FI82144C - Foerfarande foer samtidig bestaemning av flera ligander. - Google Patents
Foerfarande foer samtidig bestaemning av flera ligander. Download PDFInfo
- Publication number
- FI82144C FI82144C FI891354A FI891354A FI82144C FI 82144 C FI82144 C FI 82144C FI 891354 A FI891354 A FI 891354A FI 891354 A FI891354 A FI 891354A FI 82144 C FI82144 C FI 82144C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- scintillation
- ligand
- properties
- carrier
- ligands
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/60—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances involving radioactive labelled substances
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/804—Radioisotope, e.g. radioimmunoassay
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measurement Of Radiation (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
82144
MENETELMÄ LIGANDIEN MÄÄRITTÄMISEKSI SAMANAIKAISESTI
Keksinnön kohteena on menetelmä biokemiallisissa sitoutu-mismäärityksissä kahden tai useamman radioaktiivisesti leimatun ligandin määrittämiseksi samanaikaisesti.
US-patentissa n:o 4.568.649 on esitetty ligandien lähikan-5 tamamääritysmenetelmä (engl. proximity assay), jossa ligan-deja spesifisesti sitovia biomolekyylejä on kiinnitetty tuikeaineena toimivan kantaja-aineen pintaan. Tällaisia biomolekyylejä ovat esimerkiksi immunoglobuliinit, reseptorit tai nukleiinihapot. Kantaja-aine voi olla esim. pieninä 10 rakeina.
Menetelmän mukaan liuosta, joka sisältää tunnetun määrän radioaktiivisesti leimattua ligandia sekä tuntemattoman määrän leimaamatonta, mutta muuten samanlaista tutkittavaa ligandia, inkuboidaan rakeiden kanssa. Jos leimana käytetty 15 isotooppi on matalaenerginen, esim. tritium, jonka lähettämien β-hiukkasten kantama on korkeintaan muutama mikrometri, vain se osuus leimasta, joka sitoutuu ja joutuu siten lähelle tuikeainetta, tuottaa tuikahduksia. Nämä voidaan sitten havaita nestetuikelaskimella. Sitoutumaton leima jää 20 liian kauaksi tuottaakseen tuikahduksia. Leimatun ja lei-maamattoman ligandin välinen kilpailu johtaa siihen, että mitä enemmän tutkittavaa eli leimaamatonta ligandia on liuoksessa sitä vähemmän leimattua ligandia pystyy sitoutumaan ja sitä vähemmän saadaan tuikahduksia.
25 Kuvatun menetelmän suuri etu on siinä, että se ei vaadi sitoutuneen ja sitoutumattoman leimafraktion erottamista. Menetelmän haittapuolena taas on se, että rakeiden ollessa suspendoituina nesteeseen ne voivat sakkautua vaikuttaen haitallisesti sitoutumiseen ja tuikevalon tuottoon. Myös 30 rakeiden annostelu esimerkiksi pipetoimalla voi olla ongelmallista.
Parannukseksi on ehdotettu tukirakennetta, jossa tuikeaine prosessoidaan suodatinmaton muodostavien kuitujen sisään 2 82144 tai sen pinnalle. Matto myös pidättää näytenestettä kapillaarivoimien vaikutuksesta.
Vaikka erotteluvaiheita ei lähikantamamäärityksissä tarvita, niin näytteet kuitenkin vaativat annostelua eri näy-5 teastioihin eri ligandimäärityksissä. Ja jos halutaan määrittää useita eri ligandeja samasta näytteestä, voi näytteen kokonaismäärä rajoittaa suoritettavia määrityksiä. Kiireisessä laboratoriossa monien näyteastioiden käsittely ja laskentamahdollisuuksien rajallisuus rajoittavat ka-10 pasiteettia. Vaikka muiden isotooppien, kuten esimerkiksi 14C ja 35S käyttö lisäleimoina saattaisi periaatteessa olla mahdollista, niin näiden β-säteily on pitkäkantamaista ja saattaa aiheuttaa tuikahduksia vaikka ko. leima ei olisikaan sitoutunut tuikeaineen pintaan. Seurauksena olisi 15 taustapulssimäärien kasvu.
