CN103906435A - 用于促进镁吸收和/或镁保留的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了包含寡糖混合物的组合物，所述的混合物包含至少一种N-乙酰化的寡糖、至少一种唾液酸化的寡糖和至少一种中性寡糖，其用于促进镁吸收和/或镁保留。该组合物优选还包含至少一种长链多不饱和脂肪酸和/或至少一种益生菌。该组合物特别适合用于婴儿、特别是早产婴儿。

Description

用于促进镁吸收和/或镁保留的组合物

发明领域

本发明涉及用于促进镁吸收和/或镁保留的组合物。该组合物用于哺乳动物、优选用于人、更优选用于婴儿。

发明背景

镁(Mg)是第二最大量的细胞内阳离子，并且总体上是第四最大量的阳离子。几乎所有使用磷作为能量来源的酶过程都需要镁来活化。镁几乎涉及生物化学代谢的每个方面(例如，DNA和蛋白质合成、糖酵解、氧化磷酸化)。几乎所有涉及磷反应的酶(例如，三磷酸腺苷酶[ATPase])都需要镁来活化。镁用作RNA、DNA和核糖体的分子稳定剂。因为镁在细胞内与ATP结合，所以细胞内镁浓度的转变可以有助于调节细胞的生物能学，例如线粒体呼吸。

镁在成年人中的全身含量大约是2,000mEq或24g。全身的镁的约60%位于骨中，并且剩余部分在软组织中。通常，镁的血浆浓度范围为1.8-2.5mEq/L。这其中约三分之一是与蛋白质结合的。游离(即未结合)部分的镁被认为是活性组分。

镁在健康的个体中主要在小肠中以取决于膳食摄入的速率来吸收。吸收主要在空肠和回肠中通过离子扩散(被动)，并且以低管腔浓度通过主动转运过程发生。乙状结肠也具有一定的镁吸收能力。建议的最小的每日摄入量是0.3mEq/kg体重，以防止缺乏。婴儿和儿童倾向于比成年人具有更高的每日需求。

肾是吸收的Mg的主要排泄器官。每天在尿中Mg的平均排泄通常在2至5mmol之间变化。

镁缺乏和低镁血症往往是无症状的。然而，严重的有症状的低镁血症可以临床表现为抽搐和全身性发作。早期表现可以包括肌肉痉挛、恶心、呕吐和嗜睡。

尽管没有综合性研究已经解决了低镁血症按年龄组划分的实际发生率，但是新生儿、特别是早产婴儿更容易患低镁血症。实际上，早产被认为是Mg缺乏的主要的危险因素之一(Caddell JL.Magnesium in perinatalcare and infant health.Magnes Trace Elem1991;10(2-4):229-50)。早产婴儿中缺乏的高风险的关键原因是镁在体内储存有限以及在这些婴儿的加速的生长速率中骨和细胞对镁固有的高需求。镁缺乏可以增加严重的新生儿并发症(例如颅内出血、脑室周围白质软化或支气管肺发育不良)的风险，以及终生后遗症(例如脑性瘫痪和慢性肺病)的风险(Caddell JL,Graziani LJ,Wiswell TE等人,The possible role of magnesium in protection of prematureinfants from neurological syndromes and visual impairments and a review ofsurvival of magnesium-exposed premature infants.Magnes Res1999;12(3):201-16；Caddell JL.Evidence for magnesium deficiency in thepathogenesis of bronchopulmonary dysplasia(BPD).Magnes Res1996;9(3):205-16.)

因此，需要用于促进镁吸收和/或镁保留的营养组合物，特别在婴儿和幼儿、优选婴儿中，他们是早产的或具有低出生体重(LBW)或经历了宫内生长迟缓(IUGR)或患有吸收不良、慢性腹泻、短肠综合征和/或由于营养不良(例如宫内营养欠佳)和/或疾病导致的生长发育迟缓。

已知寡糖(特别是果寡糖和菊糖)以剂量依赖的方式促进镁吸收和/或保留。要观察到阳性效果，往往需要中到高剂量(相当于高于膳食摄入的5%)的寡糖。但是，胃肠道对这些中到高剂量的耐受性往往较弱，并且导致腹部的膨胀和疼痛、肠胃气胀以及在某些情况下腹泻。因此，需要新的营养组合物，其可以在低剂量下促进镁吸收和/或镁保留，不伴随胃肠道的症状并且具有很好的消化耐受性。在年轻的哺乳动物、特别是在婴儿和儿童、优选婴儿中、还有年轻的宠物中，对这种营养干预具有更广泛的需要。

需要这样一种干预，其通过促进吸收和/或保留，在人和动物中、特别是在年轻的哺乳动物中诱导足够水平的镁的维持。

发明概述

本发明人已令人惊奇地发现，施用特别的寡糖混合物、任选与至少一种长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)和/或至少一种益生菌组合，在促进镁吸收和/或镁保留中特别有效。

因此，本发明提供了包含寡糖混合物的组合物，所述混合物包含至少一种N-乙酰化的寡糖、至少一种唾液酸化的寡糖和至少一种中性寡糖，其促进镁吸收和/或镁保留。

本发明的组合物优选是营养组合物。

该组合物优选还包含至少一种LC-PUFA。

该组合物优选还包含至少一种益生菌。

如果存在LC-PUFA的话，其优选选自花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)，更优选所述LC-PUFA是ARA和DHA的混合物。

