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CN110862897A - 桑叶蚕蛹黄酒及制造工艺 - Google Patents

桑叶蚕蛹黄酒及制造工艺 Download PDF

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CN110862897A CN201911038959.3A CN201911038959A CN110862897A CN 110862897 A CN110862897 A CN 110862897A CN 201911038959 A CN201911038959 A CN 201911038959A CN 110862897 A CN110862897 A CN 110862897A
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silkworm
phosphate buffer
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耿敬章
李冬琴
杨萌
陈志远
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Shaanxi University of Technology
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Shaanxi University of Technology
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Abstract

本发明公开了桑叶蚕蛹黄酒，包含1～脱氧野尻霉素(DNJ)和总多糖，1～脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L，还公开了桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺、桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺。本发明的桑叶蚕蛹黄酒，包含桑叶和蚕蛹的全营养功能成分能够有效地对人体进行营养补充并兼具保健功能。

Description

桑叶蚕蛹黄酒及制造工艺
技术领域
本发明属于黄酒酿造技术领域，具体涉及桑叶蚕蛹黄酒，还涉及桑叶蚕蛹黄酒的制造工艺。
背景技术
黄酒是我国特产，与啤酒、葡萄酒并称为世界三大古酒，享有“国酒”之美誉。黄酒具有酒性柔顺、酒体丰满、酒味醇、营养丰富、低酒精度、能够食疗医疗等特点，非常适合现在社会新的消费价值趋向。与其他酒类相比，黄酒具有高营养、低酒精度、低粮耗的特点。黄酒除饮用外，也可用作烹饪料酒、制作其他药酒或补酒的原酒、中药辅料等。因黄酒加入酒药，其中很多成分具有抗氧化活性，有清除自由基的能力，减轻和消除机体内氧化应激，而且适当的饮酒具有保护心血管，促进血液循环，增加食欲的作用。《本草纲目》详载了69种药酒可治疾病，这69种药酒均以黄酒制成，以提高产品药效功能。因此，黄酒功能性的研究也逐渐成为人们的研究方向，不仅让人们对黄酒的功能性有了一定的认识，也对黄酒的推广有着促进作用。但是目前黄酒产品也存在品种单一，缺乏个性化特色产品，对黄酒代表性功能成分研究肤浅，功能评价没有具有定位，产品缺乏核心竞争力。随着人们生活水平的提高，可供选择的酒类产品也越来越多，传统的黄酒品种也越来越难以满足人们的需求。现代饮食发展趋势逐渐向功能性保健性转变，因此如何在传统黄酒制作工艺和品种的基础上，结合现代生物技术，制作营养更加丰富、兼具保健功能的新型黄酒，对于黄酒产业的发展至关重要。
桑叶是国家卫生部门批准的药食两用物品，其味苦、甘、寒，入肺经，煎汁代茶能止消渴。对人体具有补血、疏风、散风、清肝明目聪耳，降压利尿、降血脂等功效作用。桑叶中还含有1—脱氧野尻霉素(DNJ)、桑叶总多糖(TPM)等功效成分，它是人体小肠绒毛上的多种α～葡萄糖苷酶的抑制剂，能竞争性地阻断小肠粘膜细胞刷状缘内的麦芽糖酶和蔗糖酶等双糖水解酶，使摄食的多糖、寡糖和双糖消化成葡萄糖、果糖单糖的吸收过程受到阻止，从而降低血糖浓度，起到有效的降糖作用。目前，糖尿病已经成为危害人类健康的仅次于心脑血管疾病、癌，是占第三位的疾病。据资料报道，我国每年用于治疗糖尿病的医疗费将是惊人的。我国的饮食中碳水化合物主要成分是淀粉，淀粉和蔗糖(双糖)均不能直接被肠壁细胞吸收，需要在小肠绒毛上的多种α～葡萄糖苷酶的作用下生成单糖(葡萄糖及果糖)后才能被吸收。血浆中的血糖浓度则是以葡萄糖的浓度来计，桑叶中的功效成分对α～葡萄糖苷酶具有抑制作用，能阻止淀粉分解成为葡萄糖，继而降低血糖浓度，对治疗糖尿病及其并发症具有一定治疗作用。随着桑蚕产业的规模发展，桑叶及蚕蛹的精深加工利用成为关系桑蚕产业持续发展的紧迫问题。但传统的桑蚕产业对桑叶加工仅局限于代茶及药品原料，直接食用对于某些消费者来说可能存在甜味不足、口感略涩等问题，影响了桑叶的市场接受度。因此，提取桑叶中的有效营养成分，并与中国传统黄酒相结合，是充分发挥利用桑叶资源，提高桑叶价值的有效方法。
