ES2634667T3 - Métodos para fabricar conjuntos de microproyección - Google Patents

Abstract

Método para formar un conjunto de microproyección, que comprende: dispensar una cantidad de una formulación (22) sobre un molde (20) que tiene una pluralidad de cavidades para microproyecciones individuales en el conjunto, en el que el molde y la formulación se ponen en contacto de un modo tal que la pluralidad de cavidades estén en comunicación fluida con la formulación; cubrir la formulación sobre el molde con un sustrato; transferir la formulación a la pluralidad de cavidades; y retirar la formulación en exceso del molde de forma que retenga la formulación en cada una de la pluralidad de cavidades para formar el conjunto de microproyección.

Description

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DESCRIPCION

Metodos para fabricar conjuntos de microproyeccion Referencia cruzada a solicitudes relacionadas

La presente solicitud reivindica el beneficio del documento de Solicitud Provisional de Estados Unidos n.° 61/172.419, presentado el 24 de abril de 2009.

Campo tecnico

La materia objeto que se describe en el presente documento se refiere en terminos generales a un proceso para la fabricacion de un conjunto de microproyecciones para el suministro de un agente activo.

Antecedentes

Los conjuntos de microagujas se propusieron inicialmente como una forma de administrar farmacos a traves de la piel en la decada de 1970, por ejemplo en el documento de Patente de Estados Unidos expirado n.° 3.964.482. Los conjuntos de microagujas pueden facilitar el paso de los farmacos a traves de o a la piel humana y otras membranas biologicas en circunstancias en las que es inadecuada la administracion transdermica convencional. Los conjuntos de microagujas tambien se pueden usar para tomar muestras de fluidos que se encuentran en la vecindad de una membrana biologica tales como fluido intersticial, que a continuacion se someten a ensayo para la presencia de biomarcadores.

En los ultimos anos se vuelto mas factible fabricar conjuntos de microagujas de una forma que hace su uso extendido financieramente factible. El documento de Patente de Estados Unidos n.° 6.451.240, por ejemplo, desvela algunos metodos para fabricar conjuntos de microagujas. Si los conjuntos son suficientemente baratos se pueden comercializar como dispositivos desechables. Un dispositivo desechable puede ser preferente a uno reutilizable con el fin de evitar la cuestion de que se comprometa la integridad mediante el uso previo y evitar la necesidad potencial de reesterilizacion del dispositivo despues de cada uso y mantenerlo en almacenamiento controlado.

Gran parte del trabajo inicial de la fabricacion de conjuntos de microagujas se ha centrado en silicio o metales como los materiales de eleccion. Existen ventajas significativas en el uso de un polfmero como el material para la fabricacion de conjuntos polimericos. Por ejemplo, el documento de Patente de Estados Unidos n.° 6.451.240 desvela algunos metodos de fabricacion de conjuntos de microagujas polimericos. Los conjuntos hechos principalmente de polfmeros biodegradables tienen algunas ventajas. El documento de Patente de Estados Unidos n.° 6.945.952 y los documentos de Solicitud de Patente Publicada de Estados Unidos con numeros 2002/0082543, 2005/0197308 y 2008/0269685 describen conjuntos de microagujas hechos de polfmeros biodegradables. Se encuentra una descripcion detallada de la fabricacion de un conjunto de microagujas hecho de acido poliglicolico en Jung-Hwan Park et al., "Biodegradable polymer microneedles: Fabrication, mechanics, and transdermal drug delivery," J. of Controlled Release, 104:51-66 (2005). El documento de Patente de Estados Unidos n.° 7.578.954 desvela metodos de construccion de microestructuras que comprenden agujeros pasantes. El documento de Publicacion de Patente de Estados Unidos n.° 2005/0178760 describe metodos de preparacion de una estructura de conjunto de microagujas que incluye microagujas huecas que tienen un pasaje que se extiende a traves de las mismas. El documento de Publicacion PCT n.° WO 2007/075806 describe un metodo de preparacion de microestructuras que usa moderado por inyeccion. El documento de Publicacion PCT n.° WO 2005/082596 describe un metodo de preparacion de un conjunto de microagujas moldeado que usa una insercion de molde negativo en un aparato de moldeado por inyeccion.

A pesar de estos esfuerzos, aun existe la necesidad de encontrar metodos mas sencillos y mejores para la fabricacion de conjuntos de microagujas polimericos y, en particular, conjuntos de microagujas fabricados a partir de polfmeros biodegradables. Los deseos incluyen metodos que desperdicien un mmimo de ingrediente activo y metodos que situen cantidades similares de ingrediente activo en cada microaguja individual del conjunto. Un reto particular para solucionar el moldeado de conjuntos de microproyeccion usando un precursor de farmaco-polfmero ha sido el proceso de llenado del molde con el precursor y evitar que quede atrapado al aire en las cavidades del molde que forman las microproyecciones. Si no se retira el aire, el precursor puede no llenar la cavidad que forma el conjunto o puede tardar un periodo prolongado de tiempo en llenar la cavidad.

Los ejemplos precedentes de la tecnica relacionada y las limitaciones relacionadas con los mismos se pretende que sean ilustrativos y no exclusivos. Otras limitaciones de la tecnica relacionada se convertiran en evidentes para el experto en la materia tras una lectura de la memoria descriptiva y un estudio de las figuras.

Breve sumario

En un aspecto, se proporciona un metodo de formacion de un conjunto de microproyeccion. En el metodo, se proporciona un molde basicamente flexible que comprende una pluralidad de cavidades que definen

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microproyecciones individuals en el conjunto. Se coloca una cantidad de formulacion sobre un sustrato, y el molde se coloca en contacto con la formulacion de un mundo tal que la abertura de cada cavidad en la pluralidad de cavidades este en contacto directo con la formulacion. Se transfiere la totalidad o una parte de la formulacion a la pluralidad de cavidades. A continuacion, el molde se desacopla de la formulacion, o la formulacion se retira del contacto con el molde, de un modo tal que se retenga la formulacion transferida a la pluralidad de cavidades.

En otro aspecto, se proporciona un metodo de formacion de un conjunto de microproyeccion. Se proporciona un molde, comprendiendo el molde de una pluralidad de cavidades para la formacion de las microproyecciones. El molde se situa en un elemento fijo que tiene un primer y un segundo miembros, y al menos un puerto. Se introduce una formulacion a traves del puerto al elemento fijo, por contacto con las aberturas de cada una de las cavidades en la pluralidad de cavidades en el molde. Se transfiere la formulacion a la pluralidad de cavidades, y a continuacion la formulacion no transferida se retira del contacto con el molde a una velocidad mediante la que se retenga la formulacion transferida a la pluralidad de cavidades.

El metodo, en una realizacion, comprende dispensar una cantidad de una formulacion sobre un sustrato, poner en contacto un molde que tiene una pluralidad de cavidades para microproyecciones individuales en el conjunto con la formulacion dispensada sobre el sustrato, en el que el molde y la formulacion estan en contacto de un modo tal que la pluralidad de cavidades esta en comunicacion fluida con la formulacion, y a continuacion transferir la formulacion a la pluralidad de cavidades. El molde se desacopla a continuacion de la formulacion y el sustrato de una forma que retenga la formulacion en cada una de la pluralidad de cavidades.

En una realizacion, la transferencia comprende transferir la formulacion a la pluralidad de cavidades por aplicacion de presion al molde cuando esta en contacto con la formulacion dispensada sobre el sustrato. En una realizacion, se aplica una presion en el intervalo de 0,1-1 atmosferas (10,1-101 kPa). En otra realizacion, la transferencia comprende aplicar un vacfo al molde cuando esta en contacto con la formulacion.

En otra realizacion, el sustrato tiene un deposito o cavidad. En otra realizacion mas, el sustrato comprende canales para purgar un gas.

En una realizacion, el desacoplamiento del molde de la formulacion y el sustrato consigue una retencion uniforme de la formulacion en cada una de la pluralidad de cavidades, que se manifiesta mediante una desviacion tfpica de la cantidad de formulacion retenida en cada cavidad menor o igual que aproximadamente un 10% de la cantidad media de formulacion retenida en las cavidades.

En otra realizacion mas, el desacoplamiento del molde de la formulacion y el sustrato se consigue elevando un borde del molde y desprendiendo gradualmente el molde de la formulacion y el sustrato a una velocidad controlada.

En una realizacion, la velocidad controlada de desacoplamiento se lleva a cabo mediante un miembro giratorio que se puede unir al molde.

En aun otra realizacion, el metodo comprende ademas recuperar la formulacion que no esta retenida en la pluralidad de cavidades. En una realizacion se recupera al menos aproximadamente un 90 % de la formulacion no retenida en la pluralidad de las cavidades.

Las etapas de dispensar, poner en contacto, transferir y desacoplar, individual o colectivamente, se llevan a cabo a una temperatura de aproximadamente 23-25 °C.

En otra realizacion mas, el desacoplamiento comprende desacoplar a una velocidad menor o igual que 5 mm/min.

El metodo comprende ademas, en algunas realizaciones, retirar el disolvente de la formulacion que esta retenida en la pluralidad de cavidades. En una realizacion, el disolvente se retira colocando el molde a una temperatura que evapore el disolvente. En algunas realizaciones, despues de la retirada del disolvente, se aplica una segunda formulacion sobre el molde.

El molde, en una realizacion, tiene una pluralidad de cavidades que se proyectan en el molde desde una superficie de molde aproximadamente plana.

En otra realizacion, para al menos una cavidad en la pluralidad de cavidades, el diametro de la interseccion de la al menos una cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye monotonamente en funcion de la distancia al plano desde la superficie del molde.

En aun otra realizacion, el diametro de la interseccion de la al menos una cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye mas rapidamente cuando el plano esta cerca de la superficie del molde que cuando el plano esta mas lejos de la superficie del molde.

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En otra realizacion mas, el diametro de la interseccion de la al menos una cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye linealmente en funcion de la distancia a la superficie del molde para un intervalo de distancias cercano a la superficie del molde y a continuacion disminuye linealmente pero mas lentamente para un segundo intervalo de distancias mas alejado de la superficie del molde.

En otra realizacion, un metodo de fabricacion de un conjunto de microproyeccion comprende situar un molde que comprende una pluralidad de cavidades para la formacion de microproyecciones en un conjunto de microproyecciones en un elemento fijo, el elemento fijo esta comprendido por un primer miembro y un segundo miembro y al menos un puerto, el molde se situa entre el primer y el segundo miembros. Se introduce una formulacion al elemento fijo a traves del al menos un puerto de un modo tal que la formulacion ponga en contacto las aberturas con la pluralidad de cavidades en el molde. A continuacion se transfiere la totalidad o una parte de la formulacion introducida a la pluralidad de cavidades; y a continuacion se retira cualquier cantidad de formulacion no transferida del elemento fijo a una velocidad mediante la que se retenga la formulacion transferida en la pluralidad de cavidades en cada cavidad en la pluralidad.

En una realizacion, la transferencia comprende presurizar la formulacion dentro del elemento fijo.

