DE19506802A1

DE19506802A1 - Carrier for release of reagent, esp. in immunoassay

Info

Publication number: DE19506802A1
Application number: DE1995106802
Authority: DE
Inventors: Karl Reichart
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1995-02-27
Filing date: 1995-02-27
Publication date: 1996-08-29

Abstract

A reagent carrier (I) comprises a ring or hollow cylinder contg. \- 1 chemical or biological reagents. The carrier releases the reagent(s) into a reaction system. Also claimed is a kit contg. \- 1 (I) and opt. other reagent containers, for detection processes, esp. immunoassay. Each (I) contains an individual dose.

Description

Die Erfindung betrifft einen Reagensträger zur Zugabe von Reagentien.The invention relates to a reagent carrier for adding Reagents.

Chemische Reaktionen zwischen 2 oder mehreren Reaktionskomponenten benötigen zu Ihrer Durchführung, z. B. Start, Aufrechterhaltung, Kontrolle, Steuerung und/oder Beendigung in der Regel eine Beeinflußung von außen, z. B. die Zufuhr von Energie in Form von Licht- oder Wärmestrahlung geeigneter Wellenlänge, oder die Zugabe von Reagentien, z. B. zur Initiierung, Katalyse, Beendigung und/oder zur Feststellung des Umsatzgrades, z. B. durch qualitative oder quantitative Bestimmung einer der Reaktionsteilnehmer oder des Endproduktes.Chemical reactions between 2 or more Reaction components need to be carried out, e.g. B. Start, maintenance, control, control and / or Termination usually an external influence, e.g. B. the Supply of energy in the form of light or heat radiation suitable wavelength, or the addition of reagents, e.g. B. for initiation, catalysis, termination and / or determination the degree of sales, e.g. B. by qualitative or quantitative Determination of one of the reactants or the end product.

Chemischen Reaktionen kommt in zunehmendem Maße auch immer mehr Bedeutung zu bei der Konzentrationsbestimmung von Enzymen, Substraten, Hormonen, oder zur Verfolgung von Reaktionsabläufen, wie sie z. B. im Rahmen medizinischer Untersuchungs- und Diagnostizierverfahren, in der Lebensmittelanalyse, der Wasser- und Abwasseranalyse, verwendet werden. Bei der sogenannten enzymatischen Analyse, einem Spezialgebiet der biochemischen Analyse, werden Enzyme oder Substrate als Nachweisreagentien benutzt. Mit der enzymatischen Analyse ist es möglich, in Gemischen, z. B. Blut, Urin, Bioreaktorproben, Abwasser, eine einzige spezielle Substanz selektiv zu analysieren; mit standardisierten Substraten lassen sich so auch bestimmte Enzyme qualitativ oder quantitativ erfassen.Chemical reactions are increasingly coming Importance in determining the concentration of enzymes, Substrates, hormones, or for tracking Reaction processes, such as. B. in the context of medical Examination and diagnostic procedures in which Food analysis, the water and wastewater analysis used will. In the so-called enzymatic analysis, one Specialty of biochemical analysis, be enzymes or Substrates used as detection reagents. With the enzymatic Analysis is possible in mixtures, e.g. Blood, urine, Bioreactor samples, waste water, a single special substance selectively analyze; leave with standardized substrates certain enzymes qualitatively or quantitatively to capture.

Ein bevorzugtes Beispiel, dem der Ablauf chemischer und bio chemischer Reaktionen für eine biologische oder medizinische Bestimmungsmethode zugrundeliegt und dem immer größere Bedeutung zukommt, ist der sogenannte Immunoassay (IA). Beim Immunoassay handelt es sich um ein hochsensitives, auf der Spezifität immunologischer Reaktionen beruhendes Bestimmungsverfahren, für dessen qualitative und quantitative Auswertung eine Markierung eines der Reaktionspartner mit einer gut nachweisbaren und meßbaren Indikatorsubstanz erfolgt. Eine besondere Ausführungsform eines solchen Immunoassays stellt der Enzymimmunoassay (EIA) dar, bei dem enzymatische und immunochemische Analysenverfahren kombiniert werden, und der insbesondere zur Bestimmung von Antigenen, Antikörpern oder Haptenen verwendet wird. Im EIA werden Enzyme (z. B. Peroxidase) und Substrate als Detektionssystem verwendet; durch Zugabe eines geeigneten Substrats erfolgt die Messung der Enzymaktivität des Konjugats, wobei durch die katalytische Wirkung des Enzyms eine Verstärkung des Meßeffektes erzielt werden kann (vgl. z. B. Römmp Chemielexikon, 9. Auflage (1990) 1189).A preferred example that the chemical and bio chemical reactions for a biological or medical Determination method is based and the ever larger What is important is the so-called immunoassay (IA). At the Immunoassay is a highly sensitive on the Specificity based on immunological reactions Determination method, for its qualitative and quantitative Evaluation of one of the reaction partners with a easily detectable and measurable indicator substance. A special embodiment of such an immunoassay is the Enzyme immunoassay (EIA), in which enzymatic and immunochemical analysis methods can be combined, and the in particular for the determination of antigens, antibodies or Haptens is used. Enzymes (e.g. peroxidase) are used in the EIA and substrates used as a detection system; by encore a suitable substrate is used to measure the Enzyme activity of the conjugate, whereby by the catalytic Effect of the enzyme achieved an increase in the measurement effect can be (see e.g. Römmp Chemielexikon, 9th edition (1990) 1189).

Die Konzentrationsbestimmung, z. B. die Bestimmung des durch ein Enzym, z. B. Peroxidase, aus dem Substrat freigesetzten Farbstoffes, kann nach einem dafür geeigneten und üblichen Bestimmungsverfahren durchgeführt werden, z. B. photometrisch (Messung von Durchlicht oder der Reflexion), durch Messung der Fluoreszenz, durch Messung der Lumineszenz (z. B. in einem LIA), turbidimetrisch, und durch Messung der Radioaktivität.The concentration determination, e.g. B. the determination of by a Enzyme, e.g. B. peroxidase, released from the substrate Dye, can be according to a suitable and usual Determination procedures are carried out, e.g. B. photometric (Measurement of transmitted light or reflection), by measuring the Fluorescence, by measuring the luminescence (e.g. in a LIA), turbidimetric, and by measuring radioactivity.