蚕蛹，是一种高蛋白的营养品，中医认为，蚕蛹性平味甘，具有祛风、健脾、止消渴、镇惊安神、益精助阳等功效。《备急千金要方》说它“益精气，强男子阳道，治泄精”，《本草纲目》记载“为末饮服，治小儿疮瘦，长肌，退热，除蛔虫煎汁饮，止消渴”。药理研究表明，蚕蛹对机体糖、脂肪代谢能起到一定的调整作用。但其蛋白质、多糖等功能成分因其复杂的长链结构，使通过食用形式的蚕蛹多糖、蛋白质等难以被人体吸收利用，同时，由于蛋白质、多糖类物质难溶于酒精中，传统的蚕蛹黄酒中往往并不含有蚕蛹多糖成分，造成蚕蛹中重要功能活性物质的浪费。因此，采用酶催化转化技术处理蚕蛹，使蚕蛹多糖、蛋白质等降解为可溶解于酒精饮料、并可被人体吸收利用的功能性蚕蛹多糖、氨基酸，是充分利用蚕蛹活性物质的重要方法，因此结合现代工业生物技术制作蚕蛹全营养黄酒，具有广阔的市场前景。
发明内容
本发明的第一个目的是提供桑叶蚕蛹黄酒，包含桑叶和蚕蛹的全营养功能成分能够有效地对人体进行营养补充并兼具保健功能。
本发明的第二个目的是提供桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺。
本发明的第三个目的是提供桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺。
本发明所采用的技术方案是，桑叶蚕蛹黄酒，包含1～脱氧野尻霉素(DNJ)和总多糖，1～脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L。
本发明的特点还在于，
桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液：
步骤2、制备蚕蛹酶解液；
步骤3、将桑叶酶解液、蚕蛹酶解液分别纯化；
步骤4、制备黄酒酒基，并将经步骤2纯化后的桑叶酶解液、蚕蛹酶解液与黄酒酒基调配，再采用欧姆加热进行杀菌制得配制型桑叶蚕蛹黄酒。
步骤1中制备桑叶酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤1.1、将适量桑叶在40～60℃下干燥至水分小于3％，再将干燥后的桑叶超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～～200nm的桑叶纳米粉；
步骤1.2、向桑叶纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，桑叶纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，复合酶的添加量为15～20活力单位/桑叶纳米粉(g)，复合酶由果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3的比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到桑叶酶解液。
步骤2中制备蚕蛹酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤2.1、将适量蚕蛹冷冻干燥至水分小于5％，再将干燥后的蚕蛹超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～200nm的蚕蛹纳米粉；
步骤2.2、向蚕蛹纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，蚕蛹纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，复合酶的添加量为15～20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，复合酶由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到蚕蛹酶解液。
步骤4中桑叶酶解液、蚕蛹酶解液、黄酒酒基的调配重量百分比为(1～10)：(1～5)：(1～20)，步骤4中制得的配制型桑叶蚕蛹黄酒的1～脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L。
桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，其特征在于，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液；
步骤2、制备蚕蛹酶解液；
步骤3、对黄酒酿造原料进行处理，再将桑叶酶解液、蚕蛹酶解液依次加入到处理好的黄酒酿造原料中得到液体混合物，将此液体混合物搅拌均匀进行发酵，发酵周期为7～10天；
