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CN102712623B - 丙型肝炎病毒抑制剂 - Google Patents

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CN102712623B CN201080061186.1A CN201080061186A CN102712623B CN 102712623 B CN102712623 B CN 102712623B CN 201080061186 A CN201080061186 A CN 201080061186A CN 102712623 B CN102712623 B CN 102712623B
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杨忠
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陈琦
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Abstract

本发明涉及治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的化合物、组合物及方法。本发明也披露含有所述化合物的药物组合物及使用这些化合物治疗HCV感染的方法。

Description

丙型肝炎病毒抑制剂
对相关申请的交叉参考
本申请要求2009年11月11日提交的美国临时申请61/260,115及2010年8月31日提交的美国临时申请61/378,806的权益，将其内容通过引用的方式并入本申请中。
技术领域
本发明大体涉及抗病毒化合物，且更具体地涉及可抑制由丙型肝炎病毒(HCV)编码的NS5A蛋白的功能的化合物、包含所述化合物的组合物及抑制所述NS5A蛋白的功能的方法。
背景技术
HCV是主要的人类病原体，其在世界范围内感染约一亿七千万人—大致是1型人类免疫缺陷病毒感染数量的5倍。这些HCV感染个体中相当大的部分发展成严重的进行性肝脏疾病，包括肝硬化和肝细胞癌。
目前使用PEG化的干扰素和利巴韦林的组合的HCV监护标准具有实现持续的病毒应答的非最佳的成功率且引起许多副作用。因此，就开发用于解决该医学需求的有效疗法而言，存在明显和迫切的需要。
HCV是正链RNA病毒。基于对所推断氨基酸序列进行的比较和5’-非翻译区的广泛类似性，已经将HCV归类为黄病毒科(Flaviviridae family)中独立的属。黄病毒科的所有成员都具有包封的病毒体(enveloped virion)，其含有的正链RNA基因组通过翻译单一的连续的可读框而编码所有已知的病毒专属性蛋白质。
在整个HCV基因组的核苷酸序列和所编码的氨基酸序列中发现了相当程度的异质性，这是由于缺乏校正读码能力的编码的RNA依赖性RNA聚合酶的高错误率。已经表征了至少6种主要的基因型，且在世界范围内已经描述了多于50种的亚型。HCV遗传异质性的临床重要性已经证实了在单一疗法治疗中突变发生的趋势，由此期望使用额外的治疗选择。基因型对发病和治疗的可能影响仍然是难以确定的。
单链HCV RNA基因组的长度为约9500个核苷酸，且具有单一的可读框(ORF)，其编码由约3000个氨基酸组成的单一的大的多蛋白。在被感染的细胞中，这种多蛋白在多个位点被细胞蛋白酶和病毒蛋白酶裂解，从而产生结构蛋白和非结构(NS)蛋白。就HCV而言，成熟的非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的产生受到两种病毒蛋白酶的影响。认为第一种病毒蛋白酶为金属蛋白酶且在NS2-NS3接合处进行裂解；第二种病毒蛋白酶是包含在NS3(本申请也称为NS3蛋白酶)的N-端区域内的丝氨酸蛋白酶，且介导NS3下游的所有随后裂解，既在NS3-NS4A裂解位点以顺式进行裂解，又在其余的NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位点以反式进行裂解。NS4A蛋白似乎具有多种功能，其充当NS3蛋白酶的辅因子，且有助于NS3及其它病毒复制酶组分的膜定位。NS3-NS4A形成复合物是导致增加的蛋白质水解事件的效能的适当的蛋白酶活性所必须的。NS3蛋白还显示出三磷酸核苷酶和RNA解螺旋酶活性。NS5B(本申请也称为HCV聚合酶)是RNA依赖性的RNA聚合酶，其牵涉在复制酶复合物中HCV与其它HCV蛋白(包括NS5A)的复制中。
因此，期望用于治疗HCV感染的患者的化合物，其选择性抑制HCV病毒复制。特别地，期望有效抑制NS5A蛋白的功能的化合物。在例如下述文献中描述了HCV NS5A蛋白：Tan,S.L.等人，Virology,284:1-12(2001)；Park,K.-J.等人，J.Biol.Chem.,30711-30718(2003)；Tellinghuisen,T.L.等人，Nature,435:374(2005)；Love,R.A.等人，J.Virol.,83:4395(2009)；Appel,N.等人，J.Biol.Chem.,281:9833(2006)；Huang,L.,J.Biol.Chem.,280:36417(2005)；Rice,C.等人，国际专利申请WO 2006/093867。
发明内容
在本发明的第一方面，本发明提供一种式(I)化合物或其药用盐
其中：
X及X'各自独立地选自CH、CR1及N；
Y及Y'各自独立地选自CH、CR2及N；
其条件是X、X'、Y及Y′中的不超过两个为N；
R1及R2独立地选自
Figure BDA00001874284600031
Figure BDA00001874284600032
及
Figure BDA00001874284600033
每个R3独立地选自氢、氰基及卤素；
每个R4独立地选自氢及烷基，其中所述烷基可任选与相邻碳原子形成3至5元稠合环，其中所述环任选经一个或两个甲基取代；或R4与其所连接的碳形成亚乙基；
每个R5独立地选自氢及-C(O)R6；
每个R6独立地选自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、环烷基、杂环基、杂环基烷基、(NRcRd)烯基及(NRcRd)烷基；且
每个R7及R8独立地选自氢及烷基。
在第一方面的第一实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物或其药用盐，其中：
X及X'独立地选自CH及CR1；且
Y及Y'独立地选自CH及CR2。
在第一方面的第二实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物或其药用盐，其中：
X及X'独立地选自CH及CR1；且
Y及Y'各自为N。
在第一方面的第三实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物或其药用盐，其中：
Y及X'各自为N；
X选自CH及CR1；且
Y'选自CH及CR2。
在第一方面的第四实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物或其药用盐，其中：
X'为N；且
X选自CH及CR1；且
Y及Y'独立地选自CH及CR2。
在第二方面，本发明提供一种包含式(I)化合物或其药用盐及药用载体的组合物。在第二方面的第一实施方案中，所述组合物进一步包含至少一种具有抗HCV活性的其它化合物。在第二方面的第二实施方案中，至少一种所述其它化合物为干扰素或利巴韦林。在第二方面的第三实施方案中，所述干扰素选自干扰素α2B、PEG化的干扰素α、同感干扰素、干扰素α2A和淋巴细胞样干扰素τ。
在第二方面的第四实施方案中，本发明提供一种包含式(I)化合物或其药用盐、药用载体及至少一种具有抗HCV活性的其它化合物的组合物，其中至少一种所述其它化合物选自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、咪喹莫特、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺和金刚乙胺。
在第二方面的第五实施方案中，本发明提供一种包含式(I)化合物或其药用盐、药用载体及至少一种具有抗HCV活性的其它化合物，其中至少一种所述其它化合物可有效抑制靶标的功能以治疗HCV感染，所述靶标选自HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCVNS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白和IMPDH。
在第三方面，本发明提供一种在患者中治疗HCV感染的方法，其包括对所述患者给药治疗有效量的式(I)的化合物或其药用盐。在第三方面的第一实施方案中，所述方法还包括在给药式(I)的化合物或其药用盐之前、之后或同时给药至少一种具有抗HCV活性的额外化合物。在第三方面的第二实施方案中，所述额外化合物中的至少一种为干扰素或利巴韦林。在第三方面的第三实施方案中，所述干扰素选自干扰素α2B、PEG化的干扰素α、同感干扰素、干扰素α2A和淋巴细胞样干扰素τ。
在第三方面的第四实施方案中，本发明提供一种在患者中治疗HCV感染的方法，其包括对所述患者给药治疗有效量的式(I)的化合物或其药用盐，以及在给药式(I)的化合物或其药用盐之前、之后或同时给药至少一种具有抗HCV活性的额外化合物，其中所述额外化合物中的至少一种选自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、咪喹莫特、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺和金刚乙胺。
在第三方面的第五实施方案中，本发明提供一种在患者中治疗HCV感染的方法，其包括对所述患者给药治疗有效量的式(I)的化合物或其药用盐，以及在给药式(I)的化合物或其药用盐之前、之后或同时给药至少一种具有抗HCV活性的额外化合物，其中所述额外化合物中的至少一种可有效抑制靶标的功能以治疗HCV感染，所述靶标选自HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白和IMPDH。
本发明其它实施方案可包括本申请所披露的实施方案的合适组合。
本申请的其它方面和实施方案可在本申请所提供的说明书中找到。
本申请的说明书应该被解释为与化学键的法则和原理一致。在一些情况下，可能必需在任何给定位置移除氢原子以接受取代基。
应该理解的是，本发明所包括的化合物是就用作药物而言适当稳定的那些化合物。
预期任何取代基或变量在分子中的特定位置的定义独立于其在所述分子别处的定义。例如，当R1与R2均含有R4基团时，两个R4基团可相同或不同。
将本说明书中引用的所有专利、专利申请和参考文献完整引入本申请作为参考。在不一致的情况下，以本申请公开(包括定义)为准。
在本说明书中使用的以下术语具有下面指明的意义：
除非上下文明显指明，本申请使用的单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数形式。
除非另有指明，否则本发明的所有芳基、环烷基及杂环基均可如其分别定义的每一者中所述被取代。例如，芳基烷基的芳基部分可如术语“芳基”的定义中所述被取代。
本申请使用的术语“烯基”是指具有两个至六个碳原子的含有至少一个碳-碳双键的直链或支链基团。
本申请使用的术语“烯基氧基”是指经氧原子与母体分子部分连接的烯基。
本申请使用的术语“烯基氧基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的烯基氧基。
本申请使用的术语"烷氧基"是指经氧原子与母体分子部分连接的烷基。
本申请使用的术语“烷氧基烷基”是指取代有一、二或三个烷氧基的烷基。
本申请使用的术语“烷氧基烷基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的烷氧基烷基。
本申请使用的术语“烷氧基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的烷氧基。
本申请使用的术语“烷基羰基氧基”是指经氧原子与母体分子部分连接的烷基羰基。
本申请使用的术语“烷基”是指从含有一个至六个碳原子的直链或支链的饱和烃衍生的基团。在本申请的化合物中，当R4为烷基时，所述烷基可任选地与相邻的碳原子形成稠合的三元环，提供如下显示的结构：
Figure BDA00001874284600071
其中n选自1及2。
本申请使用的术语“烷基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的烷基。
本申请使用的术语“烷基硫基”是指经硫原子与母体分子部分连接的烷基。
本申请使用的术语“烷基磺酰基”是指经磺酰基与母体分子部分连接的烷基。
本申请使用的术语“芳基”是指苯基或其中一个或两个环是苯基的二环稠合环系。二环稠合环系由与四至六元芳族或非芳族碳环稠合的苯基构成。本申请的芳基可经基团中的任何可取代的碳原子与母体分子部分连接。芳基的代表性实例包括但不限于茚满基、茚基、萘基、苯基和四氢萘基。本申请的芳基任选可任选取代有一、二、三、四或五个取代基，所述取代基独立选自烯基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、第二芳基、芳基烷氧基、芳基烷基、芳基羰基、氰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基、杂环基、杂环基烷基、杂环基羰基、羟基、羟基烷基、硝基、-NRxRy、(NRxRy)烷基、氧代和-P(O)OR2，其中每个R独立选自氢和烷基，以及其中所述芳基烷基和杂环基烷基的烷基部分为未经取代的且其中所述第二芳基、芳基烷基的芳基部分、芳基羰基的芳基部分、杂环基以及杂环基烷基和杂环基羰基的杂环基部分还任选取代有一、二或三个取代基，所述取代基独立选自烷氧基、烷基、氰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基和硝基。