En una realizacion, las etapas de transferencia y retirada consiguen una retencion uniforme de la formulacion en cada una de la pluralidad de cavidades, que se manifiesta mediante una desviacion tfpica en la cantidad de formulacion retenida en cada cavidad menor o igual que aproximadamente un 10% de la cantidad media de la formulacion retenida en las cavidades.

En otra realizacion mas, un microprocesador controla las etapas de introduccion y retirada de la formulacion del elemento fijo.

En otra realizacion, el molde situado en el elemento fijo es un molde en el que la pluralidad de cavidades son cavidades alargadas con una dimension mas larga y una dimension mas corta, y el molde se mantiene en el elemento fijo de un modo tal que la dimension mas larga de cada cavidad en la pluralidad de cavidades es aproximadamente horizontal.

El metodo, en otra realizacion, comprende ademas retirar el molde con la formulacion retenida del elemento fijo.

En otra realizacion, el metodo comprende ademas retirar el disolvente de la formulacion retenida en cada una de la pluralidad de cavidades para producir una formulacion seca de la que estan compuestas las microproyecciones en el conjunto.

Ademas de los aspectos y las realizaciones a modo de ejemplo que se han descrito anteriormente, seran evidentes aspectos y realizaciones adicionales por referencia a las figuras y mediante el estudio de las siguientes descripciones.

Breve descripcion de las figuras

Las Figuras 1A-1B representan esquematicamente en vista lateral dos formas diferentes de una microproyeccion individual de un conjunto, donde en la Figura 1A, el diametro de la microproyeccion disminuye mas rapidamente con la distancia desde la base mas cerca de la base en comparacion a mas lejos de la base.

Las Figuras 2A-2D representa esquematicamente un metodo para llenar un molde de conjunto de microproyeccion con una formulacion.

Las Figuras 3A-3B son micrograffas generadas por ordenador de un conjunto de microproyeccion despues del llenado con una formulacion (Figura 3A) y despues del secado de la formulacion (Figura 3B).

La Figura 4 es una micrograffa generada por ordenador de un microscopio optico, donde la imagen es de microproyecciones en un conjunto producido usando el proceso de llenado de molde que se describe en el presente documento, en el que es visible el agente activo que esta concentrado en la punta de cada microproyeccion.

La Figura 5 representa esquematicamente una disposicion para el desprendimiento de un molde de acuerdo con uno de los metodos que se describen en el presente documento.

La Figura 6A-6B representan esquematicamente un elemento fijo para su uso en un metodo para llenar cavidades de microproyeccion en un molde para un conjunto de microagujas con una formulacion liquida que despues de secarse forma las microproyecciones del conjunto.

Descripcion detallada

Antes de describir los metodos de fabricacion con detalle, se ha de entender que los metodos no se limitan a disolventes, materiales, o estructuras de dispositivos espedficos, y como tales pueden variar. Tambien se ha de entender que la terminologfa que se usa en el presente documento es unicamente con el fin de describir realizaciones particulares, y no se pretende que sea limitante.

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Como se usa en la presente memoria descriptiva y en las reivindicaciones anexas, las formas en singular "uno", "uno", "una", "el" y "la" incluyen las referencias tanto en singular como en plural a menos que el contexto indique claramente otra cosa. De ese modo, por ejemplo, la referencia a "un ingrediente activo" incluye una pluralidad de ingredientes activos asf como un ingrediente activo individual, la referencia a "una temperatura" incluye una pluralidad de temperaturas asf como una temperatura individual, y similares.

Para la informacion con respecto a las palabras que tienen multiples significados, se hace referencia al Oxford English Dictionary (2a ed. 1989), McGraw-Hill Dictionary of Scientific and Technical Terms (6a ed. 2002) y a Hawley's Condensed Chemical Dictionary (15a ed. 2007). La inclusion de estas referencias no pretende implicar que cada definicion de los mismos sea necesariamente aplicable aqm, ya que los expertos en la materia a menudo senan capaces de observar que una definicion particular no sea aplicable de hecho en el presente contexto.

Cuando se proporciona un intervalo de valores, se pretende que cada valor intermedio entre el lfmite superior e inferior de ese intervalo y cualquier otro valor indicado o intermedio en el intervalo indicado este comprendido dentro de la divulgacion. Por ejemplo, si se indica un intervalo de 1 pm a 8 pm, se pretende que tambien esten incluidos 2 pm, 3 pm, 4 pm, 5 pm, 6 pm, y 7 pm, asf como el intervalo de valores mayor igual que 1 pm y el intervalo de valores menor igual que 8 pm.

El molde, en una realizacion, tiene una pluralidad de cavidades que se proyectan en el molde desde una superficie de molde aproximadamente plana. En otra realizacion, para al menos una cavidad en la pluralidad de cavidades, el diametro de la interseccion de la menos una cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye monotonamente en funcion de la distancia al plano desde la superficie del molde. En aun otra realizacion, el diametro de la interseccion de la al menos una cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye mas rapidamente cuando el plano esta cerca de la superficie del molde que cuando el plano esta lejos de la superficie del molde. En otra realizacion mas, el diametro de la interseccion de la al menos una cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye linealmente en funcion de la distancia a la superficie del molde para un intervalo de distancias cercano a la superficie del molde y a continuacion disminuye linealmente pero mas lentamente para un segundo intervalo de distancias alejado de la superficie del molde.

A. Conjuntos de microproyeccion

En la presente solicitud a menudo se hace referencia por conveniencia a "piel" como la membrana biologica a traves de la cual se administra el compuesto activo. Los expertos en la materia entenderan que en la mayona o la totalidad de los casos se aplican los mismos principios de la invencion a la administracion a traves de otras membranas biologicas tales como las que revisten el interior de la boca, el tracto gastrointestinal, la barrera hematoencefalica, u otros tejidos u organos o membranas biologicas corporales que estan expuestas o son accesibles durante cirugfa o durante procedimientos tales como laparoscopia o endoscopia.

En la presente solicitud tambien se hace referencia a "microagujas" como un tipo de microprotrusion o microproyeccion que se esta empleando. Los expertos en la materia entenderan que en numerosos casos se aplican los mismos principios de la invencion al uso de otras microprotrusiones o microproyecciones para penetrar la piel u otras membranas biologicas. Otras microprotrusiones o microproyecciones pueden incluir, por ejemplo, las microcuchillas que se describen en el documento de Patente de Estados Unidos n.° 6.219.574 y el documento de Solicitud de Patente Canadiense n.° 2.226.718, y las microagujas con borde que se describen en el documento de Patente de Estados Unidos n.° 6.652.478.

En general es preferente que las microproyecciones tengan una altura de al menos aproximadamente 50 pm, de al menos aproximadamente 100 pm, al menos aproximadamente 150 pm, al menos aproximadamente 200 pm, al menos aproximadamente 250 pm, o al menos aproximadamente 300 pm. En general tambien es preferente que las microproyecciones tengan una altura de no mas de aproximadamente 1 mm, no mas de aproximadamente 500 pm, no mas de aproximadamente 300 pm o, en algunos casos, no mas de aproximadamente 200 pm o 150 pm. Las microproyecciones pueden tener una relacion de aspecto de al menos 3:1 (altura con respecto a diametro en la base), al menos aproximadamente 2:1, o al menos aproximadamente 1:1. En una realizacion, una forma para las microproyecciones es un cono con una base poligonal, por ejemplo hexagonal o en forma de rombo. Otras posibles muestras de microproyeccion se muestran, por ejemplo, en el documento de Solicitud de Patente Publicada de Estados Unidos 2004/0087992.

En algunos casos, las microproyecciones pueden tener una forma que se hace mas gruesa hacia la base, por ejemplo microproyecciones que tienen aproximadamente el aspecto de un embudo, o mas generalmente donde el diametro de la microproyeccion crece mas rapido que linealmente con el aumento de la distancia al extremo distal de la microproyeccion. Tal forma es beneficiosa, por ejemplo, para facilitar la retirada del molde. La Figura 1A representa esquematicamente en vista lateral una microproyeccion individual 10 de este tipo. Como se puede observar en la figura, el diametro D de la interseccion de la microproyeccion con un plano paralelo a la base 12 disminuye a medida que el plano se aleja de la base 12 y se acerca a la punta 14 de la microproyeccion. Ademas, este diametro disminuye mas rapidamente cerca de la base 12, en la zona basal 16, de lo que lo hace mas lejos de la base, en la zona 18 de la punta.

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Cuando las microproyecciones son mas gruesas hacia la base, una parte de la microproyeccion adyacente a la base, que se denomina en el presente documento region "basal" o una region de "cimiento", identificada aproximadamente por la zona 16 en la Figura 1A, se disena para no penetrar la piel en virtud de su diametro creciente. Como se ha indicado anteriormente, la microproyeccion de la Figura 1A es meramente a modo de ejemplo, y se ilustra otro ejemplo de una microproyeccion individual en un conjunto en la Figura 1B.

El numero de microproyecciones en un conjunto es preferentemente al menos aproximadamente 100, al menos aproximadamente 500, al menos aproximadamente 1000, al menos aproximadamente 1400, al menos aproximadamente 1600, o al menos aproximadamente 2000. La densidad de area de microproyecciones, dado su pequeno tamano, puede no ser particularmente alta, pero por ejemplo el numero de microproyecciones por cm2 puede ser al menos aproximadamente 50, al menos aproximadamente 250, al menos aproximadamente 500, al menos aproximadamente 750, al menos aproximadamente 1000, o al menos aproximadamente 1500.

B. Metodos de fabricacion

En un primer aspecto, se proporciona un metodo de formacion de un conjunto de microproyeccion, tal como los que se han descrito anteriormente. En una realizacion del metodo y por referencia a las Figuras, 2A-2D, se proporciona un molde 20 del conjunto de microproyeccion, comprendiendo el molde una pluralidad de cavidades que definen microprotrusiones o microproyecciones individuales en el conjunto. Las microproyecciones no son visibles en las Figuras 2A-2D debido a su pequeno tamano. Cada cavidad en la pluralidad de cavidades tiene una abertura y una superficie interna con dimensiones, por ejemplo, diametro y altura, seleccionadas para proporcionar una configuracion de microproyeccion deseada. Por ejemplo, las dimensiones internas de las cavidades tienen una cierta altura (o longitud) y diametro, que pueden variar a lo largo de la altura como es evidente a partir de las microproyecciones a modo de ejemplo que se muestran en las Figuras 1A-1B. Las dimensiones de las cavidades de microproyeccion en el molde correlacionan exacta o aproximadamente, dependiendo de diversos factores en el proceso de fabricacion, con las dimensiones de las microproyecciones acabadas en el conjunto. El experto en la materia entendera que las cavidades en el molde pueden ser todas iguales o pueden diferir, para producir un conjunto de microproyeccion con las microproyecciones iguales o diferentes.

