Nothing Special   »   [go: up one dir, main page]

ES2793176T3 - Matriz de cromografía de afinidad - Google Patents

Matriz de cromografía de afinidad Download PDF

Info

Publication number
ES2793176T3
ES2793176T3 ES14750552T ES14750552T ES2793176T3 ES 2793176 T3 ES2793176 T3 ES 2793176T3 ES 14750552 T ES14750552 T ES 14750552T ES 14750552 T ES14750552 T ES 14750552T ES 2793176 T3 ES2793176 T3 ES 2793176T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
epitope
blood group
oligosaccharide
matrix
grafted
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES14750552T
Other languages
English (en)
Inventor
Philippe Paolantonacci
Abdessatar Chtourou
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
LFB SA
Original Assignee
LFB SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from FR1356635A external-priority patent/FR3008097B1/fr
Priority claimed from FR1356636A external-priority patent/FR3008098B1/fr
Application filed by LFB SA filed Critical LFB SA
Application granted granted Critical
Publication of ES2793176T3 publication Critical patent/ES2793176T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
    • C07K16/065—Purification, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39516—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum from serum, plasma
    • A61K39/39525—Purification
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
    • B01D15/3804—Affinity chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
    • B01D15/3804—Affinity chromatography
    • B01D15/3809—Affinity chromatography of the antigen-antibody type, e.g. protein A, G, L chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
    • B01J20/265—Synthetic macromolecular compounds modified or post-treated polymers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
    • B01J20/289—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers bonded via a spacer
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/291—Gel sorbents
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
    • B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
    • B01J20/3219—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3251—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising at least two different types of heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulphur
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3255—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure containing at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. heterocyclic or heteroaromatic structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/3272—Polymers obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B01J20/3274—Proteins, nucleic acids, polysaccharides, antibodies or antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C07K1/22—Affinity chromatography or related techniques based upon selective absorption processes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/34—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood group antigens
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/80—Aspects related to sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • External Artificial Organs (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

Matriz de cromatografía de afinidad, en forma de gel, que comprende unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A y/o de grupo B, injertándose dicho oligosacárido a dichas partículas por medio de un espaciador, caracterizada por que la densidad de oligosacáridos es de aproximadamente 0,3 a 0,4 mg/ml de matriz y dicho espaciador consiste en un espaciador de fórmula -NH-C5H10-CO-NH-C3H6-, enlazándose dicho espaciador a la partídcdula mediate su función amina.

