ES2980497T3

ES2980497T3 - Tratamiento de la hidradenitis supurativa mediante inhibidores de JAK

Info

Publication number: ES2980497T3
Application number: ES19722308T
Authority: ES
Inventors: Michael D Howell; Paul Smith
Original assignee: Incyte Corp
Current assignee: Incyte Corp
Priority date: 2018-03-30
Filing date: 2019-03-29
Publication date: 2024-10-01
Anticipated expiration: 2039-03-29
Also published as: IL302865A; EP3773593A1; CN113768934A; US20190328739A1; MX2020010322A; AU2019245420A1; CO2020013600A2; JP2021519775A; PE20210402A1; DK3773593T3; ECSP20069416A; EP3773593B1; BR112020019814A2; ZA202202361B; WO2019191684A1; CL2020002512A1; AU2019245420B2; TWI835786B; HUE067471T2; PL3773593T3

Abstract

La presente solicitud proporciona métodos para tratar la hidradenitis supurativa en un paciente que lo necesita, que comprenden administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto que inhibe JAK1 y/o JAK2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Tratamiento de la hidradenitis supurativa mediante inhibidores de JAK

[0001]La presente solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud Provisional de EE.UU. n° 62/650,600, depositada el 30 de marzo de 2018.

CAMPO TÉCNICO

[0002]La presente solicitud proporciona compuestos que modulan la actividad de la Janus quinasa (JAK) 1 y/o 2 para su uso en métodos para el tratamiento de la hidradenitis supurativa (HS).

FONDO

[0003]Las proteínas quinasas (PK) regulan diversos procesos biológicos, como el crecimiento celular, la supervivencia, la diferenciación, la formación de órganos, la morfogénesis, la neovascularización, la reparación de tejidos y la regeneración, entre otros. Las proteínas quinasas también desempeñan papeles especializados en multitud de enfermedades humanas, incluido el cáncer. Las citocinas, polipéptidos o glucoproteínas de bajo peso molecular, regulan muchas vías implicadas en la respuesta inflamatoria del huésped a la sepsis. Las citocinas influyen en la diferenciación, proliferación y activación celular, y pueden modular tanto las respuestas proinflamatorias como las antiinflamatorias para que el huésped reaccione adecuadamente ante los agentes patógenos. En la señalización de una amplia gama de citocinas intervienen la familia Janus quinasa (JAK) de proteínas tirosina quinasas y los transductores de señales y activadores de la transcripción (STAT). Se conocen cuatro JAK de mamíferos: JAK1 (Janus quinasa-1), JAK2, JAK3 (también conocidas como Janus quinasa, leucocitaria; JAKL; y L-JAK), y TYK2 (proteína tirosina quinasa 2).

[0004]Las respuestas inmunitarias e inflamatorias estimuladas por citocinas contribuyen a la patogénesis de las enfermedades: patologías como la inmunodeficiencia combinada grave (IDCG) surgen de la supresión del sistema inmunitario, mientras que una respuesta inmunitaria/inflamatoria hiperactiva o inadecuada contribuye a la patología de las enfermedades autoinmunitarias/porejemplo,asma, lupus eritematoso sistémico, tiroiditis, miocarditis), y enfermedades como la esclerodermia y la osteoartritis (Ortmann, R. A., T. Cheng, et al. (2000) Arthritis Res 2(1): 16-32).

[0005]Las deficiencias en la expresión de las JAK están asociadas a muchas enfermedades. Por ejemplo, los ratones Jak1-/- son atrofiados al nacer, no se amamantan y mueren perinatalmente (Rodig, S. J., M. A. Meraz, et al. (1998) Cell 93(3): 373-83). Los embriones de ratón Jak2-/- son anémicos y mueren alrededor del día 12,5 postcoitum debido a la ausencia de eritropoyesis definitiva.

[0006]Se cree que la vía JAK/STAT, y en particular las cuatro JAK, desempeñan un papel en la patogénesis de la respuesta asmática, la enfermedad pulmonar obstructiva crónica, la bronquitis y otras enfermedades inflamatorias relacionadas del tracto respiratorio inferior. Múltiples citocinas que señalan a través de las JAK se han relacionado con enfermedades/afecciones inflamatorias de las vías respiratorias superiores, como las que afectan a la nariz y los senos paranasales(porejemplo,rinitis y sinusitis), ya sean reacciones alérgicas clásicas o no. La vía JAK/STAT también se ha implicado en enfermedades o afecciones inflamatorias del ojo y en respuestas alérgicas crónicas.

[0007]La activación de JAK/STAT en cánceres puede producirse por estimulación de citoquinas(p. ej.IL-6 o GM-CSF) o por una reducción de los supresores endógenos de la señalización JAK como SOCS (supresor o señalización de citoquinas) o PIAS (inhibidor proteico de STAT activado) (Boudny, V., y Kovarik, J., Neoplasm. 49:349-355, 2002). La activación de la señalización STAT, así como de otras vías posteriores a lasJAK/por ejemplo,Akt), se ha correlacionado con un mal pronóstico en muchos tipos de cáncer (Bowman, T., et al. (19:2474-2488, 2000), Oncogene 19: Los niveles elevados de citocinas circulantes que señalan a través de JAK/STAT desempeñan un papel causal en la caquexia y/o la fatiga crónica. Así pues, la inhibición de JAK puede ser beneficiosa para los pacientes con cáncer por razones que van más allá de la posible actividad antitumoral.

[0008]La tirosina quinasa JAK2 puede ser beneficiosa para pacientes con trastornos mieloproliferativos, porejemplo,policitemia vera (PV), trombocitemia esencial (TE), metaplasia mieloide con mielofibrosis (MMM) (Levin, et al., Cancer Cell, vol. 7, 2005: 387-397). La inhibición de la quinasa JAK2V617F disminuye la proliferación de células hematopoyéticas, lo que sugiere que JAK2 es una posible diana para la inhibición farmacológica en pacientes con PV, ET y MMM.

[0009]La inhibición de las JAK puede beneficiar a los pacientes que sufren trastornos inmunitarios cutáneos como la psoriasis y la sensibilización cutánea. Se cree que el mantenimiento de la psoriasis depende de una serie de citocinas inflamatorias, además de diversas quimiocinas y factores de crecimiento (JCI, 113:1664-1675), muchas de las cuales señalan a través de las JAK (Adv Pharmacol. 2000;47:113-74).

[0010]Así pues, se necesitan continuamente agentes nuevos o mejorados que inhiban quinasas como las JAK para desarrollar productos farmacéuticos nuevos y más eficaces destinados a aumentar o suprimir las vías inmunitarias e inflamatorias, como el tratamiento de la hidradenitis supurativa. Esta aplicación está dirigida a esa necesidad y a otras.

[0011]El documento WO 2017/143014 A1 describe métodos para tratar el prurito en un sujeto que lo necesita que comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de<j>A<k>, y métodos de administración intranasal de inhibidores de JAK para su uso en el tratamiento del prurito.

[0012]Harumi Ochi et al., "The effect of oral clindamycin and rifampicin combination therapy in patients with hidradenitis suppurativa in Singapore", Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology, vol. 11, páginas 37-39, describe la terapia combinada en el tratamiento de la hidradenitis suppurativa en un grupo de pacientes asiáticos de Singapur.

RESUMEN

[0013]La presente solicitud proporciona un compuesto que inhibe JAK1 y/o JAK2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en métodos de tratamiento de la hidradenitis supurativa en un paciente que lo necesite.

[0014]En algunas realizaciones, el compuesto o sal es selectivo para JAK1 y JAK2, que es selectivo sobre JAK3 y TYK2.

[0015]En algunas realizaciones, el compuesto o sal es selectivo para JAK1 sobre JAK2, JAK3 y TYK2.

[0016]En algunas realizaciones, el compuesto es ruxolitinib, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0017]En algunas realizaciones, el compuesto es ruxolitinib, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que uno o más átomos de hidrógeno se sustituyen por átomos de deuterio.

[0018]En algunas realizaciones, la sal es fosfato de ruxolitinib.

[0019]En algunas realizaciones, el compuesto es {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0020]En algunas realizaciones, la sal es {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il} sal de ácido adípico acetonitrilo.

[0021]En algunas realizaciones, el compuesto es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0022]En algunas realizaciones, la sal es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida sal de ácido fosfórico.

[0023]En algunas realizaciones, el compuesto o la sal se administra a una dosis de 15, 30, 60 o 90 mg en base libre.

[0024]En algunas realizaciones, el compuesto es ((2R,SS)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]tieno[3,2-b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0025]En algunas realizaciones, el compuesto es ((2R,5S)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]tieno[3,2-b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo monohidratado.

[0026]En algunas realizaciones, los métodos comprenden además la administración de un agente terapéutico adicional (por ejemplo, un antibiótico, un retinoide, un corticosteroide, un agente anti-TNF-alfa o un inmunosupresor).

[0027]En algunas realizaciones, la administración del compuesto o sal es tópica. En algunas realizaciones, la administración del compuesto o sal es oral.

[0028]En algunas realizaciones, el método produce una mejora del 10%, 20%, 30%, 40% o 50% en la HiSCR (respuesta clínica de la hidradenitis supurativa).

[0029]La presente solicitud también proporciona un compuesto que inhibe JAK1 y/o JAK2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de la hidradenitis supurativa.

[0030]La presente solicitud también divulga el uso de un compuesto que inhibe JAK1 y/o JAK2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento para su uso en el tratamiento de la hidradenitis supurativa.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

[0031]

FIG. 1ilustra los valores individuales de expresión génica (MFI) para JAK1, para cada réplica experimental en queratinocitos simulados con TNFa e IFN-y en presencia/ausencia de los Compuestos A-D. Los queratinocitos se estimularon con TNFa (25 ng/mL) e IFNy (25 ng/mL) en presencia/ausencia de concentraciones crecientes de inhibidores de JAK. Los datos se presentan como niveles de expresión de JAK1 para cada grupo.

FIG. 2 ilustra los valores individuales de expresión génica (MFI) para JAK2, para cada réplica experimental en queratinocitos simulados con TNFa e IFN-y en presencia/ausencia de los Compuestos A-D. Los queratinocitos se estimularon con TNFa (25 ng/mL) e IFNy (25 ng/mL) en presencia/ausencia de concentraciones crecientes de inhibidores de JAK. Los datos se presentan como niveles de expresión de JAK2 para cada grupo.

FIG. 3 ilustra los valores individuales de expresión génica (MFI) de IL-1 a para cada réplica experimental en queratinocitos simulados con TNFa e IFN-y en presencia/ausencia de los compuestos A-D. Los queratinocitos se estimularon con TNFa (25 ng/mL) e IFNy (25 ng/mL) en presencia/ausencia de concentraciones crecientes de inhibidores de JAK. Los datos se presentan como niveles de expresión de IL-1a para cada grupo.

FIG. 4 ilustra los valores individuales de expresión génica (MFI) para IL-6, para cada réplica experimental en queratinocitos simulados con TNFa e IFN-y en presencia/ausencia de los Compuestos A-D. Los queratinocitos se estimularon con TNFa (25 ng/mL) e IFNy (25 ng/mL) en presencia/ausencia de concentraciones crecientes de inhibidores de JAK. Los datos se presentan como niveles de expresión de IL-6 para cada grupo.

FIG. 5 ilustra las concentraciones individuales de proteína (pg/mL) para IL-1 a, para cada réplica experimental en queratinocitos simulados con TNFa e IFN-y en presencia/ausencia de los Compuestos A-D. Los queratinocitos se estimularon con TNFa (25 ng/mL) e IFNy (25 ng/mL) en presencia/ausencia de concentraciones crecientes de inhibidores de JAK. Los datos se presentan como concentraciones de IL-1 a para cada grupo.

