ES2982253T3

ES2982253T3 - Análogos de la rapamicina y usos de los mismos

Info

Publication number: ES2982253T3
Application number: ES19819402T
Authority: ES
Inventors: Eddine Saiah; David O'neill; Seong Woo Anthony Kang
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2018-06-15
Filing date: 2019-06-17
Publication date: 2024-10-15
Anticipated expiration: 2039-06-17
Also published as: US20210220339A1; CN112423843B; EP3813946B1; IL279329B1; CA3103282A1; DK3813946T3; EP4302827A3; EP3813946A1; IL314362A; EA202092692A1; CN112423843A; JP2021528396A; FI3813946T3; EP4302827A2; MX2020013630A; JP7382353B2; HRP20240794T1; JP2024012524A; PL3813946T3; ZA202309446B

Abstract

La presente invención proporciona compuestos, composiciones de los mismos y métodos para utilizarlos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Análogos de la rapamicina y usos de los mismos

Descripción

CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN

[0001] La presente invención se refiere a compuestos y tales compuestos para su uso en métodos terapéuticos que implican la modulación de la actividad mTORC1. La invención también proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden compuestos proporcionados de la presente invención y tales composiciones para su uso en métodos de tratamiento de diversos trastornos.

FONDO DE LA INVENCIÓN

[0002] El complejo mTOR 1 (mTORC1) regula positivamente el crecimiento y la proliferación celular promoviendo muchos procesos anabólicos, incluida la biosíntesis de proteínas, lípidos y orgánulos, y limityo procesos catabólicos como la autofagia. Gran parte de los conocimientos sobre la función de mTORC1 proceden del uso del macrólido bacteriano rapamicina. Al entrar en la célula, la rapamicina se une a la proteína de unión FK506 de 12 kDa (FKBP12) e interactúa con el dominio de unión FKBP12-rapamicina (FRB) de mTOR, inhibiendo así las funciones de mTORC1 (Guertin, D.A. & Sabatini, D.M. Cancer Cell 12(1): 9-22 (2007)). A diferencia de su efecto sobre mTORC1, FKBP12-rapamicina no puede interactuar físicamente con el complejo mTOR 2 (mTORC2) ni inhibirlo de forma aguda (Janinto, E. et al., Nat. Cell Bio., 6(11): 1122-8 (2004); Sarbassov, D.D. et al., Curr. Biol. 14(14): 1296-302 (2004)). Sobre la base de estas observaciones, mTORC1 y mTORC2 se han caracterizado respectivamente como complejos sensibles a la rapamicina e insensibles a la rapamicina. Sin embargo, este paradigma podría no ser del todo exacto, ya que el tratamiento crónico con rapamicina puede, en algunos casos, inhibir la actividad de mTORC2 bloqueando su ensamblaje (Sarbassov, D.D. et al., Mol. Cell, 22(2): 159-68 (2006)). Además, informes recientes sugieren que importantes funciones de mTORC1 son resistentes a la inhibición por rapamicina (Choo, A.Y. et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 105(45): 17414-9 (2008); Feldman, M.E. et al., PLoS Biol., 7(2):e38 (2009); Garcia-Martinez, J.M. et al., Biochem J., 421(1): 29-42 (2009); Thoreen, C.C. et al., J. Biol. Chem., 284(12): 8023-32 (2009)). Por lo tanto, la inhibición selectiva de mTORC1 permitiría el tratamiento de enfermedades que implican una desregulación de la síntesis de proteínas y del metabolismo celular. Además, este conocimiento detallado de la regulación de las vías de activación de mTORC1 permitirá descubrir nuevas estrategias para regular los procesos anómalos de las enfermedades mediante la modulación de la actividad de mTORC1 en todo su espectro de funciones.

[0003] Muchas enfermedades están asociadas con respuestas celulares anormales desencadenadas por eventos como los descritos anteriormente. Estas enfermedades incluyen, entre otras, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, enfermedades óseas, enfermedades metabólicas, enfermedades neurológicas y neurodegenerativas, cáncer, enfermedades cardiovasculares, alergias y asma, enfermedad de Alzheimer y enfermedades relacionadas con las hormonas.

[0004] El complejo diana mecanicista de la rapamicina 1 (mTORC1) es un regulador maestro del crecimiento que detecta diversas señales ambientales, como factores de crecimiento, estrés celular y niveles de nutrientes y energía. Cuando se activa, mTORC1 fosforila sustratos que potencian los procesos anabólicos, como la traducción del ARNm y la síntesis de lípidos, y limita los catabólicos, como la autofagia. La desregulación de mTORC1 se produce en un amplio espectro de enfermedades, como la diabetes, la epilepsia, la neurodegeneración, la respuesta inmunitaria, la supresión del crecimiento del músculo esquelético y el cáncer, entre otras (Howell, J.J. et al., Biochem. Soc. Trans., 41: 906-12 (2013); Kim, S.G. et al., Molecular and cells, 35(6): 463-73 (2013); Laplante, M. & Sabatini, D.M., Cell, 149(2): 274-93 (2012)).

[0005] La Rapamicina se descubrió inicialmente como un metabolito antifúngico producido por Streptomyces hygroscopicus a partir de una muestra de suelo de la Isla de Pascua. Posteriormente, se descubrió que la rapamicina poseía propiedades inmunosupresoras y antiproliferativas en células de mamíferos, lo que despertó el interés por identificar el modo de acción de la rapamicina. La rapamicina demostró ser un potente inhibidor de la fosforilación de S6K1. Al mismo tiempo, se identificó la diana de la rapamicina (TOR) en levaduras y células animales. La rapamicina forma un complejo de ganancia de función con la proteína de unión a FK506 de 12 kDa (FKBP12), y este complejo se une y actúa específicamente como inhibidor alostérico del complejo 1 (mTOR, también conocido como TOR mecanicista) de TOR de mamíferos (mTORC1).

[0006] El análisis bioquímico y genético de mTOR ha demostrado que está presente en dos complejos funcionalmente distintos. Los componentes principales de mTORC1 son mTOR, la proteína 8 letal de mamíferos con sec-13 (mLST8) y la proteína asociada a la regulación de TOR (Raptor). Otros componentes son la proteína que interactúa con mTOR y contiene el dominio DEP (DEPTOR) y el sustrato de Akt rico en prolina 40 kDa (PrA s 40).

[0007] El núcleo del complejo mTOR 2 (mTORC2) está compuesto por mTOR, el compañero insensible a la rapamicina de mTOR (Rictor), la proteína 1 que interactúa con la proteína quinasa activada por estrés (mSIN1) y mLST8. La proteína observada con rictor 1/2 (protor 1/2) y DEPTOR son componentes reguladores adicionales. S6 quinasa 1 (S6K1) y el factor de inhibición eucariota eIF4E proteína de unión 1 (4E-BP1) son dos sustratos bien caracterizados de mTORC1, mientras que AKT es un sustrato bien caracterizado de mTORC2 (Li, J. et al., Cell Met., 19(3):373-9 (2014)).

[0008]Dado que la FKBP12-rapamicina no se une a mTORC2, inicialmente se pensó que la rapamicina sólo inhibía mTORC1 (Sarbassov, D.D. et al., Curr. Biol., 14(14): 1296-302(2004)). Sin embargo, en 2006 se demostró que la rapamicina suprime el ensamblaje y la función de mTORC2 e inhibe pAkt (Sarbassov, D.D. et al., Molecular Cell, 22(2): 159-68 (2006)). Se compararon los efectos de la rapamicina sobre la fosforilación de S473 de Akt (un sustrato de mTORC2) y de T389 de S6K1 (un sustrato de mTORC1) en múltiples líneas celulares. En las células PC3, HEK-293T, HeLa y H460, los tratamientos de 1 o 24 horas con rapamicina inhibieron la fosforilación de S6K1, en consonancia con la inhibición de mTORC1. La inhibición selectiva de S6K1 por rapamicina debería conducir a un aumento de la fosforilación de Akt y, de hecho, esto es lo que se observa en las células HeLa. Sin embargo, en las células PC3, el fármaco disminuyó fuertemente la fosforilación de Akt, lo que sugiere que la rapamicina no es selectiva en esta línea celular. En las células HEK-293T se observa una inhibición parcial de pAKT. En aproximadamente un tercio de las líneas celulares, la rapamicina causó una inhibición fuerte o parcial de la fosforilación de Akt, mientras que el fármaco no afectó o aumentó la fosforilación de Akt en las demás. La inhibición de pAKT tras 24 horas también se observa en líneas celulares primarias y no transformadas, incluidas células endoteliales y musculares. También se demostró que la rapamicina inhibe la pAktin vivo,ya que los ratones tratados diariamente durante 1 semana con el fármaco presentaron una disminución de la fosforilación de Akt en el timo, el tejido adiposo, el corazón y el pulmón. Estos hallazgos demostraron que la inhibición de la fosforilación de Akt por la rapamicina es común y se produce en líneas celulares normales, líneas celulares cancerosas, así como in vivo.

[0009]Sarbassovet al.concluyeron que la rapamicina y sus análogos (CCI 779, RAD001 también conocido como Everolimus, AP23573) pueden inhibir la función mTORC2 en ciertas líneas celulares y tejidos. La inhibición de Akt mediada por la rapamicina puede ayudar a explicar los efectos secundarios del fármaco. Por ejemplo, la rapamicina inhibe fuertemente la fosforilación de Akt en el tejido adiposo, un tipo de tejido en el que la actividad de Akt estimulada por la insulina desempeña un papel importante en la supresión de la lipólisis. La inhibición de Akt por la rapamicina en los adipocitos puede permitir que la lipólisis se mantenga elevada incluso en presencia de insulina, lo que da lugar a la acumulación de ácidos grasos libres en el plasma que pueden ser utilizados por el hígado para generar triglicéridos, proporcionando un mecanismo molecular para la hiperlipidemia comúnmente observada en pacientes tratados con rapamicina.

[0010]Pereira et al. (Mol Cell Endocrinol., 355(1): 96-105 (2012)) exploraron los efectos de la rapamicina sobre la captación de glucosa y las proteínas de señalización de la insulina en adipocitos obtenidos mediante biopsias de grasa en donantes humanos. A una concentración terapéutica (0,01 pM), la rapamicina redujo la fosforilación en Ser473 de AKT (PKB) y la captación de glucosa en adipocitos humanos a través de la alteración de la señalización de la insulina.

[0011]Lamming et al. (Science., 335(6076): 1638-1643 (2012)) demostraron que la rapamicina interrumpía mTORC2in vivoy que mTORC2 era necesario para la supresión de la gluconeogénesis hepática mediada por insulina.

[0012]Se obtuvieron resultados similares en humanos. Di Paoloet al.publicaron resultados similares en humanos (JASN, 17(8): 2236-2244 (2006)). El principal objetivo de su estudio era determinar el efecto de la exposición crónica a la rapamicina sobre la activación de AKT, habida cuenta de su papel crucial en la regulación del crecimiento y la supervivencia celular, así como en la respuesta de las células a los nutrientes y factores de crecimiento. Descubrieron que la inhibición de mTOR se asociaba a una marcada disminución de la fosforilación de AKT basal e inducida por insulina. El AKT es el principal responsable de muchas de las acciones metabólicas de la insulina, por lo que concluyeron que la depresión de la activación del AKT se correlacionaba significativamente con el aumento de la resistencia a la insulina en los receptores de trasplantes renales.

[0013]Kennedy et al. revisaron recientemente el papel de mTORC1 y mTORC2 en el metabolismo y el envejecimiento (Cell Metab., 23(6): 990-1003 (2016)).

[0014]Se ha encontrado sorprendentemente que los compuestos proporcionados inhiben mTORC1, pero no impactan mTORC2 (como se mide por su impacto en pAKT) durante períodos prolongados de tiempo (por ejemplo, 8 horas, 24 horas, 30 horas y 48 horas). Esta novedosa actividad se basa en la presencia de un grupo suficientemente grande en la posición C-7 de la rapamicina y sus análogos. Pequeñas sustituciones en esta posición como OMe, como se observa en rapamicina, OEt, OBn no confieren selectividad sobre mTORC2 a las 24 horas. Los grupos de longitud media, como<0>CH<2>CH<2>OH u OCH<2>CH<2>CH<2>OH muestran una selectividad parcial sobre mTORC2 a las 24 horas, pero siguen mostrando cierto nivel de inhibición. En comparación, los grupos más grandes, como los de la presente invención (por ejemplo,I-19), proporcionan una marcada selectividad sobre mTORC2 medida por el impacto de pAKT.

[0015]La ubicación de esta sustitución también es crítica para la selectividad observada. La introducción de sustituciones mayores en la posición 43, por ejemplo, no conduce a este perfil de selectividad único reivindicado en esta solicitud.

[0016]A efectos de claridad, la estructura de la Rapamicina se reproduce a continuación con las posiciones C-7 y C-43 señaladas.

[0017]En algunas realizaciones, la presente invención proporciona nuevos análogos de rapamicina que son inhibidores potentes de mTORC1 medidos por pS6K. A diferencia de la Rapamicina y el Everolimus, estos compuestos no inhiben la pAKT en puntos temporales más largos(porejemplo,24 horas y 48 horas). Estos compuestos también muestran una solubilidad mejorada y una farmacocinética mejorada en comparación con la Rapamicina.

[0018]La actividad de un compuesto utilizado en esta invención como inhibidor de mTORC1, puede ensayarsein vitro, in vivoo en una línea celular. Los ensayosin vitroincluyen ensayos que determinan la inhibición de mTORC1. Las condiciones detalladas para ensayar un compuesto utilizado en esta invención como inhibidor de mTORC1 son bien conocidas por un experto en la materia. Estos métodos se describen en detalle en Liu et al., Cancer Research, 73(8): 2574-86 (2013) and Liu et al., J. Biological Chemistry 287(13): 9742-52 (2012).

El documento WO 9402136 A1 describe derivados de rapamicina; composiciones farmacéuticas que comprenden dichos derivados de rapamicina y portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables; y métodos de uso de dichos derivados. El documento W<o>9514023 A1 describe compuestos macrólidos, análogos semisintéticos de la rapamicina, procesos para la preparación de los compuestos, productos intermedios útiles en estos procesos y composición farmacéutica.

El documento WO 9516691 A1 describe derivados demetoxi de la rapamicina de los que se dice que tienen utilidad farmacéutica como inmunosupresores.

El documento US 2006/189551 A1 describe una combinación farmacológica de: un primer compuesto que inhibe la actividad o expresión de la proteína FKBP12 y un segundo compuesto que inhibe la actividad o expresión de la homoserina deshidrogenasa. Se afirma que esta combinación es útil en métodos de tratamiento de infecciones fúngicas.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

[0019]Ahora se ha descubierto que los compuestos de esta invención, y composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos, son eficaces como inhibidores de mTORC1. Tales compuestos tienen la fórmula generalII:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R1 se selecciona entre

4 - ^ 'oE ' - oh

[0020]Los compuestos de la presente invención, y las composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos, son útiles para tratar una variedad de enfermedades, trastornos o afecciones, asociados con mTORC1. Dichas enfermedades, trastornos o afecciones incluyen las descritas en el presente documento.

BREVE DESCRIPCIÓN DEL DIBUJO

[0021]

FIG. 1muestra una comparación entre dos inmunoelectrotransferencias realizadas tras tratar células PC3 con rapamicina o un compuesto de la presente invención(I-40) durante 24 y 48 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 tanto para la rapamicina como para elI-4üen ambos puntos temporales. Por el contrario, la vía mTORC2, aunque inhibida por la rapamicina tanto a las 24 como a las 48 horas, no es inhibida por elI-40, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 2muestra una comparación entre tres inmunoelectrotransferencias realizadas tras tratar células PC3 con rapamicina o un compuesto de la presente invención(I-40) durante 30, 15 o 5 minutos. La tinción indica una inhibición dependiente del tiempo de la vía mTORC 1 tanto para la rapamicina como para elI-40.

FIG. 3muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina, temsirolimus, everolimus, ridaforolimus o un compuesto de referencia (I-118) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para todos los compuestos, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de mTORC1 porI-118.Significativamente, rapamicina, temsirolimus, everolimus y ridaforolimus muestran una inhibición dependiente de la dosis de la vía mTORC2, mientras queI-118no inhibe la vía mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 4muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina o compuestos de referencia(I-106, I-113eI-118)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto probado y ninguna inhibición de la fosforilación de 4E-BP1. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 5muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina o compuestos de referencia(I-117, I-102, I-103eI-39)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto probado y ninguna inhibición de la fosforilación de 4E-BP1. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 6muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina o compuestos de referencia(I-117, I-99, I-100eI-101)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para la rapamicinaI-117, I-100eI-101,y una apreciable inhibición dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-99. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 7muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina o un compuesto de referencia(I-117)durante 24. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTOCR1 por parte de los dos compuestos probados. Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 8muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina o compuestos de referencia(I-39, I-101eI-99)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para la rapamicina y elI-39, y una apreciable inhibición dependiente de la concentración de la vía mTORC1 para elI-101y elI-99.Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 9muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina o compuestos de referencia(I-98eI-97)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para la rapamicina y elI-98, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 para elI-101y elI-99.Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 10muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina o compuestos de referencia(I-96eI-100) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para todos los compuestos probados. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 11muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina, everolimus o un compuesto de referencia(I-7) durante 90 minutos. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para rapamicina y everolimus, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-7.Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 12muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con rapamicina, everolimus o un compuesto de referencia(I-7) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORCI para rapamicina y everolimus, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-7. Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 13muestra dos inmunoelectrotransferencias realizadas tras tratar células Jurkat con everolimus o un compuesto de la presente invención(I-40) o un compuesto de referencia(I-117) durante 24 h. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC 1 para todos los compuestos probados. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 14muestra dos inmunoelectrotransferencias realizadas después de tratar células MEF negativas para esclerosis tuberosa (TSC2) (TSC -/-) con everolimus o un compuesto de la presente invención (I-40), o compuestos de referencia (l-7eI-117) durante 90 minutos. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus,I-40eI-117, y una inhibición apreciable dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-7. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 15muestra dos inmunoelectrotransferencias realizadas después de tratar células MEF positivas para esclerosis tuberosa 2 (TSC2) (TSC /+) con everolimus o un compuesto de la presente invención(I-40), o compuestos de referencia (I-7, eI-117) durante 90 minutos. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus eI-40, una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-1 l7, y una inhibición apreciable dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-7. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 16muestra dos inmunoelectrotransferencias realizadas después de tratar células TSC -/- MEF con everolimus o un compuesto de la presente invención(I-40), o compuestos de referencia(I-7, eI-117) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus,I-40eI-117, y una apreciable inhibición dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-7. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.FIG. 17muestra dos inmunoelectrotransferencias realizadas tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus o un compuesto de la presente invención(I-40) y un compuesto de referencia(I-7) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC 1 para everolimus, una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC 1 paraI-40, y una inhibición modesta dependiente de la concentración de la vía mTORC 1 paraI-7. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 18muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC -/- con everolimus, rapamicina o compuestos de referencia(I-2eI-92) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus, rapamicina eI-2, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC 1 paraI-92.

FIG. 19muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus, rapamicina o compuestos de referencia(I-2eI-92) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus, rapamicina, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-2eI-92. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 20muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus, un compuesto de referencia(I-20), un compuesto de la invención(I-40) u otro compuesto de referencia(I-36) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-20,I-40eI-36. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.FIG. 21muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus, o un compuesto de la presente invención(I-35), o compuestos de referencia(I-7eI-26) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus, y una modesta inhibición dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-35, I-7,eI-26. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 22muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus, o un compuesto de la presente invención(I-9), o compuestos de referencia(I-97eI-98)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus, una modesta inhibición dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-9,I-97eI-98. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 23muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus, o un compuesto de referencia(I-91) durante 90 minutos. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para la rapamicina yel I-91. Curiosamente,I-91muestra cierta inhibición de mTORC2, como demuestra la inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 24muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus, o un compuesto de referencia(I-91) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para la rapamicina yel I-91. Curiosamente,I-91muestra cierta inhibición de mTORC2, como demuestra la inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 25muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus, o un compuesto de referencia(I-105)durante 90 minutos. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para la rapamicina y elI-105.Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 26muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus, o un compuesto de referencia(I-105)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para la rapamicina y elI-105.Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 27muestra dos inmunoelectrotransferencias realizadas tras tratar células PC3 con everolimus o compuestos de referencia(I-2eI-92) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto probado y ninguna inhibición de la fosforilación de 4E-BP1. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 28muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus o un compuesto de referencia(I-105)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto probado y ninguna inhibición de la fosforilación de 4E-BP1. Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 29muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus o compuestos de referencia(I-90eI-110)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus eI-90, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-110.Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 30muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF TSC /+ con everolimus o un compuesto de referencia(I-115)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-115.Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 31muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF de tipo salvaje con everolimus o un compuesto de la presente invención(I-40) o compuestos de referencia(I-105, I-117eI-90)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus, y una inhibición moderada de la vía mTORC1 paraI-105, I-117, I-40,eI-90.Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 32muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF de tipo salvaje con everolimus o un compuesto de la presente invención(I-40) o compuestos de referencia(I-105, I-1l7eI-90)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto probado. Significativamente, el compuesto de la presente invención no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 33muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF de tipo salvaje con everolimus o compuestos de referencia(I-85eI-83)durante 90 minutos. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto probado. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 34muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células MEF de tipo salvaje con everolimus o compuestos de referencia(I-85eI-83) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto probado. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 35muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con everolimus o compuestos de referencia(I-85eI-83) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto probado.

FIG. 36muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 y células MEF de tipo salvaje con everolimus o un compuesto de referencia(I-115) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para cada compuesto ensayado en las células PC3, una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus en células MEF WT, y una inhibición moderada dependiente de la concentración de la vía mTORC1 paraI-115en células MEF WT. Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 37muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con everolimus, un compuesto de referencia(I-117), PEGs cortos, everolimus en combinación con un PEG corto, oI-117en combinación con un PEG corto, durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para everolimus y 1 117, solos y en combinación con un PEG corto. Los PEG cortos no mostraron por sí solos inhibición de mTORC1 o mTORC2. Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, ni solo ni en combinación con un PEG corto, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 38muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con everolimus o compuestos de referencia(I-71, I-73eI-75)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para todos los compuestos probados. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 39muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con everolimus o compuestos de referencia(I-85eI-83)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para todos los compuestos probados. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG.40muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con everolimus o un compuesto de referencia(I-65) durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORCI para ambos compuestos probados. Significativamente, el compuesto de referencia no inhibe mTORC2, como lo demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 41muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con everolimus o compuestos de referencia(I-5, I-106eI-102)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para todos los compuestos probados. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG. 42muestra una inmunoelectrotransferencia realizada tras tratar células PC3 con everolimus o el compuesto de referencia(I-75, I-71eI-62)durante 24 horas. La tinción indica una fuerte inhibición de la vía mTORC1 para todos los compuestos probados. Significativamente, los compuestos de referencia no inhiben mTORC2, como demuestra la falta de inhibición de la fosforilación de Akt.

FIG.43muestra el curso temporal de una prueba de tolerancia a la glucosa y sensibilidad a la insulina en ratones C57B1/6 delgados.

FIG. 44muestra los resultados de una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal en ratones C57B1/6 delgados durante el tratamiento crónico con rapamicina,I-40o vehículo. ***P < 0,001; **** P < 0,0001; one-ANOVA y todas las barras indican media y DE.

FIG. 45muestra el área bajo la curva (AUC) del aclaramiento de glucosa en ratones C57B1/6 delgados durante el tratamiento crónico con rapamicina,I-40o vehículo. ***P < 0,001; prueba T y todas las barras indican media y DE.

FIG. 46muestra la tinción con rojo Sirius del tejido renal de un modelo de ratón con AKI/CKD.

FIG. 47muestra el área porcentual de fibrosis del tejido renal en un modelo de ratón con IRA/RC tras el tratamiento con everolimus,I-40,I-117(referencia) o vehículo. *P = 0,02 en comparación con el vehículo, prueba t.

FIG. 48muestra la expresión del ARNm del colágeno I en un modelo de ratón con IRA/RC tras el tratamiento con vehículo oI-40. **P < 0,01, ***P < 0,001 frente a simulacro; f fP < 0,01 frente a vehículo.

FIG. 49muestra la expresión del ARNm del colágeno III en un modelo de ratón con IRA/RC tras el tratamiento con vehículo oI-40. **P < 0,01 frente a simulacro; P < 0,05 frente a vehículo.

FIG. 50muestra la expresión de ARNm de fibronectina en un modelo de ratón con IRA/RC tras el tratamiento con vehículo oI-40. **P < 0,01 frente a simulacro; P < 0,05 frente a vehículo.

FIG. 51muestra el área de tejido renal infiltrada por macrófagos en un modelo de ratón con IRA/RC tras el tratamiento con vehículo oI-40. *P < 0,05, ***P < 0,001 frente a simulacro; f fP < 0,05 frente a vehículo.

FIG. 52muestra el porcentaje de inhibición de la producción de IFN-<y>en un ensayo de MLR alogénico tras el tratamiento con rapamicina, everolimus,I-40oI-117(referencia).

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE ALGUNAS REALIZACIONES

1. Descripción general de ciertas realizaciones de la invención:

[0022]En ciertas realizaciones, la presente invención proporciona un compuesto de FórmulaII:

2. Compuestos y definiciones:

[0023] Los compuestos de la presente invención incluyen los descritos en general en el presente documento, y se ilustran además por las clases, subclases y especies divulgadas en el presente documento. A menos que se indique lo contrario, se aplicarán las siguientes definiciones. A efectos de la presente invención, los elementos químicos se identifican de acuerdo con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed. Además, los principios generales de la química orgánica se describen en "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, y "March's Advanced Organic Chemistry", 5a ed., Ed: Smith, M.B. y March, J., John Wiley & Sons, Nueva York: 2001.

[0024] El término "alifático" o "grupo alifático", tal como se utiliza aquí, significa una cadena recta (es decir, no ramificada) o ramificada, sustituida o no sustituida, completamente saturada o que contiene una o más unidades de insaturación, o un hidrocarburo monocíclico o bicíclico completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero que no es aromático (también denominado en el presente documento "carbociclo", "cicloalifático" o "cicloalquilo"), que tiene un único punto de unión con el resto de la molécula. A menos que se especifique lo contrario, los grupos alifáticos contienen de 1 a 6 átomos de carbono alifáticos. En algunas realizaciones, los grupos alifáticos contienen 1-5 átomos de carbono alifáticos. En otras realizaciones, los grupos alifáticos contienen 1-4 átomos de carbono alifáticos. En otras realizaciones, los grupos alifáticos contienen 1-3 átomos de carbono alifáticos, y en otras realizaciones, los grupos alifáticos contienen 1-2 átomos de carbono alifáticos. En algunas realizaciones, "cicloalifático" (o "carbociclo" o "cicloalquilo") se refiere a un hidrocarburo monocíclico C<3>-C<6>que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero que no es aromático, que tiene un único punto de unión al resto de la molécula. Los grupos alifáticos adecuados incluyen, entre otros, grupos alquilo, alquenilo y alquinilo lineales o ramificados, sustituidos o no sustituidos, e híbridos de los mismos, como (cicloalquilo)alquilo, (cicloalquenilo)alquilo o (cicloalquilo)alquenilo.

[0025] El término "heteroátomo" significa uno o más de oxígeno, azufre, nitrógeno, fósforo o silicio (incluyendo, cualquier forma oxidada de nitrógeno, azufre, fósforo o silicio; la forma cuaternizada de cualquier nitrógeno básico o; un nitrógeno sustituible de un anillo heterocíclico, por ejemplo N (como en 3,4-dihidro-2H-pirrolilo), NH (como en pirrolidinilo) o NR+ (como en pirrolidinilo N-sustituido)).

[0026] El término "insaturado", tal como se utiliza aquí, significa que una fracción tiene una o más unidades de insaturación.

[0027] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "cadena de hidrocarburo bivalente C<1-8>(o C<1>-<6>) saturada o insaturada, recta o ramificada" se refiere a las cadenas bivalentes de alquileno, alquenileno y alquileno que son rectas o ramificadas tal como se definen en el presente documento.

[0028] El término "alquileno" se refiere a un grupo alquilo bivalente. Una "cadena de alquileno" es un grupo polimetileno, esdecir,-(CH<2>V , donde n es un número entero positivo, preferentemente de 1 a 6, de 1 a 4, de 1 a 3, de 1 a 2, o de 2 a 3. Una cadena alquilénica sustituida es un grupo polimetilénico en el que uno o más átomos de hidrógeno metilénico se sustituyen por un sustituyente. Los sustituyentes adecuados incluyen los descritos a continuación para un grupo alifático sustituido.

[0029] El término "alquenileno" se refiere a un grupo alquenilo bivalente. Una cadena de alquenileno sustituido es un grupo polimetileno que contiene al menos un doble enlace en el que uno o más átomos de hidrógeno se sustituyen por un sustituyente. Los sustituyentes adecuados incluyen los descritos a continuación para un grupo alifático sustituido.

[0030] El término "halógeno" significa F, Cl, Br o I.

[0031] El término "arilo" utilizado solo o como parte de una fracción mayor, como en "aralquilo", "aralcoxi" o "ariloxialquilo", se refiere a sistemas de anillos monocíclicos o bicíclicos que tienen un total de cinco a catorce miembros anulares, en los que al menos un anillo del sistema es aromático y en los que cada anillo del sistema contiene de 3 a 7 miembros anulares. El término "arilo" puede utilizarse indistintamente con el término "anillo arilo". En ciertas realizaciones de la presente invención, "arilo" se refiere a un sistema de anillos aromáticos que incluye, pero no se limita a, fenilo, bifenilo, naftilo, antracilo y similares, que pueden llevar uno o más sustituyentes. También se incluye en el ámbito del término "arilo", tal como se utiliza aquí, un grupo en el que un anillo aromático se fusiona con uno o más anillos no aromáticos, como el indanilo, el ftalimidilo, el naftimidilo, el fenantridinilo o el tetrahidronaftilo, y similares.

[0032] Los términos "heteroarilo" y "heteroar-", utilizados solos o como parte de una fracción mayor,p. ej.,"heteroaralquilo" o "heteroaralcoxi", se refieren a grupos que tienen de 5 a 10 átomos de anillo, preferentemente 5, 6 o 9 átomos de anillo; que tienen 6, 10 o 14 n electrones compartidos en un conjunto cíclico; y que tienen, además de átomos de carbono, de uno a cinco heteroátomos. El término "heteroátomo" se refiere al nitrógeno, oxígeno o azufre, e incluye cualquier forma oxidada de nitrógeno o azufre, y cualquier forma cuaternizada de un nitrógeno básico. Los grupos heteroarilo incluyen, sin limitación, tienilo, furanilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, tiadiazolilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolizinilo, purinilo, naftiridinilo y pteridinilo. Los términos "heteroarilo" y "heteroar-", tal como se utilizan aquí, también incluyen grupos en los que un anillo heteroaromático está fusionado a uno o más anillos arilo, cicloalifático o heterociclilo, donde el radical o punto de unión está en el anillo heteroaromático. Ejemplos no limitantes incluyen indolilo, isoindolilo, benzotienilo, benzofuranoilo, dibenzofuranoilo, indazolilo, bencimidazolilo, benzotiazolilo, quinolilo, isoquinolilo, cinolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo,4H-quinolizinilo,carbazolilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo y pirido[2,3-b]-1,4-oxazin-3(4H)-ona. Un grupo heteroarilo puede ser monocíclico o bicíclico. El término "heteroarilo" puede utilizarse indistintamente con los términos "anillo heteroarilo", "grupo heteroarilo" o "heteroaromático", cualquiera de los cuales incluye anillos opcionalmente sustituidos. El término "heteroaralquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido por un heteroarilo, en el que las porciones alquilo y heteroarilo independientemente están opcionalmente sustituidas.

[0033] Tal como se utilizan en el presente documento, los términos "heterociclo", "heterociclilo", "radical heterocíclico" y "anillo heterocíclico" se utilizan indistintamente y se refieren a una fracción heterocíclica monocíclica estable de 5 a 7 miembros o bicíclica de 7 a 10 miembros, saturada o parcialmente insaturada, que tiene, además de átomos de carbono, uno o más heteroátomos, preferiblemente de uno a cuatro, como se ha definido anteriormente. Cuando se utiliza en referencia a un átomo de anillo de un heterociclo, el término "nitrógeno" incluye un nitrógeno sustituido. Por ejemplo, en un anillo saturado o parcialmente insaturado con 0-3 heteroátomos seleccionados entre oxígeno, azufre o nitrógeno, el nitrógeno puede ser N (como en el 3,4-dihidro-2H-pirrolilo), NH (como en el pirrolidinilo) o NR (como en el pirrolidiniloN-sustituido).

[0034] Un anillo heterocíclico puede unirse a su grupo colgante en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé lugar a una estructura estable y cualquiera de los átomos del anillo puede estar opcionalmente sustituido. Ejemplos de tales radicales heterocíclicos saturados o parcialmente insaturados incluyen, sin limitación, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, pirrolidinilo, piperidinilo, pirrolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, decahidroquinolinilo, oxazolidinilo, piperazinilo, dioxanilo, dioxolanilo, diazepinilo, oxazepinilo, tiazepinilo, morfolinilo y quinuclidinilo. Los términos "heterociclo", "heterociclilo", "anillo heterociclilo", "grupo heterocíclico", "fracción heterocíclica" y "radical heterocíclico" se utilizan indistintamente en el presente documento. se utilizan indistintamente en el presente documento, y también incluyen grupos en los que un anillo heterociclilo está fusionado a uno o más anillos arilo, heteroarilo o cicloalifáticos, como indolinilo,3H-indolilo,cromanilo, fenantridinilo o tetrahidroquinolinilo. Un grupo heterociclilo puede ser monocíclico o bicíclico. El término "heterociclilalquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido por un heterociclilo, en el que las porciones alquilo y heterociclilo independientemente están opcionalmente sustituidas.

[0035] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "parcialmente insaturado" se refiere a una fracción de anillo que incluye al menos un enlace doble o triple. El término "parcialmente insaturado" pretende abarcar anillos que tienen múltiples sitios de insaturación, pero no pretende incluir moléculas de arilo o heteroarilo, tal como se definen en el presente documento.

[0036] Como se describe en el presente documento, los compuestos de la invención pueden contener elementos "opcionalmente sustituidos". En general, el término "sustituido", tanto si va precedido del término "opcionalmente" como si no, significa que uno o más hidrógenos de la fracción designada se sustituyen por un sustituyente adecuado. A menos que se indique lo contrario, un grupo "opcionalmente sustituido" puede tener un sustituyente adecuado en cada posición sustituible del grupo, y cuando más de una posición en cualquier estructura dada pueda sustituirse con más de un sustituyente seleccionado de un grupo especificado, el sustituyente puede ser el mismo o diferente en cada posición. Las combinaciones de sustituyentes previstas por esta invención son preferentemente aquellas que dan lugar a la formación de compuestos estables o químicamente viables. El término "estable", tal y como se utiliza en el presente documento, se refiere a compuestos que no se alteran sustancialmente cuando se someten a condiciones que permiten su producción, detección y, en determinadas realizaciones, su recuperación, purificación y uso para uno o más de los fines aquí descritos.

[0037] Los sustituyentes monovalentes adecuados en un átomo de carbono sustituible de un grupo "opcionalmente sustituido" son independientemente halógeno; -(CH<2>)o-<4>R°; -(CH<2>)o-<4>OR°; -O(CH<2>)o-<4>R°, -<0>-(CH<2>)o-<4>C(<0>)Or °; -(CH<2>)o-<4>CH(OR°)<2>; -(CH<2>)o-<4>SR°; -(CH<2>)o-<4>, que puede estar sustituido por R°; -(CH<2>)o-<4>o(CH<2>)o-iPh, que puede estar sustituido por R°; -CH=CHPh, que puede estar sustituido por R°; -(CH<2>)o-<4>o(CH<2>)o-i-piridilo, que puede estar sustituido por R°; -NO<2>; -CN; -N<3>; -(CH<2>)o-<4>N(R°)<2>; -(CH<2>)o-<4>N(R°)C(O)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH<2>)o-<4>N(R°)C(O)NR°<2>; -N(R°)C(S)NR°<2>; -(CH<2>)o-<4>N(R°)C(O)OR°; - N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°<2>; -N(R°)N(R°)C(O)OR°; -(CH<2>)o-<4>C(O)R°; - C(S)R°; -(CH<2>)o-<4>C(O)OR°; -(CH<2>)o-<4>C(O)SR°; -(CH<2>)o-<4>C(O)OSiR°<3>; -(CH<2>)o-<4>OC(O)R°; - OC(O)(CH<2>)o-<4>SR-, SC(S)SR°; -(CH<2>)o-<4>SC(O)R°; -(CH<2>)o-<4>C(O)NR°<2>; -C(S)NR°<2>; - C(S)SR°; -SC(S)SR°, -(CH<2>)o-<4>OC(O)NR°<2>; -C(O)N(OR°)R°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH<2>C(O)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)o-4SSR°; -(CH2)o-4S(O)2R°; -(CH2)o-4S(O)2OR°; - (CH2)o-4OS(O)2R°; -S(O)<2>NR°<2>; -(CH<2>)o-<4>S(O)R°; -N(R°)S(O)<2>NR°<2>; -N(R°)S(O)<2>R°; - N(OR°)R°; -C(NH)NR°<2>; -P(O)<2>R°; -P(O)R°<2>; -OP(O)R°<2>; -OP(<0>)(<o>R°)<2>; SiR°<3>; -(C<1-4>alquileno recto o ramificado)O-N(R<° )2>o -(C i<-4>alquileno recto o ramificado)C(O)ON(R°)<2>, donde cada R° puede estar sustituido como se define a continuación y es independientemente hidrógeno, C<1-6>alifático, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)o-iPh, -CH<2>-(anillo heteroarilo de 5-6 miembros), o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros con o-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno, o azufre, o, no obstante la definición anterior, dos apariciones independientes de R°, junto con su(s) átomo(s) intermedio(s), forman un anillo mono o bicíclico saturado, parcialmente insaturado o arílico de 3-12 miembros con o-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre, que puede estar sustituido como se define a continuación.

[0038] Los sustituyentes monovalentes adecuados en R° (o el anillo formado tomando dos apariciones independientes de R° junto con sus átomos intermedios), son independientemente halógeno, -(CH<2>)o-<2>R^ , -(haloR^), -(CH<2>)o-<2>OH, -(CH<2>)o-

1<o>

<2>O R -(CH<2>)o-<2>CH(OR^; - O(haloR^), -CN, -N<3>, -(CH<2>)o-<2>C(O)R^, -(CH<2>)o-<2>C(O)OH, -(CH<2>)o-<2>C(O)OR -(CH<2>)o-<2>SR ,^ -(CH<2>)o-<2>SH, -(CH<2>)o-<2>NH<2>, -(CH<2>)o-<2>NHR^, -(CH<2>)o-<2>NR^<2>, -NO<2>, -SiRVj, - OSiRVj, -C(O)SR -(alquileno C<1.4>recto o ramificado)C(O)OR-, o 'SSR' donde cada R no está sustituido o donde precedido por "halo" está sustituido sólo con uno o más halógenos, y se selecciona independientemente entre C<1-4>alifático, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)o-<1>Ph, o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre. Los sustituyentes divalentes adecuados en un átomo de carbono saturado de R° incluyen =O y =S.

[0039]Los sustituyentes divalentes adecuados en un átomo de carbono saturado de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen los siguientes: =O, =S, =NNR*<2>, =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)<2>R*, =NR*, =NOR*, -O(C(R*<2>))<2>-<3>O-, or -S(C(R*<2>))<2>-<3>S-, donde cada ocurrencia independiente de R* se selecciona entre hidrógeno, C<1-6>alifático que puede estar sustituido como se define a continuación, o un anillo no sustituido de 5-6 miembros saturado, parcialmente insaturado o arilo con 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre. Los sustituyentes divalentes adecuados que se unen a los carbonos sustituibles vicinales de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen: -O(CR*<2>)<2>-<3>O-, donde cada ocurrencia independiente de R* se selecciona entre hidrógeno, C<1-6>alifático que puede estar sustituido como se define a continuación, o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros no sustituido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre.

[0040]Los sustituyentes adecuados en el grupo alifático de R* incluyen halógeno, -R^ , -(haloR^), -OH, -OR ,^ -O(haloR^), -Cn , -C(O)OH, -C(O)OR^, -NH<2>, -NHR^, -NR^, o -NO<2>, donde cada R^ está sin sustituir o cuando está precedido por "halo" está sustituido sólo con uno o más halógenos, y es independientemente C<1-4>alifático, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)o-<1>Ph, o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre.

[0041]Los sustituyentes adecuados en un nitrógeno sustituible de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen -Rf , -NR*<2>, -C(O)Rt, -C(O)ORt, -C(O)C(O)Rt, - C(O)CH<2>C(O)Rt, -S(O^Rf , -S(O)<2>NR^, -C(S)NR^, -C(NH)NR^, o -N(Rf )S(O)<2>Rf ; donde cada Rf es independientemente hidrógeno, C<1-6>alifático que puede estar sustituido como se define a continuación, -OPh no sustituido, o un anillo de 5-6 miembros saturado, parcialmente insaturado o arilo que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre, o, no obstante la definición anterior, dos apariciones independientes de Rf , junto con su(s) átomo(s) intermedio(s), forman un anillo mono o bicíclico de 3-12 miembros saturado, parcialmente insaturado o arilo no sustituido con 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre.

[0042]Los sustituyentes adecuados en el grupo alifático de R ' son independientemente halógeno, -R^ , -(haloR^), -OH, -OR ,^ -O(haloR^), -Cn , -C(O)OH, -C(O)OR^, -NH<2>, -NHR^, -NR^, o - NO<2>, donde cada R^ no está sustituido o donde está precedido por "halo" está sustituido sólo con uno o más halógenos, y es independientemente C<1-4>alifático, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)o-<1>Ph, o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre.

[0043]Tal como se utiliza en el presente documento, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que son, dentro del ámbito del buen juicio médico, adecuadas para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales inferiores sin toxicidad indebida, irritación, respuesta alérgica y similares, y son proporcionales a una relación beneficio/riesgo razonable. Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, S. M. Berge et al. describen detalladamente las sales farmacéuticamente aceptables en J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19. Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta Invención incluyen las derivadas de ácidos y bases inorgánicos y orgánicos adecuados. Ejemplos de sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables y no tóxicas son las sales de un grupo amino formadas con ácidos inorgánicos como el ácido clorhídrico, el ácido bromhídrico, el ácido fosfórico, el ácido sulfúrico y el ácido perclórico o con ácidos orgánicos como el ácido acético, el ácido oxálico, el ácido maleico, el ácido tartárico, el ácido cítrico, el ácido succínico o el ácido malónico, o mediante otros métodos utilizados en la técnica como el intercambio iónico. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, canforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanoproplonato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formiato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, gluconato, hemlsulfato, heptanoato, hexanoato, hidroyoduro, 2-hidroxietanosulfonato, lactobionato, lactato, laurato, lauril sulfato, malato, maleato, malonato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, plvalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluenosulfonato, undecanoato, sales de valerato y similares.

