ES2541662T3 - Derivados arilamida sustituidos con triazol y utilización de los mismos como antagonistas de receptores purinérgicos P2X3 y/o P2X2/3 - Google Patents

Abstract

Compuesto de fórmula I: **Fórmula** o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en los que: R1 es [1,2,4]triazol-1-ilo sustituido opcionalmente en la posición 5 con alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, alquilamino C1-6-alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6 o cicloalquil C3-6-alquilo C1-6, R2 es 5-metil-piridín-2-ilo, 5-cloro-piridín-2-ilo, 5-fluoro-piridín-2-ilo, 5-metil-3-fluoro-piridín-2-ilo, 5-metil-3-cloro-piridín-2-ilo, 3,5-difluoro-piridín-2-ilo ó 3,5-dicloro-piridín-2-ilo, R3 es hidrógeno, R4 es hidrógeno o metilo, R5 es hidroximetilo, metoximetilo, morfolín-4-ilmetilo, piperidín-1-ilmetilo sustituido opcionalmente en la posición 4 con metilo, metanosulfonilo o acetilo, 1,1-dioxo-tiomorfolín-1-ilo, piperidín-1-ilo sustituido opcionalmente una o dos veces con un grupo o grupos seleccionados independientemente de entre metilo, metoxi o halo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirazolilo o tiazolilo, en el que el piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirazolilo y tiazolilo, cada uno, puede sustituirse opcionalmente una o dos veces con un grupo o grupos seleccionados independientemente de entre metilo, metiloamino, dimetiloamino y halo, R6, R7 y R8, cada uno independientemente, es hidrógeno, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6, halo, haloalquilo C1-6 o ciano.

Description

pulmón. Más recientemente, otros han relacionado los receptores P2X2 y P2X3 con la detección de pO2 en los CNP pulmonares (Rong et al., J. Neurosci. 23(36):11315-21, 2003). El documento nº WO 2007/020194 se refiere a moduladores de P2X3 útiles para el tratamiento del dolor y los trastornos genitourinarios, gastrointestinales y respiratorios.

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De acuerdo con lo anteriormente expuesto, existe una necesidad de compuestos que actúen como moduladores de los receptores P2X, incluyendo antagonistas de los receptores P2X3 y P2X2/3, así como una necesidad de métodos para tratar enfermedades, condiciones y trastornos mediados por los receptores P2X3 y/o P2X2/3. La presente invención satisface dichas necesidades, así como otras.

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La invención proporciona un compuesto de fórmula I: o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en los que:

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R1 es [1,2,4]triazol-1-ilo sustituido en la posición 5 con alquilo C1-6, halo-alquilo C1-6, alcoxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxi-alquilo C1-6, alquilamino C1-6-alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6 o cicloalquil C3-6-alquilo C1-6, R2 es 5-metil-piridín-2-ilo, 5-cloro-piridín-2-ilo, 5-fluoro-piridín-2-ilo, 5-metil-3-fluoro-piridín-2-ilo, 5-metil-3-cloro-piridín-2-ilo, 3,5-difluoro-piridín-2-ilo o 3,5-dicloro-piridín-2-ilo,

R3 es hidrógeno, 20

R4 es hidrógeno o metilo,

R5 es hidroximetilo, metoximetilo, morfolín-4-ilometilo, piperidín-1-ilmetilo sustituido opcionalmente en la posición 4 con metilo, metanosulfonilo o acetilo, 1,1,-dioxo-tiomorfolín-1-ilo, piperidín-1-ilo sustituido opcionalmente una o dos veces con un grupo o grupos seleccionados independientemente de entre metilo, metoxi o halo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirazolilo o tiazolilo, en el que el piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, 25 pirazolilo y tiazolilo, cada uno, puede sustituirse opcionalmente una o dos veces con un grupo o grupos seleccionados independientemente de entre metilo, metiloamino, dimetiloamino y halo,

R6, R7 y R8, cada uno independientemente, es hidrógeno, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6, halo, haloalquilo C1-6 o ciano.

La invención proporciona además composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos, métodos de 30 utilización de los compuestos y métodos de preparación de los compuestos.

A menos que se indique lo contrario, las expresiones siguientes utilizadas en la presente solicitud, incluyendo la memoria y reivindicaciones, presentan las definiciones proporcionadas posteriormente. Debe indicarse que, tal como se utiliza en la memoria y en las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares “un”, “una” y “el” o “la” incluyen los 35 referentes plurales, a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

El término “agonista” se refiere a un compuesto que incrementa la actividad de otro compuesto o sitio de receptor.

El término “alquilo” se refiere a la fracción hidrocarburo saturada lineal o ramificada monovalente que consiste 40 únicamente de átomos de carbono e hidrógeno, que presenta entre uno y doce átomos de carbono. La expresión “alquilo inferior” se refiere a un grupo alquilo de uno a seis átomos de carbono, es decir alquilo C1-C6. Entre los ejemplos de grupos alquilo se incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, n-hexilo, octilo y dodecilo.

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El término “alquenilo” se refiere a un radical hidrocarburo monovalente lineal de dos a seis átomos de carbono o un radical hidrocarburo monovalente ramificado de tres a seis átomos de carbono, que contiene por lo menos un doble enlace, por ejemplo etenilo y propenilo.

El término “alquinilo” se refiere a un radical hidrocarburo monovalente lineal de dos a seis átomos de carbono o un 50 radical hidrocarburo monovalente ramificado de tres a seis átomos de carbono, que contiene por lo menos un triple enlace, por ejemplo etinilo y propinilo.

El término “alquileno” se refiere a un radical hidrocarburo divalente saturado lineal de uno a seis átomos de carbono o un radical hidrocarburo divalente saturado ramificado de tres a seis átomos de carbono, por ejemplo metileno, 55 etileno, 2,2-dimetiletileno, propileno, 2-metilpropileno, butileno y pentileno.

Los términos “alcoxi” y "alquiloxi”, que pueden utilizarse intercambiablemente, se refieren a una fracción de fórmula -OR, en la que R es una fracción alquilo tal como se define en la presente memoria. Entre los ejemplos de fracciones alcoxi se incluyen metoxi, etoxi e isopropoxi.

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El término “alcoxialquilo” se refiere a una fracción de fórmula Ra-O-Rb, en la que Ra es alquilo y Rb es alquileno tal como se define en la presente memoria. Entre los grupos alcoxialquilo ejemplares se incluyen, a título de ejemplo, 2-metoxietilo, 3-metoxipropilo, 1-metil-2-metoxietilo, 1-(2-metoxietil)-3-metoxipropilo y 1-(2-metoxietil)-3-metoxipropilo.

El término “alquilcarbonilo” se refiere a una fracción de fórmula –R’-R’’, en la que R’ es oxo y R’’ es alquilo tal como 10 se define en la presente memoria.

El término “alquilsulfonilo” se refiere a una fracción de fórmula –R’-R’’, en la que R’ es –SO2- y R’’ es alquilo tal como se define en la presente memoria.

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El término “alquilsulfonilalquilo” se refiere a una fracción de fórmula –R’-R’’-R’’’, en la que R’ es alquileno, R’’ es -SO2- y R’’’ es alquilo tal como se define en la presente memoria.

El término “amino” se refiere a una fracción de fórmula –NRR’, en la que R y R’, cada uno independientemente, es hidrógeno o alquilo tal como se define en la presente memoria. De esta manera, amino incluye “alquilamino” (en el 20 que uno de entre R y R’ es alquilo y el otro es hidrógeno) y “dialquilamino” (en el que R y R’ son ambos alquilos).

El término “alcoxiamino” se refiere a una fracción de fórmula –NR-OR’, en la que R es hidrógeno o alquilo y R’ es alquilo tal como se define en la presente memoria.

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El término “alquilsulfanilo” se refiere a una fracción de fórmula –SR, en la que R es alquilo tal como se define en la presente memoria.

El término “aminoalquilo” se refiere a un grupo –R-R’, en el que R’ es amino y R es alquileno tal como se define en la presente memoria. El término “aminoalquilo” incluye aminometilo, aminoetilo, 1-aminopropilo y 2-aminopropilo. La 30 fracción amino de “aminoalquilo” puede sustituirse una o dos veces con alquilo, proporcionando “alquilaminoalquilo” y “dialquilaminoalquilo”, respectivamente. El término “alquilaminoalquilo” incluye metilaminometilo, metilaminoetilo, metilaminopropilo y etilaminoetilo. El término “dialquilaminoalquilo” incluye dimetilaminometilo, dimetilaminoetilo, dimetilaminopropilo y N-metil-N-etilaminoetilo.

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El término “aminoalcoxi” se refiere a un grupo -OR-R’, en el que R’ es amino y R es alquileno tal como se define en la presente memoria.

El término “alquilsulfonamido” se refiere a una fracción de fórmula –NR’SO2-R, en la que R es alquilo y R’ es hidrógeno o alquilo. 40

El término “aminocarboniloxialquilo” o “carbamilalquilo” se refiere a un grupo de fórmula –R-O-C(O)-NR’R’’, en la que R es alquileno y R’, R’’ son, cada uno independientemente, hidrógeno o alquilo tal como se define en la presente memoria.

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El término “alquinilalcoxi” se refiere a un grupo de fórmula –O-R-R’, en la que R es alquileno y R’ es alquinilo tal como se define en la presente memoria.

El término “antagonista” se refiere a un compuesto que reduce o impide la acción de otro compuesto o sitio de receptor. 50

El término “arilo” se refiere a una fracción hidrocarburo aromático cíclico monovalente que consiste de un anillo aromático mono-, bi- o tri-cíclico. El grupo arilo puede sustituirse opcionalmente tal como se define en la presente memoria. Entre los ejemplos de fracciones arilo se incluyen fenilo, naftilo, fenantrilo, fluorenilo, indenilo, pentalenilo, azulenilo, oxodifenilo, bifenilo, metilendifenilo, aminodifenilo, difenilsulfidilo, difenilsulfonilo, difenilisopropilidenilo, 55 benzodioxanilo, benzofuranilo, benzodioxililo, benzopiranilo, benzoxazinilo, benzoxazinonilo, benzopiperadinilo, benzopiperazinilo, benzopirrolidinilo, benzomorfolinilo, metilendioxifenilo y etilendioxifenilo, que incluye derivados parcialmente hidrogenados de los mismos, estando cada uno sustituido opcionalmente.

Los términos “arilalquilo” y “aralquilo”, que pueden utilizarse intercambiablemente, se refieren a un radical –RaRb, en 60 el que Ra es un grupo alquileno y Rb es un grupo arilo tal como se define en la presente memoria, por ejemplo fenilalquilos tales como bencilo, feniletilo y 3-(3-clorofenil)-2-metilpentilo y similares son ejemplos de arilalquilo.

El término “arilsulfonilo” se refiere a un grupo de fórmula –SO2-R, en la que R es arilo tal como se define en la presente memoria.

El término “ariloxi” se refiere a un grupo de fórmula –O-R, en la que R es arilo tal como se define en la presente memoria. 5

El término “aralquiloxi” se refiere a un grupo de fórmula –O-R-R'', en la que R es alquileno y R' es arilo tal como se define en la presente memoria.

El término “cianoalquilo” se refiere a una fracción de fórmula –R’-R’’, en la que R’ es alquileno tal como se define en 10 la presente memoria y R’’ es ciano o nitrilo.

El término “cicloalquilo” se refiere a una fracción carbocíclica saturada monovalente que consiste de anillos mono- o bi-cíclicos. El término cicloalquilo puede sustituirse opcionalmente con uno o más sustituyentes, en el que cada sustituyente es independientemente hidroxi, alquilo, alcoxi, halo, haloalquilo, amino, monoalquilamino o 15 dialquilamino, a menos que se indique específicamente lo contrario. Entre los ejemplos de fracciones cicloalquilo se incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo, incluyendo derivados parcialmente insaturados de los mismos.

El término “cicloalquilalquilo” se refiere a una fracción de fórmula –R’-R’’, en la que R’ es alquileno y R’’ es 20 cicloalquilo tal como se define en la presente memoria.

El término “heteroalquilo” se refiere a un radical alquilo tal como se define en la presente memoria, en la que uno, dos o tres átomos de hidrógeno han sido sustituidos por un sustituyente seleccionado independientemente de entre el grupo que consiste de -ORa, -NRbRc y -S(O)nRd (en el que n es un número entero entre 0 y 2), bajo la condición de 25 que el punto de unión del radical heteroalquilo es mediante un átomo de carbono, en el que Ra es hidrógeno, acilo, alquilo, cicloalquilo o cicloalquilalquilo; Rb y Rc son, independientemente uno de otro, hidrógeno, acilo, alquilo, cicloalquilo o cicloalquilalquilo, y en el caso de que n sea 0, Rd es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo o cicloalquilalquilo, y en el caso de que n sea 1 ó 2, Rd es alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, amino, acilamino, monoalquilamino o dialquilamino. Entre los ejemplos representativos se incluyen 2-hidroxietilo, 3-hidroxipropilo, 2-hidroxi-1-30 hidroximetiletilo, 2,3-dihidroxipropilo, 1-hidroximetiletilo, 3-hidroxibutilo, 2,3-dihidroxibutilo, 2-hidroxi-1-metilpropilo, 2-aminoetilo, 3-aminopropilo, 2-metilsulfoniletilo, aminosulfonilmetilo, aminosulfoniletilo, aminosulfonilpropilo, metilaminosulfonilmetilo, metilaminosulfoniletilo y metilaminosulfonilpropilo.

El término “heteroarilo” se refiere a un radical monocíclico o bicíclico de 5 a 12 átomos anulares que presenta por lo 35 menos un anillo aromático que contiene uno, dos o tres heteroátomos anulares seleccionados de entre N, O o S, siendo C los átomos anulares restantes, bajo la condición de que el punto de unión del radical heteroarilo se encuentre en un anillo aromático. El anillo heteroarilo puede sustituirse opcionalmente tal como se define en la presente memoria. Entre los ejemplos de fracciones heteroarilo se incluyen imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirazinilo, tienilo, benzotienilo, tiofenilo, furanilo, piranilo, piridilo, 40 pirrolilo, pirazolilo, pirimidilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzofurilo, benzotiofenilo, benzotiopiranilo, bencimidazolilo, benzooxazolilo, benzooxadiazolilo, benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, benzopiranilo, indolilo, isoindolilo, triazolilo, triazinilo, quinoxalinilo, purinilo, quinazolinilo, quinolizinilo, naftiridinilo, pteridinilo, carbazolilo, azepinilo, diazepinilo y acridinilo sustituidos opcionalmente, incluyendo derivados parcialmente hidrogenados de los mismos, cada uno sustituido opcionalmente. 45

El término “heteroarilalquilo” o “heteroaralquilo” se refiere a un grupo de fórmula -R-R’, en la que R es alquileno y R’ es heteroarilo tal como se define en la presente memoria.

El término “heteroarilsulfonilo” se refiere a un grupo de fórmula –SO2-R, en la que R es heteroarilo tal como se define 50 en la presente memoria.

El término “heteroariloxi” se refiere a un grupo de fórmula –O-R, en la que R es heteroarilo tal como se define en la presente memoria.

55

El término “heteroaralquiloxi” se refiere a un grupo de fórmula -O-R-R'', en la que R es alquileno y R’ es heteroarilo tal como se define en la presente memoria.

Los términos “halo”, “halógeno” y “haluro”, que pueden utilizarse intercambiablemente, se refieren a un sustituyente flúor, cloro, bromo o yodo. 60

El término “haloalquilo” se refiere a alquilo tal como se define en la presente memoria en el que uno o más hidrógenos han sido sustituidos por un halógeno igual o diferente. Entre los haloalquilos ejemplares se incluyen -CH2Cl, -CH2CF3, -CH2CCl3 y perfluoroalquilo (por ejemplo –CF3).

El término “haloalcoxi” se refiere a una fracción de fórmula –OR, en la que R es una fracción haloalquilo tal como se 5 define en la presente memoria. Un haloalcoxi ejemplar es difluorometoxi.

El término “heterocicloamino” se refiere a un anillo saturado en el que por lo menos un átomo anular es N, NH o N-alquilo y los átomos anulares restantes forman un grupo alquileno.

