JP2004511424A - テンプレートを固定したβヘアピンループ類似物の合成 - Google Patents

Abstract

構造（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）の１つに対応するテンプレートおよび４〜２０個のαアミノ酸残基（そのα炭素原子が不斉であれば、Ｌ配置を有する）のテンプレートを固定した鎖を含んでなる、テンプレートを固定したβヘアピンループ類似物を、固相および液相合成の混合した手順に基づいて製造することができる。もし所望であれば、この方法を改変してこれらのテンプレートを固定したβヘアピンループ類似物のエナンチオマーを得ることができる。これらのエナンチオマーは新規の化合物であり、前記テンプレートを固定したβヘアピンループ類似物の多くもそれら自身が新規化合物である。テンプレートを固定したβヘアピンループ類似物およびそれらのエナンチオマーはタンパク質の平滑な表面を模倣し、従って、タンパク質−タンパク質相互作用をプローブするために利用される。それ故に、これらは小分子量リード化合物を発見するのが困難な場合にタンパク質標的に対するリード発見ツールとしての役割を果たしうる。

Description

【０００１】
本発明は、一般式

［式中、Ｚは、もしそのα炭素原子が不斉であればＬ配置であるｎ個のαアミノ酸残基の鎖であって、ここでｎは４〜２０の整数であり、鎖中のアミノ酸残基はＮ末端アミノ酸から出発して数え；

は、式

（式中、Ｒ^１は水素または保護されたアミノ基であり；
Ｒ^２は水素または式ＣＨ_２−ＣＯＯＲ^１０の基であり；
Ｒ^３はアミノ保護基であり；
Ｒ^４は低級アルキルまたはアリール−低級アルキルであり；
Ｒ^５は低級アルキル、低級アルコキシまたはアリールであり；
Ｒ^６は水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、ＢｒまたはＮＯ_２であり；
Ｒ^７は水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、ＢｒまたはＮＯ_２であり；
Ｒ^８は低級アルキル、置換低級アルキルまたはアリール−低級アルキルであり；
Ｒ^９は低級アルキル、置換低級アルキルまたはアリール−低級アルキルであり；そして
Ｒ^１０は水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、アリール−低級アルキル、アロイル低級アルキルまたはアリルである）の基の１つである］のテンプレートを固定したβヘアピンループ類似物およびそれらの塩を合成するための信頼のおける方法に関する。
【０００２】
この方法は、固相および液相合成の混合した手順に基づくものであって、
（ａ）　適当に官能化した固体支持体を、所望の目的生成物中のもしｎが偶数であれば（ｎ／２）、（ｎ／２）＋１または（ｎ／２）−１の位置に、そしてもしｎが奇数であれば（ｎ／２）＋（１／２）または（ｎ／２）−（１／２）の位置に、それぞれ、存在するアミノ酸の適当にＮ保護された誘導体（ここで、Ｎ保護されたアミノ酸誘導体に存在しうるいずれの官能基も同様に適当に保護されている）とカップリングさせ；
（ｂ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；
（ｃ）　このようにして得た生成物を、所望の目的生成物中のＮ末端アミノ酸残基に一位置だけ近いアミノ酸の適当にＮ保護された誘導体（ここで、Ｎ保護されたアミノ酸誘導体に存在しうるいずれの官能基も同様に適当に保護されている）とカップリングさせ；
（ｄ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；
（ｅ）　Ｎ末端アミノ酸残基が導入されるまで、もし必要であれば、工程（ｃ）および（ｄ）を繰り返し；
（ｆ）　このようにして得た生成物を、一般式