本申请使用的术语“芳基烷氧基”是指经氧原子与母体分子部分连接的芳基烷基。
本申请使用的术语“芳基烷氧基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的芳基烷氧基。
本申请使用的术语“芳基烷基”是指取代有一、二或三个芳基的烷基。所述芳基烷基的烷基部分还任选取代有一或两个额外的基团，所述基团独立选自烷氧基、烷基羰基氧基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基、杂环基、羟基和-NRcRd，其中所述杂环基还任选取代有一或两个取代基，所述取代基独立选自烷氧基、烷基、未经取代的芳基、未经取代的芳基烷氧基、未经取代的芳基烷氧基羰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基、-NRxRy和氧代。
本申请使用的术语“芳基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的芳基。
本申请使用的术语“氰基”是指-CN。
本申请使用的术语“环烷基”是指具有三个至十四个碳原子和0个杂原子的饱和的单环烃环系。环烷基的代表性实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、二环[3.1.1]庚基和金刚烷基。本申请的环烷基任选取代有一、二、三、四或五个取代基，所述取代基独立选自烷氧基、烷基、芳基、氰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基、杂环基、羟基、羟基烷基、硝基和-NRxRy，其中所述芳基和杂环基还任选取代有一、二或三个取代基，所述取代基独立选自烷氧基、烷基、氰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基、硝基和氧代基团。
本申请使用的术语“环烷基氧基”是指经氧原子与母体分子部分连接的环烷基。
本申请使用的术语“环烷基氧基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的环烷基氧基。
本申请使用的术语“环烷基磺酰基”是指经磺酰基与母体分子部分连接的环烷基。
本申请使用的术语“亚乙基”是指=CH2。
本申请使用的术语“甲酰”是指-CHO。
本申请使用的术语“卤代(halo)”和“卤素(halogen)”是指Cl、Br、F或I。
本申请使用的术语“卤代烷氧基”是指经氧原子与母体分子部分连接的卤代烷基。
本申请使用的术语“卤代烷氧基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的卤代烷氧基。
本申请使用的术语“卤代烷基”是指取代有一、二、三或四个卤素原子的烷基。
本申请使用的术语“杂环基”是指含有独立选自氮、氧和硫的一、二、三或四个杂原子的四元、五元、六元或七元环。所述四元环具有0个双键，所述五元环具有0至二个双键，以及所述六元环和所述七元环具有0至三个双键。术语“杂环基”还包括二环基团，其中杂环基环与另一个单环杂环基或三至七元芳族或非芳族碳环稠合；二环基团，其中所述杂环基环取代有三至七元螺环；以及桥接二环基团，诸如7-氮杂二环[2.2.1]庚-7-基、2-氮杂二环[2.2.2]辛-2-基和2-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基。本申请的杂环基可经基团中任意的碳原子或氮原子与母体分子部分连接。杂环基的实例包括但不限于苯并噻吩基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、吗啉基、噁唑基、哌嗪基、哌啶基、吡唑基、吡啶基、吡咯烷基、吡咯并吡啶基、吡咯基、喹啉基、四氢吡喃基、噻唑基、噻吩基和硫吗啉基。本申请的杂环基任选取代有一、二、三、四或五个取代基取代，所述取代基独立选自烯基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基羰基、氰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基、第二杂环基、杂环基烷基、杂环基羰基、羟基、羟基烷基、硝基、-NRxRy、(NRxRy)烷基和氧代，其中所述芳基烷基和杂环基烷基的烷基部分为未经取代的且其中所述芳基、芳基烷基的芳基部分、芳基羰基的芳基部分、第二杂环基以及杂环基烷基和杂环基羰基的杂环基部分还任选取代有一、二或三个取代基，所述取代基独立选自烷氧基、烷基、氰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基和硝基。
本申请使用的术语“杂环基烷氧基”是指经烷氧基与母体分子部分连接的杂环基。
本申请使用的术语“杂环基烷氧基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的杂环基烷氧基。
本申请使用的术语“杂环基烷基”是指取代有一、二或三个杂环基的烷基。所述杂环基烷基的烷基部分还任选取代有一或两个额外的基团，所述基团任选独立选自烷氧基、烷基羰基氧基、芳基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基和-NRcRd，其中所述芳基还任选取代有一或两个取代基，所述取代基独立选自烷氧基、烷基、未经取代的芳基、未经取代的芳基烷氧基、未经取代的芳基烷氧基羰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基和-NRxRy。
本申请使用的术语“杂环基烷基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的杂环基烷基。
本申请使用的术语“杂环基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的杂环基。
本申请使用的术语“杂环基氧基”是指经氧原子与母体分子部分连接的杂环基。
本申请使用的术语“杂环基氧基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的杂环基。
本申请使用的术语“羟基”是指-OH。
本申请使用的术语“羟基烷基”是指取代有一、二或三个羟基的烷基。
本申请使用的术语“羟基烷基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的羟基烷基。
本申请使用的术语“硝基”是指-NO2。
本申请使用的术语“-NRcRd”是指经氮原子与母体分子部分连接的两个基团，即Rc和Rd。Rc和Rd独立选自氢、烯基氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、环烷基氧基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳基氧基羰基、芳基磺酰基、环烷基、环烷基氧基羰基、环烷基磺酰基、甲酰、卤代烷氧基羰基、杂环基、杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基、杂环基氧基羰基、羟基烷基羰基、(NReRf)烷基、(NReRf)烷基羰基、(NReRf)羰基、(NReRf)磺酰基、-C(NCN)OR’和-C(NCN)NRxRy，其中R’选自烷基和未经取代的苯基，且其中所述芳基烷基、芳基烷基羰基、杂环基烷基和杂环基烷基羰基的烷基部分还任选取代有一个-NReRf基团，以及其中所述芳基，芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳基氧基羰基和芳基磺酰基的芳基部分，杂环基以及杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基和杂环基氧基羰基的杂环基部分还任选取代有一、二或三个取代基，所述取代基独立选自烷氧基、烷基、氰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基和硝基。
本申请使用的术语“(NRcRd)烯基”是指
Figure BDA00001874284600101
其中Rc和Rd如本申请所定义且每个Rq独立为氢或C1-3烷基。
本申请使用的术语“(NRcRd)烷基”是指取代有一、二或三个-NRcRd基团的烷基。所述(NRcRd)烷基的烷基部分还任选取代有一或两个额外的基团，所述基团选自烷氧基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基硫基、C2炔基芳基烷氧基羰基、羧基、环烷基、卤素、杂环基、杂环基羰基、羟基和(NReRf)羰基；其中所述杂环基还任选取代有一、二、三、四或五个取代基，所述取代基独立选自烷氧基、烷基、氰基、卤素、卤代烷氧基、卤代烷基和硝基。
本申请使用的术语“-NReRf”是指经氮原子与母体分子部分连接的两个基团，即Re和Rf。Re和Rf独立选自氢、烷基、未经取代的芳基、未经取代的芳基烷基、未经取代的环烷基、未经取代的(环烷基)烷基、未经取代的杂环基、未经取代的杂环基烷基、(NRxRy)烷基和(NRxRy)羰基。
本申请使用的术语“(NReRf)烷基”是指取代有一、二或三个-NReRf基团的烷基。
本申请使用的术语“(NReRf)烷基羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的(NReRf)烷基。
本申请使用的术语“(NReRf)羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的-NReRf基团。
本申请使用的术语“(NReRf)磺酰基”是指经磺酰基与母体分子部分连接的-NReRf基团。
本申请使用的术语“-NRxRy”是指经氮原子与母体分子部分连接的两个基团，即Rx和Ry。Rx和Ry独立选自氢、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、未经取代的芳基、未经取代的芳基烷氧基羰基、未经取代的芳基烷基、未经取代的环烷基、未经取代的杂环基及(NRx′Ry')羰基，其中Rx′及Ry′独立地选自氢及烷基。
本申请使用的术语“(NRxRy)烷基”是指取代有一、二或三个-NRxRy基团的烷基。
本申请使用的术语“(NRxRy)羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的-NRxRy基团。
本申请使用的术语“-NRxRy”是指经氮原子与母体分子部分连接的两个基团，即Rx及Ry。Rx及Ry独立地选自氢及烷基。
本申请使用的术语“(NRx'Ry')羰基”是指经羰基与母体分子部分连接的-NRx'Ry′基团。
本申请使用的术语“氧代”是指=O。
本申请使用的术语“磺酰基”是指-SO2-。
不对称中心存在于本申请的化合物中。这些中心由符号“R”或“S”表示，这取决于围绕手性碳原子的取代基的构型。应该理解的是本发明涵盖所有具有抑制NS5A的能力的立体化学异构形式或它们的混合物。化合物的单一立体异构体可由可商购得到的含有手性中心的起始物质合成制备或通过如下制备：制备立体异构体产物的混合物，接着分离诸如转化为非对映异构体的混合物，接着分离或重结晶、利用色谱法技术或在手性色谱柱上进行立体异构体的直接分离。具有特定立体化学的起始化合物为可商购得到的或可经本领域已知的技术进行制备和拆分。
本申请的某些化合物也可以可分离的不同的稳定构象形式存在。由于围绕不对称单键的阻碍旋转(例如由于位阻或环间张力)所产生的扭转不对称可允许分离不同构象异构体。本发明包括这些化合物的每个构象异构体以及它们的混合物。
本发明的化合物也以互变异构体形式存在；因此，本发明也涵盖所有互变异构形式。
术语“本发明化合物”以及等同表述意在包括式(I)的化合物及其药用立体异构体、非对映异构体和盐。类似地，提及中间体意在包括上下文允许的它们的盐。
本发明意在包括存在于本发明化合物中出现的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子数而不同质量数的原子。作为一般实例而非限制，氢的同位素包括氘与氚。碳的同位素包括13C与14C。同位素标记的本发明化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于本申请所述的方法使用适当的同位素标记的试剂替代在其它情况下所采用的未经标记的试剂来制备。所述化合物可具有多种潜在用途，例如作为标准物与试剂以确定生物学活性。在稳定的同位素的情况中，所述化合物可具有有利地改变生物学、药理学或药物动力学性质的潜力。
本申请的化合物可按药用盐的形式存在。本申请使用的术语“药用盐”表示本发明化合物的盐形式或两性离子形式，这些形式是水溶性或水可分散性的或是油溶性或油可分散性的，这些形式在合理的医药判断范围内适用于与患者的组织接触而不引起过度的毒性、刺激性、变态反应或其它问题或并发症，这与合理的益处/风险比例相称，并且这些形式就其预期的用途而言是有效的。所述盐可在化合物的最终分离和纯化期间制备，或可通过使合适的氮原子与合适的酸反应来单独制备。代表性的酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、枸橼酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐；二葡糖酸盐(digluconate)、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、甲酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、均三甲基苯磺酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、萘-2-磺酸盐、草酸盐、棕榈酸盐(palmoate)、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、三氯乙酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐等。可用于形成药用加成盐的酸的实例包括无机酸(诸如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸)以及有机酸(诸如草酸、马来酸、琥珀酸和枸橼酸)。