A continuacion, y continuando la referencia a las Figuras 2A-2B, una cantidad de una formulacion 22, que se describe con mayor detalle posteriormente, se coloca sobre un sustrato 24. Una capa de liberacion opcional, tal como una lamina de silicona, se puede colocar sobre una superficie superior 26 del sustrato para facilitar la retirada del molde desde el sustrato. El sustrato puede incluir un hueco o depresion para retener la formulacion (no se muestra en la Figura 2A). El sustrato tambien puede comprender opcionalmente canales para purgar un gas. El molde se coloca en contacto directo con la formulacion 22, en el que el molde se orienta de un modo tal que la abertura de cada cavidad esta en contacto con la formulacion. Con respecto al dibujo de la Figura 2A, la abertura de cada cavidad esta orientada hacia abajo. Es decir, el molde tiene una superficie superior 28 con lo cual se disponen las aberturas a cada cavidad en la pluralidad de cavidades que definen cada microproyeccion en el conjunto, y la superficie superior se coloca directamente en contacto con la formulacion, de un modo tal que la formulacion puede llenar cada cavidad. A continuacion, la formulacion se mueve o se transfiere a las cavidades mediante medios adecuados. En una realizacion, el medio adecuado es presion, indicada en la Figura 2C mediante flechas, tal como la flecha 30. El molde, la formulacion, y el sustrato se colocan, por ejemplo, en una camara de presion, con el fin de transferir la formulacion a cada cavidad. El experto en la materia entendera que son posibles y se contemplan alternativas a aplicar presion al molde. Por ejemplo, un molde disenado con un puerto sobre la superficie opuesta a la superficie superior 28 o sobre una pared lateral puede proporcionar union a un vado para conseguir el movimiento de la formulacion a la pluralidad de cavidades. Despues del transporte de la formulacion a las cavidades en la pluralidad, el molde se desprende fuera de la formulacion de precursor y el sustrato de un modo tal que el precursor se retiene en las cavidades del molde, como se representa en la Figura 2D.

El molde se puede fabricar mediante una amplia diversidad de tecnicas disponibles discutidas en la bibliograffa. Por ejemplo, se puede fabricar mediante las tecnicas que se discuten en el documento de Solicitud de Patente Publicada de Estados Unidos n.° 2008/0269685. El molde puede estar hecho de materiales polimericos sinteticos que tienen las propiedades mecanicas adecuadas. El molde debena tener unas propiedades mecanicas tales que la etapa de desprendimiento del molde se pueda llevar a cabo sin dificultad y sin danar el molde. De ese modo, en una realizacion, el molde se fabrica a partir de un material flexible polimerico y en una realizacion es hidrofobo, y en otra realizacion es permeable a oxfgeno, nitrogeno y/o dioxido de carbono.

El sustrato puede ser plano sobre la superficie orientada al molde. Alternativamente, y como se ha mencionado anteriormente, puede ser una depresion o cavidad adecuada para alojar la formulacion de precursor de microproyeccion. El sustrato se puede hacer, por ejemplo, del mismo material del que esta hecho el propio molde. El sustrato tambien se puede hacer de una resina de polfmero, tal como politetrafluoroetileno, polietileno o polipropileno, o un metal, tal como acero inoxidable, titanio u oro. En una realizacion, se coloca un material en la depresion que retiene la formulacion, particularmente en el caso en el que el molde y el sustrato son de naturaleza hidrofoba. Un material colocado en la cavidad ayuda a la distribucion de la formulacion en la depresion y la humectacion de la interfase entre el sustrato y al molde. Un material a modo de ejemplo es un material no tejido o un

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tejido enmallado no tejido, tal como una poliolefina no tejida disponible con el nombre comercial DELNET® (Delstar Technologies, Inc., Middletown, DE).

La colocacion de la formulacion de precursor se puede realizar por dispensacion, por ejemplo con una pipeta, de una gota individual de la formulacion de precursor sobre el sustrato. Alternativamente, se puede dispensar mas de una gota sobre el sustrato, donde las multiples gotas se pueden disponer en un patron deseable. Si existe una depresion en el sustrato, la gota o gotas se pueden colocar en esa depresion.

La etapa de aplicar presion al molde, la formulacion, y el sustrato se puede llevar a cabo, por ejemplo, colocando los componentes en una camara de presion. Se pueden emplear presiones mayores de 0,2 atmosferas o mayores de 0,5 atmosferas o mayores de 1 atmosfera por encima de la presion atmosferica.

Un fin de la etapa de aplicar presion es reemplazar el aire en las cavidades de molde con formulacion de precursor. Existen otras tecnicas disponibles que ayudan a conseguir este objetivo, tales como las que se exponen en el documento de Solicitud de Patente Publicada n.° 2008/0269685. Puede ser deseable emplear una o mas de estas tecnicas alternativas y no llevar a cabo la etapa de aplicacion de presion.

El Ejemplo 3 posterior proporciona detalles de la fabricacion de los conjuntos de microproyeccion de acuerdo con los procesos que se describen en las Figuras 2A-2D. En el ejemplo de trabajo, se proporciono un sustrato de metal con una lamina de liberacion de silicona. Se aplico una formulacion de polfmero y fluorescema a la lamina de silicona, y el molde del conjunto de microproyeccion se coloco sobre la formulacion, con las aberturas de cada cavidad en el molde en contacto directo con la formulacion. El montaje sustrato-lamina de silicona-formulacion-molde se coloco en una camara de presion para transferir la formulacion a las cavidades del molde. Despues de la retirada de la presion, el molde se retiro del montaje por elevacion de un borde del molde y elevacion de un modo tal que el molde se desacoplara gradualmente del montaje. Los microconjuntos preparados de acuerdo con el Ejemplo 3 se inspeccionaron opticamente, y los resultados se muestran en las Figuras 3A-3B. En la Figura 3A, se observa una micrograffa de la superficie superior del conjunto de microproyeccion, donde la formulacion humeda es visible en virtud del colorante de fluorescema. Despues del proceso de llenado de las cavidades de microproyeccion en el molde, la formulacion esta basica o completamente dispuesta dentro de las cavidades y basicamente no hay ninguna cantidad de formulacion sobre la superficie del molde entre las aberturas de la cavidad. La Figura 3B muestra el microconjunto despues del secado de la formulacion y la perdida del disolvente de la formulacion, estando depositado el colorante de fluorescema, representativo de un farmaco activo, en la region de la punta de cada microproyeccion.

La Figura 4 es una interpretacion artfstica de una micrograffa optica de las microproyecciones en el conjunto, conjunto fabricado a partir del proceso que se detalla en las Figuras 2A-2D. Como se observa, el agente activo esta dispuesto principalmente en la punta de cada microproyeccion, y la region basal de mayor diametro de cada microproyeccion (zona basal 16 en la Figura 1A) esta sustancialmente exenta de agente activo.

El experto en la materia entendera que se puede invertir la orientacion de los componentes en el proceso, y cambiarse el componente que se retira, o se "desprende". Por ejemplo, se puede colocar una cantidad de formulacion sobre un molde que tenga las cavidades orientadas hacia arriba. Se coloca un sustrato o lamina flexible de material encima de la formulacion. Se aplica presion a la lamina, la formulacion de precursor, y al molde. El sustrato se desprende o se desacopla de la formulacion y el molde de un modo tal que se retenga la formulacion en las cavidades del molde.

Independientemente de si se desprende en molde o el sustrato, la etapa de desprendimientos se puede conseguir, por ejemplo, manualmente con los dedos o mas habitualmente con una herramienta, tal como unas pinzas. Al llevar a cabo el desprendimiento manualmente, puede ser deseable observar que la formulacion de precursor de microproyeccion este entre el molde y el sustrato y ver que retrocede suavemente a medida que transcurre la operacion de desprendimiento. Tambien puede ser deseable intentar mantener una velocidad de desprendimiento mas o menos constante. La velocidad se puede medir, por ejemplo, en milfmetros por minuto. Se pueden emplear velocidades entre aproximadamente 1-l0 mm/minuto, aproximadamente 3-7 mm/minuto, o aproximadamente 46 mm/minuto. Tambien puede ser deseable intentar mantener un angulo mas o menos constante entre el molde a medida que se desprende y el sustrato. Es preferente que la velocidad de desprendimiento se controle de un modo tal que solo se deje formulacion de microproyeccion en las cavidades del molde. Preferentemente, ninguna cantidad de la formulacion debena formar un puente entre las cavidades o formar gotas en la superficie del molde fuera de las cavidades.

Alternativamente, se puede emplear un mecanismo para desprender el molde fuera de la disposicion de componentes. Por ejemplo, el mecanismo puede ser un cilindro que se enrolla sobre el sustrato a una velocidad controlable, con el molde unido al cilindro con las cavidades del molde orientandose hacia el exterior. El molde puede estar unido, por ejemplo, con un adhesivo. Alternativamente, la union puede tener lugar usando un modo de union mecanico, por ejemplo protrusiones que se ajusten a traves de orificios en el molde o un mecanismo que sujete sobre un extremo del molde.

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La Figura 5 representa esquematicamente un mecanismo para desprender un molde 30 de un sustrato 32 que tiene un deposito 34 poco profundo en el que se retiene el precursor de microproyeccion. Despues de dispersar una formulacion en el deposito, se coloca el molde de microaguja sobre el deposito llenado con formulacion, de un modo tal que las aberturas de cada cavidad en el molde sean accesibles a la formulacion. La totalidad o una parte de la formulacion se transfieren a las cavidades del molde, por ejemplo, colocando el sustrato, la formulacion y el molde en un vaso de presion. A continuacion, y por referencia espedfica a la Figura 5 para esta parte del proceso, el sustrato, la formulacion, y el molde se ponen en contacto con un cilindro 36. El cilindro se puede girar mediante un mecanismo 38 que se puede basar, por ejemplo, en una transmision de rosca o un motor de pasos que acciona una polea (no se muestra) o mediante cualquier otro modo de producir un movimiento lineal del cilindro paralelo al sustrato, dejando que el cilindro gire libremente. A medida que el cilindro 36 y el molde 30 giran uno con respecto al otro, el molde se desprende del sustrato 32. A velocidades adecuadas y con cavidades de molde y propiedades de material de formulacion adecuadas (por ejemplo, viscosidad, tension superficial), las cavidades en el molde que definen cada microproyeccion en el conjunto retienen la formulacion que, tras la retirada del disolvente de la formulacion, produce un material solido en cada cavidad que es una microproyeccion. Con respecto a los medios para transferir la formulacion desde el deposito a las cavidades del molde, se ha de entender que la presion es meramente a modo de ejemplo. Otro enfoque es aplicar un vado al cilindro de un modo tal que el molde se desprenda del sustrato, el fluido de formulacion se extraiga en cada cavidad.

El mecanismo 38 puede operar bajo el control de un motor electrico, que a su vez puede operar bajo el control de un ordenador o microprocesador. El uso de motores electricos para producir movimiento controlado durante un intervalo corto se conoce bien en la tecnica, asf como el control por ordenador de motores electricos. Se puede hacer referencia, por ejemplo, a H. Wayne Beaty & James L. Kirtley, Electric Motor Handbook (McGraw-Hill 1998). El experto en la materia entendera que alternativamente es posible mover el sustrato mientras el cilindro permanece estacionario, para conseguir el movimiento del molde fuera del deposito y su formulacion.