（式中、

は上に定義したとおりでありかつＸはＮ保護基である）の化合物とカップリングさせるか、または、もし

が前記の基（ａ）であれば、代わりに、
（ｆａ）　工程（ｄ）もしくは（ｅ）で得た生成物を、一般式ＩＩＩ

（式中、Ｒ^１およびＸは上に定義したとおりである）の化合物とカップリングさせ；
（ｆｂ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；そして
（ｆｃ）　このようにして得た生成物を適当にＮ保護されたＤ−プロリンの誘導体とカップリングさせ；
（ｇ）　工程（ｆ）または（ｆｃ）で得た生成物からＮ保護基を外し；
（ｈ）　このようにして得た生成物を、所望の目的生成物中の位置ｎにあるアミノ酸の適当にＮ保護された誘導体（ここで、Ｎ保護されたアミノ酸誘導体に存在しうるいずれの官能基も同様に適当に保護されている）とカップリングさせ；
（ｉ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；
（ｊ）　このようにして得た生成物を、所望の目的生成物中の位置ｎから一位置だけ遠去かるアミノ酸の適当にＮ保護された誘導体（ここで、Ｎ保護されたアミノ酸誘導体に存在しうるいずれの官能基も同様に適当に保護されている）とカップリングさせ；
（ｋ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；
（ｌ）　全てのアミノ酸残基が導入されるまで、もし必要であれば、工程（ｊ）および（ｋ）を繰り返し；
（ｍ）　このようにして得た生成物を固体支持体から脱離し；
（ｎ）　固体支持体から切断した生成物を環化し；
（ｏ）　アミノ酸残基の鎖のいずれのメンバーの官能基に存在するいずれの保護基および、もし所望であれば、分子中にさらに存在するいずれの保護基も外し、そして
（ｐ）　もし所望であれば、このようにして得た生成物を塩に転化するかまたはこのようにして得た塩を式Ｉの対応する遊離化合物または異なる塩に転化することを含んでなる。
【０００３】
本発明の方法は、パラレルアレイ合成として実施し、前記一般式Ｉのテンプレートを固定したβヘアピンループ類似物（ｍｉｍｅｔｉｃ）のライブラリーを有利に得ることができる。そのようなパラレル合成により、多数（通常は２４〜１９２個、典型的には９６個）の一般式Ｉの環状のテンプレートを固定したペプチドのアレイを、高収率かつ規定した純度で得て、二量体および多量体の副生成物の生成を最小化することができる。その際、官能化した固体支持体（すなわち、固体支持体＋リンカー分子）、テンプレートおよび環化部位の適当な選択が重要な役割を果たす。
【０００４】
式Ｉのβヘアピンループ類似物はタンパク質の平滑な表面を模倣するので、大きな表面のタンパク質−タンパク質相互作用をプローブするために使うことができる。これらは、小分子量リード化合物を発見するのが難しいとされるタンパク質標的に対するリード発見ツールとして役立ちうる。一般式Ｉのβヘアピンループ類似物の構築様式は構造およびコンフォメーションがよく規定されているので、キーアミノ酸残基またはモチーフをコンフォメーション的にロックした配置で組みこむことができる。これらのキーアミノ酸残基またはモチーフをβヘアピン構造に沿って移動することにより、様々なコンフォメーションをスキャンすることができる（キー配列のコンフォメーション走査）。あるいは、βヘアピンループモチーフを検出する目的で、タンパク質配列をマッピングしてもよい。
【０００５】
総括すると、この技術は、大表面かつ平滑なタンパク質界面における結合にとって重要であるキーアミノ酸およびモチーフ（ホットスポット）を、その配列だけでなくその空間配置において、迅速に確認することを可能にする。この情報は最終的には小ペプチドミメチック薬物候補の設計に利用することができる（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ，Ｂ．Ｃ．； Ｗｅｌｌｓ，Ｊ．Ａ． Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｓｔｒｕｃｔ． Ｂｉｏｌ． １９９７， ７，４５７；Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．； Ａｌｔｏｒｆｅｒ，Ｍ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ａｄｖ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｖｏｌ．４，１−６８， ＪＡＩ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．， １９９９）。
【０００６】
ゲノム科学の著しい進歩により、純粋な形態で構造および機能的研究に利用し得る生物学的に重要なタンパク質（例えば、受容体、酵素、転写制御因子、リガンド、モジュレーター、シャペロン）の数が増えている。新規の生物学的標的のこの急激な増加はまた、製薬上および農芸化学上のスクリーニングをするための新しい有機分子の供給源ならびにさらに効率的なスクリーニング技術の必要性を生じさせている。近年、コンビナトリアルおよびパラレル化学が登場して新規化合物の新しいファミリーに対する需要の増加を満たしている（Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．； Ｖｉｌｌａｌｇｏｒｄｏ，Ｊ．−Ｍ，「小分子量化合物ライブラリーの固体支持コンビナトリアルおよびパラレル合成（Ｓｏｌｉｄ−Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ ａｎｄ Ｐａｒａｌｌｅｌ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｓｍａｌｌ−Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ−Ｗｅｉｇｈｔ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｌｉｂｒａｒｉｅｓ）」， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｅｒｉｅｓ， Ｖｏｌ．１７， Ｐｅｒｇａｍｏｎ， Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ， １９９８）。
【０００７】
小分子量化合物（ＭＧ＜５５０）の一般的スクリーニングにより、良く定義された結合部位とクレフトをもつ酵素および受容体などの標的に対するリード化合物を作製することに成功してきたが、この技術は、リガンド結合が対応する受容体との大表面タンパク質−タンパク質相互作用に関わるときには、どちらかといえば不十分な結果を与える。しかし、これらの標的の生物学上および製薬上の重要性は増加しており、これらのリガンド、受容体およびさらにそれらの対応する受容体と結合したリガンドのＸ線構造を多数利用できる。これらは、例えば、血小板由来成長因子（ＰＧＤＦ）［Ｏｅｆｎｅｒ，Ｃ； Ｄ’Ａｒｃｉ，Ａ．； Ｗｉｎｋｌｅｒ，Ｆ．Ｋ．； Ｅｇｇｉｍａｎｎ，Ｂ．； Ｈｏｓａｎｇ，Ｍ． ＥＭＢＯ Ｊ． １９９２， １１，３９２１］、神経成長因子（ＮＧＦ）［Ｉｂａｎｅｚ，Ｃ．Ｆ．； Ｅｂｅｎｄａｈｌ，Ｔ．； Ｂａｒｂａｎｙ，Ｇ．； Ｍｕｒｒａｙ−Ｒｕｓｔ，Ｊ．； Ｂｌｕｎｄｅｌｌ，Ｔ．； Ｐｅｒｒｏｎ，Ｈ． Ｃｅｌｌ， １９９２， ６９，３２０−３４１］、上皮成長因子（ＥＧＦ） ［Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９９２， ３１，２３６］、塩基性繊維芽細胞成長因子（ｂ−ＦＧＦ） ［Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９９６， ３５，２０８６］、トランスフォーミング成長因子βＩＩ（ＴＧＦ βＩＩ） ［Ｓｃｈｌｕｎｅｇｇｅｒ ＆ Ｇｒｕｔｔｅｒ， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．１９９３， ２３１，４４５］、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ） ［Ｍｕｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． １９９７， ９４，７１９２］などの成長因子ファミリーのメンバー、およびインターロイキン、腫瘍壊死因子（ＴＮＦαおよびβ） ［Ｂａｎｎｅｒ，Ｄ．Ｗ．； Ｄ’Ａｒｃｉ，Ａ．； Ｊａｎｅｓ，Ｗ．； Ｇｅｎｔｚ，Ｒ．； Ｓｃｈｏｎｆｅｌｄ，Ｈ．Ｊ．； Ｂｒｏｇｅｒ，Ｃ．； Ｌｏｔｓｃｈｅｒ．Ｈ．； Ｌｅｓｓｌａｕｅｒ，Ｗ． Ｃｅｌｌ， １９９３， ７３，４３１−４４５］などのサイトカインファミリーのメンバーが挙げられる。さらに、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＣＰ−１−４、エオタキシンその他などのＣＣファミリーを含むケモカイン［Ｔａｒｂｙ，Ｃ． Ｍ．； Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｊ． Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔｏｄａｙ １９９９， ４，８０−９２； Ｐｏｎａｔｈ，Ｐ．Ｄ． Ｅｘｐ． Ｏｐｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｒｕｇｓ １９９８， ７，１−１６］、およびＧＲＯα−γ、インターロイキン８（Ｉｌ ８）その他などのＣＸＣファミリーのメンバーが複数の炎症病理におけるキーメディエーターとして登場している。さらに、インテグリン［Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．； Ａｌｔｏｒｆｅｒ，Ｍ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ａｄｖ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｖｏｌ．４，１−６８， ＪＡＩ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．， １９９９］は細胞接着、遊走および増殖に重要な役割を果たす。全てのこれらのタンパク質リガンドは、１つまたは複数の大表面相互作用に関わるそれらの対応する受容体と結合する。さらに、Ｘ線結晶学および位置指定突然変異研究は、これら相互作用のキーである表面βヘアピンループモチーフの重要性を強調している。
【０００８】
大表面タンパク質界面の解剖学的構造が最近分析され、典型的な平均接触表面積は６００−９００Å^２であることが確認された。結合の自由エネルギーは界面を横切って均一に分布しているのでなく；その代わりに、二量体界面の残基の小サブセットから成る結合エネルギーのホットスポットが存在する。これらのホットスポットはトリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）およびアルギニン（Ａｒｇ）の濃度が高く、かつ恐らくホットスポットから溶媒を閉め出す役割を果たすと思われるエネルギー的に重要性の低い残基によって囲まれている［Ｂｏｇａｎ，Ａ．Ａ．； Ｔｈｏｒｎ，Ｋ．Ｓ． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９９８， ２８０，１−９］。溶媒の閉め出しは高度なエネルギー相互作用の必要条件であると考えられる。結合相互作用を可能にする２つの相反するβシート表面（例えば、疎水性と親水性表面）を提供するβヘアピンループモチーフは、これらの表面相互作用に対する判定基準に理想的に適合する。
【０００９】
βヘアピンモチーフは天然に非常に豊富に存在し、多くのタンパク質リガンドの表面上および抗体の超可変部に存在する。βヘアピンモチーフは、短いループまたはターンにより連結された２つの逆平行のβ鎖から構成され水素結合ネットワークによって分類されている［Ｓｉｂａｎｄａ，Ｂ．Ｌ．； Ｂｌｕｎｄｅｌｌ，Ｔ．Ｌ．； Ｔｈｏｒｎｔｏｎ，Ｊ．Ｍ． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９８９， ２０６，７５９−７７７］。一例は、とりわけ、抗体の抗原結合部位に見られ［Ｐａｄｌａｎ，Ｅ．Ａ． Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９４， ３１，１６９−２１７］、重および軽可変部（Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌ）からそれぞれ３つづつ、合計６つのいわゆる超可変ループまたは相補性決定領域（ＣＤＲ）に位置するアミノ酸残基により構成される。Ｉｇファミリーの抗体の６つのＣＤＲループのうち、４つは隣接する逆平行βシートを接続するβヘアピンとして分類され、２つはＶ_Ｌドメイン由来、Ｌ_２およびＬ_３であり、２つはＶ_Ｈドメイン由来、Ｈ_２およびＨ_３である。最近の評価は、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｈ_１およびＨ_２超可変部の大部分は、１８の異なる正準コンフォメーション（ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）の１つに分類しうることを示唆する［Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．； Ｌｅｓｋ，Ａ．； Ｇｈｅｒａｒｄｉ，Ｅ．； Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ，Ｉ．Ｍ．； Ｗａｌｔｅｒ，Ｇ．； Ｍａｒｋｓ，Ｊ．Ｇ．； Ｌｌｅｗｅｌｙｎ，Ｍ．Ｂ．； Ｗｉｎｔｅｒ，Ｇ． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９９２， ２２７，７９９−８１７；Ｍａｒｔｉｎ，Ａ．Ｃ．； Ｔｈｏｒｎｔｏｎ，Ｊ．Ｍ． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９９６， ２６３，８００−８１５；Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ，Ｂ．； Ｌｅｓｋ，Ａ．； Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９９７， ２７３，９２７−９４８］。
【００１０】
本発明は、様々な天然のβヘアピンコンフォメーション、特に成長因子、サイトカインおよびケモカイン、インテグリンならびに抗体に存在するβヘアピンコンフォメーションを模倣する、テンプレートに固定した一般式Ｉの環状ペプチドを合成するための信頼性のある方法を提供する（例えば、実施例１の図を参照）。上記の式（ａ）から（ｈ）までに対応するテンプレート構造は、βヘアピンに存在する水素結合ネットワークを安定化することが示されている［例えば（ａ）については： Ｓｐａｅｔｈら， Ｈｅｌｖ． Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９８，８１，１７２６； Ｆａｖｒｅ，Ｍ．； Ｍｏｅｈｌｅ，Ｋ．； Ｊｉａｎｇ，Ｌ．； Ｐｆｅｉｆｆｅｒ，Ｂ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９９９，１２１，２６７９−２６８５；例えば（ｂ）については： Ｅｍｅｒｙら， Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍ． １９９６，２１５５； Ｂｉｓａｎｇら， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．１９９８， １２０，７４３９；例えば（ｃ）については： Ｐｆｅｉｆｅｒ，Ｍ． Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ． １９９８，１９７７；例えば（ｄ）については： Ｐｆｅｉｆｅｒら， Ｈｅｌｖ． Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９７，８０，１５１３；例えば（ｅ）については： Ｂｅｅｌｉら， Ｈｅｌｖ． Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９６，７９，２２３５；および（ｆ）と類似体については： Ｍｕｌｌｅｒ，Ｋ．； Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．； Ｋｎｉｅｒｚｉｎｇｅｒ，Ａ．； Ｓｔａｎｋｏｖｉｃ，Ｃ； Ｓｐｉｅｇｌｅｒ，Ｃ．； Ｔｒｚｅｃｉａｋ，Ａ．； Ｅｎｇｌｅｒｔ，Ｇ．； Ｌａｂｈａｒｄｔ，Ａ．Ｍ．； Ｓｃｈｏｎｈｏｌｚｅｒ，Ｐ． Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ； Ｔｅｓｔａ，Ｂ．， Ｋｙｂｕｒｚ，Ｅ．， Ｆｕｈｒｅｒ，Ｗ．， Ｇｙｇｅｒ，Ｒ．，編； Ｖｅｒｌａｇ Ｈｅｌｖ． Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ： Ｂａｓｅｌ， １９９３； ｐｐ ５１３−５３１）；（ｇ）および（ｈ）と類似体については： Ｍｕｌｌｅｒ，Ｋ．； Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．； Ｋｎｉｅｒｚｉｎｇｅｒ，Ａ．； Ｓｐｉｅｇｌｅｒ，Ｃ．； Ｂａｎｎｗａｒｔｈ，Ｗ．； Ｔｒｚｅｃｉａｋ，Ａ．； Ｅｎｇｌｅｒｔ，Ｇ．； Ｌａｂｈａｒｄｔ，Ａ．； Ｓｃｈｏｎｈｏｌｚｅｒ，Ｐ． Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， 編者Ｔｅｓｔａ， Ｂ．； Ｋｙｂｕｒｚ，Ｅ．； Ｆｕｈｒｅｒ，Ｗ．； Ｇｉｇｅｒ，Ｒ．， Ｗｅｉｎｈｅｉｍ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｂａｓｅｌ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ： Ｖｅｒｌａｇ Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ，１９９３，５１３−５３１； Ｂａｎｎｗａｒｔｈ，Ｗ．； Ｇｅｒｂｅｒ，Ｆ．； Ｇｒｉｅｄｅｒ，Ａ．； Ｋｎｉｅｒｚｉｎｇｅｒ，Ａ．； Ｍｕｌｌｅｒ，Ｋ．； Ｏｂｒｅｃｈｔ．Ｄ．； Ｔｒｚｅｃｉａｋ，Ａ． カナダ特許出願、ＣＡ２１０１５９９］。
【００１１】
以上述べたように、本発明の方法は固相および液相合成の混合した手法の利点を有し、例えば２４〜１９２個、好ましくは９６個のパラレルアレイ中で反応を実施することが可能であり、テンプレートに固定した一般式Ｉの環状ペプチドを高収率かつスクリーニングにすぐ使いうる規定した純度で提供して、スクリーニング過程で偽陽性のヒットを与えがちな二量体および多量体不純物の量を最小化する。このプロセスは、既に記載されているＢａｎｎｗａｒｔｈ，Ｗ．； Ｇｅｒｂｅｒ，Ｆ．； Ｇｒｉｅｄｅｒ，Ａ．； Ｋｎｉｅｒｚｉｎｇｅｒ，Ａ．； Ｍｕｌｌｅｒ，Ｋ．； Ｏｂｒｅｃｈｔ．Ｄ．； Ｔｒｚｅｃｉａｋ，Ａ． カナダ特許出願、ＣＡ２１０１５９９による環状ペプチドの合成に対して明らかに優れている。樹脂ならびに充填容量、リンカー分子、テンプレートおよび環化部位の適当な選択は、βヘアピンループ類似物の高収率および信頼しうる純度を得るために重要である。その際、テンプレートは最終生成物のコンフォメーションを安定化するだけでなく、恐らくβヘアピン型水素結合誘導によってモノマーの環化速度を著しく増強する。
【００１２】
一般式Ｉの様々なβヘアピンループ類似物は構築様式がよく規定されているので、βヘアピン主鎖に沿って配列を移動することにより、キーアミノ酸残基とモチーフを、様々なコンフォメーションにロックすることができる（「生物学的活性配列のコンフォメーション走査」）。あるいは、βヘアピンコンフォメーションを検出するために、この手法を用いてタンパク質配列をマッピングしてもよい。このように、このβヘアピン類似物手法は、三次元配置のタンパク質界面における高エネルギー相互作用のホットスポットを検出する技術を提供する。この情報は最終的には小ペプチドミメチック分子の設計に利用しうるであろう。
【００１３】
本明細書に使用される用語「低級アルキル」は、単独にまたは「アリール−低級アルキル」のように組合せて使用され、７個まで、好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどのような４個までの炭素原子をもつ直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素残基を包含する。用語「低級アルコキシ」は、上に記載の用語「低級アルキル」の意味におけるアルコキシ基、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−ブトキシなどを包含する。用語「アリール」はフェニル残基および置換フェニル残基、特に、置換基としてまず考えられる低級アルキルまたは低級アルコキシ基またはハロゲン原子により単または二置換されたフェニル残基を包含する。用語「ハロゲン」は、特に断らない限り、４つの種類、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を指す。用語「アシル」は脂肪族および芳香族カルボン酸の残基を包含し、先ず一方では、アセチル、プロピオニル、ブチリルなどであって、例えばカルボキシまたは低級アルコキシカルボニルにより置換されて例えば４−カルボキシブチル、４−メトキシカルボニルブチリルであってもよい低級アルカノイル基、ならびに、他方では、ベンゾイル基および置換ベンゾイル基、特に、まず置換基として考えられる低級アルキルまたはアルコキシ基またはハロゲン原子による単または二置換ベンゾイル基などのアロイル基を包含する。用語「置換低級アルキル」は、フタルイミドメチル、メトキシメチル、メトキシエチルなどのような、保護されたアミノ、低級アルコキシ、ＣＯＯＲ^１０（Ｒ^１０は上記のとおりである）、カルボキサミドまたはＮ−低級アルキルカルボキサミドにより置換された低級アルキル基を包含する。用語「保護されたアミノ」は、一方ではフタルイミド（”Ｐｔ”）などの残基、そして他方では式−ＮＨ−Ｒ^１１［式中、Ｒ^１１はベンジルオキシカルボニル（”Ｚ”）、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（”Ｂｏｃ”）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（”Ｆｍｏｃ”）、アリルオキシカルボニル（”Ａｌｌｏｃ”）、トリメチルシリルエトキシカルボニル（”Ｔｅｏｃ”）、トリクロロエトキシカルボニル（”Ｔｃｃ”）、ｏ−ニトロフェニルスルホニル（”Ｎｐｓ”）などのいずれの適当なＮ保護基を意味してもよい］の残基を包含する。
【００１４】
アミノ酸残基としては、まず天然のαアミノ酸から誘導されるものが考えられる。以下に、本発明の目的に適当であるアミノ酸またはその残基の表を掲げるが、省略語は一般的に採用されている通常の使用に対応する。
【００１５】
Ａｌａ　Ａ　Ｌ−アラニン
Ａｒｇ　Ｒ　Ｌ−アルギニン
Ａｓｎ　Ｎ　Ｌ−アスパラギン
Ａｓｐ　Ｄ　Ｌ−アスパラギン酸
Ｃｙｓ　Ｃ　Ｌ−システイン
Ｇｌｕ　Ｅ　Ｌ−グルタミン酸
Ｇｌｎ　Ｑ　Ｌ−グルタミン
Ｇｌｙ　Ｇ　グリシン
Ｈｉｓ　Ｈ　Ｌ−ヒスチジン
Ｉｌｅ　Ｉ　Ｌ−イソロイシン
Ｌｅｕ　Ｌ　Ｌ−ロイシン
Ｌｙｓ　Ｋ　Ｌ−リシン
Ｍｅｔ　Ｍ　Ｌ−メチオニン
Ｐｈｅ　Ｆ　Ｌ−フェニルアラニン
Ｐｒｏ　Ｐ　Ｌ−プロリン
Ｓｅｒ　Ｓ　Ｌ−セリン
Ｔｈｒ　Ｔ　Ｌ−トレオニン
Ｔｒｐ　Ｗ　Ｌ−トリプトファン
Ｔｙｒ　Ｙ　Ｌ−チロシン
Ｖａｌ　Ｖ　Ｌ−バリン。
【００１６】
本発明の目的に適当な他のαアミノ酸またはその残基としては次のものが挙げられる。
【００１７】
Ｃ_４ａｌ　Ｌ−３−シクロブチルアラニン
Ｃ_５ａｌ　Ｌ−３−シクロペンチルアラニン
Ｃ_６ａ１　Ｌ−３−シクロヘキシルアラニン
ａＩｌｅ　Ｌ−アロイソロイシン
Ｎａｌ　Ｌ−３−（１−ナフチルアラニン）
Ｎｌｅ　Ｌ−ノルロイシン
Ｎｖａ　Ｌ−ノルバリン
Ｏｒｎ　Ｌ−オルニチン
Ｏｒｎ（ＣＨＯ）　Ｎ^５−ホルミル−Ｌ−オルニチン
Ｌ−Ｐｈｇ　Ｌ−フェニルグリシン
Ｔｚａ　Ｌ−３−（２−チアゾリル）アラニン。
【００１８】
上記の一般式ＩＩＩの化合物、すなわち上記の式（ａ）に対応するテンプレート構造の２つの構築ブロックのうちの１つは、Ｌ−プロリン（Ｌ−Ｐｒｏ、^ＬＰ）の誘導体であるが、これらの構築ブロックの第２はＤ−プロリン（Ｄ−Ｐｒｏ、^ＤＰ）残基であることは理解されるであろう。
【００１９】
ｎの好ましい値、すなわち鎖Ｚに存在するアミノ酸残基の数は、一般的には４〜１６である。ｎの特に好ましい値は、テンプレート構造が上記式（ｂ）または（ｃ）または（ｄ）に対応する場合は６、１０および１４であり、その他のテンプレート構造、すなわち上記式（ａ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）および（ｈ）に対応する場合は４、５、６、８、１２および１６である。
【００２０】
有利な場合には、鎖Ｚは、２、３、４、５、６、または場合によっては１０個までのアミノ酸残基からなるキー配列から構成されるかまたはそれらを含有し、このとき該キー配列の２つの末端メンバーは「一定」（「ｋ」）であるが、他のメンバーはいずれも、同じく「一定」であるかまたは全ての可能な組合せもしくは順列にて「可変」（「ｘ」）である。２つの末端「一定」メンバーは同じでも異なってもよく、同様のことが全ての残りの「一定」および／または「可変」メンバーについても言える。
【００２１】
特に適切な「一定」メンバー（「ｋ」）は、Ｔｒｐ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、ＧｌｕおよびＴｈｒであり、さらなる適切な「一定」メンバー（「ｋ」）は、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、ＭｅｔおよびＳｅｒであり、適切な「可変」メンバー（「ｘ」）はＡｌａ、Ｏｒｎ、ＬｅｕおよびＶａｌである。
【００２２】
２、３、４、５および６個のアミノ酸残基からなるキー配列は、模式的に以下のように記述できる：
ジペプチド
−ｋ^１−ｋ^２−
トリペプチド
−ｋ^１−ｋ^２−ｋ^３−
−ｋ^１−ｘ^１−ｋ^２−
テトラペプチド
−ｋ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｋ^４−
−ｋ^１−ｘ^１−ｋ^２−ｋ^３−
−ｋ^１−ｋ^２−ｘ^１−ｋ^３−
−ｋ^ｌ−ｘ^ｌ−ｘ^２−ｋ^２−
ペンタペプチド
−ｋ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｋ^４−ｋ^５−
−ｋ^１−ｘ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｋ^４−
−ｋ^１−ｋ^２−ｘ^１−ｋ^３−ｋ^４−
−ｋ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｘ^１−ｋ^４−
−ｋ^１−ｘ^１−ｘ^２−ｋ^２−ｋ^３−
−ｋ^１−ｋ^２−ｘ^１−ｘ^２−ｋ^３−
−ｋ^ｌ−ｘ^ｌ−ｋ^２−ｘ^２−ｋ^３−
−ｋ^１−ｘ^１−ｘ^２−ｘ^３−ｋ^２−
ヘキサペプチド
−ｋ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｋ^４−ｋ^５−ｋ^６−
−ｋ^１−ｘ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｋ^４−ｋ^５−
−ｋ^１−ｋ^２−ｘ^１−ｋ^３−ｋ^４−ｋ^５−
−ｋ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｘ^１−ｋ^４−ｋ^５−
−ｋ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｋ^４−ｘ^１−ｋ^５−
−ｋ^１−ｘ^１−ｘ^２−ｋ^２−ｋ^３−ｋ^４−
−ｋ^１−ｋ^２−ｘ^１−ｘ^２−ｋ^３−ｋ^４−
−ｋ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｘ^１−ｘ^２−ｋ^４−
−ｋ^ｌ−ｘ^ｌ−ｋ^２−ｘ^２−ｋ^３−ｋ^４−
−ｋ^１−ｋ^２−ｘ^１−ｋ^３−ｘ^２−ｋ^４−
−ｋ^１−ｘ^１−ｋ^２−ｋ^３−ｘ^２−ｋ^４−
−ｋ^１−ｘ^１−ｘ^２−ｘ^３−ｋ^２−ｋ^３−
−ｋ^ｌ−ｋ^２−ｘ^１−ｘ^２−ｘ^３−ｋ^３−
−ｋ^１−ｘ^１−ｋ^２−ｘ^２−ｘ^３−ｋ^３−
−ｋ^１−ｘ^１−ｘ^２−ｋ^２−ｘ^３−ｋ^３−
−ｋ^１−ｘ^１−ｘ^２−ｘ^３−ｘ^４−ｋ^２−。
【００２３】
特定のキー配列が重要な生理学的活性ペプチドに見られることは公知であり、例えば次の例が挙げられる：
ＲＧＤ　　フィブロネクチン（ＦＮ）、ビトロネクチン（ＶＮ）、オステオポンチン、コラーゲン、トロンボスポンジン、フィブリノーゲン（Ｆｇ）、フォン・ビルブラント因子（ｖＷＦ）に見られる。Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．； Ａｌｔｏｒｆｅｒ，Ｍ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ａｄｖ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｖｏｌ．４，１−６８， ＪＡＩ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．， １９９９を参照。
【００２４】
ＥＬＲ　　ＣＸＣケモカインに見られる。Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｊ．； Ｔａｒｂｙ，Ｃ． Ｍ． Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔｏｄａｙ， １９９９， ４，８０−９２を参照。
【００２５】
ＲＫＫ　　Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． １９９９，２７４，３５１３を参照。
【００２６】
ＫＧＦ　　Ｐｒｏｔ． Ｓｃｉ． １９９８，７，１６８１−１６９０を参照。
【００２７】
ＶＲＫＫ　　［配列番号１］、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）に見られる。Ｒｏｓｓ，Ｒ．； Ｒａｉｎｅｓ，Ｅ．Ｗ．； Ｂｏｗｄｅｎ−Ｐｏｐｅ，Ｄ．Ｆ． Ｃｅｌｌ， １９８６，４６，１５５−１５９を参照。
【００２８】
ＫＫＹＬ　　［配列番号２］、β−アミロイド神経毒性に対して神経保護的性質を示すＶＩＰ（血管作用性腸管ペプチド）に見られる。Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｍ． Ｓｏｃ． ＵＳＡ １９９９，９６，４１４３−４１４８を参照。
【００２９】
ＷＬＤＶ　　［配列番号３］、インテグリンα_４β_１に見られる。Ｅｕｒｏｐ． Ｊ． Ｂｉｏｌ． １９９６，２４２，３５２−３６２およびＩｎｔ． Ｊ． Ｐｅｐｔ． Ｐｒｏｔ． Ｒｅｓ． １９９６，４７，４２７−４３６を参照。
【００３０】
ＹＩＲＬＰ　　［配列番号４］、Ｘａ因子インヒビターに見られる。Ａｌ Ｏｂｅｉｄｉｓ，Ｆ．； Ｏｓｔｒｅｍ，Ｊ．Ａ． Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔｏｄａｙ １９９８，３，２２３−２３１を参照。
【００３１】
ＹＩＧＳＲ　　［配列番号５］、ラミニンに含まれる、ＥＭＢＯ． Ｊ． １９８４，３，１４６３を参照。
【００３２】
ＩＫＶＡＶ　　［配列番号６］、Ｃｅｌｌ １９８７， ８８，９８９を参照。
【００３３】
ＰＰＲＸＸＷ　　［配列番号７］、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． １９９８，２７３，１１００１−１１００６および１１００７−１１０１１を参照。
【００３４】
ＩＹＹＫＤＧＡＬＫＹ　　［配列番号８］、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｓｏｃ． Ｔｒａｎｓ． １９９７，２９，３８７−３９２を参照。
【００３５】
所望であれば、本発明の方法を改変して一般式Ｉの化合物のエナンチオマーを得ることができる。このためには、不斉α炭素原子をもつ全てのアミノ酸をそれらのＤ形で使用し、構造（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）もしくは（ｅ）に対応するテンプレートのエナンチオマー、または式（ｆ）、（ｇ）もしくは（ｈ）に対応するテンプレートのエナンチオマーを工程（ｆ）で用い、さらに、式ＩＩＩの化合物のエナンチオマーを工程（ｆａ）で使用しかつＬ−プロリンの誘導体を工程（ｆｃ）でそれぞれ使用する。
【００３６】
アミノ酸およびその残基に対するそれぞれの適当な保護基は、例えば、次の通りである；
−アミノ基（例えばリシンの側鎖にも存在する）に対して、
Ｚ　ベンジルオキシカルボニル
Ｂｏｃ　ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｆｍｏｃ　９−フルオレニルメトキシカルボニル
Ａｌｌｏｃ　アリルオキシカルボニル
Ｔｅｏｃ　トリメチルシリルエトキシカルボニル
Ｔｃｃ　トリクロロエトキシカルボニル
Ｎｐｓ　ｏ−ニトロフェニルスルホニル；
Ｔｒ　トリフェニルメチルまたはトリチル、
−アルコール成分を用いたエステルへの転化による、カルボキシル基（例えば、アスパラギン酸およびグルタミン酸の側鎖にも存在する）に対して、
ｔＢｕ　ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｎ　ベンジル
Ｍｅ　メチル
Ｐｈ　フェニル
Ｐａｃ　 フェナシル
アリル
トリメチルシリルエチル
トリクロロエチル；
−グアニジノ基（例えば、アルギニンの側鎖に存在する）に対して、
Ｐｍｃ　２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル
Ｔｓ　トシル（すなわち、ｐ−トルエンスルホニル）
Ｚ　ベンジルオキシカルボニル
Ｐｂｆ　ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル
−ヒドロキシ基（例えば、トレオニンおよびセリンの側鎖に存在する）に対して、
ｔＢｕ　ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｎ　ベンジル
Ｔｒ　トリチル
−メルカプト基（例えば、システインの側鎖に存在する）に対して、
ｔＢｕ　ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｎ　ベンジル
Ｔｒ　トリチル
Ｍｔｒ　２−メトキシトリチル。
【００３７】
官能化した固体支持体は、好ましくは１−５％のジビニルベンゼンを用いて架橋したポリスチレン；ポリエチレングリコールスペーサー（Ｔｅｎｔａｇｅｌ^Ｒ）により被覆したポリスチレン；およびポリアクリルアミド樹脂から誘導するのが好都合である（Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．； Ｖｉｌｌａｌｇｏｒｄｏ，Ｊ．−Ｍ，「小分子量化合物ライブラリーの固体支持型コンビナトリアルおよびパラレル合成（Ｓｏｌｉｄ Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ ａｎｄ Ｐａｒａｌｌｅｌ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｓｍａｌｌ−Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ−Ｗｅｉｇｈｔ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｌｉｂｒａｒｉｅｓ）」， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｅｒｉｅｓ， Ｖｏｌ．１７， Ｐｅｒｇａｍｏｎ， Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ， １９９８、も参照）。
【００３８】
固体支持体は、リンカー、すなわち、一端に固体支持体と結合するアンカー基をかつ他端に次の化学変換および切断過程で利用される選択的に切断しうる官能基を含有する二官能スペーサー分子を用いて官能化する。本発明の目的のためには、リンカーは様々なアミノ酸の側鎖のいずれの官能基に存在する保護基にも影響を与えない穏やかな酸性条件下で、最終的にカルボキシル基を放出するように設計しなければならない。本発明の目的に適当なリンカーは、アミノ酸のカルボキシル基と、酸易分解性のエステル、通常は酸易分解性のベンジル、ベンズヒドリルおよびトリチルエステルを形成する。この種のリンカー構造の例は、３−メトキシ−４−ヒドロキシメチルフェノキシ（Ｓａｓｒｉｎリンカー）、４−（２，４−ジメトキシフェニル−ヒドロキシメチル）−フェノキシ（Ｒｉｎｋリンカー）、４−（４−ヒドロキシメチル−３−メトキシフェノキシ）酪酸（ＨＭＰＢリンカー）、トリチルおよび２−クロロトリチルが挙げられる。
【００３９】
本発明の方法をパラレルアレイ合成として実施すると、以下に記載のとおり有利に実施できるが、当業者であれば、上記の式Ｉのある単一の化合物を合成することが所望である場合、この方法をどう改変すべきかはすぐ明らかになるであろう。
【００４０】
パラレル法により合成すべき化合物の総数と等しい数の反応容器（通常は２４〜１９２個、典型的には９６個）に、２５〜１０００ｍｇ、好ましくは１００ｍｇの適当な官能化した固体支持体、好ましくは１〜３％架橋ポリスチレンまたはテンタゲル樹脂を充填する。
【００４１】
使用する溶媒は、樹脂を膨潤する能力がなければならず、限定されるものでないが、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジオキサン、トルエン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、イソプロピルアルコールなどが挙げられる。極性溶媒を少なくとも１つ成分として含有する溶媒混合物（例えば、２０％ＴＦＥ／ＤＣＭ、３５％ＴＨＦ／ＮＭＰ）が、樹脂結合ペプチド鎖の高い反応性および溶媒和を確保するために有利である（Ｆｉｅｌｄｓ，Ｇ．Ｂ．， Ｆｉｅｌｄｓ，Ｃ．Ｇ．， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９９１，１１３，４２０２− ４２０７）。
【００４２】
穏やかな酸性条件下で、側鎖官能基を保護する酸易分解性基に影響を与えることなく、Ｃ末端カルボン酸基を放出する様々なリンカーの開発に伴って、保護ペプチド断片の合成において大きな進歩がなされた。２−メトキシ−４−ヒドロキシベンジルアルコールから誘導されるリンカー（Ｓａｓｒｉｎ^Ｒ ｌｉｎｋｅｒ， Ｍｅｒｇｌｅｒら， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９８８，２９ ４００５−４００８）は希釈トリフルオロ酢酸（０．５−１％ ＴＦＡを含むＤＣＭ）を用いて切断可能であり、ペプチド合成中のＦｍｏｃ脱保護条件に対して安定であり、Ｂｏｃ／ｔＢｕに基づく追加の保護基がこの保護スキームに適合しうる。本発明のプロセスに適している他のリンカーには、ペプチドの除去に１０％酢酸を含むＤＣＭまたは０．２％トリフルオロ酢酸を含むＤＣＭを必要とする、超酸易分解性の４−（２，４−ジメトキシフェニル−ヒドロキシメチル）−フェノキシリンカー（Ｒｉｎｋリンカー、Ｒｉｎｋ，Ｈ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９８７， ２８，３７８７−３７９０）；全ての酸易分解性の側鎖保護基を含有するペプチド断片を得る目的で１％ＴＦＡ／ＤＣＭを用いても切断される、４−（４−ヒドロキシメチル−３−メトキシフェノキシ）酪酸から誘導されるリンカー（ＨＭＰＢ−リンカー、Ｆｌｏｒｓｈｅｉｍｅｒ ＆ Ｒｉｎｉｋｅｒ， Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９９１， １９９０ １３１）、そしてさらに、氷酢酸／トリフルオロエタノール／ＤＣＭ（１：２：７）の混合物を３０分間用いてペプチドの脱離を可能にする、２−クロロトリチルクロリドリンカー（Ｂａｒｌｏｓら， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９８９， ３０， ３９４３−３９４６）が挙げられる。
【００４３】
好ましくは、９−フルオレニルメトキシカルボニル−（Ｆｍｏｃ）−保護されたアミノ酸誘導体を、テンプレートに固定した式Ｉのβヘアピンループ類似物を組み立てるための構築ブロックとして用いる。脱保護、すなわちＦｍｏｃ基の切断除去には、２０％ピペリジンを含むＤＭＦまたは２％ＤＢＵ／２％ピペリジンを含むＤＭＦを使うことができる。
【００４４】
反応物質、すなわち、アミノ酸誘導体の量は、通常、始めに反応チューブ中に秤量して入れた官能化した固体支持体のグラム当たりミリ当量（ｍｅｑ／ｇ）充填量（典型的にはポリスチレン樹脂に対して０．１〜２．８５ ｍｅｑ／ｇ）に基づいて、１〜２０当量である。もし合理的な時間で反応を完遂するようにする必要があれば、追加当量の反応物質を用いてもよい。反応チューブを、ホルダーブロックおよびマニホールドと一緒に受器ブロック中に再挿入して装置を一緒に固定する。マニホールドを通過してガスを流し始め、例えば窒素、アルゴン、空気などの制御された環境を与える。ガス流はまた、マニホールドを通して流す前に加熱または冷却してもよい。反応ウエルの加熱または冷却を、反応ブロックを加熱するかまたはイソプロパノール／ドライアイスを用いて外部から冷却するなどによって実施し、所望の合成反応を起こさせる。攪拌は振とうまたは磁気攪拌（反応チューブ内の）により行う。好ましいワークステーションは（これに限定されるものでないが）ＬａｂｓｏｕｒｃｅのＣｏｍｂｉ−ｃｈｅｍステーションおよびＭｕｌｔｉＳｙｎ ＴｅｃｈのＳｙｒｏシンセサイザーである。
【００４５】
アミド結合形成には、アシル化工程のためのα−カルボキシル基の活性化が必要である。この活性化を、通常利用される、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ， Ｓｈｅｅｈａｎ ＆ Ｈｅｓｓ， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９５５，７７，１０６７−１０６８）またはジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ， Ｓａｒａｎｔａｋｉｓら， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍｕｎ． １９７６，７３，３３６−３４２）などのカルボジイミドを使って実施する場合、一般的に使用される溶媒に対し、それぞれ、得られるジシクロヘキシル尿素は不溶であり、ジイソプロピル尿素は可溶である。カルボジイミド法の変法には、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ、Ｋｏｎｉｇ ＆ Ｇｅｉｇｅｒ， Ｃｈｅｍ． Ｂｅｒ １９７０， １０３， ７８８−７９８）のカップリング混合物への添加が挙げられる。ＨＯＢｔは脱水を防止し、活性化アミノ酸のラセミ化を抑制し、そして不活発なカップリング反応を改善する触媒として作用する。特定のホスホニウム試薬が直接カップリング試薬として利用されており、例えば、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロリン酸（ＢＯＰ）（Ｃａｓｔｒｏら， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９７５， １４， １２１９−１２２２；Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， １９７６，７５１−７５２）、またはベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロリン酸（Ｐｙ−ＢＯＰ， Ｃｏｓｔｅら， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９９０， ３１，２０５−２０８）、または２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル−）１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸（ＴＢＴＵ）もしくはヘキサフルオロリン酸（ＨＢＴＵ、Ｋｎｏｒｒら， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９８９，３０，１９２７−１９３０）が挙げられ；これらのホスホニウム試薬はまた、保護されたアミノ酸誘導体とのＨＯＢｔエステルのｉｎ ｓｉｔｕ生成にも適している。さらに最近、ジフェノキシホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）またはＯ−（７−アザ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸（ＴＡＴＵ）または０−（７−アザ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸（ＨＡＴＵ）／７−アザ−１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ、Ｃａｒｐｉｎｏら， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９９４， ３５，２２７９−２２８１）も、カップリング試薬として利用されている。
【００４６】
カップリング反応は本質的にほぼ定量的であるという事実に従って、反応完了の実験的証拠を得ることが望ましい。樹脂結合ペプチドのアリコートに対する陽性比色反応が一級アミンの存在を定性的に示すニンヒドリン試験（Ｋａｉｓｅｒら， Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９７０， ３４，５９５）を、各カップリング工程の後に容易にかつ迅速に行うことができる。Ｆｍｏｃ化学により、塩基を用いて遊離すると、Ｆｍｏｃ発色団の分光化学的検出が可能になる（Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒら， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ． １９７９， １３，３５−４２）。
【００４７】
反応チューブ内の樹脂と結合した中間体は、次の２つの方法の１つにより清浄な溶媒に繰り返し曝して、過剰に保持する試薬、溶媒、および副生成物を洗浄除去する：
１）　反応ウエルを溶媒（好ましくは５ｍｌ）で満たし、反応チューブをホルダーブロックおよびマニフォールドと一緒に浸漬し、そして５〜３００分間、好ましくは１５分間攪拌し、そして重力により次いでマニフォールド入口（出口は閉めて）を通してかけたガス圧により排出して溶媒を追い出す；
２）　マニフォールドをホルダーブロックから取外し、溶媒のアリコート（好ましくは５ｍｌ）を反応チューブの頂部を通して配給し、そして重力によりフィルターを通して試験管またはバイアルなどの受器中に排出する。
【００４８】
上記の洗浄過程を、両方とも、最大約５０回（好ましくは約１０回）繰り返し、試薬、溶媒および副生成物除去の効果を、洗浄濾液のＴＬＣ、ＧＣ、または目視等の方法によりモニターする。
【００４９】
樹脂結合化合物を試薬と反応ウエル内で反応させ、次いで過剰の試薬、副生成物、および溶媒を除去する上記の過程を、それぞれ逐次変換しながら、最終的に樹脂結合した化合物が調製されるまで繰り返す。
【００５０】
全保護された線状ペプチドの固体支持体からの脱離は、反応チューブをホルダーブロックおよびマニフォールドと一緒に切断試薬溶液（好ましくは３〜５ｍｌ）を含有する反応ウエルに浸漬することによって達成する。ガス流、温度制御、攪拌、および反応モニタリングは、上記かつ所望のように実施して、脱離反応を行う。反応チューブをホルダーブロックおよびマニフォールドと一緒に受器ブロックから取外し、溶液レベルより上であるが反応ウエルの上方縁より低いレベルに持ち上げて、マニフォールド入口（出口は閉めて）を通してガス圧をかけて効率良く最終生成物溶液を受器ウエル中に追い出す。次いで、反応チューブに残る樹脂を上のように３〜５ｍｌの適当な溶媒を用いて２〜５回洗浄して、脱離生成物をできるだけ多く抽出する（洗い出す）。このようにして得た生成物溶液を交差混合のないように注意しながら、１つにまとめる。次いで、個々の溶液／抽出液を最終化合物を、単離するための必要に応じて操作する。典型的な操作は、限定されるものでないが、蒸発、濃縮、液／液抽出、酸性化、塩基化、中和または溶液中での追加反応が挙げられる。
【００５１】
固体支持体から切断し、塩基を用いて中和した、全保護された線状ペプチド誘導体を含有する溶液を蒸発させ、次いで、環化を溶液中で、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ジオキサン、ＴＨＦなどの溶媒を用いて実施する。先に述べた様々なカップリング試薬を環化に使うことができる。環化時間は約６〜４８時間、好ましくは約２４時間である。反応の進行は、例えば、ＲＰ−ＨＰＬＣ（逆相高速液体クロマトグラフィー）により追跡する。次いで溶媒を蒸発して除去し、全保護された環状ペプチド誘導体を、ＤＣＭなどの水と混和しない溶媒中に溶解し、そして過剰のカップリング試薬を除去するため、溶液を水または水混和性溶媒の混合物を用いて抽出する。
【００５２】
全保護された環化ペプチド誘導体を、９５％ ＴＦＡ、２．５％ Ｈ２０、２．５％ ＴＩＳまたは他の捕集剤の組合せを用いて処理し、保護基の切断を行う。切断反応時間は通常３０分間〜１２時間、好ましくは２時間である。その後、ほとんどのＴＦＡを蒸発させ、生成物をエーテル／ヘキサン（１：１）またはそのために適当な他の溶媒を用いて沈殿させる。溶媒を注意深く除去した後、目的生成物として得た環状ペプチド誘導体を単離することができる。その純度によって、このペプチド誘導体を生物学的アッセイに直接利用しうるか、またはさらに、例えば分取ＨＰＬＣにより精製しなければならない。
【００５３】
目的生成物、すなわち式Ｉの化合物は、単離しかつ特性決定すれば、生物活性について個々に試験することができる。例えば、次の固相アッセイを実施できる。
【００５４】
血小板由来成長因子β（ＰＤＧＦＲ−β）の直接固定化を、免疫吸着９６ウエルプレート（Ｎｕｎｃ）中で、４℃にて、精製タンパク質１００ｎｇを含む１５ｍＭ Ｎａ_２ＣＯ_３、３５ｍＭ ＮａＨＣＯ_３、ｐＨ ９．６の溶液１００μｌを用いて、一夜のインキュベーションにより実施する。プレートをｔｒｉｓ緩衝化生理食塩水（ＴＢＳ、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ ７．４）により１回洗浄し、非特異的吸着を少なくとも１時間のＴＢＳ＋１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を用いるインキュベーションによりブロックする。ＴＢＳ＋０．１％Ｔｗｅｅｎを用いて洗浄した後、３０００ ｃｐｍの^１２５Ｉ−ＰＤＧＦ−ＢＢおよび増加傾向の量の非標識ＰＤＧＦ−ＢＢまたは式Ｉのペプチド誘導体を二重ウエルに添加し、３時間、室温にて０．１％Ｔｗｅｅｎ、１ｍＭ ＣａＣｌ_２、１ｍＭ ＭｇＣｌ_２および１％ ＢＳＡ中でインキュベートする。プレートをＴＢＳ＋０．１％Ｔｗｅｅｎを用いて３回洗浄し、そして結合したリガンドを０．１Ｍクエン酸、ｐＨ ２．５で除去した後にγカウンタで計数する。
【００５５】
一般式Ｉにより包含される複数の化合物は既に記載したが、残りのこれらの化合物、すなわち式Ｉの残りの化合物も新規でありかつまた本発明の部分を形成する。但し、それは以下の条件に基づく場合であり、つまり式：