[0044] Las sales derivadas de bases apropiadas incluyen sales de metales alcalinos, metales alcalinotérreos, amonio y N+(alquilo C<1>-<4>)<4>. Las sales representativas de metales alcalinos o alcalinotérreos incluyen sodio, litio, potasio, calcio, magnesio y similares. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen, en su caso, amonio no tóxico, amonio cuaternario y cationes de amina formados mediante contraiones como haluro, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquilo inferior y sulfonato de arilo.

[0045]A menos que se indique lo contrario, las estructuras representadas en el presente documento también incluyen todas las formas isoméricas(por ejemplo,enantioméricas, diastereoméricas y geométricas (o conformacionales)) de la estructura; por ejemplo, las configuraciones R y S para cada centro asimétrico, los isómeros de doble enlace Z y E, y los isómeros conformacionales Z y E. Por lo tanto, los isómeros estereoquímicos simples, así como las mezclas enantioméricas, diastereoméricas y geométricas (o conformacionales) de los presentes compuestos están dentro del alcance de la invención. A menos que se indique lo contrario, todas las formas tautoméricas de los compuestos de la invención están dentro del alcance de la invención. Además, a menos que se indique lo contrario, las estructuras aquí representadas también incluyen compuestos que difieren únicamente en la presencia de uno o más átomos isotópicamente enriquecidos. Por ejemplo, los compuestos que tienen las presentes estructuras incluyendo la sustitución de hidrógeno por deuterio o tritio, o la sustitución de un carbono por un carbono enriquecido con 13C o 14C están dentro del alcance de esta invención. Dichos compuestos son útiles, por ejemplo, como herramientas analíticas, como sondas en ensayos biológicos o como agentes terapéuticos de acuerdo con la presente invención.

[0046]Los términos "afinidad mensurable" e "inhibición mensurable", tal como se utilizan en el presente documento, significan un cambio mensurable en la actividad mTORC1 entre una muestra que comprende un compuesto de la presente invención, o composición del mismo, y mTORC 1, y una muestra equivalente que comprende mTORC 1 en ausencia de dicho compuesto, o composición del mismo.

3. Descripción de realizaciones ejemplares:

[0047]Se apreciará que el término "rapamicina", y estructuras de la misma, recitado a lo largo de la especificación pretende abarcar la rapamicina y análogos de la misma.

[0048]A efectos de claridad, a continuación se reproduce la FórmulaIIproporcionada con la fracción R1 representada unida en la posición C-7 hidroxilo. En consecuencia, la presente invención proporciona un compuesto de FórmulaII:

[0049]En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un compuesto de FórmulaII-aoII-b:

o

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que cada uno de R1 es como se ha definido anteriormente y descrito aquí en clases y subclases.

[0050]Se apreciará que el término "rapamicina", y estructura de la misma, recitado a través de la especificación pretende abarcar la rapamicina y análogos de la misma, tales como Rapamicina, Everolimus, Temsirolimus, Ridaforolimus, Umirolimus.

[0051]Los análogos de rapamicina mencionados anteriormente (esdecir,rapalogs) son para ejemplificación y no pretenden limitar la invención actual. La invención se define en las reivindicaciones.

[0052]Como se ha definido anteriormente, R1 se selecciona entre

[0053]En algunas realizaciones, R1es

donde n y R son como se describe en el presente documento.

[0054]En algunas realizaciones, R1es

En algunas realizaciones, R1 es

[0055]En algunas realizaciones, R1es

[0056]La rapamicina se comercializa bajo la marca Rapamune® (nombre genérico, sirolimus) y es bien conocida por su actividad antiproliferativa e inmunosupresora. La Rapamicina está aprobada por la FDA para la prevención del rechazo de trasplantes y para el recubrimiento de stents con el fin de prevenir la reestenosis. Aparte de los beneficios documentados de la rapamicina, es bien sabido que la rapamicina se asocia a una serie de efectos secundarios graves. Estos efectos secundarios incluyen síntomas similares a los de la diabetes, como la disminución de la tolerancia a la glucosa y de la sensibilidad a la insulina. Además, se ha informado de que la rapamicina activa la vía de señalización Akt (incluida la activación de Akt y ERK), lo que aumenta el riesgo de cáncer del paciente.

[0057]Tal como se utiliza aquí, la frase "solo rapamicina" pretende comparar un compuesto de la presente invención con la rapamicina, o un análogo de la misma, como alternativas.

[0058]En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado de FórmulaIIes más eficaz que la solo rapamicina. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado de FórmulaII-aes más eficaz que solo rapamicina. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado de FórmulaIl-bes más eficaz que solo rapamicina.

[0059]En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado de FórmulaII-aoII-bes más eficaz que la solo rapamicina.

[0060]En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado de FórmulaIIcuando se administra a un paciente, resulta en menos y/o menor severidad de efectos secundarios que cuando se administra rapamicina.

[0061]Los compuestos ejemplares de la invención se exponen en laTabla 1,a continuación, junto con varios compuestos de referencia que están marcados.

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59 (continuación)

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[0062] En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un compuesto establecido en la Tabla 1, más arriba, distinto de los marcados como compuestos de referencia, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Se apreciará que la presente invención también proporciona un compuesto establecido en la Tabla 1, más arriba, distinto de los marcados como compuestos de referencia, como una mezcla racémica en la posición C7, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Además, se apreciará que los compuestos expuestos en la Tabla 1, más arriba, como mezclas racémicas en la posición hidroxilo C7 pueden separarse en diastereómeros por diversos métodos, por ejemplo, cromatografía quiral.

4. Usos, formulación y administración

Composiciones farmacéuticamente aceptables

[0063] Según otra realización, la invención proporciona una composición que comprende un compuesto de esta invención o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable. La cantidad de compuesto en las composiciones de esta invención es tal que es eficaz para inhibir mensurablemente mTORC1, en una muestra biológica o en un paciente. En ciertas realizaciones, la cantidad de compuesto en las composiciones de esta invención es tal que es eficaz para inhibir mensurablemente mTORC1, en una muestra biológica o en un paciente. En ciertas realizaciones, una composición de esta invención se formula para su administración a un paciente que necesite dicha composición. En algunas realizaciones, una composición de esta invención se formula para la administración oral a un paciente.

[0064] El término "paciente", tal como se utiliza aquí, significa un animal, preferiblemente un mamífero, y más preferiblemente un ser humano.

[0065] El término "portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a un portador, adyuvante o vehículo no tóxico que no destruye la actividad farmacológica del compuesto con el que se formula. Los portadores, adyuvantes o vehículos farmacéuticamente aceptables que pueden usarse en las composiciones de esta invención incluyen, pero no se limitan a, intercambiadores iónicos, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas séricas, como albúmina sérica humana, sustancias tampón como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato potásico, mezclas parciales de glicéridos de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrolitos, como sulfato de protamina, hidrogenofosfato disódico, hidrogenofosfato potásico, cloruro sódico, sales de cinc, sílice coloidal, trisilicato de magnesio, polivinilpirrolidona, sustancias a base de celulosa, polietilenglicol, carboximetilcelulosa sódica, poliacrilatos, ceras, polímeros en bloque de polietileno-polioxipropileno, polietilenglicol y grasa de lana.

[0066] Las composiciones de la presente invención pueden administrarse por vía oral, parenteral, por pulverización inhalatoria, tópica, rectal, nasal, bucal, vaginal o a través de un reservorio implantado. El término "parenteral" aquí empleado incluye las técnicas de inyección o infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intrahepática, intralesional e intracraneal. Preferiblemente, las composiciones se administran por vía oral, intraperitoneal o intravenosa. Las formas inyectables estériles de las composiciones de esta invención pueden ser suspensiones acuosas u oleaginosas. Estas suspensiones pueden formularse según técnicas conocidas en la materia utilizando agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico aceptable para los padres, por ejemplo como solución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse se encuentran el agua, la solución de Ringer y la solución isotónica de cloruro sódico. Además, los aceites fijos estériles se emplean convencionalmente como disolvente o medio de suspensión.

[0067] Para este fin, puede emplearse cualquier aceite fijo insípido, incluidos los mono- o di-glicéridos sintéticos. Los ácidos grasos, como el ácido oleico y sus derivados glicéridos, son útiles en la preparación de inyectables, al igual que los aceites naturales farmacéuticamente aceptables, como el aceite de oliva o el aceite de ricino, especialmente en sus versiones polioxietiladas. Estas soluciones o suspensiones oleosas también pueden contener un diluyente o dispersante alcohólico de cadena larga, como carboximetilcelulosa o agentes dispersantes similares que se utilizan habitualmente en la formulación de formas farmacéuticas aceptables, incluidas emulsiones y suspensiones. Otros tensioactivos de uso común, como Tweens, Spans y otros agentes emulsionantes o potenciadores de la biodisponibilidad que se emplean habitualmente en la fabricación de formas farmacéuticas sólidas, líquidas o de otro tipo, también pueden utilizarse para la formulación.

[0068] Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención pueden administrarse por vía oral en cualquier forma de dosificación oralmente aceptable, incluidas, entre otras, cápsulas, comprimidos, suspensiones acuosas o soluciones. En el caso de los comprimidos para uso oral, los soportes utilizados habitualmente son la lactosa y el almidón de maíz. También suelen añadirse agentes lubricantes, como estearato de magnesio. Para la administración oral en forma de cápsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Cuando se requieren suspensiones acuosas para uso oral, el principio activo se combina con agentes emulsionantes y de suspensión. Si se desea, también pueden añadirse determinados agentes edulcorantes, aromatizantes o colorantes.

[0069] Alternativamente, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención pueden administrarse en forma de supositorios para administración rectal. Pueden prepararse mezclando el agente con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a temperatura ambiente pero líquido a temperatura rectal y, por tanto, se funda en el recto para liberar el fármaco. Entre estos materiales se encuentran la manteca de cacao, la cera de abejas y los polietilenglicoles.

[0070] Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención también pueden administrarse por vía tópica, especialmente cuando el objetivo del tratamiento incluye áreas u órganos fácilmente accesibles mediante aplicación tópica, incluidas enfermedades oculares, cutáneas o del tracto intestinal inferior. Se preparan fácilmente formulaciones tópicas adecuadas para cada una de estas zonas u órganos.

[0071] La aplicación tópica para el tracto intestinal inferior puede efectuarse en una formulación de supositorio rectal (véase más arriba) o en una formulación de enema adecuada. También pueden utilizarse parches tópicos transdérmicos.

[0072] Para aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticamente aceptables proporcionadas pueden formularse en una pomada adecuada que contenga el componente activo suspendido o disuelto en uno o más portadores. Los portadores para la administración tópica de compuestos de esta invención incluyen, entre otros, aceite mineral, vaselina líquida, vaselina blanca, propilenglicol, polioxietileno, compuesto de polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Alternativamente, las composiciones farmacéuticamente aceptables proporcionadas pueden formularse en una loción o crema adecuada que contenga los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más portadores farmacéuticamente aceptables. Los portadores adecuados incluyen, entre otros, aceite mineral, monoestearato de sorbitán, polisorbato 60, cera de ésteres cetílicos, alcohol cetearílico, 2-octildodecanol, alcohol bencílico y agua.

[0073] Para uso oftálmico, las composiciones farmacéuticamente aceptables proporcionadas pueden formularse como suspensiones micronizadas en solución salina estéril isotónica con pH ajustado o, preferiblemente, como soluciones en solución salina estéril isotónica con pH ajustado, con o sin un conservante como el cloruro de benzilalconio. Alternativamente, para usos oftálmicos, las composiciones farmacéuticamente aceptables pueden formularse en una pomada como la vaselina.

[0074] Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención también pueden administrarse por aerosol nasal o inhalación. Tales composiciones se preparan según técnicas bien conocidas en el arte de la formulación farmacéutica y pueden prepararse como soluciones en solución salina, empleando alcohol bencílico u otros conservantes adecuados, promotores de la absorción para mejorar la biodisponibilidad, fluorocarbonos y/u otros agentes solubilizantes o dispersantes convencionales.

[0075] Más preferiblemente, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se formulan para administración oral. Dichas formulaciones pueden administrarse con o sin alimentos. En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se administran sin alimentos. En otras realizaciones, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se administran con alimentos.

[0076] La cantidad de compuestos de la presente invención que pueden combinarse con los materiales portadores para producir una composición en una única forma de dosificación variará en función del huésped tratado, el modo particular de administración. Preferiblemente, las composiciones proporcionadas deben formularse de modo que pueda administrarse una dosis de entre 0,01 - 100 mg/kg de peso corporal/día del inhibidor a un paciente que reciba estas composiciones.

[0077] También debe entenderse que la dosis específica y el régimen de tratamiento para cualquier paciente en particular dependerá de una variedad de factores, incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo, la dieta, el tiempo de administración, la tasa de excreción, la combinación de fármacos, y el juicio del médico tratante y la gravedad de la enfermedad particular que se está tratando. La cantidad de un compuesto de la presente invención en la composición también dependerá del compuesto particular en la composición.

Usos de los Compuestos y Composiciones Farmacéuticamente Aceptables

[0078] Tal como se utilizan en el presente documento, los términos "tratamiento", "tratar" y "en tratamiento" se refieren a revertir, aliviar, retrasar la aparición o inhibir el progreso de una enfermedad o trastorno, o uno o más síntomas de los mismos, tal como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, el tratamiento puede administrarse después de que se hayan desarrollado uno o más síntomas. En otros casos, el tratamiento puede administrarse en ausencia de síntomas. Por ejemplo, el tratamiento puede administrarse a un individuo susceptible antes de la aparición de los síntomas (por ejemplo, a la luz de un historial de síntomas y/o a la luz de factores genéticos u otros factores de susceptibilidad). El tratamiento también puede continuar una vez resueltos los síntomas, por ejemplo para prevenir o retrasar su reaparición.

[0079] Los compuestos proporcionados son inhibidores de mTORC 1 y por lo tanto son útiles para tratar uno o más trastornos asociados con la actividad de mTORC 1. Así, en ciertas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método para tratar un trastorno mediado por mTORC1 que comprende el paso de administrar a un paciente que lo necesite un compuesto de la presente invención, o una composición farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0080] Tal como se utilizan en el presente documento, los términos trastornos, enfermedades y/o afecciones "mediadas por mTORC1", tal como se utilizan en el presente documento, significan cualquier enfermedad u otra afección deletérea en la que se sabe que mTORC 1 desempeña un papel. En consecuencia, otra realización de la presente invención se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento o disminuir la gravedad de una o más enfermedades en las que mTORC 1 se sabe que desempeñan un papel. En ciertas realizaciones, un trastorno, enfermedad y/o afección mediada por mTORC 1- se selecciona de los descritos por Matt Kaeberlin, Scientifica, vol. 2013, Article ID 849186.

[0081] Los métodos aquí descritos incluyen métodos para el tratamiento del cáncer en un sujeto. En este contexto, "tratar" significa aliviar o mejorar al menos un síntoma o parámetro clínico del cáncer. Por ejemplo, un tratamiento puede dar lugar a una reducción del tamaño del tumor o de su tasa de crecimiento. No es necesario que un tratamiento cure el cáncer o cause la remisión el 100% de las veces, en todos los sujetos.

[0082] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "cáncer" se refiere a las células que tienen la capacidad de crecimiento autónomo,es decir,un estado o condición anormal caracterizado por un crecimiento celular rápidamente proliferativo. El término incluye todos los tipos de tumores cancerosos o procesos oncogénicos, tejidos metastásicos o células, tejidos u órganos malignamente transformados, independientemente del tipo histopatológico o del estadio de invasión. El término "tumor", tal como se utiliza aquí, se refiere a células cancerosas, porejemplo,una masa de células cancerosas.

[0083] Los cánceres que pueden tratarse o diagnosticarse mediante los métodos aquí descritos incluyen neoplasias malignas de los diversos sistemas orgánicos, como las que afectan al pulmón, la mama, la tiroides, el sistema linfoide, el tracto gastrointestinal y el genitourinario, así como adenocarcinomas que incluyen neoplasias malignas como la mayoría de los cánceres de colon, el carcinoma de células renales, el cáncer de próstata y/o los tumores testiculares, el carcinoma de células no pequeñas de pulmón, el cáncer de intestino delgado y el cáncer de esófago.

[0084] En algunas realizaciones, los métodos aquí descritos se utilizan para tratar o diagnosticar un carcinoma en un sujeto. El término "carcinoma" está reconocido en el arte y se refiere a las neoplasias malignas de los tejidos epiteliales o endocrinos, incluidos los carcinomas del sistema respiratorio, los carcinomas del sistema gastrointestinal, los carcinomas del sistema genitourinario, los carcinomas testiculares, los carcinomas de mama, los carcinomas prostáticos, los carcinomas del sistema endocrino y los melanomas. En algunas realizaciones, el cáncer es un carcinoma renal o un melanoma. Los carcinomas ejemplares incluyen los que se forman a partir de tejido del cuello uterino, pulmón, próstata, mama, cabeza y cuello, colon y ovario. El término también incluye los carcinosarcomas, porejemplo,que incluyen tumores malignos compuestos de tejidos carcinomatosos y sarcomatosos. Por "adenocarcinoma" se entiende un carcinoma derivado de tejido glandular o en el que las células tumorales forman estructuras glandulares reconocibles.

[0085] El término "sarcoma" está reconocido en el arte y se refiere a tumores malignos de derivación mesenquimal.

[0086] En algunas realizaciones, los cánceres que se tratan mediante los métodos descritos en el presente documento son cánceres que tienen niveles aumentados de mTORC1 o una expresión o actividad aumentada de un mTORC1 en relación con tejidos normales o con otros cánceres de los mismos tejidos; los métodos conocidos en la técnica y descritos en el presente documento pueden utilizarse para identificar esos cánceres. En algunas realizaciones, los métodos incluyen la obtención de una muestra que comprende células del cáncer, la determinación de la actividad de mTORC1 en la muestra, y la administración de un tratamiento como se describe en el presente documentofporejemplo,un inhibidor de mTORCl proporcionado). En algunas realizaciones, el cáncer es uno de los que se ha demostrado en el presente documento que tienen niveles elevados de actividad mTORC1.

[0087] En algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método para tratar uno o más trastornos, enfermedades y/o afecciones en los que el trastorno, enfermedad o afección incluye, pero no se limita a, un trastorno proliferativo celular.

Trastornos proliferativos celulares

[0088] La presente invención presenta composiciones y compuestos para su uso en métodos para el diagnóstico y pronóstico de trastornos proliferativos celularesfpor ejemplo, cáncer) y el tratamiento de estos trastornos mediante la inhibición de la actividad mTORC1. Los trastornos proliferativos celulares descritos en el presente documento incluyen, por ejemplo ,elcáncer, la obesidad y las enfermedades dependientes de la proliferación. Estos trastornos pueden diagnosticarse mediante métodos conocidos en la técnica.

Cáncer

[0089] Los cánceres incluyen, sin limitación, leucemias(p. ej.,leucemia aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielocítica aguda, leucemia mieloblástica aguda, leucemia promielocítica aguda, leucemia mielomonocítica aguda, leucemia monocítica aguda, eritroleucemia aguda, leucemia crónica, leucemia mielocítica crónica, leucemia linfocítica crónica), policitemia vera, linfoma(p. ej.,enfermedad de Hodgkin o enfermedad no Hodgkin), macroglobulinemia de Waldenstrom, mieloma múltiple, enfermedad de cadenas pesadas y tumores sólidos como sarcomas y carcinomas(p. ej.,fibrosarcoma, mixosarcoma, liposarcoma, condrosarcoma, sarcoma osteogénico, cordoma, angiosarcoma, endoteliosarcoma, linfangiosarcoma, linfangioendoteliosarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiosarcoma).s tumor, leiomiosarcoma, rabdomiosarcoma, carcinoma de colon, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de próstata, carcinoma de células escamosas, carcinoma de células basales, adenocarcinoma, carcinoma de glándulas sudoríparas, carcinoma de glándulas sebáceas, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, cistadenocarcinoma, carcinoma medular, carcinoma broncogénico, carcinoma de células renales, hepatoma, carcinoma de vías biliares, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionario, tumor de Wilm, cáncer de cuello uterino, cáncer de útero, cáncer de testículo, carcinoma de pulmón, carcinoma pulmonar de células pequeñas, carcinoma de vejiga, carcinoma epitelial, glioma, astrocitoma, meduloblastoma, craneofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, schwannoma, meningioma, melanoma, neuroblastoma y retinoblastoma). En algunas realizaciones, el cáncer es melanoma o cáncer de mama.

Enfermedades fibróticas

[0090] Fibrosis pulmonar idiopática (IPF). La vía PI3K se activa en los focos fibróticos, las lesiones cardinales de la FPI. El inhibidor de la quinasa mTOR GSK2126458 reduce la señalización de la vía PI3K y las respuestas funcionales en los fibroblastos pulmonares derivados de la FPI, y la inhibición de mTOR reduce la expresión de colágeno en modelos de pacientes con FPI. En el modelo bleomicina de fibrosis pulmonar, el tratamiento con rapamicina es antifibrótico, y la rapamicina también disminuye la expresión de a-actina de músculo liso y fibronectina por los fibroblastos in vitro.

[0091] En algunas realizaciones, los compuestos de la invención son para uso en un método de inhibición de la actividad m ToR ci para tratar la fibrosis pulmonar idiopática (FPI)(Véase Mercer, P.F. et al., Thorax., 71(8): 701-11 (2016); Patel, A. S., et al., PLoS One, 7(7): e41394 (2012)). Por consiguiente, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis pulmonar idiopática (FPI), en un paciente que lo necesite, que comprende la etapa de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0092] Fibrosis renal. mTORC1 se activa en los miofibroblastos, un tipo celular patogénico importante en la fibrosis renal. La inhibición de mTOR con rapamicina en un modelo murino de fibrosis renal (UUO), atenuó la expresión de marcadores de fibrosis y daño tubulointersticial.

[0093] En algunas realizaciones, los compuestos de la invención son para uso en un método de inhibición de la actividad mToRc1 para tratar la fibrosis renal(Véase Jiang, L., et al., J Am Soc Nephrol, 24(7): 1114-26 (2013); Wu, M.J. et al., Kidney International, 69(11): 2029-36 (2006); Chen, G. et al., PLoS One, 7(3): e33626 (2012); Liu, C.F. et al., Clin Invest Med, 37(34): E142-53 (2014)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis renal, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0094] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en métodos de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la esclerodermia(Véase Mitra, A., et al., J Invest Dermatol. 135(11): 2873-6 (2015)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la esclerodermia, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0095] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la cicatrización hipertrófica y la enfermedad queloide(Véase Syed, F., et al., Am J Pathol. 181(5): 1642-58 (2012)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la cicatrización hipertrófica y la enfermedad queloide, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0096] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la fibrosis cardiaca(Véase Yano, T., et al., J Mol Cell Cardiol. 91: 6-9 (2016)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis cardiaca, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otras enfermedades proliferativas

[0097] Otras enfermedades proliferativas incluyen, porejemplo,la obesidad, la hiperplasia prostática benigna, la psoriasis, la queratinización anormal, los trastornos linfoproliferativos (por ejemplo, un trastorno en el que hay una proliferación anormal de células del sistema linfático), la artritis reumatoide crónica, la arteriosclerosis, la reestenosis y la retinopatía diabética. Las enfermedades proliferativas incluyen las descritas en

Publ. de Solicitud de Pat. de EE. UU. N.° 5,639,600; y

7,087,648

Otros Trastornos

[0098] Otros trastornos incluyen las enfermedades de almacenamiento lisosómico, entre las que se incluyen la enfermedad de Pompe, la enfermedad de Gaucher, la mucopolisacaridosis, la deficiencia múltiple de sulfatasa; enfermedades neurodegenerativas como la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Huntington, la deficiencia de alfa1-antitripsina y la atrofia muscular bulbar espinal.

[0099] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar el asma(véaseHua, W., et al., Respirology, 20(7): 1055-65 (2015)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento del asma, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0100] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar una enfermedad de almacenamiento lisosomal(véaseSardiello, M., Annals of the New York Academy of Sciences, 1371(1): 3-14 (2016); Awad, O., et al., Hum Mol Genet. 24(20): 5775-88 (2015); Spampanato, C., et al., EMBO Mol Med., 5(5): 691-706 (2013); Medina, D.L., et al., Dev Cell., 21(3): 421-30 (2011)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad de almacenamiento lisosomal, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0101] En algunas realizaciones, los compuestos son para su uso en un método de inhibición de la actividad mTORC 1 se utiliza para tratar la enfermedad de Parkinson(véaseDecressac, M., et al., Proc Natl Acad Sci U S A., 110(19):E1817-26 (2013)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la enfermedad de Parkinson, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0102] En algunas realizaciones, los compuestos de la invención son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la enfermedad de Alzheimer(véasePolito, V.A., et al., EMBO Mol Med. 6(9):1142-60 (2014)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0103] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la enfermedad de Huntington(véaseTsunemi, T., et al., Sci Transl Med., 4(142): 142ra97 (2012)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la enfermedad de Huntington, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0104] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la deficiencia de alfa-1-antitripsina(véasePastore, N. et al., EMBO Mol Med., 5(3): 397-412 (2013)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la deficiencia de alfa<1>-anti-tripsina, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0105] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la atrofia muscular bulbar espinal(véaseCortes, C.J., et al., Nat Neurosci., 17(9): 1180-9 (2014)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la atrofia muscular bulbar espinal, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0106] En algunas realizaciones, un compuesto de la presente invención se une a FKBP12 para formar un complejo. En algunas realizaciones, el complejo entre un compuesto de la presente invención y FKBP12 interactúa con el dominio de unión FK506-rapamicina de mTOR.

[0107] En algunas realizaciones, un compuesto de la presente invención se une a FKBP12 e interfiere con la interacción proteína-proteína entre FRAP y FKBP12. En algunas realizaciones, el grupo R1 de un compuesto de la presente invención interactúa tanto con FRAP como con FKBP12.

[0108] La presente invención proporciona compuestos que son inhibidores de la actividad mTORC 1 y se demostró que inhiben selectivamente mTORC 1 sobre mTORC2 según lo medido por la inhibición de pS<6>K (una medida de la actividad mTORC1) y la activación de pAKT (una medida de la actividad mTORC2). En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC 1 selectivamente sobre mTORC2. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado no inhibe mTORC2 de forma mensurable. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado tiene una IC<50>de activación de pAKT de >10|jM. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 con una selectividad >10 veces superior a mTORC2. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 con una selectividad >20 veces superior a mTORC2. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 con una selectividad >50 veces superior a mTORC2. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 con una selectividad >100 veces superior a mTORC2. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 con una selectividad >150 veces superior a mTORC2. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 con una selectividad >200 veces superior a mTORC2. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 con una selectividad >500 veces superior a mTORC2. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 con > 1.000 veces selectividad sobre mTORC2.

[0109] En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 selectivamente sobre mTORC2 después de tratamiento crónico o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 selectivamente sobre mTORC2 después de aproximadamente 24 horas de tratamiento o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC 1 selectivamente sobre mTORC2 después de aproximadamente 36 horas de tratamiento o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 selectivamente sobre mTORC2 después de aproximadamente 48 horas de tratamiento o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORCI selectivamente sobre mTORC2 después de aproximadamente 72 horas de tratamiento o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORCI selectivamente sobre mTORC2 después de aproximadamente 96 horas de tratamiento o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 selectivamente sobre mTORC2 después de aproximadamente 120 horas de tratamiento o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 selectivamente sobre mTORC2 después de aproximadamente 144 horas de tratamiento o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC1 selectivamente sobre mTORC2 después de aproximadamente una semana de tratamiento o exposición. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado inhibe mTORC 1 selectivamente sobre mTORC2 después de más de una semana de tratamiento o exposición.

[0110] En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado es menos inmunosupresor que los rapalogs existentes. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado es menos inmunosupresor que la rapamicina. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado es menos inmunosupresor que el everolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado es menos inmunosupresor que el temsirolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado es menos inmunosupresor que el ridaforolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado es menos inmunosupresor que el umirolimus.

[0111] En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado suprime la producción de interferón gamma (IFN-y) menos que los rapalogs. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado suprime la producción de IFN-<y>menos que la rapamicina. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado suprime la producción de IFN-<y>menos que el everolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado suprime la producción de IFN-<y>menos que el temsirolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado suprime la producción de IFN-y menos que el ridaforolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado suprime la producción de IFN-y menos que el umirolimus.

[0112] En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado disminuye la expresión de biomarcadores de fibrosis en tejido que ha sido dañado. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado disminuye la expresión de colágeno I(COL1A2)en el tejido que ha sido dañado. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado disminuye la expresión de colágeno III(COL3A1)en el tejido que ha sido dañado. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado disminuye la expresión de fibronectina(FN1)en el tejido que ha sido dañado.

[0113] En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado disminuye la propensión de las células inmunitarias a infiltrarse en el tejido dañado. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado disminuye la propensión de las células macrófagas a infiltrarse en el tejido dañado.

[0114] En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado induce menos tolerancia a la glucosa que los rapalogs. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado induce menos tolerancia a la glucosa que la rapamicina. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado induce menos tolerancia a la glucosa que el everolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado induce menos tolerancia a la glucosa que el temsirolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado induce menos tolerancia a la glucosa que el ridaforolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado induce menos tolerancia a la glucosa que el umirolimus. En algunas realizaciones, un compuesto proporcionado no induce la tolerancia a la glucosa significativamente más que un placebo o vehículo solo.

[0115] En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de un trastorno asociado con mTORC1 que comprende administrar al paciente un compuesto que inhibe mTORCI en el que dicho compuesto no inhibe mTORC2. Dichos compuestos pueden emplearse para indicaciones en las que la rapamicina y los rapalogs demostraron un beneficio, ya sea en modelos animales o en el contexto de una enfermedad humana. Tales indicaciones incluyen:

[0116]Tratamiento de enfermedades metabólicas (obesidad y resistencia a la insulina en la diabetes de tipo 2).La inhibición de la vía mTORC 1 prolonga la vida en levaduras, moscas y ratones, y la restricción calórica mejora la longevidad y la sensibilidad a la insulina. Se ha propuesto que el mecanismo subyacente funciona mediante la regulación de la activación de mTORC 1. Se ha demostrado que la resistencia a la insulina inducida por la rapamicina está mediada por la inhibición de mTORC2 y se prevé que un inhibidor selectivo de mTORC1 mejore la sensibilidad a la insulina y la homeostasis de la glucosa.

[0117] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar enfermedades metabólicas (obesidad y resistencia a la insulina en diabetes tipo 2)(véaseYu, Z., et al., J Gerontol A Biol Sci Med Sci, 70(4), 410-20 (2015); Fok, W.C., et al., Aging Cell 13 (2): 311-9 (2014); Shum, M., et al., Diabetologia, 59(3):592-603 (2016); Lamming, D.W., et al., Science 335(6076): 1638-43 (<2 0 1 2>)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de enfermedades metabólicas (obesidad y resistencia a la insulina en la diabetes tipo<2>), en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0118]Neurofibromatosis.La neurofibromatosis tipo 1 (NF1) está causada por mutaciones en el gen NF1. Se ha demostrado que los inhibidores de mTOR reducen el tamaño del tumor e inducen un efecto antiproliferativo en el neurofibroma plexiforme asociado a NF1.

[0119] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la neurofibromatosis(véaseFranz, D.N., et al., Curr Neurol Neurosci Rep., 12(3): 294-301 (2012); Varin, J., et al., Oncotarget., 7: 35753-67 (2016)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la neurofibromatosis, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0120]Cardiomiopatía y distrofia del músculo esquelético, modelo de distrofia muscular de Emery-Dreifuss (LMNA~'~).Las mutaciones en el LMNA dan lugar a varias enfermedades humanas, como la distrofia muscular de cinturas (LGMD1B), la distrofia muscular de Emery-Dreifuss (EDMD2/3), la cardiomiopatía dilatada (DCM) y la enfermedad del sistema de conducción (CMD1A), la lipodistrofia, la enfermedad de Charcot-Marie-Tooth y el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford (HGPS). Los ratones Lmna'/_ tienen una elevada actividad mTORC1 y el tratamiento a corto plazo con rapamicina en ratones Lmna'/_ produce una reducción de la señalización mTORC1, una mejora de la función muscular cardiaca y esquelética y una mayor supervivencia en ~50%.

[0121] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la cardiomiopatía y la distrofia del músculo esquelético(véaseRamos, F., et al., Sci Transl Med., 4(144): 144ra103 (2012); Bonne, G. & Quijano-Roy, S., Handb Clin Neurol., 113: 1367-76 (2013)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de cardiomiopatía y distrofia muscular esquelética, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0122]Síndrome de Leigh.Los ratones Ndufs4 knockout (KO) se utilizan como modelo del síndrome de Leigh y presentan hiperactivación de mTORC1 y defectos metabólicos. El tratamiento de ratones Ndufs4 KO con rapamicina prolongó la vida útil y mejoró los defectos metabólicos y neurológicos asociados a esta enfermedad.

[0123] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar el síndrome de Leigh(ver Johnson, S.C., et al., Science, 342(6165): 1524-8 (2013)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento del síndrome de Leigh, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0124]Oncología.La inhibición de mTOR con rapalogs ha demostrado tener actividad antitumoral en modelos murinos de cáncer y en pacientes con cáncer. Algunos ejemplos de tipos de cáncer sensibles son, entre otros, el carcinoma hepatocelular, los cánceres de mama, los linfomas de células del manto, el carcinoma de pulmón, la esclerosis tuberosa y la linfangioleiomiomatosis.

[0125] En algunas realizaciones, los compuestos son para su uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar el cáncer y los trastornos oncológicos(véase Ilagan, E. & manning, B.D., Trends Cancer, 2(5): 241-51 (2016)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento del cáncer y trastornos oncológicos, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0126]Esteatohepatitis no alcohólica (NASH).La presente invención proporciona inhibidores que inducen la autofagia para eliminar las proteínas citoplasmáticas degradadas, y la enfermedad NASH se caracteriza por depósitos de lípidos, inflamación y fibrosis en el hígado. La inhibición de la vía mTORC1 induce la autofagia y regula a la baja SREBP-1 para disminuir la biosíntesis de lípidos y reducir el almacenamiento de lípidos.

[0127] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la esteatohepatitis no alcohólica(NASH) (véasePuri, P. & Chandra, A., J Clin Exp Hepatol, 4(1): 51-9 (2014)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0128]Esclerosis tuberosa (TSC) y linfangioleiomiomatosis (LAM).Un fallo en la regulación de mTOR es crítico para la patogénesis del trastorno hereditario complejo de esclerosis tuberosa (TSC) y la enfermedad pulmonar relacionada, linfangioleiomiomatosis (LAM). Ambas enfermedades están causadas por mutaciones de TSC1 o TSC2 que conducen a una actividad inapropiada de la señalización corriente abajo de mTORC1. Los pacientes de TSC desarrollan tumores no malignos en muchos órganos, incluido el cerebro, mientras que los pacientes de LAM, en su mayoría mujeres, acumulan células anormales similares a las musculares en determinados órganos o tejidos, especialmente los pulmones, los ganglios linfáticos y los riñones. Los rapalogs, everolimus y sirolimus, están actualmente aprobados para el tratamiento del TSC y la LAM, respectivamente, por la FDA de EE. UU..

[0129] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORCI para tratar la esclerosis tuberosa y la linfangioleiomiomatosis(véaseWander, S.A., et al., J. Clin. Invest., 121(4): 1231-41 (2011); Taveira-DaSilva, A.M. & Moss, J., J. Clin Epidemiol., 7: 249-57 (2015)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la esclerosis tuberosa y linfangioleiomiomatosis, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0130]Senescencia y enfermedades del envejecimiento.La rapamicina suprime el complejo TORC1 de los mamíferos, que regula la traducción, y prolonga la esperanza de vida en diversas especies, incluidos los ratones. Se demostró que la rapamicina inhibe el fenotipo proinflamatorio de las células senescentes. A medida que las células senescentes se acumulan con la edad, el fenotipo secretor asociado a la senescencia (SASP) puede alterar los tejidos y contribuir a patologías relacionadas con la edad, incluido el cáncer. La inhibición de mTOR suprimió la secreción de citoquinas inflamatorias por las células senescentes. La rapamicina redujo los niveles de citocinas, incluida laIL6,y suprimió la traducción de la citocina unida a la membrana IL1A. La reducción de IL1A disminuye la actividad transcripcional de NF-<k>B, que controla el SASP. Así pues, los inhibidores de mTORC1 podrían mejorar las patologías relacionadas con la edad, incluido el cáncer tardío, suprimiendo la inflamación asociada a la senescencia.

[0131] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la senescencia y las enfermedades del envejecimiento(véaseLaberge, R.M., et al., Nature Cell Biology, 17(8): 1049 61 (2015); Nacarelli, T., et al., Free Radic Biol Med., 95: 133-54 (2016)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la senescencia y las enfermedades del envejecimiento, en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0132]Nefropatía diabética y complicaciones relacionadas con el riñón de la diabetes tipo 1 y la diabetes tipo 2.La nefropatía diabética es una complicación renal de la diabetes de tipo 1 y 2 que afecta a casi el 40% de los diabéticos. Los niveles elevados de glucosa obligan a los riñones a trabajar en exceso para filtrar la sangre, lo que provoca daños renales. Los estudios sugieren que la vía mTOR está muy activada en pacientes con neuropatía diabética y puede desempeñar un papel en los cambios patológicos y la disfunción renal debidos a la glucosa crónica elevada. Además, la inhibición de mTOR puede atenuar la hiperinsulinemia.

[0133] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la nefropatía diabética o las complicaciones renales de la diabetes de tipo 1 y de tipo 2(véaseMori, H., et al., Biochem. Res. Commun. 384(4): 471-5 (2009)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la nefropatía diabética o complicaciones relacionadas con el riñón de la diabetes tipo<1>y diabetes tipo<2>en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0134]Enfermedad renal poliquística.La poliquistosis renal (PKD) se caracteriza por el desarrollo y la acumulación de quistes renales destructivos que acaban provocando insuficiencia renal. La PKD puede ser autosómica dominante (ADPKD) o recesiva (ARPKD). Se ha observado una vía de señalización mTOR disfuncional en la PQRAD y la PQRAD. Así, la normalización de la vía mTORC 1 puede mejorar el desarrollo de quistes y la progresión de la enfermedad.

[0135] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la PKD(véaseTorres, V.E., et al., Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 5(7): 1312-29 (2010)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de PKD en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la<p>K<d>es autosómica dominante. En algunos casos, la PKD es autosómica recesiva.

[0136]Glomeruloesclerosis Segmentaria Focal (FSGS) y otras enfermedades asociadas a la esclerosis del riñón.La GEFyS es el trastorno glomerular primario causante de enfermedad renal terminal (ERT) más frecuente en Estados Unidos. A medida que la enfermedad progresa, se produce un desajuste entre el número de células podocitarias de la cápsula de Bowman y la superficie de la membrana basal glomerular que cubren. Los estudios han demostrado que el control del tamaño de los podocitos está regulado por mTOR y que la activación de mTOR contribuye a la progresión de la enfermedad. Además, se ha demostrado que la activación constitutiva de mTORC1 provoca lesiones similares a las de la GEFS en experimentos de knockdown en ratones. Así pues, la inhibición de mTORC1 podría mejorar la FSGS u otras enfermedades asociadas a la esclerosis renal normalizando o aumentando la actividad autofágica.

[0137] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la FSGS u otras enfermedades asociadas con la esclerosis del riñón(véaseZschiedrich, S. et al., J. Am. Soc. Nephrol. 28(7): 2144-57 (2017)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de FSGS u otras enfermedades asociadas con la esclerosis del riñón en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0138]Degeneración macular asociada a la edad.La degeneración macular asociada a la edad (DMAE) es una de las principales causas de ceguera y se caracteriza por la muerte de los fotorreceptores de la mácula. Los posibles mecanismos de progresión de la DMAE incluyen el estrés oxidativo que conduce a depósitos de proteínas y orgánulos disfuncionales, lo que lleva a la hipertrofia del epitelio pigmentario de la retina, la desdiferenciación y la atrofia final. mTOR está implicado en la desdiferenciación del epitelio pigmentario de la retina. Así, la inhibición de mTORC1 puede mejorar la DMAE bloqueando la hipertrofia y la desdiferenciación.

[0139] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la degeneración macular relacionada con la edad(Véase Kolosova, N.G., et al., Am. J. Path. 181(2): 472-7 (2012) and Zhen, C. & Vollrath, D., Aging 3(4): 346-47 (2011)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la degeneración macular relacionada con la edad en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0140]Edema Macular Diabético.El edema macular diabético (EMD) es una de las principales causas de ceguera en las personas con diabetes y afecta aproximadamente al 35% de ellas. Los estudios sugieren que la patogénesis del DME es una enfermedad inflamatoria en la que intervienen diversas citocinas y quimiocinas. El estrés inflamatorio y oxidativo crónico puede contribuir a la progresión del EMD. Así pues, la inhibición de mTORC1 puede mejorar los síntomas y la progresión del EMD al disminuir la respuesta inflamatoria.

[0141] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar el EMD(véaseOkamoto, T., et al., PLOS ONE, (11)(1): e0146517, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0146517 (2016)). Por consiguiente, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de EMD en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0142]Retinopatía diabética.La retinopatía diabética (DR) es una enfermedad ocular frecuente, responsable de aproximadamente el 5% de los casos de ceguera en adultos, y está asociada a la hiperglucemia crónica y a defectos de las vías de señalización de la insulina. Los pacientes con RD sufren lesiones persistentes en los vasos sanguíneos y las neuronas de la retina a causa de la inflamación, las especies reactivas del oxígeno y el estrés del retículo endoplásmico provocado por la hiperglucemia crónica. De manera significativa, se ha demostrado que la rapamicina bloquea la acción del factor inducible por hipoxia-1 (HIF-1) inducido por la insulina y la senescencia de las células retinianas, e induce la autofagia, por lo que podría ser beneficiosa para promover la apoptosis de los vasos sanguíneos nacientes y prevenir la angiogénesis. Así pues, la inhibición de mTORC 1 puede mejorar los síntomas y la progresión de la RD al disminuir la inflamación e inhibir las vías de señalización patogénicas.

