ES2863307T3

ES2863307T3 - Composición tópica que comprende extractos vegetales

Info

Publication number: ES2863307T3
Application number: ES17724285T
Authority: ES
Inventors: Barbara Pacchetti
Original assignee: Linnea SA
Current assignee: Linnea SA
Priority date: 2016-04-01
Filing date: 2017-03-30
Publication date: 2021-10-11
Anticipated expiration: 2037-03-30
Also published as: JP2019510029A; EP3436158B1; ITUA20162223A1; AU2017243956A1; EP3436158A1; CN108883030A; MX2018011677A; US20170281481A1; CA3017698A1; BR112018069291A2; ZA201806106B; US10251820B2; WO2017168354A1; CO2018011142A2; KR20180124923A

Abstract

Composición tópica que comprende: - una composición a base de agua que comprende extractos vegetales incorporados en niosomas hidrófilos (10) que presentan un tamaño inferior a 500 nm, y - por lo menos un excipiente tópicamente aceptable, caracterizada por que dichos niosomas hidrófilos (10) comprenden poligliceroles lineales o ramificados esterificados con ácidos grasos lineales saturados o monoinsaturados, o mezclas de los mismos.

Description

DESCRIPCIÓN

Composición tópica que comprende extractos vegetales

Campo de la invención

La presente invención se refiere a una composición tópica que comprende extractos vegetales. En particular, la presente invención se refiere a una composición tópica que comprende extractos vegetales incorporados en vesículas hidrófilas (niosomas), que presentan preferentemente un tamaño inferior a 500 nm, y por lo menos un excipiente tópicamente aceptable.

Técnica anterior

Los extractos vegetales son composiciones líquidas (extractos fluidos), composiciones sólidas (extractos secos) o composiciones de consistencia intermedia (extractos blandos), preparadas a partir de partes de plantas frescas o secas (hojas, flores, raíces, etc.), mediante extracción con un disolvente adecuado (agua, alcohol, acetona, etc.).

Los extractos vegetales secos se encuentran en forma de preparaciones en polvo y se obtienen mediante evaporación completa del disolvente. Los extractos secos presentan habitualmente un residuo seco no inferior al 95% en peso.

Los extractos vegetales son ampliamente conocidos por su utilización en la farmacopea, en la que se utilizan por sus propiedades terapéuticas. Entre estos, podemos citar, como ejemplos, extractos de antocianinas, tales como los de arándano, extractos de isoflavonas, tales como los de trébol rojo, extractos de lignanos, tales como los de abeto rojo, extractos de terpenos, tales como los de Ginkgo biloba y centella asiática, extractos de alcaloides y polifenoles, tales como los de trébol de olor, melisa, pasiflora y guaraná, y extractos de bioflavonoides (rutina y quercetina, asimismo en su forma glicosídica).

Los extractos de abeto rojo, por su alto contenido en lignanos, encuentran aplicación en la prevención de enfermedades inflamatorias asociadas con el estrés oxidativo, de enfermedades cardiovasculares y para prevenir o aliviar los síntomas relacionados con la deficiencia de estrógenos, particularmente en una mujer menopáusica.

Los frutos deshidratados de arándano presentan propiedades astringentes y pueden utilizarse como agentes antidiarreicos. Se ha demostrado que algunas de las sustancias presentes en la fruta son útiles para la circulación sanguínea, para la funcionalidad de la microcirculación y para los ojos, asimismo en presencia de enfermedades degenerativas tales como la diabetes. En particular, se enfatizan los efectos de las antocianinas sobre los capilares de la retina, ya que pueden proteger las paredes de los vasos capilares y ejercer una acción beneficiosa sobre la microcirculación, y en problemas vasculares y trofismo del endotelio vascular.

El extracto seco obtenido de las hojas de la planta Ginkgo biloba se ha utilizado en medicina desde aproximadamente mediados del siglo pasado en tratamientos asociados con trastornos cerebrales y con alteraciones de la circulación periférica.

El extracto de Ginkgo biloba puede utilizarse potencialmente en el tratamiento de trastornos neurodegenerativos, en particular, presenta efectos beneficiosos sobre las disfunciones asociadas con la enfermedad de Alzheimer y la demencia senil. Además, se encuentra que es útil en trastornos cardiovasculares (especialmente en la reducción de la adhesión plaquetaria), a nivel del sistema neurosensorial (especialmente en la protección de la retina) y más generalmente en vasodilatación endotelial cardíaca y periférica.

El extracto seco de trébol rojo se utiliza fundamentalmente en la prevención y/o el tratamiento de los síntomas y factores de riesgo relacionados con la menopausia y la posmenopausia. Esto se debe a su alto contenido en isoflavonas, que imitan la estructura y el comportamiento de los estrógenos pero sin los efectos secundarios provocados por la terapia hormonal sustitutiva. Los documentos KR 2002 0065958, KR 2002 0068154, KR 2002 0027760, k R 2002 0001913, KR 2001 0097020, US 2011/229538 revelan niosomas que comprenden extractos vegetales.

Es conocido que los extractos vegetales, especialmente los extractos secos, son poco adecuados para formulaciones tópicas, especialmente productos cosméticos y/o dispositivos médicos para aplicaciones en la piel y en las mucosas, debido a su insolubilidad habitual en agua, su color bastante inadecuado para matrices cosméticas que son habitualmente de color blanco, su sensibilidad al pH y/o sus variaciones durante los procedimientos de preparación y almacenamiento, y su inestabilidad o incompatibilidad con el elevado porcentaje de agua habitualmente presente en una crema, una loción, un gel u otra formulación tópica.

Sumario de la invención

El solicitante ha percibido el interés de incorporar extractos vegetales en composiciones tópicas, en particular productos cosméticos y/o dispositivos médicos, para aplicaciones en la piel y en las mucosas.

Por tanto, el solicitante se ha enfrentado al problema de elaborar una composición tópica que comprenda extractos vegetales que supere las desventajas y los inconvenientes mencionados anteriormente.

En particular, el solicitante se ha enfrentado al problema de elaborar una composición tópica que comprenda extractos vegetales en forma de emulsión a base de agua que sea estable con el tiempo y que no dé lugar a fenómenos de separación y/o precipitación y/o alteración de sus componentes.

Al mismo tiempo, el solicitante se ha enfrentado al problema de elaborar una composición tópica que comprenda extractos vegetales que tenga un aspecto y una coloración agradables y que no esté sujeta a cambios de color durante la preparación y con el tiempo.

En particular, el solicitante se ha enfrentado al problema de incorporar extractos vegetales concentrados y de alto título de abeto rojo, trébol rojo, Ginkgo biloba y arándano en composiciones tópicas.

Sorprendentemente, el solicitante ha descubierto que los extractos vegetales pueden incorporarse en vesículas hidrófilas (niosomas), que presentan preferentemente un tamaño inferior a 500 nm, obteniendo una disolución/dispersión acuosa que es estable e incolora.

Sorprendentemente, el solicitante asimismo ha descubierto que la disolución/dispersión acuosa que comprende niosomas de extractos vegetales puede utilizarse para preparar composiciones tópicas a base de agua, en particular, aguas, aguas micelares, emulsiones, lociones, bálsamos, cremas y geles, que son estables con el tiempo y no presentan coloraciones particulares.

Además, el solicitante ha descubierto, sorprendentemente, que las composiciones tópicas obtenidas mediante la incorporación de niosomas de extractos vegetales presentaban propiedades hidratantes, antienvejecimiento y antiarrugas inesperadas cuando se aplicaban en la piel, además de presentar propiedades tróficas e hidratantes cuando se aplicaban en las mucosas, especialmente las mucosas vaginales.

El solicitante ha observado que la composición a base de agua de extractos vegetales incorporados en vesículas hidrófilas (niosomas) mostraba propiedades de absorción de los principios activos a través de la piel que eran sorprendentemente superiores en comparación con las del extracto vegetal base incorporado en glicerina.

El solicitante ha descubierto, inesperadamente, que las composiciones tópicas obtenidas mediante la incorporación de los niosomas de extractos vegetales de abeto rojo presentaban un sorprendente efecto antiirritante y calmante en la piel sensible a fenómenos inflamatorios o irritantes.

El solicitante ha observado, además, que las composiciones tópicas obtenidas mediante la incorporación de los niosomas de extractos vegetales de trébol rojo fueron sorprendentemente eficaces para prevenir o reducir la discromía y la pérdida de uniformidad del color de la tez típica del envejecimiento.

El solicitante asimismo ha observado que las composiciones tópicas obtenidas mediante la incorporación de los niosomas de extractos vegetales de Ginkgo biloba fueron sorprendentemente eficaces para estimular la circulación periférica.

Finalmente, el solicitante ha observado que las composiciones tópicas obtenidas mediante la incorporación de los niosomas de extractos vegetales de arándano fueron sorprendentemente eficaces para reducir el enrojecimiento y edema asociados a la microcirculación del compartimento cutáneo.

En consecuencia, un primer aspecto de la presente invención se refiere a una composición tópica que comprende una composición a base de agua de extractos vegetales incorporados en niosomas hidrófilos que presentan un tamaño inferior a 500 nm y por lo menos un excipiente tópicamente aceptable según la reivindicación 1.

Un segundo aspecto de la presente invención se refiere a una composición a base de agua, en particular una dispersión o disolución acuosa, que comprende extractos vegetales incorporados en niosomas hidrófilos, en la que dichos extractos vegetales se seleccionan preferentemente de entre el grupo que consiste en extractos vegetales de abeto rojo, trébol rojo, Ginkgo biloba y arándano.

Más particularmente, la presente invención se refiere a una composición a base de agua que comprende extractos vegetales incorporados en niosomas hidrófilos, en la que dichas vesículas hidrófilas comprenden ésteres de poligliceroles lineales o ramificados con ácidos grasos lineales saturados o monoinsaturados.

Un tercer aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento para preparar una composición a base de agua que comprende niosomas hidrófilos que contienen extractos vegetales, que comprende la utilización de técnicas de agitación a mano o con ultrasonidos.

