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CN119173278A - 抗体偶联药物及其用途 - Google Patents

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CN119173278A CN202380039289.5A CN202380039289A CN119173278A CN 119173278 A CN119173278 A CN 119173278A CN 202380039289 A CN202380039289 A CN 202380039289A CN 119173278 A CN119173278 A CN 119173278A
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傅燕文
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Weishuo Co
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Abstract

尤其提供了包含新型喜树碱衍生物毒素的抗体偶联药物(ADC)。进一步公开了用于使用本文所提供的ADC治疗癌症的药物组合物和方法。

Description

抗体偶联药物及其用途
本申请要求于2022年3月10日提交的美国临时专利申请第63/318,693号的优先权的权益，所述美国临时专利申请出于所有目的以引用方式整体并入本文。
贯穿本申请，引用了各种出版物、专利和/或专利申请。所述出版物、专利和/或专利申请的公开内容特此以引用方式整体并入本申请中，以便更充分地描述本公开所涉及的领域的现状。
技术领域
本公开涉及新型喜树碱衍生物化合物、喜树碱衍生物-连接子化合物、包含所述新型喜树碱衍生物毒素的抗体偶联药物(ADC)及其制备方法。本文还提供了使用本文所描述的ADC治疗癌症的方法。
背景技术和发明内容
抗体偶联药物(ADC)允许将药物部分靶向递送到肿瘤，并且在一些实施方式中，允许其在其中的细胞内累积，其中全身施用未经缀合的药物可能导致对正常细胞的不可接受的毒性水平(Polakis P.(2005)《药理学最新观点(Current Opinion in Pharmacology)》5:382-387)。ADC是靶向化疗分子，所述靶向化疗分子通过将有效细胞毒性药物靶向表达抗原的肿瘤细胞而组合抗体和细胞毒性药物两者的特性(Teicher,B.A.(2009)《当前癌症药物靶标(Current Cancer Drug Targets)》9:982-1004)，由此通过使功效最大化和使脱靶毒性最小化来增强治疗指数(Carter,P.J.和Senter P.D.(2008)《癌症杂志(The CancerJour.)》14(3):154-169；Chari,R.V.(2008)《化学研究述评(Acc.Chem.Res.)》41:98-107。
本公开提供了包含单克隆抗体的ADC，所述单克隆抗体通过连接子部分与喜树碱衍生物毒素缀合。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗HER2抗体。在实施方式中，所述抗HER2抗体与表达HER2的癌细胞结合并允许将ADC选择性摄取到癌细胞中。在实施方式中，本文所提供的ADC选择性地将有效量的喜树碱衍生物毒素递送到肿瘤组织并减少与相关ADC相关的非特异性毒性。本文所描述的ADC化合物包含具有抗癌活性的化合物。
跨膜受体酪氨酸激酶的ErbB家族的成员是细胞生长、分化和存活的重要介体。所述受体家族包括四个不同成员，包括表皮生长因子受体(EGFR或ErbB1)、HER2(ErbB2或p185neu)、HER3(ErbB3)和HER4(ErbB4或tyro2)。同源二聚体和异源二聚体两者由EGFR家族的四个成员形成，其中HER2是用于其它ErbB受体的优选且最有效的二聚化配偶体(Graus-Porta等人,1997,《欧洲分子生物学组织(Embo)》3(16):1647-1655；Tao等人,2008,《细胞科学杂志(J.Cell Sci.)》121:3207-3217)。HER2不具有已知配体，但是当过表达时可以通过同源二聚化或通过与其它配体占据的ErbB受体异源二聚化来激活。
HER2基因在20-30％的早期乳腺癌中扩增，这使得此类癌症在细胞膜中过表达表皮生长因子(EGF)受体(Bange等人,《自然医学(Nature Medicine)》7(5):548-552)。除了乳腺癌之外，HER2表达还与其它人癌类型相关，包括非小细胞肺癌、卵巢癌、胃癌、前列腺癌、膀胱癌、结肠癌、食管癌和头颈部鳞状细胞癌(Garcia de Palazzo等人,1993,《国际生物标志物杂志(Int.J.Biol.Markers)》8:233-239；Ross等人,2003,《肿瘤学家(Oncologist)》8:307-325；Osman等人,2005,《泌尿学杂志(J.Urol.)》174:2174-2177；Kapitanovic等人,1997,《肠胃病学(Gastroenterology)》112:1103-1113；Turken等人,2003,《赘生物(Neoplasma)》50:257-261；和Oshima等人,2001,《国际生物标志物杂志》16:250-254)。
喜树碱(CPT)是一种从喜树(Camptotheca acuminta)(一种天然生长在中国的树)中分离出的细胞毒性喹啉生物碱。CPT在20世纪60年代被发现(Wall M.E.等人,1966,《美国化学学会杂志(J.Am.Chem.Soc.)》88:3888-3890)。喜树碱的抗肿瘤活性取决于对拓扑异构酶-I(TOPO 1)的高度特异性抑制。酶TOPO 1切割双链DNA的一条链，部分地解开DNA，并且然后使所述链重退火以减轻张力。喜树碱和其衍生物与TOPO 1/DNA复合物结合以防止重退火，所述重退火由于经部分切割的DNA的累积而可能引起细胞死亡(Hsiang Y.H.等人,1985,《生物化学杂志(J.Biol.Chem.)》260:14873-14878)。
喜树碱的临床应用由于其低溶解度以及严重副作用而受到限制(Joerger M.等人,2015,《英国临床药理学杂志(Br.J.Clin.Pharmacol.)》80:128-138；Joerger M.等人,2015,《研究性新药(Invest.New Drugs)》33:472-479)。为了克服这些缺点，迄今为止已经开发了若干种喜树碱衍生物，包括拓扑替康(topotecan)(9-二甲基氨基-10-羟基喜树碱；TPT)和伊立替康(irinotecan)(7-乙基-10-[4-(1-哌啶基)-1-哌啶基]羰基氧基喜树碱；CPT-11)(Naumczuk B.等人,2017,《化学中的磁共振(Magn.Reason.Chem.)》55:128-136；Hamilton G.等人,2014,《分子(Molecules)》19:2077-2088)。美国食品和药品管理局(TheUS Food and Drug Administration)已经批准这些CPT衍生物用于卵巢癌和结肠癌治疗(Vladu等人,2000,《分子药理学(Mol.Pharmacol.)》57:243-251；Chazin等人,2014,《药物化学短评(Mini Rev.Med.Chem.)》14:953-962)。
另一种喜树碱衍生物是依喜替康(exatecan)，其是喜树碱的水溶性衍生物(美国专利第10,195,288号、第8,575,188号)。与目前在临床环境中使用的伊立替康不同，通过酶进行的激活是不必要的。Dxd是另一种有用的喜树碱衍生物。
许多喜树碱药物在临床上得到广泛应用，并且主要适应症是骨癌、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、食管癌、子宫内膜癌等(Iqbal等人,2014,《国际分子生物学(Mol.Biol.Int.)》2014)。喜树碱药物在血浆中的半衰期短，并且在临床使用中维持药物功效要求增加的剂量或增加的施用频率，因此可能引起患者的耐受性问题。因此，需要经改进的喜树碱药物。
一方面，本文提供了一种包含单克隆抗体的抗体偶联药物(ADC)。另一方面，本文提供了制备包含单克隆抗体的ADC的方法。另一方面，本文提供了用于使用本文所公开的ADC治疗癌症(如表达HER2的癌症)的方法。此外，本文提供了新型药物-连接子化合物。
在实施方式中，本公开提供了一种抗体偶联药物(ADC)，所述ADC具有与HER2靶标结合的IgG抗体，所述IgG抗体在所述IgG抗体的一个或多个半胱氨酸位点处缀合。在实施方式中，本公开提供了一种抗体偶联药物(ADC)，所述ADC具有与HER2靶标结合的IgG抗体，所述IgG抗体在所述IgG抗体的一个或多个赖氨酸位点处缀合。在实施方式中，本公开提供了一种抗体偶联药物(ADC)，所述ADC具有与HER2靶标结合的经修饰的IgG抗体。本公开进一步提供了一种用于治疗乳腺癌、转移性乳腺癌或非小细胞肺癌的方法，所述方法包括提供有效量的HER2 ADC。
一方面，本文提供了一种式(I)或式(II)的抗体偶联药物(ADC)或其药学上可接受的盐，其中Ab是单克隆抗体；m是1至8的整数；L1是与所述单克隆抗体结合的连接子；L2是键、-C(O)-、-NH-、氨基酸单元、–(CH2CH2O)n–、–(CH2)n–、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(C(O)CH2CH2NH)–、–(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))–、-O-或其任何组合；其中n是1至24的整数；每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基；L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基或经取代或未经取代的亚杂芳基；经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接；R1是经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；D是并且D'是其中D'通过其酰胺基与R1连接并且通过氧与L2连接。
一方面，本文提供了一种治疗有需要的受试者中表达HER2的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用本文所描述的ADC(包括在方面、实施方式、表、实施例或权利要求中)或其药学上可接受的盐。
一方面，本文提供了一种制备式(I)或式(II)的抗体偶联药物(ADC)或其药学上可接受的盐的方法，所述方法包括使抗HER2抗体或经修饰的抗体与式(P-I)B-L2-L3-D或式(P-II)B-L2-D′-R1的分子或其药学上可接受的盐反应，其中B是能够与单克隆抗体形成键的反应性部分；L2是键、-C(O)-、-NH-、氨基酸单元、–(CH2CH2O)n–、–(CH2)n–、–(4-氨基苄氧羰基)–、-O-、–(C(O)CH2CH2NH)–、–(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))–或其任何组合；其中n是1至24的整数；每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基；L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基、经取代或未经取代的亚杂芳基、经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接；R1是经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；D是并且D'是其中D'通过其酰胺基与R1连接并且通过氧与L2连接。
另一方面，本文提供了一种式(III)化合物：或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)、经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)、经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)。
一方面，本文提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含本文所描述的ADC或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。
在本文所公开的任何实施方式中，所述单克隆抗体可以是抗HER2抗体。
附图说明
图1示出了喜树碱衍生物在SkBr-3(HER2+)细胞(图1A)和MDA-MB-468(HER2-)细胞(图1B)中的体外功效研究的结果。
图2示出了在体外功效研究中使用的喜树碱衍生物的化学结构(参见图1A和图1B)。
图3示出了抗HER2抗体连接的喜树碱衍生物(ADC)在SkBr-3(HER2+)细胞(图3A)和MDA-MB-468(HER2-)细胞(图3B)中的体外功效研究的结果。
图4示出了抗HER2抗体连接的喜树碱衍生物(ADC)在SkBr-3(HER2+)细胞(图4A)和MDA-MB-468(HER2-)细胞(图4B)中的体外功效研究的结果。
图5示出了喜树碱衍生物在SkBr-3(HER2+)细胞(图5A)和MDA-MB-468(HER2-)细胞(图5B)中的体外功效研究的结果。
图6示出了在体外功效研究中使用的喜树碱衍生物的化学结构(参见图5A和图5B)。
图7示出了抗HER2抗体连接的喜树碱衍生物(ADC)在SkBr-3(HER2+)细胞(图7A)、MDA-MB-468(HER2-)细胞(图7B)和NCI-N87(HER2+)细胞(图7C)中的体外功效研究的结果。
图8示出了在Nu/Nu裸小鼠中的NCI-N87异种移植物中抗HER2抗体连接的喜树碱衍生物(ADC)的体内功效研究的结果，其中将小鼠用3mg/kg或10mg/kg ADC(或对照)静脉内处理一次。图8A显示了肿瘤体积作为时间的函数。图8B顶部图显示了肿瘤体积作为来自图8A的所选择的ADC治疗(仅3mg/kg治疗)的时间的函数。底部图显示了肿瘤体积作为来自图8A的所选择的ADC治疗的时间的函数。图8C显示了肿瘤体积的百分比变化作为时间的函数(图8A的相同实验)。
图9示出了在Nu/Nu裸小鼠中的NCI-N87异种移植物中抗HER2抗体连接的喜树碱衍生物(ADC)的体内功效研究的结果，其中将小鼠用3mg/kg或10mg/kg ADC(或对照)静脉内处理一次。图9A显示了肿瘤体积作为时间的函数。图9B显示了肿瘤体积的百分比变化作为时间的函数(图9A的相同实验)。
具体实施方式
定义：
除非另外定义，否则本文所使用的技术和科学术语具有本领域的普通技术人员通常理解的含义。通常，与本文所描述的细胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学、转基因细胞产生、蛋白质化学和核酸化学以及杂交的技术有关的术语在本领域中是熟知的且通常使用的。除非另外说明，否则通常根据本领域中熟知以及如在本文中引用和讨论的各个一般和更具体的参考文献中所描述的常规程序进行本文所提供的方法和技术。参见例如，Sambrook等人《分子克隆：实验室手册(Molecular Cloning:A LaboratoryManual)》,第2版,纽约冷泉港的冷泉港实验室出版社(Cold Spring Harbor LaboratoryPress,Cold Spring Harbor,N.Y.)(1989)，和Ausubel等人,《分子生物学实验指南(Current Protocols in Molecular Biology)》,格林出版协会(Greene PublishingAssociates)(1992)。许多基础文本描述了标准抗体产生过程，包括Borrebaeck(编辑)《抗体工程化(Antibody Engineering)》,第2版纽约的弗里曼公司(Freeman and Company,NY),1995；McCafferty等人《抗体工程化实用方法(Antibody Engineering,A PracticalApproach)》英国牛津的牛津出版社IRL(IRL at Oxford Press,Oxford,England),1996；和Paul(1995)《抗体工程化方案(Antibody Engineering Protocols)》新泽西托托瓦的哈门那出版社(Humana Press,Towata,N.J.),1995；Paul(编辑),《基础免疫学(FundamentalImmunology)》,纽约的瑞文出版社(Raven Press,N.Y),1993；Coligan(1991)《当代免疫学实验指南(Current Protocols in Immunology)》纽约的威利/格林(Wiley/Greene,NY)；Harlow和Lane(1989)《抗体：实验室手册(Antibodies:A Laboratory Manual)》纽约的冷泉港出版社(Cold Spring Harbor Press,NY)；Stites等人(编辑)《基础和临床免疫学(Basicand Clinical Immunology)》(第4版)加利福尼亚州洛思阿图斯的朗格医学出版物(LangeMedical Publications,Los Altos,Calif.)以及其中引用的参考文献；《编码单克隆抗体：原理与实践(Coding Monoclonal Antibodies:Principles and Practice)》(第2版)纽约州纽约市的学术出版社(Academic Press,New York,N.Y.),1986，以及Kohler和Milstein《自然(Nature)》256:495-497,1975。本文中所引用的参考文献中的所有参考文献以引用方式整体并入本文。酶促反应和富集/纯化技术也是熟知的并且如本领域通常实现的或如本文所描述的根据制造商的说明书进行。与本文所描述的分析化学、有机合成化学以及医药和药物化学结合使用的术语以及实验室程序和技术在本领域中是熟知的且通常使用的。标准技术可以用于化学合成、化学分析、药物制剂、调配物和递送以及对患者的治疗。
本文所提供的标题不是对本公开的各个方面的限制，所述方面可以通过整体参考本说明书来理解。
除非本文中上下文另外要求，否则单数术语应包括复数含义，并且复数术语应包括单数含义。除非明确地且肯定地限于一个指示物，否则单数形式“一个(a)”、“一种(an)”和“所述(the)”和任何词的单数用途包括多个指示物。
应理解，替代方案(例如，“或”)在本文中的使用用于意指替代方案中的任一个或两个或其任何组合。
本文所使用的术语“和/或”将被视为意指在具有或不具有另一者的情况下明确公开了指定特征或组分中的每个特征或组分。例如，本文中在如“A和/或B”等短语中使用的术语“和/或”旨在包括“A和B”、“A或B”、“A”(单独)和“B”(单独)。同样，在如“A、B和/或C”等短语中使用的术语“和/或”旨在涵盖以下方面中的每个方面：A、B和C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A和C；A和B；B和C；A(单独)；B(单独)；以及C(单独)。
如本文所使用的，术语“约(about)”是指如由本领域的普通技术人员所确定的在具体值或组成的可接受误差范围内的值或组成，这将部分地取决于如何测量或确定值或组成，即，测量系统的限制。例如，根据本领域的实践，“约”或“大约(approximately)”可以意指在一个或大于一个标准偏差内。可替代地，根据测量系统的限制，“约”或“大约”可以意指至多10％(即，±10％)或更多的范围。例如，约5mg可以包括介于4.5mg与5.5mg之间的任何数字。此外，具体参考生物系统或过程，该术语可以意指至多一个数量级或至多值的5倍。当在本公开中提供了具体值或组成时，除非另外陈述，否则“约”或“大约”的含义应被假定为在所述具体值或组成的可接受误差范围内。在实施方式中，约包括指定值。
在本公开中，“包括(comprises)”、“包括(comprising)”、“含有(containing)”和“具有(having)”等可以具有在美国专利法中赋予其的含义并且可以指“包含(includes)”、“包含(including)”等。“基本上由…组成(consisting essentially of或consistsessentially)”同样具有美国专利法中赋予的含义并且该术语是开放性的，从而允许超出所叙述的存在，只要所叙述的基本或新颖特征不被超出所叙述的存在改变，但是排除现有技术实施方式。
术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”以及本文所使用的其它相关术语可互换地用于指代氨基酸残基的聚合物，其中在实施方式中，所述聚合物可以与不由氨基酸组成的部分缀合。该术语适用于其中一个或多个氨基酸残基是对应的天然存在的氨基酸的人造化学模拟物的氨基酸聚合物，以及适用于天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。“融合蛋白”是指编码重组地表达为单个部分的两个或更多个单独蛋白质序列的嵌合蛋白质。多肽包括已经历切割的成熟分子。这些术语涵盖天然和人工蛋白质、蛋白质片段和蛋白质序列的多肽类似物(如突变蛋白、变体、嵌合蛋白和融合蛋白)以及翻译后或以其它方式共价或非共价修饰的蛋白质。两个或更多个多肽(例如，3条多肽链)可以通过共价和/或非共价缔合彼此缔合以形成多聚体多肽复合物(例如，多特异性抗原结合蛋白质复合物)。多肽链的缔合还可以包括肽折叠。因此，多肽复合物可以是二聚体、三聚体、四聚体或更高阶复合物，这取决于形成复合物的多肽链的数量。
如本文所使用的，术语“癌症”、“赘生物”和“肿瘤”可互换使用，并且呈单数或复数形式，是指经历了恶性转化的细胞，所述恶性转化使得它们对宿主生物体是病理性的。通过成熟的技术，特别是组织学检查，可以容易地将原发性癌细胞与非癌细胞区分开。如本文所使用的，癌细胞的定义不仅包括原代癌细胞，还包括源自癌细胞祖先的任何细胞。这包括转移的癌细胞，以及源自癌细胞的体外培养物和细胞系。当提及通常表现为实体瘤的一种类型的癌症时,“可临床检测到的”肿瘤是基于肿瘤质量可检测的肿瘤；例如通过如计算机断层扫描(CT)扫描、磁共振成像(MRI)、X射线、超声波或体检触诊等程序，和/或由于可从患者获得的样品中的一种或多种癌症特异性抗原的表达而可检测的肿瘤。
术语“癌症”是指在哺乳动物(例如，人)中发现的所有类型的癌症、赘生物或恶性肿瘤，包括白血病、淋巴瘤、癌和肉瘤。在实施方式中，本文所提供的ADC和方法对于治疗表达HER2的癌症是有用的。在实施方式中，所述表达HER2的癌症是实体瘤。癌症可以是存在异常数量的胚细胞或不需要的细胞增殖或被诊断为乳腺癌，包括转移性乳腺癌；胃癌；食管癌，包括鳞状细胞癌，特别是腺癌；卵巢癌，包括卵巢上皮性癌；子宫内膜癌，包括子宫内膜癌，如子宫内膜浆液性癌；或肺癌，包括肺腺癌和非小细胞肺癌的任何癌症。
HER2蛋白在各种人肿瘤中过表达，并且可以使用本领域中通常进行的方法来评估，如用于评估HER2蛋白过表达的免疫组织化学染色方法(IHC)或用于评估HER2基因扩增的荧光原位杂交方法(FISH)。另外，本发明的抗HER2抗体偶联药物通过经由其抗HER2抗体识别在癌细胞表面上表达的HER2蛋白和在癌细胞中内化的HER2蛋白而表现出抗肿瘤效果。因此，本发明的抗HER2抗体-药物偶联物的治疗受试者不限于“在癌细胞的表面上表达HER2蛋白质的癌症”，并且还可以是例如白血病、恶性淋巴瘤、浆细胞瘤、骨髓瘤或肉瘤(其中HER2蛋白质被内化在癌细胞中)。
术语“癌”是指由上皮细胞构成的恶性新生长，所述上皮细胞倾向于浸润周围组织并引起转移。可以用本文所提供的化合物或方法治疗的示例性癌包括例如甲状腺髓样癌、家族性甲状腺髓样癌、腺泡癌、腺泡状癌、腺性囊性癌、腺样囊性癌、腺癌、肾上腺皮质癌、肺泡癌、肺泡细胞癌、基底细胞癌、基底样细胞瘤、基底细胞样癌、基底鳞状细胞癌、细支气管肺泡癌、细支气管癌、支气管癌、脑状癌、胆管细胞癌、绒毛膜癌、胶样癌、粉刺癌、子宫体癌、筛状癌、铠甲状癌、癌疮(carcinoma cutaneum)、柱状癌、柱状细胞癌、管癌、硬癌、胚胎性癌、髓样癌、表皮样癌、腺样上皮细胞癌、外植癌、溃疡性癌(carcinoma ex ulcere)、纤维癌、胶状癌(gelatiniforni carcinoma)、胶样癌(gelatinous carcinoma)、巨大细胞癌、巨细胞癌、腺癌、粒层细胞癌、毛母质癌(hair-matrix carcinoma)、多血癌(hematoidcarcinoma)、肝细胞癌、许特尔氏细胞癌(Hurthle cell carcinoma)、玻质状癌(hyalinecarcinoma)、肾上腺样癌、幼稚型胚胎性癌、原位癌、表皮内癌、上皮内癌、克龙派切尔氏癌(Krompecher's carcinoma)、库尔奇茨基细胞癌(Kulchitzky-cell carcinoma)、大细胞癌、豆状癌(lenticular carcinoma)、豆状癌(carcinoma lenticulare)、脂肪瘤癌(lipomatous carcinoma)、淋巴上皮癌、髓样癌(carcinoma medullare)、髓样癌(medullary carcinoma)、黑色素癌、软癌、粘液癌、粘液性癌、粘液细胞癌(carcinomamucocellulare)、粘液表皮样癌、粘液质癌(carcinoma mucosum)、粘液样癌、粘液瘤样癌、鼻咽癌、燕麦细胞癌、骨化性癌(carcinoma ossificans)、骨样癌(osteoid carcinoma)、乳头状癌、门静脉周癌、浸润前癌、棘细胞癌、软糊状癌(pultaceous carcinoma)、肾脏肾细胞癌、储备细胞癌、肉瘤样癌、施奈德癌(schneiderian carcinoma)、硬癌、阴囊癌(carcinomascroti)、印戒细胞癌、单纯癌、小细胞癌、马铃薯状癌、球状细胞癌、梭形细胞癌、髓状癌(carcinoma spongiosum)、鳞状癌、鳞状细胞癌、绳捆癌、血管扩张性癌(carcinomatelangiectaticum)、毛细管扩张癌(carcinoma telangiectodes)、移行细胞癌、块状癌(carcinoma tuberosum)、结节性皮癌(tuberous carcinoma)、疣状癌或绒毛状癌。
如本文所使用的，术语“转移”、“转移性”和“转移性癌症”可互换使用，并且指代增殖性疾病或病症(例如，癌症)从一个器官向另一个不相邻器官或身体部分的扩散。“转移性癌症”也被称为“IV期癌症”。癌症出现在起始部位，例如乳腺，这一部位被称为原发性肿瘤，例如原发性乳腺癌。原发性肿瘤或起始部位中的一些癌细胞获得了穿透和渗透局部区域中的周围正常组织的能力和/或穿透通过系统循环到体内的其它部位和组织的淋巴系统或血管系统壁的能力。由原发性肿瘤的癌细胞形成的第二可临床检测到的肿瘤被称为转移性或继发性肿瘤。当癌细胞转移时，推测转移性肿瘤和其细胞与原发性肿瘤类似。因此，如果肺癌转移到乳房，则乳房部位处的继发性肿瘤由异常肺细胞而非异常乳腺细胞组成。乳房中的继发性肿瘤被称为转移性肺癌。因此，短语转移性癌症是指受试者患有或曾经患有原发性肿瘤并患有一种或多种继发性肿瘤的疾病。短语非转移性癌症或患有非转移性癌症的受试者是指受试者患有原发性肿瘤但不患有一种或多种继发性肿瘤的疾病。例如，转移性肺癌是指患有原发性肺肿瘤或有原发性肺肿瘤病史并且在第二位置或多个位置，例如，在乳房中具有一种或多种继发性肿瘤的受试者的疾病。
可以用本文所提供的ADC或方法治疗的示例性癌症包括乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、胃癌、肾癌、宫颈癌、前列腺癌、膀胱癌、导管癌、胰腺癌、结肠癌、结直肠癌、尿路上皮癌、唾液腺癌、脑癌、食管癌以及头颈部鳞状细胞癌或上述癌症的转移。在更具体的实施方式中，乳腺癌是雌激素受体和孕酮受体阴性乳腺癌或三阴性乳腺癌(TNBC)。在另一个实施方式中，肺癌是非小细胞肺癌(NSCLC)。
本文所使用的“抗体(antibody)”和“抗体(antibodies)”以及相关术语是指与抗原特异性结合的完整免疫球蛋白或其抗原结合部分。抗原结合部分可以通过重组DNA技术或通过完整抗体的酶促或化学切割产生。抗原结合部分尤其包括Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、结构域抗体(dAb)和互补决定区(CDR)片段、单链抗体(scFv)、嵌合抗体、双功能抗体、三功能抗体、四功能抗体以及包括足以赋予与多肽特异性抗原结合的免疫球蛋白的至少一部分的多肽。
抗体包括重组产生的抗体和抗原结合部分。抗体包括非人抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体。抗体包括单特异性、多特异性(例如，双特异性、三特异性和更高阶特异性)。抗体包括四聚体抗体、轻链单体、重链单体、轻链二聚体、重链二聚体。抗体包括F(ab')2片段、Fab'片段和Fab片段。抗体包括单结构域抗体、单价抗体、单链抗体、单链可变片段(scFv)、骆驼化(camelized)抗体、亲和体、二硫键连接的Fv(sdFv)、抗独特型抗体(抗Id)、微型抗体。抗体包括单克隆群体和多克隆群体。本文描述了抗HER2抗体。
如本文所使用的，术语“单克隆抗体”是指从基本上同质的抗体群体中获得的抗体，即包括所述群体的单个抗体是相同的和/或结合相同的表位，除了例如包括天然存在的突变或在单克隆抗体制剂的生产期间产生的可能的变体抗体，此类变体通常以少量存在。与通常包括针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制剂相比，单克隆抗体制剂的每个单克隆抗体都针对抗原上的单个决定簇。因此，修饰语“单克隆”指示抗体的特征是从基本上同质的抗体群体中获得的，并且不应被解释为需要通过任何特定方法产生抗体。例如，要根据本发明使用的单克隆抗体可以通过多种技术制备，包括但不限于杂交瘤方法、重组DNA方法、噬菌体展示方法和利用包括人免疫球蛋白基因座的全部或一部分的转基因动物的方法，此类方法和用于制备单克隆抗体的其它示例性方法在本文中进行了描述。
如本文所使用的，“表位”以及相关术语是指通过抗原结合蛋白(例如，通过抗体或其抗原结合部分)结合的抗原的一部分。表位可以包括通过抗原结合蛋白结合的两个或更多个抗原的一部分。表位可以包括一个抗原或两个或更多个抗原的非连续部分(例如，在抗原的初级序列中不连续但在抗原的三级和四级结构的上下文中彼此足够接近以通过抗原结合蛋白结合的氨基酸残基)。通常，抗体的可变区，具体地CDR与表位相互作用。本文描述了与HER2多肽的表位结合的抗HER2抗体及其抗原结合蛋白。
本文所使用的“抗体片段”、“抗体部分”、“抗体的抗原结合片段”或“抗体的抗原结合部分”以及其它相关术语是指除了完整抗体之外包括结合完整抗体所结合的抗原的完整抗体的部分的分子。抗体片段的实例包括但不限于Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2；Fd；和Fv片段，以及dAb；双功能抗体；线性抗体；单链抗体分子(例如，scFv)；包括足以赋予与多肽特异性抗原结合的抗体的至少一部分的多肽。抗体的抗原结合部分可以通过重组DNA技术或通过完整抗体的酶促或化学切割产生。抗原结合部分尤其包括Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、结构域抗体(dAb)和互补决定区(CDR)片段、嵌合抗体、双功能抗体、三功能抗体、四功能抗体以及包括足以赋予抗体片段抗原结合特性的免疫球蛋白的至少一部分的多肽。本文描述了抗HER2抗体的抗原结合片段。
抗原结合蛋白可以具有例如免疫球蛋白的结构。在一个实施方式中，“免疫球蛋白”是指四聚体分子。每个四聚体分子由两对相同的多肽链构成，每对具有一条“轻”链(约25kDa)和一条“重”链(约50-70kDa)。每条链的N末端限定了具有约100至110个或更多个氨基酸的主要负责抗原识别的可变区。每条链的羧基端部分限定了主要负责效应子功能的恒定区。人轻链被分类为κ或λ轻链。重链被分类为μ、δ、γ、α或ε，并且将抗体的同种型分别定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。在轻链和重链内，可变区和恒定区通过具有约12个或更多个氨基酸的“J”区连接，其中重链还包括具有约10个以上氨基酸的“D”区。通常参见《基础免疫学》第7章(Paul,W.,编辑,第2版,纽约的瑞文出版社(1989))(所述文献出于所有目的以引用方式整体并入)。每个轻/重链对的可变区形成抗体结合位点，使得完整免疫球蛋白具有两个抗原结合位点。在一个实施方式中，抗原结合蛋白可以是具有不同于四聚体免疫球蛋白分子但仍与靶抗原结合或与两个或更多个靶抗原结合的结构的合成分子。例如，合成抗原结合蛋白可以包括抗体片段、1-6条或更多条多肽链、多肽的非对称组合件或其它合成分子。术语“可变重链”、“VH”或“VH”是指免疫球蛋白重链的可变区，包括Fv、scFv、dsFv或Fab；而术语“可变轻链”、“VL”或“VL”是指免疫球蛋白轻链的可变区，包括Fv、scFv、dsFv或Fab。“可变区”或“可变结构域”是指抗体与抗原结合所涉及的抗体重链或轻链的结构域。天然抗体的重链和轻链的可变结构域(分别为VH和VL)通常具有类似的结构，其中每个结构域包括四个保守框架区(FR)和三个高变区(HVR)。(参见例如，Kindt等人《Kuby免疫学(KubyImmunology)》,第6版,W.H.弗里曼公司(W.H.Freeman and Co.),第91页(2007)。单个VH或VL结构域可以足以赋予抗原结合特异性。此外，与特定抗原结合的抗体可以使用VH或VL结构域从与抗原结合以分别筛选互补的VL或VH结构域的文库的抗体中分离出来。参见例如，Portolano等人,《免疫学杂志(J.Immunol.)》150:880-887(1993)；Clarkson等人,《自然(Nature)》352:624-628(1991)。本文描述了与HER2特异性结合的具有免疫球蛋白样特性的抗原结合蛋白。
抗体功能片段的实例包括但不限于完整抗体分子、抗体片段，如Fv、单链Fv(scFv)、互补决定区(CDR)、VL(轻链可变区)、VH(重链可变区)、Fab、F(ab)2'以及这些的任何组合或能够与靶抗原结合的免疫球蛋白肽的任何其它功能部分(参见例如，《基础免疫学》(Paul编辑,第4版2001)。如本领域的技术人员所理解的，可以通过多种方法获得各种抗体片段，例如用酶(如胃蛋白酶)消化完整抗体；或从头合成。抗体片段通常通过化学方法或使用重组DNA方法从头合成。因此，如本文所使用的，术语抗体包括通过修饰完整抗体产生的抗体片段，或使用重组DNA方法从头合成的抗体片段(例如，单链Fv)或使用噬菌体展示文库鉴定的抗体片段(参见例如，McCafferty等人,(1990)《自然》348:552)。术语“抗体”还包括二价或双特异性分子、双功能抗体、三功能抗体和四功能抗体。在以下文献中描述了二价和双特异性分子：例如，Kostelny等人(1992)《免疫学杂志》148:1547；Pack和Pluckthun(1992)《生物化学(Biochemistry)》31:1579；Hollinger等人(1993),《美国国家科学院院刊(PNAS.USA)》90:6444；Zuckermann等人(1994)《免疫学杂志》152:5368；Zhu等人(1997)《(蛋白质科学(Protein Sci.)》6:781,Hu等人(1996)《癌症研究(Cancer Res.)》56:3055；Adams等人(1993)《癌症研究》53:4026；和McCartney等人(1995)《蛋白质工程》8:301。
本文所使用的术语“抗原结合蛋白”、“抗原结合结构域”、“抗原结合区”或“抗原结合位点”以及相关术语是指包括与抗原结合的部分的蛋白质以及任选地使抗原结合部分采用促进抗原结合蛋白与抗原结合的构象的支架或框架部分。抗原结合蛋白的实例包括抗体、抗体片段(例如，抗体的抗原结合部分)、抗体衍生物和抗体类似物。抗原结合蛋白可以包括例如具有移植的CDR或CDR衍生物的替代性蛋白质支架或人工支架。此类支架包括但不限于包括例如引入突变以稳定抗原结合蛋白的三维结构的抗体源性支架以及包括例如生物相容性聚合物的完全合成支架。参见例如，Korndorfer等人,2003,《蛋白质：结构、功能和生物信息学(Proteins:Structure,Function,and Bioinformatics)》,第53卷,第1期:121-129；Roque等人,2004,《生物技术进展(Biotechnol.Prog.)》20:639-654。另外，可以使用肽抗体模拟物(“PAM”)以及基于利用纤维蛋白连接素组分作为支架的抗体模拟物的支架。本文描述了与HER2结合的抗原结合蛋白。
在一个实施方式中，解离常数(KD)可以使用BIACORE表面等离子体共振(SPR)测定来测量。表面等离子体共振是指允许通过例如使用BIACORE系统(新泽西皮斯卡塔韦的通用医疗集团Biacore生命科学事业部(Biacore Life Sciences division of GEHealthcare,Piscataway,NJ)检测生物传感器基质内的蛋白质浓度的变化来分析实时相互作用的光学现象。
如贯穿说明书关于抗HER2抗原结合蛋白所使用的“特异性结合”意指抗原结合蛋白与人HER2(hHER2)结合，而不与其它人蛋白结合或不明显结合。然而，所述术语并不排除本发明的抗原结合蛋白也可以与其它形式的HER2，例如灵长类动物HER2具有交叉反应性的事实。在一个实施方式中，如果抗体以10-5M或更小、或10-6M或更小、或10-7M或更小、或10-8M或更小、或10-9M或更小或10-10M或更小的解离常数KD与抗原结合，则所述抗体与靶抗原特异性结合。
除非另外说明，否则如本文所使用的术语“HER2”是指来自任何脊椎动物来源(包括哺乳动物，如灵长类动物(例如，人类、食蟹猴(cyno)和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠))的任何天然HER2。所述术语涵盖“全长”未经处理的HER2以及由细胞中处理产生的任何形式的HER2。所述术语还涵盖天然存在的HER2的变体，例如剪接变体、等位基因变体和同种型。示例性人HER2蛋白的氨基酸序列示出于SEQ ID NO:16中。
术语“表达HER2的癌症”是指包括在其表面上表达HER2的细胞的癌症。在实施方式中，术语“表达HER2的癌症”是指包括使细胞内的HER2内化的细胞的癌症。
术语“抗HER2抗体”和“与HER2结合的抗体”是指能够以足够的亲和力与HER2结合的抗体，使得抗体在靶向HER2中作为治疗剂是有用的。在一个实施方式中，抗HER2抗体与不相关的非HER2蛋白的结合程度小于抗体与HER2的结合的约10％，如通过例如放射免疫测定(RIA)测量的。在某些实施方式中，与HER2结合的抗体的解离常数(Kd)≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤5nM、≤4nM、≤3nM、≤2nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM或≤0.001nM(例如，10-8M或更小，例如10-8M至10-13M，例如10-9M至10-13M)。在某些实施方式中，抗HER2抗体与在来自不同物种的HER2中保守的HER2的表位结合。
本文所使用的术语“嵌合抗体”以及相关术语是指包括来自第一抗体的一个或多个区和来自一个或多个其它抗体的一个或多个区的抗体。在一个实施方式中，所述CDR中的一个或多个CDR源自人抗体。在另一实施方式中，所有CDR源自人抗体。在另一实施方式中，来自多于一个人抗体的CDR在嵌合抗体中混合并匹配。例如，嵌合抗体可以包括来自第一人抗体的轻链的CDR1、来自第二人抗体的轻链的CDR2和CDR3以及来自第三抗体的重链的CDR。在另一实例中，CDR来源于不同物种，如人和小鼠、或人和兔、或人和山羊。本领域的技术人员应理解，其它组合是可能的。
另外，框架区可以源自相同抗体之一、源自如人抗体等一个或多个不同抗体或源自人源化抗体。在嵌合抗体的一个实例中，重链和/或轻链的一部分与来自特定物种或属于特定抗体种类或亚类的抗体相同、同源或源自所述抗体，而所述链的其余部分与来自另一物种或属于另一抗体种类或亚类的抗体相同、同源或源自所述抗体。还包括表现出期望生物活性(即，与靶抗原特异性结合的能力)的此类抗体的片段。嵌合抗体可以由本文所描述的抗HER2抗体中的任何抗HER2抗体的部分制备。
“效应子功能”是可归因于抗体的Fc区的随着抗体同种型而变化的那些生物活性。抗体效应子功能的实例包括：C1q结合和补体依赖性细胞毒性(CDC)；Fc受体结合；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)；吞噬作用；细胞表面受体(例如，B细胞受体)的下调；以及B细胞激活。
如本文所使用的，术语“Fc”或“Fc区”是指在铰链区中开始或在铰链区之后开始并且在重链的C末端结束的抗体重链恒定区的部分。Fc区包括CH和CH3区的至少一部分，并且可以包括或可以不包括铰链区的一部分。两条各自携带半Fc区的多肽链可以二聚合以形成Fc区。Fc区可以与Fc细胞表面受体以及免疫补体系统的一些蛋白质结合。Fc区表现出效应子功能，包括任一种活性或两种或更多种活性的任何组合，所述活性包括补体依赖性细胞毒性(CDC)、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)、抗体依赖性吞噬(ADP)、调理和/或细胞结合。Fc区可以与Fc受体结合，包括FcγRI(例如，CD64)、FcγRII(例如，CD32)和/或FcγRIII(例如，CD16a)。
“人源化抗体”是指具有通过一种或多种氨基酸取代、缺失和/或添加而与源自非人物种的抗体的序列不同的序列的抗体，使得与非人物种抗体相比，在将人源化抗体施用于人受试者时，所述人源化抗体不太可能诱导免疫应答和/或诱导较不严重的免疫应答。在一个实施方式中，非人物种抗体的重链和/或轻链的框架结构域和恒定结构域中的某些氨基酸发生突变以产生人源化抗体。在另一实施方式中，来自人抗体的恒定结构域与非人物种的可变结构域融合。在另一个实施方式中，改变非人抗体的一个或多个CDR序列中的一个或多个氨基酸残基以降低在将非人抗体施用于人类受试者时所述非人抗体的可能的免疫原性，其中改变的氨基酸残基对于抗体与其抗原的免疫特异性结合不是关键性的，或者对氨基酸序列作出的改变是保守性改变，使得人源化抗体与抗原的结合并不比非人抗体与抗原的结合明显更差。如何制备人源化抗体的实例可以在美国专利第6,054,297号、第5,886,152号和第5,877,293号中找到。
术语“人抗体”是指具有源自人免疫球蛋白序列的一个或多个可变区和恒定区的抗体。在一个实施方式中，所有可变结构域和恒定结构域都源自人免疫球蛋白序列(例如，全人抗体)。这些抗体可以通过各种方式制备，所述方式的实例如下描述，包括通过重组方法或通过用小鼠的所关注抗原进行免疫，所述所关注抗原被基因修饰以表达源自人重链和/或轻链编码基因的抗体。本文描述了全人抗HER2抗体及其抗原结合蛋白。该人抗体的定义明确排除了包括非人抗原结合残基的人源化抗体。
术语“分离”意指“人工”改变了其自然状态，或从其原始环境中被改变或去除，或两者皆有。当术语“分离的”应用于核酸或蛋白质时，所述术语表示所述核酸或蛋白质基本上不含在天然状态下与其缔合的其它细胞组分。它可以例如处于同质状态并且可以处于干燥状态或水溶液中。纯度和同质性通常使用分析化学技术(如聚丙烯酰胺凝胶电泳、高效液相色谱法或质谱法)确定。作为制剂中存在的主要物种的蛋白质是基本上纯化的。例如，活生物体中天然存在的多核苷酸或多肽不是“分离的”，但是从其天然状态的共存物质中分离的相同多核苷酸或多肽是“分离的”，包括但不限于当此类多核苷酸或多肽被重新引入到细胞中时，即使所述细胞与分离多核苷酸或多肽的细胞是相同的物种或类型。
“CDR”被定义为抗体的互补决定区氨基酸序列，所述互补决定区氨基酸序列是免疫球蛋白重链和轻链的高变结构域。在免疫球蛋白的可变部分中存在三个重链和三个轻链CDR(或CDR区)。因此，如本文所使用的，“CDR”可以指所有三个重链CDR或所有三个轻链CDR(如果合适的话，或所有重链CDR和所有轻链CDR两者)。
CDR为抗体与抗原或表位的结合提供了大部分接触残基。本发明中的所关注CDR源自供体抗体可变重链和轻链序列，并且包括天然存在的CDR的类似物，所述类似物也共享或保留与其来源的供体抗体相同的抗原结合特异性和/或中和能力。
抗体的CDR序列可以通过Kabat编号系统(Kabat等人；《免疫学所关注的蛋白质序列(Sequences of proteins of Immunological Interest)》NIH,1987)来确定；可替代地，所述序列可以使用Chothia编号系统(Al-Lazikani等人,(1997)《分子生物学杂志(JMB)》273,927-948)、接触定义方法(MacCallum R.M.,和Martin A.C.R.以及Thornton J.M,(1996),《分子生物学杂志(Journal of Molecular Biology)》,262(5),732-745)或本领域的技术人员已知的用于对抗体中的残基进行编号和确定CDR的任何其它已建立的方法来确定。
技术人员可用的CDR序列的其它编号惯例包括“AbM”(巴斯大学(University ofBath))和“接触”(伦敦大学学院(University College London))方法。使用Kabat、Chothia、AbM和接触方法中的至少两种方法可以确定最小重叠区，以提供“最小结合单元”。最小结合单元可以是CDR的子部分。
“亲和力”是指分子(例如，抗体)的单个结合位点与其结合伴侣(例如，抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另外指示，否则如本文所使用的，“结合亲和力”是指反映结合对的成员(例如，抗体和抗原)之间的1:1相互作用的内在结合亲和力。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可以由解离常数(Kd)表示。亲和力可以通过本领域中已知的常见方法来测量，包括本文所描述的那些方法。以下描述了用于测量结合亲和力的具体的说明性实施方式和示例性实施方式。
“亲和力成熟的”抗体是指与不具有此类改变的亲本抗体相比，在一个或多个高变区(HVR)中具有一种或多种改变的抗体，此类改变使得抗体对抗原的亲和力得到改进。
如本文所使用的，术语“变体”多肽和多肽的“变体”是指包括具有相对于参考多肽序列插入、缺失和/或取代到氨基酸序列中的一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列的多肽。多肽变体包括融合蛋白。以相同方式，变体多核苷酸包括具有相对于另一多核苷酸序列插入、缺失和/或取代到核苷酸序列中的一个或多个核苷酸的核苷酸序列。多核苷酸变体包括融合多核苷酸。
如本文所使用的，术语“结构域”是指一种折叠的蛋白质结构，其具有独立于蛋白质的其余部分的三级结构。通常，结构域负责蛋白质的离散功能特性，并且在许多情况下，可以被添加到、去除或转移到其它蛋白质而不损失蛋白质的剩余部分和/或结构域的功能。
“抗体单一可变结构域”是包括抗体可变结构域的序列特性的折叠的多肽结构域。所述术语因此包括完全抗体可变结构域和经修饰的可变结构域，例如其中一个或多个环已经被序列所替代(这并非是抗体可变结构域的特性)，或已经被截短或包括N末端或C末端延伸的抗体可变结构域，以及至少保留全长结构域的结合活性和特异性的可变结构域的折叠片段。
如本文所使用的，术语“细胞毒性剂”是指抑制或阻止细胞功能和/或造成细胞死亡或破坏的物质。细胞毒性剂包括但不限于放射性同位素(例如，211At、131I、125I、90Y、186Re、188Re、153Sm、212Bi、32P、212Pb和Lu的放射性同位素)；化疗剂或药物(例如，甲氨蝶呤、阿霉素、长春花生物碱(长春新碱、长春碱、依托泊苷)、多柔比星、美法仑、丝裂霉素C、苯丁酸氮芥、柔红霉素或其它嵌入剂)；生长抑制剂；酶及其片段，如核裂解酶；抗生素；毒素，如细菌、真菌、植物或动物来源的小分子毒素或酶促活性毒素，包括其片段和/或变体；以及下文所公开的各种抗肿瘤剂或抗癌剂。