Die Zugabe der Reagentien für einen Reaktionsablauf, z. B. zur Kontrolle und insbesondere zur Konzentrationsbestimmung in einem der vorstehend genannten Analyseverfahren, muß meistens in ganz bestimmten Mengen erfolgen, wozu in der Regel mehrere Arbeitsschritte zur Herstellung von Lösungen bestimmter Konzentration und Zusammenmischen in einem bestimmten Verhältnis erforderlich sind. Nach einer gegebenenfalls erforderlichen Inkubation kann die Konzentrationsbestimmung der Zielsubstanz dann visuell (z. B. für qualitative und halb quantitative Untersuchungen) oder mit Hilfe eines entsprechenden Meßgerätes erfolgen, wobei zur Messung und Auswertung wieder manuell, teil- oder vollautomatisch gearbeitet werden kann, z. B. mittels eines für derartige Zwecke geeigneten elektronischen Rechners.The addition of the reagents for a reaction sequence, e.g. B. for Control and in particular for determining the concentration in one of the analysis methods mentioned above, must usually in very specific quantities, usually several Steps to make certain solutions Concentration and mixing together in one Ratio are required. After a possibly required incubation can determine the concentration of the Then target substance visually (e.g. for qualitative and semi quantitative studies) or with the help of a Corresponding measuring device take place, for measurement and Evaluation again manually, partially or fully automatically can be worked, e.g. B. by means of such a purpose suitable electronic calculator.

Die Zugabe von Reagentien zur Durchführung chemischer Reaktionsabläufe, wie z. B. zur qualitativen oder quantitativen Bestimmung einer Zielsubstanz, ist in der Regel mit dem Nachteil behaftet, daß durch die oft getrennt erforderliche Zugabe mehrerer verschiedener Reagentien, meistens in Form mehrerer Lösungen bestimmter Konzentrationen, jedes einzelne Reagens zuerst in bestimmter Menge, z. B. in Form einer Lösung bestimmter Konzentration und Menge, bereitgestellt und abgemessen werden muß, was in der Regel eine vorhergehende Lösung, Verdünnung, Abmessung und/oder Vermischung erforderlich macht; eine solche Arbeitsweise ist bei chemisch instabilen Substanzen oft mit weiteren Problemen verbunden. So kann es z. B. erforderlich sein, die Reaktionslösung unter bestimmten Bedingungen (z. B. unter Kühlung und/oder in einer Inertgasatmosphäre) auf zubewahren, oder kurz vor der Durchführung der eigentlichen Reaktion (Bestimmung) frische Lösungen eines oder mehrerer der verwendeten Reagentien herzustellen.The addition of reagents to carry out chemical Reaction processes, such as B. for qualitative or quantitative Determination of a target substance is usually with the Disadvantageous that often required separately Add several different reagents, mostly in the form several solutions of certain concentrations, each one Reagent first in a certain amount, e.g. B. in the form of a solution certain concentration and quantity, provided and must be measured, which is usually a previous one Solution, dilution, size and / or mixing required power; such a way of working is chemically unstable Substances are often associated with other problems. It can e.g. B. may be required, the reaction solution under certain Conditions (e.g. under cooling and / or in a Inert gas atmosphere) or shortly before Carrying out the actual reaction (determination) freshness Solutions of one or more of the reagents used to manufacture.

Aufgabenstellung der vorliegenden Erfindung war es deshalb, einen Reagensträger zur Zugabe chemischer und/oder biologischer Reagentien bereitzustellen, mit dem die vorstehend genannten Nachteile in hohem Maße vermieden werden können, und mit dem eine leichte, problemlose und gleichzeitige und/oder synchrone Reagentiendosierung und -zugabe mit breiter Anwendbarkeit möglich ist. Diese Aufgabe wird mit der vorliegenden Erfindung gelöst.The object of the present invention was therefore to a reagent carrier for adding chemical and / or biological Provide reagents with which the above Disadvantages can be largely avoided, and with that a light, trouble-free and simultaneous and / or synchronous Reagent dosing and addition with a wide range of uses is possible. This object is achieved with the present invention solved.

Gegenstand der Erfindung ist ein Reagensträger zur Zugabe chemischer oder biologischer Reagentien gemäß Patentanspruch 1, der dadurch gekennzeichnet ist, daß er in Form eines Ringes oder Hohlzylinders ausgestaltet ist, der ein oder mehrere chemische oder biologische Reagentien enthält. The invention relates to a reagent carrier for addition chemical or biological reagents according to claim 1, which is characterized in that it is in the form of a ring or hollow cylinder is configured, the one or more contains chemical or biological reagents.

Bevorzugte Ausführungsformen davon sind Gegenstand der Ansprüche 2 bis 13.Preferred embodiments thereof are the subject of Claims 2 to 13.

Die Abmessungen des erfindungsgemäßen Reaktionsträgers, insbesondere der Außendurchmesser des Ringes oder Hohlzylinders, oder die Höhe des Hohlzylinders, sind in weiten Grenzen varierbar; sie richten sich nach der beabsichtigten Verwendung.The dimensions of the reaction support according to the invention, in particular the outer diameter of the ring or Hollow cylinders, or the height of the hollow cylinder, are wide Limits variable; they depend on the intended Use.

Zur Verwendung in einem Analysenverfahren, z. B. einem Enzymimmunoassay, bei dem die Vertiefungen einer Mikrotiterplatte zur Aufnahme des Reaktionsgemisches dienen, und die eine bevorzugte Verwendung des erfindungsgemäßen Reagensträgers darstellt, wird der Außendurchmesser des Ringes oder Hohlzylinders vorzugsweise so gewählt, daß der Reagensträger in die Vertiefungen einer solchen Mikrotiterplatte eingeführt werden kann. Bei Verwendung anderer Einrichtungen zur Aufnahme des Reaktionsgemisches z. B. von ähnlichen Platten mit weniger oder auch mehr kleineren oder größeren Vertiefungen von Tüpfelplatten, genormten Reagensgläsern usw., kann es zweckmäßig sein, die Reagensträger entsprechend anzupassen.For use in an analytical process, e.g. B. one Enzyme immunoassay in which the wells of a Serve the microtiter plate to take up the reaction mixture, and a preferred use of the invention Represents the reagent, the outer diameter of the ring or hollow cylinder preferably chosen so that the Reagent carrier into the wells of such Microtiter plate can be inserted. When using others Devices for receiving the reaction mixture z. B. from similar plates with less or more smaller or larger wells of spotted plates, standardized Test tubes, etc., it may be appropriate to use the test tubes adjust accordingly.

Mit den erfindungsgemäßen Reaktionsträgern ist es auch auf einfache Weise möglich, entsprechende Reaktionen (z. B. Test und Vergleich) in getrennten Reaktionsbehältern, z. B. den Vertiefungen einer Mikrotiterplatte, genau zur gleichen Zeit durchzuführen.It is also up with the reaction carriers according to the invention simple way possible, appropriate reactions (e.g. test and Comparison) in separate reaction vessels, e.g. B. the Wells of a microtiter plate at exactly the same time perform.