碱加成盐可在化合物的最终分离和纯化期间如下制备：使羧基与合适的碱诸如金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐反应，或使羧基与氨、有机伯胺、有机仲胺或有机叔胺反应。药用盐中的阳离子包括锂离子、钠离子、钾离子、钙离子、镁离子和铝离子以及无毒的胺阳离子诸如铵根离子、四甲基铵根离子、四乙基铵根离子、甲胺季胺阳离子、二甲胺季胺阳离子、三甲胺季胺阳离子、三乙胺季胺阳离子、二乙胺季胺阳离子、乙胺季胺阳离子、三丁胺季胺阳离子、吡啶季胺阳离子、N,N-二甲基苯胺季胺阳离子、N-甲基哌啶季胺阳离子、N-甲基吗啉季胺阳离子、二环己胺季胺阳离子、普鲁卡因(procaine)季胺阳离子、二苄胺季胺阳离子、N,N-二苄基苯乙胺季胺阳离子和N,N’-二苄基乙二胺季胺阳离子。可用于形成碱加成盐的其它代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。
当治疗有效量的式(I)的化合物及其药用盐可按化学物质原形式(rawchemical)给药而用于治疗时，其可按药物组合物的形式提供活性成分。因此，本发明还提供了药物组合物，其包含治疗有效量的式(I)的化合物或其药用盐以及一种或多种药用载体、稀释剂或赋形剂。本申请使用的术语“治疗有效量”是指各种活性组分的总量，所述总量足以显示出有意义的患者益处(例如病毒载量的持续减少)。所述术语当用于单独给药的一种活性成分时是指所述成分的单独量。所述术语当用于组合时是指引起治疗效果的各活性成分的组合量而不论是组合给药、连续给药或同时给药。式(I)的化合物及其药用盐如上文所述。载体、稀释剂或赋形剂就与制剂中的其它成分相容而言必须是可接受的，并且就其接受者而言必须是没有害处的。本申请的另一个方面还提供了制备药物制剂的方法，其包括将式(I)的化合物或其药用盐与一种或多种药用载体、稀释剂或赋形剂混合。本申请使用的短语“药用”是指这样的化合物、物质、组合物和/或剂型，这些形式在合理的医药判断范围内适用于与患者的组织接触而不引起过度的毒性、刺激性、变态反应或其它问题或并发症，这与合理的益处/风险比例相称，且对于它们的意在用途是有效的。
药物制剂可按单位剂量形式提供，其在每单位剂量中含有预定量的活性成分。本发明化合物的以下剂量水平即约0.01至约250毫克/千克体重(“mg/kg”)/日，优选约0.05至约100mg/kg体重/日在对HCV介导的疾病进行预防和治疗的单一疗法中是典型的。通常，本申请的药物组合物可每日给药约1至约5次，或可选择地，可按连续输注的形式给药。上述给药可用作慢性疗法或急性疗法。可与载体物质组合以制备单一剂型的活性成分的量将基于以下因素而变化：所治疗的病症、所述病症的严重程度、给药时间、给药途径、所用化合物的排泄速率、治疗的持续时间以及患者的年龄、性别、体重和状态。优选的单位剂量制剂是这样的单位剂量制剂，所述制剂含有本申请上文所述的日剂量或亚日剂量或其适当分数的活性成分。通常，治疗开始于基本上小于化合物最佳剂量的小剂量。此后，剂量以小的增幅增加，直到实现对病情的最佳效果。一般而言，化合物以如下的浓度水平给药是最期望的，所述水平通常可提供有效的抗病毒结果而不引起任何有害或有毒的副作用。
当本申请的组合物包含本申请的化合物和一种或多种额外的治疗药物或预防药物的组合时，所述化合物和所述额外的药物通常都以如下的剂量水平存在，所述剂量水平为单一疗法给药方案中所通常给药的剂量的约10至150%，更优选为约10至80%。
可对药物制剂进行调整以通过任何适当的途径来给药，所述途径为例如口服(包括口腔或舌下)途径、直肠途径、经鼻途径、局部(包括口腔、舌下或透皮)途径、阴道途径或肠胃外(包括皮下注射或输注、皮内注射或输注、肌内注射或输注、关节内注射或输注、滑膜内注射或输注、胸骨内注射或输注、鞘内注射或输注、病灶内注射或输注、静脉内注射或输注或皮内注射或输注)途径。所述制剂可通过药学领域已知的任何方法来制备，所述方法为例如将活性成分与载体或赋形剂混合。优选口服给药或注射给药。
针对口服给药而调整的药物制剂可按以下形式提供：离散的单位形式(诸如胶囊剂或片剂)；粉末剂或颗粒剂；在含水或不含水液体中的溶液剂或混悬剂；可食用的泡沫剂(foam)或搅打剂(whip)；或水包油型液态乳剂或油包水型乳剂。
例如，就以片剂或胶囊剂形式进行的口服给药而言，可将活性药物组分与口服的无毒的药用惰性载体诸如乙醇、甘油、水等混合。粉末剂如下制备：将化合物研磨至合适的微细尺寸，然后与经类似研磨的药物载体诸如可食用的碳水化合物(例如淀粉或甘露醇)混合。矫味剂、防腐剂、分散剂和着色剂也可存在。
胶囊剂如下制备：如上所述制备粉末混合物，然后填充到成形的明胶壳中。可将助流剂和润滑剂诸如胶体二氧化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固体聚乙二醇加到粉末混合物中，然后进行填充操作。也可加入崩解剂或增溶剂诸如琼脂、碳酸钙或碳酸钠以改善胶囊剂被摄入时的药物利用度。
此外，当期望或需要时，也可将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺到混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖(诸如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味剂、天然胶和合成胶(诸如阿拉伯胶、西黄蓍胶或海藻酸钠)、羧甲基纤维素、聚乙二醇等。在这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。片剂如下配制：例如制备粉末混合物，制粒或预压，加入润滑剂和崩解剂，然后压制成片剂。粉末混合物如下制备：将经合适研磨的化合物与上述稀释剂或基质以及任选的粘合剂(诸如羧甲基纤维素、海藻酸盐、凝胶或聚乙烯吡咯烷酮)、溶液延迟剂(solution retardant)(诸如石蜡)、吸收促进剂(诸如季胺盐)和/或吸收剂(诸如膨润土、高岭土或磷酸二钙)混合。粉末混合物可与粘合剂诸如糖浆、淀粉糊、阿拉伯胶液、纤维素溶液或聚合物溶液一起湿法制粒，然后挤压过筛。作为可选择的制粒方法，粉末混合物可通过压片机来处理，结果是不完全成形的预压片破裂成颗粒。可通过加入硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油来对颗粒进行润滑以防止与片剂成形模粘连。然后将经润滑的混合物压制成片剂。本申请的化合物也可与自由流动的惰性载体组合，并在不经历制粒或预压步骤的情况下直接压制成片剂。可提供透明的或不透明的保护性包衣，所述包衣由以下包衣层构成：由虫胶形成的隔离包衣层、由糖或聚合物形成的包衣层和由蜡形成的光亮包衣层。可将染料加到这些包衣中以区分不同的单位剂量。
口服流体诸如溶液剂、糖浆剂和酏剂可按剂量单位形式来制备，从而使给定的量含有预定量的化合物。糖浆剂可通过将化合物溶于经合适矫味的水溶液中来制备，而酏剂通过使用无毒的媒介物来制备。也可加入增溶剂和乳化剂(诸如乙氧基化的异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐剂、矫味添加剂(诸如薄荷油、天然甜味剂、糖精或其它人造甜味剂)等。
当适当时，可对用于口服给药的剂量单位制剂进行微囊化。也可例如通过将颗粒物质用聚合物、蜡等包衣或包埋到聚合物、蜡等中来制备制剂以延长或维持释放。
式(I)的化合物及其药用盐也可按脂质体递送系统的形式给药，所述脂质体递送系统诸如小单层脂囊(small unilamellar vesicle)、大单层脂囊(largeunilamellar vesicle)和多层脂囊(multilamellar vesicle)。脂质体可由各种磷脂诸如胆固醇、硬脂酰胺或磷脂酰胆碱来形成。
式(I)的化合物及其药用盐也可通过使用单克隆抗体作为与化合物分子偶联的单独载体来递送。化合物也可与作为靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。这些聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基甲基丙烯酸酰胺苯酚(polyhydroxypropylmethacrylamidephenol)、聚羟基乙基天冬氨酸酰胺苯酚(polyhydroxyethylaspartamidephenol)或取代有棕榈酰基的聚氧化乙烯聚赖氨酸(polyethyleneoxidepolylysine substituted with palitoyl residue)。此外，化合物可与可用于实现药物的控制释放的一类生物可降解的聚合物偶联，这类聚合物为例如聚乳酸、聚ξ-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联共聚物或水凝胶的两亲性嵌段共聚物。
针对透皮给药而调整的药物制剂可按离散的贴剂形式存在，其意在与接受者的表皮紧密接触且保持延长的时段。例如，如Pharmaceutical Research,3(6):318(1986)中所一般描述，活性成分可通过离子电渗法(iontophoresis)从贴剂中递送。
可将针对局部给药而调整的药物制剂配制成软膏剂、乳膏剂、混悬剂、洗液、粉末剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。
对于治疗眼部或其它外部组织(例如口及皮肤)，制剂优选以局部软膏或乳膏形式施用。当配制成软膏形式时，活性成分可与石蜡或水混溶性软膏基质一起使用。可替换地，活性成分可与水包油乳膏基质或油包水基质一起配制成乳膏形式。
适用于局部给药眼部的药物制剂包括滴眼剂，其中活性成分溶解或悬浮于适合的载体(特别是水性溶剂)中。
适用于局部给药口中的药物制剂包括锭剂、软锭剂及漱口剂。
进行调整以适于直肠给药的药物制剂可按栓剂或灌肠剂的形式提供。
进行调整以适于鼻部给药的药物制剂(其中载体为固体)包括粒度范围为例如20至500微米的一系列粉末，其按照吸入的方式来给药，即从接近鼻的装有粉末的容器中经由鼻道而快速吸入。用于以鼻喷雾剂或滴鼻剂的形式给药的合适制剂(其中载体为液体)包括活性成分的含水溶液或油溶液。
进行调整以适于吸入给药的药物制剂包括微细颗粒的粉尘或气雾，其可通过各种类型的计量剂量的加压的气雾器、喷雾器或吸入器来产生。
进行调整以适于阴道给药的药物制剂可按阴道栓剂、棉塞剂、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂的形式提供。
进行调整以适于肠胃外给药的药物制剂包括：含水和不含水的无菌注射溶液剂，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与所预期接受者的血液等渗的溶质；以及含水和不含水的无菌混悬剂，其可包含助悬剂和增稠剂。所述制剂可存在于单位剂量容器或多剂量容器例如密封的安瓿和小瓶中，并可在冷冻干燥的(冻干的)状态下贮存，其恰恰在使用前仅需要加入无菌液态载体例如注射用水。现用现配的注射溶液剂和混悬剂可从无菌粉末、颗粒或片剂来制备。
应该理解的是，除了上文具体提及的成分之外，在已考虑到所涉及制剂的类型的情况下，所述制剂还可包括本领域中的其它常规物质，例如适于口服给药的那些制剂可包括矫味剂。
术语“患者”既包括人类和其它哺乳动物。
术语“治疗”是指：(i)在可能易患疾病、障碍和/或病症但尚未诊断患有所述疾病、障碍和/或病症的患者中预防所述疾病、障碍和/或病症；(ii)抑制所述疾病、障碍和/或病症，即阻止其发展；和/或(iii)减轻所述疾病、障碍和/或病症，即引起所述疾病、障碍和/或病症的消退。
本申请的化合物可与环孢菌素例如环孢菌素A给药。环孢菌素A已经在临床试验中显示对HCV具有活性(Hepatology,38:1282(2003)；Biochem.Biophys.Res.Commun.,313:42(2004)；J.Gastroenterol.,38:567(2003))。
下表1列出了可与本申请的化合物一起给药的化合物的一些示例性实例。本申请的化合物可在联合治疗中与其它具有抗HCV活性的化合物同时给药或分开给药，或通过将各化合物组合成组合物来给药。
表1
Figure BDA00001874284600191
Figure BDA00001874284600201
本申请的化合物也可用作实验室试剂。所述化合物在提供以下研究工具中是有帮助的，这些研究工具用于设计病毒复制测定、验证动物测定系统和进行结构生物学研究以进一步提高对HCV疾病机理的认识。此外，本申请的化合物可例如通过竞争性抑制作用而用于建立或确定其它抗病毒化合物的结合位点。
本申请的化合物也可用于处理或预防物质的病毒污染，因此降低了与这些物质(例如血液、组织、手术器械和手术外衣、实验室仪器和实验室外衣以及血液采集装置和物质或输血装置和物质)发生接触的实验室人员或医务人员或患者感染病毒的风险。
当具有式(I)的化合物通过合成性过程或通过代谢性过程(包括发生在人类或动物体内(在体内)的那些代谢性过程或发生在体外的过程)来制备时，本发明旨在包括具有式(I)的化合物。
在本申请中(尤其包括在以下示例性实施例中)使用的缩写是本领域技术人员公知的。所使用的一些缩写如下：Ph为苯基；DME为1,2-二甲氧基乙烷；TFA为三氟乙酸；DCM为二氯甲烷；HATU为O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐；DMF为N,N-二甲基甲酰胺；iPr2EtN、DIEA或DIPEA为二异丙基乙胺；h、hr或hrs为小时；MeOD为CD3OD；MeOH为甲醇；min或mins为分钟；EtOH为乙醇；Et为乙基；DMSO为二甲基亚砜；rt或RT或Rt为室温或保留时间(将视上下文而定)；EDCI为1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；Boc、boc或BOC为叔丁氧基羰基；EtOAc或EtOAc为乙酸乙酯；THF为四氢呋喃；TBDPS为叔丁基二甲基甲硅烷基；DMAP为4-二甲基氨基吡啶；TBAF为四丁基氟化铵；OAc为乙酸酯；AcOH为乙酸；SEMCl为2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯；d为天；TEA或Et3N为三乙胺；ACN或MeCN为乙腈；NCS为N-氯琥珀酰亚胺；NBS为N-溴琥珀酰亚胺；Et2O为乙醚；DCE为1,2-二氯乙烷；d为天；及DEA为二乙胺。
