FI86371C - Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiska liposomkompositioner. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiska liposomkompositioner. Download PDFInfo
- Publication number
- FI86371C FI86371C FI853982A FI853982A FI86371C FI 86371 C FI86371 C FI 86371C FI 853982 A FI853982 A FI 853982A FI 853982 A FI853982 A FI 853982A FI 86371 C FI86371 C FI 86371C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- cis
- synthetic
- liposomes
- octadecenoyl
- phospholipids
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/829—Liposomes, e.g. encapsulation
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
- Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
- Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
86371
Menetelmä farmaseuttisten liposomikoostumusten valmistamiseksi.
Tämä keksintö koskee menetelmää farmaseuttisten liposomikoostumusten valmistamiseksi, jotka sisältävät synteettisiä, olennaisesti puhtaita fosfolipidejä ja farmaseuttisen aktii-viaineen.
Keksinnön mukaisesti valmistettuja farmaseuttisia koostumuksia käytetään liposomien muodossa vesipitoisissa dispersioissa.
Kirjallisuudessa liposomeja on kuvattu lukuisissa julkaisuissa. Niiden rakenne ja niiden käyttö on ollut useiden tutkimusten kohteena. Erotetaan unilamellaariset liposomit, joissa on yksi lipideistä muodostuva kaksoiskerros, ja mul-tilamellaariset liposomit, joissa on useampia lipideistä muodostuneita kaksoiskerroksia, jotka ovat järjestäytyneenä "sipulin kuoren muotoon".
Farmaseuttiseen käyttöön sopivat erityisesti liposomit, joilla on mahdollisimman homogeenisen kokoinen populaatio ja läpimitta noin 2,0 x 10“8 - 5,0 x 10“6 m, mieluimmin noin 2,0 x 10”8 - 3,0 x 10"6 m. Kuulan muotoinen päällys muodos-* / tuu lipidikomponenttien, esim. amfipaattisten lipidien, esim. · fosfolipidien, esim. lesitiinin, kefaliinin tai fosfatidi-hapon ja mahdollisesti neutraalien lipidien, esim. koleste-* rolin muodostamasta yhdestä tai useammasta kaksoiskerrok- sesta. Nämä kaksoiskerrokset käsittävät sisätilan, joka si-: : sältää vesipitoisen faasin yhdessä kapseloidun yhdisteen kanssa, jolloin kapseloitu yhdiste, riippuen sen rakenteesta : ja muista parametreista, kuten lämpötilasta tai konsentraa- tiosta, voi olla vesipitoisessa faasissa ja/tai kaksoisker-roksessa.
Liposomien terapeuttiseen käyttöön erilaisten aktiiviainei-den kantoaineena tunnetaan suurta mielenkiintoa. Niinpä li- 2 86371 posomeja on esitetty proteiinien, esim. vasta-aineiden tai entsyymien, hormonien, vitamiinien tai geenien kantoaineena tai merkittyjen yhdisteiden kantoaineena analyyttisissä menetelmissä.
Farmaseuttisia annostussysteemejä, jotka perustuvat liposo-meihin, on esitetty Gregoriadis G:n (julkaisija) katsauste-oksessa Liposome Technology, Voi. II, Incorporation of Drugs, Proteins and Genetic Material, CRC Press 1984. Katsausteok-sessa, jonka on julkaissut Knight, C.G. (Liposomes: From Physical Stucture to Therapeutic Applications, Elsevier, 1981, on luvussa 16. sivulla 166 esitetty liposomiperustai-sen farmaseuttisen annostusmuodon edullisia ominaisuuksia: 1. Liposomit tunkeutuvat biologisten membraanien läpi ja helpottavat aktiiviaineiden kuljetusta tavallisesti voittamattomien esteiden yli. Erityisesti liposomit helpottavat kapseloidun yhdisteen solun sisään tunkeutumista.
2. Liposomeja voidaan käyttää huomioon ottaen lukuisat vuorovaikutukset määrättyjen solukudosten kanssa, niiden korkea selektiivisyys ja alhainen toksisuus.
3. Aktiiviaineen farmakokineettisyyteen voivat liposomit . . vaikuttaa edullisesti, esim. muuttamalla vapautumista, ja- ; .* kautumista ja poistumista systeemisestä verenkierrosta.
4. Kemiallisista tekijöistä ja metaboliasta aiheutuville muutoksille herkät aktiiviaineet suojataan liposomeilla de- • : ; aktivoitumiselta.
5. Stimuloimalla immuunireaktioita liposomi-kapseloiduilla antigeeneillä voidaan saavuttaa immuunimoduloivia vaikutuk- .·:·. siä.
Lisäksi muina etuina voidaan pitää alentuneita aktiiviaine-määriä, jotka tarvitaan liposomi-annostuksessa verrattuna 3 86371 vapaalla aktiiviaineella suoritettuun annostukseen terapeuttisen vaikutuksen saavuttamiseksi, tai aktiiviaineen annostuksen pidentyneitä väliaikoja.
Erityisiä etuja on liposomiperustaisilla annostussysteemeil-lä aineiden kulkeutuminen endosytoiviin soluihin, erityisesti retikuloendoteelijärjestelmän soluihin. Niinpä huomataan esimerkiksi antibioottien kuljetuksen helpottuminen endosytoiviin soluihin ja parempi vaikutus näissä soluissa oleviin haittatekijöihin.
Endosytoivat solut ovat osallisina myös tulehdusprosesseissa. On havaittu liposomi-kapseloitujen, antireumaattisten aktiiviaineiden tunkeutuvan nopeammin tällaisiin soluihin kuin ympäröivään kudokseen. Liposomien muodossa kapseloidut sytostaattiset yhdisteet voivat tunkeutua retikuloendoteelijärjestelmän spesifisiin elimiin (maksa, perna, luuydin), tai keuhkoissa, keuhkokapillaareissa tapahtuneen suodatuksen seurauksena ja siirtyvien verimonosyyttien avulla tapahtuneen kuljetuksen jälkeen aktiiviaineet voivat rikastua rakkulamaisiin makrofageihin, jolloin saavutetaan parannettu vaikutus keuhko- tai maksakasvaimissa samanaikaisesti toksisuuden vähentyessä.
.·. : Kapseloituja immuunimodulaattoreita sisältävät liposomit voivat vaikuttaa immuunisysteemin reaktioiden moniin muutoksiin (immuunistimulaatio, immuunisuppressio). Niinpä Poste G. et ai. julkaisussa Cancer Research 39, 881 (1979) selvittävät liposomikapseloiduilla lymfokiineilla hiiren makrofa-gien tuumorisidisia ominaisuuksia. Sone S. ja I.J. Fidler, V-.: Cell.Immunol. 57, 42 (1981) kuvaavat synteettisillä, liposo- meihin kapseloiduilla muramyylipeptideillä suoritettua tuu-morisidisten ominaisuuksien in vitro aktivointia rotan rak-kulamaisissa makrofageissa.
Liposomit, joissa on immuunimoduloivia aineita, esim. mura-myylidi- ja muramyylitripeptidejä, ihmisen gammainterferonia 4 86371 tai makrofagi-aktivointifaktoria (MAF), sopivat solujen immuunisysteemin aktivointiin, esim. monosyyttisen systeemin solujen, esim. verimonosyyttien tai rakkulamaisten (alveolaa-risten) tai peritoneaalisten makrofagien aktivointiin infektioiden torjunnassa, erityisesti virusinfektioiden ja kas-vainsolujen torjunnassa primäärisessä kasvainkudoksessa veressä ja luuytimessä sekä etäpesäkkeissä.
Tähän asti käytetyt, luonnolliset aineet liposomien valmistamiseksi, esim. luonnolliset fosfolipidit, esim. muna-fosfatidihappo, muna- tai soijalesitiini tai muna- tai soi-jakefaliini sekä naudan aivoista peräisin oleva fosfatidyy-liseriini ovat, silloinkin kun ne ovat puhdistetussa muodossa ja niiden ohutkerros- tai paperikromatografisesti pitäisi olla yhtenäisiä, esiintyvät seoksena, joka muodostuu fos-foglyserideistä, joissa asyylitähteillä on erilaisia rakenteita. Kuivavalmisteet, joissa on luonnollisia fosfolipide-jä, ovat lämpölabiileja ja säilyvät vain lyhyitä aikoja ja luonnolliset fosfolipidit ovat myös vesipitoisessa faasissa pysymättömiä, niin että vesipitoisten liposomiseosten säilyvyys on myös rajoitettu.
Luonnollisista fosfolipideistä muodostuvien liposomiseosten vaihtelevan koostumuksen, vähäisen saannon, erilaisen koko- ·. : jakauman ja niiden vähäisen stabiilisuuden takia in vitro ja in vivo-koeyritykset sekä kliiniset tulokset eivät ole toistettavia, mikä on tähän asti estänyt näiden, jo pidemmän ai-kaa tunnettujen ja intensiivisesti tutkittujen lääkkeenanto-muotojen teollisen hyödyntämisen.
V.: Tämä keksintö perustuu farmaseuttisten koostumusten valmis tamiseen, jotka muodostavat vesipitoisessa faasissa liposo-midispersioita, joilla on yhtenäinen kokojakauma ja suuri stabiilisuus.
Tämä keksintö koskee menetelmää farmaseuttisten liposomi-koostumusten valmistamiseksi, jotka sisältävät 5 86371 1) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan fosfolipi-din, jonka kaava (I) on sn 1 CH2-0-Ri
2 Rz-O-CH O (S) O
3 0Hz-0-|-0-(CnH2n)-CH-C-0H Y® (J), u KHz jossa R1 ja r2 tarkoittavat, toisistaan riippumatta, C1Q-C2o-aUcen°yyliä, jossa C-atomien lukumäärä on parillinen, n tarkoittaa kokonaislukua 1-3 ja Y® tarkoittaa farmaseuttisesti hyväksyttävän emäksen kationia, 2) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan fosfolipi-din, jonka kaava (II) on sn 1 CHz-O-Ri ^ 2 Rz-O-OH 0 a 3 CH!-0-Jg0-(CnH2ii)-lS^-Rb (II), c jossa Rj tarkoittaa C1Q-C2o-al^an°yyliä, jossa C-atomien lukumäärä on parillinen, R2 tarkoittaa C1Q-C20“al)cenoyy-liä, jossa C-atomien lukumäärä on parillinen, Ra, R^ ja Rc : tarkoittavat vetyä tai C-l-C4-alkyyliä jän kokonaislukua 2-4, 3) aineen tai aineseoksen, jolla on biologinen vaikutus, ja mahdollisesti nestemäisen kantoaineen ja/tai muita, kiinteitä kantoaineita.
Menetelmän tunnusmerkit on esitetty oheisissa patenttivaati-muksissa.
Jo edellä mainitut ja jäljempänä esiintyvät yleiset käsitteet saavat tämän keksinnön selityksen puitteissa mieluimmin seuraavat merkitykset: 6 86371
Orgaanisten tähteiden yhteydessä, esim. alempialkyylin, alempialkyleenin, alempialkoksin, alempialkanoyylin, jne. yhteydessä käytetty maininta "alempi" tarkoittaa, että tällaiset orgaaniset tähteet sisältävät, ellei nimenomaan toisin määritellä, korkeintaan 7 ja mieluimmin korkeintaan 4 hiiliatomia.