10

El término “heterociclilo” se refiere a una fracción saturada monovalente que consiste de uno a tres anillos, que incorpora uno, dos, tres o cuatro heteroátomos (seleccionados de entre nitrógeno, oxígeno o azufre). El anillo heterociclilo puede sustituirse opcionalmente tal como se define en la presente memoria. Entre los ejemplos de fracciones heterociclilo se incluyen piperidinilo, piperazinilo, homopiperazinilo, azepinilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiazolidinilo, 15 isotiazolidinilo, quinuclidinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, bencimidazolilo, tiadiazoliloidinilo, benzotiazolidinilo, benzoazolilidinilo, dihidrofurilo, tetrahidrofurilo, dihidropiranilo, tetrahidropiranilo, tiamorfolinilo, tiamorfolinilsulfóxido, tiamorfolinilsulfona, dihidroquinolinilo, dihidrisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo y tetrahidroisoquinolinilo sustituidos opcionalmente.

20

El término “heterociclilalquilo” se refiere a una fracción de fórmula –R-R’, en la que R es alquileno y R’ es heterociclilo tal como se define en la presente memoria.

El término “heterocicliloxi” se refiere a una fracción de fórmula –OR, en la que R es heterociclilo tal como se define en la presente memoria. 25

El término “heterociclilalcoxi” se refiere a una fracción de fórmula –OR-R’, en la que R es alquileno y R’ es heterociclilo tal como se define en la presente memoria.

El término “hidroxialcoxi” se refiere a una fracción de fórmula –OR, en la que R es hidroxialquilo tal como se define 30 en la presente memoria.

El término “hidroxialquilamino” se refiere a una fracción de fórmula –NR-R’, en la que R es hidrógeno o alquilo y R’ es hidroxialquilo tal como se define en la presente memoria.

35

El término “hidroxialquilaminoalquilo” se refiere a una fracción de fórmula –R-NR’-R’’, en la que R es alquileno, R’ es hidrógeno o alquilo y R’’ es hidroxialquilo tal como se define en la presente memoria.

El término “hidroxicarbonilalquilo” o “carboxialquilo” se refiere a un grupo de fórmula –R-(CO)-OH, en la que R es alquileno tal como se define en la presente memoria. 40

El término “hidroxialquiloxicarbonilalquilo” o “hidroxialcoxicarbonilalquilo” se refiere a un grupo de fórmula –R-C(O)-O-R-OH, en la que cada R es alquileno y puede ser igual o diferente.

El término “hidroxialquilo” se refiere a una fracción alquilo tal como se define en la presente memoria, sustituida con 45 uno o dos, preferentemente uno, dos o tres grupos hidroxi, con la condición de que el mismo átomo de carbono no porta más de un grupo hidroxi. Entre los ejemplos representativos se incluyen hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 2-hidroxipropilo, 3-hidroxipropilo, 1-(hidroximetil)-2-metilopropilo, 2-hidroxibutilo, 3-hidroxibutilo, 4-hidroxibutilo, 2,3-dihidroxipropilo, 2-hidroxi-1-hidroximetiloetilo, 2,3-dihidroxi-butilo, 3,4-dihidroxibutilo y 2-(hidroximetil)-3-hidroxipropilo. 50

El término “hidroxicicloalquilo” se refiere a una fracción cicloalquilo tal como se define en la presente memoria en la que uno, dos o tres átomos de hidrógeno en el radical cicloalquilo han sido sustituidos con un sustituyente hidroxi. Entre los ejemplos representativos se incluyen 2-, 3- y 4-hidroxiciclohexilo.

55

El término “urea” o “ureido” se refiere a un grupo de fórmula –NR’-C(O)-NR''R''', en la que R', R'' y R''', cada uno independientemente, es hidrógeno o alquilo.

El término “carbamato” se refiere a un grupo de fórmula –O-C(O)-NR'R'', en la que R' y R'', cada uno independientemente es hidrógeno o alquilo. 60

El término “carboxi” se refiere a un grupo de fórmula –O-C(O)-OH.

El término “sulfonamido” se refiere a un grupo de fórmula –SO2-NR'R'', en la que R', R'' y R''', cada uno independientemente, es hidrógeno o alquilo.

La expresión “sustituido opcionalmente”, utilizada en asociación con “arilo”, “fenilo”, “heteroarilo”, “cicloalquilo” o “heterociclilo”, se refiere a un arilo, fenilo, heteroarilo, cicloalquilo o heterociclilo que se sustituye opcionalmente 5 independientemente con uno a cuatro sustituyentes, preferentemente uno o dos sustituyentes seleccionados de entre alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heteroalquilo, hidroxialquilo, halo, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, amino, acilamino, monoalquilamino, dialquilamino, haloalquilo, haloalcoxi, heteroalquilo, -COR, -SO2R (en la que R es hidrógeno, alquilo, fenilo o fenilalquilo), -(CR'R")n-COOR (en la que n es un número entero entre 0 y 5, R' y R'' son independientemente hidrógeno o alquilo, y R es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, fenilo o fenilalquilo) 10 o -(CR'R")n-CONRaRb (en la que n es un número entero entre 0 y 5, R' y R'' son independientemente hidrógeno o alquilo, y Ra y Rb son, independientemente, hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, fenilo o fenilalquilo). En determinadas realizaciones, entre los sustituyentes opcionales para “arilo”, “fenilo”, “heteroarilo”, “cicloalquilo” o “heterociclilo” se incluyen alquilo, halo, haloalquilo, alcoxi, ciano, amino y alquilsulfonilo. Son sustituyentes más preferentes, metilo, flúor, cloro, trifluorometilo, metoxi, amino y metanosulfonilo. 15

La expresión “grupo saliente” se refiere al grupo con el significado asociado convencionalmente al mismo en química orgánica sintética, es decir, un átomo o grupo desplazable bajo condiciones de reacción de sustitución. Entre los ejemplos de grupos salientes se incluyen halógeno, alcano- o arilén-sulfoniloxi, tal como metanosulfoniloxi, etanosulfoniloxi, tiometilo, bencenosulfoniloxi, tosiloxi y tieniloxi, dihalofosfinoiloxi; benciloxi, isopropiloxi y aciloxi 20 sustituidos opcionalmente.

El término “modulador” se refiere a una molécula que interactúa con una diana. Entre las interacciones se incluyen agonista y antagonista, tal como se define en la presente memoria.

25

El término “opcional” u “opcionalmente” se refiere a que el suceso o circunstancia seguidamente indicado puede no producirse y que la descripción incluye casos en los que el suceso o circunstancia se produce y casos en los que no se produce.

“Enfermedad” o “estado de enfermedad” se refiere a cualquier enfermedad, condición, síntoma, trastorno o 30 indicación.

La expresión “solvente orgánico inerte” o “solvente inerte” se refiere a que el solvente es inerte bajo las condiciones de reacción descritas conjuntamente con la misma, incluyendo, por ejemplo, benceno, tolueno, acetonitrilo, tetrahidrofurano, N,N-dimetilformamida, cloroformo, cloruro de metileno o diclorometano, dicloroetano, éter dietílico, 35 acetato de etilo, acetona, metil-etil-cetona, metanol, etanol, propanol, isopropanol, terc-butanol, dioxano y piridina. A menos que se indique lo contrario, los solventes utilizados en las reacciones de la presente invención son solventes inertes.

La expresión “farmacéuticamente aceptable” se refiere a que resulta útil para preparar una composición farmacéutica 40 que es generalmente segura, no tóxica y no deseable biológicamente o de otro modo y que incluye aceptable para el uso farmacéutico veterinario así como humano.

La expresión “sales farmacéuticamente aceptables" de un compuesto se refiere a sales que son farmacéuticamente aceptables, tal como se define en la presente memoria, y que presenta una actividad farmacológica deseada del 45 compuesto parental. Entre dichas sales se incluyen: sales de adición de ácido formadas con ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico y ácido fosfórico, o formadas con ácidos orgánicos, tales como ácido acético, ácido bencenosulfónico, ácido benzoico, ácido canforsulfónico, ácido cítrico, ácido etanosulfónico, ácido fumárico, ácido glucoheptónico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido glicólico, ácido hdiroxinaftoico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido láctico, ácido maleico, ácido málico, ácido malónico, ácido 50 mandélico, ácido metanosulfónico, ácido mucónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido propiónico, ácido salicílico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido p-toluenosulfónico y ácido trimetilacético o sales formadas al sustituir un protón ácido presente en el compuesto parental por un ión metálico, por ejemplo un ión de metal alcalino, un ión de metal alcalino-térreo, o un ión de aluminio, o coordinados con una base orgánica o inorgánica. Entre las bases orgánicas aceptables se incluyen dietanolamina, etanolamina, N-metilglucamina, trietanolamina y trometamina. Entre 55 las bases inorgánicas aceptables se incluyen hidróxido de aluminio, hidróxido de calcio, hidróxido potásico, carbonato sódico e hidróxido sódico.

Las sales farmacéuticamente aceptables preferentes son las sales formadas a partir de ácido acético, ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido metanosulfónico, ácido maleico, ácido fosfórico, ácido tartárico, ácido cítrico, sodio, 60 potasio, calcio, cinc y magnesio.

Debe entenderse que todas las referencias a sales farmacéuticamente aceptables incluyen formas de adición de solvente (solvatos) o formas cristalinas (polimorfos) tal como se define en la presente memoria, de la misma sal de adición de ácido.

La expresión “grupo protector” se refiere a que el grupo que bloquea selectivamente un sitio reactivo en un 5 compuesto multifuncional de manera que puede llevarse a cabo una reacción química selectivamente en otro sitio reactivo no protegido en el sentido convencionalmente asociado al mismo en química sintética. Determinados procedimientos de la presente invención se basan en los grupos protectores que bloquean los átomos reactivos de nitrógeno y/o oxígeno presentes en los reactivos. Por ejemplo, las expresiones “grupo protector de amino” y “grupo protector de nitrógeno” se utilizan intercambiablemente en la presente memoria y se refiere a aquellos grupos 10 orgánicos destinados a proteger el átomo de nitrógeno frente a reacciones no deseables durante los procedimientos sintéticos. Entre los grupos protectores de nitrógeno ejemplares se incluyen trifluoroacetilo, acetamido, bencilo (Bn), benciloxicarbonilo (carbobenciloxi, CBZ), p-metoxi-benciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxicarbonilo y terc-butoxicarbonilo (BOC). El experto en la materia conocerá cómo seleccionar un grupo por la facilidad de eliminación y la capacidad de resistir las reacciones siguientes. 15

El término “solvatos” se refiere a formas de adición de solvente que contienen cantidades estequiométricas o no estequiométricas de solvente. Algunos compuestos presentan una tendencia a atrapar una proporción molar fija de moléculas de solvente en el estado sólido cristalino, formando de esta manera un solvato. En el caso de que el solvente sea agua, el solvato formado es un hidrato; en el caso de que el solvente sea alcohol, el solvato formado es 20 un alcoholato. Los hidratos se forman mediante la combinación de una o más moléculas de agua con una de las sustancias en las que el agua conserva su estado molecular de H2O, siendo esta combinación capaz de formar uno o más hidratos.

El término “sujeto” se refiere a mamíferos y a no mamíferos. El término “mamíferos” se refiere a cualquier miembro 25 de la clase mamíferos, incluyendo el ser humano, primates no humanos tales como chimpancés y otras especies de simio y mono; animales de granja, tales como vacas, caballos, ovejas, cabras y cerdos; animales domésticos, tales como conejos, perros y gatos; animales de laboratorio, incluyendo roedores, tales como ratas, ratones y cobayas. Entre los ejemplos de no mamíferos se incluyen las aves. El término “sujeto” no se refiere a ninguna edad o sexo en particular. 30

La expresión “trastornos del tracto urinario” o “uropatía” utilizadas intercambiablemente con “síntomas del tracto urinario” se refiere a cambios patológicos en el tracto urinario. Entre los ejemplos de trastornos del tracto urinario se incluyen incontinencia, hipertrofia prostática benigna (HPB), prostatis, hiperreflexia del detrusor, obstrucción de la salida, frecuencia urinaria, nocturia, urgencia urinaria, vejiga hiperactiva, hipersensibilidad pélvica, incontinencia 35 imperiosa, uretritis, prostatodinia, cistitis e hipersensibilidad idiopática de la vejiga.

La expresión “estados de enfermedad asociados al tracto urinario” o “estados de enfermedad del tracto urinario” o “uropatía” utilizados intercambiablemente con “síntomas del tracto urinario” se refieren a los cambios patológicos en el tracto urinario, o a la disfunción del músculo liso de la vejiga urinaria o de su innervación que causan trastornos 40 del almacenamiento o vaciado urinario. Entre los síntomas del tracto urinario se incluyen la vejiga hiperactiva (también conocida como hiperactividad del detrusor), la obstrucción de la salida, la insuficiencia de la salida y la hipersensibilidad pélvica.

La “vejiga hiperactiva” o “hiperactividad del detrusor” incluye los cambios que se manifiestan sintomáticamente como 45 urgencia, frecuencia, capacidad alterada de la vejiga, incontinencia, umbral de micción, contracciones inestables de la vejiga, espasticidad esfintérica, hiperreflexia del detrusor (vejiga neurogénica) e inestabilidad del detrusor.

La “obstrucción de la salida” incluye la hipertrofia prostática benigna (HPB), la enfermedad de estenosis uretral, tumores, tasas de flujo bajas, dificultad para iniciar la micción, urgencia y dolor suprapúbico. 50

La "insuficiencia de la salida” incluye la hipermotilidad uretral, la deficiencia esfintérica intrínseca, la incontinencia mixta y la incontinencia por estrés.

La “hipersensibilidad pélvica” incluye el dolor pélvico, la cistitis (celular) intersticial, la prostatodinia, la prostatitis, la 55 vulvadinia, la uretritis, la orquidalgia y la vejiga hiperactiva.

El “trastorno respiratorio" se refiere a la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), al asma y al broncoespasmo.

60

El “trastorno gastrointestinal” (“trastorno GI”) se refiere al síndrome del intestino irritable (SII), a la enfermedad del intestino inflamatorio (EII), a los cólicos biliares y a otros trastornos biliares, al cólico renal, al SII con diarrea dominante y al dolor asociado a la distensión GI.

El término “dolor” incluye dolor inflamatorio, dolor quirúrgico, dolor visceral, dolor dental, dolor premenstrual, dolor central, dolor debido a quemaduras, migraña o cefaleas de racimo, lesión nerviosa, neuritis, neuralgias, envenenamiento, daño isquémico, cistitis intersticial, dolor del cáncer, infección vital, parasitaria o bacteriana, lesión post-traumática o dolor asociado al síndrome del intestino irritable. 5

La expresión “cantidad terapéuticamente eficaz” se refiere a una cantidad de un compuesto que, administrada en un sujeto para tratar un estado de enfermedad, resulta suficiente para llevar a cabo dicho tratamiento para el estado de enfermedad. La “cantidad terapéuticamente eficaz” variará dependiendo del compuesto, estado de enfermedad bajo tratamiento, la severidad o la enfermedad tratada, la edad y salud relativa del sujeto, la vía y forma de 10 administración, el criterio del médico o profesional veterinario responsable, y otros factores.

Las expresiones “las definidas anteriormente” y “aquéllas definidas en la presente memoria” en referencia a una variable incorporan mediante referencia la definición amplia de la variable así como las definiciones preferentes, más preferentes y todavía más preferentes, en caso de existir. 15

El término “tratar” o “tratamiento” de un estado de enfermedad incluye:

(i) prevenir el estado de enfermedad, es decir, causar que los síntomas clínicos del estado de enfermedad no se desarrollen en un sujeto

que puede haber estado expuesto o predispuesto al estado de enfermedad pero que todavía no experimenta o 20 manifiesta síntomas del estado de enfermedad.

(ii) Inhibir el estado de enfermedad, es decir, detener el desarrollo del estado de enfermedad o de sus síntomas clínicos, o

(iii) Aliviar el estado de enfermedad, es decir, causar la regresión temporal o permanente del estado de enfermedad o de sus síntomas clínicos. 25

Los términos “tratar”, “contactar” y “reaccionar” en referencia a una reacción química se refieren a añadir o mezclar dos o más reactivos bajo condiciones apropiadas con el fin de producir el producto indicado y/o deseado. Debe apreciarse que la reacción que produce el producto indicado y/o deseado pueden no resultar necesariamente de manera directa de la combinación de dos reactivos que han sido añadidos inicialmente, es decir, puede existir uno o 30 más intermediarios que son producidos en la mezcla que conducen finalmente a la formación del producto indicado y/o deseado.