步骤4、将发酵后的液体混合物压榨，再依次过滤、澄清、采用欧姆加热进行杀菌得到发酵型桑叶蚕蛹黄酒。
步骤1中制备桑叶酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤1.1、将适量桑叶在40～60℃下干燥至水分小于3％，再将干燥后的桑叶超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～200nm的桑叶纳米粉；
步骤1.2、向桑叶纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，桑叶纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，复合酶的添加量为15～20活力单位/桑叶纳米粉(g)，复合酶由果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3的比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到桑叶酶解液。
步骤2中制备蚕蛹酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤2.1、将适量蚕蛹冷冻干燥至水分小于5％，再将干燥后的蚕蛹超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～200nm的蚕蛹纳米粉；
步骤2.2、向蚕蛹纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，蚕蛹纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，复合酶的添加量为15～20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，复合酶由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到蚕蛹酶解液。
本发明的有益效果是：
(1)本发明通过酶催化转化技术，将蚕蛹的蚕蛹多糖和蚕蛹蛋白等降解成可溶于酒精饮料中的蚕蛹低聚糖和蚕蛹多肽，蚕蛹氨基酸等营养成分也得以充分释放和溶解，同时通过匀浆与催化降解，将桑叶中的蛋白质、维生素和微量元素等营养元素充分利用；
(2)本发明通过将两种匀浆酶解液以适当比例添加入黄酒原料中进行酿造，酿造过程中在微生物的发酵转化作用下，各种营养物质进一步得到释放和溶解，同时蚕蛹、桑叶和黄酒风味更加融合协调，成品具有独特的营养保健价值和饮用风味。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
本发明桑叶蚕蛹黄酒，包含1～脱氧野尻霉素(DNJ)和总多糖，1～脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L。
桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液：
步骤2、制备蚕蛹酶解液；
步骤3、将桑叶酶解液、蚕蛹酶解液分别纯化；
步骤4、制备黄酒酒基，并将经步骤2纯化后的桑叶酶解液、蚕蛹酶解液与黄酒酒基调配，再采用欧姆加热进行杀菌制得配制型桑叶蚕蛹黄酒。
步骤1中制备桑叶酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤1.1、将适量桑叶在40～60℃下干燥至水分小于3％，再将干燥后的桑叶超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～～200nm的桑叶纳米粉；
步骤1.2、向桑叶纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，桑叶纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，复合酶的添加量为15～20活力单位/桑叶纳米粉(g)，复合酶由果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3的比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到桑叶酶解液。
步骤2中制备蚕蛹酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤2.1、将适量蚕蛹冷冻干燥至水分小于5％，再将干燥后的蚕蛹超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～200nm的蚕蛹纳米粉；