如果存在益生菌的话，其优选选自益生细菌菌株，更优选益生菌是乳杆菌属(lactobacillus)或双歧杆菌属(bifidobacterium)。在优选的实施方案中，益生菌是鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)和路氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)。在甚至更优选的实施方案中，益生菌是乳双歧杆菌。

中性寡糖优选选自果寡糖(FOS)和半乳寡糖(GOS)，优选GOS。

在一个实施方案中，寡糖混合物可以衍生自动物乳，例如牛、山羊、绵羊或水牛的乳中的一种或多种。例如，它是通过牛乳的级分并且进一步酶处理得到的。

在第二个实施方案中，寡糖混合物可以使用酶、化学-酶和/或化学方法制备。

在第三个实施方案中，寡糖混合物可以使用酵母和/或细菌发酵技术制备。例如，遗传修饰或不经遗传修饰表达适合的酶(例如糖苷酶和/或糖基转移酶)的酵母和/或细菌细胞可以用于这个目的。

本发明的组合物优选用于婴儿，其为早产的或具有低出生体重(LBW)或经历了宫内生长迟缓(IUGR)或患有吸收不良、慢性腹泻、短肠综合征和/或由于营养不良(例如宫内营养欠佳)和/或疾病导致的生长发育迟缓。

发明详述

本文所用的下列术语具有下列含义。

术语“儿童”表示出生阶段至青春期的人。成年人是年长于儿童的人。

术语“婴儿”表示年龄在12个月以下的儿童。

术语“早产婴儿”(或“早产儿”)表示小于37周孕龄出生的婴儿。

术语“低出生体重婴儿”表示活产体重小于2,500g的婴儿。

术语“幼儿”表示年龄在1至3岁的儿童。

术语“婴儿配方”表示旨在用于生命第一个4至6个月的婴儿的特别营养用途并且本身满足该类人营养需求的食物(1991年5月14日EuropeanCommission Directive91/321/EEC第1.2款关于婴儿配方和后续配方)。

术语“早产婴儿配方”表示旨在用于早产婴儿的婴儿配方。

术语“人乳增强剂”表示用于增加喂食给早产婴儿或低出生体重婴儿的母乳中热量、蛋白质、矿物质和维生素的补充剂。

术语“后续配方”表示旨在用于年龄大于4个月婴儿的特别营养用途并且构成该类人渐进式多样化膳食的主要液体成分的食物。

术语“起始婴儿配方”表示旨在用于生命的第一个4至6个月婴儿的特别营养用途的食物。

术语“婴儿食物”表示旨在用于生命的第一年的婴儿的特别营养用途的食物。

术语“婴儿谷物组合物”表示旨在用于生命的第一年的婴儿的特别营养用途的食物。

术语“成长乳”表示适合于幼儿的特别营养需求的基于乳的饮料。

术语“断乳期”表示婴儿膳食中的母乳或婴儿配方部分或完全被其它食物取代的时期。

术语“促进镁吸收和/或镁保留”表示对镁吸收的支持或对镁保留的支持，或者二者皆是。

术语“营养组合物”表示营养个体的组合物。该营养组合物通常是口服、胃内或静脉内摄取，并且它通常包括脂质或脂肪来源和蛋白质来源。

术语“合成的混合物”表示通过化学和/或生物学方法获得的混合物，其可以是化学上与哺乳动物乳中天然存在的混合物相同的。

术语“低过敏原的组合物”表示不太可能引起变态反应的组合物。

术语“益生菌”表示对宿主健康或幸福具有有益作用的微生物细胞制备物或微生物细胞组分或微生物细胞代谢产物(Salminen S,Ouwehand A.Benno Y.等人,“Probiotics:how should they be defined”Trends Food Sci.Technol.1999:10107-10)。

