ES2677618T3 - Composición para mitigar daños inducidos por radiación ultravioleta - Google Patents

Abstract

Una composición destinada al uso en la prevención o el tratamiento de una enfermedad de la piel inducida por irradiación ultravioleta, comprendiendo dicha composición uno o más compuestos seleccionados entre un grupo consistente en D-metionina y/o sales de la misma.

Description

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DESCRIPCION

Composicion para mitigar danos inducidos por radiacion ultravioleta Campo tecnico

La presente invencion se refiere a una composicion destinada al uso en la prevencion o el tratamiento de una enfermedad de la piel inducida por irradiacion ultravioleta, comprendiendo la composicion uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo consistente en D-metionina y/o sales de la misma. La invencion se refiere ademas al uso de una composicion tal como se define mas arriba para mejorar un estado cosmetico de la piel inducido por irradiacion ultravioleta, y como un agente de filtro solar.

Antecedentes de la tecnica

Los rayos ultravioleta se clasifican en rayos ultravioleta de la region de longitudes de onda largas, de mas de aproximadamente 320 nm (UV-A), rayos ultravioleta de la region de longitudes de onda medias, de aproximadamente 320 a aproximadamente 280 nm (UV-B), y rayos ultravioleta de la region de longitudes de onda cortas, de menos de aproximadamente 280 nm (UV-C). Entre estos, los UV-C no estan incluidos en la luz solar que llega a la superficie terrestre, ya que son absorbidos por la capa de ozono. Aunque tanto los UV-A como los uV-B estan incluidos en la luz solar que llega a la superficie terrestre, los UV-B son absorbidos parcialmente por la capa de ozono. Sin embargo, dado que los UV-A no son absorbidos por la capa de ozono, son predominantes en los rayos ultravioleta que llegan a la superficie terrestre, lo que supone un peligro para la piel.

La Bibliograffa 1 distinta de las patentes describe enfermedades en las que intervienen los rayos ultravioleta, incluyendo arrugas, eritema, xerodermia pigmentosa, dermatitis actmica cronica, carcinoma de celulas escamosas, carcinoma de celulas basales, melanoma maligno, enfermedad de Bowen, queratosis solar, fotodermatosis, hidroa vacciniforme y dermatitis por fotocontacto, mientras que la Bibliograffa 2 distinta de las patentes ejemplifica dermatitis solar, dermatopatfa actmica cronica, queratosis actmica, queilitis actmica, smdrome de Favre-Racouchot, fotodermatosis, dermatitis por fotocontacto, dermatitis de Berloque, erupcion medicamentosa fotosensible, erupcion polimorfa lummica, hidroa vacciniforme, urticaria solar, dermatitis fotosensible cronica, xerodermia pigmentosa, efelides, porfiria, pelagra, enfermedad de Hartnup, queratosis solar, dermatomiositis, liquen plano, enfermedad de Darier, pitiriasis rubra pilaris, rosacea, dermatitis atopica, cloasma, herpes simple y lupus eritomatoso.

Documentos de la tecnica anterior

Documentos distintos de las patentes

Documento 1 distinto de las patentes: "HIFUSHIKKAN SAISHIN NO CHIRYO (Ultimos metodos para tratar enfermedades dermicas)", 2005-2006 (Nankodo Co., Ltd.)

Documento 2 distinto de las patentes: "HYOJUN HIFUKAGAKU (Dermatologfa estandar)", 7a edicion (Igaku-Shoin Ltd.)

Descripcion de la invencion

Problema que se ha de resolver mediante la invencion

Algunos agentes convencionales conocidos para prevenir y/o tratar danos en la piel inducidos por irradiacion ultravioleta incluyen un agente de dispersion de ultravioletas que inhibe la absorcion de los ultravioletas por la piel, tal como oxido de titanio, un absorbente de ultravioletas, tal como acido etil hexil p-metoxicinamico, o un antioxidante que depura un radical libre generado por los ultravioletas. Sin embargo, el agente de dispersion de ultravioletas o el absorbente de ultravioletas no se utilizan a diario, aunque son eficaces al aire libre para prevenir las quemaduras solares. El antioxidante es problematico en terminos de estabilidad y seguridad. Ademas, algunos agentes conocidos para tratar los danos de la piel inducidos por irradiacion ultravioleta solo se limitan a agentes sintomaticos para el tratamiento. Por consiguiente, es necesario desarrollar una composicion para mitigar danos inducidos por irradiacion ultravioleta, un preparado externo para la piel, un agente antiarrugas, un agente de filtro solar, una composicion farmaceutica para tratar y/o prevenir enfermedades de la piel, o una composicion alimentaria, que puedan ser utilizados a diario y que sean estables y seguros.

Medios para resolver el problema

La presente invencion esta definida en las reivindicaciones y, en un aspecto, proporciona una composicion destinada al uso en la prevencion o el tratamiento de una enfermedad de la piel inducida por irradiacion ultravioleta, comprendiendo la composicion uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo consistente en D-metionina y/o sales de la misma.

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En otro aspecto, la presente invencion se refiere al uso de una composicion que comprende uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo consistente en D-metionina y/o sales de la misma para mejorar un estado cosmetico de la piel inducido por irradiacion ultravioleta.

En otro aspecto mas, la presente invencion se refiere al uso de una composicion que comprende uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo consistente en D-metionina y/o sales de la misma como un agente de filtro solar.

La composicion destinada al uso en la invencion puede estar en forma de un preparado externo para la piel o en forma de un producto alimentario.

La enfermedad de la piel arriba descrita se puede seleccionar entre un grupo consistente en eritema, dermatitis solar, dermatopatfa actmica cronica, queratosis actmica, queilitis actmica, enfermedad de Favre-Racouchot, fotodermatosis, dermatitis por fotocontacto, dermatitis de Berloque, erupcion medicamentosa fotosensible, erupcion polimorfa lummica, hidroa vacciniforme, urticaria solar, dermatitis fotosensible cronica, xerodermia pigmentosa, efelides, porfiria, pelagra, enfermedad de Hartnup, queratosis solar, dermatomiositis, liquen plano, enfermedad de Darier, pitiriasis rubra pilaris, rosacea, dermatitis atopica, cloasma, herpes simple, lupus eritomatoso, carcinoma de celulas escamosas, carcinoma de celulas basales y enfermedad de Bowen. El estado cosmetico de la piel arriba descrito puede consistir en arrugas.

En la presente memoria se describe un metodo para tratar y/o prevenir una enfermedad de la piel inducida por irradiacion ultravioleta, que comprende una etapa consistente en administrar una composicion que comprende uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo que consiste en D-metionina y/o sales de la misma. La enfermedad de la piel arriba descrita se puede seleccionar entre un grupo consistente en eritema, dermatitis solar, dermatopatfa actmica cronica, queratosis actmica, queilitis actmica, enfermedad de Favre-Racouchot, fotodermatosis, dermatitis por fotocontacto, dermatitis de Berloque, erupcion medicamentosa fotosensible, erupcion polimorfa lummica, hidroa vacciniforme, urticaria solar, dermatitis fotosensible cronica, xerodermia pigmentosa, efelides, porfiria, pelagra, enfermedad de Hartnup, queratosis solar, dermatomiositis, liquen plano, enfermedad de Darier, pitiriasis rubra pilaris, rosacea, dermatitis atopica, cloasma, herpes simple, lupus eritomatoso, carcinoma de celulas escamosas, carcinoma de celulas basales y enfermedad de Bowen.

En la presente memoria se describe ademas un metodo para tratar y/o prevenir una enfermedad de la piel inducida por irradiacion ultravioleta, que comprende una etapa consistente en administrar una composicion que comprende uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo que consiste en D-metionina y/o sales de la misma, exceptuando composiciones orales. La enfermedad de la piel arriba descrita se puede seleccionar entre un grupo consistente en eritema, dermatitis solar, dermatopatfa actmica cronica, queratosis actmica, queilitis actmica, enfermedad de Favre-Racouchot, fotodermatosis, dermatitis por fotocontacto, dermatitis de Berloque, erupcion medicamentosa fotosensible, erupcion polimorfa lummica, hidroa vacciniforme, urticaria solar, dermatitis fotosensible cronica, xerodermia pigmentosa, efelides, porfiria, pelagra, enfermedad de Hartnup, queratosis solar, dermatomiositis, liquen plano, enfermedad de Darier, pitiriasis rubra pilaris, rosacea, dermatitis atopica, cloasma, herpes simple, lupus eritomatoso, carcinoma de celulas escamosas, carcinoma de celulas basales y enfermedad de Bowen.

