CZ296245B6

CZ296245B6 - Nové terapeutické pouzití derivátu thienylcyklohexylaminu a kompozice s jeho obsahem

Info

Publication number: CZ296245B6
Application number: CZ0198999A
Authority: CZ
Inventors: Lallement@Guy; D'Arbigny@Pierre; Kamenka@Jean-Marc
Original assignee: Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques (S. C. R. A. S.)
Priority date: 1996-12-06
Filing date: 1997-12-05
Publication date: 2006-02-15
Also published as: EP0956019B1; RU2183456C2; TR199901237T2; AU5326698A; IL130209A0; EP0956019A1; PT956019E; CA2274135C; TW482674B; US6207685B1; JP2001505217A; NO323695B1; ATE251907T1; NO992726L; PL191567B1; NO992726D0; WO1998024434A1; CZ198999A3; ES2206762T3; DE69725613D1

Abstract

Resení se týká pouzití thienylcyklohexylaminu chemického názvu 2-methyl-1-(1-piperidinyl)-1-(2-thienyl)cyklohexan, v racemické forme, jako diastereoizomeru nebo entantiomeru, samotného nebo spolecne s jinými látkami s farmaceutickým úcinkem, pro prípravu léku urceného pro omezení a inhibici úcinku vyvolaných expozicí neurotoxickým nebo neurotoxin obsahujícího produktu. Resení se dále týká farmaceutických kompozic a produktu s obsahem 2-methyl-1-(1-piperidinyl)-1-(2-thienyl)cyklohexanu.

Description

Nové terapeutické použití derivátu thienylcyklohexylaminu a kompozice s jeho obsahem

Oblast techniky

Vynález se týká nového terapeutického použití derivátu thienylcyklohexylaminu, farmaceutické kompozice a produktu s jeho obsahem.

Dosavadní stav techniky

Přihláška vynálezu se týká použití thienylcyklohexylaminu, samotného nebo společně s jinými produkty s farmaceutickým účinkem, pro přípravu léku určeného pro omezení nebo inhibici účinků neurotoxických nebo neurotoxonických produktů. Předložený vynález se také týká produktu obsahujícího thienylcyklohexylamin a alespoň jednu anticholinergní látku, protikřečovou látku nebo látku reaktivující cholinesterázy a dále se týká farmaceutické kompozice, která ho obsahuje. Tento produkt je také obzvláště zajímavý pro svůj účinek při omezení účinků neurotoxických nebo neurotoxonických produktů.

Skupina neurotoxických nebo neurotoxonických produktů obsahuje produkty jako organofosfátové sloučeniny, které je možné nalézt například v insekticidech nebo pesticidech pro průmyslové nebo domácí použití, ale také v bojových plynech jako je soman, sarin, tabun nebo VX. Mezi doposud existujícími terapiemi v boji proti intoxikaci těmito látkami jako je polymedikace, se žádná úplně nevyhne výskytu neuropatologických následků.

Podstata vynálezu

Vynález se týká použití thienylcyklohexylaminu, který má chemický vzorec 2-methyl-l-(lpiperidinyl)-l-(2-thienyl)cyklohexan, pro přípravu léku určeného pro omezení a inhibici účinků neurotoxických nebo neurotoxinických produktů u primátů a konkrétně u člověka. Uvedená látka může být použita sama o sobě nebo společně s jinými látkami s farmaceutickým účinkem, která jsou schopná zmírnění nebo inhibice účinků neurotoxických nebo neurotoxinických produktů.

Thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, je popsán v patentu EP 396734. Vzhledem k přítomnosti dvou asymetrických atomů uhlíku může být tento thienylcyklohexylamin v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve vzásadě čisté formě.

Příprava diastereoizomerů 1-thienylcyklohexylaminu spočívá v reakci 2-bromothienylmagnezia s 2-methylcyklohexanonem, zpracování takto získaného 2-methyl-l-(2-thienyl)cyklohexanolu pomocí NaN₃ pro získání odpovídajícího azidu, v redukci tohoto azidu na amin a konečně v působení 1,5-halogenpentanem.