术语“寡糖”表示聚合度(DP)范围为2至20(包括端点)的碳水化合物，但不包括乳糖。

术语“中性寡糖”表示不带电荷并且没有N-乙酰基残基的寡糖。

术语“唾液酸化的寡糖”表示具有唾液酸(例如N-乙酰基神经氨酸和/或N-羟乙酰基神经氨酸)残基的寡糖。

术语“N-乙酰化的”寡糖表示具有至少一个带有N-乙酰基残基的己糖的寡糖。

除非另外说明，否则所有百分数是基于重量。

在一个方面，本发明提供了组合物，其包含：寡糖混合物，所述的混合物包含至少一种选自GalNAcα1,3Galβ1,4Glc(=3’GalNAc-lac=N-乙酰基-氨基半乳糖基-乳糖)和Galβ1,6GalNAcα1,3Galβ1,4Glc(=6’Gal-3GalNAc-lac=半乳糖基-N-乙酰基-氨基半乳糖基-乳糖)，Galβ1,4GlcNAcβ1,3Galβ1,4Glc(乳糖-N-新四糖或LNnT)和Galβ1,3GlcNAcβ1,3Galβ1,4Glc(乳糖-N-四糖或LNT)的N-乙酰化的寡糖，至少一种选自NeuAcα2,3Galβ1,4Glc(=3’-唾液酰基乳糖)和NeuAcα2,6Galβ1,4Glc(=6’-唾液酰基乳糖)的唾液酸化的寡糖，以及至少一种选自Galβ1,6Gal(=β1,6-二半乳糖苷)、Galβ1,6Galβ1,4Glc(=6’Gal-lac)、Galβ1,6Galβ1,6Glc、Galβ1,3Galβ1,3Glc、Galβ1,3Galβ1,4Glc(=3’Gal-lac)、Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,4Glc(=6’,6-diGal-lac)、Galβ1,6Galβ1,3Galβ1,4Glc(=6’,3-diGal-lac)、Galβ1,3Galβ1,6Galβ1,4Glc(=3’,6-diGal-lac)、Galβ1,3Galβ1,3Galβ1,4Glc(=3’,3-diGal-lac)、Galβ1,4Galβ1,4Glc(=4’Gal-lac)和Galβ1,4Galβ1,4Galβ1,4Glc(=4’,4-diGal-lac)以及Fucα1,2Galβ1,4Glc(=2’岩藻糖基乳糖或FL)的中性寡糖，

用于促进镁吸收和/或镁保留。

优选地，组合物还包含至少一种LC-PUFA。

优选地，组合物还包含至少一种益生菌。

第二方面，本发明涉及组合物，其包含：

·占寡糖混合物的总重量的0.25-20wt%、优选0.3-10wt%、更优选0.3-5wt%并且甚至更优选约0.5wt%的至少一种N-乙酰化的寡糖，

·占寡糖混合物的总重量的0.5-30wt%、优选0.75-15wt%、更优选0.75-10wt%并且甚至更优选约1wt%的至少一种唾液酸化的寡糖，

·占寡糖混合物的总重量的50-99.3wt%、优选20-80wt%、更优选10-50wt%并且甚至更优选约50wt%的至少一种中性寡糖，

用于促进镁吸收和/或镁保留。

根据优选的实施方案，所述寡糖混合物是以占组合物的总重量的0.5-50%、更优选1-20%、甚至更优选2-8%的量存在。

寡糖化合物通过它们的结构定义，其中GalNAc是N-乙酰基半乳糖胺，GlcNAc是N-乙酰基葡糖胺，Gal是半乳糖，NeuAc是N-乙酰基神经氨酸，Fuc是岩藻糖，并且Glc是葡萄糖。

本发明的组合物的寡糖混合物可以是组合物中仅有的寡糖来源。

在第一个实施方案中，中性寡糖优选选自FOS和GOS，优选GOS，例如上文列举的那些。

在第二个实施方案中，其独立于或不独立于第一个实施方案，中性寡糖优选是2’-岩藻糖基乳糖(FL)。在这种情况下，在其制备过程中，FL优选包含在寡糖混合物中的中性寡糖中。

所述中性寡糖可以通过购买单个组分并且将其混合而制备成混合物。例如，合成的半乳糖-寡糖例如Galβ1,6Gal、Galβ1,6Galβ1,4Glc、Galβ1,6Galβ1,6Glc、Galβ1,3Galβ1,3Glc、Galβ1,3Galβ1,4Glc、Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,4Glc、Galβ1,6Galβ1,3Galβ1,4Glc、Galβ1,3Galβ1,6Galβ1,4Glc、Galβ1,3Galβ1,3Galβ1,4Glc、Galβ1,4Galβ1,4Glc和Galβ1,4Galβ1,4Galβ1,4Glc及其混合物是从商标为

(Friesland Campina,荷兰)和

可商购获得的。其它寡糖供应商是Dextra Laboratories、Sigma-Aldrich Chemie GmbH和KyowaHakko Kogyo Co.,Ltd。或者，具体的糖基转移酶和/或糖苷酶例如半乳糖基转移酶和/或岩藻糖基转移酶和/或半乳糖苷酶和/或岩藻糖苷酶可以用于产生半乳糖-寡糖和/或岩藻糖化的寡糖。

岩藻糖基乳糖是岩藻糖化的寡糖(即含有岩藻糖残基的寡糖)。这种岩藻糖化的寡糖可以通过色谱法或过滤技术从天然来源例如动物乳中分离。或者，它可以通过生物技术方法使用特别的岩藻糖基转移酶和/或岩藻糖苷酶经过使用基于酶发酵技术(重组的或天然的酶)或微生物发酵技术制备。在后种情况下，微生物可以表达它们的天然的酶和底物，或者可以被设计产生各自的底物和酶。可以使用单个微生物培养物和/或混合的培养物。岩藻糖化的寡糖的形成可以通过任何聚合度(DP)从DP=1向前开始的受体底物引发。或者，岩藻糖化的寡糖可以通过化学合成由乳糖和游离岩藻糖制备。岩藻糖化的寡糖还可以例如从日本的Kyowa,Hakko,Kogyo获得。

根据本发明，唾液酸化的寡糖可以选自3’-唾液酰基乳糖和6’-唾液酰基乳糖。优选地，唾液酸化的寡糖同时包括3’-唾液酰基乳糖和6’-唾液酰基乳糖。在该实施方案中，3’-唾液酰基乳糖与6’-唾液酰基乳糖的比例优选范围为5:1至1:2。

