DE69714971T2

DE69714971T2 - Verfahren zur herstellung von purin-derivaten

Info

Publication number: DE69714971T2
Application number: DE69714971T
Authority: DE
Inventors: B. Arzeno; D. Axt; C. Beard; A. Dvorak; R. Fatheree; E. Fisher; Yeun-Kwei Han; R. Humphreys; P. Lund; Linh Nguyen; Leslie Wren
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1996-01-26
Filing date: 1997-01-21
Publication date: 2003-05-28
Anticipated expiration: 2017-01-22
Also published as: CA2243650C; JP4094667B2; ATE222909T1; JP2000503977A; MX9805935A; CN1212693A; AU1543797A; CN1064683C; ES2180923T3; KR100491941B1; WO1997027198A1; CA2243650A1; KR19990081991A; DE69714971T3; ES2180923T5; DE69714971D1

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

Gebiet der Erfindung

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer Prodrug-Formulierung von Ganciclovir und pharmazeutisch verträglichen Salzen davon. Insbesondere betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung des L- Monovalinesters, abgeleitet von 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6- oxopurin-9-yl)methoxy-1,3-propandiol und seinen pharmazeutisch verträglichen Salzen. Die Erfindung betrifft auch neue Zwischenprodukte, die in dem vorstehenden Verfahren verwendbar sind, und ein Verfahren zum Herstellen des Zwischenprodukts.

Hintergrund der Erfindung

Das britische Patent 1523865 beschreibt antivirale Purinderivate mit einer acyclischen Kette in der 9-Position. Unter jenen Derivaten wurde von 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6- oxopurin-9-yl)methoxyethanol mit dem INN-Namen Acyclovir gefunden, dass es gute Aktivität gegen Herpesviren, wie Herpes simplex, aufweist.
US-Patent 4355032 offenbart die Verbindung 9-[(2- Hydroxy-1-hydroxymethylethoxy)methyl]guanin oder 2-(2-Amino- 1,6-dihydro-6-oxopurin-9-yl)methoxy-1,3-propandiol oder 9- [(1,3-Dihydroxy-2-propoxy)methyl]guanin (DHPG) mit dem INN- Namen Ganciclövir. Ganciclovir ist sehr wirksam gegen Viren der Herpesfamilie, beispielsweise gegen Herpes simplex und Cytomegalovirus.
Die britische Patentanmeldung GB 2122618 offenbart Derivate von 9-(2-Hydroxyethoxymethyl)guanin der generischen Formel:
worin X ein Sauerstoff- oder Schwefelatom wiedergibt, R¹ eine Hydroxy- oder eine Aminogruppe wiedergibt, R² ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe der Formel CH&sub2;OR³a wiedergibt und R³ und R³a gleich oder verschieden sein können, wobei jedes einen Aminosäureacylrest wiedergibt, und physiologisch verträgliche Salze davon. Diese Verbindungen können durch Kondensieren eines Guaninderivats mit einem Seitenkettenzwischenprodukt in einem stark polaren Lösungsmittel, wie Dimethylformamid oder Hexamethylphosphorsäuretriamid, vorteilhafterweise in Gegenwart einer Base, oder durch thermische Kondensation in Gegenwart einer starken Säure hergestellt werden. Diese Verbindungen sind für die Behandlung von viralen Infektionen verwendbar und haben eine hohe Wasserlöslichkeit, was sie von Wert bei der Formulierung von wässrigen pharmazeutischen Zubereitungen macht. Während die generische Formel in der britischen Patentanmeldung Verbindungen einschließt, in denen R² die Gruppe -CH&sub2;OR³a darstellt, sind spezielle Verbindungen dieser Gruppe nicht offenbart.
Die europäische Patentanmeldung EP 0375329 offenbart Prodrugverbindungen der nachstehenden Formel
worin R und R¹ unabhängig ausgewählt sind aus einem Wasserstoffatom und einem Aminoacylrest, bereitgestellt an mindestens einem von R und R¹, einen Aminosäureacylrest wiedergibt und B eine Gruppe der Formeln
wiedergibt, worin R² eine C&sub1;&sub6;-geradkettige, C&sub3;&submin;&sub6;- verzweigtkettige oder C&sub3;&submin;&sub6;-cyclische Alkoxygruppe oder eine Hydroxy- oder Aminogruppe oder ein Wasserstoffatom wiedergibt, und die physiologisch verträglichen Salze davon. Es wird beschrieben, dass diese Prodrugverbindungen vorteilhafte Bioverfügbarkeit aufweisen, wenn sie auf dem oralen Weg verabreicht werden, was hohe Spiegel an Stammverbindung im Körper ergibt.
Beispiel 3 (b) der europäischen Patentanmeldung EP 0375329 offenbart die Herstellung von Bis(L-isoleucinat)ester von Ganciclovir als einen Schaum. Beispiel 4 (b) offenbart die Herstellung von Bis(glycinat)ester von Ganciclovir als einen weißen Feststoff. Beispiel 5 (b) offenbart die Herstellung von Bis (L-valinat) ester von Ganciclovir als einen Feststoff. Beispiel 6 (b) offenbart die Herstellung von dem Bis (L-alaninat) ester von Ganciclovir als einen Sirup, der 90% des Bisesters und 10% des Monoesters enthält. Die Bisester werden durch Umsetzen von Ganciclovir mit einer gegebenenfalls geschützten Aminosäure oder einem funktionellen Äquivalent davon hergestellt, wobei die Reaktion in herkömmlicher Weise, beispielsweise in einem Lösungsmittel, wie Pyridin, Dimethylformamid usw., in Gegenwart eines Kupplungsmittels, wie 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid, gegebenenfalls in Gegenwart einer katalytischen Base, wie 4-Dimethylaminopyridin, ausgeführt werden kann. Die beschriebenen Bisester sind nichtkristalline Materialien, die schwierig zur Herstellung von oralen pharmazeutischen Dosierungsformen zu verarbeiten sind.
Die britische Patentanmeldung Nr. 8829571 ist die Prioritätspatentanmeldung für die europäische Patentanmeldung EP 0375329 und US-Patent-Nr. 5043339 und offenbart Aminosäureester der Verbindungen der Formel
(worin R eine Hydroxy- oder Aminogruppe oder ein Wasserstoffatom wiedergibt) und die physiologisch verträglichen Salze davon. Beispiele für bevorzugte Aminosäuren schließen die aliphatischen Säuren, beispielsweise enthaltend bis zu 6 Kohlenstoffatome, wie Glycin, Alanin, Valin und Isoleucin, ein. Die Aminosäureester schließen sowohl Mono- als auch Diester ein. Die Herstellung der Diester ist mit der Herstellung in der europäischen Patentanmeldung EP 0375329 identisch, jedoch offenbart diese Patentanmeldung sowie die europäische Patentanmeldung EP 0375329 und US-Patent Nr. 5043339 nicht die Herstellung der Monoester oder irgendwelche Daten, die ihre Verwendbarkeit vorschlagen.
Leon Colla et al., J. Med. Chem. (1983) 26, 602-604, offenbaren verschiedene in Wasser lösliche Esterderivate von Acyclovir und dessen Salzen als Prodrugs von Acyclovir. Die Autoren weisen aus, dass Acyclovir aufgrund von seiner begrenzten Löslichkeit in Wasser nicht als Augentropfen oder intramuskuläre Injektionen gegeben werden kann, und haben deshalb Derivate von Acyclovir synthetisiert, die in Wasser löslicher sind als die Stammverbindung. Die Autoren offenbaren das Hydrochloridsalz des Glycylesters, das Hydrochloridsalz des Alanylesters, das Hydrochloridsalz des b-Alanylesters, das Natriumsalz des Succinylesters und den Azidoacetatester. Die Alanylester wurden durch herkömmliche Veresterungsverfahren, einschließlich Umsetzen von Acyclovir mit der entsprechenden N-Carboxy-geschützten Aminosäure in Pyridin in Gegenwart von 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid und einer katalytischen Menge an p-Toluolsulfonsäure und anschließend Unterziehen katalytischer Hydrierung unter Gewinnung der α- und β- Alanylester als ihre Hydrochloridsalze hergestellt.
L. M. Beauchamp et al., Antiviral Chemistry & Chemotherapy (1992), 3 (3), 157-164 offenbaren 18 Aminosäureester des Antiherpes-Arzneimittels Acyclovir und deren Wirksamkeiten als Prodrugs von Acyclovir, bewertet an Ratten durch Messen von der Urinwiedergewinnung von Acyclovir. Zehn Prodrugs erzeugten größere Mengen des Stammarzneimittels im Urin als Acyclovir selbst: der Glycyl-, D,L-Alanyl-, L-Alanyl-, L-2-Aminobutyrat-, D,L-Valyl-, L-Valyl-, DL-Isoleucyl-, L-Isoleucyl-, L-Methionyl- und L-Prolylester. Gemäß den Autoren war der L-Valylester von Acyclovir der beste Prodrug der untersuchten Ester. Diese Ester wurden durch Verfahren ähnlich zu jenen, angewendet von Colla et al., hergestellt.
Die europäische Patentveröffentlichung 308065 offenbart die Valin- und Isoleucinester von Acyclovir, vorzugsweise in der L-Form, was einen erhöhten Anstieg der Absorption vom Darm nach oraler Verabreichung zeigt, verglichen mit anderen Estern und Acyclovir. Die Aminosäureester werden durch herkömmliche Veresterungsverfahren, einschließlich Umsetzen von Acyclovir mit einer N-Carboxy-geschützten Aminosäure oder einem Säurehalogenid oder Säureanhydrid der Aminosäure, in einem Lösungsmittel, wie Pyridin oder Dimethylformamid, gegebenenfalls in Gegenwart einer katalytischen Base hergestellt. Die Aminosäureester von Acyclovir können auch durch Kondensieren eines Guaninderivats mit einem Aminosäureseitenkettenzwischenprodukt in einer analogen Weise zu jener, offenbart in der britischen Patentanmeldung GB 2122618, vorstehend erörtert, hergestellt werden.
PCT-Patentanmeldung WO 94/29311 offenbart ein Verfahren zur Herstellung von Aminosäureestern eines Nucleosidanalogen, einschließlich Acyclovir und Ganciclovir. Dieses Verfahren umfasst Umsetzen eines Nucleosidanalogen mit einer veresterbaren Hydroxygruppe in ihrer linearen oder cyclischen Ethereinheit mit einem 2-Oxa-4-azacycloalkan-1,3-dion der Formel
worin R¹ Wasserstoff, eine C&sub1;&sub4;-Alkyl- oder Alkenylgruppe oder andere Aminosäureseitenketten wiedergeben kann und R² Wasserstoff oder eine Gruppe COOR³ worin R³ eine Benzyl-, t-Butyl-, Fluorenylmethyl- oder eine gegebenenfalls Halogensubstituierte lineare oder verzweigte C&sub1;-C&sub8;-Alkylgruppe darstellt, wiedergeben kann. Bevorzugte Gruppen R¹ schließen Wasserstoff, Methyl, Isopropyl und Isobutyl ein unter Gewinnung der entsprechenden Glycin-, Alanin-, Valin- und Isoleucinester von Acyclovir oder Ganciclovir. Beispiele 1-3 der PCT-Patentanmeldung WO 94/29311 offenbaren nur die Kondensation von Acyclovir mit dem Valin-substituierten 2-Oxa-4- azacycloalkan-1,3-dion (Z-Valin-N-carboxyanhydrid) durch herkömmliche Verfahren. Während die Aminosäureester der PCT- Anmeldung sowohl die Acyclovir- als auch Ganciclovir(DHPG)- ester einschließen, offenbart die Anmeldung nicht, wie die Ganciclovirester herzustellen sind, noch weniger die Monoester von Ganciclovir.
Der L-Monovalinester, abgeleitet von 2-(2-Amino-1,6- dihydro-6-oxopurin-9-yl)methoxy-1,3-propandiol und seine pharmazeutisch verträglichen Salze sind starke antivirale Mittel und werden in der europäischen Patentanmeldung Veröffentlichungs-Nr. 694547 beschrieben. Diese Verbindungen wurden als mit verbesserter oraler Absorption und niederer Toxizität gefunden. Diese Patentanmeldung offenbart auch bestimmte Verfahren zum Herstellen dieser Ester, die von jenen hierin beschriebenen verschieden sind.
Die vorliegende Erfindung betrifft ein verbessertes Verfähren und neue Zwischenprodukte, wobei ein Säureadditionssalz eines Monohydroxy-geschützten Ganciclovirs als ein neues Zwischenprodukt gebildet wird, welches die Verunreinigungen in dem Monovalinesterendprodukt, verglichen mit bekannten Zwischenprodukten, vermindert. Dies erübrigt auch die kosten- und zeitaufwendigen Reinigungsschritte und ermöglicht die Verwendung von Ausgangsmaterialien niederer Reinheit, die wiederum die Gesamtproduktionskosten senken.

