CZ300137B6

CZ300137B6 - Deriváty 1-methylkarbapenemu

Info

Publication number: CZ300137B6
Application number: CZ20031325A
Authority: CZ
Inventors: Kobayashi@Yoshiyuki; Shinozuka@Tsuyoshi; Kanno@Osamu
Original assignee: Sankyo Company Limited
Priority date: 2000-11-16
Filing date: 2001-11-14
Publication date: 2009-02-18
Also published as: HUP0303204A3; CA2429346A1; SK5982003A3; NO20032198D0; PT1340757E; IL155931A0; TWI242013B; EP1340757A1; RU2247725C2; US20040014962A1; CN1486317A; MXPA03004372A; BR0115454A; CN1289498C; EP1340757B1; NZ525934A; ATE342266T1; DK1340757T3; WO2002040483A1; ES2273902T3

Abstract

1-Methylkarbapenemové deriváty obecného vzorce I,jejich farmakologicky prijatelné soli, estery a farmaceutické prípravky, které je obsahují. Jejich použití pro výrobu farmaceutických prípravku s antibakteriální úcinností.

Description

Deriváty l-mcthylkarbapeneniu

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká 1 -methyIkarbapenemových sloučenin, které mají vynikající antibakteriální účinnost, jejich farmakologicky přijatelných esterů nebo solí, farmaceutických přípravků (zvláště antibakteriálních činidel), které je obsahují jako účinnou složku, použití uvedených sloučenin, esterových derivátů nebo solí pro výrobu uvedených farmaceutických přípravků, io nebo způsobu pro prevenci nebo léčbu nemocí (zvláště bakteriálních infekcí), který zahrnuje podání farmaceuticky účinného množství uvedených sloučenin, esterových derivátů nebo solí teplokrevným živočichům (zvláště lidem).

i? Dosavadní stav techniky

Je nutné vyvíjet karbapenemové deriváty, které mají silný a vyvážený antibakteriální účinek proti širokému spektru patogenních baktérií. 1-Methylkarbapenemové sloučeniny mající strukturní analogy se sloučeninami v předkládaném vynálezu jsou uvedeny v japonské patentové přihlášce

JP 8-53 453 [(Kokai) číslo 8-53 453.], a v dokumentu US 5 534 510.

Vynálezce prováděl výzkum l-methylkarbapenemových sloučenin dlouhou dobu. Jako výsledek bylo objeveno, že ve srovnání s konvenčními 1-methylkarbapenemovými deriváty mají sloučeniny obecného vzorce í předkládaného vynálezu silnější antibakteriální účinek a jsou účinné jako antibakteriální činidlo pro léčbu nebo prevenci (zvláště léčbu) bakteriálních infekcí, zvláště infekcí dýchacího systému.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález se týká 1-methyIkarbapenemových sloučenin obecného vzorce I;

nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo esterů,

Ve vzorci R¹ představuje;

(1) skupinu představovanou vzorcem COOR³, kde IV je vodík, CJ až CJ alkylová skupina nebo CJ až C₆ cykloalkylová skupina, (2) skupinu představovanou vzorcem CONR⁴R⁵, kde R⁴ a IU mohou být stejné nebo rozdílné a každý je vodík, Cj až CJ alkylová skupina (která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílně a jsou vybrány ze skupiny substituentů A níže uvedené), C₂ až CJ cykloalkylová skupina nebo 3 až 6—ti Členná heterocyklieká skupina nebo CJ, až Cm arylová skupina (která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B níže uvedené) nebo společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané, představují 3 až 6-ti četný heterocykl obsahující dusík (který může být substituovaný jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B níže uvedené).

(3) kyano skupinu, (4) skupina představovaná vzorcem CH₂OR^ň. R⁶ je vodík. © až ©, alkylová skupina nebo © až ? © cykloalkylová skupina nebo (5) skupina představovaná vzorcem CH₂NR'R⁸. kde R⁷ je vodík. © až © alkylová skupina nebo © až © cykloalkylová skupina, R^K je vodík. © až © alkylová skupina nebo © až © cykloalkylová skupina, © až © alkanoylová skupina, (© až ©o aryljkarbonylová skupina (která io může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B níže uvedené), (© až C₆ alkoxy)karbonylová skupina, 5 nebo 6 ti členná aromatická heterocyklokarbonylová skupina, © až © alkylsulfonylová skupina nebo © až ©₀ arylsulfonylová skupina, nebo R⁷ a R^x, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané představují sukcinimidovou skupinu (která může být kondenzována s fenylovou skupinou).

R představuje vodík nebo © až © alkylovou skupinu; n představuje 1.2 nebo 3;

X představuje síru nebo kyslík, substituent skupiny A zahrnuje hydroxylovou skupinu, amino skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěma © až © alkylovými skupinami), karbamoylovou skupinu (jejíž aminová skupina může být substituovaná jednou nebo dvěma © až © alkylovými skupinami), karboxylovou skupinu, kyano skupinu a Cj až © alkoxylovou skupinu, a substituent skupiny B zahrnuje hydroxy-© až ©-alkylovou skupinu, amino-© až ©-alkylovou skupinu (aminová skupina může být substituovaná jednou nebo dvěma © až © alkylovými skupinami), karbamoylovou skupinu (aminová skupina může být substituovaná jednou nebo dvěma C, až © alkylovými skupinami), karboxylovou skupinu, hydroxylovou skupinu, amino to skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěma © až © alkylovými skupinami), Cj až © alkoxylovou skupinu a Cfi až © alkylovou skupinu.

Ve výše uvedeném popisu .,©-© alkylová skupina podle definici R², R', R^J, R\ R^f’. Rš R\ substituentové skupiny A a substituentové skupiny B je přímá nebo větvená nasycená uhlovodí35 ková skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku. Jej i příklady zahrnují methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl. n-butyl. isobutyl, secbutyl. /trc-hutyl, n- pentyl, isopentyl, 2-methylbutyk neopentyl, I ethyIpropyl, n-hexyl, isohexyl. 4-methylpcntyk 3-methylpentyl, 2-methylpentyl, 1-methylpentyl. 3.3-dimethylbulyl, 2,2-dimethylbutyl, 1,1-dimethylbutyl, 1,2-dimethylbutyl. 1,3 dimethylbulyl, 2,3-dimethylbutyl, 2-ethylbulyl a I-methy 1-2-methyl-propyl skupinu. Podle defi40 nic R², R', R⁶, I© R^s, substituentové skupiny A a substituentové skupiny B jc upřednostňována Ci až © alkylová skupina a zvláště upřednostňována je methylová skupina. Podle definice R^J je upřednostňována © až Ci alkylová skupina a zvláště upřednostňována je methylová skupina nebo isopropylová skupina. Podle definice R“ je upřednostňována C_: až © alkylová skupina a zvláště upřednostňována je I-methyl-2 methy l-propy lová skupina.

,.C; až Cj, cykloalkylová skupina podle definic R’. R\ R\ R\ R a R^s je cyklická uhlovodíková skupina obsahující 3 až 6 atomů uhlíku. Příklady této skupiny zahrnují cyklopropy 1, cyklobutyl. cyklopenty 1 a cyklohexyl, kde cyklopropy lová skupina je upřednostňována.

„3 až 6-ti členná heteroeyklieká skupina podle definic R¹ a R^? je nasycená heteroeyklieká skupina obsahující jeden nebo dva atomy kyslíku, dusíku nebo síry. Příklady této skupiny zahrnují azi řídi nyl. azetidinyl. pyrrol idiny 1, piperídinyl. oxiranyl, oxetanyl, tet rahydro furanyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrothienyl, morfolinyl, piperazinyl a thiomoríolinyI. kde 4 až 6-ti členná

->

heterocykl ická skupina obsahující dusík je upřednostňována a azetidinyl, pyrrol idinyl nebo piperidinyl jsou upřednostňované více.

Příklady „Cj. až Cjn arylové skupiny“ podle definice R⁴ a R” a „CJ až Cjo arylové“ skupiny „(Cj až Ch, ary! )karbony lové skupiny a „C₆ až C_if) ary Isu Ifony lové skupiny podle definice R^szahrnuji fenyl, indenyl a naftvl, kde fenylová skupina je upřednostňována.

„Dusík obsahující heterocykl” „3 až 6-ti členného dusík obsahujícího heterocyklu“ podle definic skupina tvořená pomocí R^l a Rj společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, je m saturovaná heterocyklická skupina obsahující jeden nebo dva atomy dusíku, a která muže obsahovat atom kyslíku nebo síry. Příklady této skupiny zahrnují aziridino, azetidino, pyrrol idino. piperidino, morfolino, piperazino a thiomorfolino skupiny, kde 4 až 6-ti členný heterocykl obsahující dusík je upřednostňován a azetidino, piperazino, morfolino nebo thiomorfolino skupiny jsou upřednostňované více.

„CJ až Cj, alkanoyl skupina” podle definice lV je přímá nebo větvená nasycená alkanoylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku. Její příklady zahrnují formy I, aeetvl, prop i onyl, butyryl. isobutyryl, valeryl. isovaleryl, pivaloyl a hexanoyl. kde Ci až CJ alkanoylová skupina je upřednostňována a acetylová skupina je upřednostňována nejvíce.

„CJ až Cj, alkoxy skupina „(CJ až CJ, alkoxy)karbonylové skupiny podle definice R* a „Cj až C_f, alkoxy skupina” podle definice substitucntových skupin je přímá nebo větvená alkoxylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku. Příklady této skupiny zahrnují methoxy, ethoxy. propoxy, isopropoxy. butoxy. pentyloxy a hexyloxy skupiny, kde Ci až Ci alkoxy skupina je upřednostňována a methoxy skupina je nejvíce upřednostňována.

„5 až 6-ti členná aromatická heterocyklická“ skupina „5 až 6-ti členné aromatické heterocyklokarbonylové skupiny“ podle definice R* je aromatický heterocykl obsahující od jednoho do tří atomů kyslíku, dusíku a síry. Příklady tohoto heteroeyklu zahrnují pyrrol, imidazol. Ihiazol.

oxazol, isoxazol, furan, thiofen. triazol, thiad iazol, pyridin, pyrimidín, pyrídazin a triazin. kde furan, thiofen nebo pyridin jsou upřednostňovány.

Příklady „hydroxy-Cj až Cj-alkyl skupiny“ substituentové skupiny B zahrnují hydroxyniethyl. hydroxy ethy I. hydroxy pro pyl a hydroxy butyl skupiny, kde hydroxy-Cj až Cj-alkyl skupina je upřednostňována a hydroxymethyl skupina je nejvíce upřednostňována.

Příklady „amino-íj až Cj-alkyl skupiny“ substituentové skupiny B zahrnují aminomethyl, aminoelhyl, aminopropyl a aminobutyl skupiny, kde amino-C] až C— alkyl skupina je upřednostňována a aminomethy l skupina je nejvíce upřednostňována.

Přednostně substituentové skupina A obsahuje hydroxylovou skupinu, amino skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěma C_t až CJ alkyl skupinami) a karbamoyl skupinu, kde amino skupina (která může být substituovaná jednou nebo dvěma methy! nebo ethyl skupinami) je nejvíce upřednostňována.

Přednostně substituentové skupina B obsahuje hydroxy-Ci až C.»—alkyl skupinu, amino -C| až Cj-alkyl skupinu (amino skupina může být substituovaná jednou nebo dvěmi C| až C; alkyl skupinami), karbamoyl skupinu (amino skupina může býl substituovaná jednou nebo dvěma C| až CJ alkyl skupinami), hydroxylovou skupinu a amino skupinu (která může býl substituovaná

5(i jednou nebo dvěma Cj až C; alkyl skupinami), kde skupina obsahující hydro xymethylovou skupinu, aminomethylovou skupinu (kde amino skupina může být substituovaná jednou nebo dvěma methyl nebo ethyl skupinami), karbamoylovou skupinu (kde amino skupina může být substituovaná jednou nebo dvěma methyl nebo ethyl skupinami), hydroxylovou skupinu a amino skupina (která může být substituovaná jednou nebo dvěma methyl nebo ethyl skupinami) je upřed55 nostňována, aminomethyl skupina a amino skupina jsou ještě více upřednostňované.

„Farmakologicky přijatelný ester sloučeniny I je ester, u kterého jsou některé karboxylové skupiny nebo hydroxy lové skupiny sloučeniny 1 chráněné skupinou, která se dá odštěpit v těle člověka nebo zvířete chemickou nebo biologickou metodou jako je hydrolýza za vzniku původní slou5 ceniny I nebo její soli. Zdaje odvozená látka takový ester se může stanovit orálním nebo intravenózním podáním této látky pokusnému zvířeti, jako je potkan nebo myš a studováním tělních tekutin zvířete a detekci původní sloučeniny I nebo její soli.

Příklady ochranných skupin, které tvoří estery karboxylové skupiny zahrnují C| až Cm alky lovou io skupinu. Cs až C_ř> cykloalkylovou skupinu. C₄ až C₆ cykloalkylovou-Ci až C₄-alkylovou skupinu, C₂ až Cio alkanoyloxy-C| až C₄-alkylovou skupinu. (C, až (ý alkoxy)karbonyloxy-C| až

C₄-alkylovou skupinu, fenylovou skupinu (uvedená fenylová skupinu může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami vybranými z halogenu, C| až Ci alkylové skupiny, Cý až C₍alkoxylové skupiny, methylendioxylové skupiny a C| až C₆ alkanoyloxylové skupiny). Ct až Cm alkanoyloxybenzylovou skupinu, ftalidylovou skupinu a 5-methyl-2-oxo-l,3--dioxolcn-4-ylmethylovou skupinu.

Příklady ochranných skupin, které tvoří estery s hydroxylovou skupinou zahrnují C| až Cm alkanoyl skupinu, (C₆ až Cm aryl)karbonyl skupinu, (Ci až Cm alkoxyjkarbonyl skupinu a amino20 acyl skupinu.

Příklady výše uvedené „C| až Cm alkylové skupiny zahrnují methyl, ethyl, propyl. i so pro pyl. butyl, isobutyl, sek bulyl, /erc-butyl, pentyl, 2-pentyl, 3-pentyk ísopentyl. hexyl, 2-hexyl. 3-hcxyl, isohexyl, heptyl, oktvl. nonyl a decyl skupiny, kde Ch až C_ft alkylová skupina je upřed25 nostňována, C₂ až C₄ alkylová skupina je více upřednostňována a ethylová skupina nejvíce upřednostňována.

Příklady ,.C₂, až C₍₎ cykloalkvlové skupiny zahrnují cyklopropyI. cyklobutyI, eyklopentyl a cyklohexyl skupiny, kde eyklopentyl nebo cyklohexyl skupina je upřednostňována.

Příklady „C_?, až CU cykloalkyl—C7, až C₄-alkylové skupiny zahrnují cyklopropyImethyl, cyklopropylethyk cyklopropylpropyl, eyklopropylbutyl, cyklobutylmethyl. eyklobutylethyl, cyklobuty lpropy l, eyklopentylmethyl, cyklopentylethyl, cyklopentylpropyL eyklohexy Imethyl a cyklohcxylethy I skupiny; kde cyklopropylmethylová skupina je upřednostňována.

Příklady ,.C₂ až Cjo alkanoyloxy-Cj až C₄-alkylové skupiny zahrnují acetoxymethyl. l-(acetoxy)ethyl, l-(acetoxy)propyl, 1 -(aeetoxy)butyI. propionyloxymethyl. l-(propionyloxy)ethyl. ísopropionyloxymcthyl. l-(isopropionYloxy)ethyl. butyryloxymethyl, 1 -(butyryloxy)ethyI, isobutyry loxymethyk 1 (isobutyryloxyjethyl, pivaloyloxymethyl, l-(pivaloyloxy)elbyL valcryl40 oxymethyl, l-(valcryloxy)etbyi, isovaleryloxymethyl, 1- (isovaleryloxy)elhyl. hcxanoyloxymethyl. ljhexanoy loxyjethyl, oktanoyloxyrnethyl, l-{oktanoyloxy)ethyk dekanoyloxymethyl. cyklopentylkarbonyloxymcthyk 1-mcthylcyklopentylkarbonyloxymethyl, eyklohexyIkarbonyloxymcthvl a l-methylcyklohexylkarbonyloxymethyl skupiny, kde C₂ až C₍, alkanovloxymethyl nebo 1 (C₂ až C’₍, alkanoyloxyjcthyl skupina je upřednostňována.

Příklady „(CU až Cm alkoxy)karbonyloxy-C| až C₄-al kýlové skupiny zahrnují m ethoxy karbonyloxymelhyl, l-( methoxy karbony loxy )ethyl, ethoxykarbonyloxymethyl, l-( ethoxy karbony Ioxyjethyl. I-(ethoxykarbonyloxy)propyl. 1 (ethoxykarbonyloxy)butyl, propoxykarbonyloxymethyl, I (propoxy karbony loxyjethyl, isopropoxykarbonyIoxymethyl, 1-(isopropoxykarbonyI50 oxyjethyh butoxykarbonyloxymethyl. l-(butoxykarbonyloxy)ethyl, isobutoxykarbonyloxymethyl, l-(isobutoxykarbonyloxyjethyl, sek -butoxykarbonyloxymethy l. l-(.seÁ-butoxykarbonyloxyjethyl. terč butoxykarbonyloxymethyl, l—(/erc—butoxy karbony loxy jethyl, pen ty loxy karbonyloxymethyl, I-(pentyloxykarbony loxy jethyl, (1-methy'Ibutyloxykarbony loxy jmcthyl. l-( 1methylbutyloxykarbonyloxy jethyl, (2 methy Ibutyloxykarbony loxy jmelhyl, l-(2-methylbutyl55 oxykarbony loxyjethyl, (3-methy Ibutyloxykarbony loxyjmethyl. 1-(3-methy Ibuty loxy karbony 1-4C7. 300137 Bó oxy)ethyh (i-ethvlpropyloxykarbonyloxy)methyl. 1 —(1 —ethy Ipropy loxykarbony loxy )ethyk hexy loxykarbony loxy methyl. 1 -(hexyloxykarbonyloxy)ethyl. (1 -methy Ipentv loxykarbony loxy )methyl. I —(1 —mcthylpenty loxykarbony loxy )ethyl, oktyloxykarbonyloxymethyk 1 -{oktyloxykarbonyloxy)ethyl, decy loxykarbony loxy methyl, 1-(decy loxy karbon yloxy jet hyl. cyklopenty Ikarbo5 nyloxymcthyk 1-(cyklopenty loxykarbony loxy jcthyl, cyklohexylkarbonyloxymethyl a 1-(cyklohexyl oxy karbony loxy jethyl skupiny, kde (C, až C₆ a Ikoxyjkarbon yloxy methyl nebo 1—((C| až C<, alkoxy)karbonyloxy)ethyl skupina je upřednostňována.

Příklady „feny love skupiny, která může být substituovaná zahrnují ienyl, 3-fluorfenyl, io 4-fluorfenyl. 3.4-diíluorfcny 1, 3-methyIfeny 1, 4-methylfenyl, 3-niethoxyfenyl, 4-methoxyfenyl,

3.4-dimethoxyfenyl, 3,4-methylendioxyfenyk 3-acetoxyfenyl a 4-acetoxy-fenyl skupiny, kde nesubstituovaná fenylová skupina je upřednostňována.

Příklady „C₂ až C _]0 alkanoy loxy benzy love skupiny zahrnují 2-ace loxy benzyl, 3-acetoxy benzyl, is 4-acetoxybenzyl. 3 propiony loxy benzy I. 4-propionyloxybenzyl. 4-butyry loxy benzyl, 4-valeryloxyben/yl, 4-hexanoyloxybenzyl. 4-oktanoyloxybcnzyl a 4-dekanoyloxybenzyl skupiny, kde

3- nebo 4-(C₂ až C₄ alkanovloxyjbenzylová skupina je upřednostňována.

Příklady „C| až (Jo alkanoylové skupiny zahrnují formyl, acetyl, propionyl, butyryl, pentanoyk

2o hexanoyk oktanoyl a dekanoyl skupiny, kde C_? až C<, alkanoylové skupina je upřednostňována.

Příklady „(C<_t až C_!0 aryljkarbonylové skupiny zahrnují benzoyl. 1 —naftoví a 2—naftoyl skupiny, kde bcnzoylová skupina je upřednostňována.

Příklady „(Ci až O,, alkoxy )karbony lov é skupiny zahrnují methoxykarbonyl. ethoxy karbonyl, propoxykarbonyl, butoxy karbonyl. penly loxy karbonyl, hexyloxykarbonyl, oktyloxykarbonyl a decyloxykarbonyl skupiny, kde C₂ až C₆ alkoxykarbonylová skupina je upřednostňována.

Příklady ..aminoacylové skupiny zahrnují aminokyselinovou skupinu, jako je glycyl, alanyl, u β-alanyk leucyk isoleueyl. fenylalanyl, histidyl, asparagyh prolyl a lysyl, kde glycylová skupina je upřednostňována.

Sloučenina I a její farmakologicky přijatelné soli předkládaného vynálezu mohou tvořit farmakologicky přijatelné soli, je-li to nutné.

„farmakologicky přijatelné soli jsou soli, na které jc možné konvertovat sloučeninu 1 předkládaného vynálezu. Upřednostňované příklady takových solí zahrnují soli alkalických kovů. jako jsou sodíková sůl, draselná sůl a lithiová sůl, soli alkalických zemin jako je vápenatá sůl a horečnatá sůl, kovové soli jako je hliníková sul, železná sůl. zinková sůl, měděná sůl, niklová sůl a kobaltová sůl, aminové soli jako jsou anorganické soli, jako je amonná sůl a organické soli jako je /crc-oktylaniinová sůl, d i benzy lam i nová sůl. morfolinová sůl, glukosám i nová sůl, feny Iglyc i Italky lesterová sůl, ethy lendiam i nová sůl, N-methylglukaminová sůl, guanidinová sůl. d i ethyl aminová sůl, triethy lam i nová sůl, d i cyklohexyl aminová sůl, N, N '-d i benzylethy lendiam i nová sůl. chloroprokainová sůl, prokainová sůl. diethanolaminová sůl, N-benzylfenethylaminová sůl, piperazinová sůl, tetramethylammoniová sůl a lris(hydroxymcthyl)aininomethanová sůl; soli anorganických kyselin jako jsou soli halogenové kyseliny jako je fluorovodík, chlorovodík, bromovodík, jodovodík, nitráty, perchloráty, sulfáty nebo fosfáty, nižší alkensulťonáty jako je methansulfonát. trifluormethansulfonát nebo ethansulfonát; arylsulfonáty jako je benzensulfonát nebo p-toluensulfonát; a soli organických kyselin jako je acetát, malát, fumarát, sukcinát, citrát, tartarát, oxalát nebo maleát; a soli aminokyselin jako je glycinová sůl, lysinová sůl, argininová sůl, ornithinová sůl, glutarnát nebo aspartát.

Sloučenin) I, jejich farmakologicky přijatelné soli a esterové deriváty předkládaného vynálezu zahrnují také jejich hydráty nebo sol váty.

-5CZ 300137 B6

Mezi sloučeninami obecného vzorce I jsou upřednostňované následující sloučeniny:

(1) Vztahující se k R¹:

(1-1) sloučeniny, kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CONR⁴R- a kvano * x * skupinu nebo skupinu představovanou vzorcem CHjNR R ;

(1-2) sloučeniny, kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CONR⁴R⁵ nebo skupinu představovanou vzorcem ChhNR R^H;

(1-3) sloučeniny , kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CONR⁴R\ io (2) Vztahující se k R²:

(2-1) sloučeniny, kde R² představuje vodík nebo Cj až C\ alkylovou skupinu;

(2-2) sloučeniny, kde R² představuje vodík.

(3) Vztahující se k R j b (3-1) sloučeniny, kde R^? představuje vodík nebo Ci až C3 alkylovou skupinu;

(3-2) sloučeniny, kde R představuje vodík, methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu.

(4) Vztahující sc k R⁴:

(4-1) sloučeniny, kde R⁴ představuje vodík nebo C až C₃ alkylovou skupinu;

2o (4-2) sloučeniny, kde R⁴ představuje vodík, methylovou skupinu nebo isopropylovou skupinu, (5) Vztahující se k R\ (5-1) sloučeniny, kde R^ představuje vodík. Ci až C₆ alkylovou skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů A) nebo 4 až 6—ti členný heteroey kl obsahující dusík.

(5 2) sloučeniny, kde R' představuje vodík, Cj až Cj, alkylovou skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou býl stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů A), nebo azetidinyl. pyrrolidiny 1 nebo piperidinyl skupinu.

so (6) Vztahující se k R⁴ a R\ (6 1) sloučeniny, kde R⁴ a R·' společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané, představují 4 až 6-ti členný heterocykl obsahující dusík (který může být substituován jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů B);

(6 2) sloučeniny, kde R⁴ a Rj společně a s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané, představují 55 azetidino. piperazino, morfblino nebo thíomorfolino skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů B).

(7) Vztahující se k R⁶;

(7-1) sloučeniny, kde R⁶ představuje vodík nebo Cj až C-₃ alkylovou skupinu;

(7-2) sloučeniny, kde R⁽⁾ představuje vodík.

(8) Vztahující se k R':

(8-1) sloučeniny, kde R⁷ představuje vodík nebo Cj až C'₃ alkylovou skupinu;

(8-2) sloučeniny, kde R představuje vodík nebo methylovou skupinu;

(8-3) sloučeniny, kde R⁷ představuje vodík.

-6CZ 300137 B6 (9) Vztahující se k R⁸:

(9-1) sloučeniny, kde R⁸ představuje vodík, C| až C7 alkylovou skupinu, Cj až Cj alkanoyl skupinu, benzoyl skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné ajsou vybrané ze skupiny substituentů B). (C, až Cj alkoxy (karbony I skupinu, thienylkarbonyl skupinu, furylkarbonyl skupinu nebo pyridyl karbony 1 skupinu:

(9-2) sloučeniny, kde R⁸ představuje vodík, benzoyl skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů B), (2-thienylkarbonyl skupinu. (2 furyljkarbonyl skupinu nebo (3-py ridyl)lo karbony! skupinu.

(10) Vztahující se k n:

(10-1) sloučeniny, kde n představuje 1.

(11) Vztahující se k X:

(11-1) sloučeniny, kde X představuje kyslíkový atom.

Sloučeniny získané libovolnou kombinací 2 nebo více výše uvedených upřednostňovaných substituentů jsou více upřednostňované. Více upřednostňované příklady sloučenin zahrnují násle2i) dující sloučeniny:

(12) sloučeniny, kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CONR⁴R' (kde R'¹ představuje vodík nebo Cj až C₃ alkylovou skupinu; R⁵ představuje vodík, Cj až Cj, alkylovou skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů A) nebo 4 až 6-ti členný heterocykl obsahující dusík): R představuje vodík; n představuje 1; a X představuje ky slík nebo síru.

(13) sloučeniny, kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CONR⁴R' (kde R¹ představuje vodík, methylovou skupinu nebo isopropy lovou skupinu; IV představuje vodík, Ci až Cj, alkylovou skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů A), nebo azetidinyl, pyrrol id i nyl nebo piperidinyI skupinu); n představuje 1; a X představuje kyslík nebo síru.

(14) sloučeniny, kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CONR⁴R (kde R⁴ a Rj společné s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané, představují 4 až 6-ti členný heterocykl obsahující dusík (který může být substituován jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné ajsou vybrané ze skupiny substituentů B)); R představuje vodík; n představuje 1; a X představuje kyslík nebo síru.

(15) sloučeniny, kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CONR⁴R^? (kde R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané, představují azetidino. piperazino, morfolino nebo thiomorfolino skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné ajsou vybrané ze skupiny substituentů B)); R představuje vodík; n představuje I; a X představuje kyslík nebo síru.

(16) sloučeniny, kde R¹ představuje kyano skupinu; R^? představuje vodík: n představuje 1; a X představuje kyslík nebo síru.

(17) sloučeniny, kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CIENRR⁸ (kde R⁷ před50 stavuje vodík nebo C| až C3 alkylovou skupinu; R⁸ představuje vodík, C| až C3 alkylovou skupinu, C| až G alkanoylovou skupinu, benzoylovou skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů B), (C| až Ci alkoxy)karbonylovou skupinu, thienylkarbonyl skupinu, furylkarbonyl skupinu nebo pyridylkarbonyl skupinu); R² představuje vodík; n představuje I; a X představuje kyslík nebo síru.

(18) sloučeniny, kde R¹ představuje skupinu představovanou vzorcem CH₂NR'R^K (kde R' představuje vodík nebo methylovou skupinu; R^s představuje vodík, benzoylovou skupinu (která může být substituovaná jednou nebo dvěmi skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrané ze skupiny substituentů B). (2—thienyl)- karbony lovou skupinu. (2-furyl)-karbonylovou skupinu nebo (3—pyridy I)—karbony lovou skupinu); R² představuje vodík: n představuje 1. a X představuje kyslík nebo síru.

Určité sloučeniny I předkládaného vynálezu jsou specificky uvedené v tabulkách I až 5. Mělo by být známo, že sloučeniny l předkládaného vynálezu nejsou omezené těmito uvedenými sloučeninami.

V tabulkách 1 až 5 Me představuje methylovou skupinu, Et ethylovou skupinu, Pr propylovou skupinu, iPr isopropylovou skupinu, Bu butylovou skupinu. Pen pentylovou skupinu, Hex hexylovou skupinu. cPr eyklopropylovou skupinu, cBu cyklobutylovou skupinu, cPen cyklopentylovou skupinu, cHcx cyklohexylovou skupinu, Azt azetidinylovou skupinu. Pyr pyrrol idiny lovou skupinu, Píp pí per idiny lovou skupinu, a Ph fenylovou skupinu. Výraz „pozice“ znamená vazebné místo síry.

-8C7. 300137 B6

Tabulka

COOFT

1-1

Sloučenina č.	X	11	\| pozice	R²	1 ^Rí
1	s	1	3	H	H
2	s	1	3	Π	Me
3	s	1	3	H	Et
^! 4	s	1	3	H	Pr
5	s	1	3	Π	iPr ! j
6	s	1	3	II	Bu
7	s	1	3	; H	Pen
s s	I	3	II	Hex
9	1	3	H	cPr
I io ( s	1	3	H	cBu
11	s	1	3	H	cPen
12	s	1	3	H	cllcx
13	s	1	3	Me	H ..
14	s	1	3 1	Me 1	— 1> _ Γ ..I
15	s	1	3	Me
16	s	1	3	Me 'Me	Pr
17 1	s	1	iPr
18	s	1	3	Me	Bu
19	s	1	3	Me	Pen
20	s	1	3	Me	Hex
21	s	í		Me	cPr
22	s	1	3	Me	cBu
23	s	1~	3	Me	cPcn
24	s 1	1	3	Mc	! cllex
26	s	2	3	H	H
27	s F	2	3	II	Me
28	2	3 1	H	Et
29	s	² i ³	H Pr

-9CZ 300137 B6

30	S	2	3	! H	iPr
31	S	2	3	H	Bu
32	S	2	3	H	Pen
33	S	2	3	H	Hex
34	S	2	3	H	cPr
35	S	2	3	H	cBu
36	s	2	3	H	cPen
37	s	2	3	H	cHex
38	s	2	3	Me	H
39	s	2	3	Me	Me
40	s	2	3 s	Mc	Et
41	s	2	3	Mc	Pr
42	s	2	3	Me	IPr
43	s	2	3	Me	Bu
44	s	2	3	Me	Pen
45	s	2	3	Me	Hex
46	s	2	3	; Me	cPr l
47	s	2	3	Me	cBu
48	s	2	3	Me	cPen
49	s	2	3	Me	cHex
51	s	3	4	H	H
52	s	3 i 1	4	II	Me
53	s	3	4	H	Et
54	s	3	4	11	Pr
55	s	3	4	II	iPr
56	s	3	4	H	Bu
57	s	3	4	H	Pen 1
58	s	3	Ϊ 4	H	Hex
59	s	3	4	II	cPr
60	s	3	4	H	cBu
61	s	3	4	H	cPen
62	s	3	4	Π	cHex
63	s	3	4	Me	H

- 10 CZ 300137 B6

64	S	3	4	Me	Me
65	S	3	4	! Me	Et
66	s	3	4	Me	Pr
67	s	3	4	Me	iPr
68	s	3	4	Me	Bu
69	s	3	4	Me	Pen
70	s	Λ 3	4	Me	Ilex
71	s	3	4	Me	cPr
72	s	3	4	Me	cBu
73	s	3	4	Me	cPen
74	s	3	4	Me	cHex
76	0	1	3	II	H
77 [ 0	l	3	H	Me
78	0	1	•Ά J	II	Et
79	0	1	3	H	Pr
80	0	1	3	H	iPr
81	0	1	3	H	Bu
~ 82~ “	0	1 l·	3	H	Pen
83	0	1	3	H	Ilex
84	0	1	3	H	c-Pr
j 85^	0	1	3	H	cBu
86	0 1	1	3	H	cPen
87	0	1	3	II	cHex
88	0	1	3	Me	H
89	0	1	3	Me	Me
90	0	1	3	Me	Et
91	0	1	3	Me	Pr
92	0	1	3	Me	iPr
93	0	1	3	Me	Bu
94	0	I	3 ~ 1	Me	Pen
95	0	1	n	Me	Hex
96	0	1	3	Me	cPr
~ — -₉~' —	0	1	1 ³	Me	cBu

CZ 300137 Bó

\| 98 f	0	1	3	Me	i cPen
99	0	1	1 3 1	Me	cllex
101	ó	2	3	H	H
102	0	2	3	H	Me
103	0	2	3	H	Bt 1
104	0	2	3	1 H	Pr
105	0	2	3	H	ÍPr 1
106	0	2	3	ί ^H	Bu
107	0	2	3	H	Pen
108	0	2	3	H	Hex
109	0	2	3	H	cPr 1 ^!
110	0	2	3	H	cBu
111	0	2	3	H	cPen
112	0	2 ^Π	3	H	cHex
113	0	2	3	Me	H
114	0 1	2 1	3	Me	Me
' 115	0	2	3	Me	Et
116	0	2	3	Me	Pr
117	0	2	3	Me	ÍPr
118	0	2	3	Me	Bu
119	0	2	3	Me	Pen
120	0	2	3	Me	Hex
121	0	2	3	Me	cPr
122	0	2	3	Me	cBu
123	0	2	3 1	Me	cPen
124	0	2	3	Me	cHex
126	ó	3	4	H	H
127	ó	3	4	H	Me
128 L	0	Λ 3	4	H	Et
129	0	3	4	H	Pr
130	0	3 ... 1	4	H	iPr
131	0	: 3	4	H	Bu
132	0	3	4	H	Pen

- 12CZ 300137 B6

133	0	3	--	H	Hex
134	0	3	4	H	cPr
135	0	3	4	H	cBu
136	0	3	4	H	cPen
137	0	3	4	H	cHex
138	0	3	4	Me	H
139	0	3	4	Me	Me
140	0	3	4	Me	Et
141	0	3	4	Me	Př
142	0	3	4	Mc	iPr
143	0	3	4	Me	Bu
144	0	3	4	Me	Pen
145	0	3	4	Me	Hex
146	0	3	4	Me	cPr
147	0	3	4	Me	cBu
148	0	3	4	Me	cPen
149	” 0	3	4	Me	cHex

Tabulka 2

Sloučenina č.	X	n	pozice	R?	R⁴	R⁵
1	s	1	3	H	H	H
2	”s	T	3	H	H	Me
3	s	1	3	Ίί ”	H	Et
4	s	1	3	H	H	Pr
5	s	1	3	H	H	iPr
ó	s	1	3	H	H	Bu
7	s	1	3	H	Me	Me
8	s	1	3	H	Me	Et
9	s	1	3	H	Me	Pr

- 13 CZ 300137 B6

10	S	l	3	^: H	Me	iPr
11	s	1	3	H	Me	Bu
12	s	1	3	H	Et	Et 1
13	s	1	3	H	Et	Pr
14	s	1	3	H	Et	iPr
15	s	1	3	H	Et	Bu
16	s	1	3	H	Pr	Pr
17	s	1	3	H	Pr	iPr
18	s	1	3’	H	Pr	Bu
19	s	1	3	H	iPr	iPr
20	s	1		11	iPr	Bu
21	s	1	3	H	Bu	Bu
22	s	1	3	“h	H	CH₂CH₂OH
23	s	1	3	H	Mc	ch₂ch_?oh
24	s	1	3	H	Et	ch₂ch₂oh
25 “	' s ’	Ί	3	H	Pr	ch₂ch₂oh
26	s	1	3	H	iPr	CHoClbOH i
27	s	1	3	H	H	CH(CH₃)CH₂OH
28	s	1	3	li	H	CIÍ(CH₂OH)CH₂OH
29	s	1	3	H	H	CH(CH₂CH<)CH₂OH
30	s	1	3	H	H	CH(Cn(CH₃)₂)CH₂OH
31	s	1	3	H	H	ch₂ch₂nh₂
3F	” s	“í	~~3~ '	H	H	CH(CH₃)CP1₂NH₂
~ 3~	’ s ”	7	3	H	H	C1í(CH₂CH₃)CH₂NH₂
34	s	1	3	H	H	CH(CH(CH3)₂)CH₂NH₂
35	s	1	3	H	H	ch₂cooh
36	s	1	3	H	h	CI1(CH-)CÓ()H ”
37	s	1	3	H	H	CH(CH₂OH)COOH
38	s	1	3	H	H	CH(CH₂CH_s)COOH
39	s	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)COOH
40	s	1	3	H	H	ch₂conh₂
41	s	1	3	“h	—	CH(CH₂)CONH₂
42	s	1	3	H	H	CH(CH₂OH)CONH₂

- 14CZ 300137 B6

CH(CH₂CH₃)CON1I_ž

CH(CH(CH0₂)CONH₂ cPr cBu cPen

II cHex

3-Azt

3-Pyr

3-Pip

4-Pip

2-COOIÍ-Ph

ÍCONllTPh

-CH₂CH₂CH₂3-COOH-Ph

3- CONH₂-Ph

4- COÓÍĚPh

4-CONH₂-Ph

-CH₂CH₂CH₂CH₂61 ~62

-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂H -CH_?CH₂OCH₂CH₂63

H ' -CI1₂CH₂SCH₂CH₂64

-CH₂CH₂NHCH₂CH₂65

-CH₂CH(OH)CH₂66

H -CH₂CH(OH)CH₂CH_rH

-CH₂CH(OH)Cn_?CH₂Cn_r

-CH₂CH₂CH(OH)CH₂CII₂69 ’CH(COOH)CH₂CH₂70

--Cn(CONH₂)CH₂CH₂-CIi(CH₂OII)CH₂CH₂72

-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-CH(COOH)CH₂CH₂CH_z-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-CH(CH₂OH)CH?CH₂CII₂

- 15CZ 300137 B6

76	S	1	3	H	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂- j
77	s	1	3	H	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
78	s	1	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
79	s 1	1	3	H	-CII(CH₂OH)CH₂CH₂CIÍ₂CH₂-
80	s	1	3	H	-CH(CH_zNH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
81	s	1	3	H	-CH₂CH(COOH)CH₂CH₂CH_z-
82	s	1	3	H	-CH₂CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
83	s	1	3	H	-CH₂CH(CH₂OH)CH_?CH₂CH_r
84	s	1	3	H	-CH₂CH(ČH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂-
85	s	1	3	H	-CH₂CH₂CH(COOH)CH₂CH₂-
86	s	1	3	H	-CH₂CH₂CH(CONH₂)CH₂CH₂-
87	s	1	3	H	-CH₂CH₂CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
88	s	1	3	H	-CH₂CH2CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
89	s	1	n A	Me	H	H
90	s	1	3	Me	H	Me
91	s	1	3	Me	H	Et
92	s	1	3	Me	H	i Pr
93	s	1	3	Me	H	iPr
94	s	1	3	Me	H	Bu
95	s	1	3	Me	Me	Me
96	s	I	3	Me	Me	Et
97	s	1	3	Me	Me	Pr
98	s	l	3	Me	Me	iPr
99	s	1	3	Me	Me	Bu
100	s	1	3	Me	Et	Et
101	s	1	3	Me	Et	Pr
102	s	1	3	Me	Et	iPr
103	s	1	3	Me	Et	Bu
104	s	í	3	Me	Pr	Pr
105	s	1	3	Me	Pr	iPr
106	s	1	3	Me	Pr	Bu
107	s	1	3	Me	iPr	iPr
108	s	1	3	Me	iPr	Bu

- 16C7 300137 B6

109	S ί	3	Me	Bu	Bu
110	s	1	3	Me	H	CHjCH₂OH
111	s	1	3	Me	Me	CH₂CH₂OH
112	s	1	3	Me	Et	cu₂ch₂oii
113 ϊ	s	1	3	Me	Pr	ch₂ch₂oh j
114	s	1	3	Me	iPr	CH2CH2OH
115	s	1	3	Me	H	ch(ch₃)ch₂oh
116	s	1	3	Me	IJ	CH(CH₂OH)C1I₂OH i
117	s	1	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
118	s	1	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
119	s	1	3	Me	H	CH2CH2NH2
120	s	1	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
121	s	1	3	Me	H	CH(CH₂Cll3)CH₂NH2
122	s	1	3	Me	H	εΗ(€Η(<3Η₃)2)€Ή₂ΝΡΒ
123	s	1	3	Me	H	CH.COOIl
124	s	1	3	Me	H	CH(CH₃)COOH
125	s	1	3	Me	H	CH(CH₂O.H)COOH
126	s	1	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)COOH
127	s	1	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)COOH
Γ” 128	s	1	3	Me	H	ch₂conh₂
129	s	1	3	Me	H	Cí1(CH₃)CONH₂
130	s	1	3	Me	H	CH(CH₂OH)CONH₂
131		1	3	Me	H	CH(CH₂CII₃)CONH2
132	s	1	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
133	s	1	3	Me	H	cPr
134	s	1	3	Me	H	cBu
135	s	1	3	Me	H	cPen
136	s	l	3 1	Me	H	cHex
137	s	1	3	Me	H	3-Αζΐ
138	s	1	3	Me	H	3-Pyr
139	s	1	3	Me	11	3-Pip
140	’š	1	3	Me	H	4-Pip 1
141	s	1	3	Me	H	2-COOHPIi

- 17CZ 300137 B6

142	S	1	3	[ Me 1	H	2-CONH₂-Ph
143	S	t·· 1	3	Me	Í^H	3-COOII-Ph
144	s	1	3	Me	H	3-CONH₂-Ph
145	S	1	3	Me	H	4-COOH-Ph
146	s	1	3	Me	II	4-CONH₂-Ph
147	s	1	3	Me	-ch₂ch₂ch₂-
148	s	1	j	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
149	s	1	3	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
150	s	1	3	Me	-ch₂ch₂och₂ch₂-
151	s	1	3	Me	rCH₂CH₂SClI₂CH2-
152	s	1	3	Me	-CH₂CH₂NHCH₂CH₂-
153	s	1	3	Me	CÍI₂CH(OH)CH₂-
154	s	1	3	Me	-ch₂ch(oh)c;h₂ch₂-
155	s	1	3	Me	7cH₂CH(OI I)CH₂CH₂CH_?- 1
156	s	1	3	Me	-CH₂CH₂CH(OII)ČH₂CH₂-
157	s	1	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂-
158 I	s	1	3	Me 1	-CH(CONH₂)CH₂CH₂
159	s	1	3	Me	CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
160	s	1	3	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂ČH₂-
161	s	Ϊ	3	Me	-CH(COOII)CH₂CH₂CH₂-
162 ί	s	1	3	Me	-CH(CÓNH₂)CH₂CH₂CH₂-
163	s	1	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
164	s	t	3	Me	-CH(CH₂W)CI í₂CH₂CH₂-
165	s	1	3	i Me	-ČH.(COOH)C1 LCH₂CH₂CH₂-
166	s	1	3	Me	-CH(CONH₂)CI1₂CH₂CII₂CH₂-
167	s	1	3	Me	-CH(CH₂OH )CH₂CH₂CH₂CH₂-
168	s	1	3	Me	-ch(ch₂nh₂)ch₂ch₂ci i₂ch₂-
169	s	í	3	Me	-CH₂CH(COOH)CH₂CH₂C1I₂-
170	s	1	3	Me	-CH₂CH(CONII₂)CH₂CH₂CH₂-
171	s	1	3	Me	-Q1₂CH(CH₂O1I)CH₂CH₂CH₂- .
172	s	1	3	Me	-CH_?CH(CH₂NII₂)CH₃CH₂CHr !
173		l ;		Me	-CH₂ČH₂CH(COOH)CH₂CH₂.
174	s	1	³ í	Me	(:h₂ch₂ch(conh₂)Cii₇ch₂-

- 18CZ 300137 B6

175	s	1	3	Me	-CH₂CH₂CH(CH₂OH)CH₂CH_r j
176	s	1	o 0	Me	-CH₂CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CI i₂
177	s	2	3	H	H	;h
178	s	2	3	H	H	! Me
179	s	2	3	H	H 1	Et
180	s	o z.	3	H	H	Pr
181	s	2	3	H	H	tPr j
182	s	2	3	H	H	! Bu
183	s	2	3	h	Me	' Me
184	s	2	3	H	Me	Et
185	's	2	3	H	Me	Pr
186	s	2	3	H	Me	iPr
187	s	2	3	H	Me	Bu
188	s	2	3	H	Et	Et
189	s	2	3	H	Et	1^Pr
190	s	2	3	H	Et	iPr
191	s	2	3	H	Et	Bu
192	s	2	3	H	Pr	f Pr
193	s	2	3	H	Pr 1	iPr 1
194	s	2	3	H	Pr	Bu
195	s	2	3	H	iPr	iPr
196	s	2	3	H	iPr	Bu
197	s	2	3	H	Bu	Bu
198	s	2	3	H	H	CH₂CH₂OH
’Ϊ99	s	2	3	H	Me	CH2CH2OH
~200	š~	2	3	H	Et	CH₂CH₂OH
201	s	2	3	H	Pr	ch,ch₂oh
202	s	2	3	H	iPr	ch₂ch₂oh
203	s	2	3	H	H	CH(CH₃)CH₂OH
204	s	2	3	H	H	CH(CH₂OII)CH₂OH
205	s	2	3’	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
206	s	2	3	H	H 1	CH(CH(CH,j₂)CH₂OH
207	s	2	3	H	H \| CH_?CH₂NII₂ L

- 19CZ 300137 B6

208	S	2	3	H	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
209	S	¹ 2	3	H	í °	ČH(CH₂CHj)CH₂NH₂
210	s	¹ 2	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂Ňíb
ΐ 211 i	s	2	3	H 1	Π	CH₂COOH
212	s	2	3	H	H	CH(CH₃)COOH
213	s	2	3	H	H	CH(CH₂OH)COOH
214	s	2	3	H	H	CH(CH>CIIj)COOH
215	s	2	3	H	H	CH(CH(CH,)₂)COOH
216	s	2	3	H	H I	ch₂conu₂
217 1	s	2	3	H	Η 1	CH(CH₃)CONH₂
218	s	2	3	H	H	CH(ČH₂OH)CONH₂
219	s	2	3	II	H	CH(CH₂CIIj)CONH₂
220	s	2	3	H	II	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
221	s	2	3	H	H	cPr
222	s	2	3	H	H	cBu
223	s	2	3	H	II	cPen
224	s	2	n J	F	H	cHex 1
225	s	2	3	H	H	3-Azt
226	s	2	3	H	II	3-Pyr
227	s	2	3	H	H	3-Pip
228	s	2	3	H	H	4-Pip
229	s	2	3	H	H í	2-COOH-Ph
230	s	2	3	H	H	2-CON%-Ph
' 231	s i	2	3 I	H	H	3-COOH-Ph
232	s	2	3	H	H	3-CONHrPh
233	s	2	3	H	II	4-COOH-Ph
234	s	2	3	H	H	4-CONH₂-Ph
235	s	2	3	H	-ch₂ch₂ch₂-
236’ i	s	2	3 1	H	-cii₂ch₂ch₂ch₂-
237	s	2	3	H	-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-
238	s	2	3	H	-ch₂ch₂och₂ch₂-
239		2	3	H	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
240	s	2	3	H	-CII₂Cn₂NHCH₂CH₂-

-20CZ 300137 B6

241	S	2	1 ”>	H	-CH₂CH(OH)CH₂-
242	! S	2	( 3	H	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
243	s	2	3	H	-CH₂CH(OH)CH₂C1I₂CH₂-
244	s	2	3	H	-CH₂CH,CH(OH)CH₂CH₂- i
245	s	2	3	H	-CII(COOH)CH₂CH₂- i
246	s	2	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂. 4
247	s	2	3	H	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂- 1 i
248	s	2	3	H	-CH(CH₂NH₂)CH₂CI1₂- j
249	s	2	3	H	DH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
250	s	2	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
251	s	2	3	H	-CI I(CH₂OH)CH₂CH₂CHr
252	s	2	3	lí ”	-CH(CH₂NH₂)CH₂CÍI₂CH₂-
253	s	2	3	H	ί -CH(COÓH)CII₂CI I₂CH₂CIΪ2-
254	s	2	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
255	s	2	n	H	-CH(CH,OH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
256	s	2	3	H	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
257	s	2	3	H	-CH₂CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
258	s	2	3	H	-CH_zCH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
259	s	2	3	H	-CH₂CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
260	s	2	3	H	-CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂-
261	s	2	3	H	-CH₂CH₂CH(COOH)CH;CH₂-
262	s	2	3	H	-CH₂CH_?CH(CONÍI_?)CH₂CH₂-
263	s	2	3	H	’CH₂CH₂CH(CíI₂OH)CH₂CH₂-
264	s	2	3	H	-ČH₂ČH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
265	s	2	3	Me	H	H
Ίόό ~	“š '	Γ	3	Me	H	Me
267	s	2	3	Mc	H	Et
268	s	2	3	Me	H	Pr
269	s	2	3	Me	H	iPr
270 ’	s	2	3	Me	H	Bu
271	s	2	3	Me	Me	Me
272	s	2	3 i	Me	Me	Et
273	s	2	3	Mc	Mc	Pr

274	S	2	3	Mc	Me	iPr
275	s	2	3	Me	i M.e	' Bu
276	s	2	3	Mc	Et	Et
277	s	2	3	Me	Eí	Pr
278	s	2	3	Me	Et	iPr
279	s	2	3	Me	Et	Bu
280	s	2	3	Mc	Pr	Pr
281 ι	s	2	3	Me	Pr	iPr
282	s	2	3	Me	Pr	Bu
283	s	2	3	Me	iPr	iPr
284	s	2	3	Me	IPr	Bu
285	s	2	3	Me	Bu	Bu
286	s	2	3	Mc	H	CH₂CH₂OH
287	s	2	3	Me	Mc	ch₂ch₂oh
288	s	2	3	Me	El	ch₂ch₂oh
289	s	2	3	Me	Pr	CH2CH2OH
290	s	2	3	Me	iPr	CH2CH2OH
291	s	2	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂OH
292	s	2	3	Me	II	CH(CH₂OH)Cíí₂OH
293	s	2	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH2OH
294	s	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)2)CH₂OII
295	s	2	3	Me	H	ch₂ch₂nh₂
296	s	2	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
297	s	2	3	Me	II	CH(CH₂CH₃)CII₂NH₂
298 U—,	^! s i	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
299 I	s	2	3	Me	H	CH2COOH
300	s	2	3	Me	H	CH(CH₃)COOH
301	s	2	3	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
302	s	2	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)COOH
303	s	2	3	Me	II	CH(CH(CH₃)₂)COOH
304	s	2	3	Mc	H	ch₂conh₂
305	s	2	3	Me	II	ČH(CH₃)CONH₂
306	s	2 t	3	McT	H	ČH(CH₂OH)CONH₂

- 22 CZ 300137 B6

307	S 2	n J	Me	11	CH(CH₂CH₃)CONH₂
30S	' S	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
309	s	2	3	Me	H	cPr
310	s	2	3 1	Me	H	cBu
311	s	2	3	Me	H	cPen
312	s	2	3	Me	H	cHex
313	s	2	3	Me	H	3-Azt
314	s	2	3	Me	H	3-Pyr
315	s	2	3	i Me	H	3-Pip
316	s	2	3	! Me	H	4-Pip
317	s	2	3	Me	H	2-COOH-Ph
318	s	2	3	μΓ	H	2-CONH₂-Ph
319	s	2	3	Me	H	3-COOH-Ph
320	s	2	3	μΓ	H	3-CONH₂-Ph
321	s	2	3	Me	H	4-COOH-Ph
322	s	2	3	Me	H	4-CONH₂-Ph
323	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH₂-
324	S J	2	3	Me	-CH₂CH₂CH₂CH₂-
325 i	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH₂CH₂CH_r
326	s	2	3	Me	-CH₂CH₂OCH₂CH₂-
327	s	2	3	Me	-CF1₂CH₂SCí1₂CH₂-
328	s	2	3	Me	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
329	s	2	3	Me	-CH₇CH(OII)CH₂-
330	s	2	3	Me	<:h₂ch(oh)ch₂ch₂-
331	s	2	3	Me	4CH₂CH(OH)CH₂ČH₂CII₂~
332	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
333	s	2	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂-
334	s	2	3	Me	-ch(conh₂)ch₂ch₂-
335	s	2	3	Me	-CII(CH₂OH)CH₂CH₂-
336	s	2	3	Me”	-CH(CH₂NH₂)CH₂CÍI₂-
337	s	2	3	Me	-CH(COÓH)CH₂CH₂CH₂-
338	s	2	3	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂C1I₂-
339	s	2	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CJI₂CH₂-

-23 CZ 300137 Bó

P 340	S 2 1	3	Me	' -CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CII₂-
341	S	2	3	Me	1 -CHÍCOOH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
342	S	2	3	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂CI I₂-
343	s	2	3	Me	-CH(CH2OH)CII₂CH₂CH₂CH₂~
344	s	2	3	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
345	s	2	3	Me	-CH₂CH(COOH)CH₂CH₂CH₂- ..
346	s	2	3	Me	-CH₂CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
347	s	2	3	j Me	-CH₂CH(CH2OH)CH₂CH₂CH₂-
348	s	2		Me	-CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂-
349	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH(COOH)CH₂CH₂-
350	s	2	3	Me	-CI I₂CH₂CH(CONH₂)CH₂CH₂-
351	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
352	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
353	s	3	4	H	H	H
354	s	3	4	ί H	H	Me
355	s	3	4	H	H	Et
356	s	3	4	II	H	Pr
357	s	3	4	11	H	iPr
358	s	3 i	4	H	H	Bu
359	s	3	4	II	Me	Me J
360	s	3	4	H	Me	Et
361	s	3	4	H	Me	Pr
362	s	3	4	H	Me	iPr
363	s	3	4	H	Me	Bu
364	s	3	4	H '	Et	Et
365	s	3	4	H	Et	Pr
366	s	3	4	H	Et	iPr
367	š	3	4	H	Et	Bu
368	s	3	4	H	Pr	Pr
369	s	3	4	H	Pr	iPr
370	s	3	4	H	Pr	Bu
371	s	3	4	11	iPr	iPr
372	s	3	4	H i	iPr j	Bu

-24CZ 300137 Bó

373	S	3	4	H	Bu	Bu
374	s	3	4	H	H	CH₂CH₂OH
375	s	3	4	H	Me	ch₂ch₂oh
376	s	3	4	H	Et	ch₂ch₂oh
377	s	3	4	H	Pr	ch₂ch₂oh
378	s	3	4	H	iPr	ch₂ch₂oh
379	s	3	4	H	H	CH(CH₃)CH₂OH
380	s	3	4	H	H	' CH(CH₂OH)CH₂OH
381	s	3	4	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OI1
382	s	3	4	H	H	CH(CII(CH₃)₂)CH₂OH
383	s	3	4	H	H	CH₇CU₂NH₂
1 384	s	3	4	H	11	CH(CH₃)CH₂NH₂
385	s	3	4	H	H	C1I(CH₂CHj)CH₂NH₂
386	s	3	4	H	11	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
387	s	3	4	H	H	CHiCOOH
388	s	3	4	H	H	CH(CH,)COOH 1
389	s	3	4	H i	H	CH(CíbOH)COOH
390	s	3	4	H	H	CII(CH₂CiyCOOH
391	s	3	4	H	H	CH(CH(CHj)₂)COOH
392	s	3	4 l.	H	H	ch₂conh₂
393	s	3	4	H	H	C1I(CH₃)CONH₂
394	s	3	4	4%	11	CH(CH₂OH)CONH₂
395	s	3	4	H	H	CH(CI1₂CH₃)CONH₂
Γ 396	s	3	4	H	H	CH(CH(Qí₃)₂)CONH₂
397	s	3	4	H	H	cPr
398	s	3	4	H	H	cBu
399	s	3	4	H	H	cPen
400	s	3	4	H	H	cHex
401	s	3	4	H	H	3-Azt í
402	s	3	4	H	11	3-Pyr
403	s	3	4	H	H	3-Pip
404	s	3	4	H	II	4-Pip
405	s	3	4	H	H	2-COOH-Ph

-25C7 300137 B6

406

407

408

409~

II

Η

2-CONH₂-Ph

TČOOTPh

TČQŇIĚTh

4-ČOOH-Ph

410

4ΪΪ

4Ϊ2~

Η rCH₂CH₂CH₂4-CONHrPh

413

414

415

416

417

418

419

420

421

42Ϊ

423

427

425

426

427

428

429

430

431

432

434

435

436

437

438

Η

ΪΓ

Η

Η ίΓ

Η

-CH₂CH₂CH₂CH₂-CH₂CH₂CII_?CH₂CH_r “ch^h₂ochíčh7

-ch₂cii₂šch₂ch₂^čhích₂nhch₂ch7 _

<FÉČH(OH)CH₂CH₂ <h7h(OII)CH₂CH₂C1Í^ ’-Čh7cH₂CI I(OH)CH₂CI ir 7?h^ooh)ch₂ch₂- ~ -CI1(CONH₂)CH₂CH₂7^h₂oíi)c%čh7 ^ií(ch₂nh₂)c^čh7

Tli 1(COOH)CH₂CH₂CI Γ7 '-cií(c5nh₂)čh₂čh₂ch₂-CH(CH₂OH)CH₂CH?Čh7 ~ai(CH₂NH₂)CH₂CH₂CíI₂-ČH(COOH)CH₂a7cn₂CH₂”cn(CONH₂)CH₂CH₂CH₂CH7 “CH(CÍtČH)CH₂CH₂Cíl₂CH7

7h(ČH₂ŇH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂”cn₂CH(ČOÓH7cH₂CII₂ČH77h77(čonh7)cm^hIču7

-CH₂CH(CH₂OH)CH7lH₂CH₂7Η₂αΗ(€Η₂ΝΉ^)ϋΗ₂άί7Η7

-CH₂CH₂CH(COOH)ČH₂CH7^_

-ch₂ch_?,čh(čonh₂)chIch₂”

-26CZ 300137 B6

439	S	3	4	H	-CH₂CH₂CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
440	S	3	4	H	-CH₂CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
441	S	3	4	Me	H	H
442 I	S	3	4	Me 1 .. .	H	Me
1 443	s	3	4	Me	H	Et
444	s	3	4	Me	H	Pr
445	s	3	4	Me	H	iPr
446	s	3	4	Me	H	Bu
447	s	3	4	Me	Me	Me
448	s	3	4	Me	Me	Et
449	s	3	4	Me	Me	Pr
450	s	3	4	Me	Me	iPr
451	s	3	4	Me	Me	Bu
452	s	3	4	Me	Et	Et
453	s	3	4	Me	Et	Pr
454	s	n 3	4	Me	Et	iPr
455	s	3	4	Me	Et	Bu
456	s	3	4	Me	Pr	Pr
457	s	3	4	Me	Pr	iPr
458	s	3	4	Me	Pr	Bu
459	s	3	4	Me	iPr	iPr
460	s	3	4	Me	iPr	Bu
46 ί	s	3	4	Me	Bu	Bu
462	s	3	4	Me	H	CH₂CH₂OH
463	s	3	4	Me	Me	ch₂cíi₂oh
464	s	3	4	Me	Et	ch₂ch₂oh
465	s	3	4	Me	Pr	CH₂CH_zOH
466	s	3	4	Me	iPr	^hCH₂CH₂OH
467	s		4	Me	H	CH(Clh)CH₂OH
468	s	3	4	Me	H	CH(CH₂OH)CH₂ÓH
469	s	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
470	s	3	4	Me	Π	CH(Cn(CH₃)₂)CH₂OH
471	s	3	4	Me	H	CH₂CH₂NH₂

-27CZ 300137 B6

472	S	T	4	Me	H	CH(CH₃)C1I₂NH₂
473	S í	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH_?NH₂
474	s	3	4	Me	H	CU(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
475	s	3	4	Me	H	ch₂cooh
476	s	3	4	Me	H	CH(CH₃)COOH
477	s	3	4	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
478	s	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)COOÍI
479	s	3	4	Me	H	CH(CH(CH₅)₂)COOH
480	s	3	4	Mc	H	ch₂conii₂
481	s	3	4	Me	H	CJÍ(CH₃)CONH₂
482	s	3	4	Me	H	CH(CH₂OH)CONH₂
483	s	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)CONH₂
484	s	3	4	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CON1Í₂
485	s	3	4	Me	H	cPr
486	s	3	4	Me t	H	cBu
487	s	3	4	Me	H	cPen
488	s	3	Γ 4	Me	H	cHex
489	s	3	4	Me	H	3-Azt
490	s	3	4	Me	H	3-Pyr
491	s	3	4	Me	H	3-Píp
492	s	3	4	Me	H	4-Pip
493	s	3	4	Me	H	2-COOH-Ph
494	s	3	4	Me	H	2-CONH₂-Ph
495	s	3	4	Me	H	3-COOH-Ph
496	s	3	4	Me	H	3-CONH₂-Ph
497	s	3	4	Me	H	4-COOH-Ph
498	s	3	4	Me	H	4-CONH₂-Ph
499	s	3	4	Me	-cii₂ch₂cií₂-
5θθ	s	3	4	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
501	s	3	4	Me	-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-
502	s	3	4	Me	-ch₂ch₂och₂ch₂-
503	s	3	4	Me	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
504	s	3	4	Me	-Cn₂CH₂NHCH₂CII₂-

-28CZ 300137 B6

505	S	3	4	Me	-CH₂CH(OIí)CHj-
506	S	3	4	Me	-CH₂ČH(OH)CH₂CH₂-
507	S	3	4	Me	-CH₂CH(OH)CH_?CH₂CH₂-
508	S	3	4	Me	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂ČH₂-
509 t ..	s	3	4	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂- 1
510	s	3	4	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
511	s	3	4	Me	-CH(CH₂O1I)ČH₂CH₂-
512	s	3	4	Me	-CH(CH_?NH₂)CH₂CH₂-
513	S	3	4	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂·
514	s	3	4	Me	-CH(CONH₂)CH₂CTI₂CH₂-
515 i	s	3	4	Me	-Cn(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
í 51ó	s	3	4	\| Me	-CH(CH₂NU₂)CH₂CH₂CH₂-
i 517	s		4	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
518	s	3	4	Me	-Cl 1(CONH₂)CH₂CI i₂ch₂cii₂-
519	s	3	4	' Me	-CH(CH₂OH)CH₂C1í₂CH₂CH₂- i
520	s	3 '	4	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂CII₂-
521	s	3	4	Me	-CH₂CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
522	s	3	4	Me	-CH₂CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
523	s	3	4	Me	-CH_?CH(CH₂OH)CH₂CH₂CII₂-
524 ~	s	3	4	Me	-CFl2CH(CH₂NH₂)CII₂CH₂CH₂-
525	s	3	4	Me	-CH₂CH₂CH(COOH)CH₂CII₂-
526	s	3	4	Me	-CH₂CH₂CH(CONII₂)CH₂CH₂-
527	s	3	4	Me	-Cn₂CH₂CI I(CH₂OII)CH₂CH₂-
528	s	3	4	Me	-CH₂CH₂C1I(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
529	0	1		H	Η H
530	0	1	3	H	H Me
531	0	1	3	II	H Et
532	0	1	3	H	H Pr
533	0	1	3	H	H MPr
534	0	T	3	H	H Bu
535	0	1	3	Π í	Me Me
536	0	1	3	H	Me Et
537	0	1	3	II	Me Pr

-29CZ 300137 B6

538	! o i	I i	3 1	Sh	Me	' iPr
539 ί	0	1	3	H	Me	Bu
540	0	1	3	H	Et	Et
541	0	1	3	H	Et	Pr
542	0	1	3	H~	Et	ÍPr
543	0	1	3	H	! Et	Bu
544	0	1	3	H	Pr	Pr
545	0	I	3	H	Pr	iPr
546	0	1	3	H	Pr	Bu
547	0	1	3	H	iPr	iPr
548	0	1	3	H	iPr	Bu
549	0	1	3	H	Bu	Bu
550	0	1	3	H	H	CH_?CH₃OH
551	0	1	3 1	H	i Me	ch₂ch₂oh
552	0	1	3	H	Et	ch₂ch₂oh
553	0	1	3	H	Pr	cii_?ch₂oh
554	0	1	3	H	! iPr	CIECIEOH
555	0	1	3	H	II	CIÍ(CH₃)CH₂OH
556	0	1	3	H	H	CH(CH₂OH)CH₂OíI
557	0	1	3	H	ÍI	CH(CH₂CH₃)CIt₂OH
558	0	1	3 1	H	Π	CII(CH(CH₃)₂)Cn₂OH
559	0	1	Λ □	H	H	CIÍ₂CH₂NH₂
560	0	l	3	H	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
^; 561	0	1	3	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂NH₂
562	0	1	3	H	H i i	CH(C11(CH₃)₂)CI1_?NH₂
563	0	1	3	H	H	CH,COOH
564	0	1 j	3	H	11	CII(CH₃)COOH
565	0	I	3	H	H	CH(CH₂OH)COOH
566	0	1	3	H	H	ČH(CH₂CH₃)COOH
567	0	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)COOH
568	0	1	3 [ , .,-l·	H	H	ch,conh₂
569	0	1	3	H	H	CH.(CH₃)CONHí
570 . i	0	1	3	H	H	CH(CH₇OH)CONH₂

-30CZ 300137 Bó

571	’ 0	1	3	H	H	CH(CH₂CH₃)CONH₂
572	0	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
573	0	1	3	H	H	cPr
574	0	1	3	’ H	H	cBu
; 575	0	1	3	H	H	cPen
576	0	1	3	H	H	cHex
577	0	1	3	H	H	3-Azt
578	υ	1	3	H	ÍI	3-Pyr
579	0	i	3	H	H	3-Píp
580	0	1	3	H	H	4-Pip
581	0	1	3	H	H	2-COOH-Ph
582	0	1	3	H	H	2-CONH₂-Ph
583	0	1	3	H	H	3-COOH-Ph
584	0	1	3	H	H	3-CONH₂-Ph
585	0	1	3	H	H	4-COOH-Ph
586	' ⁰	1	3	H	H	4~CONH₂-Ph
587	0	1	3	H	-CH₂CH₂CH₂-
588	0	1	3	H	-CH₂CH₂CH₂CH₂~
589	0	1	3	H	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
590	0	1	3	H	-ČII₂CH₂OCH₂CH₂-
591	0	1	3	H	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
592	0 '	1	3	H	-CH₂CII₂NHCH₂CHr
593	Π)	¹	3	H	-CH,CH{()H)CH₂-
594	0	1	3	H	-Cíí₂CH(OH)CH₂CH₂-
595	0	1	3	H	~CH₂CH(OH)CH₂CH₂CII₂-
596	0	1	3	H	-ČH₂CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
597	0	1 1	3	H	-C.H(COOH)CH₂CH₂-
598	0	1	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
599	0	1	3	H	-CH(CH₂OH)CH₂CHr
600	0	1	3	H	-C11(ČH₂NH₂)CH₂CH₇-
601	^—0	1	3	H	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
602	0	1	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
603	0	1	3	H i	<II(CH₂OH)CH2CH₂CII_?-

-31 CZ 300137 B6

604	0	1	i 3 1	^Η	-CH(CH₂NH₂)CII₂CI i₂ci i₂-
605	0	1	3	Η	-CH(COOH)CH₂CH₂CH_?CH₂-
60ό	0	1	3	Η	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
607	ϋ	1	3	Η	-CH(CH₂ÓH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
608	0	]	3	Η	-ČÍI(CI1₂NIIJCH₂CH₂CH₂CH₂-
609	0	1	3	^; 11	₍ -CH₂CH(COOH)CII₂C1I₂CH₂-
610	0 i	1	3 i	Η	-CH₂CII(CONH₂)CH₂Cí 1₂CI i₂-
611	0	1 ι	3	Η	-ČHjCII(CH₂OH)CHjCH2CH₂-
612	0	1	3	Η	-ČH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH_:CH₂-
613	0	1	π J	Η	-CH₂CH₂CH(COOH)CH₂CH₂-
614	0	1	3	Η	-CH₂CH₂CH(CON4í₂)CH₂CH₂-
615	ϋ	1	3	11	-CH₂CII₂Cí 1(CH₂OH)CH₂CH₂-
616 ί	0	1	3	Η	-CH₂CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
617	0	1	3	Me	H	H
618	0	1	3	Me	H	Mc
619	0	1	3	Me	H	Et
620 1	0	1	3	Me	H	Pr
621	0	1	3	Me	II	iPr
622	0	1	3	Mc	11	Bu
623	0	1	3	Me	Me	Me
624 I	0	I	3	Me	Me	Et
625	0	1	3	Me	Me	Pr j
626	0	1	3	Me	Mc	iPr
627	0	1	^k 3 Ί 1 J	Me	Me	Bu
628	0	1	->	Me	Et	i Et í
629	0	1	3	Me	Et	Pr
630	0	ί	3	Me	Et	iPr
631	0	1	3	Mc	Et	Bu
632	0	1	3	Me	Pr	Pr
633	0	1	3	Me	Pr	iPr
634	0	1	3	Me	Pr	Bu
635	0	1	3	Me	iPr	iPr
^Η 636 I	0	1 i	3 ,„1	Me	iPr	Bu

-32CZ 300137 B6

637	0 1 1	-o J	Me	Bu	I~Bu
638	0	1	3	Me	H	CH₂CHjOH
639	0	1	3	Me	Me	CIBCHzOH
640	0	1	3	Me	Et	CH₂CH₂OH i
641	0	1	3	Me	Pr	CÍI₂CH₂OH
642	0	1	3	Me	iPr	ch₂ch₂oh
643	0	1	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂OH
644	0	1	3	Me	H	CH(CH₂OH)CH₂ÓH
645	0	1	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
646	0	1	3	Me	H	ČH(CH(CHj)₂)CH₂ÓH
647	0	1	3	Me	H	ch₂ch₂nh₂
648	0	1	3	Me	11	CII(CH₃)CH₂NH₂
649	0	l	3	Me	II	CH(CH₂CH₅)CH₂NH₂
650	0	1	3	Me	II	CII(CII(CH₃)₂)CH₂NH₂
651	0	1	3	Me	II	ch₂cooh
652	0	1	3	Me	H	CH(CH₃)COOH
653	0	1	3	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
654	0	1	3	Me	Π	CH(CH₂CH₃)COOH
655	0	1	3	Me	H	CH(CíI(CH₃)₂)COOH
65Ó	0	1	3	Me	H	ch₂conh₂
657	0 1	1	3	Me	H	CH(ČH₃)CONH₂
658	0	1	3	Me	II	CH(CH₂OH)CONÍI₂
659	0	1	3	Me	'h	CÍI(CII₂CH₃)CONH₂
660	0	1	3	Me	H	^CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
661 j	0	1	3	Me	H	cPr
662	0	1	3	Me	H	cBu
663	0	1	3	Me	H	cPen
664	0	1	> J	Me	H	cHex
665 ί_Ϊ	0	]	3	Me	11	3-Azt
666	0	1	3	Me	H	3-Pyr
667	0	1	3	Me	H	3 Pip
668	0	1	3	Me	H	4-Pip
669	⁰	1	3	Me	H	2-COOH-Ph

-33CZ 300137 B6

670	0	1>	3	Me	11	2-CONH,-Ph
671	0	1	3	Me	H	3-COOH-Ph ί
672	0	1	3	Me	II	3-CONH₂-Ph
673	0	1	3	Me	H	4-COOH-Ph
674	0	1	3	Me	II	4-CONH₂-Ph
675	0	1	3	Me	-CH₂CH₂CH_?-
676	0	1	3	J Me	~cii₂ch₂ch₂ch₂-
677	0	1	3	Me	-CH₂CH₂CII₂CH₂CH₂-
678	0	1	3	Me	-ch₃ch₂och₂ch₂-
679	0	1	3	Me	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
680	0	1	3	Me	-Cn₂CH₂NIICH₂CH2-
Ó81	0	1	3	Me	l -ČH₂CH(OH)CH₂-
682	0	1	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
683	0	1	3	Me t	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂CH.₃-
684	0	1	3	Me	-CH₃CH₂CH(OH)CH₃CH₃-
685	0	1	3	Me	-CH(CÓÓH)CH₂CH₂-
! 686	0	1	3	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
687	0	1	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
688	0	1	3	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₃CH₃- l
689	0	1	3	Me	-CH(COOH)CH_?CH₂CH₃-
690	0	Γ	3	^Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
691	0	1	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂Cn_?-
692	0	1	3	Me	-CÍI(CH₂NH₂)CII₂CHjCH₂-
693	0	1	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
694	0	1	3	Me	-CI I(CONH₂)CH,CH₂CH₂CH₂- 1
695	0	1	3	Me	CH(CH₂OH)CH₂ČH₂CH₂CH₂-
696	0	1	3	Me	-CH(CH₂ŇH₂)CH₂CH₂Cn₂CH₂-
697	0	1	3	mT	7cH₂CH(COOH)CH₂CII₂C1 1,-
698 ™	~o	í	3'	Me	^r-CII₂CH(CONH₂)CHjCIl₂CH₂-
699	0	1	3	Me	-CIÍ₂CH(CH₂OI1)CH₂CH₂CH₂-
700	0	1	3	Me	ČH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂-
701	0	1	3	Me	-CH₂CH₂CH(COOH)CH₂CH₂- i
702	0	1	3 - _i	Me	-CH₂CH₂CI I(CONH₂)CH₂CH₂-

-34CZ JUU157 B6

703	0	i	' 3	Me	-CH₂CB₂CB(CH₂OH)CH₂CH₂-
704	0	1	3	Me	-CH₂CH₂CH(CII₂NH₂)CH₂CH₂- !
705	0	2	3	H	H	H
706	0	2	3	H	H	Me
707	0	2	3	H	H	Et
708	0	2	3	H	H	Pr
709	^δ~	2	o	H	H	iPr
710	0	2	3	H	H	Bu
711	0	2	3	H	Me	Me
712	0	2	3	l- i¹¹	Me	Et
713	0	2	3	H	Me	Pr
714	0	2	„s	H	Me	iPr
715	0	2	3	H	Me	Bu
716	0	2	3	II	Et	Et
717	0	2	3	H	Et	Pr
718	0	2	3	H	Eí	iPr
719	0	2	3	H	Et	Bu
720	0	2	3	H	Pr	Pr
721	⁰	2	3	H	Pr	iPr
722	0	2	3	H	Pr	Bu
723	0	2		H	iPr	iPr
724	ΊΓ	2	3	H	iPr	Bu
725	0	2	3	H	Bu	Bu
726	' 1 0	2	3	H	H	CH₂CH₃O11 [
727	0	2	3	H	Me	CH₂CH₂OH
728	0	2	3	H	Et	CIí_?CH₂OH
729	0		3	H	Pr	ch₂ch_?oh
730	0	2	3	H	iPr	ch₂ch₂oh
731	0	2	3	n	H	ai(CH₃)CH₂OII
732	0	2	3	H	H	ai(CH₂OH)CH,OH
733	θ ;	2	3	H	H	CH(CH₂CHJCII₂OH
734	0 1	' 2	3	TI	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
735	0	2	3	H	H	ch₂ch₂nh₂

-35CZ 30U137 B6

736	0	2	3	Η	ϊϊ	CH(CH₃)CíI₂NH₂
737	0	2 1	3	Η	Η	CH(CH₂CH,)CH₂NH₂
ί 738	0	2	3	Η	Η	CH(CH(CII₃)₂)CH₂NH₂
739	0	2	3	Η	Η	ch₂cooh
740	0	2	3	Η	Η	CH(CH,)COOH 1
741	0	2	3	Η	11	CH(CH₂OH)COOH
742	0	2	3	Η	Η	CH(CH₂CH₂)COOH
743	0	2	3	Η	Η	CH(CH(CH₃)₂)COOH
744	0	2	3	Η	Η	ch₂conh₂
745	0	2	3	Η	Η	CH(CH₃)CONH₂
746	0	2	3	Η	1-1	Cfl(CH₂OIl)CONH₂
747	0	2	3	Η	II	CH(CH₂C1I₃)CONH₂
748	0	2	3	Η	Η	CII(CH(CH₃)₂)CONH₂
749	0	2	3	Η	Η	cPr
750	0	2	3	Β	Η	cBu
751	0	2	3	Η	Η	cPen
752	0 1	2	3 1	Η I	Η	cHex
753	0	2	3	Η	Η	3-Azt
754	0	2	3	Η	Η	3-Pyr
755	0	2	3	Η	Η	3-Pip
756	0	2	3	Η	Η	4-Pip
757	0	2	3	Η	Η	2-CÓOH-Ph
758	0	2	3	Η	Π	2-CONH₂-Ph
759	0	2	3	Η	Π	3-COOH-Ph
760	0	2	3	Η	Η	3-CONH₂-Ph
761	0	2	3	Η	Η	4-COOH-Ph
762	0	2	3	Η	Η	4-CONH₂-Ph
763 I	0	2	3	Η	-CH2CH2CH2-
764	0	2	3	Η	-CH₂CH₂CH₂CH₂-
765	0	2	3	Η	-ch₂ch₂ch₂cii₂ch₂-
766	0	2	3	Η	-ch₂ch₂och₂ch₂-
7Ó7	0	2	3	Η	-CII₂CH₂SCH₂CIí₂-
768	0	2	3	Η	-ch₂ch₂nhcii₂ch₂-

-36CZ 300137 B6

769	2	3	H	-CH₂CH(ÓH)CH₂
770	2	3	H	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
771	2	3	H	-CII₂CH(OH)Cll₂CH₂CH₂-
772	2	3	H	-CH₂CH₂CH(OIÍ)CH₂CH₂-
773	2	3	H	-CH(COOH)CH₂CH₂-
774	2	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
775	2	3	H	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
776	2	3	H	-CH(CH₂MH₂)CH_?CH₂-
777	2	3	H	-CII(COOH)CH₂CH₂CH₂-
778	2	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
779	2	3	H	-CH(CH₂OH)CII₂CH₂CH₂-
780	2	3	H	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH_?-
781	2	3	H	-CfI(COOH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
782	2	3	II	-CH(CONH₂)CH₃CH2CH₂Cn₂-
783	2	3	H	-CH(CH₂OH)CII₂CH₂CH₂CH₂-
784	2	3	II	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂Cí b-
_; 785	2	-?	H	-CH₂CH(ČOOH)CH₂CH₂CH₂-
786	2	3	H	-CH₂CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
787	2	3	11	-ch₂ch(ch₂oi i )ch₂ch₂ci i₂-
788	2	3	H	-CH₂CI í(CH₂NI4₂)CH₂CH₂CH₂-
789	2	3	H	-ČH₂CH₂ČH(COOH)CH₂C1I₇-
790	2	3	H	-CHiCI I₂CH(CONH₂)CH₂CH₂-
791	2	3	H	-CH₂CH₂CH(CH₂OH)CH₂CI I₂-
792	2	3	H	-CII₂CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
793	2	3	Me	Η H
794	2	3	Me	H Me
795	2	3	Me	H Et
796	2 I L	3	Me	H Pr
797	2	3	Me	H iPr
798	2	3	Me	H Bu
799	2	3	Me	Me Me
800	2	3	Me	Me El ;
801	2	3	Me	Me Pr

CZ 300137 Bó

802	0	2	3	Me	Me	iPr
803	0	2	3	Me	Mc I
804	0	2	3	Me	Et	Et
805	0	2	3	Me	Et	Pr
806	0	2	3	Me	Et	iPr
807	0	2	3	Me	Et	Bu
808	0	2	3	Me	Pr	Pr
809	0	2	3	Me	Pr	iPr
810	0	2	3	Me	Pr	Bu
811	0	2	3	Me	iPr	iPr
812	0	2	3	Me	iPr	Bu
813	0	2	3	Me	Bu ¹ )	Bu
814	0	2	3	Me	! H	CH₂CH₂OH
815	0	2	3	Me	Me	ch₂ch₂oh
816	0	2	3	Me	Et	CHjClbOH
817	0	2	3	Me	Pr	CH₂CH₂OH
818	0	2	3	Me	iPr	ch₂ch₂oh
819	0	2	3	Me	^H	CH(CH₃)CH₂OII
820	0	2	3	Me	H !	CH(CH₂OH)CH₂OH
821	0	2	3	Me	H	CH(C1I₂CH₃)CH₂OH
822	0	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
823	0	2	3	Me	H	ch₂ch₂nh₂
824	0	2	3	Me	Ml	CH(CH₃)CH₂NEI₂
825	^h ó~		3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂NH₂
826	0	2	3	Me	H	CH(CH(CHď)CH₂NH)
827	0	2	3	Me	H	CH2COOH
828	0	2	3 1	Me	H	CH(CH,)COOH i
829	0	2	3	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
830	0	2	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)COOH
831	0	2	3	Me	H	CH(CII(CH₃)₂)COOH
i 832	0	2	3	Me	H	ch₂conh₂
833	o	2	3	Me	H	ČH(C11,)CONH₂
834	0	2 i	3	Me	H	CH(CH₂OH)CONH₂

- 38 cz 300137 B6

835	0	2	3	Me	11	CH(CH₂CII₃)CONH₂
836	0	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
837	0	2	3	Me	H	cPr
838	0	2	3	Me	H	cBu
839 1	^! 0	2	3	Me	ΙΪ	cPen
840	0	2	3	Me	H	cHex
841	0	2	3	Me	H	3-Azt
842	0	2	3	Me	H	3-Pyr
843	0	2	3	Me	H	3-Pip
844	0	2	3	Me	H	4-Pip
845	0	2	3	Me	H	2-COOH-Ph
846	0	¹ 2	3	Me	H	2-CONHrPh
847	0	2	3	Me	H	3-CÓOH-Ph
848	0	2	3	Me	H	3-CONH₂-Ph
849	0	2	3	Me	H	4-COOH-Ph
850	0	2 1	3	Me	H	4-CGNH₂-Ph
851	0	2	3	Me	-CH₂CH₂CH₂-
852	0	2	3	Me	-ch₂ch₂čh₂ch₂-
853 t	0	2	3	Me	-ClhC^CíbCI-hCH:-
854	0	2	3	Me	-CIÍ₂CH₂ÓCH₂CH₂-
855	0	2	3	Me	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
856	0	2	3	Me	-ch_?ch₂nhch₂ch₂-
857	0	2	3	Me	-CII₂CH(OII)CH₂-
858	0	2	3	Me	-ch₂ch(oh)ch₂ch₂-
859	0	2	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂CI1^
860	0	2	3	Me	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂C11₂-
861	0	2	3	Me	-CH(COOH)C11₂CHj-
862	0	2	3	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
863	0	’ 2	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
864	0	2	í 3	Me	-CÍ1(CH₂N]I₂)CH₂CH₂-
865 1	0	2	3	Me	-CH(CÓOH)CH₂CH₂CH₂-
866	0	2	3	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂
867	0	2	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂ČÍl₂-

-39CZ 300137 B6

868	0	2	Τ- 3	Me	-CH(CH₂Níl₂)CiI₂CH₂CH₂-
869 ί	: 0	2	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
870	0	, 2	3	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
871	0	2	3	ί Me	i -CH(CH₂OH)CH₂CII₂CH₂CH7- I
872	0 ř 1	2	3	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂^
873	0	2	3	Me ►	-CH₂CH(COO1I)CH₂CH₂CH₂-
874	0	2	3	ί Me	-CH₂CH(CONH,)CH₂CH₂CH₂-
875	0	2	3	Me	-CH₂CH(Cn₂OH)CH₂CH₂CII₂- 1
876	0	2	3	Me	-CH₂CH(CH₂NH₂)CH_?CH₂CH2-
877	0	?	π	Me	-CH₂CH₂CH(COOH)CH₂CH₂-
878 ι	0	2	3	Me	-CH₂CH₂CII(CONH₂)CI IjCI ti-
; 879 i.	0	2	3	Me	-CH₂CH₂CH(C1I₂OH)CH₂CH₂-
880	0	2	3	’m<T	-CH₂CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH»
881	0	3	4	H	H	H
882	0	3	4	H	H	Me
883	0	3	... __	H	II	Et
884	' 0	3	4	II	H	Pr
885	6	3	4	H	H	iPr
886	0	3	4	H	11	Bu
887	0	3		H	Me	Me
888	0	3 !	4	H	Me	ί Et f
889	0 I	³	4 I	II	Me	Pr
890	0	3 i	4	H	Me	iPr
891	0	3	4	n	Me	Bu
892	0	3	4	H	Et	Et
893	o		4	H	Et	Pr
894	0	3	4	II	Et	^[ iPr
895	0	3	4	H	Et	Bu
896	0	3	4	H	Pr	Pr
Γ 897	ο !	3	4	II	Pr	iPr
898	0	3	4	H	Pr	Bu
899	0	3	4 i	H	iPr	iPr
900	0	3	4	II	iPr	Bu 1

-40CZ 300137 B6

901	0	3	4	H	Bu	Bu
902	0	3	4	H	H	CH₂CH₂OH
903	0	3	4	H	^: Me 1	ch₂ch₂oh
904	0	3	4	H	Et	CH₂ČH2OH
905	0	3	4	H	Pr	ch₂ch₂oh
906	0	3	4	H	tPr	CII2CH2O1I
907	0	3	4	H	H	CH(CH₃)CH₂OH
908	0	3	4	H	H	CH(ČH₂OH)CH₂OH
909	0	3	4	H	H	CH(CH₂CII₃)CH₂OH
910	0	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
9Π	0	3	4	ří	il	čh₂ch₂nh₂
912	0	3	4	H™	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
913	0	3	4	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂NH₂
914	0	3	4	H	ÍH	CH(CH(CII;,)₂)CH₂NH₂ 1
915	0	3	4	H	H	ch₂cooh
916	0	3	4	H	H	CH(CH₃)COOH
917	0	3	4	H	H	CH(CH₂(1I1)COOH
918 ;	0	3	4	H	H	CH(CH₂CH₃)COOH
919	0	3	4	H	H	CH(CH(CII₃)₂)COOH
920	0	3	4	H	H	ch₂conh₂
921	0	3	4	H	H	CH(CH₃)CONH₂
922	0	3	4	H	H	CH(CH₂OH)CONH₂
923	Ó	3	4	H	li	ČH(CH₂CH₃)CONH₂
924	0	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
925	0	3	4	H	H	cPr
926	0	3	4	H	H	cBu
927	0	3	4	H	H	cPen
928 ί	0	3	4	H	H	cHex
929	0	3	4	H	H	3-Ázt
930	0	3	4	H	H	3-Pyr
931	0	3	4	H	H	3-Pip
932	0	3	4	H	H	4-Pip
933	0	3	4	H	H	2-COOH-Ph

-41 CZ 300137 B6

ί 934	0	3	4	Η	II	2-CONH₂-Ph
935	0	3	4	Η	Η	3 COOH-Ph
936	0	3	4	Η 1	Η	3-CONH₂-Ph
937	0	'Ί é	4	Η	Η 1	4-COOH-Ph
938	0	3	4	Η	II	4-CONH₂-Ph
939	0	3	4	Η	-ch₂ch₂ch₂-
940	0	3	4	Η	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
941	0	3	4	Η	-CII₂CH₂CH₂CH₂CH₂-
942	0	3	4	Η	-CH₂OT₂OCH₂CIÍ2~
943	0	3	4	Η	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
944	0	3	4	Η	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
945	0	3	4	Η	-CH₂CH(OH)CH₂'
946	0	3	4	Η	-CH₂CII(OH)CH₂CH₂-
947	0	3	4	Η	-CH₂CII(OH)CH₂CII₂CH₂-
948	0	3	4	Η	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂Cíí₂-
949	0	<1 3	4	Η	-CH(COOH)CH₂CH₂-
950	0	3	4	Η	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
951	0	3	4	Η	-CH(CII₂OH)CH₂CH₂-
952	0	3	4	Η	-CH(CH₂NH₂)CH₂CII₂-
953	0	3	4	Η	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
954	0	3	4	Η	-CII(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
955	0	3	4	Η	-ČH(CH₂OH)CH₂CII₂CH₂-
956	0	3	4	Η	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂-
957	0	3	4	Η	.•CH(COOH)CH₂CII₂Cn₂CH₂-
958	0	3	4	Η	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
959	0	3	4	Η	-ch(ch₂oh)ch₂ch₂cii₂ch₂-
960	0	3	4	Η	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
961	0	3	4	Η	-CH₂CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
962	o i	3	4	Η	X'H₂CH(COŇH₂)CH₂CI1₂CH₂-
963		3	4	Η	-CH₂CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
964	0	3	4	Η	-CH₂CH(CH₂NH₂)CI i₂ch₂ch₂-
965	0	3	4	Η	-ch₂ch₂ch(cooh)ch₂ch₂-
966	0	3	4	Η	-CÍI₂CH₂CH(CONH₂)CH₂CH₂-

-42CZ 300137 B6

967	0	3	1 ⁴	\|h I	ι -CH₂CH2ČH(CH2OH)CH₂CH2-
' 968	0	3	4	H	-CH₂CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
969	0	3	4	Me	H	H
970	0	3	4	Me	H	Me
971	0	3	4	Me	H	Fa ~
972	0	3	4	Me	H	Pr
973	0	3	4	Me	H	iPr
974	0	3	4	Me	lí	Bu I
975	0	3	4	Me	Me	Me
976	0	3	4	Me	Me	Et
977	0	3	4	Me	Me	Pr
978	0	3	4	Me	Me	iPr
979	0	3	4	Me	Me	Bu
980	0	3	4	Me	Et	Et
981	0	3	4	Me	Et	Pr
982	0	3	4	Me	Et	iPr
983	0 1	3 l·	ί 4	Me	Et	Bu
984	0	3	4	Me	Pr	Pr
985	0	3	4	Me	Pr	iPr
986	0 !	3	4	Me	Pr	Bu
987	0	3	4	Me	iPr	iPr
988	0	3	4	Me	iPr	Bu
989	0	3	4	Me	Bu	Bu
990	0	3	4	Me	PI	ČH₂CH₂OH
991	0	3	4	Me	Me	CH₂CH₂OH
992	0	3	4	Me	Et	ch₂ch₂oh
993	0	3	4	Me	Pt	cpi₂ch₂oh
994	0	3	4	Me	iPr	ch₂ch₂opi
995	θ ί i	3	4	Me	Pl	Cn(CH₃)ClbOn
996	0	3	4	Me	H	CH(CH₂0H)Člí_?OH
997	0	3	4	Me	H	Cn(CH₂CH₃)CIl₂ÓH
998	0	3	4	Me , 1	H	CH(CH(CPT,)₂)Cn₂OH
\| 999	0	3	4	Me	H	ch₂ch₂nh₂

-43 Q7. 300137 B6

1000	0	3	4	Me	H	CH(CHj)CHjNI1₂
1001	0	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂NH₂
1002	0	3	4	Me	II	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
1003	^: θ	3	4	Me	II	ch₂čóoh
1004	0	3	4	Me	H	CH(CH₃)COOH
1005	0	3	4	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
1006	0	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)C(.)OH
1007	0	3	4	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)COOH
1008	0	3	4	Me	II	ch₂conh₂
1009	0	3	4	Me	H	CH(CH₃)CONH₂
1010	0	3	4	Me	H	CII(CH₂OH)CONH₂
1011	0	3	4	Me	H	C1I(CH₂CH₃)CONH₂
1012	0	3	4	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
1013	0	3	4	i Me	H	cPr
1014	0	3	4	Me	H	cRu
1015	0	3	4	Me	H	cPen
1016	0	3	4	Me	II	cHex
1017	0	3	4	Me	H	3-Azt '
1018	0	3	4	Me	H	3-Pyr
1019	0 i	3	4	Me	t ^H	3-Pip
1020	0	3	4	Me	H	4-Pip
1021	0	3	4	Me	H	2-COOH-Ph
1022	0	T	4	Me	H	2-CONH₂-Pb
1023	0	3	4	Me	H	3-COOH-Ph
1024	o		4	Me	H	3CONH₂-Ph
1025	0	3	4	Me	H	4-COOH-Ph
1026	0	3	4	Me	H	4-CONH₂-Ph
1027	0	T	4	Me	-CH₂CH₂CH₂-
1028	0	3	4	Me	-CH₂CII₂CH₂CH₂~
1029	0	3	4	Me	-CH₂CH₂CH₂CH₂Cll;-
1030	ó	3	4	Me	-CH₂CH₂OCH₂CH₂- 1
1031	0	3	4	Me	-CH₂CH₂SCH₂CIl2-
1032	0	3	4	Me	-Cn₂CII₂NHCH₂CH_?-

- 44 CZ 300137 B6

1033	0	3	4	Me	-CH₂CH(OH)CH₂-
1034	0	3	4	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
1035	0		4	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂CH₂-
1036	0	3	4	Me	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
1037	0	3	4	Me	-CH(COOH)CH₂CI1₂- J
1038	0	3	4	Me	CH(CONH₂)CH₂CH₂-
1039	0	3	4	Me	-CIÍ(CH₂OH)CH₂CH_?-
1040	0	3	4	Me 1	-CH(CH₂NH₂)CIl₂Cn_r
1041	0	3	4	\| Me	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
1042	0	3	4	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
1043	0	3	4	Me	-CH(CH₂OH)CH_?Cn₂Cn2-
1044	0	3	4	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂-
1045	0	3	4	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
1046	0	3	4	Me	-CJ1(CONH₂)CH₂CH₂CH₂CH₂-
1047	0	3	4	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
1048	0	3 1	4	Me	-C1I(CH₂NH₂)CH₂CII₂C1I₂CH₂-
1049	0	: 3	4	Me	-CII₂CH(COOH)C1í₂CI1>CH₂-
1050	0 ί	¹ 3	4	Me	-CH₂CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
1051	0	3	4	Me	-CH₂CII(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
1052	o	3	4	Me	-CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂-
1053	0 1	: 3	4	Me ,	-CH₂CH₂CH(COOH)CH₂CH₂-
1054	0	3	4	Me i	' -CH₂Cn₂CH(CONlI_?)CíI₂CH₂-
1055	0	3	4	Me	-C11_ZCH₂CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
1056	0	3	4	Me	-CH₂CH₂CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂~
1057	s	1	3	H	Π	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂OH
1058	s	1	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂NH₂
1059	s	1	3	H	H	CH(ČH₂(CH₃)₂)COÓII
1060	s	f	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CONH₂
1061	s	1	3	H	H	CH(CH₂OH)CH₂N1I₂
1062 1 1 1	s	1	3	H	H	ČH(CH(CH₃)CH₂C1I₃)CH₂O i H
1063	s	1	3 —.J	H	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)ČH₂N h₂

-45CZ 300137 Bó

1064	s	1	3	H	!^h	CH( CI 1 (Cí Ϊ ₃)CH₂CH₃)COOI I
1065	s	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)CONH 2 1
1066	s	1	3	H	Me	ch₂ch₂nh₂
1067	s	1	3	H	Me	čh₂cooh
1068	s	1	3	H	Me	ch₂conh₂
1069	s	1	3	H	iPr	ch₂ch₂nh₂
1070	s	1	3	H	iPr	ch₂cooh
1071	s	1	3	H	iPr	ch₂conh₂
1072	s	1	3	H	CH₂CH(NH₂)CH₂
1073 i	s	1	3	H	CH₂CH(OCH₃)CH₂
’ 1074	s	— 1	3	AT	CH₂CH(NCH₃)CH₂CH₂
1075	s	2	3	H	H	CH(CII₂(CH₃)₂)CH₂OH
1076	s	2	3	H	H	CH(C1I₂(Cí.I₃)₂)CH₂NH₂
1077	s	2	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)COOH
1078	s	2	3	H	ΙΪ	CH(CH₂íCH₃)₂)CONH₂
1079	s	2	3	H	H	CH(CH₂ÓH)CH₂NH₂
1080	s	2	3	H	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)CH₂O H
1081	s	2	3	H	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)CH₂N h₂ 1
; 1082	s	2	3	H 1	II	CH(CH(CH 0CH₂CH₃)COOH
1083	s	2	3	H	Tl	CH(CI I(CI h)CH₂CH₃)CONT i 2
1084	s	2	3	H	Me	ch₂ch₂nh₂
1085	s	2	3	H	Me	ch₂cooh
1086	s	2	3	H	Me	'ČHjCOŇHj
1087	s 1	^! 2	3	H	iPr	ch₂ch₂nh₂
1088	s	2	3	H	iPr	ch₂cooh
1089	^: s	2	3	H	iPr	ch₂conh₂
1090	s	2	3	H	CII₂CH(NH₂)CH₂
1091	s	2	3	H	CH₂CH(OCH₃)CH₂
1092	s	2 i	3	H	CH₂CH(NCH₃)CH₂CH₂ 1

-46 CZ 300137 Bó

1093	S	1 3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂OH
1094	s	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂NH₂
1095	s	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)COOH
1096	s	3	4	H 1	íí	CH(CH₂(CH₃)₂)CONH₂
1097	s	3	4	H	ΪΙ	CII(CH,OH)CH₂NH₂
1098	s	3	4	H	H	CH(CH(CHj)CH₂CHj)CH₂O H
1099	s	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)CH₂Cíb)CIbN h₂
1100	s	3	4	H	Jí	CU(CH(CH₃)CH2CH₃)COOH
1101	s	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)CH?CIl₃)CONH 2
1102	s		4	H 1	Me	ch₂ch₂nh₂
1103	s	3	4	!h	Me	ch₂cooh
1104	s	3	4	H	Me	Cn_?CONH₂
1105	s 1	3	4 1	H 1	iPr	ch₂ch₂nh₂
1106	! s	3	4	H	iPr	ch₂cooh
1107	s	3	4	H	iPr	ch₂conh₂
1108	s	3	4	H	CH₂CH(NH₂)CH₂
1109	s	3	4	H	CH₂CH(OCH₃)CI1₂
1110	s	3	4	H	CU,CH(NCH₃)CH,CH₂
1111	0	1	3	H	H	CII(C11,(CHj)₂)CH₂OH
1112	0	1	3	H	11	CII(CÍI₂(CH₃)₂)CH₂NII₂
1113 t	0	1	3	H	Π	CH(C1Í₂(CH₃)₂)COOH
1314	0	1	3	H	II	CH(CH₂(CH₃)₂)CONH₂
1115	0	1	3	H	H	CH(CH₂OH)CH₂NH₂
1116	0	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)CH₂O H
; 1Π7	0	1	3	TT^-1	H	ClKCHfCHjjC^CIIý.lCH.N h₂
1118	0	1	3	H	H	Cl I(CH(CH₃)CH₂CI I ,)COOH
1119 í ί 1 1	0	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH,)CONH 1

-47 CZ 300ϊ37 Bó

1120	0	1	3	Η	Me	CH₂CH₂NH₂
1121	0	1	3	Η	Me	ch₂cooh
1122	0	1	3	Η	Me	ch₂conh₂
1123	0	1	3	Η	iPr	ch₂ch₂nh₂
1124	0	1	3	Η	1 iPr	cii₂cooh
1125	0	1	3	Η	iPr	ch₂čonh₂
1126	0	1	3	Η	CH₂CH(NH₂)CIl2
1127	0	1	3	Η	CH₂CH(OCH₃)CH₂
1128	0	1	3	11	CH₂CH(NCH₃)CH₂CH₂
1129	0	2	3	Η	H	C1I(CH₂(CH3)₂)CH₂OH
1130	0	2	3	Η	H	CH(CH₂(CH₃')₂)CH₂NB₂
1131 ,	0	2	3	Η	II	Cí[(CH₂(CH₃)₂)COOH
1132	0	2	3	Η	H	(;h(ch₇(ch₃)₃)conii₂
1133	0	2	3	Η	H	CH(CH₂OH)CH₂NH₂
1134	0	2	3	Η	H	ch(ch(ch₃)ch₂ch₃)ch₂o H
1135	0	2	3	Η	H	CH(ČH(CH₃)CH₂CH₃)CH₂N n₂
1136	0	2	3	η	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)COOH
1137	0	Τ	^_ 3	Η	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)CONB 2
1138	0	2	3	Η	Me	ch₂ch₂nh₂
1139	0	2	3	II	Me	ch₂cooh
1140	0	2	3	Η	Me	cii₂conii₂
1141	0	2	3	Η	iPr	ck₂ch₂nh₂
1142	0	2	3	Η	iPr	ch₂cooh
1143	0	2	3	Η	iPr 1	cii₂conh₂ i
1144	0	2	3	Η	CH₂CH(NH₂)CH₂
1145	⁰	2	3	Η	CH₂CH(OCH₃)CH₂
1146	0	2	3	Η	CH₂CH(NCH₃)CH₂CH₂
1147	0	3	4	Η		CH(CH₂(CH₃)2)CH₂OH
1148	0	3	4	Η	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂NII₂
1149	0	3	4	II	H	CI1(CH₂(CH₃5₂)CÓOH

-48CZ 300137 Bó

1150	0	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CONH₂
1151	0	3	4	H	H	CH(CH₂OH)CH₂NH₂
1152 t	0	3	4	II	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)CI1₂O H 1
1153	0	3	4	H”	H	CH(CH(CH₃)C11₂CH₃)C1Í₂N h₂
1154	0	3	4	H	H	CH(CíÍ(CH/CH₂CH₃)COOH
1155	0	3 1	4	H	H	CH(CH(CH₃)CH₂CH₃)CONH 2
1156	0	3	4	11	Me	ch₂ch₂nh₂
1157	o“	3		H	Me	ch₂cooh
~ 1158”“	o“	^3	4~~	ll“	Me	ch₂conh₂
i 1159	0	3	4	11	iPr r	ch₂čh₂nh₂
1160	0	3	4	II	iPr	ch₂cooh
1161 l·	0	3	4	H	iPr	ch₂conh₂
1 1162	0	3	4	H	CH₂CH(NH_?.)CH₂
! 1163	0	3	4	H	CII₂CH(OCH₃)CH₂
1164	0	3	4	H	CH₂CH(NCH₃)CH₂CH₂

Tabulka 3

I Sloučenina č.	X	n	pozice	R²
~ 1	s	1	3	H
2	s	1	3	Me
3	s	2	3	H
Γ ⁴	s	2	3	Me
5	s	3	4	Η
6	s	3	4	Me
7	0	1	3	H
8	0	1	3	Me

-49CZ 300137 Bó

9	0	2	3	H \| i
10	0	2	3	Me
11	0	3	4	H
12	0 1	3	4	Me

Tabulka 4

(1-4)

Sloučenina č.	X	n	pozice	R⁷	R⁵- i
1	s	1	3	H	H
2	s	1	i 3	H	Me
3	s	1	3	11	Et
4	s	1	3	H	Pr
5 i	s	1	3	H	iPr
ó	s	t	3	H	Bu
7	s	i	3	H	cPr
8	s	' 1	3	H	cBu t
9	s	1	3	H	cPen ¹
10	s	1	3	H	cHex
11	s	1	3	Mc	H
12	s	1	3	Me	Me
13	s	1	3	Me	Et
14	s	1	3	Mc	Pr
15	s	1	i 3	Me	iPr
16	s	1	3	Me	Bu
17	s	1	3	Mc	cPr i
18	s	1	3	Me	cBu
19	s	1	3	Me	cPen
20 1	s	1	3	Me	cHex
21	s	2	3	íl	11
22	s	2	3	H	Mc

- 50 CZ 300137 B6

23	Š ’	2	3	H	Et”'
24	S		3	H	Pr
25	s	2	3	H	iPr
26	' s	2	3	H	Bu i
27	s	2	3	ί H	¹ cPr ί
28	s	2	3	H	cBu
i 29	s	. 2 i	3	H	cPen
30	i s	I = 1	S 3	H	cHex
31	s	2	3	Me	i ^H
32	s	2	3	Mc	Me
33	s	2	3	Me	Et
34	s	2	3	Me	Pr
35	s	2		Me	iPr
36	s	2	3	Me	Bu
37	s	2	3	Me	cPr f
38	s	2	3	Mc	cBu
39	s	2	3	Me	cPen
40	s	2	3	Me	cHex
41	s		4	H 1	H 1
^_ 42	s	->	4	H	Me
43	s	3	4	H	Et
44	s	3	4	H	Pr
í 45	s	3	4	H	iPr
46	s	3	4	H	Bu
47	s	3	4	H	cPr
48	s	Λ 3	4	H	cBu
49 1	s	3	4	H	cPen
50 1	S	3	4	H ! 1 \|	cHex
51	s	3 i	4	Me í i	Π
52	s	3	4	Me ί	Me
53	s	3	4	Mc i	Et
54 1	s	3	4	Me	Pr i
55	s	3	4	Mc	iPr

-51 CZ 300137 Bó

56	S	3	4	Me	^: Bu 1
57	s	í	4	Me	cPr
58	s	3	4	Me	cBu
59	S	3	4	Me	cPen
60	s	3	4	Me	cHex
61	0	1	3	H	H
62	0	1	3	H	Me
63	0	1	3	H	Et
64	0		3	H	ΐ Pr
65	0	1	3	H	iPr
66	0	1	3	H	Bu
67	0	1	3 1	H	cPr
68	0	1	3	H	cBu J
69	0	1	3	H	cPen
70	0	1	3	H	cHex
71	0	1	₃	Me	H
72	ό	’T	3	Me	Me
73	0	1	3	Me	Et
74	0	“T	3	Mc	Pr
75	0	1	3	Me	iPr
76	0	1	3	Me	Bu
ΊΊ	0	I	3	Me	cPr
78	0	1	3	“Me~	cBu
79	0	1	3	Me	cPen
80	0	1	3	Me	cHex
81	0	2	3	H	Π
82	0	2	3	H	Me
83	0	2	3	H	Et
84	0	2	3	II	Pr
85	0	2	3	H	iPr
86	0	2	3	H	Bu
87	0	2	3	H	cPr
88	0	2	3	H	cBu

-52 CZ 300137 Bó

89	0	2	3		cPen
Ϊ 90 i	0	2 í	3	H	! cHex
ί 91	0	! 2 Γ	3	Me	H
92	0	2	3	Me	Me
93	0	?	3	Me	Et
94	0	2	3	Me	Pr
95	0	2	3	Me	iPr
96	0	2	3	Me	Bu
97	0	2	3	Me	cPr
98	0	2	3	..... Me	cBu
99	0	2	3	Me	cPen
100	0	2	3	Mc	' cHex f
101	0	3	4	H	11
102	0	- -y~	4	H	Me
103	0 1	Λ	' 4	H	Et
104	0	3	4	H	Pr
““.........105	0	3	4	H	iPr.
106	0	3	4	H	Bu
107	0	3	4 1	H	cPr
108	0	3	4	H	cBu
109	0	3	4	H	cPen
110 1	0	' ' 3	4	H	cHex
; 111	0	J	4	Me	H
112	0	3	4	Me	Mc
113	0	u	4	Mc	El i
114	0	3	4	Me	Pr
115 ! 1 í	0	3	4	Mc	iPr
116	0	3	4	Me	Bu
117	0	3	4	Me i	cPr
118	0	3	4	Me	cBu
119	0	“Ύ	4	Me	cPen
120	0	3	4	Me	cllex

-53CZ 300137 B6

Tabulka 5
	OH		ch₃	X
	κ j H CHý'' j-	H	YG	/^CHA , jf R (1-5)
		N-	11 ^x	R²
	o^z		COOH

Sloučenina č.	X	n	pozice	R^;	Jr' \|	í R⁸ 1
1	í S	1	3	H	H	H
2	s	I	3	H	H	Me
O J	s	1	3	H	H	Et
' 4 i	s	1	3	; H~ r	H	coch₃
5	s	1	3	H	H	coch₂ch₃
6	s	1	3	H	H	COCH2CH2CH3
7	s	1	3	H	H	COPh
8	s	1	3	H	H	COOMe
9	s	1	3	H	H	COOEt
10 1	s	1	3	H	Me	Me
; π	s	1	3	H	Et 1	Et
12	s	1	3	H	Me	ČÓCH3
13	s	1	3	H	Me	COPh
14	: s 1	1	3	H	Me	COOMe
15	s	i—¹— 1	3	H	Me	COOEt
16	s	1	3	Me	H	H
17	s	1	3	Me	H	Me
18	s	1	3	Mc	H	Et
19	s	I	3	Me	H	coch₃
20	s	1	3	Me	H	coch₂ch₃
21 1	s	1	’Λ	Me	H	COCHjCHjCIIj
22	s	1	3	Me	H	COPh
23	s	1	3	Me	H	COOMe
24	s	1	3	Mc	H	COOEt
25	s l	1	3	Me	Me	Me
26	s	1	3	Me	Et	Et
27	s	1	3	Me	Me	COCH₃
28	s	1	3	Me	Me	COPh

-54CZ 300137 B6

i ²⁹	S	1	1 3	Me	Me	COOMe
30	s	1	! ³ i	Me	Me	i COOEt 1 1
31	s	2	3	H	H	II
32	ί S	2	3	H	H	Me
33	s 1	? I	3	^H	H	Et
1 34	S	2	3	H ~	II	COCH,
35 Ϊ	S	2	3	H	H	COCH₂CH₃
36	s	n	3	II	H	COCII2CH2CH3
37	s	2	3	II	H	COPh
38	s	2	3	H	H	COOMe
39	s	2	3	11	H	COOEt
40	s	2	3	II	Me	Mc
41	s	2	3	H	Et	Et
42 i	s	2	3	Π	Me	COCII3
43	s	2	3	II	Me	COPh
44	s	2	3	H	Me	COOMe
45	s	2	3	H	Me	COOEt
46	s	2	3	Me	H	H
47	s	2	3	Me	H	Me
48	s	2	3	Me	H	Et
49	s	2	3	Me	11	COCH3
i 50 i	s	2	3	Me	H	COCřECřh !
! 51 1	s	2	3	Me	H	COCH₂CH₂CH₃
52 i ί .	s	2	3	Me	H	COPh
53	s	2	3	Me	H	COOMe
54	s	2	3	Me	H	COOEt
55	s	2	3	Me	Me	Me
56	s	2	3	Me	Et	Et
i 57	s	2	3	Me	Me	COCH3
58	s	2	3	Me	Me	COPh
59	s	2	.>	Me	Me	COOMe
60	s	2	3	Me	Me	COOEt
61	š	3	4	II i	H	H ř

- 55 CZ 300137 B6

! 62	í S	Γ ~ ! ³(	4	Ιη ί	H	Me
,^{1 63}	S	3	4	^Η	H	Et 1
64	s i	3	4	Η	H	COCH,
65	s	3	4	Η	H	COCUCft
66	s	3	4	Η	H	COCH₂CH₂CH₃
67	s	3	4	Η	H	COPh
68	s	3	4	Η	H	COOMe
69 L.	¹ s	3	4	Η	H	COOEl
70	s	3	ί 4	Η	Me	Me
71	s	3	4	11	Et	Et
⁷²	s	3	4	Η	Me	COCIE
73	s	3	4	Η	Me	COPh
74	s	3	.	Η	Me	COOMe
75	s	3	4	Η	Me	COOEt
76	s	3	4	Me	H	lí
77	s	3	4 Η	Me	H	Mc
78	s	3	4	Me	H	Et
79	s	3	4	Me	II	COCÍ-b
80	s	^{: 3} !	4	Me	H	COCH.CIb
81	S	Λ 3	4	Mc	H	ČOCH₂CH_?CH₃
82	s	3	4	Mc	H	COPh
83	s	³	4	Me	H	COOMe
84	s	3	4	Me	H	COOEt
85	s	3	4	Mc	Me
86	s	3	4	Me	Et	El
87	s	3	4	Me	Me	COCHj
88	s	3	4	Me	Me	COPh
' 89	s	n 3	4	Me	Me	TOOMe
90	s	3	4	Me	Mc	COOEt
91	0	ΐ	3	H	H	H
92	0	1	3	H	H	Me
93	0	1		H	H	Et
94	0 i 1	1	3	H	H	COCHj

-56C7. 300137 Bó

95	0	1	í ³	H	~H	COCH2CH3
96	0	1	3	H	H	COCH₂CH₂CH₃
97	0	l	3	H	H	COPh
98	0	1	3	H	H	COOMe
99	0	1	3	H	H	COOEt
100	0	1	3	H	Me	Me
101	0	1	3	H	El	Et
102	0	1	³	H	Me	COCR3
103	0	I	3	H	Me	COPh
104	o	1	3	H	Me	COOMe
105	0	1	3	H	Me	COOEt
106	0	1	3	Me	H	H
107	0	1	3	Me	H	Me
108	0	1	3	Me	H	Et
109	0	1	3	Me	H	coch₃
í 10	0	1	3	Me	^H	COCH₂CH,
lil	Πο i	1	3	Me	H	COCH₂CH₂CH₃
112	⁰	1	3	Me	H	COPh
113 ,	⁰	1	3	Me	H	COOMe
114	⁰	1	3	Me	ΪΙ	COOEt
115	1 0	1	3	Me	Me	Me
116 1 0		3	Me	Et	Et
117	0	1	3	Me	Me	COCH3
118	0	1	3	Me	Me	COPh
119	0	1	3	Me	Me	COOMe
120	0	1	3	Me	Me	COOEt
121	0	2	3	H ‘	H	H
122	0	2	3	H	H	Me
123	0	2	3	H	H	Et
124	0	2	3	H	H	COCH3
125	0	2	3	H	H	COCH₂CH₃
126	0	2	3	H	H	coch₂ch₂ch₃
127	ó	2	3	H	H	COPh

-57CZ 300137 B6

-58 CZ 300137 B6

161	0	3	4	H	Et	Et
162	0	3	4	H	Me	COCÍÍ3
163	0	3	4	Π	Me	COPh
164	0	3	4	11	Me	COOMe
. 165	0	3	4	H	Me	COOEt
167	0	3	4	Me	H	H
168	0	3	4	Me	H	Mc
169	0	3	4	Mc	H	Et
170	0	3	4	Me	H	COCH₃
171	0	3	4	Me	H	COCH2CH3
172	0	3	4	Mc	H	COCH2CII2CH3
173	0	3	4	Me	H	: COPh
174	0	3	4	Me	H	COOMe
175	0	3	4	Me	H	COOEt
176	0	3	4	Me	Me	Me
177	0	3	4	Me	Et	Et
178	0	3	4	Me	Me	COCH,..
179	0	3	4	Me	Me	COPh
180	0	3	4	Me	Me	COOMe
181	0	3	4	Me	Me	COOEt
182	s	1	3	H	H	CO-cPr
183	s	1	3	H	H	CO-cBu
184	s	1	3	11	H	CO-cPen
185	s	1	3	II	H	^CO-cHcx
186	s	1	3	H	H	CO-2-thíenyl
187	s	1	3	H	H	CO-2-furyl
188	s	1	3	H	H	CO-2-pyridyl
189 ~	s	1	3	H	H	CO-3-pyridyl J
190 1	s	¹!	3	H	H	CO’4-pyrídyl
¹⁹¹ i	s	1 'i i	3	H	H i	SO₂-Ph
192	s	1	3	H	H	CO-Ph-2-CO()H
193	s	1	3	H	H	ČO-PI1-2-CONH2
194	s	1	3	H	H	CO-Ph-2-CH₂OH

-59CZ 300137 Bó

195	S	1	->	H	H	CO-Ph-2-CH₂ŇH₂
196	S	^! 1 !	3	H	H	CO-Ph-3-COOH
197	s	1	3	II	H	CO-Ph-3-CONlb
198	s	1	3	H	7	CO-Ph-3-CH₂OH
199	s	1	3	H	H	CO-Ph-3-C'H₂NH₂
200	s	1	3	H	H	1 CO-Ph-4-COOH
201	s	1	3	H	H	CO-Ph-4-CONIL·
202	s	1	3	H	H	CO-Ph-4-CH>Olí
203	s	1	3	H	H	CO-Ph-4-CH₂NII₂
204	s	2	3	H	H	CO-cPr
205	s	2	3	H	H	CO-cBu
206	s	2	3	H	H	CO-cPen
207	s		3	H	H	, CO cllex
208	s	2	3	H	II	CO-2-thienyl
209	s	2	3	H	II	CO-2-furyl
210	s	2	3	H	II	CO-2-pyridyl
211	s	2	3	H	H	CO-3-pyridyl
212	s	2	3	H	11	CO-4-pyridyl
213	s	2	3	H	II	SO₂-Ph
214	s	2	3	H	H	CO-Ph-2-COOH
215	s	2	3	H	H	CO-Ph-2-CONH₂
216	s	2	3	H	H	COPh-2-CH₂ÓU
217	s	2	3	H	H	CO-Ph-2-CH₂NH_?
218	s	2	3	II	H	CO-Ph-3-COOH 1
219	s	2	3	H	H	co-pm-conh₂
220	s	2	3	H	II	CÓ-Plví-CHŤOH
221	s	2	3	H	II	ČO-Ph-3.CH₂Wb 1 1
222 L________	s	2	3	H	II	CO-Ph-4-COOH
223	s	2	Ί A	H	II	CO-Ph-4-CONH₂
224	s	2	3	H	H	CO-Ph-4-CH₂OH
225	s	2	3	H	H	CO-Ph-4-CH₂NH₂
226 L i	s	a	4	H	H i	CO-ePr
' 227 i	s	3	⁴ í	H	H	CO-cBu

«60C7. 300137 B6

228 ]	í s I	1 ³	4	H	H	1 CO-cPen I
229	s	3	4	H	H	! CO-cHex
230	s 1	3	4 1	H	H	CO-2-thienyl
231	i s		4	H	H	CO-2-ftiryl
232	s	3	Γ 4	H	H	CO-2-pyridyl
233	s	3	4	H	H	CO-3-pyridyl
234	s	3	4	H	H	CO-4-pyridyl
235 '	s	3	4	H	H	SO₂~Ph '
236	s	3	4	H	H	CO-Ph-2-COOH
237	s	3	4	II	H	CO-Ph-2-CONH₃
238	s	Λ 3	4	H	^Γπ	CO-Ph-2-CH_?OIl
i 239	s	3	4	H	II	CO-Ph-2-CH₂NH₂
! 240	s	3	4	H	H	CO-Ph-3-COOH
241	s	o	4	H	H	CO-Ph-3-CONH₂
242	s	3	4	H	H	ČO-Ph-3-CH₂OH
243	s	3	4	11	H	CÓ-Ph-3 CH₂NH,
244	s	3	4	H	H	CO-Ph-4-COOH
245	s	3	4	H	II	CO-Ph 4-CONIfc
246	s	3	4	H	H	CO-Ph-4CH₂OH
247	s	3	4	H	H	CO’Ph-4-CH₂NH₂
248	0	1	3	H	H	CO-cPr
249	0	1	3	H	H	CO-cBu
250	0	1	3	II	H	CO-cPen
251	0	1	3	H	H	CO-cHex
252	0	1	^: 3	ff	H	CO-2-lhienyl
253	(5“	1	3	H	H	CO-2-furyl
254	0	1	3	H	H	CO-2-pyridyl
255	0	1	3	11	II	CO-3-pyridy)
256	0	1	3	H	H	CO-4-pyridyl
257	0	1	3	íl i	H	SO₂'Ph
258	0	1	3	H	H	CÓ-Ph-2-COÓH
259	0	1	3	II	H	CO-Ph-2-ČONH,
260	0	1	3	H	H	CO-Pb-2-CH:>OH

-61 CZ 300137 B6

261	ΠΓ	ί 3 1	Η	Η	! CO-Ph-2-CH,NH₂
262	1	3	Η	Η	CO-Ph-3-COOH ι
263	1	3	II	II	CO-Ph-3-CONII?
264	1	3	Η	Η	CO-Ph-3-CHjOII
265	1	3	Η	Η	CO-Ph-3-CH₂NH₂
266	1	3	Η	Η	CO-Ph-4-COOH
267	1	3	Η	Η	CO-Ph-4-CONH_?
268	1		Η	Η	CO-Ph-4-CH₂OM
269	1	3	Η	Η	CO-Ph-4-CH₂NH₂
270	2	3	Η	Η	CO-cPr
271	2	3	Η	Η	CO-cBu
272	2	3	Η	Η	CO-cPen
273	2	3	Η	Η	CO-cHex
274	2	3	Η	Η	CO-2-thienyl
275	2	3	Η	Η	CO-2-furyl
276	2	3	Η	Η	CO-2-pyridyl
277	2	3	Η	Η	CQ-3-pyridyl
278	2	3	Η	Η	C 0-4-pyr idyl
279	2	3	Η	Η	SO₂-Ph
280	2	3	Η	Η	CO-Ph-2-COOn
281	2	3	Η	Η	CO-Ph-2-CONII₂
282	2	3	Η	Η	CO-Ph-2-CH₂OH
283	2	3	Η	Η	CO-Ph-2-CH₂NH₂
284	2	3	Η	Η	CO-Ph-3-COOH
285	2	3	Η	Η	CO-Ph-3-CONH₂
286	2	3	Η	Η	CO-Ph-3-CHiOll
287	2	3	Η	Η	CO-Ph-3-CH₂NH₂
288	2	3	Η	Η	CO-PM-COOH
289	2	3	Η	Η	CO-Ph-4-CONH₂
290	2	3	Η	Η	ČÓ-Ph-4-CHjOH
291	2	3	Ίϊ	Η	CO-Ph-4-CHíNHj
292	3	4	Η	Η	CO-cPr
293	3	4	II	Η	CO-cBu

-62CZ 300137 Bó

294	0	! ³	4	H	H	CO-cPen
295	0	3	4	H	H	CO-cHex
296	0	3	4	H	II	CO-2-thienyl
297	0	3	4	H	H	CO-2-furyl
298	0	3	4	H	H	CO-2-pyridyl
299	0	3	4	ΙΪ	H	CO-3-pyridyl
300	0	3	4	H	H	CO-4-pyridyl
301	0	3	4	H	H	SO₂-Ph
302	0	3	4	H	H	CO-Ph-2-COOH
303	0	3	4	H	H	CO“Ph-2-CONH₂
304	0	3	4	H	H	CO-Ph-2-CH₂OH
305	0	3	4	H	II	CO-Ph-2-CH₂NH₂
306	0		4	H	H	CO-Ph-3-COOH
307	0	3	4	H 1	H	CO-Ph-3-CONH₂
308	0	3	4	H	H	CO-PhOCH₂OH
309	0	3	4 1	H	H	CO-Ph-3-CH₂NH₂
310	0	3	4	H	H	CO-Ph-4-COOH
311	0	3	4	H	H	CO-Ph-4-CONH₂
312	0	3	4	H	H	CO-Ph-4-CH₂OH
313	0	3	4	H	II	CO-Ph-4-CH₂NH₂
314	s	1	3	H	coch₂cii₂-co
315	s	1	3	H	CO-l,2-Ph-CO
31Ó	s	2	3	H	CO-CH₂CII₂-CO
317	s	2~	3	H	CO-l,2-Ph-CO
318	s	3	4	H	CO-CH₂CH₂-CO
319	s	3	4	H	CO-l,2-Ph-CO
320	0	1	3	H	CO-CH₂CH₂-CO
321	0	1	3	H	CO-l,2-Ph-CO
322	0	2	3	H	CO-CH.Clk-CO
323	0	2	3	H	CO-l,2-Ph-CO
324	0	T	4	H	CÓ-CHjCHrCO
325	0	3	4	H	CO-l,2-Ph-CO

-63C'Z 300137 B6

Mezi sloučeninami uvedenými ve výše uvedených tabulkách, jsou upřednostňované sloučeniny sčísiem příkladu 1, 2. 3. 13, 14. 15.26, 27, 28, 38. 39, 40. 51. 52. 53. 63. 64, 65, 76, 77. 78, 88,

89.90, 101. 102, 103, 113, 114, 115, 126, 127, 128. 138, 139 a 140 v Tabulce 1.

sloučeniny s číslem příkladu: 1. 2, 7, 22, 26, 31. 32, 34, 35, 39. 40. 44. 49, 50, 51, 52, 59, 62. 63, 5 64. 65. 89, 90. 95. 110. 114, 119, 120. 122. 123, 127, 128, 132, 137. 138. 139. 140. 147, 150,

151, 152, 153, 177, 178. 183, 198, 202. 207, 208, 210, 211. 215, 216, 220, 225. 226, 227, 228,

235, 238. 239. 240, 241, 265, 266. 271, 286, 290. 295. 296, 298. 299. 303, 304, 308, 313, 314,

315, 316, 323. 326, 327. 328. 329. 353. 354. 359, 374, 378. 383, 384, 386. 387, 391. 392. 396,

401. 402. 403, 404, 411, 414. 415. 416. 417. 441,442, 447, 462, 466, 471. 472, 474, 475, 479, ío 480, 484. 489. 490. 491. 492, 499, 502, 503, 504. 505, 529, 530, 535, 550. 554. 559. 560, 562.

563. 567, 568, 572. 577, 578, 579, 580, 587. 590. 591. 592, 593, 617. 618, 623, 638, 640, 647,

648. 650. 651, 655, 656, 660, 665, 666, 675, 678, 679. 680. 681. 705. 706, 711, 726. 730. 735,

753, 754, 755, 756. 763, 76. 767m. 768, 769, 793, 794, 799. 814, 818, 823, 824, 826. 827. 831,

832, 836, 841, 851, 854, 855. 856, 857, 881, 882, 887, 902, 906, 911, 912. 914, 915, 919, 920.

924. 929. 930. 931. 932, 939, 942, 943, 944, 945, 969, 970, 975. 990, 994. 999, 1000, 1002,

1003, 1007,	1008,	1012,	1017,	1018.	1019,	1020.	1027,	1030,	1031.	1032. 1033, 1057,	1058,
1059, 1060,	1063.	1064.	1065,	1066,	1067,	1068,	1069,	1070,	1071.	1072, 1073, 1074,	1075.
1076. 1077,	1078,	1081,	1082.	1083.	1084,	1085.	1086.	1087,	1088,	1089, 1090, 1091.	1092,
1093, 1094.	1095.	1096,	1099,	1100.	1101,	1102,	1103,	1 104.	1105.	1106, 1107. 1108,	1109.
1110. lili,	1112.	1113,	1114,	1117,	1118,	1119.	1120,	1 121,	1122,	1 123, 1124, 1125,	1126.
1127, 1128,	1129.	1130,	1131,	1132,	1 135,	1136,	1 137.	1138,	1139.	1140. 1141, 1142,	1143,
1144, 1145,	1146.	1 147.	1148,	1149,	1150,	1 153,	1154,	1 155,	1156.	1 157, 1158, 1159,	1160.

1161, 1162. 1163 a 1164 v Tabulce 2 jsou upřednostňované, sloučeniny s číslem příkladu: 1. 3, 5, 7, 9 a 11 v Tabulce 3 jsou upřednostňované, sloučeniny sčísiem příkladu: 1. 2. 11, 12, 21, 22, 31, 32, 41. 42, 51. 52, 61. 62. 71. 72. 81, 82, 91, 92, 101, 102, 111 a 112 v Tabulce 4 jsou upřednostňované, a sloučeniny sčísiem příkladu: 1, 2, 4. 7. 8. 10, 12, 13. 14. 16. 17, 19. 22, 23, 25, 27. 28, 29, 31, 32, 34, 37. 38, 40, 42. 43, 44, 46, 47, 49. 52. 53, 55, 57. 58, 59, 61.62. 64. 67, 68. 70. 72. 73, 74, 76, 77, 79, 82, 83. 85, 87. 88.89,91.92.94,97,98, 100, 102. 103, 104, 106, 107. 109, 112, 113,

115. 117. 118. 119, 121, 122, 124, 127, 128. 130, 132. 133, 134, 136. 137, 139. 142, 143, 145,

147. 148, 149, 151. 152. 154. 157, 158, 160, 162. 163, 164, 167. 168, 170, 173, 174. 176. 178.

179, 180, 182, 184, 185. 186, 187. 188, 189, 190, 191. 192, 193, 194, 195, 196. 197. 198, 199,

200. 201, 202, 203. 204, 205, 206, 207, 208. 209, 210. 211, 212, 213, 214. 215, 216, 217, 218.

219. 220. 221, 222, 223, 224. 225. 226. 227, 228, 229, 231, 232, 233, 234, 235. 236. 237. 238.

239, 240. 241. 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251. 252, 253, 254. 255, 256, 257,

258, 259, 260, 261, 262, 263, 264. 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274. 275. 276.

277, 278. 279, 280, 281, 282. 283. 284. 285. 286, 287, 288. 279, 290. 291, 292. 293, 294, 295,

296. 297. 298. 299. 300. 301. 302, 303, 304, 305. 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314.

15, 316. 317, 318, 319, 320, 321. 322, 323, 324, 325 a 326 v Tabulce 5 jsou upřednostňované.

Mezi nimi, sloučeniny sčísiem příkladu. 3, 28, 53. 78, 103 a 127 v Tabulce 1 jsou více upřednostňované.

sloučeniny s číslem příkladu: 1.2, 7, 26. 31, 32, 34, 35, 39. 40, 44, 49, 50, 51, 52, 59, 62, 63. 64, 65, 529, 530, 535, 554, 559, 560, 562, 563. 567, 568, 572. 577, 578. 579, 580, 587, 590, 591.

•i? 592.593, 1057. 1058. 1059, 1060. 1063. 1069. 1070. 1071, 1072. 1073, 1074, 1111. 11 12, 1113,

1114, 1117. 1123. 1125, 1126, 1127 a 1127 v Tabulce 2 jsou více upřednostňované, sloučeniny s číslem příkladu: 1, 3, 7 a 11 v Tabulce 3 jsou více upřednostňované, sloučeniny sčísiem příkladu: 1,2,21.22.41,42,61.62,81,82, 101 a 102 v Tabulce 4 jsou více upřednostňované, a so sloučeniny s číslem příkladu: 1. 2. 4. 7, 8. 91.92, 94, 97, 98. 182, 183. 184. 185. 186, 187. 188,

189, 190. 191. 192, 193. 194, 195. 196, 197. 198, 199, 200, 201, 202. 203, 248, 249, 250, 251.

-64CZ 300137 B6

252. 253. 254. 255, 256, 257, 258, 259. 260, 261, 262. 263. 264. 265, 266, 267, 268. 269. 314,

315, 320 a 321 v Tabulce 5 jsou více upřednostňované.

Nejvíce upřednostňované sloučeniny jsou uvedené níže:

(1 R,5S.6S)—2—[ 1 —(4—karbamoyl“ 1,3—thiazol—2—y Ijazetídin—3—y Ijthío—6—[( 1 R)-l-hydroxyethylj1 -methylkarbapen-2-em-3 -karboxylová kyselina, (I R.5S.6S)-2-[l-(4-karbamoyl-l,3-oxazoI-2-yl)azetidin-3 -ylJthio—6—[(1R)--1 —hydroxyethv 1]— 1-methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, (' 1 R.5S.6S)—2—[ 1 —(4—hydroxymethy I— 1,3—thiazol—2—v l)azetidin—3—yljthio—6—[(1 R)— 1 -hydroxyethyl]- I-methy Ikarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, (1 R.5S,6S)-2-[ 1 -<4-hy droxy methyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidin-3-y I Jthio-6 [(I R)~ 1 -hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3 karboxylová kyselina, (1R.5 S„6S)—2—[ 1 —(4--kyano— 1.3—thiazol—2—yl)azelídin—3—y! ]thio—6 ·[( 1R)— 1 —hydroxyethylJ— 1 — methy lkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S )-2-( 1 -(4-kyano -1,3-oxazol- 2-yl)azetidin—3-yl]thio—6—f(l R) 1 —hydroxyethyl] 1methylkarbapcn-2 -em-3-karboxylová kyselina, (1 R,5S.6S)-2-( 1- (4-morfolinokarbonvl-l ,3—thiazol—2—yl)azct idin—3—yl ]thio—6- ((1 R)-lhydroxyethylj-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S) 2-( l-(4-morfoIinokarbonyl 1,3- oxazol-2-y I )azetidi n- 3- y I] th io- 6- f {1 R)-1 hydroxyethyl]-1 methylkarbapen-2^m-3-karboxylová kyselina.

(1R.5S.6S )-2-( l-(4-azetidinokarbonyl-l ,3-thiazol-2-yl)azctídin-3-yl]thio-6 ·[( 1 R)-lhydroxvcthyl]-l-methylkarbapen-2-em 3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S) 2-[l-(4-azetidinokarbonyl· 1,3—oxazol—2—yI)azetidin—3—yl]thio—6—['(1 R)-1 hydroxyethyl]-!-methy Ikarbapen- 2-em-3-karboxvlová kyselina, (I R,5S,6S)-2-{ 1 —[4- (3-aminoazetídino)karbonyl l.3-thiazol-2-yl|azetidin-3-yl|thio-ó[(IR)-]-hydroxyethyl ]-I-methy Ikarbapen 2-em-3-karboxylová kyselina.

{I R.5S.6S)-2-{1 [4-(3-aminoazetidino)karbonyl- 1,3-oxazol 2—yIjazetídin 3-yl}thio—6[(1R)-1 hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-cm-3- karboxylová kyselina, (IR,5S,6S)-2-í l-(4-(3-hydroxyazetidino)karbonyI-1,3-thiazol-2 yIjazetídin—3-yl}thio—6— [(IR)— 1 —hydroxyethyl ]—1 methyl karbapen-2-em-3-kar boxy lová kyselina, (I R,5S,6S>-2-] 1 -[4-(3-hydroxyazetidino)karbonyl-l,3-oxazo!-2-yl]azetidin-3-yl}thio-6[(1R)-1-hydroxyethyl] 1 -methylkarbapen-2-em-3- karboxylová kyselina, (I R,5S.6S)--2—[ 1 —(4—thiomorfolinokarbonyl—1,3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yljthío 6-((lR)-lhydroxyethyi]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (I R,5S,6S)-2-[ l-(4-thiomorťolinokarbony]“l ,3-oxazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-ó-[( 1R)-1hy droxy ethy 1 ]-1 -methy I karbapen-2-em-3-karboxy lová kyše I i na, (1 R.5S,6S>-2-{ 1 -[4-(piperidÍn-4-ylkarbamoyl)-l,3-thiazol-2-yl]azetidin-3“yl]thio-6-[(R>1-hydroxyethyl]-1-methylkarbapcn-2-em-3-karboxylová kyselina, (lR,5S,6S)-2 ?1 —L4—(piperidin^4—ylkarbamoyl)—1,3—oxazol—2—yljazetidin 3 ylJ-thio—6—[(R)

I—hydroxyethyl]— 1 -- methylkarbapen-2-em-3- karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S)-2-{ 1-(4-( azetidin-3· ylkarbamoyl)-1,3—thiazol—2-yl]azetidin—3—yl}thio 6-[(R)—l — hydroxyethyl]-1 -methyIkarbapen-2 -em-3-karboxylová kyselina.

(lR,5S.6S)-2—{l-f4-(azetidin-3-ylkarbamoy])-l,3-oxazol-2-yI]azetidin- 3-yI(thio-6-[(R)-1 hydroxyethyl]-! methyl karbapen-2-em-3-kar boxy lová kyselina.

-65CZ 300137 Bó (1R.5S.6S C2j 1 - [4 ((3S)-pyrrol idin-3- ylkarbamoyl)-1.3-thiazoi-2 yljazetidin—3—y! j thio-6-[(R)-1 -hydroxyethylj 1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, (lR,5S.6S)-2-í 1—f4-<(3S.>-pyrrolidin—3—ylkarbamoyl)—1,3- oxazol—2—yljazetidin—3—yl) thio—6— [(R)— 1 —hydroxyethylj—1 -methyIkarbapen 2-cm 3 karboxylová kyselina.

(1 R,5S,6S)-2-{1 -[4-((3R)-pyrrolidin 3-ylkarbamoyl) E3—thiazoi—2 yljazetidin-3-yl}thio—6f(R)-1 hydroxyethylj- 1 - methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S,6S)-2-}' 1 -(4-((3R> pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-l,3-oxazol-2-ylJazetidin-3-yl J thio-6[(R)-l-hydroxyethylj-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina.

(IR.5S.6S)-2-{ l-[4 (piperazin-1 -karbonyI)-1,3—thiazoi—2—ylJazetidin-3—yl j thio-6- [<R>— 1 — io hydroxyethylj-1 -methylkarbapen-2-em-3 -karboxylová kyselina.

(1 R.5S.6S) 2-{ 1-(4-(piperazin-1 -karbony 1)-1,3-oxazo 1-2 yljazetidin-3-yl} thio—6—f(R)— 1 hydroxyethylj-1 methylkarbapen -2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S)-2- j 1- [4 (2-amino-ethyl karbamoyl)- lj-thiazoi- 2-y í jazet idin-3-y 1} thio-6- |(R)—

-hydroxyethylj-1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, (1 R.5S.6S)-2-{1 -(4-(2-amino-ethylkarbamoyl)-1,3—oxazol—2—yljazetidin—3—> 1}thio 6 -[(R)~

-hydroxyethylj-1-methylkarbapen-2-em-3 karboxylová kyselina.

(1 R.5S.6S)-2 J1 -[4-(( l S>— 1 aminomethyl-2 methyl-propylkarbamoyl)-l ,3 thiazoi-2-yljazetidin- 3-yl j thio 6—[(R)— 1 -hydroxyethy! |-1 -methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S)-2-j l-[4 {(1 S)-l-aminomethyl-2-mcthyl-propylkarbamoyl)-l,3-oxazol -2—ylJ20 azetidin—3-yl}thit*)—6—[(R)—l —hydroxyelhyl]—l —methylkarbapen—2—em-3- karboxylová kyselina, (1 R,5S,6S)—2—< 1—{4—[N—(2-amino—ethyl) N-isopropyl-karbamoylJ-1,3-thiazol-2-yl}azeiidin3-ylthio—6—[(R)— 1 -hydroxyethylj-1 methylkarbapen 3 karboxy lová kyselina, (1 R.55.68)-2-(1-(4- [N-(2-amino-ethyl)-N-isopropyl-karbamoyl)-],3-oxazol-2 •yljazetidin3—yI)thio—6—[(R)—1 -hydroxyethyIJ-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina.

(1 R,5S,6S)-2··( 1—{4—[N—(2—hydroxy—ethyl)· N-isopropyl-karbamoyl)-1,3 thiazol—2—ylJazetidin 3-yl{thio—6—[(R)— 1-hydroxyethy 1J-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (I R,5S,6S)-2—(1—{4—[N (2-hydroxy-ethyl)-N-isopropyl-karbamoyl) 1.3-oxazol-2- yljazetidin—3—yP₍thio—6—f(R)—1 hydroxyethylj l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina.

(1 R.5S.6S)—2—[ 1 (4—aminomethyl—L3—tliiazol-2—yl)a7.ctidin 3—yljthio—6—[(R)-1 —hydroxy30 ethyl) l-methylkarbapen-2-em-3- karboxylová kyselina, (I R,5S,6S)—2—[ H4-aminomethy1-l ,3--oxaz.ol—2—yl)azetidin—3—yljtbio—6—f(R)— I -hydroxyethylj-l-methy lkarbapen-2-em-3-karbo\y lová kyselina, (1 R,5S.6S)-2-| l-[4-(benzoylaminomethyl) 1.3-thiazoi-2-yljazetidin-3-yl}thio—6-[(R)-1 hydroxy ethylj-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R,5S,óS)-2-{l-[4-(benzoylaminomethyl)-].3-oxazol-2-ylJa7etidin-3-yl}thio 6—[(R>—1 — hydroxyethylj-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S)-2-11 [4-(benzcnsulfonylaminomethyl)-l,3-thiazol-2-yllazetidin-3-yl}thio-6[(R)— l —hydroxyethylj— 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S) -2-{l-[4-(benzensulfonylaminomethyl)-l ,3 -oxazol-2-yl]azetidin-3- vl} th io—6— [(R)-l-hydroxyethylj-l-mcthylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, (1 R,5S,6S)-2- (1 {4—[(thiofen—2 -karbonylamino)methylj-l ,3 -thiazoi—2-yl}azetidin 3 -yl)thio— 6-[( R)-1 -hydroxyethy IJ-1 -methy lkarbapen-2-em -3-karboxy lová kysel ina, (I R.5S,6S)-2-{ 1-J4 [(thiofen-2-karbonylamino)methylJ-l,3-oxazol-2-yl}azetidin-3-yl)thio6—[(R)— l hydroxyethylj-1-methylkarbapen- 2--em-3-karboxylová kyselina.

- 66 CZ 300137 B6 (1 R.5S.6S) 2 (! H l(furan 2-karbonylairuno)meth\l]-í,3 thiazol 2 ylJazetidin-3-yl)thío-6[(R)-l-hydroxyelhyl]-l-methyIkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5 S,6S)-2--ý1 — {4--[(furan--2--karbonylamino)methyl ]--1,3-oxazol--2--yl }azet idin--3--yl )thio—6— [(R)-l-hydroxyethyl]-l-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina

Způsoby provedení vynálezu

1-Methy Ikarbapenemové deriváty představované obecným vzorcem 1 předkládaného vynálezu io mohou být připravené pomocí způsobů popsaných v postupu A a postupu B uvedených níže.

Postup A

Postup A je způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I reakcí karbapenemového derivátu obecného vzorce II s merkaptovou sloučeninou obecného vzorce III a následným provedením eliminace ochranné skupiny.