Kaavojen (I) ja (II) mukaisten fosfolipidien nimityksessä seurataan Eur.J. of Biochem. 79, 11-21 (1977) esitettyä artikkelia "Nomenclature of Lipids", joka on IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature (CBN) antama suositus (sn-nomenklatuuri, stereospesifinen numerointi).
Farmaseuttisista aktiiviaineista, ellei toisin mainita, käytetään Maailman terveysjärjestön (WHO) esittämiä triviaali-nimiä (suositeltuja-kansainvälisiä ei-rekisteröityjä nimiä), jotka löytyvät standarditeoksesta "Pharmazeutische Chemie" (E. Schröder, C. Rufer und R. Schmiechen, Thieme Verlag Stuttgart, 1982) sekä Merck-Index -julkaisusta (10. painos). (Suomenkieliset nimet perustuvat pääosin Valtioneuvoston päätökseen n:o 404 apteekkitavara- ja eräiden muiden luetteloiden vahvistamisesta.) Käytettyjen, synteettisten fosfolipidien puhtaus on yli 90 ·. : paino-%, mieluimmin yli 95 %.
Kaavan (I) mukaisessa synteettisessä fosfolipidissä ovat Rx ja R2, tarkoittaessaan "C10-C2Q-alkenoyyliä, jossa on parillinen C-atomien lukumäärä" mieluimmin 9-cis-dodekenoyyli, 9-cis-tetradekenoyyli, 9-cis-heksadekenoyyli, 6-cis-oktade-kenoyyli, 6-trans-oktadekenoyyli, 9-cis-oktadekenoyyli, 9-trans-oktadekenoyyli, 11-cis-oktadekenoyyli tai 9-cis-iko-senoyyli.
Farmaseuttisesti hyväksyttävän emäksen kationi Y® on esimerkiksi aikaiimetalli-, esim. litium-, natrium- tai kaliumio- 7 86371 ni, ammoniumioni, mono-, di- tai tri-C^-C^-alkyyliammonium-ioni, esim. trimetyyli-, etyyli-, dietyyli- tai trietyyliam-moniumioni, 2-hydroksietyyli-tri-C1-C4-alkyyliammoniumioni, esim. koliinikationi, tai 2-hydroksietyyliammoniumioni sekä emäksisen aminohapon, esim. lysiinin tai arginiinin kationi.
Y® on edullisesti natriumioni.
Kaavan (I) mukaisessa, synteettisessä fosfolipidissä ovat ja R2 mieluimmin samanlaiset ja tarkoittavat 9-cis-dodekeno-yyliä, 9-cis-tetradekenoyyliä, 9-cis-heksadekenoyyliä, 9-cis-oktadekenoyyliä tai 9-cis-ikosenoyyliä, n on 1 ja Y+ on natriumioni.
Kaavan (I) mukainen, synteettinen fosfolipidi on ensi sijassa natrium-l,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli- (S)-seriini.
Kaavan (II) mukaisessa, synteettisessä fosfolipidissä on tarkoittaessaan "C10-C2Q-alkanoyyliä, jossa on parillinen C-atomien lukumäärä", mieluimmin n-dokekanoyyli, n-tetradeka-noyyli, n-heksadekanoyyli, n-oktadekanoyyli tai n-ikosanoyyli.
Kaavan (II) mukaisessa, synteettisessä fosfolipidissä tar-: koittaa R2 samaa kuin edellä, kaavassa (I).
Kaavan (II) mukaisessa, synteettisessä fosfolipidissä on kaavan _(CnH2n)- mukainen ryhmä haarautumaton tai haarautunut alkyleeni, esim. 1,1-etyleeni, 1,1- 1,2- tai 1,3-propy-leeni tai 1,2- 1,3- tai 1,4-butyleeni tai mieluimmin 1,2-etyleeni (n=2).
Kaavan (II) mukaisessa, synteettisessä fosfolipidissä tar-koittaa Rj^ mieluimmin n-dodekanoyyliä, n-tetradekanoyyliä, n-heksadekanoyyliä tai n-oktadekanoyyliä, R2 9-cis-dodeke-noyyliä/ 9-cis-tetradekenoyyliä, 9-cis-heksadekenoyyliä, a 86371 9-cis-oktadekenoyyliä tai 9-cis-ikosenoyyliä ja Rg, R^ ja Rc tarkoittavat metyyliä ja n on 2.
Kaavan (II) mukainen, synteettinen fosfolipidi on ensi si-jassa l-n-heksadekanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatifyylikoliini.
Kaavan (I) ja (II) mukaisissa fosfolipideissä asyylitähteis-tä R^ ja R2 käytetään tavallisesti sulkeissa esitettyjä nimityksiä: 9-cis-dodekenoyyli (lauroleoyyli), 9-cis-tetradekenoyyli (myristoleoyyli), 9-cis-heksadekenoyyli (palmitoleoyyli), 6-cis-oktadekenoyyli (petroseloyyli), 6-trans-oktadekenoyyli (petroselaidoyyli), 9-cis-oktadekenoyyli (oleoyyli), 9-trans-oktadekenoyyli (elaidoyyli), 11-cis-oktadekenoyyli (vakseno-yyli), 9-cis-ikosenoyyli (gadoleoyyli), n-dodekanoyyli (lau-royyli), n-tetradekanoyyli (myristoyyli), n-heksadekanoyyli (palmitoyyli), n-oktadekanoyyli (stearoyyli), n-ikosanoyyli (arakidoyyli).
Aineita tai aineseoksia, joilla on biologinen vaikutus, ovat ensi sijassa farmaseuttiset aktiiviaineet ja aineseokset, jotka muodostuvat antiflogistisista, antibioottisista, anti-leismaanisista, antimykoottisista, antineoplastisista ja im-; muunimoduloivista aineista.
Antiflogistisia, farmaseuttisia aktiiviaineita ovat esim. glukokortikoidit, esim. kortisoni, hydrokortisoni, predniso-ni, prednisoloni, fluokortoloni, triamkinoloni, metyylipre-* - dinisoloni, prednylideeni, parametasoni, deksametasoni, be- tametasoni, beklometasoni, fluprednylideeni, desoksimetaso-: ni, fluokinoloni, flumetasoni, diflukortoloni, klokortoloni, klobetasoli tai fluokortiinibutyyliesteri, ei-steroidiset tulehdusta estävät aineet, joita ovat substituoidut fenyy-lietikkahapposuolat ja 2-fenyylipropionihapposuolat, esim.
9 86371 aeklofenaakki, ibufenaakki, ibuprofeeni, MK-830, BL-2365, klindanaakki, fenkloraakki, ketoprofeeni, fenoprofeeni, in-doprofeeni, fenklofenaakki, diklofenaakki, flurbiprofeeni, pirprofeeni, naprokseeni, benoksaprofeeni, karprofeeni tai kikloprofeeni, antraniilihappojohdannaiset, esim. kaavan (III) mukaiset
A /C00H
I I • · N>/ \h (III), H A /*'
I I
v\, jossa R1# R2 ja R3 toisistaan riippumatta tarkoittavat vetyä, metyyliä, klooria tai trifluorimetyyliä, esim. mefenaami-happo, flufenaamihappo, tolfenaamihappo tai meklofenaamihap-po, anilinosubstituoidut nikotiinihappojohdannaiset, esim. miflumiinihappo, kloniksiini tai fluniksiini, heteroaryylie-tikkahapot tai 2-heteroaryylietikkahapot, joissa on 2-indol- 3-yyli- tai pyrrol-2-yylitähde, esim. indometasiini, oksmeta-siini, intratsoli, asemetasiini, sinmetasiini, tsomepiraakki, toimetiini, kolpiraakki tai tiaprofeenihappo, sulindaakki-tyyppinen indenyylietikkahappo, sekä analgeettisesti vaikuttavat heteroaryylioksietikkahapot, esim. bentsadaakki.
Antibioottisia, farmaseuttisia aktiiviaineita ovat esim.
I . tetrasykliini-antibiootit, joilla on kaava (V) H \ /*»[*
♦ *· · · OH
/\S\/\/ \ / . . . · · · · · ! · I 1 ! <v>.
jossa Rj tarkoittaa vetyä tai pyrrolidin-l-yylimetyyliä, R2 tarkoittaa vetyä tai hydroksia, R3 tarkoittaa vetyä, hydrok-sia tai metyyliä, R4 vetyä tai metyyliä ja R5 vetyä, klooria 10 86371 tai dimetyyliaminoa, esim. klortetrasykliini, oksitetrasyk-liini, tetrasykliini, demetyyliklortetrasykliini, metasyk-liini, doksisykliini, minosykliini tai rolitetrasykliini, aminoglykosidit, esim. kanamysiini, amikasiini, gentamysiini Cla, C2b tai C^, sisomisiini, netilmisiini, spektinomy-siini, streptomysiini, tobramysiini, neomysiini B, dibeka-siini tai kanendomysiini, makrolidit, esim. maridomysiini tai erytromysiini, linkomysiinit, esim. klindamysiini tai linkomysiini, penisillaanihappo (6-APA)- ja kefalosporaani-happo (7-ACA)johdannaiset, joissa on 6β- tai 70-asyyli-aminoryhmät, jotka esiintyvät fermentatiivisesti, puoli- tai täyssynteettisesti saatavissa 6p-asyyliaminopenisillaani-happo- tai 7p-asyyliaminokefalosporaanihappojohdannaisissa tai 3-asemassa muunnetuissa 7p-asyyliaminokefalosporaani-happojohdannaisissa, esim. penisillaanihappojohdannaiset, jotka ovat tulleet tunnetuiksi nimillä penisilliini G tai v, fenetisilliini, propisilliini, nafsilliini, oksasilliini, kloksasilliini, dikloksasilliini, flukloksasilliini, syklat-silliini, episilliini, mesillinaami, metisilliini, atslo-silliini, sulbenisilliini, tikarsilliini, metslosilliini, piperasilliini, karindasilliini, atsidosilliini tai sikla-silliini tai kefalosporiinijohdannaiset, jotka ovat tulleet tunnetuiksi nimillä kefaklori, kefuroksiimi, kefatsafluuri, kefasetriili, kefatsoliini, kefaleksiini, kefadroksiili, kefaloglysiini, kefoksitiini, kefaloridiini, kefsuldiini, kefotiaami, keftatsidiini, kefonisidi, kefotaksiimi, kef-menoksiimi, keftitsoksiimi, kefalotiini, kefradiini, kefa-. mandoli, kefanoni, kefapiriini, kefroksadiini, kefatritsii- ni, kefatsedoni, keftriksoni tai keforanidi sekä muut kla-vam-, penem- tai karbapenem-tyyppiset β-laktaami-antibioo-tit, esim. moksalaktaami, klavulaanihappo, nokardisiini A, sulbaktaami, atstreonaami tai tienamysiini, sekä bikotsamy-siini-, novobiosiini-, kloram- tai tiamfenikoli-, rifampi-siini-, fosfomysiini-, kolistiin!- tai vankomysiini-tyyppi-set antibiootit.
11 86371
Antileismaanisia, farmaseuttisia aktiiviaineita ovat esim. antimoniyhdisteet, esim. oksetusviinikivi (kalium-antimon-yyli-tartraatti), stibofeeni, natriumstibokaptaatti sekä natriumstiboglukonaatti.
