JP2002514161A - ガンおよび他の細胞増殖性疾患の治療に有用なレチノイルオキシ（置換）アルキレンブチレート - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、新規なレチノイルオキシ（置換）アルキレンブチレート化合物、および、これを含んでいる医薬組成物、並びに、本治療を必要とする対象者において、ガンおよび他の細胞増殖性疾患を治療、予防または軽減する方法であって、前記化合物、これの医薬的に容認されている塩またはプロドラッグを対象者に投与することを含んでいる前記方法に関する。本発明の化合物はまた、ヒストンデアセチラーゼの阻害、しわの軽減、皮膚科学上の疾患の治療または軽減、傷の治癒の促進、皮膚の潰瘍の治療、および胃腸疾患の治療のための方法においても有用である。

Description

【発明の詳細な説明】 ガンおよび他の細胞増殖性疾患の治療に有用なレチノイルオキシ（置換）アルキ レンブチレート 本発明は、レチノイルオキシ（置換）アルキレンブチレート、および、これの 医薬的に容認されている塩、前記化合物を含んでいる医薬組成物、並びに、本治 療を必要とする対象者において、ガンおよび他の細胞増殖性疾患を治療する方法 に関する。本発明の化合物はまた、ヒストンデアセチラーゼの阻害、しわの軽減 、皮膚科学上の疾患の治療または軽減、傷の治癒の促進、皮膚の潰瘍の治療、お よび胃腸疾患の治療のための方法においても有用である。 発明の背景 制御されないガン細胞の増殖は、未成熟細胞の増加をもたらす(Bloch，A.，ca ncer Treat．Rev．68:199-205，1984.)。ガン細胞は、著しい増殖能を特徴とし て、恒常性が正常に維持されている環境において、分化する能力が制限されてい る。しかし実験的証拠からは、新生した細胞は、分化できることが証明されてい る。これは、悪性化の過程が変更されるか、少なくとも部分的に回復できること を意味する。 レチノイドは、ビタミンＡ、レチノイン酸（RA）および関連する誘導体からな る化合物のグループである。これらは、内胚葉性、中胚葉性、外胚葉性組織の正 常な発生において、中心的な役割を果たしてぃる(Umesono K．et al.，Natvre 3 36:262-265，1989)。 RAの作用機序は、非常に良く研究されている。細胞質において、RAは、細胞質 性のRA結合タンパク質に結合する。RAの効果を仲介す る際の、このタンパク質の役割はわかっていない。核において、RAは、RA受容体 （α、β、γ）に結合する。RA受容体／RA複合体は、特定のDNA配列に結合して 、電気泳動移動度シフトの実験から証明されていて(Rochette-Egly et al.，J． Cell．Biol．115:535-545，1991)、この結合が、RA標的遺伝子の転写を引き起こ す。RA受容体αは、インビトロで、骨髄細胞の増殖および分化に関与しているこ とが示されている。例えば、急性前骨髄球性白血病の患者では、RA受容体αのコ ード配列領域内の切断点において、特徴的な転座(15:17)がある。従って、RA受 容体のmRNAは、潜在的な抗ガン剤の研究において有用である。 RAは、インビトロおよびインビボにおいて、例えば、白血球、脊髄形成異常症 、および固形腫瘍の患者において、多様なガン細胞の分化を誘導して、増殖を停 止させることが報告されている。例えば、Collins et al.（Int．J．Cancer 25: 213-218，1980）は、ヒト前骨髄球性白血病の細胞株HL-60は、RAによって分化誘 導されて、顆粒白血球の細胞的および分子的特徴を発現することを、明らかにし た。分化の特徴には、プロテインキナーゼＣおよび細胞内リソゾーム活性の増加 がある(Umesono et al)。Strickland et al．は、テラトカルシノーマ細胞株Ｆ ９をRAで処理すると、内蔵性内胚葉に分化することを示した(Cell 15,393-403,1 978)。 いくつかのレチノイドは、頭頚部、皮膚、および頚部の前ガン症状の回復、並 びに、頭頚部に関連する２次性の原発性腫瘍、皮膚ガンおよび非小肺ガン(non-s mall lung cancer)の抑制において、有意な活性を示した。Lippman et al.（J． cell．Biochem．22:1，1995）は、気・消化管の発ガンにおいて、レチノイドは 化学的予防活性を示すことを、証明した。これは、Nishimoto(J．Cell．Biochem ．22:231，1995)が記載している２ステージの肺ガンモデルマウ スを用いて実験された。 Strickland et al．は、インビボで、モデルマウスに、RAを経口投与すると、 用量依存的に、Ｆ９腫瘍を有するマウスの生存期間がのびることを明らかにした (Dev．Biol．78:76-85，1980)。RA処置したマウスの腫瘍は、非処置マウスのも のより、かなり小さく、形態学的および生化学的な分化の指標を示した。 RAの治療指数は低いので、これの異性体であるオールトランスRA(ATRA)を、集 中的に研究した。ニトロブルーテトラゾリウム(NBT)還元の増加の測定から、イ ンビトロにおいて、１μＭのATRAによる分化誘導が示された(Chomienne et al. ，Blood 76:1710-1717，1990)。 ATRAを用いた治療によって、インビボの分化誘導に関する証拠が集まっている 。前骨髄球性白血病細胞から成熟細胞への分化を示す形態学的特徴は、アウエル ロッド(Auer rod)（均一な結晶性の赤色染色性構造）の出現である。急性前骨髄 球性白血病の患者をATRAで処置すると、骨髄の形成不全なしに完全に緩解する。 患者の成熟細胞にはアウエルロッドが出現して、ATRAの分化誘導活性が確認され た。 臨床および実験研究から、現在、ATRAは、前骨髄球性白血病の治療薬の第１候 補に考えられている（Wright D.G.，Blood 67:334-337，1987）。しかし、ATRA による緩解は、短期的な傾向があり、ATRAに対する耐性は、患者におけるATRAの 急速な清掃（クリアランス）によって説明される(Muindi et al．Cancer Res．5 2：21 38-2142，1992)。さらに、Adamson et al.は、経口投与されたATRAの吸収 は、患者によって大きく変わることを報告している(J．Na tl．Can．Inst.，85( 12):993-996，1993)。よって、血漿中におけるATRAの有効濃度の維持、およびこ の毒性は、レチノイド治療に付随す る問題である(Adamson et al.，J．Natl．Cancer Inst，85:9 93-996，1993)。 酪酸（BA）は、無毒性の天然物質である。哺乳類は、これを主に２つの源、１ ）日常飲食物、主に乳製品の脂肪分、および２）腸内細菌による、吸収されなか った炭水化物の主要な発酵産物（ｍＭ濃度になる）から摂取する(Cummings J.H. ，Gut 22:763-779，1982;Leder A．et al.，Cell 5:319-322，1975)。 ほぼ30年前から、酪酸は、多様な新生細胞に対して、インビトロで、強力な分 化誘導性および抗細胞増殖性の試薬であることが知られている(Prasad N.K.，Li fe Sci．27:1351-1358，1980)。ガン細胞において、酪酸は、細胞学的および生 化学的変化、例えば細胞形態、酵素活性、受容体発現、細胞表面抗原の変化を誘 導することが報告されてぃる(Nordenberg J．et al.，EXP．Cell Res．162:77-8 5，1986;Nordenberg J．et al.，Br．J．Cancer 56:493-497，1987;and Fishman P.H．et al.，J．Biol．Chem．254：4342-4344，1979)。 酪酸または酪酸ナトリウムが、多くの研究の対象になっているが、この作用機 序はわかっていない。