Breve descripción de los dibujos

La presente invención se ilustrará mejor en la siguiente descripción detallada, presentada a continuación haciendo referencia a los dibujos adjuntos, suministrados únicamente como orientación y, por tanto, no limitativos, en los que:

la figura 1 representa de manera esquemática una sección de un niosoma (10) y proporciona una representación de la orientación de las moléculas (20) de tensioactivo, en las que el punto representa el extremo hidrófilo (40) y la línea representa el extremo hidrófobo (50), para formar una estructura (25) monolaminar de doble capa que encierra un compartimento (30) acuoso.

Descripción detallada de la invención

En un primer aspecto, la presente invención se refiere a una composición tópica que comprende una composición a base de agua de extractos vegetales incorporados en vesículas hidrófilas (niosomas) de forma sustancialmente esférica que presentan un diámetro inferior a 500 nm y por lo menos un excipiente tópicamente aceptable.

Se pretende que la expresión “tópicamente aceptable” utilizada en la presente descripción defina sustancias que se reconocen como libres de efectos secundarios adversos (irritación, toxicidad, etc.) si se aplican en la piel y/o en las mucosas.

Ventajosamente, los niosomas utilizados en la presente invención presentan un diámetro inferior a 400 nm, más preferentemente inferior a 300 nm e incluso más preferentemente inferior a 200 nm.

Preferentemente, los niosomas utilizados en la presente invención presentan un diámetro superior a 10 nm, más preferentemente superior a 20 nm e incluso más preferentemente superior a 40 nm.

Ventajosamente, los niosomas utilizados en la presente invención presentan un diámetro de desde 50 nm hasta 180 nm, preferentemente de desde 70 nm hasta 150 nm.

Los extractos vegetales utilizados preferentemente en la presente invención se seleccionan de entre el grupo que consiste en extractos vegetales de abeto rojo, trébol rojo, Ginkgo biloba y arándano.

Haciendo referencia a la figura 1, los niosomas (10) utilizados en el contexto de la presente invención son vesículas hidrófilas no iónicas formadas por una doble capa de moléculas (20) anfífilas que rodean un compartimento (30) acuoso.

En particular, las moléculas anfífilas utilizadas para formar los niosomas utilizados en el contexto de la presente invención son tensioactivos no iónicos. Las moléculas de tensioactivo tienden a autoorganizarse en una estructura (25) monolaminar de doble capa de tal manera que los extremos hidrófilos (40) del tensioactivo no iónico apuntan hacia el exterior de la lámina, mientras que los extremos hidrófobos (50) están enfrentados entre sí dentro de las láminas para formar la doble capa (20), tal como se ilustra en la figura 1.

Los extractos vegetales se incorporan en el compartimento (30) acuoso delimitado por la doble capa de moléculas (20) anfífilas que forma las vesículas (10) hidrófilas no iónicas. De esta manera, los extractos vegetales pueden transportarse y mantenerse en dispersión/disolución en un medio acuoso, en particular, en la composición a base de agua de la presente invención.

Los tensioactivos que son particularmente preferidos para producir los niosomas utilizados en el contexto de la presente invención consisten en ésteres de poligliceroles lineales o ramificados con ácidos grasos lineales saturados o monoinsaturados, o mezclas de los mismos.

Los ejemplos útiles de poligliceroles lineales o ramificados se representan mediante las siguientes fórmulas generales (I) y (II):

(I) H-(OCH²-CHOH-CH²)ⁿ-OH

(II) H-(OCH²-CH(CH²OH))ⁿ-OH

en las que n es un número entero desde 2 hasta 10.

Los ejemplos preferidos de poligliceroles representados por las fórmulas generales (I) y (II) son triglicerol, tetraglicerol, hexaglicerol, octaglicerol y decaglicerol.

Los poligliceroles lineales o ramificados adecuados para la presente invención están disponibles comercialmente.

Los ejemplos de productos comerciales son los poligliceroles distribuidos con el nombre comercial Vegetable Polyglycerine-3, Vegetable Polyglycerine-4, Vegetable Polyglycerine-6 y Vegetable Polyglycerine-10 por la empresa Spiga Nord S.p.A., y con el nombre comercial Polyglycerol-3 y Polyglycerol-4 por la empresa Solvay Chemicals, Inc.

Los ejemplos útiles de ácidos grasos lineales saturados comprenden ácidos monocarboxílicos que presentan desde 4 hasta 32 átomos de carbono, tales como ácido butírico, ácido valérico (valeriánico), ácido caproico, ácido enántico, ácido caprílico, ácido pelargónico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido margárico, ácido esteárico, ácido araquídico, ácido behénico, ácido lignocérico, ácido cerótico, ácido montánico, ácido melísico y ácido laceroico.

Los ácidos grasos lineales saturados preferidos comprenden ácidos monocarboxílicos que presentan desde 12 hasta 22 átomos de carbono, tales como ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido margárico, ácido esteárico, ácido araquídico y ácido behénico.

Los ejemplos útiles de ácidos grasos lineales monoinsaturados comprenden ácidos monocarboxílicos que presentan desde 14 hasta 24 átomos de carbono, por ejemplo, ácido miristoleico, ácido palmitoleico, ácido oleico, ácido gadoleico y ácido erúcico.

Los ejemplos útiles de mezclas de ácidos grasos se representan por los aceites vegetales que pueden obtenerse mediante prensado o extracción de semillas o frutos, por ejemplo, aceite de oliva, aceite de cacahuete, aceite de coco, aceite de palma y aceite de colza. Se prefieren el aceite de oliva y el aceite de coco y, en particular, aceite de oliva, por el contenido reducido en ácidos poliinsaturados.

Los ésteres de poligliceroles lineales o ramificados con ácidos grasos lineales saturados o monoinsaturados útiles en la presente invención pueden representarse mediante la siguiente fórmula general:

en la que n es un número entero desde 0 hasta 8 y el residuo X representa un átomo de hidrógeno o un grupo acilo R-CO-, en el que R es una cadena de alquilo saturada o monoinsaturada que comprende desde 3 hasta 31 átomos de carbono, preferentemente desde 11 hasta 21 átomos de carbono, y en la que por lo menos uno y no más de tres, preferentemente uno o dos, de dichos residuos X están representados por dicho grupo acilo R-CO-. Los ésteres de poligliceroles lineales o ramificados con ácidos grasos lineales saturados o monoinsaturados, o mezclas de los mismos, útiles en la presente invención están disponibles comercialmente. Los ejemplos de productos comerciales son los ésteres de poliglicerol producidos y distribuidos por la empresa Naturalis s.r.l. con el nombre comercial Soavirol, por ejemplo, Soavirol OV6 (éster poliglicerílico-6 de aceite de oliva), Soavirol OV4 (éster poliglicerílico-4 de aceite de oliva), y por la empresa Nikko Chemicals Co., Ltd. con el nombre comercial Nikkol Hexaglyn, por ejemplo, Nikkol Hexaglyn 1-L (laurato de poliglicerilo-6) y Nikkol Hexaglyn PR-15 (poli(ricinoleato de poliglicerilo-6)).

En la producción de los niosomas utilizados en el contexto de la presente invención, se utilizan preferentemente componentes adicionales que son adecuados para estabilizar y conservar la disolución/dispersión acuosa de niosomas, tales como, por ejemplo, glicerina y antioxidantes naturales solubles en agua tales como ácido ascórbico y derivados del mismo, isoflavonas, magnolol, tetrahidromagnolol, honokiol y obovatol.

En particular, los extractos vegetales utilizados para producir la composición tópica de la presente invención son extractos vegetales de abeto rojo, trébol rojo, Ginkgo biloba y arándano.

El 7-hidroximatairesinol (HMR) es el único componente de los lignanos que es, con diferencia, el más abundante en los extractos de abeto rojo (Picea abies), en los que alcanza una concentración de aproximadamente 60% en peso de los lignanos totales.

En el abeto rojo, la concentración de los lignanos en las raíces gruesas es del 2-3 por ciento. Una abundancia de lignanos está presente en el duramen de las ramas (5-10 por ciento) y ramificaciones (ramal), en particular en los nudos, en los que la cantidad de lignanos puede exceder el 10 por ciento. Estas concentraciones son aproximadamente cien veces las del polvo de linaza molida, conocido por ser un material rico en lignanos.

El HMR para su utilización en la presente invención puede aislarse a partir de una fracción de fragmentos de grandes dimensiones (que contiene ramas, ramales y nudos) mediante compresión de madera de abeto rojo (Picea abies). El extracto completo de Picea abies (TEP, que contiene HMR y el isómero) y HMR purificado, HMRLignan™ (que contiene principalmente HMR), están disponibles comercialmente por Linnea SA, Riazzino, Suiza.

El arándano (Vaccinium myrtillus L.) es una planta arbustiva de la familia Ericaceae. El extracto de arándano, obtenido de los frutos deshidratados, tal como se proporciona en la Farmacopea Europea, contiene el 36% de antocianósidos, que corresponde al 25% de antocianidinas, y otros componentes tales como flavonoides, catequinas, polifenoles, azúcares, pectinas, taninos, vitamina A, C y, en cantidades menores, vitamina B.

Ginkgo biloba es una planta que es la única especie superviviente de la familia Ginkgoaceae. El extracto de Ginkgo biloba se obtiene de diversas partes de las plantas, pero el extracto utilizado para fines médicos se obtiene principalmente de las hojas.

Tal como se indica en la Farmacopea Europea, el extracto seco obtenido de las hojas de Ginkgo biloba contiene (i) desde 22% hasta 27% en peso de flavonoides seleccionados de entre el grupo que comprende quercetina, canferol y derivados glicosídicos de isorramnetina; (ii) desde 2.8 hasta 3.4% en peso de ginkgólidos A, B y C; (iii) desde 2.6 hasta 3.2% en peso de biobalidas; y (iv) no más de 5 ppm de ácidos ginkgólicos.

El trébol rojo (Trifolium pratense) es una planta herbácea perenne perteneciente a la familia Fabaceae. El extracto de trébol rojo se obtiene de las hojas y/o de las flores rojas que crecen en los extremos de las ramas de la planta.