KURZDARSTELLUNG DER ERFINDUNG

In einem ersten Aspekt stellt diese Erfindung ein Verfahren zum Herstellen der Verbindung der Formel I:
und der pharmazeutisch verträglichen Salze davon bereit, wobei die Verbindung anschließend 2-(2-Amino-1,6- dihydro-6-oxopurin-9-yl)methoxy-3-hydroxy-1-propyl-L-valinat oder Mono-L-valinganciclovir genannt wird.
Dieses Verfahren beinhaltet die Kondensation einer gegebenenfalls substituierten Guaninverbindung mit einem substituierten Glycerinderivat, gefolgt von der Bildung eine s Säureadditionssalzes eines Monohydroxy-geschützten Ganciclovirs als ein Zwischenprodukt; Veresterung dieses Produkts mit einem L-Valinderivat und die Entfernung beliebiger Schutzgruppen bilden den Prodrug der Formel I. Gegebenenfalls kann das Verfahren auch die Bildung von Salzen des Prodrugs der Formel I, die Umwandlung eines Säureadditionssalzes des Prodrugs der Formel I in eine Nichtsalzform, die optische Auftrennung eines Prodrugs der Formel I oder die Herstellung der Prodrugs der Formel I in kristalliner Form einschließen. Einzelheiten des Verfahrens werden nachstehend beschrieben.
In einem zweiten Aspekt stellt diese Erfindung Verbindungen der Formel V und Formel IV bereit, welche verwendbare Zwischenprodukte zum Herstellen von Mono-L-valinganciclovir und seinen pharmazeutisch verträglichen Salzen darstellen. Die Verbindungen der Formel V sind:
worin X eine Säureadditionssalzeinheit darstellt, Y² ein Halogenatom, Niederacyloxy, eine gegebenenfalls substituierte Aralkyloxygruppe darstellt und P¹ Wasserstoff oder eine Aminoschutzgruppe darstellt. Die Verbindungen der Formel IV sind:
worin P¹ eine Aminoschutzgruppe darstellt, die Niederacyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist, Y¹ Halogen, Niederacyloxy oder eine gegebenenfalls substituierte Aralkyloxygruppe darstellt und Y² ein Niederacyloxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt.
Ein dritter Aspekt dieser Erfindung ist ein Verfahren zum Herstellen der neuen Zwischenprodukte der Formel V und IV.

BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG IM EINZELNEN

Definitionen

Sofern nicht anders ausgewiesen, haben die in der Beschreibung und den Ansprüchen verwendeten Begriffe die nachstehend angegebenen Bedeutungen:
"BOC" bedeutet t-Butoxycarbonyl.
"CBZ" bedeutet Carbobenzyloxy (Benzyloxycarbonyl).
"FMOC" bedeutet N-(9-Fluorenylmethoxycarbonyl).
"DHPG" bedeutet 9-[(1,3-Dihydroxy-2-propoxy)methyl]- guanin.
"Alkyl" bedeutet einen geraden oder verzweigten gesättigten Kohlenwasserstoffrest mit einer ausgewiesenen Anzahl an Kohlenstoffatomen. Beispielsweise ist C&sub1;&submin;&sub7;-Alkyl Alkyl mit mindestens einem, jedoch nicht mehr als 7 Kohlenstoffatomen, beispielsweise Methyl, Ethyl, i-Propyl, n-Propyl, n-Butyl, n-Pentyl, n-Heptyl und dergleichen.
"Niederalkyl" bedeutet ein Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen.
"Aryl" bedeutet einen organischen Rest, abgeleitet von einem aromatischen Kohlenwasserstoff durch die Entfernung eines Wasserstoffatoms. Bevorzugte Arylreste sind aromatische carbocyclische Reste mit einem einzelnen Ring (beispielsweise Phenyl) oder zwei kondensierten Ringen (beispielsweise Naphthyl).
"Aralkyl" bedeutet eine Alkylgruppe, worin ein Wasserstoffatom durch eine vorstehend definierte Arylgruppe ersetzt ist.
"Acyl" bedeutet einen organischen Rest, abgeleitet von einer organischen Säure durch die Entfernung der Hydroxylgruppe, beispielsweise ist CH&sub3;CO- oder Acetyl der Acetylrest von CH&sub3;COOH. Andere Beispiele für solche Acylgruppen sind Propionyl oder Benzoyl usw. Der Begriff "Acyl" schließt den Begriff "Alkanoyl" ein, welcher den organischen Rest RCO- darstellt, worin R eine Alkylgruppe wie vorstehend definiert darstellt.
"Niederalkyloxy", "(Niederalkyl)amino", "Di(niederalkyl)amino", "(Niederalkanoyl)amino" und ähnliche Begriffe bedeuten Alkoxy, Alkylamino, Dialkylamino, Alkanoylamino usw., wobei der oder jeder Alkylrest ein "Niederalkyl" wie vorstehend beschrieben ist.
"Halogen" oder "Halo" bedeutet Fluor, Chlor, Brom oder Jod.
"Trityl" bedeutet den Triphenylmethylrest (PH)&sub3;C-.
"Derivat" einer Verbindung bedeutet eine aus der Ursprungsverbindung durch ein ähnliches chemisches Verfahren erhältliche Verbindung.
"Aktiviertes Derivat" einer Verbindung bedeutet eine reaktive Form der Ursprungsverbindung, welche die Verbindung in einer gewünschten chemischen Reaktion aktiv macht, in der die Ursprungsverbindung nur mäßig reaktiv oder nicht reaktiv ist. Aktivierung wird durch Bildung eines Derivats oder einer chemischen Gruppierung innerhalb des Moleküls mit einem höheren freien Energiegehalt als jener der Ursprungsverbindung, die die aktivierte Form anfälliger macht, um mit einem weiteren Reagenz zu reagieren, erreicht. Im Zusammenhang der vorliegenden Erfindung ist eine Aktivierung der Carboxygruppe von besonderer Wichtigkeit und entsprechende aktivierende Mittel oder Gruppierungen, die die Carboxygruppe aktivieren, werden nachstehend genauer beschrieben. Ein Beispiel eines aktivierten Derivats von L-Valin ist die Verbindung der Formel VI:
worin P² eine Aminoschutzgruppe darstellt und A eine Carboxy-aktivierende Gruppe, beispielsweise Halogen, eine Niederacyloxygruppe, eine Carbodiimidgruppe, wie 1-Ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl)carbodiimid (EDAC), eine Isobutyratgruppe und dergleichen, darstellt.
Von besonderem Interesse für die vorliegende Erfindung ist ein Aminosäureanhydrid, welches eine aktivierte Form einer Aminosäure darstellt, welche die Aminosäure (insbesondere L-Valin) für die Veresterung anfällig macht. Aminosäureanhydride sind in die vorstehenden Verbindungen der Formel VI eingeschlossen. Besonders verwendbar für die vorliegende Erfindung sind die cyclischen Aminosäureanhydride von L- Valin, beschrieben in der PCT-Patentanmeldung WO 94/29311, wie 2-Oxa-4-aza-5-isopropylcycloalkan-1,3-dion der Formel VIa:
worin P² eine Aminoschutzgruppe darstellt. Andere Beispiele der cyclischen Aminosäureanhydride sind geschützte Aminosäure-N-carboxyanhydride (NCAs), die nachstehend genauer beschrieben werden.
"Schutzgruppe" bedeutet eine chemische Gruppe, die (a) eine reaktive Gruppe vor dem Teilnehmen an einer unerwünschten chemischen Reaktion schützt und (b) leicht nach dem Schutz der reaktiven Gruppe entfernt werden kann, wenn sie nicht mehr erforderlich ist. Beispielsweise ist die Benzylgruppe eine Schutzgruppe für eine primäre Hydroxylfunktion.
"Aminoschutzgruppe" bedeutet eine Schutzgruppe, die eine reaktive Aminogruppe schützt, die sonst durch bestimmte chemische Reaktionen modifiziert werden würde. Die Definition schließt die Formylgruppe oder Niederalkanoylgruppen mit zwei bis vier Kohlenstoffatomen, insbesondere die Acetyl- oder Propionylgruppe, die Trityl- oder substituierten Tritylgruppen, wie die Monomethoxytritylgruppe, Dimethoxytritylgruppen, wie die 4,4'-Dimethoxytrityl- oder 4,4'-Dimethoxytriphenylmethylgruppe, die Phthälyagruppe, die Silylgruppe, die Trichloracetylgruppe, die Trifluoracetylgruppe und die N-(9- Fluorenylmethoxycarbonyl)- oder "FMOC"-Gruppe, die Allyloxycarbonylgruppe oder andere Schutzgruppen, abgeleitet von Halogenkohlensäureestern, wie (C&sub6;-C&sub1;&sub2;)-Arylniederalkylcarbonate (wie die N-Benzyloxycarbonylgruppe, abgeleitet von Benzylchlorcarbonat) oder abgeleitet von Biphenylalkylhalogencarbonaten oder tertiären Alkylhalogencarbonaten, wie Tertiärbutylhalogencarbonaten, insbesondere Tertiärbutylchlorcarbonat oder Di(nieder)alkyldicarbonate, insbesondere Di(t-butyl)dicarbonat und die Triphenylmethylhalogenide, wie Triphenylmethylchlorid und Trifluoressigsäureanhydrid, ein.
"Hydroxyschutzgruppe" bedeutet eine Schutzgruppe, die eine Hydroxygruppe schützt, die sonst durch bestimmte chemische Reaktionen modifiziert werden würde. Im Zusammenhang mit der vorliegenden Erfindung kann die Hydroxyschutzgruppe eine Ether- oder Ester-bildende Gruppe sein, die leicht nach Beendigung aller anderen Reaktionsschritte entfernt werden kann, wie eine Niederacylgruppe (beispielsweise die Acetyl- oder Propionylgruppe) oder eine Aralkylgruppe (beispielsweise die Benzylgruppe, gegebenenfalls substituiert am Phenylring).
"Silylierungskatalysator", wie hierin verwendet, bezieht sich auf Katalysatoren, die die Silylierung von Guanin fördern, beispielsweise Ammoniumsulfat, p-Toluolsulfonsäure, Trifluormethansulfonsäure, Trimethylsilyltrifluormethansulfonat, Bistrimethylsilylsulfonat, Schwefelsäure, Kaliumbutylsulfonat, Ammoniumperchlorat, Natriumperchlorat, Natriumborfluorid oder Zinntetrachlorid.
"Silylierungsmittel", wie hierin verwendet, bezieht sich auf eine Verbindung, die Guanin silylieren kann. Ein bevorzugtes Silylierungsmittel ist Hexamethyldisilazan (das eine Verbindung der Formel (IIa) ergibt, worin R&sup5;, R&sup6; und R&sup7; alle Methyl bedeuten). Jedoch sind viele andere Silylierungsmittel auf dem Fachgebiet bekannt. Beispielsweise kann Guanin mit einem Trialkylsilylhalogenid der Formel SiR&sup5;R&sup6;R&sup7;X umgesetzt werden, worin R&sup5;, R&sup6; und R&sup7; unabhängig Niederalkyl darstellen und X Chlor oder Brom darstellt, wie Trimethylsilylchlorid, tert-Butyldimethylsilylchlorid und dergleichen, vorzugsweise in Gegenwart von etwa 1 bis 2 Mol-Äquivalenten einer Base. Die (per)silylierte Verbindung der Formel (IIa) wird wie nachstehend wiedergegeben:
Formel (IIa) gibt Guanin wieder, geschützt durch ein, zwei oder drei Silyliergruppen, oder ein Gemisch davon, worin Z¹, Z² und Z³ unabhängig Wasserstoff oder eine Silylgruppe der Formel SiR&sup5;R&sup6;R&sup7; darstellen, mit der Maßgabe, dass mindestens einer von Z¹, Z² und Z³ eine Sililylgruppe sein muss, worin R&sup5;, R&sup6; und R&sup7; unabhängig Niederalkyl darstellen. Es sollte angemerkt werden, dass die dargestellte Formel (IIa) ein Gemisch von N-7- und N-9-Isomeren (als ein Tautomerengemisch) wiedergibt.
"Abgangsgruppe" bedeutet eine labile Gruppe, die in einer chemischen Reaktion durch eine andere Gruppe ersetzt wird. Beispiele für Abgangsgruppen sind Halogen, die gegebenenfalls substituierte Benzyloxygruppe, die Mesyloxygruppe, die Tosyloxygruppe oder die Acyloxygruppe.
Alle die in der Herstellung der Verbindung der Formel I angewendeten aktivierenden und schützenden Mittel müssen die nachstehenden Qualifikationen erfüllen: (I) ihre Einführung sollte quantitativ und ohne Racemisierung der L-Valinkomponente verlaufen; (2) die während der gewünschten Reaktion vorliegende Schutzgruppe sollte bei den angewendeten Reaktionsbedingungen stabil sein und (3) die Gruppe muss unter Bedingungen, unter denen die Esterbindung stabil ist und unter denen die Racemisierung der L-Valinkomponente des Esters nicht stattfindet, leicht entfernt werden.
Das erfindungsgemäße Verfahren kann auch die optische Auftrennung eines Prodrugs der Formel I einschließen. Die die Stereochemie und die optische Auftrennung der Verbindungen betreffende Terminologie wird in der europäischen Patentanmeldung Veröffentlichungs-Nr. 694547, die hierin durch Hinweis einbezogen ist, beschrieben.
"Wahlweise" oder "gegebenenfalls" bedeutet, dass ein beschriebenes Ereignis oder Umstand auftreten kann oder nicht, und dass die Beschreibung Fälle einschließt, wo das Ereignis oder der Umstand auftritt, und Fälle, in denen dies nicht geschieht. Beispielsweise bedeutet "gegebenenfalls substituiertes Phenyl", dass das Phenyl substituiert sein kann oder nicht und dass die Beschreibung sowohl unsubstituiertes Phenyl als auch Phenyl einschließt, worin es eine Substitution gibt; "gegebenenfalls gefolgt von Umwandeln der freien Base zu dem Säureadditionssalz" bedeutet, dass, damit das beschriebene Verfahren in die Erfindung fällt, die Umwandlung ausgeführt werden kann oder nicht, und die Erfindung schließt jene Verfahren ein, in denen die freie Base in das Säureadditionssalz umgewandelt wird, und jene Verfahren, in denen dies nicht geschieht.
"Pharmazeutisch verträglich" bedeutet, jenes, das zum Herstellen einer pharmazeutischen Zusammensetzung verwendbar ist, d. h. im Allgemeinen sicher und nicht toxisch ist, und schließt jenes ein, das für die veterinäre Anwendung sowie für die humane pharmazeutische Verwendung annehmbar ist.
"Pharmazeutisch verträgliche Salze" bedeuten Salze, die die gewünschte pharmakologische Aktivität besitzen und die weder biologisch noch anders unerwünscht sind. Solche Salze schließen die mit anorganischen Säuren, wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Phosphorsäure und dergleichen; oder mit organischen Säuren, wie Essigsäure, Propionsäure, Hexansäure, Heptansäure, Cyclopentan- Propionsäure, Glycolsäure, Brenztraubensäure, Milchsäure, Malonsäure, Bernsteinsäure, Äpfelsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Weinsäure, Zitronensäure, Benzoesäure, o-(4-Hydroxybenzoyl)-benzoesäure, Zimtsäure, Mandelsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, 1,2-Ethandisulfonsäure, 2-Hydroxyethansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, p-Chlorbenzolsulfonsäure, 2- Naphthalinsulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure, Kampfersulfonsäure, 4-Methylbicyclo[2.2.2]oct-2-en-1-carbonsäure, Glucoheptonsäure, 4,4'-Methylenbis(3-hydroxy-2-naphthoe)säure, 3-Phenylpropionsäure, Trimethylessigsäure, Tertiärbutylessigsäure, Lauryl-Schwefelsäure, Gluconsäure, Glutaminsäure, Hydroxynaphthoesäuren, Salicylsäure, Stearinsäure, Muconsäure und dergleichen, gebildeten Säureadditionssalze ein. Bevorzugte pharmazeutisch verträglich Salze sind jene, gebildet mit Salz-, Schwefel-, Phosphorsäure, Essig- oder Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, 1,2-Ethandisulfonsäure, 2-Hydroxyethansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, p-Chlorbenzolsulfonsäure, 2- Naphthalinsulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure und Kampfersulfonsäure.