3’-和6’-形式的唾液酰基乳糖可以通过向组合物添加天然来源例如动物乳获得，或可以通过色谱或过滤技术从天然来源分离获得。或者，它们可以通过生物技术方法使用特别的唾液酰基转移酶或唾液酸酶、神经氨酸酶、通过基于酶的发酵技术(重组的或天然的酶)、通过化学合成或通过微生物发酵技术制备。在后种情况下，微生物可以表达天然酶和底物或者可以被设计产生各自的底物和酶。可以使用单个微生物培养物或混合的培养物。唾液酰基-寡糖的形成可以通过任何聚合度(DP)从DP=1向前开始的受体底物引发。或者，唾液酰基乳糖可以通过化学合成从乳糖和游离N-乙酰基神经氨酸(唾液酸)制备。唾液酰基乳糖还可以例如从日本的Kyowa,Hakko,Kogyo获得。

N-乙酰化的寡糖可以通过向组合物添加天然来源例如动物乳获得。或者，它们可以通过氨基葡糖苷酶和/或半乳糖胺酶作用于N-乙酰基-葡萄糖和/或N-乙酰基半乳糖而制备。相同地，N-乙酰基-半乳糖基转移酶和/或N-乙酰基-糖基转移酶可以用于该目的。N-乙酰化的寡糖还可以通过使用发酵技术使用不同的酶(重组的或天然的)和/或微生物发酵而制备。在后种情况下，微生物可以是表达它们的天然酶和底物或者可以是被设计产生各自的底物和酶。可以使用单个微生物培养物或混合的培养物。N-乙酰化的寡糖的形成可以通过任何聚合度(DP)从DP=1向前开始的受体底物引发。另一种选择是将游离或结合至寡糖(例如乳果糖)的酮-己糖(例如果糖)化学转变成N-乙酰基己糖胺或包含N-乙酰基己糖胺的寡糖，如Wrodnigg,T.M.；Stutz,A.E.(1999)Angew.Chem.Int.Ed.38:827-828中描述的。

LNnT和LNT可以通过使用糖基水解酶和/或糖基转移酶将供体部分的糖单元酶转移至受体部分而合成，如美国专利5,288,637和WO96/10086中所描述的。或者，LNnT可以通过将游离或结合至寡糖(例如乳果糖)的酮-己糖(例如果糖)化学转变成N-乙酰基己糖胺或包含N-乙酰基己糖胺的寡糖而制备，如Wrodnigg,T.M.；Stutz,A.E.(1999)Angew.Chem.Int.Ed.38:827-828中描述的。然后可以将这种方法产生的N-乙酰基乳糖胺转移至受体部分的乳糖。

优选所述N-乙酰化的寡糖选自乳糖-N-新四糖(或LNnT)和乳糖-N-四糖(或LNT)。在其制备过程中，优选将LNnT和/或LNT包括在寡糖混合物中的唾液酸化的寡糖中。

任选存在于本发明的组合物的益生细菌菌株可以选自满足益生菌定义并且对于掺入益生菌的组合物具有可接受贮存期的任何菌株。例如，如果将组合物掺入婴儿配方中，所述的婴儿配方需要保持稳定并且有效达12个月。益生细菌菌株优选是乳杆菌属或双歧杆菌属，并且更优选双歧杆菌属。

优选的乳杆菌属物种的实例是鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、类干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)和路氏乳杆菌。特别优选的菌株是鼠李糖乳杆菌ATCC53103、鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724、路氏乳杆菌DSM17938和类干酪乳杆菌CNCM I-2116。甚至更优选益生菌是鼠李糖乳杆菌，该术语覆盖鼠李糖乳杆菌ATCC53103和鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724。

鼠李糖乳杆菌ATCC53103可以从芬兰的Valio Oy获得，商标为LGG，路氏乳杆菌DSM17938由BioGaia A.B出售，商标为Reuteri。

优选的双歧杆菌属物种的实例包括乳双歧杆菌(Bifidobacteriumlactis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacteriumbreve)和婴儿双岐杆菌(Bifidobacterium infantis)。特别优选的菌株是丹麦Christian Hansen company以商标Bb12销售的乳双歧杆菌CNCM I-3446，日本Morinaga Milk Industry Co.Ltd.以商标BB536销售的长双歧杆菌ATCC BAA-999，Danisco以商标Bb-03销售的短双歧杆菌菌株，Morinaga以商标M-16V销售的短双歧杆菌菌株，Procter&Gamble Co.以商标Bifantis销售的婴儿双岐杆菌菌株和Institut Rosell(Lallemand)以商标R0070销售的短双歧杆菌菌株。

根据本发明，任选的益生菌选自益生细菌菌株，优选益生菌是乳杆菌属或双歧杆菌属，更优选益生菌是鼠李糖乳杆菌、路氏乳杆菌和乳双歧杆菌，并且甚至更优选益生菌是乳双歧杆菌。