具体实施方式
本发明现将结合不意在限制本发明范围的某些实施方案来描述。相反，本发明涵盖可包括在权利要求的范围内的所有替代形式、修改及等价形式。因此，以下实施例(包括具体实施方案)将示例说明本发明的一种实践，应了解所述实施例出于示例说明某些实施方案的目的且为了提供认为是最适用且最容易理解的对于其程序及概念方面的描述而提出。
起始物质可由商购资源得到或通过本领域技术人员已知的充分建立的文献方法来制备。
常用Cap的合成
化合物分析条件
纯度评估和低分辨率质量分析在偶联有Waters
Figure BDA00001874284600211
ZQ MS系统的Shimadzu LC系统上进行。应该注意的是，不同的仪器，保留时间可能稍微有些变化。额外的LC条件适用于本部分，除非另作说明。
条件-MS-W1
Figure BDA00001874284600212
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=2分钟
终止时间=3分钟
流速=5mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
条件-MS-W2
Figure BDA00001874284600221
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=3分钟
终止时间=4分钟
流速=4mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
条件-MS-W5
Figure BDA00001874284600222
起始%B=0
最终%B=30
梯度时间=2分钟
终止时间=3分钟
流速=5mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
条件-D1
Figure BDA00001874284600223
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=3分钟
终止时间=4分钟
流速=4mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
条件-D2
Figure BDA00001874284600224
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=3分钟
终止时间=4分钟
流速=4mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
条件-M3
Figure BDA00001874284600231
起始%B=0
最终%B=40
梯度时间=2分钟
终止时间=3分钟
流速=5mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
条件I
Figure BDA00001874284600232
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=2分钟
终止时间=3分钟
流速=4mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
条件II
Figure BDA00001874284600233
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=2分钟
终止时间=3分钟
流速=5mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
条件III
Figure BDA00001874284600241
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=3分钟
终止时间=4分钟
流速=4mL/min
波长=220nm
溶剂A=0.1%TFA在10%甲醇/90%H2O中
溶剂B=0.1%TFA在90%甲醇/10%H2O中
Cap-1
Figure BDA00001874284600242
(R)-2-(二甲基氨基)-2-苯基乙酸
将10%Pd/C(2.0g)的甲醇(10mL)混悬液加入至(R)-2-苯基甘氨酸(10g，66.2mmol)、甲醛(33mL 37wt%的水溶液)、1N HCl(30mL)及甲醇(30mL)的混合物中，且暴露于H2(60psi)中达3小时。经硅藻土
Figure BDA00001874284600243
过滤反应混合物，且在真空中浓缩滤液。使所得粗物质由异丙醇中重结晶，得到呈白色针状的Cap-1的盐酸盐(4.0g)。旋光度：-117.1°[c=9.95mg/mL于H2O中；λ=589nm]。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz):δ7.43-7.34(m,5H),4.14(s,1H),2.43(s,6H)；LC(条件I)：RT=0.25；LC-MS:[M+H]+C10H14NO2的分析计算值：180.10；实测值：180.17；HRMS:[M+H]+C10H14NO2的分析计算值：180.1025；实测值：180.1017。
Figure BDA00001874284600251
(R)-2-(二乙基氨基)-2-苯基乙酸
历时数分钟将NaBH3CN(6.22g，94mmol)分批加入至经冷却(冰/水)的(R)-2-苯基甘氨酸(6.02g，39.8mmol)与甲醇(100mL)的混合物中，且搅拌5分钟。历时10分钟逐滴加入乙醛(10mL)且在相同冷却温度持续搅拌45分钟并在环境温度持续搅拌约6.5小时。用冰水浴反冷却反应混合物，用水(3mL)处理，接着历时约45分钟通过逐滴加入浓HCl来淬灭直至混合物的pH值为约1.5-2.0。移除冷却浴且持续搅拌，同时加入浓HCl以保持混合物的pH值为约1.5-2.0。搅拌反应混合物过夜，过滤移除白色混悬液，且在真空中浓缩滤液。使粗物质由乙醇中重结晶，得到两批呈亮白色固体状的Cap-2的盐酸盐(第1批：4.16g；第2批：2.19g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):10.44(1.00,宽单峰,1H),7.66(m,2H),7.51(m,3H),5.30(s,1H),3.15(宽多重峰,2H),2.98(宽多重峰,2H),1.20(明显的宽单峰,6H)。第1批:[α]25-102.21°(c=0.357,H2O)；第2批:[α]25-99.7°(c=0.357,H2O)。LC(条件I)：RT=0.43分钟；LC-MS:[M+H]+C12H18NO2的分析计算值：208.13；实测值：208.26。
Cap-3
Figure BDA00001874284600252
将乙醛(5.0mL，89.1mmol)及10%Pd/C(720mg)的甲醇/H2O(4mL/1mL)混悬液先后加入至经冷却(约15℃)的(R)-2-苯基甘氨酸(3.096g，20.48mmol)、1N HCl(30mL)及甲醇(40mL)的混合物中。移除冷却浴且在H2气囊下搅拌反应混合物17小时。再加入乙醛(10mL，178.2mmol)且在H2气氛持续搅拌24小时[应注意：在整个反应过程中按需要补充H2供给]。经硅藻土
Figure BDA00001874284600253
过滤反应混合物，且在真空中浓缩滤液。使所得粗物质由异丙醇中重结晶，得到呈亮白色固体状的(R)-2-(乙基氨基)-2-苯基乙酸的盐酸盐(2.846g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ14.15(宽单峰,1H),9.55(宽单峰,2H),7.55-7.48(m,5H),2.88(宽多重峰,1H),2.73(宽多重峰,1H),1.20(明显的三重峰,J＝7.2,3H)。LC(条件I)：RT=0.39分钟；>95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C10H14NO2的分析计算值：180.10；实测值：180.18。
将10%Pd/C(536mg)的甲醇/H2O(3mL/1mL)混悬液加入至(R)-2-(乙基氨基)-2-苯基乙酸/HCl(1.492g，6.918mmol)、甲醛(20mL 37wt%的水溶液)、1N HCl(20mL)及甲醇(23mL)的混合物中。在H2气囊下搅拌反应混合物约72小时，其中按需要补充H2供给。经硅藻土
Figure BDA00001874284600261
过滤反应混合物且在真空中浓缩滤液。使所得粗物质由异丙醇(50mL)中重结晶，得到呈白色固体状的Cap-3的盐酸盐(985mg)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ10.48(宽单峰,1H),7.59-7.51(m,5H),5.26(s,1H),3.08(明显的宽单峰,2H),2.65(宽单峰,3H),1.24(宽多重峰,3H)。LC(条件I)：RT=0.39分钟；>95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C11H16NO2的分析计算值：194.12；实测值：194.18；HRMS:[M+H]+C11H16NO2的分析计算值：194.1180；实测值：194.1181。
Cap-4
Figure BDA00001874284600262
(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-苯基乙酸
历时6分钟将ClCO2Me(3.2mL，41.4mmol)逐滴加入至经冷却(冰/水)的(R)-2-氨基-2-苯基乙酸叔丁酯/HCl(9.877g，40.52mmol)及二异丙基乙胺(14.2mL，81.52mmol)的THF(410mL)半溶液中，且在类似温度搅拌5.5小时。在真空中除去挥发性组分，且使残余物分配于水(100mL)与乙酸乙酯(200mL)之间。用1N HCl(25mL)及饱和NaHCO3溶液(30mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。用己烷研磨所得无色油状物，过滤并用己烷(100mL)洗涤，得到呈白色固体状的(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-苯基乙酸叔丁酯(7.7g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):7.98(d,J=8.0,1H),7.37-7.29(m,5H),5.09(d,J＝8,1H),3.56(s,3H),1.33(s,9H)。LC(条件I)：RT=1.53分钟；约90%均匀性指数；LC-MS:[M+Na]+C14H19NNaO4的分析计算值：288.12；实测值：288.15。
历时7分钟将TFA(16mL)逐滴加入至经冷却(冰/水)的以上产物的CH2Cl2(160mL)溶液中，移除冷却浴且搅拌反应混合物20小时。因为脱保护仍未完成，所以再加入TFA(1.0mL)且再持续搅拌2小时。在真空中除去挥发性组分，且用乙醚(15ml)及己烷(12mL)处理所得油状残余物，得到沉淀物。过滤所述沉淀物且用乙醚/己烷(约1:3比例；30mL)洗涤并在真空中干燥，得到呈白色绒毛状固体的Cap-4(5.57g)。旋光度：-176.9°[c=3.7mg/mL于H2O中；λ=589nm]。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ12.84(宽单峰,1H),7.96(d,J＝8.3,1H),7.41-7.29(m,5H),5.14(d,J＝8.3,1H),3.55(s,3H)。LC(条件I)：RT=1.01分钟；>95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C10H12NO4的分析计算值：210.08；实测值：210.17；HRMS:[M+H]+C10H12NO4的分析计算值：210.0766；实测值：210.0756。
Cap-5
Figure BDA00001874284600271
在100℃将(R)-2-苯基甘氨酸(1.0g，6.62mmol)、1,4-二溴丁烷(1.57g，7.27mmol)及Na2CO3(2.10g，19.8mmol)于乙醇(40mL)中的混合物加热21小时。使反应混合物冷却至环境温度并过滤，且在真空中浓缩滤液。将残余物溶解于乙醇中且用1N HCl酸化至pH 3-4，并在真空中除去挥发性组分。通过反相HPLC(水/甲醇/TFA)纯化所得粗物质，得到呈半粘稠白色泡沫状的Cap-5的三氟乙酸盐(1.0g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,500MHz)δ10.68(宽单峰,1H),7.51(m,5H),5.23(s,1H),3.34(明显的宽单峰,2H),3.05(明显的宽单峰,2H),1.95(明显的宽单峰,4H)；RT=0.30分钟(条件I)；>98%均匀性指数；LC/MS:[M+H]+C12H16NO2的分析计算值：206.12；实测值：206.25。
Cap-6
Figure BDA00001874284600272