En la presente memoria se describe ademas un metodo para mejorar un estado cosmetico de la piel inducido por irradiacion ultravioleta, que comprende una etapa consistente en administrar una composicion que comprende uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo que consiste en D-metionina y/o sales de la misma. En el metodo para mejorar un estado cosmetico de la piel arriba descrito, la composicion puede consistir en un preparado externo para la piel o en una composicion alimentaria.

En la presente memoria se describe ademas un metodo para mejorar un estado cosmetico de la piel inducido por irradiacion ultravioleta, que comprende una etapa consistente en administrar una composicion que comprende uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo que consiste en D-metionina y/o sales de la misma, exceptuando composiciones orales. En el metodo para mejorar un estado cosmetico de la piel arriba descrito, la composicion puede consistir en un preparado externo para la piel.

En el metodo para mejorar un estado cosmetico de la piel inducido por irradiacion ultravioleta, la mejona del estado cosmetico de la piel incluye, pero no se limita a un tratamiento antiarrugas y/o a un tratamiento de filtro solar.

Tal como se emplea en la presente memoria, "sal" de D-metionina se refiere a cualquier sal, incluyendo sales metalicas y sales ammicas, siempre que no resulte afectado negativamente el efecto mitigador de la D-metionina en danos inducidos por irradiacion ultravioleta. La sal metalica arriba descrita puede incluir una sal metalica alcalina, una sal metalica alcalinoterrea y similares. La sal ammica arriba descrita puede incluir sal trietilammica, sal bencilammica y similares.

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Tal como se emplea en la presente memoria, "derivado" de D-metionina se refiere a una molecula de D-metionina enlazada de forma covalente con cualquier grupo sustituyente en su grupo amino, grupo carboxilo o cadena lateral, siempre que no resulte afectado negativamente el efecto mitigador de la D-metionina en danos inducidos por irradiacion ultravioleta. El grupo sustituyente arriba mencionado incluye, pero no se limita a un grupo protector, tal como un grupo N-fenilacetilo, un grupo 4,4'-dimetoxitritilo (DMT), etc.; una macromolecula biologica, tal como una protema, un peptido, un sacarido, un lfpido, un acido nucleico, etc.; un polfmero sintetico, tal como un poliestireno, un polietileno, un polivinilo, un poliester, etc.; y un grupo funcional tal como un grupo ester, etc. El grupo ester arriba mencionado puede incluir, por ejemplo, un ester metilico, un ester etilico, otro ester alifatico o ester aromatico.

Dado que un aminoacido existe como un isomero optico que esta en una forma L o en una forma D, pero que una protema natural esta formada por L-aminoacidos enlazados a traves de enlaces peptfdicos y unicamente se emplean L-aminoacidos excluyendo algunas excepciones tales como una pared celular bacteriana, se ha considerado que en un mairnfero, incluyendo un humano, unicamente estan presentes y se utilizan L-aminoacidos (Kinouchi, T. et al., TANPAKUSHITSU KAKUSAN KOSO (PROTEfNAS, ACIDOS NUCLEICOS Y ENZIMAS), 50:453-460 (2005), Lehninger Principles of Biochemistry [Vol. 1] 2a edicion, pp. 132-147 (1993), traduccion del idioma japones, Hirokawa Publishing Co., Harper's Biochemistry, version original, 22 edicion, pp. 21-30 (1991), traduccion del idioma japones, Maruzen Co., Ltd.). Por consiguiente, durante mucho tiempo, academica e industrialmente como aminoacidos principalmente solo se han empleado L-aminoacidos.

Algunos casos excepcionales en los que se emplea un D-aminoacido incluyen, por ejemplo, un caso de utilizacion como una materia prima para un antibiotico producido por un microorganismo y un caso de un aditivo alimentario en el que se emplea un D-aminoacido en una mezcla de DL-aminoacidos simplemente con el fin de reducir el coste de fraccionar solo un L-aminoacido de una mezcla del L-aminoacido y el D-aminoacido. Sin embargo, no ha habido ningun caso de utilizacion exclusiva de un D-aminoacido libre de L-aminoacido industrialmente como una sustancia bioactiva.

La D-serina y el acido D-aspartico han sido estudiados hasta una fase relativamente avanzada debido a sus mayores proporciones de formas D. La D-serina esta localizada en el cerebro y el hipocampo, y es sabido que interviene en un modulador del receptor NMDA en el cerebro. Esta demostrado que el acido D-aspartico esta localizado en los testmulos y en la glandula pineal, y se ha informado de que interviene en la regulacion de la secrecion hormonal (publicacion de patente japonesa no examinada n° 2005-3558). Sin embargo, los efectos fisiologicos de la D-serina y el acido D-aspartico en la piel no han sido aclarados.

Tal como se indica en los ejemplos abajo descritos, hasta ahora no se ha sabido que la D-metionina tiene un efecto mitigador en danos producidos por irradiacion ultravioleta. Por lo tanto, el uso de una composicion que comprende D-metionina tal como se describe en la presente memoria es una invencion novedosa.

Recientemente se ha informado de que se ha permitido el acceso de ratones ddY a una solucion acuosa 10 mM de un D-aminoacido durante 2 semanas y despues se ha determinado la concentracion del D-aminoacido en cada organo, que ha sido de 3 a 1.000 pmol por glandula en la glandula pineal y de 2 a 500 nmol por gramo humedo en el tejido cerebral (Morikawa, A. et al., Amino Acids, 32: 13-20 (2007)). Sobre la base de este informe se ha calculado el lfmite inferior de la dosis diaria de D-metionina contenida en una composicion descrita en la presente memoria.

Tal como se indica en los ejemplos descritos mas abajo, la D-metionina concerniente a la presente invencion muestra un efecto mitigador en danos inducidos por irradiacion ultravioleta en una concentracion de 0,001 a 100 |jM (micromolar) en un fibroblasto humano cultivado. Por consiguiente, la D-metionina contenida en una composicion farmaceutica, un agente antiarrugas, un agente de filtro solar y un preparado externo para la piel descritos en la presente memoria puede variar dentro de amplios margenes, a condicion de que la D-metionina se suministre a un fibroblasto en un tejido de la piel in vivo en un intervalo de concentraciones arriba especificado. Cuando la composicion es un preparado externo, el contenido de D-metionina puede ser del 0,0000015% en masa al 50% en masa en la cantidad total de la composicion o hasta la concentracion en masa maxima que pueda ser formulada. Por lo tanto, cuando la composicion arriba descrita es un preparado externo, de forma deseable el contenido de D- metionina es del 0,000003% en masa al 30% en masa, de forma totalmente deseable del 0,00003% en masa al 3% en masa. El lfmite inferior de la dosis diaria de D-metionina contenida en la composicion puede ser de 0,01 ng, preferiblemente de 0,1 ng, mas preferiblemente de 1 ng por kg de peso corporal.

La composicion farmaceutica descrita en la presente memoria puede comprender ademas uno o mas aditivos farmaceuticamente aceptables, ademas de D-metionina y/o sales de D-metionina, siempre que no resulte afectado negativamente el efecto mitigador de la D-metionina en danos inducidos por irradiacion ultravioleta. Dicho aditivo incluye, pero no se limita a un diluyente, un agente de hinchamiento, un ligante, un adhesivo, un lubricante, un agente deslizante, un plastificante, un desintegrante, un vehmulo disolvente, un agente tampon, un colorante, un agente aromatizante, un edulcorante, un agente de conservacion, un estabilizador, un adsorbente, asf como otros aditivos farmaceuticos conocidos por los expertos.

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Un agente antiarrugas y/o agente de filtro solar descrito en la presente memoria se puede preparar utilizando unicamente D-metionina y/o sales de D-metionina. No obstante, otros componentes empleados en preparados externos para la piel, tales como productos cosmeticos y farmaceuticos incluyendo productos de parafarmacia, se pueden formular apropiadamente segun sea necesario en la medida en que no resulte afectado negativamente el efecto de la invencion. Estos otros componentes (componentes formulados opcionalmente) incluyen, por ejemplo, aceites, agentes tensioactivos, polvos, colorantes, agua, alcoholes, agentes espesantes, agentes quelantes, siliconas, antioxidantes, absorbentes de UV, humectantes, agentes aromatizantes, diversos ingredientes medicinales, agentes de conservacion, ajustadores del pH, neutralizadores y similares.