酪酸の最も特異的な効果は、核内デアセチラーゼの阻害で あり、ヒストンH3およびH4の過剰アセチル化(hyper acetylation)をもたらす（R iggs M.G.，et al.，Nature 263:462-464，1977)。酪酸による治療の後に起こる ヒストンのアセチル化の亢進は、細胞の転写活性および分化状態の変化と相関し ている(Thorne A.W．et al.，Eur．J．Biochem．193:701-713，1990)。酪酸には 、他の核内作用があり、例えば、リン酸化(Boffa L.C．et al.，J.Biol．Chem.2 56：9612-9621，1981)およびメチル化(Haan J.B.et al.，Cancer Res．46:713-7 16，1986)の程度を変化させる。RAによって、他の細胞内器官、例えば細胞骨格 、並びに膜成分および膜機能が、影響を受けることが明らかにされている(Bourg eade M.F．et al.，J．Interferon Res．1：323-332,1981)。いくつかの型の細 胞では、酪酸によって、ガン遺伝子およびガン抑制遺伝子の発現が変化すること が証明されている。Toscani et al.は、3T3線維芽細胞において、c-myc、p53チ ミジンキナーゼ、c-fosおよびAP2の変化を報告している(Oncogene Res．3:223-2 38，1988)。B16メラノーマでは、ガン遺伝子c-mycおよびH-rasの発現の減少、並 びに、前骨髄球性白血病のHL-60では、c-mycの減少も報告されている(prasad K. N．et al.，Biochem．Cell Biol．68：1250-1255，1992;and Rabizadeh E．et a l.，FEBS Lett.328:225-229，1993)。しかし、酪酸は、通常、急速に代謝される ので、インビボの半減期は非常に短い。従って、血漿中の有効濃度の達成および 維持は、酪酸を用いる際にも問題となる。 酪酸は、アポトーシスによる細胞死を誘発することが知られている。アポトー シスは、細胞を、調節的に、そして発生時間に依存的して除くための生理学的な 機構である。器官は、細胞増殖および細胞死の微妙なバランスによって維持され ていて、このバランスが壊され、細胞が過剰に集積する場合に、ガンとなり、そ して未成熟細胞が欠失する場合に、退行性の疾患となる。よって、アポトーシス の阻害は、腫瘍の成長に寄与し、そして新生物形成の進行を促進することになる 。 RAを、他の分化誘導性試薬またはサイトカインと組み合わせた場合、相乗的な 抗細胞増殖効果および分化誘導効果が生じることが示唆されている。例えば、Br eitman et al．によると、ヒト前骨髄球性白血病の細胞株HL-60細胞の分化誘導 において、酪酸（BA）を単独投与した場合のED50は、444μＭであり、RAを単独 投与した場合のED50は、0.13μＭであった。しかし、約28ｎＭのRAを、BAと組み 合わせて用いた場合には、BAのED50は、約400μＭから約75μＭに減少し、投与 量の減少指数は、約６倍となった（Cancer Res.50:6268-6273，1990）。この実 験に基づいて、Breitmanは、いくつかの白血病の治療において、RAを他の試薬と 組み合わせることで、効果的に用いることができることを示唆した。しかし、BA 単独、RA単独、またはこれらの組み合わせによる治療においても、毒性の問題、 および血漿中の有効濃度の達成と維持の問題が依然として残る。 他では、共役結合のRA化合物が研究されている。例えば、米国特許番号467712 0(Perish，June 30,1987)およびPCT出願番号WO 90/06751には、光による皮膚の 老化(photo aging)と皮膚ガンを減少および回復させるために、化学式Ａまたは Ｂの化合物（式中、Rは、CR₂'''OC(=O)CR₃'であり；R'は、ＨまたはＣ₁-Ｃ₆アル キルであり,R'''は、R'または脂肪酸の炭化水素骨格）を使用することが開示さ れている： 前記出願は、本発明の方法を開示しておらず、これを行うことはできない。 皮膚疾患を処置するために、米国特許番号4900478(Gross，Feb 13,1990)には 、特に、オールトランス9-4-メトキシ-2,3,6-(トリメチルフェニル)-3,7-ジメチ ル-2,4,6,8-ノナ-テトラエン酸、そしてEPO出願番号0449099には、化学式R¹OCH( R²)OC(O)R³（式中、R¹は、13-シス-レチノイルであり；R²は、アルキルであり； R³は、アルキルまたはアルコキシである）の化合物を用いることが開示さ れている。前記出願は、本発明のレチノイルオキシ（アリール置換）アルキレン ブチレートを用いた方法を開示しておらず、これを行うことはできない。 ガンを治療するために、分化誘導性または抗細胞増殖性の試薬として、BAとRA との組み合わせと同等の効果を有する化合物を同定する必要がある。前記化合物 は、BAおよびRAに付随する前記の問題がなく、高い活性を有する必要がある。 本発明は、この必要性を満たすことであり、そのためにレチノイルオキシ（置 換）アルキレンブチレートである化学式（Ｉ）の化合物であって、BA単独、RA単 独またはこれらの組み合わせよりも、高い活性を有している前記化合物を目的と する。さらに、本発明は、前記化合物を含んでいる組成物、並びに、ガンおよび 他の細胞増殖性疾患を治療するため、ヒストンデアセチラーゼを阻害するため、 胃腸疾患のため、皮膚のしわを軽減するため、創傷の治癒のため、および皮膚科 学上の疾患を治療するため（アリール置換化合物の場合）に、前記化合物または 組成物を用いる方法にも向けられている。前記の参考文献には、化学式（Ｉ）の 化合物、前記化合物を含んでいる医薬組成物、または、抗ガン剤および抗細胞増 殖剤として、前記化合物または前記組成物を用いることは、全く記載または示唆 されていない。 発明の要約 従って、本発明の１つの実施例は、化学式（Ｉ）： ［式中、Retは、レチノイル基、治療活性のあるレチノイドカルボニル基、次の 化学式で表せる治療活性のあるカルボニル基： （式中、Ｚは、置換または非置換フェニル基、置換または非置換ナフチル基、あ るいはシクロヘキセニル基であり、そして前記フェニル基またはナフチル基は、 ハロ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アミノ、シアノまたはカルバルコキ シの群中から選択された０から５個までの置換基によって置換されてもよい）、 および、前記の基のＣ20またはＣ22デスメチルビニログであるレチノイドの群中 から選択されて、そして任意の前記置換基のポリエン鎖の二重結合は、シスまた はトランス配置をとることができ； ｎは０または１であり； ｎが０の場合、 Ｒは、Ｈまたは、Ｃ₁からＣ₅のアルキルであり、 Ｒ₁は、エチル、n-プロピルまたはイソプロピルであり、 ただし、Retが、13-シス-レチノイルであり、且つＲ₁が、n-プロピルである場合 には、Ｒは、Ｈまたは、Ｃ₁からＣ₅のアルキルをとることはできないで；あるい は、 ｎが１の場合、 Ｒは、任意にハロ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アミノ、 シアノ、カルバルコキシ、ニトロ、またはトリフルオロメチルによって置換され たアリールまたはヘテロアリールであり、 Ｒ₁は、任意にフェニルまたは置換フェニル基によって置換されたＣ₁からＣ₇ま でのアルキルであり、 Ａは、(CH₂)_mまたは(CH=CH)_mであり、そしてｍは０から４である］ で表される新規な化合物、並びに、これらの医薬的に容認されている塩である。 Retがトランスである、前記化合物が好ましい。特に、トランスレチノイルオ キシメチルブチレート(ROBA)、並びに、以下に示す一般化学式IIおよびIIIの化 合物（式中Retは、前記定義どおりである）が、好ましい： 化学式IIの化合物は、レチノイルオキシ（p-クロロフェニル）メチルブチレート であり、化学式IIIの化合物は、1-レチノイルオキシ-2-(3-ピリジル)エチルイソ ブチレートと医薬的に容認されている陰イオンとの塩、およびこれとN-アルキル ピリジニウムとの塩である。