Synthesereaktionsparameter

Sofern nicht das Gegenteil ausgewiesen, finden die hierin beschriebenen Reaktionen bei Atmosphärendruck innerhalb eines Temperaturbereichs von 5ºC bis 170ºC (vorzugsweise 10ºC bis 50ºC, besonders bevorzugt bei "Raum"- oder "Umgebungs "temperatur, beispielsweise 20-30ºC) statt. Jedoch gibt es deutlich mehr Reaktionen, wenn der in der chemischen Reaktion verwendete Temperaturbereich oberhalb oder unterhalb dieser Temperaturbereiche liegen wird. Weiterhin sollen, sofern nicht anders ausgewiesen, die Reaktionszeiten und -bedingungen, beispielsweise ungefähr bei etwa Atmosphärendruck innerhalb eines Temperaturbereichs von etwa 5ºC bis etwa 100ºC (vorzugsweise etwa 1.0ºC bis etwa 50ºC, besonders bevorzugt etwa 20ºC) über einen Zeitraum von etwa 1 bis etwa 100 Stunden (vorzugsweise etwa 5 bis 60 Stunden) stattfinden. Die in den Beispielen angegebenen Parameter sind als speziell, nicht ungefähr, aufzufassen.
Die Isolierung und Reinigung der hierin beschriebenen Verbindungen und Zwischenprodukte kann, falls erwünscht, durch beliebige geeignete Trenn- oder Reinigungsverfahren, wie beispielsweise Filtration, Extraktion, Kristallisation, Säulenchromatographie, Dünnschichtchromatographie oder Dickschichtchromatographie oder eine Kombination von diesen Verfahren erfolgen. Spezielle Erläuterungen geeigneter Trennungs- und Isolierungsverfahren können durch Bezug auf hierin nachstehende Beispiele erhalten werden. Jedoch können natürlich auch andere Äquivalenttrennungs- oder -isolierungsverfahren angewendet werden.

Gegenwärtig bevorzugte Ausführungsformen

Während die breiteste Definition dieser Erfindung in der Kurzdarstellung der Erfindung als ein Verfahren zum Trennen der Verbindung der Formel I und ihrer pharmazeutisch verträglichen Salze angeführt wird, sind das (R,S)-Gemisch und bestimmte Salze bevorzugt.
Die nachstehenden Säuren sind bevorzugt, um pharmazeutisch verträgliche Salze mit der Verbindung der Formel I zu bilden: Salz-, Schwefel-, Phosphorsäure, Essig-, Methansulfon-, Ethansulfon-, 1,2-Ethandisulfon-, 2-Hydroxyethansulfon-, Benzolsulfon-, p-Chlorbenzolsulfon-, 2-Naphthalinsulfon-, p-Toluolsulfon- und Kampfersulfonsäure. Besonders bevorzugt sind starke anorganische Säuren, wie Salz-, Schwefel- und Phosphorsäure.
Die besonders bevorzugten Verbindungen sind 2-(2- Amino-1,6-dihydro-6-oxopurin-9-yl)methoxy-3-hydroxy-1-propyl- L-valinathydrochlorid und -Acetat. Diese Verbindungen können als kristalline Materialien hergestellt werden und können deshalb leicht zu stabilen oralen Formulierungen verarbeitet werden.
In den letzten Schritten der hierin beschriebenen Verfahren bezieht sich ein Hinweis auf Formeln I, II, III, IV, V, VI, VIa und VII auf solche Formeln, worin P¹ und P², A, Y¹, Y², Z und X wie in ihren breitesten, in der Kurzdarstellung der Erfindung angeführten Definitionen definiert sind, wobei die Verfahren insbesondere die gegenwärtig bevorzugten Ausführungsformen anwenden.