Tämän keksinnön tarkoituksena on aikaansaada menetelmä, jolla ei ole edellä esitettyjä epäkohtia. Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista se, että ligandit määritetään lähikantamamenetelmällä siten, että kunkin 20 ligandin määrittämiseksi käytetään tuikeominaisuuksiltaan erilaista kannatinainetta, johon on kiinnitetty kyseistä ligandia sitovia molekyylejä.
Erään edullisen sovellutusmuodon mukaan kannatinaine on kokonaan tai osittain tuikeainetta.
25 Keksinnön avulla voidaan lähikantamamäärityksessä määrittää samanaikaisesti useampaa kuin yhtä ligandia. Edelleen suuri etu on se, että kukin ligandi voi olla leimattuna samalla matalaenergisellä isotoopilla, kuten tritiumilla. Kunkin ligandin tuottama osuus pulssimääriin voidaan selvittää jos 30 kukin sitova molekyylityyppi on kiinnitetty tuikeominaisuuksiltaan erilaisten kannatinaineiden, kuten rakeiden tai suodatinkuitujen pintaan.
Eräs tuikeominaisuus, jota keksinnön avulla voidaan hyödyn-
II
3 82144 tää, on eri tuikeaineiden antaman tuikevalon määrä viritettäessä niitä β-säteilyllä. Tämä ilmenee kullekin tuikeai-neelle luonteenomaisena pulssinkorkeusjakautumana eli spektrinä nestetuikelaskimella laskettaessa. Niinpä erään 5 toisen edullisen sovellutusmuodon mukaan kannatinaineissa käytetään tuikeaineita, joiden tuikeominaisuuserot ovat niiden aikaansaamien tuikepulssien korkeudessa. Tällöin tutkittavan näytteen tuottama yhdistelmäspektri voidaan analysoida käyttämällä jotain tunnettua spektrianalyysi 10 tekniikkaa, kuten kanavasuhdelaskentaa tai pienimmän neliösumman menetelmää. Niissä tarkastellaan spektrien osuuksia sopivissa osa-alueissa, kuten ikkunoissa tai kanavissa.
Mainituissa spektrianalyysitekniikoissa kunkin yksittäisen tuikeaineen tuottama spektri tai osa-alueinformaatio on 15 etukäteen talletettu muistiin sopivia standardinäytteitä käyttämällä. Näin voidaan kunkin tuikeaineen yhdistelmäs-pektriin tuottama osuus selvittää. Mainittuja menetelmiä on aikaisemmin käytetty ns. monileimauslaskennassa, jossa useita eri isotooppeja on liuenneina samaan tuikenesteeseen 20 ja mainittujen isotooppien määrä halutaan selvittää. Eri isotoopeilla on erilaiset hajoamisenergiat ja näin ollen myös erilaiset spektrit.
Monileimauslaskennasta poiketen käsillä oleva keksintö liittyy tilanteeseen, jossa käytetään vain yhtä radioaktii-25 vista isotooppia, mutta usean tyyppisiä tuikeaineita esimerkiksi rakeina niin, että kukin raetyyppi sitoo vain sille spesifistä ligandia ja tuottaa kyseiselle tuikeai-neelle tyypillisen spektrin. Esimerkkejä matalan spektrin tuottavista tuikeaineista ovat tuikemuovit, difenyylioksat-30 soli eli PPO ja butyyli-PBD. Korkeamman spektrin taas antavat antraseeni ja eräät epäorgaaniset tuikeaineet, kuten keriumilla aktivoitu yttriumsilikaatti Y2Si05(Ce).
Toinen ominaisuus, joka vaihtelee eri tuikeaineilla, ja jota keksinnön avulla voidaan hyödyntää on eri tuikeainei-35 den antaman tuikepulssin ajallinen pituus eli muoto. Esi- 4 82144 merkiksi tuikemuovien pulssin pituus on alle kymmenen nanosekuntia, kun taas yttriumsilikaatilla se on yli sata nanosekuntia. On olemassa elektronisia ns. pulssinmuoto-analysaattoreita ja diskriminaattoreita, jotka tuottavat 5 pulssin muotoon ja pituuteen verrannollisen signaalin. Tätä ominaisuutta voidaan käyttää karakterisointiin samoin menetelmin kuin edellä kuvattuja pulssinkorkeusjakautumia. Niinpä keksinnön erään kolmannen edullisen sovellutusmuodon mukaan kannatinaineissa käytetään tuikeaineita, joiden 10 tuikeominaisuuserot ovat niiden aikaansaamien tuikepulssien muodossa.