Description

DESCRIPCIÓN
Matriz de cromografía de afinidad
La presente invención se refiere a una matriz para la realización de una cromatografía de afinidad, destinada a retener, y eliminar, unos anticuerpos dirigidos contra los antígenos del grupo sanguíneo A y/o del grupo sanguíneo B, de un producto sanguíneo.
Técnica anterior:
Actualmente, se tratan numerosas patologías mediante composiciones de inmunoglobulinas (Ig). Se pueden citar, por ejemplo, las deficiencias inmunitarias primarias con defecto de producción de anticuerpos, la enfermedad de Kawasaki, la púrpura trombopénica inmunológica del niño y del adulto, las deficiencias inmunitarias secundarias con defecto de producción de anticuerpos, en particular la leucemia linfoide crónica o mieloma asociadas a infecciones a repetición, la infección del niño por el VIH asociada a infecciones bacterianas, las neuropatías motoras multifocales, el síndrome de Guillain-Barré, las infecciones agudas severas o crónicas de Parvovirus B19, la inmunodeficiencia adquirida o constitucional, la dermatomiositis corticorresistente, la miastenia aguda, la polirradiculoneuritis crónica idiopática, la púrpura trombocitopénica inmunológica, por ejemplo asociada a la infección por el VIH, el síndrome de la persona rígida (Stiffman síndrome), la neutropenia autoinmune, la eritroblastopenia autoinmune resistente, el síndrome de anticoagulación adquirida por autoanticuerpo, la poliartritis reumatoide, las uveitis, etc.
La utilización en aumento de fracciones de plasma humano enriquecidas en Ig en terapia necesita la producción a gran escala, a partir por ejemplo de plasmas humanos, de concentrados de Ig altamente purificadas, inyectables por vía intravenosa (IgIV), o subcutánea (Igsc).
Ahora bien, esta producción hace frente a numerosas obligaciones, en especialmente en términoz de inocuidad de los concentrados de Ig obtenidos.
Según la farmacopea europea, a fin de reducir los riesgos de hemolisis, sus concentrados deben presentar un contenido reducido en anticuerpos dirigidos contra los antígenos del grupo sanguíneo A y/o del grupo sanguíneo B (designados en la descripción, de manera abreviada “anticuerpo antigrupo sanguíneo A” y “antigrupo sanguíneo B”, o también “anticuerpo anti-A” y “anticuerpo anti-B” o también “isoglutininas anti-A” y “isoaglutininas anti-B”.
Dado que las necesidades en Ig están en constante aumento, es necesario disponer de pools cada vez más importantes de donantes, que serán estadísticamente más ricos en grupo sanguíneo O. Por lo tanto, se ha vuelto esencial disponer de procedimientos que permitan eliminar los anticuerpos anti-A y anti-B de los productos sanguíneos, durante la producción industrial de los concentrados de Ig a partir de pools de plasmas sanguíneos.
La solicitud WO2007/077365 describe un procedimiento de preparación de concentrados de Ig, que comprende una etapa de cromatografía de inmunoafinidad que tiene como objetivo empobrecer estas en anticuerpo anti-A y anti-B.
La solicitud WO02013066251 se refiere a un procedimiento para reducir o eliminar un componente de un producto sanguíneo utilizando una circulación extracorporal. Este procedimiento puede comprender una etapa en la que el producto sanguíneo se trata con un absorbente sobre el cual se inmovilizan unos ligandos de interés, especialmente unos péptidos o unos trisacáridos del grupo sanguíneo A o B. El documento WO2013066251 describe varios espaciadores utilizables para inmovilizar unos ligandos sobre la matriz del absorbente.
La solicitud AU2013200440 describe un procedimiento de preparación de un concentrado de inmunoglobulinas desprovisto de anticuerpos anti-A y anti-B, de uso terapéutico, que comprende una etapa de eliminación de los anticuerpos anti-A y anti-B mediante la realización de una etapa de cromatografía de afinidad con la ayuda de matrices sobre las cuales se injertan unos ligandos oligosacarídicos que presentan una similitud con los grupos sanguíneos A y B.
Resumen de la invención:
La solicitante ha elaborado ahora un soporte, particularmente útil para retener, y eliminar, unos anticuerpos anti-A y/o anti-B de un producto sanguíneo, por cromatografía de afinidad a escala industrial.
La invención proporciona así una matriz de cromatografía de afinidad, en forma de gel, que comprende unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A y/o de grupo B, injertándose dicho oligosacárido a dichas partículas por medio de un espaciador, caracterizada por que la densidad de oligosacáridos es de aproximadamente 0,3 a 0,4 mg/ml de matriz y dicho espaciador consiste en un espaciador de fórmula -NH-C 5H10-CO-NH-C3 H6-, uniéndose dicho espaciador mediante su función amina a la partícula. Un esquema de estas partículas injertadas se presenta en la figura 1.
En un modo de realización particular, la matriz comprende (i) unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A y/o (ii) unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
En un modo de realización preferido, la matriz comprende (i) unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y (ii) unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B. Este modo de realización se ilustra en la figura 4A.
En otro modo de realización, la matriz comprende unas partículas de polímero sobre las cuales se injertan al mismo tiempo un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B. Este modo de realización se ilustra en la figura 4B.
En un modo de realización particular, la matriz comprende una mezcla de (i) partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, (ii) partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B, y (iii) partículas de polímero sobre las cuales se injertan al mismo tiempo al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B. Este modo de realización se ilustra en la figura 4C.
En todos los modos de realización, el espaciador que une el ligando que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A a la partícula, y el espaciador que une el ligando que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B a la partícula pueden ser idénticos o diferentes, preferentemente idénticos, pero siempre de fórmula (I).
La invención se refiere también a la utilización de esta matriz, o soporte, en una cromatografía de afinidad que une unos anticuerpos anti-A y/o anti-B.
La invención contempla también la utilización de esta matriz, o soporte, para la producción a escala industrial de inmunoglobulinas G (IgG) para uso terapéutico.
La invención proporciona también un procedimiento de preparación de un concentrado de inmunoglobulinas (Ig) para uso terapéutico, que comprende la obtención de una composición de Ig a partir de plasma sanguíneo, por fraccionamiento etanólico y/o fraccionamiento caprílico y/o separación cromatográfica, y la eliminación de los anticuerpos anti-A y/o anti-B eventualmente presentes en la composición, mediante una cromatografía de afinidad que utiliza la matriz tal como se define aquí.
Una ventaja de esta matriz es su gran selectividad y especificidad frente a anticuerpos anti-A y anti-B, y su gran capacidad de unión a estos. En consecuencia, se hace posible reducir el tiempo de tratamiento de los productos a escala industrial, haciendo pasar una mayor cantidad de producto por volumen de columna.
Leyendas de las figuras:
La figura 1 representa un esquema simplificado de una partícula de polímero sobre la cual se injerta un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A o B. Según la invención, R1 y R2 son tales que el espaciador es de fórmula: -NH-C5H10-CO-NH-C3H6-.
La figura 2 representa un esquema simplificado de un modo de realización preferido de la invención, que representa una partícula de polímero sobre la cual se injerta un trisacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A.
La figura 3 representa un esquema simplificado de un modo de realización preferido de la invención, que representa una partícula de polímero sobre la cual se injerta un trisacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
La figura 4A representa un esquema simplificado de un modo de realización particular de la invención, de una matriz que comprende una mezcla de partículas que lleva un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y de partículas que llevan un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
La figura 4B representa un esquema simplificado de un modo de realización particular de la invención, de una matriz que comprende unas partículas que llevan al mismo tiempo un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
La figura 4C representa un esquema simplificado de un modo de realización particular de la invención, de una matriz que comprende una mezcla de partículas que lleva un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, de partículas que llevan un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B, y de partículas que llevan al mismo tiempo un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
Descripción detallada de la invención:
Soporte:
La matriz de la invención comprende un soporte a base de partículas de polímero, y está en forma de un gel.
Estas partículas de polímero son preferentemente de forma esférica u oblonga, puede tratarse especialmente de perlas. Estas partículas tienen generalmente un tamaño medio de aproximadamente 0,1 pm a aproximadamente 1000 pm, preferentemente de aproximadamente 20 a aproximadamente 500 pm, más preferentemente de aproximadamente 50 a aproximadamente 200 pm, más preferentemente de aproximadamente 70 pm a aproximadamente 120 pm de diámetro.
Preferentemente, estas partículas son porosas.
El polímero puede ser natural o no natural, orgánico o inorgánico, reticulado o no reticulado.
El polímero es preferentemente un polímero orgánico, preferentemente reticulado.
En un modo de realización preferido, el polímero es la celulosa, y las partículas son preferentemente unas perlas de celulosas porosas.
Más preferentemente, se trata de celulosa reticulada.
Otros tipos de polímeros posibles incluyen agarosa, dextrán, poliacrilatos, poliestireno, poliacrilamida, polimetacrilamida, unos copolímeros de estireno y divinilbenceno, o unas mezclas de estos polímeros.
Las partículas pueden proporcionar un medio de cromatografía que se puede utilizar para llenar una columna por ejemplo.
Ligandos:
Los ligandos llevados por el soporte según la invención son unos oligosacáridos que representan los antígenos de los grupos sanguíneos A o B, que son naturalmente unas osas.
Más precisamente, el oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A y/o el oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B llevado(s) por la matriz según la invención son típicamente unos trisacáridos. La expresión “oligosacáridos que corresponden a un epítopo de grupo sanguíneo” se refiere a unos unas unidades idénticas o similares, desde un punto de vista antigénico, a los determinantes antigénicos reconocidos por los anticuerpos anti-A y anti-B respectivamente. Los ligandos llevados por el soporte según la invención son por lo tanto específicos de los anticuerpos anti-A o anti-B.