Diastereoizomery cis a trans se separují chromatografíi na silikagelu, za použití směsi hexanu/etheru (95/5 objemově): první frakce, odpovídající sloučeniny trans, krystalizuje při teplotě 40 až 41 °C; druhá frakce, odpovídající sloučenině cis, krystalizuje při teplotě 80 až 81 °C. Enantiomeiy mohou být získány za použití opticky aktivních kyselin jako kyselina di-0,0'-4-toluoylvinná.

Podstatou předloženého vynálezu je použití thienylcyklohexylaminu chemického vzorce 2-methyl-l(l-piperidinyl)-l-(2-thienyl)cyklohexan, vracemické formě, jako diastereoizomerů nebo enantiomeru samotného nebo společně s jinými látkami s farmaceutickým účinkem, pro přípravu léku určeného pro omezení a inhibici účinků vyvolaných expozicí neurotoxickému nebo neurotoxin obsahujícímu produktu.

Předložený vynález popisuje thienylcyklohexylaminutak, jak je výše definován, s alespoň jednou anticholinergní látkou, alespoň jednou protikřečovou látkou a alespoň jednou látkou reaktivující cholinesterázy.

-1 CZ 296245 B6

Použité farmakologické termíny mají obvyklý význam, který je známý odborníkovi. Jako anticholinergní látky je možné uvést následující látky: atropin, scopolamin, N-oxid atropinu, dihexyvarin a methylsulfát tiemonia. Jako protikřečové látky je možné uvést následující látky: fenobarbital, primidon, karbamazpin, ethosuximid, fenytoin, valproát sodný, progabid, gabapentin, vigabatrin, loprazolam, benzodiazepiny jako jsou clonazepam, clobazam, diazepam a prodiazepam. Jako látky reaktivující cholinesterázy je možné uvést pralidoxim, obidoxim, HI6.

Dalším předmětem podle předloženého vynálezu je kompozice která obsahuje jako účinnou látku produktu obsahující thienylcyklohexylamin chemického vzorce 2-methyl-l-(l-piperidinyl)-l-(2-thienyl)cyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomer nebo enantiomer, v kombinaci s alespoň jednou látkou s farmaceutickým účinkem schopnou snížit nebo inhibovat účinky expozice neurotoxických nebo neurotoxin obsahujícím produktům.

Předmětem podle předloženého vynálezu je i produkt který obsahuje thienylcyklohexylamin a alespoň jednu látku zvolenou ze souboru zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterázy jakožto kombinace pro současné použití, oddělené použití nebo použití rozložené v čase, pro omezení nebo inhibici účinků vyvolaných expozicí neurotoxickému nebo neurotoxin obsahujícímu produktu.

Předložený vynález se týká produktu ve formě léku, který obsahuje thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve v zásadě čisté formě, společně s alespoň jednou látkou zvolenou ze souboru, zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterázy. Produkt, tak, jak je výše definován, obsahuje s výhodou thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, asociovaný s alespoň jednou anticholinergní látkou, protikřečovou látkou a látkou reaktivující cholinesterázy.

Předložený vynález má také za předmět produkt tak, jak je výše definován, obsahující inhibitor cholinesterázy, určené pro podání před expozicí neurotoxickým nebo neutoxinickým produktům.

Thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, může být podáván v dávce, která jev rozmezí mezi 0,001 a 10 mg/kg, s výhodou mezi 0,01 a 0,1 mg/kg. Látky, které jsou s ním případně asociovány, jako jsou anticholinergní látky, protikřečové látky nebo látky reaktivující cholinesterázy, známé ve farmakologii, jsou podávány v dávkách běžně doporučovaných v patřičných farmakologických oblastech.

Thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, jakož i látky, které mají farmaceutický účinek a které jsou s ním společně podávané, mohou být podávány klasickými cestami podání, jako podání orální, podání vnitrosvalovou cestou, intraperitoneálním podáním pod kůži nebo vnitrožilním podáním. Mohou být podávány následně nebo odděleně, stejnými nebo různými cestami podání. Thienylcyklohexylamin je s výhodou podáván vnitrožilním podáním a látky s farmaceutickým účinkem, které jsou s ním případně společně podávané, jako jsou anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterázy, jsou podávány vnitrosvalovou cestou nebo vnitrožilním podáním. V případě, že thienylcyklohexylamin je asociován s alespoň jednou látkou s farmaceutickým účinkem tak, jak jsou výše definované, může být podání thienylcyklohexylaminu odlišné od způsobu podání těchto jiných látek.

