CN114720355A - 适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法及装置、系统 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法及装置、系统，该方法包括：接收荧光通道检测装置传递的检测信号；若检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将检测信号设置为触发信号并不再对荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断；获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号；将触发信号发送至第二处理单元，以使得第二处理单元开始进行计数；当散射信号采集完毕时，向第二处理单元发送停止计数指令，以使得第二处理单元停止计数并将计数值发送至第一处理单元；接收第二处理单元发送的计数值并将触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机，以使得上位机计算粒子的种类和数量。
Description
技术领域
本申请涉及流式细胞术技术领域，尤其涉及适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法及装置、系统。
背景技术
流式细胞术技术是一种广泛应用的技术，其工作原理是：将待测样品的细胞制备成单细胞悬液，利用细胞的自发荧光，或对细胞采用特异性荧光探针标记后，在一定的流速和鞘液的约束下，使细胞液柱以单个排列的方式通过激光检测器。细胞液柱与检测器中入射的激发光垂直相交，通过测量其散射光(含前相散射光和侧相散射光)、细胞自发荧光、染料染色的荧光及探针标记的荧光等，从而将特征目标生物和背景颗粒及噪音区分开。
成像式流式细胞仪是在流式细胞术技术的基础上增添了数字成像功能，利用目标物图像和散射光、荧光通道信号值大小对待测样品实现分类和计数功能。
在实现本发明的过程中，发明人发现现有技术中至少存在如下问题：
由于受到相机拍摄速度和积分时间的限制，成像式流式细胞仪的分析速度慢以及拍摄效率低，且存在由于死区时间过长引起的目标粒子遗漏问题。
发明内容
本申请实施例的目的是提供适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法及装置、系统，以解决相关技术中存在的成像式流式细胞仪的计数过程中粒子遗漏造成计数不准确的技术问题。
根据本申请实施例的第一方面，提供一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法，包括：
接收荧光通道检测装置传递的检测信号，其中所述检测信号为所述荧光通道检测装置在粒子流过触发区域时产生的信号；
若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断；
获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，其中所述散射信号由散射通道检测装置产生并传递；
将所述触发信号发送至第二处理单元，以使得所述第二处理单元开始进行计数；
当所述散射信号采集完毕时，向所述第二处理单元发送停止计数指令，以使得所述第二处理单元停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
接收第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机，以使得上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
进一步地，获取成像区域的粒子图像的过程包括：
控制闪光灯延时预定时间闪烁；
控制相机在所述闪光灯闪烁时进行拍照，得到所述成像区域的粒子图像；
重复控制闪光灯延时预定时间闪烁和控制相机在所述闪光灯闪烁时进行拍照，得到所述成像区域的粒子图像的步骤，直至不再有粒子流入所述触发区域。
进一步地，所述第二处理单元进行计数的过程包括：
接收计数信号，其中所述计数信号为所述荧光通道检测装置产生且仅传递给所述第二处理单元的信号；
计数值增加1；
重复接收计数信号和计数值增加1的步骤，直至接收到第一处理单元发送的停止计数指令；
在将所述计数值发送至第一处理单元后，将所述计数值清零。
进一步地，上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量，包括：
上位机根据所述粒子图像、对应的所述散射信号的信号值和所述触发信号的信号值，识别粒子的种类；
将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量；
重复上位机根据所述粒子图像和对应的所述信号值的大小，识别粒子的种类至将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量的步骤，得到各种类的粒子对应的粒子数目结果。
根据本申请实施例的第二方面，提供一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数装置，包括：
接收模块，用于接收荧光通道检测装置传递的检测信号，其中所述检测信号为所述荧光通道检测装置在粒子流过触发区域时产生的信号；