Cuando se desprende el molde fuera de la formulacion, la velocidad de desprendimiento tendra influencia en si se retiene la formulacion de precursor de microproyeccion en las cavidades del molde. Una mayor velocidad de desprendimiento, es decir, una mayor velocidad de retirada del molde de la formulacion, tiende a dejar gotas de formulacion residuales sobre la superficie del molde, mientras que una velocidad de retirada menor puede sacar toda la formulacion de precursor de las cavidades en el molde. De ese modo, en una realizacion, la retirada del molde del contacto con la formulacion se selecciona para conseguir la velocidad de retirada mas rapida con una retencion de formulacion optima y fiable en las cavidades del molde. De ese modo, por ejemplo, se podnan probar una diversidad de velocidades y ver las que producen una retencion fiable para ese precursor particular y la geometna de la cavidad. La retencion de la formulacion en las cavidades de un molde se puede determinar, por ejemplo, examinando las cavidades al microscopio para ver si aparecen llenadas parcialmente, como se representa en la Figura 3B.

Sin el deseo de quedar unidos a teona alguna, se cree que el proceso de retencion de la formulacion de precursor de microproyeccion en las cavidades del molde se produce debido a que, dado que el molde se desprende del sustrato, se retiran gotas de precursor de la masa de la formulacion de precursor y permanecen en las cavidades. Una hipotesis es que la retirada del precursor se produce debido a la tension local creada por el desprendimiento. La tension se crea mediante las fuerzas opuestas de cohesion del lfquido a medida que se mueve fuera de la cavidad y la afinidad del lfquido por la cavidad. El hecho de que se produzca esta retirada es inesperado, como lo es el hecho de que el proceso sea razonablemente reproducible y que las gotas que se retienen en cada una de las cavidades tengan aproximadamente el mismo volumen.

El Ejemplo 4 describe otro ejemplo de fabricacion de un conjunto de microproyeccion de acuerdo con el proceso que se describe en las Figuras 2A-2D. En este ejemplo, un conjunto de microproyeccion fabricado a partir de una formulacion de precursor de dextrano, sorbitol, el agente activo hormona paratiroidea humana, en tampon de histidina. Despues de la transferencia de la formulacion a las cavidades del molde, el molde se puso en contacto con un miembro movil, tal como un cilindro como se representa en la Figura 5. El cilindro se hizo girar para desacoplar el molde del deposito, donde la etapa desacoplar el molde del sustrato se llevo a cabo en condiciones tales que la formulacion transferida a las cavidades del molde se retuvo en las cavidades, y la cantidad de formulacion a traves de la pluralidad de cavidades fue basicamente uniforme. En este ejemplo, la uniformidad de la formulacion retenida en las cavidades del molde se midio cuantificando la cantidad de agente activo (hormona paratiroidea humana) en cada microproyeccion. El coeficiente de variacion en la cantidad de agente activo a traves del conjunto de microproyecciones fue de un 10 %. En otras realizaciones, es preferente un coeficiente de variacion de menos de un 10 %, mas preferentemente de menos de un 7 %, y aun mas preferentemente de menos de aproximadamente un 5 % o un 3 %.

Como se ha indicado anteriormente, las microproyecciones pueden tener, en algunos casos, una forma que se hace mas gruesa hacia la base, por ejemplo microproyecciones que tienen aproximadamente el aspecto de un embudo, o mas generalmente donde el diametro de las microproyecciones crece mas rapido que linealmente con el aumento de la distancia al extremo distal de la microproyeccion. Esta forma de microproyeccion se representa en la Figura 1A, donde la region basal 16 tambien se denomina "embudo" debido a su forma de tipo embudo. Para moldes disenados para producir tales microproyecciones de tipo aproximadamente embudo, puede existir una tendencia del extremo

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mas delgado (distal) del embudo de retener precursor de microproyeccion mientras que el extremo mas grueso (proximal) del embudo no lo retiene.

Generalmente, es deseable que la cantidad de formulacion de precursor de microproyeccion retenida en las cavidades sea aproximadamente la misma de una cavidad a la siguiente. Por ejemplo, puede ser deseable que la desviacion tipica del volumen de la formulacion de precursor sea menos de aproximadamente un 30 %, menos de aproximadamente un 20 %, menos de aproximadamente un 10 %, menos de aproximadamente un 5 %, o menos de aproximadamente un 2 % del volumen medio de la formulacion de precursor en las cavidades que retienen la formulacion de precursor. Una forma alternativa de medir la variacion en la cantidad de formulacion de precursor de una cavidad a la siguiente en un conjunto es en terminos de la cantidad de agente activo para las realizaciones donde la formulacion de precursor de microproyeccion contiene un agente activo. Por ejemplo, puede ser deseable que la desviacion tfpica de los volumenes o pesos de agente activo en la pluralidad de las cavidades en el molde del conjunto de microproyeccion sea menos de aproximadamente un 30 %, menos de aproximadamente un 20 %, menos de aproximadamente un 10 %, menos de aproximadamente un 5 %, o menos de aproximadamente un 2 % del volumen o el peso medio de agente activo en las cavidades que retienen la formulacion de precursor.

En otra realizacion, se proporciona otro metodo de formacion de un conjunto de microproyeccion. En esta realizacion, se aseguran uno o mas moldes para una microaguja o un conjunto de microproyeccion en un elemento fijo formado por dos miembros, o mitades, que se acoplan de una forma tal que forman un deposito en el que se disponen los uno o mas moldes. Se proporciona un puerto a traves del elemento fijo y en el interior del deposito, a traves del que se puede introducir un material de formulacion para la formacion de las microproyecciones en el conjunto. Un segundo puerto o respiradero permite el paso del aire que se desplaza tras la introduccion de la formulacion. El deposito se llena con formulacion en una cantidad suficiente para llenar la pluralidad de cavidades en el molde. El elemento fijo se expone a continuacion a medios que transfieren la formulacion desde el deposito a las pluralidades en el molde, incluyendo los medios presion o vado o una combinacion de presion y vado. Cualquier formulacion que no se transfiera a las cavidades en el molde se retira a continuacion de forma controlable de un modo tal que la formulacion transferida a las cavidades se retenga en las cavidades, mientras se retira el exceso de formulacion. De forma deseable ninguna cantidad de la formulacion forma un puente entre cavidades o se forman gotas sobre la superficie del molde fuera de las cavidades.

Un aparato a modo de ejemplo adecuado para poner en practica esta realizacion se muestra esquematicamente en las Figuras 6A-6B. En la vista en seccion transversal del elemento fijo 40 que se muestra en la Figura 6A, se mantiene un molde 42 entre el primer y el segundo miembros, 44, 46, del elemento fijo. El primer miembro 44 tiene una superficie interior 48 y el segundo miembro 46 tiene una superficie interior 50. Uno de los miembros, en esta realizacion el segundo miembro, tiene una cavidad 52 definida por un suelo ahuecado 54 y paredes laterales 56, 58. El primer y el segundo puertos, 60, 62, proporcionan comunicacion fluida entre el entorno externo y la cavidad 52. Como se describira posteriormente, los puertos, 60, 62, se usan durante el proceso de purgado y presurizacion con un gas, para la introduccion de la formulacion, y/o para la evacuacion de la cavidad (por ejemplo, evacuacion al vado o evacuacion presurizada). La Figura 6B es una vista superior en seccion transversal del segundo miembro 46 tomada a lo largo de la lmea B-B en la Figura 6A, que muestra la cavidad 52 y los puertos, 60, 62.

En uso, uno o mas moldes de microproyeccion que tienen aberturas a una pluralidad de cavidades que definen microproyecciones individuales en el conjunto se colocan en el deposito formado cuando se ponen en contacto el primer y el segundo miembros del elemento fijo. En la Figura 6A, un molde individual 42 se asegura adyacente a la cavidad 52, donde las aberturas a la pluralidad de cavidades que definen las microproyecciones del conjunto estan en comunicacion fluida con la cavidad 52, tambien denominado deposito cuando los dos miembros estan en una disposicion de acoplamiento. En una realizacion, el deposito tiene una profundidad de al menos 0,05 mil (0,00127 mm), mas preferentemente al menos 0,1 mil (0,00254 mm). Las aberturas de microproyeccion y las cavidades no se muestran en la Figura 6A debido a su pequeno tamano. La formulacion se introduce a traves de uno de los puertos, tal como el puerto 62, y se purga aire o gas en la cavidad a traves del otro puerto, tal como el puerto 60. Se introduce suficiente formulacion en la cavidad para cubrir la pluralidad de aberturas en las cavidades en el molde. Alternativamente, sena posible dejar algunas cavidades de molde sin cubrir, por ejemplo con el fin de producir un conjunto mas pequeno que el mayor que el molde puede producir. A continuacion se cierra uno de los puertos, por ejemplo mediante una valvula adecuada, y el deposito se presurizada hasta lo deseado. Se puede unir un manometro en el miembro 46 para medir la presion en la cavidad 52. La presurizacion del deposito se puede conseguir introduciendo formulacion adicional en el deposito despues de cerrar uno de los puertos o, alternativamente, se puede introducir un gas presurizado a traves de uno de los puertos hasta que se alcance la presion deseada en el deposito. De forma deseable las cavidades del molde permaneceran cubiertas con la formulacion mientras se presurizada el deposito. A continuacion, la formulacion que no se transfiere a las cavidades del molde se retira del deposito de elemento fijo de una forma tal que retenga dentro de las cavidades de molde la formulacion que se transfiere a las cavidades de molde. La formulacion se puede retirar por presion en un puerto, vado en un puerto, o una combinacion de vado y presion en el primer y el segundo puertos.

El elemento fijo se puede proporcionar con un mecanismo que permita que los miembros 44, 46 se separen y se pongan conjuntamente usando una palanca u otro medio conveniente de manipulacion. El mecanismo se puede disenar de un modo tal que en una posicion cerrada los dos miembros se presionen conjuntamente. Puede ser

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deseable colocar el molde de conjunto de microproyeccion en el miembro con la cavidad cuando el miembro esta en posicion horizontal, y a continuacion tener el miembro que mantiene el molde movible en posicion vertical para acoplarse con el miembro opuesto para formar el elemento fijo con el molde asegurado entre los mismos.

En otra realizacion, el elemento fijo se disena para contener mas de un molde de conjunto de microproyeccion, donde los moldes pueden estar uno al lado de otro con las aberturas en las cavidades orientadas al deposito o donde los moldes se situan en una disposicion opuesta, de un modo tal que las aberturas a las cavidades estan orientadas entre sf

Al igual que el metodo que se ha descrito anteriormente con respecto a las Figuras 2A-2D, como tambien con el uso del metodo basado en el elemento fijo que se representa en las Figuras 6A-6B se cree que el proceso de retencion de la formulacion de precursor de microproyeccion en las cavidades de molde se produce debido a que, a medida que el nivel de formulacion de precursor cae, se retiran pequenas gotas de formulacion de precursor de la masa de la formulacion de precursor y permanecen en las cavidades. El hecho de que se produzca esta retirada es inesperado, como lo es el hecho de que el proceso sea reproducible y que las gotas que se retienen en las pluralidades de cavidades en el molde de conjunto de microproyeccion tengan un volumen uniforme de formulacion a traves de la pluralidad de cavidades, segun se mide mediante el volumen de formacion o mediante el peso de ingrediente activo en cada cavidad. Un volumen "uniforme" de formulacion indica que una desviacion tfpica de los volumenes o los pesos de agente activo en la pluralidad de cavidades en el molde de conjunto de microproyeccion sea menos de aproximadamente un 30 %, menos de aproximadamente un 20 %, menos de aproximadamente un 10 %, menos de aproximadamente un 5 %, o menos de aproximadamente un 2 % del volumen medio de formulacion o del peso de agente activo en las cavidades que retienen la formulacion de precursor.