FIG. 6 ilustra las concentraciones individuales de proteína (pg/mL) para IL-6, para cada réplica experimental en queratinocitos simulados con TNFa e IFN-y en presencia/ausencia de los Compuestos A-D. Los queratinocitos se estimularon con TNFa (25 ng/mL) e IFNy (25 ng/mL) en presencia/ausencia de concentraciones crecientes de inhibidores de JAK. Los datos se presentan como concentraciones de IL-6 para cada grupo.

FIG. 7 ilustra la expresión génica (IMF) de JAK1, JAK3 y TYK2 en la piel de controles sanos y sujetos con hidradenitis supurativa. Los datos se presentan como niveles de expresión de los genes JAK1, J<a k>3 o TYK2 para cada sujeto de Control Sano (n=4) e Hidradenitis Supurativa (n=41).

FIG. 8 ilustra la expresión génica (IMF) de STAT1, STAT2 y STAT3 en la piel de controles sanos y sujetos con hidradenitis supurativa. Los datos se presentan como niveles de expresión génica de STAT1, STAT2 o STAT3 para cada sujeto de control sano (n=4) e hidradenitis supurativa (n=41).

FIG. 9 ilustra la expresión génica (IMF) de IRAK1, IRAK2 e IRAK4 en la piel de controles sanos y sujetos con hidradenitis supurativa. Los datos se presentan como niveles de expresión génica de IRAK1, IRAK2 o IRAK4 para cada sujeto de control sano (n=4) e hidradenitis supurativa (n=41).

DESCRIPCIÓN DETALLADA

[0032] La presente solicitud proporciona,entre otras cosas,un compuesto que inhibe JAK1 y/o JAK2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método de tratamiento de la hidradenitis supurativa en un paciente que lo necesite. El método comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto que inhibe JAK1 y/o JAK2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0033] El método aquí descrito utiliza compuestos o sales que son inhibidores de JAK1 y/o JAK2. En algunas realizaciones, el compuesto es:

ruxolitinib;

ruxolitinib, en el que uno o más átomos de hidrógeno se sustituyen por átomos de deuterio;

{1-{1-[3-Fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}aceto nitrilo;

4-{3-(cianometil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-1-il}-N-[4-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]piperidina-1-carboxamida;

[3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-1-(1-{[2-(trifluorometil)pirimidin-4-il]carbonyl}piperidin-4-il)azetidin-3-il]acetonitrilo;

4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-yi]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida;

((2R,SS)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]thieno[3,2-b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo; 3-[1-(6-cloropiridin-2-il)pirrolidin-3-il]-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanenitrilo;

3- (1-[1,3]oxazolo[5,4-b]piridin-2-ilpirrolidin-3-il)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanenitrilo; 4- [(4-{3-ciano-2-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propil}piperazin-1-il)carbonyl]-3-fluorobenzonitrilo;

4-[(4-{3-ciano-2-[3-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirrol-1-il]propil}piperazin-1-il)carbonyl]-3-fluorobenzonitrilo;

[trans-1 -[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1 -il]-3-(4- {[2-(trifluorometil)pirimidin-4-il]carbonil}piperazin-1 -il)ciclobutil]acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-[(3-hidroxiazetidin-1-il)metil]-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]ciclobutil}acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-{[(2S)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]metil}-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]ciclobutil}acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-{[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]metil}-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7Hpirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]ciclobutil}acetonitrilo;

4- (4-{3-[(dimetilamino)metil]-5-fluorophenoxi}piperidin-1-il)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanenitrilo;

5- {3-(cianometil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-1-il}-N-isopropilpicianorazina-2-carboxamida;

4- {3-(cianometil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-1-il}-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamide;

5- {3-(cianometil)-3-[4-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-1-il}-N-isopropilpirazina-2-carboxamida;

{1-(cis-4-{[6-(2-hidroxietil)-2-(trifluorometil)pirimidin-4-il]oxi}ciclohexil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1 -il]azetidin-3-il}acetonitrilo;

{1-(cis-4-{[4-[(etilamino)metil]-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}ciclohexil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1 -il]azetidin-3-il}acetonitrilo;

{1-(cis-4-{[4-(1-hidroxi-1-metiletil)-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}ciclohexil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo;

{1-(cis-4-{[4-{[(3R)-3-hidroxipirrolidin-1-il]metil}-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}ciclohexil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo;

{1-(cis-4-{[4-{[(3S)-3-hidroxipirrolidin-1-il]metil}-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}ciclohexil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-({[(1 S)-2-hidroxi-1 -metiletil]amino}metil)-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1 -il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]ciclobutil}acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-({[(2R)-2-hidroxipropil]amino}metil)-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]ciclobutil}acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-({[(2S)-2-hidroxipropil]amino}metil)-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]ciclobutil}acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-(2-hidroxietil)-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1 -il]ciclobutil}acetonitrilo;

o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de los anteriores.

[0034]En algunas realizaciones, el compuesto o sal es selectivo para JAK1 y JAK2 sobre JAK3 y TYK2. En algunas realizaciones, el compuesto es 3-ciclopentil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanenitrilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el compuesto es (3R)-3-ciclopentil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanenitrilo (ruxolitinib), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Ruxolitinib tiene una IC<50>de menos de 10 nM a 1 mM de ATP (ensayo A) en JAK1 y JAK2. El 3-ciclopentil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanenitrilo y el ruxolitinib pueden fabricarse por el procedimiento descrito en el documento US 7.598.257 (Ejemplo 67), depositado el 12 de diciembre de 2006. En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 y/o JAK2 es la sal de ácido fosfórico (3R)-3-ciclopentil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanenitrilo. La sal de ácido fosfórico puede fabricarse como se describe en Patente de EEUU. 8.722.693.

[0035]En algunas realizaciones, el compuesto o sal es un inhibidor de JAK1. En algunas realizaciones, el compuesto o sal es selectivo para JAK1 sobre JAK2, JAK3 y TYK2. Por ejemplo, algunos de los compuestos aquí descritos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, inhiben preferentemente JAK1 sobre uno o más de JAK2, JAK3 y TYK2. JAK1 desempeña un papel central en una serie de vías de señalización de citoquinas y factores de crecimiento que, cuando están desreguladas, pueden dar lugar o contribuir a estados patológicos. Por ejemplo, los niveles de IL-6 son elevados en la artritis reumatoide, una enfermedad en la que se ha sugerido que tiene efectos perjudiciales (Fonesca, et al., Autoimmunity Reviews, 8:538-42, 2009). Debido a que la IL-6 señala, al menos en parte, a través de JAK1, la IL-6 puede ser indirectamente a través de la inhibición de JAK1, lo que resulta en un beneficio clínico potencial (Guschin, et al. Embo J 14: 1421, 1995; Smolen, et al. Lancet 371:987, 2008). Además, en algunos tipos de cáncer JAK1 está mutado, lo que provoca un crecimiento y una supervivencia indeseables de las células tumorales (Mullighan, Proc Natl Acad Sci U S A.106:9414-8, 2009; Flex, J Exp Med. 205:751-8, 2008). En otras enfermedades autoinmunes y cánceres, los niveles sistémicos elevados de citocinas inflamatorias que activan JAK1 también pueden contribuir a la enfermedad y/o a los síntomas asociados. Por lo tanto, los pacientes con estas enfermedades pueden beneficiarse de la inhibición de JAK1. Los inhibidores selectivos de JAK1 pueden ser eficaces y, al mismo tiempo, evitar los efectos innecesarios y potencialmente indeseables de la inhibición de otras JAK-quinasas.

[0036]La hidradenitis supurativa se caracteriza por una inflamación significativa de la piel; sin embargo, las publicaciones que describen la inflamación son limitadas (Hoffman et al., PLOS One, 28 de septiembre de 2018, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0203672). Aquí se presentan Ejemplos que apoyan la hipótesis de que la inflamación está impulsada, en gran parte, por vías mediadas por JAK/STAT. Los ejemplos C, D y E ilustran niveles elevados de expresión génica JAK/STA<t>en la piel de pacientes con HS en comparación con la piel sana. Además, los Ejemplos C, D y E muestran que las citocinas proinflamatorias que se sabe que están elevadas en la HS (TNF-alfa e IFN-gamma) inducen la vía JAK/STAT en queratinocitos cultivados y que esta inducción puede reducirse añadiendo inhibidores de JAK. Por lo tanto, los pacientes con HS pueden beneficiarse de la inhibición de JAK1. Los inhibidores selectivos de JAK1 pueden ser eficaces y, al mismo tiempo, evitar los efectos innecesarios y potencialmente indeseables de la inhibición de otras JAK-quinasas.

[0037]En algunas realizaciones, el compuesto o sal inhibe JAK1 preferentemente sobre JAK2 (por ejemplo, tiene una relación JAK2/JAK1 IC<50>>1). En algunas realizaciones, los compuestos o sales son aproximadamente 10 veces más selectivos para JAK1 que para JAK2. En algunas realizaciones, los compuestos o sales son aproximadamente 3 veces, aproximadamente 5 veces, aproximadamente 10 veces, aproximadamente 15 veces o aproximadamente 20 veces más selectivos para JAK1 que para JAK2 según se calcula midiendo la IC<50>a 1 mM de ATP (véase el Ejemplo A).

[0038]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 es un compuesto de la Tabla 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los compuestos de la Tabla 1 son inhibidores selectivos de JAK1 (selectivos sobre JAK2, JAK3 y TYK2). Los valores IC<50>obtenidos por el método del Ejemplo A a 1 mM de ATP se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1

(continuación)

significa <10 nM (véanse las condiciones de ensayo en el Ejemplo A)

+ significa < 100 nM (véanse las condiciones de ensayo en el ejemplo A).

++ significa < 300 nM (véanse las condiciones de ensayo en el ejemplo A).

aDatos del enantiómero 1

bDatos del enantiómero 2

[0039]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 es {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoyl]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0040]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 es {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoyl]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}sal de ácido adípico acetonitrilo.

[0041]La síntesis y preparación de {1-{1 -[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo y la sal de ácido adípico de la misma pueden encontrarse, p. ej., en Publ. Patente de EE. UU. N° 2011/0224190, depositada el 9 de marzo de 2011,

Publ. Patente de EE. UU. N° 2013/0060026, depositada el 6 de septiembre de 2012, y

Publ. Patente de EE. UU. N° 2014/0256941, depositada el 5 de marzo de 2014.

[0042]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0043]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida sal de ácido fosfórico.

[0044]En alguna realización, el JAK1 es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida sal de ácido clorhídrico.

[0045]En alguna realización, el JAK1 es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida sal de ácido bromhídrico.

[0046]En alguna realización, el JAK1 es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida sal de ácido sulfúrico.

[0047]La síntesis y preparación de 4-[3-(cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida y la sal de ácido fosfórico de la misma puede encontrarse, por ejemplo, en Publ. Patente de EE. UU. N.°

US 2014/0343030, depositada el 16 de mayo de 2014.

[0048]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 es ((2R,SS)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]tieno[3,2b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0049]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 es ((2R,SS)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]tieno[3,2-b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo monohidrato.

[0050]La síntesis de ((2R,5S)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]tieno[3,2-b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo y la caracterización de las formas anhidra y monohidratada del mismo se describen en.

Publ. Patente de EE. UU. N° 2014/0121198, depositada el 31 de octubre de 2013 y

Publ. Patente de EE. UU. N° 2015/0344497, depositada el 29 de abril de 2015.

[0051]En algunas realizaciones, los compuestos de la Tabla 1 se preparan mediante los procedimientos sintéticos descritos en

Publ. Patente de EE. UU. N° 2011/0224190, depositada el 9 de marzo de 2011,

Publ. Patente de EE. UU. N.° 2014/0343030, depositada el 16 de mayo de 2014.