本発明の化合物は、細胞増殖阻害剤および分化誘導 剤として、BA単独、RA単独、またはBAとRAとの組み合わせよりも、より高い効果 を有する。 本発明の別の具体例は、治療に有効な量の化学式（Ｉ）の化合物、および医薬 的に有効な担体または希釈剤を含んでいる医薬組成物である。 本発明の別の具体例は、治療に有効な量の、化学式（Ｉ）の化合物と、他の抗 ガン剤または抗新生物薬剤、および医薬的に有効な担体または希釈剤との組み合 わせを含んでいる医薬組成物である。 本発明の別の具体例は、ガンおよび他の細胞増殖性疾患を、治療、予防または 軽減する方法であって、治療に有効な量の化学式（Ｉ）の化合物を、この様な疾 患に罹っている対象者に投与することを含んでいる前記方法であり、並びに他の 既知の医薬剤、例えば抗新生物(anti-proliferative)、分化誘導(differentiati ng)、またはガン静止用(oncostatic)の薬剤の作用を増強する方法である。 本発明において前記方法のための医薬剤は、限定しないが、サイトカイン、イ ンターロイキン、抗ガン剤、化学療法剤、抗体、結合した抗体(conjugated anti bodies)、免疫刺激剤、抗生物質、ホルモンアンタゴニスト、および成長刺激剤 などである。本発明の化合物を、これらのいずれかの医薬剤の前に、後に、また は同時に、投与することができる。 本発明の別の具体例は、化学式（Ｉ）の化合物を細胞に投与して、前記細胞内 のヒストンアセチラーゼを阻害する方法である。 本発明の別の具体例は、治療に有効な量の化学式（Ｉ）の化合物を、治療を必 要とする対象者に投与することによって、皮膚のしわを軽減し、傷の治癒を促進 し、皮膚の潰瘍および胃腸疾患を治療する方法である。本発明の方法によって治 療できる皮膚の潰瘍には、脚部および床ずれの潰瘍、うっ血性潰瘍、糖尿病性潰 瘍、およびアテローム性動脈硬化性の潰瘍がある。傷の治癒においては、本化合 物は、擦り傷、切り傷、火傷、およびその他の創傷の治療に有効である。本発明 の方法によって、治療できる胃腸疾患には、大腸炎、炎症性腸疾患、Crohn病、 および潰瘍性大腸炎がある。 本発明の別の具体例は、ｎ＝１である化学式（Ｉ）の化合物を、 本治療を必要とする対象者に投与することによって、皮膚科学上の疾患を治療ま たは軽減する方法である。本発明においては、皮膚科学上の疾患には、乾せん(p soriasis)、およびアクネ(acne)などがある。 好ましくは、本化合物を、局所用の調製品として投与する。 本発明の方法は、ガンおよび他の細胞増殖性疾患に罹っている対象者において 、抗細胞増殖性または分化誘導性の薬剤として作用させて、これらの疾患を治療 、予防または軽減するために、特に有用である。 この様な疾患には、限定しないが、白血病、例えば急性前骨髄球性白血病、急 性骨髄性白血病、および急性骨髄単球性白血病；その他の骨髄形成不全症候群、 多発性骨髄腫；乳ガン、頚部ガン、メラノーマ、大腸ガン、カポジ肉腫、卵巣ガ ン、膵臓ガン、肝臓ガン、前立腺ガン、扁平上皮細胞ガン、腎臓細胞ガン、他の 皮膚科学上の悪性腫瘍、テラトカルシノーマ、Ｔ細胞リンパ腫、肺ガン、グリオ ーマ、神経芽細胞腫、末梢神経外胚葉腫瘍、横紋筋肉腫、前立腺ガン、およびそ の他の固形腫瘍がある。 化学式（Ｉ）の化合物は、非ガン細胞に対しても同様に、抗細胞増殖効果があ り、良性腫瘍および他の細胞増殖性疾患、例えば乾せんを治療するためにも、有 効である。白血病、扁平上皮細胞ガン、および神経芽細胞腫を治療または軽減す る方法が、好ましい。 本化合物を、インビボで、化学薬品としてそのまま用いることもできるが、医 薬組成物として用いるのが好ましい。 図面の簡単な説明 図１は、ヒトHL-60細胞を用いて、細胞分化に対するオールトランスレチノイ ドの効果を示している。 発明の詳細な説明 本明細書に記載されている本化合物は、不斉中心を有する場合がある。本発明 には、全てのキラル、ジアステレオ、およびラセミ体が含まれる。本化合物には 、オレフィンなどの多くの幾何異性体があり、この様な全ての安定な異性体もま た、本発明に含まれる。 「安定な化合物」または「安定な構造」とは、反応混合液から使用できる純度 に精製して、そして治療に有効な治療薬剤に調合する工程に耐えることができる ほどに、十分に強い化合物を意味する。 本文において「アルキル」とは、明記した数の炭素を有する、分枝鎖状または 直鎖状の、飽和または不飽和の脂肪族炭化水素基を意味する。 本文において「アリール」とは、少なくとも１つの芳香族環、例えばフェニル 、ナフチル、インダニルなどを含んでいる、安定な５から７員の単環または双環 式、あるいは７から14員の双環または三環式の炭素環のいずれかを意味する。 本文において「ヘテロアリール」は、安定な５から７員の単環または双環式、 あるいは７から10員の双環式の複素環であって、これは芳香族であり、そして炭 素原子、並びに、窒素、酸素およびイオウの中から選んだ１から３個のヘテロ原 子からなり、そして前記窒素およびイオウのヘテロ原子は、任意に酸化されてよ く、そして前記窒素は、任意に４級化されてよく、さらに、これには、任意の前 記複素環がベンゼン環に縮合している、任意の双環の基も含まれる。本複素環は 、任意のヘテロ原子または炭素原子において、安定な構造になる様に、当該側基 に結合することができる。 本複素環は、その生成化合物が安定であるなら、炭素原子または窒素原子にお いて置換されてもよい。この様な複素環の例には、限定しないが、ピリジル、ピ リミジニル、フラニル、チエニル、ピロ ールイル、ピラゾールイル、イミダゾールイル、テトラゾールイル、ベンゾフラ ニル、ベンゾチオフェニル、インドールイル、インドーレンイル、キノリンイル 、イソキノリンイルまたはベンズイミダゾールイルが含まれる。 本文において、治療活性のあるレチノイドとは、レチノイン酸（ビタミンＡの 酸に類似している）と同様な生物活性を有する化合物を意味する。従って、レチ ノイドは、レチノイン酸で知られている１つまたは複数の治療活性を有する、合 成または天然の化合物を含む。前記活性には、限定しないが、レチノイン酸受容 体に結合すること、これを活性化すること、分化誘導剤、または抗細胞増殖剤お よび抗ガン剤として作用して、ガンおよび他の細胞増殖性疾患を治療および予防 することがある。 従って、本文において、化学式（Ｉ）のRetの例は、治療活性のあるレチノイ ドからなるレチノイドカルボニル基である。 さらに、Retは、次の化学式（式中、Ｚは前記定義どおりである）の化合物を 含む。 本発明において考慮されるレチノイドの例は、米国特許番号4476056，4105681 ，4215215，4054589，および3882244内に見いだすことができる。レチノイドは 、治療活性のある、シス体およびトランス体を含む。9-シス二重結合、13-シス 二重結合、または13-トランス二重結合を有するレチノイドが好ましい。 本文において「置換された」とは、指定された原子上にある１つまたは複数の 水素が、指摘された基の中から選択された基によって置換されることで、指定さ れた原子の正常の価を超えないで、しか も置換によって安定な化合物を生じる場合を意味する。 本発明において、置換されたアリールおよびヘテロアリール基では、１つまた は複数の水素が、ハロ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アミノ、シアノ、 カルボキシ、カルバルコキシ、ニトロおよびトリフルオロメチル基によって置換 されている。ハロ基とは、ハロゲンを意味して、フルオロ、クロロ、ブロモ、お よびヨード基を含む。「アルコキシ」とは、少なくとも１つの酸素置換基を有す るアルキル基を指す。「カルバルコキシ」とは、化学式-R-C(O)O-（Ｒはアルキ ル基）の基を指す。 本文において「ビニログ」は、レチノイン酸に比べて、１または２つのビニル 基が追加されたデスメチルレチノイル基を意味する。