Una variable que puede afectar en algunas circunstancias a si la formulacion de precursor de microproyeccion permanece en las cavidades es la velocidad a la que se retira la formulacion desde el deposito, despues de la etapa de transferir la formulacion a las cavidades, por ejemplo mediante presurizacion del deposito en el elemento fijo. Se selecciona una velocidad controlada de retirada de la formulacion que permanece en el deposito despues de la transferencia de la formulacion a la pluralidad de cavidades, de modo que la formulacion que no se transfiere a una cavidad y permanece en el deposito se retira mientras se retiene dentro de cada cavidad la cantidad completa de formulacion que se transfirio a la cavidad de microproyeccion que formara la zona de la punta de cada microproyeccion. Generalmente es adecuada una velocidad de retirada entre aproximadamente 0,1 cm/min y aproximadamente 10 cm/min, o entre aproximadamente 0,2 cm/min y 2 cm/min, o entre aproximadamente 0,5 cm/min y 1,5 cm/min. La velocidad de llenado puede ser mayor en comparacion con la velocidad de retirada.

Alternativamente puede ser conveniente medir o controlar la velocidad de retirada en ml/min en lugar de en cm/min. Como se puede observar, cuando el molde no es rectangular, por ejemplo, cuando tiene una forma circular, la velocidad de retirada en cm/min podna no ser proporcional a la velocidad de retirada en ml/min. Para un deposito circular, la velocidad de retirada en ml/min puede variar, por ejemplo, iniciandose lentamente (en la parte superior del deposito), aumentando hasta que el nivel alcance la mitad del deposito, y disminuyendo hasta que se alcance el fondo del deposito.

Se podna esperar que las velocidades deseables de retirada de precursor para retencion dependan al menos en cierta medida de la viscosidad y la tension superficial del precursor de microproyeccion y de su angulo de contacto con el material de molde. Tambien se podna esperar que las velocidades deseables dependan al menos en cierta medida del tamano y la forma de las cavidades de molde y del tamano y la forma del deposito. Por ejemplo, las cavidades de molde bastante grandes podnan no ser adecuadas para retener ciertos precursores de microproyeccion a cualquier velocidad de retirada.

Los Ejemplos 5-6 posteriores detallan dos ejemplos de trabajo del metodo de fabricacion que usa un elemento fijo como se muestra en las Figuras 6A-6B, donde se fabricaron conjuntos de microproyeccion. Por referencia al Ejemplo 6, un conjunto de microproyeccion fabricado a partir de una formulacion de precursor de dextrano, sorbitol, el agente activo hormona paratiroidea humana, en tampon de histidina. Se uso un elemento fijo dimensionado para retencion de un molde de conjunto de microproyeccion en el deposito de elemento fijo (denominado en el Ejemplo 6 deposito "uno arriba"), y un elemento fijo dimensionado para retencion de dos moldes de conjunto de microproyeccion en el deposito de elemento fijo usado (denominado en el Ejemplo 6 deposito "dos arriba"). Despues de la colocacion de los uno o dos moldes en el elemento fijo, la formulacion se introdujo en el deposito a traves de uno de los puertos, con el segundo puerto en una posicion abierta para purgar aire en el deposito. A continuacion, el segundo puerto se cierra y la presion en el deposito se aumenta para transferir la formulacion a la pluralidad de cavidades en el molde o moldes. La formulacion que permanece en el deposito despues de la etapa de transferencia se retira a continuacion del deposito a una velocidad que retiene la formulacion transferida en las cavidades del molde o moldes. El disolvente en la formulacion en las cantidades de molde se retiro, por ejemplo, colocando el elemento fijo que contema los moldes en un horno. El proceso se repitio a continuacion con una segunda formulacion introducida en el deposito del elemento fijo, para formar un conjunto de microproyeccion en el que la region basal de cada microproyeccion tema una composicion que difena de la composicion de la region de la punta.

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Al igual que con el metodo de desprendimiento de las Figuras 2A-2D, as^ como con el uso de un elemento fijo como se representa en las Figuras 6A-6B, se puede usar un molde con cavidades con forma aproximada de embudo.

El molde se puede fabricar mediante una gran diversidad de tecnicas disponibles que se discuten en la bibliograffa. Por ejemplo, puede estar hecho mediante las tecnicas que se discuten en el documento de Solicitud de Patente Publicada de Estados Unidos n.° 2008/0269685. El molde puede estar hecho de materiales polimericos sinteticos que tienen propiedades mecanicas adecuadas. En general, se pueden usar moldes en esta realizacion que son menos flexibles que los que se usan en la realizacion de desprendimiento.

El experto en la materia entendera que la retirada de la formulacion del elemento fijo y/o la introduccion de la formulacion en el elemento fijo se puede conseguir mediante cualquier numero de tecnicas, que incluyen pero no se limitan a, manualmente o bajo el control de un microprocesador para asegurar una velocidad uniforme de movimiento del fluido. En los ejemplos de trabajo, se uso una bomba de jeringa controlada por microprocesador para introducir fluido en el elemento fijo, y para retirar fluido del mismo.

En cualquiera de las dos realizaciones que se han discutido anteriormente en el presente documento, una vez se han llenado las cavidades de molde, parcial o completamente con formulacion de precursor de microproyeccion, se secan para retirar el disolvente de la formulacion, para producir un material solido en cada cavidad que forma las microproyecciones en el conjunto. Se pueden aplicar una o mas capas adicionales de formulacion sobre la primera, preferentemente despues de que se haya secado, mediante un metodo igual o diferente. Los Ejemplos 1 y 2 ilustran conjuntamente este enfoque. Como entendera el experto en la materia, la formulacion adicional puede tener una composicion diferente de la primera, donde la primera formulacion contiene por lo general el agente activo de un modo tal que el agente se disponga en la punta de las microproyecciones, y la segunda formulacion carece del agente activo y forma la region basal de las microproyecciones que no puede penetrar el stratum corneum.

El experto en la materia entendera que las diversas etapas en los metodos que se describen en el presente documento, que implican dispensar formulacion, poner en contacto formulacion con el molde, transferir formulacion a las cavidades del molde, y desacoplar el molde de la formulacion o retirar la formulacion de un elemento fijo, individual o colectivamente, se pueden llevar a cabo a temperaturas iguales o diferentes. En una realizacion todas las etapas se llevan a cabo a temperatura ambiente, por ejemplo, entre aproximadamente 23-25 °C para recuperar la formulacion que no esta retenida en la pluralidad de cavidades.

El experto en la materia entendera que los metodos que se describen en el presente documento pueden incluir la etapa de recuperar la formulacion que no esta retenida en la pluralidad de cavidades en el molde. Por ejemplo, despues de retirar la formulacion del elemento fijo, la formulacion se puede recuperar para reutilizar o para analisis. Por ejemplo, despues de desacoplar el molde de la formulacion depositada sobre el sustrato, la formulacion se puede recuperar para reutilizar o analisis. En una realizacion, se recupera al menos aproximadamente un 90 %, preferentemente un 95 %, de la formulacion no retenida en la pluralidad de las cavidades.

En los metodos que se han descrito anteriormente, la transferencia de la formulacion a la pluralidad de cavidades se consigue mediante una etapa de transferencia, que puede ser, por ejemplo, presurizando la formulacion, pretendiendo que la formulacion se introduzca en el deposito del elemento fijo o la formulacion que esta depositada sobre un sustrato (en cuyo caso el sustrato-formulacion y el molde se presurizan generalmente de forma conjunta). El experto en la materia puede seleccionar una presion que sea adecuada para conseguir la transferencia de la formulacion a las cavidades del molde, y entendera las variables que grnan la seleccion de la presion optima, que incluyen pero no se limitan a volumen, propiedades de la formulacion, area, y temperatura. En una realizacion, se selecciona una presion en el intervalo de 0,1-1 atmosferas (10,1-101 kPa), y en realizaciones preferentes, se aplica una presion de al menos aproximadamente 0,1 atm (10,1 kPa), al menos aproximadamente 0,5 atm (50,7 kPa), o al menos aproximadamente 1,0 atm (101 kPa).

D. Formulaciones para las microproyecciones y el conjunto de microproyeccion

Se puede insertar una amplia diversidad de formulaciones en las cavidades de molde mediante los procesos que se describen en el presente documento. La formulacion tambien se denomina "formulacion de precursor" para reflejar que la formulacion introducida en las cavidades de molde es un precursor del material solido resultante del que estan hechas las microproyecciones y/o el conjunto de microproyeccion. Por lo general, el disolvente de la formulacion de precursor se retira para producir el material final del que esta hecho el microconjunto aunque, sin embargo, se puede disenar que se produzcan otros cambios en la formulacion de precursor (tales como reticulacion o reacciones) o se produzcan por casualidad.

En general las formulaciones de precursor comprenden al menos un agente activo (por ejemplo, farmaco o agente terapeutico), al menos un disolvente, un polfmero opcional, y otros ingredientes opcionales tales como azucares, antioxidantes, conservantes, etc. Alternativamente, las formulaciones de precursor comprenden al menos un polfmero, al menos un disolvente, un agente activo opcional, y otros ingredientes opcionales tales como azucares, antioxidantes, conservantes, etc. Opcionalmente se podnan anadir tensioactivos para ajustar la tension superficial.

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El documento de Solicitud de Patente Publicada de Estados Unidos n.° 2008/0269685 desvela una amplia diversidad de materiales adecuados para las formulaciones de precursor.

Los agentes terapeuticos activos que se pueden colocar en las microproyecciones mediante los metodos que se describen en el presente documento incluyen, pero no se limitan a, farmacos de molecula pequena, protemas, peptidos, acidos nucleicos, y similares. En los Ejemplos de trabajo 5 y 6 posteriores, se uso hormona paratiroidea humana (hPTH) como agente activo a modo de ejemplo. Las vacunas son otro agente terapeutico a modo de ejemplo que se puede incluir en la formulacion para la dispensacion en las microproyecciones del conjunto. El documento de Solicitud de Patente Publicada de Estados Unidos n.° 2008/0269685 desvela una amplia diversidad de sustancias activas adecuadas.

