DE69523610T2

DE69523610T2 - Säule für kapillarchromatographische Trennverfahren

Info

Publication number: DE69523610T2
Application number: DE69523610T
Authority: DE
Inventors: Monika Dittmann; Gerard Rozing; Hans-Peter Zimmermann
Original assignee: Agilent Technologies Inc
Current assignee: Agilent Technologies Inc
Priority date: 1995-12-14
Filing date: 1995-12-14
Publication date: 2003-04-03
Anticipated expiration: 2015-12-15
Also published as: DE69523610D1; US5908552A; EP0779512A1; EP0779512B1

Description

GEBIET DER ERFINDUNG

Die Erfindung bezieht sich auf eine Säule für kapillarchromatographische Trennvorgänge, beispielsweise für Hochleistungs-Flüssigchromatographie oder Kapillar- Elektrochromatographie oder superkritische Chromatographie.

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

Kapillarchromatographische Trennverfahren werden bevorzugt in Quarzglas(FS)- Röhren mit Innendurchmessern im Bereich zwischen 5 um und 530 um durchgeführt. Derartige Röhren bestehen aus einem Siliciumdioxid(SiO&sub2;)-Glas, das bei hoher Temperatur (1.300ºC) aus einer Quarz-Vorform gezogen wird, die mit einer schützenden Außenschicht aus Polyimid oder Aluminium versehen ist. Widerstandsfähigkeit, Zugfestigkeit, Hochdruckbeständigkeit und Biegestabilität sind vorteilhafte mechanische Eigenschaften von Röhren aus Quarzglas. Eine hohe chemische Reinheit und eine gut definierte Oberfläche der Röhre stellt in den meisten Fällen eine geringe Wechselwirkung mit gelösten Stoffen bereit und führt in vielen Anwendungen zu einer optimalen Separation.
Im US-Patent 4 293 415 beschreiben Dandeneau et al. die Verwendung einer Kapillare aus Quarzglas, die auf der Innenfläche Wandbeschichtungen aufweisen kann, um spezielle Wechselwirkungen zu stimulieren und/oder sekundäre, unerwünschte Wechselwirkungen von gelösten Stoffen und Oberfläche weiter zu minimieren, für Kapillar-Gaschromatographie (CGC) mit offener Röhre und superkritische Flüssigchromatographie (SFC) mit offener Röhre. Jorgenson et al. haben gezeigt, dass derartige Kapillaren auch für die neuere Technik der Kapillar- Elektrophorese (CE) ideal geeignet sind.
Es wurde gezeigt, dass FS-Röhren auch für Kapillartrennvorgänge verwendet werden können, die in einem gepackten Bett durchgeführt werden, wie SFC, Mikro-Hochleistungsflüssigchromatographie und Kapillar-Elektrochromatographie (CEC). Die mechanischen Eigenschaften derartiger Kapillaren aus Quarzglas genügen, um dem hohen Druck standzuhalten, der entweder auftritt, wenn die Röhre mit kleinen Partikeln unter Verwendung einer Hochdruck-Filtrationstechnik bepackt wird oder wenn die Säule speziell in einem Hochleistungs- Flüssigchromatographiemodus betrieben wird.
Das Hauptproblem beim Packen einer Quarzglas- oder anderen Röhre mit geringem Innendurchmesser besteht darin, dass das Packungsmaterial in dem Säulenbett in der Röhre festgehalten werden muss; ansonsten treiben hydraulische oder elektrische Kräfte die Partikel aus der Kapillarsäule heraus. In einer herkömmlichen Hochleistungsflüssigchromatographiesäule wird das gepackte Bett typischerweise unter dem hohen Druck an Ort und Stelle gehalten, der durch Abschlussplatten oder Siebe, sogenannte Fritten, die für die Flüssigkeit porös, für die Partikel jedoch zu eng zum Hindurchtreten sind, angewendet wird (bis zu 400 bar). Da diese Fritten fest an dem gepackten Bett angebracht sein müssen, ist ein Anschlussstück notwendig, das die Fritte an das Bett drückt und gleichzeitig dem hohen Druck widersteht. In herkömmlichen Hochleistungsflüssigchromatographiesäulen werden Edelstahl-Anschlussstücke verwendet, die an die Außenseite des Säulenrohrs geklemmt werden.
Aufgrund des geringeren Außendurchmessers der Kapillarröhre aus Quarzglas, typischerweise 0,350 mm, und den geringen Volumina, die in den Trennvorgang involviert sind, ist es nicht einfach möglich, externe Anschlussstücke zu verwenden, selbst wenn sie entsprechend in der Abmessung verkleinert sind.
Mehrere Gruppen haben daher die prinzipelle Vorgehensweise verfolgt, einen Teil des gepackten Betts in der Kapillare durch chemische Mittel zu immobilisieren. Beispielsweise beschreiben Hernan Cortez et al. im US-Patent 4 793 920 die Verwendung von KaSil (Kaliumsilikat), um eine poröse keramische Fritte in dem Quarzglasrohr zu bilden, welche die kleinen Partikel während des Packens der Säule zurückhält. Auf diese Weise hergestellte Säulen mit Frittenanschlussele menten weisen Innendurchmesser auf, die typischerweise im Bereich von 180 um bis 530 um liegen, und wurden vorzugsweise in SFC verwendet.