设置模块，用于若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断；
获取模块，用于获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，其中所述散射信号由散射通道检测装置产生并传递；
第一发送模块，用于将所述触发信号发送至第二处理单元，以使得所述第二处理单元开始进行计数；
第二发送模块，用于当所述散射信号采集完毕时，向所述第二处理单元发送停止计数指令，以使得所述第二处理单元停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
第三发送模块，用于接收第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机，以使得上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
进一步地，所述第二处理单元进行计数的过程包括：
接收计数信号，其中所述计数信号为所述荧光通道检测装置产生且仅传递给所述第二处理单元的信号；
计数值增加1；
重复接收计数信号和计数值增加1的步骤，直至接收到第一处理单元发送的停止计数指令；
在将所述计数值发送至第一处理单元后，将所述计数值清零。
进一步地，上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量，包括：
上位机根据所述粒子图像、对应的所述散射信号的信号值和所述触发信号的信号值，识别粒子的种类；
将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量；
重复上位机根据所述粒子图像和对应的所述信号值的大小，识别粒子的种类至将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量的步骤，得到各种类的粒子对应的粒子数目结果。
根据本申请实施例的第三方面，提供一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数系统，包括：
荧光通道检测装置，所述荧光通道检测装置用于在粒子流过触发区域时产生检测信号；
散射通道检测装置，所述散射通道检测装置用于产生激光检测区域的散射信号；
成像装置，所述成像装置用于采集成像区域的粒子图像；
第一处理单元，所述第一处理单元用于接收荧光通道检测装置传递的检测信号，若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断，获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，当所述散射信号采集完毕时，向第二处理单元发送停止计数指令，获取第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机；
第二处理单元，接收所述第一处理单元发送的触发信号，开始进行计数，接收所述第一处理单元发送的停止计数指令，停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
上位机，所述上位机用于接收第一处理单元发送的触发信号、粒子图像、散射信号和计数值，根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
根据本申请实施例的第四方面，提供一种电子设备，包括：
一个或多个处理器；
存储器，用于存储一个或多个程序；
当所述一个或多个程序被所述一个或多个处理器执行，使得所述一个或多个处理器实现如第一方面所述的方法。
根据本申请实施例的第五方面，提供一种计算机可读存储介质，其上存储有计算机指令，该指令被处理器执行时实现如第一方面所述方法的步骤。
本申请的实施例提供的技术方案可以包括以下有益效果：
由上述实施例可知，本申请通过将成像式流式细胞仪的成像控制系统和粒子计数系统分开设计方式，通过一个单独的第二处理单元完成粒子计数功能，使得成像式流式细胞仪在粒子计数时不会被其他事件打断，计数方式简单、高效，并且可靠性高；通过第二处理单元计数的方式，弥补了第一处理单元由于死区时间造成的粒子遗漏问题，从而提高了计数结果的准确度；可移植性强，可以经过改造适用于大部分成像式流式细胞仪进行粒子计数方法改进。
应当理解的是，以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的，并不能限制本申请。
附图说明
此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分，示出了符合本申请的实施例，并与说明书一起用于解释本申请的原理。
图1是根据一示例性实施例示出的一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法的流程图。
图2是根据一示例性实施例示出的获取成像区域的粒子图像的过程的流程图。
图3是根据一示例性实施例示出的第二处理单元进行计数的过程的流程图。
图4是根据一示例性实施例示出的上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量的过程的流程图。
图5是根据一示例性实施例示出的一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数装置的框图。