Publ. Patente de EE. UU. N° 2014/0121198, depositada el 31 de octubre de 2013,

Publ. Patente de EE. UU. N.° 2010/0298334, depositada el 21 de mayo de 2010.

Publ. Patente de EE. UU. N° 2011/0059951, depositada el 31 de agosto de 2010,

Publ. Patente de EE. UU. N° 2012/0149681, depositada el 18 de noviembre de 2011,

Publ. Patente de EE. UU. N° 2012/0149682, depositada el 18 de noviembre de 2011,

Publ. Patente de EE. UU. 2013/0018034, depositada el 19 de junio de 2012,

Publ. Patente de EE. UU. N° 2013/0045963, depositada el 17 de agosto de 2012, y

Publ. Patente de EE. UU. N.° 2014/0005166, depositada el 17 de mayo de 2013.

[0052]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 se selecciona entre los compuestos, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, de

Publ. Patente de EE. UU. N° 2011/0224190, depositada el 9 de marzo de 2011,

Publ. Patente de EE. UU. N.° 2014/0343030, depositada el 16 de mayo de 2014.

Publ. Patente de EE. UU. N° 2014/0121198, depositada el 31 de octubre de 2013,

Publ. Patente de EE. UU. N.° 2010/0298334, depositada el 21 de mayo de 2010.

Publ. Patente de EE. UU. N° 2011/0059951, depositada el 31 de agosto de 2010,

Publ. Patente de EE. UU. 2013/0018034, depositada el 19 de junio de 2012,

Publ. Patente de EE. UU. N.° 2014/0005166, depositada el 17 de mayo de 2013.

[0053]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 y/o JAK2 puede ser un compuesto marcado isotópicamente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Un compuesto "isotópicamente" o "radiomarcado" es un compuesto de la divulgación en el que uno o más átomos se sustituyen o reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico que se encuentra típicamente en la naturaleza(es decir,de forma natural). Los radionucleidos adecuados que pueden incorporarse en los compuestos de la presente divulgación incluyen, entre otros, 2H(también escrito como D para deuterio), 3H (también escrito como T para tritio), 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 35S, 36Cl, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I y 131I. Por ejemplo, uno o más átomos de hidrógeno en un compuesto de la presente divulgación pueden sustituirse por átomos de deuterio, como -CD<3>que se sustituye por -CH<3>).

[0054]Uno o más átomos constituyentes de los compuestos aquí descritos pueden ser reemplazados o sustituidos con isótopos de los átomos en abundancia natural o no natural. En algunas realizaciones, el compuesto incluye al menos un átomo de deuterio. En algunas realizaciones, el compuesto incluye dos o más átomos de deuterio. En algunas realizaciones, el compuesto incluye 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, o 1-6 átomos de deuterio. En algunas realizaciones, todos los átomos de hidrógeno de un compuesto pueden ser reemplazados o sustituidos por átomos de deuterio.

[0055]Los métodos sintéticos para incluir isótopos en compuestos orgánicos son conocidos en el arte (Deuterium Labeling in Organic Chemistry por Alan F. Thomas (New York, N.Y., Appleton-Century-Crofts, 1971; The Renaissance of H/D Exchange por Jens Atzrodt, Volker Derdau, Thorsten Fey y Jochen Zimmermann, Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 7744 7765; The Organic Chemistry of Isotopic Labelling por James R. Hanson, Royal Society of Chemistry, 2011). Los compuestos marcados isotópicamente pueden utilizarse en diversos estudios, como espectroscopia de NMR, experimentos de metabolismo y/o ensayos.

[0056]La sustitución con isótopos más pesados, como el deuterio, puede ofrecer ciertas ventajas terapéuticas derivadas de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una mayor semividain vivoo menores requisitos de dosificación, y por lo tanto puede ser preferible en algunas circunstancias. (Véase,p. ej.,A. Kerekes et.al. J. Med. Chem. 2011, 54, 201 210; R. Xu et. al. J. Label Compd. Radiopharm. 2015, 58, 308-312). En particular, la sustitución en uno o más sitios del metabolismo puede ofrecer una o más de las ventajas terapéuticas.

[0057]Por consiguiente, en algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 y/o JAK2 es un compuesto, en el que uno o más átomos de hidrógeno del compuesto se sustituyen por átomos de deuterio, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0058]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 y/o JAK2 es ruxolitinib, en el que uno o más átomos de hidrógeno se sustituyen por átomos de deuterio, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el inhibidor de<j>AK1 y/o JAK2 es cualquiera de los compuestos en

Patente de EE. u U. 9249149, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 y/o JAK2 es CTP-543, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0059]En algunas realizaciones, el compuesto es un compuesto de Fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que

R1 se selecciona de la mano D;

cada R2 se selecciona independientemente entre H y D, siempre que cada R2 unido a un carbono común sea el mismo;

cada R3 se selecciona independientemente de la mano D, siempre que cada R3 unido a un carbono común sea el mismo;

R4 se selecciona de la mano D;

cada R5 es igual y se selecciona de la Mano D; y

R6, R7, y R8 se seleccionan cada uno independientemente de la mano D; siempre que cuando R1 sea H, cada R2 y cada R3 sean H, R4 sea H y cada uno de R6, R7, y R8 sea H, entonces cada R5 sea D.

[0060]En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 y/o JAK2 es un compuesto de Fórmula I seleccionado entre los siguientes compuestos 100-130 de la tabla siguiente (en los que R6, R7, y R8 son cada uno H), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK1 y/o JAK2 es un compuesto de Fórmula I seleccionado de entre los siguientes compuestos 200-231 de la tabla siguiente (en la que R6, R7, y R8 son cada uno D), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

(continuación)

[0061]Tal como se utiliza aquí, la frase "opcionalmente sustituido" significa no sustituido o sustituido. Tal como se utiliza aquí, el término "sustituido" significa que se elimina un átomo de hidrógeno y se sustituye por un sustituyente. Debe entenderse que la sustitución en un átomo dado está limitada por la valencia.

[0062]Tal como se utiliza en el presente documento, el término "alquilo Cn-m", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo hidrocarburo saturado que puede ser de cadena recta o ramificada, con n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo alquilo contiene de 1 a 6, o de 1 a 3 átomos de carbono. Los ejemplos de moléculas alquílicas incluyen, entre otros, grupos químicos como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo,secbutilo, terc-butilo, n-pentilo,2-metil-1 -butilo, 3-pentilo,n-hexilo,1,2,2-trimetilpropilo y similares.

[0063]Tal como se utiliza en el presente documento, el término "alquileno", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de enlace alquilo divalente, que puede ser ramificado o de cadena recta, donde los dos sustituyentes pueden estar unidos en cualquier posición del grupo de enlace alquileno. Ejemplos de grupos alquileno incluyen, pero no se limitan a, etano-1,2-diilo, propano-1,3-diilo, propano-1,2-diilo, y similares.

[0064]Tal como se utiliza en el presente documento, el término "HO-alquilo-C1-3" se refiere a un grupo de fórmula -alquileno-OH, en el que dicho grupo alquileno tiene de 1 a 3 átomos de carbono.

[0065]Tal como se utiliza aquí, el término "CN-alquilo-C1-3" se refiere a un alquilo C<1-3>sustituido por un grupo ciano.

[0066]Tal como se utiliza aquí, el término "amino" se refiere a un grupo de fórmula -NH<2>.

[0067]Tal como se utiliza en el presente documento, el término "di(C1-3-alquil)amino" se refiere a un grupo de fórmula-N(alquilo)<2>, en el que cada uno de los dos grupos alquilo tiene, independientemente, de 1 a 3 átomos de carbono.

[0068]Tal como se utiliza en el presente documento, el término "alquilamino C<1>-<3>" se refiere a un grupo de fórmula -NH(alquilo), en el que el grupo alquilo tiene de 1 a 3 átomos de carbono.

[0069]Tal como se utiliza en el presente documento, el término "di(C<1-3>alquilo)aminosulfonilo" se refiere a un grupo de fórmula -S(O)<2>N(alquilo)<2>, en el que cada grupo alquilo tiene independientemente de 1 a 3 átomos de carbono.

[0070]Como se usa aquí, el término "alquilsulfonilo C<1-3>" se refiere a un grupo de fórmula -S(O)<2>-alquilo, donde el grupo alquilo tiene de 1 a 3 átomos de carbono.

[0071] Tal como se utiliza en el presente documento, "halo" o "halógeno", empleado solo o en combinación con otros términos, incluye fluoro, cloro, bromo y yodo. En algunas realizaciones, el grupo halo es fluoro o cloro.

[0072] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "haloalquilo Cn-m ", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo alquilo Cn-m que tiene hasta {2(n a m)+1} átomos de halógeno que pueden ser iguales o diferentes. En algunas realizaciones, los átomos de halógeno son átomos de flúor. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene 1-6 o 1-3 átomos de carbono. Algunos ejemplos de grupos haloalquilo son CF<3>, C<2>F<5>, CHF<2>, CCl3, CHCb, C2Cl5, y similares. En algunas realizaciones, el grupo haloalquilo es un grupo fluoroalquilo.

[0073] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "fluoroalquilo C<1-3>" se refiere a un grupo alquilo C<1-3>que puede estar parcial o totalmente sustituido por átomos de flúor.

[0074] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "cicloalquilo C<3-6>", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a una fracción de hidrocarburo monocíclico no aromático, con 3-6 átomos de carbono, que puede contener opcionalmente uno o más grupos alquenileno como parte de la estructura de anillo. Uno o más átomos de carbono formadores de anillos de un grupo cicloalquilo pueden oxidarse para formar enlaces carbonilo. Los grupos cicloalquilo C3-6 ejemplares incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo y similares. En algunas realizaciones, el grupo cicloalquilo es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo.

[0075] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "cicloalquilo C3-6-alquilo C<1>-<3>" se refiere a un grupo de fórmula-alquileno C1-3-cicloalquilo C<3>-<6>.

[0076] Los compuestos aquí descritos pueden ser asimétricos(p. ej.,tener uno o más estereocentros). Todos los estereoisómeros, como enantiómeros y diastereómeros, están previstos a menos que se indique lo contrario. Los compuestos que contienen átomos de carbono sustituidos asimétricamente pueden aislarse en formas ópticamente activas o racémicas. Los métodos para preparar formas ópticamente activas a partir de materiales de partida ópticamente inactivos son conocidos en la técnica, como la resolución de mezclas racémicas o la síntesis estereoselectiva. Muchos isómeros geométricos de olefinas, dobles enlaces C=N y similares también pueden estar presentes en los compuestos aquí descritos, y todos estos isómeros estables se contemplan en la presente solicitud. Se describen los isómeros geométricoscisytransde los compuestos de la presente solicitud, que pueden aislarse como una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas. En algunas realizaciones, el compuesto tiene la configuración(R).En algunas realizaciones, el compuesto tiene la configuración (S).

[0077] La resolución de mezclas racémicas de compuestos puede llevarse a cabo por cualquiera de los numerosos métodos conocidos en la técnica. Un método de ejemplo incluye la recristalización fraccionada utilizando un ácido de resolución quiral que es un ácido orgánico ópticamente activo que forma sal. Los agentes de resolución adecuados para los métodos de recristalización fraccionada son, por ejemplo, los ácidos ópticamente activos, como las formas D y L del ácido tartárico, el ácido diacetiltartárico, el ácido dibenzoiltartárico, el ácido mandélico, el ácido málico, el ácido láctico o los diversos ácidos canforsulfónicos ópticamente activos, como el ácido p-canforsulfónico. Otros agentes de resolución adecuados para los métodos de cristalización fraccionada incluyen formas estereoisoméricamente puras de ametilbencilamina(p. ej.,formas S y R, o formas diastereoméricamente puras), 2-fenilglicinol, norefedrina, efedrina, N-metilefedrina, ciclohexiletilamina, 1,2-diaminociclohexano y similares.