益生菌可以以大范围百分比存在于组合物中，条件是益生菌递送所述的功效。然而，优选地，益生菌是以相当于每克组合物10e2至10e12cfu(=菌落形成单位)的益生细菌菌株，更优选10e6至10e9cfu的量存在于组合物中。该表述包括这种可能性：细菌是活的、灭活的或死的或甚至以片段存在例如DNA、细胞壁物质、细胞内物质或细菌代谢物。换言之，如果所有细菌是活的，组合物包含的细菌的量是以该细菌量的菌落形成能力表示，不管它们事实上是否是活的、灭活的或死的、片段或任何或所有这些形式的混合物。

组合物任选包含至少一种LC-PUFA，其通常是n-3或n-6LC-PUFA。n-3LC-PUFA可以是C20或C22n-3脂肪酸。C20或C22n-3LC-PUFA优选以占组合物中所有脂肪酸的至少0.1wt%的量存在。优选地n-3LC-PUFA是二十二碳六烯酸(DHA，C22:6，n-3)。n-6LC-PUFA可以是C20或C22n-6脂肪酸。C20或C22n-6LC-PUFA优选以占组合物中所有脂肪酸的至少0.1wt%的量存在。优选地n-6LC-PUFA是花生四烯酸(ARA，C20:4，n-6)。LC-PUFA的来源可以是例如卵磷脂、真菌油、低EPA鱼油或海藻油。本发明组合物的任选LC-PUFA可以以少量含有大量形成的花生四烯酸和二十二碳六烯酸的油例如鱼油或微生物油提供。

本发明的组合物优选是营养组合物，更优选合成的营养组合物。在这种情况下，它可以是早产婴儿配方、人乳增强剂、起始婴儿配方、后续配方、婴儿食物配方、婴儿谷物配方、成长乳、用于临床营养的医学食物产品或补充剂，其通常用于住院期间和/或用于出院后。补充剂可以用于早产婴儿或儿童或成年人。

所述的组合物优选是用于早产喂食的产品例如早产婴儿配方、人乳增强剂或早产婴儿补充剂。根据一个实施方案，组合物优选是早产婴儿配方、人乳增强剂或补充剂。本发明组合物还可以是用于儿童或成年人的产品例如酸乳或医学食物以及宠物食物。

根据特别优选的实施方案，本发明的组合物是用于婴儿和幼儿，其为早产的或具有低出生体重(LBW)或经历宫内生长迟缓(IUGR)或患有吸收不良、慢性腹泻、短肠综合征和/或由于营养不良(例如宫内营养欠佳)和/或疾病导致的生长发育迟缓。

本发明的组合物可以在断乳期之前和/或期间和/或之后使用。

本发明还包括本发明的组合物作为合成营养剂用于促进镁吸收和/或镁保留的用途。

上述所有用途在人的情况下特别旨在用于婴儿和幼儿、优选婴儿。但这些用途还旨在用于年轻的宠物。本发明的组合物和用途特别适合于婴儿和幼儿、优选婴儿，其为早产的或具有低出生体重(LBW)或经历宫内生长迟缓(IUGR)或患有吸收不良、慢性腹泻、短肠综合征和/或由于营养不良(例如宫内营养欠佳)和/或疾病导致的生长发育迟缓。

不希望受到理论的约束，发明人认为上述组合物中的寡糖混合物的组合用于促进镁吸收和/或镁保留的效果可能是免疫调节作用的协同组合的结果。当益生菌和/或LC PUFA存在时更是这样的情况，因为那种情况下，该协同组合是由益生细菌菌株和/或LC-PUFA通过它们对特别的寡糖混合物的刺激而引起的。

寡糖混合物、任选的LC-PUFA和任选的益生细菌菌株可以在相同的组合物中施用或者可以依次施用。

如果针对早产和LBW婴儿组，组合物优选是营养组合物，例如以液体形式食用。它可以是营养完全配方例如(早产)婴儿配方、补充剂、人乳增强剂、后续配方或成长乳。或者，对于年幼哺乳动物组，组合物可以是宠物食物。

本发明组合物还可以包含蛋白质来源。并不认为蛋白质的类型对于本发明是关键的，条件是满足必需氨基酸含量的最小需求以及确保满意的生长。因此，可以使用基于乳清、酪蛋白及其混合物的蛋白质来源以及基于大豆的蛋白质来源。就受关注的乳清蛋白质而言，蛋白质来源可以是基于酸乳清或甜乳清或其混合物，并且可以包括任何所需的比例的α-乳清蛋白和β-乳球蛋白。蛋白质可以是最终部分水解的，以增强变应原、特别是食物变应原的口服耐受。在该情况下，组合物是低变应原的组合物。

除了寡糖混合物之外，本发明组合物还可以包含碳水化合物来源。这在本发明组合物是婴儿配方的情况下特别优选。在这种情况下，可以使用婴儿配方中通常存在的任何碳水化合物来源，例如乳糖、蔗糖、麦芽糊精、淀粉及其混合物，尽管优选的碳水化合物来源是乳糖。在任何情况下，寡糖混合物优选是本发明组合物的单一来源的益生菌。