步骤2.2、向蚕蛹纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，蚕蛹纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，复合酶的添加量为15～20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，复合酶由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到蚕蛹酶解液。
步骤4中桑叶酶解液、蚕蛹酶解液、黄酒酒基的调配重量百分比为(1～10)：(1～5)：(1～20)，步骤4中制得的配制型桑叶蚕蛹黄酒的1～
脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L。
桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液；
步骤2、制备蚕蛹酶解液；
步骤3、对黄酒酿造原料进行处理，再将桑叶酶解液、蚕蛹酶解液依次加入到处理好的黄酒酿造原料中得到液体混合物，将此液体混合物搅拌均匀进行发酵，发酵周期为7～10天；
步骤4、将发酵后的液体混合物压榨，再依次过滤、澄清、采用欧姆加热进行杀菌得到发酵型桑叶蚕蛹黄酒。
步骤1中制备桑叶酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤1.1、将适量桑叶在40～60℃下干燥至水分小于3％，再将干燥后的桑叶超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～～200nm的桑叶纳米粉；
步骤1.2、向桑叶纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，桑叶纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，复合酶的添加量为15～20活力单位/桑叶纳米粉(g)，复合酶由果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3的比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到桑叶酶解液。
步骤2中制备蚕蛹酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤2.1、将适量蚕蛹冷冻干燥至水分小于5％，再将干燥后的蚕蛹超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～200nm的蚕蛹纳米粉；
步骤2.2、向蚕蛹纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，蚕蛹纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，复合酶的添加量为15～20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，复合酶由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到蚕蛹酶解液。
步骤3中桑叶酶解液、蚕蛹酶解液、处理好的黄酒酿造原料的重量百分比为(1～10)：(1～5)：(1～20)。
步骤4中制得的发酵型桑叶蚕蛹黄酒的1～脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L。
实施例1
第一种桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液：将2kg桑叶40℃干燥至水分小于3％，将干燥的桑叶超微粉碎成2000目的超微粉，然后球磨成100nm的桑叶纳米粉，向桑叶纳米粉中加入pH7～8的0.02～0.08M磷酸盐缓冲液及复合酶，酶解15h，所述桑叶纳米粉与0.02～0.08M磷酸盐缓冲液的质量比为1：10，所述复合酶添加量为20活力单位/桑叶纳米粉(g)，所述复合酶为果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3比例混合，酶解结束后，离心取上清液，利用超滤膜分离收集分子量小于5000Da的液体，进一步通过大孔树脂及食品级活性炭纯化后得到桑叶酶解液；
步骤2、制备蚕蛹酶解液：将3kg蚕蛹冷冻干燥至水分小于1％，将冻干的蚕蛹超微粉碎成3000目的超微粉，然后用球磨粉碎机粉碎制得200nm的蚕蛹纳米粉，向蚕蛹纳米粉中加入pH7～8的0.02～0.08M磷酸盐缓冲液及复合酶，酶解20h，所述蚕蛹纳米粉与0.02～0.08M磷酸盐缓冲液的质量比为1:10，所述复合酶添加量为20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，所述复合酶为胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合，酶解结束后，离心取上清液，利用超滤膜分离收集分子量小于5000Da的液体，进一步通过大孔树脂及食品级活性炭纯化后得到蚕蛹酶解液；