[0078] La resolución de mezclas racémicas también puede llevarse a cabo por elución en una columna empaquetada con un agente de resolución ópticamente activo(p. ej.,dinitrobenzoilfenilglicina). Un experto en la materia puede determinar la composición adecuada del disolvente de elución.

[0079] Los compuestos aquí descritos incluyen formas tautoméricas. Las formas tautoméricas son el resultado del intercambio de un enlace sencillo por un enlace doble adyacente, junto con la migración concomitante de un protón. Las formas tautoméricas incluyen tautómeros prototrópicos que son estados de protonación isoméricos que tienen la misma fórmula empírica y carga total. Algunos ejemplos de tautómeros prototrópicos son los pares cetona - enol, amida - ácido imídico, lactama - lactim, enamina - imina, y formas anulares en las que un protón puede ocupar dos o más posiciones de un sistema heterocíclico, por ejemplo, 1H- y 3H-imidazol, 1H-, 2H- y 4H- 1,2,4-triazol, 1H- y 2H-isoindol, y 1H- y 2H-pirazol. Las formas tautoméricas pueden estar en equilibrio o bloqueadas estéricamente en una forma mediante la sustitución adecuada. Por ejemplo, se reconocerá que el siguiente anillo de pirazol puede formar dos tautómeros:

Se pretende que las reivindicaciones cubran ambos tautómeros.

[0080] Todos los compuestos, y sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden encontrarse junto con otras sustancias como agua y disolventes (por ejemplo, hidratos y solvatos) o pueden aislarse.

[0081]En algunas realizaciones, los compuestos aquí descritos, o sus sales, están sustancialmente aislados. Por "sustancialmente aislado" se entiende que el compuesto está al menos parcial o sustancialmente separado del entorno en el que se formó o detectó. La separación parcial puede incluir, por ejemplo, una composición enriquecida en los compuestos aquí descritos. La separación sustancial puede incluir composiciones que contengan al menos aproximadamente del 50%, al menos aproximadamente del 60%, al menos aproximadamente del 70%, al menos aproximadamente del 80%, al menos aproximadamente del 90%, al menos aproximadamente del 95%, al menos aproximadamente del 97%, o al menos aproximadamente del 99% en peso de los compuestos aquí descritos, o sal de los mismos. Los métodos para aislar compuestos y sus sales son habituales en la técnica.

[0082]La frase "farmacéuticamente aceptable" se emplea aquí para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas farmacéuticas que son, dentro del ámbito del buen juicio médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, proporcional a una relación beneficio/riesgo razonable.

[0083]Las expresiones "temperatura ambiente" y "rt", tal como se utilizan en el presente documento, se entienden en la materia, y se refieren generalmente a una temperatura, por ejemplo, una temperatura de reacción, que es aproximadamente la temperatura de la habitación en la que se lleva a cabo la reacción, por ejemplo, una temperatura de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 30 °C.

[0084]La presente solicitud también incluye sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos aquí descritos. Tal como se utiliza aquí, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos divulgados en los que el compuesto original se modifica convirtiendo una fracción ácida o básica existente en su forma salina. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales minerales o de ácidos orgánicos de residuos básicos como aminas; sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos como ácidos carboxílicos; y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente solicitud incluyen las sales no tóxicas convencionales del compuesto original formadas, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente solicitud pueden sintetizarse a partir del compuesto original que contiene una fracción básica o ácida mediante métodos químicos convencionales. Generalmente, dichas sales pueden prepararse haciendo reaccionar las formas ácidas o básicas libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o el ácido apropiados en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de ambos; en general, se prefieren los medios no acuosos como el éter, el acetato de etilo, los alcoholes (por ejemplo, metanol, etanol, isopropanol o butanol) o el acetonitrilo (ACN). Las listas de sales adecuadas se encuentran en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 y Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977), cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia en su totalidad.

[0085]Tal como se utiliza en el presente documento, el término "contacto" se refiere a la unión de las partes indicadas en un sistemain vitrooin vivo.Por ejemplo, "contactar" una JAK con un compuesto de la invención incluye la administración de un compuesto de la presente solicitud a un individuo o paciente, como un humano, que tenga una JAK, así como, por ejemplo, introducir un compuesto de la invención en una muestra que contenga una preparación celular o purificada que contenga la JAK.

[0086]Tal como se utiliza aquí, el término "sujeto", "individuo" o "paciente", utilizado indistintamente, se refiere a cualquier animal, incluidos mamíferos, preferiblemente ratones, ratas, otros roedores, conejos, perros, gatos, cerdos, vacas, ovejas, caballos o primates, y más preferiblemente humanos. En algunas realizaciones, el "sujeto", "individuo" o "paciente" necesita dicho tratamiento.

[0087]En algunas realizaciones, los inhibidores se administran en una cantidad terapéuticamente eficaz.[0137]Como se usa aquí, la frase "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que provoca la respuesta biológica o medicinal que se busca en un tejido, sistema, animal, individuo o humano por un investigador, veterinario, médico u otro clínico.

[0088]Tal como se utiliza aquí, el término "tratar' o "tratamiento" se refiere a uno o más de (1) inhibir la enfermedad; por ejemplo, inhibir una enfermedad, afección o trastorno en un individuo que experimenta o muestra la patología o sintomatología de la enfermedad, afección o trastorno (es decir, detener el desarrollo ulterior de la patología y/o sintomatología); (2) mejorar la enfermedad; por ejemplo, mejorar una enfermedad, afección o trastorno en un individuo que experimenta o presenta la patología o sintomatología de la enfermedad, afección o trastorno (es decir, revertir la patología y/o sintomatología), por ejemplo, disminuyendo la gravedad de la enfermedad; o (3) prevenir la enfermedad, afección o trastorno en un individuo que pueda estar predispuesto a la enfermedad, afección o trastorno pero que aún no experimente o muestre la patología o sintomatología de la enfermedad. En algunas realizaciones, tratar se refiere a inhibir o mejorar la enfermedad. En algunas realizaciones, tratar es prevenir la enfermedad.

Terapias Combinadas

[0089]Los métodos aquí descritos pueden comprender además la administración de uno o más agentes terapéuticos adicionales. Uno o más agentes terapéuticos adicionales pueden administrarse al paciente simultánea o secuencialmente.

[0090] En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un antibiótico. En algunas realizaciones, el antibiótico es clindamicina, doxiciclina, minociclina, trimetoprim-sulfametoxazol, eritromicina, metronidazol, rifampicina, moxifloxacina, dapsona o una combinación de los mismos. En algunas realizaciones, el antibiótico es clindamicina, doxiciclina, minociclina, trimetoprim-sulfametoxazol o eritromicina en combinación con metronidazol. En algunas realizaciones, el antibiótico es una combinación de rifampicina, moxifloxacina y metronidazol. En algunas realizaciones, el antibiótico es una combinación de moxifloxacino y rifampicina.

[0091] En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un retinoide. En algunas realizaciones, el retinoide es etretinato, acitretina o isotretinoína.

[0092] En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un esteroide. En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un corticosteroide. En algunas realizaciones, el esteroide es tal como triamcinolona, dexametasona, fluocinolona, cortisona, prednisona, prednisolona o flumetolona.

[0093] En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un agente anti-TNF-alfa. En algunas realizaciones, el agente anti-TNF-alfa es un anticuerpo anti-TNF-alfa. En algunas realizaciones, el agente anti-TNF-alfa es infliximab o etanercept, o adalimumab.

[0094] En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un inmunosupresor. En algunas realizaciones, el inmunosupresor es metotrexato o ciclosporina A. En algunas realizaciones, el inmunosupresor es micofenolato mofetilo o micofenolato sódico.

[0095] En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es finasterida, metformina, adapaleno o ácido azelaico.

[0096] En algunas realizaciones, el método comprende además la administración de un agente terapéutico adicional seleccionado entre IMiDs, un agente anti-IL-6, un agente hipometilante y un modificador de la respuesta biológica (BRM).

[0097] Generalmente, un BRM es una sustancia elaborada a partir de organismos vivos para tratar enfermedades, que puede aparecer de forma natural en el cuerpo o puede elaborarse en el laboratorio. Algunos ejemplos de BRM son la IL-2, el interferón, varios tipos de factores estimulantes de colonias (CSF, GM-CSF, G-CSF), anticuerpos monoclonales como abciximab, etanercept, infliximab, rituximab, trasturzumab y ascorbato en dosis altas.

[0098] En algunas realizaciones, el agente hipometilante es un inhibidor de la ADN metiltransferasa. En algunas realizaciones, el inhibidor de la metiltransferasa del ADN se selecciona entre 5 azacitidina y decitabina.

[0099] Generalmente, los IMiD son como agentes inmunomoduladores. En algunas realizaciones, la IMiD se selecciona entre talidomida, lenalidomida, pomalidomida, CC-11006 y CC-10015.

[0100] En algunas realizaciones, el método comprende además la administración de un agente terapéutico adicional seleccionado entre globulina antitimocítica, factor estimulante de colonias de granulocitos humanos recombinante (G CSF), CSF granulocito-monocítico (GM-CSF), un agente estimulante de la eritropoyesis (ESA) y ciclosporina.

[0101] En algunas realizaciones, el método comprende además la administración de un inhibidor de JAK adicional al paciente. En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK adicional es barcitinib, tofacitinib, oclacitinib, filgotinib, gandotinib, lestaurtinib, momelotinib, bacritinib, PF-04965842, upadacitinib, peficitinib, fedratinib, cucurbitacina I o CHZ868.

[0102] Uno o más agentes farmacéuticos adicionales como, por ejemplo, agentes antiinflamatorios, inmunosupresores, así como inhibidores de PI3K6, mTor, Bcr-Abl, Flt-3, RAF y fAk quinasa como, por ejemplo, los descritos en el documento WO 2006/056399, que se incorpora aquí por referencia en su totalidad, u otros agentes pueden utilizarse en combinación con los compuestos aquí descritos para el tratamiento de enfermedades, trastornos o afecciones asociados a JAK. El uno o más agentes farmacéuticos adicionales pueden administrarse a un paciente simultánea o secuencialmente.

[0103] Los inhibidores de Bcr-Abl de ejemplo incluyen los compuestos, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, de los géneros y especies divulgados en Pat. de EE. UU. N.° 5.521.184, WO 04/005281, y N.° Ser. 60/578,491).

[0104] Los inhibidores de Flt-3 adecuados a modo de ejemplo incluyen compuestos, y sus sales farmacéuticamente aceptables, según se describe en

documentos WO 03/037347; WO 03/099771; y WO 04/046120.

[0105] Ejemplos de inhibidores de RAF adecuados incluyen compuestos, y sus sales farmacéuticamente aceptables, según se describe en

documentos WO 00/09495 y WO 05/028444.

[0106]Los inhibidores de FAK adecuados a modo de ejemplo incluyen compuestos, y sus sales farmacéuticamente aceptables, según se divulga en

WO 04/080980, WO 04/056786, WO 03/024967, WO 01/064655, WO 00/053595, y WO 01/014402.

[0107]En algunas realizaciones, uno o más de los compuestos de la invención pueden usarse en combinación con uno o más inhibidores de quinasa incluyendo imatinib, particularmente para tratar pacientes resistentes a imatinib u otros inhibidores de quinasa.

[0108]En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es acetónido de fluocinolona (Retisert®), o rimexolona (AL-2178, Vexol, Alcon).

[0109]En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es la ciclosporina (Restasis®).