が
（ｉ）　基（ａ）でありかつＲ^１が水素であり、そしてＺが
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−［配列番号９］、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−［配列番号１０］、
−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［配列番号１１］、
−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−［配列番号１２］、
−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−［配列番号１３］、
−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−［配列番号１４］、
−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−［配列番号１５］、
−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−［配列番号１６］、および
−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−［配列番号１７］
以外のものであり；
（ｉｉ）　基（ｂ）でありかつＲ^２が水素もしくはＣＨ_２−ＣＯＯＨであるか、または基（ｃ）でありかつＲ^３がベンゾイルであるか、または基（ｄ）もしくは基（ｅ）であり、そしてＺが−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−［配列番号１８］以外のものであり；
（ｉｉｉ）　基（ｂ）でありかつＲ^２が水素であり、そしてＺが−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［配列番号１９］以外のものであり；
（ｉｖ）　基（ｆ）でありかつＲ^４がメチルでありＲ^５がメトキシでありＲ^６とＲ^７がそれぞれ水素であり、そしてＺが
−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−［配列番号２０］、
−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−［配列番号２１］、
−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−［配列番号２２］、
−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−［配列番号２３］、
−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−［配列番号２４］、
−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−［配列番号２５］、
−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−［配列番号２６］、
−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−［配列番号２７］および
−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−［配列番号２８］
以外のものであり；
（ｖ）　基（ｇ）でありかつＲ^８がメチルでありＲ^９がメチルもしくはｎ−ヘキシルであり、または基（ｈ）でありかつＲ^８がエチルでありＲ^９がエチルであり、そしてＺが−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−［配列番号２１］以外のものであり；
（ｖｉ）　基（ｇ）でありかつＲ^８がメチルでありＲ^９がメチルもしくはベンジルであり、そしてＺが−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−［配列番号２９］以外のものであり；
（ｖｉｉ）　基（ｇ）でありかつＲ^８がメチルでありＲ^９がメチルであり、そしてＺが−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−［配列番号３０］以外のものであり；ならびに
（ｖｉｉｉ）　基（ｇ）でありかつＲ^８がメチルでありＲ^９がｎ−ヘキシルであり、そしてＺが−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ ［配列番号１］以外のものである場合である。
【００５６】
式Ｉの全ての化合物のエナンチオマーは新規でありかつまた本発明の部分を形成する。
【００５７】
構造（ａ）〜（ｈ）および式ＩＩＩの化合物を組み込む式ＩＩの化合物は、以下の反応スキームに示すように調製することができる。これらの反応スキームを通じて、式ＩＩおよびＩＩＩの化合物中に存在するＮ保護基Ｘは、好ましいＸの値であるＦｍｏｃとして示されるが、他のＮ保護基をＸとして使用できる対応する化合物を類似の方法で調製しうることは理解されるであろう。
【００５８】
反応スキーム １