Antimykoottisia, farmaseuttisia aktiiviaineita ovat esim. tiohiilihappojohdannaiset, esim. dibentstioni, tolnaftaatti tai tolsiklaatti, imidatsoli-johdannaiset, esim. klotrimat-soli, mikonatsoli, ekonatsoli, isokonatsoli tai ketokonatso-li tai polyeeni-antibiootit, esim. nystatiini, natamysiini tai amfoterisiini B.
Antineoplastisia, farmaseuttisia aktiiviaineita ovat esim. alkyyliantsieenit, joissa on bis-(2-kloorietyyli)-amiini-ryhmä, esim. klormetiini, klorambusiili, melfalaani, ura-mustiini, mannomustiini, estramustiinifosfaatti, mekloreta-minoksidi, syklofosfamidi, ifosfamidi tai trifosfamidi, al-kyyliantsieenit, joilla on atsiridiini-rakenne, esim. tre-tamiini, tiotepa, triatsikoni tai mitomysiini, alkyloidut metaanisulfonihappoesterit, esim. busulfaani, alkyloidut N-alkyyli-N-nitrosoureajohdannaiset, esim. karmustiini, lomus-tiini, semustiini tai streptotsosiini sekä mitobronitoli-, dakarbatsiini- tai prokarbatsiini-tyyppiset alkyyliantsiee-nit, foolihappo-tyyppiset antimetaboliitlt, esim. metotrek-saatti, puriini-johdannaiset, esim. merkaptopuriini, tiogua-niini, atsatiopriini, tiamipriini, vidarabiini tai puromy-siini, pyrimidiini-johdannaiset, esim. fluorourasiili, flok-suridiini, tegafuuri, sytarabiini, idoksuridiini, flusyto-siini, antibiootit, joita käytetään syöpäkemoterapiassa, esim. daktinomysiini, daunorubisiini, doksorubisiini, mitra-mysiini, bleomysiini A2 tai B2 tai etoposidi sekä vinka-alkaloidit, esim. vinkristiini, mahdollisesti yhdessä kloo-rimetamiinin, prednisolonin tai prednisonin kanssa ja pro-karbatsiini.
Immuunimodulaattoreita ovat esim. muramyylipeptidit esim. muramyylidipeptidit tai muramyylitripeptidit, erityisesti kaavan (VI) mukaiset i2 86371
Rj? «i>? ι)'^·0" *'·<«, ir> jossa X tarkoittaa kaavojen -C(=0)- tai -C(=0)-0 mukaisia ryhmiä, Rj tarkoittaa L-Ala-D-isoGln-L-Ala-2-(1,2-dipalmito-yyli-sn-glycero-3-hydroksifosforiloksi)-etyyliamidi-, L-Ala-D-Glu(C -L-Ala-2-(1,2-dipalmitoyyli-sn-glycero-3-hydroksi-fosforiloksi)-etyyliamidi)-, L-Ala-D-isoGln-OH-, L-Ala-D-GlnNH2- n-butyyliesteri-, L-Ala-D-isoGln-L-(stearoyyli)-Lys-, L-Val-D-Gln-NH2- -n-metyyliesteri-, L-Ala-D-isoGln-L-Ala-1,2-dipalmitoyyli-sn-klyseriiniesteri-oder die L-Ala-D-isoGln-L-Ala-kolesteroliesteri-ryhmää, R2 tarkoittaa vetyä, metyyliä tai n-propyyliä, R3 tarkoittaa vetyä, n-stearoyyliä, 10-(2,3-Di-metoksi-l,4-dioksi-5-metyyli)-2,5-sykloheksadienoyy-liä, 2-behenoyylioksi-2-metyylipropanoyyliä tai n-oktanoyy-liä, R4 tarkoittaa vetyä tai n-oktanoyyliä, R5 on <2^-04-31-kyyli ja Rg vety tai C1-C4-alkyyli, sekä niiden vastaavat 2-palmitoyylitio johdannaiset, immuunimoduloivia ominaisuuksia omaavat lipopeptidit, jotka ovat tyyppiä n-lauroyyli-L-Ala-D-isoGln-(m-DAP-Gly)-NH2, n-lauroyy1i-L-Ala-D-isoGln-(L-DAP-Gly)-NH2, n-lauroyyli-L-Ala-D-isoGln-(L-Lys-D-Ala)-NH2, n-oktanoyyli-L-Ala-D-isoGln(L-Lys-D-Ala)-NH2 oder pal-mitoyyli-Cys-((2R)-2,3-dilauroyylioksi propyl)-Ala-D-Glu(Gly-taurin-Na)-NH2, tai lymfokiinit, jotka erotetaan lymfosyyteistä, monosyyteistä tai makrofageista, silloin kun näitä stimuloidaan antigeeneillä tai mitogeeneilla tai vastaavilla.
Lymfokiineihin kuuluvat esimerkiksi tunnetut interferonityy-pit, erityisesti luonnollinen tai rekombinoitu, ihmisen gamma-interferoni, esim. ihmisen gamma-interferoni, joka saadaan eurooppalaisten patenttihakemusten 63,482, 77,670, 13 86371 83,777, 88,540, 89,676, 95,350, 99,084, 110,044 ja 112,967 mukaan ja kansainvälisten hakemusten (PCT) WO 83/04,053,053 ja WO 84/02,129 mukaan.
Eurooppalaisen patenttihakemuksen 121157 mukainen rekombi-noitu, ihmisen gamma-interferoni on edullinen ja sillä on seuraava aminohapposekvenssi:
HiN-Cye-Tyr-Cys-Gln-Aep-Pro-Tyr-Val-Gln-Glu-Ala-Glu-Aen-Leu-Lye-Lye-Tyr-Phe-Aon-Ala-Gly-Hle-Ser-Aep-Val-Al a-Aep-Aon-Gly-Thr-Leu-Phe-Leu-Gly-Ile-Leu-Lye-A6n-Trp-Lye-Glu-Glo-Ser-Aep-Arg-LyE-Ile-Met-Gln-Ser-Gln-Ile-Val-Ser-Phe-Tyr-Phe-Lye-Leu-Fhe-Lyc-ABn-Phe-Lye-Aep-Asp-Cln-Ser-Ile-Gln-LyE-Ser-Val-Glu-Thr-Ile-Lye-Glu-Asp-Met-ABn-Val-Lya-Phe-Phe-Aen-Ser-ABn-LyE-Lye-Lya-Arg-Aep-Aep-Phe-Glu-Lys-Leu-Thr-Asn-Tyr-Ser-Val-Thr-Asp-Leu-Asn-Val-Gln-Arg-Lya-Ala-Ile-Hle-Glu-Leu-Ile-Gln-Val-Met-Ala-Glu-Leu-Ser-Pro-Ala-Ala-Lye-Thr-Glu-Lye-Arg-Lye-Arg-Ser-Gln-Met-Leu-Phe-Gln-Gly-Arg-Arg-Ala-Ser-Gln-OH, ja edullinen on myös rekombinoitu ihmisen gamma-interferoni, joka on GB-patenttihakemuksen 2 107 718 mukainen ja jonka aminohapposekvenssi on seuraava: 14 86371 I^N-Cys-Tyr-Cys-Gln-Aep-Pro-Tyr-Val-Lys-Glu-Ala-Glu-ABn-Leu-Lye-LyB-Tyr-Plie-AEn-Ala-Gly-His-Scr-Ar.p-Val-Al a-Aap-Asn-Gly-Thr-Leu-Phe-Lou-Gly-I le-Lcu-Lyo-Asn-Trp-Lyo-Glij-Glu-Ser-Asp-Arg-Lya-Ile-Met-Gln-Ser-Gln-Ile-Val-Ser-Phe-Tyr-Phe-Lys-Leu-Pl\f-Ly π-Ληη-Pho-Ly B-Aep-Asp-Cln-Ser-11 e-Gln-Ly b-Ser-Val-Glu-Tlir-Ile-LyE-Glu-Asp-Het-Acn-Va1-Lys-Phe-Phe-Asn-Ser-AGn-Lye-Lye-Lys-Arg-Asp-Asp-Phe-Glu-Lys-Leu-Thr-Asn-Tyr-Ser-Val-Thr-Aep-Leu-Asn-Val-Gln-Arg-Lys-Ala-Ile-Hi6-Glu-Leu-Ile-Gln-Val-Het-Ala-Glu-Leu-Ser-Pro-Ala-Ala-Lys-Thr-Gly-Lys-Arg-Lys-Arg-Ser-Gln-Met-Leu-Phe-Arg-Gly-Arg-Arg-Ala-Ser-Gln-OH.
Lymfokiineihin kuuluvat lisäksi puhdistetussa muodossa oleva ihmisen interleukiini 2, esim. T-solumitogeeneilla suoritetun ihmisen neoplastisten leukemia- tai lymfomisolujen aktivoinnin jälkeen viljetysuodoksessa oleva ja käänteisfaasi-HPLC:llä puhdistettu interleukiini 2, antigeeneillä tai mi-togeeneilla, esim. ihmisen T-solu-leukemia-lymfomi-viruksil-la (HTLV-I), fytohemaglutiinilla tai Concanavalin A:11a stimuloinnin jälkeen saaduista viljelmistä, jotka sisältävät i . ihmisen perna- tai ääreisverenkiertoperäisiä T-lymfosyyttejä, saattavat viljelysuodokset, jotka seokset sisältävät tunnetusti saatavissa olevat aineosat, kuten makrofagi-migraatio-inhibitiofaktorin (MIF), leukosyytti-migraatio-vahvistusfak-torin, makrofagiaktivointifaktorin (MAF), pesäkkeiden stimu-lointifaktorin, interleukiinin 1 ja 2 sekä gamma-interferonin, erityisesti sellaiset viljetysuodokset tai isolaatit, joissa on korkea makrofaagi-aktivointifaktori (MAF)-pitoi- SUUS.
15 86371 kiksi kuivavalmisteet (lyofilisaatit), jotka muodostavat mainituista, synteettisistä fosfolipideistä ja muramyylipep-tideistä, säilyvät useampia kuukausia, jopa useampia vuosia. Kuivavalmisteet voidaan juuri ennen käyttöä yksinkertaisella tavalla dispergoida vesipitoiseen puskuriliuokseen ravistelemalla (Vortex) tai vibraamalla ja in situ annostaa, jolloin useimmissa tapauksissa voidaan välttää lisätoimenpiteet, kuten suodatus, neutralointi, dialyysi jne. Vesipitoiset liposomidispersiot, joissa on synteettisiä fosfolipidejä ja muramyylipeptidejä kapselointiaineena, ovat pysyviä alle 10°C:n lämpötiloissa useita viikkoja, jopa kuukausia ja ne voidaan tehdä säilyviksi myös lyofilisaatteina.
Keksinnön mukaisesti valmistetut farmaseuttiset koostumukset omaavat erityisen hyvät fysiologiset soveltuvuudet, esim. niillä on vähäinen toksisuus ja edullinen, farmakokineetti-nen profiili, kun niitä käytetään vesipitoisena liposomidis-persiona. Niinpä tapahtuu hyvin nopeita endosytooseja, erityisesti monosyyttisen systeemin soluilla. Liposomit, jotka muodostuvat mainituista, synteettisistä fosfolipideistä ja muramyylidi- tai muramyylitripeptidista, joka on kapseloin-tiaine, voivat rikastua erityisesti keuhkoihin ja maksaan ja makrofagit voivat nopeasti endosytoida ne. Erityisesti rakkulamaiset makrofagit stimuloituvat ja syrjäyttävät fysiologisesti ei-toivotut materiat, esim. virukset tai metastaasi-set kasvainsolut. Näin keksinnön mukaiset farmaseuttiset koostumukset sopivat liposomien muodossa erityisen suuressa määrin syövän kemoterapiaan metastaasisten kasvainten hoitoon.