El preparado externo para la piel descrito en la presente memoria puede ser cualquiera de los empleados convencionalmente en un preparado externo para la piel y una composicion cosmetica, tal como una pomada, una crema, una emulsion, una locion, una compresa, unas sales de bano y similares, y sus formas farmaceuticas no estan especificadas de forma particular.

Para el preparado externo para la piel descrito en la presente memoria se pueden formular apropiadamente, segun sea necesario, otros componentes empleados en preparados externos para la piel, tales como productos cosmeticos y farmaceuticos incluyendo productos de parafarmacia, siempre que no resulte afectado negativamente el efecto mitigador de la D-metionina en danos inducidos por irradiacion ultravioleta. Estos otros componentes (componentes formulados opcionalmente) incluyen, por ejemplo, aceites, agentes tensioactivos, polvos, colorantes, agua, alcoholes, agentes espesantes, agentes quelantes, siliconas, antioxidantes, absorbentes de UV, humectantes, agentes aromatizantes, diversos ingredientes medicinales, agentes de conservacion, ajustadores del pH, neutralizadores.

La composicion alimentaria descrita en la presente memoria puede ser cualquiera de las empleadas convencionalmente en una composicion alimentaria, tal como una bebida, una gominola, un caramelo, un comprimido dulce, pero no esta limitada a estas.

Breve descripcion de los dibujos

La Figura 1 es un grafico que muestra el efecto de la adicion de L-metionina o D-metionina antes de una irradiacion ultravioleta en fibroblastos dermicos humanos normales.

La Figura 2 es un grafico que muestra el efecto de la adicion de D-metionina antes de una irradiacion ultravioleta en fibroblastos dermicos humanos normales.

La Figura 3 es un grafico que muestra el efecto de la adicion de D-metionina despues de una irradiacion ultravioleta en fibroblastos dermicos humanos normales.

La Figura 4 es un grafico que muestra el efecto de la adicion de L-serina o D-serina antes de una irradiacion ultravioleta en fibroblastos dermicos humanos normales.

La Figura 5 es un grafico que muestra el efecto de la adicion de D-serina antes de una irradiacion ultravioleta en fibroblastos dermicos humanos normales.

La Figura 6 es un grafico que muestra el efecto de la adicion de D-serina despues de una irradiacion ultravioleta en fibroblastos dermicos humanos normales.

La Figura 7 es un grafico que muestra el efecto de la adicion de D-cicloserina despues de una irradiacion ultravioleta en fibroblastos dermicos humanos normales.

Descripcion de realizaciones

Los ejemplos de la presente invencion descritos mas abajo estan concebidos unicamente para ejemplificar la invencion y no para limitar el alcance de la misma.

Todos los documentos mencionados en la presente memoria estan incorporados por referencia en su totalidad. Ejemplo 1

Efecto mitigador de la metionina en danos inducidos por irradiacion ultravioleta

Metodos

Cultivo celular

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La celula empleada consistia en un fibroblasto dermico neonatal humano comercialmente disponible (Cryo NHDF- Neo, Sanko-Junyaku Co., Ltd.). Esta celula se inoculo a razon de 2 x 105 celulas/ml en un plato de cultivo comercialmente disponible de 35 mm de diametro (BD FALCON 353001, Becton Dickinson Japon), donde se cultivo en un medio de cultivo celular comercialmente disponible (D-MEM (1 g/l de glucosa, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) complementado con un 10% de suero fetal bovino (en adelante, designado como "medio normal"). La celula arriba descrita se puede cultivar en el medio normal arriba descrito complementado con un antibiotico (15240-062, Gibco) al 1%. Esta celula se cultivo durante aproximadamente 24 horas en una atmosfera de un 5% de CO2 y vapor de agua saturado a 37 °C (grados Celsius).

Despues, el medio de cultivo para cultivar la celula arriba descrita se cambio a 1 ml de un medio BSO complementado con un BSO inhibidor de biosmtesis de glutation (L-butionina-(S,R)-sulfoximina, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) al 1 x 10'3%, donde se llevo a cabo el cultivo durante aproximadamente 24 horas en una atmosfera de un 5% de CO2 y vapor de agua saturado a 37 °C (grados Celsius). El medio BSO arriba descrito se preparo mediante una dilucion por un factor 200 de una solucion madre que contema un 0,2% de BSO disuelto en alcohol etflico con el medio normal arriba descrito.

Adicion de aminoacido antes de la irradiacion ultravioleta

Para determinar el efecto de la adicion de metionina antes de la irradiacion ultravioleta (en adelante, designada como "adicion de metionina previa a la irradiacion"), el medio de cultivo se cambio a un medio BSO con adicion de L- metionina (131-01603, Wako Pure Chemical Industries Ltd.) o de D-metionina (2807, Peptide Institute Inc.) de 0,0001 a 100 |jM (micromolar) 24 horas antes de la irradiacion. La irradiacion ultravioleta despues de cambar a un medio con adicion de D-prolina (165-14671, Wako Pure Chemical Industries Ltd.) 0,1 jM (micromolar) se empleo como un control positivo, mientras que la irradiacion ultravioleta del medio todavfa libre de dicho aminoacido anadido se empleo como un control negativo.

Medio de irradiacion UV

En un agua destilada se disolvio cloruro ferrico (II) al 2 x 10'3% y la solucion resultante se sometio a una dilucion por un factor 200 (concentracion final: 1 x 10'5%) con una solucion tampon de fosfatos PBS (+) que contema ion de calcio e ion de magnesio para obtener un medio (en adelante, designado como "medio de irradiacion UV"), que se calento preliminarmente a 37 °C antes de su uso.

Irradiacion UV

Antes de la irradiacion UV-A, el medio de cultivo se sustituyo con 1 ml del medio de irradiacion UV arriba descrito. La irradiacion UV-A se llevo a cabo utilizando un dispositivo de exposicion uniforme a luz UV UVE-502S+EL-160 (SAN- EI ELECTRIC) mediante irradiacion de un rayo UV de 320 nm a 400 nm, a 8 J/cm2 y 9 J/cm2, desde aproximadamente 20 cm por encima de un plato de cultivo en un estado en el que la tapa del plato de cultivo respectivo estaba quitada. La dosis de UV se midio utilizando un UV RADIOMETER UVR-3036/S (Topcon Corporation).

Adicion de aminoacido despues de la irradiacion ultravioleta

Despues de la irradiacion UV-A a 8 J/cm2, el medio se repuso al medio normal arriba descrito, y el cultivo se llevo a cabo en una atmosfera de un 5% de CO2 y vapor de agua saturado a 37 °C (grados Celsius) durante 40 horas. Para determinar el efecto de la adicion de metionina despues de la irradiacion UV (en adelante, designada como "adicion de metionina posterior a la irradiacion"), a este medio cultivado durante 40 horas se le anadio L-metionina o D- metionina 100 jM (micromolar). La irradiacion ultravioleta despues de cambiar a un medio con adicion de D-prolina 0,1 jM (micromolar) se empleo como un control positivo, mientras que la irradiacion ultravioleta del medio todavfa libre de dicho aminoacido anadido se empleo como un control negativo.

Medicion del dano celular de adiciones previas y posteriores a la irradiacion

Posteriormente, el medio de cultivo se complemento con Alamar Blue (marca registrada, Biosource, Biosource International Inc. e Invitrogen) en una concentracion final de un 10%, y tres horas despues se determino la intensidad de fluorescencia de su sobrenadante con una longitud de onda de excitacion de 544 nm y una longitud de onda de fluorescencia de 590 nm conforme a la descripcion de Ahmed S.A. et al. J. Immunol. Method. 170, 211-224 (1994) y de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El porcentaje de las celulas viables se obtuvo como un porcentaje de un cociente calculado dividiendo la intensidad de fluorescencia de Alamar Blue bajo cada condicion experimental por la intensidad de fluorescencia en el grupo de control negativo, que no contema aminoacido anadido.