In dem erfindungsgemäßen Reagensträger beträgt das Verhältnis Außendurchmesser/Innendurchmesser des Ringes oder Hohlzylinders vorzugsweise 1 bis 10; das Verhältnis Dicke des Ringes oder Höhe des Hohlzylinders/Außendurchmesser beträgt vorzugsweise 0,1 bis 1,5.The ratio in the reagent carrier according to the invention is Outside diameter / inside diameter of the ring or hollow cylinder preferably 1 to 10; the ratio thickness of the ring or Height of the hollow cylinder / outer diameter is preferably 0.1 to 1.5.

Das Material, aus dem der erfindungsgemäße Reaktionsträger aufgebaut ist, wird insbesondere im Hinblick auf seine Verwendung entsprechend ausgewählt. Bevorzugt besteht der Ring oder Hohlzylinder des erfindungsgemäßen Reagensträgers aus Glas, Metall, Keramik, Papier, z. B. Filterpapier, und/oder Kunststoff. Der Ring oder Hohlzylinder kann aus einem durchsichtigen oder opaken Material bestehen, wobei sich hier die Auswahl insbesondere nach der beabsichtigten Meßmethode, z. B. photometrischer Bestimmung im Durchlicht oder Messung der Reflexion, richtet. In einer zweckmäßigen Ausführungsform besteht der erfindungsgemäße Ring oder Hohlzylinder, insbesondere bei Verwendung zusammen mit einer Mikrotiterplatte, aus dem gleichen Material, wie die Mikrotiterplatten, d. h. üblicherweise aus Kunststoff, insbesondere aus Polystyrol oder Polyvinylchlorid. Der Ring oder Hohlzylinder kann auch teilweise oder ganz aus einem porösen oder semipermeablen Material bestehen, z. B. einem an sich bekannten porösen Kunststoff oder einer porösen Keramikmasse, die entsprechende Poren und Kanäle aufweisen, in denen das oder die Reagentien enthalten sind, und aus denen sie durch das Reaktionsmedium, in dem die übrigen Reaktionsteilnehmer vorzugsweise in gelöster und/oder dispergierter Form vorliegen, freigesetzt werden können. In einer weiteren Ausführungsform der erfindungsgemäße Reagensträger auch teilweise oder ganz aus einem sich im Reaktionsmedium auflösenden Material bestehen. An die Oberflächen des erfindungsgemäßen Ringes oder Hohlzylinders kann das Reagens auf eine an sich bekannte, z. B. zur Herstellung immobilisierter Phasen und Mikrotiterplattenbeschichtungen übliche Weise, gebunden sein.The material from which the reaction carrier according to the invention is built, especially with regard to its Use selected accordingly. The ring preferably consists or hollow cylinder of the reagent according to the invention Glass, metal, ceramics, paper, e.g. B. filter paper, and / or Plastic. The ring or hollow cylinder can be made from one clear or opaque material, where here the selection especially according to the intended measuring method, e.g. B. photometric determination in transmitted light or measurement of Reflection. In an expedient embodiment there is the ring or hollow cylinder according to the invention, especially when used together with a Microtiter plate, made of the same material as that Microtiter plates, d. H. usually made of plastic, especially made of polystyrene or polyvinyl chloride. The ring or hollow cylinder can also be partially or entirely from one porous or semipermeable material, e.g. B. one known porous plastic or a porous Ceramic mass, which have corresponding pores and channels, in which contain the reagent or reagents and from which they through the reaction medium in which the rest Reactants preferably in dissolved and / or are in dispersed form, can be released. In a further embodiment of the invention Reagent carrier also partially or entirely from one in the Reaction medium dissolving material exist. To the Surfaces of the ring or hollow cylinder according to the invention can the reagent to a known, z. B. for Production of immobilized phases and Microtiter plate coatings in the usual way.

In dem Ring oder Hohlzylinder des erfindungsgemäßen Reagensträgers können die Reagentien gleichmäßig über die Oberfläche und/oder das Innere des Ringes oder Hohlzylinders verteilt sein; es können aber auch verschiedene Reagentien in verschiedenen voneinander getrennten Zonen des Ringes oder Hohlzylinders enthalten sein, die z. B. aus aufeinanderliegend angeordneten Schichten des Ringes oder Hohlzylinders ausgebildet sind, oder aber voneinander getrennte Sektoren des Ringes oder Hohlzylinders bilden. Der Ring oder Hohlzylinder kann auch an seiner Umfangsfläche und/oder der oberen und/oder unteren Oberfläche eine Beschichtung aufweisen, die eine oder mehrere Reagentien enthält, aus der diese dann durch das Reaktionsmedium freigesetzt werden. Eine solche Beschichtung kann z. B. eine semipermeable Membran sein. Eine solche Membran kann z. B. auch die einzelnen Schichten eines aus übereinander angeordneten Schichten ausgebildeten Ringes oder Hohlzylinders bilden. Sie kann aber auch als obere und/oder untere Deckschicht ausgebildet sein,die den Hohlzylinder oder Ring unten (als Bodenfläche) und/oder oben (als Deckfläche) abschließt; in diesem Fall bildet die Beschichtung der unteren oder oberen Oberfläche des Ringes oder des Hohlzylinders und die den eigentlichen Hohlzylinder abschließende Boden- oder Deckschicht vorzugsweise eine Einheit, d. h. eine die äußere Umfangsfläche abdeckende Scheibe. Ein mit einer Bodenschicht oder Boden- und Deckschicht versehener Reaktionsträger kann z. B. in seinem Inneren einen oder mehreren Reagenzien, z. B. auch in mikroverkapselter Form, enthalten, die z. B. nach Auflösen der Bodenschicht und/oder Deckschicht freigesetzt werden können, oder mit dem durch die als semipermeable Wände ausgebildeten Schichten eindringenden Reaktionssystem reagieren können.In the ring or hollow cylinder of the invention The reagent can spread the reagents evenly over the Surface and / or the inside of the ring or hollow cylinder be distributed; however, different reagents can also be used different separate zones of the ring or Hollow cylinders can be included, the z. B. from one another arranged layers of the ring or hollow cylinder are formed, or separate sectors of the Form ring or hollow cylinder. The ring or hollow cylinder can also on its peripheral surface and / or the top and / or have a coating on the lower surface that has a contains several reagents, from which these are then replaced by the Reaction medium are released. Such a coating can e.g. B. be a semipermeable membrane. Such a membrane can e.g. B. also the individual layers one above the other arranged layers of formed ring or hollow cylinder form. But it can also be used as an upper and / or lower one Be formed cover layer, the hollow cylinder or ring below (as floor surface) and / or above (as top surface) completes; in this case the coating forms the lower one or top surface of the ring or hollow cylinder and the bottom or the final hollow cylinder Cover layer preferably one unit, i. H. one the outer Washer covering peripheral surface. One with a layer of soil or a reaction carrier provided with a bottom and top layer e.g. B. inside one or more reagents, e.g. B. also in microencapsulated form, the z. B. after Dissolution of the bottom layer and / or top layer released can be, or with that through the semi-permeable walls trained layers penetrating reaction system react can.