La formulacion de precursor de microproyeccion puede comprender uno o mas polfmeros. Los polfmeros son preferentemente biocompatibles. En otra realizacion, los polfmeros son preferentemente biodegradables. Mediante este termino se pretende que un polfmero se degrade en las condiciones esperadas de uso in vivo (por ejemplo, insercion en la piel), independientemente del mecanismo de biodegradacion. Algunos mecanismos de biodegradacion a modo de ejemplo incluyen disgregacion, dispersion, disolucion, erosion, hidrolisis, y degradacion enzimatica.

Algunos polfmeros a modo de ejemplo adecuados para su uso en formulaciones de precursor de microproyeccion incluyen, pero no se limitan a, poli(acido lactico), poli(acido glicolico), poli(acido lactico-co-acido glicolico), poli(caprolactona), polianlddridos, poliaminas, poliesteramidas, poliortoesteres, polidioxanonas, poliacetales, policetales, policarbonatos, polifosfoesteres, poliortocarbonatos, polifosfazenos, poli(acido malico), poli(aminoacidos), hidroxicelulosa, polifosfoesteres, dextrano, tetraalmidon, polisacaridos naturales o modificados, hialouronidasa, quitina, y copolfmeros, terpoUmeros y las mezclas de estos. En una realizacion, la formulacion comprende dextrano, y es preferentemente un dextrano con un peso molecular entre aproximadamente 20.000100.000 Daltons, mas preferentemente entre 40.000-80.000 Daltons, y aun mas preferentemente entre 40.00070.000 Daltons. En ejemplos espedficos, se usa dextrano con un peso molecular de 70.000 Daltons (70 kDa).

La formulacion de precursor de microproyeccion tambien puede comprender uno o mas azucares. Algunos azucares a modo de ejemplo que se pueden incluir en un conjunto de microproyeccion incluyen dextrosa, fructosa, galactosa, maltosa, maltulosa, iso-maltulosa, manosa, lactosa, lactulosa, sacarosa, y trehalosa. Tambien se pueden emplear alcoholes azucares, por ejemplo lactitol, maltitol, sorbitol, y manitol. Tambien se pueden usar de forma ventajosa ciclodextrinas en los conjuntos de microproyeccion, por ejemplo a, p, y y ciclodextrinas, por ejemplo hidroxipropil-p- ciclodextrina y metil-p-ciclodextrina. Los azucares y los alcoholes azucares tambien pueden ser utiles en la estabilizacion de ciertos agentes activos (por ejemplo, protemas) y en la modificacion de las propiedades mecanicas de las microproyecciones mediante un efecto de tipo plastificante. En una realizacion, el sorbitol es un azucar incluido en la formulacion, y en otra realizacion, la formulacion comprende sorbitol y un dextrano.

La biodegradabilidad de un conjunto de microproyeccion se puede facilitar por inclusion de polfmeros hinchables en agua tales como PVP reticulada, almidon glicolato sodico, celulosas, gomas naturales y sinteticas, o alginatos.

Los conjuntos de microproyeccion son adecuados para una amplia diversidad de sustancias farmacologicas. Algunos agentes activos adecuados que se pueden administrar incluyen las clases amplias de compuestos tales como, a modo de ilustracion y no de limitacion: agentes analepticos; agentes analgesicos; agentes antiartnticos; agentes anticancengenos, incluyendo agentes antineoplasicos; anticolinergicos; anticonvulsivos; antidepresivos; agentes antidiabeticos; antidiarreicos; antihelmmticos; antihistammicos; agentes antihiperlipidemicos; agentes antihipertensivos; agentes antiinfecciosos tales como antibioticos, agentes antifungicos, agentes antivirales y compuestos bacteriostaticos y bactericidas; agentes antiinflamatorios; preparaciones antimigranas; antiemeticos; farmacos antiparkinsonianos; antipruriginosos; antipsicoticos; antipireticos; antiespasmodicos; agentes antituberculosos; agentes antiulcerosos; ansiolfticos; supresores del apetito; farmacos para trastorno por deficit de atencion y trastorno por deficit de atencion e hiperactividad; preparaciones cardiovasculares incluyendo bloqueantes de los canales de calcio, agentes antianginosos, agentes para el sistema nervioso central, beta-bloqueantes y agentes antianitmicos; agentes causticos; estimulantes del sistema nervioso central; preparaciones para tos y resfriado, incluyendo descongestivos; citoquinas; diureticos; materiales geneticos; remedios herbales;

hormonolfticos; hipnoticos; agentes hipoglucemicos; agentes inmunosupresores; agentes queratoltticos; inhibidores de leucotrienos; inhibidores mitoticos; relajantes musculares; antagonistas de narcoticos; nicotina; agentes nutricionales, tales como vitaminas, aminoacidos y acidos grasos esenciales; agentes oftalmicos tales como agentes antiglaucoma; agentes para aliviar el dolor tales como agentes anestesicos; parasimpatoltticos; farmacos peptfdicos; enzimas proteoltticas; psicoestimulantes; farmacos respiratorios, incluyendo agentes antiasmaticos; sedantes; esteroides, incluyendo progestagenos, estrogenos, corticosteroides, androgenos y agentes anabolicos; agentes para dejar de fumar; simpatomimeticos; agentes para mejorar la curacion de tejidos; tranquilizantes; vasodiladores incluyendo coronarios generales, perifericos y cerebrales; vesicantes; y las combinaciones de los mismos.

Algunos ejemplos de peptidos y protemas que se pueden usar con los conjuntos de microproyeccion son oxitocina, vasopresina, hormona adrenocorticotropa (ACTH), factor de crecimiento epidermico (EGF), prolactina, hormona luteinizante, hormona estimulante del folfculo, luliberina u hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH),

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insulina, somatostatina, glucagon, interferon, gastrina, tetragastrina, pentagastrina, urogastrona, secretina, calcitonina, encefalinas, endorfinas, kiotorfina, taftsina, timopoyetina, timosina, timoestimulina, factor humoral timico, factor timico serico, factor de necrosis tumoral, factores estimulantes de colonias, motilina, bombesina, dinorfina, neurotensina, ceruleo, bradiquinina, uroquinasa, calicrema, analogos y antagonistas de la sustancia P, angiotensina II, factor de crecimiento nervioso, factores de coagulacion sangumea VII y IX, cloruro de lisozima, renina, bradiquinina, tirocidina, gramicidinas, hormonas de crecimiento, hormona estimulante de melanocitos, hormona liberadora de hormona tiroidea, hormona estimulante tiroidea, hormona paratiroidea, pancreozimina, colecistoquinina, lactogeno placentario humano, gonadotropina corionica humana, peptido estimulante de smtesis de protemas, peptido inhibidor gastrico, peptido intestinal vasoactivo, factor de crecimiento derivado de plaquetas, factor de liberacion de hormona de crecimiento, protema morfogenica osea, y analogos sinteticos y modificaciones y fragmentos farmacologicamente activos de los mismos. Los peptidil farmacos tambien incluyen analogos sinteticos de LHRH, por ejemplo, buserelina, deslorelina, fertirelina, goserelina, histrelina, leuprolide (leuprorelina), lutrelina, nafarelina, triptorelina, y sales farmacologicamente activas de los mismos.

Los agentes activos macromoleculares adecuados para administracion de conjunto de microproyeccion tambien pueden incluir biomoleculas tales como anticuerpos, ADN, ARN, oligonucleotidos antisentido, ribosomas y cofactores enzimaticos tales como biotina, oligonucleotidos, plasmidos, y polisacaridos. Los oligonucleotidos incluyen ADN y ARN, otros oligonucleotidos de origen natural, oligonucleotidos no naturales, y cualquier combinacion y/o fragmento de los mismos. Algunos anticuerpos terapeuticos incluyen Orthoclone OKT3 (muromonab CD3), ReoPro (abciximab), Rituxan (rituximab), Zenapax (daclizumab), Remicade (infliximab), Simulect (basiliximab), Synagis (palivizumab), Herceptin (trastuzumab), Mylotarg (gemtuzumab ozogamicin), CroFab, DigiFab, Campath (alemtuzumab), y Zevalin (ibritumomab tiuxetano).

Los agentes activos macromoleculares adecuados para administracion de conjunto de microproyeccion tambien pueden incluir vacunas tales como, por ejemplo, las aprobadas en los Estados Unidos de America para uso frente a antrax, difteria/tetanos/tos ferina, hepatitis A, hepatitis B, Haemophilus influenzae de tipo b, papilomavirus humano, influenza, encefalitis japonesa, sarampion/paperas/rubeola, enfermedades meningococicas (por ejemplo, vacuna de polisacaridos meningococica y vacuna de conjugado meningococica), enfermedades pneumococicas (por ejemplo, vacuna de polisacaridos pneumococica y vacuna de conjugado meningococica), poliomielitis, rabia, rotavirus, herpes, viruela, tetanos/difteria, tetanos/difteria/tos ferina, tifus, varicela, y fiebre amarilla.

Debido a que los conjuntos de microproyeccion penetran la piel humana, puede ser deseable tomar medidas que tiendan a eliminar la presencia de microorganismos en el conjunto. Tales etapas incluyen, por ejemplo, el uso de una formulacion con una concentracion de azucar que actue como un agente osmotico para deshidratar microorganismos en la formulacion. Una tecnica alternativa es el uso de un pH no fisiologico (por ejemplo, por debajo de pH 6 y por encima de pH 8) para retardar el crecimiento y destruir la viabilidad microbiana. La formulacion se puede preparar con disolventes organicos que a continuacion se sequen con el fin de deshidratar los microorganismos. Ademas del efecto de deshidratacion, el uso de disolventes organicos tambien es inherentemente bactericida dado que alteran las membranas celulares bacterianas. Ademas, los conjuntos de microproyeccion se pueden envasar en un entorno cerrado hermeticamente con baja cantidad de oxfgeno para retardar los microorganismos aerobicos y destruir finalmente su viabilidad. Los conjuntos tambien se pueden envasar en un entorno de baja humedad para deshidratar los microorganismos.

Una tecnica adicional para hacer frente a los microorganismos es incluir un agente antimicrobiano farmaceuticamente aceptable en la formulacion o el envase. Algunos ejemplos de tales agentes son cloruro de benzalconio, alcohol bendlico, clorbutanol, meta cresol, esteres de acido hidroxi benzoico, fenol, y timerosal.

Como alternativa adicional, se puede anadir un tensioactivo o detergente a la formulacion para alterar la membrana celular de cualquier microorganismo para eliminarlo. Tambien se podna anadir un desecante al envase para deshidratar los microorganismos y eliminarlos.

Se pueden anadir antioxidantes a la formulacion, por ejemplo para proteger el agente activo de la oxidacion. Algunos antioxidantes a modo de ejemplo incluyen metionina, cistema, acetato de D-alfa tocoferol, DL-alfa tocoferol, palmitato de ascorbilo, acido ascorbico, hidroxianisol butilado, hidroxiquinona butilada, butilhidroxianisol, hidroxicumarina, hidroxitolueno butilado, cefalina, galato de etilo, galato de propilo, galato de octilo, galato de laurilo, hidroxibenzoato de propilo, trihidroxibutirofenona, dimetilfenol, ditercbutilfenol, vitamina E, lecitina, y etanolamina.