In der Mikro-Hochleistungsflüssigchromatographie und auf dem neuen Gebiet der Kapillar-Elektrochromatographie (CEC) werden engere Säulen - Innendurchmesser < 200 um - verwendet. Auf diesem Gebiet haben mehrere Gruppen ändere Vorgehensweisen verfolgt, um eine derartige Fritte zu bilden. Im US-Patent 5 246 577 bringen Fuchs et al. schmelzbare Glaskügelchen mit einem Durchmesser von 1 um bis 50 um in die Kapillarröhre aus Quarzglas ein und schmelzen diese unter elektrischer Funkenbildung zusammen.
Alternativ wurden unmodifizierte Silikapartikel mit einem Durchmesser von 3 um bis 40 um verwendet. Nach Einbringen derselben in die Kapillarröhre aus Quarzglas wurden die Partikel durch Destabilisierung eines Tetraalkoxysilans miteinander verklebt, wobei in-situ Kieselsäure gebildet wird, welche die Partikel miteinander verbindet.
In neueren Veröffentlichungen wurden die Partikel der stationären Phase durch Anwendung von Wärme auf eine Zone der gepackten Quarzglassäule direkt im gepackten Bett immobilisiert, wo die Abschlussfritten sein sollen, während sich die Säule weiterhin bei hohem Druck auf der packenden Vorrichtung befindet (z. B. Boughtflower et al., Chromatographia 40, 329 (1995), Smith et al., Chromatographia 38, 649 (1994), Rozing et al., LC-GC Magazine, Oktober 1995). Es wird angenommen, dass die Partikel unter diesen Bedingungen aufgrund der Tatsache zusammengeklebt werden, dass sich bei Erwärmung eine kleine Menge an Siliciumoxid unter Bildung von Kieselsäure in Wasser auflöst und dass sich bei Abkühlung die repolymerisierte Kieselsäure zwischen den Partikeln abscheidet. Der Vorteil dieser Vorgehensweise besteht darin, dass sie die chemische Konstitution der Zone, die gesintert wird, nicht wesentlich ändert, dass sie problemlos auf der Einlass- und der Auslassseite bewerkstelligt werden kann, dass die Länge der gesinterten Zone durch die Abmessung der verwendeten externen Heizquelle gut gesteuert werden kann und dass die Porosität des Bettes unbeeinflusst bleibt. Photographien z. B. von Boughtflower et al., zeigen, dass die Partikelstruktur durch diese Behandlung nicht beeinflusst wird und daher die Zwischenpartikel-Porosität aufrechterhalten wird.
Das Hauptproblem bei allen diesen Vorgehensweisen besteht darin, eine chemische oder physikalische Haftung der gesinterten Zone an der Kapillarinnenwand zu erzielen, so dass die gesinterte Zone eine ausreichende Stabilität aufweist, um ein Schrumpfen oder Brechen des Bettes oder der gesinterten Zone zu vermeiden. Es wurde beobachtet, dass die Fritten nach Austrocknen einer gepackten Kapillare den Kontakt zu der Kapillarinnenwand verlieren und eine schwache elektrische oder hydraulische Kraft auf das Bett ausreicht, um die Packung herauszutreiben und die Säule zu zerstören. Bei allen Vorgehensweisen zur Erzeugung interner Fritten in einer gepackten Kapillarsäule bleibt die Haftung der gesinterten Zone an der Innenwand der Kapillare ein potentielles Problem.
Aus US-A-3 782 078 ist eine chromatographische Säule bekannt, die einen mittigen Hohlraum mit einer gekrümmten Oberfläche beinhaltet, um ein Sorptionsmittel (Packungsmaterial) aufzunehmen. Der Querschnitt der gekrümmten Oberfläche nimmt sowohl vom Einlass- als auch vom Auslassende nach innen zu. Aufgrund der Krümmung des Hohlraums ist die Affinität des Sorptionsmittels innerhalb des Hohlraums für die Probe, die den Hohlraum durchläuft, nicht nur eine Funktion der durch die Säule hindurch zurückgelegten zweidimensionalen Distanz sondern auch eine Funktion von diskreten dreidimensionalen Volumenbändern. Die Auflösung von Fluidgemischen wird somit durch Steuern der Säulengeometrie gesteigert.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Somit besteht eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung darin, eine gepackte Säule für Kapillarchromatographie bereitzustellen, bei der das Packungsmaterial in einer einfachen und effektiven Weise zurückgehalten wird.
Insbesondere besteht eine Aufgabe der Erfindung darin, die vorstehend erwähnten Probleme, die mit bekannten Techniken zum Zurückhalten des Packungsmaterials in der Säule verknüpft sind, zu vermeiden oder zu reduzieren.