前記化合物は、例えば、2, 6,6-トリメチル-1-(10'-カルボキシ-デカ-1',3',5',7',9'-ペンタエンイル)-シ クロヘクス-1-エン、および2,6,6-トリメチル-1-(12'-カルボキシ-ドデカ-1',3' ,5',7',9',11'-ヘキサエンイル)シクロヘクス-1-エン、を含む。これらの基はま た、デスメチルレチノイン酸のＣ20およびＣ22ビニログとも呼ばれて、米国特許 番号3882244に記載されている。本発明のビニログを、レチノイル基、任意の治 療活性のあるレチノイドカルボニル基、または次の化学式（式中、Ｚは前記定義 どおりである）の任意の基から、調製することができる。 本文において「治療に有効な量」とは、ガンおよび他の細胞増殖性疾患を治療 、予防または軽減するために対象に投与する必要がある量を指し、さらに、この 量は、対象者の細胞内のヒストンデアセチラーゼを阻害するか；抗ガン効果を発 揮するか；悪性ガン細胞、 良性腫瘍細胞または他の増殖性細胞の分化を誘導し、および／またはこれらの増 殖を阻害するか；ガンの化学的予防に機能するか；しわを抑制する効果を発揮す るか；乾せんを治療または軽減するか；傷の治癒を促すか、または；胃腸疾患を 治療するために、有効な量であってもよい。治療に有効な量は、当業界の通常の 方法によって容易に決定することができる。 本文において「医薬的に容認されている塩およびプロドラッグ」とは、酸性塩 または塩基性塩を作ることによるか、あるいは、通常の操作によるか、またはイ ンビボで、本化合物の官能基を修飾することによって修飾された、ここで開示し た化合物の誘導体を指す。この例には、限定しないが、アミンなどの塩基性残基 と無機酸または有機酸との塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有 機塩、並びに、アミンのアセチル、ホルミル、およびベンゾイル誘導体などがあ る。 本発明の化合物の医薬的に容認されている塩は、水中で、有機溶媒中で、また は、両者の混合液中で、本化合物の遊離酸または遊離塩基を、化学量論的な量の 適当な塩基または酸と反応させて調製する。一般に、非水性媒体として、例えば 、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリ ルが好ましい。適当な塩のリストは、Remington's Pharmaceutical Sciences，1 7th ed.，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p．1418にあり、この 内容を引用して、本明細書に組み込む。 化学式（Ｉ）の化合物と共同に投与することに関連して、本発明の方法で用い る「医薬剤」とは、限定しないが、抗ガン剤および分化誘導剤を含む。この医薬 剤は、例えば、サイトカイン、インターロイキン、抗ガン剤、化学療法剤、抗体 、結合した抗体、免疫刺激剤、抗生物質、ホルモンアンタゴニストまたは成長刺 激剤である。 この医薬剤には、細胞毒性剤もある。細胞毒性剤には、抗ウイルス性ヌクレオシ ド抗生物質、例えばガンシクロビル、アシクロビル、およびファムシクロビルが 含まれる。細胞毒性剤とは、放射腺治療も含んで意味する。 本文において「化学療法剤」は、限定しないが、アルキル化剤、プリンおよび ピリミジンのアナログ、ビンカおよびビンカ様アルカロイド、エトポシドおよび エトポシド様薬物、コルチコステロイド、ニトロソ尿素、代謝拮抗薬、白金を基 にした細胞毒性薬物、ホルモンアンタゴニスト、抗アンドロゲン剤および抗エス トロゲン剤を含む。 本文において「サイトカイン」は、限定しないが、インターフェロン、好まし くはα、βまたはγインターフェロン、並びに、IL-2，IL-3，G-CSF，GM-CSF， およびEPOを含む。 本文において「免疫刺激剤」は、免疫系の液性因子または細胞性因子を刺激す る物質で、例えばC.パルバム(C.parvum)またはサルコレクチン(sarcolectin)で ある。 本発明において、化学療法剤は、限定しないが、タモキシフェン(tamoxifen) 、ドクソルビシン(doxorubicin)、L-アスパラギナーゼ、ダカルバジン(dacarbaz ine)、アムサクリン(amsacrine)、プロカルバジン(procarbazine)、ヘキサメチ ルメラミン(hexamethylmelamine)、ミトキサントロン(mitoxantron)、およびゲ ムシタビン(gemcitabine)を含む。 本発明で提供される化合物は、一般に、当業界に既知の任意の方法によって調 製される。本発明の化合物の調製を、次の例によって説明するが、これに限定し ない。 例えば、塩基の存在下に、レチノイドの酸性形（例えばRet-OH）と、次の化学 式： （式中、Ｙは、脱離基、例えばハロゲン、メタンスルホネート、またはp-トルエ ンスルホネートであり、そしてRet、Ａ、ＲおよびＲ₁は、前記定義どおりである ）の試薬とを反応させることによって、本発明の化合物を作ることができる。前 記塩基は、トリアルキルアミン、ピリジン、アルカリ金属の炭酸塩、または他の 適当な塩基である。不活性溶媒の存在下、または非存在下に、反応を行う。溶媒 を用いる場合、溶媒は、例えば、アセトン、ベンゼン、トルエン、テトラヒドロ フラン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホ キシド、クロロホルム、ジオキサン、または1,2-ジクロロエタンである。本発明 の化合物の合成の他の方法、および詳細は、Nudelman et al.，J．Med．Chem．3 5:687-694，1992．に記載されている。 当業者は、前記に概説した方法を、例えば、温度、反応時間、化学量論、また は他の反応パラメーターを変えることによって、改良することができる。この様 な、いかなる改変も、本発明に含まれる。 本発明の化合物は、一般に、分化誘導剤、または抗細胞増殖剤として、ガンま たは他の細胞増殖性疾患などの症状を治療する際に、およびガンの化学的予防の 際に有効である。当業者に既知である一般的な方法を用いて、これらの活性を測 定する。例えば、分化誘導剤として有効な本化合物の活性を、下記のとおりに、 ニトロブルーテトラゾリウムの還元測定のための標準的な方法によって測定する ことができる（Rabizadeh et al.，FEBS Lett．328:225-229，1993;Chomienne e t al.，Leuk．Res．10:631，1986;and Breitma n et al．in Methods for Serum-free Culture of Neuronal and Lymphoid Cell s，Alan R．Liss，NY，p．215-236，1984）（参考内容を引用して本明細書に組 み込む）。このインビトロの測定は、予測的であると考えられていて、そして実 際にインビボの効果に相関している(Castaigne et al.，Blood 76:1704-1709，1 990)。 分化誘導活性を予測する別の検査は、処置群から集めた細胞において、アウエ ルロッドおよび／または分化特異的な細胞表面抗原の存在に関して、下記のとお りに、形態学的観察をすることである（Chomienne et al.，Blood 76:1710-1717 ，1990）（参考内容を引用して本明細書に組み込む）。 本発明の化合物はまた、抗細胞増殖活性および抗ガン活性を有する。当業者に 既知の一般的な方法によって、本発明の化合物の抗細胞増殖活性を決定する。生 存率および抗細胞増殖活性を測定するために、一般的に容認されている２つの方 法は、トライパンブルーによる排除試験およびトリチウム化チミジンの取り込み 測定である（前記のChomienne et al.）（参考内容を引用して本明細書に組み込 む）。 予測性があり、抗ガン活性およびインビボの効果に相関することが示されてい る別の検査は、ヒト腫瘍コロニー形成検査である（Shoemaker et al.