步骤3、制备黄酒酒基：选取符合质量标准的糯米20kg，去杂、称重后，用清水浸泡后，捞出后蒸饭，冷却后加入质量分数8～10％的酒曲，按照选取的糯米量的100～150％的水充分拌匀后落缸，在20～28℃条件下进行前发酵10天左右。发酵结束后，进行压榨过滤澄清，得到的清液即为黄酒酒基；再纯化后的桑叶酶解液、蚕蛹酶解液与黄酒酒基按照的1:1:10比例调配，得到调配型桑叶蚕蛹黄酒，利用欧姆加热设备，在80℃条件下处理10min，进行杀菌，同时提高产品稳定性，过滤后得到成品桑叶蚕蛹黄酒。所得黄酒产品的1—脱氧野尻霉素(DNJ)含量0.19mg/L，总多糖含量350mg/L。
实施例2
第二种桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液：将2kg桑叶40℃干燥至水分小于3％，将干燥的桑叶超微粉碎成2000目的超微粉，然后球磨成100nm的桑叶纳米粉，向桑叶纳米粉中加入pH7～8的0.02～0.08M磷酸盐缓冲液及复合酶，酶解15h，所述桑叶纳米粉与0.02～0.08M磷酸盐缓冲液的质量比为1：10，所述复合酶添加量为20活力单位/桑叶纳米粉(g)，所述复合酶为果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3比例混合，酶解结束后，离心取上清液，利用超滤膜分离收集分子量小于5000Da的液体，进一步通过大孔树脂及食品级活性炭纯化后得到桑叶酶解液；
步骤2、制备蚕蛹酶解液：将3kg蚕蛹冷冻干燥至水分小于1％，将冻干的蚕蛹超微粉碎成3000目的超微粉，然后用球磨粉碎机粉碎制得200nm的蚕蛹纳米粉，向蚕蛹纳米粉中加入pH7～8的0.02～0.08M磷酸盐缓冲液及复合酶，酶解20h，所述蚕蛹纳米粉与0.02～0.08M磷酸盐缓冲液的质量比为1:10，所述复合酶添加量为20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，所述复合酶为胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合，酶解结束后，离心取上清液，利用超滤膜分离收集分子量小于5000Da的液体，进一步通过大孔树脂及食品级活性炭纯化后得到蚕蛹酶解液；
步骤3、制备黄酒酒基：选取符合质量标准的的糯米20kg，去杂、称重后，用清水浸泡后，捞出后蒸饭，冷却后加入质量分数8～10％的酒曲，按照选取的糯米量的100～150％的水充分拌匀后落缸，在20～28℃条件下进行前发酵10天左右。发酵结束后，进行压榨过滤澄清，得到的清液即为黄酒酒基；再将纯化后的桑叶酶解液、蚕蛹酶解液与黄酒酒基按照的1:1:10比例调配，再加入占黄酒酒基重量2％的苦瓜提取物，得到调配型桑叶蚕蛹黄酒，利用欧姆加热设备，在85℃条件下处理7min，进行杀菌，同时提高产品稳定性，过滤后得到成品桑叶蚕蛹黄酒。所得黄酒产品的1—脱氧野尻霉素(DNJ)含量0.16mg/L，总多糖含量375mg/L；苦瓜提取物的制备方法是：将苦瓜烘干，磨成粉末，加3～5倍重量份数的黄酒酒糟蒸馏酒回流提取3次，合并滤液，蒸干制成。
实施例3
第一种桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液：将2kg桑叶40℃干燥至水分小于3％，将干燥的桑叶超微粉碎成2000目的超微粉，然后球磨成100nm的桑叶纳米粉，向桑叶纳米粉中加入pH7～8的0.02～0.08M磷酸盐缓冲液及复合酶，酶解15h，所述桑叶纳米粉与0.02～0.08M磷酸盐缓冲液的质量比为1：10，所述复合酶添加量为20活力单位/桑叶纳米粉(g)，所述复合酶为果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3比例混合，酶解结束后，离心取上清液，利用超滤膜分离收集分子量小于5000Da的液体，进一步通过大孔树脂及食品级活性炭纯化后得到桑叶酶解液；
步骤2、制备蚕蛹酶解液：将3kg蚕蛹冷冻干燥至水分小于1％，将冻干的蚕蛹超微粉碎成3000目的超微粉，然后用球磨粉碎机粉碎制得200nm的蚕蛹纳米粉，向蚕蛹纳米粉中加入pH7～8的0.02～0.08M磷酸盐缓冲液及复合酶，酶解20h，所述蚕蛹纳米粉与0.02～0.08M磷酸盐缓冲液的质量比为1:10，所述复合酶添加量为20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，所述复合酶为胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合，酶解结束后，离心取上清液，利用超滤膜分离收集分子量小于5000Da的液体，进一步通过大孔树脂及食品级活性炭纯化后得到蚕蛹酶解液；