Gemäß der Erfindung werden diese Aufgaben durch den Gegenstand von Anspruch 1 gelöst. Eine Säule gemäß der Erfindung für kapillarchromatographische Trennvorgänge, zum Beispiel Hochleistungsflüssigchromatographie, Kapillar- Elektrochromatographie oder superkritische Chromatographie, beinhaltet ein Säulenbett aus Packungsmaterial, das in der Innenbohrung der Säule angeordnet ist, und Mittel zum Halten des Säulenbettes im Inneren der Säule, wobei die Mittel zum Halten des Säulenbettes einen Bereich im Inneren der Säule beinhalten, dessen radiale Abmessung relativ zur Innenbohrung vergrößert ist.
Gemäß der bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung werden die erwähnten Probleme des Standes der Technik auf folgende Weise vermieden. Die Quarzglasröhre, die für die Herstellung einer Mikro-Hochleistungsflüssigchromatographie- oder CEC-Säule verwendet wird, weist an den Stellen, an denen die gesinterten Zonen geplant sind, eine kleine Verlängerung in radialer Richtung auf, d. h. eine Blase mit einem Ausdehnungsfaktor (Verhältnis von Blasendurchmesser zu Röhrendurchmesser) von ungefähr 1,5. Mit einer auf diese Weise hergestellten Quarzglasröhre wird eine gepackte Säule in der üblichen Weise präpariert (siehe z. B. Boughtflower et al., Rozing et al.). Die Zonen, welche die Blase enthalten, werden ebenfalls gepackt. Nach Beendigung des Packens der Säule wird die gesinterte Zone in der vorstehend beschriebenen Weise erzeugt. Die gesinterte Zone weist jedoch einen größeren Innendurchmesser als die leere Röhre auf, die davor oder dahinter liegt. Demzufolge ist, selbst dann, wenn das gesinterte Packungsmaterial beginnt, die chemische Haftung zur Wand durch Rissbildung oder Schrumpfen zu verlieren, der Stopfen aus immobilisiertem Packungsmaterial zu breit, um sich durch das Quarzglasrohr bewegen zu können, bleibt an Ort und Stelle und hält weiterhin das Packungsmaterial fest.
Gemäß einer weiteren Entwicklung der Erfindung ist eine verbesserte optische Detektion von Probensubstanzen möglich, die in der Säule getrennt werden. Eine photometrische Detektion im ultravioletten/sichtbaren Bereich (UV-VIS) in der Hochleistungs-Kapillarflüssigchromatographie und CEC wird durch Messung von Änderungen des Transmissionsgrades des einfallenden Lichts "an der Säule" durchgeführt. Zu diesem Zweck wird ein kleiner Streifen der Schutzschicht ent fernt, um eine unbehinderte Bestrahlung der Quarzglasröhre zu ermöglichen. Da der Weg des Lichts durch die Kapillare hindurch auf ihren Durchmesser beschränkt ist, werden vergleichsweise niedrige Extinktionswerte für die Elutionsspitzenwerte erhalten, und daher können Kapillar-Flüssigphasentrenntechniken die Empfindlichkeit von spektrophotometrischer Absorptionsdetektion beeinträchtigen. Die Empfindlichkeit kann durch lokale Ausdehnung des Röhrendurchmessers, d. h. durch die Erzeugung einer Blase wie in Verbindung mit der gesinterten Zone, wesentlich verbessert werden. Eine Detektionsblase als solche ist im US-Patent 5 061 361 beschrieben.
Da die für die Fertigung einer Kapillarsäule für Mikro- Hochleistungsflüssigchromatographie und CEC verwendete Quarzglasröhre zwei Blasen enthält, um die gesinterte Zone aufzunehmen, kann eine Detektionsblase mit einem Verhältnis des Blasendurchmessers zum Röhrendurchmesser von > 2 in dem gleichen Fertigungsprozess erzeugt werden. In einer bevorzugten Ausführungsform weist eine Säule für CEC und Mikro- Hochleistungsflüssigchromatographie zwei Blasen zum Halten der gesinterten Zone und eine Detektionsblase auf.
Gemäß einer weiteren Ausführungsform der Erfindung ist eine "Detektion in der Säule" von Probensubstanzen möglich. Eine "Detektion in der Säule" wurde für Kapillartrenntechniken bereits vorgeschlagen (siehe z. B. Cs Horvath et al., Analytical Methods and Instrumentation, 2(3), 122 bis 128 (1995), E. J. Guthrie et al., Anal. Chem., 56, 483 (1984)), jedoch mit einem anderen Säulentyp als bei der vorliegenden Erfindung. "Detektion in der Säule" bedeutet, dass eine photometrische UV-VIS-Detektion durch das gepackte Bett an gepackten Kapillar- Quarzglassäulen bewerkstelligt wird. Eine bestimmte Transluzenz des Bettes bei der Detektionswellenlänge ist für diesen Zweck zwingend. Das Grundprinzip hinter dieser Idee ist, dass sich Spitzenwerte, die gehalten werden, auf dem Säulenbett in einer kürzeren longitudinalen Zone als nach dem Verlassen des gepackten Bettes befinden und daher konzentrierter sind. Gemäß einer Ausführungsform der Erfindung findet die Detektion durch die gesinterte Zone hindurch statt, wodurch die Detektion durch die größere Pfadlänge weiter verbessert wird.
Nachfolgend werden bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung unter Bezugnahme auf die Zeichnungen erläutert.

KURZBESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN

Fig. 1 ist ein schematisches Diagramm einer ersten Ausführungsform der Erfindung.
Fig. 2 ist ein schematisches Diagramm einer zweiten Ausführungsform der Erfindung mit einer zusätzlichen Detektionsblase.
Fig. 3 zeigt schematisch eine dritte Ausführungsform der Erfindung, bei der eine Detektionsblase und eine Halteblase zusammenfallen.

DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER BEVORZUGTEN AUSFÜHRUNGSFORMEN

Fig. 1 zeigt eine gepackte Säule 1 gemäß einer ersten Ausführungsform der Erfindung. Die Säule besteht aus Quarzglas und weist typischerweise eine Länge von etwa 5 cm bis 200 cm auf. Fig. 1 zeigt lediglich die Endbereiche einer derartigen Säule. Die Säule weist einen Innendurchmesser im Bereich zwischen etwa 5 Mikrometer bis 530 Mikrometer auf. Das Innere der Säule ist über den Hauptteil ihrer Länge mit einem gepackten Bett 2 gefüllt, das der Trennung der Probensubstanzen dient, welche die Säule durchqueren. Die zwei Enden der Säule 1 beinhalten Zonen 3 und 4, bei denen der Innendurchmesser relativ zu dem Innendurchmesser des Rests der Säule vergrößert ist. Diese vergrößerten Zonen 3, 4 werden auch als "Blasen" bezeichnet. Die Blasen 3 und 4 sind mit Packungsmaterial (graue Fläche) gefüllt, wie es auch der Bereich in der Säule zwischen den zwei Blasen ist. Der Stopfen aus Packungsmaterial ist zu groß, um sich zu Gebieten mit kleinerem Durchmesser im Inneren der Säule bewegen zu können. Demzufolge wird das Packungsmaterial durch die Stopfen in der Säule gehalten.
Fig. 1 stellt außerdem dar, wie eine Probendetektion mit einer Säule der Erfindung durchgeführt werden kann. Die Schutzschicht 5 der Säule 1 ist in einem De tektionsbereich 5 entfernt, so dass Licht von einer Lichtquelle 7, typischerweise im ultravioletten/sichtbaren Spektralbereich, die Säule 1 und die Probe in einem Gebiet 9 der Säule durchlaufen kann, wo sich kein Packungsmaterial befindet. Die Lichtintensität, die durch die Probe modifiziert wurde, wird durch einen Detektor 8 delektiert. Die Signale, die durch den Detektor bereitgestellt werden, können für eine qualitative und quantitative Analyse der Probe verwendet werden.
Fig. 2 zeigt eine zweite Ausführungsform der Erfindung, bei der die Säule 10 ebenfalls Blasen 13 und 14 beinhaltet, die mit Packungsmaterial 12 gefüllt sind. Die Schutzschicht 15 der Säule ist in einem Gebiet 16 entfernt. Der Unterschied zu der Ausführungsform von Fig. 1 liegt darin, dass das Detektionsgebiet, in dem Licht von einer Lichtquelle 17 die Säule durchläuft, ein verbreitertes Gebiet ("Blase") 19 ähnlich den Blasen 13 und 14 beinhaltet. Die Blase 19 ist frei von Packungsmaterial. Aufgrund des größeren Innendurchmessers der Blase 19 im Vergleich zum Rest der Säule ist die Pfadlänge für das Licht vergrößert, das diese durchläuft, was zu einer wesentlich erhöhten Detektionsempfindlichkeit führt. Das Licht, das durch die Probe in der Blase 19 modifiziert wurde, wird durch einen Detektor 18 delektiert.
Eine dritte Ausführungsform der Erfindung ist in Fig. 3 gezeigt, wobei das Packungsmaterial 22 in der Säule 20 durch die Stopfen in den Blasen 23 und 24 gehalten wird. Die Schutzschicht 25 ist in einem Gebiet 26 entfernt, in dem Licht von einer Lichtquelle 27 die Säule durchläuft und auf einen Detektor 28 auftrifft. Die Probendetektion findet somit in der Zone statt, in der sich die Blase 24 zum Halten der chromatographischen Packung 2 befindet. Diese Ausführungsform weist den Vorteil auf, dass die Pfadlänge für das Licht, das die Säule durchläuft, vergrößert ist, ohne eine zusätzliche Blase wie in Fig. 2 zu erfordern.
