CN201464476U

CN201464476U - 斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统

Info

Publication number: CN201464476U
Application number: CN2009200758733U
Authority: CN
Inventors: 蒋守富; 刘静; 邱倩雯; 蔡黎; 张小萍; 何艳燕; 马晓疆; 张丽; 张明敏
Original assignee: SHANGHAI JIKONG BIOTECHNOLOGY CO Ltd; SHANGHAI DISEASE PREVENTION AND CONTROL CENTRE
Current assignee: Shanghai Disease Prevention and Control Centre; Shanghai Shen Kai Biological Technology Co., Ltd.
Priority date: 2009-08-05
Filing date: 2009-08-05
Publication date: 2010-05-12
Anticipated expiration: 2019-08-05

Abstract

本实用新型涉及一种斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，包括反应装置，反应装置包括盒体、盒盖、吸水材料和反应膜，吸水材料位于所述盒体中，反应膜置于吸水材料上，盒盖盖在所述盒体上压住反应膜，盒盖上开有反应孔，裸露部分反应膜，反应孔为椭圆形反应孔，较佳地，椭圆形反应孔的容积是50μl，底面积为0.5cm²，设置在盒盖的中央，反应膜是微孔膜，吸水材料的厚度为3mm～5mm，是吸水纸垫，反应孔中的反应膜上包被可溶性虫卵抗原膜层、人IgG膜层和封闭剂层，还包括盛放洗涤液的第一试剂瓶和盛放显色液的第二试剂瓶，本实用新型设计巧妙，使用简便，成本降低，检测快速灵敏，检测效果准确可靠，适于现场大规模应用。

Description

斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统

技术领域

本实用新型涉及抗体检测系统技术领域，特别涉及血吸虫病抗体检测系统技术领域，具体是指一种斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统。

背景技术

血吸虫病免疫学诊断方法是十分可靠的辅助诊断依据，也是流行病学调查最常用的工具。在目前常用的有酶联免疫法、间接血凝法、胶体染料试纸条法、胶体金斑点免疫渗滤法。虽然这些方法各有利弊，但在血吸虫病检测的敏感性和特异性方面没有明显区别，都纳入了中华人民共和国卫生行业标准——血吸虫病诊断标准(WS261-2006)。胶体金斑点免疫渗滤法是上世纪90年代以来我国血吸虫病免疫诊断市场上新出现的方法，其优势在于操作简便、反应快速，不需任何专门设备，不需工作人员特殊培训，可作快速诊断工具。但是，渗滤法也有一些缺点，如，渗滤法对血清的要求比较高，一般要求新鲜血清，如果陈旧血清则需离心分离，否则将使渗透速率下降造成反应膜堵塞，影响反应结果，而且渗滤法需要的血清量较大，通常50ul～100ul，这些因素都限制其现场大规模应用。

因此，需要提供一种斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其使用简便，成本降低，检测快速灵敏，检测效果准确可靠，适于现场大规模应用。

实用新型内容

本实用新型的目的是克服了上述现有技术中的缺点，提供一种斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，该检测系统设计巧妙，使用简便，成本降低，检测快速灵敏，检测效果准确可靠，适于现场大规模应用。

为了实现上述目的，本实用新型的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统有如下构成：

该斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特点是，包括反应装置，所述反应装置包括盒体、盒盖、吸水材料和反应膜，所述吸水材料位于所述盒体中，所述反应膜置于所述吸水材料上，所述盒盖盖在所述盒体上压住所述反应膜，所述盒盖上开有反应孔，裸露部分所述反应膜，所述反应孔为椭圆形反应孔。

较佳地，所述椭圆形反应孔的容积是50μl，底面积为0.5cm²。

较佳地，所述椭圆形反应孔设置在所述盒盖的中央。

较佳地，所述反应膜是微孔膜。

更佳地，所述微孔膜是硝酸纤维膜，所述硝酸纤维膜的孔径是0.45μm。

较佳地，所述吸水材料的厚度为3mm～5mm。

较佳地，所述吸水材料是吸水纸垫。

更佳地，所述吸水纸垫为32层餐巾纸。

较佳地，所述反应孔中的所述反应膜上包被可溶性虫卵抗原膜层、人IgG膜层和封闭剂层，所述可溶性虫卵抗原膜层和所述人IgG膜层位于所述封闭剂层中由所述封闭剂层隔开.

