CN114340625A - 用雌激素受体-α抑制剂的口服剂型治疗癌症的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及包含人ERα的抑制剂的药物组合物，以及使用ERα抑制剂的癌症治疗方法。特别地，本文描述了具有规定的药代动力学(PK)曲线的H3B‑6545的剂量，其允许将所述抑制剂有效且安全地施予至有需要的人类受试者。

Description

用雌激素受体-α抑制剂的口服剂型治疗癌症的方法

交叉申请

本申请要求2019年5月24日提交的美国临时专利申请号62/852,751和2019年5月28日提交的美国临时专利申请号62/853,498的权益。上述申请通过引用并入本申请中，这等同于将其完整记载于本申请中。

背景技术

已知改变的雌激素受体(下文中称为ER)信号传递在多种类型乳腺癌的发展中起关键性作用。典型地，ER信号传递的活化依赖于内源性类固醇激素(如雌二醇)的表达和能力，以向细胞内渗透并与细胞内ER相互作用。ER信号传递被活化后能促进多种细胞进程，如增殖、血管形成、代谢和细胞存活(Toss A.等人，2017,Int.J.Mol.Sci.,18(1):85)。在肿瘤发生过程中，常出现突变在不同的ER中发展，其中所述突变赋予癌细胞以配体非依赖性方式激活ER信号传递通路的能力。ERα是已知参与乳腺癌肿瘤发生的一种特定的ER，其是在全部乳腺癌的50％中存在的激素调控型转录因子(Lumachi F.,Curr.Med Chem.2013；20:596-604)。

激素调控型转录因子雌激素受体α(ERα，ESR1)在约70％的乳腺癌中表达。LumachiF.,Curr.Med.Chem.2013；20:596-604。已开发了多种ERα-定向疗法。对ERα拮抗剂的抗性在涉及若干种机制的临床中均是常见的。作为一种机制的ERα突变发生于20～40％的内分泌疗法抗性转移中。Li S,Cell Rep.2013；4:1116-1130；Robinson DR,Nat Genet.2013；45:1446-1451；Toy W,Nat Genet.2013；45:1439-1445；Chandarlapaty S,JAMA Oncol.2016；2:1310-1315；Spoerke JM,Nat Commun.2016；7:11579。ERα中的突变导致ERα通路的配体-非依赖性活化。

内分泌疗法是用于治疗或治愈乳腺癌的前沿治疗方法。内分泌疗法是涉及促进或抑制体内激素的表达或功能以治疗特定疾病的疗法。靶向ERα的内分泌疗法在乳腺癌的长期治疗方法中显示无效，其原因在于在延长内分泌疗法后，所有表达ERα的乳腺癌中的20％至40％在ERα中获得突变，所述突变使受体对常规内分泌疗法无响应(Robinson,D.R.,Nat.Genet.2013；45:1446-1451)。因此，在化疗领域，需要开发能够有效靶向赋予癌症内分泌疗法抗性的ERα的突变同种型的新治疗方法。

在寻求开发用于内分泌疗法抗性乳腺癌的新治疗方法的过程中，已发现了一类新的ERα抑制剂，其被称为选择性雌激素受体共价拮抗剂(下文中的SERCAs)。SERCAs通过靶向其他的核激素受体中不存在的ER上的半胱氨酸残基，使ER信号传递失活(Puyang,X.,Cancer Discov.2018,8(9):1176-1193)。在此期间出现的SERCAs之一是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其示出于下式I中：

(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺的游离碱形式有时被称为H3B-6545。H3B-6545是使野生型ERα(ERα-WT)和突变型ERα(ERα-mut)失活但不降解受体的共价小分子抑制剂。H3B-6545能够与ERα的Cys530残基相互作用，从而引起受体采用抑制受体对配体-非依赖性ERα信号传递转导作用的促进能力的独特构象(Puyang,X.,Cancer Discov.2018,8(9):1176-1193)。H3B-6545已显示在各种乳腺癌细胞系和裸鼠的患者源性异种移植模型中能够引发有效的化疗特性(Smith,P.G.等人，Cancer Res.2017)。

虽然H3B-6545在体外和体内模型中表现出有效，但仍需确定向需要治疗的人乳腺癌患者施予H3B-6545的方式。因此，需要设计出H3B-6545的制剂和剂量方案，从而使得向有需要的人类受试者更有效和安全地施予所述抑制剂。后述的药代动力学(下文中称为PK)结果和PK曲线展示出它们在人乳腺癌治疗方法中的一般性用途。

发明概述

一些实施方式可以提供例如口服剂型，其包含式I所示化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，所述口服剂型被配制为实现约1ng/mL至约4ng/mL的平均C_max，其中所述平均C_max是针对所述剂量中的每mg式I而测得的。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max为约2ng/mL至约4ng/mL。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max为约3ng/mL至约4ng/mL。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max在3ng/mL的80％至125％至3.5ng/mL的80％至125％的范围内。

在其他实施方式中，剂型被配制为在约2小时至约7小时内实现所述平均C_max的平均t_max。在其他实施方式中，剂型被配制为在约3小时至约7小时内实现所述平均C_max的平均t_max。在其他实施方式中，剂型被配制为在约3.5小时至约4.5小时内实现所述平均C_max的平均t_max。在其他实施方式中，剂型被配制为在约5.5小时至约6.5小时内实现所述平均C_max的平均t_max。

在如前文所报道的一些实施方式中，剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。在一些实施方式中，剂型包含总当量为约450mg的式I。

其他实施方式提供了以下口服剂型，其包含式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型被配制为实现约16h*ng/mL至约44h*ng/mL的平均AUC0-24。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC0-24为约27h*ng/mL至约44h*ng/mL。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC0-24在30h*ng/mL的80％至125％至44h*ng/mL的80％至125％的范围内。在一些实施方式中，剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。在一些实施方式中，剂型包含总当量为约450mg的式I。

其他实施方式提供了以下口服剂型，其包含式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I所示化合物是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，所述口服剂型被配制为实现约8小时至约22小时的所述剂型的式I的平均t_1/2。在其他实施方式中，平均t_1/2为约8小时至约12小时。在其他实施方式中，平均t_1/2为约9小时至约11小时。在一些实施方式中，剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。在一些实施方式中，剂型包含总当量为约450mg的式I。

其他实施方式提供了以下口服剂型，其包含式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I所示化合物是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型被配制为实现约21h*ng/mL至约67h*ng/mL的平均AUC_0-inf。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，平均AUC_0-inf为约29h*ng/mL至约67h*ng/mL。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，平均AUC_0-inf在36h*ng/mL的80％至125％至57h*ng/mL的80％至125％的范围内。在一些实施方式中，剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。在其他实施方式中，剂型包含总当量为约450mg的式I。

另外其他的实施方式可包括本文所描述的剂型，其具有实现本文所述的药代动力学数值的手段。

另一实施方式提供了以下口服剂型，其包含式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I的化合物是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型被配制为实现约16h*ng/mL至约41h*ng/mL的平均AUC_0-t。在另一实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-t在27h*ng/mL的80％至125％至36h*ng/mL的80％至125％的范围内。在另一实施方式中，所述剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。在另一实施方式中，所述剂型包含总当量为约450mg的式I。

在其他实施方式中，如前文所报道的剂型可以是包含内相和外相的胶囊，所述内相包含式I或药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、微晶纤维素、羟丙基纤维素、胶态无水二氧化硅、和硬脂酸镁；外相包含硬脂酸镁。在一些实施方式中，胶囊是羟丙甲纤维素(hypromellose)胶囊。在一些实施方式中，胶囊包括式I的单HCl盐型(mono-HCl salt form)。

在如前文所报道的一些实施方式中，所述口服剂型是包含内相、外相和薄膜包衣的片剂，所述内相包含式I或药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶态二氧化硅和纯水；所述外相包含微晶纤维素和硬脂酸镁；所述薄膜包衣包含羟丙甲纤维素、滑石、二氧化钛、丙二醇、氧化铁和纯水。在其他实施方式中，片剂包含式I的单HCl盐型。

其他实施方式提供了在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予口服剂型，所述口服剂型包含治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐、至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中所述治疗有效量是在约100mg至600mg的范围内的单次日剂量，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型在所述受试者的血浆中具有约1ng/mL至约4ng/mL的平均C_max。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max为约2ng/mL至约4ng/mL。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max为约3ng/mL至约4ng/mL。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max在3ng/mL的80％至125％至3.5ng/mL的80％至125％的范围内。在一些实施方式中，剂型具有约2小时至约7小时的式I的所述平均C_max的平均t_max。在一些实施方式中，剂型具有约3小时至约7小时的式I的所述平均C_max的平均t_max。在一些实施方式中，剂型具有约3.5小时至约4.5小时的式I的所述平均C_max的平均t_max。在一些实施方式中，剂型具有约5.5小时至约6.5小时的式I的所述平均C_max的平均t_max。

其他实施方式可提供在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予以下口服剂型，其包含治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I所示化合物是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型具有约16h*ng/mL至约44h*ng/mL的平均AUC_0-24。在其他实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-24为约27h*ng/mL至约44h*ng/mL。在其他实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC0-24在30h*ng/mL的80％至125％至44h*ng/mL的80％至125％的范围内。

其他实施方式提供了在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予以下口服剂型，其包含治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中所述式I的化合物是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中，所述口服剂型具有约8小时至约22小时的平均t_1/2。在一些实施方式中，所述平均t_1/2为约8小时至约12小时。在一些实施方式中，所述平均t_1/2为约9小时至约11小时。

其他实施方式提供了在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予以下口服剂型，其包含治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I的化合物是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型具有约21h*ng/mL至约67h*ng/mL的平均AUC_0-inf。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-inf为约29h*ng/mL至约67h*ng/mL。在一些实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，平均AUC_0-inf在36h*ng/mL的80％至125％至57h*ng/mL的80％至125％的范围内。

其他实施方式提供了在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予以下口服剂型，其包含治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂，其中，所述式I的化合物是(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型具有约16h*ng/mL至约41h*ng/mL的平均AUC_0-t。在其他实施方式中，针对所述剂量中的每mg式I，平均AUC_0-t在27h*ng/mL的80％至125％至36h*ng/mL的80％至125％的范围内。

在本文所报道的方法的一些实施方式中，剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。在其他实施方式中，剂型包含总当量为约200mg至约600mg的式I。在其他实施方式中，所述剂型包含总当量为约300mg至约600mg的式I。在其他实施方式中，所述剂型包含总当量为约450mg的式I。