Keksinnön mukaisten, farmaseuttisten koostumusten valmistamiseksi käytettävällä, fosfolipidien (I) ja (II) seoksella on, vesipitoiseen faasiin dispergoinnin jälkeen, alle noin 37°C:n faasinsiirtolämpötila (neste-geelimuotoinen). Liposo-midispersion valmistus voidaan suorittaa ilman kuumennusta.
Vesipitoiset dispersiot, joissa kaavojen (I) ja (II) mukaiset fosfolipidit ovat liposomien muodossa ja joissa mainitut ie 86371 yhdisteet tai aineseokset, joilla on biologinen vaikutus, ovat kapseloituna, ovat farmaseuttisia annostussysteemejä, joita voidaan käyttää mahdollisesti liposomien konsentroin-nin tai eristämisen, esim. ultrasentrifugoinnin jälkeen, terapeuttisiin tarkoituksiin annostettavaksi oraalisesti (p.o.) tai parenteraalisesti (i.v., i.m., i.p. tai topikaa-lisesti).
Oraalisessa annostuksessa voivat liposomiperustaiset annos-tussysteemit parantaa aktiiviaineen resorptiota.
Oraalista annostusta varten voidaan liposomi-pitoiset, vesipitoiset dispersiot puskuroituna pH-arvoon 7,0-7,8, mieluimmin 7,2-7,2, sekoittaa farmaseuttisesti vaarattomien laimen-nusaineiden tai kantoaineiden tai tavanomaisten lisäaineiden, esim. väri- tai makuaineiden kanssa ja käyttää siirappina tai kapseleina.
Parenteraalista annostusta varten liposomit dispergoidaan steriiliin, vesipitoiseen liuokseen, joka toimii nestemäisenä kantoaineena ja joka on esim. steriili kalsiumvapaa, isotoninen keittosuola- tai glukoosiliuos, joka on puskuroitu pH-arvoon 7,0-7,8, mieluimmin 7,2-7,4.
Topikaalista annostusta varten liposomi-pitoinen, vesipitoinen dispersio, joka on puskuroitu pH-arvoon 7,0-7,8, mieluimmin 7,2-7,4, sekoitetaan muiden kiinteiden kantoaineiden, esim. paksuntavien aineiden, esim. hydroksipropyylisel-luloosan sekä sopivien säilöntäaineiden, antioksidanttien tai hajusteiden kanssa ja käytetään lotionina tai geelinä annostaen iholle tai limakalvoille.
Keksinnön avulla aikaansaadaan suppeammassa merkityksessä farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät synteettisiä, yli 90 paino-%:sesti puhtaita fosfolipidejä, kaavan (I) fos-folipidin sekoitussuhteen ollessa kaavan (II) mukaiseen fos- i7 86371 folipidin noin 10:90 - noin 50:50 mooliprosenttia, ja farmaseuttisen aktiiviaineen tai aineseoksen, joka on antiflogis-tinen, antibioottinen, antileismaaninen, antimykoottinen, antineoplastinen tai immuunimoduloiva aine, ja mahdollisesti pH-arvoon 7,0-7,8 puskuroidun nestemäisen kantoaineen ja/tai muita kiinteitä kantoaineita.
Keksinnön avulla aikaansaadaan erityisesti farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät a) synteettisen, yli 90 paino-%:sestipuhtaan fosfolipidin, jolla on kaava (I), jossa Rj^ ja R2 ovat samanlaiset ja tarkoittavat 9-cis-dodekenoyyliä, 9-cis-tetradekenoyyliä, 9-cis-heksadekenoyyliä, 9-cis-oktadekenoyyliä tai 9-cis-ikosenoyyliä, n on 1 ja Y® on natriumioni, b) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan fosfolipidin, jolla on kaava (III), jossa Rj^ tarkoittaa n-dodekanoyyliä, n-tetradekanoyyliä, n-heksadekanoyyliä tai n-oktadeka-noyyliä, R2 tar-koittaa 9-cis-dodekenoyyliä, 9-cis-tetradekenoyyliä, 9-cisheksadekenoyyliä, 9-cis-oktadekenoyyliä tai 9-cis-ikosenoyyliä ja Ra, R^ ja Rc tarkoittavat metyyliä, c) farmaseuttisen aktiiviaineen tai aineseoksen, joka on an-tiflogistinen, antibioottinen, antileismaaninen, antimykoottinen, antineoplastinen tai immuunimoduloiva aine, ja mahdollisesti pH-arvoon 7,2-7,4 puskuroidun, nestemäisen kanto-aineen.
Keksinnön avulla aikaansaadaan erityisesti farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät a) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan natrium-1,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriinin, 1β 86371 b) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan 1-n-heksadeka-noyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinin, c) farmaseuttisen aktiiviaineen tai aineseoksen, joka on an-tiflogistinen, antibioottinen, antileismaaninen, antimykoot-tinen, antineoplastinen tai immuunimoduloiva aine, ja mahdollisesti pH-arvoon 7,2-7,4 puskuroidun, nestemäisen kanto-aineen.
Keksinnön avulla aikaansaadaan ensi sijassa farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät a) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan natrium-1,2-di(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriinin, b) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan l-n-heksade-kanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinin c) farmaseuttisen aktiiviaineen tai aineseoksen, joka on an-tiflogistinen, esim. diklofenaakki tai pirprofeeni, antineoplastinen, esim. mitomysiini, sytarabiini, daktinomysiini, daunorubisiini, doksorubisiini tai etoposidi, immuunimoduloiva, esim. N-asetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoglutani-yyli-L-alaniini-2-(1,2-dipalmitoyyli-sn-klysero-3-hydroksi-fosforiyylioksi)-etyyliamidi, N-asetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-klutamiinihappo-(C )-L-alaniini-2-(l,2-dipalmito-sn-klyse-ro-3-hydroksifosforiyylioksi)-etyyliamidi-dinatriumsuola, N-asetyyli-desmetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoklutamiini-natriumsuola, N-asetyyli-D-muramyyli-L-alanyyli-D-isokluta-miini-natriumsuola, N-asetyyli-D-muramyyli-L-alanyyli-D-klu-tamiini- -n-butyyliesteri, n -(N-asetyyli-D-muramyyli-L-ala-nyyli-D-isoklutamiiniyyli)-N- -stearoyyli-L-lysin tai 6-0-stearoyyli-N-asetyylimuramyyli-L-alaniini-D-isoklutamiini, lymfokiini tai näiden yhdistelmä, ja mahdollisesti pH-arvoon 7,2-7,4 puskuroidun, nestemäisen kantoaineen.
i9 86371
Keksinnön avulla aikaansaadaan pääasiallisesti farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät a) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan natrium-1,2-di(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriinin, b) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan 1-n-heksade-kanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinin, c) farmaseuttisen aktiiviaineen, joka on antineoplastinen, esim. mitomysiini, sytarabiini, daktinomysiini, daunorubi- siini, doksorubisiini tai etoposidi, tai immuunimoduloiva, esim. N-asetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoklutaminyyli-L-alaniini-2-(l,2-dipalmitoyyli-sn-glycero-3-hydroksifosfori-loksi)-etyyliamidi, N-asetyyli-desmetyylimuramyyli-L-alanyy-li-D-isoglutamiini-natriumisuola, N-asetyyli-D-muramyyli-L-alanyyli-D-isoklutamiini-natriumisuola tai lymfokiini, esim. ihmisen gamma-interferoni tai interleukiini 2 tai ai-neseoksia, jotka sisältävät antigeeneillä tai mitogeeneilla stimuloinnin jälkeen saaduista viljelmistä valmistetuissa viljelysuodoksissa perna- tai ääreisverenkiertoperäisiä ihmisen T-lymfosyyttejä ja joille on tunnusomaista korkea mak-rofagi-aktivointifaktori (MAF)-pitoisuus, tai näiden yhdistelmiä, ja mahdollisesti pH-arvoon 7,2-7,4 puskuroidun, nestemäisen kantoaineen.
Keksinnön avulla aikaansaadaan ennen kaikkea farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät a) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan natrium-1,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriinin, b) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan 1-n-heksade-kanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinin, c) immuunimoduloivasti vaikuttavan yhdisteen, esim. N-ase-tyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoklutamiiniyyli-L-alaniini- 20 86371 2-(1,2-dipalmitoyyli-sn-klysero-3-hydroksifosforiloksi)-etyy-liamidi, N-asetyyli-desmetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoklu-tamiini-natriumsuolan tai N-asetyyli-D-muramyyli-L-alanyyli-D-isoklutamiini-natriumsuolan mahdollisesti yhdessä ainese-oksien kanssa, jotka sisältävät antigeeneillä tai mitogee-neilla stimuloinnin jälkeen saaduista viljelmistä valmistetuissa viljelysuodoksissa perna- tai ääreisverenkiertoperäi-siä ihmisen T-lymfosyyttejä ja joille on tunnusomaista, että MAF- pitoisuus on ainakin 70 %, ja mahdollisesti pH-arvoon 7,2-7,4-puskuroidun, nestemäisen kantoaineen.
Mainitut farmaseuttiset koostumukset voivat olla kaupan kui-vavalmisteina ja ne annostetaan vesipitoisten liposomidis-persioiden muodossa pH-arvoon 7,0-7,8 puskuroidussa, nestemäisessä kantoaineessa.
Annostettavan aktiiviaineen annosmäärä on yleensä tiedossa kyseessä olevalle aktiiviaineelle kulloisessakin annostus-muodossa, potilaan ikä ja terveydentila huomioonottaen, ja esim. saksalaisessa lääkeainekirjassa (DAB) on esitetty maksimi- ja minimimäärät. Vesipitoisilla dispersioilla, jotka sisältävät keksinnön mukaisesti valmistettavia liposomeja, on myös etuna se, että aktiiviaineet voidaan annostaa reseptoreille pienempinä määrinä ja siellä voidaan aikaansaada terapeuttinen vaikutus tai annostettaessa suurempia annoksia voidaan välttyä ei-toivotuilta sivuvaikutuksilta.
Edullinen annosmäärä mainituille, muramyylipeptidi- tai li-popeptidityyppisille immuunimodulaattoreille, jotka ovat kapseloituina liposomeina, on 0,01- noin 10 mg/kehon paino-kg/annos. Lymfokiineille, jotka ovat liposomimuodossa, esim. ihmisen gamma-interferoni tai seokset, jotka sisältävät MAF:n, on edullinen annosmäärä noin 100 - 100 000 yksikköä/ml gamma-interferonia tai MAF:aa.
