ES2298621T3

ES2298621T3 - Nuevas diamidas del acido pirimidin-4,6-dicarboxilico para la inhibicion selectiva de colagenasas.

Info

Publication number: ES2298621T3
Application number: ES03810401T
Authority: ES
Inventors: Otmar Klingler; Reinhard Kirsch; Jorg Habermann; Klaus-Ulrich Weithmann; Christian Engel; Bernard Sanofi-Aventis Deutschland GmbH PIRARD
Original assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Current assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Priority date: 2002-11-02
Filing date: 2003-10-18
Publication date: 2008-05-16
Anticipated expiration: 2023-10-18
Also published as: CA2504153C; BR0315055A; RU2344129C2; HK1083503A1; NO20052628D0; HRP20050382A2; ATE388941T1; JP2006513158A; AR043058A1; AU2003301847A1; EP1560815A1; KR101050680B1; PE20040605A1; MA27412A1; KR20050067212A; WO2004041788A1; CA2504153A1; CO5700759A2; MXPA05004365A; TWI316512B

Abstract

Estructura de parte frontal (1) para un vehículo automóvil, en especial para un vehículo industrial, la cual comprende dos vigas longitudinales (2, 3) así como dos elementos (6, 10) de la caja de absorción de energía; en este caso, están previstas dos vigas de unión (13, 13¿), cada una de las cuales une una de las vigas longitudinales (2, 3) con el correspondiente elemento (6, 10) de la caja de absorción de energía, y cada una de las vigas de unión (13, 13¿) está constituida por una parte interior (7) y, como refuerzo de la parte interior (7), por una parte superior (5) y por una parte inferior (4); estructura ésta que está porque la parte interior representa un casco interior (7), que está posicionado de forma esencialmente vertical y que posee, por el extremo superior, unos tramos de borde superiores recanteados (8), como asimismo posee, por su extremo inferior, otros tramos de bordes inferiores recanteados adicionales (8); caracterizada porque la parte superior representa una tira de chapa superior (5), que se extiende de forma paralela a los tramos de borde superiores (8) y que está colocada a tope en éstos con toda su superficie y que se encuentra unida con los mismos; así como caracterizada porque la parte interior representa una tira de chapa inferior (4), que se extiende de forma paralela a los tramos de borde inferiores (8) y que está colocada a tope en éstos con toda su superficie y que se encuentra unida con los mismos.

Description

Nuevas diamidas del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílicos para la inhibición selectiva de colagenasas.

La invención se refiere a nuevas diamidas del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico y a su uso para la inhibición selectiva de la colagenasa (MMP 13). Por lo tanto, las diamidas del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico se pueden utilizar para tratar enfermedades articulares degenerativas.

Se sabe que las diamidas del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico y los N-óxidos de piridina 2,4-sustituidos inhiben las enzimas prolin-hidroxilasa y lisin-hidroxilasa, y con ello generan una inhibición de la biosíntesis de colágeno al ejercer una influencia sobre la reacción de hidroxilación específica del colágeno (documentos EP 0418797; EP 0463592). Mediante esta inhibición de la biosíntesis de colágeno se forma una molécula de colágeno no funcional, sub-hidroxilada, que las células sólo pueden liberar al espacio extracelular en pequeña cantidad. Además, el colágeno sub-hidroxilado no se puede incorporar a la matriz de colágeno y resulta degradado muy fácilmente por proteolisis. Como consecuencia de estos efectos, disminuye la cantidad global de colágeno que se deposita de forma extracelular. Se sabe de las solicitudes de patente WO 02/064571 y WO 02/064080, que ciertas diamidas del ácido piridin-2,4-dicarboxílico y diamidas del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico pueden ser inhibidores alostéricos de MMP 13. Objeto de la solicitud de patente internacional WO 03/049738, que cae bajo el Art. 54 (3) del Convenio de Patentes Europeo, son diamidas del ácido piridin-2,4-dicarboxílico y diamidas del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico para la inhibición selectiva de la colagenasa MMP 13.

En enfermedades tales como osteoartrosis y reumatismo, se produce una destrucción de la articulación, estando causada dicha destrucción, en particular, por la degradación proteolítica del colágeno debido a las colagenasas. Las colagenasas pertenecen a la superfamilia de las metaloproteinasas (MP) o metaloproteinasas de matriz (MMP). Bajo condiciones fisiológicas, las MMP escinden colágeno, laminina, proteoglicanos, elastina o gelatina y desempeñan, por tanto, un papel importante en el tejido óseo y conjuntivo. Se ha descrito una larga serie de diferentes inhibidores de las MMPs y/o colagenasas (documentos EP 0606046; WO 94/28889). Los inhibidores conocidos de las MMPs sufren a menudo el inconveniente de carecer de especificidad necesaria para inhibir solamente una clase de MMP. Como resultado, la mayoría de los inhibidores de MMP inhiben simultáneamente varias MMPs, porque la estructura del dominio catalítico en las MMPs es similar. En consecuencia, los inhibidores tienen la propiedad inaceptable de actuar sobre muchas enzimas, incluidas las que tienen una función vital (Massova I., et al., The FASEB Journal (1998) 12, 1075-1095).

Con el objetivo de encontrar compuestos eficaces para tratar las enfermedades del tejido conjuntivo, se ha encontrado ahora que los compuestos que se utilizan de acuerdo con la invención son potentes inhibidores de la metaloproteinasa de matriz 13, en tanto que los compuestos que se utilizan de acuerdo con la invención carecen esencialmente de efecto sobre las MMPs 3 y 8.

Por lo tanto, es objeto de la invención un compuesto de la fórmula I

1

y/o todas las formas estereoisómeras del compuesto de la fórmula I y/o mezclas de estas formas en cualquier relación, y/o una sal fisiológicamente tolerable del compuesto de la fórmula I, en la que

R1: representa un átomo de hidrógeno o -alquilo-(C_{1}-C_{6}),

R2: representa -alquilo-(C_{1}-C_{6}), en el que alquilo está una, dos o tres veces sustituido con -arilo-(C_{6}-C_{14}), en el que arilo está una, dos o tres veces sustituido, independientemente uno de otro, con

1): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R9)-(R10), en donde R9 y R10 son idénticos o diferentes y son, independientemente entre sí,

(i): un átomo de hidrógeno o

(ii): -alquilo (C_{1}-C_{6}), o

\quad: R9 y R10 forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un anillo saturado de 5, 6 ó 7 miembros, en el que un heteroátomo de la serie oxígeno, azufre y nitrógeno puede sustituir también uno o dos átomos de carbono adicionales y, en el caso del nitrógeno, los átomos de nitrógeno pueden estar no sustituidos o estar sustituidos, de forma independiente entre sí, con alquilo-(C_{1}-C_{6}),

\global\parskip0.950000\baselineskip

2): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-NH-CN,

3): -O-alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R9)-(R10), en donde R9 y R10 tienen los significados anteriormente mencionados,

4): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R8)-alquil-(C_{0}-C_{6})-N(R9)-(R10), en donde R8 significa

(i): un átomo de hidrógeno,

(ii): -alquilo (C_{1}-C_{6}), en donde alquilo no está sustituido o está sustituido una, dos o tres veces, independientemente uno de otro, con -NH_{2}, -CN, -OH, -C(O)-OH, -C(O)-NH-OH, -NO_{2}, -C(O)-O-alquilo-(C_{1}-C_{6}) o halógeno o

(iii): -OH, y

\quad: en donde R9 y R10 tienen el significado arriba mencionado,

5): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R8)-alquil-(C_{0}-C_{6})-alquil-Het, en donde R8 tiene el significado anteriormente mencionado, y Het representa un sistema de anillos monocíclico o bicíclico, heterocíclico de 3 a 10 miembros, saturado o insaturado, que contiene 1, 2 ó 3 heteroátomos del anillo idénticos o diferentes, de la serie nitrógeno, oxígeno y azufre y que no está sustituido o está sustituido una, dos o tres veces, independientemente uno de otro, con

a): halógeno,

b): ciano,

c): nitro,

d): hidroxi,

e): amino,

f): -C(O)-O-alquilo-(C_{1}-C_{6}),

g): -C(O)-OH,

h): -alquilo-(C_{1}-C_{6}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno,

i): -O-alquilo-(C_{1}-C_{6}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno o -N(R9)-(R10),

j): =O,

k): -Het,

l): -alquenilo-(C_{2}-C_{6}), en donde alquenilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno o -N(R9)-(R10), o

m): -alquinilo-(C_{2}-C_{6}), en donde alquinilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno o -N(R9)-(R10),

\global\parskip1.000000\baselineskip

6): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R8)-alquil-(C_{0}-C_{6})-arilo-(C_{6}-C_{14}), en donde arilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces, independientemente entre sí, con los radicales anteriormente mencionados a) a m),

R3, R4, R5, R6 y R7 son iguales o diferentes e, independientemente uno de otro, representa

1.: un átomo de hidrógeno,

2.: halógeno,

3.: -alquilo-(C_{1}-C_{6}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno,

4.: -O-alquilo-(C_{1}-C_{6}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno, o

5.: -S-alquilo-(C_{1}-C_{6}),

\vocalinvisible: \textoinvisible

R4 y R5 o R5 y R6 forman, junto con los átomos de carbono a los que están unidos en cada caso, independientemente entre sí, un anillo de 5 ó 6 miembros que es aromático o saturado y que contiene cero, uno o dos heteroátomos de la serie oxígeno, nitrógeno o azufre, en donde el anillo está no sustituido o está sustituido, en uno o varios átomos de carbono, una o dos veces, con halógeno, y los otros radicales R3, R6 y R7 o R3, R4 y R7 tienen el significado anteriormente mencionado de 1. a 5.