在本文所报道的方法的一些实施方式中，口服剂型是包含内相和外相的胶囊，所述内相包含式I的化合物或药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、微晶纤维素、羟丙基纤维素、胶态无水二氧化硅、和硬脂酸镁；所述外相包含硬脂酸镁。在一些实施方式中，胶囊是羟丙甲纤维素胶囊。在一些实施方式中，胶囊包括式I的单HCl盐型。

在本文所报道的一些实施方式中，口服剂型是包含内相、外相和薄膜包衣的片剂，所述内相包含式I的化合物或药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶态二氧化硅和纯水；所述外相包含微晶纤维素和硬脂酸镁；所述薄膜包衣包含羟丙甲纤维素、滑石、二氧化钛、丙二醇、氧化铁和纯水。在一些实施方式中，片剂包括式I的单HCl盐型。

在本文所报道的一些实施方式中，癌症是乳腺癌。在一些实施方式中，乳腺癌是ERα-阳性乳腺癌。在一些实施方式中，乳腺癌表达野生型ERα。在一些实施方式中，乳腺癌表达突变型ERα。

在本文所报道的一些实施方式中，所述口服剂型每日施予1次。在一些实施方式中，所述口服剂型是向禁食状态的人施予。在一些实施方式中，所述口服剂型是向进食状态的人施予。

实施方式提供了用化合物H3B-6545或其药学上可接受的盐治疗患者的方法：

所述方法包括鉴别在患者的血液中是否观察到一个或多个突变体等位基因频率的降低，选择观察到所述降低的患者，以及，向选定的患者施予治疗有效量的H3B-6545或其药学上可接受的盐。突变体等位基因频率是在群体中的特定基因座上的突变体等位基因(基因的变体)的相对频率，且将其表示为分数或者百分比。

在美国专利号9,796,683B2中报道了H3B-6545，该专利通过引用并入本文。

在本文所报道的一些实施方式中，H3B-6545的药学上可接受的盐是H3B-6545的HCl盐。

在一些实施方式中，在选自由PIK3CA、ESR1、TSC1、TP53、FGFR1、CCND1、ARID1A、POLE、FGF19、MET、NOTCH3、FGF3、AKT1、KRAS、MYC、ERBB2、ERBB3、FGFR3、PMS2、PTEN、RB1、BRAF、MDM2、ATR、ATRX、BRCA2、SETD2、ATM、FANCA、JAK2、NF1、SLX4和SMAD4组成的组中的一个或多个等位基因中观察到突变体等位基因频率的降低。

在另一实施方式中，在AKT1中观察到了突变体等位基因频率的降低。在另一实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率降低的AKT1突变位置是E17。在另一实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率降低的AKT1突变是E17K。

在另一实施方式中，在ESR1中观察到了突变体等位基因频率的降低。在另一其他的实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率减少的ESR1突变位置选自由E380、D538、L536、S463和Y537组成的组中的一个或多个成员。在另一实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率降低的ESR1突变选自由E380Q、D538G、L536H、L536P、L536R、S463P、Y537C、Y537N和Y537S组成的组中的一个或多个成员。在另一实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率降低的ESR1突变是S463P。在另一实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率降低的ESR1突变是Y537N。

在另一实施方式中，在PIK3CA中观察到突变体等位基因频率的降低。在另一实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率降低的PIK3CA突变位置选自由E542、E545和H1047组成的组中的一个或多个成员。在另一实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率的降低的PIK3CA突变选自由E542K、E545K、H1047L和H1047R组成的组中的一个或多个成员。

其他实施方式可提供从经受用化合物H3B-6545或其药学上可接受的盐治疗的患者中中止用化合物H3B-6545或其药学上可接受的盐治疗的方法：

所述方法包括鉴别在患者的血液中是否观察到一个或多个突变体等位基因频率的增加，以及如果观察到所述增加，中止患者的治疗。

在一些实施方式中，在选自PIK3CA、ESR1、TSC1、TP53、FGFR1、CCND1、ARID1A、POLE、FGF19、MET、NOTCH3、FGF3、AKT1、KRAS、MYC、ERBB2、ERBB3、FGFR3、PMS2、PTEN、RB1、BRAF、MDM2、ATR、ATRX、BRCA2、SETD2、ATM、FANCA、JAK2、NF1、SLX4和SMAD4中的一个或多个等位基因中观察到突变体等位基因频率的增加。

在一些实施方式中，在ESR1中观察到突变体等位基因频率的增加。在又一其他的实施方式中，导致观察到的所述突变体等位基因频率增加的ESR1突变位置选自由E380、D538、L536、S463和Y537组成的组中的一个或多个成员。在其他实施方式中，导致观察到的所述突变体等位基因频率的ESR1突变选自由E380Q、D538G、L536H、L536P、L536R、S463P、Y537C、Y537N和Y537S组成的组中的至少一个成员。

在其他实施方式中，在PIK3CA中观察到了突变体等位基因频率的增加。在另一其他的实施方式中，导致所述观察到的突变体等位基因频率增加的PIK3CA突变位置选自由E542、E545和H1047组成的组。在又一其他的实施方式中，导致观察到的所述突变体等位基因频率增加的PIK3CA突变选自由E542K、E545K、H1047L和H1047R组成的组。在其他实施方式中，PIK3CA突变是E545K。

在另一实施方式中，在AKT1中观察到突变体等位基因频率的增加。在另一实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率增加的AKT1突变位置是E17。在其他实施方式中，导致观察到的突变体等位基因频率增加的AKT1突变是E17K。

在另外其他的实施方式中，在患者接受了至少一次化合物H3B-6545或其药学上可接受的盐的治疗之后进行鉴别步骤：

在其他实施方式中，所述患者具有乳腺癌。在另一其他的实施方式中，所述乳腺癌是雌激素受体α(ERα)阳性乳腺癌。在又一其他的实施方式中，所述ERα具有突变。

在另外其他的实施方式中，在循环肿瘤DNA中观察到突变体等位基因频率的增加。在其他实施方式中，在循环肿瘤DNA中观察到突变体等位基因频率的降低。

本文中报道过的文件通过引用而合并入本文。如果这些文件与本文存在冲突，则以本文为准。

附图说明

图1示出了实施例3中的H3B-6545的平均血浆浓度随时间变化的曲线(循环1，第1天)。初步的PK分析表明，对于100mg至600mg的血浆暴露量，H3B-6545表现出大致与剂量成比例的增加。t_max和半衰期呈现出与剂量和时间无关。

图2示出了实施例3中报道的H3B-6545治疗的肿瘤响应和期间。在每个肿瘤评估中示出部分响应、稳定响应、病情进展、和不可评估。箭头表示在数据截断时治疗正在进行。

图3示出了实施例3中所报道的靶病灶的直径总和的百分比改变。

图4示出了液体活检和组织活检样本组的概况。

图5A～图5E示出了实施例7中的患者的基线基因组图谱。图5A至5E示出BEAMing测定。A：患者的基线ESR1和PIK3CA突变状态；B和C：ESR1和PIK3CA突变的单株性(clonality)；D和E：PIK3CA和ESR1突变的氨基酸分布。图5F示出了由Oncomine Comprehensive Panel确定的、在基线组织活检中发现的突变的瀑布图(oncoprint)。

图6A和图6B示出了在实施例7的组织和液体活检中发现的突变的一致性。图6A示出了组织和液体活检突变的等位基因频率分布和一致性。图6B是组织和液体活检突变一致性的总结表。

图7A～7C示出了与对H3B-6545的整体最佳响应相关的ctDNA动力学。AF＝等位基因频率，C＝周期，D＝天数，PD＝病情进展，PR＝部分响应，SD＝病情稳定。虚线表示ddPCR测定LOD。图8A示出了每个患者的分别着色的AF基线/C2D1的比例。一个患者可具有多个突变。图7B和图7C示出了在病情进展(B)与部分响应(C)的患者中的ctDNA动力学示例。

发明详述

定义

本文中，冠词“一”、“一个”和“这个”的使用应被解释为涵盖了单数和复数，除非在本文中另有说明或与上下文明显矛盾。例如，术语“崩解剂”指包括在本文所述制剂中的或者适用于本文所述制剂中的一种或多种崩解剂。相似的，术语“治疗量”指包括在剂型中的或者适用于剂型中的一种或多种治疗量。

除非另外指明，术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”应被解释为开放式术语(即，意指“包括但不限于”)，除非另外指明。此外，每当在实施方式中使用“包含”或另一种开放式术语时，均应理解为该实施方式可以使用中间式术语“基本由……组成”或封闭式术语“由……组成”来要求更狭窄的保护。

表达“生物等效的”或“生物等效性”是本领域的术语，旨在根据美国卫生和人类服务部出版的具有治疗等效性评估的注册药品第34版(通常被称为“橙皮书”)进行定义。同一药物物质的不同制剂的生物等效性涉及相对于药物吸收的速率和程度的等效性。将测试制剂的吸收程度和速率与对照制剂进行比较，从而确定两个制剂是否生物等效。标准的生物等效性研究以交叉方式通过广泛测试进行，所述测试包括向多名志愿者(通常为12至24名健康普通成年人)施予单次剂量的测试药物和对照药物，然后随时间测量药物的血液或血浆水平。FDA仿制药办公室生物等效性部门已出版了用于确立制剂相对于对照制剂的生物等效性的详细指南。

如本文所述，术语“平均数”指由一系列独立的测量所确定的几何平均数。例如，可以从统计学上有意义的群体中收集独立的测量。作为其他例子，当用于描述药代动力学参数(如“平均C_max”、“平均AUC_0-x”、“平均AUC_0-t”、“平均AUC_0-inf”、“平均t_max”或“平均t_1/2”(或者“平均半衰期”))时，“平均数”指源自分别收集个体测量的群体的几何平均药代动力学数值。因此，如本文中使用的，剂型可以向人类受试者施予，其中所述剂型具有平均药代动力学数值，该数值源自一系列独立测量的数值。