Resultados de la adicion de metionina previa a la irradiacion (1)

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La Figura 1 muestra los resultados del experimento que examina el efecto de la L-metionina o la D-metionina en los danos inducidos en el fibroblasto por la irradiacion ultravioleta con los UV-A a 9 J/cm2 Las barras de error para condiciones experimentales relevantes son las desviaciones estandar de los valores medidos de los resultados de los experimented repetidos cuatro veces bajo las mismas condiciones. El asterisco (*) indica P < 5%, los asteriscos (**) indican P < 1% y los asteriscos (***) indican P < 0,1% en el test de Bonferroni/Dunn.

El porcentaje de las celulas viables en ausencia del aminoacido anadido antes de la irradiacion UV-A a 9 J/cm2 (control negativo) era de un 24% El porcentaje de las celulas viables en presencia de la D-prolina anadida en una concentracion 0,1 pM (micromolar) antes de la irradiacion (control positivo) era de un 100%, lo que demostraba la supresion de la muerte celular. La adicion de D-metionina previa a la irradiacion en concentraciones 0,01 pM (micromolar), 0,1 pM (micromolar), 1 pM (micromolar), 10 pM (micromolar) o 100 pM (micromolar) resulto en porcentajes de las celulas viables de un 102%, 81%, 97%, 114% o 76%, respectivamente. La adicion de L-metionina previa a la irradiacion en concentraciones 0,001 pM (micromolar), 0,01 pM (micromolar), 0,1 pM (micromolar), 1 pM (micromolar), 10 pM (micromolar) o 100 pM (micromolar) resulto en porcentajes de las celulas viables de un 40%, 72%, 67%, 45%, 73% o 62%. Sobre la base de estos resultados, la adicion de L-metionina o D-metionina condujo a un aumento del porcentaje de las celulas viables y a una reduccion de la muerte celular.

Resultados de la adicion de metionina previa a la irradiacion (2)

La Figura 2 muestra los resultados del experimento que examina el efecto de la D-metionina en los danos inducidos en el fibroblasto por la irradiacion ultravioleta con los UV-A a 9 J/cm2. Las barras de error para condiciones experimentales relevantes son las desviaciones estandar de los valores medidos de los resultados de los experimentos repetidos de tres a cuatro veces bajo las mismas condiciones. El asterisco (*) indica p < 5% en el test de Bonferroni/Dunn.

El porcentaje de las celulas viables sin irradiacion UV y sin aminoacido anadido (en adelante, designado como "no irradiado con UV") era de un 100%. El porcentaje de las celulas viables en ausencia del aminoacido anadido antes de la irradiacion UV-A a 9 J/cm2 (control negativo) era de un 69% El porcentaje de las celulas viables en presencia de la D-prolina anadida en una concentracion 0,1 pM antes de la irradiacion (control positivo) era de un 88%, lo que demostraba la reduccion de la muerte celular. La adicion de D-metionina previa a la irradiacion en concentraciones 0,0001 pM (micromolar) y 0,1 pM (micromolar) resulto en porcentajes de las celulas viables de un 50% y el 101%. Sobre la base de estos resultados, la adicion de D-metionina en una concentracion 0,0001 pM (micromolar) no condujo a ningun aumento del porcentaje de las celulas viables, pero la adicion de D-metionina en una concentracion 0,1 pM (micromolar) condujo a un aumento del porcentaje de las celulas viables y a una reduccion de la muerte celular.

Resultados de la adicion de metionina posterior a la irradiacion

La Figura 3 muestra los resultados del experimento que examina el efecto de la D-metionina en los danos inducidos en el fibroblasto por la irradiacion ultravioleta con los UV-A a 8 J/cm2. Las barras de error para condiciones experimentales relevantes son las desviaciones estandar de los valores medidos de los resultados de los experimentos repetidos cuatro veces bajo las mismas condiciones. Los asteriscos (***) indican p < 0,1% en el test de Bonferroni/Dunn.

El porcentaje de las celulas viables en ausencia del aminoacido anadido despues de la irradiacion UV-A a 8 J/cm2 (control negativo) era de un 64%. El porcentaje de las celulas viables en presencia de la D-prolina anadida en una concentracion 0,1 pM (micromolar) despues de la irradiacion era de un 82%, lo que demostraba la reduccion de la muerte celular. La adicion de D-metionina posterior a la irradiacion en concentraciones 0,01 pM (micromolar), 0,1 pM (micromolar), 1 pM (micromolar), 10 pM (micromolar) o 100 pM (micromolar) resulto en porcentajes de las celulas viables de un 93%, 84%, 82%, 81% o aproximadamente 87%. Sobre la base de estos resultados, la adicion de D- metionina condujo a un aumento del porcentaje de las celulas viables y a una reduccion de la muerte celular. Tambien se puso de manifiesto que el efecto reductor de la muerte celular se observaba independientemente del momento de la adicion de la D-metionina, antes o despues de la irradiacion UV. Ademas, la L-metionina tambien reducfa la muerte celular inducida por la irradiacion UV. Por consiguiente, esto sugena que no tema importancia el momento en el que se anadfa la L-metionina, antes o despues de la irradiacion UV.

Ejemplo 2 (no correspondiente a la invencion)

Efecto mitigador de la serina en danos inducidos por irradiacion ultravioleta Metodos

El cultivo celular, la adicion de aminoacidos antes de la irradiacion UV, la irradiacion UV, la adicion de aminoacidos despues de la irradiacion UV y la medicion del dano celular se llevaron a cabo de modo similar al Ejemplo 1. La luz ultravioleta (UV-A) se irradio a 7,5 o 9 J/cm2. Para determinar el efecto de la adicion de serina antes de la irradiacion

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50

55

60

65

ultravioleta (en adelante, designada como "adicion de serina previa a la irradiacion") y el efecto de la adicion de serina despues de la irradiacion ultravioleta (en adelante, designada como "adicion de serina posterior a la irradiacion"), se emplearon L-serina (197-00403, Wako Pure Chemical Industries Ltd.) y D-serina (197-08823, Wako Pure Chemical Industries Ltd.) en concentraciones de 0,0001 a 100 pM (micromolar). El efecto de la adicion de serina posterior a la irradiacion se evaluo irradiando la celula con 7,5 J/cm2 de UV-A, cambiando a continuacion de vuelta al medio de cultivo normal en el que se llevo a cabo el cultivo durante 21 horas, y anadiendo D-serina a este medio de cultivo de 21 horas.

Resultados de la adicion de serina previa a la irradiacion (1)

La Figura 4 muestra los resultados del experimento que examina el efecto de la adicion de L-serina y D-serina previa a la irradiacion en los danos inducidos en el fibroblasto por la irradiacion ultravioleta con los UV-A a 9 J/cm2. Las barras de error para condiciones experimentales relevantes son las desviaciones estandar de los valores medidos de los resultados de los experimentos repetidos de cuatro a seis veces bajo las mismas condiciones. El asterisco (*) indica p < 5% en el test de Bonferroni/Dunn.

La intensidad de fluorescencia de Alamar Blue (marca registrada) sin irradiacion ultravioleta era de 794. La intensidad de fluorescencia sin aminoacido anadido antes de la irradiacion UV-A a 9 J/cm2 (control negativo) era de 140. La intensidad de fluorescencia con D-prolina anadida en una concentracion 0,1 pM (micromolar) antes de la irradiacion (control positivo) llegaba a 610, lo que indicaba una reduccion del dano celular. Las intensidades de fluorescencia con D-serina anadida en concentraciones 0,01 pM (micromolar), 0,1 pM (micromolar), 1 pM (micromolar) y 10 pM (micromolar) antes de la irradiacion eran de 445, 402, 371 y 491, respectivamente. Las intensidades de fluorescencia con L-serina anadida en concentraciones 0,1 pM (micromolar), 1 pM (micromolar) y 10 pM (micromolar) antes de la irradiacion eran de 265, 227 y 270, respectivamente. Sobre la base de estos resultados, la adicion de L-serina previa a la irradiacion practicamente no produjo ninguna reduccion del dano celular. En cambio, la adicion de D-serina previa a la irradiacion condujo a un aumento estadfsticamente significativo de la intensidad de fluorescencia, lo que demostraba una reduccion del dano celular.