(IV) (O

Vt* výše uvedených v/oreích R¹, R². X a n mají stejný význam, jak je uvedeno výše, L¹ představuje skupinu, která se eliminuje; P¹ představuje ochrannou skupinu karboxylové skupiny a R¹p představuje R¹. který může mít ochrannou skupinu.

-6720

Příklady „ochranných skupin karboxylové skupiny“, vhodné jako P¹ zahrnují benzylovou skupinu, která může mít substituent (substituent je nitro, methyl, chlor nebo methoxy), jako je benzyl,

4-mcthoxybenzyl, 4-nitrobenzyl nebo 2-nitrobenzyl; benzhydryl skupinu; ally lovou skupinu, která může mít substituent na pozici 2 (substituent je chlor nebo methyl), jako je allyl.

2—chlorallyl nebo 2 -methylallyl; a skupinu tvořící výše farmakologicky přijatelné estery, kde benzylová skupina, která může mít substítuent (zvláště 4-nitrobenzylová skupina)Je upřednostňována.

Příklady „eliminačních skupin jako ť zahrnují skupinu obecného vzorce -OR^H nebo -5(0)1(¹².

Příklady skupiny R¹¹ zahrnují a CJ až C₄ alkanesulíonyl skupinu jako je methansulfonyh trífluormethansul fonyl, et hansu I fonyl, propan sul fonyl, isopropansulfonvl nebo butansul fonyl skupinu; C₆ až C_H) arylsulfbnyl skupinu jako je feny Isulfonyl, tolylsulfonyl nebo naftylsulfony l; di—CJ až C₆ alky (fosfory 1 skupinu jako je dimethylfosforyl, diethyl fosfory 1. dipropyl fosfory I. diisopropylio fosforyl, dibutylfosfory 1, d i pen tyl fosforyl nebo dihexylfosforyl; nebo di—CJ, až C_1(l aryl fosforyl skupinu jako je difeny Ifosfory I nebo ditolylfosfory 1, kde di fenyl fosforyl skupina je upřednostňována.

Příklady skupin R¹² zahrnují CJ až CJ alkyl skupinu jako je methyl, ethyl, propyl nebo isopropyl; halogenovou CJ až. CJ alkyl skupinu jako je fluormethyl, ehlormethyl, tluorethyl, ehlorethyl, + fluoropropyl, difluonnethyl, difluorethyl, dichlorethyl. trifluormethyI nebo triíluorethyl; 2-acetylaminoethyl skupinu; 2-acety lamí no vinyl skupinu; nebo CJ, až CJ₍₎ aryl skupinu (arylová skupina může mít 1 až 3 substituenty, které mohou být stejné nebo rozdílné, a substítuent jako je methyl, ethyl, propyl nebo isopropyl; CJ až CJ alkoxy skupinu jako jc methoxy, ethoxy, propoxy nebo ísopropoxy: (CJ až C₄ alkoxy jkarbonyl skupinu jako je methoxykarbonyl, ethoxykarbonyl nebo terč buloxykarbonyl; karbamoyl, mono- nebo di—(C_s až CJ alkyljkarbamoyl skupinu; nitro skupinu: hydroxyl skupinu; nebo kyano skupinu), jako je fenyl nebo naftyl, který může mít substituenty; nebo heteroaryl skupinu, která může mít jeden nebo dva atomy dusíku (heteroaryl skupina může mít jeden až tři substituenty. které mohou být stejné nebo rozdílné, a substítuent může obsahovat halogenový atom jako je fluor, chlor nebo brom; C| až CJ alkyl skupinu jako je

2? methyl, ethyl, propyl nebo isopropyl; CJ až CJ alkoxy skupinu jako je methoxy, ethoxy, propoxy nebo ísopropoxy; (C] až C₄ alkoxy jkarbonyl skupinu jako je methoxykarbonyl, ethoxykarbonyl nebo terč buloxykarbonyl; karbamoyl nebo mono- nebo di—(C] až C‘₄ alkyljkarbamoyl skupinu; nitro skupinu; hydroxyl skupinu; nebo kyano skupinu), jako je pyridyl nebo pyrimidinyk který může mít substituenty.

Příklady „ochranných skupin hydroxylové skupiny“ zahrnuté v definici R'p zahrnují benzyloxykarbony] skupinu, která může být substituovaná (substítuent může obsahovat nitro, methyl, chlor nebo methoxy). jako jc benzyloxykarbonyl, 4-nitrobenzyloxykarbonyl. 4-chlorbenzyloxykarbonyl nebo 4-methoxybenzyloxykarbonyl; allyloxykarbonyl skupinu, která může být substituovaná na pozici 2 (substituční může obsahovat chlor nebo methyl), jako je allyloxykarbonyl, 2-ehlorallyloxykarbonyl a 2-methylal lyloxy karbonyl; tri- (C ₍ ažCJ alkyljsilyl skupinu, jako je trimethylsilyl, triethyIsityl nebo /ere-butyldimethyIsilyl; a skupinu tvořící výše farmakologicky přijatelný ester, kde triJCJ až C₄ alkyljsilyl skupina (zvláště terč-butyldimethylsilyl skupina) je upřednostňována.

4(1

Příklady „ochranných skupin amino skupiny obsažené v R¹ p zahrnují allyloxykarbonyl skupinu, která může být substituovaná na pozici 2 (substítuent může obsahovat chlor nebo methyl), jako je allyloxykarbonyl, 2-chlorallyloxykarbonyl a 2-mcthylallyloxykarbonyl; a benzyloxykarbonyl skupinu, která muže být substituovaná (substítuent může obsahovat methyl, methoxy. chlor nebo nitro) jako je benzyloxykarbonyl, 4-methylbenzyloxykarbonyl. 4-methoxybenzyloxykarbonyl. 4-chlorbenzyloxykarbonyl nebo 4-nitrobenzyloxykarbonyl. kde allyloxykarbonylová skupina nebo 4 •nitrobenzyloxykarbonyl skupina je upřednostňována a 4-nitrobenzyloxykarbonyl skupina je více upřednostňována.

5(i Ochranná skupina použita výše jako P¹ může býl použila jako Ochranná skupina karboxylové skupiny obsažené v R¹ p.

Předkládaný postup je postup kde sloučenina obecného vzorce IV je připravená reakcí sloučeniny obecného vzorce II se sloučeninou obecného vzorce III v přítomnosti báze (Krok Al) a slou-68CZ 300137 B6 ceniny obecného vzorce I je následně připravená odstraněním všech ochranných skupin {Krok

A2). V případě, kde L¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem: -OR¹¹, je sloučenina obecného vzorce II, která je použita jako počáteční látka, připravená podle způsobu popsaném v D, H. Shih et al., Heterocycles 21. 29 (1984) nebo podle analogického způsobu.

V případě, kde L¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem: -S(O)R¹², počáteční sloučenina II je připravená podle způsobu popsaném v Japonské patentové přihlášce (Kokai) No. Sho 62—30781 nebo podle analogického způsobu. Všechny kroky budou popsané níže.

(Krok A1) io Krok Al je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce IV, který je proveden pomocí reakce sloučeniny obecného vzorce II s merkaptanovým derivátem obecného vzorce III v přítomnosti báze v inertním rozpouštědle.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek i? na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady vhodných rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky, jako je methylenchlorid, 1,2-diehlorethan nebo chloroform: n itri ly jako je acetonitril: amidy jako je N.N-dimethylformamid nebo N.N-dimethylacetamid; estery jako je ethylacetát nebo methvlacetát; a ethery jako je diethylether. tetrahydrofuran nebo dioxan, kde acetonitril, N.N-dimethylformamid nebo tetrahydrofuran je upřed2o nostňován a acetonitril je zvláště upřednostňován.

Upřednostňované příklady použitelných bází zahrnují organické aminy jako je triethylamin. díísopropylethylamín. pyridin nebo dimethylamínopyridin; nebo anorganické báze jako je uhličitan draselný, uhličitan sodný nebo hydrogenuhličitan sodný, kde organické aminy (zvláště diiso25 propylethylamin) jsou upřednostňovány.

Reakce se obvykle provádí při teplotě od -20 do 40 °C (přednostně od -10 do 20 °C). Doba reakce je v rozsahu od 30 minut do 108 hodin (přednostně od jedné hodiny do 18 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina obecného vzorce IV. která je produktem předkládaného kroku, získaná z reakční směsi známými způsoby, například, přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do reakční směsi nebo do zbytku získaného vydestilováním rozpouštědla z reakční směsi. Je-li to nutné, takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna známými způsoby, například rekrystalizací, srážením nebo chromatografícky. Je také možné použít požadovanou sloučeninu obecného vzorce IV pro další krok bez izolace, je-li to požadováno.

(Krok A2)

Krok A2 je krok konverze sloučeniny obecného vzorce IV na sloučeninu obecného vzorce 1, který je proveden odstraněním jakékoliv ochranné skupiny, která obsahuje sloučenina obecného vzorce IV,

Ačkoliv způsob odstranění ochranné skupiny závisí na typu ochranné skupiny, je proveden pomocí způsobů obecné používaných v oboru chemie organických syntéz (například způsob popsaný \ Protective Groups in Organic Synthesis, Seeond Edition, John Wiley & Sons. lne. 1991 napsané podle T. W. Greene a P. G. M. Wuts).

{I) Když ochranná skupina je benzylová skupina, která může mil substituent, benzhydry! skupinu nebo benzy loxy karbonyl skupinu, který může mít substituent, tato ochranná skupina může být

5o odstraněná reakci s vodíkem v přítomností katalytického redukčního činidla v rozpouštědle.

-69Příklady katalytických redukčních činidel zahrnují a palladium-uhlíkový katalyzátor, platinový katalyzátor nebo a rhodium-uhlíkový katalyzátor, kde palladium uhlíkový katalyzátor je upřednostňována.

Cl 300137 B6

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady vhodných rozpouštědel zahrnují alkoholy jako je methanol nebo ethanol; ethery jako je tetrahydrofuran nebo ? dioxan; a směs těchto organických rozpouštědel a vodu, kde směs tetrahydrofuranu a vody je upřednostňována.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu 0 až 50 °C (přednostně od 10 do 40 °C). Ačkoliv reakční doba závisí na počáteční sloučenině a povaze katalyzátoru, je obvykle v rozsahu 5 minut až io 12 hodin (přednostně od 30 minut do 4 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána odfiltrováním nerozpustných látek, jako je katalyzátor, z reakční směsi a pak oddestilováním rozpouštědla. Je-li to nutné může být takto i? získaná sloučenina čištěna konvenčními postupy jako je rekrystalizace, preparativní tenkovrstvá chromatografie nebo kolonová chromatografie.

(2) Když ochranná skupina je allyl skupina, která může být substituovaná nebo allyloxykarbonyl skupina, která může být substituovaná, mohou být tyto ochranné skupiny odstraněny reakcí s hydridem tri (Ci až C₆ alkyl)cínu a soli alkalického kovu a organické karboxylové kyseliny v přítomnosti sloučeniny palladia v rozpouštědle. Mohou být přidány organické báze nebo organické přípravky pro záchyt allylové skupiny.

Sloučenina palladia může přednostně obsahovat chlorid bis(trifcnylfosfin)pal1adia nebo tetrakis25 (trifenylfosfin)palladium. Hydrid trialkylcínu muže přednostně obsahovat hydrid tributylcínu. Alkalická sůl organické karboxylové kyseliny může přednostně obsahovat 2 ethylhexanoát draselný nebo 2-ethylhexanoát sodný. Organická báze pro záchyt allylové skupiny může přednostně obsahovat morfolin a organický přípravek pro záchyt allylové skupiny může přednostně obsahovat dimedon.

Upřednostňované kombinace ochranných činidel mohou zahrnovat kombinaci chloridu bis{trifenylfosfin)pa11adia a hydridu tributylcínu nebo kombinaci tetrakis(trifenylfosfín)palladia a 2-ethylhexanoátu draselného.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady vhodných rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid, chloroform nebo 1.2—dichlorethan; estery jako je ethylacetát; ethery jako jc tetrahydrofuran, dioxan nebo 1,2-dimethoxyethan; nitrily jako je acetonitril; alkoholy jako je methanol. ethanol nebo propanol; vodu; nebo směs těchto rozpouštědel, kde methylenchlorid. ethylacetát nebo jejich směs je upřednostňována.

Ačkoliv zde není zvláštní omezení reakční teploty je reakce obvykle provedena při teplotě od -20 do 100 °C (přednostně od 0 do 60 °C). Reakční doba je obvykle v rozsahu 30 minut až 48 hodin (přednostně od 30 minut do 12 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána odfiltrováním nerozpustných látek vysrážených z reakční směsi a pak oddestilováním rozpouštědla. Je-li to nutné může být takto získaná sloučenina čištěna konvenčními postupy, jako je rekrystalizace, preparativní tenkovrstvá chromáso tografie nebo kolonová chromatografie.

(3) Když ochranná skupina je ochranná skupina založená na silylu, tak tato ochranná skupina může být odstraněná reakcí se zdrojem (luoridových an iontů jako je tetrabutylammonium fluorid, kyselina fluorovodíková, kyselina fluorovodíková-pyridin nebo fluorid draselný, nebo reakcí s organickou kyselinou jako je octová kyselina, methansulfonová kyselina, p-toluensulfonová

-70C7. 300137 B6 kyselina, trifluoroctová kyselina nebo trifluormethansulfonová kyselina, nebo anorganická kyselina jakoje chlorovodíková kyselina, v rozpouštědle.

Když ochranná skupina je odstraněna pomocí fluoridovc an iontu, reakce někdy probíhá za mírných podmínek za přídavku organické kyseliny jako je mravenčí kyselina, octová kyselina nebo propanová kyselina.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Upřednostňované příklady lu vhodných rozpouštědel zahrnují ethery jako je diethylether. diisopropylether, tetrahydrofuran. dioxan. dimethoxyethan nebo diethylenglykoldimethylether; nitrily jako je aeetonitril nebo isobutyronitril; vodu; organické kyseliny jako je octová kyselina; a směs těchto rozpouštědel.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu 0 do 100 °C (přednostně od 10 do 30 °C). Ačkoliv zde není zvláštní omezení, jc reakční doba obvykle v rozsahu jedné hodiny až 24 hodin (přednostně od jedné hodiny do 4 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby, například. přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do reakční směsi nebo do zbytku získaného vydestilováním rozpouštědla z reakční směsi. Je-li to nutné, takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna známými způsoby, například, rekrystalizaei, srážením nebo chromatograficky.

(4) Když ochranná skupina je skupinu tvořící farmakologicky přijatelný ester karboxylové skupiny nebo a hydroxylovou skupinu, tyto ochranné skupiny jsou odstraněny reakcí hydrolýzy ve vodě nebo směsi vody a organického rozpouštědla.

Upřednostňované příklady organického rozpouštědla míchaného s vodou zahrnují ether nebo alkohol mísitelný s vodou jakoje tetrahydrofuran, dioxan, methanol. ethanol nebo propanok so

Je upřednostňována, že soli alkalických kovů jako je fosforečnan sodný, acetát sodný nebo hydrogenuhličitan sodný jsou přidány do vody nebo směs vody a organického rozpouštědla, nebo pU upravováno do rozsahu od 6 do 8 při použití roztoku pufru jakoje pufrový roztok fosforečné kyseliny, ss není zde omezení na původ poskytnuté hydrolýzy, která může hydro lyžovat esterovou vazbu. Příklady takové hydrolýzy zahrnují esterázy získané z prasečích jater.

Reakční doba je obvykle v rozsahu 10 minut až 8 hodin (přednostně od 30 minut do 2 hodin) a reakční teplota od 10 do 50 °C (přednostně od 30 do 40 °C).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina izolována a čištěna iontově výměn nou chroinatograíli, kolonová chromatografíí na obrácené fázi, srážením, rekrystalizace, atd.

Když sloučenina obecného vzorce IV obsahuje dva nebo více druhů ochranných skupin, požadované sloučeniny obecného vzorce I mohou být získány úspěšným provedením kombinace výše uvedených eliminací ochranné skupiny. Když je požadován farmakologicky při jatelný ester sloučeniny obecného vzorce I. není nutné odstranit skupinu tvořící farmakologicky přijatelný ester jako ochrannou skupinu.

Takto získané sloučeniny obecného vzorce I mohou být konvertovány do farmakologicky přijatelných solí nebo esterů, je-li to nutné, podle způsobu nebo technologie známé v oboru medicínské chemie, zvláště pak antibiotika založena na β-laktarnu.

-71 CZ 300137 B6

Farmakologicky přijatelný estery karboxylové skupiny sloučeniny obecného vzorce I muže být připraven reakcí halogenované sloučeniny odpovídající požadovanému esterovému zbytku sloučeniny obecného vzorce I v přítomnosti báze v rozpouštědle.

Příklady použitelné halogenované sloučeniny zahrnují chlorid, bromid nebo jodid. kde jodid je upřednostňován. Když je použit chlorid nebo bromid, může být reakce podpořena přidáním katalytického množství jodidu sodného do reakčního roztoku.

Příklady použitelných bází zahrnují organické aminy jako je triethylamin. diisopropy lethy lamin, ío 4-dimethylaminopyridÍn nebo pyridin; a uhličitany alkalických kovu jako je uhličitan draselný, uhličitan sodný nebo hydrogenuhličitan sodný, kde organické aminy (zvláště 4-d i methy laminopyridin) jsou upřednostňovány.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují nitrily jako je acetonitril; amidy jako je N,N dimethylformamid; a halogenované uhlovodíky jako jc methylenchlorid, kde amidy (zvláště dimethylacetamid) nebo nitrily (zvláště acetonitril) jsou upřednostňovány.

2o Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 50 °C (přednostně od -10 do 20 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 hodin do 108 hodin (přednostně od jedné hodiny do 24 hodin).

Sloučenina izolována výše jako sůl reakcí sloučeniny obecného vzorce 1 s bázi může také reagovat s halogen idem. jak jc uvedeno výše.

2S

Alternativně sloučenina obecného vzorce I může být připravena reakcí alkoholu, který odpovídá požadovanému esterovému zbytku, na sloučeninu obecného vzorce I v přítomnosti kondenzačního činidla a báze.

Příklady kondenzačního činidla zahrnují Mitsunobu činidla jako je diethylazodikarboxylát; kondenzační činidla založená na fosforečných esterech jako je difeny Ifosforylazid; kondenzační činidla založená na karboimidu jako je dicyklohexylkarbodiimid nebo l -ethy l—3—<3—d i methyl· ammopropyl)karbodiimid: a kondenzační činidla založená na oniu jako je 2 chlor -1-methy Ipvridinjodid.

Příklad použitelných bází zahrnují organické aminy jako je triethylamin, tributylamin, diisopropy lethy lamin nebo 4-dimethylaminopyridin.

Příklady dalších přídavků zahrnují fosfiny jako je tri fenyl fosfin a tri butyl fosfin; a alkoholy tvořící lo účinný ester jako je 1-hydroxybenzotriazol

Příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako jc methylenchlorid nebo dichlorethan; amidy jako je N,N-dimethylformamid; nitrily jako je acetonitril; a ethery jako je letrahydrofuran.

Příklady upřednostňovaných kombinací těchto látek zahrnují diethylazodikarboxylát a trifenylfosfin; 2-chlor 1-methylpyridinjodid a tributylamin nebo triethylamin; l-ethyl 3-( 3-d i methy 1aminopropyl)karbodiimid a 4-dimethylaminopyridin nebo 1-hydroxybenzotriazol.

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby, například, přidáním organického rozpouštědla, která není mísitelné s vodou, do reakční směsi nebo do zbytku získaného oddcslilováním rozpouštědla z reakční sincsi a následným promytím vodou a oddeslilováním rozpouštědla. Je-li to nutné, takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna známými způsoby, například, rekrystal izace, srážením nebo chromatograficky.

- 72 CZ 300137 Bó [Způsob B]

Způsob B je způsobu přípravy sloučeniny obecného vzorec III použité jako počáteční látka ve způsobu A.

Ve výše uvedeném sehémalu:

fťp. R², X a n mají stejný význam jak je definováno výše;

P² představuje ochrannou skupinu karboxylové skupiny; příklady P zahrnují a C| až C.j alky l 10 skupinu jako je methyl, ethyl, propyl nebo butyl; a benzy l skupina, která může být substituovaná jako je benzyl nebo 4-methoxybcnzyl, kde Ci až C₄ alkyl skupina je upřednostňována a ethyl skupina je zvláště upřednostňována;

P' představuje ochrannou skupinu hydroxy lové skupiny; příklady P¹ zahrnují ochranné skupiny založené na silylu jako je trimcthylsilyl, triethylsilyl, terč-butyldiniethylsilyl nebo /erc-butyldifenyIsilyl. kde terč-butyldífenylsilyl skupina je upřednostňována;

L² představuje odštěpitelnou skupinu; příklady L² zahrnují halogenový atom jako je chlor, brom nebo jod; CU až Ci alkylsulfonyloxy skupinu, která může být substituovaná fluorem nebo benzensulfonyloxy skupinu, která může být substituovaná alkylem, jako je methansulfonyloxy, ethansulfonyloxy. trifluormethansulfonyloxy. benzensulfonyloxy nebo toluensulfonyloxy, kde CU až Cfi alkylsulfonyloxy skupina, která může být substituovaná fluorem je upřednostňována; a

P⁴ představuje ochrannou skupinu měrkaptové skupiny; příklady P⁴ zahrnují a CU až C₄ alka25 noví skupinu jako je formy I, acetyl, propionyl nebo buty ryl a benzoyl skupina, která muže být substituovaná jako je benzoyl. toluoyl nebo anisoyl, kde C| až C₄ alkanoyl skupina (zvláště aeelylová skupina) je upřednostňována.

-73 ¢7 300137 Bó (KrokBl)

Krok Bl je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce VI zavedením amidové skupiny představované obecným vzorcem C(-X)NH₂ na atom dusíku sloučeniny obecného vzorce V.

(1) Tento krok je dosažen reakcí kyanátu nebo thiokyanátu se sloučeninou obecného vzorce V v rozpouštědle.

Neni zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether; halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlormethan; a směs těchto rozpouštědel a vodu, kde směs etheru a vody (zvláště směs tetrahydrofuranu a vody) je upřednostňována.

Příklady solí kyanové kyseliny nebo thiokyanovc kyseliny zahrnují soli alkalických kovů jako je sodná sůl nebo draselná; ammoniové soli; nebo organické ammoniové soli jako je triethylammoniová sůl, kde soli alkalických kovů (zvláště draselná sůl) jsou upřednostňovány.

Kyseliny mohou být také použity pro konverzi kyanátu nebo a thiokyanátu na odpovídající kyselinu. Příklady takových kyselin zahrnují organické kyseliny jako je octová kyselina a minerální kyseliny, jako je chlorovodíková kyselina, kde octová kyselina nebo chlorovodíková kyselina je upřednostňována.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 150 °C (přednostně od -10 do 100 °C) a reakční doba jc obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od 1 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo oddestilováním rozpouštědla z reakční směsi, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná so sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystalizace, srážením nebo chromatograficky.

(2) Alternativně tento krok může být dosažen následujícím způsobem. Předkládaný způsob obsahuje reakci pro přípravu následující sloučeniny obecného vzorce XIII ze sloučeniny obec55 ného vzorce V a reakci pro přípravu sloučeniny obecného vzorce VI ze sloučeniny obecného vzorce XIII.

^HO\a_x NH—COOR⁹

VÁ (XIII)

Ve výše uvedeném vzorci, X a n mají stejný význam jak je definováno výše a R^J představuje

C| až C,i alkyl skupinu (přednostně ethylovou skupinu).

41)

Krok přípravy sloučeniny XIII ze sloučeniny V je dosažen reakcí sloučeniny představované obecným vzorcem X=C=N-COOR^t> (kde X a R⁹ mají stejný význam jak je uvedeno výše) na sloučeninu obecného vzorce V v rozpouštědle.

4? Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether; halogenované uhlovodíky jako je mcthylenehlorid nebo dichlorcthan; a směs těchto rozpouštědel a vodu, kde ether nebo směs etheru a vody (zvláště tetrahydrofuran nebo směs tetrahydrofuranu a vody) je upřednostňována.

-74CZ 300137 B6

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 150 °C (přednostně od - 10 do 50 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Napří5 klad požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční smčsi nebo oddestilováním rozpouštědla z reakční směsi, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může byl dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystalizace, srážením nebo chromatografleky.

io

Krok přípravy sloučeniny obecného vzorce VI ze sloučeniny obecného vzorce XIII je dosažen reakcí báze se sloučeninou XI11 v rozpouštědle.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek iš na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují alkoholy jako je methanol nebo ethanol; ethery' jako je tetrahydrofuran nebo diethylether; a směs těchto rozpouštědel a vodu, kde alkohol nebo smčs alkoholu a vody (zvláště ethanol nebo směs ethanolu a vody) je upřednostňována).

Příklady použitelných bází anorganické báze jako je hydroxid sodný, hydroxid draselný, hydrogenuhliěitan sodný, uhličitan sodný a uhličitan draselný; a organické báze jako je methoxid sodný a ethoxid sodný , kde hydroxid sodný je upřednostňován.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 15 °C (přednostně od -10 do 100 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční smčsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina muže byt získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo oddestilováním rozpoušso tědla z reakční směsi, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jakoje rekrysta1 izace, srážením nebo chromatografleky.

(Krok B2)

Krok B2 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce VII pomocí reakce amidové skupiny sloučeniny obecného vzorce VI za vzniku cyklické struktury⁷.

í ento krok je dosažen reakcí sloučeniny představované obecným vzorcem RCH1'C()COOP²(kde R² a P² mají stejný význam jak je definováno výše a I? představuje odštěpitelnou skupinu) se sloučeninou obecného vzorce VI v přítomnosti báze v rozpouštědle. Upřednostňované příklady odštěpitelné skupiny 1. zahrnují a halogenový atom, kde hrom je zvláště upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují alkoholy jako je methanol nebo ethanol; ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether; halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlorethan; a amidy jako je N,N-dimethylformamid, kde alkoholy (zvláště ethanol) jsou upřednostňovány.

Příklady použitelných bází zahrnují organické báze jako jc triethylamin a diisopropylamin: a

5o anorganické báze jako je uhličitan sodný, uhličitan draselný a hydrogenuhličitan sodný, kde organické báze (zvláště triethylamin) jsou upřednostňovány.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 150 °C (přednostně od -10 do l00°C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

-75CZ 300137 B6

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby.

Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo oddestilováním roz? pouštědla z reakční směsi, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystal izace. srážením nebo chromatografícky.

(Krok B3) io Krok B3 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce V1H zavedením ochranné skupiny P' na hydroxylovou skupinu sloučeniny obecného vzorce VII.

Tento krok může být dosažen pomocí způsobu obvykle používaného v oboru organických syntéz (například způsob popsaný v Protective Groups in Organic Synthesis, Seeond Edition, John

Wiley & Sons, lne.. 1991, authors T. W. Greene a P. G. M. Wuts).

Zavedení ochranné skupiny založené na silylu je dosažen reakcí silylového halogenidu nebo a silyltriflálu. který obsahuje požadovaný substituent. se sloučeninou obecného vzorce VII v přítomnosti báze v rozpouštědle.

Příklady silylového halogcnidu zahrnují trimethylsilylchlorid. triethylsilyIchlorid, /ezr-butyldimethylsilyIchlorid a terč-butyldifenylsilylehlorid. kde Zcrc—butyldifenylsilylchlorid je upřednostňován.

Příklady sily Itri flátu zahrnují tri methy Isilyltriťlát, triethylsily Itri ťlát, terč butyldimethy Isi lyltritlát a terč-butyldiťenylsilyltriflát, kde /erc-buty Id ifeny Isilyltriťlát je upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují amidy jako je dimethylformamid; halogenovaně uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo sn dichlorethan; a ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether. kde amidy (zvláště dimethylformamid) nebo halogenované uhlovodíky (zvláště methylenchlorid) jsou upřednostňovány.

Příklady použitelných bází zahrnují organické báze jako je imidazol, triethylamin. lutidin, pyridin nebo dimethylamínopyridin, kde imidazol nebo 2,6—lutidin jsou upřednostňovány.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 50 °C (přednostně od 10 do 40 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od 1 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. 4o Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo oddestilováním rozpouštědla z reakční směsi, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystal izace. srážením nebo chromatografícky.

(Krok B4)

Krok B4 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce IX pomocí konverze skupiny představované obecným vzorcem COOP“ ve sloučenině Vlil na požadovanou skupinu R^lp.

lento krok může být dosažen pomocí použití konversní reakce funkční skupiny obvykle používané v oboru organických syntéz. Detaily jsou popsané vc způsobu C až způsobu H. níže.

-76CZ 300137 B6 (KrokB5)

Krok B5 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce X pomocí odstranění ochranné skupiny P' hydroxylové skupiny sloučeniny obecného vzorce IX.

Tento krok může býl dosažen pomocí způsobu obvykle používaného v oboru organických syntéz {například způsob popsaný v Protec tive Groups in Organic Syn thesis, Seeond Edit ion, John Wiley & Sons. Inc. 1991, autbors T. W. Greene a P. G. M. Wuts).

Když ochranná skupina P^? hydroxylové skupiny je ochranná skupina založená na silylu. je její io eliminace dosaženo podobným způsobem jako ve způsobu popsaném v kroku A2 (3).

(Krok B6)

Krok B6 je krok přípravy sloučeniny XI pomocí konverze hydroxy lové skupiny sloučeniny obecného vzorce X na odštěpitelnou skupinu 1/ .

(1) Když odštěpitelnou skupinu L' představuje typ sulfonyloxy skupiny, je tento krok dosažen reakcí su liony lačního činidla sc sloučeninou obecného vzorce X v přítomnosti báze v rozpouštědle.

Příklady sulfonylačního činidla zahrnují methansulfonylchlorid. ethansulfonylchlorid. trifluormethansulfonylchlorid, benzensulfonylchlorid nebo toluensulfonylchlorid, kde methansulfonylchlorid jc upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako je mcthylcnchlorid, dichlorethan nebo chloroform; a ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether, kde halogenované uhlovodíky (zvláště methylenehlorid) jsou upřednostňovány.

so Příklady použitelných bází zahrnují organické báze jako je triethylamin. diisopropylelhylamin, pyridin nebo dimethy laminopyridin, kde triethylamin je upřednostňován.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu 20 do 80 °C (přednostně od -10 do 40 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0.5 do 108 hodin (přednostně od 1 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla ncmísitclncho s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo oddestilováním rozpouštědla z reakční směsi, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná

4o sloučenina může být dále čištěna, jc-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako jc rckrystalizace, srážením nebo chromatografie ky.

(2) Když odštěpitelnou skupinou L“ je halogenovaný atom, je tento krok dosažen reakcí halogenačního činidla se sloučeninou obecného vzorce X v rozpouštědle.

Příklady použitelných halogenačních činidel zahrnují pcntachlorid fosforu, thiony lchloridu, oxychlorid fosforu, jod, tetrabrommethan. tetrachlormethan, N-chlor-sukcinimid, N-bromsukcinimid nebo trifluorid diethylaminosíry, kde tetrabrommethan je upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako jc mcthylcnchlorid nebo dichlormethan; a ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether. kde halogenované uhlovodíky (zvláště methylenehlorid) jsou upřednostňovány.

-77CZ 300137 B6

Příklady použitých pomocných látek zahrnují fosfiny jako je tri feny lfosí in a tributy I fosfin. kde trifenylfosfin jc upřednostňována,

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 100 ^ĎC (přednostně od -10 do 50 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 10 minut až 108 hodin (přednostně od 0,5 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného m svedou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo oddestilováním rozpouštědla z reakční směsi, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrysta1 izace, srážením nebo chromatograficky.

(Krok B7)

Krok B7 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XH pomocí konverze odštěpitelne skupiny Lc sloučeniny obecného vzorec XI na ochrannou merkapto skupinu.

Tento krok je dosažen reakcí merkapto tvořícího činidla se sloučeninou obecného vzorce XI ?o v rozpouštědle.

Příklady použitých činidel tvořících merkapto zahrnují soli alkalických kovů thiokarboxylové kyseliny jako je thioacetát sodný, thioacetát draselný, thiopropionát sodný nebo thiobenzoát sodný; nebo soli alkalických kovů 4 methoxy benzy Imerkaptanu, kde thioacetát draselný je upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují ethery jako je tetrahydrofuran nebo dioxan; aeetáty jako je ethylacetát nebo methylacetál; nitrily ta jako je aeetonitril; a amidy jako je dimethylformamid nebo dimethylaeetamid. kde amid (zvláště dimethylformamid) je upřednostňován.

Reakční teplota je obvy kle v rozsahu -20 do 150 °C (přednostně od 0 do 100 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo oddestilováním rozpouštědla z reakční směsi, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná

4o sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrysta!izace, srážením nebo chromatograficky.

(Krok B8)

Krok B8 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce III pomocí odstranění ochranné skupiny P¹45 merkapto skupiny sloučeniny obecného vzorce XII.

(1) Když ochranná skupina P⁴ je alkanoylová skupina nebo aryIkarbonylová skupina, je tento krok dosažen reakcí soli hyd raz i nové sloučeniny se sloučeninou XII v rozpouštědle.

5ii Příklady solí hydrazinové sloučeniny zahrnují hydrazin/oetová kyselina nebo N.N-dimcthylhydrazin/oetová kyselina, kde hydrazin/oetová kyselina je upřednostňována.

Jako použitelná rozpouštědla se mohou použít rozpouštědla použita v prvním kroku.

-78CZ 300137 B6

Reakční teplota není zvláště omezená a je obvykle v rozsahu -10 do 40 °C (přednostně od 10 do °C). Ačkoliv reakční doba závisí na rozpouštědle, reakční teplotě a původu činidel, je obvykle v rozsahu 30 minut až 24 hodin (přednostně od jedné hodiny do 8 hodin),

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nem ísite lného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo oddeslilováním rozpouštědla z reakční směsi, promyt ím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rckrysta* io lizace, srážením nebo chromatograficky.

Když sůl hydrazinové sloučeniny je použita jako eliminační činidlo, sloučenina obecného vzorce III může být použita jako počáteční látka výše uvedeného kroku Al bez izolace z reakčního roztoku.

i? Předkládaný krok je také dosažen reakcí báze se sloučeninou obecného vzorce XII v rozpouštědle.

Příklady použitelných bází zahrnují soli alkalických kovů jako je hydroxid sodný, hydroxid draselný. uhličitan draselný, uhličitan sodný, methoxid sodný nebo ethoxid sodný, kde methoxid π sodný je upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují alkoholy jako je methanol nebo ethanol; ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether; amidy jako je dimethylformamid; a halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlorethan, kde alkoholy (zvláště methanol) jsou upřednostňovány.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 100 °C (přednostně od -10 do 40 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 10 minut až 108 hodin (přednostně od 0,5 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina muže být získána přidáním organického rozpouštědla nem ísite! ného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná slouče5? ni na může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rek rysta lizace, srážením nebo chromatograficky.

(2) Když P* je 4- methoxybenzyl skupina, je tento krok dosažen reakci kyseliny se sloučeninou obecného vzorce Xll v rozpouštědle.

K)

Příklady použitelných kyselin zahrnují sulfonové kyseliny jako je melhansulfonová kyselina nebo trifluormethansulfonové kyselina, kde trilluormethansulfonová kyselina je upřednostňována. Reakce může být urychlena existencí anisolu nebo thioanisolu.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlorethan; ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether; a volitelně substituované octové kyseliny jako je octová kyselina a trifluoroctová kyselina, kde volitelně substituované octové kyseliny (zvláště trifluoroctová

5(i kyselina) jsou upřednostňovány,

Reakční teplota je obvykle v rozsahu - 20 do 100 °C (přednostně od --10 do 80 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 10 minut až 108 hodin (přednostně od 0,5 do 24 hodin).

-79CZ 300137 B6

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční smčsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla neinísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promyt ím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekry stalizace, srážením nebo chromatograficky.

[Způsob C]

Způsob C je způsobu přípravy sloučeniny obecného vzorce IX-1 obsahující požadovanou esterovou skupinu pomocí konverze chráněné karboxylové skupiny sloučeniny obecného vzorce Vlil.

(XV) (IX-1)

Ve výše uvedeném schématu, R², X, η. P² a P’ mají stejný význam jak je definováno výše, a R^ippředstavuje R¹ který může být chráněn.

(Krok Cl)

Krok Cl je krok přípravy sloučenin) XIV pomocí redukce karboxylesterové skupiny sloučeniny obecného vzorce Vlil na hydroxy methyl skupinu. Tento krok je dosažen reakcí redukčního činidla se sloučeninou obecného vzorce Vlil v rozpouštědle.

Použitelné redukční činidlo není zvláště omezeno dokud může konvertovat karboxy lesterovou skupinu na hydroxymethyl skupinu pomocí redukce. Příklady redukčních činidel zahrnují hvdridy hliníku a alkalických kovů jakoje hydrid hlinítolithný; hydrídy boru a alkalických kovů jako je borhydrid lithný nebo borhydrid sodný, kde hydrid hlinítolithný je upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují ethery jako je tetrahydrofuran nebo dietbylether, kde tetrahydrofuran je upřednostňována.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 100 °C (přednostně od -10 do 40 ^UC) a reakční doba je obvykle v rozsahu 10 minut až 24 hodin (přednostně od 0,5 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla neinísitelného s vodou do reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla.

Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupu jakoje rekrystalizace, srážením nebo chromatograficky.

-80CZ 300137 B6 (Krok C2)

Krok C2 je krok přípravy sloučenin) obecného vzorce XV oxidací hydroxymethyl skupiny sloučeniny obecného vzorec XIV.

Tento krok je dosažen reakcí oxidačního činidla se sloučeninou obecného vzorce XIV v roz5 pouštědle zahrnuje krok oxidace hydroxymethvl skupiny na aldehydovou skupinu a krok oxidace aldehydové skupiny na karboxylovou skupinu.

(1) Krok oxidace hydroxymethylové skupiny na aldehydovou skupinu

Použitelné oxidační činidlo není zvláště omezeno dokud může oxidovat hydroxy methyl skupinu io a převést ji na aldehydovou skupinu. Příklady zahrnují pyridiniumchlorchromát, oxalylchloriddimethylsulfoxid, bezvodá trifluoroetová kyselina-dimethyl sulťoxid. aktivní oxid manganičitý nebo Dess-Martin činidlo, kde aktivní oxid manganičitý je upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnuji halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlorethan, kde methylenchlorid je upřednostňován.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -100 do 100 °C (přednostně od -100 do 50 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 30 minut až 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Napří20 klad požadovaná sloučenina múze být získána přidáním organického rozpouštědla neinísiteiného s vodou do zbytku získaného destilováním reakění smčsi nebo rozpouštědla v reakění směsi, jeho neutralizací, promyt ím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako jc rekry stalizaee, srážením nebo chromatografícky.

(2) Krok oxidace aldehydové skupiny na karboxylovou skupinu

Použitelné oxidační činidlo není zvláště omezeno dokud může oxidovat aldehydovou skupinu a převést ji na karboxylovou skupinu. Příklady oxidačního činidla zahrnují manganistan draselný, oxid rutheniěelý. chloritan sodný dihydrogenfosfál-2-mcthyl-2-biiten sodný (nebo draselný), so kde chloritan sodný - dihvdrogenfosfát-2-methyl-2-biiten sodný je upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlorethan; ethery jakoje tetrahydrofuran nebo diethylether, alkoholy jako je /ero-butanol; a směs těchto rozpouštědel a vodu. kde í5 směs tetrahydrofuran-methylenchlorid-voda-terc-butanol je upřednostňována.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 50 °C (přednostně od -10 do 40 °C) a reakění doba je obvykle v rozsahu 10 minut až 108 hodin (přednostně od 0,5 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakění směsi nebo rozpouštědla v reakční smčsi, jeho neutralizací, promyt ím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystalizaee, srážením nebo chromatografícky.

(KrokC3)

Krok C3 je krok přípravy karboxylové kyseliny sloučeniny obecného vzorce XV alternativním způsobem a je dosažen pomocí odstranění ochranné skupiny sloučeniny VJH, fento krok může být proveden podobným způsobem, jako krok A2 způsobu A.

-81 CZ 300137 B6 (Krok C4)

Krok C4 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce IX-1 esterifikací karboxy lové skupiny sloučeniny obecného vzorce XV.

? (1) Tento krok je dosažen reakcí požadovaného alkoholu představovaného obecným vzorcem

R’^POH se sloučeninou obecného vzorce XV v přítomnosti kondenzačního činidla v rozpouštědle.

Použitelná kondenzační činidla jsou popsána v oddělení tvorby esterů v kroku A2 způsobu A. Kondenzace může také být dosažena cestou přes kysely chlorid za použití oxalylchlorídu.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek ío na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlormethan; ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethy lether; amidy jako je dimethyl formám id; a nitrily jako je acetonitril, kde halogenované uhlovodíky (zvláště methylenchlorid) jsou upřednostňovány.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -50 do 100 °C (přednostně od -20 do 50 °C) a reakční doba 15 je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od 1 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby . Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nem ísite Iného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytí vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná slouče20 nina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystalizace. srážením nebo ehromatogra ficky.

(2) Předkládaný krok je také dosažen reakcí požadované sloučeniny představované obecným vzorcem R'^PL¹ se sloučeninou obecného vzorce XV v přítomnosti báze v rozpouštědle. L' představuje odštěpítelnou skupinu, přednostně atom halogenu (zvláště jod nebo brom).

Jako použitelné báze se mohou použít anorganické báze nebo organické báze. Anorganické báze může obsahovat uhličitany jako je uhličitan sodný, uhličitan draselný nebo uhličitan česný nebo hydrogenuhličitany jako jc hydrogenuhličitan sodný nebo hydrogenuhličitan draselný, přednostně uhličitan česný. Organická báze může obsahovat terciární aminy jako je triethy lamin nebo diiso50 propylethylamin; nebo bicyklické organické báze jako je DBU nebo DBN, přednostně diisopropylethy lamin.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako je methy lenchlorid nebo dichlorethan; ethery jako je tetrahydro55 furan nebo diethylether, amidy jako je diniethylformamid; a nitrily jako je acetonitril, kde amidy (zvláště dimethylfonnamid) jsou upřednostňovány.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu 50 do 100 °C (přednostně od -20 do 100 T) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Napří40 klad požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nem ísite Iného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako jc rekrystalizace, srážením nebo ehromatogra ficky.

[Způsob DJ

Způsob D je způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce IX—2 obsahující požadovaný amidový zbytek pomocí konverze karboxylové skupiny sloučeniny XV.

-82CZ 300137 B6

Ve výše uvedeném schématu. R², X, n a P' mají stejný význam jak je definováno výše, a R^1p a R^p představují R¹ a R' které mohou být chráněné.

(Krok Dl) fento krok je dosažen reakcí požadované sloučeniny obecného vzorce HNR^JpR'^p se sloučeninou obecného vzorce XV v přítomnosti kondenzačního Činidla v rozpouštědle.

Předkládaný krok může být proveden za použití amino sloučeniny obecného vzorce HNR^4pR'^pio namísto sloučeniny alkoholu obecného vzorce R'^POH ve výše uvedením kroku C4 způsobu C.

Příklady kondenzačního činidla zahrnují kondenzační činidla založená na esteru fosforečné kyseliny jako je kyanid diethy 1 fosfory lu; kondenzační činidla založená na karbonátech jako je karbonyldiimidazol, kde kyanid diethyl fosfory lu nebo karbonyldiimidazol jsou upřednostňovány.

[Způsob E]

Způsob E je způsobu přípravy a požadované sloučeniny obecného vzorce IX—2 obsahující amidovou skupinu pomocí konverze a karboxylové esterové skupiny sloučeniny VIII.

(Vili)

(1X-2)

Ve výše uvedeném schématu. R². X. n. P\ R^lp a R'^p mají stejný význam jak je definováno výše. a P“' představuje Ci až C₄ alkyl skupinu jako ochrannou skupinu P výše uvedené karboxylové skupiny.

(Krok El) l ento krok je dosažen reakcí požadované amino sloučeniny představované obecným vzorcem HNR^R^’ se sloučeninou obecného vzorce VID v přítomnosti katalyzátoru v rozpouštědle.

Příklady použitelného katalyzátoru zahrnují tri-Ci až C₄ allylhliníky jako je triinethyIhliník, kde trimethylhliník je upřednostňován.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují aromatická rozpouštědla jako je benzen, toluen nebo mesitylen: halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlorethan, kde aromatická rozpouštědla (zvláště benzen nebo toluen) jsou upřednostňovány.

Reakění teplota je obvykle v rozsahu -20 do 150°C (přednostně od -10 do 100 °C) a reakění doba jc obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

-83 40 Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakění směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystalizace.

srážením nebo chromatograficky.

[Způsob F]

Způsob F je způsobu přípravy a kyano sloučeniny obecného vzorce IX—3 pomocí konverze a karboxylové esterové skupiny sloučeniny obecného vzorce VIII.

P3O.

Ve výše uvedeném schématu, R\ X, η, P' a P^2kl mají stejný význam jak je definováno výše.

(Krok Fl)

Tento krok je dosažen použitím amoniové solí místo amino sloučeniny ve výše uvedeném kroku El způsobu F a reakcí při vyšší teplotě.

i? Chlorid amonný je přednostně použit jako amoniová sůl a reakéní teplota je obvykle v rozsahu -20 do 150 °C (přednostně od 10 do 100 °C).

[Způsob G]

Způsob G je způsobu přípravy sloučeniny obecného vzorce 1X1) zavedením požadovaného 20 substituentů R⁶ na hydroxylovou skupinu sloučeniny obecného vzorce XIV.

Tento krok je dosažen reakcí a Iky lačn ího činidla se sloučeninou obecného vzorce XIV v přítomnosti báze v rozpouštědle nebo reakcí redukčního činidla a požadované karbonyl sloučeniny se sloučeninou obecného vzorce XIV v přítomnosti kyselého katalyzátoru v roz25 poustědle.

(I) Alky lační způsob při základních podmínkách

Příklady použitelných rozpouštědel zahrnují amidy jako je N,N d imethy I formani íd; a ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether. kde amidy (zvláště N,N-dimethyIformamid) jsou upřed5íi nostňovány.

Příklady použitelných bází zahrnují hydridy alkalických kovů jakoje hydrid sodný nebo hydrid draselný; anorganické báze jako je hydroxid sodný nebo hydroxid draselný; a organické báze jako je triethylamin nebo diisopropylamin, kde hydridy alkalických kovů (zvláště hydrid sodný) jsou upřednostňovány.

Příklady použitelného alkylačního činidla zahrnují alkylhalidy jako je niethyljodid nebo etliyljodid; dialkylsulfaly jako je dimethyIsulfát a dietliyIsulfát, kde alkylhalidy (zvláště alkyljodid) jsou upřednostňovány.

- 84 CZ 300137 B6

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -50 do 100 °C (přednostně od -10 do 40 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 10 minut až 108 hodin (přednostně od 0.5 do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční smčsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizaci, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina muže býl dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekry stal izace, srážením nebo chromatograficky.

jo (2) Alky laění způsob při kyselých podmínkách

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlorethan; a ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether, kde halogenované uhlovodíky (zvláště methylenchlorid) jsou upředli nostňovány.

Příklady kyselých katalyzátorů zahrnují trialkylsolyltriflátv jako je trimcthylsilyltriťlát. triethylsilyltri flát nebo terč-buty ld i methy Isilyltritlát, kde trimethylsilyltriflát je upřednostňován.

Příklady požadované karbonylové sloučeniny zahrnují ketony jako je aceton, methylethylketon a cyklohexylketon; alkylaldehydy jako je acetaldehyd a propionaldehyd, kde ketony jsou upřed2o nostňovány.

Příklady redukčního činidla zahrnují trialkylsilany jako je triethylsilan a difenylmethylsilan, kde trialkylsilany (zvláště triethylsilan) jsou upřednostňovány.

Reakční teplota jc obvykl v rozsahu -50 do 100 °C (přednostně od -10 do 40 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 10 minut až 108 hodin (přednostně od 0,5 do 24 hodin).

2? Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako jc rekry stal izace.

sa srážením nebo chromatografleky.

[Způsob H]

Způsob H je způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce IX—5 pomoct konverze hydroxylové skupiny sloučeniny obecného vzorce XIV na požadovanou skupinu představovanou obecným vzorcem NR^7pR^Xp.

P3O.

7/

X (XIV)

R2

_N CH₂OH

Krok H3

-85 CZ 300137 B6 (Krok Hl)

Krok HI je krok přípravy sloučenin) obecného vzorce XV zavedením odštěpitelné skupiny L' na sloučeninu obecného vzorce XIV a může být dosažen podobným způsobem jako krok B6 způsobu B výše uvedený.

(Krok H2)

Krok H2 je krok přípravy aminové sloučeniny obecného vzorce lX-5a ze sloučeniny obecného vzorce XV a přípravy sloučeniny obecného vzorce IX—5b, je-li to nutné, zavedením substituentů.

ío (A) Příprava aminové sloučeniny obecného vzorce IX—5a

Tento krok může být dosažen reakcí animačního činidla se sloučeninou obecného vzorce XV v rozpouštědle. Tento krok může být také dosažen přípravou azidové sloučeniny reakcí az i dacii ího činidla se sloučeninou obecného vzorce XV v rozpouštědle, a následnou redukcí redukčním činidlem.

(1) Způsob s použitím aminaěního činidla

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují amidy jako je dimethylformamid; alkoholy jako je methanol nebo ethanol; a ethery jako je tetra2o hydrofuran nebo diethylether, přednostně amidy (zvláště dimethylformamid).

Příklady použitelného aminaěního činidla zahrnují primární alky lam iny která mohou být substituované jako je mcthylamin nebo ethylamin; aromatické aminy, které mohou být substituovány jako je anilin nebo aminothiazol; sekundární alkylaminy která mohou být substituovány jako je methylethylamín nebo dímethylamin: a soli těchto aminů (například, hydrochlorid), kde primární nebo sekundární alkylaminy, která mohou být substituovány ajejich soli (zvláště methy lamin hydrochlorid nebo dímethylamin hydrochlorid) jsou upřednostňovány.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu 0 do 150 °C (přednostně od 10 do 100 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddeslilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystal izace, srážením nebo chromatograficky.

(2) Způsob s použitím azidačního činidla a redukčního činidla

4o Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují amidy jako je dimethylformamid; alkoholy jako jc methanol nebo ethanol; a ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether, kde amidy (zvláště dimethylformamid) jsou upřednostňovány.

Příklady azidačního činidla zahrnují azidy alkalických kovu jako je azid sodný nebo azid lithný, kde azidy alkalických kovů (zvláště azid sodný) jsou upřednostňovány.

Reakční teplota je obvy kle v rozsahu 0 do 150 °C (přednostně od 10 do 100 ^UC) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

5d

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného

-86CZ 300137 B6 s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina muže být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupu jako je rekrystalizace, srážením nebo cbromatografleky.

Takto získaný azid je konvertován na amin obecného vzorce IX—5a redukcí.

Příklady použitelného redukčního činidla zahrnují hliníkové hydrídy alkalických kovu jako je hydrid li Hnito—lithný; fosflny jako jc trifenylfosftn; kovové katalyzátory používající katalytickou hydrogenaci jako je palladium—uhlík nebo platinový katalyzátor, kde katalytická hydrogenace (zvláště v případě kde je použit palladium—uhlík jako katalyzátor) je upřednostňována io

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethy Ictber; alkoholy jako je methanol nebo ethanol, kde ethery (zvláště tetrahydrofuran) jsou upřednostňovány.

is

Příklady použitelných rozpouštědel pro katalytickou hydrogenaci zahrnují alkoholy jako je methanol nebo ethanol, kde methanol je upřednostňován.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -10 do 150 °C (přednostně od 0 do 100 °C) a reakční doba

2o je obvykle v rozsahu 0.5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla neinísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystalizace, srážením nebo chromatograficky.

(B) Příprava sloučeniny IX-5b so Tento krok je krok, který je proveden je-li to nutné pro přípravu sloučeniny obecného vzorce IX-5b zavedením substituentu na amin sloučeniny obecného vzorce IX-5a.

Předkládaný krok je dosažen reakcí požadovaného acy lační ho činidla, sul fonyl ač ního činidla, a fosforylaěního činidla nebo esteru chlormravenčí kyseliny s aminem sloučeniny obecného vzorce lX-5a v přítomnosti báze v rozpouštědle.

Příklady acylačního činidla zahrnují anhydridy kyselin jako je anhydrid octové kyseliny nebo anhydrid benzoové kyseliny; chloridy kyselin jako je acetylchlorid nebo benzoylchlorid, kde chloridy kyselin (zvláště acetylchlorid) jsou upřednostňovány.

Příklady sil 1 fony lacn ího činidla zahrnují chloridy kyselin jako je methansulfonylchlorid nebo p loluensulfony lehlorid; a anhydridy kyselin jako je anhydrid methansulfonové kyseliny nebo anhydrid p-toluensulfonové kyseliny, kde chloridy kyselin (zvláště methansulfonylchlorid) jsou upřednostňovány.

Příklady fosfory lacn ího činidla zahrnují chloridy kyselin jako je diethy i fosfory ich lorid nebo dimethylfosfory lehlorid, kde diethylfosforylchlorid je upřednostňován.

Příklady esteru chlormravenčí kyseliny zahrnují esterové sloučeniny jako je methy lchlorformiát.

5d elhy lehl orformiát nebo benzylehlorformiat, kde estery chlormravenčí kyseliny (zvláště methylchlorformiát) jsou upřednostňovány.

-87C'Z 300137 B6

Příklady použitelných bází zahrnují organické báze jako je triethylamin. diisopropylethylamin nebo pyridin; anorganické báze jako jc uhličitan sodný, uhličitan draselný nebo hydrogenuhličitan sodný, kde organické báze (zvláště triethylamin) jsou upřednostňovány.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethy lether; a halogenované uhlovodíky jako je methylenchloríd nebo dichlorethan, kde ethery (zvláště tetrahydrofuran) jsou upřednostňovány.

io Reakční teplota je obvykle v rozsahu 0 do 100 °C (přednostně od 10 do 50 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0.5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného is s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupu jako je rekrystal izace, srážením nebo chromatograficky.

2t) (Krok H3)

Krok 113 je krok přípravy aminové sloučeniny obecného vzorce IX-5a ze sloučeniny obecného vzorce XIV via azidovou sloučeninu a přípravy sloučeniny obecného vzorce IX—5b zavedením substituentu je-li to nutné.

(A) Příprava azidovc sloučeniny

Předkládaný krok je proveden reakcí azidační sloučeniny (zvláště difenylfosorylazidu). d i ethyla/odíkarboxylátu a tri feny lfosfin se sloučeninou obecného vzorce XIV v rozpouštědle.

Není zde zvláštní omezení na podstatu použitého rozpouštědla, nemělo by mít nepříznivý účinek so na reakci a mělo by rozpouštět počáteční látku do určitého stupně. Příklady rozpouštědel zahrnují amidy jako je dimethylformamid a ethery jako je tetrahydrofuran nebo diethylether. kde ethery (zvláště tetrahydrofuran) jsou upřednostňovány.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu 0 °C do 50 (přednostně od 10 do 30 °C) a reakční doba je

3? obvy kle v rozsahu 0.5 do 108 hodin (přednostně od jedné do 24 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho

4o neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystal izace, srážením nebo chromatograficky.

(B) Příprava aminové sloučeniny

Toto je krok přípravy aminu obecného vzorce lX-5a pomocí redukce azidové sloučeniny a může byl proveden podobný m způsobem jako redukce popsaná v kroku H2 (A)(2).

(C) Příprava sloučeniny IX—5b

I ento krok, proveden je-li to nutné, je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce IX 5b

5o zavedením substituentu na amin obecného vzorce IX--5a a může být proveden podobným způsobem jako krok H2 (B) uveden výše.

- 88CZ 300137 B6

Sloučeniny obecného vzorce IX—1 až IX—5 získané ve způsobu C až způsobu H mohou být konvertovány na sloučeninu obecného vzorce III, která je použita jako počáteční látka bočního řetězce na pozici 2 sloučeniny obecného vzorce I podle kroků po kroku B5 způsobu B.

[Způsob I]

Způsob I je způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce IX 6, která je sloučeninou obecného vzorce IX. meziproduktu syntetické cesty způsobu B. kde X je atom kyslíku, pomocí jiného postupu.

R\ .OH R:-_x ^OH

Krok 1-1

Krok I-2

ZHN' COOH .1 (XVIa)

ZHN ^sRp (xvi)

R2_x ,OP zhn^rJ (XVII)

Krok 1-3

Krok 1-5 r², .op³

Krok 1-4 rU .op³

H₂N' R p (XVIII) r? .op³

OH

Krok 1-7 p°O

S=c=í< R p (XIX)

Krok 1-6

N NH ^xRp ¹ (XX)

N,R¹p

N O R' ¹ (XXII)

R\ .OH

N NH Rp ¹ (XXI)

Krok I-8

io Ve výše uvedeném schématu, R'p, RJ P a n mají stejný význam jak je definováno výše; Z představuje ochrannou skupinu amino skupiny, přednostně benzyloxykarbonyl skupinu; a P představuje ochrannou skupinu hydroxylové skupiny, přednostně ochranná skupina založenou na aeylu jako je acetyl, benzoyl nebo pivaloyl, nejpřednostněji benzoyl skupinu.

-89i? (Krokl 1)

Krok l 1 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XVI pomocí konverze karboxylové skupiny aminokyseliny XVIa kde amino skupina je chráněná pomocí požadované R'p.

CZ 300137 Bó lento krok může být proveden podle způsobu vybraného zvýše uvedených způsobů C až IL

Mělo by se vědět, že ve sloučenině obecného vzorce XVla, která tvoří počáteční látku, sloučenina, kde R je atom vodíku, může být připraven ze šeřinu a sloučenina, kde R je methylová skupina, může být připraven / threoninu. Sloučeniny, kde R je skupina jiná než vodík nebo methyl skupina, se mohou také připravit podle způsobu známého pro odborníky v oboru.

(Krok 1-2)

Krok 1-2 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XVII zavedením ochranné skupiny na hydroxyl skupiny sloučeniny obecného vzorce XVI.

i o

Tento krok může být proveden podobným způsobem jako krok B3 způsobu B, Upřednostňované příklady ochranné skupiny založené na silylu vhodné jako P' zahrnují terč-butyldimelhylsilyl skupinu.

is (Krok 1-3)

Krok 13 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XVIII pomocí odstranění ochranné skupiny z amino skupiny sloučeniny obecného vzorce XVII.

Tento krok může být proveden podobným způsobem jako způsob kroku A2 (1) způsobu A. 20 Upřednostňované rozpouštědlo je methanol.

(Krok 1-4)

Krok 1-4 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XIX pomocí konverze amino skupiny sloučeniny obecného vzorce XVIII na isothiokvanátovou skupinu.

Tento krok je dosažen reakcí sirouhlíku a dehydrosulfldačního činidla se sloučeninou obecného vzorce XVIII v přítomnosti báze v rozpouštědle.

Upřednostňované příklady rozpouštědel zahrnují halogenované uhlovodíky (zvláště methylen30 chlorid).

Upřednostňované příklady dehydrosulfldačního Činidla zahrnují halogenované estery' mravenčí kyseliny (zvláště ethylehlorformiát) nebo kvartérni činidla obsahující dusík (zvláště 2 chlor 1 methylpyridiniumjodid nebo 2-chlor-l-ethyIbenzoxazoliumtetrafiuorborát).

Upřednostňované příklady báze zahrnují terciární aminy jako je triethy lamin, diisopropylethylamin nebo tributylamin (zvláště triethy lamin).

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 100 °C (přednostně od 0 do 60 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0,5 do 48 hodin (přednostně od jedné do 12 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakění směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddesti lován ím rozpouštědla. Takto získaná požadovaná slouče45 nina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystalizace, srážením nebo chromatograficky.

(Krok 1-5)

Krok 1-5 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XX reakcí požadovaného cyklického

5o aminu se sloučeninou obecného vzorce XIX. Tento krok může být proveden podle kroku Bl způsobu B.

-90C7. 300137 B6 (Krok 1-6)

Krok 1-6 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XXI zavedením ochranné skupiny založené na acylu P na hydroxyl skupiny sloučeniny XX a následně odstraněním ochranné skupiny založené na silylu P’.

s (1) Zavedení ochranné skupiny založené na acylu P

Tento krok může byt proveden podle kroku H2(B) způsobu II.

(2) Krok odstranění ochranné skupiny založené na silylu P’ io Tento krok může být proveden podle kroku A2 zpusobu A.

(Krok 1 7)

Krok 1 7 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XXII podstoupením sloučeniny obecného vzorce XXI reakcí, kde dochází k uzavírání kruhu. Tento krok je dosažen reakcí cyklizačního činidla (dehydrosulfidačního činidla) se sloučeninou obecného vzorce XXI v přítomnosti báze v rozpouštědle.

Příklady rozpouštědel zahrnují amidy jako je dimethylformamid nebo dimethylaeetamid; halogenované uhlovodíky jako jc melhylenelilorid; a nitrily jako je aeetonitril; kde aeetonitril je upřed20 noslnován.

Upřednostňované příklady báze zahrnují terciární aminy jako je triethylamin, di i sopropy let hylamin nebo tributy lamin (zvláště triethylamin).

Upřednostňované příklady cyklizačního (dehydrosulfidačního) činidla zahrnuji rtuťnaté soli jako je oxid rtuťnatý a chlorid rtuťnatý; nebo kvartémí činidla obsahující dusík (zvláště 2-ch lor-1methylpyridiniumjodid nebo 2-chlor-l-ethylbenzoxazoliumtetraíluorborál).

Reakční teplota je obvykle v rozsahu -20 do 100 °C (přednostně od 0 do 60 °C) a reakční doba je

5o obvykle v rozsahu 0,5 do 48 hodin (přednostně od jedné do 12 hodin).

Po skončení reakce je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby. Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, jeho neutralizací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutné, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystal izace, srážením nebo chromatograficky.

(Krok 1-8)

Krok 1-8 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce XXI11 pomocí dehydrogenace sloučeniny obecného vzorce XXII.

Tento krok je dosažen reakcí dehydrogenačního činidla se sloučeninou obecného vzorce XXII v rozpouštědle.

4S

Příklady rozpouštědel zahrnují aromatické uhlovodíky jako je benzen nebo toluen; a halogenované uhlovodíky jako je methylenchlorid nebo dichlorethan.

Příklady dehydrogenačního činidla zahrnují oxidačního činidla jako je oxid manganičitý.

Reakční teplota je obvykle v rozsahu 0 do 100 °C (přednostně od 0 do 60 °C) a reakční doba je obvykle v rozsahu 0.5 do 48 hodin (přednostně od jedné do 12 hodin).

-91 CZ 300137 B6

Po skončení reakee je požadovaná sloučenina získaná z reakční směsi známými způsoby.

Například požadovaná sloučenina může být získána přidáním organického rozpouštědla nemísitelného s vodou do zbytku získaného destilováním reakční směsi nebo rozpouštědla v reakční směsi, odstraněním nerozpustných částí filtrací, promytím vodou a oddestilováním rozpouštědla. Takto získaná požadovaná sloučenina může být dále čištěna, je-li to nutně, pomocí konvenčních postupů jako je rekrystal izace, srážením nebo chromatografícky.

{Krok 1-9) io Krok 1-9 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce IX-6 pomocí odstranění ochranné skupiny založené na aeylu l^p sloučeniny obecného vzorce XXIII a následným zavedením ochranné skupiny založené na silylu P\ (1) Eliminace ochranné skupiny založené na aeylu P^? is Tento krok může být proveden podle způsobu přípravy sloučenina obecného vzorce VI ze sloučeniny obecného vzorce XIII v kroku Bl (2) způsobu 8.

(2) Zavedení ochranné skupiny založené na silylu P’ len to krok může být proveden podle kroku B3 způsobu B.

[Způsob J ]

Sloučenina obecného vzorce 1 může být také připravená jiným postupem než podle způsobu A, a to následujícím způsobem J. Způsob J může být použit pro přípravu sloučeniny obecného vzorce l-l nebo 1 2 kde R¹ je představovaný obecným vzorcem COOR¹ nebo obecným vzorcem CONR’RJ

-92CZ 300137 B6

(0

Ve výše uvedeném schématu, R^l, R'p, R². Ρ¹, Ρ¹, X, L¹ a n mají stejný význam jak je definováno výše. Upřednostňovaný příklad P^? je terč-butyldimethylsilylová skupina.

-93 CZ 300137 B6 (Krok JI)

Krok JI je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce IV—1 pomocí kondenzace sloučenin) obecného vzorce Il-l, která je chráněná ochrannou skupinou založenou na silylu P' a sloučeniny obecného vzorce lil-1 kde R¹ p je karboxylové skupina chráněná ally lovou skupinou.

Tento krok může byt proveden podobným způsobem jako krok Al způsobu A. Sloučenina obecného vzorce 11 i použita jako počáteční látka může být připraven reakcí silylačního činidla se sloučeninou obecného vzorce II a tento krok může být proveden podle kroku B3 způsobu B. Sloučenina obecného vzorce [Il-l může být připravena podle způsobu B.

(Krok J2)

Krok 32 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce IV-2 pomocí odstranění allylové ochranné skupiny ze sloučeniny obecného vzorce IV-1. Tento krok muže být proveden podle kroku A2 (2) způsobu A.

(Krok 33)

Krok J3 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce IV—3 modifikací karboxylové skupiny sloučeniny obecného vzorce IV—2. Tento krok může být proveden podle kroku B4 způsobu B (zvláště způsob C a způsob D).

(Krok J4)

Krok J4 je krok přípravy sloučeniny obecného vzorce I pomocí odstranění ochranné skupiny P' a P¹ ze sloučeniny obecného vzorce IV—3.

(1) Eliminace ochranné skupiny P’ fento krok může být proveden podle kroku A2 (3) způsobu A.

(2) Eliminace ochranné skupiny P¹

Tento krok může být proveden podobným způsobem jako krok A2 způsobu A.

Sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmakologicky přijatelný soli předkládaného vynálezu vykazují silnou a širokou antibakteriální účinnost proti různým patogenním bakteriím zahrnující gram-pozitivní bakterie jako je Staphylococeus a Bacillus subtilis, gram negativní bakterie jako je Escherichiu coli. Klebsiella pneumoniae, Shigella, Próteus vulgaris, Serratia, Enterobacter a

Pseudontonas aerginosa, a anaerobní bakterie jako je Bacleroides fragilis, a, zvláště mají silnou antibakteriální účinnost proti Strepfococcus pneumoniae (zahrnující bakterie rezistentní vůči penicilínu) a Haemophilus influenzae (zahrnující bakterie produkující β-laktamá/u), které způsobují infekce respiračního traktu. Sloučeniny obecného vzorce I předkládaného vynálezu mají vysokou stabilitu proti β laktamázám včetně metalo β-laktamázy. Sloučeniny obecného vzorce I předkládaného vynálezu vykazují dobrou farmakokinetiku jako je vysoká maximální koncentrace v séru a dlouhá životnost v séru, když jsou podány jak orálně, tak jinou cestou. Proto sc u sloučenin obecného vzorce 1 předkládaného vynálezu očekává značný terapeutický účinek i když jsou podávané méně často nebo v menších dávkách ve srovnání s existujícími léčivy. Sloučeniny obecného vzorce I předkládaného vynálezu mají nízkou toxicitu pro ledviny. Proto jsou sloučeniny obecného vzorce 1 nebo jejich farmakologicky přijatelné soli nebo estery předkládaného vynálezu vhodné, například, jako farmaceutika a jsou zvláště vhodné jako antibakteriální činidla při léčbě nebo prevenci (přednostně léčbě) bakteriálních infekcí způsobených různými druhy patogenních bakterií, zvláště bakterií způsobujících infekci respiračního traktu.

Když sloučeniny obecného vzorce 1, jejich farmakologicky přijatelné estery nebo soli jsou použity jako farmaceutika, zvláště antibakteriální činidla, mohou být podány orálně ve formě tablet, kapslí, granulí, prášku nebo sirupu, a to buď samostatně, nebo ve smčsi s vhodným

-94CZ 300137 B6 farmakologicky přijatelným aditivem jako jsou pomocné látky nebo ředicí látky; nebo podány parenterálně ve formě injekcí.

Tylo přípravky mohou být připraveny známým postupem za použití aditiv. Příklady aditiv zahrnují pomocné látky (např. deriváty cukru jako je laktóza, sacharóza, glukóza, mannitol a sorbitol; deriváty škrobu jako je kukuřičný škrob, bramborový škrob, cx-škrob. dextrin a karboxymethylškrob; celulózovc deriváty jako jc krystalická celulóza, málo substituovaná hydroxypropylcelulóza, hydroxy propy Imethylcelulóza, karboxymethyleelulóza, vápenatá karboxy methylcelulóza a vnitřně zesilovaná sodná karboxymethyleelulóza; arabskou gumu; dextran; pul ulán; io deriváty silikátu jako je lehký křemičitý anhydrid, syntetický hlinitý silikát, hořečnatý hlinitometasilikát; fosfátové deriváty jako je vápenatý fosfát; uhličitanové deriváty jako jc uhličitan vápenatý; nebo sulfátové deriváty jako jc vápenatý sulfát), pojivá (např. výše uvedené pomocné látky; želatina; polyvinylpyrrolidon; nebo Macrogol); dezintegrátory (např. výše uvedené pomocné látky: nebo chemicky modifikované deriváty škrobu nebo celulózy jako je sodná kroskarme15 lóza nebo sodný karboxymethylškrob; nebo zesíťovaný polyvinylpyrrolidon); lubrikační látky (např. talek; stearová kyselina; kovové soli stearové kyseliny jako je vápenatý stearát nebo horečnatý stearát; koloidní křemenka; „vccgum, vosky jako je včelí vosk a tuk z vorvaně; bórová kyselina; glykol; karboxylové kyseliny jako fumarová kyselina nebo adipové kyselina; sodné karboxyláty jako je benzoat sodný; sulfáty jako je sodný sulfát; leucin; laurylové sulfáty

2o jako je sodný laurylsulfát nebo horečnatý laurylsulfát; křemičité kyseliny jako je křemičitý anhydrid nebo křemičitý hydrát; nebo škrobové deriváty uvedené výše jako pomocné látky ), stabilizátory (např. estery p-hydroxybenzoové kyseliny jako je methylparaben nebo propvlparaben; alkoholy jako je chlorbutanol, bcnzylalkobol nebo fcnylethylalkohol; benzalkoniumchloríd; fenoly jako je fenol a kresol; thimerosal; anhydrid kyseliny octové; nebo sorbová kyselina), pomocné chuťové látky (např. obecně používána sladidla, okysel u jící činidla nebo aromatické látky), suspenzační činidla (např. Polysorbát 80 nebo sodná karboxymethyleelulóza), ředicí látky a rozpouštědla pro přípravek (např. voda, ethanol nebo glycerin).

Dávka sloučeniny obecného vzorce J bude v závislosti na kondici a věku pacienta. Orálně jsou

5(i podávány v množství 10 mg (přednostně 50 mg) v jedné dávce jako spodní limit a 2000 mg (přednostně 1000 mg) v jedné dávce jako horní limit, intravenózně jsou podávány v množství 10 mg (přednostně 100 mg) v jedné dávce jako spodní limit a 3000 mg (přednostně 2000 mg) v jedné dávce jako horní limit. Je žádoucí, že sloučenina je podána dospělému člověku v jedné dávce nebo v rozdělených dávkách (šesti) za den v závislosti na kondici pacienta.

Příklady provedení vynálezu

Nej lepší způsob provedení vynálezu

Předkládaný vynález bude dále detailněji ilustrován následujícími příklady, srovnávacími příklady, příklady testů a příklady přípravků. Rozsah vynálezu není omezen těmito příklady. Při spektrech magnetické rezonance v příkladech a srovnávacích příkladech byl použit jako vnitřní standard triincthylsilylpropionát-d₄ sodný v deuterované vodě a tetramethylsilan byl použit jako vnitřní standard v jiných rozpouštědlech. Když nebyl použil vnitřní standard při měření v deuterované vodě, měření bylo provedeno na základě signálu 11OD v deuterované vodě, který' se objevuje na 4,65 ppm,

Příklad 1 (l R,5S.6S)—2—[ 1—(4—Ethoxykarbonyl 1,3 thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thío- 6 [(R) 1 -hydroxyethyl ]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxvlová kyselina, sodná sul

- 95 CZ 300137 B6

HO

COO'Na* (!) p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-[l-(4 ethoxykarbonyl-1.3 thiazol—2—yl )azetidin-3-yl]thio6- [(R)-! -hydroxyethy1] -1 -methyIkarbapen 2 cm 3-karboxy lát ? Do roztoku 3-acetylthio-l-(4-ethoxykarbonyl-L3-thÍazol 2-yl)azetidiiiLi (468 mg. 1,71 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 1) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán hydrazinaeetát (171,0 mg, 1.86 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs bvla míchána 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-difenyIfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyethyl]-l-methyIkarbapen 2-em-3“karboxylátu ííj (1.02 g, 1,72 mmol) v acetonitrilu (30 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diísopropylcthylaminu (1.5 ml, 8,61 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšován teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva bvla oddě15 léna. promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagclovč koloně (eluent: ethylacetát) za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S.6S)-2 [1 -(4-cthoxykarbonyl-1,3-thiazol -2—yl)azetidin—3—yljthio 6 [(R)-l-hydroxvethylJ 1 methylkarbapen-220 em 3 karboxylátů jako světle žluté pevné látky (752 mg. výtěžek 75%).

'H-NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8,6 Hz,), 7,66 (2H, d. J - 8.6 Hz), 7,50 (IH, s). 5,50(111. d.J = 13.7 Hz), 5.25(111, d, J = 13,7 Hz). 4.55 (211, dd. J = 14,4. 8,0 Hz). 4.36 (211, q. J = 7.1 Hz), 4.35 až 4,20 (3H. m), 4.20 až 4,05 (2H, m). 3.29 (IH. dd. J “ 6,7, 2,4 Hz), 3,20 (1H, dq, J = 10,3,8,3 Hz), 1,82 (IH. br s). 1.42 (3H, d, J - 6,3 Hz), 1,40 (3H, t. J - 7,1 Hz).

1,26 (311, t.J = 7.5 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 589 |M+I IJ (2) (lR,5S,6S)-2-[l (4 Elhoxykarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]lhio-6-[(R)-lhydroxyethylJ-l-niethylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl ·( l R.5S,6S)—2—[ 1 —(4—ethoxykarbonyl— l ,3—thiazol—2-y l)azetidin—3—yl ]thio—6— [(R)— I—hydroxyethyl]—I-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (744 mg. 1,26 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 1(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (46 ml) a destilované vody (23 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (736 mg) ve vodní lázni (30 °C) í5 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (106 mg), směs ethylacetátu a letrahydrofuranu (1:1) a destilovaná voda. Smčs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Costnosil za použití destilované vody 3% acetonitrilu; destilované

4(i vody 5% acetonitrilu; destilované vody- 7% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny, sodné soli (I R.5S,6S)-2-[ 1 -(4-ethoxykarbonyl- 1.3-thiazol-2-yl)azctidin-3- yl Jthio—6—f( R)-1 -hydroxyethyl]-1 -methy Ikarbapen-2em-3-karboxylové kyseliny (376 mg, výtěžek 63%) jako bíle pevné látky.

H-NMR (400 MHz, D₂O): 6 (ppm) 7.68 (IH. s), 4,50 (2H. t, J= 12.6 liz). 4,40 a 4.10 ts (5H. ni obsahující q na 4,30 ppm, J = 8,4 Hz), 4.10 až 3,95 (2H, m), 3,45 až 3.35 (I H, m). 3.30 až

3,25 (1H, ni), i ,30 (3H, t, J = 8,4 Hz), 1,25 (311, d, J - 6,7 I Iz). 1.15 (311. d. J = 9.2 I Iz).

-96CZ 300137 Bó

IR(KBr): 1749, 1720. 1602, 1544. 1395, 1316 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): 476 [M+HJ'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána Ci9H?;O_ftN₅S₂Na : 476,0912. Nalezena: 476,0938 [M+Hp

Příklad 2 (1 R.5S,6S)-2-[ 1 - (4 Karboxy 1-1,3-th iazo 1-2 y 1 >azetidin—3—y 1 Jthio 6-[(R)— 1 —hydroxyethy 1] — l — lo methylkarbapen-2-cm-3-karboxylová kyselina, disodná sůl

(1) p-N i trobenzy l-( 1 R,5S,6S)-2-[l-(4 p-nitrobenzy loxykarbony 1-1,3-thiazol-2-yl )azetidin3-y I Jtli ío—6—[ (R)—1 -hydroxyethy 1]-1 -methy lkarbapen-2-ern-3-karboxy lát lš Do roztoku 3-acetylthio-l-(4 p-n i trobenzy loxy karbony 1-1,3-th i azo l-2-yl)azet idin u (380 mg, 1.0 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán hydrazinacetát (115 mg, 1,25 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl rozlok p-nitrobenzyl(1 R,5S.6S>-2-difenylfosforyloxy 6 [(R)-l-hydroxyethyIJ-1 methylkarbapen-2-em-3 karb20 oxylátu (695 mg. 1,17 mmol) v acetonitrilu (30 ml) přidán po kapkách k výsledné smési v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,84 ml, 4,82 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethyl· acetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořeěnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku, Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát) za vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)—2-[ 1-(4-p-nitrobenzy loxykarbony I-1,3-thiazol-2- yljazetidin-3-yl]thio 6-[(R)- 1-by?(i droxyethyl]-4-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu jako hnědé pěnové pevné látky (336 mg.

výtěžek 50%).

'H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8,23 (211, d, J = 8,6 Hz), 8,22 (211, d, J - 8.6 Hz), 7.66 (211. d .J = 8,6 Hz). 7,59 (2H, d. J = 8,6 Hz). 7.57 (IH, s). 5.51(1 H. d, J - 13.7 Hz). 5,43 (2H, s), 5.25 (|H, d, J - 13,7 Hz), 4,56 (2H. dd, J - 15.7. 8.7 Hz), 4,31 až 4,20 (311. m), 4.19-4,05 (311.111). 3,29 (IH, dd, J - 7.1, 2.9 Hz). 3,20 (IH. dq, J - 9.2, 7,4 Hz), 1,38 (3H, d, .1 = 6,5 Hz),

1,27 (3H,d, J - 7,2 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB’): 696 [M+HJ' (2) (1 R.5S,6S)-2-[ l-(4-Karboxyl 1,3--thiazol—2—yljazetidin—3—yl]thio—6—[(R)— 1 -hydroxy40 ethyl]-1-methylkarbapen-2-cin-3-karbo\ylová kyselina, disodná sůl

-97p--Nitrobenzy l-( 1 R,5 S,6S)—2-[ 1 -(4- p nitrobenzy loxykarbony 1-1,3-th iazol-2-yl)a/etid i n-3yljthio 6—[(R )-l-hydroxyethy IJ-Ί -methy lkarbapen-2-em-3-karboxylát (330 mg, 0,474 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 2(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilované vody (8 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (325 mg) ve vodní

C7 300137 B6 lázni (30 °C) 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byi přidán hydrogenuhličitan sodný (45 mg), směs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody jako eluenta. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5$,6$)-2-[M4-karboxyl-l.3 thiazol-2-yja/etidin- 3 yl]thio-6-i(R)-l-hydroxyelhyl]-l-inethylkarbapen-2 em -3-karboxylové kyseliny, disodná sul (86 mg. výtěžek 41%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D₂O): ó (ppm) 7,10 (1Π, s). 4.35 (2H. t, J = 8,0 I lz), 4,20 až 4,10 (1H. m), io 4.10 až 4.00 (2H. m). 3.90 až 3,80 (2H, m), 3,25 až 3,20 (IH. ni). 3,15 až 3.00 (1Π. m), 1.12 (3H, d, J = 6.0 Hz), 1,00 (3H, d, J - 9,2 Hz).

IR(KBr): 1745, 1594, 1541, 1400, 1316, 1282 cm Hmotnostní spektrum (FAB) : 470 [M+H|

Příklad 3 (1 R.5$,ó$)-2-[ ]-(4-K.arbamoyl-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6 [(R)— 1 —hydroxyetliylJ— 1-methy Ikarbapen 2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p-Nitrobenzy]-(] R,5S,6S)-2-[ l-(4 karbamoyl-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin 3 yjthio-6f(R>-1 - hydroxyetliyl] 1 -methy !karbapen-2-em-3-karbo.\y lát

Do roztoku 3—acetylthio—l —(4—karbamoyl—L3—thiazol—2—yl)azetídinu (1.13 g, 4,39 mmol) (zí25 skaného podle popisu v referenčním příkladu 3) v dimethylformamidu (57 ml) byl přidán hydrazinacetát (485 mg. 5,27 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p--nitrobenzyl—(lR,5S,6S)—2— di fenyl fosfory loxy-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1 - methy lkarbapen-2-em-3-kar boxy látu (2,61 g,

4,39 mmol) v acetonitrilu (130 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (3,1 ml, 17,6 mmol). Směs byla míchána 3 hodiny při postupném zvyšování teploty' na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylaeetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M vodným roztokem chloridu sodného, nasyceným vodným roztokem hydrogen?5 uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu -3% methanolu, methy lenchloridu-6% methanolu. methylenchloridu-9% methanolu a methylenchloridu jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl (1 R.5S,óS)-2-[ l-(4-karbamoy 1-1,3-thiazol-2-yl)azelidin-3-yllthio-6-|(R)-1-hydroxyetliyl]ίο 1 -methyl kar ba pen-2-em-3 -karboxylátu jako světle žluté pevné látky (2,61 g. výtěžek 94%).

'H-NMR (400 MHz. CDCl.,): δ (ppm) 8.23 (2H. d, .1 - 8,8 Hz), 7,66 (2H, d. .1 = 8,8 Hz), 7.48 (111, s). 6,99 (111. br s), 5,55 (1H. bs). 5,51 (111, d, J = 13,9 Hz), 5,25 (1H, d. .1 = 13.9 Hz), 4,50 (2H,dd. J = 16.0. 8,0 Hz), 4,31 až 4.20 (3H. m). 4,10 až 4,00 (211, m). 3,30 (lil. dd,

J - 6.6. 2,2 Hz). 3,21 (IH, dq. J = 10,6. 8,0 Hz). 1,83 (IH, brs), 1.38 (3H. d. J - 6.6 Hz), 1,28 is (311. d. .1 = 7.3 liz).

98CZ 300137 B6

Hmotnostní spektrum (FAB J: 566 [M+HJ (2) (1 K.5S.6S>—2—f l —(4—Karbainoyl— l ,3—thiazol—2—yl)azetídin-3—yl]thio—6—[(R)— l —hydroxyethy l]-l-methy lkarbapen-2-em-3 -karboxylová kyselina, sodná sůl μ-> -Νitrobenzyl—(HC.5S.6S) 2—[ 1 —<4 karbamoyl l ,3 thiazol-2-yl)azetidin~3 -yl]thit>—6—[(R)—l — hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát (2,2 g. 3.93 mrnol) (získaný podle popisu v příkladu 3( I)) ve směsi tetrahydrofuranu (110 ml) a destilované vody (110 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (2,2 g) při teplotě místnosti 2 hodiny, io Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (330 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce.

Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatografickv na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 2% acetonitrilu; destilované vody 4% acetonitrilu; destilované vody - 6% acetonitrilu; destilované vody - 8% acetonitrilu a desti15 lované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)2-[ 1 -(4 -karbamoyl-C3-thiazol-2- yljazetidin-3-yI(thio-6-[(R) 1 -hydroxyethyl J-l-methy 1karbapen-2-em-3 karboxylová kyselina, sodná sůl (1,12 g. výtěžek 64%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 Mllz, L>,0, TSP): δ (ppm) 7.54 (lil. s), 4.56 (2H. t. J = 8.6 Hz). 4.40 - 4,30 (lil. m). 4.52 (IH. kvintet. J = 6.2 Hz), 4,21 (IH, dd. J - 9.1, 2.5 I Iz). 4,07 (2H. in),3.44 (III. dd.

J = 6.2. 2.5 Hz). 4.07 (211, dt. J - 8,6. 4.2 Hz). 3.44 (III. dd. J = 6.2, 2.5 Hz), 3,26 (IH.dd, J = 9,1, 7,2 Hz), 1,30 (311, d. J = 6.2 Hz). 1.20 (3 Η, d, J = 7,2 Hz).

IR(KRr): 1749, 1671, 1598, 1546. 1394. 1287 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB*): 447 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CMboOsN|S₂Na : 447.0773,

Nalezena: 447,0734 [M+H]'

Příklad 4 (1 R.5S.6S)-2-[ 1—(4—Kyano— Ϊ,3-thiazol—2—yl)azctídin—3—vljthio- 6 [(RH-hydroxyethyl|-1 methylkarbapen -2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

HO

(1) p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-[]-(4-kyano-l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3- yl]thio-6-[(R)-lhydroxycthyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

ÍS

Do roztoku 3—acetylthio—1—(4—kyano--1.3—thiazol—2—yíjazetidinu (760 mg, 3,18 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 4) \ dimethylformamidu (38 ml) byl přidán hydrazinaeetát (351 mg, 3,81 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzy!-(l R,5S,6S)-2 difenyl4(i fosforyloxy-6-[(R)~ 1 -hydroxyethyl]-1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy latu {1.89 g. 3.18 mmol) v acetonitrilu (95 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (2,21 ml, 12,7 mmol). Směs byla míchána 4 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného byl přidán do reakční směsi, is Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta

-99CZ 300137 B6

0.5M vodným roztokem chloridu sodného, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na si 1 ikagelovc koloně za použití hexan : ethylacetát (1 : 4) a ethylacetátu jako eluentu za vzniku p-nitro5 benzyl-(1 R,5S.6S)-2--[ 1 -(4—kyano—ES-thiaziol—2—yl)azetidin—3--yljthio—6—[(R)—1 - hydroxyethyl]- I -methy lkarbapcn-2-€m-3 -karboxylátu jako světle žluté pevné látky (1.65 g, výtěžek 96%).

'H-NMR (400 MHz. CDCI?): δ (ppm) 8.23 (2H. d, J - 8,8 Hz). 7,66 (2H. d. J = 8,8 Hz), 7,29 (1H. s). 5,51 (1H. d, 13.9 Hz), 5,25 (1H. d, J - 13.9 I Iz), 4,54 (2H, dd. J = 16,0. 8,0 Hz). 4,36 až io 4.24 (3 H, m), 4,12 až 4.04 (2H, m). 3.30 (111. dd, J = 6,6, 2.9 Hz), 3,20 (1H, dq, .1 = 9,4, 7.3 I Iz),

1,80 (IH. brs). 1.38(314, d,J-5,9Hz). 1.27 (3H, d. J = 7,3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 542 |M+H]‘ (2) (1 R..5S.6S)—2—[ 1—(4-·Kyano-1.3-thiazol-2-yl)azetidin-3-ylJthio-6 [(R)-1-hydroxyethyl] 15 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p—Nitrobenzyl—(1 R,5$,6S)-2-|l-(4-kyano l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl[thío-6-[(R>-lhydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-ein-3-karboxylát (600 mg, 1,11 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 4(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody (30 ml) byl :o katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (600 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (93 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek bvl čištěn chromatograficky na koloně Cos iti ošil za použití destilované vody - 3% acetonitrilu;

^Ί5 destilované vody - 6% acetonitrilu; destilované vody - 9% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu; destilované vody - 15% acetonitrilu; destilované vody - 18% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (I R.5S.6S)2-[l (4-kyano-1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-ylJthio—6- [(R)— 1 —hydroxyethyl] 1 -methyIkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (285 mg. výtěžek 60%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D₂O. TSP): δ (ppm) 7,68 (1H, s). 4,57 (211, t, J = 8.2 Hz), 4,44 až 4.32 (IH, m). 4.25 (IH. kvintet. J = 6,2 Hz), 4,21 (III. dd. J = 9,0, 2,3 Hz), 4.07 (2H, dt, 8,2,4,7 Hz), 3,44 (III. dd, J = 6.2. 2.3 Hz). 3.25 (III, dq. J = 9,0, 7.2 Hz), 1.31 (3H, d, .1 = 6,2 Hz), 1,20 (311, d, J = 7.2 Hz).

IR (KBr): 2231, 1750, 1599, 1549, 1470, 1397. 1307 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB ): 429 [M+H]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB'): počítána ©ΛΙιΧΕΚ^Νη : 429,0668, Nalezena: 429,0662 [M+H]

Příklad 5 (1 R.5S.6S) 2-[l-(4-N-Methylkarbamoyl 1.3-thiazol- 2- yl)azetidin-3-yl]thio-6-)(R)-lhydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

HO

COO'Na⁺

,ΟΟΝΗΜο

- 100CZ 300137 B6 (1) p-Nitrobenzyl-(l R,5S,6S)-2-[l -(4-N-methylkarbamoyl-l ,3-thiazol--2-yl)azetidin—3—>llthio-ó-[(R)- -1-hydroxy ethy l]-l-met hylkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku 3-acetyIthio-1 -{4-N-methyIkarbamoyl-IJ-thiazol 2-yl)azetidinu (570 mg. 2.10 mmol) s (získaného podle popisu v referenčním příkladu 5) v dimethylformamidu (28 ml) byl přidán hydrazinacetát (291 mg. 3.16 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla roztok p-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2di-feny I fosfory loxy-ó-[(R)-1-hydroxyeihyl]-l -methy lkarbapen-2 em3 karboxy látu (1,25 g.

2.10 mmol) v acetonitrilu (25 m!) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod io dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylcthylaininu (1.83 ml. 10,5 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena. promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličita15 nu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (2 : 3) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl(1 R.5S.6S)-2-[ 1 -(4 -N-methy Ikarbamoyl-1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio -6- [(R> 1 hydroxy ethy l]-l-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy látu jako světle žluté pevné látky (774 mg,

2o výtěžek 64%).

'H-NMR (400 MHz. CDCl·,): δ (ppm) 8.2! (2H. d, ,1 - 8,8 Hz), 7,66 (211, d. J - 8,8 Hz), 7,43 (IH, s), 7,14 (lH,s), 5,51 (IH. d, .1= 13,8 liz). 5,25 (IH, d. J= 13.8 Hz), 4.48 (2H, dd, J= 17,2, 8,9 Hz), 4,35 - 4,20 (311, m), 4,10-4.00 (2H, m). 3,35- 3,15 (2H. m), 2.96 (311, d, J - 5,1 liz), 1.70 (IH, br s). 1,38 (3H, d, J - 6,2 Hz), 1,27 (3H, d, J = 7,3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB'): 574 [M+H]‘ (2) (I R.5S,óS)-2-[l-(4-N-Methy Ikarbamoy 1-1_Ί3—thíazol—2—yl)axetidin—3—yI]thio—6—((R)—1 hydroxyethyl]-l-methyIkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sul so p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S.6S> 2 [ l-(4-N-methylkarbamoyl-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio6-f(R)-l-hydiOxyethylJ-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (768 mg, 1,34 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 5( I)) ve směsi tetrahydrofuranu (38 ml) a destilované vody (19 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (757 mg) ve vodní lázni (30 °C) 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitanu sodný (115 mg), směs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1), oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 3% acetonitrilu; destilované vody 5% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofiíizován za vzniku požadované

-to sloučeniny (1 R,5S,6S)-2-[l-(4-N-methy Ikarbamoyl 1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thiO6[(R) 1 -hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (392 mg, výtěžek 64%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO): fí (ppm) 7,30 (III, s), 4,40 (211. t. J = 8.0 Hz). 4.30 až 4,18 (IH, m), 4.18 až 4,00 (2H. m), 3,90 až 3,85 (2H, m), 3,30 (IH, dd,,! - 6,3, 3,8 Hz), 3,20 až 3,05 (111, m),

1,18 (3H. d, J - 6,4 Hz), 1,06 (3H. d, .1 - 7,2 Hz).

IR (KBr): 1749, 1650, 1599, 1552, 1397, 1316 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB) 461 [M t H]'

Příklad 6 (I R,5S.6S)-2-[ l-(4-N,N-DimethyIkarbamoy 1-1.3-thiazol—2—y 1 )azetidin—3 -yIJthio-6-[(R)— 1 hydroxyethvl] l-methylkarhapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

- 101 CZ 300137 B6

^Z/ ,CONMe₂ (1) p—Nitrobenzyl—(1 R,5S,6S)-2-[ 1 -(4 N,N-d imethy Ikarbamoy 1-1 ,3—thiazol—2—yl )azetidin—3 vl]thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-]-methy lkarbapen-2-em--3-karhoxy lát

Do roztoku 3—acetylthio-1—(4—N.N dimethyíkarbarnoyl— 1,3—thiazol—2—yl)azetidinu (563 mg, 1.49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu (6) v dimethylformamidu (28 ml) byl přidán hydrazinaeetát (264 mg, 2,87 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 3 hodiny. Po zkontrolováni doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl(1R.5 S,6$ )-2-d ífcnyl fosfory loxy-6-[(R)-l -hydroxyethyl]--1 methy lkarbapen-2-em-3-karblo oxylát (1,15 g, 1,94 mmol) v acetonitrilu (23 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaininu (1,7 ml. 9,76 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethvlacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (2 : 3) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl(1 R,5S,6S)-2-[ 1—(4—N.N—d imethy Ikarbamoy 1-1,3 th iazol-2- y ljazetidin—3- yl |thio- 6-[(Rf-1 2o hydroxyethyl] 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu jako světle žluté pevné látky (777 mg, výtěžek 68%).

'H-NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 8,22 (211, d, J - 8,2 Hz). 7.66 (2H. d. J - 8,2 Hz), 7,09 (IH. s), 5,50 (111, d, J = 13.5 Hz), 5,25 (1H, d, J = 13,5 Hz), 4.60 až 4,40 (211. m). 4,35 až 4.20 (3H. m). 4,20 až 4.00 (2H. m). 3,32 až 3.25 (IH. m), 3,25 až 3.12 (4H. m), 3,05 (3H. brs). 1.57 (IH.brs), 1.38 (311. d. J - 6.2 Hz). 1.25 (3H. d, J - 7,1 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 588 [M+H] (2) (1 R,5S.6S)-2-[l-(4-N,N-Dimethylkarbainoyl-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6[(R)-l-hy droxy ethyl ]-l-mel hylkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná sul p -Nitrobcnzyl-( lR,5S,6S)-2-[l-(4-N,N-dimethylkarbamoykl.3Mhiazol-2-yl)azetidiii 3 yl]th io-6-J(R)-]-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3 karboxy lát (772 mg, 1,31 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 6(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (38 ml) a destilované vody (19 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (768 mg) ve vodní lázni (30 °C) 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs Filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (112 mg), směs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody, Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil. bluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)—2—[ I —(4—Ν,Ν-diinethy Ikarbamoyl—1,3—thiazol—2—y I )azetidin—3—yl]thiť>—

6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sul (375 mg, výtěžek 60%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₂O): δ (ppm) 7.00 (IH, s). 4,56 až 4,36 (2H, m). 4.31 až 4,21 (IH, m). 4,21 až 4,06 (2H. m). 4,01 až 3.91 (2H, m), 3,41 až 3,32 (111, m). 3.21 až 3.11 (1H. m). 3.00 (3H, s), 2,91 (3H.\s). 1,21 (311, d, J = 6,4 Hz), 1,11 (3H,d,J - 7,1 Hz).

IR(KBr): 1750, 1610, 1540, 1397, 1305 cm ¹

- 102CZ 300137 B6

Hmotnostní spektrum (FAB ): 475 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CiqHz^NjS^Na : 475,1087, Nalezena: 475,1085 [M+H]'

Příklad 7 (1 R. 5 5.65)2-[ 1 -(4-'N-Pthylkarbamoyl-1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6-[(R)—1 hy droxy ethy lj-1 -met hylkarbapen-2-em-3 -karboxyl ová kyselina, sodná sůl io

HO

CONHEt (l) p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-[ l —(4—N—ethy Ikarbamoyl-1,3—thiazol—2—yl )azetidin-3-vlJthio 6 [(R) -1 —hydroxyethyl]— 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Do rozloku 3-aeetylthio-l-(4-N-cthylkarbamoyl-l,3-tliiazol-2-yl)azetidinu (450 mg, 1,58 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 7) v dirnethylformamidu (23 ml) byl přidán hydrazinaeetát (174 mg. 1,89 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p -nitrobenzy l—( 1 R,5S,6S)-2di-fenylfosforyloxy 6~[(R)—1 -hydroxyethyl]-!-mcthylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (939 mg, 1.58 mmol) v acetonitrilu (47 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním díisopropylethylaminu (1,10 ml, 6.31 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta (),5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hvdrogen2> uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu 10% methanolu a ethylacetátu jako eluentu za vzniku p—nitrobenzy 1—(IR.5S.6S)-2-[l-(4-N-ethylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)aze-tidin-3yljtliio—6—[(R)—l—hydroxyethyl]—l-methylkarbapen-2-em 3 karboxylátu jako světle žluté pev50 né látky (753 mg, výtěžek 81%).

'H-NMR (400 MHz, CDCh): ó (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,66 (211. d, J - 8,8 Hz), 7,43 (lil, s). 7,12 (lH.t, J = 5,1 Hz), 5,51 (IH. d. J = 13,9 Hz). 5,25 (IH, d, .1 - 13.9 Hz). 4.49 (2H, dd, J- 16,1. 8.1 Hz), 4,32 až 4,20 (3H. m), 4,10- 4,00 (211, m), 3,44 (2H. dq, J= 7,3, 5,0 Hz), 3,29 (IH, dd, J- 7,3. 2,9 Hz), 3,21 (IH, dq. J= 8,9, 7,3 Hz), 1,38 (3H,d, J = 5,9 Hz), 1,28 (3H,d,J-7,3 Hz), 1.23 (3H,t,J - 7.3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 588 [M+H]’ (2) (1 R.5S.6S) 2 [1 (4-N -EthyIkarbamoyl-1,3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yl]thio—6—l(R)—1 hydroxy ct hyl]-l-methy lkarbapen-2-cm-3-karboxy lová kyselina, sodná sul p—NitrobenzyI—(1 R.5S,6S)-2-[l (4 N Ethy lkarbamoy l-l,3-thiazol-2-yl)azctidin-3-yl]thio-6[{R)-l-liydro\yeihyl]-l-metliylkarbaptín-2-em-3_karboxylát (750 mg, 1,23 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 7(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (38 ml) a destilované vody (38 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (750 mg) při teplotě místnosti 1,7 hodiny. Po zkontrolováni doběhnuli reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (103 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána

-103CZ 300137 B6 v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody 3% acetonitrilu;

destilované vody - 6% acetonitrilu; destilované vody - 9% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu; destilované vody - 15% acetonitrilu; destilované vody - 18% acetonitrilu; destilova5 né vody - 21% acetonitrilu; a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (I R,5S,6S)-2-[l-(4 N--ethy Ikarbamoy l-l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3yl]thio—6—f(R)—1 — hydroxyelhyl]--1-methylkarbapen-2-em 3 karboxylová kyselina, sodná sůl (384 mg, výtěžek 66%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO, TSP): δ (ppm) 7,45 (IH, s). 4.60 až 4,48 (2H, m), 4,40 až 4,29 ίο (1H. m). 4.25 (111. kvintet, J = 6.2 Hz), 4.20(IH, dd. J = 9.1, 2,3 Hz), 4,12 až 4,00 (2H. m), 3,43 (IH, dd. .1 = 6,2, 2,3 Hz), 3,37 (3H, q, J = 7.2 Hz), 3,32 až 3,18 ()H. m), 1.30 (3H. d, J = 6,2 Hz), 1.20 (3H, d, J = 7,2 Hz), 1,19 (3H, t, J ~ 7.2 Hz).

IR (KBr): 1750. 1659, 1604. 1548, 1394. 1315 cm ¹1 Imotnostní spektrum (EAB ): 475 [Μ + HJ

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána ; 475,1086,

Nalezena: 475.1070 [M+H]'

Příklad 8 (I R.5S.6S)—2—[ 1 —(4—N—lsopropylkarbamoy I— U3—thiaz.ol—2—y Dazetidin—3 -yl]th io—6—f(R>— l — hydroxyelhyl]- 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-[ 1A4-N-isopropyIkarbamoyl-l.3—thiaz.ol—2—yl)azetidin-35 yl ]thio—6-1 (R)-1 -hydroxyethyl]- 1 - -methylkarbapcn-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acety Ith io-l-(4-N-isopropylkarbanioyl-l,3-thiazol-2-yl)azetí dinu (460 mg,

1,65 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 8) v dimethylformamidu (23 ml) byl přidán hydrazinacetát (182 mg, 1,98 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl(1 R,5S.6S)-2-difenylťosforyloxy-6-[(R)-l-hydroxyethyll-]-inethylkarbapen-2-em- 3 karboxy látu (981 mg, 1.65 mmol) v acetonitrilu (49 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním di isopropy lethylam inu (1,15 ml, 6,60 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti.

Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakění směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn io chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2); ethylacetát 5% methanolu a ethylacetátu jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-(l R,5S,6S> 2-f1—(4—N— isopropy Ikarbamoy 1-1,3-thiazol-2-yl )azetidin-3-yfjthio-ó-[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu jako světle žluté pevné látky (790 mg, výtěžek 80%).

^!H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8,23 (2H. d, J “ 8,8 Hz), 7.66 (211, d, J = 8.8 Hz), 7,42 (IH.s). 6,95 (IH. d. J= 8,1 Hz), 5,51 (Ul, d, J = 13,6 Hz), 5,25 (IH. d. J= 13.6 Hz), 4,49

- 104CZ 300137 B6 (2H, dd. J = 14.6, 8,1 Hz), 4,32 až 3.40 (511. m), 3,30 (IH, dd, J = 7.3. 2.9 Hz). 3.21 (IH.dq,

J = 8,8. 7,3 Hz), 1,60 (1 H,br s), 1.38 (1H, d. J = 6.6 Hz), 1,30 až 1.20 (9Ϊ1. m).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 602 [M+H] (2) (1R-5S.65) 2 [ 1-(4-N-i sopro pyl karbaní oy 1-1,3—thiazol—2 yl)azetidin-3-vl]thio-6 -[(RJ

I- -hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-cm-3-karboxylová kyselina, sodná sul p Nitrobenzyl-(1 R.5S.6S)—2—[ 1 —(4- N ísopropylkarbamoyl l,3-thiazol-2-yl)azetidin 3-yl]thio—6—Γ(R)—l —hydroxyethyl]—I-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (790 mg, 1.31 mmol) io (získaný podle popisu v příkladu 8(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (40 ml) a destilované vody (40 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (790 mg) při teplotě místnosti 1,7 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhliěitan sodný (110 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 4% acetonitrilu; destilované vody - 8% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu; destilované vody - 16% acetonitrilu: destilované vody - 20% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofvlizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S) 2 11 (4-N-isopropylkarbamoyl-l,3thiazo!“2-y 1 )azetidin 3 yljthío—6—[(R)— 1-hydroxyethyl]-l -methylkarbapen-2-cm-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (389 mg, výtěžek 61 %) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DX), TSP): δ (ppm) 7,45 (IH, s). 4,55 (2H, t. .1 = 8,4 Hz). 4.40 až 4,30 (1H, m), 4,25 (1H, kvintet, J - 6.3 Hz). 4.19 (1H. dd, J = 9,0, 2.4 Hz), 4.14 až 4,03 (3H, m), 3,43 (111, d, J- 6.3, 2,4 Hz), 3,25 (111, dq, J= 9.0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J- 6.3 Hz). 1.23 (6H, d. J = 6,7 Hz), 1,20 (3H,d,J = 7,2 Hz).

IR (KBr): 1751. 1657, 1548, 1492. 1469. 1393, 1303, 1263 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB J: 489 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB); počítána C%1 EXXN.iSiNa : 489,1242, Nalezena: 489,1234 [M+Hf

Příklad 9 (1 R,5 S,6 S)-2-[l-(4-NA?ykl o pentyi karbamoyl -1.3—thiaz.ol—2—yl )azetidin—3—y llthio—6—[(R)— 1 hydroxyethylj-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p-NitrobenzylJ 1 R.5S.6S)-2-[H4-N-cyklopentylkarbainoyl-1,3-thiazol-2-yl)azetidín3—yl |thio-6 [(R)-1 -bydro\yethyl| ! methylkarbapcn 2-em 3-karboxylát

Do roztoku 3-acetylthio-l-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-thiazol-2--yl)azetidinu (550 mg, 40 i.67 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 9) v dimethylformamidu (28 ml) byl přidán hydrazinacetát (187 mg, 2.03 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p- nitrobenzylj 1R,5S.6S)-2-difenylfosforyloxy-6 [(R) 1-hydroxyethyl]-1 methylkarbapen 2 -cm-3-karboxylátu (993 mg, 1.67 mmol) v acetonitrilu (50 Ml) přidán po kapkách k výsledné směsí v ledové lázni ts pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethy lam inu (1,16 ml. 6.68 mmol).

- 105 CZ 300137 B6

Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylaeetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogen5 uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek bvl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S.6S)-2-[ l-(4-N-cyklopentylkarbamoyl1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl |thio-6-[(R)-l-hydroxyethy 1|-1 -methyIkarbapen 2-em-3karboxy látu jako světle žluté pevné látky (346 mg, výtěžek 33%).

io 'll-NMR (400 MHz, CDCb); δ (ppm) 8.24 (2H. d. J- 8,0 Hz). 7.66 (2H, d, J- 8,0 Hz). 7.42 (1H, s), 7,05 (111, bd, J = 8,0 Hz), 5,51 (1II, d ,J - 13,6 Hz), 5.26 (1H. d, J - 13,6 Hz). 4,49 (2H,dd, J= 15.6. 8.1 Hz). 4.38 až 4.24 (3H, m). 4,10- 4.00 (2H, m). 3,30 (IH. dd. J = 6.2, 2,1 Hz), 3.22 (1II, dq. J 9.4, 8.3 Hz), 2,12- 2,00 (2H. m), 1.81 (1H, br s), 1.78 až 1.44 (6H, m), 1,38 (3H, d. J - 5,8 Hz), 1.28 (311, d. J - 7,3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAR ): 628 [M+H] (2) (1 R,5S.6S)-2-[1- (4 N-cyklopenty lkarbamoy 1-1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio -6[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methy lkarbapen-2-em- 3 karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)—2—L1 —(4—N—cyklopentylkarbamoy 1-1,3-thiazo 1-2 yl)azetidin-3—ylJthío—6—f(R>—1—hydroxyethyl]- 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (340 mg, 0,542 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 9(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (17 ml) a destilované vody (17 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (340 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (46 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Smčs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosíl za použití destilované vody - 4% acetonitrilu; destilované vody - 8% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu; destilované vody - 16% acetonitrilu; destilované vody 20% acetonitrilu; destilované vody - 24% acetonitrilu; destilo50 váné vody - 28% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Fluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S,6S)-2-[ l-( 4-N-cyklopenty lkarbamoy l-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin—3—yl]thio-6 [(R)-l-hvdroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (159 mg, výtěžek 57%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO, fSP); δ (ppm) 7,45 (IH, s), 4,55 (IH. dt, J = 8,1, 1,3 Hz). 4.40 až

4,30 (1H, m), 4,30 až 4,16 (3H, m obsahující q na 4,25, J = 6.3 Hz a dd na 4,19, J = 9,1,2,6 Hz),

4,12 až 4.00 (2H, m), 3,43 (III, dd. J = 63, 2,6 Hz), 3,24 (lil, dq, J = 9,1. 7,3 Hz), 2,06 až 1,94 (2II.ni). 1.80 až 1,50 (6H, rn), 1,30 (3H, d, J ~ 6.3 Hz), 1.19 (3H.d. J = 7,3 Hz).

IR (KBr): 1751, 1658, 1605, 1547, 1393, 1315 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): 515 [M+Hf

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB’): počítána CM FsOMtSjNa ; 515,1399, Nalezena: 515,1398 [M+Hf

Příklad 10 (lR.5S.6S)-2-[l-(4-N-Cyklohexylkarbamoyl 1.3-thiazol-2-yl)azetidin-3-ylJthío-ó-[(R)-lhydroxvethyl]-l-melhylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

- 106 CZ 300137 B6

COOW (1) p-Nitrobenzyl-( I R,5S.6S)-2-[ l-(4-N-cyklohexylkarbamoy!-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin-3yljthio · 6—[(R)— 1 —hydroxyethyl]— 1 - metliylkarbapen-2-em-3-karboxylát ? Do roztoku 3 acety Ith io— I -(4-N-cyklohexyl karbamoyl 1,3—th iazo I—2—y Dazetidinu (121 mg,

1.09 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 10) v dimethylformamidu (19 ml) byl přidán hydrazinaceíát (121 mg, 1,31 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p--nitrobenzy I(1 R,5S.6S)-2-ditenylfosforyloxy 6—[(R)— í —hydroxyethylJ—1 -methylkarbapcn-2-em-3-karbio oxylátu (648 mg, 1,09 mmol) v acetonitrilu (32 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropy lethy lam inu (0,759 ml. 4.36 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethyl15 acetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 4); ethylacetát - 5% methanolu a ethylacetátu jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-(I R,5S.6S)-2-[l-(4-N20 cyklohexylkarbamoyl-1,3-th iazo l-2-yl)azetid i n -3 —yljthio—6—f( R )-l -hydroxyethyl]- 1 -methy 1karbapen-2-em-3-karboxylátu jako světic žluté pevné látky (598 mg. výtěžek 86%).

'H-NMR (400 MHz. CDCh): 5 (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8.8 liz), 7.66 (2H. d, J - 8,8 Hz), 7,42 (IH, s), 7.00 (IH, d, 8.8 Hz), 5,51 (11L d, J= 13,5 Hz), 5,25 (IH, d, J- 13,5 Hz). 4,49 (2H, dd, J = 15,4, 8,8 1 Iz), 4,32 až 4.20 (3H. m). 4,11 - 4,00 (211, m), 3.96 až 3.80 (1 H, m), 3,29 (1II, dd. J = 6.6. 2,2 Hz). 3,21 (IH, dq. J = 8.8, 7,3 liz), 2,01 až 1,18 (16H, m obsahující 311, d na

1,38. J 5.9 Hz a 3H. dna 1,28, J -7,3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 642 (M+Hj (2) (I R,5S,6S>—2—f l —(4—N—CyklohexyIkarbamoyl-1.3—ihiazol—2—yl)azetidin—3—vIJthío—6— so [(R)-l-hydroxyethyl]- 1 -methyIkarbapen 2 em-š-karbo\ylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S) 2-[l-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-thiazol 2 yl)azetidin-3-yl]thio 6-f(R)—l-hydroxyethyl]-l-methyIkarbapen 2 em 3-karboxylát (590 mg. 0.919 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 10(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody (30 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (590 mg) při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (77 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 4% acetonitrilu;

destilované vody - 8% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu; destilované vody - 16% acetonitrilu; destilované vody - 20% acetonitrilu; destilované vody - 24% acetonitrilu; destilované vody -28% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)-2-(1 -(4-N cyklohcxylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)azetidin—3—vl]thio—6—[(R)—l—hydroxyethyl]- 1 methylkarbapen-2 em 3-karboxylové kyselina, sod45 ná sůl (318 mg. výtěžek 66%) jako bílé pevné látky.

- 107CZ 300137 B6 'H-NMR (400 MHz, D,O. TSP): δ (ppm) 7.45 (IH, s). 4.55 (IH. dt, J = 8.5. 1,9 Hz). 4,40 až

4.30 (IH. in). 4,25 (1H, kvintet. J - 6.3 Hz). 4,19, (IH, dd, J = 9.0, 2.4 Hz), 4.10 až 4.00 (211. m),

3,80 až 3.70 (IH. m), 3.43 (IH, dd, J - 6,3, 2.4 Hz). 3.24 (IH. dq. J = 9,0. 7,1 1 Iz), 1.96 až 1.84 (2H, m), 1,83 až 1.70 (2H. m), 1,69 až 1,58 (1H, m), 1.46 až 1.10 (11H. m obsahující 3H, d, na

1,30. J = 6,3 a 3H, d, na 1,19, J = 7,1 Hz).

IR(KBr): 1751. 1660, 1605, 1545, 1492, 1393, 1310, 1296 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB‘j: 529 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CMI.AfiN.STXa : 529,1555, Nalezena: 529.1575 [M+H]’ io

Příklad 11 (lR.5S,6S)-2-[]-(4-Morfolmokarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yljtliiťH3 f(R) 115 hydroxyelhyl]-l-inethy!karbapen-2-em-3-kar boxy lová kyselina, sodná sůl

COO‘Na* (1) p-Nitrobenzyl-(l R.5S.6S) 2- [ 1 (4 mortolmokarbonyl 1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yIjthio-6- [(R)-1 - hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxy lát

2o Do roztoku 3-acetyIthio-1 (4 morfolinokarbonyI-1,3-thiazol-2-y fiazetidinu (410 mg. 1.50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 11) v dimethylformamidu (20 ml) byl přidán hydrazin acetát (138 mg, 1,50 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-{ 1 R.5S,óS)-2difenyIfosfory loxy-6-[( R)-1 -hydroxyethyl]-l -methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (743 mg,

2? 1,25 mmol) v acetonitrilu (37 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethy laminu (0,873 ml, 5.01 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethy lacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethy lacetát 10% methanolu a ethyíacetátu jako eluentu za vzniku p-nitrobcnzyl-( 1 R,5S,6S)-2-[ l-(4-morťolinokarbonyl-l .3—thiazol—2—y l)azetidin—3—yl]thio -635 |(R>-l-hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu jako světle žluté pevné látky (485 mg, výtěžek 62%).

’H NMR (400 MHz, CDCl·,): δ (ppm) 8.23 (2H. d, J = 8,8 Hz), 7,66 (211, d. .1 = 8,8 Hz), 7,19 (III, s), 5,51 (III, d,J~ 13.9 Hz), 5,25 (111. d, J ~ 13,9 Hz), 4,50 (2H, ddd, J - 13.9.8.1.2,2 Hz), 4.35 až 4,20 (3H. m), 4,10 - 4,00 (2H. m). 3,95 až 3,60 (811, m), 3,29 (IH, dd. J - 6,6. 2,2 Hz),

3,20 (1H, dq, ,1 = 8,8, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d, ,1 = 6,6 Hz), 1,27 (3H, d, J = 7,3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB'): 630 [M+H]'¹ (2) (1 R,5S,6S) 2 [l-(4-Morfblinokarbonyl-l,3-thiazol-2- y'l)azetidin-3-yl]tliio-ó-[(R)-lhydroxyethyl]--1--methylkarbapen--2-em-3--karboxylová kyselina, sodná sůl

- iosCZ 300137 Bó ρ N ilroben/yi ( 1R,5S.6S)-2-[ 1 -{4-N-morfolinokarbonyl-l.3--thiazol—2—y 1 )azetidin—3—yl]thio—

6-[(RF 1-hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (480 mg. 0,762 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 11(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (24 ml) a destilované vody (24 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (480 mg) při teplotě místnosti 1,3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (64 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na koloně Cosmosil za použití destilované vody 3% acetonitrilu; destilované vody - 6% acetonitrilu; destilované vody - 9% acetonitrilu; destilované vody - 12% io acetonitrilu; destilované vody - 15% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (!R,5S,6S)-2-[l-(4-morfolinokarbonyl-1.3-thiazol 2-yl)azetidin-3-yl]thio- 6 [(R)-l-hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3 karboxylová kyselina, sodná sul (236 mg, výtěžek 60%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₂O, TSP): 6 (ppm) 7,15 (IH, s), 4,56 (2H. dt, J = 8.4, 0,9 Hz). 4.42 až iš 4,32(111, m), 4,25 (1H, kvintet. J - 6,3 Hz), 4,21 {1H, dd, J - 9.0, 2.3 Hz), 4.05 (2H. m), 3,90 až

3,60 (8H, m), 3,44 (111, dd. J = 6,3, 2,3 Hz), 3,25 (IH, dq, J- 9.0, 7,3 Hz), 1.30 (3H,d. J = 6,3 liz), 1,20 (3H, d, J - 7,3 Hz).

IR(KBr): 1799, 1608, 1536, 1392, 1311, 1236, II13 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): 517 [M111]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CJiH+oOHHNa : 517.1192, Nalezena: 517,1186 [M+ll]'

Příklad 12 (1 R.5S.6S)·· 2-[l-(4-Fthoxykarbony l-l,3-thiazol-2-yl)piperidinM-yl]thio-6-[(R)-l-hydroxy25 ethyl]-1-methylkarbapen 2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

HO

COO*Na⁺

(1) p-Nitrobenzyl (IR,5S.6S)-2-[l-(4-ethoxykarbonyl 3-lhia/ol-2-yI)piperidin-4 yl]thio6—[(R)— l —hydroxyethyl]—1 -methy lkarbapcn-2-cni-3-karboxy lát

Do roztoku 4-acetylthio 1-{4-ethoxy karbony l-l,3-thiazol-2-yl)piperidinu (400 mg, 1,27 mmol) ío (získaného podle popisu v referenčním příkladu 13) v dimethylformamidu (12 ml) byl přidán hydrazinacetát (152 mg, 1,65 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a smčs byla míchána 2.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-( I R,5S.6S)-2difenylfosforyloxy 6 |(R)-1-hydroxyethyl]-1-methy lkarbapen-2-em-3 karboxy lát u (755 mg,

1,27 mmol) vacetonitrilu (21 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,11 ml, 6,37 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném /vyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethy lacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogen40 uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2) a ethylacetátu jako eluentu za vzniku p- nilrobenzyl-(lR,5S,6$) 2-[l-(4-cthoxykarhonyl 1.3-thiazol-2-yl)pÍperidin-4-yl]thio-6- 109CZ 300137 Bó [(R )-l-hydroxyethyl]-1 -methyl kar ba pen- 2-cm-3-karboxyl átu jako světle žluté pevné látky (296 mg. výtěžek 38%).

'H-NMR (400 MHz, CDCI;): δ (ppm) 8,27 (2H, d, J = 8.7 Hz). 7.71 {211, d, J = 8.7 Hz). 7.51 (IH.s), 5.56 (111. d. J = 13.7 Hz). 5,28 (IH. d. J - 13,7 Hz), 4.40 (2H. q, J = 7,1 Hz), 4.39 až

4,30 (211. m), 4,10 až 4,00 (2H. m), 3.60 až 3.20 (5H. m), 2,20 až 2.00 (2H. m). 1,90 až 1,70 (3H,m). 1.43 (311. d.J = 6,5 Hz). 1.41 (311, t, J = 7.1 Hz), 1,36 (7.2 1 lz).

(2) (1 R.5S.6S)-2 -[ 1-(4-Ethoxykarbonyl-1.3-thiazol -2—yl)piperidin—4—yljthio 6-[(R)-1 hydroxyethyl] 1 -mcthylkarbapen-2-em-3 karboxylové kyselina, sodná sůl io p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S.6S)—2—[ 1 —(4 ethoxykarbonyl-I,3-thiazol-2-yl)piperidin—4--yl]thio-ó[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em- 3 -karboxylát (291 mg. 0,578 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 12(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (14 ml) a destilované vody (7 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (291 mg) ve vodní lázní (30 °C) 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnuti reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl i? přidán hydrogenuhličitan sodný (42 mg), smčs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody 5% acetonitrilu: destilované vody - 7% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl fyoťylizován za vzniku požadované slou20 ceniny (l R.5S.6S)—2—[ 1 —(4- ethoxykarbonyl—1.3—thiazol-2- yl)piperidin-4-yl ]tliio—6-[(R) 1 -hydroxyethyl]—1 methylkarbapcn-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (69 mg, výtěžek 29%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 MHz. DO, TSP): Ó (ppm) 7,69 (IH, s), 4,35 <2H, q. J - 7,1 Hz). 4,30 až 4.20 (2H, m obsahující dd na 4,23, J = 9.2, 2,5 Hz), 4.00 až 3.85 (2H, m), 3,55 až 3,20 (5H. m). 2.20

2^ς až 2.05 (2H. m), 1.75 až 1,60 (2Π, m), 1,36 (3H,t, .1 = 7,1 liz). 1,31 (3H, d. J = 6,4 Hz). 1,23 (3H,d, .1 = 7,2 Hz).

IR (KBr): 1750, 1729, 1603, 1540, 1448, 1385, 1337, 1265, 1223. l210cm ¹Hmotnostní spektrum (EAB'): 504 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB’): počítána C2iH?₇O_ftN;S₂Na : 504,1239. so Nalezena: 504,1246 [Μ i II|

Příklad 13 (1 R.5S.6S)-2—[ I —(4—Karboxyl·-1.3 th iazol 2 yl)pi peridín—4-yljthio-6-[(R) 1 -hydroxyethyl ]l-methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, disodná sůl

HO

COO'Na* (1) p-Nítrobenzyl-( I R.5S,6S)-2~[l-(4-p-nitrobenzylkarbonyl-3-thiazol-2-yl)piperidin-4yl]lhio-6-[(R)-l-hydroxyethyl] 1 -inelhylkarbapen-2-em-3 karboxylát

Do roztoku 4-acety lth io— 1 (4-p-nitrobenzylkarbonyl·· 1,3-thiazol-2-y 1 )piperid lnu (150 mg,

0,353 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 14) v dimethylformamidu (7,5 ml) byl přidán hydrazinacetát (46 mg, 0,49 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyI(1 R,5S,6S)-2-difenylfosfbryloxy 6-[(R)— 1 -hydroxyethyl]-1 -methylkarbapen-2-cm-3-karb- I 10CZ 300137 Bó oxylátu (200 mg. 0.353 mmol) v acetonitrilu (3.0 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v Jedové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0.09 ml.

0.517 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti.

Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořcčnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelovc koloně za vzniku p—nitrobenzyl—( 1 R,5S,6S)- 2—[ 1 —(4—p—nitroio benzylkarbonyl 1,3- thiazol-2-yl)piperidin- 4—vljthio—6- [(R)-1 -hydroxyethy IJ-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu jako světle žluté pevné látky (220 mg, výtěžek 89%).

'll-NMR (400 MHz, CDCI,): δ (ppm) 8,23 (2H, d. J - 8,6 Hz). 8.22 (2H, d, J - 8.6 Hz). 7,66 (2H, d, J = 8,6 I Iz), 7,59 (2H. d, J - 8,6 Hz), 7,53 (1H, s), 5,51 (1H, d, J = 13.8 Hz). 5,43 (2H. s), 5,22 (11L d. J = 13.8 Hz), 4,35 až 4,20 (2H, m). 4.05 až 3,90 (211, m), 3,50 až 3,10 (611, m), 2,20 i> až 1,95 (2H.m), 1,90 až 1.50 (3H,m), 1,38 (3H, d, J - 6,2 Hz). 1,31 (3H,d. J ~ 7,2 Hz). Hmotnostní spektrum (PAB'): 724 [M+HJ (2) (1 R,5S.6S)-2-[ l-(4-Karboxyl-C3 thiazol-2-y])piperidin-4-yl]lhio-6-[(R)-l-hvdroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sůl p-Nilrobenzyl-( IR,5S,6S)-2-[l-(4-p-nitrobenzy loxykarbony 1-1.3-thiazol-2-yl)piperidin^lyl Jthio- 6- [(R)-1- hydroxyethyl] 1 -methy lkarbapen-2-em-3 karboxylát (570 mg, 0,788 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 13(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (38 ml) a destilované vody (19 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (572 mg) ve vodní lázni (30 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (132 mg), směs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody 3% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (I R.5S.6S)-2-[ 1 30 (4-karboxyl-1.3-thiazol-2-yljpiperidin 4 yl]thio-6-[(R)-l -hydroxyethyl]-1 -inethy Ikarbapen2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sul (285 mg, výtěžek 76%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO, TSP): δ (ppm) 7,22 (111, s), 4,30 až 4,10 (2H, m). 4,00 až 3,78 (211, m), 3,60 až 3.05 (5H. m), 2,15 až 2.00 (2H, ni). ESO až 1,55 (2H. m). 1.26 (311, d. J - 6,4 Hz). 1,18 (311. d. J 7,2 Hz).

IR (KBr): 1747, 1597. 1532, 1397, 1289 cm '

Příklad 14 (1 R.5S.6S)-2-[ l-(4-Karbamoyl-1.3 -lbiazol-2-yl)piperidin- 4- ylJthio—6—[(R)— 1 -hydroxyethyl]— 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sul

HO

N ..

// ,, \ JJ

SCONH-,

COO*Na⁺ (1) p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-[ 1-(4-karbaním I 1,3—thiazol—2—yljpiperidin—4—yljthio -6[(R)— 1 -hydroxyethyl ]-] -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

C7. 300137 B6

Do roztoku 4-aeetylthio— 1 -(4 karbamoyl 4,3-thiazo!-2-yl)piperidinu (400 mg. 1.40 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 15) v dimethylformamidu (20 ml) byl přidán hydrazinacetát (142 mg, 1,54 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl (lR,5S,6$)-2d ifeny lfosforyloxy-6-[(R)_l-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy látu (1.25 mg. 2.10 mmol) v acetonitrilu (37 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním d i isopropy lethylam inu (0.61 ml, 3.50 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena. promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na si 1 ikagelove koloně za použití ethylacetát a ethylacetát: methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-[ l-(4-karbamoyl-l .3-thiazol-2-yl)piperidin-4-yl]thio-6-[(R)-lhydroxyethylj-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylatu jako světic žluté pevné látky (348 mg. výtěžek 42%).

'H-NMR (400 MHz, CDCl·,): ó (ppm) 8,22 (2H, d, J = 8.6 Hz). 7,66 (2H. d, J = 8,6 Hz), 7,44 (1H, s), 6.99 (1Π. br s), 5,56(1 H. br s), 5,51 (IH, d, J = 13,8 Hz), 5,24 (1H, d, J = 13.8 1 Iz), 4,35 až 4.20 (2H. m obsahující dd na 4,28, J = 9,7. 2,9 Hz), 4.04 až .3,85 (3H. m), 3,50 až .3,10 (6H. m), 2,20 až 2,00 (211. m), 1.95 až 1,70 (3H.m), 1,39 (3H, d. J = 6,3 Hz). 1,31 (3H, d. J = 7,3 Hz). Hmotnostní spektrum (EAB ): 587 [M+H] (2) (1 R.5S,6S)—2—[ 1 —(4—Karbamoyl— 1.3- thiazol—2—yl)piperidin-M—yljthio 6 -[(R)-1 -hydroxyethyl]-! -methylkarbapen-2-em 3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)piperidin-4-YlJthio-6 [(R)— t hydroxyethyl]-1-methy lkarbapen-2 em-3-karboxylát (493 mg. 0.839 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 14(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody (15 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (0.50 g) ve vodní lázni (30 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (71 mg), směs ethy lacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 3% acetonitrilu a destilované vody - 5% aeetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (IFC5S.6S)—2—[I —(4—karbamoyl— 1,3-thiazol-2—yDpiperidin—4—yljthio—6 [(R.)-1 -hydroxyethyl]1-methy lkarbapen- 2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (127 mg. výtěžek 32%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D_?O, TSP): δ (ppm) 7.70 (IH. s), 4,50 až 4.35 (211. m obsahující dd na 4,18, .1 = 9,2, 2.8 Hz). 4.00 až 3,80 (2H, m), 3.50 až 3,10 (5H. m). 2.15 až 1.95 (2H. m). 1.75 až 1.55 (2H, m). 1,26 (3H. d. J = 6.5 1 Iz), 1.19 (3H. d.J = 9.0 Hz).

IR (KBr): 1749, 1667. 1594, 1547, 1386 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB ): 475 [M+H]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C,.,II>₄O_sN₄S>Na : 475,1086, Nalezena: 475.1070 [M+H]'

Příklad 15 (1 R,5S,6S) —2—[ 1 - (4-N-Methylkarbamoyl 1.3-thiazol-2-yl)piperidinM-yl]thio-6-[(R)-1hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

-112CZ 300137 B6

HO

COONa⁺

CONHMe (1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,óS)-2-[l (4 N-methylkarbamoyl-l ,3-thiazol 2-yjpiperidín-4yl]thio—6- L(R)-1 -hydroxyethyl]-!-met hylkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku 4-acely Ithio-l-(4-N-methy lkarbamoyl- 1,3 thiazol·-2-y Dpiperidinu (1.21 g. 4.04 mmol) s (získaného podle popisu v referenčním příkladu 16) v dimethylformamidu (36 ml) byl přidán hydrazinacetát (408 mg, 4.43 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(1 R.5S.6S) čití i fenyl fos fóry loxy-ó-[(R)-l-hydro xyethylj-1-methy Ikarbapen-2-cm-3-karboxy látu (3,12 g,

5.25 mmol) v acetonitrilu (72 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusilo kovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1.76 ml, 10,1 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylaeetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogen15 uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylaeetát : methanolu (20 : 1) jako eluentu za vzniku p nitrobenzyH 1 R.5S,6S)-2-[ l-(4-N-methyIkarbamoyl-1,3—thiazol -2-y I )piperidin^4—yl |thio—6—l(R)— 1-hydroxyetliyl]-1-methyIkarbapen 2 em-3-karboxylátu jako světle žluté pevné látky (1.336 g.

2i) výtěžek 55%), 'H-NMR (400 MHz. CDCI,): δ (ppm) 8,21 (211, d, J = 8,0 Hz). 7.64 (2H. d, J - 8.0 Hz), 7,40 (1I I, s), 7,19 (111. br s), 5,50 (1H, d. J = 12.8 Hz). 5,22 (IH. d, .1 - 12,8 Hz), 4.40 až 4,20 (211, m), 4,00 až 3,80 (2H, m), 3,50 až 3,10 (5H. m), 2,95 (311. d, J ^- 6,4 Hz), 2,15 až 1.90 (3H, m), 1,90 až 1,70 (211, m). 1,39 (3H. d, J = 6,4 Hz). 1,20 (3H, d, J - 9,6 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB’): 602 [M+H] (2) (1 R.5S,6S)-2-[H4-N-Methylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)piperidm-4 yl]thio—6—[(R)— l — hydroxyethyl]· 1 -methyIkarbapen 2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-NitrobenzyK l R,5S,6S)-2-( l-(4-N-methylkarbamoyl-l ,3—thiazol—2—y!)piperidin—4 yl]lhio— so 6—f(R)—l—hydroxyethyl]—1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylál (857 mg, 1,424 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 15(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (40 ml) a destilované vody (20 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (853 mg) ve vodní lázni (30 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (120 mg), směs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a desti35 lovanč vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 3% acetonitrilu a destilované vody - 5% acetonitrilu; destilované vody - 7% acetonitrilu; destilované vody - 9% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byi lyofylízován za vzniku požadované sloučeniny (1R, 5 S,6S)-2-[l-(4-N-mcthyl karbamoyl-l ,3-thiazol-2-yl)piperidinM-yl]thio-6-[{R)- 1 hydroxyethyl|“1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (317 mg, výtěžek 46%) jako bílé pevné látky.

^!1I-NMR (400 MHz, DO, 1SP): δ (ppm) 7.34 (IH, s), 4,25 až 4,10 (2H, m obsahující dd na

4.16. J = 9.2. 2.2 Hz), 3.95 až 3.80 (2H,rn), 3,50 až 3,10 (511, m), 2,84 (311, s), 2,15 až 1,95 (2H, m). 1,75 až 1,50 (2H.m), 1,24 (311. d, J - 6,3 Hz). 1,17 (3H. dj - 7.3 Hz).

- 113 Cl 300137 B6

IR (KBr): 1750, 1654. 1602. 1553, 1385. 1266 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB’): 489 [M+Hf

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CNJKCkNiS.Na : 489,1242, Nalezena: 489.1255 [M+Hf

Příklad 16 (1 R,5S,6S)-2 [ 1-(4-N ,N-D i methy lkarbamoy 1-1,3-thiazol-2-yl)piperidin-4-yl]thio-6-[(R)-lI» hydroxyethy lJ— l -methyIkarbapen -2-cm-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

HO

coow (1) p-Nitrobenzyl (1 R,5S,6S)-2-[l-(4-N,N-dimethylkarbamoyl-F3-thiazol-2-yl)piperidin4 yIJthio—6—f(R')— 1 — hydroxyethyl]—1 melhylkarbapen-2-em-3-karboxyíát tš Do roztoku 4—acetyIthio—l —(4—N,N—dimethylkarbamoyl—1,3—thiazol—2—yl)piperidinu (620 mg. 1,98 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 17) v dimethylformamidu (35 ml) byl přidán hy drazí nacctát (201 mg. 2.18 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl(lR,5S.6S)-2 difenyi fosfory loxy-6-|(R)-]-hydroxyethy 1]-1-methy lkarbapen-2-em 3 karb2o oxy látu (2.35 g, 3,96 mmol) v acetonitrilu (65 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,40 ml. 8.04 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylaeetátová

2? vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát: methanolu (10 ; 1) jako eluentu za vzniku p-n itrobenzy l-( 1 R,5S,6S)-2-[l -(4-N, N-dimethy lkarbamoy l-l. 3-thiazol-230 yI)piperidin t-yljthio 6—[(R)—1 —hydroxyethyIJ—1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxvlátu jako světle žluté pevné látky (495 mg. výtěžek 41%).

'H-NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 8,22 (2H, d. J = 8,7 Hz). 7.66 (2H. d. J - 8,7 Hz), 7,09 (IH, s). 5.51 (1H, d, J = 13.8 Hz), 5,23 (1H, d, J = 13,8 Hz), 4.35 až 4,20 (2H. tn), 4,00 až 3,85 (2H, nt), 3,50 až 3.00 (12H, m obsahující 3H x2, každý br s na 3,22 a 3,07), 2,20 až 1.95 (2H, m),

1,93 až 1,70 (3H,m), 1,38 (3H. d.J = 6,2 Hz), 1,31 (3H, dj = 7.3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB):616[MMIf (2) (1 R.5S.6S) 2 [l-(4-N.N-Dimethylkarbamoy!-l,3-thiazol-2-yl)piperidinM-y!]th!O-6[(R) 1 —hydroxyethylj—1 -methyIkarbapen 2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-N itrobenzy 1- (1 R,5S,6S)-2-[ l —(4—N,N—dimethy lkarbamoy I— 1,3—thiazol—2—yl )piperidin—4—yljthio- 6—[(R)—l—hydroxyethy!]—1—methylkarbapen—2—cm—3—karboxykít (487 mg. 0,791 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 16(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (22 ml) a destilované vody (11 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (485 mg) ve vodní lázni (30 °C) 1.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do

-114C7. 300137 B6 filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (67 mg), směs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 5% acetonitrilu; destilované vody - 7% acetonitrilu; destilované vody - 9% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (IR,5S.6S)—2—[1 -(4-N.N-dimethylkarbamoy 1-1.3- thiazol 2—ylJpiperidin 4 yl |thio €> [(R)-l-hydroxyethyl] I-methyIkarbapen 2 em3-karboxylová kyselina, sodná sůl (183 mg, výtěžek 46%) jako bílé pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz, DO, TSP): δ (ppm) 7,00 (1 ll, s), 4,30 až 4.10 (211, ni obsahující dd na io 4,17 ,J - 9.0, 2.3 Hz), 3,95 až 3,75 (2H, m), 3,50 až 3,10 (5H, m). 3,07 (3H, s), 3,00 (311. s), 2.15 až 1.95 (2H, m), 1.80 až 1.50 (2H, m), 1,25 (3H.d. J = 6.3 Hz). 1.18 (3H, d. J - 7,2 Hz).

IR (KBr): 1750, 1612. 1538, 1395 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): 503 [M+H]'

Příklad 17 (1 R.5S.6S)-2-|(3S)-I-(4 Karbamoyl-],3-thiazol-2-yl)pyrrolidin 3-yl]thio-6-[(R) 1 hydroxyethyl]-! methy lkarbapen-2-em -3-karboxylová kyselina.

sodná sul

,CONH_? (1) p-Nitrobenzyi-(l R,5S,6S) 2-[(3S)-l-(4-karbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-3-yl]th io-6-[( R)-1-hydroxyelhy I ]-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku (3 S)- 3-acety Ith io I —(4—karbamoy I—1.3-th iazol—2—yljpynOl id i nu (210 mg, 0.721 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18) v dirnethylformamidu (10 ml) byl přidán hydrazinaeetát (80 mg, 0,865 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(lR.5S.6S)-2difeny I fosfory loxy-6-[( R)-1 hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3 karboxylátu (429 mg. 0,721 mmol) v acetonitrilu (20 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním díisopropylethylaminu (0,502 ml. 2,88 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyla 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogen55 uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu - 10% methanolu a methylenchloridu jako eluentu za vzniku p nitrobcnzyl-(lR,5S.6S) 2-[(3S)-l-(4-karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin—3—yljthio—6—f(R)—l—hydroxyethylJ— l —methyIkarbapen 2-ern-3-karboxylatu jako světle žlu40 té pevné látky (412 mg, výtěžek 100%).

‘ll-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8,22 (2H. d, J - 8,8 Hz), 7,65 (2H. d. J = 8.8 Hz). 7.40 (1H, s). 7,03 (lil, br s). 5,50 (1II, d, J = 13.6 Hz). 5,48 (1H, br s), 5,22 (1H, d, .1 = 13.6 Hz). 4,36 až 4,25 (2H. m obsahující dd na 4,32. J = 9,5, 2,2 Hz), 3,71 až 3,60 (IH. m), 3.60 až 3,49 (211.

m), 3.40 (IH, dq, J = 9,5, 7,3 Hz), 3,30 (1H. dd. .1 - 6.6, 2,2 Hz). 2,60 až 2,45 (1H, m), 2,40 až

2.05 (1H. m). 1,77(111. d, J - 4,4 Hz), 1,39 (3Π, d, J = 6,6 Hz), 1.31 (311. d. J - 7.3 I iz).

-115CZ 300137 Bó

Hmotnostní spektrum (FAB*): 574 [M+H] (2) (U<.5S.6S)-2-](5SHA4 Karbamo>l1 J-thiazol 2 yl)pyrrolidin-3-yl]thio-6-[(R)-1hydroxyethyl]-! - methylkarbapen~2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p N ítrobenxy l < 1 K.5 S,6S ) 2 [(3 S > 1 —{4-karbamoy 1— 1,3—t ti iaxol—2 y I jpyrrol id i n > v 1 jt h io 6 [(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (410 mg, 0,715 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 17(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (15 ml) a destilované vody (15 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (410 mg) při teplotě místio nosti 1,7 hodiny. Po zkontrolování doběhnuti reakce byla reakční smés filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (60 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku, Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 3% acetonitrilu; a destilované vody 6% acetonitrilu; destilované vody - 9% acetonitrilu; destilované vody - 12% aceton i15 trilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S.6S)-2-[(3S)-1-(4-karbamoyl-1.3 thiazol-2-yl)pyrrolidin 3 yl]thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (150 mg, výlěžek 46%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO, TSP): ó (ppm) 7,41 (IH. s), 4,35 až 4,20 (2H. m), 4,05 (IH, kvintet.

2() J - 5.2 Hz). 3.90 (1H. dd, J - 10,8, 5,9 Hz), 3,75 až 3,65 (ΗI. m). 3,60 až 3.40 (411, m). 2.60 až 2,45 (1H. m), 2.20 až 2,15 (IH. m), 1,31 (3H,d,J -6,4 Hz). 1,25 (3H,d. .1 - 8,9 Hz).

IR (KBr): 1749, 1669, 1599, 1557. 1391, 1289 cm’¹

Hmotnostní spektrum (FAB ); 461 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ); počítána CMFiOsNiS^Na : 461,0929,

2? Nalezena: 461.0926 [M+H]

Příklad 18 so (1R, 5 S,6S)-2-[(3S)-l-(4-K yano-1.3--thiazol-2-yl)py rro lidi n-3-yl]lh io-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1-methylkarbapen 2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

HO

(1) p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S.6S)-2-[(3S)-1 (4 kyano-1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidm-3-yl]thio -6[(R F-1 -hyd roxvethy 1J-1 -methy 1 karbapen-2-em-3-kar boxy lát

Do roztoku (3S)-3-acetylthio l-(4-kyano-l,3-thiazol-2-yl)pyrrolidinu (137 mg, 0,541 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 19) v dimethylformamidu (7 ml) byl přidán hydrazinacetát (60 mg. 0,649 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-iiitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2K) d ifeny i fosfory loxy-6-[(R)-I-hydroxyethyl] l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (322 mg,

0,541 mmol) v acetonitrilu (16 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,376 ml. 2.16 mmol). Směs byla míchána 2 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla

- 116CZ 300137 B6 oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 3) a ethylacetátu jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-(I R,5S.6S)-2- [(3S® 1 -(4 kyano-l.3—thiazol—2—yl)pyrrolidin-3 yl]thio-6-[(R)1-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxy látu jako světle žluté pevné látky (251 mg. výtěžek 84%).

'H-NMR (400 MHz, CDCl·,): δ (ppm) 8,22 (2H. d. J = 8,8 Hz), 7,65 (2H, d. J = 8,8 Hz), 7.21 (IH, s), 5,50(111, d. J = 13,6 Hz), 5,22 (IH, d, .1 = 13.9 Hz), 4.35 až 4,24 (2H. m). 5.90 (211, m), m 3,74 až 3,45 (3H. m), 3,38 (1 H, dq, J - 9.4, 4,7 Hz). 3.30 (IH, dd, J = 7,3, 2,9 Hz), 2,60 až 2,48 (lH,m), 2,24 až 2.10 (111. m), 1,62 až 1,50 (IH, br s), 1.38 (3H. d. J = 5.9 Hz). 1.31 (311. d.