Preferentemente, el oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, utilizado como ligando en la invención, es un trisacárido N-acetilgalactosamina (GalNAc)-Galactosa(Gal)-Fucosa, más precisamente N-acetilGala1-3(Fuc a1-2)Gal, el espaciador se enlaza por el átomo de oxígeno enlazado preferentemente al carbono en posición 1 de la galactosa:
El oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B, utilizado como ligando en la invención, es preferentemente un oligosacárido Galactosa-Galactosa-Fucosa, más precisamente Gal a1-3((Fuc a1-2)Gal, el espaciador se enlaza por el átomo de oxígeno enlazado preferentemente al carbono en posición 1 de la galactosa:
Figure imgf000005_0001
Espaciador:
El ligando se enlaza de manera covalente al espaciador, que une el ligando a las partículas.
El espaciador permite reducir el volumen estérico y aumentar la accesibilidad del ligando frente a anticuerpos anti-A y anti-B a enlazar.
El espaciador sirve para inmovilizar, en una partícula, o bien un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, que es preferentemente un trisacárido N-acetilGala1-3(Fuc a1-2)Gal tal como se ha descrito antes, o bien un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B, que es preferentemente un trisacárido Gal a1-3(Fuc a1-2)Gal tal como se ha descrito antes.
Una partícula puede llevar varios espaciadores.
El enlace entre el ligando y el espaciador puede ser, por ejemplo, un enlace amida.
El espaciador comprende típicamente al menos un átomo de C, O, N o S.
Se describen unos espaciadores de tipo -(CH2)mX(CH2)n- o -(CH2)mX1 (CH2)nX2(CH2)p-, en los que X, X1, y X2 se seleccionan cada uno, independientemente el uno del otro, entre O, S, NH, y un enlace covalente; y m, n y p son cada uno independientemente, 0, 1, 2, 3, 4, 5 o 6. Se pueden sustituir 1, 2 o 3 de los átomos de hidrógeno anteriores por un número equivalente de grupos OH y/o metilo.
Se describe también un espaciador que comprende una estructura seleccionada entre
Figure imgf000005_0002
y
en las que cada uno de X1 y X2 se selecciona independientemente entre O, S y NH; y cada uno de Ra, Rb, Rc y Rd se selecciona independientemente entre H, OH, y metilo.
Se describe también un espaciador que comprende una estructura seleccionada entre
Figure imgf000006_0001
Se describe también un espaciador que presenta la fórmula (I) -NH-R1-CO-NH-R2-, en la que R1 es un grupo alquilo de C4-C6, R2 es un grupo alquilo de C3-C8, y dicho espaciador se enlaza mediante su función amina a la partícula (en negrita anteriormente). Un esquema de esta matriz se presenta en la figura 1.
R1 es un grupo alquilo de C4-C6, lineal o ramificado, preferentemente lineal. Según la invención, R1 es un grupo alquilo de C5.
R2 es un grupo alquilo de C3-C8, lineal o ramificado, preferiblemente lineal. Según la invención, R2 es un grupo alquilo de C3.
Según la invención, los ligandos (que son preferentemente unos trisacáridos tales como se han descritos anteriormente) se injertan a las partículas por un espaciador que consiste en un espaciador de fórmula: (partícula)-NH-C5 H10-CO-NH-C3 H6-(ligando).
En un modo de realización preferido, se mezclan perlas de celulosa reticulada sobre las cuales se injertan unos ligandos que son unos trisacáridos que corresponden a un epítopo del grupo sanguíneo A (N-acetilgalactosamina (GalNAc)-Galactosa(Gal)-Fucosa), como se representa en la figura 2, y perlas de celulosa reticulada sobre las cuales se injertan unos ligandos que son unos trisacáridos que corresponden a un epítopo del grupo sanguíneo B(Galactosa-Galactosa-Fucosa), como se representa en la figura 3. Los trisacáridos se injertan a las perlas por un espaciador de fórmula: (perla)-NH-C5-H10-CO-NH-C3H6-(ligando).
Preparación de la matriz:
Los ligandos se inmovilizan químicamente mediante enlaces covalentes entre las partículas y el espaciador, y entre el espaciador y el ligando.
Esta inmovilización se puede realizar de manera clásica por el experto en la materia.
En un modo de realización preferido, la partícula lleva un brazo -NH-R1-COOH en el que R1 es C5H10 de tal manera que se trata de ácido e-aminocaproico (en el que R1 es un grupo pentilo).
De manera clásica, la partícula puede activarse utilizando unos reactivos bifuncionales tales como la epiclorhidrina, la epibrmhidrina, dibromo- y dicloropropanol, dibromobutano, el etilenglicol diglicidiléter, el butanodiol diglicidiléter, la divinilsulfona, el alilglicidiléter, y el bromuro de alilo. El reactivo bifuncional es capaz de reaccionar al mismo tiempo con las partículas y el brazo -NH-R1-COOH. Los compuestos heterofuncionales alilo, tales como el bromuro de alilo, son unos reactivos bifuncionales preferidos y permiten obtener una matriz activada.
Para algunos soportes sólidos, tales como la celulosa, los compuestos que contienen un hidrogel u otros materiales que presentan unos grupos hidroxilos, es ventajoso desprotonar los grupos hidroxilos con una fuente de hidróxido, por ejemplo, antes de la reacción con un reactivo bifuncional.
Los ligandos que representan los antígenos de los grupos sanguíneos A y/o B se inmovilizan después sobre la partícula activada que lleva el brazo -NH-R1-COOH por medio de un grupo enlazador -NH-R2-, en el que R2 es -C 3H6. Para ello, la función COOH del brazo -NH-R1 -COOH portada por la partícula se pone a reaccionar con la función NH2 del ligando NH2-R2-oligosacárido, mediante la utilización de un agente de condensación de tipo N-etoxicarbonil-2-etoxi-1,2-dihidroquinolina (EEDQ).
El experto en la materia puede injertar o bien un ligando que representa un antígeno de grupo A o bien que representa un antígeno de grupo B, o también los dos, en la misma partícula. Preferentemente, el espaciador utilizado es idéntico. Esto es particularmente ventajoso para asegurar un injerto equivalente de ligandos que representan un antígeno de grupo A con respecto a los ligandos que representan un antígeno de grupo B. El experto en la materia sabe, por otro lado, colocarse en condiciones adaptadas, en función de la reactividad de los ligandos frente a partículas, para obtener unas partículas que llevan una proporción determinada de ligandos que representa un antígeno de grupo A con respecto a los ligandos que representan un antígeno de grupo B.
La matriz en forma de gel se prepara por adición clásica de un tampón sobre las partículas de polímero que llevan los ligandos, como se conoce por el experto en la materia, para obtener una matriz en forma de gel, adaptada para una cromatografía de afinidad.
Se describen unas matrices en las que la densidad de ligandos, es decir la cantidad de ligandos (a saber de oligosacáridos que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A o B) injertados, por volumen de matriz, está comprendida entre aproximadamente 0,2 y aproximadamente 0,7 mg/ml de matriz.
La matriz de cromatografía de afinidad según la invención tiene una densidad de oligosacáridos comprendida entre aproximadamente 0,3 y aproximadamente 0,4 mg/ml de matriz. Preferentemente, la densidad de oligosacáridos es de aproximadamente 0,3 mg/ml de matriz.
Según la invención, esta densidad permite disminuir de manera drástica el tiempo de purificación por cromatografía de afinidad, por comparación con una densidad de 1 mg/ml (por ejemplo sobre gel GLYCOSORB ABO® de Glycorex Transpantation AB (Suecia), mencionado en la solicitud WO2007/077365). El volumen de matriz puede aumentarse y el caudal a través de la columna de cromatografía puede aumentarse. Así, con una densidad de ligandos de 0,3 mg/ml de matriz (comparada con una densidad de 1 mg/ml), la duración del procedimiento se ha dividido por 2, lo que, a escala industrial, representa un ahorro destacable. De manera ventajosa, la disminución de la densidad de ligandos permite también disminuir el coste de la matriz, y hace así la etapa de afinidad sobre la matriz según la invención menos costosa, contribuyendo a bajar el precio de fabricación de la composición de inmunoglobulinas final. Ventajosamente, la disminución de la densidad de ligandos se acompaña de una conservación de la capacidad de eliminación de los anticuerpos anti-A y/o anti-B.
En un modo de realización preferido, las partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y las partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B, pueden después mezclarse, por ejemplo en una proporción de 25/75 a 75/25 (v/v), preferentemente aproximadamente 50/50 (v/v).
Las partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y las partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B, pueden también, llegado el caso, mezclarse a unas partículas de polímero que llevan al mismo tiempo al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
Cromatografía de afinidad:
La matriz tal cojo se define aquí es útil en una cromatografía de afinidad que enlaza anticuerpos anti-A y/o anti-B.
Por esta razón, la matriz puede introducirse en una columna de cromatografía. A escala industrial, la columna puede contener de 1 a 150 litros, incluso de 250 a 500 l, si fuese necesario. En el caso de una realización a escala piloto, se pueden utilizar unas columnas de 1 a 50 cm de altura, el diámetro se adapta entonces a la altura de columna utilizada. El volumen de matriz utilizado en la columna se ajusta en función del porcentaje residual en anticuerpo anti-A y/o anti-B deseado con respecto a los porcentajes de anticuerpo anti-A y/o anti-B inicial de la solución. El volumen de matriz puede también ajustarse para responder a las obligaciones de un procedimiento industrial, especialmente adaptarse a los volúmenes de producto a tratar.
Los anticuerpos anti-A y/o anti-B presentes en la preparación líquida de inmunoglobulinas (o el derivado de productos sanguíneos), se fijan a la matriz, y el producto no absorbido se recupera, empobrecido de anticuerpo anti-A y/o anti-B. La preparación líquida de inmunoglobulinas o el derivado de productos sanguíneos se vierte a través de la matriz a una velocidad y en condiciones que permiten el enlace de los anticuerpos con los ligandos llevados por la matriz.
Las matrices pueden reutilizarse de manera repetida, por ejemplo hasta 100 veces aproximadamente, sin degradación. Su regeneración se puede realizar mediante procedimientos conocidos por el experto en la materia, por ejemplo por tratamiento por sosa (NaOH), por ejemplo a 1 M. La reutilización después de la regeneración responde a las exigencias de seguridad de un procedimiento industrial de fabricación de medicamentos, especialmente a las necesidades de descontaminación biológica y a la eliminación de trazas de producto que puede inducir a una contaminación lote a lote. La reutilización de la matriz de afinidad permite también ventajosamente bajar el precio de fabricación industrial durante la fabricación de inmunoglobulinas.
La matriz de afinidad según la invención es perfectamente adecuada, por lo tanto, para una utilización industrial para la fabricación de medicamentos tales como las inmunoglobulinas, permitiendo una eliminación robusta y suficiente de los anticuerpos anti-A y/o anti-B inicialmente presentes en la solución, sin aumentar de manera drástica el precio de fabricación industrial del producto de inmunoglobulinas final.
Purificación de los productos de inmunoglobulinas:
Una cromatografía de afinidad que utiliza la matriz de la invención es particularmente ventajosa para purificar unas preparaciones o composiciones de inmunoglobulinas, eliminando los anticuerpos anti-A y/o anti-B indeseables eventualmente presentes en estas preparaciones o composiciones, y así preparar unos concentrados de inmunoglobulinas para uso terapéutico.
Por “eliminación” se entiende una reducción sustancial de la cantidad de anticuerpos anti-A y/o anti-B presentes, preferentemente de al menos un 25%, más preferentemente de al menos un 50%, aún más preferiblemente de al menos un 80 o un 90%. El concentrado de Ig de la invención obtenido después de la cromatografía de afinidad presenta unos contenidos respectivos en anticuerpos anti-A y anti-B conformes (a la dilución 1/64) a un resultado negativo al ensayo de Coombs directo realizado con una concentración inicial de IgG a 30 g/l. Preferentemente, el concentrado de Ig de la invención obtenido después de la cromatografía de afinidad comprende un contenido en anticuerpo anti-A no superior a 23 ng/mg de IgG, y un contenido en anticuerpo anti-B no superior a 20 ng/mg de IgG. Unos métodos de evaluación de los anticuerpos anti-A y anti-B residuales se describen, especialmente, en la solicitud WO2007/077365. Preferentemente, un método de evaluación de los anticuerpos anti-A y anti-B se efectúa mediante una citometría de flujo, cuyo principio se basa en la utilización de hematíes humanos de grupo A o B, según la determinación del título de los anticuerpos anti-A y anti-B deseada, utilizando la detección de una señal de fluorescencia proporcional al contenido en estos anticuerpos. El método de evaluación por citometría de flujo utiliza generalmente una muestra estándar, por ejemplo un control positivo de inmunoglobulinas (tal como un título 1:32 de EDQM, ref n° 07/306; Thorpe etal., 2009, Vox Sang. 97, 160-168), o un concentrado de anticuerpos anti-D monoclonal o cualquier otro producto de referencia adaptado.
Los productos de inmunoglobulinas contienen esencialmente unas IgG. Típicamente, estas IgG son unas IgG policlonales obtenidas a partir del plasma sanguíneo o de una fracción de plasma sanguíneo ya enriquecido en Ig.
Los concentrados de Ig de uso terapéutico están a concentraciones comprendidas entre 50 y 100 g/l. Estos concentrados están destinados a un uso clínico y pueden inyectarse, en particular, por vía intravenosa. Para ello, deben asegurarse y, llegado el caso, contener unos excipientes, tales como unos estabilizantes, compatibles con este uso clínico.
Los concentrados de Ig de uso terapéutico pueden también administrarse por vía subcutánea. En este caso, la concentración de los productos es superior o igual a 100 g/l, ventajosamente superior o igual a 150 g/l.
Los concentrados de Ig de uso terapéutico pueden también administrarse por vía intramuscular.
Estos concentrados de Ig pueden obtenerse de la manera siguiente:
a) preparación de una composición de Ig, por ejemplo por fraccionamiento etanólico y/o por fraccionamiento caprílico y/o por separación cromatográfica,
b) cromatografía de inmunoafinidad por percolación de la composición de Ig sobre una matriz de la invención,
y c) etapa de securización biológica, preferentemente una nanofiltración para eliminar virus y/o partículas contaminantes.
La composición de Ig se puede obtener por un fraccionamiento etanólico desarrollado inicialmente por Cohn et al.
(Cohn et al., 1946. J. Am. Chem. Soc. 68, 459; Oncley et al., 1949, J. Am. Chem. Soc. 71, 541), o bien por una separación cromatográfica, tal como se describe por ejemplo en el documento EP 0703922 y WO 99/64462, o también por un fraccionamiento caprílico tal como se describe por Steinbuch et al, 1969, Arch Biochem Biophys.
134(2):279-84). Se prefieren muy particularmente los procedimientos elaborados por la solicitante en las solicitudes de patente w O 94/29334 y WO 02/092632, y muy particularmente el descrito en el documento WO 02/092632. En este caso, se somete un plasma sanguíneo, o una fracción de plasma sanguíneo enriquecido en IgG, a un fraccionamiento caprílico (prepurificación por precipitación de contaminantes no inmunoglobulinas), una cromatografía única sobre un soporte de resina intercambiadora de aniones efectuada a pH alcalino, una elución selectiva de las IgG en una etapa por un tampón apropiado a pH comprendido entre 4 y 7. Puede realizarse un tratamiento de inactivación viral, preferentemente efectuado por disolvente-detergente, como se describe por Horowitz en la patente US 4764369.
La fracción de IgG así recogida está ya concentrada, pero puede sufrir después unas etapas de concentración suplementaria por ultrafiltración, y de filtración esterilizante.
Este concentrado se somete después a una etapa de cromatografía de inmunoafinidad sobre la matriz de la invención. Preferentemente, el pH de la preparación de inmunoglobulinas se ajusta a un pH de aproximadamente 6 a aproximadamente 7, preferentemente de aproximadamente 6, antes de la cromatografía.
La carga de la columna está adaptada al porcentaje residual buscado de anticuerpos anti-A y/o anti-B. La especificidad de tal matriz no necesita un acondicionamiento previo de la fracción de IgG, es decir que puede ser adecuado cualquier fracción o concentrado de IgG obtenida por las técnicas de fraccionamiento de plasma.
La percolación del concentrado no hace intervenir un mecanismo de elución. En consecuencia, sea cual sea la manera por la cual se obtiene el concentrado de IgG, se percola a través de la columna, eventualmente gracias a una bomba. Esta percolación permite la retención de los anticuerpos anti-A y anti-B. El tiempo de contacto entre los ligandos y la preparación de Ig es superior o igual a un minuto, ventajosamente del orden de 2 minutos.
La columna se puede lavar después por agua para recuperar las IgG todavía presentes en el volumen muerto de la columna.
Después de la percolación del concentrado de IgG, se obtiene una fracción de IgG empobrecida en anticuerpos anti-A y anti-B.
El procedimiento puede comprender después unas etapas de concentración por ultrafiltración y de filtración esterilizante.
La columna cromatográfica y la matriz pueden lavarse y eluirse después para desorber los anticuerpos anti-A y anti-B retenidos.
El ejemplo siguiente ilustra la presente invención, sin no obstante limitar su alcance.
Ejemplo: Cromatografía de afinidad (escala industrial)
Condiciones de cromatografía:
Una preparación de inmunoglobulinas, obtenida por fraccionamiento según el procedimiento descrito en la solicitud WO2002/092632, que comprende 10±2 g/l de IgG, se somete, a escala industrial, a una etapa de cromatografía de afinidad anti-A/anti-B realizada sobre una columna que comprende una mezcla 50/50 (v/v) de perlas de celulosa reticulada sobre las cuales se injertan unos trisacáridos que corresponden a un epítopo del grupo sanguíneo A (N-acetilgalactosamina (GalNAc)-Galactosa(Gal)-Fucosa), como se representa en la figura 2 (gel designado “Iso A HyperCel”), y de perlas de celulosas reticulada sobre las cuales se injertan unos trisacáridos que corresponden a un epítopo del grupo sanguíneo B (Galactosa-Galactosa-Fucosa), como se representa en la figura 3 (gel designado “Iso BHyperCel”).
Los trisacáridos se injertan con las perlas por un espaciador de fórmula:
(perla)-NH-C5H10-CO-NH-C3H6-(ligando)
La densidad de trisacáridos injertados es de 0,3 mg por ml de gel de matriz.
Para verificar la actividad residual anti-A y anti-B, la preparación de inmunoglobulinas designada Eluato (fracción obtenida después de la cromatografía intercambiadora de aniones), cuyo pH se ha ajustado a 6 (± 0,05) se ha pasado sobre una columna de 1 ml (que comprende 0,5 ml de gel Iso A HyperCel 0,5 ml de gel Iso B HyperCel)
Formato de la columna: D = 0,5 cm x 5,1 cm (volumen de la columna (VC) = 1 ml).
Tiempo de contacto: 2 minutos
Carga: 6 g de preparaciones Eluato / mg de ligandos A+B, es decir 180 ml de producto por columna.
Antes del ensayo, el gel se lava con agua (10 VC mínimo).
Las condiciones de las diferentes etapas del procedimiento se resumen en la tabla siguiente:
Tabla de las etapas:
Figure imgf000009_0001
Figure imgf000010_0001
VC: volumen columna; FNA: Fracción no absorbida
Se ha recogido una única fracción no absorbida (FNA).
Ensayos de evaluación:
El rendimiento se ha determinado por evaluación de las IgG en la fracción no adsorbida, después del lavado y de la percolación. La actividad residual anti-A y anti-B, que corresponde al porcentaje de isoaglutininas anti-A y anti-B presentes en la preparación final con respecto a su concentración antes de la etapa de cromatografía de afinidad, se ha medido por citometría de flujo (técnica más sensible y precisa que la de las diluciones solicitada por la Farmacopea Europea), según la técnica descrita a continuación.
Se han recogido unos glóbulos rojos de grupos A- y B- sobre EDTA y se han lavado dos veces en una solución de NaCl 0,9% (centrifugación a 1730 g durante 5 minutos entre los dos lavados). Se han distribuido 2.106 glóbulos rojos sobre una placa de microtitración y se han añadido 50 ml de control positivo estándar (1:32 EDQM, ref n° 07/306; Thorpe et al. 2009) o las muestras diluidas a una concentración de trabajo (PBS pH 7,4, 1% BSA). Las placas se incubaron durante 2h a 37°C bajo agitación. Después del lavado, se ha utilizado un anticuerpo F(ab’)2 de carba anti-IgG humanas (Fc específico) (Beckman Coulter) marcado con ficoeritrina (PE) diluido al 1/20 en PBS-BSA. Las placas se han incubado durante 30 minutos a temperatura ambiente y fuera de la luz.
Después del lavado, se ha resuspendido cada residuo en 200 ml de PBS-BSA, y leído con el citómetro de flujo (Beckman Coulter Cytomics FC 500).
La intensidad media de fluorescencia (IMF) del control positivo se ha detallado en función de la concentración en IgG (curva estándar) para unas concentraciones que van de 0,23 g/l a 30 g/l. Los resultados se expresan como la relación entre la pendiente de la muestra y la pendiente del estándar positivo. La ecuación de la curva estándar es y = ax b; en la que “a” es el valor del pendiente de la curva estándar y “b” el punto cero que corresponde al ruido de fondo del ensayo. Como la ecuación de la muestra es y’ = a’x b, y utilizando los valores conocidos de IMF de la muestra (y’) y la concentración en IgG (x’), la relación de las pendientes se ha calculado como siendo [(IMF-b)/[IgG concentración]]/a.
Resultados:
El rendimiento en IgG y la actividad residual anti-A y anti-B obtenidos se presentan en la tabla siguiente:
Tabla de los resultados:
Figure imgf000010_0002
Los resultados de esta tabla muestran un rendimiento en IgG del 98% en la fracción no adsorbida, lo que provoca que el soporte de afinidad presenta una buena especificidad frente a isoaglutininas anti-A y anti-B.
Los resultados de esta tabla muestran también una reducción importante de la actividad residual anti-A y anti-B, que son respectivamente del 12% y del 8%. El producto así obtenido es entonces conforme (a la dilución 1/64) a un resultado negativo al ensayo de Coombs direct utilizado con una concentración inicial de IgG a 30 g/l.