En general, la nomenclatura utilizada en la presente solicitud se basa en AutoNomTM v.4.0, un sistema computerizado del Beilstein Institute para la generación de nomenclatura sistemática de la IUPAC. Las estructuras 35 químicas mostradas en la presente memoria se prepararon utilizando el programa ISIS®, versión 2.2. Cualquier valencia abierta que aparezca en un átomo de carbono, oxígeno, azufre o nitrógeno en las estructuras en la presente memoria indica la presencia de un átomo de hidrógeno a menos que se indique lo contrario. En el caso de que se muestre un anillo heteroarilo que contiene nitrógeno con una valencia abierta en un átomo de nitrógeno y se muestren variables tales como Ra, Rb o Rc en el anillo heteroarilo, dichas variables pueden encontrarse unidas o 40 enlazadas con el nitrógeno de valencia abierta. En el caso de que exista un centro quiral en una estructura pero no se muestra una estereoquímica específica para el centro quiral, ambos enantiómeros asociados al centro quiral se encontrarán comprendidos en la estructura. En el caso de que una estructura mostrada en la presente memoria pueda existir en múltiples formas tautoméricas, la totalidad de dichos tautómeros se encontrará comprendida en la estructura. 45

En la fórmula I:

R1 es [1,2,4]triazol-1-ilo sustituido opcionalmente en la posición 5 con alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, alquilamino C1-6-alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6 o cicloalquil C3-6-alquilo C1-6, 50

R2 es 5-metil-piridín-2-ilo, 5-cloro-piridín-2-ilo, 5-fluoro-piridín-2-ilo, 5-metil-3-fluoro-piridín-2-ilo, 5-metil-3-cloro-piridín-2-ilo, 3,5-difluoro-piridín-2-ilo ó 3,5-dicloro-piridín-2-ilo,

R3 es hidrógeno,

R4 es hidrógeno o metilo, y R5 es hidroximetilo, metoximetilo, morfolín-4-ilometilo, piperidín-1-ilmetilo sustituido opcionalmente en la posición 4 con metilo, metanosulfonilo o acetilo, 1,1,-dioxo-tiomorfolín-1-ilo, piperidín-1-55 ilo sustituido opcionalmente una o dos veces con un grupo o grupos seleccionados independientemente de entre metilo, metoxi o halo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirazolilo o tiazolilo, en el que el piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirazolilo y tiazolilo, cada uno, puede sustituirse opcionalmente una o dos veces con un grupo o grupos seleccionados independientemente de entre metilo, metiloamino, dimetiloamino y halo, 60

En los compuestos de referencia de fórmula I, R1 es un grupo de fórmula A o B:

en la que Rc y Rd, cada uno independientemente, es hidrógeno, alquilo C1-6, alcoxi C1-6, alquil C1-6-sulfonilo, fenilo, amino, N-alquilamino C1-6, N,N-dialquilamino C1-6 haloalquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, heteroalquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, cicloalquil C3-6-alquilo C1-6, aminocarbonilo, heterociclilcarbonilo, alcoxi C1-6-carbonilo o ciano, o Rc y Rd 5 conjuntamente con los átomos a los que se encuentran unidos pueden formar un grupo fenilo, piridinilo o pirimidinilo, cada uno sustituido opcionalmente.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es: hidrógeno, alquilo C1-6, alcoxi C1-6, alquil C1-6-sulfonilo, amino, N-alquil C1-6-amino, N,N-dialquil C1-6-amino halo-alquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, heteroalquilo C1-6, 10 cicloalquilo C3-6, cicloalquil C3-6-alquilo C1-6, aminocarbonilo, heterociclilcarbonilo, alcoxi C1-6-carbonilo o ciano.

En los compuestos de referencia de fórmula I, en la que Rc o Rd es heteroalquil C1-6, dicho heteroalquilo C1-6 puede seleccionarse de entre hidroxialquilo C1-6, alcoxi C1-6-alquilo C1-6, alquilamino C1-6-alquilo C1-6 y N,N-di(alquil C1-6)-aminoalquilo C1-6. 15

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, isopropilo, isobutilo, terc-butilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopropilmetilo, fenilo, trifluorometilo, difluorometilo, fluorometilo, pentafluoroetilo, 1,1-difluoroetilo, 2,2-difluoroetilo, 1-metoxietilo, 1-etoxietilo, 2-metoxi-1-metiletilo, 1-hidroxietilo, isopropoxi, dimetilamino, azetidín-2-ilo, 1-metil-azetidín-2-ilo, 1-dimetilaminoetilo o dimetilamino-metilo. 20

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es alquilo C1-6 o haloalquilo C1-6.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es alquilo C1-6.

25

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es alcoxi C1-6.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es alquilsulfonilo C1-6.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es amino. 30

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es N-alquilamino C1-6.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es N,N-di-alquilamino C1-6.

35

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es haloalquilo C1-6.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es haloalcoxi C1-6.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es heteroalquilo C1-6. 40

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es cicloalquilo C3-6.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es cicloalquilo C3-6-alquilo C1-6.

45

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es aminocarbonilo.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es heterociclilcarbonilo.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es alcoxicarbonilo C1-6. 50

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es ciano.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, isopropilo, isobutilo, terc-butilo, ciclopropilo, ciclopropilometilo, trifluorometilo, pentafluoro-etilo, 1,1-difluoro-etilo, 1-metoxi-etilo, 55 1-etoxi-etilo, 2-metoxi-1-metil-etilo, 1-hidroxi-etilo o dimetilamino-metilo.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc es hidrógeno y Rd es metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, terc-butilo, ciclopropilo o ciclopropilmetilo.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc y Rd conjuntamente con los átomos a los que se encuentran unidos forman un fenilo sustituido opcionalmente. 5

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc y Rd conjuntamente con los átomos a los que se encuentran unidos forman piridinilo sustituido opcionalmente.

En los compuestos de referencia de fórmula I, Rc y Rd conjuntamente con los átomos a los que se encuentran unidos 10 forman pirimidinilo sustituido opcionalmente.

La expresión "triazolilo sustituido opcionalmente" tal como se utiliza en la presente memoria incluye triazolilo que opcionalmente presenta un anillo heteroarilo, aromático de 6 elementos fusionado o nitrogenado, en el mismo. De esta manera, la expresión "triazolilo sustituido opcionalmente" incluye benzotriazolilo, [1,2,4]triazolo[4,3-a]piridinilo, 15 [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridinilo y derivados sustituidos con aza de los mismos. De acuerdo con lo anterior, en determinados compuestos de referencia de fórmula I en la que R1 es de fórmula A y Rc y Rd conjuntamente con los átomos a los que se encuentran unidos forman un grupo fenilo, piridinilo o pirimidinilo, R1 puede representarse por un grupo de fórmula A4:

20

en la que X1 y X2, cada uno independientemente, es CRf o N, y Re y Rf, cada uno independientemente, es hidrógeno, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6 o halo. En muchos de dichos compuestos de referencia, Rc y Rd conjuntamente con los átomos a los que se encuentran unidos forman un grupo piridinilo tal que X1 y X2 son CH. 25

En determinados compuestos de referencia de fórmula I en la que R1 es de fórmula B y Rc y Rd conjuntamente con los átomos a los que se encuentran unidos forman un grupo fenilo, piridinilo o pirimidinilo, R1 puede representarse por un grupo de fórmula B4:

30

en la que X1 y X2, cada uno independientemente, es CRf o N, y Re y Rf, cada uno independientemente, es hidrógeno, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6 o halo. En muchos de dichos compuestos de referencia, Ra y Rb conjuntamente con los átomos a los que se encuentran unidos forman un grupo fenilo tal que X1 y X2 son CH. 35

En los compuestos de referencia de fórmula I, los compuestos de la invención son más concretamente de fórmula II:

40

o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en los que:

X es C o N, R11 y R12, cada uno independientemente, es hidrógeno, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6, halo, haloalquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, heteroalquilo C1-6, alquilsulfonilo C1-6 o ciano, y 45 R1 y R5 son tal como se definen en la presente memoria.

La solicitud proporciona además métodos para tratar una enfermedad o condición mediada o asociada de otra manera a un antagonista de receptor P2X3, un antagonista de receptor P2X2/3, o ambos, comprendiendo el método la administración, en un sujeto que lo necesita, de una cantidad eficaz de un compuesto de la invención.

5

La enfermedad puede ser una enfermedad genitourinaria o una enfermedad del tracto urinario. En otro casos la enfermedad puede ser una enfermedad que cursa con dolor. La enfermedad del tracto urinario puede ser: capacidad reducida de la vejiga, micción frecuente, incontinencia imperiosa, incontinencia por estrés, hiperreactividad de la vejiga, hipertrofia prostática benigna, prostatitis, hiperreflexia del detrusor, frecuencia urinaria, nocturia, urgencia urinaria, vejiga hiperactiva, hipersensibilidad pélvica, uretritis, síndrome del dolor pélvico, prostatodinia, cistitis o 10 hipersensibilidad idiopática de la vejiga.

La enfermedad que cursa con dolor puede ser: dolor inflamatorio, dolor quirúrgico, dolor visceral, dolor dental, dolor premenstrual, dolor central, dolor debido a quemaduras, migraña o cefales de racimo, lesión nerviosa, neuritis, neuralgias, envenenamiento, daño isquémico, cistitis intersticial, dolor del cáncer, infección vital, parasitaria o 15 bacteriana, lesión post-traumática o dolor asociado al síndrome del intestino irritable.

La enfermedad puede ser un trastorno respiratorio, tal como el trastorno pulmonar obstructivo crónico (EPOC), asma o broncoespasmo o un trastorno gastrointestinal (GI), tal como el síndrome del intestino irritable (SII), la enfermedad intestinal inflamatoria (EII), cólicos biliares y otros trastornos biliares, cólico renal, SII con diarrea dominante o dolor 20 asociado a distención GI.

Se muestran compuestos representativos según los métodos de la invención en la Tabla 1.

TABLA 1 25

Nº

Nombre (Autonom™) M+H

55

N-(2-Hidroxi-1-metil-etil)-3-(5-isopropil[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 153,0-154,5°C

56

3-(5-Isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 428

57

N-(2-Hidroxi-1-metil-etil)-3-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 396

58

3[5-(1-Metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 444

59

3-(5-Ciclopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 378

60

3-(5-Ciclopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 426

69

3[5-(1,1-Difluoro-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 70,0-71,0°C

70

3[5-(1,1-Difluoro-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 70,0-71,0°C

71

3[5-(1,1-Difluoro-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-N-((S)-2-hidroxi-1-metiletil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 76,0-77,0°C

73

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-[5-(1,1-difluoro-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-benzamida 159,0-160,0°C

74

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-isobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 462

76

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-difluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 456

77

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-difluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-benzamida 456

78

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-difluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-benzamida 408

79

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 474

80

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 474

81

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 426

82

3-(5-terc-Butil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 422

83

3-(5-terc-Butil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-cloro-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 462

84

3-(5-terc-Butil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-cloro-piridín-2-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-benzamida 462

85

3-(5-terc-Butil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-cloro-piridín-2-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-benzamida 414

86

3-(5-Ciclobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 85,0-86,0°C

87

3-(5-Ciclobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 440

88

3-(5-Ciclobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 95,0-96,0°C

89

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-isobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-benzamida 462

90

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-isobutil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 414

91

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-fluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 438

92

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-fluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-benzamida 438

93

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-fluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-benzamida 390

94

3-(5-terc-Butil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 394

95

3-(5-terc-Butil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 442

97

N-((S)-2-Hidroxi-1-metil-etil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 406

98

3-(5-Metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 454

99

N-(5-Metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 169,0-170,0 °C

100

3-(5-Metil-piridín-2-il)-5-(5-metil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 400

101

N-(5-Metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-metil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 400

102

N-((S)-2-Hidroxi-1-metil-etil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-metil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 352

106

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-etil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 86,0-87,0°C

107

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-etil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-benzamida 94,0-95,0°C

109

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-propil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 127,0-128,0°C

110

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-propil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 87,0-88,0°C

111

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-propil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 146,0-147,0°C

114

N-((S)-2-Hidroxi-1-metil-etil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-propil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 380

115

3-(5-Metil-piridín-2-il)-5-(5-propil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 428

116

N-(5-Metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-propil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 428

118

3-(5-Isobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 442

119

3-(5-Isobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 442

120

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 448

121

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-benzamida 448

122

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-isopropil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 400

124

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-(5-etil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-benzamida 72,0-73,0°C

125

3-(5-Ciclopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 426

127

3-(5-Etil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 366

128

3-(5-Etil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 414

129

3-(5-Etil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 414

131

N-((S)-2-Hidroxi-1-metil-etil)-3-(5-isobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 394

132

3-(5-Isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 428

133

3[5-(1-Metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 444

140

3[5-(1-Dimetilamino-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 409

141

3[5-(1-Dimetilamino-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 457

142

3[5-(1-Dimetilamino-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 457

145

3[5-(2,2-Difluoro-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 414

146

3[5-(2,2-Difluoro-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-N-((S)-2-hidroxi-1-metiletil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 366

147

3[5-(2-Metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)- 444

benzamida

148

N-((S)-2-Hidroxi-1-metil-etil)-3[5-(2-metoxi-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 396

149

3[5-(2-Etoxi-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 458

150

3[5-(2-Etoxi-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-N-((S)-2-hidroxi-1-metiletil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 410

152

3-(5-Ciclobutil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(6-metil-pyridazin-3-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 440

153

3-(5-Isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-metil-6-oxo-1,6-dihydro-piridín-3-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 443

154

3[5-(2-Metoxi-etil)-3-metil-[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 458

155

N-((S)-2-Hidroxi-1-metil-etil)-3[5-(2-metoxi-etil)-3-metil-[1,2,4]triazol-1-il]-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 410

156

3[5-(2-Hidroxi-2-metil-propil)[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 458

158

3-(5-Cloro-piridín-2-il)-5-[5-(1-dimetilamino-etil)[1,2,4]triazol-1-il]-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-benzamida 87,0-88,0°C

159

3-(5-Isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(1-metil-2-oxo-1,2-dihidro-piridín-4-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 443

161

N-(6-Metil-piridazín-3-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 195,4-196,0°C

164

4-Fluoro-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 472

165

4-Fluoro-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 424

166

3-(5-Metil-piridín-2-il)-N-(2-metil-pyrimidin-5-ilmetil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 454

167

2-Fluoro-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 424

168

2-Fluoro-3-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 472

169

2-Fluoro-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 472

170

4-Fluoro-3-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 472

171

3-(5-Metil-piridín-2-il)-N-(5-metil-pirimidín-2-ilmetil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 454

172

2-Fluoro-5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 446

173

2-Fluoro-5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-3-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida 446

174

2-Fluoro-N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-5-(5-isopropil[1,2,4]triazol-1-il)-3-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 398

175

4-Fluoro-3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida 446

176

2-Fluoro-N-(6-metil-piridazín-3-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 472

177

2-Fluoro-3-(5-metil-piridín-2-il)-N-(5-metil-pirimidín-2-ilmetil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 472

178

2-Fluoro-3-(5-metil-piridín-2-il)-N-(2-metil-pirimidín-5-ilmetil)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 472

179

N-((R)-1-Metil-2-morfolín-4-il-etil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 475

180

3-(5-Metil-piridín-2-il)-N-((S)-1-pirazín-2-il-etil)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida 454

Pueden prepararse compuestos de la presente invención mediante una diversidad de métodos ilustrados en los esquemas ilustrativos de reacción sintética mostrados y descritos posteriormente.

Los materiales de partida y reactivos utilizados para la preparación de dichos compuestos generalmente se encuentran disponibles de proveedores comerciales, tales como Aldrich Chemical Co., o se preparan mediante métodos conocidos por el experto en la materia siguiendo procedimientos descritos en referencias estándares. Los esquemas de reacción sintética siguientes son meramente ilustrativos de algunos métodos mediante los que pueden sintetizarse los compuestos de la presente invención y pueden llevarse a cabo diversas modificaciones de estos 5 esquemas de reacción sintética y podrán ser concebidos por el experto en la materia tras hacer referencia a la exposición contenida en la presente solicitud.