[0143] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la RD(véaseDi Rosa, M., et al., Curr. Neuropharmacol. 14(8): 810-25 (2016)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la RD en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0144]Glaucoma.El glaucoma es una neuropatía óptica frecuente asociada al envejecimiento y a una presión intraocular elevada, y es la principal causa de ceguera irreversible. Los estudios sugieren que la desregulación de la autofagocitosis dependiente de mTOR puede ser un factor en la progresión de la enfermedad. Así pues, la inhibición de mTORC1 puede ralentizar la progresión o mejorar el glaucoma normalizando o aumentando la autofagia.

[0145] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar el glaucoma(véasePorter, K., et al., Biochim. Biophys. Acta. 1852(3): 379-85 (2014)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento del glaucoma en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0146]Restauración de la función inmunitaria.Se ha demostrado que la inhibición de mTORC1 reduce la expresión del receptor de la muerte programada-1 (PD-1) en los linfocitos T CD4+ y CD<8>+, promoviendo la señalización de las células T. Así pues, la inhibición de mTORC1 puede restaurar la función inmunitaria mejorando la respuesta inmunitaria adaptativa.

[0147] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para restaurar la función inmunitaria(véaseMannick, J.B., et al., Sci. Trans. Med. 6(268): ppra179 (2014)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de restauración de la función inmune en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0148]Tratamiento de infecciones respiratorias y/o del tracto urinario.La inhibición de mTORC1 puede reducir las infecciones mediante la regulación de la expresión y respuesta de genes antivirales. Así pues, la inhibición de mTORC1 puede mejorar la capacidad del sistema inmunitario del paciente para defenderse de las infecciones respiratorias y/o del tracto urinario.

[0149] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORCI para tratar infecciones respiratorias y/o del tracto urinario.(véaseMannick, J.B., et al., Sci. Trans. Med. 10(449): eaaq1564 (2018)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de restauración de la función inmune en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0150]Insuficiencia cardiaca.La actividad de mTORC1 es esencial para la hipertrofia cardiaca en respuesta al estrés, pero puede provocar trastornos cardiacos como resultado de la remodelación cardiaca tras un infarto. La inhibición de mTORC 1 reduce el remodelado cardíaco y la insuficiencia cardíaca en respuesta a la sobrecarga de presión. Así, la inhibición de mTORC1 puede disminuir la insuficiencia cardíaca en pacientes que han sufrido daños en el miocardio.

[0151] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la insuficiencia cardíaca(véaseSciarretta, S. et al., Circ. Res. 122(3): 489-505 (2018)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la insuficiencia cardíaca en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0152]Osteoartritis.La osteoartritis (OA) es una enfermedad degenerativa crónica que provoca pérdida de cartílago e inflamación articular. mTOR puede desempeñar un papel importante en la homeostasis del colágeno y en el recambio y remodelación del cartílago. Así pues, la inhibición de mTORC1 puede ralentizar la progresión o mejorar los síntomas de la osteoartritis al normalizar el recambio del cartílago.

[0153] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la osteoartritis(véasePal, B., et al., Drugs R&D, 15(1): 27-36 (2017))). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la osteoartritis en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0154]Hipertensión arterial pulmonar.La hipertensión arterial pulmonar (PAH) es una enfermedad progresiva y mortal asociada al aumento de la resistencia vascular pulmonar. La proliferación y migración de las células musculares lisas de la arteria pulmonar están implicadas en la progresión del engrosamiento de la pared arterial, exacerbando la vasoconstricción. Así pues, la inhibición de mTORC 1 puede aliviar la HAP reduciendo el remodelado vascular.

[0155] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la HAP(véaseMa, X., et al., Interact. Cardiovasc. Thorac. Surg. 25(2): 206-11 (2017)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la HAP es un paciente en necesidad de la misma, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o farmacéuticamente sal aceptable de la misma.

[0156]Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica.La reducción de la autofagia provoca la acumulación de proteínas y otros materiales celulares que aceleran la senescencia celular en pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD). Así pues, la inhibición de mTORC1 puede ralentizar la progresión o mejorar los síntomas de la COPD normalizando o aumentando la autofagia.

[0157] En algunas realizaciones, los compuestos se utilizan en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar la COPD(véaseFujii, S., et al., Oncoimmunology 1(5): 630-41 (2012)). En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de la COPD en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0158] Otras indicaciones terapéuticas en las que la inhibición de mTORC puede ser beneficiosa son: enfermedades cardiovasculares (síndrome coronario agudo), oclusiones coronarias con stents eluyentes, enfermedad renal poliquística y enfermedad renal asociada con formación de quistes o cistogénesis), neurofibromatosis, epilepsia asoc. con mutaciones TSC1 y/o TSC2, hígado poliquístico, paquioniquia congénita, síndrome X frágil, ataxia de Friedrich, síndrome de Peutz-Jeghers, enfermedades oculares, incluida la degeneración macular neovascular asociada a la edad, uveítis, edema macular diabético, crecimiento fibroblástico, incluida la fibrosis pulmonar, insuficiencia renal/fibrosis, síndrome metabólico, enfermedades del sistema inmune incluyendo senescencia inmune, nefritis lúpica, trombocitopenia inmune crónica, esclerosis múltiple, cáncer incluyendo linfoma, tumores asociados con mutaciones TSC1/2, angiomiolipoma asoc. con mutaciones TSC1/2, cáncer de mama, cáncer hepatocelular, leucemia, glioma, carcinoma adenoide quístico, senescencia, autismo y artritis reumatoide vascular.

[0159] En algunas realizaciones, los compuestos son para uso en un método de inhibición de la actividad mTORC1 para tratar enfermedades cardiovasculares (síndrome coronario agudo), oclusiones coronarias con stents eluyentes, enfermedad renal poliquística, neurofibromatosis, epilepsia asoc. con mutaciones TSC1 y/o TSC2, hígado poliquístico, paquioniquia congénita, síndrome x frágil, ataxia de Friedrich, síndrome de Peutz-Jeghers, enfermedades oculares, incluida la degeneración macular neovascular asociada a la edad, uveítis, edema macular diabético, crecimiento de fibroblastos, incluida la fibrosis pulmonar, insuficiencia renal/fibrosis, síndrome metabólico, enfermedades del sistema inmunitario, incluida la senescencia inmunitaria, la nefritis lúpica, la trombocitopenia inmunitaria crónica, la esclerosis múltiple, el cáncer, incluido el linfoma, los tumores asociados a mutaciones TSC1/2, el angiomiolipoma asociado a mutaciones TSC1/2, el cáncer de mama, el cáncer hepatocelular, la leucemia, el glioma, el carcinoma adenoide quístico, la senescencia, el autismo y la artritis reumatoide vascular.

[0160] Por consiguiente, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método de tratamiento de enfermedades cardiovasculares (síndrome coronario agudo), oclusiones coronarias con stents eluyentes, enfermedad renal poliquística, neurofibromatosis, epilepsia asoc. con mutaciones TSC1 y/o TSC2, hígado poliquístico, paquioniquia congénita, síndrome x frágil, ataxia de Friedrich, síndrome de Peutz-Jeghers, enfermedad ocular incluyendo degeneración macular neovascular asociada a la edad, uveítis, edema macular diabético, crecimiento de fibroblastos incluyendo fibrosis pulmonar, insuficiencia renal/fibrosis, síndrome metabólico, enfermedades del sistema inmune incluyendo senescencia inmune, nefritis lúpica, trombocitopenia inmune crónica, esclerosis múltiple, cáncer incluyendo linfoma, tumores asociados con mutaciones TSC1/2, angiomiolipoma asoc. con mutaciones TSC1/2, cáncer de mama, cáncer hepatocelular, leucemia, glioma, carcinoma adenoide quístico, senescencia, autismo y artritis reumatoide vascular, en un paciente que lo necesite, comprendiendo el paso de administrar a dicho paciente un compuesto proporcionado o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0161] Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención pueden administrarse a seres humanos y otros animales por vía oral, rectal, parenteral, intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, tópica (como polvos, pomadas o gotas), bucal, como aerosol oral o nasal, o similares, dependiendo de la gravedad de la infección que se esté tratando. Además de los compuestos activos, las formas de dosificación líquidas pueden contener diluyentes inertes comúnmente utilizados en la técnica como, por ejemplo, agua u otros disolventes, agentes solubilizantes y emulsionantes como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, dimetilformamida, aceites (en particular, aceites de algodón, cacahuete, maíz, germen, oliva, ricino y sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácidos grasos de sorbitán, y mezclas de los mismos.

[0162] Las formas de dosificación líquidas para administración oral incluyen, entre otras, emulsiones, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables. Además de los compuestos activos, las formas de dosificación líquidas pueden contener diluyentes inertes comúnmente utilizados en la técnica como, por ejemplo, agua u otros disolventes, agentes solubilizantes y emulsionantes como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, dimetilformamida, aceites (en particular, aceites de algodón, cacahuete, maíz, germen, oliva, ricino y sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácidos grasos de sorbitán, y mezclas de los mismos. Además de diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes como agentes humectantes, emulsionantes y agentes de suspensión, edulcorantes, saborizantes y perfumantes.

[0163] Las preparaciones inyectables, por ejemplo, las suspensiones acuosas u oleaginosas inyectables estériles pueden formularse según la técnica conocida utilizando agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución, suspensión o emulsión inyectable estéril en un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo, como una solución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse se encuentran el agua, la solución de Ringer, el U.S.P. y la solución isotónica de cloruro sódico. Además, los aceites fijos estériles se emplean convencionalmente como disolvente o medio de suspensión. Para ello, puede emplearse cualquier aceite fijo insípido, incluidos los mono o diglicéridos sintéticos. Además, en la preparación de inyectables se utilizan ácidos grasos como el ácido oleico.

[0164] Las formulaciones inyectables pueden esterilizarse, por ejemplo, por filtración a través de un filtro que retenga bacterias, o incorporando agentes esterilizantes en forma de composiciones sólidas estériles que puedan disolverse o dispersarse en agua estéril u otro medio inyectable estéril antes de su uso.

[0165] Para prolongar el efecto de un compuesto de la presente invención, a menudo es deseable ralentizar la absorción del compuesto a partir de la inyección subcutánea o intramuscular. Esto puede lograrse mediante el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo con poca solubilidad en agua. La velocidad de absorción del compuesto depende entonces de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño del cristal y de la forma cristalina. Alternativamente, la absorción retardada de una forma compuesta administrada parenteralmente se logra disolviendo o suspendiendo el compuesto en un vehículo oleoso. Las formas de depósito inyectables se fabrican formando matrices de microencápsulas del compuesto en polímeros biodegradables como la polilactida-poliglicolida. Dependiendo de la proporción entre compuesto y polímero y de la naturaleza del polímero empleado, puede controlarse la velocidad de liberación del compuesto. Algunos ejemplos de otros polímeros biodegradables son los poli(ortoésteres) y los poli(anhídridos). Las formulaciones inyectables de depósito también se preparan atrapando el compuesto en liposomas o microemulsiones compatibles con los tejidos corporales.

[0166] Las composiciones para administración rectal o vaginal son preferentemente supositorios que pueden prepararse mezclando los compuestos de esta invención con excipientes o portadores no irritantes adecuados, como manteca de cacao, polietilenglicol o una cera para supositorios, que son sólidos a temperatura ambiente pero líquidos a temperatura corporal y, por lo tanto, se funden en el recto o la cavidad vaginal y liberan el compuesto activo.

[0167] Las formas farmacéuticas sólidas para administración oral incluyen cápsulas, tabletas, píldoras, polvos y gránulos. En tales formas farmacéuticas sólidas, el compuesto activo se mezcla con al menos un excipiente o portador inerte, farmacéuticamente aceptable, como citrato sódico o fosfato dicálcico y/o a) cargas o extensores como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y ácido silícico, b) aglutinantes como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y acacia, c) humectantes como glicerol, d) agentes desintegradores como agar-agar, carbonato cálcico, almidón de patata o de tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos y carbonato sódico, e) agentes retardadores de la disolución como la parafina, f) aceleradores de la absorción como los compuestos de amonio cuaternario, g) agentes humectantes como, por ejemplo, el alcohol cetílico y el monoestearato de glicerol, h) absorbentes como el caolín y la arcilla bentonita, e i) lubricantes como el talo, el estearato de calcio, el estearato de magnesio, los polietilenglicoles sólidos, el lauril sulfato de sodio y sus mezclas. En el caso de cápsulas, comprimidos y píldoras, la forma farmacéutica también puede contener agentes tamponadores.

[0168] Las composiciones sólidas de tipo similar también pueden emplearse como relleno en cápsulas de gelatina blandas y duras utilizando excipientes como la lactosa o el azúcar de la leche, así como polietilenglicoles de alto peso molecular y similares. Las formas farmacéuticas sólidas de comprimidos, grageas, cápsulas, píldoras y gránulos pueden prepararse con recubrimientos y envolturas tales como recubrimientos entéricos y otros recubrimientos bien conocidos en el arte de la formulación farmacéutica. Opcionalmente, pueden contener agentes opacificantes y también pueden tener una composición tal que liberen el principio o principios activos sólo, o preferentemente, en una determinada parte del tracto intestinal, opcionalmente, de forma retardada. Ejemplos de composiciones de incrustación que pueden utilizarse incluyen sustancias poliméricas y ceras. Las composiciones sólidas de tipo similar también pueden emplearse como relleno en cápsulas de gelatina blanda y dura utilizando excipientes como la lactosa o el azúcar de la leche, así como polietilenglicoles de alto peso molecular y similares.

[0169] Los compuestos activos también pueden estar en forma microencapsulada con uno o más excipientes, como se señaló anteriormente. Las formas farmacéuticas sólidas de comprimidos, grageas, cápsulas, píldoras y gránulos pueden prepararse con recubrimientos y envolturas tales como recubrimientos entéricos, recubrimientos que controlan la liberación y otros recubrimientos bien conocidos en el arte de la formulación farmacéutica. En tales formas farmacéuticas sólidas, el compuesto activo puede mezclarse con al menos un diluyente inerte, como sacarosa, lactosa o almidón. Dichas formas farmacéuticas también pueden contener, como es habitual, sustancias adicionales distintas de los diluyentes inertes, por ejemplo, lubricantes y otros coadyuvantes, como estearato de magnesio y celulosa microcristalina. En el caso de cápsulas, comprimidos y píldoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes tamponadores. Opcionalmente, pueden contener agentes opacificantes y también pueden tener una composición tal que liberen el principio o principios activos sólo, o preferentemente, en una determinada parte del tracto intestinal, opcionalmente, de forma retardada. Ejemplos de composiciones de incrustación que pueden utilizarse incluyen sustancias poliméricas y ceras.

[0170] Las formas de dosificación para la administración tópica o transdérmica de un compuesto de esta invención incluyen pomadas, pastas, cremas, lociones, geles, polvos, soluciones, aerosoles, inhalantes o parches. El componente activo se mezcla en condiciones estériles con un soporte farmacéuticamente aceptable y los conservantes o tampones necesarios. La formulación oftálmica, las gotas para los oídos y las gotas para los ojos también se contemplan dentro del alcance de esta invención. Además, la presente invención contempla el uso de parches transdérmicos, que tienen la ventaja añadida de proporcionar un suministro controlado de un compuesto al organismo. Dichas formas farmacéuticas pueden fabricarse disolviendo o dosificando el compuesto en el medio adecuado. También pueden utilizarse potenciadores de la absorción para aumentar el flujo del compuesto a través de la piel. La velocidad puede controlarse proporcionando una membrana de control de velocidad o dispersando el compuesto en una matriz polimérica o gel.

[0171] El término "muestra biológica", tal como se utiliza aquí, incluye, sin limitación, cultivos celulares o extractos de los mismos; material de biopsia obtenido de un mamífero o extractos de los mismos; y sangre, saliva, orina, heces, semen, lágrimas u otros fluidos corporales o extractos de los mismos.

[0172] En otras realizaciones, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método para tratar un trastorno mediado por mTORC1 en un paciente que lo necesite, que comprende el paso de administrar a dicho paciente un compuesto según la presente invención o una composición farmacéuticamente aceptable del mismo. Dichos trastornos se describen detalladamente en el presente documento.

[0173] Dependiendo de la condición particular, o enfermedad, a ser tratada, agentes terapéuticos adicionales que son normalmente administrados para tratar esa condición, pueden también estar presentes en las composiciones de esta invención. Tal como se utilizan en el presente documento, los agentes terapéuticos adicionales que se administran normalmente para tratar una enfermedad o afección concreta se conocen como "apropiados para la enfermedad o afección que se está tratando".

[0174] Un compuesto de la presente invención también puede usarse ventajosamente en combinación con otros compuestos antiproliferativos. Dichos compuestos antiproliferativos incluyen, entre otros, inhibidores de la aromatasa; antiestrógenos; inhibidores de la topoisomerasa I; inhibidores de la topoisomerasa II; compuestos activos microtubulares; compuestos alquilantes; inhibidores de la histona desacetilasa; compuestos que inducen procesos de diferenciación celular; inhibidores de la ciclooxigenasa; inhibidores de la MMP; inhibidores de la mTOR; antimetabolitos antineoplásicos; compuestos platínicos; compuestos dirigidos contra una proteína o lípido quinasa o que disminuyen su actividad y otros compuestos antiangiogénicos; compuestos dirigidos contra una proteína o lípido fosfatasa o que disminuyen o inhiben su actividad; agonistas de la gonadorelina; antiandrógenos; inhibidores de la metionina aminopeptidasa; inhibidores de la metaloproteinasa de matriz; bifosfonatos; modificadores de la respuesta biológica; anticuerpos antiproliferativos; inhibidores de la heparanasa; inhibidores de las isoformas oncogénicas de Ras; inhibidores de la telomerasa; inhibidores del proteasoma; compuestos utilizados en el tratamiento de neoplasias hematológicas; compuestos dirigidos contra Flt-3, que disminuyen o inhiben su actividad; Inhibidores de Hsp90 como 17-AAG (17-alilaminogeldanamicina, NSC330507), 17-DMAG (17-dimetilaminoetilamino-17-demetoxi-geldanamicina, NSC707545), IPI-504, CNF1010, CNF2024, CNF1010 de Conforma Therapeutics; temozolomida (Temodal®); inhibidores de la proteína huso kinesina, como SB715992 o SB743921 de GlaxoSmithKline, o pentamidina/clorpromazina de CombinatoRx; inhibidores de MEK como ARRY142886 de Array BioPharma, AZD6244 de AstraZeneca, PD181461 de Pfizer y leucovorina. El término "inhibidor de la aromatasa", tal como se utiliza aquí, se refiere a un compuesto que inhibe la producción de estrógenos, por ejemplo, la conversión de los sustratos androstenediona y testosterona en estrona y estradiol, respectivamente. El término incluye, pero no se limita a esteroides, especialmente atamestano, exemestano y formestano y, en particular, no esteroides, especialmente aminoglutetimida, rogletimida, piridoglutetimida, trilostano, testolactona, ketokonazol, vorozol, fadrozol, anastrozol y letrozol. El exemestano se comercializa con el nombre comercial de Aromasin™. El formestano se comercializa con el nombre comercial de Lentaron™. El fadrozol se comercializa con el nombre comercial de Afema™. El anastrozol se comercializa con el nombre comercial de Arimidex™. El letrozol se comercializa con los nombres comerciales Femara™ o Femar™. La aminoglutetimida se comercializa con el nombre comercial de Orimeten™. Una combinación de la invención que comprende un agente quimioterapéutico que es un inhibidor de la aromatasa es particularmente útil para el tratamiento de tumores con receptores hormonales positivos, como los tumores de mama.

[0175] El término "antiestrógeno", tal como se utiliza aquí, se refiere a un compuesto que antagoniza el efecto de los estrógenos a nivel del receptor de estrógeno. El término incluye, entre otros, tamoxifeno, fulvestrant, raloxifeno y clorhidrato de raloxifeno. El tamoxifeno se comercializa con el nombre comercial de Nolvadex™. El hidrocloruro de raloxifeno se comercializa con el nombre comercial de Evista™. El fulvestrant puede administrarse bajo el nombre comercial de Faslodex™. Una combinación de la invención que comprende un agente quimioterapéutico que es un antiestrógeno es particularmente útil para el tratamiento de tumores con receptores de estrógeno positivos, como los tumores de mama.

[0176] El término "antiandrógeno", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a cualquier sustancia capaz de inhibir los efectos biológicos de las hormonas androgénicas e incluye, entre otras, la bicalutamida (Casodex™). El término "agonista de la gonadorelina" utilizado en el presente documento incluye, entre otros, abarelix, goserelina y acetato de goserelina. La goserelina puede administrarse bajo el nombre comercial de Zoladex™.

[0177] El término "inhibidor de la topoisomerasa I", tal como se utiliza en el presente documento, incluye, entre otros, topotecán, gimatecán, irinotecán, camptotecán y sus análogos, 9-nitrocamptotecán y el conjugado macromolecular de camptotecán PNU-166148. El irinotecán puede administrarse,por ejemplo,en la forma en que se comercializa, por ejemplo, bajo la marca comercial Camptosar™. El topotecán se comercializa con el nombre comercial de Hycamptin™.

[0178] El término "inhibidor de la topoisomerasa II", tal como se utiliza aquí, incluye, pero no se limita a las antraciclinas como la doxorrubicina (incluida la formulación liposomal, como Caelyx™), daunorrubicina, epirrubicina, idarrubicina y nemorrubicina, las antraquinonas mitoxantrona y losoxantrona, y las podofilotoxinas etopósido y tenipósido. El etopósido se comercializa con el nombre comercial de Etopophos™. Teniposide se comercializa bajo el nombre comercial VM 26-Bristol Doxorubicina se comercializa bajo el nombre comercial Acriblastin ™ o Adriamycin™. La epirubicina se comercializa con el nombre comercial de Farmorubicin™. La idarubicina se comercializa bajo el nombre comercial de Zavedos™. La mitoxantrona se comercializa con el nombre comercial de Novantron.

[0179] Los agentes activos microtubulares incluyen compuestos estabilizadores y desestabilizadores de microtúbulos e inhibidores de la polimerización de la microtubulina, incluidos, entre otros, taxanos, como paclitaxel y docetaxel; alcaloides de vinca, como vinblastina, sulfato de vinblastina, vincristina y sulfato de vincristina, y vinorelbina; discodermólidos; cochicina y epotilonas y sus derivados. El paclitaxel se comercializa con el nombre comercial de Taxol™. El docetaxel se comercializa con el nombre comercial de Taxotere™. El sulfato de vinblastina se comercializa bajo el nombre comercial Vinblastin R.P™. El sulfato de vincristina se comercializa con el nombre comercial de Farmistin™.

[0180 ] El término "agente alquilante", tal como se utiliza aquí, incluye, entre otros, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalán o nitrosourea (BCNU o Gliadel). La ciclofosfamida se comercializa con el nombre comercial de Cyclostin™. La ifosfamida se comercializa con el nombre comercial de Holoxan™.

[0181 ] El término "inhibidores de la histona deacetilasa" o "inhibidores HDAC" se refiere a compuestos que inhiben la histona deacetilasa y que poseen actividad antiproliferativa. Esto incluye, entre otros, el ácido hidroxámico de suberoilanilida (SAHA).

[0182] El término "antimetabolito antineoplásico" incluye, entre otros, el 5-fluorouracilo o 5-FU, la capecitabina, la gemcitabina, los compuestos desmetilantes del ADN, como la 5-azacitidina y la decitabina, el metotrexato y el edatrexato, y los antagonistas del ácido fólico, como el pemetrexed. La capecitabina se comercializa con el nombre comercial de Xeloda™. La gemcitabina se comercializa con el nombre comercial de Gemzar™.

[0183 ] El término "compuesto de platino" como se usa aquí incluye, pero no se limita a, carboplatino, cis-platino, cisplatino y oxaliplatino. El carboplatino puede administrarse, porejemplo,en la forma en que se comercializa,por ejemplo,bajo la marca Carboplat™. El oxaliplatino puede administrarse, porejemplo,en la forma en que se comercializa,por ejemplo,bajo la marca comercial Eloxatin™.

[0184] El término «compuestos dirigidos a/que disminuyen la actividad de una proteína o lípido quinasa; o una proteína o lípido fosfatasa; o compuestos antiangiogénicos adicionales», tal como se utiliza en el presente documento, incluye, pero no se limita a, inhibidores de proteína tirosina quinasa y/o serina y/o treonina quinasa o inhibidores de lípido quinasa, tales como a) compuestos dirigidos a, que disminuyen o inhiben la actividad de los receptores del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR), como compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad del PDGFR, especialmente compuestos que inhiben el receptor PDGF, como un derivado de N-fenil-2-pirimidina-amina, como imatinib, SU101, SU<6 6 6 8>y GFB-111; b) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de los receptores del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR); c) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad del receptor I del factor de crecimiento similar a la insulina (IGF-IR), como compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad del IGF-IR, especialmente compuestos que inhiben la actividad quinasa del receptor IGF-I, o anticuerpos que se dirigen al dominio extracelular del receptor IGF-I o sus factores de crecimiento; d) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de la familia de receptores tirosina quinasa Trk, o inhibidores de la efrina B4; e) compuestos dirigidos, que disminuyan o inhiban la actividad de la familia de receptores tirosina quinasa AxI; f) compuestos dirigidos, que disminuyan o inhiban la actividad del receptor tirosina quinasa Ret; g) compuestos dirigidos, que disminuyan o inhiban la actividad del receptor tirosina quinasa Kit/SCFR, como el imatinib; h) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de las tirosina quinasas del receptor C-kit, que forman parte de la familia PDGFR, como los compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de la familia tirosina quinasa del receptor c-Kit, especialmente los compuestos que inhiben el receptor c-Kit, como el imatinib; i) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de los miembros de la familia c-Abl, sus productos de fusión génica (por ejemplo, BCR-Abl quinasa) y mutantes, como compuestos dirigidos a disminuir o inhibir la actividad de miembros de la familia c-Abl y sus productos de fusión génica, como un derivado de N-fenil-2-pirimidina-amina, como imatinib o nilotinib (AMN107); PD180970; AG957; NSC 680410; PD173955 de ParkeDavis; o dasatinib (BMS-354825); j) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de miembros de la familia de la proteína quinasa C (PKC) y Raf de serina/treonina quinasas, miembros de la familia MEK, SRC, JAK/pan-JAK, FAK, PDK1, PKB/Akt, Ras/MAPK, PI3K, SYK, TYK2, BTK y TEC, y/o miembros de la familia de la quinasa dependiente de ciclina (CDK) incluidos los derivados de estaurosporina, como la midostaurina; otros ejemplos de compuestos son UCN-01, safingol, BAY 43-9006, briostatina 1, perifosina; llmofosina; RO 318220 y RO 320432; GO 6976; lsis 3521; LY333531/LY379196; compuestos de isoquinolina; FTI; PD184352 o QAN697 (un inhibidor de P13K) o AT7519 (inhibidor de CDK); k) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de los inhibidores de la proteína tirosina quinasa, como los compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de los inhibidores de la proteína tirosina quinasa, como el mesilato de imatinib (Gleevec™) o la tirfostina, como la Tirfostina A23/RG-50810; AG 99; Tirfostina AG 213; Tirfostina AG 1748; Tirfostina AG 490; Tirfostina B44; enantiómero Tirfostina B44 (+); Tirfostina AG 555; AG 494; Tirfostina AG 556, AG957 y adafostina (4-{[(2,5-dihidroxifenil)metil] amino}-éster adamantílico del ácido benzoico; NSC 680410, adafostina); 1) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de la familia del factor de crecimiento epidérmico de receptores tirosina quinasas (EGFR1 ErbB2, ErbB3, ErbB4 como homo- o heterodímeros) y sus mutantes, tales como compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de la familia del receptor del factor de crecimiento epidérmico son especialmente compuestos, proteínas o anticuerpos que inhiben miembros de la familia del receptor tirosina quinasa del EGF, como los receptores EGF, ErbB2, ErbB3 y ErbB4 o que se unen al EGF o a ligandos relacionados con el EGF, CP 358774, ZD 1839, ZM 105180; trastuzumab (Herceptin™), cetuximab (Erbitux™), Iressa, Tarceva, OSI-774, Cl-1033, EKB-569, GW-2016, E1. 1, E2.4, E2.5, E6.2, E6.4, E2.11, E6.3 o E7.6. 3, y derivados de 7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidina; m) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad del receptor de c-Met, como compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de c-Met, especialmente compuestos que inhiben la actividad quinasa del receptor de c-Met, o anticuerpos que se dirigen al dominio extracelular de c-Met o se unen a HGF, n) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad quinasa de uno o más miembros de la familia JAK (JAK1/JAK2/JAK3/TYK2 y/o pan-JAK), incluidos, entre otros, PRT-062070, SB-1578, baricitinib, pacritinib, momelotinib, VX-509, AZD-1480, TG-101348, tofacitinib y ruxolitinib; o) compuestos dirigidos, que disminuyen o inhiben la actividad quinasa de la PI3 quinasa (PI3K), incluidos, entre otros, ATU-027, SF-1126, DS-7423, PBI-05204, GSK-2126458, ZSTK-474, buparlisib, pictrelisib, PF-4691502, BYL-719, dactolisib, XL-147, XL-765 e idelalisib; y; y q) compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben los efectos de señalización de las vías de la proteína erizo (Hh) o del receptor liso (SMO), incluidos, entre otros, ciclopamina, vismodegib, itraconazol, erismodegib e IPI-926 (saridegib).

[0185] El término "inhibidor de PI3K" como se usa en el presente documento incluye, pero no se limita a compuestos que tienen actividad inhibitoria contra una o más enzimas de la familia fosfatidilinositol-3-quinasa, incluyendo, pero sin limitarse a PI3Ka, PI3Ky, PI3K5, PI3Kp, PI3K-C2a, PI3K-C2p, PI3K-C2y, Vps34, p110-a, p110-p, p110-Y, p110-5, p85-a, p85-p, p55-Y, p150, p101, y p87. Ejemplos de inhibidores de PI3K útiles en esta invención incluyen, entre otros, ATU-027,<s>F1126, DS-7423, PBI-05204, GSK-2126458, ZSTK-474, buparlisib, pictrelisib, PF-4691502, BYL-719, dactolisib, XL-147, XL-765 e idelalisib.

[0186] El término "inhibidor de Bcl-2", tal como se utiliza en el presente documento, incluye, entre otros, compuestos con actividad inhibitoria contra la proteína del linfoma de células B 2 (Bcl-2), incluidos, entre otros, ABT-199, ABT-731, ABT-737, apogosipol, inhibidores pan-Bcl-2 de Ascenta's pan-Bcl-2 inhibitors, curcumin (and analogs thereof), dual Bcl-2/BclxL inhibitors (Infinity Pharmaceuticals/Novartis Pharmaceuticals), Genasense (G3139), HA14-1 (and analogs thereof;seeWO 2008/118802), navitoclax (y sus análogos,véase

Publ. de Solicitud de Pat. de EE. UU. N° 7.390.799), NH-1 (Universidad Farmacéutica Shenayng), obatoclax (y sus análogos, véase

WO 2004/106328), S-001 (Gloria Pharmaceuticals), compuestos de la serie TW (Univ. de Michigan) y venetoclax. En algunas realizaciones, el inhibidor de Bcl-2 es una pequeña molécula terapéutica. En algunas realizaciones, el inhibidor de Bcl-2 es un peptidomimético.

[0187] El término "inhibidor de BTK" como se usa aquí incluye, pero no está limitado a compuestos que tienen actividad inhibitoria contra la Tirosina Quinasa de Bruton (BTK), incluyendo, pero no limitado a AVL-292 e ibrutinib.

[0188] El término "inhibidor de SYK" tal como se usa aquí incluye, pero no se limita a compuestos que tienen actividad inhibitoria contra la tirosina quinasa del bazo (SYK), incluyendo pero no limitándose a PRT-062070, R-343, R-333, Excellair, PRT-062607, y fostamatinib.

[0189] En los documentos WO 2008/039218 y WO 2011/090760 pueden encontrarse otros ejemplos de compuestos inhibidores de la BTK y de afecciones tratables con dichos compuestos en combinación con compuestos de la presente invención.

[0190] En los documentos WO 2003/063794, WO 2005/007623 y WO 2006/078846 pueden encontrarse otros ejemplos de compuestos inhibidores de SYK y afecciones tratables con dichos compuestos en combinación con compuestos de la presente invención.

[0191] Se pueden encontrar otros ejemplos de compuestos inhibidores de PI3K y afecciones tratables con dichos compuestos en combinación con compuestos de la presente invención, en los documentos WO 2004/019973, WO 2004/089925, WO 2007/016176 y Pat. de EE. UU. N° 8.138.347, WO 2002/088112, WO 2007/084786, WO 2007/129161, WO 2006/122806, WO 2005/113554 y WO 2007/044729.

[0192] En los documentos WO 2009/114512, WO 2008/109943, WO 2007/053452, WO 2000/142246 y WO 2007/070514 pueden encontrarse otros ejemplos de compuestos inhibidores de JAK y afecciones tratables con dichos compuestos en combinación con compuestos de la presente invención.

[0193] Otros compuestos antiangiogénicos incluyen compuestos que tienen otro mecanismo para su actividad, por ejemplo , no relacionado con la inhibición de la proteína o lípido quinasa,por ejemplo,talidomida (Thalomid™) y TNP-470.

[0194] Ejemplos de inhibidores del proteasoma útiles para su uso en combinación con compuestos de la invención incluyen, pero no se limitan a bortezomib, disulfiram, epigalocatequina-3-galato (EGCG), salinosporamida A, carfilzomib, ONX-0912, CEP-18770, y MLN9708.

[0195] Los compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de una fosfatasa proteica o lipídica son, por ejemplo, inhibidores de la fosfatasa 1, fosfatasa 2<a>o CDC25, como el ácido okadaico o un derivado del mismo.

[0196] Los compuestos que inducen procesos de diferenciación celular incluyen, entre otros, el ácido retinoico, el a-<y>- o<8>- tocoferol o el a- y- o 5-tocotrienol.

[0197] El término inhibidor de la ciclooxigenasa, tal como se utiliza en el presente documento, incluye, entre otros, inhibidores de la Cox-2, ácido 2-arilaminofenilacético sustituido por 5-alquilo y derivados, como celecoxib (Celebrex™), rofecoxib (Vioxx™), etoricoxib, valdecoxib o un ácido 5-alquil-2-arilaminofenilacético, como el ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoroanilino)fenilacético, lumiracoxib.

[0198] El término "bifosfonatos", tal como se utiliza en el presente documento, incluye, entre otros, el ácido etridónico, clodrónico, tiludrónico, pamidrónico, alendrónico, ibandrónico, risedrónico y zoledrónico. El ácido etridónico se comercializa con el nombre comercial de Didronel™. El ácido clodrónico se comercializa con el nombre comercial de Bonefos™. El ácido tiludrónico se comercializa con el nombre comercial de Skelid™. El ácido pamidrónico se comercializa con el nombre comercial de Aredia™. El ácido alendrónico se comercializa con el nombre comercial de Fosamax™. El ácido ibandrónico se comercializa con el nombre comercial de Bondranat™. El ácido risedrónico se comercializa con el nombre comercial Actonel™. El ácido zoledrónico se comercializa con el nombre comercial de Zometa™. El término "inhibidores de mTOR" se refiere a compuestos que inhiben la diana de rapamicina en mamíferos (mTOR) y que poseen actividad antiproliferativa, como sirolimus (Rapamune®), everolimus (Certican™), CCI-779 y ABT578.

[0199] El término "inhibidor de la heparanasa", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la degradación del sulfato de heparina. El término incluye, entre otros, PI-<8 8>. El término "modificador de la respuesta biológica", tal como se utiliza aquí, se refiere a una linfoquina o a interferones.

[0200] El término "inhibidor de las isoformas oncogénicas de Ras", como H-Ras, K-Ras o N-Ras, tal como se utiliza en el presente documento se refiere a compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad oncogénica de Ras; por ejemplo, un "inhibidor de la farnesil transferasa" como L-744832, DK8G557 o R115777 (Zarnestra™). El término "inhibidor de la telomerasa", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de la telomerasa. Los compuestos que atacan, disminuyen o inhiben la actividad de la telomerasa son especialmente compuestos que inhiben el receptor de la telomerasa, como la telomestatina.

[0201] El término "inhibidor de la metionina aminopeptidasa", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de la metionina aminopeptidasa. Los compuestos que atacan, disminuyen o inhiben la actividad de la metionina aminopeptidasa incluyen, entre otros, la bengamida o un derivado de la misma.

[0202] El término "inhibidor del proteasoma", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad del proteasoma. Los compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad del proteasoma incluyen, pero no se limitan a, Bortezomib (Velcade™) y MLN 341.

[0203] El término "inhibidor de metaloproteinasa de matriz" o ("inhibidor de MMP") como se usa aquí incluye, pero no se limita a, inhibidores peptidomiméticos y no peptidomiméticos de colágeno, derivados de tetraciclina, porej,el inhibidor peptidomimético hidroxamato batimastat y su análogo biodisponible por vía oral marimastat (BB-2516), prinomastat (AG3340), metastat (NSC 683551) BMS-279251, BAY 12-9566, TAA211, MMI270B o AAJ996.

[0204] El término "compuestos utilizados en el tratamiento de neoplasias hematológicas" tal como se utiliza aquí incluye, pero no se limita a, inhibidores de tirosina quinasa similares a<f>M<s>, que son compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de los receptores de tirosina quinasa similares a FMS (Flt-3R); interferón, 1-p-D-arabinofuransilcitosina (ara-c) y bisulfán; e inhibidores de ALK, que son compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la linfoma quinasa anaplásica.

[0205] Los compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de los receptores tirosina quinasa similares a FMS (Flt-3R) son especialmente compuestos, proteínas o anticuerpos que inhiben a miembros de la familia de receptores quinasa Flt-3R, como PKC412, midostaurina, un derivado de estaurosporina, SU11248 y MLN518.

[0206] El término "inhibidores de HSP90", tal como se utiliza aquí, incluye, pero no se limita a, compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad ATPasa intrínseca de HSp90; que degradan, se dirigen, disminuyen o inhiben las proteínas cliente de HSP90 a través de la vía del proteosoma de ubiquitina. Los compuestos dirigidos, que disminuyen o inhiben la actividad ATPasa intrínseca de la HSP90 son especialmente compuestos, proteínas o anticuerpos que inhiben la actividad ATPasa de la HSP90, como la 17-alilamino,17-demetoxigeldanamicina (17AAG), un derivado de la geldanamicina; otros compuestos relacionados con la geldanamicina; el radicicol y los inhibidores de la HDAC.

[0207] El término "anticuerpos antiproliferativos", tal como se utiliza en el presente documento, incluye, entre otros, trastuzumab (Herceptin™), Trastuzumab-DM1, erbitux, bevacizumab (Avastin™), rituximab (Rituxan®), PRO64553 (anti-CD40) y anticuerpo 2C4. Por anticuerpos se entiende anticuerpos monoclonales intactos, anticuerpos policlonales, anticuerpos multiespecíficos formados a partir de al menos<2>anticuerpos intactos, y fragmentos de anticuerpos siempre que presenten la actividad biológica deseada.

[0208] Para el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (AML), los compuestos de la presente invención pueden usarse en combinación con terapias estándar contra la leucemia, especialmente en combinación con terapias usadas para el tratamiento de la AML. En particular, los compuestos de la presente invención pueden administrarse en combinación con, por ejemplo, inhibidores de la farnesil transferasa y/u otros fármacos útiles para el tratamiento de la LMA, como Daunorubicina, Adriamicina, Ara-C, VP-16, Tenipósido, Mitoxantrona, Idarubicina, Carboplatino y PKC412.

[0209] Otros compuestos antileucémicos incluyen, por ejemplo, Ara-C, un análogo de la pirimidina, que es el derivado 2 -alfa-hidroxi ribosa (arabinósido) de la desoxicitidina. También se incluye el análogo purínico de la hipoxantina, la<6>-mercaptopurina (<6>-MP) y el fosfato de fludarabina. Los compuestos que se dirigen, disminuyen o inhiben la actividad de los inhibidores de la histona deacetilasa (HDAC), como el butirato de sodio y el ácido hidroxámico suberoilanilida (SAHA), inhiben la actividad de las enzimas conocidas como histona deacetilasas. Entre los inhibidores específicos de HDAC se incluyen MS275, SAHA, FK228 (anteriormente FR901228), tricostatina A y compuestos divulgados en

Publ. de Solicitud de Pat. de EE. UU. No. 6,552,065 incluyendo, pero no limitado a,N-hidroxi-3-[4-[[2-(2-metil-1H-indol-3-//)-etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y N-hidroxi-3-[4-[(2-hidroxietil){2-(1H-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, especialmente la sal lactato. Los antagonistas del receptor de somatostatina, tal como se utilizan en el presente documento, se refieren a compuestos que se dirigen, tratan o inhiben el receptor de somatostatina, como octreotida y SOM230. Los enfoques que dañan las células tumorales se refieren a enfoques como la radiación ionizante. El término "radiación ionizante" mencionado anteriormente y en lo sucesivo se refiere a la radiación ionizante que se produce como rayos electromagnéticos (como los rayos X y los rayos gamma) o partículas (como las partículas alfa y beta). La radiación ionizante se proporciona en la radioterapia, pero no se limita a ella, y es conocida en la técnica(Véase Hellman, Principles of Radiation Therapy, Cancer, en Principles and Practice of Oncology, Devita et al., Eds., 4.a edición, Vol. 1, págs. 248 275 (1993)).

[0210] También se incluyen los aglutinantes EDG y los inhibidores de la ribonucleótido reductasa. El término "aglutinantes de e Dg ", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a una clase de inmunosupresores que modulan la recirculación de linfocitos, como FTY720. El término "inhibidores de la ribonucleótido reductasa" hace referencia a análogos de nucleósidos de pirimidina o purina, incluidos, entre otros, fludarabina y/o arabinósido de citosina (ara-C),<6>-tioguanina, 5-fluorouracilo, cladribina,<6>-mercaptopurina (especialmente en combinación con ara-C contra la LLA) y/o pentostatina. Los inhibidores de la ribonucleótido reductasa son especialmente la hidroxiurea o los derivados de la2-hidroxi- IH-isoindol-1,3-diona.

