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DE4425382C2 - Salmonella-Lebendimpfstoff - Google Patents

Salmonella-Lebendimpfstoff

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Description

Die Erfindung betrifft die Verwendung eines Salmonella spp.-Bakterienstammes als Lebendimpfstoff.
Nach dem Stand der Technik ist es bekannt, bakterielle Lebendimpfstoffe zur Immunprophylaxe in der Human- und Veterinärmedizin einzusetzen. Beispiele hierfür sind verschiedene in Deutschland zugelassenen Salmonella-Lebendvaccinen, die in der Landwirtschaft zum Schutz der Tierbestände vor Salmonellosen angewandt werden.
Eine Grundvoraussetzung für den Einsatz von Lebendvaccinen stellt ihre sichere Nachweisbarkeit und Abgrenzbarkeit vom Wildtyp dar. Gegenwärtig erfolgt die Detektion über den phänotypischen Nachweis der attenuierenden Marker, z. B. Auxotrophien oder Resistenzen. Zusätzliche Markierungen werden bekanntermaßen nicht mehr vorgenommen.
Im Fall von Auxotrophien erfolgt die Prüfung nach selektiver Kultivierung und Reinigung einer Einzelkolonie auf einem Spezialnährmedium (Diagnostikum), auf dem der Impfstamm entsprechend seiner Auxotrophien nicht wachsen darf. Ein solcher Nachweis stellt hohe Anforderungen an die Reinkultur und ist dementsprechend arbeitsaufwendig, langwierig (ca. 2 Wochen bis zur Verdachtsdiagnose) und teuer. Da man häufig mit Mischkulturen von Wildtyp und Impfstamm zu rechnen hat, beispielsweise bei Salmonellen in der Geflügelhaltung, müssen außerdem möglichst viele Einzelkolonien geprüft werden, um eine ausreichend sichere Aussage zum Vorkommen des Impfstammes in einer Salmonella typhimurium-haltigen Probe treffen zu können. Im Fall von Resistenzmarkern müssen in der Routinediagnostik ständig entsprechende Selektivplatten in ausreichender Zahl parallel beimpft und mitkultiviert werden, um den posititven oder negativen Nachweis des Impfstammes zu führen. Da die Auswertung dieser Platten durch resistente Spontanmutanten aus anderen Bakteriengattungen erschwert werden kann, bedarf eine Verdachtskolonie einer weiteren Charakterisierung und Bestätigung als "Salmonella-Impfstamm". Das bedeutet, daß auch hier nur die Einzelkolonie-Reinigung und Charakterisierung die endgültige Diagnose ermöglicht.
Eine Möglichkeit der Bereitstellung bakterieller Lebendimpfstoffe ist die gentechnische Veränderung entsprechender Bakterienstämme. So ist beispielsweise aus der WO 90/15873 A1 ein Mykobakterium-Stamm (BCG = Bacillus-Calmette-Guerin) als Lebendimpfstoff (gegen Tuberkulose) bekannt, der rekombinierte Luziferasegene enthält.
Die Verwendung von Luziferasegenen zur gentechischen Markierung von Bakterienstämmen - unter anderem auch von Salmonella-Stämme - mit dem Ziel, die betreffenden Bakterien anhand ihrer hiermit erzeugten Biolumineszenzfähigkeit im Vitalitätstest einzusetzen (als Indikatororganismus für Toxizitätstests, Antibiotikasensibilitätstests u. a.), ist auch aus der DE-OS 38 33 628 und der US- PS 4 861 709 bekannt.
Bei der Verwendung von Rekombinationsverfahren ist jedoch immer zu beachten, daß ein gentechnisch veränderter Lebendimpfstoff allen Kriterien des deutschen Gentechnikgesetzes genügen muß und gegebenenfalls entsprechenden internationalen Anforderungen.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, einen bakteriellen Lebendimpfstoff bereitzustellen, dessen Nachweis mit vergleichsweise sehr geringem Zeit-, Material- und Kostenaufwand möglich ist.
Eine Lösung dieser Aufgabe besteht in der Verwendung eines Bakterienstammes der eingangs genannten Art, dessen Bakteriengenom rekombinierte Luciferase-Gene enthält, als Lebensimpfstoff. Der derart markierte Bakterienstamm besitzt die Eigenschaft der bakteriellen Lichtproduktion, und damit-die Lebendvaccine vom Wildtyp optisch unterscheidbar.