.1 = 7.3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 556 [M 111j (2) (1R, 5 S,óS )-2-((3 S )-1-( 4-Kyano-1,3—th iazo 1-2 -yl)pyrrolidin 3 yT]thio—6—[(R)—l — hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sul p- Nitrohen/yl (1 R,5S.6S)-2-[(3S)—1 -(4-kyano-1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-3-yl]thio-6-|(R)1 -hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (250 mg, 0,450 mmol) (získaný podle zo popisu v příkladu 18(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (12 ml) a destilované vody (12 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (250 mg) při teplotě místnosti hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (38 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chro25 matografeky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 3% acetonitrilu; a destilované vody - 6% acetonitrilu; destilované vody - 9% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu; destilované vody - 15% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofyIizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S.6S)-2-[(3S)-1-(4 kyano—®3—th iazoi—2—yl)pyrrol idin—3— yl [th i o—6—l(R)— Ϊ-hydroxyethyl] I-met hylkarbapen-2-em-3-kar boxy lová kyselina, sodná sůl (128 mg, výtěžek 64%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. DO): 8 (ppm) 7,56 (IH. s). 4.32 až 4.22 (2H. m). 4.10 až 4.00 (IH. m), 3.88 (IH. dd. J = 10.8, 5.9 I Iz). 3.74 až 3.62 (IH, m). 3.62 až 3.53 (IH, m), 3.52 až 3.38 (3H. m). 2,60 až 2,48 (1H. m). 2.19 až 2,08 (IH, ni), 1,31 (31-1, d, J = 6,4 liz). 1,24 (3H, d.J = 7,3 Hz).

IR (KBr): 2229, 1751. 1604. 1560. 1391. 1310 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): 443 [Μ 111]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB'): počítána C|8H2o04N₄S2Na : 443,0824, Nalezena: 443,0799 [M+H]

Příklad 19 (1 R,5S.6S)-2-[(3R)-i-(4- Karbamoyl-1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-3- yljthio- 6- [(!<)—I hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

-117C'Z 300137 B6 (1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S>-2-[(3R)-H⁴-karbamoyl--l3-thiazol-2-yl)pyrrolíclin-3-y'l]thio—6—[(R)— 1 -hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku (3R)—3—acetylthío—1 —(4—karbamoyl—1,3—thiazol—2—yl )pyrrol idinu (500 mg,

1,84 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20) v dimethylformamidu (25 ml) byl přidán hydrazinacetát (204 mg. 2,21 mmol) pří teplotě místností pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobcnzyl(1 R,5S,6S) 2 di fenyl fosfory loxy—6—| (R>—1 -hydroxyethyl] 1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxylátu {i,09 g, 1,84 mmol) v acetonitrilu (55 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové io lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,28 ml, 7.36 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolováni doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělící nálevce a ethyl acetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztoiš kem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromalografieky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu - 9% methanolu a methylenchloridu jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S) 2 [(3 R)-1-(4-karbamov 1-1,3-th iazo l-2-yl)pyrrol idin-3-yljthio- 6- [(R)-1 hydroxyethyl]-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxylálu jako

2o světle žluté pevné látky (917 mg. výtěžek 87%).

'H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8.22 (211, d, J 8,2 Hz). 7,66 (2H, d, J - 8,2 Hz), 7.40 (III. s), 7.05(111. brs), 5,55 (IH, brs), 5,51 (1H. d, J - 14,1 Hz), 5,24(111, d, J - 14,1 Hz), 4,35 až 4,25 (2H. m), 4,05 až 3.90 (2H, m). 3,70 až 3.60 (IH. m). 3.60 až 3.40 (4H, m), 3.31 (IH, dd, J= 6.9. 2,9 Hz). 2,60 až 2.40 (lH.m). 2.20 až 2,05 (1H, m), 1,95 (IH, br s), 1,39 (3H, d.

2> J -5,9 Hz), 1.33 (3H. d, J = 6.8 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB‘):574[M+HT (2) (1 R.5S,6S)—2—[(3R)- -1 -(4—Karbamoyl— 1,3—thiazol—2—yl ipyrrolidin—3—yljthio 6 [(R) 1hydroxyethyI]— 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl ρ Nilrobenzyl—(1 R,5S.6S>—2—f(3R)— 1 —(4—karbamoyl— K3—thiazol—2--yI)pyrrolidin—3—yl]tliio—6— [(R>—1 -hydroxyethyl]-]-metliyIkarbapen 2 em-3-karboxylát (917 mg. 1,60 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 19(1)) ve smčsi tetrahydrofuranu (45 ml) a destilované vody (45 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (917 mg) při teplotě míst55 nosti 1.7 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (134 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 2% acetonitrilu; a destilované vody - 4% acetonitrilu; destilované vody - 6% acetonitrilu; destilované vody - 8% acetonitrilu; destilované vody - 10% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu; destilované vody - 14% acetonitrilu; destilované vody - 16% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofylizován za vzniku požadované sloučeniny (IR.5S.6S)-2 [(3R) 1 (4karbamoy 1-1,3-thiazol 2 yl)pyrrolidin-3-vl]thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1-metliyIkarbapen2-em-3-kar boxy lová kyselina, sodná sůl (388 mg, výtěžek 46%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D,O. TSP): δ (ppm) 7.41 (lil, s), 4.35 až 4.20 (211, m). 4,10 až 4,00 (111. m). 3,89 (lll.dd.J = 11.2, 6.7 Hz), 3.70 až 3.60 (1H. m). 3.58 až 3.40 (4H. ni), 2,60 až 2.45 (lH.m). 2,20 až 2.10 (1H. m), 1,31 (3H, d. .1 = 6,3 liz). 1,25 (3H, d. .1 - 7,3 Hz).

IR (KBr): 1748, 1608. 1597. 1559. 1391. 1289 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): 461 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CMKOsN.jS^Na : 461,0929,

Nalezena: 461,0938 [M+H]

-118CZ 300137 B6

Příklad 20 (1 R,$S,6S)-2-| l-(4-Hydroxymcthyl-l ,3—thiazol—2—vl)azctidin—3—yljthio—6-[( R)— l —hydroxy-

? (1) p-Nitrobenzy l-( 1 R.5S.6S)—2-[(3S)— 1 —(4-terč-butyIdimethylsilyíoxyniethy 1-1,3-thiazo!

2-yjazetidín-3-yljthio-6-f(R>-1 -hydroxyethyl] -1-methy lkarbapen-2-em 3 karboxylát

Do roztoku 3 —acetylthio—1 —(4—/erc—butyldimelhylsilyloxymethyl-1„3—thiazol-2—yl)azetidinu (415 mg, 1.16 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 12) v dimethylformamidu (20,8 ml) byl přidán hydrazinacetát (137,0 mg, 1,39 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou io atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p -nitrobenzy l-{ 1 R,5S,6$)-2- d i feny 1 fosfory loxy-6-[( R)-1 -hydroxyethyl |-1 -methy Ikarbapen2- em-3-karboxylátu (690 mg, 1.16 mmol) v acetonitrilu (34,4 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethy laminu (1.34 ml. 7.69 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu iš místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku pnitrobenzyljl R,5S,6S)-2-[ l-(4-/erc-buty Idímethy Isily loxymcthyl-l ,3-thiazo!-2-yl)azetidin3— yljthio—6—f(R)—l—hydroxyethyl]—1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu jako světle žlutého sirupu (719 mg, výtěžek 94%).

'H-NMR (400 MHz, CDClj; δ (ppm) 8,22 (211. d, J = 8.3 Hz). 7,66 (2H, d. .1 - 8.8 Hz), 6.48 (111. s), 5.50 (1H, d, J = 13,9 1 Iz), 5.25 (1H. d. ,1 = 13,9 Hz), 4,66 (21 i, dd ,J = 15.4. 8.1 Hz), 4.32 až 4,20 (3H. m), 4,08 až 4,00 (2H. m). 3,28(111, dd, J= 6.6, 2,2 Hz). 3.21 (111, d. dq. J = 9,1. 7,3 Hz). 1,95 (IH, brs), 1,37 (311, d, .1 = 5,9 Hz). 1.26 (311. d, J - 7,3 Hz). 0,94 (9H. s), 0,10 (6H,s).

3o (2) p--Nitrobenzyl—( 1 R,5S,6S)—2—L1 —(4—hydroxymethyl— l,3—thiazol—2-yI)azetidin—3—yljthio— 6--[(R)— 1 -hydroxyethy l]-l -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(l R.5S.6S) 2 [ 1 -(4-/ez^‘-butyldimethylsilyloxymethyl-f3-thiazol2- yljazetidin-3 yljthio—6—f(R>— 1 —hydroxyethyl]-1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylálu (719 mg. 1,09 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 20(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (36 ml) byla následně přidána kyselina octová (0,19 ml. 3.3 mmol) a roztok tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (3,3 ml, 3,3 mmol) v ledové lázni. Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethyIacelát a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný a vodná vrstva byla důkladně extrahována to ethylacetátem. Organické vrstvy byly promyty nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušeny přes bezvodý síran hořečnatý, filtrovány a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (15: 1) jako eluentu za vzniku požadované sloučeniny p-nitrobenzy!-( 1 R,5S,óS}-2-[l-(4hydroxymethyl- 1,3 thiazol-2-yl)azetidin 3 yljtliio-6-[(Rf-1 hydroxyethyl] 1-methy 14? karbapen 2 em-3-karboxylátu (426,2 mg, výtěžek 72%) jako žlutého sirupu.

-119CZ 300137 B6 ^lH NMR (400 MHz, CDCI/; δ (ppm) 8.20 <2H. d, J= 8,1 Hz). 7.66 (211. d. J = 8,1 Hz). 6.50 (IH. s). 5.54 (IH. d, J = 13,6 Hz), 5,27 (IH. d, J - 13.6 Hz), 4.56 (IH, d, J = 13.6 Hz). 4.53 (Hl. d. J- 13,6 Hz), 4,47 (IH, t. J- 8,5 Hz), 4.41 (IH, t, J= 8,5 Hz), 4.32 (IH. kvintet, = 6,4 Hz), 4.28 až 4,20 (2H, m), 4.08 (1H, dd, J = 8,5, 5,4 Hz). 3,88(1 H. dd, J = 5,4. 8.5 Hz).

? 3,304 (IH, dd, 6,2, 2,7 Hz), 3,204 (IH, dq, J - 9.2, 7,3 Hz), 1.35 (3H. d, J - 6.2 liz). 1,25 (3H.d.

J = 7,3 Hz).

(3) (1R,5S,6SM2-[1J4-Hydroxymethyl-1.3 thiazol-2-y l)azet idin-3-y l]thio-6-[(R)-lhydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl κι p-Nitrobenzyl-(] R,5S,6S)-2- [ 1 —(4—hy droxy methy I- l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio- 6 [(R)-1 -hydroxyethyl]—1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (426.2 mg. 0,78 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 20(2)) ve směsi tetrahydrofuranu (20 ml) a destilované vody (10 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (530 mg) při teplotě místnosti 1.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl při15 dán hydrogenuhličitan sodný (65,5 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 3% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofi lizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S) 2--[l—(4— hydroxymethylu 1,3—thiazol—2—y Dazetidin—3—y! |thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl] 1 methy Ikarba2(i pen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (156 mg. výtěžek 46%) jako bíle pevné látky.

'H NMR (400 MHz. D₃O): δ (ppm) 6,50 (Hl. s). 4.36 až 4.28 (411, m), 4,19 až 4.10 (111, m),

4,10 až 3.98 (2H. m obsahující ΙΙΪ. dd na 4,01, J = 8,0. 3.0 Hz), 3.88 až 3,68 (2Π. m), 3,24 (IH. dd.J =-6,6, 2,9 Hz). 3,12 až 3,00 (1H, m), 1,11 (3H,d,J = 5.9 Hz). t,()0(3H.dJ - 7,3 Hz). IR(KBr): 3357, 1748. 1600, 1528, 1470, 1396, 1311 cm ^]

Hmotnostní spektrum (PAB ): 434 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB/: počítána CMHjiChNiS/sla : 434,0820, Nalezena; 434,0796 [MHIJ

Příklad 21 (1 R.5S.6S) 2 [ l-(4-N-McthyIkarbamoy! l,3-oxazol-2-yl)azetidin 3-y!|thio-ó-[(R)-l hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karbo.xylová kyselina, sodná sůl

CONHMe (I) p-Nitrobenzyl (1 R.5S,6S)-2-[ 1~{4-N-Methy Ikarbamoy 1-1,3-oxazol 2-vI)azetidin-3-yl]thio—6—[(R) -1-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxv lát

Do roztoku 3-acetylthio l-(4-N-mcthylkarbamoyl-1,3 oxazol-2-y!)azetidinu (142 mg,

0,56 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21) v dimethylformamidu (7 ml) byl přidán hydrazinaeetát (62 mg, 0,67 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-{ 1 R,5S,6S) 2 di fenyl fosfory loxy-6-[(R)-l hydroxyethyl J-l-methy lkarbapcn-2-em-3-karboxy látu

4i) (333 mg, 0,56 mmol) v acetonitrilu (7 ml) přidán po kapkách k výsledně směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropy lethy laminu (0,39 ml, 2,24 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do

- 120CZ 300137 Bó reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylaeetátová vrstva byla oddělena. promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na > silíkagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-[ 1-44-N-methylkarbamoyl-l ,3-oxazol- 2 yl)azctidin—3—y 1 ]thio—6—L(R>—

1- hydroxyethy!]-1 melhylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (274 mg. výtěžek 88%) jako světle žluté pevné látky, 'll-NMR (400 MHz, CDClj: δ (ppm) 8.23 (2H, d, 8,8 Hz), 7,77 (IH. s), 7,66 (2H. d, io J -8,8 Hz), 6.78 (IH, brs), 5,51 (IH. d, J = 13,9 Hz). 5.25 (IH, d. J = 13,2 Hz). 4,51 (2H, q.

J = 8,1 Hz). 4,30 až 4,21 (3H, rn), 4,08 (2H, dd. J = 5,9, 8,1 Hz), 3,30 (IH, dd, J = 2.9. 7.3 Hz), 3,24 až 3,16 (1II, m), 2,94 (3H,d,J-5,1 Hz), 1,38 (3H, d ,J = 5,9 Hz), 1,26 (3H, d, J “ 7.4 Hz), (2) (1 R,5S,6S)—2—11 —(4—N—MethyJkarbamoyI— 1,3—oxazol—2—yl)azetidin--3—yljthio—6—f(R)—1 — hydroxyethylJ-l-methylkarbapcn-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sul p-Nitrobenzyl-{ 1 R.5S,6S)-2-[t-(4-N-methyl karbamoyl-!,3-oxaz.ol-2-yl)azetidin~ 3 yl]thio—

-[(R)-l-hydroxyethylJ-l-methylkarbapen-2^cm-3-karboxylát (344 mg, 0,62 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 21(1)) vc směsi tetrahydrofuranu (17 ml) a destilované vody (9 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (344 mg) ve vodní lázni (30 °C)

2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (52 mg), směs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Smčs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1), oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 5% acetonitrilu jako eluentu. Eluát byl lyoflli25 zován za vzniku požadované sloučeniny (I R,5S,6S)—2—[ 1 —(.4—N methylkarbamoy 1-1.3-oxazol2— yljazetidin -3 yl]thio—6—f(R)— 1 —hydroxyethylj— 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sul (166 mg, výtěžek 60%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 Mllz. DO): 6 (ppm) 7.73 (IH. s). 4.44 (211. t. J - 8.1 Hz), 4.20 až 4.13 (III. m),

4.10 (III. t. J - 6,6 Hz). 4,05 (IH, d, .1 = 0,5 liz). 3,04 (2H, kvinl., J = 4.4 liz). 3.28 (IH, dd,

J = 2.2. 5,0 Hz), 3,00(111. kvint.. J = 7.3 Hz). 2.73 (311. s). 1,15 (3H. d. J = 6.6 Hz). 1.04(311, d, J = 7.3 Hz).

IR (KBr): 3415, 1750, 1625. 1531, 1338 cm ¹

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (EAB): počítána CixH_??O₍,N₄SNa : 445,1157, Nalezena: 445,1162 (M+íIJ'

Příklad 22 (I R,5S,6S)-2-[ 1 -(4-Karbamovl-l .3-o.\azol-2-yl)azetidin-3-y]]thio-ó-[(R)-l -hydroxyethy I]1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl

HO

COO’Na⁺ (I) p-Nitrobenzyl-(lR.5S.6S)-2-[] (4 karbamoyl-1,3-oxazol 2 yljazetidin 3 yljthio 6 [ (R)— 1 —hydroxyethylj— 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetylthio-l-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl jazet id inu (275 mg, 1,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 22) v dimethylformamidu (14 ml) byl přidán hydrazinacctát (i26 mg, 1,37 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla

- 121 CZ 300137 B6 míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(lR,5S.6S)-2difenylfosforyloxv-6-[(R)-l-liydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátii (677 mg,

1.14 mmol) v acetonitrilu (14 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylarninu (0,79 ml, 4,56 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacctát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného by l přidán do reakční směsi. Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena. promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na io silikagelové koloně za použití toluenu : acetonitrilu : methanolu (10 : 10 : 1) jako eluentu za vzniku p - nitrobenzyl-( I R.5S,6S)-2-[l-(4-karbamoyl-l,3-oxa7.ol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6-[(R}1-hydroxyethyl]-l-methylkarbapcn-2-em-3_karboxylátu (313 mg. výtěžek 51%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CD₃OD): 6 (ppm) 8,08 (2H, d, J - 8,8 Hz), 7,77 (IH, s). 7.55 (2H, d. 15 J = 8,8 Hz). 5,32 (III, d, J = 13,9 Hz), 5.14 (1H. d, .1 = 13,9 Hz). 4.43 (2H, t, J = 8,8 I Iz). 4,28 až

.1 = 4,4. 9,5 Hz), 3,23 až 3.18 (2H, m), 1,18 (3H, d. .1 = 5.9 Hz), 1,09 (3H.d, J - 7.3 Hz).

zo (2) (IR.5S.6S)-2-1 l-(4-Karbamoyl-1,3 oxazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6 [(R)-l-hvdroxyethyl]-l-methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( lR,5S,6S)-2-[!-(4-karbamoyl-l.3 oxazol-2-yl)azetidin-3-ylJthio-6- [(R) l hydroxyethyl]-1-methylkarbapen 2 em-3-karboxylátu (313 mg. 0,582 mmol) (získaného podle popisu v příkladu 22( l)) ve směsi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilované vody (8 ml) byl kataly25 ticky hydrogen ován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (313 mg) ve vodní lázni (30 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (49 mg), směs ethyíacetátu a tetrahydrofuranu (l: l) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla promyta směsí ethyíacetátu a tetrahydrofuranu (l:l), oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky so na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 5% acetonitrilu jako eluentu. f luát by l lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (l R.5S.6S)-2 [l -(4-karbatnoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidin-3-yljthio-6-[(R)-1-hydroxyethyl] l -methy!karbapen-2-em-3-karboxylová kyselina.

sodná sůl (l 10 mg, výtěžek 44%) jako bílé pevné látky.

'II-NMR (400 MHz, D₂O): δ (ppm) 7,79 (lH. s), 4,46 (2H. t, J = 8.I Hz), 4,20 až 4,16 (!li. m),

4.10 (l H, t, J = 5,9 I Iz). 4.06 (111, dd. J = 2.9, 9,5 Hz), 3,95 (2H, kvint., .1 = 4,4 1 Iz), 3,28 (1H, dd,

J = 2,9, 5.9 Hz). 3,12 až3,08 (IH. m), 1, 15 (3H. d, .1 = 6,6 I Iz). 1.05 (3H, d.J = 7,3 Hz).

IR (KBr): 3360. 1749, 1671, 1625, 1384. 1275 cm '

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána : 431.0992, Nalezena: 431,1008 [M+H]'

Příklad 23 (1 R,5S.6S)-2-[l-(4-Kyano-1.3-oxazol- 2 yl)azelidin-3-yl]thio-6-[(R)— 1 -hydroxyethyl]-1 methylkarbapen-2 em-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl

HO

.

(1) p Jilroben/.\] (! R.5S,6Sh2-i 1- (4 kyano 1.3 oxazol 2 yl)a/etidin 3 \ljthio 6-[(R)-l hydroxyethyl]—1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku 3-acetylthio-l-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidinu (156 mg. 0,70 mmol) (získané5 ho podle popisu v referenčním příkladu 23) v dimethylformamidu (8 ml) byl přidán hydrazinacetát (77 mg, 0.84 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce hyl roztok p-nitrobenzyf (I R.5S.6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-l hydroxyethyl]-1-methy lkarbapen-2--em-3 -karboxylatu (316 mg. 0,70 mmol) v acetonitrilu (8 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosféio rou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,49 ml, 2,80 mmol). Smčs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku p nilrobenzylýlR,5S,6S)-2-[l-(4-kyano-l,3oxazol-2-yl)azetidin 3 yl]thio-6-[(R)-l -hydroxyethyl J-l -methy lkarbapen 2 em-3-karboxylátu (309 mg, výtěžek 84%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8,22 (211, d, J= 8,8 Hz). 7,74 (IH, s). 7,66 (211, d,

J - 8.8 I Iz), 5,51 (1H. d, J = 13,9 Hz). 5.25 (1H, d, J - I3,2 Hz), 4,56 (2Π. q, J ~ 8,1 Hz). 4,29 až 4,22 (3H, m). 4,15 až 4,10 (2H, m). 3,30 (1H, dd,.) = 2,9, 7,3 1 Iz), 3.19 (1H, dt. J = 7.3, 9.5 Hz), 1.37 (311. d, J - 6.6 1 iz), 1.26 (3H, d, J = 7,3 Hz).

(2) (1 R,5S,6S>-2-[ l-(4-Kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidin- 3 yl]thío—6-[(R)-1-hydroxyethyl]25 l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-[ 1-(4-kyano 1.3 oxazol-2-y bazetidin-S-ylJthio-b-KRH-hydroxyelhyl]-! -melhylkarbapen 2 em .V-karbo\ylát (309 mg. 0,59 mmol) (získaný podle popisu \ příkladu 23(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilované vody (8 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (309 mg) ve vodní lázni (30 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakee byla reakční smčs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (50 ing), směs ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla promyta směsí ethylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1). oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na koloně Cosmosil z,a použití destilované vodv - 5% acetonitrilu jako eluentu, Eluát byl lyofi lizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S) 2-[l-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidin3-yl]lhio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (150 mg, výtěžek 60%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D_?O): δ (ppm) 7.92 (IH. s), 4,45 (2H. t, .1 = 8,8 Hz). 4,20 až 4.16 (IH. m),

4,09 (1H. i. J = 6,6 Hz). 4.05 (1H, d. J = 8,8 Hz), 3.95 (211, kvint., J - 4,4 I Iz). 3,28 (1H. dd,

J = 6,6 Hz), 3,08 (111, kvint,, J - 8,1 1 Iz), 1.14 (311. d. J = 6.6 Hz). 1,0 (3H, d. .1 = 7.3 Hz).

IR (KBr): 3372. 1750, 1628, 1394. 1283 cm ¹

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána : 413.0860, Nalezena: 431,0921 [M+H]'

Příklad 24 (1 R.5S,6S)-2- [1 (4 Azetidinokarbonyl-l .3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yl |thio-6-[(R)- 15(i hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karhoxylová kyselina, sodná sůl

- 123 CZ 300137 B6

COO*Na⁺ (1) p—N itrobenzyl—(1 K,5S,6S)—2—[ l —(4—azetidinkarbony I- - 1,3-ltiiazol—2—yl)azetidin—3-yl]thio— 6-[(R)-l hydroxyethyl]-1-methy Ikarbapen 2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3 acetyllhio-1 -(4-azetidinokarbonyl-1,3-thiazol-2-yl)azetidinu (247 mg,

0,83 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 24) v dimethylformamidu (12 ml) byl přidán hydrazinacetát (92 mg. 1,0 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a smčs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl(1 R,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1- methylkarbapen-2-em-3-karbio oxylátu (493 mg. 0,83 mmol) v acetonitrilu (25 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0.58 ml. 3,32 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a cthylacetátová i? vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasycený vodný hydrogenuhliěitan sodný a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití 10% methanolu- ethylacetátu jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-(1 R,5S.6S)—2—[_ 1 —(4—azetidinkarbonyl— 1,3—thiazol—2—yl)azetídin- -3—yl]thio—6—1(R)—1 —hy2d droxyethyl]-]-rncthy lkarbapen-2-em-3-karboxy latu (321 mg, výtěžek 65%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8,7 Hz). 7,66 (2H. d, .1 = 8.7 Hz), 7,41 (IH. s), 5,51 (IH.d, J= 13,7 Hz), 5,25(111, d.J = 13,7 Hz), 4,56 (211, t, J - 7,4 Hz), 4,50 až 4.40 (2H, m). 4,35 až 4,10 (5H, m obsahující 2H. t na 4,17, J = 7,4 Hz). 4.04 (IH, t, J = 5,4 Hz), 4,02 ’5 (IH, t, J= 5,4 Hz), 3,29 (IH, dd, J- 7,0, 2.5 Hz). 3.18 (IH, dq, J= 8,9, 7,3 Hz). 2,30 (2H. kvintet. .1 = 7,4 i lz). 1.95 až 1.50 (neostrý s obsahující IH OH skupiny), 1,38 (3H, d, J - 6,3 Hz), 1,26 (311, d, J = 7,3 Hz).

Imotnostní spektrum (FAB ): 600 [Μ III] so (2) (1 R.5S.6S)- 2-[ 1 - (4 Azetidinokarbonyl-1,3-thiazol-2-yl)azetidin 3- y l]th i o- 6- [(R)— 1 hydroxyethyl]- 1 methylkarbapcn-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sul p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S.6S)-2-[l-(4-azctidinokarbonyl-l.3—thiazol 2—yl)azetidin—3—yljthio—6 [(R)-l-hydroxyethylj-1 -methyIkarbapen-2-cm-3-karhoxylátu (321 mg. 0.54 mmol) (získaného podle popisu v příkladu 24( 1)) ve směsi tetrahydrofuranu (15 ml) a destilované vody (15 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (321 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (45 mg), ethylacetátu a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla promyta směsí rozpouštědel popsaných výše. oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody 5% acetonitrilu; destilované vody - 10% acetonitrilu; destilované vody - 15% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S.6S)-2-[ 1 —(4—azetidinokarbonyl—1,3—thiazol—2—yl)azetidin—3- yljlhio 6—|(R)—I—hydroxyethyl]—I-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (162 mg.

výtěžek 65%) jako bílé pevné látky.

- 124 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 MHz. D₂O, TSP): δ (ppm) 7.34 (1H, s), 4.95 až 4.65 (4Ϊ i. m), 4.40 až 4.30 (i H.

m), 4.30 až 4,13 (4H, m, obsahující lil. kvintet na 4,25, J = 6.3 Hz a IH, dd, na 4,19. J = 14.4,

7.2 Hz). 4.10 až 4.00 (2H, m), 3,43 (IH. dd. J = 6.3. 2.5 Hz). 3.26 (IH, kvintet. J = 7,2 Hz). 2.37 (2H. kvintet. J = 7.9 Hz), 1.30 (3H. d, J = 6,4 I lz), 1,20 (3H. d. J = 7.2 Ilz).

IR (KBr): 1750, 1607. 1538. 1455, 1435, 1393. 1308, 1292 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): 487 [Mt 11]

Příklad 25 io (1 R.5S,6S)-2-[ l-(4-Thiomorfolinokarbonyl-l ,3-thiazol 2-yl )azetidín-3-yíjthio-6-[(R)--1 hydroxyethyl] l-methylkarbapen-2-em 3 karboxylová kyselina, sodná sůl

ČOO'Na⁺ (1) p-Nitrobenzyl (1 R.5S,6S)-2-[ 1 —(4—thioniorfolinylkarbonyl— 1,3-thiazol-2-yl)azetidin-315 yljthio· -6—|_(R)— I -hydroxyethyl]— 1 methylkarbapen-2-em-3 karboxylát

Do roztoku 3 -acetyIthio—I —<4—azetidinokarbony 1—l,3—thiazol—2-yl)azetidinu (207 mg,

0,62 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 25) v dimethylformamidu (8 ml) byl přidán hydrazinaeetát (68,4 mg. 0,74 mmol) při 0 °C pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(lR.5S,6S)-2d ifenyl fosforyloxy-6-[( R)-1 —hydroxyethylJ-1 -methylkarbapen-2-em 3-karboxylátu (370,5 mg,

0,62 mmol) v acetonitrilu (16 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,43 ml, 2.48 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběh25 nutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena. promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití 5% methanolu-ethylacctátu jako so eluentu za vzniku p-nitrobenzyI-(1 R,5S,6S)-2-[ 1 -(1 -(1,3-thiazol 4-thiomorfolinokarbonyl-2yl )azetidin—3—y l)thío—6—[(R) 1-hydroxyethyl |-1-methy lkarbapcn-2-em-3-karboxylátu (246 mg. výtěžek 61%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCIJ: δ (ppm) 8,23 (2H. d, J = 8,7 liz), 7,67 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,12 (IH. s), 5,51 (IH, d. J = 13,8 Hz), 5.25 (IH, d, J - 13,8 Hz). 4,60 až 4,40 (2H, m), 4,35 až 4,22 (3H. m), 4,10 až 4,00 (2H, m), 4,00 až 3,90 (4H, m), 3,29 (111, dd, .1 - 6,4. 2,6 Hz). 3.21 (IH.dq,

J = 9,2, 7,3 Hz). 2,80 až 2,60 (4H. m). 1,80 až 1,50 (neostrý s obsahující 1Η Oil skupiny), 1,38 (3H, d, J ~ 6,4 Hz), 1,27 (3H, d, .1 - 7,3 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 646 [M+H]

-to (2) (1 R,5S,óS)-2-[ 1 -(4-ThiomorfoiinokarbonyI-1,3-thiazol-2-yl )azetidín-3-yljthio-6-|{R)— 1-hydroxyethyl]-1-methylkarbapen 2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-[l-(4-thiomorfolinokarbonyl -1,3-thiazol—2 yl)azetidin-3-yljthío—6—[(R)—1 -hydroxyethyl]-! methylkarbapen-2-em-3-karboxy lát (543 mg. 0,84 mmol) (zí45 skaný podle popisu v příkladu 25(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody

-125CZ 300137 B6 (30 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (543 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (70,6 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatogra ficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 5% acetonitrilu: destilované vody - 10% acetonitrilu; destilované vody - 15% acetonitrilu a destilované vody - 20% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S,6S)-2-[ l-(4-th i omorfo lin karbony l-l,3-th iazo 1-2 yl)azetidin-3-yl]thío-ó[(R) l-hydroxyethylJ-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (277 mg, id výtěžek 62%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. DO, TSP): δ (ppm) 7,10 (1H. s), 4.56 (211, t, J - 8,0 Hz), 4,42 až 4,30 (1H, m), 4,25 (IH, kvintet. J - 6.3 Hz), 4.21 (2H, dd, J = 7,8. 2.4 Hz). 4,12 až 4,02 <211. m), 3,96 až

3.85 (211, m), 3,85 až 3,75 (2H, m), 3,44 (1H, dd. J 6,3, 2,4 Hz), 3,26 (lll, dq. J = 8,9. 7,8 Hz),

2.86 až 2,70 (2H, m). 2.70 až 2,60 (2H, m), 1,30 (3H, d, J 6,3 Hz). 1.20 (3H, d, J = 7,8 Hz), is IR (KBr): 1749. 1608. 1535. 1454 em ¹

Hmotnostní spektrum (FAB'): 533 [M+H]'

Příklad 26

Ethy 1(1 R,5S,6S)-2-[]-(4-Karbamoyl 1,3 thiazol-2-yl)azetidin-3-yljthio -6-[(R)—1 “hydroxyethyl J-l -methylkarbapen--2-em-3-karboxy lát

HO

Do roztoku (1 R.5S.6S) 2 [ 1 -(4-karbamoyl-1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yljthio-6-j(R)-1 -hy25 droxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em 3 karboxylové kyseliny, sodná sůl (357 mg, 0,80 mmol) (získané podle popisu v příkladu 3) v d i methyl formám i du (5 ml) byl přidán ethyl jodid (357 mg, 2,40 mmol) při 0 °C pod dusíkovou atmosférou a smčs byla míchána 1 hodinu. Stněs byla dále míchána 2 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Na konci byl do reakční směsi přidán ethylacetát a organická vrstva byla postupně promyta 10% vodným roztokem chlo5o ridu sodného, 10% vodným roztokem thiosíranu sodného, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetát - 20% acetonitrilu; ethylacetát - 40% acetonitrilu; ethylacetát - 60% acetonitrilu a ethylacetátu za vzniku čištěného produktu, který byl rozpuštěn

5? v methylenchloridu a diethylether a hexan byli postupně přidáni do roztoku za vzniku ethyl(1 R,5S,6S)-2-[ l-(4-karbamoyl-l .3-thíazol-2-yl)azetidin-3-yl)thio-6-[(R)-l -hydroxyethyl]1-methylkarbapeii 2-cm-3-karboxylátu (387 mg, výtěžek 95%) jako bezbarvého prášku.

¹ H-NMR (400 MHz. CDCb): δ (ppm) 7.48 (IH. s). 6.99 (IH. br s). 5,61 (IH.br s). 4,48 (2H. q, J - 8,5 Hz), 4,19 až 4,43 (411, m). 4,02 až 4.13 (2H. m), 3,26 (2H, dd, .1 - 7,1, 2,7 Hz), 3.10 (lll, dq, J = 9,0, 7,3 Hz), 2.07 (IH. d, J = 4.8 Hz). 1,37 (3H, d, J - 6.9 liz), 1,36 (3H. t, .1 - 7.5 Hz), 1,25 (3H.d, .1-7.2 Hz).

IR (KBr): 1770, 1669, 1602. 1543, 1324, 1283 cm ^!

Hmotnostní spektrum (FAB ): 453 [M+H]

- 126CZ 300137 B6

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána Ο,ΗΗΑλΝΛ: 453,1267, Nalezena

453.1235 [M+H]’

Příklad 27

Feny 1( 1 R.5S.6S)-2-[l-(4-karbamoy1-1.3—thiazol—2—yl)azetidin 3---yl]thio—6—[(R)—!—hydroxyethyl J--1-melhylkarbapen--2-em-3-karboxylát

io Do roztoku (1 R,5S,6S)-2-[ l-(4—karbarnovl—1.3—thiazol—2—yl>éizetidin--3—yl]thio—6“f(R)—1—hydroxyethyl]—1—methylkarbapen—2—em—3—karboxy lové kyseliny, sodná sul (162 mg, 0.36 mmol) (získané podle popisu v příkladu 3) ve směsi vody (1 ml) byla přidána IM kyselina chlorovodíková (0,33 ml, 0,36 mmol) při 0 °C. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku. Do roztoku zbytku v acetonitrilu (10 ml) byl přidán fenol (102 mg, 1.1 mmol), dimethylaminopyridin i? (22 mg. 0,18 mmol) a l-ethyl-3-(3-dimethylaininopropyl)karbodiimidliydroch!orid (139 mg, 0,73 mmol) při teplotě místnosti. Po míchání směsi 30 minut, 1 -ethy 1-3-(3—dimethylaminopropyl)karbodiimidhydrochlorid (139 mg, 0,73 mmol) byl přidán a výsledná směs byla míchána 30 minut. Na konci byl do reakční směsi přidán ethylacetát a organická vrstva byla postupně promyta ředěnou kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roziokem hydrogenuhliěitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát - 20% acetonitrilu; ethylacetát - 40% acetonitrilu: ethylacetát - 60% acetonitrilu a ethylacetát za vzniku feny 1( 1R, 5S,6S>-2-[ l-( 4-karbamoy I l,3 -thiazol-2yl)azetidin-3-yl)tbio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-]-methylkarbapen-2-cin-3-karboxylátu (66 mg, výtěžek 36%) jako bezbarvého prášku.

'H-NMR (400 MHz, CDC1.0: δ (ppm) 7.48 (IH. s). 7,38 až 7,43 (2H. m), 7,23 až 7,28 (311. m), 6,99 (IH, brs). 5.60 (IH, br s), 4.40 až 4,55 (2H, m), 4,24 až 4,36 (3H, m). 4,03 až 4,13 (2H. m), 3,32 (lil, dd, J- 7,0. 2,6 Hz). 3,25 (IH. dq, J= 9.2, 7.3 Hz), 2,09 (lil, br), 1,39 (311. d, J = 6.4 Hz), 1,30 (3H, d, J - 7,3 Hz).

IR(KBr): 1771, 1668, 1542, 1195 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): 501 [Μ 111]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána 501,1266, Nalezena

501.1266 [M+H]'

Příklad 28

Pivaloyloxymethy l( 1 R.5S,6S)—2—[ 1 -(4—karbamoyl— 1.3—thiazol—2—yDazetidin—3—v l]th io—6—[(R)1 hydroxyethyl]-]-methy lkarbapen-2-em-3-karboxát

- 127 CZ 300137 B6

Do roztoku (! R,5S,6S)-2-[]-(4-karbamoyl 1.3 thiazol-2-yl)azetidin-3-ylJthio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-rnethylkarbapen-2-cm-3-karboxylové kyseliny, sodná sul (402 mg, 0.90 mmol) (získané podle popisu v příkladu 3) v dimethylformamidu (5 ml) byl přidán jodmethylpivalát (261 mg, 1,08 mmol) při 0 °C pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Na konci byl do rcakcní směsi přidán ethylacetát a organická vrstva byla postupně promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného. 10% vodným roztokem thiosíranu sodného, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do zbytku io byt přidán diethylether za vzniku pivaloyloxymethyl(lR,5S,6S)-2-ll-(4-karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)azctidin-3-vl)thiO“6-|(R)-l-hydroxyethylJ-l-methylkarbapen-2-eni-3-karboxylátu (450 mg. výtěžek 93%) jako bezbarvého prášku.

'H-NMR (400 MHz. DMSO-dJ: δ (ppm) 7.47 (1H. s), 7.43 (1H, br s), 7.32 (1H. br s), 5.89 (1H. d, J = 5.9 Hz). 5,74 (IH, d, J - 5.9 Hz), 5,09 (IH, d, J = 5,2 I Iz), 4,42 až 4.58 (3 H. m), 4,20 (1H, dd, J = 9,4, 2,4 Hz), 3,89 až 4,02 (3H, m), 3,37 (IH, dq. J- 9,1. 7.4 Hz), 3,26 (IH, dd, J = 6.3. 2.6 Hz), 1.14 (3H, d.J-7,4 Hz). 1.13 (9H,s), 1.11 (311, d. J - 6,5 Hz).

IR(KBr): 1778, 1754. 1602, 1545, 1282, I I 18cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): 539 [M+Hf

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB’): počítána CÁdFiCFN.iS: 539.1634. Nalezena

539,1634 [M+HJ'

Příklad 29 l-(Isopropoxykarbonyloxv)ethyl( lR,5S,6S)-2-[l - <4 karbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)azetidin-3yVJthio—6—f(R)—1 -hydroxyethy l]-l -methy lkarbapen-2-em-3-karboxát

HO

O

Do roztoku (IR,5S,6S)-2-[l-(4-karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yllthitv-6-[(R)-l-hydroxyethy l|-i-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lové kyseliny, sodná sůl (245 mg, 0,55 mmol) so získané podle popisu v příkladu 3 v dimethylformamidu (5 ml) byl přidán 1 jodoethylisopropyIkarbonát (317 mg. 1,21 mmol) při 0 °C pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1.5 hodiny. Výsledná směs byla dále míchána 1,5 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Na konci byl do reakční směsi přidán ethylacetát a organická vrstva byla postupně

- 128 CZ 300137 B6 promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného. 0.1M kyselinou chlorovodíkovou. 10% vodným roztokem thiosíranu sodného, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát - 20% acetonitrilu; ethylacetát - 40% acetonitrilu; ethylacetát - 60% acetonitrilu a ethylacetátu za vzniku čištěného produktu, který' by! rozpuštěn v methylenchloridu a diethylether a hexan byli postupně přidáno do roztoku za vzniku 1-(isopropoxykarbonyloxy)ethyl( I R.5S,6S)-2“[ l-(4-karbamoyl- 1,3-th iazol--2—yl )azctidin—3—yl>thio—6—[(R)— 1 hydroxycthyl]—l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (266 mg, výtěžek 88%) jako bezbarvého prášku.

io 'H-NMR (400 MHz, CDCI.;); δ (ppm) 7,48 (IH, s), 7.00 (Hk br s), 6,82 až 6.92 (IH. m), 5.65 (IH. br s). 4,84 až 4,97 (IH, m), 4,43 až 4,52 (2H, m), 4,18 až 4,39 (311, m), 4.02 až 4,07 (2H. m). 3,25 (1H, dd. J = 7,0. 2.5 Hz), 3,17 (1H, dq. J = 9.3. 7,3 Hz). 2,16 (1H, brs). 1,61 (3/2 11, d, J - 5.9 Hz). 1.59(3/2 H, d, J - 5,5 Hz), 1,18 až l,39(12H.m).

IR (KBr): 1763. 1669, 1542, 1276, lí)74crn ¹

Hmotnostní spektrum (FAB¹): 555 [M+H]¹

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána Cí.^H^OsNqSi 555,1584, Nalezena 555,1570 [M+H 1' ?(i Příklad 30 l-(3-Pentyloxykarbonyloxy)ethyl(lR,5S,6S)-2-[1 (4 karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3yl]thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapcn-2-em-3-karboxylát

Do roztoku (IR,5S,6S)-2-[l-(4-karbamoyl-l.3-thiazol-2-yl)azetÍdin 3-yl]thío—6—f(R>—l—hydroxyethyl |—1—methylkarbapen—2-ein—3 karboxylové kyseliny, sodná sul (402 mg, 0,90 mmol) získané podle popisu v příkladu 3) v dirnethylformamidu (8 ml) byl přidán I -jodocthyl-3pentylkarbonát (568 mg. 1.98 mmol) při 0 °C pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Výsledná směs byla dále míchána 2 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu io místnosti. Na konci byl do reakční směsi přidán ethylacetát a organická vrstva byla postupně promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného, 0JM kyselinou chlorovodíkovou, 10% vodným roztokem thiosíranu sodného, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát - 20% acetonitrilu; ethylacetát - 40% acetonitrilu; ethy I acetát - 60% aceton itrilu a ethylacetátu za vzniku !-(3-pentyloxykarbonyloxy)eihyl(lR,5S,óS)-2-[l (4 karbamoyl1,3-thiazol--2-yl)azetidin-3-yl)thio-6-[(R)-] -hydroxyethyl j-1 -methy lkarbapcn-2-em-3-karboxylátu (506 mg, výtěžek 96%) jako bezbarvé amorfní látky.

'll-NMR (400 MHz, CDCb): δ (ppm) 7.48 (IH, s). 7,00 (IH, br s), 6,85 až 6.93 (IH. m), 5,58

4u (IH. br s). 4.57 až 4,66 (IH. m). 4,42 až 4.52 (2H. m), 4,15 až 4.32 (3H, m), 4.02 až 4,10 (2H, m), 3,24 (IH, dd, J = 7,1, 2,6 Hz), 3,17 (1H, dq, J - 9,3, 7,4 Hz), 2.00 (IH. brs), 1,50 až

- 129CZ 300137 B6

1.72(711. m), 1.34 (3/2 H. d. J = 6,9 Hz), 1,36 (3/2H, d, J = 6,5 Hz), 1.24(3/2 11. d. J = 7,3 Hz),

1.25 (3/2 H, d, J = 7.3 Hz), 0,84 až 0,98 (ÓH, m).

IR(KBr): 1761, 1671, 1542, 1268, 1074cm '

Hmotnostní spektrum (FAB ): 583 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CjsíhsOxN-jS: 583,1896. Nalezena 583.1907 [M+H]'

Příklad 31 io (1 R,5S,6S)-2-[ 1 —(4—Pyrrolidinkarbonyl-1 „3—thiazol—2—yl)azetidin-3—y 1 )thio—6—[(R)- 1 hydroxyethyl] l-methylkarbapen-2-em-3 karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p—Nitrobenzy 1-(1 R.5S,6S)—2—[I —(4—pyrrolidinokarbony 1— 1.3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yI]15 thio 6 [(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3 acety Ithio—l—(4—pyrrolidinokarbonyl—l „3—thiazol—2—yl)azelidinu (235 mg,

0.84 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 26) v dimethylformamidu (12 ml) byl přidán hydrazinacetát (103 mg, 110 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl(1 R,5S,óS)-2-(difenylfosforyloxy)-ó-[{R)-1 -hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxylátu (499 mg, 0,84 mmol) v acetonitrilu (25 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0.56 ml, 3,36 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti.

2? Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethy lacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta Q,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chroma30 tograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylaeetát : methanolu (9:1) jako eluentu za vzniku p n itrobenzy!-(1 R,5S,6S)-2-[ l-{4-pyrrolidinokarbonyl-l ,3-thiazol 2—yl)azetidin 3 -yl]thio—6—[<R>—1—hydroxyethyl ]—l methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (240 mg, výtěžek 46%) jako světle žluté pevné látky.

^;H-NMR (400 MHz, CDClj; δ (ppin) 8,23 (2H, d, J - 8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,28 b (IH, s), 5,51 (IH. d, J = 13,8 Hz), 5,25 (IH, d. .1 = 13.8 Hz). 4.49 (211. dd. J - 14.6. 8.5 ).4.35 až

4,20 (3H, m), 4.05 (1H, t. J = 6,1 Hz), 4,04 (1H. t. J = 6.1 Hz), 3,78 (2H, t, J - 6,5 Hz), 3.62 (2H, t, J = 6,5 Hz). 3.29 (IH. dd, J = 7,2. 2,5 liz), 3.20 (IH, dq, J = 9,0, 7.3 Hz). 1.82 až 1,98 (4H, m), 1.38 (3H. d, J = 6,1 Hz). 1,27 (3H, d, ,1 = 7,2 Hz).

(2) (l R„5S,6S)—2—[ 1—(4—Pyrrolidinokarbonyi-1,3—thiazol—2—yl)azetidin- 3 yljthio 6—[(R)—l — hydroxyethyl [-1-methyikarbapen 2-cm-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p Nitrobenzyl-( 1 R„5S,6S>—2—(l-(4-pyrrolidinokarbonyl-l,3- lhiazol-2-yl)azetidin-3—yl]thio—

6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1 -methylkarbapen-2-em-3 karboxylát (240 mg, 0,39 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 31(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (12 ml) a destilované vody (12 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (240 mg) ve vodní lázni

- 130CZ 300137 B6 (30 °C) 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvía reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (33 mg), kyselina octová a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody 3% acetonitrilu;

destilované vody - 6% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofiíizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)-2-[ 1 -(4-pyrrol idinokarbonyI-1.3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl[thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapcn-2-em-3-karbo\ylové kyseliny, sodná sůl (113 mg. výtěžek 60%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. DO): 5 (ppm) 7.40 (IH, s). 4,56 (211, t, J = 8.6 Hz), 4,43 až 4,30 (IH, m), lu 4,25 (1H. kvint., J = 6.4 Hz), 4,20 (1 li. dd. J - 8.9. 2.4 Hz). 4,10 až 3,98 (211, m), 3.62 (2H. t,

J - 6.6 Hz), 3,54 (2H. t, J - 6,6 I Iz), 3,26 (IH. dq. J = 8,9, 7,4 I Iz), 3,43 (1H, dd. J - 8.9, 2.4 Hz), 2.05 až 1.85 (4H,m). 1,30 (3H, d.J - 6.4 Ilz), 1,27 (3H, d, J - 7,4 Hz).

IR (KBr): 3375.7 1605,9, 1537,4, 1468,9, 1423,6, 1396.6, 1298,2 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 501 [M+II]’

Příklad 32 (1 K5S.6S)—2-[ 1 —(4 Piperidinkarbony 1-1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6-[(R)— 1-hydroxy2o ethyl]-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl

(1) p Nilrobenzyl-( 1 R,5S,óS)-2-[]-(4-piperidinokarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)azetidin--3-yl]th io-6-[(R)-1 -hydroxyethvl]-1 -metliy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku 3-acety lthio-1 -(4-piperidinokarbonyi-1,3-thiazol-2-yl)azetidinu (276 mg,

0,85 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 27) v dimethylformamidu (20 ml) byl přidán hydrazinacetát (94 mg, 1,02 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl(1 R.5S.6S)-2-(di fenyIfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em 3 karb30 oxylátu (505 mg, 0.85 mmol) v acetonitrilu (20 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,59 ml, 3,40 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného by l přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta (),5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chroinalografieky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát : methanolu (9:1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl (1 R.5S.6S)-2-[ 1 -(4-piperidinokarbonyi 1.3 thiazol-2-yl)•10 azetidin-3-yl]thio 6-[(RH-hydroxyethvl]-]-methylkarbapen-2-em-3-karbo\ylátu (464 mg, výtěžek 87%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl·,): Ó (ppm) 8,23 (2H. d, J- 8,7 Hz). 7.66 (211, d. J = 8,7 Hz), 7.02 (IH. s). 5,5! (111, d, .1 = 13,7 Hz), 5,26 (1H, d, .1 = 13,7 Hz), 4,51 (1H, t, .1-8,1 Hz), 4,50 (1H, t.

J= 8,1 Hz), 4,32 až 4,20 (3H, m obsahující 4,25 (1H, dd, J- 8.0, 2,5 Hz)). 4,07 (lil, t,

C7. 300137 B6

J = 5.7 Hz). 4.05 (1H. t, J = 5,7 Hz), 3,72 až 3.58 (411, m), 3,28 (IH, dd. J = 6.8. 2.5 Hz). 3,20 (1H, dq. J - 8,4. 7,3 Hz), 1,80 až 1,45 (6H. m). 1,38 (3H, d, J = 6.8 1 Iz), 1.26 (3H, d. J = 7.1 Hz).

(2) (l R,5S,6S)—2—[ 1 —(4—Piperidinokarbonyl— I <3—thiazol—2—yl)azctidin—3—yl ]thio—6_[(R)— 1 — ? hydroxyethyl]-! -met hy I karbapen-2-ern-3-kar boxy lová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S.6S )--2-( 1 {4-piperidinokarbonyl-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin-3 y l]thío—6[(R)-l-hydroxyethyl]-1-methylkarbapcn-2-em-3-karboxylát (464 mg, 0.74 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 32( 1)) ve směsi tetrahydrofuranu (20 ml) a destilované vody (20 ml) byl io katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (464 mg) ve vodní lázni (35 ^OC) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (62 mg), kyselina octová a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vod\ - 2% acetonitrilu;

destilované vody 5% acetonitrilu; destilované vody - 10% acetonitrilu; destilované vody 20% acetonitrilu; destilované vody - 30% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. fliiát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S,6S)-2-[ l-(4-piperidinokarbonyl-l,3-thiazol2-yl)azetidin—3—yI]ttiit> 6 [(R)-!-hydroxyethy 1]-1 -methylkarbapen-2-em 3 karboxylová kyselina, sodná sůl (171 mg, výtěžek 45%) jako bílé pevné látky, 'H-NMR (400 MHz. D₂O): δ (ppm) 7,04 (IH, s), 4.10 až 4.00 (2H. m), 4,42 až 4,30 (IH, m), 4,25 (1H, kvint.. J = 6,2 Hz). 4,21 (IH, dd. J - 9,0, 2,4 Hz), 4,05 (211. ddd. .1 - 8,3. 5,4. 2,7 Hz), 3.62 (211, t, J = 5,3 I Iz), 3,49 (211, t. J - 5.3 Hz), 3,44 (1H, dd. J = 6,2. 2,4 Hz). 3,26 (IH, dq, J = 7.7.7,4 Hz), 1,70 až 1,60 (4H. m), 1.60 až 1,50 (2H. m). 1,30 (3H.d, .1 = 6.4 Hz). 1.27 (3H.d, J =7,2 Hz).

IR (KBr): 3382,5 1747,7, 1605,9, 1538.4. 1400,4, 1310.7, 1249,0 cm ¹1 Imotnostní spektrum (FAB ): m/z: 515 [M+H] ‘

Příklad 33 (1R,5S.6S )-2-(1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-1.3-thiazoI 2 yl)azetídiii-3-yl]lhio-6-[(R)-lhydroxyethyl]-! -methy lkarbapen-2-cm-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl

(1) p-Nitrobenzyt-(l R,5S,6S )-2-( l-(4-N-cyklopropylkarbamoy!-l,3-th iazol-2-yl)azetíd i n55 3-vljthio-6-[(R)-1 hydroxyethyl]-]-methylkarbapen-2-em-3 karboxylát

Do roztoku 3—acetylthio—1—(4—N—cyklopropylkarbamoyl— t ,3—thiazol—2—yl)azetidinu (342 mg, 1,15 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 28) v dimethylformamidu (12 ml) byl přidán hydrazinacetát (127 mg, !,38 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a

4o směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl rozlok p-nitrobenzyl(1 R,5S.óS)-2-{difenvl fosfory loxy )-6-[(R)-l-hydroxyethy l|-l-methy lkarbapen-2-em-3-karboxylátu (684 mg, 1,15 mmol) v acetonitrilu (25 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,80 ml. 4,60 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti.

4? Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělící nálevce a ethy 1- 132 CZ 300137 B6 acetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M vodným roztokem chloridu sodného, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát :

methanolu (9:1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyI-(lR,5S.6S)-2-[l-(4-N-eyklopropylkarbamoyl-13-thiazol-2-yl)azetÍdin-3-y!Jthio-6-[(RH-hydroxyethyl]-]-methylkarbapen-2em-3-karboxylátu (606 mg. výtěžek 88%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl;): δ (ppm) 8,23 (2H. d. J = 8,7 Hz). 7,66 (2H, d, J - 8,7 liz), 7,44 (IH. s). 7.23 (IH.br s). 5,51 (IH, d, J = 13,7 Hz), 5,25 (III, d. J= 13,7 Hz). 4,49 (2H, dd, io J- 14.3. 7,6 Hz), 4.37 až 4.19 (311. m). 3.98 až 4,12 (3H, m), 3,30 (I H, dd. J = 9.2, 7.3 Hz), 3,20 (1H.dq.J-9,2, 7.3 Hz), 2,80 až 2,94 (1 Η, m). 1.38 (3H, d, J = 6,4 Hz), 1.27 (3H. d, J = 7.3 Hz),

0.85 (1H. t. J - 5,5 Hz), 0,83 (1H. t. J - 5,5 1 Iz), 0,58 až 0,70 (2H, m).

(2) (lR.5S,6S)-2-[l (4 N -Cyklopropy lkarbarnoyl— 1.3—thiazol—2—yl )azetidin—3—yl]thio—6— [(R)-l-hydroxyctliyl|-l-niethylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p -Nitrobenzyl (1 R.5S.6S)—2—f 1 —(4—N—cyklopropylkarbamoyl—l.3—thiazol—2—vl)azetidin 3 yl]thio-6-[(R)-l“hydroxyethyÍ|-i-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (606 mg. 1,01 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 33(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody

2ii (30 ml) by! katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (606 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (85 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 5% acetonitrilu;

destilované vody - 10% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (I R,5S,6S)-2-[ l-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l,3-thiazol-2yl )azetidin—3—yljthio—6-[(R)--1 -hydroxyethyl] 1 methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl (275 mg. výtěžek 56%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. DO): δ (ppm) 7,46 (IH.s), 4,54 (2H. t, J = 8.2 Hz), 4.38 až 4.30 (lil, m), ΐο 4.25 (lil, kvint., J 6.3 Hz). 4,19 (HI, dd, J- 8,9, 2,4 Hz), 4,10 až 4,19 (IH, dd.

J = 8,9. 2.4 Hz), 3.43 (211, dd, .1 = 6,3, 2,4 Hz), 3.24 (IH, dq, J = 8,9, 7,3 Hz), 2,78 až 2,70 (IH, ni). 1,30 (3H, d. J - 6.4 Hz). 1.19 (3H, d, J = 7,2 Hz). 0.85 (lil, t. J = 5,2 liz). 0,84 (lift. J-5,2 Hz), 0,73 až 0.61 (211. m).

IR (KBr): 3397,0, 1750,1, 1603.5, 1545,7, 1489.7, 1470,5, 1393,3, 1312,3 cm ‘

Hmotnostní spektrum (PAB ): m/z: 465 [M+H]'

Příklad 34 (1 R,5S,6S)—2—[ 1—(4—N—Cyklobuty Ikarbamoyl— 1.3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yl ]thio—6—[(R)— l — hydroxyethyl] -l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p-Nitrobcnzyl-(IR,5S,6S)-2-[l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)azeiídiii-3yljthio—6—| (R)— 1 -hydroxyethyl]-! -methy Ikarbapen -2-em-3-karboxylát * 155 C’Z 300137 Bó

Do roztoku 3-acetylthio-l-(4-N-cyklobuty lkarbamoy I —1,3—th iazol 2-y Jazetid inu (398 mg.

1,28 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 29) v dimethylformamidu (15 ml) byt přidán hydrazinacetát (141 mg, 1,53 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 2,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl5 (1 R.5S,6S)-2 -(difeny Ifosfory loxy )-6-(( R)-l -hydroxyethylj-1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxylatu (761 mg, 1,28 mmol) v acetonitrilu (30 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0.88 mk 5,12 mmol), Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sod10 ného byl přidán do reakční směsi. Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M vodným roztokem chloridu sodného, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát : methanolu (9:1) is jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R.5$,6S)-2-[ l-(4-N-cyklobulylkarbamoyl-l ,3-thiazol—2—yI )azetidin—3—yl]thio-6 [(R)-l-hydroxyethy 1]-1-melhylkarbapcn-2-em-3-karboxylatu (578 mg, výtěžek 74%) jako světle žluté pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz. CDClj: δ (ppm) 8.23 (211, d, J = 8,7 Hz). 7.66 (211. d, J = 8,7 Hz), 7.41 (IH. s), 5,51 (1H. d, J = 13.7 Hz), 5,25 (IH. d. J - 13,7 Hz), 4,60 až 4,42 (3H. m obsahující 4,52

2í> (2H, kvint., ,1 - 7,8 liz)), 4,36 až 4.20 (3H, m). 3,30 (IH. dd, J - 6,9, 2,5 Hz), 3,21 (1H. dq, J 9,2, 7.4 liz). 2,47 až 2,33 (2H, in), 2,10 až 1.92 (2H, m), 1,85 až 1,65 (2H, m), 1,39 (3H, d, J = 6,4 Hz). 1,28 (3H,d,J-7.3 Hz).

(2) (1 R,5S„6S)—2—[ 1 —(4—N—Cyklobutylkarbamoyl— l ,3—thiazoi—2—y!)azelídin—3—yIjthio—6—[(R)—

1-hydroxyethylj-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S) 2-[ l-(4-N-cyklobutylkarbamoy 1-1,3—thiazoi—2—yl)azetidin -3—yljthio— 6-[(R) 1 -hydroxyethy 1]-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (578 mg. 0,94 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 34(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody so (30 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (578 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (79 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 5% acetonitrilu: ss destilované vody 10% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu, Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)-2-[ ]-(4-N-cyklobulylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)~ azetidin—3-yljthio 6-[(R )-l-hydroxyethylj-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina.

sodná sůl (322 mg, výtěžek 68%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 Mllz. D,O): δ (ppm) 7.45 (IH. s), 4.56 (211. t. J = 8.0 Hz). 4.44 až 4.29 (2H. ni), io 4,25 (IH. kvinl., J- 6,3 Hz), 4,20(111, dd, J = 8,8. 2,4 Hz), 4,12 až 4.00 (2H, m). 3,44 (III, dd,

J = 6.3, 2,5 Hz). 3,26 (111, dq. J = 8,8, 7,4 Hz). 2.41 až 2,28 (2H. m). 2,15 až 2,00 (211, m), 1,87 až 1,72 (2H, m), 1.31 (3H, d.J = 6.2 Hz), 1,20 (3H, d. J = 7,2 Hz).

IR (KBr): 3395.1. 1750.1, 1659,4, 1604,5. 1545,7, 1490,7, 1470,5, 1393,8, 1310.4. 1251.6 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 501 [M+l I]*

Příklad 35 (1 R,5S,6S)-2-{ 1-(4-(4 Methylpiperazin-I-karbonyl) 1,3- th iazol-2-yl jazet idin-3- yl | thio 650 [(R)- ι - hydroxyethylj-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

-134C7 300137 B6

(1) p-Nitrobenzyl-( 1R,5S,65)-2-[ l-[4-(4-methylpiperazin-l-karbonyl)-1.3-thiazol-2-yl]azetidin 3-yl [th i o 6-|(RH -hydroxyethyl]-! -methy lkarbapen-2-em 3-karboxylát

Do roztoku 3 aeely Ithio-1 - [4-(4-methy lpiperazin-1 - karbónyl)-!,3-thiazol 2 -yl]a/.etidinu (1.35 g. 3,97 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 30) v dimethylformamidu (40 ml) byl přidán hydrazinacetát (438 mg, 4,76 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobcnzyl-( 1 R,5S,6S )-2-(di feny I fosfory !oxy>—6—[(!<)— 1 -hydroxyethyl]-] -methylkarbapen io 2-em-3-karboxy lálu (2,36 mg, 3,97 mmol) v acetonitrilu (40 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním d i isopropy lethylam inu (2,77 ml, 15,9 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a is ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát : methanolu (1 : 5)jako eluentu za vzniku p—nitrobenzyl—(I R,5S,6S)-2- {1-(4-( 4-methylpiperazin-l-karbo20 ny 1) 1,3—thiazol—2—yI Jazetidin—3—yl {tliio 6--[(R>— 1 -hydroxyethyl]-1 -methylkarbapcn-2-em-3kar boxy látu (828 mg, výtěžek 60%) jako světle žluté pevné látky, 'H-NMR (400 MHz. CDCl.?): δ (ppm) 8,23 (211, d, J = 8,7 Hz), 7.66 (2H. d, J = 8.7 Hz), 7,16 (IH, s), 5,51 (IH, d, .1 = 13,8 Hz). 5,25 (IH, d.J - 13,8 Hz), 4.50 (2H, t, J = 4.9 Hz), 4.49( ΠI, t. J - 4,9 Hz), 4,33 až 4.20 (3H. m). 4,06 (1H. t. J = 4.9 I Iz), 4.05 (1 Η, l. J = 4.9 Hz), 3,99 až 3,73 (411. m). 3.29 (1H, dd, .1 - 7.0, 2,5 1 Iz). 3,20 (IH, dq. J = 9,1, 7,3 Hz). 2.74 až 2,48 (4H. m). 1,38 {3H, d, J = 6,3 Hz), 1,27 (3H, d, J = 7,3 Hz).

(2) (1 R,5S,6S)-2-{ l-[4-(4-Methylpiperazin-l-karbónyl)-!.3-thiazol-2-yl]azetidin-3-yl}thio—6—[(R)—l—hydroxyethyl] 1 --met hylkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1 R,5$,6$) 2- {1-(4-(4-mcthy lpiperazin-1 - karbónyl)-! ,3-thiaz.ol-2-ylJazetidin 3 -yl]thio-6-[(R)-l -hydroxyethylJ-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (500 mg, 0,78 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 35(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (25 ml) a destilované vody (25 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (500 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs filtrována a do filtrátu byl přidána kyselina octová a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta směsí rozpouštědel uvedených výše a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 2% acetonitrilu; destilované vody - 4% acetonitrilu: destilované vody to - 6% acetonitrilu; destilované vody - 8% acetonitrilu; destilované vody - 10% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S,6S)-2-{ I-14-(4-methylpiperazin-1 - karbony 1)1,3-thiazol-2-yljazetidin 3-yl ]thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl] 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (192 mg. výtěžek 49%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₂O): δ (ppm) 7.24 (1H. s), 4,57 (2H. t, J - 8,4 Hz), 4,39 až 4,30 (1H. m),

4,25 (1H. kvint., J = 6,3 Hz), 4,20 (1H, dd, .1 = 9,0. 2,4 Hz), 4,15 až 3,05 (12H. m obsahující 4.04

- 135 CZ 300137 B6 (2H, dd. J = 8.4. 4.9 Hz)), 3,44 (111, dd. J = 6.3, 2,6 Hz). 3.25(111. dq. J = 9,0, 7.0 1 Iz)). 2.88 (3H,s). 1.30 (3H. d, J 6,4 liz). 1.20 (3H.d, J = 7.1 Hz).

IR(KBr): 3397.0. 1757,8, 1606.4. 1536.0. 1457.9. 1429.0. 1329,7. 1312,3 cm '

Hmotnostní spektrum (EAB’): m/z: 508 (M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESP): počítána CJHXTNsSiNa 508.1688, Nalezena 508,1688 [M+H]’

Příklad 36 io (1 R.5S.6S)-2-JI-[4-(3-Methoxyazetidin-1-karbonyl)-l,3-thiazol-2 yljazetidin-3-yl}thio-6[(R)-l-hydroxyethyl] 1 methylkarbapen-2-em-3-kar boxy lová kysel i na, sodná sul

(1) p Nilrobenzyl-( I R.5S,6S)-2-{ l—[4—(3-methoxyazetidin-l-karbonyl)-!,3 thiazol-2-yl(i? a/etidin-3-yl}thio-6-[(R)-] hydroxyethyl]-]-methylkarbapen -2 em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetylthio-l-[4-(3-methoxyazetidin-l-karbonyl)-1.3- -lhiazol-2-y Házet id inu (350 mg. 1.07 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 31) v dimethylformamidu (18 tn!) byl přidán hydrazinaeetát (118 mg. 1,28 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmo2o sférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(1 R,5S,6S)-2-(difeny Ifosfory loxy)-6-[(R) 1 hydroxyethyl ]-l-methyIkarbapen 2-em3-karboxylátu (636 mg, 1,07 mmol) v acetonitrilu (32 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropy lethy laminu (746 μΙ.

4.28 mmol). Směs byla míchána 6 hodin při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti.

Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a elhylaeetátova vrstva byla oddělena, promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : so methanolu (95:5 a 9: 1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S) 2 {1—[4—(3— methoxyazetidin-l-karbonyl) 1,3-thiazoI-2-yl]azetidin-3-yl [thio- 6 ·[( R)-l -hydroxyethyl]-1methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (636 mg, výtěžek 94%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCI,): δ (ppm) 8,23 (2H, d. J - 8.8 Hz). 7.66 (211, d, J = 8,8 Hz), 7,44 (1H, s), 5,51 (111. d, J - 13,9 Hz). 5,25 (1H. d, J = 13,2 Hz), 4.75 až 4.69 (1H, m). 4,51 až 4.43 (211. m), 4.42 až 4.37 (1H, m). 4.32 až 4,20 (511. nt), 4,04 (2H. dt, J - 8,1, 5.1 Hz), 3,33 (3H, s),

3.29 (IH. dd, J = 2,2, 6,6 liz), 3,20 (IH, dq, J = 9,2. 7.3 Hz), 1,38 (311, d, J - 6,6 Hz). 1,27 (3H. d. J = 7,3 Hz).

(2) (1 R,5S,6S)-2-f l-[4-(3-Methoxyazetidin- 1 -karbonyl)-! ,3-thiazoI-2-yl]azetidin-3 yl}»

4o thio—6—[(R)—l —hydroxyethyl] 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p NitrobenzyH 1 R,5S.6S)-2-{l-[4 (3 methoxyazetidin-1-karbonyl)-l,3-thiazol-2-yl(azetidin-3-yl}thio-6—f(R)— I-hydroxyethyl]-I-methylkarbapen-2-cm-3-karbo\vlát (630 mg.

1.00 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 36(1)) ve smčsi tetrahydrofuranu (32 ml) a dešti45 lované vody (32 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí

- 136Q7. 300137 B6 (630 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán bvdrogenuhličitan sodný (84 mg), cthylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody a destilované vody : acetonitrilu (92 : 8) jako eluentu. Eluát byl lyoťilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S,ó$)-2-{ l-[4-(3-methoxyazetidin -1-karbonyI}· U thiazol 2 -yl]azctidin-3yljthio—6-· [(R)-l-hydroxyethyl)-1-methylkarbapen-2-em-3 karboxylová kyselina, sodná sůl (239 mg, výtěžek 46%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO): δ (ppm) 7,39 (IH, s), 4.76 až 4,69 (IH, m), 4,56 (211, d, J = 8,1 Hz), io 4,44 až 4.31 (4H. m), 4,25 (IH, dq. J = 6.1.6.4 Hz), 4,20 (Π1, dd, J = 2,4. 9,1 Hz). 4.09 až 3,99 (311. m). 3,43 (IH, dd, J = 2.4, 6,1 Hz), 3,37 (3H, s), 3.26 (IH, dq. J = 9.1, 7,2 Hz). 1,30 (311. d. .1-6.4 Hz), 1.20 (3H. d.J-7,2 Hz)

IR (KBr): 1750, 1607, 1538. 1449. 1395. 1306 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 539 [M+Na]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FSf): počítána (’ΗΜΧ,ΝΜΜιο 539,0111, Nalezena 539,1026 [M+Na]'

Elementární analýza počítána CfiiifsCfN^Na-JM^O C: 46,40%; H:519%; N: 10,31%; S: 11,80%

Nalezena C:46,48%; 11:5,53%; N: 10,60%; S:l 1,66%

Příklad 37 (1 R,5S.6S)-2-[l-(4-Fenylkarbamoyl-! ,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6-[(R)-l-hydroxy25 ethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p-N itrobenzy l-( 1 R.5S,6S)-2-[l-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tliiazol-2-yl)azetidin-3-yl]tIiioó-[(R)-1-hydroxyethyl]-l-mcthylkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku 3-aeetyIthio-l-(4-fenylkarbamoy 1-1,3 thiazol-2-yl)azctidinu (893 mg. 2.68 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 32) v dimethylformamidu (40 ml) byl přidán bydrazinacetát (296 mg, 3,21 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl (lR.5S.6S)-2(difeny 1 fosfory loxy)-6-[(R)-1 -hydroxyethyl] -1 -m et h yl kar ba pcn-2-em-3 -karboxylátu (1,59 mg, 3,2) mmol) v acetonitrilu (53 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledově lázní pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,87 ml, 10,7 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla κι oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethyíacetátu a ethylacctát : methanolu (9:1) jako eluentu za vzniku p nitrobenzy 1 (1 R,5$,6S)-2-[ I -(4-fenylkarbamoyI-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl |- 137CZ 300137 B6 thio-6-[(R)-1 -hydroxyethyl]-1 melhylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (1.2 g. výtěžek 71%) jako světle žluté pevné látky.

'H- NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 8,29 až 8,18 (2H. m), 7.73 až 7,62 (4H, m), 7.62 až 7,50 (IH, m), 7,42 až 7,82 (2H. m), 7,18 až 7,09 (IH. m), 5,51 (1H, d. J= 13,8 Hz). 5,25 (IH. d,

J= 13,8 Hz), 4,54 (2H. dd, J = 15.6, 7,8 Hz)), 4,40 až 4,21 (3H. m), 4.21 až 4.08 (2H. m), 3,31 (IH, dd, J - 6.9, 2,5 Hz). 3.23 (IH, dq, J = 9.1, 7.3 Hz). 1.39 (3H. d. J - 6.4 Hz). 1.29 (3H,d. J = 7,3 Hz).

(2) (1 R.5S.óS)- 2 [ 1 -(4 Fenylkarbamoyl-1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl Jthio-6 [(R)— l — io hydroxyethyl]-1-methy lkarbapen-2-cin-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-(1 R,5S,6S)-2-[ 1%4-feny Ikarbamoy 1-1 ,3-thiazol-2-yl)azetidin—3 yl]thio-6[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (400 mg. 0.63 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 37(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (120 ml) a destilované vodv (120 ml) i> byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (400 ing) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (53 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody - 4% acetonitrilu; zo destilované vody - 8% acetonitrilu; destilované vody - 12% acetonitrilu; destilované vody - 16% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S,6S)-2-[ I -(4-fenylkarbamoyl-l ,3-thiazol-2-yl)azctidin-3-yl]thio-6 [(R)-l-hydroxyethyl]-1-methy Ikarbapen 2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (211 mg, výtěžek

64%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D₃O): δ (ppm) 7,69 až 7,51 (3H, in), 7,54 až 7.42 (2H, m). 7.36 až 7.27 (1H. m), 4,63 až 4,52 (2H. m), 4,29 až 4,39 (1Π, m), 4,25 (1 H. kvint.. J - 6.3 Hz), 4,20 (l H. dd. .1 = 9.0. 2.3 Hz). 4,09 (1H, t, .1 = 8,8 Hz). 4,08 (1H, t, J = 8,8 I lz). 3,44 (1H, dd, J = 6.6, 1.9 Hz), 3,25 (1H, dq. J = 6,3, 5.9 Hz), 1.3 (3H. d, J = 6.4 Hz), 1,20 (3H. dd, J = 7,2, 2,4 1 iz).

IR (KBr): 3368,1, 1750,1, 1676.8, 1598.7. 1538,9. 1506,1. 1470,5, 1440,6, 1394,3, 1324.9.

5d 1295.9, 1245,8 cm ¹

Hmotnostní spektrum (EAB ): m/z: 501 [M+H]

Příklad 38 (1 R.5$,óS)-2-! l-[4%2-Hydroxyethylkarbamoyl)-!,3~thia/ol-2-ylJazetidin-3 yl] Ihío—6—[(R)—

1-hydroxyethyl]-!-methyIkarbapen 2-cm-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p- N itrobenzyl-(1 R,5S.6S)-2- (1 -| 4-[2-{ /ere-butyldimethy Isily loxy)ethy Ikarbamoy I]-1.34;) thiazol—2—yl}azetidin-3 -yl)thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3karboxylát

Do roztoku 3-acety lthio-1 -{4-[2-(/m-buty Id imethy Isily loxy )ethy Ikarbamoy 1J-1.3-th iazol -2yljazetidinu (398.2 mg, 0,96 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 33) v dimethyllonnamidu (20 ml) byl přidán hydrazinacetát (110 mg, 1,19 mmol) při teplotě míst- 138CZ 300137 B6 nosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl©! R,5S,6S)-2©difenylfo$foryloxy}-6©(R) -1 -hydroxyethyl]

-methy lkarbapen-2-em-3--karboxylátu (561.4 mg, 0,94 mmol) v acetonitrilu (38 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diiso5 propylethylaminu (0,7 ml, 4.02 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou. nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného a nasyceným vodným roztokem io chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (2:1) jako eluentu za vzniku p—nítrobenzvl—(lR,5S,6S)-2 (l-{4-[2©/e/r-butyIdimethylsiiyloxy)ethylkarbamoyl]-l ,3-thiazol -2—yI}azetídin—3—yljthio—6—f(R>—1 -hydroxyethyl]-1methylkarbapen-2-em-3 karboxylátu (605.3 mg. výtěžek 80%) jako světle Žlutého sirupu.

'H-NMR (500 MHz, CDCIJ: δ (ppm) 8,79 (211, d, J = 8.8 Hz), 7,66 (2H. d, J - 8.8 I lz), 7,54 (1H, t, J = 5,8 1 lz). 7.42 (1H, s). 5,51 (1H, d. J = 13,7 1 lz), 5,26 (1H. d, J = 13,7 Hz). 4,48 (IH, dd. J = 8,3, 7,3 Hz), 4.45 (IH, dd, J = 8,3. 7,3 Hz), 4,32 až 4.23 (3H, m), 4,06 (IH, dd, J = 8.3, 5,9 Hz), 4,03 (IH, dd, J = 8.3. 5.9 Hz), 3,76 (2H, t, .1 = 5.8 Hz), 3,52 (2H, q, J - 5,8 Hz),

3,30 (lil, dd, J= 6.8, 2,0 Hz). 3,208 (1H. dq, .1= 9.0, 7,4 Hz). 1,95 (lil, br s), 1,38 (3H,d, zo J = 5.7 Hz), 1,27 (3H,d, J = 6,8 Hz), 0,91 (911, s), 0,07 (6H, s).

(2) p-Nitrobenzyl© I R.5S.6S }2, I [4©2-hydroxy-ethylkarbamoyl)-l ,3-thiazol-2-yl]azetidin—3—yl}thio—6—[(R)— 1 hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3 -karboxylát

Do roztoku p-n itro ben zyl© IR, 5S,6S)—2—(l-©4—[2—(Zerc butyldimethylsilyloxy)ethylkarbamoylJ-1.3-thiazol-2-yl}thio-6-[(R) 1 -hydroxyethyl]-1 methylkarbapen-2-em 3-karboxylátu (605,3 mg, 0,84 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml) byla přidána kyselina octová (0,15 mk 2.6 mmol) a roztok IM tetrahydroamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,5 ml, 2,5 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu pří teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí so reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhlíčitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití toluen ; acetonitrilu (2 :3)jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl© 1 R,5S.óS)-2© l-[4©2-hydroxycthylkarbamoyl) 1,3-thiazol-2 yl]55 azetidin—3—yl}thio—€»-[(R)-1 —hydroxyethylJ— 1 - methy lkarbapen-2-em 3-karboxylátu (383,7 mg, výtěžek 75%) jako světle žluté pevné látky.

Ίί-NMR (500 MHz, CDCIJ: Ó (ppm) 8,23 (2Π. d, J = 7.9 Hz), 7,66 (2H. d. J = 7,9 Hz), 7,53 (IH. t. .1 = 5,3 Hz). 7.45 (1H, s), 5,508 (IH, d. J - 13,7 Hz), 5.255 (IH, d, .1 = 13,7 Hz), 4,50 (1Π. t. J = 8,6 Hz), 4.48 (IH, t, J = 8,6 Hz). 4,32 až 4.24 (3H, m), 4,07 (1H, dd, J - 8,6, 5,3 Ilz),

4.05 (1H, dd, J 8,6, 5,3 Hz), 3,807 (211, t. J = 5,3 Hz), 3.58 (2H, q, J - 5,3 Hz), 3,295 (1H, dd,

J= 7.6, 2,3 Hz), 3,21 (1Π, dq, J = 9.1. 7.6 Hz), 2,78 (IH, br s). 1,92 (IH, br s). 1,38 (3Π, d, J = 6.3 Hz). 1,24 (3H, d, J = 7,6 Hz), (3) (1 R.5S,6S)-2© 1 ©4© 2-Hydroxyelhyl karbamoyl)- 1.3—thiazol—2—ylJazetidin—3—yl}thio—6— [{R)-l hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3 karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobcnzyl© 1 R.5S.6S) 2© l-[4©2-hydroxyethylkarbamoyl)-l ,3-thiazol-2 -yl]azetidin-3yl}thio—6—[(R) !-hydroxyethyl]-1-methylkarbapcn-2-em 3 karboxylát (383,7 mg, 0.64 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 38(2)) ve směsi tetrahydrofuranu (20 ml) a destilované vody

5o (9,6 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (400 mg) ve vodní lázni (30 °C) 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (53.4 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na koloně Cosmosil za použití destilované

- 139Q7. 300137 Bó vody - 3% acetonitrilu; destilované vody - 5% acetonitrilu; destilované vody - 10% acetonitrilu a destilované vody jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (lR,5S,6S)-2-{ 1 —f4—(2—hydroxyethylkarbamoyl)— 1,3--thiazol—2—y!]a^etidin—3—yl} thio- 6 -f(R.)—

-hydroxyethyl]-! -methylkarbapen-2-em -3-karboxylová kyselina, sodná sůl (152.2 mg, výtěžek 49%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO): δ (ppm) 7.29 (111, s). 4,36 (2H. t. J = 8.4 Hz), 4,20 až 4.10 (1 H. m). 4. 05 (1H, kvintet. .1 = 6.6 Hz), 4.00 (IH, dd. .1 = 10.9, 2,2 Hz). 3,90 až 3,83 (2H. ni). 3.55 (2H. t. J- 5.5 Hz). 3,32 (2H, t, J= 5.5 Hz). 3.24 (IH. dd, .1- 6.6, 2.2 Hz). 3,06 (IH. dq. J- 10.9, 8,6 Hz), 1,11 (3H. d, J - 6,6 Hz). 1.00 (3H, d, J ~ 8.6 Hz).

io IR(KBr): 3396, 1748, 1649. 1599, 1551. 1395, 1315, 1265 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 491 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FSI ): počítána CpHz.vOf^S^Na 491,1035, Nalezena 491.1024 [M+H]'

Příklad 39 (1 R.5S.6S)-2- ] 1 [4-(( IS)— 1 —I lydroxymethy l-propylkarbamoyl)-1.3-thiazol-2 yljazetidin-3yl}thio 6-[(R)— I-hydroxyethyl] -l-methylkarbapen-2-cni-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

OH (1) p-Nitrobenzyl (1 R,5S,óS)-2-( l-]4 ·[( 1S)-1 -(terč-ButyldiinethyIsilyloxymethyl)propylkarbamoyl]-! ,3-thiazol-2 yl ;azetidin-3-yl)thio 6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen·2-em-3-karboxy lát

Do roztoku 3—acetyllhio— l—{4—[(1 S)-l -(/ťn-buty Id i methy Isily loxy methy l)-propyl karbamoyl |1,3-thiazol-2-y 1 fazetidinu (610 mg. 1,37 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 34) v dimethy lformamidu (30 ml) byl přidán hydrazinaeetát (152 mg, 1,65 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p --nitrobenzyM 1R, 5 S, 6 S )-2-( d i fenyl fosfory loxy)-ó-[(RH -hyd roxyethyl ]50 1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxylátu (814 mg, 1,37 mmol) v acetonitrilu (40 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (955 μΐ, 5.48 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána b v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2) a ethylacetátu jako eluentu za vzniku p-nilrobcnzyl-(l R,5S,6S)—2—(l—{4—[(1S)—(/<vc—butyldimethyIsilyloxy methyl )-propylkarbamoyl]-E340 thiazol- 2- yl [azetidín-3 yl)thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl j-l-methy Ikarbapen 2-em-3-karboxylátu (928 mg. výtěžek 89%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCl·): Ó (ppm) 8,23 (2H, d. J = 8.8 Hz), 7,66 (2H, d, ,1 = 8.8 Hz), 7,42 (lll. s), 7.42 až 7,38 (111, br d ,J = 9.5 Hz), 5,51 (IH, d, J - 13,9 Hz), 5,25 (IH, d, J = 13,9 Hz),

4,50 (IH, t. .1-8,1 Hz), 4,45 (IH, t. J= 8,1 Hz), 4.31 až 4.23 <2H, m), 4.27 (HI, dd.

- 140CZ 300137 B6

J = 8.8, 2,6 Hz). 4,07 až 1,01 (2H. m), 4,00 až 3.94 (IH, m), 3.72 (IH, dd. J =- 10.3. 2.6 Hz). 3.65 (IH, dd. J = 10,3, 4,0 Hz), 3,30 (111, dd. J = 7.3, 2,6 Hz). 3.21 (IH. dq. J = 8.8, 6,6 Hz). 1.72 až 1.56 (2H. m), 1,38 (3H,d, J = 5.7 Hz), 1.27 (.711. d. J = 6.6 Hz), 0.95 (3H. t. J - 7.3 Hz). 0.90 (9H. s). 0.06 (6H.s).

Λ (2) p-Nitrobenzyl-( IR,5S,6S)-2-( 144-((IS)-l-hydroxymethy 1-propylkarbamoyl)-],3th iazol 2-yljazetidin-3-yljthío-6-[(R)—I— hydroxyethyl] 1-methylkarbapen 2 em-3karboxylát io Do roztoku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-( l-(4-[( 1 S)-l-(/ř7Y.'-bLityldimethylsilyloxymethyl)propy Ikarbamoyl]— 1,3—thiazol—2—yl} azetidin—3—yl )th io—6—l(R)— 1 —hydroxyethyl 1—1 —methy Ikarbapen-2-em-3-karboxylátu (920 mg, 1,23 mmol) (získané podle popisu v příkladu 39(1)) v tetrahydrofuranu (46 ml) byla přidána kyselina octová (208 μΐ, 3,63 mmol) a roztok IM tetrahydroamoniumíluoridu v tetrahydrofuranu (3,63 ml, 3,63 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 2 dny při teplotě místností. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný; filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromátograťicky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát : methanolu (95 : 5) jako

2o eluentu za vzniku p-nítrobenzyl-(l R,5S,6S)-2-{ l-[4 (( 1S)-I-hydroxymethyl-propyIkarbamoyl)— 1.3—th iazol 2 yljazetidin- 3-y I) thio-6- [(R) 1 -hydroxyethyl]-1 -melhy lkarbapen-2-em3-karboxylatu (437 mg, výtěžek 56%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (500 MHz, CDCl,): δ (ppm) 8,23 (2H, d, .1 = 8,8 Hz). 7,66 (2H. d. .1 = 8,8 Hz). 7,44 (IH, s). 7.24 až 7,19(1 H, br d. J = 7.8 Hz), 5.51 (IH. d. J - 13,7 Hz). 5.26 (IH. d. J - 13,7 Hz),

4.50 (2H, dl, J - 8,8, 4,9 Hz). 4.32 až 4.24 (3H. m). 4,07 (211. dt, .1 = 8.8. 5.9 Hz). 4,01 až 3,93 (IH. ni). 3,81 až 3.75 (1H, m). 3.71 až 3,64 (111, m). 3.30 (IH, dd, .1 = 6,8 2,9 I Iz), 3.21 (IH, dq, J = 9,0, 6.8 Hz). 1.75 až 1,66(111, ni), 1,65 až l.55(IH,m), 1,38 (311. d. J = 6,8 Hz). 1.28(311, d, J - 7,8 Hz). 1,00 (3H, t.J = 7,8 Hz).

(3) (1 R,5S,6S)-2-{ l“[44(IS)-l-Hydroxymethylkarbamoyl)-l,3-thiazol-2-yl]az.etidin-3yl] thio—6—|(R)—1—hydroxyethyl] -1 —methylkarbapen—2—em- 3 karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-{ 1-(4-(( 1 S)-l-hydroxymethyl-propylkarbamoyl)-1,3-thiazol-2yljazetidin-3-yl}thio 6 [(R)—!—hydroxyethyl]—l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (430 mg, 0,681 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 39(2)) ve směsi tetrahydrofuranu (22 ml) a destilované vody (22 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (430 mg) při teplotě místnosti 4 hodiny; Po zkontrolování doběhnutí reakee byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (57 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentro40 vána za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na koloně Cosmosil za použití destilované vody a destilované vody : acetonitrilu (94 : 6) jako eluentu. Eluát byl lyofi lizován za vzniku požadované sloučeniny ()R,5S,6S)-2-{l-[4-((lS)-l-hydroxymethylpropylkarbamoyl)l .3—thiazol—2 y l]azetid i n-3-yl[thio~6-[(R)-l hydroxy ethyl J-l-methy lkarbapen 2 etn-3karboxylová kyselina, sodná sůl (212 mg, výtěžek 60%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D_?O, TSP): δ (ppm) 7.49 (IH, s). 4.59 až 4.52 (2H. m). 4.39 až 4,31 (IH, m), 4,25(111, dq,J = 6,8, 6,3 Hz), 4,21 (IH, dd. J - 9,0, 2,4 Hz). 4.10 až 4.03 (2H. m).4,0l až 3.93 (IH, ni). 3.71 (IH. dd, J= 11,7. 4.5 Hz). 3.64 (IH, dd, J = 11,7, 6,8 Hz). 3.43 (lil, dd. J = 6,3. 2.4 Hz). 3,26 (IH, dq, J = 8.8. 7.2 Hz), 1.73 až 1,62 (IH, tn). 1.57 až 1,44 (IH. m). 1.30 (3H. d. J = 6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J = 7,2 liz), 0,93 (3H, t, .1 = 7.4 liz).

511 IR (KBr): 1750. 1650. 1602, 1547, 1393. 1313 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB'): m/z: 519 [M+H]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FSI¹): počítána 5I9.1348, Nalezena 519,1339 [M+H]

- 141 CZ 300137 B6

Elementární analýza počítána C2iH₂7O₆N4S₂Na,7/4H2O C:45,85%: H:5.79%: N: 10.18%: S: 11,66%

Nalezena C:46.07%; H:5,78%; N: 10.29%; 8:11.61%

Příklad 40 {1 R,5S,6S)-2- j 1 - (4-(( 1S)-1 -Hydroxymethy l-ethylkarbamoyl)-1.3-thiazol- 2-y IJazetidin-3yl} th i 0-6-[(R)-1 -hydroxyethyl ]-l -methyl karbapen-2-em- 3 -karboxylová kv se li na. sodná sůl

HO

COONa⁺

(1) p-Nitrobenzyl-(lR.5S,6S)-2 (1 -{4-[( 1S )-2-(/erc-Bu ty Id i methy lsily loxy)- 1 methylethylkarbamoyl]-! ,3-thiazol-2-yl]azetidin-3-yl)thio-6-[(R)- 1 hy droxyethyl ]-1-methyl karbapen2-em-3-karboxylát i? Do roztoku 3- acety Ithio-1 - {4 -[(18) 2 (/crc-buty Idimethylsi lyloxy)-l-methy lethylkarbamoyl]-l,3-thiazol-2-yl}azetidinu (645 mg, 1,50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 35) v dimethylformamidu (32 ml) byl přidán hydrazinacetát (166 mg, 1,80 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl (1 R,5$,6S)-2-(d i fenyl fosfory loxy )-6-|(R)-l-hy2d droxyethyl] 1 melhylkarbapen-2-cm-3-karboxylátu (892 mg, 1,50 mmol) v acetonitrilu (45 ml) přidán po kapkách k výsledné smési v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1.05 ml, 6,0 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylaeetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2) a ethylacetátu jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S.6S)-2-( l-{4-[( IS )-2-( /crc-butyld imethy lsily loxy)-1 -methy I]—ethy lsí) karbamoyl}-! ,3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yl)thio—6—[(R.)- I hydroxyethyl]-1 -methyIkarbapen2-em-3 karboxylátu (949 mg, výtěžek 86%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCI,): Ó (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.66 (211, d, .1 - 8.8 liz). 7.44 až 7,38 (1H, br d, .1 = 5,9 IIz), 7,42 (lil, s), 5,51 (IH, d, J - 13,9 Hz). 5,25 (1H, d, J - 13,9 Hz), 4,52 až 4,42 (2H,m), 4,33 až 4,22 (3H. rn), 4,22 až 4,14 (IH, m). 4.04 (211, ddd, ₃s .1 = 14.0. 5.9. 2.9 Hz). 3.67 (IH. dd. J 10.3. 4.4 Hz). 3,62 (IH. dd. J = 10.3. 2.9 Hz). 3.30 (IH, dd. 6,6. 2,2 Hz), 3,21 (IH, dq, J- 7,3, 6,6 Hz), 1,38 (3H, d, .1 = 5,9 Hz), 1,27 (311, d, .1 - 7,3 Hz). 1.25 (311, d. J = 6,6 1 Iz), 0,92 (911, s). 0.07 (6H, s).

(2) p Nitrobenzy 1% I R,5S,6S)-2-{ 1 —[4—((lS)—2—hydroxy— l —methylethylkarbamoyl>—1,3— •io thiazol-2-yl[azetidin-3-yl}thio-6-[(R)—1— hydroxyethyI] 1 melhylkarbapen 2 ein-3karboxylát

Do roztoku p—nitrobenzyl—(1 R.5S.6S)—2—(1—(4—[(1S) 2 (Jere butyldimetliy lsily loxy)—l - methy lethyl karbamoyl]-! ,3-th iazol—2—yl} azetidin—3—yl jth io—6—[(R)—1 -hydroxy ethyl ]-l -methyl45 karbapen 2-em-3-karboxylátu (940 mg, 1,28 mmol) (získané podle popisu v příkladu 40(1)) v tetrahydrofuranu (47 ml) byla přidána kyselina octová (221 pl, 3,85 mmol) a roztok IM tetra- 142 CZ 300137 Bó butylanioniumfluoridu v tetrahydrofuranu (3.85 ml, 3,85 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 3 dny při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smés rozdělena mezi ethylaeetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný; filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylaeetát : methanolu (99 : t a 9 : 1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzvl-(l R,5S,6S)-2-{ l-[4-(( 1 S)-2-hydroxy-l-methylethylkarbamoyl )-l,3-th iazol-2-yl]azetídín-3-yl)thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl] I - methy Ikarbapen2-em-3-karboxylátu (462 mg, výtěžek 58%) jako světle žluté pevné látky.

io 'H-NMR (400 MHz, CDClj: δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8,8 Hz). 7.66 (2H. d, J = 8,8 Hz), 7.44 (1Π. s). 7.23 až 7.19 (IH, br d, J = 7,3 I lz), 5,51 (1H, d, J = 13.9 Hz), 5.25 (1H, d , J - 13,9 I lz),

4.52 až 4,46 (211, m). 4.31 až 4,24 (2H, m), 4,27 (1H, dd, J = 9,5. 2,0 Hz), 4.22 až 4.15 (1H. m), 4,06 (211. dt, J = 8,1, 5,1 Hz). 3.79 až 3,71 (Ul, m), 3,66 až 3.59 (IH, in). 3,30 (IH, dd. J = 6,6. 2,2 Hz). 3.21 (Hl. dq, J = 9.5, 7.3 Hz), 1,38 (3H. d. J - 5,9 Hz), l,28(6H,d, J = 7,3 Hz).

(3) (1 R.5S.6S )-2-( 1-(4-(( 1 S)-2-Hydroxy-1-methylkarbamoyl)-l .3—thiazol—2—v 1 ]azetidin-3yl}thio—6—[(R)—l—hydroxyethyl] 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( I R,5S.6S)-2-( 1-(.4-(( 1 S)-2-hvdroxy 1 -methylethylkarbamoyl)-] ,3-thiazol

2-yIJazetidin-3—ylíthic>-6—[(R)— l —hydroxyethyl]— 1 -methyIkarbapen- 2 em 3-karboxylát (460 mg. 0,745 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 40(2)) ve směsi tetrahydrofuranu (23 ml) a destilované vody (23 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (460 mg) při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (63 mg), ethylaeetát a desti25 1 ováná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosil za použití destilované vody a destilované vody : acetonitrilu (82 : 12) jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S.6S)-2-{ 1-(4-(( 1 S)-2-hydroxy-l-methy lethy Ikarbamoyl )-1.3thiazol—2—yljazetidin--3—yI)thio 6 [(R)--1-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3~karboxy30 lová kyselina. sodná sůl (179 mg, výtěžek 48%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D₂O, TSP): δ (ppm) 7,48 (IH.s). 4,56 (211, dd, J = 8.3, 8.3 Hz). 4.39 až 4,32 (Ul, m), 4,25(111, dq, J - 6,3, 6,4 Hz), 4,20(1 H, dd, J-9.1.2.4 Hz), 4.18 až 4.11 (111, m). 4.10 až 4,03 (2H, m), 3.68 (IH. dd. J =- 11.6, 4.8 Hz), 3,61 (111. dd, J - 11,6. 6.7 Hz), 3,44 (IH. dd. J= 6,3, 2,4 Hz), 3,26 (IH. dq, J = 9,1. 6.6 Hz). 1,30 (3H, d, J = 6,4 Hz). 1,22 (311, d. J = 6,7 Hz), 1,20 (3H, d, J = 6.6 Hz), 3.26 (1H, dq, .1 = 9,1,6,6 í lz), 1.30 (3H, d, J = 6.4 Hz), 1,22 (3H. d. .1 = 6,7 Hz), 1.20 (3H, d, J - 6,6 1 lz).

IR(KBr): 1749. 1650, 1602, 1547, 1393, 1313. 1295 em '

Hmotnostní spektrum (EAB ): m/z: 505 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána C_V1 CQ,N,S'\;'i 505,1191, Nalezena

4(1 505,1196 [M+H]¹

Elementární analýza počítána Cio^^CLNjS^NaJGI E()

C:45,45%: 11:5,28%: N: 10,60%; S: 13,13%

Nalezena C:45,Ó3%; Π:5,35%; N: 10,66%; S:11,91%

Příklad 41 (1 R,5S,óS)-2- {1 - [4-((1 S)-1-Hydroxymetliy l-2-methylpro py Ikarbamoyl)-1,3-thiazol-2-yl]azetidin-3-yl}thio—6—[(R)— 1 -hydroxyethyl] 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

- 143 CZ 300137 B6

(1) p- Nitrobenzvl-( 1 R,5S,6S)—2—(1—{4—[< 1S) l-(/e/r-buty Idimethylsily loxy methyl)- 2-methylpropylkarbamoylj—1.3—thiazol—2 yl)azetidin-3-yl)thio-6- [(R)- I hydroxyethvl]-1-methyl· karbapen-2-em 3 karboxy lát

Do roztoku 3- acety lthio-1 - {4- [(1S)-1 - (lerc -buly Idimethylsily loxymethyl)- 2 -methylpropylkarbamoyl]-1.3-thiazol 2 yljazelidinu (500 mg, 1,09 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 36) v dimethylformamidu (25 ml) byl přidán hydrazinacetát (121 mg, 1,31 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(1R. 5 S,6S)-2-(d ifeny Ifosfory loxy )-6io [(R)-I hydroxyethvl]-l-methylkarbapen-2-em 3 -karboxy látu (648 mg, 1,09 mmol) v acetonitrilu (33 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (759 μΐ, 4,36 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnuli reakce, ethyIacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi.

Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek bvl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2 a 1 : 4) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyI-( 1 R.5S,6S)-2-( l-{4-[(lS)-l-(/ťrc buty Id imethy lsily loxy methy l)-220 met hy 1—propy Ikarbamoy 1]— 1,3—thiazol- 2- y I ] azetidin-3- yl)thio—6-|( R)-1 - hydroxyelhyl]-1 methylkarbapen -2-em-3-karbo\ylátu (649 mg, výtěžek 84%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCl;,): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J - 8.8 Hz). 7.66 (2H. d, J - 8,8 Hz). 7,47 až

7,52 (1H. br d, J = 9,8 Hz), 7,43 (lil. s). 5,52 (1H. d. J - 13.7 Hz). 5,25 (IH. d, J - 13,7 Hz), 4,51 (l H, t, J = 7.8 1 Iz), 4,45 (1H, t. J = 7,8 Hz), 4,28 (1H, dd, J = 9,3, 2,0 Hz). 4.31 až 4,25 (2H, m).

4,05 (2H, ddd, .1 - 7,8, 5,6, 1,2 Hz), 3.86 až 3.80 (2H, m), 3,62 (IH. dd, .1 - 9.8, 3,9 liz), 3.30 (líh dd. J - 6.8. 2.0 Hz), 3.22 (1H, dq, ,1 9,3, 6.8 Hz), 2,05 až 1,95 (IH, m), 1.39 (3H, d,

J 5,9 Hz), 1,28 (3H. d, J = 6,8 liz). 0,99 (3H, d, J = 6,8 Hz), 0.97 (3H, d. J - 6.8 Hz). 0,91 (911, s). 0,06 (6H.s).

3(i (2) p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-[ l-]4-((l S)- 1 hydroxymethyl-2-methy Ipropy Ikarbamoy I)1.3—thiazol—2-yl]azetidin—3—yl lthio—6—](R)—1 -hydroxy ethyl] 1 -melhylkarbapen-2-em-3karboxy lát

Do roztoku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-( 1—{4—[(1S) 1 (terč butyldimcthylsilyloxymethyl)-2mcthylpropylkarbamoylj-1,3-thiazol 2 yI)azetidin-3-yl)thio-6-[(R)™ 1-hydroxyethy 1]-1 -me35 thylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (690 mg, 0.914 mmol) (získané podle popisu v příkladu 41(1)) v tetrahydrofuranu (35 ml) byla přidána kyselina octová (157 μΙ, 2,74 mmol) a roztok IM tetrabutylamoniumfiuoridu v tetrahydrofuranu (2,74 ml, 2,74 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 2 dny při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem

4o hydrogenuhliěilanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek by l čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát : methanolu (9:1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyI-( 1 R,5S,6S)-2-{ 1-(4-(( lSHl-hydroxymethyl-2-methylpropyl· karbamoyl)-l,3-thiazol 2-yljazclidín-3- y 1} th io-6- [(R)— I hydroxyelhyl]-1-methylkarbapen45 2-em-3-karboxylátu (388 mg, výtěžek 66%) jako světle žluté pevné látky.

- 144 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 MHz, CDCI,): δ (ppm) 8.23 (2H. d, J = 8,8 Hz), 7,66 (2H. d. J = 8.8 Hz). 7,44 (IH. s). 7.33 až 7.28 (IH. br d. J = 8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J - 13.9 Hz). 5.25 (IH. d. J = 13.9 Hz),

4,50 (2H, ddd, J = 8.1. 3.7 IIz). 4.32 až 4.24 (2H, m), 4,27 (1H. dd. .1 = 9.2. 2.5 Hz). 3.88 až 3,76 (2H, m). 3,74 (IH. dd, J= 11.0. 6.6 Hz). 3.30 (IH. dd, J- 7.0, 2.5 Hz). 3,22 (IH, dq,

J - 7.2 7,3 Hz), 2,06 až 1,95 (IH, m), 1,38 (3H, d, J - 6,6 Hz), 1.28 (3H, d. J - 7.3 Hz), 1,02 (3H, d, J = 7,3 Hz), 0,99 (3H. d. .1 = 6,6 Hz).

(3) (1 R.5S.6S)-2-l 1 -[4 ((IS)-1-Hydroxymethyl-2-methyIpropylkarbamoyl)-l,3-thiazol-2yljazetidin -3-yI }thio—6—|(R)— 1 hydroxyelhyl] -1 -methyIkarbapen 2 -em-3-karboxv lová io kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S.6S) 2 {1 -[4 ((1 S)-l-hydroxymethyl-2-nicthylpropylkarbamoyl)-l ,3thiazol- 2 yl]azctidin—3—yl}thio—6—[(R)_ 1 - hydroxyethyl ]-l-methy lkarbapen-2-cm-3-karboxylát (380 mg, 0,588 mmol) získaný podle popisu v příkladu 41(2) ve směsi tetrahydrofuranu (19 ml) a destilované vody (19 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (380 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (49 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ch roní atogra fícky na koloně Cosmosil za použití destilované vody a destilované vody : acetonitrilu (76 : 24) jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za

2ii vzniku požadované sloučeniny (1 R,5$,6$)-2-{ 1-(4-(( 1 S)-l-hydroxyinelhyl-2-methy Ipropy Ikarbamoyl)—1.3—thiazol - 2—yl]azetidin—3—ylJ thio—6—l(R) 1 hydroxyethyl]-!-methy Ikarbapen2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (164 mg, výtěžek 52%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, D_;?O, TSP): δ (ppm) 7.49 (IH, s), 4,61 až 4,53 (214, m), 4.39 až 4,31 (111, m). 4,25 (lH.dq.J~ 6,2, 6,3 Hz). 4,20 (IH. dd. J “ 2,4, 9,1 Hz). 4.11 až 4,04 (2Π. ni), 3.87 až

3.83 (1H. ni). 3.80 (IH, dd, .1= 3,8. 11,7 Hz), 3.71 (IH, dd, J = 7.5, 11,7 Hz). 3,43 (IH. dd,

J - 2,4. 6,2 Hz). 3,26 (lil, dq. J ~ 9.1. 7.2 Hz), 1,97 až 1,84 (IH. ni), 1,30 (3H, d, J ~ 6,3 Hz), 1,20 (31 L d. J - 7,2 Hz). 0,97 (3H. d. J = 6,8 I Iz), 0,93 (3H, d, J - 6,9 Hz).

IR(KBr): 1749, 1651, 1600. 1547, 1493, 1470. 1393. 1315 cm ¹I Imotnostní spektrum (FAB ): m/z: 555 [M+H]’ in Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FSI ): počítána C^íLoOfiNjSiNa 533,1505, Nalezena 533,1497 (M+H]’

Elementární analýza počítána C22H;_líO6N,₁S₁Na,5/3H₂O C:46,96%; H:5,79%; N:9,96%; S:11,40%

Nalezena C:46.89%; H:5,86%; N: 10,41%; S: 11,15%

Příklad 42 (1 R.5S.6S)-2-ί 1 [4 -((1 S)-l-Hydroxymethyl-3-methylbutylkarbamoyl)-l ,3-thiazol-2 yI]azetidin -3—yl }thio—6—[ (R)—l —hydroxyethyl]—I -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

,.l.....

HO

COO*Na⁺

- 145 C7 300137 B6 (1) p-Nitrobenzyl-(l R,5S,6S)—2—(1—{4- [(1S)-1-(Z^re-Butyld imethy Isi ly loxy methy l)-3methy Ibutv lkarbamoy I] -13 th iazol-2-yl}azet id i n-3-yl)th i o-6-[(R)-l-hydroxy ethyl ]-lmethylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3 -acety llhio-1-{4-J( 1S)-1 -(terč butyldimethylsilyloxymethyl)-3 methylbutylkarbamovl]-l.3-thiazol-2-yl}azetidinu {450 mg, 0,954 mmol) {získaného podle popisu v referenčním příkladu 37) v dimethylformamidu (23 ml) byl přidán hydrazinacetát (105 mg. 1,14 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl {1 R, 5 S.6S)-2-(d i feny Ifosfory loxy )-610 [(Rf-l-hydroxyethylj-l-methylkarbapen-2 em-3-karboxylátu (567 mg. 0.954 mmol) v acetonitrilu (28 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (665 μΙ. 3,82 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi.

Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2 a 1 : 4) jako eluentu za vzniku p—nitrobenzyl—(1 R,5S,6S)—2—(l — (4—[(1S)—1 (terč-butyldifenvlsilyloxy)-32i) methylbutylkarbatnoyl]— 1,3—thiazoi—2—yl}azetidin 3-yI)thio—6-[(R)-1 -hydroxyethyI] 1methylkarbapen-2-em-3-karboxylálu (645 mg, výtěžek 87%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCb): 6 (ppm) 8,23 (2H, d, .! - 8,8 Hz). 7,66 (2H. d. J - 8,8 Hz). 7.41 (III, s), 7,35 až 7,30 (IH, brd, J - 9,5 Hz), 5,51 (IH. d, J = 13,9 Hz), 5.25 (111, d. J - 13,9 Hz), 4,50 (1H. dd, J - 8.1 Hz). 4,45 (1II, t. J = 8.1 Hz), 4,31 až 4.24 (311. m), 4.21 až 4.13 (1H, m),

4.06 (IH, dd, J 5,9, 2,9 Hz), 4,03 (1H, dd, J 5,9, 2,2 i Iz). 3,66 (2H. d, J - 2,9 Hz), 3,30 (lil, dd,.) - 7,3. 2,9 Hz), 3,21 (IH, dq. J 6.6. 7,3 liz). 1,68 až 1.57 (IH,m), 1,52 (111, ddd, J = 14,6. 8,8, 5,9 Hz). 1,44 (111, ddd. J- 14,6, 8,8, 5.9 Hz). 1,38 (311, d, J = 5,9 Hz), 1.28 (3H, d. J = 7,3 Hz), 0,95 (6H. t, J = 6,6 Hz). 0,91 (9H, s), 0,05 (611, s).

(2) p—NitrobenzyI—(1 R.5S.6S)—2—(l —[4—((1S)—I —l lydroxymethy 1 3 methylbutvlkarbamoyl)1.3-thiazoi 2 y I jazet idin—3—yl} thio—6—((R)— 1 -hydroxyethy lj-l-methylkarbapen-2-em- 3 karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyí-(lR,5S,6S) 2 {l-{4-[( 1 S)-l-(/en^L-butyldimethylsilyloxyinethyl>-355 methy lbuty lkarbamoy l]-l,3-thiazol-2-yl}azetidin-3-yl)thio 6-[(R)-l-hydroxyethylj-1-methy Ikarbapen--2-em-3-karboxylátu (640 mg, 0,827 mmol) (získané podle popisu v příkladu 42(1)) v tetrahydrofuranu (32 ml) byla přidána kyselina octová (142 μΙ, 2,48 mmol) a roztok 1M tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,4$ ml, 2,48 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 2 dny při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs roz40 dělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát : methanolu (9 ; 1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzvl-( 1 R.5S.6S)-2-( l-[4-(( 1S) 1 hydroxymethyl-3-methyIbutyl45 karbamoyl) 1,3—thiazoi—2—yljazetidin—3—yl}thio -6-[(R)-l-hydroxyethy 1]-1-methylkarbapen2-em-3-karboxylátu (302 mg, výtěžek 55%) jako světle žluté pevné látky, ll-NMR (400 MHz. CDCI.,): δ (ppm) 8,23 (2H. d, J = 8,8 Hz), 7.66 (2H. d. J = 8.8 Hz). 7.44 (1H. s). 7.18 až 7.14 (t H. br d, .1 = 7.8 Hz). 5.51 (IH. d. J = 13.7 Hz). 5.26 (IH. d. J = 13.7 I Iz).

4,53 až 4.47 (2H, in). 4.31 až 4,25 (3H. m). 4,20 až 4.13 (IH. m), 4,07 (2H. ddd,

J = 8,8, 4,9, 4.9 I Iz). 3,80 až 3.74 (IH, m). 3.66 až 3.60 (IH, m), 3,30 (IH. dd, .1 = 6.8. 2.9 Hz).

3,22 (lil, dq. J - 6,8. 6.8 Hz), 2,79 až 2,74 (IH, bl, J 5,9 Hz), 1,74 až 1,65 (lil. m), 1.51 (IH.

ddd. J = 14.7, 8.8, 5,9 Hz), 1,43 (1H, ddd, J = 14.7, 8,8, 5,9 Hz), 1,38 (3H. d. J = 6.8 Hz). 1.28 (3H. d. J -6,8 Hz), 0.96 (3H, d, J = 4.9 liz). 0.95 (3H, d, J =4.9 Hz).

- 146CZ 300137 B6 (3) (1 R.5S.6S} 2 | i_[4—((I S)-1-Hydroxy methy l-3-methylbuty lkarbamoy l)-l,3-th iazol-2yljazetidin--3-yl) thio--6--[(R)— 1 —hydroxyethylj— 1 -methy Ikarbapen--2-em-3--karboxylová kyselina, sodná sůl p-N itrobenzy l-( 1 R,5S,óS)-2-{ 1 [4—('(' 1 S)-l-hydroxymethyl-3-methylbiity lkarbamoy 1)-1,3thiazol—2—v !]azetidin—3—yl J thic>6—|(R > 1 -hydroxyethy I] 1 -methy lkarbapcn-2-em-3-karboxylál (300 mg, 0.455 mmol) získaný podle popisu v příkladu 42(2) ve směsi tetrahydrofuranu a destilované vody (15 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (380 mg) při teplotě místností 2,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční m směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (38 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Smčs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na koloně Cosmosíl za použití destilované vody a destilované vody ; acetonitrilu (76 ; 24) jako eluentu. Eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S,6S)-2-{ 1 —[4—((1 S)-l-hydroxymethy!-3-methylbutylkarba15 nioyl)-1,3-thiazol-2-yIJazetidin-3-yI}thio 6 [(R)-l-hydroxyethy!]-!-methylkarbapen-2-em3-karboxylová kyselina, sodná sůl (131 mg, výtěžek 53%) jako bílé pevné látky.

’Η-NMR (400 MHz, D₂O, TSP): ó (ppm) 7,45 (IH, s), 4.60 až 4.53 (2H, m), 4,39 až 4.3 I (IH, m), 4,25 (1H, dq, J = 6,0, 6,4 Hz), 4,19 (111, dd. J = 2,0. 9.1 Hz). 4,19 až 4,13 (1H. m), 4,06 (211, dd. J 4,9. 8,4 Hz), 3,68 (1H, dd. J = 4,7, 11,6 Hz). 3,59 (1Π. dd. J ~ 6,7, 11.6 Hz). 3,43 (1H. dd, zo J - 2.0, 6,0 Hz), 3,26 (IH, dq, J = 9,1. 7,2 IIz). ! ,69 až 1,57 (1 Η. m). 1.50 (1H, ddd, J = 4.5, 9,2,

14.1 Hz), 1.39 (IH, ddd, J = 4.5,9,2, 14,1 Hz), 1,39 (3H, d, J = 6,4 Hz). 1,20 (3H. d. J = 7,2 Hz),

0.91 (6H, t, J = 6.2 Hz).

IR(KBr): 1750. 1651, 1604, 1547. 1492. 1470, 1390, 1311 cm '

Hmotnostní spektrum (PAB ): m/z: 547 [M+H]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (EST): počítána pro CMHrOjSfiSiNa 547,1661,

Nalezena 547.1674 [M+H]’

Příklad 43 (l R,5S,6S)-2-{ l-[4-((] S.2S)-1-hydroxymethyl-2-methylbuty lkarbamoy l)-1.3-thiazol-2-yl]azelidin—3—y 11 tli io—6—[(R)— l -hydroxy ethyl |-1 -methy lkarbapen-2 em 3 karboxylová kyselina, sodná sůl

(!) p- N itroben zyl-(lR,5S,6S )-2-( 1—{4—[< 1S,2S)-1 -(/m*-buty Idi methyl sily loxy methy l)-2methyIbutylkarbamoylJ—1,3—thiazol—2—yl}azetidin-3 yl)thio 6 [(R) 1 hydroxyethyl] 1methylkarbapen-2-em-3 karboxylát

Do roztoku 3-acety Ith io-1-[4-[(lS, 2 S )-1-(/0/-0 buly Idi melhyl sily loxy melhyl) 2 methy Ibutyl40 karbamoyl] 1,3-thiazol 2 yljazetidinu (910 mg, 1,93 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 38) v dimethylformamidu (46 ml) byl přidán hydrazinacetát (213 mg.

2,31 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-n itrobenzy l-( 1R, 5 S,6S)-2-(d i fenyl fosfory loxy) 6f(R’>—1 -hydroxyethyl]-1 -methyIkarbapen 2--em-3-karboxvlátu (1,15 mg. 1.93 mmol) v accto- 147CZ 300137 B6 nitrilu (58 ml) přidán po kapkách k výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,34 μΙ. 7,72 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi.

Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: n-hexane : ethylacetát (1 : 1 až ! : 4)) za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R.5S.6S)—2—(1—{4—[< 1 S,2S)— 1 -(Zerc-bulyldimethylsilyloxymethyl)-2-methylio butyl karbamoyl] 1,3-th iazol-2-y 1 ] azet id i n-3-yl)thio-ó-((R)-l-hydroxy ethyl] 1 methylkarbapen--2--cm-3--karboxylátu (765 mg, výtěžek 51%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl j: δ (ppm) 8,23 (211, d, J = 8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J = 8,8 Hz). 7.50 až 7.45 (1H. br d, J = 9.5 I Iz). 7.42 (111, s). 5,66 (1H. d. J = 13.9 Hz), 5,25 (1 H, d, J = 13,9 Hz), 4,50 (IH. I, J = 8,l Hz). 4.44 (IH. í, J = 8.1 Hz). 4,32 až 4,24 (211, m). 4,27 (IH. dd.

J = 2,6, 9.7 Hz). 4,07 až 4,02 (21 l.m). 3.91 až 3,85 (1H, m). 3,83 (1H, dd. J - 2,9. 10,3 Hz), 3,63 (1H. dd. J = 3.7. 10.3 Hz), 3.30 (1H. dd. J = 2.6. 7.0 Hz), 3,21 (1H, dq, J = 9,7, 6.6 1 Iz), 1,88 až 1,84 (IH, brs), 1,80 až l,70(IH,m), 1,58 až 1,50(111, m), 1,38 (3H, d, J = 6,6 Hz), 1,27 (3H,d, J = 7,3 Hz). 1,22 až 1,10(111. m), 0,95 (3H. d. J = 7,3 Hz), 0,90 (3H, i, J - 7,4 Hz), 0,91 (9H, s), 0,05 (6H, s), (2) p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-{l—[4—((I S,2S)—1 —hydroxymethyl-2—metliylbutylkarbamoyl)-l ,3-thiazo 1-2-yl] azet idi n—3—y 11- th io—6—[(R)— l -hydroxyethyl] 1 m ethyl karbapen2-em-3-karboxylát p-Nitrobenzyl-(l R,5S,6S)—2—(1—{4—[(1 S.2S)-l-(/í-?r-buty Idímethy Isily loxyniethy!)-2-methylb u tyl karbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl} azet idin-3->l)thio- 6- ((R f-1 -hydroxyethy 11-1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxylát (760 mg, 0.982 mmol) (získané podle popisu v příkladu 43(1)) v tetrahydrofuranu (38 ml) byla přidán kyseliny octové (169 μ|. 2,95 mmol) a IM tetrabutylainoniumfíuorid v roztoku tetrahydrofuranu (2,95 ml, 2,95 mmol) a směs byla míchána při teplotě místnosti 3 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a voda byl přidán do reakční směsi. Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl Čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent : ethylacetát ethyl35 acetát: methanol (9:1)) za vzniku p nitrobenzyl (1 R,5S,6$)-2-{ 1-(4-(( 1 S,2S)-l-hydroxymethyl-2-mcthy Ibutyl karbamoyl)-1,3-thiaz.ol-2-yl]azetidin-3-yl I thio—6—[(R)— 1 -hydroxyethy I]—1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxyfátu (390 mg, výtěžek 60%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDClj: ó (ppm) 8.23 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7,66 (2H, d. J = 8.8 Hz). 7.44 (11L s). 7,33 až 7,29 (IH. brd. J - 8.8 Hz), 5,51 (IH, d. J = 13,8 Hz), 5.25 (lil, d, J - 13,8 Hz),

4.53 až 4.46 (2H. m). 4,31 až 4,28 (2H. in). 4,28 (IH.dd, J = 9.5. 2,2 Hz), 4.10 až 4,03 (2H. m), 3,94 až 3,87 (1H, m). 3.85 až 3,79 (III, m), 3,78 až 3,72 (111. m). 3,30 (1H. dd. .1 = 7.0, 2,2 IIz). 3,21 (!H, dq, J= 9,5, 7,3 Hz), 1,83 až 1,72 (IH, m), 1.61 až 1,48 (IH, m), 1,38 (3H, d, .1 = 6,6 Hz). 1,28 (3H, d, J = 7.3 Hz), 1.26 až 1,14 (IH, m), 0.99 (3H, d. J - 6,6 Hz), 0,93 (3H, t,

J = 7,3 Hz).

(3) (1 R.5S,6S)-2-{ 1-(4-(( 1 S,2S)-l-hydroxymethyl-2-methylbutylkarbamoy])-l ,3-thia/ol-2yIJazetidin-3-yl}thio- 6-[(R)-l -hydroxyethyl]- I methylkarbapen--2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p Nitrobenzyl-< 1 R,5S.6$)-2-{ 1-[4 ((1S,2S) 1 -hydroxymethyl-2 methylbutylkarbamoyl)

1,3-th iazol-2 y l]azetidin-3-yl( th i o—6—[ (R)— 1 -hydroxyethy l]-l -methy Ikarbapen-2-em-3karboxvlát (390 mg. 0,591 mmol) získaný podle popisu v příkladu 43(2) ve směsi tetrahydrofuranu (20 ml) a destilované vody (20 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10%

- 148CZ 300137 B6 palladia na aktivním uhlí (390 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny, Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (50 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na koloně Cosmosil (eluent : destilovaná voda -o- destilovaná voda:acetonitril (76:24)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S,6S)-2-| 1 [4-((IS,2S)-l-hydroxy methy !-2-methylbuty lkarbamoyl)-1,3—thiazol—2—yl]azetídin—3—yl }thio—6—[(R>— 1 —hydroxyethyl ]— l -methy Ikarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná sul (136 mg. výtěžek 42%) jako bílé pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz, D₂O, TSP): δ (ppm) 7,49 (lil. s), 4.61 až 4,53 (2H. ni). 4.39 až 4.31 (IH. io m), 4,25 (1H. dq. J - 6,2, 6,3 1 Iz). 4.20 (I H. dd. J - 9,0, 2.3 Hz), 4.11 až4.04 (2H, m), 3.91 (IH, ddd. J - 7,4, 3.6, 3,6 1 Iz), 3.81 (1H, dd, J = 11,8, 3,6 I Iz), 3,72 (1H, dd, J = I 1,8. 7,4 Hz), 3,43 (1H, dd. J - 6,2, 2.3 Hz), 3,25 (111. dq, J = 9.0, 7,2 Hz). 1,76 až 1,64 (IH. m). 1,55 až 1,44 (1H, m), 1,30 (.311, d, J - 6,3 Hz). 1.20 (3H, d, J= 7,2 liz), 1.22 až 1,11 (IH. m), 0,95 (3H. d. j = 6,9 liz), 0.88 (3H, t. J = 7.4 Hz), ,5 IR (KBr): 1750, 1651, 1602, 1547. 1493, 1470, 1394, 1311 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB’): m/z: 547 |M + H|

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FSI’): počítána pro CMfijOftNíS^Na 547.1661. Nalezena 547,1647 (Ms IT]'

Příklad 44 (lR,5S,6S)—2—{l-[4-(2-hydroxy-l-(hydroxymethyl)cthylkarbamoyl)-l,3-thiazol-2-yl]azetidin-3-yl}thio—6-[(R)-1 -hydroxyethyl]— l —methylkarbapen 2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl ,OH

NS'

CONH

..OH (1) p-Nitrobenzyl-(l R,5S,6S)—2—(Ϊ—{4—[2 •/e/x’-butyldimethylsilyloxy)-( I -/erc-butylbifcnylsi ly loxy methy Dethy Ikarbamoy 1]— l ,3-th iazol—2—yl |azet idin 3 -y I )th io—6—[(R)— 1 —hydroxyethyl]—

-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku 3-acety lthio-1 -{4-[(2-/m‘-buty ldimethy Isily loxy)-(1 -/erc-buty ldifeny Isily loxy methyl)ethy lkarbamoyl] 1.3-thiazol-2-y 1 J-azetidinu (770 mg, 1.45 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 39) v dimethylformamidu (39 ml) byl přidán hy drazinacetát (160 mg, 1.74 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(lR,5S.6S)-2-(bifenylfosforylox>)-6[(R)-l-hydroxyethyl]-1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylálu (862 mg, 1,45 mmol) v acetonitrilu (43 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,01 ml. 5,79 mmol). Smés byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethyl4o acetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitan sodný byl přidán do reakění směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethyl acetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ch rom atogra fleky na si 1 i kagc lově koloně (eluent: n-hexane: ethylacetát (1:2 -> 1:4)) za vzniku p-nitiObenzvl-( 1 R.5S.6S)-2-(1- 149 CZ 300137 B6 ,4|(2 /('/τ-butyldimcthytsilyloxyH l-/erc-buty Id ifeny lsi lyloxymethyl)ethylkarbamoyl]-l ,3thiazol-2-yl jazetidin -3-yl)thio-6-[(R)-1-hydroxyethyl]-1-methylkarbapcn-2-em-3-karboxy látu (951 mg. výtěžek 76%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl·,): δ (ppm) 8.23 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,66 (211. d. J = 8.8 Hz), 7.57 až.

7.52 (III. br. d. J - 8.8 Hz), 7.42 (III, s). 5,52 (IH. d, J = 13.9 Hz). 5.25 (III, d. J = 13.9 Hz).

4.47 (IΗ. I, J = 8,1 IIz), 4,44 (III. t. J = 8,1 Hz), 4.26 (IH. dd. J = 3.6, 9,2 Hz), 4,31 až 4.23 (211. in). 4.09 až 3,99 (3H. m). 3.86 až 3.81 (III, m). 3.61 (III. dd. J = 6.6. 9,5 Hz). 3.30 (1H. dd. J - 2.6. 7,0 Hz), 3,21 (IH, dq, J = 9,2. 6,6 Hz). 1.38 (3H. d, .1 - 5.9 Hz), 1,27 (311. d. J = 6.6 Hz). 0.91 (9H.s). 0.07 (611, s).

(2) p Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-{]-[4-(2-hydroxy-l-hydroxymethyl)etliylkarbamoyl)-l,3thiazol-2-ylJazetidin-3-yl [thio -6-[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapcn-2-cnt-3karboxy lát p-N itrobenzy I (1 R.5S,6S)-2-( l-{4-[(2-/fc?-í=butyl dimethy (sily loxy)-(l-/íTc-butyl dimethy Isilyl oxymethyl)ethylkarbamoyl]-1.3-thiazol-2 -yl} azetidin—3—yljthio—6—[(R.)— 1—hydroxyethyl] 1methy lkarhapen-2-em 3 karboxylát (950 mg. 1,10 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 44(1)) v tetrahydrofuranu (48ml) byl přidán do kyseliny octové (378 pl, 6,60 mmol) a IM tetrabutylamon i um fluoridu v roztoku tetrahydrofuranu (6,60 ml, 6,60 mmol) a směs byla míchána při tep2o lote místnosti 3 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a voda byl přidán do reakční směsi. Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: methanol (9:1 > 85: 15)) za vzniku p-nitrobenzyl-(l R,5S,6S)-2-{ 1-(4-(2 hydroxy-l-fhydroxymethyl)ethylkarbamoyl)-l ,3—thiazol—2—y 1 Jazetidin—3—y I fihio- 6-[( R)-1 -hydroxyethyl ]-1 methylkarbapen-2-em -3--karboxylátu (499 mg, výtěžek 72%) jako světle žluté pevné látky .

'H-NMR (400 MHz, CDCl·,): δ (ppm) 8,23 (2H, d, .1 = 8,8 Hz), 7,73 (2H. d. J = 8.8 Hz), 7.49 (1H. s). 7,45 (1H. d. J = 8,1 Hz). 5,46 (1H. d, J - 13,9 I Iz), 5,31 (1H, d. J = 13,9 Hz), 5,09 (1H, d, so .1 = 4,4 Hz), 4.85 až 4,77 (2H. m), 4,57 až 4,42 (3H, m), 4,22 < 1H, dd, J - 1.7, 8.8 Hz). 4,01 až

3,95 (2H.m), 3.89 až 3,82 (IH, m), 3.56až3,50(2Π. m),3.49až3.41 (2H,m).3,4l až 3,27 (2H, rn). 1,16 (3H. d. J = 6,6 1 Iz), 1,14 (3 H. d, J = 6,6 Hz).

(3) (IR.5S,6S)-2-{ l-[4-(2-hydroxv-H hydroxy methy l)elhyl karbamoyl H,3-thiazol-2-yl ]55 azetidin-3-yfithio 6 [(R)—1 -hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3 karboxylová kyselina.

sodná sůl p Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2—{l-|4-(2-hydroxy-l-(hydroxymethyl)ethylkarbamoy!)-l,3thiazol-2-yl]azetidin-3-yl}thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy40 lát (490 mg. 0,773 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 44(2)) ve směsi tetrahydrofuranu (25 ml) a destilované vody (25 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (490 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhl ičitan sodný (65 mg), cthylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrová45 na za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilované vody > destilované vody: acetonitrile (9:1) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)—2— {1 [4-(2-hydroxy-l-(hydroxymethy|)ethylkarbamoyl}-l.3-thiazol2-y 1 ]azct id i n-3-yl] tli io-6-[(R)-l-hydroxyethyl] -1 -met hy lkarbapen-2-em-3-kar boxy lová kyselina, sodná sůl (187 mg. výtěžek 47%) jako bílé pevné látky.

so ¹1 l-NMR (400 MHz. D_?(), TSP): δ (ppm) 7,51 (IH, s), 4,56 (2H. I. J = 8,2 Hz), 4.39 až 4.31 (1H.

m), 4,25 (lil, dq, J - 6.3, 6,4 Hz), 4,20 (11-1, dd, J ~ 2,4, 9,0 Hz), 4,19 až 4.14 (1H, m), 4.06 (2H.

ddd, J - 3.6, 4,9. 8.6 Hz), 3,78 (2H. dd. J = 5.1. 11,7 Hz), 3,72 (2H. dd, J 6,6, 11,7 Hz), 3,43

- 150

C7. 300137 B6 (IH. dd, J = 2.4. 6.3 Hz), 3.25 (IH. dq, J = 9.0. 7,2 Hz), 1,30 (3H. d, J 6.4 Hz), 1.20 (3H. d,

J = 7.2 Hz).

IR (KBr): 1748. 1649, 1599, 1547, 13903 1313 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB*): m/z: 521 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FSE): počítána pro CýftlL.ChN-S^a 521.1141, Nalezena 521,1155 [M+H]

Elementární analýza: C₂oH₂5N₄07S₂Na4/3H₂()

Vypočítána: C. 44,11 % H, 5,12 % N, 10,29 % S, 11,78 %

Nalezena: C. 44,21 %H,5,I2%N, 10,31 % S, 11,46%

Příklad 45 (1 R,5S,6S) 2 (1 --Í4-[N-(2-hydroxycthyl)—N—methyl—karbamoyl]— l ,3—thiazol—2-yl}azelidin 3-y 1 )thio-ó-[(R)-l-hydroxyethyl]-]-methylkarbapen-2-em-3 - karboxylové kyselina, sodná sůl

HO

ΌΗ // // >>

/

N·

N /7 /

\

Me

COO'Na⁺ (1) p-N itrobenzyI-(lR,5S,6S)-2-[]-(4-{N-[N4^rc-buty Id imethy Isily loxy )ethyl]-N-methylkarbamovlj· 1,3-th iazol-2-y I )azet id i n-3-y I] th io-6-[( R)-l-hydroxy ethy 1 J-1 -methy Ikarbapen2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acety lthio-1-(4-{ 2-[N-{/erc-buty Idimethy Isily loxy )ethylJ-N-methyl-karbanioyl}-!. 3-th iazol—2—v l)azetid inu {384 mg, 0,89 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 40) v dimethylformamidu (11 ml) byl přidán hydrazinacetát (99 mg. 1,07 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování reakce byl roztok p -n itrobenzyH IR, 5 S,6S)-2-(d i fenyl fosfory loxy )-6-[(R)-l-hydroxy-ethylj-l-methy Ikarbapen-2-em-3-karboxylátu (5,29 mg, 0,89 mmol) v acetonitrilu (22 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázní pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0.62 ml. 3.56 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný so roztok hydrogenuhličitan sodný byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent; ethylacetát ethylacetát:

methanol (9:1)) za vzniku fwiitrobcnzyl-( l R,5S,6S)-2-[ l-(4-[2-1N-{/crc-butyídimethylsilyloxy)ethyl]-N-methyl-karbamoyl}-l ,3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yljthio—6—[(R)— l -hydroxyethyl] l methylkarbapen 2 em 3 karboxylátu (263 mg, výtěžek 50%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8,21 (2Π, d. J = 8.7 Hz), 7,63 (2H, d. J - 8,7 Hz), 7.I4 (0.6H. s), 7,03 (0,4H, s), 5,48 (IH. d. J = 1.3 Hz), 5,25 (IH. d. J = 1.3 Hz), 4,50 (tH, t,

J = 8.0 Hz). 4.23 (2H, t. J = 9.0 Hz), 4,31 až 4,18 (3H, m). 4,05 (1H, dd. J - 8,3. 5,4 t lz), 3,89 až

3,80 (IH, m), 3,80 až 3,72 (IH, m), 3,72 až 3,63 (IH, m), 3,63 až 3,51 (IH, m), 3,26 (IH, dd,

J = 7.1, 2,5 Hz). 3,26 (1,811. s), 3,18 (IH, dq. J = 8,3, 7,5 Hz), 3.07 (I.2H. s). 1.35 (311, d.

- 151 CZ 300137 B6

J = 6,4 Hz). 1, 22 (3H. d, J= 6,9 Hz), 0.86 (9H. dd, J= 7.8. 1.4 Hz). 0.27 (6H, dd,

J= 12.4,3,2 Hz).

(2) p-NitrobenzyKlR,5S,6S)-2-(l-|4-[N-(2-hydroxyethyl)-N-methyl-karbamoyI]-l,35 thiazol-2 -yl}azetidin-3-yl)thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1-methyIkarbapen· 2-em-3karboxylát p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-[l-( 4-{2-|N-(/ťre-buty ldimethylsí lyloxy )ethy l]-N-methylkarbamoyl}-! .3—thiazol—2—y l)azetidin-3-y I] thio—6 -[(R)— 1 -hydroxyethyl]-! -methy Ikarbapen— io 2-em-3-karboxylát (622 mg, 0,85 mino!) (získaný podle popisu v příkladu 45(1)) v tetrahydrofuranu (30 ml) byl přidán do kyseliny octové (0.15 ml, 2,55 mmol) a 1 M letrabutylamoniumfluorid v roztoku tetrahydrofuranu (2.55 ml, 2,55 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční smčsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacelátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: —> ethylacetát: methanol (9:1)) za vzniku p-nitrobenzvl-(lR.5S,6S)-2-(l-{4-pS-(2-hydroxyethyl)-N-methylkarbanioyl]-1.3thiazol-2-y! J azetidin-3-yl)thio-6-[(R)-1- hydroxyethyl] 1 -methyIkarbapen-2-em-3-karboxy2o látu (263 mg, výtěžek 50%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCI/: Ó (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8.7 Hz), 7,66 (2H, d. J = 8,7 liz), 7,25 (111. s). 5.50(111. d, J 1,4 Hz). 5.26(111, d, J ’ 1.4 Hz), 4,62 až 4,40 (2H. m). 4.36 až 4,20 (3H, m), 4.08 (IH, l, J = 9,1 Hz), 4,06 (IH, t, J=9,l Hz), 3,84 (2H, t, J - 4,9 Hz), 3.63 (2H, dd., J = 4.9 Hz), 3,29 (1H. dd, J = 6,4. 2.6 liz). 3,21 (111. kvint., J - 7,5 Hz), 3,08 (311, s), 1,38 (3H,d,

J = 6.2 Hz). 1,26 (3H. d, J = 7.3 Hz).

(3) (1 R,5S,6S)-2-(!-{4-[N-(2-hydroxyethyl)-N-metliyl-karbamoyl]-I.3-thiazol-2-yl}azetidin- 3-yl)thio-ó-[(R)-1-hydroxyethyl]-! methylkarbapen-2-cm-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-(l R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hydroxyethyl)-N-methyl-karbamoyl]-l ,3-thiazol2—y I} azetidin—3—yl )thio—6—[(R)— 1 -hydroxyethyl]-1-methy lkarbapen-2-cm-3-karboxy kát (401 mg, 0,65 mmol) (získané podle popisu v příkladu 45(2)) ve směsí tetrahydrofuranu (20 ml) a destilované vody (20 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktiv35 ním uhlí (401 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (5 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilované vodě -> 4% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S.6S)-2-( l4—[(2—hydroxyethyl)— methylkarbamoyl]-l,3-thiazol 2 yl}azetidin—3—yl)thio—6 [(R) 1 hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (134 mg, výtěžek 41%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₂O, TSP): 6 (ppm) 7,31 (0,6H, s), 7,11 (0.4H. s), 4,56 (211. t, J 8,2 Hz),

4.41 až 4.31 (2H, m). 4,25 (1H, kvint.. J = 6,2 Hz). 4.21 (111, dd. J = 9,1, 2,4 Hz), 4,12 až 4,00 (211, m). 3,85 (IH, t, J = 5,4 Hz). 3,74 (111, t. J - 5,4 Hz). 3,70 až 3,60 (211, m), 3.44 (111, dd, J= 6,2, 2.4 Hz), 3,26 (IH, dq, > 9,1, 7,4 Hz). 3,07 (1.2H, s). 3.08 (1,8H, s), 1.30 (3H, d, J-6,5 Hz), 1,20 (311, d,J-7,3 Hz).

IR(KBr): 3397.0, 1749.1. 1606,4. 1538.9. 1469.5, 1398.1. 1311.4, 1266.0 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 505 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI’): počítána pro CnoH^O^SOMac 505,1191.

Nalezena 505,1185 [M+H]'

-152CZ 300137 Bó

Elementární analýza: CjoHijN.iC^Na-d/SHjO Vypočítána: C. 44,11 % H, 5,12 % N. 10.29 % S, 11.78 %

Příklad 46 (l R.5S.6S)~2—{1 —[4—(karboxymethvlkarbamoyl)— 1.3—thiazol—2—yl]a^etidin-3-y I j thio—6—f( R)—

1—hydroxyethyl]-1 - methylkarbapen- 2 em 3 karboxylová kyselina, disodná sůl

io (1) p Nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2 {1 [4 (p-nitrobenzyloxykarbonylrnethylkarbamoyl)-1.3thiazol- 2- y 1 [azet idin—3—y 1} th io-6-[(R)-l “hydroxyethyl ]-l -methyl karbapen-2-em-3karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-( 1 S.5S.6S )-2-( 1-[4-( p-nitrobenzyl oxy kar bony Imethy Ikarbamoy I)i? 1,3 thiazol 2 yljazetidin 3 ylfthio 6 [(R)-1-/erc-butyldimelhylsilyloxyethyl] 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxy látu (209,7 mg, 0.24 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(10)) v tetrahydrofuranu (10 ml) byla přidána kyselina octová (0,042 ml, 0.7 mot) a IM tetrabutylainoniumfluorid v roztoku tetrahydrofuranu (0,72 ml, 0,72 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 4 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasy20 cený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakění směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: toluen: acetonitril (2:1)) za vzniku p nitrobenzyl- (1 R.5S,6S)-2- (1 [4 (p-nitrobenzoloxykarbonyl25 methy I karbamoyl )-l,3-tliiazol-2-yl|az.etid í n—3—yl} thio—6—f(R)— 1 —hydroxyethyl ]— 1 -methylkarbapen-2-cm-3-karboxylátu (94,5 mg, výtěžek 53%) jako světle žluté pevné látky.

‘H NMR (400 MHz, CDCl·,): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 7,9 Hz), 8,22 (2H. d, J - 7,9 Hz), 7,66 (211, d, .1 = 7.9 Hz), 7.60 (1H, t. J - 6,6 Hz), 7,54 (2H, d, J - 7,9 Hz), 7.47 (1H, s), 5,505 (IH, d, J= 13,8 Hz), 5,30 (211, s), 5,255 (IH,d, J = 13,8 Hz), 4,50 (1Π, t, J= 8,3 Hz), 4,40 (1H, t,

J- 8,3 Hz), 4,32 až 4,24 (4H. m), 4,06 (IH, dd, J= 8,3. 6,2 Hz), 4,05 (IH, dd, J = 8,3, 6.2 Hz), 3,30 (IH, dd, J = 7.0, 3,1 liz), 3.21 (lil. dq, J = 9,0, 7.4 Hz). 1,98 (IH. br s), 1,38 (311, J = 5,7 Hz). 1.27 (3H. d, J = 7,4).

(2) (1 R.5S.6S)-2-11 -[4-(karboxymethyIkarbamoyl)-1,3-thiazol-2-ylJazetidin-3-vljthio-655 [(R)-1 -hy d ro xy ethyl]—1 -met hylkarbapen-2-em-3-karboxy lové kyseliny, disodná sůl p-Nitrobcnzyl-( 1 R.5S.6S)-2-( 1 — [4 (p -n itrobenzy loxy karbony Imethy Ikarbamoy l)-l,3-thiazol2—yljazetidin—3—yl }·tliio-6-[(R)-l -hydroxyethyl ]-l -methylkarbapen-2-em-3 karboxylát (330,4 mg, 0,38 mmol) získaný podle popisu v příkladu 46(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (16,5 ml) a destilované vody (8,3 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (350 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (63.9 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku.. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně

Cosmosil (eluent: destilovaná voda) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)- 2- (1 -(4-( karboxymethy Ikarbamoy I)— 1.3—thiazol—2 yljazetidin-3-y 1 [ th io 6- [(R)- 153 CZ 300137 B6 ] -hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylové kyseliny, disodná sůl (l 58,7 mg.

výtěžek 79%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D_?O): δ (ppm) 7,83 (1H. s). 4,45 (1H, t. J = 8,3 Hz). 4,43 (III. t. J - 8.3 Hz). 4,28 až 4,21 (l H. m). 4,124 (1H. kvintet, J = 5,8 Hz). 4.08 (111, dd, J = 8.8, 2.0 Hz). 3,99 až 3,92 (2H, nt). 3.80 (2H, s), 3,31 (IH, dd. J = 5.9. 2,0 Hz). 3,14 (IH. dq. J = 8,8, 6,8 Hz). 1,18 (3H, d,

J = 5,9 Hz), 1,08 (3H,dJ = 6,8).

IR (KBr): 3388. 1748. 1602. 1550. 1398. 1314. 1267 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB*): 527 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C₁₉1 i>iNjOiSiNa: Nalezena: [M+l IJ

Příklad 47 (1 R.5S.6S)-2-{1-[4-(3-hydroxyazetidin-1-karbonyl)-1.3-thiazol-2-yl]azetidin 3 yl)thio· 6 i? [(R)-l-hydroxyethyl] 1 niethylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

COO'Na⁺ (1) p-Nitrobenzyl (1 R,5S,6S)-2-{ l-[4-(3-hy droxyazetid i n-l-karbony 1)-1,3-th iazo Ι-2-ylJazetidin—3—yl} thio—6—[(R.)—1 —hydroxyethy l]-l-methy Ikarbapen- 2 em 3 karboxy lál

Do roztoku p-nitrobenzyl-( I S,5S,6S)-2-( l-{4-[3-(/ezr-butyldifeny Isily loxy )azelidin 1 karbonylj-1,3-thiazol-2-ylJazetidin-3-yljthio-6-[(R)-1 -/un· butyIdimethyIsilyloxyethyl[-l-inethylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (850 mg. 0.878 mmol) získaného podle popisu v referenčním příkladu 42(2) v tetrahydrofuranu (43 ml) byla přidána kyselina octová (301 μΙ, 5,27 mmol) a IM tetrabuty lamon i um fluorid v roztoku tetrahydrofuranu (5,27 tni, 5,27 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 1 den. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a voda byl přidán do reakční směsi. Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně (eluent:

ethylacetát: methanol (95:5) -c methylenchloridu: methanol (9:1) za vzniku p-nitrobenzvl(1 R,5S,6S)-2-{ l-[4-(3-hydroxyazetid i n-l-karbonyl)-! ,3-thiazol-2-yl]azetídin-3-yl [thio-6[(R)-l-/e/r-buty!dimethyIsilyloxyethyl |-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátii (355 mg. výtěžek 66%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCI_?): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J - 8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J - 8,7 Hz), 7,44 (IH. s), 5.51 (IH, d, J= 13,7 Hz), 5.25 (IH, d. ,1 = 13,7 Hz). 4,82 až 4,77 (IH. m), 4,71 až 4,65 (IH, m). 4.51 až 4,36 (4H. m), 4,31 až 4,23 (3H, m). 4,07 až 3.96 (3H. m), 3.29 (IH. dd, J = 2,4. 7.0 Hz). 3,20 (IH. dq, J - 9,2. 7,l Hz). l,38 (3H. d, J = 6,3 Hz). I.27 (3H, d, J = 7.1 Hz).