Podání thienylcyklohexylaminu může být také provedeno počínaje od momentu intoxikace až po několik hodin po intoxikaci. Podání je s výhodou provedeno do dvou hodin po intoxikaci.

Toto podání může být provedeno s výhodou mezi 10 minutami a 45 minutami po intoxikaci.

Výsledky, které jsou níže uvedeny v části příkladů provedení vynálezu, ukazují velkou účinnost doplňkového podání cisthienylcyklohexylaminu 10 až 45 minut po intoxikaci.

-2CZ 296245 B6

Předložený vynález má tedy za předmět výše popsané použití, při kterém se 2-methyl-l-(lpiperidinyl)-l-(2-thienyl)cyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve v zásadě čisté formě, podává s výhodou do dvou hodin po intoxikaci neurotoxickými nebo neurotoxinickými produkty.

Následující příklady jsou určeny pro ilustraci výše uvedených postupů a v žádném případě nejsou považovány za omezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příkladová část: farmakologická studie

1) První série pokusů:

Protokol studie:

Devět opic Cynomolgus bylo ošetřeno 1 hodinu před intoxikaci pyridostigminem (0,2 mg/kg; podáno vnitrosvalovou cestou). Tato dávka pyridostigminu inhibuje 30 % plasmatických cholinesteráz, což odpovídá normám ochrany v zemích NATO. Zvířata byla potom intoxikována 5 DL₅₀ somanu, organofosfátové sloučeniny (30 pg/kg; podáno vnitrosvalovou cestou) potom se na ně působí 1 minutu po intoxikaci „terapeutickým koktailem“: sulfát atropinu (0,5 mg/kg; podáno vnitrosvalovou cestou) + valium (0,2 mg/kg; podáno vnitrosvalovou cestou) + valium (0,2 mg/kg; podáno vnitrosvalovou cestou) + pralidoxim (30 mg/kg; podáno vnitrosvalovou cestou). Tato směs 3 léků odpovídá terapeutice v urgentních případech zavedené na osobní ochranu ve formě samoinjikujících stříkaček.

Deset minut po intoxikaci dostala zvířata czs-thienylcyklohexylamin nitrožilní cestou (0,01; 0,03 a 0,1 mg/kg, 3 zvířata na dávku).

Zvířata byla potom pozorována, znaky těžké toxicity a zotavení byly pozorovány během 17 okamžiků pozorování jdoucích od 2 minut po intoxikaci až do 3 týdnů. Tři týdny po intoxikaci byla zvířata usmrcena, byl jim odebrán mozek, potom byly po jednoměsíčním ponoření do formolu vytvořeny histologické řezy (10 pm) barvené Luxol Fast Blue HE za účelem hledání případných neurologických následků.

U zvířat určených pro srovnání, která nedostala m thienylcyklohexylamin byly provedeny obdobné pokusy. Takto bylo možné pozorovat vliv této sloučeniny na klinické znaky intoxikovaných zvířat a neuropatologické následky.

Výsledky:

Kontrolní zvířata (n=4):

U těchto zvířat byly pozorovány známky těžké intoxikace (rychlení svalové záškuby (fascikulace), třes, žmoulání), které se objeví 1 až 2 minuty po podání somanu, zvířata mají potom tonickotrhavé křeče, spojení s obloukovitým prohnutím těla dozadu při křeči zádového svalstva (opistotonem). Všechna zvířata upadnou potom rychle do bezvědomí, zhruba do pěti minut. Bezvědomí zvířat trvá od 20 do 40 minut. Po této fázi bezvědomí, se během šesti hodin po intoxikaci zotaví, třes postupně ustane. Den po intoxikaci, jsou všechna schopna chůze, uchopení a lezení, ale normální aktivita se u nich neobnoví dříve než do čtyř dnů po intoxikaci. Tři týdny po intoxikaci ukáže histopatologické vyšetření mozkové tkáně zásadní snížení velikosti populace neuronů ve druhé vrstvě frontoparietální kůry u všech primátů.