“化疗剂”是指可用于治疗癌症的化学化合物。化疗剂的实例包括烷化剂，如噻替派(thiotepa)和环磷酰胺(cyclosphosphamide)烷基磺酸盐，如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮杂环丙烷，如苯佐替哌(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替哌(uredopa)；乙撑亚胺类和甲基蜜胺类(methylamelamines)，包括六甲蜜胺、三乙撑密胺、三乙撑磷酰胺、三乙撑硫代磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和三羟甲密胺(trimethylolomelamine)；乙酰精宁(acetogenins)(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone))；δ-9-四氢大麻酚(屈大麻酚(dronabinol)，)；β-拉帕醌(beta-lapachone)；拉帕醇；秋水仙碱；桦木酸；喜树碱(包括合成的类似物拓扑替康(topotecan)CPT-11(伊立替康(irinotecan)，)、乙酰基喜树碱(acetylcamptothecin)、东莨菪亭(scopolectin)和9-氨基喜树碱(9-aminocamptothecin))；苔藓抑素；凯利他汀(callystatin)；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；足叶草毒素；鬼臼酸；替尼泊苷(teniposide)；念珠藻素(具体地是念珠藻素1和念珠藻素8)；海兔毒素；多卡米星(duocarmycin)(包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉碱(pancratistatin)；匍枝珊瑚醇(sarcodictyin)；海绵抑制素(spongistatin)；氮芥类(nitrogen mustard)，如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、氯磷酰胺(cholophosphamide)、雌氮芥(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、氮芥(mechlorethamine)、盐酸甲氧氮芥(mechlorethamine oxidehydrochloride)、美法仑、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲洛磷胺(trofosfamide)、乌拉莫司汀(trofosfamide)；亚硝基脲(nitrosurea)，如卡莫司汀(carmustine)、氯脲霉素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，如烯二炔类抗生素(例如，卡奇霉素(calicheamicin)，尤其是卡奇霉素γ1和卡奇霉素ω1(参见例如，《应用化学英文国际版(Agnew,ChemIntl.Ed.Engl.)》,33:183-186(1994))；达内霉素(dynemicin)，包括达内霉素A；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素生色团和相关的色蛋白烯二炔抗生素生色团)、阿克拉霉素(aclacinomysins)、放线菌素(actinomycin)、安曲霉素(authramycin)、氮杂丝氨酸(azaserine)、博莱霉素(bleomycins)、放线菌素(cactinomycin)、卡拉比星(carabicin)、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌菌素(carzinophilin)、色霉素(chromomycins)、更生霉素(dactinomycin)、柔红霉素、地托比星(地托比星)、6-二氮-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星(包括吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉基-多柔比星和脱氧多柔比星)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycins)如丝裂霉素C、菌酚酸(mycophenolic acid)、诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycins)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(porfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链脲菌素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，如二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷、6-氮尿苷、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷；雄激素，如卡普睾酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺，如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，如亚叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；苯丁酸氮芥(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；地美可辛(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；依氟鸟氨酸(elfornithine)；依利醋铵(elliptinium acetate)；埃坡霉素(epothilone)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓(galliumnitrate)；羟基脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidamine)；美登木素生物碱，如美登素(maytansine)和安丝霉素(ansamitocins)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌达醇(mopidanmol)；二胺硝吖啶(nitraerine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼(procarbazine)；多糖复合物(俄勒冈州尤金的JHS天然产品公司(JHS Natural Products,Eugene,OR))；雷佐生(razoxane)；根瘤霉素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺；单端孢霉烯(trichothecene)(尤其是T-2毒素、疣孢菌素A(verracurin A)、杆孢菌素A(roridin A)和蛇形菌素(anguidine))；尿烷(urethan)；长春地辛(vindesine)达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；盖克托辛(gacytosine)；阿拉伯糖苷(arabinoside)(“Ara-C”)；噻替派(thiotepa)；紫杉烷，例如紫杉醇(新泽西州普林斯顿的百时美施贵宝肿瘤学(Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.))、ABRAXANETM不含克列莫佛、白蛋白工程化的紫杉醇纳米颗粒调配物(伊利诺斯州绍姆贝格的美国制药伙伴公司(American Pharmaceutical Partners,Schaumberg,Illinois))和多西他赛(法国安东尼的罗纳普朗克乐安公司( Rorer,Antony,France))；苯丁酸氮芥(chloranbucil)；吉西他滨(gemcitabine)6-硫鸟嘌呤(6-thioguanine)；巯基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤；铂类似物，如顺铂(cisplatin)和卡铂(carboplatin)；长春花碱铂；依托泊苷(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；长春新碱奥沙利铂(oxaliplatin)；醛氢叶酸(leucovovin)；长春瑞滨诺安特龙(novantrone)；依达曲沙；道诺霉素(daunomycin)；氨基蝶呤；伊班膦酸盐(ibandronate)；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine)(DMFO)；类视黄醇，如视黄酸；卡培他滨以上中的任一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物；以及以上中的两种或两种以上的组合，如CHOP，环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松龙的组合疗法的缩写；CVP，环磷酰胺、长春新碱和泼尼松龙组合疗法的缩写；和FOLFOX，奥沙利铂(ELOXATINTM)组合5-FU和醛氢叶酸治疗方案的缩写。
“抗体偶联药物”或“ADC”是与一种或多种异源分子(包括但不限于细胞毒剂)缀合的抗体。
如本文所使用的，术语“缀合的”在指代两个部分时意指两个部分键合，其中连接两个部分的键可以是共价的或非共价的。在实施方式中，两个部分彼此共价键合(例如，直接或通过共价键合的中间体)。在实施方式中，两个部分是非共价键合的(例如，通过离子键、范德华键(van der waal's bond)/相互作用、氢键、极性键或其组合或混合物)。
“个体”或“受试者”是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于驯养动物(例如，牛、羊、猫、狗和马)、灵长类动物(例如，人和非人灵长类动物，如猴子)、兔子和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)。在某些实施方式中，个体或受试者是人。在某些实施方式中，受试者是成人、青少年、儿童或婴儿。在一些实施方式中，使用术语“个体”或“患者”并且旨在与“受试者”互换。
相对于参考多肽序列的“氨基酸序列同一性百分比(％)”被定义为在比对序列并且引入空位(如果必要的话)以实现最大序列同一性百分比之后，候选序列中与参考多肽序列中的氨基酸残基相同的氨基酸残基的百分比。出于确定氨基酸序列同一性百分比的目的的比对可以以本领域技术范围内的多种方式来实现，例如，借助于Smith和Waterman,1981,《应用数学进展(Ads App.Math.)》2,482的局部同源性算法，借助于Needleman和Wunsch,1970,《分子生物学杂志》48,443的局部同源性算法，借助于Pearson和Lipman,1988,《美国国家科学院院刊)》88,2444的相似搜索算法，或借助于使用所述算法的计算机程序(例如，EMBOSS Needle或EMBOSS Water，可在www.ebi.ac.uk/Tools/psa/获得)。本领域的技术人员可以确定用于比对序列的适当参数，包括在所比较的序列的全长上实现最大比对所需的任何算法。如本文所使用的，“序列同一性百分比”或“[序列]同一性百分比(％)”是通过在由两个序列之间的局部比对长度限定的比较窗口上比较两个最佳局部比对的序列来确定的。(这也可以被认为是同源性的百分比或“同源性百分比(％)”。)与参考序列相比，比较窗口中的氨基酸序列可以包括添加或缺失(例如，空位或突出端)以用于两个序列的最佳比对。两个序列之间的局部比对仅包括根据取决于用于进行比对的算法(例如，EMBOSSWater)的标准而被认为足够相似的每个序列的区段。“相同的”或“同一性百分比”是指两个或更多个序列或子序列是相同的或具有相同的指定百分比的氨基酸残基或核苷酸(即，当在比较窗口或指定区内进行最大对应性比较和比对时，在指定区内具有约60％同一性，优选地65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高同一性)。百分比同一性通过以下计算：确定在两个序列中出现相同核酸碱基或氨基酸残基的位置数以产生匹配的位置数、将匹配的位置数除以比较窗口中的总位置数并且将结果乘以100。用于比较的序列的最佳比对可以通过以下进行：Smith和Waterman(《应用数学进展》2:482,1981)的局部同源性算法，Needleman和Wunsch(《分子生物学杂志》48:443,1970)的全局同源性比对算法，Pearson和Lipman(《美国国家科学院院刊》85:2444,1988)的相似性搜索方法，或通过检查。作为另外的实例，GAP和BESTFIT可以用于确定已经被鉴定用于比较的两个序列的最佳比对。通常，使用空位权重的默认值5.00和空位权重长度的默认值0.30。
序列比较和两个多肽序列或两个多核苷酸序列之间同一性百分比的确定可以使用数学算法来实现。例如，两个多肽或两个多核苷酸序列的“同一性百分比”或“同源性百分比”可以通过使用GAP计算机程序(GCG威斯康星软件包(GCG Wisconsin Package)，10.3版(加利福尼亚州圣迭戈的Accelrys公司(Accelrys,San Diego,Calif.))使用其默认参数比较序列来确定。关于测试序列的如“包括与Y具有至少X％同一性的序列”的表达意指当如上文所描述与序列Y比对时，测试序列包括与Y的残基至少X％相同的残基。
在一个实施方式中，测试抗体的氨基酸序列可以与构成本文所描述的多特异性抗原结合蛋白质复合物的多肽的任何氨基酸序列相似，但不完全相同。测试抗体与多肽之间的相似性可以为至少95％，或与构成本文所描述的多特异性抗原结合蛋白质复合物的任何多肽至少96％相同、或至少97％相同、或至少98％相同或至少99％相同。在一个实施方式中，类似多肽可以包括重链和/或轻链内的氨基酸取代。在一个实施方式中，氨基酸取代包括一个或多个保守氨基酸取代。“保守氨基酸取代”是氨基酸残基被具有拥有相似化学特性(例如，电荷或疏水性)的侧链(R基团)的另一个氨基酸残基取代的氨基酸取代。通常，保守氨基酸取代不会实质上改变蛋白质的功能特性。在两个或更多个氨基酸序列因保守取代而彼此不同的情况下，可以向上调整序列同一性百分比或相似性程度以纠正取代的保守性质。用于作出该调整的方式是本领域的技术人员所熟知的。参见例如，Pearson(1994)《分子生物学方法(Methods Mol.Biol.)》24:307-331，所述文献以引用方式整体并入本文。具有拥有相似化学特性的侧链的氨基酸基团的实例包括：(1)脂肪族侧链：甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；(2)脂肪族-羟基侧链：丝氨酸和苏氨酸；(3)含酰胺的侧链：天冬酰胺和谷氨酰胺；(4)芳香族侧链：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；(5)碱性侧链：赖氨酸、精氨酸和组氨酸；(6)酸性侧链：天冬氨酸和谷氨酸；以及(7)含硫侧链是半胱氨酸和甲硫氨酸。
抗体可以从如包括具有各种抗原特异性的免疫球蛋白的血清或血浆等来源中获得。如果对此类抗体进行亲和纯化，则此类抗体可以富集特定抗原特异性。此类富集的抗体制剂通常由对于具体抗原具有特异性结合活性的少于约10％的抗体构成。对这些制剂进行几轮亲和纯化可以增加对抗原具有特异性结合活性的抗体的比例。以这种方式制备的抗体通常被称为“单特异性的”。单特异性抗体制剂可以由对于具体抗原具有特异性结合活性的约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％、99％或99.9％的抗体构成。可以使用如下文所描述的重组核酸技术产生抗体。
如本文所使用的，术语“载体”是指能够传播其连接到的另一个核酸的核酸分子。所述术语包括作为自我复制核酸结构的载体，以及并入到其已被引入到的宿主细胞的基因组中的载体。某些载体能够指导与其可操作地连接的核酸的表达。此类载体在本文中被称为“表达载体”。
术语“宿主细胞”、“宿主细胞系”和“宿主细胞培养物”可互换地使用并且是指其中已经引入外源核酸的细胞，包括此类细胞的子代。宿主细胞包括“转化子”和“转化细胞”，所述转化子和转化细胞包括原代转化细胞和由其衍生的子代，而不考虑传代数量。子代的核酸含量可能与亲本细胞不完全相同，但可以包括突变。本文中包括具有与原始转化的细胞中筛选或选择的功能或生物活性相同的功能或生物活性的突变子代。
术语“药学上可接受的盐”旨在包括根据本文所描述的化合物上发现的特定取代基用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐。当本公开的化合物包括相对酸性的官能团时，可以通过使中性形式的此类化合物与足够量的期望碱(纯净的或在合适的惰性溶剂中)接触来获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐的实例包括钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、有机胺盐或镁盐或相似盐。当本公开的化合物包括相对碱性的官能团时，可以通过使中性形式的此类化合物与足够量的期望酸(纯净的或在合适的惰性溶剂中)接触来获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括衍生自无机酸的酸加成盐，所述无机酸如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、一氢碳酸、磷酸、一氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、一氢硫酸、氢碘酸或亚磷酸等；以及衍生自相对无毒的有机酸的盐，所述有机酸如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、乳酸、杏仁酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯基磺酸、柠檬酸、酒石酸、草酸、甲烷磺酸等。还包括如精氨酸等氨基酸的盐，以及如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等有机酸的盐(参见例如，Berge等人,“药用盐(Pharmaceutical Salts)”,《药物科学杂志(Journalof Pharmaceutical Science)》,1977,66,1-19)。本公开的某些特定化合物包括允许化合物转化为碱加成盐或酸加成盐的碱性官能团和酸性官能团两者。
因此，本公开的化合物可以以盐(如具有药学上可接受的酸)的形式存在。本公开包括此类盐。此类盐的非限制性实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、马来酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、丙酸盐、酒石酸盐(例如，(+)-酒石酸盐、(-)-酒石酸盐或其的包括外消旋混合物的混合物)、琥珀酸盐、苯甲酸盐和具有氨基酸(如谷氨酸)的盐和季铵盐(例如，碘甲烷、碘乙烷等)。这些盐可以通过本领域的技术人员已知的方法制备。
化合物的中性形式优选地通过使盐与碱或酸接触并且以常规方式分离母体化合物而再生成。化合物的母体形式在某些物理特性(如在极性溶剂中的溶解度)方面可能不同于各种盐形式。
除了盐形式之外，本公开还提供了前药形式的化合物。本文所描述的化合物的前药是容易在生理条件下经历化学变化从而提供本公开的化合物的那些化合物。本文所描述的化合物的前药可以在施用之后在体内转化。另外地，可以在离体环境中(例如，当与合适的酶或化学试剂接触时)通过化学方法或生物化学方法将前药转化为本公开的化合物。
本公开的某些化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式(包括水合形式)存在。通常，溶剂化形式等同于非溶剂化形式，并且被涵盖在本公开的范围内。本公开的某些化合物可以以多种结晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式对于由本公开所考虑的用途是等效的，并且旨在处于本公开的范围内。
“药学上可接受的赋形剂”和“药学上可接受的载剂”是指有助于向受试者施用活性剂和有助于受试者吸收的物质，并且所述物质可以包括在本公开的组合物中而不会对患者引起显著不良的毒理学作用。药学上可接受的赋形剂的非限制性实例包括水、NaCl、生理盐水溶液、乳酸化林格氏(Ringer's)液、普通蔗糖、普通葡萄糖、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣、甜味剂、调味剂、盐溶液(如林格氏溶液(Ringer's solution))、醇、油、明胶、碳水化合物(如乳糖、直链淀粉或淀粉)、脂肪酸酯、羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和颜料等。此类制剂可以进行灭菌，并且如果需要的话，可以与助剂(如润滑剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、用于影响渗透压的盐、缓冲液、着色物质和/或芳香物质等)混合，所述助剂不与本公开的化合物发生有害反应。本领域的技术人员将认识到，其它药物赋形剂在本公开中是有用的。
术语“药物调配物(pharmaceutical formulation)”是指呈允许其中所包括的活性成分的生物活性有效的形式并且不包括对将施用调配物的受试者产生不可接受的毒性的另外的组分的制剂。
术语“施用(administering)”、“施用(administered)”以及语法变体是指使用本领域的技术人员已知的各种方法和递送系统中的任何一种将药剂物理引入到受试者体内。本文所公开的调配物的示例性施用途径包括静脉内、肌内、皮下、腹膜内、脊髓或其它肠胃外施用途径，例如通过注射或输注。如本文所使用的，短语“肠胃外施用”意指除了肠内施用和局部施用之外的施用模式(通常通过注射)，并且包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、淋巴管内、病灶内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外和胸骨内注射和输注以及体内电穿孔。在一些实施方式中，调配物通过非肠胃途径(例如，口服)施用。其它非肠胃外途径包括局部、表皮或粘膜施用途径，例如，经鼻内、经阴道、经直肠、舌下或局部。施用也可以进行例如一次、多次和/或历时一个或多个延长的时段。
术语药剂例如药物调配物的“有效量”是指以剂量计并且在所需的时间段内有效实现所期望的治疗或预防结果的量。
本文所使用的缩写具有其在化学领域和生物学领域内的常规含义。本文所阐述的化学结构和式是根据化学领域中已知的化学价的标准规则构建的。
对本公开化合物的描述受本领域的技术人员已知的化学键合原理的限制。因此，在基团可以被多个取代基中的一个或多个取代基取代的情况下，选择此类取代以便符合化学键合原理并且得到并非固有地不稳定和/或如本领域的普通技术人员已知的将可能在环境条件下(如水性、中性和几种已知的生理条件下)不稳定的化合物。例如，杂环烷基或杂芳基按照本领域的技术人员已知的化学键合原理通过环杂原子与分子的其余部分连接，由此避免固有地不稳定的化合物。
当取代基由其常规化学式(从左到右书写)指定时，所述取代基同等地涵盖从右到左书写结构时产生的化学上相同的取代基，例如，-CH2O-等同于-OCH2-。
术语糖类意指碳水化合物(或糖)。在实施方式中，糖类是单糖。在实施方式中，糖类是多糖。糖类的最基本单位是碳水化合物的单体。通式是CnH2nOn。术语糖类衍生物意指用除羟基以外的取代基修饰的糖分子。实例包括糖基胺、糖磷酸酯和糖酯。其它糖类衍生物包括例如β-D-葡萄糖醛酸基、D-半乳糖基和D-葡萄糖基。
术语“带电基团”意指带有正电荷或负电荷的化学基团，如磷酸盐、膦酸盐、硫酸盐、磺酸盐、硝酸盐、羧酸盐、碳酸盐等。在一些实施方式中，在至少一个pH在5-9范围内的水溶液中，带电基团至少50％被电离。在一些实施方式中，带电基团是阴离子带电基团。
除非另外说明，否则术语“烷基”，其本身或作为另一个取代基的一部分，意指直链(即，无支链的)或支链碳链(或碳)或其组合，其可以是完全饱和的、单不饱和的或多不饱和的，并且可以包括单价、二价和多价基团。烷基可以包括指定数量的碳(例如，C1-C10意指一至十个碳)。烷基是未环化的链。饱和烃基团的实例包括但不限于如以下的基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、甲基、例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物和异构体。不饱和烷基是具有一个或多个双键或三键的烷基。不饱和烷基的实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙炔基、1-丙炔基和3-丙炔基、3-丁炔基以及更高的同系物和异构体。烷氧基是通过氧连接子(-O-)与分子的其余部分连接的烷基。烷基部分可以是烯基部分。烷基部分可以是炔基部分。烷基部分可以是完全饱和的。烯基可以包括多于一个双键和/或除了所述一个或多个双键之外的一个或多个三键。炔基可以包括多于一个三键和/或除了所述一个或多个三键之外的一个或多个双键。
除非另外说明，否则术语“亚烷基”，其本身或作为另一个取代基的一部分，意指衍生自烷基的二价基团，例如但不限于-CH2CH2CH2CH2-。通常，烷基(或亚烷基)将具有1至24个碳原子，其中具有10个或更少碳原子的那些基团在本文中是优选的。“低级烷基”或“低级亚烷基”是通常具有八个或更少碳原子的短链烷基或亚烷基。除非另外说明，否则术语“亚烯基”，其本身或作为另一个取代基的一部分，意指衍生自烯烃的二价基团。
除非另外说明，否则术语“杂烷基”，其本身或与另一术语的组合，意指包括至少一个碳原子和至少一个杂原子(例如，O、N、P、Si或S)的稳定直链或支链或其组合，并且其中氮原子和硫原子可以任选地被氧化，并且氮杂原子可以任选地被季铵化。杂原子(例如，O、N、S、Si或P)可以被置于杂烷基的任何内部位置处或位于烷基与分子的其余部分连接的位置处。杂烷基是未环化的链。实例包括但不限于：-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-S-CH2、-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH＝CH-O-CH3、-Si(CH3)3、-CH2-CH＝N-OCH3、-CH＝CH-N(CH3)-CH3、-O-CH3、-O-CH2-CH3和-CN。至多两个或三个杂原子可以是连续的，例如，-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3)3。杂烷基部分可以包括一个杂原子(例如，O、N、S、Si或P)。杂烷基部分可以包括两个任选地不同的杂原子(例如，O、N、S、Si或P)。杂烷基部分可以包括三个任选地不同的杂原子(例如，O、N、S、Si或P)。杂烷基部分可以包括四个任选地不同的杂原子(例如，O、N、S、Si或P)。杂烷基部分可以包括五个任选地不同的杂原子(例如，O、N、S、Si或P)。杂烷基部分可以包括至多8个任选地不同的杂原子(例如，O、N、S、Si或P)。除非另外说明，否则术语“杂烯基”，其本身或与另一术语的组合，意指包括至少一个双键的杂烷基。除所述一个或多个双键以外，杂烯基可以任选地包括多于一个双键和/或一个或多个三键。除非另外说明，否则术语“杂炔基”，其本身或与另一术语的组合，意指包括至少一个三键的杂烷基。杂炔基可以任选地包括多于一个三键和/或除所述一个或多个三键以外的一个或多个双键。
类似地，除非另外说明，否则术语“亚杂烷基”，其本身或作为另一个取代基的一部分，意指衍生自杂烷基的二价基团，如但不限于-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。对于亚杂烷基，杂原子还可以占据链末端中的任一个或两个(例如，亚烷基氧基、亚烷基二氧基、亚烷基氨基、亚烷基二氨基等)。仍进一步地，对于亚烷基和亚杂烷基连接基团，连接基团的式书写的方向并不暗示连接基团的取向。例如，式-C(O)2R'-表示-C(O)2R'-和-R'C(O)2-两者。如上文所描述，如本文所使用的，杂烷基包括通过杂原子与分子的其余部分连接的那些基团，如-C(O)R'、-C(O)NR'、-NR'R”、-OR'、-SR’和/或-SO2R'。在叙述“杂烷基”、随后叙述特定杂烷基(如-NR'R”等)的情况下，应当理解术语杂烷基和-NR'R”不是冗余的或相互排斥的。相反，叙述特定杂烷基以增加清晰度。因此，术语“杂烷基”在本文中不应被解释为排除特定杂烷基，如-NR'R”等。
除非另外说明，否则术语“环烷基”和“杂环烷基”，其本身或与其它术语的组合，分别意指“烷基”和“杂烷基”的环状形式。环烷基和杂环烷基不是芳香族的。另外地，对于杂环烷基，杂原子可以占据杂环与分子的其余部分连接的位置。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。杂环烷基的实例包括但不限于1-(1,2,5,6-四氢吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。“亚环烷基”和“亚杂环烷基”单独或作为另一取代基的一部分，意指分别衍生自环烷基和杂环烷基的二价基团。
在实施方式中，术语“环烷基”意指单环、双环或多环环烷基环体系。在实施方式中，单环环体系是包括3至8个碳原子的环状烃基团，其中此类基团可以是饱和的或不饱和的，但不是芳香族的。在实施方式中，环烷基是完全饱和的。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。双环环烷基环体系是桥接的单环或稠合的双环。在实施方式中，桥接的单环包括单环环烷基环，其中单环的两个非相邻碳原子通过介于一个与三个之间的另外的碳原子的亚烷基桥连接(即，形式为(CH2)w的桥接基团，其中w是1、2或3)。双环体系的代表性实例包括但不限于双环[3.1.1]庚烷、双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷、双环[3.2.2]壬烷、双环[3.3.1]壬烷和双环[4.2.1]壬烷。在实施方式中，稠合的双环环烷基环体系包括与苯基、单环环烷基、单环环烯基、单环杂环基或单环杂芳基稠合的单环环烷基环。在实施方式中，桥接或稠合的双环环烷基通过单环环烷基环内包括的任何碳原子与母体分子部分连接。在实施方式中，环烷基任选地被独立地为氧代或硫代的一个或两个基团取代。在实施方式中，稠合的双环环烷基是与苯环、5或6元单环环烷基、5或6元单环环烯基、5或6元单环杂环基或5或6元单环杂芳基稠合的5或6元单环环烷基环，其中稠合的双环环烷基任选地被独立地为氧代或硫代的一个或两个基团取代。在实施方式中，多环环烷基环体系是与以下稠合的单环环烷基环(基础环)：(i)选自由以下组成的组的一个环体系：双环芳基、双环杂芳基、双环环烷基、双环环烯基和双环杂环基；或(ii)独立地选自由以下组成的组的两个其它环体系：苯基、双环芳基、单环或双环杂芳基、单环或双环环烷基、单环或双环环烯基和单环或双环杂环基。在实施方式中，多环环烷基通过基础环内包括的任何碳原子与母体分子部分连接。在实施方式中，多环环烷基环体系是与以下稠合的单环环烷基环(基础环)：(i)选自由以下组成的组的一个环体系：双环芳基、双环杂芳基、双环环烷基、双环环烯基和双环杂环基；或(ii)独立地选自由以下组成的组的两个其它环体系：苯基、单环杂芳基、单环环烷基、单环环烯基和单环杂环基。多环环烷基的实例包括但不限于十四氢菲基(tetradecahydrophenanthrenyl)、全氢吩噻嗪-1-基和全氢吩噁嗪-1-基。
在实施方式中，环烷基是环烯基。术语“环烯基”根据其普通一般含义使用。在实施方式中，环烯基是单环、双环或多环环烯基环体系。在实施方式中，单环环烯基环体系是包括3至8个碳原子的环状烃基团，其中此类基团是不饱和的(即，包括至少一个环形碳碳双键)，但不是芳香族的。单环环烯基环体系的实例包括环戊烯基和环己烯基。在实施方式中，双环环烯基环是桥接的单环或稠合的双环。在实施方式中，桥接的单环包括单环环烯基环，其中单环的两个非相邻碳原子通过介于一个与三个之间的另外的碳原子的亚烷基桥连接(即，形式为(CH2)w的桥接基团，其中w是1、2或3)。双环环烯基的代表性实例包括但不限于降冰片烯基和双环[2.2.2]辛2烯基。在实施方式中，稠合的双环环烯基环系包括与苯基、单环环烷基、单环环烯基、单环杂环基或单环杂芳基稠合的单环环烯基环。在实施方式中，桥接的或稠合的双环环烯基通过单环环烯基环内包括的任何碳原子与母体分子部分连接。在实施方式中，环烯基任选地被独立地为氧代或硫代的一个或两个基团取代。在实施方式中，多环环烯基环包括与以下稠合的单环环烯基环(基础环)：(i)选自由以下组成的组的一个环体系：双环芳基、双环杂芳基、双环环烷基、双环环烯基和双环杂环基；或(ii)独立地选自由以下组成的组的两个环体系：苯基、双环芳基、单环或双环杂芳基、单环或双环环烷基、单环或双环环烯基和单环或双环杂环基。在实施方式中，多环环烯基通过基础环内包括的任何碳原子与母体分子部分连接。在实施方式中，多环环烯基环包括与以下稠合的单环环烯基环(基础环)：(i)选自由以下组成的组的一个环体系：双环芳基、双环杂芳基、双环环烷基、双环环烯基和双环杂环基；或(ii)独立地选自由以下组成的组的两个环体系：苯基、单环杂芳基、单环环烷基、单环环烯基和单环杂环基。
在实施方式中，杂环烷基是杂环基。如本文所使用的，术语“杂环基”意指单环、双环或多环杂环。杂环基单环杂环是包括至少一个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的3元、4元、5元、6元或7元环，其中环是饱和的或不饱和的，但不是芳香族的。3元或4元环包括选自由O、N和S组成的组的1个杂原子。5元环可以包括零个或一个双键以及选自由O、N和S组成的组的一个、两个或三个杂原子。6元或7元环包括零个、一个或两个双键以及选自由O、N和S组成的组的一个、两个或三个杂原子。杂环基单环杂环通过杂环基单环杂环内包括的任何碳原子或任何氮原子与母体分子部分连接。杂环基单环杂环的代表性实例包括但不限于氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、氮丙啶基、二氮杂环庚烷基、1,3-二氧杂环己基、1,3-二氧杂戊烷基、1,3-二硫代戊基、1,3-二噻烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑啉基、异噻唑烷基、异噁唑基、异噁唑烷基、吗啉基、噁二唑啉基、噁二唑烷基、噁唑啉基、噁唑烷基、哌嗪基、哌啶基、吡喃基、吡唑啉基、噻唑烷基、吡咯啉基、吡咯烷基、四氢呋喃甲基、四氢噻吩基、噻二唑啉基、噻二唑啉烷基、噻唑啉基、四氢噻唑基、硫代吗啉基、1,1-氧硫代吗啉基(硫代吗啉砜)、硫代吡喃基和三噻烷基。杂环基双环杂环是与苯基、单环环烷基、单环环烯基、单环杂环或单环杂芳基稠合的单环杂环。杂环基双环杂环通过双环环体系的单环杂环部分内包括的任何碳原子或任何氮原子与母体分子部分连接。双环杂环基的代表性实例包括但不限于2,3-二氢苯并呋喃-2-基、2,3-二氢苯并呋喃-3-基、吲哚-1-基、吲哚-2-基、吲哚-3-基、2,3-二氢苯并噻吩-2-基、十氢喹啉基、十氢异喹啉基、八氢-1H-吲哚基和八氢苯并呋喃基。在实施方式中，杂环基任选地被独立地为氧代或硫代的一个或两个基团取代。在某些实施方式中，双环杂环基是与苯环、5或6元单环环烷基、5或6元单环环烯基、5或6元单环杂环基或5或6元单环杂芳基稠合的5或6元单环杂环基环，其中双环杂环基任选地被独立地为氧代或硫代的一个或两个基团取代。多环杂环基环体系是与以下稠合的单环杂环基环(基础环)：(i)选自由以下组成的组的一个环体系：双环芳基、双环杂芳基、双环环烷基、双环环烯基和双环杂环基；或(ii)独立地选自由以下组成的组的两个其它环体系：苯基、双环芳基、单环或双环杂芳基、单环或双环环烷基、单环或双环环烯基和单环或双环杂环基。多环杂环基通过基础环内包括的任何碳原子或氮原子与母体分子部分连接。在实施方式中，多环杂环基环体系是与以下稠合的单环杂环基环(基础环)：(i)选自由以下组成的组的一个环体系：双环芳基、双环杂芳基、双环环烷基、双环环烯基和双环杂环基；或(ii)独立地选自由以下组成的组的两个其它环体系：苯基、单环杂芳基、单环环烷基、单环环烯基和单环杂环基。多环杂环基的实例包括但不限于10H-吩噻嗪-10-基、9,10-二氢吖啶-9-基、9,10-二氢吖啶-10-基、10H-吩恶嗪-10-基、10,11-二氢-5H-二苯并[b,f]氮杂卓-5-基、1,2,3,4-四氢吡啶并[4,3-g]异喹啉-2-基、12H-苯并[b]吩恶嗪-12-基和十二氢-1H-咔唑-9-基。
除非另外说明，否则术语“卤代”或“卤素”，其本身或作为另一个取代基的一部分，意指氟、氯、溴或碘原子。另外地，如“卤代烷基”等术语意指包括单卤代烷基和多卤代烷基。例如，术语“卤代(C1-C4)烷基”包括但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。
除非另外说明，否则术语“酰基”意指-C(O)R，其中R是经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基。
除非另外说明，否则术语“芳基”意指多不饱和的芳香族烃取代基，其可以是单环或稠合在一起(即，稠环芳基)或共价连接的多个环(优选地，1至3个环)。稠环芳基是指稠合在一起的多个环，其中稠环中的至少一个稠环是芳基环。术语“杂芳基”是指包括至少一个杂原子(如N、O或S)的芳基(或环)，其中氮原子和硫原子任选地被氧化，并且氮原子任选地被季铵化。因此，术语“杂芳基”包括稠环杂芳基(即，稠合在一起的多个环，其中稠环中的至少一个稠环是杂芳香族环)。5,6-稠环亚杂芳基是指稠合在一起的两个环，其中一个环具有5元并且另一个环具有6元，并且其中至少一个环是杂芳基环。同样，6,6-稠环亚杂芳基是指稠合在一起的两个环，其中一个环具有6元并且另一个环具有6元，并且其中至少一个环是杂芳基环。并且6,5-稠环亚杂芳基是指稠合在一起的两个环，其中一个环具有6元并且另一个环具有5元，并且其中至少一个环是杂芳基环。杂芳基可以通过碳或杂原子与分子的其余部分连接。芳基和杂芳基的非限制性实例包括苯基、萘基、吡咯基、吡唑基、哒嗪基、三嗪基、嘧啶基、咪唑基、吡嗪基、嘌呤基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃、异苯并呋喃基、吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、异喹啉基、喹喔啉基、喹啉基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-噁唑基、4-噁唑基、2-苯基-4-噁唑基、5-噁唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。以上所指出的芳基和杂芳基环体系中的每一个的取代基选自下文所描述的可接受取代基的组。“亚芳基”和“亚杂芳基”单独或作为另一个取代基的一部分，意指分别衍生自芳基和杂芳基的二价基团。杂芳基取代基可以是与环杂原子氮键合的-O-。
稠环杂环烷基-芳基是与杂环烷基稠合的芳基。稠环杂环烷基-杂芳基是与杂环烷基稠合的杂芳基。稠环杂环烷基-环烷基是与环烷基稠合的杂环烷基。稠环杂环烷基-杂环烷基是与另一个杂环烷基稠合的杂环烷基。稠环杂环烷基-芳基、稠环杂环烷基-杂芳基、稠环杂环烷基-环烷基或稠环杂环烷基-杂环烷基可以各自独立地未被取代或被本文所描述的取代基中的一个或多个取代基取代。
螺环是其中相邻环通过单个原子连接的两个或更多个环。螺环内的单个环可以是相同的或不同的。螺环中的单个环可以是经取代或未经取代的，并且可以具有与一组螺环内的其它单个环不同的取代基。螺环内的单个环的可能取代基是当不是螺环的一部分时的同一环的可能取代基(例如，环烷基环或杂环烷基环的取代基)。螺环可以是经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的亚环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的亚杂环烷基，并且螺环基团内的单个环可以是紧接着的前一列表中的任何环，包括具有一种类型的所有环(例如，取代亚杂环烷基的所有环，其中每个环可以是相同的或不同的经取代的亚杂环烷基)。当提及螺环环体系时，杂环螺环意指其中至少一个环是杂环并且其中每个环可以是不同环的螺环。当提及螺环环体系时，经取代的螺环意指至少一个环是经取代的并且每个取代基可以任选地是不同的。
符号(波浪线)表示化学部分与分子或化学式的其余部分连接的点。
如本文所使用的，术语“氧代”意指与碳原子双键键合的氧。
如本文所使用的，术语“烷基磺酰基”意指具有式-S(O2)-R'的部分，其中R'是如以上所定义的经取代或未经取代的烷基。R'可以具有指定数量的碳(例如，“C1-C4烷基磺酰基”)。
术语“烷基亚芳基”是与亚烷基部分(在本文中也称为亚烷基连接子)共价键合的亚芳基部分。在实施方式中，烷基亚芳基具有式：
烷基亚芳基部分可以在亚烷基部分或亚芳基连接子上(例如，在碳2、3、4或6处)被以下取代(例如，被取代基取代)：卤素、氧代、-N3、-CF3、-CCl3、-CBr3、-CI3、-CN、-CHO、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO2CH3、-SO3H、-OSO3H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC(O)NHNH2、经取代或未经取代的C1-C5烷基或经取代或未经取代的2至5元杂烷基)。在实施方式中，烷基亚芳基是未经取代的。
以上术语中的每个术语(例如，“烷基”、“杂烷基”、“环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”和“杂芳基”)包括所指示的基团的经取代的形式和未经取代的形式两者。下文提供了针对每种类型的基团的优选取代基。
烷基和杂烷基(包括通常被称为亚烷基、烯基、亚杂烷基、杂烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的那些基团)的取代基可以是选自但不限于以下的多个基团中的一个或多个基团：-OR'、＝O、＝NR'、＝N-OR'、-NR'R”、-SR'、-卤素、-SiR'R”R”'、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R”、-OC(O)NR'R”、-NR”C(O)R'、-NR'-C(O)NR”R”'、-NR”C(O)2R'、-NR-C(NR'R”R”')＝NR””、-NR-C(NR'R”)＝NR”'、-S(O)R'、-S(O)2R'、-S(O)2NR'R”、-NRSO2R'、-NR'NR”R”'、-ONR'R”、-NR'C(O)NR”NR”'R””、-CN、-NO2、-NR'SO2R”、-NR'C(O)R”、-NR'C(O)-OR”、-NR'OR”，数量在零至(2m'+1)的范围内，其中m'是此类基团中的碳原子的总数。R、R'、R”、R”'和R””各自优选地独立地是指氢、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基(例如，被1-3个卤素取代的芳基)、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基或芳烷基。当本文所描述的化合物包括多于一个R基团时，例如，如当存在多于一个这些基团时独立地选择每个R'基团、R”基团、R”'基团和R””基团那样，独立地选择R基团中的每个基团。当R'和R”与同一氮原子连接时，其可以与氮原子组合以形成4元、5元、6元或7元环。例如，-NR'R”包括但不限于1-吡咯烷基和4-吗啉基。根据上文对取代基的讨论，本领域的技术人员将理解术语“烷基”旨在包括包含与除氢基团以外的基团结合的碳原子的基团，如卤代烷基(例如，-CF3和-CH2CF3)和酰基(例如，-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3等)。
类似于针对烷基所描述的取代基，芳基和杂芳基的取代基是变化的并且选自例如：-OR'、-NR'R”、-SR'、-卤素、-SiR'R”R”'、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R”、-OC(O)NR'R”、-NR”C(O)R'、-NR'-C(O)NR”R”'、-NR”C(O)2R'、-NR-C(NR'R”R”')＝NR””、-NR-C(NR'R”)＝NR”'、-S(O)R'、-S(O)2R'、-S(O)2NR'R”、-NRSO2R'、-NR'NR”R”'、-ONR'R”、-NR'C(O)NR”NR”'R””、-CN、-NO2、-R'、-N3、-CH(Ph)2、氟代(C1-C4)烷氧基和氟代(C1-C4)烷基、-NR'SO2R”、-NR'C(O)R”、-NR'C(O)-OR”、-NR'OR”，数量在零至芳香族环体系上的开放价总数的范围内；并且其中R'、R”、R”'和R””优选地独立地选自氢、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基和经取代或未经取代的杂芳基。当本文所描述的化合物包括多于一个R基团时，例如，如当存在多于一个这些基团时独立地选择每个R'基团、R”基团、R”'基团和R””基团那样，独立地选择R基团中的每个R基团。
环(例如，环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、亚环烷基、亚杂环烷基、亚芳基或亚杂芳基)的取代基可以被描绘为环上的而非环的特定原子上的取代基(通常被称为浮动取代基)。在此情况下，取代基可以与环原子中的任何环原子(遵循化学价规则)连接，并且在稠环或螺环的情况下，被描绘为与稠环或螺环的一个元缔合的取代基(单环上的浮动取代基)可以是稠环或螺环中的任一个上的取代基(多个环上的浮动取代基)。当取代基与环而非特定原子连接(浮动取代基)并且取代基的下标是大于一的整数时，多个取代基可以位于同一原子、同一环、不同原子、不同稠环、不同螺环上，并且每个取代基可以任选地是不同的。在环与分子的其余部分的连接点不限于单个原子(浮动取代基)的情况下，连接点可以是环的任何原子，并且在稠环或螺环的情况下，在遵循化学价规则的同时可以是稠环或螺环中的任一个的任何原子。在环、稠环或螺环包括一个或多个环杂原子，并且所述环、稠环或螺环被示出为具有一个以上浮动取代基(包括但不限于与分子的其余部分的连接点)的情况下，浮动取代基可以与杂原子键合。在环杂原子被示出为与具有浮动取代基的结构或式中的一个或多个氢结合(例如，具有与环原子相连的两个键和与氢相连的第三键的环氮)的情况下，当杂原子与浮动取代基键合时，取代基将被理解为在遵循化学价规则的同时置换氢。
两个或更多个取代基可以任选地连接以形成芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基。发现此类所谓的环形成取代基通常(尽管不是必须的)与环状基础结构连接。在一个实施方式中，环形成取代基与基础结构的相邻元连接。例如，与环状基础结构的相邻元连接的两个环形成取代基产生稠环结构。在另一个实施方式中，环形成取代基与基础结构的单个元连接。例如，与环状基础结构的单个元连接的两个环形成取代基产生螺环结构。在又另一个实施方式中，环形成取代基与基础结构的非相邻元连接。
芳基或杂芳基环的相邻原子上的取代基中的两个取代基可以任选地形成式-T-C(O)-(CRR')p-U-的环，其中T和U独立地是-NR-、-O-、-CRR'-或单键，并且p是0至3的整数。可替代地，芳基或杂芳基环的相邻原子上的取代基中的两个可以任选地被式-A-(CH2)r-B-的取代基替代，其中A和B独立地是-CRR'-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2NR'-或单键，并且r是1至4的整数。如此形成的新环的单键之一可以任选地被双键替代。可替代地，芳基或杂芳基环的相邻原子上的取代基中的两个取代基可以任选地被式-(CRR')s-X'-(C”R”R”')d-的取代基替代，其中s和d独立地是0至3的整数，并且X'是-O-、-NR'-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-S(O)2NR'-。取代基R、R'、R”和R”'优选地独立地选自氢、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基和经取代或未经取代的杂芳基。
如本文所使用的，术语“杂原子”或“环杂原子”意在包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、磷(P)和硅(Si)。
如本文所使用的，“取代基”意指选自以下部分的基团：
(A)氧代、卤素、-CCl3、-CBr3、-CF3、-CI3、-CH2Cl、-CH2Br、-CH2F、-CH2I、-CHCl2、-CHBr2、-CHF2、-CHI2、-CN、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO3H、-SO4H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC(O)NHNH2、-NHC(O)NH2、-NHSO2H、-NHC(O)H、-NHC(O)OH、-NHOH、-OCCl3、-OCF3、-OCBr3、-OCI3、-OCHCl2、-OCHB r2、-OCHI2、-OCHF2、-N3、未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)、未经取代的杂烷基(例如，2至8元杂烷基、2至6元杂烷基或2至4元杂烷基)、未经取代的环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)、未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、未经取代的芳基(例如，C6-C10芳基、C10芳基或苯基)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)，以及
(B)被至少一个选自以下的取代基取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)、杂烷基(例如，2至8元杂烷基、2至6元杂烷基或2至4元杂烷基)、环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)、杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、芳基(例如，C6-C10芳基、C10芳基或苯基)、杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)：
(i)氧代、卤素、-CCl3、-CBr3、-CF3、-CI3、-CH2Cl、-CH2Br、-CH2F、-CH2I、-CHCl2、-CHBr2、-CHF2、-CHI2、-CN、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO3H、-S O4H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC(O)NHNH2、-NHC(O)NH2、-NHSO2H、-NHC(O)H、-NHC(O)OH、-NHOH、-OCCl3、-OCF3、-OCBr3、-OCI3、-OCHCl2、-OCHBr2、-OC HI2、-OCHF2、-N3、未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)、未经取代的杂烷基(例如，2至8元杂烷基、2至6元杂烷基或2至4元杂烷基)、未经取代的环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)、未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、未经取代的芳基(例如，C6-C10芳基、C10芳基或苯基)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)，以及
(ii)被至少一个选自以下的取代基取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)、杂烷基(例如，2至8元杂烷基、2至6元杂烷基或2至4元杂烷基)、环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)、杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、芳基(例如，C6-C10芳基、C10芳基或苯基)、杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)：
(a)氧代、卤素、-CCl3、-CBr3、-CF3、-CI3、-CH2Cl、-CH2Br、-CH2F、-CH2I、-CHCl2、-CHBr2、-CHF2、-CHI2、-CN、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO3H、-S O4H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC(O)NHNH2、-NHC(O)NH2、-NHSO2H、-NHC(O)H、-NHC(O)OH、-NHOH、-OCCl3、-OCF3、-OCBr3、-OCI3、-OCHCl2、-OCHBr2、-OC HI2、-OCHF2、-N3、未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)、未经取代的杂烷基(例如，2至8元杂烷基、2至6元杂烷基或2至4元杂烷基)、未经取代的环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)、未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、未经取代的芳基(例如，C6-C10芳基、C10芳基或苯基)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)，以及
(b)烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)、杂烷基(例如，2至8元杂烷基、2至6元杂烷基或2至4元杂烷基)、环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)、杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、被至少一个选自以下的取代基取代的芳基(例如，C6-C10芳基、C10芳基或苯基)、杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)：氧代，卤素、-CCl3、-CBr3、-CF3、-CI3、-CH2Cl、-CH2Br、-CH2F、-CH2I、-CHCl2、-CHBr2、-C HF2、-CHI2、-CN、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO3H、-SO4H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC(O)NHNH2、-NHC(O)NH2,-NHSO2H、-NHC(O)H、-NHC(O)OH、-NHOH、-OCCl3、-OCF3、-OCBr3、-OCI3、-OCHCl2、-OCHBr2、-OCHI2、-OCHF2、-N3、未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)、未经取代的杂烷基(例如，2至8元杂烷基、2至6元杂烷基或2至4元杂烷基)、未经取代的环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)、未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、未经取代的芳基(例如，C6-C10芳基、C10芳基或苯基)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。