\vskip1.000000\baselineskip

Otro objeto de la invención es un compuesto de la fórmula I, en donde

R1: representa un átomo de hidrógeno o -alquilo-(C_{1}-C_{6}),

R2: representa -alquilo-(C_{1}-C_{6}), en el que alquilo está una, dos o tres veces sustituido con fenilo, en el que fenilo está una, dos o tres veces sustituido, independientemente uno de otro, con

(i): un átomo de hidrógeno o

(ii): -alquilo (C_{1}-C_{6}), o

2): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-NH-CN,

(i): un átomo de hidrógeno,

(iii): -OH, y

\quad: en donde R9 y R10 tienen el significado arriba mencionado,

5): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R8)-alquil-(C_{0}-C_{6})-alquil-Het, en donde R8 tiene el significado anteriormente mencionado, y Het representa un radical del grupo azepina, azetidina, aziridina, bencimidazol, benzo[1,4]dioxina, 1,3-benzodioxol, 4H-benzo[1,4]oxazina, benzoxazol, benzotiazol, benzotiofeno, quinazolina, quinolina, quinoxalina, cromano, cinolina, 1,2-diazepina, 1,3-diazepina, 1,4-diazepina, 1,4-dioxina, dioxol, furano, imidazol, indazol, indol, isoquinolina, isocromano, isoindol, isotiazol, isoxazol, morfolina, 1,2-oxazina, 1,3-oxazina, 1,4-oxazina, oxazol, oxirano, piperazina, piperidina, ftalazina, pirano, pirazina, pirazol, piridazina, piridina, pirimidina, piridoimidazol, piridopiridina, piridopirimidina, pirrol, pirrolidina, tetrazol, 1,2-tiazina, 1,3-tiazina, 1,4-tiazina, tiazol, tiomorfolina, tiofeno, tiopirano, 1,2,3-triazina, 1,3,5-triazina, 1,2,4-triazina, 1,2,3-triazol ó 1,2,4-triazol, y en donde Het no está sustituido o está sustituido una, dos o tres veces, independientemente uno de otro, con

a): halógeno,

b): ciano,

c): nitro,

d): hidroxi,

e): amino,

f): -C(O)-O-alquilo-(C_{1}-C_{6}),

g): -C(O)-OH,

j): =O,

k): -Het, en donde Het está definido como antes,

6): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R8)-alquil-(C_{0}-C_{6})-fenilo-(C_{6}-C_{14}), en donde fenilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces, independientemente entre sí, con los radicales anteriormente mencionados a) a m),

1.: un átomo de hidrógeno,

2.: halógeno,

3.: -alquilo-(C_{1}-C_{6}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno, o

\vocalinvisible: \textoinvisible

R4 y R5 o R5 y R6 forman, junto con los átomos de carbono a los que están unidos en cada caso, independientemente entre sí, un anillo de dioxano, dioxol, dihidrofurano o furano, en donde el anillo está no sustituido o está sustituido, en uno o varios átomos de carbono, una o dos veces, con halógeno, y los otros radicales R3, R6 y R7 o R3, R4 y R7 tienen el significado anteriormente mencionado de 1. a 5.

\vskip1.000000\baselineskip

Otro objeto de la invención es un compuesto de la fórmula I, en donde

R1: representa un átomo de hidrógeno,

R2: representa -alquilo-(C_{1}-C_{3}), en el que alquilo está sustitudo con fenilo, en donde fenilo está sustituido una, dos o tres veces con fenilo, independientemente uno de otro, con

1): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R9)-(R10), en donde R9 y R10 representa un átomo de hidrógeno, metilo, etilo, propilo o butilo, o

\quad: R9 y R10 forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un radical que se puede derivar de pirrolidina, piperidina, pirazolidina, pirazina, tetrazina, imidazolidina, piperazina, isoxazolidina, morfolina, isotiazolidina o tiomorfolina, y en el caso de nitrógeno, los átomos de nitrógeno pueden estar no sustituidos independientemente uno de otro o pueden estar sustituidos con alquilo-(C_{1}-C_{4}),

2): -alquil-(C_{0}-C_{4})-C(O)-NH-CN,

4): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-N(R8)-alquil-(C_{0}-C_{6})-N(R9)-(R10), en donde R8 representa hidrógeno, metilo, etilo, propilo o butilo, y R9 y R10 tienen el significado arriba mencionado,

5): -C(O)-N(R8)-alquil-(C_{0}-C_{2})-alquil-Het, en donde R8 tiene el significado anteriormente mencionado, y Het representa azepina, azetidina, aziridina, bencimidazol, benzofurano, benzo[1,4]dioxina, 1,3-benzodioxol, 4H-benzo[1,4]oxazina, benzoxazol, benzotiazol, benzotiofeno, quinazolina, quinolina, quinoxalina, cromano, cinolina, 1,2-diazepina, 1,3-diazepina, 1,4-diazepina, 1,4-dioxina, dioxol, furano, imidazol, indazol, indol, isoquinolina, isocromano, isoindol, isotiazol, isoxazol, morfolina, 1,2-oxazina, 1,3-oxazina, 1,4-oxazina, oxazol, oxirano, piperazina, piperidina, ftalazina, pirano, pirazina, pirazol, piridazina, piridina, pirimidina, piridoimidazol, piridopiridina, piridopirimidina, pirrol, pirrolidina, tetrazol, 1,2-tiazina, 1,3-tiazina, 1,4-tiazina, tiazol, tiomorfolina, tiofeno, tiopirano, 1,2,3-triazina, 1,3,5-triazina, 1,2,4-triazina, 1,2,3-triazol ó 1,2,4-triazol, y Het no está sustituido o está sustituido una, dos o tres veces, independientemente uno de otro, con

a): halógeno,

b): ciano,

c): nitro,

d): hidroxi,

e): amino,

f): -C(O)-O-alquilo-(C_{1}-C_{4}),

g): -C(O)-OH,

h): -alquilo-(C_{1}-C_{4}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno,

i): -O-alquilo-(C_{1}-C_{4}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno, o

6): -C(O)-N(R8)-alquil-(C_{0}-C_{4})-fenilo-(C_{6}-C_{14}), en donde fenilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces, independientemente entre sí, con los radicales anteriormente mencionados a) a i),

1.: un átomo de hidrógeno,

2.: halógeno,

\vocalinvisible: \textoinvisible

R4 y R5 o R5 y R6 forman, junto con los átomos de carbono a los que están unidos en cada caso, independientemente entre sí, un anillo de dioxano, dioxol, dihidrofurano o furano, y los otros radicales R3, R6 y R7 o R3, R4 y R7 tienen el significado anteriormente mencionado de 1. a 4.