[0110]En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional se selecciona entre Dehydrex™ (Holles Labs), Civamide (Opko), hialuronato sódico (Vismed, Lantibio/TRB Chemedia), ciclosporina (ST-603, Sirion Therapeutics), ARG101(T) (testosterona, Argentis), AGR1012(P) (Argentis), ecabet sódico (Senju-Ista), gefarnato (Santen), ácido 15-(s)-hidroxieicosatetraenoico (15(S)-HETE), cevilemina, doxiciclina (ALt Y-0501, Alacrity), minociclina, iDestrin™ (NP50301, Nascent Pharmaceuticals), ciclosporina A (Nova22007, Novagali), oxitetraciclina (Duramycin, MOLI1901, Lantibio), CF101 (2S,3S,4R,5R)-3,4-dihidroxi-5-[6-[(3-yodofenil)metilamino]purin-9-il]-N-metil-oxolano-2-carbamilo, Can-Fite Biopharma), voclosporina (LX212 o LX214, Lux Biosciences), ARG103 (Agentis), RX-10045 (análogo sintético de la resolvina, Resolvyx), DYN15 (Dyanmis Therapeutics), rivoglitazona (DE011, Daiichi Sanko), TB4 (RegeneRx), OPH-01 (Ophtalmis Monaco), PCS101 (Pericor Science),<r>E<v>1-31 (Evolutec), Lacritin (Senju), rebamipida (Otsuka-Novartis), OT-551 (Othera), PAI-2 (Universidad de Pensilvania y Universidad de Temple), pilocarpina, tacrolimus, pimecrolimus (AMS981, Novartis), etabonato de loteprednol, rituximab, diquafosol tetrasódico (INS365, Inspire), KLS-0611 (Kissei Pharmaceuticals), dehidroepiandrosterona, anakinra, efalizumab, micofenolato sódico, etanercept (Embrel®), hidroxicloroquina, NGX267 (TorreyPines Therapeutics), actemra, gemcitabina, oxaliplatino, L-asparaginasa o talidomida.

[0111]En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un agente antiangiogénico, un agonista colinérgico, un modulador del receptor TRP-1, un bloqueador del canal de calcio, un secretagogo de mucina, un estimulante de MUC1, un inhibidor de calcineurina, un corticosteroide, un agonista del receptor P2Y2, un agonista del receptor muscarínico, un inhibidor de mTOR, otro inhibidor de JAK, un inhibidor de la quinasa Bcr-Abl, un inhibidor de la quinasa Flt-3, un inhibidor de la quinasa RAF y un inhibidor de la quinasa FAK como, por ejemplo, los descritos en

documento WO 2006/056399. En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un derivado de la tetraciclina (por ejemplo, minociclina o doxiciclina). En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional se une a FKBP12.

[0112]En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un agente alquilante o un agente reticulante del ADN; un agente antimetabolito/desmetilante (por ejemplo, 5-flurocilo, capecitabina o azacitidina); una terapia antihormonal (por ejemplo, antagonistas de los receptores hormonales, SERM o inhibidor de la aromotasa); un inhibidor mitótico (por ejemplo, vincristina o paclitaxel); un inhibidor de la topoisomerasa (I o II) (por ejemplo, mitoxantrona e irinotecán); un inductor apoptótico (por ejemplo, ABT-737); una terapia con ácidos nucleicos (por ejemplo, antisentido o ARNi); ligandos de receptores nucleares (por ejemplo, agonistas y/o antagonistas: ácido transretinoico total o bexaroteno); agentes epigenéticos como inhibidores de la histona desacetilasa (p. ej., vorinostat), agentes hipometilantes (p. ej., decitabina); reguladores de la estabilidad proteica como inhibidores de Hsp90, moléculas conjugadoras o desconjugadoras de ubiquitina y/o similares a la ubiquitina; o un inhibidor del EGFR (erlotinib).

[0113]En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional incluye un antibiótico, un antiviral, un antifúngico, un anestésico, agentes antiinflamatorios incluyendo antiinflamatorios esteroideos y no esteroideos, y agentes antialérgicos. Algunos ejemplos de medicamentos adecuados son los aminoglucósidos, como la amikacina, la gentamicina, la tobramicina, la estreptomicina, la netilmicina y la kanamicina; fluoroquinolonas como ciprofloxacina, norfloxacina, ofloxacina, trovafloxacina, lomefloxacina, levofloxacina y enoxacina; naftiridina; sulfonamidas; polimixina; cloranfenicol; neomicina; paramomicina; colistimetato; bacitracina; vancomicina; tetraciclinas; rifampicina y sus derivados ("rifampinas"); cicloserina; betalactámicos; cefalosporinas; anfotericinas; fluconazol; flucitosina; natamicina; miconazol; ketoconazol; corticosteroides; diclofenaco; flurbiprofeno; ketorolaco; suprofeno; cromolina; lodoxamida; levocabastina; nafazolina; antazolina; feniramina; o antibiótico azalida.

Formulaciones y Formas Farmacéuticas

[0114]Cuando se emplean como productos farmacéuticos, los compuestos de la invención pueden administrarse en forma de composiciones farmacéuticas. Estas composiciones pueden prepararse de una manera bien conocida en el arte farmacéutico, y pueden administrarse por una variedad de vías, dependiendo de si se desea un tratamiento local o sistémico y de la zona a tratar. La administración puede ser tópica (incluyendo transdérmica, epidérmica, oftálmica y a las membranas mucosas, incluyendo la administración intranasal, vaginal y rectal), pulmonar(p. ej.,por inhalación o insuflación de polvos o aerosoles, incluyendo por nebulizador; intratraqueal o intranasal), oral o parenteral. La administración parenteral incluye la administración intravenosa, intraarterial, subcutánea, intraperitoneal intramuscular o inyección o infusión; o intracraneal,p. ej.,intratecal o intraventricular. La administración parenteral puede ser en forma de una dosis única en bolo, o puede ser, por ejemplo, mediante una bomba de perfusión continua. Las composiciones y formulaciones farmacéuticas para administración tópica pueden incluir parches transdérmicos, pomadas, lociones, cremas, geles, gotas, supositorios, aerosoles, líquidos y polvos. Pueden ser necesarios o deseables portadores farmacéuticos convencionales, bases acuosas, en polvo u oleosas, espesantes y similares.

[0115]En algunas realizaciones, la administración es tópica. En algunas realizaciones, la administración es tópica sobre la piel.

[0116]En algunas realizaciones, la administración es oral.

[0117]Esta invención también incluye composiciones farmacéuticas que contienen, como principio activo, el compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables (excipientes). En algunas formas de realización, la composición es adecuada para la administración tópica. Al hacer las composiciones de la invención, el ingrediente activo se mezcla típicamente con un excipiente, se diluye con un excipiente o se encierra dentro de un portador de este tipo en forma de, por ejemplo, una cápsula, sobre, papel u otro recipiente. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semisólido o líquido, que actúa como vehículo, portador o medio para el principio activo. Así, las composiciones pueden presentarse en forma de comprimidos, píldoras, polvos, pastillas, bolsitas, cachés, elixires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (como sólido o en medio líquido), ungüentos que contengan, por ejemplo, hasta un 10% en peso del compuesto activo, cápsulas de gelatina blanda y dura, supositorios, soluciones inyectables estériles y polvos envasados estériles.

[0118]Al preparar una formulación, el compuesto activo puede molerse para obtener el tamaño de partícula adecuado antes de combinarlo con los demás ingredientes. Si el compuesto activo es sustancialmente insoluble, puede molerse hasta un tamaño de partícula inferior a 200 mesh. Si el compuesto activo es sustancialmente soluble en agua, el tamaño de las partículas puede ajustarse mediante molienda para proporcionar una distribución sustancialmente uniforme en la formulación, p. ej., aproximadamente de 40 mesh.

[0119]Los compuestos de la invención pueden molerse utilizando procedimientos de molienda conocidos, como la molienda húmeda, para obtener un tamaño de partícula apropiado para la formación de comprimidos y para otros tipos de formulación. Las preparaciones finamente divididas (nanoparticuladas) de los compuestos de la invención pueden prepararse mediante procesos conocidos en la técnica, por ejemplo, véase la Ap. Internacional. N.°

WO 2002/000196.

[0120]Algunos ejemplos de excipientes adecuados incluyen lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, goma acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe y metilcelulosa. Las formulaciones pueden incluir además: agentes lubricantes como talco, estearato de magnesio y aceite mineral; agentes humectantes; agentes emulsionantes y suspensores; agentes conservantes como metilhidroxibenzoatos y propilhidroxibenzoatos; agentes edulcorantes; y agentes aromatizantes. Las composiciones de la invención pueden formularse para proporcionar una liberación rápida, sostenida o retardada del ingrediente activo tras su administración al paciente empleando procedimientos conocidos en la técnica.

[0121]En algunas realizaciones, la composición farmacéutica comprende celulosa microcristalina silicificada (SMCC) y al menos un compuesto descrito en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la celulosa microcristalina silicificada comprende aproximadamente un 98% de celulosa microcristalina y aproximadamente un 2% de dióxido de silicio en peso.

[0122]En algunas realizaciones, la composición es una composición de liberación sostenida que comprende al menos un compuesto descrito en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la composición comprende al menos un compuesto descrito en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un componente seleccionado entre celulosa microcristalina, lactosa monohidrato, hidroxipropilmetilcelulosa y óxido de polietileno. En algunas realizaciones, la composición comprende al menos un compuesto descrito en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y celulosa microcristalina, lactosa monohidrato e hidroxipropilmetilcelulosa. En algunas realizaciones, la composición comprende al menos un compuesto descrito en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y celulosa microcristalina, lactosa monohidrato y óxido de polietileno. En algunas realizaciones, la composición comprende además estearato de magnesio o dióxido de silicio. En algunas realizaciones, la celulosa microcristalina es Avicel PH102™. En algunas realizaciones, la lactosa monohidratada es Fast-flo 316™. En algunas realizaciones, la hidroxipropilmetilcelulosa es hidroxipropilmetilcelulosa 2208 K4M (por ejemplo, Methocel K4 M Premier™) y/o hidroxipropilmetilcelulosa 2208 K100LV (por ejemplo, Methocel K00LV™). En algunas realizaciones, el óxido de polietileno es óxido de polietileno WSR 1105 (por ejemplo, Polyox WSR 1105™).

[0123]En algunas realizaciones, se utiliza un proceso de granulación húmeda para producir la composición. En algunas realizaciones, se utiliza un proceso de granulación en seco para producir la composición.

[0124]Las composiciones pueden formularse en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada dosis desde aproximadamente 1 a aproximadamente 1.000 mg, desde aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg, desde 1 mg a aproximadamente 50 mg, y desde aproximadamente 1 mg a 10 mg de principio activo. Preferiblemente, la dosis es de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg o de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 10 mg de principio activo. En algunas realizaciones, cada dosis contiene aproximadamente 10 mg del principio activo. En algunas realizaciones, cada dosis contiene unos 50 mg del principio activo. En algunas realizaciones, cada dosis contiene aproximadamente 25 mg del principio activo. El término "formas farmacéuticas unitarias" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, cada unidad conteniendo una cantidad predeterminada de material activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado.

[0125]En algunas realizaciones, las composiciones comprenden de aproximadamente 1 a aproximadamente 1.000 mg, de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg, de 1 mg a aproximadamente 50 mg, y de aproximadamente 1 mg a 10 mg de principio activo. Preferentemente, las composiciones comprenden de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg o de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 10 mg de principio activo. Alguien que tenga habilidad ordinaria en el arte apreciará que esto encarna compuestos o composiciones que contienen aproximadamente 1 mg a aproximadamente 10 mg, aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg, aproximadamente 1 mg a aproximadamente 25 mg, aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg del ingrediente activo.