较佳地，所述斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统还包括盛放洗涤液的第一试剂瓶和盛放显色液的第二试剂瓶。

本实用新型的有益效果具体如下：

1.本实用新型将反应孔设计成椭圆形反应孔，设计巧妙，扩大了血清渗透面积，便于洗涤液对反应膜的充分洗涤，保持滤孔通畅，使得陈旧血清也能够渗透，省却了使用离心机进行离心分离的步骤，使用简便；

2.本实用新型的抗原包被于反应孔的正中央，检测时血清从中央加入，直接加在抗原上面与之充分接触，血清用量成倍减少(容积均为50μl时，采用椭圆形反应孔可以减少血清用量25μl)，成本大大降低；

3.本实用新型的吸水材料采用吸水纸垫，最适厚度为32层餐巾纸，提高了渗透速率；通过调整金标二抗及包被抗原的浓度，最适金标二抗浓度为A520nm 1.0，抗原浓度为0.2mg/ml，增强了反应灵敏度；通过调整金标洗涤液配方，吐温-20的最适浓度为2％，背景更加清晰，检测快速灵敏，检测效果准确可靠；

4.本实用新型对血清纯度不作要求，陈旧血清无需离心即可使用；反应体系血清用量少，仅需25μl；反应速率快，全过程用时1分半钟；检测效果准确可靠，适于现场大规模应用。

附图说明

图1是本实用新型的一具体实施例的结构示意图。

图2是图1所示的具体实施例的反应装置的分解示意图。

图3a-c是采用本实用新型进行检测的检测结果示意图。

具体实施方式

为了能够更清楚地理解本实用新型的技术内容，特举以下实施例详细说明。

请参阅图1-2所示，本实用新型的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统包括反应装置1，所述反应装置1包括盒体11、盒盖12、吸水材料13和反应膜14，所述吸水材料13位于所述盒体11中，所述反应膜14置于所述吸水材料13上，所述盒盖12盖在所述盒体11上压住所述反应膜14，所述盒盖12上开有反应孔15，裸露部分所述反应膜14，所述反应孔15为椭圆形反应孔。因此，体积不变，反应孔15设计成椭圆形，扩大了血清渗透面积，便于洗涤液对反应膜14的充分洗涤，保持滤孔通畅，使得陈旧血清也能够渗透，省却了使用离心机进行离心分离的步骤。

在本实用新型的具体实施例中，所述椭圆形反应孔的容积是50μl，底面积为0.5cm2。

在本实用新型的具体实施例中，所述椭圆形反应孔设置在所述盒盖12的中央。

较佳地，所述反应膜14是微孔膜。在本实用新型的具体实施例中，所述微孔膜是硝酸纤维膜，所述硝酸纤维膜的孔径是0.45μm。

较佳地，所述吸水材料13的厚度为3mm～5mm。

较佳地，所述吸水材料13是吸水纸垫.通过调整反应膜14下面吸水纸垫的厚度，提高渗透速率.将不同层数的市售餐巾纸(吸水纸垫)衬于反应膜14下，根据检测效果确定最适层数.在本实用新型的具体实施例中，所述吸水纸垫为32层餐巾纸.

较佳地，所述反应孔15中的所述反应膜14上包被可溶性虫卵抗原膜层、人IgG膜层和封闭剂层，所述可溶性虫卵抗原膜层和所述人IgG膜层位于所述封闭剂层中由所述封闭剂层隔开。在本实用新型的具体实施例中，可溶性虫卵抗原膜层位于反应孔15的正中央，抗原旁点滴人IgG作为质控点。检测时血清从中央加入，直接加在抗原上面与之充分接触，血清用量可成倍减少(25μl)。

较佳地，所述斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统还包括盛放洗涤液的第一试剂瓶2和盛放显色液的第二试剂瓶3。显色液即为金标二抗，调整金标二抗及包被抗原的浓度，可增强反应灵敏度。在本实用新型的具体实施例中，包被抗原采用自制的血吸虫可溶性虫卵抗原，浓度为0.2mg/ml；采用中国药品生物制品检定所提供的“血吸虫病抗体诊断试剂国家参考品”(批号：20041108)作为最适抗原浓度和金标二抗验证血清；洗涤剂基本配制为0.02mol/LpH8.0TBS，然后加入不同浓度(0.5％～5％)的吐温-20，根据背景清晰度选择最适浓度，吐温-20的最适浓度为2％，背景更加清晰。