ＩＶ→Ｖ
ｉ：　メタノール中の塩化チオニルなどの脱水試薬を用いる、高温、好都合には還流におけるＩＶの処理。
ｉｉ：　例えば、ジクロロメタンなどの適当な溶媒中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートおよびトリエチルアミンを用いる、Ｂｏｃの導入；任意の他の適当なＮ保護基（反応スキーム１には示してない）を類似の方法で導入してもよい。
ｉｉｉ：　好都合にＶを得るための、標準Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件下（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，Ｏ．； Ｗａｄａ，Ｍ．； Ｓａｎｏ，Ｔ．Ｊ． Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９７２， ９４，６７２）における生成物とフタルイミド、ジアゾジカルボン酸ジエチルおよびトリフェニルホスフィンとの反応。
【００５９】
Ｖ→ＶＩ
ｉｖ：　適当には、高温、好都合には約８０℃においてエタノールなどの適当な溶媒中でヒドラジン水和物を用いるＶの処理による、フタルイミド基の切断。
ｖ：　３−アミノ基の標準的保護。
ｖｉ：　例えば、メタノールおよび水中において水酸化リチウムなどの適当な塩基試薬を用いる、メチルエステル基の鹸化。
ｖｉｉ：　次いで、ジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸またはジオキサン中の４Ｎ塩酸などの試薬を用いて、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を切断除去する。
ｖｉｉｉ：　生成したアミノ酸を、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬により、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンのような塩基を使って、ジオキサンおよび水、またはジクロロメタンなどの適当な溶媒または溶媒混合物中で保護し、ＶＩを得る。
【００６０】
反応スキーム ２

Ｖ→ＶＩＩ
ｉ：　ジクロロメタン中でトリフルオロ酢酸を用いる、Ｖの処理
ＶＩＩ→ＶＩＩＩ
ｉｉ：　ＶＩＩを、標準ペプチドカップリング条件下で、ＨＢＴＵおよび１−ヒドロキシベンズトリアゾール（ＨＯＢｔ）などの試薬を用い、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基を用いて、ＤＭＦ中、Ｚ−Ａｓｐ（ｔＢｕ）ＯＨとカップリングさせてＶＩＩＩを得る。
【００６１】
ＶＩＩＩ→ＩＸ
ｉｉｉ：　好都合には、Ｈ_２および木炭上のパラジウムなどの触媒を用いる水素化による、エタノール、ＤＭＦおよび酢酸エチルなどの溶媒中で、Ｚ基の除去。
ｉｖ：　フタルイミド基を、好都合には、エタノールなどの適当な溶媒中で、高温、適当には約８０℃においてヒドラジンを用いる処理により、得た生成物から切断除去する。
ｖ：　生成したアミノ酸を、好都合には、９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬によって、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を使って、ジオキサンおよび水、またはジクロロメタンのような適当な溶媒または溶媒混合物中で保護して、ＩＸを得る（Ｂｉｓａｎｇ，Ｃ．； Ｗｅｂｅｒ，Ｃ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ｈｅｌｖ． Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９６，７９，１８２５−１８４２に記載のとおり）。
【００６２】
反応スキーム３

ＩＶ→Ｘ
ｉ：　メタノールなどの適当な溶媒中で、高温で、好都合には還流下において、塩化チオニルなどの脱水剤を用いて、ＩＶを処理する。
ｉｉ：　得られたアミノ酸エステルを、Ｚ基を導入する標準条件下で、例えば、ベンジルオキシカルボニルクロリドおよびトリエチルアミンを用いて、ジクロロメタンなどの適当な溶媒中でＮ保護する。
ｉｉｉ：　Ｚ保護されたアミノ酸メチルエステルを、トリメチルシリルクロリドおよびトリエチルアミンなどの塩基を用いて、好都合には約−７８℃に冷却したテトラヒドロフランなどの溶媒中で処理し、次いで、リチウムジイソプロピルアミドまたはリチウムヘキサメチルジシリルアジドなどの強塩基およびブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチルと反応させて、ジアステレオマーの混合物としてＸを得る（Ｂｉｓａｎｇ，Ｃ．； Ｊｉａｎｇ，Ｌ．； Ｆｒｅｕｎｄ，Ｅ．； Ｅｍｅｒｙ，Ｆ．； Ｂａｕｃｈ，Ｃ．； Ｍａｔｉｌｅ，Ｈ，； Ｐｌｕｓｃｈｋｅ，Ｇ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９９８， １２０，７４３９−７４４９； Ｅｍｅｒｙ，Ｆ．； Ｂｉｓａｎｇ，Ｃ．； Ｆａｖｒｅ，Ｍ．； Ｊｉａｎｇ，Ｌ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ．１９９６，２１５５−２１５６に記載のとおり）。
【００６３】
Ｘ→ＸＩ
ｉｖ；　Ｘを、フタルイミド、ジアザジカルボン酸ジエチルおよびトリフェニルホスフィンと、標準Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件下で反応させる（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，Ｏ．； Ｗａｄａ，Ｍ．； Ｓａｎｏ，Ｔ．Ｊ． Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９７２， ９４，６７２）。
ｖ；　得られた生成物を、Ｈ_２およびチャコール上のパラジウムなどの適当な触媒を用いて、酢酸エチル、ＤＭＦおよびエタノールなどの溶媒中で水素化する；次いでジアステレオマーの分離が起こる。
ＸＩ→ＸＩＩ
ｖｉ；　ＸＩＩを、標準ペプチドカップリング条件下で、ＨＢＴＵ、ＨＯＡｔなどの試薬およびジイソプロピルエチルアミンなどの塩基を用いて、ＤＭＦなどの適当な溶媒中で、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（アリル）ＯＨとカップリングさせる。
ｖｉｉ；　好都合にはＤＭＦ中でのＤＢＵによる、環化。
【００６４】
ＸＩＩ→ＸＩＩＩ
ｖｉｉｉ；　得られた生成物から、好都合にはヒドラジン分解により、例えばメチルヒドラジンを用いて、ＤＭＦなどの適当な溶媒中で処理することにより、フタルイミド基を開裂除去する。
ｉｘ；　得られた生成物を、好都合には、９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、ジオキサンおよび水、またはジクロロメタンのような適当な溶媒または溶媒混合物中で保護する。
【００６５】
ＸＩＩＩ→ＸＩＶ
ｘ；　例えば、パラジウム（０）を触媒として用い、アリルエステル基を標準的方法で除去する。
【００６６】
反応スキーム４