Einzelheiten der Syntheseverfahren

Das erfindungsgemäße Verfahren wird in der nachstehend gezeigten Reaktionsfolge angeführt:
worin P¹ Wasserstoff oder eine Aminoschutzgruppe darstellt, P² eine Aminoschutzgruppe darstellt und X eine pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalzgruppe darstellt. Die Verbindungen der Formel III sind Glycerinderivate, worin Y¹ und Y² unabhängig Halogen, Niederacyloxy oder eine gegebenenfalls substituierte Aralkyloxygruppe darstellen, oder einer von Y¹ oder Y² eine Valeryloxygruppe darstellt und Z eine Abgangsgruppe, ausgewählt aus Niederacyloxy, Isopropyloxy, Benzyloxy, Halogen, Mesyloxy oder Tosyloxy und dergleichen, darstellt. Im Allgemeinen müssen Y¹ und Y² des Glycerinderivats in einer solchen Weise ausgewählt sein, um die Gewinnung des Mono-L-valinesters der Formel T zu erlauben. Einer von Y¹ oder Y² kann eine Amino-geschützte L-Valyloxygruppe oder eine Gruppe, die zu der L-Valyloxygruppe umwandelbar ist, sein.
Die Guaninverbindung der Formel II, gegebenenfalls in persilylierter Form, wird mit einem 2-substituierten Glycerin der Formel III kondensiert unter Gewinnung einer Verbindung der Formel IV, welche ein 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxopurin- 9-yl)methoxy-1,3-propandiol (Ganciclovir)-Zwischenprodukt mit einem Schutz der beiden Hydroxyfunktionen (oder Schutz einer Hydroxyfunktion, wenn einer von Y¹ oder Y² eine Valyloxygruppe darstellt) und gegebenenfalls an der 2-Aminoeinheit der Guaningruppe darstellt. Wenn beide Hydroxyfunktionen geschützt sind, dann ist die Verbindung der Formel IV an einer der Hydroxyfunktionen von den Schutzgruppen befreit unter Bereitstellung des Monogeschützen Ganciclovirzwischenprodukts mit anschließender oder gleichzeitiger Bildung des Säureadditionssalzes unter Bereitstellung des neuen Zwischenprodukts der Formel V. Verbindungen der Formel V können mit einem aktivierten Derivat von L-Valin der Formel VI oder VIa verestert sein unter Bereitstellung der Verbindungen der Formel VII, gegebenenfalls gefolgt von Entfernen von Amino- und/oder Hydroxyschutzgruppen unter Bildung einer Verbindung der Formel I.
Wenn die Valyloxygruppe in Schritt I unter Verwendung eines Glycerinderivats, worin einer von Y¹ und Y² eine Amino- geschützte L-Valyloxygruppe oder eine Gruppe, die zu der L- Valyloxygruppe umwandelbar ist, darstellt und der andere eine Hydroxyschutzgruppe darstellt, eingeführt wird, wird die erhaltene Verbindung der Formel IV direkt zu einer Verbindung der Formel I durch Entfernen der Hydroxy- und Aminoschutzgruppen umgewandelt.
Die Verbindungen der Formel I können gegebenenfalls in ein pharmazeutisch verträgliches Salt davon umgewandelt werden. Das Verfahren kann auch die Umwandlung eines Säureadditionssalzes des Prodrugs der Formel I in eine Nichtsalzform einschließen unter optischer Trennung einer Verbindung der Formel I oder der Herstellung der Verbindung der Formel I in kristalliner Form.
Die vorliegende Erfindung ist ein verbessertes Verfahren zur Herstellung von Mono-L-valinganciclovir, worin die Bildung des Zwischenprodukts der Formel V verschiedene Vorteile gegenüber den vorher bekannten Verfahren bereitstellt. Dieses neue Zwischenprodukt, das ein Säureadditionssalz eines Monohydroxy-geschützten Ganciclovirs darstellt, sorgt für eine wesentliche Verminderung an starken Verunreinigungen, die mit dem gewünschten Endprodukt einhergehen.
Zuerst kann das Ausgangsmaterial für die Herstellung von einigen der Glycerinreagenzien der Formel III mit bestimmten Verunreinigungen verunreinigt sein. Diese Verunreinigungen werden während der Synthese des Glycerinreagenz nicht entfernt und wenn das Reagenz in der Kondensationsreaktion mit Guanin umgesetzt wird, wird es zu den entsprechenden isomeren Ganciclovirverunreinigungen führen. Beispielsweise kann das Ausgangsmaterial für das Glycerinreagenz der Formel III, worin Y¹ Benzyloxy darstellt und Y² und Z Propionyloxy darstellen, die Verbindung 1-Benzyloxy-3-chlor-2-propanol sein. Dieses Ausgangsmaterial kann 2-Chlor-3-benzyloxypropanol oder 2-Benzyloxy-3-chlorpropanol enthalten. Jede von diesen Verunreinigungen ergibt die jeweilige Verunreinigung in dem Glycerinreagenz und bei der anschließenden Kondensationsreaktion mit Guanin wird die Verunreinigung als eine isomere Verunreinigung des Ganciclovirzwischenprodukts hinübergeschleppt.
Zweitens ergibt die Reaktion von Guanin mit dem Glycerinreagenz der Formel III ein Isomerenproduktgemisch: das erwünschte 9-substituierte Guanin (das 9-Isomer) und eine kleine Menge des unerwünschten 7-substituierten Guanins (das 7-Isomer). Wenn das Glycerinreagenz die vorstehend erörterten Verunreinigungen enthäht, dann werden die entsprechenden Verunreinigungen von Ganciclovir ebenfalls vorliegen. Keine von diesen Verunreinigungen kann leicht aus dem gewünschten 9- Isomer entfernt werden.
Die vorliegende Erfindung stellt die Erzeugung eines Säureadditionssalzes der Verbindung der Formel V bereit, welche die Isolierung des Endprodukts, das im Wesentlichen frei von dem 7-Isomer ist und mit Anteilen an Verunreinigungen, die um mindestens 50% vermindert sind, erlaubt. Das Säureadditionssalzzwischenprodukt kann direkt aus dem Guaninreaktionsgemisch, das die Dihydroxy-geschützte Verbindung der Formel IV enthält, hergestellt werden. Alternativ kann die Verbindung der Formel IV zuerst an einer der Hydroxyeinheiten von den Schutzgruppen befreit werden, um das Monohydroxygeschützte Ganciclovir, aus dem das Zwischenprodukt des Säureadditionssalzes dann hergestellt wird, bereitzustellen. Auch kann man aus der Verbindung der Formel IV zuerst das Zwischenprodukt mit dem Schutz an beiden Hydroxyeinheiten und an der 2-Aminosäureeinheit der Guaningruppe mit beispielsweise einem Acylanhydrid herstellen. Dieses Verfähren ist vorteilhaft, weil das vollständig geschützte Zwischenprodukt frei von dem unerwünschten 7-Isomer kristallisiert werden kann. Aus diesem vollständig geschützten Zwischenprodukt kann das neue Monohydroxy-geschützte Ganciclovir als ein Säureadditionssalz isoliert werden. Diese vollständig geschützten Verbindungen sind neue Zwischenprodukte und sind jene Verbindungen der allgemeinen Formel IV, worin P¹ eine Amino- schutzgruppe darstellt, die Niederacyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt, Y¹ ein Halogen, Niederacyloxy oder eine gegebenenfalls substituierte Aralkyloxygruppe darstellt und Y² ein Niederacyloxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt, sodass die Acylgruppe von P¹ und Y² die gleichen sind. Ein bevorzugtes vollständig geschütztes Zwischenprodukt ist Dipropionylmonobenzylganciclovir oder Diacetylmonobenzylganciclovir.
Im Allgemeinen kann das Herstellungsverfahren der Verbindungen der Formel 7: den Schutz der Aminogruppe in der 2-Position der Guaninbase beinhalten oder nicht. Diese Schutzgruppen können vor der Bildung des Salzzwischenprodukts der Formel V, nach dem Veresterungsschritt oder im letzten Schutzgruppenentfernungsschritt entfernt werden. Für den Fall, wenn die Ganciclovirzwischenprodukte eine geschützte 2- Aminogruppe aufweisen, kann die Schutzgruppe durch herkömmliche Verfahren entfernt werden. Wenn die Aminoschutzgruppe beispielsweise eine Niederalkanoylgruppe darstellt, werden basische Bedingungen (pH zwischen 8 bis 11) angewendet, um die Schutzgruppe zu entfernen. Beispielsweise wird ein 2-N- Acetylganciclovir-Zwischenprodukt mit einem alkalischen Reagenz, wie Ammoniumhydroxid, Natrium- oder Kaliumcarbonat oder Natrium- oder Kaliumhydroxid, behandelt, bis die Entfernung der Acetylgruppe vollständig ist. Im Allgemeinen wird diese Reaktion in Gegenwart eines geeignetes Lösungsmittels, wie einem Niederalkanol, durchgeführt. Vorzugsweise wird das Ausgangsmaterial in Methanol gelöst und ein stöchiometrischer Überschuss an Ammoniumhydroxid dazugegeben. Die Reaktionstemperatur wird zwischen 0º und 50ºC, vorzugsweise bei Raumtemperatur, gehalten. Nachdem die Reaktion vollständig ist (was durch DC bestimmt werden kann), kann weiteres Lösungsmittel zum Erleichtern der Isolierung des von den Schutzgruppen befreiten Produkts zugegeben werden, wie Ethylether, was zur Ausfällung des entacylierten Produkts führt, welches abfiltriert und unter Verwendung herkömmlicher Trennverfahren isoliert werden kann.
Beim Ausführen eines erfindungsgemäßen Verfahrens müssen solche Amino-, Hydroxy- oder Carbonsäuregruppen, die nicht an der Synthesereaktion teilnehmen, im Allgemeinen geschützt werden bis (I) entweder die Schutzgruppenentfernung das Endprodukt ergibt oder (2) das Vorliegen der ungeschützten Gruppe in den nachfolgenden Reaktionsschritten, welche zum Endprodukt führen, nicht die beabsichtigte Reaktionsfolge modifizieren würde. Ein Beispiel für ein zutreffendes Erfordernis (1) ist die Benzyloxycarbonylgruppe bei der Herstellung des Endprodukts dieser Erfindung, welches die Aminogruppe der Valinfunktion von Ganciclovir schützt, bis sie in dem Schutzgruppenentfernungsschritt entfernt wird. Ein Beispiel für das Zutreffen des Erfordernisses (2) ist die Acetylgruppe oder die Trityl- oder Monomethoxytritylgruppe, welche die Aminogruppe des Guaninringsystems von Ganciclovir schützt, sodass die ungeschützte Aminogruppe nicht mit der Veresterung in Wechselwirkung tritt (Schritt III).
Im Allgemeinen schließen die Eigenschaften von starken Blockierungsmitteln, die sie zur Verwendung bei der Herstellung der Verbindung der Formel I geeignet machen, ein:
(I) Ihre Einführung sollte quantitativ und glatt ohne L-Valin-Racemisierung verlaufen;
(2) das blockierte Zwischenprodukt muss für die angewendeten Reaktionsbedingungen bis zum Entfernen der Schutzgruppe stabil sein, was gefordert wird;
(3) die Blockierungsgruppe muss unter Bedingungen, die nicht die chemische Natur des Rests des Moleküls verändern oder Racemisierung der L-Valin-Komponente ergeben, leicht entfernbar sein. Silylierung von Guanin
worin 21, 22 und 23 unabhängig Wasserstoff oder eine Silylschutzgruppe der Formel R&sup5;R&sup6;R&sup7;Si darstellen, worin R&sup5;, R&sup6; und R&sup7; unabhängig Niederalkyl darstellen, mit der Maßgabe; dass mindestens einer von. 21, 22 und 23 eine Silylgruppe darstellt.
Herstellung von silyliertem Guanin der Formel (IIa) Die Trialkylsilylhalogenide der Formel R&sup5;R&sup6;R&sup7;SiX (worin X Chlor oder Brom darstellt) oder Hexamethyldisilazan sind kommerziell erhältlich.
Wie in dem vorstehenden Reaktionsschema erläutert, wird Guanin silyliert unter Gewinnung der entsprechend silylierten Verbindung der Formel IIa.
Der Schutz von Guanin ist auf dem Fachgebiet gut bekannt (siehe beispielsweise "Synthesis of 9-substituted Guanines. A Review" von F. P. Clausen und J. J. Christensen, Org. Prep. Proced. Int., 25 (4), Seiten 375-401 (1993)). Guanin kann beispielsweise unter Verwendung von Acylgruppen, beispielsweise Acetyl- oder durch Silylgruppen, geschützt sein. Wenn traditionell Silylgruppen zum Schutz angewendet werden, wird Guanin in einer solchen Weise silyliert, dass alle aktiven Protonen, die in Guanin vorliegen, vor dem Ablauf der gewünschten Reaktion durch eine Silylgruppe ersetzt werden, d. h. Guanin wird als das Trisilylderivat geschützt. Jedoch wurde gefunden, dass, obwohl Trisilylierung von Guanin, gefolgt von der Kondensation von Schritt (a), das gewünschte Produkt in guter Ausbeute ergibt, und tatsächlich bevorzugt ist, es nicht wesentlich ist, dass Guanin für die Kondensation, die in Schritt (a) ausgeführt wird, trisilyliert ist, um für die Herstellung von Verbindung (IV) wesentlich spezifisch zu sein. Herkömmlicherweise wird Guanin als Aufschlämmung mit einem Silylierungsmittel, beispielsweise Hexamethyldisilazan, unter Rückfluss umgesetzt, bis das gesamte suspendierte Material in Lösung geht, was die vollständige Bildung des Trisilylderivats anzeigt. Diese Reaktion kann bis zu 48 Stunden oder mehr stattfinden. Es wurde gefunden, dass Erhitzen unter Rückfluss für viel weniger Zeit, beispielsweise nur 2 Stunden, dann Umsetzen der so erzeugten Aufschlämmung mit einer Verbindung der Formel (III), wie in Schritt (a) beschrieben, gute Ausbeuten des gewünschten Produkts ergibt. Dieses Ergebnis ist sehr vorteilhaft, da weniger Kosten in einer kürzeren Reaktionszeit einbezogen sind und kleinere Mengen Silylierungsmittel verwendet werden. Obwohl die Zusammensetzung einer Verbindung der Formel (IIa), erzeugt durch Umsetzen von Guanin mit Hexamethyldisilazan, aufgrund der Kürze noch nicht mit jeglicher Bestimmtheit bekannt ist, wird angenommen, dass es hauptsächlich ein Monosilylderivat ist, das wahrscheinlich mit etwas Disilyl- und Trisilylguanin vermischt wird.
In einem bevorzugten Verfahren wird Guanin mit etwa 3-10 Mol-Äquivalenten eines Silylierungsmittels, vorzugsweise mit Hexamethyldisilazan (d. h. um eine Verbindung der Formel (IIa) zu ergeben, worin R&sup5;, R&sup6; und R&sup7; alle Methyl darstellen), in Gegenwart eines Silylierungskatalysators, vorzugsweise Ammoniumsulfat, Trifluormethansulfonsäure, Trimethylsilyltrifluormethansulfonat oder Bistrimethylsilylsulfonat, besonders bevorzugt Trifluormethansulfonsäure (etwa 0,01 bis 0,1 Mol- Äquivalente), umgesetzt. Das Gemisch wird über einen Zeitraum von etwa 5 bis 24 Stunden, vorzugsweise etwa 16 Stunden, unter Rückfluss erhitzt. Wenn die Reaktion im Wesentlichen vollständig ist, wird überschüssiges Silylierungsmittel unter vermindertem Druck entfernt und die erhaltene Lösung des geschützten Guaninprodukts der Formel (IIa) wird im nächsten Schritt ohne weitere Reinigung verwendet.
Alternativ wird Guanin mit einem Silylierungsmittel, vorzugsweise Hexamethyldisilazan, in Gegenwart eines Silylierungskatalysators, vorzugsweise Trifluormethansulfonsäure, wie in dem vorangehenden Absatz beschrieben, jedoch für einen Zeitraum von etwa 1-8 Stunden, vorzugsweise 2-4 Stunden, umgesetzt. Gegebenenfalls wird überschüssiges Silylierungsmittel unter vermindertem Druck entfernt und das erhaltene Gemisch des geschützten Guaninprodukts der Formel (IIa) wird im nächsten Schritt ohne weitere Reinigung verwendet.
Alternativ kann Guanin mit 1-5 Mol-Äquivalenten eines Trialkylsilylhalogenids der Formel SiR&sup5;R&sup6;R&sup7;X, worin R&sup5;, R&sup6; und R&sup7; unabhängig Niederalkyl darstellen und X Chlor oder Brom darstellt, wie Trimethylsilylchlorid, tert-Butyldimethylsilylchlorid und dergleichen, in Gegenwart von etwa 1-5 Mol- Äquivalenten einer Base umgesetzt werden.
Es sollte angemerkt werden, dass Ammoniumsulfat, Trifluormethansulfonsäure, Trimethylsilyltrifluormethansulfonat oder Bistrimethylsilylsulfonat gut als Silylierungskatalysatoren bei der Silylierung von vorstehend beschriebenem Guanin dienen. Die Verwendung von Trifluormethansulfonsäure ist jedoch bevorzugt, weil sie viel kostengünstiger als Trimethylsilyltrifluormethansulfonat oder Bistrimethylsilylsulfonat ist.

Ausgangsmaterialien

Alle Ausgangsmaterialien, die zum Herstellen der Verbindung der Formel I angewendet werden, sind bekannt, wie Guanin und die schützenden und Carbonsäuregruppen-aktivierenden Reagenzien.
Die Glycerinderivate der Formel III, die in der Kondensationsreaktion mit Guanin oder einer geschützten Guaninverbindung verwendet werden, werden in der ebenfalls anhängigen europäischen Patentanmeldung Veröffentlichungs-Nr. 694547 und in der europäischen Patentveröffentlichung 187297 beschrieben. Die europäische Patentveröffentlichung 187297 beschreibt ebenfalls bestimmte Verfahren zum Herstellen von Glycerinderivaten der Formel III. Ein bevorzugtes Verfahren zum Herstellen der Glycerinderivate wird nachstehend im Abschnitt "Herstellung von Glycerinderivaten" beschrieben.
Ein bevorzugtes Guaninausgangsmaterial ist das ungeschützte Guanin und bevorzugte Glycerinderivate sind 1-Propionyloxy-2-propionyloxymethoxy-3-benzyloxypropan, 1-Acetoxy- 2-acetoxymethoxy-3-benzyloxypropan oder 1-Benzyloxy-2-acetyloxymethoxy-3-benzyloxypropan.
Vor dem Ausführen von Schritt II (Veresterungsschritt) muss die Aminogruppe des L-Valinderivats geschützt werden, um seine Wechselwirkung mit der Veresterung durch unerwünschte Amidbildung zu vermeiden. Die verschiedenen Amino- geschützten L-Valinderivate, die in dieser Erfindung verwendbar sind, wie N-Benzylcxycarbonyl-L-valin, BOC-L-valin und FMOC-L-valin, N-Formyl-L-valin und N-Benzyloxycarbonyl-N- carboxy-L-valinanhydrid, sind kommerziell erhältlich (SNPE Inc., Princeton, NJ, Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI und Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) oder sind in der Literatur beschrieben, wie N-Allyloxycarbonyl-L-valin. Cyclische Amino- geschützte L-Valinderivate sind auch in der Literatur, wie vorstehend angemerkt, beschrieben. Von besonderem Interesse für die vorliegende Erfindung ist das Benzyloxycarbonylvalinsubstituierte 2-Oxa-4-azacycloalkan-1,3-dion (Z-Valin-N-carboxyanhydrid oder Z-Valin-NCA), das auch kommerziell erhältlich ist (SNPE Inc., Princeton, NJ). Alternativ kann der Schutzschritt durch herkömmliche Verfahren ausgeführt werden.