步骤3、选取符合质量标准的的糯米20kg，去杂、称重后，用清水浸泡后，捞出后蒸饭，冷却后加入质量分数8～10％的酒曲，分别加入1kg蚕蛹酶解液、1kg桑叶酶解液及选取的糯米量的100～150％的水充分拌匀后落缸，在20～28℃条件下进行前发酵10天左右；
步骤4、发酵结束后，进行压榨过滤澄清，得到发酵型桑叶蚕蛹黄酒，利用欧姆加热设备，在85℃条件下处理5min进行杀菌，同时提高产品稳定性，过滤后得到成品桑叶蚕蛹黄酒。
经品评鉴定，发酵型桑叶蚕蛹黄酒酒香醇厚，无蚕蛹腥味及桑叶的蒸煮味。所得黄酒产品1—脱氧野尻霉素(DNJ)含量0.17mg/L，总多糖含量360mg/L。
实施例4
第二种桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液：将2kg桑叶40℃干燥至水分小于3％，将干燥的桑叶超微粉碎成2000目的超微粉，然后球磨成100nm的桑叶纳米粉，向桑叶纳米粉中加入pH7～8的0.02～0.08M磷酸盐缓冲液及复合酶，酶解15h，所述桑叶纳米粉与0.02～0.08M磷酸盐缓冲液的质量比为1：10，所述复合酶添加量为20活力单位/桑叶纳米粉(g)，所述复合酶为果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3比例混合，酶解结束后，离心取上清液，利用超滤膜分离收集分子量小于5000Da的液体，进一步通过大孔树脂及食品级活性炭纯化后得到桑叶酶解液；
步骤2、制备蚕蛹酶解液：将3kg蚕蛹冷冻干燥至水分小于1％，将冻干的蚕蛹超微粉碎成3000目的超微粉，然后用球磨粉碎机粉碎制得200nm的蚕蛹纳米粉，向蚕蛹纳米粉中加入pH7～8的0.02～0.08M磷酸盐缓冲液及复合酶，酶解20h，所述蚕蛹纳米粉与0.02～0.08M磷酸盐缓冲液的质量比为1:10，所述复合酶添加量为20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，所述复合酶为胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合，酶解结束后，离心取上清液，利用超滤膜分离收集分子量小于5000Da的液体，进一步通过大孔树脂及食品级活性炭纯化后得到蚕蛹酶解液；
步骤3、选取符合质量标准的的糯米20kg，去杂、称重后，用清水浸泡后，捞出后蒸饭，冷却后加入质量分数8～10％的酒曲，分别加入1kg蚕蛹酶解液1kg、桑叶酶解液、0.2kg苦瓜干粉及选取的糯米量的100～150％的水充分拌匀后落缸，在20～28℃条件下进行前发酵10天左右；
步骤4、发酵结束后，进行压榨过滤澄清，得到发酵型桑叶蚕蛹黄酒，利用欧姆加热设备，在83℃条件下处理9min，进行杀菌，同时提高产品稳定性，过滤后得到成品桑叶蚕蛹黄酒。
经品评鉴定，发酵型桑叶蚕蛹黄酒酒香醇厚，无蚕蛹腥味及桑叶的蒸煮味。所得黄酒产品1—脱氧野尻霉素(DNJ)含量0.15mg/L，总多糖含量380mg/L。
桑叶黄酒功效实验验证：
(1)桑叶蚕蛹黄酒缓解小鼠运动疲劳实验
将100只小鼠随机分成5组，每组20只，第一组为空白对照组(灌胃2.5g/kg生理盐水)，第二、三、四、五组为桑叶蚕蛹黄酒组(灌胃2.5g/kg桑叶蚕蛹黄酒)，第二、三、四、五组分别对应灌胃实施例1、2、3、4制备得到的桑叶蚕蛹黄酒，每天灌胃1次，连续灌胃20天，在第20天对每组小鼠给药1h后，于小鼠尾根部缠上其体质量5％的铅块，并将小鼠置于水深25cm、水温25士0.5℃的恒温水浴箱中，记录小鼠从入水至力竭沉入水中持续9s不浮出水面的时间，作为小鼠的负重运动时间。经测定，第一组小鼠的平均负重游泳时间为5.12士0.34min，第二组小鼠的平均负重游泳时间为7.16士0.23min；第三组小鼠的平均负重游泳时间为8.01士0.15min；第四组小鼠的平均负重游泳时间为8.05士0.27min；第五组小鼠的平均负重游泳时间为8.17士0.30min。结果表明，本发明桑叶蚕蛹黄酒可有效缓解小鼠运动疲劳，显著延长小鼠的平均负重游泳时间。
(2)桑叶蚕蛹黄酒降血糖实验
采用胰岛素损伤高血糖动物模型：通过注射四氧嘧啶造模，血糖值10～25mmol/L为高血糖模型。实验设四个实施例组(第一实施例组用实施例1桑叶蚕蛹黄酒，第二实施例组用实施例2桑叶蚕蛹黄酒，第三实施例组用实施例3桑叶蚕蛹黄酒，第四实施例组用实施例4桑叶蚕蛹黄酒，均为3.0g/kg)和一个模型组(为高血糖动物模型)，同时设定空白对照组(正常动物)，每组15只小鼠，受试样品给予时间30天，测空腹血糖值，比较剂量组和模型对照组动物血糖值及下降百分率。结果表明：第一实施例组空腹血糖下降12.3％；第二实施例组空腹血糖下降14.2％；第三实施例组空腹血糖下降14.9％；第四实施例组空腹血糖下降15.1％；空白对照组空腹血糖下降～0.23％；模型组空腹血糖下降～0.23％。表明模型组与空白对照组实验前后血糖值无显著差异(P≥0.05)，判定实验成立。实施例组实验前后血糖值有有显著差异(P≤0.05)，判断四个实施例组对实验动物血糖下降具有改善作用，桑叶蚕蛹黄酒具有降血糖功效。