Los materiales de partida e intermediarios de los esquemas de reacción sintética pueden aislarse y purificarse si se desea utilizando técnicas convencionales, incluyendo la filtración, la destilación, la cristalización y la cromatografía. 10 Dichos materiales pueden caracterizarse utilizando medios convencionales, incluyendo constantes físicas y datos espectrales.

A menos que se indique lo contrario, las reacciones descritas en la presente memoria preferentemente se llevan a cabo bajo una atmósfera inerte a presión atmosférica en un intervalo de temperaturas de reacción de entre 15 aproximadamente -78ºC y aproximadamente 150ºC, más preferentemente de entre aproximadamente 0ºC y aproximadamente 125ºC, y más preferente y convenientemente a aproximadamente temperatura de laboratorio (o ambiente) (TA), por ejemplo a aproximadamente 20ºC.

El Esquema A a continuación ilustra un procedimiento sintético utilizable para preparar compuestos específicos de 20 fórmula I, en la que Y es un grupo saliente opcional, dos de entre Z1, Z2 y Z3 son opcionalmente nitrógeno y el otro es carbono y X, R3, R4, R5, R6, R11, R12, Rc y Rd son tal como se define en la presente memoria.

25

En la etapa 1 del Esquema A, se somete el ácido nitrobenzoico a a yodación bajo condiciones de ácido sulfúrico, proporcionando ácido yodonitrobenzoico b. El compuesto ácido benzoico b se hace reaccionar con compuesto ácido arilborónico c en presencia de catalizador tetracis-(trifenilfosfina)paladio, proporcionando el compuesto ácido bifenílico d. El grupo ácido del ácido bifenílico d se protege mediante esterificación en la etapa 3, formando el metil-éster de ácido bifenílico e. A continuación, el éster bifenílico e se somete a reducción, formando bifenilamina f en la 30

etapa 4. Se lleva a cabo una reacción de yodación en la etapa 5 mediante el tratamiento de la bifenilamina f con yoduro de metileno o reactivo similar de yodación, proporcionando el compuesto de yodo g. En la etapa 6, el compuesto éster del compuesto g se hidroliza, proporcionando el compuesto ácido h. En la etapa 7, se lleva a cabo una formación de amida mediante reacción del compuesto bifenil-yodo h con amina i en presencia de carbodiimida, proporcionando el compuesto j. El compuesto j seguidamente se hace reaccionar con reactivo heteroarilo k, 5 rindiendo el compuesto m, que es un compuesto de fórmula I según la invención. El reactivo heteroarilo k puede comprender un pirrol, imidazol, pirazol o triazol. Y en determinadas realizaciones puede ser halo, y en otras realizaciones puede ser -B(OH)2. En todavía otras realizaciones Y puede encontrarse ausente.

Resultan posibles muchas variaciones del Esquema A y podrán ser concebidas por el experto en la materia. Por 10 ejemplo, el éster de metilo formado en la etapa 3 puede sustituirse por otros ésteres de alquilo inferior mediante la utilización del alcohol apropiado en la etapa 3. En muchas realizaciones la etapa 8 puede llevarse a cabo antes de las etapas 6 y 7 de manera que el compuesto yodobifenilo g se hace reaccionar con el reactivo k. El compuesto sustituido con heteroarilo resultante (no mostrado) seguidamente se somete a hidrólisis de éster, tal como en la etapa 6, seguido de la formación de amida, tal como en la etapa 7, proporcionando el compuesto m. En todavía 15 otras realizaciones, la formación de amida de la etapa 7 puede llevarse a cabo en un punto anterior de la secuencia de sucesos del Esquema A.

En determinadas realizaciones, los compuestos de la invención pueden prepararse mediante el procedimiento del Esquema B, en el que X, R3, R4, R5, R6, R11, R12 y Rd son tal como se define en la presente memoria. 20

En la etapa 1 del Esquema B, el compuesto amina f (del Esquema A, anteriormente) se trata con nitrito sódico en presencia de ácido, seguido de cloruro estanoso, proporcionando el compuesto hidrazina n. En la etapa 2, una 25 mezcla de compuesto amida o y dimetilacetal de dimetilacetamida se hace reaccionar con compuesto hidrazina n, rindiendo el compuesto triazolilo p. En la etapa 2, la amida o y el compuseto acetal forman una imina de fórmula s,

30

que puede generarse in situ en muchas realizaciones, sin aislamiento. La hidrólisis del éster de la etapa 3 y la formación de amida de la etapa 4 se llevan a cabo tal como se ha indicado anteriormente para las e tapas 6 y 7 del Esquema A.

Tal como en el caso del Esquema A, muchas variaciones del procedimiento del Esquema B son posibles dentro del 35 alcance de la invención. En la sección de Ejemplos, posteriormente, se indican detalles concretos para producir los compuestos de la invención.

Los compuestos de la invención son utilizables para el tratamiento de un amplio abanico de enfermedades, condiciones y trastornos genitourinarios, incluyendo estados de enfermedad del tracto urinario asociados a la obstrucción de la salida de la vejiga y condiciones de incontinencia urinaria, tales como una capacidad reducida de la vejiga, micción frecuente, incontinencia imperiosa, incontinencia por estrés, hiperreactividad de la vejiga, hipertrofia prostática benigna (HPB), prostatis, hiperreflexia del detrusor, frecuencia urinaria, nocturia, urgencia 5 urinaria, vejiga hiperactiva, hipersensibilidad pélvica, uretritis, síndrome del dolor pélvico, prostatodinia, cistitis e hipersensibilidad idiopática de la vejiga y otros síntomas relacionados con la vejiga hiperactiva.

Los compuestos de la invención se espera que resulten útiles como analgésicos en el tratamiento de enfermedades y condiciones que cursan con dolor por una amplia diversidad de causas, incluyendo dolor inflamatorio, tal como 10 dolor asociado a artritis (incluyendo artritis reumatoide y osteoartritis), dolor quirúrgico, dolor visceral, dolor dental, dolor premenstrual, dolor central, dolor debido a quemaduras, migraña o cefaleas de racimo, lesión nerviosa, neuritis, neuralgias, envenenamiento, lesión isquémica, cistitis intersticial, dolor de cáncer, infección vírica, parasitaria o bacteriana, lesiones post-traumáticas (incluyendo fracturas y lesiones deportivas) y dolor asociado a trastornos funcionales del intestino, tales como el síndrome del intestino irritable. 15

Además, los compuestos de la invención resultan útiles para tratar trastornos respiratorios, incluyendo el trastorno pulmonar obstructivo crónico (EPOC), el asma y el broncoespasmo.

Además, los compuestos de la invención resultan útiles para tratar los trastornos gastrointestinales, incluyendo el 20 síndrome del intestino irritable (SII), la enfermedad del intestino inflamatorio (EII), los cólicos biliares y otros trastornos biliares, el cólico renal, el SII con diarrea dominante y el dolor asociado a la distensión GI.

La invención incluye composiciones farmacéuticas que comprenden por lo menos un compuesto de la presente invención o un isómero individual, mezclas racémicas o no racémicas de isómeros o una sal o solvato 25 farmacéuticamente aceptable de los mismos, conjuntamente con por lo menos un portador farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos y/o profilácticos.

En general, los compuestos de la invención se administran en una cantidad terapéuticamente eficaz mediante cualquiera de los modos de administración aceptados para agentes que sirven utilidades similares. Los intervalos de 30 dosis adecuados típicamente son de entre 1 y 500 mg diarios, preferentemente de entre 1 y 100 mg diarios, y más preferentemente de entre 1 y 30 mg diarios, según numerosos factores, tales como la severidad de la enfermedad que debe tratarse, la edad y la salud relativa del sujeto, la potencia del compuesto utilizado, la vía y forma de administración, la indicación a la que está destinada la administración y las preferencias y experiencias del profesional médico participante. El experto ordinario en la materia del tratamiento de dichas enfermedades podrá, sin 35 necesidad de experimentación indebida y basándose en los conocimientos personales y la exposición de la presente solicitud, determinar una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos de la presente invención para una enfermedad dada.

Los compuestos de la invención pueden administrarse como formulaciones farmacéuticas, incluyendo las adecuadas 40 para la administración oral (incluyendo bucal y sublingual), rectal, nasal, tópica, pulmonar, vaginal o parenteral (incluyendo intramuscular, intraarterial, intratecal, subcutánea e intravenosa) o en una forma adecuada para la administración mediante inhalación o insuflado. El modo de administración preferente generalmente es oral al utilizar un régimen de dosificación diaria conveniente que puede ajustarse según el grado de la aflicción.

45

Puede introducirse un compuesto o compuestos de la invención, conjuntamente con uno o más adyuvantes, portadores o diluyentes convencionales, en la forma de composiciones farmacéuticas y dosis unitarias. Las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación unitaria pueden comprender ingredientes convencionales en proporciones convencionales, con o sin compuestos o principios activos adicionales y las formas de dosificación unitaria pueden contener cualquier cantidad eficaz adecuada del ingrediente activo proporcionales al intervalo de 50 dosis diaria que se pretende utilizar. Las composiciones farmacéuticas pueden utilizarse como sólidos, tales como tabletas o cápsulas rellenas, semisólidos, polvos, formulaciones de liberación sostenida, o líquidos tales como soluciones, suspensiones, emulsiones, elixires o cápsulas rellenas para la utilización oral, o en forma de supositorios para la administración rectal o vaginal o en forma de soluciones inyectables estériles para la utilización parenteral. Las formulaciones que contienen aproximadamente un (1) miligramo de ingrediente activo o, más ampliamente, 55 aproximadamente 0,01 a aproximadamente cien (100) miligramos, por cada tableta, son, por consiguiente, formas de dosificación unitaria representativas adecuadas.

Los compuestos de la invención pueden formularse en una amplia diversidad de formas de dosificación de administración oral. Las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación pueden comprender un compuesto o 60 compuestos de la presente invención o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos como el componente activo. Los portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser sólidos o líquidos. Entre las preparaciones en forma sólida se incluyen polvos, tabletas, píldoras, cápsulas, tabletas, supositorios y gránulos dispersables. Un

portador sólido puede ser una o más sustancias que también pueden actuar como diluyentes, agentes saborizantes, solubilizadores, lubricantes, agentes de suspensión, ligantes, conservantes, agentes desintegrantes de tableta o un material de encapsulado. En forma de polvos, el portador generalmente es un sólido finamente dividido que es una mezcla con el componente activo finamente dividido. En tabletas, el componente activo generalmente se mezcla con el portador que presenta la capacidad ligante necesaria en proporciones adecuadas y se compacta en la forma y 5 tamaño deseados. Los polvos y tabletas preferentemente contienen entre aproximadamente uno (1) y aproximadamente setenta (70) por ciento del compuesto activo. Entre los portadores adecuados se incluyen carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, una cera de bajo punto de fusión y manteca de cacao. El término “preparación” pretende incluir la formulación del compuesto activo con material de encapsulado como 10 portador, proporcionando una cápsula en la que el componente activo, con o sin portadores, se encuentra circundado por un portador, que se encuentra asociado con el mismo. De manera similar se incluyen obleas y pastillas. Las tabletas, polvos, cápsulas, píldoras, obleas y pastillas pueden resultar como formas sólidas adecuadas para la administración oral.

15

Entre otras formas adecuadas para la administración oral se incluyen preparaciones de forma líquida, incluyendo emulsiones, jarabes, elixires, soluciones acuosas, suspensiones acuosas o preparaciones en forma sólida que están destinadas a ser convertidas poco antes de la utilización en preparaciones en forma líquida. Las emulsiones pueden prepararse en soluciones, por ejemplo en soluciones acuosas de propilenglicol o pueden contener agentes emulsionantes, por ejemplo, tales como la lecitina, el monooleato de sorbitán o la acacia. Pueden prepararse 20 soluciones acuosas mediante la disolución del componente activo en agua y la adición de colorantes adecuados, saborizantes, estabilizantes y agentes espesantes. Pueden prepararse suspensiones acuosas mediante la dispersión del componente activo finamente dividido en agua con material viscoso, tal como gomas naturales o sintéticas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica y otros agentes de suspensión bien conocidos. Entre las preparaciones en forma sólida se incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones, y pueden contener, además 25 del componente activo, colorantes, saborizantes, estabilizadores, tampones, edulcorantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes y agentes solubilizadores.

Los compuestos de la invención pueden formularse para la administración parenteral (por ejemplo mediante inyección, por ejemplo la inyección de bolo o la infusión continua) y pueden presentarse en forma de dosis unitaria 30 en ampollas, jeringas prerrellenas, infusión de volumen reducido o recipientes multidosis con un conservante añadido. Las composiciones pueden presentar dichas formas, tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos aceitosos o acuosos, por ejemplo soluciones en polietilenglicol acuoso. Entre los ejemplos de portadores, diluyentes, solventes o vehículos aceitosos o no acuosos se incluyen propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales (por ejemplo aceite de oliva) y ésteres orgánicos inyectables (por ejemplo oleato de etilo) y pueden contener agentes 35 de formulación, tales como agentes conservantes, humectantes, emulsionantes o de suspensión, estabilizadores y/o dispersantes. Alternativamente, el ingrediente activo puede encontrarse en forma de polvos, obtenidos mediante aislamiento aséptico de un sólido estéril o mediante liofilización a partir de solución para la constitución antes de la utilización con un vehículo adecuado, por ejemplo agua estéril sin pirógenos.

40

Los compuestos de la invención pueden formularse para la administración tópica en la epidermis como pomadas, cremas o lociones, o como parche transdérmico. Las pomadas y cremas pueden, por ejemplo, formularse con una base acuosa o aceitosa con la adición de agentes espesantes y/o gelificantes adecuados. Las lociones pueden formularse con una base acuosa o aceitosa y en general contendrán además uno o más agentes emulsionantes, agentes estabilizadores, agentes dispersantes, agentes de suspensión, agentes espesantes o agentes colorantes. 45 Entre las formulaciones adecuadas para la administración tópica en la boca se incluyen pastillas que comprenden agentes activos en una base saborizada, habitualmente sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte, tal como gelatina y glicerina o sacarosa y acacia, y lavados bucales que comprenden el ingrediente activo en un portador líquido adecuado.

50

Los compuestos de la invención pueden formularse para la administración como supositorios. Una cera de bajo punto de fusión, tal como una mezcla de glicéridos de ácido graso o manteca de cacao en primer lugar se funde y el componente activo se dispersa homogéneamente, por ejemplo mediante agitación. La mezcla homogénea fundida seguidamente se vierte en moldes de tamaño conveniente, se dejan enfriar y solidificar.

55

Los compuestos de la invención pueden formularse para la administración vaginal. Los pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o sprays que contienen además del ingrediente activo, son portadores que es conocido de la técnica que resultan apropiados.

Los compuestos de la invención pueden formularse para la administración nasal. Las soluciones o suspensiones se 60 aplican directamente en la cavidad nasal por medios convencionales, por ejemplo con un cuentagotas, pipeta o spray. Las formulaciones pueden proporcionarse en forma de dosis individual o multidosis. En este último caso, de un cuentagotas o pipeta, lo anterior puede ser llevado a cabo por el paciente administrando un volumen

predeterminado apropiado de la solución o suspensión. En el caso de un pulverizador, lo anterior puede llevarse a cabo, por ejemplo mediante una bomba de pulverización-atomización dosificadora.

Los compuestos de la invención pueden formularse para la administración de aerosol, particularmente en el tracto respiratorio e incluyendo la administración intranasal. El compuesto generalmente presenta un tamaño de partícula 5 reducido, por ejemplo del orden de cinco (5) micrómetros o inferior. Dicho tamaño de partícula puede obtenerse por medios conocidos de la técnica, por ejemplo mediante micronización. El ingrediente activo se proporciona en un paquete presurizado con un propelente adecuado, tal como clorofluorocarbono (CFC), por ejemplo diclorodifluorometano, triclorofluorometano o diclorotetrafluoroetano o dióxido de carbono u otro gas adecuado. El aerosol puede contener también convenientemente un surfactante tal como lecitina. La dosis de fármaco puede 10 controlarse con una válvula dosificadora. Alternativamente, los ingredientes activos pueden proporcionarse en una forma de polvos secos, por ejemplo una mezcla de polvos del compuesto en una base de polvos adecuada, tal como lactosa, almidón, derivados de almidón, tal como hidroxipropilmetilcelulosa y polivinilpirrolidona (PVP). El portador de polvos formará un gel en la cavidad nasal. La composición de polvos puede presentarse en forma de dosis unitaria, por ejemplo en cápsulas o cartuchos de, por ejemplo, gelatina, o paquetes blíster a partir de los que pueden 15 administrarse los polvos mediante un inhalador.