Keksinnön puitteissa aikaansaadaan seoksia, erityisesti homogeenisia seoksia, jotka muodostuvat synteettisistä, olen- 21 86371 naisesti puhtaista, kaavojen (I) ja (II) mukaisista fosfoli-pideistä, erityisesti seoksia, joissa kaavan (I) mukaisen fosfolipidin seossuhde kaavan (II) mukaiseen fosfolipidiin on noin 10:90 - noin 50:50 mooliprosenttia. Edullinen sekoitussuhde on 30:70 mooliprosenttia. Näitä seoksia voidaan käyttää liposomien valmistamiseksi vesipitoisessa faasissa, joka sisältää vesiliukoisen aktiiviaineen.
Mainitut farmaseuttiset koostumukset tai mainitut seokset valmistetaan siis esimerkiksi siten, että a) valmistetaan homogeeninen seos, joka muodostuu synteettisistä, yli 90 paino-%:sesti puhtaista, kaavojen (I) ja (II) mukaisista fosfolipideistä ja lipofiilisesta aineesta tai aineseoksesta, jolla on biologinen vaikutus, ja liposomin valmistamiseksi saatu, homogeeninen seos dispergoidaan vesipitoiseen faasiin, tai b) valmistetaan homogeeninen seos, joka muodostuu synteettisistä, yli 90 paino-%:sesti puhtaista, kaavojen (I) ja (II) mukaisista fosfolipideistä, ja liposomin valmistamiseksi saatu, homogeeninen seos dispergoidaan vesipitoiseen faasiin, joka sisältää vesiliukoisen aineen tai aineseoksen, jolla on biologinen vaikutus, ja c) tarvittaessa, saatu, vesipitoinen dispersio puskuroidaan pH-arvoon 7,0-7,8, ja haluttaessa, saatu liposomi rikastetaan ja/tai erotetaan.
Homogeenisen seoksen valmistus tapahtuu esimerkiksi muodostamalla kalvo tai mieluimmin lyofilisaatti.
Kalvon muodostaminen tapahtuu menetelmämuunnoksen a) mukaan siten, että liuotetaan synteettiset, kaavojen (I) ja (II) mukaiset fosfolipidit ja lipofiilinen ja kapseloitava aine tai aineseos, tai menetelmämuunnoksen b) mukaan siten, että 22 86371 liuotetaan synteettiset, kaavojen (I) ja (II) mukaiset fos-folipidit orgaaniseen liuottimeen, jolla on alhainen sulamispiste, ja liuotin poistetaan.
Sopivan liuottimen valinta kalvon valmistukseen riippuu li-pidikomponenttien ja kapseloitavan aineen liukoisuudesta. Sopivia liuottimia homogeenisen seoksen valmistukseen kalvon muodostuksella ovat esimerkiksi alhaalla kiehuvat ja sulavat (alle 0°C:n), substituoimattomat tai substituoidut, esim. halogenoidut, alifaattiset tai sykloalifaattiset hiilivedyt, esim. n-heksaani, sykloheksaani, metyleenikloridi tai kloroformi, alkoholit, esim. metanoli, alempialkaanikarboksyyli-happoesterit, esim. etikkahappoetyyliesteri tai eetterit, esim. dietyylieetteri tai näiden liuottimien seokset. Liuotin poistetaan tyhjössä, mieluimmin suurtyhjössä tai johtamalla inerttikaasua, esim. typpeä liuokseen.
Lyofilisaatin muodostaminen tapahtuu menetelmämuunnoksen a) mukaan siten, että kaavojen (I) ja (II) mukaisten, synteettisten fosfolipidien ja lipofiilisen, kapseloitavan aineen tai aineseoksen liuos lyofilisoidaan tai menetelmämuunnoksen b) mukaan siten, että kaavojen (I) ja (II) mukaisten, synteettisten fosfolipidien liuos orgaanisessa liuottimessa, jolla on korkea sulamispiste, lyofilisoidaan julkaisussa DE-A- 2 818 655 esitetyllä tavalla. Sopivia liuottimia jäädy-tyskuivauksessa ovat esim. metanoli-, etanoli- tai asetoni-kuivajääseoksen lämpötilassa lipidikomponenttien ja kiinteässä olotilassa olevan kapseloitavan aineen yhteydessä esim. orgaaniset liuottimet, joilla on korkeampi sulamispiste kuin 0°C, esim. jääetikka, bentseeni tai dioksaani, erityisesti tert.-butanoli.
Homogeeninen seos voidaan valmistaa myös sumutuskuivaamalla fosfolipidien ja lipofiilisen, kapseloitavan aineen liuos or-gaanisessa liuottimessa, esim. kloroformissa. Saadaan homogeeninen seos jauheena.
23 8 6 3 71
Homogeenisen seoksen valmistamiseksi kaavan (I) mukaisen fosfolipidin likimääräinen sekoitussuhde kaavan (II) mukaiseen fosfolipidiin on noin 10:90 - noin 50:50 mooliprosent-tia, erityisesti 30:70 mooliprosenttia. Kapseloitavan yhdisteen likimääräinen sekoitussuhde lipidien kokonaismäärään on noin 0,001-1,0 : 1,0, mieluimmin 0,005-0,1 : 1:0 moolia.
Dispergoidaan esimerkiksi ravistelemalla (esim. Vortex-sekoitin) tai hämmentämällä vesipitoinen faasi, joka on lisätty menetelmämuunnoksen a) mukaisesti etukäteen valmistettuun kaavan (I) ja (II) mukaisten fosfolipidien ja lipofii-lisen, kapseloitavan yhdisteen homogeeniseen seokseen, tai joka menetelmämuunnoksen b) mukaan sisältää vesiliukoisen, kapseloitavan yhdisteen ja johon on lisätty etukäteen valmistettu, kaavojen (I) ja (II) mukaisten fosfolipidien homogeeninen seos. Liposomien, jotka voivat olla suuria, pieniä, unilamellaarisia tai multilamellaarisia, muodostuminen tapahtuu itsestään (spontaneous vesiculation), t.s. ilman ulkoista lisäenergialisäystä ja suurella nopeudella. Homogeenista seosta voidaan dispergoida vesipitoiseen faasiin noin 0,1-50 painoprosenttia, mieluimmin 2-20 painoprosenttia (laskettuna vesipitoisen dispersion kokonaispainosta).
Happamesti tai emäksisesti reagoivat vesipitoiset dispersiot . . puskuroidaan pH-arvoon 7,0-7,8, mieluimmin pH-arvoon 7,2- 7,4. Mieluimmin dispergoidaan jo valmiiksi, tähän pH-arvoon puskuroituun, vesipitoiseen faasiin.
Menetelmämuunnos a) sopii erityisesti, kun pitää kapseloida lipofiilisia ja huonosti veteen liukenevia aktiiviaineita liposomien muotoon, esim. muramyylidi- tai muramyylitripep-tidejä. Menetelmämuunnos b) toimii silloin, kun on vielä valmistettava liposomiseos vesiliukoisista aktiiviaineista, esim. sytarabiinista tai trifosfamidi-tyyppisistä sytostaat-tisista aineista.
24 8 6 3 71
Keksinnön mukaisten, farmaseuttisten koostumusten valmistaminen vesipitoisten liposomiseosten muodossa voidaan tehdä myös kaikkien muiden, tähän asti tunnettujen liposomien valmistusmenetelmien mukaisesti, esim. tavanomaisella tavalla antamalla ultraäänen vaikuttaa vesipitoiseen dispersioon, joka sisältää kaavojen (I) ja (II) mukaiset fosfolipidit ja kapseloitavan aineen, infuusiomenetelmällä tai käänteisfaasi-haihdutuksella.
Dispergointi suoritetaan lämpötilassa, joka on alle noin 36°C:n, mieluimmin huoneen lämpötilassa. Jos kapseloitavien yhdisteiden herkkyys vaatii, suoritetaan menetelmä jäähdyttäen ja mahdollisesti inerttikaasu-, esim. typpi- tai argo-natmosfäärissä.
Saatavat liposomit ovat vesipitoisessa faasissa hyvin kauan (jopa useampia viikkoja tai kuukausia) pysyviä. Farmaseuttiset koostumukset vesipitoisten liposomi-dispersioiden muodossa voidaan tehdä säilyviksi mahdollisesti lisäämällä sta-bilisaattoreita, esim. manniittia tai laktoosia, jonka jälkeen ne jäädytyskuivataan.
Muodostuneiden, unilamellaaristen liposomien koko riippuu mm. aktiiviaineen ja lipidikomponenttien rakenteesta, komponenttien sekoitussuhteesta ja näiden komponenttien konsent-raatiosta vesipitoisessa dispersiossa. Niinpä voidaan esimerkiksi korottamalla tai alentamalla lipidikomponenttien :.· konsentraatiota valmistaa vesipitoisia faaseja, joissa on suurempi osa pientä tai suurta liposomia.
Käsittelemällä liposomidispersiot jälkeen päin esim. ultraäänellä tai ekstrudoimalla tasahuokoisen suodattimen läpi (esim. Nucleopore ®) voidaan saada liposomi, jolla on erityisen yhtenäinen kokojakaantuma.
Suurten liposomien erottaminen pienistä liposomeista, mikäli se yleensä on tarpeellista, tapahtuu tavanomaisilla erotus- 25 86 371 menetelmillä, esim. geelisuodatuksella, esim. kantoaineena Sepharose 4B tai Sephacryl, tai sedimentoimalla liposomit ultrasentrifuugissa, esim. 160 000 x g. Esimerkiksi useamman tunnin, esim. noin kolmen tunnin sentrifugoinnin jälkeen tässä painovoimakentässä suuret liposomit painuvat alas, kun taas pienet liposomit jäävät dispergoituneiksi ja voidaan dekantoida pois. Sentrifugoimalla useita kertoja voidaan suuret liposomit erottaa pienistä täydellisesti.
Liposomit erotetaan mieluimmin silloin, kun menetelmämuun-noksen b) mukainen vesipitoinen faasi ei sisällä kapseloituja, vesiliukoisia yhdisteitä. Erityisesti täytyy vesiliukoiset antineoplastiset aineet, esim. alkylantsieeni, erottaa esimerkiksi suodattamalla, ultrasuodattamalla, dialysoimalla tai sentrifugoimalla, koska näiden aktiiviaineiden sopivuus liuotetussa muodossa ei ole erityisen hyvä. Rikastetut liposomit voidaan sekoittaa nestemäiseen kantoaineeseen, esim. isotoniseen, steriiliin keittosuolaliuokseen. Vesipitoiset dispersiot, jotka sisältävät pieniä suhteellisen yhtenäisen kokoisia liposomeja, saadaan myös käsittelemällä ultraäänellä.
Myös geelisuodatuksella voidaan erottaa kaikki vesipitoisessa faasissa olevat liposomit, joiden läpimitta on 6,0 x 10-8 . . m, sekä ei-kapseloidut, lipofiiliset aktiiviaineet ja ylimää räiset, dispergoituneet lipidit, jotka ovat suurimolekyyli-sinä aggregaatteina, ja näin valmistetaan vesipitoinen dispersio, jossa fraktio muodostuu suhteellisen yhtenäisen kokoisista liposomeista.