如本文所使用的，“大小受限的取代基(size-limited substituent)”或“大小受限的取代基(size-limited substituent group)”意指选自上文针对“取代基”所描述的所有取代基的基团，其中每个经取代或未经取代的烷基是经取代或未经取代的C1-C20烷基，每个经取代或未经取代的杂烷基是经取代或未经取代的2至20元杂烷基，每个经取代或未经取代的环烷基是经取代或未经取代的C3-C8环烷基，每个经取代或未经取代的杂环烷基是经取代或未经取代的3至8元杂环烷基，每个经取代或未经取代的芳基是经取代或未经取代的C6-C10芳基，并且每个经取代或未经取代的杂芳基是经取代或未经取代的5至10元杂芳基。
如本文所使用的，“低级取代基(lower substituent)”或“低级取代基(lowersubstituent group)”意指选自上文针对“取代基”所描述的所有取代基的基团，其中每个经取代或未经取代的烷基是经取代或未经取代的C1-C8烷基，每个经取代或未经取代的杂烷基是经取代或未经取代的2至8元杂烷基，每个经取代或未经取代的环烷基是经取代或未经取代的C3-C7环烷基，每个经取代或未经取代的杂环烷基是经取代或未经取代的3至7元杂环烷基，每个经取代或未经取代的芳基是经取代或未经取代的苯基，并且每个经取代或未经取代的杂芳基是经取代或未经取代的5至6元杂芳基。
在一些实施方式中，本文化合物中所描述的每个经取代的基团被至少一个取代基取代。更具体地，在一些实施方式中，本文化合物中所描述的每个经取代的烷基、经取代的杂烷基、经取代的环烷基、经取代的杂环烷基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、经取代的亚烷基、经取代的亚杂烷基、经取代的亚环烷基、经取代的亚杂环烷基、经取代的亚芳基和/或经取代的亚杂芳基被至少一个取代基取代。在其它实施方式中，这些基团中的至少一个基团或全部基团被至少一个大小受限的取代基取代。在其它实施方式中，这些基团中的至少一个基团或全部基团被至少一个低级取代基取代。
在本文化合物的其它实施方式中，每个经取代或未经取代的烷基可以是经取代或未经取代的C1-C20烷基，每个经取代或未经取代的杂烷基是经取代或未经取代的2至20元杂烷基，每个经取代或未经取代的环烷基是经取代或未经取代的C3-C8环烷基，每个经取代或未经取代的杂环烷基是经取代或未经取代的3至8元杂环烷基，每个经取代或未经取代的芳基是经取代或未经取代的C6-C10芳基，和/或每个经取代或未经取代的杂芳基是经取代或未经取代的5至10元杂芳基。在本文化合物的一些实施方式中，每个经取代或未经取代的亚烷基是经取代或未经取代的C1-C20亚烷基，每个经取代或未经取代的亚杂烷基是经取代或未经取代的2至20元亚杂烷基，每个经取代或未经取代的亚环烷基是经取代或未经取代的C3-C8亚环烷基，每个经取代或未经取代的亚杂环烷基是经取代或未经取代的3至8元亚杂环烷基，每个经取代或未经取代的亚芳基是经取代或未经取代的C6-C10亚芳基，和/或每个经取代或未经取代的亚杂芳基是经取代或未经取代的5至10元亚杂芳基。
在一些实施方式中，每个经取代或未经取代的烷基可以是经取代或未经取代的C1-C8烷基，每个经取代或未经取代的杂烷基是经取代或未经取代的2至8元杂烷基，每个经取代或未经取代的环烷基是经取代或未经取代的C3-C7环烷基，每个经取代或未经取代的杂环烷基是经取代或未经取代的3至7元杂环烷基，每个经取代或未经取代的芳基是经取代或未经取代的C6-C10芳基和/或每个经取代或未经取代的杂芳基是经取代或未经取代的5至9元杂芳基。在一些实施方式中，每个经取代或未经取代的亚烷基是经取代或未经取代的C1-C8亚烷基，每个经取代或未经取代的亚杂烷基是经取代或未经取代的2至8元亚杂烷基，每个经取代或未经取代的亚环烷基是经取代或未经取代的C3-C7亚环烷基，每个经取代或未经取代的亚杂环烷基是经取代或未经取代的3至7元亚杂环烷基，每个经取代或未经取代的亚芳基是经取代或未经取代的C6-C10亚芳基，和/或每个经取代或未经取代的亚杂芳基是经取代或未经取代的5至9元亚杂芳基。在一些实施方式中，化合物是以下实施例章节、附图或表格中所阐述的化学物种。
在实施方式中，经取代或未经取代的部分(例如，经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的亚烷基、经取代或未经取代的亚杂烷基、经取代或未经取代的亚环烷基、经取代或未经取代的亚杂环烷基、经取代或未经取代的亚芳基和/或经取代或未经取代的亚杂芳基)是未经取代的(例如，分别是未经取代的烷基、未经取代的杂烷基、未经取代的环烷基、未经取代的杂环烷基、未经取代的芳基、未经取代的杂芳基、未经取代的亚烷基、未经取代的亚杂烷基、未经取代的亚环烷基、未经取代的亚杂环烷基、未经取代的亚芳基和/或未经取代的亚杂芳基)。在实施方式中，经取代或未经取代的部分(例如，经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的亚烷基、经取代或未经取代的亚杂烷基、经取代或未经取代的亚环烷基、经取代或未经取代的亚杂环烷基、经取代或未经取代的亚芳基和/或经取代或未经取代的亚杂芳基)是经取代的(例如，分别是经取代的烷基、经取代的杂烷基、经取代的环烷基、经取代的杂环烷基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、经取代的亚烷基、经取代的亚杂烷基、经取代的亚环烷基、经取代的亚杂环烷基、经取代的亚芳基和/或经取代的亚杂芳基)。
在实施方式中，经取代的部分(例如，经取代的烷基、经取代的杂烷基、经取代的环烷基、经取代的杂环烷基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、经取代的亚烷基、经取代的亚杂烷基、经取代的亚环烷基、经取代的亚杂环烷基、经取代的亚芳基和/或经取代的亚杂芳基)被至少一个取代基取代，其中如果经取代的部分被多个取代基取代，则每个取代基可以任选地是不同的。在实施方式中，如果经取代的部分被多个取代基取代，则每个取代基是不同的。
在实施方式中，经取代的部分(例如，经取代的烷基、经取代的杂烷基、经取代的环烷基、经取代的杂环烷基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、经取代的亚烷基、经取代的亚杂烷基、经取代的亚环烷基、经取代的亚杂环烷基、经取代的亚芳基和/或经取代的亚杂芳基)被至少一个大小受限的取代基取代，其中如果经取代的部分被多个大小受限的取代基取代，则每个大小受限的取代基可以任选地是不同的。在实施方式中，如果经取代的部分被多个大小受限的取代基取代，则每个大小受限的取代基是不同的。
在实施方式中，经取代的部分(例如，经取代的烷基、经取代的杂烷基、经取代的环烷基、经取代的杂环烷基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、经取代的亚烷基、经取代的亚杂烷基、经取代的亚环烷基、经取代的亚杂环烷基、经取代的亚芳基和/或经取代的亚杂芳基)被至少一个低级取代基取代，其中如果经取代的部分被多个低级取代基取代，则每个低级取代基可以任选地是不同的。在实施方式中，如果经取代的部分被多个低级取代基取代，则每个低级取代基是不同的。
在实施方式中，经取代的部分(例如，经取代的烷基、经取代的杂烷基、经取代的环烷基、经取代的杂环烷基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、经取代的亚烷基、经取代的亚杂烷基、经取代的亚环烷基、经取代的亚杂环烷基、经取代的亚芳基和/或经取代的亚杂芳基)被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代；其中如果经取代的部分被选自取代基、大小受限的取代基和低级取代基的多个基团取代，则每个取代基、大小受限的取代基和/或低级取代基可以任选地是不同的。在实施方式中，如果经取代的部分被选自取代基、大小受限的取代基和低级取代基的多个基团取代，则每个取代基、大小受限的取代基和/或低级取代基是不同的。
本公开的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心或手性中心)或双键；就绝对立体化学而言，可以被定义为呈氨基酸和单独异构体的(R)-或(S)-或呈(D)-或(L)-的对映异构体、外消旋体、非对映异构体、互变异构体、几何异构体、立体异构形式涵盖在本公开的范围内。本公开的化合物不包括本领域中已知的太不稳定而无法进行合成和/或分离的化合物。本公开意在包括呈外消旋形式和光学纯形式的化合物。光学活性(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂来制备，或使用常规技术来解析。当本文所描述的化合物包括烯烃键或其它几何不对称中心时，并且除非另外指明，否则预期化合物包括E几何异构体和Z几何异构体两者。
如本文所使用的，术语“异构体”是指具有相同数量和种类的原子，并且因此具有相同分子量，但在原子的结构布置或配置方面不同的化合物。
如本文所使用的，术语“互变异构体”是指平衡存在并且容易由一种异构形式转化为另一种异构形式的两种或更多种结构异构体之一。
对于本领域的技术人员将显而易见的是，本公开的某些化合物可以以互变异构形式存在，所述化合物的所有此类互变异构形式均处于本公开的范围内。
除非另外说明，否则本文所描绘的结构也意在包括所述结构的所有立体化学形式；即，每个不对称中心的R构型和S构型。因此，本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构体混合物和非对映异构体混合物均处于本公开的范围内。
应注意，贯穿本申请，替代方案书写在马库什群组(Markush group)中，例如包括多于一个可能氨基酸的每个氨基酸位置中。经特别考虑，马库什群组的每个成员应单独考虑，由此包括另一个实施方式，并且马库什群组不应被理解为单一单位。
“连接子”是指包括共价键或原子链的将抗体与药物部分共价连接的化学部分。在各个实施方式中，连接子包括二价基团。在各个实施方式中，连接子可以包括一个或多个氨基酸残基。在实施方式中，连接子是不可切割连接子。在实施方式中，连接子是酶可切割连接子(例如，Val-Cit或Val-Cit-PAB连接子)。
“氨基酸单元”具有式其中R0是氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苄基、对羟基苄基、—CH2OH、—CH(OH)CH3、—CH2CH2SCH3、—CH2CONH2、—CH2COOH、—CH2CH2CONH2、—CH2CH2COOH、—(CH2)3NHC(═NH)NH2、—(CH2)3NH2、—(CH2)3NHCOCH3、—(CH2)3NHCHO、—(CH2)4NHC(═NH)NH2、—(CH2)4NH2、—(CH2)4NHCOCH3、—(CH2)4NHCHO、—(CH2)3NHCONH2、—(CH2)4NHCONH2、—CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2-吡啶基甲基-、3-吡啶基甲基-、4-吡啶基甲基-、苯基或环己基。在各个实施方式中，氨基酸单元不仅包括天然存在的氨基酸，而且包括次要氨基酸(minor amino acids)，以及非天然存在的氨基酸类似物，如瓜氨酸、正亮氨酸、硒代甲硫氨酸、β-丙氨酸等。氨基酸单元可以通过其针对氨基酸的标准三字母代码(例如，Ala、Cys、Asp、Glu、Val、Phe、Lys等)来表示。
如本文所使用的，术语“生物缀合物”和“生物缀合物连接子”是指“生物缀合物反应性基团”或“生物缀合物反应性部分”的原子或分子之间产生的缔合。缔合可以是直接的或间接的。例如，本文所提供的第一生物缀合物反应性基团(例如，–NH2、–C(O)OH、-N-羟基琥珀酰亚胺或-马来酰亚胺)与第二生物缀合物反应性基团(例如，硫醇、含硫氨基酸、胺、含氨基酸的胺侧链或羧酸盐)之间的缀合可以例如通过共价键或连接子(例如，第二连接子的第一连接子)直接进行，或例如通过非共价键(例如，静电相互作用(例如，离子键、氢键、卤素键)、范德华相互作用(例如，偶极-偶极、偶极诱导的偶极、伦敦分散)、环堆积(π效应)、疏水相互作用等)间接进行。在实施方式中，生物缀合物或生物缀合物连接子是使用生物缀合物化学(即，两个生物缀合物反应性基团的缔合)形成的，所述生物缀合物化学包括但不限于亲核取代(例如，胺和醇与酰基卤、活性酯的反应)、亲电取代(例如，烯胺反应)以及碳-碳和碳-杂原子多重键的加成(例如，迈克尔反应(Michael reaction)、狄尔斯-阿尔德加成(Diels-Alder addition))。在以下文献中讨论了这些和其它有用的反应：例如，March,《高级有机化学(ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY)》,第3版,纽约的约翰威利父子公司(JohnWiley&Sons,New York),1985；Hermanson,《生物缀合物技术(BIOCONJUGATETECHNIQUES)》,圣迭戈学术出版社(Academic Press,San Diego),1996；和Feeney等人,《蛋白质的修饰(MODIFICATION OF PROTEINS)》,化学进展系列,第198卷,华盛顿特区的美国化学学会(American Chemical Society,Washington,D.C.),1982。在实施方式中，第一生物缀合物反应性基团(例如，马来酰亚胺部分)与第二生物缀合物反应性基团(例如，硫醇)共价连接。在实施方式中，第一生物缀合物反应性基团(例如，卤代乙酰基部分)与第二生物缀合物反应性基团(例如，硫醇)共价连接。在实施方式中，第一生物缀合物反应性基团(例如，吡啶基部分)与第二生物缀合物反应性基团(例如，硫醇)共价连接。在实施方式中，第一生物缀合物反应性基团(例如，-N-羟基琥珀酰亚胺部分)与第二生物缀合物反应性基团(例如，胺)共价连接。在实施方式中，第一生物缀合物反应性基团(例如，氟苯基酯部分)与第二生物缀合物反应性基团(例如，胺)反应以形成共价键。在实施方式中，第一生物缀合物反应性基团(例如，–磺基–N-羟基琥珀酰亚胺部分)与第二生物缀合物反应性基团(例如，胺)反应以形成共价键。
用于本文的生物缀合物化学的有用的生物缀合物反应性部分包括，例如：
(a)羧基及其各种衍生物，包括但不限于N-羟基琥珀酰亚胺酯、N-羟基苯并三唑酯、酸性卤化物、酰基咪唑、硫代酯、对硝基苯基酯、烷基、烯基、炔基和芳香族酯；
(b)羟基，所述羟基可以转化为酯、醚、醛等。
(c)卤代烷基，其中卤化物随后可以被如胺、羧酸根阴离子、硫醇阴离子、碳负离子或烷氧离子等亲核基团置换，由此导致新的基团在卤素原子的位点处共价连接；
(d)亲二烯基，所述亲二烯基能够参与狄尔斯-阿尔德反应，例如马来酰亚胺基或马来酰亚胺基团；
(e)醛基或酮基，所述醛基或酮基使得可以通过羰基衍生物(例如，亚胺、腙、半卡巴腙或肟)的形成或通过如格氏(Grignard)加成或烷基锂加成等机制进行随后的衍生化；
(f)磺酰卤基，所述磺酰卤基用于随后与胺反应，例如以形成磺酰胺；
(g)硫醇基，所述硫醇基可以转化为二硫化物，与酰基卤反应，或与如金等金属键合，或与马来酰亚胺反应；
(h)胺或硫醇基(例如，存在于半胱氨酸中)，所述胺或硫醇基可以被例如酰化、烷基化或氧化；
(i)烯烃，所述烯烃可以经历例如环加成、酰化、迈克尔加成等；
(j)环氧化物，所述环氧化物可以与例如胺和羟基化合物反应；
(k)亚磷酰胺和可用于核酸合成的其它标准官能团；
(l)金属氧化硅键合；以及
(m)与反应性磷基(例如，膦)以形成例如磷酸二酯键的金属键合。
(n)使用铜催化的环加成点击化学与炔烃偶联的叠氮化物。
(o)生物素缀合物可以与亲和素或链霉亲和素(strepavidin)反应，以形成亲和素-生物素复合物或链霉亲和素-生物素复合物。
可以选择生物缀合物反应性基团，使得其不参与或不干扰本文所描述的缀合物的化学稳定性。可替代地，可以通过保护基团的存在来保护反应性官能团不参与交联反应。在实施方式中，生物缀合物包括衍生自如马来酰亚胺等不饱和键与硫醇基的反应的分子实体。
“类似物(analog)”或“类似物(analogue)”根据其在化学和生物学内的普通一般含义使用，并且是指例如在一个原子被不同元素的原子置换中，或在存在特定官能团的情况下，或一个官能团被另一个官能团替代中，或参考化合物的一个或多个手性中心的绝对立体化学中，与另一化合物(即，所谓的“参考”化合物)在结构上类似但在组成上不同的化学化合物。因此，类似物是与参考化合物在功能和外观上类似或相当，但在结构或来源上不类似或不相当的化合物。
如本文所使用的，常见的有机和细胞类型缩写定义如下：
Ac 乙酰基
ACN 乙腈
Ala 丙氨酸
Asn 天冬酰胺
aq. 水溶液
β-Ala β-丙氨酸
BOC或Boc 叔丁氧基羰基
℃ 以摄氏度为单位的温度
CBZ 苄氧羰基
Cit 瓜氨酸
DBU 1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯
DCM 二氯甲烷
DIEA 二异丙基乙胺
DMAP 4-(二甲基氨基)吡啶
DMF N,N'-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
EDC 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺
EEDQ N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉
Et 乙基
EtOAc 乙酸乙酯
Eq 当量
Fmoc 9-芴基甲氧基羰基
G 克
Gly 甘氨酸
Hr 小时(Hour/hours)
HATU 2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐
HOBt N-羟基苯并三唑
HPLC 高效液相色谱法
LC/MS 液相色谱法-质谱法
Lys 赖氨酸
Me 甲基
mg 毫克
MeOH 甲醇
mL 毫升
μL/μL 微升
mol 摩尔
mmol 毫摩尔
μmol/umol 微摩尔
MS 质谱法
NHS N-羟基琥珀酰亚胺
PAB或PABC 对氨基苄氧羰基
Phe 苯丙氨酸
Pip 哌啶
PyAOP (7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)六氟磷酸盐三吡咯烷磷鎓
RP-HPLC 反相HPLC
rt 室温
Ser 丝氨酸
t-Bu 叔丁基
Tert,t- 叔
TFA 三氟乙酸
Thr 苏氨酸
Val 缬氨酸
组合物
抗体偶联药物
一方面，本文提供了一种抗体偶联药物(ADC)，所述ADC包含单克隆抗体(Ab)、药物部分(D)和将所述单克隆抗体与所述药物部分共价连接的连接子部分。
另一方面，本文提供了一种式(I)或化学式(II)的ADC：
或其药学上可接受的盐，其中：
Ab是单克隆抗体；
m是1至8的整数；
L1是与所述单克隆抗体结合的连接子；
L2是键、-C(O)-、-NH-、氨基酸单元、–(CH2CH2O)n–、–(CH2)n–、-O-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(C(O)CH2CH2NH)–、–(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))–或其任何组合；其中n是1至24的整数；
每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基；
L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基、经取代或未经取代的亚杂芳基、经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接；
R1是经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
D是并且D'是其中D'通过其酰胺基与R1连接并且通过氧与L2连接。
在实施方式中，m是1至8的整数。在实施方式中，m是1。在实施方式中，m是2。在实施方式中，m是3。在实施方式中，m是4。在实施方式中，m是5。在实施方式中，m是6。在实施方式中，m是7。在实施方式中，m是8。
在实施方式中，n是1至24的整数。在实施方式中，n是1。在实施方式中，n是2。在实施方式中，n是3。在实施方式中，n是4。在实施方式中，n是5。在实施方式中，n是6。在实施方式中，n是7。在实施方式中，n是8。在实施方式中，n是9。在实施方式中，n是10。在实施方式中，n是11。在实施方式中，n是12。在实施方式中，n是13。在实施方式中，n是14。在实施方式中，n是15。在实施方式中，n是16。在实施方式中，n是17。在实施方式中，n是18。在实施方式中，n是19。在实施方式中，n是20。在实施方式中，n是21。在实施方式中，n是22。在实施方式中，n是23。在实施方式中，n是24。
在实施方式中，所述单克隆抗体是抗HER2抗体、抗ROR1抗体、抗CD25抗体、抗TROP2抗体、抗B7-H3抗体、抗c-Met抗体、抗FOLR1抗体或抗CHOP2抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗HER2抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗ROR1抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗CD25抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗TROP2抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗B7-H3抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗c-Met抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗FOLR1抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗CHOP2抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体与跨膜蛋白，例如跨膜蛋白的细胞外结构域结合。在实施方式中，所述跨膜蛋白是跨膜受体，如跨膜受体激酶。在实施方式中，所述跨膜受体激酶是跨膜受体酪氨酸激酶。在实施方式中，所述单克隆抗体与酪氨酸激酶结合。
在实施方式中，所述单克隆抗体是经修饰的抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是经修饰的抗HER2抗体、抗ROR1抗体、抗CD25抗体、抗TROP2抗体、抗B7-H3抗体、抗c-Met抗体、抗FOLR1抗体或抗CHOP2抗体。在实施方式中，所述经修饰的抗体与跨膜蛋白，例如跨膜蛋白的细胞外结构域结合。在实施方式中，所述跨膜蛋白是跨膜受体，如跨膜受体激酶。在实施方式中，所述跨膜受体激酶是跨膜受体酪氨酸激酶。在实施方式中，所述经修饰的抗体与酪氨酸激酶结合。
在实施方式中，L1是与单克隆抗体结合的连接子。在实施方式中，L1是与单克隆抗体上的一个或两个硫或氮原子结合的连接子。在实施方式中，L1是与单克隆抗体上的一个硫原子结合的连接子。在实施方式中，L1是与单克隆抗体上的两个硫原子结合的连接子。在实施方式中，L1是与单克隆抗体上的一个氮原子结合的连接子。在实施方式中，L1是与单克隆抗体上的两个氮原子结合的连接子。
在实施方式中，L1是与经修饰的单克隆抗体结合的连接子。
在实施方式中，L1是与抗HER2抗体结合的连接子。在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的一个或两个硫或氮原子结合的连接子。在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的一个硫原子结合的连接子。在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的两个硫原子结合的连接子。在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的一个氮原子结合的连接子。在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的两个氮原子结合的连接子。
在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的一个半胱氨酸分子结合的连接子。在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的两个半胱氨酸分子结合的连接子。在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的一个赖氨酸分子结合的连接子。在实施方式中，L1是与抗HER2抗体上的两个赖氨酸分子结合的连接子。
在实施方式中，L1是与经修饰的抗HER2抗体、抗ROR1抗体、抗CD25抗体、抗TROP2抗体、抗B7-H3抗体、抗c-Met抗体、抗FOLR1抗体或抗CHOP2抗体结合的连接子。在实施方式中，L1是与经修饰的抗HER2抗体结合的连接子。
在实施方式中，L1是
在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是在实施方式中，L1是
在L1是的情况下，在结构的右侧上显示的两个CH2部分可以各自通过硫醇基与抗HER2抗体的不同半胱氨酸结合。在L1是的情况下，在结构的底部上显示的两个烯碳可以各自通过硫醇基与抗HER2抗体的不同半胱氨酸结合。在L1是的情况下，碳可以通过硫醇基与抗HER2抗体的半胱氨酸结合。
在实施方式中，L2是键、-C(O)-、-NH-、-Val-、-Phe-、-Lys-、-Gly-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))–、-Ser-、-Thr-、-Ala-、-β-Ala-、-瓜氨酸-(Cit)、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–或其任何组合。
在实施方式中，每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是H。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代或未经取代的烷基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代或未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。
在实施方式中，每个R2和R3独立地是H或经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的烷基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。
在实施方式中，每个R2和R3独立地是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基或己基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是甲基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是乙基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是丙基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是丁基。
在实施方式中，L2是键、-C(O)-、-NH-、-Val-、-Phe-、-Lys-、-Gly-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))–、-Ser-、-Thr-、-Ala-、-β-Ala-、-O-、-瓜氨酸-(Cit)、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–或其任何组合。
在实施方式中，L2是-C(O)-、-NH-、-Val-、-Gly-、-Cit-、-Ala-、-O-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–、–(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))–或其任何组合。
在实施方式中，L2是-C(O)-、-NH-、-Gly-、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–或其任何组合。
在实施方式中，L2是-C(O)-、-NH-、-Val-、-Cit-、–(CH2CH2O)n–、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(CH2)n–、–(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))–或其任何组合。
在实施方式中，L2是：
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是键。在实施方式中，L2是-C(O)-。在实施方式中，L2是-NH-。在实施方式中，L2是-Val-。在实施方式中，L2是-Phe-。在实施方式中，L2是-Lys-。在实施方式中，L2是–(4-氨基苄氧羰基)–。在实施方式中，L2是–(CH2)n–。在实施方式中，L2是–(CH2CH2O)n–。在实施方式中，L2是-Gly-。在实施方式中，L2是-Ser-。在实施方式中，L2是-Thr-。在实施方式中，L2是-Ala-。在实施方式中，L2是-β-Ala-。在实施方式中，L2是-Cit-。在实施方式中，L2是-O-。
在实施方式中，-L1-L2-是
在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是其中在结构的左侧上显示的两个CH2部分可以各自与单克隆抗体的单独硫结合。在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是其中在结构的底部上显示的两个烯碳可以各自与单克隆抗体的单独的硫结合。在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是在实施方式中，-L1-L2-是
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环烷基(例如，3至8元亚杂环烷基、3至6元亚杂环烷基或5至6元亚杂环烷基)、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂芳基(例如，5至10元亚杂芳基、5至9元亚杂芳基或5至6元亚杂芳基)、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。在实施方式中，L3被一个或多个取代基取代。在实施方式中，L3被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，L3被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)亚杂环烷基(例如，3至8元亚杂环烷基、3至6元亚杂环烷基或5至6元亚杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环烷基(例如，3至8元亚杂环烷基、3至6元亚杂环烷基或5至6元亚杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂芳基(例如，5至10元亚杂芳基、5至9元亚杂芳基或5至6元亚杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂芳基(例如，5至10元亚杂芳基、5至9元亚杂芳基或5至6元亚杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至8元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至8元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是未经取代的3至8元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至8元杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至8元杂环烷基。在实施方式中，L3是未经取代的3至8元杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(3至8元杂环烷基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至6元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至6元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是未经取代的3至6元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至6元杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至6元杂环烷基。在实施方式中，L3是未经取代的3至6元杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(3至6元杂环烷基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环丁基、亚杂环戊基或亚杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂环丁基、亚杂环戊基或亚杂环己基。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环丁基、亚杂环戊基或亚杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，L3是未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环丁基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂环丁基。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环丁基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基。在实施方式中，L3是未经取代的杂环丁基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环丁基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环戊基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂环戊基。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环戊基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环戊基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环戊基。在实施方式中，L3是未经取代的杂环戊基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环戊基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂环己基。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环己基。在实施方式中，L3是未经取代的杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环己基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至10元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至10元亚杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至10元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至10元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至10元杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至10元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(5至10元杂芳基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至9元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至9元亚杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至9元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至9元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至9元杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至9元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(5至9元杂芳基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至6元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至6元亚杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至6元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至6元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至6元杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至6元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(5至6元杂芳基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚呋喃基、亚吡咯基、亚吡啶基、亚吡喃基、亚咪唑基、亚噻吩基、亚噁唑基或亚噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚呋喃基、亚吡咯基、亚吡啶基、亚吡喃基、亚咪唑基、亚噻吩基、亚噁唑基或亚噻唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚呋喃基、亚吡咯基、亚吡啶基、亚吡喃基、亚咪唑基、亚噻吩基、亚噁唑基或亚噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，L3是未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚呋喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚呋喃基。在实施方式中，L3是未经取代的亚呋喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基。在实施方式中，L3是未经取代的呋喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(呋喃基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚吡咯基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚吡咯基。在实施方式中，L3是未经取代的亚吡咯基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡咯基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡咯基。在实施方式中，L3是未经取代的吡咯基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(吡咯基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚吡啶基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚吡啶基。在实施方式中，L3是未经取代的亚吡啶基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡啶基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡啶基。在实施方式中，L3是未经取代的吡啶基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(吡啶基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚吡喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚吡喃基。在实施方式中，L3是未经取代的亚吡喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡喃基。在实施方式中，L3是未经取代的吡喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(吡喃基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚咪唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚咪唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚咪唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的咪唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的咪唑基。在实施方式中，L3是未经取代的咪唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(咪唑基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚噻唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻唑基。在实施方式中，L3是未经取代的噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(噻唑基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚噻吩基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚噻吩基。在实施方式中，L3是未经取代的亚噻吩基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻吩基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻吩基。在实施方式中，L3是未经取代的噻吩基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(噻吩基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚噁唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚噁唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚噁唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噁唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噁唑基。在实施方式中，L3是未经取代的噁唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚噁唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(噁唑基)。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，R1被一个或多个取代基取代。在实施方式中，R1被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，R1被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，R1是未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，R1是未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至8元杂环烷基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至8元杂环烷基。在实施方式中，R1是未经取代的3至8元杂环烷基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至6元杂环烷基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至6元杂环烷基。在实施方式中，R1是未经取代的3至6元杂环烷基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，R1是未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基。在实施方式中，R1是未经取代的杂环丁基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环戊基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环戊基。在实施方式中，R1是未经取代的杂环戊基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环己基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环己基。在实施方式中，R1是未经取代的杂环己基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至10元杂芳基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至10元杂芳基。在实施方式中，R1是未经取代的5至10元杂芳基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至9元杂芳基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至9元杂芳基。在实施方式中，R1是未经取代的5至9元杂芳基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至6元杂芳基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至6元杂芳基。在实施方式中，R1是未经取代的5至6元杂芳基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。在实施方式中，R1是未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基。在实施方式中，R1是未经取代的呋喃基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡咯基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡咯基。在实施方式中，R1是未经取代的吡咯基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡啶基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡啶基。在实施方式中，R1是未经取代的吡啶基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡喃基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡喃基。在实施方式中，R1是未经取代的吡喃基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的咪唑基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的咪唑基。在实施方式中，R1是未经取代的咪唑基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻唑基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻唑基。在实施方式中，R1是未经取代的噻唑基。
在实施方式中，本文提供了一种式(IA)或式(IIA)的ADC：
或其药学上可接受的盐，其中：
环A是通过杂原子Y与L2连接的经取代或未经取代的亚杂环烷基或经取代或未经取代的亚杂芳基；
环A'是通过杂原子Y与D'连接的经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
每个Y独立地是N、P或S；并且
L1、L2、Ab、m、D和D'各自是如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，环A是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环烷基(例如，3至8元亚杂环烷基、3至6元亚杂环烷基或5至6元亚杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂芳基(例如，5至10元亚杂芳基、5至9元亚杂芳基或5至6元亚杂芳基)。在实施方式中，环A被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环A被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环A被一个或多个低级取代基取代。环A通过杂原子Y与L2连接。
在实施方式中，环A'是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，环A'被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环A'被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环A'被一个或多个低级取代基取代。环A'通过杂原子Y与D'连接。在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，环A被一个或多个3至8元亚杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)，其中环A通过杂原子Y与L2连接。在实施方式中，环A'被一个或多个3至8元杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)，其中环A'通过杂原子Y与D'连接。在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，环A被一个或多个5至6元亚杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)，其中环A通过杂原子Y与L2连接。在实施方式中，环A'被一个或多个5至6元杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)，其中环A'通过杂原子Y与D'连接。在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，本文提供了一种式(IB)或式(IIB)的ADC：