Resultados de la adicion de serina previa a la irradiacion (2)

La Figura 5 muestra los resultados del experimento que examina el efecto de la adicion de D-serina previa a la irradiacion en los danos inducidos en el fibroblasto por la irradiacion ultravioleta con los UV-A a 8 J/cm2. Las barras de error para condiciones experimentales relevantes son las desviaciones estandar de los valores medidos de los resultados de los experimentos repetidos cuatro veces bajo las mismas condiciones. El asterisco (*) indica p < 5% en el test de Bonferroni/Dunn.

El porcentaje de las celulas viables sin irradiacion ultravioleta era de un 100%. El porcentaje de las celulas viables en ausencia del aminoacido anadido antes de la irradiacion UV-A a 8 J/cm2 (control negativo) era de un 77% Los porcentajes de las celulas viables en presencia de la D-serina anadida en concentraciones 0,0001 pM (micromolar), 0,01 pM (micromolar) y 10 pM (micromolar) antes de la irradiacion eran de un 74%, 92% y 93%, respectivamente. Sobre la base de estos resultados, el dano celular inducido por ultravioletas se caracterizaba por el hecho de que la adicion de D-serina en una concentracion 0,0001 pM (micromolar) resultaba en un aumento del porcentaje de las celulas viables, y la adicion de D-serina en concentraciones 0,1 pM (micromolar) y 10 pM (micromolar) resultaba en un aumento del porcentaje de las celulas viables, lo que indicaba una reduccion de la muerte celular.

Resultados de la adicion de serina posterior a la irradiacion

La Figura 6 muestra los resultados del experimento que examina el efecto de la adicion de D-serina posterior a la irradiacion en los danos inducidos en el fibroblasto por la irradiacion ultravioleta con los UV-A a 7,5 J/cm2. Las barras de error para condiciones experimentales relevantes son las desviaciones estandar de los valores medidos de los resultados de los experimentos repetidos ocho veces bajo las mismas condiciones. El asterisco (*) indica p < 5% en el test de Bonferroni/Dunn.

La intensidad de fluorescencia de Alamar Blue (marca registrada) sin irradiacion ultravioleta era de 764. La intensidad de fluorescencia sin aminoacido anadido despues de la irradiacion UV-A a 7,5 J/cm2 (control negativo) era de 348. La intensidad de fluorescencia con adicion de D-prolina en una concentracion 0,1 pM (micromolar) despues de la irradiacion (control positivo) llegaba a 579, lo que indicaba una reduccion del dano celular. Las intensidades de fluorescencia con adicion de D-serina en concentraciones 0,01 pM (micromolar), 0,1 pM (micromolar), 1 pM (micromolar), 10 pM (micromolar) y 100 pM (micromolar) despues de la irradiacion eran de 697, 735, 742, 664 y 663, respectivamente. Sobre la base de estos resultados, la adicion de D-serina posterior a la irradiacion condujo a un aumento estadfsticamente significativo de la intensidad de fluorescencia, lo que demostraba una reduccion del dano celular. Tambien se puso de manifiesto que el efecto reductor del dano celular se obtema independientemente del momento de la adicion de la D-serina, antes o despues de la irradiacion UV.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Ejemplo 3 (no correspondiente a la invencion)

Efecto mitigador de la D-cicloserina en danos inducidos por irradiacion ultravioleta Metodos

El cultivo celular, la adicion de aminoacidos antes de la irradiacion UV, la irradiacion UV, la adicion de aminoacidos despues de la irradiacion UV y la medicion del dano celular se llevaron a cabo de modo similar al Ejemplo 1. La luz ultravioleta (UV-A) se irradio a 9 J/cm2 Para determinar el efecto de la adicion de D-cicloserina antes de la irradiacion ultravioleta (en adelante, designada como "adicion de cicloserina previa a la irradiacion"), se empleo D- cicloserina (C6880, Sigma) en una concentracion de 0,0001 a 100 pM.

Resultados de la adicion de D-cicloserina previa a la irradiacion

La Figura 7 muestra los resultados del experimento que examina el efecto de la adicion de D-cicloserina previa a la irradiacion en los danos inducidos en el fibroblasto por la irradiacion ultravioleta con los UV-A a 9 J/cm2. Las barras de error para condiciones experimentales relevantes son las desviaciones estandar de los valores medidos de los resultados de los experimentos repetidos de tres a cuatro veces bajo las mismas condiciones. El sfmbolo (+) y los asteriscos (***) indican p < 10% y p > 0,1%, respectivamente, en el test de Bonferroni/Dunn.

El porcentaje de las celulas viables sin adicion de aminoacido antes de la irradiacion UV-A a 9 J/cm2 (control negativo) era de un 53%. El porcentaje de las celulas viables con D-cicloserina anadida en concentraciones 0,1 nM, 10 nM, 100 nM, 1 pM (micromolar), 10 pM (micromolar) y 100 pM (micromolar) antes de la irradiacion era de un 60%, 60%, 63%, 74%, 69% y 109%. Sobre la base de estos resultados, la adicion de D-cicloserina condujo a un mayor porcentaje de las celulas viables, lo que indicaba una reduccion de la muerte celular.

Sobre la base de la presente invencion, mas abajo se muestran los ejemplos de formulacion que comprenden D- metionina una formulacion en emulsion, una formulacion en parche, un comprimido, una capsula blanda, un granulo, bebida, un caramelo, una galleta, pasta de miso, una salsa vinagreta, una mayonesa, un pan frances, una salsa de soja, yogur, polvo seco de condimento para arroz, salsa de condimento/salsa para natto (pasta de soja fermentada japonesa), natto, vinagre negro sin refinar, crema, crema corporal, una formulacion en gel, una mascarilla exfoliante, una compresa humeda, una emulsion, una locion facial y una formulacion en aerosol. En los siguientes Ejemplos de Formulacion, la metionina estaba en forma D. Estos ejemplos de formulacion se enumeran unicamente con fines de ejemplificacion y no estan concebidos para limitar el alcance de la invencion.

Ejemplo de Formulacion 1 (formulacion en emulsion)

(Composicion) Contenido (% en masa)

Metionina Alcohol behemlico Cetanol

Monoester de acido graso y glicerina Aceite de ricino hidrogenado POE (60)

Vaselina blanca Parafina lfquida Miristato de isopropilo Metil polisiloxano (6cs)

Glicerina conc.

Dipropilenglicol Polfmero de carboxivinilo Hialuronato de sodio Hidroxido de potasio Acido lactico Edetato de sodio Etilparabeno

Agua depurada____________________________

Ejemplo de Formulacion 2 (formulacion en parche)

0,42

0,2

0,5

1,8

1,0

2,0

10,0

3.0 1,5

13,0

2.0 0,25

0,005

Segun corresponda Segun corresponda Segun corresponda Segun corresponda

___________Resto

100,00

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Metionina 0,3

Acido poliacnlico 3,0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Poliacrilato de sodio

2,5

Gelatina

0,5

Carboximetil celulosa sodica

4,0

Alcohol polivimlico

0,3

Glicerina conc.