图6是根据一示例性实施例示出的一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数系统的结构示意图。
具体实施方式
这里将详细地对示例性实施例进行说明，其示例表示在附图中。下面的描述涉及附图时，除非另有表示，不同附图中的相同数字表示相同或相似的要素。以下示例性实施例中所描述的实施方式并不代表与本申请相一致的所有实施方式。相反，它们仅是与如所附权利要求书中所详述的、本申请的一些方面相一致的装置和方法的例子。
在本申请使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本申请。在本申请和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。还应当理解，本文中使用的术语“和/或”是指并包含一个或多个相关联的列出项目的任何或所有可能组合。
应当理解，尽管在本申请可能采用术语第一、第二、第三等来描述各种信息，但这些信息不应限于这些术语。这些术语仅用来将同一类型的信息彼此区分开。例如，在不脱离本申请范围的情况下，第一信息也可以被称为第二信息，类似地，第二信息也可以被称为第一信息。取决于语境，如在此所使用的词语“如果”可以被解释成为“在……时”或“当……时”或“响应于确定”。
图1是根据一示例性实施例示出的一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法的流程图，如图1所示，该方法应用于第一处理单元中，可以包括以下步骤：
步骤S11：接收荧光通道检测装置传递的检测信号，其中所述检测信号为所述荧光通道检测装置在粒子流过触发区域时产生的信号；
步骤S12：若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断；
步骤S13：获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，其中所述散射信号由散射通道检测装置产生并传递；
步骤S14：将所述触发信号发送至第二处理单元，以使得所述第二处理单元开始进行计数；
步骤S15：当所述散射信号采集完毕时，向所述第二处理单元发送停止计数指令，以使得所述第二处理单元停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
步骤S16：接收第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机，以使得上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
由上述实施例可知，本申请通过将成像式流式细胞仪的成像控制系统和粒子计数系统分开设计方式，通过一个单独的第二处理单元完成粒子计数功能，使得成像式流式细胞仪在粒子计数时不会被其他事件打断，计数方式简单、高效，并且可靠性高；可移植性强，可以经过改造适用于大部分成像式流式细胞仪进行粒子计数方法改进。
在步骤S11的具体实施中，接收荧光通道检测装置传递的检测信号，其中所述检测信号为所述荧光通道检测装置在粒子流过触发区域时产生的信号；
具体地，在粒子流过触发区域时，粒子中的荧光物质在特定波长激光激发下发射荧光，该荧光通过荧光通道检测装置由光信号转换为电信号，该电信号即为检测信号。
在步骤S12的具体实施中，若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断；
具体地，当所述检测信号的信号值大于预设触发阈值时，所述检测信号则被视为有效触发，第一处理单元在接收到有效触发后进入成像工作流程，在成像工作未完成之前，第一处理单元不再对荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断，其中，预设触发阈值是用于判断检测信号是否为有效信号的门限值，设置过程是在第一处理单元中进行设置的，具体阈值大小的设定需根据具体实施中实际光路设定，该阈值推荐设置大小应略小于单个样品细胞或粒子所发出的荧光信号值大小。
在步骤S13的具体实施中，获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，其中所述散射信号由散射通道检测装置产生并传递；
具体地，第一处理单元在接收到触发信号后，通过系统中成像装置获取成像区域中的粒子图像，与此同时通过散射通道检测装置获取激光检测区域的散射信号并对所述散射信号进行采集存储，其中所述散射信号为粒子在激光照射下的侧向90°散射光信号。
具体地，如图2所示，获取成像区域的粒子图像的过程可以包括：
步骤S21：控制闪光灯延时预定时间闪烁；
具体地，闪光灯延时预定时间闪烁是为了确保粒子刚好到达成像区域时才进行成像。
步骤S22：控制相机在所述闪光灯闪烁时进行拍照，得到所述成像区域的粒子图像；
具体地，相机在闪光灯闪烁时进行拍照，才能获得清晰的粒子图像。
步骤S23：重复控制闪光灯延时预定时间闪烁和控制相机在所述闪光灯闪烁时进行拍照，得到所述成像区域的粒子图像的步骤，直至不再有粒子流入所述触发区域。
具体地，重复步骤S21-步骤S22的过程，直至不再有粒子流入所述触发区域，从而得到一次粒子流入过程中所有的粒子图像。
在步骤S14的具体实施中，将所述触发信号发送至第二处理单元，以使得所述第二处理单元开始进行计数；
具体地，所述触发信号在第一处理单元认定为有效触发信号时，会同步触发第二处理单元进入计数工作模式开始进行计数。