Zvířata ošetřovaná thienylcyklohexylaminem (n=3 na dávku):

Vnitrožilní podání cis-thienylcyklohexylaminu se vykoná, jako bylo uvedeno v protokolu studie, během fáze bezvědomí zvířat. Pozorování klinického stavuje shrnuto vnásledující tabulce:

-3 CZ 296245 B6

dávka cisthienylcyldohexyl aminu (mg/kg)	známky těžké toxicity stejné se zvířaty určenými pro srovnání	prevence respiračních potíží	rychlé antaxie ustání třesu	doba do zotavení (kontrolní zvířata 4 dny)
0,1	X	X	X X	4 dny
0,03	X	X	X	4 dny
0,01	X			24 hodin bez opětovného

návratu do 48 hodin

Tři týdny po intoxikaci ukázalo histologické vyšetření mozkové tkáně zvířat ošetřených thienylcyklohexylaminem normální neuronální hustotu ve druhé vrstvě frontoparietální kůry, při jakékoli dávce použitého cisthienylcyklohexylaminu. Provedená počítání v této části mozku poukazují na významný rozdíl mezi hustotou neuronů pozorovanou u zvířat určených pro srovnání a hustotou neuronů u zvířat ošetřených thienylcyklohexylaminem. Neuroprotektivní účinek thienylcyklohexylaminu se tudíž projeví již u nejnižší dávky.

Závěr:

V našich podmínkách pokusy bylo urgentní ošetření podání 1 minuty po intoxikaci. V těchto podmínkách trvá zhoršený stav vyvolaný Samonem pouze 3 až 5 minut. Nicméně neuropatologické následky přetrvávají do 3 týdnů po intoxikaci. Podání cis-thienylcyklohexylaminu navíc k urgentní polymedikaci umožní při dávce 0,01 mg/kg podané nitrožilním podáním znatelně zlepšit zotavení intoxikovaných zvířat 48 hodin po podání somanu a předejít početnímu snížení populace neuronů pozorované ve frontoparietální kůže zvířat určených pro srovnání.

2) Druhá série pokusů:

Série pokusů níže popsaná je blíže reálná situaci. Protokol, jež byl převzat je následující:

Zvířata intoxikovaná 8 DL₅₀ dostanou 1 minutu po intoxikaci pouze ekvivalent jediné samoinjikující stříkačky obsahující sulfát atropinu, valinu a pralidoxim. Cisthienylcyklohexylamin je potom podán 45 minut poté vnitrožilní cestou; toto zpoždění 45 minut by mělo odpovídat času potřebnému pro sebrání zraněného na času odpovídajícímu dopravě k místu pomoci, kde by byla provedena dekontaminace oblečení týmem specialistů a vnitrožilní injekce provedená lékařským personálem.

Protokol studie:

Měsíc před pokusem bylo operováno 6 opic Cynomolgus za účelem implantace korových elektrod pro snímání EEG podle standardního protokolu (Mestries a kol., Sci. Těch. Anim. Lab., 1984, 9, 35—46). Byla provedena upravená pooperační péče (obecná antibiotická terapie během 10 dnů a lokální aplikace antiseptik během 5 dnů).

Den před pokusem byla u zvířat provedena anestesie (Imalgen, 3 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) a jsou umístěna na sedačku s upevněním. Dvacet čtyři hodin potom (doba potřebná pro vyloučení Imalganu a více než 99 %) jsou primáti napojeni na zařízení pro snímání EEG (ALVAR 16 kanálů). EEG aktivita zvířat je nepřetržitě snímána (během šesti hodin a je provedena analýza rozložení energie ve frekvenčních pásmech po analýzou FFT (pásmo delta 0,5 až 5 Hz, pásmo theta 5 až 10 Hz, pásmo alfa 10 až 16 Hz, pásmo beta 16 až 48 Hz) za účelem získání indexu EEG výpočtem (% delta + theta / % beta). Zvířata byla ošetřena pyridostigminem (0,2 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) 1 hodinu před intoxikací somanem. Tato dávka pyridostigminu inhibuje 30 % plastických cholinesteráz, což odpovídá normám přijatých v zemích NATO. Zvířata byla potom intoxikována 8 DL₅₀ somanu, organofosfátové sloučeniny (30 μg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) potom se na ně působí 1 minutu po intoxikaci směsi: sulfát atro