或其药学上可接受的盐，其中：
每个R4独立地是H、氧代、卤素、-CCl3、-CBr3、-CF3、-CI3、-CH2Cl、-CH2Br、-CH2F、-CH2I、-CHCl2、-CHBr2、-CHF2、-CHI2、-CN、-OR4A、-NR4AR4B、-COOR4A、-CONR4AR4B、-NO2、-SR4A、-SOn4R4A、-SOv4NR4AR4B、-PO(OH)2、-POm4R4A、-POr4NR4AR4B、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的环烷基或经取代或未经取代的杂环烷基；
位于相邻碳原子上的任何两个R4取代基可以任选地连接以形成经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；
每个R4A和R4B独立地是H、-CX3、-CHX2、-CH2X、-C(O)OH、-C(O)NH2、-CN、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO3H、-SO4H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC＝(O)NHNH2、-NHC＝(O)NH2、-NHSO2H、-NHC＝(O)H、-NHC(O)OH、-NHOH、-OCX3、-OCHX2、-OCH2X、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；与同一氮原子键合的R4A和R4B取代基可以任选地连接以形成经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
X是-Cl、-Br、-I或–F；
每个n4独立地是0至4的整数；
每个v4独立地是1或2；
每个m4独立地是0至3的整数；并且
每个r4独立地是1或2；并且
Y、m、D、D'、L1、L2和Ab各自是如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，每个R4独立地是H、卤素或经取代或未经取代的烷基。在实施方式中，每个R4独立地是H、氯、溴、碘、氟或经取代或未经取代的烷基。在实施方式中，每个R4独立地是H、氯、溴、碘、氟、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基或己基。在实施方式中，每个R4独立地是H。在实施方式中，每个R4独立地是氟。在实施方式中，每个R4独立地是甲基。在实施方式中，每个R4独立地是乙基。
在实施方式中，本文提供了一种式(IC)或式(IIC)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、m、Y、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(ID)或式(IID)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、m、Y、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(ID1)或式(IID1)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、m、Y、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(IE)或式(IIE)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、m、Y、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(IF)或式(IIF)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、m、Y、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(IG)或式(IH)的ADC：
或其药学上可接受的盐，其中：
环W是经取代或未经取代的亚环烷基或经取代或未经取代的亚芳基；环C是经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；并且其中D、m、L1、L2和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚环烷基(例如，C3-C8亚环烷基、C3-C6亚环烷基或C5-C6亚环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚芳基(例如，C5-C10亚芳基、C5-C8亚芳基或C5-C6亚芳基)。在实施方式中，环W被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环W被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环W被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的C3-C8亚环烷基。在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的C3-C8亚环烷基。在实施方式中，环W是未经取代的C3-C8亚环烷基。
在实施方式中，环W被一个或多个C3-C8亚环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚环丁基。在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚环戊基。在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚环己基。
在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的C5-C6亚芳基。在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的C5-C6亚芳基。在实施方式中，环W是未经取代的C5-C6亚芳基。在实施方式中，环W被一个或多个C5-C6亚芳基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，环C被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，环C被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，环C被一个或多个5至9元杂芳基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。在实施方式中，环C是未经取代的5至9元杂芳基。
在实施方式中，环C被一个或多个5至6元杂芳基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。在实施方式中，环C是未经取代的5至6元杂芳基。
在实施方式中，环C被一个或多个3至8元杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。在实施方式中，环C被一个或多个5至6元杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，环C是未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基。在实施方式中，环C是未经取代的呋喃基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡咯基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡咯基。在实施方式中，环C是未经取代的吡咯基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡啶基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡啶基。在实施方式中，环C是未经取代的吡啶基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡喃基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡喃基。在实施方式中，环C是未经取代的吡喃基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的咪唑基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的咪唑基。在实施方式中，环C是未经取代的咪唑基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻唑基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻唑基。在实施方式中，环C是未经取代的噻唑基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻吩基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻吩基。在实施方式中，环C是未经取代的噻吩基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噁唑基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噁唑基。在实施方式中，环C是未经取代的噁唑基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的芳基(例如，C5-C10芳基、C5-C8芳基或C5-C6芳基)。在实施方式中，环C被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的C3-C8环烷基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的C3-C8环烷基。在实施方式中，环C是未经取代的C3-C8环烷基。在实施方式中，环C被一个或多个C3-C8环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的环丁基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的环戊基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的环己基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的C5-C6芳基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的C5-C6芳基。在实施方式中，环C是未经取代的C5-C6芳基。在实施方式中，环C被一个或多个C5-C6芳基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，本文提供了一种式(IJ)或式(IK)的ADC：
或其药学上可接受的盐，其中：
Z是S、N或O；V是C或N；并且其中D、m、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，Z是N。在实施方式中，Z是O。在实施方式中，Z是S。
在实施方式中，V是C。在实施方式中，V是N。
在实施方式中，本文提供了一种式(IL)或式(IM)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、Z、m、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(IN)或式(IO)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、Z、m、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(IP)或式(IQ)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、Z、m、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种具有以下结构的ADC：
或其药学上可接受的盐。
前体
另一方面，本文提供了一种式(III)化合物：
或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，R5被一个或多个取代基取代。在实施方式中，R5被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，R5被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，R5是未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，R5是经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，R5是未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至8元杂环烷基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至8元杂环烷基。在实施方式中，R5是未经取代的3至8元杂环烷基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至6元杂环烷基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至6元杂环烷基。在实施方式中，R5是未经取代的3至6元杂环烷基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，R5是未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基。在实施方式中，R5是未经取代的杂环丁基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环戊基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环戊基。在实施方式中，R5是经取代、未经取代的杂环戊基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环己基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环己基。在实施方式中，R5是未经取代的杂环己基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至10元杂芳基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至10元杂芳基。在实施方式中，R5是未经取代的5至10元杂芳基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至9元杂芳基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至9元杂芳基。在实施方式中，R5是未经取代的5至9元杂芳基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至6元杂芳基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至6元杂芳基。在实施例中，R5为未经取代的5元到6元杂芳基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。在实施方式中，R5是未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基。在实施方式中，R5是未经取代的呋喃基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡咯基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡咯基。在实施方式中，R5是未经取代的吡咯基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡啶基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡啶基。在实施方式中，R5是未经取代的吡啶基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡喃基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡喃基。在实施方式中，R5是未经取代的吡喃基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的咪唑基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的咪唑基。在实施方式中，R5是未经取代的咪唑基。
在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻唑基。在实施方式中，R5是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻唑基。在实施方式中，R5是未经取代的噻唑基。
载药量
载药量由m表示，m是式(I)或式(II)的抗体偶联药物(ADC)及其变体中每个单克隆抗体的药物部分的平均数(即，D或D')。载药量可以在每个抗体1至20个药物部分的范围内。式(I)或式(II)的ADC及其任何实施方式、变体或方面包括与1至20个药物部分范围缀合的抗体集合。在制备来自缀合反应的ADC中，每个抗体的药物部分平均数可以通过如质谱法、ELISA测定和HPLC等常规方法来表征。还可以确定ADC关于m的定量分布。在一些情况下，可以通过如反相HPLC或电泳等方法来实现从具有其它载药量的ADC中分离、纯化和表征其中m为特定值的同质ADC。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗HER2抗体、抗ROR1抗体、抗CD25抗体、抗TROP2抗体、抗B7-H3抗体、抗c-Met抗体、抗FOLR1抗体或抗CHOP2抗体。在实施方式中，每个抗HER2抗体的药物模块的平均数(即，D或D')可以在每抗体1至20个药物模块的范围内。在实施方式中，每个抗HER2抗体的药物模块的平均数(即，D或D')可以在每抗体1至8个药物模块的范围内。
对于一些ADC，m可能会受到抗体上连接位点数量的限制。例如，如在本文所描述的示例性实施方式中的一些示例性实施方式中，在连接是半胱氨酸硫醇时，抗体可以具有仅一个或几个半胱氨酸硫醇基，或者可以具有仅一个或几个可以通过其连接子被连接的充分反应的硫醇基。在实施方式中，ADC的平均载药量在1至约8或约3至约8的范围内。在实施方式中，L1能够与IgG抗体中游离半胱氨酸的硫醇基形成共价键。
在实施方式中，通过与赖氨酸侧链形成酰胺键，可以实现用有效载荷衍生化多肽的缀合方法。由于存在大量具有相似反应性的赖氨酸侧链胺，该缀合策略可以产生非常复杂的多相混合物。本文所提供的组合物和方法提供了通过赖氨酸进行的缀合，其中，在一些实施方式中，赖氨酸选择性的增强可以产生异质性较低的混合物。在实施方式中，ADC的平均载药量在1至约20、1至约8或约3至约8的范围内。在实施方式中，L1能够与IgG抗体中赖氨酸的胺基团形成共价键。
在实施方式中，在缀合反应期间，与抗体缀合的药物部分少于药物部分的理论最大值。抗体通常不包括许多可以与药物部分连接的游离的和反应性半胱氨酸硫醇基；实际上，抗体中的大多数半胱氨酸硫醇残基作为二硫桥存在。在实施方式中，可以在部分或完全还原条件下用如二硫苏糖醇(DTT)或三羰基乙基膦(TCEP)等还原剂来还原抗体，以生成反应性半胱氨酸硫醇基。在实施方式中，使抗体经受变性条件以揭示如赖氨酸或半胱氨酸等反应性亲核基团。
ADC的负载量(药物/抗体比率或“DAR”)可以以不同方式例如通过以下来控制：(i)限制药物-连接子中间体或连接子试剂相对于抗体的摩尔过量；(ii)限制缀合反应时间或温度；以及(iii)用于半胱氨酸硫醇修饰的部分或限制性还原条件。DAR也可以通过与抗体反应的基团的反应性来控制。
应当理解，在多于一个亲核基团与药物-连接子中间体或连接子试剂反应的情况下，所得产物是ADC化合物的混合物，其中分布有一个或多个与抗体连接的药物部分。每个抗体的药物的平均数可以通过双重ELISA抗体测定从混合物计算，所述双重ELISA抗体测定对抗体具有特异性并且对药物具有特异性。单个ADC分子可以通过质谱法在混合物中鉴定并通过HPLC分离，例如疏水作用色谱法(参见例如，McDonagh等人(2006)《蛋白质工程设计与选择(Prot.Engr.Design&Selection)》19(7):299-307；Hamblett等人(2004)《临床癌症研究(Clin.Cancer Res.)》10:7063-7070；Hamblett,K.J.等人“载药量对抗CD30抗体偶联药物的药理学、药代动力学和毒性的影响(Effect of drug loading on thepharmacology,pharmacokinetics,and toxicity of an anti-CD30 antibody-drugconjugate)”,摘要第624期,《美国癌症研究协会(American Association for CancerResearch)》,2004年年会,2004年3月27日至31日,《美国癌症研究协会论文集(Proceedingsof the AACR)》,第45卷,2004年3月；Alley,S.C.等人“控制抗体偶联药物中药物连接的位置(Controlling the location of drug attachment in antibody-drug conjugates)”,摘要第627期,《美国癌症研究协会》,2004年年会,2004年3月27日至31日,《美国癌症研究协会论文集》,第45卷,2004年3月)。在实施方式中，可以通过电泳或色谱法从缀合混合物中分离具有单一负载值的同质ADC。
抗HER2抗体
i.示例性抗体和抗体序列
在实施方式中，ADC包含与HER2结合的抗体。据报道，例如在乳腺癌中，HER2独立于HER2表达的基线水平而上调。在实施方式中，本文所描述的ADC化合物包含抗HER2抗体。
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体包括半胱氨酸。在实施方式中，抗HER2抗体通过半胱氨酸残基的硫通过连接子与药物结合。在实施方式中，抗HER2抗体通过两个半胱氨酸残基的硫通过连接子与药物结合。
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体包括赖氨酸。在实施方式中，抗HER2抗体通过赖氨酸残基的胺通过连接子与药物结合。在实施方式中，抗HER2抗体通过两个赖氨酸残基的胺通过连接子与药物结合。
在实施方式中，本文所提供的ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括轻链可变区和重链可变区，其中所述轻链可变区包括轻链互补决定区1(CDR1)、轻链CDR2和轻链CDR3，并且所述重链可变区包括重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3。
在实施方式中，本文所提供的ADC包含抗HER2抗体，所述抗体包括至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括至少一个选自以下的CDR：(a)包括SEQ IDNO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VLCDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括至少两个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VLCDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括至少三个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VLCDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括至少四个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括至少五个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括至少六个选自以下的CDR：(a)包括SEQ IDNO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VLCDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。
在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括一个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括两个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VLCDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括三个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ IDNO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括四个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括五个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VLCDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括六个选自以下的CDR：(a)包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3；(d)包括SEQ IDNO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。
在实施方式中，抗HER2抗体包含包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1、包括SEQ IDNO:2序列的VL CDR2、包括SEQ ID NO:3序列的VL CDR3、包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1、包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2和包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。在实施方式中，抗HER2抗体包含包括SEQ ID NO:1序列的VL CDR1。在实施方式中，抗HER2抗体包含包括SEQID NO:2序列的VL CDR2。在实施方式中，抗HER2抗体包括包含SEQ ID NO:3序列的VL CDR3。在实施方式中，抗HER2抗体包含包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1。在实施方式中，抗HER2抗体包含包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2。在实施方式中，抗HER2抗体包含包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。
在实施方式中，ADC包括抗HER2抗体，所述抗体包括具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的轻链CDR1、具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的轻链CDR2、具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的轻链CDR3、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的重链CDR1、具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的重链CDR2和具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的重链CDR3。
在实施方式中，抗HER2抗体包括具有与SEQ ID NO:7具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列的VL。在实施方式中，抗HER2抗体包括具有SEQ ID NO:7序列的VL。在实施方式中，虽然与SEQ ID NO:7具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的VL序列包括相对于参考序列的取代(例如，保守取代)、插入或缺失，但是包括所述序列的抗HER2抗体保留了与HER2结合的能力。在实施方式中，SEQ ID NO:7中总共有1至10个氨基酸被取代、插入和/或缺失。在实施方式中，SEQ ID NO:7中总共有1至5个氨基酸被取代、插入和/或缺失。在实施方式中，取代、插入或缺失发生在CDR之外的区中(即，在FR中)。在实施方式中，抗HER2抗体包括SEQ ID NO:7的VL序列，并且包括所述序列的翻译后修饰。
在实施方式中，抗HER2抗体包括具有与SEQ ID NO:8具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列的VH。在实施方式中，抗HER2抗体包括具有SEQ ID NO:8序列的VH。在实施方式中，虽然与SEQ ID NO:8具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的VH序列包括相对于参考序列的取代(例如，保守取代)、插入或缺失，但是包括所述序列的抗HER2抗体保留了与HER2结合的能力。在实施方式中，SEQ ID NO:8中总共有1至10个氨基酸被取代、插入和/或缺失。在实施方式中，SEQ ID NO:8中总共有1至5个氨基酸被取代、插入和/或缺失。在实施方式中，取代、插入或缺失发生在CDR之外的区中(即，在FR中)。在实施方式中，抗HER2抗体包括SEQ ID NO:8的VH序列，并且包括所述序列的翻译后修饰。
在实施方式中，抗HER2抗体是IgG抗体。在实施方式中，抗HER2抗体是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗体。在实施方式中，抗HER2抗体是IgG1或IgG4抗体。在实施方式中，抗HER2抗体是IgG1抗体。
在实施方式中，抗HER2抗体与人HER2结合。在实施方式中，人HER2具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列。
在上述实施方式中的任何实施方式中，抗HER2抗体是人源化的。在实施方式中，抗HER2抗体包括如上述实施方式中的任何实施方式中的CDR，并且进一步包括人受体框架，例如人免疫球蛋白框架或人共有框架。在实施方式中，人源化抗HER2抗体包含(a)包括SEQ IDNO:1序列的VL CDR1；(b)包括SEQ ID NO:2序列的VL CDR2；(c)包括SEQ ID NO:3序列的VLCDR3；(d)包括SEQ ID NO:4序列的VH CDR1；(e)包括SEQ ID NO:5序列的VH CDR2；和(f)包括SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。
在实施方式中，抗HER2抗体是单克隆抗体，包括嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。在一个实施方式中，抗HER2抗体是抗体片段，例如，Fv、Fab、Fab'、scFv、双功能抗体或F(ab')2片段。在另一个实施方式中，抗体是基本上全长抗体例如IgG1抗体或如本文所定义的其它抗体类别或同种型。
ii.抗体亲和力
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体以≤10nM、或≤5nM、或≤4nM、或≤3nM或≤2nM的亲和力与人HER2结合。在实施方式中，抗HER2抗体以≥0.0001nM、或≥0.001nM或≥0.01nM的亲和力与人HER2结合。熟练技术人员已知的标准测定可以用于确定结合亲和力。例如，抗HER2抗体是否“以≤10nM、或≤5nM、或≤4nM、或≤3nM或≤2nM的亲和力结合”，可以使用利用非线性曲线拟合程序的标准Scatchard分析来确定(参见例如，Munson等人,《分析生物化学(Anal Biochem)》,107:220-239,1980)。
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体的解离常数(Kd)≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM或≤0.001nM，并且任选地≥10-13M(例如，10-8M或更小，例如，10-8M至10-13M，例如，10-9M至10-13M)。
iii.抗体片段
在实施方式中，本文所提供的抗体(例如，抗HER2抗体)是抗体片段。抗体片段包括但不限于Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2、Fv和scFv片段以及下文所描述的其它片段。关于某些抗体片段的评述，参见Hudson等人《自然医学》9:129-134(2003)。关于scFv片段的评述，参见例如，Pluckthün,《单克隆抗体的药理学(The Pharmacology of MonoclonalAntibodies)》,第113卷,Rosenburg和Moore编,(纽约的施普林格出版公司(Springer-Verlag,New York)),第269-315页(1994)；还参见WO 93/16185；以及美国专利第5,571,894号和第5,587,458号。关于包括补救受体结合表位残基并具有增加的体内半衰期的Fab和F(ab')2片段的讨论，参见美国专利第5,869,046号。
双功能抗体是具有两个抗原结合位点的抗体片段，其可以是二价或双特异性的。参见例如，EP 404,097；WO 1993/01161；Hudson等人,《自然医学》9:129-134(2003)；和Hollinger等人,《美国国家科学院院刊》90:6444-6448(1993)。也在Hudson等人,《自然医学》9:129-134(2003)中描述了三功能抗体和四功能抗体。
单结构域抗体是包括抗体的全部或部分重链可变结构域或全部或部分轻链可变结构域的抗体片段。在实施方式中，单结构域抗体是人单结构域抗体(马萨诸塞州沃尔瑟姆的多曼蒂斯公司(Domantis,Inc.,Waltham,MA)；参见例如，美国专利第6,248,516B1号)。
抗体片段可以通过各种技术制备，包括但不限于完整抗体的蛋白水解消化以及重组宿主细胞(例如，大肠杆菌(E.coli)或噬菌体)的产生，如本文所描述。
iv.嵌合抗体和人源化抗体
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体是嵌合抗体。在例如美国专利第4,816,567号；以及Morrison等人,《美国国家科学院院刊》,81:6851-6855(1984)中描述了某些嵌合抗体。在一个实例中，嵌合抗体包括非人可变区(例如，源自小鼠、大鼠、仓鼠、兔或非人灵长类动物如猴子的可变区)和人恒定区。在另外的实例中，嵌合抗体是“类别转换”抗体，其中类别或子类已从亲本抗体的类别或子类改变。嵌合抗体包括其抗原结合片段。
在实施方式中，嵌合抗体是人源化抗体。通常，将非人抗体人源化以降低对人的免疫原性，同时保留亲本非人抗体的特异性和亲和力。人源化抗体通常包括一个或多个可变结构域，其中HVR，例如CDR(或其各部分)源自非人抗体，并且FR(或其各部分)源自人抗体序列。人源化抗体任选地还将包括人恒定区的至少一部分。在实施方式中，人源化抗体中的一些FR残基被来自非人抗体(例如，HVR残基所来源的抗体)的对应残基取代，例如以恢复或改进抗体特异性或亲和力。
人源化抗体和制备人源化抗体的方法在例如Almagro和Fransson,《生物科学前沿(Front.Biosci.)》13:1619-1633(2008)中进行评述，并且在例如Riechmann等人,《自然》332:323-329(1988)；Queen等人,《美国国家科学院院刊》86:10029-10033(1989)；美国专利第5,821,337号、第7,527,791号、第6,982,321号和第7,087,409号；Kashmiri等人,《方法(Methods)》36:25-34(2005)(描述SDR(a-CDR)移植)；Padlan,《分子免疫学(Mol.Immunol.)》28:489-498(1991)(描述“表面重塑”)；Dall'Acqua等人,《方法》36:43-60(2005)(描述“FR改组”)；和Osbourn等人,《方法》36:61-68(2005)和Klimka等人,《英国癌症杂志(Br.J.Cancer)》,83:252-260(2000)(描述FR改组的“指导选择”方法)中进行进一步描述。
可以用于人源化的人框架区包括但不限于：使用“最佳拟合”方法选择的框架区(参见例如，Sims等人《免疫学杂志》151:2296(1993))；源自特定轻链可变区子组或重链可变区子组的人抗体的共有序列的构架区(参见例如，Carter等人《美国国家科学院院刊》,89:4285(1992)；和Presta等人《免疫学杂志》,151:2623(1993))；人成熟(体细胞突变)构架区或人种系构架区(参见例如，Almagro和Fransson,《生物科学前沿》13:1619-1633(2008))；和源自筛选FR文库的框架区(参见例如，Baca等人,《生物化学杂志》272:10678-10684(1997)和Rosok等人,《生物化学杂志》271:22611-22618(1996))。
v.人抗体
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体是人抗体。可以使用本领域中已知的各种技术来产生人抗体。在van Dijk和van de Winkel,《当代药理学观点(Curr.Opin.Pharmacol.)》5:368-74(2001)和Lonberg,《免疫学新见(Curr.Opin.Immunol.)》20:450-459(2008)中总体上描述了人抗体。
可以通过向转基因动物施用免疫原来制备人抗体，所述转基因动物已经被修饰成响应于抗原攻击产生完整人抗体或具有人可变区的完整抗体。此类动物通常包括人免疫球蛋白基因座的全部或一部分，所述人免疫球蛋白基因座替代内源免疫球蛋白基因座或是染色体外存在的或随机整合到动物的染色体中。在此类转基因小鼠中，内源免疫球蛋白基因座通常已经失活。关于从转基因动物中获得人抗体的方法的评述，参见Lonberg,《自然生物技术(Nat.Biotech.)》23:1117-1125(2005)。参见例如，描述了XENOMOUSETM技术的美国专利第6,075,181号和第6,150,584号；描述了技术的美国专利第5,770,429号；描述了K-M 技术的美国专利第7,041,870号以及描述了技术的美国专利申请公开号US2007/0061900。来自由此类动物产生的完整抗体的人可变区可以被进一步修饰，例如，通过与不同的人恒定区组合。
人抗体也可以通过基于杂交瘤的方法来制备。用于产生人单克隆抗体的人骨髓瘤和小鼠-人异源骨髓瘤细胞系已经进行了描述。(参见例如，Kozbor《免疫学杂志》,133:3001(1984)；Brodeur等人,《单克隆抗体产生技术和应用(Monoclonal Antibody ProductionTechniques and Applications)》,第51-63页(纽约的马塞尔德克尔公司(Marcel Dekker,Inc.,New York),1987)；和Boerner等人,《免疫学杂志》,147:86(1991)。)也在Li等人,《美国国家科学院院刊》,103:3557-3562(2006)中描述了通过人B细胞杂交瘤技术产生的人抗体。另外的方法包括例如在美国专利第7,189,826号(描述了由杂交瘤细胞系产生单克隆人IgM抗体)和Ni,《现代免疫学(Xiandai Mianyixue)》,26(4):265-268(2006)(描述了人-人杂交瘤)中描述的那些方法。也在以下文献中描述了人杂交瘤技术(Trioma技术)：Vollmers和Brandlein,《组织学与组织病理学(Histology and Histopathology)》,20(3):927-937(2005)；以及Vollmers和Brandlein,《实验和临床药理学的方法和发现(Methods andFindings in Experimental and Clinical Pharmacology)》,27(3):185-91(2005)。
也可以通过分离选自人源性噬菌体展示文库的Fv克隆可变结构域序列来产生人抗体。此类可变结构域序列然后可以与期望的人恒定结构域组合。下文描述了用于从抗体文库中选择人抗体的技术。
vi.多特异性抗体
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体。多特异性抗体是具有对至少两个不同位点具有结合特异性的单克隆抗体。在实施方式中，结合特异性中的一种结合特异性是针对HER2，并且另一种结合特异性是针对任何其它抗原。在实施方式中，双特异性抗体可以与HER2的两种不同表位结合。双特异性抗体还可以用于将细胞毒性剂定位到表达HER2的细胞。双特异性抗体可以被制备为全长抗体或抗体片段。
用于制备多特异性抗体的技术包括但不限于具有不同特异性的两个免疫球蛋白重链-轻链对的重组共表达(参见Milstein和Cuello,《自然》305:537(1983))，WO 93/08829，和Traunecker等人,《欧洲分子生物学学会杂志(EMBO J.)》10:3655(1991))以及“杵臼结构(knob-in-hole)”工程化(参见例如美国专利第5,731,168号)。多特异性抗体还可以通过以下来制备：工程化静电转向效应以用于制备抗体Fc-异源二聚体分子(WO 2009/089004A1)；交联两个或更多个抗体或片段(参见例如，美国专利第4,676,980号和Brennan等人,《科学》,229:81(1985))；使用亮氨酸拉链产生双特异性抗体(参见例如，Kostelny等人,《免疫学杂志》,148(5):1547-1553(1992))；使用“双功能抗体”技术以用于制备双特异性抗体片段(参见例如，Hollinger等人,《美国国家科学院院刊》,90:6444-6448(1993))；以及使用单链Fv(sFv)二聚体(参见例如，Gruber等人,《免疫学杂志》,152:5368(1994))；以及制备三特异性抗体，如例如在Tutt等人《免疫学杂志》147:60(1991)中所描述。
本文还包括具有三个或更多个功能抗原结合位点的经工程化的抗体，包括“章鱼抗体(Octopus antibody)”(参见例如，US2006/0025576A1)。
本文的抗体或片段还包括“双重作用FAb”或“DAF”，其包括与HER2以及另一种不同抗原结合的抗原结合位点。
vii.抗体变体
在实施方式中，考虑了本文所提供的抗体的氨基酸序列变体。例如，可能期望改善抗体的结合亲和力和/或其它生物特性。抗体的氨基酸序列变体可以通过将适当的修饰引入到编码抗体的核苷酸序列中或通过肽合成来制备。此类修饰包括例如抗体的氨基酸序列内的残基的缺失和/或插入和/或取代。可以进行缺失、插入和取代的任何组合以实现最终构建体，前提是最终构建体具有期望特性，例如，抗原结合。
a)取代变体、插入变体和缺失变体
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体具有一个或多个氨基酸取代。取代诱变的所关注位点包括HVR和FR。保守取代示出于表1中的标题“优选取代”下。在表1中的标题“示例性取代”下并且如下文参考氨基酸侧链类别进一步描述的，提供了更多实质性改变。可以将氨基酸取代引入到所关注抗体中，并且筛选产物的期望活性，例如，保留的/改进的抗原结合、降低的免疫原性和/或改进的ADCC或CDC。
表1：示例性氨基酸取代。
氨基酸可以根据共同的侧链特性进行分组：
(1)疏水性：正亮氨酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile；
(2)中性亲水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；
(3)酸性：Asp、Glu；
(4)碱性：His、Lys、Arg；
(5)影响链取向的残基：Gly、Pro；
(6)芳香族：Trp、Tyr、Phe。
非保守取代将需要将这些类别中的一种类别的成员与另一种类别的成员交换。
一种取代变体涉及取代亲本抗体(例如，人源化或人抗体)的一个或多个高变区残基。通常，选择用于进一步研究的所得变体将相对于亲本抗体在生物特性(例如，增加的亲和力、降低的免疫原性)方面具有修饰(例如，改进)，和/或将基本上保留亲本抗体的某些生物特性。示例性取代变体是可以例如使用基于噬菌体展示的亲和力成熟技术(如本文所描述的那些技术)方便地产生的亲和力成熟抗体。简单来说，一个或多个HVR残基发生突变，并且变体抗体展示在噬菌体上并且筛选特定生物活性(例如，结合亲和力)。
可以在HVR中进行改变(例如，取代)，例如，以改进抗体亲和力。此类改变可以在HVR“热点(hotspot)”中进行，即由在体细胞成熟过程期间以高频经历突变的密码子编码的残基(参见例如，Chowdhury,《分子生物学方法》207:179-196(2008))和/或在SDR(a-CDR)中进行，其中所得变体VH或VL针对结合亲和力进行测试。通过构建二级文库和从二级文库中重新选择来进行的亲和力成熟已经在例如Hoogenboom等人,《分子生物学方法》178:1-37(O'Brien等人,编辑,新泽西州托托瓦的胡马纳出版社(Human Press,Totowa,NJ),(2001))中进行了描述。在亲和力成熟的实施方式中，通过多种方法(例如，易错PCR、链改组或寡核苷酸定向诱变)中的任何方法将多样性引入到被选择用于成熟的可变基因中。然后产生二级文库。然后对文库进行筛选，以鉴定出具有期望亲和力的任何抗体变体。用于引入多样性的另一种方法涉HVR指导的方法，其中若干个HVR残基(例如，一次4-6个残基)被随机化。抗原结合所涉及的HVR残基可以例如使用丙氨酸扫描诱变或建模特异性地鉴别出来。具体地，CDR-H3和CDR-L3通常是靶向的。
在实施方式中，取代、插入或缺失可以发生在一个或多个HVR中，只要此类改变不显著降低抗体与抗原结合的能力即可。例如，在HVR中可以进行基本上不降低结合亲和力的保守改变(例如，如本文所提供的保守取代)。此类改变可以在HVR“热点”或SDR之外。在上文所提供的变体VH和VL序列的实施方式中，每个HVR不改变，或包括不超过一个、两个或三个氨基酸取代。
一种用于鉴定可以靶向诱变的抗体的残基或区的有用方法被称为“丙氨酸扫描诱变”，如Cunningham和Wells(1989)《科学(Science)》,244:1081-1085所描述的。在该方法中，靶残基的残基或组(例如，如arg、asp、his、lys和glu等带电荷的残基)被鉴定出来并被中性氨基酸或带负电荷的氨基酸(例如，丙氨酸或聚丙氨酸)替代，以确定抗体与抗原的相互作用是否受到影响。可以在氨基酸位置处引入另外的取代，从而证明对初始取代的功能敏感性。可替代地或另外地，使用抗原-抗体复合物的晶体结构来鉴定抗体与抗原之间的接触点。此类接触残基和相邻残基可以作为取代候选物被靶向或消除。可以对变体进行筛选，以确定所述变体是否包括期望特性。
氨基酸序列插入包括长度范围为一个残基至包括一百个或更多个残基的多肽的氨基末端和/或羧基末端融合，以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。末端插入的实例包括具有N末端甲硫氨酰基残基的抗体。抗体分子的其它插入变体包括抗体的N末端或C末端与酶(例如，用于ADEPT)或增加抗体的血清半衰期的多肽的融合。
b)糖基化变体
在实施方式中，本文所提供的抗HER2抗体被改变以增加或减少抗体被糖基化的程度。针对抗体的糖基化位点的添加或缺失可以通过改变氨基酸序列使得一个或多个糖基化位点得以产生或去除来方便地完成。
在抗体包括Fc区的情况下，连接到其的碳水化合物可以被改变。由哺乳动物细胞产生的天然抗体通常包括通常通过N键与Fc区的CH2结构域的Asn297连接的支链双触角寡糖。参见例如，Wright等人《生物技术趋势(TIBTECH)》15:26-32(1997)。寡糖可以包括各种碳水化合物，例如甘露糖、N-乙酰基葡糖胺(GlcNAc)、半乳糖和唾液酸，以及在双触角寡糖结构的“干”中与GlcNAc连接的岩藻糖。在实施方式中，可以对抗体中的寡糖进行修饰，以产生具有某些经改进的特性的抗体变体。
在一个实施方式中，提供了具有缺乏与Fc区(直接或间接)连接的岩藻糖的碳水化合物结构的抗体变体。例如，此类抗体中的岩藻糖的量可以为1％至80％、1％至65％、5％至65％或20％至40％。岩藻糖的量是通过计算Asn297处的相对于如通过MALDI-TOF质谱法测量的与Asn 297连接的所有糖结构(例如，复合物、杂合物和高甘露糖结构)的总和的糖链内的岩藻糖的平均量确定的，例如，如WO 2008/077546中所描述的。Asn297是指位于Fc区中约位置297(Fc区残基的Eu编号)处的天冬酰胺残基；然而，由于抗体中的微小序列变化，Asn297还可以位于位置297上游或下游约±3个氨基酸处，即，位置294与300之间。此类岩藻糖基化变体可以具有经改进的ADCC功能。参见例如，美国专利公开号US2003/0157108(Presta,L.)；US2004/0093621(日本协和发酵工业株式会社(Kyowa Hakko Kogyo Co.,Ltd))。与“去岩藻糖化”或“岩藻糖缺陷”抗体变体相关的出版物的实例包括：US2003/0157108；WO 2000/61739；WO 2001/29246；US2003/0115614；US2002/0164328；US2004/0093621；US2004/0132140；US2004/0110704；US2004/0110282；US2004/0109865；WO 2003/085119；WO 2003/084570；WO 2005/035586；WO 2005/035778；WO2005/053742；WO2002/031140；Okazaki等人《分子生物学杂志》336:1239-1249(2004)；Yamane-Ohnuki等人《生物技术与生物工程(Biotech.Bioeng.)》87:614(2004)。能够产生去岩藻糖化抗体的细胞系的实例包括缺乏蛋白岩藻糖基化的Lec13 CHO细胞(Ripka等人,《生物化学与生物物理学集刊(Arch.Biochem.Biophys.)》249:533-545(1986)；美国专利申请第US2003/0157108 A1号,Presta,L；以及WO 2004/056312 A1,Adams等人，尤其在实施例11处)和敲除细胞系，如α-1,6-岩藻糖基转移酶基因、FUT8、敲除CHO细胞(参见例如，Yamane-Ohnuki等人《生物技术与生物工程》87:614(2004)；Kanda,Y.等人,《生物技术与生物工程》,94(4):680-688(2006)；和WO2003/085107)。