Suoritettu liposomien muodostaminen ja niiden pitoisuus vesipitoisessa faasissa voidaan sinänsä tunnetulla tavalla, erilaisten fysikaalisten mittausmenetelmien perusteella todeta, esim. jäädytysmurskatuilla (freeze fracture) näytteillä ja ohutleikkeillä elektronimikroskoopissa tai röntgendif-fraktiolla, dynaamisella valon hajotuksella, määrittämällä 26 86371 suodoksen massa analyyttisessä ultrasentrifuugissa ja ennen kaikkea spektroskooppisesta esim. ydinresonanssipektrillä ^H, 13C ja 31p) ·
Synteettiset, olennaisesti puhtaat kaavojen (I) ja (II) mukaiset fosfolipidit ovat tunnettuja. Esimerkiksi Browning J. ja Seeling J. ovat katsausartikkelissa Synthesis of Specifically Deuterated Saturated and Unsaturated Phosphatidylse-rins" in Chem. and Physics of Lipids 24 (1979), 103-118, kuvanneet 1,2-Di-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriinin valmistuksen.
Antiflogistiset, antibioottiset, antileismaaniset ja syöpä-kemoterapeuttiset, farmaseuttiset aktiiviaineet ovat tunnettuja, katso Merck-Index, 10. painos, tai jo edellä mainittu katsausjulkaisu Schröder et. ai. "Pharmazeutische Chemie".
Mainitut kaavan (VI) mukaiset, muramyylipeptidi-tyyppiset immuunimodulaattorit ovat myös tunnettuja, katso esimerkiksi eurooppalaiset patenttijulkaisut nro 25 495 ja 21 367, sekä ranskalainen patenttijulkaisu nro 7 637 091.
Mainitut, lipopeptidi-tyyppiset immuunimodulaattorit ovat myös tunnettuja, esim. EP-A-114 787 tai eurooppalainen patenttijulkaisu 3 30.
Puhdistetun interleukiini 2:n valmistus on kuvattu julkai-’ : sussa EP-A-0106179 sekä US-patenttijulkaisussa 4 448 879.
Aineseokset, jotka sisältävät makrofagi-migraatio-inhibitio-faktorin (MIF), leukosyytti-migraatio-inhibitiofaktorin, leu-kosyytti-migraatio-vahvistusfaktorin, makrofagi-aktivointi-. . faktorin (MAP), pesäkestimulointifaktorin, jne. on kuvattu lukuisissa julkaisuissa, esim. Salahuddi S.Z. et ai., Science 223 (4637) 703-707 (1984. Viljelysuodoksen, joka sisältää erityisen suuren osan ihmisen MAF:ää, valmistus on myös ku-vattu lukuisissa julkaisuissa, esim. Le J. et ai. J. Immuno- 27 86371 logy, Voi. 131, 2821-2826 (1983), Kleinermann et. ai., j. Clinical Investigation, 72, 304-315 (1983), Cameron D.J., J.Clin. Lab. Immunol. (1984), 13, 47-50, sowie Kleinermann E.S. und Fidler I. J., Lymphokine Research, Vol. 2, No. l, 7-12 (1983).
Käytetyt puskuriliuokset, joidan pH on 7,0-7,8, ovat mieluimmin fosfaattipuskuriliuoksia, joiden perustana on divety-/vetyfosfaatti, jotka voidaan valmistaa esimerkiksi julkaisussa Hagers Handbuch der Pharmazeutischen Praxis, Spinger Verlag, Band 1, s, 357-359 esitetyn ohjeen mukaan. Erityisesti käytetään steriiliä, isotonista, kalsium-vapaata puskuriliuosta, jonka pH 7,2 (Dulbecco).
Seuraavat esimerkit havainnollistavat keksintöä, sitä kuitenkaan rajoittamatta. Lämpötilat ovat Celsius-asteita.
Esimerkki 1:
Pyörökolvissa liuotetaan 586 mg steriiliä tert.-butanolia, 0,1 mg N-asetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoklutamiiniyyli-L-alaniini-2-(1,2-di-palmitoyyli-sn-klysero-3-hydroksifos-foriloksi)-etyyliamidia (valmistetaan eurooppalaisen patenttijulkaisun 25 496 mukaisesti), 75 mg (95%:isesti puhdasta) natrium-1,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriiniä (valmistetaan menetelmällä, jonka ovat esittäneet Browning J. und Seelig J., Chem. and Physics of Lipids 24 (1979) 103-118) ja 175 mg (95%:isesti puhdasta) 1-n-heksade-kanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinia (Avanti, Polar Lipids). Liuos steriilisuodatetaan Acrodis-cilla (2,0 x 10-7 m) ja täytetään steriili ampulli, jota sen jälkeen jäähdytetään -45°C:ssa. Kun 25°:n lämpötila saavutetaan, ampulli kuivataan tyhjössä ja suljetaan argonatmos-fäärissä.
’ Ennen käyttöä, tähän kuivavalmisteeseen (lyofilisaattiin) lisätään huoneen lämpötilassa steriilillä ruiskulla 2,5 ml 28 8 6 3 71 steriiliä kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua (pH 7,2- 7,4) keittosuolaliuosta (Dulbecco) ja ampullia ravistellaan standardisoidulla laboratorioravistelijalla (Vortex, nopeus 6) 10 minuuttia. Muodostunut liposomidispersio on varastoin-tikelpoinen 4°:ssa ja sopii parenteraaliseen (i.v.) annostukseen.
Esimerkki 2:
Pyörökolvissa liuotetaan 586 mg steriiliä tert.-butanolia, 0,1 mg N-asetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoglutaminyyli-L-alaniini-2-(1,2-di-palmitoyyli-sn-glysero-3-hydroksifosfo-riloksi)-etyyliamidia (valmistetaan eurooppalaisen patenttijulkaisun 25 495 mukaisesti), 75 mg (95%:isesti puhdasta) natrium-1,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriiniä (valmistetaan menetelmällä, jonka ovat esittäneet Browning J. und Seelig J., Chem. and Physics of Lipids 24 (1979) 103-118) ja 175 mg (95%risesti puhdasta) 1-n-heksa-dekanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikolii-nia (Avanti, Polar Lipids). Liuos steriilisuodatetaan Acro-discilla (2,0 x 10-7 m) ja täytetään steriiliin ampulliin. Ampullia pyöri- tetään 150 kierrosta/min. ja liuottimeen puhalletaan puhdistettu, 1 baarissa suodatettu typpivirta. Lopuksi ampulli evakuoidaan suurtyhjössä 6,0 x 10-2 mbar. Ampulli suljetaan argon-suojakaasuatmosfäärissä.
Ennen käyttöä lisätään tähän valmistettuun kalvoon huoneen lämpötilassa steriilillä ruiskulla 2,5 ml steriiliä, kalsium-vapaata fosfaatti-puskuroitua (pH 7,2 - 7,4) keittosuolaliuosta (Dulbecco) ja ampullia ravistellaan standardisoi-: : dulla laboratorioravistelijalla (Vortex, nopeus 6) 10 minuu- tin ajan. Muodostunut liposomidispersio on varastointikel-poinen 4°C:ssa ja sopii parenteraaliseen (i.v.) annostukseen.
λ/ Esimerkki 3:
Esimerkin 2 mukaisesti voidaan valmistaa vesipitoisia dis-persioita, jotka sisältävät liposomeja, jotka muodostuva 75 29 86371 mg:sta (0,091 mmoolia) natrium-1,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli)- 3-sn-fosfatidyyliseriiniä, 175 mg:sta (0,213 mmoolia) l-n-heksadekanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-koliinia ja enemmästä kuin 0,1 mg:sta ja korkeintaan 10 mg:sta N-asetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoglutaminyyli-L-alaniini-2-(1,2-dipalmitoyyli-sn-glysero-3-hydroksifosfori-loksi)-etyyliamidia.
Esimerkki 4:
Pyörökolvissa liuotetaan 586 mg steriiliä, tert.-butanolia, 75 mg (95%risesti puhdasta) natrium-1,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli ) -3-sn-fosfatidyyli- (S ) -seriiniä ja 175 mg (95%:isesti puhdasta) l-n-heksadekanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinia, steriilisuodatetaan Acrodiscilla (2,0 x 10"7 m) ja täytetään steriiliin ampulliin. Ampullia pyöritetään 1750 kierrosta/min. ja liuottimeen puhalletaan puhdistettu, 1 baarissa suodatettu typpivirta. Lopuksi ampulli evakuoidaan suurtyhjössä 6,0 x 10-2 mbar. Ampulli suljetaan argonsuoj akaasuatmosfäärissä.
Ennen käyttöä tähän valmistettuun kalvoon lisätään huoneen lämpötilassa steriilillä ruiskulla 2,5 ml steriiliä, kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua (pH 7,2 - 7,4) keitto-suolaliuosta (Dulbecco), joka sisältää doksorubisiinia kon-sentraatiossa 4 g/l, ja ampullia ravistellaan standardisoidussa laboratorioravistelijassa (Vortex, nopeus 6) 10 minuutin ajan. Sen jälkeen dispersio sentrifugoidaan 40 000 g:ssa 10 minuutin ajan. Suodos poistetaan ja liposomi suspendoi-daan 2,5 ml:aan 0,85%:ista steriiliä keittosuolaliuosta.
Esimerkki 5:
Ampullissa (15 ml) liuotetaan 506 mg steriiliä tert.-butano-. . lia, 75 mg (98%:isesti puhdasta) natrium-1,2-di-(9-cis-oktade- kenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriiniä (valmistetaan menetelmällä, jonka ovat esittäneet Browning J. und Seelig J., Chem. and Physics of Lipids 24 (1979) 103 ja 175 mg (99,5 30 86 371 % risesti puhdasta) l-n-heksadekanoyyli-2-(9-cis-oktadekeno-yyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinia (valmistetaan menetelmällä, jonka on esittänyt Eibl H., Chem. Physics of Lipids 26 (1980) 239 und Eibl H., Angewandte Chemie 96 (1984) 247). Liuos ste-riilisuodatetaan Acrodiscilla (2,0 x 10~7 m) ja steriili ampulli täytetään, jonka jälkeen jäädytetään -45°:ssa. Ampullia kuivataan tyhjössä, kunnes saavutetaan 25°:n lämpötila ja se suljetaan argonatmosfäärissä.
Ennen käyttöä tähän kuivavalmisteeseen lisätään steriilillä ruiskulla 2,5 ml steriiliä, kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua keittosuolaliuosta (Dulbecco), joka sisältää doksorubisiinia konsentraatiossa 4 g/l, ja ampullia ravistellaan standardisoidulla laboratorioravistelijalla (Vortex, nopeus 6) yhden minuutin ajan. Lisätään 22,5 ml steriiliä, kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua keittosuolaliuosta, joka on tasapainotettu 10°:ssa, jonka jälkeen suspensiota ravistellaan 2 minuutin ajan ja lopuksi sentrifugoidaan 10 000 grssä ja 10°:ssa, 30 minuutin ajan. Jäännös poistetaan ja liposomit suspendoidaan uudestaan 25 ml:aan steriiliä keittosuolaliuosta 10°:ssa. Sentrifugointimenetelmä toistetaan, jonka jälkeen liposomit suspendoidaan uudestaan 2,5 ml:aan, 0,85%:ista steriiliä keittosuolaliuosta. Liposomi-suspensio sisältää 9 mg doksorubisiinia per 250 mg lipidiä ja on sopiva suonensisäiseen (i.v.)-annostukseen.