-4CZ 296245 B6 pinu (0,25 mg/kg), podáno vnitrosvalovou cestou) + valium (0,1 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) + pralidoxim (15 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou). Tyto dávky odpovídají u primáta podání jediné samoinjikující stříkačky u člověka. Zvířata byla potom pozorována a přítomnost nebo nepřítomnost pěti znaků těžké toxicity (třes, trhavé pohyby nebo tonicko-trhavé krize, 5 bezvědomí, respirační potíže, hyperreaktivita na zvukové a hmatové podněty) u každého zvířete, jakož i čtyř znaků zotavení u každého zvířete (oční reflex, štípací reflex, uchopení, sledování pohledem) byly zaznamenávány v časech 2, 5, 10, 15, 30, 45 minut po intoxikaci.

Tři zvířata byla čtyřicet pět minut po intoxikaci ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem, podaným io nitrožilní cestou dávkou 0,1 mg/kg. Ostatní 3 zvířata nebyla ošetřena ničím. Znaky toxicity a zotavení, které byly předtím uvedeny, byly potom zaznamenávány pro každé zvíře v časech 1 hodina, 1 hodina 15, 1 hodina 30, 1 hodina 45, 2 hodiny, 2 hodiny 30, 3 hodiny, 3 hodiny 30, 4 hodiny, 4 hodiny 30, 5 hodin po intoxikaci. Pět hodin po intoxikaci (tedy 6 hodin od začátku pokusu, bere-li se v úvahu čas pro ošetření pyrodostigminem), bylo zastaveno snímání aktivity 15 EEG zvířat, primáti byli uvolněni ze sedačky, potom přeneseni (bez anestersie) do klece o velkých rozměrech. Klinický stav zvířat byl potom hodnocen v časech 5 hodin, 5 hodin 30, 6 hodin potom 24 hodin, 48 hodin, 3 dny, 4 dny, 1 týden, 2 týdny, 3 týdny po intoxikaci na základě těch stejných znaků těžké toxicity a zotavení, které byly předtím uvedeny a ke kterým se přidá přítomnost nebo nepřítomnost vysílení (znak toxicity), jakož i schopnost posadit se, schopnost chůze a 20 lezení a schopnost živit se (znaky zotavení).

Tři týdny po intoxikaci byla zvířata usmrcena nitrožilní injekcí pentabarbitalu, mozek byl rychle odebrán a umístěn do desetiprocentního roztoku formolu po dobu 1 měsíce (změna lázně každý týden). Potom bylo provedeno histologické vyšetření mozkové tkáně na základě obarvení 25 Hemalun-eosinem/luxol Fast-Blue.

Výsledky:

Prvních čtyřicet pět minut po intoxikaci: (před podáním cisthienylcyklohexylaminu, Perioda Pi) * Klinické znaky:

U všech zvířat byly zaznamenány těžké znaky intoxikace (rychlejší svalové záškuby (fascikulace), třes, žmoulání), které se objevily 2 až 3 minuty po podání somanu. Všechna zvířata měla potom tonicko-trhavé křeče spojené s obloukovitým prohnutím těla dozadu při křeči zádového svalstva (opistotonem). Latence křečí byla přibližně 3 až 4 minuty. Během této těžké fáze byla 35 zvířata kyonotická. Pět ze šesti intoxikovaných zvířat potom upadlo do bezvědomí na přibližně 5 až 8 minut. Tato fáze bezvědomí trvala přibližně 30 minut. Anarchické respirační pohyby (dyspnoe) byly pozorované u šesti zvířat a byla zaznamenána silná sekrece. Čtyřicet pět minut po intoxikaci bylo jedno zvíře ještě v bezvědomí a jednomu ze šesti se navrátil víčkový reflex a sledování pohledem k normě. V tutéž dobu se u všech zvířat vyskytl přetrvávající třes spojený se 40 závažnými respiračními potížemi.