[0211] También se incluyen en particular aquellos compuestos, proteínas o anticuerpos monoclonales de VEGF tales como 1-(4-cloroanilino)-4-(4-piridilmetil)ftalazina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, succinato de 1-(4-cloroanilino)-4-(4-piridilmetil)ftalazina; Angiostatin™; Endostatin™; amidas de ácido antranílico; ZD4190; ZD6474; SU5416; SU<6 6 6 8>; bevacizumab; o anticuerpos anti-VEGF o anticuerpos anti-receptor de VEGF, como rhuMAb y RHUFab, aptámero de VEGF como Macugon; inhibidores de FLT-4, inhibidores de FLT-3, anticuerpo IgGI de VEGFR-2, Angiozyme (RPI 4610) y Bevacizumab (Avastin™).

[0212] La terapia fotodinámica, tal como se utiliza aquí, se refiere a la terapia que utiliza ciertas sustancias químicas conocidas como compuestos fotosensibilizantes para tratar o prevenir cánceres. Ejemplos de terapia fotodinámica incluyen el tratamiento con compuestos, como Visudyne™ y porfimer sódico.

[0213] Los esteroides angiostáticos utilizados en el presente documento se refieren a compuestos que bloquean o inhiben la angiogénesis, como, por ejemplo, anecortave, triamcinolona, hidrocortisona, 11-a-epihidrocortisol, cortexolona, 17ahidroxiprogesterona, corticosterona, desoxicorticosterona, testosterona, estrona y dexametasona.

[0214] Los implantes que contienen corticosteroides se refieren a compuestos como la fluocinolona y la dexametasona.

[0215] Otros compuestos quimioterapéuticos incluyen, entre otros, alcaloides vegetales, compuestos hormonales y antagonistas; modificadores de la respuesta biológica, preferentemente linfoquinas o interferones; oligonucleótidos antisentido o derivados de oligonucleótidos; ARNhc o ARNsi; o compuestos diversos o compuestos con otro mecanismo de acción o desconocido.

[0216] La estructura de los compuestos activos identificados por números de código, nombres genéricos o comerciales puede tomarse de la edición actual del compendio estándar "The Merck Index" o de bases de datos, porejemplo,Patents Internationalfpor ejemplo, IMS World Publications).

[0217] Un compuesto de la presente invención también puede utilizarse en combinación con procesos terapéuticos conocidos, por ejemplo, la administración de hormonas o radiación. En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado se utiliza como radiosensibilizador, especialmente para el tratamiento de tumores que muestran una escasa sensibilidad a la radioterapia.

[0218] Un compuesto de la presente invención puede administrarse solo o en combinación con uno o más compuestos terapéuticos, pudiendo adoptar la terapia combinada la forma de combinaciones fijas o la administración de un compuesto de la invención y uno o más compuestos terapéuticos escalonados o administrados independientemente unos de otros, o la administración combinada de combinaciones fijas y uno o más compuestos terapéuticos. Un compuesto de la presente invención puede además o en adición ser administrado especialmente para terapia tumoral en combinación con quimioterapia, radioterapia, inmunoterapia, fototerapia, intervención quirúrgica, o una combinación de éstas. La terapia a largo plazo es igualmente posible, al igual que la terapia adyuvante en el contexto de otras estrategias de tratamiento, como se ha descrito anteriormente. Otros tratamientos posibles son la terapia para mantener el estado del paciente tras la regresión del tumor, o incluso la terapia quimiopreventiva, por ejemplo en pacientes de riesgo.

[0219] Dichos agentes adicionales pueden administrarse por separado de una composición que contenga un compuesto inventivo, como parte de un régimen de dosificación múltiple. Alternativamente, dichos agentes pueden formar parte de una única forma de dosificación, mezclados junto con un compuesto de esta invención en una única composición. Si se administran como parte de un régimen de dosificación múltiple, los dos agentes activos pueden someterse simultáneamente, secuencialmente o dentro de un periodo de tiempo uno del otro, normalmente dentro de las cinco horas siguientes.

[0220] Como se usa aquí, el término "combinación", "combinado" y términos relacionados se refiere a la administración simultánea o secuencial de agentes terapéuticos de acuerdo con esta invención. Por ejemplo, un compuesto de la presente invención puede administrarse con otro agente terapéutico simultánea o secuencialmente en formas farmacéuticas unitarias separadas o juntas en una única forma farmacéutica unitaria. En consecuencia, la presente invención proporciona una forma de dosificación unitaria única que comprende un compuesto de la presente invención, un agente terapéutico adicional y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.

[0221] La cantidad tanto de un compuesto inventivo como de un agente terapéutico adicional (en aquellas composiciones que comprenden un agente terapéutico adicional como se ha descrito anteriormente) que puede combinarse con los materiales portadores para producir una única forma de dosificación variará dependiendo del huésped tratado y del modo particular de administración. Preferentemente, las composiciones de esta invención deben formularse de modo que pueda administrarse una dosis de entre<0 , 01 - 1 0 0>mg/kg de peso corporal/día de un compuesto inventivo.

[0222] En aquellas composiciones que comprenden un agente terapéutico adicional, ese agente terapéutico adicional y el compuesto de esta invención pueden actuar sinérgicamente. Por lo tanto, la cantidad de agente terapéutico adicional en dichas composiciones será menor que la requerida en una monoterapia que utilice únicamente ese agente terapéutico. En tales composiciones puede administrarse una dosis de entre 0,01 - 1.000 pg/kg de peso corporal/día del agente terapéutico adicional.

[0223] La cantidad de agente terapéutico adicional presente en las composiciones de esta invención no será mayor que la cantidad que normalmente se administraría en una composición que comprenda ese agente terapéutico como único agente activo. Preferiblemente, la cantidad de agente terapéutico adicional en las composiciones actualmente divulgadas oscilará entre el 50% y el 100% de la cantidad normalmente presente en una composición que comprenda dicho agente como único agente terapéuticamente activo.

[0224] En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional administrado en combinación con un compuesto de la presente invención es otro inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR adicional inhibe mTOR uniéndose al sitio activo catalítico de mTOR. Ejemplos de estos inhibidores adicionales de mTOR son: dactolisib,<8>-(<6>-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (WO 2006/122806), vistusertib (AZD2014; WO 2009/153597); AZD8055 (WO 2009/153597; XL388 ( Pat. de EE. UU. Pat. de EE.UU. Pub. de EE. UU. 2010/0305093); sapanisertib (MLN0128; INK128; WO 2015/051043); DS3078; apitolisib (GDC0980; WO 2008/070740); omipalisib (GSK-2126458; WO 2008/14446); NVP-BGT226 (Chang, K.Y., et al., Clin. Cancer Res., 2002, 62, 7291-7297(19):5665-9, 2007. 17(22): 7116-26 (2011)); voxtalisib (XL765; SAR245409; WO 2007/044813); PF04691502 (WO 2008/032162); gedatolisib (PF05212384; PKI-587; WO 2009/143313); SF1126 (WO 2004/089925); GSK1059615 (WO 2007/136940); BI-860585; OSI 027 (WO 2007/061737); VS 5584 (WO 2010/114484); CC-223 (WO 2010/062571); DCBCI-0901 (Lee, Y.E., et al., Mol. Canc. Thera. SUPL. Abstract nr C270 (2013)):); LY3023414 (WO 2012/097039); P529 (WO 2007/133249); panulisib (P7170; WO 2012/007926); DS-7423 (Kashiyama, T., et al., PLoS One 9(2): e87220 (2014)); mesilato de PWT33567 (VCD-597; WO 2010/110685); ME-344 (NV-128; Navarro, P., et al., Cell Rep. 15(12):2705-18 (2016)); ABTL0812 (WO 2010/106211); WYE-132; EXEL-3885 (Eur J Cancer Suppl. 6(12): Abst 322 (2008)); EXEL-4431 (Eur J Cancer Suppl. 6(12): Abst 322 (2008)); AR-mTOR-26 (101st Annu Meet Am Assoc Cancer Res (A<a>C<r>) (17-21 de abril, Washington, D.C.) 2010, Abst 4484); NV-128 (A.B. Alvero et al., Mol Cancer Ther. 10(8): 1385-93 (2011)); salinomycin (VS-507; Gupta, P.B., et al., Cell 138(4): 645-59 (2009)); BN-107; BN-108; WAY-600; WYE-687; WYE-354 (Yu, K., et al., Cancer Res. 69(15): 6232-40 (2009)); Ku-063794 (Garcia-Martinez, J.M., et al., Biochem. J. 421(1): 29-42 (2009)); torkinib (PP242; Apsel, B., et al., Nat. Chem. Biol. 4(11): 691-99 (2008)); PP30; CZ415 (REF); INK1069; EXEL-2044; EXEL-7518; SB2158; SB2280; AR-mTOR-1 (Wallace, E.M., et al., Mol. Canc. Thera. SUPL. Abst. B267 (2009)).

[0225] La referencia a cualquier inhibidor de mTOR adicional particular en el presente documento también comprende cualquier sal farmacéuticamente aceptable, estereoisómeros, tautómeros, solvatos, hidratos y polimorfos de los mismos.

[0226] Los compuestos de esta invención, o composiciones farmacéuticas de los mismos, también pueden incorporarse en composiciones para recubrir un dispositivo médico implantable, como prótesis, válvulas artificiales, injertos vasculares, stents y catéteres. Los stents vasculares, por ejemplo, se han utilizado para superar la reestenosis (nuevo estrechamiento de la pared del vaso tras una lesión). Sin embargo, los pacientes que utilizan stents u otros dispositivos implantables corren el riesgo de que se formen coágulos o se activen las plaquetas. Estos efectos no deseados pueden prevenirse o mitigarse recubriendo previamente el dispositivo con una composición farmacéuticamente aceptable que comprenda un inhibidor de la quinasa. Los dispositivos implantables recubiertos con un compuesto de esta invención son otra realización de la presente invención.

EJEMPLIFICACIÓN

[0227] Como se representa en los Ejemplos a continuación, en ciertas realizaciones ejemplares, los compuestos se preparan de acuerdo con los siguientes procedimientos generales. Se apreciará que, aunque los métodos generales describen la síntesis de ciertos compuestos de la presente invención, los siguientes métodos generales, y otros métodos conocidos por un experto en la materia, pueden aplicarse a todos los compuestos y subclases y especies de cada uno de estos compuestos, como se describe en el presente documento(VéasetambiénLuengo, J.I. et al., Chem. Biol., 2(7): 471 81 (1995); and Grinfeld, A.A. et al., Tet. Lett., 35(37): 6835-38 (1994)). [0005] La invención se define en las reivindicaciones. Los ejemplos no comprendidos en el ámbito de las reivindicaciones se facilitan a título de referencia.

[0228] Lista de abreviaturas utilizadas en la sección experimental.

CH<3>CN: acetonitrile

DCE: dicloroetano

DCM: diclorometano

DIPEA: N,N-diisopropiletilamina

DMF: N,N-dimetilformamida

DMSO: dimetilsulfóxido

ESI: ionización por electrospray

EtOAc: acetato de etilo

EtOH: etanol

h: horas

HBr: bromuro de hidrógeno

HF: fluoruro de hidrógeno

HND-<8>: resina de intercambio iónico ácidafporejemplo,Amberlyst)

H2O: agua

HPLC: cromatografía líquida de alto rendimiento

MeOH: metanol

min: minutos

ml: mililitros

mM: millimolar

mmol: millimoles

MS: espectrometría de masas

N<2>: gas nitrógeno

NaHCO<3>: bicarbonato sódico

NaI: yoduro sódico

NaN<3>: azida sódica

NaOH: hidróxido de sodio

Na<2>SO<4>: sulfato de sodio

NH<4>Cl: cloruro de amonio

NMR: Resonancia Magnética Nuclear

°C: grados centígrados

prep-HPLC: cromatografía líquida preparativa de alta resolución

PPIi<3>: trifenilfosfina

p-TsOH: ácido para toluenosulfónico

rt: temperatura ambiente

TEA: trietilamina

TFA: ácido trifluoracético

THF: tetrahidrofurano

Ejemplo 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metN-etM]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (1-28, 1-29 y 1-30):

[0229]

Esquema sintético:

[0230]

[0231] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) e hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,52 g, 2,73 mmol) en THF (15 mL) a 25 °C se añadió 2-[2-(2-hidroxietoxi) etoxi) etanol (5 mL). La mezcla resultante se agitó durante 2 horas, después se añadió a una solución acuosa saturada de NaHCOs helada y se extrajo con EtOAc (30 mL * 3). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CHaCN/agua pura: 7:3) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-28: 0,19 g, 33,7% rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1054.4 [M+Na]+. 1,5 g de este material se enviaron a separación quiral, que proporcionó I-29 (0,6 mg) e I-30 (0,2 g).

[0232] El método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC (IC00CD-TB016)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 15 cm L

Fase móvil: Hexano/EtOH = 60/40 (V/V)

Caudal: 1,0 mL/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AD CP-HPLC-05

[0233] I-29:1H NMR (500 MHz, CDCls)<8>6.41 -6.20 (m, 2H), 6.13 (dd,J= 15.0, 10.3 Hz, 1H), 5.92 (dd,J= 32.7, 11.0 Hz, 1H), 5.51 (dd,J= 15.1, 8.9 Hz, 1H), 5.41 (d,J= 9.9 Hz, 1H), 5.27 (d,J= 5.3 Hz, 1H), 5.13 (dd,J= 26.5, 20.5 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.19 (t,J= 8.9 Hz, 1H), 3.92 (d,J= 36.4 Hz, 1H), 3.80 - 3.51 (m, 12H), 3.50 - 3.24 (m, 12H), 2.87-2.51 (m,<6>H), 2.29 (t,J= 34.7 Hz, 2H), 2.12 - 1.87 (m, 5H), 1.84 - 1.66 (m, 13H), 1.53 - 1.15 (m, 9H), 1.15 - 0.77 (m, 18H), 0.65 (dt,J= 20.2, 10.1 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 2: Síntesis de sal de ácido trifluoroacético de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-aminoetoxi)etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (1-39):

[0234]

Esquema sintético:

[0235]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: 2-(2-(2-bromoetoxi)etoxi)etanol:

[0236] Se añadió bromuro de hidrógeno (86,21 g, 1,07 mmol, 115 mL) a una solución de 2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etanol (100 g, 665,90 mmol) en tolueno (1,15 L) y la mezcla resultante se agitó a reflujo durante 18 horas, después se desechó la capa acuosa. La capa orgánica se lavó con solución acuosa de NaOH, se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en gel de sílice (MeOH:DCM = 1:20) para obtener 2-[2-(2-bromoetoxi)etoxi]etanol (20 g, 14% de rendimiento) como líquido. 1H NMR (400 MHz, CDCh)<8>3.83 (t,J= 6.2 Hz, 2H), 3.77 - 3.72 (m, 2H), 3.69 (s, 4H), 3.64 -3.61 (m, 2H), 3.49 (t,J= 6.1 Hz, 2H), 2.51 (t,J= 6.1 Hz, 1H).

Etapa 2: (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-bromoetoxi)etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona:

[0237] Se añadió 2-[2-(2-bromoetoxi)etoxi]etanol (0,12 g, 0,547 mmol, 2 mL) a una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) y ácido p-toluenosulfónico hidratado (0,5 g, 2,73 mmol) en THF (7 mL) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó durante 2 horas. A continuación se añadió solución acuosa de NaHCOs helada y la mezcla se extrajo con EtOAc (30 mL * 3). La fase orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía de fase inversa (C^CN/agua pura = 7:3) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R, 39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-bromoetoxi)etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35, 36,37,47,48-hexametil-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (0.2 g, 33,4% de rendimiento, 1HNMR muestra una impureza de rapamicina) como sólido blanco. MS (EI+,m/z):1116.4 [M+Na]+.

Etapa 3: (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-azidoetoxi)etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-68,69-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona:

[0238] Una solución de N aN (1,07 g, 16,44 mmol), Nal (0,33 g, 2.19 mmol) and (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-bromoetoxi)etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (0.6 g, 0,548 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a 60 °C durante 1,5 horas. La reacción se extinguió con EtOAc (50 mL) y la mezcla se lavó con solución acuosa de NH<4>Cl (20 mL), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C^CN/agua pura = 4:1) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-azidoetoxi) etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-68,69-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (0.3 g, 51,8% de rendimiento) como sólido amarillo claro. MS (EI+, m/z): 1079.4[M+Na]+.

Etapa 4: Sal de ácido trifluoroacético de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-aminoetoxi)etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona:

[0239] Se añadió lentamente trifenilfosfina (0,186 g, 0.7 mmol) se añadió lentamente a una solución de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-azidoetoxi) etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-68,69-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (0.25 g, 0,24 mmol) en THF (5 mL) trifenilfosfina. La solución resultante se agitó a 60°C durante 2 horas, y después se añadieron 0,05 mL de agua y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante<6>horas, concentrándose a continuación. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C ^C N / 0,02% TFA en agua (2:3) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-43-[2-[2-(2-aminoetoxi) etoxi]etoxi]-45,55-dihidroxi-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-39: 0,035 g, 14% rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1031.4[M+H]+. 1H NMR (500 MHz, DMSO-de)<8>7.82 (s, 3H), 6.42 (dd,J= 33.7, 19.3 Hz, 2H), 6.25 -6.09 (m, 2H), 5.46 (dd,J= 14.7, 9.7 Hz, 1H), 5.28 (s, 1H), 5.08 (d,J= 10.1 Hz, 1H), 5.00 -4.92 (m, 1H), 4.08 -3.92 (m, 2H), 3.78 (d,J= 11.6 Hz, 1H), 3.63 - 3.38 (m, 16H), 3.36 - 3.08 (m, 12H), 2.99 (dd,J= 22.3, 17.1 Hz, 2H), 2.87 - 2.73 (m, 2H), 2.37 (dd,J= 17.9, 8.4 Hz, 1H), 2.30-1.75(m, 4H), 1.7-1.49 (m, 15H), 1.51 - 1.01 (m,<6>H), 1.01- 0.65 (m, 18H), 0.63 -0.56 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 3: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41R,43S,46S,47R,48R,57S)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-46-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-36):

[0240]

Esquema sintético:

[0241]

Procedimientos y caracterización:

[0242] Se añadió 2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etanol (1,06 g, 5,47 mmol, 5 Ml) a una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) y ácido p-toluenosulfónico hidratado (0,21 g, 1,09 mmol) en THF (15 Ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante<2>horas, después se añadió a solución acuosa saturada de NaHCO<3>helada y se extrajo con EtOAc (30 Ml * 3). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. El crudo se purificó por cromatografía de fase inversa (CH<3>CN/agua pura = 3:2) para obtener (21E,23E,25E,26E,36R, 37S,38R,39R,41R,43S,46S,47R,48R,57S)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi) etoxi]etoxi]etoxi]-46-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-36: 0,15 g, 25,5% de rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1098.4[M+H]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh)<8>6.40 - 5.92 (m, 4H), 5.73 -5.35 (m, 3H), 5.25 -5.05 (m, 2H), 4.31 -4.12 (m, 1H), 3.97 (dd,J= 25.7, 6.3 Hz, 1H), 3.87 -3.53 (m, 15H), 3.52 -3.17 (m, 11H), 2.99 -2.46 (m,<6>H), 2.36 - 1.93 (m, 9H), 1.90 - 1.54 (m, 13H), 1.52 -1.17 (m, 9H), 1.15 -0.81 (m, 18H), 0.68 -0.58 (m, 1H).

Ejemplo 4: Síntesis de

(21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43R,45S,47R,48S,49R,50R,59S)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatnaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (1-35):

[0243]

Esquema sintético:

[0244]

Procedimientos y caracterización:

[0245] Se añadió 2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etanol (0,08 g, 0,33 mmol, 2 Ml) a una solución de rapamicina (0,3 g, 0,328 mmol) y ácido p-toluenosulfónico hidratado (0,31 g, 1,64 mmol) en THF<( 6>Ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante<2>horas, después se añadió a una solución acuosa saturada de NaHCO<3>helada y se extrajo con EtOAc (20 Ml * 3). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CHaCN/agua pura: 3:2) para obtener (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43R,45S,47R,48S,49R,50R,59S)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil -70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (I-35: 0,06 g, 16,3% rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1042.4[M+Na] . 1H NMR (500 MHz, CDCh)<8>6.42 -5.81 (m, 4H), 5.58 -4.81 (m, 4H), 4.31 -4.11 (m, 1H), 4.01 -3.51 (m, 22H), 3.49 - 3.13 (m, 11H), 3.01 -2.43 (m,<6>H), 2.29 (t,J= 30.6 Hz, 2H), 2.15 - 1.88 (m, 7H), 1.76 - 1.55 (m, 12H), 1.51 - 1.18 (m, 9H), 1.15 - 0.74 (m, 18H), 0.66 (dd,J= 23.9, 12.0 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 5: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35R,37S,39S,40S,41R,42R,52S)-39-(2,3-dihidroxipropoxi)-41,52-dihidroxi-40-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-64,65-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-25):

[0246]

Esquema sintético:

[0247]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37R,39S,41S,42S,44R,45R,55S)-41-[(2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi]-44,55-dihidroxi-42-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-32,33,34,35,46,47-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-24,26,28(46),29(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona:

[0248] Se añadió (2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metanol (1 Ml) a una solución de rapamicina (0,2 g, 0,22 mmol) y ácido ptoluenosulfónico hidratado (0,1 g, 0,547 mmol) en THF (3 Ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, después se añadió a solución acuosa saturada de NaHCOs helada y se extrajo con EtOAc (20 Ml * 2). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron al vacío. El crudo se purificó por cromatografía de fase inversa (CHaCN/agua pura: 7:3) para obtener (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37R,39S,41S,42S,44R,45R,55S)-41-[(2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi]-44,55-dihidroxi-42-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-32,33,34,35,46,47-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-24,26,28(46),29(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (0.07 g, 32% de rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1036.4[M+Na]+.

Etapa 2: (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35R,37S,39S,40S,41R,42R,52S)-39-(2,3-dihidroxipropoxi)-41,52-dihidroxi-40-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-64,65-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (1-25):

[0249] Se añadió ácido 4-metilbencenosulfónico-piridina (0,037 g, 0.148 mmol) se añadió a una solución de (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37R,39S,41S,42S,44R,45R,55S)-41-[(2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi]-44,55-dihidroxi-42-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-32,33,34,35,46,47-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-24,26,28(46),29(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (0.05 g, 0,05 mmol) en MeOH (2 Ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Tras la evaporación del metanol, el residuo se neutralizó con NaHCO acuoso saturado. A continuación, la mezcla se extrajo con EtOAc (10 Ml * 3). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na<2>SO<4>, y se concentraron con el material crudo resultante purificado por cromatografía en fase inversa (CHsCN/agua pura = 1:1) to give (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35R,37S,39S,40S,41R,42R,52S)-39-(2,3-dihidroxipropoxi)-41,52-dihidroxi-40-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-64,65-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-25: 0,005 g, 10% rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 996.5[M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 8 6.21-5.97 (m, 4H), 5.77 -4.78 (m, 5H), 4.53 -4.12 (m, 2H), 4.05 -3.11 (m, 19H), 3.07 -2.88 (m, 2H), 2.65-2.5 (m, 4H), 2.39 -1.91 (m, 7H), 1.89 - 1.69 (m, 12H), 1.52 -1.20 (m, 9H), 1.17 -0.76 (m, 18H), 0.73 -0.61 (m, 1H).

Ejemplo 6: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,42R,43S,44R,45R,47S,49S,51S,52S,53R,54R,63R)-53,63-dihidroxi-51-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]-52-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-54-metoxi-42,43,44,45,55,56-hexametil-74,75-dioxa-64-azatricidohexatriaconta-21,23,25(55),26(56)-tetraeno-57,58,59,60,61-pentona (I-24):

[0250]

Esquema sintético:

[0251]

Procedimientos y caracterización:

[0252] Una solución de rapamicina (0,5 g, 547 mmol) y 2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etanol (0,2 g, 0.547 mmol, 3 Ml) e hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,52 g, 2,73 mmol) en THF (15 Ml) se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas, después se extinguió con EtOAc (30 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución saturada de NaHCOs helada y se concentraron. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía de fase inversa (CHaCN/agua pura = 7:3) para obtener (21E,23E,25E,26E,42R,43S,44R,45R,47S,49S,51S,52S,53R,54R,63R)-53,63-dihidroxi-51-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]-52-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-54-metoxi-42,43,44,45,55,56-hexametil-74,75-dioxa-64-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(55),26(56)-tetraeno-57,58,59,60,61-pentona (I-24: 0,13 g, 19%) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1275.6[M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 8 6.45 - 5.80 (m, 4H), 5.57 - 5.05 (m, 4H), 4.85 - 4.08 (m, 2H), 3.90 - 3.50 (m, 34H), 3.47 - 3.24 (m, 13H), 2.97 - 2.44 (m, 7H), 2.39 -2.06 (m, 2H), 2.03 - 1.84 (m, 6H), 1.78 - 1.58 (m, 13H), 1.53 -1.16 (m, 9H), 1.14 -0.78 (m, 18H), 0.67 0.53 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 7: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,38S,41S,43S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-42-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-43-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-23):

[0253]

Esquem a sintético:

[0254]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: 2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil trifluorometanosulfonato:

[0255] Una mezcla de 2-[terc-butil(dimetil)sMil]oxietanol (4 g, 22,69 mmol) y DIPEA (3,81 g, 29,49 mmol, 5,14 Ml) en DCM (50 Ml) se enfrió a 0 °C bajo N<2>, después se añadió trifluorometilsulfonato de trifluorometanosulfonilo (7,04 g, 24,95 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 1 hora. La reacción se diluyó con EtOAc (200 Ml), se lavó con NaHCO saturado (200 Ml), agua (200 Ml), salmuera (200 Ml) y la capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró al vacío para obtener 2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil trifluorometanosulfonato (5,5 g, 78,6% de rendimiento) como aceite marrón. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 84.50 - 4.42 (t, 2H), 3.85 - 3.80 (t, 2H), 0.84 - 0.78 (s, 9H), 0.00 (s, 6H).

Etapa 2® 27El29El31El32El36Rl37Sl38Rl39R,40Sl43Sl44Sl45Sl47Rl48Rl57R)-45-[(1R)-2-[(1Sl2Rl3R)-3-(2-[tercbutilo(dimetil)silil]oxietoxi]-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47,57-dihidroxi-44,48-dimetoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-67,68-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-27,29,31(49),32(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona:

[0256] Rapamicina (2 g, 2,19 mmol) y DIPEA (2,26 g, 17,50 mmol, 3,05 Ml) se disolvieron en tolueno (60 Ml) y se calentaron a 60 °C. A continuación, se añadió 2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil trifluorometanosulfonato (5,40 g, 17,50 mmol) bajo N<2>, y se agitó a 60 °C durante 16 horas. La mezcla se vertió en NaHCO<3>saturado helado (100 Ml) y después se extrajo con EtOAc (150 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, y se concentraron al vacío. A continuación, el residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C^CN/agua pura = 4...1):1) para obtener (27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,40S,43S,44S,45S,47R,48R,57R)-45-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-[2-[terc-butilo (dimetil)silil]oxietoxi]-2-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-47,57-dihidroxi-44,48-dimetoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-67,68-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-27,29,31(49),32(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (0.75 g, 32% de rendimiento) como un aceite incoloro. ESI-MS (EI+, m/z): 1095.5 [M+Na]+.

Etapa 3: (22E,24E,26E,27E,31R,32S,33R,34R,35S,38S,39S,40S,42R,43R,52R)-42,52-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(lS,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil]-1-metíl-etil]-39,43-dimetoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-62,63-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(44),27(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona:

[0257] Una solución de TEA-3HF (4,65 g, 28.87 mmol) and (27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,40S,43S,44S,45S,47R,48R,57R)-45-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-[2-[tercbutil(dimetil)silil]etoxi]-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47,57-dihidroxi-44,48-dimetoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-67,68-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-27,29,31(49),32(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (3.05 g, 2,89 mmol) en THF (50 Ml) se agitó a 20 °C durante 2 horas. La mezcla se vertió en NaHCOs saturado helado (100 Ml) y después se extrajo con EtOAc (150 Ml x<3>). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y salmuera y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CHaCN/agua pura: 7:3) para obtener (22E,24E,26E,27E,31R,32S,33R,34R,35S,38S,39S,40S,42R,43R,52R)-42,52-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-39,43-dimetoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-62,63-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(44),27(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (1.5 g, 54% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 980.5 [M+Na]+.

Etapa 4: (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,38S,41S,43S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-42-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-43-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-23):

[0258] Una mezcla de (22E,24E,26E,27E,31R,32S,33R,34R,35S,38S,39S,40S,42R,43R, 52R)-42,52-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil] -1-metil-etil]-39,43-dimetoxi-31,32,33,34,44,45-hexilmetil-62,63-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(44),27(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (0.5 g, 0,52 mmol), 2-(2-hidroxietoxi)etanol (2,77 g, 26,09 mmol) e hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,54 g, 3,13 mmol) en THF (6 Ml) se agitó a 20 °C durante 2 horas. La mezcla se vertió en NaHCOs saturado helado (30 Ml) y se extrajo con EtOAc (50 Ml x 3). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y salmuera y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CH<3>CN/agua pura = 1:1) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,38S,41S,43S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-42-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-43-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-23: 0,1 g, 19% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1054.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.63 - 5.86 (m, 4H), 5.70 - 5.00 (m, 4H), 4.87 - 4.15 (m, 2H), 4.02 - 3.54 (m, 14H), 3.50 - 3.26 (m, 11H), 3.24 - 3.02 (m, 3H), 2.76 - 2.46 (m, 3H), 2.38 - 1.86 (m, 8H), 1.84 - 1.54 (m, 14H), 1.47 (m, 3H), 1.25 (m, 6H), 1.00 (m, 16H), 0.69 (dt,J =34.1, 12.1 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 8: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,40S,43S,45S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-44-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-45-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-32):

[0259]

Esquem a sintético:

[0260]

[0261] Una mezcla de everolimus (3,92 g, 26,09 mmol) e hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,45 g, 2,61 mmol) en THF (10 Ml) se agitó a 20 °C durante 2 horas. La mezcla se vertió en NaHCOs saturado helado (30 Ml) y se extrajo con EtOAc (50 Ml x<3>). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y salmuera y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CHaCN/agua pura = 1...1):1) para obtener (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,40S,43S,45S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-44-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-45-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (1-32:0,155 g, 28% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+,m/z):1098.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.49 - 5.83 (m, 4H), 5.67 -5.35 (m, 2H), 5.33 -5.01 (m, 2H), 4.92 -4.08 (m, 2H), 4.05 -3.51 (m, 17H), 3.52 -3.23 (m, 11H), 3.23 -3.01 (m, 3H), 2.66 (m, 4H), 2.40 - 1.95 (m, 5H), 1.95 -1.55 (m, 17H), 1.52 -1.13 (m, 9H), 1.13 -0.79 (m, 16H), 0.71 (dd,J= 23.8, 11.9 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 9: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,42S,45S,47S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-46-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (1-22):

[0262]

Esquem a sintético:

[0263]

Procedimientos y caracterización:

[0264] Se agitó a 20 °C durante 2 h una mezcla de everolimus (0,5 g, 0,52 mmol), 2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etanol (2,03 g, 10,44 mmol) e hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,54 g, 3,13 mmol) en THF (6 Ml). La mezcla se vertió en NaHCOs saturado helado (30 Ml) y se extrajo con EtOAc (50 Ml*3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CHaCN/agua pura = 1...1):1) para obtener (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,42S,45S,47S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-46-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-(2-hidroxietoxi)-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (I-22: 0,1 g, 17% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1043.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCls) 86.71 - 5.78 (m, 4H), 5.77 - 5.01 (m, 4H), 4.65 - 3.88 (m, 3H), 3.87 - 3.50 (m, 20H), 3.50 - 3.00 (m, 14H), 2.77 -1.9 5 (m, 11H), 1.89 - 1.53 (m, 13H), 1.53 -0.79 (m, 27H), 0.76 -0.62 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 10: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,39S,42S,44S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-hidroxi-2-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-47-metoxi-43-[2-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-27):

[0265]

Esquema sintético:

[0266]

Procedimientos y caracterización:

[0267] Una mezcla de rapamicina (1 g, 1,09 mmol), 2-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]etanol (8,98 g, 54,69 mmol) e hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,94 g, 5,47 mmol) en THF (20 Ml) se agitó a 20 °C durante 2 horas. La mezcla se vertió en NaHCO<3>saturado helado (50 Ml) y se extrajo con EtOAc (100 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CH<3>CN/agua pura = 4...1):1) para obtener (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,39S,42S,44S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-hidroxi-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-43-[2-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-27: 0,16 g, 14% rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1068.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.50 - 5.81 (m, 4H), 5.73 - 5.05 (m, 4H), 4.85 - 3.98 (m, 3H), 3.90 - 3.10 (m, 27H), 3.02 - 2.24 (m, 7H), 1.98 (m, 6H), 1.82 - 1.55 (m, 13H), 1.54 -1.16 (m, 9H), 1.16 -0.78 (m, 17H), 0.75 -0.59 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 11: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,31R,32S,33R,34R,35S,38S,40S,42R,43R,52R)-42,52-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-hidroxi-2-metoxi-ciclohexil]-1 -metN-etM]-39-(3-hidroxipropoxi)-43-metoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-63,64-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(44),26(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (I-34):

[0268]

Esquem a sintético:

[0269]

Procedimientos y caracterización:

[0270] Una mezcla de rapamicina (0,5 g, 0,55 mmol), propano-1,3-diol (13,13 g, 172,48 mmol, 12,5 Ml) e hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,47 g, 2,74 mmol) en THF (37,5 Ml) se agitó a 20 °C durante 2 horas. La mezcla se vertió en NaHCO<3>saturado helado (100 Ml) y se extrajo con EtOAc (100 Ml * 3). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y salmuera y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CHaCN/agua pura = 7:3) para obtener (21E,23E,25E,26E,31R, 32S,33R,34R,35S,38S,40S,42R,43R,52R)-42,52-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-hidroxi-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-39-(3-hidroxipropoxi)-43-metoxi-31,32, 33,34,44,45-hexametil-63,64-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(44),26(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (0.15 g, 29% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 980.3 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.58 - 5.84 (m, 4H), 5.72 -4.83 (m, 4H), 4.65 -4.06 (m, 2H), 4.03 -3.63 (m, 5H), 3.62 -3.05 (m, 12H), 3.03 -2.40 (m, 6H), 2.42 - 1.91 (m, 7H), 1.89 - 1.56 (m, 17H), 1.53 - 1.27 (m, 6H), 1.25 -0.76 (m, 19H), 0.62 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 12: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35R,37S,40S,41R,42R,51S)-41,51-dihidroxi-39-(2-hidroxietoxi)-40-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametN-62,63-dioxa-52-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-38):

[0271]

Esquema sintético:

[0272]

Procedimientos y caracterización:

[0273] A una mezcla de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) y etilenglicol (3 Ml) en THF (10 Ml) a 10 °C se añadió hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,31 g, 1,64 mmol). La mezcla resultante se agitó a 10 °C durante 17 horas y después la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 Ml) y se ajustó a Ph 9 utilizando solución acuosa saturada de NaHCO<3>(unos 50 Ml). La capa orgánica se concentró in vacuo y el residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa ((CH<3>CN/agua pura = 5,5): 4.5). El disolvente se eliminó por liofilización, obteniéndose (21E,23E,25E,26E,30R,31 S,32R,33R,35R,37S,40S,41R,42R,51 S)-41,51-dihidroxi-39-(2-hidroxietoxi)-40-[('/S)-2-[(■/S,3R,4R/)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-62,63-dioxa-52-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (0.05 g, 9% de rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 966.3 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.47-5.91 (m, 4H), 5.60-5.13 (m, 4H), 4.85-3.92 (m, 3H), 3.88-3.68 (m, 4H), 3.60-3.53 (m, 1H), 3.46-3.29 (m, 10H), 3.25-3.19 (m, 1H), 2.97-2.84 (m, 2H), 2.76-2.53 (m, 4H), 2.35-1.83 (m, 8H), 1.80-1.64 (m, 12H), 1.53-1.16 (m, 9H), 1.14-0.82 (m, 18H), 0.67-0.57 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 13: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45R,47S,50S,51R,52R,61S)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-50-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55,56,57,58,59-pentona (I-33):

[0274]

Esquem a sintético:

[0275]

Procedimientos y caracterización:

[0276 ] Se añadió hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,19 g, 1,02 mmol) a una mezcla de rapamicina (0,31 g, 0,34 mmol) y hexaetilenglicol (2 Ml) en THF (6 Ml) a 15 °C. La mezcla resultante se agitó a 15 °C durante 17 horas y después la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (200 Ml) y se ajustó a Ph 9 utilizando solución acuosa saturada de NaHCO<3>(unos 100 Ml). La capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía de fase inversa ((CH<3>CN/agua pura = 3:2). A continuación, se eliminó el disolvente mediante liofilización. (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45R,47S,50S,51R,52R,61S)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-50-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55,56,57,58,59-pentona (I-33: 0,21 g, 51% de rendimiento) se obtuvo como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1186.8 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.39-5.94 (m, 4H), 5.55-5.14 (m, 4H), 4.93-3.75 (m, 2H), 3.73-3.71 (m, 2H), 3.67-3.55 (m, 22H), 3.48-3.44 (m, 1H), 3.41-3.16 (m, 12H), 2.98-2.86 (m, 2H), 2.75-2.69 (m, 2H), 2.59-2.44 (m, 1H), 2.34-2.21 (m, 1H), 2.11-1.97 (m, 4H), 1.90 (s, 3H), 1.78-1.54 (m, 13H), 1.50-1.12 (m, 9H), 1.08-0.83 (m, 18H), 0.71-0.62 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 14: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,32R,33S,34R,35R,37R,39S,42S,43R,44R,53S)-43,53-dihidroxi-41-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-42-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-44-metoxi-32,33,34,35,45,46-hexametil-64,65-dioxa-54-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(45),26(46)-tetraeno-47,48,49,50,51-pentona (I-18):

[0277]

Esquem a sintético:

[0278]

Procedimientos y caracterización:

[0279] A una mezcla de rapamicina (0,3 g, 0,33 mmol) y dietilenglicol (2 Ml) en THF (6 Ml) a 10 °C se añadió hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,187 g, 0,98 mmol). La mezcla resultante se agitó a 10 °C durante 17 horas y después la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 Ml) y se ajustó a Ph 9 utilizando solución acuosa saturada de NaHCO<3>(unos 50 Ml). La capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se purificó por fase inversa ((CH<3>CN/agua pura = 3:2). Los disolventes se eliminaron por liofilización, obteniéndose (21E,23E,25E,26E,32R,33S,34R,35R,37R,39S,42S,43R,44R,53S)-43,53-dihidroxi-41-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-42-[(1S)-2-[(■/S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-44-metoxi-32,33,34,35,45,46-hexametil-64,65-dioxa-54-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(45),26(46)-tetraeno-47,48,49,50,51-pentona (I-18: 0,126 g, 37% de rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1010.7 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.40-5.95 (m, 4H), 5.55-5.14 (m, 4H), 4.85 4.17 (m, 2H), 4.05-3.57 (m, 10H), 3.53-3.15 (m, 12H), 2.97-2.89 (m, 2H), 2.76-2.48 (m, 4H), 2.36-1.84 (m, 7H), 1.79-1.56 (m, 14H), 1.49-1.14 (m, 9H), 1.10-0.81 (m, 18H), 0.70-0.61 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 15: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,31R,32S,33R,34R,36R,38S,41S,42R,43R,53S)-42,53-dihidroxi-40-[3-hidroxi-2-(hidroximetil)propoxi]-41-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-43-metoxi-31,32,33,34,44,45-hexametM-65,66-dioxa-54-azatricidohexatriaconta-21,23,25(44),26(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (I-31):

[0280]

Esquem a sintético:

[0281]

Procedimientos y caracterización:

[0282] A una mezcla de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) y 2-(hidroximetil) propano-1,3-diol (0,58 g, 5,47 mmol) en THF (10 Ml) a 15 °C se añadió hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,31 g, 1,64 mmol). La mezcla resultante se agitó a 15 °C durante 17 horas y después la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 Ml) y se ajustó a Ph 9 utilizando solución acuosa saturada de NaHCOs (unos 50 Ml). La capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía de fase inversa ((CHaCN/agua pura = 3:2). El disolvente se eliminó por liofilización, obteniéndose (21E,23E,25E,26E,31R,32S, 33R,34R,36R,38S,41 S,42R,43R,53S)-42,53-dihidroxi-40-[3-hidroxi-2-(hidroximetil) propoxi]-41-[('/S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-43-metoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-65,66-dioxa-54-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(44),26(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (1-31:0,054 g, 9% rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+,m/z):1010.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.37-5.96 (m, 4H), 5.56-5.15 (m, 4H), 4.86-4.17 (m, 2H), 3.85-3.47 (m, 10H), 2.96-2.91 (m, 2H), 2.75-2.58 (m, 3H), 2.35-2.22 (m, 3H), 2.11-1.94 (m, 6H), 1.84 1.46 (m, 23H), 1.35-1.12 (m, 9H), 1.11-0.88 (m, 18H), 0.67-0.65 (m, 1H).