本申请中使用的术语缩写和定义的名单如下。AUC：血浆浓度-时间曲线下面积；AUC_0-x：给药后0时至x时的血浆浓度-时间曲线下面积(例如，x可表示12或24小时)；AUC_0-t：从0时至最后可定量浓度时的血浆浓度-时间曲线下面积；AUC_0-inf：从0时至无穷大的血浆浓度-时间曲线下面积；ANCOVA：协方差分析；CI：置信区间；C_max：最大药物浓度；C_x：给药后x小时的血浆浓度；CV：变异系数；LC-MS/MS：液相色谱-质谱/质谱；MAD：多次上升剂量；MTD：最大耐受剂量；PD：药物效力学；PK：药代动力学；RT：反应时间；SAD：单次上升剂量；SD：标准差；t1/2：终末消除半衰期；t_max：施予药物后到达最大(峰)浓度的时间。如本文中使用的，t_1/2包括药物浓度的终末消除半衰期，其可以是C_max的终末消除半衰期。如本文中使用的，C_max包括在人血浆中测得的物质的最大药物浓度。

两个吸收速率和程度相差-20％/+25％或更少的剂型通常被认为是“生物等效的”。另一种用于平均生物等效性的方法涉及计算测试产品和对照产品的测量的平均值(群体几何平均数)的比率的90％置信区间。为了确立BE，计算的置信区间通常应落入产品平均值的比例的80～125％内。除了该常规方法外，其他方法可用于生物等效性的确立，包括(1)药代动力学数据的对数转化，(2)评估序列效应的方法，和(3)评估离群值数据的方法。例如，在上述(1)中，置信区间通常应落入对数转换的PK参数的平均数值差异的80～125％内。

本文中使用的术语“约”、“大约”或“近似”当指可测量数值如数量、时距等时，意在涵盖与指定数值±20％或10％的差异，更优选5％，甚至更优选1％，以及仍然更优选0.1％，只要这样的差异在给定的上下文中是恰当的。

当以“式I的化合物”或“H3B-6545”或“H3B-6545的游离碱”的形式的质量或重量提及剂量值或剂量范围时，本领域技术人员将理解，提供等摩尔量的活性化合物作为药学上可接受的盐通常需要施予比施予化合物本身所需的量更大质量的盐(即，游离碱的量和盐的量具有1:1摩尔比)。例如，短语“25mg至50mg的式I所示化合物或其药学上可接受的盐”考虑了25mg至50mg(包括端点)的量的式I的游离碱，以及26mg至53mg(包括端点)的量的式I的化合物的单盐酸盐。该转换可被称为例如“盐转换因子”、“盐校正因子”或“效力调节因子”。

效力调节因子转换也适用于作为水合物、溶剂合物而存在的式I的结晶形态，或者同时具有i)水合物或溶剂合物和ii)盐抗衡离子的式I的结晶形态。此外，不论共结晶的溶剂分子及/或盐抗衡离子是以整数还是以非整数的化学当量比存在于结晶形态中，均可适用这类效力调节因子转换。因此，本领域技术人员理解，可以针对H3B-6545的单盐酸盐、H3B-6545的半盐酸盐或者例如1:1.3、1:1.25等的特殊比例，进行不同的效力调节。

与前文段落一致，如本文中使用的，式I(或H3B-6545、H3B-6545的游离碱或其在本文中使用的任意其他同义词)的“相等的”量(例如，质量、重量、剂量等)指遵循其效力调节因子的任意的盐及/或水合物的量。

“H3B-6545药物物质”指H3B-6545的单盐酸盐，如美国专利号10,640,483中报道的，其通过引用而合并入本文中。

如本文中使用的，“人类受试者”可与“需要治疗的人类受试者”、“有需要的人类受试者”互换，其均指具有乳腺癌的人类受试者，或者具有相对于多数群体而言发展乳腺癌的风险增加的人类受试者。有需要的人类受试者可以是之前被诊断或鉴别为具有乳腺癌或癌前状态的人。可选的，有需要的人类受试者可以是具有相对于多数群体而言发展此类病症的风险增加的人(即，相对于多数群体而言倾向于发展此类病症的受试者)。有需要的人类受试者可具有癌前状态。

有需要的人类受试者可以具有难愈性或抗性癌症(即，不响应治疗或者尚未响应治疗的癌症)。受试者可以在治疗开始时是抗性的，或者可以在治疗过程中成为抗性的。在一些实施方式中，有需要的受试者在最近的疗法缓解后具有癌症复发。在一些实施方式中，有需要的受试者接受过用于癌症治疗的所有已知有效的疗法，并且均失败。在一些实施方式中，有需要的受试者接受过至少一次既往疗法，在优选的实施方式中，受试者具有癌症或癌性状态(cancerous condition)。

如本文中使用的，“禁食条件”描述了下述有需要的人类受试者，其在施予前经过至少10小时的禁食过夜。在给药后至少4小时内，不允许摄入任何食物。除药物施予前后的1小时内以外，可根据需要允许喝水。

如本文中使用的，“进食状态”描述了下述的人类受试者，其在至少10小时的禁食过夜后，于30分钟或更短的时间内吃完高脂肪早餐，然后在开始进餐后的30分钟内服用单次剂量的H3B-6545。除药物施予前后的1小时内以外，可根据需要允许喝水。

如本文中使用的，“治疗(treating)”或“治疗(treat)”描述了出于抵抗疾病、症状或病症的目的，对人类受试者的管理和护理，包括施予H3B-6545或其药学上可接受的盐、同质异形体(polymorph)、水合物或溶剂合物的剂型，来减轻疾病、症状或病症的症状或并发症，或者消除疾病、症状或病症。

H3B-6545或其药学上可接受的盐及/或溶剂合物能够或者还可以用于预防相关的疾病、症状或病症，或者用于鉴别用于此类目的的合适候选物。如本文中使用的，“预防”、“防止”或“保护”描述了降低或消除这样的疾病、症状或病症的症状或并发症的发生。

如本文中使用的，“试样”意指源自人类受试者的任意的生物学试样，其包括但不限于细胞、组织试样、体液(包括但不限于粘液、血液、血浆、血清、尿液、唾液和精液)、肿瘤细胞和肿瘤组织。优选地，试样选自骨髓、外周血细胞、血液、血浆和血清。试样可以由处于治疗或测试中的受试者提供。可选地，试样可以由医生根据本领域的常规实践来获得。

如本文中使用的，术语“剂型”指适合作为单剂量(unitary dosages)用于待治疗的人类受试者的物理离散单元；每个单元含有经计算产生理想的治疗效果的、预定量的活性化合物，以及所需的药物载体。剂型按施予途径和应用位点进行分类，包括例如，口服的、局部的、直肠的、阴道的、静脉内的、皮下的、肌肉内的、眼科的、鼻的、眼的和吸入的施予。可选的，剂型按物理形式分类，如固体、半固体或液体。剂型是多种形式中的任一种，包括例如，IV袋、片剂、气溶胶吸入器上的单次泵送或小药瓶。“口服剂型”指容易通过口向人类受试者施予的剂型。口服剂型的非限制性例子包括胶囊和片剂。单元剂量中的活性成分的量(例如，所公开的化合物或其盐、水合物、或溶剂合物的制剂)是有效量，且根据所涉及的特定治疗而变化。

如本文中使用的，短语“药学上可接受的”指落入合理的医学判断的范围内，适用于与人类和动物的组织接触而无过度的毒性、刺激性、过敏反应、或其他问题或并发症，与合理的收益/风险比相称的化合物、材料、组合物、载体及/或剂型。

如本文中使用的，短语“药学上可接受的赋形剂”意指用于制备药物组合物的赋形剂，所述赋形剂通常安全、无毒、既不是在生物学上也不是在其他方面不理想的，包括对于兽医用途以及人类药物用途而言可接受的赋形剂。说明书和权利要求中使用的“药学上可接受的赋形剂”既包括一种上述赋形剂，也包括一种以上的上述赋形剂。例如，用于本发明制剂的药学上可接受的赋形剂可以是稀释剂或惰性载体、润滑剂、粘合剂、或其组合。用于本发明制剂的药学上可接受的赋形剂还可以包括填充剂、抗微生物剂、抗氧化剂、抗结块剂、包衣剂，或其混合物。

本文中使用的术语“组合物”包括以特定的量包含特定的成分的产品，以及通过以特定的量组合特定的成分而直接或间接产生的任意产品。当涉及药物组合物时，该术语意在包括包含活性成分(本文中，式I或其药学上可接受的盐、水合物及/或溶剂合物中的任一者)和构成载体的惰性成分的产品，以及包括通过任意两个或多个成分的组合、复合或凝聚或者一个或多个成分的解离、其他类型的反应或相互作用而直接或间接产生的任意产品。因此，本发明的药物组合物包括通过将式I所示的化合物(或药学上可接受的盐、水合物及/或溶剂合物)与药学上可接受的赋形剂混合而制备的任意组合物。

如本文中使用的，术语“治疗有效量”指能够在人类受试者中产生治疗效果的H3B-6545的量。治疗有效量是如下的量，所述量能够治疗、改善或预防被鉴别的疾病或症状，或者表现出可检测的治疗效果或抑制效果。效果可以通过本领域已知的任意测定方法来检测。针对受试者的精确有效量将取决于受试者的体重、体格(size)和健康；症状的性质和程度；以及选定用于施予的治疗剂。针对给定情况的治疗有效量可以通过在医生的技能和判断范畴内的常规实验来确定。

在优选的方面，待治疗的疾病或症状是癌症。在另一方面，待治疗的疾病或症状是细胞增殖性病症。H3B-6545的治疗有效量可以以剂型施予。治疗有效量的H3B-6545可以是药学上可接受的盐、溶剂合物、及/或水合物的形式。

如本文中使用的，“治疗效果”是任意种类的医学处理(medical treatment)的后果，其结果被判断为是期望的和有益的。无论所述结果是预料之内、预料之外、或者甚至是所述处理的非预期的后果，其都是正确的。期望的或有益的结果可以是抑制被改变的细胞信号传递通路，抑制细胞生长(优选癌细胞生长)，促进细胞死亡(优选癌细胞死亡)，或者使肿瘤萎缩，所有结果均未观察到严重的副作用。使肿瘤的生长减慢，优选使其消退，还优选引起癌症的完全消退是治疗效果的另一个例子。治疗效果还可以是医生或其他合格观察员所注意到的、客观上可识别的改善，例如，可以参照肿瘤的直径来测量患者中的肿瘤消退。肿瘤的直径减少表明消退。肿瘤在治疗终止后不再复发也表明消退。