* Aktivita EEG:

Objevení se dříve uvedených tonicko-trhavých krizí bylo doprovázeno zhoršeným stavem (status epilepticus), který je typický pro intoxikaci organofosfáty. Tento zhoršený stav trval přibližně 45 5 minut a potom ustal během fáze bezvědomí, potom se znovu objevil (to znamená přibližně minut po intoxikaci). Analýza frekvenčních pásem ukazuje zvýšené rozložení EEG energie v pásmu beta, spojené s relativním poklesem energie pásma delta, jak v temporálních odchylkách, tak na parietálních odchylkách. Tento vzestup relativní energie ve vysokých frekvencích je zcela typický pro injekci diazepimu zvířatům (Lipp, Arch. Int. Farmacodyn., 1973, 202, 24450 251). Výpočet indexu EEG (delta + theta/beta), během prvních 45 minut po intoxikaci poukazuje na velmi významný pokles tohoto indexu, vzhledem k periodě, která předcházela injekci somanu.

Toto ukazuje vzhledem k údajům poskytovaných v literatuře na hyperexcitaci mozku (Nagymajtényi a kol., Neurotox. Taratology, 1988, 10, 429-434).

-5CZ 296245 B6

Perioda od čtyřicáté páté minuty po intoxikaci až ke konci snímání EEG: (5 hodin po intoxikaci, Perioda P₂) * Klinické znaky:

Tři zvířata, která nedostala cřs -thienylcyklohexylamin vykazovala neustávající třes asociovaný s trháním, které trvalo po dobu několika hodin, jakož i potíže respiračního rytmu spojené s anarchickými pohyby břicha. Jejich zotavení bylo velmi pomalé, protože jediné zvíře ze tří vykazovalo štípací reflexy a uchopení, jakož i schopnost sledování pohledem 6 hodin po intoxikaci. Respirační potíže asociované s hypersekrecí byly pozorované během celé Periody P₂. Jedno ze zvířat zemřelo na respirační selhání 4 hodiny po intoxikaci.

U zvířat, kterým byl podán cis-thienylcyklohexylamin, bylo 5 až 10 minut po vnitrožilní injekci produktu zaznamenáno ustání trhání nebo tonicko-trhavých krizí, jakož i úplně vymezení respiračních potíží. Zvířata ventilovala pravidelně. Po úvodní fázi bezvědomí opět získala 3 zvířata, která byla ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem svoji reakci na štípání, svoji schopnost uchopení a schopnost sledování pohledem 2 hodiny až 2 hodiny 30 po intoxikaci. Ani jedno ze tří zvířat ošetřených cis-thienylcyklohexylaminem během prvních pěti hodin po injekci somanu nezemřelo.

* Aktivota EEG:

U zvířat, která nebyla ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem bylo zaznamenáno přetrvávání status epilepticus během 2 hodin 30 až 3 hodin po intoxikaci. EEG aktivita potom postupně klesala s a) - převahou relativní energie u nízkých frekvencí (rytmus delta) asociovanou sb) - poklesem relativní energie u vysokých frekvencí (rytmus beta). Výpočet indexu EEG během periody P₂ ukazuje, vzhledem k periodě, které předchází injekci somanu, silné zvýšení tohoto indexu, souběžně na temporálních odchylkách a parietálních odchylkách. Toto zvýšení indexu předpovídá navýšením relativní části v pásmu delta a poklesem relativní části v pásmu beta neuropatologické následky (Philipes a kol., Pharmacol. Biochem. Behav., 1992,42, 711-719).

U zvířat, která byla ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem bylo zaznamenáno zastavení status epilepticus 8 až 10 minut po vnitrožilní injekci tohoto produktu. Záznam s vysokou frekvencí/vysokou energií přešla na záznam představovaný pomalými vlnami (2 až 4 Hz) typickými po cis-thienylcyklohexylamin během přibližně jedné hodiny. Záznam EEG se potom postupně navrátil k normě bez zpětného navrácení k paroxystické aktivitě. Analýza vzhledem k frekvenčním pásmům během periody P₂ ukazuje rozložení energie EEG ekvivalentní rozložení zaznamenanému během periody, která předchází intoxikaci. Index EEG vypočítaný během této periody byl schopný s indexem EEG periody před intoxikací.