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Otro objeto de la invención es un compuesto de la fórmula I, en el que se elige uno de los siguientes compuestos

4-(4-dietilcarbamoil-bencilamida)-6-(3-metoxi-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-(4-propilcarbamoil-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-carboxílico,

4-(4-isopropilcarbamoil-bencilamida)-6-(3-metoxi-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-carboxílico,

4-[4-(2-dimetilamino-etilcarbamoil)-bencilamida]-6-(3-metoxibencilamida) del ácido pirimidin-4,6-carboxílico,

4-[(2,3-dihidro-benzo[1,4]dioxin-6-ilmetil)-amida]-6-[4-(2-dimetilamino-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido
pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-cloro-4-fluoro-bencilamida)-6-[4-(2-dimetilaminoetil-carbamoil)-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-{4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-bencilamida} del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4(2-morfolin-4-il-2-oxo-etoxi)bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-dietilcarbamoilmetoxi-bencilamida)-6-(4-fluoro-3-metil-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(isopropilcarbamoil-metil)-bencilamida del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-{4-[(2-morfolin-4-il-etilcarbamoil)-metil]-bencilamida} del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-dietilcarbamoilmetil-bencilamida)-6-(4-fluoro-3-metil-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(2-morfolin-4-il-2-oxo-etil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(isopropilcarbamoil-metoxi)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[4-(2-morfolin-4-il-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[4-(2-pirrolidin-1-il-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(tiomorfolin-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[4-(tiomorfolin-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-cianocarbamoil-bencilamida)-6-(4-fluoro-3-metilbencil-amida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[4-(3-morfolin-4-il-propilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-[4-(3-morfolin-4-il-propilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(4-metilpiperazin-1-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-{4-[(piridin-4-ilmetil)-carbamoil]-bencilamida} del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-N-ciano-carbamoil-bencilamida)-6-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-N-ciano-carbamoil-bencilamida)-6-(3-metoxi-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-morfolin-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(2-piperazin-1-iletilcarbamoil)-bencilamida],

4-(4-terc-butilcarbamoil-bencilamida)-6-(3-metoxibencil-amida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-{4-[metil-(1-metil-piperidin-4-il)-carbamoil]-bencilamida} del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(2-pirrolidin-1-il-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[3-(2-morfolin-4-il-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(2-morfolin-4-il-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

éster metílico del ácido [4-({[6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carbonil]-amino}-metil)-benzoilamino]-acético,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[3-morfolin-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-{4-[(piperidin-4-ilmetil)-carbamoil]-bencilamida} del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-{4-[metil-(1-metilpiperidin-4-il)-carbamoil]-bencilamida} del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(4-fluoro-3-metil-bencilamida)-6-{4-[(piperidin-4-ilmetil)-carbamoil]-bencilamida} del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[4-(4-metil-piperazin-1-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-[4-(morfolin-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-[4-(4-metil-piperazin-1-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)amida]-6-[4-(2-pirrolidin-1-il-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-[4-(2-morfolin-4-il-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-cloro-4-fluoro-bencilamida)-6-[4-(2-pirrolidin-1-il-etilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-[4-(morfolin-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-metoxi-bencilamida)-6-{4-[(piridin-4-ilmetil)-carbamoil]-bencilamida} del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-cloro-4-fluoro-bencilamida)-6-(4-dietilcarbamoil-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-cloro-4-fluoro-bencilamida)-6-[4-(morfolin-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico,

4-(3-cloro-4-fluoro-bencilamida)-6-[4-(2-morfolin-4-iletilcarbamoil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico, o

4-(4-dietilcarbamoil-bencilamida)-6-(3-metoxi-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico.

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Por el término "halógeno" se entiende flúor, cloro, bromo o yodo.

Por el término "alquilo-(C_{0}-C_{6})" se entienden radicales de hidrocarburos cuya cadena de carbonos es lineal o ramificada, y contiene 1 a 6 átomos de carbono, por ejemplo metilo, etilo, propilo, i-propilo, butilo, butilo terciario, pentilo o hexilo. "Alquilo-C_{0}" es un enlace covalente.

Por el término "arilo-(C_{6}-C_{14})" se entienden radicales de carbono aromáticos con 6 a 14 átomos de carbono en el anillo. Radicales arilo (C_{6}-C_{14}) son, por ejemplo, fenilo, naftilo, por ejemplo 1-naftilo, 2-naftilo, bifenililo, por ejemplo 2-bifenililo, 3-bifenililo y 4-bifenililo, antrilo o fluorenilo. Radicales fenilo preferidos son radicales bifenililo, radicales naftilo y, en particular, radicales fenilo.

Por la expresión "R4 y R5 o R5 y R6 forman, junto con los átomos de carbono a los que están unidos en cada caso, independientemente entre sí, un anillo de 5 ó 6 miembros que es aromático o saturado y que contiene cero, uno o dos heteroátomos de la serie oxígeno, nitrógeno o azufre" se entienden sistemas de anillo que se pueden derivar de dioxol, pirrol, pirrolidina, piridina, piperidina, dioxano, tetrahidropiridina, pirazol, imidazol, pirazolina, imidazolina, pirazolidina, imidazolidina, piridazina, pirimidina, pirazina, piperazina, pirano, furano, dihidrofurano, tetrahidrofurano, oxazol, isoxazol, 2-isoxazolina, isoxazolidina, morfolina, oxotiolano, tiopirano, tiazol, isotiazol, 2-isotiazolina, isotiazolidina o tiomorfolina.

Por el término "Het" se entiende un sistema de anillo heterocíclico, de 3 a 10 miembros, saturado o insaturado, monocíclico o bicíclico, que contiene 1, 2 ó 3 heteroátomos de anillo idénticos o diferentes de la serie nitrógeno, oxígeno y azufre. En el sistema de anillo heterocíclico, monocíclico o bicíclico, subyacente, Het contiene 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ó 10 átomos de anillo. El sistema de anillo monocíclico puede ser un anillo de 3, 4, 5, 6 ó 7 miembros. En el Het bicíclico, dos anillos pueden estar unidos entre sí, siendo posible que uno de los anillos sea un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros, y el otro, un anillo heterocíclico o carbocíclico de 5 ó 6 miembros. Un grupo Het bicíclico puede estar compuesto, por ejemplo, por 8, 9 ó 10 átomos de anillo.

Het comprende sistemas de anillo heterocíclicos saturados que no poseen ningún doble enlace en los anillos, y asimismo sistemas de anillo heterocíclicos insaturados, incluidos sistemas de anillo heterocíclicos mono-insaturados y poli-insaturados, que poseen uno o más dobles enlaces y forman un sistema de anillo estable. Los anillos insaturados pueden estar parcialmente insaturados o formar un sistema aromático. El grupo Het contiene heteroátomos idénticos o diferentes de la serie nitrógeno, oxígeno y azufre. Ejemplos de heterociclos a partir de los que se puede derivar el grupo Het son acridinilo, azocinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benztiazolilo, benztriazolilo, benztetrazolilo, bencisoxazolilo, bencisotiazolilo, bencimidazalinilo, carbazolilo, 4aH-carbazolilo, carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinolinilo, decahidroquinolinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, dihidrofuro-[2,3-b]-tetrahidrofurano, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, 1H-indazolilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, 3H-indolilo, isobenzofuranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo (bencimidazolilo), isotiazolilo, isoxazolilo, morfolinilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, pirimidinilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatiinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, piperazinilo, piperidinilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, piroazolidinilo, pirazolinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazol, piridoimidazol, piridotiazol, piridinilo, piridilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinolizinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, 6H-1,2,5-tiadazinilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo y xantenilo.

Se prefieren azepina, azetidina, aziridina, bencimidazol, benzofurano, benzo[1,4]dioxina, 1,3-benzodioxol, 4H-benzo[1,4]oxazina, benzoxazol, benzotiazol, benzotiofeno, quinazolina, quinolina, quinoxalina, cromano, cinolina, 1,2-diazepina, 1,3-diazepina, 1,4-diazepina, 1,4-dioxina, dioxol, furano, imidazol, indazol, indol, isoquinolina, isocromano, isoindol, isotiazol, isoxazol, morfolina, 1,2-oxazina, 1,3-oxazina, 1,4-oxazina, oxazol, oxirano, piperazina, piperidina, ftalazina, pirano, pirazina, pirazol, piridazina, piridina, pirimidina, piridoimidazol, piridopiridina, piridopirimidina, pirrol, pirrolidina, tetrazol, 1,2-tiazina, 1,3-tiazina, 1,4-tiazina, tiazol, tiomorfolina, tiofeno, tiopirano, 1,2,3-triazina, 1,3,5-triazina, 1,2,4-triazina, 1,2,3-triazol ó 1,2,4-triazol, etc., y asimismo sistemas de anillo que resultan de los heterociclos enumerados, estando estos últimos unidos, o fusionados con un anillo carbocíclico, por ejemplo derivados benzo-condensados, ciclopenta-condensados, ciclohexa- condensados o ciclohepta-condensados de estos heterociclos. Heterociclos de nitrógeno adecuados pueden estar también presentes como N-óxidos o como sales cuaternarias, en los que un átomo de nitrógeno adecuado está alquilado con radicales alquilo-(C_{1}-C_{4}).

Los grupos Het pueden estar no sustituidos o estar sustituidos de acuerdo con las definiciones enumeradas.