Gemäß der Erfindung ist es somit möglich, die Zone, die zum Halten des chromatographischen Bettes ("gesinterte Zone") dient, derart zu erzeugen, dass es physikalisch unmöglich wird, dass die Zone aus der Kapillare herausgepresst wird, selbst wenn sie die Haftung an der Kapillarenwand verliert. In einer Ausführungsform der Erfindung wird der Kapillarendurchmesser durch eine Technik radial ausgedehnt, die im US-Patent 5 061 361 beschrieben ist. Auf diese Weise wird eine Blase in der Kapillare erzeugt. Dieser spezifische Punkt auf der Kapillare wird zu der Zone, in der sich die haltende Fritte befindet. Da eine Einlassfritte und eine Auslassfritte benötigt werden, werden Kapillaren mit zwei derartigen Blasen in einem spezifizierten Abstand zueinander hergestellt. Vor und hinter den gesinterten Zonen gibt es kein Packungsmaterial, so dass die Säulenlänge durch den Abstand zwischen den Zonen festgelegt ist und typischerweise im Bereich zwischen 5 cm und 75 cm liegt.
Durch die im vorhergehenden Abschnitt erwähnte Behandlung werden die Partikel "zusammengeklebt" und bilden einen porösen Klumpen mit einem größeren Durchmesser als dem Innendurchmesser der vorhergehenden/nachfolgenden Quarzglasröhre. Daher kann sich der poröse Stopfen nicht aus seiner Position bewegen. In einem typischen Beispiel wird die Wärme zur Erzeugung der Blase durch ein Nickel/Chrom-Heizfilament mit einem Durchmesser von 0,5 mm bis 1,0 mm angelegt, das zwei Windungen mit einem Spulendurchmesser von 2 mm aufweist. Die Quarzglaskapillare ist so ausgerichtet, dass sie durch die Mitte dieser Spule verläuft. An diese Spule wird eine elektrische Energie von etwa 8 W (2 V, 4 A) von einer Gleichstromversorgung angelegt, wie dem Hewlett-Packard-Modell Nr. HP 6267B.
In der bevorzugten Ausführungsform kann die Quarzglaskapillare mit Blasen, welche die gesinterte Zone enthalten, auf der gleichen Glasblas-Drehbank ("lathe") vorgefertigt werden, wie sie zur Herstellung der Detektionsblasen verwendet wird, wie im US-Patent 5 061 361 beschrieben. Daher ist es sehr gut möglich, in dieser Kapillare durch den gleichen Prozess in einem Vorgang eine Detektionsblase mit einem größeren Verhältnis von Blasendurchmesser zu Säuleninnendurchmesser ("Blasenfaktor") von 3 bis 5 herzustellen. Tatsächlich ist es für die Genauigkeit (der Elektrochromatographie) von großem Vorteil, wenn eine derartige Blase innerhalb 1 cm der Auslassfrittenzone platziert wird. Die Integrität der Trennung wird aufrechterhalten, während eine gleichzeitige Signalsteigerung in der Detektionsblase die Empfindlichkeit erhöht. Zusätzlich ermöglicht die enge Nachbarschaft der gesinterten Zone zu der Detektionsblase, dass sie in der Justiervorrichtung eingeschlossen ist, die typischerweise notwendig ist, um in Kapillardetektoren die Detektionszone präzise in den Lichtpfad zu platzieren, wodurch die gesinterte Zone vor mechanischer Schädigung und Biegespannung geschützt wird.
Während alternativ in dem Fertigungsprozess der späteren Fritte die schützende Außenschicht weggebrannt wird, ist diese Zone sauber und für Licht im UV- und sichtbaren Bereich transparent und ermöglicht eine Detektion des spektrophotometrischen oder Fluoreszenz-Typs mit der erwähnten Steigerung des chromatographischen Signals.
In dieser Erfindung wird eine Quarzglasröhre als Behältnis für das gepackte Bett verwendet, da es schmalere Säulen bereitstellt, als typischerweise in der Hochleistungsflüssigchromatographie und SFC mit gepackter Säule (1 mm bis 5(10) mm i.D.) verwendet werden. Quarzglas weist mehrere Vorteile als Behältnis für ein gepacktes Bett auf, wie im einleitenden Teil erläutert. Daher hat seine Verwendung für die Mikro-Hochleistungsflüssigchromatographie in letzter Zeit eine Menge Interesse hervorgerufen (mehrere Autoren). Die Firma LC-Packings in Amsterdam, Niederlande, bietet Mikro-Hochleistungsflüssigchromatographiesäulen basierend auf Quarzglaskapillarröhren an. Es versteht sich, dass, selbst wenn Quarzglas das bevorzugte Material für Säulen der Erfindung ist, auch andere Materialien verwendet werden können, aus denen Kapillaren hergestellt werden können.