Ejemplo 16: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfanyl)etilsulfanyl]etoxi]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-21):

[0283]

Esquem a sintético:

[0284]

Procedimientos y caracterización:

[0285] A una mezcla de rapamicina (1 g, 1,09 mmol) y 2-[2-(2-hidroxietilsulfanil)etilsulfanil]etanol (1,99 g, 10,94 mmol) en THF (20 Ml) a 15 °C se añadió hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,62 g, 3,28 mmol). La mezcla resultante se agitó a 15 °C durante 17 horas y después la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 Ml) y se ajustó a Ph 9 utilizando solución acuosa saturada de NaHCOs (unos 50 Ml). La capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía de fase inversa ((CHaCN/agua pura = 3:2). Los disolventes se eliminaron por liofilización, obteniéndose (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfanil)etilsulfanil]etoxi]-44-[(1S)-2-[('/S,3R,4R)-4-hydroxy-3-metoxi -ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatnaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-21: 0,15 g, 0,133 mmol, 12% de rendimiento) como sólido amarillo. MS (EI+,m/z):1086.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCls) 86.39-5.95 (m, 4H), 5.54-5.19 (m, 4H), 4.81-4.17 (m, 2H), 3.96-3.73 (m, 4H), 3.59-3.14 (m, 12H), 2.96 2.55 (m, 14H), 2.35-1.87 (m, 6H), 1.81-1.59 (m, 13H), 1.53-1.13 (m, 11H), 1.16-0.84 (m, 18H), 0.71-0.63 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 17: Síntesis de Síntesis de (21E,23E,25E,26E,42R,43S,44R,45R,47S,49S,51S,52S,53R,54R,63R)-53,63-dihidroxi-51-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-52-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-54-metoxi-42,43,44,45,55,56-hexametil-74,75-dioxa-64-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(55),26(56)-tetraeno-57,58,59,60,61 -pentona (I-26):

[0286]

Esquem a sintético:

[0287]

Procedimientos y caracterización:

[0288] Se añadió lentamente hidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,52 g, 2,73 mmol) a una solución de rapamicina (0,5 g, 0,55 mmol) y 2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etanol (3,57 g, 10,94 mmol) en THF (10 Ml). La solución resultante se agitó a 20 °C durante 17 horas y después se concentró. El residuo se purificó por cromatografía de fase inversa (CHsCN/agua pura = 7:3) para obtener (21E,23E,25E,26E,42R,43S,44R,45R,47S,49S,51S,52S,53R,54R,63R)-53,63-dihidroxi-51-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-52-[(Lr)-2- [(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil] -1 -metil-etil]-54-metoxi-42,43,44,45, 55,56-hexametil-74,75-dioxa-64-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(55),26(56)-tetraeno-57, 58,59,60,61-pentona (I-26: 0,16 g, 24% rendimiento) como sólido blanco. MS (EI+, m/z): 1230.6[M+Na]+.1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.46 - 5.74 (m, 4H), 5.61 - 4.74 (m, 4H), 4.05-4.5 (m, 2H), 4.02 - 3.51 (m, 35H), 3.43 -3.16 (m, 14H), 2.99 -2.42 (m, 8H), 2.4-1.6 (m, 7H), 1.61-1.1 (m, 12H), 1.13 -0.79 (m, 18H), 0.74 -0.61 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 19: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-42-[R-2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (1-119) y (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-42-[S-2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-120):

[0289]

Esquem a sintético:

[0290]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-42-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona:

[0291 ] A una mezcla de rapamicina (2 g, 2,19 mmol), 2-(2-metoxietoxi)etanol (4 Ml) en THF (30 Ml) se añadió HND-8 (240 mg, 2,19 mmol) y la reacción se agitó a 50 °C durante 4 h bajo N<2>, después se filtró y se concentró. El producto bruto resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H<2>O = 3:1) para obtener (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-42-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (0.6 g, 27% de rendimiento) como sólido amarillo claro. ESI-MS (EI+, m/z): 1024.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.56 - 5.82 (m, 4H), 5.47 (ddd,J= 37.4, 17.7, 9.4 Hz, 2H), 5.31 -5.06 (m, 2H), 4.82 -4.50 (m, 1H), 4.32 -3.94 (m, 2H), 3.92 -3.71 (m, 2H), 3.70 -3.44 (m, 8H), 3.43 -3.26 (m, 12H), 3.20 (dd,J= 27.0, 16.2 Hz, 1H), 3.00 -2.22 (m, 7H), 2.18 -1.56 (m, 19H), 1.54 -1.25 (m, 7H), 1.24 -0.81 (m, 19H), 0.67 (dd,J= 23.8, 11.9 Hz, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-eti;l]-45-metoxi-42-[R-2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (1-119) y (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-42-[S-2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-120):

[0292] (22E,24E, 26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-42-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (0.095 g, 0.095 mmol) se purificó mediante HPLC prequiral para proporcionar (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-42-[R-2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33.34.35.36.46.47- hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-119: 13.2 mg, 14% rendimiento) y (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-45-metoxi-42-[S-2-(2-metoxietoxi)etoxi]-33.34.35.36.46.47- hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-120: 18,1 mg, 19% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0293] El método de separación quiral se indica a continuación:

Instrumento: Gilson-281

Columna: CHIRALPAK IC 20*250mm, 10|jm (Daicel)

Temperatura de la columna: 35 °C

Fase móvil: n-Hexano:Etanol = 60:40

Caudal: 50 Ml/min

Longitud de onda de detección: 214 nm

Tiempo de ciclo: 18min

Solución de muestra: 95 mg disueltos en 7 ml de metanol

Volumen de inyección: 0,5 ml (carga: 7,1 mg/inyección)

[0294] I-119: ESI-MS (EI+, m/z): 1024.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.42 - 5.92 (m, 4H), 5.75 - 5.05 (m, 4H), 4.49 (s, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.15 (d,J= 10.9 Hz, 1H), 3.99 (t,J= 13.3 Hz, 1H), 3.88 - 3.73 (m, 1H), 3.69 - 3.46 (m, 8H), 3.45 -3.29 (m, 11H), 3.22 (dd,J= 10.1,6.5 Hz, 2H), 2.99 -2.77 (m, 3H), 2.68 (dt,J= 28.5, 11.1 Hz, 3H), 2.61 -2.22 (m, 4H), 2.05 (ddd,J= 21.5, 15.3, 7.5 Hz, 5H), 1.88 - 1.65 (m, 12H), 1.53 - 1.30 (m, 7H), 1.17 - 0.78 (m, 19H), 0.73 - 0.57 (m, 1H).

[0295] I-120: ESI-MS (EI+, m/z): 1024.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.43 - 6.18 (m, 2H), 6.13 (dd,J= 15.0, 10.0 Hz, 1H), 5.91 (dd,J= 31.6, 10.6 Hz, 1H), 5.56 -5.36 (m, 2H), 5.27 (d,J= 4.9 Hz, 1H), 5.16 (dt,J= 18.2, 9.1 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.20 (dd,J =21.1, 11.1 Hz, 1H), 3.96 -3.71 (m, 3H), 3.70 -3.43 (m, 9H), 3.42 -3.26 (m, 14H), 2.98 -2.87 (m, 1H), 2.77 -2.62 (m, 3H), 2.58 (dd,J= 16.9, 6.3 Hz, 1H), 2.34 (d,J= 13.4 Hz, 2H), 2.15 - 1.84 (m, 5H), 1.83 - 1.64 (m, 7H), 1.34 (dddd,J= 22.7, 19.4, 18.1, 9.1 Hz, 12H), 1.16 -0.80 (m, 19H), 0.66 (dt,J= 16.8, 8.4 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 20: Síntesis de (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,36S,39S,41S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-41-[(lR)-2-[(1S,2R,3R)-3-hidroxi-2-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-40-[[(2S,5S)-5-(hidroximetil)-1,4-dioxan-2-N]metoxi]-46-metoxi-32,33,34,35,47,48-hexametN-68,69-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(47),28(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-118):

[0296]

Esquema sintético:

[0297]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (S)-1-(benciloxi)-3-cloropropan-2-ol:

[0298] Una solución de (2R)-2-(clorometil)oxirano (1 g, 10,81 mmol) y fenilmetanol (2,34 g, 21,62 mmol) en DCE (10 Ml) se agitó a rt durante 1 h y después se enfrió a 0 °C, se añadió lentamente trifluoruro de boro eterato (76,7 mg, 0,54 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta rt, se agitó durante toda la noche y se dejó refluir durante 2 h. Tras enfriar, la mezcla de reacción se diluyó con solución acuosa de NaHCOs al 10% y se extrajo con EtOAc (100 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EtOAc= 10: 1) para proporcionar el producto deseado (1,8 g, 86% de rendimiento) como un aceite incoloro. ESI-MS (EI+, m/z): 218.1 [M+H<2>O]+.1H NMR (500 MHz, CDCh) 87.36-7.27 (m, 5H), 4.64 (s, 2H), 3.99-3.95 (m, 1H), 3.64-3.55 (m, 4H), 2.75 (d,J= 6.0 Hz, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (S)-2-((S)-1-(benciloxi)-3-cloropropan-2-iloxi)-3-hidroxipropil 4-metilbencenosulfonato:

[0299] Una solución de (2S)-1-benciloxi-3-cloro-propan-2-ol (6 g, 29,9 mmol) y [(2S)-oxiran-2-il]4-metilbencenosulfonato de metilo (6,83 g, 29,9 mmol) en DCE (100 Ml) se agitó a rt durante 1 h, después se enfrió a 0°C y se añadió lentamente trifluoruro de boro eterato (254,6 mg, 1,79 mmol). La reacción se calentó a rt, se agitó a rt durante toda la noche, se sometió a reflujo durante 2 h y luego se enfrió a rt. Se añadieron EtOAc (100 Ml) y agua (50 Ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc (100 Ml * 2). A continuación, las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 * 50 Ml) y salmuera (50 Ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (8% EtOAc en PE) para obtener [(2S)-2-[(1S)-1-(benciloximetil)-2-cloroetoxi]-3-hidroxi-propil] 4-metilbencenosulfonato (4,4 g, 34% de rendimiento) como un aceite incoloro. ESI-MS (EI+,m/z):429.1 [M+H]+.

Etapa 3: Síntesis de ((2R,5R)-5-(benzoiloximetil)-1,4-dioxan-2-il)metanol.

[0300] Una solución de [(2S)-2-[(1S)-1-(benzoximetil)-2-cloroetoxi]-3-hidroxipropil] 4-metilbencenosulfonato (0,78 g, 1,82 mmol), NaOH (0,22 g, 5.46 mmol) en H<2>O 10 Ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 h, después se calentó a 90 °C durante 4 h, se enfrió a rt y se agitó toda la noche, después se calentó a 90 °C durante otras 2 h. La mezcla de reacción se acidificó con solución acuosa de HCl 1N y se extrajo con DCM (100 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución acuosa de NaHCOs, se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron para obtener [(2R,5R)-5-(benzoiloximetil)-1,4-dioxan-2-il]metanol (4,4 g, 41% de rendimiento) como un aceite incoloro. Este material se utilizó sin más purificación. ESI-MS (EI+, m/z): 239.1 [M+H]+.

Etapa 4: Síntesis de ((2R,5R)-1,4-dioxano-2,5-diil)dimetanol.

[0301] A una solución de [(2R,5R)-5-(benzoiloximetil)-1,4-dioxan-2-il]metanol (2,4 g,10 mmol) en MeOH (30Ml) se añadió Pd/C (0,86g). La mezcla se dejó agitar a rt durante una noche bajo un globo de hidrógeno y después se filtró a través de un tapón corto de celita, lavando con etanol. Los lavados orgánicos combinados se concentraron a presión reducida para proporcionar (2R,5R)-1,4-dioxano-2,5-diil)dimetanol (1,2 g, 74% de rendimiento) en forma de aceite. ESI-MS (EI+, m/z): 149.2 [M+H]+.

[0302] Etapa 5:Síntesis de (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,36S,39S,41S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-41-[(1R)-2-[(lS,2R,3R)-3-hidmxi-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-40-[[(2S,5S)-5-(hidmximetil)-1,4-dioxan-2yl]metoxi]-46-metoxi-32,33,34,35,47,48-hexametil-68,69-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(47),28(48)-tetraeno-49.50.51.52.53- pentona (I-118):

[0303] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) e hidrato de ácido 4-metilbencenosulfónico (0,471 g, 2,73 mmol) en THF (15 Ml) se añadió [(2R,5R)-5-(hidroximetil)-1,4-dioxan-2-il]metanol (0,81 g, 5,47 mmol) a 25 °C. Tras agitar a rt durante 2 h, la reacción se extinguió con solución acuosa fría de NaHCO<3>y se extrajo con EtOAc (50 Ml* 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O= 65:35) seguida de cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH = 8:8:3:1) para obtener (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,36S,39S,41S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-41-[(1R)-2-[(1S,2R,3R)-3-hidroxi-2-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-40-[[(2S,SS)-5-(hidroximetil)-1,4-dioxan-2-il]metoxi]-46-metoxi-32,33,34,35,47,48-hexametil-68,69-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(47),28(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-118: 80 mg, 14% rendimiento) como sólido blanco. ESI-m S (EI+,m/z):1052.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.46 - 5.86 (m, 4H), 5.69 - 5.06 (m, 4H), 4.16 (ddd,J= 56.1, 52.0, 39.5 Hz, 3H), 3.94 -3.49 (m, 10H), 3.48 -3.11 (m, 12H), 3.08 -2.46 (m, 7H), 2.40 - 1.93 (m, 7H), 1.73 (dd,J= 16.9, 10.5 Hz, 13H), 1.52 -1.17 (m, 8H), 1.16 -0.79 (m, 18H), 0.65 (d,J= 17.5 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 21: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametN-66,67-dioxa-56-azatricidohexatnaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49.50.51.52.53- pentona (I-116) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R, 55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametN-66,67-dioxa-56-azatricidohexatnaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49.50.51.52.53- pentona (I-117):

[0304]

Esquema sintético:

[0305]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona:

[0306] Una solución de everolimus (1 g, 1,04 mmol) en THF (15 Ml) se desgasificó con N. Se añadió ácido ptoluenosulfónico (0,895 g, 5,20 mmol) a 0 °C seguido de 2-(2-hidroxietoxi)etanol (2,8 Ml). La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 0,5 h bajo N<2>, y después a 25°C durante 3 h. La reacción se vertió en NaHCO<3>sat. (40 Ml), se extrajo con EtOAc (30 Ml), se lavó con agua (30 Ml * 2) y salmuera (40 Ml), después se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice en fase normal (MeOH: DCM = 1:15) y, a continuación, cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H<2>O= 7: 3) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (0.43 g, rendimiento del 40%) como sólido amarillo claro. ESI-MS (EI+, m/z):1053.9 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 86.47 - 5.85 (m, 4H), 5.40 (ddd,J =99.7, 51.9, 29.1 Hz, 4H), 4.80 (d,J = 22.0Hz, 1H), 4.23 (d,J =42.5 Hz, 1H), 4.05 -3.54 (m, 13H), 3.52 -3.01 (m, 14H), 2.67 (ddd,J =46.8, 27.3, 6.8 Hz, 4H), 2.17 (dd,J= 82.0, 45.9 Hz, 6H), 1.70 (dt,J =21.0, 15.8 Hz, 12H), 1.34 (dd,J =105.2, 26.3 Hz, 11H), 1.15 -0.79 (m, 18H), 0.76 -0.64 (m, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi) -3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-116) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-117):

[0307] 90 mg de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona se purificó mediante HPLC prequiral y se obtuvieron los epímeros resultantes: (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-116: 14 mg, 16% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-117: 15 mg, 17% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0308] El método de separación quiral se indica a continuación:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 5.0 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 11,5 mg/ml

Inyección: 10 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=50/50(V/V)

Caudal: 60 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0309] I-116: ESI-MS (EI+, m/z): 1054.0 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz,, CDCh) 86.42 -5.90 (m, 4H), 5.79 (ddd,J= 51.6, 30.9, 16.6 Hz, 1H), 5.54 -5.08 (m, 4H), 5.03 -4.88 (m, 1H), 4.74 (d,J= 61.6 Hz, 1H), 4.28 (dd,J= 57.6, 29.0 Hz, 2H), 3.99 (dd,J= 26.5, 6.0 Hz, 1H), 3.89 - 3.55 (m, 12H), 3.54 - 2.96 (m, 15H), 2.87 - 2.47 (m, 4H), 2.38 - 1.92 (m, 8H), 1.86 -1.6 7 (m, 11H), 1.51 - 1.30 (m, 6 H), 1.14 -0.80 (m, 18H), 0.76 -0.64 (m, 1H).

[0310] I-117: ESI-MS (EI+, m/z): 1053.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz,, CDCla) 86.41 -6.22 (m, 2H), 6.13 (dd,J= 15.1, 10.1 Hz, 1H), 5.94 (dd,J= 22.3, 10.8 Hz, 1H), 5.52 (dt,J= 18.4, 9.2 Hz, 1H), 5.41 (d,J= 9.9 Hz, 1H), 5.27 (d,J= 5.3 Hz, 1H), 5.12 (dt,J= 46.3, 5.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.23 -4.14 (m, 1H), 3.91 -3.52 (m, 15H), 3.49 -3.25 (m, 12H), 3.23 -3.03 (m, 3H), 2.94 -2.80 (m, 1H), 2.65 (ddd,J= 23.4, 16.9, 6.0 Hz, 3H), 2.39 -2.15 (m, 2H), 2.16 -1.85 (m, 5H), 1.82 -1.64 (m, 10H), 1.47 (dd,J= 26.8, 15.9 Hz, 5H), 1.38 - 1.16 (m, 6H), 1.10 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 1.07 - 1.03 (m, 3H), 1.00 (t,J= 6.8 Hz, 3H), 0.94 (d,J= 6.6 Hz, 3H), 0.88 (ddd,J= 34.0, 16.9, 5.0 Hz, 6H), 0.71 (dd,J= 23.9, 11.8 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 22: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatricidohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (I-114) y (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (I-115):

[0311]

Esquema sintético:

[0312]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona:

[0313] Se agitó a 20 °C durante 2 h una mezcla de everolimus (1 g, 1,04 mmol), 2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etanol (4,05 g, 20,87 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (0,898 g, 5,22 mmol) en THF (20 Ml). La mezcla se vertió en NaHCO<3>sat. Frío (30 Ml), se extrajo con EtOAc (50 Ml * 3) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, después se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H2O=6:4) para obtener (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (0.25 g, 21% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z):1142.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.41 - 5.85 (m, 4H), 5.78 (s, 1H), 5.60 - 4.98 (m, 4H), 4.22 (t,J= 27.1 Hz, 1H), 3.97 (dd,J= 17.7, 6.4 Hz, 1H), 3.87 - 3.54 (m, 21H), 3.51 - 3.03 (m, 15H), 2.72 - 2.45 (m, 3H), 2.28 (s, 6H), 2.16 - 1.96 (m, 4H), 1.89 - 1.56 (m, 10H), 1.51 -1.17 (m, 8H), 1.17 -0.81 (m, 18H), 0.78 -0.62 (m, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70J1-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (I-114) y (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (I-115):

[0314] 1,5 g de (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38.39.40.41.51.52- hexametil-70,71-dioxa-60-azatriccidohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH = 8:8:3:12) para obtener (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38.39.40.41.51.52- hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (I-114: 300 mg, 20% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,49R,50R,59R)-49,59-dihidroxi-47-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-50-metoxi-38,39,40,41,51,52-hexametil-70,71-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(51),26(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (I-115: 563 mg, 38% de rendimiento) como sólido blanco.

[0315] Condiciones de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC-3(IC30CE-NJ008)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 15 cm L

Inyección: 20.0 ul

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40(V/V)

Caudal: 1,0 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AT

[0316] I-114: ESI-MS (EI+, m/z):1142.5 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.42 - 5.91 (m, 4H), 5.60 - 5.08 (m, 4H), 4.19 (dd,J= 43.8, 32.6 Hz, 1H), 3.96 (dd,J= 27.1, 6.3 Hz, 1H), 3.85 - 3.54 (m, 21H), 3.53 -3.01 (m, 12H), 2.93 -2.80 (m, 1H), 2.75 -2.45 (m, 3H), 2.30 (d,J= 12.1 Hz, 1H), 2.03 (dd,J= 37.0, 32.8 Hz, 13H), 1.84 - 1.69 (m, 12H), 1.50 -1.18 (m, 5H), 1.16 -0.82 (m, 18H), 0.71 (dt,J= 23.8, 12.1 Hz, 1H).

[0317] I-115: ESI-MS (EI+, m/z):1142.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 8 6.36 (dd,J= 14.7, 10.9 Hz, 1H), 6.23 (dd,J= 14.7, 10.6 Hz, 1H), 6.10 (dd,J= 15.0, 10.5 Hz, 1H), 5.92 (dd,J= 45.2, 10.5 Hz, 1H), 5.61 (s, 1H), 5.43 (dd,J= 15.6, 9.6 Hz, 2H), 5.21 (d,J= 5.4 Hz, 1H), 5.10 (dd,J= 9.9, 5.9 Hz, 1H), 4.20 (d,J= 4.5 Hz, 1H), 4.10 - 3.95 (m, 1H), 3.84 (d,J= 5.0 Hz, 1H), 3.80 -3.49 (m, 21H), 3.48 -3.13 (m, 12H), 3.11 -3.01 (m, 1H), 2.73 -2.50 (m, 3H), 2.34 -2.19 (m, 2H), 2.01 (ddd,J= 62.0, 34.6, 28.2 Hz, 12H), 1.80 - 1.54 (m, 10H), 1.51 - 1.37 (m, 5H), 1.35 - 1.12 (m, 6H), 1.05 (dd,J= 6.4, 5.0 Hz, 6H), 0.97 (d,J= 6.5 Hz, 3H), 0.93 (d,J= 6.6 Hz, 3H), 0.91 - 0.82 (m, 6H), 0.74 - 0.67 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 23: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metN-etM]-42-(5-hidroxipentoxi)-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-65,66-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-113):

[0318]

Esquema sintético:

[0319]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-((lS,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil)-1-metil-etil)-42-(5-hidroxipentoxi)-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-65,66-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-113):

[0320] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) en THF (10 Ml) se añadió hidrato de ácido 4-metilbencenosulfónico (0,52 g, 2,73 mmol) y pentano-1,5-diol (3 Ml). La solución resultante se agitó a rt durante 2 h, después se vertió en solución acuosa fría de NaHCO<3>y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se concentró y se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O del 10% al 72% de rendimiento) para obtener (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-(5-hidroxipentoxi)-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-65,66-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (1-113: 150 mg, 28% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z):1008.0 [M+Na]+. 1HNMR (500 MHz, CDC13) 86.42 -5.82 (m, 4H), 5.58 -5.37 (m, 2H), 5.32 -5.02 (m, 2H), 4.78 (t, J = 25.9 Hz, 1H), 4.31 -4.08 (m, 1H), 4.00 -3.53 (m, 5H), 3.53 -3.05 (m, 12H), 2.99 -2.80 (m, 2H), 2.77 -2.51 (m, 3H), 2.48 -2.23 (m, 2H), 2.15 -1.89 (m, 4H), 1.89 - 1.16 (m, 32H), 1.15 -0.78 (m, 18H), 0.65 (dt, J = 24.1, 12.0 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 24: Síntesis de (28E,30E,32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxacidododec-2-Nmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatncidohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52.53.54.55.56- pentona (I-111) y (28E,30E,32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52.53.54.55.56- pentona (I-112):

[0321]

Esquema sintético:

[0322]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (28E,30E,32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-((1R)-2-((1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil)-1-metil-etil)-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52.53.54.55.56- pentona:

[0323] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) e hidrato de ácido 4-metilbencenosulfónico (0,471 g, 2,73 mmol) en THF (15 Ml) se añadió 1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetanol (2,25 g, 10,9 mmol) a 25 °C. La mezcla resultante se agitó a rt durante 2 h, después se vertió en solución acuosa de NaHCO<3>helada y se extrajo con EtOAc. A continuación, la capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O= 7:3) para obtener (28E,30E,32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatricciclohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (70 mg, 11% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z):1110.5 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.41 -5.82 (m, 4H), 5.54 -5.04 (m, 4H), 4.72 (d, J = 22.1 Hz, 1H), 4.35 -4.09 (m, 1H), 3.92 -3.51 (m, 18H), 3.48 -3.03 (m, 14H), 2.99 -2.51 (m, 5H), 2.34 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.04 (d, J = 62.6 Hz, 4H), 1.72 (ddd, J = 43.8, 30.6, 28.9 Hz, 12H), 1.53 -1.17 (m, 10H), 1.14 -0.81 (m, 18H), 0.70 -0.62 (m, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (28E,30E,32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-[(1R)-2- [(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52.53.54.55.56- pentona (I-112) y (28E,30E,32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52.53.54.55.56- pentona (I-111):

[0324] (28E,30E, 32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (170 mg) se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH = 3:3:1:0.5) para obtener (28E,30E,32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3- metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-112: 55 mg, 32% rendimiento) y (28E,30E,32E,33E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,48R,49R,58R)-48,58-dihidroxi-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-36,37,38,39,50,51-hexametil-45-(1,4,7,10-tetraoxaciclododec-2-ilmetoxi)-72,73-dioxa-59-azatriciclohexatriaconta-28,30,32(50),33(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-111: 11 mg, 6% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0325] Método de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC(IC00CE-OL002)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 25 cm L

Inyección: 100.0 ul

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40 (V/V)

Caudal: 1,0 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AT CP-HPLC-06

[0326] I-112: ESI-MS (EI+, m/z): 1109.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.40 -6.03 (m, 3H), 5.90 (dd,J= 37.1, 9.8 Hz, 1H), 5.54 - 5.06 (m, 4H), 4.71 (d,J= 22.4 Hz, 1H), 4.20 (t,J= 20.9 Hz, 1H), 3.93 - 3.52 (m, 17H), 3.50 - 3.24 (m, 11H), 3.14 -3.02 (m, 1H), 2.93 (dt,J= 31.2, 12.0 Hz, 1H), 2.63 (tdd,J= 17.0, 14.2, 5.5 Hz, 3H), 2.37 -2.18 (m, 2H), 1.94 (ddd,J= 31.3, 24.3, 22.1 Hz, 5H), 1.71 (dt,J= 22.5, 10.1 Hz, 11H), 1.51 - 1.17 (m, 13H), 1.15 - 0.81 (m, 18H), 0.67 (dd,J= 23.7, 11.9 Hz, 1H).

[0327] I-111: 1H NMR (500 MHz, CDCls) 86.46 -5.78 (m, 4H), 5.75 -5.14 (m, 4H), 4.58 (d,J= 31.9 Hz, 1H), 4.21 (d,J= 66.8 Hz, 1H), 3.87 - 3.47 (m, 16H), 3.43 - 3.14 (m, 10H), 2.94 (s, 1H), 2.80 -2.54 (m, 3H), 2.26 (ddd,J= 110.3, 80.5, 42.6 Hz, 6H), 1.81 - 1.49 (m, 18H), 1.46 - 1.25 (m, 10H), 1.18 -0.77 (m, 18H), 0.72 -0.61 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 25: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-109) y (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)47,57-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-110):

[0328]

Esquema sintético:

[0329]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46-((1R)-2-((1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etíl]-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona:

[0330] Se agitó a 20 °C durante 2 h una mezcla de everolimus (0,5 g, 0,522 mmol), 2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etanol (3,92 g, 26,09 mmol) y ácido p-toluenosulfónico monohidratado (0,45 g, 2,61 mmol) en THF (10 Ml). A continuación, la mezcla se vertió en agua helada. NaHCO<3>aq. (30 Ml) y se extrajo con EtOAc (50 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O =6,5.): 3.5) para obtener (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46- [(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (0.155 g, 28%) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z):1098.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.42 - 5.87 (m, 4H), 5.63 - 5.34 (m, 2H), 5.32 -5.00 (m, 2H), 4.85 (s, 1H), 4.35 -4.09 (m, 1H), 4.05 - 3.49 (m, 18H), 3.49 - 3.01 (m, 14H), 2.66 (dddd,J= 31.3, 24.8, 21.2, 13.0 Hz, 4H), 2.33 (d,J= 12.0 Hz, 2H), 2.06 (dd,J= 39.9, 10.6 Hz, 3H), 1.77 - 1.53 (m, 13H), 1.51 -1.14 (m, 10H), 1.14 -0.81 (m, 18H), 0.71 (dd,J= 23.8, 11.9 Hz, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil)-1-metil-etil)-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-110) y (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,4IS,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46-((1R)-2-((1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil)-1-metil-etil)-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-109):

[0331] 170 mg de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-4757-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatricciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona purificada mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes purificados mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtoAc:MeOH = 3:3:1:0.8) para obtener (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-110: 37 mg, 21% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-109: 33 mg, 19% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0332] Método de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC(IC00CE-OL002)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 25 cm L

Inyección: 30.0 ul

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40(V/V)

Caudal: 1,0 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °c

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AT CP-HPLC-06

[0333] I-110: ESI-MS (EI+, m/z):1098.0 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.41 -6.18 (m, 2H), 6.12 (dd,J= 15.0, 10.3 Hz, 1H), 5.93 (dd,J= 33.7, 10.6 Hz, 1H), 5.47 (ddd,J= 33.0, 20.8, 9.5 Hz, 2H), 5.26 (d,J= 5.6 Hz, 1H), 5.13 (dt,J= 21.8, 10.8 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.19 (t,J= 9.3 Hz, 1H), 3.94 -3.52 (m, 19H), 3.49 -3.25 (m, 12H), 3.24 -3.02 (m, 3H), 2.76 (ddd,J= 26.2, 16.6, 10.3 Hz, 3H), 2.57 (dd,J= 17.0, 6.3 Hz, 1H), 2.29 (t,J= 26.2 Hz, 2H), 2.16 - 1.85 (m, 6H), 1.74 -1.53 (m, 10H), 1.53 - 1.16 (m, 9H), 1.15 - 1.01 (m, 8H), 1.01 - 0.82 (m, 10H), 0.71 (dd,J= 23.9, 12.0 Hz, 1H).

[0334] I-109: ESI-MS (EI+, m/z):1098.0 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCls) 86.43 - 5.90 (m, 4H), 5.62 - 5.02 (m, 5H), 4.24 (d,J= 63.6 Hz, 1H), 3.97 (dd,J= 21.5, 6.8 Hz, 1H), 3.86 -3.50 (m, 18H), 3.45 -3.01 (m, 14H), 2.73 -2.46 (m, 3H), 2.39 - 1.94 (m, 6H), 1.91 - 1.69 (m, 10H), 1.50 -1.31 (m, 12H), 1.16 -0.85 (m, 18H), 0.69 (d,J= 11.7 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 26: Síntesis de (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metN-etM]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametN-47- (1,4,7,10,13-pentaoxaciclopentadec-2-Nmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatriciclohexatnaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54,55,56,57,58-pentona (I-107): (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametil-47-(1,4,7,10,13-pentaoxaciclopentadec-2-ilmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatriciclohexatriaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54,55,56,57,58-pentona (I-108):

[0335]

Esquema sintético:

[0336]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etíl]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametil-47-(1,4,7,10,l3 pentaoxaciclopentadec-2-ilmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatriciclohexatriaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54.55.56.57.58- pentona:

[0337] Se agitó a 20 °C durante 2 h una solución de rapamicina (2 g, 2,19 mmol), 1,4,7,10,13-pentaoxaciclopentadec-2-ilmetanol (3,83 g, 15,31 mmol) y ácido p-toluenosulfónico monohidratado (1,88 g, 10,94 mmol) en THF (10 Ml). La mezcla se vertió en NaHCO<3>sat. Helado (50 Ml) y se extrajo con EtOAc (100 Ml*3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, a continuación se secaron al vacío y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O =8:2) para obtener (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametil-47-(1,4,7,10,13-pentaoxaciclopentadec-2-ilmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatriciclohexatriaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54,55,56,57,58-pentona (80 mg, 2.6% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z):1154.0 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.16 (tdt,J= 40.0, 33.8, 20.7 Hz, 4H), 5.54 -5.03 (m, 4H), 4.21 (t,J= 22.5 Hz, 1H), 3.90 -3.46 (m, 22H), 3.44 - 3.04 (m, 12H), 2.74 (dddd,J= 27.8, 22.2, 13.7, 4.7 Hz, 5H), 2.37 - 1.56 (m, 22H), 1.50 - 1.16 (m, 8H), 1.13 -0.81 (m, 18H), 0.67 (dd,J= 23.8, 11.9 Hz, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-((1R)-2- [(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etíl]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametil-47-(1,4,7,10,l3-pentaoxaciclopentadec-2-ilmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatriciclohexatriaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54.55.56.57.58- pentona (I-108) y (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametil-47-(1,4,7,10,13-pentaoxaciclopentadec-2-ilmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatriciclohexatriaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54,55,56,57,58-pentona (I-107):

[0338] 130 mg de (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametil-47-(1,4,7,10,13-pentaoxaciclopentadec-2-ilmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatricociclohexatriaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54.55.56.57.58- pentona se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH = 3:3:1:0.5) para obtener (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3- metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametil-47-(1,4,7,10,13-pentaoxaciclopentadec-2-ilmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatriciclohexatriaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54,55,56,57,58-pentona (I-108: 18 mg, 13% rendimiento) y (30E,32E,34E,35E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,50R,51R,60R)-50,60-dihidroxi-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-51-metoxi-38,39,40,41,52,53-hexametil-47-(1,4,7,10,13-pentaoxaciclopentadec-2-ilmetoxi)-75,76-dioxa-61-azatriciclohexatriaconta-30,32,34(52),35(53)-tetraeno-54,55,56,57,58-pentona (I-107: 16 mg, 12% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0339] Método de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC(IC00CE-OL002)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 25 cm L

Inyección: 100.0 ul

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40(V/V)

Caudal: 1,0 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °c

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AT CP-HPLC-06

[0340] I-108: ESI-MS (EI+, m/z):1153.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 66.31 (dt,J= 25.1, 14.5 Hz, 2H), 6.17 -6.08 (m, 1H), 5.95 (s, 1H), 5.55 - 5.37 (m, 2H), 5.26 (s, 1H), 5.16 (d,J= 4.4 Hz, 1H), 4.71 (d,J= 28.0 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.93 - 3.48 (m, 25H), 3.44 - 3.26 (m, 12H), 3.20 - 3.03 (m, 1H), 2.94 (dd,J= 16.5, 7.7 Hz, 1H), 2.70 (dd,J= 17.9, 12.1 Hz, 3H), 2.56 (d,J= 17.0 Hz, 1H), 2.33 (d,J= 12.0 Hz, 2H), 2.13 -1.84 (m, 5H), 1.81 - 1.67 (m, 8H), 1.50 -1.17 (m, 8H), 1.14 -0.81 (m, 20H), 0.67 (dd,J= 23.6, 11.9 Hz, 1H).

[0341] I-107: ESI-MS (EI+, m/z):1153.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCls) 86.40-5.95 (m, 4H), 5.58-5.11 (m, 4H), 4.30 -4.1 2 (m, 1H), 3.88-3.51 (m, 25H), 3.42-3.12 (m, 12H), 2.99 -2.53 (m, 5H), 2.50 - 1.90 (m, 5H), 1.83 - 1.65 (m, 14H), 1.44 - 1.30 (m, 8H), 1.12 -0.76 (m, 18H), 0.74 -0.62 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 27: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,41S,42R,43R,52R)-40-[bis(hidroxim etil) phosphorylmetoxi]-42,52-dihidroxi-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexM]-1-metN-etil]-43-metoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-65,66-dioxa-53-azatricidohexatriaconta-21,23,25(44),26(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (I-106):

[0342]

Esquema sintético:

[0343]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de Bis(hidroximetil)fosforilmetanol:

[0344] Se disolvió Ba(OH<)2>(8,43 g, 49,23 mmol) en 50 Ml de agua destilada a 60 °C. Se añadió sulfato de tetraquis(hidroximetil)fosfonio (20 g, 49,23 mmol) gota a gota a la solución, que se agitó a 60 °C durante 4 h. Tras eliminar el BaSO<4>por centrifugación, se añadió lentamente peróxido de hidrógeno (solución al 30%, 98,45 mmol) y la reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla se lavó con cloroformo y a continuación se obtuvo el producto deseado eliminando el agua a presión reducida (6,5 g, 94% de rendimiento) en forma de aceite. ESI-MS (EI+, m/z):141.1 [M+H]+. 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 85.35 (bs, 3H), 3.97 (s, 6H).

Etapa 2: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,41S,42R,43R,52R)-40-[bis(hidroximetil)phosphorylmetoxi]-42,52-dihidroxi-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-43-metoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-65,66-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(44),26(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (I-106):

[0345] Una mezcla de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol), bis(hidroximetil)fosforilmetanol (0,766 g, 5,47 mmol) e hidrato de ácido 4-metilbencenosulfónico (0,52 g, 2,73 mmol) en THF (20 Ml) se agitó a 25°C durante 4h. Se añadieron EtOAc (100 Ml) y agua (50 Ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (100 Ml * 2) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 * 50 Ml) y salmuera (50 Ml), después se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O =7:3) para obtener (21E,23E,25E,26E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,41S,42R,43R,52R)-40-[bis(hidroximetil) phosphorylmetoxi]-42,52-dihidroxi-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-43-metoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-65,66-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(44),26(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (I-106: 50 mg, 9% rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z):1043.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDC13) 56.47- 5.91 (m, 4H), 5.58 - 5.08 (m, 4H), 4.51 -3.63 (m, 12H), 3.59 -3.16 (m, 14H), 2.80 (d,J= 138.1 Hz, 6H), 2.38 -1.91 (m, 8H), 1.50 -0.77 (m, 35H), 0.67 (d,J= 9.0 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 28: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etM]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-104) y (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-105):

[0346]

Esquema sintético:

[0347]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35.36.37.38.48.49- hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona:

[0348] Una mezcla de everolimus (5 g, 5,22 mmol) y 2-(2-metoxietoxi)etanol (15 Ml) en THF (80 Ml) se desgasificó con N<2>y luego se calentó a 50 °C. Se añadió HND<- 8>(600 mg) y la mezcla resultante se agitó a 50°C durante 4 h bajo N<2>, después se filtró y se diluyó con EtOAc. Tras la concentración, el residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H<2>O de 0%-100% de rendimiento) para obtener (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (1.5 g, 27% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1068.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh)<8>6.40 - 5.85 (m, 4H), 5.56 - 5.36 (m, 2H), 5.21 (ddd,J= 16.0, 11.7, 5.6 Hz, 2H), 4.21 (dd,J= 25.8, 15.5 Hz, 2H), 3.94 - 3.26 (m, 28H), 3.25 - 3.02 (m, 4H), 2.76 -2.40 (m, 3H), 2.34 (d,J= 13.3 Hz, 2H), 2.19 -2.06 (m, 2H), 2.01 - 1.67 (m, 13H), 1.54 - 1.30 (m, 7H), 1.15 -0.81 (m, 18H), 0.72 (dd,J= 23.1, 11.7 Hz, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35.36.37.38.48.49- hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-105) y (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35.36.37.38.48.49- hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-104):

[0349] 120 mg de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona se purificó mediante HPLC prequiral para obtener (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1s,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35.36.37.38.48.49- hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-105: 17 mg, 20% rendimiento) y (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-104: 15 mg, 16% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0350] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 2,5 cm D.I. * 25 cm L, 10pm

Solución de muestra: 14 mg/ml en

Fase móvil Inyección: 15 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=50/50(V/V)

Caudal: 60 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0351] I-105: ESI-MS (EI+, m/z):1068.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla)<8>6.42 -6.19 (m, 2H), 6.13 (dd,J= 15.1, 10.0 Hz, 1H), 5.91 (dd,J= 33.0, 10.5 Hz, 1H), 5.56 -5.38 (m, 2H), 5.27 (d,J= 5.0 Hz, 1H), 5.15 (dt,J= 15.2, 7.6 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.18 (d,J= 5.6 Hz, 1H), 3.93 -3.25 (m, 30H), 3.24 - 3.03 (m, 3H), 2.72 (dd,J= 16.7, 5.6 Hz, 2H), 2.57 (dd,J= 16.8, 6.5 Hz, 1H), 2.34 (d,J= 13.9 Hz, 2H), 2.13 - 1.84 (m,<6>H), 1.82 - 1.67 (m, 7H), 1.47 (dd,J= 24.1, 16.7 Hz, 4H), 1.25 (ddd,J= 24.1, 20.2, 10.0 Hz, 7H), 1.14 -0.81 (m, 18H), 0.72 (dd,J= 23.9, 12.1 Hz, 1H).

[0352] I-104: ESI-MS (EI+, m/z):1068.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCls)<8>6.19 (m, 4H), 5.56 - 5.36 (m, 2H), 5.28 -5.07 (m, 2H), 4.83 (d,J= 4.9 Hz, 4H), 4.28 (s, 1H), 4.21 -4.09 (m, 1H), 4.04 -3.51 (m, 15H), 3.46 -3.29 (m, 11H), 3.27 -2.91 (m, 5H), 2.76 -2.42 (m, 3H), 2.31 (d,J= 11.3 Hz, 2H), 2.18 -1.70 (m, 13H), 1.53 -1.19 (m,<8>H), 1.16 -0.84 (m, 18H), 0.76 -0.60 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 29: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfonyl)etilsulfonyl]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-95) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfonyl)etilsulfonyl]etoxi]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-102):

[0353]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfanyl)etilsulfanyl]etoxi]-44-((1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona:

[0355] A una mezcla de rapamicina (1 g, 1,09 mmol), 2-[2-(2-hidroxietilsulfanil)etilsulfanil]etanol (2 g, 10,94 mmol) en THF (20 Ml) se añadió ácido 4-metilbencenosulfónico monohidratado (0,62 g, 3,28 mmol) a 15 °C. La mezcla resultante se agitó a 15 °C durante 17 h, después se diluyó con EtOAc (100 Ml) y se ajustó a Ph 9 con solución acuosa saturada de NaHCO<3>(unos 50 Ml). A continuación, la capa orgánica se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 6:4) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-d¡h¡droxy-43-[2-[2-(2-h¡drox¡ethylsulfanyl)ethylsulfany!/etox¡]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-h¡drox¡-3-metox¡-c¡clohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatnaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (150 mg, rendimiento del 12%) como sólido amarillo. ESI-MS (EI+, m/z):1086.4 [M+Na] . 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.39-5.95 (m, 4H), 5.54-5.19 (m, 4H), 4.81-4.17 (m, 2H), 3.96-3.73 (m, 4H), 3.59 3.14 (m, 12H), 2.96-2.55 (m, 14H), 2.35-1.87 (m, 6H), 1.81-1.59 (m, 13H), 1.53-1.13 (m, 11H), 1.16-0.84 (m, 18H), 0.71 0.63 (m, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfonyl)etilsulfonyl]etoxi]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-102):

[0356] A una solución de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfanil)etilsulfanil]etoxi]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatnaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (170 mg, 0.16 mmol) en metanol (8 Ml) se añadió Oxona (393 mg, 0,64 mmol) a 0 °C. La mezcla resultante se dejó calentar hasta 10 °C y se agitó durante 5 h. La reacción se filtró y luego se purificó mediante cromatografía de fase inversa (C18, utilizando una mezcla de acetonitrilo-agua al 5-60%) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfonil)etilsulfonil]etoxi]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatnaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona(I-102, 30 mg, 17% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z):1150.8 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.40 -5.90 (m, 4H), 5.57 -5.08 (m, 5H), 4.14 (s, 4H), 3.68 (tdd,J= 37.6, 33.2, 11.6 Hz, 11H), 3.48 -3.13 (m, 20H), 2.95 (s, 2H), 2.68 (dd,J= 36.4, 30.5 Hz, 5H), 2.37 -1.70 (m, 12H), 1.31 (dd,J= 78.6, 46.8 Hz, 7H), 1.13 -0.81 (m, 18H), 0.67 (d,J= 11.9 Hz, 1H).

Etapa 3: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfonyl)etilsulfonyl]etoxi]-44-((1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-95):

[0357] 90 mg de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39R,41S,44S,45R,46R,55S)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfonil)etilsulfonil]etoxi]-44-[(1S)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi34.35.36.37.47.48- hexametil-70,71-dioxa-56-azatricidohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona se purificó mediante HPLC prequiral para proporcionar (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55RM5,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietilsulfonil)etilsulfonil]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-70,71-dioxa-56-azatriddohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-95: 15 mg, 16% rendimiento) como sólido blanco.