Por la expresión "R9 y R10 forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un anillo saturado de 5, 6 ó 7 miembros, en donde un heteroátomo de la serie oxígeno, azufre y nitrógeno puede reemplazar también uno o dos átomos de carbono adicionales" se entienden radicales que se pueden derivar de imidazolidina, isotiazolidina, isoxazolidina, morfolina, piperazina, piperidina, pirazina, pirazolidina, pirrolidina, tetrazina o tiomorfolina.

Los compuestos de la fórmula I se pueden preparar, por ejemplo, haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula II

2

a) con un compuesto de la fórmula IIIa o IIIb

3

en donde R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 tienen los significados indicados en la fórmula I e Y es halógeno, hidroxilo o alcoxi-(C_{1}-C_{4}) o, junto con el grupo carbonilo, forma un éster activo o un anhídrido mixto, formándose un compuesto de la fórmula I y convirtiendo los productos de reacción, eventualmente, en sus sales fisiológicamente tolerables, o

b) haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula II con un compuesto de la fórmula IIIa o IIIb para dar un compuesto de la fórmula IVa o IVb

4

en donde R1 a R7 tienen los significados indicados en la fórmula I e Y es halógeno, hidroxilo o alcoxi-(C_{1}-C_{4}) o, junto con el grupo carbonilo, forma un éster activo o un anhídrido mixto, y purificando el compuesto de la fórmula IVa o IVb, cuando resulte apropiado, y convirtiéndolo, entonces, con un compuesto de la fórmula IIIa o IIIb en un compuesto de la fórmula I.

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La preparación de compuestos según la fórmula I, y la preparación de las sustancias de partida necesarias para este propósito - en tanto las sustancias no estén disponibles en el comercio - se describen de forma más detallada a continuación.

Los compuestos según la invención se preparan, de la forma más sencilla, mezclando los dos componentes, el derivado de pirimidina según la fórmula (II) y la amina según la fórmula IIIa o IIIb, en cantidades equimolares, y haciéndolas reaccionar a temperaturas entre -30ºC y 150ºC, preferentemente entre 20ºC y 100ºC, para dar el compuesto de la fórmula IVa o IVb, y haciendo reaccionar, seguidamente, los compuestos de la fórmula IVa o IVb, de manera análoga, con hasta una cantidad equimolar de amina según la fórmula IIIb o IIIa. El final de la reacción se puede determinar, por ejemplo, por medio de una cromatografía de capa fina o HPLC-MS. Una variante de este procedimiento comprende llevar a cabo la reacción en un disolvente adecuado, tal como éter dietílico, dimetoxietano o tetrahidrofurano, hidrocarburos clorados tales como cloruro de metileno, cloroformo, tricloroetileno o tetracloroetileno, benceno o tolueno, o también disolventes polares tales como dimetilformamida, acetona o dimetilsulfóxido. En este caso, las temperaturas de reacción se encuentran entre la temperatura ambiente y el punto de ebullición del disolvente, prefiriéndose especialmente temperaturas en el intervalo de la temperatura ambiente a 130ºC.

La reacción puede tener lugar también mediante un anhídrido mixto tal como éster etílico del ácido clorofórmico, o mediante un éster activo, tal como éster paranitrofenílico (Y = ClCH_{2}-COO o NO_{2}-C_{6}H_{4}-O). En la bibliografía se dan a conocer y describen métodos correspondientes.

Asimismo, la reacción de un compuesto de la fórmula II o un compuesto de la fórmula IVa o IVb se puede efectuar con una amina de la fórmula IIIa o IIIb si Y representa OH y el correspondiente ácido carboxílico se activa in situ usando reactivos de acoplamiento habituales. Ejemplos de estos reactivos de acoplamiento son carbodimidas tales como diciclohexilcarbodiimida (DCC) o diisopropilcarbodiimida (DCI) o N,N'-carbonildiazoles tales como N,N'-carbonil-diimidazol, o una sal de uronio tal como tetrafluoroborato de O-((ciano(etoxicarbonil)metilen)amino-1,1,3,3-tetrametiluronio (TOTU) o hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (HATU). Se conocen métodos correspondientes.

Si las aminas de la fórmula IIIa o IIIb no están disponibles en el comercio, se les puede preparar a partir de compuestos de partida correspondientes, disponibles en el comercio, usando métodos conocidos en la bibliografía. Ejemplos de compuestos de partida adecuados para aminas son nitrilo, compuestos nitro, amidas de ácidos carboxílicos, ésteres de ácidos carboxílicos, ácidos carboxílicos, aldehídos y bromuros. Nitrilos, compuestos nitro y amidas de ácidos carboxílicos se pueden reducir a aminas usando métodos conocidos. Los ácidos carboxílicos y ésteres de ácidos carboxílicos se pueden convertir en amidas de ácidos carboxílicos. Los aldehídos se pueden convertir directamente en aminas por medio de aminación reductiva usando NH_{4}Ac/NaBH_{4}, o se pueden convertir inicialmente en las oximas usando hidroxilamina, para reducirlas luego en las aminas por reducción.

Eventualmente, la reacción puede tener lugar también en presencia de bases. Ejemplos de bases adicionales adecuadas son carbonatos o hidrógeno-carbonatos tales como carbonato sódico o carbonato de potasio o hidrógeno-carbonato sódico o hidrógeno-carbonato de potasio, o aminas terciarias tales como trietilamina, tributilamina, etildiisopropilamina o aminas heterocíclicas tales como N-alquil-morfolina, piridina, quinolina, o dialquil-anilinas.

Eventualmente, los productos y, en particular, el compuesto de la fórmula IVa o IVb, se pueden procesar, por ejemplo, por extracción o cromatografía, por ejemplo a través de gel de sílice. El producto aislado puede recristalizar y, eventualmente, hacerlo reaccionar con un ácido adecuado para dar una sal fisiológicamente tolerable. Ejemplos de ácidos adecuados son:

ácidos minerales tales como ácido clorhídrico y ácido bromhídrico, así como ácido sulfúrico, fosfórico, nítrico o perclórico, o ácidos orgánicos tales como ácido fórmico, acético, propiónico, succínico, glicólico, láctico, málico, tartárico, cítrico, maleico, fumárico, fenilacético, benzoico, metanosulfónico, toluenosulfónico, oxálico, 4-aminobenzoico, naftaleno-1,5-disulfónico o ascórbico.

En el caso que no estén disponibles en el comercio, los compuestos de partida de la fórmula IIIa o IIIb se pueden sintetizar fácilmente (por ejemplo, Organikum, Organisch Chemisches Grundpraktikum, 15ª edición, VEB Deutscher Verlag der Wissenschaften, 1976; en la pág. 822, índice de métodos, se puede encontrar una síntesis de las diferentes posibilidades).

Los compuestos de partida de la fórmula (II) se obtienen, por ejemplo, mediante reacción de ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico en el correspondiente haluro de ácido pirimidina-4,6-dicarboxílico, preferentemente cloruro de ácido pirimidina-4,6-dicarboxílico, preferentemente en presencia de un catalizador tal como dimetilformamida. Este haluro de ácido se puede hacer reaccionar entonces, por ejemplo, con un alcohol adecuado, por ejemplo alcohol paranitrobencílico, para dar el correspondiente éster activo, o también con alcoholes inferiores, tales como metanol o etanol, para dar los ésteres correspondientes. El ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico se puede convertir inicialmente también, mediante la adición de un ácido carboxílico adecuado o de un éster de ácido carboxílico tal como éster etílico del ácido clorofórmico, en un anhídrido mixto que, entonces, se hace reaccionar con las aminas del compuesto de las fórmulas IIIa o IIIb y IVa o IVb para dar los productos según la invención. Igualmente, se describe en la bibliografía un método correspondiente.

La preparación del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico se efectúa según procedimientos conocidos de la bibliografía, por ejemplo oxidando 4,6-dimetilpirimidina que, por su parte, se puede obtener, por ejemplo, por hidrogenación catalítica de 2-mercapto-4,6-dimetilpirimidina disponible en el comercio.