本发明的组合物还可以包含脂质来源，其包括或不包括任选的LC-PUFA。如果本发明的营养组合物是婴儿配方时，这特别相关。在这种情况下，脂质来源可以是任何适合用于婴儿配方的脂质或脂肪。优选的脂肪来源包括棕榈油酸(palm oleic)、高油酸向日葵油和高油酸红花油，任选富含至少一种LC-PUFA(例如ARA和/或DHA)。还可以加入基本的脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸。在该组合物中，脂肪来源(包括LC-PUFA)优选具有n-6比n-3脂肪酸的比例为约1:2至约10:1、优选约3:1至约8:1。

本发明组合物还可以包含每日膳食必需的且营养显著量的所有维生素和矿物质。已经建立了某些维生素和矿物质的最小需求量。本发明组合物中任选存在的矿物质、维生素和其它营养素的实例包括维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素E、维生素K、维生素C、维生素D、叶酸、肌醇、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸和L-肉碱。矿物质通常是以盐形式添加。具体的矿物质和其它维生素的存在和量将取决于目标人群而变化。

如果需要，本发明组合物可以包含乳化剂和稳定剂，例如大豆、卵磷脂、单和二甘油酯的柠檬酸酯等。

本发明组合物还可以包含其它可能具有有益作用的物质，例如乳铁蛋白、核苷酸、核苷、神经节苷脂、聚胺等。

本发明组合物的制备将通过实施例的方式描述。

配方可以以任何适合的方式制备。例如，它可以通过以适合的比例一起混合蛋白质来源、碳水化合物来源(不同于寡糖混合物)和脂肪来源包括任选LC-PUFA而制备。如果使用，在该点可以包含乳化剂。维生素和矿物质可以在该点加入，但是通常更晚加入以避免热分解。可以将任何亲脂性维生素、乳化剂等在混合前溶于脂肪来源中。然后可以将水，优选进行反渗透的水混合入，以形成液体混合物。水的温度通常范围为约50℃至约80℃，以帮助成分分散。商购可获得的液化剂可以用于形成液体混合物。如果最终产品是液体形式，在这个阶段加入寡糖混合物。如果最终产品是粉末，如果需要同样可以在这个阶段加入寡糖。然后将液体混合物匀化。例如在两个阶段。

然后可以将液体混合物热处理，以降低细菌载量，通过快速将液体混合物例如加热至温度范围为约80℃至约150℃，持续约5秒至约5分钟。这可以借助蒸汽注入、高压釜或热交换器例如板式换热器进行。

然后，可以将液体混合物冷却至约60℃至约85℃，例如通过快速冷却。然后可以再次将液体混合物匀化，例如在两个阶段，第一阶段在约10MPa至约30MPa，以及第二阶段在约2MPa至约10MPa。然后可以将匀化的混合物进一步冷却，以加入任何热敏感的组分，例如维生素和矿物质。匀化的混合物的pH和固体含量通常在该点调节。

将匀化的混合物转移至适合的干燥装置，例如喷雾干燥器或冷冻干燥器，并且转变成粉末。粉末应当具有水份含量小于约5%重量。寡糖混合物可以在该阶段添加，通过与任选益生细菌菌株干燥混合，或通过将晶体糖浆形式的它们与任选益生细菌菌株混合，并且喷雾干燥(或冷冻干燥)。

如果优选液体组合物，那么可以将匀化的混合物灭菌，然后无菌填充入适合的容器中或可以首先填充入容器中然后蒸馏(retorted)。

在另一个实施方案中，本发明组合物可以是在个体中足以获得所需作用的量的补充剂。这种形式的施用通常更适合于早产或LBW或IUGR婴儿，年长的儿童和成年人。

包括在补充剂中的寡糖混合物、任选的LC-PUFA和任选的益生细菌菌株的量将根据补充剂施用的方式而选择。

补充剂可以是例如粉末、片剂、胶囊剂、锭剂或液体形式。补充剂还可以包含保护性水胶体(例如树胶、蛋白质、变性淀粉)、粘合剂、成膜剂、包封剂/物质、壁/壳物质、基质化合物、包衣、乳化剂、表面活性剂、增溶剂(油、脂肪、石蜡、卵磷酯等)、吸附剂、载体、填充剂、共化合物、分散剂、润湿剂、加工助剂(溶剂)、流动剂、掩味剂、增重剂、胶凝剂和成胶剂。补充剂还可以包含常规药物添加剂和辅助剂、赋形剂和稀释剂，包括但不限于水、任何来源的明胶、植物树胶、木质素-磺酸盐、滑石粉、糖、淀粉、阿拉伯胶、植物油、聚乙二醇、矫味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂、润滑剂、着色剂、润湿剂、填充剂等。

补充剂可以添加到消费者(人或动物)可接受的产品中，例如分别是可摄取的载体或支持物。这些载体或支持物的实例是药物或食物或宠物食物组合物。这类组合物的非限制性实例是乳、酸乳、凝乳、乳酪、发酵乳、基于乳的发酵产品、基于发酵谷物的产品、基于乳的粉末、人乳、早产儿配方、婴儿配方、口服补充剂和管饲。