通过使用Cap-5的制备方法，由(R)-2-苯基甘氨酸及1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷合成Cap-6的三氟乙酸盐。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,500MHz)δ12.20(宽单峰,1H),7.50(m,5H),4.92(s,1H),3.78(明显的宽单峰,4H),3.08(明显的宽单峰,2H),2.81(明显的宽单峰,2H)；RT=0.32分钟(条件I)；>98%；LC/MS:[M+H]+C12H16NO3的分析计算值：222.11；实测值：222.20；HRMS:[M+H]+C12H16NO3的分析计算值：222.1130；实测值：222.1121。
Cap-7
将对甲苯磺酰氯(8.65g，45.4mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液逐滴加入至经冷却(-5℃)的(S)-2-羟基-2-苯基乙酸苄酯(10.0g，41.3mmol)、三乙胺(5.75mL，41.3mmol)及4-二甲基氨基吡啶(0.504g，4.13mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液中，同时保持温度介于-5℃与0℃之间。在0℃搅拌反应混合物9小时，接着储存于冷藏箱(-25℃)中且保持14小时。使其解冻至环境温度且用水(200mL)、1N HCl(100mL)及盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩，得到呈粘稠油状的2-苯基-2-(甲苯磺酰氧基)乙酸苄酯，其在静置后固化(16.5g)。未监测产物的手性完整性且所述产物无需进一步纯化即用于下一步骤中。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,500MHz)δ7.78(d,J＝8.6,2H),7.43-7.29(m,10H),7.20(m,2H),6.12(s,1H),5.16(d,J＝12.5,1H),5.10(d,J＝12.5,1H),2.39(s,3H)。RT=3.00(条件III)；>90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C22H20NaO5S的分析计算值：419.09；实测值：419.04。
在65℃将2-苯基-2-(甲苯磺酰氧基)乙酸苄酯(6.0g，15.1mmol)、1-甲基哌嗪(3.36mL，30.3mmol)及N,N-二异丙基乙胺(13.2mL，75.8mmol)的THF(75mL)溶液加热7小时。使反应混合物冷却至环境温度且在真空中除去挥发性组分。使残余物分配于乙酸乙酯与水之间，且用水及盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。通过快速色谱法(硅胶，乙酸乙酯)纯化所得粗物质，得到呈橙棕色粘稠油状的2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-苯基乙酸苄酯(4.56g)。手性HPLC分析(
Figure BDA00001874284600282
OD-H)表明样品为38.2至58.7比例的立体异构体混合物。如下实现立体异构体的分离：将产物溶解于120mL乙醇/庚烷(1:1)中且注射(每次注射5mL)至手性HPLC柱(Chiracel OJ，5cm ID×50cm L，20μm)上，用85:15庚烷/乙醇以75mL/min洗脱，且在220nm监测。得到呈粘稠油状的立体异构体-1(1.474g)及立体异构体-2(2.2149g)。1H NMR(CDCl3,δ=7.26,500MHz)7.44-7.40(m,2H),7.33-7.24(m,6H),7.21-7.16(m,2H),5.13(d,J＝12.5,1H),5.08(d,J＝12.5,1H),4.02(s,1H),2.65-2.38(明显的宽单峰,8H),2.25(s,3H)。RT=2.10(条件III)；>98%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C20H25N2O2的分析计算值：325.19；实测值：325.20。
将2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-苯基乙酸苄酯(1.0g，3.1mmol)的任一立体异构体的甲醇(10mL)溶液加入至10%Pd/C(120mg)的甲醇(5.0mL)混悬液中。在密切监测下，使反应混合物暴露于氢气囊且保持不超过50分钟。完成反应后，立即经硅藻土过滤催化剂且在真空中浓缩滤液，得到呈棕褐色泡沫状的受苯基乙酸污染的Cap-7(867.6mg；质量超过理论收率)。产物无需进一步纯化即用于下一步骤中。1H NMR(DMSO-d6，δ=2.5,500MHz)δ7.44-7.37(m,2H),7.37-7.24(m,3H),3.92(s,1H),2.63-2.48(app.宽单峰,2H),2.48-2.32(m,6H),2.19(s,3H)；RT=0.31(条件II)；>90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C13H19N2O2的分析计算值：235.14；实测值：235.15；HRMS:[M+H]+C13H19N2O2的分析计算值：235.1447；实测值：235.1440。
根据Cap-7的合成，通过SN2置换步骤使用适当胺(即Cap-8使用4-羟基哌啶且Cap-9使用(S)-3-氟吡咯烷)且如下所述修改分离各个立体异构中间体的条件来进行Cap-8及Cap-9的合成。
Cap-8
通过使用以下条件来实现中间体2-(4-羟基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸苄酯的立体异构分离：将化合物(500mg)溶解于乙醇/庚烷(5mL/45mL)中。将所得溶液注射(每次注射5mL)至手性HPLC柱(Chiracel OJ，2cm ID×25cm L，10μm)上，用80:20庚烷/乙醇以10mL/min洗脱，在220nm监测，得到呈浅黄色粘稠油状的186.3mg立体异构体-1及209.1mg立体异构体-2。根据Cap-7的制备，使这些苄酯氢解，得到Cap-8：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,500MHz)7.40(d,J＝7,2H),7.28-7.20(m,3H),3.78(s 1H),3.46(m,1H),2.93(m,1H),2.62(m,1H),2.20(m,2H),1.70(m,2H),1.42(m,2H)。RT=0.28(条件II)；>98%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C13H18NO3的分析计算值：236.13；实测值：236.07；HRMS:[M+H]+C13H18NO3的计算值：236.1287；实测值：236.1283。
Cap-9
通过使用以下条件来实现中间体2-((S)-3-氟吡咯烷-1-基)-2-苯基乙酸苄酯的非对映异构分离：在手性HPLC柱(Chiracel OJ-H，0.46cm ID×25cm L，5μm)上，在10巴压力、70mL/min流速及35℃的温度用95%CO2/5%甲醇(含0.1%TFA)洗脱来分离酯(220mg)。浓缩各个立体异构体的HPLC洗脱液，将残余物溶解于CH2Cl2(20mL)中且用水性介质(10mL水+1mL饱和NaHCO3溶液)洗涤。干燥(MgSO4)有机相，过滤并在真空中浓缩，得到92.5mg馏分-1及59.6mg馏分-2。根据Cap-7的制备使这些苄酯氢解，制得Cap-9a及Cap-9b。Cap-9a(非对映异构体-1；样品为在反相HPLC上使用H2O/甲醇/TFA溶剂纯化后所得的三氟乙酸盐)：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,400MHz)7.55-7.48(m,5H),5.38(多重峰的二重峰,J＝53.7,1H),5.09(宽单峰,1H),3.84-2.82(宽多重峰,4H),2.31-2.09(m,2H)。RT=0.42(条件I)；>95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C12H15FNO2的分析计算值：224.11；实测值：224.14；Cap-9b(非对映异构体-2)：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,400MHz)7.43-7.21(m,5H),5.19(多重峰的二重峰,J＝55.9,1H),3.97(s,1H),2.95-2.43(m,4H),2.19-1.78(m,2H)。RT=0.44(条件I)；LC-MS:[M+H]+C12H15FNO2的分析计算值：224.11；实测值：224.14。
Cap-10
Figure BDA00001874284600302
向D-脯氨酸(2.0g，17mmol)及甲醛(2.0mL 37wt%的水溶液)的甲醇(15mL)溶液中加入10%Pd/C(500mg)的甲醇(5mL)混悬液。在氢气囊下搅拌混合物23小时。经硅藻土
Figure BDA00001874284600303
过滤反应混合物且在真空中浓缩，得到呈灰白色固体状的Cap-10(2.15g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,500MHz)3.42(m,1H),3.37(dd,J＝9.4,6.1,1H),2.85-2.78(m,1H),2.66(s,3H),2.21-2.13(m,1H),1.93-1.84(m,2H),1.75-1.66(m,1H)。RT=0.28(条件II)；>98%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C6H12NO2的分析计算值：130.09；实测值：129.96。
Cap-11
Figure BDA00001874284600311
在氢气囊下将(2S,4R)-4-氟吡咯烷-2-羧酸(0.50g，3.8mmol)、甲醛(0.5mL 37wt%的水溶液)、12N HCl(0.25mL)及10%Pd/C(50mg)于甲醇(20mL)中的混合物搅拌19小时。经硅藻土
Figure BDA00001874284600312
过滤反应混合物且在真空中浓缩滤液。使残余物由异丙醇中重结晶，得到呈白色固体状的Cap-11的盐酸盐(337.7mg)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,500MHz)5.39(d m,J＝53.7,1H),4.30(m,1H),3.90(ddd,J＝31.5,13.5,4.5,1H),3.33(dd,J＝25.6,13.4,1H),2.85(s,3H),2.60-2.51(m,1H),2.39-2.26(m,1H)。RT=0.28(条件II)；>98%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C6H11FNO2的分析计算值：148.08；实测值：148.06。
Cap-12(与Cap-52相同)
Figure BDA00001874284600313
(S)-2-(甲氧基羰基氨基)丙酸
将L-丙氨酸(2.0g，22.5mmol)溶解于10%碳酸钠水溶液(50mL)中，且向其中加入氯甲酸甲酯(4.0mL)的THF(50mL)溶液。在环境条件下搅拌反应混合物4.5小时且在真空中浓缩。将所得白色固体溶解于水中且用1N HCl酸化至pH~2-3。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取所得溶液，干燥(Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩，得到无色油状物(2.58g)。通过反相HPLC(H2O/甲醇/TFA)纯化500mg该物质，得到150mg呈无色油状的Cap-12。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,500MHz)7.44(d,J＝7.3,0.8H),7.10(宽单峰,0.2H),3.97(m,1H),3.53(s,3H),1.25(d,J＝7.3,3H)。
Cap-13
在氢气气氛(50psi)下将L-丙氨酸(2.5g，28mmol)、甲醛(8.4g，37wt%)、1N HCl(30mL)及10%Pd/C(500mg)于甲醇(30mL)中的混合物搅拌5小时。经硅藻土
Figure BDA00001874284600315
过滤反应混合物且在真空中浓缩滤液，得到呈油状的Cap-13的盐酸盐，其在真空静置后固化(4.4g；质量超过理论收率)。产物无需进一步纯化即使用。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5,500MHz)δ12.1(宽单峰,1H),4.06(q,J＝7.4,1H),2.76(s,6H),1.46(d,J＝7.3,3H)。
Cap-14
Figure BDA00001874284600321
(R)-2-苯基-2-(哌啶-1-基)乙酸
步骤1：在0℃在甲醇中搅拌(R)-(-)-D-苯基甘氨酸叔丁酯(3.00g，12.3mmol)、NaBH3CN(0.773g，12.3mmol)、KOH(0.690g，12.3mmol)及乙酸(0.352mL，6.15mmol)的混合物。历时5分钟向该混合物中逐滴加入戊二醛(2.23mL，12.3mmol)。搅拌反应混合物，同时使其温热至环境温度且在相同温度持续搅拌16小时。随后除去溶剂且用10%NaOH水溶液及乙酸乙酯分配残余物。分离有机相，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩干燥，得到澄清油状物。通过反相制备性HPLC(Primesphere C-18，30×100mm；CH3CN-H2O-0.1%TFA)纯化该物质，产生呈澄清油状的中间体酯(2.70g，56%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53-7.44(m,3H),7.40-7.37(m,2H),3.87(d,J＝10.9Hz,1H),3.59(d,J＝10.9Hz,1H),2.99(t,J＝11.2Hz,1H),2.59(t,J＝11.4Hz,1H),2.07-2.02(m,2H),1.82(d,J＝1.82Hz,3H),1.40(s,9H)。LC-MS:C17H25NO2的分析计算值：275；实测值：276(M+H)+。