严重的副作用可包括威胁生命的副作用(如肝衰竭、异常心率和某些类型的过敏反应)、导致持续的或严重的残疾或住院的副作用，或者引起出生缺陷的副作用。

如本文中使用的，“药学上可接受的盐”指H3B-6545的衍生物，其中母体化合物通过制造其酸式盐或碱式盐来进行修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基(如氨基)的无机酸盐或有机酸盐，酸性残基(如羧酸)的碱盐或有机盐，等等。药学上可接受的盐包括例如从无毒的无机酸或有机酸所形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。

如本文中使用的，“可定量的”意指能够被测量、计算或表示为数量或数值。可定量的血浆浓度是能够在施予后的人类受试者的血浆中检测和测量到的H3B-6545的浓度。可定量的AUC生物利用度是进入人类受试者的全身循环中的H3B-6545的分数，其能够由分析自人类受试者在设定时间段内采集的血浆试样中的H3B-6545的血浆浓度计算而得。可定量的半衰期是可检测的或可计算的时间，其中H3B-6545的血浆浓度是H3B-6545的最大可定量的血浆浓度的50％。定量上述PK参数所需的方法和材料是本领域普通技术人员普遍已知的。本申请中呈现了特定的定量方法。

如本文中使用的，术语“溶剂合物”意指含有化学当量或非化学当量的溶剂的溶剂加成形式。

如本文中使用的，术语“互变异构体”意指两个或多个结构异构体中的一个，所述结构异构体平衡地存在的且容易从一种异构体转换为另一种。

除非具体说明或者根据上下文显而易见，如本文中使用的，术语“或”应理解为包含性的。

本发明的一方面提供了具有治疗有效量的H3B-6545或其药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的载体或赋形剂的剂型，其能够向有需要的人类受试者施予，其中治疗有效量在施予后达到可定量的血浆浓度。在本发明的一个实施方式中，剂型是口服剂型。在本发明的另一个实施方式，剂型是固体剂型。在本发明的另一个实施方式，剂型是固体口服剂型。在又另一个实施方式中，固体口服剂型可以是速释型口服固体剂型。口服固体剂型可以是片剂或胶囊的形式。这些形式可具有多个相，包括例如内相和外相。

在一个实施方式中，剂型基本上不含水。在本文中，“基本上”不含水意指制剂在包装时的水含量小于制剂总重量的7％、小于制剂总重量的5％、小于制剂总重量的1％、或小于制剂总重量的0.5％。在一个实施方式中，水的量在制剂总重量的0.1至5％之间(例如，0.1～1％或0.1～0.5％)。在一个实施方式中，通过喷雾包被工艺制造的本发明制剂中的水的量小于0.5％。

至少一种药学上可接受的赋形剂可以是稀释剂或惰性载体、崩解剂、润滑剂、粘合剂，或其组合。药学上可接受的赋形剂还可包括填充剂、抗微生物剂、抗氧化剂、抗结块剂、包衣剂，或其混合物。

示例性的粘合剂可包括但不限于玉米淀粉、土豆淀粉、其他淀粉、明胶、天然胶和合成胶如阿拉伯树胶(acacia)、黄原胶、海藻酸钠、海藻酸、其他海藻酸盐、粉状黄蓍胶、瓜尔胶、纤维素及其衍生物(例如，乙基纤维素、纤维素乙酸酯、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠)、聚乙烯吡咯烷酮(例如，聚维酮、交联聚维酮、共聚维酮等)、甲基纤维素、美多秀(methocel)、预糊化淀粉(例如，STARCH

和STARCH 1500

由Colorcon,Ltd.出售)、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素(FMC Corporation,Marcus Hook,PA,USA)、Emdex、Plasdone，或其混合物；填充剂如滑石、碳酸钙(例如，颗粒或粉末)、二碱式磷酸钙、三碱式磷酸钙、硫酸钙(例如，颗粒或粉末)、微晶纤维素、粉状纤维素、葡萄糖结合剂(dextrates)、高岭土、甘露醇、硅酸、山梨醇、淀粉、预糊化淀粉、右旋糖(dextrose)、果糖、蜂蜜、乳糖无水合物、乳糖单水合物、乳糖和阿斯巴甜、乳糖和纤维素、乳糖和微晶纤维素、麦芽糖糊精、麦芽糖、甘露醇、微晶纤维素&amp(microcrystalline cellulose&amp)；瓜尔胶、糖蜜、蔗糖，或其混合物。

示例性的崩解剂可包括但不限于：瓜尔胶、海藻酸、碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠(croscarmellose sodium)、交联聚维酮、聚克立林钾(polacrilinpotassium)、淀粉乙醇酸钠(如Explotab)、土豆或木薯淀粉、其他淀粉、预糊化淀粉、粘土、其他海藻素(algins)、其他纤维素、胶(如明胶)、低取代的羟丙基纤维素、交联聚维酮(ployplasdone)，或其混合物。

示例性的润滑剂可包括但不限于：硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻矿物油、甘油、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其他醇类、山嵛酸甘油酯(compritol)、硬脂酸、月桂酸硫酸钠、硬脂富马酸钠(如Pruv)、植物脂肪酸润滑剂、滑石、氢化植物油(例如，花生油、棉籽油、向日葵油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂、syloid硅胶(AEROSIL 200,W.R.Grace Co.,Baltimore,MD USA)、合成二氧化硅的凝聚型气溶胶(Deaussa Co.,Piano,TX USA)、热原性二氧化硅(CAB-O-SIL,Cabot Co.,Boston,MA USA)，或其混合物。

示例性的包衣剂可包括但不限于：羧甲基纤维素钠、乙酸邻苯二甲酸纤维素、乙基纤维素、明胶、药用釉料(pharmaceutical glaze)、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素(羟丙甲纤维素)、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、聚乙二醇、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、紫胶、蔗糖、二氧化钛、棕榈蜡、微晶蜡、结冷胶、麦芽糖糊精、甲基丙烯酸、微晶纤维素和卡拉胶，或其混合物。

在一个实施方式中，剂型是固体口服剂型，所述剂型任选地用包衣系统(例如

fx薄膜包衣系统)处理，以包被有例如

蓝(OY-LS-20921)、

白(YS-2-7063)、

白(YS-1-7040)和黑墨水(S-1-8 106)。

在一个实施方式中，口服剂型被构造成具有内相的胶囊，所述内相包含治疗有效量的H3B-6545或其药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、微晶纤维素、羟丙基纤维素和胶态无水二氧化硅。胶囊还具有包含硬脂酸镁的外相。

在一个实施方式中，胶囊是羟丙甲纤维素。

在另一个实施方式中，胶囊是羟丙甲纤维素，且还包括氧化铁红和二氧化钛。

在另一个实施方式中，口服剂型是胶囊，其包含按胶囊的总重量计25％至30％治疗有效量的H3B-6545或药学上可接受的盐、10％至15％的乳糖单水合物、5％至10％的低取代的羟丙基纤维素、1％至5％的微晶纤维素、0.5％至5％的羟丙基纤维素、0.05％至0.5％的胶态无水二氧化硅、0.1％至1％的硬脂酸镁、40％至45％的羟丙甲纤维素、0.5％至2％的氧化铁红和0.5％至2％的二氧化钛。

药学上可接受的盐可包括所形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐，例如，来自无毒的无机酸或有机酸。例如，这类常规的无毒盐包括但不限于源自无机酸和有机酸的盐，所述无机酸和有机酸选自2-乙酰氧基苯甲酸、2-羟基乙磺酸、乙酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、碳酸氢酸(bicarbonic)、碳酸、柠檬酸、依地酸、乙烷二磺酸、1,2-乙烷磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、乙醇酰对氨苯基砷酸(glycollyarsanilic)、己基间苯二酸、海巴明(hydrabamic)、氢溴酸、盐酸、氢碘酸、羟基马来酸、羟基萘甲酸、羟基乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂基磺酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、萘磺酸、硝酸、草酸、帕莫酸(pamoic)、泛酸、苯乙酸、磷酸、聚半乳糖醛酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、亚乙酸、琥珀酸、氨基磺酸(sulfamic)、对氨基苯磺酸(sulfanilic)、硫酸、单宁酸、酒石酸、对甲苯磺酸(toluenesulfonic)，以及常见的氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、精氨酸等。

药学上可接受的盐的其他例子可包括己酸、环戊烷丙酸、丙酮酸、丙二酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基二环-[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸、3-苯丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、粘康酸等。本发明还涵盖当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子替代或者与有机碱配位时所形成的盐，所述金属离子例如碱金属离子、碱土离子、或铝离子，所述有机碱如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。在盐形式中，应理解化合物与盐的阳离子或阴离子的比例可以是1：1，或者除1:1以外的任意比例，例如3:1、2:1、1:2或1:3。

在另一个实施方式中，剂型还可以包括一种或多种活性化合物(例如，H3B-6545或其盐)与至少一种药学上可接受的赋形剂或载体的组合。

溶剂合物的实施例可包括以下情形，如果溶剂是水，则所形成的溶剂合物是水合物；如果溶剂是醇，则所形成的溶剂合物是醇化物。水合物是通过将一分子或多分子的水与一分子的物质结合而形成，其中水保持其作为H₂O的分子状态。半水合物是通过将一分子的水与多分子的物质结合而形成的，其中水保持其作为H₂O的分子状态

具有治疗有效量的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体或赋形剂的口服剂型可以在施予后的约0.5小时至约12小时、约0.5小时至约5小时、约0.5小时至约3小时、约1小时至约5小时或约1小时至约3小时，达到可定量的血浆浓度，其中所述口服剂型能够向有需要的人类受试者施予。

可存在于口服剂型中的H3B-6545或其药学上可接受的盐的治疗有效量在约50mg至约1000mg、约100mg至约800mg、约100mg至约600mg、约200mg至约600mg或约400mg至约600mg的范围内。

在一优选的实施方式中，可存在于口服剂量中的H3B-6545或其药学上可接受的盐的治疗有效量为450mg。在本发明的一个实施方式中，上述剂量是每日剂量。

具有治疗有效量的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体或赋形剂的口服剂型可以在施予后达到约170ng/mL至约2000ng/mL、约200ng/mL至约1500ng/mL、约500ng/mL至约2000ng/mL、约500ng/mL至约1500ng mL、约1000ng/mL至约2000ng/mL或约1000ng/mL至约1500ng/mL的最大可定量的血浆浓度，其中所述口服剂型能够向有需要的人类受试者施予。