En caso de que se desee, las formulaciones pueden prepararse con recubrimientos entéricos adaptados para la administración de liberación sostenida o controlada del ingrediente activo. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención pueden formularse en dispositivos de administración transdérmica o subcutánea de fármaco. 20 Estos sistemas de administración resultan ventajosos en el caso de que resulte necesaria la liberación sostenida del compuesto y en el caso de que el cumplimiento del paciente de un régimen de tratamiento resulte crucial. Los compuestos en los sistemas de administración transdérmica frecuentemente se unen a un soporte sólido adhesivo en la piel. El compuesto de interés también puede combinarse con un intensificador de la penetración, por ejemplo azona (1-dodecil-azacicloheptán-2-ona). Los sistemas de administración de liberación sostenida se insertan 25 subcutáneamente en la capa subdérmica mediante cirugía o inyección. Los implantes subdérmicos encapsulan el compuesto en una membrana soluble en lípidos, por ejemplo goma de silicona, o un polímero biodegradable, por ejemplo ácido poliláctico.

Las preparaciones farmacéuticas preferentemente se presentan en formas de dosificación unitaria. En dicha forma, 30 la preparación se subdivide en dosis unitarias que contienen cantidades apropiadas del componente activo. La forma de dosificación unitaria puede ser una preparación empaquetada, conteniendo el paquete cantidades discretas de preparación, tales como tabletas empaquetadas, cápsulas y polvos en viales o ampollas. Además, la forma de dosificación unitaria puede ser una cápsula, tableta, oblea o pastilla, o puede ser el número apropiado de cualquiera de ellas en forma empaquetada. 35

Otros portadores farmacéuticos adecuados y sus formulaciones se describen en Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, editado por E. W. Martin, Mack Publishing Company, 19a edición, Easton, Pennsylvania. Las formulaciones farmacéuticas representativas que contienen un compuesto de la presente invención se describen posteriormente. 40

EJEMPLOS

Las preparaciones y ejemplos siguientes se proporcionan a fin de permitir que el experto en la materia entienda más claramente y pueda poner en práctica la presente invención. 45

A menos que se indique lo contrario, todas las temperaturas, incluyendo los puntos de fusión (es decir, PF), se expresan en grados Celsius (ºC). Debe apreciarse que la reacción que produce el producto indicado y/o deseado pueden no resultar necesariamente de manera directa de la combinación de dos reactivos que han sido añadidos inicialmente, es decir, pueden existir uno o más intermediarios que son producidos en la mezcla que conducen 50 finalmente a la formación del producto indicado y/o deseado. Pueden utilizarse las abreviaturas siguientes en las Preparaciones y Ejemplos.

Abreviaturas: DBU: 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno; DCM: diclorometano/cloruro de metileno; DMF: N,N-dimetilformamida, DMAP: 4-dimetilaminopiridina; EDCl: 1-etil-3-(3'-dimetilaminopropil)carbodiimida; EtOAc: acetato 55 de etilo, EtOH: etanol; cg: cromatografía de gases, HMPA: hexametilfosforamida, HOBt: N-hidroxibenzotriazol; hplc: cromatografía líquida de alto rendimiento, IPA: ácido m-cloroperbenzoico; MeCN: acetonitrilo, NMM: N-metil-morfolina; NMP: N-metil-pirrolidinona, TEA: trietilamina, THF: tetrahidrofurano, LDA: diisopropilamina de litio, CCF: cromatografía de capa fina.

Preparación 1: (S)-2-Metoxi-1-metil-etilamina

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema C.

5

Etapa 1 (S)-Boc-2-amino-propanol

Se añadió D-alanina (3,5 g, 39,3 mmoles) en partes pequeñas a una suspensión de LiAlH4 (2,89 g, 76,26 mmoles) 10 en THF bajo reflujo. Se continuó con el reflujo durante 12 horas, después la mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y el exceso de reactivo se inhibió mediante la adición cuidadosa de una solución acuosa de NaOH al 15% (3 ml) y agua (9 ml). Tras agitar a TA durante 10 minutos, se añadió una solución de (Boc)2O (8,31 g, 38,13 mmoles) en CH2Cl2 (40 ml). La mezcla de reacción se agitó a 60ºC durante 6 horas, se enfrió hasta la TA, se filtró a través de una almohadilla de Na2SO4 anhidro y el filtrado se concentró bajo vacío. La purificación del residuo mediante 15 cromatografía de columna de gel de sílice proporcionó (S)-Boc-2-amino-propanol en forma de un sólido blanco, rendimiento: 63%. EM (M+H)=176.

Etapa 2 (S)-Boc-2-Metoxi-1-metil-etilamina

20

A una solución de (S)-Boc-2-amino-propanol (2,00 g, 11,4 mmoles) se añadió sucesivamente Ag2O (5,89 g, 25,4 mmoles) y yoduro de metilo (16,00 g, 112,7 mmoles) a TA. La mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 días. Se separó el sólido mediante filtración y el filtrado se concentró bajo vacío, proporcionando (S)-Boc-2-metoxi-1-metil-etilamina en forma de un aceite incoloro que se utilizó sin purificación adicional.

25

Etapa 3 (S)-2-Metoxi-1-metil-etilamina

Se disolvió (S)-Boc-2-metoxi-1-metil-etilamina en MeOH (40 ml) y se añadió HCl 3 M (10 ml). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a TA, después se eliminó el solvente bajo presión reducida y el residuo se coevaporó con EtOH adicional (20 ml), proporcionando (S)-2-metoxi-1-metil-etilamina en forma de aceite marrón pálido en forma 30 hidrocloruro (1,42 g, 100%). EM (M+H)=90.

De manera similar se preparó (S)-2-etoxi-1-metil-etilamina. De manera similar se preparó a partir de L-alanina, (R)-2-metoxi-1-metil-etilamina y (R)-2-etoxi-1-metil-etilamina.

35

Preparación 2: (S)-1-Metil-2-morfolín-4-il-etilamina

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema D.

40

Etapa 1 2-terc-butoxicarbonilamino-propil-éster de ácido metanosulfónico

A una solución de (S)-Boc-2-amino-propanol (4,91 g, 0,028 moles), Et3N (1,5 equiv.) en CH2Cl2 a 0ºC se añadió 5 cloruro de metanosulfonilo (1,1 a 1,2 equiv.). La reacción se agitó a 0ºC durante 30 minutos. Se añadió agua (5 ml) y la capa orgánica se separó, se lavó con solución acuosa saturada de NaHCO3, solución hipersalina y se secó con MgSO4. Se eliminó el solvente bajo vacío, proporcionando 2-terc-butoxicarbonilamino-propil-éster de ácido metanosulfónico en forma de un sólido blanco, rendimiento: 98%. EM (M+H)=254.

10

Etapa 2 terc-butil-éster de ácido (1-metil-2-morfolín-4-il-etil)-carbámico

A una solución de 2-terc-butoxicarbonilamino-propil-éster de ácido metanosulfónico (23 mmoles) en CH3CN (20 ml) se añadió morfolina (28 mmoles) y K2CO3 (23 mmoles) a TA. La mezcla de reacción se llevó a 50ºC y se mantuvo a la misma temperatura durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió y se eliminó el solvente bajo presión 15 reducida y el residuo se trató con CH2Cl2 (50 ml) y H2O (50 ml). Se separó la capa orgánica y se extrajo la capa acuosa con CH2Cl2. La capa orgánica agrupada se secó sobre Na2SO4. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna (acetato de etilo), proporcionando terc-butil-éster de ácido (1-metil-2-morfolín-4-il-etil)-carbámico en forma de líquido viscoso, rendimiento: 62%. EM (M+H)=245.

20

Etapa 3 (S)-1-Metil-2-morfolín-4-il-etilamina

A una solución de terc-butil-éster de ácido (1-metil-2-morfolín-4-il-etil)-carbámico (0,30 g, 1,22 mmoles) en metanol (10 ml) se añadió HCl 2 N (5 ml) a 0ºC. Se dejó que se calentase la mezcla de reacción hasta la TA y se agitó durante la noche. Se eliminó el solvente bajo vacío, proporcionando (S)-1-metil-2-morfolín-4-il-etilamina en forma de 25 un sólido amarillo pálido (250 mg, 96%). EM (M+H)=145.

De manera similar se preparó (S)-1-metil-2-tiomorfolín-4-il-etilamina, (S)-1-[4-(2-amino-propil)-piperazín-1-il]-etanona, (S)-1-(2-amino-propil)-piperidín-4-ol, (S)-1-(2-amino-propil)-piperidín-3-ol, (S)-1-metil-2-(4-metil-piperazín-1-il)-etilamina, (S)-1-metil-2-(4-metanosulfonil-piperazín-1-il)-etilamina, (S)-4-(2-amino-propil)-piperazín-2-ona, 1-metil-2-30 piperidín-1-il-etilamina, 1-(2-amino-propil)-pirrolidín-3-ol, (S)-2-(4-metoxi-piperidín-1-il)-1-metil-etilamina, (S)-2-(3-metoxi-piperidín-1-il)-1-metil-etilamina, (S)-2-(4-metanosulfonil-piperidín-1-il)-1-metil-etilamina, y otros 2-amino-1-heterociclil-propanos.

Preparación 3: (S)-2-(1,1-Dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-1-metil-etilamina 35

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema E.

Etapa 1 terc-butil-éster de ácido (1-metil-2-oxo-2-tiomorfolín-4-il-etil)-carbámico

A una solución de ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-propiónico (3,5 g, 18,5 mmoles), HOBt (22,2 mmoles), NMP 5 (22,2 mmoles) y EDCl (22,2 mmoles) en CH2Cl2 se añadió tiomorfolina (2,29 g, 22,2 mmoles) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante la noche, después se lavó con solución acuosa al 2% de NaOH, agua, solución hipersalina y se secó sobre Na2SO4. Se eliminó el solvente bajo vacío, proporcionando terc-butil-éster de ácido (1-metil-2-oxo-2-tiomorfolín-4-il-etil)-carbámico (5,0 g), rendimiento: 98%. EM (M+H)=275.

10

Etapa 2 terc-butil-éster de ácido [2-(1,1-dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-1-metil-2-oxo-etil]-carbámico

A una solución de terc-butil-éster de ácido (1-metil-2-oxo-2-tiomorfín-4-il-etil)-carbámico (5,0 g, 18,2 mmoles) en CH2Cl2 se añadió m-CPBA (11,4 g, 46,25 mmoles) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó a TA durante la noche. Se eliminaron los sólidos mediante filtración y el filtrado se lavó con Na2S2O3 y se secó sobre Na2SO4. Se eliminó el 15 solvente bajo vacío, proporcionando terc-butil-éster de ácido [2-(1,1-dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-1-metil-2-oxo-etil]-carbámico (5,6 g), rendimiento: 100%. EM (M+H)=307.

Etapa 32-amino-1-(1,1-dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-propán-1-ona

20

A una solución de terc-butil-éster de ácido [2-(1,1-dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-1-metil-2-oxo-etil]-carbámico (5,6 g, 18,2 mmoles) en CH2Cl2 (70 ml) se añadió ácido trifluoroacético (5 ml) a 0ºC. Se dejó que se calentase la mezcla de reacción hasta la TA y se agitó durante 3 horas. Tras la eliminación del CH2Cl2 y el exceso de ácido trifluoroacético bajo presión reducida, se obtuvo 2-amino-1-(1,1-dioxo-1-lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-propán-1-ona (6,0 g, rendimiento: 100%) en forma de un sólido blanco. EM (M+H)=207. 25

Etapa 4 (S)-2-(1,1-Dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-1-metil-etilamina

Una mezcla de 2-amino-1-(1,1-dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-propán-1-ona (6,0 g, 18,2 mmoles) y BH3 (1 M en THF, 110 ml) se calentó bajo reflujo durante 48 h, después se enfrió hasta la TA y se inhibió con MeOH. Se eliminó 30 el volátil bajo vacío. Se añadió HCl 2 N (100 ml) al residuo y se calentó bajo reflujo durante 18 h. Se eliminó el solvente bajo vacío, proporcionando (S)-2-(1,1-dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-1-metil-etilamina (4,5 g) en forma de sólido blanco, rendimiento: 90%. EM (M+H)=193.

Preparación 4: 1-pirazín-2-il-etilamina 35

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema F.

A una solución de 1-pirazín-2-il-etanona (2,0 g, 15,85 mmoles) y acetato amónico (19,337 g, 158,5 mmoles) en metanol (50 ml) se añadió cianoborohidruro sódico (0,7 g, 11,1 mmoles) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a TA durante la noche. Tras la eliminación del metanol, se añadió agua (20 ml) al residuo y la solución 5 resultante se basificó mediante adición de hidróxido sódico a pH=13. La solución acuosa se extrajo con diclorometano y la fase orgánica agrupada se secó sobre sulfato sódico. La eliminación del solvente bajo presión reducida proporcionó 14,62 g de 1-pirazín-2-il-etilamina, rendimiento: 75%. EM (M+H)=124.

Preparados de manera similar a partir de las heteroaril-metil-cetonas o fenil-metil-cetonas apropiadas se 10 proporcionan: 1-piridín-2-il-etilamina, 1-piridín-3-il-etilamina, 1-piridín-4-il-etilamina, 1-(2-fluoro-fenil)-etilamina, 1-(3-fluoro-fenil)-etilamina, 1-(4-metanosulfonil-fenil)-etilamina, 1-tién-3-il-etilamina, 1-furán-2-il-etilamina, 1-(5-metil-furán)-2-il-etilamina, 1-tiazol-2-il-etilamina, 1-tién-2-il-etilamina, 1-pirimidín-2-il-etilamina, C-(6-metil-piridazín-3-il)-metilamina, C-(5-metil-pirazín-2-il)-metilamina y 1-piridazín-4-il-etilamina.

15

Preparación 5: (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema G.

20

Etapa 1 Ácido 3-yodo-5-nitrobenzoico

A una solución bajo agitación de yodo (137,95 g, 0,5436 mmoles) en ácido sulfúrico fumante (250 ml) se añadió ácido m-nitrobenzoico (64,6 g, 0,3866 mmoles) a TA. La mezcla de reacción se calentó lentamente a 85ºC durante 2 5 horas y se agitó a la misma temperatura durante 12 horas adicionales. La mezcla de reacción se enfrió hasta la TA y se vertió en hielo y la solución acuosa se extrajo con diclorometano. La fase orgánica se separó y se lavó con agua, solución 2,0 M de Na2S2O3 y solución hipersalina y después se secó sobre Na2SO4. Se eliminó el solvente bajo presión reducida, rindiendo ácido 3-yodo-5-nitrobenzoico en forma de sólido amarillo pálido, 111 g, rendimiento: 98%. EM (M+H)=294. 10

Etapa 2 Ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico

A una solución bajo agitación de ácido 3-yodo-5-nitrobenzoico (15,48 g, 52,83 mmoles) y Pd(Ph3P)4 (1,84 g, 1,69 mmoles) en 300 ml de tolueno y 50 ml de etanol se añadió ácido p-tolilborónico (7,87 g, 58,11 mmoles) y una 15 solución de Cs2CO3 (18,89 g, 58,11 mmoles) en 20 ml de agua a TA. La reacción se llevó a reflujo durante 18 horas y después se enfrió hasta la TA. A la solución se añadió NaOH 2 N y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos. Se separó la fase orgánica y la fase acuosa se ajustó a pH<4 utilizando HCl 12 N. El precipitado sólido resultante se filtró y se lavó con tolueno, proporcionando 13,2 g de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico en forma de sólido amarillo pálido (97,2 %). EM (M+H)=258. 20

Etapa 3 (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico

Se añadió EDCl (16,17 g, 84,38 mmoles) en partes a una solución bajo agitación de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico (15,49 g, 60,27 mmoles), HOBt (11,44 g, 84,38 mmoles) y 2-amino-1-metoxi-1-propano (7 ml, 66,31 25 mmoles) en NMP (9,29 ml, 84,38 mmoles), CH2Cl2 (180 ml) y DMF (20 ml) a 0ºC. La mezcla se dejó que se calentase hasta la TA y se agitó a la misma temperatura durante 14 horas. La mezcla de reacción se lavó con HCl 2 N, NaOH 2 N, solución acuosa saturada de NaHCO3, solución hipersalina, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron bajo vacío, proporcionando (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico en forma de un aceite amarillo (16,5 g, 83,5%). EM (M+H)=329. 30

Etapa 4 (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-amino-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

A una solución bajo agitación de (2-metoxi-1-metiletil)-amida de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico (39 mmoles) en 250 ml de metanol se añadió SnCl2 (117 mmoles) en una porción a TA. La mezcla de reacción se 35 calentó bajo reflujo durante 3 horas. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y el residuo se diluyó con acetato de etilo y se trató con solución saturada de NaHCO3. Se separaron los sólidos mediante filtración y se lavó el filtrado con solución acuosa saturada de NaHCO3, solución hipersalina, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró bajo vacío, proporcionando (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-amino-4’-metil-bifenil-3-carboxílico en forma de un aceite amarillo (10,5 g, 90,3%). EM (M+H)=299. 40

Etapa 5 (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

Una mezcla de (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-amino-4’-metil-bifenil-3-carboxílico (5,3 g, 17,8 mmoles), nitrito de isoamilo (13,5 ml, 88,9 mmoles) y diyodometano (8 ml, 106,7 mmoles) se agitó a TA durante 1 hora. A 45 continuación, la mezcla se calentó a 65ºC y se reservó durante 8 horas; la CL/EM indicó que se había completado la reacción. La mezcla de reacción se enfrió hasta la TA y la separación de yodobenceno del exceso de diyodometano se llevó a cabo mediante adición de la mezcla de reacción a TA a una solución bajo agitación de piperidín-CH3CN (V/V=90 ml/90 ml). Se produjo una reacción exotérmica vigorosa. Se eliminó el exceso de reactivos volátiles mediante evaporación giratoria a 80ºC. Se diluyó el residuo con acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico al 50 10%, agua y solución hipersalina. La capa orgánica se separó y se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna flash (acetato de etilo/hexanos=10:1), rindiendo (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico en forma de un sólido amarillo (5,2 g, 83,8%). EM (M+H)=410.