El extracto de trébol rojo contiene tres clases de principios activos: isoflavonas, lignanos y cumestrol. La cantidad mayoritaria de principio activo está representada por las isoflavonas en forma aglicónica, el único ejemplo en la naturaleza, y representada casi en su totalidad por biochanina A y formononetina, mientras que genisteína y daidzeína están presentes en cantidades más pequeñas. En cambio, los lignanos y el cumestrol están presentes en cantidades muy pequeñas, y su contribución a la actividad del trébol rojo es casi insignificante. En particular, el extracto utilizado por la presente invención es un extracto de trébol rojo con un título del 36-44% de isoflavonas totales, expresadas como la suma de biochanina A, formononetina, genisteína y daidzeína.

La composición a base de agua que comprende niosomas de la presente invención puede prepararse mediante las técnicas conocidas en la materia, por ejemplo, mediante la técnica de agitación manual (agitación a mano) o mediante la técnica por ultrasonidos.

La agitación a mano comprende una primera etapa de disolución de los componentes en un disolvente orgánico volátil, por ejemplo, etil éter, cloroformo o metanol, llevada a cabo en un matraz de vidrio de fondo redondo, una segunda etapa de evaporación, llevada a cabo en un evaporador rotatorio a temperatura ambiente (20-25°C), que deja una capa fina de los componentes depositada sobre las paredes del matraz de fondo redondo, y finalmente una tercera etapa de rehidratación con una fase acuosa que comprende los extractos vegetales a una temperatura entre 0°C y 60°C, con agitación suave.

La técnica por ultrasonidos comprende sonicación, a una temperatura entre 0°C y 60°C, de una dispersión obtenida mezclando una fase orgánica que comprende los tensioactivos y una fase acuosa que comprende los extractos vegetales.

Estos y otros procedimientos para preparar composiciones que comprenden niosomas se describen en la bibliografía, por ejemplo, en el artículo de Madhav et al., “Niosomes: a novel drug delivery system”; International Journal of Research in Pharmacy and Chemistry, IJRPC 2011, 1(3), 498-511.

La dispersión/disolución de niosomas resultante comprende agua en una cantidad de desde 30% hasta 40% en peso en relación con el peso total de la dispersión/disolución de niosomas.

Los ésteres de poligliceroles constituyen la porción mayoritaria, de desde 35% hasta 50% en peso en relación con el peso total de la dispersión/disolución de niosomas.

La glicerina está presente en una cantidad de desde 10% hasta 20% en peso en relación con el peso total de la dispersión/disolución de niosomas.

Los extractos vegetales se incluyen en una cantidad más limitada, de desde 2% hasta 5% en peso en relación con el peso total de la dispersión/disolución de niosomas.

Los antioxidantes representan la porción minoritaria, de desde 1% hasta 6% en peso en relación con el peso total de la dispersión/disolución de niosomas.

La composición tópica de la presente invención puede ser líquida o semisólida.

En particular, la composición tópica de la presente invención consiste en una composición cosmética y/o un dispositivo médico, para aplicación en la piel y en las mucosas.

La composición tópica de la presente invención comprende ventajosamente composiciones líquidas o semisólidas, en la que la composición a base de agua de niosomas se dispersa en una cantidad de desde 1% hasta 5% en peso en relación con el peso total de la composición tópica.

Las composiciones líquidas de la presente invención comprenden disoluciones, emulsiones, microemulsiones, lociones, espumas, leches, aceites, productos espumantes o suspensiones con una amplia variación de viscosidad.

Las composiciones líquidas comprenden, por ejemplo, disoluciones acuosas, disoluciones hidroalcohólicas, disoluciones oleosas, emulsiones obtenidas dispersando una fase oleosa en una fase acuosa (aceite en agua) o viceversa, una fase acuosa en una fase oleosa (agua en aceite), y suspensiones obtenidas dispersando una fase dispersada, que consiste en partículas sólidas, en un medio de dispersión representado generalmente por un líquido acuoso u oleoso de una determinada viscosidad.

Las composiciones semisólidas de la presente invención comprenden cremas, geles, bálsamos, pomadas, pastas, geles en crema, barras y ceras.

Además, las composiciones para utilización tópica de la presente invención pueden comprender diversos aditivos o vehículos tópicamente aceptables útiles para preparar productos cosméticos y/o dispositivos médicos conocidos por un experto en la materia, por ejemplo, emulsionantes, agentes hidratantes, disolventes, emolientes, estabilizadores, modificadores de la viscosidad, conservantes, lubricantes, agentes secuestrantes o quelantes, cargas, polvos, fragancias, perfumes, absorbentes, tintes y opacificantes, antioxidantes, vitaminas, sustancias de detección, filtros UV, aceites esenciales, sustancias activas de queratina y aminoácidos.

Los aditivos disolventes adecuados comprenden, por ejemplo, agua, alcoholes, cetonas (tales como acetona y metil isobutil cetona), glicoles (tales como etilenglicol, propilenglicol y butilenglicol), polietilenglicoles (tales como PEG-40, PEG-50, PEG-60), acetatos de alquilo (tal como acetato de amilo, acetato de isopropilo, acetato de butilo), parafinas e isoparafinas, cicloalquilos (tales como ciclohexano), glicerina, aceites naturales y sintéticos, triglicéridos naturales y sintéticos.

Ventajosamente, las composiciones tópicas de la presente invención son composiciones acuosas.

En las composiciones acuosas, el agua representa el componente principal de la composición, alcanzando incluso una cantidad de hasta 99% en peso en relación con el peso total de la composición. Las composiciones acuosas contienen una cantidad de agua preferentemente de desde 25% hasta 95% en peso, preferentemente de desde 50% hasta 90% en peso en relación con el peso total de la composición.

Las composiciones acuosas de la presente invención pueden comprender preferentemente una cantidad total de disolventes no acuosos de desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 60%, más preferentemente de desde 1% hasta 40% e incluso más preferentemente de desde 5 hasta 35% en peso en relación con el peso total de la composición.

Los ejemplos de aditivos emulsionantes adecuados son tensioactivos no iónicos, catiónicos, aniónicos y anfóteros, o una combinación de los mismos. Los ejemplos de emulsionantes útiles en la presente invención son sorbitanos, alcoholes etoxilados de cadena larga, alquil poliglicósidos, jabones, sulfatos de alquilo, tales como, por ejemplo, cetilestearilsulfato de sodio, fosfatos de monoalquilo y dialquilo, sulfonatos de alquilo, aceite de ricino hidrogenado, isetionatos de acilo, ésteres de sacarosa, betaínas, lecitinas, sales de amonio cuaternario, oleatos de alquilo, glicéridos tales como, por ejemplo, polioxiglicéridos de caprilocaproílo (macrogolglicéridos de caprilocaproílo) y agentes emulsionantes de aceite de oliva.

Preferentemente, la composición de la presente invención comprende una cantidad total de agentes emusionantes de desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 60%, más preferentemente de desde 0.5% hasta 25% e incluso más preferentemente de desde 0.5% hasta 10% en peso en relación con el peso total de la composición.

Los aditivos modificadores de la viscosidad típicos útiles en la presente invención son, por ejemplo, goma xantana, hidroxipropilcelulosa, hidroxietilcelulosa, Carbopol, carragenanos, poloxámeros y goma arábiga.

Ventajosamente, la composición de la presente invención comprende una cantidad total de modificadores de la viscosidad de desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 25%, más preferentemente de desde 0.5% hasta 10% e incluso más preferentemente de desde 0.5% hasta 5% en peso en relación con el peso total de la composición.

Los ejemplos de aditivos con acción hidratante útiles en la presente invención son, por ejemplo, urea, alantoína, ácido hialurónico y derivados del mismo, glicerina, aminoácidos, acetil monoetanolamidas, butoxipropanol, butilglicol, polietilenglicoles de bajo peso molecular (tales como PEG-40, PEG-50, PEG-60), aloe, malva, trehalosa y sorbitol.

Preferentemente, la composición de la presente invención comprende una cantidad total de agentes hidratantes de desde aproximadamente 0.05% hasta aproximadamente 25%, más preferentemente de desde 0.5% hasta 10% e incluso más preferentemente de desde 0.1% hasta 5% en peso en relación con el peso total de la composición.

Los ejemplos de emolientes adecuados útiles en la presente invención incluyen, por ejemplo, lanolina, aceite de almendras, aceite de oliva, aceite de ricino hidrogenado, cera microcristalina, polidimetilsiloxano (dimeticona), polimetilfenilsiloxano, polímeros de glicol y silicona, aceites minerales, parafina, ozoquerita, ceresina, ésteres de triglicéridos, acetilatos de monoglicéridos, glicéridos etoxilados, ésteres de alquilo de ácidos grasos, ácidos grasos, alcoholes de cadena larga, esteroles, cera de abejas, alcoholes polihidroxilados, poliésteres y amidas de ácidos grasos.

Preferentemente, la composición de la presente invención comprende una cantidad total de emolientes de desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 25%, más preferentemente de desde 0.5% hasta 10% e incluso más preferentemente de desde 0.5% hasta 5% en peso en relación con el peso total de la composición.

Los ejemplos de conservantes adecuados útiles en la presente invención incluyen, por ejemplo, alcoholes, tales como etanol, fenoxietanol y alcohol bencílico, parahidroxibenzoato de metilo y propilo, butilato de hidroxianisol (BHA), sorbatos, derivados de urea e isotiazolinonas. Otros ejemplos de tintes que pueden utilizarse en la composición tópica de la presente invención pueden encontrarse en el anexo V del reglamento (CE) n.° 1223/2009 con fecha del 30 de noviembre de 2009.

Preferentemente, la composición de la presente invención comprende una cantidad total de conservantes de desde aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 2.00%, más preferentemente de desde 0.05% hasta 1.00% e incluso más preferentemente de desde 0.1% hasta 0.5% en peso en relación con el peso total de la composición.