具有治疗有效量的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体或赋形剂的口服剂型可以在施予后达到约5小时至约24小时、约8小时至约24小时、约8小时至约15小时、约10小时至约15小时或约15小时至约24小时的半衰期，其中所述口服剂型能够向有需要的人类受试者施予。

具有治疗有效量的H3B-6545,或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体或赋形剂的口服剂型可以在施予后达到约2,000ng*hr/mL至约20,000ng*hr/mL、约5,000ng*hr/mL至约20,000ng*hr/mL、约10,000ng*hr/mL至约20,000ng*hr/mL、约15,000ng*hr/mL至约20,000ng*hr/mL、约5,000ng*hr/mL至约15,000ng*hr/mL或者约10,000ng*hr/mL至约15,000ng*hr/mL的可定量的AUC生物利用度，其中所述口服剂型能够向有需要的人类受试者施予。

在20天周期、21天周期、22天周期、23天周期、24天周期、25天周期、26天周期、27天周期、28天周期的期间内或者直到在有需要的受试者中出现治疗效果为止，具有治疗有效量的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体或赋形剂的口服剂型可以以单次剂量每日1次口服施予，其中所述口服剂型能够向有需要的人类受试者施予。剂型也可以在20天以下的循环中施予。

A、包含约100mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂的口服剂型。

在一些实施方式中，口服剂型包含约100mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，在向需要治疗的受试者施予约150ng/mL至约2100ng/mL之后，剂量达到最大可定量的血浆浓度Cmax(按ng/mL计)。在其他实施方式中，在向需要治疗的受试者施予约250ng/mL至约1700ng/mL之后，剂量达到最大可定量的血浆浓度。在其他实施方式中，在向需要治疗的受试者施予约1200ng/mL至约1500ng/mL之后，剂量达到最大可定量的血浆浓度。在这些实施方式中，在约1小时至约25小时；约2小时至约12小时；约2小时至约5小时；或约4小时的时间内达到所述Cmax。

在一个实施方式中，口服剂型包含约100至600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，口服剂型能达到每mg的H3B-6545约1.8ng/mL至约4.0ng/mL的Cmax范围。在另一实施方式中，口服剂型能达到每mg的H3B-6545约1.8ng/mL至约3.4ng/mL的Cmax范围。在另外其他的实施方式中，口服剂型能达到每mg的H3B-6545约3.0ng/mL至约4.0ng/mL的Cmax范围。

在一些实施方式中，口服剂型包含约100mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在一些上述实施方式中，剂型在向有需要的人类受试者施予后实现约8.0小时至约22.0小时的半衰期；或约10.0小时至约13.0小时的半衰期。

在一个实施方式中，口服剂型包含约100mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到从约1,600ng*hr/mL至约23,000ng*hr/mL；约2,500ng*hr/mL至约18,500ng*hr/mL；约4,000ng*hr/mL至约20,000ng*hr/mL；或者约9,000ng*hr/mL至约17,000ng*hr/mL的可定量的AUC生物利用度(从0～24小时)。

在一个实施方式中，口服剂型包含从约100mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到约17ng*hr/mL/mg至约40ng*hr/mL/mg；约17ng*hr/mL/mg至约37ng*hr/mL/mg，或者约26ng*hr/mL/mg至约40ng*hr/mL/mg的可定量的AUC生物利用度(0～24小时)，其中可定量的AUC生物利用度(0～24小时)是基于“每毫克H3B-6545”所测得的。

在一个实施方式中，口服剂型包含约100mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂型在向有需要的人类受试者施予后可达到从约2,000ng*hr/mL至约40,000ng*hr/mL；约5,000ng*hr/mL至约25,000ng*hr/mL，或者约20,000ng*hr/mL至约23,000ng*hr/mL的可定量的AUC生物利用度(0～无限小时)。

在一个实施方式中，口服剂型包含从约100mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到约21ng*hr/mL/mg至约66ng*hr/mL/mg；约21ng*hr/mL/mg至约55ng*hr/mL/mg、或者约30ng*hr/mL/mg至约66ng*hr/mL/mg的可定量的AUC生物利用度(0～无穷)，其中AUC生物利用度(0～无穷)是基于“每毫克H3B-6545”所测得的。

B、包含约300mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂的口服剂型。

在一些实施方式中，口服剂型包含约300mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向需要治疗的受试者施予后达到约900ng/mL至约2100ng/mL的最大可定量的血浆浓度Cmax(以ng/mL计)。在其他实施方式中，剂量在向需要治疗的受试者施予后达到约1100ng/mL至约1900ng/mL的最大可定量的血浆浓度。在其他实施方式中，剂量在向需要治疗的受试者施予后达到约1200ng/mL至约1700ng/mL的最大可定量的血浆浓度。在这些实施方式中，可以在约1小时至约25小时；约2小时至约10小时；约2小时至约5小时；或者约4小时内的时间达到所述Cmax。

在一个实施方式中，口服剂型包含从约300至600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，口服剂型能达到每mg的H3B-6545约3.0ng/mL至约4.0ng/mL的Cmax范围。在另一实施方式中，口服剂型能达到每mg的H3B-6545约3.0ng/mL至约3.4ng/mL的Cmax范围。

在一些实施方式中，口服剂型包含从约300mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在一些上述实施方式中，剂型在向有需要的人类受试者施予后实现约9.5小时至约14.5小时的半衰期；或者约10.0小时至约11.0小时的半衰期。

在一个实施方式中，口服剂型包含从约300mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到约9,000ng*hr/mL至约23,000ng*hr/mL或约12,000ng*hr/mL至约19,000ng*hr/mL的可定量的AUC生物利用度(0～24小时)。

在一个实施方式中，口服剂型包含从约300mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到约30ng*hr/mL/mg至约40ng*hr/mL/mg或者约30ng*hr/mL/mg至约37ng*hr/mL/mg的可定量的AUC生物利用度(0～24小时)，其中可定量的AUC生物利用度(0～24小时)是基于“每毫克H3B-6545”所测得的。

在一个实施方式中，口服剂型包含从约300mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后，可达到约11,000ng*hr/mL至约40,000ng*hr/mL；约11,000ng*hr/mL至约33,000ng*hr/mL，或约12,000ng*hr/mL至约40,000ng*hr/mL的可定量的AUC生物利用度(0～无穷)。

在一个实施方式中，口服剂型包含从约300mg至约600mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这样的实施方式中，如基于“每毫克H3B-6545”所测得的，剂量在向有需要的人类受试者施予后，可达到约37ng*hr/mL/mg至约66ng*hr/mL/mg；约37ng*hr/mL/mg至约54ng*hr/mL/mg，或约38ng*hr/mL/mg至约66ng*hr/mL/mg的可定量的AUC生物利用度(0～无穷)。

C、包含约450mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂的口服剂型。

在一些实施方式中，口服剂型包含约450mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向需要治疗的受试者施予后达到从约1,000ng/mL至约1,600ng/mL的最大可定量的血浆浓度Cmax(以ng/mL计)。在其他实施方式中，剂量在向需要治疗的受试者施予后达到从约1,100ng/mL至约1,500ng/mL的最大可定量的血浆浓度。在其他实施方式中，剂量在向需要治疗的受试者施予后达到从约1,200ng/mL至约1,400ng/mL的最大可定量的血浆浓度。在这些实施方式中，在约3小时至约6小时或者在约4小时至约6小时之内的时间达到所述Cmax。

在一个实施方式中，口服剂型包含约450mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，口服剂型能达到每mg的H3B-6545约2.4ng/mL至约3.5ng/mL的Cmax范围。在另一实施方式中，口服剂型能达到每mg的H3B-6545约3.0ng/mL至约3.5ng/mL的Cmax范围。在另外其他的实施方式中，口服剂型能达到每mg的H3B-6545约3.3ng/mL至约3.5ng/mL的Cmax范围。

在一些实施方式中，口服剂型包含约450mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在一些上述实施方式中，剂型在向有需要的人类受试者施予后，实现约8.0小时至约11.0小时的半衰期；或者约9.0小时至约10.0小时的半衰期。

在一个实施方式中，口服剂型包含约450mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到从约12,000ng*hr/mL至约20,000ng*hr/mL；约14,000ng*hr/mL至约16,000ng*hr/mL，或约12,000ng*hr/mL至约17,000ng*hr/mL的可定量的AUC生物利用度(0～24小时)。

在一个实施方式中，口服剂型包含约450mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这样的实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到约27ng*hr/mL/mg至约43ng*hr/mL/mg；约30ng*hr/mL/mg至约40ng*hr/mL/mg，或约30ng*hr/mL/mg至约35ng*hr/mL/mg的可定量的AUC生物利用度(0～24小时)，其中可定量的AUC生物利用度(0～24小时)是基于“每毫克H3B-6545”所测得的。

在一个实施方式中，口服剂型包含约450mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这样的实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到约16,000ng*hr/mL至约26,000ng*hr/mL；约16,000ng*hr/mL至约23,000ng*hr/mL，或约16,000ng*hr/mL至约18,000ng*hr/mL的可定量的AUC生物利用度(0～无穷小时)。

在一个实施方式中，口服剂型包含约450mg的H3B-6545或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在这类实施方式中，剂量在向有需要的人类受试者施予后可达到约36ng*hr/mL/mg至约57ng*hr/mL/mg；约38ng*hr/mL/mg至约52ng*hr/mL/mg，或约35ng*hr/mL/mg至约40ng*hr/mL/mg的可定量的AUC生物利用度(0～无穷)，其中可定量的AUC生物利用度(0～无穷)是基于“每毫克H3B-6545”所测得的。

实施方式还可涉及用于治疗乳腺癌的方法(即，ERα-阳性及/或HER2阴性的癌症)，其中所述方法包括向有需要的人类受试者施予本文所描述的任意口服剂型，以获得所描述的PK结果。

在涉及治疗方法的所有实施方式中，有需要的人类受试者可以处于进食或禁食状态。

非临床发现支持ERαWT的剂量依赖性抑制和ERαmut-依赖性转录和后续的细胞增殖减少。考虑H3B-6545在患有ER+、HER2-阴性乳腺癌(BC)的女性中的安全性、药代动力学(PK)和药物效力学(PD)从而鉴别所推荐的2期剂量(RP2D)。