Mit dieser Erfindung gehen überraschend viele Vorteile einher: Sie ermöglicht eine schnelle, einfache und sichere -weil "positive"- Identifikation des Impfstammes bereits nach dem ersten Kultivierungsschrift. Bakterien-Reinkulturen sind nicht mehr erforderlich. Die markierten Bakterien sind aufgrund ihrer Lichtproduktion mit bloßem Auge auf jeder routinemäßig angelegten Selektionsplatte nachweisbar. Der Befund "Impfstamm" erfolgt gleichzeitig mit dem bakteriologischen Befund "Salmonellae" nach 3-4 Tagen Arbeitsaufwand. Ein zusätzliches Diagnostikum ist nicht notwendig. Die bakteriologische Routinediagnostik auf Salmonellen in den Untersuchungsämtern muß weder methodisch noch apparativ verändert werden. Auch die bisher bestehende Notwendigkeit einer Bestätigung des Testergebnisses durch den Impfstamm-Hersteller entfällt.
Das lux-System eignet sich besonders deshalb als Nachweismittel, weil
  • - dieses System unter natürlichen Bedingungen ein selten vorkommendes Ereignis ist (d. h. es treten keine background-Effekte auf),
  • - die Messung von Licht schnell und sensitiv und der Einsatz von Luminometern eine gut etablierte, preiswerte Technik ist, und
  • - der Nachweis einer luminiszierenden Kultur auf einem Nährboden mit bloßem Auge möglich ist.
Die gentechnische Markierung kann sowohl mit eukaryontischen als auch mit prokaryontischen Luciferase-Genen durchgeführt werden.
Bei einer bevorzugten Variante der Erfindung erfolgt die gentechnische Markierung mit Luciferase-Genen durch Rekombination eines lux-Operons von Vibrio fischeri und/oder Vibrio harveyi und/oder Phototbacterium phosphoreum und/oder Photobacterium leiognathi und/oder Xenorhabdus luminescens in das Bakteriengenom.
Die bakterielle Lichtproduktion wird vorzugsweise mit Hilfe von Photometer(n), insbesondere Luminometer(n) nachgewiesen.
Das zur Rekombination verwendete lux-Operon kann auf gentechnischem Weg durch Klonierung oder auch durch chemische Synthese bereitgestellt werden.
In einer besonders bevorzugten Verfahrensvariante wird das lux-Operon in dem Vektor pMMB 190, ATCC 37807, vorzugsweise am Restriktionsort SalI, oder in dem Vektor pMMB 207, vorzugsweise am Restriktionsort BamHI-SalI, ligiert, in dem Bakterium Escherichia coli, vorzugsweise Stamm E. coli K12, kloniert und mit Hilfe des Plasmids pRK, ATCC 37159 oder eines anderen Hilfsvektors in die als Lebendvaccine geeignete(n) Bakterienzelle(n)transferiert.
Bei einer anderen Verfahrensvariante wird das lux-Operon durch homologe Rekombination in das Impfstamm-Chromosom eingebaut.
Ebensogut kann der Einbau in das Impfstamm-Chromosom mittels eines Transposon Vektors oder mittels eines Phagen erfolgen.
Eine besonders einfach zu gewinnende bakterielle Lebendvaccine zeichnet sich dadurch aus, daß das Bakteriengenom ein rekombiniertes lux-Operon enthält, das vorzugsweise aus Vibrio fischeri und/oder Vibrio harveyi und/oder Photobacterium phosphoreum und/oder Photobacterium leiognathi und/oder Xenorhabdus luminescens stammt.
Ein zur Bekämpfung der Salmonellose besonders geeigneter erfindungsgemäß verwendeter Lebendimpfstoff wird mit einem Salmonella typhimurium-Bakterienstamm bereitgestellt, dessen Bakteriengenom rekombinierte Luciferase-Gene enthält, die dem Bakterienstamm die Eigenschaft der bakteriellen Lichtproduktion geben und ihn damit vom Wildtyp optisch unterscheidbar machen.
Die Erfindung wird im folgenden anhand von Ausführungsbeispielen näher erläutert.
Beispiel 1
Zur Bekämpfung von Salmonellosen bei Hühnern und Tauben sind in Deutschland die Lebendimpfstoffe Salmonella typhimurium (Zoosaloral H® Deutsches Tierärzteblatt, Dez. 1992; Zoosaloral T, DT, Februar, 1993) und Salmonella typhimurium (TAD Salmonella vac® T) zugelassen. Der Nachweis von Salmonella typhimurium (Zoosaloral H®) erfolgt bisher anhand der stammeigenen Auxotrophien, der von Salmonella typhimurium (TAD Salmonella vac® T) anhand der stammspezifischen Resistenzen.
In beide Impfstämme wurde das lux-Operon aus Vibrio fischeri wie im folgenden beschrieben rekombiniert.