本实用新型的制造过程为：在4.0cm×2.2cm的塑料盒体11内填满吸水垫料13，盒盖12中央开一面积0.5cm²的椭圆形的反应孔15，孔下紧贴吸水垫料放置一小片硝酸纤维膜(孔径0.45μm)，膜中央点滴1μl可溶性虫卵抗原(用0.02mol/L PBS稀释)，抗原旁点滴0.5μl人IgG作为质控点，室温自然干燥2h，滴加封闭剂，干燥后密闭4℃保存备用。

检测时在反应装置1的中央的椭圆形的反应孔15内滴加2滴洗涤液，渗入后于反应孔15中央加25μl受检血清，待液体充分吸入，加2滴洗涤液，渗入后加4滴金标二抗，最后加2滴洗涤液，渗入后即可判断结果。如图3a-c所示，反应孔15中出现两个红色斑点为阳性，出现一个红色斑点为阴性，无斑点表示结果无效。

采用本实用新型对血吸虫病抗体诊断试剂国家参考品的测试结果，显示出阴阳性参考品的检测符合率均为100％，灵敏度为1:4，精密度测试10次均为阳性，显色均匀一致，均符合国家参考品的检测质量要求(见下表1)。参加由卫生部血吸虫病专家咨询委员会于2008年组织的中国血吸虫病免疫诊断试剂实验室测评工作，历经初筛和正式测评2个阶段。试剂盒的敏感性92％，特异性95.08％，Youden指数0.87，kappa值0.87，具有较好的重复性。

表1血吸虫病抗体诊断试剂国家参考品的测试结果

血清Sera	份数No.sera	阴性(数)No.negative	阳性(数)No.positive	符合率(％)Coincident rates
血清Sera	份数No.sera	阴性(数)No.negative	阳性(数)No.positive	符合率(％)Coincident rates	阴性参考品Negative reference sera	15	15	0	100

血清Sera	份数No.sera	阴性(数)No.negative	阳性(数)No.positive	符合率(％)Coincident rates
血清Sera	份数No.sera	阴性(数)No.negative	阳性(数)No.positive	符合率(％)Coincident rates	阳性参考品Positive reference sera	15	0	15	100
灵敏度参考品Detectable minimumreference sera	4(1:2～1:16)	＞1:8	≤1:4		阳性参考品Positive reference sera	15	0	15	100
灵敏度参考品Detectable minimumreference sera	4(1:2～1:16)	＞1:8	≤1:4		精密度参考品Precision reference sera	10	0	10

综上，本实用新型的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统设计巧妙，使用简便，成本降低，检测快速灵敏，检测效果准确可靠，适于现场大规模应用。

在此说明书中，本实用新型已参照其特定的实施例作了描述。但是，很显然仍可以作出各种修改和变换而不背离本实用新型的精神和范围。因此，说明书和附图应被认为是说明性的而非限制性的。

Claims

1.一种斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，包括反应装置，所述反应装置包括盒体、盒盖、吸水材料和反应膜，所述吸水材料位于所述盒体中，所述反应膜置于所述吸水材料上，所述盒盖盖在所述盒体上压住所述反应膜，所述盒盖上开有反应孔，裸露部分所述反应膜，所述反应孔为椭圆形反应孔。

2.根据权利要求1所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述椭圆形反应孔的容积是50μl，底面积为0.5cm²。

3.根据权利要求1所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述椭圆形反应孔设置在所述盒盖的中央。

4.根据权利要求1所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述反应膜是微孔膜。

5.根据权利要求4所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述微孔膜是硝酸纤维膜，所述硝酸纤维膜的孔径是0.45μm。

6.根据权利要求1所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述吸水材料的厚度为3mm～5mm。

7.根据权利要求1所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述吸水材料是吸水纸垫。

8.根据权利要求7所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述吸水纸垫为32层餐巾纸。

9.根据权利要求1所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述反应孔中的所述反应膜上包被可溶性虫卵抗原膜层、人IgG膜层和封闭剂层，所述可溶性虫卵抗原膜层和所述人IgG膜层位于所述封闭剂层中由所述封闭剂层隔开。

10.根据权利要求1所述的斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统，其特征在于，所述斑点免疫金渗滤法血吸虫病抗体检测系统还包括盛放洗涤液的第一试剂瓶和盛放显色液的第二试剂瓶。