En tanto que los compuestos de la fórmula I permitan formas diastereoisómeras o enantiómeras y se resulten como sus mezclas en la síntesis seleccionada, la separación en los estereoisómeros puros se alcanza por cromatografía en un material de soporte opcionalmente quiral o, siempre que el compuesto racémico de la fórmula I sea capaz de la formación de sal, mediante cristalización fraccionada de las sales diastereoisómeras que se forman usando una base o ácido ópticamente activo como sustancia auxiliar. Ejemplos de fases estacionarias quirales adecuadas para la separación por cromatografía de capa fina o de columna de enantiómeros son soportes de gel de sílice modificado (las denominadas fases Pirkle), así como carbohidratos de alto peso molecular, tales como triacetil-celulosa. Tras la derivatización correspondiente, conocida por el experto en la técnica, se pueden utilizar métodos de cromatografía de gases sobre fases estacionarias quirales con fines analíticos. Para separar los enantiómeros de los ácidos carboxílicos racémicos, se forman las sales diastereoisómeras, que difieren en solubilidad, usando una base ópticamente activa, normalmente disponible en el comercio, tal como (-)-nicotina, (+)- y (-)-feniletilamina, bases de quinina, L-lisina o L- y D-arginina, se aísla en forma de sólido el compuesto más escasamente soluble, se separa de las aguas madre el diastereoisómero más fácilmente soluble y se aíslan los enantiómeros puros de las sales diastereoisómeras obtenidas de esta forma. Los compuestos racémicos de la fórmula I que contienen un grupo básico, tal como un grupo amino, se pueden convertir, en principio de la misma manera, en los enantiómeros puros usando ácidos ópticamente activos tales como ácido (+)-canfor-10-sulfónico, ácido D- y L-tartárico, ácido D- y L-láctico, así como ácido (+)- y (-)-mandélico. Los compuestos quirales que contienen funciones alcohol o amina también se pueden convertir en los correspondientes ésteres o amidas usando aminoácidos correspondientemente activados o, eventualmente N-protegidos, enantioméricamente puros o, por el contrario, los ácidos carboxílicos quirales se pueden convertir en las amidas usando aminoácidos enantioméricamente puros carboxi-protegidos, o en los correspondientes ésteres quirales usando ácidos hidroxicarboxílicos enantioméricamente puros tales como ácido láctico. La quiralidad del radical aminoácido o alcohol que se ha introducido en forma enantioméricamente pura se puede utilizar, entonces, para separar los isómeros separando los diastereoisómeros que ahora están presentes por medio de cristalización o cromatografía en fases estacionarias adecuadas y,
después de ello, empleando métodos adecuados para eliminar, una vez más, el resto de la molécula quiral incluida.

Productos ácidos o básicos del compuesto de la fórmula I pueden estar presentes en forma de sus sales o en forma libre. Se prefieren sales fisiológicamente tolerables, por ejemplo sales de metales alcalinos o sales de metales alcalino-térreos o hidrocloruros, hidrobromuros, sulfatos, hemisulfatos, todos los posibles fosfatos, así como sales de los aminoácidos, bases naturales o ácidos carboxílicos.

Las sales fisiológicamente toleradas se preparan de una forma en sí conocida a partir de compuestos de la fórmula I, incluyendo sus formas estereoisómeras, que son capaces de formar sales. Los ácidos carboxílicos forman sales estables de metales alcalinos, de metales alcalino-térreos o de amonio opcionalmente sustituidas con reactivos básicos tales como hidróxidos, carbonatos, hidrógeno-carbonatos, alcóxidos y amoniaco, o bases orgánicas, por ejemplo trimetilamina o trietilamina, etanolamina o trietanolamina, o también aminoácidos básicos, por ejemplo lisina, ornitina o arginina. En tanto los compuestos de la fórmula I posean grupos básicos, se pueden preparar también sales estables por adición de ácidos, utilizando ácidos fuertes. Para este propósito resultan adecuados ácidos tanto inorgánicos como orgánicos, tales como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, metanosulfónico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, 4-bromo-bencenosulfónico, ciclohexil-amidosulfónico, trifluorometilsulfónico, acético, oxálico, tartárico, succínico o trifluoroacético.

Como consecuencia de sus propiedades farmacológicas, los compuestos de la fórmula I son adecuados para la prevención y el tratamiento de todas aquellas enfermedades en cuya evolución interviene un incremento de la actividad de la metaloproteinasa de matriz 13.

A ellas pertenecen enfermedades articulares degenerativas, tales como osteoartrosis, espondilosis o pérdida de cartílago tras un traumatismo articular o un período relativamente prolongado de inmovilización articular después de lesiones del menisco o de rótula, o ruptura de ligamentos. Además, a ellas pertencen también enfermedades del tejido conjuntivo tales como colagenosis, enfermedades periodontales, trastornos de la cicatrización de heridas y enfermedades crónicas del aparato locomotor, tales como artritis inflamatoria, de origen inmunológico o metabólico, agudas y crónicas, artropatías, mialgias y trastornos del metabolismo óseo o enfermedades oncológicas tales como el cáncer de mama.

La aplicación de los medicamentos según la invención se puede efectuar por inyección subcutánea, intraarticular, intraperitoneal o intravenosa. Se prefiere la inyección intraarticular. Asimismo, es posible la administración rectal, oral, por inhalación o transdérmica.

Los compuestos de la fórmula I se mezclan con aditivos adecuados para ellos, tales como sustancias de soporte, estabilizantes o diluyentes inertes, y se llevan a formas adecuadas de administración tales como comprimidos, grageas, cápsulas enchufables, suspensiones acuosas, alcohólicas u oleosas, o soluciones acuosas u oleosas, usando métodos habituales. Como sustancias de soporte inertes se pueden utilizar, por eejmplo, goma arábiga, óxido de magnesio, carbonato de magnesio, fosfato de potasio, lactosa, glucosa o almidón, en particular almidón de maíz. En este caso, la preparación se puede efectuar en forma de gránulos secos o gránulos húmedos. Como sustancias de soporte o disolventes oleosos entran en consideración, por ejemplo, aceites vegetales o animales tales como aceite de girasol o aceite de hígado de bacalao.

Para la administración subcutánea, intraarticular, intraperitoneal o intravenosa, los compuestos se llevan, si se desea, a solución, suspensión o emulsión utilizando las sustancias adecuadas para este fin, tales como solubilizantes, emulsionantes u otras sustancias auxiliares. Como disolventes entran en consideración, por ejemplo, solución fisiológica de cloruro sódico o alcoholes, por ejemplo etanol, propanol o glicerol y, junto a ellos, soluciones de azúcares tales como soluciones de glucosa o manitol, o también una mezcla compuesta por los diferentes disolventes mencionados.

También se utilizan coadyuvantes habituales tales como sustancias de soporte, desintegrantes, agentes aglutinantes, agentes de revestimiento, agentes de hinchamiento, deslizantes o lubricantes, saboreantes, edulcorantes y solubilizantes. Sustancias auxiliares que se emplean con frecuencia y que se pueden mencionar son carbonato de magnesio, dióxido de titanio, lactosa, manitol y otros azúcares, talco, proteína láctea, gelatina, almidón, celulosa y sus derivados, aceites animales y vegetales tales como aceite de hígado de bacalao, aceite de girasol, aceite de cacahuete o aceite de semillas de sésamo, polietilenglicol y disolventes tales como agua estéril y alcoholes monohídricos o polihídricos, tales como glicerol.

Los compuestos de la fórmula I se preparan, preferentemente, como preparaciones farmacéuticas y se administran en unidades de dosificación, conteniendo cada unidad una dosis definida del compuesto de la fórmula I como componente activo. Con este fin, los compuestos de la fórmula I se pueden administrar por vía oral en dosis de 0,01 mg/kg/día a 25,0 mg/kg/día, preferentemente desde 0,01 mg/kg/día a 5,0 mg/kg/día, o por vía parenteral en dosis desde 0,001 mg/kg/día hasta 5 mg/kg/día, preferentemente desde 0,001 mg/kg/día a 2,5 mg/kg/día. La dosificación se puede incrementar también en casos graves. No obstante, dosis menores resultan también adecuadas en muchos casos. Estos valores se refieren al tratamiento de adultos.

La invención se explica seguidamente más detalladamente con la ayuda de ejemplos.

Ejemplo de Referencia 1

Éster etílico del ácido [4-({[6-(fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carbonil]-amino}-metil)-fenil]-acético

5

a) Éster metílico del ácido 6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico

Se disolvieron 8,81 g (0,045 mol) de éster metílico del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico en 200 ml de DMF y se mezclaron con 6,25 g (0,045 mol) de 4-fluoro-3-metil-bencilamina y se agitó a 60ºC durante 48 horas (h). El disolvente se separó al vacío y el residuo se recogió en éster etílico del ácido acético. La fase orgánica se lavó con solución saturada de hidrógeno-carbonato sódico y HCl 0,5N y se secó (MgSO_{4}). Después de separar por filtración y concentrar el disolvente al vacío, el residuo se agitó en isopropanol. Se obtuvieron 8,75 g de producto, que se sometió a posterior reacción sin purificación adicional.