组成性地活化突变的ESR1基因可见于～30％的MBC肿瘤中，其位于配体结合域中，能产生对雌激素剥夺疗法(例如，芳香化酶抑制)的抗性并促进抗ER疗法。Li S.,等人，CellReports,2013；4:1116-1130；Robinson DR,Wu YM,Vats P,等人，Nature genetics,2013；45:1446-1451；Toy W,Shen Y,Won H,等人，Nature genetics.2013；45:1439-1445。

H3B-6545是可口服用的选择性ER共价拮抗剂，其通过不可逆地接合(irreversibly engaging with)其他核激素受体中非保守的独特半胱氨酸，来同时抑制雌激素受体α(ERα)突变型(MUT)和野生型(WT)活性。H3B-6545有效地阻遏ERα功能而不降解受体。

实施方式提供了用H3B-6545或其药学上可接受的盐治疗患者的方法，包括鉴别在患者的血液中是否观察到一个或多个突变体等位基因频率的降低，选择观察到所述降低的患者，向所选择的患者施予治疗有效量的H3B-6545或其药学上可接受的盐。突变体等位基因频率是在群体中的特定基因座上的突变体等位基因(基因的变体)的相对频率，其被表示为分数或者百分比。

申请人报道了H3B-6545(一种首创型(first-in class)高选择性ERα共价拮抗剂(SERCA))在患有ER-阳性、HER2-阴性乳腺癌(HR+BC)的女性中的1期剂量升高。

实施例

实施例1：胶囊制剂

实施例1报道了具有各种量的H3B-6545药物物质的胶囊制剂。在后续实施例中使用的胶囊也是使用该方法制备的。根据下表配制25mg、50mg和150mg强度胶囊：

表1：H3B-6545胶囊的组分和组成

NF＝美国国家药品集(US)，Ph.Eur.＝欧洲药典，JP＝日本药典

a：按各效力调节因子调节H3B-6545药物物质的量，其是游离形式的测定值的衍生值。

b：根据H3B-6545药物物质的量调节乳糖单水合物的混配量，从而维持粉末恒重。

c：表2和3中提供了羟丙甲纤维素胶囊的组分和组合物。

d：适用JP16官方专著“胶囊”或JP17官方专著“羟丙甲纤维素胶囊”。

表2：H3B-6545 25和150mg胶囊的羟丙甲纤维素胶囊壳的组分和组成

JPE＝日本药用赋形剂(Japanese Pharmaceutical Excipients)，NF＝美国国家药品集(US)，JP＝日本药典，

USP＝美国药典，EC条例＝欧洲委员会条例，Ph.Eur.＝欧洲药典，q.s.＝足量。E172是氧化铁和氢氧化物的欧洲标准。

表3：H3B-6545 50mg胶囊的羟丙甲纤维素胶囊壳的组分和组成

JPE＝日本药用赋形剂，NF＝美国国家药品集(US)，JP＝日本药典，

USP＝美国药典，EC条例＝欧洲委员会条例，Ph.Eur.＝欧洲药典，q.s.＝足量。E172是氧化铁和氢氧化物的欧洲标准。

简而言之，胶囊是通过在高剪切混合器中形成H3B-6545药物物质、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、微晶纤维素、羟丙基纤维素和二氧化硅，无水胶体的初始混合物而制备的。然后，使用高剪切混合器将硬脂酸镁与初始混合物混合。然后，使用辊式碾压机(roller compactor)将得到的混合物压缩成带状物(ribbons)，穿过筛网(分选)，并使用转鼓混合器与硬脂酸镁混合。使用封装器将最终的掺合物填充到羟丙甲纤维素胶囊中。

实施例2：片剂制剂

实施例2报道了包括H3B-6545药物物质的片剂的制剂。使用该方法制备在后续实例中讨论的片剂。根据下列制剂制备含有150mg的H3B-6545药物物质作为游离碱的H3B-6545薄膜包被的片剂：

表4：H3B-6545片剂的组成

JP＝日本药典，NC＝非药典(Non-compendial)，NF＝美国国家药品集(US)，Ph.Eur.＝欧洲药典，q.s.＝足量，USP＝美国药典。

a：按效力调节因子调节H3B-6545药物物质的量，其是游离形式的测定值的衍生。

b：根据H3B-6545药物物质的量调节乳糖单水合物的混配量，从而维持片剂恒重

c：在干燥工艺中去除。

d：按研磨颗粒的产量成比例地调节。

e：OPADRY 03H420000YELLOW的组分和组成如表中所述。

f：在包被工艺中去除。

表5：

03H420000YELLOW的组分

组分	说明
		羟丙甲纤维素	USP,Ph.Eur.,JP
滑石	USP,Ph.Eur.,JP
		二氧化钛	USP,Ph.Eur.,JP
丙二醇	USP,Ph.Eur.,JP
		氧化铁(黄)	NF,JPE,EC条例

EC条例＝欧洲委员会条例，JP＝日本药典，JPE＝日本药用赋形剂，NF＝美国国家药品集(US)，Ph.Eur.＝欧洲药典，USP＝美国药典。

按以下方式形成片剂：

将乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素和胶态二氧化硅装入湿式高剪切造粒机并混合形成第一混合物。然后，将H3B-6545药物物质和第一混合物装入对流式混合器，并混合以形成第二混合物。

将第二混合物连续地进料至湿式高剪切造粒机中，用泵倒入纯水造粒以形成湿颗粒。在升高的温度下使用流式床干燥器将湿颗粒连续地干燥，直至干燥颗粒的干燥损失达到不超过1.5％。

然后，使用筛分磨研磨干燥颗粒。然后，将研磨的颗粒、微晶纤维素和硬脂酸镁装入对流式混合器中，混合以形成混合颗粒，其中混合颗粒被被压制成片芯片剂。然后，使用锅式包衣机将包衣悬浮液(通过将包衣剂悬浮于纯水中制得)喷雾在片芯片剂上。

在计划的时间点从各患者收集血液试样并离心。然后，将各试样的血浆部分转移至K2EDTA管后，将其运至生物分析实验室，从而使用LC-MS/MS进行浓度测量。然后，使用

WinNonlin软件分析浓度数据以获得PK参数。使用分析软件进一步总结所获得的PK参数。

在给药前和在给药后的各个小时时间点从人类患者收集血液试样(各约5mL)。使用验证过的高性能液相色谱/串联质谱(LC-MS/MS)方法，确定H3B-6545的血浆浓度。定量的下限为0.100ng/mL。

PK分析集包括如下受试者，所述受试者接受胶囊或片剂中的H3B-6545药品，并具有足够的有价值的血浆浓度数据来衍生各治疗中的至少1个主要PK参数。将H3B-6545(作为游离碱)的血浆浓度制成表格，并在恰当时使用描述统计学(受试者数量、标准差[SD]的算术平均数、变异系数[CV％]、几何平均数、中位数、最小值和最大值)在各标定时间进行总结。针对各个治疗提供个体和平均的(±SD)血浆浓度-时间曲线。

使用非房室法计算H3B-6545的药代动力学参数，使用对于血浆数据和血管外施予而言恰当的模型。PK参数包括但不限于末次可定量的浓度(AUC_0-t)的时间之前的曲线下面积、最大浓度(C_max)，和产生最大浓度时的时间(t_max)。如果数据允许，还衍生出外推至无穷大的血浆浓度-时间曲线下面积(AUC_0-inf)、终末消除半衰期(t_1/2)、表观总体清除率(CL/F)、在稳态下口服施予后的总全身清除率(CLss/F)、终末期期间的表观分布体积(Vz/F)、表观稳态分布体积(Vss)、C_max的累积比(RC_max)和AUC_0-24的累积比(RAUC)。

实施例3：在禁食患者中胶囊的药代动力学(PK)第一中期分析(First Interim Analysis)

实施例3报道了单次试验的临床和基因组学分析。实施例3的研究群体如下：

女性≥18岁，且患有局部晚期或转移性ER+HER2-BC。

在至少一次激素疗法和至少一次其他疗法/治疗方案后的进展；无最大数量的先前治疗路线。

0或1的ECOG性能状态。

合格的骨髓和器官功能。

排除患有骨专有性疾病或炎性BC。

使用方法分析H3B-6545是否通过靶向半胱氨酸530和强化独特的拮抗剂构象来同时失活野生型和突变型ERα。方法：在经过至少一次激素疗法和至少一次其他疗法/治疗方案后的进展之后，用H3B-6545药品治疗(tx)患有局部晚期或转移性HR+BC的女性，所述药品在28天周期内通过胶囊每日1次口服施予。剂量升高使用选择回填之前清除的剂量的3+3设计，并允许患者内剂量升高。该实施例探索了H3B-6545在患有HR+BC的女性中的安全性、药代动力学和药物效力学，以鉴别用于测试的所推荐的后续剂量。

结果：至2018年12月10日，32名患者已进行过H3B-6545药品治疗，剂量为100至450mg/天；97％具有用CDK4/6抑制剂的先前治疗，56％已接受过≥3次先前的抗癌疗法路线。未观察到剂量-限制性毒性，仅观察到1例3级治疗相关不良事件(TRAE)(淋巴细胞计数减少)。

最常见的(≥10％)TRAE包括无症状型窦性心律过缓、腹泻、恶心、疲劳、贫血、食欲下降和潮热。H3B-6545以2-4小时的t_max被快速吸收。血浆浓度随着剂量从100至450mg而增加，与C1D1和C1D15相似。与H3B-6545的作用机制和临床前期数据一致，在所有的治疗后剂量水平，H3B-6545均抑制ER靶向基因表达并在Ki67水平中显示出50％减少。在基线处检测到血浆中的ESR1(60％)和PIK3CA(34％)突变，突变体等位基因频率的改变表现出响应治疗的相关性。在15名患者(47％)中观察到病情稳定，且34％的患者完成了至少6个月的治疗。在3名患者中观察到部分响应(PR)：1名患者(突变型)接受过2次先前的治疗路线，2名患者(1个突变型和1个野生型)接受过>5次先前的治疗路线，包括氟维司群和卡培他滨；所有3名患者均接受过先前的CDK4/6抑制剂。

H3B-6545药品在高达450mg剂量水平是被良好耐受的，在CDK4/6后背景中具有单一药剂抗肿瘤活性的早期迹象。在患有晚期HER2-阴性乳腺癌的患者中剂量升高持续。

药物施予和剂量：

在28天周期内每日1次口服施予H3B-6545。

使用标准的3+3研究设计，使用100、200、300、450和600mg QD的剂量队列进行剂量升高。

允许患者回填之前清除的剂量。

完成周期3后允许患者内剂量升高。

结果(至2019年4月20日)