(2) (l R.5S.6S)-2-{l-[4 (3 hydroxyazetidin l - karbonyl>-l,3-thiazoi 2-yljazetidin-3-yl]•to thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methy 1karbapen-2-em-3-karboxylové kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1R, 5 S,óS )-2-{l-[4-(3-hy droxy azetidin-1-karbony l)-l .3-thiazol-2-yl]azet id i n—3—yl} th io—6—f(R)— 1 -hydroxyethyl]-1 -methy lkarbapcn-2-ein-3- karboxy lát (350 mg, 0.568 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 47(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (18 ml) a destilované vody (18 ml) bvl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí

-154CZ 300137 B6 (350 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (48 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku.. Zbytek byl chromatografíeky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda destilovaná voda:acetonitril (9:1)), a eluát byl Iyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S )-2-( I-[4©3-hydroxyazetidin -1 —karbony I)— 1.3—th iazol—2—y I Jazetidi n—3—y IΪ thio—6— [(R)-1-hydroxyethyl]-1 -methylkarbapeii-2-em 3 karboxylová kyselina, sodná sul (118 mg. výtěžek 42%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. DO. TSP): δ (ppm) 7,33 (IH, s), 4.78 až 4,67 (2H, m). 4.56 (2H. í, io J = 8,0 Hz), 4,45 až 4,31 (31H, m). 4.25 (1H, dg, J = 6,3, 6,3 Hz), 4,20 (IH. dd.

J = 2.3. 9,0 Hz). 4,10 až 4,03 (2H. m). 3,97 (IH, dd, J 3.7, 11,5 Hz). 3.44 (IH. dd, J = 2.3. 6.3 Hz), 3,25 (1H, dq. J = 9.0, 7.2 Hz), 1.30 (3H, d, J - 6,3 Hz), 1.20 (311, d. J = 7.2 Hz). IR (KBr): 1749, 1603. 1540, 1452. 1394. 1306 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): 503 [M+H]‘

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C₂oH₂₄N₄()₆S₂Na:5()3.1035. Nalezena: 503,1040 [M+H]'

Elementární analýza: C₂()H₂₄N₄O_ťtS₂Na-8/3lf O Vypočítána: C‘. 43.63 % H, 5.19 % N, 10.18 % S, 11.65 %

Nalezena: C, 44,04 % H, 4,93 % N, 9,86 % S. 11,30 %

Příklad 48

3>S (1 R.5S,6S)-2-{ l-[4-(N-karbox> methy 1-N-methy Ikarbamoyl)-! .3—thiazol - 2 yl]azetidin-3yljthio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1-methyIkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sůl

(1) p-Nitrohenzyl-( I R.5S.6S) 2 {1 [4©N-methyl-N-p“nitrobenzyloxykarbonylmethylkarbarnoyl')— 1,3—thiazol—2—yl [azetidin—3—yl} thio—6—[(R)— l--hydroxyethyl]—1 —rnctby ikarbapen— 2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl ·(1 S.5S.6S)- 2 {1 [4-(N-metliyl-N-p-nitrobenzyloxykarbonylmelhy Ikarbamoyl)-1,3-th iazol-2-yljazet idin-3- yl [thio- 6- [(R)-1 -terč-butyldimethylsilyloxyethyl[-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (997 mg, 1,15 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 43(3)) v lelrahydrofuranu (50 ml) byla přidána kyselina octová (0.2 ml.

3? 3,44 mmol) a IM tetrabutylamoniumfluorid v roztoku tetrahydrofuranu (3.44 ml. 3,44 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 2 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný hydrogenuhliěílan sodný byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograíicky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát > ethylacetát: methanol (19:1)) za vzniku p-nitrobenzyl© 1 R.5S,6S©2-{ 1[4-(N-methyl-N-p-nitrobenzyloxykarbonyImethyIkarbamoyl)-l,3-thiazol-2 yl]azctidin- 3 yl} th io-6- [(R)-1 - terč buty Idimethylsilyloxyethy fi-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy látu (413 mg, výtěžek 47%) jako světle Žluté pevné látky.

- 155CZ 300137 B6 ¹ H-NMR (400 MHz. CDCb): δ (ppm) 8,32 až 8,10 (4H, m), 7,75 až 7,60 (2H. m), 7.60 až 7.45 (2H. m). 7.75 (0,5H, s), 7,41 (0.5H, s), 5,51 (lH,d, J = 13,6 Hz), 5.38 až 5,20 (3H. m obsahující

5,26 (1H. d. J 13.6 I Iz)), 4,75 až 4.71 (9H, m obsahující 4,36 (1H, s). 4.56 až 4,46 (1H. m).

3,93 až 3,83 (IH. m)). 3,45 až 3,05 (411, m obsahující 3,36 (0,9H. s), 3.16 (2,111, s)). 3,29 (1H, d.

J = 6,3 Hz), 1,38 (311, d ,J = 6,1 Hz). 1,33 až 1.20 (3H,m).

(2) (1 R,5S,6S)-2-[ l-[4-(N-karboxymelhyl N -methylkarbarnoyl)-] ,3-thiazol-2 yljazetidin3-y l}thio-6-[( REI-hydroxy ethyl J-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lové kyseliny, disodná sů!

p-Nitrobenzy I -(1 R,5$,6S)- 2- {1 -[4-(N-methyl-N-p-nitrobenzv loxy karbonyl methy 1-karbamoylE1.3—thiazol—2—ylJazetidin—3—yl}thio 6-[(RE1 -hydroxyethyl]-1 -methylkarbapen-2-cm3-karboxylát (413 mg. 0,54 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 48(1)) vc směsi tetrahydrofuranu (20 ml) a destilované vody (20 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti

7.5% palladia na aktivním uhlí (413 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (91 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku.. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S.6S)-2-{ 1-[4-(N-karboxymethyl-N-methylkarbamoy 1)-1,3-tliiazol-2 yIJazetidin-3yljthio 6 [(R)--4-hydroxyelhy l]-l-methy lkarbapen-2-em-3- karboxylové kyseliny, disodná sul (126 mg, výtěžek 43%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D.O. TSP): δ (ppm) 7.18 (0.6H. s), 7,03 (0.4H, s), 4,41 až 4.32 (0,211, m). 4.25 (lil, kvint.. J = 6.3 Hz). 4,15 až 3,98 (4H, m). 3.43 (111, dd. J= 6,3. 2.2 Hz), 3.26 (IH, kvint., J -8.2 Hz), 3,1 I (1,211, s), 3,06 (1,811, s). 1.30 (3H, d, J - 6,4 Hz). 1,20 (311, d, 7,1 liz).

IR (KBr): 3389.3, 1748,2, 1605,4, 1541,8. 1469,5. 1394,3 cm ¹Hmotnostní spektrum (ESI ): m/z: 519 [M Na+2H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána ChoIKiNjO^Nan 19.0984, Nalezena: 519,0956 [M Na+2H]’

Příklad 49 (1 R.5S,6SE2-L H4-N-karbamoy Imethy l-N-methy l-karbamoy l-l,3-thiazol-2-yl )azetidin-3yl]lhio-6-[(R)-l-hydroxyethyl|-l-methyIkarbapen-2-em 3 karboxylová kyselina, disodná sůl

HO

COO'Na'* (I) p-Nitrobenzy l-( I R,5S,6S)-2-{ l-[4AN-karbamoylmethyl-N-methylkarbamoyl)-l,3thiazol-2-y ljazetidin—3—yl} thio—6—f(R)— l -hydroxy ethy 1 J-1 -met hylkarbapen-2-em-3karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-( 1 S,5S,6S)-2-[ 1 -[4-(N-karbamoyImethy l-N-methylkarbamoyΟΙ .3—thiazol—2—yljazetidin—3—ylΪ tliio-6 [(R) 1 -/m-butvldimethyIsilyloxyethylj-l-met-hyIkarbapen—2—em—3—karboxylátu (932 mg, 1,27 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 44(2)) v tetrahydrofuranu (50 ml) byla přidána kyselina octová (0,22 ml. 3.81 mmol) a IM telrabutylamoniuinfluorid v roztoku tetrahydrofuranu (3,81 ml, 3,81 mmol) v ledové lázni a směs

- 156CZ 300137 B6 byla míchána při teplotě místnosti 2 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakee. ethylacetát a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograíleký na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát -> ethylacetát : methanol (10:1)) za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-{ I [4-(N-karbamoylmethylN-methyl karbamoyl)-1,3-lhiazol-2-y ljazet idin-3-y I) th io-6-[( R)-1 -hydroxyethyl] -1 -methy Ikarbapen-2-em-3-karboxylátu (424 mg, výtěžek 53%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCl;): δ (ppm) 8.23 (2Π, d, J = 7,8 Hz), 7,66 (2H, d. J = 7.8 Hz), 7,36

1(1 (0.2H, s). 7.24 (0.8H, s), 5.51 (111, d, J = 13.7 Hz). 5.25 (IH. d. J = 13,7 Hz)). 4,59 až 4,39 (211,

m), 4,39 až 3,94 (7H. m). 3,36 (0.6H, s), 3,29 (IH, dd. J = 6,9, 3,3 Hz). 3,25 až 3.14 (IH, m). 3,11 (2.4H,s). 1.38 (3H, d, J = 6,1 Hz). 1.26 (3Π, d, J - 7,1 Hz).

(2) (1 R,5S,6S)-2-{l-[4-(N-karbamoylmethyl-N-methylkarbamoyl)-] .3-thiazol-2-yl]15 azet id i n-3-yl}th io-6-[( R)-l-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em- .3 karboxylová kyselina, sodná sůl p-N itro benzy l-(l R, 5 S,6S )-2-( 1 -[4-( N-karbamoy Imethyl --N-mct hyl karbaní oyl)-1,3 -thiazol2—yljazetidin—3—yl ] thio—6—f( R)— 1 —hydroxyethyl]— l —methylkarbapen—2—em—3—karboxy lát (424 mg, 0.67 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 49(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (20 ml) a destilované vody (20 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (424 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakee byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogen uhličitan sodný (57 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sní25 ženého tlaku. Zbytek byl chromatografícky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilované vodě > 4% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofi lizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S,6S)-2-] l-[4-(N-karbamoylmethyl-N-methy!karbamoyl) 1,3 thiazol -2—yljazetidin 3 --yl}thio-6—[(R)— I—hydroxyethyl]— l—methylkarbapen— 2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (115 mg, výtěžek 33%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₃O, TSP): Ó (ppm) 7,22 (0,5H. s), 7,20 (0,511, s), 4.55 (211. dd, J - 17.4. 8.4 liz). 4,41 až 4,32 (111, m), 4,25 (IH, kvint.. J = 6.3 Hz). 4,23 až 4,18 (3H. m. obsahující 4,22 (2H, s)), 4.05 (2H, ddd, J = 17,3. 8,8, 4,9 Hz), 3,44 (1H, dd. J = 6,2. 2,4 I Iz). 3,31 až 3,20 (1H, m), 3,18 (1.5H, s), 3,09 (l,5H, s), 1,30 (3H. d, J = 6.4 Hz). 1,20 (3H,d. 7,1 Hz). IR(KBr): 3384.5. 1748,2, 1681,6. 1603,5, 1539,9, 1469.5. 1397.2, 1310,4 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB'): m/z: 518 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána CGH+^GOoSzNa: 518,1144, Nalezena: 518,1168 [MH1[

Příklad 50 (1 R.5S.6S)- 2- {1--[4-Jkarbamoylmethyl-karbamoy1)-1,3-thiazol--2—yljazetidin—3—yl} thio--6[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methyl karbapen-2 em 3-karboxylová kyselina, sodná sůl

- 157CZ 300137 B6 (1) p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S,6Sý -2-{ l-[4-(karbamoylmethyl-karbamoyl)-i,3-thiazol-2-ylJazet id i n-3-yl}th io-6-[(R)-l-hydroxyethy IJ-1-methy lkarbapen-2-em-3· 'karboxy lát

Do roztoku p-nitrobenzyH I S.5S,6S)-2-( l-[4-(karbamoy Imethy l-karbamoyl) 1,3 -thiazol—2— yljazetidin-3-ví}thio-6-[(R)-1 -terč butyidimethylsilyloxyethyl] 1-methy lkarbapen-2-em-3karboxylátu (428,6 mg, 0,6 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 45(2)) v tetrahydrofuranu (21 ml) byla přidána kyselina octová (0,11 ml. 1,9 mmol) a IM tetrastylamoniumfluorid v roztoku tetrahydrofuranu (1,8 ml. 1,8 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 3 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný io hydrogenuhličitan sodný byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: methanol (8:1)) za vzniku p-nitrobenzyl-(l R.5S,6S)-2-{ l-[4-( karbamoy Imethy I-karbamoy!) 1,3 thiazol 2 i? y I ]azetídín—3—> l} thio—6—f(R>— I —/í'rc—butyidimethylsilyloxyethyl]— 1 —niethylkarbapen—2—em—3— karboxylátu (310,5 mg, výtěžek 85%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. DMSO-d₆): δ (ppm) 8.24 (2H. d, J - 8,8 Hz), 7,96 (IH, t. J = 5.7 Hz), 7,72 (2H. d, J - 8.8 Hz). 7,50 (IH. s). 7,40 {IH. br s), 7,08 (1H, br s), 5,46 (1H, d, J - 13.9 Hz). 5,32 (lil, d. .1 = 13,9 Hz)), 5,09 (IH, d, J =5,1 Hz), 4,58 až 4.40 (3H. m), 4,22 (IH. dd.

J = 9.2. 2,7 Hz), 4.01 až 3,96 (3H, m). 3,81 (211, d, J = 5.7 Hz). 3,44 až 3.30 (2H, m), 1,16 (3H,d, J - 6,6 Hz), 1,14 (3H, d, J = 7,3 Hz), (2) (1 R.5S.6S)—2— (1-[4-( karbamoy Imethy l-karbamoy 1)-1,3-thiazol-2-yl]azetÍdin-3-yl} thio6-[(R)— 1 -hydroxyethyl]-l-methylkarbapen 2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nilrobenzyl (IR.5S,6S>-2 {l-[4-(karbamoyImethyI- karbamoyI) 1.3 thiazol 2 yljazetidin— 3-yl}thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (310,5 mg.

0.5 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 50(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (15.5 ml) a destilované vody (7.8 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (360 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (42,3 mg), ethylacetát a destilovaná voda, Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent; destilovaná voda -> 5% acetonitril v destilované vodě -> 10% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofiíizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S) 2 - 11 --[4-- (karbamoy Imethy Ikarbamoy 1)-1,3—th iazo I-2-y 1 ] azetid i n-3-yl}thio-6-[(R>-l-hydroxyethy l]-l -methy 1 karbapen2-cm-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (157 mg, výtěžek 62%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, D₂O); δ (ppm) 7,43 (IH, s), 4,45 (211. t, J - 7,8 Hz), 4,28 až 428 (1H, ni), 433 (lil. kvintet, .1 = 5,9 Hz), 4,08 (IH, dd, J = 9,3, 2,3 Hz), 4,00 až 3,92 (4H, m), 3,31 (IH, dd,

J = 5,9. 2,3 Hz), 3,14 (1H, dq. J = 9,3. 7.8 Hz). 1,13 (311. d, J - 5.9 Hz). 1,08 (311. d. J = 7.8 Hz). IR (KBr): 3384, 1748, 1660, 1600, 1549, 1492, 1471, 1394, 1315, 1264 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB’): 504 |M+HJ

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB'): počítána CrTbiCCNRSjNaxSOd.OQSS, Nalezena: 504,1018 [M+Hj

Příklad 51 (1 R.5S.6S)- 2- {1 - [4-((1 S)-l-karboxy l-2-rncthylpropy Ikarbamoyl)-! .3—th íazol—2—yl ]azetidin—

3—yl}thio-6-l(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3- karboxylová kyselina, disodná sůl

- 158CZ 300137 B6

(1) p-N itrobenzy 1-( 1 R.5S.6S)· 2-(1-(4-(( 1 S)-2-methyl-]-(p-nilrobenzyIo\ykarbonyl)propylkarbamoy I ]-1,3-th iazol-2-y I} azetidin-3-yl)thio-6-[(R)-l-hydroxy ethy IJ-1-methy Ikarbapen2-em-3-karboxylát s

Do roztoku p-n itrobenzy l-( 1S.5S,6S )-2-( H 4-((1 S)-2-methy l-l-(p-nitrobenzy loxy karbonyl)propy lkarbamoyl]-! ,3-thiazol-2-yl}azetidin-3-yl)thio-6- [(R) 1 -lere -buty ld imethy Isily loxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3- karboxylátu (1,15 mg, 1,29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 46(3)) v tetrahydrofuranu (58 ml) byla přidána kyselina octová (222 μΙ, io 3,87 mmol) a IM tetrabutylamoniumfluorid v roztoku tetrahydrofuranu (3,87 ml, 3,87 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 2 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylaeetát a nasycený vodný chlorid sodný byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena is přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: n-hexane: ethylaeetát (1:2) -> ethylaeetát) za vzniku p-nitrobenzyl (1 R,5S,6S>—2—(1—(4—[(1 S)-2-methyl-l-(p-nítrobenzyloxykarboxyl)propy lkarbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl (azetidin-3- yl)thio-6 [(R)-1-hydroxyethyl]-]-methylkarbapen-2-em-3-karboxylálu (377 mg, výtěžek 37%) jako světle žluté pevné látky.

2d 'll-NMR (400 MHz, CDCl·,): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8,8 Hz), 8,22 (211. d. J = 8.8 Hz). 7.66 (2H. d. J = 8.8 Hz). 7.58 až 7.55 (IH. br s). 7,54 (2Π. d. J = 8,8 Hz), 7,45 (I H, s), 5,51 (111, d. J= 13,5 Hz). 5.28 (211. s), 5,26(111. d. J = 13.5 Hz), 4,74 (1H. dd, J = 5.1, 8.8 Hz), 4.53 až 4,47 (211. m). 4.32 až 4,26 (3H, m), 4.10 až 4,05 (2H, m). 3,30 (111, dd, J = 2,9, 6.6 Hz), 3.22 (1 H, dq. J = 9.5, 6.6 Hz), 2.32 až 2,24 (lil. m), 1.39 (3H. d. J - 5,8 Hz), 1.28 (311. d, J - 6.6 Hz). 1.00 <3H, d, J = 7,3 Hz), 0,97 (311, d, J - 7,3 Hz).

(2) (1 R.5S.6S) 2-] 1--(4--((1S) I-karboxyl-2-methyIpropyIkarbamoyl)—l.3—thiazol 2 yljazetidin-3-y 1 }thio-6-[(R)-l-hydroxyethylJ-l-methyIkarbapen 2 em-3-karboxylová kyselina, disodná sůl

5(i p-N itrobenzy l-( 1 R,5S.6S)-2 (1 (4 [(IS) 2-methyl-l-(p-n itrobenzy loxy karbony l)-propylkarbamoy!]-l ,3-thiazol-2-yl(azetidin-3-yl)thio-6-[(R)-l -hydroxyethyl] 1 methy lkarbapen-2em-3-karboxylát (370 mg, 0,465 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 51(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (19 ml) a destilované vody (19 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti

10% palladia na aktivním uhlí (370 mg) při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogen uhličitan sodný (80 mg), ethylaeetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda-> destilovaná voda:acetonitril (96:4)) a eluát byl lyofilizován za io vzniku požadované sloučeniny (l FC5S.6S)—2—{l —[4--(( 1S)—1—karboxyl—2—methy l-N—propylkarbainoyl) -1,3-th iazol—2—yl]azetidin—3—yl} th io-6-[( R)-1 hydroxyethyl]-1-metli v Ikarbapen 2cni-3-karboxylové kyseliny, disodná sůl (165 mg, výtěžek 63%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D_;O, TSP): δ (ppm) 7,51 (IH, s), 4,59 (2H. dt, .1 =· 8.0. 5.6 Hz), 4.40 až

4.34 (lil. m), 4,29 až 4,23 (2H. ni). 4.20 (IH. dd, J - 2,4. 9,0 Hz), 4,10 (2H, dl. J - 9.0. 5,2 Hz).

3.44 (III. dd, J = 2,4. 6,4 Hz), 3.27 (III. dq. J = 9.0. 7,2 Hz). 2.28 až 2.16 (III. m). 1.30 (3H,d.

J - 6.2 Hz). 1.20 (3H. d, J = 7.2 liz), 0.98 (3H, d, J = 6,8 Hz), 0.95 (311. d, J = 6.8 Hz).

- 159CZ 300137 Bó

IR (KBr): 1749, 1599, 1547, 1491. 1471, 1400, 1314, 1292, 1264 cm ¹

Hmotnostní spektrum (ESE): m/z: 591 [M+NaJ

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESE): počítána C22H₂₆N₄O7S_?Na₇: 591.0936,

Nalezena: 591,0952 [M+Na]'

Elementární analýza: C^H^cNiCES^NavR/ol EO Vypočítána: C, 42,85% H 5,12% N,9.09% S, 10,40%

Nalezena: C, 42,78% H 5,33% N.9,14% S,10,12%

Příklad 52 (lR,5S,6S)-2-{ 1-(4-(( 1 S)-l-karbamoyl-2-methyl-propylkarbamoyl)-l,3-thÍazol-2-ylJazetidin—3-yI}tliio-6 [(R)-l-hydroxyethyl|-1 -methylkarbapcn-2-em-3-karboxylová kyselina.

(i) p-Nitrobenzyl-( 1 R,5$.óS)-2 ·( l-[4-(( I S)-l-karbamoyl-2 melhyl-propylkarbamoyl)-! ,3thiazol—2—yljazetídin—3—yl}tliio—6—Í(R)—1 -hydroxyethyl] -l-methylkarbapen-2-em-3 karboxylát

Do roztoku p-n i trobenzy 1-(1 S,5S,6S)-2- {1 [4-(( 1 S)-l-karbamoyl-2-methylpropyl-karbamoyl)-1,3-thiazol-2-yljazetidin-3- yl } thio— 6- [ (R)-l -terč- buly Id imethy lsily loxyethyl]-1 melhylkarbapen 2 em-3-karboxylátu (930 mg. 1.20 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 47(3)) v tetrahydrofuranu (47 ml) byla přidána kyselina octová (206 μΐ, 3,60 mmol) a IM tetrabutylamoniumfluorid v roztoku tetrahydrofuranu (3.60 ml. 3,60 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 2 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a voda byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylaeetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát -> ethylacetát: methanol (95:5)) za vzniku p-nitrobenzyH 1 R,5S,6S)-2-f l-[4-(( 1 S)-l-karbamoyl-2-methyl-propylkarbamoyl)-],3-thiazol-2” yl]azetidin-3-yl) thio-6-l(R)-l-hydroxyethy l]-l-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy látu (383 mg. výtěžek 48%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8.23 (211. d, J = 8,8 Hz), 7.66 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,61 až 7,56 (1H, br d, J - 9.5 Hz), 6.05 až 6,01 (111, br s). 5,51 (1 El, d, .1 13.5 I Iz). 5,43 až 5.39 (1H, br

s). 5.26 (IH, d, J = 13,5 Hz). 4,54 až 4,47 (2H, m), 4,38 až 4,33 (IH, m), 4,32 až 4.25 (211, m), 4,10 až 4,04 (2H, m). 3,30 (IH, dd. J “ 6.6, 2,9 Hz), 3,22 (IH, dq, J = 9,5. 7,3 Hz). 2,33 až 2,24 (lH,m), 1.38 (3H, d, .1 = 5,9 IIz), 1,28 (3H. d. .1 = 7,3 Hz). 1,03 (311, d, J = 6.6 Hz). 10.01 (3H.d. J - 6.6 Hz).

(2) (lR,5S,6S)-2-{ l-[4-((lS)-l-karbanioyl-2-methyl-propylkarbamoyl)-1.3 lhiazol-2-yl |azctidin-3-yl J-thio—6—|(R)— 1 -hydroxyethyl]-l-methylkarbapcn-2-ent-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

- 160CZ 300137 Bó p NitrobenzvI (1 R,5S,6S>-2-{1 —[4—((lSf-I-karbamoyl-2-methyl-propylkarbamoyl)-E3-thiazol 2 yl]a/ctidm -3 yljthio—/)-](!<)-l-hydroxyethyl]-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (380 mg. 0.577 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 52(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (19 ml) a destilované vody (19 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (380 mg) při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (48 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku,. Zbytek byl chromatografícky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda-> destilovaná voda:acetonitril (81:9)). a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované io sloučeniny (1 R,5S,6S)-2-{ I-[4 -((1 S')-l-karbamoy 1-2-methyl propy lkarbamoyl )-l,3-th iazol-2 yl Jazetidin—3—yl}thio -6—[(R)— l —hydroxyethyl]—1 - methylkarbapcn-2-em-3-karboxylove kyseliny, sodná sůl (170 mg, výtěžek 54%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, DO, TSP): 6 (ppm) 7,55 (1H, s), 4,58 (211, t, J - 8,2 Hz), 4.40 až 4,34 (1H, m), 4,29 (1II, d, > 6,9 Hz), 4,25 (! H, dq. .1 = 6,2, 6.4 Hz). 4.20 (1H, dd, J = 2.4. 9.0 IIz), 4.09 is (2H, dt, J = 9,0, 4,6 Hz), 3,43 (1II, dd, J = 2.4. 6.2 Hz), 3,26 (IH, dq, J - 9,0. 7,2 Hz). 2,26 až

2.16 (IH, m), 1,30 (311, d, J - 6.4 Hz), 0,20 (3H, d, J = 7,2 Hz), 1.02 (6H, d, J = 6,8 Hz).

IR (KBr): 1749. 1662. 1603. 1545, 1490, 1471, 1394, 1316, 1293, 1260 cm ¹

Hmotnostní spektrum (PAB’): m/z: 546 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána C22^^0(,$Na₂: 568,1276. Nalezena: 20 568,1271 [M+Nal'

Elementární analýza: CMHiíiNsCVSNa-SI EO

Vypočítána: C, 44,07 % H 5,72 % N. 11,68 % S. 10,69 %

Nalezena: C, 44,17 % H 6.18 % N, 11,84 % S. 10,67 %

Příklad 53 (1 R.5S.6S)-2-{ l-[4-(N-karboxymethyl- N isopropylkarbauioyI)-E3-thiazol-2-yl]azetidin-3ylJthio-6-[(R)-1-hydroxyethyl]-l-mcthylkarbapen-2-em-3-karboxylové kyseliny, disodná sůl

(1) Do roztoku 3-acetylthío-l-{4-[N-isopropy l-N-(p-nitrobenzy loxy karbony Imethy l)-karbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl Jazetidinu (312 mg, 0,63 mmol) (získaného podle popisu v referenčním přikladu 48) v dimethylformamidu (9 ml) byl přidán hydrazinacetát (70 mg, 0,76 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyI-( 1 R,5S,6S)-2 -(d ifenyl fosfory loxy) 6-[( R)-I -hydroxy ethy!]-1 -methy!karbapen-2-em 3-karboxylátu (452 mg. 0,76 mmol) v acetonitrilu (20 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,44 ml, 2,52 mmol). Směs byla míchána 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakění směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátové vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na

- 161 CZ 300137 Bó silíkagelové koloně (eluent: ethylacetát -» ethylacetát: methanol (20:1)) za vzniku p-nitrobenzy l-( 1 R,5S,6S )-2-( 1 -{4-[N-isopropy 1-N (p-nitrobenzy loxy karbony lmethyl )-karbamoyl]1,3—thiazoi—2—yl J azetidin-3-y!)thio-6-[( R)-l -hydroxyethy I J—l—methy lkarbapen-2-em-3karboxylátu (193 mg, výtěžek 39%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDClj: δ (ppm) 8.23 (4H, d, J - 8,9 Hz). 7.66 (2H. d, J - 8,9 Hz), 7,56 (IH. d, J= 8.0 Hz), 7.43 až 7,32 (1.4H, m), 7,15 (0.6H. brs). 5.51 (lll.d. J = 13.8 Hz), 5.28 (1,2H, br s), 5.25 (1H, d, J = 13.8 Hz), 5,20 (0,8H, br s). 5,05 až 4,65 (0,4H. m), 4.85 až 4.65 (0,6H, m), 4,65 až 3,95 (8H, m obsahující 4,50 (2H, t. J = 7,4 Hz). 4,1 1 (2H, t. J = 7.4 Hz)), 3,93 až 3.75 (1H, m), 3,29 (lil, dd. J - 6,6. 2.0 Hz), 3,25 až 3.08 (IH. m). 1.38 (3H, d. J = 6,4 Hz), io 1,35 (3H, d. J - 7.2 Hz). 1.20 (6H, br s).

(2) (1 R.5S.6S )-2-( 1 [4-(N -karboxymethy t-N-isopropy lkarbamoy 1)-1,3—thiazoi 2 yl jazet i~ din—3—yl j th i o-6-[(R)-l-hydroxy ethyl ]-l-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, d i sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1R, 5 S,6S>—2— l—·{.4-[N-isopropyl-N-(p-nitrobenzyloxykarbony Imethy !)-karbainoylj-1.3-thiazoi-2-yl [azetidin-3-yljthio 6 [(R) 1 hydroxyethylj 1 methylkarbapen 2 em 3-karboxy lát (193 mg. 0.24 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 53(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (9 ml) a destilované vody (9 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5%

2o palladia na aktivním uhlí (193 mg) vc vodní lázni (35 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (40 mg), ethy lacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta výše uvedenými smíchanými rozpouštědly a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda), a eluát byl lyofl25 lizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)-2-{1 -[4-(karboxymelhyIisopropylkarbamoyl)-1,3- thiazoi-2-yljazetidin-3-yl} thio—6—f(R)— 1 -hydroxyethy l|-l -methy Ikarbapen2-em-3-karboxylové kyseliny, disodná sůl (63 mg. výtěžek 45%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₂O): δ (ppm) 7.08 (0.6H, br s), 7,04 (0.4H. br s). 4.70 až 4,69 (0.211, m), 4,53 (2H, d, J= 8,0 liz), 4,42 až 4,31 (IH, m), 4,18 až 4.09 (0,8H, m). 4,25 (IH, kvinl., !i) .1 = 6.4 Hz). 4.20 (IH. d, J = 9.1 Hz). 4,09 až 4,02). (2H, ni), 3,95 (2H. d. J = 5,8 I lz), 3,43 (1H, dd.J -6.4.0,8 liz). 3,26(1(1, kvint., J = 7,6 Hz), 1.31 (3H,d. J -6.4 Hz). 1.26 až 1,10 (9H,m). IR (KBr): 3398,0. 1749.1, 1603,5. 1539,9, 1467.. 1453,1, 1392,4. 1310,4, 1277.6 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB¹): m/z: 569 [M+l I] ’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána Cv,H_?7O₇N₄S_?Na+ 569,1 116,

Nalezena: 569.1H9 [M+H]

Příklad 54 (l R,5S.6S)-2-( l-[4-(N-karbamoy Imethy l-N-í sopropy lkarbamoy IH*3-thiazol-2-y IJazetidin3-yl}thio- 6 [(R) l hydroxyethylj--l-methylkarbapen-2- cín -3--karboxylová kyselina, sodná sůl

(l) p-Nitrobenzvl-( l R,5S,6S)-2- J l--[4·-(N-karbamoy Imethy l-N-isopropy lkarbamoy l)-C3thiazol—2—ylJazetidin—3—yl}thio—6—[(R)— l-hydroxyethylj l methylkarbapcn-2-em-3karboxylát

- i 62 CZ 300137 Bó

Do roztoku 3-acetylthio-l-[4-(N-karbamoyImethy 1-N-isopropyIkarbamoyl)-l ,3 thiazol—2— yljazetidinu (347 mg, 0,97 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 49) v dimethylformamidu (10 m!) byl přidán hydrazinacetát (108 mg, 1.17 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-( 1 R,5$.6S)-24difenylfosforyloxy)-6-[(R) 1 -hydroxyethyl ]_1 —methylkarbapen—2—em—3—karboxylátu (696 mg, 1,17 mmol) v acetonitrilu (20 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylelhylaminu (0,68 ml, 3,88 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty io na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná smés byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku.

Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: methanol (10:1) za vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,óS)-2-{ 1 [4 (N-karbamoy Imethy l-N-isopropv Ikarbamoy I)1.3-thiazol 2 yl]azetidin-3-ylIthto-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1-methyIkarbapen-2-em-3-karboxylálu (359 mg, výtěžek 56%)jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDClj): δ (ppm) 8.22 (211, d, J = 8,6 Hz), 7,66 (2H, d. J - 8,6 Hz), 7.05 až 7.62 (lil. ni). 5,51 (IH,d. J = 13.8 Hz). 5.25 (11H. d. J - 13,8 Hz). 4.80 až4,45 (111. ni). 4.45 až 4.35 (211. m). 4.35 až 4.17 (3H. m). 4.03 (4H. ni). 3.29 (IH. dd, J = 7,0, 2,5 Hz). 3.25 až 3.05 (IH.ni), 1,38 (3H. d, J = 6,3 Hz), 1.33 až 0.98 (911. m obsahující 1.25 (3H, d. J = 7.1 Hz)).

(2) (1 R,5S,6S)-2-{ l-[4-(N-karbamoylmethyl-N-isopropy Ikarbamoy I)- 1,3 thiazol-2-yl]azetidin-3-yf}thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-N itrobenzyl· -(1 R,5S.6S)-2- {l-[4-(N-karbamoy Imethy 1-N-isopropy Ikarbamoy l)-K3-thiaF.ol—2—yl]azetidin—3—yl }thio—6—L(R)—1 —hydroxyethyl]—1 methyl karbapen-2-cm-3-karhoxy lát (359 mg. 0,55 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 54(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (12 ml) a destilované vody (12 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% hydroxidu palladia (359 mg) ve vodní lázni (35 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (46 mg), kyselina octová a destilovaná voda. Smčs byla třepána v dělící nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda —> 2% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadovaně sloučeniny (1 R,5S,6S)-2-{ l-[4-(N-karbamoy Imethy 1-N-isopropy Ikarbamoy l)-K3-thiazol-2-y l]azetidin-3-yl}thio-ó-[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-eni-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (195 mg, výtěžek 65%) jako bílé pevné látky .

to 'll-NMR (400 MHz. DO): δ (ppm) 7,17 (0,2H, br s), 7,12 (0,8H, br s), 4,56 (2H. dd, J = 17,4. 9.0Hz). 4.42 až 4,16 (4H. m obsahující 4,25 (111, kvint.. .) = 6,3 Hz). 4.21 (lil. dd, J= 8,4, 2,3 Hz), 4,09 až 3,97 (211, m), 3,44 (IH, dd, J= 6,3, 2,5 Hz), 3,26 (IH, kvint., J = 8.4 Hz). 1,30 (3H. d, J = 6.4 Hz). 1,25 až 1.08 <9H, m obsahující 1,19 (3H, d. J - 6,7 Hz)).

IR (KBr): 3404,7, 1749.1. 1681.6, 1605.4. 1538.0. 1468,5, 1448,3, 1395,2. 1306,5, 1277.6 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 546 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C_?2Il₂<,NsO₆S₂Na: 546,1457, Nalezena: 546,1458 [MH©

Příklad 55 (1 R.5S.6S)-2-{1 -[4-(N-kyanomethyl-N-isopropy Ikarbamoy l)-l,3-th iazo 1-2 y Ijazetidin-3yl }thio-6-[( R)-1-hydroxy ethyl J-1-methyl karbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl

- 163 CZ 300137 B6

HO

COO'Ní?

(1) p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S>—2—{1 [4-(N-kyanomethyl-N-isopropYlkarbamoyl)-l ,3thiazol—2—yljazetidin—3—yl}thio—6—[(R)—l —hydroxyethyl]— l —methylkarbapen—2· em 3 karboxylát

Do roztoku 3 -acetylthio-l-[4-(N-kyanometliyl-N-isopropyIkarbamoyl)-l,3-thíazol-2-yl|azetidinu (344 mg, 1,01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 50) v dimethylformamidu (10 ml) byl přidán hydrazinacetát (112 mg, 1,22 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl io roztok p-nitrobenzyl (!R, 5 S,6S)-2-(d i fenyl fosfory loxy )-6-[(R)-t -hydroxyethyl]-! -mcthylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (725 mg, 1,22 mmol) v acetonitrilu (20 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním di isopropy 1ethylaminu (0,70 ml, 4,04 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok is hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: -» ethylacetát:

methanol (10:1) za vzniku p-nitrobenzy l-( I R.5S,6S? 2 -{l-|4-(N-kyanomethyl -N isopropylkarbamoyí}-1,3-thiazol-2-yljazetidin—3 ylJthio—6—[(R)— I—hydroxyethyl]— Ϊ —methylkarbapen— 2-em-3-karboxylátu (245 mg. výtěžek 39%) jako světle žluté pevné látky.

¹ H-NMR (400 MHz, CDCl?: δ (ppm) 8.23 (211, d, J = 8,7 Hz). 7.6 (211. d, J - 8,7 Hz), 7,48 až 7,15 (IH, rn), 5,51 (IH, d, J = 14.0 Hz). 5.26(1 IH, d, .1 = 14,0 1 lz), 4.86 (1 H, kvint., .1 = 6,5 Hz),

4,72 až 3,76 (911, m obsahující 4,52 (2H, t J = 8.1 1 lz), 4.27 (2H. dd, .1 = 6,6, 2,5 1 lz)). 3.29 (1H.

dd, J ~ 6.9, 2,5 Hz), 3.21 (IH, kvint., J - 9,3. 7,3 Hz), 1,38 (311, d, J = 6,2 Hz). 1.35 až 1.20(911. m obsahující 1,25 (311. d. J ^- 7.3 Hz)).

(2) (1 R,5S.6S)-2-{ l-[4-(N-kyanomethyl-N-isopropylkarbamoyl)- 1,3-th iazol-2-ylJazetid iu sn 3-yl}thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl J-1 -methy lkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S.6S) 2 {1 [4-(N-kyanomethyl-N-isopropy 1 karbamoyI >-1, 3-thiazol--2yIJ—azetidin—3—yl}thio—6—[(R)—1 -hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3 karboxylát (245 mg. 0,39 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 55(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (12 ml) vs a destilované vody (12 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7.5% palladia na aktivním uhlí (245 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (33 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta výše uvedeným směsným rozpouštědlem a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl c hro mat ote graficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda 2% acetonitril v destilované vodě -> 4% acetonitril v destilované vodě -> 6% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (tR,5S,6S)-2-{l-[4-(N-kyanomethyl-Nisopropy Ikarbamoy I)— l ,3—thiazol-2-y IJazel id in—3—y I} thio-6-[(R) 1 hydroxyethyl]-1 -methvlkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (87 mg, výtěžek 42%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D,O): δ (ppm) 7.20 (1H. br s), 4,58 (2H, t, J =- 8.0 Hz). 4,49 až 4,31 (3H. m obsahu jící 4.41 (2H. s)). 4,25 (lil, kvint., J = 6,3 Hz), 4,21 (lil, dd. J - 9,0, 2,3 I lz), 4.19 až 3.80 (3H. m obsahující 4.07 (2H. dd. i - 8.6, 4,9 Hz). 3.44 (IH. dd. ,1= 6.3. 2,4 Hz). 3.26

- 164CZ 300137 B6 (IH. dq. J - 9.0. 7.2 Hz). 1,43 až 1.25 (911. m obsahující 1,31 (3H. d. J = 6.4 liz). 1.20 (3H. d.

J - 7,2 Hz)).

IR (KBr): 3398,0, 1750,1, 1606.4. 1537.0. 1468.5. 1426,1, 1401.0, 1373.1. 1332,6. 1.311.4. 1274,7 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB*): m/z: 550 [M+Na]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CMHy.N/TSjNay 550.1171, Nalezena: 550,1179 |M+Na]’ io Příklad 56 (1 R.5S.6S)-2-11-IMpiperidin-M-ylkarbamoy 1)-13 thiazol-2 yl |azetidin-3- yl}thio—6—[(R)— I-hydroxyethyl]-!- methylkarbapen-2-em--3 - karboxylové kyseliny

(1) p-Nitrobenzy l-( 1 R,5S,6S)-2- J4 -|l-(p-nitr0benzyloxykarbonyl)-piperidin_4-ylkarbamoylj-l ,3-thíazol-2 yljazetidin-3-yl}thio-6-[(R)-l-hydroxyethy!]-1-methylkarbapen2-em-3 karboxylát

Do roztoku 3-aeetyllhio-1-{4-[ l-fp-nitrobenzyloxykarbonylEpiperidin 4-ylkarbamoyl]-1,32o thiazol—2—yl}azetidinu (260 mg, 0,500 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu

51) dimethylformamidu (13 ml) hyl přidán hydrazinacetát (55 mg. 0,600 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a smčs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p nitrobcnzyl-( 1 R,5S.6S)-2-(difenylfbsíoryloxy)-6-[(R) 1 hydroxyethyl]1 -methylkarbapcn-2-em-3-karboxylátu (297 mg, 0,500 mmol) v acetonitrilu (15 ml) přidán po

2? kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (348 ml, 2,00 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasyceny vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylaeetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chloro vodí koso vou. nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelovc koloně (eluent: ethylacetát > ethylacetát: methanol (9:1) za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-( l-{4 [l-(p-nitrobenzyloxykarbony I)—piperidin—4-y lkarbamoy l]-1.3-th i azo l-2-yl)azet idi n-3-yl)th i o—6—[ (R)— 1 -hydroxy35 ethyl]—1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (348 mg, výtěžek 85%) jako světle žluté pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 8,23 (4H. d, J - 8.8 Hz). 7.66 (2H, d, .1 = 8.8 liz). 7,52 (211. d, J - 8.8 liz), 7.43 (III. s). 7.05 až 7.01 (IH. brd, .1 = 8,8 liz), 5,51 (IH, d, J - 13,7 Hz), 5.25 (IH. d. J - 13.7 Hz). 5.23 (2H.s), 4.52 až 4,46 (2H. m). 4.31 až 4,25 (3H. m). 4.2.3 až 4,04 (3H. m), 4,05 (211. dt. .1 = 8.8. 5,9 Hz), 3.30 (IH, dd, .1 = 2.4, 7.3 liz). 3.21 (IH. dq.

J = 6.8, 8,8 liz). 3.11 až 2.95 (2H. m). 2.07 až 2,00 (211. m), 1,55 až. 1,41 (211, m). 1.38 (3H, d, J 6.8 Hz), 1.28(.3H.d. J = 5,9 liz).

(2) (I R,5S,6S)-2-! 1 —[4—(piperidin—4—ylkarbamoyl)—1,3—thiazol—2—yljazetidin—3—yI] thio—6— |(R)-1 - hydroxyethyl] 1 -methylkarbapcn-2-em-3- karboxylová kyselina

- 165 CZ 300137 B6 p-N itrobenzyl© 1 R,5S,6S)-2 ©1 - {4-[ I © pni itrobenzvlo\vkarbon\ I) piperidin 4 \ Ikarbamoyl ]

L3-tbíazol—2—yl }azetidin-3—yl)thio—6—[(R)—1—hydrOxXyethyl]— I—methylkarbapen—2-em-3-karboxylát (340 mg. 0.414 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 56(1)) ve směsi tctrahydro5 furanu (17 ml) a destilované vody (17 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (340 mg) při teplotě místnosti 4,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a destilovaná voda. Směs byia třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografíeky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> desti10 lovatiá voda:acetonitril (8:2)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)- 2© I - ©©piperidin-4-ylkarbamoy I© 1,3- thiazol-2-yl]azetidin-3- yl {thio- 6 [(R)— 1-hydroxyethylj-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylové kyseliny (70 mg, výtěžek 33%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 MHz. D₃O): Ó (ppm) 7.50 (IH. s), 4.55 (211, t, J “ 8,2 Hz), 4,36 až 4,29 (IH. m).

4.24 (1H, dq, ,1 = 6,2, 6,4 Hz), 4,17 (1H, dd. J = 2.2, 9,1 Hz). 4,17 až 4,08 (lil, m), 4.03 (1H. dd,

J - 5,0. 8,3 liz), 3,53 (2H, dl, J = 13,3, 3.1 Hz). 3.43 (IH, dd. J = 2,2, 6,2 Hz), 3,25 (llk dq, J = 9,1, 7,2 Hz), 3,17 (211, dt, J = 12.8. 2,9 Hz), 2,20 (III, dd, J= 2,9, 14,2 Hz), 1,93 až 1.80 (2H, m). 1.30 (311. d, J - 6,4 Hz), 1.19 (3H. d, J = 7,2 Hz).

IR (KBr): 1754. 1658. 1602. 1545. 1.485. 1315 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 508 [Mtllf

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C^H^N/ý©: 508,1688, Nalezena: 508,1693 [M+H]’

Elementární analýza: C©I ©Ν Ό©·31 FO Vypočítána; C. 47.05 % H, 6,28 %N, 12,47 % S, 11,42%

Nalezena: C, 47,07 % 11, 6,38 % N. 12,37 % S, 11,14 %

Příklad 57 so (1 R.5S,6S)-2© I-[4-((3S©pyrrolidin 3-ylkarbamoyl)— 1,3—thiazol 2-yIjazetídin—3—ylJthio-6 [(R)— I -hydroxyethyl]-1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kysel ina

COOH (1) p-Nitrobenzvl©] R.5S.6S) 2© 1 — {4—f (3S)-I ©p-nitrobenzy loxykarbonyl ©py rrolidin 3-ylkarbamoyl]-1,3 thiazol-2-yljazetidin-3-yl)thio 6-[(R)— l-hydroxyethyl]-1-methyIkarbapen55 2 em-3-karboxylát

Do roztoku 3 -acety Ithio-1 - {4-[(3S)— 1 ©p nitrobenzy loxykarbonyl) pyrrolidin 3 ylkarbamoyl|—1,3—thiazol—2—yl| azetidinu (280 mg, 0,554 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 52) dimethylformamidu (14 ml) byl přidán hydrazinaeetát (61 mg. 0.665 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnuli reakce byl roztok p •nitrobcnzyl©l R,5S,6S>-2©difenylfosforyloxy)-6-[(R)-l-hydroxyethyl ]-l-methy lkarbapcn-2-em-3-karboxy látu (329 mg, 0,554 mmol) v acetonitrilu (16 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (356 μΙ, 2,22 mmol). Směs byla míchána přes noc

- 166C7. 300137 B6 při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi.

Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta

0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a ? nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát ethylacetát: methanol (9:1)) za vzniku p-nitrobenzyl -(1 R.5S,6S)-2-( 114 -[(3 S f-14p-n i t robenzyloxykarbony l)-pyrrolid i n—3—yl karbamoyl]-]. 3-th iazo 1-2-yl} azet idin— 3—yljthio—6—[(R) 1 -hydroxyethyl|-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxylátu (399 mg, výtěžek io 89%) jako světle žluté pevné látky.

’H NMR (400 MHz. CDCl j: δ (ppm) 8,23 (4H. d, J = 8,8 Hz), 8.20 <2H. d, J - 8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J- 8,8 Hz), 7.53 (2H, d, J= 8,8. 13,7 Hz). 7,45 {1H. s). 7,17 až 7,12 (lil. br t, J = 7,8 Hz), 5,51 (III, d, J - 13.7 Hz). 5.25 (1H, d, J = 13,7 liz). 5.30 až 5.18 (2H, m), 4,68 až 4.59 (1H, m), 4.54 až 4,46 (2H. m), 4.32 až 4.24 (3Π, m), 4.09 až 4.00 (2H, m), 3.84 až 3.76 (1H, is iti), 3,65 až 3,53 (2H, m), 3.46 až 3.40 (IH, m), 3,30 (IH, dd. .1 = 2,9, 6,8 Hz). 3,22 (IH. dq, .1 = 8.8, 6.6 Hz). 2,32 až 2,22 (1H, m). 2.09 až 1,94 (1H, m), 1,38 (3Π, d ,J = 6,8 Hz), 1,28 (3H, d.

J = 6.8 Hz).

(2) (1 R,5S,6S)-2-i 1-(4-((3S)—pyrrolidin- 3 ylkarbamoyl)-l,3-thiazol-2-yljazetídin-3-yl}zo thio—6—((R)— l-hydroxyethyl]-!-methyl karbapen-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S.6S)-2 (1- (4-((3S)— I —(p—nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrrolidÍn-3-ylkarbamoyl]- 1.3 thiazol-2-yl} azet idin-3-yljthio—ó-[(R)-1 -hydroxyethyl ]-1-methy lkarbapen-2em-3-karboxylát (390 mg, 0,483 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 57(1)) vc směsi tetra25 hydrofuranu (20 ml) a destilované vody (20 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (390 mg) při teplotě místnosti 4,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografiek) Čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda —>

3(i destilovaná voda:aeetonitril (76:24)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S,6S)-2-{ 1 -(4-((3Sj- pyrrol idin -3-ylkarbamoyl)-1,3-thiazol-2-yl]azetidin-3-yl}thio-6((R)-l-hydroxyethyl]-1 -methyIkarbapen 2 em 3 karboxxlove kyseliny (90 mg. výtěžek 38%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, DO): δ (ppm) 7,52 (1H, s), 4.69 až 4,62 (III. m). 4.59 až 4.50 (2H. m),

4,37 až 4,39 (IH, m). 4,22 (IH, dq. .1 - 6,4, 6.4 Hz), 4,11 (IH, dd. J =2,4, 9,0 Hz). 4.07 až 4,01 (2H. m). 3,65 až 3,55 (2H, m), 3.48 až 3,39 (3H, m). 3,21 (IH, dq, J = 9,0, 7,2 liz), 2,50 až 2,40 (IH. m). 2,23 až2,14 (lil. m), 1.30 (3H, d, J = 6,4 Hz.)). 1,18 (311, dj = 7.2 Hz).

IR (KBr): 1754. 1654, 1597, 1545, 1386. 13 13 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB J: m/z: 494 [M+H]'

4D Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CJI-EJSECKS:: 494,1532, Nalezena: 494,1529 [Ml H]

Elementární analýza: C21H27N5O5S27/3H2O Vypočítána: C, 47,09 % H, 5.96 % N, 13,0$ % S, 11,97 %

Nalezena: C, 47.04 % I I, 5,95 % N, 13.04 % S, 11,83 %

Příklad 58 (IR,5$,6S) 2 f 1 —[4—((3R>-pyrrolidin—3-ylkarbamoyl)—l,3—thiazol—2—yllazetidin—3-y!|thio—6— ((R)— 1 —hydroxyethyl j-1-methylkarbapen-2-cm-3-karboxylová kyselina

- 167CZ 300137 B6

HO

N

.CO-NH'“·

NH

COOH (t) p-N itrobenzy 1-(1 R,5S,6S )-2-( 1—{4—[(3 R)—1 —(p-nitrobenzy loxy karbony 1)—pyrro lidi n-3vl karbamoyl]-1.3 thiazol-2 yl ]azetidin-3-yI)thio-6-[(R)-]-hydroxyethyl]-1 methylkarbapcn2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acelyIthio-1 -{4-[(3R>— 1 -(p-n itrobenzy loxy karbony l)-pyrrolid i n-3-yl karbamoyl ]—1.3—thiazol—2—yljazetidinu (280 mg. 0,554 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 53) dimethylformamidu (14 ml) byl přidán hydrazinaeetát (61 mg, 0,665 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodiny. Po zkontrolování io doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-(lR,5$,ó$)-2-(difenylfbsfbryloxy}-ó-l(R)-l-hydroxyethylJ-l-methylkarbapen-2-em 3 karboxylátů (329 mg. 0.554 mmol) v acetonitrilu (16 ml) přidán po kapkách do výsledné smési v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním di i sopropy lethy laminu (386 μΙ, 2,22 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, is ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky' na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát -c ethylacetát: methanol (9:1)) za vzniku p-n itrobenzy l-( IR. 5 S.6S )-2-(1(4-[(3R)-l-(p-n itrobenzyloxykarbonyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-l,3-thiazoi-2- yl]azeti~ din-3-yI}thio—6—[(R)—l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen- 2 em 3 -karboxylátu (416 mg, výtěžek 93%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCI_?): δ (ppm) 8,23 (4H. d, J - 8,8 Hz), 8,19 (2H, d. J = 8,8 Hz), 7,66 25 (211. d, J = 8,8 Hz). 7,53 (211, d. J = 8.8, 15.6 1 Iz). 7,45 (1H, s), 7.17 až 7.11 (1H. br s). 5,51(1 H,

(2) (1 R.5S.6S)—2- {I [4-((3 R) pyrrolidin-3-ylkarbarnoyl)-1.3-thiazol-2-yllaz.etidin-3-yl] thio—6—[(R)— l-hydroxyethyl]-l-methy lkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-( l-{4-[( 3R )-1-( p-n itrobenzy loxy karbonyl f-pyrro lid i n-3 -ylkar55 bamoyl] 1,3 thiazol -2- yljazetidin 3 yljthio 6 [(R)- 1-hydroxyethyl] 1 methy Ikarbapen 2 em-3-karboxylát (410 mg, 0,508 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 58(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (21 ml) a destilované vody (21 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (410 mg) při teplotě místnosti 4,5 hodin. Po zkontrolování doběhnuti reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a desti4(i lovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta výše uvedeným směsným rozpouštědlem a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromátograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda destilovaná voda:acetonitril (76:24)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (Ϊ R,5S.6S)-2- {1 [4 ((3R) pyrrolidin-3-y Ikarbamoyl)-] .3 -thiazol-2-yljazetidin-3-yl}thio—6—[(R) 1 -hydroxyethyl]-145 methylkarbapen-2-em-3-karboxylově kyseliny (101 mg, výtěžek 41%) jako bílé pevné látky.

- 168 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 MHz. D_?O): δ (ppm) 7,52 (IH. s). 4,69 až 4,62 (IH. m). 4.60 až 4.52 (2H. m).

4,38 až 4,30 (IH. m). 4,24 (IH. dq, J - 6,3. 6,3 Hz). 4,16 (IH, dd, J - 2.3. 8.9 Hz). 4.09 až 4.02 (2H, m). 3.67 až 3.54 (2H, m), 3,49 až 3.40 <3H. m). 3,24 (IH, dq. J - 8.9. 7,2 Hz). 2.49 až 2.40 (1H, m), 2.24 až 2.14 (1H, m), 1,30 (311. d, J = 6,3 Hz)), 1,20 (3H. d. J - 7,2 Hz).

IR(KBr): 1756. 1656. 1598, 1544. 1384. 1313 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 494 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C21H28N5O5S2: 494,1532, Nalezena: 494,1519 [M+H]'

Elementární analýza: C^jH^NO^-SINO 10 Vypočítána: C. 46.06 % H, 6.07 % N, 12.79 % S. 11.71 %

Nalezena: C. 46.35 % H, 5,75 % N, 12,82 % S, 11,68 %

Příklad 59 15 (1 R,5S,6S)-2-11 [4 {azetid i n-3-yl karbamoyl)-!,3—thiazol--2- y l]azetidin—3—yl Ϊ thio—6—[(R)— 1 — hydroxycthyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

COOH (1) p-Nitrobenzyt-( 1 R,5S,6S)—2—(1 —[4 [1 (p-nitrobenzyloxvkarbonyl)-azetidin 3 —yΙσο karbamoyl]-1.3-thiazol 2 yl}azetidin-3-> l)thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1-methyIkarbapen2 em-3-karboxylát

Do roztoku 3—acetylthio—1—{4—[ IJp-nitrobenzyloxykarbonyI >-azetidin—3—yIkarbamoy 1J-1,3thiazol-2-yl 1 azetidinu (400 mg, 0,814 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu

54) dimethylformamidu (20 ml) by! přidán hydrazinaeetát (90 rng, 0,977 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobcnzyl-( IR,5S,6S)-2-(d i feny Ifosfory loxy )-6-[(R)-l-hydroxyethy 1]1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy látu (484 mg, 0.814 mmol) v acetonitrilu (25 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropy lethy lam inu (568 μΙ, 3,26 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacelátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát > ethylacetát: methanol (9:1)) za vzniku p—nitrobenzyí—(l K,5S,6S)—2—(I — f 4—[ l —(p—nitrobenzxd oxy karbony l>—azetidin—3-y Ikarbamoy 1]-1,3—thiazol—2—yl (azetidin 3-yl)thio-6-[(Rf-1 hydroxyethyl] 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxyIátu (496 mg, výtěžek 77%) jako světle žluté

4i) pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCI/: δ (ppm) 7.54 (1H, s). 8,23 (4H, d. J= 8.8 Hz), 8.22 (2H, d,

J = 8.8 Hz), 7,66 (211, d, J = 8.8 Hz), 7,52 (2H. d. J ~ 8,8 Hz), 7,52 až 7.47 (1H, m). 7,45 (I H. s),

5.51 (111, d. J - 13.9 Hz). 5,25 (1H. d, J - 13.9 Hz), 4,90 až 4.80 (1H, m). 4,54 až 4.47 (211, m).

- 169CZ 300137 Bó

4,47 až 4.38 (2H. m), 4,42 (2H. dd, J- 8,8, 8.8 liz), 4.13 až 4.25 (211, m). 4.27 (IH, dd,

J - 2,2, 9,5 Hz). 4,09 až 3.96 (411, m), 3.30 (IH, dd, J - 2.2. 7.0 Hz). 3,21 (IH, dq.

J - 9.5. 6.6 Hz). 1.38 (3H, d, J - 6.6 Hz). 1.28 <3H. d, J = 5.9 Hz), (2) (1 R,5S.6S)-2-[ l—[4—(azetidin- 3 yl karbamoyl)-1,3-th iazol 2—yl]azctidin—3—yi}thio—6— [(R)-l-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina p Nitrobenzyl-( 1 R.5S.6S)- 2-{ l-{4-[ l-(p-nit robenzy loxy karbony l)-azetid in-3-yl karbamoyl ]1,3—thiazol-2- yl 1 azetidin-3- yl )thio-6-[( R) I -hydroxyethyl j-l -methy lkarbapen-2-em-3-kario boxy lál (490 mg, 0,617 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 59( 1)) ve směsi tetrahydrofuranu (25 ml) a destilované vody (25 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (490 mg) při teplotě místnosti 4.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografícky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda > destilovaná voda : acetonitril (76:24)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S,6S)~2 J1 [4-(azetidin 3 ylkarbamoyl)— l,3—thiazol—2—yljazetidin—3—yl}thio_6—[(R)— 1 - hydroxyethyl|—1 — methylkarbapen-2-em-3-karboxylové kyseliny (143 mg, výtěžek 49%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D.O): δ (ppm) 7,54 (IH. s), 4,97 až 4.87 (IH. m), 4,60 až 4.54 (211. m).

2(i 4,44 (211, dd, J = 11.9, 8,4 Hz), 4,39 až 4.30 (3H. m), 4.23 (IH. dq. .1 = 6,4, 6.2 Hz). 4,15 (IH. dd.

J= 9.0. 2,4 Hz). 4,10 až. 4.03 (2H. in). 3.43 (IH, dd. .1 = 6.3. 2.4 Hz), 3,23 (1H, dq, .1 =9.0. 7.2 liz). 1.30(3H.d. J -6,4 Hz). 1.19 (311, d, J = 7.2 Hz).

IR (KBr): 1753. 1655. 1600. 1545, 1387. 1314 cm ¹1 Imotnostní spektrum (FAB ): m/z: 480 [M+HJ’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CjoHv.NsOsSj: 480,1375, Nalezena: 480.1391 (M+HJ

Elementární analýza: C.nJI^NsOsSj^MHiO Vypočítána: C, 46.19 % 11, 5.72 % N. 13.47 % S, 12,33 %

Nalezena: C, 46.06 % 11. 5,38 % N, 13.70 % S. 12,33 %

Příklad 60 (I R.5S.6S)—2— {1 — [4—(piperazin-1 y 1 karbonyl)- 1,3-th iazol-2-y ljazet idin- 3-yl)thio-ó-[( R)-l?5 hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

HO

COOH

-170(1) p-N itro benzy l-(l R,5S,6S )-2-( l-]4-[(4-p-n i trobenzy loxy karbony 1)—piperazin— 1 — karbonyl]-1,3—th iazol—2—yl} azetidin 3 y I )thio—6—[(R)— I -hydroxy ethyl] 1 methy Ikarbapen-2em-3-karboxylát

1(1

Oo roztoku 3-acetylthio-1-(4 ((4-p-nítrobenzyloxykarbonyl)-piperazin-l-karbonyl] 1.3-thiazol-2-ylJazetidinu (546 mg, 1,07 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 55) dimethylformamidu (15 ml) byl přidán hydrazinacetát (118 mg, 1.29 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl

C7 300137 B6 roztok p n itrobenzy 1J1R, 5 S, 6 S )-2-( difenyl fosfory loxy)-6-[(R)-l - hydroxyethyl ]-t -methy Ikarbapen-2-em-3-karboxyIátu (636 mg, 1,07 mmol) v acetonitrilu (30 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,22 ml, 1.29 mmol). Smés byla míchána 1 hodinu při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek io byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát -> ethylacetát; methanol (1:20)) za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-< l-M-lM-p-nitrobenzoloxykarbonylh-piperazin-l -karbonyΊ]-1.3 thiazol—2—y 1}azetidin—3—yl)thio 6-[(R)-l-hydroxyethyl]-! - methylkarbapen 2 em -3-karboxylátu (215 mg, výtěžek 29%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8.22 (4H, d, J = 8,5, 5,2 Hz), 7,66 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,52 ís (2H, d, J = 8,7 Hz). 7.22 (lH.s). 5.51 (IH, d, J = 13,8 Hz). 5,25 (1H. d, J = 13,8 Hz). 5.25 (2H. s), 4.50 (111, t ,J = 8.0 Hz), 4,49 (1H, t, J = 8.0 I Iz), 4,35 až 4,20 (3 H. m), 4,04 (IH. t. J = 8,5 Hz).

4,31 (IH, t, .1= 8,5 Hz), 3.98 až 3,69 (4H, m), 3,69 až 3,48 (4H, m), 3,29 (IH, dd, .1 = 6,8. 2,6 1 Iz). 3.20 (1H, dq, J = 9,2, 7,2 Hz), 1,36 (311, d, J = 6,3 Hz), 1,26 (3H, d. J - 7,5 Hz).

(2) (1 R,5S,6S)-2-{ 1 —[4—(piperidin— 1 —karbonyl)— 1,3—thiazol—2- yl]azetidin-3-yl[thio-6-[(R)I-hydroxyethylj-l-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina p-N itrobenzy 1% 1 R,5S,6S) 2 (l-{4-[(4-p-n itrobenzy loxy karbony l)-pipcridin-l-karbony I]1,3 thiazol-2-y 1[azctidtn-3-yl)thio-6-[(R) 1 -hydroxyethyl]-1 -methylkarbapen-2-cm-3-kar2? boxylát (539 mg, 0,79 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 60( 1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody (30 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7.5% palladia na aktivním uhlí (539 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -» 2% aceton itri I v destilované vodě 4% aeelonitril v destilované vodě -> 6% acetonitril v destilované vodě > 8% acetonitril v destilované vodě -> 10% acetonitril v destilované vodě 13% acetonitril v destilované vodě -> 16% acetonitril v destilované vodě -> 20% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S.6S)-2-{ l—[4—(piperazin 1 karbonyl)-l.3—thiaz.ol—2—yljazetidin—3 -yl}Ihio-6-[(R)-l-hydroxyethylj-l - melhylkarbapen-2em-3-karboxylové kyseliny (107 mg, výtěžek 27%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₃O): δ (ppm) 7,23 (IH, s), 4,56 (2H, l, J = 8,4 Hz). 4,40 až 4.30 (IH. m), 4.24 (IH. kvint., .1 = 6,2 Hz), 4,20 (IH. dd, J = 8,7, 2,2 Hz). 4,03 (2H. dd, J = 8,7, 2,2 Hz), 3.95 (4H, t, J- 5,2 Hz), 3,43 (IH. dd, .1 = 6.2, 2,4 Hz), 3,40 až 3,29 (4H, m), 3,24 (IH, dq,

J = 8,7, 7,3 Hz), 1,29 (311, d.J -6,3 Hz)). 1.19 (3H. d, J = 7,9 liz).

IR (KBr): 3415,3, 1759,7, 1620.9, 1536,0, 1456,0, 1431,9, 1384,6. 1313.3, 1246,8 cm ' Hmotnostní spektrum (FAB'): m/z: 494 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CUiHžsNsOsSž: 494,2532, Nalezena: 494,1529 [M+H]¹

Příklad 61 (1 R,5S,6S)-2-{ l-[4-((2-aminoethyl)karbamoyl}-l,3-thÍazol-2-yljazetidin 3 yfithio 6-[(R)~

5o 1-hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

- 171 CZ 300137 B6

(1) p-Nitrobenzy 1-(1 R.5S.6SE24EJ 4-((2-(p-nitrobenzy loxykarbony lamino )ethy 1)karbamoyl]-1,3-th iazol-2-yl} azetidin-3 yl)thio-6-[(R)-1-hydroxyethyl |-l-methylkarbapen2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetylthio-l-{4-[(2-(p-nitrobenzyloxy karbony lam ino)ethyl)karbamoylj-1,3-thiazol—2—yl}azetidinu (330.6 mg, 0.68 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 56) dímelhylformamidu (17 ml) byl přidán hydrazinaeetát (82 mg. 0,89 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl io roztok p-nitrobenzy]-(IR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)—6—[(REI hydroxyethyl El -methy Ikarbapen-2-em-3-karboxylátu (426 mg. 0,72 mmol) v acetonitrilu (2I ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropyIethylaminu (0,5 ml. 2,9 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydro)5 gcnuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: toluemacetonitril (1:2)) za vzniku

2o p-nitrobenzy 1-(I R,5S,6SE2-( l-{4 [(2 (p ni(robenzyloxykarbonylamino)ethyl)karbamoylj1.3 thiazol 2 yl)azetidin—3—yl)thio—6—[(REI-hydroxyethylJ-1-methy lkarbapeii-2-em -3 karboxylátu (348,1 mg, výtěžek 66%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (500 MHz, CDCh): δ (ppm) 8.23 (411, d. J - 7.8 Hz). 8.14 (2H, d, J - 8,8 Hz), 7,66 (211, d, J - 7,8 Hz). 7,47 (2H. d. J - 8.8 Hz), 7,43 (lH.s), 7.38 (IH, t. .1 = 6,3 Hz), 5,51 (III, d, .1 = 13.7 Hz), 5,51 (IH. t, J- 6,3 Hz). 5,25 (1Π, d, J- 13.7 Hz). 5.18 (2H. s). 4.48 (IH. t,

J = 8,3, 5,6 Hz), 4,46 (IH, t, J = 8,3 Hz). 4.32 až 4.24 (3H, m), 4.05 (IH. dd, .1 = 8,3, 5,6 Hz), 4,03 (IH, dd, J- 8,3, 5,6 Hz), 3,55 (2H, d, J= 6,3 Hz), 3,44 (211, q, 6,3 Hz), 3.30 (IH. dd, J = 6,9, 1,9 Hz), 3,22(111, dqj -8,8,6,5 Hz), 1,73 (1H, br s), 1,38 (3H,d, .1-6,5 Hz), 1.28 (3H. d. J = 6.5 Hz), (2) {1 R.5S.6SE2-{l-[4-((2-aminoethyl)karbamoylEh3-thiaz.ol-2-vlJazctidin-3-ylíthio-6[(REl-hydroxyethyl J-l -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobcnzyl-(l R,5S,6SE2-( l-{4-[(2-(p-n! trobenzy loxy karbony lamino)ethy l)karbamoylj35 1,3-th iazol 2 yl J azetidin-3- yljthio-6-[(R) 1 -hydroxyethyl]-1-methy lkarbapcn-2-em-3-karboxylát (328,4 mg, 0,42 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 61(1)) ve směsi telrahydrofuranu (16,4 ml) a destilované vody (8.2 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (328.4 mg) ve vodní lázni (30 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána směs ethylacetát40 tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta výše uvedeným směsným rozpouštědlem a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> 15% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (I R,5S,óSE2- t l-[4-((2-aminoethyl)karbamoylEI th iazol-2 y ljazetidin 3 -yl} thio--6-[(RE

1 -hydroxyethyl]— 1 -methylkarbapen-2-ein-3-karboxylové kyseliny (96,4 mg, výtěžek 49%) jako bílé pevné látky.

- 172 CZ 300137 B6

Ίΐ-NMR (400 MHz, DO): δ (ppm) 7.37 (1H. s), 4,42 (IH. t, J 8,4 Hz), 4.42 (1H. t, j = 8,4 Hz), 4,24 až 4,16 (1H, m), 4,10 (1H. kvintet, J - 6,6 11z), 4.00 (1H. dd. J = 8.9, 2.4 I Iz).

3,94 (IH, dd, J = 8.4.4,8 Hz), 3,90 (111, dd. J - 8,4. 4,8 Hz), 3.57 (2H. t ,J - 5,9 Hz). 3.26 (IH, dd, J- 6.6, 2,4 Hz), 3,12 (2H. t, J= 5,9 Hz). 3,08 (IH, dq. J = 8,9. 7,3 Hz). 1,16 (311, d.

J = 6.6 Hz), 1,05 (3H, d, J = 7,3 Hz).

IR(KBr): 3383, 1755, 1652, 1599. 1547. 1387. 1314 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 468 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C|₉IF0N5O5S2: 468,1366. Nalezena: 468.1365 [M+H]'

Příklad 62 (lR,5S,6S)-2-{ I —[4—(3—aminoazetidin—1 —karbonyl)—1,3—thiazol—2 yljazetidin- 3-yl}thio-615 [(R)-l-hydroxyethyl]-· 1 -methyIkarbapen 2 -em-3-karboxylová kyselina

(1) p Nitrobenzyl· (1R.5S.6S) 2(1 [4-[3-(p-ni trobcnzy loxy karbony lam ino)azet idin-1karbony 1 j-1.3—th iazx>l2\l Jazetid in3\l 1 th io 6 [ (R) 1 -hydroxyethyl] 1 methy lkarbapen-2ein-3 -karboxy lát

Do roztoku 3-acety lthio-1 -{4-[3-l-(p-nitrobenzy loxykarbony Iamino)azet idin-1 -karbony 1]1,3 thiazol-2-yl}azelidinu (390 mg, 0,793 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 57) dimethylformamidu (20 ml) byl přidán hydrazinacetát (88 mg, 0,952 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyH lR,5S,6S)-2-( d i fenyl fosfory loxy )-6-(( R)-lhydroxyethyl] -1 -methyIkarbapen -2 em 3 karboxylátu (471 mg, 0.793 mmol) v acetonitrilu (24 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (552 μί, 3,17 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethyIacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a cthylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným solution a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: methanol (93:7)) za vzniku p nitro35 benzy I-(1 R.5S.6S)- 2-(1 - {4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylainino)-azetidin-l-karbonyl]-l,3th iazol-2-yl} azetid i n-3-yl)thio-6-|( R)-l-hydroxy ethyl ]-l-methy lkarbapen-2-em-3karboxylátu (587 mg, výtěžek 93%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8.23 (4H. d. J ~ 8.8 Hz). 7.66 (211. d. J = 8.8 Hz). 7.51 (2H. d, J = 8,8 Hz), 7.46 (2H, s). 5,51 (IH, d, J = 13,9 Hz), 5,40 až 5.37 (IH. m). 5,25 (1H. d,

J = 13,9 Hz), 5.21 (2H, s), 4,92 až 4,86 (IH, ni), 4,59 až 4,42 (41 i, m), 4,40 až 4,32 (IH, m), 4,30 až 4,23 (3Π, m), 4,04 až 3,92 (311. m), 3.30 (IH, dd, J- 2.2. 6.6 Hz), 3.21 (IH. dq, J = 7,3.9.0 liz). 1.38 (3H. d.J -6,6 Hz). 1,27 (3H. d, J = 7,3 liz).

(2) (1 R.5S.6S)-2-[ 1-(4-(3- aminoazetidino- 1 —karbonyl)— U3—thiaz.ol—2—yI]azetidin—3-yl}thio—

6-[(R) 1 - hydroxyethyl]—1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

-173C7. 300137 B6 p-N itrobenzyl©¹ R,5S,6S)-2©( 1 ©4©3©p-nítrobcnzy loxy karbony l)azet idin-1-karbony!] 1.3thiazol-2-yl] azetidin-3 -y 1} th i o-6© (R© 1 -hyd roxyethy l]-l -methyl karbapen-2 em-3-karboxylát (580 mg. 0.731 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 62(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody (30 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (580 mg) pří teplotě místnosti 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a destilovaná voda. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta výše uvedenými smíchanými rozpouštědly a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografíeky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -» destilovaná voda:aeelonitril (8:2)) a eluát byl lyofilizován io za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S„6S)-2© 1 ©4©3-aminoazet id in-1-karbony I© 1,3-thiazol—2—yl]azetidin—3—yl}thio—6—[{R)—l—hydroxyethyl]— 1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy love kyseliny (135 mg, výtěžek 39%) jako bílé pevné látky.

II—NMR (400 MHz. D_?O): fí (ppm) 7,45 (IH. s), 4.98 až 4,85 (111, m), 4,64 až 4,49 (4H, m), 4,38 až 4,30 (III, m), 4,31 až 4.17 (4H, m). 4,07 až 4.00 (2H. m), 3,44 (1H, dd, J = 2,0, 5,9 Hz), is 3.24 (1 IE qd. J = 7,2. 8,5 Hz), 1,30 (311. d. J = 6,4 Hz), 1.20 (3H. d. J = 7,2 Hz).

IR (KBr): 1756, 1607. 1537. 1449. 1387, 1309. 1291, 1261 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB© in/z: 50 [M+Na]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána CSdH^NsCESNa: 502,1195. Nalezena: 502,1179 [M+Na]^:

Elementární analýza: (©I EsNsCESi JHqO

Vypočítána: C, 45.02% 11, 5,86% N, 13,12 % S, 12,02%

Nalezena: C, 44,27 % 11, 5,28 % N, 13,26 % S, 12.68 %

Příklad 63 (lR,5S,6S©2©l-{4-[(2-aminoethyl©mcthyl-karbamoyl]-1.3-thiazol 2 yl}azetidin-3-yl)thio 6--[(R)— 1 -hydroxyethyl]- 1-methylkarbapen 2-em-3-karboxylová kyselina

HO

O'

COOH so (1) p-Nitrobenzyl (1 R.5S.6S©2-[ l ©4© methy l©2©p-nitrobenzy loxvkarbony lamí no)ethyljkarbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl)azetidin-3 y l]lhio-6-[(R©l-hydroxy ethyl J-l-methy Ikarbapen2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetylthio-1 (4 {methy l-[2©p-nitrobenzyloxykarbony lamino) ethyl]karba55 moyl}-l ,3 - thiazol-2-yl)azetidinu (348,9 mg, 0,71 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 58) dimethylformamidu (17.5 ml) byl přidán hydrazinaeetát (85.2 mg. 0.93 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl© l R, 5 S,6S)-2©d ifenyl fosfory loxy ©6- [(R>-1 — hydroxyethyl]-!-methyIkarbapen 2-em-3-karboxylátu (420,3 mg, 0,71 mmol) v acetonitrilu

4i) (21 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,49 ml, 2,8 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyse-174CZ 300137 Bó linou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent:

toluen:acetonitril (1:2)) za vzniku p-nitrobenzyl-(l R,5S,6S)-2-[ 1 —(4—{methyl—[2 Áp-nitroben5 zy loxy karbony lam ino)ethyl] karbamoyl }-1.3-th iazol-2-y l)azctid i n-3-yl]th io-6-((R>-lhydroxyethyl] 1 -methyIkarbapen 2 eni-3-karboxylátu (267,5 mg. výtěžek 47%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 8,23 (411, d, J - 8,8 Hz), 7,66 (21 i. d. J = 8.8 Hz), 7.56 až 7.46 (3H, m obsahující 2H, d, na 7,49 ppm. J = 8,8 Hz), 7.22 (0,711. s). 7.21 (0,3H, s). 5.52 (1H, io d,13,9 Hz), 5,25 (IH, d, J- 13.9 Hz), 5.172 (211. s), 4,52 až 4,38 (2H, m), 4,32 až 4.10 (311, m). 4.10 až 3,98(211. m). 3,74 až 3,58 (211. m), 3,56 až 3,40 (2H. m), 3,30 až 3,26 (111, m). 3.16 až 3.06 (IH. m). 3,24 (0.9H, s), 3.04 (2.1H. s). 1,77 (IH, d, J 4,4 Hz). 1.38 (311, d. J = 5,9 Hz),

1.22 (3H,J- 7.3 Hz).

(2) (1 R,5S,6S)-2-( 1—{4—[(2—aminoelhyl)—methyl—karbamoyl] l,3-thiazol-2-yl)azetidin-3yl)thio-6-[(R)- I-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina p-N i trobenzy l-(l R.5S,óS)-2-[l (4-{methy l-[2-{p-nitrobenzy loxykarbony lamino)ethyl]karbamoyl ]-1.3-thiazol 2-yl)azetidin—3—yljthitv-6 [(R)—1—hydroxyethyIJ 1 -methy lkarbapen-2--em

2o 3—karboxylát (267,5 mg, 0,33 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 63(1)) ve směsi teírahydrofuranu (14 ml) a destilované vody (6,7 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% palladia na aktivním uhlí (300 mg) při teplotě 30 °C ve vodní lázni 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána směs ethylacetát— tetrahydrofuranu (1:1) a destilované vody. Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena, promyta výše uvedeným směsným rozpouštědlem a koncentrována za sníženého llaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent; destilovaná voda -> 5% acetonitril v destilované vodě > 10% aeetonitril v destilované vodě -» 15% acetonitril v destilované vodě), a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (I R,5S,6S)-2-{ 1 {4-[(2-aminoethyl)-methyl-karbamoyl]-l ,3-th iazo l-2-yl}azetidin-3-yl)thio-6-[(R)- 1 hydroxyethy IJ-15o methylkarbapen-2-em-3-karboxylové kyseliny (81,6 mg, výtěžek 51%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₂O): δ (ppm) 7.11 (0,4H, s), 7,05 (0.6M, s). 4,43 (2H, t. J = 8,8 Hz). 4,26 až 4,18 (IH, rn). 4,12 (IH. kvintet. J “ 5,9 Hz). 4,08 (IH. dd, .) - 8,8. 2.3 Hz), 3,91 (2H, dd, J 8,8, 4,9 Hz). 3.70 (2H, t, J - 5,9 Hz), 3.31 (IH, dd, J - 5.9, 2,3 Hz), 3,23 až 3,16 (2H. m), 3,12 (IH.dq.J-8.8. 7.8 Hz). 3.00 (1,811. s). 2.94 (1,2H, s), 1,17 (311, dj = 5,9 Hz). 1,07(311, d,

J 7,8 Hz).

IR (KBr); 3419, 2966. 1754, 1607. 1540. 1470, 1391, 1315 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB’): m/z: 482 [M+H] to Příklad 64 (1 R.5S.6SKM 1—{4—[(2—hy droxyethyl f- isopropy l-karbamoylj- 1,3 - thiazol-2-y I} azetidin-3y 1 )thio-6-[(Rf 1-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2“em-3-karboxylová kyselina

COOH

- 175C7 300137 B6 (1) p—Niirobenzy1-( 1 R,5S.6S)—2—(1—(4—{[2 -(Zerc—butyldimethylsily loxy )eth\ Γ]—isopropylkarbamoyl }-l,3-thiazoI-2-yl)azelidin-3-ylJtliio-6-[(R)-l-hydroxyethyl J-l-methylkarbapen2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3—acetylthio— 144“{[2-0ere-butyIdímethyl$ilyloxy)-ethyl]-isopropy!karbamoyl}1.3- thiazol-2-yl)azctidinu (618 mg. 1,35 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 59) dimethylformamidu (30 ml) byl přidán hydrazinacetát (149 mg. 1,62 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl (1 R.5S.6S)-2-(difenylfosforyloxy )-6-(( RH-hydroxyethy Ij10 l-methylkarbapen-2-em 3-karboxylátu (963 mg, 1,62 mmol) v acetonitrilu (60 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0.94 ml, 5,40 mmol). Směs byla míchána 8 hodin při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová is vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: -> ethylacetát: methanol (10:1)) za vzniku p-nítrobenzyH 1 R.5S.6S) 2-(( 1-( 4-((2-(/crr-butyldimethy Isily loxy )ethy! j-isopropyl20 karbamoyl} 1,3-thiazol-2-yljazetidin-3-yljthio 6 -[(R)-l-hydroxyethyl]-1-methyIkarbapen2 -em-3-karboxylátu (310 mg. výtěžek 30%) jako světle žluté pevné látky.

'H NMR (400 MHz. CDCl,): δ (ppm) 8.21 (2H, d. .1 = 8.4 Hz). 7.64 (2H. cl. .1 - 8.4 Hz). 7.12 až 6,90 (1H. m). 5.45 (1H, d, J = 13,7 Hz). 5,25 (lil, d, J - 13,7 Hz). 4,69 až 4,18 (611, m obsahující 4,45 (2H. dd, J = 7,9. 6,5 Hz), 4,24 (1H. kvint., J = 6.3 Hz), 4,22 (1H. dd, J = 9.0, 2,5 Hz)), 3,89 až 3,72 (1H. m), 3,72 až 3,46 (2H. m). 3.46 až 3,32 (1H. m), 3,26 (1H. dd, J - 6,3. 2,5 I Iz). 3,17 (IH. dq. J = 9,0, 7,3 Hz). 1,36 (3H, d, J = 6,3 Hz), 1.31 až 1,09 (9H, m obsahující 1,25 (3H. d, J = 7.2 Hz)). 0,87 (9H, s). 0,06 (611, d, J = 2,9 Hz).

(2) p-NítrobenzyI (IR,5S,6S)-2-( 1-(4-((2-hydroxyethyl)-isopropyl-karbamoyl]-l.3 -thiazol— so 2-yI}azetidin-3-y 1 )thio-6-((R)-1-hydroxyethy 1]-l-methylkarbapen-2 em-3-karboxylát p-Nilrobenzyl-( IR,5S,6S)-2-( 1-(4-((2 </erc-butyldimethylsÍIyloxy)ethyl] isopropylkarbamoyl }-l ,3-thiazol-2-y l)azetidin-3-yl]thio-6-|(R)-l-hydroxyethy 1]-1-methy lkarbapen-2-em3-karboxylátu (4,47 g, 5.88 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 64(1)) ve směsi letrahydro3? furanu (220 ml) byl přidán do kyseliny octové (0.40 ml, 7,06 mmol) a IM tetrabutylamoniumfluoridu v roztoku tetrahydrofuranu (7,06 ml, 7,06 mmol) a směs byla míchána pří teplotě místnosti 1 den. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidána do reakční směsi. Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát _> ethylacetát: methanol (10:1)) za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-(l-{4-[(2-hydroxyelhyl)-- isopropyl-karbamoyl]1.3— thiazol- 2 yl}azetidin-3-yl)thio-6-((R)-l-hydroxyethyl]-1 -methyIkarbapen- 2 em 3 karboxylátu (1,79 g, výtěžek 47%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 8,23 (2H, d, .1 = 8.7 Hz), 7.66 (2M, d. J = 8.7 Hz), 7.20 (0.6Π, brs). 7,09(0,411. br s). 5,50( IH, d, .1= 13,8 liz), 5,26 (IH.d, ,1 = 13,8 Hz). 4,62 až 4,18 (6H, m obsahující 4,49 (2H, t, J = 8.4 Hz), 4.26 (IH, dd, J - 9,3. 2,6 Hz)), 4,04 (211, dd. J = 8,4.

5.4 Hz), 3,80 (2H, br s), 3,56 (2H, br s). 3,28 (1H. dd, .1 = 7,5. 2.5 I Iz). 3.19(1 H. br s), 1.38 (3H, d. J - 6.2 I Iz), 1,35 (3.6H, br s), 1,26 (3H. d, J = 7,3 Hz). 1,21 (2.4H, br s).

(3) (1 R,5S,6$)-2-( 1-(4-((2 hydroxyethylj-isopropyl-karbamoyl] l.3-thiazol-2-yl}azetidin3—yI)thio—6—((R>-1-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

- 176QZ 300137 B6 p-N itrobenzy 1-( 1 R.5S,6S)-2( I (4 [(2 hydroxyethylj-isopropvl karbamo\ l] -I ,3-th iazol· 2yl)azetidin-3 -yljthio—6-[(R)-1 -hydroxyethyl] 1 methyIkarbapcn-2-em-3-karboxylát (1.79 g,

2.77 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 64(2)) ve směsi tetrahydrofuranu (90 ml) a destilované vody (90 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (1,79 g) vc vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (23 mg), ethylacetát a destilovaná voda Směs byla třepána v dělicí nálevce. Vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilované vodě -> 4% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofl10 lizován za vzniku požadované sloučeniny (!R.5S,6S)-2—(l—-}4—[(2—hydroxyethyl>—isopropyl— karbamoyl]-l,3-fhiazol-2-yl}azetidin-3-yl)thio-6-í(RH -hydroxyethylj-1 -methy Ikarbapen2-em-3-karboxylové kyseliny (897 mg. výtěžek 61%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDClj: 5 (ppm) 7.08 (0,211. s). 7,02 (0.8H, s), 4,56 (21L t. J = 8.0 Hz). 4.50 až 4,40 (0,3II. m), 4,40 až 4.30 (IH, m), 4,25 (111. kvint., J = 6.5 Hz), 4,21 (lil, dd, is J - 8.4, 2.2 Hz), 4.16 až 4,06 (0,7H. m). 4,05 (2H, dd, J - 8,0, 4.8 Hz), 3,69 až 3.60 (0.5H, m),

3.60 až 3,52 (0,511. nt). 3,52 (2H, t. J = 6.3 Hz), 3,43 (IH, dd. J = 6.5, 2,4 Hz). 3,25 (IH, kvint., .1 = 8,4 Hz), 1,42 až 1,07 obsahující 1.30 (3H, d.J - 6,3 Hz), 1.20 (3H, dj = 7,1 Hz)).

IR (KBr): 3382,5. 1750,1, 1603,5, 1537.0. 1468,5, 1452.1, 1396,2. 1312,3. 1284.4 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 533 [MHI]'

2o 1 Imotnostní spektrum vysokého rozlišení (LSI'): počítána C22H29N jCNSiNa: 533,1504, Nalezena:

533.1489 [M+H]‘

Příklad 65 (1 R,5S,6$)-2-( l-{4-[(2-aminoethyl)-isopropyl-karbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl}azetidin- 3 yl)thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl] 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

CO-N

(1) p-Nitrobenzyl (1 R.5S.6S )--2-(1-(4-( i sopropyΊ—[ 2—(p—n itrobenzy loxy amino)—clliyl j— karbamoyl}—L3—thiazoi—2—yljazetidin—3—yljthio—6 [(R)— 1 -hydroxyethylj-1 -methyIkarbapen2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetylthio-1(4; i sopropy I—[2—(p-nitrobenzy loxy am i no j-ethyl] karbamoyl }1,3 thiazoi-2-yljazetidinu (746 mg, 1.43 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu

60) dimethylformamidu (22 ml) byl přidán hydrazinacetát (158 mg, 1,72 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl (1 R.5S.6S)- 2-(difeny Ifosfory loxy)- 6- [(R)-l -hydroxyethy! j1 melhylkarbapcn-2-cm-3-karboxylátu (1.02 g, 1,72 mmol) v acetonitrilu (45 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diiso40 propylethylaminu (1,00 ml, 5,72 mmol). Směs byla míchána 3 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou. nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem

4? chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého

-177C7. 300137 B6 tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně (eluent: ethylacetát: —>

ethylacetát: methanol (10:1)) za vzniku p-mírobenzyM l R.5S.6S) 2 | 1-<4- [isopropxI [2 (p nitrobenzyloxyamino)ethyl]—karbamoyl1,3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yl]thio 6 [(«)-1 hydro\\cth>IJ-l-met hy lkarbapen-2-em 3 karboxy latu (610 mg, výtěžek 52%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCb); δ (ppm) 8,21 (4H, dd ,J = I 1,0, 8,6 Hz), 7,66 (2H, d, J = 8,6 Hz), 7,50 (2H, d, .1= 8,6 Hz), 7,25 až 6,95 (IH. m), 5,51 (IH, d. J- 13,7 Hz). 5.25 (IH, d,

13.7Hz). 5.19 (2H, s). 4.63 až 3,88 (8H, rn), 3,91 až 3.35 (411. m), 3,29 (III, dd. .1 = 6,8, 2,2 Hz), 3,25 až 3,08 (IH. m). 1,38 (3H, d. J = 6,2 Hz). 1,31 (3H. br s). 1,25 (3H. d. J = 7,3 Hz), 1,21 (3H,brs).

(2) (1 R,5S.6S)-2-( 1 — {4—[(2—aminoethyl)—tsopropyl—karbamoyI]— 1.3—thiazol-2 -yl}azelidin-3 v 1 )th io—6—[ (R.)— l -hydroxyethyl]-1 -methy Ikarbapen 2 -em-3-karboxy lová kysel i na p-NitrobenzyK 1 R,5S.6S)-2-[ 1-(4-) isopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)ethyf]karbamoy]}“

1.3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6 [(R) 1 - hydroxyethy lj-1 -methyl karbapen-2-em-3karboxylát (610 mg, 0.74 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 65(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody (30 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (610 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a destilovaná voda byla přidána do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylaeetátová vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosíl (eluent: destilovaná voda -> 2% aeetonitril v destilované vodě ->4% aeetonitril v destilované vodě -> 6% aeetonitril v destilované vodě -> 8% aeetonitril v destilované vodě -> 10% aeetonitril v destilované vodě -> i 2% aeetonitril v destilované vodě -> 14% aeelonitril v destilované vodě -> 16% aeetonitril v destilované vodě —> 18% aeetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)-2-(l-)4-[(2-aminoethyl)-isopropyI karbamovl]-l,3-thiazol-2-yl}azctidin-3-yl)thio-6-[(R)-l-hydroxyethyll-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylové kyseliny (104 mg, výtěžek 28%) jako bílé pevné látky, 'H-NMR (400 MHz. DO): δ (ppm) 7.06(111. s), 4,56 (211. t, J ’ 8.4 Hz), 4.41 až 4,31 (IH, m). 4.29 až 4.09 (3H, ni obsahující 4.24 (1H. kvint., J - 6,3 Hz). 4,20 (IH, dd. .1 = 8.9, 2.4 I Iz)), 4.03 (2H. dd. .1 = 8,4, 4,8 Hz), 3,43 (IH, dd, .1 = 6,3, 2,4 Hz), 3,37 až3,16(311, ni obsahující 3,25 (IH, dq. J = 8,9. 7,4 Hz)), 1,29 (3H. d, J = 6.4 Hz), 1,25 až 1,15 (9H. m obsahující 1,19 (3H, d, J = 7,0 Hz)).

IR (KBr): 3381,6, 1759,7, 1597,7, 1537,0, 1469,5, 1424,2, 1388,5, 1371,1, 1314,3, 1282,4 cm ¹Hmotnostní spektrum (PAB ): m/z: 510 [Μ +11J¹

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána CSjH^NsOsS^Na: 510,1845, Nalezena: 510.1826 [M+H]'

Příklad 66 (1 R.5S.6S)—2—{ 1 - [4-((IS )-l-am inometh vl-2-methy lpropy lkarbamoy l)-t ,3-thiazol-2-yl jazetidin -3-yl}thio—6—[(R)— 1 —hydroxyethyl’J— l-methyIkarbapen 2 em-3-karboxylová kyselina

COOH

- 178CZ 300137 B6 (1) p-N itrobenzyH 1 R,5S.6S)-2- [ 1 —(4— {(1 S)-2-methyl-[ Hp-nitrobenzyloxykarbonylamino)rnethylj-propylkarbamoyl j-1 „3—thiazol—2—v Ijazetidin—3—yl]thio—6—l(R>— 1 -hydroxyethyl J-1 -methylkarbapen-2-em-3 karboxylát

Do roztoku 3-acety lth io-1-(4 ~ [(1S)—2—methyl—[ 1 -(p-nitroben zy loxy karbony lam ino)methyljpropylkarbamoylj —1,3—thiazol—2—y!)azetidinu (780 mg. 1.50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 61) dimethylformamidu (40 ml) byl přidán hydrazinacetát (166 mg, 1.80 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-n itrobenzyH 1R, 5 S,6S )-2-( d i fenyl fosfory loxy )-6 id [(R)—1 -hydroxyethylJ-1 -methylkarbapcn-2-em-3-karboxylátu (892 mg, 1,50 mmol) v acetonitrilu (45 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1.05 ml, 6,00 mmol). Smčs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi.

Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: > ethylacetát: methanol (98:2)) za vzniku p-nitrobenz>ϊ—(1 R,5S„6S)—2—[I —(4—{(1S)—2- methyl-f l-(p-nitrobenzyloxykarbonylainíno)2.(i methy ljpropy Ikarbamoy 1}-1,3-th iazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl ]-l~ methy lkarbapen-2-em-3-karboxyIátu (950 mg, výtěžek 77%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCfi): δ (ppm) 8.23 (2H, d, J = 8,8 Hz). 8,09 (2H. d, J = 8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J - 8,8 Hz), 7,43 (IH, s), 7.40 (2H. d, J - 8,8 I lz), 7,12(1 H, br d, J = 8.8 Hz.), 5,51 (1H, d, J = 13,2 Hz), 5,25 (IH, d, J= 13,2 Hz), 5,23 (IH, d. .) - 13,2 Hz). 5,05 (IH, d.

J= 13,2 Hz),4.51 (IH.t, .1 = 8,1 Hz), 4,44 (IH. t, J = 8,1 Hz). 4.32 až 4,25 (311, m). 4,06 až 3,96 (3H, m), 3,45 až 3,32 (211. m), 3,30 (IH, dd, J - 2,2, 6,6 Hz), 3.21 (1H. dq, J = 7,3, 9,5 Hz), 1,93 až 1.84 (l H, m), 1,38 (3H, d, J - 5.9 Hz). l,28(3H,d, J - 7,3 Hz), 1.00(311, d, J = 6,6 Hz), 0,98 (3H, d,

J = 7,3 Hz).

(2) (1 R,5S,6S)-2-{ 1-(4-((1 $)-l-amin omethy 1-2-methy Ipropy Ikarbamoy 1) ! ,3—thiazol—2—v I]azctidin-3-ylJthio 6-[(R)-l-hydroxyethyl] l-methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina p NitrobenzyH 1 R.5S.6S) 2-[l-(4—J(lS)-2-methyHMp-nitrobenzylo.\ykarbonylamino)55 methy ljpropy Ikarbamoy I j-1,3-th iazol 2-y l)azetid i n—3—yljlhio—6—R)— 1 -hydroxy ethyl ]-lmethylkarbapen-2-em-3-karboxylát (950 mg. 1,15 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 66(1)) ve smčsi tetrahydrofuranu (48 ml) a destilované vody (48 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (950 ing) při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát io a destilovaná voda. Výsledná smčs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena, promyta výše uvedeným směsným rozpouštědlem a koncentrována za sníženého tlaku, Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda > destilovaná voda:acetonitril (76:24)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1R.5S.6S)2-] l —[4- ((1S)-1 -aminomethy 1-2 methy Ipropy Ikarbamoy I)— 1.3-th iaz.ol—2—y Ijazetidin—3—yl} 45 thio-6-[(RH-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2 em-3-karboxylové kyseliny (103 mg, výtěžek 18%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D₂O): ó (ppm) 8.18 až 8,03 (IH, rn), 7,51 (IH. s), 4.47 (211. t. J = 8,1 Hz),

4,24 až 4,14 (IH, m), 3,99 až. 3,85 (4H. m), 3,84 až 3,77 (IH. m), 3,09 až 2,88 (4H. m). 1,94 až 1,84 (114. m), 1,14 (3H, d. J = 6,2 Hz), 1,03 (311, d, J = 7,0 Hz), 0.89 (3H, d, J - 6.6 Hz), 0,84

5o (3H. d.J = 6,6 Hz).

IR (KBr): 1752, 1660, 1605, 1545. 1494. 1471 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 510 [M+H]

-179CZ 300137 B6

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána C22H12N5CNS2'· 510.1845, Nalezena;

510,1846 [M+HJ

Elementární analýza: CGHnN^CRSv 13/7H₂O

Vypočítána: C. 48,65 % H, 6,44 % N. 12,90 % SJ 1,81 %

Nalezena; C. 48,92 % 11, 6,29 % N, 12.60 % S. 12,04 %

Příklad 67 io (lR,5S,6S)-2-[l -(4-aminomethyl-1,3-thiazol—2—yl)azelidin 3 yl]thto—6—f(R>—I-hydroxyethy 1]-1 -methylkarbapen -2-em-3-karboxylová kyselina

HO

COOH (1) p Nitrobenzylj 1 R,5S,6S)-2-[ 1 — J4—(p-nitrobenzyl karbonylam inomethy I)—1.3—th i azol-2 yljazetidin-3 yl}thio—6—f(R)— 1 —hydroxyethyIj— 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3—acetylthio— 1 —[4 (p-nitrobenzylkarbonylaniinomethyl)-l,3-thiazol-2-ylJazetidinu (265.2 mg, 0.63 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 62) dimethylformamidu (14 ml) byl přidán hydrazinacetát (76,4 mg, 0,5 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 0,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-(difenylfosfbryloxy)-6-[(R) 1 -hydroxyethvl]-! -methy Ikarbapen2-em-3-karhoxyIátu (390 mg, 0,66 mmol) v acetonitrilu (19 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0.44 ml. 2.5 mmol). Směs byla míchána přes noc pří postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogen25 uhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byta třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyla 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: toluemacctonitril (2:3)) za vzniku p3i) nitrobenzylj 1 R,5S.6S)-2J l-[4-(p-nitrobenzylkarbony laminomethyl)-! ,3—thiazol—2 yljazetidin- 3- yl | thio-6—[{RJ1 -hydroxyethylj-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxy látu (268.4 mg, výtěžek 59%) jako světle žluté pevné látky.

lI NMR (400 MHz. CDCl,): 6 (ppm) 8.22 (411. d. J - 8.8 Hz), 7.66 (2H, d. J = 8,8 IIz), 7,51 (2H, d. J= 8,8 Hz). 6.45 (IH, s). 5,51 (IH, d. .1= 13,9 Hz). 5.37 (IH, br s). 5.25 (IH. d.

J= 13.9 liz). 5,21 (2H.s). 4.48(111. t.j - 7.8 Hz). 4,46 (III. t, J - 7.8 Hz). 4.35 až 4,20 (5H, m), 4,03 (2H. dd, J = 7,8, 4.9 Hz), 3,29 (lil, dd, .1 = 6,2, 2,5 Hz). 3,22 (IH, dq, J = 8.9. 7.3 Hz). 1.80 (IH, d. J “4,4 Hz). 1.38 (3H, d. J = 5,9 Hz). 1.27 (311, d, J = 7,3 Hz).

(2) (1 R,5S,6SJ2 [1 -(4—aminoniethyl—1.3—thiazol—2—yl)axelidin—3—yIjthio—6—[(R>— I-hydroxy4o ethyl] -1 -methylkarbapen- 2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzylj 1 R,5S.6S)—2— 1 — (4—(p ·-ni trobenzy Ikarbony laminomethyl JI,3-th iazo l-2-yl|azetidin- 3 · -y 1 }· thio—6—f(R)— 1 -hydroxyethvl]-1 - methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát (660 mg.

0,89 minol) (získaný podle popisu v příkladu 67(1)) vc směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a desti45 lované vody (30 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7.5% palladia na aktivním uhlí

- 180CZ 300137 Bó (606 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda 2% acetonitril v desti5 lované vodě >4% acetonitril v destilované vodě -> 6% acetonitril v destilované vodě —» 8% acetonitril v destilované vodě -> 10% acetonitril v destilované vodě 13% acetonitril v destilované vodě -> 15% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6S)—2—[ 1 —(4—aminomethyl— 1,3—thiazol—2—yl Jazetidin 3 -yl]thio—6—[(R)—l — hydroxy ethy I ]--I--methy lkarbapen--2--em 3-karboxylové kyseliny (123 mg. výtěžek 34%) jako in bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D.O): δ (ppm) 6.85 (IH, s). 4,54 (211, t. J - 8.1 Hz), 4,38 až 4,30 (IH. m),

4.25 (IH, kvint., J =- 6,3 Hz), 4.25 (lll. dd, ,1- 8,9. 2,5 Hz)), 4,07 (2H. s), 4.02 (2H, dd. J-8.1. 4.0 liz). 3.44 (IH. dd, J = 6,3. 2,5 Hz), 3,25 (IH. dq. J- 8.9. 7,3 Hz)). 1.30 (311, d, J = 6,4 Hz), 1,20 (311, d.J- 7.2 Hz)).

IR (KBr): 3362.3, 1756,8, 1589.1, 1527,3, 1469,5, 1386,6, 1309,4, 1286,3. 1259,3 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 411 [M t H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána C17H23N.1O.jS2: 411.4161. Nalezena: 411.1173 fM+H]^!

2Í)

Příklad 68 (1 R,5S.6S)-2-{ l-[4-(methoxykarbony laminomethyl)-!,3 thiazol-2-yl]azetidin-3-yl}thio-6[(R)-l-hydroxyethylj-1-methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

S

NHCOOMe (1) p—Nitrobenzyl—(1 R„5S,6S )-2-( l-[4-(mcthoxykarbony lam i nomethy l)-l, 3-thiazol 2-yljazetidin -3-yl jth io-6- [(Rf-1 -hydroxyethyl]-! -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku 3-acetyllhio-l-l4-(.methoxykarbonylamino methyl)-!,3-thiazol-2-ylJazetidinu (441 mg, 1,39 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 63) v dimethylformamidu (13 ml) byl přidán hydrazinacetát (154 mg, 1,67 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobcnzyH IR, 5S,6S)-2-(d ifeny lfosfory loxy >-6-[(R)-l-hydroxyethyl j-l-methy lkarbapen2-em 3—karboxy látu (993 mg, F67 mmol) v acetonitrilu (26 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním d i isopropy lethylam inu (0.97 ml. 5,56 mmol). Směs byla míchána 30 minut při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuh líčí tanu sodného byl přidán do reakění směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodní ným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát) za vzniku p-nitrobenzyl (1 R.5S,6S)-2-{ 1 -[4-( methoxy karbony lam i nomethy I)-l,3-thiazol-2-yl]azetid in-3- y I) thio 6l(R)— 1 hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em 3-karboxylátu (307 mg, výtěžek 53%) jako světle žluté pevné látky.

- 181 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 MHz. CDCIJ: 8 (ppm) 8.22 (2H. d. J = 8,7 Hz), 7,66 (2H, d. J = 8.7 Hz). 6.45 (1H. s). 5,51 (1H. d. J = 13,7 Hz). 5.26 (1H. d. J = 13,7 Hz), 4,48 (2H, t. J = 8.0 Hz), 4,43 až 4,18 (5H, m), 4.09 až 3,99 (2H, m). 4,09 až 3,99 (2H, m), 3,69 (3H, s). 3.29 (1H. dd. J = 6,7. 2.7 Hz). 3,21 (111. dq, J = 9.0, 7,3 Hz), 1,38 (3H. d. J = 6,1 Hz), 1,25 (3H,d, J = 7,3 Hz), (2) (1R.5S.6S) -2-{ 1- [4-(methoxykarbonylaminomethyl)-l,3-thiazol-2-yl]azetidin-3-yl}thiu—6—[(R)—l —hydroxyethyl] 1 -methylkarbapen-2 -em-3-karboxyIová kyselina, sodná sul p Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-{ l—[4—( methoxy karbony lam i nomethyl) 1.3-thiazo!-2-y IJazetiio din—3—yl }· th io—6—[(R)— I —hydroxyethyl] -1 -methy Ikarhapen 2 em-3-karbo\\ lát (307 mg.

0,52 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 68(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (15 ml) a destilované vody (15 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7.5% palladia na aktivním uhlí (307 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smés filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhl ičitan sodný (44 mg), cthylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilované vodé 4% acetonitril v destilované vodé -> 6% acetonitri! v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S,6S)-2-{ l-|4-< methoxy karbony laminomethyl)-l,3-thiazol-2->IJazetidin-3 yl}thio—6—[(R) Ί-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná síil (135 mg. výtěžek 53%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. DO): δ (ppm) 6.59 (IH. s). 4,51 (211, t. .1 = 8.1 Hz), 4.38 až 4,29 (I H, m).

4,25 (IH, kvint.. J = 6,2 Hz), 4,20 (IH, dd, J = 9,1. 2,5 Hz), 4,19 (211, s), 4.05 už 3,98 (211, m), 3,68 (3H,s), 3.43 (lil. dd, J = 6.2. 2.4 Hz). 3.25 (III. dq. J - 9,1. 7,4 liz). 1,30 (3H, d,

J - 6,2 Hz), 1,20 (3H, ti, J = 7,2 Hz).

IR (KBr): 3355.5, 1748.2. 1725,1, 1660.6, 1525.4. 1470.5. 1395.2, 1311.4. 1290.1. 1254,5 em ' Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 513 [M+Na]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CiUhNjO^Na:: 513,0855, Nalezena: 513,0850 [M+Na] so

Příklad 69 (I R,5 S,6S>—2- {l-[4 (benzoylam i nomethyl H ,3—thiazol—2—y I ]axetidin-3 -yl |thio-6-[(R) 1 hydroxyethyl] -1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p—Nitrobenzyl—(1 R,5S,6S)-2-{ l-[4-( benzoylam i nomethyl) -1,3-thiazol 2 yl Jazetidin 3yl]thio-6-[(R)-l-hydroxyethyH-l-methylkarbapen-2 em-3-karboxylát

4o Do roztoku 3—acety Ithio— l — [4—(benzoy lam i nomethyl)-1,3-thiazo 1-2- y l]azet idinu (698 mg,

2,01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 64) v dimethylformamidu (20 ml) byl přidán hydrazinacelát (222 mg, 2,41 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p nitrobenzyl(1 R,5S,6S)-2-(difenylfosfory loxy >—6—[(R)— I -hydroxyethyl]-I-methy lkarbapen-2-em-3-karb4? oxylátu (1.43 g. 2,41 mmol) v acetonitrilu (40 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1.40 ml.

- 182CZ 300137 B6

8.94 mmol). Směs byla míchána 2,5 hodin pří postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti.

Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční smčsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethvlacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: ethylacetát: methanol (20:1)) za vzniku p nitiObenzyí—(1 R,5S.6S) 2 f 1 [4j benzoy laminomethyl)-1,3 thiazol—2—y l]azetidin-3y 1} th i o—6—[(R >-1 -hydroxyethyl] -1 -methy Ikarbapen -2-ein-3 karboxy látu (851 mg. výtěžek io 65%) jako světle žluté pevné látky, 'H-NMR (400 MHz. CDCI/: δ (ppm) 8,21 (2H. d, J - 8,7 Hz), 7,81 (211, d, J = 7.3 Hz), 7,66 (211, d, J - 8,7 Hz), 7,56 až 7,38 (3H, m), 6,79 (IH, bs), 6.52 (1II, s), 5,51 (1Π, d. J = 13,7 Hz),

5.25 (IH, d, J = 13.7 Hz), 4,53 (2H, dd. J = 5,3. 2,9 Hz), 4,47 (2H. t, J = 8,3 Hz), 4,33 až 4,22 (3H, m), 4,10 až 3,95 (2H, m), 3,28 (1H. dd. J = 6.7, 2,6 liz), 3,19 (IH. dq, J = 7,9, 6,4 Hz), 1,37 (3H, d, J = 6,4 Hz). 1,26 (3H, d. J = 7.3 Hz).

(2) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(benzoylaminoiTiethyl)-l,3-thiazol-2-yl]azetidin-3-Yl}thio-6-[(R)1-hydroxyethyl]-1 iiiethylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p—Nitrobenzyl—(1 R.5S.6S)—2—{1 -[4-(benzoylaminomethyl) 1,3—thiazol—2- yl]azetidin-3-yl}thio-6-[(R)-l-hydroxyethylJ-1-methylkarbapen-2-eni-3-karboxvlát (851 mg, 1,31 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 69(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (40 ml) a destilované vody (40 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (851 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do Filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (110 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda 2% acetonitril v destilované vodě -» 4% acetonitril v destilované vodě -> 6% acetonitril v destilované vodě -> 8% acetonitril v destilované vodě -> 10 % acetonitril v destilované vodě -> 15% to acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S,6S)-2-{ 1 -[4- (benzoylaminoniethyl)-l ,3 -thiazol—2—yIJazetidin—3—yl] thio—6—[(R)—1 hydroxyethyl]- 1 -methylkarbapen-2-cm-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (144 mg, výtěžek

20%)jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D_:O): δ (ppm) 7,81 (2H. d, J = 7,4 Hz). 7,70 až 7,55 (311, m), 6,62 (111. d.

,i5 J= 8,6 Hz), 4.52 (2H. t. J= 7,9 Hz). 4.47 (2H, s). 4.37 až 4,28 (III, m), 4,24 (III.kvint. J = 6,2 Hz). 4.19 (IH. dd, J = 8.8. 2.2 Hz), 4,05 až 3,97 (2H, m), 3,43 (IH, dd, J = 6,2, 2,2 Hz),

3.26 (1H. dq, j = 8,8. 7.2 Hz), 1,29 (3H. d, J = 6.4 Hz), 1.19 (3 H. d, J - 7.2 Hz).

lR(KBr): 3336,2, 1750,2, 1645,9, 1601.6. 1526.4, 1488,8. 1470.5. 1396.2, 1308,5, 1294.0 cm ' Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 537 [M+HJ

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CJdHif.N/JS^Na: 537,1243. Nalezena: 537,1246 [M+H]'

Příklad 70 45 (1 R,5S,6S)-2-{ ]-[4-(benzensulfonylaminomethyl)-L3-thiazol2-yl]azetidin-3-yl}lhi()-6[(RH-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

- 183CZ 300137 Bó

(1) p-NitrobcnzyÍ-(lR,5S,6$) 2— (I —[ d—fbenzensulfonylaminomethy I)— 1,3—thiazol 2-ylJazctidin—3—yl}thio—6- [(R)-1 -hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Oo roztoku 3-acetylthio-l-[4-(benzensulfonylaminomethyl)-l ,3 thiazol-2-yljazelidinu (1,00 g, 2,68 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 65) v dimethylformamidu (30 ml) byl přidán hydrazinacetát (296 mg, .3.21 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána ! hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-(difeny!fosforyloxy)-6-[(R)-l hydroxyethyl]- -1 methylkarbapenio 2-em-3 karboxy tátu (1,75 g, 2,94 mmol) v acetonitrilu (60 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,87 ml. 10.7 mmol). Směs byla míchána 3 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsí. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně (eluent: hexane: ethylacetát (1:1)) za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2— ·{ 1 -[4-(benzensulfonyIaminomethyI)-1,3 thiazol—2—yl]aze?o tidin-3-yl 1 thio—6—((R)—1 hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3 -karboxylátu (851 mg, výtěžek 65%) jako světle žluté pevné látky, 'H-NMR (400 MHz, CDCl.,): 6 (ppm) 8,21 (211, d, J - 8,7 Hz). 7,83 (2H. d. .1 = 7.5 Hz), 7.66 (2H.d. J =8.7 Hz), 7.60 až 7,43 (3 H, m). 6.33 (IH. s). 5.58(111, brs). 5,51 (IH.d, J= 13.7 Hz)

5.26 (IH. d. J - 13,7 Hz). 4.48 (214. t. J = 7,8 liz), 4,44 (211, t, J = 7.8 Hz). 4,36 až 4.18 (311. m).

4.13 (111, kvint, .1 = 7.2 I Iz), 4,08 (111. dd, J - 12.7, 6.0 Hz), 4.01 (111. dd, J = 8,6. 5,6 Hz), 3,94 (IH. dd. J - 8.6. 5,6 Hz), 3,30 (III, dd, J = 6.7, 2,6 Hz), 3.21 (111, dq. J = 8,9. 7.4 Hz). 1.37 (311. d. J = 6.2 Hz), 1.23(3)1, dd, .1 = 7,2. 1.2 Hz).

(2) {1 R.5S,6S)-2 -(l-l4-(benzensu Ifony lam inomethy 1)-1,3 thiazol—2—yljazetidin—3—yl} th io—

6-[(R)-l-hydroxyethyl]- 1-methylkarbapen-2-em-3- karboxylová kyselina, sodná sůl p-N itro benzy l-( 1 R.5S.6S) 2% l-[4- (benzensu Ifony lam inomethy I) 1,3-th iazo 1-2 -yljazetidin— 3—yl 1 thio—6—[(R)- 1-hydroxydhyI]-l-mcthylkarbapen-2-em—3—karboxylát (1,13 mg,

1,65 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 70(1)) vc směsi tetrahydrofuranu (55 mi) a .υ destilované vody (55 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (1,13 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (139 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografícky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilované vodě -> 4% acetonitril v destilované vodě 8% acetonitril v destilované vodě —> 12% acetonitril v destilované vodě -> 16% acetonitril v destilované vodě > 20% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (I R.5$,6S)-2-{ ]-[4-(benzensulfonyIaniinoinelhyl)-l .3 thiazol—2—yl]azctídin-3—ylJthio-6-[(R)-í-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (627 mg, výtěžek 66%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 Mllz. Ο,Ο): δ (ppm) 7.71 až 7,68 (3H, m), 7,61 až 7,52 (211, m). 6.52 (IH, s).

4,35 až 4.18 (5H. m obsahující 4.22 (1H. dd, J = 9.1.2.4 Hz)), 4,12 (211. s). 3.78 až 3.65 (211. m).

- 184C7. 300137 B6

3.36(111. dd, J = 6,2. 2.4 Hz), 3.23 (III, dq. J = 8,8, 7,2 Hz). 1.31 (3H.d. J = 6,4 Hz). 1.21 (3H.

d. J = 7.2 Hz).

IR (KBr): 3293,8. 1748,2. 1597,7. 1528.3, 1470.5, 1447.3. 1,397.3, 1397.2, 1314.3 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB’): m/z: 573 [M+H]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB): počítána CiiHi^OjSiNa: 573.0093. Nalezena: 573.0911 [M+H]’

Přiklad 71 (1 R.5S.6S)-2-( 1- [4- [(Thiofén-2-karbonylamino)methyl]- 1,3-thiazol-2-vI}azetidin-3-yl)thio6-[(R)-1 -hydroxyethyl]-1 -methylkarbapcn-2-em -3-karboxylová kyselina, sodná sul

(1) p-Nitrobenzyl-( 1R,5S,6S)-2-( l-{4-[(thiofen -2-karbonylamino)methylj-l ,3-thiazoi 2yl[azetidin-3-yl)thio 6—[(R>— 1 -hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetylthio-l-[4-[(lhiofen-2-karbonylamino)methyl]-l ,3-thiazol-2-yl[azetidinu (490 ing. 1.52 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 66) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán hydrazinaeetát (169 mg, 1.83 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a smčs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2 -(difeny Ifosforyloxy >—6—[ (R>— l -hydroxyethyI ]-1 -methyl karbapen2-em-3-karboxylátů (1,09 g, 1,83 mmol) v acetonitrilu (30 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,06 ml, 0.68 mmol). Smčs byla míchána 2,5 hodin při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promvta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát) za vzniku p-n itrobenzy I(I R,5S.6S>-2-( l-{4-[(thiofen-2-karbonylamino)methyl] 1,3-thiazol-2-yl[azetidin-3-yl)thio6-[(R)-l-hydroxyethyl ]-l-methy lkarbapen-2-em 3-karboxylátu (997 mg, výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCl,): δ (ppm) 8,22 (2H. d. J- 8,0 Hz), 8.02 (211. s). 7.66 (211. d. J = 8,0Hz). 7.47 (IH. d. J = 5,2 liz), 7,07 (lll, d. J - 4,2 Hz). 6.55 (IH. s). 5,50 (IH. d. .1 = 13,7 Hz), 5,26(111. d. J = 13,7 Hz), 4.67 až 4.55 (211. m). 4.51 (211, d. .1 = 5.3 Hz). 4.35 až 4.22 (2H. m). 4,22 až 4.03 (311, m), 3,29 (IH, dd, J = 6,8, 2,6 Hz). 3.18 (IH. dq, J = 9.0, 7.5 Hz), 1.37 (3H, d. .1 = 6,3 Hz), 1.25 (3H. d. J - 7.3 Hz).

(2) (I R.5S.6S)-2-{ 1- {4-[(thiofen-2-karbonylamino)methyl]-l .3—thiazol 2-y[[azetidin-3ylthio-6-[(R)-l-hydroxyelhy|]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sul p-N itrobenzy l-(t R,5$.6S)-2-(l-{4-[(thiofen-2-karbonylamino)methyl]-l,3 -thiazol-2-yl}* azet id i n-3-y 1 )th i o-6-[(R)-l -hydroxyethy l]-l-methyl karba pen-2-em-3 -karboxy lál (997 mg,

1,52 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 71(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (35 ml) a

- 185 ¢.7. 300137 B6 destilované vody (35 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (997 mg) ve vodní lázní (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (128 mg), ethylaeetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -» 4% aeetonitril v destilované vodě > 8% aeetonitril v destilované vodě -» 12% aeetonitril v destilované vodě -> 15% aeetonitril v destilované vodě -> 20% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1R.5S.6S)2Al-í4-[(thiofen-2-karbonylamino)methyJ-l,3-thiazol-2-yl}azetidin-3-yl)thio 6 [(R)-l10 hydroxy—ethyl]—1 -methyIkarbapen -2 em-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl (287 mg, výtěžek

35%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, DO): δ (ppm) 7,73 (2H, d, J - 2,7 Hz), 7,19 (1H, tJ = 4,4 liz), 6.59 (IH. d. J = 0.7 Hz), 4,49 (2H, t, J = 7.5 Hz). 4.43 (2H, s). 4,35 až 4.27 (Hl, m). 4,24 (1H. kvint. .1 = 6.3 I lz). 4,18 (1H. dd. J = 8,3. 2.4 Hz). 3.99 (1 H, t. J = 4,7 Hz), 3,97 (l Π, t, J = 4,7 Hz), 3.42 is (lil, dd, .1 - 6,3, 2.4 Hz), 3.22 (111, kvint., .1 = 8.3 Hz). 1,30 (3H, d, J = 6,4 Hz), 1.18 <3H, d,

J = 7,1 Hz).

IR(KBr): 3324,7. 1749,1, 1599,7, 1530.2. 1469,5. 1418,4. 1396,2 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 521 [M-Na-í2H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ); počítána CMÍbsN/XS·»: 521,0942, Nalezena: 20 521,0992 [M-Na+211] '

Příklad 72 (1 R.5S.6S)—2—(1 [4-[(furan-2- karbony lam i no)metliylJ-l.3-thiazol-2-ylJazetidin-3-yI)thio-6 |(R)-1 hydroxyethyl]-1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxyíová kyselina, sodná sul

HO

COO'Na⁺ (1) p-N itrobenzy l-( I R,5S,6S)-2-( |-{4 ((furan-2-karbonylamino)melhyl]-l ,3-thiazol 2 -yl}azetidin—3—yl )thío--6—l(R)— 1 -hyd roxy ethyl] -1 methyl kar ba pen 2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acety!thio-l-{4-[(furan-2-karbonylamino)methyl'|-E3-thiazol 2-yfiazctidinu (341 mg, 1,12 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 67) v dimethylformamidu (10 ml) byl přidán hydrazinacetát (123 mg, 1.34 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl (1R, 5 S,6 S )-2-( d i feny 1 fos fóry loxy )-6-[ (R)-1-hyd roxycthyl]-l-methy Ikarbapen2-em-3 karboxylátu (797 g. 1,34 mmol) v acetonitrilu (20 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,78 ml. 4.48 mmol). Směs byla míchána 3 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylaeetát a nasycený vodný roztok hydrogen40 uhličitanu sodného byl přidán do reakční smési. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylaeetát) za vzniku p-nitrobenzyI4? (1 R.5S.6S)-2-( 1- {4-[(furan-2-karbonylaniino)mcthyl] 1,3—thiazol—2- yl}azetidin-3-yljthio-6- 186CZ 300137 Bó [(REI·-hydroxyethyl]--1 -methvIkarbapen--2-em-3--karboxylátu (641 mg, výtěžek 89%) jako světle žluté pevné látky.

'H NMR (400 MHz. CDCI.,): δ (ppm) 8,22 (2H. d, J = 7,8 Hz), 7.66 (211. d. J - 7.8 liz). 7,45 (III, s). 7,13 (IH. d. J- 3.5 Hz). 6,53 (IH, s). 6.49 (IH, d. J - 5.1 Hz). 5.48 (lil. d.

J - 13.7 Hz). 5.26 (IH, d. .1 - 13.7 Hz), 4.60 až 4,40 (4H. m obsahující 4,51 (2H. d. J - 5,6 Hz)), 4,35 až 4,20 (211, m), 4,20 až 4,00 <3H, m), 3,29 (1H, dd. J = 6,9, 2.5 Hz). 3.19 (1H. dq. J = 9,3, 7.3 Hz), 1,37 (3H. d. J = 6.4 Hz). 1,26 (3H, d, J = 7,3 Hz).

(2) (1 R,5S,6S)-2-(l-í4-[(furan-2-karbonylamino)methyl] l,3-thiazol-2-vl}azetidin-3-yI)10 thio-6-[( REI-hydroxyethyl EI-ntethylkarbapcn-2 -em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-NitrobenzyH 1 R,5S,6S)—2—(1-- (4—[(furan—2- karbonylamino)methyIEE3 thiazol-2-v1|azetidin-3 -yl)thio-6-[(REEhydroxyethylJ-]“inethylkarbape»-2-em-3-karboxylát (640 mg. 1,00 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 72(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (32 ml) a deštili lovanc vody (32 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (640 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (84 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda —> 2% acetonitril v destilované vodě -> 4% acetonitril v destilované vodě -> 6% acetonitril v destilované vodě -> 8% acetonitril v destilované vodě -» 10% acetonitril v destilované vodé -> 15% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (lR.5S.6SE2-<l-|4-[(ťuran-2-karbonylamino)methyl]-l,3 -thiazoE2-yl}azctidin-3-vl)thio-6[(RE·-hydroxyethyl]-]-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (218 mg, výtěžek 41%) jako bílé pevné látky.

¹ H-NMR (400 MHz, D,O): δ (ppm) 7.69 () H, dd. J = 1.7, 0.8 1 Iz). 7.19 (111. dd .J - 3.6. 0.7 Hz). 6.64 (IH. dd. J = 3.6. 1,7 Hz), 4.51 (211, t. J = 8.2 Hz), 4.44 (2H. s). 4.38 až 4.28 (IH. m), 4,25 (IH. kvint. J = 6,3 Hz), 4,19 (IH, dd, J - 8.9, 2,2 Hz), 4,02 (IH. dd, J = 5,0. 3.2 Hz). 4.00 (IH. dd. J - 5,0, 2.9 Hz), 3,43 (IH. dd. J -6.3, 2.5 Hz). 3,24 (IH. dq, .1 = 8,9, 7,1 liz). 1,30 (3H, d,

5(i J = 6,4 liz), 1,19 (311, d, .1 = 7.1 liz).

IR (KBr): 3367,1, 1749,1. 1653.7, 1594.8. 1524,5, 1472,4, 1395.2 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 505 [M-Nai 2H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána Cnl 505,1216, Nalezena:

505,1208 [M-Nai2H]‘

Příklad 73 (1 R,5S,6SE2-[ 1 -(4-ťtalimidomethyl-1,3-thiazol-2-yljazetidin-3-yIJthio-6-[(REI hydroxyethylEl-methylkarbapen 2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

tu (1) p Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6$) 2-[ 1 -(4-Italimidoniethyl-1,3-thiazol 2 - yl jazetidin—3—yl |— ihio—6—[(R Ε1 -hydroxyethyl El -methy Ikarbapen-2 -em-3-karboxylát

Do roztoku 3—acetylthio— 1—(4—ftalimidomethyl--l ,3—thiazol—2—y Ijazetidinu (599 mg, 1.60 mmol) získaného podle popisu v referenčním příkladu 68 v dimethylfonnamidu (18 ml) byl přidán

- 187CZ 300137 B6 hydrazinaeetát (177 mg, 1,92 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl© 1R.5S,6S)-2(difenyIfosforyloxy©6-[(R©1 -hydroxyethyl]- l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (1.14 g.

1,92 mmol) v acetonitrilu (36 ml) přidán po kapkách do výsledné směsí v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1.11 ml, 6,40 mmol). Směs byla míchána 30 minut při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti.

Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová to vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý stran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát) za vzniku p-nitrobenzyl© 1 R.5S.6S) 2[ l ©4—fta! íniidomethyl—1.3—thiazol—2—yl)azctidin—3—yljthio—6—[(R>-1 -hydroxyethyl]-1 — i? methylkarbapen-2 em-3-karboxylátu (640 mg, výtěžek 59%)jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCI,): δ (ppm) 8,22 (2H, d. J - 8,7 Hz). 7.88 (211. dd, J - 5,3, 3,1 l iz), 7.73 (2H. dd, J = 5.5, 3,1 Hz), 7,65 (214, d, .1 = 8,7 Hz). 6.41 (lil. s), 5,49 (IH. d, J = 13,7 Hz). 5.25 (IH. d, J - 13.7 Hz). 4.80 (211. s). 4,46 (III, d, .1 - 8,1 Hz), 4,43 (I Η. I. J = 8.1 Ilz), 4.32 až 4,18 (311, m obsahující 4,24 (IH, dd, J = 9,2. 2,4 Hz)). 4,02 (IH, dd, J - 5.5. 2,8 Hz), 4,00 (IH.

2D dd. J = 5,5. 2,8 Hz). 3,26 (III. dd. J -= 6,9. 2,5 Hz), 3,19 (lil, dq, .1 = 9,2, 7,3 liz). 1,38 (3H. d. J - 6.2 Hz), 1,25 (311, dd, .1 = 7.3, 2.1 Hz).

(2) (I R©S.óS)-2© l—(4 ftalimidomethyl-l .3-thiazol-2- yljazetidin-3-yi)thio—6-1(R© 1 hydroxyethyl]-! methy Ikarbapen -2-em-3-karboxy lová kyselina, sodná sůl p-N itro benzyl© I R,5S,6S©2© l©4 ftalimídomethyll.3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6[(R©l-hydroxyethyl]-©melhylkarbapen-2-em-3-karboxylát (640 mg, 0,95 mmol) (získaný podle popíšu v příkladu 73(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (32 ml) a destilované vody (32 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (640 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (80 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografíeky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilované vodě 4% acetonitril v destilované vodě -> 6% acetonitril v destilované vodě -> 8% acetonitril v destilované vodě -> 10% acetonitril v destilované vodě -> 15% acelo55 nitril v destilované vodě —> 20% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyotllizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S.óS©2-[l (4-ftalimidomethyl-C3-thiazol 2-yIjazetídin 3 yl]thio—6-[(R© 1 -hydroxy-ethyI] 1 -metliylkarbapen-2-em-3-karboxy!ová kyselina, sodná sůl (202 mg, výtěžek 38%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 Mllz, DO): δ (ppm) 7,90 až 7.78 (4H, in), 6,56 (IH, il, J - 2,7 liz). 4,70 (2H. s). io 4,43 (I Η. I, J = 7,9 I lz), 4,42 (IH. t, J = 7,9 Hz). 4,31 až 4.19 (211. m obsahující 4.24 (IH, kvint.,

J = 6,3Hz)), 4.17 (IH, dd, J - 8.7, 2.0 Hz), 3,94 (lil, l, J = 7.9 Hz). 3.92 (IH, t. J - 7.9 Hz), 3,18 (III, dq, J = 8.7. 7.2 Hz), 1.29 (311, d, J - 6.4 Hz), 1,15 (314, d, .1 = 7,2 Hz). IR(KBr): 3409,5, 1768.4, 1750,1, 1717,3. 1601,6, 1528,3. 1425,1, 1393,3, 13.13,3 cm ' Hmotnostní spektrum (FAB¹): m/z: 563 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C©©N₄O<,S>Na< 585,0864. Nalezena: 585.0865 [M+H]’

Příklad 74 (I R.5S.6S) 2 J]©4-sukcinimidomethyl-l,3-lhiazol-2-yIjazetídin 3-yljthio 6©(R) 150 hydroxyethyl]-]- methylkarbapen-2-em 3-karboxylová kyselina, sodná sůl

- 188CZ 300137 B6

COO’Na (1) p-N itrobenzyl/1 R,5S,6S)-2-[! - (4- -sukeinimidomethyl-I,3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6-[(R)-l -hydroxyethyl]-1 -methyIkarbapen 2 em 5 karbo,\\ lát

Do roztoku 3—acetylthio—1 —(4—sukcinimidornethyl—1.3—thiazol 2 yl)azetidinu (238 mg.

0.73 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 69) v dimethylformamidu (7 ml) byl přidán hydrazinaeetát (81 mg, 0,88 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl(1 R,5S.6S)-2-(di feny Ifosfory loxy) 6 -[(R)-l-hydroxyethyl}-1-methylkarbapen-2-em-3-karbid oxylátu (523 g, 0,88 mmol) v acetonitrilu (14 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (0,51 ml. 2,92 mmol). Směs byla míchána 2 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethyIb acetátová vrstva byla oddělena, promyta 0.5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořeěnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát -> ethylacetát: methanol (20:1)) za vzniku p-n itrobenzyl- (1 R,5S.6S)-2-[I/4-sukcinimidomethyl-1.3-thiazol-2-yl)azetidin-3-yl]20 thio-6-[(R)-1—hydroxyethyl]—1 -methylkarbapen-2-em 3 karboxylátu (640 mg. výtěžek 59%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCI./: 6 (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J = 8.7 Hz), 6,42 (111, s), 5,50 (IH, d, J = 13,8 Hz), 5,25 (1H, d, J = 13,8 Hz). 4.61 (2H, s). 4.46 (111. d. J- 8.0 Hz). 4,45 (IH. t, J = 8,0 IIz). 4,32 až 4,18 (3H, m obsahující 4,25 (1H, dd, ,1 = 9.1, 2.3 Hz)), 4.02 (IH. t, J= 4,8 Hz). 4,00 <lH.dd.J- 4,8. 3.7 Hz). 3.28 (Hl, dd,

J = 6,9. 2.5 Hz), 3,20 (111, dq, .1 “ 9.1. 7,3 Hz), 2.76 (4H, s), 1,38 (311, d, .1 - 6.2 Hz), 1,27 (3H,d, J - 7,3 Hz).

(2) (I R,5S,6S)-2-[l (4-sukcinimidomethyI-1.3-thiazol-2-vl)azetidin-3-yl]thio—6-[(R)-1 50 hydroxyethy 1 J-l-methy Ikarbapen-2·· em 3 karboxylová kyselina, sodná sůl p-Nitrobenzyl-(l R.5S,6S)-2- [1 (4 sukcinimidomethyl-1.3—thiazol—2—yl)azetidin—3—yl]thio—6— [(R)-1 hydroxyethyIJ-I-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (211 mg, 0,34 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 74(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (10 ml) a destilované vody (10 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 7,5% palladia na aktivním uhlí (21 1 mg) ve vodní lázni (35 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (29 mg), ethylacetát a destilovaná voda, Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> 2% aeeto40 nitril v destilované vodě -> 4% acetonitril v destilované vodě) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S,6S)-2-[ l/4-sukcinimidomethyl 1.3-thiazol-2-yl)azetidin-3yljlhio—6—[(R.)— 1 —hydroxy—ethyl]—1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (115 mg. výtěžek 66%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₂O): δ (ppm) 6,59 (IH, s), 4,57 (211, s), 4,50 (2H, t, J - 8,1 Hz), 4,38 až

4.29 (IH. m), 4,25 (IH, kvint., J - 6.3 Hz)), 4,20 (IH, dd, J = 8,7. 2,3 Hz), 4,01 (IH, t,

J 4,2 Hz). 3,99 (1H, t, J = 4,2 1 Iz), 3,43 (1H, dd, J “ 6,3, 2,4 1 Iz), 3,24 (1H, dq. J - 8,7. 7,4 Hz).

2.48 (4H. s), 1,30 (311, d, J = 6,4 Hz). 1,19 (3H, d, J - 7,2 Hz).

- 189CZ 300137 B6

IR (KBr): 3381.6. 1749,1, 1794,8. 1601,6, 1526,4, 1470.5, 1424.2, 1399.1. 1312,3, 1295.0,

1168,7 cm ¹

Hmotnostní spektrum (LAB ): m/z: 515 [M+H]’

Hotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána C JGNTFS Nm 515.1035. Nalezena: 5 515,1034 [M+H]’

Příklad 75 io (IR,^S,6S)-2-[l-(4-azetidinokarbonyl-1.3-oxazol-2-yl)azetidin-3 yljthio 6 [(R)-l-hydroxyethy!] 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

HO

COO’Na (I) p Nitrobenzvl (1R,5S,6S) 2 [1 (4 azetidinokarbonyl-l,3-o\azol-2-yl)a/etidin-3-yl]thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-cm-3-karboxyIát

Do roztoku 3- acety lthio-1 - (4-azetidinokarbony 1-1,3-oxazol-2-yl)azct tdinu (330 mg.

1.17 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 71) v dimethylformamidu (17 ml) byl přidán hydrazinacetát (130 mg, 1,41 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl2o (IR.5S.6S) 2 (difenyIfosfory loxy) 6 [(R) 1 hydroxyelhyl] 1 -inelhylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (696 g. 1,17 mmol) v acetonitrilu (35 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (815 μΐ. 4.68 mmol). Směs byla míchána přes noe při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným solution a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zhvtek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: methanol (9:1)) za vzniku p-nitrobenzylJlR,5S,6S)-2-[l-(4-azelidÍnokarbonyl--1,3-oxazol 2 yOazetid i n—3—yl]thio—6—[(R)— 1 — hydroxyethyl]— l -methy lkarbapen-2-em-3-kar boxylátu (605 mg. výtěžek 89%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl·,): δ (ppm) 8.23 (2H, d, J- 8,8 Hz), 7,71 (111, s). 7,66 (2H, d.

J-5.9 Hz), 1,26 (3H, d. J = 7,3 Hz).

(2) (1 R,5S,6SJ2-[ l-(4-azetidinokarbony 1-1.3-oxazol-2-vBazetidin-3-yl]thio 6 [(R)-lhydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-NitrobenzylJ l R,5S,6SJ2-[ l-(4-azctidinokarbonyl-1.3-oxa/ol-2-yl)azctidin 3 -yljlhio—6— L(R>—1—hydroxyethylj—t-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (600 mg. 1.03 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 75(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilované vody (30 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (600 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (86 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla

-190CZ 300137 B6 třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku.

Zbytek byl chromatografícky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> destilovaná voda:acetonitril (9:1)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (IR.5S.6S) 211--(4--azet id inokarbonyl--1,3--oxazol--2--yl)azet id i n-3- yl ] th i i>-6 [(R)-1 - hydroxy-ethyl]-1 5 methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (278 mg, výtěžek 58%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. D₂O, TSP): δ (ppm) 7,80 (IH, s). 4,59 (2H, t. J ~ 8,3 Hz). 4,45 (2H, t.

J = 7,8 Hz). 4.35 až 4,27 (I H. m), 4.25 (1H, dq, J - 6,2, 6.4 Hz)), 4,20 (1H, dd, J = 2,4, 9,1 Hz),

4,16 (2H, t. J- 7.8 Hz), 4,08 (211. dt, J = 9.2, 4,6 Hz). 3.43 (111. dd, J = 2,4, 6,2 Hz). 3.24 (IH. io dq. J - 9,1. 7.2 Hz), 2,39 < 1H, kvintet, J= 7,8 Hz), 1,30 (3H, d, J = 6,4 Hz). 1.19 (311. d.

J = 7.2 Hz).

IR (KBr): 1750. 1619, 1468, 1443, 1383 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB): m/z: 493 [M+Na]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI): počítána C₂₀I I₂(N₄O₆SNa₂: 493,1133. Nalezena: υ 493,1167 [M+Naj'

Elementární analýza: C₂₍₎H₂₂,N.it^SNaJLO

Vypočítána: C, 49,18 % H, 5.16 % N. 11.47 % S, 6,56 %

Nalezena: C. 49,04 % H. 5,45 % N, 11,57 % S, 6,29 %

Příklad 76 (IR.5S.6S)-2-[l-(4-mortolinokarbonyl- l,3-oxazol-2-yI)azctidin 3 yl]thio—6—[(R)—l — hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3 -karboxylové kyselina, sodná sůl

(1) p-Nitrobenzyl-(1 R,5S,6S)-2-[ 1 —(4—niorlolinokarbonyl-l,3-oxazoI-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6—[(R)-l- hydroxyethyl]-1 -methy lkarbapen-2-em- 3 karboxy lát

Do roztoku 3-acetylthio-l-(4-morfolinokarhonyl-I.3-oxazol- 2 yl)azetidinu (260 mg,

0,835 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 72) v dimethylformamidu (13 ml) byl přidán hydrazinacetát (92 mg, 1,00 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenzyl(1 R.5 S.6 S )-2-( d i feny (fosfory loxy) 6 [(R)-1-hydroxyethyl]-1 -methy lkarbapen-2-ein-3-karboxylátu (496 g, 0,835 mmol) v acetonitrilu (25 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (582 μΙ. 3,34 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místností. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsí. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacctátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným solution a nasyceným vodným

4() roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetátmiethanol (9:1)) za vzniku pnítrobenzyl-(lR,5S.6S)-2-[l-(4-morfolinokarbonyl-l,3oxazol-2-yl )azetidin—3—y I Jthio—6—[(R)— l -hydroxyethyl]-! -methy lkarbapen-2-em-3-karbo\ylátu (552 mg. výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

- 191 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 MHz. CDCl,): δ (ppm) 8,23 (2H. d, J= 8.8 Hz). 7.73 (IH, s). 7.66 (2H. d, .1-8.8 liz). 5,51 (lll. d, .1 - 13,2 Hz). 5.25 (lll, d. J = 13,2 Hz). 4,52 (211. q. .1 = 8,1 Hz). 4,31 až 4.20 (3H. m), 4.13 až 4.06 (2H, m). 3.76 až 3.65 (8H, br s). 3,29 (IH. dd. J - 2.5, 7.0 Hz), 3.19 (IH. dq. J = 9.5. 7,3 Hz), 1,38 (3H, d. J = 5,9 liz), 1,26 (3H, d. J = 7,3 liz).

(2) (IR,5S,6S?-2-[l-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol--2--yljazetidin—3--yljthio--6—|(R)-1hydroxyethylj-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p-N itrobenzy Η1 R,5S,6S)-2-[ l-(4-morfol inokarbony l-l,3-oxazol-2-yl jazetidin-3-yl Jth io-6io [(R)—I hydroxyethyl]-!-mcthylkarbapen-2-em-3-karboxylát (550 mg, 0,835 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 76(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (28 ml) a destilované vody (28 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (550 mg) při teplotě místnosti 2,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (70 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda destilovaná voda:acetonitril (9:1)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R,5S,6S)-2í 1 —(4- morfolinokarbonyl-1,3—oxazol—2—y I jazetid in—3—y I ]th io—6—[(R)— 1 —hydroxy—ethy 1] 1 methylkarbapen 2-em-3-karbo\ylová kyselina, sodná sůl (193 mg. výtěžek 46%) jako bílé

2o pevné látky.

'H -NMR (400 MHz. D,O, TSP): δ (ppm) 7.77 (1H. s). 4.60 (211, t, .1 = 8.2 Hz). 4.36 až 4,28 (lll, m). 4.25 (lll. dq. J -6.1, 6.3 liz)), 4.21 (IH, dd. J = 2,2. 9.0 liz), 4,09 (IH. dt. J = 8.9. 4,5 Hz), 3,90 až 3.66 (8H. m). 3.43 (IH, dd, J = 2,2. 6.1 Hz), 3,25 (lll. dq. J = 9.0. 7.2 Hz). 1.30 (3H. d, J = 6,3 liz), 1.19 (3H. d, J = 7.2 Hz).

.’5 lR(KBr): 1750. 1618, 1459. 1443, 1385, l304cm '

Hmotnostní spektrum (FAB*); m/z; 523 [MrNa]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána C₂₍lFsN₄O₇SNa< 523,1240. Nalezena: 523,1238 [M+Na]'

Elementární analýza: CaiHisN/USNa/HO

5« Vypočítána: C, 48,64 % H. 5,25 % N, 10.81 % S, 6,18 %

Nalezena: C. 48,45 % H, 5,41 % N, 10,45 % S, 5,55 %

Příklad 77 (1 R,5S,6S)- 2-(l-[4-(3-methoxyazetidin-1 -karbonylý-U-oxazol-2-ylJazetidin-3 yl |thio—6[(R) 1-hydroxyethyl] l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl

(1) p-Nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-f l-[4-(3-methoxyazelidin -l-karbonyl)-1.3-oxazol-2- yfj40 azet idin-3- y 1} thio- 6-f (R)-1 —hydroxyethyl] 1 -methylkarbapen 2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acety Ithio -1 —(4—(3—methoxyazetidin—1 -karbónyl)- I,3-oxazol-2-yl)azetidinu (330 mg, 1.06 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 73) v dimethylformamidu (17 ml) byl přidán hydrazinacetát (117 mg. 1,27 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou

- 192CZ 300137 B6 atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-nitrobenz>’l-(lR.5S,6S)-2-(difenyIfosforyloxy)-6-l(R)-l-hydroxyethyl]-1 -methylkarbapen2-em-3-karboxylátu (630 g, 1,06 mmol) v acetonitrilu (32 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (739 μΐ. 4,24 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným solution a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentro10 vána za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně (eluent: ethylacetát: methanol (95:5 -> 9:1)) za vzniku p -n itrobenzy ΗI R.5S.6S )-2-( l-|4-(3-methoxyazetidin 1 -karbony l)-b3--oxazol-2-y I jazet id i n-3-yl} tli io-6-[(R)-l-hydroxyethyl ]-l -methy Ikarbapen--2- em 3-karboxylátu (550 mg. výtěžek 85%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDClj: δ (ppm) 8.23 (2H, d. J= 8.8 Hz), 7,74 (IH, s), 7,66 (2H, d.