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b) Ácido 6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico

Se recogieron 8,75 g (0,02 mol) de éster metílico del ácido 6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico (al 70%) en 150 ml de etanol, y se mezclaron con 1,89 g (0,022 mol) de NaOH en 6 ml de agua. Después de 3 horas (h) a temperatura ambiente, el disolvente se separó bajo presión reducida, el residuo se mezcló con agua y se ajustó a pH < 2 con HCl conc. El precipitado se filtró con succión y se secó. Se obtuvieron 5,5 g (94%) de ácido 6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico. MS (ES^{+}): m/e = 289,09.

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c) Éster etílico del ácido (4-aminometil-fenil)-acético

Se disolvieron 0,5 g (2,6 mmol) de éster etílico del ácido (4-ciano-fenil)-acético en 70 ml de solución de amoniaco etanólica y se hidrogenó, a temperatura ambiente y bajo presión estándar, sobre níquel Raney. Después de 45 minutos, se separó por filtración y se concentró. Se obtuvieron 0,42 g (al 82%) de éster etílico del ácido (4-aminometil-fenil)-acético. MS (ES^{+}): m/e = 194,11.

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d) Éster etílico del ácido [4-({[6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carbonil]-amino}-metil)-fenil]-acético

Se disolvieron 1,3 g (4,5 mmol) de ácido 6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico y 1,042 g (5,4 mmol) de éster etílico del ácido (4-aminometil-fenil)-acético en 30 ml de DMF y se mezclaron con 1,02 g (4,9 mmol) de diciclohexilcarbodiimida y 0,607 g (4,5 mmol) de hidroxibenzotriazol a 5ºC. Se agitó durante 5 horas (h) y se filtró con succión. El disolvente se separó al vacío, el residuo se recogió en éster etílico del ácido acético y se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3}. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}), se separó por filtración y se concentró bajo presión reducida. Se obtuvieron 2,66 g de producto, que se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa. MS (ES^{+}): m/e = 464,19.

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Ejemplo de Referencia 2

Ácido [4-({[6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carbonil]-amino}-metil)-fenil]-acético

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6

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Se recogieron 2,4 g (5,2 mmol) de éster etílico del ácido [4-({[6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carbonil]-amino}-metil)-fenil]-acético en 150 ml de agua y se mezclaron con 10 ml de agua y 0,227 g (5,7 mmol) de NaOH. Después de 5 días de agitación a temperatura ambiente, el disolvente se separó bajo presión reducida y el residuo se agitó con etanol y se separó por filtración. Se obtuvieron 1,51 g (67%) de ácido [4-({[6-(4-fluoro-3-metil-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carbonil]-amino}-metil)-fenil]-acético. MS (ES^{+}): m/e = 436,15.

Ejemplo 3 4-(4-dietilcarbamoil-bencilamida)-6-(3-metoxi-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico

7

a) Síntesis del ácido 6-(3-metoxi-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico

Se disolvieron 26 g (88 mmol) de éster metílico del ácido 6-(3-metoxi-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico (preparado haciendo reaccionar éster dimetílico del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico con 3-metoxibencilamina) en 100 ml de tetrahidrofurano y se mezclaron con 104 ml (1,2 equivalentes) de una solución acuosa 1 molar de hidróxido de litio, y luego la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas.

La mayoría del disolvente empleado se separó a continuación por destilación bajo presión reducida y los productos secundarios insolubles se retiraron por filtración del residuo y, seguidamente, el filtrado se acidificó con una solución al 20% de ácido cítrico. En este caso, el ácido 6-(3-metoxibencilcarbamoil)pirimidin-4-carboxílico cristalizó en forma de cristales de color amarillo pálido, que se separaron por filtración.

Se obtuvieron 19 g (66,2 mmol) de ácido 6-(3-metoxi-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico (rendimiento, 75% del teórico; MS (ES^{+}): m/e = 287,8).

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b) Éster metílico del ácido 4-({[6-(3-metoxi-bencilcarbamoil)-pirimidina-4-carbonil]-amino}metil)-benzoico

Se disolvieron 4,3 g de ácido 6-(3-metoxi-bencilcarbamoil)-pirimidin-4-carboxílico (15 mmol) de a) en 50 ml de N,N-dimetilformamida absoluta y se mezclaron consecutivamente, a 0ºC y bajo agitación, con 3,3 g (16,5 mmol) de benzoato-hidrocloruro de metil-4-(aminometilo), 5,4 g (16,5 mmol) de tetrafluoroborato de O-[(cianoetoxicarbonilme-
tilen)-amino]-N,N,N',N'-tetrametiluronio (TOTU) y 4,6 ml de trietilamina (33 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1 hora y, a continuación, se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas.

Para el procesamiento, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida y el residuo se recogió con 100 ml de diclorometano. La fase orgánica se lavó con 100 ml de una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato sódico y, a continuación, se lavó tres veces con sendos 100 ml de agua. Después de secar la fase orgánica con Na_{2}SO_{4}, se separó el disolvente por destilación bajo presión reducida. El residuo oleoso se trituró con un poco de éter dietílico, durante lo cual cristalizaron cristales incoloros. Después de filtrar el producto de reacción y lavarlo con n-pentano, se obtuvieron 6,6 g de éster metílico del ácido 4-({[6-(3-metoxi-bencilcarbamoil)-pirimidina-4-carbonil]-amino}-metil)-benzoico] (cristales de color amarillo pálido). De acuerdo con el análisis de LC-MS, la pureza del producto de reacción es 88% (MS (ES^{+}): m/e = 435,2).

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c) Ácido 4-({[6-(3-metoxi-bencilcarbamoil)-pirimidina-4-carbonil]-amino}-metil)-benzoico

Se disolvieron 6,6 g del éster metílico preparado en b) en 100 ml de tetrahidrofurano y se mezclaron con 36 ml (2,4 equivalentes) de una solución 1 molar de hidróxido de litio, agitando entonces la mezcla de reacción durante 4 horas mientras el disolvente se sometía a reflujo. Seguidamente, se separó el disolvente por destilación bajo presión reducida. Después de agregar 50 ml de agua, la mezcla se filtró a través de un auxiliar de filtro de Celite® y el filtrado se acidificó con ácido clorhídrico acuoso 2n. El producto de reacción precipitó tras la acidificación y se separó por filtración.

Se obtuvieron 3,05 g de ácido 4-({[6-(3-metoxi-bencilcarbamoil)-pirimidina-4-carbonil]-amino}-benzoico, cristales de color amarillo pálido [rendimiento 48% del teórico; MS (ES^{+}): m/e = 421,31].

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d) 4-(4-dietilcarbamoil-bencilamida)-6-(3-metoxi-bencilamida) del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico

Se disolvieron 420 mg de ácido 4-({[6-(3-metoxi-bencil-carbamoil)-pirimidina-4-carbonil]-amino}-metil)-benzoico de c) en 5 ml de N,N-dimetilformamida absoluta y se mezclaron consecutivamente, a 0ºC y bajo agitación, con 115 \mul de dietilamina, 361 mg de tetrafluoroborato de O-[(ciano-etoxicarbonil-metilen)amino]-N,N,N',N'-tetrametil-uronio (TOTU) y 153 \mul de trietilamina, y la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1 hora y, luego, a temperatura ambiente durante 12 horas.

Para el procesamiento, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida y el residuo se recogió con 100 ml de diclorometano. La fase orgánica se lavó con 30 ml de una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato sódico y, a continuación, se lavó tres veces con sendos 30 ml de agua. Después de secar la fase orgánica con Na_{2}SO_{4}, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida. El residuo oleoso se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice (40-63 \mu) usando acetato etílico/n-heptano, en relación de mezcla 2:1, como fase móvil. Después de separar el disolvente por destilación, se obtuvo un residuo oleoso que cristalizó lentamente después de añadir un poco de éter dietílico.

Se obtuvieron 270 mg de 4-(4-dietilcarbamoil-bencilamida)-6-(3-metoxi-bencilamida) de ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico, en forma de cristales incoloros (rendimiento 57% del teórico [MS(ES^{+}): m/e = 476,40]).