抗体变体进一步设置有二等分的寡糖，例如，其中与抗体的Fc区连接的双触角寡糖被GlcNAc二等分。此类抗体变体可以具有降低的岩藻糖基化和/或经改进的ADCC功能。在例如WO 2003/011878(Jean-Mairet等人)；美国专利第6,602,684号(Umana等人)；和US2005/0123546(Umana等人)中描述了此类抗体变体的实例。还提供了在与Fc区连接的寡糖中具有至少一个半乳糖残基的抗体变体。此类抗体变体可以具有经改进的CDC功能。在例如WO 1997/30087(Patel等人)、WO 1998/58964(Raju,S.)和WO 1999/22764(Raju,S.)中描述了此类抗体变体。
c)Fc区变体
在实施方式中，可以将一个或多个氨基酸修饰引入到本文所提供的抗HER2抗体的Fc区中，由此产生Fc区变体。Fc区变体可以包括在一个或多个氨基酸位置处包括氨基酸修饰(例如，取代)的人Fc区序列(例如，人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc区)。
在实施方式中，考虑到具有一些但不是全部效应子功能的抗体变体，所述效应子功能使所述抗体变体成为这样的应用的令人期望的候选物：抗体在体内的半衰期具有重要性，但某些效应子功能(如补体和ADCC)是不必要的或有害的。可以进行体外和/或体内细胞毒性测定，以确认CDC和/或ADCC活性的降低/耗竭。例如，可以进行Fc受体(FcR)结合测定以确保抗体缺乏FcγR结合(因此可能缺乏ADCC活性)，但是保留FcRn结合能力。用于介导ADCC的原代细胞NK细胞仅表达FcγRIII，而单核细胞表达FcγRI、FcγRII和FcγRIII。在Ravetch和Kinet,《免疫学年度评论(Annu.Rev.Immunol.)》9:457-492(1991)的第464页上的表3中概述了造血细胞上的FcR表达。用于评估所关注分子的ADCC活性的体外测定的非限制性实例描述于美国专利第5,500,362号(参见例如，Hellstrom,I.等人《美国国家科学院院刊》83:7059-7063(1986)和Hellstrom,I等人,《美国国家科学院院刊》82:1499-1502(1985))；第5,821,337号(参见Bruggemann,M.等人,《实验医学杂志(J.Exp.Med.)》166:1351-1361(1987))中。可替代地，可以采用非放射性测定方法(参见例如，用于流式细胞术的ACTITM非放射性细胞毒性测定(加利福尼亚州山景城的细胞科技公司(CellTechnology,Inc.Mountain View,CA))；和CytoTox 非放射性细胞毒性测定(威斯康星州麦迪逊的普洛麦格公司(Promega,Madison,WI)))。用于此类测定的有用的效应子细胞包括外周血单核细胞(PBMC)和自然杀伤(NK)细胞。可替代地或另外地，所关注分子的ADCC活性可以在体内评估，例如在动物模型(如在Clynes等人《美国国家科学院院刊》95:652-656(1998)中公开的动物模型)中。还可以进行C1q结合测定，以确认抗体不能结合C1q并且因此缺乏CDC活性。参见例如WO 2006/029879和WO 2005/100402中的C1q和C3c结合ELISA。为了评估补体激活，可以进行CDC测定(参见例如，Gazzano-Santoro等人,《免疫学方法杂志(J.Immunol.Methods)》202:163(1996)；Cragg,M.S.等人,《血液(Blood)》101:1045-1052(2003)；和Cragg,M.S.And和M.J.Glennie,《血液》103:2738-2743(2004))。还可以使用本领域中已知的方法执行FcRn结合和体内清除/半衰期确定(参见例如，Petkova,S.B.等人,《国际免疫学(Int'l.Immunol.)》18(12):1759-1769(2006))。
效应子功能降低的抗体包括取代了Fc区残基238、265、269、270、297、327和329中的一个或多个残基的抗体(美国专利第6,737,056号)。此类Fc突变体包括在氨基酸位置265、269、270、297和327中的两个或更多个氨基酸位置处具有取代的Fc突变体，包括将残基265和297取代为丙氨酸的所谓的“DANA”Fc突变体(美国专利第7,332,581号)。
描述了与FcR的结合改进的或减少的某些抗体变体。(参见例如，美国专利第6,737,056号；WO 2004/056312，和Shields等人,《生物化学杂志》9(2):6591-6604(2001)。)
具有增加的半衰期和与新生儿Fc受体(FcRn)的经改善的结合(其负责母体IgG向胎儿的转移，Guyer等人,《免疫学杂志》117:587(1976)和Kim等人,《免疫学杂志》24:249(1994))描述于US2005/0014934A1(Hinton等人)中。那些抗体包括其中具有一个或多个取代的Fc区，所述一个或多个取代改善Fc区与FcRn的结合。此类Fc变体包括在以下Fc区残基中的一个或多个Fc区残基处具有取代的Fc变体：238、256、265、272、286、303、305、307、311、312、317、340、356、360、362、376、378、380、382、413、424或434，例如，Fc区残基434的取代(美国专利第7,371,826号)。
还参见Duncan和Winter,《自然》322:738-40(1988)；美国专利第5,648,260号；美国专利第5,624,821号；和WO 94/29351中关于Fc区变体的其它实例。
viii.抗体衍生物
在实施方式中，本文所提供的单克隆抗体(如抗HER2抗体)可以被进一步修饰(例如，衍生化)以包括本领域中已知的且容易获得的一个或多个另外的非蛋白质部分。适于抗体的衍生化的部分包括但不限于水溶性聚合物。水溶性聚合物的非限制性实例包括但不限于聚乙二醇(PEG)、乙二醇/丙二醇的共聚物、羧甲基纤维素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1,3-二氧戊环、聚-1,3,6-三噁烷、乙烯/马来酸酐共聚物、聚氨基酸(均聚物或无规共聚物)和葡聚糖或聚(n-乙烯基吡咯烷酮)聚乙二醇、聚丙二醇均聚物、聚环氧丙烷/环氧乙烷共聚物、聚氧乙烯化多元醇(例如，甘油)、聚乙烯醇及其混合物。聚乙二醇丙醛由于其在水中的稳定性而在制造中具有优点。聚合物可以具有任何分子量，并且可以是支化或非支化的。与抗体连接的聚合物的数量可以变化，并且如果连接多于一种聚合物，则聚合物可以是相同或不同的分子。用于衍生化的聚合物的数量和/或类型通常可以基于包括但不限于以下的考虑因素来确定：要改进的抗体的特定特性或功能、抗体衍生物是否将在定义的条件下在疗法中使用等。
ix.重组方法和组合物
可以使用重组方法和组合物产生抗体，例如，如美国专利第4,816,567号中所描述。本领域的技术人员将熟悉适用于抗体表达的宿主细胞。示例性宿主细胞包括真核细胞，例如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞或淋巴细胞(例如，Y0、NS0、Sp20细胞)。
为了重组生产抗HER2抗体，分离编码抗体(例如，如上文所描述的抗体)的核酸，并且插入到一个或多个载体中，以在宿主细胞中进一步克隆和/或表达。此类核酸可以使用常规程序(例如，通过使用能够与编码抗体的重链和轻链的基因特异性结合的寡核苷酸探针)容易地分离和测序。
制备抗体偶联药物的方法
可以采用本领域的技术人员已知的有机化学反应、条件和试剂通过若干种途径制备式(I)的ADC，所述途径包括：(1)抗体的亲核基团与二价连接子试剂(L1)反应，通过共价键形成Ab-L1，随后与药物-连接子分子D-L3或D-L3-L2反应，以及(2)药物部分D的亲核基团与二价连接子试剂(L3-L2-L1或L3-L1)反应，通过共价键形成D-L3-L1或D-L3-L2-L1，随后与抗体或还原抗体的亲核基团反应。可以采用本领域的技术人员已知的有机化学反应、条件和试剂通过若干种途径制备式(II)的ADC，所述途径包括：(1)抗体的亲核基团与二价连接子试剂(L1)反应，通过共价键形成Ab-L1，随后与药物-连接子分子R1-D'或R1-D'-L2反应，以及(2)药物-连接子分子R1-D'的亲核基团与二价连接子试剂(L2-L1或L1)反应，通过共价键形成R1-D'-L1或R1-D'-L2-L1，随后与抗体或还原抗体的亲核基团反应。以下文献中描述了若干此类方法：Agarwal等人,(2015),《生物缀合化学(Bioconjugate Chem.)》,26:176-192。
在实施方式中，可以在部分或完全还原条件下用如二硫苏糖醇(DTT)或三羰基乙基膦(TCEP)等还原剂来还原抗体，以生成反应性半胱氨酸硫醇基。然后，链间半胱氨酸残基可以被烷基化，例如使用马来酰亚胺。可替代地，链间半胱氨酸残基可以进行桥接烷基化，例如使用双砜连接子或炔丙基二溴马来酰亚胺，随后进行铜点击反应连接。在实施方式中，抗体可以通过赖氨酸氨基酸缀合。此类缀合可以是一步缀合或两步缀合。在实施方式中，一步缀合需要赖氨酸残基的ε-氨基通过酰胺键与包括胺反应性基团的药物-连接子分子(D-L3-L2-L1或D-L3-L1)缀合。在实施方式中，一步缀合需要赖氨酸残基的ε-氨基通过酰胺键与包括胺反应性基团的药物-连接子分子(R1-D'-L2-L1或R1-D'-L1)缀合。在实施方式中，胺反应性基团是经激活的酯。在实施方式中，抗体可以通过两步缀合来缀合。两步缀合需要第一步骤，其中包括胺和硫醇反应性官能团两者的双官能试剂与赖氨酸ε-氨基反应。在第二步骤中，药物-连接子分子(D-L3-L2-L1、D-L3-L1、R1-D'-L2-L1或R1-D'-L1)与双官能试剂的硫醇反应性基团缀合。在以下文献中提供了若干实例：Jain等人,(2015),《药学研究(Pharm.Res.)》,32:3526-3540。在实施方式中，第一步骤可以涉及用叠氮化物将抗体功能化，随后用炔烃修饰的连接子或药物-连接子分子(D-L3-L2-L1、D-L3-L1、R1-D'-L2-L1或R1-D'-L1)进行点击化学反应。在实施方式中，第一步骤可以涉及用炔烃将抗体功能化，随后用叠氮化物修饰的连接子或药物-连接子分子(D-L3-L2-L1、D-L3-L1、R1-D'-L2-L1或R1-D'-L1)进行点击化学反应。在实施方式中，第一步骤可以涉及用醛将抗体功能化，随后用烷氧基胺或肼修饰的连接子或药物-连接子分子(D-L3-L2-L1、D-L3-L1、R1-D'-L2-L1或R1-D'-L1)进行点击化学反应。在实施方式中，第一步骤可以涉及用四嗪将抗体功能化，随后用反式环辛烯或环丙烯修饰的连接子或药物-连接子分子(D-L3-L2-L1、D-L3-L1、R1-D'-L2-L1或R1-D'-L1)进行点击化学反应。在实施方式中，第一步骤可以涉及用反式环辛烯或环丙烯将抗体功能化，随后用四嗪修饰的连接子或药物-连接子分子(D-L3-L2-L1、D-L3-L1、R1-D'-L2-L1或R1-D'-L1)进行点击化学反应。在以下文献中描述了一些实例：Pickens等人,(2018),《生物缀合化学》,29:686-701；Li等人,(2018),《单克隆抗体(Mabs)》,10:712-719；和Chio等人,(2020),《分子生物学方法》,2078:83-97。
一方面，式(I)或式(II)的ADC可以通过使单克隆抗体(Ab)与式(P-I)或式(P-II)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐，其中：
B是能够与所述单克隆抗体形成键的反应性部分；
L2是键、-C(O)-、-NH-、氨基酸单元、–(CH2CH2O)n–、–(CH2)n–、-O-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(C(O)CH2CH2NH)–、–(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))–或其任何组合；其中n是1至24的整数；
每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基；
L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基、经取代或未经取代的亚杂芳基、经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接；
R1是经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
D是并且
D'是其中D'通过其酰胺基与R1连接并且通过氧与L2连接。
一方面，式(I)或式(II)的ADC可以通过使抗HER2抗体、抗ROR1抗体、抗CD25抗体、抗TROP2抗体、抗B7-H3抗体、抗c-Met抗体、抗FOLR1抗体或抗CHOP2抗体(Ab)与式(P-I)或式(P-II)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐，其中：
B是能够与抗HER2抗体、抗ROR1抗体、抗CD25抗体、抗TROP2抗体、抗B7-H3抗体、抗c-Met抗体、抗FOLR1抗体或抗CHOP2抗体形成键的反应性部分；
L2是键、-C(O)-、-NH-、氨基酸单元、–(CH2CH2O)n–、–(CH2)n–、-O-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(C(O)CH2CH2NH)–、–(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))–或其任何组合；其中n是1至24的整数；
每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基；
L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基、经取代或未经取代的亚杂芳基、经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接；
R1是经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
D是并且
D'是其中D'通过其酰胺基与R1连接并且通过氧与L2连接。
在实施方式中，所述单克隆抗体用反应性部分(如醛、叠氮化物、炔烃、四嗪、肼、烷氧基胺、反式环辛烯或环丙烯)修饰。在实施方式中，所述单克隆抗体用醛修饰。在实施方式中，所述单克隆抗体用叠氮化物修饰。在实施方式中，所述单克隆抗体用四嗪修饰。在实施方式中，所述单克隆抗体用烷氧基胺修饰。在实施方式中，所述单克隆抗体用肼修饰。在实施方式中，所述单克隆抗体用反式环辛烯修饰。在实施方式中，所述单克隆抗体用环丙烯修饰。
在实施方式中，所述单克隆抗体(Ab)是抗HER2抗体、抗ROR1抗体、抗CD25抗体、抗TROP2抗体、抗B7-H3抗体、抗c-Met抗体、抗FOLR1抗体或抗CHOP2抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗HER2抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗ROR1抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗CD25抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗TROP2抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗B7-H3抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗c-Met抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗FOLR1抗体。在实施方式中，所述单克隆抗体是抗CHOP2抗体。在实施方式中，B是能够与抗HER2抗体形成键的反应性部分。在实施方式中，Ab是经修饰的抗HER2抗体。
在实施方式中，Ab用醛、叠氮化物、炔烃、四嗪、肼、烷氧基胺、反式环辛烯或环丙烯修饰。在实施方式中，Ab用醛修饰。在实施方式中，Ab用叠氮化物修饰。在实施方式中，Ab用四嗪修饰。在实施方式中，Ab用烷氧基胺修饰。在实施方式中，Ab用肼修饰。在实施方式中，Ab用反式环辛烯修饰。在实施方式中，Ab用环丙烯修饰。在实施方式中，经修饰的Ab是经修饰的抗HER2抗体。
在实施方式中，n是1至24的整数。在实施方式中，n是1。在实施方式中，n是2。在实施方式中，n是3。在实施方式中，n是4。在实施方式中，n是5。在实施方式中，n是6。在实施方式中，n是7。在实施方式中，n是8。在实施方式中，n是9。在实施方式中，n是10。在实施方式中，n是11。在实施方式中，n是12。在实施方式中，n是13。在实施方式中，n是14。在实施方式中，n是15。在实施方式中，n是16。在实施方式中，n是17。在实施方式中，n是18。在实施方式中，n是19。在实施方式中，n是20。在实施方式中，n是21。在实施方式中，n是22。在实施方式中，n是23。在实施方式中，n是24。
在实施方式中，B是能够与所述抗HER2抗体或所述经修饰的抗HER2抗体的一个或两个硫醇基或胺基形成键的反应性部分。在实施方式中，所述抗HER2抗体用叠氮化物、醛、炔烃、四嗪、肼、烷氧基胺、反式环辛烯或环丙烯修饰。
在实施方式中，B是炔烃、叠氮化物、醛、四嗪、肼、烷氧基胺、反式环辛烯、环丙烯、经激活的酯、卤代乙酰基、环炔烃、马来酰亚胺或双砜。在实施方式中，B是二溴马来酰亚胺。在实施方式中，B是环辛炔。在实施方式中，所述经激活的酯可以是例如五氟苯基酯、四氟苯基酯、三氟苯基酯、二氟苯基酯、单氟苯基酯、N-羟基琥珀酰亚胺酯。
在实施方式中，B是
在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是在实施方式中，B是
在实施方式中，B-L2-是
在实施方式中，单克隆抗体、经修饰的单克隆抗体或抗HER2未经修饰或经修饰的抗体(Ab)与以下反应性B部分进行缀合反应，如下：
在实施方式中，L2是如以下中所描述的可切割或不可切割连接子：美国专利第US9,884,127号、第US 9,981,046号、第US 9,801,951号、第US10,117,944号、第US10,590,165号和第US10,590,165号以及美国专利公开号US2017/0340750和US2018/0360985，所有所述美国专利都以引用方式整体并入本文。
在实施方式中，L2是键、-C(O)-、-NH-、-Val-、-Phe-、-Lys-、-Gly-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))–、-Ser-、-Thr-、-Ala-、-β-Ala-、-O-、-瓜氨酸-(Cit)、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–或其任何组合。
在实施方式中，每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是H。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代或未经取代的烷基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代或未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。
在实施方式中，每个R2和R3独立地是H或经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的烷基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是未经取代的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。在实施方式中，每个R2和R3独立地是经取代(例如，被至少一个取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的烷基(例如，C1-C8烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基)。
在实施方式中，每个R2和R3独立地是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基或己基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是甲基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是乙基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是丙基。在实施方式中，每个R2和R3独立地是丁基。
在实施方式中，L2是键、-C(O)-、-NH-、-Val-、-Phe-、-Lys-、-Gly-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))–、-Ser-、-Thr-、-Ala-、-β-Ala-、-瓜氨酸-(Cit)、-O-、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–或其任何组合。
在实施方式中，L2是-C(O)-、-NH-、-Val-、-Ala-、-Gly-、-Cit-、-O-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–、–(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))–或其任何组合。
在实施方式中，L2是-C(O)-、-NH-、-Gly-、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–或其任何组合。
在实施方式中，L2是-C(O)-、-NH-、-Val-、-Cit-、–(4-氨基苄氧羰基)–、–(CH2)n–、–(CH2CH2O)n–、–(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))–或其任何组合。
在实施方式中，L2是：
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是在实施方式中，L2是
在实施方式中，L2是键。在实施方式中，L2是-C(O)-。在实施方式中，L2是-NH-。在实施方式中，L2是-Val-。在实施方式中，L2是-Phe-。在实施方式中，L2是-Lys-。在实施方式中，L2是–(4-氨基苄氧羰基)–。在实施方式中，L2是–(CH2)n–。在实施方式中，L2是–(CH2CH2O)n–。在实施方式中，L2是-Gly-。在实施方式中，L2是-Ser-。在实施方式中，L2是-Thr-。在实施方式中，L2是-Ala-。在实施方式中，L2是-β-Ala-。在实施方式中，L2是-Cit-。在实施方式中，L2是-O-。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环烷基(例如，3至8元亚杂环烷基、3至6元亚杂环烷基或5至6元亚杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂芳基(例如，5至10元亚杂芳基、5至9元亚杂芳基或5至6元亚杂芳基)、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))、经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。在实施方式中，L3被一个或多个取代基取代。在实施方式中，L3被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，L3被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)亚杂环烷基(例如，3至8元亚杂环烷基、3至6元亚杂环烷基或5至6元亚杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环烷基(例如，3至8元亚杂环烷基、3至6元亚杂环烷基或5至6元亚杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂芳基(例如，5至10元亚杂芳基、5至9元亚杂芳基或5至6元亚杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂芳基(例如，5至10元亚杂芳基、5至9元亚杂芳基或5至6元亚杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基))。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基))。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至8元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至8元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是未经取代的3至8元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至8元杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至8元杂环烷基。在实施方式中，L3是未经取代的3至8元杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(3至8元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(3至8元杂环烷基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至6元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至6元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是未经取代的3至6元亚杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至6元杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至6元杂环烷基。在实施方式中，L3是未经取代的3至6元杂环烷基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(3至6元杂环烷基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(3至6元杂环烷基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环丁基、亚杂环戊基或亚杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂环丁基、亚杂环戊基或亚杂环己基。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环丁基、亚杂环戊基或亚杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，L3是未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环丁基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂环丁基。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环丁基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基。在实施方式中，L3是未经取代的杂环丁基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环丁基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环丁基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环戊基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂环戊基。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环戊基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环戊基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环戊基。在实施方式中，L3是未经取代的杂环戊基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环戊基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环戊基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚杂环己基。在实施方式中，L3是未经取代的亚杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环己基。在实施方式中，L3是未经取代的杂环己基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(杂环己基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(杂环己基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至10元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至10元亚杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至10元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至10元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至10元杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至10元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(5至10元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(5至10元杂芳基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至9元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至9元亚杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至9元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至9元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至9元杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至9元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(5至9元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(5至9元杂芳基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至6元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至6元亚杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至6元亚杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至6元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至6元杂芳基。在实施方式中，L3是未经取代的5至6元杂芳基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(5至6元杂芳基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(5至6元杂芳基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚呋喃基、亚吡咯基、亚吡啶基、亚吡喃基、亚咪唑基、亚噻吩基、亚噁唑基或亚噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚呋喃基、亚吡咯基、亚吡啶基、亚吡喃基、亚咪唑基、亚噻吩基、亚噁唑基或亚噻唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚呋喃基、亚吡咯基、亚吡啶基、亚吡喃基、亚咪唑基、亚噻吩基、亚噁唑基或亚噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，L3是未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚呋喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚呋喃基。在实施方式中，L3是未经取代的亚呋喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基。在实施方式中，L3是未经取代的呋喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(呋喃基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(呋喃基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚吡咯基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚吡咯基。在实施方式中，L3是未经取代的亚吡咯基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡咯基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡咯基。在实施方式中，L3是未经取代的吡咯基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(吡咯基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(吡咯基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚吡啶基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚吡啶基。在实施方式中，L3是未经取代的亚吡啶基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡啶基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡啶基。在实施方式中，L3是未经取代的吡啶基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(吡啶基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(吡啶基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚吡喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚吡喃基。在实施方式中，L3是未经取代的亚吡喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡喃基。在实施方式中，L3是未经取代的吡喃基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(吡喃基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚咪唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚咪唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚咪唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的咪唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的咪唑基。在实施方式中，L3是未经取代的咪唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(咪唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚噻唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻唑基。在实施方式中，L3是未经取代的噻唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(噻唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(噻唑基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚噻吩基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚噻吩基。在实施方式中，L3是未经取代的亚噻吩基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻吩基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻吩基。在实施方式中，L3是未经取代的噻吩基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(噻吩基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(噻吩基)。
在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚噁唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的亚噁唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚噁唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噁唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噁唑基。在实施方式中，L3是未经取代的噁唑基。在实施方式中，L3是未经取代的亚噁唑基。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-CH2NCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-CH2NCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-CH2NCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的-OCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的-OCH2-(噁唑基)。在实施方式中，L3是未经取代的-OCH2-(噁唑基)。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，R1被一个或多个取代基取代。在实施方式中，R1被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，R1被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，R1是未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，R1是未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至8元杂环烷基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至8元杂环烷基。在实施方式中，R1是未经取代的3至8元杂环烷基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的3至6元杂环烷基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的3至6元杂环烷基。在实施方式中，R1是未经取代的3至6元杂环烷基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。在实施方式中，R1是未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环丁基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环丁基。在实施方式中，R1是未经取代的杂环丁基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环戊基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环戊基。在实施方式中，R1是未经取代的杂环戊基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环己基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的杂环己基。在实施方式中，R1是未经取代的杂环己基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至10元杂芳基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至10元杂芳基。在实施方式中，R1是未经取代的5至10元杂芳基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至9元杂芳基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至9元杂芳基。在实施方式中，R1是未经取代的5至9元杂芳基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的5至6元杂芳基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的5至6元杂芳基。在实施方式中，R1是未经取代的5至6元杂芳基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。在实施方式中，R1是未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基。在实施方式中，R1是未经取代的呋喃基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡咯基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡咯基。在实施方式中，R1是未经取代的吡咯基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡啶基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡啶基。在实施方式中，R1是未经取代的吡啶基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡喃基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡喃基。在实施方式中，R1是未经取代的吡喃基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的咪唑基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的咪唑基。在实施方式中，R1是未经取代的咪唑基。
在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻唑基。在实施方式中，R1是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻唑基。在实施方式中，R1是未经取代的噻唑基。
在实施方式中，式(IA)或式(IIA)的ADC可以通过使单克隆抗体(Ab)与式(P-IA)或式(P-IIA)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐，其中：
环A是通过杂原子Y与L2连接的经取代或未经取代的亚杂环烷基或经取代或未经取代的亚杂芳基；
环A'是通过杂原子Y与D'连接的经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
每个Y独立地是N、P或S；并且
B、L2、D和D'各自是如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，在式(P-IA)或式(P-IIA)中，
环A是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂环烷基(例如，3至8元亚杂环烷基、3至6元亚杂环烷基或5至6元亚杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚杂芳基(例如，5至10元亚杂芳基、5至9元亚杂芳基或5至6元亚杂芳基)。在实施方式中，环A被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环A被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环A被一个或多个低级取代基取代。环A通过杂原子Y与L2连接。在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，环A'是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，环A'被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环A'被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环A'被一个或多个低级取代基取代。环A'通过杂原子Y与D'连接。
在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，在式(P-IA)或式(P-IIA)中，
环A被一个或多个3至8元亚杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。在实施方式中，环A通过杂原子Y与L2连接。在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，环A'被一个或多个3至8元杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。环A'通过杂原子Y与D'连接。
在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，在式(P-IA)或式(P-IIA)中，
环A被一个或多个5至6元亚杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。环A通过杂原子Y与L2连接。在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，环A'被一个或多个5至6元杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。环A'通过杂原子Y与D'连接。
在实施方式中，每个Y是N。
在实施方式中，式(IB)或式(IIB)的ADC可以通过使单克隆抗体(Ab)与式(P-IB)或式(P-IIB)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐，其中：
每个R4独立地是H、氧代、卤素、-CCl3、-CBr3、-CF3、-CI3、-CH2Cl、-CH2Br、-CH2F、-CH2I、-CHCl2、-CHBr2、-CHF2、-CHI2、-CN、-OR4A、-NR4AR4B、-COOR4A、-CONR4A R4B、-NO2、-SR4A、-SOn4R4A、-SOv4NR4AR4B、-PO(OH)2、-POm4R4A、-POr4NR4AR4B、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的环烷基或经取代或未经取代的杂环烷基；
位于相邻碳原子上的任何两个R4取代基可以任选地连接以形成经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；
每个R4A和R4B独立地是H、-CX3、-CHX2、-CH2X、-C(O)OH、-C(O)NH2、-CN、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO3H、-SO4H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC＝(O)NHNH2、-NHC＝(O)NH2、-NHSO2H、-NHC＝(O)H、-NHC(O)OH、-NHOH、-OCX3、-OCHX2、-OCH2X、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；与同一氮原子键合的R4A和R4B取代基可以任选地连接以形成经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
X是-Cl、-Br、-I或–F；
每个n4独立地是0至4的整数；
每个v4独立地是1或2；
每个m4独立地是0至3的整数；并且
每个r4独立地是1或2；并且
Y、D、D'、B和L2各自是如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，每个R4独立地是H、卤素或经取代或未经取代的烷基。在实施方式中，每个R4独立地是H、氯、溴、碘、氟或经取代或未经取代的烷基。在实施方式中，每个R4独立地是H、氯、溴、碘、氟、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基或己基。在实施方式中，每个R4独立地是H。在实施方式中，每个R4独立地是氟。在实施方式中，每个R4独立地是甲基。在实施方式中，每个R4独立地是乙基。