55

Se prepararon de manera similar, utilizando el compuesto amina apropiado en la etapa 3:

(1-pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=444; (2-hidroxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-yodo-4’-metilbifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=396; (1-metil-2-morfolín-4-il-etil)-amida de ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=465; [2-(1,1-dioxo-1lambda*6*-tiomorfolín-4-il)-1-metil-etil]-amida de ácido 5-60 yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=513; y (pirazín-2-ilmetil)-amida de ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=430.

Preparación 6: Ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema H.

5

Etapa 1 Metil-éster de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico

A una solución de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico (10,00 g, 0,039 moles) en metanol se añadió SOCl2 (5,09 10 g, 0,043 moles) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó que se calentase hasta la TA y después se calentó bajo reflujo durante 2 horas. Se eliminó el solvente bajo vacío, proporcionando metil-éster de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico (9,72 g, 92%) en forma de sólido amarillo pálido. EM (M+H)=273.

Etapa 2 Metil-éster de ácido 5-amino-4’-metil-bifenil-3-carboxílico 15

Se redujo metil-éster de ácido 4’-metil-5-nitro-bifenil-3-carboxílico se redujo utilizando SnCl2 utilizando el procedimiento de etapa 4 de preparación 6, proporcionando metil-éster de ácido 5-amino-4’-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=242.

20

Etapa 3 Metil-éster de ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

Se trató metil-éster de ácido 5-amino-4’-metil-bifenil-3-carboxílico con yoduro de metileno y nitrato de isoamilo utilizando el procedimiento de la etapa 5 de preparación 5, proporcionando ácido 5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=353. 25

Se preparó de manera similar metil-éster de ácido 2’-fluoro-5-yodo-4’-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=371.

Preparación 7: Ácido 3-yodo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

30

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema I.

Etapa 1 Metil-éster de ácido 3-yodo-5-nitrobenzoico

A una solución de ácido 3-yodo-5-nitrobenzoico (20,00 g, 0,068 moles) en metanol (50 ml) se añadió SOCl2 (5,45 ml, 5 0,075 moles) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó que se calentase hasta la TA y después se calentó bajo reflujo durante 2 horas. La reacción se enfrió y el solvente se eliminó al vacío, proporcionando metil-éster de ácido 3-yodo-5-nitrobenzoico en forma de sólido amarillo pálido (20,67 g, 99%). EM (M+H)=309.

Etapa 2 Metil-éster de ácido 3-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolán-2-il)-benzoico 10

Una solución de metil-éster de ácido 3-yodo-5-nitro-benzoico (10 g, 0,0326 moles), bis(pinacolato)diboro (9,1 g, 0,0358 moles), KOAc (9g, 0,098 moles) y PdCl2 (dppf) (798 mg, 0,98 mmoles) en DMSO (40 ml) se calentó a 80ºC durante 4 horas bajo una atmósfera de N2. La mezcla se enfrió hasta la TA y se extrajo con Et2O. Las fases orgánicas agrupadas se lavaron con solución hipersalina y se secaron sobre Na2SO4. Se evaporó el solvente bajo 15 presión reducida y el metil-éster de ácido 3-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolán-2-il)-benzoico en bruto resultante se utilizó sin purificación en la etapa siguiente.

Etapa 3 Metil-éster de ácido 3-(5-metil-piridín-2-il)-5-nitro-benzoico

20

A una solución de 2-bromo-5-metilpiridina (1,24 g, 7 mmoles), Pd(PPh3)4 (226 mg, 0,2 mmoles) y K3PO4 (2,76 g, 13 mmoles) en DME/H2O (5 ml/1 ml) se añadió metil-éster de ácido 3-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolán-2-il)-benzoico (2,00 g, 6,5 mmoles) bajo una atmósfera de N2. La mezcla se sometió a radiación de microondas a 130ºC durante 0,5 horas. La mezcla de reacción se enfrió y el solvente se evaporó bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (CH2Cl2/MeOH), proporcionando metil-éster de ácido 3-(5-metil-piridín-2-il)-5-25 nitro-benzoico en forma de un sólido blanco (700 mg, 40%).

Etapa 4 Metil-éster de ácido 3-amino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

A una solución de metil-éster de ácido 3-(5-metil-piridín-2-il)-5-nitro-benzoico (4 g, 14,7 mmoles) en metanol/acetato de etilo se añadió SnCl2 (11,15 g, 58,8 mmoles) a TA. La mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 3 horas y después se enfrió. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y el residuo se disolvió en H2O y se basificó mediante la adición de Na2CO3 hasta pH=9. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 y la fase orgánica se lavó con agua, solución hipersalina y se secó sobre Na2SO4. Se eliminó el solvente bajo presión reducida, proporcionando metil-5 éster de ácido 3-amino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (3,2 g, 90%) en forma de sólido blanco.

Etapa 5 Metil-éster de ácido 3-yodo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

Se trató metil-éster de ácido 5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico con yoduro de metileno y nitrato de isoamilo utilizando el 10 procedimiento de la etapa 5 de preparación 5, proporcionando metil-éster de ácido 3-yodo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico, EM (M+H)=353.

Etapa 6 Ácido 3-yodo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

15

Una solución de hidrato de LiOH (82 mg, 1,94 mmoles) en H2O (7 ml) se añadió gota a gota a una suspensión de metil-éster de ácido 3-yodo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (526 mg, 1,49 mmoles) en THF (4 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó que se calentase hasta la TA y se agitó hasta clarificar la solución de reacción. Se eliminó el solvente bajo vacío y la solución acuosa resultante se acidificó con HCl al 10% hasta pH=6∼7. Se recogió el precipitado resultante y se secó, proporcionando ácido 3-yodo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (470 mg, 93%). EM 20 (M+H)=340.

De manera similar se preparó, aunque utilizando 2-bromo-5-cloropiridina en la etapa 3 en lugar de 2-bromo-5-metilpiridina, ácido 3-yodo-5-(5-cloro-piridín-2-il)-benzoico, EM (M+H)=360.

25

Preparación 8: Metil-éster de ácido 3-bromo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema J.

30

Etapa 1 Metil-éster de ácido 3-bromo-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolán-2-il)-benzoico

Se añadieron metil-éster de ácido 3-bromo-5-yodo-benzoico (14,16 g, 41,53 mmoles), bis(pinacolato)-diborano 35 (11,60 g, 45,7 mmoles), PdCl2(dppf)2 (1,02 g, 1,256 mmoles) y acetato potásico (12,22 g, 124,6 mmoles) a 50 ml de DMSO, y la mezcla de reacción se agitó a 80ºC durante 20 horas y después se enfrió hasta la TA. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con éter dietílico. Los extractos orgánicos agrupados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida, proporcionando 18,5 g de metil-éster de ácido 3-bromo-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolán-2-il)benzoico, que se utilizó directamente en la etapa siguiente sin 40 purificación adicional.

Etapa 2 Metil-éster de ácido 3-bromo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

Una mezcla de 2-bromo-5-metil-piridina (10,27 g, 59,68 mmoles) y paladio tetracis(trifenilfosfina) (1,88 g, 1,65 45 mmoles) en 300 ml de DME se agitó a 60ºC bajo nitrógeno durante 30 minutos. A dicha mezcla se añadió metil-éster de ácido 3-bromo-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolán-2-il)-benzoico (18,5 g, 54,25 mmoles), seguido de K3PO4 (23,03 g, 108,5 mmoles) en 40 ml de agua. La mezcla se sometió a reflujo durante ocho horas, después se enfrió hasta la TA y se dividió entre agua y EtOAc. Las capas orgánicas agrupadas se lavaron con agua, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash 50 (EtOAc/hexanos 5:1), proporcionando 8,5 g de metil-éster de ácido 3-bromo-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico, EM (M+H)=306.

Se prepararon de manera similar:

metil-éster de ácido 3-bromo-5-(2-cloro-5-metil-piridín-2-il)-benzoico, EM (M+H)=341,

metil-éster de ácido 3-bromo-5-(2-fluoro-5-metil-piridín-2-il)-benzoico, EM (M+H)=325, y 5

metil-éster de ácido 3-bromo-5-(5-cloro-piridín-2-il)-benzoico, EM (M+H)=327.

Ejemplo 1: (2-Metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 4’-metil-5-[1,2,3]triazol-1-il-bifenil-3-carboxílico (Ejemplo de referencia)

10

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema K.

15

Etapa 1 (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-azido-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

A una solución de (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-amino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (500 mg, 1,68 mmoles) en ácido trifluoroacético (10 ml) se añadió una solución de NaNO2 (21,47 mmoles, 1,49 g) en agua (10 ml) a 0ºC. La mezcla se agitó a 0ºC durante 10 minutos y se añadió una solución de NaN3 (44,43 mmoles, 2,89 g) en agua (10 20 ml). La solución se agitó a TA durante 16 horas. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y el residuo se extrajo con acetato de etilo, se lavó con solución acuosa saturada de NaHCO3, solución hipersalina y se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró bajo vacío, proporcionando (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-azido-4’-metil-bifenil-3-carboxílico. (80%). EM (M+H)=325.

25

Etapa 2 (2-Metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 4’-metil-5-[1,2,3]triazol-1-il-bifenil-3-carboxílico

Una solución de (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-azido-4’-metil-bifenil-3-carboxílico (488 mg, 1,5 mmoles), etiniltrimetilsilano (4,5 mmoles, 0,64 ml) en DMF (6 ml) se calentó a 110ºC durante 16 horas. Se enfrió y se filtró la mezcla y el filtrado se purificó mediante HPLC preparativa, proporcionando 262 mg de (2-metoxi-1-metil-etil)-amida 30 de ácido 4'-metil-5-[1,2,3]triazol-1-il-bifenil-3-carboxílico en forma de sólido blanco (50%). EM (M+H)=351.

Los compuestos adicionales preparados utilizando el procedimiento anterior se muestran en la Tabla 1.

Ejemplo 2: (2-Metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 4’-metil-5-[1,2,3]triazol-2-il-bifenil-3-carboxílico (Ejemplo de referencia)

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el 5 Esquema L.

Etapa 1 (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-hidrazino-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

10

Se disolvió (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-amino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (596 mg, 2 mmoles) en 6 ml de HCl concentrado y se agitó durante 15 minutos a 0ºC. A la mezcla de reacción se añadió una solución de NaNO2 (138 mg, 2 mmoles) en agua (1,5 ml) gota a gota a 0ºC. La mezcla se agitó durante 30 minutos y después se añadió gota a gota una solución de SnCl2 (4,5 mmoles, 189,6 mg) en 2 ml de HCl concentrado. Empezó a formarse inmediatamente un precipitado. Tras agitar durante 30 minutos adicionales, la (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 15 5-hidrazino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico resultante se aisló en forma de una sal hidrocloruro mediante filtración y se utilizó inmediatamente en la etapa siguiente.

Etapa 2 (2-Metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 4’-metil-5-[1,2,3]triazol-2-il-bifenil-3-carboxílico

20

Una mezcla de sal hidrocloruro de (2-metoxi-1-metil-etil)-amida de ácido 5-hidrazino-4’-metil-bifenil-3-carboxílico (2 mmoles), glioxal (solución acuosa al 40%, 1 ml) y ácido acético acuoso al 50% (2 ml) se calentó a 150ºC durante 60 minutos mediante irradiación de microondas. La mezcla de reacción se enfrió y se diluyó con EtOAc, se lavó con solución acuosa saturada de Na2CO3 y solución hipersalina y se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa, proporcionando 210 mg de (2-metoxi-1-metil-etil)-amida 25 de ácido 4'-metil-5-[1,2,3]triazol-2-il-bifenil-3-carboxílico en forma de sólido blanco (30%). EM (M+H)=351.

Los compuestos adicionales preparados utilizando el procedimiento anterior se muestran en la Tabla 1.

Ejemplo 3: (1-Pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (Ejemplo 30 de referencia)

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema M.

Etapa 1 Metil-éster de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4’-metil-bifenil-3-carboxílico 5

El metil-éster de ácido 5-hidrazino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico utilizado en el presente Ejemplo se preparó a partir de metil-éster de ácido 5-amino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico siguiendo el procedimiento de la etapa 1 del Ejemplo 6.

A una solución de metil-éster de ácido 5-hidrazino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (300 mg, 1,17 mmoles) en HOAc (5 10 ml) se añadió N-dimetilaminometilén-isobutiramida (233 mg, 1,4 mmoles) en una porción. La mezcla se calentó a 90ºC durante dos horas. Tras eliminar el exceso de HOAc, el residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con NaHCO3 acuoso saturado. Se secó la capa orgánica sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (ISCOTM), proporcionando metil-éster de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4’-metil-bifenil-3-carboxílico en forma de un sólido amarillo (293 mg, 74,6%). 15

Etapa 2 Ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

Se hidrolizó el metil-éster de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico con LiOH siguiendo el procedimiento de la etapa 2, Ejemplo 8, proporcionando ácido 5-(5-isopropiol-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-20 carboxílico.

Etapa 3 (1-Pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico

El ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico se sometió a reacción de acoplamiento de 25 amidas descrito en la etapa 4 del Ejemplo 6, aunque sustituyendo la 2-amino-propán-1-ol por 1-pirazín-2-il-etilamina, proporcionando (1-pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=427.

Se preparó de manera similar, aunque sustituyendo el metil-éster de ácido 5-hidrazino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico 30 de la etapa 1 por metil-éster de ácido 3-hidrazino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (preparado tal como se indica en la etapa 1 del Ejemplo 6), la 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida, EM (M+H)=428.

Ejemplo 4: (1-Pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-[5-(1-metoxi-etil-[1,2,4]triazol-1-il]-4'-metil-bifenil-3-carboxílico 35 (Ejemplo de referencia)

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema N.

5

Etapa 1 Metil-éster de ácido 5-[5-(1-hidroxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

Una mezcla de 2-hidroxi-propionamida (1,0 g, 11,2 mmoles) y dimetil-acetal de N,Ndimetilformamida (1,06 g, 8,96 mmoles) en dimetilglicol (6 ml) se calentó a 80ºC durante dos horas y después se enfrió a TA. La mezcla se añadió a 10 una solución de metil-éster de ácido 5-hidrazino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (1,2 g, 4,1 mmoles) en HOAc (5 ml) y la mezcla se calentó a 80ºC durante dos horas adicionales. La mezcla de reacción se enfrió y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida. Se disolvió el residuo en EtOAc y se lavó con NaHCO3 acuoso saturado. Se secó la capa orgánica sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash, proporcionando metil-éster de ácido 5-[5-(1-hidroxietil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4’-metil-15 bifenil-3-carboxílico en forma de un sólido blanco (410 mg, 29,76%).