Die Schichten, Sektoren und/oder einzelnen Beschichtungen, aus denen der Ring oder Hohlzylinder des erfindungsgemäßen Reagensträgers besteht oder die er enthält, sind vorzugsweise fest miteinander verbunden, z. B. durch einen geeigneten Kleber. Die einzelnen Abschnitte (Schichten, Sektoren, Membranen) können dabei mehrere Reagentien enthalten, vorzugsweise enthalten sie aber nur ein einziges Reagens, wodurch eine vorzeitige Wechselwirkung zwischen zwei oder mehreren Reagentien vor der Durchführung der eigentlichen Bestimmungsmethode sicher vermieden werden kann. Der Hohlzylinder eines erfindungsgemäßen Reaktionsträgers kann z. B. aus zwei oder mehreren konzentrisch übereinander angeordneten erfindungsgemäßen Ringen und/oder Hohlzylindern geringerer Höhe aufgebaut sein, die lösbar oder vorzugsweise fest, z. B. durch Verkleben, miteinander verbunden sind.The layers, sectors and / or individual coatings which the ring or hollow cylinder of the invention Reagent carrier or which it contains are preferred firmly connected, e.g. B. with a suitable adhesive. The individual sections (layers, sectors, membranes) can contain several reagents, preferably however, they contain only one reagent, which means one early interaction between two or more Reagents before performing the actual Determination method can be safely avoided. Of the Hollow cylinder of a reaction carrier according to the invention can, for. B. of two or more arranged concentrically one above the other Rings and / or hollow cylinders of lower height according to the invention be built, the detachable or preferably fixed, for. B. by Glue, are connected.

Eine oder vorzugsweise mehrere der Oberflächen des erfindungsgemäßen Ringes oder Hohlzylinders können zur Vergrößerung der Oberfläche auch entsprechend ausgestaltet sein, z. B. aufgerauht oder ziehharmonikaartig gefaltet.One or preferably more of the surfaces of the ring or hollow cylinder according to the invention can for Enlargement of the surface also designed accordingly be, e.g. B. roughened or folded like an accordion.

Mit dem erfindungsgemäßen Reaktionsträger ist es möglich, ein oder mehrere Reagentien auf einfache und problemlose Weise einem Reaktionsmedium zuzuführen. Insbesondere ist es erfindungsgemäß möglich, auch instabile Reagentien oder miteinander in Reaktion tretende Reagentien leicht, problemlos und gleichzeitig zuzugeben, ohne daß vor der eigentlichen Bestimmungsreaktion zeitaufwendige und komplizierte Maßnahmen erforderlich sind, wie z. B. ein Auflösen, Einstellen auf eine bestimmte Konzentration, Abmessen und Mischen.With the reaction carrier according to the invention it is possible to use a or multiple reagents in a simple and easy way to supply a reaction medium. In particular it is possible according to the invention, also unstable reagents or reagents reacting with one another easily, admit easily and at the same time without that before the actual determination reaction time consuming and complicated measures are required, such as B. a Dissolve, adjust to a certain concentration, measure and mixing.

Mit dem erfindungsgemäßen Reaktionsträger ist es möglich, ein oder mehrere Reagentien bereits in einer bestimmten gewünschten Menge bereitzustellen, wodurch es vor der eigentlichen Durchführung der Bestimmungsreaktion nur noch erforderlich ist, einen oder mehrere gleiche oder verschiedene erfindungsgemäße Reagensträger zuzusetzen, wobei deren Mengenanteil auf einfache Weise, z. B. durch Abzählen oder Abwiegen, festgelegt werden kann. Die erfindungsgemäßen Reagensträger können aber auch bereits in entsprechenden Dosiseinheitspackungen bereitgestellt werden, die z. B. ein oder mehrere Reagentien für einen Test enthalten, gegebenenfalls in Inertgasatmosphäre eingeschlossen. Auf diese Weise ist es möglich, gemäß der Anleitung für einen bestimmten Test den Inhalt einer oder mehrerer Probenfläschchen, die erfindungsgemäße Reagensträger enthalten, einem Reaktionsmedium auf einfache Weise und ohne vorhergehende aufwendige Zusatzmaßnahmen, zuzugeben. With the reaction carrier according to the invention it is possible to use a or several reagents already in a certain desired one Provide amount, making it before the actual The determination reaction is only necessary, one or more identical or different according to the invention Add reagent, the proportion of which is simple Way, e.g. B. by counting or weighing can. However, the reagent carriers according to the invention can also already provided in appropriate dose unit packs be the z. B. one or more reagents for a test included, optionally included in an inert gas atmosphere. This way it is possible to follow the instructions for one certain test the content of one or more vials, contain the reagent carrier according to the invention, one Reaction medium in a simple manner and without previous costly additional measures to admit.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist deshalb auch die Verwendung eines erfindungsgemäßen Reagensträgers, insbesondere in Form seiner vorstehend und nachstehend beschriebenen bevorzugten Ausführungsformen, zur Durchführung chemischer oder biochemischer Reaktionen. Vorzugsweise finden die erfindungsgemäßen Reaktionsträger Verwendung in Mikrotiterplatten-Verfahren, z . B. in entsprechenden Immunoassays, und insbesondere Enzymimmunoassays.The present invention therefore also relates to Use of a reagent carrier according to the invention, in particular in the form of his described above and below preferred embodiments, for carrying out chemical or biochemical reactions. Preferably find the Reaction carriers according to the invention use in Microtiter plate method, e.g. B. in corresponding Immunoassays, and especially enzyme immunoassays.

Unter chemischen Reaktionen sind erfindungsgemäß auch physikalisch-chemische Reaktionen zu verstehen, und unter biochemischen Reaktionen auch biologische Reaktionen. So kann z. B. eine z. B. durch Temperaturänderung verursachte physikalisch-chemische Reaktion, z. B. Auskristallisation oder Lösung, durch Zugabe entsprechend gekühlter oder erwärmter erfindungsgemäßer Reagensträger gesteuert werden.Chemical reactions are also according to the invention understand physico-chemical reactions, and under biochemical reactions also biological reactions. So can e.g. B. a z. B. caused by temperature change physico-chemical reaction, e.g. B. crystallization or Solution, by adding appropriately cooled or heated Reagent carrier according to the invention can be controlled.