[0358] Método de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC(IC00CD-NA012)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 15 cm L

Inyección: 10.0 j l

Fase móvil: EtOH=100%

Caudal: 0,5 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AD CP-HPLC-06

[0359] I-95: ESI-MS (EI+, m/z):1150.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.32 (td,J= 24.8, 14.8 Hz, 2H), 6.13 (dd,J= 14.9, 9.9 Hz, 1H), 5.98 (dd,J= 22.1, 10.3 Hz, 1H), 5.56 -5.31 (m, 2H), 5.26 (d,J= 5.4 Hz, 1H), 5.14 (d,J= 4.1 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.16 (dd,J= 11.9, 5.5 Hz, 3H), 3.92 -3.49 (m, 11H), 3.44 - 3.17 (m, 15H), 2.93 (dd,J= 14.1, 5.5 Hz, 1H), 2.78 - 2.50 (m, 5H), 2.36 -2.17 (m, 2H), 2.01 (ddd,J= 21.5, 18.0, 9.0 Hz, 5H), 1.84 - 1.65 (m, 11H), 1.49 - 1.16 (m, 12H), 1.14 -0.82 (m, 14H), 0.66 (dd,J= 23.8, 12.0 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 29: Síntesis de 3-[2,2-bis(2-cyanoetoximetil)-3-[[(21E,23E,25E,26E,41R,42S,43R,44R,46S,48S,51S,52R,53R,62R)-52,62-dihidroxi-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-53-metoxi-41,42,43,44,54,55-hexametil-56,57,58,59,60-pentaoxo-76,77-dioxa-67-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(54),26(55)-tetraen-50-il]oxi]propoxi]propanenitrile (I-101):

[0360]

Esquema sintético:

[0361]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (1-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metanol:

[0362] A una solución de 2,2-bis(hidroximetil)propano-1,3-diol (20 g, 146,9 mmol) y ácido 4-metilbencenosulfónico (0,25 g, 1,47 mmol) en tolueno (200 Ml) se añadió 1,1,1-trietoxietano (27 Ml, 146,9 mmol) a reflujo. A continuación, la reacción se agitó a 130 °C hasta que la solución se volvió transparente, se añadieron unas gotas de TEA y la reacción se filtró en caliente. El filtrado se enfrió y luego se concentró para proporcionar (1-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metanol (20 g, 85% de rendimiento) como cristales incoloros. 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 84.79 (t,J= 5.3 Hz, 1H), 3.85 (s, 6H), 3.22 (d,J= 5.3 Hz, 2H), 1.29 (s, 3H).

Etapa 2: Síntesis de 4-(benciloximetil)-1-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano:

[0363] Se añadió (1-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metanol sólido (1,5 g, 9,37 mmol) a una suspensión agitada de KOH finamente potenciado (2,47 g, 44 mmol) y BnBr (1,86 g, 10,86 mmol) en DMSO (5 Ml). La solución resultante se agitó a rt durante 1 h, después se vertió en agua helada y se extrajo con EtOAc, se secó, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (EtOAc:PE = 1:10) para obtener 4-(benciloximetil)-1-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (1,5 g, 64% de rendimiento) como sólido amarillo claro. ESI-MS (EI+, m/z):251.1 [M+H]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 87.36-7.25 (m, 5H), 4.45 (s, 2H), 4.01 (s, 6H), 3.19 (s, 2H), 1.45 (s, 3H).

Etapa 3: Síntesis de 2-(benciloximetil)-2-(hidroximetil)propano-1,3-diol:

[0364] Una solución de 4-(benciloximetil)-1-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (2 g, 8 mmol) y cloruro de hidrógeno (2 Ml, 2M en agua) en THF (20 Ml) se agitó a rt durante una noche y después se concentró y purificó por cromatografía de fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 1:3) para proporcionar 2-(benzoximetil)-2-(hidroximetil)propano-1,3-diol (1,3 g, 72% de rendimiento) como un aceite amarillo espeso. ESI-MS (EI+, m/z): 227.1 [M+H]+. 1H NMR (500 MHz, CDCla) 87.36-7.26 (m, 5H), 4.48 (s, 2H), 3.68 (s, 6H), 3.46 (s, 2H), 3.40 (bs, 3H).

Etapa 4: Síntesis de 3-(2-(benzoximetil)-3-(2-cianoetoxi)-2-(2-cianoetoximetil) propoxi]propanenitrilo:

[0365] A una mezcla de 2-(benzoximetil)-2-(hidroximetil)propano-1,3-diol (4,9 g, 21,66 mmol) y KOH (98 mg,1,75 mmol) se añadió lentamente acrilonitrilo (11,49 g, 216,56 mmol), asegurándose de que la temperatura interna de reacción no superaba los 30°C. La mezcla se agitó toda la noche a temperatura ambiente, se neutralizó con solución acuosa de HCl 1 N y se extrajo con EtOAc (200 Ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron dos veces con agua, se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron para obtener 3-[2-(benciloximetil)-3-(2-cianoetoxi)-2-(2-cianoetoximetil)propoxi]propanenitrilo (7 g, 84% de rendimiento) como sólido amarillo. ESI-MS (EI+, m/z): 386.3 [M+H]+.

Etapa 5: Síntesis de 3-[2,2-bis(2-cianoetoximetíl)-3-hidroxi-propoxi]propanenitrilo:

[0366] A una solución de 3-[2-(benzoximetil)-3-(2-cianoetoxi)-2-(2-cianoetoximetil)propoxi]propanenitrilo (5 g, 12,97 mmol) en MeOH (50Ml) se añadió Pd/C (1,59 g). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche bajo un globo de hidrógeno, después se filtró a través de una almohadilla de celita y se lavó con etanol. La solución resultante se concentró para proporcionar 3-[2,2-bis(2-cianoetoximetil)-3-hidroxi-propoxi]propanenitrilo (2,6 g, 68 % de rendimiento) como un aceite incoloro. ESI-<m>S (EI+, m/z): 296.2 [M+H]+.

Etapa 6: Síntesis de 3-(2,2-bis(2-cyanoetoximetil)-3-[[(21E,23E,25E,26E,41R,42S,43R,44R,46S,48S,51S,52R,53R,62R)-52,62-dihidroxi-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-53-metoxi-41,42,43,44,54,55-hexametil-56,57,58,59,60-pentaoxo-76,77-dioxa-67-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(54),26(55)-tetraen-50-il)oxi)propoxi)propanenitrile (I-101):

[0367] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) en DCM (30 Ml) se añadió ácido 2,2,2-trifluoroacético (2,4 Ml) a -40 °C. La reacción se agitó a -40 °C durante 10 min y, a continuación, se añadió 3-[2,2-bis(2-cianoetoximetil)-3-hidroxipropoxi]propanenitrilo (0,48 g, 1,64 mmol). Tras agitar durante 1 h más, la reacción se diluyó con DCM (3 ml) y se vertió en una solución acuosa fría de NaHCO<3>. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 8:2) para obtener 3-[2,2-bis(2-cyanoetoximetil)-3-[[(21E,23E,25E,26E,41R,42S,43R,44R,46S,48S,51S,52R,53R,62R)-52,62-dihidroxi-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-53-metoxi-41,42,43,44,54,55-hexametil-56,57,58,59,60-pentaoxo-76,77-dioxa-67-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(54),26(55)-tetraen-50-il]oxi]propoxi]propanenitrile (I-101: 80 mg, 12% rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1198.8 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDC13) 86.42 -5.87 (m, 4H), 5.35 (ddd, J = 120.9, 41.2, 32.5 Hz, 4H), 4.24 (dd, J = 29.5, 16.4 Hz, 2H), 3.98 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 3.87 - 3.60 (m, 7H), 3.56 -3.01 (m, 18H), 2.88 (d, J = 59.1 Hz, 2H), 2.74 -2.42 (m, 9H), 2.34 (s, 2H), 2.23 -1.84 (m, 5H), 1.82 -1.65 (m, 13H), 1.53 -1.22 (m, 10H), 1.16 -0.84 (m, 18H), 0.72 -0.61 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 30: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxicidohexM]-1-metN-etM]-49-metoxi-37,38,39,40,50,51-hexametN-71,72-dioxa-60-azatricidohexatnaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-100) y (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46R,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-37,38,39,40,50,51-hexametil-71,72-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-64) y (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46S,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-49-metoxi-37,38,39,40,50,51-hexametil-71,72-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-65):

[0368]

Esquem a sintético:

[0369]

Etapa 1: Síntesis de 7-((2-(benciloxi)etoxi)metil)-1,13-difenil-2,5,9,12-tetraoxatridecano:

[0370] A una solución de 2-(hidroximetil)propano-1,3-diol (2 g, 18,85 mmol) en THF (30 Ml) a 0 °C se añadió hidruro sódico (9,05 g, 376,93 mmol) y la reacción se calentó a 50°C durante 1 h y después se enfrió a rt. A continuación se añadió 2-bromoetoximetilbenceno (40,54 g, 188,47 mmol) y la mezcla se calentó a 65 °C durante 17 h. La reacción se extinguió con agua helada (50 Ml) y se extrajo con EtOAc (50 Ml * 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 Ml), se secaron, se filtraron, se concentraron y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EtOAc = 20:1) para obtener 2-[3-(2-benciloxietoxi)-2-(2-benciloxietoximetil)propoxi]etoximetilbenceno (5 g, 52% de rendimiento) como líquido incoloro. ESI-MS (EI+, m/z): 509.0 [M+H]+.

Etapa 2: Síntesis de 2,2’-(2-((2-hidroxietoxi)metil)propano-1,3-diil)bis(oxi)dietanol:

[0371] A una solución de 2-[3-(2-benciloxietoxi)-2-(2-benciloxietoximetil)propoxi]etoximetilbenceno (2 g, 3,93 mmol) en MeOH (20 Ml) se añadió Pd/C (2,41 g). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche bajo un globo de hidrógeno. A continuación, la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de celita y se lavó con etanol. La solución resultante se concentró a presión reducida para proporcionar 2,2'-((2-((2-hidroxietoxi)metil)propano-1,3-diil)bis(oxi))bis(etan-1-ol) (0,92 g, 98% de rendimiento).<1>HNMR (500 MHz, CDCh) 83.65 (dd,J= 5.7, 3.4 Hz, 6H), 3.53 -3.48 (m, 12H), 2.22-2.14 (m, 1H).

Etapa 3: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-49-metoxi-37,38,39,40,50,51-hexametil-71,72-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52.53.54.55.56- pentona (I-100):

[0372] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) y ácido 4-metilbencenosulfónico (0,47 g, 2,73 mmol) en THF (10 Ml) se añadió 2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etanol (1,3 g, 5,47 mmol). La mezcla se agitó a 25 °C durante 2 h, después se vertió en solución acuosa de NaHCO<3>helada y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H<2>O: 7:3) seguido de cromatografía en gel de sílice (DCM:MeOH = 15.:1):1) para obtener (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-37.38.39.40.50.51- hexametil-71,72-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-100, 150 mg, rendimiento del 25%) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1142.0 [M+Na]+.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) 86.21 (dddd, J = 32.0, 27.8, 21.3, 10.2 Hz, 3H), 6.05 - 5.84 (m, 1H), 5.57 - 5.36 (m, 2H), 5.29 -4.97 (m, 2H), 4.83 (s, 1H), 4.20 (dd, J = 36.3, 30.2 Hz, 1H), 4.01 - 3.66 (m, 6H), 3.62 - 3.22 (m, 29H), 3.00 - 2.43 (m, 9H), 2.36 - 1.85 (m, 9H), 1.77 -1.51 (m, 6H), 1.52 -1.17 (m, 9H), 1.16 -0.79 (m, 18H), 0.65 (dt, J = 21.9, 11.0 Hz, 1H).

Etapa 4: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46S,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-49-metoxi-37,38,39,40,50,51-hexametil-71,72-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52.53.54.55.56- pentona (I-65) y (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46R,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-37,38,39,40,50,51-hexametil-71,72-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-64):

[0373] 140 mg de (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,47S,48R,49R,59R)-4859-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-37,38,39,40,50,51-hexametil-71,72-dioxa-60-azatricciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52.53.54.55.56- pentona se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH = 3:3:1:1) para obtener (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46S,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(Lr)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-37.38.39.40.50.51- hexametil-71,72-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-65: 35.2 mg, 25% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46R,47S,48R,49R,59R)-48,59-dihidroxi-46-[2-[3-(2-hidroxietoxi)-2-(2-hidroxietoximetil)propoxi]etoxi]-47-[(Lr)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-49-metoxi-37,38,39,40,50,51-hexametil-71,72-dioxa-60-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(50),26(51)-tetraeno-52,53,54,55,56-pentona (I-64:16 mg, 11% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0374] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 2.5 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 1,4 mg/ml

Inyección: 7 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40(V/V)

Caudal: 30 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0375] 1-65: ESI-MS (EI+, m/z): 1142.4 [M+Na]+.<1>H NMR (400 MHz, CDC13) 86.42 -6.18 (m, 2H), 6.13 (dd, J = 14.9, 10.1 Hz, 1H), 5.93 (dd, J = 23.9, 11.0 Hz, 1H), 5.54 -4.89 (m, 6H), 4.80 (s, 1H), 4.18 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.80 -3.6 6 (m, 5H), 3.63 -3.48 (m, 11H), 3.47 -3.21 (m, 11H), 2.99 -2.47 (m, 6H), 2.38 -2.15 (m, 3H), 2.14 -1.85 (m, 5H), 1.84 - 1.64 (m, 12H), 1.46 (dd, J = 28.7, 18.7 Hz, 5H), 1.35 -1.15 (m, 7H), 1.15 -0.81 (m, 18H), 0.66 (dd, J = 23.7, 11.8 Hz, 1H).

[0376] I-64: ESI-MS (EI+, m/z): 1142.4 [M+Na]+.<1>H NMR (400 MHz, CDC13) 86.34 -5.86 (m, 4H), 5.41 (ddd, J = 54.0, 26.4, 18.2 Hz, 2H), 5.16 (dd, J = 9.6, 5.0 Hz, 2H), 4.88 (s, 1H), 4.20 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.14 -4.02 (m, 1H), 3.93 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 3.87 -3.72 (m, 1H), 3.64 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 3.57 -3.36 (m, 14H), 3.36 -3.22 (m, 8H), 3.21 -3.11 (m, 1H), 2.92-2.33 (m, 8H), 2.32 -2.11 (m, 3H), 2.11 - 1.85 (m, 5H), 1.82 - 1.63 (m, 11H), 1.48 - 1.25 (m, 9H), 1.09 - 0.72 (m, 18H), 0.66 -0.50 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 31: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,48R,49S,50R,51R,53S,55S,58S,59R,60R,69R)-59,69-dihidroxi-57-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]etoxi]-58-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-cidohexM]-1-metN-etM]-60-metoxi-48,49,50,51,61,62-hexametN-80,81-dioxa-70-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(61),26(62)-tetraeno-63,64,65,66,67-pentona (I-98):

[0377]

Esquema sintético:

[0378]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,48R,49S,50R,51R,53S,55S,58S,59R,60R,69R)-59,69-dihidroxi-57-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-58-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-60-metoxi-48,49,50,51,61,62-hexametil-80,81-dioxa- 70-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(61),26(62)-tetraeno-63,64,65,66,67-pentona(I-98):

[0379] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) y ácido 4-metilbencenosulfónico (0,47 g, 2.73 mmol) en THF (15 Ml) se añadió 2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etanol (2,51 g, 5,47 mmol) y la mezcla se agitó a 25 °C durante 2 h. A continuación, la reacción se vertió en una solución acuosa fría de NaHCO<3>, que se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (CH<3>CN:agua pura = 7:3) para obtener (21E,23E,25E,26<e>,48R,49S,50R, 51R,53S,55S,58S,59R,60R,69R)-59,69-dihidroxi-57-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-58-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-60-metoxi-48,49,50,51,61,62-hexametil-80,81-dioxa-70-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(61),26(62)-tetraeno-63,64,65,66,67-pentona (I-98: 115 mg, rendimiento del 15%) como aceite espeso. ESI-MS (EI+, m/z): 1362.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDC13) 86.40 -5.83 (m, 4H), 5.55-5.35 (m, 2H), 5.32 -5.03 (m, 2H), 4.31 -4.10 (m, 1H), 3.93 (dd,J= 70.7, 6.3 Hz, 1H), 3.78 -3.15 (m, 53H), 2.97 -2.41 (m, 5H), 2.32 (s, 2H), 2.15 -1.55 (m, 18H), 1.52 -1.16 (m, 10H), 1.14 - 0.81 (m, 18H), 0.73 - 0.58 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 32: Síntesis de 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48,49,50,51,52-pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]e til N-metilcarbamate (I-81) y 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42R,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48,49,50,51,52-pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]e til N-metilcarbamate (I-74) y 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48,49,50,51,52-pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]e til N-metilcarbamate (I-75):

[0380]

Esquem a sintético:

[0381]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48.49.50.51.52- pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]etil N-metilcarbamate (I-81):

[0382] A una solución desgasificada de everolimus (0,5 g, 0,52 mmol) en THF (10 Ml) a 0°C, se añadió ácidop-toluenosulfónico (0,45 g, 2,61 mmol) y N-metilcarbamato de 2-hidroxietilo (2,80 Ml). La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 0,5 h bajo N<2>, después se calentó a 23 °C y se agitó durante 3 h. La mezcla se vertió en NaHCO<3>sat. (40 Ml) que se extrajo con EtOAc (30 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (30 Ml * 2), salmuera (40 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM:MeOH = 10:1) y luego se purificó adicionalmente mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 7:3) para obtener 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48,49,50,51,52-pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]etil N-metilcarbamate (I-81: 100 mg, 18% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1067.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 86.50-5.91 (m, 4H), 5.58 -4.97 (m, 4H), 4.70 (s, 1H), 4.51 (d, J = 40.4 Hz, 1H), 4.33 -4.02 (m, 3H), 3.93 -3.62 (m, 6H), 3.61 -3.00 (m, 13H), 2.86 - 2.46 (m, 6H), 2.40 - 2.22 (m, 2H), 2.18-1.69 (m, 22H), 1.58-1.25 (m, 7H), 1.24 - 0.79 (m, 18H), 0.79 - 0.62 (m, 1H).

Etapa 2: Síntesis de 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48.49.50.51.52- pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]etil N-metilcarbamate (I-75) y 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42R,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etíl]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48.49.50.51.52- pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]etil N-metilcarbamate (I-74):

[0383] 120 mg de 2-[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48,49,50,5l,52-pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatricidohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]N-metilcarbamato de etilo se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH= 3:3:1:0.6) para obtener 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48,49,50,51,52-pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]etil N-metilcarbamate (I-75: 18 mg, 15% rendimiento) y 2-[[(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42R,43S,44R,45R,55R)-44,55-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-48,49,50,51,52-pentaoxo-67,68-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraen-42-il]oxi]etil N-metilcarbamate (I-74: 20 mg, 16% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0384] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 5.0 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 2,4 mg/ml

Inyección: 8 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40(V/V)

Caudal: 30 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0385] I-75: ESI-MS (EI+, m/z): 1067.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 86.33 (dt, J = 24.4, 14.6 Hz, 2H), 6.13 (dd, J = 15.0, 9.9 Hz, 1H), 5.93 (dd, J = 24.5, 10.6 Hz, 1H), 5.52 (dd, J = 15.0, 8.8 Hz, 1H), 5.41 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.35 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.29 - 4.07 (m, 3H), 3.93 - 3.63 (m, 6H), 3.62 - 3.47 (m, 3H), 3.46 - 3.25 (m, 11H), 3.23 - 3.01 (m, 3H), 2.79 (d, J = 4.9 Hz, 3H), 2.74 - 2.62 (m, 2H), 2.57 (dd, J = 16.5, 6.4 Hz, 1H), 2.34 (d, J = 12.7 Hz, 2H), 2.25 -2.19 (m, 1H), 2.08 (s, 1H), 1.93 (dd, J = 30.0, 22.7 Hz, 5H), 1.83 -1.65 (m, 7H), 1.55 -1.42 (m, 5H), 1.28 (s, 6H), 1.15 -0.83 (m, 18H), 0.72 (dd, J = 23.6, 12.0 Hz, 1H).

[0386] I-74: ESI-MS (EI+, m/z): 1067.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 86.50-5.95 (m, 4H), 5.60 - 4.96 (m, 5H), 4.59 -3.96 (m, 4H), 3.95 -3.66 (m, 6H), 3.64 -2.97 (m, 15H), 2.95 -2.65 (m, 6H), 2.59 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.51 - 1.95 (m, 5H), 1.78 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 1.55 - 1.29 (m, 11H), 1.15 -0.83 (m, 18H), 0.69 (dd, J = 23.6, 11.5 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 33: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-[(lR)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metN-etM]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametN-39-[(2R,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-63) y (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39R,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-57) y (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39S,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-58):

[0387]

Esquema sintético:

[0388]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (2R,3R,4R,SR)-2,3,4,5-tetrahidroxihexano-1,6-dül dibenzoato:

[0389] A una solución de (2R,3R,4R,5R)-hexano-1,2,3,4,5,6-hexaol (10,0 g, 54,89 mmol, 1,0 eq) en piridina (25,39 g, 548,9 mmol, 10,0 eq) a 0 °C se añadió cloruro de bencilo (7,72 g, 54,89 mmol, 1,0 eq). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, se diluyó con H<2>O (200 Ml) y se extrajo con DCM (150 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 Ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron, se concentraron y se purificaron mediante cromatografía en fase inversa (CHsCn :H<2 0>= 40%-60% de rendimiento) para obtener (2R,3R,4r ,SR)-2,3,4,5-tetrahidroxihexano-1,6-diil dibenzoato (4,7 g, 22% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+,m/z):391.1 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-da)<8>8.07 - 8.00 (m, 4H), 7.66 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.54 (t, J = 7.7 Hz, 4H), 5.09 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.60 -4.48 (m, 4H), 4.28 (dd, J = 11.2, 6.2 Hz, 2H), 3.87 (dt, J = 6.1, 5.3 Hz, 2H), 3.77 (t, J =<8 . 6>Hz, 2H).

Etapa 2: Síntesis de ((4R,4’R,5R,5’R)-2,2,2’,2’-tetrametil-4,4’-bi(1,3-dioxolano)-5,5’-diil)bis(metileno) dibenzoato y ((4R,4Ar,8R,8Ar)-2,2,6,6-tetrametiltetrahidro-[1,3]dioxino[5,4-d][1,3]dioxina-4,8-diil)bis(metileno) dibenzoato:

[0390] Se agitó a 28°C durante 10 h una solución de [(2R,3R,4R,SR)-6-benzoiloxi-2,3,4,5-tetrahidroxi-hexil] benzoato (5 g, 12,81 mmol) yp-TsOH(1,22g, 6,40 mmol) en 2,2-dimetoxipropano (50 Ml). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (100 Ml*3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (EtOAc:PE = 1:10 a 1:2) para proporcionar [(4R,5R)-5-[(4R,5R)-5-(benzoiloximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]benzoato de metilo (2.,4 g de rendimiento).4 g, rendimiento del 40%) y [(4R,4Ar,8R,8Ar)-4-(benzoiloximetil)-2,2,6,6-tetrametil-4,4a,8,8a-tetrahidro-[1,3]dioxino[5,4-d][1,3]dioxin-8-il]benzoato de metilo 1,2 g, rendimiento del 20%) como sólidos blancos. ESI-MS (EI+, m/z): 493.2 [M+Na]+.

[0391] [(4R,5R)- 5-[(4R,5R)-5-(benzoiloximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metil benzoato: 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6):<8>7.98 (dd,J= 11.6, 4.5 Hz, 4H), 7.67 (dd,J= 11.7, 4.3 Hz, 2H), 7.55 (t,J= 7.7 Hz, 4H), 4.42 - 4.33 (m, 4H), 4.08 - 3.94 (m, 4H), 1.33 (s,<6>H), 1.26 (s,<6>H). 13C NMR (101 MHz, DMSO-d6)<8>165.52, 133.44, 129.47, 129.15, 128.78, 100.61, 67.89, 67.60, 64.25, 24.24, 23.45.

[0392] [(4R,4Ar, 8R,8Ar)-4-(benzoiloximetil)-2,2,6,6-tetrametil-4,4a,8,8a-tetrahidro-[1,3]dioxino[5,4-d][1,3]dioxin-8-il]metilbenzoato: 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): 88.03 - 7.92 (m, 4H), 7.67 (dd,J= 10.6, 4.3 Hz, 2H), 7.54 (t,J= 7.7 Hz, 4H), 4.57 (dd,J= 11.1, 5.9 Hz, 2H), 4.53 -4.44 (m, 4H), 4.39 (dd,J= 11.5, 7.3 Hz, 2H), 1.43 (s,<6>H), 1.29 (s,<6>H). 13C NMR (101 MHz, DMSO-d6)<8>165.45, 133.42, 129.52, 129.17, 128.75, 108.39, 74.49, 73.77, 64.17, 27.04, 25.27.

Etapa 3: Síntesis de ((4R,4’R,5R,5’R)-2,2,2’,2’-tetrametil-4,4’-bi(1,3-dioxolano)-5,5’-diil)dimetanol:

[0393] Una mezcla de [(4R,5R)-5-[(4R,5R)-5-(benzoiloximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]benzoato de metilo (8.5 g, 18,07 mmol) y K<2>CO<3>(7,48 g, 54,20 mmol) en THF (25 Ml) y CH<3>OH (25 Ml) se agitó a 29 °C durante 18 h. La reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (EtOAc/PE= 1:1) para obtener [(4R,5R)-5-[(4R,5R)-5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metanol (3,2 g,<6 8>% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+,m/z):285.1 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6):<8>4.73 (t,J= 5.8 Hz, 2H), 3.71 (t,J= 5.6 Hz, 2H), 3.55 - 3.35 (m,<6>H), 1.29 (s,<6>H), 1.23 (s,<6>H).

Etapa 4: Síntesis de (25E,27E,29E,30E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,49R,50R,61R)-49,61-dihidroxi-44-[(1R)-2-((1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-43-[[(4R,5R)-5-[(4R,5R)-5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metoxi]-50-metoxi-34,35,36,37,51,52-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-25,27,29(51),30(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona:

[0394] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mol) en DCM (16 Ml) se añadió ácido 2,2,2-trifluoroacético (1,2 Ml) a -40°C. Tras agitar durante 10 minutos, se añadió [(4R,5R)-5-[(4R,5R)-5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metanol (0,43 g, 1,64 mmol) y la reacción se agitó a -30°C durante 1,5 h, después se diluyó con DCM (10 Ml) y se vertió en una solución acuosa fría de NaHCO<3>. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 7:3) para obtener (25E,27E,29E,30E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,49R,50R,61R)-49,61-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-43-[[(4R,5R)-5-[(4R,5R)-5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metoxi]-50-metoxi-34,35,36,37,51,52-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-25,27,29(51),30(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (150 mg, 24% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1166.4 [M+Na]+. 1HNMR (400 MHz, CDCh)<8>6.52 - 5.69 (m, 4H), 5.48 - 5.10 (m, 4H), 4.51 (d,J= 40.1 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.94 (dd,J= 26.3, 5.8 Hz, 4H), 3.52 -3.12 (m, 13H), 2.98 -2.45 (m,<8>H), 2.41 -2.17 (m, 2H), 2.00 (s, 3H), 1.76 (dt,J= 29.0, 14.4 Hz, 15H), 1.50 -1.31 (m, 24H), 1.14 -0.77 (m, 18H), 0.62 (d,J= 12.1 Hz, 1H).

Etapa 5: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-((1R)-2-((1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil)-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-63):

[0395] A una solución de (25E,27E,29E,30E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,49R,50R,61R)-49,61-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-43-[[(4R,5R)-5-[(4R,5R)-5-{hidroximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metoxi]-50-metoxi-34,35,36,37,51,52-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-25,27,29(51),30(52)-tetraeno-53,54,55,56,57-pentona (500 mg, 0.437 mmol) en 1,4-dioxano<( 6>Ml) y<h2o( 6>Ml) se añadió Dowex 50W-X8 (1.0 g) y la mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 24 h, después se filtró y se purificó por cromatografía de fase inversa (C18, CHsCN:H<2>O= 4:6) para obtener (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,SR)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45.46.47.48.49- pentona (I-63: 70 mg, rendimiento del 15%) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1086.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 86.51 -5.91 (m, 4H), 5.61 -4.98 (m, 5H), 4.24 (d, J = 22.2 Hz, 1H), 3.78 (dd, J = 34.1, 28.6 Hz, 9H), 3.59 -3.17 (m, 19H), 3.00 -2.49 (m, 5H), 2.38 -2.22 (m, 1H), 2.05 (d, J = 33.7 Hz, 3H), 1.82 -1.68 (m, 11H), 1.29 (ddd, J = 46.4, 34.9, 8.8 Hz, 12H), 1.09 -0.77 (m, 18H), 0.70 -0.56 (m, 1H).

Etapa 6: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39S,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-[(1R)-2- [(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,5R)-2.3.4.5.6- pentahidroxihexoxi]-70, 71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45.46.47.48.49- pentona (I-58) y (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39R,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidmxi-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidmxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-57):

[0396] 90 mg de (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,5R)-2.3.4.5.6- pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatricciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH = 3:3:1:1) para obtener (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39S,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3- metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-58: 15 mg, 17%) and (21E,23E,25E,26E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39R,40S,41R,42R,55R)-41,55-dihidroxi-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42-metoxi-30,31,32,33,43,44-hexametil-39-[(2R,3R,4R,5R)-2.3.4.5.6- pentahidroxihexoxi]-70,71-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(43),26(44)-tetraeno-45,46,47,48,49-pentona (I-57: 8 mg, 9% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0397] Método de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC-3(IC30CE-NJ008)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 25 cm L

Inyección: 50.0 pl

Fase móvil: Hexano/EtOH=50/50(V/V)

Caudal: 0,8 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °c

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AT CP-HPLC-06

[0398] I-58: ESI-MS (EI+, m/z): 1086.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.45 - 5.93 (m, 4H), 5.59 - 4.88 (m, 5H), 4.23 (d,J= 26.4 Hz, 1H), 4.00 - 3.48 (m, 14H), 3.46 - 3.23 (m, 11H), 2.93 (d,J= 6.8 Hz, 2H), 2.79 - 2.49 (m, 3H), 2.38 -1.84 (m, 8H), 1.66 (t,J= 14.8 Hz, 9H), 1.50 -1.17 (m, 11H), 1.16 -0.79 (m, 18H), 0.64 (dd,J= 23.7, 11.8 Hz, 1H).

[0399] I-57: ESI-MS (EI+, m/z): 1086.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.49-5.98 (m, 4H), 5.52-5.11 (m, 5H), 4.32 4.23 (m, 1H), 4.08 -3.11 (m, 14H), 3.05 -2.43 (m, 9H), 2.37 - 1.95 (m, 8H), 1.91 - 1.53 (m, 17H), 1.46 -0.54 (m, 30H).

Ejemplo de (Referencia) 34: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi) etoxi]etoxi]-3-metoxiddohexM]-1-metN-etM]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametN-72,73-dioxa-62-azatriddohexatnaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55,56,57,58,59-pentona (I-78) y (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,49R,50S,51R,52R,61R)-51,61 -dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ddohexM]-1-metN-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55,56,57,58,59-pentona (I-72) y (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,49S,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55,56,57,58,59-pentona (I-73):

[0400]

��

Esquema sintético:

[0401]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de 2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietoxi]etanol:

[0402] A una solución de 2-(2-hidroxietoxi)etanol (50 g, 471,2 mmol) en piridina (49,6 Ml) a 0 °C se añadió terc-butil-clorodifenil-silano (30 g, 109,2 mmol). La solución resultante se agitó a rt durante 1h y después se vertió en agua (300 Ml) y se extrajo con EtOAc (300Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (EtOAc:PE = 1:8) para proporcionar 2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietoxi]etanol (29,9 g, 80% de rendimiento) como un aceite incoloro. ESI-MS (EI+, m/z): 367.2 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 87.74 - 7.64 (m, 4H), 7.46 - 7.33 (m, 6H), 3.81 (t,J= 5.2 Hz, 2H), 3.73 - 3.66 (m, 2H), 3.63 - 3.54 (m, 4H), 2.32 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 1.06 (s, 9H).

Etapa 2: Síntesis de 2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietoxi]trifluorometanosulfonato de etilo:

[0403] A una solución de 2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietoxi]etanol (7,6 g, 22 mmol) y DIPEA (5,76 Ml) en DCM (50 Ml) a 0 °C, bajo N<2>, se añadió 1,1-difluoroetanosulfonato de trifluorometilsulfonilo (3,92 Ml).92 Ml). La mezcla se diluyó con DCM (150 Ml), se lavó con NaHCO<3>saturado (150 Ml), agua (150 Ml) y salmuera (150 Ml). A continuación, la capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar 2-[2-[tercbutil(difenil)silil]oxietoxi]trifluorometanosulfonato de etilo (10,21 g, 97% de rendimiento) como un aceite marrón que se utilizó sin más purificación. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 87.69-7.66 (m, 4H), 7.43-7.36 (m, 6H), 4.58 (t,J= 4.8Hz, 2H), 3.83-3.80 (m, 4H), 3.64-3.61 (t,J= 5.6Hz, 2H), 1.05 (s, 9H).

Etapa 3: Síntesis de (35E,37E,39E,40E,50R,51S,52R,53R,55S,57S,59S,60S,61R,62R,71R)-60-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-[2-[terc-butílo(diphenyl)silil]oxietoxi]etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-61,71-dihidroxi-59,62-dimetoxi-50,51,52,53,63,64-hexametil-81,82-dioxa-73-azatriciclohexatriaconta-35,37,39(63),40(64)-tetraeno-65,66,67,68,69-pentona:

[0404] Una mezcla de everolimus (2 g, 2,09 mmol), 2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietoxi]trifluorometanosulfonato de etilo (9,95 g, 20,87 mmol) y N-etil-N-isopropil-propan-2-amina (5,82 Ml) en tolueno (50 Ml) se agitó a 60°C durante 18 h y luego se vertió en NaHCO<3>sat. Helado (60 Ml). La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (40 Ml) y la capa orgánica se lavó con agua (50 Ml * 3) y salmuera (50 Ml), después se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EA = 5:1 a 3:1) para obtener (35E,37E,39E,40E,50R,51S,52R,53R,55S,57S,59S,60S,61R,62R,71R)-60-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-[2-[tercbutilo(diphenyl)silil]oxietoxi]etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-61,71-dihidroxi-59,62-dimetoxi-50,51,52,53,63,64-hexametil-81,82-dioxa-73-azatriciclohexatriaconta-35,37,39(63),40(64)-tetraeno-65,66,67,68,69-pentona (1.7 g, 63% de rendimiento) como sólido amarillo. ESI-MS (EI+, m/z): 1307.5 [M+Na]+.

Etapa 4: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-44,47-dimetoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona:

[0405] A una solución de (35E,37E,39E,40E,50R,51S,52R,53R,55S,57S,59S,60S,61R,62R,71R)-60-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-[2-[tert-butil(diphenil)silil]oxietoxi]etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-61,71-dihidroxi-59,62-dimetoxi-50,51,52,53,63,64-hexametil-81,82-dioxa-73-azatriciclohexatriaconta-35,37,39(63),40(64)-tetraeno-65,66,67,68,69-pentona (322 mg, 0.251 mmol) en THF (10 Ml) se añadió piridina HF (248,5 mg, 2,51 mmol). La solución resultante se agitó a rt durante 3 h, después se vertió en NaHCO<3>acuoso saturado y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (acetona: PE = 1:3) para obtener (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-44,47-dimetoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (114 mg, 44% de rendimiento) como sólido amarillo claro. ESI-MS (EI+, m/z): 1069.3 [M+Na]+.

Etapa 5: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-((1R)-2-((1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55,56,57,58,59-pentona (I-78):

[0406] Una mezcla de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-44,47-dimetoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (0.95 g, 0,908 mmol), 2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etanol (2 Ml) y ácido p-toluenosulfónico (0,78 g, 4,54 mmol) en Th F (20 Ml) se agitó a 20 °C durante 2 h. La reacción se vertió en NaHCO<3>acuoso saturado frío (30 Ml) y se extrajo con EtOAc (50 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se concentraron y se purificaron mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 6..5:1) para obtener (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi) etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54hexametil-72,73-dioxa-62-azatricidohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55,56,57,58,59-pentona (I-78: 0,317 g, rendimiento del 30%) como sólido blanco. ESI-MS (EI+,m/z):1186.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 86.39-5.95 (m, 4H), 5.59-5.34 (m, 2H), 5.26-5.09 (m, 2H), 4.81 (s, 1H), 4.29-4.15 (m, 1H), 4.00-3.49 (m, 28H), 3.48-3.34 (m, 9H), 3.16-3.0 (m, 4H), 2.80-2.52 (m, 3H), 2.34-2.20 (m, 2H), 2.07-1.88 (m, 4H), 1.79-1.72 (m, 5H), 1.66(s, 3H), 1.51-1.38 (m, 4H), 1.37-1.22 (m, 7H), 1.21-0.84 (m, 20H), 0.76-0.64 (m, 1H).

Etapa 6: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,49S,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletíl]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametíl-72,73-dioxa-62-azatríciclohexatríaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55.56.57.58.59- pentona (I-73) y (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,49R,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55,56,57,58,59-pentona (I-72):

[0407] 330 mg de (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatricciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55.56.57.58.59- pentona se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtoAc:MeOH= 3:3:1:1) para obtener (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,49S,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55.56.57.58.59- pentona (I-73: 77 mg, 23% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,49R,50S,51R,52R,61R)-51,61-dihidroxi-49-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-52-metoxi-40,41,42,43,53,54-hexametil-72,73-dioxa-62-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(53),26(54)-tetraeno-55.56.57.58.59- pentona (I-72: 50 mg, rendimiento del 15%), ambos como sólidos blancos.

[0408] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 2.5 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 6,5 mg/ml

Inyección: 7 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40 (V/V)

Caudal: 40 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0409] I-73: ESI-MS (EI+, m/z): 1186.6 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 86.42 - 6.06 (m, 3H), 5.92 (dd, J = 29.5, 10.8 Hz, 1H), 5.55 -5.37 (m, 2H), 5.26 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 5.14 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.23 (d, J = 24.9 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.81 -3.22 (m, 36H), 3.19 -2.99 (m, 3H), 2.78 -2.48 (m, 3H), 2.33 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 2.10 -1.87 (m, 5H), 1.76 - 1.55 (m, 13H), 1.46 (s, 4H), 1.39 -1.18 (m, 5H), 1.15 -0.81 (m, 18H), 0.71 (dd, J = 23.5, 11.7 Hz, 1H).

[0410] I-72: 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.42 - 5.92 (m, 4H), 5.61 - 5.04 (m, 5H), 4.24 (d,J= 53.9 Hz, 2H), 3.99 (dd,J= 13.8, 6.9 Hz, 1H), 3.83 -2.90 (m, 36H), 2.75 -2.46 (m, 3H), 2.16 (ddd,J= 109.4, 53.2, 24.9 Hz, 7H), 1.86 -1.69 (m, 7H), 1.52 -1.16 (m, 17H), 1.15 -0.80 (m, 18H), 0.66 (dd,J= 23.9, 11.6 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 35: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(lR)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatricidohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-91):

[0411]

Esquema sintético:

[0412]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno:

[0413] A una suspensión de hidruro sódico (12,49 g, 520,5 mmol) en DMF (150 Ml) se añadió 2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etanol (5 g, 34,7 mmol) en DMF (10 Ml) bajo atmósfera de N<2>a 0 °C. La mezcla se agitó durante 1 h y a continuación se añadió gota a gota 2-bromoetoximetilbenceno (18,66 g, 86,75 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h, se extinguió con agua (50 Ml) y se extrajo con EtOAc (80 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (50 Ml * 3), salmuera (50 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EA = 25:1 a 20:1) para proporcionar 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno (8,1 g, 84% de rendimiento) como líquido incoloro. 1H NMR (400MHz, CDCk): 57.37 - 7.26 (m, 5H), 4.57 (s, 2H), 3.90 (q,J=<8 . 8>Hz, 2H), 3.79 (dd,J= 5.6, 3.5 Hz, 2H), 3.71 - 3.61 (m,<6>H).

Etapa 2: Síntesis de 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]:

[0414 ] A una solución de 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno (0,5 g, 1,8 mmol) en CH<3>OH (10 Ml) se añadió Pd/C (0,43 g) y la reacción se agitó bajo atmósfera de h<2>a temperatura ambiente (20°C) durante 20 h. El Pd/C se eliminó por filtración y el filtrado resultante se concentró y purificó por cromatografía en gel de sílice (DCM:CH<3>OH= 50:1) para proporcionar 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etanol (0,30 g, 89% de rendimiento) como aceite incoloro. 1H NMR (400 Mh z , CDCl<3>) 53.91 (q,J= 8.7 Hz, 2H), 3.80 (dd,J= 5.6, 3.4 Hz, 2H), 3.75 (d,J =4.0 Hz, 2H), 3.70 (dd,J= 5.5, 3.5 Hz, 2H), 3.62 (dd,J= 5.2, 3.9 Hz, 2H), 2.23 (t,J= 5.7 Hz, 1H (OH)). 19F NMR (376 MHz, CDCk, (trifluorometilbenzene as standard) 5 -74.33 (t,J=<8 . 8>Hz).