* Perioda od pěti hodin po intoxikaci až po usmrcení zvířat: (3 týdny po pokusu)

Dvě zvířata, která přežila a byla určená pro srovnání se po jejich uložení do klece opět velmi pomalu zotavila. Jedno z těchto dvou zvířat zemřelo 48 hodin po pokusu ve stavu úplného vyčerpání (zvíře nebylo schopné samostatného pohybu a samostatného přijímání potravy). Jediné zvíře, které přežilo ze série zvířat určených pro srovnání vykazovalo naprosto uspokojivé zotavení od páté hodiny po intoxikaci, spojené s očním reflexem, uchopením, štípáním, chůzí, lezením a živením.

U tří zvířat ošetřených cis-thienylcyklohexylaminem bylo zaznamenáno úplné klinické zotavení 5 hodin po intoxikaci, kromě schopnosti chůze a lezení, která se vrátila k normě až den po pokusu. Ani jedno ze tří zvířat ošetřených cis-thienylcyklohexylaminem nezemřelo během tří týdnů pozorování a jejich klinické zotavení bylo zcela uspokojivé.

Histopatologické vyšetření mozku zvířat, která přežila:

-6CZ 296245 B6

Histologické vyšetření mozku jediného zvířete, které přežilo ze skupiny kontrolních zvířat, která nebyla ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem, ukazuje neuropatologické následky v hippokampu ve fromtoparietální kůře. V hippokampu byla zaznamenána ložiska se sníženým počtem populace neuronů v pyramidální vrstvě oblasti CA_b jakož i těžké postižení granulární vrstvy v oblasti 5 gyrus dentetus. Ve frontoparietální kůže bylo zaznamenáno ubývání neuronů vrstev IHII.

U zvířat ošetřených cis-thienylcyklohexylaminem nebyla zaznamenána žádná patologická poškození.

Shrnutí: viz tabulka

Závěr:

V této druhé sérii pokusů provedených v podmínkách blízkých realitě bylo možné ukázat, že podání czs-thienylcyklohexylaminu doplněné samoinjikující stříkačkou,

a) - velmi znatelně zlepší přežití intoxikovaných zvířat

b) - podporuje jejich klinické zotavení

c) - návrat jejich EEG aktivitu k normě

d) - úplně předejde vzniku neuropatologických následků.

Výsledky tedy jasně dokazují terapeutický prospěch spojený s podáním cis-thienylcyklohexylaminu u těžce intoxikovaného jedince, který by si mohl podat pouze jedinou třísložkovou stříkačku, a to vše i v případě podání cis-thienylcyklohexylaminu s časovým zpožděním 45 minut po urgentním ošetření.

Formulace:

Příprava vstřiknutelného roztoku cis-thienylcyklohexylaminu

- lyofylizát cis-thienylcyklohexylaminu 0,5 mg

- mannitol 25 mg

- chlorid sodný 85,5 mg

- voda pro vstřiknutelné přípravky: gsp 10,0 ml.

Látky, které jsou popřípadě podávané společně s thienylcyklohexylaminem, jsou použity ve svých běžných formách v odpovídajících farmaceutických oblastech.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použití thienylcyklohexylaminu chemického názvu 2-methyl-l-(l-piperidinyl)-l-(2-thienyljcyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomeru nebo enantiomeru samotného nebo společně s jinými látkami s farmaceutickým účinkem, pro přípravu léku určeného pro omezení a inhibicí účinků vyvolaných expozicí neurotoxického nebo neurotoxin obsahujícímu produktu.

2. Použití podle nároku 1, kdy thienylcyklohexylamin je v kombinaci s jedním nebo dalšími látkami s farmaceutickým účinkem schopnými omezení nebo inhibice účinků neurotoxických nebo neurotoxin obsahujících látek.

3. Použití podle nároku 2, kdy thienylcyklohexylamin je v kombinaci s alespoň jednou látkou zvolen ze souboru, zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterázy.

4. Použití podle jednoho z nároků 2 a 3, kdy thienylcyklohexylamin je v kombinaci s alespoň jednou anticholinergní látkou, alespoň jednou protikřečovou látkou a alespoň jednou látkou reaktivující cholinesterázy.

5. Použití podle jednoho z nároků 3 a 4, kdy anticholinergní látka je zvolena ze souboru, zahrnujícího atropin, scopolamin, N-oxid atropinu, dihexyverin a methylsulfát tiemonia.