Esimerkki 6:
Esimerkin 5 mukaisesti voidaan valmistaa doksorubisiinia sisältäviä liposomeja kuivavalmisteesta, joka sisältää 225 mg (0,297 mmoolia) (99,5%risesti puhdasta) 1-n-heksadekano-yyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinia j a 25 mg (0,030 mmoolia) (98%risesti puhdasta) natrium-1,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-S-seriiniä. Liposo-misuspensio sisältää 7 mg doksorubisiinia per 250 mg lipidiä ja on sopiva suonensisäiseen (i.v.)-annostukseen.
3i 86371
Esimerkki 7:
Esimerkkien 4 ja 5 mukaisesti voidaan valmistaa liposomidis-persio ja fosfolipidien kuivavalmiste dispergoidaan 2,5 ml:aan steriiliä, kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua (pH
7,2- 7,4) keittosuolaliuosta (Dulbecco), joka sisältää mito-mysiini C:tä konsentraatiossa lg/1, sentrifugoidaan ja sus-pendoidaan keittosuolaliuokseen.
Esimerkki 8:
Esimerkin 5 mukaisesti, mutta jättämällä sentrifugointi pois voidaan valmistaa liposomidispersio ja fosfolipidien kuiva-valmiste dispergoidaan 2,5 ml:aan steriiliä, kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua (pH 7,2 - 7,4) keittosuolaliuosta (Dulbecco), joka sisältää 50 - 200 /ug natrium-N-asetyyli-D-muramyyli-L-alanyyli-D-isoglutamiinia (GB-patenttijulkaisu 1,570,625) ja 1 000 - 10 000 yksikköä rekombinoitua, ihmisen gamma-interferonia, joka on eristetty EP-patenttihakemuksen 121 157 mukaisesti (Kyowa Hakko Kogyo Co.).
Esimerkki 9:
Esimerkin 5 mukaisesti, mutta jättämällä pois sentrifugointi, voidaan valmistaa liposomisuspensio ja fosfolipidien kuiva-ainevalmiste dispergoidaan 2,5 ml:aan steriiliä, kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua (pH 7,2 - 7,4) keitto-suolaliuosta (Dulbecco), joka sisältää 50 - 200 /ug natrium-N-asetyylidesmetyyli-muramyyli-L-alanyyli-D-isoglutamiinia ja 1 000 - 100 000 yksikköä rekombinoitua ihmisen gamma-interferonia.
Esimerkki 10:
Esimerkin 4 mukaisesti, mutta jättämällä pois sentrifugointi, voidaan valmistaa liposomisuspensio ja fosfolipidien kuiva-ainevalmiste dispergoidaan 2,5 ml:aan steriiliä, kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua (pH 7,2-7,4) keittosuolaliuosta (Dulbecco), joka sisältää 50 - 200 /ug natrium-N-asetyyli-D-muramyyli-L-alanyyli-D-isoglutamiinia ja 1 000-100 000 yksikköä rekombinoitua ihmisen gamma-interferonia.
32 86371
Esimerkki 11:
Esimerkin 4 mukaisesti, mutta jättämällä sentrifugointi pois, voidaan valmistaa liposomisuspensio ja fosfolipidien kuiva-valmiste dispergoidaan 2,5 ml:aan steriiliä, kalsium-vapaata, fosfaatti-puskuroitua (pH 7,2-7,4) keittosuolaliuosta (Dul-becco), joka sisältää noin 50 - 200 ^ug natrium-N-asetyyli-desmetyylimuramyyli-L-alanyyli-D-isoglutamiinia ja 1 000 -100 000 yksikköä rekombinoitua, ihmisen gamma-interferonia.
Esimerkki 12:
Pyörökolviin, jossa on 1 g sorbitolia (kidekoko 125-500 /um), lisätään tipoittain tyhjössä 14,2 ml steriiliä tert.-butanolia, joka sisältää 1 - 10 mg N-asetyyli-muramyyli-L-alanyyli-D-isoglutamiini-L-alanyyli-2-(1,2-dipalmitoyyli-sn-klysero-3-hydroksifosforiyyliloksi)-etyyliamidia (valmistetaan eurooppalaisen patenttijulkaisun 25 495 mukaan), 75 mg natrium-1,2-di-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli- (S)-seriiniä ja 175 mg l-n-heksadekanoyyli-2-(9-cis-oktade-kenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikoliinia. Sen jälkeen poistetaan liuotin tyhjössä kontrolloidussa lämpötilaoloissa. Muodostunut kuivajauhevalmiste suljetaan argonatmosfäärissä.
Ennen käyttöä lisätään tähän kuivavalmisteeseen huoneen lämpötilassa steriilillä ruiskulla 20 ml tislattua, steriiliä vettä ja kolvia ravistellaan 10 minuutin ajan.
Esimerkki 13:
Esimerkin 12 mukaisesti voidaan sorbitolin sijasta käyttää myös glukoosia, sakkaroosia, laktoosia tai natriumkloridia kantoaineena.
Claims (2)
1. Menetelmä farmaseuttisten liposomikoostumusten valmistamiseksi, jotka sisältävät 1. synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan fosfolipidin, jonka kaava (I) on sn 1 CHz-O-Rx
2 Rz-O-CH O (S) O
3 CHz-0-P-0-(C H, )-Cff-C-OH Y® (I), O® n 2n ÄH* jossa ja R2 tarkoittavat, toisistaan riippumatta, C1Q-C20-alkenoyyliä, jossa C-atomien lukumäärä on parillinen, n tarkoittaa kokonaislukua 1-3 ja Y® tarkoittaa farmaseuttisesti hyväksyttävän emäksen kationia, 2. synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan fosfolipidin, jonka kaava (II) on sn 1 CHj-O-Rx «
2 Rz-O-CH 0 a 3 <U>' c jossa Rj tarkoittaa C10-C20-alkanoyyliä, jossa C-atomien lukumäärä on parillinen, R2 tarkoittaa C10-C20-alkenoyy-liä, jossa C-atomien lukumäärä on parillinen, Rg, R^ ja Rc tarkoittavat vetyä tai C1-C4-alkyyliä ja n kokonaislukua : 2-4, - : 3) aineen tai aineseoksen, jolla on biologinen vaikutus, ja mahdollisesti nestemäisen kantoaineen ja/tai muita, kiinteitä kantoaineita, tunnettu siitä, että 34 8 6 3 71 a) valmistetaan homogeeninen seos, joka muodostuu synteettisistä, yli 90 paino-%:sesti puhtaista, kaavojen (I) ja (II) mukaisista fosfolipideistä ja lipofiilisesta aineesta tai aineseoksesta, jolla on biologinen vaikutus, ja lipo-somien valmistamiseksi saatu, homogeeninen seos dispergoi-daan vesipitoiseen faasiin ravistelemalla tai hämmentämällä, ultraäänikäsittelyllä, infuusiomenetelmillä tai kään-teisfaasihaihdutuksella, tai b) valmistetaan homogeeninen seos, joka muodostuu synteettisistä, yli 90 paino-%:sesti puhtaista, kaavojen (I) ja (II) mukaisista fosfolipideistä, ja liposomien valmistamiseksi saatu, homogeeninen seos dispergoidaan vesipitoiseen faasiin, joka sisältää vesiliukoisen aineen tai aineseok-sen, jolla on biologinen vaikutus, suorittamalla kohdassa a) mainittuja toimenpiteitä, ja tarvittaessa saatu vesipitoinen dispersio puskuroidaan pH-arvoon 7,0-7,8, ja, haluttaessa, saadut liposomit rikastetaan ja/tai erotetaan.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä farmaseuttisten liposomikoostumusten valmistamiseksi, jotka sisältävät a) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan natrium-1,2-di-(9—cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyyli-(S)-seriinin, b) synteettisen, yli 90 paino-%:sesti puhtaan l-n-heksade-kanoyyli-2-(9-cis-oktadekenoyyli)-3-sn-fosfatidyylikolii-nin, c) N-asetyyli-D-muramyyli-L-alanyyli-D-isoglutaminyyli-L-alaniini-2-(1,2-dipalmitoyyli-sn-glysero-3-hydroksifosfor-yylioksi)-etyyliamidin, ja mahdollisesti pH-arvoon 7,2-7,4 puskuroidun, nestemäisen kantoaineen, tunnettu siitä, että valmistetaan kohdissa a) ja b) mainittujen fosfolipidien homogeeninen seos N-asetyyli-D-muramyyli-L-alanyyli-D-isoglutaminyyli-L-alaniini-2-(1,2-dipalmi- 35 86 371 toyyli-sn-glysero-3-hydroksifosforyylioksi)-etyyliamidin kanssa ja tämä homogeeninen seos dispergoidaan vesipitoiseen faasiin ravistelemalla tai sekoittamalla.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH495184 | 1984-10-16 | ||
| CH495184 | 1984-10-16 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI853982A0 FI853982A0 (fi) | 1985-10-14 |
| FI853982L FI853982L (fi) | 1986-04-17 |
| FI86371B FI86371B (fi) | 1992-05-15 |
| FI86371C true FI86371C (fi) | 1992-08-25 |
Family
ID=4285361
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI853982A FI86371C (fi) | 1984-10-16 | 1985-10-14 | Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiska liposomkompositioner. |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4971802A (fi) |
| EP (1) | EP0178624B1 (fi) |
| JP (2) | JPH0618773B2 (fi) |
| KR (1) | KR890000908B1 (fi) |
| AT (1) | ATE58474T1 (fi) |
| AU (1) | AU590221B2 (fi) |
| CA (1) | CA1260393A (fi) |
| DD (1) | DD239117A5 (fi) |
| DE (1) | DE3580648D1 (fi) |
| DK (1) | DK165220C (fi) |
| ES (1) | ES8700934A1 (fi) |
| FI (1) | FI86371C (fi) |
| GR (1) | GR852492B (fi) |
| HK (1) | HK135793A (fi) |
| HU (1) | HU198128B (fi) |
| IE (1) | IE58143B1 (fi) |
| IL (1) | IL76700A (fi) |
| NO (1) | NO171443C (fi) |
| PH (1) | PH22978A (fi) |
| PT (1) | PT81298B (fi) |
| ZA (1) | ZA857888B (fi) |
Families Citing this family (39)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2562421B1 (fr) * | 1984-04-09 | 1989-02-17 | Sandoz Sa | Perfectionnements a la therapie par l'interleukine |
| US5243062A (en) * | 1984-10-12 | 1993-09-07 | Ciba-Geigy Corporation | Substituted propane-phosphonous acid compounds |
| JPS61172833A (ja) * | 1985-07-17 | 1986-08-04 | Nakanishi Michio | 消炎鎮痛性医薬組成物 |
| US5133973A (en) * | 1986-08-07 | 1992-07-28 | Medice Chem.-Pharm. Fabrik Putter Gmbh & Co. Kg | Pharmaceutical preparations |
| EP0256989A1 (en) * | 1986-08-18 | 1988-02-24 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Pharmaceutical administration systems containing chemotactic peptides |
| JPH0761940B2 (ja) * | 1986-11-17 | 1995-07-05 | 株式会社資生堂 | 外皮用リポソ−ム製剤 |
| EP0274219A3 (en) * | 1986-12-04 | 1988-08-03 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Interleukin-2-containing liposome composition and method for the production thereof |
| US4944941A (en) * | 1987-08-07 | 1990-07-31 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for the treatment of lung conditions |
| US5178875A (en) * | 1991-01-14 | 1993-01-12 | The Board Of Regents, The University Of Texas System | Liposomal-polyene preliposomal powder and method for its preparation |
| US5830498A (en) * | 1987-10-16 | 1998-11-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Liposomal-polyene preliposomal powder and method for its preparation |
| FI874742A (fi) * | 1987-10-28 | 1989-04-29 | K & V Licencing Oy | Foerfarande foer framstaellning av liposomer. |
| EP0331635A3 (en) * | 1988-02-29 | 1990-02-28 | The Board of Regents of the University of Texas System | Preparations for treating bladder cancer |