14,0

1,3-butilenglicol

12,0

Hidroxido de aluminio

0,1

Edetato de sodio

0,03

Metilparabeno

0,1

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 3 (comprimido) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (mg/comprimido)

D-serina y/o D-cicloserina

360,5

Lactosa

102,4

Carboximetil celulosa calcica

29,9

Hidroxipropil celulosa

6,8

Estearato de magnesio

5,2

Celulosa cristalina

10,2

515,0

Ejemplo de Formulacion 4 (comprimido) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (mg/comprimido)

Ester de sacarosa

70

Celulosa cristalina

74

Metil celulosa

36

Glicerina

25

D-serina y/o D-cicloserina

475

N-acetilglucosamina

200

Acido hialuronico

150

Vitamina E

30

Vitamina B6

20

Vitamina B2

10

Acido a (alfa) -lipoico

20

Coenzima Q10

40

Ceramida (extracto de Konjac)

50

L-prolina

300

1.500

Ejemplo de Formulacion 5 (capsula blanda) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (mg/capsula)

Aceite de soja comestible

530

Extracto de Eucommia ulmoides

50

Extracto de ginseng

50

D-serina y/o D-cicloserina

100

Jalea real

50

Maca

30

GABA

30

Cera de abejas

60

Gelatina

375

Glicerina

120

Este de acido graso y glicerina

105

1.500

Ejemplo de Formulacion 6 (capsula blanda) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (mg/capsula)

Aceite de germen de arroz pardo

659

D-serina y/o D-cicloserina

500

Resveratrol

1

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Extracto de germen de loto

100

Elastina

180

ADN

30

Acido folico

30

1.500

Ejemplo de Formulacion 7 (granulo) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (mg/compresa)

D-serina y/o D-cicloserina

400

Vitamina C

100

Isoflavona de soja

250

Lactosa reducida

300

Oligosacarido de soja

36

Eritritol

36

Dextrina

30

Agente aromatizante

24

Acido cftrico

24

1.200

Ejemplo de Formulacion 8 (bebida) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (g/60 ml)

Extracto de Eucommia ulmoides

1,6

Extracto de ginseng

1,6

D-serina y/o D-cicloserina

1,6

Jarabe de maltosa reducida

28

Eritritol

8

Acido dtrico

2

Agente aromatizante

1,3

N-acetilglucosamina

1

Hialuronato de sodio

0,5

Vitamina E

0,3

Vitamina B6

0,2

Vitamina B2

0,1

Acido a (alfa) -lipoico

0,2

Coenzima Q10

1,2

Ceramida (extracto de Konjac)

0,4

L-prolina

2

Agua depurada

Resto

60

Ejemplo de Formulacion 9 (caramelo) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Azucar

50

Jarabe

48

D-serina y/o D-cicloserina

1

Agente aromatizante

1

100

Ejemplo de Formulacion 10 (galleta) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Harina debil

45,0

Mantequilla

17,5

Azucar granulado

20,0

D-serina y/o D-cicloserina

4,0

Huevo

12,5

Agente aromatizante

1,0

100,0

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 10 (galleta)

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

El azucar granulado se anadio en porciones a la mantequilla bajo agitacion, luego se anadieron y se mezclaron un huevo, D-serina y/o D-cicloserina junto con un agente aromatizante. Despues de mezclar a fondo se anadio harina debil uniformemente tamizada y luego se agito lentamente, y se dejo reposar como una masa en un refrigerador. A continuacion se moldeo y se cocio al horno durante 15 minutos a 170 °C (grados Celsius) para obtener una galleta.

Ejemplo de Formulacion 11 (pasta de miso (soja)) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion) Contenido (g)

Semilla de soja Arroz malteado Sal

D-serina y/o D-cicloserina

Agua_______________________________________________________

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 11 (pasta de miso (soja))

1.000

1.000

420

158

Resto

4.000

El arroz malteado se mezcla a fondo con una sal. Las semillas de soja lavadas se ponen en remojo en tres veces su volumen de agua, que despues se escurre y se anade agua nueva en ebullicion, y se vierte en un colador para recoger el caldo (lfquido de tanemizu), en el que se disuelve D-serina y/o D-cicloserina al 10% p/v. Las semillas hervidas se pican inmediatamente, combinadas con arroz malteado mezclado con sal, y despues se anade el lfquido de tanemizu arriba descrito que contiene D-serina y/o D-cicloserina disueltas en el mismo, y se amasa uniformemente para obtener una dureza similar a la de la arcilla. Se preparan bolas de masa y se introducen de forma compacta en un recipiente sin dejar ningun hueco, y la superficie del contenido se alisa y se cierra hermeticamente envolviendola con una pelfcula de plastico. Tres meses despues, el contenido se transfiere a un nuevo recipiente y la superficie se alisa y se cierra hermeticamente envolviendola con una pelfcula de plastico. En lugar de anadir D-serina y/o D-cicloserina al lfquido de tanemizu, se puede emplear un arroz malteado que produce una gran cantidad de D-serina y/o D-cicloserina. Dicho arroz malteado se puede seleccionar cuantificando la D- serina y/o la D-cicloserina mediante el metodo descrito en la publicacion de patente japonesa no examinada n° 2008185558. Alternativamente, una pasta de miso comercialmente disponible se puede complementar con D-serina y/o D-cicloserina o con una sal de las mismas.

Ejemplo de Formulacion 12 (salsa vinagreta) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion) Contenido (g)

Aceite de ensalada Vinagre

Cloruro de sodio D-serina y/o D-cicloserina Pimienta

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 12 (salsa vinagreta)

27.0

30.0 0,9 1,1 1,0

60.0

El vinagre se combina con cloruro de sodio y con D-serina y/o D-cicloserina, se agita a fondo y despues se anade la pimienta.

Ejemplo de Formulacion 13 (mayonesa) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (g)

Aceite de ensalada Vinagre

Cloruro de sodio D-serina y/o D-cicloserina Yema de huevo Azucar Pimienta

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 13 (mayonesa)

134.0 5

0,9

1

18

0,2

0,9

160.0

Una yema de huevo (a temperatura ambiente) se combina con vinagre, cloruro de sodio y pimienta, asf como con D- serina y/o D-cicloserina, y se agita a fondo utilizando una batidora. La agitacion continua mientras se anade el aceite de ensalada en porciones para formar una emulsion. Finalmente se anade el azucar y la mezcla se agita.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Ejemplo de Formulacion 14 (pan frances) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion) Contenido (g)

Harina de fuerza Harina debil Cloruro de sodio Azucar

D-serina y/o D-cicloserina Levadura seca

Agua tibia____________________________________________

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 14 (pan frances)

140

60

3 6 2

4

128

343

El agua tibia se combina con 1 g de azucar y levadura seca, y despues se deja que esta experimente una prefermentacion. En un cuenco se disponen la harina de fuerza, la harina debil, el cloruro de sodio y 5 g de azucar, junto con D-serina y/o D-cicloserina, y se introduce la levadura prefermentada. Despues de amasar a fondo para obtener una masa en forma de bola, se lleva a cabo una fermentacion primaria a 30 °C. La masa se amasa de nuevo y se deja reposar, y despues se conforma en formas adecuadas, que se someten a una fermentacion final utilizando una maquina de fermentacion electronica. Despues de formar cortes, se lleva a cabo una coccion durante 30 minutos en un horno a 220 °C (grados Celsius).

Ejemplo de Formulacion 15 (salsa de soja) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (g)

Salsa de soja comercialmente disponible

D-serina y/o D-cicloserina_________________________________

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 15 (salsa de soja)

900

100

1.000

La salsa de soja comercialmente disponible se complementa con D-serina y/o D-cicloserina, y se agita a fondo. En lugar de anadir D-serina y/o D-cicloserina o una sal de las mismas, para fermentar la salsa de soja se puede emplear un arroz malteado que produzca una gran cantidad de D-serina y/o D-cicloserina. Dicho arroz malteado se puede seleccionar cuantificando la D-serina y/o la D-cicloserina mediante el metodo descrito en la publicacion de patente japonesa no examinada n° 2008-185558.

Ejemplo de Formulacion 16 (yogur) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (g)

Leche

L. bulgaricus S. thermophilus

D-serina y/o D-cicloserina___________________________

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 16 (yogur)

880

50

50

20

1.000

La fermentacion de lleva a cabo a una temperatura de 40 °C (grados Celsius) a 45 °C (grados Celsius). Tambien es posible emplear otros organismos de semilla de fermentacion comercialmente disponibles y complementar yogur comercialmente disponible con D-serina y/o D-cicloserina. En lugar de anadir D-serina y/o D-cicloserina o una sal de las mismas, para la fermentacion se puede emplear un organismo que produzca una gran cantidad de D-serina y/o D-cicloserina. Dicho organismo se puede seleccionar cuantificando la D-serina y/o la D-cicloserina mediante el metodo descrito en la publicacion de patente japonesa no examinada n° 2008-185558.