在实施方式中，式(IC)或式(IIC)的ADC可以通过使单克隆抗体(Ab)与式(P-IC)或式(P-IIC)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、Y、B、L2和R4各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，式(ID)或式(IID)的ADC可以通过使单克隆抗体(Ab)与式(P-ID)或式(P-IID)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、Y、B、L2和R4各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，式(ID1)或式(IID1)的ADC可以通过使单克隆抗体(Ab)与式(P-ID1)或式(P-IID1)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、Y、B、L2和R4各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，式(IE)或式(IIE)的ADC可以通过使单克隆抗体(Ab)与式(P-IE)或式(P-IIE)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、Y、B、L2和R4各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，式(IF)或式(IIF)的ADC可以通过使单克隆抗体(Ab)与式(P-IF)或式(P-IIF)的分子反应来制备：
或其药学上可接受的盐；其中D、D'、Y、B、L2和R4各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(IG)或式(IH)的ADC：
或其药学上可接受的盐，其中：
环W是经取代或未经取代的亚环烷基或经取代或未经取代的亚芳基；环C是经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；并且其中D、m、L1、L2和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚环烷基(例如，C3-C8亚环烷基、C3-C6亚环烷基或C5-C6亚环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚芳基(例如，C5-C10亚芳基、C5-C8亚芳基或C5-C6亚芳基)。在实施方式中，环W被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环W被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环W被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的C3-C8亚环烷基。在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的C3-C8亚环烷基。在实施方式中，环W是未经取代的C3-C8亚环烷基。
在实施方式中，环W被一个或多个C3-C8亚环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚环丁基。在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚环戊基。在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的亚环己基。
在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的C5-C6亚芳基。在实施方式中，环W是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的C5-C6亚芳基。在实施方式中，环W是未经取代的C5-C6亚芳基。在实施方式中，环W被一个或多个C5-C6亚芳基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，环C被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂环烷基(例如，3至8元杂环烷基、3至6元杂环烷基或5至6元杂环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的杂芳基(例如，5至10元杂芳基、5至9元杂芳基或5至6元杂芳基)。在实施方式中，环C被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，环C被一个或多个5至9元杂芳基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。在实施方式中，环C是未经取代的5至9元杂芳基。
在实施方式中，环C被一个或多个5至6元杂芳基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。在实施方式中，环C是未经取代的5至6元杂芳基。
在实施方式中，环C被一个或多个3至8元杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。在实施方式中，环C被一个或多个5至6元杂环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。在实施方式中，环C是未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、噁唑基或噻唑基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的呋喃基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的呋喃基。在实施方式中，环C是未经取代的呋喃基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡咯基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡咯基。在实施方式中，环C是未经取代的吡咯基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡啶基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡啶基。在实施方式中，环C是未经取代的吡啶基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的吡喃基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的吡喃基。在实施方式中，环C是未经取代的吡喃基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的咪唑基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的咪唑基。在实施方式中，环C是未经取代的咪唑基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻唑基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻唑基。在实施方式中，环C是未经取代的噻唑基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噻吩基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噻吩基。在实施方式中，环C是未经取代的噻吩基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的噁唑基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的噁唑基。在实施方式中，环C是未经取代的噁唑基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的环烷基(例如，C3-C8环烷基、C3-C6环烷基或C5-C6环烷基)或经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的芳基(例如，C5-C10芳基、C5-C8芳基或C5-C6芳基)。在实施方式中，环C被一个或多个取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个大小受限的取代基取代。在实施方式中，环C被一个或多个低级取代基取代。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的C3-C8环烷基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的C3-C8环烷基。在实施方式中，环C是未经取代的C3-C8环烷基。在实施方式中，环C被一个或多个C3-C8环烷基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的环丁基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的环戊基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的环己基。
在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)或未经取代的C5-C6芳基。在实施方式中，环C是经取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)的C5-C6芳基。在实施方式中，环C是未经取代的C5-C6芳基。在实施方式中，环C被一个或多个C5-C6芳基取代(例如，被取代基、大小受限的取代基或低级取代基取代)。
在实施方式中，本文提供了一种式(IJ)或式(IK)的ADC：
或其药学上可接受的盐，其中：
Z是S、N或O；V是C或N；并且其中D、m、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，Z是N。在实施方式中，Z是O。在实施方式中，Z是S。
在实施方式中，V是C。在实施方式中，V是N。
在实施方式中，本文提供了一种式(IL)或式(IM)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、Z、m、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(IN)或式(IO)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、Z、m、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，本文提供了一种式(IP)或式(IQ)的ADC：
或其药学上可接受的盐；其中D、Z、m、L1、L2、R4和Ab各自如本文(包括实施方式)所定义。
在实施方式中，B-L2-L3-D(P-I)是下式的分子：
或其药学上可接受的盐。
在实施方式中，B-L2-D′-R1(P-II)是下式的分子：
或其药学上可接受的盐。
药物组合物
一方面，本文提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含如本文(包括实施方式)所描述的ADC以及药学上可接受的载剂。在实施方式中，如本文所描述的ADC以治疗有效量被包括在内。
在实施方式中，所述药物组合物被调配为如本文所描述的片剂、粉剂、胶囊、丸剂、扁囊剂或锭剂。所述药物组合物可以被调配为用于口服施用的片剂、胶囊、丸剂、扁囊剂或锭剂。所述药物组合物可以被调配成溶解在溶液中，用于通过例如静脉内施用的技术进行施用。如本文所描述，所述药物组合物可以被调配用于口服施用、栓剂施用、局部施用、静脉内施用、腹膜内施用、肌内施用、病灶内施用、鞘内施用、鼻内施用、皮下施用、植入、经皮施用或经粘膜施用。
所述ADC及其药物组合物特别适用于肠胃外施用，即皮下(s.c.)、鞘内、腹膜内、肌内(i.m.)或静脉内(i.v.)。在实施方式中，所述ADC及其药物组合物通过静脉内或皮下施用。
所述组合物可以包括接近生理条件所需的药学上可接受的辅助物质，如pH调节剂和缓冲剂等。本发明的抗原结合蛋白在此类药物调配物中的浓度可以变化很大，即从小于约0.5重量％，通常为或至少约1重量％至高达约15重量％或20重量％，并且将根据所选择的特定施用模式主要基于流体体积、粘度等来选择。
用于制备可肠胃外施用的组合物的实际方法是本领域的技术人员已知的或将显而易见的，并且更详细地描述于例如《雷明顿氏药物科学(Remington's PharmaceuticalScience)》,第15版,宾夕法尼亚州伊斯顿市的马克出版公司(Mack Publishing Company,Easton,Pa)。关于本发明的可静脉内施用的抗原结合蛋白调配物的制备，参见Lasmar U和Parkins D“生物制药产物的调配物(The formulation of Biopharmaceuticalproducts)”,《当代药学科学与技术(Pharma.Sci.Tech.today)》,第129-137页,第3期(2000年4月3日)；Wang,W“液体蛋白质药物的不稳定性、稳定和调配(Instability,stabilisation and formulation of liquid protein pharmaceuticals)”,《国际药剂学杂志(Int.J.Pharm)》185(1999)129-188；蛋白质药物部分的稳定性A和B部分(Stabilityof Protein Pharmaceuticals Part A and B)编辑Ahern T.J.,Manning M.C.,纽约州纽约的普莱纽姆出版社(New York,N.Y.:Plenum Press)》(1992)；Akers,M.J.“肠胃外调配物中赋形剂-药物相互作用(Excipient-Drug interactions in ParenteralFormulations)”,《药物科学杂志(J.Pharm Sci)》91(2002)2283-2300；Imamura,K等人“糖的种类对干燥状态下蛋白质稳定性的作用(Effects of types of sugar onstabilization of Protein in the dried state)”,《药物科学杂志》92(2003)266-274；Izutsu,Kkojima,S.“赋形剂结晶度和其在冷冻干燥期间的蛋白质结构稳定作用(Excipient crystallinity and its protein-structure-stabilizing effect duringfreeze-drying)”,《药学和药理学杂志(J.Pharm.Pharmacol)》,54(2002)1033-1039；Johnson,R,“甘露醇-蔗糖混合物-蛋白质过氧化物酶19g19n的通用调配物(Mannitol-sucrose mixtures-versatile formulations for protein peroxidise19g19n)”,《药物科学杂志》,91(2002)914-922；以及Ha,E Wang W,Wang Y.j.“聚山梨醇酯80中过氧化物形成与蛋白质稳定性(Peroxide formation in polysorbate 80and protein stability)”,《药物科学杂志》,91,2252-2264,(2002)，所述文献的全部内容以引用方式并入本文并且读者可以特别参考所述文献。
在实施方式中，所述药物组合物可以包含本文所描述的化合物的光学异构体、非对映异构体、对映异构体、异构体、多晶型物、水合物、溶剂合物或产物、或药学上可接受的盐。如上文所描述，包含在所述药物组合物中的本文所描述的化合物(包含其药学上可接受的盐)可以与载剂部分共价连接。在实施方式中，包含在所述药物组合物中的本文所描述的化合物(包含其药学上可接受的盐)不与载剂部分共价连接。本文所描述的共价和非共价连接的化合物的组合可以在本文的药物组合物中。
使用方法
在大约15-30％的乳腺癌中存在HER2基因的扩增或过表达(Burstein H.J.,2005,《新英格兰医学杂志(N.Engl.J.Med.)》353(16):1652-1654)。随着对HER2生物学的了解不断增加，现在已经认识到在其它形式的癌症中也存在HER2过表达，如胃癌、卵巢癌、子宫浆液性子宫内膜癌、结肠癌、膀胱癌、肺癌、子宫颈癌、头颈癌和食管癌(Fukushige S.I.等人,1986,《分子细胞生物学(Mol.Cell Biol.)》6(3):955-958；Reichelt U.等人,2007,《现代病理学(Mod Pathol.)》20(1):120-129)。
HER2在15-30％的侵袭性乳腺癌中过表达，其具有预后和预测意义(BursteinH.J.,2005,《新英格兰医学杂志》353(16):1652-1654)。发现HER2基因的扩增是总生存期(P<0.001)和复发时间(P<0.0001)两者的显著预测因子。在Press等人(Press M.F.等人,1993,《癌症研究(Cancer Res.)》53(20):4960-4970)的研究中，在704个淋巴结阴性乳腺癌中研究了HER2的表达，并且发现患有具有高过表达的乳腺癌的妇女的复发风险是那些乳腺癌具有正常表达的妇女的复发风险的9.5倍(P＝0.0001)。Seshadri等人(Seshadri R.等人,1993,《临床肿瘤学杂志(J.Clin.Oncol.)》11(10):1936-1942)在其对具有I-III期乳腺癌的1056名患者的研究中发现，HER2扩增3倍或更高与显著更短的无病生存期相关(P＝0.0027)。HER2扩增还与疾病的病理学阶段、肿瘤的腋窝淋巴结数量、组织学类型以及雌激素受体(ER)和孕酮受体(PgR)的缺失显著相关。证据表明，HER2扩增是人乳腺肿瘤发生的早期事件。
一方面，本文提供了一种治疗有需要的受试者中的疾病的方法，所述方法包括施用有效量的抗体偶联药物(ADC)，所述ADC包含IgG抗体、缀合连接子部分(L1)，所述缀合连接子部分与所述IgG抗体的半胱氨酸残基的硫醇或赖氨酸残基的胺结合，并且与L3-L2-L1共价结合的药物部分或与L2-L1和R1两者单独结合的药物部分结合。在实施方式中，所述IgG抗体与HER2结合。
一方面，本文所提供的ADC用于抑制表达HER2的细胞的增殖的方法，所述方法包括在允许ADC的抗HER2抗体结合于所述细胞的表面上的条件下，将所述细胞暴露于所述ADC，由此抑制所述细胞的所述增殖。在实施方式中，所述方法是体外或体内方法。在实施方式中，所述细胞是B细胞。
可以使用可从普洛麦格公司(威斯康星州麦迪逊)商购获得的CellTiter-GloTM发光细胞活力测定来测定体外细胞增殖的抑制。所述测定基于存在的ATP(其是代谢活性细胞的指标)的定量来确定培养物中活细胞的数量。参见Crouch等人(1993)《免疫学方法杂志》160:81-88，美国专利第6602677号。所述测定可以在96孔或384孔形式中进行，使其适合自动化高通量筛选(HTS)。参见Cree等人(1995)《抗癌药物(AntiCancer Drugs)》6:398-404。测定程序涉及将单一试剂(试剂)直接添加到经培养的细胞中。这导致细胞溶解并且产生由荧光素酶反应产生的发光信号。发光信号与存在的ATP的量(其与培养物中存在的活细胞的数量成正比)成比例。数据可以由光度计或CCD相机成像装置记录。发光输出以相对光单位(RLU)表示。
另一方面，提供了一种用作药物的ADC。在另外的方面，提供了一种用于治疗方法的ADC。另一方面，本文提供了一种治疗有需要的受试者中的疾病的方法，所述方法包括施用有效量的如本文所描述的ADC的药物组合物。
在实施方式中，所述疾病是癌症。在实施方式中，所述癌症与HER2、ROR1、CD25、TROP2、B7-H3、c-Met、FOLR1或CHOP2的过表达相关。在实施方式中，所述癌症与HER2的过表达相关。在实施方式中，所述癌症与ROR1的过表达相关。在实施方式中，所述癌症与CD25的过表达相关。在实施方式中，所述癌症与TROP2的过表达相关。在实施方式中，所述癌症与B7-H3的过表达相关。在实施方式中，所述癌症与c-Met的过表达相关。在实施方式中，所述癌症与FOLR1的过表达相关。在实施方式中，所述癌症与CHOP2的过表达相关。在实施方式中，本文提供了一种用于治疗患有表达HER2的癌症的个体的方法中的ADC，所述方法包括向所述个体施用有效量的所述ADC。在一个此类实施方式中，所述方法进一步包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。
在另外的方面，本公开提供了ADC在制造或制备药物中的用途。在实施方式中，所述药物用于治疗表达HER2的癌症。在另外的实施方式中，所述药物用于在治疗表达HER2的癌症的方法中，所述方法包括向患有表达HER2的癌症的个体施用有效量的所述药物。在一个此类实施方式中，所述方法进一步包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。
在实施方式中，本文所提供的方法用于治疗哺乳动物中的癌症。在实施方式中，本文所提供的方法用于治疗人中的癌症。
在实施方式中，所述癌症是实体瘤。在实施方式中，表达HER2的实体瘤包括但不限于乳腺癌(例如，雌激素和孕酮受体阴性乳腺癌、三阴性乳腺癌(TNBC))、卵巢癌、肺癌(例如，非小细胞肺癌(NSCLC)(包括腺癌、鳞状细胞癌和大细胞癌)和小细胞肺癌)、胃癌、食管癌、结直肠癌、尿路上皮癌(例如，微毛细管尿路上皮癌和典型的尿路上皮癌)、胰腺癌、唾液腺癌(例如，粘膜表皮样癌、腺样囊性癌和末端导管腺癌)和脑癌或上述癌症的转移(即，来自HER2+乳腺癌的肺转移)(Martin等人,2014,《未来肿瘤学(Future Oncol.)》10(8):1469-86)。
在其它实施方式中，表达HER2的实体瘤包括膀胱癌、胃肠道间质瘤、子宫颈癌、腹膜癌、肝癌、肝细胞癌、结肠癌、直肠癌、子宫内膜癌、肾癌、外阴癌、甲状腺癌、阴茎癌、肛门癌、星形细胞瘤、白血病、淋巴瘤、头颈癌、睾丸癌、宫颈癌、肉瘤、血管瘤、眼癌、喉癌、口癌、间皮瘤、皮肤癌、骨髓瘤、口腔癌、咽喉癌、前列腺癌或导管癌。
在一些实施方式中，所述表达HER2的癌症包括实体瘤。在一些实施方式中，所述表达HER2的癌症是转移性的。在一些实施方式中，所述表达HER2的癌症是复发性癌症。
在实施方式中，所述癌症选自由以下组成的组：乳腺癌、肺癌、卵巢癌和胃癌。在实施方式中，乳腺癌是转移性乳腺癌或三阴性乳腺癌。在实施方式中，肺癌是非小细胞肺癌(NSCLC)。
在实施方式中，所述癌症是乳腺癌。在实施方式中，所述癌症是转移性乳腺癌。在实施方式中，所述癌症是非小细胞肺癌(NSCLC)。在实施方式中，所述癌症是卵巢癌。
在实施方式中，本文所公开的ADC可以用于治疗先前尚未用治疗剂治疗的表达HER2的癌症(即，作为一线治疗)。
在实施方式中，本文所公开的ADC可以用于治疗对用另一种治疗剂进行的治疗具有抗性、难治性和/或复发性的表达HER2的癌症(即，作为二线治疗)。在实施方式中，先前治疗是曲妥珠单抗(trastuzumab)(曲妥珠单抗或)，单独地或与另外的治疗剂(即，紫杉烷，如紫杉醇、多西他赛(docetaxel)、卡巴他赛(cabazitaxel)等)组合。
在实施方式中，本文所公开的ADC可以用于治疗对用多于一种其它治疗剂进行的治疗具有抗性、难治性和/或复发性的表达HER2的癌症(即，作为三线治疗或四线治疗等)。
本文所描述的ADC可以在疗法中单独使用或与其它药剂组合使用。例如，如本文所描述的ADC可以与至少一种另外的治疗剂共同施用。在实施方式中，其它治疗方案可以与ADC的施用组合，包括但不限于放射疗法和/或骨髓和外周血移植和/或细胞毒性剂。在实施方式中，细胞毒性剂是一种药剂或多种药剂的组合，例如环磷酰胺、多西他赛、紫杉醇、羟基柔红霉素、阿霉素、多柔比星(doxorubincin)、长春新碱(OncovinTM)、泼尼松龙、CHOP(环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松龙的组合)或曲妥珠单抗。
上文指出的此类组合疗法涵盖组合施用(其中两种或更多种治疗剂被包括在相同或单独的调配物中)和单独施用，在这种情况下，ADC的施用可以在施用另外的治疗剂和/或佐剂之前、同时和/或之后发生。本文所描述的ADC还可以与放射疗法组合使用。
制品
在另外的方面，本文提供了包括可用于治疗、预防和/或诊断上文所描述的病症的材料的制品。制品(试剂盒)包括容器和在容器上或与容器相关的标签或包装说明书。合适的容器包括例如瓶、小瓶、注射器、IV溶液袋等。容器可以由多种材料(如玻璃或塑料)形成。容器容纳有本身或与另一种组合物组合可有效治疗、预防和/或诊断病症的组合物，并且可以具有无菌进入端口(例如，容器可以是静脉内溶液袋或具有可通过皮下注射针穿透的塞子的小瓶)。所述组合物中的至少一种活性剂是如本文所描述的ADC。标签或包装说明书指示所述组合物用于治疗选择的病状。而且，制品(试剂盒)可以包括(a)其中包括组合物的第一容器，其中所述组合物包含如本文所描述的ADC；和(b)其中包括组合物的第二容器，其中所述组合物包含另外的细胞毒性剂或其它治疗剂。本发明的该实施方式中的制品可以进一步包括指示组合物可以用于治疗特定病状的包装插页。可替代地或另外地，制品可以进一步包括第二(或第三)容器，所述容器包括药学上可接受的缓冲液，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液或右旋糖溶液。制品可以进一步包括从商业和用户立场来看令人期望的其它材料，所述材料包括其它缓冲液、稀释剂、过滤器、针和注射器。
序列表：
人HER2序列SEQ ID NO:16(UniProt P04626-1)
序列表格
表2：
表3
实施例
以下实施例旨在是说明性并且可以用于进一步理解本公开的实施方式并且不应被解释为以任何方式限制本发明教导的范围。
实施例中描述的化学反应可以容易地适于制备许多本公开的其它化合物，并且用于制备本公开的化合物的替代性方法被视作在本公开的范围内。例如，通过对本领域的技术人员而言显而易见的修饰，例如通过利用本领域中已知的除所描述的试剂之外的其它合适的试剂或通过对反应条件、试剂和起始材料进行常规修改，可以成功地进行根据本公开的非例示性化合物的合成。可替代地，本文所公开或本领域中已知的其它反应将被认为适用于制备本公开的其它化合物。美国专利第10,590,165号和第9,981,046号中公开了化合物40和相关化合物的合成，所述美国专利整体并入本文。通过HPLC(如下所述)纯化的所有化合物是TFA盐。
合成实施例
实施例S1：化合物L078-030-LT的合成。
向化合物1(18mg，94μmol)、5(甲磺酸盐，50mg，94μmol)和HATU(35mg，94μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(25mg，188μmol)。将溶液搅拌5分钟后，通过HPLC来对反应混合物进行纯化。将所得产物3用50％ TFA于DCM中的溶液处理30分钟，并在减压下蒸发至干燥。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈白色粉末的化合物L078-030(TFA盐，32mg)。MSm/z 519.4(M+H)。
将化合物L078-030(TFA盐，12mg，19μmol)、化合物4(CAS2003260-12-4；22mg，23μmol)、HOBt(5mg)和DIEA(6mg)于2mL DMF中的溶液搅拌1小时。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到呈淡黄色粉末的化合物L078-030-LT(8mg)。MS m/z 1323.0(M+H)。
实施例S2：化合物L078-062的合成。
向化合物2(目录号1415800-42-8；500mg，0.858mmol)、化合物9(目录号7093-67-6；260mg，0.858mmol)于4mL DMF中的溶液中添加10％ NaHCO3(并且将pH调节至8.5)。将溶液搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到呈白色固体的化合物7(463mg)。MS m/z 702.3(M+H)。
向化合物7(10mg，14μmol)、L078-030(TFA盐，9mg，14μmol)和HATU(5mg，14μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(5mg，35μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈淡黄色粉末的化合物L078-062(9mg)。MS m/z 1202.6(M+H)。
实施例S3：化合物L078-079的合成。
将化合物8(2.0g，3.42mmol)溶解于50mL的50％ CH3CN/H2O溶液中。向溶液中添加9(1.04g，3.42mmol)的水溶液(30mL)。向混合物中添加NaHCO3的饱和溶液(2mL)。将溶液搅拌20分钟。将白色沉淀物通过过滤收集，用水洗涤并干燥，以得到10(1.52g)。MS m/z 773.4(M+H)。
将10(30mg，39μmol)于DMSO(6mL)中的悬浮液加热至60℃。将澄清溶液冷却至室温。向溶液中添加L078-030(TFA盐，20mg，39μmol)、HATU(15mg，39μmol)和DIEA(13mg，98μmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加1mL二乙胺并浓缩。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈TFA盐的11。MS m/z 1051.9(M+H)。
将化合物11(52mg，39μmol)、12(27mg，39μmol)和DIEA(13mg，98μmol)的溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-079(7.1mg)。MS m/z 1394.5(M+H)。
实施例S4：化合物L078-056的合成。
向化合物13(22mg，94μmol、2(甲磺酸盐，50mg，94μmol)和HATU(36mg，94μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(30mg，235μmol)。将溶液搅拌10分钟并通过HPLC纯化。将所得产物14用50％ TFA/DCM(2mL)处理30分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-048(48mg)。MS m/z 549.8(M+H)。
向化合物4(10mg，14μmol)、L078-048(TFA盐，9.5mg，14μmol)和HATU(5mg，14μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(5mg，35μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-056(2.1mg)。MS m/z 1232.6(M+H)。
实施例S5：化合物L078-078的合成。
将10(40mg，45μmol)于DMSO(6mL)中的悬浮液加热至60℃。将澄清溶液冷却至室温。向溶液中添加L078-048(TFA盐，30mg，45μmol)、HATU(17mg，45μmol)和DIEA(15mg，112μmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加1mL二乙胺，搅拌另外30分钟并浓缩。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈TFA盐的15。MS m/z 1081.8(M+H)。
将化合物15(68mg，57μmol)、12(40mg，57μmol)和DIEA(15mg，112μmol)的溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-078(16.1mg)。MS m/z 1423.5(M+H)。
实施例S6：化合物L078-059的合成。
向化合物16(5mg，38μmol)和17(13mg，38μmol)于5mL的50％ CH3CN/H2O中的溶液中添加0.5mL的饱和NaHCO3溶液。将溶液搅拌10分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物18(13mg)。
向化合物18(13mg，38μmol)、5(甲磺酸盐，20mg，38μmol)和HATU(15mg，38μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(12mg，95μmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将溶液搅拌另外30分钟，并且通过在减压下蒸发去除二乙胺。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-049(15mg，22μmol)。
向化合物L078-049(TFA盐，15mg，22μmol)、7(16mg，22μmol)和HATU(8.5mg，22μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(7mg，55μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-059(6.5mg)。MS m/z 1232.5(M+H)。
实施例S7：化合物L078-055的合成。
向化合物19(5mg，19μmol)、5(甲磺酸盐，10mg，19μmol)和HATU(7mg，19μmol)于2mLDMF中的溶液中添加DIEA(6mg，48μmol)。将溶液搅拌10分钟并通过HPLC纯化。将所得产物20用50％ TFA/DCM(2mL)处理30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-047(9mg)。MS m/z 549.4(M+H)。
向化合物7(9.5mg，14μmol)、L078-047(TFA盐，9mg，14μmol)和HATU(5mg，14μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(5mg，35μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-055(2.6mg)。MS m/z 1232.5(M+H)。
实施例S8：化合物L078-058的合成。
向化合物21(5mg，19μmol)、5(甲磺酸盐，10mg，19μmol)和HATU(7mg，19μmol)于2mLDMF中的溶液中添加DIEA(6mg，48μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化。将所得产物22用含50％ TFA的DCM(1mL)处理30分钟并浓缩，以得到呈黄色粉末的化合物L078-046(9.6mg)。MS m/z 549.6(M+H)。
向化合物7(9.5mg，14μmol)、L078-046(TFA盐，9mg，14μmol)和HATU(5mg，14μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(5mg，35μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-058(5mg)。MS m/z 1232.5(M+H)。
实施例S9：化合物L078-063的合成。
向化合物23(HCl盐，50mg，0.36mmol)和17(122mg，0.36mmol)于4mL的50％CH3CN/H2O中的溶液中添加0.5mL的饱和NaHCO3溶液。将溶液搅拌10分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物24(82mg)。
向化合物24(30mg，0.094mmol)、5(甲磺酸盐，50mg，0.094mmol)和HATU(36mg，0.094mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(30mg，0.235mmol)。在搅拌5分钟后，向溶液中添加1mL二乙胺。将反应混合物再搅拌30分钟。在减压下通过蒸发去除二乙胺。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-042(41mg)。MS m/z 519.3(M+H)。
向化合物L078-042(TFA盐，9mg，14μmol)、7(10mg，14μmol)和HATU(6mg，14μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(5mg，38μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-063(6mg)。MS m/z 1203.1(M+H)。
实施例S10：化合物L078-064的合成。
向化合物25(HCl盐，50mg，0.36mmol)和17(122mg，0.36mmol)于4mL的50％CH3CN/H2O中的溶液中添加0.5mL的饱和NaHCO3溶液。将溶液搅拌10分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物26(102mg)。
向化合物26(20mg，0.060mmol)、5(甲磺酸盐，33mg，0.060mmol)和HATU(23mg，0.060mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(20mg，0.15mmol)。在搅拌5分钟后，向溶液中添加1mL二乙胺。将反应混合物再搅拌30分钟。在减压下通过蒸发去除二乙胺。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-043(28mg)。MS m/z 519.3(M+H)。
向化合物L078-043(TFA盐，9mg，14μmol)、7(10mg，14μmol)和HATU(6mg，14μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(5mg，38μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-064(1.5mg)。MS m/z 1202.9(M+H)。
实施例S11：化合物L078-066LT的合成。
向化合物27(14mg，55μmol)、5(甲磺酸盐，30mg，55μmol)和HATU(21mg，55μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(11mg，83μmol)。将溶液搅拌10分钟并通过HPLC纯化。将所得产物(29mg)用50％ TFA/DCM(2mL)处理30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-066。MS m/z 532.7(M+H)。
将化合物7(20mg，28μmol)于DMSO(3mL)中的悬浮液加热至60℃。将澄清溶液冷却至室温。向溶液中添加L078-066(TFA盐，18mg，28μmol)、HATU(11mg，28μmol)和DIEA(9mg，70μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-066LT(15mg)。MS m/z 1217.1(M+H)。
实施例S12：化合物L078-065LT的合成。
向化合物28(14mg，55μmol)、5(甲磺酸盐，30mg，55μmol)和HATU(21mg，55μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(11mg，83μmol)。将溶液搅拌10分钟并通过HPLC纯化。将所得产物(29mg)用50％ TFA/DCM(2mL)处理30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-065(23mg)。MS m/z 532.9(M+H)。
将化合物7(20mg，28μmol)于DMSO(3mL)中的悬浮液加热至60℃。将澄清溶液冷却至室温。向溶液中添加L078-065(TFA盐，18mg，28μmol)、HATU(12mg，28μmol)和DIEA(9mg，70μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-065LT(14mg)。MS m/z 1217.0(M+H)。
实施例S13：化合物L078-057的合成。
向化合物29(5mg，38μmol)和17(13mg 20mg，28μmol)于4mL的50％ CH3CN/H2O中的溶液中添加0.5mL的饱和NaHCO3溶液。将溶液搅拌20分钟。将溶液用二氯甲烷萃取，干燥并浓缩，以得到化合物30(12mg)。MS m/z 356.4(M+H)。
向化合物30(12mg，34μmol)、5(甲磺酸盐，20mg，38μmol)和HATU(14mg，34μmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA(11mg，85μmol)。在搅拌5分钟后，向溶液中添加0.5mL二乙胺。将反应混合物再搅拌30分钟。在减压下通过蒸发去除二乙胺。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-051(18mg)。MS m/z 551.1(M+H)。
向化合物L078-051(TFA盐，10mg，14μmol)、7(10mg，20mg，28μmol)和HATU(6mg，14μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(5mg，38μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-057(3.1mg)。MS m/z 1234.4(M+H)。
实施例S14：化合物L078-045的合成。
将化合物L078-043(TFA盐，20mg，30μmol)、4(30mg，32μmol)、HOBt(2mg，14μmol)和DIEA(7mg，54μmol)于2mL DMF中的溶液搅拌一小时。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-045(14mg)。MS m/z 1323.0(M+H)。
实施例S15：化合物L078-044的合成。
将化合物L078-042(TFA盐，17mg，27μmol)、4(25mg，27μmol)、HOBt(2mg，14μmol)和DIEA(7mg，54μmol)于2mL DMF中的溶液搅拌一小时。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L-78-044(16mg)。MS m/z 1323.0(M+H)。
实施例S16：化合物L078-081-LT的合成。
向化合物33(50mg，0.388mmol)和17(131mg，0.388mmol)于4mL的50％CH3CN/H2O中的溶液中添加0.5mL的饱和NaHCO3溶液。将溶液搅拌20分钟。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物34(56mg)。MS m/z 352.5(M+H)。
向化合物34(50mg，142μmol)、5(甲磺酸盐，75mg，142μmol)和HATU(54mg，142μmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA(46mg，355μmol)。在搅拌5分钟后，向溶液中添加0.5mL二乙胺。将反应混合物再搅拌30分钟。在减压下通过蒸发去除二乙胺。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-081(51mg)。MS m/z 547.3(M+H)。
向化合物L078-081(TFA盐，10mg，15μmol)、7(10mg，15μmol)和HATU(6mg，15μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(5mg，38μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-081-LT(2.0mg)。MS m/z 1230.6(M+H)。
实施例S17：化合物L078-090的合成。
向化合物35(250mg，2.13mmol)和17(720mg，2.13mmol)于10mL的50％CH3CN/H2O中的溶液中添加DIEA(412mg，3.2mmol)。将溶液搅拌10分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物36(451mg)。
向化合物36(30mg，88μmol)、5(甲磺酸盐，47mg，88μmol)和HATU(33mg，88μmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA(28mg，220μmol)。在搅拌5分钟后，向溶液中添加0.5mL二乙胺。将反应混合物再搅拌30分钟。在减压下通过蒸发去除二乙胺。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物L078-088(36mg)。MS m/z 532.2(M+H)。
向化合物L078-088(TFA盐，15mg，23μmol)、7(16mg，23μmol)和HATU(9mg，23μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(7mg，58μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈黄色粉末的化合物L078-090(5.2mg)。MS m/z 1219.1(M+H)。
实施例S18：化合物L078-091的合成。
将化合物37(HCl盐，250mg，1.48mmol)、38(643mg，2.95mmol)和NaOH(296mg，7.4mmol)于MeOH(10mL)/H2O(1mL)中的溶液搅拌5小时。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物39(305mg)。
向化合物39(21mg，94μmol)、5(甲磺酸盐，50mg，94μmol)和HATU(36mg，94μmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA(30mg，235μmol)。在搅拌5分钟后，通过HPLC来对溶液进行纯化并浓缩至干燥。将残余物用含50％ TFA的二氯甲烷(2mL)处理30分钟，以得到化合物L078-089(TFA盐，52mg)。MS m/z 537.3(M+H)。
向化合物L078-089(TFA盐，15mg，23μmol)、7(16mg，23μmol)和HATU(9mg，23μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(7mg，58μmol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到呈淡黄色粉末的化合物L078-091(9.2mg)。MS m/z 1221.3(M+H)。
实施例S19：化合物L078-084的合成。
向化合物40(目录号132742-00-8；20mg，38μmol)、L078-048(TFA盐，25mg，38μmol)和HATU(15mg，38μmol)于2mL DMF中的溶液中添加DIEA(10mg，76μmol)。将溶液搅拌5分钟。向反应混合物中添加二乙胺(1mL)。将溶液搅拌另外30分钟。通过蒸发去除二乙胺。通过HPLC来对残余物进行纯化并干燥，以得到呈黄色粉末的化合物41。
将化合物41溶解于2ml DMF中。向化合物41的溶液中添加化合物42(20mg，32μmol)和NaHCO3溶液(0.5mL，5％)并搅拌10分钟。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到呈淡黄色粉末的化合物L078-084(3.2mg)。MS m/z 1276.5(M+H)。
实施例S20：化合物L078-092的合成。
将化合物L078-049(TFA盐，10mg，15μmol)、4(14mg，15μmol)、HOBt(1mg，7μmol)和DIEA(4mg，30μmol)于2mL DMF中的溶液搅拌2小时。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈淡黄色粉末的化合物L78-092(10.1mg)。MS m/z 1352.7(M+H)。
实施例S21：化合物L078-093的合成。
将化合物L078-048(TFA盐，30mg，45μmol)、4(43mg，45μmol)、HOBt(4mg，30μmol)和DIEA(12mg，90μmol)于2mL DMF中的溶液搅拌2小时。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到呈淡黄色粉末的化合物L078-093(51mg)。MS m/z 1353.0(M+H)。
实施例S22：化合物L079-018的合成。
将DIEA(15μL)缓慢添加到化合物5(甲磺酸盐，10mg，0.0188mmol)、43(2.6mg，0.0188mmol)和HATU(7.2mg，0.0188mmol)于DMF(2mL)中的悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌15分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物L078-029(8mg)。MS m/z556.4(M+H)。
将DMAP(60mg，0.5mmol)添加到化合物L078-029(50mg，0.1mmol)和44(60mg，0.3mmol)的悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌3小时并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物45(10mg)。MS m/z 721.1(M+H)。
将化合物46(15μL)添加到化合物45(10mg，0.014mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物47(13mg)。MS m/z 670.3(M+H)。
将DIEA(10μL)缓慢添加到化合物47(12mg，0.014mmol)、4(17mg，0.018mmol)和HOAt(3mg，0.018mmol)的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌15分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物L079-018(8mg)。MS m/z 1473.7(M+H)。
实施例S23：化合物L079-019的合成。
将化合物54(Broadpharm；300mg，0.354mmol)、化合物55(161mg，0.531mmol)和DIEA(68mg，0.531mmol)于DMF(5mL)中的溶液搅拌5小时。通过HPLC来对粗产物进行纯化，以得到呈灰白色粉末的化合物48。
将DIEA(8μL)缓慢添加到化合物47(7mg，0.0105mmol)、48(12mg，0.0118mmol)和HOAt(1.4mg，0.0103mmol)于DMF(2ml)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物49(15mg)。MS m/z 1545.9(M+H)。
将哌啶(100μL)缓慢添加到化合物49(15mg，0.0097mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌15分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物50(10mg)。