[0126]En algunas realizaciones, la dosis del compuesto, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de 15, 30, 60 o 90 mg en base libre. En algunas realizaciones, la dosis es de 15, 30, 60 o 90 mg en base libre, del Compuesto 4, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la dosis del compuesto, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de 15 mg en base libre. En algunas realizaciones, la dosis del compuesto, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de 30 mg en base libre. En algunas realizaciones, la dosis del compuesto, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de 60 mg en base libre. En algunas realizaciones, la dosis del compuesto, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de 90 mg en base libre.

[0127]El compuesto activo puede ser eficaz en un amplio intervalo de dosis y generalmente se administra en una cantidad farmacéuticamente eficaz. Se entenderá, sin embargo, que la cantidad del compuesto realmente administrado será determinada generalmente por un médico, según las circunstancias relevantes, incluyendo la condición que se tratará, la ruta elegida de la administración, el compuesto real administrado, la edad, el peso, y la respuesta del paciente individual, la severidad de los síntomas del paciente, y similares.

[0128]Para preparar composiciones sólidas como comprimidos, el principio activo principal se mezcla con un excipiente farmacéutico para formar una composición sólida de preformulación que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente solicitud. Cuando nos referimos a estas composiciones de preformulación como homogéneas, el ingrediente activo suele estar disperso uniformemente por toda la composición, de modo que ésta puede subdividirse fácilmente en formas farmacéuticas unitarias igualmente eficaces, como comprimidos, píldoras y cápsulas. Esta preformulación sólida se subdivide entonces en formas de dosificación unitarias del tipo descrito anteriormente que contienen, por ejemplo, de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 1000 mg del ingrediente activo de la presente solicitud.

[0129]Los comprimidos o píldoras de la presente solicitud pueden recubrirse o componerse de otro modo para proporcionar una forma de dosificación que ofrezca la ventaja de una acción prolongada. Por ejemplo, el comprimido o píldora puede comprender un componente de dosificación interno y otro externo, este último en forma de sobre sobre el primero. Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica que sirve para resistir la desintegración en el estómago y permitir que el componente interno pase intacto al duodeno o se retrase su liberación. Para dichas capas o recubrimientos entéricos pueden utilizarse diversos materiales, entre los que se incluyen diversos ácidos poliméricos y mezclas de ácidos poliméricos con materiales como goma laca, alcohol cetílico y acetato de celulosa.

[0130]Las formas líquidas en las que pueden incorporarse los compuestos y composiciones de la presente solicitud para su administración por vía oral o inyectable incluyen soluciones acuosas, jarabes convenientemente aromatizados, suspensiones acuosas o oleosas y emulsiones aromatizadas con aceites comestibles como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de cacahuete, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares.

[0131]Las composiciones para inhalación o insuflación incluyen soluciones y suspensiones en disolventes acuosos u orgánicos farmacéuticamente aceptables, o mezclas de los mismos, y polvos. Las composiciones líquidas o sólidas pueden contener excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados, como se describesupra.En algunas formas de realización, las composiciones se administran por vía respiratoria oral o nasal para un efecto local o sistémico. Las composiciones en pueden nebulizarse mediante el uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas pueden respirarse directamente desde el dispositivo nebulizador o éste puede conectarse a una tienda de máscaras faciales o a una máquina respiratoria de presión positiva intermitente. Las composiciones en solución, suspensión o polvo pueden administrarse por vía oral o nasal a partir de dispositivos que administren la formulación de forma adecuada.

[0132]Las formulaciones tópicas pueden contener uno o más portadores convencionales. En algunas realizaciones, las pomadas pueden contener agua y uno o más portadores hidrófobos seleccionados entre, por ejemplo, parafina líquida, polioxietileno alquil éter, propilenglicol, vaselina blanca y similares. Las composiciones portadoras de cremas pueden basarse en agua en combinación con glicerol y uno o más componentes, p. ej., glicerinemonostearato, PEGglicerinemonostearato y alcohol cetilestearílico. Los geles pueden formularse utilizando alcohol isopropílico y agua, convenientemente en combinación con otros componentes como, por ejemplo, glicerol, hidroxietilcelulosa y similares. En algunas realizaciones, las formulaciones tópicas contienen al menos aproximadamente 0,1, al menos aproximadamente 0,25, al menos aproximadamente 0,5, al menos aproximadamente 1, al menos aproximadamente 2, o al menos aproximadamente 5 % en peso del compuesto de la invención. Las formulaciones tópicas pueden envasarse adecuadamente en tubos de, por ej. 100 g que opcionalmente se asocian con instrucciones para el tratamiento de la indicación seleccionada, p. ej., psoriasis u otra afección cutánea.

[0133]La cantidad de compuesto o composición administrada a un paciente variará dependiendo de lo que se administre, el propósito de la administración, como profilaxis o terapia, el estado del paciente, la forma de administración y similares. En aplicaciones terapéuticas, las composiciones pueden administrarse a un paciente que ya padece una enfermedad en una cantidad suficiente para curar o al menos detener parcialmente los síntomas de la enfermedad y sus complicaciones. Las dosis eficaces dependerán de la enfermedad que se esté tratando, así como del criterio del médico que atienda al paciente, en función de factores como la gravedad de la enfermedad, la edad, el peso y el estado general del paciente, y otros similares.

[0134]Las composiciones administradas a un paciente pueden estar en la forma de composiciones farmacéuticas descritas anteriormente. Estas composiciones pueden esterilizarse mediante técnicas de esterilización convencionales, o pueden filtrarse estérilmente. Las soluciones acuosas pueden envasarse para su uso tal cual, o liofilizarse, combinándose la preparación liofilizada con un soporte acuoso estéril antes de su administración. El pH de las preparaciones compuestas estará típicamente entre 3 y 11, más preferentemente entre 5 y 9 y más preferentemente entre 7 y 8. Se entenderá que el uso de algunos de los excipientes, portadores o estabilizadores anteriores dará lugar a la formación de sales farmacéuticas.

[0135]La dosis terapéutica de un compuesto de la presente solicitud puede variar según, por ejemplo, el uso particular para el que se realiza el tratamiento, la forma de administración del compuesto, la salud y el estado del paciente, y el juicio del médico que lo prescribe. La proporción o concentración de un compuesto de la invención en una composición farmacéutica puede variar en función de diversos factores, como la dosis, las características químicas(p. ej.,la hidrofobicidad) y la vía de administración. Por ejemplo, los compuestos de la invención pueden proporcionarse en una solución tampón fisiológica acuosa que contenga aproximadamente del 0. 1 al 10% p/v del compuesto para administración parenteral. Algunos intervalos de dosis típicos son de aproximadamente 1 pg/kg a aproximadamente 1 g/kg de peso corporal al día. En algunas realizaciones, el intervalo de dosis es de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal al día. Es probable que la dosificación dependa de variables como el tipo y el grado de progresión de la enfermedad o trastorno, el estado de salud general del paciente concreto, la eficacia biológica relativa del compuesto seleccionado, la formulación del excipiente y su vía de administración. Las dosis eficaces pueden extrapolarse a partir de curvas dosis-respuesta derivadas de sistemas de ensayoin vitroo de modelos animales.

[0136]Las composiciones de la invención pueden incluir además uno o más agentes farmacéuticos adicionales, ejemplos de los cuales se enumeran más arriba.

Kits

[0137]La presente solicitud también incluye kits farmacéuticos útiles, por ejemplo, en el tratamiento y/o prevención de enfermedades o trastornos relacionados con citocinas, como el SRC, que incluyen uno o más recipientes que contienen una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto descrito en el presente documento. Dichos kits pueden incluir además, si se desea, uno o más de los diversos componentes convencionales de los kits farmacéuticos, como, por ejemplo, recipientes con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, recipientes adicionales, etc., como será fácilmente evidente para los expertos en la materia. También pueden incluirse en el kit instrucciones, ya sea en forma de insertos o de etiquetas, que indiquen las cantidades de los componentes que deben administrarse, las pautas de administración y/o las pautas para mezclar los componentes.

EJEMPLOS

[0138]La invención se describirá con más detalle mediante ejemplos específicos. Los siguientes ejemplos se ofrecen a título ilustrativo y no pretenden limitar en modo alguno la invención. Los expertos en la materia reconocerán fácilmente una variedad de parámetros no críticos que pueden cambiarse o modificarse para obtener esencialmente los mismos resultados.

Ejemplo A: Ensayo de quinasa JAK in vitro

[0139]Los inhibidores de JAK1 que pueden usarse para el tratamiento de enfermedades o trastornos relacionados con citocinas se prueban para la actividad inhibitoria de las dianas JAK según el siguiente ensayoin vitrodescrito en Park et al., Analytical Biochemistry 1999, 269, 94-104. Los dominios catalíticos del JAK1 humano (a.a. 837-1142), JAK2 (a.a. 828 1132) y JAK3 (a.a. 781-1124) con una etiqueta His N-terminal se expresan mediante baculovirus en células de insecto y se purifican. La actividad catalítica de JAK1, JAK2 o JAK3 se evaluó midiendo la fosforilación de un péptido biotinilado. El péptido fosforilado se detectó mediante fluorescencia homogénea resuelta en el tiempo(HTRF). Las IC<50>de los compuestos se miden para cada quinasa en las reacciones de 40 microL que contienen la enzima, ATP y 500 nM de péptido en tampón Tris 50 mM (pH 7,8) con 100 mM de NaCl, 5 mM de DTT y 0,1 mg/mL (0,01%) de BSA. Para las mediciones de IC<50>de 1 mM, la concentración de ATP en las reacciones es de 1 mM. Las reacciones se llevan a cabo a temperatura ambiente durante 1 hora y luego se detienen con 20 pl de EDTA 45 mM, 300 nM SA-APC, 6 nM Eu-Py20 en tampón de ensayo (Perkin Elmer, Boston, MA). La unión con el anticuerpo marcado con europio tiene lugar durante 40 minutos y la señal HTRF se midió en un lector de placas Fusion (Perkin Elmer, Boston, MA). Los compuestos de la Tabla 1 se probaron en este ensayo y mostraron tener los valores IC<50>de la Tabla 1

Ejemplo B: Estudio de seguridad y eficacia de inhibidores de JAK1 y/o JAK2 en sujetos con hidradenitis supurativa de moderada a grave

[0140]Se realiza un estudio aleatorizado, doble ciego, placebo-control y multicéntrico en hombres y mujeres de 18 a 75 años con hidradenitis supurativa moderada (estadio Hurley II) a grave (estadio Hurley III) durante al menos 6 meses. El estadio I de Hurley se asocia a la formación de abscesos (únicos o múltiples) sin tractos sinusales y cicatrización. El estadio II de Hurley se asocia a abscesos recurrentes con formación de tractos y cicatrización; lesiones únicas o múltiples, muy separadas. El estadio III de Hurley se asocia a una afectación difusa o casi difusa o a múltiples tractos y abscesos interconectados en toda la zona. Los participantes en el estudio se distribuyen aleatoriamente en 5 grupos (unos 50 participantes por grupo) y se tratan con 15, 30, 60 ó 90 mg de un inhibidor de JAK1 y/o JAK2 (por ejemplo, ruxolitinib, el compuesto 4 o el compuesto 5, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos), o placebo. En la semana 16 (criterio de valoración primario), los participantes del grupo placebo son reasignados por igual a los brazos de tratamiento activo durante 8 semanas. La persiana se mantiene. El criterio de valoración principal es la proporción de sujetos que logran una respuesta clínica a la hidradenitis supurativa (HiSCR) en la semana 16.