步骤2：向经搅拌的中间体酯(1.12g，2.88mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入TFA(3mL)。在环境温度搅拌反应混合物4小时，接着将其浓缩干燥，产生浅黄色油状物。使用反相制备性HPLC(Primesphere C-18，30×100mm；CH3CN-H2O-0.1%TFA)纯化所述油状物。合并适当馏分并在真空中浓缩干燥。接着将残余物溶解于最少量甲醇中且施加于MCX LP萃取柱(2×6g)上。用甲醇(40mL)淋洗所述柱，接着使用2M氨水的甲醇溶液(50mL)洗脱所需化合物。合并含有产物的馏分并浓缩，将残余物溶解于水中。冻干该溶液，得到呈浅黄色固体状的标题化合物(0.492g，78%)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.50(s,5H),5.13(s,1H),3.09(宽单峰,2H),2.92-2.89(m,2H),1.74(m,4H),1.48(宽单峰,2H)。LC-MS:C13H17NO2的分析计算值：219；实测值：220(M+H)+。
Cap-15
步骤1：2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向α-溴苯基乙酸(10.75g，0.050mol)、(S)-(-)-1-苯基乙醇(7.94g，0.065mol)及DMAP(0.61g，5.0mmol)于无水二氯甲烷(100mL)中的混合物中一次性加入固体EDCI(12.46g，0.065mol)。在室温在Ar下搅拌所得溶液18小时，接着用乙酸乙酯稀释，洗涤(H2O×2、盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，产生淡黄色油状物。对该油状物进行快速色谱法(SiO2/己烷-乙酸乙酯，4:1)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物(11.64g，73%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53-7.17(m,10H),5.95(q,J＝6.6Hz,0.5H),5.94(q,J＝6.6Hz,0.5H),5.41(s,0.5H),5.39(s,0.5H),1.58(d,J＝6.6Hz,1.5H),1.51(d,J＝6.6Hz,1.5H)。
步骤2：(R)-2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(0.464g，1.45mmol)的THF(8mL)溶液中加入三乙胺(0.61mL，4.35mmol)，随后加入四丁基碘化铵(0.215g，0.58mmol)。在室温搅拌反应混合物5分钟，接着加入4-甲基-4-羟基哌啶(0.251g，2.18mmol)的THF(2mL)溶液。在室温搅拌混合物1小时，接着在55-60℃(油浴温度)加热4小时。接着用乙酸乙酯(30mL)稀释经冷却的反应混合物，洗涤(H2O×2、盐水)，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(0-60%乙酸乙酯-己烷)纯化残余物，首先得到呈白色固体状的标题化合物的(S,R)-异构体(0.306g，60%)，接着得到也呈白色固体状的相应(S,S)-异构体(0.120g，23%)。(S,R)-异构体：1H NMR(CD3OD)δ7.51-7.45(m,2H),7.41-7.25(m,8H),5.85(q,J＝6.6Hz,1H),4.05(s,1H),2.56-2.45(m,2H),2.41-2.29(m,2H),1.71-1.49(m,4H),1.38(d,J＝6.6Hz,3H),1.18(s,3H)。LCMS:C22H27NO3的分析计算值：353；实测值：354(M+H)+。(S,S)-异构体：1H NMR(CD3OD)δ7.41-7.30(m,5H),7.20-7.14(m,3H),7.06-7.00(m,2H),5.85(q,J＝6.6Hz,1H),4.06(s,1H),2.70-2.60(m,1H),2.51(dt,J＝6.6,3.3Hz,1H),2.44-2.31(m,2H),1.75-1.65(m,1H),1.65-1.54(m,3H),1.50(d,J＝6.8Hz,3H),1.20(s,3H)。LC-MS:C22H27NO3的分析计算值：353；实测值：354(M+H)+。
步骤3：(R)-2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(0.185g，0.52mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)且在室温搅拌混合物2小时。随后在真空中除去挥发性物质且通过反相制备性HPLC(Primesphere C-18，20×100mm；CH3CN-H2O-0.1%TFA)纯化残余物，产生呈淡蓝色固体状的标题化合物(呈三氟乙酸盐形式)(0.128g，98%)。LC-MS:C14H19NO3的分析计算值：249；实测值：250(M+H)+。
Cap-16
Figure BDA00001874284600341
步骤1：2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯基乙酯：在室温将2-氟苯基乙酸(5.45g，35.4mmol)、(S)-1-苯基乙醇(5.62g，46.0mmol)、EDCI(8.82g，46.0mmol)及DMAP(0.561g，4.60mmol)于CH2Cl2(100mL)中的混合物搅拌12小时。接着浓缩溶剂且用H2O-乙酸乙酯分配残余物。分离各相且用乙酸乙酯(2次)反萃取水层。洗涤(H2O、盐水)合并的有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(
Figure BDA00001874284600342
/0-20%乙酸乙酯-己烷)纯化残余物，得到呈无色油状的标题化合物(8.38g，92%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.32-7.23(m,7H),7.10-7.04(m,2),5.85(q,J＝6.5Hz,1H),3.71(s,2H),1.48(d,J＝6.5Hz,3H)。
步骤2：(R)-2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯：在0℃向2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯基乙酯(5.00g，19.4mmol)的THF(1200mL)溶液中加入DBU(6.19g，40.7mmol)且使溶液温热至室温同时搅拌30分钟。接着使溶液冷却至-78℃，加入CBr4(13.5g，40.7mmol)的THF(100mL)溶液，使混合物温热至-10℃且在此温度搅拌2小时。用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应混合物且分离各层。用乙酸乙酯(2次)反萃取水层且洗涤(H2O、盐水)合并的有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。向残余物中加入哌啶(5.73mL，58.1mmol)且在室温搅拌溶液24小时。接着在真空中浓缩挥发性物质且通过硅胶色谱法(
Figure BDA00001874284600351
/0-30%乙醚-己烷)纯化残余物，得到呈黄色油状的非对映异构体的纯混合物(2:1比例，根据1H NMR)(2.07g，31%)，以及未反应的起始物质(2.53g，51%)。对非对映异构混合物进行进一步色谱法(
Figure BDA00001874284600352
/0-10%乙醚-甲苯)纯化，得到呈无色油状的标题化合物(0.737g，11%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.52(ddd,J＝9.4,7.6,1.8Hz,1H),7.33-7.40(m,1),7.23-7.23(m,4H),7.02-7.23(m,4H),5.86(q,J＝6.6Hz,1H),4.45(s,1H),2.39-2.45(m,4H),1.52-1.58(m,4H),1.40-1.42(m,1H),1.38(d,J＝6.6Hz,3H)。LC-MS:C21H24FNO2的分析计算值：341；实测值：342(M+H)+。
步骤3：(R)-2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸：在室温及大气压(H2气囊)使(R)-2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯(0.737g，2.16mmol)与20%Pd(OH)2/C(0.070g)于乙醇(30mL)中的混合物氢化2小时。接着用Ar净化溶液，经硅藻土
Figure BDA00001874284600353
过滤，且在真空中浓缩。此步骤得到呈无色固体状的标题化合物(0.503g，98%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.65(ddd,J＝9.1,7.6,1.5Hz,1H),7.47-7.53(m,1H),7.21-7.30(m,2H),3.07-3.13(m,4H),1.84(宽单峰,4H),1.62(宽单峰,2H)。LC-MS:C13H16FNO2的分析计算值：237；实测值：238(M+H)+。
Cap-17
Figure BDA00001874284600354
步骤1：(R)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(1.50g，4.70mmol)的THF(25mL)溶液中加入三乙胺(1.31mL，9.42mmol)，随后加入四丁基碘化铵(0.347g，0.94mmol)。在室温搅拌反应混合物5分钟，接着加入4-苯基-4-羟基哌啶(1.00g，5.64mmol)的THF(5mL)溶液。搅拌混合物16小时，接着用乙酸乙酯(100mL)稀释，洗涤(H2O×2、盐水)，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。在硅胶柱上纯化(0-60%乙酸乙酯-己烷)残余物，得到非对映异构体的约2:1混合物，如通过1H NMR判断。使用超临界流体色谱法(
Figure BDA00001874284600355
OJ-H，30×250mm；20%乙醇，在CO2中，在35℃)进行这些异构体的分离，首先产生呈黄色油状的标题化合物的(R)-异构体(0.534g，27%)，接着为也呈黄色油状的相应(S)-异构体(0.271g，14%)。(S,R)-异构体：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.55-7.47(m,4H),7.44-7.25(m,10H),7.25-7.17(m,1H),5.88(q,J＝6.6Hz,1H),4.12(s,1H),2.82-2.72(m,1H),2.64(dt,J＝11.1,2.5Hz,1H),2.58-2.52(m,1H),2.40(dt,J＝11.1,2.5Hz,1H),2.20(dt,J＝12.1,4.6Hz,1H),2.10(dt,J＝12.1,4.6Hz,1H),1.72-1.57(m,2H),1.53(d,J＝6.5Hz,3H)。LC-MS:C27H29NO3的分析计算值：415；实测值：416(M+H)+；(S,S)-异构体：H1NMR(400MHz,CD3OD)δ7.55-7.48(m,2H),7.45-7.39(m,2H),7.38-7.30(m,5H),7.25-7.13(m,4H),7.08-7.00(m,2H),5.88(q,J＝6.6Hz,1H),4.12(s,1H),2.95-2.85(m,1H),2.68(dt,J＝11.1,2.5Hz,1H),2.57-2.52(m,1H),2.42(dt,J＝11.1,2.5Hz,1H),2.25(dt,J＝12.1,4.6Hz,1H),2.12(dt,J=12.1,4.6Hz,1H),1.73(dd,J＝13.6,3.0Hz,1H),1.64(dd,J＝13.6,3.0Hz,1H),1.40(d,J=6.6Hz,3H)。LC-MS:C27H29NO3的分析计算值：415；实测值：416(M+H)+。
以类似方式制备以下各酯：
Figure BDA00001874284600361
Figure BDA00001874284600371
用于确定保留时间的手性SFC条件：
条件I
柱：
Figure BDA00001874284600372
AD-H柱，4.62×50mm，5μm
溶剂：含0.1%DEA的90%CO2-10%甲醇
温度：35℃
压力：150巴
流速：2.0mL/min
在220nmUV监测
注射：1.0mg/3mL甲醇
条件II
柱：
Figure BDA00001874284600373
OD-H柱，4.62×50mm，5μm
溶剂：含0.1%DEA的90%CO2-10%甲醇
温度：35℃
压力：150巴
流速：2.0mL/min.