患者群体：

用剂量为100至600mg QD的H3B-6545治疗46名患者。

42名(91.3％)患者接受过先前的CDK4/6抑制剂，32名(69.6％)接受过先前的氟维司群。

30名(65.2％)患者在晚期/转移性背景中接受过≥3次先前的抗癌疗法路线。

表6中显示了人口统计学特征和基线特征。

表6

^a年龄是知情同意书时的年龄。

^b如果受试者在同一类型中具有多个位点，则受试者在该类型中仅计数一次。

安全性：

在600mg QD队列中发生了两个剂量-限制性毒性(DLT)，3级疲劳和3级麻疹样皮疹。

最常见的(≥10％)治疗相关性不良事件(TRAE)包括窦性心律过缓、恶心、疲劳、贫血、腹泻和天冬氨酸转氨酶(表2)。

观察到6例3级TRAE：在450mg晕厥和心电图QT延长；在600mg发生贫血、天冬氨酸转氨酶增加、疲劳和麻疹样皮疹。

没有TRAE≥4级。

最常见的TRAE(窦性心律过缓)未呈现出剂量-或浓度-依赖性且不需要剂量降低、中断或不连续。

TRAE总结于表7中。

表7：治疗相关性不良事件≥10％

药代动力学：

t_max为2至4h

血浆浓度随剂量(100至600mg)增加(图1)。

血浆浓度在C1D1和C1D15之间是相似的。

药物效力学：

在基线血浆中检测到ESR1(55％)和PIK3CA(39％)突变。

突变体等位基因频率的改变显示与临床响应的相关性。

患者案例研究：

1名50岁女性患者，于2006年首次诊断患有ER+HER2-乳腺癌，具有转移背景中的先前治疗，包括来曲唑/帕博西尼、恩替诺特/依西美坦、卡培他滨、艾日布林和卡铂/吉西他滨。在基线肿瘤和血浆中检测到ESR1 Y537S和PI3KCA E545K突变。在招募时，ECOG性能状态为1；疾病位置包括肝、骨、胸腔积液、盆腔腹水和皮下结节。于2018年6月以450mg QD的剂量开始H3B-6545。

所有靶病灶的直径总和从基线至C3D1和C7D1的减少分别为-27.8％和-35.6％。4个周期后，患者实现了部分响应并保持C11治疗。

初步活性：

在17名(37.0％)患者中观察到病情稳定

14名(30.4％)患者完成了至少6个月的治疗

在3名(6.5％)患者中观察到经过确认的部分响应

图2中显示了关于初步活性的进一步的信息。图3显示了靶病灶的直径总和的百分比改变。

表8显示了肿瘤响应和无进展存活。

表8

总结

安全性/耐受性：大部分TRAE是1级或2级且可控；耐受高达并包括450mg QD。

药物效力学：突变体等位基因频率的改变显示出与临床响应的相关性。

初步活性：在重度预治疗的CDK4/6i后的背景中观察到了抗肿瘤活性的鼓励信号，包括3例经确认的部分响应和mPFS＝7.2个月。

2期：在确定RP2D后启动。

实施例4：第二中期分析

继续实施例3的临床试验，在以后基于更大的患者群体进行(本实施例4的)PK评估。表1的胶囊在禁食患者的药代动力学(PK)分析以及表2中的总结显示了接受实施例1中制备的H3B-6545药物产品的胶囊的人类患者的PK参数和曲线。如表中所确定的，患者接受了总等效剂量为100mg、200mg、300mg、450mg或600mg的式I。表1反映了在第一周期的第一天测得的患者的PK值。表2反映了在第一周期的第15天测得的患者的PK值。

在向有需要的人类受试者施予后，计算PK参数，其中人类受试者处于禁食条件中。QD意指剂量“每日一次(quaque die)”地施予，或者每天仅施予一次。参数n是被施予相应剂量的、有需要的人类受试者的数量。

表9和11包括除T_max和T_lag外的、与各剂量相关的所有血浆PK参数的几何平均数和几何平均数变异系数，所述PK参数是从有需要的人类受试者(n)计算而得的。T_max和T_lag值包括除了最小和最大值外，在有需要的人类受试者中计算而得的中位数值。表10和12将表9和表11中示出的AUC0-t、AUC0-24、AUC0-inf和Cmax PK参数相对于每1mg活性药物成分(API)的血浆PK参数归一化。

表9

表10：

表11

表12

实施例5：450mg胶囊在禁食和进食患者中的药代动力学(PK)

表3细化了接受实施例1中制备的胶囊的人类患者的PK参数和曲线。如表13中确认的，患者接受了总等效剂量为450mg的式I。表14将表13中所示的AUC0-t、AUC0-24、AUC0-inf和Cmax PK参数相对于每1mg的活性药物成分(API)的血浆PK参数进行归一化。

表13

表14

实施例6：片剂在人中的药代动力学(PK)

在健康的人类受试者中测试实施例1中所描述的胶囊和实施例2中所描述的片剂。所有剂量均耐受良好。已注意到胶囊和片剂之间H3B-6545的相似的暴露(Cmax和AUC)和Tmax，如表15所示。

表15

表16中显示了胶囊与H3B-6545的片剂制剂的相对生物利用度。

表16

Geo.LSM：几何最小二乘平均。

CI：置信区间；*栏显示下边界和上边界。

CV：变异系数

实施例7——基因组学研究

由于缺少对内分泌抗性转移性乳腺癌(MBC)的有效治疗，申请人研发了H3B-6545，其为一种新型选择性ERa共价拮抗剂，能够不可逆地使野生型和突变型Era均失活。

本研究的目的是1)表征重度预治疗MBC中的热点突变谱线，并将血浆与肿瘤组织中的ESR1、PIK3CA和AKT1突变相关联；2)确定ESR1或PIK3CA中的突变是否预测对H3B-6545的响应；3)评估ctDNA的纵向追踪(longitudinal tracking)是否与对H3B-6545的响应相关联。

方法

在基线(给药前)、周期1第15天(C1D15)、C2D1、C3D1和之后每8周收集新鲜的血浆试样，在疾病进展时进行末次试样收集。在基线，使用BEAMing数字PCR以评估ESR1、PIK3CA和AKT1中的热点突变。随后通过ddPCR监控患者特异性ctDNA突变。将基线肿瘤活检进行靶向下一代测序(NGS)组以鉴别热点突变。

结果

在77％的患者(30/39)中，通过BEAMing测定在基线检测到突变，其中21/39、16/39和3/39分别在ESR1、PIK3CA和AKT1中具有突变。20％(9/39)的患者在ESR1和PIK3CA中呈现共突变。在60％的(9/15)的患者中，在肿瘤活检中还检测到通过血浆BEAMing测定鉴别的DNA突变；在86％(12/14)的病例中，还在血浆中检测到发现于组织中的DNA突变。梯度ctDNA监控揭示了以下内容，在具有经确认的部分响应的患者中(3/3)，通过C2D1检测不到ctDNA水平。相反，在3/4的具有病情进展的患者中，ctDNA水平从基线增加。展示了对ctDNA比(第15天/基线和第30天/基线)的探索以及PIK3CA和ESR1突变与对H3B-6545响应的相关性。

对实施例7的总结

ctDNA是用于评估MBC中的ESR1、PIK3CA和AKT1突变的可靠试样类型，其克服了在转移性背景中获得活检的挑战。此外，ctDNA动力学表现为提供监控H3B-6545的效力的有用工具。

药物施予和剂量：

在28天周期内每日1次口服施予H3B-6545(PO QD)

使用标准的3+3研究设计，使用100、200、300、450和600mg/天的剂量队列进行剂量升高。

液体活检测定：在该位置收集10ml的Strek血浆，然后在Sysmex Inostics中加工成血浆。从用于BEAMing的2ml血浆中以及用于Biorad ddPCR的3ml血浆中分离cfDNA。

肿瘤下一代测序(NGS)分析：使用Recoverall试剂盒，从10x 5μm载玻片分离DNA，然后使用10ng的DNA作为输入用于Oncomine Comprehensive检测。

表17显示了研究基线特征。

表17

图4示出了液体活检和组织活检试样集合的概况。

图5A～图5E示出了该实施例中的患者的基线基因组学谱线。AA＝氨基酸。*在3/49名患者中观察到AKT1突变(数据未显示)。

图5A至5E示出了BEAMing测定。A：患者的基线ESR1和PIK3CA突变状态；B和C：ESR1和PIK3CA突变的单株性；D和E：PIK3CA和ESR1突变的氨基酸分布。

图5F示出了由Oncomine Comprehensive Panel确定的、在基线组织活检中发现的突变的oncoprint图。

图6A和图6B示出了在实施例2中的组织和液体活检中发现的突变的一致性。图6A示出了组织和液体活检突变的等位基因频率分布和一致性。图6B是组织和液体活检突变一致性的总结表。

图7A～7C示出了与H3B-6545的整体最佳响应相关的ctDNA动力学。AF＝等位基因频率，C＝周期，D＝天，PD＝病情进展，PR＝部分响应，SD＝病情稳定。虚线表示ddPCR测定LOD。图7A：分别着色的各患者的AF基线/C2D1的比例。一个患者可具有多个突变。图7B和图7C：在具有病情进展(B)与部分响应(C)的患者中的ctDNA动力学示例。

患者案例研究——这是与实施例3中报道的相同的患者案例研究。

1名50岁女性，于2006年首次诊断患有ER+HER2-BC。

转移背景中的先前治疗，包括来曲唑/帕博西尼、恩替诺特/依西美坦、卡培他滨、艾日布林、和卡铂/吉西他滨。

在招募时，ECOG性能状态为1；疾病位置包括肝、骨、胸腔积液、盆腔腹水和皮下结节。

在基线肿瘤和血浆中检测到ESR1 Y537S和PI3KCA E545K突变。

于2018年6月开始H3B-6545，剂量为450mg PO QD。

所有靶病灶的直径总和从基线至C3D1和C7D1的减少分别为-27.8％和-35.6％。

4个周期后，患者实现了部分响应并保持在C11治疗。

结论

在晚期路线的ER+MBC中，在39％和55％的基线血浆中分别检测到PIK3CA和ESR1突变。

组织与血浆突变水平的一致性为80％。

液体活检与组织突变水平的一致性为51％。

在具有经确认的部分响应的患者中，通过C2D1未检测到ctDNA水平。

ctDNA动力学呈现出其是用于监控H3B-6545的效力和基线基因组学谱线的表征的有用工具。

本文中引用的所有的出版物和专利文件均通过引用而合并入本文，就如同这些出版物或文件被具体且分别地指出通过引用而合并入本文。对出版物和专利文件的引用并非旨在承认任一者是相关的现有技术，也不构成任何对所述出版物和专利文件的内容或日期的承认。本发明通过书面描述的方式进行描述，本领域技术人员可认识到，本发明可以以各种实施方式来实施，上述描述和实例是出于说明的目的，而并非所附权利要求的限制。