，Can．Res ．45:2145-2153，1985）（参考内容を引用して本明細書に組み込む）。これらの 検査の詳細を、以下に記載する。 細胞培養： ヒト前骨髄球性白血病細胞(HL-60)、ヒト膵臓ガン細胞(PaCa-2)、および胸膜 浸出液中のヒト乳腺ガンの細胞(MCF-7)を次の様に培養する。10％FCS、２mMグル タミンを加えたRPMI培地を用いて、細胞を培養する。加湿した5% CO2インキュベ ーター内に、37℃で放置す る。トライパンブルーを用いて、生存率を決定する。酪酸、レチノイン酸、また は本発明の化合物を細胞に加えて、種々の時間に培養を集めて、次の処理を行う 。 ニトロブルーテトラゾリウム(NBT)による検査： 次のとおりに、NBT還元活性によって細胞分化を評価する。0.1% NBTを含んで いる培養細胞を、400nMの12-O-テトラデカノイルホルボール-13-アセテート(TPA )で刺激する。30分間、37℃で細胞を培養して、顕微鏡観察によって、少なくと も200個の細胞を検査する。NBTを還元する細胞の能力は、細胞内に、還元された ホルマザンの黒色沈殿を有する細胞の割合として評価して、生存率によって補正 する。 細胞分化の追加実験： ヒト前骨髄球性白血病細胞株HL-60を、0.25μＭのRA、または本発明のレチノ イルオキシ（置換）アルキレンブチレートの存在下に、４日間培養する。前記ど おりに、この化合物を合成する。前記のNBT検査によって、細胞分化を測定する 。 細胞表面抗原の免疫表現型の決定： 細胞に、サイズに応じた穴を開けて、二重蛍光色素を用いて、細胞表面抗原の 免疫型を決定する。初期骨髄(CD33)から後期骨髄まで、各抗原群の発現を決定す る（warrell，Jr．et al.，New Engl．J．Med．324:1385-1392，1992）（参考内 容を引用して本明細書に組み込む）。 RA受容体αの発現を調べるためのノーザンブロット分析： Rabizadeh et al.，FEBS Lett．328(3):225-229,1993，の記載どおりに、グア ニジンチオシアネート、フェノール／クロロホルムを用いて、細胞内の総RNAを 抽出して、Miller et al.，J．Natl．Cancer Inst．82:1932-1933，1990，の記 載どおりに、ヒトRA受容 体αのcDNAをプローブとして分析する（参考内容を引用して本明細書に組み込む ）。 RA受容体α遺伝子ゲノムの再配置(rearrangement)を調べるためのサザンブロッ ト分析： ゲノムDNAを調製し、EcoRIまたはHindIII（μｇDNAあたり２〜３ユニット加え る）を加えて３時間反応させて、完全に切断する。このDNAを、0.8%アガロース ゲル電気泳動して、サイズによって分離する。ゲルを、変性、再生、中和してか ら、ニトロセルロース膜に転写する。次に、RA受容体αのcDNAをEcoRI/SstIで切 断した640bpの断片をプローブとして、この膜をハイブリダイゼーションし、そ の後55℃でストリンジェントに洗浄する。増感スクリーンを用いて、−70℃にて 、Kodak-XARフィルムに感光して、オートラジオグラフを得る。 アポトーシスの評価： アポトーシスは、DNAの断片化、核構造の視認できる変化、およびBcl-2の発現 の免疫化学的分析によって、評価することができる。 電気泳動したアガロースゲル上のDNAラダーを観察することによって、DNA断片 化を検出する。細胞内DNAを、Martin et al.，J．Immunol.，145:1859-1867，19 90の方法によって単離する。これを簡単に説明する。細胞を、PBSにて２回洗浄 した後、1200rpmにて、室温で５分間遠心する。ペレットを、0.5%(w/v)N-ラウリ ルサルコシンおよび0.5mg/mlプロテナーゼＫを加えた溶解緩衝液(10mM EDTA，50 mM Tris，pH8)中に、2x10⁷cells/mlになるように縣濁して、50℃で１時間放置す る。熱処理したリボヌクレアーゼを、終濃度0.25mg/mlになるように加えて、さ らに１時間50℃で放置する。このDNAの粗調製液を、緩衝剤を加えたフェノール で抽出して、 その後２回、クロロホルム：イソアミルアルコール(24:1)で抽出する。DNA調製 液に、10mM Tris，pH8，1mM EDTA（ＴＥ緩衝液）を加えて、容量を2.5倍にした 後、２倍容量のエタノールを加えて、−20℃で24時間放置して、DNAを沈殿させ る。沈殿したDNAを、遠心して回収し、空気中で乾燥し、ＴＥ緩衝液で再縣濁す る。これを４℃で保存する。DNA濃度は、260nmの吸光度を測定して計算する。 前記(Martin et al.)どおりに、１μｇのエチジンブロマイドを加えた１％ア ガロースゲルを用いて、DNAを電気泳動する。DNAサイズマーカーとして、φx174 DNAをHaeIIIで切断した11断片(72-1353bp)を用いる。電気泳動後、染色された ゲルに紫外線ライト(302nm)を照射し、放射光を観察し、ポラロイド667(3000ASA )フィルムを装填したDS34ポラロイドダイレクトスクリーンインスタントカメラ を用いて写真を撮る。 核構造の変化は、Hare et al.，J.Hist．Cyt.，34:215-220，1986に記載され た、アクリジンオレンジ染色法によって検査する。BA、RA、または本発明の１つ の化合物で処理したHL-60細胞から、サイトスピン(Cytospins)を調製する。未処 理細胞を対照に用いる。100%エタノールによって、細胞を10分間固定する。固定 した細胞を、1.2mg/mlアクリジンオレンジ溶液(0.13M Na₂HPO₄，0.35M citric a cid，1μM Na₂EDTA,pH6.5)によって30分間染色する。オリンパスBH-2蛍光顕微鏡 によって、約250細胞が含まれる視野を、少なくとも３カ所観察して計数する。 アグファフィルム(ASA 1000)を装填したオリンパスカメラによって、その視野の 写真を撮る。 BA、RA、またはRN-1からRN-4の中の１つの化合物で処理したHL-60細胞、ある いは未処理のHL-60細胞を用いて、Bcl-2を免疫学的に検出する。サイトスピンを 調製して、細胞をエタノールで固定する。１次抗体として、1:50に希釈した抗Bc l-2モノクローナル抗体 (Dako)を用いて、４℃で一晩、固定した細胞と反応させる。Strep A-B Universa 1 Kit(DPC,Sigma)を用いて、取扱説明書どおりに染色する。フィルムをASA200に する以外は、前段の記載どおりに、顕微鏡観察、および写真撮影する。１次抗体 を使わないこと以外は同じに処理した細胞を、非特異的結合を観察するための対 照とする。 ガンモデルマウス： 本発明の化合物に関して、B16メラノーマ、Lewis肺ガン、および骨髄単球性白 血病を有する動物の生存期間を延ばす能力を調べる(Nudelman et al.，J．Med． Chem．35:687-694，1992，or Rep haeli et aｌ.，Int．J．Cancer 49:66-72，1 991）（参考内容を引用して本明細書に組み込む）。 白血病モデルを用いて、本発明の化合物の効果を、次のようにして調べる。Ba lb/cマウスにWEHI細胞を注入して、次の日に薬剤または対照溶液を投与する。処 理した動物の生存期間を、未処理動物のものと比べる。 肺ガンまたはB16メラノーマを皮下に移植して、原発性のガンに対する、本発 明の化合物の効果を調べる。薬剤処理動物および対照動物において、２週間毎に 、移植箇所の腫瘍の容量を測定する。 化学的予防： ２ステージの発ガンモデルマウス（Nishimoto et al.前記）を用いて、本発明 の化合物の化学的予防効果を調べる。 異種移植： 異種移植として、大腸ガン（ヒトHCT-15細胞）、乳腺ガン（ヒトMX-1細胞）お よびメラノーマ(マウスB16)の各細胞を、無胸腺マウスの皮下に移植する。