此外，补充剂可以包含适合于肠内或非肠道施用的有机或无机载体物质以及根据政府机构推荐例如USRDA的维生素、矿物质微量元素和其它微量营养物。

本发明的优点、性质和多种其它特征在完全考虑详述的说明性试验和附图后将变得更清晰。在附图中：

图1是绘制的镁吸收(%)的试验结果的条形图。

图2是绘制的镁保留(%)的试验结果的条形图。

实施例

在7周龄的大鼠中进行关于补充寡糖混合物(去矿物质、去乳糖的乳清渗透物或DDWP)的作用方面的试验，所述的寡糖混合物为富含半乳寡糖的牛乳寡糖(CMOS)的混合物。

方法学

1.试验方案

40只7周龄的雄性大鼠(Wistar)购自法国Charles River SA。动物在到达后的6天适应动物设施的条件。在这期间，动物在标准的Macrolon笼中单独饲养，并且接受对照组的膳食(参见表1-3)。适应期后，动物根据它们的体重随机分为四组，并且在7天期间转移到具有半金属丝底部的笼中，以适应后来使用的代谢笼的金属丝底部。从这一刻开始直到研究结束，动物接受根据它们所属分组的试验膳食(对照、Synergy、对照+和DDWP)(参见表1-3)。在研究的最后7天，动物单独饲养在代谢笼中，以定量收集尿和粪便样品。

2.处理和膳食

下列功能性成分用于试验膳食的加工中：

·CMOS(PTC Konolfingen，批次24722)：去矿物质、去乳糖的乳清渗透物喷雾干燥粉末(总寡糖含量：1.3%的干物质)。

·

GOS(Friesland Foods Domo,NL)：半乳寡糖糖浆(总寡糖含量：58.1%的干物质)。

·

(Beneo-Orafty,BE)。1:1的菊糖和果寡糖混合粉末(总寡糖含量：92%的干物质)。

研究了下列膳食组：

·对照。喂以适合于成长并且基于AIN93G的半合成的膳食。它用于作为Synergy组的对照。

·Synergy。喂以包含10%(w/w)

的对照膳食

·对照+。喂以补充有葡萄糖、半乳糖和乳糖以及Na、Ca、Mg和P(其以与DDWP成分有类似贡献的浓度)的对照膳食。它用于作为DDWP组的对照。

·DDWP。喂以包含21.7%(w/w)CMOS和8.6%(w/w)GOS的对照膳食，其代表在最终膳食中寡糖浓度为4%(w/w)。

DDWP寡糖通常是根据WO2007/101675或WO2007/090894的公开内容而获得，并且通常包含约30wt%的GalNAcα1,3Galβ1,4Glc和Galβ1,6GalNAcα1,3Galβ1,4Glc、50wt%的Galβ1,6Galβ1,4Glc和Galβ1,3Galβ1,4Glc、20wt%的NeuAcα2,3Galβ1,4Glc和NeuAcα2,6Galβ1,4Glc的混合物。

膳食摄入在试验的最后14天每天进行评估。尿和粪便样品从第16日至第20日定量收集。

膳食的组成(相应的膳食组具有相同参考编号)在下表1、2和3中给出。

表1：膳食的组成(g/100g膳食)

表2.膳食中脂肪混合物的组成(g/100g脂肪混合物)

表3.膳食中矿物质和大量营养素的浓度

3.镁参数

如图1的条形图所示，对于每一个膳食组，镁吸收效率(%)通过ICP-OES分析矿物质浓度在膳食和粪便中的平衡来测量。

如图2的条形图所示，对于每一个膳食组，镁保留(%)通过ICP-OES分析矿物质浓度在膳食、粪便和尿中的平衡来测量。

“Synergy”是已知增加镁和其它矿物质的消化生物利用度的寡糖混合物(Coudray C,Tressol JC,Gueux E等人,Effects of inulin-type fructans ofdifferent chain length and type of branching on intestinal absorption andbalance of calcium and magnesium in rats.Eur J Nutr2003;42(2):91-8;Lobo AR,Filho JM,Alvares EP等人,Effects of dietary lipid composition andinulin-type fructans on mineral bioavailability in growing rats.Nutrition2009;25(2):216-25)。“Synergy”将与“对照”进行比较，因为它们有相似的矿物质和其它营养素组成。“Synergy”已知是以剂量依赖的方式改善镁吸收和/或保留。

组合物“对照+”是与含DDWP的膳食相似的。在每个相似组成的组之间进行这些比较，图1显示相对于对照膳食(“对照”和“对照+”)，“Synergy”和含DDWP的膳食都改善了镁吸收。图2显示，镁保留没有受到“Synergy”的显著影响，但被本发明的DDWP膳食改善。

那些结果都更有趣，因为DDWP寡糖在膳食中是低剂量(4%)的，而Synergy在膳食中是相当高的剂量(10%)，其预期消化耐受性低(特别是在婴儿人群中)。

因此，本发明的营养组合物在低剂量时显示出促进镁吸收和镁保留的作用，预期其具有良好的消化耐受性，特别是在婴儿人群中。

Claims (14)

1.包含寡糖混合物的组合物，所述的混合物包含至少一种N-乙酰化的寡糖、至少一种唾液酸化的寡糖和至少一种中性寡糖，优选选自果寡糖(FOS)和/或半乳寡糖(GOS)、更优选GOS，其用于促进镁吸收和/或镁保留。