将DIEA(6μL)缓慢添加到化合物50(10mg，0.0076mmol)、51(5mg，0.0084mmol)和HATU(3mg，0.0079mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟，随后添加哌啶(100μL)并再搅拌15分钟。通过HPLC来对所得混合物进行纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物52(15mg)。
将化合物52(15mg，0.0103mmol)和53(8mg，0.0328mmol)于乙腈/水中的混合物在室温下搅拌15分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物L079-019(3mg)。MS m/z1663.5(M+H)。
实施例S24：化合物L079-027的合成。
将DIEA(12mL)缓慢添加到Fmoc-Gly-Gly-Gly-OH(6.7g，16.2mmol)于二氯甲烷(200mL)中的悬浮液中。将所得混合物添加到填充有2-氯三苯甲基氯树脂(20g，16.2mmol)的500mL反应容器中。在室温下振荡1小时后，将树脂过滤并用DMF(300mL x3)洗涤，以得到树脂Ia。然后将树脂用含25％哌啶的DMF(200mL)在室温下处理30分钟。将树脂过滤并用DMF(300mL x 3)洗涤，以得到树脂Ib(23.5g，16.2mmol)。
将Fmoc-Gly-Gly-OH(2.13g，6.2mmol)和Oxyma Pure(目录3849-21-6；0.86g，6mmol)溶解于无水DMF(100mL)中。将所得混合物缓慢添加到填充有树脂Ib(7.5g，5mmol)的250mL反应容器中，随后添加N,N'-二异丙基碳二亚胺(4mL，25.5mmol)。将容器在室温下振荡2小时。将树脂过滤并用DMF(100mL x 3)洗涤，以得到树脂Iia。然后将树脂用含25％哌啶的DMF(100mL)在室温下处理30分钟。将树脂过滤并用DMF(100mL x 3)洗涤，以得到树脂Iib。
将DIEA(2.1mL)缓慢添加到Fmoc-NH-PEG4-CH2CH2COOH(2.93g，6mmol)和PyAOP(3.1g，6mmol)于DMF(100mL)中的混合物中。将所得混合物缓慢添加到容器中的树脂Iib中。在室温下振荡1小时后，将树脂过滤并用DMF(100mL x 3)洗涤，以得到树脂IIIa。然后将树脂用含25％哌啶的DMF(100mL)在室温下处理30分钟。将树脂过滤并用DMF(100mL x 3)洗涤，以得到树脂IIIb。
将DIEA(2.1mL)缓慢添加到化合物51(3.6g，6mmol)和PyAOP(3.1g，6mmol)于DMF(100mL)中的混合物中。将所得混合物缓慢添加到容器中的树脂IIIb中。在室温下振荡1小时后，将树脂过滤并用DMF(100mL x 3)和二氯甲烷(100mL x 2)洗涤，以得到树脂IV。然后将树脂用含5％ TFA的二氯甲烷(100mL)处理，以得到化合物56(0.95g)。
将DIEA(4μL)缓慢添加到化合物47(4mg，0.00605mmol)、化合物56(7mg，0.00628mmol)和HATU(2.4mg，0.0060mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟，随后添加哌啶(100μL)持续另外15分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物57b(5mg)。
将化合物57b(5mg，0.0037mmol)和化合物53(3mg，0.0123mmol)于乙腈-H2O中的混合物在室温下搅拌15分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物L079-027(2mg)。MS m/z 1544.8(M+H)。
实施例S25：化合物L079-034的合成。
将DIEA(60μL)缓慢添加到化合物5(甲磺酸盐，33mg，0.0940mmol)、化合物60(12mg，0.0975mmol)和HATU(36mg，0.0947mmol)于DMF(2mL)中的悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌15分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物61(33mg)。MS m/z541.5(M+H)。
将DMAP(45mg，0.3683mmol)添加到化合物61(33mg，0.061mmol)和化合物44(61mg，0.3026mmol)于二氯甲烷中的悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌3小时并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物62(40mg)。MS m/z 706.3(M+H)。
将化合物46(15μL)添加到化合物62(10mg，0.014mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物63(11mg)。MS m/z 655.4(M+H)。
将DIEA(10μL)缓慢添加到化合物63(10mg，0.015mmol)、化合物4(15mg，0.0159mmol)和HOAt(2mg，0.0147mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物L079-034(9mg)。MS m/z 1459.2(M+H)。
实施例S26：化合物L079-035的合成。
将DIEA(80μL)缓慢添加到化合物5(甲磺酸盐，53mg，0.1mmol)、化合物64(11.5mg，0.1mmol)和HATU(38mg，0.1mmol)于DMF(2mL)中的悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌15分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物65(62mg)。
将DMAP(41mg，0.3355mmol)添加到化合物65(30mg，0.056mmol)和化合物44(57mg，0.2835mmol)于二氯甲烷中的悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌3小时并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物66(10mg)。
将化合物46(12μL)添加到化合物66(10mg，0.0143mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物67(6mg)。
将DIEA(5μL)缓慢添加到化合物67(6mg，0.0092mmol)、化合物4(8mg，0.0085mmol)和HOAt(1.3mg，0.0095mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物L079-035(2.4mg)。MS m/z 1451(M+H)。
实施例S27：化合物L079-040的合成。
将化合物61(20mg，0.037mmol)、三光气(8.5mg，0.0287mmol)和DMAP(23mg，0.1885mmol)于二氯甲烷(2mL)中的混合物在室温下搅拌30分钟，随后添加含化合物68(目录2055024-58-1；47mg，0.055mmol)的DMF(0.5mL)和DIEA(10μL)。将混合物再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物69a(10mg)。
将哌啶(100μL)缓慢添加到化合物69a(10mg，0.007mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌15分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物69b(8mg)。
将DIEA(8μL)缓慢添加到化合物69b(8mg，0.0067mmol)、化合物70(2mg，0.0118mmol)和HATU(5mg，0.0131mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到呈微黄色粉末的化合物L079-040(3.7mg)。MS m/z 1345(M+H)。
实施例S28：化合物L078-121的合成。
将化合物72(386mg，3.356mmol)溶解于DMF(5mL)中。将溶液添加到化合物51(目录号345958-22-7；1g，1.678mmol)和EDC-HCl(987mg，5.030mmol)于DCM(50mL)中的溶液中。将所得溶液搅拌30分钟。将粗产物用DCM萃取，用水洗涤并浓缩，以得到化合物73。将粗化合物73溶解于50mL的CH3CN/H2O中，随后添加5％NaHCO3溶液(以将溶液的pH调节至pH 8)。将化合物74(277mg，1.678mmol)添加到化合物73的溶液中，并且将所得溶液搅拌30分钟。然后将所述所得溶液浓缩并通过HPLC纯化，以得到化合物77(1.12g)。MS m/z 844.2(M+H)。
将化合物L078-030(40mg，0.063mmol)、化合物75(目录863971-53-3；73mg，0.093mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(16mg，0.124mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌2小时。向溶液中添加0.5ml二乙胺并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物76(61mg)。
向化合物76(61mg，0.059mmol)、化合物77(50mg，0.059mmol)和HATU(23mg，0.059mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(19mg，0.147mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物78(42mg)。
将化合物78(42mg)溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向溶液中添加化合物53(10mg)于乙腈中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-121(25mg)。MS m/z 1513.7(M+H)。
实施例S29：化合物L078-118的合成。
向化合物L078-088(TFA盐，40mg，0.062mmol)、75(71mg，0.093mmol)和HOBt(5mg)于3mL DMF中的溶液中添加DIEA(16mg，0.124mmol)。将溶液搅拌16小时。向溶液中添加0.5ml二乙胺并搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物80(TFA盐，59mg)。
向化合物80(TFA盐，59mg，0.056mmol)、化合物77(47mg，0.056mmol)和HATU(22mg，0.056mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(19mg，0.147mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物81(TFA盐，36mg)。
将化合物81(TFA盐，36mg)溶解于3ml的60％乙腈/H2O(1％ TFA)中。向溶液中添加53(10mg)于乙腈中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-118(11mg)。MSm/z 1529.5(M+H)。
实施例S30：化合物L078-119的合成。
将化合物L078-042(TFA盐，50mg，0.079mmol)、化合物75(60mg，0.078mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(20mg，0.158mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌2小时。向溶液中添加0.5ml二乙胺，并且将溶液再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物82(58mg)。向化合物82(58mg，0.056mmol)、化合物77(47mg，0.056mmol)和HATU(22mg，0.056mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(19mg，0.147mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物搅拌另外30分钟并通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物83(52mg)。将化合物83(52mg)溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向溶液中添加化合物53(10mg)于CH3CN中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-119(30mg)。MS m/z 1513.28(M+H)。
实施例S31：化合物L078-120的合成。
将化合物77(400mg，0.474mmol)、化合物85的TFA盐(目录号159857-79-1；180mg，0.474mmol)、HATU(180mg，0.474mmol)和DIEA(122mg，0.946mmol)于DMF(5mL)中的溶液搅拌5分钟，以得到化合物86。将化合物55(216mg，0.711mmol)添加到化合物86的粗溶液中，并且将混合物再搅拌4小时。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物87(123mg)。
将化合物L078-048(TFA盐，40mg，0.060mmol)、化合物87(TFA盐，56mg，0.060mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(16mg，0.12mmol)的溶液搅拌2小时并通过HPLC纯化，以得到化合物88(28mg)。将化合物88溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向溶液中添加化合物53(10mg)于CH3CN中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-120(24mg)。MS m/z 1543.7(M+H)。
实施例S32：化合物L078-177的合成。
将化合物L078-088(TFA盐，30mg，0.046mmol)、化合物89(目录编号1394238-92-6；38mg，0.055mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(12mg，0.092mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌16小时，随后添加0.5ml二乙胺并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物90(20mg)。向化合物90(TFA盐，20mg，0.021mmol)、化合物77(18mg，0.021mmol)和HATU(8mg，0.021mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(7mg，0.052mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物搅拌另外30分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物91。将化合物91溶解于3ml的60％CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向溶液中添加化合物53(6mg)于CH3CN中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-118(4mg)。MS m/z 1442.4(M+H)。
实施例S33：化合物L078-130的合成。
将化合物L078-042(TFA盐，30mg，0.047mmol)、化合物89(40mg，0.059mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(12mg，0.94mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌2小时。向溶液中添加0.5ml二乙胺并搅拌另外30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物92。向化合物92(TFA盐，45mg，0.047mmol)、化合物77(40mg，0.047mmol)和HATU(18mg，0.047mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(15mg，0.117mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。然后将混合物搅拌另外30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物93。将化合物93溶解于3ml的60％CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向化合物93的溶液中添加化合物53(10mg)于CH3CN中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-130(18mg)。MS m/z 1427.7(M+H)。
实施例S34：化合物L078-123的合成。
将化合物L078-047(TFA盐，50mg，0.075mmol)、化合物75(86mg，0.112mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(19mg，0.15mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌2小时。向溶液中添加0.5ml二乙胺，并且将溶液搅拌另外30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物94(62mg)。向化合物94(TFA盐，62mg，0.058mmol)、化合物77(49mg，0.058mmol)和HATU(22mg，0.058mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(19mg，0.147mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物搅拌30分钟并通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物95。将化合物95溶解于3ml的60％CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向化合物95的溶液中添加化合物53(10mg)于CH3CN中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-123(13mg)。MS m/z1543.3(M+H)。
实施例S35：化合物L078-139的合成。
将化合物V(1g，2.13mmol)、化合物VI(目录号5070-13-3；288mg，2.34mmol)和EEDQ(790mg，3.19mmol)于二氯甲烷的溶液搅拌2小时。将溶液浓缩并通过HPLC纯化，以得到化合物VII(1.1g)。将化合物VII(1g，1.916mmol)、化合物55(873mg，2.874mmol)和DIEA(258mg，2mmol)于DMF(10mL)中的溶液搅拌5小时。通过HPLC来对粗产物进行纯化，以得到化合物99(823mg)。
将化合物L078-042(TFA盐，50mg，0.079mmol)、化合物99(64mg，0.087mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(20mg，0.16mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌2小时，随后添加0.5ml二乙胺，并且然后再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物100(58mg)。向化合物100(TFA盐，58mg，0.057mmol)、化合物101(20mg，0.057mmol)和HATU(21mg，0.057mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(19mg，0.144mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物搅拌另外30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物102(16mg)。向化合物102(TFA盐，16mg，0.014mmol)、化合物103(6mg，0.014mmol)和HATU(6mg，0.016mmol)的溶液中添加DIEA(5mg，0.035mmol)。在搅拌5分钟后，通过HPLC来对粗产物进行纯化并干燥。将残余物用含30％ TFA的二氯甲烷(1mL)处理30分钟并通过HPLC纯化，以得到L078-139(TFA盐，4mg)。MS m/z 1293.4(M+H)。
实施例S36：化合物L078-163的合成。
向化合物104(44mg，0.188mmol)、化合物5(甲磺酸盐，100mg，0.188mol)和HATU(71mg，0.188mmol)于3mL DMF中的溶液中添加DIEA(49mg，0.376mol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化。将所得产物用含50％ TFA的二氯甲烷(1mL)处理30分钟并浓缩，以得到呈黄色粉末的化合物L078-149(TFA盐，130mg)。MS m/z 548.4(M+H)。
将L078-149(TFA盐，30mg，0.045mmol)、化合物75(50mg，0.065mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(12mg，0.09mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌16小时，随后添加二乙胺(0.5mL)并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物106(28mg)。向化合物106(28mg，0.026mmol)、化合物77(23mg，0.026mmol)和HATU(10mg，0.026mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(9mg，0.065mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物107。将化合物107溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向溶液中添加化合物53(8mg)于CH3CN中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-163(7mg)。MS m/z 772.2(M/2+H)。
实施例S37：化合物L078-164的合成。
向化合物108(23mg，0.094mmol)、化合物5(甲磺酸盐，5mg，0.094mol)和HATU(36mg，0.094mmol)于3mL DMF中的溶液中添加DIEA(30mg，0.235mol)。将溶液搅拌5分钟并通过HPLC纯化。将所得产物用含50％ TFA的DCM(1mL)处理30分钟并浓缩，以得到呈黄色粉末的化合物L078-150(TFA盐，57mg)。MS m/z 564.2(M+H)。
将化合物L078-150(TFA盐，27mg，0.04mmol)、化合物75(46mg，0.06mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(10mg，0.08mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌16小时，随后添加二乙胺(0.5mL)并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物109(19mg)。向化合物109(19mg，0.018mmol)、化合物77(15mg，0.018mmol)和HATU(7mg，0.018mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(6mg，0.045mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物110。将化合物110溶解于3ml的60％CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向化合物110的溶液中添加化合物53(8mg)于CH3CN中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-164(5mg)。MS m/z 1556.2(M+H)。
实施例S38：化合物L078-173的合成。
将化合物75(50mg，0.065mmol)、化合物111(10mg，0.065mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(17mg，0.143mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌20分钟。通过HPLC来对粗混合物进行纯化，以得到化合物112(36mg)。向化合物112(36mg，0.046mmol)、化合物5(甲磺酸盐，24mg，0.046mmol)和HATU(17mg，0.046mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA(12mg，0.092mmol)。在搅拌5分钟后，将0.5ml二乙胺添加到溶液中并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物113。向化合物113(TFA盐，36mg，0.046mmol)、化合物77(39mg，0.046mmol)和HATU(18mg，0.046mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(12mg，0.092mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物114。将化合物114溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％ TFA)中。将化合物53(8mg)于CH3CN中的溶液添加到化合物114的溶液中，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-173(13mg)。MS m/z 1567.0(M+H)。
实施例S39：化合物L078-170的合成。
将化合物L078-089(TFA盐，27mg，0.041mmol)、化合物75(32mg，0.041mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(11mg，0.082mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌15小时，随后添加0.5ml二乙胺并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物115(28mg)。向化合物115(TFA盐，28mg，0.026mmol)、化合物77(23mg，0.026mmol)和HATU(10mg，0.026mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(9mg，0.065mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物116。将化合物116溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％TFA)中。将化合物53(8mg)于CH3CN中的溶液添加到化合物116的溶液中，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-170(6mg)。MS m/z 1531.8(M+H)。
实施例S40：化合物L078-171的合成。
将化合物75(54mg，0.070mmol)、化合物117(20mg，0.070mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(18mg，0.14mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌20分钟。通过HPLC来对粗混合物进行纯化，以得到化合物118(19mg)。向化合物118(19mg，0.023mmol)、化合物5(甲磺酸盐，13mg，0.023mmol)和HATU(9mg，0.023mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA(8mg，0.058mmol)。在搅拌5分钟后，将0.5ml二乙胺添加到溶液中并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物119(20mg)。向化合物119(TFA盐，20mg，0.018mmol)、化合物77(16mg，0.018mmol)和HATU(7mg，0.018mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(6mg，0.045mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物120。将化合物120溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％ TFA)中。将化合物53(8mg)于CH3CN中的溶液添加到化合物120的溶液中，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-171(7mg)。MS m/z 1583.8(M+H)。
实施例S41：化合物L078-162的合成。
将化合物75(50mg，0.065mmol)、化合物121(19mg，0.070mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(21mg，0.16mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌10分钟，以得到化合物122。将含化合物5(甲磺酸盐，35mg，0.065mmol)、HATU(25mg，0.065mmol)的DMF(2mL)和DIEA(17mg，0.13mmol)添加到化合物122(52mg，0.065mmol)的溶液中。在搅拌5分钟后，将0.5ml二乙胺添加到溶液中并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到呈TFA盐的化合物123(26mg)。向化合物123(TFA盐，26mg，0.023mmol)、化合物77(20mg，0.023mmol)和HATU(9mg，0.023mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(8mg，0.059mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物124(18mg)。将化合物124溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％ TFA)中。向化合物124的溶液中添加化合物53(8mg)于CH3CN中的溶液，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-171(8mg)。MS m/z 1584.1(M+H)。
实施例S42：化合物L078-178的合成。
将化合物L078-030(TFA盐，30mg，0.047mmol)、化合物89(39mg，0.057mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(11mg，0.114mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌30分钟，随后添加0.5ml二乙胺，并且然后再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物125(42mg)。向化合物125(TFA盐，42mg，0.044mmol)、化合物77(37mg，0.044mmol)和HATU(17mg，0.044mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(14mg，0.11mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物搅拌另外30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物126。将化合物126溶解于3ml的60％CH3CN/H2O(1％ TFA)中。将化合物53(13mg)于CH3CN中的溶液添加到化合物126的溶液中，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-178(12mg)，m/z 1427.7(M+H)。
实施例S43：化合物L078-182的合成。
向化合物L078-088(TFA盐，30mg，0.046mmol)、化合物40(24mg，0.046mmol)和HATU(18mg，0.046mmol)于DMSO(3mL)中的溶液中添加DIEA(11mg，0.114mmol)。在搅拌5分钟后，将二乙胺(0.5mL)添加到溶液中并再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物127(21mg)。向化合物127(TFA盐，21mg，0.022mmol)、化合物77(19mg，0.022mmol)和HATU(9mg，0.022mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加DIEA(7mg，0.055mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物128。将化合物128溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％ TFA)中。将化合物53(13mg)于CH3CN中的溶液添加到化合物128的溶液中，搅拌5分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物L078-182(8mg)，m/z 1409.1(M+H)。
实施例S44：化合物L078-184的合成。
将化合物129(15mg，0.03mmol)、化合物5(10mg，0.02mmol)、HOBT(3mg)和DIEA(11mg，0.114mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌5小时，随后添加0.5ml二乙胺，并且然后再搅拌30分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化，以得到化合物130(21mg)。将化合物130(TFA盐，21mg，0.031mmol)、化合物89(21mg，0.031mmol)、HOBT(5mg)和DIEA(10mg)于DMF(3mL)中的溶液搅拌30分钟，随后添加0.5mL二乙胺。将混合物再搅拌30分钟，通过HPLC纯化并干燥，以得到化合物131(16mg)。向化合物131(16mg，0.016mmol)、化合物77(14mg，0.016mmol)和HATU(6mg，0.016mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA(5mg，0.04mmol)。将溶液搅拌5分钟，随后添加0.5mL二乙胺，并且然后搅拌另外30分钟。通过HPLC来对溶液进行纯化并干燥，以得到化合物132。将化合物132溶解于3ml的60％ CH3CN/H2O(1％TFA)中。将化合物53(5mg)于CH3CN中的溶液添加到化合物132的溶液中。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物L078-184(4mg)，m/z 1475.3(M+H)。
实施例S45：化合物L081-034的合成。
将化合物51(500mg，0.839mmol)、HATU(319mg，0.839mmol)和DIEA(108mg，0.839mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌1分钟。然后将溶液逐滴添加到化合物133(目录号33527-91-2；367mg，2.52mmol)于DCM(20mL)中的溶液中。将DCM在减压下蒸发。通过HPLC来对残余物进行纯化，以得到化合物134(172mg)。
将化合物134(TFA盐，60mg，0.057mmol)、化合物135(17mg，0.057mmol)、HATU(22mg，0.057mmol)和DIEA(29mg，0.228mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌5分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化并浓缩，以得到化合物136。向化合物136(原位粗产物)于MeOH(2ml)中的溶液中添加甲醛(在水中37％，0.2ml)。将溶液搅拌5分钟，随后添加NaCNBH3(10mg)并且然后搅拌另外30分钟。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物137(24mg)。将化合物137(TFA盐，24mg，0.023mmol)、化合物80(TFA盐，25mg，0.023mmol)、HATU(9mg，0.023mmol)和DIEA(12mg，0.092mmol)于DMF(2ml)中的溶液搅拌5分钟，随后添加二乙胺(0.5ml)，再搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物138。将化合物138溶解于60％ CH3CN/H2O(0.5％TFA)中并与化合物53(5mg)于乙腈中的溶液混合。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物L081-034(9mg)，m/z 1713.9(M+H)。
实施例S46：化合物L081-036的合成。
向化合物139(目录号139262-23-0；盐酸盐，500mg，1.237mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加37％ CH2O(1mL)。将溶液搅拌2分钟，随后添加NaCNBH3(200mg)。将溶液搅拌20分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物140(502mg)。将化合物140(150mg，0.294mmol)、化合物72(目录号6066-82-6；50mg，0.44mmol)和EDC-HCl(168mg，0.882mmol)于DCM中的溶液搅拌1小时。将溶液用EtOAc萃取并浓缩，从而产生化合物141。将化合物141溶解于50％ CH3CN/H2O(5mL)中。向溶液中添加化合物74(目录号663921-15-1；78mg，0.294mmol)和10％ NaHCO3(使溶液至pH 8.5)。将溶液搅拌30分钟，浓缩并纯化，以得到化合物142(157mg)。
将化合物142(15mg，0.02mmol)、化合物80(20mg，0.02mmol)、HATU(8mg，0.02mmol)和DIEA(10mg，0.08mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌5分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化并浓缩，以得到化合物143(17mg)。将化合物143(17mg，0.011mmol)、化合物51(7mg，0.011mmol)、HATU(5mg，0.011mmol)和DIEA(6mg，0.044mmol)的溶液在DMF(2ml)中搅拌5分钟，随后添加二乙胺(0.5ml)，并且然后搅拌另外30分钟。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物144。将化合物144与化合物53(5mg)于乙腈中的溶液混合。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物L081-036(12mg)，m/z 1686.2(M+H)。
实施例S47：化合物L081-038的合成。
将化合物142(TFA盐，15mg，0.023mmol)、化合物94(TFA盐，20mg，0.023mmol)、HATU(8mg，0.02mmol)和DIEA(10mg，0.08mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌5分钟。通过HPLC来对混合物进行纯化并浓缩，以产生化合物145(20mg)。将化合物145(TFA盐，20mg，0.013mmol)、化合物51(8mg，0.013mmol)、HATU(5mg，0.013mmol)和DIEA(7mg，0.052mmol)的溶液在DMF(2ml)中搅拌5分钟，随后添加二乙胺(0.5ml)，并且然后再搅拌30分钟。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物146。将化合物146与化合物53(5mg)于乙腈中的溶液混合。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物L081-038(13mg)，m/z 1701.2(M+H)。
实施例S48：化合物L081-045的合成。
将化合物137(TFA盐，18mg，0.014mmol)、化合物94(15mg，0.014mmol)、HATU(6mg，0.014mmol)和DIEA(8mg，0.056mmol)的溶液在DMF(2ml)中搅拌5分钟，随后添加二乙胺(0.5ml)，并且然后再搅拌30分钟并通过HPLC纯化，以得到化合物147。将化合物147溶解于60％ CH3CN/H2O(0.5％ TFA)中并与化合物53(5mg)于乙腈中的溶液混合。通过HPLC来对溶液进行纯化，以得到化合物L081-045(5mg)，m/z 1728.6(M+H)。
抗体偶联药物(ADC)的制备
通过将药物-连接子化合物(其合成在上文提供)与抗HER2抗体缀合来制备抗体偶联药物(ADC)。
开发了用于将药物-连接子化合物与抗体(如抗HER2抗体)缀合的三种普遍适用的程序。所描述的用于制备ADC-1的程序用于将包含2,3-双(溴甲基)喹喔啉的化合物与半胱氨酸基团的硫醇缀合。所描述的用于制备ADC-2的程序用于将包含马来酰亚胺的化合物与半胱氨酸基团的硫醇缀合。所描述的用于制备ADC-3的程序用于将具有经激活的羧酸的化合物与赖氨酸基团的胺缀合。
ADC-1的制备
将亲和纯化的抗HER2抗体缓冲液交换到浓度为5mg/mL的缀合缓冲液(50mM磷酸钠缓冲液，pH 7.2，4mM EDTA)中。向该抗体储备液的一部分中添加15倍摩尔过量的新鲜制备的10mM三(2-羧乙基)膦(TCEP)水溶液。将所得混合物在4-8℃下温育过夜。然后用新鲜的缀合缓冲液通过若干轮离心超滤去除过量的未反应的TCEP。相对于抗体消光系数，通过UV-Vis分析定量还原的抗体材料的回收。
为了引发药物-连接子化合物与抗体的缀合，将化合物新鲜地溶解于3:2乙腈/水混合物中至浓度为5mM。然后在添加8倍摩尔过量的药物-连接子化合物之前立即将丙二醇(PG)添加到一部分还原的纯化的(去除TCEP的)抗HER2抗体中，使PG的最终浓度为20％(v/v)。在彻底混合并在环境温度下温育2小时后，通过HIC-HPLC色谱法分析粗缀合反应，以在280nm波长检测下确认反应完成(起始抗体峰消失)。然后通过凝胶过滤色谱法，使用配备有用PBS平衡的Superdex 200pg柱(通用电气医疗集团(GE Healthcare))的AKTA系统，对所得ADC-缀合物(ADC-1)进行纯化。基于HIC-HPLC色谱图的比较峰面积积分，计算出平均药物与抗体比率(DAR)。使用分析SEC-HPLC确定所得ADC-缀合物(ADC-1)的低百分比(<5％)高分子量(HMW)聚集体的确认。
ADC-2的制备
将亲和纯化的抗HER2抗体以与ADC-1相同的方式缓冲液交换到缀合缓冲液中。向该抗HER2抗体溶液的一部分中添加新鲜制备的3倍摩尔过量的TCEP的10mM水溶液。将所得混合物在37℃下温育2小时。然后将药物-连接子化合物新鲜地溶解于无水二甲亚砜(DMSO)中至5mM。将该混合物的一部分以6倍摩尔过量添加到还原的抗HER2抗体溶液中。在彻底混合并在环境温度下温育2小时后，通过HIC-HPLC色谱法分析粗缀合反应，以在280nm波长检测下确认反应完成(起始抗体峰消失)。以与ADC-1相同的方式进行所得ADC-缀合物(ADC-2)的纯化和分析。基于HIC-HPLC色谱图的比较峰面积积分，计算出所得平均DAR。使用分析SEC-HPLC确定所得ADC-缀合物(ADC-2)的低百分比(<5％)高分子量(HMW)聚集体的确认。
ADC-3的制备
以分批或连续流动的方式向0.5-50mgs/mL抗体于pH 6.0-9.0具有0-30％有机溶剂的缓冲液中的溶液中添加0.1-10当量的经激活的药物连接子缀合物。反应在0-40℃下进行，持续0.5-50小时，同时轻轻搅拌或振荡，通过HIC-HPLC监测。使用现有技术程序以与ADC-1相同的方式，使所得粗ADC产物经历必要的脱盐、缓冲改变/调配以及任选地纯化的下游步骤。通过HIC-HPLC表征ADC产物。基于HIC-HPLC色谱图的比较峰面积积分，计算出所得平均DAR。
实施例B1：喜树碱衍生物的体外功效。
使用以下人癌细胞系评估喜树碱衍生物的体外功效：SkBr-3(Her2+)和MDA-MB-468(HER2-)，购自美国典型培养物保藏中心(ATCC；弗吉尼亚州马纳萨斯(Manassas,VA))，并且常规培养在补充有10％胎牛血清(FBS；目录号MT35011CV；康宁公司(Corning))和1X青霉素-链霉素(目录号30-002-CI；康宁公司)的DMEM/F-12培养基(目录号10-090-CV；康宁公司)中并在潮湿环境中用5％ CO2维持在37℃下。
通过用细胞剥离器分离来采集肿瘤细胞。使用Countess或Countess II自动细胞计数器通过台盼蓝排除法进行活细胞计数。细胞活力测定：采集所有细胞并以875个细胞/孔的密度接种在384孔白色壁透明底板(目录号3765；康宁公司)中的补充有10％胎牛血清和1X青霉素-链霉素的DMEM/F-12培养基(完全生长培养基)中。将板在37℃下维持4-6小时，以允许细胞粘附到板。板的外孔仅包括完全生长培养基，并用于细胞活力测定的背景减除。在完全生长培养基中以2X最终浓度和5倍系列稀释度制备测试制品的工作溶液。一式三份地进行细胞处理并维持在37℃下进行120小时测定。在处理之后，通过CellTiter-Glo 2.0测定(目录号G9243；美国威斯康星州麦迪逊市的普洛麦格公司)基于制造商的说明确定细胞活力。CellTiter Glo试剂与代谢活性细胞中的ATP反应，以产生与活细胞数量成正比的发光读数。简单来说，在添加CellTiter Glo试剂之前，将板从温育器中取出并平衡至室温。使用Tecan Spark微孔板读数器(瑞士门内多夫的Tecan公司(Tecan；Mannedorf,Switzerland))测量发光。
对于细胞毒性测定，原始发光数据背景减去仅含培养基的外孔的平均发光，并且使用Excel(新墨西哥州阿尔伯克基的微软公司(Microsoft；Albuquerque,NM))相对于未经处理的对照归一化。基于使用GraphPad Prism 8.0拟合四参数逻辑方程的归一化数据的非线性回归分析，确定剂量-应答关系和EC50值。
图1A、1B、5A和5B以及表4A和4B中示出了喜树碱衍生物的细胞活力。图2和6中示出了喜树碱衍生物的对应结构。
使用标准细胞活力测定，针对表达HER2的SkBr-3和HER2阴性MDA-MB-468癌细胞系，评估了本文所描述的喜树碱衍生物(TFA盐形式)(和对照：依喜替康甲磺酸盐和Dxd TFA盐)的体外细胞毒性活性。如图1A、1B、5A和5B所示，喜树碱衍生物在5天测定中剂量依赖性地降低了SkBr-3和MDA-MB-468细胞活力。通过EC50确定的效力范围确定为约0.7至564nM，尽管大部分EC50在单数位范围内(表4A和4B)。喜树碱衍生物以剂量依赖性方式抑制跨两种细胞系的细胞增殖，而不管HER2表达水平。
表4A和4B中呈现了喜树碱衍生物在人肿瘤细胞中的EC50值(nM)的概述。
表4A：喜树碱衍生物在人肿瘤细胞中的EC50值(nM)
表4B：喜树碱衍生物在人肿瘤细胞中的EC50值(nM)
实施例B2：抗体偶联药物(ADC)的体外效力。
将ADC的体外效力与在图3A、3B、4A和4B中也标记为HER2-SET0218的抗HER2-Dxd(其中Dxd通过马来酰亚胺-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GGFG)肽连接子与抗HER2抗体共价结合)的效力进行比较。抗HER2抗体与化合物L078-030-LT、L078-044、L078-045、L078-055、L078-056、L078-057、L078-058、L078-059、L078-062、L078-063、L078-064、L078-065LT、L078-066LT、L079-018、L079-019、L079-027、L079-034、L079-035、L079-040、L078-121、L078-118、L078-119、L078-120、L078-177、L078-130、L078-123、L078-163、L078-164、L078-173、L078-170、L078-171、L078-178、L078-182、L081-034、L081-036或L081-038缀合。抗HER2抗体包括SEQ ID NO:7的VL序列和SEQ ID NO:8的VH序列。
ADC-L079-040的所得平均药物-抗体比率(DAR)为约1.0。ADC-L079-018和ADC-L079-019的所得平均DAR为1.8-1.9。ADC-L079-034和ADC-L079-027的所得平均DAR为2.2-2.3。ADC-L078-164、ADC-L078-171和ADC-L078-123的所得平均DAR为2.75-3.05。ADC-L078-178、ADC-L078-170、ADC-L078-177、ADC-L078-120、ADC-L078-118、ADC-L079-034、ADC-L079-036、ADC-L078-121、ADC-L078-163和ADC-L078-173的所得平均DAR为3.2-3.5。ADC-L078-044、ADC-L078-045、ADC-L078-058、ADC-L078-059、ADC-L078-063、ADC-L078-064、ADC-L078-066LT、ADC-L078-182、ADC-L078-130、ADC-L079-035和对照ADC-SET-0218(DAR4)的所得平均DAR为3.8-4.1。ADC-L078-056、ADC-L078-057、ADC-L078-119、ADC-L081-038和ADC-L078-062的所得平均DAR为3.6-3.7。ADC-L078-065LT的所得平均DAR为4.4。ADC-L078-030-LT和ADC-SET0218(DAR8)的所得平均DAR为6.2-6.4。