Edellä esitetystä käy selville, että vähintään kaksi eri tuikeainetta voidaan erottaa sellaisten tuikeominaisuuksien perusteella, kuten pulssin korkeus ja muoto. Tällöin saavu-15 tetaan huomattavia säästöjä työskentelyäjassa, näytemääris-sä ja laskenta-ajassa.
Keksintöä selostetaan seuraavassa esimerkin avulla viittaamalla oheiseen piirustukseen, joka esittää kaaviollisesti kahta erilaista tuikeaineraetta ja kahta erilaista, samalla 20 isotoopilla leimattua ligandia. Kuviossa nähdään rakeina difenyylioksatsolia eli PPO:ta ja keriumilla aktivoitua yttriumsilikaattia eli Y2Si05(Ce):tä, jota kuviossa kuvaa kirjain Y. Kumpikin tuikeaine sitoo vain sille spesifistä ligandia. Ligandit on merkitty samalla radioaktiivisella 25 isotoopilla, joka on matalaenergistä tritiumia eli 3H.
Leimatut ligandimolekyylit kilpailevat leimaamattoman eli mitattavien aineiden molekyylien kanssa sitoutumisessa tuikeaineiden pyydystäjämolekyyleihin. Käytetyssä lähikan-tamamäärityksessä vain sitoutunut, leimattu ligandi on 30 riittävän lähellä tuikeainetta aiheuttaakseen valon tuikahduksen. Tuikelaskimella saadaan tällöin määritettyä mitattavan aineen osuus.
Alan ammattimiehelle on selvää, että keksinnön erilaiset sovellutusmuodot voivat vaihdella jäljempänä esitettävien 35 patenttivaatimusten puitteissa.
Claims (5)
1. Menetelmä biokemiallisissa sitoutumismäärityksissä kahden tai useamman radioaktiivisesta leimatun ligandin määrittämiseksi samanaikaisesti, tunnettu siitä, että ligandit määritetään lähikantamamenetelmällä siten, 5 että kunkin ligandin määrittämiseksi käytetään tuikeominai-suuksiltaan erilaista kannatinainetta, johon on kiinnitetty kyseistä ligandia sitovia molekyylejä.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kannatinaine on kokonaan tai 10 osittain tuikeainetta.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kannatinaineissa käytetään tuikeaineita, joiden tuikeominaisuuserot ovat niiden aikaansaamien tuikepulssien korkeudessa.
4. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kannatinaineissa käytetään tuikeaineita, joiden tuikeominaisuuserot ovat niiden aikaansaamien tuikepulssien muodossa.
5. Jonkin patenttivaatimuksista 1-4 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että kannatinaineissa käytetään tuikeaineita, joilla on kaksi tai useampia eroja tuike-ominaisuuksissa . e 82144
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI891354A FI82144C (fi) | 1989-03-22 | 1989-03-22 | Foerfarande foer samtidig bestaemning av flera ligander. |
| EP90904632A EP0487522B1 (en) | 1989-03-22 | 1990-03-21 | Simultaneous scintillation proximity assay for two or more ligands |
| US07/761,836 US5246869A (en) | 1989-03-22 | 1990-03-21 | Method for the simultaneous assay of ligands |
| PCT/FI1990/000073 WO1990011524A1 (en) | 1989-03-22 | 1990-03-21 | Simultaneous scintillation proximity assay for two or more ligands |
| AU52699/90A AU5269990A (en) | 1989-03-22 | 1990-03-21 | Simultaneous scintillation proximity assay for two or more ligands |
| DE69023505T DE69023505D1 (de) | 1989-03-22 | 1990-03-21 | Simultaner szintillation-annäherungstest für zwei oder mehr liganden. |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI891354A FI82144C (fi) | 1989-03-22 | 1989-03-22 | Foerfarande foer samtidig bestaemning av flera ligander. |
| FI891354 | 1989-03-22 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI891354A0 FI891354A0 (fi) | 1989-03-22 |
| FI82144B FI82144B (fi) | 1990-09-28 |
| FI82144C true FI82144C (fi) | 1991-01-10 |
Family
ID=8528103