Herstellung von Glycerinderivaten der Formel III:

Die in dieser Erfindung verwendbaren Glycerinderivate können aus bekannten Ausgangsmaterialien hergestellt werden. Beispielsweise können die Verbindungen der Formel III, worin Y¹ Niederaralkyloxy oder Halogen darstellt, Y² Niederacyloxy oder Halogen darstellt und Z Niederacyloxy darstellt, wie nachstehend beschrieben hergestellt werden. Diese Reaktion wird beispielhaft durch die Herstellung der Verbindungen, worin Y¹ Benzyloxy darstellt, Y² Propionyloxy darstellt und Z Propionyloxy, d. h. 1-Benzyloxy-3-propionyloxy-2-(propionyloxy)methoxypropan, darstellt, angegeben.
Epichlorhydrin wird mit Benzylalkohol in Gegenwart von Tetrabutylammoniumbisulfat in wässrigem Natriumhydroxid bei Raumtemperatur umgesetzt. Das Produkt dieser Reaktion, Benzylglycidylether, wird durch herkömmliche Mittel isoliert und wird anschließend langsam zu einer Suspension von Lithiumchlorid in Tetrahydrofuran und Essigsäure bei 40º-70ºC, vorzugsweise unter 60ºC, zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird auf Raumtemperatur abkühlen lassen und 2-10 Stunden, vorzugsweise 3-6 Stunden, gerührt. Das Produkt wird durch Extraktion isoliert, gewaschen und getrocknet unter Bereitstellung von 1-Benzyloxy-3-chlor-2-propanol. Zu diesem Produkt wird dann Propionsäuremethoxymethylester gegeben, welcher durch Zugeben von Propionsäureanhydrid zu Dimethoxymethan in Gegenwart von Ionenaustauscherharz, beispielsweise Amberlyst 15, Halten der Reaktion zwischen 40º-60ºC, vorzugsweise zwischen 40ºC-50ºC während der Zugabe, hergestellt wird. Das Reaktionsgemisch wird gealtert und gekühlt, dann filtriert, gewaschen und destilliert. Dieses Produkt, Propionsäuremethoxymethylester, wird mit 1-Benzyloxy-3-chlor-2-propanol in einem aprotischen Lösungsmittel, beispielsvaeise Hexanen, in Gegenwart von p- Toluolsulfonsäurehydrat unter Rückfluss umgesetzt. Die Destillation und das Waschen liefert das Produkt, 1-Benzyloxy-3- chlor-2-(propionyloxy)methoxypropan. Schließlich, um die Verbindungen der Formel III herzustellen, wird 1-Benzyloxy-3- chlor-2-(propionyloxy)methoxypropan mit Natriumpropionat in einem aprotischen Lösungsmittel, beispielsweise Toluol, unter Rückfluss erhitzt, wonach Tetrabutylphosphoniumchlorid zugegeben wird. Das Reaktionsgemisch wird bei 90ºC für 1-3 Tage, vorzugsweise 2 Tage, unter der Rückflusstemperatur gerührt, währenddessen weiteres Tetrabutylphosphoniumchlorid und Lösungsmittel zugegeben wurden. Das Gemisch wurde unter Rückfluss erhitzt und das Destillat entfernt, dann bei 90ºC bis zur Rückflusstemperatur 3-16 Stunden, vorzugsweise 5-10 Stunden, gerührt, dann auf Umgebungstemperatur gekühlt. Das Gemisch wird dann mit Wasser und Salzlösung gewaschen und die organische Phase wird abgetrennt und aufkonzentriert unter Gewinnung von 1-Benzyloxy-3-propionyloxy-2-(propionyloxy)- methoxypropan. In analoger Weise können andere Glycerinderivate der Formel III hergestellt werden.

Herstellung von aktiviertem Derivat von L-Valin:

Vor dem Ausführen von Schritt II (Veresterungsschritt) muss L-Valin ebenfalls aktiviert werden. Mindestens 1 Äquivalent der geschützten Aminosäure und 1 Äquivalent eines geeigneten Kupplungsmittels oder Dehydratisierungsmittels, beispielsweise 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid oder Salze von solchen Diimiden mit basischen Gruppen, sollten für den Beginn angewendet werden. Andere Carbodiimide, wie N,N'- Carbonyldiimidazol, können auch verwendet werden. Weitere verwendbare Dehydratisierungsmittel sind Trifluoressigsäureanhydrid, gemischte Anhydride, Säurechloride, 1-Benzotriazolyloxy-tris(dimethylamino)phosphoniumhexafluorophosphat, Benzotriazol-1-yl-oxy-trispyrrolidinophosphoniumhexafluorophosphat, 1-Hydroxybenzotriazol, 1-Hydroxy-4-azabenzotriazol, 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol, N-Ethyl-N'-(3-(dimethylaminoypropyl)carbodiimidhydrochlorid, 3-Hydroxy-3,4-dihydro-4-oxo- 1,2,3-benzotriazin, O-(Benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumhexafluorophosphat, O-(7-Azabenzotriazol-1-yl) 1,1,3,3-tetramethyluroniumhexafluorophosphat, O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluoroborat, O- (1H-Benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-bis(tetramethylen)uroniumhexafluorophosphat oder O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-bis- (tetramethylen)uroniumhexafluorophosphat. Eine Beschreibung von diesen Kupplungsmitteln von L. A. Carpino kann in J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, S. 4397-4398 gefunden werden.
Ebenfalls für diesen Zweck verwendbar sind Urethangeschützte Aminosäure-N-carboxyanhydride (UNCA), welche eine aktivierte Form von Aminosäure darstellen; diese wurden von William D. Fuller et al., J. Am. Chem. Soc. 1990, 112, 7414- 7416, welche hierin durch Hinweis einbezogen sind, beschrieben. Andere geschützte Aminosäure-N-carboxyanhydride werden in der PCT-Patentanmeldung WO 94/29311, vorstehend erörtert, beschrieben. Zusammengefasst kann beliebiges anderes Reagenz, das ein Anhydrid oder weiteres aktiviertes Derivat der geschützten Aminosäure unter milden Bedingungen erzeugt, als das Kupplungsmittel verwendet werden.
Die Amino-geschützte Aminosäure wird in einem inerten Lösungsmittel, wie einem halogenierten Niederalkan, vorzugsweise Dichlormethan, unter einer Inertatmosphäre, beispielsweise Stickstoff, gelöst und das Kupplungsmittel wird zugegeben (vorzugsweise 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid). Das Reaktionsgemisch wird bei Temperaturen zwischen 0º und 50ºC, vorzugsweise bei etwa Raumtemperatur, gerührt. Das Reaktionsgemisch wird filtriert und das Reaktionsprodukt (das Anhydrid der geschützten Aminosäure) isoliert. Das erhaltene Produkt wird in einem trockenen Inertlösungsmittel, wie trockenem Dichlormethan, gelöst und unter Stickstoff gesetzt.

Herstellung von Mono-L-valinganciclovir

Schritt I:

Die Reaktionsbedingungen für die Kondensation von Guanin mit der 2-Aminogruppe, die gegebenenfalls geschützt ist, werden in der europäischen Patentveröffentlichung 187297 beschrieben. In dieser Kondensationsreaktion wird Guanin mit einem Glycerinderivat der Formel (III) in einem aprotischen Kohlenwasserstofflösungsmittel (wie Benzol oder Toluol oder Xylolen) oder Dimethylformamid mit einem Hexaniederalkyl- (di)silazan, beispielsweise Hexamethyldisilazan, Hexaethyldisilazan oder dergleichen, und einem Katalysator bei Temperaturen zwischen 30ºC und der Rückflusstemperatur umgesetzt. Der Katalysator ist ein Lewis-Säure-Salz, wie Trialkylsilylsalz (wie das Sulfat) oder eine Trifluoralkylsulfonsäure, ein Chlorsilan oder Ammoniumsulfat und Pyridin. Für eine genauere Offenbarung der Reaktionsbedingungen von Kondensationsschritt I siehe die Offenbarung der europäischen Patentveröffentlichung 187297, die hierin durch Hinweis einbezogen ist. Die erhaltene Verbindung ist ein Ganciclovirderivat mit geschützten Hydroxygruppen und mit einer gegebenenfalls geschützten 2-Aminogruppe.
Beispielsweise kann ein Ganciclovirzwischenprodukt der Formel IV, worin Y¹ Niederacyloxy darstellt und Y² Benzyloxy darstellt, durch Kondensieren von Persilylguanin mit einem Glycerinderivat der Formel III, worin Y¹ und Z Niederacyloxy darstellen und Y² Benzyloxy darstellt, hergestellt werden. Typischerweise wird Persilylguanin mit einem großen Überschuss eines Glycerinderivats der Formel III in Gegenwart einer katalytischen Menge eines Lewis-Säure-Salzes, vorzugsweise Trifluormethansulfonsäure, bei 60º-150ºC, vorzugsweise 110º-130ºC, für 3-24 Stunden, vorzugsweise 6-8 Stunden, behandelt. Das Gemisch wird gekühlt, mit einem aprotischen nicht polaren Lösungsmittel, vorzugsweise Toluol, verdünnt und dann wird vorsichtig Wasser zugegeben. Das Produkt kann gegebenenfalls durch Filtration isoliert werden.

Schritt II:

Das geschützte Ganciclovirderivat von Schritt I wird teilweise von den Schutzgruppen befreit, um Ganciclovir mit der 2-Aminogruppe, gegebenenfalls in geschützter Form, und einer geschützten primären Hydroxylfunktion bereitzustellen. Vorzugsweise wird die primäre Hydroxylfunktion mit einer Benzylgruppe geschützt. Geeignete Aminoschutzgruppen sind Niederalkanoylgruppen mit 2-4 Kohlenstoffatomen, insbesondere die Acetyl- oder Propionylgruppe. Andere geeignete Amino- schutzgruppen sind die Trityl- oder substituierte Tritylgruppen, wie die Monomethoxytritylgruppe und die 4,4'-Dimethoxytritylgruppe.
Wie vorstehend ausgewiesen, kann das Säureadditionssalz der Verbindung der Formel V direkt aus dem Produkt von Schritt I hergestellt werden, welche die Dihydroxy-geschützte Verbindung der Formel IV darstellt, durch Schutzgruppenentfernung von einer der Hydroxyeinheiten unter gleichzeitiger Herstellung des Salzes. Alternativ kann die Verbindung der Formel IV zuerst an einer der Hydroxyeinheiten von den Schutzgruppen befreit werden, um das Monohydroxy-geschützte Ganciclovir herzustellen, aus dem das Säureadditionssalz anschließend hergestellt wird. Auch aus der Verbindung der Formel IV kann zuerst das Zwischenprodukt unter Schutz der beiden Hydroxyeinheiten sowie an der 2-Aminoguaningruppe zuerst mit beispielsweise einem Acylanhydrid hergestellt werden. Aus diesem Zwischenprodukt kann das neue Monohydroxy-geschützte Ganciclovir als ein Säureadditionssalz (Formel V) hergestellt werden. Beispielsweise wird das Dipropionylmonobenzylganciclovirzwischenprodukt aus dem Propionylmonobenzylganciclovirzwischenprodukt der Formel IV durch Reaktion mit Propionsäureanhydrid/Dimethylaminopyridin in beispielsweise Toluol hergestellt. Wie vorstehend erörtert, ist das Ganciclovirzwischenprodukt, das an beiden Hydroxyeinheiten und einer 2- Aminoguaningruppe geschützt ist, wie Dipropionylmonobenzylganciclovir, ein bevorzugtes Zwischenprodukt, weil es im Wesentlichen frei von dem ungewünschten 7-Isomer an Guanin isoliert werden kann.
Wenn sowohl Y¹ als auch Y² beide Aralkyloxy, beispielsweise Benzyloxy, darstellen, dann tritt Schutzgruppenentfernung durch Hydrogenolyse unter herkömmlichen Hydrierungsbedingungen auf; wenn eine der Gruppen Y¹ oder Y² Acyloxy oder Halogen darstellt, wird die Gruppe selektiv durch basische Hydrolyse entfernt.
Übertragungshydrie rungsbedingungen können auch angewendet werden: ein Palladiumkatalysator, wie Palladiumhydroxid, wird in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Cyclohexen, verwendet. Ein Co-Lösungsmittel, wie Ethanol oder Isopropanol, kann zur besseren Löslichkeit des Addukts notwendig sein.
Hydrogenolyse wird vorzugsweise durch Auflösen des geschützten Ganciclovirs in einem Lösungsmittelsystem unter herkömmlichen Hydrierungsbedingungen bei erhöhtem Druck von 5-100 psi (0,35-7 atm), vorzugsweise 10-40 psi (0,7-2,8 atm) Wasserstoff in Gegenwart eines Katalysators, wie einer Palladiumverbindung, insbesondere Palladiumhydroxid-auf-Kohlenstoff (Pearlman-Katalysator) bei etwa 20º-60ºC, vorzugsweise 20º-35ºC, bis zur Vollständigkeit der Reaktion ausgeführt. Andere geeignete Hydrierungskatalysatoren schließen im Allgemeinen Hydrierungskatalysatoren, wie Pd, Pd-auf-Kohlenstoff und homogene Hydrierungskatalysatoren, ein. Das Lösungsmittelsystem schließt einen Niederalkanol, wie Methanol oder Ethanol, ein. Im Allgemeinen wird die Reaktion bei Temperaturen zwischen Raumtemperatur und der Rückflusstemperatur des Lösungsmittelsystems, beispielsweise in unter Rückfluss erhitztem Ethanol, unter einer Wasserstoffatmosphäre und unter Ausschluss von Luft ausgeführt. Das Reaktionsgefäß wird vorzugsweise mit Stickstoff gespült, vor Beschicken desselben mit Wasserstoff. Der Katalysator wird durch Filtration gewonnen. Das Filtrat wird im Volumen durch Verdampfen von überschüssigem Lösungsmittel vermindert. Das erhaltene rohe Reaktionsgemisch schließt im Allgemeinen unverändertes Ausgangsmaterial und 2-Amino-geschütztes Ganciclovir mit einer geschützten aliphatischen Hydroxygruppe als die Hauptprodukte ein. Die Trennung dieser zwei Produkte wird gewöhnlich durch Isolierung mit auf dem Fachgebiet bekannten Verfahren, häufig durch chromatographische Verfahren, vorzugsweise an Kieselgel, gefolgt durch Elution mit geeigneten Elutionsmitteln, wie Gemischen eines Niederalkanols mit einem halogenierten Niederalkan (vorzugsweise Ethanol und Dichlormethan), durchgeführt, um 2-Amino-geschütztes Ganciclovir mit einer geschützten aliphatischen Hydroxygruppe zu ergeben. Dieses Ganciclovirzwischenprodukt kann dann als die Salzverbindung der Formel V durch herkömmliche Verfahren unter Anwenden von beispielsweise Chlorwasserstoff und einem Lösungsmittel, wie Methanol, isoliert werden.
Die Hydrolysereaktion zum Entfernen einer Acylhydroxy-geschützten Gruppe wird vorzugsweise durch Behandeln des geschützten Ganciclovirs unter basischen Hydrolysebedingungen ausgeführt. Das Hydrolysemedium kann einen Niederalkylalkohol, wie Methanol oder Ethanol, Toluol und wässriges Natriumhydroxid einschließen. Im. Allgemeinen wird die Reaktion bei Temperaturen zwischen Raumtemperatur und der Rückflusstemperatur des Lösungsmittelsystems ausgeführt. Wiederum können dieses Ganciclovirzwischenprodukt als die Salzverbindung der vorstehend beschriebenen Formel V isoliert werden.
Beispielsweise kann das in Schritt I erhaltene Produkt teilweise durch Entfernen der Niederacylgruppe (von der Gruppe Y¹) mit einer Base von den Schutzgruppen befreit werden. Nachdem die in Schritt I beschriebene Reaktion vollständig ist und das Reaktionsgemisch gekühlt und mit vorzugsweise Methanol verdünnt wird, wird wässriges Natriumhydroxid zugegeben. Das Gemisch wird auf 40º-90ºC, vorzugsweise 60º-80ºC, bis die Reaktion vollständig ist, erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird dann vorsichtig mit Salzsäure angesäuert. Das Produkt wird als das Hydrochlorid durch Filtration gesammelt, dann gewaschen und getrocknet.