J - 8.8 Hz), 5,55 (1H, d. J = 13,2 Hz), 5,25 (IH, d, J - 13,2 Hz), 4.71 až 4.63 (1H. m). 4.51 (2H, q, J = 8,1 Hz). 4,38 až 4,20 (6H. m). 4,10 až 4.05 (2H, m), 4,04 až 3,98 (IH. m), 3,32 (3H, s). 3.29 (IH, dd. J = 2,2. 6,6 Hz), 3,20 (IH. dq, J ~ 9,2, 7,3 Hz), 1,38 (311. d, J = 5,9 Hz). 1.26 (3H. d. J = 7.3 Hz).

2d (2) (1 R.5S,6S)-2-{ 1—[4 '{3-methoxyazet idin-1-karbony 1)-1,3 oxazo l-2-yl jazet idin 3-yljthio—6—[(R)—1 hydroxyethylj-1 methy lkarbapen-2 -em-3-karboxylová kyselina, sodná sul p-Nitrobcnzyl (1 R,5S,6S)-2-{1 [4-f3-methoxyazetidin-l-karbonvl)-1.3-oxazol-2-yl]azetidin-3-ylj tíiio- 6 -[(R)-t-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (550 mg,

0.896 mmol) (získaný podle popíšu v příkladu 77(1)) ve směsí tetrahydrofuranu (28 ml) a destilované vody (28 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (550 mg) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (75 mg), kyselina octová a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda destilovaná voda:aeetonitril (92:8)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (I R,5S.6S)-2-{ 1-(4-(3 methoxyazctidin-1 karbonyl)-l,3oxazok2-yl ]azetidin-3-yl( thio-6 - [(R)-l-hydroxyethyIJ-1-methy 1 karbapen-2-ent-3karboxylová kyselina, sodná sul (276 mg, výtěžek 62%) jako bílé pevné látky.

<5 'H NMR (400 MHz. D.O): δ (ppm) 7,84 (III. s). 4,66 (1H, dd, J = 6.4. 10.3 Hz). 4.60 (2H. t. J = 8.3 Hz). 4,46 až 4,30 (4H, m). 4,25 (IH, dq. J - 6,2, 6,4 Hz)). 4,20 (111, dd. .1 = 2.4. 0,0 I Iz). 4.09 (211. kvintet. J = 4,5 Ilz), 4,04 až 3,98 (lil, m). 3.43 (III, dd, J = 2.4, 6,2 Hz), 3,37 (3H, s), 3.25 (1H. dq. J = 9.0. 7.2 Hz), 1.30 (311, d, J - 6.4 Hz). 1.19 (3H. d. J = 7.2 1 lz).

IR (KBr): 1750. 1622. 1457, 1385 cm ¹ •to Hmotnostní spektrum (FABJ: m/z: 523 |MfNa]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FS1'): počítána C_?|H35N.iO7SNa₂: 523.1239, Nalezena: 523J227 [M+Naj'

Flementární analýza: C₂|H_2?N₄O-SNa-4/3H>()

Vypočítána: C. 48.09 % II, 5,32 % N. 10.68 % S, 6,11 %

Nalezena: C, 48,07 % H. 5,61 %N, 10.78 % S, 6,03 %

Příklad 78 (1 R.5S.6S) 2 {l-(4-(3-hydroxyazetidin-l-karbony 1)-1,3 oxazo l-2-yl jazet idin 3-yl* thio—6— [(R) 1-hydroxyethylj-1-methylkarbapen-2 -em-3-karboxylová kyselina, sodná sul

- 193 C7. 300137 B6

COO'Na⁺ (1) p-Nitrobenzyl-(IR,5S,6S )-2-(l-{4-[3Mterc-butyldifenylsilyloxy)-azetidin-l-ylkarbonyl]-L3-oxazol-2-yl Jazetidin -3—yl )tliio—6—[(R)— 1 -hydroxyethyl]- 1-methy lkarbapen-2em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyIthio-l-]4-[3-(/erc butyldifenylsilyloxy)—azetidin— I —ylkarbonylj— 1,3— oxazol-2 yljazetidinu (860 mg. 1.61 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 74) v dimethylformamidu (43 ml) byl přidán bydrazinacetát (178 mg, 1,93 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí io reakce byl roztok p- n itrobenzy I-(1R,5 S,6S)—2—(d i fenyl fosforyloxy )-6-[(R)-l -hydroxyethyl]1 -methy Ikarbapen-2 em 3 karboxvlatii (957 g, 1,61 mmol) v acetonitrilu (48 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (1,12 ml. 6.44 mmol). Smés byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacctát a nasycený vodný i? roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným solution a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát: —> ethylacctát: methanol (95:5)) za vzniku p-n itrobenzy l-( l R.5S.6S) -2-(120 {4—[3—</erc—butyldifenylsi lyloxy)—azetidin— 1 —ylkarbonyl]— 1,3—oxazol--2—yl} azetidin—3—yl )thio— [(R)-l-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen -2-em-3-karboxylátu (1,20 mg, výtěžek 89%) jako světle žluté pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz. CDCl·): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7,69 (lil, s), 7,66 (2H. d, J - 8.88 1 Iz), 7,64 až 7,59 (4H, m). 7,47 až 7,36 (6H,m), 5,51 (1H, d, J = 13.5 Hz). 5,25 (111, d.

J - 13,5 Hz). 4.65 až 4,59(111, m), 4.69 až 4,50 (IH, m), 4,50 (211. q. J = 8.1 Hz), 4,30 až 4.32 (11L tn), 4,30 až 4.20 (2H. in), 4,26 (1Π. dd. .1 = 2.9. 9.5 Hz). 4,18 až 3.99 (411. m), 3.29 (I H, dd. J= 2.9. 7.3 Hz), 3,20 (IH, dq, J = 9,5, 7,3 Hz), 1.38 (3H, d, .1 = 6,5 Hz), 1,27 (3H, d. J = 7,3 Hz), 1,06(911, s).

so (2) (IR,5$,6$)-2 (1-[443-hydroxyazetidin-l-karbonyl) l,3-oxazol-2-yl]azetidin-3-yl}lhio-6—[(R>—1 -hydroxyethyl]-1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl p NitrobenzyI-(1 R,5S,6S)-2-(1 -}4 [3 (/en=butyldifenylsilyloxy)-azetidin-1 ylkarbonyl]t.3-oxaz.ol-2-yl}azetidin-3-yl)thia-6-((R)-l-hydroxyethyl] 1 -methylkarbapen-2 -etn-335 karboxylát (1,20 mg, 1,43 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 78(1)) v tetrahydrofuranu (60 ml) byl přidán do kyseliny octové (240 μΙ, 4,30 mmol) a IM tetrabulylainoniumfluorid v roztoku tetrahydrofuranu (4,30 mi, 4,30 mmol) a směs byla míchána při teplotě místnosti 4 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, cthylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného byl přidán to rcaction mixlure. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva •10 byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: cthylacetát: methanol (95:5 -> 9:1)) za vzniku p-n itrobenzy l-( 1 R,5S.6S)-2-J 1-(4-(3hydroxyazetidin I-karbony'l)-l,3-oxazol-2-yl]azetidin 3 yl}thio 6-[(R)-1 -hydroxyethyl]-1 15 methylkarbapcn-2-cm- 3 karboxylátu (325 mg, výtěžek 38%) jako světic žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl·): δ (ppm) 8,23 (211, d, J= 8,8 Hz), 7,74 (IH. s), 7.66 (2H, d, .1 - 8.8 Hz), 5,51(1 H, d ,J = 13,7 Hz), 5,25 (1H, d ,J = 13,7 Hz), 4,80 až 4,68 (2H. m), 4.50 (2H.

- 194 CZ 300137 B6

q. J - 8.0 Hz). 4.43 až 4,29 (2H, ni). 4.29 až 4.20 (3H, m), 4.13 až 4.05 (2H. m). 4,02 až 3,95 (IH, m). 3.29 (IH, dd, J “ 2,7, 6.9 Hz), 3,20 (IH, dq. J = 9.3, 7.3 Hz). 1.38 (311. d. J = 6.3 liz).

1.26 (3H, d. J - 7,3 Hz).

(3) (lR,5S,6S)-2-{ 1 —[4—(3—liydroxyaz.etidin—1 -karbonyl} 1.3-oxazol-2-yl]azetidin-3y l}thio—6—|_(R)—1 -hydroxyethyl]- 1-methyl karbapen- 2-em-3--karboxylová kyselina, sodná sul p-N i trobenzy l-( 1 R,5S.6S)-2-{ 1 -[4-(3-hy droxyazetidin-1 -karbony!) -1,3-oxazol-2-yl ]azetidin 3-yI}thio—6—[(R)— 1 -hydroxyethyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát (320 mg, io 0,534 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 78(2)) ve směsi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilované vody (16 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (320 mg) pří teplotě místnosti 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byl přidán hydrogenuhličitan sodný (45 mg), ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -» destilovaná voda:acetonitril (9:1)) a eluát byl lyofylizován za vzniku požadovaně sloučeniny (1 R,5S.6S)-2-{ l-(4-(3-hydroxyazctidin-l-karbonyl)-l,3-oxazol“2-yl]azetidin-3yl}thio-6-[(R)-l-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sůl (144 mg. výtěžek 56%) jako bílé pevné látkv.

an 'H-NMR (400 MHz, D₂O, TSP): δ (ppm) 7,84 (IH, s), 4,75 až 4.66 (2H, m). 4,60 (2H, t, J - 8,2 Hz), 4.44 až 4,38 (IH. m), 4.35 až 4.23 (3H, m). 4,20 (III, dd, .1 = 2,4. 9,0 liz), 4.09 (2H, dt, J - 8,9, 4,5 Hz), 3,98 až 3,93 (IH, m), 3,43 (IH, dd, J = 2,4, 6.2 Hz). 3,24 (IH. dq, J = 9,0, 7.2 Hz). 1,30 (3H. d, J = 6,4 Hz). 1,19 (3H, d, J - 7,2 Hz).

IR (KBr): 1750, 1621, 1470, 1385, 1294. 1277 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 509 [M+Na]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESE): počítána 509,1083, Nalezena: 509,1102 [M+Na]'

Elementární analýza:

Vypočítána: C, 49.38 % H, 4,77 % N, 11.52 % S, 6.59 % so Nalezena: C. 46,25 % H. 6.23 % N, 11,07 % S, 5,90 %

Příklad 79 (1 R,5S,6S)-2-{ 1 -[ 4-(3-aminoa/ct idin-1 -karbonyl 1,3-oxazol-2-yl]azetidin-3-yl }thio-6_ [(R)-l-hydroxyethylj-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

(1) p-Nitrobenzyl-( 1 R.5S.6S)—2-{l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azet idin-l-ylkarbonyl]— l .3—oxazol—2—yl}azctidin—3—yI}thio—6—[(R)— 1 - hydroxyethylJ-l-methylkarbapen-240 cm-3-karboxy lát

Do roztoku 3-acety Ithio 1 (4 [3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azctidin-l-ylkarbonyl]l,3-oxazol-2-yl}azctidinu (190 mg. 0,383 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 75) v dimethylformamidu (10 ml) byl přidán hydrazinacetát (42 mg. 0.460 mmol) při

- 195 CZ 300137 B6 teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p--ni trobenzy K 1R,5S,6S )-2-(d ifeny I fosfory loxy )-6-[(R) 1- hydroxyethyl]- 1-methy Ikarbapen-2-em-3-karboxy látu (228 g, 0,383 mmol) v acetonitrilu (11 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (268 μΐ, 1,53 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místností. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylaeetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným solution a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně (eluent: ethylacetát: methanol (93:7)) za vzniku p-nitrobenzyl-f 1R,5S,6S)2- J1 -{4-[3-(p-nitrobenzy loxykarbony lamino Jazetidin-1-y Ikarbony lJ-U-oxazol-2-yl) azetidin 3—yl}thio—6—f(R)—1 hydroxyethyl]-1-methy lkarbapen-2-em-3 -karboxylátu (257 mg, výtěžek 86%) jako světle žluté pevné látky.

‘ll-NMR (400 MHz. CDCIj): δ (ppm) 8.22 (4H, d. J = 8,8 Hz), 7,75 (IH. s). 7.66 (2H, d, J = 8.8 liz). 7.51 (2H. d.J = 8,8 Hz). 5.51 ( IH. d. J = 13,7 Hz), 5,34 až 5,31 (IH. m). 5,25 (111, d. J= 13,7 Hz). 5,21 (2H. s), 4.87 až 4,82 (IH. m), 4.60 až 4.42 (2H, m). 4,49 (2H. q, J = 8.8 Hz). 4,38 až 4,30 (IH, m), 4.28 až 4.20 (3H. m). 4,06 (211, dt. .1 - 8.8. 4.9 Hz). 4,00 až 3.93 (IH. m). 3.29 (1H. dd. J= 2,9. 6.8 Hz). 3.18 (IH, dq, J= 9.0, 6.8 liz), 1.38 (3H. d,

2() J-5,9 Hz). 1.26(311. d.J = 6.8 Hz).

(2) (1 R.5S.6SJ-2-) I - [4-(3- aminoazetid i n-l -karbonyl)-] ,3-oxaz.ol-2 yl]azetidÍn-3-yl)lhio 6-[(R)-l-hydroxyethylJ-l-methylkarbapen-2~em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(] R.5S.6S) 2 [ 1 {4—[3—(p-n itrobenzy loxykarbony lam i nojazetid i n-l -yl karbonyl]- 1,3-oxazol-2- yl}azetidin—3—y 1 i thia-6—[(R)— l-hydroxyethyl]-1 -methy lkarbapen-2-em3- karboxvlát (250 mg, 0,321 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 79( I)) ve směsi tetrahydrofuranu (13 tni) a destilované vody (13 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (250 mg) při teplotě místnosti 3,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byt chromatograficky čištěn na koloně Cosmosíl (eluent: destilovaná voda -> destilovaná voda:aeetonitril (82:18)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1 R.5S.6SJ-2- ) 1 -[4—(3—aniinoazelidin—1—karbonyl)-1,3 oxazol-2-yl]azctidin-355 ylj thio-6-[(R)-1 hydroxyethyl]-1-methy lkarbapcn-2-em 3-karboxylovc kyseliny (68 mg, výtěžek 46%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, D₂O): δ (ppm) 7,88 (IH, s). 4,60 (2H, t, J - 8,2 Hz), 4,57 až 4,49 (2H, m). 4,35 až 4,16 (ÓH, m). 4.08 (211, dt. J = 8.6, 4,5 1 fz), 3,44 (1H. dd, J ~ 2,6, 6,2 Hz), 3.24 (1H, dq, J-9,0. 7,2 Hz), 1,30 (3H, d. J = 6,4 Hz). 1.19 (3H. d, J = 7,2 Hz).

IR (KBr): 1754, 1624, 1457, 1380 cm ¹

Hmotnostní spektrum (ESI ): m/z: 486 |M+Na]‘

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána C%H->_flNsO₍,S: 464.1603. Nalezena: 464.1609 [M+H]’

Elementární analýza: C20H25N5O0S· 10/31 EO

Vypočítána: C. 45,85 % H, 5.69 % N. 13,62 % S, 6,18 %

Nalezena: C, 45,88 % H, 6.10 % N, 13,38 % S, 6,12 %

Příklad 80 (IR. 5 S,6 S )-2-) 1 [4-(( 3 S)—pyrrol idin—3—y lkarbamoy l)-l,3-oxazol-2 yl Jazetidin-3-yl } th i o-650 [(R>— 1- hydroxyethyl]-! methyIkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

- 196CZ 300137 B6

HO

Ί

NH

COOH {1) p-N itrobenzy l-( 1 R,5S,6S)-2-( 1 -(4-[( 3 S)— 1 —(p-n itrobenzy loxy karbonyl) -pyrrol idin—3— karbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl} azetíd i n—3—y 1 )th io—6—[< R)— I -hydroxyetliyl] -1 -methy Ikarbapen2-cm-3-karboxylát

Do roztoku 3-acety Ithio-1 — {4—f(3S)— 1 -(p-nítrobenzyloxykarbonyl) pyrroIidin-3-yIkarbamoyl]-l.3-oxazol-2-yl}azetidinu (530 mg, 1.08 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 76) v dimethylformamidu (27 ml) byl přidán hydrazinacetát (120 mg, 1,30 mmol) při teplotč místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování io doběhnutí reakce byl roztok ρ·-n itrobenzy l-( IR, 5 S,6S)-2-(d i feny lfosfor\'loxy)-6--[(R) 1 hy~ droxyelhyl]-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (642 g, 1.08 mmol) v acetonitrilu (32 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (753 μΙ, 4,32 mmol). Směs byla míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylaeetát a nasyce15 ný vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným solution a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylaeetát -> ethylaeetát: methanol (95:5)) za vzniku p-nitrobenzyl20 (1 R.5S.6S)-2-(l- {4-[(3S)· 4-(p-n itrobenzy loxykarbony l)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-1.3-oxazol—2—yl f azetidin—3—yljthio—6—((R)— 1 -hydroxyethyl]-1 -methy Ikarbapen-2-em-3-karboxylátu (652 mg. výtěžek 76%) jako světle žluté pevné látky.

Ή-NMR (40(1 MHz, CDCI;,): δ (ppm) 8,23 (4H. d. J= 8.8 Hz), 7,77 (IH, s), 7.66 (211. d. J = 8.8 Hz.). 7.53 (2H, l, J - 8.8 Hz). 6.82 až 6,78 (III, m). 5.51 (111. d. J - 13.6 Hz). 5.25 (IH, d.

ío (2) (1 R,5S,68)-2-( 1-(4-((38)-pyrrolidin 3 yIkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-ylJazetidin—3—yI}th i o-6-[ (R)-1-hyd roxyetbyl ]-l-met hvlkarbapen-2-em-3-kar boxy lová kyselina p-N itrobenzy!-(1 R,5S.6S)-2-( 1-(4-(( 3S)— 1 -{p-n itrobenzy loxykarbony I >—pyrrolidin 3 -v Ikarbamoyl]- 1,3-oxazol-2-yl} azetidin-3 -yl)thío-6-[(R) 1 -hydroxyethyl]-! -methy lkarbapen-235 em-3-karboxylát (650 mg, 0,821 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 80(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (33 ml) a destilované vody (33 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (650 mg) při teplotě místnosti 4,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylaeetát a destilovaná voda. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a končen tro vána za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatograficky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> destilovaná voda:acetonitril (76:24)), a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (IR,5S.6S)-2-f ' I — [4—(<3S)—pyrrolidin—3—ylkarbamoyl)— l ,3—oxazol—2—yljazetidin-3yl(thio-ó-[(R)-l-hydroxyethyl]-l-methyIkarbapen 2-em- 3 -karboxylové kyseliny (129 mg, výtěžek 33%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO): δ (ppm) 7,94 (IH, s), 4,68 až 4,60 (IH, m). 4,60 (2H, t, .1 = 8,2 Hz).

-197CL 300137 B6 (3H.m). 3.24 (IH. dq. J = 9,1. 7.2 Hz). 2,49 až 2.39 (IH. ni), 2.22 až 2.13 (IH. m). 1,30 (3H. d.

J-6,1 Hz), 1,19 (3H. d.J = 7,2 Hz).

IR (KBr): 1755. 1626. 1543. 1386 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): m/z: 478 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána CjiIF^NsO^S: 478,1761, Nalezena: 478.1768 [M+H]

Elementární analýza: ΗιΙΗΝΛΛΝόΙΗ.)

Vypočítána: C, 47,45 % H, 6,26 % N, 13,17 % S, 6,06 %

Nalezena: C. 47,33 % H. 5,52 % N. 12,9 % S, 5,97 % io

Příklad 81 (1 R,5S,6S)-2-{ 1 — [4—((3 R)—pyrrolidin—3—ylkarbamoyl)— L3—oxazol—2—yl ]azetidin—3—y I} thio—6— 15 [(R)— l-hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

(1) p-NitrobenzyH 1 R.5S.6S )-2-( 1-(4-((3 R)-pyrrolidin-3-yIkarbamoyl)-F3-oxazol-2-yl]azetidin 3 yljthio 6 [(R)-1 hydroxyethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acety lthio— 1 — [4-((3 R)—pyrrol id i n-3-y Ikarbamoy lý-l,3-oxazo 1-2-yl ]azet idinu (280 mg, 0,572 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 77) v dimethylformamidu (14 ml) byl přidán hydrazinacetát (63 mg, 0,686 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs bvla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvl roztok

W tí p-n itrobenzyH1 R-5S,6S)-2-(di feny 1 fosfory loxy')—6—[(’R)— t-hydroxyethyl]-! -methy Ikarbapen25 2-em-3-karboxylátu (340 g, 0,572 mmol) v acetonitrilu (17 ml) přidán po kapkách do výsledné směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou, následován přidáním diisopropylethylaminu (399 pl, 2,29 mmol). Smčs byla míchána 4,5 hodiny při postupném zvyšování teploty na teplotu místností. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného byl přidán do reakční směsi. Výsledná směs byla třepána v dělicí nálevce a ethylacetátová vrstva byla oddělena, promyta 10% chloridem sodným solution a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně (eluent: ethylacetát ethylacetát: methanol (95:5)) za vzniku p-nitrobenzyl( 1 R,5S,6S) 2 1 (4 [4-((3R) pyrro1 idin-3-y Ikarbamoy l)-1.3-oxazol-2-yl|azetidin-3-yljthio-6-|(R)-l-hydroxyethyl]-!-methyl35 karhapen 2 em -3-karboxylátu (323 mg, výtěžek 73%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCI;,): 6 (ppm) 8.23 (211, d, J - 8,8 Hz), 8.22 (211, dd, J = 8,8. 12,7 Hz). 7,77 (IH. s), 7,66 (2H, d, J - 8,8 Hz), 7,52 (2H, dd. 8,8, 12,7 Hz), 6,82 až 6,78 (IH, bt. J = 6,8 Hz), 5.51 (111. d, J - 13.7 Hz), 5,23 (lil, d, J = 13,7 Hz), 5,25 až 5,19 (2H, m). 4,66 až 4,58 (1H. m). 4.56 až 4,49 (2H, m), 4.30 až 4,21 (3H, m), 4,13 až 4,04 (2H. ni), 3,80 až 3,74 (1H.

m), 3,64 až 3,53 (2H, tn). 3.44 až 3,39 (IH, m), 3,29 (lil, dd. J = 2.9. 6,8 Hz), 3,80 až 3,74 (1H, m), 2,30 až 2,20 (IH, m), 2,10 až 1,94 (IH, m), 1,38 (3H, d. J = 5,9 Hz), 1.27 (3H, d,

J = 7.8 Hz).

- 198 C7. 300137 Bó (2) (lR.5S,6S)-2-{ 1-[4-((3R)-pyrrolidin-3-ylkarbanioyl)-13-oxazol-2- yljazetidin- 3-yI}thio-6-[(R)-1 -hydroxyethyl]— I-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl (1 R,5S,6S)—2— 1 —[4—«3R)—pyrrolídin-3- ylkarbamoyl-l.3-oxazol-2-yl]azetidin5 3—yl}thio—6—((R)—1—hydroxyethyl]—I melhylkarbapcn-2-em-3-karboxylát (320 mg,

0,404 mmol) (získaný podle popisu v příkladu 81(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilované vody (16 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (320 mg) při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do filtrátu byla přidána ethylacetát a destilovaná voda. Výsledná smčs byla io třepána v dělicí nálevce a vodná vrstva byla oddělena a koncentrována za sníženého tlaku.

Zbytek byl chromatografícky čištěn na koloně Cosmosil (eluent: destilovaná voda -» destilovaná voda:acetonitril (79:21)) a eluát byl lyofilizován za vzniku požadované sloučeniny (1R.5S.6S) ! I-[4%(3 R)-pyrro lid i n-3-yl karbamoyl)- 1,3-oxazol-2-y ljazet idin-3-yl jthi o-6- [ (R)— 1 — hydroxyethy l] 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylové kyseliny (88 mg, výtěžek 46%) jako is bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, DO): δ (ppm) 7,94 (IH. s), 4.67 až 4,60 (IH. rn), 4.60 (211. t. J = 8.3 Hz).

4,35 až 4.28 (IH. m). 4.25 (IH, dq. J - 6,2, 6,4 Hz), 4,20 (111. dd. J = 2,4. 9.1 Hz). 4.08 (2H. dt.

J = 8,8. 4,5 Hz.), 3.63 (I H. dd. ,1 = 7,0, 12,6 liz), 3,57 (1H. dl, J = 12,0, 7,6 Hz). 3,49 až 3,37 (3H. m). 3.24(111, dq.J -9.1. 7,2 Hz). 2.49 až 2,38 (IH, m). 2,22 až 2,13 (111, ni), 1.30 (3H. d, 20 J = 6,4 Hz). 1.19 (3H. d. J - 7,2 Hz).

IR (KBr): 1758. 1625. 1543. 1385 cm '

Hmotnostní spektrum (ESI ): m/z: 478 [MHI|

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (ESI ): počítána CJiH^N.OcS: 478,1760. Nalezena:

478,1739 [Mžll|'

Elementární analýza: 021^7^0(5-3^0

Vypočítána: C. 47,45 % H, 6.26 % N. 13,17 % S, 6,03 %

Nalezena: C, 47,30 % H. 5,88 % N. i 344 % S, 6.01 % so Referenční příklad 1

3-Acetylthio-]%4-ethoxykarbonyl 1,3 --thiazol—2—yljazetidin

COOEt

(I) (3 Hydroxyazctidin-l-karbothioyl)karbamová kyselina, ethylester

Roztok N-benzhydryl-3-hydroxyazetidínu (20 g, 83,6 mmol) v methanolu (600 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (20 g) ve vodní lázni (50 °C) při tlaku vodíku 1 atmosféra 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát byl koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl

4<i rozdělen mezi ethylacetát a destilovanou vodu. Organická vrstva byla oddělena a dále extrahována destilovanou vodou. Vodné vrstvy byly koncentrovány za sníženého tlaku a sušeny za vzniku produktu jako hnědého oleje, E)o roztoku produktu ve směsi tetrahydrofuranu (180 ml) a destilované vody (60 ml) byl přidán ethoxykarbonylisolhiokyanát (19.7 ml. 167 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi 10 minul v ledové lázni byla výsledná směs míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na

-199CZ 300137 B6 silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 1) -> ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3-hydroxyazetidin-l-karbothioyl)karbamové kyseliny. ethylesteru {7,4 g. výtěžek 43%) jako žlutého oleje.

'll-NMR (400 MHz, CDCI;): δ 7,63 (IH. br s). 4,80 až 4,50 (3H, m), 4,40 až 4,00 (4H, m obsahující 211, q.at 4,18. J = 7.3 Hz). 2,28 (IH, br s), 1.29(311. t. 7,3 Hz).

(2) l-(4-Ethoxykarbonyl-l ^3—thiazol—2- yl)-· 3 -hydroxyazetidin

Do roztoku ethylesteru (3—hydroxyazetidin—I -karbolhioyljkarbamové kyseliny (14,4 g, io 70,5 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 1(1)) ve směsi ethanolu (72 ml) a destilované vody (72 ml) byl přidán hydroxid sodný <14.1 g, 353 mmol). Směs byla zahřívána pod refluxein 16 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs ochlazena na teplotu místnosti. Do reakční směsi byl přidán 4N chlorovodík v dioxanu (88 ml) v ledové lázni, následován přidáním ethy 1-2-brompyruvátu (17.7 ml, 141 mmol) a triethylamin (19,8 ml,

141 mmol). Výsledná směs byla zahřívána pod refluxem 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (3 : I -> I ; 1) jako eluentu za vzniku 1-{4-ethoxykarbonyl- ·· l .3—thiazol—2—yl>—3—hydroxyazetidinu (8,5 g. výtěžek 53%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCh): Ó 7.46 (IH, s), 4,88 až 4,78 (IH, m). 4,42 až 4.32 (4H, in). 4.02 (2H. ddd. .1 = 10,3, 5,6, 1,5 I lz). 2.05 (1H, br s). 1,37 (3H, t, 7,3 Hz).

(3) l-(4-Ethoxykarbonyl-1.3-thiazol-2-ylE3-methansulfonyloxyazctidin

Do roztoku l-(4-ethoxykarbony1—l ,3—th iazol—2—yl)—3—hydroxyazelidinu (676 mg, 2,96 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 1(2)) v methylenchloridu (20,5 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (0.28 ml, 3.63 mmol) a triethylamin (0,495 ml, 3,56 mmol) v ledové lázni, io Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 2 hodiny Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán do reakční směsi ethanol v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku l-(4-ethoxy karbony l-l, 3 thiazol2-ylE3-methansulfonyloxyazetidinu (748 mg, výtěžek 82%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 7.52 (IH, s), 5,50 až 5,30 (IH, m). 4.51 (211. dd. J = 9.9. 6,7 Hz). 4,37 /{2H, q, J - 7.1 Hz), 4,32 (2H, dd, J- 10,1, 3,7 Hz), 3,09 (3H, s), 1,37 (3H, t.J = 7.1 Hz).

(4) 3-Acetylthio-l-(4-ethoxykarbonyl-l,3—thiazol—2—yljazetidin

Do roztoku l-{4-ethoxykarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)-3“methansulfonyloxyazetidinu (742 mg.

2,42 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 1(3)) v dirnethylformamidu (37 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,1 ] g, 9.72 mmol) při teplote místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý.

filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelovc koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (I : 1) jako eluentu za vzniku 3-acety Ith io—l—(4ethoxykarbonyl- 1,3-th iazol- 2 yl jazetidinu (494 mg, výtěžek 71%) jako světle hnědé pevné látky.

-200CZ 300137 B6 ’Η-NMR (400 Ml Iz. CDClj: δ (ppm) 7,49 (1H. s), 4,58 (2H. t, J = 8.3 Hz). 4.50 až 4.30 (3H. m, obsahující 2H, q. at 4,36. J = 7,2 Hz). 4,03 (211, dd, J = 8.3. 5,7 Hz). 2,36 (3H. s). 1,37 (3H, t,

J = 7,2 Hz).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 287 [M+H]

Referenční příklad 2

-Acetylthio-l-(4-p-nitrobenzylkarbony 1-1,3-th iazol-2-y IJazetidin

1(1

AcS'

N

COOPNB (1) 3-terč- Butyldifeny Isily loxy-1 - (4-cthoxykarbonyl-1,3-thiazol-2- y I Jazelidin

Do roztoku l-(4-ethoxykarbonyl l,3-lhiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (8,5 g. 37.2 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 1(2)) v dimethylformamidu (255 ml) byl přidán terč-butyIdifenylsilylchlorid (19.4 ml, 74.5 mmol) a imidazol (5,07 g, 74.5 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla výsledná směs míchána při teplotě místnosti 2.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethanol (2,59 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dosta2u tečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu <6 : 1 —> 2 : 1) jako eluentu za vzniku 3 / w-butyld i feny Isily loxy- l-(4-ethoxykarbonyl-1.3-thiazol-2-yjazetídinu (14,85 g, výtěžek 86%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDClj: δ (ppm) 7,64 až 7,58 (4H. m). 7.50 až 7.36 (611. m), 7,43 (IH.s). 4,79 až 4,50 (IH. rn), 4,35 (2H, q, J = 7,3 Hz). 4,13 (2H. dd, J = 9,0, 6,6 Hz), 4.06 (2H,d, J = 9,0. 5.1 Hz). 1,36 (311. t. J = 7,1 Hz). 1,06 (9H, s).

(2) 3-terc -Buty Idifeny Isi ly loxy-1 -{4-hydroxymelhy I-1,3-th iazol-2-y 1 )azet idin

Roztok 3-/erc-butyld i feny Isily loxy- l-(4-ethoxy karbonyl 1,3--thiazol-2-yl)azetidinu (5,0 g,

10,7 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1J v bezvodém tetrahydrofuranu (100 ml) byl přidán po kapkách do roztoku hydridu hlinitolithného (1,22 g, 32.1 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (250 ml) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána

1,5 hodiny za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl do reakční směsi v ledové lázni postupně přidán deka hydrát síranu hořečnatého. Po ukončení pěnění byla výsledná směs míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Do reakční směsi byl postupně přidán ethylacetát. Výsledná směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (3 : 1 -> 1 : 2) jako eluentu za vzniku 3 --ZcTe-buly Idifeny Isily loxy-l-('4-liy droxy methy 11,3—thiazol- 2 yjazetídinu (3,88 g, výtěžek 86%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDClj: δ (ppm) 7,66 až 7.58 (4H, rn), 7.50 až 7.38 (611, m), 6,40 (IH, s). 4,78 až 4,70 (111, m). 4,53 (2H, s), 4,10 (2H, dd, J = 9,2, 6,6 1 Iz), 4,01 (2H, ddd. J = 9,2. 5,1, 1,3

Hz). 2.24(111, brs). 1.06 (9H, s).

(3) 3-ten:-Butyldifenylsilyloxy-1-(4-myl-1,3-thiazol-2-yjazetidin

-201 CZ 300137 B6

Do roztoku 3-/ere-b uty Idi fen y Isi I y loxy-1 ©4-h y dro xy rn ethy 1-1,3-thiazol-2-y l)azet i dinu (3.88 g. 9,15 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(2)) v bezvodém methylenchloridu (194 ml) byl přidán aktivovaný oxid manganičitý (19,4 g) a směs byla míchána při teplotě místnosti 7 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (3 : 1 —> 1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-/e/Y-butyIdi feny Isilyloxy-l©4-myl-I J-thiazol 2-yl)azetidinu (3,54 g, výtěžek 92%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCIj: δ (ppm) 9,69 (IH. s), 7,64 až 7.59 až (41L m). 7.50 až 7.36 (7H, m), 4,80 až 4.72 (1H, m), 4,16 (211, dd. J - 9,5. 6,6 Hz). 4,08 {211, ddd, J = 9,5. 5,1. 1,5 I lz).

io 1,06 (9H, s).

(4) 3-terc ButyIdifenyIsilyloxy-1-(4-karboxyI-1,3-thiazol-2-yl)azetidin

Do roztoku 3-terc butyldifenyIsilyloxy—1 —(4—myl—1,3-thiazol—2—yl)azetidinu (3,5 g,

8,28 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(3)) v bezvodém methylenchloridu (21 ml) byl přidán Zerc-butanol (105 ml) a roztok 2M 2-mcthyl-2-butanu v tetrahydrofuranu (41,4 ml), následován přidáním roztoku chlornanu sodného po kapkách (1,88 g. 16.6 mmol) a dihvdrogenfosforečnanu sodného (1,99 g, 16,6 mmol) ve vodě (21 ml) v ledové lázni a směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla do reakční směsi přidána IM kyselina

2o chlorovodíková o pl I od 2 do 3. Výsledná směs byla extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití ethylacetát -> 5% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-terč-butyldífenyIsilyloxy-1-(4-karboxyl-1.3-thiazol-2-yIjazetidinu (2,34 g. výtěžek

67%) jako hnědého sirupu.

^!H-NMR (400 MHz. CDCIJ: δ (ppm) 7.62 až 7,56 (4H, m), 7,50 (IH. s). 7,49 až 7,36 (611, m), 4.81 až 4.72 (111. m), 4J6 až 4,08 (2H. m), 4,04 (211, dd, J = 9,5, 5.1 Hz). 2.00 (IH, br s), 1,07 (911, s).

so (5) 3-Zc^jn'-Buty Idi feny isily loxy- l©4-p-nítrobenzv IkarbonyΊ— l ,3—thiazol—2—v Ijazetídin

Do roztoku 3-Zcn-bulyldifenylsilyloxy-l-(4-karboxyl-1.3 tli iazol-2-yljazetidinu (224,8 g.

0.51 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v bezvodém methylenchloridu (11,2 ml) byl přidán oxalylchlorid (0.067 ml. 0.76 mmol) a katalytické množství dimethylamidu

A (0,022 ml) v ledové lázni. Směs byla míchána 2 hodiny a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl sušen za vzniku produktu. Do roztoku produktu v bezvodém dichlormethanu (11,2 ml) byl přidán p-nitrobenzy lalkohol (157 mg, 1.0 mmol) a triethylamin (0,14 ml, 1,0 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného.

Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (3 : 1) jako eluentu za vzniku 3-Zť/T-buty Idi feny Isily loxy-l-(4-p-nitrobenzy Ikarbony l-1.3-thiazo]-2-yl)azetidinu (93 mg, výtěžek 32%) jako světle žlutého sirupu.

'H NMR (400 MHz, CDCIJ: δ (ppm) 8,22 (2H. d, J 8,8 Hz), 7,64 až 7,56 až (4H. m). 7,50 (IH, s). 7,48 az 7,36 (ÓH, m), 5,42 (2H, s), 4.79 až 4,72 (lil, m), 4,16 (2H. dd, J - 8,8. 6,8 Hz). 4.07 (211. dd, J - 8.8. 4,8 Hz), 1.06 (911, s).

(6) 1 (4 p-NitrobenzyIkarbonyI 1,3-thiazol-2-yl©3-hydroxyazetidinu

Do roztoku 3-terč-butvIdifenytsilyloxy 1 (4-p-nitrobcnzyloxykarbonyl-l,3-thiazol-2 yljazetidinu (93 mg, 0,16 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(5)) v bezvodém tetrahydrofuranu (4.7 ml) byla přidána kyselina octová (0,028 ml, 0,49 mmol) a roztok IM

-202 CZ 300137 B6 tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (0,48 tni, 0,48 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (2 : 1) jako eluentu za vzniku 1 (4-p-n itrobenzy loxy karbony J1.3—thiazol—2—yl)—3-hydroxyazetidinu (42,4 mg, výtěžek 81%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 MHz. CDCl?: Ó (ppm) 8.23 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,59 (211, d. J = 8.8 Hz). 7,53 (IH, s). 5,40 (2H, s). 4,90 až 4,78 (1Π. m), 4,39 až (2H. dd, J = 9.7, 7,2 Hz). 4,03 (2H. dd, κι J = 9.7, 5,1 Hz). 2.28 (1H. d ,J = 6.2 Hz).

(7) 1 -(4-p-N itrobenzy loxykarbony I-1,3—thiazol—2—yl) -3 -methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku I -(4-p-n itrobenzy loxy karbony 1—l .3—thiazol—2—yl)—3—hydroxyazet idinu (648 mg,

1,93 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(6)) v methylenchloridu (20 ml) byl přidán metliansulfonylchlorid (0,3 1 ml, 3,95 mmol) a tríethylamin (0,55 ml, 3,95 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 niinut byla směs míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným

2o roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl rekrystal izován ze směsi n-hexanu a ethylacetátu za vzniku l—(4—p— nitrobenzy loxykarbony l-l ,3-thiazol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidinu (789 mg. výtěžek 99%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl?: 6 (ppm) 8,23 (2H, d, 8,7 Hz), 7,59 (2H, s), 7,59 (2H, d,

J = 8.7 Hz). 5,50 až. 5,40(311, m obsahující IH, s at, 5,44), 4,52 (211. dd. J = 10.3. 6.6 Hz). 4,32 (211. dd. J- 10.3.4.1 Hz), 3,10 (3H. s). ' (8) 3-Acet) Ithio—1 -(4-p-n itrobenzy loxykarbony l-l. 3—thiazol—2—yl jazetidin

Do roztoku 1-(4-p-n itrobenzy loxy karbony l-l.3-thiazol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidinu (776 mg, 1.88 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(7)) v dimethylformamidu (35 ml) byl přidán thioaeetát draselný (860 mg, 7,53 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 1)jako eluentu za vzniku 3-acety Ithio 1 (4 p nitrobenzy loxykarbony I 1,3 thiazol 2 yljazetidinu (73.8 mg, výtěžek 11 %) jako světle hnědé pevné látky.

¹ ll-NMR (400 MHz, CDCl?: δ (ppm) 8,23 (211, d, J - 8,6 liz), 7,59 (211, d, J- 8,6 Hz), 7,55 (1H, s), 5,43 (2H, s), 4.59 (2H. t. J = 8.5 Hz). 4,50 až 4.40 (1H. m). 4,04 (2H, dd. J = 8,5. 5.7 Hz), 2,36(311, s).

Referenční příklad 3

3-Acetv Ithio-1 M4-karbamoy 1-1,3-thiazoI-2-yl jazetidin

- 203 CZ 300137 B6 (1) 3-terc Butyldifenylsilyloxs-1 (4—karbamoyl—l ,3—thiazol—2—yljazetidin

Do roztoku 3-terc butyldifenylsi ly loxy-1 -(4 etlum'karbony 1--1.3--thiazol--2-\l jazetidinu (5.85 g. 12,5 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (290 ml) byl přidán roztok 0.67M chloridu amonného-trimethylhliníku v benzenu (56,4 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána ve vodní lázni (40 °C) 17 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (50 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu, io Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (3 : 1 —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku 3-terc butyldifeny Isily loxy-1 -(4-karbamoyl-1,3- thiazol-2-yljazetidinu (4,97 g, výtěžek 91%) jako světle i? hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCl,): δ (ppm) 7.66 až 7,58 (4H, m). 7.50 až 7,38 (7H, m), 6,99(111, bs). 5,48 (IH. br s), 4,80 až 4.72 (IH, m). 4.10 (2H, dd, J - 8,8, 6,6 Hz). 4.01 (2H, dd. J-8,8, 5.1 liz). 1.07 (9H. s).

2u (2) l-(4-Karbamoyl-l,3-thiazol 2-ylj-3-hydiO.\yazelidin

Do roztoku 3- terč- butyldifenylsi ly loxy l-(4-karbamoyl-l,3-thiazol-2-y Dazetidinu (6.7 g.

15,3 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 3(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (200 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-bulylamoniumfliioridu v tetrahydrofuranu (18,4 ml) v ledové lázni. $měs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatogra fieky na silikagelové koloně za použití ethylacetát -> 10% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-(4-karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidinu (2,78 g. výtěžek 91%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDCh): 8 (ppm) 7.43 (1H, s), 7,05 (111, br s). 5,47 (1H. br s). 4.90 až 4,80 (1H, m), 4,35 (211, dd, J - 9,5, 6,6 Hz), 3,97 (211, dd, J - 9,5, 4,4 Hz), 2,3 I (111, d, J = 9.6 Hz).

(3) H4-Karbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)-3-methansiilfonyloxyazetidin

Do roztoku l-(4-karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (1,00 g. 5,02 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 3(2)) ve směsi methylenchloridu (30 ml) a pyridinu (5 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (0.967 ml, 12,5 mmol) a triethylamin (1,75 ml, 12,5 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 2,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce, methanol (0,405 ml) byl přidán

4d do reakění směsí v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do zbytku byl přidán isopropylether a směs byla filtrována za vzniku l-(4-karbamoyl-l,3—thiazol 2 yl)-3-methan45 sul fonyloxyazet idinu (1,30 g. výtěžek 94%) jako světle žluté pevné látky.

^!H-NMR (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 7,50 (IH, s), 6,99 (IH, brs), 5,60 až 5.40 (211. m). 4.46 (2H, ddd. J = 9.5,6,6, 1.5 Hz), 4,28 (211, ddd ,J = 9.5. 4,4, 1,5 Hz), 3.11 (lil, s), (4) 3-Acetylthio-1-(4-karbamoyl-1,3-thiazol-2 yljazetidin

5(1

Do roztoku 1 —(4—karbainoyl—1,3 lhiazol-2-yl)-3-methansulfonyloxya7ct idinu (3.04 g.

11,0 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 3(3)) v dimethylformamidu (152 ml) byl přidán thioacetát draselný (7,5 g, 65,8 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána

- 204 CZ 300137 B6 v olejové lázni (80 °C) 10 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečné promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého ? tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetát > 4% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3—acetyIthio—1 -(4-karbamoyl-1.3 thiazol-2yljazetidinu (1,97 g, výtěžek 70%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 Mllz, CDCl·,): δ (ppin) 7,46 (III. s). 7.00 (IH, brs). 5,55 (IH. brs). 4,53 (211, t, J - 8.1 I Iz), 4,50 až 4,40 (1H, m), 3,99 (2H, dd. J - 8,1, 5.1 Hz). 2.37 (3H, s).

io

Referenční příklad 4

3—AcetyJthio—l ---(4—kyano—L3—thiazol—2—yl)azetidin

(I) 3 -terč- Buty Idifeny Isily loxy-1-(4 kyano-l ,3-thiazol-2-yl)azetidin

Do roztoku 3-terc bulyIdifenylsilyloxy-1 -(4-ethoxykarbonyl“ 1.3-thiazol-2 yl)a/ctidinu (7,73 g. 16,6 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (370 ml) byl přidán roztok 0,67M chloridu amomiého-trimethyIhliníku v benzenu (75 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána ve vodní lázni (50 °C) 17 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (50 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná smčs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-bexan : ethylacetátu (3 : 1) jako eluentu za vzniku 3-terč- buty Idifenylsilyloxy -1 -(4-kyano-1.3- thiazol 2-yl)azetidinu (6,98 g, výtěžek 76%) jako světle hnědé pevné látky.

3» 'H-NMR (400 MHz, CDCl,): δ 7,64 (411, m), 7,50 až 7,37 (6H, m). 7.20 (lll, s). 4.80 až 4,74 (1H. m), 4.13 (2H, dd, J - 8,8, 6,8 Hz), 4.04 (2H, dd, J = 8.8, 4,9 Hz), 1.07 (9H. s).

IR (KBr): 2230, 1535. 1465, 1310, 1114 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB ): 420 [M+H]’ (2) l —(4- Kyano-l ,3-th iazol-2-yl )-3-hy droxyazetid in

Do roztoku 3-terc butvld i feny Isily loxy-1 -(4-kyano 1,3- thiazol-2-yl )azetidinu (2.36 g.

5.62 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 4(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (115 ml) byl přidán roztok 1.0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (6,7 ml.

6,7 mmol) v ledové lázni. Smčs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatogra Ficky na silikagelové koloně za použití toluen : ethylacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku 1(4-kyano-l,3 lhiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (0,78 g, výtěžek 77%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCl;): δ (ppm) 7,26 (IH. s), 4,92 až 4,86 (IH.m), 4.37 (2H. dd,

J = 9.8. 6.8 Hz). 4,02 (211, dd, J = 9,8, 4,9 Hz), 2.34 (IH, d, J = 5.9 l Iz).

(3) I-(4-Kyano-1,3-thiazol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidin

-205 CZ 300137 B6

Do roztoku l/4-kyano-l J“thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (0,78 g. 4,3 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 4(2)) v methylenchloridu (40 ml) byl přidán mcthansulfonylchlorid (1,0 ml, 12,9 mmol) a triethylamin (1,8 ml, 12,9 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 40 minut. Po zkontro5 lování doběhnutí reakce byl přidán methanol do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místností 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořeěnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za io použití toluen : ethylacetátu (1 : I) jako eluentu za vzniku l —(4—nitriI—1.3 -thiazol—2—yl)—3— methansu]fonyloxyazetidinu (1.12 g, výtěžek 100%) jako bílé pevně látky.

^lH-NMR (400 MHz. CDCI/: δ (ppm) 7,31 (IH, s). 5.50 až 5.40 (IH. ni), 4.50 (2H. dd. J - 9.9, 6,6 1 Iz), 4,31 (2H, dd, J - 9.0, 4.4 Hz), 3,11 (3H. s).

(4) 3-Acetylthio-l-(4-kyano- U-thiazol-2-y/azetidin

Do roztoku 1/4-kyano-l ,3-thiazol 2-yl)-3-methansulfonyloxyazelidinu (1.12 g. 4.32 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 4(3)) v dimethylformamidu (56 ml) byl přidán thioaeetát draselný (3,89 g, 27,0 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (2: 1) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-1 -(4 kyano-1,325 thiazol-2-ybazetidinu (0,767 g. výtěžek 75%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCb): δ (ppm) 7.28 (IH. s). 4,57 (211. t. J- 8,3 Hz). 4,50 až 4,40 (IH, ni), 4.03 (211, dd, J = 8,3, 5,5 Hz), 2,39 (311, s).

Referenční příklad 5

3—Acetylthio-1 (4 -N-methylkarbainoyl-l,3-thiazol-2 v/azetidin

AcSN

CONHMe (1) 3 /erc-Buty Id i fenyl sily loxy- 1/4-N-methy Ikarbamoy I-1,3-thiazol-2-y /azetidin

Do roztoku 3-terc-butyldifenyIsilyloxy·· 1 (4-ethoxykarbonyI-l ,3-thiazol 2 y/azetidinu (500 mg, 1,07 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (25 ml) byl přidán roztok 0.67M methylarninhydrochloridu-trimethylhliníku v benzenu (3.21 ml) pří teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod reíluxcm 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (25 ml) a ethylacetát (50 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti

30 minut. Reakční směs byla extrahována ethylacetátem. Organická vrstva b\la dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan ; ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-terč-butyldifenylsilyloxy 1 (4-N-methvl45 karbamoyl 1,3 -tliiazol—2—yl)azetidinu (479 mg, výtěžek 99%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDCI/: δ (ppm) 7.65 až 7,59 (4H, m). 7.50 až 7.34 (7H, m). 7.14

11H, br s). 4.80 až 4,70 (1H, m), 4,09 (2H, l, J = 8.8 Hz), 4,00 (211, dd, J = 8.8, 5.1 I Iz). 2,95 (3H,

d. J = 5.1 Hz). 1.06 (9H,s).

-206 CZ 300137 B6 (2) 1 (4-N Methylkarbamovl 1.3 thiazol- 2 vl) 3-hydroxyazctidin

Do roztoku 3-/en?-butyldifenylsilyloxy-l-(4-N-methy Ikarbamoy 1-1.3—thiazol—2—yl )azetidinu (4.74 g. 10,5 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 5(1)) v bezvodém tetra5 hydrofuranu (240 ml) byl přidán roztok 1.0M telra-n-butylamoniumfluorídu v tetrahydrofuranu (12,6 ml, 12,6 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce by la reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku l-(4-N-methy Ikarbamoy l-l,3-thíazol-2-vljj-hydroxyazetidinu (2,1 Og, výtěžek 96%) jako io bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl;): δ (ppm) 7.34 (2H, s). 7.20 (IH, brs), 4,85 až 4.75 (IH, m). 4,31 (2H. dd. J = 9.7, 6.4 Hz), 3,94 (211, dd. J = 9.7. 5.5 Hz), 3,10(111, br s), 2,96 (3H. d. J - 5.1 Hz). Hmotnostní spektrum: 213 [M'| (3) l-(4-N-Methy Ikarbamoyl-l.3-thiazol-2- yl}-3-methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku l-(4-N-rnethylkarbainoyl-1.3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (2,15 g,

10.1 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 5(2)) v methy lenchloridu (45 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (3,12 ml, 40,3 mmol) a triethylamin (7,04 ml. 50,5 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 1,5 ho20 diny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs by la míchána při teplotě místnosti 30 minut, Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku l-(4 N methylkarbamoyl-1,3thiazol-2-y!)-3-methansulfonyloxyazetidinu (2,95 g, výtěžek 100%) jako světle žluté pěnové pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl;): δ (ppm) 7.44 (IH. s), 7,18 (IH. br s). 5,50 až 5.39 (IH. m), 4.45 (82H. dd. J = 9,7. 6,6 Hz), 4,26 (2H. dd. J = 9.7. 4,3 Hz). 3,11 (3H, s), 2,97 (311, d, J - 5.1 Hz).

5o I Imotnostní spektrum (FAB ): 292 [M+H] (4) 3-Aeetylthio-l-( 4-N-methy Ikarbamoyl -1,3-thiazol-2-yl)azetidin

Do roztoku 1-(4-N-methyIkarbamoyl - l,3-thiazol-2-yl)-3-melhansulfonyloxyazetidinu (3,0 g, 10,3 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 5(3)) v dimethylformamidu (150 ml) b byl přidán thioacetát draselný (7,07 g, 61,9 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikage40 lové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 4 —> 1 : 10) jako eluentu za vzniku 3 -acety 1thio-I-(4-N methy Ikarbamoy1-1,3-thiazol -2-yl)azetidinu (2,41 g. výtěžek 86%) jako světle hnědé pevné látky.

'H -NMR (400 Mil?, CDCl·,): δ (ppm) 7.44 (III. s). 7.18 (IH. br s). 4,53 (2H, t. .1 - 8.0 liz), 1.50 až4,40 (lil. m),4,50 až 3,95 (2H, m). 2.59 (3H. d. J = 6,0 IIz), 2.38 (311. s).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 272 jM+II]

Referenční příklad 6

3-Accty Ith io-l-(4-N,N-d imethy Ikarbamoy l-l,3-thiazol-2-yI)azet idin

- 207 CZ 300137 B6

(1) 3-/í.w-Buty ldifeny Isi ly loxy -l-(4-N.N-dimethylkarbamoyl-i ,3-th iazol 2 -yl )azetídin

Do roztoku 3 -Ze/r-buty ldifeny Isi ly loxy- l-(4-ethoxy karbonyl 1,3- thiazol-2-y ljazet idinu (500 mg. 1,07 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (25 ml) byl přidán roztok 0.67M dimethylaminhydrochloridu-trimethylhliníku v benzenu (3,21 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (50 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti io 30 minut. Reakční směs byla extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (3:1 > 1 : 3) jako eluentu za vzniku 3-Zerc-buty ldifeny lsi ly loxy-1^(4--Ν,Ν-dimethy!15 karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)azelidinu (500 mg, výtěžek 100%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 MHz. CDCh): Ó (ppm) 7.70 až 7,60 (4H, m). 7.52 až 7,40 (6H, m), 7.00 (111. s). 4,79 až 4,70 (lil. m). 4.11 (2H. dd, J = 9.5, 7,5 Hz), 4,02 (211. dd. J = 9.5, 5.0 Hz), 3,19 (3H. s). 3.05 (3H.s), 1,06 (9H,s).

2o (2) ]-(4-N,N-dÍmethylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidin

Do roztoku 3—buty Idilenylsilyloxy—l —(4—N,N · dimethylkarbamoyl 1,3-th iazo 1-2-yl)azetidinu (5,13 g, 10.7 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 6(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (250 ml) byl přidán roztok l,0M letra-n-butylamon i um fluoridu v tetrahydro25 furanu (12.0 ml, 12.0 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku l-(4-N,N-dimethylkarbarnoyl-l,3-thiazol-2-yl) 3-hvdroxyazetidinu (2,42 g, výtěžek 100%)jako čirého sirupu.

to 'HNMR (400 MHz. CDCl,): δ (ppm) 7,03 (IH, s), 4,90 až 4,70 (III. ni), 4.32 (2H. (, J = 8,2 Hz). 3,95 (211, dd, J = 8,2, 4,5 Hz), 3,20 (3H, br s), 3.05 (3H. br s). 2,85 (IH, br s).

Imotnostní spektrum: 227 [M ] (3) l-(4-N,N-dimethylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-y!)-3-methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku l-(4-N.N-dirnethylkarbamoyl-l,3 lhiazol-2-yl)-3-hvdroxyazetidinu (2.56 g.

10.7 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 6(2)) v methylenchloridu (50 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (2,4 ml. 31.0 mmol) a triethylamin (7.4 ml, 53.1 mmol) v ledové lázní. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 2.5 ho40 diny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát : methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku l-(4-N,Ndimethylkarbamoyl 1.3-thiazol-2-yl)-3-meihansulfonyloxyazetidinu (3,28 g, výtěžek 100%) jako světle hnědého oleje.

'H-NMR (400 MHz, CDCl,): δ (ppm) 7,13 (IH. s), 5,50 až 5,38 (IH, m), 4.46 (2H, dd,

J =9.7. 6.6 Hz). 4,26 (2H. dd.J = 9.7, 4,3 Hz), 3.21 (3H, brs), 3,10 (3Π, s), 3,07 (3H, brs).

- 208 CZ 300137 Bó

Hmotnostní spektrum (FAB*): 306 [M+H]* (4) 3-Acety ith io-l-(4-N,N-d imethy lkarbamoy 1-1,3-th iazol-2-y Jazet idin

Do roztoku l-(4-N-N-d i methy lkarbamoy 1-1 ,3-thÍazol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidinu (3,40 g, 11-1 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 6(3)) v dimethylformamidu (170 ml) byl přidán thioacetát draselný (7.62 g, 66,7 mmol) při teplotě místnosti. Smčs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická io vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethylacetátu : n-hexanu (4 :14 > 5 : 1 -> 7 : 1) jako eluentu za vzniku 3 acetylthio-1-(4-N,N-dirnethylkarbamoy i-1.3—thiazoi—2—yljazetidinu (2,71 g, výtěžek 85%) jako hnědého sirupu.

'H-NMR (400 MHz, CDClj: δ (ppm) 7,09 (IH, s), 4,53 (2H, dd, J - 9,0, 7,9 Hz), 4,50 až 4,40 (lil, m), 3,99 (211. dd, J “ 9,0, 5,5 I lz), 3.20 (31 i. br s), 3,06 (311, br s). 2,36 (311, s).

2<i Referenční příklad 7

3-Acety lthio-I -(4-N-ethy lkarbamoy 1-1,3-th iazol-2-y l)azet idin

AcS'

N

CONHEt (1) 3-/trc-Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-ethylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-vl)azetidin

Do roztoku 3—/erc—butylditenylsilyloxy—1 —(4—ethoxykarbonyl—l ,3—thiazoi—2—yl)azelidinu (1.0 g,

2.14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 ml) byl přidán roztok 0.67M ethylaminhydrochloridu-tri methy lhl i niku v benzenu (6,42 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 2 hodiny. Po zkontrolování to doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Po přidání ethylacetát u byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (5 ; 1 ~> 1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-/m-buty Idifenyl sily loxy-1-(4-N-ethy Ikarbamoyl-l.3-thiazol-2-yl)azetidinu (997 mg, výtěžek 100%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDClj: δ (ppm) 7,66 až 7.58 (4H, m), 7.50 až 7.37 (6H. m), 7.35 (IH, s),

7.14 (IH, brs). 4,80 až 4,76 (1H, m). 4,16 až 4.06 (2H, m). 4.01 (2H, dd, J = 8.8, 5,1 liz), 3.43 <211. dq, J = 7,3, 5,6 Hz), 1,22 (3H, t, J - 7,3 Hz). 1.07 (9H, s).

(2) l-(4-N-Fthylkarbamoyl-1,3 thiazoi 2 yl)-3 hydroxyazetidin

Do roztoku 3-/eri -butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-ethylkarbamoy 1-1,3-th iazol-2-yl)azetidinu (990 mg. 2,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 7(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (30 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,56 ml, 2.56 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 1,3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán ethylacetát a reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena

209 CZ 300137 B6 přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-bexan : ethyíacetátu (I : 2) -> ethylacetát

-> 5% methanolu v ethyíacetátu jako eluentu za vzniku 1—(4—N—ethyl karbamoyl-L 3 thiazol 2 yl)—3- hydroxyazetidinu (461 mg. výtěžek 95%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCIJ: δ (ppm) 7.36 (IH, s). 7,20 (IH. brs). 4.90 až 4.78 (III, m). 4.32 (2H. dd. J = 9,0, 7,3 Hz). 3.96 (2H, dd, J = 9.0. 4.3 Hz), 3.44 (211. dq, J = 7.2. 5.4 Hz). 2.61 (IH, d, J = 6.6 Hz), 1.22 (3H. t, J = 7,2 Hz).

(3) 1-(4-N-Ethy Ikarbamoy 1-1.3-thiazol2-yJ-3-methansulfonyloxyazetidin io

Do roztoku l-(4-N-methy Ikarbamoy l-E3-thiazol-2-ylý-3-hydroxyazetidinu (460 mg,

2,02 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 7(2)) v methylenchloridu (23 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,469 ml, 6,06 mmol) a triethylamin (0,849 ml, 6,06 mmol) v ledové lázni. Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána 1,3 hodiny.

Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethyíacetátu (1 : 3) -> ethyíacetátu jako eluentu za vzniku 1-(4-N-ethy Ikarbamoy 1-1.3—thiazol—

2o 2-yl)-3-inethansulfonyloxyazetidinu (598 mg, výtěžek 97%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCIJ: δ (ppm) 7,44 (IH, s). 7,13 (IH, br s), 5.48 až 5.38 (IH. m). 4,46 (211, ddd, .1 = 9,5, 6,6. 1,5 Hz), 4,27 (2H, ddd, J = 9,5, 4,4, 1,5 Hz), 3,45 (2H, dq, ,1 = 7,3. 5,0 Hz), 3,10 (3H,s), 1,24 <3H.t.J = 7.3 Hz).

2? (4) 3-Acetylthio-1-(4-N^thyIkarbamoy 1-1,3-thiazol-2-yJazetidin

Do roztoku l-(4-N-ethylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-y^rl)-3-methansulfonylazetidinu (590 mg,

1,93 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 7(3)) v dimethylformamidu (30 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,32 g. 11,6 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs byla so míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan :

ethyíacetátu (I :3 > 1 : 2) jako eluentu za vzniku 3-acety Ithio-1 -(4-N ethy Ikarbamoy 1-1.3thiazol-2-yl)azetidinu (453 g, výtěžek 82%) jako světle hnědé pevné látky, ¹1 i-NMR (400 MHz, CDCI J: δ (ppm) 7,40 (1H, s), 7.14 (1H, br s). 4,53 (2H. t. J = 8.8 Hz), 4,48 až 4,38 (IH. m), 3,98 (2H, dd. J = 8.8, 5,6 Hz), 3.44 (211, dq, J 7,3, 5,9 Hz). 2,37 (311, s). 1,23 (3H,t,J-7.3Hz).

Referenční příklad 8

3-Acetylthio-l-(4-N-isopropyIkarbamoy!- 1.3-thiazol-2-y Jazetidin

(1) 3 terč Butyldifenylsilyloxy--1-(4-N-isopropy Ikarbamoy 1- 1.3-thiazoI-2-y'Jazetidin

-21045

Do roztoku 3-/m-butyldifenylsi ly loxy-l-(4-ethoxy karbamoyl 1,3-thiazol-2-y Jazetidinu (EO g, 2,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 mj byl

¢.7. 300137 B6 přidán roztok 0.67M isopropylaminhydrochloridu-trimcthylhliniku v benzenu (6,42 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 2,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázní a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti

30 minut. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličilanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití 3—/crc—butyldifenylsilyloxy— 1—<4—N—Ísopropylkarbamoyl— 1,3—thiazol—2—yl)azetidinu io (1,01 g. výtěžek 99%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCl·,): δ (ppm) 7,66 až 7.58 (4H. m), 7,50 až 7.36 (6H. m). 7,34 (IH. s), 6.98 (IH. brd. J = 8,1 Hz), 4,80 až 4,70 (UI, m), 4.26 až 4.16 (1H, m). 4,11 (2H. dd, J = 8,8, 7,3 Hz), 4,02 (2H, dd, J = 8,8,4,4 Hz). 1,24 (6H, d. J - 6,6 Hz), 1,07(911, s).

i? (2) 1 —(4—N—ísopropylkarbamoyl—1,3—thiazol—2—yl)—3—hydroxyazetidin

Do roztoku 3-terc butyldifenylsilyloxy— I —(4—N—ísopropylkarbamoyl— K3-·thiazol—2—yI)az.ctidinu (1.01 g, 2,11 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 8( 1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (30 ml) byl přidán roztok 1.0M tctra-n-butylainoniumfluoridu v tetrahydrofuranu

2o (2,53 ml) v ledové lázni. Směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 3) > ethylacetátu jako

2? eluentu za vzniku l-(4-N-isopropylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)-3-hy droxy azet id inu (681 mg, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDClj: δ (ppm) 7,36 (IH, s), 7,00 (IH, brd. J = 8,0 Hz), 4,90 až 4,78 (IH, m), 4,32 (2H, dd, J - 9,9, 8,7 Hz), 3.97 (2H, ddd. J - 9,9, 7.3, 1,7 Hz), 2.55 (IH.d. J = 8.8 Hz). 1,25 (6H.d,J = 6,6 Hz).

(3) 1-{4-N-Isopropylkarbamoy 1-1.3-th iazol-2-yl)-3-ínethansulfonyloxyazelidui

Do roztoku 1-(4-N-isopropylkarbamoyl-l,3-thíazol-2-yl)-3-hydroxyazetídinu (490 mg,

2,03 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 8(2)) v methylenchloridu (15 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0.471 ml, 6.09 mmol) a triethylamin (0,854 ml. 6,09 mmol) v ledové lázni. Reakční smčs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za

4o sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 3) -> ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1-(4-N-isopropylkarbamoyl 1,3th iazol-2-yl)-3--methansulfonyloxyazetid inu (681 mg, výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDClj: δ (ppm) 7,44 (IH, $), 7,00 (lil, br d, J = 8,0 Hz), 5,48 až 5,38

4< (IH, rn), 4,46 (211, dd, J - 9,5. 6,6 Hz), 4,32 až 4,18 (3H, m obsahující 2H, dd, na 4.28. J = 9,5. 5,1 Ilz),3,ll (311. s), 1,25 (6H, d, J = 6,6 Hz).

(4) 3-Acety Ith i o-]-(4-N-isopropylkarbamoyl 1,3 thiazoI-2-yl)azetidin

5o Do roztoku l-(4-N-isopropylkarbamoyl-l ,3-th iazo 1-2-yl} 3 metbansulfonylazetidinu (680 mg, 2,03 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 8(3)) v dimethylformamidu (35 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,39 g. 12.2 mmol) při teplotě místností. Reakční směs bvl a míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční

-211CZ 300137 B6 směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyla nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za vzniku

3-acety Ith io-1-(4 N isopropy lkarbamoy I-1,3-th iazol-2-yl jazetidinu (461 mg. výtěžek 81%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCI-,): δ (ppm) 7,40 (IH, s), 6,98 (1H, br s). 4,54 (2H, t. J = 8,8 Ilz), 4,50 až 4,40 (IH, m). 4.26 až 4.16 (IH, m). 3,99 (2H. dd. J - 8,8, 5,9 Hz), 2,37 (311, s). 1.24 (611, d. J - 5,9 Hz).

Referenční příklad 9

3-Acetyl thio 1 (4-N-eyklopenty Ikarbamoyl-1,3-th iazol-2-y ljazetidin

(1) 3-/erc-RutyIdifeny Isilyloxy- l-(4-N-cy klopen ty lkarbamoy l-l .3—thiazol—2—y ljazetidin

Do roztoku 3-/ere-buty Idifeny Isily loxy-l-(4-ethoxy karbony l-l ,3-thiazol-2-yl jazetidinu (1,0 g.

2,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 ml) byl přidán roztok 0,67M cyklopcntylaminu-trimcthylhliníku v benzenu (6,42 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Po přidání ethy laeetátu bvla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně

2? promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za vzniku 3-/err-buty Idifeny Isily loxy-l-(4-N-cyklo-penty lkarbamoy1-1,3-thiazol-2-y 1 jazetidinu {1.07 g. výtěžek 99%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCIi): δ (ppm) 7,66 až 7,60 (4H, m). 7,50 až 7.38 (6H. m). 7,34 (IH, s). 7,08 (Hl, brd. J= 8.1 Hz), 4,80 až 4,70 (IH, m), 4.38 až 4.26 (IH, ni), 4,11 (211, dd. J = 8.8. 5,6 Hz), 4,02 (2H, dd. J = 8,8. 4.4 Hz), 2.12 až 2,20 (2H, m). 1,80 až 1,40 (6H, m). 1,07 (9H, s).

(2) l-(4-N-Cyklopcnty lkarbamoy l-l.3-thiaz,ol-2-yl)-3-hydroxy azetidin

Do roztoku 3-/m:-buty Idifeny Isily loxy-l-(4-N-eyklopcnty Ikarbamoyl- 1,3-lhiazol 2 yljazetl· dinu (1,07 mg, 2.12 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 9(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (32 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-bulylamoniumfluoridu v tetrahydro4d furanu (2,54 rnl, 2,54 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 40 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethy lacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl Čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za vzniku I -(4-N45 cyklopenty lkarbamoy 1-1 ,3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (528 mg. výtěžek 93%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCI;): δ (ppm) 7,36 (IH, s), 7,11 (IH. d. .1= 4,4 Hz). 4.88 až 4,78 (lil, ni). 4,40 až 4,25 (3H, m), 3,96 (2H, dd, J = 9,5, 4,4 Hz), 2.54 (IH, d. J = 6,0 Hz). 2,12 až

2,00(211. m), 1.80 až 1,44 (6H.m).

(3) 1%4-N-Cyklopenty lkarbamoy I -1.3—thiazol—2—yl> -3-methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku 1 -(4-N-cyklopentylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (520 mg,

1.95 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 9(2)) v methylenchloridu (16 ml) byl přidán methansul fony Ichlorid (0,452 ml, 5,84 mmol) a triethylamin (0.818 ml 5,84 mmol) v ledové lázni. Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným io roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (1:2)^- ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-(4 N-cyklopentylkarbamoyl-1.3thiazol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidinu (691 tng, výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

lš 'll-NMR (400 MHz. CDCf): δ (ppm) 7,43 (111. s), 7,07 (IH, br d, J - 8.1 Hz), 5.48 až 5,38 (1H, m), 4.46 (2H, ddd, J = 9,9. 6,6, 1,5 Hz). 4.40 až 4.20 (3H. m obsahující 211, ddd. J = 9.9,4,9, 1.5 Hz). 3.1 I (311, s), 2,15 až 1.98 (2H, m). 1,80 až 1,40 (611, m).

(4) 3-Acety Ithio-1 (4-N-cyklopentylkarbamoyl-l ,3-th iazol--2 yljazetidin

Do roztoku 1 -(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l.3-thiazol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidinu (670 mg, 1,95 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 9(3)) v dimethylformamidu (34 ml) byl přidán thioacelát draselný (1,34 g, 11.7 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 ; 1 —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku 3—acety Ithio-1 (4-N-cyklo30 pentylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)azetidinu (550 mg. výtěžek 87%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCb): 6 (ppm) 7,40 (IH, s), 7,10 (IH, d, J - 8.0 Hz), 4.53 (2H, dd, J -9,2, 6.9 Hz). 4.48 až 4,38 (IH, m), 4,38 až 4,26 (IH. m). 3,99 (211. dd. J = 9,2. 4,6 Hz), 2,36 (3H. s), 2,12 až 2,06 (211. m). 1.80 až 1,40(611, m).

Referenční příklad 10

3--AcetyIthio—1 —(4—N cyklohexy lkarbamoy 1-1.3 thiazol—2—yljazetidin

-213(I) 3-/m-Buty Idifeny lsily loxy-l-(4-N-cyklohexy lkarbamoy l-l,3-thiazol - 2-y Ija/etidin

Do roztoku 3-/err-buty4di feny lsily loxy-l-(4-ethoxy karbony 1-1,3-thiazol-2-yl)azetidinu (1,0 g,

2,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 ml) byl přidán roztok 0.67M eyklohexylaminu-trimelhylhliníku v benzenu (6,42 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla zahřívána pod rcfluxem 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Do reakční směsi byl postupně přidán ethylacetát a reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu.

Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikage5 lové koloně za použití n-hexan : ethylacetát (5 : 1 —> 1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-/err-butyl· d i feny Isily loxy 1 (4- N cyklohexy Ikarbamoy I-1,3-th i azo 1-2-yl )azet idinu (1,09 g. výtěžek 99%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCfi): ó (ppm) 7,66 až 7,58 (411. m), 7,50 až 7,38 (6H. m). 7.34 (IH. s). 7.04 (1H. brd. J = 8,8 Hz). 4.80 až 4,70 (IH, m). 4.11 (2H. dd. J = 8.8. 6.6 Hz). 4,02 (211, dd, io J-8,8. 5.1 Hz). 3.98 až. 3,80 (IH, m). 2.02 až 1,94(211. m). 1,80 až 1.70 (211, ni). 1.70 až 1.10 (611. m), 1,07 (9H, s).

(2) 1-(4-N-Cy klohexy Ikarbamoy 1-1,3-th iazol-2-yl)-3-hydroxy azetidin

Do roztoku 3-fcrc-buty ldifeny Isily loxy-1-(4-N-cy klohexy Ikarbamoy 1-1,3-th iazol-2-yl)azetidinu (1,09 mg, 2.10 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 10(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (55 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-bulylamoniunifluoridu v tetrahydrofuranu (2,52 ml) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezí ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 1) -> ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-(4-N-cy klohexy Ikarbamoy l-l,3-th iazol-2-y lfi-3hydroxvazetidinu (570 mg. výtěžek 97%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCI;): δ (ppm) 7.36 (IH, s). 7,07 (IH. d. J= 8,1 Hz). 4.99 až 4.78 (lil, m). 4.33 (211. dd. J = 9,0. 7,3 Hz). 4.00 až 3,80 (3H, ni obsahující 2H, dd. J = 9,0. 4.4 Hz), 2.56(111, d,J = 8.3 Hz). 2.02 až 1,92 (2H.m), 1,80 až 1,70 (2H. m)/l.70 až 1,10 (6H, m).

(3) 1-(4-N-Cyklohexy Ikarbamoy 1-1.3-thiazol-2-yl)-3-methansu] fony loxyazetidin in

Do roztoku 1 -(4-N-cy klohexy Ikarbamoy l-l, 3-th iazol-2-yl)-3-hydroxyazct idinu (570 mg.

2,03 mino!) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 10(2)) v methylenehloridu (17 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,471 ml. 6.08 mmol) a triethylamin (0,852 ml, 6,08 mmol) v ledové lázni. Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána při b teplotě místnosti 17 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva hýla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do získaného zbytku byl přidán isopropylether a výsledná směs byla filtrována za vzniku 1 (4 N cyklohexy Ikarbamoy 1 1,3-thiazol-2-yl)-3 methansulfo40 nyloxyazetidinu (739 mg, výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCfi): 6 (ppm) 7,43 (1H, s), 7,02 (IH, br d, J - 8,1 Hz). 5,48 až 5,39 (IH. m), 4.46 (2H, ddd, J - 9,5. 6,6, 1,5 Hz), 4,27 (2H, dd. J = 9.5, 5.1 1 Iz), 3,98 až 3,84 (1H, m). 3,11 (3H, s), 2,01 až 1,94 (211. m). 1.80 až 1.70(211, m), 1.70 až 1.1O(ÓH. ni).

(4) 3-Acety Ith io-1-(4-N-cyklohcxy Ikarbamoy l-l,3-th iazol-2-y Ijazetidin

Do roztoku l-(4-N-ey klohexy Ikarbamoy I 4,3- thiazol-2-yl) 3 methansulfonyloxyazelidinu (730 mg. 2,03 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 10(3)) v dimethylformamidu (37 ml) byl přidán ihioaeetát draselný (1,39 g, 12.2 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 15 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezí ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentro-214C7 300137 B6 vána za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití nhexan : ethylacetátu (2 : 1 - > 1 : 2) jako eluentu za vzniku 3-acetyIthio-1 (4Neyklohc.\\lkarbamoyl-l.3—thiazol—2 -yljazetidinu (372 mg. výtěžek 54%) jako světle hnědé pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz. CDCl?: δ (ppm) 7,40 (1H, s). 7.06 (IH, br d. J = 8,0 Hz), 4,53 (IH. dd. 5 .1 = 9.5. 8,2 Hz), 4,48 až 4,40 (1H. m), 3.99 (2H. dd. J = 9.5. 3,7 Hz), 3.95 až 3,85 (IH. m). 2,37 (3H, s). 2,01 až 1,96 (2H, rn). 1.80 až 1.10 (SH, m).

1(1

Referenční příklad 11

3-Acetylthio-1 - -(4—morfolinokarbony l-1,3—thiazol—2—yljazetidin

CO-N O _AcS_Z>

(1) \/ S3 7(Tr-Butyldifenylsilyloxy-l-(4-N-morfolinokarbonyl-l,3 thiazol—2—yljazetidin

Do roztoku 3-/erc“buty Idifenylsily loxy-l-(4-ethoxy karbony 1-1 „3-thiazo1-2-y1)azet idinu (1,0 g.

2.14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 ml) byl přidán roztok 0.67M morťolinu-trimethylhliníku v benzenu (6,42 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Reakění směs byla zahřívána pod refluxem 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethy lacetát (100 ml) bvl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethyl25 acetátu (3 : 1 —> 1 : 3) jako eluentu za vzniku 3-terč-butyldifenylsiiyloxy-1 -(4-morfo-1 inokarbonyl— 1.3-thiazol—2—yljazetidinu (1,05 g, výtěžek 97%) jako světle hnědé pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz. CDCl.?: δ (ppm) 7.64 až 7.58 (4Π, m), 7,50 až 7.36 (6H, m), 7.12 (IH. s), 4.80 až 4.70 (111. m), 4,10 (2H, dd. .1 = 9,6, 8,0 Hz?. 4,00 (211, dd. J = 9,6, 4,8 Hz), 3,96 až 3.60 (8H. m), 1,06 (9H.s).

(2) l-(4-N-Morfolinokarbonyl-l,3-thiazol - 2 yl)-3-hydroxyazetidin

Do roztoku 3-/erc-butyldifenylsilylo\y-l-(4-morfolinokarbonyl-1,3 thiazol—2—yljazetidinu (l,05 g. 2.07 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 11(1)) v bezvodém tetra55 hydrofuranu (32 ml) byl přidán roztok I,0M tetra n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,48 ml. 2,48 mmol) a reakční směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát > 10% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1-{4-morfolinokarbonyl 1,3—thiazol—2—yl)—3—hydroxyazetidinu (542 mg. výtěžek 97%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCl?: δ (ppm) 7.15 (111. s). 4,90 (lil, m), 4,32 (2H. d. J = 8,8, 7,3 Hz), 3,95 (211, dd, J = 8,8, 4,4 Hz), 4,00 až 3.60 (8H. rn), 2,45 (1H. br s).

-215(3) l-(4-N-Morfolinokarbonyl-l,3-thiaz.ol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku 1 (4-morfolinokarbonyl 1,3—thiazol—2—yl) -3-hydroxy azet idinu (540 mg.

2.01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 11(2)) v methylenchloridu (27 ml) byl přidán metliansulfonylchlorid (0,467 ml. 6,03 mmol) a tríethylamin (0.845 ml. 6,03 mmol) v ledové lázni. Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána 1 hodinu.

Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koneentro5 vana za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití 5% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1-(4-morfol inokarbonyl-1,3-thiazo 1-2 -y 1 )3-methansu Ifony loxyazetidinu (688 mg. výtěžek 99%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDCb): δ (ppm) 7.23 (IH, s), 5,45 až 5.40 (lil, m). 4.45 (2H. dd. J - 9,5, 6,6 1 Iz), 4,26 (211, ddd, J - 9,5, 4,4. 1.5 Hz), 4.00 až 3,60 (8H. m). 3.10 (3H, s).

io (4) 3-Acctylthio-l-(4-N-morfolinokarbonyl-l ,3—thiazol—2—yl Jazetidin

Do roztoku 1 -(4-morfol inokarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)-3-methansu Ifony loxy azetid inu (680 mg, 1.96 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 11(3)) v dimethylformamidu (20 ml) i? byl přidán thioacetát draselný (671 mg, 5.87 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 18 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a končen trová20 na za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití nhexan : ethylacetátu (1 : 3)—> ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-l-(4-morfolinokarbonvl 1,3 thiazol 2 yl)azetidinu (411 mg, výtěžek 64%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCR): δ (ppm) 7,20 (IH, s), 4.52 (2H. I, J = 8.8 Hz). 4.48 až 4,38 (IH, m), 3,98 (2H, dd, J = 8,8, 5,1 Hz), 4,00 až 3,60 (8H, m), 2,36 (311, s).

>>

Referenční příklad 12

3-Aeety Ithio-1 -(4-ten- butyldi methy lsi ly loxymethyl-1,3—thiazol—2—yl jazetidin

AcS

OTBDMS (1) 1-(4-1 lydroxy methy 1-1,3-th iazol-2-yl)-3-hy droxy azetid i n

Do roztoku 3-/m-butyIdifenvIsilyloxy-l-(4-hydroxyniethy!-l ,3-thiazol-2-yl)azetidinu (548.5 mg, 1,29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(2)) v bezvodém telraA hydrofuranu (28 ml) byl přidán roztok ROM tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1,56 ml, 1,56 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromalografieky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku l-(4-hydroxymethyl-1.3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (230 mg, výtěžek 96%)

4d jako bílé pevné látky.

'H NMR (-100 MHz. CDjOD): δ (ppm) 6,5) (IH. s). 4,76 až 4.68 (IH. m). 4,16 (2H. s). 4.32 až 4.24 (2H, lil). 3.88 až 3.82 (2H. ni).

-216(2) 1 -(4-terč-ButyIdímethylsilyloxymethyI-1,3-thiazol -2-yI)—3-hydroxyazetidin

Do roztoku l-(4-h}droxymethy 1-1,3-th iazol-2-yl)-3-hydroxyazetid inu (226,5 mg, 1,22 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 12(1)) v dimethylformamidu (11,5 ml) byl přidán terč-butyldimethylsilylchlorid (220 mg, 1.46 mmol) a imidazol (120 mg, 1,76 mmol) v ledové lázni. Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti za 10 minut a míchána 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán v ledové lázni methanol (2 ml) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití nhexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 1©4--/étc butyldimcthylsilyloxymethyl-l.3thiazol-2-yl©3-hydroxyazetidinu {300.4 mg, výtěžek 82%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCIJ: δ (ppm) 6,43 (lH.s), 4,86 až 4.78 (lil. m). 4.66 (2H. s). 4.30 io (2H. dd. J= 9.5. 7.0 Hz), 3,93 (2H, dd, J- 9,5, 4,4 liz), 2,80 (IH.br s). 0,94 (9H. s). 0,10 (6H, s).

(3) 1©4- terč Butyldimcthylsilyloxymethyl-1,3-thiazol-2-yl)-3-methansulfbnyloxyazetidin

Do roztoku 1©4 -terč -buly Idimethy Isily loxymcthy 1-1.3-thiazol-2-y l)-3-methansulfony loxyazetidinu (300,4 mg, 1,00 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 12(2)) v methylenchloridu (15 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,2 ml. 2.49 mmol) a triethylamin (0,35 ml, 2,51 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok

2o hydrogenuhliěitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý stran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku I —(4—/erc—butyldimelhylsílyloxyniethyl 1.3 thiazol2-y|)-3-methansulfonyloxyazetidinu (326,5 mg, výtěžek 86%) jako žlutého sirupu.

'H-NMR (400 MHz. CDCh): δ (ppm) 6.50 (IH. s). 5.44 až 5.38 (IH, m), 4.43 (2H. dd, J - 9.9, 5.5 Hz). 4,23 (2H, dd. J = 9,9, 4,1 Hz), 3,10 (311, s). 0.90 (9H. s). 0.10 (6H. s).

(4) 3- Aeetylthio 1 ©4-terc-buty Idimethy Isily loxy methy 1-1,3-thiazol-2-y Ijazetídin to Do roztoku l-(4-/m-buty Idimethy Isily loxy methyl 1.3 thiazol-2-yl)-3-meíhansulfonyloxyazetidinu (326.5 mg, 0.86 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 12(3)) v dimethylformamidu (16 ml) byl přidán thioacetát draselný (780 mg. 5.41 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogen35 uhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (4 : l)jako eluentu za vzniku 3-aeetylthio-1©4-terč-butyldiinethyIsilyloxvmethyl-1,3-thiazol-2yljazetidinu (191 mg, výtěžek 62%) jako hnědého sirupu.

'H-NMR (400 MHz. CDCl,.): δ (ppm) 6.45 (1H. s). 4,66 (2H, s), 4,50 (2H, t, J - 8,6 Hz), 3,95 (2H. dd, .1 = 8.6. 5.1 Hz), 2.35 (3H, s), 0,93 (9H, s), 0,10 (611, s).

Referenční příklad 13 45

4-Accty 1 thio- l©4-ethoxy karbony I-1,3—th iazol—2—yljpiperidin

COOE1

AcS (1) (4-1 lydroxypíperidin 1 -karbothioyljkarbamová kyselina, ethylester

-217CZ 300137 B6

Do roztoku 3-hydroxypiperidinu (1,0 g, 9,89 mmo!) v tetrahydrofuranu (50 ml) byl přidán ethoxykarbonylisothiokyanát (1.4 ml, 11.9 mmol) v ledové lázni. Reakční smčs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána přes noc, Po zkontrolování a doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a /koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn ehromatogra ficky na silikagelové koloně za použití toluen : ethylacetát (1 : 2) jako eluentu za vzniku (4-hydroxypiperidin-l-karbothíoyl)karbamové kyseliny, ethylesteru (2.3 g. výtěžek 100%) jako žlutého oleje, ¹ H-NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 4,26 (1H, br s). 4,19 (211. q. >8.3 Hz). 4,0ό (IH. ni), 4.0 io až 3.4 (3H, neostrý s). 2.10 (211, m), 1,80 až 1.60{4H,m), 1.29 (3H. t. >8.3 Hz).

(2) 1 (4-Elhoxykarbonyl-l ,3-thiazol-2-yl)-4-hydroxy piperidin

Do roztoku (4- hydroxy piperidin- 4 -karbothiol)karbamové kyseliny, ethylesteru (2,3 g. i? 9,89 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 13(1)) v ethanolu (23 ml) a destilované vody (23 ml) byl přidán hydroxid sodný (1,98 g, 49,5 mmol) a směs byla zahřívána pod refluxem 15 hodin. Po zkontrolování doběhnutí rekce byla reakční směsi v ledové lázni, ethyl 2brompyruvátu (2.5 ml, 19,8 mmol) a triethylamin (2.8 ml 20.1 mmol) byl pak přidán a reakční směs byla zahřívána pod refluxem 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití toluen : ethylacetátu (2:1) jako eluentu za vzniku 1 -(4ethoxykarbonyl-1.3-thiazol-2-yl>4-hydroxypiperidinu (0,99 g. výtěžek 39%) jako světle žlutého sirupu.

'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ (ppm) 7,46 (IH, s), 4.35 (2H. q, >7,8 Hz), 3,96 (1H, m), 3,88 (2H, dl, >13.5, 3,0 Hz). 3.31 (2H, ddd, >13,5, 9,0, .3,0, liz), 2,04 až 1,96 (211. m). 1.74 až 1,56 (3H, m), 1,37 t, .1=7,8 Hz).

Hmotnostní spektrum: 256 [M ] (3) 1 (4 Ethoxykarbonyl-1,3-thiazol-2-yl)-4-methansulfonylo\ypiperidin

Do roztoku l-(4-ethoxykarbony 1-1,3-thiazol 2 yl) 4 hydroxypiperidinu (128 mg. 0,50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 13(2)) v methylenchloridu (6.5 ml) byl přidán methansulfonyl chloride (0.043 mmol) a triethylamin (0,084 ml, 0,60 mmol) v ledové lázni. Reakční smčs by la ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán v ledové lázni ethanol (I ml) a reakční směs bvla míchána 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva by la promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rekrystalizován z roztoku ethylacetát: n-hexan (5:1) za vzniku l-(4-ethoxykarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)-4-methansulfonyloxypipcridinu (81,0 mg, výtěžek 49%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCl,) δ (ppm) 7,49 (IH, s), 5.01 až 4,90(111. m). 4.45(211, q. >8,0 Hz).

3,80 (2H, ddd. >12,6, 8.4, 4,2 Hz). 3,52 (2H. ddd, >12,6, 8.4, 4,2 Hz), 3.05 (3H. s). 2,20 až

1,90 (4H,m), 1,36 (3H, t,J-8.0 Hz).

Hmotnostní spektrum: 334 [MJ (4) 4—Acetylthio— l —(4 -ethoxykarbonyl-1.3-thiazol-2- yl)piperidin

Do roztoku l-(4-ethoxy karbony 1-1,3-th iazol-2-y l)-4-melhansul fony loxy piperidinu (76 mg,

0.23 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 13(3)) v dimethylformamidu

-218CZ 300137 B6 (4,0 ml) byl přidán thiacetát draselný (145 mg, 1,3 mmol) při teplotě místnosti a reakění směs byla míchána v olejově lázni (80 °C) 8 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (I : I) jako eluentu za vzniku 4-acetylthiO’M4-ethoxykarbonyl-1.3-thiazol-2-yl)piperidinu (67 mg, výtěžek 94%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 (ppm) 7,45 (111. s). 4,34 (211, q. J=7.1 Hz), 3,88 (2H, dt,

J - 13,4, 3,2 Hz). 3,80 až 3,60 (IH, m), 3.33 (ddd. J-13.6. 8.5, 3.2 Hz). 2,33 (3H. s), 2,15 až 1.95 (21L m). 1.85 až 1,65 (2H, m). 1.37 (3H. t,J=7.1 Hz).

Hmotnostní spektrum: 314 [M ]

Referenční příklad 14

4-Acetyl thio-1 - (4-p nitrobenzyl karbony! 1,3 ihiazol-2-yl)piperidin

AcS

COOPNB zo (1) 4-/m-Buty ld imethy Isily loxy- l-(4-ethoxykarbony 1-1,3- thiazol-2-y I )piperidin

Do roztoku l-(4-ethoxykarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidinu (l.OOg. 3,90 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 13(2)) v dimethylformamidu (50 ml) byl přidán /ťrr-butvldimethylsilylchlorid (1,2 g, 7,96 mmol) a imidazol (0.6 g, 8.8 mmol) v ledové lázni.

2? Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána 18 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce, byl přidán v ledové lázni ethanol a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (4 : I) jako eluentu za vzniku 4-/erc-butyldimethylsilyloxy-l =(4-ethoxykarbonyl1,3-thiazol-2-yl jazetidinu (1,38 g, výtěžek 95%) jako světle žlutého oleje.

'll-NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 7.42 (ΗI, s). 4,35 (2H, q, J=7.1 Hz), 4,03 až 3,89 (IH, m), 3.70 (2H, ddd. J-12.4, 8,5, 3.7 Hz), 3,46 (2H, ddd, 12.4, 8,5, 3,7 l iz), 1,90 až 1.77 (211, m), 1,71 až 1,59 (211, m). 1,37 (3H. t, .1=7,1 Hz). 0,90 (911, 0,08 (611, s).

Hmotnostní spektrum: 370 [M J (2) 4-terč-Butyldimethylsilyloxy-1 -(4-karboxy 1-1,3-thiazol-2-yljpiperidin κι Do roztoku 4-terč butyldimethylsily loxy 1 (4 ethoxykarbonyl 1,3-thiazol-2-yl)piperidinu (1.00 g. 2,7 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 14(1)) v ethanolu (20ml) byl přidán IN vodný roztok hydroxidu sodného (5,4 ml, 5,4 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 3,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, 2N vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (1.8 ml) byl přidán v ledové lázni. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rekrystalizován z roztoku methanolu a ethylacetátu za vzniku bílých krystalů (471 mg) jako primárních krystalů. Následně byl zbytek získaný koncentrací matečného roztoku čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : 2-propanol: vody (10:4: 1 >

-219C7. 300137 B6 : 2 : 1) jako eluentu za vzniku 4-/erc-J?w/y/dimethyIsilyloxy- 1/4-karboxy 1-1,3- thiazol-2-yl)piperidinu (440 mg. total amount 911 mg, výtěžek 99%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCB) δ (ppm) 7.35 (IH. s). 4.10 až 3,85 (IH, m). 3,75 až 3.50 (211. m), 3,50 až 3,25 (2H. ní), 1,90 až 1,70 (2H, m). 1.70 až 1,50 (2H, m), 0,90 (9H. s). 0.07 (6H. m).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 343 [M+H] (3) 4-/ezí‘-Butyldimethy Isilyloxy- l/4-p-n itrobenzy loxy karboxyl-1,3 thiazol-2 yl )piperidin

Do roztoku 4-/erc-butyldimethylsifyloxy-l/4-karboxyl-1,3-thiazol-2-yl)pipcridinu (902 mg. io 2,63 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 14(2)) v bezvodém mcthylenehloridu (40 ml) byl přidán hydroxybenzotriazole (710 mg, 5,3 mmol). I—ethyl—3-(3 dimelbylaminopropy/karbodiimidhydrochlorid (WSC) (1.254 g. 6,6 mmol) a p-nitrobenzylalkohol (788 mg,

5,2 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasy15 cený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 4-/m*-butyldimethvlsilyloxy-1/4-p-n itrobenzy loxykarbonyl-1 ,3—thiazol—2- y/piperidinu (916 mg. výtěžek

73%) jako žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCH) δ (ppm) 8,23 (2H, d. .1=8,5 Hz), 7.60 (2H. d, .1=8.5 Hz), 7,49 (lil, s). 5.42 (2H. s), 4,05 až 3,95 (IH, tn), 3,70, (2H, ddd, J-12,6. 8,6. 3.9 Hz), 3.48 (2H, ddd.

12,6, 6.2, 4,2 Hz), 1,92 až 1,76 (2H. ni), 1,75 až 1.50, (2H, m). 0,90 (9H, s), 0,07 (611, s).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 478 [M+H] (4) 1 / 4-p-n i troben zy I oxy karbony 1-1.3-th i azol-2-yl//-hydroxy piperidin

Do roztoku 4-terc butyldi methy Isi ly loxy-1/4-p-n i trobenzyloxv karbonyl 1,3 thiazol-2-y/pipcridinu (300 mg. 0.628 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 14(3)) v bezvodém tetrahydrofuranu (15 ml) byla přidána kyselina octová (0,22 ml. 0,628 mmol) a roztok IM tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (3.76 ml. 3.76 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 21 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořeěnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku 1/4-p-nitrobenzyloxykarbonyl 1,3 thiazol-2-yl)-4-hy droxy piperidinu (123 mg. výtěžek 54%) jako světic žluté pevné látky.

‘H NMR (400 MHz, CDCI3+DO) δ (ppm) 8.22(211, d, J-8.0 Hz). 7,60(211. d. J=8,0 Hz), 7,50 (IH, s), 5,42 (211, s). 4,02 až 3,94 (1H. ni), 3,89 (2H, dt. J/2,0, 4,0 Hz). 3,33 (2H. ddd.

J= 12.0, 8,0, 4,0 Hz), 2,05 až 1,94 (2H, rn). 1,75 až 1,55 (211, m).

Hmotnostní spektrum: 363 [MJ (5) 4-M eth an sul fonyl oxy-1 (4-p n itrobenzyl oxy karbony 1-1,3-t h i azol-2-y/piper idin •i? Do roztoku I/4-p-n i trobenzy loxy karbony l-l,3-thiazol-2-yl)· -4-hydroxypipendinu (0.75 g, 2.06 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 14(4)) v bezvodém methylenchloridu (38 ml) byl přidán mcthansulfonylchlorid (0.18 ml, 2,33 mmol) a triethylamin (0,35 ml, 2.5 I mmol) v ledové lázni. Směs byla ohřátá na teplotu místnosti během 10 minut a míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořeěnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za

- 220 CZ 300137 B6 použití n-hexan : ethylacetátu (2 : I) jako eluentu za vzniku 4-methan-sul fony loxy-1- (4 -pn itrobenzy loxy karbony l-1.3-thiazol-2-y Ijpiperidinu (0.87 g, výtěžek 96%) jako bezbarvé látky ¹ H-NMR (400 MHz. CDCI3) Ó (ppm) 8.23 (214, d. >8,5 Hz). 7,59 (2H, d. >8,5 Hz). 7.54 (IH. s), 5,42 (2H. s), 5,05 až 4.95 (IH, m), 3,79 (2H, ddd, >12,2, 7,6, 4,0 Hz). 3,55 (2H. ddd.

>12,2. 7,2, 4,0 Hz), 3,07 (311, s), 2.18 až 2,06 (2H, m). 2,00 až 1,80 (2H, m).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 441 (M+H] (6) 4-AcelyIthio-l-(4-p-nitrobcnzyloxykarbony 1-1,3—thiazol—2—yDpiperidin io Do roztoku 4-methansul fony loxy-1-(4-p-n itrobenzy loxy karbonyl-1,3-th iazol-2-yl)piperid inu (1.2 g. 2.72 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 14(5)) v dimethylformamidu (60 ml) byl přidán thioacetát draselný (625 mg. 5,47 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 3,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezí ethylaeetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organic15 ká vrstva byla promyla nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1: I) jako eluentu za vzniku 4 acetvlthio 1 (4- p-nitrobenzyloxvkarbonyl-1.3-thiazol-2-yl)piperidÍnu (769 mg, výtěžek 88%) jako světle hnědé pevné látky.

¹11-NMR (400 Ml lz. CDCH) δ (ppm) 8,23 (211, d, >8,4 Hz), 7.59 (2H, d. >8.4 Hz), 7,51 (1H.

s), 5,42 (2H. s), 3.95 až 3,80 (2H, m), 3.80 až 3,60 (IH, m), 3,34 (2H, ddd, 4 13.1,9.9. 3,1 Hz). 2.34 (311, s). 2,25 až. 1,95 (2Π, m). 1,85 až 1,65 (2H, m).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 422 (M +11] ‘

Referenční příklad 15

4-Acety Ith io-1 -(4-karbamoyl-1,3- thiazol-2-y Dpi per idin

(1) 4-/m-Butyldí methy Isily loxy-l-(4-karbamoyl-1,3-th iazol-2-y Dpiperidin

Do roztoku 4-/ťrc-butyldimethylsilyloxy-l-(4-karboxyl-l,3-thiazol-2-yl)piperidinu (4,99 g, 14,6 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 14(2)) v methylenchloridu (150 ml) byl přidán karbonyldiimidazol (2,80 g, 17,3 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosfé35 rou a reakční směs byla míchána 1,5 hodiny za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce, 28% vodný roztok amoniaku byla přidán a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut.

Následně byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozdělen mezi io ethylaeetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 4—Ze/’c—butyldimethylsilyloxy—1 —<4—karbamoyl— 1,3—thiazol—2—yl)pipeťidinu (2,90 g, výtěžek 59%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 Ml lz, CDC13) δ (ppm) 7,39 (IΠ, s). 7,03 (111, br s). 5.50 (IH. br s), 4,05 až 3.95 (IH, m), 3.66 (2H. ddd, >12,5. 8,6, 3,7 Hz), 3,43 (2H, ddd. >12.5. 6.5, 4,2 Hz), 1.92 až 1,75 (214, m), 1,75 až 1,55 (211, m), 0,90 (9H„ 0,08 (6H, $).

Hmotnostní spektrum (FAB'): 342 [M+H] .-5-71.

CZ 300137 Bó (2) l-(4-Karbamoyl-l ,3-thiazol-2 -yl)· 4-hydroxypípcrÍdin

Do roztoku 4-/erc-butyldÍmethylsilyloxy -1 -{4-karbamoy 1-1,3-thiazol-2-yl)piperidinu ? (1,226 g. 3.59 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 15(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (30 ml) byla přidána kyselina octová (1,85 ml) a roztok LOM tetra-n-bu-ty Iamoniumfluorídu v tetrahydrofuranu (32.3 ml, 32.3 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 24 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za vzniku 1 (4-karbamoylio 1.3-thiazol-2-ylj4-hydroxypiperidinu (0.82 g. výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 MHz. CDC13) δ (ppm) 7.38 (IH. s). 3,95 až 3,80 (IH. m), 3,40 až 3.20 (2H. m). 2,00 až 1,85 (2H, m). 1,75 až 1,50 (2H.m).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 228 [M+H] is (3) l-(4-Karbamoyl-l ,3-thiazol-2-yl)-4-methansulfonyloxypiperidin

Do roztoku 1 -(4-karbamoyI-1.3-thiazol-2-yl J4-hydroxypiperidinuí 1.93 g, 8,49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 15(2)) v methylenchloridu (100 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (10,0 ml, 129 mmol) a triethylamin (18,0 ml, 129 mmol) v ledové lázni. Po

2o míchání směsi v ledové lázní 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 24 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelovc koloně za použití ethylacetát: methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku l-(4-karbamoyl-l .3-thiazol2-ylM-methansulfonyloxypipcridinu (31a) (1,59 g, výtěžek 61 %) jako světic žluté pevné látky.

¹ H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ (ppm) 7.42 (IH, s). 5,10 až 4,90 (IH, m). 3.77 (2H. ddd. J-13,0, 7,4, 4,0 Hz), 3.53 (2H, ddd, J-13,0. 7,7. 4.0 Hz). 3,12 (3H. s), 2.18 až 2,07 (2H, m), 2.00 so až 1,89(211, m).

Hmotnostní spektrum: 305 [M ] (4) 4-Acctylthio- 1 -(4 karbamoyl-1,3-thiazol-2-yl)pipcridin

Do roztoku 1 (4 karbamoyl-1,3 thiazol 2-yl)-4 metliansulfonyloxypiperidinu (31a) (1,59 g, 5,21 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 15(3)) v dimethylformamidu (80 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.19 g. 10.4 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 2,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce by la reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná orga40 nieká vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : n-hexanu (10: 1) jako eluentu za vzniku 4—acetylthio—1—(4—karbamoyl—G3—thia^ol—2—yl)piperidinu (1,01 g, výtěžek 68%) jako hnědé pevné látky.

4? 'H NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 7,41 (1H, s). 7,00 (1H. br s), 5,55 (1H. br s), 3,90 až 3,78 (2H, m), 3,78 až 3,64 (IH, m), 3.35 až 3,25 (2H, ni), 2,32 (3H. s). 2,10 až 2.00 (2H, in). 1.80 až 1.65 (21 l,m).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 285 [MH1]

Re fe re nčη í příkIad 16

4-Acetyllhio-1 -(4-N-methyIkarbamoyl 1.3 thiazol-2 yI)piperidin . Ί77 C7. 300137 B6

AcS

CONHMe {1) 4-terc ButyIdímethylsilyloxy - I- (4-N-methy Ikarbamoy 1-1,3—thiaz.ol—2—yl)piperidin

Do roztoku 4-terč-butyldimethylsilyloxy 1--(4-karboxy -1,3 thiazol-2-yl)pipcridinu (200 mg. 5 0,584 mmol) (získaného podle popíšu v referenčním příkladu 14(2)) v dimethylformamidu (6,0 ml) byl přidán karbonyldiimidazol (114 mg, 0,703 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a reakční směs byla míchána v olejové lázni (50 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce. 40% aqueous methylaminu solution (0,23 ml) byl přidán a reakční smčs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut.

Následně byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran hořečnatý; filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethyíacetátu (5 : 4) jako eluentu za vzniku 4-tcrc buty Idímethylsily loxy-1-(415 N-methylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)piperidinu (202.5 mg, výtěžek 97%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCI3) δ (ppm) 7,36 (IH. s), 7,20 (IH. br. s), 4,10 až 3,98 (IH, m). 3,68 (2H. ddd, .1=12,6, 8,5, 3.7 Hz), 3,45 (2H, ddd, J=12,6, 6,4, 4,2 Hz), 2,99 (3H, d, .1=4,8 Hz), 1,95 až 1.78 (2H.m), 1,78 až 1.60(211, m). 0,93(11, s), 0.11 (611, s).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 356 [M+l 1] (2) l-(4-N-Methylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidin

Do roztoku 4-/m-buty Idímethylsily loxy-1 -(4-N-methyl karbamoyl-1,3-th iazol-2-yl )2? piperidinu (1,69 g, 4,75 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 16(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (85 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butylarnoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (23,8 ml. 23,8 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v olejové lázni (50 °C) 14.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : metha3i.) nolu (10: 1) jako eluentu za vzniku I-(4-N-methylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidinu (1,48g, výtěžek 97%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDCI3) δ (ppm) 7,35 (IH, s), 7,18 (IH. br s), 4,05 až 3,90 (IH, rn). 3,74 (2H, ddd. .1=12.7. 4,7 Hz), 3.28 (2H, ddd, .1=12,7, 9,0, 3.6 Hz), 2,10 až 1.90(211. m). 1,80 až 1.50 (311, m).

Hmotnostní spektrum: 241 [M ] (3) 4-Methansulfonyloxy-l (4 N methylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)piperidin

Do roztoku l-(4-N-methyIkarbamoyl 1,3 thiazol--2-yl)-4-hydroxypi per idinu (1.143 g.

4,74 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 16(2)) v melhylenchloridu (35 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,44 ml, 5,63 mmol) a triethylamin (0,86 ml. 5,68 mmol) v ledové lázní. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut hýla směs míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol do reakční směsi v ledové lázni a výsledná smčs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý; filtrována a koncentrována za sníženého tlaku, Do zbytku byl přidán ethylacetát a směs byla filtrována za vzniku 4-methansulfonyloxy-l-(4-N-methylkarbamoy'l-l,3-thiazol-2 yjpiperidinu (1,438 g.

výtěžek 95%) jako světle žluté pevné látky.

- 223 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 7.38 (IH, s). 7.14 (IH, br s), 5,06 až 4,93 (1H. m). 3,74 (2H. ddd, J=13.2, 7.5. 4,2 Hz), 3,48 (2H, ddd. J-13,2, 7,2, 4,2 Hz), 3.07 (3H. s), 2,97 (3H. d.

J=5,l Hz). 2.20 až 1.90 (4H, m).

Hmotnostní spektrum (FAB’): 320 [M+H] (4) 4-Acet>lthio-H4-N-methylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)piperidin

Do roztoku 4 methansulfonyloxy-l-(4-N-methy Ikarbamoy l-l ,3 thiazol-2-yljpiperidinu (1,438 g, 4,50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 16(3)) v dimethyl10 formamidu (72 ml) byl přidán thioacetát draselný (l,03g, 9,00 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 2,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. i> Získaný zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: n-hexanu (10: 1) -» ethylacetátu jako eluentu za vzniku 4-acetylthio-l-(4-N-methylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)piperidinu (1,22 g. výtěžek 91%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 Mllz,CDC13) δ (ppm) 7.38 (IH.s), 7,15(114, br s), 3,82 (211, dt, J-l2,7, 4,8 Hz), 3.78 až 3.63 (IH, m), 3,30 (2H, ddd, J-12,7, 11,1.4.7 Hz). 2,95 (3H, d. J=6.4 Hz), 2,35 (3H, s),

2,15 až 1,95 (211, m), t ,85 až 1.38 (2Π. m).

Hmotnostní spektrum (ΓΑΒ ): 300 [M+H]

Referenční příklad 17

4-Acetylthio-]-(4-N,N-dimetliylkarbamoyl 1,3 thiazol-2-vl)azetidin

(1) 4-/m--Buty Idimethy Isi ly loxy-l-(4-N,N dimethy Ikarbamoy 1-1,3-thiazol-2-yl)piperidin so Do roztoku 4-tere buty Idimethy lsi ly loxy-1 -(4 karboxyl 1,3-th iazol-2-y Dpiperidiini (0.98 g. 2,86 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 14(2)) v dimethylformamidu (30 ml) byl přidán karbony Idiimidazol (559 mg, 3,45 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a reakční smčs byla míchána v olejové lázni (50 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakee. 50% vodný roztok dimethylaminu (100 ml) byl přidán a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut.

Následně byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodný roztok. Získaná organická vrstva byla promyla nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na

4o silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 : 3) jako eluentu to 4-terc butyldimcthylsilyloxy-l-(4-N,N-dimethylkarbamoyl-1,3-thiazol-2-yljpiperidinu (440 mg. celkové množství 995 mg, výtěžek 94%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 MHz. CDCI3) δ (ppm) 7.04 (IH. s). 4,05 až 3.95 (IH, m), 3.67 (2H. ddd. .1=12.6. 8.4.4.3 Hz). 3.41 (2H. ddd. J= 12.6. 7.0. 4.3. Hz). 3.26 (3H. br s), 3.07 (3H, br s). 1.92 až

1.75 (2H. ni), 1,72 až 1.50 (2H, m). 0.90 <911, s). 0.08 <6H, s).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 370 [M+H] (2) I-(4-N,N-Dimethy Ikarbamoy I-1,3-thiazol -2-yl)-4-hydroxypiperidtn

-224 CZ 300137 B6

Do roztoku 4 -terč-butyd i Imethylsi ly loxy I {4 N.N-dimethylkarbanio\ Dl. 3-th iazol-2 -yl)piperidinu (2.13 g, 5.76 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 17(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (85 ml) byla přidána kyselina octová (1,65 ml, 28.8 mmol) a roztok

1.0M tetra-nbiitylamoniumfluoridu \ tetrahydrofuranu (28.8 ml, 28,8 mmol) v ledové lázni a smčs byla míchána v olejové lázni (50 °C) 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku l-(4-N.N-dirnethylkarbamoyl-l,3-thiazol-2-ylM-hydroxypiperídinu (1,47 g, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

io 'll-NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 7,07 (IH, s), 4,03 až 3.89 (1 H. m), 3.83(211, ddd, J-12.0. 5.0 Hz), 3,35 až 3.20 (5H. m), 3,08 (3H. br s). 2.05 až 1.90 (2H. m), 1,90 až 1.55 (3H. m). Hmotnostní spektrum: 255 [M ] (3) l-( 4-N,N-Dimethy Ikarbamoy l-l.3-thiazol-2-yD-4-methansulfonyloxypipendin

Do roztoku I -(4-N ,N-d irnethy! karbamoyl- 1,3-th iazo l-2-yl)-4 hydroxypiperidinu (1,47 g,

5,76 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 17(2)) v methylenchloridu (60ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0.82ml. 10,6 mmol) a triethylamin (1,48 ml, 10.6 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličilanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylaceetat : methanol (10 : 1) jako eluentu za vzniku 1 {4-N.N-dimcthylkarbamoyl1,3—thiazol—2- yl) 4-mclhansulfonyloxypiperidinu (1,38 g. výtěžek 72%) jako světle žluté pevné látky.

^lH NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 7,12 (IH. s). 5,05 až 4,90 (IH. m). 3.85 až 3,65 (211, ni). 3,60 až 3,40 (211. m). 3,23 (3H. br s). 3.08 (611, br s), 2.20 až 1,90 (4H, m).

3o Hmotnostní spektrum (FAB ); 334 [M+H]' (4) 4-Acetylthio-1-(4-N.N-dímethyIkarbamoy 1-1.3-thiazol-2-yl)píperidín

Do roztoku I-(4-N,N-d i methy Ikarbamoy I-1,3 lhiazol-2-yl)-4-methansu Ifony loxy piperidi nu (1,33 g. 3,99 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 17(3)) v dimethylformamidu (66 ml) byl přidán thioacetát draselný (940 mg. 8,23 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 3,0 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran •to hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : n-hexanu (5:1 -> 7:1) jako eluentu za vzniku 4—acetylthio 1 (4-N,N-dimethylkarbamoyl-l .3-thiazol-2-yl)piperidinu (629 mg. výtěžek 50%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 7.07 (IH, s), 3,90 až 3,78 (311, m), 3,75 až 3,60 (2H. m).

3,40 až 3,15 (5H. rn), 3.08 (3H, brs), 2,32(311, s), 2,12 až 1.98 (2H.m). 1,82 až 1,60.(211, m).

Hmotnostní spektrum (FAB ): 314 [M+H]'

Referenční příklad 18 {3S)-3-Acetylthio-1 -(4 karbamoyl -1,3 thiazol-2-yl)pyrrolidin

- 225 CZ 300137 B6

AcS//,,.

CONH₂ (1) [(3R)-3 Hydroxypyrrolidin-l-karbothioy!]karbarnová kyselina, ethylester (3R)-3-hydroxypyTrolidinhydrochlorid (15 g, 121,4 mmol) byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu ? (450 ml) a ethoxykarbonylisothiokyanát (15.7 ml) byl přidán v ledové lázni. Roztok směsi byl ohřát na teplotu místnosti za deset minut a míchán přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl rekrystalizován ze směsi ethylacetátu a n hexanu za vzniku [(3R)-3-hydroxyiii pyrrolidin-l-karbothioyl]karbamové kyseliny, ethylesteru (24.62 g, výtěžek 93%) jako žlutých krystalů.

'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ (ppm) 7,38 až 7,25 (1H. br s), 4,35 až 3,63 (511, m), 4,16(211, q, J=6.8 Hz), 2,19 až 2,05 (2H, m). 1.30 (3H. t, J=6.8 Hz).

(2) (3R)-l-(4-Ethoxykarbony 1-1,3-thiazol-2-yl)-3-hydroxvpyrrolidin

Do roztoku hydrochloridu [(3 R)-3-hy droxy pyrrol idin-l-karbothíoyl]karbamo ve kyseliny (24,6 g, 113 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 18(1)) v ethanolu (125 ml) a destilované vodě (125 ml) byl přidán hydroxid sodný (31,6 g, 789 mmol) a směs byla zahřívána pod refluxem přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs ochlazena na teplotu místnosti. Do reakční směsi byl přidán roztok 4N chlorovodíku v dioxinu v ledové lázni až pH směsi bylo 7, ethyl-2-brompyruvátu (28,4 ml, 226 mmol) a triethylamin (31,7 mi 226 mmol) byl pak přidán a reakční směs byla zahřívána pod refluxem 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhli25 čitanu sodného, Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek hyl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (1 : l —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku (3R) 1 (4-ethoxykarbonyl-1.3-thiazol-2· yl) 3 hydroxypyrrolidinu (19,26 g, výtěžek 70%) jako světle hnědé pevné látky.

so 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ (ppm) 7,39 (IH, sf 4,66 až 4.6! (IH, m), 4,36 (2H, q, J-7,3 Hz), 3,72 až 3,65 (211. m), 3,62 až 3,56 (2H, m), 2.23 až 2,15 (lil, m). 2.14 až 2,07 (IH, m). E37(3H,t. J-7,3 Hz).

(3) (3R) 3 terč Buty ldifeny Isily loxy- l-( 4-ethoxy karbony 1-1,3—thiazol—2—yl)pyrrol idin

Do roztoku (3 Rf-1 -(4-ethoxy karbony Ι—Ϊ ^3—thiazol—2—yl)—3—hydroxy pyrrol idinu (3,0 g,

12,4 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18(2)) v dimethylformamidu (90 ml) byl přidán terč-butyldifenylsilylchlorid (6,45 ml, 24,8 mmol) a imidazol (1,69 g. 24.8 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla výsledná směs míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethanol (2,59 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentro45 vána za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (4 : l —> 1 : 1) jako eluentu za vzniku (3R)-3-/e/r-butyldifenylsilyloxyl-(4-ethoxykarbonyl 1.3-thiazol-2-yl)pyrro!idinu (5,85 g, výtěžek 90%) jako světle hnědé pevné látky.

- 226 C7 300137 B6 'H-NMR (400 MHz. CDCB) δ (ppm) 7.69 až 7.60 (4H, m), 7,48 až 7,35 (6H. m). 7,39 (IH, s).

4.56 až 4.50 (IH, m), 4,12 (2H, q, J=7,3 Hz), 3,77 až 3.70 (1H, m), 3.56 až 3.46 (311. m). 2.06 až 1.90 (2H, m). 1.38 (3H. t. >7,3 Hz). 1.05 (911. s).

(4) (3ΚΕ3-/^ύ-7?ζ/Ζν7ίϋΓ6ηνΐ5ίΙγΙοχν-1-(4-1ΐ3Γ6οχνΙ-1.3-(ΜαζοΙ-2-ν1)ρνΓΓθΙίδίη

Do roztoku (3RE3-/en’-butyldifenylsilyloxy-l-(4-ethoxykarbonyl-l ,3—thiazol—2- yl)pyrrolidinu (300 mg. 0,624 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18(3)) ve směsi ethanolu (12 ml) a destilované vody (3 ml) byl přidán IN vodný rozíok hydroxidu sodného io (1.56 ml. 1,56 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce, IN vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (1.8 ml) byl přidán v ledové lázni dokud pil reakční směsi dosáhlo 4 až 5. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku za vzniku (3R)-3-/eTc i? buty Idifeny Isily loxy-1-(4-karboxy I-1.3-2-yl)py rrolidinu (305 mg, výtěžek 97%) jako bílé pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz. CDCB) δ (ppm) 7.68 až 7,60 (4H, m), 7.48 až 7,35 (6H. m). 7,40 (1 ff s).

4.57 až 4.50 {lil. m), 3,72 až 3.62 (IH, m), 3.50 až 3,36 (3H, m). 2,10 až 1,92 (2H. m), 1.05 (911. s).

(5) (3R)—3-Zere-ButyldifenyIsilyloxy-1-(4-karbamoyl-1.3 thiazol-2-yl)pyrrolidin

Do roztoku (3 RE3-/en-buty Idifeny Isi lyloxy-1-(4-karboxy l-l ,3 -2 yl)py rrolidinu (910 mg, 2,01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18(4)) v dirnethylformamidu (30 ml) byl přidán karbonyldiimidazol (652 ing, 4,02 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a reakční směs byla míchána v olejové lázni (50 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce. 28% vodný roztok amoniaku byl přidán a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut.

sa Následně byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za vzniku (3R) 3 terč butyldifcnylsilyloxy-1 -(4-N karbamoyl—>3—thiab zol-2-yljpyrrolidinu (730 mg, výtěžek 80%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 7,71 až 7,64 (4H, m). 7.48 až 7,38 (6H, m). 7,09 až 7,05 (IH, br s), 5.50 až 5.44 (IH, br s). 4.57 až 4,52 (IH. m), 3,72 až 3,66 (IH. m), 3.51 až 3,45 (1H, in), 3,45 až 3.43 (2H. m), 2.09 až 2,02 (1Π, m), 2,08 až 1,93 (1 H, m). 1,08 (9H, s).

(6) (3 RE 1 -(4-Karbamoyl -1,3-thia/ol-2-yl)-3-hy droxy pyrrol idin

Do roztoku (3 R E3-/ere-buty Id i feny Isily loxy-M4-karbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)py rrolidinu (950 mg, 2.10 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18(5)) v bezvodém tetrahydrofuranu (20 ml) byl přidán roztok KOM tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2.52 ml. 2,52 mmol) v ledové lázní. Směs byla míchána při teplotě místnosti I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetát (1 : 1) -> 10% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3R>-l-(4-karbamoy'l-l,3 thiazol-2-ylE3hydroxypyrrolidinu (428 mg, výtěžek 96%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. DMSO-d,,): δ (ppm) 7.42 až 7,36 (III, br s). 7,30 až 7.23 (IH. br s). 7,27 (III, s), 5.08 (IH, d. J=3,7 Hz). 4,42 až 4.37 (IH, m), 3.51(1 H. dd. J=11.0. 4.4 I Iz). 3.90 až 3,43 (2H. m), 3.30 až 3.27 (1H, m). 2,14 až 2,01 (lil, m), 1,99 až 1,86 (III, tn).

- 227 C7. 300137 B6 (7) (3R)-I44-Karbamoyl-1,3-thiazol· 2 yI)-3- methansul fony loxy pyrrol idin a(3R)—l—<4— kyano-1.3-thiazol-2-yl)-3-methansulfony loxy pyrrolidin

Do roztoku (3 R) I <4 karbamoy II ,3—t h ia/ol—2—yl)—3—hydroxy pv rrol id inu (290 mg,

1,36 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18(6)) suspenzovaném v methylenchloridu (9 m!) byl přidán methansul fony Ichlorid (0,684 ml, 8.85 mmol) a triethylamin (1,24 ml, 8.85mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti přes noe. Po zkontrolování doběhnutí reakce, methanol (0,33 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut, io Reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití 5% methanolu v ethylacetátu -> 10% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3 R)-l -(4-karbamoy 1-1,3—thiazol—2—yl )-3-methansul fony loxy pyrrolidinu (148 mg. výtěžek 40%) jako světle žluté pevné látky.

(3R)-1-(4-Karbamoyl-1,3-thiazol 2 -ylj-3-methansuIfonyloxypyrrolidin (a) 'H-NMR (400 MHz. CDCB): δ (ppm) 7.41 (IH, s), 7,10 až 6.98 (IH, bs), 5,60 až 5.52 (IH, br s), 5,50 až 5,40 (IH, m). 3,88 až 3.76 (2H, m). 3,65 až 3,60 (2H. m), 3,08 (3H, s), 2,50 až 2,41 (III, ni). 2,39 až 2,32 (III, ni).

2d f3R>—1 —(4—Kyano— l,3—thiazol—2—yl)—3—nicthansultbnyloxypyrrolidin (b) 'H-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7,23 (IH, s). 5,45 až 5.42 (IH, m). 3,88 až 3,76 (2H, m). 3,69 až 3,62 (211, m). 3.08 (311, s), 2,55 až 2,47 (III, ni), 2,43 až 2.32 (III. m).

(8) (3S)—3—Acety Ithio— 1 —(4—karbamoy 1—l „3—tliiazol—2—y l)pyrrolidin

Do roztoku (3 R)-l -(4-karbamoy 1—1,3—thiazol—2—yl)—3—methansul fony loxy pyrrol idinu (190 mg. 0.652 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18(7)) v acetonitrilu (6 ml) byl přidán thioacetátu draselný (223 mg. 1,96 mmol) při teplot místnosti. Směs byla zahřívána pod refluxem 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethyl.m acetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyla nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : I) -> ethylacetát > 2% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3S>—3—acetyllhio—1 —<4—karbamoyl—1,3—thiazol—2—yljpyrrolidinu (135 mg, .15 výtěžek 77%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7.37 (IH. s), 7.08 až 7,02 (IH. br s). 5.50 až 5.44 (1H, br s). 4,26 až 4,12 (III, m), 3.94 (lil. dd, J=11.0, 6,6 Hz), 3,62 až 3,50 (2H, m). 3.44 (IH. dd, .1=11,0.5.1 Hz. 2.54 až2,45 (IH, rn), 2.36 (3H, s). 2.13 až2.04 (IH. m).

Referenční příklad 19 (3S)—3—Acety Ithio— l —(4—kyano— 1.3—thiazol 2-y 1 )pyrrol id in

Do roztoku (3 Rý-1 -(4-kyano-1,3-thiazol 2 -ylj-3-mcthansu Ifony loxy pyrrol idinu (300 mg,

1,10 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18(7)) v acetonitrilu (9 ml) byl přidán thioacelát draselný (376 mg. 3,30 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla zahřívána pod refluxem 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta

- 228 CZ 300137 B6 nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za vzniku n-hexan : ethylacetátu (5 ; I > 1 : 1) jako eluentu za vzniku (3S)_3—acetylthio-1—(4— kyano-1.3 thiazol-2-yl)pyrrolidinu (137 mg, výtěžek 50%) jako světle hnědé pevné látky.

S 'll-NMR (400 MHz. CDCB): 6 (ppm) 7,19 (IH, s), 4,19 až 4.12 (IH. m), 3,94 (IH, dd. J=11.0, 6,6 Hz), 3,64 až 3,53 (211. m). 3.43 (1 H. dd, J-l 1.0. 5.1 Hz). 2.55 až 2.48 (IH, m). 2.36 (311, s). 2.15 až2,06(IH.m).

io Referenční příklad 20 (3R)-3-Acetylthio-1 --(4 karbamoy 1-1,3—thiazol—2—yl)pyrrolídin

(1) (3R)-]-(4-Ethoxykarbonyl-l ,3-thiazol-2-yl)-3-nnethansulfonyloxypyrrolidin

Do roztoku (3R)-l-(4-ethoxykarbony 1—1,3—thiazol—2—yl)—3-hydroxypyrrolidinu (970 mg,

4,00 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 18(2)) v methylenchloridu (30ml) byl přidán mcthansulfonylchlorid (1,24 ml, 16,0 mmol) a triethylamin (2.24 ml, 16,0 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethanol

2(i (0,81 ml) byl pak přidán a výsledná smčs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (4 : 1 —► l : 1) jako eluentu za vzniku (3R)-]-(4-ethoxykarbonyl-l,3-thíazol-2-yl>3-methansulfonylo\ypyrrolidinu (1,00 g, výtěžek 78%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB) Ó (ppm) 7,43 (111. s). 5.44 až 5,41 (IH, m), 4,36(211, q. J-7.0 Hz), 3.92 (HI, dd, J-12.5. 1,5 Hz). 3,85 (IH, dd, J-l 2,5, 3,7 Hz), 3,72 až 3,65 (2H, m), 3,06 (3H, s), 2.52 až 2.46 (1H, m), 2,40 až 2,3 1(111, m), 1,38 (3H, t, J=7.0 Hz).

(2) (3S)-3-Acetyl-l-(4-ethoxykarbonyl-1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin

Do roztoku (3R)-l-(4-ethoxykarbonyl 1,3—thiazol—2—yI)—3—methansulfonyloxypyrrolidinu (1,0 g. 3,12 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20(1)) v dimethylformamidu (30 ml) byl přidán thioacetát draselný (919 mg, 9,36 mmol) při teplotě místnosti. Smčs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 5,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za

4o sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (3 : 1 —> I : 1) jako eluentu za vzniku (3S)—3—acetyI—l—(4—ethoxykarbonyl—l,3th iazoi 2 y 1 Jpyrrolidinu (877 mg, výtěžek 99%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 7,41 (IH. s). 5.45 až 5,41 (IH. in), 4.36 (2H, q, J-7,3 liz), 3,44 (1 H, dd, J=l 1.7. 5,1 Hz). 3,70 až 3.6c (3H, m), 2,35 až 2,17 (211, m). 2,05 (3H, s). 1,38 (3H.

t. 7.3 Hz).

(3) (3 S)— l -(4-fthoxykarbony 1-1.3 thiazol-2-y l)-3-hydroxypyrrol idin

- 229 CZ. 300137 B6

Do roztoku (3S)-3-acctyl-l-(4-ethoxykarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)pynOlidinu (5.0 g.

17,6 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20(2)) v ethanolu (150 ml) byl přidán ethoxid sodný (60 mg, 0,879 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána přes noc za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán roztok 4N chlorovodíku v 1,4 dioxanu (0,22 ml) po neutralizaci směsi. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografíeky na silíkagelové koloně za použití toluen : acetonitrolu (1:1 > 1 : 2) jako eluentu za vzniku (3S)-l-(4-ethoxykarbonylto 1.3 thiazoi-2-yl)-3-hydroxypyrrolidinu (4.16 g, výtěžek 98 %) jako bílé pevné látky.

¹ H-NMR (400 MHz. CDCB) δ (ppm) 7.39 (IH. s). 4,67 až 4.61 (IH. m), 4.36 (211. q. J'7,3 1 lz). 3,72 až 3,56 (4H, m). 2.24 až 2,07 (211, m). 1.37 (311, t, J~7.3 Hz).

(4) (3S)-3-/er< -Buty Id i feny Isi ly loxy- l-(4-ethoxy karbonyl-1,3-th iazol—2—y I) pyrrol idin

Do roztoku (3S)-1 -(4-cthoxykarbonyl-l ,3—thiazoi—2—yl)—3—hydroxypyrrolidinu (4.1 g,

16,9 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20(3)) v dimethylformamidu (120 ml) byl přidán terč butyldifenylsilylchlorid (8,8 ml, 33,8 inmol) a imidazol (2,3 g, 33,8 mmol) v ledové lázni a reakční smčs byla ohřátá na teplotu místnosti během 10 minut a míchána přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethanol (1,18 inl) byl přidán v ledové lázni a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagclovc koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (4 : 1 —> l : 1) jako eluentu za vzniku (3S)-3-/crc-butyldifenylsilyloxy-l-(4-ethoxykarbonyl -1,3 -thiazoi-2-y 1 )pyrrolidinu (7,60 g. výtěžek 94%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 7,68 až 7,61 (4H, m), 7,52 až 7,35 (6H, m), 7,37 (IH, s), 4.56 až 4.51 (IH, m), 4,36 (2H. q, .1=7,0 Hz), 3.77 až 3.69 (1H, m), 3.58 až 3.48 (311. m). 2.05 až

1.88 (211, m), 1,38 (3H, t, J=7,0 i lz), 1,05 (911, s).

(5) (3 S)-3-/erí-Blity Idifeny Isi ly loxy-1 -(4-karboxy 1-1,3-th iazol-2-yl)pyrrol idin

Do roztoku (3S)-3-/err buty Idifeny Isi ly loxy- l-(4-ct hoxy karbony 1-1,3-th iazol-2-yl)55 pyrrolidinu (5,0 g, 10,4 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20(4)) ve směsi ethanolu (200 ml) a destilované vody (50 inl) byl přidán IN vodný roztok hydroxidu sodného (26.0 ml, 26,0 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 7,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, IN vodný roztok kyseliny chlorovodíkové byl přidán v ledové lázni dokud pil reakční směsi dosáhlo 4 až 5. Reakční směs byla rozdělena mezi

4o ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku za vzniku (3S)-3-Zcrí·butyldifenylsilyloxy 1-(4-karboxy 1-1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidinu (4.71 g, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDCB) 6 (ppm) 7,70 až 7,52 (41-1, m), 7,52 až 7,25 (6H, in), 7,40 (IH, s),

4.57 až 4,40 (IH. m). 3,68 až 3,55 (IH. m). 3,48 až 3,24 (3H, in), 2.04 až 1.86 (211. m), 1.07 (9H,s).

(6) (3S)-3-7í7t Butyldifenvlsilyloxy 1 (4-karbamoyl-1,3-th iazol 2 yjpyrrolidin

5(i Do roztoku (3S)-3-terc butyldifenylsi ly loxy-1 -(4-karboxyl- K3—thiazoi—2—yl )pyrrolidinu (4.7 g. 10.4 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20(5)) v dimethylformamidu (140 ml) byl přidán karbony Id i imidazol (3,37 g, 20,8 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a reakční směs byla míchána v olejové lázni (50 °C) 3,5 hodinv. Po zkontrolování

- 230 CZ 300137 B6 doběhnutí reakce, 28% vodný roztok amoniaku byl přidán a reakění směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Reakění směs byla rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (4:1 -> 2 : l) jako eluentu za vzniku (3S)-3-terc butyldifenylsilyloxy-l-(4-N-karbamoyl-1,3 -thiazol-2-vl)pyrrolidinu (3,14 g, výtěžek 67%)jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 7,68 až 7,62 (4H, m). 7.48 až 7,36 (6H. ni). 7.34 (IH. s), io 7,08 až 7.05 (1H, br s). 5,49 až 5,44 (1H, br s), 4,57 až 4.51 (lil, m), 2,10 až 1,93 (2H. m). 1,06 (9H, s).

(7) {3 S)—l-(4-Karbamoy l— 1,3—thiazol—2—yl)—3—hydroxy pyrrol idin

Do roztoku (3S)—3—buty Idifenylsi lyloxy— 1 —(4—karbamoyl— l ,3—th iazol—2—yljpyrrol idinu (3,1 g, 6,86 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20(6)) v bezvodém tetrahydrofuranu (90 ml) byl přidán roztok Ι.0Μ tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (8,24 ml, 8,24 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát -a 10% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3S)M =(4-karbamoyl-1.3-thiazol 2-yl)-3-hydroxypyrrolidinu (1.42 g, výtěžek 98%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 MHz. DMSO-dd δ (ppm) 7,43 až 7,36 (lil, br s). 7.74 až 7.22 (IH, br s). 7,27 {1H, s), 5.09 (1II, d. J~3,7 Ilz). 4,44 až 4,38 (1H. m), 3,51 (1H, dd, J-1 1,0. 4.4 Hz). 3.49 až 3.42 (2H, m). 3.33 až 3,2$ (1H, m), 2,15 až 2,02 (1H, m), 1,97 až 1,89 (111, m).

(8) (3S) 1 (4-Karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)-3-methansulfonytkoxypyrrolidín

Do roztoku (3S) I (4 ·karbamoyl-1,3—thiazol—2—yl)—3—hydroxypyrrolídinu (1.42 g, 6,66 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20(7)) suspenzovaném ve směsí mcthylenchloridu (40 ml) a pyridinu (9 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (2,58 ml. 33,3 mmol) a tríethylamin (4,67 ml. 3.33 mmol) v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití 5% methanolu v ethylacetátu -> 10% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3S)-l-(4-karbamoyl 1,3-thiazol-2-yl)—3-methansu Ifony loxypyrrol idinu (1.15 g. výtěžek 60%) jako světle žlutě pevné látky.

ni 'll-NMR (400 MHz, CDCB) δ (ppm) 7.41 (1H. s). 7,08 až 7,02 {IH, s), 5,57 až 5.46 (111. br s), 5,45 až 5,43 (IH, m), 3,86 (IH, dd, J= 12.5 liz), 3,80 (IH, dd, J=I2.5, 4,4 Hz), 3.68 až 3,60 (2H, rn), 3,08 (311, s), 2,52 až 2,40 (1H, m). 2,39 až 2,31 (1H, m).

(9) (3R)-3-Acetvlthio-l-(4-karbamoyl-l,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin

Do roztoku (3 S)- 10 karbamovl i.3 tlnazoi 2 yl) Smethansij Ifony loxy pyrrol idinu (1,15 g) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 20(7)) v acetonitrilu (35 ml) byl přidán thioaeetát draselný (1,35 g, 1 1,8 mmol) při teplotě místnosti a směs byla zahřívána pod refluxem 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát

-231 CZ 300137 B6 > 2% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3R)—3—acetyl thio—1 (4-karbarnovl-1.3th iazol-2-y Ijpyrrol idinu (962 mg. výtěžek 90%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDC13) δ (ppm) 7.37 (111. s). 7.13 až 6.99 (IH. br s). 5,59 až 5,45 (IH, br s), 4,19 až 4,09 (111, m), 3,94 (IH, mdd, J-11.0, 6,6 Hz), 3.61 až 3.50 (2H, m). 3.44 (IH. dd, J=11.0, 5,1 Hz), 2.54 až 2,45 (1H, m). 2,37 (3H. s), 2,14 až 2,05 (1H, m).

Referenční příklad 21 io 3-Acety lthio- l-(4-N-methy Ikarbamoy 1-1,3—thiazol—2—y Ijazetidin

CONHMe

(1) l-Karbamoyl-3-hydroxyazetidin

Roztok N- benzhydryl-3-hydroxya/etidinu (5,36 g, 22,4 mmol) v methanolu (250 ml) byl i? katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% hydroxidu palladia (5,36 g) a vodní lázně (50 °C) při tlaku vodíku 1 atmosféra. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs filtrována aby sc odstranil katalyzátor. Filtrát byl koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a destilovanou vodu, Organická vrstva byla extrahována destilovanou vodou. Získaná vodná vrstva byla koncentrována za sníženého tlaku za vzniku tmavěčerveného olejového produktu. Následně byl produkt sušen za sníženého tlaku a rozpuštěn ve směsi kyseliny octové (10 ml) a destilované vody (20 ml), vodný roztok (20 ml) kyanidu sodného (2,91 g) byl pak přidán při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenehloridu : methanol (5: I) jako eluentu za vzniku l-karbamoyl-3-hydroxyazetidinu jako bezbarvého oleje.

'H NMR (400 MHz. CDCI3) δ (ppm) 4,54 až 4.50 (IH, m), 4.16 až 4.12 (211, m). 3,74 (2H. dd. .1=4,4, 9,7 Hz).

(2) 3 terč Buty ldifeny Isily loxy-1-karbamoylazctidin w

Do roztoku l-karbamoyl-3-hydroxyazetidinu (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21(1)) v dimethylformamidu (100 ml) byl přidán terč-buty ldifeny Isily Ichlorid (18,0 ml, 66,9 mmol) a imidazol (4,55 g, 66,9 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla výsledná směs míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnuli reakce, ethanol (1 ml) byl přidán do reakční směsi v ledově lázni a výsledná smčs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut, Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : jo methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku 3-/m.-buty ldifeny Isily loxy-l-karbamoylazet idinu (1.45 g, celkový výtěžek 18%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCI3) δ (ppm) 7,60 (4H, d, J=8.1 Hz), 7,46 až 7,36 (6H, m). 4.59 až 4,54 (1H, m). 4,26 (2H, br s), 3,96 (211. t, .1=8,8 Hz), 3.91 (2H, dd, ,1=5,1. 8,8 Hz). 1.06 (911. s).

(3) 3-/e/r-Butyldifenylsilyloxy-l -(4-elhoxykarbonyl-l,3-oxazol 2-yljazetidin

Do roztoku 3-/<w-buty ldifeny Isily loxy-l-karbamoylazet idinu (3,47 g. 9,79 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21(2)) v tetrahydrofuranu (170 ml) byl přidán hydrogen- Já.

CZ 300137 Bó uhličitan sodný (4,11 g, 48,95 mmol) a ethyl-2-bromopyruvát (2.5 ml. 19.58 mmol) a reakční směs byla zahřívána pod refluxem 8 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (5 : 1) jako eluentu za vzniku 3- -terč bu ty Idi feny Isily loxy-l-(4-ethoxy karbony l-l.3-oxazo©2-y Ijazetidinu (2,96 g. výtěžek 45%) jako bité pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCH) δ (ppm) 7.76 (IH, s). 7,60 (4H. d. >7.8 Hz), 7,46 až 7,37 (611, m). io 4,71 až 4,67 (1H, m). 4,34 (2H, q, >6.8 Hz), 4,14 (2H, t, >8,8 Hz), 4,09 (21 i, dd, >5.9, 9,8 Hz),

1,34 (3H. t. >6,8 Hz), 1,05 (91 ks).

(4) 3-/m-Buty Idifeny Isily loxy-l©4-N-methylkarbamoy 1-4,3-oxazol-2-y Ijazetídin

Do roztoku 3-terc butyldifcnyIsilyloxy— l —<4—ethoxykarbonyl—>3—oxazol—2—yIjazetidinu (325 mg, 0.72 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21(3)) v benzenu (7 ml) byl přidán roztok 0.67M methylaminu-trimelhylhliníku v benzenu (2.7 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (20 ml) byl přidán do reakční směsi

2d v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 3-terc butyldifenylsilyloxy 1 (4- N-methy Ikarbamoyl-l ,3-oxazol-2yljazetidinu (236 mg. výtěžek 75%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCIS): fí (ppm) 7,72 (IH, s), 7.61 (411. d. >7.8 Hz). 7,47 až 7,38 (6H, m). 6.88 (IH, brs). 4,74 až 4.68 (lil. m). 4.10 (2H. t. >8.7 Hz). 4,04 (2H. dd, >5,6, 8,8 Hz), 2,92 (3H,d, >5,0 Hz), 1,06 (9H.s).

(5) l-{4-N-MethyIkarbamoyl -1,3- oxazol-2-yIjazetídin

Do roztoku 3-/tr<.'-buly Idifeny Isily loxy-l-(4-N-niethylkarbamoy 1-1.3 oxazol-2- yljazetidinu (662 mg, 1,52 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21(4)) v tetrahydrofuranu (33 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-blitylamoniufluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ml,

1.5 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: mcthanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku l©4-Nmethylkarbamoyi-l,3-oxazol-2-yIjazetidinu (210 mg, výtěžek 70%) jako bílé pevné látky.

ai 'H-NMR (400 M liz, CDCH): fí (ppm) 7,83 (lil, s), 4,86 až 4.66 (111. m). 4.33 (2H, dd, .1-6,6. 8.1 Hz), 3,93 (2H, dd, >5,1,8.8 Hz), 2.85 (3H, s).

(6) 1 (4 N-Methylkarbamoyl-1.3-oxazol-2-yl)-3-methansuIfonvloxyazetidin

Do roztoku l-(4-N-methyikarbamoyl-l ,3-oxazol-2-yIjazetidinu (209 mg, 1,06 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21(5)) ve směsí methylenchloridu (5 ml) a pyridinu (15 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,41 ml, 5,30 mmol) a triethylamin (0,74 ml, 5,30 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, methanol (I ml) byl přidán a reakční směs byla míchána pří teplotě místnosti 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10:1) jako eluentu za vzniku

CZ 300137 Bó ]-{4-N-methy lkarbamoy I-1,3—oxazol—2—yl)—3—methansul fony loxyazetidinu (253 mg, výtěžek

86%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDC13): δ (ppm) 7,78 (IH, s), 6,80 (IH, brs), 5,41 až 5,35 (IH. m), 4,48 (211, dd.J=6,6, 10,3 Hz). 4.30 (2H, dd. JMA 10,3 Hz). 3,10 (3H. s). 2,94 (3Π. d. J=5.1 Hz).

(7) 3-Aeety lt h io-1-{4-N-niethy lkarbamoy l-l,3 oxazol-2-yl Jazetidin

Do roztoku 1 -(4-N-mctliylkarbanioyl-l .3-oxazol-2-yl)-3-methansii Ifony loxy azetid inu (252 mg. 0,92 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21(6)) v dimethyIformío amidu (12 ml) byl přidán thiacctát draselný (0,63 g. 5.52 mmol) při teplotě místnosti. Smés byla míchána v olejové lázni (80 °C) 8 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3 acetylíhio-I-(4-Nmethy lkarbamoy I—1,3—oxazol—2—yljazetid i nu (136 mg, výtěžek 58%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCB): δ (ppm) 7.75 (IH. s). 6,79 (IH, brs), 4,55 (2H. t, .1=8,4 Hz), 4,43 až4.37 (IH. m). 4,02 (2H, dd. J=5.8, 8,9 Hz), 2,94 (3H, d, .1=5,1 Hz). 2,36 (311, s).