-8CZ 296245 B6

6. Použití podle jednoho z nároků 3 a 4, kdy protikřečová látka je zvolena ze souboru, zahrnujícího následující látky: fenobarbital, primidon, benzodiazepiny, karbamazepin, ethosuximid, fenytoin, falproát sodný, progabid, gabapentin, vigabatrin a loprazolam.

7. Použití podle nároku 6, kdy protikřečová látka je benzodiazepin zvolený ze souboru, zahrnujícího clonazepam, clobazam, diazepam a prodiazepam.

8. Použití podle jednoho z nároků 3 a 4, kdy látka reaktivující cholinesterázy je zvolena ze souboru, zahrnujícího následující látky: pralidoxim, obidoxim a HI6.

9. Použití podle jednoho z nároků 1 až 8, kdy thienylcyklohexylamin je v kombinaci s reverzibilním inhibitorem cholinesterázy určeným pro podání před expozicí neurotoxickým nebo neurotoxin obsahujícím produktům.

10. Použití podle jednoho z nároků 1 až 9, kdy reverzibilní inhibitor cholinesterázy je zvolen ze souboru, zahrnujícího pyridostigmin, fysostigmin.

11. Použití podle jednoho z libovolných nároků 1 až 10, kdy 2-methyl-l-(l-piperidinyl)-l-(2thicnyljcyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomer nebo enantiomer je podán do dvou hodin, s výhodou do jedné hodiny, po intoxikaci neurotoxickými nebo neurotoxin obsahujícími produkty.

12. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou látku produkt obsahující thienylcyklohexylamin obecného názvu 2-methyl-l-(l-piperidinyl)-l-(2thienyl)cyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomer nebo enantiomer, v kombinaci s alespoň jednou látkou s farmaceutickým účinkem schopnou snížit nebo inhibovat účinky expozice neurotoxickým nebo neurotoxin obsahujícím produktům.

13. Farmaceutická kompozice podle nároku 12, vyznačující se tím, že thienylcyklohexylamin je v kombinaci s alespoň jednou látkou zvolenou ze souboru, zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterázy.

14. Farmaceutická kompozice podle jednoho z nároků 12 a 13, vyznačující se tím, že thienylcyklohexylamin je v kombinaci s alespoň jednou anticholinergní látkou, alespoň jednou protikřečovou látkou a alespoň jednou látkou reaktivující cholinesterázy.

15. Farmaceutická kompozice podle jednoho z nároků 13 a 14, vyznačující se tím, že anticholinergní látka je zvolena ze souboru, zahrnujícího atropin, scopolamin, N-oxid atropinu, dihexyverin a methylsufát tiemonia.

16. Farmaceutická kompozice podle jednoho z nároků 13 a 14, vyznačující se tím, že protikřečová látka je zvolena ze souboru, zahrnujícího následující látky: fenobarbital, primidon, karbamazepin, ethosuximid, fenytoin, valproát sodný, progabid, gabapentin, vigabatrin, lorazolam a benzodiazepiny, jako jsou clonozepam, clobazam, diazepam a profiazepam.

17. Farmaceutická kompozice podle jednoho z nároků 13 a 14, vyznačující se tím, že látka reaktivující cholinesterázy je zvolena ze souboru, zahrnujícího prolidoxim, obidoxim, HI6.

18. Produkt, vyznačující se tím, že obsahuje thienylcyklohexylamin jak je definovaný v nároku 1 a alespoň jednu látku ze souboru zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivujícího cholinesterázy jakožto kombinace pro současné použití, oddělené použití nebo použití rozložené v čase, pro omezení nebo inhibici účinků vyvolaných expozicí neurotoxickému nebo neurotoxin obsahujícímu produktu.

-9CZ 296245 B6

19. Produkt podle nároku 18, vyznačující se tím, že navíc obsahuje inhibitor cholinesterázy určený pro podání před expozicí neurotoxickému nebo neurotoxin obsahujícímu produktu.

5 20. Produkt podle nároku 19, vyznačující se tím, že reverzibilní inhibitor cholinesterázy je zvolen ze souboru, zahrnujícího pyridostigmin, fysostigmin.