Schritt III:

In diesem Schritt wird ein aktiviertes Derivat von Amino-geschütztem L-Valin der Formel VI oder VIa mit dem in Schritt II erhaltenen Monohydroxy-geschützten Ganciclovirsalzderivat der Formel. V verestert. Geeignete Amino- schützende Gruppen für das L-Valinderivat sind die N-Benzyloxycarbonylgruppe, die Phthalylgruppe, die tertiär-Butyloxycarbonylgruppe und die N-(9-Fluorenylmethoxycarbonyl) - oder "FMOC"-Gruppe.
Eine Suspension des Produkts von Schritt II (die Verbindung der Formel VI) in einem aprotischen Lösungsmittel (vorzugsweise Dimethylformamid), enthaltend eine organische Base (vorzugsweise TEA), wird zu einer ungefähren Äquivalentmenge des aktivierten L-Valinderivats in einem aprotischen Lösungsmittel (vorzugsweise Dimethylformamid) gegeben. Das aktivierte N-Valinderivat ist vorzugsweise Z-Valin-N-carboxyanhydrid oder L-Valinanhydrid. Das Reaktionsgemisch wird bei 0º-40ºC, vorzugsweise bei 4º-10ºC, für 1 bis 5 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser, vorzugsweise Toluol und Wasser, verdünnt. Der Niederschlag wird durch Filtration gesammelt, gewaschen und bei Umgebungstemperatur getrocknet.

Schritt IV (Endschutzgruppenentfernung unter Gewinnung des Produkts der Formel I):

Die Valin-schützenden Gruppen des Produkts von Schritt III, die Hydroxyschutzgruppe Y² und gegebenenfalls beliebige 2-Aminoguanin-schützende Gruppen werden durch Schutzgruppenentfernungsreaktionen, vorzugsweise in einem sauren Medium oder Lösungsmittel, besonders bevorzugt durch Hydrierung, entfernt. Die Schutzgruppenentfernung unter sauren Bedingungen ist bevorzugt, weil diese gewährleistet, dass die Aminogruppe, die bei der Schutzgruppenentfernungsreaktion befreit wird, protoniert wird, d. h., dass die Base der Formel I, wie sie in der Schutzgruppenentfernungsreaktion gebildet wird, durch mindestens eine stöchiometrische Menge an vorliegender Säure eingefangen wird. Das Isolieren der Verbindung der Formel I als ein Säureadditionssalz wird die gewünschte Stereokonfiguration der Verbindung der Formel I schützen. Deshalb zeigen jene nachstehend angegebenen Beispiele, die den Schutzgruppenentfernungsschritt zeigen, auch den gleichzeitigen Salzbildungsschritt.
Die Schutzgruppenentfernungsreaktion wird durch Auflösen des Produkts des Veresterungsschritts in einem inerten Lösungsmittel, vorzugsweise in einem sauren Lösungsmittel, unter Verwendung eines Hydrierungskatalysators, wie Palladium-auf-Kohlenstoff oder Palladiumhydroxid-auf-Kohlenstoff (Pearlman-Katalysator), unter Verwendung von erhöhtem Wasserstoffdruck zwischen 1 und 2000 psi (0,07-140 atm), vorzugsweise 20 bis 200 psi (1,4-14 atm) ausgeführt. Die Vollständigkeit der Reaktion kann unter Verwendung von herkömmlicher DC-Analyse verfolgt werden. Die Hydrogenolyse wird fortgesetzt, bis die Umwandlung vollständig ist, falls erforderlich, unter Zugabe von weiterem Hydrierungskatalysator. Der Katalysator wird entfernt und gewaschen. Die vereinigten Filtrate aus der Filtration und die Waschlaugen werden aufkonzentriert und lyophilisiert, um Ganciclovir-L-valinester zu isolieren. Die Reinigung des Produkts und die Isolierung eines kristallinen Esters wird durch Umkristallisation oder andere Reinigungstechniken, wie flüssigchromatographische Techniken, ausgeführt.
Die Hydrogenolyse kann sich aufgrund des Vorliegens von Verunreinigungen (Katalysatorgifte) in dem Ausgangsmaterial verlangsamen. Es wurde als vorteilhaft gefunden, das Ausgangsmaterial für die Hydrogenolyse in Methanol mit Filterhilfen, die kommerziell erhältlich sind, wie katalytisches Filtrol® (stark saurer aktivierter Ton), Solka Floc® (vermahlene Zellulose) und Aktivkohle, wie ADP-Kohlenstoff, zu behandeln. Dies entfernt wirksam die meisten Katalysatorgifte.
Wenn die tertiäre Butyloxycarbonylgruppe als Amino- schutzgruppe verwendet wird, wird ihre Entfernung mit Säure, wie HCl, und Isopropanol als ein Lösungsmittel oder mit reiner Trifluoressigsäure bewirkt.
Wenn alternativ der Veresterungsschritt mit einem Trityl- oder substituierten Trityl-geschützten Ganciclovirderivat ausgeführt wird, können solche Schutzgruppen durch Behandlung mit einer wässrigen Alkansäure oder Trifluoressigsäure oder Salzsäure bei. Temperaturen zwischen -20ºC und 100ºC, beispielsweise wässrige Essigsäure, entfernt werden.

Herstellung von Salzen

Der Durchschnittsfachmann wird auch erkennen, dass die Verbindung der Formel I entweder als ein Säureadditionssalz oder als die entsprechende freie Base hergestellt werden kann. Wenn als ein Säureadditionssalz hergestellt, kann die Verbindung durch Behandlung mit einer geeigneten Base, wie einer Ammoniumhydroxidlösung, Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid oder dergleichen, zu der freien Base umgewandelt werden. Jedoch ist es wichtig anzumerken, dass die freie Base der Formel I schwieriger zu charakterisieren ist als ihre Säureadditionssalze. Beim Umwandeln der freien Base zu einem Säureadditionssalz wird die Verbindung mit einer geeigneten organischen oder anorganischen. Säure (vorher beschrieben) umgesetzt. Diese Reaktionen werden durch Behandlung mit einer mindestens stöchiometrischen Menge einer geeigneten Säure (im Fall der Herstellung eines Säureadditionssalzes) oder Base (im Fall der Freisetzung der freien Verbindung der Formel I) bewirkt. In dem Salzbildungsschritt dieser Erfindung wird die freie Base typischerweise in einem polaren Lösungsmittel, wie Wasser oder einem Niederalkanol (vorzugsweise Isopropanol) und Gemischen davon, gelöst und die Säure wird in der erforderlichen Menge in Wasser oder in Niederalkanol zugegeben. Die Reaktionstemperatur wird gewöhnlich bei etwa 0 bis 50ºC, vorzugsweise etwa bei Raumtemperatur, gehalten. Das entsprechende Salz fällt spontan aus oder kann aus der Lösung durch die Zugabe eines weniger polaren Lösungsmittels, Entfernung des Lösungsmittels durch Verdampfen oder in einem Vakuum oder durch Kühlen der Lösung aus der Lösung gebracht werden.
Isolierung von Stereoisomeren und die Herstellung von kristallinem 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxopurin-9-yl)methoxy- 3-hydroxy-1-propyl-L-valinat
Aus der Formel (I:) wird deutlich, dass die erfindungsgemäße Verbindung ein asymmetrisches Kohlenstoffatom (chirales Zentrum) in der Propylkette zusätzlich zu dem asymmetrischen Kohlenstoffatom in L-Valin aufweist. Deshalb liegen zwei diastereomere Formen, die (R)- und (S)-Form, wie durch die Regeln von Cahn et al. bestimmt, vor. Geeignete Verfahren zur Trennung der Diastereomeren werden in der europäischen Patentanmeldung Veröffentlichungs-Nr. 694547, die hierin durch Hinweis einbezogen ist, beschrieben.
Die Verbindungen der Formel (I) können auch in kristalliner Form hergestellt werden, die viele gut bekannte Vorteile gegenüber der nicht kristallinen Form aufweist. Geeignete Herstellungsverfahren für die erfindungsgemäßen Verbindungen in kristalliner Form werden auch in der US- Patentanmeldung Serien-Nr. 281893, die hierin durch Hinweis einbezogen ist, beschrieben.
Die nachstehenden Herstellungen und Beispiele werden angegeben, um dem Fachmann zu ermöglichen, sie deutlicher zu verstehen und die vorliegende Erfindung auszuführen. Sie sollten nicht als Begrenzung des Umfangs der Erfindung aufgefasst werden, sondern nur als erläuternd und repräsentativ dafür.

BEISPIEL 1

1A. Herstellung von 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxopurin-9-yl)- methoxy-3-benzyloxypropyl--1-propionat

Trifluormethansulfonsäure (0,5 ml) wurde zu Guanin (25 g) gegeben und das Gemisch wurde kurz gerührt. Hexamethyldisilazan (HMDS) (125 ml) wurde zugegeben und das Gemisch unter Rückfluss erhitzt, bis Lösung erreicht wurde. Die Lösung wurde unter Vakuum destilliert, um überschüssiges HMDS zu entfernen. Der Rückstand wurde gekühlt und weitere Trifluormethansulfonsäure (0,4 ml) wurde zugegeben, gefolgt von 1- Propionyloxy-2-propionyloxymethoxy-3-benzyloxypropan (70 g). Das Gemisch wurde für einige Stunden auf 110º-130ºC erhitzt, bis wenig oder kein Guanin durch HPLC nachgewiesen wurde. Das Gemisch wurde gekühlt und mit Toluol (150 ml) und Methanol (21 ml) verdünnt. Wasser (20 ml) wurde vorsichtig zugegeben und das Gemisch wurde dann abgekühlt. Propionylmonobenzylganciclovir (29 g) wurde durch Filtration gesammelt, mit Toluol und Wasser gewaschen und getrocknet.

1B. Herstellung von 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxopurin-9-yl)- methoxy-3-benzyloxypropyl-1-acetat

Trifluormethansulfonsäure (0,5 ml) wurde zu Guanin (25 g) gegeben und das Gemisch wurde kurz gerührt. Hexamethyldisilazan (HMDS) (125 ml) wurde zugegeben und das Gemisch unter Rückfluss erhitzt, bis Lösung erreicht wurde. Die Lösung wurde unter Vakuum destilliert, um überschüssiges HMDS zu entfernen. Der Rückstand wurde gekühlt und weitere Trifluormethansulfonsäure (0,4 ml) wurde zugegeben, gefolgt von 1- Acetoxy-2-acetoxymethoxy-3-benzyloxypropan (65 g). Das Gemisch wurde für einige Stunden auf 110º-130ºC erhitzt, bis wenig oder kein Guanin durch HPLC nachgewiesen wurde. Das Gemisch wurde abgekühlt und mit Toluol (75 ml) verdünnt. Wasser (25 ml) wurde vorsichtig zugegeben und das Gemisch wurde dann abgekühlt. Acetylmonobenzylganciclovir (38 g) wurde durch Filtration gesammelt, mit Toluol und Wasser gewaschen und getrocknet.