Referenční příklad 22

- Aeety I th i o-1-(4-N-karbamoyl 1.3 oxazol -2 -yl Jazetidin

(1) 3-terc Buly Idi feny Isily loxy-1 -(4-karbamoyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidin

Do roztoku 3 ferc buty Idifeny Isilv loxy- l-(4-ethoxy karbony l-l ,3-oxazol-2-yl)azetidiini (1,70 g, 3,77 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21(3)) v benzenu (38 ml) byl přidán roztok 0.67M rnethylaminu-trimethylhliníku v benzenu (13,7 ml) pří teplotě místnosti so pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána ve vodní lázni (50 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodné35 ho, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethyleetátu jako eluentu za vzniku 3-/ť/r-butyldifenylsilyloxy-l-(4-karbamoyl-1,3- oxazol 2 yljazetidinu (0,83 g, výtěžek 52%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCB): δ (ppm) 7.75 (IH, s), 7,61 (411, d, J=6.7 Hz). 7,47 až 7.36 (ÓH,

m), 6,72 (IH, brs). 5,69 (IH. brs). 4,74 až 4.69 (IH, m), 4,12 (2H. í, J=6,7 Hz), 4,05 (211, dd,

J=5,0, 7,8 Hz), 1.06 (9H,s).

(2) 1 -(4 Karbamoyl 1,3-oxazol 2-yl)-3—hydroxyazctidin

Do roztoku 3—/erc—buty Idifeny Isily loxy— 1 -(4-karbamoyl 1,3-oxazol-2-yl)azetidinu (1,30 g.

3,08 mmol) v tetrahydrofuranu (60 ml) byl přidán roztok l,0M tetra n butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (3.1 ml) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn

- 234 CZ 300137 B6 chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylcetát: methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku 1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol 2 yl)- 3-hydroxyazetidinu (0.43 g. výtěžek 75%) jako bílé pevné látky, 'H-NMR (400 M Hz. CDCIj): δ (ppm) 7.87 (III, s). 4.70 až 4,65 (IH. m). 4,34 (2H. dd. .1=6.6.

9.5 Hz), 3.94 (211. dd, J=5,5. 9,5 Hz),.

(3) l-(4-Karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-methansulfony loxyazet idin

Do roztoku l-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-vl)-3-hydroxyazetídinu (423 mg. 2.31 mmol) io získané podle popisu v referenčním příkladu 22(2)) ve směsi methylenchloridu (10 ml) a pyridinu (30 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,90 ml. 11,55 mmol) a triethylamin (1.60 ml.

11,55 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána pří teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, methanol (1 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10 : I) jako eluentu za vzniku (1 4- karbamoyl-1.3--oxazol-2-yl)-3-incthansulfonyloxyazetidinu (470 mg, výtěžek 78%) jako bíle pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCI3): δ (ppm) 7.91 (IH. s). 5.45 až 5,42 (IH, m), 4,51 (211, dd. J=6.6,

9,5 Hz). 4.28 (211, dd, J=4,4. 9,5 1 Iz), 3,16 (311, s).

(4) 3-Acctyltbio-l-(4“karbamoyl”l ,3-oxazol-2-ylJazetidin

Do roztoku l-(4-karbamoyl-l ,3-oxazol-2-yl)-3-met hansu liony loxy azetidinu (4 69mg,

1,80 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 22(3)) v dimethylformamidu (23 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.23 g, 10.8 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 8 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi cthylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-]-(4-karbamoyl-Í.3-oxazol-2-yIjazetidinu (275 mg, výtěžek 63%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz. CDCI3): δ (ppm) 7.79 (IH, s), 6,69 (IH, brs), 5.60 (IH, brs). 4.56 (2H. I. J=8,8 Hz), 4,44 až 4,37 (1H. m), 4,03 (211. dd. J-5.1, 8,8 Hz), 2,36 (3H, s).

Referenční příklad 23

Aeetylthio-l -(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl Jazetidin

(1) 3-terc--butydiIfenylsilyloxy— 1 —(4-kyano- 1,3 oxazol-2-ylJazetidin

Do roztoku 3-terc- butyldifenylsilyloxy-l-(4-ethoxykarbonyl-l ,3 oxazol-2-yl Jazetidinu (357 g. 0.79 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 21(3)) v benzenu (8 ml) byl přidán roztok 0,67M methylaminu—trimethylhliníku v benzenu (2,8 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána ve vodní lázni (60 °C) 7 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (10 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná smčs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční smčs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným

- 235 CZ 300137 B6 vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. sušena pres bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan ; ethylacetátu (5:1) jako eluentu za vzniku 3-k-rc-bu ty ld ifeny lsily loxy-1 —(4—ky ano-1,3-oxazol-2-yl)azetidinu (130 mg, s výtěže k 41 %) j a ko bezba rvé h o o I ej e.

'H-NMR (400 M Hz, CDC13): 6 (ppm) 7,66 (IH. s), 7,60 (411. d. J8,l Hz), 7.48 až 7.38 <6H, m). 4.73 až 4,70 (1H. m), 4,14 (211. dd, J-6,6, 8,8 Hz), 4,08 (2H. dd. J=5.1.9.5 Hz), i .06 (9H, s).

(2) 1 -(4-Kyano -1.3-oxazol-2-ylj3-hydroxyzetidin

Do roztoku 3—/erc—butyld i feny lsily loxy- 1 —(4—ky ano-1,3-oxazol-2-yl)azet idin (0,61 g.

1,51 mmol) (získaného popisu v referenčním příkladu 23(1)) v tetrahydrofuranu (30 I) byl přidán roztok 1.0M tetra-n-butylamonioumfluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ml) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku lj 4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazettdinu (0,21 g, výtěžek 86%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDC13): δ (ppm) 7,70 (IH. s). 4,83 až 4,81 (1H, m). 4,40 (2H, dd. J-6.6, 9,5 I Iz). 4.06 (2H, dd. J=4.4, 8,8 Hz). 2,26 (IH, d, J-5,9 Hz).

(3) l-(4-Kyano-l,3-oxazol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku l-(4-kyano-1 ,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetid inu (214 mg. 1.30 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 23(2)) ve směsí methylenchloridu (10 ml) a pyridinu (5 ml) by přidán methansulfonylchlorid (0.50 ml. 6,50 mmol) a triethylamin (0.90 ml, 6,50 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla výsledná směs míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, methanol (1 ml) byl přidán v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na so silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1 -(4-kyano-l ,3-oxazol-2yl)-3-meihansulíonyloxyazetidinu (310 mg, výtěžek 98%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDC13): δ (ppm) 7,76 (IH, s), 5,42 až 5,36 (IH. m), 4,53 (2H, dd, .1=6,6, 11,0 Hz), 4,34 (2H. dd, J=4,4, 11,0 Hz). 3,11 (311, s).

(4) 3-Acety Ith i o-1 -(4-kyano-1,3-oxazol-2-yl)azetidin

Do roztoku l-(4 kyano 1,3 oxazol 2 yl) 3 mcthansulfonyloxyazetidinu (309 mg, 1.27 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 23(3)) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán thioacetát draselný (0.87 g, 7.62 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs byla míchána io v olejové lázni (80 °C) 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce hýla reakční směs rozdělena mezí ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (2 : 1) jako eluentu za vzniku 3- acety lthio-1 45 (4-kyano-1.3-oxazol-2-yIjazetidinu (157 mg, výtěžek 55%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 M Hz. CDCI3): δ (ppm) 7,72 (IH, s). 4.60 (211. t. J~8,8 Hz). 4.45 až 4,38 (IH, m), 4.07 (2H, dd, J-5.9. 8.8 Hz), 2.37 (3H. s).

Referenční příklad 24

3-t-Acety Ith io—1 -(4-kyano-1,3-oxazol 2-yljazetidin

- 236 CZ 300137 B6

(1) 3-fcTr-Butyldi feny Isi lyloxy-] (4-azctidinokarbonyl-l ,3-th iazol—2- y /azetid in

Do roztoku 3-tcrc butyldifeny Isi lyloxy 1/4-cthoxykarbonyl-l ,3-thiazol-2-yl)azetidirm (! .0 g.

? 2.14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 ml) byl přidán roztok 0.67M azetidin-trimethylhliníku v benzenu (4,6 ml) pří teplotě místností pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod rcfluxem 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnuli reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla io extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehrornatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 5-terč buty Idi feny Isily loxy-1 -(4-azetid ino kar bony 1-1,3- thiazol- 2- yl )azet id i n li (0.60 g. výtěžek i? 55%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCB): δ (ppm) 7,62 (411, dd, J=8,0, 1,4 Hz). 7,51 až 7,36 <6H, m), 7.42 (lil. s), 4.80 až 4,68 (1H. tn), 4,56 (211. t. >7.7 Hz), 4,16 (211. t, J-7,7 Hz), 4.09 (2H, t, J=8,7 Hz), 4,0 (211, dd. J-8,7. 4,9 Hz), 2,28 (2H, kvintet, J7,7 Hz), 1,06 (9H. s).

co (2) 1 (4-Azetidinokarbonyl-l,3-thiazol 2 -yl)-3-hydroxyazetidin

Do roztoku 3 -terč butyldífenylsilyloxy-1 -(4 azelidinokarbonyl-l,3-thiazol 2 y/azetidinu (0,60 g. 1,18 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 24(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (25 ml) byl přidán roztok Ι.0Μ tetra-n-butylanioniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1,42 ml, 1,42 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnuti reakce byla reakční směs rozdělena mezí ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuliličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití 5% methanolu v ethylacetátu jako so eluentu za vzniku l-(4 azetidÍnokarbonyl-L3-thiazol-2-yl) 3-hydroxyazetidinu (242 mg, výtěžek 86%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCB): δ (ppm) 7.35 (IH, s). 4.86 až 4.78 (211, t, J~7,7 Hz). 4,30 (2H. dd, J=9,5, 6.6 Hz), 4,16 (211, t. >7.7 Hz), 3,93 (211, dd, J=9,5. 5,0 Hz), 2,29 (211, kvintet. J“7.7 Hz). 1,95 až 1.5 (neostrý s obsahující 111 OH skupiny).

(3) Ι/4-Azetidinokarbonyl-l ,3-thiazol-2-yI/-3-methansiilfonyloxyazclidin

Do roztoku ]/4-azetidinokarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (242 mg,

1.01 mmol) (získaného podle popisu v referenčního příkladu 24(2)) v methylenchloridu (10 ml)

4i) byl přidá methansulfonylchlorid (0,43 ml. 3.04 mmol) a triethylamin (0.24 ml. 3.04 mmol) v ledové lázni. Po smíchání směsi v ledové lázni 10 minul byla směs míchána při teplotě místnosti 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný; filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití 5% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1 -(4-azetidinokarbonyl-1,3-thiazol-2- yl)-3 hydroxyazetidinu (242 mg, výtěžek 86%) jako bílé pevné látky.

- 237 C7. 300137 Bó 'H-NMR (400 M Hz. CDCH): δ (ppm) 7,35 (1H. s). 4,86 až 4,78 (21 í. t, J=7.7 Hz), 4,30 (2H. dd, >9,5. 6.6 Hz). 4,16 (2H. t, J-7,7 Hz), 3,93 (2H, (dd. J-9.5, 5.0 Hz), 2.29 (2H, kvintet.

J-7,7 Hz). 1,95 až 1,5 (neostrý· s obsahující IH OH skupiny).

(3) ]-J4-Azetidinokarbony 1-1,3-thiazol-2-yl>>methansulfonylo\\ azetidin

Do roztoku l-(4-azetidmokarbony!-l,3~thiazol-2-yl)-3-hydro\yazetidinu (242 mg.

1,01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 24(2)) v methylenchloridu (10 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,43 ml. 3.04 mmol) a triethylamin (0.24 ml. 3,04 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotč místnosti 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a nasyceny vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do zbytku byl přidán isopropylether a výsledná směs byla filtrována za vzniku l-(4-azetidinokarbonyl-l,3-lhiazol-2-yl>3-rnethansulfonyloxyazetidinu (302 mg. výtěžek 94%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCH): δ (ppm) 7,44 (IH, s), 5.46 až 5,38 (HI. m). 4.58 (2H. t, J-7,8 Hz), 4,43 (2H, ddd, .1=9,6, 6,6, 1,0 Hz), 4,24 (III, ddd, J-9.6. 4.6. 1.0 Hz). 4.17 (2H. t. J-7,8 liz), 3,10 (3H. s). 2,30 (2H. kvintet, J=7,8 Hz).

(4) 3-Acety ithio-1 —(4—azetidinokarbonyl— 1,3—thiazol—2—yl jazetidin

Do roztoku l-(4-azetid i nokarbony 1-1,3-th iazol-2-yl)-3-methansul fony loxy azetíd inu (302 mg, 0.95 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 24(3)) v dimethylformamidu (10 ml) byl přidán thiacetát draselný (0,65 g, 5,70 mmol) při teplotč místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smés rozdělena mezi ethylaeetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličiianu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 : 1) jako eluentu za vzniku 3-acety Ithio-1 -(4-azetidÍnokarbony I- 1,3th iazol-2-yl)azet id inu (247 mg, výtěžek 87%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI3): δ (ppm) 7,40 (IH, s). 4,57 (211, t. J-7,8 Hz). 4,51 (2H, t. .1=8,4 Hz, 4,46 až 4.36 (1II, m). 4,16(211, t, J=7,8 Hz), 3,96 (2H. dd ,J=8.4, 5,3 Hz), 2,36 (3H, s), 2,29 (2H, kvintet. J-7,8 Hz).

Referenční příklad 25

3—Acety Ithio— l —(4—thiomorfolinokarbonyl— 1,3—thiazol—2—yljazetidin

AcS

N

CO-N

-terč Buly Idi feny Isily loxy->(4-thioniorfolinokarbonyl-l,3-thiazol-2-vÍ)azetidin

Do roztoku 3-řť.v‘c-buty Idifeny Isily loxy -1· (4 ethoxy karbonyl -l,3-thiazol-2-yl)azeiidinu (1,0 g, 2,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 ml) byl přidán roztok 0.67M thiomorphopline- trimethy (hliníku v benzenu (4.6 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylaeetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotč místnosti 30 minut, Reakční směs

- 238 CZ 300137 B6 byla extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla dostatečně promyla nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : elhyleetátu (1:1) jako eluentu za ? vzniku 3-/m-butyldifenylsilyloxy-H4-thiomorfolino-karbonyl-1.3- thiazol 2- yl)azetidínu (1,16 g, výtěžek 98%) jako světle hnědé pevné látky.

^!H-NMR (400 M Hz. CDC13): ó (ppm) 7.32 (4H, dd. J=7.9. 1.4 Hz), 7,54 až 7,35 (6H, m), 7,07 (III. s), 4.80 až 4.70(1(1, m), 4,10 (2H. dd. >8.8, 6,5 Hz), 4,10 až 3,86 (6H, m obsahující 2H. dd na 4.00, .1=8.8. 4.8 Hz). 2.80 až 2,55 (4H. m), 1,06 (911. s).

io (2) l-(4-Thiomorfolinokarbony-l.3 thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidin

Do roztoku 3-/í^jzc buty ldifeny lsi ly loxy-1 -(4-thiomorfolinokarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)azetidinu (1,16 g. 2,10 mmol) (získáno podle popisu v referenčním příkladu 25(1)) v bezvodém tetra15 hydro furanu (35 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,52 ml. 2.52 mmol) a reakční směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakee byla reakční smčs koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-(4-thiomorfolinokarbonyl1,3—thiazol—2-yl) 3 hydroxyazetidinu (599 mg, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 MHz, CDC43) δ (ppm) 7,09 (IH, s), 4,89 až 4,77 (111. m), 4.32 (2H. dd. >9,1. 6.7 Hz). 4,10 až 3.90 (6H, m. obsahující 211, dd na 3,96, J 9.1, 4,3 Hz), 2.80 až 2,58 (411. m), 2,50(111, brs).

(3) I-(4-Triomorfol i nokarbonyl-1,3-th iazol-2-yl) 3 methansu I fony loxyazet idin

Do roztoku I—<4—thiomofolinokarbony 1—1.3—thiazol—2—yl)-3 hydroxyazctidinu (599 g,

2.50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 25(2)) v methylenchloridu (30 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0.49 ml, 6,30 mmol) a triathylamin (0,88 ml, 6,30 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti

40 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za snižencho tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití 5% methanolu v ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-(4-thiomorfolínokarbonvl- 1,3-th iazol 235 yl)-3-methaiisulfonyloxyazetidinu (709 mg, výtěžek 93 %) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI3): δ (ppm) 7.17 (III, s), 5.46 až 5,38 (IH. m). 4.45 (2H. ddd. J=9.8, 6.7, < 1,1 I Iz). 4,26 (211, ddd, J = 9,8.4.4, 1.1 Hz), 4,08 až 3,93 (4H, m). 3.11 (311, s), 2.80 až 2,60 (4H, m).

a (4) 3- Acetylthio 1 (4 ihiomofolinokarbonyl-1,3-thiazol-2-yl)azetidin

Do roztoku l-(4 thiomofolinokarbony 1-4,3-thiazol-2-y l)-3--niethansulfony loxyazet idinu (709 g, 1,95 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 25(3)) v dimethyIformamidu (20 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,34 g, 11,7 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakee byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : n-hexanu : methylenchloridu (1:1:1) jako eluentu za vzniku 3—acetylthio—1 -(4— thiomorfolinokarbonyl 1,3-thiazol-2-yDazetidinu (413 mg, výtěžek 64%) jako světle hnědé pevně látky.

- 239 CZ 300137 B6 ^!H-NMR (400 MHz. CDCH): δ (ppm) 7.13 (1H, s), 4,53 (2H. t. >8,4 Hz), 4,48 až 4.40 (1H, m),

4.13 až 3.86 (6H, m obsahující 211, dd na 3,98, >8,4, 5.2 Hz). 2,80 až 2,60 (4H. m). 2.36 (311. s).

Referenční příklad 26

3-Acetylthio-I-(4-pyrrolidinokarbonyl- 1,3-t h iazo f-2-yl)azet idin

(1) 3-terc - Buty ldifeny Isily loxy- 1-(4-pyrrolidinokarbony 1-1,3 thiazol --2—yljazetidin io

Do roztoku 3-terc butyldifenylsi lyloxy-1 A 4-ethoxy karbony 1-1.3—thiazol 2 yljazetidinu (1,00 g. 2.14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50ml) byl přidán roztok 0.67M pyrrolidin-trimethylhliníku v benzenu (7.6 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí is reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázní a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatogra fieky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-/ere-butyIdifenylsiloxy 1 (4-pyrro-lidinokarbonyl-l ,3-th iazol—2—yl jazetidinu (775 mg, výtěžek 78 %)jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDC13): 6 (ppm) 7,70 až 7,56 (4H, m), 7,35 až 7,50 (611, m), 7,21 (IH. s), 4,80 až 4,70 (IH, m), 4,18 až 4,06 (2H. m), 4,00 (211, dd. J - 8.6 . 5.1 Hz). 3.80 (2H. t, J = 6,5

Hz), 3,60 (211. t, J = 6,5 Hz), 1.83 až 1,98 (4H.m). 1,06 (9H,s).

(2) 3-1 Iydroxy->(4-pyrro!idÍnokarbonyI-l ,3-thiazol- 2 yljazetidin

Do roztoku 3-/en -butyldifenylsilyloxy-1 —(4—pyrrolidinokarbonyl- 13 -thiazol-2-yl)azctidinu ío (775 mg, 1,58 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 26(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (30 ml) byl přidán roztok 1,OM tet ra-n-butv lamou iumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,01 ml, 2.01 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát --> ethylacetát: methanol (20 : 1) jako eluentu za vzniku 3 hydroxy 1 (4-pyrrolidinokarbonyl-l,3-thiazol-2-yl)azetidinu (290 mg, výtěžek 72 %) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDC13): δ (ppm) 7,42 (lil, s). 4.88 až 4,78 (111. m). 4.32 (211, dd. J - 9,0, 6.8 Hz), 3,95 (211, dd, J = 9,0, 4,3 Hz). 3,82 (211, t. J = Ó.5 Hz), 3,61 (211, t, J - 6.5 Hz), 2.43 (111, d. J = 6.8 Hz)m, 1,83 až 1,97 (4H, ni).

4d (3) 3-Methansulfonyloxy 1 (4 pyrrolidinokarbonyl-1,3-thiazol-2-yljazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-pyrrolidinokarbonyl-l,3·-thiazol-2-y Dazetidinu (290 mg,

1,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 26(2)) v methylenchloridu (9 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (0,30 ml, 5.12 mmol) a triethylamin (0,70 ml, 5,12 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného, Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran

-240 CZ 300137 B6 sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : ethylacetát (1 : I) -> ethy lacetátu jako eluentu za vzniku 3-methansulfbnyloxy-]-(4-pyrrolidinokarbonyl-l₁3-thíazol-2-yl)azetidinu (335 mg, výtěžek 89 %) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7,33 (IH. s), 5.48 až 5,38 (IH. m), 4,45 (2H. ddd. >10,1.6.6. 1.2 Hz), 4.26 (21 Im. ddd. J=10,1. 4.4, 1,1 Hz), 3,82 (2H. t. >6,6 Hz), 3,62 (2H, t, >6.6 Hz), 3.10 (3H. s). 2,00 až 1,83 (4H. m).

(4) 3—Acetylthio—l—(4—pyrro!idinokarbonyl— 1,3—thiazol—2—yljazetidin io

Do rozloku 3-methansulfonyloxy-l-(4-pyrrolidinokarbonyl-l,3-thiazol-2-ylJazetidin (335 mg. 1,01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 26(3)) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán thiacetát draselný (1,10 g, 8.80 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs i? rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3 -- acety hhio—1 —(4—pyrrot idinokarbonyl—1.3-thiazol 2 -yl')20 azetidinu (235 mg. výtěžek 75%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7.28 (IH. s), 4,52 (21L dd. >8,4, 8,4 Hz), 4,39 až 4,48 (1H. m), 3,98(211. dd. >8,4. 5.2 1 lz), 3,82 (2H, t ,J=6,5 Hz). 3.61 (2H, t, >6.5 Hz), 2,36(311. s), 1,98 až 1,82 (4H, m).

Referenční příklad 27

3-Acety Ithio 1 —(4—pípcridínokarbonyl— 1,3-thiazol-2 -yljazetidin

5o {1) 3 terč Buly Idi fcnylsily loxy-l-(4-piperidinokarbony l-l.3-thiazol-2-yl jazetidin

Do roztoku 3-/erc-butyldifenylsilyloxy-1 -(4-ethoxykarbonyl-1,3-thiazol-2-yl)azet idinu (1,00 g, 2,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 ml) byl přidán roztok 0.67M piperidin trimethylhliníku v benzenu (7,3 ml) při teplotě místnosti pod

5? dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 1) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakění směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyla nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným to vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku 5-terc butyldifeny!silyloxy-l-(4-piperidinokarbony1-l,3-thiazol-2-yl)azet idinu (607 mg, výtěžek 56%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7,61 (4H, dd, >6,2 Hz), 7,35 až 7,50 (6H. m), 6,95 (IH.

s), 4,78 až 4,70 (IH, m), 4.17 až 4,05 (2H, m). 4,01 (2H, dd, >8.6, 4,9 Hz), 3,64 (4H, t,

J = 5,4 Hz), 1,75 až 1.48 (6H, m), 1.06 (9H, s).

(2) 3-Hydroxv- 1 -(4-pipcridinokarbonyl-l ,3-thiazol-2 yljazetidin

-241 CZ 300137 B6

Do roztoku 3- terč butyIdifenylsilyloxy-1 -(4-piperidinokarbonyl-1,3-thiazoi-2-yl)azctidinu (607 mg. 1,20 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 27(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (25 ml) byl přidán roztok 1.0M tetra-n-butylamoniumfluoridu tetrahydrofuranu (25 ml) byl přidán roztok 1.0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1,40 ml,

1,40 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethylacetát _> methanol (9 : 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-(4-piperidiiiokarbonyl-1.3-thÍazol-2-yl)-azetidinu (310 mg. výtěžek io 97%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 6,97 (IH. s), 4,87 až 4,77 (IH, m), 4,33 (2H, ddd, >9,8, 6,6, 1,1 HZ). 3.96 (2H. dd. >9,8, 4.4 Hz), 3,57 až 3.72 (4H. t, J-5.4 Hz), 1,81 až 1,45 (6H, m).

(3) 3-Methansulfonyloxy-l-(4-piperidinokarbonyl- 1, 3-th i azo l-2-y Jazet idin

Do roztoku 3-hydrox\-l-(4-pipcridinokarbonyl-l,3-thiazol-2 yjazetidmu (310 mg,

1,16 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 27(2)) v methylenchloridu (10 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0.27 ml, 3,48 mmol) a triethy lamin (0,49 ntl. 3,48 mmol) v le2o dové lázni a směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištčn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethyleetátu jako eluentu za vzniku 3-methansul fony loxy->(425 piperidinokarbonyl-1.3-thiazoi-2-yjazetidinu (346 mg, výtěžek 86%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7,06 (IH, s), 5,37 až 5,47 (1Π, ni), 4.46 (2H, dd, J = 9,8, 6,7 Hz), 4,27 (2H, dd, >9,8, 4,3 Hz). 3,65 (411.1, >5,2 Hz), 3,10 (3H, l, >5.2 Hz), 1,78 až 1,47 (6H,m),

5(1 (4) 3-Acety Ithio— 1 —(4—piperidinokarbonyl— >3—thiazoi—2—y Jazet idin

Do roztoku 3 -methansulfonyloxy-l-(4-piperidinokarbonyl-1.3-thiazol-2 yjazetidinu (346 mg, 1,00 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 27(3)) v dimethylformamidu (15 ml) u byl přidán thioacetát draselný (687 g. 6,01 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koneentro40 vána za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3- acetyIthio-1—(4-piperidinokarbonyl—>3—thiazoi 2-yJzetidinu (276 mg, výtěžek 85%) jako světle hnědé pevné látky.

'lí-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7,02 (IH, s), 4,54 (211, dd, J ~ 8.5 Hz). 4,39 až 4,49 (IH. s), 3,99 (2H. dd, .1=8.5, 5.4 Hz), 3,65 (411.1, J = 5,4 Hz). 2,36 (3H. s), 1.90 až 1,40(611, m).

Referenční příklad 28

3-Acety Ithio-l-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-1.3-thiazol-2 y Jazet idin

-242 CZ. 300137 B6 (I) 3--terč--Butyldifenylsí lyloxy— l -J4--N--cyklopropylkarbamoy 1 1,3-thiazol-2-yl)azetidin

Do oztoku —Zďre-butyldifenylsilvloxy—l—(4- ethoxy karbony 1-1.3-thiazol-2-yl)azetidinu 1,00 g, 2,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2( 1)) v benzenu (50 ml) byl přidán roztok 0.67M cyklopropy laminu-trimethy Ihliníku v benzenu (7,20 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla jo dostatečně promvta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku 3-terč-butyldifenylsilyloxy-1 -(4-N-cyklopropyliš karbamoy 1—U3—thiazol—2—yl)azetidinu (979 mg. výtěžek 90%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7,62 až 7,62 (4H, m). 7,33 až 7,50 (6H. m), 7,36 (IH, s). 4.80 až 4,68 (IH, m), 4.18 až 4,06 (3H, m), 4,02 (211, dd, J=8,2, 5,8 Hz), 3,80 až 3,70 (IH, m).

1,06 (911, s), 0,83 (1H, t, >6,9 Hz), 0.82 (lift, >6.9 Hz), 0,70 až 0.58 (211. m).

(2) 1 -J4-N-Cyk lopropy Ikarbamoyl- 1,3-th iazoi—2—y I)—3—hy droxy azetidin

Do roztoku 3-/m-buty idifenylsilyloxy 1 -(4-N-cyklopropy Ikarbamoyl-1,3- th iazoi-2-y I )azetidinu (907 mg, 1,94 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 28(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (40 ml) byl přidán roztok 1.0M tetra-n-butylamoniufluoridu v tetrahydro25 furanu (2,30 ml, 2,30 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku.

3o Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1 -(4-N-cyklopropylkarbamoyl-1.3 thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (367 mg, výtěže, 81%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7.37 (1H, s), 7,23 (1H, s), 4,67 až 4,80 (1 H,m ), 4,32 (2H. dd. J=9.0, 6.7 Hz), 3.96 (2H, dd. .1=9.0. 4.3 Hz), 2.82 až 2,70 (IH, m), 0.84 (IH, t. >7,1 Hz),

8,03 (IH, t, >7,1 liz), 0,55 až0.70(2H.in).

(3) 1 (4 \ λklopropxIkarbamoyl-1.3 thiazol-2-ylý-3-methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku l-(4-N-eyklopropylkarbamoyl 1,3-thiazol-2-yl>-3-hydroxyazetidinu (376 rng,

1,57 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 28(2)) v methylenchloridu (10 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0.36 ml, 4,71 mmol) a triethylamin (0,66 ml, 4,71 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 1 - (4-N -eyklopropylkarbamoyl-1.3—thiazol - 2 yl)-3-methansu I fony loxyazet id inu (343 mg, výtěžek 88%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400MHz. CDCb): δ (ppm) 7.45 (IH, s), 7.18 (IH. s). 5,48 až 5,36 (IH. ni), 4.44 ί» (2H, dd, J=l0.2. 6,6 Hz). 4,26 (2H, dd. J=l0.2, 4.4 Hz). 3,11 (311, s), 2,91 až. 2.79 (111. m). 0,85 (lll. d. .1=6,9 liz). 0,84 (1H, d. J-6,9 Hz). 0,72 až 0,66 (2H, ni).

(4) 3 A cely 11 h i o-1 - (4-N -ey k lopropy I karbamoy 1-1,3-t h i azo l-2-y I )azet i d i n

-243 CZ 300137 B6

Do roztoku 1 -(4-N-cy klopropy Ikarbamoy 1-1,3-th iazo I-2-yl )-3-met hansu I fony loxyazetidin u (433 mg, 1.31 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 28(3)) v dirnethylformamidu (20 ml) byl přidán thioacetát draselný (895 mg, 7.84 mmol) při teplotě místností. Smčs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečné promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití in hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-aeelylthio-1%4-N-cyklopropy Ikarbamoy 11,3-thiazol-2-yljazetidinu (343 mg. výtěžek 88%) jako světle hnědé pevné látky.

^]H-NMR (400 MHz, CDCI3): δ (ppm) 7.14 (IH. s), 7,20 (111. br s). 4,52 (2H, t. J-8.6 Hz). 4,49 až 4.38 (1H. m), 3,98 (211, dd, J=8,6, 5.9 Hz), 3,98 (211, dd, J =8.6. 5,9 Hz). 2,90 až 2.82 (1H. m), 2,36 (3H, s). 0,84 (1H, t, 7,0 Hz), 0,83 (111.1. J=7,0 Hz), 0,70 až 0,56 (2H, m).

Referenční příklad 29

3—Acctylthio— l —(4—N—cyklobutylkarbarnoy 1—1.3—thiazol—2—yljazetidin

(1) 3 terč Butyldifenylsilyloxy- 1 (4-N-cyklobutylkarbamoyl 1,3-th iazol-2-y Ijazetidin

Do roztoku 3-/ezr-butyld tfeny isilyloxy -l-(4-N-ethoxykarbonyl 1,3-thiazol-2-yljazetidinu (1,00 g, 2.14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (50 1) byl přidán roztok 0,67M cyklobutylaminu- trimelhyíhliníku v benzenu (7,30 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Smčs byla zahřívána pod refluxem 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická so vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-/crc-butyldifenylsilyloxy-l-(4N-cyklobutylkarbamovf-],3-thiazol-2-yl)azetidinu (965 mg, výtěžek 87%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDC13): δ (ppm) 7.62 (411, d. J=8.0 Hz), 7.28 až 7,39 <6H. mn). 7.34 (IH.s), 4.70 až4.80 (IH, m). 4.58 až 4.46 (IH, m), 4.11 (2H, dd. .1=8.8. 6.5 Hz). 4.02 (2H, dd, J=8,8.4.0 Hz). 2,35 až 2,20 (2H, m), 2,05 až 1.92 (2H. m), 1.69 až l.80(2H.m), 1.07 (911. s).

(2) l-(4-N-Cyklobuty Ikarbamoy 1-1,3-thiazol-2-yl)- 3-hydroxvazetid in

Do roztoku 3-/trc-buty ldifeny Isily loxy- l-(4-N-cyklobuty Ikarbamoy 1- 1.3-thiazol 2 yljazetidinu (966 mg, 1,86 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 29(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (40 ml) byl přidán roztok 1.0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,20 ml, 2.20 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolová45 ní doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan ; elhyl-244 CZ 300137 B6 acetátu (1 : 1) -> ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1-(4-N-cy klobutyIkarbamoy 1-1,3-thiazol2- yl)-3-liydroxyazetidinu (433 mg, výtěžek 95%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCB): δ (ppm) 7,35 (1H. s). 4.89 až 4,78 (IH, m), 4,60 až 4,45 (1H. m), 4,34 (2H. dd, >9,3, 6.7 Hz), 3,96 (211. dd. >9,3. 6,7 Hz). 2,32 až 2.48 (2H, m). 2,48 až 2,32 (IH. m), 1.72 až 1.68 (2H, m).

(3) 1 -(4-N-Cy klobuty Ikarbamoy 1-1,3-th iazo 1-2-yl )-methansu Ifony loxy azctid i n

Do roztoku l-(4-N-cyklobutyIkarbamoy 1-1,3-thiazol-2-ylf-3-hydroxyazetidin (433 mg. io 1.71 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 29(2)) v methylenchloridu (10 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,30 ml. 5,12 mmol) a triethylamin (0,70 ml. 5,12 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena is přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vznikli

I-(4--N eyklobutylkarbamoyl-1.3-thiazol-2-yl)-3-methansulfo nyloxyazetidinu (567 mg. výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 MHz. CDCB); δ (ppm) 7,43 (lil. s), 5,48 až 5,38 (IH, m), 4,60 až 4,38 (3H, m obsahující 4,47 (2H, dd, >9,6, 6.6 Hz)), 4,28 (2H, dd, >9,6, 4,6 Hz), 3.11 (3H. s). 2.48 - 2,33 (2H. m), 2,07 až 1.92 (2H, m). 1,85 až 1,68 (2H, m).

(4) 3 - A c e ty 1111 ί o-1 -(4-N-cy k I o b uty I k a r ba m oy 1 -1,3-t h i azo I—2—y 1 )a zet i d i n

Do roztoku l-(4-N cyklobutylkarbanmoy 1-1,3-thiazol-2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidinu (567 mg, 1,71 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 29(3)) v dimethylformamidu (10 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,17 g, 10,3 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla vodným so roztokem chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 3) jako eluentu za vzniku 3 acetylthio-1—('4—N—cvklobutylkarbamoyl-1,3-thiazol-2-yjazetídinu (318 mg. výtěžek

75%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 MHz, CDCB): δ (ppm) 7,33 (1H, s), 4,62 až 4,37 (4H. in obsahující 4,54 (2H. I, >8,6 Hz), 4,00 (2H. dd, >8,6, 2,55 Hz)). 2.31 až 2.48 <5H, m, obsahující 2,37 (3H. s)), 2,07 až 1,93 (2H. m), 1,84 až 1,67 (2H.m).

4o Referenční příklad 30

3— Acetylthio— 1 - [4-(4-mcthy lpi perazin-1-karbony!) 1,3 thiazol-2-yjazetidin

-245 (1) 3-/o/r-ButyIdifenylsilyloxy -I —[4—(4—niethylpiperazin— 1 -karbonyl)- 1,3-thiazol-2-yl]azetidin

Do roztoku 3-Zere-butyld i feny Isily loxy- l-(4-ethoxy karbonyl 1,3-th iazol-2-yl)azetidinu (1.00 g. 2.14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v toluenu (50 ml) byl přidán roztok 0.67M i -methylpiperazin-trimcthylhliníku v toluenu (7.40 ml) při teplote místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 I) a ethylacetát (100 ml) bvl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (10:1) jako eluentu za vzniku 3-řerc-buty Id i feny Isilyloxy-I-[4 io -{4-rnethy lpiperazin-1 -karbony IH .3- thiazol-2-yIjazetidinu (941 mg, výtěžek 85%) jako světle hnědé pevné látky.

’H NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 7,62 (4H. dd, >8,0, 1,4 Hz). 7.50 až 7.36 (6H, m). 7.08 (IH, s), 4,10 (2H, dd, J-10,3, 6,9 liz). 4.00 (2H, dd, > 10,3, 5,0 Hz)). 3,98 až 3.65 (411. m). 2.63 až 2.42 (4H. m), 2,37 (3H. m). 1.06 (9H, s).

(2) 3 Hydroxy-l-|4-(4-methylpiperazin-l-karbonyI>13--thiazol-2-yljazetidin

Do roztoku 3 -terč butyldifeny Isily loxy-1 - [4-(4-methy lpiperazin-1 karbonyl)— >3—thiazol—2— yljazctidinu (941 mg. 1.81 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 30(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (47 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butylamoniumfliioridu v tetrahydrofuranu (2,17 ml, 2.17 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce by la reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (3 : 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy— 1—[4-(4- methylpiperazin-1 - karbony I)-1,3- thiazol-2- y Ijazetidinu (422 mg, výtěžek 83%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI-,): δ (ppm) 7,01 (III, s), 4,88 až 4.80 (III, m). 4.26 (2H, dd. .1=8.6. 7.1 Hz). 3.96 (2H. dd, >8.6,4,8 Hz). 3.89 až 3,68 (411. m). 2.80 až 2.58 (4H. m). 2,31 (311, s).

(3) 3-Methansulfonyloxy->[4-(4-methylpiperazin->karbonyl)-l .3 thiazol-2-yljazetidin

Do roztoku 3-hydroxy->[4-(4-methylpiperazin-1 karbonyl >— 1,3—thiazol—2- yljazctidinu (422 mg, 1,49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 30(2)) v methy lenchloridu (21 ml) by l přidán methansulfonylehlorid (0,14 ml, 1,79 mmol) a triethylamin (0,25 ml. 1,79 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : methanolu (3 : 1) jako eluentu za vzniku 3-methansu lfony loxy -1 -[4-(4-tnethy lpiperazin-1 karbony I)-1,3 -th iazol-2-y Ijazetidinu to (537 mg, výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI-,): δ (ppm) 7,36 (IH. s), 5.47 až 5,40 (IH. m), 4,46 (2H, dd, J-10,0, 6,6 Hz), 4,27 (2H, dd, >10.0. 4,3 Hz), 3.56 až 3,47 (4H. m). 3,11 (3H, s). 2.96 až 2,86 (4H.m).2.8l(3H.s).

(4) 3—Acetylthio— 1 —[4—(4—methy lpiperazin— >karbonyl)—>3—thiazol 2 y ljazetidin

Do roztoku 3-mcthansulfonyloxy-l- [4 (4-mcthyIpiperazin-l-karbonyl) 1,3 thiazol-2-yljazetidinu (537 mg. 1,49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 26(3)) v diniethylformumidu (16 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,02 g, 8,94 mmol) při teplotě míst50 nosti. Směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a

- 246 CZ 300137 B6 koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (10:1) jako eluentu za vzniku 3-aeetv Ithio—l —[4—(4— methylpiperazin--1--karbonyl)-1,3--thiazol--2-yl]azetidinu (261 mg. výtěžek 51%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCI;,): δ (ppm) 7,15 (1II. s). 4,53 (2H. t, J-8,5 Hz), 4,48 až 4,38 (1H, m). 3.98 (2H. dd, J=8,5, 5,4 Hz), 3,96 až 3,74 (4H, m), 2,63 až 2,42 (4H, m). 3.49 (6H. s).

Referenční příklad 31 m

Aeetylthio-l-[4-(3-methoxyazetidin 1 -karbonyl)-!.3-thiazol-2-ylJazetidin

(1) \-terc Butoxykarbonyl-3-methoxyazetidin i? Roztok l-benzhydryl-3-hydroxyazetidinu (10,0 g, 41,8 mmol) v methanolu (300 ml) byl katalytický hydrogenován v přítomnosti 10% palladia (10,0 g) na aktivním uhlí při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor. K filtrátu přidán di--terč butoxykarbonový anhydrid (18,2 g. 83,6 mmol) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční ?o směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 1 —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku 1-Zm-butoxykarbonyl-3-hydroxyazetidinu (7.05 g, výtěžek 97%),

Následně, do roztoku l-/e/r-butoxykarbony 1-3-hydroxyazet idinu (2,5 g, 14,4 mmol) v dí25 methylformamidu (125 ml) byl přidán hydrid sodný (55% olejová disperze) v ledové lázni. Po mícháni směsi 10 minut v ledové lázni byla výsledná směs míchána při teplotě místnosti 30 minut. Do reakční směsi byl přidán niethyljodid (1,79 ml. 28. mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla reakční směs míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové byl přidán v ledové lázni a so reakční směs byla míchána v ledové lázni 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (2 : I) jako eluentu za vzniku 1 terč butoxykarbony 1-3-methoxyazetidinu (2,18 g. výtěžek 81%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 MHz, CDCI;): δ (ppm) 4,16 až 4,10 (III, m). 4,09 až 4,03 (2H, m), 3.82 (2H, dd. J=10,2, 4,4 Hz), 3,28 (3H, s), 1,44 (9H,s).

(2) 3-/m-Butyldifenylsilyloxy-l-[4-(3-methoxyazetidin 1 —karbonyI)— 1,3—thiazol—2—yljazetidin

Do roztoku l-/m-butoxykarbonyl-3-methoxyazetidinu (2,60 g, 13.9 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 31(1)) v 1.4 dioxanu (26 ml) by! přidán roztok 4N chlorovodíku v 1,4 dioxanu (26 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a do zbytku byl přidán ethylacetát a diisopropylether. Výsledná směs byla filtrována a zbytek byl diisopropylethercni a sušen za sníženého tlaku za vzniku 3-methoxyazctidinhydrochloridu (1.84 g, výtěžek 100%) jako bílých krystalů.

- 247CZ 300137 B6

Následně, do roztoku 3-/m-but\'ldifenylsilyloxy-l J4-ethoxykarbonyl 1,3-thiazol-2-y 1 )azetidinu (500 mg. 1.07 mmol) v toluenu (25 ml) byl přidán roztok 0.67M 3-methoxyazctidintrimetby Ihliníku v benzenu (3,21 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána ve vodní lázni (80 °C) 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (20 ml) a ethylacetát (50 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem io chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-terc-butyIdifenyIsilyloxy-l-[4-(3-methoxyazeiidin-l-karbonyl)-1.3 thiazol-2-yljazetidinu (366 mg. výtěžek 67%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl·): Ó (ppm) 7.64 až 7,60 (4H, m), 7.49 až 7,38 (611, m), 7,36 (IH, s),

4,78 až 4.70 (211. m). 4,42 až 4,36 (1H, m), 4,32 až 4.25 (1H. m), 4.24 až 4.18 (1H. m), 4,09 (211, t, J—7,3 Hz). 4,03 až 3,96 (3H, m), 3.33 (3H, s). 1.07 (911, s).

(3) 3-1 lydroxy-1 [4-(3-ínethoxyazetidin--1-karbony 1 JI,3-thiazol-2 yljazetidin

Do roztoku 3-/e/‘í'-butyldifenylsilyloxy-l-(4-(3-methoxyazctidin-l-karbonyl) 1,3—thiazol—2— yljazetidinu (870 mg, 1,71 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 31(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (45 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,06 ml, 2,06 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (9: 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-[4 (3 -incthoxyazetidin-1-karbonyI JI ,3-thiazo 1—2—yljazetidinu (481 mg, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl·,): δ (ppm) 7.38 (1H, s), 4,85 až 4,79 (IH, m), 4,75 (IH. dd. >10.3, 5.9 Hz), 4,41 (1 JI, dd, J=11.0, 2.9 Hz). 4,34 až 4,25 (3H. m), 4.22 (lil. tt. >6.6, 4.4 Hz),

5a 4,01 (IH, dd, J-10,3. 2,9 Hz). 3,93 (2H, dd. >8.8, 4,4 Hz), 3,32 (3H, s).

(4) 3-Methansulfonyloxy 1 [4-(3-methoxyazetidin I karbonyIJI,3—thiazol—2 yljazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-1-(4-(3 methoxyazetidin-1-karbonyI Jl.3-thiazol-2-ylJazetidinu (480 mg. 1.71 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 31(3)) v methylenchloridu (25 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (397 μΙ, 5,13 mmol) a triethylamin (719 μΐ, 5,13 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyla nasyceni ným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3-meth an sulfony loxy-1-(4-(3methoxy azet idin-1-karbony l)-1.3 thiazol-2-yljazetidinu (568 mg. výtěžek 96%) jako světic žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl,): δ (ppm) 7,46 (IH, s). 5,45 až 5.39 (lil, m), 4,74 (III, dd, >10,6. 6,2 Hz), 4.47 až 4,37 (3H, m), 4,33 až 4,19 (4H, m). 4.04 až 3.99 (IH. tn). 3.33 (3H, s), 3,10 (311, s).

(5) 3-Acety Ith io-l-[4J3-methoxy azetid i n-t-karbony I JI ,3-thiazol 2-yIJ azetidin

Do roztoku 3-incthansulfonyloxy-l-[4 (3 methoxyazetidin-1-karbony 1J 1.3 thiazol-2-yl]— azetidinu (560 mg, 1.61 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 31(4)) v dimethylformamidu (28 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,10 g. 9,67 mmol) při teplotě

- 248 CZ 300137 B6 místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (SOC) 4,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného.

Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný.

filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —> ethylacetát: methanolu (97 : 3) jako eluentu za vzniku 3acetylthio— 1-[4-(3-methoxy-azetidin-1 -karbonyl}-] ,3- thiazol-2-yl]azetidinu (356 mg, výtěžek 68%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI/: 6 (ppm) 7.43 (IH. s), 4,73 (111. dd. J-10,3, 5.1 Hz). 4,51 (2H. t, io 3=8.1 Hz). 4,46 až 4,37 (211, m). 4.32 až 4,26 (HI. m), 4.21 (IH, tt, .1=6,6. 4,4 Hz), 4.00 až 3.93 (2H. m), 3,78 až 3,72 (IH, m). 3.32 (311, s). 2,36 (3H, s).

Referenční příklad 32

3—Acety Ithio— 1 —(4- feny Ikarbamoy 1-1.3-th iazol 2-y/azetidin

(1) 3-terc -Butyídifenylsilyloxy-l/4/enylkarbamoyl-1.3-th iazol-2-y/azet id in

Do roztoku 3-/m-butyldifenylsilyloxy-l-(4-ethoxykarbony!-l,3-thiazol-2 yl)azelidinu (2,00 g. 4,29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2( 1)) v toluenu (100 ml) byl přidán roztok 0.67M anilin trimethylhliníku v benzenu (14,6 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod rcfluxem 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (200 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití so hexan : ethylacetátu (2 : 1) jako eluentu za vzniku 3-terc - butyldi fenylsilyloxy-1/4- fenyl— karbamoyl/,3-th iazol-2- y/azetidinu (2.20 g, výtěžek 100%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1.0: δ (ppm) 7,73 až 7,61 (6H. m), 7,51 až 7,30 (9H. m). 7,14 až 7,08 (lil, m). 4,82 až 4,76 (lil, ni). 4,14 (2H. dd, J=l5.2. 8,2 Hz), 4.06 (2H. dd. J=8,9, 4,6 liz). 1.08 (9H. s).

(2) 3 Hydroxy-l/4-fenyIkarbamoyl-l.3-thiazol-2-y/azetidin

Do roztoku 3-Zťrc-butyldifenylsilyloxy l/4-fcny Ikarbamoy 1-1,3 thiazol-2-yl)azetidinu (2,20 g. 4,29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 32(1)) v bezvodém tetra40 hydrofuranu (110 ml) byl přidán roztok 1.0M letra-n-butylamouiumfluoridu v tetrahydrofuranu (5.15 ml, 5,15 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-hydroxy 1/4-fenylkarbamoyl-1.3-tliiazol-2-y/azetidinu (1.18 g, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz. CDCI/: δ (ppm) 9,04 (IH, br s), 7,76 až 7,65 (2H, m), 7,5! až 7.37 (3H.

ni), 7,18 až 7,08 (IH. m). 4.90 až 4,80 (IH, m), 4,36 (2H, dd, .1=9,1, 6,6 Hz), 3,99 (2H, dd, .1=9,1.4.3 Hz).

- 249 C7. 300137 B6 (3) 3-Melhansulfony loxy-l-(4-feny Ikarbamoy l-l,3-thiazol-2-yJazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-fcnyIkarbamoyl-l,3-thiazol-2-yJazetidinu (1.18 g. 4.29 mmo!) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 32(2)) v methylenchloridu (60 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,50 ml, 6,44 mmol) a triethylamin (0.90 ml. 6.44 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn io chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : ethylacetát (9: 1) jako eluentu za vzniku 3 -methansulfonyloxy-l-(4-fenyIkarbamoy 1-1,3-ihiazol 2-y Jazetidinu (1.36 g, výtěžek 89%) jako světic žluté pevné látky.

'H-NMR (400 Μ 1 Iz, CDCIJ: δ (ppm) 8,98 (1H, br s), 7,68 (211. d. J=7.6 Hz), 7,55 (1H. s), 7,36 (2H, d, J=8,() Hz). 7,18 až 7,08 (1H. m), 5,50 až 5,40 (1H, m). 4.51 (211, ddd. J =9.6, 6,6. 1,0 I Iz),

4.32 (211. ddd. J=9,6, 4,3. 1,0 Hz). 3,12 (311. s).

(4) 3-AcetyIthio- 1-(4-feny Ikarbamoy 1-1.3-thíazol 2-y Jazetidin

Do roztoku 3-methansulfonyloxy 1 -(4-fenylkarbamoyl-l ,3-thiazol-2-yl)azetidinu (1,28 g.

3,85 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 32(3)) v dimethylformamidu (40 mJ byl přidán thioacetát draselný (2.60 g. 23.1 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázní (90 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi cthylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečné promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sod něho a nasyceným vodným

2? roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použili hexan : ethyíacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku 3-acetyIthio - -1—(4—feny lkarbamoyl-1,3-thiazol-2-yJazetidinu (893 mg, výtěžek 70%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCIJ: δ (ppm) 9.01 (IH, br s), 7.68 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,35 (2H, t,

J-7,5 Hz), 7,20 až 7.28 (IH, m), 4,58 (211, t. J=8,5 Hz). 4.52 až 4,02 (1H, m), 4.04 (211, dd, .1=8,5, 5,3 liz). 2.83 (3H, s).

Referenční příklad 33

3-Acetylthio 1 - {4-[2-{terč -butyldimethy Isily loxyjethylkarbamoyj-1,3—thiazol—2- yl Jazetidin

CONH /X^OTBDMS (1) [2-(terc Butyldifenylsilyloxy)ethyl]karbamic acidbenzyl ester

Do roztoku aminoethanol (2.0 g. 32.7 mmol) v methylenchloridu (60 ml) byl přidán ehloromic aeid benzyl ester (5,6 ml, 41,3 mmol) a triethylamin (5,5 ml, 39,5 mmol) v ledové lázni. Smčs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnuti reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (3 : 2)jako eluentu za vzniku benzylesteru (2-hydroxycthyJkarbamové kyseliny (5,37 g, výtěžek 840%) jako bílé pevné látky.

- 250 CZ 300137 Bó

Následně, do roztoku (N-benzyIoxykarbonyl)-2-aminoethanolu (5,37 g. 27,5 mmol) v dimethy Iformamidu (160 ml) byl přidán terč butyldifenyl Silylchlorid (8,6 ml. 33.0 mmol) a imidazol (2,3 g, 33,8 mmol) v ledové lázni a smés byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce, ethanol byl přidán a reakční směs byla míchána 2 hodiny.

Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasyceny vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (5 : 1) jako eluentu za vzniku benzylesteru [2-(/erc-buty Idifeny Isily loxy )ethyl]karbamové kyseliny (11,93 g, výtěžek io 100%) jako bezbarvého průhledného sirupu.

'H NMR (400 M Hz, CDCb).- δ (ppm) 7,64 (4Π, d, J=6,8 Hz). 7.46 až 7,28 (12H. rn), 5,10 (211. s). 3.73 (2H, t. .1=4,9 Hz), 3,35 (2H, q. J =4,9 Hz), 1,05 (911. s), (2) 3-ten·- B u ty 1 d i fe ny I s i 1 y ] o xy-1 - {4 -12% terč-b u ty 1 d i fe n y I s i 1 y I o xy )e t h y l k a r ba m oy I ] 1.315 thiazol 2-yljazetidin

Roztok benzylesteru [2-(/m’-butyldifenylsilyloxy)elhyl]karbamové kyseliny (3,01 g. 6,9 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 33(1)) v methanolu {150 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (3,0 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl cištčn chromatograficky na silikagelové koloně za použití melhylenehloridu ; methanol (10: 1) jako eluentu za vzniku 2~{terc-biityldiťenylsilyloxy)cthylamiiHi (1,49 g, výtěžek 72%) jako světle hnědého sirupu.

Následně, do roztoku 3—^erc-butyldífenylsilyloxy—I —(4—ethoxykarbonyl-1,3 thiazol-2-yljazetb dinu (1.16 g, 2,49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (8.5 ml) byl přidán roztok 0.67M 2-(ferc- buty Idifeny Isily loxy )elhylaminu—trimethylhl iníku v benzenu (6,42 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (50 ml) a ethylacetát (200 ml) byl přidán do reakční směsi a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti I hodinu. Po přidáni ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečné promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (3 : 1) jako eluentu za vzniku 3—/ťrc—butyl—difenv Isily loxy-1 - {4-[ 2-(/m-buty Id i feny Isily loxy )ethy lkarbamoy l]-l ,3-thiazo 1-2-yl} azetidinu (1,68 g, výtěžek 94%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCb): δ (ppm) 7,74 (IH, br t, >4,6 Hz). 7,67 (4H, d, .1=7.5 liz). 7.60 (4H, d. .1=7,5 Hz), 7,42 až 7,32 (13H, m), 4,78 až 4,68 (IH. ni), 4,08 (211, t, >7.8 Hz), 4.03 až

3,98 (2H. m), 3.79 (2H. t, J-4,6 Hz), 3.56 (2H. t, J=4,6 I Iz), 1,08 (9H. s), 1,06 (9H, s).

(3) 3-1 lydroxy-1 >4- hydroxyethy lkarbamoy l-l ,3—thiazol—2—yl jazetidin

Do roztoku 3-terc-buty Idi feny Isily loxy- >{4-[2-(/m'-buty Idifeny Isily loxy )ethy lkarbamoy I]45 l,3—thiazol—2—yI]•azetidinu (1,68 g. 2,33 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu

33(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (75 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butylamoniumfiuoridu v tetrahydrofuranu (5.6 ml, 5,6 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla rcakcní směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát:

5o methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-1 (4 hydroxyethylkarbamoyl-1,3-thíazol-2-yl )azetidinu (481,2 mg, výtěžek 85%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CD,OD): δ (ppm) 7.39 (1H, s), 4,78 (IH, m), 4,31 (211, dd, .1=8,4. 7.0 Hz),

3,89 (211. dd. .1=8.4, 4,8 I Iz). 3.67 (2H. t, .1=5,9 I Iz), 3.46 (2H, t. J=5,9 Hz).

-251CZ 300ϊ37 B6 (4) 1 - [ 4-[2©/erc-Buty Idi methy lsilyloxyjethy Ikarbamoyl ©1,3-th iazo 1-2 y!} —3—hydroxyazetidin

Do roztoku 3-•hydroxy-l©4-hydroxyethylkarbamoy 1-1.3-thiazol-2-yIjazetidinu (481,2 mg, 1,98 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 33(3)) v dimethylformamidu (24,0 ml) byl přidán terč butyldimethylsilylehlorid (352 mg, 2,3 mmol) a imidazol (116,3 mg, 2,4 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol a reakční směs byla míchána 30 minut. Reakční směs byla io rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (2 : 3) jako eluentu za vzniku 1 -14-[2-(terč buty Idimethy Isi ly loxy)- ethvlkarbamoy · IJ— 1,3-th iazol-2-y I ©3-hydroxyazetidinu (531,1 mg, výtěžek 75%) jako bezbarvého průhledného sirupu.

'H-NMR (400 M Hz. CDCb): δ (ppm) 7.60 (1H. t. J=5,9 I lz). 7,35 (1H, s), 4,88 až 4,76 (1H, m), 4,30 (2H. dd, .1=9.8. 7,8 Hz), 3.93 (2H. dd, .1=9,8, 4,9 Hz), 3.75 (2H, t, .1=5,9 Hz), 3.52 (2H, q, >5.9 Hz), 2,85 (1H, d, J=6,8 Hz), 0,92 (911, s). 0,08 (6H, s).

2o (5) I -14-1 2-(terč-Butyldimelhylsilyloxyjethylkarbamoy 1]-1,3-th iazol-2-yl} -3 methansu Ifony loxyazet íd i n

Do roztoku 1- (4 [2© tcrc-buty Idimethy Isily loxy )elhy Ikarbamoyl j-l,3-thíazol-2-yl ©3hy droxy azetidinu (531,1 mg, 1,49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 33(4)) v methylenchloridu (26,6 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,3 ml, 3,9 mmol) a triethylamin (0,52 ml, 3,7 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol do reakční směsi a výsledná směs byla míchána 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena .tu přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 1 - 5 4-[2 (terč buty Id i methy Isily loxy jet hy Ikarbamoyl |-1,3-thiazol 2-y 1} ©-methansulfonyloxyazetidinu (647.1 mg. výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI J: 6 (ppm) 7.54 (1H, br t, .1=5,9 Hz), 7.44 (1H, s), 5,46 až 5,39 (1H,

m), 4,43 (211, dd, >9.7. 6.8 Hz), 4,24 (2H. dd, >9.7, 3.9 Hz), 3,76 (211, t, J-5.9 Hz), 3,53 (2H, t,

J-5,9 Hz). 3,11 (3H, s), 0,93 (911, s), 0,08 (61 I, s), (6) 3—Acety Ithio 1 ©4-[2©/m-butyldimethylsílyloxy)ethylkarbamoyl©1,3 th iazol-2- y 1 © azet idin

Do roztoku 1-{4-[2-(terc-butyldimethylsilyloxyjethylkarbamoyl] 1,3-thiazol-2-yl}-3 methansulfonyloxyazetidinu (647,1 mg. 1,49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 33(5)) v dimethylformamidu (32,0 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,28 mg, 8,9 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhIiěilanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (3 : 2) jako eluentu za vzniku 3-aeetylthio-1 {4-[2©/ťrc butyldimethylsilyloxyjethyIkarbamoyl© 1,3-thiazol-2-yl{azetidinu (398.2 mg. výtěžek 65%) jako světle hnědé pevné látky.

- 252 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7.55 (1H. br t. >5.4 Hz). 7,40 (IH. s). 4.51 (2H, dd, >8,8, 7,8 Hz). 4,48 až 4,40 (IH. m), 3.96 (2H. dd. >8,8, 4,9 Hz), 3,75 (2H, t, .1-5.·! Hz). 3.52 (2H. q, >5,4 Hz), 2,37 (3H, s). 0.92 (9H, s), 0,08 (ÓH, s).

Referenční příklad 34

3-Acetvlthio-1 -{4-[(1 S>1 -(terč butvldimethylsilyloxyrnethyl)propylkarbamoylj-1.3 thiazoi2—yl (azetidin

AcS

CONH .OTBDMS (1) Benzylester [(1 S)-l-(Zťrc-butyldifenylsilyloxymethyl)propyJkarbamové kyseliny

Do roztoku L ethvlglyeinolu (2,00 g, 22,4 mmol) v methylenchloridu (60 ml) byl přidán benzylesícr kyseliny chromové (3,84 ml. 26,9 mmol) a triethylamin (3.77 ml, 26.9 mmol) v ledové lázni is a směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezí ethylaeetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného.

Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 ; I —► I : 2) jako

2o eluentu za vzniku benzylesteru [(1S)-1-( hydroxy met hyl)propyllkarbamové kyseliny (4,27 g. 85%) jako bezbarvého oleje,

Následně, do roztoku benzylesteru [(IS)- >(hydroxymethyl)propyl]karbamové kyseliny (4,27 g, 19,1 mmol) v dimethylformamidu (128 ml) byl přidán terč bulyldifenylsiíylchlorid (5,97 ml.

22.9 mmol) a imidazol (1,56 g. 22,9 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotč místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethyl· acetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý stran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého so tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (6:1 — 4 : 1) jako eluentu za vzniku benzylesteru [(IS) 1 -(terč butyldifenylsilyloxymcthyl)propyl]karbamové kyseliny (9,48 g, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 Μ I lz. CDCl j: δ (ppm) 7.65 až 7,60 (4H, m), 7,44 až 7,29 (11H, m). 5.09 (2H, s), 4,92 až 4,86 (IH. br d. >8.8 Hz), 3,71 až 3,47 (311, m), 1,68 až 1.60 (2H, m), 1.05 (911. s), 0.88 (3H. t, >7,3 Hz).

(2) 3-/íví.^,-Butyldifenylsilyloxy-l-}4-[(]S)-l (terč butyldifcnylsilyloxymethyl)propyl· karbamoylj-1,3—thiazol—2—yl (azetidin

Roztok benzylesteru f(IS)-l-(/ďrc-buty Id ifeny Isi lyloxymethyl)propyl]karbamovč kyseliny (3,70 g, 8,00 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 34(1)) v methanolu (185 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (3,70 g) při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromato45 graficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanol (9 : 1) jako eluentu za vzniku (lS)-l-(/tTc butyldifénylsilyloxymetliyjpropylaminu (2.32 g, výtěžek 88%) jako bezbarvého oleje.

- 253 CZ 300137 B6

Následně, do roztoku J-zm-butyldifenylsilyloxy 1 -{4 -ethoxykarbonyl-1,3-thiazol-2-yljazetidinu (2.00 g, 4.29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (100 ml) byl přidán roztok 0.67M (4S)-l-(/erc-butyldifenylsily]oxymethyl)propylaminu-trl· methylhliníku v benzenu (12.9 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (200 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Reakční směs byla extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, io filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (6:1 —> 2: 1) jako eluentu za vzniku

3-/erc-butyldifeny Isilyloxy-1 - (4-[( l S)-l-(/c/v buty kli fen\lsil\ lowmcthv I) propylkarbamoyl]-l,3-thiazol-2 yljazetidinu (2.52 g, výtěžek 79%) jako světle hnědé pevné látky.

'H -NMR (400 M Hz. CDCl·,): δ (ppm) 7,57 až 7.69 (8H, m), 7,28 až 7,46 (12H. m), 7.36 (IH, s).

4.69 až 4,74 (Ul, m), 3,76 až 4,11 (5H, m), 3,74 (IH, dd, J-10,3, 2,9 Hz). 3,70 (IH, dd,

J=10,3. 4,1 Hz), 1,08 (9H. s), 1.05 (9H, s). 0,93 (3H. t, >7,3 Hz).

(3) 3-Hydroxy-l-{4-|(lS)-Hhydroxyniethyl)-propylkarbamoyl]-l,3-thiazol 2 yljazetidin

Do roztoku 3-terc butyldifenylsilyloxy-l {4-f(IS>—l—(Zťrc—butyldifenylsilyloxymethyl)propylkarbamoyl|—1,3—thiazol 2-yljazetidinu (2.52 g, 3.50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 34(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (126 ml) byl přidán roztok 1.0M tetra—n bulylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (8,40 ml, 8,40 mmol) v ledové lá/ni. Směs byla míchána přes noc. Po zkontrolování doběhnuli reakce byla reakční směs koncentrována za

2? sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —* ethylacetát: methanolu (9: 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-(4 [(1S)—l —(hydroxymethyljpropy lkarbamoyl]-1,3-thíazol- 2 yljazetidinu (947 mg. výtěžek 100%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl·,): 6 (ppm) 7,36 (1H, s). 4,86 až 4,75 (IH, m). 4,33 (2H, dd. so J=8,l, 6,6 Hz), 4,02 až 3.91 (3H, m), 3,79 (111. dd, >11,0, 1,2 Hz), 3,67 (IH, dd.

>11,0, 6,6 Ϊ Iz), 3,19 až 3,10 (IH. br s), 3,02 až 2,97 (1H, br s), 1,73 až 1,64 (2H, ιη), 1,00 (311, t. .1=7,3 Hz).

(4) 1—{4—L( lS)-l-(/ťrc Bu ty ldimethy Isi lyloxymethyl)-propy lkarbamoyl] 1.3- thiazol-2-ylJ 55 3-hydroxyazelidin

Do roztoku 3-hydroxy-l-J4—f( 1 S)-l-(hydroxymethyl)-propylkarbamoyl]-l ,3-thiazol-2-ylJazetidinu (940 mg, 3,50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 34(3)) v dimethylformamidu (47 ml) byl přidán terc-butyIdimethvlsilyl chlorid (633 mg, 4,20 mmol) a imidazol (286 mg. 4,20 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek bvl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 : I -+ 1 : .3) jako eluentu za vzniku I - {4-[(1S)- I - (terč- butyldimethy Isi ly loxymcthyl)propy Ikarbamoyl]- 1.3-thiazol-2-yl}-3-hydro\yazetidinu (1,00 g. výtěžek 74%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz. CDCh): δ (ppm) 7,50 až. 7,44 (IH, m), 7,36 (IH, s), 4.86 až 4.79 (1H. m), 4,33 až 4,27 (211, m), 4,01 až 3.92 (311, m), 3.72 (Hl, dd, J-9,9, 2.6 Hz). 3,65 (III, dd.

.1=9,9. 4,0 liz). 1,70 až 1,60 (211, m). 0.95 (3H, t, J=7,3 Hz). 0.92 (9H. s). 0.06 (6H, s).

(5) 1- J4-[( 1S)-1 -(terč- Buty ldimethy! sily loxy methy l)propylkarbamoylj-l,3-thiazol-2-yl J-3inethansulfonyloxyazetidin

- 254 CZ 300137 B6

Do roztoku >{4—[(1 S>J-(7ť/r-butyldímethylsílyloxymethyl)propylkarbamoyl]-1.3 thiazoi—2— yl}-3-hydroxyazetidinu (1,00 mg, 2,59 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu

34(4)) v methylenchloridu (50 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (602 μΙ. 7,78 mmol) a tricthylamin (4,09 ml, 7,78 mmol) v ledové lázni. Po mícháni směsi v ledové lázni 10 minut bvla směs míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena, mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěilanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn io chromatograficky na silíkagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 : 1—> 1:2) jako eluentu za vzniku l-{4 ·[( 1 S)-l-(/íw-buty Idimethy Isily loxymethyl)propy lkarbamoy l]-l,3thiazol—2-y 1 )-3-methansulfonyloxyazetidinu (1,02 g, výtěžek 85%) jako světle žlutého oleje.

'll-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7,44 (IH, s), 7,44 až 7,38 (11L m). 5,45 až 5.39 (IH. m), 4,47 až 4.40 (211, m), 4,29 až 4,21 (2H, ni), 4,02 až 3.95 (1H, m). 3.73 (IH. dd, J-10.3. 2.9 Hz), is 3,65 (111. dd, >10,3, 4,4 Hz), 3,11 (311. s), 0.95 (3H, t. >7,3 Hz), 0.92 (911, s), 0.06 (6H, s).

(6) 3-Acety Ithio 1 -{4-[( 1 S)-l-(/ero-buty Idimethy Isi lyloxy methy l)propy lkarbamoy I] 1,3 thiazoi 2 -yl j azetidin

Do roztoku 1 {4 [(1 S>l-(/ťrc-butyldimethylsilyloxymethyl)propylkarbamoylJ-l ,3 thiazol-2yl}--3-methansulfonyloxyazetidinu (1.02 g, 2.20 mmol) (získaného podle popisu v referenčním přikladu 34(5)) v dimethylformamidu (50 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,51 mg, 13.2 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °CJ přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (4:1 —> 2 : 1) jako eluentu za vzniku 3—acety Ithio—1—{4—[(1S)- 1 (terč butyldimethylsilyloxymethyjpropyl30 karbamoyl]-l ,3-th iazol-2-yl} azetidin u (618 mg, výtěžek 63%) jako světle hnědého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7,43 až 7,39(111, m), 7.40 (IH, s), 4,53 až 4,47 (211, m), 4.46 až 4.41 (114, m), 4,00 až 3.93 (311. m), 3.74 až 3,70 (IH, ni). 3,67 až 3,62 (IH, m), 2.37 (3H, s), 1,72 až 1,56 (211. m), 0,95 (3H. t. >7.3 Hz), 0,91 (911, s), 0.06(614, s).

Referenční příklad 35

3—Acetylthio— >{ 4—[(1 S)-2-(/ere-buty Idimethy Isily loxy )-l -methy lethy lkarbamoy lj-1,3th iazol 2-yljazetidin

(1) Benzylester [(lS>2>re/Y-butyldifcnytsilyloxy) 1 methyl cthyljkarbamové kyseliny

Do roztoku L-alanínolu (2,00 g. 26,6 mmol) v methylenchloridu (60 ml) byl přidán benzylester kyseliny chromové (4,57 ml, 32.0 mmol) a triethylamin (4,48 ml, 32.0 mmol) v ledové lázni.

Směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného.

Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek bvl čištěn

- 255 C7, 300137 Bó chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 : 1 —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku benzylesteru [(lS)-2-hydroxy- 1 -methyl-ethyljkarbamové kyseliny (4.61 g, výtěžek 83%) jako bílých krystalů.

Následně, do roztoku benzylesteru [(IS)-l-(hydroxymethy l)cthyl]karbamové kyseliny (4,61 g. 22.0 mmol) v dimethylformamidu (140 ml) byl přidán /ere-butyldifenylsilyjehlorid (6.87 ml. 26,4 mmol) a imidazol (1,80 g, 26.4 mmol) v ledové lázni. Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta io nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (8 : 1 —> 6 : 1) jako eluentu za vzniku benzylesteru [(1 S)-2-(/ere-butyldifenylsilyloxy)l-methylelhyl]karbamamové kyseliny (10.7 g. výtěžek 100%) jako bezbarvého oleje.

i? HNMR (400 M Hz, CDCH): δ (ppm) 7,67 až 7,60 (4H, m). 7,42 až 7,29 (11H. m), 5,10 (2H. s),

4.96 až 4,85 (III, br s), 3,91 až 3.80 (IH, m), 3,67 (IH. dd. >10,3. 2,6 Hz), 3,56 (IH. dd, J=10.3, 3.7 Hz), 1,55 (3H, d. J=l 1,7 Hz), 1,09 (9H. s).

(2) 3-/ere-Buty Id i feny lsily loxy-l-(4-[(!S)-2-(/erí-buly Id i feny Isi lyloxy}-!-methy let hvl2(i karbamoyl] 1.3-t h i azo l-2-yl jazetidin

Roztok benzylesteru [(1 S)—2—buty Idifeny lsily loxy)— 1 -methy lethyl] karbamové kyseliny (6.71 g, 15,0 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 35(1)) v methanolu (340 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (6,71 g) při teplotě místnosti 2,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromalogralleky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu methylenchloridu : methanol (85 : 15) jako eluentu za vzniku (1 S)-2-(/e/r-butyldifeny lsily loxy )-1-inethy l-ethylaminu (3,93 g, výtěžek 84%) jako světle žlutého oleje.

Následně, do roztoku 3-/er<-butyldifenylsilyloxy-1 (4—ethoxykarbonyl—I „3—thiazol 2—yI)azetidinu (2,0 g, 4,29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (100 ml) byl přidán roztok 0.67M (IS)- 2-(/erc-blity Idifeny lsily loxy)-1 -methylethylaminu trimethylhliníku v benzenu (12.9 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod rcfluxem přes noe. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (200 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po přidáni ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (6 : I —> 2: 1) jako eluentu za vzniku 3 terč butyldi fenylsilyloxy-1-(4-(( 13)-2 (terč butyldifcnylsilyloxy)-l-melhylelhylkarbamoyl]-l,3-thiazol-2-yl Jazetidinu (2.77 g. výtěžek 88%) jako světle hnědé pevné látky.

li-NMR (400 M Hz. CDCIj: δ (ppm) 7,69 až 7,65 (411, ni). 7.61 až 7.57 (4H. m), 7.46 až 7,30 (12H. m), 7,35 (1H, s), 4,75 až 4,68 (111, ni), 4,28 až 4,18 (1H, ni), 4,10 až 4.03 (H.m). 4.03 až

3.97 (2H, m), 3,72 (IH. dd, J~9,9. 4,1 Hz). 3,64 (1H, dd, .1=9.9, 3.3 Hz). 1,31 (311, d. J-6,6 Hz), 1,09(911, s), 1,05 (9H,s).

so (3) 3 Hydroxy-l-[4-((lS)-2-hydroxy-1 methylethylkarbamoyl)-1.3-thiazol 2 yljazetidin

Do roztoku 3-terc butyldi feny Isi lyloxy-1 - (4-[(1S) 2-(lerc butyldifenylsilyloxy)- 1 methylelhylkarbamoyf]-],3-thiazol-2-yl jazetidinu (2,77 g, 3,77 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 35(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (140 ml) byl přidán roztok l,0M

- 256 CZ 300137 Bó tetra—n-butylamoniumfiuoridu v tetrahydrofuranu (9,06 ml, 9,06 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 3,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatografieky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —* ethylacetát: methanolu (9 : 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxv l-[45 ((lS)-2-hydroxy-l-methylethylkarbamoyl)-l_:3-thiazol-2-yl]azetidinu (911 mg. výtěžek 94%) jako bílé pevné látky.

H-NMR (400 M Hz, CDCI,): δ (ppm) 7,34 (IH, s). 7,26 až 7,10 (1H. br s), 4,86 až 4,77 (IH, m), 4,32 (211, dd, >8,8. 6.6 Hz). 4.24 až 4,12 (IH, m). 3,99 až 3.92 (2H. m). 3.79 až 3,71 io (111, m), 3,66 až 3,58 (IH, m). 3,28 až 3.21 (1H, br s). 2.99 až 2,92 (lil, br d. >5.1 Hz), 1,25 (3H. d, >7,2 Hz).

(4) 1 -14-[( IS}-1 -{/erc-Biity Idimethy Isily loxy)-1 -methy lethyl karbaní oyl] 1.3--tli i a/o 1-2-yl} 3-hydroxyazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-l -[4-((1 $)-2-hydroxy-1 -met hylethy 1 karbamoy 1)-1,3-th iazol-2-y 11 azetidinu (910 mg, 3,54 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 35(3)) v dimethylformamidu (46 ml) hyl přidán terč-buty Idimethy Isily Ichlorid (586 mg, 3.89 mmol) a imidazol (265 mg, 3,89 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití π hexan : ethylacetátu (I : 1 —»

1 : 4) jako eluentu za vzniku >{4-[( 1 S)-2-(/crc· buty Idimethy Isilyloxy>-1-methy lethyl- karbamoylj—1,3—thiazol—2—yl} -3- -hydroxyazetidinu (935 mg, výtěžek 71%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI,): δ (ppm) 7,48 až 7,42 (IH, br d, J-8,8 Hz), 7.36 (III. s), 4,86 až 4.79 (IH. m), 4,30 (211, ddd, >15.6. 5,9. 2.9 Hz), 4,34 až 4,27 (111. m), 3,97 až 3.91 (2H, m), 3,68 (1H, dd. >9,5. 4.4 Hz), 3,63 (IH, dd, >9,5, 2,9 Hz), 1,25 (3H, d, >7.3 Hz). 0,93 (911, s), .to 0.07 (6H, s).

(5) l — {4—[(I S)-2-(terc-Buty Idimethy Isily loxy)- 1- methylelhy IkarbamoyΊ ]— I,3-th iazol -2-y 1) 3-methansulfony loxy azetidin

Do roztoku 1 -{4-[(1S)-2-(terč-butyldimethyIsilyloxy)-1 methylethylkarbamoyl]-l,3-thiazol2-yl}-3-hydroxyazetidinu (930 mg. 2,50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 35(4)) v methylenehloridu (47 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (480 μί, 6,20 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 35(4)) a triethylamin (869 μ|. 6,20 mmol) v ledové lázni, Po míchání smčsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti

1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2:1—>· 1 : 2) jako eluentu za vzniku 1 — í4—[(ΪS) -2—(Zerc— buty Idimethy Isily loxy) 1 methy lethylkarbamoy 11-1,3—thiazol—2—yl J-3-methansul fony loxyazetidinu (1,16 g, výtěžek 100%) jako světle žlutého oleje.

’H NMR (400 M Hz, CDCfi): 6 (ppm) 7.43 (111, s), 7,43 až 7.39 (IH. br s). 5,44 až 5,39 (IH. m), 4.43 (211, ddd, J-6,6, 5,9, 1.5 Hz), 4,27 až 4.21 (2H, m), 4,21 až 4.13 (III. m). 3.68 (IH, dd. >9,5, 4.4 Hz). 3.63 (IH. dd, >9,5, 2,9 Hz), 3,11 (3H, s). 1,25 (311, d. >6,6 Hz), 0,93 (911, s),

0,07 ( 6H. s).

(6) 3-Acetv Ith io-l-[4-[(lS)-2-(/erc-buty Id imethy Isily loxy >-1 -methylethy Ikarbamoy l> l ,3th iazol 2 yljazetidin

- 257 C7 300137 B6

Do roztoku l-{4-[( 1S )-2-( Zezc-bu ty Idimethy Isily loxy)-1 —methylethy Ikarbamoy l]-l ,3-thiazol2-vl>3-methansulfonyloxyazetidinu (1.16 g, 2.50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 35(5)) v dimethylformamidu (60 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.71 mg.

15,0 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejově lázni (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použili n-hexan : ethylacetátu (4 : 1—► 2 : 1) jako io eluentu za vzniku 3—acetylthio—I - {4-[( IS)-2-(/erí’-butyldimetliyfsilyloxy) 1 methylcthylkarbamoyl]- 1.3-thiazol-2-yl Jazetidinu (709 mg, výtěžek 60%) jako světic hnědého oleje. 'H-NMR (400 Μ 1 Iz, CDCl·.): δ (ppm) 7.45 až 7.4θ\ I H,br s), 7,39 (lil, s), 4,54 až 4.47 (211. m), 4,46 až 4,41 (1H, m), 4,20 až 4,15 (1H. m). 4.00 až 3,93 (211. m), 3,67 {1H. dd. > 10.3. 4,4 Hz). 3,62 (IH.dd, >10,3. 3.7 Hz), 2,37(311. s). 1.24 (3H, d. >6,6 Hz). 0.92(911, s). 0,07 (6H,s).

Referenční příklad 36

Acetylthio-1-(4-(( 1S)—t — {terc-b uty Idimethy Isily loxy )-2- methy I propy Ikarbamoy IJ-1,3— th iazol—2—y 1 (azetidin

AcS

CONH

OTBDMS (1) Benzyl ester [(1 S>l -{/erc-Biity ldifeny Isily loxy )-2-melhyl propy IJkarbamové kyseliny

Do roztoku L valinolu (2,00 g. 19,4 mmol) v methylenchloridu (60 ml) byl přidán benzylcster kyseliny chromové (3,32 ml, 23,3 mmol) a triethylamin (3,27 ml. 23.3 mrnol) v ledové lázni a smés byla míchána při teplotě místnosti 4,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn so chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2:1-+1:2) jako eluentu za vzniku benzylesteru [(l S)-1-( hydroxy methy l>2-methyl propy IJkarbamové kyseliny (4,56 g, výtěžek 99%) jako bílých krystalů.

Následně, do roztoku benzylesteru [(!S)-l-(hydroxymethyl)-2-methylpropyl]karbamové >5 kyseliny (4,56 g. 19,2 mmol) v dimethylformamidu (140 ml) byl přidán terč-butyldifenylsilyIehlorid (6,00 ml, 23,1 mmol) a imidazol (1,57 g, 23,1 mmol) v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (8:1 —► 6 : 1) jako eluentu za vzniku benzylesteru [(I S>I (terč buty Id i feny Isily loxy >2-methylpropyl|-karbamové kyseliny (10.1 g, výtěžek 100%) jako bílých krystalů.

'H-NMR (400 Μ 1 Iz. CDCl;): δ (ppm) 7.65 až 7,60 (4H, m), 7,45 až 7,29 (11H, m). 5,09 (2H. s),

4.92 až 4.84 (IH. brd, >9,5 Hz), 3.71 (IH, dd. >10,3, 4,4 Hz), 3.66 (111. dd. >10,3. 4.4 Hz),

3,55 až 3.46 (111, m), 1,99 až 1,87 (IH, m), 1,05 (9H, s). 0.89 (6H, d. .1-7,3 Hz).

- 258 CZ 300137 Bó (2) 3· /erc-Butyldi feny Isi lyloxy-1 - {4-[( 1S>1 - (terč buty Idi feny Isi ly loxy )-2-methyl propy 1karbamoyl]— 1.3—thiazol—2—yl J· azetidin

Roztok benzylestcru [(1 S)-l-(Zm’ butyldifcnyl$ilyloxy)-2-methylpropyl]karbamové kyseliny (7,14 g. 15,0 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 36(1)) v methanolu (215 mi) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (7,14 g) při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs filtrována ab\ se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanolu (98 : 2 —> 9 : 1) jako io eluentu za vzniku (IS) 1 (terč butyldifenylsilyloxymethyl)-2-mcthylpropylaminu (3.73 g, výtěžek 73%) jako bezbarvého oleje.

Následně, do roztoku 3-/ere-butyldifenylsi ly loxy-1 -(4-ethoxy karbony 1--1.3-th iazo 1-2- y 1 )azet idinu (2.0 g, 4.29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu is (100 ml) byl přidán roztok 0.67M (!S)-l-(/erc -butyldifcnyIsilyloxymethy!> 2 inethylpropyIaminu—trimethylhliníku v benzenu (12,9 tni) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou.

Směs byla zahřívána pod refluxem přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (200 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (6 : 1 —* 4 : 1) jako eluentu za vzniku 3 terč butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(1S)-1 -(terč-butyldifenylsiiyloxy)25 2-methylpropy Ikarbamoy lj-1,3-thiazok2-yl} azet idinu (1,98 g, výtěžek 61%) jako světle hnědé pevné látky.

¹ H-NMR (400 M Hz, CDCl?: δ (ppm) 7,69 až 7,56 (811, m), 7,44 až 7,31 (12H, m). 7,37 (1H. s). 4,74 až 4,67 (IH. m). 4.09 až 3,94 (4Π. m), 3,87 až 3,78 (IH, m). 3,85 (111, dd, >10.3, 2.1 Hz), 3,67 (IH, dd. >10,3. 3.9 Hz), 2,17 až 2,05 (1Π, m), 1,09 (9H, s), 1.06 (9H, s). 0.99 (3H, d,

5(i >6,9 Hz), 0.97 (3 H,d, >6.8 Hz).

(3) 3-Hydroxy 1-(4-((1 S>l-(hydroxymethyl>2-metliylpropylkarbamoylJ-l,3-thiazol· 2 yl} azetidin

Do roztoku 3 terč butyldifcny Isi ly loxy 1-(4-((1 S>-l-(/m* butyldifenylsiiy loxy)-2-methyl propyIkarbamoyl|-l,3-thiazol-2-yl}azetidinu (1.98 g, 2,60 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 36(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (lOOrnl) byl přidán roztok l,0M tetra -n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (6,23 ml, 6,23 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát ethylacetát: methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3-liydroxy-1-(4 [(1S) 1 -(hydro\yniethyl)-2-tnethylpropylkarbamoyl]-l,3-thiazol-2-yl{azetidinu (755 mg, výtěžek 100%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl?: ó (ppm) 7,34 (IH, s), 7,35 až 7.31 (lll. br s). 4,84 až 4,75 (1 H,

m). 4.32 2H, dd. >8.8. 6.8 I lz). 3.97 (1H. dd. >8,8, 4.4 Hz), 3,94 (1H, dd. >8,8, 4.4 Hz), 3,87 až 3,77 (211. m), 3,73 (IH, dd, >10,7, 6,8 Hz), 3,33 až 3,21 (lll, br s), 3,24 až 2,94 (IH. br s).

1.98 (111. septet. >6,8 Hz), 1,01 (3H, d, >6.8 Hz), 0,98 (3H, d. >6.8 Hz).

(4) 1-(4-(( lS>l-(/e/r Buty ld imethy Isi lyloxy methy l>2-met hyl propy Ikarbamoy l]-l ,350 thiazol—2—yl}- 3 hydroxyazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-1-(4-(( 1 S> 1-(hydroxy methy l>2-methylpropy Ikarbamoyl]--1,3thiazo 1-2-yljazetidinu (750 mg, 2,60 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu

36(3)) v dimethylformamidu (38 ml) by! přidán Ze/r-butyIdimethylsilylehlorid (470 mg,

- 259 CZ 300137 B6

3,12 mmol) a imidazol (212 mg, 3.12 mmol) v ledové lázni a reakční smčs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečné promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatogra ficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2:1 1:3) jako eluentu za vzniku M4-[(lS)-l-(/eřc--butyldimethylsil\lo\ymethyl)-2-melhyl-propylkarbamoyl]-l,3 thiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidinu (700 mg, výtěžek 67%) jako světle žlutého oleje.

io 'll-NMR (400 M Hz, CDCl·,): δ (ppm) 7,54 až 7,50 (IH. brd. J-9,8 Hz), 7.37 (IH. s). 4,86 až 4,80 (IN, m), 4,35 až 4,27 (2H, m), 3,98 až 3,92 (2H, m). 3,84 (líl. dd. J=9,8. 2.9 Hz), 3,84 až 3,79 (IH. m). 3.62 (111, dd, >9,8, 3,9 Hz). 2.00 (lll, septet. J=6,8 Hz), 0,98 (311, d, >6,8 Hz), 0,96 (311, d. J=ó,8 Hz), 0,91 (9H. s). 0.06 (611, s).

(5) I —-J 4—[(1 S> 1- {/erc-ButyId i methyIsily loxy methy l)-2-methylpropy Ikarbamoyl J-1,3thiazol-2- yl] -3-methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku 1-|4-[(1S) \-(terc butyldimethylsilyloxymethyl)-2-mcthylpropylkarbainoyl] 1,3thiazol-2-yl ]-3-hvdroxyazetidinu (700 mg. 1,75 mmo!) (získaného podle popisu v referenčním zo příkladu 36(4)) v methylenchloridu (35 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (406 pl,

5,25 mmol) a triethylamin (736 pl, 5,25 mmol) v ledové lázni. Po mícháni směsi v ledové lázni minut byla směs míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogen uhličitá nu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena

2? přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 : I —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku l-{4-f( 1 S> l-(/erí-butyldimethy Isily lo.xymethylý-2-methylpropy Ikarbamoyl] l,3-thiazol-2-yl}-3-methansu lfony loxy azetidinu (895 mg. výtěžek 100%) jako světle žlutého oleje.

io ‘H-NMR (400 M Hz, CDCl.,): δ (ppm) 7,50 až 7.45 (IH.br tl. J=9.5 Hz). 7.44 (lll, s). 5,45 až

5.39 (lll. m), 4.43 (211. ddd, J=11,0, 6.6. 1.5 Hz). 4.24 (2H. ddd, J-l 1,0, 4,4. 1.5 Hz), 3.83 (IH. dd. .1=10.7. 2.6 Hz). 3.84 až 3,79 (lll. ni), 3.62 (lll. dd. J=10.7, 4.8 Hz). 3,1 I (311. s). 2.04 až 1.94 (IH, m), 0,98 (3H, d, .1=7.3 1 Iz). 0,96 (3H. d, J=6,6 Hz), 0,91 (9H, s). 0.06 (6H. s).

(6) 3—Acetylthio— 1 - ]4 [(IS)-1-(/m’-butyldimethylsiIyloxymethyl)-2-mcthylpropylkarbamoyl]— 1,3—thiazol—2—yl} azetidin

Do roztoku l - {4—[(I S)-l-{/ezt- buty Idimethy Isily loxy met hyl)-2-in ethyl propy Ikarbamoyl] 1.3thiazol-2-yl)-3-methansu lfony loxy azetidinu (890 mg, 1,75 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 36(5)) v dimethylformamidu (45 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.20 g, 10,5 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (3 : I —> I : 1) jako eluentu za vzniku 3—acety Ithio—1—{4—[(IS)-1- (terč butyldimethylsilyloxymethyl)-2-methylpropyl—karbamoyl]-1.3-thiazol-2 yljazclidinu (502 mg, výtěžek 63%) jako světle hnědého oleje.

^lH-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7.50 až 7,45 (IH. br d, >9.5 Hz), 7,40 (IH. s), 4,54 až o 4,43 (21I. m). 4.47 až 4,40 (1H, m), 4,00 až 3.93 (2H. m), 3,86 až 3,78 (211, in), 3,64 až 3.59 (1H,

m), 2.04 až 1,94 (IH, m), 0,98 (3H, d, J-6.6 Hz), 0,96 (311, d. J~6,6 Hz). 0,91 (9H, s), 0,05 (6H, s).

260 CZ 300137 B6

Referenční příklad 37

3- Aeet\ Ithio-f-’4- [(Ί S) 1 (terč butyldimethvlsÍlyloxymethyl>3-methylbutylkarbamo\ 1J1,3—th iazol—2—yl) azetidin

_Acs^\_^jT (1) Benzy lester [< 1S)— 1 butyldifeny Isily loxymethy IE3-methylbutyljkarbamové kyseliny

Do roztoku L-leueinolu (1,00 g, 8,53 mmol) v methylenchloridu (30 ml) byl přidán benzy lester io kyseliny chromové (1.46 ml. 10.2 mmol) a triethylamin (1,43 ml. 10,2 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 3 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan ; ethylacetátu (2 : 1 —► 1 : 1) jako eluentu za vzniku benzylesteru [(1 SEI-(hydroxymethyl)-3-rnethylbutylJkarbamové kyseliny (2.31 g, výtěžek 100%) jako bezbarvého oleje.

Následně, do roztoku benzylesteru [(1 SEMhydroxymethylE3-methylbutyl]karbamové kyseliny

2ii (4,84 g, 19.3 mmol) v dirnethylformamidu (145 ml) byl přidán tere-butyldifenylsílylchlorid (6,01 ml, 23,1 mmol) a imidazol (1.57 g, 23,1 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána pří teplotě místnosti 8 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem

2? chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan ; ethylacetátu (19 : 1 » 7 : 1) jako eluentu za vzniku benzylesteru [(lS)-l-(/ť/T-butyldifenvlsilyloxyniethyl)-3-mcthylbutyl]karbamové kyseliny (9,22 g, výtěžek 98%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 M Hz. CDCb): δ (ppm) 7,65 až 7,61 (4H, rn), 7,45 až 7,32 {11H, m), 5,09 (2H. d, io >2.9 Hz), 4.85 až 4.80 (IH, br d, >8.8 Hz), 3,86 až 3,77 (1H, m). 3,70 (IH, dd. >9,8. 2.9 Hz),

3.59(lH.dd, >9.8, 2.9 Hz), 1,63 až 1,54 (IH, m), 1,43 až 1,37(211, m), 1.06 (9H,s), 0,91 (311, d,>6.8 Hz), 0,89 (311, d, >6.8 Hz).

(2) 3-/en-Butyld ifeny Isily loxy-1 {4—[( I S> 1-(/erc-buty Idifeny Isily loxymethy lE3-methyl15 buty lkarbamoy 1]-1,3-th iazol-2-yl} azetidin

Roztok benzylesteru [ 1 SE I -(/erc-buty Id ifeny Isily loxy met hyl) 3 methyl butyl Jkarbamové kyseliny (7,35 g, 15,0 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 37(1)) v methanolu (220 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (7,35 g) při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanol (98 : 2 -> 9 : 1) jako eluentu za vzniku (ISEl—buty Idifenylsilyloxymethyl) 3 -methylbutylaminu (4.50 g, výtěžek 84%) jako bezbarvého oleje.

-261 CZ 300137 B6

Následně, do roztoku 3-fórc-buty ld i feny Isi lyloxy—1 —(4—ethoxy karbony 1-1.3-th iazol-2-y I )azetidinu (2,00 g, 4,29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (100 ml) byl přidán roztok 0.67M (1S)- 4-ízm*-buty Idifeny Isily loxy methy l)-3-methylbuty 1aminutrimethylhliníku v benzenu (12,9 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (200 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 0 hodin. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličilanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodnéio ho, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (6 : 1 —► 4 : 1) jako eluentu za vzniku 3 -Zerc-b uty Idi feny Isily loxy-1 -{4-[( 1S)- -1 —(Zerc-buty Idifeny 1-s i ly loxyniethyl)—3—methylbutylkarbamoyl]-1.3-thiazol—2—yl }azelidinu (2,14 g. výtěžek 64%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCl;): δ (ppm) 7,68 až 7,62 (4H, m). 7,62 až 7,56 (4H, m), 7,46 až 7.28 (12H. m), 7,37 (IH. s), 4,74 až 4,69 (IH, m), 4,24 až 4,16 (IH. m), 4,11 až 4,03 (2H, m), 1,00 (IH, dd, >10.7. 4.9 Hz). 3,98 (IH, dd. >11,7, 4,9 Hz), 3,72 (IH, dd, J=9.8. 3.9 Hz). 3,67 (IH, dd. >9,8, 2,9 Hz), 1,65 až 1,46 (3H, m). 1.08 (9H. s), 1,05 (911, s). 0,94 (3H, d, >5,9 Hz), 0,92 (3H. d. >5,9 Hz).

(3) 3-Hydroxy-l 14—f( IS)— I —(hydroxymethyl)—3—methyIbulylkarbamoyl]— 1,3—thiazol—2—yl} azet idin

Do roztoku 3 tere butyldifenylsilyloxy-4-{4-[( l S)—l—(žere buty Id ifeny Isily loxy methy 1)—3— methyl buty Ikarbamoy!]-1.3-thiazol-2-yljazetidinu (2,14 g, 3,72 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 37(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (107 ml) byl přidán roztok 1.0M telra-n-butylamoníumfluorídu v tetrahydrofuranu (8,94 ml. 8,94 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za so použití ethylacetát —> ethylacetát: methanolu (9: 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-!-]4[(1S)-1 (hydroxymethyl)-3 mcthyl-butylkarbamoyl] 1,3-thiazol-2-ylJazelidinu (825 mg. výtěžek 74%) jako světic žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7,36 (IH, s), 7,24 až 7.17 (IH. br d. >8,8 Hz), 4,85 až 4,77 (IH. m), 4,32 (211, dd, >8.8. 7,3 Hz), 4,20 až 4,12 (IH, m). 3,96 (2H. ddd, >8,8, 8,8, 4,4 b Hz). 3.77 {1H, dd, > 10.9, 1.3 Hz), 3,61(111. dd, > 10,9, 5,9 I Iz). 3,17 až 3,08 (1H, br s), 3,08 až

2,95 (IH. br s). 1,75 až 1,65 (IH, m), 1,55 až 1,46 (HL m), 1,46 až 1,37 (1H. m). 0,95 (311, d, .1-6.6 Hz), 0.94 (3Π, d, >6,6 Hz).

(4) 1 14-f( 1 S)-H/í^jrc-Biityldimethylsilv!oxyrnethyl)-3-rnethylbutylkarbanioyl]-] .3-thíazol40 2-yl}- 3-hydroxyazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[( 1S )-1-( hydroxy methy l)-3-methy Ibutyl karbamoyl J-1,3-th iazol2-ylJazctidinu (820 mg, 2,74 inmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 37(3)) v dimethylformamidu (41 ml) byl přidán terč-butyldimethylsilylchlorid (495 mg. 3,29 mmol) a b imidazol (224 mg, 3.29 mmol) v ledové lázni a reakční smčs byla míchána v ledové lázni přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečné promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl so čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použili n-hexan : ethylacetátu (2 : I —♦ 1 ; 2) jako eluentu za vzniku 1 -|4-[( IS)-l-(/ťrc-butyldimcthylsílyloxymetliyl) 3 metliyl-butylkarbamoyl]-1,3-th iazol-2 yl}-3-hydroxyazetidinu (731 mg, výtěžek 65%) jako světle žlutého oleje.

-262 CL 300137 B6 ‘HNMR (400 M Hz. CDCl,): δ (ppm) 7.40 až 7,37 (IH. brs). 7.36 (III, s). 4.87 až 4,79 (IH. m). 4.31 (2Π. dd. J=15.0, 8,4 liz). 4,21 až 4.12 (III. m). 3.98 až 3.92 (2H. m), 3.68 až 3,65 (211. m), 1,68 až 1,60 (IH. m), 1,56 až 1.40 (2H. m), 0.95 (3H. d. J=6,6 Hz), 0,94 (311. d. J=6,6 Hz). 0.92 (9H, s,), 0,06 (6H, s).

(5) l-J4-[(1S)-\-{terc ButyldimethyIsilyloxyrnethy1>—3 methylbutylkarbamoyl] 1,3—thiazol—

2- -yl} -3-methansulfony loxy azetidin

Do roztoku l-{4-[( ISj-I-f/ere butyldimethy Isily loxy methy I)—3—methy Ibuty Ikarbamoy I] 1,3io thiazol- 2-ylj-3-hydroxyazetidinu (730 mg, 1,76 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 37(4)) v methylenchloridu (37 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (409 μΙ,

5.29 mmol) a triethylamin (741 μΐ, 5,29 mmol) v ledové lázni. Po mícháni směsí v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sod15 něho. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromá togra fič ky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethyíacetátu (2 : 1 —* 1 : 2) jako eluentu za vzniku l—{4—[(1 S)-l-(/erc-butyldirnethy Isily loxy methy l)-3 methylbutylkarbamoyl]-1,3thiazo l 2 y 1{-3-methansulfonyloxyazetidínu (846 mg, výtěžek 98%) jako světle žlutého oleje.

'll-NMR (400 M Hz, CDCIJ: δ (ppm) 7,43 (lil, s). 7.36 až 7,30 (lil, brd. J=9.5 Hz), 5,45 až

5,39 (IH, m). 4,47 až 4.39 (2H. m), 4,28 až 4,20 (2H, m), 4,20 až 4,14 (111, m), 3,66 (2H. d. J=3.7 Hz), 3,11 (3H, s), 1.70 až 1,58 (IH. iný 1,53 (1H, ddd, J-13,9. 8.8, 5.9 Hz), 1,44 (111, ddd, .1=13.9. 8,8. 5,9 Hz). 0.95 (6H, t, J-6,3 Hz). 0,92 (9H, s), 0.09 (611, s).

(6) 3-Acetylthio-1 -{4-[(1S)-1 -(terč butyldimeíhylsilyloxymethyl)-3-methylbutylkarbamoylj—1,3—thiazol—2—yl Jazetidin

Do roztoku 1-J4- [(1S)-1 -{/erc-butyldi methy Isily loxy methyl )-3 melhy Ibuty Ikarbamoy l]-1,3thiazo! 2-vlJ-3-methansulfonyloxyazetidinu (840 mg. 1,7! mmol) (získaného podle popisu so v referenčním příkladu 37(5)) v dimethylformamidu (42 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,17 mg. 10,2 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc.

Po zkontrolování doběhnuli reakce byla reakční směs rozdělena mezi elhylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethyíacetátu (3 : 1 —► 1 : I) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-1-{4-[(1 Sf-1 -(terč butyldimethy lsi lyloxymethyl')—3—methyl— butylkarbanioyl]-!,3-thiazol-2-yl}azetidinu (452 mg, výtěžek 56%) jako světle hnědého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl·,): δ (ppm) 7,39 (111. s), 7,36 7,31 (IH, hr d, >9,5 Hz), 4,54 až

4,39 ( 3H. m), 4,20 až 4,12 (IH, ni), 3.97 (III. dd, J=8.8 Hz), 3.96 (III. dd, J-8.8 Hz), 3.66 (2H.

d. >3.7 Hz), 1,70 až 1.60 (III. m), 1,58 až 1,40 (211. m). 0.95 (3H. d. J=6,6 liz). 0,94 (3H. d. >6.6 Hz), 0,91 (911, s). 0.05 (6H. s).

Referenční příklad 38

3— Acety Ithio—1 -{4- [(1 S,7,S)-l-(/erť - buty Id inielhy Isilyloxy methy l)-2 methyl buty Ikarbamoy l|1,3—thiazol--2 yljazetidin

- 263 CZ 300137 Bó (1) Benzylester [(1 S.2S/-1 -(/m-Butyld i feny Isi ly loxy methy 1/2-methy 1 butyl ] karbamové kyseliny

Do roztoku L-isoleucinoIu (2,20 g. 18,8 mmol) v methylenchloridu (66 ml) byl přidán benzy 15 ester kyseliny chromové (3,22 ml, 22,5 mmol) a triethylamin (3,15 ml, 22,5 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn io chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2:1 —► 1:1) jako eluentu za vzniku benzylcsteru [(1S,2S/ 1 -(hydroxymethyl)-2 methy Ibutyljkarbamové kyseliny (4,17 g. výtěžek 88%) jako bezbarvého oleje.

Následně, do roztoku [(2S) {N-bcnzyloxykarbonyl)-2-amino-3-methylbutaiiolu (4,17 g.

16.6 mmol) v dimethylformamidu (125 ml) byl přidán terč- butyldifeny Isily Ichlorid (5,18 ml.

19,9 mmol) a imidazol (1,35 g, 19.9 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodné20 ho, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (19 : 1 —* 5 : 1) jako eluentu za vzniku benzylcsteru [(1 S,2S)-1 butyldifenylsilyloxymethyl)—2—methylbutyljkarbamové kyseliny (6.72 g, výtěžek 83%) jako bezbarvých krystalů.

'll-NMR (400 M Hz. CDCI/: δ (ppm) 7,65 až 7,60 (4H. m). 7,45 až 7,30 (1111, m). 5,09 (2H,

m), 4,93 až 4,84 (111, brd, >8.8 Hz). 3.74 až 3,60 (2H, m). 3,60 až 3,52 (IH, m), 1,74 až 1.64 (IH, m), 1,53 až 1.44 (IH. m). 1,14 až 1,06 (lH,m). 1.04 (911, s). 0.92 ažO,8(6H, m).

(2) 3-terč-Butyldifenylsily loxy-1 - [4-[(1 S.2S) 1 —<Zc/-c—butyldifeny Isily loxymethyl>2methylbuty Ikarbamoy I J-l. 3-thiazol-2-yl J azetidin

Roztok benzylcsteru f( I S.2S/-I--(terč buly Id i feny 1 sily loxy met hyl) -2-methylbutyl j karbamové kyseliny (6,72 g. 13.7 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 38(1)) v methanolu (200 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (6,72 g) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbvtek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanol (98 : 2 —► 9 : 1) jako eluentu za vzniku (lS,2S)-!-(/e7r-butyldifenylsilyloxymethyl)-2-methylbutylaminu (4.04 g. výtěžek 83%).

Následně, do roztoku 3-terc- butyId ifeny Isilyloxy-1 /4-ethoxy karbonyl- 1,3- thiazol-2-y 1 )azet idinu (2.00 g. 4,29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (100 ml) byl přidán roztok 0.67M (1 S,2S>-l-(/erc-butyldifenylsilyloxymethyl>-2-mcthylbutylamínu—trimethylhliníku v benzenu (12,9 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refiuxem přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (200 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek

5(i byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (6:1—*

I : 3) jako eluentu za vzniku 3-/erc-butyldifenylsilyloxy-l-{4-[( 1 S,2S)-1-(/erc butyldifenylsily loxy methyl/- 2- methylbutylkarbamoyl] 1,3-thiazol-2-yl}azetidinu (1,89 g, výtěžek 57%) jako světle hnědé pevné látky.

-264 Cí 300137 B6 'H-NMR (400 M Hz. CDCI·,): δ (ppm) 7,70 až 7,57 (8H. m), 7,46 až 7.26 (1211, m). 7.36 (IH, s), 4,73 až 4,67 (IH. m). 4.09 až 3,94 (4H. m). 3,93 až 3,86(111. m). 3.84 (IH. (kl. J-10.7. 2.0 Hz). 3.67 (IH, dd. J= 10,7. 3,4 Hz). 1.90 až 1,82(111. m), 1,22 až 1,11 (111. m). 1,07 (9H.s). 1.04 (911. s), 0.93 (311. d. J=6,9 Hz). 0.90 (311, t. J=7.3 Hz).

(3) 3-Hydroxy-1 - {4-[(1S.2S)-1 —(hydroxymethyl)—2—methyIbutytkarbamoyl]-1,3-thiazol-2yl} azetidin

Do roztoku 3 terč butyIdifenylsilyloxy-1 —{4—[(l S.2S)—1 —(/ďrc but} IdifenyIsilyloxymethyl)2 methyl butyl karbamoyl]-] ,3-thiazol-2-\ I[azetidinu (1,89 g, 2.45 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 38(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (95 ml) bvl přidán roztok l,0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (5,87 ml, 5,87 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za ís použili ethylacetát —> ethylacetát: methanolu (9:1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-1-{ 4[(I S,2S)-l-(hydroxyrnclhy i}-2-methylbuly lkarbamoy l]-l,3-th íazol 2—yl jazetidin (811 mg, výtěžek 100%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 7.37 (IH. s), 7,35 až 7,31 (IH, br s), 4,87 až 4,78 (IH, m). 4,33 (211, dd, >10,3. 6.6 Hz), 4.00 až 3,93 (2H, m). 3.92 až 3,86 (IH, m). 3,86 až 3,78 (IH. zo m), 3,78 až 3,70 (IH, m), 3,05 až 2.98 (IH. brs), 2,75 až 2.71 (IH. brd. ,1=7,3 liz), 1,80 až. 1.70 (IH, m), 1,59 až 1.50 (IH. m), 1,27 až 1,13 (IH, m), 0,98 (3H. d, >7.3 Hz), 0.93 (31L t, >7,3 Hz).

(4) 3-Hydroxy 1 -|4-[( 1 S,2S> 1 -(terč- buty ld imethy Isily loxy methy I )-2-methyl buty I25 karbamoyl]-! .3—thiazol—2—yl j azetidin

Do roztoku 3-hydroxy-1—{4-[(lS.2S)-l-(hydroxymethyl)-2 melhylbutylkarbamoyl] 4,3thiazol—2—yl [azetidinu (1,34 g. 4.48 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 38(3)) v dimethylformamidu (67 ml) byl přidán terč-butyIdimethyIsilylchlorid (810 mg, .mi 5.37 mmol) a imidazol (527 mg, 5.37 mmol) \ ledové lázni a reakční směs byla míchána v ledové lázni 2.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (5 : 1 —► 3 : 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-1-{4-[( 1 S,2S)-l-(/e/r butyldimethylsilyloxyrnethv lj-2-mct hyl buty lkarbamoy l]-l ,3-thiazol—2—yl [azetidinu (1.35 g, výtěžek 97%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 7.57 až 7,51 (IH, hrd, >8.8 Hz), 7.36 (III, s), 4,86 až

4o 4.79 (IH, ní), 4,34 až 4,26 (2H, m), 3,98 až 3,91 (211, m). 3.90 až 3.84 (1H. m), 3,84 (IH, dd, >9,8, 2.4 Hz). 3,63 (IH, dd, .)=9,8, 3,9 Hz), 2.63 až 2,59 (1H, br d, >5.9 Hz), 1.80 až 1,71 (1H, m), 1,60 až 1.51 (IH. ni), 1,20 až 1,12 (IH, m). 0,95 (311, d. >6,8 Hz), 0,91 (9H, s), 0,90 (2H, t, >6,8 Hz), 0,05 (6H, s), (5) l-[4-[(l S,2S)-l-(/erc Buty Idimethy Isily loxymethyl)-2-methylbuty lkarbamoy l]-l ,3th iazo 1-2 - y IJ — 3-methansu 1 fony loxy azetid i n

Do roztoku 3-hydroxy-1 {4-[( 1 S.2S)—1 —(/ťrc—butyldimethylsilyloxymethyl)—2-methyl—butylkarbamoyl] 1.3-thiazol-2-ylj azetid inu (1.35 g, 3.26 mmol) (získaného podle popisu v refe50 renčním příkladu 38(4)) v methylenchloridu (68 ml) byl přidán methansu Ifony leh lorid (758 μΙ.

9,79 mmol) a triethylamin (1,37 ml, 9,79 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni minut byla směs míchána při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena

- 265 CZ 300137 B6 přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2:1 —> 1:2) jako eluentu za vzniku l—{4—[(1 S,2Sjl-(/erc buty Idimethylsily loxy methy lj2-methyl buty Ikarbamoy l]-1.3-thiazol-2-ylJ3-methansulfonyloxyazetid inu (1,55 g. výlěžek 97%) jako světle žlutého oleje.

'll-NMR (400 M Hz, CDCl;): δ (ppm) 7,50 až 7,46 (IH, brd, J=9,8 Hz), 7,43 (IH, s). 5.45 až

5.39 (111, m), 4.45 (IH, dd. >8,8, 6,8 Hz), 4.42 (1H, dd, >8,8. 6.8 Hz). 4.26 (IH. dd. .1=9.8, 3.9 Hz). 4,23 (IH. dd. >9,8. 3.9 Hz). 3.91 až 3,85 (1H. m), 3.84 (1H. dd. J-10.3. 2.4 Hz). 3,63 (111. dd. >10,3. 3.4 Hz), 3,11 (3H. s), 1.80 až 1,71 (IH, m), 1,59 až 1.51 (lil. m). 1.22 až io 1,12 (IH. m). 0.95 (3H. d, >3,8 Hz), 0.91 (9H. s), 0,91 (3H, t, >6.8 Hz), 0,05 (6H. s).

(6) 3 Aeetv lthio—1—{4—[(Ϊ S.2S)— l -(/erc-buty Idimethylsily loxymethyl J2-methylbutylkarbamoyl ]-| ,3-thiazol-2-yl) azetidin i? Do roztoku 1-J4- [(1 S,2S JH/erc-butyldiniethylsilyloxymethyl J2-methylbutylkarbamoyl]l,3-thiazol-2-yl}-3-methansulfonyloxyazetidinu (l,55g, 3,15 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 38(5)) v dimethylformamidu (78 ml) byl přidán thioacetát draselný (2,16 g, 18,9 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan ; ethylacetátu (3 : 1 —► 2 : 1) jako eluentu za vzniku 3—acetylthio—1 — {4—L( 1 S,2S )-1-(/erc-buty Idimethylsily loxymcthy 1 j2-mcthy l-butyl25 karbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl(azetidinu (910 mg. výtěžek 61%) jako světle hnědého oleje.

'll-NMR (400 M Hz, CDCl·,): δ (ppm) 7,52 až 7,46 (lH.br d, >9,5 Hz), 7.39 (IH. s), 4,54 až

4.40 (3H, rn), 4,00 až 3,92 (2H, m), 3,91 až 3.84 (111, m), 3.83 (lil, dd, >10,3, 2,2 Hz), 3.63 (111. dd. >10.3,3,7 Hz), 2,37 (3H. s), 1.81 až 1.70 (IH, m), 1.58 až 1.50(111. m). 1.20 až 1,09 (IH, m). 0,95 (3H, d. >6,6 Hz), 0.91 (911, s). 0.90 (3H, t. .1=7.3 Hz), 0,05 (6H, s).

.40

Referenční příklad 39

3-Acety lthio 1 -{4- [2-{/ere-buty Idimethylsily loxy JI -{/m-buty Idimethylsily loxy metliy I)ethyIkarbamoyl]-!,3-thiazol 2-yljazetidin

AcSN

CONH

OTBDMS

OTBDMS (i) Methylester /ere-butyldifcnylsilyloxy-N--karbobenzyloxy-L-serinu

Do roztoku N-karbobcnzyloxy L šeřinu (4,0 g, 16,7 mmol) v benzenu (200 ml) a methanol 40 (50 ml) byl přidán roztok 2M trimethylsilyldiazomclhanu v hexanu (10,9 ml. 21,7 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (>!—►> 3) jako eluentu za vzniku

N-karbobenzyloxy-L-scrínu, methylesteru (4,40 g, výtěžek 100%) jako bezbarvého oleje.

Následně, do roztoku N-karbobenzyloxy-L-serinu. methylesteru (4.40 g. 16.7 mmol) v dimethylformamidu (210 ml) byl přidán terč buty ld i feny Isi lylch lorid (5.20 ml, 20,0 mino!) a

- 266 Ql 300137 B6 imidazol (1.36 g. 20.0 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 3 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bez5 vody síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (8 : 1 —>· 6 ; 1) jako eluentu za vzniku /erc-buty Idifeny Isily loxy-N-karbobenzyloxy-L-šeřinu, methylesteru (18.8 g, 99%).

'H-NMR (400 M Hz, CDCIJ: 6 (ppm) 7,61 až 7,56 (4H, m). 7.45 až 7,3 1(11 H, m), 5,69 až 5,62 (IH. br d, >8.8 Hz), 5,12 (2H, s). 4,45 (1H. dt. >8,1, 2.9 Hz). 4.09 (IH. dd. J=l0.3, 2.9 Hz), io 3,90 (IH, dd, >10,3. 2.9 Hz), 3,74 (3H, s).

(2) Ben /\ lester [2© terč-Buty Id i fenyl sily loxy© \-(terc buly Id i feny Isily loxy methy Jet h\l© karbamové kyseliny

Do roztoku /ero-butyldifenylsilyloxc-N-karbobenzyloxy-L-serinu, methylesteru (11,5 g.

24.8 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 39(1)) ve směsi tetrahydrofuranu (115 ml) a ethanol (230 ml) byl přidán borohydrid sodný (1.88 g. 49.6 mmol) a chlorid lithný (2,10 g. 49,6 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi methylenchloríd a 10% vodný

2d roztok kyseliny octové. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použili n-hexan : ethylacetátu (3 : 1 —> 1 : 1) jako eluentu za vzniku benzylesteru [2-(tere-butyldifenylsilyloxy©l©hydroxymethyjethyljkarba25 niové kyseliny (9,26 g, výtěžek 81%) jako bezbarvého oleje.

Následně, do roztoku benzylesteru (2-(tcrc butyldifenylsilyloxy) 1 (hydroxymethyl)elhyl]-karbamové kyseliny (9,26 g. 20.0 mmol) v dimethylformamidu (280 ml) byl přidán /m-butyldifenylsilylchlorid (7,79 ml, 30,0 mmol) a imidazol (2,04 g. 30,0 mmol) v ledové lázni a směs .to byla míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití n35 hexan : ethylacetátu (19:1 —> 9:1) jako eluentu za vzniku benzylesteru [2©/e/r- butyldifenylsily loxy© l©/en-buty Idifeny Isily loxymetliyl ©thy l]karbamové kyseliny (13,6 g, 97%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 M Hz. CDCIJ: δ (ppm) 7.65 až 7,60 (811, m), 7,44 až 7,29 (17H, m). 5,05 (2H. s), 4,99 až 4.93 (lil. br d. >8,8 Hz). 3,94 až 3,87 (IH. m), 3,85 (2H. dd, >9.8, 3,9 Hz). 3.76 (2Π, dd. >9.8. 5.9 Hz). 1.02(1811, s).

(3) 3-/erc-Buty Idifeny loxy-4©2©/en’ butyklífenylsilyloxy)l©/ť/r-butyldifenylsilyloxymethyl)ethylkarbamoyl©l,3-thiazol-2 yljtzetidin

Roztok benzylesteru [2©/crc buty Idifeny Isily loxy© 1 -(terč- buty Idifeny Isily loxy methyJethyl© karbamové kyseliny (13,6 g, 19,5 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 39(2)) v melhanolu (410 rnl) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (13,6 g) při teplotě místnosti 3.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn so chromatografíeky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanol (98 : 2 —► 9 : 1) jako eluentu za vzniku 2-(terc-butyldifenylsilyloxy©l©tcrc-butyldifenylsilyloxymethyljethylaminu (9,34 g. výtěžek 84%) jako bezbarvého oleje.

- 267 CZ 300137 B6

Následně, do roztoku 3 /erc but\ldifcn\lsil\loxy 1(4 -ethoxxkarbonyl 1.3 thiazol 2 \l)azetidinu (2.00 g. 4,29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (100 ml) byl přidán roztok 0.67M 2-( ten--buty Id i feny Isi ly loxy )-I-(/ťrc-buty Idi feny Isily loxymethyl)ethylaminu-trimethylhliníku v benzenu (12,9 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (200 ml) a ethylaeetát (200 ml) byl přidán do reakční směsi a výsledná směs byla míchána při teplotč místnosti 3 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodneío ho, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (6 : 1 -+4: 1) jako eluentu za vzniku 3-íerc- butyldifeny loxy-1 - {4 [2-(/erc-butyldifenylsi ly loxy )-1-( terč butyldifenylsilyloxymethyl)cthylkarbamoyl]-1.3-thiazol-2- yl} azetíd inu (3.19 g. výtěžek 75%) jako světic žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCh): δ (ppm) 7,70 až 7,65 (811. m). 7,59 až 7,55 (4H. m). 7.44 až 7,28 (18H, m), 7,33 (IH. s). 4.71 až 4,64 (111, m), 4,31 až 4.22 (IH. m). 4.04 až 3.97 (4H, m). 3.94 (2H, dd, J=9.2. 4.4 Hz), 3,82 (2H, dd, J-9,2. 6,2 Hz).

(4) 3 -Hydroxy-l-(4-[2-hydroxy 1- (hydroxymethyl)ethylkarbamoyl]-1,3-thiazol-2-vl [ azetidin

Do roztoku 3 terč- butyldifenyloxy-1 -14 [2-(/ťrc-butyld i feny Isily loxy)-1 (/ť/r-butyldifenylsilyloxymethyl)ethylkarbamoyl]-l,3-thiazol-2-yl)azetidinu (3.19 g, 3,23 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 39(3)) v bezvodém tetrahydrofuranu (160 ml) byl přidán roztok COM tetra-n butylanioniumfluoridu v tetrahydrofuranu (11,6 ml, 11,6 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylaeetát: methanolu (9 : 1 —+ 8:2) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-{4- (2-hydroxy-l-(hydroxymethyl)-ethylkarbamoyl]-l .3-thiazol 2-yl [azetidinu (1.21 g, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, DMSO-dJ; δ (ppm) 7,47 až 7.41 (IH, brd. J-8.8 Hz), 7,42 (IH, s). 5,84 (III, d, .1=6,6 Hz), 4,80 (211. t. .1=5.5 Hz). 4,66 až 4,58 (lil. m), 4,28 až 4,21 (2H. m), 3,88 až 3,81 (lli, m), 3.80 (2H, dd. J=8,8, 4.4 Hz), 3,53 (2H. m), 3,45 (211, m).

(5) l-{4-[2-(/erc Butyldimethylsilyloxy)-1 (/erc-butyldimethylsilyloxymethyl)ethylkarbamoyl]-l.3-thiazol-2-ylJ-3 hydroxyazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-1-{4 [2-hydroxy-l-(hydroxymethyl)ethylkarbamoyl]-l,3 thiazol- 2 yjazetidinu (750 mg, 2,74 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 39(4)) vdi40 methyl fbrmamidu (38 ml) byl přidán terč-butyldimethyIsilylchlorid (951 mg, 6.31 mmol) a imidazol (430 mg, 6.31 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána v ledové lázni přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (3:1 -> 1 : 1) jako eluentu za vzniku 1 — {4—J 2—(/erc- buty klimethylsilyloxy)- i - (terč -butyldimethylsilyloxymethyl)etbylkarbamoyl]-1,3 thiazol-2-yl}-3-hydroxyazelidinu (070 mg, výtěžek 71%) jako světle žluté pevné látky.

5» 'H-NMR (400 M Hz. DMSO-d,,): δ (ppm) 7.62 až 7,57 (IH. br <1. .1=8,1 1 lz), 7.38 (IH. s), 4,87 až 4.78 (III. m). 4.30 (2H, dd, .1=10,3. 6.6 Hz), 4,12 až 4,04 (IH, m). .3,93 (2H, dd, .1=9,5, 4,4 Hz), 3.84 (211, dd, ,1-9,5. 3,7 Hz), 3,62 (211, dd, J-9,5. 6.6 Hz). 2.26 až 2,22 (I H, br d.

J=6.6 Hz), 0,92 (I8H, s). 0,08(1211. s).

268 · (6) ί -{4- [ 2-((erc-Butyl dimethyl sily loxy)-1 -(terč buty Id imethy Isi ly loxymethy l)cthylkarbainoyl]-! ,3-th iazol-2-yl}-3-methansul fony loxyazct idin

Do roztoku 1 — {4—[ 2—(/ere—butyld imethy Isily loxy)- M/ere-butyldi methy Isi lyloxy meth v Jethylkarbamoyl]-! ,3-thiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidinu (1,27 g, 2,53 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 39(5)) v methylenchloridu (64 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (587 μΙ. 7.59 mmol) a triethylamin (1,06 ml. 7,59 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 1.5 hodiny. Po zkontrolování io doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použiti n-hexan : ethylacetátu (3 : I —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku >{4-[2 (terč butyldimelliv Isi lyloxy) 1 (terč is butyldimethvlsi lyloxymethyl )ethylkarbamoyl]— 1.3—thiazoi—2—yl}—3—methansulfony loxyazetidinu (1,56 g. výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7.58 až 7,53 (IH, brd. >8.8 Hz), 7.44 (IH. s). 5.43 až 5,38 (III, m), 4,41 (2H, dd, .1=9,5, 6,6 Hz), 4,23 (2H, dd, J-9,5, 5,9 Hz), 4,12 až 4,03 (IH, m), 3,84 (IH. dd. >9.5. 2,9 Hz), 3,64 (2H, dd. >9.5, 5.9 Hz). 3.11 (311, s), 0.91 (18H, s). 0,07 (1211,

s).

(7) 3-Acety Ith io—l—{4—[2—(Zerc- buty Id i methy Isi lyloxy) 1 (terč buty Id imethy Isi lyloxymethyl)- ethyl karbamoyl J-l ,3—thiazoi—2—v I [azetidin

Do roztoku >{4-[2-(/erí.--buty ld i methy Isily loxy )-l-(Zďrc -buty Idimethy Isi lyloxymethyl )ethylkarbamoyl]-l,3-thiazol-2 yl[ 3-methansulfony loxyazetidinu (1.56 g, 2.53 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 39(6)) v dimethylformamidu (78 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,73 g, 15,2 mmol) při teplotě místností. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10%

5(i vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (4:1 —► 2 : 1) jako eluentu za vzniku 3-acety1thio->{4-[2-{/erc buty Id imethy Isi lyloxy) 1 --(terč buty Id imethy 135 si lyloxymethyl )-ethylkarbamoyl]-l,3-thiazol-2-yl[azetidinu (773 mg. výtěžek 57%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7.59 až 7,53 (IH, br d, >8,8 Hz), 7,40 (111, s), 4,52 až 4,42 (3H. m). 4.11 až 4.06 (IH. m), 3,94 (2Π. dd, >8,4, 4,8 Hz). 3,83 (2H, dd. >9,5, 3.3 Hz), 3.61 (211. dd, >9,5. 6,6 Hz), 2,37 (3H. s), 0,91 (18H, s), 0,07 (12H, s).

Referenční příklad 40

3-Acety Ithio- l-M-{[2-(/m^,-buty Idimethy Isily loxy )cthyl]-methyl-karbamoyl [- 1,3-thiazoi-245 yl [azetidin

(1) Benzylester [2-jerí-butyldifenylsilyloxy)ethyl]methylkarbamové kyseliny

- 269 CZ 300137 B6

Do roztoku N-methylaminoethanol (1,20 ml, 15.0 mmol) v methylenchloridu (36 ml) byl přidán benzylcster kyseliny chromové (2.56 ml. 18.0 mmol) a triethylamin (2.52 ml. 18.0 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku benzylesteru (2-hydroxyethyl jmethylkarbamové kyseliny (2,8 g. výtěžek 90%) jako světle žlutého oleje.

Následně, do roztoku benzylesteru (2-hy droxyethyl jmethylkarbamové kyseliny (2,82 g. 13,5 mmol) v dimethylformamidu (85 ml) byl přidán /ere-butyIdifenylsilylchlorid (4.21 ml.

16,2 mmol) a imidazol (1.10 g, 16.2 mmol) v ledové lázni. Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol a reakční is směs byla míchána 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (9 : l)jako eluentu za vzniku benzylesteru |2-(/ďrc-butyldi fenylsi lyloxyjethyl Jmethylkarbamové

2(i kyseliny (5.7 g, výtěžek 94%)jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCh): δ (ppm) 7,72 (1H, dd, J=7.4, 1,6 1 Iz), 7,47 až 7,20 (11H. m). 7,64 (4H, t, J=6J Hz), 5,12 (IH, s), 5.05 (IH. s). 3.80 (IH, t, .1=5.5 Hz). 3,73 (1H. t. J=5.5 Hz), 3,45 (1H, t. J-5,6 Hz). 3,41 (1H, t, .1=5,6 Hz), 2,99 (3H. s). 1.03 (911, s).

(2) 3-/ítc Buty ldifeny lsi lyloxy-1-(4-( [2 </erc-buty ldifeny Isily loxy )ethyl] methy Ikarbamoy 1(1,3—th iazol—2—y ljazet idin

Roztok benzylesteru [2-(/ere-butyldifenylsilyloxy) ethyijmethylkarbamové kyseliny (5,7 g, 12,7 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 40(1)) v methanolu (285 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (5,7 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnuli reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (19 : 2) —> ethylacetát: methanolu (1:1) jako eluentu za vzniku J2-(terč-butyidifenylsilyloxyjethylImethylaminu (2,67 g, výtěžek 69%) jako b průhledného oleje.

Následně, do roztoku 3-terč-butyklifenylsilyloxy-1-(4-ethoxykarbonyl-1.3-thiazol 2-yljazetidinu (1.91 g, 4,09 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(1)) v benzenu (100 ml) byl přidán roztok 0.67M \2-(í.crc butyldifenylsilyloxyj-ethyljmethylaminu trimethyl40 hliníku v benzenu (13,6 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána pod refluxem přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce 10% vodný roztok kyseliny octové (100 ml) a ethylacetát (100 ml) byl přidán do reakční směsi v ledové lázni a výsledná smčs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po přidání ethylacetátu byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromalograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za v/niku 3terc buty Id i feny Isily loxy-1-(4-( [2-(/rrc buty ldifeny Isily loxy jet hyljmethyl karbamoyl )-1,3thiazol-2-y ljazet idi nu (2,54 g, výtěžek 85%) jako světle žluté pevné látky.

5(1 'll-NMR (400 M Hz. CDCh): δ (ppm) 7.74 až 7,55 <8H. ni). 7.50 až 7,31 (1211. m). 7.00 (III. s),

4,79 až 4.64 (IH, ni), 4.08 až 3.59 (711, m, obsahující 4,80 až 4.00 (211, m). 3,85 až .3.73 (2H. m)), 3,27 (0.3 Π, s), 3,07 (0,7 H, s). 1,06 (911, s). 1.02 (9H, s).

(3) 3-llydroxy-l-}4 -[(2—hydroxyethyl) methyl -karbamoyl J-1,3-th íazol-2-y ljazet idin

-270CZ 300137 Bó

Do roztoku J-Zerc-buty Idifeny Isily loxy-1 —(4—{[2—(Zerc—buty Idifeny Isi lyloxvjethyl J methy lkarbamoyl}-1,3-thiazol-2-y!)azetidinu (2.24 g. 3,05 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 40(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (70 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butyI? amon i um fluoridu v tetrahydrofuranu (7.32 ml, 7,32 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (20 : 1) —> ethylacetát: methanolu (15 : 1) jako eluentu za vzniku 3 hydroxy l-{4-[(2-hydroxyethylEmethyl-karbamoylJ-1.3-thiazol-2-yl}azetidinu (833 mg, výtěžek io 94%) jako bílé pevné látky.

¹1 l-NMR (400 Μ I lz. CDCb): Ó (ppm) 7.18 (1H. s). 4.86 až 4.74 (1H. m), 4.29 (2H, t, >8.4 Hz), 3,94 (2H, dd, J-8,4, 4,9 Hz), 3.86 (2H. t. J“5.0 I lz), 3,65 (211.1, J=5,0 I Iz), 3,07 (3H, s).

(4) 1 (4 ·{ [2-(Zm-Buty Id imet hyl sily loxy )eíhyl]-mcthyl-karbamoyl}-1,3-th iazol 2 yl)—3— υ hydroxyazetidin

Do roztoku 3 hydroxy-l-{4-[(2-hydroxyethyl)mcthylkarbamoyI]-1,3-thiazol 2 v 1}azetidinu (576 mg. 2,24 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 40(3)) v dimethyl· formám idu (29 ml) byl přidán terč- buty Idimelhylsi lylehlorid (354 mg, 2.35 mmol) a imidazol

2o (160 mg, 2,35 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyla nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan :

ethylacetátu (3:1) —► ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1-(4-( [2-(terc- butyldi methy 1silyIoxy)ethy1]methylkarbamoy1}-l,3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazctidinu (489 mg, výtěžek 60%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCb): δ (ppm) 7,11 (0,7H, s), 7,01 (0,311, s), 4,87 až 4,76 (IH, rn), 4.3 I (2H, t. J-8,3 Hz), 3,96 (2H, dd, >8,3, 4,5 I lz), 3,91 až 3,83 (IH, m), 3,79 (1H, d. J =4.5 I lz). 3,74 so (111, d. >4,5 Hz), 3,66 až 3,52 (IH. m), 3.28 (0,911. s). 3.11 (2,1H. s), 0,88 (9H. s), 0,05(6H, d,

J-14,0 Hz).

(5) 1 -(4-( [2-(/fc?r-ButyldiinethyIsily loxy )ethyl]—methyl—karbamoyl}—>3—thiazol—2—yl)—3— methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku 1 (4-{[2-</m-butyldimethylsilyloxy)cthyl]melhylkarbamoyf}—l,3—thiazol—2—yl>—

3-hydroxyazetidinu (442 mg. 1,19 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 40(4)) v methylenchloridu (15 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (0,12 ml. 1,49 mmol) a triethylamin (0,20 ml, 1,49 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkon40 trolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogcnuhliěilanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku >(4 ([2 Wc-butyldimethy!silyloxy)ethyl]nielhyl-karbamoyl}i? 1,3-lhiazol 2-yl)-3-methansulfonyloxyazctidinu (517 mg. výtěžek 97%) jako světle žluté pevné látky.

¹ H NMR (400 M Hz. CDCb): δ (ppm) 7,18 (0,6H, s), 7,08 (0,4H, s), 5,45 až 5.35 (IH. m), 4,42 (2H. I, >8.7 Hz), 4,23 (2H, dd, >8.7, 3,7 Hz). 3,91 až 3.81 (IH, m), 3.81 až 3,74 (IH, m). 3.74 až3,67 (IH. rn), 3.62 až3,53 (Hl, m). 3,26 (1,2H. s), 3.09 (1.8H, s). 0,85 (911, s), 0,01 (611, s).

51) (6) 3-AcetyIthio— I -(4-([ 2-(terč-butyIdimethylsi lyloxyjethy I] -methyl-karbamoyl}-1,3th iazol-2-y ljazetidin

-271 CZ 300137 B6

Do roztoku 1 (4-{[2-(/m*· butyldimethylsilyloxy)ethyl]methylkarbamoyI}-1,3-thiazol-2-yl)—

3-methansulfonyloxyazetidinu {516 mg. 1,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 40(5)) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán thioacetát draselný (815 mg.

7,14 mmol) při tepioté místnosti. Smčs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (I : 2) jako eluentu za vzniku 3id acetyllhio-1-(4- í [2 -(/erc-butyld imethy Isily loxy )ethylj-methy l-karbamoyl}-l,3-th iazoI-2yljazetidinu (279 mg, výtěžek 57%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M liz, CDCI,): δ (ppm) 7,08 (0,7H, s), 7,16 (0,4H. s). 4.52 (2H. t, >7.3 Hz). 4,48 až 4,39 (IH, m). 3.97 (2H, t. >7,3 liz). 3.92 až 3,82 (IH, m). 3,78 (IH, d, >4,1 Hz). 3.75 (IH, d. >4,1 Hz), 3.66 až 3.50 (IH. rn). 3,59 (0.9H, s), 3,92 (2.lil, s). 2,39 (311. s), 0,88 (9H, d, is >4,7 Hz), 0,04 (ÓH.d, >1,5 liz).

Referenční příklad 41 no p-Nitrobcnzyl (1 R,5S,6S)-2—{1-(4-( p-n itrobenzy loxy karbony Imethy l)karbamoy 1-1,3-thiazol2— yljazetidin—3—yl }th io—6—[(R>— l terč buty Idimethy Isily loxyethyl |— l-methylkarbapen-2 em3- kar boxy lát

COOPNB (1) l —(4—Ally loxy karbonyl 1.3--thiazol—2—y l>3-/crc-buty ldifeny Isily loxyazetidin

Do roztoku 3-íerc bulyldi fenylsi lyloxy-l-(4-karboxy l-l ,3-th iazol-2-vl)azetid inu (6,73 g,

15.3 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dimethylformamidu (330 ml) hyl přidán ally Ibromid (1,59 ml. 18,4 mmol) a diisopropylethylaminu (3.21 ml. 18,4 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 10 hodin. Po zkontrolování doběh5o nutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (5: 1) jako eluentu za vzniku 1 (4 allyloxy35 karbonyl-l ,3-thiazol 2 yl)--3-/ťrc-butyldifenylsilyloxyazetidinu (5,31 g, výtěžek 73%) jako hnědého oleje, 'H-NMR (400 M Hz. CDCh): δ (ppm) 7.63 až 7,59 (4H, m), 7.46 (IH, s). 7.47 až 7.36(611. m). 6,04 až 5.95 (IH. m). 5.40 až 5,35 (IH, m), 5.28 až 5.24 (IH. rn). 4,80 až 4,78 (211, rn). 4.77 až 4.71 (IH, ni), 4,16 (2H, dd, .1=8,8, 6,6 Hz), 4,06 (2H. dd, .1=8,8, 4,4 Hz). 1.06 (9H. s).

(2) l-(4-Allyloxykarbonyl -1,3 th i azo l—2—yl)—3 -hydroxy azet idin

Do roztok u I -(4-a I ly loxy karbony 1 -1,3-th iazo 1—2—y 1 )-3-terc -buty I d i feny l s i ly I oxyazet idinu (5,31 g, 11.1 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (266 ml) byl přidán roztok ÍM tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (13,3 ml.

13.3 mmol) v ledové lázni. Smčs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chroma- 272 CZ 300137 B6 tografíeky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1 (4-allyloxykarbonyl-l .3-thiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (2.91 g. výtěžek 100%) jako světle hnědých krystalů.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI;): δ (ppm) 7.49 (111, s). 6.06 až 5.96 (IH, m). 5.42 až 5,35 (111, m).

5.29 až 5.24 (1H. m), 4,87 až 4,80 (1H, m), 4.79 (2H, d, >5.9 Hz). 4.38 (2H. t, >8,8 Hz), 4.02 (2H. dd. .1=9,8, 3.9 Hz). 2,52 až 2.37 (1H. br s).

(3) 1 -(4- Allyloxykarbony i-1,3-th Íazol-2-yl)-3-methansu liony loxyazetidin io Do roztoku 1 -(4-allyloxykarbony I-1,3-thiazol-2-yl)- 3-hydroxyazet idinu (2.91 g, 11.1 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(2)) v methylenchloridu (146 ml) by! přidán methansu Ifony Ichlorid (2,58 ml, 33.3 mmol) a triethylamin (4,67 ml. 33,3 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do zbytku byl přidán ethylacetát a diisopropylether a směs byla filtrována a výsledný zbytek byl promyt diisopropyletherem za vzniku l-(4-ally loxy karbony 1-1,3-th iazo l-2-yl)-3methansulfonyloxyazetidinu (2,71 g, výtěžek 77%) jako světle hnědých krystalů.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI;): δ (ppm) 7,55 (lil, s), 6,07 až 5,96 (IH, m), 5,45 až 5,35 (2H. m), 5,30 až 5,25 (IH, m), 4,81 (211. dt. >5.9, 1,5 Hz), 4.51 (2H, dd. >11,0. 6.6, 1,5 Hz), 4,31 (2H, ddd. J-l 1,0, 4,4, 1,5 Hz), 3,10 <3H, s).

(4) 3—Acety Ithio- 1 (4-allyloxykarbonyl-l ,3-thiazol-2-yI)azetidin

Do roztoku l-(4-allyloxykarbonyl-l,3—thiazol 2-yl)-3-methansulfonyloxyazetidinu (2.70 g. 8,51 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(3)) v dimethylformamidu (135 ml) byl přidán thioacetát draselný (5.83 g, 51,1 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 10 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2: 1) jako eluentu za vzniku 3-acety lth io-l-( 4-ally loxykarbony l-l,3-thiazol-2-yl jazetidinu (1,61 g. výtěžek 63%) jako světle hnědé pevné látky.

'HNMR (400 Μ I lz, CDCI;): δ (ppm) 7.51 (1H. s). 6.06 až 5,96 (1H, in), 5,41 až 5,35 (111, m). 5,29 až 5,26 (1H, ni). 4,58 (2H, t, J=8.1 Hz), 4,47 až 4,40 (IH. m), 4.04 (211. dd. J=9.5, 5.9 Hz), 2,36(311, s).

(5) p-Nitrobenzyl-í 1 R.5S.6S)- 6 [(R)-1 -/ere-butyldimethy lsily loxyethyl]- 2- (difeny Ifosfory Ito oxy) 1 methy íkarbapen-2-em-3-karboxvlát

Do roztoku p-nitrobenzyl( 1R, 5 S, 6 S )-2-( d i fe ny 1 fos fóry loxy)—6—[(R>-1 — hydroxyethyl |-lmethylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (5.00 g. 8,41 mmol) v dimethylformamidu (250 ml) byl přidán /m-buty [dimethylsily Ichlorid (2.54 g, 16,8 mmol) a imidazol (1.14 g, 16,8 mmol) v Icdoi? vé lázni a reakční směs byla míchána v ledové lázni 7 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol a výsledná směs byla míchána 30 minul. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití nhexan : ethylacetátu (3:1) jako eluentu za vzniku p-n i trobenzy l-( 1 R,5S,6S>6-l(R)-l-Zť/x' buty Idimethyl-silyloxyethyl ] 2 (d i feny Ifosfory loxy H-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy látu (5,27 g. výtěžek 88%) jako světle žlutého oleje.

- 273 CZ 300137 B6 ’Π-NMR (400 M Hz, CDCI/: δ (ppm) 8,14 (2H, d, >8,8 Hz). 7,56 (2H. d. >8.8 Hz), 7.39 až

7.29 (4H. m), 7.28 až 7.17 (6H. m). 5.34 (1H. d, 3=13,9 Hz), 5.23 (111, d. >13.9 Hz). 4.24 (IH.

dq, J-5.9. 5.9 Hz). 4,20 (IH, dd, >10,3. 2.9 Hz), 3,43 (IH. dq. 3=10.3.7.3 Hz). 3.28 (1H. dd,

3=5.9. 2.9 Hz), 1,23 (3H, d, 3=5,9 Hz). 1.20 (3H. d. >7,3 Hz). 0,86 (9H. s), 0,06 (6H, d.

3—3,7 Hz).

(6) p-Nitrobenzyl/1 R,5S,6S)-2-[ I/4-al 1\'loxykarbonyI-1.3-thiazol-2\/azetidin-3-ylJthio6-[(R)-l - terč -buty Idimethy Isily loxyethy! ]-l -methy lkarbapen-2- em 3 karboxy lát io Do roztoku 3-acetylthio-1 /4-allyloxykarbonyl-1.3 lhiazol-2-y/azetidinu (1.61 g, 5,40 mmol) (získaného v referenčním příkladu 41(4)) v dimethylformamidu (80 ml) byl přidán hydrazinaeetát (596 mg. 6.47 mmol) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1,5 hodiny za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl roztok p-n itrobenzy 1(I R.5S.6S )-6/( R>]-/£tc buty Idimethy Isily loxyethy l|-2/d ifeny Ifosfory loxy )-l-met hylkarba15 pen 2 em-3-karboxylátu (3,83 g, 5,40 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(5)) v acetonitrilu (190 ml) přidán po kapkách do reakční směsi v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou.

Následně diisopropylethylamin (3,76 ml, 21,6 mmol) byl přidán do reakční směsi a směs byla

2o míchána přes noc při postupném zvyšování teploty na teplotu místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhl ičitanu sodného a promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý stran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : I) jako eluentu za vzniku pnitrobenzyl/l R,5S,6S)-2-[ l/4-al lyloxy karbony 1-1.3-th iazol-2-y l)azet idin-3-yl] thio 6 [(R)— \-tere -butyIdiinethylsilyloxyethylJ—Ϊ —methyI—karbapen-2- em-3-karboxylátu (3.73 g. výtěžek 97%) jako světle žluté pevné látky.

‘H-NMR (400 M Hz, CDCI/: δ (ppm) 8.21 (211, d, >8,8 Hz). 7.65 (2H. d. 3=8.8 Hz). 7,53 {1H, to s), 6,07 až 5.96 (III, m), 5,45 (1H. d, .1-!3,9 Hz). 5.42 až 5.35 (1Π. m). 5,30 až. 5,25 (1H, m),

5.26 (IH, d, >13,9 Hz), 4.80 (2H, d, 3=5,1 Hz), 4.55 (2H, q. 3=8,1 Hz). 4,32 až 4,22 (3Π, m), 4,15 až 4.09 (311. ní). 3.26 (IH, dd. 3-5.1. 2,9 Hz), 3,13 (111, .19.5, 7,3 Hz), 1,25 (3H. d. 3=5,9 Hz), 1,24 (3H, d, 3=7.3 Hz). 0.87 (911, s). 0,08 (6H. d. 3=5.1 Hz).