| DE3806852A1 (de) * | 1988-03-03 | 1989-09-14 | Knoll Ag | Neue (alpha)-aminodicarbonsaeure-derivate, ihre herstellung und verwendung |
| DE68927679T2 (de) * | 1988-10-27 | 1997-06-26 | Univ Minnesota | Immunhilfsmittel aus Liposome enthaltend Lymphokin IL -2 |
| US5466468A (en) * | 1990-04-03 | 1995-11-14 | Ciba-Geigy Corporation | Parenterally administrable liposome formulation comprising synthetic lipids |
| US5270053A (en) * | 1990-04-03 | 1993-12-14 | Ciba-Geigy Corp. | Parenterally administerable liposome formulation comprising synthetic lipid |
| ES2056617T3 (es) * | 1990-04-03 | 1994-10-01 | Ciba Geigy Ag | Formulacion de liposomas, aplicable de forma parenteral, constituida por lipidos sinteticos. |
| US5162361A (en) * | 1990-04-10 | 1992-11-10 | The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Method of treating diseases associated with elevated levels of interleukin 1 |
| EP0467838A3 (en) * | 1990-07-17 | 1992-09-02 | Ciba-Geigy Ag | Process for preparing an injectable liposome dispersion |
| ATE118168T1 (de) * | 1990-12-03 | 1995-02-15 | Vestar Inc | Verhütung der synovialischen adhäsion. |
| JPH07502734A (ja) * | 1991-12-31 | 1995-03-23 | ザイモジェネティクス，インコーポレイティド | 血液損失を減少する方法および組成物 |
| PT100487B (pt) * | 1992-05-14 | 1999-07-30 | Univ Texas | Formulacoes lipossomais de rifamicinas com elevada estabilidade e eficacia de incorporacao de antibiotico, e processo para a sua preparacao |
| DE59406065D1 (de) * | 1993-03-24 | 1998-07-02 | Ciba Geigy Ag | Verfahren zur Herstellung einer Liposomendispersion im Hochdruckbereich |
| EP0706374B1 (en) * | 1993-06-30 | 1997-12-10 | Genentech, Inc. | Method for preparing liposomes |
| US5474985A (en) * | 1993-12-22 | 1995-12-12 | The Regents Of The University Of California | Preventing and treating elevated intraocular pressure associated with administered or endogenous steroids using non-steroidal cyclooxygenase inhibitors |
| US6313106B1 (en) * | 1995-06-07 | 2001-11-06 | D-Pharm Ltd. | Phospholipid derivatives of valproic acid and mixtures thereof |
| US5599535A (en) * | 1995-06-07 | 1997-02-04 | Regents Of The University Of California | Methods for the cyto-protection of the trabecular meshwork |
| US5674888A (en) * | 1995-06-07 | 1997-10-07 | University Of California | Method for the treatment of a trabecular meshwork whose cells are subject to inhibition of cell division |
| EP0906088B1 (en) * | 1996-05-14 | 2005-11-23 | BURZYNSKI, Stanislaw R. | Liposomal antineoplaston therapies with markedly improved antineoplastic activity |
| US6723338B1 (en) * | 1999-04-01 | 2004-04-20 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Compositions and methods for treating lymphoma |
| GB9921958D0 (en) * | 1999-09-16 | 1999-11-17 | Pharmacia & Upjohn Spa | Formulations for parenteral use of estramustine phosphate and sulfoalkylether-cyclodextrins |
| WO2002062810A2 (en) * | 2000-11-29 | 2002-08-15 | Bracco International B.V. | Linkable sialyl lewis x analogs |
| WO2007014754A1 (en) * | 2005-08-02 | 2007-02-08 | I.D.M. Immuno-Designed Molecules | Process for the preparation of liposomal formulations |
| JP4931527B2 (ja) * | 2006-09-20 | 2012-05-16 | 富士フイルム株式会社 | フッ素化ホスファチジルセリン化合物 |
| JP2010513354A (ja) * | 2006-12-19 | 2010-04-30 | ノヴォソム アクチェンゲゼルシャフト | トランスフェクションエンハンサー要素を含む脂質および脂質集合体 |
| US9758536B2 (en) | 2011-12-07 | 2017-09-12 | Omega Protein Corporation | Phospholipid compositions enriched for palmitoleic, myristoleic or lauroleic acid, their preparation and their use in treating metabolic and cardiovascular disease |
| ES2730405T3 (es) | 2012-11-20 | 2019-11-11 | Spectrum Pharmaceuticals Inc | Método mejorado para la preparación de vincristina encapsulada en liposomas para uso terapéutico |
| TWI678213B (zh) | 2015-07-22 | 2019-12-01 | 美商史倍壯製藥公司 | 用於長春新鹼硫酸鹽脂質體注射之即可使用的調配物 |
| CN113995852B (zh) * | 2021-11-08 | 2024-01-30 | 河北大学 | Arg-脂质体微囊、微囊包封的鱼精蛋白-siRNA复合体及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1523965A (en) * | 1976-03-19 | 1978-09-06 | Ici Ltd | Pharmaceutical compositions containing steroids |
| USRE30748E (en) * | 1976-10-12 | 1981-09-22 | Phosphatidyl quaternary ammonium compounds | |
| DE2647395C2 (de) * | 1976-10-20 | 1984-03-29 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Verfahren zur Herstellung von Estern des Glycerophosphocholins |
| GB2026340B (en) * | 1978-07-03 | 1982-12-22 | Ash P | Stabilising microvesicles |
| FI75578C (fi) * | 1979-07-25 | 1988-07-11 | Ciba Geigy Ag | Analogifoerfarande foer framstaellning av farmakologiskt verkande lipofila fosfatidylmuramylpeptider. |
| US4302459A (en) * | 1980-03-19 | 1981-11-24 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Liposome carriers in leishmaniasis chemotherapy with 8-aminoquinoline derivatives |
| IL64397A0 (en) * | 1981-01-07 | 1982-02-28 | Weder Hans G | Process for the preparation of liposomal medicaments |
| US4485045A (en) * | 1981-07-06 | 1984-11-27 | Research Corporation | Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes |
| DE3374837D1 (en) * | 1982-02-17 | 1988-01-21 | Ciba Geigy Ag | Lipids in the aqueous phase |
| DE3209537A1 (de) * | 1982-03-16 | 1983-09-22 | Siemens AG, 1000 Berlin und 8000 München | Elektrokleinmotor mit einer vorrichtung zum einstellen des axialspiels |
| DE3239817A1 (de) * | 1982-07-06 | 1984-01-12 | Max Planck Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen | Neue glycerinderivate zur synthese von phospholipiden |
| US4666893A (en) * | 1983-02-15 | 1987-05-19 | St. Thomas Institute | Methods of inducing resistance to bacterial and viral infections |
| US4515736A (en) * | 1983-05-12 | 1985-05-07 | The Regents Of The University Of California | Method for encapsulating materials into liposomes |
| US4622219A (en) * | 1983-06-17 | 1986-11-11 | Haynes Duncan H | Method of inducing local anesthesia using microdroplets of a general anesthetic |
| GB8322178D0 (en) * | 1983-08-17 | 1983-09-21 | Sterwin Ag | Preparing aerosol compositions |
| DE3346525C2 (de) * | 1983-12-22 | 1987-03-19 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Pharmazeutische Zubereitung mit speziellen 1,2-Diacyl-glycero-3-phosphocholinen zur Behandlung von Erkrankungen im Magen-Darmbereich |
| JPS6150912A (ja) * | 1984-08-16 | 1986-03-13 | Shionogi & Co Ltd | リポソ−ム製剤の製造法 |
| JPS62501631A (ja) * | 1985-01-11 | 1987-07-02 | ザ・リ−ジェンツ・オブ・ジ・ユニバ−シィティ・オブ・カリフォルニア | リポソ−ムの保持法 |
| US4774085A (en) * | 1985-07-09 | 1988-09-27 | 501 Board of Regents, Univ. of Texas | Pharmaceutical administration systems containing a mixture of immunomodulators |
-
1985
- 1985-10-11 CA CA000492845A patent/CA1260393A/en not_active Expired
- 1985-10-14 DE DE8585113027T patent/DE3580648D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-14 EP EP85113027A patent/EP0178624B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-14 IE IE252785A patent/IE58143B1/en not_active IP Right Cessation
- 1985-10-14 PT PT81298A patent/PT81298B/pt unknown
- 1985-10-14 FI FI853982A patent/FI86371C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-10-14 IL IL76700A patent/IL76700A/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-10-14 AT AT85113027T patent/ATE58474T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-10-15 GR GR852492A patent/GR852492B/el unknown
- 1985-10-15 DD DD85281752A patent/DD239117A5/de not_active IP Right Cessation
- 1985-10-15 HU HU853987A patent/HU198128B/hu unknown
- 1985-10-15 AU AU48713/85A patent/AU590221B2/en not_active Expired
- 1985-10-15 ZA ZA857888A patent/ZA857888B/xx unknown
- 1985-10-15 NO NO854085A patent/NO171443C/no not_active IP Right Cessation
- 1985-10-15 DK DK471085A patent/DK165220C/da not_active IP Right Cessation
- 1985-10-15 ES ES547889A patent/ES8700934A1/es not_active Expired
- 1985-10-16 PH PH32933A patent/PH22978A/en unknown
- 1985-10-16 JP JP60228985A patent/JPH0618773B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-16 KR KR1019850007613A patent/KR890000908B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1989
- 1989-08-16 US US07/395,286 patent/US4971802A/en not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-10-13 JP JP5255752A patent/JPH0816067B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-09 HK HK1357/93A patent/HK135793A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI86371C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiska liposomkompositioner. | |
| US4774085A (en) | Pharmaceutical administration systems containing a mixture of immunomodulators | |
| US4863740A (en) | Interleukin therapy | |
| US5466468A (en) | Parenterally administrable liposome formulation comprising synthetic lipids | |
| ES2224299T3 (es) | Dispersion liposomal de eritroyetina. | |
| US4983397A (en) | Pharmaceutical compositions consisting of acylated phospholipids | |
| CN1044093C (zh) | 低毒性药物类脂制剂 | |
| US4916118A (en) | Pharmaceutical administration systems containing chemotactic peptides | |
| US5270053A (en) | Parenterally administerable liposome formulation comprising synthetic lipid | |
| CA1273575A (en) | Pharmaceutical compositions consisting of acylated phospholipids | |
| CN1055483A (zh) | 肽药物的长效脂质体制剂及其制备 | |
| CA1309346C (en) | Pharmaceutical administration systems containing chemotactic peptides | |
| CA2039477C (en) | Parenterally administrable liposome formulation comprising synthetic lipids |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC | Transfer of assignment of patent |
Owner name: NOVARTIS AG |
|
| FG | Patent granted |
Owner name: NOVARTIS AG |
|
| MA | Patent expired |