在步骤S15的具体实施中，当所述散射信号采集完毕时，向所述第二处理单元发送停止计数指令，以使得所述第二处理单元停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
具体地，在第一处理单元中数据采集工作全部完毕时，向第二处理单元发送停止计数指令，第二处理单元在接收到停止计数命令后，停止计数工作，将计数结果传回至第一处理单元并重新初始化为下一次计数工作做准备。
具体地，如图3所示，所述第二处理单元进行计数的过程可以包括：
步骤S31：接收计数信号，其中所述计数信号为所述荧光通道检测装置产生且仅传递给所述第二处理单元的信号；
步骤S32：计数值增加1；
步骤S31-步骤S32的具体实施中，每接收到一次计数信号，计数值增加1。
步骤S33：重复接收计数信号和计数值增加1的步骤，直至接收到第一处理单元发送的停止计数指令；
具体地，在第一处理单元未发送停止计数命令前，第二处理单元将一直处于接收计数信号和计数值增加1的工作状态。
步骤S34：在将所述计数值发送至第一处理单元后，将所述计数值清零。
具体地，第二处理单元在接收到停止计数命令后，将计数结果传回第一处理单元，并将所述计数值清零，为下一次计数工作做准备。
在步骤S16的具体实施中，接收第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机，以使得上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
具体地，将粒子图像以及侧向散射通道和荧光通道信号值作为特征数据进行粒子种类识别；将粒子种类识别结果作为粒子计数种类，所述第二处理单元的计数结果作为该次触发的粒子数量，便可得到所分析样品中所述粒子的种类和数量。在一实施例中，通过本方法对水中的浮游植物根据类别进行计数，样品中的细胞或粒子的种类大致有普通无荧光粒子、有叶绿素荧光粒子以及不同种类的浮游植物藻类细胞，如亚历山大藻、刚毛藻、念珠藻、新月藻、水棉、双星藻等多种藻类细胞。
具体地，如图4所示，上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量的过程可以包括：
步骤S41：上位机根据所述粒子图像、对应的所述散射信号的信号值和所述触发信号的信号值，识别粒子的种类；
具体地，将粒子图像以及侧向散射通道和荧光通道信号值作为特征数据，通过特征识别算法计算识别粒子的种类。
步骤S42：将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量；
具体地，将所述计数值与所述种类的粒子当前数量进行结果累加之和更新为所述种类的粒子的当前数量。
步骤S43：重复上位机根据所述粒子图像和对应的所述信号值的大小，识别粒子的种类至将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量的步骤，得到各种类的粒子对应的粒子数目结果。
具体地，重复步骤S41-步骤S42的过程，从而可以得到各种类的粒子对应的粒子数目结果。
与前述的适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法的实施例相对应，本申请还提供了适用于成像式流式细胞仪的粒子计数装置的实施例。
图5是根据一示例性实施例示出的一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数装置框图。参照图5，该装置应用于第一处理单元，可以包括：
接收模块21，用于接收荧光通道检测装置传递的检测信号，其中所述检测信号为所述荧光通道检测装置在粒子流过触发区域时产生的信号；
设置模块22，用于若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断；
获取模块23，用于获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，其中所述散射信号由散射通道检测装置产生并传递；
第一发送模块24，用于将所述触发信号发送至第二处理单元，以使得所述第二处理单元开始进行计数；
第二发送模块25，用于当所述散射信号采集完毕时，向所述第二处理单元发送停止计数指令，以使得所述第二处理单元停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
第三发送模块26，用于接收第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机，以使得上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
关于上述实施例中的装置，其中各个模块执行操作的具体方式已经在有关该方法的实施例中进行了详细描述，此处将不做详细阐述说明。
对于装置实施例而言，由于其基本对应于方法实施例，所以相关之处参见方法实施例的部分说明即可。以上所描述的装置实施例仅仅是示意性的，其中所述作为分离部件说明的单元可以是或者也可以不是物理上分开的，作为单元显示的部件可以是或者也可以不是物理单元，即可以位于一个地方，或者也可以分布到多个网络单元上。可以根据实际的需要选择其中的部分或者全部模块来实现本申请方案的目的。本领域普通技术人员在不付出创造性劳动的情况下，即可以理解并实施。