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Ejemplo de Referencia 62

4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida-6-[(piridin-4-ilmetil)-amida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico

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8

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a) Síntesis del ácido 6-[(piridin-4-ilmetil)-carbamoil]-pirimidin-4-carboxílico

Se disolvieron 9,7 g (35,7 mmol) de éster metílico del ácido 6-[(piridin-4-ilmetil)-carbamoil]-pirimidin-4-carboxílico (preparado haciendo reaccionar éster dimetílico del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico con piridin-4-il-metilamina) en 80 ml de tetrahidrofurano y 40 ml de agua y se mezclaron con 40 ml de una solución acuosa 1 molar de NaOH, agitando seguidamente la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2 horas.

Para el procesamiento, la mezcla de reacción se concentró, en un evaporador rotatorio y bajo presión reducida, a la mitad del volumen original. A continuación, se acidificó el residuo con 22 ml de una solución acuosa 2N de ácido clorhídrico y la mezcla de reacción se concentró hasta sequedad en el evaporador rotatorio.

Se obtuvieron 12,2 g de un producto sólido incoloro, que se hizo reaccionar directamente a continuación, según se describe en 62 b).

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b) 4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-[(piridin-4-il-metil)-amida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico

Se disolvieron 12,2 g del compuesto preparado en 62 a) en 150 ml de DMF absoluta y se mezclaron consecutivamente, bajo agitación de la mezcla a 0ºC, 6,63 g (35,7 mmol) de hidrocloruro de 5-aminometil-2,3-dihidrobenzofurano, 11,7 g (35,7 mmol) de tetrafluoroborato de O-[(ciano-etoxicarbonilmetilen)-amino]-N,N,N',N'-tetrametiluronio (TOTU) y 20 ml de trietilamina. Tras completar la adición, la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1 hora y a temperatura ambiente durante 4 horas.

Para el procesamiento, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida y el residuo se recogió con 200 ml de diclorometano. Se lavó, entonces, la fase orgánica dos veces con una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato sódico y una vez con agua, y luego se secó con sulfato sódico; a continuación, se separó el disolvente bajo presión reducida en un evaporador rotatorio. El producto de reacción, que resulta como residuo oleoso, cristalizó en forma de cristales de color rosa después de añadir un poco de éter dietílico. Para purificarlo adicionalmente, se recristalizó dos veces en sendos 200 ml de isopropanol.

Se obtuvieron 10 g (25,6 mmol) de 4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-[(piridin-4-ilmetil)-amida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico (rendimiento 72% del teórico, basado en las dos etapas de reacción; MS (ES^{+}): 390,08).

RMN-^{1}H (400 MHz, d_{6}-DMSO): \delta = 3,13 (t, J = 8,6 Hz,2H), 4,42 (d, J = 6,4 Hz,2H), 4,48 (t, J = 8,6 Hz,2H), 4,54 (d, J = 6,4 Hz,2H), 6,69 (d, J = 8 Hz,1H), 7,07 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,31 (m, 2H), 8,46 (m, 1H), 8,50 (m, 2H), 9,47 (m, 1H), 9,58 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 9,80 (t, J = 6,4 Hz, 1H).

Ejemplo 117 4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-[4-(morfolina-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico

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9

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a) Síntesis del ácido 6-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-carbamoil]-pirimidin-4-carboxílico

Se disolvieron 16,1 g (51 mmol) de éster metílico del ácido 6-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-carbamoil]-pirimidin-4-carboxílico (preparado haciendo reaccionar éster dimetílico del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico con 5-aminometil-2,3-dihidrobenzofurano) en 150 ml de tetrahidrofurano, se mezclaron con 62 ml de una solución acuosa 1 molar de LiOH, agitando seguidamente la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2 horas.

Para el procesamiento, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida en un evaporador rotatorio. El producto bruto se recogió, entonces, en 100 ml de agua y, tras la adición de carbón activo, se filtró a través de una capa de clarificación de Celite®. Las aguas madre resultante se acidificó luego mediante la adición de una solución 2N de HCl acuoso, precipitando el producto de reacción lentamente en forma de cristales incoloros.

Después de haber filtrado y secado el producto de reacción, se obtuvieron 8,3 g (27 mmol) de un producto sólido incoloro, haciendo reaccionar este producto adicionalmente de forma directa para dar 117 b; rendimiento 53% del teórico.

MS (ES^{+}): 300,1

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b) Síntesis de éster metílico del ácido 4-[({6-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-carbamoil]-pirimidina-4-carbo-nil}-amino)-metil]-benzoico

Se disolvieron 4,7 g (15,7 mmol) del compuesto preparado en a) en 30 ml de DMF absoluta y se mezclaron consecutivamente con 3,5 g (17,3 mmol) de éster metílico del ácido 4-amino-metil-benzoico, 5,7 g (17,3 mmol) de tetrafluoroborato de O-[(ciano-etoxi-carbonil-metilen)-amino]-N,N,N',N'-tetra-metiluronio (TOTU) y 4,8 ml de trietilamina, mientras se agitaba a 0ºC. Después de completar la adición, la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1 hora y a temperatura ambiente durante 8 horas.

Para el procesamiento, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida y el residuo se recogió con 100 ml de diclorometano. La fase orgánica se lavó, a continuación, dos veces con una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato sódico y una vez con agua y se secó con sulfato sódico y se separó el disolvente bajo presión reducida en un evaporador rotatorio. El producto de reacción, que resulta como un residuo oleoso, cristalizó en forma de cristales de color amarillo pálido después de la adición de un poco de éter dietílico.

Se obtuvieron 6,8 g (15,2 mmol) de éster metílico del ácido 4-[({6-](2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-carbamoil}-pirimidina-4-carbonil)-amino)-metil]-benzoico, rendimiento 97% del teórico.

MS (ES^{+}): 447,1.

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c) Ácido 4-[({6-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-carbamoil]-pirimidina-4-carbonil}-amino)-metil]-benzoico

Se suspendieron 6,28 g (14 mmol) de 4-[({6-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-carbamoil]-pirimidina-4-carbo-
nil}-amino)-metil]-benzoico (véase 117 b) en 150 ml de tetrahidrofurano y 70 ml de agua y se mezclaron con 16,9 ml de una solución acuosa 1N de NaOH, agitando, a continuación, la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 24 horas.

Para el procesamiento, la mezcla de reacción se concentró, en un evaporador rotatorio y bajo presión reducida, a un volumen de aprox. 50 ml y se mezcló con 100 ml de agua helada. Seguidamente, se acidificó con una solución acuosa 2N de HCl, con lo que el producto de reacción precipitó en forma de cristales de color amarillo pálido.

Después de filtrar el producto de reacción, lavarlo con un poco de agua y secarlo, se obtuvieron 5,4 g (12,5 mmol) de un producto sólido incoloro, haciendo reaccionar adicionalmente este producto de forma directa para dar 117 d; rendimiento: 89% del teórico.

MS (ES^{+}): 433,2.

RMN-^{1}H (400 MHz, d_{6}-DMSO): \delta = 3,13 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 4,43 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 4,48 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 4,59 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 6,69 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,07 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,44 (m, 2H), 7,88 (m, 1H), 7,90 (m, 1H), 8,47 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 9,46 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 9,56 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 9,76 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 12,90 (s ancho, 1H).

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d) 4-[(2,3-dihidro-benzofuran-5-ilmetil)-amida]-6-[4-morfolina-4-carbonil)-bencilamida] del ácido pirimidin-4,6-dicarboxílico

Se disolvieron 432 mg (1 mmol) del compuesto preparado en c) en 5 ml de DMF absoluta, tras lo cual se agregaron consecutivamente 96 \mul (1,1 mmol) de morfolina, 361 mg (1,1 mmol) de tetrafluoroborato de O-[(ciano-etoxi-carbonil-metilen)-amino]-N,N,N',N'-tetrametiluronio (TOTU) y 155 \mul de trietilamina, mientras se agitaba a 0ºC. Después de completar la adición, la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1 hora y a temperatura ambiente durante 8 horas.

Para el procesamiento, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida y el residuo se recogió en 30 ml de diclorometano. A continuación, se lavó la fase orgánica dos veces con una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato sódico y una vez con agua, y se secó con sulfato sódico y se separó, entonces, el disolvente bajo presión reducida en un evaporador rotatorio. El producto bruto, que resulta como un residuo oleoso, se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (40-63 \mu; fase móvil: acetato etílico/metanol = 20/1). Después de separar la fase móvil por destilación bajo presión reducida, se obtuvo un producto de reacción oleoso que cristalizó en forma de cristales incoloros tras la adición de éter dietílico.

Se obtuvieron 340 mg (0,68 mmol) de cristales incoloros, rendimiento 68% del teórico.

MS (ES^{+}): 502,27.