Los ejemplos de aditivos secuestrantes o quelantes útiles en la presente invención son EDTA, HEDTA, oxalatos de alquilo, oxalato de litio o potasio, pirofosfato de sodio o potasio. Preferentemente, la composición de la presente invención comprende una cantidad total de aditivos secuestrantes o quelantes de desde aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 20%, más preferentemente de desde 0.05% hasta 10% e incluso más preferentemente de desde 0.1% hasta 5% en peso en relación con el peso total de la composición.

Los ejemplos de estabilizadores adecuados útiles en la presente invención son alcoholes de cadena larga (tales como alcohol cetílico, alcohol estearílico) y mezclas de los mismos, polietilenglicoles de alto peso molecular (tales como PEG-9000 y PEG 14000) y polivinilpirrolidonas (tales como povidona).

La composición de la presente invención comprende preferentemente una cantidad total de estabilizadores de desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 25%, más preferentemente de desde 0.5% hasta 15% e incluso más preferentemente de desde 1% hasta 10% en peso en relación con el peso total de la composición.

Los ejemplos de aditivos adecuados en forma de polvo útiles en la presente invención son siliconas elastoméricas tales como polímeros cruzados de dimeticona/vinildimeticona (DC 9506, Dow Corning), mezclas de polímeros cruzados de ciclometicona y dimeticona (DC 9040, Dow Corning), polímeros cruzados de dimeticona y vinildimeticona tratados con sílice (DC 9701, Dow Corning), mezclas de polímeros cruzados de ciclometicona y dimeticona/vinildimeticona (SFE 839, GE Bayer Silicones).

La composición de la presente invención comprende preferentemente una cantidad total de aditivos en forma de polvo de desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 5%, más preferentemente de desde 0.2% hasta 1% en peso, en relación con el peso total de la composición.

Los ejemplos de opacificantes útiles en la presente invención son óxido de cinc o aluminio, dióxido de titanio o cinc, alúmina, mica, sales de ácidos grasos con aluminio y yeso.

Los ejemplos de tintes utilizados preferentemente en la presente invención son tintes solubles en agua fácilmente lavables que no tiñen la piel y no dejan residuos, tales como, por ejemplo, azul ácido 3 C.I.42051, azul ácido 9 C.I.42090, azul ácido 74 C.1.73015, pigmento azul 15 C.I.74160, amarillo ácido 3 C.I.47005, amarillo alimentario 3 C.I.15985, amarillo ácido 23 C.I.19140, amarillo ácido 73 C.I.45350, rojo ácido 14 C.I.14720, rojo ácido 18 C.I.16255, rojo ácido 27 C.I.16185, rojo ácido 51 C.I.45430, verde ácido 1 C.I.10020, verde ácido 25 C.1.61570 y mezclas de los mismos. Otros ejemplos de tintes que pueden utilizarse en la composición tópica de la presente invención pueden encontrarse en el anexo IV del reglamento (CE) n.° 1223/2009 con fecha del 30 de noviembre de 2009.

Preferentemente, la composición de la presente invención comprende una cantidad total de opacificantes y tintes de desde aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 15%, más preferentemente de desde 0.05% hasta 5% en peso, en relación con el peso total de la composición.

Preferentemente, la composición de la presente invención puede comprender filtros UV capaces de proteger la piel contra la acción de la radiación ultravioleta. Los ejemplos de filtros UV son, por ejemplo, acrilatos tales como 2-ciano-3,3-difenilacrilato de 2-etilhexilo (PARSOL 340) y 2-ciano-3,3-difenilacrilato de etilo, derivados de alcanfor tales como 4-metilbencilideno alcanfor (PARSOL 5000) y 3-bencilideno alcanfor, cinamatos tales como metoxicinamato de octilo (PARSOL MCX), metoxicinamato de etoxietilo, metoxicinamato de dietanolamina (PARSOL Hydro), derivados de triazona tales como etilhexiltriazona (UVINUL T-150), dietilhexilbutamida triazona (UVASORB HEB), derivados de dibenzoilmetano tales como 4-terc-butil-4'-metoxidibenzoilmetano (PARSOL 1789), dimetoxidibenzoilmetano, derivados de benzotriazol tales como 2,2'-metilen-bis(6-(2H-benzotriazol-2-il)-4-(1,1,3,3-tetrametilbutil)-fenol (TINOSORB M), derivados de triazina tales como bisetilhexiloxifenolmetoxifeniltriazina (TINOSORB S). Otros ejemplos de filtros UV que pueden utilizarse en la composición tópica de la presente invención pueden encontrarse en el anexo VI del reglamento (CE) n.° 1223/2009 con fecha del 30 de noviembre de 2009.

Preferentemente, la composición de la presente invención comprende una cantidad total de filtros UV de desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 20%, más preferentemente de desde 0.5% hasta 15% en peso, en relación con el peso total de la composición.

Los siguientes ejemplos ilustrarán por lo menos una forma de realización de la invención.

Ejemplos

Ejemplo 1 - Niosomas

Se prepararon varias formulaciones de extractos vegetales incorporados en vesículas hidrófilas (niosomas), que presentaban la composición proporcionada en la tabla 1 a continuación La composición resultante presentaba el aspecto de un gel viscoso transparente uniforme. Se proporciona el porcentaje en peso en relación con el peso total de la composición para cada componente.

Tabla 1

El extracto de abeto rojo, Picea abies, que contiene lignano HMR, se obtuvo de los nudos de los árboles sometidos a extracción en caliente con etanol. Luego se cocristalizaron las fracciones extraídas con acetato de potasio en un sistema ternario de disolventes (etanol, acetato de etilo y agua), hasta que se obtuvo un precipitado. Luego se filtró el precipitado y se secó para proporcionar el compuesto en forma de polvo.

La reproducibilidad de la composición farmacológica de sus principios activos se obtiene mediante la selección especial de plantas de Picea abies europea, recogiendo la madera en condiciones controladas, y con un procedimiento de extracción y purificación normalizado.

El extracto de trébol rojo se obtuvo de las hojas, sometidas a extracción en caliente con etanol acuoso. Luego se diluyeron con agua las fracciones extraídas y se purificaron mediante extracciones líquido/líquido. Luego se concentró el líquido purificado para retirar el etanol y, finalmente, se concentró, filtró y secó adicionalmente para obtener el extracto final en forma de polvo.

La reproducibilidad de la composición farmacológica de sus principios activos se obtiene mediante el cultivo especial de plantas de trébol rojo (cultivadas en Europa), que se hacen crecer en condiciones controladas, y con un procedimiento de extracción y purificación normalizado.

El extracto de Gingko biloba se obtuvo de las hojas, sometidas a extracción en caliente con etanol acuoso. Luego se concentraron las fracciones extraídas a presión reducida para retirar el disolvente de extracción y se purificaron mediante filtración en columnas a base de resina y extracciones sólido/líquido. Luego se intercambiaron los disolventes orgánicos con agua y, finalmente, se concentró la fase acuosa y se secó para obtener el extracto final en forma de polvo.

La reproducibilidad de la composición farmacológica de sus principios activos se obtiene mediante el cultivo especial de plantas Ginkgo biloba (cultivadas en Europa y América del Norte), que se cultivan en condiciones controladas, y con un procedimiento de extracción y purificación normalizado.

El extracto de arándano se obtuvo de los frutos, sometidos a extracción con etanol. Luego se concentraron las fracciones extraídas a presión reducida para retirar el disolvente de extracción y se purificaron mediante filtración en una columna de resina para retirar los componentes azucarados. Luego se intercambiaron los disolventes orgánicos con agua y, finalmente, se liofilizó la fase acuosa mediante una técnica de secado por pulverización para obtener el extracto en forma de polvo.

La reproducibilidad de la composición farmacológica de sus principios activos se obtiene seleccionando plantas de arándano (cosechadas en Europa), cuyos frutos se cosechan en condiciones controladas, y con un procedimiento de extracción y purificación normalizado.

Ejemplo 2 - Emulsiones

Se preparó una serie de emulsiones que comprendían las formulaciones de extractos vegetales incorporados en vesículas hidrófilas obtenidas tal como se describió anteriormente en el ejemplo 1.

La composición de las emulsiones se proporciona en la tabla 2 a continuación.

Tabla 2

La muestras de cada emulsión representativa de la presente invención y de la emulsión comparativa se sometieron a las pruebas de eficacia descritas a continuación.

Ejemplo 3a - Prueba de hidratación a corto plazo

Se evaluó la eficacia hidratante y protectora a corto plazo (una hora) como el índice de hidratación medido utilizando un dispositivo Dermalab Combo con una unidad de parámetros múltiples (Cortex Technology ApS, Hadsund, Dinamarca), con sonda de humedad de tipo pin, que permite evaluar la hidratación de la piel midiendo la conductancia en microsiemens (|jS) entre el estrato córneo y el sensor de la sonda del equipo. Se llevó a cabo la medición en una región de la piel del rostro lo más plana posible, teniendo cuidado de ejercer una presión constante durante un tiempo predeterminado por el propio instrumento. Se mantuvo el sensor limpio cada vez. Se midió el índice de hidratación en condiciones de una temperatura de aproximadamente 20°C y aproximadamente 40-60% de humedad ambiental.

Se aplicó la muestra según sus características de utilización. Se evaluó su eficacia con una prueba de corta duración de 1 hora.

El área utilizada para la prueba es una región de la piel de la frente delimitada de antemano con esparadrapo en el que se realizó un recorte cuadrado, con un área de 6 cm2. Tal cinta adhesiva permaneció en su lugar durante toda la prueba.

Se realizaron las evaluaciones instrumentales en el tiempo t0 (valor inicial) y a los 5 (t5), 15 (t15), 30 (t30) y 60 (t60) minutos después de la aplicación del producto.

Antes de la prueba, se pidió a cada voluntario que no se lavara el rostro, durante por lo menos 3 horas antes del experimento.

Antes de la prueba, los sujetos permanecieron en la clínica durante 30 minutos, para aclimatar la piel a la temperatura y humedad de la habitación climatizada en la que se realizaron las pruebas. Al final de este tiempo, se llevó a cabo la medición de los valores iniciales de hidratación.