在不脱离本发明的精神和基本特征的情形下，本发明可以以其他的具体形式来实施。因此，上述实施方式在所有方面都被认为是说明性的，而非对本文所描述的发明的限制。因而本发明的范围是通过所附权利要求而非上述描述来表明的，所有落入与权利要求等同的含义和范围内的改变均旨在被涵盖于其中。

Claims (70)

1.口服剂型，其包含：

i)式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；且

其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，所述口服剂型被配制为实现约1ng/mL至约4ng/mL的平均C_max，其中所述平均C_max是针对所述剂量中的每mg式I而测得的。

2.如权利要求1所述的口服剂型，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max为约2ng/mL至约4ng/mL。

3.如权利要求2所述的口服剂型，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max为约3ng/mL至约4ng/mL。

4.如权利要求1所述的口服剂型，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max在以下范围内：

3ng/mL的80%至125%至

3.5ng/mL的80%至125%。

5.如权利要求1～4中任一项所述的口服剂型，其中，剂型被配制为在约2小时至约7小时内实现所述平均C_max的平均t_max。

6.如权利要求5所述的口服剂型，其中，剂型被配制为在约3小时至约7小时内实现所述平均C_max的平均t_max。

7.如权利要求6所述的口服剂型，其中，剂型被配制为在约3.5小时至约4.5小时内实现所述平均C_max的平均t_max。

8.如权利要求6所述的口服剂型，其中，剂型被配制为在约5.5小时至约6.5小时内实现所述平均C_max的平均t_max。

9.如权利要求1～6中任一项所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。

10.如权利要求1～6中任一项所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约450mg的式I。

11.口服剂型，其包含：

i)式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氧基]丁-2-烯酰胺；和

其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型被配制为实现约16h*ng/mL至约44h*ng/mL的平均AUC_0-24。

12.如权利要求11所述的口服剂型，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-24为约27h*ng/mL至约44h*ng/mL。

13.如权利要求11所述的口服剂型，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-24在以下范围内：

30h*ng/mL的80%至125%至

44h*ng/mL的80%至125%。

14.如权利要求11所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。

15.如权利要求11所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约450mg的式I。

16.口服剂型，其包含：

i)式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；且

其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，所述口服剂型被配制为实现约8小时至约22小时的所述剂量的式I的平均t_1/2。

17.如权利要求16所述的口服剂型，其中，所述平均t_1/2为约8小时至约12小时。

18.如权利要求17所述的口服剂型，其中，所述平均t_1/2为约9小时至约11小时。

19.如权利要求16所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。

20.如权利要求16所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约450mg的式I。

21.口服剂型，其包含：

i)式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氧基]丁-2-烯酰胺；且

其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型被配制为实现约21h*ng/mL至约67h*ng/mL的平均AUC_0-inf。

22.如权利要求21所述的口服剂型，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-inf为约29h*ng/mL至约67h*ng/mL。

23.如权利要求21所述的口服剂型，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-inf在以下范围内：

36h*ng/mL的80%至125%至

57h*ng/mL的80%至125%。

24.如权利要求21所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。

25.如权利要求21所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约450mg的式I。

26.口服剂型，其包含：

i)式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；且

其中，当每日1次向人类受试者口服施予时，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型被配制为实现约16h*ng/mL至约41h*ng/mL的平均AUC_0-t。

27.如权利要求26所述的口服剂型，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-t在以下范围内：

27h*ng/mL的80%至125%至

36h*ng/mL的80%至125%。

28.如权利要求26所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。

29.如权利要求26所述的口服剂型，其中，所述剂型包含总当量为约450mg的式I。

30.如权利要求1、11、16、21和26中任一项所述的口服剂型，其中，所述口服剂型是胶囊，其包含：

i)内相，其包含式I或药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、微晶纤维素、羟丙基纤维素、胶态无水二氧化硅和硬脂酸镁；和

ii)外相，其包含硬脂酸镁。

31.如权利要求30所述的口服剂型，其中，所述胶囊是羟丙甲纤维素胶囊。

32.如权利要求31所述的口服剂型，其包含式I的单HCl盐型。

33.如权利要求1、11、16、21和26中任一项所述的口服剂型，其中，所述口服剂型是片剂，其包含：

i)内相，其包含式I或药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶态二氧化硅和纯水；

ii)外相，其包含微晶纤维素和硬脂酸镁；以及

iii)薄膜包衣，其包含羟丙甲纤维素、滑石、二氧化钛、丙二醇、氧化铁和纯水。

34.如权利要求33所述的口服剂型，其包含式I的单HCl盐型。

35.在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予口服剂型，所述口服剂型包含

i)治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N,N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；

其中，所述治疗有效量是在约100mg至600mg的范围内的单次日剂量，且

其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型在所述受试者的血浆中具有约1ng/mL至约4ng/mL的平均C_max。

36.如权利要求35所述的方法，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max为约2ng/mL至约4ng/mL。

37.如权利要求36所述的方法，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max为约3ng/mL至约4ng/mL。

38.如权利要求35所述的方法，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均C_max在以下范围内：

3ng/mL的80%至125%至

3.5ng/mL的80%至125%。

39.如权利要求35～38中任一项所述的方法，其中，所述剂型具有约2小时至约7小时的式I的所述平均C_max的平均t_max。

40.如权利要求39所述的方法，其中，所述剂型具有约3小时至约7小时的式I的所述平均C_max的平均t_max。

41.如权利要求40所述的方法，其中，所述剂型具有约3.5小时至约4.5小时的式I的所述平均C_max的平均t_max。

42.如权利要求40所述的方法，其中，所述剂型具有约5.5小时至约6.5小时的式I的所述平均C_max的平均t_max。

43.在人类受试者中治疗癌症的方法，包括向所述受试者施予口服剂型，所述口服剂型包含

i)治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；且

其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型具有约16h*ng/mL至约44h*ng/mL的平均AUC_0-24。

44.如权利要求43所述的方法，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-24为约27h*ng/mL至约44h*ng/mL。

45.如权利要求43所述的方法，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-24在以下范围内：

30h*ng/mL的80%至125%至

44h*ng/mL的80%至125%。

46.在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予口服剂型，所述口服剂型包含

i)治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I所示化合物是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；且

其中，所述口服剂型具有约8小时至约22小时的平均t_1/2。

47.如权利要求46所述的方法，其中，所述平均t_1/2为约8小时至约12小时。

48.如权利要求47所述的方法，其中，所述平均t_1/2为约9小时至约11小时。

49.在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予口服剂型，所述口服剂型包含

i)治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-

5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；且

其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型具有约21h*ng/mL至约67h*ng/mL的平均AUC_0-inf。

50.如权利要求49所述的方法，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-inf为约29h*ng/mL至约67h*ng/mL。

51.如权利要求49所述的方法，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-inf在以下范围内：

36h*ng/mL的80%至125%至

57h*ng/mL的80%至125%。

52.在人类受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施予口服剂型，所述口服剂型包含

i)治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐，和

ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，

其中，所述式I是由以下结构表示的(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺：

(E)-N，N-二甲基-4-[2-[5-[(Z)-4，4，4-三氟-1-(3-氟-2H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯基]吡啶-2-基]氧乙基氨基]丁-2-烯酰胺；且

其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述口服剂型具有约16h*ng/mL至约41h*ng/mL的平均AUC_0-t。

53.如权利要求52所述的方法，其中，针对所述剂量中的每mg式I，所述平均AUC_0-t在以下范围内：

27h*ng/mL的80%至125%至

36h*ng/mL的80%至125%。

54.如权利要求35、43、46、49和52中任一项所述的方法，其中，所述剂型包含总当量为约100mg至约600mg的式I。

55.如权利要求54所述的方法，其中，所述剂型包含总当量为约200mg至约600mg的式I。

56.根据权利要求55所述的方法，其中，所述剂型包含总当量为约300mg至约600mg的式I。

57.根据权利要求56所述的方法，其中，所述剂型包含总当量为约450mg的式I。

58.根据权利要求24、32、35、38和41中任一项所述的方法，其中，所述口服剂型是胶囊，所述胶囊包含

i)内相，其包含式I或药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、微晶纤维素、羟丙基纤维素、胶态无水二氧化硅和硬脂酸镁；和

ii)外相，其包含硬脂酸镁。

59.根据权利要求47所述的方法，其中，所述胶囊是羟丙甲纤维素胶囊。

60.根据权利要求48所述的方法，其包含式I的单HCl盐型。

61.根据权利要求24、32、35、38和41中任一项所述的方法，其中，所述口服剂型是片剂，所述片剂包含

i)内相，其包含式I或药学上可接受的盐、乳糖单水合物、低取代的羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶态二氧化硅和纯水；

ii)外相，其包含微晶纤维素和硬脂酸镁；和

iii)薄膜包衣，其包含羟丙甲纤维素、滑石、二氧化钛、丙二醇、氧化铁和纯水。

62.根据权利要求61所述的方法，所述方法包括式I的单HCl盐型。

63.根据权利要求35、43、46、49和52中任一项所述的方法，其中，所述癌症是乳腺癌。

64.根据权利要求61所述的方法，其中，所述乳腺癌是ERα-阳性乳腺癌。

65.根据权利要求64所述的方法，其中，所述乳腺癌表达野生型ERα。

66.如权利要求64所述的方法，其中，所述乳腺癌表达突变型ERα。

67.根据权利要求35、43、46、49和52中任一项所述的方法，其中，所述口服剂型每日施予1次。

68.根据权利要求57所述的方法，其中，所述口服剂型每日施予1次。

69.根据权利要求35、43、46、49和52中任一项所述的方法，其中，所述口服剂型向禁食状态的人施予。

70.根据权利要求35、43、46、49和52中任一项所述的方法，其中，所述口服剂型向进食状态的人施予。

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