ＸＶ→ＸＶＩ
ｉ；　ＸＶ（Ｈｕｂｓｃｈｗｅｒｌｅｎ，Ｃ． （Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８６，９６２）に記載の通り、ビタミンＣから得られる）を、フタルイミド、ジアゾジカルボン酸ジエチルおよびトリフェニルホスフィンを用いて、標準Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件下で処理する（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，Ｏ．； Ｗａｄａ，Ｍ．； Ｓａｎｏ，Ｔ．Ｊ． Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９７２， ９４，６７２）。
ｉｉ；　生成物から、好都合にはヒドラジン分解により、例えばメチルヒドラジンを用いて、ＤＭＦなどの適当な溶媒中で処理することにより、フタルイミド基を開裂除去する。ｉｉｉ；　アミノ基を、無水安息香酸または塩化ベンゾイルなどのベンゾイル化試薬、およびトリエチルアミンまたは４−ジメチルアミノピリジンなどの塩基を用いて、ジクロロメタンまたはＤＭＦなどの適当な溶媒中で処理することによって保護する。
ｉｖ；　例えばＫ_２Ｓ_２Ｏ_８およびＮａ_２ＨＰ０_４用い、アセトニトリル水溶液中において、高温、例えば約８０℃において、２，４−ジメトキシベンジル基を除去する。
ｖ；　例えば、重炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、トリエチルアミンおよび触媒量の４−ジメチルアミノピリジン使い、ジクロロメタンなどの適当な溶媒中で、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基を導入する。
ｖｉ；　炭酸ナトリウム水溶液とテトラヒドロフラン中で反応させ、その後酸性化する。ｖｉｉ；　好都合には、ジアゾメタンによるジエチルエーテルなどの適当な溶媒中において、カルボン酸基をエステル化する。
ｖｉｉｉ；　好都合には、チャコール上のパラジウムなどの触媒の存在のもとでエタノール、ＤＭＦなどの溶媒中でＨ_２を用いて水素化し、Ｚ基を除去してＸＶＩを得る（Ｐｆｅｉｆｅｒ，Ｍ． ； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ｊ．Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ． １９９８，１９７７に記載の通り）。
【００６７】
ＸＶＩ→ＸＶＩＩ
ｉｘ；　ＸＶＩを、標準ペプチドカップリング条件下で、ＤＭＦ中において、ＨＢＴＵおよび１−ヒドロキシベンズトリアゾールなどの試薬を用い、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基を用いて、Ｚ−Ａｓｐ（ｔＢｕ）ＯＨとカップリングさせ、ＸＶＩＩを得る（Ｐｆｅｉｆｅｒ，Ｍ． ； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ｊ．Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ． １９９８，１９７７に記載の通り）。
【００６８】
ＸＶＩＩ→ＸＶＩＩＩ
ｘ；　例えば、Ｈ_２およびチャコール上のパラジウムなどの触媒を用いる標準条件下で水素化し、Ｚ基を除去してＸＶＩＩＩを得る（Ｐｆｅｉｆｅｒ，Ｍ． ； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ｊ．Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ． １９９８，１９７７に記載の通り）。
【００６９】
ＸＶＩＩＩ→ＸＩＸ
ｘｉ；　好都合にはジクロロメタン中のトリフルオル酢酸またはジオキサン中の４Ｎ塩酸を用い、ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよびｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基を開裂する。
【００７０】
ｘｉｉ；　生成した、遊離のアミノ酸中間体を、好都合には、９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬を用いて、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を使って、ジオキサンおよび水、またはジクロロメタンなどの適当な溶媒または溶媒混合物中で、保護することによりＸＩＸを得る（Ｐｆｅｉｆｅｒ，Ｍ． ； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｊ．Ａ． Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ． １９９８，１９７７に記載の通り）。
【００７１】
反応スキーム５

ＸＸ → ＸＸＩ
ｉ：　ＸＸの塩化チオニルなどの脱水剤を用いる処理を、メタノールなどの適切な溶媒中で、高温、好都合には約８０℃で行う。
ｉｉ：　その中間体を、リチウムジイソプロピルアミドもしくはリチウムヘキサメチルジシリルアジドなどの強塩基を用い、テトラヒドロフランなどの適切な溶媒中、低温で処理し、ｔ−ブチルブロモアセテートで処理する（Ｐｆｅｉｆｅｒ， Ｍ．； Ｌｉｎｄｅｎ， Ａ．；Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， Ｊ．Ａ． Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９７， ８０， １５１３−１５２７に記載のとおり）。
ｉｉｉ：　水酸化リチウムなどの塩基を用いたけん化を、水およびメタノールなどの適切な溶媒中で行う。
【００７２】
ＸＸＩ → ＸＸＩＩ
ｉｖ：　ＸＸＩと（２Ｓ，４Ｒ）−Ｚ−ヒドロキシプロリンとのカップリングを、標準的なペプチドカップリング条件下、例えばＨＢＴＵおよびＨＯＢＴ、ならびに塩基としてのジイソプロピルエチルアミンを用いて、ＤＭＦなどの適切な溶媒中で行ってＸＸＩＩを得る（Ｐｆｅｉｆｅｒ， Ｍ．； Ｌｉｎｄｅｎ， Ａ．；Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， Ｊ．Ａ． Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９７， ８０， １５１３−１５２７に記載のとおり）。
【００７３】
ＸＸＩＩ →　ＸＸＩＩＩ
ｖ：　例えば、Ｈ２およびチャコール上のパラジウムなどの触媒を用いて、酢酸エチルなどの適切な溶媒中で水素化を行うことによりＺ−基を除去する。
【００７４】
ＸＸＩＩＩ　→　ＸＸＩＶ
ｖｉ：　ＸＸＩＩＩを、標準的な方法に従って、例えば、ピリジン中でｐ−トルエンスルホニルクロリドと反応させることによって、対応するトシラートに転換する。
ｖｉｉ：　トシラート中間体の対応するアジ化物への転換を、例えば、ＤＭＦなどの適切な溶媒中で、高温で、好都合には約８０℃で、アジ化ナトリウムを用いて処理することにより行う。
ｖｉｉｉ：　アジド基のアミノ基への還元を、好都合には、Ｈ２およびチャコール上のパラジウムなど触媒を用いて、酢酸エチルなどの適切な溶媒中で、またはトリフェニルホスフィンを用いて行うことができる。
ｉｘ：　遊離のアミノ酸ｔ−ブチルエステル中間体を、好都合には、９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬を用い、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用い、適切な溶媒又は溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、又はジクロロメタン中で保護する。
ｘ：　例えばジクロロメタン中でのトリフルオロ酢酸を用いる酸分解により、好都合にＸＸＩＶが得られる（Ｐｆｅｉｆｅｒ， Ｍ．； Ｌｉｎｄｅｎ， Ａ．；Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， Ｊ．Ａ． Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９７， ８０， １５１３−１５２７に記載のとおり）。
【００７５】
反応スキーム６

ＸＸＶ　→　ＸＸＶＩ
ｉ：　ＶＩＩとＸＸＶの標準的なペプチドカップリングを、ＨＢＴＵおよびＨＯＢＴなどの試薬および例えばジイソプロピルエチルアミンを塩基として用いて、ＤＭＦなどの適切な溶媒中で標準的なペプチドカップリング条件で行う。
ｉｉ：　Ｈ２およびチャコール上のパラジウムなどの触媒を用いて、酢酸エチル、ＤＭＦ、およびエタノールなどの溶媒中で水素化することによりＸＸＶＩを得る（Ｂｅｅｌｉ， Ｒ； Ｓｔｅｇｅｒ， Ｍ．； Ｌｉｎｄｅｎ， Ａ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， Ｊ．Ａ． Ｈｅｌｖ． Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９６， ７９， ２２３５−２２４８に記載のとおり）。
【００７６】
ＸＸＶＩ　→　ＸＸＶＩＩ
ｉｉｉ：　ＯＨ基の酸化を、ピリジン−三酸化イオウ錯体、ジョーンズ試薬、もしくはＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ 超原子価ヨウ素酸化剤などの試薬を用いて行う。
ｉｖ：　ケトン中間体のＷｉｔｔｉｇ−Ｈｏｒｎｅｒ濃縮を、（ＭｅＯ）２ＰＯＣＨ２ＣＯＯＭｅおよびナトリウムヘキサメチルジシリルアジドなどの塩基を用いて、テトラヒドロフランまたはジメトキシエタンなどの溶媒中で行う（Ｂｅｅｌｉ， Ｒ； Ｓｔｅｇｅｒ， Ｍ．； Ｌｉｎｄｅｎ， Ａ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， Ｊ．Ａ． Ｈｅｌｖ． Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９６， ７９， ２２３５−２２４８に記載のとおり）。
ｖ：　二重結合の立体選択的水素化を、例えばＨ２およびチャコール上のパラジウムなどの触媒を用いて、エタノール、ＤＭＦ、および酢酸エチルなどの溶媒中で行う。
ｖｉ：　フタルイミド中間体のヒドラジン分解を、例えばヒドラジンを用いて、エタノールなどの適切な溶媒中で、高温で、好都合には約８０℃で行う。
ｖｉｉ：　メチルエステル基のケン化を、例えば、水酸化リチウムなどの適切な塩基性試薬を用いて、水およびエタノール中で処理することによって行う。
ｖｉｉｉ：　形成された遊離のアミノ酸中間体を、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、適切な溶媒または溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、またはジクロロメタン中で、保護することによりＸＸＶＩＩを得る（Ｂｅｅｌｉ， Ｒ； Ｓｔｅｇｅｒ， Ｍ．； Ｌｉｎｄｅｎ， Ａ．； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， Ｊ．Ａ． Ｈｅｌｖ． Ｃｈｉｍ． Ａｃｔａ １９９６， ７９， ２２３５−２２４８に記載のとおり）。
【００７７】
反応スキーム７

ＸＸＶＩＩＩ　→　ＸＸＩＸ
ｉ：　ＸＸＶＩＩＩは、Ｐ． Ｗａｌｄｍｅｉｅｒ， 「β−ターンのｓ安定化された環状ペプチドライブラリー合成のための、高度に置換されたキサンテン由来テンプレートの、固体支持体での合成”Ｓｏｌｉｄ−ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｈｉｇｈｌｙ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ ｘａｎｔｈｅｎｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｔｅｍｐｌａｔｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ β−ｔｕｒｎ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ ｃｙｃｌｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ｌｉｂｒａｒｉｅｓ”」， ＰｈＤ論文， Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｚｕｒｉｃｈ， １９９６に従って合成することができる。フタルイミド基を開裂させるために、ＸＸＶＩＩＩを、好都合には、例えばヒドラジン水和物を用いて、エタノールなどの適切な溶媒中で高温、例えば約８０℃で処理することによりヒドラジン分解に付す。
ｉｉ：　アミノニトリル中間体のケン化を、好都合には塩基性条件下で、例えばエタノールなどの適切な溶媒中で水酸化ナトリウム水溶液を用いて、高温で、好都合には還流下で行うことによりＸＸＩＸを得る。
【００７８】
ＸＸＩＸ　→　ＸＸＸ
ｉｉｉ：　 形成された遊離のアミノ酸中間体は、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、適切な溶媒または溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、またはジクロロメタン中で保護することによりＸＸＸを得る（Ｐ． Ｗａｌｄｍｅｉｅｒ， 「β−ターンの安定化された環状ペプチドライブラリー合成のための、高度に置換されたキサンテン由来テンプレートの固体支持体での合成」， ＰｈＤ論文， Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｚｕｒｉｃｈ， １９９６に記載のとおり）。
【００７９】
ＸＸＩＸ　→　ＸＸＸＩ
ｉｖ：　ＸＸＩＸの位置選択的臭素化は、好ましくは酢酸またはジクロロメタン中の臭素を用いて行う。同様にＲ^６＝ＮＯ２を酢酸中のＨＮＯ３で処理することによって導入でき、Ｒ^６＝ＣＨ２−ＮＰｔはＨ２ＳＯ４中のヒドロキシメチルフタルイミドで処理することによって導入することができる。
ｖ：　アミノ基は、好都合にはベンジルオキシカルボニルクロリドまたはスクシンイミドなどの試薬を用い、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、水酸化ナトリウム水溶液などの塩基の存在下で、Ｚ−保護する。
ｖｉ：　カルボン酸基を、好ましくはＤＭＦ中のＤＢＵおよびヨウ化メチルを用いてエステル化する。
【００８０】
ＸＸＸＩ　→　ＸＸＸＩＩ
ｖｉｉ：　低級アルキル、置換された低級アルキル、およびアリール置換基（Ｒ^６）の導入を、好都合にはパラジウム（０）を触媒としたＳｔｉｌｌｅカップリング（Ｓｔｉｌｌｅ， Ｊ． Ｋ． Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． １９８６， ６８， ５０４）およびＳｕｚｕｋｉカップリング（Ｏｈ−ｅ， Ｔ； Ｍｉｊａｕｒａ， Ｎ．； Ｓｕｚｕｋｉ， Ａ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９３， ５８， ２２０１）によって行う。
ｖｉｉｉ：　例えば、Ｈ２およびチャコール上のパラジウムなどの触媒を用い、適切な溶媒、例えばエタノール、ＤＭＦ、および酢酸エチル中で水素化を行うことによりＺ−基を除去する。
ｉｘ：　エステル基の加水分解を、好都合には酸性条件下で、例えば２５％の塩酸水溶液を用いて、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、高温、好ましくは約１００℃で行う。
ｘ：　形成された遊離のアミノ酸中間体を、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、適切な溶媒または溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、またはジクロロメタン中で、保護することによりＸＸＸＩＩを得る。
【００８１】
反応スキーム８

ＸＸＩＸ　→　ＸＸＸＩＩＩ
ｉ：　二重オルト臭素化を、好ましくは、酢酸およびジクロロメタン中の過剰の臭素を用いて行う。同様にＲ^６＝Ｒ^７＝ＮＯ２を酢酸中のＨＮＯ３で処理することによって導入でき、Ｒ^６＝Ｒ^７＝ＣＨ２−ＮＰｔはＨ２ＳＯ４中のヒドロキシメチルフタルイミドで処理することによって導入することができる。
ｉｉ：　アミノ基は、ベンジルオキシカルボニルクロリドまたはスクシンイミドなどの試薬を用い、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、水酸化ナトリウム水溶液などの塩基の存在下で保護、好都合にはＺ−保護する。
ｉｉｉ：　カルボン酸基を、好ましくはＤＭＦ中のＤＢＵおよびヨウ化メチルを用いてエステル化することによりＸＸＸＩＩＩを得る。
【００８２】
ＸＸＸＩＩＩ　→　ＸＸＸＩＶ
ｉｖ：　低級アルキル、置換された低級アルキル、およびアリール置換基（Ｒ^６＝Ｒ^７）の導入を、例えば、パラジウム（０）を触媒としたＳｔｉｌｌｅカップリング（Ｓｔｉｌｌｅ， Ｊ． Ｋ． Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． １９８６， ６８， ５０４）およびＳｕｚｕｋｉカップリング（Ｏｈ−ｅ， Ｔ； Ｍｉｊａｕｒａ， Ｎ．； Ｓｕｚｕｋｉ， Ａ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９３， ５８， ２２０１）によって行う。
【００８３】
ＸＸＸＩＶ　→　ＸＸＸＶ
ｖ：　例えば、Ｈ２およびチャコール上のパラジウムなどの触媒を用いて、適切な溶媒、例えばエタノール、ＤＭＦ、または酢酸エチル中で水素化することによって、ＸＸＸＩＶのＺ−基を除去する。
ｖｉ：　エステル基の加水分解を、好都合には酸性条件下で、例えば２５％の塩酸水溶液を用いて、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、高温、好都合には約１００℃で行う。
ｖｉｉ：　形成された遊離のアミノ酸中間体を、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、適切な溶媒または溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、またはジクロロメタン中で、保護することによりＸＸＸＶを得る。
【００８４】
反応スキーム９