在220nmUV监测
注射：1.0mg/mL甲醇
Cap-17步骤2：(R)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(0.350g，0.84mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)且在室温搅拌混合物2小时。随后在真空中除去挥发性物质且通过反相制备性HPLC(Primesphere C-18，20×100mm；CH3CN-H2O-0.1%TFA)纯化残余物，产生呈白色固体状的标题化合物(呈三氟乙酸盐形式)(0.230g，88%)。LC-MS:C19H21NO3的分析计算值：311.15；实测值：312(M+H)+。
以类似方式制备光学纯形式的以下羧酸：
Figure BDA00001874284600381
用于确定保留时间的LC-MS条件：
条件I
柱：
Figure BDA00001874284600382
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=4分钟
流速=4mL/min
波长=220
溶剂A=10%甲醇-90%H2O-0.1%TFA
溶剂B=90%甲醇-10%H2O-0.1%TFA
条件II
柱：Waters-Sunfire 4.6×50mm S5
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=2分钟
流速=4mL/min
波长=220
溶剂A=10%甲醇-90%H2O-0.1%TFA
溶剂B=90%甲醇-10%H2O-0.1%TFA
条件III
柱：
Figure BDA00001874284600391
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=2分钟
流速=4mL/min
波长=220
溶剂A=10%甲醇-90%H2O-0.1%TFA
溶剂B=90%甲醇-10%H2O-0.1%TFA
Cap-18
Figure BDA00001874284600392
步骤1：(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-溴乙酸乙酯：在0℃在氩气下向4-吡啶基乙酸乙酯(1.00g，6.05mmol)的无水THF(150mL)溶液中加入DBU(0.99mL，6.66mmol)。历时30分钟使反应混合物温热至室温，接着冷却至-78℃。向此混合物中加入CBr4(2.21g，6.66mmol)且在-78℃持续搅拌2小时。接着用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应混合物且分离各相。洗涤(盐水)有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。立即通过快速色谱法(SiO2/己烷-乙酸乙酯，1:1)纯化所得黄色油状物，得到呈略微不稳定的黄色油状的标题化合物(1.40g，95%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.62(dd,J＝4.6,1.8Hz,2H),7.45(dd,J＝4.6,1.8Hz,2H),5.24(s,1H),4.21-4.29(m,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)。LC-MS:C9H10BrNO2的分析计算值：242,244；实测值：243,245(M+H)+。
步骤2：(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-(N,N-二甲基氨基)乙酸乙酯：在室温向(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-溴乙酸乙酯(1.40g，8.48mmol)的DMF(10mL)溶液中加入二甲胺(2M THF溶液，8.5mL，17.0mmol)。反应完成(如通过薄层色谱法判断)后，在真空中除去挥发性物质且通过快速色谱法(
Figure BDA00001874284600401
40+MSiO2柱；50%-100%乙酸乙酯-己烷)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的标题化合物(0.539g，31%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.58(d,J＝6.0Hz,2H),7.36(d,J＝6.0Hz,2H),4.17(m,2H),3.92(s,1H),2.27(s,6H),1.22(t,J=7.0Hz)。LC-MS:C11H16N2O2的分析计算值：208；实测值：209(M+H)+。
步骤3：(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-(N,N-二甲基氨基)乙酸：在室温向(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-(N,N-二甲基氨基)乙酸乙酯(0.200g，0.960mmol)于THF-甲醇-H2O(1∶1:1，6mL)混合物中的溶液中加入粉末状LiOH(0.120g，4.99mmol)。搅拌溶液3小时，接着使用1N HCl酸化至pH 6。用乙酸乙酯洗涤水相，接着冻干，产生呈黄色固体状的标题化合物的二盐酸盐(含有LiCl)。产物按原样用于后续步骤中。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(d,J＝5.7Hz,2H),7.34(d,J＝5.7Hz,2H),3.56(s,1H),2.21(s,6H)。
以类似方式使用上述方法制备以下实施例：
Figure BDA00001874284600402
Figure BDA00001874284600421
Figure BDA00001874284600422
步骤1：(R,S)-2-(喹啉-3-基)-2-(N,N-二甲基氨基)-乙酸乙酯：用Ar气泡流使N,N-二甲基氨基乙酸乙酯(0.462g，3.54mmol)、K3PO4(1.90g，8.95mmol)、Pd(t-Bu3P)2(0.090g，0.176mmol)、3-溴喹啉及甲苯(10mL)的混合物脱气15分钟。接着在100℃加热反应混合物12小时，随后使其冷却至室温且倒入H2O中。用乙酸乙酯(2次)萃取混合物且洗涤(H2O、盐水)合并的有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。首先通过反相制备性HPLC(Primesphere C-18，30×100mm；CH3CN-H2O-5mM NH4OAc)，接着通过快速色谱法(SiO2/己烷-乙酸乙酯，1:1)纯化残余物，得到呈橙色油状的标题化合物(0.128g，17%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.90(d,J＝2.0Hz,1H),8.32(d,J＝2.0Hz,1H),8.03-8.01(m,2H),7.77(ddd,J＝8.3,6.8,1.5Hz,1H),7.62(ddd,J＝8.3,6.8,1.5Hz,1H),4.35(s,1H),4.13(m,2H),2.22(s,6H),1.15(t,J＝7.0Hz,3H)。LC-MS:C15H18N2O2的分析计算值：258；实测值：259(M+H)+。
步骤2：(R,S)2-(喹啉-3-基)-2-(N,N-二甲基氨基)乙酸：在100℃加热(R,S)-2-(喹啉-3-基)-2-(N,N-二甲基氨基)乙酸乙酯(0.122g，0.472mmol)与6M HCl(3mL)的混合物12小时。在真空中除去溶剂，得到呈浅黄色泡沫状的标题化合物的二盐酸盐(0.169g，>100%)。未纯化的物质无需进一步纯化即用于后续步骤中。LC-MS:C13H14N2O2的分析计算值：230；实测值：231(M+H)+。
Cap-38
Figure BDA00001874284600431
步骤1：(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯及(S)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯：向(RS)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸(2.60g，13.19mmol)、DMAP(0.209g，1.71mmol)及(S)-1-苯基乙醇(2.09g，17.15mmol)于CH2Cl2(40mL)中的混合物中加入EDCI(3.29g，17.15mmol)且使混合物在室温搅拌12小时。接着在真空中除去溶剂且用乙酸乙酯-H2O分配残余物。分离各层，用乙酸乙酯(2次)反萃取水层且洗涤(H2O、盐水)合并的有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(
Figure BDA00001874284600441
/0-50%乙醚-己烷)纯化残余物。接着通过反相制备性HPLC(Primesphere C-18，30×100mm；CH3CN-H2O-0.1%TFA)分离所得纯非对映异构混合物，首先产生(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯乙酯(0.501g，13%)，接着产生(S)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)-乙酸(S)-1-苯乙酯(0.727g，18%)，两者均呈其三氟乙酸盐形式。(S,R)-异构体：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.65-7.70(m,1H),7.55-7.60(ddd,J＝9.4,8.1,1.5Hz,1H),7.36-7.41(m,2H),7.28-7.34(m,5H),6.04(q,J＝6.5Hz,1H),5.60(s,1H),2.84(s,6H),1.43(d,J＝6.5Hz,3H)。LC-MS:C18H20FNO2的分析计算值：301；实测值：302(M+H)+；(S,S)-异构体：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.58-7.63(m,1H),7.18-7.31(m,6H),7.00(dd,J=8.5,1.5Hz,2H),6.02(q,J＝6.5Hz,1H),5.60(s,1H),2.88(s,6H),1.54(d,J=6.5Hz,3H)。LC-MS:C18H20FNO2的分析计算值：301；实测值：302(M+H)+。
步骤2：(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸：在室温及大气压(H2气囊)使(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯三氟乙酸盐(1.25g，3.01mmol)与20%Pd(OH)2/C(0.125g)于乙醇(30mL)中的混合物氢化4小时。接着用Ar净化溶液，经硅藻土
Figure BDA00001874284600442
过滤，且在真空中浓缩。此步骤产生呈无色固体状的标题化合物(0.503g，98%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.53-7.63(m,2H),7.33-7.38(m,2H),5.36(s,1H),2.86(s,6H)。LC-MS:C10H12FNO2的分析计算值：197；实测值：198(M+H)+。
S-异构体可以类似方式由(S)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯三氟乙酸盐获得。
Cap-39
Figure BDA00001874284600443
在室温及大气压(H2气囊)使(R)-(2-氯苯基)甘氨酸(0.300g，1.62mmol)、甲醛(35%水溶液，0.80mL，3.23mmol)及20%Pd(OH)2/C(0.050g)的混合物氢化4小时。接着用Ar净化溶液，经硅藻土
Figure BDA00001874284600444
过滤，且在真空中浓缩。通过反相制备性HPLC(Primesphere C-18，30×100mm；CH3CN-H2O-0.1%TFA)纯化残余物，产生呈无色油状的标题化合物(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氯苯基)乙酸的三氟乙酸盐(0.290g，55%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.59-7.65(m,2H),7.45-7.53(m,2H),5.40(s,1H),2.87(s,6H)。LC-MS:C10H12ClNO2的分析计算值：213；实测值：214(M+H)+。