1C. Herstellung von 2-(2-Acetyl-amino-1,6-dihydro-6-oxopurin- 9-yl)-methoxy-1,3-dibenzyloxypropan

In vollständig analoger Weise zu jener, beschrieben in Beispielen 1A und 1B, wurde 2-(2-Acetyl-amino-1,6-dihydro- 6-oxopurin-9-yl)methoxy-1,3-dibenzyloxypropan unter Verwendung von 1-Benzyloxy-2-acetyloxymethoxy-3-benzyloxypropan als Glycerinreagenz und 2-N-Acetylguanin hergestellt.

BEISPIEL 2

Herstellung von 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxopurin-9-yl)methoxy-3-benzyloxypropan-1-olhydrochlorid

2A. Die Herstellung des monogeschützten Ganciclovirzwischenprodukts als ein Salz (die Verbindung der Formel V) wurde direkt aus dem Produkt von Beispiel 1A wie nachstehend hergestellt:
Monobenzylganciclovirhydrochlorid wurde als das Produkt des in Beispiel 1A beschriebenen Verfahrens unter Verwendung der nachstehenden. Modifizierung isoliert. Anschließend war die Reaktion vollständig und wurde gekühlt und mit Methanol (250 ml) verdünnt, NaOH (23 g) wurde zugegeben. Das Gemisch wurde unter gutem Rühren erhitzt. Wenn die Hydrolyse als vollständig eingeschätzt wurde (HPLC, DC), wurde das Gemisch gekühlt und konz. Salzsäure (45,2 g) zugegeben. Das Gemisch wurde filtriert und das Filtrat mit Essigsäureethylester (240 ml) verdünnt. Das Gemisch wurde gekühlt und das Produkt gesammelt, mit Essigsäureethylester gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 30,0 g.
2B. Ähnlich wurde Monobenzylganciclovirhydrochlorid aus Acetylmonobenzylganciclovir (das Produkt von Beispiel 1B) durch Erhitzen eines Gemisches von Natriumhydroxid (10,0 g), Methanol (150 ml) und Acetylmonobenzylganciclovir (49 g), bis die Reaktion vollständig war, hergestellt. Die Lösung wurde mit Salzsäure (31 g) angesäuert und das Gemisch wurde filtriert. Das Filtrat wurde mit Essigsäureethylester (750 ml) verdünnt und gekühlt. Das Produkt wurde durch Filtration gesammelt, mit Essigsäureethylester gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 47 g.

BEISPIEL 3

3A. Die Herstellung von dem monogeschützten Ganciclovirzwischenprodukt als ein Salz (die Verbindung der Formel V) würde auch über das Nichtsalzzwischenprodukt (2-(2-Amino-1,6- dihydro-6-oxopurin-9-yl)methoxy-3-benzyloxypropan-1-ol oder Monobenzylganciclovir wie nachstehend hergestellt:
Monobenzylganciclovir wurde als das Produkt des in Beispiel 1A beschriebenen Verfahrens unter Verwendung der nachstehenden Modifizierung isoliert. Nachdem die Reaktion vollständig war und gekühlt und mit Toluol (25 ml) verdünnt wurde, wurde eine Lösung von NaOH (25 g) in Wasser (125 ml) zugegeben. Das Gemisch wurde unter gutem Rühren erhitzt. Wenn die Hydrolyse als vollständig eingeschätzt wurde (HPLC, DC), wurde die untere wässrige Schicht langsam zu einem heißen Gemisch von Aceton (125 ml), Essigsäure (25 g) und Wasser (25 ml) unter gutem Rühren gegeben. Das Gemisch wurde gekühlt und Monobenzylganciclovir durch Filtration isoliert, mit wässrigem Aceton gewaschen und getrocknet.
Nun wurde Monobenzylganciclovirhydrochlorid aus Monobenzylganciclovir (17 g) durch Vermischen mit konz. Salzsäure (5 ml) und Methanol (80 ml) und unter Erwärmen, bis sich alle Feststoffe lösen, hergestellt. Die Lösung wurde mit Essigsäureethylester (160 ml) verdünnt und gekühlt. Das Produkt wurde durch Filtration gesammelt, mit Essigsäureethylester gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 18,1 g.
Während ein bevorzugtes Lösungsmittel zum Herstellen von Monobenzylganciclovirhydrochlorid, aus dem Monobenzylganciclovir hergestellt werden kann, Methanol ist, können andere Lösungsmittel in einer analogen Weise verwendet werden. Solche Lösungsmittel schließen Isopropanol, Ethanol und Butanol ein.
3B. Alternativ wurden Monobenzylganciclovir und Monobenzylganciclovirhydrochlorid aus dem Produkt von Beispiel 1B wie nachstehend hergestellt:
Monobenzylganciclovir wurde als das Produkt des in Beispiel 1B beschriebenen Verfahrens unter Verwendung der nachstehenden Modifizierung isoliert. Nachdem die Reaktion vollständig war und gekühlt und mit Toluol (25 ml) verdünnt wurde, wurde eine Lösung von NaOH (25 g) in Wasser (125 ml) zugegeben. Das Gemisch wurde unter gutem Rühren erhitzt. Wenn die Hydrolyse als vollständig eingeschätzt wurde (HPLC, DC), wurde die untere wässrige Schicht langsam zu einem heißen Gemisch von Aceton (125 ml), Essigsäure (25 g) und Wasser (25 ml) unter gutem Rühren gegeben. Das Gemisch wurde gekühlt und Monobenzylganciclovir durch Filtration isoliert, mit wässrigem Aceton gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 41 g.
Monobenzylganciclovir-HCl wurde dann aus Monobenzylganciclovir in einer ähnlichen Weise zu jener, vorstehend in Beispiel 3A beschrieben, hergestellt.
3C. Alternativ wurden Monobenzylganciclovir und Monobenzylganciclovirhydrochlorid aus dem Produkt von Beispiel 1C wie nachstehend hergestellt. In diesem Beispiel ist das Produkt von Beispiel 1C ein 2-Amino-geschütztes Dibenzylganciclovirzwischenprodukt der Formel IV:
Zuerst wurde N-Acetyldibenzylganciclovir zu N-Acetylmonobenzylganciclovir umgewandelt. N-Acyldibenzylganciclovir (14,5 kg) wurde in einen 200-1-Glasreaktor zusammen mit 60,1 kg Methanol und 900 g Pearlman-Katalysator gegeben. Dieses Gemisch wurde unter Wasserstoffatmosphäre gesetzt und 11 Stunden auf 40ºC erhitzt. Der Katalysator wurde durch Filtration durch einen Solka-Floc-Kuchen entfernt. Dieser Kuchen wurde mit 60 kg Methanol gewaschen. Methanol (60 kg) wurde aus der Lösung von N-Acetyldibenzylganciclovir und N- Acetylmonobenzylganciclovir abdestilliert. Wasser (113 kg) wurde zu dieser konzentrierten Methanollösung gegeben. Dieses Gemisch wurde auf 5ºC über Nacht gekühlt. Das N-Acetyldibenzylganciclovir wurde dann durch Filtration entfernt und mit 140 ml von (6 : 4) Methanol/Wasser gewaschen. Die Methanol/Wasser-Lösungen wurden vereinigt und Methanol/Wasser wurde unter Vakuum zu einer Manteltemperatur von 115ºC, 27 ins (685,8 mm) Hg und einer Topftemperatur von 44ºC abdestilliert, bis 260 kg Methanol/Wasser destilliert hatten. Die erhaltene wässrige Schicht wurde dreimal mit 100 kg Dichlormethan (jede Dichlormethanextraktion enthielt 3,75 l Ethanol) extrahiert. Die Dichlormethanschichten wurden vereinigt und das Dichlormethan/Ethanol wurde durch atmosphärische Destillation bei einer Topftemperatur von 40ºC entfernt. Aceton (7,3 l) wurde zu dem Topfrückstand gegeben und der Topf wurde unter Rühren auf 50ºC erhitzt. Dieses heterogene Gemisch wurde über Nacht auf 5ºC gekühlt. Der Feststoff wurde abfiltriert und mit 15 l (-5ºC bis -10ºC) Aceton gewaschen. Der Feststoff wurde in einem Vakuumofen (-50ºC, 25 ins Hg, Austreibung mit Stickstoff) für 24 Stunden getrocknet. Masse: 3,425 kg N-Acetylmonobenzylganciclovir. Isolierte Ausbeute 29%. HPLC: 91,7% N-Acetylmonobenzylganciclovir, 2,3% Monobenzylganciclovir, 0,3% N-Acetylganciclovir.
Ammonolyse von N-Acetylmonobenzylganciclovir zu Monobenzylganciclovir: Zu 103 g N-Acetylmonobenzylganciclovir wurden 500 ml Methanol und 100 ml 30%iges NH4OH in Wasser gegeben. Die Reaktion war laut DC in etwa 22 Stunden vollständig. Das Methanol wurde aus dem heterogenen Gemisch zu einer Temperatur von 40ºC bei 28 ins Hg verdampft. Die wässrige Lösung wurde auf Raumtemperatur gekühlt und dann filtriert. Der Feststoff wurde mit 500 ml Wasser gewaschen und in einem Vakuumofen (-50ºC, 25 ins Hg, Austreibung mit Stickstoff) über Nacht getrocknet. Gewicht: 94,1 g. HPLC: 95,5% Monobenzylganciclovir.
Monobenzylganciclovir-HCl wurde dann aus Monobenzylganciclovir in einer ähnlichen Weise zu jener, vorstehend in Beispiel 3 A beschrieben, hergestellt.

BEISPIEL 4

4A. Die Herstellung des monogeschützten Ganciclovirzwischenprodukts als ein Salz (die Verbindung der Formel V) wurde über ein 2-Amino-geschütztes Zwischenprodukt 2-(2- Propionylamino-1,6-dihydro-6-oxopurin-9-yl)methoxy-3-benzyloxypropyl-1-propionat wie nachstehend hergestellt:
Dipropionylmonobenzylganciclovir wurde als das Produkt des in Beispiel 1A beschriebenen Verfahrens unter Verwenden der nachstehenden Modifizierung isoliert. Nachdem die Reaktion vollständig war und gekühlt wurde, wurde eine Lösung von 4-Dimethylaminopyridin (1,6 g) in Propionsäureanhydrid (31 g) zugegeben und das Gemisch wurde erhitzt, bis die Acylierung vollständig war (HPLC, DC). Wasser (8,5 g) wurde zugegeben und das heiße Gemisch wurde mit Hexan (160 ml) oder einem Hexan (160 ml)/Toluol (80 ml)-Gemisch extrahiert. Die untere Schicht des Gemisches wurde abgetrennt und mit Toluol (150 ml) verdünnt. Die heiße Lösung wurde mit Wasser (1 · 25 ml, 1 · 75 ml) gewaschen, mit Essigsäureethylester (15 ml) verdünnt und erneut mit Wasser (75 ml) gewaschen. Die organische Schicht wurde abgekühlt und gerührt. Das Produkt wurde durch Filtration gesammelt, mit Toluol gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 43 g.
Monobenzylganciclovirhydrochlorid wurde aus Dipropionylmonobenzylganciclovir durch Erhitzen eines Gemisches von Natriumhydroxid (20,0 g), Methanol (400 ml) und Dipropionylmonobenzylganciclovir (112 g), bis die Reaktion vollständig war, hergestellt. Die Lösung wurde mit Salzsäure (73,5 g) angesäuert und das Gemisch wurde filtriert. Das Filtrat wurde mit Essigsäureethylester (800 ml) verdünnt und gekühlt. Das Produkt wurde durch Filtration gesammelt, mit Essigsäureethylester gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 76,7 g Monobenzylganciclovirhydrochlorid.
4B. Monobenzylganciclovir kann auch aus Dipropionylmonobenzylganciclovir wie nachstehend hergestellt werden. Ein Gemisch von Natriumhydroxid (7 g), Wasser (80 ml) und Dipropionylmonobenzylganciclovir (22,9 g) wird erhitzt, bis die Reaktion vollständig ist. Das Gemisch wird zu einem Gemisch von Essigsäure (10 g) und Wasser (20 ml) gegeben und wird dann gekühlt. Das Produkt wird durch Filtration gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 17,1 g.