(4)桑叶蚕蛹黄酒降血脂实验
采用胰岛素抵抗，糖\脂代谢紊乱模型实验模型。实验设四个实施例组(第一实施例组用实施例1桑叶蚕蛹黄酒，第二实施例组用实施例2桑叶蚕蛹黄酒，第三实施例组用实施例3桑叶蚕蛹黄酒，第四实施例组用实施例4桑叶蚕蛹黄酒，均为3.0g/kg)和一个模型组(为高血脂动物模型)，同时设定空白对照组(正常动物)，每组15只，空白对照组不做处理，模型组给予同体积溶剂。禁食3～4小时，检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯水平(TG)。比较实施例组和模型组动物血清总胆固醇(TC)、甘油三酯水平(TG)及下降百分率。结果表明：第一实施例组TC下降11.3％，TG下降18.2％；第二实施例组TC下降13.4％，TG下降19.5％；第三实施例组TC下降14.3％，TG下降19.2％；第四实施例组TC下降14.8％，TG下降19.8％；空白对照组TC下降2.3％，TG下降～1.2％；模型组TC下降3.0％，TG下降～1.3％。表明剂量组实验前后血糖下降百分率对比模型和空白组有显著差异，判断四个实施例组对实验动物血脂下降具有改善作用，桑叶蚕蛹黄酒具有降血脂功效。
(5)桑叶蚕蛹黄酒缓解消化不良实验
选取100名消化不良患者，症状包括上腹部疼痛、胃胀、烧心、暖气、胸闷、胃饱、腹胀。年龄在25一40岁。服用本发明实施例1～4的桑叶蚕蛹黄酒50mL，每天1次，观察疗效，疗效分为治愈：上腹部疼痛、胃胀、烧心、暖气、胸闷、胃饱、腹胀等症状全部消失；有效：上腹部疼痛消失，其他症状明显改变；无效：临床症状无变化。服用上述桑叶蚕蛹黄酒100天后，实施例1的有效率为60％，治愈率为51％；实施例2的有效率为80％，治愈率为70％；实施例3的有效率为82％，治愈率为73％；实施例4的有效率为85％，治愈率为76％。
本发明将现代定向酶解技术与传统黄酒发酵技术进行结合，有效利用了蚕蛹中的功效物质和桑叶中的营养成分，实现了两种原料的全利用。所制备的桑叶蚕蛹黄酒富含蚕蛹低聚糖、蚕蛹多肽、蚕蛹氨基酸、1—脱氧野尻霉素(DNJ)、桑叶总多糖(TPM)、维生素、微量元素等等功效成分，有效提升了传统黄酒的营养价值和保健功效，更适合于消费者的日常饮用，并具有抗疲劳、降血糖、降血脂，增强免疫力等功效。

Claims (10)

1.桑叶蚕蛹黄酒，其特征在于，包含1～脱氧野尻霉素(DNJ)和总多糖，1～脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L。
2.桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺，其特征在于，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液：
步骤2、制备蚕蛹酶解液；
步骤3、将桑叶酶解液、蚕蛹酶解液分别纯化；
步骤4、制备黄酒酒基，并将经步骤2纯化后的桑叶酶解液、蚕蛹酶解液与黄酒酒基调配，再采用欧姆加热进行杀菌制得配制型桑叶蚕蛹黄酒。
3.根据权利要求2所述的桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺，其特征在于，所述步骤1中制备桑叶酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤1.1、将适量桑叶在40～60℃下干燥至水分小于3％，再将干燥后的桑叶超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～～200nm的桑叶纳米粉；
步骤1.2、向所述桑叶纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，所述桑叶纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，所述磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，所述复合酶的添加量为15～20活力单位/桑叶纳米粉(g)，所述复合酶由果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3的比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到桑叶酶解液。