RMN-^{1}H (500 MHz, d_{6}-DMSO): \delta = 2,60 (m 2H), 3,4-3,6 (m ancho, 8H), 4,42 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 4,48 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 4,56 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 6,68 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,88 (m, 4H), 8,46 (m 1H), 9,46 (m, 1H), 9,57 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 9,75 (t, J = 6,5 Hz, 1H).

De manera comparable, se prepararon los siguientes compuestos.

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(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 1

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Ejemplos farmacológicos Determinación de la actividad enzimática del dominio catalítico de la colagenasa humana 3 (MMP-13)

Esta proteína se obtiene como una proenzima inactiva de la firma INVITEK, Berlín (Nº de Catálogo 30 100 803). Activación de la proenzima:

Se incuban 2 partes en volumen de la proenzima con 1 parte en volumen de solución APMA a 37ºC durante 1,5 horas. La solución APMA se prepara a partir de una solución de 10 mmol/l de acetato p-aminofenil-mercúrico en 0,1 mmol/l de NaOH, diluyendo con 3 partes en volumen de tampón tris/HCl, pH 7,5 (véase más adelante). El valor del pH se ajusta a entre 7,0 y 7,5 mediante la adición de 1 mmol/l de HCl. Después de haber activado la enzima, se diluye a una concentración de 1,67 \mug/ml usando el tampón tris/HCl.

Para medir la actividad enzimática, se incuban 10 \mul de solución enzimática durante 15 minutos con 10 \mul de una solución tamponada al 3% (en volumen) de dimetil-sulfóxido (reacción 1). Para medir la actividad de inhibición enzimática, se incuban 10 \mul de solución enzimática con 10 \mul de una solución tamponada al 3% (v/v) de dimetilsulfóxido que contiene el inhibidor de la enzima (reacción 2).

Tanto en el caso de la reacción 1 como en el caso de la reacción 2, la reacción enzimática se controla por espectroscopia de fluorescencia (328 nm (extinción)/393 nm (emisión)), después de añadir 10 \mul de una solución acuosa al 3% (v/v) de dimetilsulfóxido que contiene 0,75 mmol del sustrato.

La actividad enzimática se muestra como incremento de extinción/minuto.

El efecto del inhibidor se calcula como inhibición porcentual usando la fórmula siguiente:

% de inhibición = 100 - [(incremento de extinción/minuto en la reacción 2)/(incremento de la extinción/minuto en la reacción 1) x 100]

La CI_{50}, es decir la concentración inhibitoria necesaria para inhibir la actividad enzimática en 50%, se determina gráficamente trazando las inhibiciones porcentuales a diferentes concentraciones del inhibidor.

La solución tampón contiene 0,05% de Brij (Sigma, Deisenhofen, Alemania), así como

0,1 mol de tris/HCl/l, 0,1 mol de NaCl/l y 0,01 mol de CaCl_{2}/l (pH = 7,5). La solución enzimática contiene 1,67 \mug/ml del dominio enzimático.

La solución de sustrato contiene 0,75 mmol/l del sustrato fluorogénico (7-metoxicumarin-4-il)acetil-Pro-Leu-Gly-Leu-3-(2',4'-dinitrofenil)-L-2,3-diaminopropionil-Ala-Arg-NH_{2} (Bachem, Heidelberg, Alemania).

La siguiente Tabla 2 muestra los resultados.

TABLA 2

17

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Determinación de la actividad enzimática del dominio catalítico de la colagenasa neutrófila humana (MMP-8) y de la estromelisina humana (MMP-3)

Las enzimas colagenasa neutrófila humana y estromelisina humana se prepararon como dominios catalíticos activos, se llevaron a cabo según se describe en Weithmann et al., Inflamm. Res., 46 (1997), páginas 246-252. La medición de la actividad enzimática, así como la determinación del efecto inhibitorio de la actividad enzimática se llevaron a cabo también de la forma descrita en dicha publicación.

Al determinar la colagenasa neutrófila humana y la estromelisina humana, los compuestos conformes a los Ejemplos anteriores tuvieron, en cada caso, valores de CI_{50} superiores a 100.000 nM. Estos compuestos carecen, por lo tanto, prácticamente de actividad en lo que respecta a la inhibición de MMP 3 y 8.

Claims

1. Compuesto de la fórmula I

18

R1: representa un átomo de hidrógeno o -alquilo-(C_{1}-C_{6}),

(iii): un átomo de hidrógeno o

(iv): -alquilo (C_{1}-C_{6}), o

2): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-NH-CN,

(i): un átomo de hidrógeno,

(iii): -OH, y

\quad: en donde R9 y R10 tienen el significado arriba mencionado,

j): halógeno,

k): ciano,

l): nitro,

m): hidroxi,

n): amino,

o): -C(O)-O-alquilo-(C_{1}-C_{6}),

p): -C(O)-OH,

q): -alquilo-(C_{1}-C_{6}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno,

r): -O-alquilo-(C_{1}-C_{6}), en donde alquilo está no sustituido o está sustituido una, dos o tres veces con halógeno o -N(R9)-(R10),

j): =O,

k): -Het,

1.: un átomo de hidrógeno,

2.: halógeno,

5.: -S-alquilo-(C_{1}-C_{6}),

\vocalinvisible: \textoinvisible

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2. Compuesto de la fórmula I según la reivindicación 1, en el que

R1: representa un átomo de hidrógeno o -alquilo-(C_{1}-C_{6}),

(i): un átomo de hidrógeno o

(ii): -alquilo (C_{1}-C_{6}), o

2): -alquil-(C_{0}-C_{6})-C(O)-NH-CN,

(i): un átomo de hidrógeno,

(iii): -OH, y

\quad: en donde R9 y R10 tienen el significado arriba mencionado,

a): halógeno,

b): ciano,

c): nitro,

d): hidroxi,

e): amino,

f): -C(O)-O-alquilo-(C_{1}-C_{6}),

g): -C(O)-OH,

j): =O,

k): -Het, en donde Het está definido como antes,

1.: un átomo de hidrógeno,

2.: halógeno,

\vocalinvisible: \textoinvisible

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3. Compuesto de la fórmula I según la reivindicación 1 ó 2, en la que

R1: representa un átomo de hidrógeno,

2): -alquil-(C_{0}-C_{4})-C(O)-NH-CN,

a): halógeno,

b): ciano,

c): nitro,

d): hidroxi,

e): amino,

f): -C(O)-O-alquilo-(C_{1}-C_{4}),

g): -C(O)-OH,

1.: un átomo de hidrógeno,

2.: halógeno,

\vocalinvisible: \textoinvisible

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4. Compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 3, en el que se selecciona uno 1de los siguientes compuestos

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5. Proceso para preparar el compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque un compuesto de la fórmula II

19

a) se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula IIIa o IIIb

20

en donde R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 tienen los significados indicados en la fórmula I e Y es halógeno, hidroxilo o alcoxi-(C_{1}-C_{4}), o forma, junto con el grupo carbonilo, un éster activo o un anhídrido mixto, formándose un compuesto de la fórmula I, y los productos de reacción se convierten, eventualmente, en sus sales fisiológicamente tolerables, o

b) se hace reaccionar un compuesto de la fórmula II con un compuesto de la fórmula IIIa o IIIb para dar un compuesto de la fórmula IVa o IVb

21

en donde R1 a R7 tienen los significados indicados en la fórmula I, e Y es halógeno, hidroxilo o alcoxi-(C_{1}-C_{4}), o forma, junto con el grupo carbonilo, un éster activo o un anhídrido mixto, y el compuesto de la fórmula IVa o IVb se purifica eventualmente y, a continuación, se convierte, con un compuesto de la fórmula IIIa o IIIb, en un compuesto de la fórmula I.

6. Medicamento, caracterizado por un contenido eficaz de al menos un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 4, junto con una sustancia de soporte, aditivos y/u otros compuestos activos y sustancias auxiliares farmacéuticamente adecuadas y fisiológicamente tolerables.

7. Uso del compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 4, para preparar un producto farmacéutico para la prevención y la terapia de enfermedades articulares degenerativas tales como osteoartrosis, espondilosis y pérdida de cartílago como consecuencia de traumatismos articulares o una inmovilización articular relativamente prolongada debida a lesiones del menisco o de la rótula, o ruptura de ligamentos, pertenecen también enfermedades del tejido conjuntivo tales como colagenosis, enfermedades periodontales, trastornos de la cicatrización de heridas, y enfermedades crónicas del aparato locomotor tales como artritis inflamatoria, de origen inmunológico o metabólico, agudas y crónicas, artropatías, mialgias y trastornos del metabolismo óseo o enfermedades oncológicas tales como el cáncer de mama.