腫瘍 が、約100mgの時点で、化学式（Ｉ）の化合物および対照溶液を用いて処理を開 始する。腫瘍の成長の遅れによって、抗ガン活性を評価する。 薬理学、臨床化学などの分野で既知の任意の方法によって、生物試料中の化学 式（Ｉ）の化合物、この塩、または代謝産物を測定できる。化学式（Ｉ）の化合 物を測定する方法は、標準的な方法であり、限定しないが、高性能液体クロマト グラフィー、ガスクロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー質量分析、ラジ オイムノアッセイなどを含む。 投与および調合： ガンまたは他の細胞増殖性疾患を治療するために、活性薬剤を、対象者の体内 の薬剤作用部位に運ぶための任意の方法によって、本発明の化合物を投与する。 薬剤の使用における通常の任意の方法によって、独立した治療薬として、または 治療薬の組み合わせとして、本化合物を投与する。本化合物を、単独で投与する こともできるが、一般には、投与経路および薬剤投与の実例に基づいて選択した 医薬用の担体と一緒に投与する。本発明の医薬組成物は、経口、腸管外経路、経 皮、粘膜経路で投与するために適合させることができ、しかも、医薬分野で周知 な単位投与形にすることができる。用語「腸管外経路」は、皮下、静脈内、筋肉 内、または胸骨内への注入または点滴を含んで意味する。 投与のいかなる場合においても、適する投与量は、既知の因子、例えば、本発 明の薬剤の薬力学特性、並びに、投与の様式および経路；被投与者の年齢、健康 の総状態、代謝、体重、並びに、本化合物への反応に影響を与える他の因子；症 状の性質および程度；同時に行う治療の種類；治療の頻度；並びに、希望する効 果、に応じて変化する。活性成分の１日の投与量は、体重ｋｇあたり、約0.001 から500mg(mg/kg body weight)が期待されて、好ましくは、0.01-50mg/kgである 。 投与形（投与に適した組成物）には、投与単位あたり、約１ｍｇ から約１ｇの活性成分が含まれる。本医薬組成物内には、通常、組成物の全重量 に対して、重量で、約0.5-95％の量の活性成分が含まれる。 活性成分を経口投与する場合、固形、または半固形の投与形、例えば、硬いか 、または柔らかいゼラチンカプセル、錠剤、および粉末、あるいは、液体の投与 形、例えば、エリキシール、シロップ、分散した粉末または顆粒、乳剤、および 、水性または油性縣濁液によって、投与することができる。活性成分を、無菌の 液体の投与形によって、腸管外に投与することもできる。その他の投与形も可能 であり、例えば、限定しないが、貼り薬(patch)または軟膏によって、経皮投与 することができる。 医薬組成物の製造分野に既知の任意の方法によって、経口投与用の組成物を調 製する。美しく風味のよい医薬品にするために、この組成物には、甘味料、香味 料、着色料、および保存料の中から、１つまたは複数の試薬を含ませることがで きる。 製造に適し、毒性がなく、医薬的に容認されている賦形剤と混ぜ合わせた活性 成分が、錠剤には含まれている。前記賦形剤は、例えば、不活性な希釈剤、例え ば、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、 またはラクトース；顆粒状で分解される試薬、例えば、メイズスターチまたはア ルギン酸；結合剤、例えば、スターチ、ゼラチンまたはアラビアゴム(acacia)； 並びに、潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタル ク、を含む。圧縮した錠剤を、コーティングしなくてもよいが、不愉快な味を隠 し、そして大気から錠剤を保護するために、既知の手法を用いて、糖分、または フィルムでコーティングする。あるいは、胃腸管において、選択的に分解吸収す るために、これを、腸溶性なものでコーティングする。 硬いゼラチンカプセル、または液体を詰めた柔らかいゼラチンカプセルには、 活性成分、および、粉末または液体の不活性の担体、例えば、限定しないが、炭 酸カルシウム、リン酸カルシウム、カオリン、ラクトース、レシチン、スターチ 、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ピーナッツオ イル、液体パラフィン、オリーブオイル、医薬的に容認されている合成オイル、 および、カプセルの製造のために適した他の希釈剤が含まれる。共に、長時間に 亘って、薬物を連続的に遊離放出させるために、錠剤およびカプセルを、放出維 持型の製品(sustained release-product)として製造することができる。 水性縣濁液では、これの製造に適した賦形剤に、活性化合物を混ぜている。前 記賦形剤は、縣濁用の試薬であり、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロ ース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナ トリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、アラビアゴム；分散用ま たは湿潤用の試薬、例えば、天然のリン脂質、例えば、レシチン、または、アル キレンオキサイドと脂肪酸との縮合生成物、例えば、ステアリン酸ポリオキシエ チレン、または、エチレンオキサイドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、 例えば、ヘプタデカエチレンオキシセンタノール、または、エチレンオキサイド と、脂肪酸およびヘキシトールから得られた部分エステルとの縮合生成物、例え ば、ソルビトールモノオレイン酸ポリオキシエチレン、または、エチレンオキサ イドと、脂肪酸およびヘキシトール無水物から得られた部分エステルとの縮合生 成物、例えば、ソルビタンモノオレイン酸ポリオキシエチレンである。 水性縣濁液はまた、１つまたは複数の保存剤、例えば、エチル、n-プロピル、 またはp-ヒドロキシ安息香酸、１つまたは複数の着色 料、１つまたは複数の香味料、および１つまたは複数の甘味料、例えば、スクロ ース、サッカリン、またはシクラミン酸ナトリウムもしくはカルシウムを含むこ とができる。 水を加えて、水性縣濁液を調製するために適した、分散した粉末または顆粒で は、活性成分を、分散用または湿潤用の試薬、縣濁用の試薬、並びに、１つまた は複数の保存剤に混ぜている。適当な分散用および湿潤用の試薬、並びに縣濁用 の試薬の例は、前記のものである。追加できる賦形剤には、例えば、甘味料、香 味料、および着色料がある。 シロップおよびエリキシールには、甘味料、例えば、グリセロール、ソルビト ールまたはスクロースが一緒に配合されている。この調合剤には、粘滑剤、保存 剤、香味料、および着色料も含ませることができる。 本医薬組成物は、無菌の注入用の調製品の形、例えば、無菌の注入用水性縣濁 液、であってもよい。当業界に既知の方法によって、この縣濁液には、前記の分 散用または湿潤用の試薬、および前記の縣濁用の試薬が配合されている。無菌の 注入用の調製品は、毒性のない、医薬的に容認されている希釈剤または溶媒によ る、無菌の注入用溶液または縣濁液でもよく、例えば、1,3-ブタンジオールによ る溶液がある。 腸管外経路用の溶液に適する担体には、一般に、水、適当なオイル、塩溶液、 水性デキストロース（グルコース）、ポリソルベート （Cutter Laboratories,Inc．Berkley CA）、並びにグリコール、例えば、プロ ピレングリコールまたはポリエチレングリコールがある。適当な安定化試薬には 、抗酸化剤、例えば、限定しないが、重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、 またはアスコルビン酸があり 、これらを単独で、または組み合わせて用いる。クエン酸、クエン酸塩、および EDTAナトリウムもまた有用である。さらに、腸管外経路用の溶液には、保存剤、 例えば、限定しないが、塩化ベンザルコニウム、メチル−またはプロピル−パラ ベン(paraben)、およびクロロブタノール、が含まれてもよい。 