相应的，如图6所示，本申请还提供一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数系统，该系统可以包括：
荧光通道检测装置，所述荧光通道检测装置用于在粒子流过触发区域时产生检测信号；
具体地，荧光通道检测装置将激光区域中粒子在激光照射下产生的荧光转换为电信号以便后续处理。
散射通道检测装置，所述散射通道检测装置用于产生激光检测区域的散射信号；
具体地，散射通道检测装置将激光区域中粒子在激光照射下产生的侧向散射光转换为电信号以便后续处理。
成像装置，所述成像装置用于采集成像区域的粒子图像；
具体地，成像装置由CCD相机和闪光灯组成，用于采集成像区域的粒子图像。
第一处理单元，所述第一处理单元用于接收荧光通道检测装置传递的检测信号，若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断，获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，当所述散射信号采集完毕时，向第二处理单元发送停止计数指令，获取第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机；
具体地，所述第一处理单元可以为任意具有处理控制能力的单元，在一实施例中，选取Atmel公司生产的ATXMEGA128A1，8位单片机来作为所述第一处理单元，选取该单片机是因为其具有很好地实时性，性能能够达到需求的同时功耗小的特点。
第二处理单元，接收所述第一处理单元发送的触发信号，开始进行计数，接收所述第一处理单元发送的停止计数指令，停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
具体地，第二处理单元作为粒子计数单元，任务简单，可靠性好，只需完成接收第一处理单元发送的计数开始和停止命令，计数过程不易被干扰，计数结果具有良好的可信度。在具体实施中，所述第二处理单元可以为任意具有处理控制能力的单元，也可与所述第一处理单元保持一致，更方便制作。
上位机，所述上位机用于接收第一处理单元发送的触发信号、粒子图像、散射信号和计数值，根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
具体地，所述上位机是粒子种类识别和数据处理单元，通过将粒子图像、散射信号、触发信号和计数值等多路数据进行融合计算，最终获得所述粒子的种类和数量结果并通过可视化图表形式进行结果展示，使结果更加清晰直观。
需要说明的是，该系统中各部分的处理逻辑与流程已在上文对适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法进行描述的部分解析清楚，此处不作赘述。
相应的，本申请还提供一种电子设备，包括：一个或多个处理器；存储器，用于存储一个或多个程序；当所述一个或多个程序被所述一个或多个处理器执行，使得所述一个或多个处理器实现如上述的适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法。
相应的，本申请还提供一种计算机可读存储介质，其上存储有计算机指令，其特征在于，该指令被处理器执行时实现如上述的适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法。
本领域技术人员在考虑说明书及实践这里公开的内容后，将容易想到本申请的其它实施方案。本申请旨在涵盖本申请的任何变型、用途或者适应性变化，这些变型、用途或者适应性变化遵循本申请的一般性原理并包括本申请未公开的本技术领域中的公知常识或惯用技术手段。说明书和实施例仅被视为示例性的，本申请的真正范围和精神由下面的权利要求指出。
应当理解的是，本申请并不局限于上面已经描述并在附图中示出的精确结构，并且可以在不脱离其范围进行各种修改和改变。本申请的范围仅由所附的权利要求来限制。
Claims (10)
1.一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法，其特征在于，包括：
接收荧光通道检测装置传递的检测信号，其中所述检测信号为所述荧光通道检测装置在粒子流过触发区域时产生的信号；
若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断；
获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，其中所述散射信号由散射通道检测装置产生并传递；
将所述触发信号发送至第二处理单元，以使得所述第二处理单元开始进行计数；
当所述散射信号采集完毕时，向所述第二处理单元发送停止计数指令，以使得所述第二处理单元停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
接收第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机，以使得上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，获取成像区域的粒子图像的过程包括：
控制闪光灯延时预定时间闪烁；
控制相机在所述闪光灯闪烁时进行拍照，得到所述成像区域的粒子图像；
重复控制闪光灯延时预定时间闪烁和控制相机在所述闪光灯闪烁时进行拍照，得到所述成像区域的粒子图像的步骤，直至不再有粒子流入所述触发区域。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二处理单元进行计数的过程包括：