La prueba se llevó a cabo en 12 sujetos de ambos sexos (6 hombres, 6 mujeres), entre 26 y 53 años de edad con un promedio de 37.4 años. Los sujetos seleccionados no presentaban patologías dermatológicas o patologías de alguna otra naturaleza, no estaban en tratamiento farmacológico y no habían declarado intolerancia a productos para utilización tópica. Todos los sujetos completaron todo el tratamiento.

En primer lugar, se llevó a cabo la prueba con la emulsión comparativa (Emu-COM) y con las emulsiones que comprendían los extractos de abeto rojo (Emu-HMR) y de trébol rojo (Emu-RCL).

Los resultados se resumen en la tabla 3 a continuación, que muestra el valor medio del índice de hidratación de los 12 sujetos medido en los diversos tiempos de observación para la emulsión de prueba y para el placebo. Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Tabla 3

Se repitió la prueba dos meses después utilizando una emulsión comparativa idéntica (Emu-COM) y las emulsiones preparadas con los extractos de Ginkgo biloba (Emu-GIN) y arándano (Emu-MRT).

Los resultados se resumen en la tabla 4 a continuación, que proporciona el valor medio del índice de hidratación de los 12 sujetos medido en los diversos tiempos de observación para la emulsión de prueba y para el placebo. Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Tabla 4

Ejemplo 3b - Prueba de hidratación a largo plazo

Se repitió el método descrito en el ejemplo 3b, pidiendo a los mismos sujetos que se aplicaran el producto de prueba y el placebo dos veces al día, al despertar por la mañana y a la hora de acostarse, en dos regiones diferentes de la piel de la frente delimitadas de antemano con esparadrapo, en el que se realizó un recorte cuadrado, con un área de 6 cm2. Se realizaron las evaluaciones instrumentales en el tiempo t0 (valor inicial) y a los 7 (t7), 14 (t14) y 28 (t28) días.

Los resultados se resumen en la tabla 5 a continuación, que proporciona el valor medio de los cambios en porcentaje en el índice de hidratación de los 12 sujetos medido en los diversos tiempos de observación en relación con el valor inicial para la emulsión de prueba y para el placebo. Todos los datos se analizaron utilizando la prueba de la t de Student para datos emparejados.

Tabla 5

Ejemplo 4 - Prueba de hidratación a largo plazo de TEWL

Se evaluó la eficacia hidratante y protectora a largo plazo (28 días) midiendo la pérdida de agua transcutánea (pérdida de agua transepidérmica, TEWL). La TEWL, es decir, la cantidad de agua que migra desde la dermis y desde la epidermis a través del estrato córneo al entorno externo, es un indicador sensible de la integridad de la barrera cutánea. Dado que la TEWL aumenta con la edad, esto asimismo se toma como parámetro de referencia para evaluar la eficacia antienvejecimiento de los productos cosméticos.

Para la evaluación se utilizó un instrumento SkinLab Combo (Cortex Technology ApS, Hadsund, Dinamarca), que determina la TEWL mediante el método de cámara abierta de “gradiente de presión de vapor de Nilsson”, según las directrices del “Standardizaron Group of European Society of Contact Dermatitis” (directrices para la medición de la pérdida de agua transepidérmica (TEWL)).

Se aplicó la muestra según sus características de utilización. Se evaluó su eficacia con una prueba a largo plazo que duró 4 semanas.

El área utilizada para la prueba es una región de la piel de la parte interior del antebrazo derecho delimitada de antemano con esparadrapo, en el que se realizó un recorte cuadrado, con un área de 6 cm2. Tal cinta adhesiva permaneció en su lugar durante toda la prueba.

Se realizaron las evaluaciones instrumentales en el tiempo t0 (valor inicial) y a los 7 (t7d), 14 (t14d) y 28 (t28d) días después de la aplicación del producto.

Antes de la prueba, se pidió a cada voluntario que no se lavara la región del antebrazo implicada en la prueba durante por lo menos 3 horas antes del experimento.

Antes de la prueba, los sujetos permanecieron en la clínica durante 30 minutos, para aclimatar la piel a la temperatura y humedad de la habitación climatizada en la que se realizaron las pruebas. La medición de la TEWL se realizó al final de este tiempo.

La prueba se llevó a cabo en 12 sujetos de ambos sexos (6 hombres, 6 mujeres), entre 26 y 53 años de edad con una edad promedio de 37.4 años. Los sujetos seleccionados no presentaban patologías dermatológicas o patologías de alguna otra naturaleza, no estaban en tratamiento farmacológico y no habían declarado intolerancia a productos para utilización tópica. Todos los sujetos completaron todo el tratamiento.

Los resultados se resumen en la tabla 6 a continuación, que proporciona el valor medio de los cambios en porcentaje de la TEWL de los 12 sujetos medido en los diversos tiempos de observación en relación con el valor inicial para la emulsión de prueba y para el placebo. Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Tabla 6

Ejemplo 5 - Prueba de elasticidad a largo plazo

Se evaluó la eficacia en la mejora de la elasticidad de la piel a largo plazo (28 días) utilizando el equipo SkinLab Combo con una sonda de medición de la piel. La medición de la elasticidad se basa en dos fases separadas: una fase de aspiración aplicada en la superficie de la piel y una fase de liberación. La sonda de medición consiste en una cámara de vacío con cinta adhesiva para una mejor adherencia a los pliegues de la piel.

Durante las fases de aspiración y liberación, el instrumento registra cómo la piel se eleva y luego se retrae, midiendo los tres parámetros físicos que son descriptivos de la elasticidad de la piel, a saber (i) el módulo de Young (E), (ii) el tiempo de retracción de la piel R (el tiempo que tarda la piel en volver de la situación totalmente extendida en la situación inicial) y (iii) la viscoelasticidad de la piel (VE), que combina los datos relativos a la fase de succión/elevación de la piel con los de liberación/retracción.

El área utilizada para la prueba es una región de la piel de la parte interior del antebrazo derecho delimitada de antemano con esparadrapo, en el que se realizó un recorte cuadrado, con un área de 6 cm2 Tal cinta adhesiva permaneció en su lugar durante toda la prueba.

Antes de la prueba, los sujetos permanecieron en la clínica durante 30 minutos, para aclimatar la piel a la temperatura y humedad de la habitación climatizada en la que se realizaron las pruebas. Al final de este tiempo, se realizaron mediciones del módulo de Young (E), el tiempo de retracción de la piel (R) y la viscoelasticidad de la piel (VE).

Los resultados se resumen en las tablas 7 a 9 a continuación, que proporcionan los valores medios de los cambios en porcentaje de E, R y VE de los 12 sujetos medidos en los diversos tiempos de observación en relación con el valor inicial para la emulsión de prueba y para el placebo. Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Tabla 7

Tabla 8

Tabla 9

Ejemplo 6 - Prueba a largo plazo del efecto antienvejecimiento

Se evaluó la eficacia del producto de prueba para producir un aumento a largo plazo en el grosor de la piel y la densidad dérmica (56 días) utilizando un equipo SkinLab Combo con una sonda de ultrasonidos de alta frecuencia (20 MHz).

El análisis de la imagen de alta resolución obtenida mediante ultrasonidos de alta frecuencia (20 MHz) permite la investigación in vivo de los procesos fisiológicos y patológicos que se producen en la piel. La metodología se basa en la medición de la respuesta acústica obtenida cuando un pulso sonoro de alta frecuencia se propaga dentro de la piel. A todos los efectos prácticos, cuando esto incide en las diversas estructuras de la piel, parte del pulso se refleja y parte se transmite más. La señal reflejada se recoge por un transductor de ultrasonidos y, después del procesamiento, se convierte en una imagen de la sección transversal de la piel sobre la que inciden las ondas sonoras. Tal imagen presenta diferentes grados de intensidad luminosa en función de la intensidad de las señales acústicas reflejadas en una escala de color, en la que los colores oscuros representan regiones de la piel con baja reflexión (es decir, sin cambios o pequeños cambios en la densidad entre las estructuras cutáneas). y los colores brillantes (de verde a blanco, pasando por amarillo y rojo) representan las regiones que pueden generar señales reflejadas de alta intensidad debido a cambios significativos en la densidad estructural.

Los cambios en la matriz extracelular que se producen durante el proceso de envejecimiento de la piel pueden cuantificarse en cuanto a cambios en el grosor de la piel, la densidad dérmica y la ecogenicidad. Esta última se determina como píxeles de diferentes colores: blanco-amarillo - rojo - verde - azul - negro. En una imagen de piel sana, la ecogenicidad epidérmica aparece como una banda blanca y, a la inversa, la dermis aparece coloreada de manera heterogénea con píxeles de colores que van del rojo/amarillo al verde y la hipodermis aparece negra.

Se aplicó la muestra según sus características de utilización. Se evaluó su eficacia con una prueba a largo plazo que duró 8 semanas.

Se realizaron las evaluaciones instrumentales en el tiempo t0 (valor inicial) y a los 28 (t28) y 56 (t56) días después de la aplicación del producto.

Antes de la prueba, los sujetos permanecieron en la clínica durante 30 minutos, para aclimatar la piel a la temperatura y humedad de la habitación climatizada en la que se realizaron las pruebas. Se llevó a cabo la medición mediante ecografía al final de este tiempo.

Los resultados se resumen en las tablas 10 y 11 a continuación, que proporcionan los valores medios de grosor de la piel (en mm) y densidad de la piel (en intensidad de píxeles) de los 12 sujetos medidos en los diversos tiempos de observación para la emulsión de prueba y para el placebo. Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Tabla 10

Ejemplo 7 - Prueba de resistencia antimicrobiana (prueba de exposición)

La prueba consiste en “exponer” la preparación a un inóculo definido de microorganismos adecuados, dejar la preparación inoculada a una temperatura estipulada y retirar muestras del recipiente a intervalos de tiempo específicos y contar el número de organismos presentes en las muestras recolectadas.

La prueba se realizó siguiendo las recomendaciones dadas en la Farmacopea Italiana - Edición IX y utilizando cultivos bacterianos de las siguientes cepas de microorganismos.

Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027

Escherichia coli ATCC 8739

Staphylococcus aureus ATCC 6538

Candida albicans ATCC 10231

Aspergillus niger ATCC 16404

Se inoculó cada formulación niosómica que contenía los extractos vegetales preparados tal como se describió en el ejemplo 1 con los diversos microorganismos con un inóculo que comprendía un número de bacterias entre 105 y 106y una serie de hongos o mohos entre 104 y 105 Se almacenó el producto inoculado a temperatura ambiente (20-25°C) protegido de la luz. Se tomó una muestra de producto en el tiempo t0 (valor inicial) y a los 2 (t2), 7 (t7), 14 (t14) y 28 (t28) días para determinar el número de microorganismos presentes.

Los resultados se resumen en las tablas 12 a 16 a continuación, que proporcionan los valores encontrados, expresados en una base logarítmica, para cada producto y para cada microorganismo a los diversos tiempos de observación.

Tabla 12

Tabla 13

Tabla 14

Tabla 15

Tabla 16

Basándose en los resultados obtenidos, todas las formulaciones niosómicas bajo investigación pasaron la prueba de exposición, mostrando actividad inhibidora contra todos los microorganismos según los criterios de aceptabilidad establecidos por la CTPA (Cosmetic, Toiletry, and Perfumery Association) y la CTFA (Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association), que prevén una reducción igual a 99.9% de las bacterias y a 90% de los mohos u hongos inoculados, en los 7 días siguientes a la inoculación, y una reducción adicional posterior.

Ejemplo 8 - Prueba del efecto calmante de los niosomas de extractos vegetales de abeto rojo

Se determinó la eficacia del niosoma preparado con extracto de abeto rojo (Nio-HMR), formulado como emulsión (Emu-HMR), para determinar una reducción de la sensibilización de la piel utilizando el equipo SkinLab Combo (Cortex Technology, Dinamarca) equipado con una sonda colorimétrica. La sonda colorimétrica SkinLab, gracias a la función “eritema”, puede medir específicamente el contenido de hemoglobina en la piel, proporcionando así una cuantificación precisa del valor del índice de eritema (EI). Cuanto mayor sea este valor, mayor será el grado de irritación.

Con el fin de inducir una reacción eritematosa, se pretrató la región interna de la piel del antebrazo con una disolución que contenía laurilsulfato de sodio (SLS) al 5% en oclusión con la ayuda de cámaras de Finn (pequeñas células de aluminio con un volumen de 20 microlitros) durante aproximadamente 12 horas. Al final de este tratamiento, se retiraron los emplastos oclusivos que contenían las pequeñas células de aluminio. Después de un intervalo de tiempo de 12 horas, se aplicó una cantidad de muestra igual a 2.0 mg/cm2 en las áreas de piel irritada.

La prueba se llevó a cabo con el producto Emu-HMR, teniendo como comparación el producto Emu-COM, con una crema antiinflamatoria disponible comercialmente a base de hidrocortisona-17-butirato al 0.1% como control positivo (C+) y agua destilada como control negativo (C-). Para cada sujeto, se aplicó cada producto en una región diferente del antebrazo previamente sensibilizado.

Durante toda la prueba, se instruyó a los sujetos para (i) no aplicar productos y/o detergentes en la región implicada en el tratamiento, (ii) no mojar el emplasto, (iii) no participar en actividades deportivas y (iv) evitar la exposición a las radiaciones UVA y UVB.

Se realizaron las evaluaciones instrumentales en el tiempo t0 (valor inicial) y a los 30 (t30), 60 (t60) y 120 (t120) minutos después de la aplicación del producto.

Los resultados se resumen en la tabla 17 a continuación, que proporciona los valores medios del índice de eritema (EI) de los 12 sujetos medidos en los diversos tiempos de observación en las áreas tratadas con el producto de prueba, el placebo y el control positivo y negativo. Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Tabla 17

Ejemplo 9 - Prueba de absorción de la piel (prueba de permeación)

La prueba consiste en evaluar la cinética de difusión de los principios activos contenidos en la formulación niosómica para utilización tópica, después de diversos tiempos de contacto de la formulación niosómica mencionada anteriormente con un modelo de membrana sintética, simulando, en la medida de su compatibilidad con el modelo, las condiciones de utilización in vivo. Se buscan los principios activos de la formulación niosómica liberados opcionalmente y que pueden atravesar la barrera epidérmica, en diversos tiempos de tratamiento, en la sección receptora de la celda de Franz y se cuantifican mediante HPLC-DAD.

Se realizó la prueba para evaluar la difusión transmembrana utilizando el modelo de celdas de Franz según el método descrito en la norma USP 1724 (2015) SemiSolid Drug Products (productos farmacéuticos semisólidos) y utilizando membranas Strat-M® (EMD Millipore). Las membranas Strat-M® son membranas sintéticas utilizadas para pruebas de difusión transmembrana, que simulan la difusión de diversos tipos de compuestos y formulaciones en la epidermis humana.

La prueba se realizó para los principios activos biochanina A (n.° CAS: 491-80-5) y formononetina [n.° CAS: 485 72-3] contenidas en la formulación niosómica con extracto de trébol rojo, 7-HMR (7-hidroximatairesinol) contenido en la formulación niosómica con extracto de abeto rojo, quercetina contenida en la formulación niosómica con Ginkgo biloba y antocianinas contenidas en la formulación niosómica con arándano.

Se aplicó cada formulación niosómica que contenía los extractos vegetales preparados tal como se describió en el ejemplo 1 sobre las membranas (1 g/cm2) mediante la pipeta de desplazamiento positivo especial P100 Gilson para líquidos densos. Pesando la celda de Franz con una balanza analítica antes y después de la aplicación, fue posible medir la muestra con precisión. Se aplicaron las formulaciones niosómicas como tal sobre la membrana Strat-M®. Se suspendieron los extractos como tal al 3% en glicerina y luego se aplicaron sobre la membrana Strat-M®. De esta forma, se llevó a cabo de manera adecuada la comparación entre los principios activos de las muestras.

El control negativo está representado por membranas tratadas con tampón fosfato.

Se incubaron las muestras y los controles a 32°C, el 5% de CO2 y se expusieron durante 3 y/o 6 y/o 24 y/o 48 horas. Se sometió a prueba cada muestra por triplicado. En los diversos tiempos de exposición, se tomaron muestras de parte del líquido receptor con una jeringa.

Se colocaron inmediatamente las muestras así recogidas en el frigorífico a 4°C y luego se tomaron para análisis cromatográficos cuantitativos. Al final de la exposición, se evaluó la integridad de la barrera epidérmica con fluoresceína.

Los resultados se resumen en las tablas 18 a 20 a continuación, que proporcionan los valores encontrados para cada producto a los diversos tiempos de observación.

Tabla 18

La difusión transmembrana, analizada in vitro en la membrana STRAT M®, de biochanina A y formononetina dentro de los productos (RCL al 3% en glicerina y Nio-RCL) mostró difusión por debajo del límite de detectabilidad analítica (< 0.50 |jg/cm2) en el tiempo T1 para ambos principios activos de ambos productos.

En cambio, en el tiempo T2, la difusión transmembrana de los dos principios activos es detectable para ambos productos, pero la cantidad difundida en la formulación niosómica (Nio-RCL) es significativamente mayor para ambos principios activos con respecto a la cantidad difundida de la muestra de extracto de trébol rojo suspendido en glicerina (RCL al 3% glicerina).

Tabla 19

La difusión transmembrana, analizada in vitro en la membrana STRAT M®, de 7-hidroximatairesinol (7-HMR) dentro de los productos (lignano HMR al 2% en glicerina y Nio-HMR) mostró comportamientos muy diferentes de los dos productos ya en el tiempo T1.

Después de 3 horas, la muestra de extracto de lignano HMR suspendido en glicerina (lignano HMR al 2% en glicerina) mostró difusión por debajo del límite de detectabilidad analítica (< 0.25 |jg/cm2), mientras que la difusión de la formulación niosómica (Nio-HMR) estuvo muy por encima del umbral de detectabilidad, cuantificable como 23.5 jg /cm 2

En el tiempo T2, la difusión transmembrana de los dos principios activos es detectable para ambos productos, pero la cantidad difundida en la formulación niosómica (Nio-HMR) es significativamente mayor con respecto a la cantidad difundida de la muestra lignano HMR al 2% en glicerina, que permanece bastante baja (0.66 jg /cm 2).

Tabla 20

La difusión transmembrana, analizada in vitro en la membrana STRAT M^®, de quercetina dentro del producto GIN al 3% en glicerina mostró, hasta 24 horas, una difusión que está por debajo del límite de detectabilidad analítica (<0.40 jg /cm ²; tiempos T1, T2 y T3) y sólo es detectable después de 48 horas (tiempo T4), cuantificable como 7.1 jg/cm ².

Ventajosamente, la formulación niosómica (Nio-GIN) mostró difusión por debajo del límite de detectabilidad analítica (< 0.40 jg /cm ²), sólo hasta 6 horas (tiempos T1 y T2), mientras que fue detectable después de 24 horas (tiempo T3), cuantificable como 4.9 jg /cm ², y después de 48 horas (tiempo T4), cuantificable como 12.4 jg /cm ². Ventajosamente, aunque en el tiempo T4 la difusión transmembrana de los dos principios activos es detectable para ambos productos, la cantidad difundida en la formulación niosómica (Nio-GIN) es significativamente mayor con respecto a la cantidad difundida de la muestra de extracto de Ginkgo biloba suspendido en glicerina (GIN al 2% en glicerina).

Se obtuvieron resultados sustancialmente similares para las composiciones niosómicas que contenían extracto de arándano (Nio-MRT).

Ejemplo 10 - Prueba de toxicidad

Se verificó la seguridad de utilización de las formulaciones niosómicas preparadas tal como se describió en el ejemplo 1 mediante ensayos in vitro para evaluar el poder irritante a nivel de piel y mucosas, tanto en general como en particular en el compartimento ocular, determinando la citotoxicidad medida con el ensayo de MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio).

Este ensayo mide la actividad de la enzima mitocondrial succinato deshidrogenasa, que sólo es activa en células vivas y reacciona con MTT (de color amarillo) formando una sal de color azul, cuya densidad óptica (DOⁿ), que es proporcional al número de células vivas, se cuantifica de manera espectrofotométrica a una longitud de onda de 570 nm.