Etapa 2 Metil-éster de ácido 5-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

A una mezcla en suspensión de metil-éster de ácido 5-[5-(1-hidroxietil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4,4'-metil-bifenil-3-20 carboxílico (300 mg, 0,89 mmoles) y Ag2O (454 mg, 1,96 mmoles) en CH3CN (5 ml) se añadió MeI (1 ml). Se envolvió la mezcla de reacción en hoja de aluminio y se agitó durante la noche. El sólido se filtró y se lavó con CH3CN. El filtrado agrupado se condensó y el residuo se purificó mediante ISCO, proporcionando metil-éster de ácido 5-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4’-metil-bifenil-3-carboxílico en forma de un sólido amarillo pálido (290 mg, 93,0%). 25

Etapa 3 Ácido 5-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

Se hidrolizó el metil-éster de ácido 5-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4'-metil-bifenil-3-carboxílico con LiOH siguiendo el procedimiento de la etapa 2, Ejemplo 8, proporcionando ácido 5-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4'-metil-bifenil-3-carboxílico.

Etapa 4 (1-Pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-[5-(1-metoxi-etil-[1,2,4]triazol-1-il]-4'-metil-bifenil-3-carboxílico 5

El ácido 5-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4'-metil-bifenil-3-carboxílico se sometió a reacción de acoplamiento de amidas descrito en la etapa 4 del Ejemplo 6, aunque sustituyendo 2-amino-propán-1-ol por 1-pirazín-2-il-etilamina, proporcionando (1-pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-4'-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=443. 10

Se preparó de manera similar, aunque sustituyendo el metil-éster de ácido 5-hidrazino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico de la etapa 1 por metil-éster de ácido 3-hidrazino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (preparado tal como se indica en la etapa 1 del Ejemplo 6), la 3-[5-(1-metoxi-etil)-[1,2,4]triazol-1-il]-5-(5-metil-piridín-2-il)-N-(1-pirazín-2-il-etil)-benzamida, EM (M+H)=444. 15

Ejemplo 5: (1-Pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (Ejemplo de referencia)

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el 20 Esquema O.

Etapa 1 Etil-éster de ácido 5-isopropil-1-[5-metoxicarbonil-4'-metil-bifenil-3-il)-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxílico

El metil-éster de ácido 5-azido-4'-metil-bifenil-3-carboxílico utilizado en la presente etapa se preparó a partir de metil-5 éster de ácido 5-amino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico siguiendo el procedimiento de la etapa 1 del Ejemplo 4.

A una mezcla de metil-éster de ácido 5-azido-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (200 mg, 0,75 mmoles) e isobutirilacetato de etilo (119 mg, 0,75 mmoles) en EtOH (5 ml) se añadió EtONa (51 mg, 0,75 mmoles) y la mezcla se calentó a 80ºC durante dos horas y después se enfrió hasta la TA. Se eliminó el EtOH de la mezcla de reacción, 10 proporcionando etil-éster de ácido 5-isopropil-1-(5-metoxicarbonil-4'-metil-bifenil-3-il)-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxílico en forma de un gel que se utilizó directamente en la etapa siguiente.

Etapa 2 Ácido 1-(5-carboxi-4'-metil-bifenil-3-il)-5-isopropil-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxílico

15

El etil-éster de ácido 5-isopropil-1-(5-metoxicarbonil-4'-metil-bifenil-3-il)-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxílico de la etapa 1 se disolvió en THF (7 ml) y agua (4 ml) y se añadió LiOH·H2O (184 mg, 4,38 mmoles) en una sola porción. La mezcla de reacción se agitó a TA durante tres horas. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y la solución acuosa remanente se acidificó con HCl concentrado hasta pH∼1. La solución se extrajo con EtOAc y las capas orgánicas agrupadas se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida, 20 proporcionando ácido 1-(5-carboxi-4'-metil-bifenil-3-il)-5-isopropil-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxílico en forma de sólido amarillo pálido (260 mg), que se utilizó sin purificación adicional en la etapa siguiente.

Etapa 3 Ácido 5-(5-isopropil-[1,2,3]triazol-1-il)-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

El ácido 1-(5-carboxi-4'-metil-bifenil-3-il)-5-isopropil-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxílico de la etapa 2 se calentó a 170ºC hasta que ya no se liberó más dióxido de carbono. La mezcla de reacción se enfrió hasta la TA y el ácido 5-(5-5 isopropil-[1,2,3]triazol-1-il)-4'-metilbifenil-3-carboxílico en bruto resultante se utilizó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional.

Etapa 4 (1-Pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,3]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico

10

El ácido 5-(5-isopropil-[1,2,3]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico se sometió a la reacción de acoplamiento de amidas descrita en la etapa 4 del Ejemplo 6, aunque sustituyendo el 2-amino-propán-1-ol por 1-pirazín-2-il-etilamina, proporcionando (1-pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(5-isopropil-[1,2,3]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico, EM (M+H)=427.

15

Ejemplo 6: 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema P.

20

Etapa 1 Metil-éster de ácido 3-hidrazino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

Se suspendió metil-éster de ácido 3-amino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (1,0 g, 4 mmoles) en 16 ml de HCl acuoso concentrado y la mezcla se enfrió a 0ºC. Se añadió una solución de nitrito sódico (0,30 g) en agua (3 ml) y la mezcla se agitó a 0ºC durante 45 minutos. A continuación se añadió una solución de hidrato de SnCl2 (2,34 g) en 5 ml de HCl acuoso concentrado. La mezcla de reacción se agitó durante una hora a TA y después se filtró. El sólido 5 recogido se lavó con agua y se secó, proporcionando 1,80 g de metil-éster de ácido 3-hidrazino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico en forma de unos polvos blancos.

Etapa 2 Metil-éster de ácido 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

10

Se añadió isobutiramida (6,02 g, 69 mmoles) y DMFDMA (9,22 ml) a 10 ml de DMA en un primer matraz y la mezcla se calentó a 80ºC bajo agitación durante una hora. En un segundo matraz, se suspendió una suspensión de metil-éster de ácido 3-hidrazino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (6,42 g, 23 mmoles) en ácido acético y se calentó a 80ºC. El contenido del primer matraz se añadió lentamente al segundo matraz y la mezcla agrupada se agitó a 80ºC durante dos horas. La mezcla de reacción se enfrió y se concentró bajo presión reducida. El residuo se diluyó con 15 EtOAc, se lavó con NaHCO3 acuoso saturado y agua, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (hexanos/EtOAc 4:--2:1), proporcionando 2,06 g de metil-éster de ácido 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico en forma de un aceite transparente, EM (M+H)=337.

20

Etapa 3 Ácido 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico

Se disolvió metil-éster de ácido 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (2,0 g, 6 mmoles) en 30 ml de MeOH y se añadieron 2,0 ml de NaOH acuoso 3 N. La mezcla de reacción se agitó a TA durante 18 horas, después se enfrió y se acidificó con HCl acuoso al 10% y se concentró bajo presión reducida, rindiendo 2,45 g de 25 ácido 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico.

Etapa 4 3-(5-Isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida

Se añadió ácido 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (1,90 g, 6 mmoles), C-(5-metil-30 pirazín-2-il)-metilamina (0,73 g, 6 mmoles), EDCl (1,69 g, 9 mmoles), HOBt (1,20 g, 9 mmoles) y NMM (3,2 ml) a 20 ml de acetonitrilo. Se agitó la mezcla de reacción a TA durante 18 horas bajo una atmósfera de nitrógeno y después se dividió entre agua y EtOAc. Las capas orgánicas agrupadas se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía flash (IPA/DCM 1:4), proporcionando 1,63 g de 3-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzamida, EM 35 (M+H)=428.

Ejemplo 7: N-(5-Metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el 40 Esquema Q.

Etapa 1 Metil-éster de ácido N-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzoico

Se disolvió trifluoroacetamida (4,70 g, 40 mmoles) en 15 ml de DME en un primer matraz y se añadieron 5,53 ml de 5 DMF DMA. Se agitó la mezcla a TA durante 30 minutos y después se eliminó el solvente bajo presión reducida. En un segundo matraz, se disolvió ácido toluenosulfónico (11,85 g, 60 mmoles) y ácido 3-hidrazino-5-(5-metil-piridín-2-il)-benzoico (6,08 g, 20 mmoles) en 100 ml de DMSO y se calentó a 70ºC. El contenido del primer matraz se añadió lentamente al contenido del segundo matraz y la mezcla de reacción se agitó a 70ºC durante dos horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta la TA y se dividió entre agua y EtOAc. Las capas orgánicas agrupadas se lavaron con 10 agua, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna, proporcionando 1,44 g de metil-éster de ácido N-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzoico en forma de un sólido blanco, EM (M+H)=363.

Etapa 2 Ácido N-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzoico 15

Se disolvió metil-éster de ácido N-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzoico (1,44 g) en una mezcla de MeOH y THF (20 ml de cada uno) conjuntamente con 2 ml de NaOH acuoso 3 N. La mezcla se agitó a TA durante 18 horas, después se enfrió a 0ºC y se acidificó con HCl acuoso al 10% hasta un pH de aproximadamente 4. Se eliminó el solvente bajo presión reducida, proporcionando 1,50 g de ácido N-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-20 trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzoico en forma de un sólido blanco.

Etapa 3 N-(5-Metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida

Se preparó N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida (670 mg, 25 EM (M+H)=454) a partir de ácido N-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzoico y C-(5-metil-pirazín-2-il)-metilamina utilizando el procedimiento de la etapa 6 del Ejemplo 6.

Ejemplo 8: (1-Pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (Ejemplo de referencia) 30

El procedimiento sintético utilizado en la presente preparación se describe de manera general a continuación, en el Esquema R.

Etapa 1 Metil-éster de ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

La hidrazida de ácido isobutírico utilizada en el presente ejemplo se preparó a partir de cloruro de ácido isobutírico e 5 hidrato de hidrazina siguiendo el procedimiento de Org. Synth. 81:254, 2005. Se añadió hidrazida de ácido isobutírico (55 mg, 5,34 mmoles) y (1,1-dimetoxi-etil)-dimetil-amina (774 mg, 5,81 mmoles) a 6 ml de CH3CN y la mezcla se calentó a 50ºC y se agitó durante 30 minutos. Se añadió metil-éster de ácido 5-amino-4'-metil-bifenil-3-carboxílico (1,0 g, 4,15 mmoles), seguido de 6 ml de ácido acético. Se calentó la mezcla de reacción a 120ºC y se agitó durante cinco horas y después se enfrió hasta la TA. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y el residuo 10 se purificó mediante cromatografía flash, proporcionando 400 mg (30%) de metil-éster de ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico en forma de unos polvos blancos.

Etapa 2 Ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4’-metil-bifenil-3-carboxílico

15

Se preparó el ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico mediante hidrólisis básica del metil-éster de ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico siguiendo el procedimiento de la etapa 3 del Ejemplo 4.

Etapa 3 (1-Pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico 20

Se preparó (1-pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico a partir de ácido 5-(3-isopropil-5-metil-[1,2,4]triazol-4-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico y 1-pirazín-2-il-etilamina siguiendo el procedimiento de la etapa 4 del Ejemplo 6.

25

Ejemplo 9: Formulaciones

Se formularon preparaciones farmacéuticas para la administración por diversas vías tal como se muestra en las Tablas, posteriormente. La expresión “ingrediente activo” o “compuesto activo” tal como se utiliza en las Tablas se refiere a uno o más de los compuestos dados a conocer anteriormente. 30

Composición para la administración oral

Ingrediente

% p/p

Ingrediente activo

20,0%

Lactosa

79,5%

Estearato de magnesio

0,5%

Se mezclaron los ingredientes y se dispensaron en cápsulas que contenían aproximadamente 100 mg cada una; una cápsula era aproximadamente una dosis diaria total. 5

Composición para la administración oral

Ingrediente

% p/p

Ingrediente activo

20,0%

Estearato de magnesio

0,5%

Croscarmelosa sódica

2,0%

Lactosa

76,5%

PVP (polivinilpirrolidona)

1,0%

Se agruparon los ingredientes y se granularon utilizando un solvente, tal como metanol. A continuación la 10 formulación se secó y se formó en tabletas (que contenían aproximadamente 20 mg de compuesto activo) con una tableteadora apropiada.

Composición para la administración oral

15

Ingrediente

Cantidad

Compuesto activo

1,0 g

Ácido fumárico

0,5 g

Cloruro sódico

2,0 g

Metilparabén

0,15 g

Propilparabén

0,05 g

Azúcar granulado

25,5 g

Sorbitol (solución al 70%)

12,85 g

Veegum K (Vanderbilt Co.)

1,0 g

Saborizante

0,035 ml

Colorantes

0,5 mg

Agua destilada

c.s. para 100 ml

Se mezclaron los ingredientes para formar una suspensión para la administración oral.

Formulación parenteral

20

Ingrediente

% p/p

Ingrediente activo

0,25 g

Cloruro sódico

c.s. para hacer isotónico

Agua para inyección

100 ml

El ingrediente activo se disolvió en una porción del agua para inyección. A continuación se añadió una cantidad suficiente de cloruro sódico bajo agitación para que la solución fuese isotónica. Se completó la solución hasta el peso final con el resto del agua para inyección, se filtró a través de un filtro de membrana de 0,2 micrómetros y se empaquetó bajo condiciones estériles. 25

Formulación de supositorio

Ingrediente

% p/p

Ingrediente activo

1,0%

Polietilenglicol-1000

74,5%

Polietilenglicol-4000

24,5%

Se fundieron juntos los ingredientes y se mezclaron en un baño de vapor y se vertieron en moldes que contenían 2,5 g de peso total.

Formulación tópica

5

Ingredientes

Gramos

Compuesto activo

0,2-2

Span 60

2

Tween 60

2

Aceite mineral

5

Petrolato

10

Metilparabén

0,15

Propilparabén

0,05

BHA (hidroxianisol butilado)

0,01

Agua

c.s. 100

Se agruparon todos los ingredientes, excepto el agua, y se calentaron hasta aproximadamente 60ºC bajo agitación. A continuación se añadió una cantidad suficiente de agua a aproximadamente 60ºC bajo agitación vigorosa para emulsionar los ingredientes y seguidamente se añadió agua, c.s. hasta aproximadamente 100 g.

10

Formulaciones de spray nasal

Se prepararon varias suspensiones acuosas que contenían entre aproximadamente 0,025 y 0,5 por ciento de compuesto activo como formulaciones de spray nasal. Las formulaciones contenían opcionalmente ingredientes inactivos, tales como, por ejemplo, celulosa microcristalina, carboximetilcelulosa sódica y dextrosa. Puede añadirse 15 ácido clorhídrico para ajustar el pH. Las formulaciones de spray nasal pueden administrarse mediante una bomba dosificadora de spray nasal que administra típicamente aproximadamente 50 a 100 microlitros de formulación por accionamiento. Un programa de dosificación típico es de 2 a 4 sprays cada 4 a 12 horas.