Weiterer Gegenstand der Erfindung ist auch ein Kit zur Durchführung eines Bestimmungsverfahrens, insbesondere eines Enzymimmunoassays, der aus einem oder mehreren die erfindungsgemäße Träger enthaltenden Einheitdosisbehältern und gegebenenfalls weiteren Behältern mit Hilfsstoffen besteht.Another object of the invention is also a kit for Carrying out a determination procedure, in particular one Enzyme immunoassays consisting of one or more of the unit dose containers and carriers according to the invention if necessary, there are other containers with auxiliary substances.

Die erfindungsgemäßen Reaktionsträger können, insbesondere abhängig von der chemischen oder biochemischen Reaktion, die durchgeführt werden soll, in verschiedener Größe und Gestalt zugegeben werden. Die Größe, Gestalt und Menge der erfindungsgemäßen Reaktionsträger richtet sich dabei insbesondere auch nach der Art des Reagens oder der Reagentien, die er enthält. Wenn das Reagens als Katalysator dient, so ist es in der Regel ausreichend, einen oder wenige entsprechend ausgestaltete Reaktionsträger dem Reaktionsmedium zuzugeben. Wenn der Reaktionsträger aber eine oder mehrere Reaktionskomponenten einer chemischen oder biochemischen Reaktion enthält, ist es meistens erforderlich, die Reaktionsträger in größerer Menge zuzugeben. So kann z. B. ein Reaktionsgefäß, z. B. ein entsprechender Kolben, eine Reagensglas, ein Zentrifugenglas oder eine Küvette zur photometrischen Messung mit den erfindungsgemäßen Reagensträgern teilweise oder ganz gefüllt werden, und nach Beendigung der Reaktion, die gegebenenfalls unter Rühren oder Agitieren des die Reagensträger enthaltenden Mediums durchgeführt wird, lassen sich die Reagensträger wieder auf einfache Weise von der Reaktionsmischung, die diese Reaktionsträger z. B. nach Art von Füllkörpern enthält, wieder einfach abtrennen, z. B. durch Abdekantieren, Filtration oder nach einem anderen dafür bekannten und üblichen Verfahren.The reaction carriers according to the invention can, in particular depending on the chemical or biochemical reaction that should be carried out in different sizes and shapes be added. The size, shape and quantity of the Reaction carriers according to the invention are directed here in particular also according to the type of reagent or reagents, that it contains. If the reagent serves as a catalyst, so is it usually suffices to match one or a few designed reaction carriers to add the reaction medium. If the reaction carrier is one or more Reaction components of a chemical or biochemical Reaction contains, it is mostly necessary that Add reaction carriers in larger quantities. So z. B. a Reaction vessel, e.g. B. a corresponding piston, a Test tube, a centrifuge tube or a cuvette photometric measurement with the invention Reagent carriers are partially or completely filled, and after Termination of the reaction, optionally with stirring or Agitate the medium containing the reagent carrier is carried out, the reagent carriers can be opened again simple way of the reaction mixture that this Reaction carrier z. B. contains in the manner of packing, again just separate, e.g. B. by decanting, filtration or by another known and customary method.

Aufgrund ihrer Ausgestaltung als Ring oder Hohlzylinder mit flachen unteren und oberen Begrenzungsflächen eignen sich die erfindungsgemäßen Reaktionsträger insbesondere auch für den Einsatz in Reaktionsgefäßen mit flachem Boden und kreisförmigem oder auch rechteckigem Querschnitt. In derartigen Behältern, wie z. B. den Vertiefungen einer üblichen Mikrotiterplatte, wird vorzugsweise ein Reagensträger mit gleichem Grundriß verwendet, wobei der Außendurchmesser des Ringes oder Hohlzylinders so verkleinert ist, daß der Reagensträger problemlos in den Reaktionsbehälter, z. B. die Vertiefung einer Mikrotiterplatte, eingeführt und ausgebracht werden kann, und zwischen der Innenwand des Behälters und der Umfangs-Außenwand des Ringes oder Hohlzylinders ein für die Durchführung der Reaktion ausreichend großer Abstand verbleibt. Durch die Verwendung von Reaktionsbehältern mit flachem Boden und entsprechend angepaßten erfindungsgemäßen Reaktionsträgern läßt sich auch eine Agglutination von Reaktionsteilnehmern, wie sie insbesondere bei Reaktionsgefäßen mit einem sich nach unten verjüngenden Querschnitt auftreten können, weitgehend vermeiden. Auf der anderen Seite ist es aber z. B. auch möglich, mittels entsprechend ausgestaltener erfindungsgemäßer Reaktionsträger, z. B. zur Blutgruppenbestimmung, das Auftreten von Agglutinationen qualitativ oder auch quantitativ zu bestimmen, z. B. durch photometrische Messung der Extinktionsänderung oder Trübung, die durch Ablagerung eines Agglutinates (Reaktionsniederschlages) im Bereich des Innendurchmessers des Reaktionsträgers verursacht wird. Due to their design as a ring or hollow cylinder flat lower and upper boundary surfaces are suitable Reaction carrier according to the invention in particular for Use in reaction vessels with a flat bottom and circular or rectangular cross section. In such containers, such as B. the wells of a conventional microtiter plate preferably use a reagent carrier with the same layout, the outer diameter of the ring or hollow cylinder so is reduced that the reagent carrier in the Reaction vessel, e.g. B. the deepening of a microtiter plate, can be introduced and deployed, and between the Inner wall of the container and the peripheral outer wall of the ring or a hollow cylinder for carrying out the reaction sufficient distance remains. By the use of Flat bottom reaction vessels and the like adapted reaction carriers according to the invention can also an agglutination of reactants like her especially in reaction vessels with a downward tapering cross-section can occur largely avoid. On the other hand, it is e.g. B. also possible by means of appropriately designed inventive Reaction carriers, e.g. B. for blood group determination, the occurrence of agglutinations qualitatively or quantitatively determine e.g. B. by photometric measurement of Change in extinction or turbidity caused by deposition of a Agglutinates (reaction precipitation) in the area of Inner diameter of the reaction carrier is caused.