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI891354A FI82144C (fi) | 1989-03-22 | 1989-03-22 | Foerfarande foer samtidig bestaemning av flera ligander. |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5246869A (fi) |
| EP (1) | EP0487522B1 (fi) |
| AU (1) | AU5269990A (fi) |
| DE (1) | DE69023505D1 (fi) |
| FI (1) | FI82144C (fi) |
| WO (1) | WO1990011524A1 (fi) |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1991008489A1 (en) * | 1989-12-01 | 1991-06-13 | Packard Instrument Company, Inc. | Scintillation proximity radioimmunoassay using solid scintillator support body |
| EP0576155B1 (en) * | 1992-05-27 | 1998-09-09 | Colin Gerald Potter | Method and a filter for filtration of radioassays |
| DE69330892T2 (de) * | 1992-06-22 | 2002-04-11 | Packard Instrument B.V., Groningen | Plastischer Selbsklebender Szintillator |
| ATE148237T1 (de) * | 1993-03-11 | 1997-02-15 | Packard Instr Bv | Szintillationszählmedium und verfahren |
| US5961923A (en) * | 1995-04-25 | 1999-10-05 | Irori | Matrices with memories and uses thereof |
| US6017496A (en) | 1995-06-07 | 2000-01-25 | Irori | Matrices with memories and uses thereof |
| US6329139B1 (en) | 1995-04-25 | 2001-12-11 | Discovery Partners International | Automated sorting system for matrices with memory |
| US6284459B1 (en) | 1995-04-25 | 2001-09-04 | Discovery Partners International | Solid support matrices with memories and combinatorial libraries therefrom |
| US6100026A (en) * | 1995-04-25 | 2000-08-08 | Irori | Matrices with memories and uses thereof |
| US6232124B1 (en) | 1996-05-06 | 2001-05-15 | Verification Technologies, Inc. | Automated fingerprint methods and chemistry for product authentication and monitoring |
| ES2260157T3 (es) * | 1997-09-11 | 2006-11-01 | Bioventures, Inc., | Metodo para ser dispositivos de alta densidad. |
| US6057092A (en) * | 1998-08-31 | 2000-05-02 | Trellis Bioinformatics, Inc. | Cellular transport detection method |
| US6490030B1 (en) | 1999-01-18 | 2002-12-03 | Verification Technologies, Inc. | Portable product authentication device |
| JP3649319B2 (ja) * | 1999-01-25 | 2005-05-18 | 東洋紡績株式会社 | レセプター結合能の測定方法および測定用試薬 |
| US7079230B1 (en) | 1999-07-16 | 2006-07-18 | Sun Chemical B.V. | Portable authentication device and method of authenticating products or product packaging |
| US6512580B1 (en) | 1999-10-27 | 2003-01-28 | Verification Technologies, Inc. | Method and apparatus for portable product authentication |
| US6638593B2 (en) | 2000-06-30 | 2003-10-28 | Verification Technologies, Inc. | Copy-protected optical media and method of manufacture thereof |
| WO2002002301A1 (en) | 2000-06-30 | 2002-01-10 | Verification Technologies Inc. | Copy-protected optical media and method of manufacture thereof |
| US7660415B2 (en) | 2000-08-03 | 2010-02-09 | Selinfreund Richard H | Method and apparatus for controlling access to storage media |
| UY27304A1 (es) * | 2001-05-24 | 2002-12-31 | Avanir Pharmaceuticals | Inhibidores del factor inhibidor de la migración de los macrófagos y métodos para su identificación |
| US6856125B2 (en) * | 2001-12-12 | 2005-02-15 | Lifescan, Inc. | Biosensor apparatus and method with sample type and volume detection |
| TW200418829A (en) * | 2003-02-14 | 2004-10-01 | Avanir Pharmaceutics | Inhibitors of macrophage migration inhibitory factor and methods for identifying the same |
| EP1656376A1 (en) * | 2003-08-22 | 2006-05-17 | Avanir Pharmaceuticals | Substituted naphthyridine derivatives as inhibitors of macrophage migration inhibitory factor and their use in the treatment of human diseases |
| CA2600175A1 (en) * | 2005-03-24 | 2006-03-20 | Avanir Pharmaceuticals | Thienopyridinone derivatives as macrophage migration inhibitory factor inhibitors |