ＸＸＶＩＩＩ　→　ＸＸＸＶＩ
ｉ：　ＸＸＸＶＩＩＩのメトキシ基の開裂を、好ましくは過剰の三臭化ホウ素を用いて、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中で行う。
ｉｉ：　酸性条件下でのシアノ基の加水分解を、好ましくは２５％の塩酸水溶液を用いて、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、高温、好都合には約１００℃で行う。
ｉｉｉ：　得られた酸を、塩化チオニルなどの脱水剤を用い、ジオキサンなどの適切な溶媒中で処理することによりＸＸＸＶＩを得る。
【００８５】
ＸＸＸＶＩ　→　ＸＸＸＶＩＩ
ｉｖ：　 ＸＸＸＶＩの処理を、適切なトリフラート化試薬、好ましくはトリフルオロスルホン酸無水物を用い、２，６−ジ−ｔ−ブチルピリジンなどの塩基の存在下で、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中で行う。
ｖ：　その中間体の加熱を、好都合にはメタノールなどの適切な溶媒中で行う。
【００８６】
ＸＸＸＶＩＩ　→　ＸＸＸＶＩＩＩ
ｖｉ：　低級アルキルまたはアリール−低級アルキル（Ｒ^４）をアルキル化によって導入する。
【００８７】
ＸＸＸＶＩＩＩ　→　ＸＸＸＩＶ
ｖｉｉ：　低級アルキルまたはアリール（Ｒ^５）の導入を、好都合にはパラジウム（０）を触媒としたＳｕｚｕｋｉカップリング（Ｏｈ−ｅ， Ｔ； Ｍｉｊａｕｒａ， Ｎ．； Ｓｕｚｕｋｉ， Ａ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９３， ５８， ２２０１）によって行う。
【００８８】
ＸＸＸＩＸ　→　ＸＬ
ｖｉｉｉ：　 エステル基の加水分解を、酸性条件下で、好都合には２５％の塩酸水溶液を用いて、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、高温、例えば約１００℃で行う。
ｉｘ：　フタルイミド基の開裂を、好都合にはヒドラジン分解により、例えばヒドラジン水和物を用いて、エタノールなどの適切な溶媒中で行う。
ｘ：　形成された遊離のアミノ酸中間体を、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、適切な溶媒または溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、またはジクロロメタン中で、保護することによりＸＬを得る。
【００８９】
反応スキーム１０

ＸＸＸＶＩ　→　ＸＬＩ
ｉ：　ＸＸＸＶＩの臭素化を、臭素などの試薬を用いて、酢酸とジクロロメタンの混合物中で、約０℃からほぼ室温までの範囲の温度で行う。
ｉｉ：　水酸基のベンゾイル化を、塩化ベンゾイルまたは安息香酸無水物などの適切なアシル化剤を用いて、ピリジンまたはトリエチルアミンなどの塩基、およびジクロロメタンなどの適切な溶剤中で行う。
【００９０】
ＸＬＩ　→　ＸＬＩＩ
ｉｉｉ：　ＸＬＩをメタノールおよびカンファースルホン酸などの酸性触媒の触媒量を用いて、加熱しつつ処理する。
ｉｖ：　低級アルキルまたはアリール−低級アルキル（Ｒ^４）の導入を、水素化ナトリウムまたはカリウムｔ−ブトキシドなどの塩基を用いて、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン、またはＤＭＦなどの溶媒中で行う。
【００９１】
ＸＬＩＩ　→　ＸＬＩＩＩ
ｖ：　低級アルキル、置換された低級アルキル、およびアリール置換基（Ｒ^７）の導入を、パラジウム（０）を触媒としたＳｔｉｌｌｅカップリング（Ｓｔｉｌｌｅ， Ｊ． Ｋ． Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． １９８６， ６８， ５０４）およびＳｕｚｕｋｉカップリング（Ｏｈ−ｅ， Ｔ； Ｍｉｊａｕｒａ， Ｎ．； Ｓｕｚｕｋｉ， Ａ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９３， ５８， ２２０１）によって行う。
ｖｉ：　ベンジルオキシ基を開裂させるために、その中間体を、好都合には酸化アルミニウムに吸着させたシアン化ナトリウムおよびメタノールと共に加熱する。
ｖｉｉ：　適切なトリフラート化試薬、好ましくはトリフルオロスルホン酸無水物を用いて、２，６−ジ−ｔ−ブチルピリジンなどの塩基の存在下で、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中で処理する。
ｖｉｉｉ：　低級アルキルおよびアリール置換基（Ｒ^５）の導入を、例えばパラジウム（０）を触媒としたＳｔｉｌｌｅカップリング（Ｓｔｉｌｌｅ， Ｊ． Ｋ． Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． １９８６， ６８， ５０４）およびＳｕｚｕｋｉカップリング（Ｏｈ−ｅ， Ｔ； Ｍｉｊａｕｒａ， Ｎ．； Ｓｕｚｕｋｉ， Ａ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９３， ５８， ２２０１）によって行う。
【００９２】
ＸＬＩＩＩ　→　ＸＬＩＶ
ｉｘ：　臭素化を、標準的な条件下で、例えば、臭素を用いて、酢酸およびジクロロメタン中で、約０℃からほぼ室温までの範囲の温度で行う。
【００９３】
ＸＬＩＶ　→　ＸＬＶ
ｘ：　低級アルキル、置換された低級アルキル、およびアリール置換基（Ｒ^６）の導入を、例えば、パラジウム（０）を触媒としたＳｔｉｌｌｅカップリング（Ｓｔｉｌｌｅ， Ｊ． Ｋ． Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． １９８６， ６８， ５０４）およびＳｕｚｕｋｉカップリング（Ｏｈ−ｅ， Ｔ； Ｍｉｊａｕｒａ， Ｎ．； Ｓｕｚｕｋｉ， Ａ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９３， ５８， ２２０１）によって行う。
【００９４】
ＸＬＶ　→　ＸＬＶＩ
ｘｉ：　エステル基の加水分解を、酸性条件下、好都合には２５％の塩酸水溶液を用いて、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、高温、例えば約１００℃で行う。
ｘｉｉ：　フタルイミド基の開裂を、例えばヒドラジン分解により、好都合にはヒドラジン水和物を用い、エタノールなどの適切な溶媒中で行う。
ｘｉｉｉ：　形成された遊離のアミノ酸中間体を、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、適切な溶媒または溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、またはジクロロメタン中で保護することによりＸＬＶＩを得る。
【００９５】
反応スキーム１１

ＸＬＶＩＩ　→　ＸＬＶＩＩＩ
ｉ：　３，７−ジメトキシフェノチアジンを調製し、Ｍｕｌｌｅｒ， Ｋ．； Ｏｂｒｅｃｈｔ， Ｄ．； Ｋｎｉｅｒｚｉｎｇｅｒ， Ａ．； Ｓｐｉｅｇｌｅｒ， Ｃ．； Ｂａｎｎｗａｒｔｈ， Ｗ．；Ｔｒｚｅｃｉａｋ， Ａ．； Ｅｎｇｌｅｒｔ， Ｇ．； Ｌａｂｈａｒｄｔ， Ａ．； Ｓｃｈｏｎｈｏｌｚｅｒ， Ｐ．； Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｔｅｓｔａ， Ｂ．； Ｋｙｂｕｒｚ， Ｅ．； Ｆｕｈｒｅｒ， Ｗ．； Ｇｉｇｅｒ， Ｒ．編， Ｗｅｉｎｈｅｉｍ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｂａｓｅｌ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ： Ｖｅｒｌａｇ Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ， １９９３， ５１３−５３１； Ｂａｎｎｗａｒｔｈ， Ｗ．； Ｇｅｒｂｅｒ， Ｆ．； Ｇｒｉｅｄｅｒ， Ａ．； Ｋｎｉｅｒｚｉｎｇｅｒ， Ａ．； Ｍｕｌｌｅｒ， Ｋ．； Ｏｂｒｅｃｈｔ， Ｄ．； Ｔｒｚｅｃｉａｋ， Ａ．， カナダ特許出願ＣＡ２１０１５９９（１３１ページ）に従ってＸＬＶＩＩに転換する。好都合には、例えばＨ_２およびチャコール上のパラジウムなどの触媒を用いて、エタノール、ＤＭＦ、または酢酸エチルなどの適切な溶媒中で水素化することにより、ＸＬＶＩＩからベンジル基を開裂除去する。
ｉｉ：　低級アルキル（Ｒ^９）の導入を、液体窒素中のナトリウムアミドまたはテトラヒドロフラン、ジオキサン、もしくはＤＭＦ中の水素化ナトリウムなどの強塩基を用いて、ＴＤＡ−Ｉなどの相転移触媒の存在下で、適切なアルキル化剤（Ｒ^９＝Ｘ’ Ｘ’＝ＯＴｆ、Ｂｒ、Ｉ）でアルキル化することにより行う。同様な方法で置換された低級アルキル（Ｒ^９）を導入することができる；例えば、Ｒ^９＝ＣＨ２ＣＯＯＲ^１０およびＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＲ^１０はそれぞれ適切な２−ハロ酢酸誘導体および３−ハロプロピオン酸誘導体で処理することにより導入することができる。
【００９６】
ＸＬＶＩＩＩ　→　ＩＬ
ｉｉｉ：　ＸＬＶＩＩＩのメトキシ基の開裂を、好都合には過剰の三臭化ホウ素を用いて、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中で、約−２０℃からほぼ室温までの範囲の温度で処理することにより行う。
ｉｖ：　低級アルキル、置換された低級アルキル、またはアリール−低級アルキル置換基（Ｒ^８）を導入するために、ｂｉｓ−フェノール誘導体の中間体を、好都合には式Ｒ^８−Ｘ’（Ｘ’＝ＯＴｆ、Ｂｒ、Ｉ）と、テトラヒドロフラン、ジオキサン、またはＤＭＦ中の水素化ナトリウムなどの強塩基の存在下で、ＴＤＡ−Ｉなどの相転移触媒の存在下で反応させる。
【００９７】
ＸＬＶＩＩＩ　→　Ｌ　 ＩＬ　→　ＬＩ
ｖ：　ＸＬＶＩＩＩおよびＩＬのシアノ基の加水分解をそれぞれ、好都合には酸性条件下で、例えば２５％の塩酸水溶液を用いて、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、高温、例えば約１００℃で行う。
ｖｉ：　その中間体のフタルイミド基を、好都合にはヒドラジン分解によって、例えばヒドラジン水和物を用いて、エタノールなどの適切な溶媒中で、開裂させる。
【００９８】
ｖｉｉ：　遊離のアミノ基を、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、適切な溶媒または溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、またはジクロロメタン中で保護することによりＬおよびＬＩをそれぞれ得る。
【００９９】
反応スキーム１２

ＬＩＩＩ　→　ＬＩＶ
ｉ：　ＬＩＩは市販のレゾルフィンから調製でき、Ｍｕｌｌｅｒ， Ｋ．； Ｏｂｒｅｃｈｔ， Ｄ．； Ｋｎｉｅｒｚｉｎｇｅｒ， Ａ．； Ｓｐｉｅｇｌｅｒ， Ｃ．； Ｂａｎｎｗａｒｔｈ， Ｗ．；Ｔｒｚｅｃｉａｋ， Ａ．； Ｅｎｇｌｅｒｔ， Ｇ．； Ｌａｂｈａｒｄｔ， Ａ．； Ｓｃｈｏｎｈｏｌｚｅｒ， Ｐ．； Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｔｅｓｔａ， Ｂ．； Ｋｙｂｕｒｚ， Ｅ．； Ｆｕｈｒｅｒ， Ｗ．； Ｇｉｇｅｒ， Ｒ．編， Ｗｅｉｎｈｅｉｍ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｂａｓｅｌ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ： Ｖｅｒｌａｇ Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ， １９９３， ５１３−５３１； Ｂａｎｎｗａｒｔｈ， Ｗ．； Ｇｅｒｂｅｒ， Ｆ．； Ｇｒｉｅｄｅｒ， Ａ．； Ｋｎｉｅｒｚｉｎｇｅｒ， Ａ．； Ｍｕｌｌｅｒ， Ｋ．； Ｏｂｒｅｃｈｔ， Ｄ．； Ｔｒｚｅｃｉａｋ， Ａ．， カナダ特許出願ＣＡ２１０１５９９（１３１ページ）に従ってＬＩＩＩへと転換する。ベンジル基をはずすために、ＬＩＩＩを好都合には、例えば水素およびチャコール上のパラジウムなどの触媒を用いて、エタノール、ＤＭＦ、または酢酸エチルなどの適切な溶媒中で水素化する。
ｉｉ：　低級アルキル（Ｒ^９）の導入を、液体窒素中のナトリウムアミドまたはテトラヒドロフラン、ジオキサン、もしくはＤＭＦ中の水素化ナトリウムなどの強塩基を用いて、ＴＤＡ−Ｉなどの相転移触媒の存在下、Ｒ^９＝Ｘ’（Ｘ’＝ＯＴｆ、Ｂｒ、Ｉ）でアルキル化することによりＬＩＶを得る。同様な方法で置換された低級アルキル（Ｒ^９）を導入することができる；例えば、Ｒ^９＝ＣＨ２ＣＯＯＲ^１０およびＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＲ^１０はそれぞれ適切な２−ハロ酢酸誘導体および３−ハロプロピオン酸誘導体で処理することにより導入することができる。
【０１００】
ＬＩＶ　→　ＬＶ
ｉｉｉ：　ＬＩＶのメトキシ基の開裂を、好都合には過剰の三臭化ホウ素を用いて、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中で、約−２０℃からほぼ室温までの範囲の温度で処理することにより行う。
ｉｖ：　ｂｉｓ−フェノール誘導体の中間体を、好ましくはＲ^８−Ｘ’（Ｘ’＝ＯＴｆ、Ｂｒ、Ｉ）と、テトラヒドロフラン、ジオキサン、またはＤＭＦ中の水素化ナトリウムなどの強塩基の存在下で、ＴＤＡ−Ｉなどの相転移触媒の存在下で反応させる。
【０１０１】
ＬＩＶ　→　ＬＶＩ　ＬＶ　→　ＬＶＩＩ
ｖ：　ＬＩＶおよびＬＶのシアノ基の加水分解をそれぞれ、酸性条件下で、例えば２５％の塩酸水溶液を用いて、ジオキサンなどの適切な溶媒中で、高温、好都合には約１００℃で行う。
ｖｉ：　フタルイミド基を、好都合にはヒドラジン分解によって、例えばヒドラジン水和物などを用いて、エタノールなどの適切な溶媒中で、開裂させる。
ｖｉｉ：　遊離のアミノ基を、好都合には９−フルオレニルメトキシカルボニルクロリドまたは９−フルオレニルメトキシカルボニルスクシンイミドなどの試薬で、炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンなどの塩基を用いて、適切な溶媒または溶媒の混合物、例えばジオキサンと水、またはジクロロメタン中で、保護することによりＬＶＩおよびＬＶＩＩをそれぞれ得る。
【０１０２】
下記の実施例は本発明をより詳細に説明するものであるが、本発明の範囲をどのような意味においても限定することは意図していない。
【０１０３】
実施例 １
式 Ｉ の単一化合物の調製
２−クロロトリチルクロリド樹脂（１．２５ミリモル／ｇ、１．７５ミリモル）１．４ｇを三口フラスコ中に入れた。その樹脂をＤＣＭ（１４ｍＬ）中に懸濁し、室温で連続的に攪拌しつつ膨潤させた。その樹脂をＤＣＭ（１０ｍＬ）中に１．２５ｇ（１．０７７当量）のＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨおよび０．８９８ｍＬのジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）を含む液で処理し、その混合液を２５℃で１５分間振盪し、あらかじめ膨潤させた樹脂に注ぎ、２５℃で１８時間攪拌した。樹脂の色は紫色に変化し、溶液は黄色のままであった。その樹脂を十分洗い、減圧下で４時間、４０℃で乾燥させた。
【０１０４】
収率： ２，３７９ｇ　　 ロード： ８４％
このエステル化された樹脂は次いで下記の合成サイクルにかけ、その量は１反応容器あたり４０ｍｇであった。

