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CN103146622A - 一株土地类芽孢杆菌 - Google Patents

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CN103146622A
CN103146622A CN2013100974502A CN201310097450A CN103146622A CN 103146622 A CN103146622 A CN 103146622A CN 2013100974502 A CN2013100974502 A CN 2013100974502A CN 201310097450 A CN201310097450 A CN 201310097450A CN 103146622 A CN103146622 A CN 103146622A
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Abstract

一株土地类芽孢杆菌。它涉及一种类芽孢杆菌。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.7011。NK3-4具有固定空中的氮、分解矿物磷、矿物钾、难溶性硅和抑制植物病原菌的功能。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4在减少化肥施用量的情况下,仍可使水稻、玉米、大豆等作物增产,特别是与硅肥配合使用,水稻增产幅度更为显著。本发明用于农业领域。

Description

一株土地类芽孢杆菌
技术领域
本发明涉及一种类芽孢杆菌。
背景技术
类芽胞杆菌属(Paenibacillus Ash,Priest&Collin,1994)属于厚壁菌门,杆菌纲,芽胞杆菌目,类芽胞杆菌科。细胞呈杆状,革兰氏染色阳性、阴性或可变,以周生鞭毛运动。在膨大胞囊内有椭圆形芽孢,在营养琼脂上无可溶性色素。兼性厌氧或严格好氧。目前已至少记录了39个种,类芽胞杆菌在自然界中分布广泛。
对已知类芽胞杆菌的研究发现其具有极高的应用价值。例如,多粘类芽孢杆菌(P.polymyxa)能防治病原细菌、病原真菌、根结线虫等多种有害微生物,既能分泌多种肽类抗菌物质(如多粘菌素、粘菌素、环杆菌素、乔利肽菌素、多肽菌素、谷缬菌素、杀镰孢菌素等),又能直接作用于细菌菌体,并能诱导宿主植物产生抗病性,还能通过固氮和溶解有机磷为宿主植物提供营养,促进植株生长。固氮类芽胞杆菌(P.azotofixans)对棒杆菌(Corynebacterium fimi)具有明显的抑制作用,并对重金属及抗生素具有较强的耐受能力。而且近几年还发现了一些具备新功能的类芽胞杆菌新种,Aguilera等2001年在橄榄压榨废料堆制的秸秆堆肥中发现了一株具有产生胞外多糖功能的新种P.s jamilae;Daane等于2002年在盐沼植物根际发现一株能够降解萘的新种P.naphthalenovorans;Yoon等2003年发现了两株能够产生高效絮凝海藻的絮凝剂的新种P.kribbensis和P.terrae;Horn等2005年在蚯蚓内脏中发现了一株能产生N2O的新种P.anaericanus。
土地类芽胞杆菌(P.s terrae)是2003年在印度发现的新种,目前有3个土地类芽胞杆菌菌株被做为功能菌株进行报道,分别是Paenibacillus terrae AM141菌株、HPL-003菌株和MH72菌株。Paenibacillus terrae AM141菌株可作为水藻收获的絮凝剂,HPL-003菌株可以产木聚糖酶,MH72菌株能产生N2O。
氮、磷、钾是植物生长必需的大量营养元素,土壤耕作层中全磷含量为0.1~2.0g/kg,其中无机磷占全磷总量的15%~80%,其中大部分是难溶性的无机磷化合物,很难被植物直接利用;土壤耕作层中全钾含量为0.5~45g/kg,其中矿物性钾占全钾的90%~98%,很难被植物直接利用;农业生产上施用的磷肥和钾肥的利用率只有40%~60%,其余部分被土壤重新固定,由于作物对其利用率低、容易流失、造成严重的浪费和环境污染。
发明内容
本发明提供了一株土地类芽孢杆菌
本发明土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.7011。
本发明土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4属于类芽孢杆菌属(PaenibacillusAsh,Priest&Collin,1994),保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为2012年12月17日,保藏号为CGMCC No.7011。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4为革兰氏阳性菌,菌体为杆状,1.0~1.2μm×3~4μm,能形成芽胞,形成芽胞时菌体近端膨大,胞囊明显膨胀,芽胞椭圆形,位于胞囊一端(如图1所示)。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4在硅酸盐蔗糖无氮培养基平板上,培养5~7天形成直径为1~2mm左右的圆形菌落,单菌落中间隆起,边缘不整齐,表面湿润,半透明,菌苔浓稠,易挑起(如图2所示)。