Etapa 3: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona:

[0415] A una solución desgasificada de (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-dihidroxi-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-38,41-dimetoxi-29,30,31,32,42,43-hexametil-60,61-dioxa-51-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(42),27(43)-tetraeno-44,45,46,47,48-pentona (0.1 g, 0,11 mmol) en THF (5 Ml) a 0 °C se añadió ácido p-toluenosulfónico (94 mg, 0,547 mmol) y 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etanol (0,2 g, 1,09 mmol). La mezcla resultante se agitó a 23°C durante 5 h bajo N<2>y después se vertió en NaHCO<3>sat. (40 Ml) y se extrajo con EtOAc (30 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (30 Ml * 2), salmuera (20 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía de fase inversa (C<18>, CH<3>CN:H<2>O = rendimiento del 0% al 65%) para proporcionar (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33.,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoril-ciclohexil]-1-metil-metil],34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-91: 30 mg, 26% rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1093.5 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCk) 56.38-5.90 (m, 4H), 5.46-5.05 (m, 4H), 4.5 4.4 (m, 1H), 4.21-4.11 (m, 2H), 3.91-3.52 (m,<6>H), 3.34-3.25 (m,<8>H), 3.07 (s, 1H), 2.84-2.59 (m, 5H), 2.31-1.91 (m,<6>H), 1.77-1.54 (m, 22H), 1.43-1.19 (m, 10H), 1.04-0.80 (m, 16H), 0.60 (q,J= 12Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 36: Síntesis de (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)cidohexM]-1-metil-etil]-36,37,38,39,49,50-hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51.52.53.54.55- pentona (I-92) y (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)cidohexM]-1-metil-etil]-36,37,38,39,49,50-hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51.52.53.54.55- pentona (I-90) y (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ddohexM]-1-metil-etil]-36,37,38,39,49,50-hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51.52.53.54.55- pentona (I-89):

[0416]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de trifluorometanosulfonato de 2-metoxietilo:

[0418] Una solución de 2-metoxietanol (3 g, 39,42 mmol) y DIPEA (10,30 Ml, 59,14 mmol) en DCM (60 Ml) se enfrió a 0 °C bajo N<2>, y se añadió gota a gota anhídrido trifluorometanosufónico (7,28 Ml, 43,37 mmol). La mezcla se agitó a 0 °C durante 2 h y después se diluyó con DCM (50 Ml). La capa orgánica se lavó con NaHCO<3>sat. (50 Ml), agua (50 Ml), salmuera (50 Ml), después se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró al vacío para obtener trifluorometanosulfonato de 2-metoxietilo como aceite marrón. Se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 54.62 - 4.58 (t, J=4.4Hz 2H), 3.70 - 3.65 (t, J=4.4Hz, 2H), 3.39 (s, 3H).

Etapa 2: Síntesis de (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-dihidroxi-41,44-dimetoxi-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ciclohexil]-1-metil-etil]-32,33,34,35,45,46-hexametil-62,63-dioxa-54-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(45),28(46)-tetraeno-47,48,49,50,51-pentona:

[0419] Una mezcla de rapamicina (2 g, 2,19 mmol), trifluorometanosulfonato de 2-metoxietilo y N-etil-N-isopropil-propan-2-amina (6,48 Ml, 37,19 mmol) en tolueno (60 Ml) se agitó a 58°C durante 18 h y luego se diluyó con EtOAc (100 Ml), se vertió en Sat. Helado y se añadió a la mezcla. NaHCO<3>(150 Ml), se lavó con agua helada dos veces (250 Ml), salmuera (200 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (acetona:PE = 1.:6):6) para obtener (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R, 44R,53R)-43,53-dihidroxi-41,44-dimetoxi-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ciclohexil]-1-metil-etil]-32,33,34,35,45,46-hexametil-62,63-dioxa-54-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(45),28(46)-tetraeno-47,48,49,50,51-pentona (0.53 g, rendimiento del 25%) como sólido marrón claro. ESI-MS (EI+, m/z): 994.5 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 56.42-6.11 (m, 3H), 5.96 (m, 1H), 5.58-5.40 (m, 2H), 5.29-5.14 (m, 2H), 4.80 (s, 1H), 4.18 (m, 1H), 3.75-3.64 (m, 5H), 5.59-3.50 (m, 3H), 3.46-3.43 (m, 4H), 3.38-3.30 (m, 6H), 3.17-3.05 (m, 4H), 2.80-2.56 (m, 3H), 2.06-1.92 (m, 4H), 1.86-1.75 (m, 6H), 1.69-1.59 (m, 10H), 1.51-1.42 (m, 5H), 1.31-1.15 (m, 8H), 1.11-1.04 (m, 6H), 1.00-0.83 (m, 10H), 0.72 (q,J= 12Hz, 1H).

Etapa 3: Síntesis de (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ciclohexil]-1-metil-etil]-36.37.38.39.49.50- hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-92):

[0420] Una solución de (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R, 44R,53R)-43,53-dihidroxi-41,44-dimetoxi-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ciclohexil]-1-metil-etil]-32,33,34,35,45,46-hexametil-62,63-dioxa-54-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(45),28(46)-tetraeno-47,48,49,50,51-pentona (0.45 g, 0,463 mmol) en THF (25 Ml) se desgasificó con N<2>, se añadió ácido 4-metilbencenosulfónico (0,4 g, 2,31 mmol) a 0 °C, seguido de 2-(2-metoxietoxi)etanol (4 Ml). La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 0,5 h bajo N<2>, y después a 25 °C durante 3 h. La mezcla se vertió en NaHCO<3>sat. Helado (50 Ml), se extrajo con EtOAc (80 Ml * 2), la capa orgánica se lavó con agua (100 Ml), salmuera (100 Ml) y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O con un rendimiento del 10%-75%) para obtener (23E,25E,27E,28E,36R,37S, 38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi) ciclohexil]-1-metil-etil]-36,37,38,39,49,50-hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-92: 0,11 g 22% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1082.5 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 56.32-5.99 (m, 3H), 5.89-5.78 (m, 1H), 5.48-5.07 (m, 4H), 4.70 4.51 (m, 1H), 4.20-4.10 (m, 1H), 3.83-3.76 (m, 1H), 3.73-3.62 (m, 3H), 3.57-5.43 (m, 8H), 3.41-3.37 (m, 4H), 3.35-3.21 (m, 12H), 3.14-3.97 (m, 3H), 2.68-2.45 (m, 3H), 2.24 (m, 2H), 1.99-1.81 (m, 4H), 1.68-1.52 (m, 15H), 1.44-1.34 (m, 4H), 1.26 1.14 (m, 5H), 1.05-0.94 (m, 8H), 0.92-0.77 (m, 10H), 0.65 (q,J= 12Hz, 1H).

Etapa 4: Síntesis de (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ciclohexil]-1-metil-etil]-36.37.38.39.49.50- hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-90) y (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ciclohexil]-1-metil-etil]-36.37.38.39.49.50- hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-89):

[0421] 1,16 g de (23E,25E,27E,28E,36R,37S, 38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi) ciclohexil]-1-metil-etil]-36,37,38,39,49,50-hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano: DCM:EtOAc:MeOH = 3:3:1:0.3) para obtener (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxil-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ciclohexil]-1-metil-etil]-36.37.38.39.49.50- hexametil-66,67-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-90: 340 mg, 28% rendimiento) y (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-48-metoxi-45-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-metoxi-4-(2-metoxietoxi)ciclohexil]-1metil-etil]-36,37,38,39,49,50-hexametil-66,67-dioxa-58-azatricidohexatriaconta-23,25,27(49),28(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-89: 135 mg, 11% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0422] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 2.5 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 2,5 mg/ml

Inyección: 3 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40 (V/V)

Caudal: 30 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0423] 1-90: ESI-MS (EI+, m/z): 1082.4 [M+Na]+.1H NMR (400 MHz, CDCh) 86.40 - 6.22 (m, 2H), 6.14 (dt,J= 15.0, 9.8 Hz, 1H), 5.90 (dd,J= 32.4, 10.7 Hz, 1H), 5.56 - 5.32 (m, 2H), 5.27 (d,J= 5.0 Hz, 1H), 5.16 (d,J= 4.2 Hz, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.18 (d,J= 5.9 Hz, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.80 -3.24 (m, 29H), 3.22 -3.01 (m, 3H), 2.72 (dd,J= 16.9, 5.8 Hz, 2H), 2.57 (dd,J= 16.8, 6.4 Hz, 1H), 2.30 (t,J= 21.1 Hz, 2H), 1.93 (ddd,J= 26.1,21.2, 9.8 Hz, 6H), 1.82 -1.64 (m, 8H), 1.50 (dd,J= 22.1, 10.9 Hz, 6H), 1.37 -1.15 (m, 6H), 1.15 -0.82 (m, 18H), 0.71 (q,J= 8.0, 20.0 Hz, 1H).

[0424] I-89: ESI-MS (EI+, m/z): 1082.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.41 - 5.93 (m, 4H), 5.59 - 5.37 (m, 2H), 5.20 (dd,J= 23.8, 19.2 Hz, 2H), 4.55 (d,J= 10.4 Hz, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.15 (d,J= 10.2 Hz, 1H), 4.00 (d,J= 3.7 Hz, 1H), 3.91 - 3.27 (m, 28H), 3.27 - 2.85 (m, 5H), 2.76 - 2.24 (m, 5H), 2.18 - 1.55 (m, 14H), 1.54 - 1.20 (m, 10H), 1.16 - 0.82 (m, 18H), 0.75 -0.61 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 37: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(lR)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metN-etM]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametN-44-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatricidohexatriaconta-21,23,25(48),26(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (1-86) y (21E,23E,25E,26E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-44-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(48),26(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-85):

[0425]

Esquem a sintético

[0426]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno:

[0427] A una solución de hidruro de sodio (12,49 g, 520,5 mmol) en DMF (150 Ml) se añadió 2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etanol (5 g, 34,7 mmol) en DMF (10 Ml) bajo N<2>a 0 °C. La mezcla se agitó a 0 °C durante 1 h, después se añadió gota a gota 2-bromoetoximetilbenceno (18,66 g, 86,75 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. La mezcla se extinguió con agua (50 Ml) y se extrajo con EtOAc (80 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (50 Ml * 3), salmuera (50 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EtOAc = 25:1 a 20:1) para obtener 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno (8,1 g, 83,9% de rendimiento) como líquido incoloro. 1H NMR (400MHz, CDCla): 57.37 -7.26 (m, 5H), 4.57 (s, 2H), 3.90 (q,J= 8.8 Hz, 2H), 3.79 (dd,J= 5.6, 3.5 Hz, 2H), 3.71 -3.61 (m, 6H).

Etapa 2: Síntesis de 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]:

[0428] A una solución de 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno (0,5 g, 1,80 mmol) en CH<3>OH (10 Ml) se añadió Pd/C (436,45 mg). A continuación, esta mezcla se agitó en atmósfera de H<2>a temperatura ambiente durante 20 h, se filtró y el filtrado se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: CH<3>OH= 50: 1) para obtener 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etanol (0,30 g, 89% de rendimiento) como aceite incoloro. 1H NMR (400 Mh z , CDCh)53.91 (q,J= 8.7 Hz, 2H), 3.80 (dd,J= 5.6, 3.4 Hz, 2H), 3.75 (d,J= 4.0 Hz, 2H), 3.70 (dd,J= 5.5, 3.5 Hz, 2H), 3.62 (dd,J= 5.2, 3.9 Hz, 2H), 2.23 (t,J= 5.7 Hz, 1H (OH)). 19F NMR (376 MHz, CDCh, (trifluorometil)benceno como patrón) 5 -74 ,33 (t,J=<8 , 8>Hz).

Etapa 3: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-44-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi) etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(48),26(49)-tetraeno-50.51.52.53.54- pentona (I-86):

[0429] Se desgasificó una solución de everolimus (0,5 g, 0,52 mmol) en THF (5 Ml), se añadió ácido p-toluenosulfónico (0,45 g, 2,61 mmol) a 0 °C seguido de 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etanol (0,98 g, 5,22 mmol). La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 0,5 h bajo N<2>, después a 23 °C durante<6>h, se vertió en NaHCOs sat. (40 Ml) y se extrajo con EtOAc (30 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (30 Ml * 2), salmuera (40 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O de 0% a 70% de rendimiento) para proporcionar (21E,23E,25E,26E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S, 46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-44-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(48),26(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-<8 6>: 0,08 g, 14% rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1136.5 [M+Na]+. 1H NMR (400MHz, CDCla): 56.44-5.88 (m, 4H), 5.73-5.06 (m, 4H), 4.52-4.32 (m, 1H), 4.22-4.12 (m, 1H), 3.91-3.81 (m, 2H), 3.71-3.51 (m,<6>H), 3.42-3.21 (m, 16H), 3.13-2.98 (m, 4H), 2.63-2.42 (m, 4H), 2.32-2.14 (m, 2H), 2.05-1.93 (m, 3H), 1.86-1.55 (m, 16H), 1.44-1.35 (m, 4H), 1.24-1.15 (m, 5H), 1.06-0.78 (m, 17H), 0.65-0.51 (m, 1H).

Etapa 4: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etíl]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-44-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(48),26(49)-tetraeno-50.51.52.53.54- pentona (I-85):

[0430] 100 mg de (21E,23E,25E,26E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S, 46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-44-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi) etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(48),26(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona se purificó mediante HPLC prequiral, que proporcionó (21E,23E,25E,26E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35.

(21E,23E,25E,26E,35R,36S,36S,37R,38,48,49),36,37,38,48,49-hexametil-44-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(48),26(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-85: 14,3 mg, 14,3% rendimiento) como sólido blanco.

[0431] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 5.0 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 2,4 mg/ml

Inyección: 5 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=70/30(V/V)

Caudal: 30 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0432] I-85: ESI-MS (EI+, m/z): 1136.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13)<8>6.42 - 6.06 (m, 3H), 5.92 (dd, J = 30.3, 10.3 Hz, 1H), 5.56 -5.06 (m, 5H), 4.74 (s, 1H), 4.18 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 3.94 -3.83 (m, 2H), 3.82 -3.51 (m, 12H), 3.49 -3.25 (m, 11H), 3.22 -3.03 (m, 2H), 2.72 (dd, J = 16.6, 5.5 Hz, 2H), 2.57 (dd, J = 17.0, 6.5 Hz, 1H), 2.34 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 2.25 -2.18 (m, 1H), 2.13 - 1.85 (m, 5H), 1.69 (dd, J = 35.2, 8.9 Hz, 10H), 1.47 (dd, J = 20.5, 13.6 Hz, 5H), 1.26 (s, 7H), 1.15 -0.81 (m, 18H), 0.71 (dd, J = 23.9, 12.0 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 38: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(lR)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatricidohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48.49.50.51.52- pentona (I-91) y (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi] etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48.49.50.51.52- pentona (1-85) y (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42R,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatricidohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona:

[0433]

Esquem a sintético:

[0434]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etanol:

[0435] 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etanol fue igual que el Ejemplo 37.

Etapa 2: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi] etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-91):

[0436] Una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) en DCM (20 Ml) se desgasificó a - 40°C y se añadió ácido trifluoroacético (1,67 Ml). Tras agitar durante 10 min, se añadió 2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etanol (0,2 g, 1,09 mmol). La mezcla se agitó a -40 °C durante 40 minutos más y, a continuación, se vertió en NaHCO<3>(aq.) helado. 60Ml), se lavó con agua (20Ml), salmuera (20Ml), se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 65:35) para obtener (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-91: 85 mg, rendimiento del 15%) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1092.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.45 - 5.76 (m, 4H), 5.40 (ddd,J= 24.9, 15.2, 8.0 Hz, 2H), 5.25 -4.99 (m, 2H), 4.57 -4.01 (m, 3H), 3.98 -3.45 (m, 7H), 3.43 -2.99 (m, 11H), 2.95 -2.3 7 (m, 6H), 2.26 (d,J= 13.9 Hz, 2H), 2.08 - 1.76 (m, 6H), 1.75-1.52 (m, 14 H) 1.48 - 1.10 (m, 10H), 1.07 - 0.74 (m, 18H), 0.60 (dd,J= 23.5, 12.0 Hz, 1H).

Etapa 3: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42R,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona(I-126):

[0437] 159 mg de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-cidohexil]-1-metiletil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi] etoxi]-65,66-dioxa-56-azatricidohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona se purificó mediante HPLC prequiral para proporcionar (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-metil]-45-metoxi-33.

(21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R),34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-125: 48.5 mg, 30% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42R,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-126:43 mg, 27% de rendimiento) como sólido blanco.

[0438] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 5.0 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 3,0 mg/ml

Inyección: 3 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=70/30(V/V)

Caudal: 30 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0439] I-125: ESI-MS (EI+, m/z): 1092.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.36 - 6.13 (m, 2H), 6.06 (dd,J= 15.0, 10.0 Hz, 1H), 5.85 (dd,J= 29.4, 10.8 Hz, 1H), 5.49 -5.37 (m, 1H), 5.33 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 5.20 (d,J= 4.6 Hz, 1H), 5.08 (t,J= 11.7 Hz, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.11 (d,J= 5.8 Hz, 1H), 3.94 -3.64 (m, 7H), 3.63 -3.46 (m, 5H), 3.42 -3.18 (m, 12H), 2.93 -2.79 (m, 2H), 2.71-2.43 (m, 4H), 2.27 (d,J= 11.8 Hz, 2H), 2.08-1.85 (m, 6H), 1.83 -1.61 (m, 11H), 1.48 -1.21 (m, 8H), 1.08 -0.74 (m, 18H), 0.65 -0.54 (m, 1H).

[0440] I-126: ESI-MS (EI+, m/z): 1092.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 86.41 -6.07 (m, 3H), 6.00 -5.81 (m, 1H), 5.56 - 5.05 (m, 4H), 4.75 (s, 1H), 4.18 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 3.98 - 3.52 (m, 11H), 3.50 - 3.22 (m, 12H), 2.95 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.77 -2.50 (m, 4H), 2.38 -2.16 (m, 2H), 2.12 -1.83 (m, 5H), 1.69 (dd, J = 39.3, 11.0 Hz, 12H), 1.49 -1.17 (m, 11H), 1.15 -0.80 (m, 18H), 0.74 -0.60 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 39: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(lR)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etM]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (1-88) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (1-82) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(tnfluorometoxi)etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatricidohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-83):

[0441]

Esquem a sintético:

[0442]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de O-[2-(2-benciloxietoxi)etil] metilsulfanilmetanotioato:

[0443] Se cargó un matraz de fondo redondo de 1000 Ml de dos cuellos equipado con una barra de agitación magnética con 2-(2-benciloxietoxi)etanol (12 g, 61,2 mmol) y cloruro de bencil(trietil)amonio (1,0 g, 4,87 mmol). Se añadió una solución acuosa al 50% de hidróxido sódico (141 Ml) a través de un embudo cuentagotas. Tras agitar la mezcla durante 10 min, se añadió gota a gota CS<2>(141 Ml, 2,34 mol), seguido de yodometano (22,0 g, 154 mmol). La mezcla se agitó durante 3 h a temperatura ambiente. Se añadió agua (100 Ml). La capa orgánica se eliminó y la fase acuosa se extrajo con CH<2>Cl<2>(100 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 * 100 Ml), se secaron sobre MgSO<4>, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (EtOAc:PE = 1:3) para obtener O-[2-(2-benciloxietoxi)etil] metilsulfanilmetanotioato (16,8 g, 95% de rendimiento) como aceite amarillo. ESI-MS (EI+, m/z): 308.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, DMSO-da) 57.32 (dt,J= 18.3, 6.8 Hz, 5H), 4.74 - 4.62 (m, 2H), 4.50 (s, 2H), 3.85 - 3.72 (m, 2H), 3.60 (ddd,J= 8.7, 6.2, 3.6 Hz, 4H), 2.56 (s, 3H).

Etapa 2: Síntesis de 2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoximetilbenceno:

[0444] A una suspensión de 1,3-dibromo-5,5-dimetil-imidazolidina-2,4-diona (29,95 g, 104,75 mmol) en DCM (150 Ml) se añadió poli(fluoruro de hidrógeno) (HF)g/Pindinio(49.36 Ml, 209,49 mmol,) y O-[2-(2-benciloxietoxi)etil] metilsulfanilmetanotioato (10 g, 34,92 mmol) a -78 °C, y la mezcla se agitó a - 50 °C durante 2 h. La mezcla se vertió en una solución acuosa de NaHCO<3>y NaHSO<3>, se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró, se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EtOAc = 25:1) para obtener el producto bruto. A continuación, el crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EtOAc = 100:1 a 50:1 a 40:1) para obtener 2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoximetilbenceno (3,6 g, 39% de rendimiento) como líquido incoloro. ESI-MS (EI+, m/z): 287.1 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 57.37-7.22 (m, 5H), 4.57 (s, 2H), 4.10 (t,J= 4.8Hz, 2H), 3.75 (t,J= 4.8Hz, 2H), 3.72 -3.6 2 (m, 4H).

Etapa 3: Síntesis de 2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etanol:

[0445] A una solución de 2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoximetilbenceno (3,4 g, 12,87 mmol) en CH<3>OH (60 Ml) se añadió Pd/C (3,13 g). A continuación, esta mezcla se agitó en atmósfera de H<2>a temperatura ambiente durante 20 h, se filtró, se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: CH<3>OH= 50: 1) para proporcionar 2-[2-(trifluorometoxi)etoxi] etanol (1,87 g, 83% de rendimiento) como líquido incoloro. 1H NMR (400 MHz, cD ch)54.11 -4.03 (m, 2H), 3.69 (dt,J= 4.4, 2.3 Hz, 4H), 3.61-3.54 (m, 2H), 2.75 (t,J= 5.9 Hz, 1H). 19F NMR (376 MHz, CDCh) 5 -61.11 (s).

Etapa 4: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-((1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-88):

[0446] A una solución desgasificada de everolimus (0,5 g, 0,52 mmol) en THF (30 Ml) se añadió ácido p-toluenosulfónico (0,45 g, 2,61 mmol) a 0 °C seguido de 2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etanol (0,91 g, 5,22 mmol). La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 0,5 h bajo N<2>, y después a 23 °C durante 6 h. La reacción se vertió en NaHCO<3>sat. (40 Ml) y se extrajo con EtOAc (30 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (30 Ml * 2), salmuera (20 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida a temperatura ambiente. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H<2>O = rendimiento del 0% al 70%) para proporcionar (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S, 41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34. (21E,23E,25E,26E) para obtener35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-88: 141 mg, 24% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1122.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 56.39-5.88 (m, 4H), 5.73-5.05 (m, 5H), 4.52-3.83(m, 5H), 3.70-3.50 (m, 6H), 3.43-3.21 (m, 8H), 3.12-2.93 (m, 4H), 2.80-2.44 (m, 4H), 2.31-2.16 (m, 4H), 2.05-1.59 (m, 20H), 1.43-1.34 (m, 4H), 1.21-1.09 (m, 6H), 1.01-0.78 (m, 17H), 0.62-0.51 (m, 1H).

Etapa 5: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi) etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-83) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-82):

[0447] 130 mg de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi) etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona se purificó mediante HPLC prequiral para proporcionar (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.

(21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R),35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-82: 19 mg, 14.6% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(trifluorometoxi)etoxi]etoxi]-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-83: 12 mg, 9,2% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0448] Método de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC(IC00CE-OL002)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 25 cm L

Inyección: 40.0 ul

Fase móvil: Hexano/EtOH =60/40(V/V)

Caudal: 1,0 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AT CP-HPLC-07

[0449] I-82: ESI-MS (EI+, m/z): 1122.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.43 - 5.83 (m, 4H), 5.57 - 5.13 (m, 5H), 4.31 -4.04 (m, 3H), 3.91 -3.53 (m, 11H), 3.49 -3.00 (m, 19H), 2.76 -2.52 (m, 3H), 2.25 (dd,J= 34.2, 26.6 Hz, 3H), 2.12 -1.9 6 (m, 5H), 1.75 (dd,J= 35.2, 24.7 Hz, 8H), 1.52 -1.34 (m, 8H), 1.15 -0.79 (m, 18H), 0.72 (d,J= 12.1 Hz, 1H).

[0450] I-83: ESI-MS (EI+, m/z): 1122.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.54 -6.41 (m, 1H), 6.18 (tdd,J= 29.7, 22.4, 12.7 Hz, 3H), 5.82 - 5.68 (m, 1H), 5.46 - 5.30 (m, 2H), 5.19 (dd,J= 25.5, 20.6 Hz, 2H), 4.62 - 4.40 (m, 1H), 4.21 (d,J= 18.4 Hz, 1H), 3.94 (dd,J= 34.8, 4.5 Hz, 1H), 3.83 -3.62 (m, 4H), 3.59 (d,J= 3.3 Hz, 1H), 3.50 -2.95 (m, 13H), 2.62 (dt,J =55.5, 38.6 Hz, 2H), 2.42 - 2.17 (m, 3H), 2.16 - 1.57 (m, 24H), 1.54 - 1.27 (m, 10H), 1.12 - 0.80 (m, 18H), 0.71 -0.62 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 40: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(lR)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metN-etM]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi] etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (1-87) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi] etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (1-79) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi] etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-80):

[0451]

ı64

Esquem a sintético:

[0452]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de 2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno:

[0453] Bajo una atmósfera de nitrógeno, sulfonato de plata trifluorometano (19,64 g, 76,44 mmol), sulfonato de litio trifluorometano (3,97 g, 25.48 mmol), 1-(dorometil)-4-fluoro-1,4-diazoniabicido[2.2.2]octano bis(tetrafluoroborato) (18,05 g, 50,96 mmol) y fluoruro potásico (5,92 g, 101,92 mmol). A continuación se añadieron 2-(2-benciloxietoxi)etanol (5 g, 25,48 mmol), trimetil(1,1,2,2-pentafluoroetil)silano (14,69 g, 76,44 mmol), EtOAc (20 Ml), trifluorometilbenceno (20 Ml) y 2-fluoropiridina (7,42 g, 76,44 mmol) bajo atmósfera de N<2>en este orden. La mezcla de reacción se agitó bajo atmósfera de N<2>durante 60 h a 30 °C y después se filtró a través de un tapón de sílice (eluyendo con EtOAc). Se recogió el filtrado y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EtOAc = 25:1) para obtener 2-[2-(1,1,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno (2,5 g, 31% de rendimiento) como líquido amarillo claro. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 57.36 -7.24 (m, 5H), 4.56 (s, 2H), 4.17 -4.11 (m, 2H), 3.76 -3.72 (m, 2H), 3.71 -3.65 (m, 2H), 3.65 -3.60 (m, 2H). 19F NMR (376 MHz, CDCla) 5-90.77 (s), -86.02 (s).

Etapa 2: Síntesis de 2-[2-(1,1,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etanol:

[0454] A una solución de 2-[2-(1,1,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etoximetilbenceno (0,757 g, 2,41 mmol) en CH<3>OH (10 Ml) se añadió Pd/C (0,58g). La mezcla se agitó en atmósfera de H<2>a temperatura ambiente durante 20 h, después se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM:CH<3>OH= 50:1) para obtener 2-[2-(1,1,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etanol (0,5 g, 93% de rendimiento) como líquido incoloro. 1H NMR (400 Mhz , CDCh)54.13 -4.0 6 (m, 2H), 3.69 (dd,J= 5.4, 4.1 Hz, 4H), 3.54 (dd,J= 5.2, 3.9 Hz, 2H), 2.47 (s, 1H). 19F NMR (376 MHz, CDCh) 5 -86.21 (d,J= 1.2 Hz), -90.98 (d,J= 1.2 Hz).

Etapa 3: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49.50.51.52.53- pentona (I-87):

[0455] A una solución de everolimus (0,5 g, 0,52 mmol) en THF (10 Ml) se añadió ácido p-toluenosulfónico (0,45 g, 2,61 mmol) a 0 °C, seguido de 2-[2-(1,1,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etanol (0,58 g, 2,61 mmol). La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 0,5 h bajo N<2>, después a 22 °C durante 6 h, y se vertió en NaHCO<3>sat. (40 Ml) y se extrajo con EtOAc (30 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (30 Ml * 2), salmuera (20 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida a temperatura ambiente. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H<2>O= rendimiento de 0% a 70%) para proporcionar (21E,23E,25E,26E, 34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxiciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34. (21E,23E,25E,26E) para obtener35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-87: 40 mg, 7% rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1172.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 56.45-5.95 (m, 4H), 5.79-5.13 (m, 5H), 4.59-4.17 (m, 3H), 3.98-3.59 (m, 8H), 3.50-3.28 (m, 10H), 3.20-3.00 (m, 5H), 2.89-2.49 (m, 4H), 2.37-2.22 (m, 4H), 2.10-1.61 (m, 20H), 1.51-1.23 (m, 8H), 1.06-0.85 (m, 16H), 0.71-0.63 (m, 1H).

Etapa 4: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49.50.51.52.53- pentona (I-80) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi] etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-79):

[0456] 95 mg de (21E,23E,25E,26E, 34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49.50.51.52.53- pentona se envió a separación quiral para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi] etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-80: 7,2 mg, 7.5% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-methy1-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-43-[2-[2-(1,1,2,2,2-pentafluoroetoxi)etoxi]etoxi]-67,68-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-79: 5,1 mg, 5,3% rendimiento) como sólido blanco.

[0457] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 5.0 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 0,79 mg/ml

Inyección: 5 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=70/30(V/V)

Caudal: 30 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0458] 1-80: ESI-MS (EI+, m/z): 1150.3 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 86.42 - 5.80 (m, 4H), 5.58 - 5.05 (m, 5H), 4.74 (s, 1H), 4.24 -4.08 (m, 3H), 3.92 -3.51 (m, 10H), 3.48 -3.24 (m, 12H), 3.13 (ddd,J =24.2, 17.1, 11.3 Hz, 3H), 2.64 (ddd,J= 23.4, 16.8, 6.0 Hz, 3H), 2.42 -2.15 (m, 3H), 2.14 -1.88 (m,<6>H), 1.84 -1.64 (m, 14H), 1.54 - 1.39 (m, 5H), 1.17 - 0.81 (m, 18H), 0.71 (dd,J= 23.8, 12.1 Hz, 1H).

[0459] I-79: ESI-MS (EI+, m/z): 1172.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCI<3>)<8>6.42 - 5.90 (m, 4H), 5.54 - 5.03 (m,<6>H), 4.31 -3.96 (m, 5H), 3.88 -3.01 (m, 22H), 2.94 -2.37 (m, 5H), 2.39 - 1.94 (m, 7H), 1.68 (dd,J= 28.2, 19.2 Hz,<8>H), 1.52 - 1.31 (m,<6>H), 1.14 -1.00 (m,<6>H), 0.97 -0.62 (m, 19H).

Ejemplo de (Referencia) 41: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-76) y (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ddohexM]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (1-66) y (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ddohexN]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-67):

[0460]

Esquem a sintético:

[0461]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de 2-[terc-butíl(difenil)silil]oxietíl trifluorometanosulfonato:

[0462] Una solución de 2-[terc-butM(difenil)sMil]oxietanol (4,3 g, 14,31 mmol) y DIPEA (2,77 g, 21,47 mmol) en DCM (40 Ml) se enfrió a 0 °C bajo N<2>y se añadió gota a gota anhídrido trifluorometanosulfónico (4,44 g, 15,74 mmol). La mezcla se agitó a 0 °C durante 2 h, se diluyó con DCM (50 Ml) y se lavó con NaHCO<3>sat. (50 Ml), agua (50 Ml *<3>) y salmuera (50 Ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró al vacío para obtener trifluorometanosulfonato de 2-[terc-butil(difenil)silil]oxietilo (6,19 g, 99% de rendimiento) como aceite marrón. Ésta se utilizó en el siguiente paso sin más purificación. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 57.66 (dd,J= 7.9, 1.5 Hz, 4H), 7.45-7.38 (m, 6H), 4.56 (t,J= 4.4Hz, 2H), 3.91 (t,J =4.4Hz, 2H).

Etapa 2: Síntesis de (35E,37E,39E,40E,48R,49S,50R,51R,53S,55S,57S,58S,59R,60R,69R)-58-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-[terc-butilo(diphenyl)silil]oxietoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-59,69-dihidroxi-57,60-dimetoxi-48.49.50.51.61.62- hexametil-79,80-dioxa-71-azatriciclohexatriaconta-35,37,39(61),40(62)-tetraeno-63,64,65,66,67-pentona:

[0463] Una solución de everolimus (1,5 g, 1,57 mmol), 2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil trifluorometanosulfonato y DIPEA (3,27 Ml, 18,78 mmol) en tolueno (20 Ml) se agitó a 45 °C durante 18 h. A continuación, la mezcla se vertió en agua helada. NaHCO<3>(50 Ml), se lavó con agua helada dos veces (60 Ml), salmuera (50 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. La mezcla se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EtOAc = 5:1 a 2:1, después PE: acetona = 4:1) para obtener (35E,37E,39E,40E,48R,49S,50R,51R,53S,55S,57S,58S,59R,60R,69R)-58-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-[terc-butilo(diphenyl)silil]oxietoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-59,69-dihidroxi-57,60-dimetoxi-48.49.50.51.61.62- hexametil-79,80-dioxa-71-azatriciclohexatriaconta-35,37,39(61),40(62)-tetraeno-63,64,65,66,67-pentona (1.15 g, 59% de rendimiento) como sólido marrón. ESI-MS (EI+, m/z): 1263.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 57.62-7.60 (m, 4H), 7.35-7.28 (m, 6H), 6.35-5.80 (m, 4H), 5.51-5.09 (m, 4H), 4.75 (s, 1H), 4.37-4.02 (m, 2H), 3.87 3.49 (m, 11H), 3.37-3.26 (m, 8H), 3.10-2.96 (m, 5H), 2.76-2.48 (m, 3H), 2.28-2.21 (m, 2H), 1.98-1.90 (m, 3H), 1.67-1.39 (m, 18H), 1.26-1.08 (m, 7H), 1.04-0.76 (m, 26H), 0.64 (q,J= 11.2Hz, 1H).

Etapa 3: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42,45-dimetoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona:

[0464] (35E,37E, 39E,40E,48R,49S,50R,51R,53S,55S,57S,58S,59R,60R,69R)-58-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[2-[tertbutil(diphenil)silil]oxietoxi]etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-59,69-dihidroxi-57,60-dimetoxi-48,49,50,51,61,62-hexametil-79,80-dioxa-71-azatriciclohexatriaconta-35,37,39(61),40(62)-tetraeno-63,64,65,66,67-pentona (1.15 g, 0,93 mmol) se disolvió en THF (10 Ml). Se añadió hidrofluoruro de piridinio (0,437 Ml, 1,85 mmol,) y la mezcla se agitó durante 3 h a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con EtOAc (30 Ml), se lavó con NaHCO<3>sat. (aq., 40 Ml * 2) hasta Ph 10, después se lavó con agua hasta neutralidad, salmuera (40Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:acetona = 4:1 a 2:1) para obtener (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42,45-dimetoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (680 mg, 73% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1024.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 56.35-5.80 (m, 4H), 5.51-5.09 (m, 4H), 4.75 (s, 1H), 4.37-4.02 (m, 2H), 3.87-3.49 (m, 11H), 3.37-3.26 (m, 8H), 3.10-2.96 (m, 5H), 2.76-2.48 (m, 3H), 2.28-2.21 (m, 2H), 1.98-1.90 (m, 3H), 1.67-1.39 (m, 18H), 1.26-1.08 (m, 7H), 1.04-0.76 (m, 17H), 0.64 (q,J= 11.2Hz, 1H).

Etapa 4: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-76):

[0465] A una solución de (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R, 45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-42,45-dimetoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-64,65-dioxa-55-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(46),27(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (0.65 g, 0,65 mmol) en THF (6 Ml) bajo N<2>a 0°C se añadió p-TsOH (0,56 g, 3,24 mmol) seguido de 2-(2-hidroxietoxi)etanol (1,38 g, 12,97 mmol). La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 10 min y después a 20°C durante 2 h. La mezcla se vertió en NaHCO<3>sat. (40 Ml) y se extrajo con EtOAc (30 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (30 Ml * 2), salmuera (40 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida a temperatura ambiente. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EtOAc= 50% a 100% EtOAc, luego a DCM:CH3CN=95:5 a 90:10) y después se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 50: 50) para obtener (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S, 46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-76: 140 mg, 20% rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1098.5 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 56.31-5.80 (m, 4H), 5.46-4.74(m, 5H), 4.21-4.11 (m, 2H), 3.68-3.56 (m, 18H), 3.4-3.14 (m, 12H), 3.03-2.97 (m, 2H), 2.68-2.39 (m, 5H), 2.28-2.25 (d, 2H), 1.73-1.55 (m, 18H), 1.40-1.14 (m, 8H), 1.03-0.79 (m, 16H), 0.64 (q,J= 11.2Hz, 1H).

Etapa 5: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-67) y (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-66):

[0466] 140 mg de (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S, 46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriccidohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona purificada mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes repurificados mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH = 3:3:1:1) para obtener (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36,37,38,39,49,50-hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-67: 25,3 mg, 18.1% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-dihidroxi-45-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-48-metoxi-36.37.38.39.49.50- hexametil-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(49),26(50)-tetraeno-51,52,53,54,55-pentona (I-66: 34 mg, 24,3% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0467] Método de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC(IC00CD-OL002)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 25 cm L

Inyección: 100.0 ul

Fase móvil: Hexano/EtOH=60/40(V/V)

Caudal: 1,0 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AD CP-HPLC-08

[0468] 1-67: ESI-MS (EI+, m/z): 1098.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.49 -6.19 (m, 2H), 6.13 (dd,J= 15.0, 9.8 Hz, 1H), 5.94 (dd,J= 24.3, 10.5 Hz, 1H), 5.58 - 5.45 (m, 1H), 5.41 (d,J= 9.8 Hz, 1H), 5.37 -5.24 (m, 1H), 5.13 (t,J= 10.8 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.19 (t,J= 8.7 Hz, 1H), 3.92 -3.52 (m, 16H), 3.51 -3.25 (m, 11H), 3.25 -2.99 (m, 3H), 2.72 (dd,J= 16.9, 5.6 Hz, 2H), 2.57 (dd,J= 16.8, 6.3 Hz, 1H), 2.39 -2.18 (m, 2H), 1.95 (ddd,J= 29.6, 22.0, 10.2 Hz, 6H), 1.83 - 1.40 (m, 15H), 1.37 -1.16 (m, 8H), 1.15 -0.82 (m, 18H), 0.71 (dd,J= 24.0, 12.0 Hz, 1H).

[0469] I-66: ESI-MS (EI+, m/z): 1098.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.45 - 5.92 (m, 4H), 5.52 - 4.75 (m, 5H), 4.31 -3.92 (m, 3H), 3.88 -3.54 (m, 16H), 3.51 -3.13 (m, 13H), 3.07 (s, 2H), 2.87 -2.42 (m, 4H), 2.38 - 1.55 (m, 12H), 1.51 -1.29 (m, 15H), 1.13-0.72 (m, 18H), 0.69 -0.58 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 42: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-43-hexoxi-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametN-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatnaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-103):

[0470]

Esquem a sintético:

[0471]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-43-hexoxi-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-103):

[0472 ] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) y hexan-1-ol (56 mg, 0,547 mmol) en THF (10 Ml) se añadió lentamente hidrato de ácido 4-metilbencenosulfónico (0,52 g, 2,73 mmol). La solución resultante se agitó a 20°C durante 2h bajo N<2>, y después la mezcla se vertió en solución acuosa helada. NaHCO<3>sat., y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró. A continuación, el residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O= 78:22) para obtener (22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-43-hexoxi-45,55-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-103: 72 mg, 13% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1006.0 [M+Na]+. 1H NMR(500 MHz, CDC13) 86.44 - 5.85 (m, 4H), 5.60 -5.07 (m, 4H), 4.77 (s, 1H), 4.29 -3.98 (m, 2H), 3.76 -3.67 (m, 1H), 3.46 -3.28 (m, 10H), 3.23 -3.03 (m, 2H), 3.02 - 2.77 (m, 2H), 2.69 (m, 3H), 2.36 (d, J = 32.6 Hz, 2H), 2.17 - 1.90 (m, 4H), 1.66 - 1.44 (m, 22H), 1.35 - 1.21 (m, 11H), 1.17 -0.84 (m, 22H), 0.72-0.65 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 43: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,44R,45S,46R,47R,49S,51S,54S,55R,56R,65R)-55,65-dihidroxi-53-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-54-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-56-metoxi-44,45,46,47,57,58-hexametil-76,77-dioxa-66-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(57),26(58)-tetraeno-59,60,61,62,63-pentona (I-99):

[0473]

Esquema sintético:

[0474]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,44R,45S,46R,47R,49S,51S,54S,55R,56R,65R)-55,65-dihidroxi-53-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]-54-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxiciclohexH]-1-metíl-etil)-56-metoxi-44,45,46,47,57,58-hexametíl-76j7-dioxa-66-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(57),26(58)-tetraeno-59,60,61,62,63-pentona (I-99):

[0475] A una solución de everolimus (0,5 g, 0,52 mmol) y 2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etanol (3,41 g, 10,44 mmol) en THF (15 Ml) se añadió lentamente hidrato de ácido 4-metilbencenosulfónico (0,52 g, 2,73 mmol). La mezcla resultante se agitó a 22 °C durante 18 h bajo N<2>y luego se extinguió con NaHCO<3>aq. (30 Ml) y se extrajo con EtOAc (60 Ml* 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (50 Ml), salmuera (50 Ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en fase inversa (C18, CHaCN:H<2>O= 70:30) para obtener (21E,23E,25E,26E,44R,45S,46R,47R,49S,51S,54S,55R,56R,65R)-55,65-dihidroxi-53-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]-54-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxiciclohexil]-1-metiletil]-56-metoxi-44,45,46,47,57,58-hexametil-76,77-dioxa-66-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(57),26(58)-tetraeno-59,60,61,62,63-pentona (I-99: 93 mg, 14% rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1274.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) 86.42 - 5.82 (m, 4H), 5.64 - 5.06 (m, 4H), 4.81 (s, 1H), 4.30 -4.08 (m, 1H), 3.81 -3.53 (m, 35H), 3.46 -3.26 (m, 12H), 3.22 -3.05 (m, 4H), 2.76 -2.65 (m, 2H), 2.39 -2.22 (m, 2H), 2.14 -1.97 (m, 3H), 1.75 - 1.55 (m, 13H), 1.52 - 1.39 (m, 4H), 1.30 -1.13 (m, 6H), 1.08 -0.82 (m, 17H), 0.76 -0.65 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 44: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,56S,57R,58R,67R)-57,67-dihidroxi-55-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-58-metoxi-46,47,48,49,59,60-hexametil-78,79-dioxa-68-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(59),26(60)-tetraeno-61,62,63,64,65-pentona (1 -97):

[0476]

Esquem a sintético:

[0477]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,56S,57R,58R,67R)-57,67-dihidroxi-55-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-58-metoxi-46,47,48,49,59,60-hexametil-78,79-dioxa-68-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(59),26(60)-tetraeno-61,62,63,64,65-pentona (I-97):

[0478] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) en THF (15 Ml) se añadió ácido 4-metilbencenosulfónico (0,47 g, 2,73 mmol) y nonaetilenglicol (2,27 g, 5,47 mmol) a 10 °C. La reacción se agitó a 30°C durante 18 h bajo N<2>y luego se extinguió con NaHCO<3>aq. Y se extrajo con EtOAc (60 Ml* 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (50 Ml), salmuera (50 Ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O = 63:37) para obtener (21E,23E,25E,26E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,56S,57R,58R,67R)-57,67-dihidroxi-55-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metiletil]-58-metoxi-46,47,48,49,59,60-hexametil-78,79-dioxa-68-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(59),26(60)-tetraeno-61,62,63,64,65-pentona (I-97: 111 mg, 16% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1318.9 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDC13) 86.50 - 5.79 (m, 4H), 5.64 - 5.06 (m, 4H), 4.89 (d, J = 53.5 Hz, 1H), 4.51 - 3.94 (m, 2H), 3.75 -3.1 8 (m, 46H), 3.02 -2.86 (m, 2H), 2.82 -2.61 (m, 3H), 2.39 -2.18 (m, 2H), 2.20 -1.91 (m, 6H), 1.78 - 1.54 (m, 16H), 1.51 -1.19 (m, 11H), 1.09 -0.82 (m, 17H), 0.74 -0.62 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 45: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,50R,51S,52R,53R,55S,57S,60S,61R,62R,71R)-61,71-dihidroxi-59-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-60-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-62-metoxi-50,51,52,53,63,64-hexametil-82,83-dioxa-72-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(63),26(64)-tetraeno-65,66,67,68,69-pentona (I-96):

[0479]

Esquema sintético:

[0480]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,50R,51S,52R,53R,55S,57S,60S,61R,62R,71R)-61,71-dihidroxi-59-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-60-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-62-metoxi-50,51,52,53,63,64-hexametil-82,83-dioxa-72-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(63),26(64)-tetraeno-65,66,67,68,69-pentona (I-96):

[0481] A una solución de rapamicina (0,2 g, 0,22 mmol) y ácido 4-metilbencenosulfónico (0,19 g, 1.09 mmol) en THF (6 Ml) se añadió 2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etanol (1,10 g, 2,19 mmol) a 0 °C y la reacción se agitó a 20 °C durante 2 h y después se vertió en una solución sat. NaHCO<3>(30 Ml) y se extrajo con EtOAc (40 Ml* 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (40 Ml), salmuera (40 Ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H<2>O = 51:49) para obtener (21E,23E,25E,26E,50R,51S,52R,53R,55S,57S,60S,61R,62R,71R)-61,71-dihidroxi-59-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]etoxi]etoxi] etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]-60-[(Lr)-2-[(Ls,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-62-metoxi-50,51,52,53,63,64-hexametil-82,83-dioxa-72-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(63),26(64)-tetraeno-65,66,67,68,69-pentona (I-96: 61 mg, 20% rendimiento) como aceite incoloro. ESI-MS (EI+, m/z): 1408.0 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDC13) 86.41 - 5.84 (m, 4H), 5.61 - 5.08 (m, 4H), 4.79 (s, 1H), 4.32 -4.05 (m, 1H), 3.89 -3.46 (m, 44H), 3.46 -3.16 (m, 12H), 2.98 -2.50 (m, 7H), 2.32 (s, 2H), 2.15 -1.8 9 (m, 4H), 1.82 -1.68 (m, 8H), 1.56 -1.16 (m, 14H), 1.12 -0.82 (m, 18H), 0.74 -0.56 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 46: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(lR)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etM]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametM-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]-65,66-dioxa-56-azatricidohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48.49.50.51.52- pentona (I-77) y (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48.49.50.51.52- pentona y (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43R,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona:

[0482]

Esquem a sintético:

[0483]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi) etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-77):

[0484] Una solución de rapamicina (0,3 g, 0,313 mmol) y 2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etanol (0,9 g, 6,26 mmol) en THF (9 Ml) se enfrió a 0°C y se añadió p-TsOH (0,27 g, 1,57 mmol). La mezcla resultante se agitó a 35 °C durante 5 h bajo N<2>y después se vertió en NaHCO<3>helado y se extrajo con EtOAc (40 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (30 Ml), salmuera (30 Ml), se secaron, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, C H sC N ^O = 57:43) para obtener (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-77: 0,063 g, 19% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1092.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCls) 86.55 - 5.88 (m, 4H), 5.72 - 5.03 (m, 4H), 4.78 (s, 1H), 4.63 - 4.34 (m, 1H), 4.32 - 4.09 (m, 1H), 4.00 -2.81 (m, 21H), 2.77 -2.43 (m, 3H), 2.41 -2.17 (m, 2H), 2.18 -1.93 (m, 3H), 1.93 - 1.54 (m, 18H), 1.54 -1.14 (m, 10H), 1.13 -0.79 (m, 16H), 0.78 -0.63 (m, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi) etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-71) y (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43R,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (1-70):

[0485] 100 mg de (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi) etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriccidohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtOAc:MeOH = 3:3:1:0.3) para obtener (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-71: 16 mg, 16% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43R,44R,45R,54R)-44,54-dihidroxi-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-45-metoxi-33,34,35,36,46,47-hexametil-42-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)etoxi]-65,66-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(46),26(47)-tetraeno-48,49,50,51,52-pentona (I-70: 8 mg, 8% rendimiento) como sólido blanco.

