CN112359009A - 一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，最后加入的壳多糖水溶液，继续反应，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值；将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，干燥冷冻处理，获得细胞载体。本发明制备方法简单，可操作性行强，材料获取简单，有利于降低细胞载体的生产成本，细胞载体基于壳多糖，提高了细胞的生存几率和生产时长，有利于细胞的转运和培养。
Description
技术领域
本发明涉及一种细胞保存技术领域，具体是一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体。
背景技术
载体指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子，三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。理想的药物载体除了具备适当的粒径及粒形、较高的载药率及包封率外，更重要的是可生物降解，毒性低甚至没有毒性，这就要求药物载体使用可生物降解型高分子材料，生物可降解材料成为国内外科研人员关注的重点，是近几十年来高分子材料领域的一大研究热点，生物可降解材料药物载体按其来源分类，可以分为人工合成的高分子聚合物体系和天然的高分子体系，如聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯/聚丙交酯共聚物(PLGA)、聚乙交酯(PGA)、聚己内酯(PCL)和聚丙交酯-聚己交酯(PLCL)等都属于人工合成的高分子聚合物；天然高分子材料可以分为多糖类、蛋白质类和其他类，用于载药系统的多糖类主要有壳聚糖、淀粉及海藻酸盐等，蛋白质类主要有明胶、清蛋白等。按照形态和类型，生物可降解材料载体的载药形式又可以分为溶胶与胶束、纳米囊与囊泡、纳米粒与纳米球等类型。此外，根据在体内的降解代谢途径，生物可降解材料载体又可被分为生物降解和非生物降解两种，生物降解型载体材料通过调节降解速率，进而可以控制所载药物或基因多肽的释放，受到越来越多的关注和研究。另外，近年来还出现了多功能的复合纳米载体，其构成包括纳米载体(高分子化物)、活性组分(治疗药物)、靶向分子(抗体)和聚乙二醇修饰成分等。比如多肽连接的金纳米粒，Farokhzad等用前列腺癌特异膜抗体连接PLGA纳米粒包载多西紫杉醇等。
壳多糖又称几丁质，为N-乙酰葡糖胺通过β连接聚合而成的结构同多糖，广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的甲壳和真菌的胞壁中,也存在于一些绿藻中，壳多糖一个N-氨基乙酰化的多聚化合物,主要来自于自然界壳类的动植物外壳如螃蟹和虾，壳多糖及其衍生物已被广泛应用，壳多糖通常以其N氨基乙酰化程度和/或者糖单元结构的聚合程度来表示其一些化学或物理特征.在一定程度上,DA代表着某一壳多糖骨架上自由氨基的数目多少,DA值越大,壳多糖骨架上自由氨基被乙酰化的百分比越大,自由氨基的百分率越低；DP代表着某一壳多糖分子的大小,DP值越大,说明该壳多糖分子是由更多的单糖分子构成,分子量更大；在一定质量时,壳多糖的DP越大,其所含的壳多糖分子个数越少，因此,在一定程度上DA和DP影响着壳多糖的物理化学性质和生物学活性。针对这种情况，现提出一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，降低细胞载体的生产成本，提高细胞载体的给药安全。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，本发明制备方法简单，可操作性行强，材料获取简单，有利于降低细胞载体的生产成本，细胞载体基于壳多糖，提高了细胞的生存几率和生产时长，有利于细胞的转运和培养，细胞载体免疫排斥反应概率小，避免了细胞培养中因为细胞载体的问题失败。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：
步骤一：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，20～45℃反应1～1.5h，最后加入1～3％的壳多糖水溶液，继续反应1～3h，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；
步骤二：将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值；
步骤三：将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，干燥冷冻处理，获得细胞载体。
进一步地，所述步骤一中处理溶液为甲醇溶液，搅拌速度为1000～1500rpm。
进一步地，所述步骤二中的调节pH为8.0～9.0。
进一步地，所述步骤三干燥冷冻处理为冷冻干燥机(-50～-60℃，18～20pa) 干燥20～30min。
本发明的有益效果：
1、本发明制备方法简单，可操作性行强，材料获取简单，有利于降低细胞载体的生产成本；
2、本发明细胞载体基于壳多糖，提高了细胞的生存几率和生产时长，有利于细胞的转运和培养；
3、本发明细胞载体免疫排斥反应概率小，避免了细胞培养中因为细胞载体的问题失败。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：
步骤一：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，20～45℃反应1～1.5h，最后加入1～3％的壳多糖水溶液，继续反应1～3h，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；
步骤二：将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值。
步骤三：将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，干燥冷冻处理，获得细胞载体；
步骤一中处理溶液为甲醇溶液，搅拌速度为1000～1500rpm。
步骤二中的调节pH为8.0～9.0。
步骤三干燥冷冻处理为冷冻干燥机(-50～-60℃，18～20pa)干燥20～30min，得到孔细胞载体颗粒。
实施例1
一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：
步骤一：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于甲醇溶液中，搅拌速度为1000rpm，搅拌过程中加入提取液，20℃反应1h，最后加入1％的壳多糖水溶液，继续反应1h，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；
步骤二：将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值，PH值为8.0。