BEISPIEL 5

Herstellung von 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxopurin-9- yl)-methoxy-3-benzyloxy-1-propyl-N-(benzyloxycarbonyl)-L-valinat

5A. N-CBZ-Monovalinatmonobenzylganciclovir (CBZ = Carbobenzyloxy = Benzyloxycarbonyl, normalerweise abgekürzt Z) kann aus Monobenzylganciclovir durch Zugeben einer Lösung von CBZ-L-Valin-N-carboxyanhydrid (2,0 g) in Dimethylformamid (2 ml) zu einem Gemisch von Triethylamin (0,2 g), Dimethylformamid (2 ml) und Monobenzylganciclovir (2,0 g) hergestellt werden. Das Gemisch wird anschließend mit weiterem Triethylamin (0,2 g), Toluol (2,9 ml) und Wasser (8 ml) verdünnt und wird zum Starten der Kristallisation heftig gerührt. Weiteres Wasser (8 ml) wird zugegeben und das Gemisch wird gekühlt. Das Produkt wird durch Filtration gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 3,1 g.
5B. Alternativ kann N-CBZ-Monovalinatmonobenzylganciclovir aus Monobenzylganciclovir durch Zugeben einer Lösung von CBZ-L-Valinanhydrid in Dimethylformamid (50 ml) zu einem Gemisch von 4-Dimethylaminopyridin (3,8 g), Dimethylformamid (50 ml) und Monobenzylganciclovir (47,0 g) hergestellt werden. Das Anhydrid wird durch Zugeben einer Lösung von Dicyclohexylcarbodiimid (36,0) zu einem gerührten Gemisch von CBZ- L-Valin (97,2 g) und Essigsäureethylester (280 ml) hergestellt. Das Gemisch wird über Nacht gerührt, filtriert und der Kuchen mit Essigsäureethylester (150 ml) gewaschen. Das Filtrat wird abgestreift und der Rückstand in Dimethylformamid gelöst und wie vorstehend beschrieben verwendet. Nach Reaktionsbeendigung wird das Gemisch dann mit Triethylamin (20 g), Toluol (50 ml) und Wasser (200 ml) verdünnt und zum Beginn der Kristallisation heftig gerührt. Weiteres Wasser (200 ml) wird zugegeben und das Gemisch wird gekühlt. Das Produkt wird durch Filtration gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet unter Gewinnung von 87,4 g.
5C. N-CBZ-Monovalinatmonobenzylganciclovir kann aus Monobenzylganciclovirhydrochlorid wie nachstehend hergestellt werden. Zu einer mechanisch gerührten Suspension von O-Monobenzylganciclovir-HCl (25,0 g, 66,8 mMol) in Dimethylformamid (23 ml) bei 4-7ºC unter Stickstoffatmosphäre wurde Triethylamin (7,4 g, 87 mMol) mit einer derartigen Geschwindigkeit gegeben, dass die Temperatur der Aufschlämmung 8ºC nicht überstieg. War die Zugabe einmal beendet, wurde die Aufschlämmung bei 4-6ºC gerührt, während eine Lösung von Z- Valin-NCA (24,0 g, 86 mMol) in Dimethylformamid (23 ml) tropfenweise zugegeben wurde. Nachdem die Zugabe beendet war, wurde das Eisbad entfernt und das Gemisch wurde auf Raumtemperatur kommen lassen (23-25ºC, ungefähr 30-45 Minuten). Bewertung des Gemisches laut DC (80 : 10 : 8 CH&sub3;CN : CH&sub3;COOH : H&sub2;O) zeigte, dass die Reaktion nach diesem Zeitraum vollständig war. Anschließende Zugabe zu dem Gemisch von Triethylamin (2,2 g, 21,7 mMol), Toluol (17,5 ml) und Wasser (20 ml) bei 23-25ºC wurde von Erhitzen des Gemisches auf 40-60ºC gefolgt. Das Gemisch wurde tropfenweise mit weiterem Wasser (80 ml) behandelt und anschließend langsam auf 23-25ºC über einen Zeitraum von 2 Stunden gekühlt. Zu dem moderat heftig gerührten Gemisch wurde Wasser (100 ml) über einen Zeitraum von 10- 15 Minuten gegeben. Der so gebildete Feststoff wurde für einen Zeitraum von 10-15 Minuten rühren lassen und dann durch Filtration gesammelt. Der Filterkuchen wurde mit 2 Portionen Wasser (jeweils 50 ml) gewaschen und drei Stunden luftgetrocknet. Restliches Toluol wurde im Vakuum bei 35-40ºC entfernt. Ausbeute: 39,3 g (100%).
5D. N-CBZ-Monovalinatmonobenzylganciclovir kann auch vorteilhafterweise in überlegener Reinheit aus Monobenzylganciclovirhydrochlorid wie nachstehend hergestellt werden: CBZ- Valin-NCA (1,15 Äquivalerte) wird in Essigsäureethylester gelöst und zu einer Aufschlämmung von Monobenzylganciclovir (1,0 Äquivalent) in Gegenwart von 4-Dimethylaminopyridin (3 Gew.-%) in Dimethylformamid (DMF) und Essigsäureethylester bei 23º-27ºC gegeben. Nachdem das Reaktionsgemisch für etwa 3 Stunden gerührt wurde, wird das Gemisch mittels HPLC auf das Fortschreiten der Reaktion analysiert. Das Rühren des Reaktionsgemisches wird fortgesetzt, bis die Reaktion als im Wesentlichen vollständig eingeschätzt wird. Wasser wird zum Stoppen der Reaktion zugegeben und Essigsäureethylester wird zum Verdünnen des Gemisches zugegeben. Die organische Phase wird abgetrennt und die wässrige Phase wird erneut mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigte Essigsäureethylesterlösung wird zweimal mit Wasser gewaschen, mit Aktivkohle, wie PWA-Kohle, bei 35º-40ºC behandelt und dann filtriert und azeotrop getrocknet und zu einem vormarkierten Volumen aufkonzentriert. Hexan wird langsam bei 89ºC zugegeben und das erhaltene Gemisch wird langsam auf 25ºC gekühlt, um das Produkt zu kristallisieren. Die Mutterlauge wird durch Dekantierung entfernt und das Produkt wird zweimal mit Essigsäureethylester/Hexan (4/3)-Lösung und einmal mit Hexan gewaschen. Die Essigsäureethylester/Hexan- und Hexan-Waschlaugen werden durch Dekantierung entfernt. Das reine Produkt wird durch Filtration isoliert und bei < 45º getrocknet.

BEISPIEL 6

Herstellung von 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxopurin-9- yl)methoxy-3-hydroxy-1-propyl-L-valinathydrochlorid

Ganciclovir-L-valinathydrochlorid wurde aus N-CBZ- Monovalinatmonobenzylganciclovir wie nachstehend hergestellt. Eine Lösung des Ausgangsmaterials (14,2 g) in Methanol (100 ml) und konz. Salzsäure (2,7 g) wurde über Palladiumhydroxid- auf-Kohlenstoff (Pearlman-Katalysator) (2,7 g) hydriert. Als die Reaktion vollständig war, wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat wurde im Vakuum auf ein niedriges Volumen abgestreift. Wasser (9 g) wurde zugegeben und die Lösung erneut abgestreift, um restliches Methanol zu entfernen. Isopropanol (35 ml) wurde zugegeben und das Gemisch wurde zum Beginn der Kristallisation heftig gerührt. Weiteres Isopropanol (55 ml) wurde zugegeben und das Gemisch wurde gerührt und gekühlt.
Das Produkt wurde durch Filtration gesammelt, mit Isopropanol gewaschen und getrocknet, um 8,0 g, MS: 355 (MH)&spplus; zu ergeben.

Claims

1. Verfahren zur Herstellung der Verbindung 2-(2-Amino-1,6- dihydro-6-oxo-purin-9-yl)-methoxy-3-hydroxy-1-propyl-L-valinat-yl-L-valinat oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes oder Diastereomeren davon, wobei das Verfahren eines der nachstehenden Verfahren oder Kombinationen davon umfasst:

a) Kondensation eines Guanins der Formel

gegebenenfalls in persilylierter Form, worin P¹ Wasserstoff oder eine Aminoschutzgruppe darstellt, mit einem 2-substituierten Glycerin-Derivat der Formel

worin Y¹ und Y² unabhängig Halogen, Niederacyloxy oder eine gegebenenfalls substituierte Aralkyloxygruppe darstellen oder einer von Y¹ oder Y² eine Valyloxygruppe darstellt und Z eine Abgangsgruppe, ausgewählt aus Niederacyloxy, Methoxyisopropyl, Benzyloxy, Halogen, Mesyloxy oder Tosyloxy und dergleichen, darstellt, gegebenenfalls in Gegenwart eines Lewissäurekatalysatots, zur Bereitstellung der Verbindung 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-purin-9-yl)methoxy-3-hydroxy-1-propanyl-L-valinat; eine Verbindung der Formel

worin P¹, Y¹ und Y² wie vorstehend definiert sind;

(b) Entfernen von einem von Y¹ oder Y² durch Hydrogenolyse, wenn sowohl Y¹ als auch Y² Aralkyloxy darstellen oder durch basische Hydrolyse, wenn einer von Y¹ oder Y² Acyloxy oder Halogen darstellt, mit anschließender oder gleichzeitiger Umwandlung in ein Säureadditionssalz davon;

(c) falls erforderlich, Veresterung des Produkts von Schritt (b) mit einem aktivierten Derivat von L-Valin;

(d) gegebenenfalls Entfernen einer Amino- und/oder Hydroxyschutzgruppe aus einer Verbindung der Formel

worin P¹ eine Hydroxyschutzgruppe oder Wasserstoff darstellt, P² eine Aminoschutzgruppe darstellt und Y² wie vorstehend definiert ist, zur Bereitstellung der Verbindung 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-purin-9-yl)- methoxy-3-hydroxy-1-propyl-L-valinat-yl-L-valinat oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon;

(e) gegebenenfalls Umwandeln der Verbindung 2-(2-Amino- 1,6-dihydro-6-oxo-purin-9-yl)-methoxy-3-hydroxy-1- propyl-L-valinat in ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon;

(f) gegebenenfalls Umwandeln des Säureadditionsalzes der Verbindung 2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-purin-9-yl)- methoxy-3-hydroxy-1-propyl-L-valinat in eine Nicht- Salzform; oder

(g) gegebenenfalls diastereoisomeres Trennen von 2-(2- Amino-1,6-dihydro-6-oxo-purin-9-yl)-methoxy-3-hydroxy-1-propyl-L-valinat in seine (R)- und (S)-Diastereoisomeren.

2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei das aktivierte Derivat von L-F-Valin Z-Valin-N-carboxyanhydrid darstellt.

3. Verfahren nach Anspruch 1, wobei das Glycerin-Derivat 1- Propionyloxy-2-propionyloxymethoxy-3-benzyloxypropan, 1- Acetoxy-2-acetoxymethoxy-3-benzyloxypropan oder 1-Benzyloxy-2-acetyloxymethoxy-3-benzyloxypropan darstellt.

4. Verfahren nach Anspruch 1, wobei das Produkt von Schritt (a) weiter mit einem Acylanhydrid mit 1-4 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise Propionsäureanhydrid oder Acetanhydrid, behandelt wird.

5. Verbindung der Formel

worin P¹ eine Aminoschutzgruppe darstellt, die Niederacyl mit 1-4 Kohlenstoffatomen darstellt, Y¹ ein Halogen, Niederacyloxy oder eine gegebenenfalls substituierte Aralkyl oxygruppe darstellt und Y² eine Niederacyloxygruppe mit 1- 4 Kohlenstoffatomen darstellt.

6. Verbindung nach Anspruch 5, worin P¹ Propionyl darstellt und Y² Propionyloxy darstellt oder P¹ Acetyl darstellt und Y Acetyloxy darstellt.

7. Verfahren zur Herstellung der Verbindung von Anspruch 5, wobei das Verfahren umfasst:

a) Kondensation eines Guanins der Formel

gegebenenfalls in persilylierter Form, worin P¹ Wasserstoff darstellt, mit einem 2-substituierten Glycerin-Derivat der Formel

worin Y¹ Halogen, Niederacyloxy- oder eine gegebenenfalls substituierte Aralkyloxygruppe darstellt, Y² eine Niederacyloxygruppe mit 1-4 Kohlenstoffatomen darstellt und Z eine Abgangsgruppe, ausgewählt aus Niederacyloxy, Methoxyisopropyl, Benzyloxy, Halogen, Mesyloxy oder Tosyloxy und dergleichen, darstellt, gegebenenfalls in Gegenwart eines Lewissäurekatalysators; und

(b) das Produkt von Schritt (a) mit einem Acylanhydrid mit 1-4 Kohlenstoffatomen behandelt wird.

8. Verfahren nach Anspruch 8, wobei das Acylanhydrid Propionanhydrid oder Acetanhydrid darstellt.

9. Verbindung der Formel

worin X eine salzbildende Gruppe darstellt und Y² Halogen, Niederacyloxy, Niederalkyloxy, eine gegebenenfalls substituierte Aralkyloxygruppe oder eine Valyloxygruppe darstellt und P¹ Wasserstoff oder eine Aminoschutzgruppe darstellt.

10. Verfahren zur Herstellung der Verbindung nach Anspruch 9, wobei das Verfahren umfasst:

a) Kondensation eines Guanins der Formel

III

worin Y¹ und Y² unabhängig Halogen, Niederacyloxy oder eine gegebenenfalls substituierte Aralkyloxygruppe darstellen oder einer von Y¹ oder Y² eine Valyloxygruppe darstellt und Z eine Abgangsgruppe, ausgewählt aus Niederacyloxy, Methoxyisopropyl, Benzyloxy, Halogen, Mesyloxy oder Tosyloxy und dergleichen, darstellt, gegebenenfalls in Gegenwart eines Lewissäurekatalysators, zur Bereitstellung der Verbindung 2-(2-Amin-1,6-dihydro-6-oxo-purin-9-yl)methoxy-3-hydroxy-1-propyl-L-valinat; oder

b) Entfernen von einem von Y¹ oder Y² durch Hydrogenolyse, wenn sowohl Y¹ als auch Y² Aralkyloxy darstellen oder durch basische Hydrolyse, wenn einer von Y¹ oder Y² Acyloxy oder Halogen darstellt, und Umwandlung in ein Säureadditionssalz davon.