ÍS (7) p-N i trobenzy 1/1 R.5 S.6S)—2—| 1/4-karboxy- 1,3 -thiazol-2-y /azetid i n-3-yl (thio- 6- [(R)1 -ím-buty Idimethy Isi ly loxyethy 1] 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-n itrobenzyl/1 R,5S,6S)—2—[ 1 /4—allyloxykarbony I— l ,3—thiazol—2—yl )azetidin—3— y/thio- 6- [(R) 1 /erc-buty Idimethy Isily loxyethy 1]-1- methy lkarbapen-2-em-3-karboxy látu (3.73 g. 5.2 mmol) (získaného v referenčním příkladu 41(6)) v methylenchloridu (180 ml) byl přidán dimedone (1,46 g. 10,4 mmol), tetrakís(tnfenylfosfin)palladium(0) (603 mg, 0,522 mmol) a trifcnylfosfin (205 mg, 0.783 mmol) a směs byla míchána při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla sušena přes

4? bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (10 : I) —> methylenchloridu : methanolu (10:1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl/1 R,5S,6S)-2-[ 1/4karboxy -1,3—thiazol—2—y/azetidin—3-yl]thio- 6-[(R)-l-ím‘ -buty Idimethy Isi Ivloxyethyl J-1 methyl-karbapen-2 em-3-karboxylátu (1.91 g, výtěžek 54%) jako světle hnědé pevné látky.

I Imotnostní spektrum (PAB¹): m/z : 675 [M+H]' (8) p N itrobenzy lester N//erc-butoxykarbonyl)glyeinu

-274 CZ 300137 B6

Do roztoku N-fierc butoxykarbonyl)glycinu (1,51 g, 8,62 mmol) v bezvodém methylenchloridu (75 ml) byl přidán p-nitrobenzylalkohol (2.63 ml. 17,2 mmol). I—ethy 1—3—(3—di- melhylaminopropy jkarbodiimidhydrochlorid (dále označován jako WSC) (3.3 g. 17.2 mmol) a 4-dimethy 1aminopvridin (106 mg. 0,87 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethyíacetátu (2 : l)jako eluentu za vzniku p-n itrobenzy Iio esteru N-f/e/r-butoxykarbonyDglycinu (2,67 g, výtěžek 100%) jako bílých krystalů.

'H-NMR (400 M Hz. CDCIj): δ (ppm) 8.23 (2H. d. >7.5 Hz). 7.53 (2H, d. >7.5 liz). 5.28 (2H. s). 5,02 (IH. br t. >3.3 liz). 4.00 (2H. d. J=3.3 Hz), 1.46 (911. s).

(9) p-Nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)--2-( l-[44p-nitrobenzyloxykarbonylmethyl)karbamoyl-f.315 thiazol—2 -yljazetidin—3—yl Jthio- 6-[(R) 1 /tvr-butyldí methy lsi lyloxyethyl] 1 methyl-karbapen-2-em-3-kar boxy lát

Do roztoku p-nilrobenzylesteru N-(/e/r-butoxykarbonyl)glycinii (2,67 g, 8.62 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(8)) v 1.4-dioxanu (27 ml) byl přidán roztok 4N chlorovodíku v 1.4-dioxanu (27 ml) v ledové lázni. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán diethylether a reakční směs byla míchána 30 minut. Výsledná reakční směs byla filtrována a získaný zbytek byl promyt diethyletherem a sušen za vzniku hydroehloridu p-n itrobenzy lesteru glycinu (1,59 g. výtěžek 75%) jako bílých krystalů,

Následně do suspenze p-n itrobenzy l-( 1 R.5S.6S)- 2-[ 1 - (4- karboxy-1.3-thiazol-2-yljazetidin 3-yl jthio- 6-[(R) 1 /erc—butyldimethy lsi lyloxyethyl]-1-methy lkarbapcn-2-em- 3 karboxylátu (207.4 mg. 0,31 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(7)) a hydroehloridu p-nitrobenzylesteru glycinu (116 mg. 0,47 mmol) (získaného jak jc uvedeno výše) v dimethyl3d formamidu (10.5 ml) bvl přidán diethylfosforylkyanid (0,072 ml. 0.47 mmol) a triethylamin (0,14 ml. 1.00 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Smčs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnuli reakce byla reakční směs rozdělena mezi etliylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta 0.5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (3 : I) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2 j 1 [44 p-n itrobenzy loxy karbony! methy l)karbamoyl-l ,3Ih iazol- 2-yl jazetidin-3- yl} thio—6—L(R)—1 —t—butyId imethylsi lyloxyethyl]- 1-methy lkarbapen-240 em-3-karboxylátu (209,7 mg. výtěžek 77%) jako světle žlutého sirupu.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl·,): δ (ppm) 8,23 (211, d, >8,8 Hz). 8,22 (2H. d, J-8.8 Hz). 7.65 (2H. d. J=8.8 Hz), 7,59 (IH. t, J=3.3 Hz). 7,54 (2H. d, >8,8 Hz), 7,47 (IH. s), 5,46 (lil, d, J-13,9 Hz). 5,30(211, s), 5.27 (IH. d, J-13,9 liz), 4,51 (IH, t. >8,3 Hz), 4.47 (IH, I, J-8,3 Hz), 4.37 až 4.23 (5H, m), 4,08 (lil, dd, .1^8,3. 3,3 Hz), 4,06 (lil, dd, J-8,3. 3.3 Hz), 3,27 (IH. dd,

J=6,2, 3,6 liz). 3.16 (IH, dq. J=l 1,5. 8,8 Hz). 1,27 (3H. d. J=8.8 liz), 1,25 (311, d. J=8.8 liz).

0,87 (9H, s), 0,09 (3H, s). 0,08 (3H. s).

Referenční příklad 42 p-Nitrobenzyl-(] R.5S.6S)-2-( l-[4 (3-/t?r-butyldifenylsilyloxyazetidm-l-karbonyl)-l.3thiazol-2-y Jazet idin- 3-yl} tli io-6-[(Rj-l-/er<.· buty Idímethylsily loxyethyl]— 1-methy Ikarbapen2 em-3-karboxylát

- 275 Q7. 300137 B6

N\

OTBDPS (1) 1 -Benzy loxy karbony l-3-/ere-butyIdi feny Isilyloxyazetidin

Roztok 1-benzhvdryl--3--hydroxvazetidinu {10 g. 41,8 mmol) v methanolu (300 ml) byl kata5 lyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia (10 g) na aktivním uhlí ve vodní lázni (50 °C) hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs filtrována a zbytek promyt methanolem. Kombinovaný filtrát bvl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a destilovanou vodu. Organická vrstva byla koncentrována za sníženého tlaku a získaný zbytek sušen za sníženého tlaku. Výsledný surový produkt byl rozpuštěn ve směsi io methylenchloridu (120 ml) a methanolu (120 ml), benzylesteru chloromové kyseliny (8,95 ml,

62.7 mmol) a pak byl přidán tríethylamin (8,79 ml. 62,7 mmol) a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, is filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethy lacetátu (1:1)—» ethylacetátu jako eluentu za vzniku

1-benzy loxykarbony l-3-hydroxyazelidinu (1,9 í g, výtěžek 22%).

Následně, do roztoku 1 -benzyloxykarbony 1-3 hydroxvazetidinu (1,91 g. 9.22 mmol) v dimethyl20 formamidu (96 ml) byl přidán /m-butyIdifenylsilyIchlorid (2.88 ml. 11,1 mmol) a imidazol (756 mg. 11,1 mmol) v ledové lázni. Výsledná směs byla míchána v ledové lázni 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogen uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (6:1) jako eluentu za vzniku

1-benzyloxykarbonyl-3-/erc-bulyldifenylsilyloxyazctidinu (4,04 g, výtěžek 98%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCb): δ (ppm) 7,73 až 7.70 (lll, m). 7,60 až 7.56 (4H, m), 7,46 až 7,29 .to (10H. m). 5,07 (2H, s), 4,58 až 4,52 (IH, m). 4.01 (2H, m), 3.95 (211, dd, .1=9,8, 4,9 Hz), 1,05 (QH.s).

(2) p-N itrobenzy I (1 R,5S.6S)-2-( 1 -[4-(3-/ťrc-butyIdifenylsilyloxyazetidin-1 -karbonyΟΙ. 3 -thiazol—2—yljazetidin 3-yl} thio—6—I(R)— \-terc-buty ld imethylsily loxyethyl J-1 -met hyl35 karbapen-2-em-3-karboxylát

Roztok l-benzyloxykarbonyl-3-/erc-butyIdifenylsilyloxyazetidinu (4.04 g, 9,07 mmol) v incthanolu (200 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (4,04 g) při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs filtrována a filtrát koncentrován za sníženého tlaku a získaný zbytek byl susen za sníženého tlaku za vzniku 3-terc butyldifenylsilyloxyazctidinu (2,70 g, výtěžek 96%) jako bezbarvého oleje.

Následně do roztoku p-nitrobenzyl-( 1 R,5S,6S)-2-[ l-(4-karboxy 1.3- th iazol-2-yljazetidin-3yljthio- 6- [(R)-1 - terč butyldimethylsilyloxyethylj-l methylkarbapen- 2-em-3-karboxylátu t? (1.71 g, 2.53 mmol) a 3-tere-buty Idi feny Isi lyloxyazetidinu (947 mg, 3,04 mmol) (získaného jak jc uvedeno výše) v dimethylformamidu (86 ml) byl přidán diethyIfosforyIkyanid (461 μΙ.

3.04 mmol) a tríethylamin (426 μΐ, 3,04 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs

- 276 CZ 300137 B6 byla míchána při teplotě místnosti 5.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta 0,5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (4 : I) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzy l( 1 R,5S.6S©2-{ >[4©3-/w butyldifcnylsilyl-oxyazetíd i η-1-karbony l)-l,3-th i azol-2-yl] azet idi n-3-yl}thio-6-[(R)- \-terc butyldimethylsilyloxy-ethyl] 1- methylkarbapcn-2-em-3-karboxylátu (789 mg, výtěžek 32%).

io 'H-NMR (400 M Hz. CDCIJ: 6 (ppm) 8.22 (2H, d, >8,8 Hz). 7,66 (211. d, >8.8 Hz). 7,62 (2H, d, >8.8 Hz). 7,47 až 7,36 (6H. m). 7,39 (IH, s). 5,46 (111, d, >13.7 Hz), 5,27 (Ul. d, >13,7 Hz). 4.65 až 4,52 (2H. m). 4.50 až 4,42 (2H. m). 4,40 až 4,34 (IH, m). 4,32 až 4,26 (3H, m), 4.19 až 4,1 I (IH, m). 4,06 až 4.00 (3H, m). 3,28 (IH, dd, >4,9, 2,9 Hz). 3,18 (1H. dq, >8,8, 7,8 Hz), 1,27 (3H, d, J-7,8 Hz). 1,26 (311, d. >5,9 Hz), 1.07 (9H. s), 0.87 (911, s), 0,09 is (6H. d. >5.9 Hz).

Referenční příklad 43 p Nitrobenzy!© I R,5S,6S©2© >{4©methyl©p-nitrobenzylo\ykarbonyi)methvl-karbamoyl] 1.3—thiazol—2—yl) azet idin- 3-yl)thie>-6—[(R)— 1 —Zerc—butyldimethyIsi ly loxyethv I] -1 -methy 1karbapen-2-em-3-karboxylát

COOPNB (1) (terč Butoxykarbonylmethylaminojoctová kyselina, p nitrobenzylester

Do roztoku sarkosinu (3,56 g, 40 mmol) ve směsi methanolu (180 ml) a destilované vody (90 ml) byl přidán IM vodný roztok hydroxidu sodnéhon (80 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, Dovvex-50W byl přidán v ledové lázni pro úpravu pil reakční směsi na 5 až 4, Reakční směs byla filtrována a filtrát so koncentrován za sníženého tlaku za vzniku (/e/r-butoxykarbonyl methyl aminojoctové kyseliny (7,57 g) jako surového produktu.

Následně do roztoku (/erc-butoxykarbonyl-methyl-amino)oelové kyseliny (2.52 g, 13.3 mmol) a p-nitrobenzy lalkohol (4,07 g. 26.6 mmol) v methylenchloridu (125 ml) byl přidán WSC (5,10 g. 26,6 mmol) a 4-dimethylaminopyridin (252 mg, 1,33 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethyl•u) acetátu (I : 1) jako eluentu za vzniku (t-buthoxykarbonyl-methyl-amino)octové kyseliny, pnitrobenzylesteru (4.30 g, výtěžek 88%) jako světle žlutého oleje.

‘H-NMR (400 M Hz. CDCI,): 8 (ppm) 8,28 až 8,29 (2H. m). 7,58 až 7.47 (2H. in). 5.72 (211. d. J=2.2 Hz), 4,07 (1,211, s), 3.99 (0.8H. s), 2,95 (3H, d. J=5,8 Hz), 1,47 (5,411, s). 1.39 (3.6H, s).

(2) Hydrochlorid p n itrobenzyl esteru sarkosinu

- 277 CZ 300137 B6

Do roztoku (/ere-butoxykarbonyl-methyl-amino)octové kyseliny, p-n i t robenzy lesteru (4.30 g,

133 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 43(1)) byl přidán roztok 4N chlorovodíku v 1,4-dioxanu (4,3 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 2.5 hodin.

Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán diethy!ether a reakční směs byla míchána 30 minut.

Výsledná reakční smčs byla filtrována a získaný zbytek byl promyt diethyletherem a sušen za vzniku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru sarkosinu (3,04 g. výtěžek 88%).

'H-NMR (400 M liz. CDClj: δ (ppm) 8.32 až 8,23 (2H, m), 7,72 až 7.60 (2H. m), 5.42 (211, s). 4,08 (2H.s), 2.77 (3H. s).

io (3) p-Nitrobenzy l-( 1 R.5S,6S)-2-(l-í4-[metliyl-(p- nitrobenzy loxykarbony Jmethylkarbamoyl] 1,3-th iazol-2 -yjazetidin- 3 -v l)thio-6-[(R)-l-(/erc'-buty Idímethy Isily loxy )ethyl] methy l-karbapen-2-em-3-karboxy lát

Do suspenze p-nitrobenzyl-{ 1 R,5S,6S)-2-[ l-(4-karboxy-l .3—thiazol—2—yljazetidin—3- yl]lliiot5 6—f( Rj-l-Zczc-buty Idímethy Isily 1 oxyethy 1|-1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxylálu (1,00 g,

1.51 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(7)) a hydrochloridu p-nitro— bcnzylesteru sarkosinu (590 mg, 2,26 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 43(2)) v dimethylformamidu (30 ml) byl přidán diethyIfosforylkyanid (0.37 ml. 2,26 mmol) a triethylamin (0,95 ml, 6,80 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána zo při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezí ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta 0,5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 1) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-( 1 R.5S,6S)-2-( 1—{4—[methyl {p-uitrobenzyloxykarbonyljmethyl karbamoyl]-1,3-th iazo 1-2-yl} azet idin 3 y l)thio-6-[(R)-l-Jtvx-buty Idímethy Isilyl—oxy)ethyl]—1—methylkarbapen—2 em 3-karboxylátu (997 mg. výtěžek 76%), 'H-NMR (400 M Hz. CDClj): δ (ppm) 8.29 až 8.15 (411. ni), 7,71 až 7,62 (2H. m). 7.58 až 7.42 to (211, m). 7.40 (0,6H, s), 7,25 (0,4H. s). 5,46 (IH, d, J=13,8 Hz). 5,34 až 5,22 (3H. m obsahující

5,26 (IH. d, J=13.9 liz)), 4,63 (IH, s). 4,57 až 4,45 (IH, m), 4,27 (2H, t, >9,6 Hz), 4.26 (211, t, >9,6 Hz). 3,89 (IH, dd, >7,7, 5,8 Hz), 3.36 (1,2H, s). 3.15 (1.811. s). 3.26 (1H, dd. J=5,0, 2,6 Hz), 1,25 (611, d, J-7,2 Hz), 0,86 (9H. s), 0,08 (6H, d, J=5.0 I Iz).

Referenční příklad 44 p-Nitrobenzyl-(] R,5S,6S)-2-( 1 - {4 [ methy l-(karbamoyl)methy Ikarbamoy 1] 1,3 —thiazol—2—yl) azetidin 3 yljthio-6-[(R)-l-/m'-buty Idímethy Isi lyloxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-34í; karboxylát

(1) Karbanioylinethylmcthylkarbamová kyselina, terč butylester

Do roztoku (/erc-butoxykarbonylmethylaminojoctové kyseliny (5,03 g, 26,6 mmol) (získaného podle popisu \ referenčním příkladu 43(1)) v methylenchloridu (250 ml) byl přidán 1- hydroxybenzotriazol (7,19 g. 53,2 mmol), WSC (10,2 g, 53,2 mmol) a 4 -dimethyl—aminopyridin

- 278 CZ 300137 B6 (325 mg. 2,66 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou 2 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce. 28% vodný roztok amoniaku byl přidán a reakční směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smés rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methjenchloridu : methanol (10 : 1) jako eluentu za vzniku karbamoylmelhylmethylkarbamové kyseliny, Žere-buty lesteru (848 mg, výtěžek 17%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl,): 6 (ppm) 3,87 (211. s), 2,96 (3H, s), 1,47 <9H, s).

io (2) p-NitrobenzylJ 1 R,5S,6S) 2 ·( 1 (4 [methyl-(karbamoyl)methyl-karbamoyl |-l,3-thiazol2- y!}azetidin-3-vl)thio-6-[(R >1-/ert-buty Idimethylsily loxyethyl]-1 -methylkarbapen-2-em3- karboxy lát

Do roztoku karbamoylmethylmethylkarbamové kyseliny, /erc-butylesteru (848 mg, 4.50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 44(1)) v 1,4-dioxanu (8,50 ml) byl přidán roztok 4N chlorovodíku v 1,4-dioxanu (8,50 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 2,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl pak přidán diethylether a reakční směs byla míchána 30 minut. Výsledná reakční směs byla filtrována a získaný zbytek byl promyt diethyletherem a sušen za vzniku 2-methylam i noacetamidhydroch loridu (421 mg. výtěžek 75%).

Následně do suspenze p-nitrobenzylj 1 R.5$,6S)-2-[1 (4 karboxy-],3-thiazol-2-vl)a/etidin3-yl]thio-6-[(R)-l -terč butyIdimethvlsilyloxyethyljl-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu {1,00 g, 1,51 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(7)) a 2-rnelhylatnino25 acetamidhydrochloridu (282 mg. 2.26 mmol) (získaného jak jc uvedeno výše) v dimethylformamidu (30 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (0.37 ml, 2,26 mmol) a triethylamin (0.95 ml, 6.80 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti

3.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně w promyta 0.5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —► ethylacetát: methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzylj 1 R.5S.6S)-2-( l-{4-| methy l-( karbamoy !)methy l-karbamoy 1]-1,3-thia35 zol-2-ylj azetidin 3 yl)thio 6 [(R)-l-(/ert- butyIdimcthyIsilvlox>)ethyl]-l-methy 1-karbapen2- em-3-karboxylátu (932 mg, výtěžek 84%).

'H-NMR (400 M Hz, CDCl;): δ (ppm) 8,22 <2H. d. >7.9 Hz). 7,65 (2H, d, >7,9), 7.35 (0,7H, $), 7,23 (0,3H, s), 5,46 (1H, d, > I3,9 Hz), 5,26 (1H, d, .1= 13,9 1 Iz). 4,62 - 4,40 (211. m), 4,40 až 4.22 (3H. m), 4.20 (IH, s), 4.12 (2H. dd. >14,2. 7,1 Hz), 4,07 až 3.97 (IH, m). 4,04 (0,6H, br s),

3,27 (IH. dd, J-5,0. 2,8 Hz), 3.15 (1H, dq, J-9,5, 7,3 Hz), 3,1 I (2.4H. br s), 1.25 (6H. d.

.1=5,8 1 Iz), 0,87 (911, s), 0,08 (611, d, >5,0 I iz).

Referenční příklad 45 p-Nitrobenzyl-(lR.5S,6S) 2-( I [4-( karbamoy Imethy I ikarbamoyl 1,3-thiazol 2 yljazctidin3— y I} thio—6—[(R)— 1 —Zťrr—hutyld imethy lsily loxyethylj-l -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

O

279 CZ 300137 B6 (1) (Karbamoylmethyl)karbamová kyselina, rere-buty lester

Do roztoku N-(/en‘ butoxykarbonyljglycinu (3,01 g, 17,2 mmol) v bezvodém methylenchloridu (150 ml) byl přidán 1-hydroxybenzotriazol (4,63 g. 34,3 mmol), WSC (6,60 g, 34.4 mmol) 5 a 4-dimethylaminopyridin (210 mg. 1,72 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou přes noe. Po zkontrolování doběhnutí reakce. 28% vodný roztok amoniaku byl přidán a výsledná směs byla míchána 15 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi methylenchloridu a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a io koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku (karbamoyl methy fíkarbamové kyselin); terč butylesteru (717,7 mg, výtěžek 24%) jako bezbarvého průhledného sirupu.

'll-NMR (400 M Hz. CDCl·,): ó (ppm) 6,202 (IH, br s), 5.763 (NL br s). 5,267 (1 H, br t,

J až 5,1 Hz). 3.820 (2H.d. >5,1 Hz), 1,456 (911, s).

(2) p NilrobenzyH 1 R,5S,6S)-2-{ >[4-( karbamovImethyl)karbamoy 1-1,3 thiazol-2-} l]azetidin—3—yl} thio—6—[(R)— l —Zerc—buty ldimethy Isily loxycthyl]-! -methy lkarbapen-2-em-3karboxylái

Do roztoku (karbamovImethyl)karbamové kyseliny, Zerc-butylesteru (717.2 mg. 4,12 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 45(1)) v 1.4- dioxanu (7.2 ml) byl přidán roztok 4N chlorovodíku v 1,4 dioxanu (7,2 ml) v ledové lázni. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byt pak přidán diethylether a reakční směs byla míchána 30 minut. Výsledná reakční směs byla filtrována a získaný zbytek byl promyt diethyI etherem a sušen za vzniku glyeinamidhydrochloridu (389 mg, výtěžek 86%) jako bílých krystalů.

Následně do suspenze p-nitrobenzyl-{ 1R, 5 S, 6 S )-2-(1-(4-kar boxy-1,3 thiazol -2-v 1 )azetidin3 yljthio 6 [(R)-l-/ere buty ldimethy Isily loxycthyl]—I -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy látu (566.6 mg, 0,85 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(7)) a glyeinamidhydrochlorídu (154,3 mg. 1,40 mmol) (získaného jak je uvedeno výše) v dimethylformamidu (28,0 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (0.2 ml, 1.32 mmol) a triethylamin (0,36 ml,

2,6 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasy3? ceny vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta 0.5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý; filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (2 : 3) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzy 14o (1 R.5S,6S>-2-{1 -[4-(karbamoyImethyl)karbamoyl 1,3 thiazol 2 yljazetidin—3—yl} thio—6— [(R> \-terc -buty ldimethy Isily loxy ethy l]-l -metli yl-karbapen-2-em-3-karboxy lát u (428,6 mg. výtěžek 70%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCl·,): δ (ppm) 8,21 (2H, d, >8,4 Hz), 7,70 (IH. t, >5.3 Hz), 7.65 (2H, d, >8,4 Hz), 7,46 (1H, s), 6,15 (1H. br s), 5,46 (IH, d, .1-13.4 Hz), 5.43 (11L br s). 5,27 (111. d. ís >13,4 Hz), 4,52 (IH, t, >8,3 Hz). 4,50 (IH, t, >8,3 Hz), 4,345 až 4,24 (3H. m), 4.12 až 4.04 (4H. m). 3,265 (IH, dd, >5.1, 2.7 Hz). 3,155 (IH, dq, >9.4, 7,0 Hz), 1.264 (3H, d, >7.0 Hz),

1,22 (3H, d, .1=4,8 Hz), 0,86 (9H, s), 0,09 (3H, s), 0,08 (3H, s).

so Referenční příklad 46 p-Nitrobenzyl (1 R,5S,6S)-2- J1 [4-« 1 S)-2-mcthy l-l-(ρ-nitrobenzy loxy karbony l)-propylkarbamoylf-1.3- thiazol-2-yl jazetidin-3- yl Jthio-6-[(R) 1 - terč buty ldimethy Isily loxycthyl]-1me-thylkarbapen-2 em 3 karboxylál

- 280 CZ 300137 Bó

TBD

OPNB

COOPNB (1) ρ-N itrobenzy lester N (terč butoxykarbonylH -valinu

Do roztoku N-Jefc-butoxykarbonyJ-L-valinu (2,50 g, 11,5 mmol) v methylenchloridu 5 (125 ml) byl přidán p-n itrobenzy lalkohol (3,52 g, 23,0 mmol), WSC (4,41 g, 23.0 mmol) a 4—dí— mcthylaminopyridin (140 mg. 1,15 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou 4,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl in čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2: 1) jako eluentu za vzniku N-(/m’-butoxy karbonyl) L valinu, p-n itrobenzy lesteru (3.07 g. výtěžek

76%) jako bílých krystalů.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 8.23 (211, d, >8,8 Hz), 7,53 (2H, d. J=8,8 Hz). 5,26 (2H, is 0,88 (3H.d. >6,6 Hz).

(2) L-Valin-p-nitrobenzylalkoholhydrochlorid

Do roztoku N-ýzcrc-butoxykarbonyJ-L-valimi, p-nitrobenzylesteru (3,07 g, 8,71 mmol) (zís20 kaného podle popisu v referenčním příkladu 46(1)) v 1,4-dioxanu (31 ml) byl přidán roztok 4N chlorovodíku v 1.4 dioxanu (31 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotč místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku, k obdrženému zbytku byl přidán ethylaeetát a směs byla filtrována. Výsledný zbytek byl promyt ethylacetátem a sušen za vzniku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru 1-valinu (2,21 g. výtěžek

88%).

Elementární analýza:

Nalezená hodnota: C, 48,77 % 11, 5,63 % N,9,49 % Cl, 12,38 %

Vypočítaná hodnota: C. 49,92 % H. 5,93 % N, 9.7 0% Cl, 12,28 % a (3) p-Nítrobenzyl-(l R.5S.6S )-2-( >( >(( 1 S>2-methy 1-1-(p-n itrobenzy loxy karbony I)propy I ka r b a m oy I > 1,3-t h i a zo l-2-y I ] azel id i n-3 -y 1} th io-6- [ (R > 1 -terc-b u tyldimethvlsilyloxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku p—nitrobenzyl—(I R,5S.6S)—2—[Ί —(4—karboxy— 1.3—thiazol—2—yl’)az:etidin—3—yl|thio—6— [ (R)-l-řm-bu ty Id imethy Isily loxy et hy I ]->met hyl kar ba pei»em-3-karboxy látu (1.00 g.

1.48 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(7)) a hydrochloridu p nitro benzylesteru L-valinu (514 mg. 1,78 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 46(2)) v dimethylformamidu (50 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (275 μΙ. 1,78 mmol) a diisopropylethylaminu (620 μΙ, 3.56 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečné promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n45 hexan : ethylacetátu (2:1 —» 1:1) jako eluentu za vzniku p-n itrobenzy 1( 1 R,5S,6S)-2-( >[4{(1 S>2-methyl-I-(p-n itrobenzy loxy karbony l>propy lkarbamoyl) 1,3 thiazol-2-yl (azetidin-3-281 CZ 300137 B6 yl j thio—6—[(R)—l —/ďrc—butyldimethylsi lyloxyethylj—l - methv ikarbapen—2—em—3—karboxylátu {1,15 g. výtěžek 86%).

'H-NMR (400 M Hz. CDCb): δ (ppm) 8,23 (2H, d. >8,8 Hz). 8.21 (2H. d. >8.8 Hz). 7.65 (2H, d, J=8.8 Hz), 7,58 až 7,55 (IH. br s), 7.54 (2H. d. >8,8 Hz). 7,45 (lil, s). 5,46 (IH, d, >13,9 Hz). 5.28 (2H, s), 5,27 (IH. d. >13,9 Hz), 4.74 (IH. dd, >9.5, 5.9 Hz). 4.51 (211, t.

J=8,8 Hz), 4,33 až4,24 (3H. m), 4,08 (2H. dd, >8,8, 5,9 Hz), 3,27 (IH, dd, >5,1. 2,9 Hz), 3,17 (IH. dq. >9.5. 7,3 Hz). 2.33 až 2,24 (1Π. m), 1,26 (3H. d. J=7.3 Hz). 1,25 (3H. d. >5,9 Hz), 1.01 (3H, d. >6,6 Hz), 0,97 (3H. d, >7.3 Hz), 0.87 (9H. s), 0.09 (6H. d. J-5,1 Hz).

io

Referenční příklad 47 p-N itrobenzy Μ1 R.5S.6S)- 2-j1-)4-(( 1 S>1-karbamoy 1-2-methy lpropy lkarbamoy!)- 1,3thiazol 2 yl]azetidin-3-yl[thio-ó-[(R)-l-/ťr<’ buty Idimethy Isily loxyethy I]— 1 methy Ikarbapen15 2-em-3-karboxylát

(1) (1 S)-l-Karbamoy Ι-2-tTiethylkarbamová kyselina. ím-buty lester

Do roztoku N-(/m· butoxykarbonyl)-L-valinu (3,00 g. 13,8 mmol) v bezvodém methylen2o chloridu (150 ml) byl přidán 1-hydroxybenzotriazol (3.73 g, 27.6 mmol), WSC (5,29 g,

27,6 mmol) a 4-dirncthylaminopyridin (169 mg, 1,38 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce. 28% vodný roztok amoniaku byl přidán a reakční směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanol (9:1) jako eluentu za vzniku (1S>1-karbamoy 1-2-methy 1-karbamové kyseliny, terč-butylesteru (2,81 g, výtěžek 94%) jako bílých krystalů.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 5,93 až 5,84 (IH, br s). 5.45 až 5,36 (IH. br s). 5.06 až so 5.00 (IH. brs), 3,98 až 3,91 (IH, m), 2.21 až 2,12 (IH, m), 1,45 (9H. s), 0,99 (3H, d, J=6,ó Hz),

0,94(311. d, .1=6,6 Hz).

(2) 2-Amino-3-methylbutyramidhydrochlorid

Do roztoku 1 --karbamoyl-2-methylkarbaniové kyseliny, zere-butylesteru (2,81 g, 13,0 mmol) {získaného podle popisu v referenčním příkladu 47(1)) v 1,4 dioxanu (28 ml) by! přidán roztok 4N chlorovodíku v 1.4-dioxanu (28 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán ethylacetát byla reakční směs filtrována a získaný zbytek promyt ethylacetátem a sušen za vzniku (2S)-2-ammo-3-mcthylbutyramid40 hydrochloridu (1.94 g, výtěžek 98%).

Elementární analýza:

Nalezené hodnoty:C,39.21 %H. 8,34%N, 18.31 % Cl, 23,38 %

Vypočtené hodnoty: C, 39.35 % H, 8.59 % N. 18.35 % Cl. 23,23 %

- 282 CZ 300137 B6 (3) p-N i trobenzy 1-( 1 R,5S,6S>2-{ 1 — [4—((1 S>l-karbamoyl-2-methyl-propy Ikarbamoy 1)-1.3thiazol-2- yljazetidin-3-yl} thio-6-[(Rj-1 •zerc-butyldimetbylsilyloxyethylj-l-mcthylkarbapen2-em-3 karboxylát

Do roztoku p nitroben/\ 1 {1 R.5S.6S)- 2-[ 1-(1 -karboxy- 1,3-th iazo1-2-y 1 )azet id in-3-yl] thio 6 [(R>1 -/e^c-buty Idimethy Isily loxy ethyl J-l -methy lkarbapen-2-em-3 karboxy látu (1.00 g,

1,48 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 41(7)) a L-valinamidhydrochloridu (272 mg. 1.78 mmol) získaného podle popisu v referenčním příkladu 47(2) v dimethylformamidu (50 ml) byl přidán diethyl fosfory! kyanid (275 μΐ. 1,78 mmol) a diisopropylethylaminu (620 μΙ.

io 3,56 mmol) v ledovc lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 2,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek is byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 3) —* methylenchloridu : ethylacetát (3:1) jako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S.6S)-2-f 1[4—(( 1S)—1—karbamoyl—2—methy Ipropy Ikarbamoy I)—1,3—thiazol—2—yljazetidin—3—yl }th io—6— [(R)-1-/m?-butyldimethylsilyloxyethyl!-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylátu (934 mg, výtěžek 82%).

2ii 'H NMR (400 M Hz, CDCl·,); δ (ppm) 8.22 (2H, d, >8.8 Hz), 7,65 (2H. d, >8,8 Hz), 7,61 až 7.56 (111, brd, J-9,5 Hz), 7,43 (111, s), 6,06 až 6,00(111, brs). 5,46 (IH, d, J=13,9 Hz). 5,42 až 5,37 (IH. br s). 5.27 (IH. d, J=I3,9 Hz), 4,50 (IH, dl. J=8,l, 4,4 Hz). 4,36 (IH, dd, .1=8.8. 6.6 Hz), 4.32 až 4.25 (3H. m), 4,08 (2H. dd, .1=8,1. 5,1 Hz), 3.27 (IH. dd, J=5.1, 2.2 Hz), 3.16 (IH. dq. J=9.5, 7,3 Hz), 2,34 až. 2.24 (IH. m), 1,26 (3H. d. J=7,3 Hz), 1.25 (3H. d, J=ó,6

Hz). 1.03 (3H, d. .1=6.6 Hz), 1,01 (3H, d, J-6,6 Hz), 0,87 (9H, s), 0,08 (6H, d, J-4,4 Hz).

Referenční příklad 48 so 3-Acctylthio-l-{4-[isopropyl-(p-nitorobenzyloxykarbonylinelhyI) karbamoyl] 1,3 ihiazol- 2yl} azetidin (1) (/erc-Butoxvkarbonyl-isopropyl-aiiiinojoctová kyselina, methylester

5? Do roztoku hydrochloridu methylesteru glycinu (3,03 g, 24,1 mmol) v methanolu (150 ml) byl přidán triethylaminu (.3,4 ml. 24,4 mmol) a aceton (17.7 ml. 241,1 mmol) a směs byla míchána ve vodní lázni (50 °C) 1,5 hodiny. Následně byl přidán kyanoborohydrid sodný (3,03 g, 48,2 mmol) v ledové lázni a roztok 10% chlorovodíku v methanol byl přidán do reakční směsi pro úpravu pl 1 reakční směsi na 3 až 4 a výsledná reakční směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl sušen za sníženého tlaku. Do suspenze získaného surového produktu ve směsi methanolu (45 ml) a methylenchloridu (90 ml) byl přidán di-/ťrc--butoxykarbonový anhydrid (10,5 g, 48.1 mmol) a Iriethylamin (13,5 ml, 96,9 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolován i doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : ethylacetátu (5:1) jako eluentu za vzniku (terč butoxykarbonylisopropylaminojoetové kyseliny, methylesteru (3,93 g, výtěžek 70%) jako bezbarvého průhledného sirupu.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl,): Ó (ppm) 4,54 až 4,40 (0,6H, m), 4,24 až 4,10 (0,4H, m). 3,86 (0,8H, s). 3,74 (],2H, s), 3,72 (3H, s). 1,48 (3.6H, s), 1.42 (5,4H, s), 1,11 (2,411, d, J=7,7 Hz), 1,09 (3,6H, d, J-7,7Hz).

(2) (zcn-Butoxykarbonylisopropylaminojoctová kyselina, p-nitrobenzylester

- 283 CZ 300137 B6

Do roztoku (terč butoxykarbonylisopropylamino)octové kyseliny, methylesteru (5.59 g.

24,2 mmol) ve směsi methanolu (112 ml) a destilované vody (56 ml) byl přidán IM vodný roztok hydroxidu sodného (37 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 7 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce, Dowex 50W byl přidán v ledově lázni pro úpravu pH reakční smési na 5 až 4. Reakční směs byla filtrována a filtrát koncentrován za sníženého tlaku za vzniku (terč- butoxykarbonyl-isopropyl-amino)oetovč kyseliny (5.25 g)jako surového produktu.

Následně, do roztoku (Zťrc-butoxykarbonylísopropylamino)octové kyseliny (2.05 g. 9.44 mmol) to a p-nitrobenzylalkoholu (2.89 g, 18,9 mmol) v methylenchloridu (100 ml) byl přidán WSC (3.62 g, 18.9 mmol) a 4-dimcthylarninopyridin {120 mg, 0,98 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (5:2) jako eluentu za vzniku (terč -butoxykarbonyl-isopropyl-amino)octové kyseliny, p-nitrobenzylesteru (1,93 g, výtěžek 58%) jako světle žlutého průhledného sirupu.

¹ H-NMR (400 Μ Ilz, CDCl J: δ (ppm) 8,24 (111, d, J-8,0 Hz). 8,22(111. d, J-8,0 liz), 7,53 (211, d, .1=8.0 Hz). 5.26 (2H, s). 4.54 až 4.42 (0,5H. rn). 4,28 až 4,16 (0,5H, m). 3.94 (IH, s). 3,84 (1H.

2o s), 1.48(4,511. s). 1,36 (4,511, s), 1,12 (311. d. J=7.7 Hz). 1.10 (311. d, J=7,7 1 lz).

(3) Hydrochlorid p-nitrobenzylesteru (isopropylamino)octové kyseliny

Do roztoku (/err-butoxykarbonylisopropylamino)octové kyseliny, p-nitrobenzylesteru (1,93 g,

5.48 mmol) v 1,4-dioxanu (20 ml) byl přidán roztok 4N chlorovodíku v 1.4-dioxanu (20 ml) v ledové lázni a smčs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce by! pak přidán diethylether reaction směs byla míchána 30 minut a filtrována a získaný zbytek byl prornyt diethyletherem a sušen za vzniku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru (isopropylamino)octové kyseliny (1,50 g, výtěžek 95%) jako bílých krystalů.

w 'll-NMR (400 M liz. CDCh): δ (ppm) 8,26 (2H. d„ .1=8.8 Hz). 7,67 (2H. d. .1-8.8 Hz), 5.43 (211, s). 4,11 (2H. s), 3.50 až 3,40 (IH. m). 1.34 (6H. d. J=5,9 I lz).

(4) j-Zerc-Bu ty ld i feny Isily loxy-l-(4-[isopropyl-( p-n í torobenzy loxy karbony Imethyl)karbamoy Π— 1.3—thiazol—2—yt} azetidin

Do roztoku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru (isopropylamino)octové kyseliny. (500 mg, 1,73 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 48(3)) a 3-terc butyldifenylsilyloxy— I —(4 karboxy 1-1,3 thiazol 2 -yl)azetidinu (506 mg, 1,15 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán diethyIfosforylkyanid (0.28 ml,

1,73 mmol) a triethylamin (0,60 ml, 4,32 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta 0,5M vodným roztokem kvseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (l : 1) jako eluentu za vzniku 3-Zerc-butyldifenylsilyloxy-l-(4“[isopropyl-([4-nitrobenzyloxykarbonylmethyl)karbamoyl]-l,3-thiazol-2-y!} azetidinu (578 mg, výtěžek 75%) jako světle žlutého sirupu.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: 6 (ppm) 8.28 až 8,18 (2H, ni), 7,70 až 7,30 (12H, m), 7,38 (0,4H, br s), 7.10 (0.6H. br s), 5.29 (0,8H. br s). 5,16 (1,2H, br s), 5,04 až 4,44 (311, m). 4,20 až 3,85 (511, m). 1,17 (6H, brs). 1.06 (9H, br s).

- 284 CZ 300137 B6 (5) 3-H)droxy-1—{4—[isopropyl 3p-nitrobenzyloxykarbonyImethyl)karbamoyl]- 1.3-thiazol2—yl} azetidin

Do roztoku 3-Zerc-butyldifenylsilyloxy 1 {4 [isopropy l-( p-n itrobenzy loxy karbony Imethy 1)5 karbamoylj-l ,3-th iazol-2-yl jazetidinu (1,81 g, 2,69 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 48(4)) v bezvodém tetrahydrofuranu (90 ml) byla přidána kyselina octová (0.18 ml, 3.23 mmol) a roztok l,0M telra-n-butylarnoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (3,23 ml, 3.23 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn io chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenehloridu : ethylacetát (1 : l)jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-[4-}isopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmethyl)karbamoyl] 1.3-thiazol-2-yl Jazetidinu (968 mg. výtěžek 83%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCh): δ (ppm) 7.22 (2H. d. >8,0 Hz), 7,55 (IH, d, .1=8,0 Hz). 7,42 (IH. d, J-8,0 Hz), 7,39 (0.4H, s). 7.12 (0.ÓH, s), 5,29 (1,2! 1, br s), 5,22 (0,8H. br s), 5,03 až 4.89 (0.5H. m), 4.89 až 4,76 (Hl, m). 4,59 (lil. br s), 4,32 (IH. t, J=7.3 Hz). 4,22 až 4,02 (2H, m).

4,02 až 3,85 (1H, m), 3,85 (1H, m), 1.10 až 1.03 (6H. m).

(6) 1-{4-[l sopropy l-(p-nitrobe nzyloxykar bony I methy l)karbamoyfi-1,3-thi azo 1-2-yl j-3methansul fony loxyazetidin

Do roztoku 3-hydroxy 1 {4 [isopropy l-(p-nitrobenzyloxykarbony Imethy l)karbamoyl]-l ,3thiazol-2-yl jazetidinu (968 mg, 2,23 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 48(5)) v methylenehloridu (50 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,42 ml. 5,34 mmol) a triethylamin (0,37 ml, 2,67 mmol) v ledové lázni. Reakční směs byla míchána v ledové lázni 2 ho25 diny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití mcthylenchloridu : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 1 —{4 [isopropyl-(p-nitrobcnzyl50 oxykarbony Imethy l)karbamoyl] 1,3 thiazol-2-ylj-3-methansulfonyloxyazetidinu (835 mg, výtěžek 73%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 8,22 (2Π. d, J~7,9 Hz). 7.55 (IH, d, J=7,9 Hz). 7.48 (0,411. brs), 7,43 (Hl. d, >7,9 Hz). 7,26 (0,6H. brs), 5,51 až 5.16 (3H, ni obsahující 5,29(1,211. s), 5,22 (0,8H, s)), 5,04 až 4.89 (0.4H. m), 4,89 až 4,72 (lil, m), 4,59 až 4,48 (IH. m). 4,48 až

4,37(111. m). 4,37 až 4.18 (211, m). 4.18 až 3,96 (2H, m). 3,11 (3H. s). 1.30 až 1.17 (ÓH. in).

(7) 3-Acetv lthio-1—{4—[ isopropyΉρ-nitrobenzy loxykarbony Imethy l)karbamoyl J-1.3-th iazol2 yljazetidin

Do roztoku 1-J4-[i sopropy l-(p-nitrobenzy loxy karbonyl met hyl)karbamoylj-l ,3-t hi azo 1-2-yl }3-methansulfonyloxyazetidinu (835 mg, 1,63 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 48(6)) v dimethylformamidu (42 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.12 g. 9,77 mmol) při teplotě místnosti. Smčs byla míchána v olejově lázni (90 °C) 7 hodina. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatografieky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-> {>[ isopropy Ή p-n itorobenzy loxy karbony Imethy I ikarbamoy l]-l, 3-th iazol-2-yl jazetidinu

5() (312 mg, výtěžek 39%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI;,): δ (ppm) 8.21 (2H, d. .1=6.9 Hz), 7.55 (IH, d. >8,3 Hz), 7,44 (0,6H. brs), 7,43 (IH, d. >8,3 Hz), 7,17 (0.611, br s), 5,19 (1.211. s), 5,22 (0,8H, brs). 5.02 až

- 285 C7 300137 B6

4,90 (0,6H. m). 4.90 až 4,78 (0.4H, m), 4.65 až 3.65 (7H, ni). 2.36 (3H. br s). 1,40 - 1,18 (6H. m).

Referenční příklad 49

3-Acety Ithio-1 -[4-ý karbamoy Imethy lisopropy lkarbamoy I)— l ,3—thiazol—2—y ljazetidin

(1) Karbamoylmethyl-isopropyl-karbamová kyselina, /ere-butylester io

Do roztoku (l-bulhoxykarbonylisopropylamino)octové kyseliny (3.20 mg. 14.7 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 48(2)) a 1 hydroxy benzol riazolu (4,0 g, 29,6 mmol) v methylenchloridu (150 ml) byl přidán WSC (5,6 g, 29,2 mmol) a 3 dimethyl-aminopyridin (200 mg, 1,64 0111101) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs bvla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce, 28% vodný roztok amoniaku (40 ml) byl přidán a výsledná směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi methylenehloridu a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methy len20 chloridu : methanol (10:1) jako eluentu za vzniku karbamoylmethylisopropylkarbamové kyseliny, /erc-butylesteru (2,67 g, výtěžek 84%) jako bílé pevné látky.

^lII-NMR (400 M liz, CDCb): δ (ppm) 5,434 (IH. br s). 4.25 (IH. br s), 3,735 (2H, s), 1,478 (9H.s), 1,14 (6H, d. J=6,6 Hz).

(2) 2-Isopropy'laminoacelamidhydroehlorid

Do roztoku karbamoy Imethyl isopropy lkarbamové kyseliny, tere butylesleru (2,67 g, 12,3 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 49(1)) v 1,4-dioxanu (30 ml) byl přidán roztok 4N chlorovodíku v 1,4- dioxanu (30 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán diethylether a reakční směs byla míchána 30 minut. Výsledná směs byla filtrována a zbytek byl promyt diethyl etherem a sušen za sníženého tlaku za vzniku 2 isopropylaminoaeetaniidliydrochloridu (1,82 g. výtěžek 97%) jako bílých krystalů.

'H-NMR (500 M Hz, CD,OD): δ (ppm) 3,80 (211. s). 3,46 až 3,38 (IH, ni), 1.34 (6H, d.

J=6,8 Hz) (3) 3-/m-Buty Idifeny Isily loxy-1-[4-{ karbamoy Imethy lisopropy Ikarbamoyl)-4,3-thiazol-2yljazetidin

Do roztoku 2-isopropyÍamino-acetamidhydrochloridu (500 mg, 3,28 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 49(2)) a 3-zerc-buty Idifeny Isily loxy-H 4-karboxy I- 1,3-thiazol— 2 -y Ijazetidinu (961 mg. 2,19 mmol) v dimethyl formám idu (29 ml) byl přidán diethy Ifosforylkyanid (0,54 ml, 3,29 mmol) a triethylamin (1,15 ml, 8.19 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reak45 ce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok a hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta 0.5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuh lič i tanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a končen trová- 286 CZ 300137 Bó na za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-terc butv Idi feny Isi lyloxy- 4 -[4 -{karbamoyl met hyl i sopropy Ikarbamoyl)-l,3-thiazol-2-yI]azetidinu (1,18 g. výtěžek 100%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl?: δ (ppm) 7,62 (411. d. >6,6 Hz). 7,52 až 7.36 (6H, m). 7,21 až 6.85 (1H. m). 4.80 až 4.72 (1H, m). 4.28 (1H. t. >7.3 Hz). 4.24 (1H. t, J=7.3 Hz). 4.16 až 4.01 (2H.

m). 4,01 až 3,88 (2H. m), 1,25 (6H, d, .1=6.7 Hz), 1,07 (9H, br s).

(4) 1-(4-( Karbamov Imethy 1 isopropy Ikarbamoy 1)-1.3-thiazol-2 yl] 3 hydroxyazetidin io Do roztoku 3-/m‘-butyldifenylsi lyloxy-1-[4-(karbamoy Imethy 1 isopropy Ikarbamoyl) 1.3 thiazol 2-yljazetidinu (6,52 g, 11,8 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 49(3)) v bezvodém tetrahydrofuranu (326 ml) byl přidán a 1.0M roztok tetra-n-butylamoniumfluoridii v tetrahydrofuranu (14,2 ml, 14.2 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku.

Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku l-(4-(karbamoylmcthylisopropytkarbamoyl)-1,3-thiazol-2-yl] hydroxvazetidinu (2,35 g. výtěžek 67%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl?: δ (ppm) 7,20 až 7,02 (0,611, m). 7,02 až 6,80 (0,611, m). 5.86 až 5,62 (0,411, m). 5.62 až 5,32 (0,6H, m), 5.25 až 5,14 (0,3H, m), 4,90 až 4,75 (0.7H. m). 4,67 (0,7H, kvint., >6,6 Hz), 4,43 až 4,34 (0.411. m), 4,34 až 4,22 (0,6H, m), 4,03 (2H, s). 4,00 až

3.91 (211, m), 3,89 (0.3H. kvint., J-6,0 Hz), 1.26 (6H, dd, >6.7, 2.4 Hz).

(5) l-(4-(Karbamoylmethy lisopropyIkarbamoyl)-1.3—thiazol—2—ylj—3—methansulfonyloxy— azetidin a 1 -[4-(kyanomethyl isopropy Ikarbamoy 1)-1,3—thiazol—2—yl j-3-methansulfony loxv25 azetidin

Do roztoku 1 -(4-( karbamoyImethylisopropyIkarbamoy 1 > 1,3—thiazol—2—yIJ-3-hydroxyazetidinu (2.35 g. 7.88 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 49(4)) v methylenchloridu (120 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,91 ml, 11.8 mmol) a triethy lamin (1.66 ml.

11.8 mmol) v ledové lázni. Reakění směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : met haυ nolu (10 : I) jako eluentu za vzniku I (4 -(karbamoy l-methy lisopropy Ikarbamoyl)-1,3-thiazol2 yl]-3-methansulfonyloxyazetidinu (516 mg, výtěžek 17%) jako světle žluté pevné látky a

1-(4-(ky anomethy lisopropy Ikarbamoy I>l,3-th iazo l-2-yl]-3-methansu Ifony loxy azet idinu (634 mg. výtěžek 22%) jako světle žluté pevné látky.

4o >(4-(Karbamoylmethylisopropylkarbamoyl)-l,3-thiazol 2- ylj 3 methansulfonyloxyazetidin ^!H-NMR (400 Μ I lz, CDCl?: Ó (ppm) 7,15 až 6,72 (1H, m). 5.65 až 5.15 (111. m). 4.79 až 4,62 (1H, in), 4,44 (2H, t. J=6.7 Hz). 4,26 (211, d, .>6,7 1 lz), 4,05 (2H, m). 3,11 (3H. s). 1,26 (6H. m).

[4 -(Ky anomethy 1 isopropy Ikarbamoy l>l,3-thiazol-2-yl] 3 methansulfonyloxyazetidin ^lH -NMR (400 Μ I Iz, CDCl?: Ó (ppm) 7,55 až 7,10 (IH. ni), 5.50 až 5,38 (111, m), 4,93 až 4,78 (III, m). 4.60 až 4,00 (6H, m obsahující 4,51 (211, t. >9.6 Hz), 4,32 (2H. dd. >9,6. 3,7 Hz)). 3.11 (311. s). 1,31 (6H,d,>6,8Hz).

(6) 3-Acetylthio 1 (4 (karbamoy Imethy lisopropy Ikarbamoy >1-3-thiazol- 2 yljazetidin

Do roztoku 1-(4-( karbamoy Imethy lisopropy Ikarbamoyl)-l,3-thiazol-2-y I j-3-methansulfony 1oxyazetidinu (516 mg, 1,37 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 49(5)) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán thioaeetát draselný (939 mg, 8.22 mmol) při teplotě

- 287 CZ 300137 B6 místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného.

Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena pres bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethylacetát —> ethylacetát: methanolu (20: 1) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio 1 [4- (karbamoy Imethy li sopropy I karbaní oyl)-l ,3-th iazol-2-yI jazet id i nu (347 mg, výtěžek 71%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz. CDClj: ó (ppm) 7.45 až 6,72 (1II, m), 4,76 až 4,61 (1H, ni), 4,51 (2H, t, io >7.4 Hz). 4.47 až 4,40 (IH, m). 4,40 (211. s), 3,98 (211. t, >7.4 Hz). 2,37 (3H. s). 1,26 (6H, d, >6.8 Hz).

Referenční příklad 50 !5

3- Acetylthio 1 [4-(kyanomethy lisopropy l-karbamoy I)-1,3-lhiazol-2-yl jazet idin

(1) 3-Acety Ith io->[4-{ kyanomethy lisopropy l-karbamoy l>l,3-thiazol-2-yl jazet idin ?o Do roztoku !-[4-(kyanomethylisopropvlkarbamoyI) 1,3 thiazoi 2 yl] 3 methansul fony loxyazetidinu (635 mg, 1,77 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 49(5)) v dimethylformamidu (19 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.21 g, 10,6 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn ehroniatograficky na siIikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1)—» ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-aeetylthio-l-[4-(kyanomethylisopropyl-karbamoyl)-l ,3-thiazol-2-yljw azetidinu (344 mg, výtěžek 57%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDClj: ft (ppm) 7,58 až 7.18 (IH. m), 4,96 až 4,82 (IH. m), 4,82 až 4,10 (5H, m obsahující 4,54 (2H, t, >8,4 Hz), 4,50 až 4.40 (1H. m)). 4,01 (2H. t. >8,4 Hz). 2,36 (3H, s), 1,30(611, d, >6,8 Hz).

b

Referenční příklad 51

3-Acety Ithio-1- J 4-[ 1 -(p-nitrobenzy loxykarbony 1)—piperidin—4—y lkarbamoy I] 1.3-thiazoi-2vl} azetidin

(1) 4 -Hydroxy-Hp-nitrobenzyloxykarbonyJpiperidin

- 288 C7. 300137 B6

Do roztoku 4 hydroxypiperidinhydrochloridu (3.0 g. 21.8 mmol) vc směsi methylenchloridu (90 ml) a pyridinu (15 ml) byl přidán p-nitrobenzy lester chloromové kyseliny (15.4 g.

72.0 mmol) a triethylamin (13,1 mk 93.8 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti 3 dny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát ? a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : l) —► ethylacetátu jako eluentu za vzniku 4-hydro\y-l-(pnitro-benzy loxy karbony Jpipcridinu (2.96 g. výtěžek 48%) jako světle žlutých krystalů.

io 'H-NMR (400 M Hz. CDCIJ: ó (ppm) 8.23 (2kk d. .1=8.1 Hz), 8,51 (21 k d. >8.1 Hz). 5.23 (2H, s), 3,98 až 3,87 (3H. m), 3,30 až 3,15 (211, m), 1,96 až 1,85 (2H, m), 1,59 až 1.48 (2H. m).

(2) 4-Methansulfonyloxy-1-(p-nitrobenzyloxvkarbonyJpiperidin ts Do roztoku 4-hydroxy-l©p-nitrobenzyloxykarbonyljpiperidinu (2.96 g. 14,8 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 51(1)) v methylenchloridu (90 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (1.15 ml. 14,8 mmol) a triethylamin (2,07 ml, 14.8 mmol) v ledové lázni. Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycen} vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rekrvslalizován z roztokn-hexan . ethylacetátu (1 : 1) za vzniku 4-mcthansulfonyloxy-1 ©p-nitrobenzyloxykarbonyjpiperidinu (3,31 g. výtěžek 87%) jako světle žlutých krystalů.

'kl-NMR (400 M liz, CDCIJ: Ó (ppm) 8.23 (2H. d, >8,8 Hz), 7,51 (2H, d, >8,8 Hz), 5,23,(2H,s), 4,96 až4,90 (IH, m), 3,79 až 3,72 (21 k m), 3,51 až 3.44 (2kk m). 3.05 (3H. s). 2,10 až 1,96(211, m), 1,92 až 1,84 (2H. m).

Do roztoku 4-methansulkonyloxy-l©p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidinu (3.31 g, 9.24 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 51(2)) v dimethylformamidu (100 ml) byl přidán azid sodný (660 mg, 10,2 mmol) a směs byla míchána v olejové lázni (100 ^QC) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (3:1 — ► 1 : 1) jako eluentu za vzniku 4-azido-l©p-nitrobenzyloxykarbo-nyl)piperidinu (2,81 g, výtěžek 100%) jako světle žlutých krystalů.

4o 'H-NMR (400 M Hz, CDCIJ; δ (ppm) 8.23 (2kk d. J-8,8 Hz). 7.51 (2H. d, J=8,8 Hz), 5,22 (211, s), 3.86 (21 k dt. .1=13,9, 5,1 Hz), 3.68 až 3,62 (111, m), 3,32 až 3,20 (21 k m). 1,98 až 1.85 (2H.m), 1,68 až 1.61 (211. m).

Do roztoku 4-azido-l ©p-nitrobenzy loxy karbony l)-pi per id inu (2,81 g, 9.17 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 51(3)) v acetonitrilu (84 ml) byl přidán trifenyIfosfin (2,53 g. 9,63 mmol) a směs byla míchána v olejové lázni (70 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce dekahydrát síranu sodného (3,10 g, 9,63 mmol) bvl přidán a reakční směs byla míchána 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs fí liro vána a rozdělena mezi methylenchloríd a 0,IM vodný roztok chlorovodíku. Do získané vodné vrstvy byl přidán methylenchloríd a hydrogenuhličitan sodný a vodná vrstva byla extrahována methylenchloridem.

Získaná organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za

- 289 C'Z 300137 Bó sníženého tlaku. Zbytek byl sušen za sníženého tlaku za vzniku 4-am ino-H p-n itro benzyloxy karbony l)piperidinu (2,33 g, výtěžek 91%) jako světle žlutých krystalů.

“H-NMR (400 M Hz, CDCI,): δ (ppm) 8.22 (2H, d. 8.8 Hz), 7.51 (2H. d. 8.8 Hz). 5.22 (211. s). 4.18 až 4.06 (2H, m). 3.01 až 2,83 (2H. m). 1,88 až 1,80(211. m), 1.34 až 1,22 (2H.m), (5) 3-/m-Buty Idifeny loxy-l-{4-[l-( p-n i trobenzy loxy karbony l)-piperidin-^-y lkarbamoy I]1.3 —th iazo I—2- y 1} azetidin

Do roztoku 4-amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidinu (382 mg, 1,37 mmol) (získaného io podle popisu v referenčním příkladu 51(4)) a 3-terc-butyldifenylsilyloxy 1 -(4-karboxyl-1.3thiazol-2-yl)azetidinu (500 mg, 1,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu

2(4)) v dimethylformamidu (25 ml) byl přidán diethyIfosfory Ikyanid (208 μΙ, 1,37 mmol) a triethylamin (192 μΙ. 1.37 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roziokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatografieky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1:1 —> 1:3) jako eluentu za vzniku 3—Zerc—butyldifenyloxy—1—4—[l —(p20 nitrobenzy loxy karbony l)-piperidinM-y lkarbamoy IJ-1,3 thiazol 2 yl jazetidinu (574 mg, výtěžek 72%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 8.24 (211. d, .1=8,8 Hz). 7,62 (411, d. >8,8 Hz). 7,54 až 7.38 (611, m), 7,36 (111. s), 7,09 až 7,04 (1H, br d, >8,8 Hz). 5.23 (2H. s). 4.79 až 4,72 (I H, m). 4,22 až 4,04 (5H. m), 4,01 (2H, dd. >8,8, 5.1 Hz), 3.08 až 2,97 (2H. m). 2,08 až 2.00 (211, m),

1,55 až 1,42 (2H,m), 1,07(911, s).

(6) 3-1 iydroxy-1-(4-(1 -(p-nitrobenzy loxy karbony 1)—piperidin—4—y lkarbamoy 1 J-l ,3—thiazol—

2-yl jazetidin sn Do roztoku 3-/ťrc-butyldifenyloxy-l-{4-[ 1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidin-4-ylkarbamoylj-l ,3-thiazol-2-yl j azetidinu (570 mg, 0.820 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 51(5)) v bezvodým tetarahydrofuranu (17 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (56 μΚ 0,984 mmol) a 1.0M roztok telra- n butytamoniumíluorídu v tetrahydrofuranu (984 μΗ 0,984 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování do55 běhuuti reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný rozlok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan : ethylacetátu (1 :3)-+ ethylacetát : methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3-hydrox>-l-(4-[l-( p-nitrobenzy loxy karbony I )-piperidin--4-y lkarbamoy |]-1,3-th iazo l-2-yl Jazetidinu (360 mg, výtěžek 95%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz. CDCb): δ (ppm) 8,23 (211. d, >8,8 liz), 7.51 (211, d, >8,8 Hz), 7,39 (IH, s), 7.11 až 7.06 (IH. br d, >8.1 Hz), 5,23 (2H. s), 4.88 až 4,80 (IH. m), 4,32 (211, dd. .1=8,8, 6,6 Hz), 4.24 až 4.04 (311, m). 3.96 (211. dd, >9,5, 4.4 I Iz), 3,12 až 2,95 (211, m). 2,37 až

2,32 (1 H. d. >5.9 Hz). 2,04 až 1,99 (2H. m), 1.55 až 1,43 (2H. m).

(7) 3-Methansulfony loxy-1-(4-( l-íp-nitrobenzyloxykarbonylf-piperidinM-ylkarbamoyl]1.3 —t h i a zo 1—2—y 1 {aze t i d i n

5o Do roztoku 3 -hydroxy-1-(4-(1-(p-nitrobenzyloxykarbony 1) piperidÍn-4-ylkarbamoyl]-l,3thiazol-2-ylJazetidinu (360 mg, 0,780 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu

51(6)) v methylenchloridu (18 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (181 μΐ. 2.34 mmol) a triethylamin (328 μΙ, 2.34 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla

-290 CZ 300137 Ró směs míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smés rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky ? na silikagelové koloně za použití ethylacetát —> ethylacetát: methanolu (98 : 2) jako eluentu za vzniku 3 methansulfonyloxy-1—{4—fl—(p—nitrobenzyloxykarbony 1)—piperidin 4 ylkarbamoyI]l,3-thiazol-2-yl [azetidinu (390 mg, výtěžek 93%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCI.,): δ (ppm) 8.23 (2H. d. >8.8 Hz). 7,52 (2H, d. >8,8 Hz). 7.52 (111. s). 7.06 až 7,02 (1H, br d, ,1=7,7 Hz), 5,45 až 5,40 (IH, ni), 5,23 (2H. s), 4,45 (2H, dd, io >10,3, 6,8 Hz). 4.27 (2H, dd. >10,3. 4.3 Hz). 4,24 až 4,06 (3H. m), 3.11 (3H, s). 3,10 až 2,95 (21Ί. m), 2,07 až 2,00 (2H, m). 1.56 až 1.44 (2H. m).

(8) 3-Acety Ithio->{4-[>{p-nitrobenzy loxykarbony I) piperidin 4-y lkarbamoy l]-l ,3thiazol-2-yl [azetidin

Do roztoku 3 -methansulfonyloxy 1 (4 [1 (p nitrobenzyloxykarbonyl>piperidinM-ylkarbamoyl|-1.3-thiazol-2-yl [azetidinu (390 mg. 0,723 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 51(7)) v dimethylformamidu (20 ml) byl přidán thioacetát draselný (496 mg, 4,34 mmol) při teplotě místnosti, Smčs byla míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc. Po

2o zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethy lacetátu (1 : 2) —» ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-acety Ithio- >{4-[l-(p-n itrobenzy loxy karbonyl) piperidin -4-ylkarbamoy l]-l.3-th iazol-2-yl} azetid i nu (262 mg, výtěžek 70%) jako světle hnědé pevné látky.

^lH-NMR (400 M Hz, CDCf): ó (ppm) 8,23 (2H, d, >8,1 Hz). 7,51 (2H,d. .1=8,1 Hz), 7.41 (IH, s), 7.08 až 7,04 (1Π, brd, >7,8 Hz), 5,23 (211, s), 4.53 (211. t, >8,8 Hz), 4,46 až 4,40(111, m), 4,22 až 4.04 (3H, m), 3,98 (2H. dd, >8,8, 5.9 Hz), 3,12 až 2.96 (2H, ni), 2,37 (3H. s). 2,06 až

2,00 (211, ní), 1,55 až 1,43 (211. m).

Referenční příklad 52

3-Acety Ithio-l-[4-[(3S)-l-(p-nitrobenzy loxykarbony l>pyrrolidin-3-y lkarbamoy! |-1,3thiazol-2-yl jazetidin

(1) (3 R)-3-Hydroxy-l -(p-nitrobenzy loxykarbony l)pyrrolidin io Do suspenze (3R)-3-hydroxypyrrolidinhydrochlorid (7.00 g. 56.6 mmol) v methylenchloridu (210 ml) by! přidán p-nitrobenzy lester ehloromové kyseliny (13,4 g. 62,3 mmol) a triethylamin (17,4 ml, 125 mmol) v ledové lázni. Směs hýla míchána při teplotě místnosti 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan :

ethylacetátu (>])—* ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3R)-3-hy droxy- l-(p-nitrobenzy 1oxykarbonyl)pyrrolidinu (13,6 g, výtěžek 90%) jako světle žluté pevné látky.

-291 CZ 300Í37 B6 'H-NMR (400 M Hz. CDCIJ: δ (ppm) 8,22 (2H. d. J=8,l Hz). 7,53 (2H, d, J=8.1 Hz), 5,24 (2H,

s), 4,55 až 4,50 (1H. m). 3,63 až 3,53 (311, ni), 3,51 až 3.44 (1H, m), 2,09 až 1.93 (2H. nj (2) (3 R)-3-Methansulfony loxy-14p-n itrobenzy loxy karbony Jpyrrol idin

Do roztoku (3 R)-3-hydroxy-l4p-n itrobenzy loxy karbony Jpvrro! idinu (9.0 g. 33,8 mmol) v methylenchloridu (270 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (2.88 ml. 37.2 mmol) a triethy lamin (5.21 ml, 37,2 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla smés míchána při teplotě místnosti 1.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-bexan : ethyíacetátu (1 : 2) —► ethyíacetátu jako eluentu za vzniku (3 R )-3-methan sulfonyloxy-1 -(p-nitrobenzy loxy karbony Jpyrrol idinu (11,5 g, výtěžek 99%) i? jako světle žluté pevné látky.

'H NMR (400 M Hz, CDCIj: Ó (ppm) 8.23 (21 -I, d, J=8,l liz), 7,53 (211, m). 5.33 až 5.23 (III. ni) 5.24 (211, s), 3,82 (IH, dd. .1=12.5, 5.1 Hz). 3,72 až 3,53 (3H. m), 3,06 (3H, s). 2,42 až 2,26 (1H. m). 2.26 až 2,11 (IH, m).

(3) (3S)—3—Azido-1 (p nitrobeiizyloxvkarbonyjpyrrolidin

Do roztoku (3R)-3- methansulfonyloxy 1 (p nitrobenzy loxykarbonylj-pvrrolidinu (4.00 g, 11,6 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 52(2)) v dimethylformamidu (120 ml) byl přidán azid sodný (831 mg, 12.8 mmol) a směs byla míchána v olejové lázni (100 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethy lacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethyíacetátu (3:1 —> 1:2) jako eluentu za vzniku (3$) 3 azido 1 (p -nitrobenzy 1-oxy50 karbonyl)pyrrolidinu (3,43 g. výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl·,): δ (ppm) 8,23 (2H, d, >8,7 Hz). 7,54 (211. d. .1=8.7 I Iz). 5.18(211, s), 4,24 až4,38 (lil, m). 3.62 až3.48 (411. m). 2.19 až2.11 (2H. m).

(4) (3 S)-3-Amino-l-(P“H itrobenzy loxy karbony l)pyrrol idin

155

Do roztoku (3 Sý-fi-azido-l 4 p-nitrobenzy loxy karbony Jpyrrol idinu (3.43 g, 11,6 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 52(3)) v acetonitrilu (103 ml) byl přidán trifenylfosfin (3.19 g. 12,2 mmo!) a směs byla míchána v olejové lázni (70 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce, dekahydrát síranu sodného (3.93 g, 12,2 mmol) byl přidán a reakční směs byla míchána 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a rozdělena mezi methylenehlorid a 0.ΙΜ vodný roztok chlorovodíku, Do získané vodné vrstvy byl přidán methylenehlorid a hydrogenuhl ičitan sodný a vodná vrstva byla extrahována methylenchloridem. Získaná organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl sušen za sníženého tlaku za vzniku (3S)-3-ainino 1 (p nitro15 benzyloxykarbonyl )pyrrol idinu (2,83 g, výtěžek 92%) jako světle žluté pevné látky.

‘H-NMR (400 Μ I!z, CDCIJ: δ (ppm) 8,22 (211, d, J=8,7 I Iz). 7,52 (211, d, J-8.7 1 Iz). 5,23 (211. s). 3.68 až 3,57 (3H, m). 3,52 až 3,44 (lil. m), 3,19 až 3.11 (IH. m). 2,14 až 2,04 (111. m). 1,77 až 1,64 (1H. m).

(5) 3—/ďre—Butyldifenylsilyloxy—1—] 4—L(3S)—14p ·-nitrobenzy loxy karbony I) pyrrolidin 3-ylkarbamoyl]-! ,3—thiazol—2—yl Jazetidin

- 292 CZ 300137 B6

Do suspenze (3S>—3 -amino-Mp nitrobcnzylox\karbonyl)pyrrolidinu (363 mg, 1.37 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 52(4)) a 3 terč butyldifeny Isilyloxy—1—(4— karboxyl-1.3·-thiazol 2 yljazctidinu (500 mg. 1,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dirnethylformamidu (25 ml) byl přidán diethylfosfory Ikyanid (208 pl.

1,37 mmol) a triethylamin {192 pl, 1.37 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentroio vána za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1:1-+1: 3) jako eluentu za vzniku 3-tcrc -butyldifenylsilyloxy-1-{4|(_3S) 1 (p nitrobenzy loxykarbony I) pyrrolidin 3 ylkarbamoyl] 1.3 - thiazol—2—yl jazetidinu (566 mg, výtěžek 72%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCI,): δ (ppm) 8,22 (2H, m). 7,61 (4H, d, J-8,8 Hz), 7,53 (2H. m). 7,48 až 7.38 (611. m). 7.37(111, s). 7,22 až 7,15 (111. brt. J=8,3 Hz), 5,24 (211. d, .1=10,7 Hz). 4.80 až 4.74 (IH, m), 4,67 až 4,59 (IH, m), 4,11 (2H, t, >7.3 Hz). 4,07 až 4,00 (2H, m), 3,81 (IH, dt. J=10,7, 5.9 Hz), 3,67 až 3.52 (211, m). 3.40(111. dd. >11,2. 5.4 Hz). 2.33 až 2.22 (IH. m). 2,08 až 1,92(114, m), 1,07 (9H.s).

(6) 3- Hydroxy 4-{4 [(38)-1-( p-nitrobenzy loxykarbony I)—pyrrol idin—3—y Ikarbamoyl j-1,3th iazol—2—y 1 j azetidin

Do roztoku 3—Zťrc—butyldifeny Isi lyloxy—l—{4—[(3S)-·· l (p nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrrolídin3 - ylkarbamoyl]-1,3-thiazol- 2-yljazetidinu (560 mg, 0,816 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 52(5)) v bezvodém tetrahydrofuranu (17 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (56 pl. 0,980 mmol) a roztok 1.0M tctra-n-butylamon i um fluoridu v tetrahydrofuranu (980 pl, 0,980 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán ethylacetát a vodu a vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem to hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografleky na silikagelové koloně za použití ethylacetát ethylacetát: methanolu (95 : I) jako eluentu za vzniku 3—hydroxy— 1 — {4—[(3S) 1 (p n i trobenzy loxy karbony I)—pyrrol id in—3—ylkarbamoyl] 1,3-thiazol-2-yl | azetidinu (359 mg, výtěžek 98%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCb): δ (ppm) 8,22 (211, m), 7,53 (2H, m), 7.40 (IH, s), 7,24 až 7,17 (Hl, br s), 5,30 až 5,18 (2H. in), 4.89 až 4,82 (IH, m), 4,66 až 4,58 (1H, m). 4,33 (211, t. >7,8 Hz). 3,96 (211, dd, >8,8, .3.9 Hz), 3,80 (IH. dt, .1-11.2. 5.8 Hz). 3.66 až 3.52 (2H, m), 3,46 až 3,39 (lil, m), 2,44 až 2,37 (114, br s). 2.33 až 2,22 (1H, m). 2,10 až 1.95(111. m).

4o (7) 3 - M eth ansu 1 fony loxy I [4 [(3 S)- 4 -(p-n i trobenzy I oxy karbony I >py rro 1 id i n-3-y Ikarbamoyl] 1,3 thiazol-2-yl}azetidin

Do roztoku 3-hydroxy->[4-[(3S>l-(p-nitrobenzy loxy karbony lEpyrrolid i n-3-y I karbamoy I]>3—thiazol 2—yljazetidinu (350 mg. 0,782 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 52(6)) v methylenchloridu (18 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (182 pl, 2,35 mmol) a triethy lamin (329 pl, 2,35 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát -> ethylacetát : methanolu (98 : 2) jako eluentu za vzniku 3-met hansu 1 fon v loxy->{4-[(3S )-1-( p-nitrobenzy loxy karbonyl) pyrrolidin- 3-ylkarbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl}azetidinu (410 mg. výtěžek 99%) jako světle žluté pevné látky.

- 293 CZ 300137 B6 'H-NMR {400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 8,21 (2H. m), 7,53 (2H. m). 7,46 (IH, s). 7,20 až 7,14 (HL br s), 5,45 až 5,40 (1H. m), 5.24 (2H. d, >8,8 Hz). 4,66 až 4.59 (IH. m). 4.46 (2H. t. >8,1 Hz). 4.27 (2H, dd, J-9.9. 4,0 liz). 3,81 (IH. dt, >11,0. 6.3 Hz), 3,67 až 3,52 (214. m). 3.42 (IH, dd. >11.0. 5.1 Hz). 3.12 (3H.s), 2.31 až 2,24(114, m). 2,07 až 1.95(111. m).

(8) 3—Acetylthio—1--J 4—L(3S)—1 -(p nitroberizyloxykarbonyl)—pyrrolidín—3—yl karbamoyl] 1,3th iazo 1-2 -yjazetidin

Do roztoku 3 -methansul fony loxy-l-{4-[(3S)-l-(p-n itrobenzy loxy karbonyl) -pyrrol idin-3-ytio karbamoyl]-l,3-thiazol“2-yl}azetidinu (410 mg, 0,780 mmol) (získaného podle popisu v reterenčním příkladu 52(7)) v dimethylformamidu (21 ml) byl přidán thioacetát draselný (534 mg,

4,68 mmol) při teplotě místnosti a reakční směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným rozto15 kem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 ; 2) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3—acetylthio—1—{4—[(3S>—1 --(p nitrobenzy loxy karbony I)—pyrrol idi i» ylkarbamoyl] 1.3 lhiazol-2-yl j azetidinu (287 mg, výtěžek 73%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDClj: δ (ppm) 8.22 (2H. m), 7,52 (211, m), 7.42 (111, s), 7,20 až 7,15 (IH. br s), 5.24 (211, d, >10.7 liz). 4,66 až 4,59 (IH, m), 4.53 (2H, l. J=8.3 Hz). 4,47 až 4,41 (IH, m), 3,99 (2H, t. ,1-6,4 Hz), 3,84 až 3,76 (IH, m), 3.65 až 3,53 (211, m), 3,41 (1H, dd, .1= 11.7, 4,9 Hz), 2.37 (3H. s). 2.33 až 2.20 (1H. m), 2,07 až 1.93 (1H. nfl.

Referenční příklad 53

3—Acetylthio—1 -]4-[(3R)-l-(p-nitrobenzy loxy karbony l)—pyrrolidín -3 -ylkarbamoyl] 1,3thiazol 2 yjazetidin

(1) (3S)-3-Aeetoxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyJpyrrolidin

Do roztoku (3R)-3 methansu Ifony loxy-1-{ p-n i t robenzy loxy karbony l)py rrolid inu (7,50 g. 21,8 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 52(2)) v dimethylformamidu (225 ml) byl přidán acetát draselný (6,41 g. 65,3 mmol) a směs byla míchána v olejové lázni (80 °CJ přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta 10% vodným roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku.

Získaný zbytek byl čištěn chromatogralleky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 : 1 —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku (3 S)-3-acetoxy-l-( p-n itrobenzy loxy karbony Jpyrrolidinu (5,51 g, výtěžek 82%) jako bílých krystalů.

'H-NMR (400 M liz. CDCl·): δ (ppm) 8,23 (211. d. J=8.1 Hz). 7.53 (2H. d. J=8,l Hz). 5,33 až 5,29 (IH. lil). 5.24 (2H. s). 3,68 až 3,50 (4H, m), 2.19 až 2,02 (211. m). 2,04 (311, s).

(2) (3 S)-3-Hydroxy-l--(p-nitrobenzy loxykarbony Jpyrrolidin

Do roztoku (3S)-3-acetoxy-l>p-nitrobcnzy loxy karbony J-pyrrolidinu (5.51 g. 17,8 mmol) (získaného podle, popisu v referenčním příkladu 53(1)) v methanolu (200 ml) by! přidán a

-294 CZ 300137 B6 katalytické množství methoxidu sodného a směs byla míchána při teplotě místnosti 4.5 hodiny.

Po zkontrolování doběhnutí reakce roztok 4N chlorovodíku v 1.4-dioxanu (4,3 ml) byl pak přidán pro neutralizaci směsi. Výsledná reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3S)-3-hydro\v-l-(pnitrobenzyloxykarbonyljpyrrolidinu (4,00 g, výtěžek 84%) jako bílých krystalu.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl·,): δ (ppm) 8,22 (211. d, J=8,l Hz). 7.53 (2H,d.>8.l Hz). 5.24 (2H. to s), 4,55 až 4,50 (líh m), 3.63 až 3.52 (3H. m). 3.52 až 3,44 (1H. m). 2.09 až 1,92 (2H. m).

(3) (3S)-3-Methansulfonyloxy-l-(p-nitrobenz>doxykarbonyl)pyrrolidin

Do roztoku (3SJ3-hydroxy-l-(p-n i trobenzy loxy karbony l)pyrrol idinu (4.00 g, 15,0 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 53(2)) v methylenchloridu (120 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (1,28 ml. 16,5 mmol) a triethylamin (2.31 ml. 16.5 mmol) v ledové lázni. Po míchaní směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 2,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 :2) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku (3S)-3-methansulfbnyloxy-1-(pnitrobenzyloxykarbonyI)pyrrolidinu (5,33 g, výtěžek 100%) jako bezbarvého průhledného sirupu.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl,): δ (ppm) 8,23 (2H, d. >8,8 Hz), 7,53 (2H, dd, >8,1, 3.7 Hz). 5,33 až 5.23 (111. m), 5,24 (211, s), 3.82 (111. dd. .1= 12.5. 5.1 Hz). 3,72 až 3,53 (311, m). 3,06 (311, s), 2,42 až 2.26 (1H. m), 2,26 až 2,11 (1H, m).

(4) (3 Rj3-Azido-l-(p-nÍtrobenzy loxy karbony IJpyrrolidin

Do roztoku (3S J3-methansul fony loxy-1-( p-nitrobenzyl oxy karbony l)py rro li dinu (5,33 g. 15,0 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 53(3)) v dimethylformamidu (159 ml) byl přidán azid sodný (1.07 g. 16.5 mmol) a směs byta míchána v olejové lázni (100 °C) 3,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla dostatečné promyta

10% vodným roztokem chloridu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (3 : 1 —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku (3 R J3-azí do-1-(p-ní trobenzy loxy karbony l)pyrrolídínu (4,48 g, výtěžek 100%) jako bezbarvého oleje.

^lH NMR (400 M Hz. CDCl;): δ (ppm) 8,23 (211. d. >8.8 Hz), 7,53 (211. d, >8.8 I Iz). 5.24(211. s). 4,24 až 4,18 (111, m). 3.62 až 3.48 (4H, m). 2,19 až 2.02 (2H, ni).

(5) (3R>3-Amino-1 Jp n itrobenzy loxykarbonyl)pyrrol idin

Do roztoku (3 R )-3-azido-1 -(p-n itrobenzy loxy karbony l)pyrrol tdinu (4,48 g, 15,4 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 53(4)) v acetonitrilu (134 ml) hvl přidán trifenyIfosfin (4.22 g. 16.1 mmol) a směs byla míchána v olejové lázni (70 ^GC) 1,5 hodiny. Po kontrole vymizení surových reaklanlů byl přidán deka hydrát síranu sodného (5.19 g, 16,1 mmol) a reakční směs byla míchána 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a

5i) rozdělena mezi methylenchlorid a 0,1 M vodný roztok chlorovodíku. Do získané vodné vrstvy byl přidán methylenchlorid a hydrogenuhličitan sodný a vodná vrstva byla extrahována methylenehloridem. Získaná organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl sušen za sníženého tlaku za vzniku (3R)-3- 295 C’Z 300137 B6 am ino-1-(p-n itrobenzy loxy karbon v jpyrrol idi nu (3,53 g. výtěžek 86%) jako světle žlutých krystalů.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl·,): δ (ppm) 8.22 (2H, d. J=8.8 Hz). 7.52 (2H. d. >8,8 Hz), 5.23 (2H. s), 3,66 až 3.58(311. m), 3.52 až 3.45 (1H, m), 3,19 až 3,12 (1H, m). 2,13 až 2.04 (IH.m). 1.76 až 1.66 (1H. m).

(6) 3 -terč B u t y 1 d i fe n y I s i 1 y 1 o x y -1 - {4- [ (3 R > I -(p-n i t r o be n zy 1 oxy ka r bo η \ I) pyrrolidín-3-ylkarbamoyl |—l ,3-th iazol—2—yl ΐ azetidin io Do suspenze (3 R >3-amino-1 -(p-n itrobenzy loxy karbony l)pyrro lid i nu (363 mg, 1.37 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 53(5)) a 3-ferc buty Idi feny Isily loxy-1 -(4karboxyl-1.3-thiazol-2-yjazetidinu (500 mg, 1,14 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dimethylformamidu (25 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (208 pl,

1.37 mmol) a triethylamin (192 μΐ, 1,37 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs i? byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sní/encho tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za

2a použití n-hexan : ethylacetátu (1:1 -> 1:3) jako eluentu za vzniku 3—/ďrc—butyldifenyIs i lyl oxy- >{4-[(3R)-1-( p-n itrobenzy loxykarbony l)-pyrrol idi n-3-y ikarbamoyl ]-l ,3-th iazo 1-2yjazetidinu (598 mg. výtěžek 51%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 8,22 (211, d, >8,8 Hz), 7,62 (4H, d, >8,1 Hz), 7,56 až

7.38 (8H. m), 7.37 (IH, s), 7,22 až 7.16 (IH, br s), 5,24 (2H. d, >8.8 Hz), 4.76 (IH. ddd.

>6.6. 5.1 Hz), 4.67 až 4,58 (IH. m), 4,15 až 4,07 (2H, m), 4,06 až 3,98 (211, m). 3,86 až 3,78 (IH. m), 3.67 až 3,52 (2H. m), 3,40 (IH, dd, >11,0, 5,1 Hz). 2,34 až 2.20 (IH. m). 2,02 až 1,90 (lil, m), 1.07 (9H, s).

(7) 3-Hydroxy-I -{4-[(3 R}-1 -(p-n itrobenzy loxy karbony l)-pyrrol idi n-3-y lkarbamoyl]-] .350 t h i azo 1 -2-y 1} a ze t í d i n

Do suspenze 3-/erc-bu ty I d i feny I s i ly loxy-1 - f 4-[( 3 R > 1 -(p-n i t robenzy I oxy karbony I >py rro I idin—3—ylkarbamoyl]— 1,3—thiazol—2—yl} azetidinu (590 mg, 0,860 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 53(6)) v bezvodém tetrahydrofuranu (18 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (59 μΙ. 1,03 mmol) a roztok 1.0M tetra-n-butylamon ium fluoridu v tetraliydrofuranu (i,03 ml. 1,03 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylaeetát —> ethylaeetát : methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3 hyd roxy -1 {4- [(3 R > 1 -(p-n i troben zy I o xy ka r bon y I)—py rr o 1 i d i n -3 -y I -ka r b a m oy 1 ] -1,3 thiazol-2-yI} azetidinu (378 mg, výtěžek 98%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz. CDClj: δ (ppm) 8,21 (2H, m), 7,53 (2H, m), 7,40 (IH. s), 7.24 až 7.18 (IH, br s). 5.30 až 5,18 (211. m), 4,88 až 4,81 (1II, m). 4,66 až 4,58 (IH. m). 4,32 (2H. t, >7.8 Hz), 3,96 (2H„ dd. .1=8.8, 4.9 Hz), 3.80 (1H, dt, > 12,2. 6.8 Hz), 3.66 až 3.52 (211, m), 3,46 až 3,40 (1H, m), 2,49 až 2,41 (111, br s), 2,33 až 2,22 (1H, m), 2,09 až >05(1 H. m).

(8) 3-Methansulfonyloxy 1 J4 j(3R) 1 (p nitrobenzyloxykarbonyl>pyrrolidin 3 yl50 karbamoyl]— >3—thiazol -2-y > azetidin

Do roztoku 3 hydroxy-1 {4- [(3 R>l-( p-n itrobenzy loxy karbony l>pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-1.3-thiazol-2-yl] azetidinu (370 mg. 0.827 mmoí) (získaného podle popisu v referenčním pří-296 CZ 300137 Bó kladu 53(7)) v methylenchloridu (19 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (192 μΐ. 2/8 mmol) a triethylamin (348 μΙ, 2,48 mmol) v ledové lázni. Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti za deset minut a míchána při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného.

Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn ehromatograíicky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu —► ethylacetát: methanolu (98 : 2) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-1-{4-|(3Rý-l/p-nitrobenzyloxykarbony l)-pyrr°l idin-3-y Ikarbamoy I] 1,3 thiazol 2 yljazetidinu (422 mg. výtěžek 97%) jako světle io žluté pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCI/: δ (ppm) 8,21 (2H, m). 7,53 (2H. m). 7,46 (IH. s). 7,19 až 7,13 (IH.br s), 5/5 až 5/0 (111. ni). 5,24 (211. d, >10.7 Hz). 4.66 až 4,59 (Hl. m). 4/6 (2H. t. j-7,8 Hz), 4.27 (2H, dd, >9,8. 2,9 Hz). 3,81 (1H. dt, >13,7,5.9 Hz), 3,66 až 3,54 (2H, ni), 3/3 (1H. dd. >1 1,2, 4/ Hz), 3,12 (3H, s). 2,30 až 2,22 (1H, m), 2,09 až 1,95 (IH, ni).

(9) 3-Aeet\lthio-l-{4-[(3R)-l-(p-nitrobenzy loxy karbony lj-pyrrolidin-3-y Ikarbamoy l]-l.3thiazol—2—yl) azetidin

Do roztoku 3-methansulfonylox>-l-{4-| (3 R)-l/p-n itrobenzy loxy karbonyl)—pyrrol idin—3—\Ί— karbamoyl] 1.3 thiazol—2—yl Ϊazetidinu (420 mg, 0.799 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 53(8)) v dimethylformamidu (2! ml) byl přidán thioaeetát draselný (548 mg, 4,79 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázní (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným rozto25 kem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1:2) —> ethylacetát: methanolu (99 : 1) jako eluentu za vzniku 3-acetylth io-l-{ 4/(3R)-I/p-n itrobenzy loxykarbony/-pyrrolidin 3 yIkarbamoyl]-l,3-thiazol—2—y!}azetidinu (280 mg. výtěžek 69%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz. CDCI/: δ (ppm) 8,22 (2H. m), 7.3 (2H. m), 7/2(111, s). 7,21 až 7,15 (IH. br s). 5,24 (2H. d. >10.7 Hz), 4.66 až 4.58 (IH.m). 4,53 (211. dd. >8,8, 7.8 Hz), 4/7 až 4,41 (IH, m), 3,99 (2H, dd, >6,8, 5,9 Hz), 3,84 až 3,76 (IH, m), 3.66 až 3,53 (2H. m), 3,4] (IH, dd, > 11.7, 4,9 Hz). 2,37 (311. s), 2.33 až2.23 (III. m), 2.03 až 1,94 (III. m).

Referenční příklad 54

3—Acetylthio- t 5 4 [(1 p n itrobenzy loxykarbony I)—azetidin—3—y Ikarbamoy 1J-1,3-thiazol-2-ylj •to azetidin

(1) 3-Hydroxy-1 / p-n itrobenzy loxy karbony/azetidin

Roztok 1 benzhydryl-3-hydroxyazetidinu (9,00 g, 37,6 mmol) v methanolu (270 ml) byl kata45 lyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (9.00 g) ve vodní lázni (50°C)

5,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby sc odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a destilovanou vodu. Organická vrstva byla koncentrována za sníženého tlaku a sušena ve vakuu za

- 297 CZ 300137 B6 vzniku surového produktu. Do roztoku surového produktu ve směsi methyl enchloridu (82 ml) a methanolu (55 ml) byl přidán p nitrobenzylester chloromové kyseliny (8.90 g. 41.3 mmol) a triethylamin (5.79 ml. 41,3 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti 1.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagclovč koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 1) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-hydroxy 1 (p nitrobenzyloxvkarbonyl)azetidinu (3,52 g, výtěžek 37%) jako světle žlutých krystalu.

io ’Η-NMR {400 M Hz. CDCl j: δ (ppm) 8.22 (2H, d. >8.8 Hz), 7,50 (2H. d. >8.8 Hz). 5.19 (2H. s), 4.71 až 4,64 (III, m), 4,27 (21 i. dd, >9,9, 7,0 Hz), 3,93 (2H, dd. .1=9.9. 4,0 Hz), 2.20 až 2.16 (ÍH, br d, >5.9 Hz).

(2) 3-Methansulťony loxy-1 (p-n itrobenzy loxykarbony Jazetid i n

Do roztoku 3-hydroxy-1-(p-n itrobenzy loxykarbony l)azetid i nu (3.52 g, 14,0 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 54(1)) v methylenchloridu (106 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (1.19 ml, 15,4 mmol) a triethylamin (2,16 ml, 15.4 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti přes noc. Po

2o zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezí ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použili n-hexan : ethylacetátu (1 : 1 —> 1 : 3) jako eluentu za vzniku 3-melhansulfonyloxy-><p-nitrobenzy 1-oxy25 karbonyl) azetidinu (4,63 g, výtěžek 100%) jako světle žlutých krystalů.

¹ H-NMR (400 M Hz. CDCl-,): 8 (ppm) 8,22 (211, d. .1=8,8 liz), 7,50 (2H. d, J=8.8 Hz). 5.29 až 5.22 (lll, ni), 5,20 (2H. s), 4.40 (2H. dd. J=IO,2. 6.2 Hz), 4,22 (2H, dd. .1=10,2. 4.0 Hz). 3,08 (3H. s).

so (3) 3-Azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyJazelidin

Do roztoku 3-methansulfony loxy-1 -(p-n itrobenzy loxykarbony Dazetidinu (4.63 g. 14,0 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 54(2)) v ditnethylťorniainidu (140 ml) byl přidán azid sodný (1.37 g. 21,0 mmol) a směs byla míchána v olejové lázni (100 °C) 4 hodiny. Po os zkontrolováni doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena me/i ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použiti n-hexan : ethylacetátu (2 : 1 —► : I) jako eluentu za vzniku 3-azido- 1 (p nitrobenzyloxykarbo-nyja/etidinu (2,15 g, výtěžek

4ii 55 %) j ako svět 1 c ž I utých k ry sta 1 u.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 8,22 (211, d. >8,8 liz), 7.50 (211, d, >8.8 Hz). 5.19 (2H. s). 4.33 až 4,28 (311, m). 4.03 až 3.96 (211. m).

(4) 3-Amino-l-{p-nitrobenzyloxykarbonyfiazetidin

Do roztoku 3-azido-1 -(p-n itrobenzy loxy karbony Jazetid inu (2,15 g, 7,76 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 54(3)) v acetonitrilu (65 ml) byl přidán tri feny Ifbsfin (2,14 g. 8,14 mmol) a směs byla míchána v olejové lázni (70 °C) 2 hodiny. Po zkontrolování vymizení výchozí látek byl přidán dekahydrát síranu sodného (2,62 g, 8.14 mmol) a reakční směs byla míchána 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs filtrována a rozdělena mezi methylenchlorid a 0,1M vodný roztok chlorovodíku. Do získané vodné vrstvy byl přidán methylenchlorid a hydrogenuhličitan sodný a vodná vrstva byla extrahována methyleneh lor idem. Získaná organická vrslva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a

- 298 CZ 300137 Bó koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl sušen za sníženého tlaku za vzniku 3-amino-l( p nitro-benzy lo.\\ karhon\l) a/etidinu (1.87 g, výtěžek 96%) jako světle žlutých krystalů.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl·,): 6 (ppm) 8.22 (2H, d, J=8,8 Hz). 7,50 (211. d. >8.8 Hz). 5,18 (2H. s), 4,27 (211. dd, >8,6. 8.6 Hz), 3,87 (IH, tt, >5,1.7,3 i Iz), 3,70 (2H. dd, J-8,8, 5.1 Hz).

(5) 3-/erc-Buty ldifeny Isily loxy-1 - {4-[(l-p-nitrobenzy loxykarbony D-azetidin-3-vlkarbamoyl] - -1,3—Thiazol 2- yl} azetidin

Do roztoku 3-amino-l-(p-nitrobenzy loxy karbony lf-azet idinu (549 mg. 2.18 mmol) (získaného io podle popisu v referenčním příkladu 54(4)) a 3-terc butyldifenylsi lyloxy-1-{4-karbo,\} 1 1,3 thiazol—2—yljazetidinu (800 mg, 1.82 mmol) v dimethylformamidu (40 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (331 μί, 2,18 mmol) a triethylamin (306 μΙ, 2,18 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného.

Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 1 —> I : 3) jako eluentu za vzniku 3terc- buty ldifeny Isily loxy l — {4—[( l-p-n itrobenzy loxykarbony I)—azetidin 3 yl-karbamoyl]-1.320 thiazol—2—y!Jazetidinu (1,06 g. výtěžek 49%) jako světle žluté pevné látky, 'H-NMR (400 M Hz, CDCl·): δ (ppm) 8,23 (2H, d, >8,1 Hz). 7.62 (411, d, J~8.1 liz). 7.54 až

7,39 (8H, m), 7,37 (1H. s), 5,21 (2H, s). 4.89 až 4.81 (111, m). 4.81 až 4.73 (IH. m). 4.41 (2H. dd. J-8,8, 8.8 Hz), 4,12 (2H, dd, J=8,8, 8,8 Hz), 4,05 až 3,98 (4H, m), 1.07 (9H, s).

(6) 3 Hydroxy-1-{4-[( l-p-n itrobenzy loxy karbony l)-azet idin· 3 ylkarbamoyl]-1,3—thiazol—2— yljazetidin

Do roztoku 3-/err-buty ldifeny Isily loxy -1 [4 [(1 p-nilrobenzy loxy karbony 1)—azetidin—3—y Ikarbamoyl] 1,3 --thiazol—2—yl Jazetidinu (1,06 g, 1.58 mmol) (získaného podle popisu sa v referenčním příkladu 54(5)) v bezvodém tetrahydrofuranu (53 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (109 μΙ. 1.90 mmol) a l,0M roztok tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1,90 ml, 1,90 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn c li rom atogra fí ekv na silikagelovc koloně za použití ethylacetát —* ethylacetát: methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l· J4 [(1 ρ n itrobenzy loxy karbony l)-azet id in-3-y lkarbamoyl]- 1.3-th iazol 2-yljazetidinu (649 mg, výtěžek 95%) jako bílé pevné látky, io 'H-NMR (400 Μ I Iz, CDCl·): δ (ppm) 8.22 (2H. d. J-8,8 Hz), 7,58 až 7.50 (1H, br s). 7,52 (2H, d. J=8,8 Hz), 7,40 (IH, s), 5.20 (2H, s), 4,90 až 4,80 (III, m), 4,42 (211. dd. J=8,8. 8,8 říz). 4,34 (2H, dd, .1=9,5, 6,6 1 Iz), 4,02 (211, dd. J~9.5. 5,2 Hz). 4,00 až 3,96 (2H. m).

(7) 3 Methansulfonyloxy-l-{4-(( l-p-nitrobenzyloxykarbonyD-azetidin-3 ylkarbamoyl]-l,315 tli iazol—2—yl J azetidin

Do roztoku 3-hydroxy-1-(4-1( l-p-n itrobenzy loxy karbony 1} azelidin-3-ylkarbaino\l]-l .3thiazol—2—yl Jazetidinu (640 mg, 1,48 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 54(6)) v methylenchloridu (20 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (343 μΙ, 4,43 mmol) a tri50 ethylamin (621 μί, 4.43 mmol) v ledové lázní. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý

-299 CZ 300137 Bó síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištén chromatografíeky na silíkagelové koloně za použití ethylacetát —> ethylacetát: methanolu (98 : 2) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-1-(4-(( 1-p-nitrobenzyloxykarbon\'l)-azetidin-3-ylkarbamoyI]1,3—thiazoi—2 yljazetidinu (611 mg. výtěžek 81%)jako světle žlutě pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl j: δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, >8.8 Hz). 7.50 až 7,46 (IH, br s), 7,46 (IH, s). 5,46 až 5.4] (IH, m). 5.20 (2H. s). 4.89 až 4.80 (IH. m). 4.49 až 4,38 (4H. m), 4,28 (2H. dd, >11.8. 4.4 Hz). 4.01 (2H, dd, >9.5. 5.3 Hz). 3,12 (3H,s).

(8) 3—Acety llhio 1- {4—f( 1 -p-nitrobenzy loxy karbony I)—azetidin—3—y lkarbamoy 1]-1,3-th iazol— io 2—yl} azetidin

Do roztoku 3-mcthansulfonyloxy-l—(4-(( 1-p-nitrobenzyloxykarbonyl) azetidin --3-yl karbamoy lj-l,3-thiazol-2-yl} azetidinu (610 mg. 1,19 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 54(7)) v dimethylformamidu (81 ml) byl přidán thioacetát draselný (817 mg,

7,15 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na si!ikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2) —» ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-acetylthio 1 (4 [(1 -p-nitrobenzy loxy karbony l>az.ctidin-3-y Ikarbamoylj-1,3-thiazoi-2-yljaz.etidínu (405 mg, výtěžek 69%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 8,22 (21 f d, >8,8 1 lz), 7,53 až 7,49 (1Π, m), 7,5 1 (2H, d, >8,8 Hz), 7,43 (1H, s), 5.20 (2H, s). 4,89 až 4,79 (1H, m). 4,54 (2H, dd, J-8,1, 8,1 Hz), 4.48 až

4,18 (3H. m), 4,04 až 3.97 (2H, tn), 2,37 (3H, s).

Referenční přiklad 55

3 - Acety Ith io— 1—{4—[(4—p—ti itrobenzy loxykarbonyl)-pipcrazin-l-karbonyll -1.3-th i azo 1-2-y 1 }azetidin

(1) 4-(p -Nitrobenzyloxykarbonyjpiperazinhydroehlorid

Do roztoku 4-(/erc butoxykarbonyjpiperazinu (1,50 g, 8,05 mmol) v methylenchloridu (68 ml) byl přidán p-nitrobenzy lester chloromové kyseliny (1.90 g, 8,86 mmol) a triethylamin (1,24 ml, 8,86 mmol) v ledové lázni. Smčs byla míchána v ledové lázni 1.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagclovc koloně za použití hexan ; ethylacetátu = (1:3) jako eluentu za vzniku 1 -(řm-butoxy karbony 1)-4-( p-nitrobenzy loxykarbonylJpiperazinu (2,60 g, výtěžek 89%) jako světle žlutého oleje.

Následně, do roztoku produktu (2,60 g. 7.12 mmol) v acetonitrilu (100 ml) byl přidán a 4N roztok chlorovodíku v ethylacetát (15,0 ml) v ledové lázni a reakční směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán d i ethyl ether a reakční směs byla míchána 30 minul. Reakční směs byla filtrována a promyta diethyletherem za vzniku 4—(p—nitro— henzyloxykarbonyjpiperazinhydrochloridu (2.4 g, výtěžek 86%) jako bílé pevné látky.

- 300CZ 300137 B6 (2) 3 -terč Butyldifenylsilyloxy-1 - 44-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazm 1 karbony! ]1,3-th iazol—2-y 1 jazetidin

Do roztoku 4©p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperazinhydrochloridu (874 mg, 2.19 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 55(1)) a 3-/crc-butyIdifenylsilyloxy l-(4-karbo\yl1.3-thiazol-2-yl)azetidinu (800 mg. 1.82 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dimethylformamidu (40 ml) byl přidán díethylfosforylkyanid (0,33 ml. 2.19 mmol) a triethylamin (0,30 ml, 2,19 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána io v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečné promyta 0,5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové kolonč za použití hexan : ethylacetátu (1 : l)jako eluentu za vzniku 3—ferc—butyldifenylsilyloxy-1 - {4 [(4-p-nitrobenzy loxykarbonyl )-piperazin-l -karbony 1 J-l.3—thiazol—2—yl}azetidinu (915 mg, výtěžek 73%)jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz. CDCIJ: δ (ppm) 8,24 (211, d. >8.7 Hz), 7,61 (4H, dd, >7.9, 1,4 Hz), 7.52 (2H, d, J-S.7 Hz). 7,49 až 7.37 (611, m), 7,14 (1H, s), 5,25 (2H, s), 4,80 až 4,71 (IH. m), 4,11

2o (2H. dd. .1=8.7. 6,6 1 lz). 4,01 (2H. dd, >8.7. 4,9 Hz), 3,95 až 3,66 (4H, m). 3,65 až 3,52 (4H, rn), 1.06 (9H,s).

Do roztoku 3-terc buty Idifeny Isily loxy->{4-[(4-p-nitrobenzy loxvkarbony l)-piperazin->karbony 1 ]-1,3-thiazol-2-yIjazetidinu (l,77g, 1,71 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 55(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (35 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (0,11 ml. 1,88 mmol) a roztok l,0M tetra-n-butylamoniurníluoridu v tetrahydrofuranu (1,88 ml,

3ti 1.88 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —>

ethylacetát: methanolu (9:1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy I J4-[(4-p-nitrO“benzyloxykarbonyl)-piperazin-l-karbonylj-1.3-thiazol 2 yljazetidinu (726 mg. výtěžek 95%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCIJ: δ (ppm) 8.24 (2H, d. >8,6 Hz). 7,52 (2H, d, >8,6 Hz). 7,17(111. s). 5.25 (211, s), 4.89 až 4,79 (III, m), 4,32 (2H. dd, >9.1, 6,7 Hz), 3,96 (211, dd, >9,1,4,5 Hz),

4o 3.93 až 3.68 (4H, m), 3,66 až 3,52 (4H, m).

(4) 3-Methansulfonyloxy-l-[4-[(4 p nitrobenzy loxykarbonyl)-piperazin-l-karbony IJ-1,3th iazol 2-y Ijazetídin

Do roztoku 3 hydroxy-1-{4-[(4-p-n itrobenzv loxy karbony l>piperazin-1 -karbony lj 1,3-thiazol-2-yljazetidinu (804 mg. 1.80 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 55(3)) v methylenchloridu (40 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,30 ml, 2,15 mmol) a triethylamin (0,17 ml. 2.15 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové kolonč za použití ethylacetát ethylacetát: mcthanolu (9:1) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy 1 -}4-[(4-p-nitro-301 CZ 300137 Bó benzvloxykarbonyl)-piperazin-l -karbonyl]- 1,3-th iazo 1-2-y l jazetidinu (550 mg. výtěžek 58%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 8.23 (2H, d. >8.5 Hz), 7,53 (2H. d. >8.5 Hz). 7.25 (IH. s), 5.50 až 5,39 (IH, m). 5,26 (2H. s). 4.49 (211, t. >9,6 Hz). 4.26 (2H. dd. >9.6. 4.2 Hz), s 4,00 až 3,66 (4H. m). 3.66 až 3.47 (411. m), 3,11 (3H, s).

(5) 3-Acetylthio-1 -{4 [(4-p-nitrobenzyloxykarbonyí)-piperazin-1-karbonyl j-l,3-thiazol-2yl J azetidin io Do roztoku 3-methansulfonylo\y-l—(4-[( 4-p-nitrobe nzy loxy karbony l>p i pe raz i n-l karbony IJ-1,3 thiazol—2—yl jazetidinu (550 mg. 1.05 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 55(4)) v dimethylformamidu (40 ml) byl přidán thioacetát draselný (717 mg. 6,28 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 3 hodiny. Po zkontrolováni doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný i? roztok chloridu sodného. 7, i skaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3—acetylthio— 1 — {4- [(4 p-nitrobenzyloxykarbonyl>piperazin-l-karbonyl]-l.3—thiazol—

2—yl Jazetidinu (345 mg, výtěžek 64%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 8.23 (2H, d, >8,7 Hz), 7,53 (211, d, >8,7 Hz), 7,22 (IH, s). 5,25 (211, s). 4.52 (2H, t, >8,4 Hz). 4,48 až 4.39 (111. m). 3.98 (2H. dd. J-8.4, 5.3 Hz). 3.95 až 3,68 (4H, m), 3.45 až 3.68 (4H, m), 2.33 (3Π, s).

Referenční příklad 56

S-Acetyllhia-14~[--( p-nitrobenzy loxykarbony lamino)ethy Ikarbamoy 1 ]— >3—thiazol—2-yl > azetidin

(1) /m-Butylester (2-hydroxvethyl)karbamové kyseliny

Do roztoku aminoethanolu (2,51 g. 41.1 mmol) ve směsi methylenchloridu (50 ml) a methanolu (50 ml) byl přidán di-Jere butoxykarbonový anhydrid (13.5 g. 61,9 mmol) a triethylamin (8.6 ml, 61,7 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku (2-hydroxycthyIJkarbamové kyseliny, /crc-butylcsteru (6,18 g.

výtěžek 93%) jako bezbarvého průhledného sirupu.

'H NMR (400 M Hz. CDCl-,): δ (ppm) 5.01 (III. br s), 3,70 (2H. br s). 3,29 (2H. q. J=5.1 Hz). 2.65 (IH. brs). 1.45(911. s).

(2) /crc-Butylesler (2-azidoethyl)karbamové kyseliny

Do roztoku (2-hydroxyethyl)karbamovc kyseliny, /err-buty lesteru (1,5 g. 6,2 mmol) v tetrahydrofuranu (75 ml) byl přidán azid difenylfosforylu (3,0 ml, 13.9 mmol), tri feny Ifosfin (3.7 g.

- 302 CZ 300137 B6

14,1 mmol) a 40% roztok diethylazodikarboxvlátu v toluenu (5.1 g. 13.9 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 4 hodiny za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncen5 trována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethyíacetátu (3:1) jako eluentu za vzniku (2-azídoethyl)karbamové kyseliny, terč- butylesteru (1,24 g. výtěžek 72%) jako bezbarvého průhledného sirupu.

'H-NMR (500 M Hz, CDCIJ: δ (ppm) 4.85 (IH. br s), 3.42 (2H, t. .1=4,8 Hz). 3.31 (2H. t. J=4,8 Hz). l,45(9H,s).

IR (kapalný film): 2103, 1697, 1521. 1368. 1272. 1253 cm ¹

Hmotnostní spektrum (FAB)': 187 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): Obdržená hodnota: 187,1 186 [M+H]' Vypočítána hodnota: 187.1195 (C₇11 lsOjN ₄) i5 (3) p-N itrobenzy lest cr (2-terc butoxykarbonylaminoethyjkarbamové kyseliny

Roztok (2-azidoethyl)karbamové kyseliny, terč-butylesteru (l.22 g, 6.55 mmol) v methanolu (60 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (1,22 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Do roztoku získaného surového produktu v methylenchloridu (60 ml) byl přidán p-nitrobenzylester ehloromovc kyseliny (2.12 g, 9,8 mmol) a triethylamin (1,37 ml, 9,8 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti pres noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacctát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, fíltro2? vána a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (3 : I) jako eluentu za vzniku p-n itrobenzy lesteru (2-tercbutoxykarbonylaminoethyjkarbamové kyseliny (F46 g, výtěžek 66%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (500 M Hz, CDCl·,): δ (ppm) 8,22 (211, d, J=9,0 Hz), 7,51 (2H, d, >9,0 Hz), 5,37 (IH. br s), 5.20 (2H, s), 4,82 (IH, br s), 3,35 až 3.25 (4H. ni), 1,45 (911. s).

3ii IR(KBr): 3355. 1708, 1692. 1534. 1350, 1263. 1170 cm '

Hmotnostní spektrum (FAB) : 340 [M+H]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB) : Obdržená hodnota: 340,1512 [M+l 1] Vypočítána hodnota: 340.1 508 (C_t J F_?()_bN J (4) 3 terč Butyldifenylsilyloxy-4-[4-[2-(p-nitrobcnzyloxykarbonylamino)ethyIkarbamoyl]1.3 thíazol-2-y Jazetidin

Do roztoku p-nitrobenzy lesteru (2-/m-butoxykarbonylaminoethyl)karbamové kyseliny (1.46 g.

4.3 mmol) v 1.4-dioxanu (15 ml) byl přidán a 4N roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (15 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 5,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán diethylether a reakční směs byla míchána 30 minut. Výsledná reakční smčs byla filtrována a promyta diethyletherem za vzniku I (p nitrobenzyloxykarbonylaminojethylaminhydrochloridu (1,18 g, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

Následně do suspenze 2-(p-nilrobcnzyloxykarbonylamino)ctliylaminhydrochloridu (490 mg. 1.77 mmol) popsané výše a 3-terc butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-1,3-thiazol-2-y l)azetidinu (530 mg, 1,21 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dimethylformamidu (26.5 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (0,3 ml. 1.98 mmol) a triethylamin (0.5 ml, 3,59 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě

5o místnosti 1.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla

- 303 CZ 300137 B6 dostatečně prornyt 0.5M vodném roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hvdrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodném roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnaté. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek b\ I čištěn chromatografickv na silikagelové koloně za použití toluen ; acetonitrilu (2:1) jako eluentu za vzniku 3-terc-buty Idifeny lsi lyloxy-1 ] 4--[2-( p-n itrobenzy loxykarbony lam ino)eth\ 1 karbamoy IJ—13—thiazol—2—yt}azetidinu (630 mg, výtěžek 79%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (500 M Hz, CDCh): δ (ppm) 8,16 (211, d, J=8.8 Hz), 7,62 (4H, d. >6.8 Hz), 7.50 až 7.38 (9H, m). 7,35 (IH, s). 5.62 (IH, br t, >5,9 Hz). 5,17 (211, s). 4.79 až 4,72 (IH. m). 4.09 (2H, dd, >8,8, 6,6 Hz), 4,00 (2H, dd, >8,8, 4,9 Hz), 3.55 <2H, q. ,1=5,9 Hz). 3,43 (2H. q.

io >5.9 Hz), 1,07 (9H,s).

IR(KBr): 1724. 1660, 1547, 1523. 1346, 1318, 1255. 1113 cm ^!

Hmotnostní spektrum (FAB) : 660 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): Obdržená hodnota: 660,2324 [M+H]2 Vypočítána hodnota: 660,2312 (C_?,.-;H_?ÍJO₆SSi) (5) 3-1 lydroxy— Ϊ—{4—[2—(p- nitrobenzy!o\ykarbonylamino)ethylkarbamoyl] l.3—thiazol—2— yljazetidin

Do roztoku 3-terc -butyldifenylsilyloxy- l-]4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylaniino)ethylkarba2o moyl]-1,3- thiazol—2—yl | azetidinu (1,21 g. 1,84 mmol) (získaného podle popisu v referenčním přikladu 56(4)) v bezvodém tetrahydrofuranu (60,6 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (0,13 ml, 2,27 mmol) a roztok LOM tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,2 ml, 2.2 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána 2,5 hodin za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do zbytku byl přidán isopropylether a směs byla míchána, promyta a filtrována za vzniku 3-hydroxy-1-[4- [2 (p-nilrobenzyloxykarbonylamino)-ethylkarbarnoyl]- 1,3 thiazol—2—yl)azetidinu (667 mg. výtěžek 86%) jako žluté pevné látky.

3d 'H-NMR (500 M liz, DMSO-dJ: δ (ppm) 8.21 (2H. d. >8.8 Hz). 8,03 (IH, t. J-5.9 liz), 7,59 (211, d, .1=8,8 Hz), 7,50 (1H, t, J-5.9 Hz). 7,41 (1H. s). 5.83 (111, d, J-5.9 Hz). 5,17 (2H, s). 4,66 až 4,58 (IH, m), 4,23 (211, dd. .>8.8, 7,0 Hz), 3.79 (2H. dd. .1-8,8, 4,9 Hz), 3.31 (211. q, .1=5,9 liz), 3,16 (211. q. J=5,9 Hz).

IR(KBr): 1698. 1655. 1552. 1520, 1343. 1279 em ¹Hmotnostní spektrum (FAB’): 422 [M+H]'

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB’): Obdržená hodnota: 444.0952 [M+Na]’ Vypočítána hodnota: 444,0953 (CMhANsSNa) (6) 3 Methansulfony loxy-l-{4-[2-(p-n itrobenzy loxy karbony laminofethy Ikarbamoyl]-1,340 thiazol—2—yl ] azetidin

Do roztoku 3-hydroxy-1- {4—[ 2—(p-n itrobe nzy loxy karbony lam i no)ethy Ikarbamoyl]-! ,3th iazol-2-yl} azetidinu (658.4 mg, 1,56 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 56(5)) ve směsi methylenchloridu (33 ml) a pyridinu (5 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,31 ml, 4,00 mmol) a triethylamin (0.57 ml. 4.09 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázní 10 minut byla výsledná směs míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycené vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla dostatečně prornyt 0.5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceno ným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití

- 304 CZ 300137 B6 toluen ; acetonitrilu (1; 2) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-l-{4-|2-(p-nitrobenzy loxykarbony lam ino)_ethy Ikarbamoy 1]-1.3-th iazo 1-2-yl jazetidinu (607.3 mg. výtěžek

78%) jako světle žluté pevné látky.

H-NMR (400 M Hz. DMSO d, ): ó (ppm) 8.21 (2H. d, J=8.8 Hz). 8J0 (IH. t. J 5.9 Hz), 7.59 (2H. d. .1-8.8 Hz). 7,51 (111, t, >5,9 Hz). 7.50 (IH, s), 5,46 až 5,41 (HL m), 5.17 (2H. s). 4,45 (2H, dd, J—9,9. 6,6 Hz), 4.17 (2H, dd. ,1=9.9. 4,0 Hz), 3,29 (311, s).

IR(KBr): 1720. 1658. 1547, 1523, 1348. 1255. I 184. 1169 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): 500 [M+lI]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): Obdržená hodnota: 500,0910 [Μι II]’. in Vypočítána hodnota: 500.0910 (CHH^OkNsS;) (7) 3-Acety lth io— 1—-J 4—[2—(p-n itrobenzy loxy karbony lam ino)-cthy Ikarbamoy 11-1,3-th i azo 1-2yl j azetidin

Do roztoku 3-methansulfony loxy 1 [4 [2-(p-nítrobcnzyloxykarbonylamino)ethylkarbamoyl]>3—thiazol—2—y l Jazetidinu (607,3 mg, 1,22 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 56(6)) v dimethylformamidu (33 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.06 g. 7,35 mmol) při teplotě místnosti. Reakční smčs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 7 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvla reakční smčs rozdělena mezi ethvlacetát a nasvěcný vodný roztok v r' r » hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta 0.5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (1:2) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio I {4 [2-(p-nilrobenzyloxy25 karbony lam ino)· ethy Ikarbamoy 1]-1,3—thiazol—2—yl jazetidinu (335,8 mg. výtěžek 58%) jako světle hnědé pevné látky.

^lH-NMR (500 M Hz. DMSO-d_(I): δ (ppm) 8,21 (2H, d, >8.3 Hz). 8,05 (IH. t, >5.9 Hz). 7,58 (2H. d. 3-8.3 Hz). 7,50 (1H, t. .1=5,9 Hz). 7,47 (111, s). 5,17 (211, s), 4,50 (211, t. J-8,8 1 lz), 4,42 až 4.36 (IH, ni). 3.92 (2H. dd, J=8,8. 4,6 Hz), 3,305 (2H. q. J=5,9 Hz), 3,!6 (2H, q, J-5,9 Hz), so 2,36 (3H,s).

IR(KBr): 3368, 1690, 1677, 1543, 1520. 1494, 1349. 1255. 1239, 1108cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ): 480 [M+H]’

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): Obdržená hodnota: 480,1002 [Μ 111] , Vypočítána hodnota: 480,1011 (CHfKOJsgS;;)

Referenční příklad 57

3- Acety lthio 1 {4-[3%p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidin 1 karbonyl] 1,3 thiazol-240 yljazetidin

NHPNZ (1) l-/m-Butoxykarbonyl-3-(niethansulfonyloxy)azetidin

- 305 CZ 300137 Bó

Do roztoku l-ferc--butoxykarbonyl--3--hydroxyazetidinu (3.24 g, 18,7 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 31(1)) v methylenchloridu (160 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (1,59 ml. 20,6 mmol) a triethylamin (2,89 ml, 20,6 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 6 hodin. Po zkontrolování doběhnuli reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetatu (1 : 1 —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku 1-terc butoxykarbonyl-3-(methansulťo-nyloxy)!0 azetidinu (4.71 mg. výtěžek 100%) jako světle žlutého oleje.

*H-NMR (400 M Hz. CDCI;,): δ (ppm) 5,23 až 5.17 (IH, m). 4.28 (2H. dd, >6.6,1,5 Hz). 4.10 (211, ni), 3.07 (3H. s), 1,46 (9H,s).

(2) 3-Azido-l-(/m-butoxykarbonyl Jazetidin

Do roztoku I-/ere-butoxykarbony 1-3 (methansulfonyloxyjazetidinu (4,71 g. 18.7 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 57(1)) v dimethylformamidu (140 ml) byl přidán azid sodný (3.65 g, 56.1 mmol) a směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (4 : 1) jako eluentu za vzniku 3-azido-l(ze/x-hutoxykarbonyIJ-azetidinu (3,44 g, výtěžek 93%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI;): δ (ppm) 4.25 až 4,15 (3H, rn). 3,92 až 3.87 (2H. m). 1.45 (9H. s).

(3) >/ťre-Butoxykarbonyl 3 (p nitrobenzy loxy karbony lam ino jazetidin

Roztok 3-azido-l-(/m--butoxy karbonyl jazetidinu (3,44 g, 17,4 mmol) (získaného podle popisu íd v referenčním příkladu 57(2)) v methanolu (170 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti

10% palladia na aktivním uhlí (3,44 g) při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakéní směs filtrována aby sc odstranil katalyzátor, filtrát byl koncentrována za sníženého tlaku za vzniku 3-amino-l-/m-butoxykarbonylazetídin jako surového produktu. Tento produkt byl rozpuštěn v methylenchloridu (170 ml) a p-nitrobenzylester ehloromové kyseliny (5.63 g, 26,1 mmol) a triethylamin (3.66 ml. 26,1 mmol) byl přidán v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti přes noe. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromá40 tografieky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (ί : 1 —> 1 : 2) jako eluentu za vzniku l-řere-butoxy karbony 1-3-( p-n i trobenzyl-oxy karbony lam i nojazet idinu (4,84 g, výtěžek 79%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 M Hz. CDCh): δ (ppm) 8,23 (211. d, >8.1 Hz). 7.50 (2H, d. >8.1 Hz). 5,26 až 5.18 (IH, br s), 5.26 (2H, s), 5,84 (1H, d, J-5,1 Hz). 4,50 až4,40 (lil. m). 4,24 (2H. t. >9,5 Hz),

3,76 (2H, dd, .1=9,5. 5,1 Hz), 1,43 (911. s).

(4) 3-/m'-Bu ty Idi feny lsily loxy-l-{4-(3-(p-ni trobenzy loxy karbony lamino>azet idin-1karbony l]— 1,3—thiazol—2—y IJazetidin

Do roztoku l-/e/r-butoxykarbonyl 3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín (4.84 g,

13,8 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 57(3)) v 1.4 dioxanu (50 ml) byl přidán a 4N roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (50 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 2.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována

- 306 CZ 300137 B6 za sníženého tlaku. Do zbytku byl přidán ethylacetát a výsledná směs byla filtrována a zbytek byl promyt ethy lacetátem a sušen za sníženého tlaku za vzniku 3/p-nitro-benzy loxy karbony 1amino)azetidinhydrochloridu (2.31 g. výtěžek 58%) jako světle žlutých krystalů,

Následně do suspenze 3/p-mtrobenzy loxy karbony lamino)-azetidinhydroehloridu (944 mg. 3,28 mmol) (získaného jak je uvedeno výše) a 3-/ťrc-butyldifenylsilylo\y-l-(4-karboxyl 1,3th iazol 2 /azetidinu (1,2 g. 2,74 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dimethylformamidu (60 ml) byl přidán dicthylfosforylkyanid (498 μΙ, 3,28 mmol) a triethylamin (922 μΐ, 6.58 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplo lote místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako i5 eluentu za vzniku 3-/ď/r-buty Idifeny Isily loxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzy loxy karbony lam íno)-azctidí n-l-karbonyl] 1,3 --thiazol—2—yl ] azetidinu (853 mg, výtěžek 53%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCI/: δ (ppm) 8,23 (2H, d, >8,8 Hz). 7.64 až 7,59 (4H. m). 7.52 (2H. d, .1-8,8 Hz), 7.48 až 7,37 (6H. m), 7.37 (111, s), 5,58 až 5,51 (1H.br d, J-8,1 Hz), 5,22 (21L s).

2d 4,93 až 4.84 (1H, ni). 4,76 až 4.70 (111. m). 4.60 až 4.50 (1H. m), 4.50 až 4,41 (111, m). 4,39 až 4,30 (IH, m), 4,11 až 4.03 (2H. ni). 3.97 (2H. dd, .1=8,1, 5.1 Hz). 4.00 až 3.92 (IH, ni), 1,06 (9H. s), (5) 3—I lydroxy— l — {4 - [3--(p - n itrobenzy loxy karbony lam i no)-azet id in -I karbony l]— >3—thiazol—

2—yl} azetidin

Do roztoku 3- íerc-butyldifeny Isily loxy-1 -[ 4-[3 -(p nitrobenzyloxykarbonylaminojazetidin-lkarbonyl]-1,3-thiazol-2-yl jazetidinu (850 mg, 1,27 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 57(4)) v bezvodém tetrahydrofuranu (43 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny vi octové (87 μΙ, 1.52 mmol) a roztok 1.0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1.52 ml, 1,52 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do zbytku by l přidán ethylacetát a diisopropy lether a výsledná směs byla filtrována a promyta diisopropyletherem za vzniku 3-hydroxy-1 -{4-,3™(pn itrobenzy loxykarbony lam ino>azetid i n-l karbonyl] -1,3-th iazol—2—yl} azetid inu (486 mg, výtěžek 88%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCI/: δ (ppm) 8,25 (211, d, >8,8 Hz). 8.14 (IH. d, >7.3 Hz), 7,61 (2H.

d. J=8,8 Hz), 7,43 (111, s), 5,83 (IH, d, >5,9 Hz), 5,19 (2H, s), 4,74 až 4,67 (IH. m), 4.66 až 4.58 (IH, m), 4,40 až 4.34 (IH. m). 4.32 až 4.26 (1Π. m), 4,24 až 4.17 (3H. m), 3,86 až 3,80 (1H. mk 3.79 až 3.71 (211. m).

(6) 3 Methansulfonyloxy-l-j4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidin-1-karbonyl]45 1.3 “t h i a zo 1-2-y / azet i d ί n

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[3-(p-mtrobenzy loxy karbony lamino)-azct idin-1 -karbonyl j-l ,3thiazol-2 y/azetidinu (630 mg, 1.45 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 57(5)) ve směsi methylenchloridu (32 ml) a pyridinu (12 ml) byl přidán methansulfonylchlorid

5o (377 μΙ, 4,36 mmol) a triethylamin (611 μΙ. 4,36 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do zbytku bv! přidán

- 307 CZ 300137 B6 ethylacetát a diisopropylether a směs byla filtrována a promyta diisopropyletherem za vzniku

3-methansulfonyloxy -l-}4-[3-( p-n itrobenzy loxykarbony lam i no) azet idin-1 -karbony 11 1.3 thiazol—2—yl}azetidinu (766 mg. výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

^!H-NMR (400 M Hz. CDClj: δ (ppm) 8.25 (2H, d, >8.8 Hz), 8,15 (211. d, >7.3 Hz). 7.61 (2H.

d, >8,8 IIz). 7,52 (1H. s). 5,50 až 5,43 (lil, m). 5.19 (2H, s). 4.72 (1H. t, >8.8 Hz). 4,46 až4.27 (4H. m). 4.25 až 4,11 (3H, m), 3,85 (1H. dd. J-9.9. 5.5 1 Iz). 3,29 (3H. s).

(7) 3-Acety Ithio-1- {4-[3 {p-n itrobenzy loxykarbony lam ino j-azet idin-1-karbonyl]-1,3th iazol-2-yb'azetidin κι

Do roztoku 3-methansulfonyloxy-l-{4-[3 {p-nitrobenzyloxykarbonylaniinoKizetidin- 1 karbony l]-l.3-th iazol-2-y IJazetidin u (760 mg. 1.45 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 57(6)) v dimethylformamidu (38 ml) byl přidán thioacetát draselný (993 mg. 8,70 mmol) při teplotě místnosti. Smčs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 9 hodin. Po zkontro15 lování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatogralleky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3—acetyl—thio—I- {4 -[3—(p— nitrobenzy loxy karbonylaminoj-azctidin-l-karbony l] -1.3—thiazol—2—yl}azetidinu (397 mg, výtěžek 56%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCb): 6 (ppm) 8.23 (2H, d, >8,8 Hz). 7.52 (2H, d. .1=8,8 Hz), 7,44 (IH. s), 5,36 až 5.30 (IH, m), 5,21 (2H, s). 4,74 až 4,83 (IH, m), 4,60 až 4,34 (611, m). 3.95 (3H, in), 2,37(311. s).

Referenční příklad 58

3-Acety lthio-1 (4 Jnet hy 1-(2-( p-n i trobe nzy loxy karbony lam i no )-ethyl] karbamoyl}-! ,350 thiazol 2-yjazetidin

(1) 3-terč- Butyldifenylsilyloxy 1 {4-[methy!-(2-hydroxyethyl)karbamoyl]-l,3-tliiazol- 2yjazetidín

Do suspenze N-methylaminoethanolu (1,0 ml, 12,4 mmol) a 3-terč-butyldifenylsilyloxy-1-(4karboxyl 1,3—thiazol—2—yjazetídinu (3,64 g, 8,3 inrnol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dimethylformamidu (180 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (1,9 ml, 12,5 mmol) a triethylamin (1.73 ml. 12.4 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotě místnosti 7 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs io rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta 0,5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (1:1) jako eluentu za vzniku 3 -tere butyldifenylsilyloxy 1 — {4—(methy l-(2-hy droxy ethyl )karbamoyj1.3—thiazol—2 yl}azetidinu (3.41 g, výtěžek 83%) jako světle žlutého průhledného sirupu.

- 308 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 M Hz, CDCh): ó (ppm) 7,61 (4H, d. >7.0 Hz), 7.48 až 7.36 (6H. m). 7,17 (IH, s), 4,79 až 4,71 (IH, m). 4,17 (2H, t. >6.8 Hz). 4,05 (2Í1. dd, J=6.8. 2.7 Hz), 3,84 (2H, t, .1=5,4 Hz). 3.64 (2H. t. >5,4 Hz), 3,28 (IH.br s), 3,05 (31L s). 1.06 (9H, s).

(2) 3-terc- Buty Idifeny Isi lyloxy-l-(4-[(2-azidoethyl)-iiietliyl-karbanioylJ-1.3- - ihiazol—2—v ljazetidin

Do roztoku 3 terč -butyldífenylsilyloxy—1—{4—[melhy I—(2—hydroxyethy I )karbamoyl] 1.3thia/ol-2-yljazetidinu (997,5 mg, 2,0 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu io 58(1)) v tetrahydrofuranu (50 ml) byl přidán azid d i feny 1 fos forv lu (0,65 ml, 3,02 mmol), tri fenylfosfin (793 mg. 3,02 mmol) a 40% roztok d i ethy lazod i karboxy látu v toluenu (1,12 g, 3.04 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a smés byla míchána přes noc za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 3-/erc-butyldifenylsilyloxy-l-(4-[(2azidoethy])-nietlivl-karbamoyl]-l,3-thiazol-2 yljazetidinu (1.05 g. výtěžek 100%) jako bezbarvého průhledného sirupu.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 7,80 až. 7,00 (1 IH, m), 4,90 až 3.00 (11H, ni), 1.06 (9H. s), (3) 3-terc Buty Idifeny Isily loxy-1-» methy l-[2-( p-n itrobenzy loxy karbony lam ino)cthyljkarbamoyl[-1,3-thiazol-2- y I Jazetidin

2š

Roztok 3-/ťro-buty Idifeny Isily loxy-1 -|4-[(2-azidoelhyl)- methyl-karbamoy 1 ]-1,3-thiazol-2yl[azetidinu (1,05 g, 2,02 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 58(2)) v methanolu (60 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (1,05 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs

3i) filtrována aby sc odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Do roztoku získaného surového produktu v methylenchloridu (52,3 ml) byl přidán p-n itrobenzy lester ehloromové kyseliny (650,7 mg. 3,02 mmol) a triethylamin (0,42 ml. 3,01 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasvcený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (2:1) jako eluentu za vzniku 3 -terč b u ty 1 d i fe n y 1 s i 1 y 1 oxy-1 -(4 {met hy 1- [ 2-( p-n i t roben zy l-oxy kar bonylamino)-etliyl]karbamoyl[-l,3-thiazol-2 yljazetidinu (699,5 mg, výtěžek 52%) jako světle žluté pevné látky.

io 'H-NMR (500 M Hz, CDCI,): δ (ppm) 8,12 (2H. d. >7.8 Hz). 7.78 (lil, br s), 7,68 až 7.30 (1311, m), 5.18 (0.5H. s), 5,13 (1,511, s), 4,80 až 4,64 (111, m), 4,10 (2H. t. .1=7,3 Hz), 4,01 (2H, dd. >7,3, 5,4 Hz), 3,72 (211, m), 3,50 (2H. m), 3,25 (0.75H, s), 3,02 (2,2511, s). 1,03 (9H, s). Hmotnostní spektrum (EAB‘): 674 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (PAB ): Obdržená hodnota: 674,2490 [M+H]

Vypočítána hodnota: 674.2468 (C_ul OM SSi) (4) 3-Hydroxy-l-(4-{ methy l-[2-(p-n itrobenzy loxy karbony lam í no>ethyl] karbamoyl >1.3thiazol-2-yljazetidin

Do roztoku 3-/ť/r-buty Idifeny Isily loxy-1 -(4- [methy l-[2-(p-nitrobenzv loxykarbony lamino) ethyl]karbamoyl[-1,3-thiazol-2-yl)azelidinu (806,9 mg, 1,20 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 58(3)) v bezvodém tetrahydrofuranu (40 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (0,09 ml, 1.57 mmol) a roztok l,0M tetra n butylamoniumfluoridu v tetra- 309 CZ 300137 B6 hydrofuranu (1,44 ml. 1,44 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 4 hodiny.

Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promvta nasveeným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát: methanolu (15:1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-M4 {methv 1-(2-(pnitrobenzyloxykarbonylamino) ethyllkarbamovl) 1,3-thiazol-2-vIjazetidinu (428.2 mg. výtěžek 84%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz.. CDCl?: δ (ppm) 8,21 (2H, d. .1=8,8 liz), 7,71 (IH, t. .1=5.5 Hz). 7,49(211, io d. J=8,8 Hz). 7.17 (IH.s). 5.18 (2H. s). 4,88 až 4,70(1 H, m), 4.27(211, dd. J=9,l, 7,8 Hz). 3,93 (2H, dd. J-9,1,4,8 1 Iz). 3,68 (2 H. t, .1=5.5 I lz). 3.47 (2H. q. .1=5.5 I lz). 3.25 (0,811, s). 3.03 (2.2H. s). 2,40 (lil. d.J=5,9 Hz).

(5) 3 -Methansulfonyloxy- I (4—fmethyI—[2—(.Ρ nitrobcnzyloxykarbonylamino)ethylj15 karbamov 1 )-1.3- thiazol-2-yl jazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-1-(4-) methy l-[2 (p-n itrobenzyloxy karbony lamiiioj-ethyljkarbamoyl )1.3- thiazol -2-v Ijazetidinu (428.2 mg. 1.01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 56(5)) v methylenchloridu (21,4 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0.25 ml. 3.23 mmol) a

2o tríethylamin (0.45 ml, 3,23 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi v ledové lázni 10 minut byla směs míchána při teplotě místnosti 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným ro /Tokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na

2? silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (15:1) jako eluentu za vzniku 3methansu Ifonv loxy-1 -(4-( methy 1-(2-( p-nitrobenzy loxykarbony lamino>ethyl]karbamoyl}1.3— thiazol—2- yljazetidinu (480,1 mg, výtěžek 93%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl?: δ (ppm) 8,22 (2H. d, .1=8,1 1 lz). 7.60 až 7.44 (311, m obsahující d, na 7.50 ppm, .1=8,1 Hz), 7,26 (0,3H, s). 7,24 (0.711. s), 5,41 (0,3H, m), 5.34 (0.7H, m), 5,18 (211. to s), 4,42 (211, dd. J=9.0, 7,4 Hz). 4,25 (211, dd, J=9,0, 3.2 Hz), 3,66 (2H. t, J=5,2 Hz). 3.60 až 3,42 (211, m), 3,26 (0.9H. br s), 3,10 (0.9H. br s), 3,08 (2,111, s). 3,03 (2,1H. s).

(7) 3-Acety Ithio-1-(4-) methy l-[2-(p nitrobenzy loxykarbony lamino jetliyl Ikarbamoyl} 1.3th iazo 1-2-yI jazetidin

Do roztoku 3-methansulfonyloxy-1-(4-( methyl-(2-(p nitrobenzyloxykarbonylaminojethyljkarbamoyl j-1.3-thiazol-2—yljazetidinu (480,1 mg. 0,93 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 56(6)) v dimethylformamidu (24 ml) byl přidán thioaeetát draselný (820 mg, 5,69 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 2 hodiny, κι Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta (),5M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikage45 lové koloně za použiti ethylacetát : methanolu (15: 1) jako eluentu za vzniku 3- acety Ithio 1 (4{methyl—[2—(p- nitrobenzy loxykarbony Iamino)ethyl]karbamoyl}-1,3-thiazol -2- yl jazetidinu (348,9 mg. výtěžek 76%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (500 M Hz. CDCl?: δ (ppm) 8,22 (2H, d. J=8.8 Hz). 7,73 (IH, br s). 7,49 (2H, d,

J=8,8 Hz), 7.29 (0.4H. s). 7,20 (0.6H, s). 5.18 (211. s). 4,47 (2H, t, .1=8,8 1 lz), 4,40 až 4.28 (111,

m). 3,92 (2H. dd, J-8,8, 5.7 Hz). 3.66 (2H, t. ,1=5,4 Hz), 3,52 až 3,44 (2H. m), 3.26 (1.211, s).

3,03 (1,811, s), 2.36 (1.211. s), 2,34 (1,8H, s).

-310C.7. 300137 B6

Referenční příklad 59

3_Acetylthio— 1 —(4— {[2—(Zerc—buly ídimethy Isilyloxy )ethy I]—isopropyl—karbamoyl J — 1,3—thiazol 2—yljazetidin

(1) 3-terc Butyldifenylsilyloxy 1 j4-[(2-h\diOxyethyI Jísopropy JkarbamoylJI ,3-thiazol2-yll azetidin

Do suspenze N-isopropylarninoethanol (0,61 ml. 1,38 mmol) a 3-terč- buly Idifeny Isilyloxy—1 ifj (4-karboxy 1-1,3- thiazol—2—yljazetidinu (500 mg. 1,14 mmol) v dimethylformamidu (15 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (0.23 ml, 1,38 mmol) a triethylamin (0,19 ml. 0,23 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána 2 hodiny za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena me/i ethylacetát a nasycený vodný a roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyt 0.5M vodíš ným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátujako eluentu za vzniku 3 -terč butyldifenylsilyloxy ! — {4—[(2— hydroxyethyl Jisopropy l-karbamoyl JI,3-thiazol · 2-yl} azetidinu (318 mg, výtěžek 56%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 Μ I Iz, CDCl.,): δ (ppm) 7.57 (411, d. J-6,5 Hz). 7,50 až 7,30 (611, m). 7,07 (0.6H, s), 6,92 (0,411, s), 4,81 až 4,63 (111, m), 4,49 (0,5 H. s). 4.33 (0,511. s). 4.22 až 3,88 (411, m. obsahující 4,06 (2H. dd, J=14,3. 7,7 Hz)). 3,88 až 3.62 (2H. m), 1.39 až 1.08 (611, m), 1,02 (9H, s).

2S (2) 3-Hydroxy-l-{4- [(2 hydroxyethyl Jisopropyl-karbamoyl JI ,3-thiazol-2-yl| azetidin

Do roztoku 3-terc- b utv Id i feny 1 s i lyl oxy-1 -14-[( 2-hy droxy ethy 1)- i sopropy l-karbam ον I ] -1,3 thiazol—2—yl{azetidinu (2,49 g, 4,75 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu so 59(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (lOOml) byl přidán roztok l,0M tctra-n-butylamoniuinfluoridu v tetrahydrofuranu (5,70 mL 5,70 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (10 : 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(2-hydroxyethyIJisopropyl-karbamoyI]55 1,3-lhiazol-2-yl}azetidinu (1,33 g, výtěžek 98%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl·): δ (ppm) 7,13 (0,711. s), 7,03 (0,3H, s), 4.62 až 4,48 (IH, m), 4,48 až 4,36 (1H. m). 4.29 (2H, t, J=8,() 1 Iz). 3.94 (2H, dd, J=8,0, 4,1 I Iz). 3.80 (2H, br s), 3,57 (2H. br s), 1,35(3H, brs), 1,20 (3H, brs).

(3) l-(4-|[2-(/m-Butyldimethylsilylo\y)ethyl Jisopropy Jkarbamoyl) 1,3-thiazol-2-yl J3hydroxyazctidin

Do roztoku 3-hydroxy- l-{4-[(2-hydrox\ethyl Jisopropy l-karbamoyl] -1,3-thiazo l-2-yl] azetidinu (1.33g, 4.66 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 59(2)) v dimethy 145 formamidu (40 ml) byl přidán tere-bulyIdimethylsilylchlorid (738 mg. 4,89 mmol) a imidazol (333 mg. 4.89 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol a směs byla míchána 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok

- 311 CZ 300137 B6 hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silíkagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1) —* ethylacetátu jako eluentu /a vzniku 1 (4-{[2-[terč-butyldimethylsilyloxy>ethyl]5 isopropyl- karbamoyl) 1.3—thiazoi—2—y l>--3 -hydroxyazetidinu (1.26 g, výtěžek 69%) jako světle žlutého oleje.

¹ H-NMR (400 M Hz, CDClj; δ (ppm) 6,99 (0,2H, s). 6.9] (0,811. s). 4.84 až 4,72 (111. m). 4.72 až4,35 (IH, m ).4.72 až 4,35 (IH, m). 4,27 (2H. dd. >9.4. 6.8 Hz). 3.91 (2H. dd. >9.4. 4.8 Hz). 3,71 až 3,35 (1H, m), 3,71 až 3.50 (2H. m). 3.50 až 3,28 (1H. ní). 1,17(611, br s). 0.87 (9H. br s), io 0,06 (611. d, >2,8 Hz).

(4) 1-(4-} [2 4/erc-Buty Idimethy Isily loxy )ethyl]-i sopropy l-karbamoy I} — 1,3—thiazoi—2—y I)—3— metliansulfbnyloxyazetidin

Do roztoku 1 (4-{[2-(terč-butyldimethyIsilyloxy)ethyl]-isopropyl-karbamoyl}-1.3 -thiazoi—2— yl)-3-hydroxyazetidinu (1,24 g, 3,23 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 59(3)) v methylenchloridu (62 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0.30 ml, 3,88 mmol) a triethylamin (0,54 ml. 3.88 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný jo roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na sílikagelové koloně za použití hexan ; ethylacetátu (1 : l) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-(4-{[2-J/e/r-buty Idimethy Isi lyloxy >ethyljisopropyl-karbamoyl}-l ,3—thiazoi—2—yI>—3-methansulfonyloxyazetidinu (649 mg. výtěžek 42%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M liz, CDClj; δ (ppm) 7,16 až 6,95 (IH, m), 5,46 až 5,36 (IH. ni), 4,49 až 3,68 (3H- ni obsahující 4,41 (2H, ddd, >9.6. 6.6. 1.0 Hz)), 4.23 (211, dd, >9,6, 4,4 Hz), 3.91 až 3,72 (III. m). 3,72 až 3,51 (211, m), 3,51 až 3,30 (IH, m). 3.07 (3H, s), 1.24 (611. br s). 0.83 (9H. s). 0,06 (6Π, d. >3,4 Hz).

o (5) 3-Acetylthio- >(4- ( [2-(/£άύ—butyldimethvlsi lyloxy )ethyl 1—isopropyl—karbamoyl >1,3thiazol-2 yjazetidin

Do roztoku 1 (4-} [2-(/erc-buty Idimethy Isily loxy )ethyl]-i sopropy l-karbamoy I}-1,3-th iazol-215 yl)-3-mcthansulfony loxyazetidinu (649 mg, 1,35 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 59(4)) v dimethylformamidu (19 ml) byl přidán thioacetát draselný (930 mg. 8,14 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištčn chromatograficky na sílikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (3 ; 1) —» ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3---acety Ith ίο—1 —(4—{[2—(/ere butyldimethylsilyloxy) ethyl]-isopropyl karbamoyl) >3—thiazoi—2—yljazetidinu (618 mg, výtěžek 100%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7,20 až 6,89 (IH. m). 4,68 až 4.18 (4H, m obsahující 4,48 (2H, t. .1=8,5 Hz)). 3.94 (2H, dd, .1=8,5, 5,3 Hz). 3,88 až 3,23 <4H. m). 2.39 (3H. s). 1.16 (611, br s), 0.86 (911, s), 0,04 (6H, d, > 1.4 I lz).