接收计数信号，其中所述计数信号为所述荧光通道检测装置产生且仅传递给所述第二处理单元的信号；
计数值增加1；
重复接收计数信号和计数值增加1的步骤，直至接收到第一处理单元发送的停止计数指令；
在将所述计数值发送至第一处理单元后，将所述计数值清零。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量，包括：
上位机根据所述粒子图像、对应的所述散射信号的信号值和所述触发信号的信号值，识别粒子的种类；
将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量；
重复上位机根据所述粒子图像和对应的所述信号值的大小，识别粒子的种类至将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量的步骤，得到各种类的粒子对应的粒子数目结果。
5.一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数装置，其特征在于，包括：
接收模块，用于接收荧光通道检测装置传递的检测信号，其中所述检测信号为所述荧光通道检测装置在粒子流过触发区域时产生的信号；
设置模块，用于若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断；
获取模块，用于获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，其中所述散射信号由散射通道检测装置产生并传递；
第一发送模块，用于将所述触发信号发送至第二处理单元，以使得所述第二处理单元开始进行计数；
第二发送模块，用于当所述散射信号采集完毕时，向所述第二处理单元发送停止计数指令，以使得所述第二处理单元停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
第三发送模块，用于接收第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机，以使得上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
6.根据权利要求5所述的装置，其特征在于，所述第二处理单元进行计数的过程包括：
接收计数信号，其中所述计数信号为所述荧光通道检测装置产生且仅传递给所述第二处理单元的信号；
计数值增加1；
重复接收计数信号和计数值增加1的步骤，直至接收到第一处理单元发送的停止计数指令；
在将所述计数值发送至第一处理单元后，将所述计数值清零。
7.根据权利要求5所述的装置，其特征在于，上位机根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量，包括：
上位机根据所述粒子图像、对应的所述散射信号的信号值和所述触发信号的信号值，识别粒子的种类；
将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量；
重复上位机根据所述粒子图像和对应的所述信号值的大小，识别粒子的种类至将所述计数值与所述种类的粒子的当前数量相加之和更新为所述种类的粒子的当前数量的步骤，得到各种类的粒子对应的粒子数目结果。
8.一种适用于成像式流式细胞仪的粒子计数系统，其特征在于，包括：
荧光通道检测装置，所述荧光通道检测装置用于在粒子流过触发区域时产生检测信号；
散射通道检测装置，所述散射通道检测装置用于产生激光检测区域的散射信号；
成像装置，所述成像装置用于采集成像区域的粒子图像；
第一处理单元，所述第一处理单元用于接收荧光通道检测装置传递的检测信号，若所述检测信号的信号值大于预定触发阈值，则将所述检测信号设置为触发信号并不再对所述荧光通道检测装置传递的检测信号进行阈值判断，获取成像区域的粒子图像和激光检测区域的散射信号，当所述散射信号采集完毕时，向第二处理单元发送停止计数指令，获取第二处理单元发送的计数值并将所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值发送至上位机；
第二处理单元，接收所述第一处理单元发送的触发信号，开始进行计数，接收所述第一处理单元发送的停止计数指令，停止计数并将计数值发送至第一处理单元；
上位机，所述上位机用于接收第一处理单元发送的触发信号、粒子图像、散射信号和计数值，根据所述触发信号、粒子图像、散射信号和计数值计算所述粒子的种类和数量。
9.一种电子设备，其特征在于，包括：
一个或多个处理器；
存储器，用于存储一个或多个程序；
当所述一个或多个程序被所述一个或多个处理器执行，使得所述一个或多个处理器实现如权利要求1-4任一项所述的方法。
10.一种计算机可读存储介质，其上存储有计算机指令，其特征在于，该指令被处理器执行时实现如权利要求1-4中任一项所述方法的步骤。
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| CN202210202477.2A CN114720355A (zh) | 2022-03-03 | 2022-03-03 | 适用于成像式流式细胞仪的粒子计数方法及装置、系统 |
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