Se ha de entender que mientras que los metodos se han descrito junto con las realizaciones espedficas preferentes de los mismos, la descripcion precedente se pretende que ilustre y no que limite el alcance de la invencion. Otros aspectos, ventajas, y modificaciones dentro del alcance de la invencion seran evidentes para los expertos en la materia con la que esta relacionada la invencion.

Cuando se describe en el presente documento un documento de patente, de solicitud de patente, o publicacion que contiene definiciones expresas, se debena entender que las definiciones expresas se aplican al documento descrito de patente, publicacion de patente, o publicacion en el que se encuentran, y no al resto del texto de la presente solicitud, en particular las reclamaciones de la presente solicitud.

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Ejemplos

Los siguientes ejemplos se presentan para que proporcionen a los expertos habituales en la materia una divulgacion y descripcion completa de la forma de poner en practica los metodos que se describen en el presente documento, y no se pretende que sean limitantes del alcance de lo que los presentes inventores consideran que es su invencion. Se han realizado esfuerzos para asegurar la exactitud con respecto a los numeros (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.) pero se debenan suponer algunos errores y desviaciones. A menos que se indique otra cosa, las partes son partes en peso, la temperatura es en °C y la presion es o esta cerca de la presion atmosferica.

Ejemplo 1

Proceso general para moldear un conjunto

Se esteriliza un molde de microaguja, por ejemplo mediante calentamiento o irradiacion gamma en seco. Se prepara una formulacion que contiene un 25 % de albumina de suero bovino (BSA), un 20 % de alcohol polivimlico, un 27 % de trehalosa, y un 28 % de maltitol, con un total de un contenido de solidos de un 20 % en agua. Se dispensa sobre el molde una cantidad de formulacion (denominada en el presente documento formulacion de precursor), por ejemplo, 20 pl. La formulacion se extiende manualmente sobre el molde usando una pipeta de transferencia con una punta recortada. El molde se cubre con formulacion y a continuacion se agita vorticialmente durante cinco segundos usando un instrumento de vibracion comercial para distribuir uniformemente la formulacion a traves del molde. El molde con la formulacion que la cubre se coloca en un vaso de presion a 1 atm durante aproximadamente 10 minutos. A continuacion se retira la presion. El molde se coloca en una incubadora a una temperatura de 32 °C, durante aproximadamente 30 minutos a 1 hora. A continuacion el conjunto se retira del molde usando una cinta adhesiva de doble cara, y se une opcionalmente a un soporte.

Ejemplo 2

Proceso general para moldear conjuntos de dos capas

Despues de la etapa de secado y antes de la retirada del molde del Ejemplo 1, se moldea una capa adicional sobre el molde usando un procedimiento similar. La capa adicional consiste en 75 pl de un 20 % en peso del copolfmero cationico de metacrilato EUDRAGIT® EPO (copolfmero cationico basado en metacrilato de dimetilaminoetilo, metacrilato de butilo, y metacrilato de metilo) en una mezcla 3:1 de etanol y alcohol isopropflico. La capa adicional se aplica uniformemente al molde usando un portaobjetos de vidrio. El molde se coloca en un vaso de presion y se presurizada a 1 atm durante 2 minutos. La presion se libera y se deja que el molde se seque en el vaso de presion durante un penodo adicional de cinco minutos, sin alterarlo. El molde se seca de nuevo en la incubadora durante 1 hora a 32 °C, y a continuacion se retira del molde.

Ejemplo 3

Colocacion del precursor de microproyeccion en las cavidades del molde usando desprendimiento

Se fabrico un conjunto de microproyeccion como sigue a continuacion. Se coloco una lamina de silicona sobre un sustrato metalico plano. Se dispensaron 125 pl de una formulacion de precursor de microproyeccion en forma de una gota sobre la lamina de silicona usando una micropipeta. Se coloco un molde de conjunto de microproyeccion flexible y polimerico sobre la formulacion con la pluralidad de aberturas a la pluralidad de cavidades que definen las microproyecciones individuales orientadas a la formulacion y la superficie superior del molde en contacto directo con la formulacion. Cada cavidad en la pluralidad de cavidades, en la que la cavidad inclma tanto la region de la punta como la region basal (o region de "embudo") tema un volumen de aproximadamente 1 nl. La formulacion se extendio para cubrir un area de 1" x 1" (2,54 cm x 2,54 cm) en el molde aplicando presion manualmente al lado posterior del molde con unas pinzas. El montaje se coloco en un vaso de presion y se presurizo a 50 psi (344,7 kPa) durante 1 minuto. Se libero la presion y el montaje se retiro del vaso de presion. Agarrando una esquina del molde con las pinzas, se desprendio el molde de la lamina de silicona.

La superficie de molde flexible se ajusto bien a la superficie de la lamina de silicona. Cuando se examino el molde (despues del llenado) al microscopio (usando luz UV), las cavidades aparedan uniformemente llenas en condiciones humedas (Figura 3A). No se observo ninguna cantidad de formulacion en el area del embudo y el llenado se confino unicamente a las cavidades de aguja.

El molde de silicona con la formulacion en las cavidades se seco en una incubadora a 32 °C durante 30 minutos a 1 hora. Como se muestra la Figura 3B, las cavidades continuan apareciendo uniformemente llenas despues del secado. A continuacion se coloco el molde sobre el portador de molde, se comprobo la alineacion con una rasqueta de TEFLON®, y la distancia de la rasqueta se ajusto a 17 mil (0,043 cm) desde el punto mas bajo del molde. Se cargaron 700 pl de una segunda formulacion, una solucion "basal", en el area del conjunto y se extendieron con un cubreobjetos de tereftalato de polietileno (PET). El molde con la solucion basal se presurizo 50 psi (344,7 kPa) durante 1 minuto. El exceso de solucion se limpio usando la rasqueta, montada perpendicular al molde. La capa

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basal se seco en una campana de humos a temperatura ambiente durante una noche, y a continuacion se seco a 32 °C en una incubadora durante un mmimo de 15 minutes. Esto dio como resultado un conjunto de microproyeccion, que se inspecciono opticamente y se muestra una micrograffa en la Figura 4.

Ejemplo 4

Colocacion de precursor de microproyeccion en cavidades de molde usando desprendimiento

Se preparo una formulacion compuesta por un 14% de dextrano 70, un 4,8% de sorbitol, un 2,8% de hormona paratiroidea humana (1 - 34) (hPTH) en disolvente de tampon de histidina, pH 5,5. La formulacion se filtro hasta esterilidad a traves de un filtro de 0,22 micrometros. Se dispensaron 250 jl de la formulacion en un deposito poco profundo, se coloco un molde de silicona esterilizado previamente encima del deposito poco profundo con las aberturas a cada cavidad de cada microaguja en el molde orientadas hacia abajo de un modo tal que la formulacion pudiera entrar en las cavidades. Las cavidades de microproyeccion en el molde se llenaron con el precursor de formulacion por presurizacion del sustrato con el deposito lleno de formulacion y el molde a 50 psi (344,7 kPa) en una camara de presion durante 1 minuto. A continuacion el molde se unio a un cilindro y el cilindro se hizo girar a una velocidad de 2 - 4 mm/min para desprender el molde del deposito poco profundo. Se retuvo la cantidad deseable de formulacion de precursor en las cavidades del molde y se seco a 32 °C durante 30 minutos. A continuacion se revistio una capa basal encima del precursor seco como se ha descrito en el Ejemplo 3, para formar un conjunto de microestructura (troquelado en 1 cm2 de diametro). Para analizar el contenido de hPTH en cada conjunto de microproyeccion, el conjunto se inspecciono opticamente, y se muestra una micrograffa en la Figura 4. Se observa el farmaco concentrado en las puntas de las microproyecciones. A continuacion se disolvio el microconjunto en tampon y se midio el contenido de hPTH por HPLC. Con un tamano de muestra de 30 conjuntos sometidos a ensayo, el contenido medio de hPTH por conjunto fue de 32,9 mg con un coeficiente de variacion de un 10 %.

Ejemplo 5

Colocacion de precursor de microproyeccion en molde usando elemento fijo

Se proporciono un molde de 1 pulgada por 1 pulgada (2,54 cm x 2,54 cm). Cada cavidad en la pluralidad de cavidades en el molde, en el que la cavidad inclrna tanto la region de la punta como la region basal (o region de "embudo"), tema un volumen de aproximadamente 1 nl. Se preparo una formulacion de precursor de microproyeccion comprendida por un 2,1 % de hPTH (1-34), un 14% de tetraalmidon, y un 4,8% de sorbitol en disolvente de tampon de histidina, pH 5,5.

Se proporciono un elemento fijo comprendido por un primer y un segundo miembros (Figura 6A). El segundo miembro comprendfa una cavidad cilmdrica (denominada deposito) con un diametro de 22 mm y una profundidad de 20 mil (0,508 mm), para dar un volumen de aproximadamente 200 jl. Los miembros del elemento fijo estaban hechos de metal revestido con politetrafluoroetileno (PTFE).

Se sumergio el cuello de una jeringa esteril de 1 ml en la formulacion y se extrajo aproximadamente 1 ml en el barril. El aire atrapado en el interior del barril cerca de la cabeza del embolo se retiro con golpecitos suaves a la jeringa. Se unio un tubo a un puerto de entrada en el elemento fijo y el extremo opuesto del tubo se unio al cuello de la jeringa. La lmea se purgo para asegurar que no hubiera ninguna burbuja de aire en el tubo.

El molde se cargo en el elemento fijo, y se sujeto con una abrazadera. La jeringa con la formulacion se coloco en una bomba de jeringa, que a continuacion se encendio, y la formulacion se introdujo en el deposito del elemento fijo a 0,95 ml/minuto. Despues del llenado, la formulacion del deposito fluye a la entrada de purgado. Cuando la formulacion se llena aproximadamente 2 pulgadas (5,1 cm) en el tubo la entrada de purgado, se detiene la bomba de jeringa.

Se empleo una valvula para cerrar el tubo de entrada de purgado. A continuacion, la presion en el deposito se aumento gradualmente a 50 psi (344,7 kPa). Durante el proceso de aumento de presion, mientras la formulacion ocupa la cavidad del molde para reemplazar el aire en la cavidad el nivel de la formulacion en el tubo de entrada de purgado caera en cierta medida, de modo que puede ser necesario bombear formulacion adicional para mantener el nivel de formulacion en el tubo a aproximadamente 2 pulgadas (5,1 cm) durante el curso de la presurizacion. Cuando se alcanzaron 50 psi (344,7 kPa), la presion se mantuvo durante 1 minuto y a continuacion se libero gradualmente.