Claims (13)

REIVINDICACIONES
1. Matriz de cromatografía de afinidad, en forma de gel, que comprende unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A y/o de grupo B, injertándose dicho oligosacárido a dichas partículas por medio de un espaciador, caracterizada por que la densidad de oligosacáridos es de aproximadamente 0,3 a 0,4 mg/ml de matriz y dicho espaciador consiste en un espaciador de fórmula -NH-C 5H 10-CO-NH-C3H6-, enlazándose dicho espaciador a la partidcdula mediate su función amina.
2. Matriz según la reivindicación 1, que comprende (i) unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y/o (ii) unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
3. Matriz según la reivindicación 2, que comprende (i) unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y (ii) unas partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo de grupo sanguíneo B.
4. Matriz según la reivindicación 1, que comprende unas partículas de polímero sobre las cuales se injertan al mismo tiempo al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
5. Matriz según la reivindicación 1, que comprende una mezcla de (i) partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, (ii) partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B, y (iii) partículas de polímero sobre las cuales se injertan al mismo tiempo al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B.
6. Matriz según una de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la densidad de oligosacáridos es de aproximadamente 0,3 mg/ml de matriz.
7. Matriz según una de las reivindicaciones 1 a 6, en la que el oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A y/o el oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B es un trisacárido.
8. Matriz según la reivindicación 7, en la que el oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A es un trisacárido N-acetilgalacosamina (GalNAc)-Galactosa (Gal)-Fucosa.
9. Matriz según la reivindicación 7, en la que el oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B es un oligosacárido Galactosa-Galactosa-Fucosa.
10. Matriz según la reivindicación 3, en la que las partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo A, y las partículas de polímero sobre las cuales se injerta al menos un oligosacárido que corresponde a un epítopo de grupo sanguíneo B, se mezclan en una proporción de 25/75 a 75/25 (v/v), preferentemente de aproximadamente 50/50 (v/v).
11. Matriz según una de las reivindicaciones 1 a 10, en la que el polímero es un polímero reticulado, preferentemente celulosa, y las partículas son preferentemente unas perlas de celulosa porosas.
12. Utilización de la matriz según una de las reivindicaciones 1 a 11, en una cromatografía de afinidad que enlaza unos anticuerpos anti-A y/o anti-B, preferentemente para la producción a escala industrial de inmunoglobulinas G (IgG) de uso terapéutico.
13. Procedimiento de preparación de un concentrado de inmunoglobulinas G (IgG) de uso terapéutico, que comprende la obtención de una composición de Ig a partir de plasma sanguíneo, por fraccionamiento etanólico y/o fraccionamiento caprílico y/o separación cromatográfica, y la eliminación de los anticuerpos anti-A y/o anti-B eventualmente presentes en la composición, mediante una cromatografía de afinidad que utiliza la matriz según una de las reivindicaciones 1 a
ES14750552T 2013-07-05 2014-07-04 Matriz de cromografía de afinidad Active ES2793176T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1356635A FR3008097B1 (fr) 2013-07-05 2013-07-05 Matrice de chromatographie d'affinite
FR1356636A FR3008098B1 (fr) 2013-07-05 2013-07-05 Matrice de chromatographie d'affinite a densite de ligands reduite
PCT/FR2014/051734 WO2015001277A1 (fr) 2013-07-05 2014-07-04 Matrice de chromatographie d'affinité

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2793176T3 true ES2793176T3 (es) 2020-11-13

Family

ID=51303088

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES14750552T Active ES2793176T3 (es) 2013-07-05 2014-07-04 Matriz de cromografía de afinidad

Country Status (13)