步骤三：将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，冷冻干燥机-50℃，20pa 干燥30min，得到孔细胞载体颗粒。
实施例2
一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：
步骤一：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，35℃反应1.2h，最后加入2％的壳多糖水溶液，继续反应2h，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；
步骤二：将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值。
步骤三：将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，干燥冷冻处理，获得细胞载体。
步骤一中处理溶液为甲醇溶液，搅拌速度为1200rpm。步骤二中的调节pH 为9.0，步骤三干燥冷冻处理为冷冻干燥机(-55℃，19pa)干燥25min，得到孔细胞载体颗粒。
实施例3
一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：
步骤一：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，45℃反应1.5h，最后加入3％的壳多糖水溶液，继续反应3h，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；
步骤二：将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值。
步骤三：将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，干燥冷冻处理，获得细胞载体。
步骤一中处理溶液为甲醇溶液，搅拌速度为1500rpm，步骤二中的调节pH 为8.0，步骤三干燥冷冻处理为冷冻干燥机(-60℃，20pa)干燥30min，得到孔细胞载体颗粒。
实施例3
一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：
步骤一：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，25℃反应1.5h，最后加入3％的壳多糖水溶液，继续反应3h，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；
步骤二：将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值。
步骤三：将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，干燥冷冻处理，获得细胞载体；
步骤一中处理溶液为甲醇溶液，搅拌速度为1100rpm，步骤二中的调节pH 为8.0，步骤三干燥冷冻处理为冷冻干燥机-50，20pa干燥20～30min，得到孔细胞载体颗粒。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。
Claims (4)
1.一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，其特征在于，利用以下步骤制成：
步骤一：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，20～45℃反应1～1.5h，最后加入1～3％的壳多糖水溶液，继续反应1～3h，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；
步骤二：将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值；
步骤三：将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，干燥冷冻处理，获得细胞载体。
2.根据权利要求1所述的一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体,其特征在于，所述步骤一中处理溶液为甲醇溶液，搅拌速度为1000～1500rpm。
3.根据权利要求1所述的一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体,其特征在于，所述步骤二中的调节pH为8.0～9.0。
4.根据权利要求1所述的一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体,其特征在于，所述步骤三干燥冷冻处理为冷冻干燥机(-50～-60℃，18～20pa)干燥20～30min。
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|---|---|---|---|
| CN202011261513.XA CN112359009A (zh) | 2020-11-12 | 2020-11-12 | 一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体 |
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| CN202011261513.XA CN112359009A (zh) | 2020-11-12 | 2020-11-12 | 一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体 |
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| CN202011261513.XA Pending CN112359009A (zh) | 2020-11-12 | 2020-11-12 | 一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115252829A (zh) * | 2022-08-07 | 2022-11-01 | 山西省人民医院 | 一种能靶向肾癌给药超声造影剂的制备方法 |
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| WO1997003708A1 (fr) * | 1995-07-17 | 1997-02-06 | Aber Technologies S.A. | Pansement pour plaies chroniques, notamment escarres, en gel de chitine |
| CN109988314A (zh) * | 2019-04-04 | 2019-07-09 | 大连民族大学 | 一种超支化聚壳多糖及其制备方法和应用 |
-
2020
- 2020-11-12 CN CN202011261513.XA patent/CN112359009A/zh active Pending
Patent Citations (2)
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