Obwohl der Grundriß der erfindungsgemäßen Reagensträger in der Regel kreisförmig ist, ist er nicht darauf beschränkt; er kann z. B. auch ellipsenförmig und insbesondere quadratisch/ rechteckig ausgebildet sein. Ein rechteckiger Grundriß eignet sich z. B. vor allem für Reaktionen, die in Meßküvetten zur photometrischen Bestimmung durchgeführt werden. In diesem Fall ist der erfindungsgemäße Reaktionsträger dann vorzugsweise als Polyeder mit rechteckigem Querschnitt ausgestaltet, der einen zur äußeren Umfangsfläche parallen inneren Schacht aufweist.Although the floor plan of the reagent carrier according to the invention in the Usually circular, it is not limited to this; he can e.g. B. also elliptical and in particular square / be rectangular. A rectangular floor plan is suitable z. B. especially for reactions in the measuring cuvettes photometric determination can be carried out. In this case is then the reaction carrier according to the invention preferably as a polyhedron with a rectangular cross section designed that parallel to the outer peripheral surface inner shaft.

Es kann auch zweckmäßig sein, auch den Querschnitt (Aufriß) des erfindungsgemäßen Reaktionsträgers dem Querschnitt (Aufriß) des Reaktionsgefäßes anzupassen; so kann es z. B., insbesondere im Hinblick auf die Bestimmung von Agglutinationsbildungen, oder bei Reaktionen, in denen eine Trennung der Reaktionsprodukte durch Zentrifugieren erfolgt, zweckmäßig sein, den Reaktionsträger an das Reaktionsgefäß anzupassen, z. B. dadurch, daß das untere Ende sich wie bei einem Zentrifugengefäß nach unten verjüngt, d. h. also, daß z. B. der untere Grundriß des erfindungsgemäßen Reaktionsträgers eine kleineren Durchmesser als der obere Grundriß des Reaktionsträgers besitzt, oder der Reaktionsträger sich nach unten hin kegelförmig verjüngt und mit einer abgerundeten Spitze abschließt. Auch die vorstehend aufgeführten Abänderungen (z. B. ein dem Reaktionsgefäß angepaßter ellipsenförmiger oder rechteckiger Grundriß, oder ein dem Reaktionsgefäß angepaßter sich nach unter verjüngender Aufriß) fallen ebenfalls unter dem Schutzumfang der vorliegenden Erfindung.It may also be appropriate to cross-section (elevation) the reaction carrier according to the invention the cross section (elevation) of the Adapt the reaction vessel; so it can e.g. B., especially in With regard to the determination of agglutination formations, or in reactions in which the reaction products are separated done by centrifugation, be appropriate Adapt reaction carrier to the reaction vessel, e.g. B. thereby that the lower end follows like a centrifuge tube tapered below, d. H. So that z. B. the bottom floor plan of the reaction carrier according to the invention has a smaller diameter than the top plan of the reaction support, or Reaction carrier tapers conically downwards and with with a rounded tip. Even the above modifications listed (e.g. a reaction vessel adapted elliptical or rectangular plan, or one adapted to the reaction vessel tapering under Aufriß) also fall under the scope of protection of the present invention.

In einer zweckmäßigen Ausführungsform kann der erfindungsgemäße Reaktionsträger an seiner Bodenfläche auch einen ringförmigen Einsatz aufweisen, dessen Außendurchmesser und Querschnitt so gewählt ist, daß er in den Reaktionsträger paßt, wobei zwischen der Außenwand des Einsatzes und der Innenwand des Reaktionsträgers zweckmäßigerweise kein oder nur ein sehr geringer Abstand verbleibt, und wobei die Innenwände des Einsatzes einen sich nach unten verjüngenden Kegelstumpf bilden, wobei der Durchmesser des oberen Querschnittes etwa mit dem Durchmesser der Außenwand des Einsatzes übereinstimmt, und der Durchmesser des unteren Grundrisses entsprechend kleiner ist. Ein Beispiel für einen erfindungsgemäßen Reaktionsträger, der einen solchen sich nach unten verjüngenden Einsatz trägt, und insbesondere zur Bestimmung von Agglutinatbildung verwendet werden kann, zeigt die Abb. 8.In an expedient embodiment, the reaction support according to the invention can also have an annular insert on its bottom surface, the outer diameter and cross section of which is selected such that it fits into the reaction support, with advantageously no or only a very small amount between the outer wall of the insert and the inner wall of the reaction support Distance remains, and wherein the inner walls of the insert form a truncated cone, the diameter of the upper cross-section roughly corresponds to the diameter of the outer wall of the insert, and the diameter of the lower plan is correspondingly smaller. Fig. 8 shows an example of a reaction carrier according to the invention which carries such a tapering insert and can be used in particular for determining agglutinate formation.

Werden die erfindungsgemäßen Reagensträger in einem Verfahren zur Bestimmung einer Zielsubstanz verwendet, z. B. in einem Enzymimmunoassay zur Bestimmung eines Antigens oder Antikörpers, so können die erfindungsgemäßen Reagensträger sowohl die entsprechenden Reagentien, als auch die die zu bestimmende Zielsubstanz enthaltende Probe, z. B. eine Körperflüssigkeit, in vorzugsweise mehreren verschiedenen Reaktionsträgern enthalten. Dazu ist es z. B. nur erforderlich, die Probe, z. B. Körperflüssigkeit, in einem entsprechenden erfindungsgemäßen Ring oder Hohlzylinder, der dann vorzugsweise aus saugfähigem porösem Kunststoff- oder Keramikmaterial, oder Filterpapier besteht, auf zusaugen, und dann auf geeignete Weise zusammen mit den übrigen Reagensträgern in ein sich in einem Reaktionsbehälter, z. B. der Vertiefung einer Mikrotiterplatte, befindliches Reaktionsmedium, z. B. aufeinanderliegend, einzubringen.Become the reagent carrier according to the invention in one process used to determine a target substance, e.g. B. in one Enzyme immunoassay for the determination of an antigen or Antibody, so the reagent carrier according to the invention both the corresponding reagents and those for determining target substance containing sample, e.g. Legs Body fluid, preferably in several different Reaction carriers included. For this it is e.g. B. only required the sample, e.g. B. body fluid, in a corresponding ring or hollow cylinder according to the invention, which is then preferred made of absorbent porous plastic or ceramic material, or Filter paper is there to suck, and then in an appropriate way together in one with the other reagent carriers Reaction vessel, e.g. B. the well of a microtiter plate, located reaction medium, e.g. B. lying on top of each other, bring in.