[0141]Los criterios de valoración secundarios incluyen (1) Proporción de sujetos con HiSCR por encima del valor basal en cada visita; (2) Proporción de sujetos que alcanzan un recuento de abscesos y nódulos inflamatorios (AN) de 0 a 2 en cada visita; (3) Cambio medio desde el valor basal en la escala de valoración numérica del dolor HS1) en cada visita; (4) Cambio en la escala de Sartorius modificada en la semana 16 y en la semana 24; (5) Cambio en el recuento del número de fístulas drenantes en cada visita; (6) Proporción de sujetos que requieren tratamiento de rescate lesional hasta la semana 24; (7) Número de episodios de tratamientos de rescate lesional hasta la semana 24; (8) PK poblacional del inhibidor de JAK1 y/o JAK2 (p. ej.g., aclaramiento aparente, volumen aparente de distribución); (9) Seguridad y tolerabilidad evaluadas mediante la monitorización de la frecuencia, duración y gravedad de los EA, exploración física, constantes vitales y datos de laboratorio de hematología, química sérica y análisis de orina; (10) Cambio en la evaluación del Índice Dermatológico de Calidad de Vida (DLQI); (11) Cambio en la gravedad de la enfermedad con respecto al valor basal según la puntuación IHS43 en cada visita; (12) Cambio en la evaluación de la calidad de vida de la hidradenitis supurativa (HiSQOL) en cada visita con respecto al valor basal; y (13) Evaluación de la dosis/exposición-respuesta sobre el cambio porcentual con respecto al valor basal en cuanto a los criterios de valoración de eficacia y seguridad durante los periodos de tratamiento.

[0142]La HiSCR se define como una reducción de al menos el 50% en el recuento de abscesos y nódulos inflamatorios (AN) sin aumento en el recuento de abscesos y sin aumento en el recuento de fístulas drenantes en la semana 16 en relación con el valor basal). La escala de valoración numérica del dolor se utiliza para evaluar el peor dolor cutáneo y el dolor cutáneo medio debido a la HS. Las puntuaciones de los 2 ítems van de 0 (sin dolor cutáneo) a 10 (dolor cutáneo tan intenso como puedas imaginar). Los participantes registran las evaluaciones en un diario antes de acostarse y se basan en un periodo de recuerdo de las "últimas 24 horas". La escala de Sartorius modificada se utiliza para cuantificar la gravedad de la HS. Se conceden puntos por 12 zonas corporales (axila izquierda y derecha, zonas sub/inframamaria izquierda y derecha, zona intermamaria, nalgas izquierda y derecha, pliegues inguino-crurales izquierdo y derecho, zona perianal, zona perineal y otras): puntos concedidos por nódulo (2 puntos por cada uno); abscesos (4 puntos); fístulas (4 puntos); cicatriz (1 punto); y distancia más larga entre dos lesiones (2-6 puntos, 0 si no hay lesiones); y si las lesiones están separadas comprar piel normal (sí-0 punto; no-6 puntos). La escala Sartorius total es la suma de las 12 puntuaciones regionales. Tratamiento de rescate lesional: En caso de que una lesión dolorosa aguda requiera una intervención inmediata, los médicos tienen la opción de realizar intervenciones de rescate. Sólo se permiten dos tipos de intervenciones: (1) inyección con suspensión de acetónido de triamcinolona intralesional (hasta 30 mg en total en la misma visita) y/o (2) incisión y drenaje. Una intervención puede producirse en un máximo de dos lesiones diferentes en la misma visita o en la misma lesión en dos visitas de estudio diferentes. La misma lesión no puede tratarse dos veces en la misma visita. Si un sujeto requiere más de dos intervenciones antes de la semana 16, se le retira del estudio. Sistema internacional de puntuación de la gravedad de la hidradenitis supurativa (IHS4): IH4 (puntos) = (número de nódulos *1) (número de abscesos *2) (número de túneles de drenaje [fístulas/sinusitis] *4). HS leve: < 3 puntos; HS moderada: 4 -10 puntos; HS grave: >11 puntos.

[0143]El tratamiento de estudio 1 (Activo) incluye un comprimido oral que contiene 15 mg de 4-[3-(Cianometil)-3-(3',5'-dimetil-1 H,1 'H-4,4'-bipirazol-1 -y})azetidin-1 -y}]-2,5-difluoro-N-[(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -metiletil]benzamida. Los niveles de dosificación incluyen 15 mg (1 comprimido), 30 mg (2 comprimidos), 60 mg (4 comprimidos) y 90 mg (6 comprimidos). El tratamiento del estudio 2 (Placebo) incluye un comprimido oral de placebo.

[0144]Las muestras de sangre para la medición de las concentraciones plasmáticas del inhibidor de JAK1 y/o JAK2 se toman, al menos, en las semanas 2, 12, 16, 20 y 24 antes y después de la administración del fármaco del estudio en los puntos de tiempo predosis, 1 hora posdosis y 2-5 horas posdosis. En la visita de interrupción prematura, si los sujetos interrumpen el tratamiento antes de la semana 8, se recoge una muestra de PK mínima, si es posible. También se registrará la fecha/hora de la última administración de la dosis anterior.

[0145]Las pruebas de superioridad del inhibidor de JAK1 y/o JAK2 a 90, 60, 30 y 15 mg en comparación con placebo se llevan a cabo mediante el procedimiento de Hochberg a un nivel global de a = 0,05 de dos caras. Las comparaciones entre cada grupo activo y placebo en la semana 16 se realizan con una regresión logística. En todos los niveles de dosis, las pruebas de superioridad son significativas (por ejemplo, una mejora del 10%, 20%, 30%, 40% o 50% en la HiSCR (respuesta clínica de la hidradenitis supurativa)) y demuestran la eficacia del inhibidor de JAK 1 y/o JAK2 para tratar la HS. Las pruebas muestran una reducción de los nódulos y la no inferioridad/superioridad en comparación con el placebo.

[0146]Todas las medidas de eficacia secundarias y exploratorias se evalúan utilizando estadísticas descriptivas. Los datos de seguridad clínica (constantes vitales, pruebas de laboratorio rutinarias y EA) se analizan mediante estadística descriptiva. Se determina(n) la(s) relación(es) exposición-respuesta (E-R) entre las exposiciones PK plasmáticas a los inhibidores de JAK1 y/o JAK2 y los datos de eficacia/seguridad. Se realiza un análisis provisional para estimar la respuesta al tratamiento y facilitar la planificación de futuros estudios cuando al menos la mitad de los sujetos aleatorizados alcanzan la semana 16.

Ejemplo C. Expresión de Janus quinasa inducida por interferón gamma y necrosis tumoral alfa en queratinocitos y posterior producción de mediadores inflamatorios

[0147]Las células de queratinocitos humanos transformados (HaCaT) se compraron a AddexBio (Catálogo # T0020001) y se cultivaron en medio Eagle modificado de Dulbecco optimizado (AddexBio, Catálogo # C0003-02) suplementado con 10% de suero bovino fetal (Hyclone, Catálogo # 16140-071) y 1x Penicilina/Estreptomicina (Gibco, Catálogo # 15140 122). Cuando las células alcanzaron una confluencia del 80-90%, se lavaron con 1x DPBS y se separaron de los frascos de cultivo de tejidos incubándolas con tripsina al 0,25% (Gibco, Catálogo n° 25200-056) durante 3-5 minutos a<37°c /5%c o 2>. El medio de cultivo celular se añadió a las células tripsinizadas y, a continuación, la suspensión celular se transfirió a un tubo de centrífuga estéril de 15 ml para centrifugarla durante 10 minutos a 1.300 rpm. Se aspiró el medio que contenía tripsina del sedimento celular y se volvió a suspender el sedimento en 10 mL de medio de cultivo celular. Las células se contaron utilizando un contador celular automatizado Countess II y, a continuación, se sembraron en placas de 24 pocillos tratadas con cultivo tisular a una concentración de 4x104 células/mL y se incubaron durante 48 horas a<37°c /5%c o 2>. Transcurridas 48 horas, se retiró el medio y se sustituyó por 500 uL de medio de cultivo celular o por una estimulación combinada de interferón gamma humano recombinante (R&D Systems, Catálogo n° 285-IF-100) y factor de necrosis tumoral alfa humano recombinante (R&D Systems, Catálogo n° 210-TA-020). Las células HaCaT tratadas con la estimulación combinatoria de citocinas se trataron a concentraciones finales de 10 ng/mL, 25 ng/mL, 50 ng/mL o 100 ng/mL de cada citocina. Las placas tratadas se mezclaron mediante agitación suave durante 30 segundos y luego se incubaron durante 24 horas a<37°c /5%c o 2>. Al final de la incubación de 24 horas, se retiró inmediatamente el medio de cada placa.

[0148]Se aisló el ARN de las células HaCaT utilizando los reactivos y protocolos del ensayo QuantiGene Plex (Affymetrix, Catálogo # QGP-232-M18042302). Las células se lavaron con 1x DPBS y luego se lisaron mediante incubación con el tampón de lisis QuantiGene suministrado durante 30 minutos a 50-55°C. Los lisados celulares se incubaron durante 18 24 horas a 55°C con perlas de captura y un conjunto de sondas diseñadas para hibridar específicamente con el ARNm de las dianas de interés. El panel de 32 dianas de interés incluía genes de mantenimiento utilizados para la normalización de los resultados. Tras las 18-24 horas de incubación, la señal se amplificó utilizando metodologías de ADN ramificado, de acuerdo con los procedimientos del fabricante (Affymetrix, Catálogo n° QGP-232-M18042302). Tras los pasos de hibridación y lavado, la placa de ensayo se leyó en el Luminex 200 y los datos se expresaron como Intensidad de Fluorescencia Media Neta. A continuación, los datos se normalizaron con respecto a la mediana neta de la intensidad de fluorescencia del gen de mantenimiento HPRT1 (Tabla 2).

Tabla 2. La estimulación de queratinocitos humanos con TNFa e IFNy induce la via de JAK/STAT y citocinas proinflamatorias

(continuación)

[0149] Las proteínas diana de interés en los medios se detectaron y cuantificaron utilizando los reactivos y protocolos ProCarta Multiplex Immunoassay (Invitrogen, Catálogo # EPX450-12171-901). Los medios se incubaron con microesferas conjugadas con anticuerpos diseñados para unirse a los epítopos de proteínas diana específicas e identificar la proteína unida a través del patrón espectral distintivo de la microesfera. Los anticuerpos de detección biotinilados, diseñados para unirse a diferentes epítopos de las mismas proteínas diana, y la estreptavidina-PE se añaden a las placas de ensayo para cuantificar la cantidad de la proteína diana. Las placas de ensayo se leyeron en el Luminex 200 y los datos se expresaron como intensidad de fluorescencia mediana neta. Los valores de intensidad de fluorescencia mediana neta para la curva estándar de antígeno, preparada según los procedimientos del fabricante (Invitrogen, Catálogo n° EPX450-12171-901) se trazaron frente a las concentraciones esperadas para cada estándar. La concentración de cada proteína se extrapoló a partir de la curva patrón del antígeno y las concentraciones se expresaron en pg/mL (Tabla 3).

Tabla 3. La estimulación de queratinocitos humanos con TNFa e iFNy induce la producción da citocinas proinflamatorias

(continuación)

Ejemplo D. Los inhibidores de la quinasa Janus interfieren con la inflamación mediada por interferón gamma y necrosis tumoral alfa en queratinocitos.