2.前述权利要求的组合物，其还包含至少一种长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)，优选选自花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)，并且更优选LC-PUFA是ARA和DHA的混合物。

3.前述权利要求中任意一项的组合物，其还包含至少一种益生菌，通常选自益生细菌菌株，优选益生菌是乳杆菌属或双歧杆菌属、更优选益生菌是鼠李糖乳杆菌、乳双歧杆菌和路氏乳杆菌，并且甚至更优选益生菌是乳双歧杆菌。

4.前述权利要求中任意一项的组合物，其中所述寡糖混合物包含至少一种选自GalNAcα1,3Galβ1,4Glc(=3’GalNAc-lac=N-乙酰基-氨基半乳糖基-乳糖)、Galβ1,6GalNAcα1,3Galβ1,4Glc(=6’Gal-3GalNAc-lac=半乳糖基-N-乙酰基-氨基半乳糖基-乳糖)、Galβ1,4GlcNAcβ1,3Galβ1,4Glc(乳糖-N-新四糖或LNnT)和Galβ1,3GlcNAcβ1,3Galβ1,4Glc(乳糖-N-四糖或LNT)的N-乙酰化的寡糖，至少一种选自NeuAcα2,3Galβ1,4Glc(=3’-唾液酰基乳糖)和NeuAcα2,6Galβ1,4Glc(=6’-唾液酰基乳糖)的唾液酸化的寡糖，以及至少一种选自Galβ1,6Gal(=β1,6-二半乳糖苷)、Galβ1,6Galβ1,4Glc(=6’Gal-lac)、Galβ1,6Galβ1,6Glc、Galβ1,3Galβ1,3Glc、Galβ1,3Galβ1,4Glc(=3’Gal-lac)、Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,4Glc(=6’,6-diGal-lac)、Galβ1,6Galβ1,3Galβ1,4Glc(=6’,3-diGal-lac)、Galβ1,3Galβ1,6Galβ1,4Glc(=3’,6-diGal-lac)、Galβ1,3Galβ1,3Galβ1,4Glc(=3’,3-diGal-lac)、Galβ1,4Galβ1,4Glc(=4’Gal-lac)和Galβ1,4Galβ1,4Galβ1,4Glc(=4’,4-diGal-lac)以及Fucα1,2Galβ1,4Glc(=2’岩藻糖基乳糖或FL)的中性寡糖。

5.前述权利要求中任意一项的组合物，其中寡糖混合物包含：

·占寡糖混合物的总重量的0.25-20wt%、优选0.3-10wt%、更优选0.3-5wt%并且甚至更优选约0.5wt%的至少一种N-乙酰化的寡糖；

·占寡糖混合物的总重量的0.5-30wt%、优选0.75-15wt%、更优选0.75-10wt%并且甚至更优选约1wt%的至少一种唾液酸化的寡糖，以及

·占寡糖混合物的总重量的50-99.3wt%、优选20-80wt%、更优选10-50wt%并且甚至更优选约50wt%的至少一种中性寡糖。

6.前述权利要求中任意一项的组合物，其中寡糖混合物是以占组合物的总重量的0.5-50%、更优选1-20%、甚至更优选2-8%的量存在。

7.前述权利要求中任意一项的组合物，其中N-乙酰化的寡糖选自乳糖-N-新四糖(或LNnT)和乳糖-N-四糖(或LNT)。

8.前述权利要求中任意一项的组合物，其中唾液酸化的寡糖选自3’-唾液酰基乳糖和6’-唾液酰基乳糖，并且优选唾液酸化的寡糖包含3’-唾液酰基乳糖和6’-唾液酰基乳糖二者，3’-唾液酰基乳糖和6’-唾液酰基乳糖的比例优选范围为5:1和1:2。

9.前述权利要求中任意一项的组合物，其中中性寡糖是2’-岩藻糖基乳糖(或FL)。

10.前述权利要求中任意一项的组合物，其中所述的组合物是早产婴儿配方、人乳增强剂、初始婴儿配方、后续配方、婴儿食物配方、婴儿谷物配方、成长乳、用于临床营养的医疗食物产品或补充剂，并且优选所述的组合物是早产婴儿配方、人乳增强剂或补充剂。

11.前述权利要求中任意一项的组合物，其用于婴儿和儿童，优选婴儿，其为早产的或具有低出生体重(LBW)或经历宫内生长迟缓(IUGR)或患有吸收不良、慢性腹泻、短肠综合征和/或由于营养不良例如宫内营养欠佳和/或疾病导致的生长发育迟缓。

12.包含寡糖混合物的组合物的用途，所述的混合物包含至少一种N-乙酰化的寡糖、至少一种唾液酸化的寡糖和至少一种中性寡糖，作为合成营养剂，用于促进镁吸收和/或镁保留。

13.前述权利要求的用途，其中组合物还包含至少一种长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)。

14.权利要求12和13中任意一项的用途，其中组合物还包含至少一种益生菌，通常选自益生细菌菌株，优选益生菌是乳杆菌属或双歧杆菌属，更优选益生菌是鼠李糖乳杆菌、乳双歧杆菌和路氏乳杆菌，并且甚至更优选益生菌是乳双歧杆菌。

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