＋４当量 １−ベンゾトリアゾール−１−イル−テトラメチルウロニウム（ｕｒｏｕｎｉｕｍ）ヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）

各ステップで５ｍＬの溶媒を用いた。Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを上記のプロトコールに従って結合させた。
【０１０５】
完全に保護されたペプチド断片の開裂
合成の完了後、ペプチド樹脂をＤＣＭ中にＴＦＡを１％（ｖ／ｖ）含有する液５ｍＬ中に懸濁し、１０分間攪拌し、樹脂はろ過して除き、ろ液をピリジン（１当量）で中和した。この操作を２回繰り返して開裂の完了を確実にした。ろ液を留去、乾固し、逆相（ＲＰ）−ＨＰＬＣで分析して直鎖状ペプチド合成の効率をモニターした。
【０１０６】
Ｈ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ 直鎖ペプチド ［ 配列番号 ３１］ の環状化
５０ｍｇ（０．０２９４ミリモル）の完全に保護された直鎖状ペプチドをＤＭＦ（５０ｍＬ、濃度 １ｍｇ／ｍＬ）中に溶解した。次いで３３．５ｍｇ（０．０８８２ミリモル、３当量）のＨＡＴＵ、１２．０ｍｇ（０．０８８２ミリモル、３当量）のＨＯＡｔ、および５ｍＬのＤＩＰＥＡ（１％ ｖ／ｖ）を添加し、その混合液を２０℃で１６時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮した。残査をジクロロメタン（ＤＣＭ）とＨ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ（９０：１０）とに分配した。ＤＣＭ相を留去して完全に保護された環状ペプチドの純品を得た。
【０１０７】
環状ペプチドの保護基除去
得られた非晶質の粉末を、９５％のトリフルオロ酢酸、２．５％の水、および２．５％のトリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）を含有する開裂混合液２ｍＬ中で溶解した。この混合液を２０℃で２時間静置し、次いで減圧下で濃縮した。残査をジエチルエーテルを用いて粉末化し、２０ｍｇの化合物１ ［配列番号３２］が白色粉末として得られた。
【０１０８】

Ｃ５５Ｈ９５Ｎ１５Ｏ１２， ＭＷ １１５８．５
ＭＳ（ＥＳＩ）：　５８０．０２（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋， ３８７．０２（Ｍ＋３Ｈ^＋）^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　７．５１
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：５％アセトニトリル／水（０．１％ トリフルオロ酢酸）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；５分間一定に維持し、５％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に５分かけて戻す。
【０１０９】
実施例 ２
式 Ｉ の単一化合物の調製
実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物２を得た［配列番号３３］：

Ｃ６２Ｈ９５Ｎ１５Ｏ１４， ＭＷ １２７４．５
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６３８．４（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋， ４２４．８．０２（Ｍ＋３Ｈ^＋）^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　８．５９
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：５％アセトニトリル／水（０．１％ トリフルオロ酢酸）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；５分間一定に維持し、５％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に５分かけて戻す。
【０１１０】
実施例 ３
式 Ｉ の単一化合物の調製
実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３を得た［配列番号３４］：

Ｃ６６Ｈ９７Ｎ１７Ｏ１２， ＭＷ １３２０．６
ＭＳ（ＥＳＩ）：　１３２１．６（Ｍ＋Ｈ^＋）^＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　９．０４
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：５％アセトニトリル／水（０．１％ トリフルオロ酢酸）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；５分間一定に維持し、５％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に５分かけて戻す。
【０１１１】
実施例 ４
式 Ｉ の単一化合物の調製
実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物４を得た［配列番号３５］：

Ｃ５０Ｈ８７Ｎ１５Ｏ１２， ＭＷ １０９０．５
ＭＳ（ＥＳＩ）：　５４６．１５．４（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋， ３６４．３（Ｍ＋３Ｈ^＋）^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　１２．５１
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：５％アセトニトリル／水（０．１％ トリフルオロ酢酸）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；５分間一定に維持し、５％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に５分かけて戻す。
【０１１２】
実施例 ５
式 Ｉ の単一化合物の調製
実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物５を得た［配列番号３６］：

Ｃ５０Ｈ８７Ｎ１５Ｏ１４， ＭＷ １１２２．３
ＭＳ（ＥＳＩ）：　５６２．１５（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋， ３７５．３（Ｍ＋３Ｈ^＋）^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　５．７４
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：５％アセトニトリル／水（０．１％ トリフルオロ酢酸）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；５分間一定に維持し、５％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に５分かけて戻す。
【０１１３】
実施例 ６
ジプロリンテンプレート上で ＰＤＦＦ− ループ −ＩＩＩ の類似物を得るための、式 Ｉ の化合物のライブラリーの合成とその固相アッセイでの試験
１． 標的ペプチド
ｘ１−ｘ４：可変アミノ酸残基（ｘ）
ＶａｌＡｒｇＬｙｓＬｙｓ（ＶＲＫＫ）［配列番号１］：不変のアミノ酸残基
^ＤＰｒｏ^Ｌｐｒｏ：テンプレート

［配列番号３７］
ｘ１^１−４：Ｇｌｕ， Ｔｙｒ， Ｔｒｐ， Ａｌａ
ｘ２^１−６：Ｉｌｅ， Ｔｙｒ， Ｔｒｐ， Ａｌａ， Ｓｅｒ， Ｌｙｓ
ｘ３^１−６：Ｐｒｏ， Ｔｙｒ， Ｔｒｐ， Ａｌａ， Ｓｅｒ， Ｌｙｓ
ｘ４^１−４：Ｉｌｅ， Ｔｙｒ， Ｔｒｐ， Ａｌａ
【表１】

２． 　実験方法
２．１　保護された直鎖ペプチドの合成
第１のアミノ酸Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（１当量）を、ＤＣＭ中の３当量ＤＩＥＡを用いて塩化２−クロロトリチル樹脂（Ｐｏｌｙｐｈｏｒ， １．２５ミリモル／ｇ）と一晩かけて連結し、その結合率は約８５％であった。その直鎖ペプチドを標準的なＦｍｏｃの化学反応を用いて、各アミノ酸を各々４当量、および各４当量のＨＢＴＵおよびＨＯＢｔ、ならびに６当量のＤＩＥＡを用い、ＤＭＦ中でカップリング時間を１．５〜２時間としてアセンブルした。保護された直鎖ペプチドをＤＣＭ中の１％ ＴＦＡを用いて樹脂から開裂させ（２×１０分）、ピリジン（１当量）で中和し、溶媒を留去した。
【０１１４】
２．２　保護された直鎖ペプチドの環状化
保護された直鎖ペプチド（精製はしていない）は、ＤＭＦ中で１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で、ＨＡＴＵ（３当量）、ＨＯＡｔ（３当量）、およびＤＩＥＡ（１％ ｖ／ｖ）を用いて１６時間反応させ直接的に環状化した。次いで、ＤＭＦおよびＤＩＥＡを留去し、残査をＤＣＭで溶解し、その溶液をＨ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ（９０：１０）で抽出し、その後ＤＣＭを除去した。
【０１１５】
２．３　環状ペプチドの保護基除去
環状化した生成物を９５％ ＴＦＡ、２．５％ Ｈ２Ｏ、および２．５％ ＴＩＳで２時間処理し、次いでＴＦＡの大部分を留去した。Ｅｔ２Ｏを添加し、生成物を沈殿させた。遠心後、エーテルを注意深く除去し、減圧下で乾燥して最終生成物を得た。その純度の如何によっては、その生成物を調製用ＨＰＬＣで精製した。
【０１１６】
２．４　固相アッセイ
血小板由来成長因子β受容体（ＰＤＧＦＲ−β）の直接的固定化を免疫吸着用９６ウエルプレート（Ｎｕｎｃ）中で、１００μＬの１５ｍＭ Ｎａ_２ＣＯ_３、３５ｍＭ ＮａＨＣＯ_３， ｐＨ９．６中の１００ｎｇの精製タンパク質とともに４℃、一晩インキュベートすることによって行った。プレートをＴｒｉｓ緩衝生理食塩水（ＴＢＳ， ２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ， ｐＨ７．４）で１回洗い、非特異的吸着をＴＢＳに１％ ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を添加した液で少なくとも１時間インキュベートしてブロックした。ＴＢＳに０．１％ Ｔｗｅｅｎを添加した液で洗浄した後、３０００ｃｐｍの^１２５Ｉ−ＰＤＧＦ−ＢＢおよび非標識ＰＤＧＦ−ＢＢもしくは供試ペプチド（徐々に増量）をウエルに添加し（２回測定のため２つのウエルに添加）、０．１％ Ｔｗｅｅｎ、１ｍＭ ＣａＣｌ_２、１ｍＭ ＭｇＣｌ_２、および１％ ＢＳＡを添加したＴＢＳ中で、室温で３時間インキュベートした。プレートをＴＢＳに０．１％ Ｔｗｅｅｎを添加した液で３回洗浄した後、γカウンターでの計数の前に、結合したリガンドを０．１Ｍ クエン酸， ｐＨ２．５で除去した。
【０１１７】
３． 　結果
この環状ペプチドの分析および精製を、調製用ＨＰＬＣ（デュアルポンプＰｈａｒｍａｃｉａシステムにＷａｔｅｒｓ ＲＣＭ−μＢｏｎｄａｐａｋ（商標）−Ｃ１８−カートリッジ、１０μｍ ３００Ａ 調製用には２５×１００ｍｍ、分析用には８×１００ｍｍ、流速はそれぞれ８および２ｍＬ／ｍｉｎ； ＵＶでの検出は２２６ｎｍおよび２７８ｎｍ）、次いでＭＳ、ＮＭＲ（６００ＭＨｚ， １Ｈ）、およびＣＤによって行った。固相アッセイは２．４に記載のとおり行った。
【０１１８】
４． 　考察
４．１．　直鎖ペプチドをＨＰＬＣで分析したところ、２４種の化合物全てが９５％を超える純度であることが判明し、このことはアミノ酸のアセンブルが高い信頼性で行われたことを示している。
【０１１９】
４．２　環状化ペプチド
ａ）　この直鎖ペプチドを樹脂から開裂させ、ピリジンで中和してピリジン塩を形成させたが、このピリジン塩は環状化の前に精製する必要はなかった。
【０１２０】
ｂ）　環状化のためのペプチドの種々の濃度、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ／ｍＬ ＤＭＦを比較し、１ｍｇ／ｍＬの濃度が最良の結果となった。
【０１２１】
ｃ）　粗製生成物の純度は表２に示す。
【０１２２】
４．３．　固相アッセイ
ＩＣ５０値は表２に示す。粗製ペプチドと精製ペプチドの間のＩＣ５０値の相異はわずかであった。
【０１２３】
【表２】

分析的ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：５％アセトニトリル／水（０．１％ トリフルオロ酢酸）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；５分間一定に維持し、５％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に５分かけて戻す。
【０１２４】
実施例 ２５−４０
下記の実施例は、３種の異なるテンプレートおよび１種の共通のキイモチーフである−ｋ^１−ｘ^１−テンプレート−ｘ^２−ｋ^２［配列番号５７］（ここでｘ^１＝Ｙ，Ｆ，ＫもしくはＷ、ｘ^２＝Ｙ、ｋ^１＝Ｋ、およびｋ^２＝Ｅである）を取り込んでいる６ ｍｅｒ、８ ｍｅｒ、１０ ｍｅｒ、１２ ｍｅｒ、１４ ｍｅｒ、および１６ ｍｅｒのβヘアピンループ類似物を合成する、該プロセスの適用について述べている。βヘアピン構造を取っているため、ｘ^１とｘ^２はβ−シートの同じ側にあり、疎水性のパッチを形成している。このようなモチーフは、例えば種々のケモカイン中に存在する（Ｔａｒｂｙ， Ｃ．Ｍ．； Ｓａｕｎｄｅｒｓ， Ｊ．， Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔｏｄａｙ １９９９， ４， ８０−９２； Ｐｏｎａｔｈ， Ｐ．Ｄ． Ｅｘｐ． Ｏｐｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｒｕｇｓ １９９８， ７， １−１６を参照）。
【０１２５】
１． 　 （２Ｓ，６Ｓ，８ａＳ）−８ａ−｛［（ｔ− ブチル ） オキシカルボニル ］ メチル ｝ ペルヒドロ −５，８− ジオキソ −｛［（９Ｈ− フルオレン −９− イル ） メトキシカルボニル ］ アミノ ｝− ピロロ ［１，２−ａ］ ピラジン −６− 酢酸 （ テンプレート ｂ１） の合成
脱気したジクロロメタン／メタノール（９：１， ３ｍＬ）中に２５０ｍｇ（０．４１４ミリモル）のアリル｛（２Ｓ，６Ｓ，８ａＳ）−８ａ−［（ｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝ペルヒドロ−５，８−ジオキソ−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシカルボニル］アミノ｝−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６−酢酸を含有する溶液を攪拌し、それにアルゴン雰囲気下で２５ｍｇ（０．０２１６ミリモル）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、０．０５ｍＬの酢酸、および０．０２５ｍＬのＮ−メチルモルホリンを添加した。この反応混合液を室温で４８時間攪拌し、水およびジクロロメタンに注いだ。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、留去し、その残査をＳｉＯ_２でジクロロメタン／メタノール（９：１）を用いてクロマトグラフィーを行い１８０ｍｇ（７７％）の（２Ｓ，６Ｓ，８ａＳ）−８ａ−｛［（ｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝ペルヒドロ−５，８−ジオキソ−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシカルボニル］アミノ｝−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６−酢酸（テンプレートｂ１）を白色粉末として得た。
【０１２６】
^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ_６）：８．３０（ｓ，１Ｈ）；７．８８（ｄ，Ｊ＝７．２， ２Ｈ）；７．６７（ｄ，Ｊ＝７．４， ２Ｈ）；７．６２（ｂｒ．ｓ， １Ｈ）；７．４１（ｔ，Ｊ＝７．２， ２Ｈ）；７．３３（ｔ，Ｊ＝７．４， ２Ｈ）；４．３５−４．２（ｍ， ５Ｈ）；３．５５（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝６．３， ２Ｈ）；２．８−２．５５（ｍ， ３Ｈ）；２．４５−２．２５（ｍ， ２Ｈ）；２．１−１．９５（ｍ， １Ｈ）；１．３５（ｓ， ９Ｈ）； ＭＳ（ＥＳＩ）：５８６．１（Ｍ＋Ｎａ）^＋， ５６４．１（Ｍ＋Ｈ）^＋
２． 　直鎖ペプチドの合成
第１のアミノ酸Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（１当量）を、ＤＣＭ中の３当量のＤＩＥＡを用いて２−クロロトリチルクロリド樹脂（Ｐｏｌｙｐｈｏｒ， １．２５ミリモル／ｇ）と一晩かけて連結し、その結合率は約８０％であった。その直鎖ペプチドを標準的なＦｍｏｃの化学反応を用いて、各アミノ酸を４当量ずつ、および４当量のテンプレート（もしくは、適切であるならば、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨおよびＦｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ）、各４当量のＨＢＴＵおよびＨＯＢｔ、ならびに６当量のＤＩＥＡを用い、ＤＭＦ中でカップリング時間を１．５〜２時間としてアセンブルした。保護された直鎖ペプチドをＤＣＭ中の１％ ＴＦＡを用いて樹脂から開裂させ（４×１０分）、ピリジン（１当量）で中和し、溶媒を留去した。
【０１２７】
３． 　直鎖ペプチドの環状化
保護された直鎖ペプチド（精製はしていない）は、ＤＭＦ中で１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で、ＨＡＴＵ（３当量）、ＨＯＡｔ（３当量）、およびＤＩＥＡ（１％ ｖ／ｖ）を用いて１６時間反応させ直接的に環状化した。次いで、ＤＭＦおよびＤＩＥＡを留去し、残査をＤＣＭで溶解し、その溶液をＨ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ（９０：１０）で抽出し、その後ＤＣＭを除去した。
【０１２８】
４． 　環状ペプチドの保護基除去
環状化した生成物を９５％ ＴＦＡ、２．５％ Ｈ２Ｏ、および２．５％ ＴＩＳで２時間処理し、次いでＴＦＡの大部分を留去した。Ｅｔ２Ｏを添加し、生成物を沈殿させた。遠心後、エーテルを注意深く除去し、減圧下で乾燥して最終生成物を得た。その純度の如何によっては、その生成物を調製用ＨＰＬＣで精製した。下記のテンプレートを用いた。
【０１２９】