Die erfindungsgemäßen Reagensträger eignen sich aufgrund ihrer Ausgestaltung insbesondere auch sehr gut für eine photometrische Konzentrationsbestimmung im Durchlicht, weil das Strahlenbündel in einem solchen Fall parallel zur Achse durch die kreisförmige Öffnung des Ringes oder Hohlzylinders geführt werden kann. Wenn der erfindungsgemäße Reaktionsträger eine Bodenschicht aufweist, z. B. in Form einer semipermeablen Wand, einer ein Reagens enthaltenden Wand usw., die nicht vollkommen lichtdurchlässig ist, so wird in einer solchen Wand im Zentrum zweckmäßigerweise ein ausreichend großes Fenster vorgesehen, das aus einem vollkommen lichtdurchlässigen Material ausgebildet ist. Die den Reaktionsträger unten und/oder oben abschließende Wand, z. B. in Form einer Membran, und insbesondere ein im Zentrum einer solchen Membran vorgesehenes völlig durchsichtiges Fenster, kann zweckmäßigerweise auch eine Prägung (Markierung), z. B. in Form eines Zählnetz-Rasters zur mikroskopischen Beurteilung eines Niederschlages (z. B. eines Agglutinats) aufweisen.The reagent carriers according to the invention are suitable because of their Design especially very good for one photometric concentration determination in transmitted light because that In such a case, the beam passes parallel to the axis guided the circular opening of the ring or hollow cylinder can be. If the reaction carrier of the invention Has bottom layer, e.g. B. in the form of a semi-permeable wall, a wall containing a reagent, etc., which is not perfect is translucent, so in such a wall in the center expediently a sufficiently large window is provided, made of a completely translucent material is trained. The reaction carrier below and / or above final wall, e.g. B. in the form of a membrane, and in particular one provided in the center of such a membrane completely transparent window, can expediently also a Embossing (marking), e.g. B. in the form of a counting grid microscopic assessment of a precipitation (e.g. a Agglutinate).

Auf diese Weise lassen sich z. B. die mit bekannten Systemen, z. B. auf der Basis einer Mehrschichtfilmtechnologie, bei denen nur eine Oberflächenmessung, z. B. Reflexionsmessung, aber keine Messung im Durchlicht erfolgen kann, verbundenen Nachteile vermeiden; auch Reagentien in Granulatform müssen zur Messung im Durchlicht erst in einem Lösungsmittel gelöst werden.In this way, z. B. with known systems, e.g. B. on the basis of a multi-layer film technology, in which only a surface measurement, e.g. B. reflection measurement, but none Measurement can be done in transmitted light, associated disadvantages avoid; reagents in granular form also have to be measured can only be dissolved in a solvent in transmitted light.

Mit den erfindungsgemäßen Reagensträgern läßt sich in der Regel auch das Volumen des Reaktionsmediums verringern, wodurch z. B. turbidimetrische Messungen erleichtert oder überhaupt erst möglich werden. Bei gleichbleibender Meßgenauigkeit und Empfindlichkeit läßt sich meist auch die Reagensmenge und/oder Probenmenge verringern.As a rule, the reagent carriers according to the invention can be used also reduce the volume of the reaction medium, whereby z. B. Turbidimetric measurements made easier or even easier become possible. With constant measurement accuracy and The amount of reagent and / or can usually also be sensitive Reduce the amount of sample.

Die Erfindung wird nun durch die nachfolgenden Beispiele näher veranschaulicht, ohne den Rahmen der Erfindung darauf zu beschränken.The invention is now illustrated by the following examples illustrated without departing from the scope of the invention restrict.

Examples

Die Fig. 1 bis 5 zeigen beispielhafte Ausgestaltungen eines erfindungsgemäßen Reagensträgers. Figs. 1 to 5 show exemplary embodiments of a reagent support according to the invention.

In den Figuren bedeuten:In the figures:

Fig. 1 eine perspektivische Darstellung eines erfindungsgemäßen Reagensträgers 1 in Form eines Hohlzylinders; Fig. 1 is a perspective view of a reagent support the invention 1 in the form of a hollow cylinder;

Fig. 2 den Querschnitt eines aus mehreren übereinanderliegenden Schichten 2 ausgebildeten Reagensträgers 1 in Achsenebene; Fig. 2 shows the cross-section of a reagent support formed of several superimposed layers 2 1 in axial plane;

Fig. 3 den Grundriß eines sektorförmig in 3 Segmente 3, 4, 5 aufgeteilten, als Ring oder Hohlzylinder ausgestalteten Reagensträgers 1; FIG. 3 shows the outline of a sector-shaped divided into 3 segments 3, 4, 5, embodied as a ring or hollow cylinder reagent support 1;

Fig. 4 den Querschnitt in Achsenebene eines erfindungsgemäßen Reagensträgers 1, dessen untere und obere Begrenzungsfläche Rinnen 6 aufweist; Fig. 4 has the cross section in the axial plane of a reagent support 1 of the invention, the lower and upper boundary surface grooves 6;

Fig. 5 die obere Begrenzungsfläche eines Reagensträgers 1 nach Fig. 4 in Draufsicht, wobei die Rinnen 7 konzentrisch angeordnet sind; FIG. 5 shows the top boundary surface of a reagent carrier 1 according to FIG. 4 in a top view, the channels 7 being arranged concentrically;

Fig. 6 den Querschnitt eines Reagensträgers 1 in Form eines Hohlzylinders, der unten mit einer Bodenschicht 10 abgeschlossen ist; Fig. 6 shows the cross-section of a reagent support 1 in the form of a hollow cylinder which is closed at the bottom with a bottom layer 10;

Fig. 7 den Querschnitt durch eine übliche Mikrotiterplatte 8 (8 × 12 cm, 8 × 12 = 96 Vertiefungen, Fassungsvermögen jeder Vertiefung ca. 250 µl), in der 3 Vertiefungen 9 einen erfindungsgemäßen Reagensträger 1 in Form eines Hohlzylinders enthalten; und Fig. 7 (cm, 8 × 12 = 96-well capacity of each well 250 ul 8 × 12), contain the cross-section of a conventional microtiter plate 8 in the 3 wells 9 a reagent carrier 1 according to the invention in the form of a hollow cylinder; and

Fig. 8 den Querschnitt durch einen erfindungsgemäßen Reaktionsträger 1, der einen Einsatz 11 enthält, der auf der Bodenschicht 10 ruht; die Innenwand 12 des Einsatzes 11 bildet einen Kegelstumpf. Ein solcher Einsatz, der zweckmäßigerweise aus dem gleichen Material wie der erfindungsgemäße Reaktionsträger besteht, eignet sich z. B., wie auch in Fig. 8 dargestellt, zur Bestimmung des Auftretens eines Agglutinats 13 in einem Reaktionsgemisch 14. Der Einsatz kann auch fest mit dem Reaktionsträger verbunden sein, z. B. fest verklebt oder insbesondere mit diesem integriert. Fig. 8, which rests the cross-section through an inventive reaction support 1 which includes an insert 11 on the ground layer 10; the inner wall 12 of the insert 11 forms a truncated cone. Such an insert, which advantageously consists of the same material as the reaction support according to the invention, is suitable for. B., as also shown in FIG. 8, for determining the occurrence of an agglutinate 13 in a reaction mixture 14 . The insert can also be firmly connected to the reaction support, e.g. B. firmly glued or in particular integrated with this.