Ejemplo de Formulacion 17 (polvo seco de condimento para arroz) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion) Contenido (g)

D-serina y/o D-cicloserina 50

Laver 15

L-glutamato de sodio 10

Cloruro de sodio 2

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Sesamo tostado 10

Escamas de caballa secas 10

Azucar 1

Salsa de soja_________________________________________________________________________________2

100

Ejemplo de Formulacion 18 (condimento, salsa para natto) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion) Contenido (g)

Salsa comercialmente disponible para natto 9

D-serina y/o D-cicloserina_______________________________________________________________________1_

10

Ejemplo de Formulacion 19 (natto) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion) Contenido (g)

Natto comercialmente disponible

D-serina y/o D-cicloserina__________________________

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 19 (natto)

19,9

0,1

20

En lugar de anadir D-serina y/o D-cicloserina o una sal de las mismas, para producir natto se puede emplear un organismo que produzca una gran cantidad de D-serina y/o D-cicloserina. Dicho organismo se puede seleccionar cuantificando la D-serina y/o la D-cicloserina mediante el metodo descrito en la publicacion de patente japonesa no examinada n° 2008-185558.

Ejemplo de Formulacion 20 (vinagre negro sin refinar) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion) Contenido (g)

Vinagre negro sin refinar comercialmente disponible

D-serina y/o D-cicloserina__________________________________________

Metodo para producir el Ejemplo de Formulacion 20 (vinagre negro sin refinar)

900

100

1.000

En lugar de anadir D-serina y/o D-cicloserina o una sal de las mismas, para producir vinagre, vinagre negro o vinagre sin refinar se puede emplear un organismo que produzca una gran cantidad de D-serina y/o D-cicloserina. Dicho organismo se puede seleccionar cuantificando la D-serina y/o la D-cicloserina mediante el metodo descrito en la publicacion de patente japonesa no examinada n° 2008-185558.

Ejemplo de Formulacion 21 (crema)

(Composicion) Contenido (%)

Parafina lfquida 3

Vaselina 1

Dimetil polisiloxano 1

Alcohol esteanlico 1,8

Alcohol behemlico 1,6

Glicerina 8

Dipropilenglicol 5

Aceite de nuez de macadamia 2

Aceite hidrogenado 3

Escualano 6

Acido estearico 2

HIdroxiestearato de colesterol 0,5

2-etilhexanoato de cetilo 4

Aceite de ricino hidrogenado de polioxietileno 0,5

Monoestearato de glicerina autoemulsionado 3

Hidroxido de potasio 0,15

Hexametafosfato de sodio 0,05

Trimetil glicina 2

Sal potasica de diester de acido L-ascorbico dl-acido alfa tocoferol 1

fosforico

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Acetato de tocoferol

0,1

Metionina

4

Parabeno

Segun corresponda

Edetato trisodico

0,05

4-t-butil-4'-metoxibenzofl metano

0,05

Diparametoxicinamato mono-2-etilhexanoato de glicerilo

0,05

Colorante

Segun corresponda

Polfmero de carboxivinilo

0,05

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 22 (crema corporal) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Dimetil polisiloxano

3

Decametil ciclopentasiloxano

13

Dodecametil ciclohexasiloxano

12

Copolfmero de polioxietileno - metil polisiloxano

1

Etanol

2

Isopropanol

1

Glicerina

3

Dipropilenglicol

5

Polietilenglicol 6000

5

Hexametafosfato de sodio

0,05

Acetato de tocoferol

0,1

D-serina y/o D-cicloserina

5

Extracto de hinojo

0,1

Extracto de hamamelis

0,1

Extracto de ginseng

0,1

L-mentol

Segun corresponda

p-oxibenzoato

Segun corresponda

Edetato trisodico

0,05

Dimorfolinopiridazinona

0,01

Trimetoxicinamato de metilbis(trimetoxisiolxi)sililisopentilo

0,1

Oxido de hierro amarillo

Segun corresponda

Titanato de cobalto

Segun corresponda

Dimetil diestearil amonio hectolita

1,5

Alcohol polivimlico

0,1

Hidroxietil celulosa

0,1

Acido trimetilsiloxi silfcico

2

Perfume

Segun corresponda

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 23 (crema corporal)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Dimetil polisiloxano

3

Decametil ciclopentasiloxano

13

Dodecametil ciclohexasiloxano

12

Copolfmero de polioxietileno - metil polisiloxano

1

Etanol

2

Isopropanol

1

Glicerina

3

Dipropilenglicol

5

Polietilenglicol 6000

5

Hexametafosfato de sodio

0,05

Acetato de tocoferol

0,1

Metionina

3

Extracto de hinojo

0,1

Extracto de hamamelis

0,1

Extracto de ginseng

0,1

L-mentol

Segun corresponda

p-oxibenzoato

Segun corresponda

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Edetato trisodico

0,05

Dimorfolinopiridazinona

0,01

Trisiloxano trimetoxicinamato de isopentilo

0,1

Oxido de hierro amarillo

Segun corresponda

Titanato de cobalto

Segun corresponda

Dimetil diestearil amonio hectolita

1,5

Alcohol polivimlico

0,1

Hidroxietil celulosa

0,1

Trimetilsiloxisilicato

2

Perfume

Segun corresponda

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 24 (formulacion en gel)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Dimetil polisiloxano

5

Glicerina

2

1,3-butilenglicol

5

Polietilenglicol 1500

3

Polietilenglicol 20000

3

Octanoato de cetilo

3

Acido cftrico

0,01

Citrato de sodio

0,1

Hexametafosfato de sodio

0,1

Glicirricinato dipotasico

0,1

Metionina

2

Acetato de tocoferol

0,1

Extracto de rafz de Scutellaria

0,1

Extracto de Saxifraga

0,1

Edetato trisodico

0,1

Goma xantana

0,3

Polfmero cruzado de acrilatos/C10-30 acrilato de alquilo (Pemulen TR-2)

0,05

Polvo de agar

1,5

Fenoxietanol

Segun corresponda

Dibutilhidroxitolueno

Segun corresponda

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 25 (mascarilla exfoliante) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Etanol

10

1,3-butilenglicol

6

Polietilenglicol 4000

2

Aceite de oliva

1

Aceite de nuez de macadamia

1

Acido fitosteril hidroxiestearico

0,05

Acido lactico

0,05

Lactato de sodio

0,1

L-ascorbato sulfato disodico

0,1

Sal potasica de diester de acido L-ascorbico dl-acido alfa tocoferol fosforico

0,1

D-serina y/o D-cicloserina

10

Colageno de pescado

0,1

Sulfato de sodio condroitina

0,1

Carboximetil celulosa de sodio

0,2

Alcohol polivimlico

12

p-oxibenzoato

Segun corresponda

Perfume

Segun corresponda

Agua depurada

Resto

100,00

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Ejemplo de Formulacion 26 (mascarilla exfoliante)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Etanol

10

1,3-butilenglicol

6

Polietilenglicol 4000

2

Aceite de oliva

1

Aceite de nuez de macadamia

1

Acido fitosteril hidroxiestearico

0,05

Acido lactico

0,05

Lactato de sodio

0,1

L-ascorbato sulfato disodico

0,1

Sal potasica de diester de acido L-ascorbico dl-acido alfa tocoferol fosforico

0,1

Metionina

4

Colageno de pescado

0,1

Sulfato de sodio condroitina

0,1

Carboximetil celulosa de sodio

0,2

Alcohol polivimlico

12

p-oxibenzoato

Segun corresponda

Perfume

Segun corresponda

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 27 (compresa humeda)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Glicerina

1

1,3-butilenglicol

8

Xilita

2

Polietilenglicol 1500

2

Aceite de romero

0,01

Aceite de salvia

0,1

Acido cftrico

0,02

Citrato de sodio

0,08

Hexametafosfato de sodio

0,01

Hidroxipropil-P (beta) -ciclodextrina

0,1

Metionina

0,5

Extracto de abedul

0,1

Extracto de lavanda

0,01

Goma xantana

0,05

Polfmero de carboxivinilo

0,15

p-oxibenzoato

Segun corresponda

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 28 (emulsion)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Parafina lfquida

7

Vaselina

3

Decametil ciclopentasiloxano

2

Alcohol behemlico

1,5

Glicerina

5

Dipropilenglicol

7

Polietilenglicol 1500

2

Aceite de jojoba

1

Acido isoestearico

0,5

Acido estearico

0,5

Acido behenico

0,5

Tetra (2-etilhexanoato) de pentaeritritol

3

2-etilhexanoato de cetilo

3

Monoestearato de glicerina

1

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Monoestearato de polioxietileno-glicerina