Country Link
US (1) US10611826B2 (es)
EP (1) EP3016729B1 (es)
JP (1) JP2016532100A (es)
KR (1) KR20160029840A (es)
CN (1) CN105358228A (es)
AU (1) AU2014285971A1 (es)
CA (1) CA2916566A1 (es)
ES (1) ES2793176T3 (es)
IL (1) IL243414A0 (es)
MX (1) MX2016000063A (es)
PL (1) PL3016729T3 (es)
TW (1) TW201509432A (es)
WO (1) WO2015001277A1 (es)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112076330B (zh) 2010-12-30 2023-06-02 法国化学与生物科技实验室 作为病原体灭活剂的二元醇
WO2014125374A2 (en) 2013-02-13 2014-08-21 Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Highly galactosylated anti-tnf-alpha antibodies and uses thereof
US10034921B2 (en) 2013-02-13 2018-07-31 Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Proteins with modified glycosylation and methods of production thereof
JP2016532100A (ja) 2013-07-05 2016-10-13 ラボラトワール・フランセ・デュ・フラクシオンマン・エ・デ・ビョテクノロジーＬａｂｏｒａｔｏｉｒｅ Ｆｒａｎｃａｉｓ Ｄｕ Ｆｒａｃｔｉｏｎｎｅｍｅｎｔ Ｅｔ Ｄｅｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ アフィニティークロマトグラフィーマトリックス
FR3026950A1 (fr) * 2014-10-09 2016-04-15 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation de plasma universel
US20170066839A1 (en) * 2015-09-08 2017-03-09 Merck Patent Gmbh Novel affinity chromatography media for removal of anti-a and/or anti-b antibodies
US10697983B2 (en) 2015-09-08 2020-06-30 Merck Patent Gmbh Methods of evaluating quality of media suitable for removing anti-A or anti-B antibodies
US10697982B2 (en) 2015-09-08 2020-06-30 Merck Patent Gmbh Methods of evaluating quality of a chromatography media which binds anti-A or anti-B antibodies
EP3592759A1 (en) 2017-03-07 2020-01-15 JMVA Biotech AB Modified adsorptive surfaces
CN110997133A (zh) * 2017-08-23 2020-04-10 Jsr株式会社 色谱用载体、配体固定载体、色谱柱、靶物质的纯化方法和色谱用载体的制造方法
CN108101981B (zh) * 2018-01-15 2019-06-04 四川远大蜀阳药业有限责任公司 一种静注免疫球蛋白的生产工艺
EP3894437A4 (en) 2018-12-05 2022-10-12 Cytosorbents Corporation CROSSLINKED POLYSACCHARIDE BASED ABSORBENT FOR REMOVAL OF ANTI-A OR ANTI-B ANTIBODIES FROM HUMAN PLASMA AND WHOLE BLOOD
US20240190913A1 (en) * 2022-10-25 2024-06-13 Donaldson Company, Inc. Separation media and purification methods for carbohydrate containing molecules using the same
US20240190995A1 (en) * 2022-10-25 2024-06-13 Donaldson Company, Inc. Separation media and purification methods for blood antibodies using the same