example 1

Dieses Beispiel beschreibt einen erfindungsgemäßen Reagensträger in Form eines zur Einführung in Vertiefungen einer Mikrotiterplatte (Fig. 6) ausgestalteten Hohlzylinders zur Verwendung in einem ELISA-Enzymimmunoassays zur Bestimmung von Gesamt-Thyroxin. Als Reagensträger für den nach diesem Verfahren verwendeten Antikörper dient ein erfindungsgemäßer Hohlzylinder aus Polystyrol, der an seinen äußeren und inneren Oberflächen mit Thyroxin-Antikörper (Schaf) beschichtet ist. Nach Zugabe des Probenmaterials (Serum, Heparin-, EDTA-, Citrat- und Oxalat-Plasma) in die Vertiefungen der Mikrotiterplatte, die erfindungsgemäße, mit Thyroxin- Antikörpern beschichtete Reagensträger enthält, und Zugabe der Inkubationslösung (Inkubationstemperatur 20 bis 25°C, Inkubationszeit 30 Minuten), werden die erfindungsgemäßen Reagensträger aus den Vertiefungen herausgenommen und nach Überführung in die Vertiefungen einer anderen Mikrotiterplatte mit Substrat-Chromogen-Lösung (ABTS/H₂O₂) versetzt. Nach Inkubieren (30 Minuten) kann die photometrische Auswertung direkt im Durchlicht mittels eines Spektralphotometers (Wellenlänge: 420 nm) erfolgen.This example describes a reagent carrier according to the invention in the form of a hollow cylinder designed for insertion into wells of a microtiter plate ( FIG. 6) for use in an ELISA enzyme immunoassay for the determination of total thyroxine. A hollow cylinder made of polystyrene according to the invention, which is coated on its outer and inner surfaces with thyroxine antibody (sheep), serves as the reagent carrier for the antibody used according to this method. After adding the sample material (serum, heparin, EDTA, citrate and oxalate plasma) into the wells of the microtiter plate, which contains reagent carriers coated with thyroxine antibodies according to the invention, and adding the incubation solution (incubation temperature 20 to 25 ° C., incubation time 30 minutes), the reagent carriers according to the invention are removed from the wells and, after transfer into the wells of another microtiter plate, substrate chromogen solution (ABTS / H₂O₂) is added. After incubation (30 minutes), the photometric evaluation can be carried out directly in transmitted light using a spectrophotometer (wavelength: 420 nm).

Example 2

Dieses Beispiel beschreibt eine enzymatische Bestimmung von Harnsäure mit Uricase (vgl. D. Barham und P. Trinder, Analyst 97 (1972) 142 bis 145; P. Fossati et al, Clin. Chem. 26 (1980) 227 bis 231).This example describes an enzymatic determination of Uric acid with uricase (see D. Barham and P. Trinder, Analyst 97 (1972) 142-145; P. Fossati et al, Clin. Chem. 26 (1980) 227 to 231).

Die Bestimmung der Harnsäure erfolgt nach Umsetzung mit Uricase; das gebildete H₂O₂ wird mit 3,5-Dichlor-2- hydroxybenzolsulfonsäure (DCHBS) und 4-Aminophenazon (Katalyse mit Peroxidase) zu einem rotvioletten Chinoniminfarbstoff umgesetzt, der als Indikator dient.After the reaction, the uric acid is determined with Uricase; the H₂O₂ formed with 3,5-dichloro-2- hydroxybenzenesulfonic acid (DCHBS) and 4-aminophenazone (catalysis with peroxidase) to a red-violet quinonimine dye implemented, which serves as an indicator.

Claims

1. reagent carrier for adding chemical and / or biological reagents to a reaction system, characterized in that it is designed in the form of a ring or hollow cylinder which contains one or more chemical or biological reagents.

2. Reagent carrier according to claim 1, characterized characterized in that the ring or hollow cylinder made of glass, Metal, ceramic, paper and / or plastic.

3. Reagent carrier according to claim 1 or 2, characterized characterized in that the outer diameter of the ring or Hollow cylinder is selected so that the reagent carrier in the Wells of a microtiter plate can be inserted.

4. reagent carrier according to one of claims 1 to 3, characterized in that the ratio Outside diameter / inside diameter of the ring or hollow cylinder Is 1 to 10.

5. reagent carrier according to one of claims 1 to 4, characterized in that the ratio thickness of the ring or the height of the hollow cylinder / outer radius is 0.1 to 1.5.

6. reagent carrier according to one of claims 1 to 5, characterized in that he uses the reagents on the Surface and / or the inside of the ring or hollow cylinder contains evenly distributed.

7. reagent carrier according to one of claims 1 to 5, characterized in that different reagents in different separate zones of the ring or Hollow cylinders are included.

8. reagent carrier according to claim 7, characterized characterized that the separate zones superimposed layers of the ring or Hollow cylinders are.

9. reagent carrier according to claim 7, characterized characterized in that the separate zones segments of the ring or hollow cylinder.

10. reagent carrier according to claim 7, characterized characterized in that it is on its peripheral surface, the upper and / or lower surface has a coating that a or contains several reagents.

11. reagent carrier according to claim 8, characterized characterized in that two or more are concentric with each other arranged reagent carrier according to one of claims 1 to 7, 9 and 10 the superimposed layers of the ring or Form hollow cylinder.

12. reagent carrier according to claim 10, characterized characterized in that the coating as an upper and / or lower Cover layer is formed, which is also the actual Hollow cylinder or ring closes below and / or above.

13. Reagent carrier according to one of claims 1 to 12, characterized in that it carries an insert ( 11 ) on a bottom layer ( 10 ) closing the reaction carrier ( 1 ) below, the outer wall of which runs parallel to the inner wall of the reaction carrier and the diameter of which essentially Corresponds to the inner diameter of the reaction vessel, and the inner wall ( 12 ) of which forms a truncated cone, the smaller diameter of which is adjacent to the bottom layer.

14. Use of a reagent according to one of the Claims 1 to 13 for carrying out chemical or biological reactions.

15. Use according to claim 14 for carrying out Immunoassays, especially enzyme immunoassays.

16. kit for carrying out a determination method, in particular an immunoassay consisting of one or several reagent carriers according to one of claims 1 to 13 containing unit dose containers and optionally further Containers with auxiliary materials.