Referenční příklad 60

3-Acetylthio-l-(4-{isopropyl“!2-(p_nitrobenzylo\yamino)ethy]]-karbamoyl} 1.3-thiazoi-2y Jazet idin n CZ 300137 B6

(1) 1 - ,^ř4—í(2—Azidocthvl)— isopropyl karbamoy!]— 1,3—thiazol—2 yl jazetid i n-3-/ť/r- butyl· difenylsilyloxyazetídin

Do roztoku 3-Zcrc-butyldifenylsilyloxy—14—[(2—hydroxyethyl)—isopropyl—karbamoy11— 1.3— thiazol—2—yl jazetidinu (1,46 g, 2.79 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 59(4)) v tetrahydro furanu (73 ml) byl přidán azid d ifeny Ifosforylu (0.90 ml, 4.18 mmol), tri feny Ifosfin {1,10 g. 4,18 mmol) a 40% roztok diethylazodikarboxylát v toluenu (1,54 g. 4,18 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 3 hodiny za stejných podmínek, io Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (2 : 1) jako eluentu za vzniku l—{4—f(2—azidoethyl)— isopropyl-karbamoy lj-1,3-thiazol-2-ylj azetidin-3-/e/r-butyld i fenyl- oxyazet idinu (1.38 g.

výtěžek 87%) jako světle žlutého oleje.

^!H-NMR (400 M Hz. CDC!;): δ (ppm) 7,62 (4H. dd, J-8,0, 1,4 Hz), 7,36 až 7,26 (6H, m), 7,26 až 6,90 (1H, m). 4,80 až 4,76 (III, m), 4,75 až 4.61 (1H. m). 4,13 (1H, t, J-7,4 Hz), 4,10(1 H. t. J=7,4 Hz). 4.01 (211, dd. J=8.7. 4,0 Hz). 3,80 až 3,33 (4H, m obsahující 3,56 (2H, br s)). 1,20 (6H. brs), 1,06 (9H,s).

(2) 3 -/e r c- B u ty I d i fe η y 1 s i 1 y 1 o xy-1 -(4- {i s o propy I - [ 2 - (p n i t r o bc 11 zy I o \y a m in o) - e l h \ I ] karbamoyl j-1.3-thiazol-2-yl jazetidin

Roztok 1—{4—[(2—azido ethyl)-isopropy l-karbamoyl] -1.3—thiazol—2—yl jazetidin -3—Zerc—blityI25 difenyloxyazetidinu (1,33 g. 2.42 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 60(1)) v methanolu (65 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (1,33 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Do roztoku získaného surového produktu v methylenchloridu (63 ml) byl přidán p nitrobenzylester chloro30 niovč kyseliny (627 mg, 2.90 mmol) a triethylamin (0,41 ml, 2,90 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek by! čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —> etliyl35 acetát: methanolu (10 : I) jako eluentu za vzniku 3 (erc butyldifenylsilyloxy-1 -(4 {isopropyl— 12-(p-n itrobcnzyloxyamino)ethylj-kar ba moyl j- 1,3-th iazol-2-y Ijazetidinu (945 mg, výtěžek 56%) jako světle žlutého oleje,

H-NMR (400 M Hz. CDCI,): ii (ppm) 7,60 (4H. d. J=1.0 Hz), 7,55 až 7,32 (Ι0Η, m), 7,12 (0,411, br s), 6,95 (0,6H. br s), 5,28 až 5.18 (2H. ni). 4.81 až 4.67 (1H, m). 4.24 až 4.06 (211. m).

4H 4.00 (211, dd. >8.7. 4,9 Hz). 3.70 až 3.18 (4H, ni). 1,20 (6H. br s). 1.06 (9H. d. .1=1.6 liz).

(3) 3 -Hydroxy-1 —(4—{isopropyl—[2—(p-nitrobenzyloxyamino)ethyl]—karbamoy 1} 1.3-thiazol2-yl jazetidin

Roztok 3-/erc-butyldi lény Isilyloxy-1 -(4 {isopropy !-[2-(p-nitrobenzy loxy aminoj-ethyl Ikarbamoyl j-1,3-thiazol-2-yljazetidinu (945 mg, 1.38 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 60(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (50 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (0,10 ml, 1,66 mmol) a l,0M roztok tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1,66 ml,

1,66 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 3 hodiny. Po zkontrolování

-313CZ 300137 B6 doběhnutí reakce byla reakění směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použiti ethylacetát ->

ethylacetát: methanolu (10:1) jako eluentu za vzniku 3—hydroxy—l —(4-í isopropyt—[2—('p nitrobenzyloxyamino)-ethyl]-karbamoyl}—l,3-thiazol-2-vljazetidinu (433 mg. výtěžek 66%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl.,): 6 (ppm) 8.21 (2H. d. J=8.5 Hz). 7.49 (2H. d. >8.5 Hz). 7.11 (0.4H. s), 6.95 (0.6H. s), 5.18 (2H. s). 4.88 až 4,62 (1II. m). 4.62 až 4,18 (311. m), 3.93 (211, dd.

io >8,8, 4,4 Hz), 3.72 až 3.36 (4H. m), 1,30 (3H, br s). 1.20 (3H. br s).

(4) 1-(4-( Isopropyl-[2%p-nitrobenzyloxyamino)- ethy!]-karbamovI j-1,3-thiazol-2-y 1%3methansulťonyloxyazetidin

Roztok 3-hydroxy-l-(4 {i sopro pyl-[ 2-{ p-n itrobenzy loxy am i no f-ethyl] karbamoyl j-1.3thiazol—2—yljazetidinu (1,43 g. 3,09 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 60(3)) v methylenchloridu (72 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (0,29 ml. 3,70 mmol) a triethylamin (0.52 ml. 3,70 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakění směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný

2o roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —> ethylacetát : methanolu (20 : l)jako eluentu za vzniku 1 —(4—{isopropyl [2 -(p-uitrobenzyloxyamino)elhyl]-karbamoyl)-1.3-thiazol-2-yl>3-methansulfonyloxyazctidinu (766 mg, výtěžek 46%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz. CDCl,): δ (ppm) 8,20 (2H. d, >8.4 Hz). 7,50 (2H. d, .1=8.4 líz), 7.20 (0.4H, br s), 7.07 (0.6H, br s), 5.41 (IH. br s), 5.19 (2H, s), 4,66 až 4,18 (5H, m obsahující 4,44 (211, t, J-8.8 Hz), 4.25 (2H. t, .1=8,8 Hz)). 3,68 až 3,36 (411, m). 3,10 (3H, s). 1.31 (3H.brs), 1,22 (3H, brs).

?o (5) 3-Aeetylthio-l-(4-(isopropyl-[2 (p nitrobenzyloxyaminojethylj-karbamovl>1,3thiazol—2—yljazetidin

Roztok l—(4—J isopropyl—[2-(p nitrobenzyloxyamino)cthyl] karbamoyl>3—thiazol 2-yl)—3— methansulfonyloxyazelidinu (776 mg, 1.43 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 60(4)) v dimethylformamidu (23 ml) byl přidán thioacetát draselný (982 mg, 8.60 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztolo kem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn cbromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku 3acetylthio— 1 —(4—{isopropyl—[2 (p-nitrobenzyloxyamino)ethyl] karbamoyl}-!,3-thiazol -2—yljazetidinu (746 mg, výtěžek 46%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCf): δ (ppm) 8.21 (2H, d. .1=8.4 Hz). 7,50 (2H, d. >8.4 IIz), 7,15 (0,4H. br s), 7,04 (0,611, br s), 5,19 (2H. s). 4.66 až 4.20 (4H. m). 4.08 až 3.88 (211. m). 3,66 až 3,26 (4H, m). 2.96 (3H, s), 2,36 (3H. br s), 1,63 (3H, br s).

-31450 Referenční příklad 61

3-Acetylthio-1-(4-(( IS) 2-methyI—[ H 2-(p-n itrobenzy loxy karbony lam ino )m ethyl jpropylkarbamoyl]-! .3- thiazol-2-yl}azetidin

(1) ((1 $H-Hydroxymethyl-2-methylpropyl)karbamová kyselina, terč-butylester

Do roztoku L-valinolu (2,00 g, 19.4 mmol) ve směsí methylenchloridu (50 ml) a methanolu (50 ml) byl přidán di-/crc-biitoxykarbonový anhydrid (5,08 g. 23,3 mmol) v ledové lázni a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn io chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethyíacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku ((1S)-1-hy droxy methy 1-2-methy lpropy Jkarhamové kyseliny, tcrc butylesteru (4,19 mg, výtěžek 100%) jako bezbarvého oleje.

^ll i-NMR (400 M Hz, CDCIj: Ó (ppm) 4,70 až 4,59 (IH, brs). 3,74 až 3.66 (IH. m), 3,65 až 3,57 (IH, m), 3,48 až 3.39 (IH. mý 2,38 až 2,30 (111. br s), 1,89 až 1,78 (IH, m), 1,45 (9H, s), 0,96 (3H, d, J-6.6 Hz). 0,94 (3H, d. .1=6.6 Hz).

(2) ((! S)-l-Azidomethyl-2-mcthy lpropy fikarbamová kyselina, /crc-buty lester

Do roztoku ((IS)-l-hydroxymethyl-2-methylpropyl)karbamové kyseliny, /w-butylesteru

2o (3,00 g, 14,8 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 61(1)) v tetrahydrofuranu (150 ml) byl přidán azid d i fenyl fosfory lu (4.78 ml, 22,2 mmol), trifenylfosfin (5,82 g, 22,2 mmol) a 40% roztok diethylazodikarboxylát v toluenu (9.67 g. 22.2 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 2 hodiny za stejných podmínek. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi cthylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethyíacetátu (9: 1) jako eluentu za vzniku ((lS)—1 —azidomethyl—2—methylpropyjkarbamové kyseliny, tcrc butylesteru (3,26 g. výtěžek 90%) jako bezbarvého oleje.

'H-NMR (400 Μ IIz. CDCIj): δ (ppm) 4.59 až 4.45 (IH. 111). 3.56 až 3.47 (IH. m), 3,42 (211. d.

» >4.4 liz). 1.86 až 1,74(111,m). 1.45 (9H, s), 0.95 (311, d, >6.6 Hz), 0.93 (311. d. >7.3 Hz).

(3) p-N itrobenzy lester ((2S)-2-/crc·- butoxy karbony lamino-3-methy Ibuty fikarbamové kyseliny

Roztok ((IS)—I—azidomethyl 2-mcthylpropyl)karbamové kyseliny; /e/x-butylesteru (3,26 g,

13,3 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 61(2)) v methanolu (160 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí (3,26 g) při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Do roztoku získaného surového produktu v methylenchloridu (160 ml) byl přidán p nitrobenzylester ehloromovc kyseliny (4,31 g,

20,0 mmol) a triethylamin (2,80 ml, 20,0 mmol) v ledové lázni a smčs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezí ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný; filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagc45 lově koloně za použití n-hexan : ethyíacetátu (8 :1 -+ 1 : I)jako eluentu za vzniku p-nitrobenzylcstcru ((2S)-2-/m^,-buloxykarbonylamino-3 metbylbutyjkarbainové kyseliny (3,13 mg, výtěžek 62%) jako světic Žlutých krystalů.

-315CZ 300137 B6 'll-NMR (400 M Hz. CDClj: δ (ppm) 8.21 (2H. d, >8.8 Hz). 7,50 (2H, d. J-8.8 Hz). 5.43 až 5,31 (1H, br s), 5.19 (2H, s), 4,57 až 4.49 (1H. br d. >8,8 Hz). 3,60 až 3,49 (111. m). 3.40 až 3.29 (IH, m). 3,26 až 3.13 (IH, m). 1.82 až 1,71 (IH, m), 1.43 (9H, s), 0,96 (3H. d. J-7.3 Hz), 0,93 (3H,d.>6.6 Hz).

S (4) 3-terč-Butyldifenylsilyloxy 1-(4-(( 1 S)-2-methy>[>(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)methyl]-propy Ikarbamoyl}-1,3-th Íazol-2-yl Jazetidin

Do roztoku p-nitrobenzylesteru ((2S)-2-/m?-butoxykarbonylamino-3-niethylbutyljkarbamovc io kyseliny (3.13 g. 8.21 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 61(3)) v 1.4-dioxanu (31 ml) byl přidán a 4N roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (31 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Ethyl acetát byl přidán do zbytku a výsledná směs byla filtrována a promyta ethylacetátem za vzniku hydrochloridu p -n itrobenzy lesteru «2S)-2-amino

3-methyl butyl Jkarbamovc kyseliny (1.82 g, výtěžek 70%) jako světle žlutých krystalů.

Následně do suspenze hydrochloridu p-nitrobenzy lesteru ((2$>2-amino-3-methylbutyl)karbamové kyseliny (1.29 g, 4,05 mmol) získaného jak je uvedeno výše a 3-ferc butyldifeny Isilyloxy-1 -(4-karboxyl-1.3-thiazol-2-yl)azetidínu (1,48 g, 3,37 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(4)) v dimethylformamidu (74 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (615 μΙ. 4.05 mmol) a triethylamin (1.14 ml. 8,10 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána při teplotč místností 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 3-terč-butyIdifenylsily loxy-1-(4-(( 1 S)-2-methyl -[1-(p-n itrobenzy loxykarbony lamino )methyl] propy Ikarbamoyl } —>3—thiazol—2—yl)azetidinu (1,55 g, výtěžek 74%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCl j: δ (ppm) 8.11 (2H. d. J-8.8 Hz), 7,64 až 7,60 (411, m), 7,49 až 7.39 (811, m), 7,35 (IH, s), 7,20 až 7,18 (IH, br d, >9,8 Hz). 5,56 až 5.48 (IH. br s). 5.20 (IH, d. J-l3,7 Hz), 5,08 (lli, d, >13.7 Hz), 4.78 až 4.72 (IH, tn). 4.14 až 4.06 (211. m). 4,04 až 3.94 (311, m). 3,46 (IH, dt, >13,7, 3,9 Hz), 3,31 (IH, ddd, .>13.7, 10.7, 5,9 Hz). 1,95 až 1,86 (IH, m), 1.07 (9H.s). 1,01 (3H. d, >6,8 Hz). 0,99 (3H. d, J=6,8 Hz).

(5) 3 Hydroxy-1-(4-(( I S>2-methyI-1 l-(p-nitrobenzyloxykarbonylaniino)inethyllpropylkarbatnoy I}—>3—thiazol—2—yljazetidin

Do roztoku 3- terč- butyldifeny Isily loxy-1 -(4- ((1S) 2-methy l-( l-( p-nitrobenzy loxy karbony 140 aminojmethy I] propy lkarbamoyl} 1,3 thiazol-2-vljazetidinu (1,54 g, 2,20 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 61(4)) v bezvodém tetrahydrofuranu (78 ml) bylo přidáno dostatečně kyseliny octové (151 μ|) a Ε0Μ roztok tetra-n-butylamouiumfluorídu v tetrahydrofuranu (2,64 ml. 2,64 mmol) v ledové lázni. Směs byla míchána v ledové lázni I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylaeetát a vodu. Získaná organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zhyiek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3 hydroxy-1-(4-(( 1S)—2— methyl—l l-(p-n itrobenzy loxy karbony lamíno)methyl]-propy Ikarbamoyl}- 1,3-th iazol 2 yj50 azetidinu (927 mg. výtěžek 91%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCI.·): 8 (ppm) 8,09 (211, d, J-8.8 Hz), 7,41 (211, d, J=8,8 Hz), 7,39 (IH.

s), 7,19 až 7.14(1 H. brd, .1=9,5 liz), 5.54 až 5.46 (IH, m). 5.22 (IH. d. .1-13.6 Hz). 5,06(111. d.

J=13.6 liz), 4,87 až 4,78 (IH. m), 4,37 až 4.26 (211, in). 4,04 až 3.90 (311, ni). 3.47 až 3,40 (IH,

-316CZ 300137 Bó

m). 3.38 až 3,30 (1H, m), 2.38 (IH.d, J=7.3 Hz). 1,94 až 1,83 (lil. m). 1.00 (3H. d. J-7.3 Hz).

0,99 (3H.d. >7,3 Hz).

(6) 3 Methansulfonyloxy-l-(4 j(1 S)-2-mcthyl-[ I-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)5 methy 1]—propy Ikarbamoy 1 j-l ,3—thiazol—2—yljazetidin

Do roztoku 3-hydroxv 1-(4-(( 1S)—2—methy I—[ >( n itrobenzy loxy karbony lam i no )nietliyl] propy 1karbamovtj 1.3--ihiazol—2—yl)azetidinu (920 mg, 1,98 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 61(5)) v methylenchloridu (46 rnl) byl přidán methansulfonylchlorid (46) μΙ, κι 5.95 mmol) a triethylamin (834 μΐ. 5.95 mmol) v ledové lázni. Bo míchání směsi v ledové lázni minul byla směs míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhiičitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan ; ethylacetátu (1 : 4) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-l-(4 -{(1S) 2—methy I—[ l-( p-nitrobenzy loxy karbony lam i no )methyl]-propylkarbamoyl}-1.3-thiazol-2-yDazetidinu (1.06 g, výtěžek 99%) jako světle žluté pevné látky.

‘H-NMR (400 M Hz, CDCD): δ (ppm) 8,10 (2H, d, .1=8,8 liz). 7.45 (IH. s). 7.41 (2H, d, >8.8

1 Iz). 7.18 až 7.12 (1H. br d. J-8.8 Hz). 5.50 až 5.45 (IH. br s). 5.42 (1H. tt, J-6.6. 4.4 Hz), 5,22 (IH. d. >13,2 Hz), 5,08 (III, d, >13.2 Hz). 4,49 až 4,40 (2H, ní), 4,29 až 4.20 (21L m), 4,04 až 3.95(1)1. m), 3.44(114, dl. >13,9, 4,4 Hz), 3.38 až 3.24 (lil. m). 3,12 (3H, s). 1,94 -1.85 (IH, m). 1,01 (3H,d, J-6,6 Hz), 0.99 (311, d,.>6.6 Hz).

(7) 3—Acetylthio— 1 —(4- J(1 S) 2- melhyl-[ 1 -(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)melhyl] propylkarbamoyl j-l,3-thiazo 1-2-y Dazetidin

Do roztoku 3 methansu I fony loxy-1-(4-(( 1S >2-methy!-[!-(p-n i trobenzy loxy karbony lam i no )methyl ] propylkarbamoyl}-1,3-th iazol 2 -yDazetidinu (1.06 g, 1,96 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 61(6)) v dimethylformamidu (53 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,34 mg, 11,7 mmol) při teplotě místnosti. Směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 8,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla dostatečně promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2:3) jako eluentu za vzniku 3—acetylthio— 1 —(4—{(l S>2-methyl-[ l-(p-nitrobenzyloxykarbonylaniino)methylj-piOpylkarbamoyl j-l ,3-thiazol 2 yDazetidinu (785 mg, výtěžek 77%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl.,): δ (ppm) 8.12 (211. d.J =8.8 liz), 7.42 (2H. d. J=8.8 Hz). 7.41 (IH. s). 7.20 až 7,16 (lil, br d. J-9.5 Hz). 5.54 až 5.45 (IH. brs). 5.21 (IH.d. J=I3.2 Hz). 5.09( IH. d, J-l3.2 Hz). 4.51 (2H. dt. J=l 1.0. 8,4 Hz), 4,47 až 4,39 (IH, m), 4,03 až 3,93 (311, m), 3.45 (IH, dt, J 13.2. 4.0 Hz). 3.37 až 3.68 (III, m). 2,37 (311. s). 1.95 až 1.84 (III. ni). 1,00 (3H. d, J=7,3 liz). 0,99 (3H, d. J=7.3 Hz).

Referenční příklad 67

3-Acetylthio-1 - {4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminojmethyl-1,3-thiazol-2- yl } azetidin

AcS

NHPNZ

CZ 300137 Bó (1) 1 -(4-Azidomcthyl-1,3-thiazol-2- yl)- 3-terč-buty Idifeny lsi lyloxy azetidin

Do roztoku 3-terc butyldifenylsilyloxy-l-(4-hy droxy methy I-1.3-thiazol-2-y Dazetidinu (1.02 g. 2,39 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(2)) v tetrahydrofuranu ? (50 ml) by! přidán azid difenylfosforylu (0,8 ml. 3,71 mmol). trifenylfosfin (950 mg. 3.62 mmol) a 40 % diethylazodikarboxylát v roztoku toluenu (1,32 g, 3,59 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva by i a sušena přes bezvodý síran sodné, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku, io Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (8:1) jako eluentu za vzniku 1 —<4—azidomethyl—13—thiazol—2—yl>—3—zerc—butyldífcnyIsilv loxyazetidinu (1.06 g. výtěžek 99%) jako bezbarvého sirupu.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7.66 až 7,36(1 OH. m), 6,45 (1 H. s). 4,78 až 4,71 (IH.m).

4,24 (2H. s). 4.12 (2H, dd. >8,6, 6.2 Hz). 4.02 (2H. dd, >8,6. 5.7 Hz). 1,06 (9H. s), is IR (kapalný film): 2858, 2170, 2100. 1527,1313. 1182. 1143, 1114 cm ¹Hmotnostní spektrum (FAB ) 450 [M+H]

Hmotnostní spektrum vysokého rozlišení (FAB ): počítána ÍJiHasONJSSi: 450.1784:

Nalezena: 450.1793[M+H]¹ (2) 3-ferc-Butyldifenylsilyloxy-1 [4 (p-nilrobcnzyloxykarbonylaminomethyl)-1.3-thiazol-2vljazetidin

1-(4-Azidomethyl-1,3-thiazol 2-yl)-3-terč-butyldifenylsilyloxyazetidin (1,06 g, 2.37 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 62(1)) v methanolu (53 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia na aktivním uhlí (1,05 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční smčs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (53,2 ml). Do směsi byl přidán p-nitrobenzyl chloromate (0,76 g, 3,52 mmol) a triethylamin (0.5 ml, 3.59 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs destilována za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodé síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen ; ethylacetátu (3 : 2) jako eluentu za vzniku 3-Zen-butyl35 difenylsilyloxyI l-[4-(p-nitrobenzyl0xykarbonylaminomethyl) 1,3-thiazol-2-yljazetidinu (867,2 mg. výtěžek 61%) jako žluté pevné látky.

'H-NMR (500 Μ I lz. CDCl·): 6 (ppm) 8.21 (2H, d, >8,3 Hz), 7,62 (4H, d. >8,3 Hz), 7,50 (211. d, >8,3 Hz). 7,50 až 7,34 (6H. m), 6,37 (111, s). 5,38 (1H, br t, >5.4 Hz). 5.20 (2H. s). 4,78 až 4,71 (IH, ni). 4,26 (211, d, >5.4 Hz). 4.10 (2H, dd, >8.3, 6,8 Hz), 4,00 (2H. dd, >8,3, 4.7 Hz), io 1,06 (9H,s).

(3) 3-1 lydroxy-]-[4-(p- nitrobenzyloxykarbony)aminomethyl)-1.3-thiazol 2-yljazetidin

Do roztoku 3-terc bu ty Id i feny Isily loxy 1— I — [4—(p-n i trobenzy loxy karbony lam inomelhyl)- 1.345 thiazol—2- yljazetidinu (867,2 mg. 1,44 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 62(2)) v bezvodém tetrahydrofuranu (45 ml) byla přidána kyselina octová (0,1 ml, 1,75 mmol) a 1.0M tetra-n-buty lamon ium fluorid v tetrahydrofuranu (1,72 ml, 1.72 mmol) v ledové lázni a smčs byla míchána v ledové lázni 4,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceném vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnaté, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografícky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (15 : 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-318CZ 300137 Bó

-[4-( p-n itrobenzy loxy karbony iaminomethyl) 1.3—thiazol—2—yljazetidinu (457 mg, výtěžek

87%) jako žluté pevné látky, 'H-NMR (500 M Hz. CDCb): δ (ppm) 8,21 (211. d. J=8,6 Hz). 7.51 (211. d. J-8.6 Hz), 6.40 (IH. s). 5.38(1 H, br s), 5,21 (2H. s). 4,88 až 4,80 (1H. m), 4,32 (2H. dd, J=9.1.6,8 1 lz). 4.27 <2H. d.

J=5.7 1 lz). 3,95 (2H, dd, .1=9,1.4,5 1 iz). 2,23 (1H, d, J=7.9 Hz).

(4) 3-M ethansulí ony I oxy-1-[4-( p-n i trobe lizy loxy karbony lamin omet hyl )-l ,3-thiazol 2 yljazetidin io Do roztoku 3-hydroxy-l [4 -(p-n itrobenzyloxykarbony Iaminomethyl)-1,3—thiazol—2—yl |azetidinu (457 mg, 1.25 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 62(3)) v methylenehloridu (25 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,29 ml, 3,75 mmol) a triethylamin (0,53 ml. 3,80 mmol) v ledové lázni. Po míchání směsi 10 minut v ledově lázni byla výsledná smčs míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek by! Čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-methan- sul fony loxy-1 [4 (p-n itrobenzy loxy kar hony lam inomethy lf-1.3-th iazo 1-22d yljazetidinu (499.4 mg. výtěžek 90%) jako žluté pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz. CDCI;): δ (ppm) 8,21 (211, d. J-7,8 Hz). 7.51 (2H. d. .1=7,8 liz). 6,46 (IH. s), 5,44 až 5.38 (211, m). 5,26 (2H. s), 4,43 (2H. dd, J=9.8, 6.8 liz), 4,28 (2H. d. J=5.9 Hz). 4,24 (211, dd, J-9,8.4,4 Hz), 3,10 (311. s).

(5) 3-Acety lthio-l-[4-(p-nitrobenzy loxykarbony Iaminomethyl >1 ,3-thiazol 2 yljazetidin

Do roztoku 3-methansulfonyloxy 1·-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminomelliyl) 1.3-thiazol—

2—yljazetidinu (499.4 mg. 1,13 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 62(4)) v dimethylformamidu (25 ml) hyl přidán thioacetát draselný (1,0 g, 6,93 mmol) při teplotě so místnosti a směs byla míchána v olejově lázni (80 °C) 6,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethvlacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatografieky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (2 : 1)jako eluentu za vzniku 3-acety lthio-1-[4-(p-nitrobenzy loxykarbony Iaminomethyl)-!,3-thiazol-2-yl]azetídÍnu (265.2 mg, výtěžek 56%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCI;): δ (ppm) 8,21 (211, d, ,1=8,42 Hz). 7,51 (211, d, J=8.4 Hz). 6,42 (IH, s), 5,39(IH, brt, .1=7,5 liz), 5,21 (211. s). 4,51 (2H,l, J-8,1 Hz), 4.,50 až4,38 (IH. m), 4,27 to (211, d. J-7,5 liz). 3.96 (2H. dd. J=8,l, 5.1 Hz), 2,36 (311, s).

Referenční příklad 63

3-Acety lthio-1 - [4-(methoxykarbonylamino)niethyl-i ,3-thiazol—2-yl | azetidin

AcS

NHCOOMe (1) 3-/e/r-ButyId i feny Isi lyloxy- 1 [4 (methoxy karbonyIaminomethyl)-! „3—thiazol-2 y l|azetidin

- 319 CZ 300137 Bó ]-(4-Azidomethyl-1,3-thiazol—2-yI)-3-terč-butyldifenyIsilyloxyazetidin (2,12 g, 4,71 mmol) (získaný podle popisu v referenčním příkladu 62(1)) v methanolu (106 ml) byl katalyticky redukován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (2,12 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (100 ml). Do směsi byl přidán methylchíoromát (0.43 ml, 5.65 mmol) a triethylamin (0,79 ml, 5,65 mmol) a směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs destilována za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodio ného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatografieky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku

3- terč -butyldifenylsilyloxy--1 - -[4- (methoxykarbonylamino-rnethyl)-! ,3—th iazol—2-yl Jazetidinu (1.88 g. výtěžek 45%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 7.60 (411, d. >1,5 Hz), 7.48 až 7.31 (6H, rn). 7, 19 (III. t,

J-8.1 Hz). 7,00 (111. s). 4.78 až 4.68 (IH, m), 4.24 (2H, d. .1-5,8 Hz). 4.09 (211, t. >9,0. 6.6 Hz).

3.99 (2H. t, J=9.0, 5.0 Hz). 3,67 (3H, s), 1,06 (911. s).

(2) 3-1 iydroxy-1 [4· (met hoxy karbony lam inometbyl>l,3-thiazol-2-yl Jazetidin

2o Do roztoku 3-terc-butyldifenylsilyloxy 1 [4 (methoxykarbonylaminomethyl>l,3-thiazol-2yljazetidinu (l,88g. 3.90 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 63(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (94 ml) byla přidána kyselina octová (0.27 ml, 4,68 mmol) a 1.0M tctra-n-butylamon i uin fluoridu v tetrahydrofuranu (4.68 ml. 4,68 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3—h\droxy-1 -[4-(methoxykarbonylaminomethyl)-l,3-thiazol-2-yl]azetidinu (426 mg, výtěžek 45%) jako bílé pevné látky.

to ‘H-NMR (400 M Hz, CDCh,): δ (ppm) 6.39 (1H. s), 4.79 až 4.39 (IH, m), 4,31 (211, dd. J-9,1.6.7 Hz). 4.25 (2H, d, ,1=5.8 Hz). 3,94 (211, dd. .1=9,1,4.3 liz), 3,68 (311, s).

(3) 3-Methansul fony loxy-1-(4-(inethoxy karbony lamino-methyl)-L3-thiazol-2-y IJazetidin

Do roztoku 3 hydroxy -1 -[4-( methoxy karbony lamino-met byl)-1,3-thiazol-2-yl|azetidinu (426 mg, 1,75 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 63(2)) v methylenchloridu (20 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (0,16 ml, 2.10 mmol) a triethylamin (0,29 ml, 2,10 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného.

4i) Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-metliansulfonyloxy-1-f 4-( methoxy karbony lam i nomethvl)-l,3-thiazol-2-yl Jazetidinu (448 mg, výtěžek 80%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCh): Ó (ppm) 6,45 (IH. s), 5,45 až 5,36 (IH, m). 4,43 (2H. dd, .1=9,6. 6.7 Hz). 4.25 (2H. s), 4,25 (IH, t. .1=5,8 IIz). 4,23 (III, t. >5.8 Hz). 3,69 (3H. s), 3.10 (3H. s).

(4) 3-Acetylthio-l-[4-(methoxykarbonylaminomethyl)-1.3-tbiazol-2-yIJazetidin so

Do roztoku 3-methansulfonyloxy-l-[4-(metlioxykarbonylairuno-methyl)-l ,3-thiazol-2-ylJazetidinu (448 mg, 1.39 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 63(3)) v dimethylformarnidu (13 ml) byl přidán thioacetát draselný (952 mg, 8,34 mmol) při teplotě

- 320 CZ 300137 B6 místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrová5 na za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-l-[4-( methoxy karbony laminomethyl)-1.3-thiazol-2-yljazetidinu (441 mg, výtěžek 100%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 Μ I Iz. CDCh): δ (ppm) 6.41 (111. s). 4,50 (2H. t. ,1=8.5 l iz). 4.49 až 4.45 (i H. m).

4,25 (2H, d, J=5,7 Hz). 3.56 (21 f dd. J=8,5. 5.3 Hz), 3,68 (3H. s), 2.05 (3H. s).

io

Referenční příklad 64

3—Acety Ithio— 1 (4 (ben/oylaminomethyl )-I ,3-thiazol 2-y IJazetidin

(1) 1 - [4 (Benzoylam inornethy!)-] ,3-th iazol—2—yl]—3- tere buty Idi feny Isily loxyazet idin

-(4-Azidomethy 1-1.3-th iazol- 2-yl)-3-/m-butyIdifeny Isily loxyazetidin (2,53 g, 5,60 mmol) (získaný podle popisu v referenčním příkladu 62(1)) v methanolu (120 ml) byl katalyticky redu20 kován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (2,53 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce bvla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor. K filtrátu přidán benzole anhydride (1,90 ml, 8,40 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 2.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs destilována za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (3 : 1) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-[4-(benzoylaminomethyl)-! ,3-thiazol-2-yl]-3-/erc-buty Idi feny Isily loxyazetidinu (1,49 g, výtěžek 50%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 7.79 (211. d, J=7,3 Hz), 7,63 až 7,55 (4H, m). 7,55 až 7,31 (9H, rn). 6,79 (111, br s), 6,44 (lil, s), 4.79 až4.68 (1H, m). 4,51 (211, d. J5.4 1 lz). 4.11 (2H, dd. J-8,4, 7.3 Hz), 4,01 (2H. dd, J-8,4, 5,0 Hz), 1,06(911, s).

(2) 1—14—(Benzoylam inornethy l) 1.3 --thiazol—2—yl]—3—hydroxyazetidin ;s

Do roztoku l-[4-(benzoylaminomethy 4)-1,3-th iazol- 2 -y 1]-3- terč butyldifenylsily loxyazetidinu (1,49 g, 2,82 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 64(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (75 tni) byl přidán a l,0M roztok tetra-n-butylarnoniumfluoridii v tetrahydrofuranu (3,39 ml. 3,39 mmol) v ledové lázni a smčs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkon40 tro lová ní doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok liydrogcnuhličitarm sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 2) —> ethylacetát: methanolu (9:1) jako eluentu za vzniku 1 -[4-(benzoyl-aminomethy 1)-1.345 thiazol-2 -yl]-3-hydroxyazetidinu (582 mg, výtěžek 71%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl·,): S (ppm) 7,79 (211, dd, J=7,4 Hz). 7,60 až 7,36 (3H, ni). 6,82 (lil, br s), 6.46 (lil. s), 4.85 až 4.77 (IH. m). 4.51 (2H, d. .1=5,6 liz), 4.31 (211. dd. J=8,9. 6.6 Hz).

3,95 (211, dd. J-8,5,4,4 Hz).

- 321 C7. 300137 B6 (3) l-[4-(Benzoylatninomethyl)-h3 thiazol -2-y1]-3-methansulfonyloxy azetidin

Do roztoku l-[4-(bcnzoylaminomethyl)-1,3—thiazol—2—yl |-3—hydroxyazetidinu (582 mg. 2,01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 64(2)) v methylenchloridu (30 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0.19 ml, 2.41 mmol). triethylaminu (0.34 ml. 2.41 mmol) a pyridinu (5.8 ml) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ch rolo niatograťicky na silikagelové koloně za použití ethyíacetátu jako eluentu za vzniku l-[4-(benzoy laniinoincthy l>— l ,3—th iazol—2—y 1]—3—methansul fony loxyazetídinu (739 mg, výtěžek 100%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCIJ: δ (ppm) 7.80 (211, d. 3-6.9 Hz). 7.57 až 7,41 (3H. ni). 6,71 (lil, bs), 6,53 (1H, s), 5.46 až 5,38 (lil, m), 4,54 (2H, d, J -5.2 Hz), 4,44 (211, ddd. J-9.6, 6.6. 0.9 Hz).

i? 4.25 (2H. ddd. J~9,6. 9.3. 0,9 Hz), 3,10 (3H, s).

(4) 3—Acetylthio— 1 —| 4—(benzoyl amino- methyl) l .3—thiazol—2—yl jazetidin

Do roztoku l-[4-( benzoylam i nomethyl )-1,3-thiazol·· 2-y 1]-3-methan sul fonyloxy azetidinu

2» (739 mg. 2,01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 64(3)) v dimethylformamidu (20 ml) by l přidán thioacetát draselný (1.38 g. 12,1 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 3.5 hodiny . Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacctát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethyíacetátu = (1:1)—»· ethyíacetátu jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-1-(4-(benzoylaminomethyl)-1,3thiazol 2 yljazet idinu (698 mg. výtěžek 100%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 M Hz, CDCI J: δ (ppm) 7.08 (2H, d, 3=7.8 Hz). 7.55 až 7,46 (3H, m), 6.77 (111, br so s), 6,49 (III, s). 4.47 až 4,38 (4H. m), 4,47 až 4.38 (IH, m). 3,97 (211. dd, J~8,6. 5.2 Hz), 2,37 (3H, s).

Referenční příklad 65

Acetylthio-l-[4-(bcnzcnsulfonylamino)methyl-l,3-thiazol-2-yJazetidin

(1) 3—/err—Butyldifenylsilyloxy—1 [4-(benzensulfonylamino)methyl-1.3-thiazol-2-yJazetidin

1 -(4-Azidomethyl-1.3-thiazol-2-yl)-3 tcrc bulyldifenyIsilyloxyazetidin (2,12 g. 4,71 mmol) (získaný podle popisu v referenčním příkladu 62(1)) v methanolu (106 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (2,12 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (100 ml). Do směsi bv!

přidán be uzen esu 1 fony 1 chloride (0.90 g, 7,07 mmol) a triethylamin (0.98 ml, 7,07 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs destilována za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethy lacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého

- 322 CZ 300137 B6 tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-/erc-buty Idifeny Isily loxy-l-[4/benzensul fon v lam ino)methy 1-1,3-thiazol2-ylJazetidinu (755 mg, výtěžek 28%) jako světle žlutého oleje.

^!H-NMR (400 M Hz. CDCI/: δ (ppm) 7.80 (2H, d, .1=7,5 IIz). 7.61 (4H. d. J=6.3 Hz). 7.54 až

7,30 (9H. m). 6.21 (1H, s). 5,07 (1H, t, .1- 6.0 1 Iz), 4,74 až 4,66 (1H, m), 4.05 (211. d. J-6,3 Hz).

3,99 (2H, dd, J=7.6 Hz), 3,89 (2H, dd, J-8,8, 4.8 Hz), 1,07 (9H. s).

(2) 1 [4 (Benzensulfonylaniino)methy!-l,3-thiazol-2-yl] 3 hydroxvazetidin io Do roztoku 3-terc butyldifenylsilyloxy-l-[4-(benzensulfonylamino)methyl-1,3 thiazol 2-ylJazetidinu (2,79 g. 4,95 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 65(!)) v bezvodém tetrahydrofuranu (140 ml) byl přidán roztok 1.0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (5.94 ml, 5,94 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolováni doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok i? hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran horečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-[4/benzensulfonylamino)methyl-l ,3-thiazol 2 yl]—3—hydroxyazetidinu (1,06 g, výtěžek 66%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCI/: δ (ppm) 7.79 (2H. d, J=7,5 Hz). 7,50 až 7,41 (3H. m), 6.25 (1H. s), 5.51 (1H, br s), 4,80 až 4.70 (111, m), 4.19 (2H. t, J~9,1 Hz), 4,03 (2H, t, 3=3,5 1 Iz). 3.83 (2H, dd, J=9.1.4.Hz).

(3) 1-[4/Benzensu lfony lamino )melhy l-l,3-thiazol-2-yl]-33 methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku I—[4—(benzensulfonylamiiio)methyl—l,3—thiazol—2—ylj—3-hydroxyazetidinu (1,06 g.

3,26 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 65(2)) v methylenchloridu (50 ml) byl přidán mcthansulfonylchlorid (0,38 ml. 4.89 mmol) a triethylamin (0.68 ml, 4,89 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs roz50 dělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-[4/benzensulfonylainino)methyl1,3—thiazol—2—yl] -3 methansulfonyloxyazetidinu (1.16 mg, výtěžek 91%) jako světle žluté pevné látky.

'H NMR (400 M Hz. CDCI,): δ (ppm) 7.82 (2H. d, J=7.3 liz). 7.61 až 7,46 (3H. ni). 6.33 (lil, s), 5,42 až 5.33 (IH. m). 5.15 (IH, t, J=5.9 Hz), 4,34 (2H. dd. J=9.8, 6,7 Hz). 4.14 (2H. dd. J=9,8.4.1 Hz), 4.08 (2H. d. .1=6,3 I Iz), 3.10 (3H, s).

(4) 3-Acety I lh i o-l-[4/benzen sulfony lam i no )met hyl 1,3 -thiazol-2-yl jazetidin

Do roztoku l — [4- (benzensu lfony lam i no )methy 1-1,3-thiazol- 2 yl]-3-methansulfonyloxyazetidinu (1.16 g. 2,98 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 65(3)) v dimethylformamidu (35 ml) byl přidán thioaeetát draselný (2,04 g, 17,9 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu :

5o ethylacetát (5 : I) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-l-[4-(benzensulfonylamino)mcthyl-l ,3th iazol-2-y/azetidinu (1.00 g, výtěžek 91%) jako světle hnědé pevné látky.

- 323 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 Μ IIz. CDCl·): δ (ppm) 7.82 (2H. d, >7,4 Hz). 7.58 až 7.42 (3H, m). 6,23 (IH.

$), 5.40 až 5,50 (IH. in), 4.48 až 4.30 (3H, m). 4.09 (2H. d. >5,8 Hz). 3.90 (2H. dd.

>8,3.4,5 Hz). 2,37(311 s).

Referenční příklad 66

3-Acety lthio-1 -[4-(thiofen 2-karbony lamino)methy 1-1,3-thiazol-2-yl]aze tidin

io (t) 3—Zczv-Butyldifenylsilyloxy— 1 —[4—(thiofen—2—karbonylaminojmethyl— 1,3 thiazol-2-vi]azetidin l-(4-Azidomethyl l,3-lhiazol-2-yl)-3-/m·-buly Idifeny lsily loxyazet idinu (2.47 g, 5,50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 62(1)) v methanolu (120 ml) byl katalyticky is hydrogenován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (2,47 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (115 ml). Do směsi byl přidán thienylehlorid (0,71 ml. 6,60 mmol) a triethylamin (0.92 ml. 6,60 mmol) a směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs destilována za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 3-terč-buty Idifeny Isi lyloxy-1 - [4-(thiofen 2 karbonylamino)methyl-l .3 thiazol—2—yljazetidinu (1,88 g, výtěžek 64%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl;): δ (ppm) 7.75 až 7.32(1311, ni). 7,11 až 7,03 (lil, m), 6,65 (IH, br s). 4,80 až 4,70 (111, m), 4.47 (2H. d. .1=5,0 liz). 4.11 (211. t. J-8,5 Hz). 4.01 (211, dd. .1=8,5,5,0 Hz). 1.06 (9H, s).

(2) 3-Hydroxy-1-(4-(thiofen 2 karbonylamino)methyl-l,3 thiazol—2—yljazetidin

Do roztoku 3-/err-buty Idifeny Isi lyloxy-1 -[4-(thiofén-2-karbonylamino)methyl-1,3-thiazo 1-2 yljazetidinu (2.18 g, 4,08 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 66(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (110 ml) byl podán roztok t,0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (4.90 ml, 4,90 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasyceny vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití ethyl40 acetát: methanolu (10 : 1)jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-4-[4jthiofen-2-karbonylamino)methyl-1.3-thiazol-2-yl]azetidinu (571 mg, výtěžek 47%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M liz. CDCl·,): $ (ppm) 7,53 (IH, d, J=3,5 liz), 7.46 (lil, d, J=5,4 Hz), 7,60(111, dd, J-4,0, 3,8 Hz). 6.87 (1H, br s), 6.46 (III. s). 4,87 až 4,78 (IH, m), 4,48 (2H, d, J=5.6 Hz). 4,33 (2H, dd, J=8,7,4,6 Hz), 3,98 <2H, dd, J=8.7,4.6 Hz).

(3) 3-Methansulfonyloxy -1 -[4-(thiofen-2-karbonylamino)methy 1-1,3-lhiazol-2-yl]azetidin

Do roztoku 3-hydroxy-1 —[4—(thiofen-2-karbonylammo)methyl-l,3-thiazol-2 yljazetidinu (571 mg, 1.93 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 66(2)) v methylenchloridu

- 324 C.7. 300137 B6 (28 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,18 mk 2,32 mmol) a triethylamin (0,33 mk

2.32 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného.

Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bez5 vodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-1-[4©thiofen-2-karbonylamÍno)methyl-1.3 thiazol—2—yljazetidinu (490 mg. výtěžek 91%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 Μ Hz. CDCIJ: δ (ppm) 7,56 (IH. d. >5.4 Hz), 7.47 (IH, d, >5.4 Hz). 7,07(111. io dd. >5,1, 3,7 Hz), 6.87 (IH. br s), 6,50 (IH. s), 4.57 (2H. t, >8,6 Hz). 4,50 (2H. t. J=5.4 Hz).

4.50 (21 k d. .1=5,4 Hz). 4,48 až 4.37 {1H, m), 4.36 (211, dd, >8.6, 5.5 Hz), 2,36 (311, s).

Do roztoku 3-methansulfonyloxy-l-[4©thiofen-2 karbonylamino)methyl-l,3-thiazol -2—yljazetidinu (623 mg. 1,67 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 66(3)) v dimethylformamidu (18 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.14 g, 10.0 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla

2t) promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-acetylthio- 1 [4- {thiofen-2-karbonylamino)methyl-l,3- thiazol—2—yljazetidinu (490 mg. výtěžek 91%) jako světle hnědé pevné látky.

¹ H-NMR (400 M Hz, CDCIJ: δ (ppm) 7,56 (IΠ, d, J~5.4 Hz). 7.47 (IH, d, .1=5,4 i lz), 7,07 (1H, dd, >5,1. 3,7 Hz), 6,87 (IH, br s). 6.50 (IH, s), 4,57 (2H, t, >8,6 Hz). 4,50 (2H, t. .1-5.4 Hz),

4.50 (211, d. >5,4 Hz). 4.48 až 4.37 (1H, m), 4,36 (2H, dd. >8.6. 5,5 Hz), 2,36 (311, s).

so Referenční příklad 67

3—Aeetylthio- I [4 {íuran-2-karbonvlamino)methyl-1,3 thiazol-2-yljazetidin

(1) 3 terč Biity]difetiylsilyloxy->[4-(iuran-2-karbonylainino)mcthyl-] ,3-th iazol- 2 ylj55 azetidin <4 -Az.idomethyl—1.3—thiazol—2—yI>-3 tere butyklifenylsilyloxyazetidin (2.47 g, 5,50 mmol) (získaný podle popisu v referenčním příkladu 62(1)) v methanolu (120 ml) byl katalyticky redukován v přítomnosti 20% hydroxidu palladia (2.47 g) při teplotě místnosti. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs filtrována aby se odstranil katalyzátor a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (115 ml). Do směsi byl přidán

2-ťuroylchlorid (0.65 mk 6,60 mmol) a trieth}lamin (0,92 mk 6,60 mmol) a směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolovaní doběhnuli reakce byla směs destilována za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogen45 uhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 3—butyldifenylsily loxy 1 - [4 (furan 2 karbonylaminojmethyl 1,3 thiazol—2—yljazetidinu (1.60 g, výtěžek 60%) jako světle žlutého oleje.

- 325 CZ 300137 B6 ‘H-NMR (400 M Hz. CDCl·,): δ (ppm) 7.75 až 7,58 (4H, m). 7.50 až 7.09 (9H, rn), 6.68 (IH. br

s). 4.82 až 4.70 (IH. m), 4.47 (2H. d, >5,5 Hz). 4,11 (211. t. >8.3 Hz). 4,02 (2H, dd.

>8.3. 5.0 Hz). 1.06(914, s).

(2) >[44Furan-2-karbonylamíno)methyl-1.3-thiazol-2-yl]-3-hydroxyazetidin

Do roztoku 3-/erc~buty Idifenylsily loxy-l-[4-(furan-2-karbonyl-amino)methyl·-1.3 -thiazol—2— yljazetidinu (1.90 g. 3,68 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 67(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (95 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butylamoniumfluoridu in v tetrahydrofuranu (4,41 ml. 4.41 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethyl1? acetát: methanolu (10: 1) jako eluentu za vzniku 1-(4-(furan-2-karbonylamino)melhyl-l.3thiazol -2 yl]-3-hydroxyazetidinu (426 mg. výtěžek 47%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 M Hz, CDCl?: δ (ppm) 7,44(111, s), 7.12 {1H. d, >3.5 Hz). 7,04 (IH. br s). 6,49 (IIL dd. >3,4. 1.7 liz), 6,45 (IH. s). 4.86 až 4,78 (IH, m), 4.48 (211, d, >5,7 Hz), 4.33 (2H. I, >8.8 Hz), 3,98 (2H, dd. >8.8. 4,4 Hz).

(3) 1 (4 (Furan-2-karbony lani ino)niethyl-i.3-thiazol-2-yl]-3-met hansu Ifony loxy azet idin

Do roztoku 1 -(4-(furan 2 karbonylaminojinclhyl—1,3—thiazol—2—ylJ—3—hydroxyazetidinu (426 mg. 1.72 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 67(2)) v methylenchloridu 25 (20 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,16 ml, 2,07 mmol) a tríethylamin (0,29 ml,

2.07 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chroma30 tograficky na silikagelové koloně za použili ethylacetát : methanolu (20: 1) jako eluentu za vzniku 1 (4 (furan-2-karbony lam inojmethy 1-1,3—thiazol—2—yl ]-3-met hansu Ifonyloxyazet idinu (481 mg, výtěžek 78%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M liz, CDCl?: δ (ppm) 7.45 (IH, d, >0,9 Hz). 7,13 (IH. d, .1=3,5 Π), 7.00(111, s), 6,53 (IH. s). 6,50 (IH, dd. >3,5, 1,8 Hz), 5.49 až 5,38 (111, m), 4,51 (2H, d, >5,8 Hz), 4,48 (2H,dd. .1=3,1. 1,0 Hz). 4.29 (211. dd. >5,8. 4,9 Hz). 3.10 (3H. s).

(4) 3-Acetylthio-1-(4-(furan-2-karbonylamino)methyl-l,3-thiazol-2-yljazetidin

Do roztoku 1 -(4-(furan-2-karbonylamino)methyl-l ,3-thiazol-2-yl]-3 m ethan sul fony loxy40 azetidinu (481 mg. 1,34 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 67(3)) v dímcthylformarnidu (14 ml) byl přidán thioaeetát draselný (921 mg, 8,07 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (90 °C) 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 3—acetylthio—1-(4-(furan-2-karbonylamino)methyl-l,3--thiazol—2—yljazetidinu (341 mg, výtěžek 83%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 M Hz. CDCl?): δ (ppm) 7,45 (IH, s). 7,12 (IH. d. >3,5 Hz). 7,09 až 6.94 (211.

ni), 6,49 (2H, t, >2,5 Hz), 4,56 (2H, t, .1=8,5 Hz), 4.50 (2H, d, >5,7 1 lz), 4.48 až 4,38 (111. m).

4,02(211, dd.J-8.5. 6.1 I lz), 2,36 (314. s).

- 326 CZ 300137 B6

Referenční příklad 68

3—Acetylthio- 1 (4 ftalímidomethyl—l.3- thiazol- 2—y ljazetidin

(1) 3-/e/r-Buty Idifeny Isily loxy-1 —(4—ftal imidomethyl—1.3 th iazol-2-yl jazetidin

Do roztoku 3-Zerc-buty Id ifeny Isily loxy-1-(4-hydroxy methy l-l ,3- thiazol 2-yl jazetidinu (1.50 g. 3.53 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(2)) v tetrahydrofuranu ni (75 ml) byl přidán ftalimide (5l9mg, 5,30 mmol), tri fenyl fosfin (1.39 g. 5,30 mmol) a 40 % diethyl azodikarboxylát v roztoku toluenu (2.03 mk 5.30 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána v ledové lázni 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl is čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:5) jako eluentu za vzniku 3-terc- butyldifenylsi lyloxy I (4-f'tal imidomethyl-1,3-th iazol—2—y Ijazetidinu (1.52 mg, výtěžek 78%) jako světle žlutého oleje.

¹ H-NMR (400 M Hz. CDCl·,): 6 (ppm) 7,88 (2H. dd. >5,5. 3.1 Hz). 7.33 (2H. dd, >5,5, 3,1 Hz). 7,60 (4H. dd, J-7,9, [,4 Hz), 7,47 až 7,34 (611. m). 6,26 (IH. s), 4.83 (2H. s). 4.76 až 4.68 (lil.

2o ni), 4.26 až 4.08 (211, m), 4,08 až 3,92 (2H. m). 1.05 (9H. s).

(2) >(4-Ftalimidomethyl-l,3-thiazol-2- yl) 3 hydroxyazetidin

Do roztoku 3-terc butyldifenylsi lyloxy-1 —(4—ftalíniidomethyl 1,3 --thiazol—2—yl jazetid inu (1,52 g. 2,57 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 68(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (76 ml) byl přidán a l,0M roztok tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (3,29 ml, 3,29 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem io chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý. filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 1 (4-flalimidomethyl-l,3-thiazol-2-yl>3-hydroxyazetidinu (864 mg, výtěžek 100%) jako bílé pevné látky.

¹ H-NMR (400 M Hz, CDCb): δ (ppm) 7,87 (2H, dd, >5,4, 3,1 Hz), 7,73 (2H, dd, >5,4, 3,1 I lz). 6.32 (IH, s), 4,79 (2H. s), 4.78 až 4,70 (IH. m), 4,27 (211, dd. >9.2, 6.9 Hz). 3,91 (2H. dd, J=9,2, 4,6 Hz).

(3) I (4-FtalÍmidomethyl-l,3-thiazol-2-yl>3-methansulfonyloxyazetidin

Do roztoku l-(4 ftal imidomethyl-1.3-thiazol-2-yl>3-hydroxyazetidinu (864 mg. 2.74 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 68(2)) v methy lenchloridu (35 ml) by l přidán methansulfonylehlorid (0,25 ml. 3.29 mmol) a triethylamin (0.46 ml. 3,29 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána i hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán do směsi diethylether a směs byla míchána 30 minut. Směs byla filtrována pevná látka sebrána a promyta diethyletherem za vzniku 1(4 fial imidomethyl—1,3—thiazol—2—yl)—3—methansulfony loxyazelidinu (726 mg, výtěžek 67%) jako bílé pevné látky.

- 327 CZ 300137 Bó 'H-NMR {400 M Hz. CDCh): δ (ppm) 7.91 (2H. dd, .1=5.5, 2.8 Hz). 7.86 (2H. dd, >5.5. 3.5 Hz).

6.70 (IH. s). 5,46 až 5.39 (III, m). 4.63 (2H, s). 4,36 (2H, dd. >10,0, 6.6 Hz), 4.09 (2H. dd.

>10,0. 3.4 Hz). 3,27 (3H,s).

(4) 3-Acetylthio 1-(4-ftalimidomethyl—>3—thiazol—2—yl)azetidin

Do roztoku 1 —(4—ftalimidomethyl—1,3—thiazol—2—yl)—3—methansulfony loxyazetidinu (726 mg, 1,85 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 68(3)) v dimethylformamidu (22 ml) hyl přidán thioacetát draselný (1,26 g. 11.1 mmol) při teplotě místnosti a směs hýla míchána ni v olejové lázni (90 °C) 6,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1:1) jako eluentu za vzniku 3-acety Ithio 1--(4—ftal imidomethyl—1,3—thiazol -2—yljazetidinu (599 mg, výtěžek 87%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCb,): δ (ppm) 7,88 (2H, dd, >5,4, 2,9 Hz), 7.73 (2H, dd, >5.4, 3.1 Hz). 6.35 (IH, s). 4,82 (211, s), 4.52 (2H. t. >8,4 Hz). 4.45 až 4.35 (1H. m). 3,98 (2H. dd, .1=8,4,5.7 Hz), 2.34 (3H. s).

Referenční příklad 69

3-Acetylthio- J-(4-sukcÍnimidomcthy l-l ,3—thiazol—2—yl Jazetidin

(1) 3 terč Butyldifenylsilyloxy— l —(4—sukcinimidomethyl— 1.3—thíazol—2—yl)azetidin

Do roztoku 3 terč buty Idi feny Isily loxy-l-(4-hydroxy melhy l-l ,3-thiazol-2-yl)azetidinu so < 1,50 g, 3.53 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 2(2)) v tetrahydrofuranu (75 ml) byl přidán sukcinimid (525 mg, 5,30 mmol), trifenylfosfin (1,39 g, 5,30 mmol) a 40% diethylazodikarboxylát v roztoku toluenu (2,03 ml, 5,30 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána v ledové lázni 4 hodiny, Po zkontrolování doběhnutí reakce byla smčs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bvla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití hexan : ethylacetátu (1 : 1) jako eluentu za vzniku 3—řerc—butyldifenylsilyloxy-l-(4-sukcininiidomethyl-l,3-thiazol-2-yljazetidinu (1.79 g, výtěžek 100%) jako světle žlutého oleje.

'H-NMR (400 M Hz, CDCb): δ (ppm) 7,65 až 7.57 (4H, m). 7,49 až 7.36 (6H. m), 6,30 (IH, s), io 4.75 až 4,66 (lil. ni), 4,60 (2H, s), 4,21 (4H, dd, J-14,2. 7.1 Hz). 4,12 (411, dd. > 14,2. 7,1 Hz).

4,09 (211, t, >8,5 Hz), 3,99 (2H. dd, .1=8,5. 4,9 Hz). 1,05 (911, s).

(2) 3-1 lydroxy-1-(4-sukcinimidomethyI-1,3-thiazol-2-ylJazetidin •i? Do roztoku 3-terc- butvldifenylsi ly loxy 1 (4 sukcinimidomethyl-1.3-thiazol-2-yl)azelidinu (1.79 g, 3,53 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 69(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (141 ml) byl přidán roztok 1 ,()M tetra n--butylamoniumťluoridu v tetrahydrofuranu (4.24 ml, 4.24 mmol) v ledové lázni a smčs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontro- 328 CZ 300137 Bó lování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran hořečnatý, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silíkagelové koloně za použití ethylacetát ethyl5 acetát: methanolu (20: 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-(4-sukcininiidoinethyl- 1.3 thiazoi—2—yljazetidinu (456 mg. výtěžek 49%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI.J; δ (ppm) 6,34(1 H.s). 4,84 až 4,74 (1H. m). 4.62 (211. s). 4.31 (211. dd, J-9.9, 6,6 Hz). 3.94 (2H. dd, .)=9.9. 4,4 Hz), 2.76 (4H. m).

io (3) 3-Methansulfonyloxy 1 -(4-sukcinimidomelhyl-l.3—thiazoi—2-yl)azetidin

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4 sukcinimidomethyl- 1,3-th iazol- 2-yl )azetid i nu (459 mg.

1,72 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 69(2)) v methylenchloridu (50 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (0,16 ml, 2,06 mmol) a triethylamin (0.29 ml. 2.06 mmol) i? v ledové lázni a smčs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na sílikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-l-(42ii sukeinimidotnethyl-1,3 tliiazol—2—yljazetidinu (515 mg, výtěžek 87%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 6,43 (1H, s), 5.44 až 5.34 (1H, m), 4,62 (211, s), 4,44 (2H, dd. J= 10.3, 6,6 Hz), 4,24 (2H. dd, J-l0,3. 4,2 1 lz). 3,09 (3H. s), 2.76 (41L s).

(4) 3-Acetylthio-1 -(4-sukcinimidomethyl-1.3-thiazoi-2 yjazetidin

Do roztoku 3 methansulfonyloxy-l-(4 sukeinimidomethyl-1,3 thiazoi—2~yl)azetidinu (515 ing. 1,49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 69(3)) v dimethylformamidu (15 ml) vi byl přidán thioacetát draselný (1,02 g. 8.95 mmol) při teplotě místnosti a míchána v olejové lázni (90 °C) 8 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na sílikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-acetyl· thio-l-(4-sukcinimidomethyI-1,3-thiazoi-2-yjazetidinu (238 mg. výtěžek 49%) jako světle hnědé pevné látky, 'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 6.37 (IH, s), 4,62 (211, s). 4,51 (2H, t. .1=8,5 Hz). 4,45 až to 4,35 (IH, m). 3.97 (2H, dd, J=8.4, 5.4 Hz), 2,76 (411, s), 2,35 (3H. m).

Referenční příklad 70

3-(enB u ty Id i fe ny 1 s i ly loxy-1 -(4 - k a r bo xy I-1,3 -ox azo I—2—y I )azet i din

O

(1) Methylester (2S)-3-(/m'-butyldifeiiyLsilyloxy)-2-isothiokyanatopropanové kyseliny

- 329 C7. 300137 B6 terč Butyldifenylsilyloxy—N—benzyloxykarbonyl—L—serin. methylester (32,0 g. 65,1 mmol) (získaný podle popisu v referenčním příkladu 39(1)) v methanolu (960 ml) byl katalyticky hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí při teplotě místnosti 2 hodiny. Pak byla reakční směs filtrována a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromá5 tografieky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanol (95 : 5) jako eluentu za vzniku /ert:-butyldifenylsi lyloxy-1-šeřinu, methylesteru (19.7 g, výtěžek 85%) jako bezbarvého oleje. Do roztoku produktu (7m-butyldifenylsilyloxy-I,-serinu, methylesteru) (19.7 g, 55.0 mmol) v methylenchloridu (590 ml) byl přidán sírouhlík (6,62 ml. 110 mmol) a triethylamin (19.3 ml. 138 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána přes noc. K výsledné směsi byl přidán io ethy leh lormát (13.2 ml, 138 mmol) a triethylamin (19,3 ml. 138 mmol) a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl do reakční směsi přidán methanol a výsledná směs byla míchána 30 minut. Reakění směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatogra fieky na silikagelové koloně za použili toluene jako eluentu za vzniku methylesteru (2S )-3-(/erc butyldifenylsi ly loxy) 2 isothiokyanatopropanové kyseliny (14,8 g, výtěžek 67%) jako žlutých kry stalu.

'll-NMR (400 M Hz, CDCh): δ (ppm) 7.70 až 7,62 (4H, m), 7,48 až 7.38 (6H. m), 4,28 (lil. dd, J-3,7. 5,1 Hz), 4,05(111, dd. J-5,1, 10.3 Hz). 3,95 (IH, dd, .1=3.7, 10.3 Hz), 3,80 (3H. s). 1,06 (911, s).

(2) Methylester (2S)-3-(/erc Buly kli fen> Isi ly loxy)—2—1(3—hydroxyazetidin 1 karbothiov lfaminolpropanové kyseliny

Do roztoku methylesteru 3-(ferc buty ldifeny Isily loxy )-2-isothiokyanatopropanové kyseliny (13,4 g, 33,5 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 70(1)) v tetrahydrofuranu (245 ml) byl přidán roztok 3-hydroxyazetidinu (4,90 g. 67,1 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 31(1)) ve vodě (50 ml) při teplotě místnosti a směs byla míchána přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrováno na a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití toluene a toluen : acetonitrilu (3 : 1) jako eluentu za vzniku (2S)-3-(/ťn buty ldifeny Isily loxy)—2—[(3—hydroxyazetidin— l karbothioy l)am ino] propanové kyseliny, methylesteru (9,60 g, výtěžek 61%) jako žluté pevné látky.

Tt-NMR (400 M Hz. CDCl;): δ (ppm) 7.61 až 7.55 (411. m), 7.47 až 7.36 (6H. m), 5.94 (IH. br b d, .18.1 Hz). 5.19 (IH. dt, .1=2.9, 8,1 liz). 4.71 až 4,64 (IH, m), 4.40 až 4.33 (IH. m), 4,31 až

4,23 (III. m). 4,18 (IH. dd, J=2,2. 10.3 liz), 4,04 (IH, dd, J=2,9, 10.3 IIz). 4,02 až 3.96 (IH, m). 3.94 až 3,88 (IH, ro). 3,76 (3H. s), 2.24 (111, br d, J5,9 Hz), 1,04 (9H, s).

(3) Methylester (2S )-2-{[3-(benzoy loxy)—azetid in-1 -karbothioyl]am ino} -3-(/erc-butyld i-lo feny Isilyloxy )propanové kyseliny

Do roztoku methylesteru (2S>—3-(/cTc-butyldifenylsilyloxy)-2-[(3 hydroxyazetidin-I-karbothioyl)-aminojpropanové kyseliny (21.1 g, 44,6 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 70(2)) v pyridinu (630 ml) byl přidán roztok anhydridu kyseliny benzoové (30,0 g,

133 mmol) a 4-dimethylaminopyridin (545 mg. 4,46 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (4:1) jako eluentu za vzniku methylesteru (2S)-2 }[3-(benzoyloxy )-azetidin-1-karbothioyl]amino}-3-(/m-biityldifenylsilyloxy)propanové kyseliny. (23,3 g, výtěžek 91%) jako světle žluté pevné látky.

- 330 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 M Hz, CDClj: δ (ppm) 8,10 až 8,05 (2H. rn), 7,65 až 7.54 (4H. m), 7,52 až 7,45 (3H, m), 7.44 až 7,35 (6H, m), 5,96 (UL br d, >8.1 Hz). 5,47 až 5.40 (IH. m). 5.20 (IH, dt. J=8,1, 2,9 Hz). 4,57 až 4,51 (1H. m). 4.49 až 4,40 (IH, m), 4.27 až 4.20 (1 IL m), 4.20 (1H. dd. >2,2. 10,3 Hz). 4.06 (1H, dd. >2.9. 10,3 Hz), 3.77(311, s). l.04(9H.s).

(4) Methylester (2$) 2 J[3-(benzoyloxy)-azctidin-l-karbothioyl]amino} 3 -hvdroxypropanové kyseliny.

Do roztoku methylesteru (2S)—2—J3-(benzoyloxy>-azetidin-1 -karbolhioylJamino|-3-(/erc10 butyldifenylsilyloxy)propanové kyseliny (23,3 g. 40,0 mmol) (získané podle popisu v referenčním příkladu 70(3)) v tetrahydrofuranu (700 ml) byl přidán a l,0M roztok telra n-butvlamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (48.4 g. 48,4 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, ílltrová15 na a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen .aeelonitrilu (3 : I) jako eluentu za vzniku methylesteru (2$)-2- {[3 (benzoy loxy )-azet id i η-1 -karbothioyl Jam ino} -3-hydroxy propanové kyseliny. (12,6 g. výtěžek 92%) jako bílé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDClj: ó (ppm) 8,08 až 8,04 (2H, rn), 7,64 až 7,59 (III, m), 7,51 až 7.45

2ii (2H, m), 6,00 (1H, d, >7,3 Hz). 5,49 až 5,43 (lil. m). 5.25 (1H. dt. >7,3, 3,7 Hz), 4,63 až 4.56 (211. m). 4,32 až 4.24 (2H, m). 4,12 až 4,02 (2H. m), 3.82 (3H, s).

(5) 3-Benzoy loxy- >1(4S)—4-methoxy karbony 1-1.3 -oxazolin-2-ylJazctidin

Do roztoku 2-cbloro-3-ethylbenzoxazoltetraťluoroborátu (15,1 g, 55,9 mmol) v acetonitrilu (380 ml) byl přidán po kapkách roztok methylesteru (2S)—2— j[3-( benzoy loxy )-azetid in-1 karbothioylJamino}-3-hydroxypropanové kyseliny (získané podle popisu v referenčním příkladu 70(4)) (12.6 g, 37,2 mmol) v acetonitrilu (500 ml) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána 1 hodinu. K výsledné směsi byl přidán triethylaminu (10.4 ml. 74.4 mmol) a směs byla míchána 1,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu a ethylacetát: methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3 benzoyloxv-l35 [(4S)-(4-methoxykarbonyI-l,3-oxazolin-2 yJazetidinu (9,12 g, výtěžek 81%) jako světle hnědé pevné látky.

'H NMR (400 M Hz. CDClj: δ (ppm) 8.08 až 8,04 (211, rn), 7,63 až 7,58 (III. m), 7.49 až 7,44 (211, m). 5,50 až 5.44 (III. m), 4.69 (1H, dd, >6,6, 9,5 Hz), 4,55 (IH, dd, J-6,6. 8,1 Hz). 4,51 až 4,44 (3H. m), 4,20 až 4,14 (2H. m), 3,78 (311, s).

(6) 3-Benzoylox) -1 - [4 methoxy karbony 1-1,3-oxazol-2-ylJazetidin

Do roztoku 3-benzoyloxy-1-(4-methoxykarbonyl· 1.3 oxazolin 2 yjazelidinu (9.12 g.

30,0 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(5)) ve směsi toluene (450 ml) a methylenchloridu (180 ml) byl přidán oxid manganičitý (63,8 g) a směs byla zahřívána pod refluxem 5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla smčs filtrována a filtrát koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu “1:1 jako eluentu za vzniku 3-benzoylo\y-]-(4 methoxykarbonyl-l,3oxazol-2-y Jazetidinu (5,24 g, výtěžek 58%) jako světic žlutých krystalů.

‘H-NMR (400 M Hz. CDClj: δ (ppm) 8,08 až 8,04 (2H, tn), 7,84 (1 H, s), 7,63 až 7,58 (IH. m),

7,50 až 7,44 (2H. m), 5.60 až 5,53 (lil m), 4,61 (IH. dd. >5,9, 9,5 Hz). 4.31 (1H, dd.

>3,4. 9.5 Hz), 3,89(311. s).

-331 CZ 300137 B6 (7) 3-Hydroxy-l-[4-methoxy karbony!-l,3-oxazol-2-yi]azctidin

Do roztoku 3-benzoyloxy -l-(4-methoxykarbony 1-1,3-oxazol 2-y 1 jazetidinu (5.24 g,

17.3 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(6)) ve smčsi methanolu (260 ml) a methylenehloridu (80 m!) bylo přidáno katalytické množství mcthoxidu sodného při tepioté místnosti a smés byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs neutralizována 4M chlorovodíkem v dioxanu a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenehloridu : methanol (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy -!-( 4-methoxy karbony l-l.3-oxazol-2-yl jazetidinu (2,65 g, id výtěžek 77%) jako světle hnědých krystalu.

'H-NMR (400 M Hz, CDCfi): δ (ppm) 7.81 (IH, s), 4,83 až 4.76 (IH, br s), 4.41 (21 i, dd. >6,6, 9.5 Hz). 4.06 (2H, dd, >4,4, 9,5 Hz). 3.88 (311, s). 2.39 až 2.30 (lil. br s).

(8) 3-/er<-Buty Id i feny Isily loxy-H 4-methoxy karbony 1-1,3-oxazol 2-y Ijazetidin i 5

Do roztoku 3-hydroxy-1—(4 mcthoxykarbony 1 1,3-o\azol-2-yl)azetídinu (2,64 g. 13.4 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(7)) v dimethylformamidu (80 ml) byl přidán terč buty ldifeny Isilan (6,97 ml. 26.8 mmol) a imidazol {1,82 g, 26,8 mmol) v ledové lázni a směs by la míchána v ledové lázni přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl přidán methanol do reakční smčsi a směs byla míchána 30 minut. Výsledná smčs byla rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (4 : 3 —► 3 : 1) jako

2í eluentu za vzniku 3-íerc butyldifenylsilyloxy-» methoxy karbonyl-1.3 oxazol-2-yl jazetidinu (4,95 g, výtěžek 85%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCI;): δ (ppm) 7,78 (111, s), 7,62 až 7.58 (4H, m), 7,48 až 7,36 (6H. m), 4.74 až 4,67 (lil, m), 4,15 (lH.dd, >6,6, 9,5 liz), 4,08 (IH. dd, >5,1.9.5 1 lz). 3.87 (3H,s), 1,06 (9H, s).

(9) 3-ftvr-Butyldifeny Isi lyloxy-1 —(4—hy droxy methyl -1,3-oxazo 1-2-yl] azet idin

Do roztoku 3-terc- butyldifeny Isily loxy->( 4-methoxykarbony 1-1,3-oxazol-2-yl jazetidinu (4,95 g, 11.3 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(8)) v bezvodém telra35 hydrofuranu (lOOml) byla přidána po kapkách suspenze hydridu hl in ito— I ithného (1.29g. 33,9 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (250 ml) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána v ledové lázni 5 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byl do reakční směsi v ledové lázni postupně přidán dekahydrát síranu horečnatého. Po ukončení pěnění byla výsledná smčs míchána při teplotě místnosti I hodinu. Po reakční smčsi hyl postupně přidán ethylacetát. Výsledná směs byla rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití toluen : acetonitrilu (3 : 1) jako eluentu za vzniku 3-terc butyldifenylsilyloxy-1 (4 hydroxymethyl-1,3oxazol-2-y!jazetidinu (3,88 g, výtěžek 84%) jako bílé pevné látky.

'H NMR (400 M liz, CDCI,): δ (ppm) 7.63 až 7,59 (411. m). 7.47 až 7.36(611, m). 7.13 (IH. s).

4.7.3 až 4,66 (IH. m). 4.45 (2H. s). 4.11 (2H. dd. J=6.6, 8,8 liz), 4.04 (211, dd. J-5,1. 8.8 Hz), 2,21 až2,15 (IH, brs), 1,06 (911, s).

(10) 3-terc Butyldifenydsilyloxy—1 —(4- myl-l.3-oxazol-2-yIjazetidin

Do roztoku 3-/m*-buty ldifenyIsily loxy-1 -(4- hydroxymethy!-1.3-oxazol-2-yl jazetidinu (3,88 g. 9.50 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(9)) v methylenehloridu (190 ml) byl přidán aktivovaný oxid manganíčitý (19.4 g) a směs by la míchána při teplotě

- 332 CZ 300137 B6 místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs filtrována a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbvtek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (3 : 1) jako eluentu za vzniku 3-/e/x-butyldifeny!si!\lox>-l %4_myl_1.3-oxazol-2“-yl)azetidinu (3,09 g. výtěžek 80%) jako světle žlutých krystalů.

? ¹ H-NMR (400 M Hz. CDCl?): δ (ppm) 9,75 (111. s). 7,80 (1H. s). 7,63 až 7.58 (4H, rn). 7,48 až

7,37 (6H, m). 4.75 až 4,68 (IH, s), 4.16 (211. dd. >6,6, 9,5 Hz). 4,10 (211. dd, >5,1. 9.5 Hz). 1.06 (9H. s).

(11) 3-/ť/r-Bu ty Id i feny Isily loxy-1 -{4-karboxyl- 2 yjazetidin io

Do roztoku 3~terč-butyldifeny Isilyloxv-1 -(4-myl-1,3-oxazol-2-> 1 )azetidinu (3,09 g.

7,60 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(10)) v bezvodém methylenchloridu (18 ml) byl přidán terč butanol (93 ml) a roztok 2M 2-methyl-2-butenu v tetrahydrofuranu (5.70 ml. 11.4 mmol), následován přidáním roztoku chlornanu sodného po kapkách i? (1.72 g. 15,2 mmol) a dihydrogenfosforečnanu sodného (1.82 g. 15,2 mmol) vc vodě (18 ml) v ledové lázni a směs byla míchána 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla do reakční směsi přidána IM kyselina chlorovodíková tak, aby pH bylo v rozmezí 2 až 3. Výsledná směs byla extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu a methylenchloridu (9: 1)jako eluentu za vzniku 3-terč-butyldifenylsilyloxy 1 (4 karboxy l-l ,3-th iazol-2-yl)azet idin u (1.90 g, výtěžek 59%) jako hnědé pevné látky.

Hmotnostní spektrum (FAB'): m/z: 423 [M+H]'

Referenční příklad 71

3-Acetylthio-1-(4-azetidinokarbonyl 1,3 -oxazol-2-yl)azetidin

to (1) I (4-Azetidinokarbonyl-J3-oxazol-2-yl) 3 -terč buty Idifeny Isily loxyazetidin

Do roztoku 3-terc butyldifenylsilyloxy-l-(4-methoxykarbonyl 1.3-oxazol-2-yl)azetidinu (2,00 g, 4,58 mmol) v toluenu (100 ml) byl přidán roztok 0.67M azetidin-trimethylhlíníku v benzenu (13,7 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána v olejové lázni (100 °C) 5.5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla do reakční směsi přidána 10% vodná kyselina chlorovodíková (100 ml) a ethylacetát (200 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Reakční smčs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličilanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována to a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan ; ethylacetátu (1:1) a ethylacetátu jako eluentu za vzniku l-(4-azetidinokarbonyl- 1.3-oxazol-2-yl)- 3-(ct t- butyldifenylsily loxyazetidinu (875 mg. výtěžek 41%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 Μ I Iz. CDCl·,): δ (ppm) 7.67 (IH, s). 7,65 až 7.57 (411, ni), 7.48 až 7.37 (6H, m).

4.72 až 4.66 (IH. m). 4.54 až 4.47 (211, m). 4,18 až 4,11 (2H, m). 4.10 (2H, dd. .1=-6,6. 8,8 Hz).

4,04 (2Π. dd. .1=5,1. 8.8 Hz), 2.30 (211. kvintet, J=7,7 Hz). 1.06 (9H, s).

- 333 CZ 300137 B6 (2) l-(4-Azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxy azetidin

Do roztoku l-(4-azetidinokarbonyl-1.3-oxazol-2-yl)-3-/t/rc-buty ldifenylsily loxyazet idinu (870 mg. 1.88 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 71(1)) v bezvodém tetra5 hydrofuranu (44 ml) byl přidán roztok l.OM tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2.26 ml. 2,26 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla smčs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethy lacetát: methanolu (9 : I) jako eluentu za vzniku 1 -(4-azet id i nokarbonyl-l ,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidinu (396 mg. výtěžek 94%) io jako bílých krystalů.

'H-NMR (400 M Hz, CDCIJ: 6 (ppm) 7.70 (1II, s), 4.81 až 4.74 (IH. m). 4.53 (211. dd. >6.8. 7,8 Hz). 4,34 (211, dd, >6.8. 9,8 Hz). 4,16 (2H, dd, >6,8, 7,8 Hz), 3,99 (211, dd. >4,9. 8.8 Hz), 2,34 (111. d, >7,8 Hz). 2.31 (211. kvintet, .1=7,8 Hz).

(3) M 4-A zet idinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl) 3-mcthansul fony lazet idin

Do roztoku l-(4-azetidinokarbonvl-1.3-o\azol 2 yl)-3-hydroxya/etidinu (390 mg, 1.75 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 71(2)) v methylenchloridu (20 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (406 μΙ. 5.24 mmol) a triethylamin (734 μΙ. 5.24 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 10 minut a při teplotě místnosti I hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezí ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý chlorid sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku, Do zbytku byl přidán ethylacetát a diisopropy lether za vzniku pevné látky, která byla sebrána, promyta diisopropyl25 etherem a sušena ve vakuu za vzniku I-(4-azet idinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-methansul tony lazet idinu (449 mg, výtěžek 85%) jako světle žluté pevné látky.

'1 I-NMR (400 M Hz, CDCIJ; δ (ppm) 7,74 (1H. m), 5,40 až 5,34 (1 H, nj. 4,55 až 4,49 (211, br t, >7,3 Hz). 4,47 (2H, ddd, >1 1,0, 6,6, 0,7 Hz), 4,29 (211, dd. >11,0. 4,4 liz), 4,19 až 4.12 (2H, br t, >7,3 Hz), 3,09 (311, s), 2,32 (2H, kvintet. .1=7,3 Hz).

(4) 3—Acetylthio— 1 -(4-azet id i nokarbonyl-J3-oxazol-2-y Jazetidin

Do roztoku 1 -(4-azetidinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)-3-methansulfonylazetidiiui (470 mg, 1,56 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 71(3)) v dimethylformamidu (25 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,07 g. 9,36 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 8,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek •to byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethyíacetátu a ethylacetát : methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3 acety lthio 1 (4 azetidinokarbonyl 1,3 oxazol-2yjazetdine (330 mg, výtěžek 75%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCl J: δ (ppm) 7,71 (IH, s), 4,54 (211, t. >8,8 Hz). 4,55 až 4.49 (211. br t, .1=8.1 Hz), 4,43 až4,35 (IH, m), 4.18 až4,12 (2H, br t. >8.1 Hz), 4.00 (211. dd, >8,8. 5,9 Hz),

2.35 (311, s), 2,36 až 2,26 (2H. m).

Referenční příklad 72 so 3—Acety Ithio— 1 --(4 morfolinokarbony!-1,3-oxazol-2-y Jazetidin

- 334 CZ 300137 B6

{1) 3-íerc Butyldifenylsilyloxy—1 - <4 -morfolinokarbony 1-1,3-oxazol 2-y jazetidin

Do roztoku S-Ze/r-butyldifenylsilyloxy-1 -(4 methoxykarbonyl-1,3-oxazol-2 yjazetidinu (1,00 g, 2.29 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(8)) v toluenu (50 m j byl přidán roztok 0,67M morfolinu-trimethylaluminía v toluenu (6.87 ml) při teplotč místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána v olejové lázni (80 °Cj 4 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla do reakční smési přidána 10% vodná kyselina chlorovodíková (50 m j a ethylaeetát (100 mj v ledové lázni a směs byla míchána při teplotč místnosti 1 hodinu.

io

Do reakční směsi byl přidán ethylaeetát. Směs byla rozdělena mezi ethylaeetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbvtek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n hexan :

ethylacetátu (1 : 2) jako eluentu za vzniku 3-/c/r-btityldifenylsilyloxy-l-(4-morfolinokarbonyl1,3-o\a/ol-2-y jazetidinu (400 mg, výtěžek 36%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M liz. CDClj: Ó (ppm) 7.68 (IH, s), 7,62 až 7,59 (411, m). 7.48 až 7,37 (ÓH, m), 4.73 až 4,67 (1H, m). 4,15 až 4.09 (2H, m). 4,05 (211, dd, >8,8, 5,1 Hz), 3,75 až 3,65 (8H, brs), 1.06 (9H. s).

?.() (2) 3-1 ly d roxy->(4-mor foli nokarbony I-1,3-oxazol-2-y jazetidin

Do roztoku 3 terč buly kli fenyisilyloxy—l —(4—morfolinokarbony I—1.3- oxazol 2 yjazetidinu (730 mg. 1,48 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 72(1)) v bezvodém tetra25 hydrofuranu (37 mj byl přidán roztok 1.0M tetra-n-buty lamou iumfluorídu v tetrahydrofuranu (1,78 ml. >78 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylaeetát : methanolu (95 : 5 —► 9 : I) jako eluentu za vzniku 3-hydro\y-l-(4-morfolinokarbonyl l,3-o\azol-2-yjazetidinu (377 mg, so výtěže k 10 0%) j a ko b ί 1 ýc h k ry st a I ů.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI,): δ (ppm) 7.71 (III, s), 4,82 až 4.74 (IH, in), 4,35 (2H, dd, .1=9,5. 6.6 I lz). 4,00 (211, dd, J-9.5.4.4 Hz), 3,76 až 3,65 (8H. ni). 2,42 až 2.30 (III, br s).

(3) 3-Methansulfonyloxy-l-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yjazetidin

Do roztoku 3-hydroxv-l-(4-morfolinokarbony 1-1,3-oxazol-2-v jazetidinu (370 mg,

1,48 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 72(2)) v methylenchloridu (19 mj byl přidán methansulfonylchlorid (344 μ I, 4,44 mmol) a triethylamin (622 μΙ, 4,44 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 10 minut a při teplotě místnosti 1 hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylaeetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý chlorid sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbvtek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylaeetát: methanolu (93 : 7) jako eluentu za vzniku 3-methansu lf ony loxy-l-(4-morfol inokarbony I-1.3-oxazol-2-yj45 azetidinu (404 mg. výtěžek 100%) jako světle žlutých krystalů.

'll-NMR (400 M Hz. CDCI,): δ (ppm) 7,75 (IH, s). 5.41 až 5.34 (IH, m). 4.48 (2H. ddd.

J-9.5. 6.6, 1,5 Hz), 4,30 (2H, ddd, J=9,5,4,0, 1,5 Hz), 3,78 až 3,65 (811, ni), 3,10 (3H, s).

- 335 CZ 300137 B6 (4) 3 Acety Ith io-1J 4-morfol inokarbony 1- l,3-oxazol-2-yljazetidin

Do roztoku 3-methansuIíonyloxy-l j4-morfolinokarbony 1-1,3-oxazol-2-yl)azetidinu (400 mg. 1,21 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 72(3)) v dimethylformamidu (20 ml) byl přidán thioacetát draselný (827 mg, 7.24 mmol) při teplotě místnosti a vše mícháno v olejové lázni (80 °C) 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromaio tograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —> ethy lacetát: methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3-acetyIthio-l-(4-morfolínokarbonyl-l.3-oxazol-2-yl)azetidinu (266 mg, výtěžek 71%) jako světle hnědé pevné látky, 'H-NMR (400 Μ 1 Iz. CDCl.,): δ (ppm) 7.72 (1H, s), 4.55 (211, t. >8.4 Hz). 4.43 až 4,36 (1H, m), 4,02 (2H, dd, >9,5. 5,9 Hz), 3,76 až 3,66 (811, br s), 2,36 (3H. s).

Referenční příklad 73

Acety lthio-l-[4j3-methoxyazetidin-l-karbony t)- l,3-oxa/ol-2-yl (azetidin

O

(1) 3-Zerc-BLity Idifeny Isi lyloxy-1 [4 (3-metho\yazetidin-l-karbonyl JI ,3-oxazol 2 yljazetidin

Do roztoku 3-terc bu ty Idifeny Isi lylox v-l-(4-methoxy karbony 1-1,3-oxazol -2-yl )azet idinu (1,57 g, 3,60 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(8)) v toluenu (80 ml) byl přidán roztok 0,67M 3-methoxyazctidinu (získaného podle popisu v referenčním příkladu 3 l(2))-trimethylaluminum v toluenu (10,8 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána v olejové lázni (60 °C) 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla do reakční směsi přidána 10% vodná kyselina chlorovodíková (100 ml) a ethylacetát (200 ml) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu.Do reakční směsi byl přidán ethylacetát. Směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetátu jako eluentu za vzniku

3-/erc-buty Idifeny lsily loxy-1-[4 J3 -methoxyazetidin-1-karbony 1 JI ,3-oxazol-2-yl]azet idinu (1,50 g. výtěžek 90%) jako světle hnědé pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCl;): δ (ppm) 7.69 (IH, s), 7,63 až 7,59(411, m), 7,48 až 7,37 (6H. in), 4.73 až 4,76 (211. m). 4,37 až 4.19 (3H. m). 4,10 (2H. dd, >8,8, 6.6 Hz), 4,03 (211, dd, >8,8, 5,1 Hz), 4,02 až 3,98 (1Π, m), 3,32 (3H, s), 1,06 (911, s).

(2) 3-1 lydroxy-l-[4-(3-methoxyazetidin 1 karbonyI)-1,3-oxazol-2-yl Jazetidin

Do roztoku 3-terc butyldifcny Isilyloxy—1—[4—(3—methoxyazetidin -1 karbony lj 1,3-oxazol-245 yljazetidinu (1,49 g, 3,23 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 72(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (75 ml) byl přidán roztok l,0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (3.88 ml, 3,88 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni hodinu. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs koncentrována za sníženého tlaku.

- 336 CZ 300137 B6

Zbytek byl čištěn chromatografíeky na silikagelové koloně za použití ethylacetát : methanolu (95 : 5 —> 9 : 1) jako eluentu za vzniku 3-hydroxy-1 -[4©3-methoxyazetidin-l-karbony 1© 1.3oxazol-2-yl©azetidinu (486 mg. výtěžek 60%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCIJ: ó (ppm) 7.71 (IH. s). 4,81 až 4.66 (2H. m), 4,34 (211, dd.

>9,5. 6,6 Hz). 4.39 až 4.20 (3H. m). 4.04 až 3,98 (IH. m). 3,99 (2H. dd. >9.6, 4.4 Hz). 3,32 (3H,s),2,45 (1H, d, J=6.6 Hz).

(3) 3-Methansulfonyloxy-l [4 (3 methoxyazetidin-1-karbonvl© 1,3-oxazol 2 yljazetidin i o Do rozloku 3-hydroxy-1 ©4©3-methoxyazetidin -1 karbony!© 1,3-oxazol-2-yl J azetidinu (480 mg, 1.89 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 73(2)) v methylenchloridu (24 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (439 μΙ. 5,67 mmol) a triethylamin (795 ml. 5,67 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 10 minut a při teplotě místnosti 30 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhliěitanu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý chlorid sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Do zbytku byl přidán ethylacetát a diisopropylether za vzniku a solid pevná látka sebrána, promyta diisopropyletherem za vzniku 3 methansul fony loxy- >[4©3-methoxyazetidin-1karbonyl©1.3-oxazol 2 yljazetidinu (586 mg, výtěžek 94%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCIJ: δ (ppm) 7,76 (IH, s), 5,41 až 5,34 (IH. m), 4.72 až4.63 (IH, m), 4,29 (2H, dd, >1 1,0. 4,4 Hz), 4.38 až 4,20 (5H, m), 4,03 až 3.97 (IH. rn), 3.32 (3H. s). 3,10 (3H. s).

Do roztoku 3-methansulfonyloxy-l-[4©3-methoxyazetidin 1-karbonyl©l.3-oxazol-2-yIjazetidinu (580 mg, 1.75 mmol) (získaného podle popisu v referenčním přikladu 73(3)) v dimethyl· formamidu (30 rnl) byl přidán thioacetát draselný (1,20 g, 10,5 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 6 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs .to rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použili ethylacetát —> ethylacetát: methanolu (97 ; 3) jako eluentu za vzniku 3- acety Itli i o-1 - [4—(3-methoxyazetidin35 l —karbonyI©©3—oxazol—2—yljazetidinu (336 mg, výtěžek 62%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 Μ Ilz. CDCh): δ (ppm) 7.73 (IH. s). 4,72 až 4,65 (IH. m). 4.54 (2H. I. .1-8.8 Hz). 4.43 až 4.19 (411, m). 4,03 až 3.97 (IH, m), 4.01 (2H, dd, J=8.8. 5,1 Hz), 3.31 (311. s). 2.35 (3H.s).

Referenční příklad 74

OTBDPS (1) 1 - [ 4© 3-terč-b u ty 1 d i fe n y 1 s i ly 1 o xy azet i d i η-1 - k ar bon y I © 1.3 -o xazo I - 2 y! ]-3-hy d ro xyazetidin

- 337 CZ 300137 Bó

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-met hoxy karbony 1-1.3-oxazol-2-y!)azetídinu (500 mg, 2,52 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(7)) v toluenu (25 ml) byl přidán roztok 0,67M

3-ierc- butyldifenylsi ly loxyazetidinu (získaného podle popisu v referenčním příkladu 42(2))- trimethylaluminum v toluenu (11.3 ml) při teplotě místnosti pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 15 minut. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla do reakční směsi přidána 10% vodná kyselina chlorovodíková (20 ml) a ethylacetát (50 ml) v ledové lázni a směs hýla míchána při teplotě místnosti 0.5 hodiny. Do reakční směsi byl přidán ethylacetát. Směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, io sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na sílikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanol (95 : 5 9:1) jako eluentu za vzniku 1-(4-(3-terč butyidifenylsilyloxyazetidin-l-karbony 1) 1.3oxazol-2-yl]-3-hydroxyazetidinu (1,24 g, výtěžek 100%) jako světle hnědé pevné látky 'H-NMR (400 M Hz, CDCI,): δ (ppm) 7,68 (IH, s), 7,61 (411, dd, J=8.1, 1.5 Hz). 7,47 až 7.36 (611. m). 4.81 až 4.74 (IH, m), 4,65 až 4,52 (211, m), 4,40 až 4,36 (IH. m), 4,33 (211. dd,

J-9,5. 6,6 Hz), 4.18 až 4,11 (IH, m). 4.06 až 3,97 (IH, m), 3.98 (211, dd. J=9,5. 5.1 Hz), 1,06 (911, s).

(2) 1 -[4-(3-/m-Buty Idifeny Isilyloxyazet idin-1 -karbonyl )-l .3-oxazol-2--yl] 3 methan20 su 1 fony I oxy aze t id i n

Do roztoku l-[4 (3 terč buty Idifeny Isily !oxyazetidin—l—karbonyl) 1,3 oxazol-2-ylj-3hydroxyazetidinu (1,68 g. 3,53 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 74(1)) v methylenchloridu (84 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (820 μ!, 10.6 mmol) a triethylamin (1,49 ml, 10,6 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 10 minut a pří teplotě místnosti

0,5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištčn chromatograficky na sílikagelové koloně za použití methylenchloridu : to ethylacetát (1:1) jako eluentu za vzniku 1 [4 (.3 terč buty IdifenyIsilyloxyazetidin-1karbonyl)-! ,3-oxazol 2 yl]-3-methansulfonyloxyazetidinu <1.56g. výtěžek 80%) jako světle žluté pevné látky.

‘H-NMR (400 M Hz, CDCI,): 8 (ppm) 7,72 (IH. s). 7,61 (4H, cl. J-6.8 Hz), 7.45 (211, t, J-6.8 Hz), 7.39 (4H, t. J=6.8 Hz), 5.40 až 5.34 (IH. m), 4,64 až 4.59 (lil. ni). 4.59 až 4.52 (IH.

.15 m), 4.45 (2H. (Id. .1=10.7. 5.9 Hz). 4,39 až 4.32 (lil. m), 4,28 (2H. dd. J-l0.7. 4,9 Hz), 4,18 až

4,12 (1II. m).4.0.5 až 4.00 (IH. m). 3.10 (3H. s). 1.07 (9H. s).

(3) 3—Acety Ithio—1 —14—(3—A/rc—buty Idifeny Isily loxyazet idin-1 -karbonyl)-! ,3-oxazol-2-yijazetidin

Do roztoku l —[4—(3—Zďrc—butvldifenylsilyloxyazet idin-1-karbony Ί)— >3—oxazol—2—y 11-3methansulfonyloxyazetidinu (1,56 g, 2.81 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 74(2)) v dimethylformamidu (80 ml) byl přidán thioacetát draselný (1,92 g. 16,8 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejové lázni (80 °C) 7,5 hodin. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný; filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehrornatografieky na sílikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (2 : 1 —» 1 : 1) jako eluentu za vzniku 3-acetylthio- 1-[4-(3-/οπ· butyldífenyIsilyloxyazetidin— 1 —karbony 1)— >3—oxazol—2—yljazetidinu (863 mg, výtěžek 57%) jako světle hnědé pevné látky.

- 338 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 M Hz, CDCIů: δ (ppm) 7.69 (111. s), 7,63 až 7,60 (4H, m), 7,47 až 7.36 (6H. m),

4,64 až 4,54 (2H, m), 4,53 (211, t. J-8.8 Hz), 4,43 až 4.32 (211. m). 4,18 až 4.13 (1H. ni), 4.06 až

4,00 (1H, m), 4.00 (211, dd. J=8,8, 5,9 Hz). 2.36 (311, s). 1,06 (9H. s).

Referenční příklad 75 [3 (p-n itrobenzy loxykarbony lamino)azelidin-l -karbonyl J-l .3 -oxazol-23—Acetylthio— 1 — {4— yljazetidin io

NNHPNZ (1) 3-/erc-Buty ldifeny Isily loxy 1 -J 4-| 3-(p-n itrobenzy loxy karbony lam ino)azctidm-l_ karbonyIJ-1.3 thiazol—2—yl}azetidin

Do roztoku 3-(p-nitrobenzylo\ykarbonylamino)azetidinhydrochloridu (l,39g. 4,83 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 57(4)) a 3-/m-buty ldifeny Isily loxy 1 (4-karboxyl-1,3-oxazol-2-yl)azelidinu (1,70 g. 4.02 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(11)) v dimethylformamidu (85 ml) byl přidán dietliylfosforylkyanid (801 μΙ. 4.83 mmol) a triethylamin (1,70 ml, 12,1 mrnol) v ledové lázni a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla smčs rozdělena mezi ethylacetát a na2o sycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 2) —> ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-terc butyldifcnylsilyloxy-l-{4-[3-(p-nilrobenzyloxykarbonylamino)azeti2? din-1-karbonyl]-l,3-thiazol-2-yl}azetidinu (596 mg, výtěžek 23%) jako světle žluté pevné látky.

'll-NMR (400 M Hz, CDCl;): δ (ppm) 8.23 (211. d, J-8.8 Hz). 7,71 (1H. s). 7.61 (411. d, J-8,8 Hz), 7,53 až 7.49 (211, m), 7.47 až 7,38 (6H, m), 5,30 až 5,26 (III. m). 5,21 (2H. s). 4,89 až 4,80 {1H. m). 4.72 až 4,66 (1H. rn). 4.59 až 4,51 (1II, m), 4.51 až 4,42 (1H, m), 4.37 až 4,30 (1II, so m), 4,12 až 4,06 (211. m). 4,02 (211, dd, J=8,8. 4,9 Hz). 3,97 až 3.90 (1II. m). 1,06 (9H. s).

(2) 3—Hydroxy— 14—f 3-( p-n i trobenzy loxy karbony lamino)azctidin-1 -karbonyl J— l ,3—thiazol— 2—yljazetidin

Do roztoku 3 -terč buty Idi fenyl sily loxy 1 f 4-[ 3-(p-n i trobenzy loxy karbony lam i no )-a/et idi n1 -karbonyIJ—1.3—thiazol—2 yl } azetidinu (640 mg, 0.976 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 75(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (32 ml) byl přidán roztok kyseliny octové (67 μΙ. 1.17 mmol) a 1.0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1,17 ml, 1.17 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni 1,5 hodiny. Po zkontrolování io doběhnutí reakce byla smčs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byia promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu : methanol (95 : 5 —> 9 : 1) jako eluentu za vzniku 3-hvdroxy-l-{445 [3—( p-n i trobenzy loxy karbony lam ino)azet idin 1 -karbony I]— 1,3—thiazol—2—yl} azetidinu (360 mg, výtěžek 88%) jako bílé pevné látky.

- 339 CZ 300137 B6 'H-NMR (400 M Hz, CDCb): 6 (ppm) 8.23 (211. d. J-8.8 Hz). 7.73 (IH, s). 7.51 (2H. d.

J-8,8 Hz), 5,46 až 5.40 (1H, m), 5.21 (211, s). 4,89 až 4.74 (2H. m), 4.60 až 4.40 (2H. m). 4.39 až

4,31 (IH. m), 4,33 (2H, dd. J=9.5, 6,6 Hz). 3,98 (2H. dd. .1=9.5. 5,1 1 Iz), 3.96 až 3,90 (1 H, m).

(3) 3-Methansul fony loxy-1 -(4—[3—(p-n i trobenzv loxy karbonylamino Jazetidin-1 karbonyl ]—

1,3-th iazo!-2-y!) azetidin

Do roztoku 3—hy droxy— 1—·{ 4—[ 3—< p-n itrobenzy loxy karbonyl ami no Jazetidin-1-karbony I ]-1,3thiazol—2—ylJazetidinu (360 mg. 0,863 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 75(2)) v methylenchloridu (18 ml) byl přidán methansulfonylchlorid (200 μΙ. 2.59 mmol) a triethylamin (363 μΙ, 2,59 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 10 minut a při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, Uhrová na a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití methylenchloridu methylenchloridu : methanol (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-1(4-[3-(p nitrobenzy loxykarbony laminoj—azetidin—1 -karbony l]-l. 3-th iazol-2-ylj azetidinu (390 mg. výtěžek 91%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCb): δ (ppm) 8.23 (2H, d. J=8,8 Hz). 7.77 (IH. s). 7,51 (2H, d, J-8,8 Hz), 5,40 až 5,34 (1H, m), 5,11 až 5.27 (111, m), 5,21 (2H, s), 4,90 až 4.81 (1H, m), 4.60 až 4,53 (IH. m), 4,45 (211. dd. J-10.3. 6.6 Hz). 4,39 až 4,30 (IH, m), 4,27 (211, dd. J= 10,3. 4,4 Hz). 3,99 až 3,92 (lH.m), 3,10 (3H.s).

(4) 3-Aeety Ithio-1 -j4-[3 (p nitrobenzy loxykarbony laminojazetidin-1 karbony 1]-1,3thíazol 2-yljazelidin

Do roztoku 3 methansu Ifony loxy-1-(4-(3-(p-n itrobenzy loxy karbony lam i nojazetid i n-l karbonyl]-1.3-thiazol-2-yl [azetidinu (390 mg. 0.787 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 75(3)) v dimethylformamidu (20 ml) byl přidán thioacetát draselný (539 mg, 4,72 mmol) při teplotě místnosti a smés byla míchána v olejové lázni (80 °C) 10.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 :3) -+ ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-1 -(4 [3 (p-nitrobenzyloxykarbonylaminoJazetidin-1-karbonyl]-1,3-thiazol 2 yljazetidinu (195 mg, výtěžek 52%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCb): δ (ppm) 8.24 (2H, d, J=8,8 Hz). 7.75 (IH, s), 7,51 (211, d, J=8,8 Hz), 5.16 až 5,10 (IH. br d, .1=5,9 Hz), 5,21 (211, s), 4,89 až 4,80 (IH. m), 4,60 až 4,10 (4H. m). 4,53 (2H, t, J=8,8 liz). 3.99 (2H. dd, J=9,5. 5,9 Hz), 3,98 až 3.91 (tlí, m), 2,36 (311. s).

Referenční příklad 76

3-Acety 1 tli io-l-{4-[(3S)-l-{ p-n itrobenzy loxy karbonyl) py rrolid i n-3-y lkarbamoy l]-1,3oxazol-2-yl [azetidin

AcS'

(I) 3-/en Buty Idi feny Isily loxy-1—{4—[(3 S)— I --(p- n itrobenzy loxv karbony I)—pyrrol idm-3-yíkarbamoyl ]-1,3-oxazol-2-yl [azetidin

- 340 C7. 300137 B6

Do roztoku (3 S)-3-am ino-1 -p-n i trobenzy loxy karbony I pyrrol idinu (905 mg. 3.41 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 52(4)) a 3—Žere·—butyldifenylsilyloxy—1 —(4— karboxyl- 1.3-oxazol-2 yljazetidinu (1,20 g. 2,84 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(11)) v dimethylformamidu (36 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (556 bl. 3,41 mmol) a triethylamin (478 μΙ, 3,41 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noe. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloio ridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn ehromatografieky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu {1:2 —► 1:3) jako eluentu za vzniku 3-/m*-butyldifenylsilyloxy-l--{4-[(3S)-l-(p-nitroenzy loxy karbonyl )pyrrolidin-3-y lkarbamoy l|-l ,3-oxazol-2-yl [ azetidinu (936 mg. výtěžek 49%) jako světle žluté pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI;): 6 (ppm) 8.22 (2H. m). 7,72 (lil. s), 7.63 až 7.58 (4H. m), 7,53 (2H. m). 7.48 až 7.37 (6H. m). 6.85 až 6,80 (lil. br t. >8.1 Hz), 5,24 (2H, d, .1=8.1 Hz), 4,75 až 4,67 (111, m), 4,65 až 4,58 (1H, m). 4,16 až 4,09 (2H. rn). 4,06 (211, dd, >8,8, 5.1 Hz). 3,83 až 3,75 (1H, in), 3,64 až 3,46 (2H, m). 3.38 (111. dd. >11,0, 4,4 Hz). 2,30 až 2,20 (1H, m), 2,04 až 1,90(111. m). 1.06(911,s).

(2) 3-1 Iydroxy-l-[4-[(3S)-l-( p-n itrobenzy loxy karbony l)pyrrolid in-3-y lkarbamoy 11-1,3oxazol 2-yl [ azetidin

Do roztoku 3-ferc butyldi fenyl sily loxy-1-{4-[(3 S)-1-(p-n it roben zy loxy karbony l)py rro lidin

3-ylkarbamoyl]-l,3-oxazol-2-yl[azetidinu (1,10 g, 1,64 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 76(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (55 ml) byl přidán roztok kyseliny octové (113 μΙ, 1,97 mmol) a 1.0M tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1.97 ml, 1,97 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —► ethylacetát : methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3 hy droxy-1-{4-[(38)-1% p-nitrobenzy loxy karbony Ijpyrrol idin-3-ylkarbamoyl]-1.3-oxazol”2-yl [azetidinu (687 mg, výtěžek 97%) jako bílé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDClý): δ (ppm) 8,22 (211, m), 7,75 (IH. s). 7,52 (2H, m). 6,89 až 6,82 (III. m). 5,27 až 5,20 (2H. m). 4.84 až 4,77 (IH. m), 4,66 až 4,59 (IH, m), 4,36 (2H. dd, .55 >8,8, 7,3 Hz), 4,01 (2H, dd, >8,8. 5.2 Hz), 3.82 až 3,74 (111, m). 3,67 až 3.52 (311, m), 3,45 až

3,39 (III, m), 2.30 až 2.20 (IH, m), 2,03 až 1,93 (1H, m).

(3) 3-Methansulfony loxy-1 -{4-((3 S)-l-(p-nitrobenzy loxykarbony Ijpyrrol idin 3 ylkarbamoyl] 1,3 oxazol 2 yljazetidin

Do roztoku 3-hvd roxy-1 - {4 [(38)-1 (p-nitrobenzy loxy karbony Ijpyrrol idin-3-y lkarbamoy 1|1,3—oxazol—2—yl} azetidinu (680 mg. 1,58 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 76(2)) v methylenchloridu (34 ml) byl přidán methansulfonylehlorid (366 μΙ, 4,73 mmol) a triethylamin (663 μΐ, 4.73 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 10 minut a při teplotě místnosti 2 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —► ethylacetát: methanolu (96 : 4) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-1-{4-[(3S)-150 (p-nitrobenzy loxy karbony Ijpyrrol idin—3—y lkarbamoy 1|-1.3-oxazol-2-yl [ azetidinu (760 mg.

výtěžek 95%) jako světle žluté pevné látky.

'H NMR (400 M Hz. CDCI,): δ (ppm) 8,22 (2H. m), 7,78 (IH, s), 7,52 (2H, m), 6,85 až 6,80 (IH. m), 5.42 až 5.37 (IH, m). 5.24 (2H, d, >8,1 Hz), 4.66 až 4,58 (IH. m). 4.49 (2H, dd,

- 341 CZ 300137 B6

J=10,3. 6.6 Hz), 4,31 (2H. dd. >10.3. 4.4 liz). 3.82 až 3,74 (IH, m), 3.64 až 3,75 (211, m). 3.44 až 3,38 (1H. m), 3,11 (3H. $). 2,30 až 2.20 (1H. m), 2,04 až 1.96 (1H, rn).

(4) 3-Acety líh io— 1 — J4—f(3S>— 1 —(p-nitrobenzy loxy karbony l)py rrol idín-3-y Ikarbamoyl] 1.3 5 oxazol-2-yl jazetidin

Do roztoku 3-methansu lfony loxy 1- [4-[(3S>l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrroltdin-3-ylkarbamoyl]-1.3-oxazol-2-ylJazetidinu (760 mg. 1.49 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 76(3)) v dimethylfonnamidu (38 ml) byl přidán thioacetát draselný (1.02 g, κι 8,95 mmol) při teplotě místnosti a vše bylo mícháno v olejové lázni (80 °C) 10.5 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silika15 gelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 6) — ethy lacetátu jako eluentu za vzniku 3acety Ithio-1 - {4 f(3S) 1 -(p-nitrobenzy loxykarbony l)pyrrol idin—3—v Ikarbamoyl]-1,3-oxazol-2yl jazetidinu (533 mg. výtěžek 73%) jako světle hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz. CDCl j: δ (ppm) 8.22 (2H, m), 7,76 (I H, s), 7.52 (211. m). 6,87 až 6,80 (lit, br s). 5,24 (2H. d. >7,3 Hz). 4,66 až 4.58 (1Π, ni), 4.56 (2H, t, >8,8 Hz), 4.44 až 4,36

2d (IH, m), 4,03 (2H. dd, .1-8,8. 5,9 Hz). 3,79 (IH, dt. >11.0, 6.6 Hz), 3,65 až 3,51 (2H. m), 3.40 (I Π, dd. J“11.0. 4,4 Hz). 2.36 (3H.s), 2,32 až 2.20 (IH, m). 2,23 až 1,91 (111, m).

Referenční příklad 77

3-Acetylthio- >{ 4-[(3 R>1 -(p nitrobenzy loxy karbony l)py rrol idi n-3-yl karbamoyl]-1.3oxazol-2-yl jazetidin

O

(1) 3 -(erc Buty Idi fenyl s i lyloxy-1 -{4-[(3 RE 1 -{p- nitrobenzy loxykarbony I )pyrrolidin-3- y Ιίο karbamoyl]-] ,3-oxazol-2-yl jazetidin

Do roztoku (3 RE3-am ino-1-p-nitrobenzy loxy karbonyl pyrrol idi nu (798 mg, 3.01 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 53(5)) a 3-zm-butyIdifenyIsilyloxy 1 -(4karboxy!-l,3-oxazol-2-y])azetidinu (1.06 g, 2,51 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 70(1!)) v dimethylfonnamidu (50 ml) byl přidán diethylfosforylkyanid (464 μΙ. 3,01 mmol) a triethylamin (422 μί, 3,01 mmol) v ledové lázni pod dusíkovou atmosférou a smčs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla promy ta nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištčn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1:1 — 1:3) jako eluentu za vzniku 3 lerc butyldifenylsilyloxy 1 >-[(3REHp-nitroben/yloxykarbonyl)pyrrolidin—3—y 1 karbamoyl]-l,3-oxazol-2-yIjazetidinu (813 mg, výtěžek 48%) jako světle hnědé pevné látky .

'H-NMR (400 M Hz, CDCI j: δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,72 (IH, s) 7,63 až 7,59 (4H, m). 7,53(2H.

m). 7,48 až 7,38 (6H, m), 6,86 až 6,60 (IH. ni), 5.24 (2H. d. J-8.1 Hz), 4,77 až 4,68 (lil, m).

4,64 až 4,58 (IH, m), 4,15 až 4,09 (211, m), 4,05 (2H. dd, J-8,8. 5.1 Hz), 3,82 až 3,75 (IH, tn).

- 342 CZ 3UU1J7 Bó

3.64 až 3.49 (2H. rn), 3.38 (1H. dd, J-11,0, 5,1 Hz), 2,30 až 2,20 (1 H. m). 2,06 až 1.90 (1H, m),

1,06 (9H, s).

(2) 3--Hydroxy-1 - {4—[(3R/-1 /p-n itrobenzy loxykarbony I )pyrrolidin-3-y 1 karbamoyl]-1.35 oxazol-2-yl Jazetidin

Do roztoku 3-lerc butyldifenylsily loxy -1/4/( 3 R}-1/p-n i trobenzy loxykarbony I/pyrrol idin3· yIkarbamoyl]-l,3-oxazol-2-y/azetidinu (810 mg, 1,21 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 77(1)) v bezvodém tetrahydrofuranu (40 ml) byl přidán roztok kyseliny octové (83 pl. 1,45 mmol) a Ι.0Μ tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (1,45 ml, io 1.45 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána v ledové lázni přes noc. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —> ethylacetát: methanolu (95 : 5) jako eluentu za vzniku 3 - hy droxy-1-{4/( 3 R)-/(p-ni trobenzy loxy karbony/pyrrol idin 3 yl karbamoyl]-I.3-oxazol-2-yI jazetidinu (507 mg, výtěžek 97%) jako světle žlutého oleje.

‘ll-NMR (400 M 11/, CDCI/: δ (ppm) 8,22 (2H. m), 7.75 (111. s). 7,52 (211. m), 6.89 až 6,83 (IH. br s). 5.28 až 5.20 (211, m), 4,84 až 4.76 (IH, m), 4.66 až 4,58 (IH. m). 4,36 (211, dd, ./8,8, 6,6 Hz), 4,01 (2H. dd, /8.8. 4.4 Hz). 3,82 až 3.74 (111. m). 3,64 až 3,51 (2H, m), 3,44 až 3.37 (1H. m). 2.32 až 2.20 (111, m), 2.08 až 1.92 (1H, m).

(3) 3-M ethan sulfony loxy-Z ;4/(3R)-/(p n i tro benzy loxy karbony/pyrrol idi n-3-ylkarbamoy 1]-1,3-oxazo/2-yl J azetidin

Do roztoku 3-hydroxv-1 J4 [(3 R)-l/p-n itrobenzy loxykarbony 1 /pyrrol idin 3 vlkarbamoyl]1,3-oxazol-2-y /azetidinu (500 mg. 1,16 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 77(2)) v methylenchloridu (25 mí) byl přidán methansulfonylchlorid (269 pl, 3.48 mmol) a tri25 ethylamin (488 pl. 3,48 mmol) v ledové lázni a směs byla míchána 10 minut a při teplotě místnosti 3 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití ethylacetát —- ethylacetát: methanolu (96 : 4) jako eluentu za vzniku 3-methansulfonyloxy-l/4/(3R)-l(p-n itrobenzy loxy karbony l)pyrrolidin-3-y Ikarbamoy l]-l,3-oxazol-2 ylj azetidinu (546 mg, výtěžek 92%) jako světle žluté pevné látky.

Hmotnostní spektrum (PAB'): m/z: 510 |M+H] (4) 3—Acety Ithio—1—J4/(3R)-1 /p-n i íro benzy loxykarbony /pyrro lidi n-3-yl karbamoyl] 1,3o x azo 1 -2-y 1} a ze l i d i n

Do roztoku 3-methansulfony loxy -l/4/(3R)-l/p-nitrobenzy loxykarbony/-pyrrol idin-3-ylkarbamoyl] 1,3-oxazol-2-ylJazetidinu (540 mg, 1,06 mmol) (získaného podle popisu v referenčním příkladu 77(3» v dimethylformamidu (27 ml) byl přidán thioaeetát draselný (726 mg. w 6,36 mmol) při teplotě místnosti a směs byla míchána v olejově lázni (80// 9 hodiny. Po zkontrolování doběhnutí reakce byla směs rozdělena mezi ethylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného, Organická vrstva byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěilanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušena přes bezvodý síran sodný, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatograficky na silikagelové koloně za použití n-hexan : ethylacetátu (1 : 6) ethylacetátu jako eluentu za vzniku 3-acetylthio-1 /4 [(3 R)-l/p-n itrobenzy loxykarbony/ pv rrolidin—3—y Ikarbamoy I]1,3 -oxazol-2-yl Jazetidinu (281 mg. výtěžek 54%) jako světic hnědé pevné látky.

'H-NMR (400 M Hz, CDCI/: δ (ppm) 8,22 (211, m). 7,76 (IH, s). 7,52 (2H. m). 6,86 až 6.80 (IH. m), 5,23 (2H, d. /7,3 liz), 4,64 až 4,58 (IH, m), 4,56 (211. t, ./8.8 Hz), 4,44 až 3,86 (1H, m), 4.03 (2H. dd. J-8,8. 5.9 Hz). 3.79 (III, dd, /11.0, 6,6 Hz). 3.65 až 3,52 (2H, m), 3,40 (111. dd, .1-11,0, 4,4 1 Iz), 2,12 (311, s), 2,32 až 2,20 (1H. m). 2,23 az 1,92 (1H. m).

- 343 CZ JUU157 B6

Testovací příklad 1 Antibakteriální účinnost in vitro

Pro odhad antibakteriální účinnosti sloučenin byla stanovena minimální koncentrace (μg/ml) sloučenin inhibuj ící růst různých patogenních baktérií pomocí ředicí metody na agarovém plátu.

Výsledky jsou uvedené v tabulce 6. V této tabulce byla použity následující baktérie A, B a C:

A: Staphyhcoccus aureus B: Streptococcus pne utnou iae

C: Haemophil is i nfl uenzae stra in 97 8 7 (a st ra i n p rod u c i n g β-l ac ta mase) o Tabulka 6

Sloučeniny Minimální koncentrace inhibující růst (pg/ml)

	použitých baktérií
A	B	C
Příklad	3	0,05	0,20	0,10
Příklad	4	0,05	0,20	0,20
Příklad	5	0,05	0,20	0,20
Příklad	6	0,05	0,20	0,20
Příklad	19	0,05	0,20	0,10
Příklad	22	0,05	0,20	0,10
Příklad	24	<0,012	0,025	0,05
Příklad	25	0,025	0,10	0,39
Příklad	56	0,05	0,20	0,20
Příklad	57	0,025	0,20	0,20
Příklad	58	<0,012	0,20	0,20
Příklad	59	<0,012	0,20	0,20
Příklad	60	0,025	0,39	0,39
Příklad	61	0,025	0,20	0,39
Příklad	67	<0,012	0,39	0,20
Příklad	69	<0,012	<0,012	0,78
Příklad	70	<0,012	<0,012	0,78
Příklad	71	<0,012	<0,012	0,39
Příklad	72	<0.012	0,025	0,20
Příklad	76	0,05	0,20	0,39
Příklad	80	0,025	0.20	0,39
Příklad	81	<0,012	0,20	0,39

Tyto výsledky ukazují. Že sloučeniny předkládaného vynálezu vykazují dostatečnou antibakteriální účinnost.

- 344 CZ, 300137 Ró

Testovací příklad 2

Farmakokinetika

Předmětné sloučeniny (20 mg/kg f byly subkutanně inj i kovány samčí ddY myši (n-3,ddY. koupené od SLC Japan). Koncentrace plazmy byla určena biologickou zkouškou v 5. 15 a 30 minuté respektive v 1, 1.5 a 2 hodině po podání. Farmakokinetické výsledky jsou uvedeny v tabulce 7.

V tabulce 7 Ctnax. TI/2. AUCall, indikují maximální koncentrací plazmy, poločas rozpadu koncentrace plazmy, respektive plochu pod koncentrační křivkou plazmy pro jednotlivé sloučeniny.

Tabulka 7

Sloučenina	r '-max (pgůnl)	(hr)	AUC_aI1 (pg-h/ml)
Příklad	3	127,17	0,25	83,90
Příklad	4	157,38	1,02	165,19
Příklad	11	56,56	0,33	40,38
Příklad	57	48,15	0,38	45.31
Příklad	58	63,88	0,41	47,38
Příklad	60	46,14	0,30	27,88
Příklad	67	40,20	0,45	34,13
Příklad	76	52,80	0,19	27,88
Testovací příklad 3 Antibakteriální účinnost in	vivo

Samčí ddY myši staré 4 týdny (koupené od SLC Japan) byly intraperitonálně i noku továny Ypneumoniae 9605 (PRSP) o objemu 0,2 ml (obsahující 5% mucin, 1 až 5 x 10' kolonií tvořících jednotek (cfu)/myš). Okamžitě po infikování bvly myši subkutanně léčeny jednotlivou testovací sloučeninou o objemu 0,1 ml. Bylo použito sedm myší na skupinu. V experimentu byl použit roztok testovací sloučeniny ředěný ve dvou krocích. ED₅o hodnoty sloučenin byly počítány pomocí Probit metody z počtu jedinců, kteří přežili 7 dnů po infikování. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 8.

Tabulka 8

Sloučeniny	ed₃₀ (mg/kg)
Příklad	57	0,855
Příklad	58	0,899
Příklad	59	1,08
Příklad	60	T41
Příklad	61	1,79
Příklad	67	1,60
Příklad	76	0,534

- 345 CZ 300137 B6

Příklad přípravy 1 (injekční činidlo)

500 mg sloučeniny z přikladu 3 rozpuštěné v 5 ml destilované vody bylo lyofvlizováno po přefiltrování přes sterilizační filtr za vzniku lyofyli/ovaného injekčního přípravku.

Příklad přípravy 2 (kapsle)

Sloučenina příkladu 24 50 mg

Laktóza 128 mg

Kukuřičný škrob 70 mg io Stearát hořečnatý 2 mg

250 mg

Prášek výše uvedeného přípravku byt smíchán a směs byla prosáta přes síto 60, 250 mg prášku bylo naplněno do želatinových kapslí č. 3 za vzniku požadovaných kapslí.

Příklad přípravy 3 (tablety)

Sloučenina příkladu 24 1 .aktóza

Kukuřičný škrob 2u Stearát hořečnatý

Prášek výše uvedeného přípravku byl smíchán a směs byla granulována za mokra při použití kukuřičného škrobu a sušena, byly připravené 200 mg tablety. Tyto tablety mohou být potažené cukrem, je-li to nutné.

Účinnost vynálezu l-methylkarbapenové sloučeniny obecného vzorce 1 předkládaného vynálezu a jejich farmaíi) ceuticky přijatelné soli mají vynikající antibakteriální účinky, jsou stabilní vůči dehydropeptidázc l a β laktamáze a mají vysoký poměr nalezení v močí. Protože vykazují nízkou toxicitu pro ledviny. jsou sloučeniny vhodné jako farmaceutika, zvláště antibakteriální činidla.

mg 126 mg 23 mg 1 mg 200 mg

Claims

(I), kde:

R¹ představuje (1) skupinu představovanou vzorcem COOR', kde IC je vodík. C| až C_(J alkylová skupina nebo

45 C? až Cj, cykloalkylová skupina.

- 346 CZ 300137 B6 (2) skupinu představovanou vzorcem CONR^JR\ kde R' a R' mohou být stejné nebo rozdílné a každý je vodík, Cj až Cj, alkylová skupina, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů A níže uvedené. Cj až C₆ cykloalkylová skupina nebo 3 až 6-ti členná hetcrocyklická skupina nebo C₍,

5 až Cm ary lová skupina, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou bvt stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B níže uvedené, nebo kde R¹ a R^? společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané, představují 3 až 6-ti členný heterocykl obsahující dusík, který' může být substituovaný jednou nebo dvěma skupinami, kterc mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vy brány ze skupiny substituentů B níže uvedené.

io (3) kyanoskupinu.

(4) skupinu představovanou vzorcem OBOR⁶, kde R⁶ je vodík. Cj až C₆ alkylová skupina nebo Cý až Cj, cykloalkylová skupina nebo (5) skupinu představovanou vzorcem CHiNRR⁸, kde R' je vodík, Cj až Cj, alkylová skupina nebo G až C₍, cykloalkylová skupina. R* je vodík. Cj až Cj, alkylová skupina nebo G až Cj, i? cykloalkylová skupina, Cj až Cj, alkanoylová skupina. (Cý až Cm aryl fkarbony lová skupina, klerá může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B níže uvedené, (Cj až Cj, alkoxyjkarbonylová skupina. 5 nebo 6-ti členná aromatická heterocyklokarbonylová skupina, (j až Cj, alkylsulfonylová skupina nebo Cj, až C_Hi arylsulfonylová skupina, nebo R' a R^s, společně s atomem dusíku, ke zu kterému jsou vázané představují sukcinimidovou skupinu, která může být kondenzována s fenylovou skupinou,

R² představuje vodík nebo Cj až Cj, alkylovou skupinu; n představuje 1,2 nebo 3;

X představuje síru nebo kyslík,

25 substituent skupiny A zahrnuje hydroxylovou skupinu, amino skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma Cj až C₆ alkylovým i skupinami, karbamovlovou skupinu, jejíž aminová skupina může být substituovaná jednou nebo dvěma Cj až Cj, alkylovým i skupinami, karboxylovou skupinu, kyano skupinu a Cj až Cj, alkoxylovou skupinu, a substituent skupiny B zahrnuje hydroxy Cj až C.j alkylovou skupinu. amino-Cj až Cj-alkylovou

50 skupinu, kde aminová skupina může být substituovaná jednou nebo dvěmi Cj až Cj, alkylovými skupinami, karbamoy lovou skupinu, kde aminová skupina může být substituovaná jednou nebo dvěma Cj až Cj, alkylovými skupinami, karboxylovou skupinu, hydroxylovou skupinu, amino skupinu, která muže být substituovaná jednou nebo dvěma Cý až Cj, alkylovými skupinami. Cj až Cj, alkoxylovou skupinu a Cj až C₆ alkylovou skupinu,

55 nebo její farmakologieky přijatelné soli nebo esterové deriváty .
2. 1 -MethyIkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologieky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1, obecného vzorce I, kde R¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem CONR^fR\ kyano skupinu nebo skupinu představovanou obecným vzorcem CH?NR'R⁸.
3. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologieky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1, obecného vzorce I, kde R¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem CONR⁴R j nebo skupinu představovanou obecným vzorcem ClhNR l<ý

45
4, l-Melhylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologieky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1, obecného vzorce 1, kde R¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem CONR⁴R^>.
5. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologieky přijatelná sůl nebo esterový

50 derivát podle nároku I až 4 obecného vzorec 1, kde R představuje atom vodíku nebo Cj až G alkylovou skupinu.

- 347 C7. 300137 Bó
6. l-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její fannakologicks přijatelná sul nebo esterový derivát podle nároku 1 až 4, obecného vzorce 1. kde R^? představuje atom vodíku.

5
7. 1-Methylkarbapcnemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1 až 6. obecného vzorce I, kde R' představuje atom vodíku nebo C_I až C₃alkylovou skupinu.
8. 1 -MethyIkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový io derivát podle nároku 1 až 6, obecného vzorce 1. kde R' představuje atom vodíku, methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu,
9. l-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sul nebo esterový derivát podle nároku 1 až 8. obecného vzorce I. kde R⁴ představuje atom vodíku nebo C, až G

15 alkylovou skupinu.
10. 1-Methylkarbapencmová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1 až 8. obecného vzorce L kde R⁴ představuje atom vodíku, methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu.
11. l-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterové derivát podle nároků 1 až 10, obecného vzorce I, kde R^? představuje atom vodíku. C| až G alkylovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné ajsou vybrány ze skupiny substituentů A nebo 4 až 6-ti členné hctcrocykl

25 obsahující dusík.
12. 1 Methy Ikarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároků 1 až 10, obecného vzorce I, kde R představuje atom vodíku. C| až CJ alkylovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být

30 stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů A nebo azetidinyl. pyrrolidinyl nebo piperidinyl.
13. l-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároků 1 až 8, obecného vzorce 1, kde R⁴ a R^? společně s atomem dusíku, ke

35 kterčniu jsou vázané, představují 4 až 6-ti členný heteroeykl obsahující dusík, který může být substituovaný jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B.
14. 1 Methy Ikarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterové

40 derivát podle nároků 1 až 8. obecného vzorce l. kde R⁴ a R^? společné s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané, představují azetidinovou. piperizinovou, morfolinovou nebo thiomorfolinovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B.

45 15. l-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterové derivát podle nároků 1 až 14, obecného vzorce l. kde R⁶ představuje atom vodíku nebo Cý až G alkylovou skupinu.

16. l-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterové ?(i derivát podle nároků 1 až 14, obecného vzorce 1, kde R⁶ představuje atom vodíku.

17. l-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterové derivát podle nároku 1 až 16, obecného vzorce I, kde R představuje atom vodíku nebo G až G alkylovou skupinu.

- 348 Q7. 300137 B6

18. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároků 1 až 16. obecného vzorce I, kde R představuje atom vodíku nebo methylovou skupinu.

5 19. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároků 1 až 16. obecného vzorce I. kde R představuje atom vodíku.

20. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároků I až 19, obecného vzorce 1. kde R^K představuje atom vodíku, Cj až C? alkylu lovou skupinu, Cj až Cj; alkanoylovou skupinu, benzoylovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B, (Cj až C; alkoxy)karbonylovou skupinu, thienylkarbonylovou skupinu, furylkarbonylovou skupinu nebo pvrídylkarbonylovou skupinu.

is 21. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároků 1 až 19, obecného vzorce I, kde R^s představuje atom vodíku, benzoylovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů B. (2—thienyl)karbonylovou skupinu. (2-f uryl karbonylovou skupinu nebo (3-pyridy!)karbonylovou skupinu.

22. 1 Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároků 1 až 21. obecného vzorce 1. kde n představuje 1.

23. l-Methylkarbapcnemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový

25 derivát podle nároků 1 až 22. obecného vzorce 1, kde X představuje atom kyslíku.

24. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1, obecného vzorce I. kde:

R¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem CONR⁴Rj kde R⁴ představuje atom

50 vodíku nebo Cj až CC alkylovou skupinu R' představuje atom vodíku. Ci až C₆ alkylovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů Λ nebo 4 až 6-ti členný heterocykl obsahující dusík.

R² představuje atom vodíku,

55 n představuje 1, a

X představuje atom kyslíku nebo síry.

25. 1- Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1, obecného vzorce I. kde:

jo R¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem C()NR^IR⁵, kde R¹ představuje atom vodíku, methylovou skupinu nebo isopropylovou skupinu, a R představuje atom vodíku. C| až Cj, alky lovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny substituentů A nebo azetidinyl. pyrrolidinyl nebo piperidinyI,

45 n představuje 1, a

X představuje atom kyslíku nebo síry.

26. l-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1. obecného vzorce 1, kde:

5d R¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem CONR^JR\ kde R⁴ a R' společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázáné, představují 4 až 6-ti členný heterocykl obsahující

- 349 CZ 300137 B6 dusík, který může být substituovaný jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné ajsou vybrány ze skupiny substituentů B,

R² představuje atom vodíku.

n představuje 1, a

5 X představuje atom kyslíku nebo síry.

27. 1-Methylkarbapcnemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sul nebo esterový derivát podle nároku 1. obecného vzorce 1, kde:

R¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem CONR'R\ kde R¹ a R² společně io s atomem dusíku, ke kterému jsou vázané, představují azetidinovou. píperizinovou, morfolinovou nebo thiomorfolinovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné ajsou vybrány ze skupiny substituentů B,

R“ představuje atom vodíku, n představuje 1, a
15 X před sta v uj e atom kys 1 í ku nebo s í ry.

28. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1. obecného vzorce 1. kde:

R¹ představuje kyano skupinu,

2o R² představuje atom vodíku, n představuje 1, a

X představuje atom kyslíku nebo síry.

29. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový 25 derivát podle nároku 1. obecného vzorce 1, kde:

R' představuje skupinu představovanou obecným vzorcem CICNR R*. kde R' představuje atom vodíku nebo C| až G alkylovou skupinu, R^s představuje atom vodíku, až G alkylovou skupinu, C₍ až alkanoylovou skupinu, benzoylovou skupinu, která může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány ze skupiny so substituentů B. (C| až G alkoxy )karbony lovou skupinu, thienvlkarbonylovou skupinu, furylkarbony lovou skupinu nebo pyridyl karbonylovou skupinu.

R² představuje atom vodíku, n představuje 1, a

X představuje atom kyslíku nebo síry.

30. 1-Methylkarbapenemová sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sůl nebo esterový derivát podle nároku 1. obecného vzorce I, kde:

R¹ představuje skupinu představovanou obecným vzorcem CH₂NR R^K. kde R⁷ představuje atom vodíku nebo methylovou skupinu, a R^lS představuje atom vodíku, benzoy lovou skupinu, která io může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami, které mohou být stejné nebo rozdílné a jsou vybrány zc skupiny substituentů B, (2-thienvl)karbony lovou skupinu, (2-fury Ikarbonylovou skupinu nebo (3-pyridyl)karbonylovou skupinu,

R ‘ p řed st a v uj e atom v od i k u. n představuje 1. a

45 X představuje atom kyslíku nebo síry.

- 350 CZ 300137 B6

31. 1 Methy Ikarbapenemová sloučenina podle nároku 1 vybraná / následující skupiny sloučenin:

{1 R.5S.6S)- 2-[ karbamoyl-1.3-thiazol-2- yl Jazetidin- 3- yl Jthio- 6- [(1R) hydroxycthy 1]-1 methylkarbapen 2 em-3-karboxylová kyselina.

5 (1R.5S.6SJ-2 [ 1 -(4-karbamoyl-1,3-oxazol-2-yjazetidin 3 yljthio—6—[( 1 R)—hydroxyethyl]—1 — methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina.

(1 R,5S.6$)-2-[1-(4-hydroxymethyl 1.3 thiazol 2 yl)azctidin-3-\ l]thio—6—[( 1R)-hydroxyethyl]- 1 -methy lkarbapen-2-em 3-karboxvlová kyselina.

(1R,5S.6S)-2-[H4-hydroxymethyl-1,3 oxazol—2—yljazetidin—3—yl ]thio—6—[( 1 R)-hydroxyio cthyl]-l-methylkarbapen 2-em -3- karboxylová kyselina, (! R.5S.6S) 2 [1 -(4-kyano 1.3 thiazol -2—yljazetidin—3—yl]thio—6—1_( 1 RJ-hydroxyethyl] 1 methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R,5S,6S)-2-[ 1 -(4-kyano-1,3-oxazol-2-y 1 Jazetid in-3- y l]th i o-6- [(1 RJ-hydroxy ethyl] 1 methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina.

is (1 R.5S,6S)-2-[l-(4-morfolinokarbonyl-l,3—thiazol—2—yJazetidin -3 yl]thio 6-[( lR)-hydro\yethylj-l-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, (1 R,5S,6SJ-2-[l-(4-morfblinokarbony 1--1,3- oxazol 2 -yJazetidin-3 —yI]thio—6—[(1 Rj-hydroxy·ethyl] 1 metliylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1R.5S.6S) 2 [l- -(4-azetidinokarbonyl-1,3-thiazol-2-y-Jazetidin—3—yljthio—6—[( 1 Rj-bydroxy20 ethyl]-!-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina,

(]R.5S,6S)-2-[l-(4-azetidinokarbonyl-1,3—oxazol—2—y Jazetidin—3—yljthio—6—[(1 RJ-hydroxyethyl]-]-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S)-2-(1 —[4—(3—aminoazetidino)karbonyl—1,3—thiazol—2—yl jazetidin—3—yl} thio—6[(1R)-hydroxyethyl] I methylkarbapen 2-em 3-karboxylová kyselina,

25 (1 R,5S,óS)-2-{ l-[4-(3-aminoazetidino)karbonyl-l ,3—oxazol—2—y Jazetidin—3—yl} tliío- 6 [(IR) hydroxyethyl] 1 methylkarbapen 2 em-3 karboxylová kyselina, (1R.5S.6S) 2 J1 -[443-hydroxyazetidino)karbonyl 1,3 thiazol 2 v Jazetidin - 3·· y 1} th io—6— [(1R)—hydroxycthyI]— 1 -methylkarbapcn-2-em-3-karboxylová kyselina.

(1 R.5S.6S) 2 (1 [4 (3 hydroxyazelidino)karbonyl-1.3 oxazol 2-yl)azetidin-3-yJthio-650 [(1 Rj-hydroxyethylj-l-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (I R,5S,6S)-2-[ l-(4-thiomorfolinokarbonyl-l,3-thÍazo]-2-y 'Jazetidin—3—yljthio—6—[(IR)hydroxyethyl]-]-methylkarbapen-2-eni-3-karboxylová kyselina.

(lR,5S,6S)-2-[H4-thiomorfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidin-3-yl]thio-6-[( 1R)hydroxyelhyl]-1 methylkarbapen 2 -em-3 karboxylová kyselina.

35 (I R,5S,6S)-2-] 1 [/4 (piperidin -4 y Ikarbamoy J 1,3—thiazol—2—yl Jazetidin—3—y Jlhio-6- [(RJhydroxy ethvlj- 1 -methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, (1 R,5S,6S) 2-{ I-[4 -(piperidín-4-yIkarbamoyl)-l,3-oxazol-2-yl)azetidin-3-yJthio-6 [(R) hydroxyethylj-l-melhy lkarbapen-2-em -3-karboxy lová kyselina, (1 R,5S,6S) 2- [ 1 —[4—(azetidin—3—ylkarbamoyl)— 1,3—thiazol—2—yJazetidin—3—yl}thio—6—[(R>—

40 hydroxyethyl]-1-methy Ikarbapen 2 em -3 karboxylová kyselina.

(lR,5S,6S)-2-{ 1-[4-(azetidin 3 ylkarbamoyj-1.3 oxazol 2-yjazetidin-3 yl{thio 6 [(RJhydroxy ethyl J-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina,

- 351 C7. 300137 B6 (1 R.5S.6S)—2—{ l-(4-((3 S)-py rrol id i n-3-y Ikarbamoy 1)-1.3-th iazol 2 yl)azetidin 3 yl} thio—6— [(R)—hydroxyethyl]—1 - methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (lR.5S-6S)—2—(I [4 (<3S)—pyrrolidin—3—ylkarbamoyl)—l ,3-oxazol—2—yljazetidin—3—yl j thio—6[(R)--hydroxyethyl]— 1 -methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina,

5 (1 R,5S,6S)-2-{ 1-(4-(( 3 R)-py rrol id i n-3-y Ikarbamoy I) -1.3—thiazol—2—yl jazetidin—3—yl J thio—6— [(R)-hydroxyethy1 J-1 -methyIkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (! R.5S.6$)-2-{ 1 —(4—((3R)—pyrrolidin--3 --yIkarbamoyl)-l ,3-oxazo 1-2-yl jazetidin-3-yl! thio 6 [(R) hydroxy ethy í]-l-melhylkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, (1 R.5S.6S)- 2- {l—[4—(piperazin— l -karbonyl >— 1,3—thiazol—2—yl (azetidin—3—y!} thio—6 [(R) io hydroxyethyl] -! methylkarbapen-2-cm-3-karboxylová kyselina.

(1 R.5S.6S)-2-] 1 —[4—(piperazin— t -karbony l)-l,3-oxazol-2-yl)azetidin-3-yl)thio-6-[(R> hydroxyethyl]-l-methylkarbapcn-2-cm-3-karboxylová kyselina, (l R.5S.6S)—2—] l-[4 (2 -amino—ethyIkarbamoyl)—1,3—thiazol—2—yljazetidin—3—vl]·thio 6-[(R)hydroxyethy I] 1 melhylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina,

15 (IR.5S.6S) 2 {1 [4 (2-amino-ethy Ikarbamoy i)-l.3-oxazol-2-y Ijazetidin 3 yHlhio—6—[(R)— hy droxy ethy 1]-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, (1 R.5S,6S)—2—{1 — [4—((I S)-l-aminomethyl-2-methyl-propylkarbamoyl)-l,3-lhiazol-2-yl)azctidin-3-y l}thio-6-((R)-hydroxyethyl]-l-methylkarbapen 2-cm-3-karboxylová ky selina.

(1 R.5S.6S)-2-{ 1-(4-(( 1 S)-l-aminomethy!-2 methyI -propyIkarbamoyI)-l,3-oxazol-220 y Ijazetidin -3 yljthio 6 [(R)-hydroxyethyl]-1 -methylkarhapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S)-2-(l-{4-[N-(2-amino -ethyl)—N—isopropyl—karbarnoydj— 1.3—thiazol—2—yl}azetidin— 3 yl jthio-6—[(R)—hydroxyethyl]— I -methy4karbapen-2-em-3-karboxylová kyselina.

(1 R.5S.6S)- 2-( l-{4-[NH2-amino-ethyl)-N-isopropyl-karbamoyl]-] ,3-oxazo 1-2-yl j azetidin 3-yl 1 th io—6—f(R)—hydroxyethyl ]— 1 -methy Ikarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina,

2? (1 R.5S.6S >-2—( l—{4—fN—(2—hydroxy—ethyl )—N—isopropyl—karbanioyl]—l ,3-thiazol-2-y I] a/etidin-3-yl} tli io—6—[(R)—hydroxyethyl]— 1—methylkarbapen- 2 em 3 karboxy lová kyselina.

(I R,5S,6S)-2-( 1 -{4-(N-(2-hydroxy-ethyl)-N-i sopropy l-karbamoyl] 1.3 oxazo 1-2-yl j azetidin—3—y! jthio—6—[(R)—hy'droxyethyl]- 1 -methyIkarbapen-2-cm-3-karboxylová kyselina.

(1 R.5 S,6 S )-2-(1-(4-am inomethy l-l ,3-th iazo 1-2-yl jazet idin 3 -yl]lhio—6—f(R)—hydroxyethyl ]— 'o 1 -methylkarbapcn-2-cin-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S) 2 [1 (4 aminomethy l-l ,3-oxazol -2-yl)azetidin-3-yl|thio-6-[(R)-hydroxyethyl]1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina, (I R.5S.6S}—2—{l-(4-benzoylaminomethyl)-1.3-thiazol-2-yl]azetidin-3- yl]thio—6—[(R)— hydroxy-ethy 1]-1-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina,

55 (l R.5S.6S)—2—{l-(4-benzoylaminomethyl)--1.3-oxazol-2 yljazetidin 3 -ylJthio-6-[(R)hydroxy ethyl] I melhylkarbapcn-2-cm-3-karboxylová kyselina.

(1 R.5S.6S)—2—{1 -(4-benzenesulfonylaminomethyl) 1,3-thiazol 2 yl]azelidin-3-yl}thio—6— [(R) 1 methylkarbapen-2 em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S)-2-{1 [4 -benzenesulfony lam inomethy l)-l,3-oxazol-2-y Ijazetidin—3—y I jthio-ó4o [(R)-l-mcthylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina, (1 R.5S.6S) 2-(l {4 [(thiofen-2-karbonylamino)niethyl]-l.3- thiazol -2-yljazetidin-3-yljthio-6-[(R)-1-hydroxyethyl]-!-methy lkarbapen-2-em-3-karboxy lová kyselina.

- 352 CZ 300137 Bó (1 R.5S.6S> 2 (l-{4-[(thiofen-2-karbonylamino)methyl]-1.3 oxazol-2 yl}azetidín-3-yl}thio6-[(R)-l-hydroxyethy 1]-1-methy lkarbapen-2-em 3 karboxylová kyselina, (lR,5S,6S)-2 4l-[4-[(furan-2 karbonylamino)methyl]-1.3-thiazol 2 yIjazetidin-3-yljthio 6-[(R)-l-hydroxyethyl]-1-methylkarbapen-2-em-3-karboxylová kyselina.

5 (1R.5S.6S)-2% l-{4-[(furam-2- karbonylaminoguethyl]-1.3 -oxazol-2-yl}azctidin-3-yl jíhio6-[(R) -1-hydroxv ethyl]-1-methy Ikarbapen- 2 em-3-karboxylová kyselina.

32. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím. že obsahuje sloučeninu nebo její farmakologicky přijatelnou sul nebo esterový derivát definovaný v nárocích 1 až 31 jako účinnou io složku.

33. Farmaceutický přípravek podle nároku 32. vyznačující se tím. že farmaceutický přípravek je přípravek pro prevenci nebo léčbu bakteriálních infekcí.

15 34. Sloučenina nebo její farmakologicky přijatelná sul nebo esterový derivát podle nároku 1 až

31, který je používán jako léčivo.

35. Použití sloučeniny nebo její farmakologicky přijatelné soli nebo esterového derivátu podle nároku 1 až 31 při výrobě léčiv pro prevenci nebo léčbu bakteriálních infekcí.