La etapa de retirar la formulacion de precursor de microproyeccion comenzo. Esta etapa se prolonga durante un pertedo de 6-10 minutos, de modo que la velocidad media de retirada de aproximadamente 200 jl de formulacion fue aproximadamente 20-30 jl/min. La formulacion se retiro a una velocidad inicial de aproximadamente 15 jl/min, aumentando a una velocidad mayor a medida que el nivel de formulacion alcanzaba el centro del molde y a continuacion de nuevo a una velocidad inferior a medida que el nivel de formulacion continuaba disminuyendo. Cuando se complete la retirada de la formulacion lfquida del deposito, la formulacion se traslado al tubo de entrada. La bomba se detuvo, se abrio el elemento fijo, y el molde se retiro y se coloco en una placa de Petri. El molde se examino para uniformidad de llenado y manchas de precursor de microproyeccion alrededor de la periferia. Despues

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del secado del molde en una incubadora a 32 °C durante 30 minutos, se cerro la cubierta de la placa de Petri, la placa se coloco en una bolsa de papel de aluminio y se sello termicamente con relleno de nitrogeno, y a continuacion se almaceno en un refrigerador a 4 °C.

Se moldeo una capa adicional (25 % de poli(acido lactico-co-glicolico) en acetonitrilo) sobre la formulacion en las cavidades de molde y se seco durante una noche. El conjunto resultante se retiro del molde usando una tira de PET con adhesivo revestido doble 1513. El conjunto se corto una muesca con un diametro de 11 mm, se etiqueto, y se almaceno en una camara seca.

Se determinaron el contenido de agente activo y la pureza usando HPLC. La desviacion tipica del contenido de agente activo en las cavidades del molde fue ~ 6 %.

Ejemplo 6

Colocacion de precursor de microproyeccion en cavidades de molde usando desprendimiento

Se obtuvo un molde para un conjunto de microproyeccion de 18 mm por 30 mm. Se preparo un precursor que comprendfa un 14% de dextrano 70, un 4,8% de sorbitol, un 2,1 % de hormona paratiroidea humana (1 - 34) (hPTH) en disolvente de tampon de histidina, pH 5,5. La formulacion de precursor se filtro hasta esterilidad a traves de un filtro de 0,22 pm.

Se proporcionaron elementos fijos que comprendfan un primero y un segundo miembros (Figura 6A). En un elemento fijo, el segundo miembro comprendfa una cavidad (o deposito) cilmdrica con un diametro de 22 mm y una profundidad de 53 mil (1,35 mm, denominado en el presente documento "deposito uno arriba"). En un segundo elemento fijo, el segundo miembro comprendfa un deposito rectangular con una longitud de 28 mm y una anchura de 16 mm (denominado en el presente documento "deposito dos arriba"). El elemento fijo con el deposito dos arriba se puede orientar vertical u horizontalmente en uso.

Se sumergio el cuello de una jeringa de 2 ml (esterilizada mediante autoclave) en el precursor y se extrajeron aproximadamente 1,5 ml de formulacion de precursor en el barril. Unos golpecitos suaves retiraron cualquier cantidad de aire atrapado en la jeringa. Se unio un tubo de entrada al cuello la jeringa y la lmea se purgo para asegurar que no hubiera burbujas de aire en el tubo.

El molde se cargo en el elemento fijo, y se sujeto con abrazadera. La jeringa con la formulacion se coloco en una bomba de jeringa. La bomba de jeringa se encendio y la formulacion se introdujo en la cavidad del elemento fijo a una velocidad de 0,95 ml/min. Despues del llenado, la formulacion de precursor de deposito fluyo a la entrada de purgado. Cuando la formulacion de precursor se llena aproximadamente 2 pulgadas (5,1 cm) en el tubo de entrada de purgado, se detiene la bomba de jeringa.

Se empleo una valvula para cerrar el tubo de entrada de purgado. La presion en el deposito se aumento a continuacion gradualmente a 50 psi (344,7 kPa), como se describe en el Ejemplo 5. Despues de la presurizacion, la formulacion de precursor se retiro del deposito a una cierta velocidad. Se retuvo una cantidad deseable de formulacion de precursor entre las cavidades del molde o moldes despues de la finalizacion de la retirada de la formulacion de precursor del deposito. La formulacion de precursor en las cavidades del molde se seco a 32 °C durante 30 min. A continuacion se revistio la capa basal encima de la formulacion de precursor seca como se ha descrito en los ejemplos anteriores, para formar un conjunto de microestructura (troquelado en 1 cm2 de diametro).

Para analizar el contenido de hPTH en cada conjunto de microproyeccion, el conjunto se disolvio en tampon y se midio el contenido de hPTH por HPLC. Como se muestra en la siguiente tabla, la cantidad de formulacion de precursor retenida en las cavidades de microproyeccion por cm2 de conjunto se vio afectada por varios factores que incluyen, pero no se limitan a, orientacion del deposito, profundidad, velocidad de retirada del precursor, etc.

Grupo

Tipo de deposito Orientacion Profundidad del deposito mil (mm) Velocidad de retirada (mm/min) Contenido de hPTH (pg/cm2 de conjunto)

1

Cilmdrico (uno arriba) NA 52 (1,3) 12 21,6 ± 2,8

2

Rectangular (dos arriba) Vertical 35 (0,89) 3 52,1 ± 5,9

3

Rectangular (dos arriba) Vertical 35 (0,89) 12 86,1 ± 9,2

4

Rectangular (dos arriba) Vertical 49 (1,24) 7,5 74,7 ± 9,8

Grupo

Tipo de deposito Orientacion Profundidad del deposito mil (mm) Velocidad de retirada (mm/min) Contenido de hPTH (|jg/cm2 de conjunto)

5

Rectangular (dos arriba) Vertical 63 (1,6) 3 45,3 ± 2,8

6

Rectangular (dos arriba) Vertical 63 (1,6) 12 66,5 ± 4,1

7

Rectangular (dos arriba) Horizontal 63 (1,6) 3 18,8 ± 2,7

Aunque se han discutido anteriormente cierto numero de aspectos y realizaciones a modo de ejemplo, los expertos en la materia reconoceran ciertas modificaciones, permutaciones, adiciones y subcombinaciones de los mismos. Por lo tanto, se pretende que las siguientes reivindicaciones anexas y las reivindicaciones introducidas a continuacion se 5 interpreten para incluir la totalidad de tales modificaciones, permutaciones, adiciones y subcombinaciones.

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   REIVINDICACIONES

   1. Metodo para formar un conjunto de microproyeccion, que comprende:

   dispensar una cantidad de una formulacion (22) sobre un molde (20) que tiene una pluralidad de cavidades para microproyecciones individuales en el conjunto, en el que el molde y la formulacion se ponen en contacto de un modo tal que la pluralidad de cavidades esten en comunicacion fluida con la formulacion; cubrir la formulacion sobre el molde con un sustrato; transferir la formulacion a la pluralidad de cavidades; y

   retirar la formulacion en exceso del molde de forma que retenga la formulacion en cada una de la pluralidad de cavidades para formar el conjunto de microproyeccion.
2. 2. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que retirar la formulacion en exceso del molde incluye desacoplar el molde del sustrato.
3. 3. Metodo para fabricar un conjunto de microproyeccion, que comprende:

   situar un molde que comprende una pluralidad de cavidades para formar microproyecciones en un conjunto de microproyecciones en un elemento fijo (40), el elemento fijo comprendido por un primer miembro (44) y un segundo miembro (46) y al menos un puerto (60, 62), situandose el molde entre el primer y el segundo miembros;

   introducir una formulacion en el elemento fijo a traves del al menos un puerto de un modo tal que la formulacion

   ponga en contacto aberturas con la pluralidad de cavidades en el molde;

   transferir la formulacion introducida en el elemento fijo en la pluralidad de cavidades; y

   retirar la formulacion del elemento fijo a una velocidad mediante la cual la formulacion transferida a la pluralidad de cavidades se retenga en cada cavidad de la pluralidad para formar el conjunto de microproyeccion.
4. 4. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que transferir comprende transferir formulacion en la pluralidad de cavidades aplicando presion a la formulacion dispensada en el molde.
5. 5. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 1 o 2, en el que retirar la formulacion en exceso del molde consigue una retencion uniforme de formulacion en cada una de la pluralidad de cavidades, segun se manifiesta mediante una desviacion tfpica en la cantidad de formulacion retenida en cada cavidad menor o igual que aproximadamente un 10 % de la cantidad media de formulacion retenida en las cavidades.
6. 6. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 2 o la reivindicacion 5, en el que retirar la formulacion en exceso del molde se consigue elevando un borde del molde y desprendiendo gradualmente el molde de la formulacion y el sustrato a una velocidad controlada.
7. 7. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 6, en el que la velocidad controlada de desacoplamiento se lleva a cabo mediante un miembro giratorio (36) sujetable al molde.
8. 8. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 3, en el que las etapas que transferir y retirar consiguen una retencion uniforme de la formulacion en cada una de la pluralidad de cavidades, segun se manifiesta mediante una desviacion tfpica en la cantidad de formulacion retenida en cada cavidad menor o igual que aproximadamente un 10 % de la cantidad media de formulacion retenida en las cavidades.
9. 9. El metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 o la reivindicacion 3, que comprende ademas recuperar la formulacion que no se retiene en la pluralidad de cavidades.
10. 10. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 9, en el que se recupera al menos aproximadamente un 90 % de la formulacion no retenida en la pluralidad de las cavidades.
11. 11. El metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, en el que una o mas de las etapas en el metodo se lleva a cabo a una temperatura entre aproximadamente 23-25 °C.
12. 12. El metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, en el que la formulacion comprende al menos un polfmero disuelto en un disolvente, comprendiendo ademas el metodo retirar el disolvente de la formulacion retenida en la pluralidad de cavidades.
13. 13. El metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, que comprende ademas aplicar una segunda formulacion sobre el molde.
14. 14. El metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, en el que la pluralidad de cavidades sobresale en el molde desde una superficie de molde aproximadamente plana.

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15. 15. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 14, en el que para al menos una cavidad en la pluralidad de cavidades, el diametro de la interseccion de la al menos una cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye monotonamente en funcion de la distancia al plano desde la superficie del molde.
16. 16. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 15, en el que el diametro de la interseccion de la al menos una

    cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye mas rapidamente cuando el plano esta cerca

    de la superficie del molde que cuando el plano esta mas lejos de la superficie del molde.
17. 17. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 16, en el que el diametro de la interseccion de la al menos una

    cavidad con un plano paralelo a la superficie de molde plana disminuye linealmente en funcion de la distancia a la superficie del molde para un intervalo de distancias cercano a la superficie del molde y a continuacion disminuye linealmente pero mas lentamente para un segundo intervalo de distancias mas alejado de la superficie del molde.
18. 18. El metodo de acuerdo con la reivindicacion 3 u 8, en el que situar incluye situar un molde en el que la pluralidad de cavidades son cavidades alargadas con una dimension mas larga y una dimension mas corta, y el molde se mantiene en el elemento fijo de modo que la dimension mas larga de cada cavidad en la pluralidad de cavidades es aproximadamente horizontal.
19. 19. El metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3, 8 o 18, en el que las etapas de introducir y retirar formulacion se llevan a cabo con el control de un microprocesador.
20. 20. El metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3, 8, 18 o 19, que comprende ademas retirar el molde con formulacion retenida del elemento fijo.
21. 21. El metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, en el que la formulacion comprende al menos un polfmero disuelto en un disolvente, comprendiendo el metodo ademas retirar el disolvente de la formulacion retenida en cada una de la pluralidad de cavidades.