Die Methodik der Klonierung des lux-Operons aus Vibrio fischeri sowie die Charakterisierung der Gene gehört zum Stand der Technik. Bereits 1982 wurde ein lux- Operon aus Vibrio harveyi isoliert und in E. coli kloniert (Belas et al., 1982, Bacterial bioluminescence: isolation and expression of the luciferase genes from Vibrio harveyi. Science 128, 791-793). Weitere lux-Operon-Isolierungen sind für Photobacterium phosporeum, Photobacterium leiognathi und Xenorhabdus luminescens beschrieben (zur Übersicht siehe Meighen, 1991, Molecular Biology of Bacterial Bioluminescence. Mikrobiol. Rev. 55, 123-142).
Ein ca. 9 kb SalI-Fragment mit dem kompletten lux-Operon aus Vibrio fischeri wird mit den bekannten Methoden in den SalI-Ort des Plasmids pMMB 190, ATCC 37807, ligiert und in E. coli K12 kloniert. Die Selektion erfolgt auf Ap-Resistenz und "Leuchten". Die Übertragung des Konstrukts auf den einen bzw. anderen Impfstamm erfolgt durch ein triparentales Mating mit dem Helferplasmid pRK, 2013 ATCC 37159. Die Isolierung leuchtender Salmonellen erfolgt für
  • - den Salmonella typhimurium Impfstamm (Zoosaloral H®) nach Revitalisierung in Peptonwasser und zweimaliger Selektivanreicherung in RVS auf antibiotikahaltigen Selektivagarplatten (XLD, BPLA mit Ampicillin),
  • - den Salmonella typhimurium - Impfstamm TAD Salmonella vac® T nach Kultivierung auf antibiotikahaltigen Selektivagarplatten (XLD mit Rifampicin, Nalidixinsäure und Ampicillin).
Leuchtende Kolonien sind mit bloßem Auge in der Dunkelkammer leicht zu identifizieren.
Beispiel 2
Zur Markierung der beiden Impfstämme Salmonella typhimurium (Zoosaloral HR) und Salmonella typhimurium (TAD Salmonella vac® T) wird ein promotorloses BglII-SalI-Fragment aus dem lux-Operon von Vibrio fischeri in das Plasmid pMMB 207, ATCC 37809, BamHI-Sa1I ligiert. In diesem Konstrukt stehen die Gene luxAB unter der Kontrolle des tac-Promotors von pMMB 207. Der Promotor ist IPTG-induzierbar. Aufgrund des Fehlens von luxC und eines Teils von luxD ist für die bakterielle Lichtproduktion die exogene Zugabe eines Aldehyds notwendig.
Die Übertragung des rekombinierten Plasmids in einen der beiden Vaccine-Stämme erfolgt wie in Beispiel 1 beschrieben.
Zur Induzierung der Lichtproduktion wird IPTG (0.2-0.4 mM) und Aldehyd (10%ige Nonanal-, Decanal- oder Dodecanal-Lösung) zum Medium gegeben. Aufgrund der besonders intensiven Lichtproduktion ist Nonanal als Substrat bevorzugt. Schon innerhalb weniger Sekunden nach der Substratzugabe können die Kolonien in der Dunkelkammer eindeutig identifiziert werden.
Sowohl die gemäß Beispiel 1 als auch die gemäß Beispiel 2 markierten Lebendimpfstoffe sind in routinemäßig auf Salmonellen zu untersuchenden Hühner- bzw. Tauben- Kotproben eindeutig zu identifizieren.
Eine Überprüfung der Stabilität der rekombinanten Plasmide in Form einer 10-maligen Subkultivierung im Flüssigmedium ohne Antibiotikazusatz ergab einen Plasmidverlust in 8 von 2500 Kolonien (0,3%).

Claims (3)

1. Verwendung eines Salmonella spp.-Bakterienstamms, dessen Bakteriengenom rekombinierte Luciferase-Gene enthält, als Lebendimpfstoff.
2. Verwendung nach Anspruch 1, wobei als Salmonella spp.-Bakterienstamm ein Salmonella typhimurium-Bakterienstamm eingesetzt wird.
3. Verwendung eines Salmonella spp.-Bakterienstamms nach Anspruch 1 oder 2, für Vögel, insbesondere für Hühner und Tauben.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4861709A (en) * 1985-05-31 1989-08-29 Technicon Research A.G. Detection and/or identification of microorganisms in a test sample using bioluminescence or other exogenous genetically-introduced marker
DE3833628A1 (de) * 1988-10-03 1990-04-12 Genlux Forschungsgesellschaft Verfahren zum nachweis und zur identifikation toxischer substanzen mit hilfe klonierter mikroorganismen
CA2063414A1 (en) * 1989-06-19 1990-12-20 Richard A. Young Vector-mediated genomic insertion and expression of dna in bcg

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8137904B2 (en) 2002-06-05 2012-03-20 Genelux Corporation Light emitting microorganisms and cells for diagnosis and therapy of diseases associated with wounded or inflamed tissue

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