Ejemplo 10: Ensayo de FLIPR (lector de placas de imágenes de fluorimétricas) de P2X3/P2X2/3 20

Se transfectaron células CHO-K1 con subunidades de receptor P2X3 de rata o P2X2/3 humano clonadas y se subcultivaron en matraces. 18 a 24 horas antes del experimento de FLIPR, se desprendieron las células de los matraces, se centrifugaron y se resuspendieron en medio nutritivo a una densidad de 2,5x105 células/ml. Se dividieron las células en alícuotas en placas de 96 pocillos de paredes negras a una densidad de 50.000 25 células/pocillo y se incubaron durante la noche con 5% de CO2 a 37ºC. El día del experimento, las células se lavaron en tampón de FLIPR (solución salina equilibrada de Hank sin calcio ni magnesio, HEPES 10 mM, CaCl2 2 mM, probenecid 2,5 mM, FB). Cada pocillo recibió 100 ml de FB y 100 ml de pigmento fluorescente Fluo-3 AM [conc. final: 2 mM]. Tras una incubación de carga de pigmento de 1 hora a 37ºC, se lavaron 4 veces las células con FB y se dejó en cada pocillo 75 ml/pocillo finales de FB. 30

Se añadieron los compuestos de ensayo (disueltos en DMSO a una concentración de 10 mM y diluidos en serie con FB) o vehículo a cada pocillo (25 ml de una solución 4X) y se dejó que se equilibrasen durante 20 minutos a TA. A continuación las placas se introdujeron en el FLIPR y se obtuvo una medición de línea base de la fluorescencia (excitación a 488 nm y emisión a 510-570 nm) durante 10 segundos antes de la adición de 100 ml/pocillo de 35 agonista o vehículo. El agonista era una solución 2X de α,β-meATP que produjo una concentración final de 1 mM (P2X3) ó 5 mM (P2X2/3). Se midió la fluorescencia durante 2 minutos adicionales a intervalos de 1 segundo tras la adición de agonista. Se llevó a cabo una adición final de yonomicina (5 mM, concentración final) a cada pocillo de la placa de ensayo de FLIPR para establecer la viabilidad celular y fluorescencia máxima del calcio citosólico unido a pigmento. Se midió la fluorescencia máxima en respuesta a la adición de α,β-meATP (en ausencia y en presencia de 40 compuestos de ensayo) y se generaron curvas de inhibición utilizando regresión no lineal. Como control positivo se utilizó PPADS, un antagonista de P2X estándar.

Utilizando el procedimiento anteriormente indicado, los compuestos de la invención mostraban actividad para el receptor P2X3. El compuesto ((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-amida de ácido 2'-fluoro-5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-45 metil-bifenil-3-carboxílico, por ejemplo, mostraba un pIC50 de aproximadamente 8,77 para el receptor P2X3 y el compuesto (1-pirazín-2-il-etil)-amida de ácido 2'-fluoro-5-(5-isopropil-[1,2,4]triazol-1-il)-4'-metil-bifenil-3-carboxílico mostraba un pKi de aproximadamente 7,64 para el receptor P2X2/3, utilizando el ensayo anteriormente indicado.

Ejemplo 11: ensayo in vivo de asma y función pulmonar

Se inmunizaron ratones BALB/cj con un protocolo de inmunización estándar. Brevemente, se inmunizaron ratones (N=8/grupo) i.p. con ovalbúmina (OVA, 10 mg) en alum los días 0 y 14. A continuación se retaron los ratones con OVA aerosolizado (al 5%) los días 21 y 22. Los animales recibieron vehículo (p.o.) o un compuesto de la invención 5 (100 mg/kg p.o.), todos desde el día 20.

Se evaluó la función pulmonar el día 23 utilizando el sistema Buxco para medir PenH en respuesta a un reto de aerosol de metacolina. A continuación se eutanizaron los ratones y se recogieron muestras de plasma al final del estudio. 10

Ejemplo 12: ensayo de contracción de vejiga inducida por volumen

Se anestesiaron ratas Sprague-Dawley hembra (200 a 300 g) con uretano (1,5 g/kg, s.c.). Los animales fueron traqueotomizados y se canuló una arteria carótida y una vena femoral para la medición de la presión sanguínea y la 15 administración de fármaco, respectivamente. Se llevó a cabo una laparotomía y se ligaron los uréteres y se seccionaron proximalmente a la ligación. Se ligó el meato uretral externo con sutura de seda y se canuló la vejiga urinaria por la cúpula para la infusión de solución salina y la medición de la presión de la vejiga.

Tras un periodo de estabilización de 15 a 30 minutos, la vejiga se infusionó con solución salina a TA a 100 ml/min. 20 hasta observar contracciones continuas de la vejiga inducidas por volumen (CVIV). A continuación se redujo la tasa de infusión a 3-5 ml/min durante 30 minutos antes de vaciar la vejiga y dejar reposar durante 30 minutos. Todas las infusiones posteriores se llevaron a cabo tal como se indica, excepto en que la tasa de infusión inferior se mantuvo durante sólo 15 minutos en lugar de 30 minutos. Los ciclos de llenado y vaciado de la vejiga se repitieron hasta que los volúmenes umbral (VU: el volumen necesario para inducir la primera contracción de la vejiga para la micción) 25 variaban en menos de 10% en dos líneas base consecutivas y la frecuencia de contracción no discrepaba en más de 2 contracciones en un periodo de 10 minutos posterior a la tasa de infusión más lenta. Tras establecer VU y CVIV reproducibles, se vacío la vejiga y el animal recibió una dosis de fármaco o de vehículo (0,5 ml/kg, i.v.) 3 minutos antes de iniciar la siguiente infusión programada.

30

Ejemplo 13: ensayo de dolor con formalina

Se introdujeron ratas Sprague Dawley macho (180 a 220 g) en cilindros de metacrilato individuales y se dejó que

se aclimatasen al ambiente de ensayo durante 30 min. Se administró vehículo, fármaco o control positivo (morfina, 2 35 mg/kg) subcutáneamente a una dosis de 5 ml/kg. 15 min después de la dosificación se inyectó formalina (al 5% en 50 ml) en la superficie plantar de la pata trasera derecha utilizando una aguja de calibre 26. Las ratas se devolvieron inmediatamente a la cámara de observación. Unos espejos situados en torno a la cámara permitían una observación sin obstáculos de la pata en la que se había inyectado formalina. Un observador ciego a los tratamientos registró la duración del comportamiento nocifensivo de cada animal utilizando un temporizador automático de comportamiento. 40 Se registró el lamido de patas traseras y la agitación/levantamiento separadamente en periodos de 5 min durante un total de 60 min. La suma del tiempo dedicado a lamer o agitar en segundos entre los tiempos 0 y 5 min se consideró la etapa temprana, mientras que la etapa tardía se consideró la suma de los segundos dedicados a lamer o agitar entre 15 y 40 min. Se recogió una muestra de plasma.

45

Ejemplo 14: ensayo de dolor de colon

Se alojaron ratas Sprague-Dawley macho adultas (350 a 425 g, Harlan, Indianapolis, IN), 1 a 2 en cada jaula, en unas instalaciones de cuidado animal. Las ratas fueron anestesiadas profundamente con pentobarbital sódico (45 mg/kg) administrado intraperitonealmente. Se colocaron electrodos y se fijaron en la musculatura oblicua externa 50 para el registro electromiográfico (EMG). Los cables de los electrodos se condujeron subcutáneamente y se exteriorizaron en la nuca para el acceso posterior. Tras la cirugía, las ratas se alojaron separadamente y se dejó que se recuperasen durante 4 a 5 días antes de los ensayos.

El colon descendente y el recto se distendieron mediante hinchado de presión controlada de un balón de látex 55 flexible de 7 a 8 cm de longitud atado en torno a un tubo flexible. Se lubricó el balón, se insertó en el colon por el ano y se ancló con cinta el catéter con balón a la base de la cola. Se consiguió la distensión colorrectal (DCR) mediante la abertura de una válvula solenoide a un depósito de aire a presión constante. Se controló la presión intracolónica y se realizó un seguimiento continuo con un dispositivo de control de la presión. Se cuantificó la respuesta como la respuesta visceromotora (RVM), una contracción de la musculatura abdominal y de las patas traseras. La actividad 60 EMG producida por la contracción de la musculatura oblicua externa se cuantificó utilizando el software Spike2 (Cambridge Electronic Design). Cada prueba de distensión duró 60 s y la actividad EMG se cuantificó durante 20 s

antes de la distensión (línea base), durante 20 s la distensión y durante 20 s después de la distensión. El incremento del número total de recuentos registrados durante la distensión superior a la línea base se define como la respuesta. Las respuestas de línea base estables a la DCR (10, 20, 40 y 80 mmHg, 20 segundos, separados por 4 min) se obtuvieron en ratas conscientes, no sedadas, antes de cualquier tratamiento.

5

Se evaluaron los compuestos para los efectos sobre las respuestas a la distensión del colon inicialmente en un modelo de nocicepción visceral aguda y en un modelo de hipersensibilidad del colon producida por el tratamiento intracolónico con zimosán (25 mg, 25 mg/ml) instilado en el colon con una aguja de alimentación insertada hasta una profundidad de aproximadamente 6 cm. Los grupos experimentales consistían de 8 ratas cada uno.

10

Nocicepción visceral aguda: para someter a ensayo los efectos del fármaco sobre la nocicepción visceral aguda, se administraron 1 de 3 dosis de fármaco, vehículo o control positivo (morfina, 2,5 mg/kg) tras establecer las respuestas de línea base; se realizó un seguimiento de las respuestas a la distensión durante los siguientes 60 a 90 minutos.

Hipersensibilidad visceral: para someter a ensayo los efectos de fármaco o vehículo tras el tratamiento intracolónico 15 con zimosán, se proporcionó tratamiento intracolónico tras establecer las respuestas de línea base. Antes del ensayo con fármacos a las 4 horas, se evaluaron las respuestas a la distensión para establecer la presencia de hipersensibilidad. En las ratas tratadas con zimosán, se administró 1 de 3 dosis de fármaco, vehículo o control positivo (morfina, 2,5 mg/kg) 4 horas después del tratamiento de zimosán y se realizó un seguimiento de las respuestas a la distensión durante los siguientes 60 a 90 minutos. 20

Ejemplo 15: alodinia al frío en ratas con lesión de constricción crónica del nervio ciático

Se determinaron los efectos de los compuestos de la presente invención sobre la alodinia al frío utilizando el modelo de lesión de constricción crónica (LCC) del dolor neuropático en ratas, en el que se midió la alodinia al frío en un 25 baño de agua fría con un suelo de placa metálica y agua de una profundidad de 1,5 a 2,0 cm y una temperatura de 3ºC a 4ºC (Gogas K.R. et al., Analgesia 3:1-8, 1997).

Concretamente se anestesiaron ratas de LCC; se localizó la trifurcación del nervio ciático y se aplicaron 4 ligaduras (gut crómico 4-0 ó 5-0) en torno al nervio ciático próximo a la trifurcación. A continuación se dejó que las ratas se 30 recuperasen de la cirugía. Los días 4 a 7 después de la cirugía las ratas fueron evaluadas inicialmente para alodinia inducida por frío introduciendo individualmente los animales en el baño de agua fría y registraron el número total de levantamientos de la pata lesionada durante un periodo de tiempo de 1 min: Levantan la pata lesionada fuera del agua. No se registraron los levantamientos de pata asociados a la locomoción o recolocación del cuerpo. Las ratas que mostraron 5 levantamientos por minuto o más el día 4-7 tras la cirugía se consideró que mostraban alodinia al 35 frío y se utilizaron en los estudios posteriores. En los estudios agudos, se administró por vía subcutánea (s.c.) el compuesto o compuestos de referencia de la presente invención 30 minutos antes de los ensayos. Se determinaron los efectos de la administración repetida de los compuestos de la presente invención sobre la alodinia al frío 14, 20 ó 38 h después de la última dosis oral del régimen siguiente: administración oral (p.o.) de vehículo, referencia o de un compuesto de la presente invención a intervalos de ~12 h (BID) durante 7 días. 40

Ejemplo 16: dolor de cáncer hueso en ratones C3H/HeJ

Se determinaron los efectos de los compuestos de la presente invención sobre el dolor óseo entre los días 7 y 18 tras la inyección intramedular de células de sarcoma 2472 en el fémur distal de ratones C3H/HeJ. 45

Concretamente, se cultivaron células tumorales NCTC 2472 (American Type Culture Collection, ATCC), las cuales se ha demostrado previamente que forman lesiones líticas en el hueso tras la inyección intramedular, y se mantuvieron siguiendo las recomendaciones de la ATCC. Se inyectaron aproximadamente 105 células directamente en la cavidad medular del fémur distal en ratas C3H/HeJ anestesiadas. Desde aproximadamente el día 7, se 50 evaluaron los ratones para comportamientos nocifensivos espontáneos (evitación y defensa), comportamientos nocifensivos inducidos por palpación (evitación y defensa), defensa ambulatoria forzada y utilización de las extremidades. Se determinaron los efectos de los compuestos de la presente invención tras una única administración aguda (s.c.) el día 7-día 15. Además, se determinaron los efectos de la administración repetida (BID) de compuestos de la presente invención entre los días 7 y 15 en la primera hora posterior a la primera dosis los días 55 7, 9, 11, 13 y 15.

Claims (9)

1. REIVINDICACIONES

   1. Compuesto de fórmula I:

   5

   o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en los que:

   R1 es [1,2,4]triazol-1-ilo sustituido opcionalmente en la posición 5 con alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, alquilamino C1-6-alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6 o cicloalquil C3-6-alquilo C1-6, 10

   R2 es 5-metil-piridín-2-ilo, 5-cloro-piridín-2-ilo, 5-fluoro-piridín-2-ilo, 5-metil-3-fluoro-piridín-2-ilo, 5-metil-3-cloro-piridín-2-ilo, 3,5-difluoro-piridín-2-ilo ó 3,5-dicloro-piridín-2-ilo,

   R3 es hidrógeno,

   R4 es hidrógeno o metilo,

   R5 es hidroximetilo, metoximetilo, morfolín-4-ilmetilo, piperidín-1-ilmetilo sustituido opcionalmente en la posición 4 15 con metilo, metanosulfonilo o acetilo, 1,1-dioxo-tiomorfolín-1-ilo, piperidín-1-ilo sustituido opcionalmente una o dos veces con un grupo o grupos seleccionados independientemente de entre metilo, metoxi o halo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirazolilo o tiazolilo, en el que el piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirazolilo y tiazolilo, cada uno, puede sustituirse opcionalmente una o dos veces con un grupo o grupos seleccionados independientemente de entre metilo, metiloamino, dimetiloamino y halo, R6, R7 y R8, cada uno 20 independientemente, es hidrógeno, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6, halo, haloalquilo C1-6 o ciano.
2. 2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R6 es hidrógeno.
3. 3. Compuesto según la reivindicación 2, en el que R7 y R8 son hidrógenos. 25
4. 4. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R1 es [1,2,4]triazol-1-ilo sustituido una vez con metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, isopropilo, isobutilo, terc-butilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopropilmetilo, fenilo, trifluorometilo, difluorometilo, fluorometilo, pentafluoroetilo, 1,1-difluoroetilo, 2,2-difluoroetilo, 1-metoxietilo, 1-etoxietilo, 2-metoxi-1-metiletilo, 1-hidroxietilo, isopropoxi, 1-dimetilaminoetilo o dimetilamino-metilo. 30
5. 5. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R5 es hidroximetilo, metoximetilo, pirazín-2-ilo, 5-metil-pirazín-2-ilo o 6-metil-piridazín-3-ilo.
6. 6. Composición farmacéutica que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y un compuesto según la 35 reivindicación 1.
7. 7. Utilización de un compuesto de fórmula I según la reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para tratar una condición de dolor seleccionada de entre dolor inflamatorio, dolor quirúrgico, dolor visceral, dolor dental, dolor premenstrual, dolor central, dolor debido a quemaduras, migraña o cefaleas de racimo, lesión nerviosa, 40 neuritis, neuralgias, envenenamiento, lesión isquémica, cistitis intersticial, dolor de cáncer, infección vírica, parasitaria o bacteriana, lesión post-traumática o dolor asociado a síndrome del intestino irritable o un trastorno respiratorio seleccionado de entre enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), asma y broncoespasmo.
8. 8. Utilización de un compuesto de fórmula I según la reivindicación 1 para la preparación de un medicamento 45 destinado al tratamiento de una condición inflamatoria y/o autoinmunológica.
9. 9. Compuesto de fórmula I según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto se selecciona de entre el grupo que consiste de:

   50

   N-((S)-2-hidroxi-1-metil-etil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida, N-(5-metil-pirazín-2-ilmetil)-3-(5-metil-piridín-2-il)-5-(5-trifluorometil-[1, 2, 4]triazol-1-il)-benzamida, 3-(5-metil-piridín-2-il)-N-(2-metil-pirimidín-5-ilmetil)-5-(5-trifluorometil-[1,2, 4]triazol-1-il)-benzamida y3-(5-metil-piridín-2-il)-N-(5-metil-pirimidín-2-ilmetil)-5-(5-trifluorometil-[1,2,4]triazol-1-il)-benzamida.

   55