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4在钾长石酵母粉培养基上菌落呈乳白色,半个玻璃珠状,圆形菌落,菌苔量多而粘,培养至后期菌落边缘不整齐,生长物可生长至培养基内部,使培养基裂开。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4通过16S rDNA序列比对分析,与Paenibacillus terrae AM141菌株(登录号为AF391124)亲缘关系最为接近,相似性为99%。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4的16S rDNA如SEQ ID NO:1所示。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4又与Paenibacillus terrae AM141相比存在明显的不同。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4为革兰氏染色阳性,菌体长度为1.0~1.2μm×3~4μm,不能利用甘露醇,在2%NaCl中不生长;而Paenibacillus terrae AM141革兰氏染色可变,菌体长度为1.3~1.8μm×4~7μm,能利用甘露醇,在2%NaCl中生长。因此,判定土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4为土地类芽孢杆菌种的一株新菌株。
本发明土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4革兰氏染色为阳性,吲哚反应为阴性,M.R试验为阴性,V.P试验为阳性;在硅酸盐蔗糖无氮培养基上生长良好。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株能很好的利用葡萄糖、蔗糖、乳糖、羧甲基纤维素钠、腐殖酸等作为碳源,能水解淀粉,不利用甘露醇;利用葡萄糖和蔗糖时产酸产气,利用乳糖、羧甲基纤维素钠、腐殖酸时产酸不产气,一般培养后基质pH值降低0.8~1.5。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4能利用大多数氨基酸中的氮,能使明胶液化、使牛奶胨化,在1%NaCl中生长,在2%NaCl中不生长;最适生长温度为30~32℃,生长最适pH值为6.5~7.5。土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4生理生化性状及对碳、氮源的利用情况如表1所示。
表1
本发明土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4对致病性尖孢镰刀菌具有抑制作用,可利用此特性防治作物病害,减少化学农药用量,减轻化学农药对环境和农产品的污染。
本发明土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4具有固定空气中的氮,分解矿物磷(无机磷)、矿物钾和难溶性硅的功能。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4属于类芽孢杆菌属 (Paenibacillus Ash,Priest&Collin, 1994),保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏地址是北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所,保藏日期为2012年12月17日,保藏号为CGMCC No.7011。
附图说明
图1是土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4的显微镜观察图。
图2是土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4在硅酸盐蔗糖无氮培养基平板上的菌落形态图。
图3是土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株与大豆根腐病菌尖孢镰刀菌的平板拮抗图。
具体实施方式
本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式,还包括各具体实施方式间的任意组合。
具体实施方式一:本实施方式土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.7011。
本实施方式土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4采样地点为中国黑龙江省佳木斯市黑龙江省农垦科学院院内实验田(46°46′02.8″N;130°25′44.5″E)。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株采集、分离和筛选:
于2005年7月,在重茬4年的大豆田内,选择生长健壮的大豆植株,连根拔起,收集根周土壤,从采样地点采集样品后,对每个样品分别进行分类、编号,装入灭菌的封口聚乙烯袋中,置于冰盒内带回实验室,4℃保存,2天内进行加富培养。再将上述土壤样品1g,放入选择性钾长石液体培养基(选择性钾长石液体培养基由10.0g蔗糖、0.2g K2HPO4、0.2gMgSO4·7H2O、0.2g NaCl、5.0g CaCO3、1.0g钾长石粉、0.1g CaSO4、2.0g酵母粉和1L蒸馏水组成,pH值7.2)进行加富培养(30℃,200r/min,培养24h),加富培养后将培养液梯度稀释,每个梯度浓度取出100μL以涂布法接种于选择性钾长石固体培养基(琼脂平板)每个梯度3个重复,30℃培养48h后选择单一菌落进行纯化,显微镜观查菌落的单一性,对不纯的进一步纯化,直至得到纯菌株。
将上述获得的纯菌株与大豆根腐病菌的主要致病菌尖孢镰刀菌进行抑菌实验,从中筛选出对尖孢镰刀菌具有良好拮抗作用的优良菌株。该尖孢镰刀菌由黑龙江省农垦科学院植物保护研究所提供。
采用平皿对峙培养法。将尖孢镰刀菌点接于种PDA培养基上,25℃培养5d后,用无菌的打饼器先取致病性尖孢镰刀菌菌苔均匀一致的,直径为10mm的菌饼,将菌饼置于PDA培养基培养皿中,平皿直径9cm,将菌饼置于以平皿圆心为中心的等边三角形3个顶点上,致病性尖孢镰刀菌菌饼中心与培养皿圆心相距30mm,再取已涂布接种于LA培养基上,30℃培养2d,菌苔厚薄一致,直径为10mm的待测供试菌株的菌饼置于上述接种致病性尖孢镰刀菌菌饼的PDA培养基平皿中心,待测供试菌株与致病性尖孢镰刀菌形成对峙培养局面。共设5次重复,28℃培养36h后测量抑菌圈大小,选出与致病性尖孢镰刀菌对峙培养抑菌圈最大的菌株,依据16S rDNA及生理生化试验鉴定结果判定为土地类芽胞杆菌种内的一株新菌株,命名为土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4。土地类芽孢杆菌(Paenibacillusterrae)NK3-4对大豆根腐病菌尖孢镰刀菌的抑菌带宽度达到8.0mm(如图3所示),抑制效果远远超出其它待测供试菌株。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4分解矿物,释放钾、硅、磷,固定空气中的氮:
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株能在以为磷矿石为唯一磷源的固体平板培养基上生长,在含1%Ca3(PO4)2的解磷培养液中培养8d后,用钼锑抗比色法测定培养液中速效磷的浓度为57.6~70.5mg/L。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株在摇瓶条件下表现出较强的分解硅酸盐矿物的能力。以钾长石粉为底物,培养24小时后,培养基中速效钾的浓度为127.3mg/L,菌体中速效钾浓度为22.0mg/L,培养液中速效钾浓度较不加钾长石处理对照高15.0mg/L,而且,土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌体中固定的钾较不加钾长石的处理对照组高4.8mg/L。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株在破坏硅酸盐矿物的同时,还释放出硅元素,以钾长石为底物,接菌处理滤液中的硅的浓度为193.0~226.2mg/L,较接种灭活菌处理的对照组高131.7%。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株在阿须贝(Ashby)无氮培养液中培养15d,菌液中速效氮含量可达8.1~11.6mg/L,比接种灭活菌处理的对照组高368.1%。
本实施方式土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4在减少化肥施用量的情况下,仍可使水稻、玉米、大豆等作物增产,特别是与硅肥配合使用水稻增产幅度更为显著。
实施例1
挑取土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌苔接种于钾长石液体培养基(钾长石液体培养基由10.0g蔗糖、0.2g K2HPO4、0.2g MgSO4·7H2O、0.2g NaCl、5.0g CaCO3、1.0g钾长石粉、0.1g CaSO4、2.0g酵母粉和1L蒸馏水组成,pH值7.2),另外将土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4接种于不含钾长石粉的对照组培养基(对照组培养基由10g蔗糖、0.2g K2HPO4、0.2g MgSO4·7H2O、0.2g NaCl、5.0g CaCO3、0.1g CaSO4、2.0g酵母粉和1L蒸馏水组成,pH值为7.2),以不接菌的钾长石液体培养基做为空白对照,实验设4个重复,在30℃、200r/min条件下培养24h,备用。
取上述培养24h的菌液稀释10倍,用火焰光度法测培养基中钾的浓度,另取菌液5ml于100℃水浴锅加热30min,以使菌体破碎,释放钾,冷却后,稀释10倍,测定液体中速效钾的浓度(先测出培养基与菌体钾浓度的和,这个值减去直接测定的值,即为每升液体中菌体钾的浓度)。结果表明,在接种土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4的钾长石培养基中速效钾的浓度为127.3mg/L,菌体中速效钾浓度为22.0mg/L,而不含钾长石的对照组培养基中速效钾的浓度为112.3mg/L,菌体中速效钾浓度为17.3mg/L。分别高出15.0mg/L和4.8mg/L。