Las pruebas se llevaron a cabo en un modelo de epidermis humana reconstituida y en un modelo de epitelio corneal humano reconstruido.

El protocolo in vitro basado en la utilización de epidermis humana reconstituida fue validado por EVCAM (http://ecvam.irc.ec.europa.eu) y aceptado por las directrices OECD/OCSE 439 como modelo alternativo a la utilización de animales, y se describe a continuación.

Se trataron los tejidos, después de la incubación en medio de cultivo (EPI-100-NMM), con 25 mg de formulación niosómica. Se preparó el control positivo (CP) tratando los tejidos con 30 j l de una disolución al 5% de SDS (laurilsulfato de sodio) y el control negativo (CN) tratando los tejidos con 30 j l de DPBS (solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco, Euroclone).

Después del tratamiento, se incubaron los tejidos durante 60 minutos (37°C, el 5% de CO²), se lavaron con tampón fosfato y se incubaron de nuevo en medio de cultivo limpio durante 24 horas (37°C, el 5% de CO²), luego se transfirieron de nuevo a medio de cultivo recién preparado y se incubaron durante 18 horas adicionales (37°C, el 5% de CO²).

A continuación, se transfirieron los tejidos a una disolución 1 mg/ml de MTT en DPBS y se incubaron durante 3 horas (37°C, el 5% de CO²), luego se transfirieron a isopropanol y se incubaron durante 2 horas en la oscuridad a temperatura ambiente.

Al final del procedimiento, se realizó una lectura espectrofotométrica a una longitud de onda A=570 nm utilizando el espectrofotómetro de microplacas pQUANT BIO TEK-US. Se normalizaron los valores de densidad óptica obtenidos para las muestras tratadas y para los controles con respecto a los valores obtenidos para isopropanol solo.

Los resultados se resumen en la tabla 21 a continuación, que proporciona los valores medios de DOⁿ(n=6, 2 alícuotas, 3 muestras de tejido) y de porcentaje de vitalidad celular obtenidos para los tejidos tratados con cada formulación niosómica y para los controles positivo y negativo asociados.

Se calculó el grado de vitalidad celular a partir de la siguiente fórmula:

% de vitalidad celular=[DOⁿ(570 nm) del compuesto sometido a prueba/DOⁿ(570 nm) del control negativo] x 100 Un compuesto debe clasificarse como irritante (R38) si se encuentra que la vitalidad celular es inferior al o igual al 50%, mientras que puede clasificarse como no irritante cuanto esto excede del 50%.

Tabla 21

Puede concluirse a partir de los resultados obtenidos en la prueba para evaluar el poder irritante in vitro, en epidermis humana reconstituida, que todas las formulaciones niosómicas de la presente invención pueden clasificarse como no irritantes (vitalidad celular >50%).

El protocolo in vitro basado en la utilización de un modelo de epitelio corneal humano reconstruido fue validado por EVCAM (http://ecvam.irc.ec.europa.eu) y aceptado por las directrices OECD TG492 como modelo alternativo a la utilización de animales, y se describe a continuación.

Se trataron los tejidos, después de la incubación en medio de cultivo basado en DMEM (medio de Eagle modificado por Dulbecco; OCL-200-ASY), con 20 pl de DPBS y se incubaron durante 30 minutos (37°C, el 5% de CO²). A continuación, se añadieron 50 pl de formulación niosómica. Se produjo el control positivo (PC) añadiendo 50 pl de acetato de metilo a los tejidos y el control negativo (CN) añadiendo 50 pl de agua desionizada estéril.

Después del tratamiento, se incubaron los tejidos durante 30 minutos (37°C, el 5% de CO²), se sometieron a lavado con DPBS y se incubaron de nuevo en medio de cultivo limpio durante 12 minutos (37°C, el 5% de CO²), luego se transfirieron a un nuevo medio de cultivo caliente y se incubaron durante 2 horas adicionales (37°C, el 5% de CO²). A continuación, se transfirieron los tejidos a una disolución 1 mg/ml de MTT en DPBS y se incubaron durante 3 horas (37°C, el 5% de CO²), luego se transfirieron a isopropanol y se incubaron durante la noche en la oscuridad a una temperatura de 2-8°C sin agitación.

Los resultados se resumen en la tabla 22 a continuación, que proporciona los valores medios de DOⁿ(n=12, 4 alícuotas, 3 muestras de tejido) y de porcentaje de vitalidad celular obtenidos para los tejidos tratados con cada formulación niosómica y para los controles positivo y negativo.

En el caso de la prueba para irritación ocular, un compuesto debe clasificarse como irritante (R38) si se encuentra que la vitalidad celular es inferior o igual a 60%, mientras que puede clasificarse como no irritante cuanto esto excede de 60%.

Tabla 22

Puede concluirse a partir de los resultados obtenidos en la prueba para evaluar el poder irritante in vitro, en un modelo de epitelio corneal humano reconstruido, que todas las formulaciones niosómicas de la presente invención pueden clasificarse como no irritantes (vitalidad celular >60%).

Ejemplo 11 - Prueba de efecto a largo plazo contra manchas de la piel.

Se evaluó la eficacia del niosoma preparado con extracto de trébol rojo (Nio-RCL), formulado como una emulsión (Emu-RCL), para determinar una reducción en el número de manchas de la piel y una mejora en la tersura del cutis utilizando un equipo VISIA II (Canfield Scientific, Inc.).

VISIA II (Canfield Scientific, Inc.) es un analizador de imágenes optimizado específicamente para estudiar los cambios morfológicos del cutis. Mediante escaneo fotográfico de alta definición, VISIA II puede adquirir, asimismo con la ayuda de filtros UV especiales, luz polarizada y fluorescencia, información morfológica detallada sobre el estado del cutis del sujeto sometido a análisis. Mediante un analizador de imagen multiespectral, VISIA puede procesar la información fotográfica obtenida, aportando datos cualitativos y cuantitativos sobre ocho características que se relacionan con la salud y el aspecto de la piel, tales como: (i) pigmentación de la piel, (ii) tamaño y (iii) número de poros, (iv) presencia de porfirinas debido a la actividad bacteriana (prueba de bacterias), (v) manchas de la piel fotoinducidas, (vi) enrojecimiento de la piel, (vii) número y (viii) intensidad de las arrugas.

El área utilizada para la prueba con la emulsión de niosoma de trébol rojo (Emu-RCL) es la mitad izquierda del rostro. La mitad derecha se trató con la emulsión comparativa (Emu-COM).

Se realizaron las evaluaciones instrumentales en el tiempo T0 (valor inicial) y a los 7 (T7) y 28 (T28) días después de la aplicación del producto.

Antes de la prueba, se pidió a cada voluntario que no se aplicara productos decorativos faciales y no se lavara el rostro, durante por lo menos 3 horas antes del experimento.

La alineación de la cámara del VISIA y el equilibrado del “blanco” se llevaron a cabo antes de cada sesión de medición.

La prueba se llevó a cabo en 15 sujetos de ambos sexos (6 hombres, 9 mujeres), entre 22 y 56 años de edad con una edad promedio de 36.7 años. Los sujetos seleccionados no presentaban patologías dermatológicas o patologías de alguna otra naturaleza, no estaban en tratamiento farmacológico y mostraron un fenotipo de tipo II-IV (Fitzpatrick). Todos los sujetos completaron todo el tratamiento.

Los resultados se resumen en las tablas 23 a 25 a continuación, que proporcionan los valores medios de los cambios en porcentaje en relación con el valor inicial (T0) de la puntuación de manchas (evaluación cualitativa de manchas), del número de manchas y de la puntuación de textura (tersura de la piel) de los 15 sujetos, medidos en los diversos tiempos de observación para la emulsión bajo examen (Emu-RCL) y para la emulsión comparativa (Emu-COM). Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Tabla 23

Tabla 24

Cambio en porcentaje, número de manchas

Tabla 25

La emulsión que contiene Nio-RCL ha demostrado que es significativamente eficaz, con respecto a la emulsión comparativa, en la mejora de la tersura del cutis y la textura general del rostro. El tratamiento con Emu-RCL asimismo parece producir una reducción en el número de manchas, que no correlaciona con una reducción de melasma y léntigos de la vejez, tal como se demuestra mediante análisis con luz polarizada, sino con una mejora de la discromía e hipercromía posinflamatorias.

Ejemplo 12 - Prueba de efecto antiarrugas a largo plazo

Se evaluó la eficacia del niosoma preparado con extracto de trébol rojo (Nio-RCL), formulado como una emulsión (Emu-RCL), para producir una reducción en el número de arrugas faciales y la extensión de las arrugas del contorno de los ojos utilizando el equipo VISIA II (Canfield Scientific, Inc.) descrito en el ejemplo 11.

Se evaluó su eficacia con una prueba a largo plazo que duró 4 semanas.

El área utilizada para la prueba es la mitad izquierda del rostro (Emu-RCL). La mitad derecha del rostro se trató con la emulsión comparativa (Emu-COM).

Se realizaron las evaluaciones instrumentales en el tiempo T0 (valor inicial) y a los 7 (T7), 14 (T14), 21 (T21) y 28 (T28) días después de la aplicación del producto.

La prueba se llevó a cabo en 15 sujetos de ambos sexos (6 hombres, 9 mujeres), entre 26 y 56 años de edad con una edad promedio de 36.7 años. Los sujetos seleccionados no presentaban patologías dermatológicas o patologías de alguna otra naturaleza, no estaban en tratamiento farmacológico y mostraban un fenotipo de tipo II-IV (Fitzpatrick). Todos los sujetos completaron todo el tratamiento.

Los resultados se resumen en las tablas 26 y 27 a continuación, que proporcionan los valores medios de los cambios en porcentaje en relación con el valor inicial (t0) de la puntuación de arrugas (evaluación cualitativa de arrugas) y el número de arrugas de los 15 sujetos, medidos en los diversos tiempos de observación para la emulsión bajo investigación y para la emulsión comparativa. Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Tabla 26

Los resultados del análisis del relieve de la piel destacaron una reducción significativa tanto en el número como en el volumen total de las arrugas presentes en la cuadrícula de medición del VISIA en los sujetos tratados con Emu RCL, con respecto a los tratados con la emulsión comparativa. En particular, se observó una reducción del 59% en el volumen total de arrugas y una reducción del 22% en el número de arrugas.