[0150] Se adquirieron células de queratinocitos humanos transformados (HaCaT) de AddexBio (Catálogo # T0020001) y se cultivaron como se describe en el Ejemplo C. Cuatro compuestos A-D (A: ruxolitinib, B: itacitinib ({1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-y})-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo), C: 4-[3-(cianometil)-3-(3 ',5'-dimetil-1 H,1 'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1 -il]-2,5-difluoro-N-[(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -metiletil] benzamide, D: ((2R,5S)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]tieno[3,2-b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo) se reconstituyeron en DMS<o>y, a continuación, cada compuesto se diluyó en serie con medio de cultivo celular hasta concentraciones de 400 nM, 200 nM, 100 nM y 50 nM. Transcurridas 48 horas, se retiró el medio de cultivo celular de las placas de 24 pocillos y se sustituyó por 250 uL de medio que contenía el fármaco diluido en serie, incubándose a continuación durante 15 minutos a<37 ° c /5 % c o 2>. Tras la incubación del fármaco, se añadieron a las placas 250 uL de estimulación combinatoria que contenía Interferón gamma humano recombinante (R&D Systems, Catálogo n° 285-IF-100) y Factor de Necrosis Tumoral alfa humano recombinante (R&D Systems, Catálogo n° 210-TA-020). La concentración final de interferón gamma humano recombinante y de factor de necrosis tumoral alfa humano recombinante fue de 25 ng/mL de cada citoquina. La estimulación con citocinas añadida a los pocillos que contenían fármaco elevó las concentraciones finales para cada tratamiento farmacológico a 25 nM, 50 nM, 100 nM y 200 nM. Las placas tratadas se mezclaron mediante agitación suave durante 30 segundos y luego se incubaron durante 24 horas a<37 ° c /5 % c o 2>. Al final de las 24 horas de incubación, se retiró inmediatamente el medio de cada placa.

[0151] Se aisló el ARN de las células HaCaT utilizando los reactivos y protocolos del ensayo QuantiGene Plex (Affymetrix, Catálogo # QGP-232-M18042302) de acuerdo con las directrices del fabricante. Las células se lavaron con 1x DPBS y luego se lisaron mediante incubación con el tampón de lisis QuantiGene suministrado durante 30 minutos a 50-55°C. Los lisados celulares se incubaron durante 18-24 horas a 55°C con perlas de captura y un conjunto de sondas diseñadas para hibridar específicamente con el ARNm de las dianas de interés. Entre los genes se incluyen genes de mantenimiento (p. ej. HPRT1, GAPDH) utilizados para la normalización de los resultados. Tras las 18-24 horas de incubación, la señal se amplificó utilizando metodologías de ADN ramificado, de acuerdo con los procedimientos del fabricante (Affymetrix, Catálogo n° QGP-232-M18042302). Tras los pasos de hibridación y lavado, la placa de ensayo se leyó en el Luminex 200 y los datos se expresaron como Intensidad de Fluorescencia Media Neta. A continuación, los datos se normalizaron con respecto a la intensidad de fluorescencia media neta del gen de mantenimiento HPRT1 (Tabla 4).

Tabla 4. Expresión normalizada de genes diana en células de queratinocitos humanos

estimuladas con TNFa e IFNy en presencia/ausencia de inhibidores de JAK

(continuación)

(c o n tin u a c ió n )

[0152] Las FIGS. 1 - 4 ilustran los valores individuales de expresión génica (IMF) para JAK1, JAK2, IL-1 a e IL-6, respectivamente, para cada réplica experimental en queratinocitos simulados con TNFa e IFN-y en presencia/ausencia de inhibidores de JAK.

[0153] Las proteínas diana de interés en los medios se detectaron y cuantificaron utilizando los reactivos y protocolos ProCarta Multiplex Immunoassay (Invitrogen, Catálogo # EPX450-12171-901). Los medios se incubaron con microesferas conjugadas con anticuerpos diseñados para unirse a los epítopos de proteínas diana específicas e identificar la proteína unida a través del patrón espectral distintivo de la microesfera. Los anticuerpos de detección biotinilados, diseñados para unirse a diferentes epítopos de las mismas proteínas diana, y la estreptavidina-PE se añaden a las placas de ensayo para cuantificar la cantidad de las proteínas diana. Las placas de ensayo se leyeron en el Luminex 200 y los datos se expresaron como intensidad de fluorescencia mediana neta. La mediana neta de los valores de fluorescencia para la curva estándar del antígeno, preparada de acuerdo con los procedimientos del fabricante (Invitrogen, Catálogo # EPX450-12171-901) se trazó contra las concentraciones esperadas para cada estándar. La concentración de cada proteína se extrapoló a partir de la curva patrón del antígeno y las concentraciones se expresaron en pg/mL (Tabla 5).

Tabla 5. Concentraciones de mediadores inflamatorios producidos por células de

queratinocitos humanos estimuladas con TNFot e IFNy en presencia/ausencia de inhibidores

de JflK

C o m p u esto C C om puesto D

3rote ina Es ti fiu l ac ió n 5 C oncentrac ión p g M h v a le r pgi'mLb valo r pgi'mLh valor p g lm Lfc va lo r

30.57 i 2.89

562.33 ±17.5 $

(continuación)

(c o n tin u a c ió n )

- Los dalos se m í a n ccmo proiredio ± error oslando

: Diferencias s gnificativas eicorrparariór con la estimulación con TNFa y IFNy seles

[0154] Las FIGS. 5 y 6 ilustran las concentraciones individuales de proteínas (pg/mL) para IL-1 a e IL-6, respectivamente, para cada réplica experimental en queratinocitos simulados con TNFa e IFN-<y>en presencia/ausencia de inhibidores de JAK.

Ejemplo E: Las biopsias cutáneas de hidradenitis supurativa se caracterizan por una mayor expresión de Janus quinasa

[0155] El ARN total de la piel de control sana de 3 donantes individuales se adquirió de Amsbio (Catálogo #s HR101 y R1234218-50). El ARN total de la piel de control sana procedente de un grupo de donantes se adquirió a Life Technologies Corporation (n° de catálogo QS0639). Las biopsias de piel de hidradenitis supurativa (41 donantes) se adquirieron en Discovery Life Sciences como bloques embebidos en parafina fijados con formalina (FFPE) a partir de los cuales se purificó el ARN total.

[0156] Se midió la expresión génica de las muestras de ARN total de la piel de Control Sano (n=4) e Hidradenitis Supurativa (n=41) para los genes descritos en la Tabla 6 utilizando los reactivos y protocolos del Ensayo QuantiGene Plex (Life Technologies Corporation, Catálogo # QGP-277-M19012402). Los ARN purificados se utilizaron en el rango de ensayo recomendado de 50 ng a 500 ng y se incubaron durante la noche con perlas de captura diseñadas para hibridar específicamente con ARNm de genes seleccionados (Tabla 6). Este panel de dianas incluía varios genes de mantenimiento que se utilizaron para normalizar los resultados. Tras una incubación de una noche, la señal se amplificó utilizando metodologías de ADN ramificado, de acuerdo con los procedimientos del fabricante (Life Technologies Corporation). La placa de ensayo se leyó en un Luminex 200 y los datos se expresaron como intensidad de fluorescencia mediana neta (MFI neta). Los datos se normalizaron con respecto a la media geométrica de la IMF neta de los genes de mantenimiento ACTB y GAPDH. Las FIGS. 7 - 9 ilustran la expresión génica de JAK1, JAK3, TYK2, STAT1, STAT2, STAT3, IRAK1, IRAK2 e IRAK4 en la piel de controles sanos y sujetos con hidradenitis supurativa.

Tabla 6* Genes dirigidos

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto que inhibe JAK1 y/o JAK2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de la hidradenitis supurativa, en el que el compuesto es:

ruxolitinib;

{1-{1-[3-Fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo;

4-{3-(Cianometil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-l-il}-N-[4-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]piperidina-1-carboxamida;

[3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-1-(1- { [2-(trifluorometil)pirimidin-4-il]carbonyl}piperidin-4-il)azetidin-3-il]acetonitrilo;

[trans-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-3-(4-{[2-(trifluorometil)pirimidin-4-il]carbonil}piperazin-1 -il)ciclobutil]acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-[(3-hidroxiazetidin-1-il)metil]-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] ciclobutil} acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-{[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]metil}-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]ciclobutil}acetonitrilo;

{ 1-(cis-4-{[6-(2-hidroxietil)-2-(trifluorometil)pirimidin-4-il]oxi}ciclohexil)-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il} acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-({[(2R)-2-hidroxipropil]amino}metil)-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] ciclobutil} acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-({[(2S)-2-hidroxipropil]amino}metil)-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxi}piperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] ciclobutil} acetonitrilo;

{trans-3-(4-{[4-(2-hidroxietil)-6-(trifluorometil)piridin-2-il]oxilpiperidin-1-il)-1-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1 -il]ciclobutil}acetonitrilo;

o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de los anteriores.

2. El compuesto para uso según la reivindicación 1, en el que el compuesto o sal es selectivo para JAK1 y JAK2 sobre JAK3 y TYK2.

3. El compuesto para uso según la reivindicación 2, en el que el compuesto es ruxolitinib, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. El compuesto para uso según la reivindicación 3, en el que el compuesto es ruxolitinib, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o en el que uno o más átomos de hidrógeno se sustituyen por átomos de deuterio.

5. El compuesto para uso según la reivindicación 3, en el que la sal es fosfato de ruxolitinib.

6. El compuesto para uso según la reivindicación 1, en el que el compuesto o sal es selectivo para JAK1 sobre JAK2, JAK3 y TYK2.

7. El compuesto para uso según la reivindicación 6, en el que el compuesto es {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

8. El compuesto para uso según la reivindicación 7, en el que la sal es {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrilo sal de ácido adípico.

9. El compuesto para uso según la reivindicación 6, en el que el compuesto es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5-dimetil-1H,1'H-4,4'-bipirazol-1-il)azetidin-1-il]-2,5-difluoro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]benzamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

10. El compuesto para uso según la reivindicación 9, en el que la sal es 4-[3-(cianometil)-3-(3',5-dimetil-1H,1'H-4,4-bipirazol-1 -il)azetidin-1 -il]-2,5-difluoro-N-[(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -metiletil]benzamida sal de ácido fosfórico.

11. El compuesto para uso según la reivindicación 6, en el que el compuesto es ((2R,5S)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]tieno[3,2-b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

12. El compuesto para uso según la reivindicación 6, en el que el compuesto es ((2R,5S)-5-{2-[(1R)-1-hidroxietil]-1H-imidazo[4,5-d]tieno[3,2-b]piridin-1-il}tetrahidro-2H-piran-2-il)acetonitrilo monohidrato.

13. El compuesto para uso según cualquiera de las reivindicaciones 7-12, en el que el compuesto o la sal se administra a una dosis de 15, 30, 60 o 90 mg en base libre.

14. El compuesto para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-13, en el que el compuesto se administra en combinación con un agente terapéutico adicional.

15. El compuesto para uso según la reivindicación 14, en el que el agente terapéutico adicional es un antibiótico, un retinoide, un corticosteroide, un agente anti-TNF-alfa o un inmunosupresor.

16. El compuesto para uso según la reivindicación 15, en el que

(a) el antibiótico es clindamicina, doxiciclina, minociclina, trimetoprim-sulfametoxazol, eritromicina, metronidazol, rifampicina, moxifloxacina, dapsona o una combinación de los mismos, o bien

(b) el retinoide es etretinato, acitretina o isotretinoína, o

(c) el corticosteroide es triamcinolona, dexametasona, fluocinolona, cortisona, prednisona, prednisolona o flumetolona, o

(d) el agente anti-TNF-alfa es infliximab, etanercept o adalimumab, o bien

(e) el inmunosupresor es metotrexato, ciclosporina A, micofenolato mofetilo o micofenolato sódico.

17. El compuesto para uso según la reivindicación 14, en el que el agente terapéutico adicional es finasterida, metformina, adapaleno o ácido azelaico.

18. El compuesto para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-17, en el que se administra el compuesto o la sal:

(a) por vía tópica, o

(b) oralmente.