本発明の医薬組成物には、皮膚上皮または粘膜上皮を介して分配するための、 例えば、経皮経路、鼻腔内、舌下、頬内、および直腸内に投与するための組成物 も含まれる。前記組成物を、適当な賦形剤と一緒に混ぜて、経皮投与用の製品、 例えば、貼り薬（パッチ）、局所用配合剤、ゲルなどの一部分に適用することが できる。従って、透過促進用の試薬、例えば、1-n-ドデシルアザシクロペンタン -2-オン、または、米国特許番号3991203および4122170（本発明の経皮用もしく は鼻腔内用の組成物に含ませることができる透過促進用の試薬を記載するために 、この内容を引用して本明細書に組み込む）に開示されている他の透過促進用の 試薬を、本発明の化合物に混ぜることは有用である。 医薬用の適当な担体は、この分野の標準的参考書であるRemington's Pharmace utical Sciences(Mack Publishing Company)に記載されていて、この内容を引用 して本明細書に組み込む。 本発明の化合物を投与するために有用な、薬剤の投与形を以下に説明する。 カプセル： 標準的な２ピースの硬いゼラチンカプセルに、0.1-50mgの粉末状活性成分、15 0mgのラクトース、50mgのセルロース、および６mgのステアリン酸マグネシウム を詰めて、単位カプセルを多数調製する。 柔らかいゼラチンカプセル： 消化できるオイル、例えば、ダイズオイル、レシチン、綿実オイル、またはオリ ーブオイル中に活性成分を混ぜて、混合液を調製する。加圧排出ポンプによって 、カプセル内に0.1-50mgの活性成分が含まれる様に、この混合液をゼラチンに注 入して、柔らかいゼラチンカプセルを作る。このカプセルを洗浄して、そして乾 かす。 錠剤： 投与単位あたり、0.1-50mgの活性成分、0.2mgのコロイド状二酸化珪素、５mg のステアリン酸マグネシウム、275mgの微晶性セルロース、11mgのスターチ、お よび98.8mgのラクトースを含む様に、通常の方法によって、錠剤を多数調製する 。嗜好性を増すために、または吸収を遅らせるために、適当なコーティングを施 す。 本明細書の記載から、当業者にとっては、本発明に関する種々の改修が、明白 である。この様な改修もまた、特許請求の範囲に含まれる。本明細書は、当業者 が、本発明を実施するために必要と思われる全情報を含んでいる。引用した特許 または文献には、さらに有用な情報が含まれているので、この内容を引用して、 本明細書に組み込む。 実施例１：ROBAの合成： レチノイン酸(0.5g，1.67mmol)、ヨードメチルブチレート(0.57g，1.5eq)、お よびトリエチルアミン(0.35ml，1.5eq)を含んだアセトニトリル溶液を、室温で 一晩撹拌した。TLC(シリカプレート，EtOAc:hexane=1:4)によって、生成物を、 濃い黄色のスポットとして検出した(Rf=0.7)。溶媒を除き、残査をEtOAcに溶解 し、そして5% NaHCO₃で洗浄し、次に水で洗浄した。乾燥させて溶媒を除いた後 に得られた残査を、シリカゲルカラム(EtOAc:hexane=1:4)で分離した。黄色のオ イルとして、生成物を得た(0.43g，64%)。 実施例２：13-シス-レチノイルオキシ-(4-クロロフェニル)メチ ルブチレートの合成： 13-シス-レチノイン酸(300mg，1mmol)および1-クロロ-1-(4-クロロフェニル) メチルブチレート(1eq)を含んだ無水DMF(1ml)に、トリエチルアミン(1.2eq)を点 滴して加える。1-クロロ-1-(4-クロロフェニル)メチルBAは、Rasmussen et al.1 967,J.Am.Chem.Soc.,89,5439に記載の方法で、塩化ブチロイルおよびp-クロロベ ンズアルデヒドから調製した。前記溶液を、70℃で数時間撹拌した。TLC(シリカ 、酢酸エチル：ヘキサン＝１：４)によって検出して、開始物質が無視できるほ どになった時に、反応を停止した。混合液をエーテルに溶解して、飽和塩化ナト リウムで洗浄した。このエーテル溶液をMgSO₄と一緒に真空乾燥させ、溶媒を除 いた。シリカゲルカラムのクロマトグラフィーで、生成物を精製した。 実施例３：細胞分化： HL-60細胞の細胞分化の程度(NBT還元％で表示する)に対する、酪酸(BA)および レチノイン酸(RA)の効果と、ROBAの効果を比較した。この結果を、以下の表１お よび表２に示す。 表１：前骨髄細胞の分化 表１の結果から、本発明の化合物は、HL-60細胞を、用量依存的に分化させ、 分化した細胞の割合を81％まで増加させることがわかった。この増加は、BA単独 、またはRA単独の場合に比べて、非常に大きい。 表２：前骨髄細胞の分化 表２の結果から、本発明の化合物は、単独のBA、または単独のRAよりも、非常 に高い活性を有すること、さらに、このROBAの分化誘導活性は、BAとRAとを組み 合わせた場合よりも、はるかに高いことがわかる。 実施例４：細胞分化の追加実験： 各0.25μＭのRA，ROBA(RN-1)，レチノイルオキシメチルプロピオネート(RN-2) ，レチノイルオキシメチルイソブチレート(RN-3)，またはレチノイルオキシメチ ルピバレート(RN-4)の存在下に、ヒト前骨髄細胞株HL-60を、４日間培養した。 前記化合物は、実施例１の方法、または実施例１を適当に改変した方法によって 合成した。細胞分化は、前記のNBT検査によって測定した。２回の別々の培養実 験の結果から、ROBA(RN-1)，RN-2およびRN-3は、RAまたはRN-4に比べると、分化 した細胞の割合を有意に高めたことがわかる（図１）。表３からは、ROBAの存在 下に分化した細胞の割合の平均は、73％であり、RN-4の存在下に分化した細胞の 割合の平均は、17％であったことがわかる。この差は、実質的であり、予想に反 するものであった。 表３：細胞分化に対するROBAおよびRN-4の効果 注^a NBT還元によって決定した、分化した細胞の割合(%)

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 17/10 Ａ６１Ｐ 17/10 35/00 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ， ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，Ｍ Ｘ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ， ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 ヌーデルマン，アブラハム イスラエル国，レホボト，ミラー ストリ ート 15 ストリート

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．化学式（Ｉ）： ［式中、Retは、レチノイル基、治療活性のあるレチノイドカルボニル基、次の 化学式で表せるカルボニル基： （式中、Ｚは、置換または非置換フェニル基、置換または非置換ナフチル基、あ るいはシクロヘキセニル基であり、そして前記フェニル基またはナフチル基は、 ハロ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アミノ、シアノ、カルボキシまたは カルバルコキシの群中から選択された０から５個までの置換基によって置換され てもよい）、および、前記の基のＣ20およびＣ22デスメチルビニログであるレチ ノイドの群中から選択されて、そして任意の前記置換基のポリエン鎖の二重結合 は、シスまたはトランス配置をとることができ； ｎは０または１であり； ｎが０の場合、 Ｒは、Ｈまたは、Ｃ₁からＣ₅のアルキルであり、 Ｒ₁は、エチル、n-プロピルまたはイソプロピルであり、 ただし、Retが、13-シス-レチノイルであり、且つＲ₁が、n-プロピルである場合 には、Ｒは、Ｈまたは、Ｃ₁からＣ₅のアルキルをとることはできないで；あるい は、 ｎが１の場合、 Ｒは、任意にハロ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アミノ、シアノ、カル バルコキシ、ニトロ、またはトリフルオロメチルによって置換されたアリールま たはヘテロアリールであり、 Ｒ₁は、任意にフェニルまたは置換フェニル基によって置換されたＣ₁からＣ₇ま でのアルキルであり、 Ａは、(CH₂)_mまたは(CH=CH)_mであり、そしてｍは０から４である］ で表される化合物、並びに、これの医薬的に容認されている塩。 ２．Ret基が、13-トランス二重結合を有する、請求項１の化合物。 ３．Ret基が、9-シス二重結合を有する、請求項１の化合物。 ４．R₁が、n-プロピルである、請求項１の化合物。 ５．13-トランス-レチノイルオキシメチルブチレートである、請求項４の化合 物。 ６．13-トランス-レチノイルオキシ（p-クロロフェニル）メチルブチレートで ある、請求項４の化合物。 ７．R₁が、イソプロピルである、請求項１の化合物。 ８．13-トランス-レチノイルオキシメチルイソブチレートである、請求項７の 化合物。 ９．1-(13-トランス-レチノイルオキシ-2-(3-ピリジル)エチルイソブチレート である、請求項７の化合物。 10．ガンおよび細胞増殖性疾患を含む疾患を治療するために有用であって、治 療に有効な量の請求項１〜９の任意の１項の化合物、および、医薬的に有効な担 体または希釈剤を含んでいる医薬組成物。 11．分化誘導剤または抗細胞増殖剤として有用であって、治療に有効な量の請 求項１〜９の任意の１項の化合物、および、医薬的に 有効な担体または希釈剤を含んでいる医薬組成物。 12．本治療を必要とする対象者において、ガンまたは他の細胞増殖性疾患を、 治療、予防または軽減する方法であって、対象者において、前記ガンまたは前記 疾患を、治療、予防または軽減するために有効な量の請求項１〜９の任意の１項 の化合物を投与することを含んでいる前記方法。 13．前記疾患が、白血病、扁平上皮細胞ガン、神経芽細胞腫、腎臓細胞ガン、 メラノーマまたは膵臓ガンである、請求項12の方法。 14．前記の有効な量が、ヒストンデアセチラーゼを阻害するために有効な量で ある、請求項12または13の方法。 15．ガン性細胞または新生細胞を分化誘導するか、またはその増殖を抑制する 方法であって、ガン性細胞または新生細胞を分化誘導するか、またはその増殖を 抑制するために有効な量の請求項１〜９の任意の１項の化合物を、前記細胞に投 与することを含んでいる前記方法。 16．前記細胞が、インビボである、請求項15の方法。 17．前記細胞が、インビトロである、請求項15の方法。 18．ガンまたは他の細胞増殖性疾患を治療するために有用な医薬剤の作用を増 強するための方法であって、治療に有効な量の請求項１〜９の任意の１項の化合 物と、治療に有効な量の前記医薬剤とを、共同に投与することを含んでいる前記 方法。 19．前記医薬剤が、分化誘導剤、サイトカイン、インターロイキン、抗ガン剤 、化学療法剤、抗体、結合した抗体、ホルモンアンタゴニスト、免疫刺激剤、抗 生物質、または成長刺激剤を含んでいる、請求項18の方法。 20．前記抗生物質を、ガンシクロビル、アシクロビル、およびファムシクロビ ルの群中から選択する、請求項19の方法。 21．前記化学療法剤を、アルキル化剤、プリンアナログ、ピリミジンアナログ 、ビンカアルカロイド、ビンカ様アルカロイド、エトポシド、エトポシド様薬物 、コルチコステロイド、ニトロソ尿素、代謝拮抗薬、白金を基にした細胞毒性薬 物、ホルモンアンタゴニスト、抗アンドロゲン剤および抗エストロゲン剤の群中 から選択する、請求項19の方法。 22．前記サイトカインが、インターフェロンである、請求項19の方法。 23．前記免疫刺激剤が、コリネバクテリウム・パルバム(Corynebacterium par vum)またはサルコレクチン(sarcolectin)である、請求項19の方法。 24．前記化学療法剤を、タモキシフェン(tamoxifen)、ドキソルビシン(doxoru bicin)、L-アスパラギナーゼ、ダカルバジン(dacarbazine)、アムサクリン(amsa crine)、プロカルバジン(procarbazine)、ヘキサメチルメラミン(hexamethylmel amine)、ミトキサントロン(mitoxantron)およびゲムシタビン(gemcitabine)の群 中から選択する、請求項19の方法。 25．胃腸疾患を治療する方法であって、治療に有効な量の請求項１〜９の任意 の１項の化合物を、対象者に投与することを含んでいる前記方法。 26．皮膚の潰瘍を治療する方法であって、治療に有効な量の請求項１〜９の任 意の１項の化合物を、対象者に投与することを含んでいる前記方法。 27．傷の治癒を促進する治療する方法であって、治療に有効な量の請求項１〜 ９の任意の１項の化合物を、対象者に投与することを含んでいる前記方法。 28．本治療を必要とする対象者において、ガンまたは他の細胞増 殖性疾患を、治療、予防または軽減する方法であって、ガン細胞、または他の細 胞増殖性疾患の細胞において、細胞性アポトーシスを引き起こすために有効な量 の請求項１〜９の任意の１項の化合物を、投与することを含んでいる前記方法。 29．細胞のヒストンデアセチラーゼを阻害するための方法であって、有効な量 の請求項１〜９の任意の１項の化合物を、前記細胞に投与することを含んでいる 前記方法。 30．前記細胞が、インビボである、請求項29の方法。 31．前記化合物を、経口、腸管外経路、経皮または粘膜経路で投与する、請求 項12〜30の任意の１項の方法。 32．しわを軽減する方法であって、治療に有効な量の請求項１〜９の任意の１ 項の化合物を、対象者に投与することを含んでいる前記方法。 33．皮膚科学上の疾患を治療または軽減する方法であって、有効な量の、ｎが １である請求項１〜４または７の任意の１項の化合物を、対象者に投与すること を含んでいる前記方法。 34．前記化合物が、13-トランス-レチノイルオキシ（p-クロロフェニル）メチ ルブチレートまたは1-(13-トランス-レチノイルオキシ-2-(3-ピリジル)エチルイ ソブチレートである、請求項33の方法。 35．前記の皮膚科学上の疾患が、乾せん(psoriasis)またはアクネ(acne)であ る、請求項33または34の方法。 36．前記化合物を、局所的に投与する、請求項32〜35の任意の１項の方法。 37．治療に有効な量の請求項１〜９の任意の１項の化合物と、治療に有効な量 の医薬剤とを共に含んでいる医薬組成物であって、前記医薬剤を、サイトカイン 、インターロイキン、抗ガン剤もしくは 抗新生物剤、化学療法剤、抗体、結合した抗体、免疫刺激剤、抗生物質、ホルモ ンアンタゴニスト、または成長刺激剤の群中から選択する、前記医薬組成物。 38．前記医薬剤が、細胞毒性剤を含んでいる、請求項37の組成物。 39．前記抗生物質が、ガンシクロビル、アシクロビル、およびファムシクロビ ルの群中から選択される抗ウイルス性ヌクレオシド抗生物質である、請求項37の 組成物。 40．前記抗生物質が、ガンシクロビルである、請求項37の組成物。 41．前記化学療法剤を、アルキル化剤、プリンおよびピリミジンアナログ、ビ ンカおよびビンカ様アルカロイド、エトポシドおよびエトポシド様薬物、コルチ コステロイド、ニトロソ尿素、代謝拮抗薬、白金を基にした細胞毒性薬物、ホル モンアンタゴニスト、抗アンドロゲン剤および抗エストロゲン剤の群中から選択 する、請求項37の組成物。 42．前記サイトカインが、インターフェロンである、請求項37の組成物。 43．前記免疫刺激剤が、コリネバクテリウム・パルバムまたはサルコレクチン である、請求項37の組成物。 44．前記化学療法剤を、タモキシフェン、ドキソルビシン、L-アスパラギナー ゼ、ダカルバジン、アムサクリン、プロカルバジン、ヘキサメチルメラミン、ミ トキサントロンおよびゲムシタビンの群中から選択する、請求項37の組成物。