取上述钾长石培养基培养的菌液稀释10倍后过滤,用钼蓝分光光度法测定滤液中速效硅的浓度,结果表明接种土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌的滤液中硅的浓度为193.0~226.2mg/L,不接菌空白对照组中硅的浓度为89.0mg/L,比不接种的空白对照组高131.7%。
土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4菌株在阿须贝(Ashby)无氮培养液中培养15d(培养条件30℃、200r/min),菌液中速效氮含量可达8.1~11.6mg/L,不接种的空白对照组速效氮含量为2.06mg/L,接种土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4比不接种的空白对照组高368.1%。
将土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4接种于解磷培养液中(解磷培养液每升含有葡萄糖10.0g、NaCl0.3g、MnSO4·4H2O0.03g、(NH4)2SO40.5g、KCl0.3g、FeSO4·7H2O0.03g和Ca3(PO4)210.0g,pH值7.2),以不接菌的作为对照,4次重复,在30℃、200r/min条件下培养8d后,用钼蓝比色法测定培养液中速效磷的浓度,接种土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4的培养基中速效磷的浓度为57.6~70.5mg/L,不接菌对照组中为13.3mg/L,前者是后者的4.8倍。
实施例2
将精选的大豆种子放入浓度为0.1%的次氯酸钠溶液中消毒3分钟,然后取出迅速用无菌水冲洗干净,再移入一灭菌圆滤纸片的无菌平板中,15粒/板,加入土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4液体生物制剂(以下均统一称NK3-4液体生物制剂)10ml,并以加入10ml无菌水作为对照组,9次重复,第3天测发芽势,第6天测发芽率。
实验结果如表2所示,NK3-4液体生物制剂能使大豆种子发芽率提高4.4个百分点。
实验结论:NK3-4液体生物制剂可做大豆种子播前处理。
表2
Figure BDA00002962466300061
实施例3
供试土壤为重茬土(连作5年大豆田)及正茬土(前茬为玉米的大豆田),前茬为玉米的大豆田土壤中未检测到镰刀菌孢子。取重茬土与正茬土风干过筛,装于2.2L盆钵中,每钵装土2.35kg。实验分为3组,第1组:大豆种子播种前用种衣剂(有效成份为15%多菌灵、10%福美双和10%克百威)按种衣剂与大豆种子1︰100的重量比拌种处理;第2组:大豆种子播种前用NK3-4液体生物制剂按10ml NK3-4液体生物制剂︰1000克大豆种子的比例拌种处理;第3组:以同比例清水拌种处理作为空白对照组。每钵播种6粒种子,出苗后定植,每钵2株,设4次重复。于大豆第3复叶和第5复叶时期测量株高、干物质积累量、结瘤情况、根腐病病情指数。
实验结果如表3所示,用NK3-4液体生物制剂和种衣剂都可降低正茬土中大豆干物质积累量及病情指数,其中NK3-4液体生物制剂明显增加了根瘤数量和重量。在重茬土中,NK3-4液体生物制剂及种衣剂对豆幼苗干物质积累量、根瘤干重和数量都高于空白对照组,且病情指数均低于空白对照组。NK3-4液体生物制剂的使用效果在3片复叶期略差于种衣剂,而在5片复叶期效果则优于种衣剂。实验表明应用NK3-4液体生物制剂的效果持久稳定。
表3
Figure BDA00002962466300071
实施例4
实验设置在大豆重茬地(连作4年大豆田),设常规施肥和常规施肥并用NK3-4液体生物制剂拌种处理两组。大豆品种为垦丰16,百粒重为18g,公顷保苗36万株。小区实验,设3次重复,随机区组排列,小区面积为16.25m2。常规施肥:尿素40kg/hm2、磷酸二铵150kg/hm2、氯化钾40kg/hm2;常规施肥并用NK3-4液体生物制剂拌种,NK3-4液体生物制剂用量为10ml/kg种子。
用NK3-4液体生物制剂拌种处理,大豆亩产量达到2680.5kg/hm2,比常规施肥(常规施肥亩产2424.0kg/hm2)高10.6%。
实施例5
2012年在黑龙江省农垦科学院水稻研究所园区实验田进行,土壤有机质20.5g/kg、全氮1.1g/kg、速效磷10.2mg/kg、速效钾218mg/kg,pH值6.5。小区面积24m2,行距25cm,穴距10cm。
实验设置9个实验组,3个重复,供试水稻品种为垦稻10,每个实验组施肥情况如表4所示。
表4
Figure BDA00002962466300081
田间管理措施均按当地种植常规方法进行,水稻收获时进行取样、考种,在每个小区内选取3m2收割测产。考种及测产结果如表5所示,常规施肥增施硅肥并使用本发明NK3-4液体生物制剂处理的可明显改善水稻产量构成因素,水稻平均产量达到10008.3kg/hm2,较常施肥增产16.4%,较只增施硅肥增产10.2%。
表5
Figure BDA00002962466300082
实施例6
供试种衣剂有效成份为15%多菌灵、10%福美双、10%克百威;市购抗重迎茬专用复合肥(施可丰牌:N13%、P2O525%、K2O10%,钼等微肥);尿素(N:46%),磷酸二铵(P2O5:46%,N:18%),氯化钾(K2O:60%),大豆品种为垦丰16,百粒重为18克,公顷保苗36万株。