1

Hidroxido de potasio

0,1

Hexametafosfato de sodio

0,05

Glicirricinato de estearilo

0,05

Metionina

1

Extracto de jalea real

0,1

Extracto de levadura

0,1

Acetato de tocoferol

0,1

Hialuronato de sodio acetilado

0,1

Edetato trisodico

0,05

4-t-butil-4'-metoxidibenzoilmetano

0,1

Parametoxicinamato de 2-etilhexilo

0,1

PoKmero de carboxivinilo

0,15

Parabeno

Segun corresponda

Perfume

Segun corresponda

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 29 (emulsion)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Dimetil polisiloxano

2

Alcohol behemlico

1

Alcohol batilico

0,5

Glicerina

5

1,3-butilenglicol

7

Eritritol

2

Aceite hidrogenado

3

Escualano

6

Tetra (2-etilhexanoato) de pentaeritritol

2

Polioxietileno gliceril isoestearato

1

Monoestearato de polioxietileno-glicerina

1

Metionina

0,3

Hidroxido de potasio

Segun corresponda

Hexametafosfato de sodio

0,05

Fenoxietanol

Segun corresponda

Polfmero de carboxivinilo

0,1

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 30 (locion para la piel) (no correspondiente a la invencion)

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Alcohol etflico

5

Glicerina

1

1,3-butilenglicol

5

Eter polioxietileno-polioxipropileno deciltetradedlico

0,2

Hexametafosfato de sodio

0,03

Trimetil glicina

1

Acido sodio poliaspartico

0,1

Sal potasica de diester de acido L-ascorbico dl-acido alfa tocoferol

0,1

fosforico

Tiotaurina

0,1

D-serina y/o D-cicloserina

8

EDTA trisodico

0,1

Polfmero de carboxivinilo

0,05

Hidroxido de potasio

0,02

Fenoxietanol

Segun corresponda

Perfume

Segun corresponda

Agua depurada

Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 31 (locion para la piel)

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

(Composicion)

Contenido (% en masa)

Alcohol etilico 5

Glicerina 1

1,3-butilenglicol 5

Eter polioxietileno-polioxipropileno deciltetradedlico 0,2

Hexametafosfato de sodio 0,03

Trimetil glicina 1

Acido sodio poliaspartico 0,1

Sal potasica de diester de acido L-ascorbico dl-acido alfa tocoferol 0,1

fosforico

Tiotaurina 0,1

Metionina 4

EDTA trisodico 0,1

PoKmero de carboxivinilo 0,05

Hidroxido de potasio 0,02

Fenoxietanol Segun corresponda

Perfume Segun corresponda

Agua depurada___________________________________________________________________________Resto

100,00

Ejemplo de Formulacion 32 (locion para la piel)

(Composicion) Contenido (% en masa)

Etanol

Dipropilenglicol

Polietilenglicol 1000

Polietilenmetil glucosido

Aceite de jojoba

Tri (2-etilhexanoato) de glicerilo

Aceite de ricino hidrogenado de polioxietileno

Diisoestearato de poliglicerilo

N-estearofl L-glutamato de sodio

Acido cftrico

Citrato de sodio

Hidroxido de potasio

Glicirricinato dipotasico

Clorhidrato de arginina

Acido L-ascorbico 2-glucosido

Metionina

Edetato trisodico

Parametoxicinamato de 2-etilhexilo

Dibutilhidroxitolueno

Parabeno

Agua de alta mar

Perfume

Agua depurada__________________________________________________________

Ejemplo de Formulacion 33 (solucion madre para preparado externo de urea en aerosol)

10

1

1

1

0,01

0,1

0,2

0,15

0,1

0,05

0,2

0,4

0,1

0,1

2

0,5

0,05

0,01

Segun corresponda Segun corresponda 3

Segun corresponda

___________Resto

100,00

(Composicion) Contenido (% en masa)

Etanol 15,0

Aceite de ricino hidrogenado de polioxietileno 50 1,5

Difenhidramina 1,0

Dibucama 2,0

Acetato de tocoferol 0,5

Metionina 0,1

Acido isoestearico 0,1

1,3-butilenglicol 3,0

Polietilenglicol 400 3,0

Alcanfor 0,05

Urea 20,0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Agua depurada________________________________

Ejemplo de Formulacion 34 (espray de urea en aerosol)

Resto

100,00

(Composicion)

Contenido (% en masa)

(Solucion madre para preparado externo de urea en aerosol)

Eter dimetilico_____________________________________

100,00

65.0

35.0

Metodo para el llenado del Ejemplo de Formulacion 34 (espray de urea en aerosol)

La solucion madre para preparado externo de urea en aerosol y el eter dimetilico se cargan en un recipiente de aluminio para aerosol resistente a la presion, cuya superficie interior esta revestida con Teflon (marca registrada) para obtener un preparado en aerosol.

Claims (8)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   45

   50

   55

   60

   65

   REIVINDICACIONES

   1. Una composicion destinada al uso en la prevencion o el tratamiento de una enfermedad de la piel inducida por irradiacion ultravioleta, comprendiendo dicha composicion uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo consistente en D-metionina y/o sales de la misma.
2. 2. La composicion destinada al uso segun la reivindicacion 1, en la que la enfermedad de la piel se selecciona entre un grupo consistente en eritema, dermatitis solar, dermatopatia actmica cronica, queratosis actmica, queilitis actmica, enfermedad de Favre-Racouchot, fotodermatosis, dermatitis por fotocontacto, dermatitis de Berloque, erupcion medicamentosa fotosensible, erupcion polimorfa lummica, hidroa vacciniforme, urticaria solar, dermatitis fotosensible cronica, xerodermia pigmentosa, efelides, porfiria, pelagra, enfermedad de Hartnup, queratosis solar, dermatomiositis, liquen plano, enfermedad de Darier, pitiriasis rubra pilaris, rosacea, dermatitis atopica, cloasma, herpes simple, lupus eritomatoso, carcinoma de celulas escamosas, carcinoma de celulas basales y enfermedad de Bowen.
3. 3. La composicion destinada al uso segun la reivindicacion 1 o 2, que se suministra en forma de un preparado externo para la piel o en forma de un producto alimentario.
4. 4. Uso no terapeutico de una composicion que comprende uno o mas compuestos seleccionados entre un grupo consistente en D-metionina y/o sales de la misma como un agente para mejorar un estado cosmetico de la piel inducido por irradiacion ultravioleta.
5. 5. El uso segun la reivindicacion 4, consistiendo el estado cosmetico de la piel en arrugas.
6. 6. Composicion destinada al uso segun la reivindicacion 1, consistiendo la composicion en un agente de filtro solar.
7. 7. El uso segun la reivindicacion 4 o 5, o la composicion destinada al uso segun la reivindicacion 6, suministrandose la composicion en forma de un preparado externo para la piel o en forma de un producto alimentario.

   Porcentaje de celulas viables (%)

   imagen1

   imagen2

   imagen3

   D-metionina L-metionina

   Concentration (^M)

   O O

   o o

   FIG.1

   Bonferron Dun n * : p < 0 05

   imagen4

   No Control Control

   irradiado negativo positivo

   con UV
8. 0.0001 0.1

   i__________________I

   D-metionina (^M)

   FIG.2

   Intensidad de fluorescencia

   vO

   O'

   imagen5

   Control Control o.01 0.1 1 10 100

   CL negativo positivo

   D-metionina (^M)

   FIG.3

   imagen6

   D-serina (^M) L-serina (^M)

   FIG.4

   Intensidad de fluorescencia

   imagen7

   imagen8

   Contro1 O.OOOIjjM 0.01 10^M

   negativo

   D-serina

   FIG.5

   Media ± DE, N = 8 Bonferroni/Dunn * p < 0,05 frente a control negativo

   imagen9

   No Control Control 0.01 0.1 1 10 100

   irradiado negativo positivo con UV

   D-serina (^M)

   FIG.6

   Media ± DE, N = 3-4 (no irradiado con UV:N = 9) Bonferroni/Dunn *** p < 0,001, + p < 0,1

   CO

   _CD

   _Q

   03

   >

   CO

   03

   kCD

   O

   CD

   ■a

   CD

   'aT

   H—'

   c

   CD

   O

   i_

   o

   CL

   imagen10

   No Control irradiado negativo con UV

   0*1 nM 10nM 100nM I^M 10pM IOOjjM

   D-cicloserina

   FIG.7