Family Cites Families (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3519558A (en) 1968-02-15 1970-07-07 Abcor Inc Separation of similar solutes using a semipermeable membrane
BE759625A (fr) 1969-12-10 1971-04-30 Molkereigenossenschaft Dahlenb Procede et dispositif pour la dialyse du lait, en particulier pour l'obtention de l'albumine du lait et du petit-lait
CH566798A5 (es) 1973-05-29 1975-09-30 Battelle Memorial Institute
SE396017B (sv) 1974-12-23 1977-09-05 Alfa Laval Ab Filtreringsforfarande, serskilt for ultrafiltrering
US4351710A (en) 1980-01-10 1982-09-28 Ionics, Incorporated Fractionation of protein mixtures
US4350156A (en) 1980-05-29 1982-09-21 Japan Foundation For Artificial Organs Method and apparatus for on-line filtration removal of macromolecules from a physiological fluid
JPS583705B2 (ja) 1980-07-18 1983-01-22 川澄化学工業株式会社 二重ロ過型血漿分離交換装置
US4420398A (en) 1981-08-13 1983-12-13 American National Red Cross Filteration method for cell produced antiviral substances
US4764369A (en) 1983-07-14 1988-08-16 New York Blood Center Inc. Undenatured virus-free biologically active protein derivatives
US4888115A (en) 1983-12-29 1989-12-19 Cuno, Incorporated Cross-flow filtration
CA1244349A (en) 1985-06-26 1988-11-08 Jen-Chang Hsia Purification of hemoglobin and modified hemoglobin by affinity chromatography
US4789482A (en) 1986-02-10 1988-12-06 Millipore Corporation Method for separating liquid compositions on the basis of molecular weight
US6727405B1 (en) 1986-04-09 2004-04-27 Genzyme Corporation Transgenic animals secreting desired proteins into milk
ATE141646T1 (de) 1986-04-09 1996-09-15 Genzyme Corp Genetisch transformierte tiere, die ein gewünschtes protein in milch absondern
ES2037273T3 (es) 1987-04-11 1993-06-16 Ciba-Geigy Ag Proceso de focalizacion isoelectrica y medios para llevar a cabo dicho proceso.
SE464687B (sv) 1987-11-10 1991-06-03 Biocarb Ab Foerfarande foer framstaellning av en gelprodukt
US5948441A (en) 1988-03-07 1999-09-07 The Liposome Company, Inc. Method for size separation of particles
US5256294A (en) 1990-09-17 1993-10-26 Genentech, Inc. Tangential flow filtration process and apparatus
US5648253A (en) 1990-12-20 1997-07-15 Tsi Corporation Inhibitor-resistant urokinase
US6448469B1 (en) 1991-10-02 2002-09-10 Genzyme Corporation Production of membrane proteins in the milk of transgenic nonhuman mammals
DK0804070T3 (da) 1993-03-09 2000-08-07 Genzyme Corp Fremgangsmåde til isolering af proteiner fra mælk
FR2706466B1 (fr) 1993-06-14 1995-08-25 Aetsrn Concentré d'immunoglobulines G à usage thérapeutique et procédé de production dudit concentré.
DE4326665C2 (de) 1993-08-09 1995-07-13 Biotest Pharma Gmbh Verfahren zur Sterilfiltration von Milch
US5827690A (en) 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
US5518624A (en) 1994-05-06 1996-05-21 Illinois Water Treatment, Inc. Ultra pure water filtration
US5843705A (en) 1995-02-21 1998-12-01 Genzyme Transgenic Corporation Transgenically produced antithrombin III
US5597486A (en) 1995-05-01 1997-01-28 Millipore Investment Holdings Limited Membrane filtration with optimized addition of second liquid to maximize flux
EP0871671A1 (en) 1995-09-07 1998-10-21 PPL Therapeutics (Scotland) Limited Purification of alpha-1 proteinase inhibitor
US6054051A (en) 1996-01-17 2000-04-25 Genentech, Inc. Tangential-flow filtration system
US6268487B1 (en) 1996-05-13 2001-07-31 Genzyme Transgenics Corporation Purification of biologically active peptides from milk
US5868936A (en) * 1996-06-20 1999-02-09 Baxter International Inc. Affinity membrane system and method of using same
US6686457B1 (en) * 1996-12-23 2004-02-03 Kurt Nilsson Material
WO1998037224A1 (en) 1997-02-25 1998-08-27 Genzyme Transgenics Corporation Transgenically produced non-secreted proteins
US6210736B1 (en) 1997-06-17 2001-04-03 Genzyme Transgenics Corporation Transgenically produced prolactin
CA2306796A1 (en) 1997-10-20 1999-04-29 Genzyme Transgenics Corporation Novel modified msp-1 nucleic acid sequences and methods for increasing mrna levels and protein expression in cell systems
KR100501263B1 (ko) 1998-06-09 2005-07-18 스태튼스 세룸 인스티튜트 정맥 주사용 면역글로불린의 제조 방법 및 그 외의 면역글로불린 제품
US20050181482A1 (en) 2004-02-12 2005-08-18 Meade Harry M. Method for the production of an erythropoietin analog-human IgG fusion proteins in transgenic mammal milk
DK1088084T3 (da) 1998-06-15 2007-01-29 Gtc Biotherapeutics Inc Erythropoietin analog-humant serumalbumin fusionsprotein
US20030005468A1 (en) 1998-06-19 2003-01-02 Meade Harry M. Methods and vectors for improving nucleic acid expression
US20040117863A1 (en) 1998-09-18 2004-06-17 Edge Michael D. Transgenically produced fusion proteins
US6580017B1 (en) 1998-11-02 2003-06-17 Genzyme Transgenics Corporation Methods of reconstructed goat embryo transfer
US20030177513A1 (en) 1998-11-02 2003-09-18 Yann Echelard Transgenic and cloned mammals
EP1818397A1 (en) 1998-11-02 2007-08-15 Trustees Of Tufts College Methods for cloning animals
US7208576B2 (en) 1999-01-06 2007-04-24 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Non-glycosylated human alpha-fetoprotein, methods of production, and uses thereof
EP1162934A4 (en) 1999-02-22 2005-01-26 Eric F Bernstein COMPOSITIONS AND METHODS FOR PREVENTING PHOTOVAGENING
IL144421A (en) 1999-02-22 2004-12-15 Henry Kopf Purification of biological substances
KR100772465B1 (ko) 1999-10-14 2007-11-02 지티씨바이오쎄라퓨틱스,인크. 트랜스제닉 동물 내에서 표적 분자를 생성시키는 방법, 및그 표적 분자를 정제하는 방법
US7544500B2 (en) 1999-11-13 2009-06-09 Talecris Biotherapeutics, Inc. Process for the production of a reversibly inactive acidified plasmin composition
AU5946501A (en) 2000-05-05 2001-11-20 Genzyme Transgenics Corp Transgenically produced decorin
BR0111817A (pt) 2000-06-19 2003-08-05 Gtc Biotherapeutics Inc Fator de crescimento derivado de plaquetas transgenicamente produzido
WO2002012441A2 (en) 2000-08-10 2002-02-14 Genzyme Transgenics Corporation Cryopreservation of sperm
EP1333032A4 (en) 2000-10-06 2005-03-16 Kyowa Hakko Kogyo Kk METHOD FOR PURIFYING ANTIBODIES
US20040226053A1 (en) 2000-10-13 2004-11-11 Meade Harry M. Methods of producing a target molecule in a transgenic animal and purification of the target molecule
FR2824568B1 (fr) * 2001-05-11 2004-04-09 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation de concentres d'immunoglobulines humaines a usage therapeutique
CA2448432A1 (en) 2001-06-13 2002-12-19 Taurus Hsa Llc Purification of human serum albumin
DE60232895D1 (de) 2001-10-09 2009-08-20 Mayo Foundation Verwendung von agonistischen 4-1bb antikörpern zur erhöhung der immunantwort
US20060099674A1 (en) 2001-11-28 2006-05-11 Peter Alliger Chromatographic purification of recombinant human erythropoietin
JP2005515782A (ja) 2002-01-11 2005-06-02 ジーティーシー バイオセラピューティックス インコーポレイテッド 再構築された胚へ核を移植した後の融合および活性化のための方法およびシステム
US20040133931A1 (en) 2003-01-08 2004-07-08 Gavin William G. Method and system for fusion and activation following nuclear transfer in reconstructed embryos
JP4460302B2 (ja) 2002-02-05 2010-05-12 ジェネンテック インコーポレイテッド タンパク質精製法
IL164078A0 (en) 2002-04-01 2005-12-18 Gtc Biotherapeutics Inc Treatment of lung disorder
NZ535367A (en) 2002-04-01 2008-01-31 Gtc Biotherapeutics Inc A method for selecting cell lines to be used for nuclear transfer in mammalian species
DK1501369T3 (en) 2002-04-26 2015-09-28 Genentech Inc Non-affinity purification of proteins
WO2004006853A2 (en) 2002-07-15 2004-01-22 Mayo Foundation For Medical Education And Research Treatment and prophylaxis with 4-1bb-binding agents
WO2004012499A2 (en) 2002-08-01 2004-02-12 Gtc Biotherapeutics, Inc. Method of selecting cells for somatic cell nuclear transfer
CN1856324A (zh) 2002-09-17 2006-11-01 Gtc生物治疗学公司 缺乏重链间二硫键的免疫球蛋白分子的分离
US7264728B2 (en) 2002-10-01 2007-09-04 Dow Corning Corporation Method of separating components in a sample using silane-treated silica filter media
JP2006513170A (ja) 2002-11-18 2006-04-20 トーラス エイチエスエイ エルエルシー 酸および塩基から溶液を連続的に自動混合する方法
US7087719B2 (en) 2002-11-19 2006-08-08 Gtc Biotherapeutics, Inc. Method for the crystallization of human serum albumin
WO2004050847A2 (en) 2002-11-27 2004-06-17 Gtc Biotherapeutics, Inc. Modified antibodies stably produced in milk and methods of producing same
AU2003296408A1 (en) 2002-12-10 2004-06-30 Gtc Biotherapeutics, Inc. Method and system for utilizing somatic cell nuclear transfer embryos as cell donors for additional nuclear transfer
JP2006515227A (ja) 2003-02-24 2006-05-25 ジーティーシー バイオセラピューティックス インコーポレイテッド 十字流濾過の方法およびそのための装置
US7550263B2 (en) 2003-09-05 2009-06-23 Gtc Biotherapeutics, Inc. Method for the production of fusion proteins in transgenic mammal milk
EP1678298A2 (en) 2003-09-15 2006-07-12 GTC Biotherapeutics, Inc. Expression of dominant negative transmembrane receptors in the milk of transgenic animals
US9469672B2 (en) 2003-10-27 2016-10-18 Wyeth Llc Removal of high molecular weight aggregates using hydroxyapatite chromatography
US20050169908A1 (en) 2004-01-23 2005-08-04 Kazunori Murakami Use of aerosolized antithrombin to treat acute lung injury
US20050186608A1 (en) 2004-02-19 2005-08-25 Olsen Byron V. Method for the production of transgenic proteins useful in the treatment of obesity and diabetes
US20050192226A1 (en) 2004-02-20 2005-09-01 Perenlei Enkhbaatar Method of preventing fibrin clots in pulmonary tissue through the use of aerosolized anticoagulants
US20050197496A1 (en) 2004-03-04 2005-09-08 Gtc Biotherapeutics, Inc. Methods of protein fractionation using high performance tangential flow filtration
US20050245444A1 (en) 2004-04-30 2005-11-03 Yann Echelard Method of using recombinant human antithrombin for neurocognitive disorders
US20060123500A1 (en) 2004-12-07 2006-06-08 Gtc Biotherapeutics, Inc. Methods of prescreening cells for nuclear transfer procedures
US20060121004A1 (en) 2004-12-07 2006-06-08 Yann Echelard Methods of reducing the incidence of rejection in tissue transplantation through the use of recombinant human antithrombin
US20060130159A1 (en) 2004-12-09 2006-06-15 Nick Masiello Method of purifying recombinant MSP 1-42 derived from Plasmodium falciparum
US20060168671A1 (en) 2005-01-21 2006-07-27 Gavin William G Injection of caprine sperm factor (cSF), phospholipase C zeta (PLCzeta) and adenophostin A as alternative methods of activation during nuclear transfer in the caprine species
US20060182744A1 (en) 2005-02-15 2006-08-17 Strome Scott E Anti-CD137 antibody as an agent in the treatment of cancer and glycosylation variants thereof
US20080019905A9 (en) 2005-02-18 2008-01-24 Strome Scott E Method of using an anti-CD137 antibody as an agent for radioimmunotherapy or radioimmunodetection
DE102005007372A1 (de) * 2005-02-17 2006-08-24 Fresenius Medical Care Deutschland Gmbh Vorrichtung zur Eliminierung von Substanzen aus Flüssigkeiten, insbesondere Blut
US20060286548A1 (en) 2005-06-16 2006-12-21 Gregory Liposky Method of making recombinant human antibodies for use in biosensor technology
AR053632A1 (es) 2005-06-17 2007-05-09 Wyeth Corp Metoddos para purificar anticuerpos anti a beta
US20070037192A1 (en) 2005-07-25 2007-02-15 Gtc Biotherapeutics, Inc. Method of purifying recombinant human antithrombin to enhance the viral and prion safety profile
PL1945666T3 (pl) 2005-10-21 2013-09-30 Genzyme Corp Przeciwciała o wzmocnionej aktywności zależnej od przeciwciał cytotoksyczności komórkowej, sposoby ich wytwarzania i zastosowanie
FR2895263B1 (fr) 2005-12-26 2008-05-30 Lab Francais Du Fractionnement Concentre d'immunoglobines g (lg) appauvri en anticorps anti-a et anti-b, et en igg polyreactives
AU2013200440B2 (en) * 2005-12-26 2016-03-31 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Immunoglobulin G (IgG) concentrate depleted of anti-A and anti-B antibodies and of polyreactive IgGs
US7531632B2 (en) 2006-02-16 2009-05-12 Gtc Biotherapeutics, Inc. Clarification of transgenic milk using depth filtration
US8173860B2 (en) 2006-04-21 2012-05-08 Gtc Biotherapeutics, Inc. Non-human transgenic mammal expressing a human FcRn on its mammary gland cells and expressing a transgenic protein-human Fc-domain fusion
FR2901796A1 (fr) 2006-05-31 2007-12-07 Lab Francais Du Fractionnement Procede d'extraction d'une ou de plusieurs proteines presentes dans du lait
US20080207487A1 (en) 2006-11-02 2008-08-28 Neose Technologies, Inc. Manufacturing process for the production of polypeptides expressed in insect cell-lines
WO2008136735A1 (en) * 2007-05-04 2008-11-13 Nilsson Kurt G I Material for separation of a biomolecule
WO2009134389A2 (en) 2008-05-01 2009-11-05 Gtc Biotherapeutics, Inc. An anti-cd137 antibody as an agent in the treatment of inflammatory conditions
EP2335076B1 (en) 2008-09-15 2012-08-08 EMD Millipore Corporation Methods for quantifying protein leakage from protein based affinity chromatography resins
US20110082083A1 (en) 2009-04-10 2011-04-07 Gtc Biotherapeutics, Inc. Formulations of liquid stable antithrombin
CN112076330B (zh) 2010-12-30 2023-06-02 法国化学与生物科技实验室 作为病原体灭活剂的二元醇
EP2729164A4 (en) 2011-07-07 2015-05-06 Lfb Usa Inc FORMULATIONS STABILIZING PROTEINS
EP2556848A1 (en) * 2011-08-08 2013-02-13 Gambro Lundia AB Separation material comprising saccharide ligands
CA2844435A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Highly galactosylated antibodies
US8859840B2 (en) * 2011-09-08 2014-10-14 Cynthia Katsingris Multiple-use blood blotting devices for diabetics for use when monitoring blood glucose levels
SE1200356A1 (sv) * 2011-10-30 2013-05-01 Kurt Nilsson Polymerbaserad produkt och användning
EP2793936A4 (en) 2011-12-19 2015-05-27 Lfb Usa Inc RECOMBINANT HUMAN ALPHA-1-ANTITRYPINE FOR THE TREATMENT OF INFLAMMATORY DISEASES
TW201400499A (zh) 2012-03-12 2014-01-01 Revo Biolog Inc 抗凝血酶用於治療妊娠毒血症之用途
US9511087B2 (en) 2012-08-03 2016-12-06 Revo Biologics, Inc. Use of antithrombin in extracorporeal membrane oxygenation
US20160039913A1 (en) 2012-09-10 2016-02-11 Lfb Usa, Inc. The use of antibodies in treating hiv infection and suppressing hiv transmission
MX2015010428A (es) 2013-02-13 2016-04-13 Lab Francais Du Fractionnement Anticuerpos anti-her2 altamente galactosilados y sus usos.
WO2014125374A2 (en) 2013-02-13 2014-08-21 Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Highly galactosylated anti-tnf-alpha antibodies and uses thereof
MX2015010429A (es) 2013-02-13 2016-05-16 Lab Francais Du Fractionnement Cetuximab con glicosilación modificada y sus usos.
US10034921B2 (en) 2013-02-13 2018-07-31 Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Proteins with modified glycosylation and methods of production thereof
FR3005576B1 (fr) 2013-05-15 2015-06-19 Lab Francais Du Fractionnement Procede d'inactivation d'une proteine prion
JP2016532100A (ja) 2013-07-05 2016-10-13 ラボラトワール・フランセ・デュ・フラクシオンマン・エ・デ・ビョテクノロジーＬａｂｏｒａｔｏｉｒｅ Ｆｒａｎｃａｉｓ Ｄｕ Ｆｒａｃｔｉｏｎｎｅｍｅｎｔ Ｅｔ Ｄｅｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ アフィニティークロマトグラフィーマトリックス
FR3015484A1 (fr) 2013-12-20 2015-06-26 Lab Francais Du Fractionnement Proteines recombinantes possedant une activite de facteur h
US20160326547A1 (en) 2013-12-24 2016-11-10 Lfb Usa, Inc. Transgenic production of heparin
KR20170040132A (ko) 2014-06-02 2017-04-12 라보라토이레 프란카이즈 듀 프락티온네먼트 에트 데스 바이오테크놀로지스 Fc 단편의 제조
FR3022462B1 (fr) 2014-06-18 2018-04-27 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Composition orale d'anticorps anti-tnfalpha
US20160158676A1 (en) 2014-12-01 2016-06-09 Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Method and apparatus for manipulating components of a filtration system
JP2018515073A (ja) 2015-05-04 2018-06-14 ラボラトワール フランセ デュ フラクショヌマン エ デ ビオテクノロジーＬａｂｏｒａｔｏｉｒｅ Ｆｒａｎｃａｉｓ ｄｕ Ｆｒａｃｔｉｏｎｎｅｍｅｎｔ ｅｔ ｄｅｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｆｃ融合タンパク質のトランスジェニック産生
EP3307237A1 (en) 2015-06-12 2018-04-18 Laboratoire Français du Fractionnement et des Biotechnologies Injectable composition of factor vii and fillers
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie

Also Published As

Publication number Publication date
CN105358228A (zh) 2016-02-24
EP3016729A1 (fr) 2016-05-11
US20160168229A1 (en) 2016-06-16
IL243414A0 (en) 2016-02-29
CA2916566A1 (fr) 2015-01-08
US10611826B2 (en) 2020-04-07
TW201509432A (zh) 2015-03-16
AU2014285971A1 (en) 2016-02-04
EP3016729B1 (fr) 2020-03-25
WO2015001277A1 (fr) 2015-01-08
JP2016532100A (ja) 2016-10-13
KR20160029840A (ko) 2016-03-15
MX2016000063A (es) 2016-03-01
PL3016729T3 (pl) 2020-09-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2793176T3 (es) Matriz de cromografía de afinidad
US6610630B2 (en) Chromatography adsorbents utilizing mercapto heterocyclic ligands
JP5530633B2 (ja) アフィニティークロマトグラフィーマトリックスおよびその作成および使用法。
US4138287A (en) Purifying and isolating method for hepatitis virus to use in preparing vaccine
WO2014003137A1 (ja) 高アフィニティー抗体、及びその製造方法
JP2019034963A (ja) 陽イオン交換基を用いた新規抗体精製法（Ｎｏｖｅｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｕｓｉｎｇ Ｃａｔｉｏｎ Ｅｘｃｈａｎｇｅｒ）
JP2015501310A (ja) タンパク質の混合モードクロマトグラフィー精製用の固相
JP7073333B2 (ja) 免疫グロブリン組成物を調製するためのプロセス
CN101060931B (zh) 色谱配体
CN103534264A (zh) 血栓形成试剂减少的免疫球蛋白及其制备
FR3008097A1 (fr) Matrice de chromatographie d'affinite
JP4739233B2 (ja) 免疫グロブリンの精製
JP6740357B2 (ja) 強カチオン交換クロマトグラフィー担体及びその使用方法
JP3748927B2 (ja) 糖脂質抗体吸着材
FR3008098A1 (fr) Matrice de chromatographie d'affinite a densite de ligands reduite
TW200927254A (en) Antibody production method
WO2000041721A1 (en) Process for purifying immunoglobulins
JP2010070490A (ja) 抗体の精製方法
ES2624245T3 (es) Procedimiento de preparación de un producto plasmático deplecionado de uno o varios factores trombogénicos
US11732004B2 (en) Compositions and methods for simplified high efficiency isolation of proteins
JP6236278B2 (ja) 体液浄化デバイス用ＩｇＧ型抗体吸着材
WO1988007892A1 (en) B lymphocyte separating material and body fluid clarifying material
Wang et al. Chimeric AQP4-based immunosorbent for highly-specific removal of AQP4-IgG from blood
Ren et al. An Adsorbent for Extracorporeal Elimination of Pathogenic Autoantibodies
JPH0624625B2 (ja) 自己抗体産生ｂ細胞用吸着剤および自己抗体産生ｂ細胞の吸着除去方法