Claims

1. Säule (1) für kapillarchromatographische Trennvorgänge, zum Beispiel Hochleistungs-Flüssigchromatographie, Kapillar-Elektrochromatographie oder superkritische Chromatographie, mit

- einem Säulenbett (2) aus Packungsmaterial, das in der Innenbohrung der Säule (1) angeordnet ist, und

- Mitteln zum Halten des Säulenbettes (2) im Inneren der Säule (1),

wobei die Mittel zum Halten des Säulenbettes (2) einen Bereich (3) im Inneren der Säule beinhalten, dessen radiale Abmessung relativ zur Innenbohrung vergrößert ist und der mit einem Stopfen aus immobilisiertem Packungsmaterial gefüllt ist.

2. Säule nach Anspruch 1, die zwei Bereiche (3, 4) beinhaltet, die relativ zu der Innenbohrung vergrößert und mit Packungsmaterial gefüllt sind, wobei die Bereiche an den zwei Enden des Säulenbettes (2) angeordnet sind.

3. Säule nach Anspruch 1 oder 2, wobei das Säulenbett (2) aus Silika- Partikeln mit einer Beschichtung besteht, die für Hochdruck- Flüssigchromatographie oder elektrisch betriebene Flüssigchromatographie geeignet ist.

4. Säule nach Anspruch 1 oder 2, wobei das Säulenbett (2) aus Quarz oder aus auf Polymeren basierenden Partikeln mit einer Beschichtung besteht, die für Hochdruck-Flüssigchromatographie oder elektrisch betriebene Flüssigchromatographie geeignet ist.

5. Säule nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4, die eine Detektionszone in der Form einer Zelle (19) innerhalb der Säule (10) auf ihrer Auslassseite beinhaltet.

6. Säule nach irgendeinem der vorhergehenden Ansprüche, die aus Quarzglas gefertigt ist.

7. Verwendung einer Säule nach irgendeinem der vorhergehenden Ansprüche in einer Detektoranordnung (27, 28) zur Detektion von Probensubstanzen, die in der Säule getrennt werden, wobei die Detektion an der Stelle der Mittel (24) zum Halten des Säulenbettes (22) auf der Säulenauslassseite durchgeführt wird.