4.根据权利要求2所述的桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺，其特征在于，所述步骤2中制备蚕蛹酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤2.1、将适量蚕蛹冷冻干燥至水分小于5％，再将干燥后的蚕蛹超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～200nm的蚕蛹纳米粉；
步骤2.2、向所述蚕蛹纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，所述蚕蛹纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，所述磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，所述复合酶的添加量为15～20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，所述复合酶由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到蚕蛹酶解液。
5.根据权利要求2所述的桑叶蚕蛹黄酒的配制型制造工艺，其特征在于，所述步骤4中桑叶酶解液、蚕蛹酶解液、黄酒酒基的调配重量百分比为(1～10)：(1～5)：(1～20)，所述步骤4中制得的配制型桑叶蚕蛹黄酒的1～脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L。
6.桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，其特征在于，具体按照以下步骤实施：
步骤1、制备桑叶酶解液；
步骤2、制备蚕蛹酶解液；
步骤3、对黄酒酿造原料进行处理，再将桑叶酶解液、蚕蛹酶解液依次加入到处理好的黄酒酿造原料中得到液体混合物，将此液体混合物搅拌均匀进行发酵，发酵周期为7～10天；
步骤4、将发酵后的液体混合物压榨，再依次过滤、澄清、采用欧姆加热进行杀菌得到发酵型桑叶蚕蛹黄酒。
7.根据权利要求6所述的桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，其特征在于，所述步骤1中制备桑叶酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤1.1、将适量桑叶在40～60℃下干燥至水分小于3％，再将干燥后的桑叶超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～～200nm的桑叶纳米粉；
步骤1.2、向所述桑叶纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，所述桑叶纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，所述磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，所述复合酶的添加量为15～20活力单位/桑叶纳米粉(g)，所述复合酶由果胶酶和纤维素酶按活力单位1:3的比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到桑叶酶解液。
8.根据权利要求6所述的桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，其特征在于，所述步骤2中制备蚕蛹酶解液具体按照以下步骤实施：
步骤2.1、将适量蚕蛹冷冻干燥至水分小于5％，再将干燥后的蚕蛹超微粉碎成500～5000目的超微粉，然后球磨粉碎成50～200nm的蚕蛹纳米粉；
步骤2.2、向所述蚕蛹纳米粉中添加磷酸盐缓冲液、复合酶进行酶解12～36h，所述蚕蛹纳米粉与磷酸盐缓冲液的质量比为1:5～10，所述磷酸盐缓冲液的pH为7～8、摩尔质量为0.02～0.08M，所述复合酶的添加量为15～20活力单位/蚕蛹纳米粉(g)，所述复合酶由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按活力单位3:2比例混合而成，待酶解结束后，离心得到上清液I，将上清液I通过超滤膜分离并收集得到分子量小于5000Da的上清液II，再将上清液II依次通过大孔树脂、食品级活性炭纯化，得到蚕蛹酶解液。
9.根据权利要求6所述的桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，其特征在于，所述步骤3中桑叶酶解液、蚕蛹酶解液、处理好的黄酒酿造原料的重量百分比为(1～10)：(1～5)：(1～20)。
10.根据权利要求6所述的桑叶蚕蛹黄酒的发酵型制造工艺，其特征在于，所述步骤4中制得的发酵型桑叶蚕蛹黄酒的1～脱氧野尻霉素(DNJ)含量不小于0.15mg/L，总多糖含量≥300mg/L。
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