実施例 ２５：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物２５を得た［配列番号５８］：
ＭＷ：　　Ｃ５７Ｈ８５Ｎ１７Ｏ１４， ［１２３２．３０］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６１６．７２（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　１０．８３
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３０】
実施例 ２６：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物２６を得た［配列番号５９］：
ＭＷ：　　Ｃ５７Ｈ８５Ｎ１７Ｏ１３， ［１２１６．４１］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６０８．８（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　８．２７
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３１】
実施例 ２７：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物２７を得た［配列番号６０］：
ＭＷ：　　Ｃ５４Ｈ８８Ｎ１８Ｏ１３， ［１１９７．４］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　５９９．４（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　８．８５
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３２】
実施例 ２８：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物２８を得た［配列番号６１］：
ＭＷ：　　Ｃ５９Ｈ８７Ｎ１８Ｏ１３， ［１２５６．４］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６２８．５０（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋、４１９．２０［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　９．１６
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３３】
実施例 ２９：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物２９を得た［配列番号６２］：
ＭＷ：　　Ｃ８６Ｈ１２２Ｎ２２Ｏ２２， ［１８１６］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　９０８（Ｍ＋２Ｈ^＋）^２＋、６０６．２［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　８．４０
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３４】
実施例 ３０：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３０を得た［配列番号６３］：
ＭＷ：　　Ｃ８３Ｈ１２５Ｎ２３Ｏ２１， ［１７８１］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　５９４．６［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　９．０４
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３５】
実施例 ３１：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３１を得た［配列番号６４］：
ＭＷ：　　Ｃ８３Ｈ１２５Ｎ２３Ｏ２１， ［１７２１］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　８９１．１５［Ｍ＋２Ｈ^＋］^２＋、５９４．８５［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　９．８４
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３６】
実施例 ３２：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３２を得た［配列番号６５］：
ＭＷ：　　Ｃ１１０Ｈ１５０Ｎ２６Ｏ２６， ［２２５２．４］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　７５１．９３［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　９．４２
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３７】
実施例 ３３：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＬＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−^ＤＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３３を得た［配列番号６６］：
ＭＷ：　　Ｃ１０４Ｈ１５６Ｎ２８Ｏ２６， ［２２１４．５］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　７３８．１０［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　１３．４６
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３８】
実施例 ３４：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、テンプレートｆ１、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３４を得た［配列番号６７］：
ＭＷ：　　Ｃ６７Ｈ９１Ｎ１６Ｏ１６， ［１３７６．５］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６８９．０２［Ｍ＋２Ｈ^＋］^２＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　９．８７
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１３９】
実施例 ３５：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、テンプレートｆ１、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３５を得た［配列番号６８］：
ＭＷ：　　Ｃ６７Ｈ９１Ｎ１６Ｏ１５， ［１３６０．１４］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６８１．４４［Ｍ＋２Ｈ^＋］^２＋、４５４．７７［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　９．６８
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１４０】
実施例 ３６：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、テンプレートｆ１、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３６を得た［配列番号６９］：
ＭＷ：　　Ｃ９３Ｈ１３１Ｎ２２Ｏ２３， ［１９２５．１９］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６４３．２８［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　８．８５
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１４１】
実施例 ３７：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、テンプレートｂ１、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３７を得た［配列番号７０］：
ＭＷ：　　Ｃ５４Ｈ７４Ｎ１７Ｏ１４， ［１１８５．１８］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　５９３．８３［Ｍ＋２Ｈ^＋］^２＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　１１．２３
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１４２】
実施例 ３８：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、テンプレートｆ１、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３８を得た［配列番号７１］。
【０１４３】
ＭＷ：　　Ｃ９６Ｈ１２９Ｎ２１Ｏ２２， ［１９２９．２３］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６４４［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋、 ４８３．１１［Ｍ＋４Ｈ^＋］^４＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　９．２２
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１４４】
実施例 ３９：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、テンプレートｂ１、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物３９を得た［配列番号７２］：
ＭＷ：　　Ｃ１０５Ｈ１３８Ｎ２５Ｏ２９， ［２２１４．３］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　７３７．７６［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　１３．２６
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。
【０１４５】
実施例 ４０：

実施例１に述べた方法と類似の方法により、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、テンプレートｆ１、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨを、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨをロードさせた樹脂と結合させ、開裂、環状化、および保護基除去して化合物４０を得た［配列番号７３］：
ＭＷ：　　Ｃ９３Ｈ１３１Ｎ２２Ｏ２３， ［１９２６．２２］
ＭＳ（ＥＳＩ）：　６４３．０１［Ｍ＋３Ｈ^＋］^３＋、４８２．３５［Ｍ＋４Ｈ^＋］^４＋
ＨＰＬＣ−ＲＴ（分）：　８．９９
条件：分析用ＨＰＬＣ条件：カラム　ＣＣ ２５０／４ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ １００−５ Ｐｒｏｔｅｃｔ １（Ｓｅｒ．Ｎｏ． ８１１１３４６， Ｂａｔｃｈ ８０２３）； 勾配：１０％アセトニトリル／９０％水（０．１％ トリフルオロ酢酸含有）から１５分かけて１００％アセトニトリルへ；４分間一定に維持し、１０％アセトニトリル／水（０．１％トリフルオロ酢酸）に４分かけて戻す。

Claims (8)

1. 一般式
   

   

   ［式中、Ｚは、もしそのα炭素原子が不斉であれば、Ｌ配置を有するｎ個のαアミノ酸残基の鎖であって、ここでｎは４〜２０の整数であり、鎖中のアミノ酸残基の位置はＮ末端アミノ酸から出発して数え；
   

   

   は、式
   

   

   （式中、Ｒ^１は水素または保護されたアミノ基であり；
   Ｒ^２は水素または式ＣＨ_２−ＣＯＯＲ^１０の基であり；
   Ｒ^３はアミノ保護基であり；
   Ｒ^４は低級アルキルまたはアリール−低級アルキルであり；
   Ｒ^５は低級アルキル、低級アルコキシまたはアリールであり；
   Ｒ^６は水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、ＢｒまたはＮＯ_２であり；
   Ｒ^７は水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、ＢｒまたはＮＯ_２であり；
   Ｒ^８は低級アルキル、置換低級アルキルまたはアリール−低級アルキルであり；
   Ｒ^９は低級アルキル、置換低級アルキルまたはアリール−低級アルキルであり；そして
   Ｒ^１０は水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、アリール−低級アルキル、アロイル低級アルキルまたはアリルである）の基の１つである］の化合物およびそれらの塩を製造する方法であって、
   （ａ）　適当に官能化した固体支持体を、所望の目的生成物中のもしｎが偶数であれば（ｎ／２）、（ｎ／２）＋１または（ｎ／２）−１の位置に、そしてもしｎが奇数であれば（ｎ／２）＋（１／２）または（ｎ／２）−（１／２）の位置に、それぞれ、存在するアミノ酸の適当にＮ保護された誘導体（ここで、Ｎ保護されたアミノ酸誘導体に存在しうるいずれの官能基も同様に適当に保護されている）とカップリングさせ；
   （ｂ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；
   （ｃ）　このようにして得た生成物を、所望の目的生成物中のＮ末端アミノ酸残基に一位置だけ近いアミノ酸の適当にＮ保護された誘導体（ここで、Ｎ保護されたアミノ酸誘導体に存在しうるいずれの官能基も同様に適当に保護されている）とカップリングさせ；
   （ｄ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；
   （ｅ）　Ｎ末端アミノ酸残基が導入されるまで、もし必要であれば、工程（ｃ）および（ｄ）を繰り返し；
   （ｆ）　このようにして得た生成物を、一般式
   

   

   （式中、
   

   

   は上に定義したとおりでありかつＸはＮ保護基である）の化合物とカップリングさせるか、または、もし
   

   

   が前記の基（ａ）であれば、代わりに、
   （ｆａ）　工程（ｄ）もしくは（ｅ）で得た生成物を、一般式ＩＩＩ
   

   

   （式中、Ｒ^１およびＸは上に定義したとおりである）の化合物とカップリングさせ；
   （ｆｂ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；そして
   （ｆｃ）　このようにして得た生成物をＤ−プロリンの適当にＮ保護された誘導体とカップリングさせ；
   （ｇ）　工程（ｆ）または（ｆｃ）で得た生成物からＮ保護基を外し；
   （ｈ）　このようにして得た生成物を、所望の目的生成物中の位置ｎにあるアミノ酸の適当にＮ保護された誘導体（ここで、Ｎ保護されたアミノ酸誘導体に存在しうるいずれの官能基も同様に適当に保護されている）とカップリングさせ；
   （ｉ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；
   （ｊ）　このようにして得た生成物を、所望の目的生成物中の位置ｎから一位置だけ遠去かるアミノ酸の適当にＮ保護された誘導体（ここで、Ｎ保護されたアミノ酸誘導体に存在しうるいずれの官能基も同様に適当に保護されている）とカップリングさせ；
   （ｋ）　このようにして得た生成物からＮ保護基を外し；
   （ｌ）　全てのアミノ酸残基が導入されるまで、もし必要であれば、工程（ｊ）および（ｋ）を繰り返し；
   （ｍ）　このようにして得た生成物を固体支持体から脱離し；
   （ｎ）　固体支持体から切断した生成物を環化し；
   （ｏ）　アミノ酸残基の鎖のいずれのメンバーの官能基に存在するいずれの保護基および、もし所望であれば、分子中にさらに存在するいずれの保護基も外し、そして
   （ｐ）　もし所望であれば、このようにして得た生成物を塩に転化するかまたはこのようにして得た塩を式Ｉの対応する遊離化合物または異なる塩に転化することを含んでなる、前記方法。
2. 官能化した固体支持体を、ジビニルベンゼンを用いて架橋したポリスチレンから；ポリエチレングリコールスペーサーを用いてコートされたポリスチレンから；またはポリアクリルアミド樹脂から誘導し；そしてリンカー、すなわち一端は固体支持体と結合するためのアンカー基そして他端は次の化学変換および切断過程に使うための選択的に切断しうる官能基を含有する二官能性スペーサー分子を使って官能化する、請求項１に記載の方法。
3. リンカーがアミノ酸のカルボキシル基と酸易分解性のベンジル、ベンズヒドリルまたはトリチルエステルを形成する、請求項２に記載の方法。
4. ３−メトキシ−４−ヒドロキシフェニルフェノキシ（Ｓａｓｒｉｎ）、４−（２，４−ジメトキシフェニル−ヒドロキシメチル）−フェノキシ（Ｒｉｎｋ）、４−（４−ヒドロキシメチル−３−メトキシフェノキシ）酪酸（ＨＭＰＢ）、トリチルまたは２−クロロトリチルリンカーを利用する、請求項３に記載の方法。
5. Ｘおよびアミノ酸誘導体のＮ保護基が９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
6. 請求項１に定義した式Ｉの化合物のエナンチオマーを製造するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法の改変であって、不斉α炭素原子を有する全てのアミノ酸をそれらのＤ型で使用し、構造（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）もしくは（ｅ）に対応するテンプレートのエナンチオマーまたは式（ｆ）、（ｇ）もしくは（ｈ）に対応するテンプレートを工程（ｆ）において使用し、そして、それぞれ、式ＩＩＩの化合物のエナンチオマーを工程（ｆａ）で使用しかつＬ−プロリンの誘導体を工程（ｆｃ）で使用することを特徴とする前記方法の改変。
7. 

   が
   （ｉ）　基（ａ）でありかつＲ^１が水素であり、そしてＺが
   −Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−［配列番号９］、
   −Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−［配列番号１０］、
   −Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［配列番号１１］、
   −Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−［配列番号１２］、
   −Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−［配列番号１３］、
   −Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−［配列番号１４］、
   −Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−［配列番号１５］、
   −Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−［配列番号１６］、および
   −Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−［配列番号１７］と異なり；
   （ｉｉ）　基（ｂ）でありかつＲ^２が水素もしくはＣＨ_２−ＣＯＯＨであるか、または基（ｃ）でありかつＲ^３がベンゾイルであるか、または基（ｄ）であるか、または基（ｅ）であり、そしてＺが−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−［配列番号１８］と異なり；
   （ｉｉｉ）　基（ｂ）でありかつＲ^２が水素であり、そしてＺが−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［配列番号１９］と異なり；
   （ｉｖ）　基（ｆ）でありかつＲ^４がメチルでありＲ^５がメトキシでありＲ^６とＲ^７がそれぞれ水素であり、そしてＺが
   −Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−［配列番号２０］、
   −Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−［配列番号２１］、
   −Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−［配列番号２２］、
   −Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−［配列番号２３］、
   −Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−［配列番号２４］、
   −Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−［配列番号２５］、
   −Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−［配列番号２６］、
   −Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−［配列番号２７］および
   −Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−［配列番号２８］と異なり；
   （ｖ）　基（ｇ）でありかつＲ^８がメチルでありＲ^９がメチルもしくはｎ−ヘキシルであるか、または基（ｈ）でありかつＲ^８がエチルでありＲ^９がエチルであり、そしてＺが−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−［配列番号２１］と異なり；
   （ｖｉ）　基（ｇ）でありかつＲ^８がメチルでありＲ^９がメチルもしくはベンジルであり、そしてＺが−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−［配列番号２９］と異なり；
   （ｖｉｉ）　基（ｇ）でありかつＲ^８がメチルでありＲ^９がメチルであり、そしてＺが−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−［配列番号３０］と異なり；ならびに
   （ｖｉｉｉ）　基（ｇ）でありかつＲ^８がメチルでありＲ^９がｎ−ヘキシルであり、そしてＺが−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ ［配列番号１］と異なることを条件とする、請求項１に記載の一般式Ｉの化合物。
8. 請求項１に記載の一般式Ｉの化合物のエナンチオマー。

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