| US20070037215A1 (en) * | 2005-08-11 | 2007-02-15 | Patton Wayne F | Assay particles and methods of use |
| GB0605689D0 (en) * | 2006-03-21 | 2006-05-03 | Novartis Ag | Organic compounds |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4016250A (en) * | 1974-03-22 | 1977-04-05 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method for testing for pregnancy |
| US4271139A (en) * | 1978-03-27 | 1981-06-02 | Hiram Hart | Scintillation proximity assay |
| US4388296A (en) * | 1978-03-27 | 1983-06-14 | Hiram Hart | Energy-emitting latex-particulates |
| US4568649A (en) * | 1983-02-22 | 1986-02-04 | Immunex Corporation | Immediate ligand detection assay |
| JPS59184862A (ja) * | 1983-04-05 | 1984-10-20 | ベクトン・ディッキンソン・アンド・カンパニ− | 試料内細胞の複数副次集団を識別する方法と装置 |
| US4584277A (en) * | 1983-04-05 | 1986-04-22 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Fluorescent multiparameter particle analysis |
| WO1988007670A2 (en) * | 1987-03-27 | 1988-10-06 | Chimerix Corporation | Time-resolved fluorescence apparatus and immunoassay |
-
1989
- 1989-03-22 FI FI891354A patent/FI82144C/fi not_active IP Right Cessation
-
1990
- 1990-03-21 DE DE69023505T patent/DE69023505D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-03-21 US US07/761,836 patent/US5246869A/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-03-21 AU AU52699/90A patent/AU5269990A/en not_active Abandoned
- 1990-03-21 EP EP90904632A patent/EP0487522B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-03-21 WO PCT/FI1990/000073 patent/WO1990011524A1/en active IP Right Grant
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69023505D1 (de) | 1995-12-14 |
| AU5269990A (en) | 1990-10-22 |
| US5246869A (en) | 1993-09-21 |
| EP0487522A1 (en) | 1992-06-03 |
| EP0487522B1 (en) | 1995-11-08 |
| FI82144B (fi) | 1990-09-28 |
| WO1990011524A1 (en) | 1990-10-04 |
| FI891354A0 (fi) | 1989-03-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI82144C (fi) | Foerfarande foer samtidig bestaemning av flera ligander. | |
| JP4318859B2 (ja) | 複合アッセイ方法 | |
| FI93781B (fi) | Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä | |
| US5739042A (en) | Method of assay | |
| US4665020A (en) | Flow cytometer measurement of binding assays | |
| EP0191575B1 (en) | Homogeneous fluorescence immunoassay using a light absorbing material | |
| US7214539B2 (en) | Scintillation proximity test | |
| CN105259164A (zh) | 基于磁微粒化学发光的多目标物定量检测的微流控芯片 | |
| JP2003512625A (ja) | 磁気クロマトグラフィ測定法を行うためのシステムおよび方法 | |
| JP2002517759A5 (fi) | ||
| US6551788B1 (en) | Particle-based ligand assay with extended dynamic range | |
| JP3384805B2 (ja) | 粒子の２つの判別可能な型を用いた検定方法 | |
| WO1991008489A1 (en) | Scintillation proximity radioimmunoassay using solid scintillator support body | |
| JP4415093B2 (ja) | 標識化複合体並びにその製造方法及び使用方法 | |
| CN212459331U (zh) | 时间分辨流式荧光检测分析装置 | |
| FI91920B (fi) | Menetelmä biospesifisen moniparametrisen määritysmenetelmän tarkkuuden parantamiseksi | |
| FI90695B (fi) | Biospesifinen määritysmenetelmä | |
| EP0576155B1 (en) | Method and a filter for filtration of radioassays | |
| Jones et al. | Color quench correction in scintillation proximity assays using paralux count mode | |
| CA2179826C (en) | Method of assay | |
| JPS61290362A (ja) | 微粒子測定法 | |
| FI70330C (fi) | Foerfarande foer utfoering av immunobestaemningar | |
| CN114324853A (zh) | 一种基于颗粒计数的均相反应体系、方法及应用 | |
| CN111239029A (zh) | 时间分辨流式荧光检测分析装置及其使用方法 | |
| FI96641B (fi) | Biospesifinen määritysmenetelmä |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: WALLAC OY |