[0486] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 2.5 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 2,0 mg/ml

Inyección: 7 ml.

Fase móvil: Hexano/EtOH=70/30(V/V)

Caudal: 40 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0487] 1-71: ESI-MS (EI+, m/z): 1092.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 86.41 -6.20 (m, 2H), 6.13 (dd,J= 15.1, 9.7 Hz, 1H), 5.93 (dd,J= 22.9, 10.3 Hz, 1H), 5.58 - 5.45 (m, 1H), 5.41 (d,J= 9.8 Hz, 1H), 5.27 (d,J= 5.2 Hz, 1H), 5.19 -5.03 (m, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.19 (dd,J= 13.9, 5.9 Hz, 1H), 3.95 -3.63 (m, 10H), 3.63 -3.53 (m, 2H), 3.52 -3.25 (m, 11H), 3.24 -3.01 (m, 3H), 2.72 (dd,J= 16.8, 5.8 Hz, 2H), 2.58 (dd,J= 16.8, 6.3 Hz, 1H), 2.31 (t,J= 23.5 Hz, 2H), 2.15 -1.40 (m, 18H), 1.27 (ddd,J= 32.5, 16.2, 6.3 Hz, 8H), 1.15 -0.81 (m, 18H), 0.70 (dt,J= 17.8, 9.0 Hz, 1H).

[0488] 1-70: ESI-MS (EI+, m/z): 1092.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 86.43 - 5.90 (m, 4H), 5.56 - 5.08 (m, 5H), 4.33 -3.99 (m, 3H), 3.95 -3.63 (m, 8H), 3.62 -3.02 (m, 18H), 2.89 -1.97 (m, 12H), 1.76 (dd,J= 31.4, 24.8 Hz, 8H), 1.40 (ddd,J= 39.2, 29.5, 12.0 Hz, 9H), 1.14 -0.79 (m, 18H), 0.76 -0.61 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 47: Síntesis de 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etM]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametN-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-N]oxi]-N,N-dimetilbutanamide (1-69) y 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetilbutanamide (1-61) y 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetilbutanamide (I-62):

[0489]

Esquem a sintético:

[0490]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de 4-hidroxi-N,N-dimetilbutanamida:

[0491] Una mezcla de tetrahidrofurano-2-ona (5 g, 58,1 mmol) y N-metilmetanamina (43,64 g, 290,4 mmol, 90 Ml) se agitó a 10 °C durante 18 h, se eliminó el disolvente y se liofilizó para obtener 4-hidroxi-N,N-dimetil-butanamida (6,9 g, 91% de rendimiento) como un aceite incoloro. ESI-MS (EI+, m/z): 132.3 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 83.67 (t, J= 5.8 Hz, 2H), 3.04 (s, 3H), 2.96 (s, 3H), 2.49 (t,J= 6.9 Hz, 2H), 1.94 - 1.84 (m, 2H).

Etapa 2: Síntesis de 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(lS,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metíl-etíl]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetil-butanamide (I-69):

[0492] A una solución de everolimus (0,3 g, 0,313 mmol) en THF (9 Ml) a 0 °C bajo N<2>se añadió ácido p-toluenosulfónico (0,27 g, 1,57 mmol) y 4-hidroxi-N,N-dimetil-butanamida (0,82 g, 6,26 mmol). La mezcla se calentó a 35 °C y se agitó durante 18 h, después se vertió en NaHCO<3>helado y se extrajo con EtOAc (20 Ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (30 Ml), salmuera (30 Ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O =55:45) para obtener 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatricidohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetilbutanamide (I-69: 0,05 g, rendimiento del 15%) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1079.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDC13) 86.52 -5.78 (m, 4H), 5.67 -5.0 5 (m, 4H), 4.75 (s, 1H), 4.48 -4.09 (m, 2H), 4.04 -3.51 (m, 7H), 3.52 -3.12 (m, 12H), 3.12 -2.88 (m, 7H), 2.82 -2.27 (m, 6H), 2.22 - 1.53 (m, 23H), 1.54 -1.13 (m, 10H), 1.12 -0.80 (m, 15H), 0.79 -0.61 (m, 1H).

Etapa 3: Síntesis de 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetil-butanamide (I-62) y 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-50,51,52,53,54 pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetil-butanamide (I-61):

[0493] 120 mg de 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ddohexN]-1-metN-etN]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametN-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetilbutanamida se purificó mediante HPLC prequiral para proporcionar 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetil-butanamida (I-62: 34.3 mg, 29% rendimiento) y 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametil-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-il]oxi]-N,N-dimetil-butanamide (I-61: 24,2 mg, 20% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0494] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC

Tamaño de columna: 5.0 cm I.D. * 25 cm L

Concentración de la solución: 1 mg/ml

Inyección: 5 ml.

Fase móvil: EtOH=100%

Caudal: 50 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

[0495] 1-62: ESI-MS (EI+, m/z): 1079.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 86.30 (tt,J= 34.4, 17.0 Hz, 2H), 6.13 (dd,J= 14.9, 10.0 Hz, 1H), 5.91 (dd,J= 28.8, 10.6 Hz, 1H), 5.51 (dd,J= 15.0, 8.9 Hz, 1H), 5.45 -5.37 (m, 1H), 5.27 (d,J= 5.4 Hz, 1H), 5.17 (d,J= 4.4 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.19 (d,J= 4.9 Hz, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.82 -3.64 (m, 5H), 3.62 -3.52 (m, 2H), 3.47 -3.25 (m, 11H), 3.24 -3.14 (m, 2H), 3.10 (d,J= 7.0 Hz, 1H), 3.01 (s, 3H), 2.94 (s, 3H), 2.71 (dd,J= 16.7, 5.7 Hz, 2H), 2.55 (dd,J= 16.8, 6.6 Hz, 1H), 2.44 - 2.25 (m, 4H), 2.14 - 1.63 (m, 17H), 1.33 (ddd,J= 40.8, 27.4, 12.3 Hz, 11H), 1.14 -0.83 (m, 18H), 0.71 (dd,J= 23.8, 11.9 Hz, 1H).

[0496] 1-61: ESI-MS (EI+, m/z): 1079.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.43 - 5.88 (m, 4H), 5.65 - 5.08 (m, 5H), 4.33 - 4.08 (m, 2H), 3.94 - 3.52 (m, 6H), 3.49 - 3.31 (m, 8H), 3.30 - 3.12 (m, 8H), 3.09 - 2.81 (m, 8H), 2.75 - 2.26 (m, 6H), 2.10 (d,J= 63.9 Hz, 3H), 1.88 - 1.65 (m, 14H), 1.35 (dt,J= 49.7, 11.3 Hz, 9H), 1.18 -0.81 (m, 18H), 0.77 -0.60 (m, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 48: Síntesis de 4-[[(23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,57R)-46,57-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etM]-47-metoxi-35,36,37,38,48,49-hexametN-50,51,52,53,54-pentaoxo-69,70-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-23,25,27(48),28(49)-tetraen-44-N]oxi]-N,N-dimetilbutanamide (1-68) y 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49,50,51,52,53-pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metil-butanamide (I-59) y 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49,50,51,52,53-pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metil-butanamide (I-60):

[0497]

Esquema sintético:

Etapa 1: Síntesis de 4-hidroxi-N,N-dimetilbutanamida:

[0499] A una solución de metilamina (5,41 g, 174,24 mmol) en agua (30 Ml) se añadió tetrahidrofurano-2-ona (5 g, 58,08 mmol) gota a gota a 0 °C. La mezcla se agitó a 5 °C durante 2 h, se concentró y se liofilizó para obtener 4-hidroxi-N-metilbutanamida (6,5 g, 95,5% de rendimiento) en forma de líquido espeso. ESI-Ms (EI+, m/z): 118.3 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.02 (s, 1H), 3.69 (t,J= 5.7 Hz, 2H), 2.81 (d,J= 4.8 Hz, 3H), 2.36 (t,J= 6.8 Hz, 2H), 1.88 (dt,J= 12.2, 6.1 Hz, 2H).

Etapa 2: Síntesis de 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49,50,51,52,53-pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metilbutanamide (I-68):

[0500] Una solución de everolimus (1 g, 1,04 mmol) y 4-hidroxi-N-metil-butanamida (2,45 g, 20,87 mmol) en THF (30 Ml) se enfrió a 0 °C bajo N<2>y se añadió ácido p-toluenosulfónico (0,9 g, 5,22 mmol). La reacción se calentó a 35 °C y se agitó durante 18 h, tras lo cual se vertió en NaHCO<3>sat. (150 Ml) y se extrajo con EtOAc (100 Ml* 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (80 Ml), salmuera (80 Ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, 80 g, CH<3>CN:H<2>O = 37:33) para obtener 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49,50,51,52,53-pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metil-butanamide (I-68: 0,14 g, 13% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1065.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 86.50 - 5.85 (m, 4H), 5.78 -4.96 (m, 5H), 4.78 (s, 1H), 4.33 -4.03 (m, 2H), 3.98 -3.64 (m, 5H), 3.63 -3.49 (m, 2H), 3.49 -2.90 (m, 13H), 2.90 -2.4 8 (m, 6H), 2.41 - 1.94 (m, 7H), 1.93 -1.54 (m, 18H), 1.53 -1.11 (m, 10H), 1.11 -0.80 (m, 16H), 0.78 -0.54 (m, 1H).

Etapa 3: Síntesis de 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49.50.51.52.53- pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metilbutanamide (I-60) y 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49.50.51.52.53- pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metilbutanamide (I-59):

[0501] 130mg de 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49,50,51,52,53-pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatricidohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metil-butanamida se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtoAc:MeOH = 3:3:1:0.8) para obtener 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49,50,51,52,53-pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metil-butanamida (I-60: 25 mg, 19% rendimiento) y 4-[[(22E,24E,26E,27E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,56R)-45,56-dihidroxi-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-49,50,51,52,53-pentaoxo-68,69-dioxa-58-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(47),27(48)-tetraen-43-il]oxi]-N-metil-butanamide (I-59: 36 mg, 27% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0502] Método de análisis quiral:

Columna: CHIRALPAK IC-3(IC30CE-NJ008)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. *25 cm L

Inyección: 50.0 pl

Fase móvil: Hexano/EtOH=50/50(V/V)

Caudal: 1,0 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AT CP-HPLC-06

[0503] I-60: ESI-MS (EI+, m/z): 1065.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 86.32 (ddd,J= 31.4, 14.8, 10.2 Hz, 2H), 6.13 (dd,J= 15.1, 9.9 Hz, 1H), 6.00 -5.85 (m, 1H), 5.69 (s, 1H), 5.51 (dd,J= 14.9, 9.0 Hz, 1H), 5.41 (d,J= 9.9 Hz, 1H), 5.27 (d,J= 5.7 Hz, 1H), 5.13 (dt,J= 48.5, 24.3 Hz, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.18 (d,J= 5.7 Hz, 1H), 3.92 -3.63 (m, 6H), 3.61 -3.50 (m, 2H), 3.46 - 3.25 (m, 10H), 3.22 - 3.00 (m, 3H), 2.79 (dd,J= 4.8, 2.2 Hz, 3H), 2.72 (dd,J= 16.9, 5.5 Hz, 2H), 2.55 (dd,J= 16.8, 6.5 Hz, 1H), 2.38 - 2.14 (m, 4H), 2.12 - 1.91 (m, 4H), 1.89 - 1.62 (m, 15H), 1.52 - 1.11 (m, 13H), 1.10 -1.01 (m, 6H), 1.00 -0.81 (m, 9H), 0.71 (dd,J= 23.6, 12.1 Hz, 1H).

[0504] I-59: ESI-MS (EI+, m/z): 1065.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 86.37 - 5.81 (m, 4H), 5.66 (d,J= 15.6 Hz, 1H), 5.60 -4.89 (m, 4H), 4.16 (ddd,J= 31.9, 15.6, 5.8 Hz, 2H), 3.93 -3.42 (m, 8H), 3.38 -2.95 (m, 12H), 2.89 -2.39 (m, 7H), 2.37 - 1.89 (m, 9H), 1.83 - 1.60 (m, 13H), 1.45 - 1.05 (m, 11H), 1.03 -0.73 (m, 18H), 0.62 (dd,J= 23.9, 12.1 Hz, 1H).

Ejemplo 49: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metN-etM]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-94):

[0505]

-

Esquema sintético:

[0506]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-94):

[0507] A una solución de rapamicina (0,5 g, 0,547 mmol) en THF (10 Ml) a 20 °C bajo N<2>se añadió hidrato de ácido 4-metilbencenosulfónico (0,52 g, 2,73 mmol) lentamente y 2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etanol (1,72 g, 11,49 mmol, 3 Ml). La solución resultante se agitó durante 2 h y luego se vertió en NaHCO<3>sat. (80 Ml) y se extrajo con EtOAc (60 Ml* 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (60 Ml), salmuera (60 Ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en fase inversa (C-18, CH<3>CN:H<2>O = 75:25) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-94: 125 mg, 22% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1054.5 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) 86.44 - 5.87 (m, 4H), 5.52 - 5.12 (m, 4H), 4.90 (s, 1H), 4.34 -4.11 (m, 1H), 4.05 - 3.83 (m, 1H), 3.80 - 3.53 (m, 13H), 3.50 - 3.22 (m, 12H), 3.01 -2.49 (m, 6H), 2.39 - 1.87 (m, 6H), 1.82 -1.68 (m, 8H), 1.44 -1.15 (m, 13H), 1.11-0.85 (m, 18H), 0.71 -0.57 (m, 1H).

Ejemplo 50: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi -ciclohexM]-1-metN-etM]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-93):

[0508]

Esquema sintético:

[0509]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-93):

[0510] 7.0 g de la mezcla epimérica (Ejemplo 49; I-94) se purificó mediante HPLC prequiral para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-cidohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatricidohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-93: 1,113 g, 16% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1054.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, CDCh) 86.41 - 5.92 (m, 4H), 5.63 (ddd,J= 23.1, 15.1, 8.2 Hz, 1H), 5.47 (dd,J= 29.9, 10.3 Hz, 1H), 5.30 -5.00 (m, 2H), 4.33 -4.12 (m, 2H), 3.97 (dd,J= 18.9, 6.6 Hz, 1H), 3.86 -3.48 (m, 14H), 3.44 -3.22 (m, 10H), 2.97 -2.88 (m, 1H), 2.82 (s, 1H), 2.74 -2.46 (m, 3H), 2.30 (d,J= 14.3 Hz, 2H), 2.21 - 1.91 (m, 5H), 1.86 - 1.57 (m, 11H), 1.50 - 1.22 (m, 12H), 1.16 -0.81 (m, 18H), 0.66 (dt,J= 23.8, 11.7 Hz, 1H).

Ejemplo de (Referencia) 51: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46S,47R,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(lR)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etM]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-121):

[0511]

Esquema sintético:

[0512]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42S,43R,52R)-42,52-dihidroxi-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-40,43-dimetoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-62,63-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(44),27(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona:

[0513] A una solución de everolimus (1 g, 1,04 mmol) en DCM (50 Ml) se añadió Ti(OiPr<)4>(0,89 g, 3,13 mmol) gota a gota a rt. La mezcla de reacción adquirió un color amarillo pálido. Después de 30 min, la solución se vertió en un embudo separador que contenía una mezcla heterogénea de HCl 1N (50 Ml) y EtOAc(50 Ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con NaHCO<3>acuoso saturado (30 Ml), H2O(50 Ml), salmuera (50 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (hexano: acetona= 2:1) para obtener (22E,24E,26E,27E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42S,43R,52R)-42,52-dihidroxi-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexy1]-1-metil-etil]-40,43-dimetoxi-31,32,33,34,44,45-hexametil-62,63-dioxa-53-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(44),27(45)-tetraeno-46,47,48,49,50-pentona (380 mg, rendimiento del 38%) como sólido amarillo claro. 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 86.44 (dt,J= 13.9, 10.3 Hz, 2H), 6.33 -6.06 (m, 3H), 5.54 -4.85 (m, 5H), 4.48 (t,J= 5.3 Hz, 1H), 4.10 -3.91 (m, 2H), 3.89 -3.79 (m, 1H), 3.62 (d,J= 11.5 Hz, 1H), 3.54 -3.41 (m, 5H), 3.38 - 3.28 (m, 8H), 3.19 (dt,J= 11.9, 7.6 Hz, 4H), 3.10 -2.92 (m, 6H), 2.71 (t,J= 14.8 Hz, 1H), 2.43 - 1.78 (m, 6H), 1.75 -1.44 (m, 10H), 1.38 -0.90 (m, 14H), 0.89 -0.67 (m, 13H), 0.66 -0.56 (m, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,56R)-46,56-dihidroxi-45-((1R)-2-((1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil)-1-metiletil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-121):

[0514] A una solución de 28-epi-everolimus (0,2 g, 0,208 mmol) y 2-(2-metoxietoxi)etanol (0,99 Ml, 8,35 mmol) en sulfolano (5 Ml) se añadió HND-8 (35 mg) a 50 °C bajo N<2>. La solución resultante se agitó a 50 °C durante 4 h, se filtró y se diluyó con agua (30 Ml) y EtOAc (30 Ml). La capa orgánica se lavó con agua (10 Ml * 3), salmuera (20 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN: H<2>O= 6.5: 3.5) para obtener (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,56R)-46,56-dihidroxi-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-hidroxietoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-47-metoxi-44-[2-(2-metoxietoxi)etoxi]-35,36,37,38,48,49-hexametil-66,67-dioxa-57-azatriciclohexatriaconta-22,24,26(48),27(49)-tetraeno-50,51,52,53,54-pentona (I-121: 60 mg, 27% de rendimiento) como sólido blanco. ESI-MS (EI+, m/z): 1068.1 [M+Na]+. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 86.57 - 6.35 (m, 2H), 6.31 -5.88 (m, 3H), 5.61 -5.38 (m, 1H), 5.28 -4.82 (m, 4H), 4.47 (t,J= 5.3 Hz, 1H), 3.98 (dd,J= 40.4, 6.9 Hz, 2H), 3.88 -3.73 (m, 2H), 3.59 -3.40 (m, 12H), 3.30 (dd,J= 12.1, 8.2 Hz, 4H), 3.26 -3.14 (m, 8H), 3.08 -2.92 (m, 3H), 2.85 -2.6 2 (m, 2H), 2.43 -2.22 (m, 2H), 2.19 -1.82 (m, 6H), 1.79 - 1.45 (m, 9H), 1.32 (dd,J= 58.1,21.2 Hz, 5H), 1.19 -0.92 (m, 10H), 0.90 -0.57 (m, 15H).

Ejemplo 52: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45S,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etM]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-127) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45S,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-128) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45S,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1 -metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-129):

[0515]

Esquema sintético:

[0516]

Procedimientos y caracterización:

Etapa 1: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45S,46R,SSR)-45,55-dihidroxi-43-(2-(2-(2-hidroxietoxi)etoxi)etoxi)-44-((1R)-2-((1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (1-127):

[0517] A una solución de 28-epi-rapamicina (0,2 g, 0,22 mmol; ver Ejemplo 52) y 2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etanol (0,436 Ml, 3,28 mmol) en sulfolano (5 Ml) se añadió HND-8 (30 mg) y la mezcla se agitó a 50 °C durante 5 h. Tras enfriar, la reacción se diluyó con EtOAc (50 Ml), se filtró, se lavó con agua (50 Ml * 3) y salmuera (50 Ml), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en fase inversa (C18, CH<3>CN:H<2>O de 0 a 70% de rendimiento) para proporcionar (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45S,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-127: 60 mg, 26% de rendimiento) como sólido amarillo claro. ESI-m S (El+, m/z): 1054.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 86.61 - 6.32 (m, 2H), 6.30 - 5.98 (m, 3H), 5.65-5.38 (m, 1H), 5.28-4.89 (m, 4H), 4.68 - 4.53 (m, 2H), 4.11-3.91 (m, 2H), 3.89 -3.71 (m, 2H), 3.54 -3.44 (m, 9H), 3.44 -3.40 (m, 3H), 3.31 -3.28 (m, 4H), 3.27 -3.11 (m, 6H), 2.86 -2.66 (m, 3H), 2.20 - 1.82 (m, 7H), 1.80 - 1.58 (m, 13H), 1.42 - 1.06 (m, 9H), 1.05 - 0.68 (m, 18H), 0.56 (dd,J= 23.8, 12.0 Hz, 1H).

Etapa 2: Síntesis de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45S,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxiletoxil-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil)-1-metil-etil)-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (1-128) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45S,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxiletoxil-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34.35.36.37.47.48- hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-129):

[0518] 130 mg de (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45S,46R,55R)-4555-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatricciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona se purificó mediante HPLC prequiral y los epímeros resultantes se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (hexano:DCM:EtoAc:MeOH = 3:3:1:0 a 3:3:1:0.8) para obtener (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45S,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-128: 28 mg, 21.5% rendimiento) y (21E,23E,25E,26E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45S,46R,55R)-45,55-dihidroxi-43-[2-[2-(2-hidroxietoxi)etoxi]etoxi]-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hidroxi-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil]-46-metoxi-34,35,36,37,47,48-hexametil-66,67-dioxa-56-azatriciclohexatriaconta-21,23,25(47),26(48)-tetraeno-49,50,51,52,53-pentona (I-129: 22 mg, 16,9% de rendimiento), ambos como sólidos blancos.

[0519] Método de separación quiral:

Columna: CHIRALPAK IC(IC00CE-WF029)

Tamaño de columna: 0.46 cm I.D. * 25 cm L

Inyección: 10.0 pl

Fase móvil: Hexano/EtOH =60/40(V/V)

Caudal: 1,0 Ml/min

Longitud de onda: UV 254 nm

Temperatura: 35 °C

Equipo HPLC: Shimadzu LC-20AT CP-HPLC-09

[0520] I-128: ESI-MS (EI+, m/z): 1054.2 [M+Na] . 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.56 - 6.22 (m, 2H), 6.14 (dd,J= 15.0, 10.3 Hz, 1H), 6.00 (dd,J= 17.9, 11.0 Hz, 1H), 5.61 -5.46 (m, 1H), 5.46 -5.32 (m, 1H), 5.29 -5.12 (m, 2H), 4.70 (s, 1H), 4.15 -4.04 (m, 1H), 3.99 -3.88 (m, 1H), 3.86 -3.52 (m, 13H), 3.51 - 3.25 (m, 11H), 3.01 -2.60 (m, 5H), 2.52 (dd,J= 16.7, 7.1 Hz, 2H), 2.39-1.87 (m, 7H), 1.74 (dt,J= 13.3, 8.7 Hz, 8H), 1.63 - 1.16 (m, 13H), 1.14 - 0.78 (m, 18H), 0.67 (dd,J= 23.8, 12.0 Hz, 1H).

[0521] I-129: ESI-MS (EI+, m/z): 1054.1 [M+Na] . 1H NMR (500 MHz, CDCla) 86.46 -5.89 (m, 4H), 5.60 -4.93 (m, 5H), 4.15 (dd,J= 50.5, 20.8 Hz, 2H), 3.97 - 3.15 (m, 25H), 3.06 -2.43 (m, 8H), 2.39 - 1.69 (m, 16H), 1.54 -1.19 (m, 10H), 1.13 -0.79 (m, 18H), 0.66 (dd,J= 23.6, 11.7 Hz, 1H).

Ejemplo 53: AlphaLISA Ultra Ps6K1 Assay

Protocolo de ensayo

[0522]

1. Sembrar células MCF-7 en placa Corning 3701 e incubar durante 20-24 horas. Se sembrarán entre 12.000 y 16.000 células en 36 |jl de medio por pocilio.

2. Cambiar el medio de cultivo por medio fresco e incubar durante otras 2 horas.

3. Añadir 12 jL (4X) de compuestos en la placa celular por HAMILTON. La concentración final de DMSO es del 0,5%. Incubar durante 90 minutos.

4. Aspirar 38 jL por HAMILTON, 10 jL de resto por pocillo.

5. Añadir 10 jL de tampón de lisis 2X con HAMILTON; el volumen total en los pocillos es de 20 jL . Dejar que las células se agiten durante 30 minutos. Cubra la placa con una lámina de plástico y guárdela a -80 °C hasta el momento del análisis.

6. Descongelar el lisado celular a temperatura ambiente y transferir 10 j l de lisado a la placa de ensayo (Optiplate-384).

7. Añadir 5 jL de microesferas aceptoras en la placa de ensayo e incubar durante 2 horas.

8. Añadir 5 jL de microesferas donantes e incubar durante 2 horas

9. Recuento de la placa mediante el lector de placas multimodo EnSpire

[0025] Reactivos/materiales Cat. Proveedor N.° Lote. N.° MCF-7 ATCC HTB-225105360 DMEM Invitrogen 12430-054 1677193 FBS Invitrogen 10099-141 16605160. 25% Tripsina-EDTA Invitrogen 25200-072 1638603 Placa de 384 pocillos para cultivo de tejidos 25% Tripsina-EDTA Invitrogen 25200-072 1638603 Placa de 384 pocillos, tratada para cultivo de tejidos Corning CLS3701 29214010 Placas de 384 pocillos Corning CLS3656 29514036 Torinl Selleck S2827 01 Rapamicina SELLECK S1039 08 OptiPlate-384, White Opaque 384-well MicroPlate PerkinElmer 6007299 8210-14501 AlphaLISA SureFire Ultra p-p70 S6 Quinasa (Thr389) Assay Kit PerkinElmer ALSU-PP70-A10K U0381

Tabla 2: Sum inistros de Reactivos clave

Ejemplo 54: Ensayo AlphaLISA Ultra Pakt

Protocolo de ensayo:

[0523]

1. Células MCF-7 en placa Corning 3701 e incubar durante 20-24 horas. Se sembrarán 16.000-20.000 células en 36 j l de medio por pocillo.

2. Cambiar el medio de cultivo por medio fresco e incubar otros 90 minutos.

3. Añadir 12 jL (4X) de compuestos en la placa celular por HAMILTON. La concentración final de DMSO es del 0,5%. Incubar durante 2 horas.

4. Aspirar 38 jL por HAMILTON, 10 jL de resto por pocillo.

8. Añadir 5 jL de microesferas donantes e incubar durante 2 horas

9. Recuento de la placa mediante el lector de placas multimodo EnSpire

Tabla 3: Reactivos clave / Suministros

Ejemplo 55: Análisis de Ps6K1 y Pakt por Inmunoelectrotransferencia a las 24 y 48 horas

Protocolo de ensayo

[0524]

1. Sembrar una placa de seis pocillos con 500.000 células PC3 por pocillo e incubar durante 20-24 horas. 2. Añadir los compuestos en la placa celular. Incubar de 24 a 48 horas.

4. Se coloca la placa en hielo y se retira el medio por aspiración. Los pocillos se lavan con 1 Ml de PBS 1* y luego se aspiran completamente.

5. Se añaden 110 j l de tampón de lisis Tritón al 1% y se raspa enérgicamente cada pocillo.

6. Los homogeneizados celulares se transfieren a tubos eppendorf de 1,5 Ml en hielo y se centrifugan a 4 °C durante 10 minutos a 10.000 rpm.

7. La concentración de proteínas de los lisados celulares resultantes se cuantificó mediante un ensayo de Bradford y las muestras se analizaron mediante inmunoelectrotransferencia en geles Bis/Tris al 4-12% con tampón MES 1*.

8. Los geles se transfirieron a membranas a 50 V durante 100 minutos, se bloquearon con tampón de bloqueo Odyssey durante 30 minutos y luego se incubaron durante la noche con el anticuerpo primario (Ps6K1 T389 Conejo o pAkt S473 Conejo) a 4 °C en un rotador.

9. Las membranas se lavaron 3 veces con TBS-T con una incubación de 5 minutos entre cada lavado y luego se incubaron con anticuerpo secundario (LiCor IRDye 800 Donkey Anti Rabbit) durante al menos 30 minutos.

10. Las membranas se lavaron 3 veces con TBS-T con una incubación de 5 minutos entre cada lavado.

11. A continuación, los geles se incubaron durante 5 minutos con PBS a temperatura ambiente y se tomaron imágenes con un Li-Cor.

[0525] Los resultados de una inmunoelectrotransferencia representativa se resumen en la FIG. 1. Las células PC3 se trataron con rapamicina (0,1 μM y 0,01 μM) o I-40 (1 μM, 0,1 μM, 0,01 μM y 0,001 μM) durante 24 y 48 hora inmunoelectrotransferencias demuestran claramente una reducción significativa de Ps6K1 tanto para rapamicina como para I-40 a las 24 y 48 horas, indicando la inhibición de la vía Mtorc1. Es importante destacar que el I-40 no redujo los niveles de pAkt a las 24 o 48 horas. Por el contrario, la rapamicina mostró inhibición de la fosforilación de S6K1 (S473) tanto a las 24 como a las 48 horas, lo que indica una inhibición de la vía mTORC2.

[0526] Los resultados para inmunoelectrotransferencias representativas adicionales, y los compuestos evaluados en ellas, se resumen en la FIG. 2 hasta FIG. 42. Los métodos empleados fueron sustancialmente similares a los descritos anteriormente. Los compuestos se evaluaron en células PC3, células Jurkat, células de fibroblastos embrionarios de ratón

(MEF) de tipo salvaje, células MEF con esclerosis tuberosa 2 (TSC2) negativa (TSC -/-) y células MEF con esclerosis tuberosa 2 (TSC2) positiva (TSC /+). Las células se incubaron con compuestos de la presente invención durante varios periodos de tiempo (por ejemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 90 minutos, 24 horas o 48 horas), y se evaluaron de acuerdo con metodologías conocidas, como las aquí descritas.

[0527] La Tabla 4 muestra la actividad inhibitoria (IC<50>) de compuestos seleccionados de esta invención en los ensayos

Ps6K1 y Pakt, y su solubilidad en tampón fosfato 100 Mm (Ph 7,4). Los números de los compuestos corresponden a los de la Tabla 1.

[0528] Los compuestos de la presente invención que inhiben selectivamente Mtorc1 sobre Mtorc2-y retienen la selectividad durante al menos 24 horas-se indican con “SÍ” en la columna “Mtorc1 selectivo @ 24 hrs” de la Tabla 4. Los compuestos que no son selectivos a las 24 horas se indican con “NO” en la columna “Mtorc1 selectivo a las 24 horas” de la Tabla 4. Los compuestos que conservan parcialmente la selectividad para la inhibición de Mtorc1 sobre Mtorc2 se indican con “Parcial” en la columna “Selectivo para Mtorc1 @ 24 h” de la Tabla 4. “N/A” significa “no ensayado”.

[0529] Los compuestos denotados “+” presentan solubilidades inferiores a 30<ji>M (x < 30<ji>M). Los compuestos marcados

“++” presentan solubilidades superiores o iguales a 30<ji>M e inferiores a 60<ji>M (30<ji>M < x < 60<ji>M). Los compuestos indicados con “+++” presentan solubilidades superiores o iguales a 60<ji>M (60<ji>M < x).

[0530] Los compuestos denotados “A” exhibieron una IC<50>inferior a 0,1 Nm (x < 0,1 Nm). Los compuestos denominados

“B” mostraron una IC<50>mayor o igual a 0,1 Nm y menor de 1 Nm (0,1 Nm< x < 1,0 Nm). Los compuestos denominados

“C” mostraron una IC<50>superior o igual a 1,0 Nm e inferior a 10 Nm (1,0 Nm < x < 10 Nm). Los compuestos denominados

“D” mostraron una IC<50>superior o igual a 10 Nm e inferior a 100 Nm (10 Nm < x < 100 Nm). Los compuestos denominados

“E” mostraron una IC<50>mayor o igual a 100 Nm (100 Nm < x).

Tabla 4: Datos de ensayo de compuestos ejemplares

(Continuación)

Ejemplo 56: Propiedades farmacocinéticas

[0531] Las propiedades farmacocinéticas de los compuestos de la presente invención se evaluaron en ratones C57BI/6 y se compararon con la rapamicina. Los animales fueron ayunados durante la noche antes de la administración de I-40 o rapamicina (1 mg/kg IV, 10 mg/kg PO, o 2 mg/kg IP). Los animales fueron sangrados a intervalos de tiempo de hasta 48 horas tras la administración de los compuestos. La sangre total de cada ratón se recogió individualmente en tubos de polipropileno y se centrifugó inmediatamente. Los aloquatos del plasma separado se prepararon rápidamente para el análisis HPCL. Los resultados de los estudios farmacocinéticos se resumen en la Tabla 5. El compuesto I-40 muestra una biodisponibilidad oral mejorada en comparación con la rapamicina, así como un menor aclaramiento, una semivida más larga, una Cmax aumentada y una AUC aumentada en comparación con la rapamicina.

T a b l a 5 : C o m p a r a c ió n do l a s p r o p ie d a d e s f a r m a c o c i n é t ic a s

de u p a m i c i n a e 1 - 40 e n r a t ó n

Ejemplo 57: Evaluación del efecto del tratamiento crónico con I-40 sobre la tolerancia a la glucosa y la sensibilidad a la insulina en ratones C57Bl/6 magros

[0532] Se aleatorizaron ratones C57BI/6 (n = 12; 8 semanas de edad) y se midieron las mediciones basales (peso, glucosa en ayunas e insulina en ayunas) cuatro (4) días antes de la administración de los compuestos o del vehículo. A continuación, los animales fueron tratados con I-40 (10 mg/kg PO), rapamicina (10 mg/kg IP) o vehículo (PO o IP) durante 19 días. Los días 7 y 14 se pesó a los animales y se evaluaron los niveles de glucosa e insulina alimentadas. Los animales fueron ayunados durante la noche del día 14 y el día 15 se evaluaron la insulina en ayunas y una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (ipGTT). El día 19 los animales fueron sacrificados una (1) hora después de la administración del compuesto o del vehículo. Se recogieron tejidos para evaluar los niveles de compuestos y la farmacodinámica. La evolución temporal del estudio se resume en la FIG. 43.

[0533] Los resultados de la ipGTT se resumen en la FIG. 44 y FIG. 45. Brevemente, el tratamiento crónico con rapamicina durante 15 días indujo intolerancia a la glucosa en ratones C57Bl/6, como demostraron los elevados niveles de glucosa en comparación con Vh R. En comparación, I-40 no indujo intolerancia a la glucosa.

Ejemplo 58 Evaluación del efecto de I-40, I-117 y Everolimus en el modelo de ratón de enfermedad renal aguda/enfermedad renal crónica (AKI/CKD)

[0534] Se aleatorizaron ratones C57Bl/6 (n = 15; machos; 10 semanas de edad). Tras 7 días de aclimatación, se realizó la cirugía IR o simulada. Se dejó que los ratones se recuperaran durante un (1) día y, a partir del día 2, a los animales que recibieron la cirugía IR se les administró vehículo, everolimus (10 mg/kg PO), I-40 (10 mg/kg PO) o I-117 (10 mg/kg PO). El día 9 se realizó una uninefrectomía (Unx) o una cirugía simulada. El día 29 se sacrificó a los animales.

[0535] La histología renal se evaluó mediante PAS, tinción tricrómica de Masson o rojo Sirius. Los resultados de la tinción con rojo Sirus se resumen en la FIG. 46 y FIG. 47. En resumen, I-40 mostró una reducción significativa de la fibrosis renal en comparación con el vehículo.

[0536] El ARNm del tejido renal fue analizado para marcadores inflamatorios y fibróticos (qPCR para TGFp, colágeno I, colágeno III, factor de unión a CCCTC (CTCF), fibronectina (FN) y actina de músculo liso alfa (a-SMA)).

[0537] Se evaluó la inmunohistoquímica para colágeno I, colágeno IV, a-SMA, 4-hidroxinonenal (4-HNE) y macrófago F4/80.

[0538] Se evaluaron los niveles de compuestos en plasma y la farmacodinamia en tejido renal.

[0539] Los resultados de la expresión de marcadores de fibrosis e infiltración de macrófagos en los riñones se resumen en la FIG. 48 a FIG. 51. En resumen, el I-40 redujo significativamente la expresión de ARNm de colágeno I, colágeno III y fibronectina. Además, el I-40 disminuyó significativamente la infiltración de macrófagos en el riñón.

Ejemplo 59 Evaluación del efecto sobre la producción de IFN-<y>en la reacción alogénica de linfocitos mixtos [0540] El efecto de rapamicina, everolimus, I-40 e I-117 sobre la producción de IFN-V se evaluó en una reacción alogénica de linfocitos mixtosfp.ej.,Eleftheriadis, T. et al., Int. J. Mol. Med., 37(5): 1412-20 (2016) https://doi.org/10.3892/iimm.2016.2547). Los valores IC<50>se resumen en la Tabla 6, a continuación, y en la FIG. 52. En resumen, el I-40 y el I-117 no inhibieron la producción de IFN-y, mientras que la rapamicina y el everolimus inhibieron significativamente la producción de IFN-V.

T a b l a 6 : I n h i b i c i ó n d e I F N - y

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de fórmula II:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R1 se selecciona entre ■ V ^ o ^ r - ' OM 4 ^ o í r ^ ' ° f1
2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que el compuesto se selecciona de cualquiera de las fórmulas II-a y II-b:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
3. El compuesto según la reivindicación 1, en el que el compuesto se selecciona de:

y
4. Una composición farmacéuticamente aceptable que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.
5. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una composición farmacéutica del mismo, para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad, trastorno o afección mediada por mTORC en un paciente que lo necesite, comprendiendo el método administrar a dicho paciente dicho compuesto; opcionalmente, en el que la enfermedad, trastorno o afección mediada por mTORC se selecciona de: nefropatía diabética, complicaciones relacionadas con el riñón de la diabetes tipo 1 y la diabetes tipo 2, poliquistosis renal autosómica dominante (ADPKD), poliquistosis renal autosómica recesiva (ARPKD), enfermedades renales asociadas con la formación de quistes o cistogénesis, glomeruloesclerosis segmentaria focal (FSGS) y otras enfermedades asociadas con la esclerosis del riñón, laminopatías, degeneración macular asociada a la edad (AMD), edema macular diabético, retinopatía diabética, glaucoma, enfermedad retiniana asociada a la edad, senescencia del sistema inmunitario, infecciones de las vías respiratorias, infecciones de las vías urinarias, insuficiencia cardiaca, osteoartritis, hipertensión arterial pulmonar (PAH) y enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD).
6. El compuesto para uso de la reivindicación 5, el método comprende además administrar un agente terapéutico adicional en combinación con dicho compuesto.