Ejemplo 13 - Prueba de actividad sobre la microcirculación y efecto de antipérdida del cabello.

Se evaluó la eficacia del niosoma preparado con extracto de Ginkgo (Nio-GIN), formulado como una emulsión (Emu-GIN), para reducir y/o detener la pérdida de cabello estudiando la actividad y vitalidad promedio medidas con el ensayo de MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio), tal como se describió en el ejemplo 10. Se realizó una prueba con doble enmascaramiento en 40 sujetos de ambos sexos afectados por efluvio telógeno de grado 2 y 3 (según la escala de Hamilton-Norwood), entre 18 y 65 años de edad.

Se evaluó la eficacia con una prueba a largo plazo que duró 3 meses.

El área utilizada para la prueba es la mitad izquierda del cráneo, tratada con el producto bajo investigación (Emu-GIN). La mitad derecha se trató con la emulsión comparativa (Emu-COM).

Las evaluaciones se realizaron en el tiempo T0 (valor inicial) y a los 30 (T30), 60 (T60) y 90 (T90) días después de la aplicación del producto. El estudio se dividió en las siguientes fases:

1. evaluación clínica objetiva;

2. análisis tricográfico realizado con técnicas de biología celular: imágenes microtricográficas del área frontovertical con una microcámara LED, y evaluación posterior de la actividad biológica del cabello recogido de cada sujeto, con evaluación de la vitalidad promedio mediante el ensayo de MTT;

3. evaluación subjetiva por los participantes en el estudio mediante un cuestionario con preguntas adecuadas para investigar la percepción de la eficacia del tratamiento y la aceptación del producto.

Todos los datos se sometieron a análisis de varianza (ANOVA) para mediciones repetidas seguido por la prueba de Tukey a posteriori.

Se encontró que la emulsión que contenía Nio-GIN era significativamente eficaz, en relación con la emulsión comparativa, para mejorar la evaluación objetiva y subjetiva del cabello. Además, el análisis tricográfico mostró una mejora de la vitalidad celular en el cabello recogido.

Ejemplo 14 - Prueba del efecto a largo plazo contra ojeras y bolsas bajo los ojos

Se evaluó la eficacia del niosoma preparado con extracto de arándano (Nio-MRT), formulado como una emulsión (Emu-MRT), en la descongestión y reducción del volumen de las bolsas subcutáneas y en el enmascaramiento y la reducción de las ojeras mediante evaluación clínica objetiva e instrumental.

Se evaluó la reducción de bolsas subcutáneas mediante la técnica Visio-3D DermaTOP Blue (Eotech, SA), que permite una medición precisa del mismo área de la piel en diferentes tiempos de análisis, acoplada al software OptoCAT utilizado para la adquisición, la visualización y el análisis de los resultados.

Este programa puede suministrar datos de los parámetros relacionados con cambios histomorfológicos superficiales, cuantificar los volúmenes de los relieves y su variación en un área de 80 x 75 mm.

La reducción de ojeras se cuantificó mediante colorimetría de reflexión utilizando un cromámetro CR-200 (Minolta) y utilizando las componentes de reflexión L*a*b (asimismo conocidas por el nombre CIELab).

CIELab es un espacio de colores opuestos, basado en las coordenadas del espacio de color no lineal comprimido CIE XYZ, en el que un color se identifica por tres valores: la luminancia L, expresada como porcentaje (0 para negro y 100 para blanco), y las dimensiones de colores opuestos a y b, el color varía respectivamente de verde a rojo y de azul a amarillo con valores desde -120 hasta 120.

Se realizó un estudio con enmascaramiento único en 20 sujetos entre 25 y 65 años de edad que mostraban bolsas subcutáneas y/u ojeras.

Se aplicó la emulsión con niosoma de extracto de arándano (Emu-MRT) dos veces al día, por la mañana y por la noche. Se evaluó su eficacia con un estudio a largo plazo que duró 30 días.

El área utilizada para la prueba es la región periocular izquierda del rostro y se trató con emulsión de niosoma de extracto de arándano (Emu-MRT). La región derecha se trató con la emulsión comparativa (Emu-COM).

Las evaluaciones se realizaron en el tiempo T0 (valor inicial) y a los 15 (T15) y 30 (T30) días después de la aplicación del producto.

El estudio se dividió en las siguientes fases:

1. evaluación clínica objetiva de la eficacia de la reducción de ojeras y bolsas subcutáneas;

2. evaluación instrumental de la reducción de bolsas subcutáneas;

3. evaluación instrumental de la reducción de ojeras.

Se descubrió que la emulsión que contenía Nio-MRT era significativamente eficaz, con respecto a la emulsión comparativa, en la descongestión y la reducción del volumen de bolsas subcutáneas y en el enmascaramiento y la reducción de ojeras.

Ejemplo 15 - Prueba del efecto contra la sequedad de las mucosas

Se evaluó la eficacia del niosoma preparado con extracto de trébol rojo (Emu-RCL), formulado como una emulsión, para proporcionar una reducción de la sequedad de las mucosas vaginales, en un estudio clínico de observación en 40 sujetos y se evaluó con una prueba a largo plazo que duró 90 días (T90). Los parámetros considerados como indicadores de mejora del estado de las mucosas vaginales fueron:

• escozor y sequedad vulvovaginal evaluados utilizando una escala visual análoga (VAS - escala graduada desde 0=ausencia de dolor hasta 10=dolor máximo, con indicación de los valores intermedios según una tasa igual a 0.5).

• dispareunia evaluada mediante la escala de Marinoff (0 = sin dolor; 1 = dolor con molestias, sin interferencia en la frecuencia del coito; 2 = dolor con interferencia en la frecuencia del coito; 3 = el dolor impide el coito). (Marinoff SC, Turner MLC. Vulvar vestibulitis syndrome. Dermatol Clin 1992; 10:435-44).

Los análisis de la eficacia se realizaron para la población completa que comenzó el tratamiento (análisis ITT - por intención de tratar). Las características generales de los pacientes y la sintomatología clínica al entrar en el estudio se describieron utilizando los valores medios, la mediana de los valores y las mediciones relativas de dispersión o los porcentajes. Estas características se compararon utilizando la prueba de la t o la prueba de la x2, según fuera apropiado.

Se compararon las frecuencias de los parámetros de estudio y se sometieron a prueba para determinar la significación estadística utilizando la prueba de la x2 bilateral y se consideró un nivel de significación igual a 0.05.

Los resultados para la escala de dolor (VAS) y para la dispareunia se proporcionan en la tabla 28 a continuación.

Tabla 28

Se descubrió que la emulsión que contenía Nio-RCL era significativamente eficaz para mejorar la sintomatología de la sequedad vaginal.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Composición tópica que comprende:

- una composición a base de agua que comprende extractos vegetales incorporados en niosomas hidrófilos (10) que presentan un tamaño inferior a 500 nm, y

- por lo menos un excipiente tópicamente aceptable, caracterizada por que dichos niosomas hidrófilos (10) comprenden poligliceroles lineales o ramificados esterificados con ácidos grasos lineales saturados o monoinsaturados, o mezclas de los mismos.

2. Composición tópica según la reivindicación 1, en la que dichos niosomas (10) presentan un diámetro inferior a 400 nm, preferentemente inferior a 300 nm y más preferentemente inferior a 200 nm.

3. Composición tópica según la reivindicación 1, en la que dichos niosomas (10) presentan un diámetro superior a 10 nm, preferentemente superior a 20 nm y más preferentemente superior a 40 nm.

4. Composición tópica según la reivindicación 1, en la que dichos niosomas (10) comprenden una estructura monolaminar (25) que delimita un compartimento acuoso (30).

5. Composición tópica según la reivindicación 4, en la que dicha estructura monolaminar (25) está formada por una doble capa de moléculas anfífilas (20).

6. Composición tópica según la reivindicación 5, en la que dichas moléculas anfífilas (20) son tensioactivos no iónicos seleccionados de entre el grupo que consiste en dichos poligliceroles lineales o ramificados esterificados con ácidos grasos lineales saturados o monoinsaturados, o mezclas de los mismos.

7. Composición tópica según la reivindicación 1, en la que dichos niosomas (10) comprenden estabilizadores y conservantes seleccionados de entre el grupo que consiste en glicerina y antioxidantes naturales hidrosolubles.

8. Composición tópica según la reivindicación 1, en la que dichos extractos vegetales se seleccionan de entre el grupo que consiste en extractos vegetales de abeto rojo, trébol rojo, Ginkgo biloba y arándano.

9. Composición tópica según la reivindicación 1, en la que dicha composición tópica se selecciona de entre el grupo que consiste en una composición cosmética y un dispositivo médico, para la aplicación a la piel y a la mucosa.

10. Composición tópica según la reivindicación 1, en la que dicha composición tópica comprende dicha composición a base de agua en una cantidad de desde 1% a 5% en peso con respecto al peso total de dicha composición tópica.

11. Composición a base de agua que comprende extractos vegetales incorporados en niosomas (10) hidrófilos como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 anteriores.

12. Composición a base de agua según la reivindicación 11, que comprende agua en una cantidad de desde 30% a 40%, tensioactivos no iónicos seleccionados de entre el grupo que consiste en poligliceroles lineales o ramificados esterificados con ácidos grasos lineales saturados o monoinsaturados, o mezclas de los mismos, en una cantidad de desde 35% a 50%, glicerina en una cantidad de desde 10% a 20%, extractos vegetales en una cantidad de desde 2% a 5% y antioxidantes naturales hidrosolubles en una cantidad de desde 1% a 6%, expresándose dichas cantidades como porcentaje en peso con respecto al peso total de dicha composición a base de agua.

13. Procedimiento para la preparación de la composición a base de agua según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 12 mediante la técnica de agitación a mano o la técnica por ultrasonidos.