使用以下人癌细胞系评估ADC：HER2-阳性SkBr-3、HER2-阳性NCI-N87和HER2-阴性MDA-MB-468，购自美国典型培养物保藏中心(ATCC；弗吉尼亚州马纳萨斯)，并且常规培养在补充有10％胎牛血清(FBS；目录号MT35011CV；康宁公司)和1X青霉素-链霉素(目录号30-002-CI；康宁公司)的DMEM/F-12培养基(目录号10-090-CV；康宁公司)中并在潮湿环境中用5％ CO2维持在37℃下。
通过用细胞剥离器分离来采集肿瘤细胞。使用Countess或Countess II自动细胞计数器通过台盼蓝排除法进行活细胞计数。细胞活力测定：采集所有细胞并以875个细胞/孔的密度接种在384孔白色壁透明底板(目录号3765；康宁公司)中的补充有10％胎牛血清和1X青霉素-链霉素的DMEM/F-12培养基(完全生长培养基)中。将板在37℃下维持4-6小时，以允许细胞粘附到板。板的外孔仅包括完全生长培养基，并用于细胞活力测定的背景减除。在完全生长培养基中以2X最终浓度和5倍系列稀释度制备测试制品的工作溶液。一式三份地进行细胞处理并维持在37℃下进行120小时测定。在处理之后，通过CellTiter-Glo 2.0测定(目录号G9243；美国威斯康星州麦迪逊市的普洛麦格公司)基于制造商的说明确定细胞活力。CellTiter Glo试剂与代谢活性细胞中的ATP反应，以产生与活细胞数量成正比的发光读数。简单来说，在添加CellTiter Glo试剂之前，将板从温育器中取出并平衡至室温。使用Tecan Spark微孔板读数器(瑞士门内多夫的Tecan公司)测量发光。
对于细胞毒性测定，原始发光数据背景减去仅含培养基的外孔的平均发光，并且使用Excel(新墨西哥州阿尔伯克基的微软公司)相对于未经处理的对照归一化。基于使用GraphPad Prism 8.0拟合四参数逻辑方程的归一化数据的非线性回归分析，确定剂量-应答关系和EC50值。
图3A、3B、4A、4B、7A、7B和7C以及表5、6和7中示出了ADC-L078-030-LT、ADC-L078-044、ADC-L078-045、ADC-L078-055、ADC-L078-056、ADC-L078-057、ADC-L078-058、ADC-L078-059、ADC-L078-062、ADC-L078-063、ADC-L078-064、ADC-L078-065LT、ADC-L078-066LT、ADC-L079-018、ADC-L079-019、ADC-L079-027、ADC-L079-034、ADC-L079-035、ADC-L079-040、ADC-L078-121、ADC-L078-118、ADC-L078-119、ADC-L078-120、ADC-L078-177、ADC-L078-130、ADC-L078-123、ADC-L078-163、ADC-L078-164、ADC-L078-173、ADC-L078-170、ADC-L078-171、ADC-L078-178、ADC-L078-182、ADC-L081-034、ADC-L081-036、ADC-L081-038和对照(HER2-SET0218、HER2抗体、STI-1499-SET0218(也标记为Iso-Dxd)和Dxd毒素)的细胞活力。STI-1499-SET0218是Dxd的同种型对照，其中Dxd与抗SARS-COV-2抗体缀合。HER2-SET0218如上文所述。
使用标准细胞活力测定，针对HER2-阳性SkBr-3、HER2-阳性NCI-N87和HER2-阴性MDA-MB-468癌细胞系，评估了本文所描述的ADC的体外细胞毒性活性和靶向特异性。如图3A、3B、4A、4B、7A、7B和7C所示，用ADC-L078-030-LT、ADC-L078-044、ADC-L078-045、ADC-L078-055、ADC-L078-056、ADC-L078-057、ADC-L078-058、ADC-L078-059、ADC-L078-062、ADC-L078-063、ADC-L078-064、ADC-L078-065LT、ADC-L078-066LT、ADC-L079-018、ADC-L079-019、ADC-L079-027、ADC-L079-034、ADC-L079-035、ADC-L079-040、ADC-L078-121、ADC-L078-118、ADC-L078-119、ADC-L078-120、ADC-L078-177、ADC-L078-130、ADC-L078-123、ADC-L078-163、ADC-L078-164、ADC-L078-173、ADC-L078-170、ADC-L078-171、ADC-L078-178、ADC-L078-182、ADC-L081-034、ADC-L081-036、ADC-L081-038处理剂量依赖性地降低了SkBr-3和NCI-N87细胞活力，并且在5天测定中不显示针对MDA-MB-468细胞的有效活性。观察到如通过针对HER2-阳性SkBr-3细胞系的约0.096至>1000nM的EC50和针对HER2-阳性NCI-N87细胞系的约5至>1000nM的EC50确定的效力范围(表5、6和7)。
ADC-L078-055、ADC-L078-056、ADC-L078-058和ADC-L078-059的比较(针对其使用同一连接子和缀合化学(L1-L2-L3))揭示了从EC50 0.3812nM至>1000nM的较大效力变化。ADC之间的差异是L3(其是吗啉)与-C(O)NH-D连接的立体化学和位置。
尽管一些ADC(如ADC-L078-055和ADC-L078-058)在HER2-阳性SkBr-3与HER2-阴性MDA-MB-468细胞之间的细胞毒性方面没有显示出很大的差异，但其它ADC对HER2-阳性SkBr-3细胞的细胞毒性是对HER2-阴性MDA-MB-468细胞(ADC-L078-056和ADC-L078-062)的细胞毒性1500倍以上。
与靶向HER2的ADC HER2-SET0218(HER2-连接子-Dxd)相比，同种型对照STI1499-SET0218(SARS-COV-2-连接子-Dxd)的活性降低>160x，表明细胞毒性是由HER2靶向驱动的。在HER2-阴性MDA-MB-468细胞中，HER2抗体和大多数靶向HER2的ADC在至多1μM的浓度下都不显示细胞毒性(图3B、4B、7B以及表5、6和7)，尽管一些ADC显示一些细胞毒性(例如，ADC-L078-059、ADC-L078-030-LT、ADC-L079-040、Her2-L078-057、Her2-L078-059、Her2-L078-064、ADC-L078-066-LT、Her2-L078-177和ADC-L078-063，其中EC50在20nM-310nM的范围内)。相比之下，Dxd和其它未经缀合的喜树碱衍生物以剂量依赖性方式抑制跨所有细胞系的细胞增殖，其中平均EC50为约0.7nM-163nM，而不管HER2表达水平。
表5中呈现了抗HER2 ADC和对照的EC50值(nM)的概述。
表5:抗HER2 ADC在人肿瘤细胞中的EC50值(nM)
表6中呈现了抗HER2 ADC和对照的EC50值(nM)的概述。
表6:抗HER2 ADC在人肿瘤细胞中的EC50值(nM)
表7中呈现了抗HER2 ADC的EC50值(nM)的概述。
表7:抗HER2 ADC在人肿瘤细胞中的EC50值(nM)
N/D不运行。
实施例B3：抗体偶联药物(ADC)的体内效力。
Her2抗体赫赛汀(曲妥珠单抗)购自Myonex公司(Myonex LLC)(美国宾夕法尼亚州霍舍姆(Horsham,PA,USA))。
6周龄的雌性Nu/Nu小鼠购自查尔斯河实验室(Charles River Laboratories)(马萨诸塞州威明顿(Wilmington,MA))。收到后，将每组5只小鼠圈养在受控环境动物饲养室中的每个笼中，并在实验之前允许适应72小时。随意提供啮齿动物食物和水。在适应时段期间确定动物健康状态。通过组编号和研究编号鉴定每个笼，并且使用耳标单独地鉴定小鼠。该研究是在批准的IACUC方案下进行的并且是在由Explora BioLabs公司(Explora BioLabs)(加利福尼亚州圣迭戈(San Diego,CA))管理的索伦托治疗公司(Sorrento TherapeuticsInc)(加利福尼亚州圣迭戈董事广场4955号(4955Directors Places,San Diego,CA))处的动物饲养室中进行的。
每周两次观察动物的一般临床状况，包括活力、死亡率、移动性、姿势、体重(BW)和其它痛苦迹象。如果动物由于毒性或毒性和疾病的组合而变得奄奄一息或BW损失>15％，则对所述动物实施安乐死并进行记录。
将人胃癌细胞系NCl-N87细胞在补充有10％ FBS(目录号FB-02，加利福尼亚州塔扎纳市的欧米伽科技公司(Omega Scientific,Tarzana,CA))的RPMI 1640培养基(目录号10-041-CV，纽约的康宁公司康宁公司)中在37℃下在5％ CO2潮湿环境中培养和扩增2-3周的时段，然后采集以供植入。在Countess II自动细胞计数器(目录号AMQAX1000，加利福尼亚州卡尔斯巴德的英杰公司(Invitrogen,Carlsbad,CA))上通过台盼蓝染料排除测定确定细胞活力，并且在植入之前是>90％。
将100μl PBS(目录号21-040-CV，康宁公司)中的150万NCl-N87细胞-基质胶(目录号354234，康宁公司)1:1(v/v)混合物通过皮下注射植入每只小鼠的右上胁腹。
在肿瘤细胞接种后11天开始肿瘤体积测量，并且在初始给药后每周进行两次肿瘤体积测量。通过使用数字卡尺(目录号62379-531，宾夕法尼亚州拉德诺的VWR公司(VWR,Radnor,PA))测量作为长度的最长纵向直径和作为宽度的最宽横向直径。然后通过下式计算肿瘤体积(TV)：TV＝[长度x(宽度)2]/2，并且在Excel(华盛顿州雷德蒙德的微软办公软件(Microsoft Office,Redmond,WA.))中进行分析。将携带介于100mm3至500mm3之间的肿瘤的小鼠随机分配到每个组中(N＝7只小鼠)。每组的平均肿瘤体积是约170mm3。
然后，根据表8中所示的方案，用单剂量(3mg/kg或10mg/kg)的PBS(媒剂)、单独的HER2 Ab(曲妥珠单抗)或HER2-ADC处理每组的小鼠。将所有化合物在PBS中稀释至工作浓度，所述工作浓度根据治疗方案和每只小鼠0.2ml的注射体积计算。
表8：治疗组和治疗方案的概述
使用GraphPad Prism 8.0(加利福尼亚州拉荷亚的GraphPad Software公司(GraphPad Software,La Jolla,CA))绘制肿瘤生长曲线，并且数值以平均值±SEM呈现。
TV(肿瘤体积)计算如下：TV＝[长度x(宽度)2]/2，其中长度是最长的纵向直径并且宽度是最宽的横向直径。
TV变化％计算如下：TV变化％＝(TVdx-TVd0)/TVd0 x 100，其中TVdx是初次治疗后第x天的TV，并且TVd0是恰好初次治疗前的TV。
肿瘤消退率(TR％)计算如下：TR％＝(1-TVdx/TVd0)x 100，其中TVdx是初次治疗后第x天的TV，并且TVd0是恰好初次治疗前的TV。
肿瘤生长抑制率(TGI％)计算如下：
TGI％＝[1–(TVdx-TVd0)treatment/(TVdx-TVd0)control]x 100，其中(TVdx-TVd0)treatment是治疗组的TV变化，并且(TVdx-TVd0)control是对照组的TV变化。
将与对照组进行多重比较的双向ANOVA用于统计学分析。P<0.05被认为是统计学上显著的。显著性水平被分类为*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。
图8A、8B和9A中示出了所有组的肿瘤生长曲线。
表9概述了治疗后第28天的肿瘤生长抑制(TGI％)和肿瘤消退(TR％)的数据。表10A和10B中示出了统计学分析。
在治疗1-3周后，单独的Her2-Ab(曲妥珠单抗)和所有Her2ADC显著且快速地抑制NCl-N87肿瘤的生长(与媒剂PBS相比)。
在3mg/kg单剂量施用后，Her2-L078-118、Her2-L078-182、Her2-L078-120和Her2-SET0218(阳性对照)的ADC的最大TGI分别为76.3％(第21天)、74.8％(第28天)、77.7％(第14天)和64.4％(第28天)。在10mg/kg单剂量施用后，Her2-L078-118对NCl-N87肿瘤模型的作用与Her2-SET0218(DAR4)对NCl-N87肿瘤模型的作用相当，而Her2-L078-120表现出最强的功效，这通过在给药后第28天显示超过50％的高得多的肿瘤消退率来证明。
与Her2-SET0218(与Dxd缀合的Her2 ADC)相比，ADC Her2-L078-118、Her2-L078-182和Her2-L078-120在肿瘤生长抑制方面显示剂量依赖性和比Her2-SET0218更好的功效，如图8C和9B所示。
如表9所示，在治疗后第28天，Her2-L078-120在被测试ADC中表现出最佳功效，其中肿瘤生长抑制为100％并且肿瘤消退超过50％。在任何治疗组中都没有观察到体重减轻(数据未显示)。在任何治疗组中都没有观察到脱靶毒性的明显迹象。
表9：治疗后第28天的TGI％和TR％的概述数据
治疗组 TGI％(第28天) TR％(第28天)
低剂量3mg/kg
媒剂/PBS 0.0 0.0
Her2 Ab(曲妥珠单抗)，3mg/kg 46.5 0.0
Her2-SET0218(DAR4)，3mg/kg 64.4 0.0
Her2-L078-118(DAR3.34)，3mg/kg 72.0 0.0
Her2-L078-120，3mg/kg 74.8 0.0
Her2-L078-170，3mg/kg 48.2 0.0
Her2-L078-173，3mg/kg 57.4 0.0
Her2-L078-177，3mg/kg 66.8 0.0
Her2-L078-178，3mg/kg 56.7 0.0
Her2-L078-182，3mg/kg 74.3 0.0
Her2-SET0218(DAR8)，3mg/kg 60.2 0.0
高剂量10mg/kg
媒剂/PBS 0.0 0.0
Her2-SET0218(DAR4)，10mg/kg 96.0 12.4
Her2-L078-118，10mg/kg 98.6 15.7
Her2-L078-120，10mg/kg 100.0 51.9
表10A：统计学分析(3mg/kg，静脉内，一次)
表10B：统计学分析(10mg/kg，静脉内，一次)
尽管出于清楚理解的目的，已经通过图示和实施例的方式详细描述了前述发明，但是这些描述和实施例不应被解释为限制本发明的范围。本文所引用的所有专利和科学文献的公开内容明确地以引用方式整体并入本文。

Claims (136)

1.一种式(I)或式(II)的抗体偶联药物(ADC)：
或其药学上可接受的盐，其中：
Ab是单克隆抗体；
m是1至8的整数；
L1是与所述单克隆抗体结合的连接子；
L2是键、-C(O)-、-NH-、氨基酸单元、-(CH2CH2O)n-、-(CH2)n-、-O-、-(4-氨基苄氧羰基)-、-(C(O)CH2CH2NH)-、-(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))-或其任何组合；其中n是1至24的整数；
每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基；
L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基、经取代或未经取代的亚杂芳基、经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接；
R1是经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
D是并且
D'是其中D'通过其酰胺基与R1连接并且通过氧与L2连接。
2.根据权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中所述单克隆抗体是抗HER2抗体。
3.根据权利要求1或2所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中所述单克隆抗体是经修饰的单克隆抗体。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L1是与所述单克隆抗体的一个或两个硫或氮原子结合的连接子。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L1是：
6.根据权利要求1至5中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中m是1、2、3、4、5、6、7或8。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是键、-C(O)-、-NH-、-Val-、-Phe-、-Lys-、-(4-氨基苄氧羰基)-、-Gly-、-Ser-、-Thr-、-Ala-、-β-Ala-、-瓜氨酸-(-Cit-)、-(CH2)n-、-(CH2CH2O)n-、-O-、-(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))-或其任何组合。
8.根据权利要求7所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是-C(O)-、-NH-、-Val-、-Ala-、-Gly-、-Cit-、-(4-氨基苄氧羰基)-、-(CH2)n-、-(CH2CH2O)n-、-O-、-(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))-或其任何组合。
9.根据权利要求7所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是-C(O)-、-NH-、-Gly-、-(CH2)n-、-(CH2CH2O)n-或其任何组合。
10.根据权利要求7所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是：
11.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
12.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
13.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
14.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
15.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
16.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
17.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
18.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
19.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
20.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
21.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
22.根据权利要求10所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
23.根据权利要求1至22中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基或经取代或未经取代的杂环烷基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
24.根据权利要求23所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的3至8元亚杂环烷基或经取代或未经取代的3至8元杂环烷基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(3至8元杂环烷基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(3至8元杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
25.根据权利要求23所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的3至6元亚杂环烷基或经取代或未经取代的3至6元杂环烷基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(3至6元杂环烷基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(3至6元杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
26.根据权利要求25所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的亚杂环丁基、亚杂环戊基或亚杂环己基；或经取代或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
27.根据权利要求1至22中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的亚杂芳基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
28.根据权利要求27所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的5至10元亚杂芳基或经取代或未经取代的5至10元杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(5至10元杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(5至10元杂芳基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
29.根据权利要求27所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的5至9元亚杂芳基或经取代或未经取代的5至9元杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(5至9元杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(5至9元杂芳基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
30.根据权利要求27所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的5至6元亚杂芳基或经取代或未经取代的5至6元杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(5至6元杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
31.根据权利要求30所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L3是经取代或未经取代的亚呋喃基、亚吡咯基、亚吡啶基、亚吡喃基、亚咪唑基、亚噻吩基、亚噁唑基或亚噻唑基；或经取代或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻唑基、噻吩基或噁唑基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻唑基、噻吩基或噁唑基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻唑基、噻吩基或噁唑基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
32.根据权利要求1至22中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的杂环烷基。
33.根据权利要求32所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的3至8元杂环烷基。
34.根据权利要求32所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的3至6元杂环烷基。
35.根据权利要求34所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。
36.根据权利要求1至22中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的杂芳基。
37.根据权利要求36所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的5至10元杂芳基。
38.根据权利要求36所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的5至9元杂芳基。
39.根据权利要求36所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的5至6元杂芳基。
40.根据权利要求39所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中R1是经取代或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。
41.根据权利要求1至22中任一项所述的ADC，其具有式(IA)或式(IIA)的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
环A是通过杂原子Y与L2连接的经取代或未经取代的亚杂环烷基或经取代或未经取代的亚杂芳基；
环A'是通过杂原子Y与D'连接的经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；并且
每个Y独立地是N、P或S。
42.根据权利要求41所述的ADC，其具有式(IB)或式(IIB)的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
每个R4独立地是H、氧代、卤素、-CCl3、-CBr3、-CF3、-CI3、-CH2Cl、-CH2Br、-CH2F、-CH2I、-CHCl2、-CHBr2、-CHF2、-CHI2、-CN、-OR4A、-NR4AR4B、-COOR4A、-CONR4AR4B、-NO2、-SR4A、-SOn4R4A、-SOv4NR4AR4B、-PO(OH)2、-POm4R4A、-POr4NR4AR4B、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的环烷基或经取代或未经取代的杂环烷基；
位于相邻碳原子上的任何两个R4取代基可任选地连接以形成经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；
每个R4A和R4B独立地是H、-CX3、-CHX2、-CH2X、-C(O)OH、-C(O)NH2、-CN、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO3H、-SO4H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC＝(O)NHNH2、-NHC＝(O)NH2、-NHSO2H、-NHC＝(O)H、-NHC(O)OH、-NHOH、-OCX3、-OCHX2、-OCH2X、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；与同一氮原子键合的R4A和R4B取代基可任选地连接以形成经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
X是-Cl、-Br、-I或-F；
每个n4独立地是0至4的整数；
每个v4独立地是1或2；
每个m4独立地是0至3的整数；并且
每个r4独立地是1或2。
43.根据权利要求41所述的ADC，其具有式(IC)或式(IIC)的结构：
或其药学上可接受的盐。
44.根据权利要求41所述的ADC，其具有式(ID)或式(IID)的结构：
或其药学上可接受的盐。
45.根据权利要求41所述的ADC，其具有式(ID1)或式(IID1)的结构：
或其药学上可接受的盐。
46.根据权利要求41所述的ADC，其具有式(IE)或式(IIE)的结构：
或其药学上可接受的盐。
47.根据权利要求41所述的ADC，其具有式(IF)或式(IIF)的结构：
或其药学上可接受的盐。
48.根据权利要求1至22中任一项所述的ADC，其具有式IG或式IH的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
环W是经取代或未经取代的亚环烷基或经取代或未经取代的亚芳基；
环C是经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基。
49.根据权利要求44所述的ADC，其具有式IJ或式IK的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
Z是S、N或O；并且
V是C或N。
50.根据权利要求44所述的ADC，其具有式IL或式IM的结构：
或其药学上可接受的盐。
51.根据权利要求44所述的ADC，其具有式IN或式IO的结构：
或其药学上可接受的盐。
52.根据权利要求44所述的ADC，其具有式IP或式IQ的结构：
或其药学上可接受的盐。
53.根据权利要求1至52中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中所述ADC是：
或其药学上可接受的盐。
54.根据权利要求1至53中任一项所述的ADC，其中所述抗HER2抗体包括包含SEQ IDNO:1序列的VL CDR1、包含SEQ ID NO:2序列的VL CDR2、包含SEQ ID NO:3序列的VL CDR3、包含SEQ ID NO:4序列的VH CDR1、包含SEQ ID NO:5序列的VH CDR2和包含SEQ ID NO:6序列的VH CDR3。
55.根据权利要求1至54中任一项所述的ADC，其中所述抗HER2抗体包括具有与SEQ IDNO:7具有至少95％、96％、97％、98％、或99％同一性的序列的VL。
56.根据权利要求1至55中任一项所述的ADC，其中所述抗HER2抗体包括具有与SEQ IDNO:8具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列的VH。
57.根据权利要求1至56中任一项所述的ADC，其中所述抗HER2抗体包括具有SEQ IDNO:7序列的VL。
58.根据权利要求1至57中任一项所述的ADC，其中所述抗HER2抗体包括具有SEQ IDNO:8序列的VH。
59.根据权利要求1至58中任一项所述的ADC，其中所述抗HER2抗体是IgG抗体，任选地其中所述抗HER2抗体是IgG1抗体。
60.根据权利要求1至59中任一项所述的ADC，其中所述抗HER2抗体与人HER2结合，任选地其中所述人HER2具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列。
61.根据权利要求1至60中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐，其用于疗法中。
62.根据权利要求61所述的ADC或其药学上可接受的盐，其用于治疗表达HER2的癌症。
63.一种治疗受试者中表达HER2的癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用根据权利要求1至60中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐。
64.根据权利要求1至60中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐的用途，其用于制备药物。
65.根据权利要求1至60中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐的用途，其用于制备用于治疗表达HER2的癌症的药物。
66.根据权利要求62、63或65中任一项所述的供使用的ADC或其药学上可接受的盐、用途或方法，其中所述表达HER2的癌症是乳腺癌、肺癌、卵巢癌或胃癌。
67.根据权利要求66所述的供使用的ADC或其药学上可接受的盐、用途或方法，其中所述乳腺癌是转移性乳腺癌或三阴性乳腺癌。
68.根据权利要求66所述的供使用的ADC或其药学上可接受的盐、用途或方法，其中所述肺癌是非小细胞肺癌(NSCLC)。
69.一种制备根据权利要求1至53中任一项所述的ADC的方法，所述方法包括使单克隆抗体与式(P-I)或式(P-II)的化合物反应：
或其药学上可接受的盐，其中：
B是能够与所述单克隆抗体形成键的反应性部分；
L2是键、-C(O)-、-NH-、氨基酸单元、-(CH2CH2O)n-、-(CH2)n-、-O-、-(4-氨基苄氧羰基)-、-(C(O)CH2CH2NH)-、-(C(O)N(R2)CH2CH2N(R3))-或其任何组合；其中n是1至24的整数；
每个R2和R3独立地是H或经取代或未经取代的烷基；
L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基、经取代或未经取代的亚杂芳基、经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接；
R1是经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
D是并且
D'是其中D'通过其酰胺基与R1连接并且通过氧与L2连接。
70.根据权利要求69所述的方法，其中所述单克隆抗体是抗HER2抗体。
71.根据权利要求69或70所述的方法，其中所述单克隆抗体用醛、叠氮化物、炔烃、四嗪、肼、烷氧基胺、反式环辛烯或环丙烯修饰。
72.根据权利要求69至71中任一项所述的方法，其中B是能够与所述单克隆抗体的一个或两个硫醇基或胺基或与经修饰的单克隆抗体形成键的反应性部分。
73.根据权利要求72所述的方法，其中B是：
74.根据权利要求69至73中任一项所述的方法，其中L2是键、-C(O)-、-NH-、-Val-、-Phe-、-Lys-、-(4-氨基苄氧羰基)-、-Gly-、-Ser-、-Thr-、-Ala-、-β-Ala-、-瓜氨酸-(-Cit-)、-O-、-(CH2)n-、-(CH2CH2O)n-、-(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))-或其任何组合。
75.根据权利要求74所述的方法，其中L2是-C(O)-、-NH-、-Val-、-Ala-、-Gly-、-Cit-、-O-、-(4-氨基苄氧羰基)-、-(CH2)n-、-(CH2CH2O)n-、-(C(O)N(CH3)CH2CH2N(CH3))-或其任何组合。
76.根据权利要求74所述的方法，其中L2是-C(O)-、-NH-、-Gly-、-(CH2)n-、-(CH2CH2O)n-或其任何组合。
77.根据权利要求74所述的方法，其中L2是：
78.根据权利要求77所述的方法，其中L2是
79.根据权利要求77所述的方法，其中L2是
80.根据权利要求77所述的方法，其中L2是
81.根据权利要求77所述的方法，其中L2是
82.根据权利要求77所述的方法，其中L2是
83.根据权利要求77所述的方法，其中L2是
84.根据权利要求77所述的方法，其中L2是
85.根据权利要求77所述的方法，其中L2是
86.根据权利要求77所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
87.根据权利要求77所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
88.根据权利要求77所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
89.根据权利要求77所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中L2是
90.根据权利要求69至89中任一项所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的亚杂环烷基；或经取代或未经取代的杂环烷基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
91.根据权利要求90所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的3至8元亚杂环烷基；或经取代或未经取代的3至8元杂环烷基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(3至8元杂环烷基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(3至8元杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
92.根据权利要求90所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的3至6元亚杂环烷基；或经取代或未经取代的3至6元杂环烷基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(3至6元杂环烷基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(3至6元杂环烷基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
93.根据权利要求92所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的亚杂环丁基、亚杂环戊基或亚杂环己基；或经取代或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)，其中L3通过氧与D连接；或者
L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环丁基、杂环戊基或杂环己基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
94.根据权利要求69至89中任一项所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的亚杂芳基或经取代或未经取代的杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L连接。
95.根据权利要求94所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的5至10元亚杂芳基；或经取代或未经取代的5至10元杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(5至10元杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(5至10元杂芳基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
96.根据权利要求94所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的5至9元亚杂芳基；或
经取代或未经取代的5至9元杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(5至9元杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(5至9元杂芳基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
97.根据权利要求94所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的5至6元亚杂芳基；或
经取代或未经取代的5至6元杂芳基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(5至6元杂芳基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
98.根据权利要求97所述的方法，其中L3是经取代或未经取代的亚呋喃基、亚吡咯基、亚吡啶基、亚吡喃基、亚咪唑基、亚噻吩基、亚噁唑基或亚噻唑基；或经取代或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻唑基、噻吩基或噁唑基；或者L3是经取代或未经取代的-OCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻唑基、噻吩基或噁唑基)，其中L3通过氧与D连接；或者L3是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基、噻唑基、噻吩基或噁唑基)，其中L3通过-CH2-与D连接并且通过氮与L2连接。
99.根据权利要求69至85中任一项所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的杂环烷基。
100.根据权利要求99所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的3至8元杂环烷基。
101.根据权利要求99所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的3至6元杂环烷基。
102.根据权利要求101所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。
103.根据权利要求69至85中任一项所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的杂芳基。
104.根据权利要求103所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的5至10元杂芳基。
105.根据权利要求103所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的5至9元杂芳基。
106.根据权利要求103所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的5至6元杂芳基。
107.根据权利要求103所述的方法，其中R1是经取代或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。
108.根据权利要求69至89中任一项所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IA)或式(P-IIA)：
或其药学上可接受的盐，其中：
环A是通过杂原子Y与L2连接的经取代或未经取代的亚杂环烷基或经取代或未经取代的亚杂芳基；
环A'是通过杂原子Y与D'连接的经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；并且
每个Y独立地是N、P或S。
109.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IB)或式(P-IIB)：
或其药学上可接受的盐，其中：
每个R4独立地是H、氧代、卤素、-CCl3、-CBr3、-CF3、-CI3、-CH2Cl、-CH2Br、-CH2F、-CH2I、-CHCl2、-CHBr2、-CHF2、-CHI2、-CN、-OR4A、-NR4AR4B、-COOR4A、-CONR4AR4B、-NO2、-SR4A、-SOn4R4A、-SOv4NR4AR4B、-PO(OH)2、-POm4R4A、-POr4NR4AR4B、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的环烷基或经取代或未经取代的杂环烷基；
位于相邻碳上的R4取代基可任选地连接以形成经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；
每个R4A和R4B独立地是H、-CX3、-CHX2、-CH2X、-C(O)OH、-C(O)NH2、-CN、-OH、-NH2、-COOH、-CONH2、-NO2、-SH、-SO3H、-SO4H、-SO2NH2、-NHNH2、-ONH2、-NHC＝(O)NHNH2、-NHC＝(O)NH2、-NHSO2H、-NHC＝(O)H、-NHC(O)OH、-NHOH、-OCX3、-OCHX2、-OCH2X、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基；与同一氮原子键合的R4A和R4B取代基可任选地连接以形成经取代或未经取代的杂环烷基或经取代或未经取代的杂芳基；
X是-Cl、-Br、-I或-F；
每个n4独立地是0至4的整数；
每个v4独立地是1或2；
每个m4独立地是0至3的整数；并且
每个r4独立地是1或2。
110.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IC)或式(P-IIC)：
或其药学上可接受的盐。
111.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-ID)或式(P-IID)：
或其药学上可接受的盐。
112.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-ID1)或式(P-IID1)：
或其药学上可接受的盐。
113.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IE)或式(P-IIE)：
或其药学上可接受的盐。
114.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IF)或式(P-IIF)：
或其药学上可接受的盐。
115.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IG)或式(P-IH)：
或其药学上可接受的盐，其中：
环W是经取代或未经取代的亚环烷基或经取代或未经取代的亚芳基；
环C是经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的芳基或经取代或未经取代的杂芳基。
116.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IJ)或式(P-IK)：
或其药学上可接受的盐，其中：
Z是S、N或O；并且
V是C或N。
117.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IL)或式(P-IM)：
或其药学上可接受的盐。
118.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IN)或式(P-IO)：
或其药学上可接受的盐。
119.根据权利要求108所述的方法，其中所述化合物具有式(P-IP)或式(P-IQ)：
或其药学上可接受的盐。
120.根据权利要求69至119中任一项所述的方法，其中B—L2—L3-D是：
或其药学上可接受的盐。
121.根据权利要求69至119中任一项所述的方法，其中B--L2-D'-R是：
或其药学上可接受的盐。
122.一种式(III)的化合物：
或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中：
R5是经取代或未经取代的杂环烷基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)、经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)、经取代或未经取代的-OCH2-(杂环烷基)或经取代或未经取代的-OCH2-(杂芳基)。
123.根据权利要求122所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的杂环烷基。
124.根据权利要求123所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的3至8元杂环烷基。
125.根据权利要求123所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的3至6元杂环烷基。
126.根据权利要求123所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的杂环丁基、杂环戊基或杂环己基。
127.根据权利要求122所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的杂芳基。
128.根据权利要求127所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的5至10元杂芳基。
129.根据权利要求127所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的5至9元杂芳基。
130.根据权利要求127所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的5至6元杂芳基。
131.根据权利要求130所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、咪唑基或噻唑基。
132.根据权利要求130所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)或经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂环烷基)。
133.根据权利要求130所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(杂芳基)。
134.根据权利要求130所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体或前药，其中R5是经取代或未经取代的-CH2NCH2-(5至6元杂芳基)。
135.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至60中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。
136.一种抑制表达HER2的细胞的增殖的方法，所述方法包括在允许根据权利要求1至60中任一项所述的ADC的所述抗HER2抗体结合于所述细胞的表面上的条件下，将所述细胞暴露于所述ADC或其药学上可接受的盐，由此抑制所述细胞的所述增殖，任选地其中所述方法是体外方法或体内方法。
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