实验地土壤类型为黑土,大豆重茬6年,有机质含量为3.9%,全氮1.522g/kg,速效磷43mg/kg)速效钾170mg/kg,pH值6.8。
实验设4个实验组,4次重复,小区面积16.25m2,土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4固体生物制剂(以下均统一称NK3-4固体生物制剂)每公顷用量为45kg,与化肥混匀后以基肥形式一次性施入。实验组1:NK3-4固体生物制剂+80%常规施肥;实验组2:施可丰牌抗重迎茬专用复合肥每公顷300kg;实验组3:1.3%种衣剂拌种+常规施肥;实验组4:常规施肥。常规施肥:每公顷尿素40kg、磷酸二铵150kg和氯化钾40kg。
从表6可以看出施用NK3-4固体生物制剂(实验组1)的单株粒数、粒重最高,单株荚重、茎重也在前列。实验组1产量最高,比常规施肥(实验组4)增产10.06%,比种衣剂(实验组3)增产7.3%。施用NK3-4固体生物制剂增产的同时,还减少了20%的化肥施用量。
表6
Figure BDA00002962466300091
实施例7
实验设在黑龙江省农垦科学院作物所玉米实验区内,土壤为草甸黑土。土壤耕层础养分含量为有机质3.26%、水解氮46.1%、速效磷150.3mg/kg、速效钾229.6mg/kg,pH值6.9。前茬为玉米,秋深松起垄。播种时土壤水分不足,玉米苗期、拔节后雨水充足。供试玉米品种:四早11号。
采用小区实验,6行区,行长8m,3次重复,随机区组排列,小区面积31.2m2。实验设10组,施肥情况如表7所示。
表7
Figure BDA00002962466300101
5月7日播种,人工开沟施肥,等距点播,密度6万株/hm2。播后苗前用乙草胺1500ml+赛克400g进行封闭灭草,玉米4~5叶期深松。9月26~28日收获。
实验结果如表8所示,NK3-4固体生物制剂与对照组(实验组10)间差异显著,NK3-4固体生物制剂作种肥与种子同位、种下、种围施用间差异不显著,并且较常规施肥对照增产7%以上,NK3-4固体生物制剂作种肥、叶肥、追肥间差异显著,做为种肥施用增产效果最佳;NK3-4固体生物制剂做为种肥,施用量为30kg/hm2、45kg/hm2、75kg/hm2间差异不显著,并且均较常规施肥对照增产10%。在追肥正常施用的情况下,按玉米常规施肥量计算:土地类芽孢杆菌生物固体制剂25%+化肥75%做种肥,产量比常规施提高3.9%~8.2%。
表8
Figure BDA00002962466300102
上述实施例中土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4液体生物制剂采用以下步骤制备:
A、将土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4接种至液体培养基,在180r/min条件下培养13h,然后按0.5%的接种量接种到装有液体培养基的种子罐中,种子罐中液体培养基的体积为种子罐容积的70%,在28~30℃、搅拌速度为220r/min及无菌空气通入量为1︰0.8的条件下培养11h;每升液体培养基含有10g蔗糖、0.2g K2HPO4、0.2g MgSO4、0.2gNaCl、5.0g CaCO3、1.0g CaSO4、2.0g酵母粉、5.0g淀粉、1.0g(NH4)SO4,pH值7.2~7.5;
B、经种子罐培养的土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4按5%的接种量接种到装有发酵培养基的生产罐中,生产罐中发酵培养基的体积为生产罐容积的70%,每吨发酵培养基中含有1.2kg蔗糖,2.6kg玉米淀粉,1.2kg蛋白胨,0.84kg干酵母,0.24kg硫酸镁,0.6kg CaCO3,1.2kg K2HPO4,6.3kg黄豆饼粉,18.0kg玉米面,0.9kg酵母,0.15L消泡剂、1.35kg豆油,灭菌后pH值7.2~7.5;然后在28~30℃、搅拌速度为250r/min及无菌空气通入量为1︰0.8的条件下培养至土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4发酵液中95%的以上的菌体产生芽胞,且芽胞数量超过10亿个/ml,即得到土地类芽孢杆菌(Paenibacillusterrae)NK3-4液体生物制剂。
上述实施例中土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4固体生物制剂采用以下步骤制备:将土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4液体生物制剂按液体制剂与草炭1︰10的质量比进行混合,并加入固体生物制剂总质量30%~35%的白粘土和10%~15%的腐殖酸作为辅料,挤压造粒得到土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4固体生物制剂。
Figure IDA00002962467100021

Claims (1)

1.一株土地类芽孢杆菌,其为土地类芽孢杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.7011。
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