Cap-40
向冰冷的(R)-(2-氯苯基)甘氨酸(1.00g，5.38mmol)及NaOH(0.862g，21.6mmol)的H2O(5.5mL)溶液中逐滴加入氯甲酸甲酯(1.00mL，13.5mmol)。在0℃使混合物搅拌1小时，接着通过加入浓HCl(2.5mL)酸化。用乙酸乙酯(2次)萃取混合物且洗涤(H2O、盐水)合并的有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩，产生呈黄橙色泡沫状的标题化合物(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(2-氯苯基)乙酸(1.31g，96%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.39-7.43(m,2H),7.29-7.31(m,2H),5.69(s,1H),3.65(s,3H)。LC-MS:C10H10ClNO4的分析计算值：243；实测值：244(M+H)+。
Cap-41
Figure BDA00001874284600452
向2-(2-(氯甲基)苯基)乙酸(2.00g，10.8mmol)的THF(20mL)混悬液中加入吗啉(1.89g，21.7mmol)且在室温搅拌溶液3小时。接着用乙酸乙酯稀释反应混合物且用H2O(2次)萃取。冻干水相且通过硅胶色谱法(/0-10%甲醇-CH2Cl2)纯化残余物，产生呈无色固体状的标题化合物2-(2-((N-吗啉基)甲基)苯基)乙酸(2.22g，87%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.37-7.44(m,3H),7.29-7.33(m,1H),4.24(s,2H),3.83(宽单峰,4H),3.68(s,2H),3.14(宽单峰,4H)。LC-MS:C13H17NO3的分析计算值：235；实测值：236(M+H)+。
使用对于Cap-41所述的方法，类似地制备以下实施例：
Figure BDA00001874284600461
Cap-45a
Figure BDA00001874284600462
将HMDS(1.85mL，8.77mmol)加入至(R)-2-氨基-2-苯基乙酸对甲苯磺酸盐(2.83g，8.77mmol)的CH2Cl2(10mL)混悬液中且在室温搅拌混合物30分钟。加入一份异氰酸甲酯(0.5g，8.77mmol)，持续搅拌30分钟。通过加入H2O(5mL)淬灭反应混合物且过滤所得沉淀物，用H2O及正己烷洗涤，并在真空干燥。回收呈白色固体状的(R)-2-(3-甲基脲基)-2-苯基乙酸(1.5g；82%)且其无需进一步纯化即使用。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 2.54(d,J＝4.88Hz,3H)5.17(d,J=7.93Hz,1H)5.95(q,J=4.48Hz,1H)6.66(d,J＝7.93Hz,1H)7.26-7.38(m,5H)12.67(s,1H)。LC-MS:C10H12N2O3的分析计算值：208.08，实测值：209.121(M+H)+；HPLC
Figure BDA00001874284600463
C-183.0×46mm，历时2分钟0至100%B，1分钟保持时间，A=90%水、10%甲醇、0.1%TFA，B=10%水、90%甲醇、0.1%TFA，RT=1.38分钟，90%均匀性指数。
Cap-46
Figure BDA00001874284600471
根据对于Cap-45a所述的方法制备所需产物。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 0.96(t,J＝7.17Hz,3H)2.94-3.05(m,2H)5.17(d,J＝7.93Hz,1H)6.05(t,J＝5.19Hz,1H)6.60(d,J＝7.63Hz,1H)7.26-7.38(m,5H)12.68(s,1H)。LC-MS:C11H14N2O3的分析计算值：222.10，实测值：223.15(M+H)+。HPLC
Figure BDA00001874284600472
C-183.0×506mm，历时2分钟0至100%B，1分钟保持时间，A=90%水、10%甲醇、0.2%H3PO4，B=10%水、90%甲醇、0.2%H3PO4，RT=0.87分钟，90%均匀性指数。
Cap-47
步骤1：(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯：历时10分钟向经搅拌的(R)-2-氨基-2-苯基乙酸叔丁酯(1.0g，4.10mmol)及许尼希碱(1.79mL，10.25mmol)于DMF(40mL)中的溶液中逐滴加入二甲基氨基甲酰氯(0.38mL，4.18mmol)。在室温搅拌3小时后，减压浓缩反应混合物且将所得残余物溶解于乙酸乙酯中。用H2O、1N HCl水溶液及盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤且减压浓缩。获得呈白色固体状的(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯(0.86g；75%)且无需进一步纯化即使用。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 1.33(s,9H)2.82(s,6H)5.17(d,J＝7.63Hz,1H)6.55(d,J＝7.32Hz,1H)7.24-7.41(m,5H)。LC-MS:C15H22N2O3的分析计算值：278.16，实测值：279.23(M+H)+；HPLC
Figure BDA00001874284600474
LUNA C-184.6×50mm，历时4分钟0至100%B，1分钟保持时间，A=90%水、10%甲醇、0.1%TFA，B=10%水、90%甲醇、0.1%TFA，RT=2.26分钟，97%均匀性指数。
步骤2：(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸：向经搅拌的(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯(0.86g，3.10mmol)的CH2Cl2(250mL)溶液中逐滴加入TFA(15mL)且在室温搅拌所得溶液3小时。接着用EtOAC:己烷混合物(5:20)使所需化合物由溶液中沉淀出，滤出并减压干燥。分离出呈白色固体状的(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸(0.59g，86%)且无需进一步纯化即使用。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 2.82(s,6H)5.22(d,J＝7.32Hz,1H)6.58(d,J＝7.32Hz,1H)7.28(t,J＝7.17Hz,1H)7.33(t,J＝7.32Hz,2H)7.38-7.43(m,2H)12.65(s,1H)。LC-MS:C11H14N2O3的分析计算值：222.24；实测值：223.21(M+H)+。HPLCC-183.0×50mm，历时2分钟0至100%B，1分钟保持时间，A=90%水、10%甲醇、0.2%H3PO4，B=10%水、90%甲醇、0.2%H3PO4，RT=0.75分钟，93%均匀性指数。
Cap-48
Figure BDA00001874284600482
步骤1：(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯：历时10分钟向经搅拌的(R)-2-氨基-2-苯基乙酸盐酸盐(1.0g，4.10mmol)及许尼希碱(1.0mL，6.15mmol)于DMF(15mL)中的溶液中逐滴加入异氰酸环戊酯(0.46mL，4.10mmol)。在室温搅拌3小时后，减压浓缩反应混合物且将所得残余物吸收于乙酸乙酯中。用H2O及盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩。获得呈不透明油状的(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯(1.32g；100%)且无需进一步纯化即使用。1H NMR(500MHz,CD3Cl-D)δppm 1.50-1.57(m,2H)1.58-1.66(m,2H)1.87-1.97(m,2H)3.89-3.98(m,1H)5.37(s,1H)7.26-7.38(m,5H)。LC-MS:C18H26N2O3的分析计算值：318.19，实测值：319.21(M+H)+；HPLC
Figure BDA00001874284600483
C-183.0×50mm，历时4分钟0至100%B，1分钟保持时间，A=90%水、10%甲醇、0.1%TFA，B=10%水、90%甲醇、0.1%TFA，RT=2.82分钟，96%均匀性指数。
步骤2：(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸：向经搅拌的(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯(1.31g，4.10mmol)的CH2Cl2(25mL)溶液中逐滴加入TFA(4mL)及三乙基甲硅烷(1.64mL；10.3mmol)，且在室温搅拌所得溶液6小时。减压除去挥发性组分且使粗产物在乙酸乙酯/戊烷中重结晶，得到呈白色固体状的(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸(0.69g，64%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6).δppm 1.17-1.35(m,2H)1.42-1.52(m,2H)1.53-1.64(m,2H)1.67-1.80(m,2H)3.75-3.89(m,1H)5.17(d,J＝7.93Hz,1H)6.12(d,J＝7.32Hz,1H)6.48(d,J＝7.93Hz,1H)7.24-7.40(m,5H)12.73(s,1H)。LC-MS:C14H18N2O3的分析计算值：262.31；实测值：263.15(M+H)+。HPLC
Figure BDA00001874284600491
C-183.0×50mm，历时2分钟0至100%B，1分钟保持时间，A=90%水、10%甲醇、0.2%H3PO4，B=10%水、90%甲醇、0.2%H3PO4，RT=1.24分钟，100%均匀性指数。
Cap-49
向经搅拌的2-(苄基氨基)乙酸(2.0g，12.1mmol)的甲酸(91mL)溶液中加入甲醛(6.94mL，93.2mmol)。在70℃保持5小时后，减压浓缩反应混合物至20mL且沉淀出白色固体。过滤后，收集母液且进一步减压浓缩，得到粗产物。通过反相制备性HPLC(
Figure BDA00001874284600493
30×100mm，在220nm检测，流速35mL/min，历时8分钟0至35%B；A=90%水、10%甲醇、0.1%TFA，B=10%水、90%甲醇、0.1%TFA)纯化，得到呈无色蜡状的呈三氟乙酸盐形式的标题化合物2-(苯甲基(甲基)-氨基)乙酸(723mg，33%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 2.75(s,3H)4.04(s,2H)4.34(s,2H)7.29-7.68(m,5H)。LC-MS:C10H13NO2的分析计算值：179.09；实测值：180.20(M+H)+。
Cap-50
Figure BDA00001874284600494
向经搅拌的3-甲基-2-(甲基氨基)丁酸(0.50g，3.81mmol)的水(30mL)溶液中加入K2CO3(2.63g，19.1mmol)及苄基氯(1.32g，11.4mmol)。在环境温度搅拌反应混合物18小时。用乙酸乙酯(30mL×2)萃取反应混合物且减压浓缩水层，得到粗产物，通过反相制备性HPLC(
Figure BDA00001874284600501
30×100mm，在220nm检测，流速40mL/min，历时6分钟20至80%B；A=90%水、10%甲醇、0.1%TFA，B=10%水、90%甲醇、0.1%TFA)纯化所述粗产物得到呈无色蜡状的2-(苯甲基(甲基)氨基)-3-甲基丁酸三氟乙酸盐(126mg，19%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 0.98(d,3H)1.07(d,3H)2.33-2.48(m,1H)2.54-2.78(m,3H)3.69(s,1H)4.24(s,2H)7.29-7.65(m,5H)。LC-MS:C13H19NO2的分析计算值：221.14；实测值：222.28(M+H)+。
Cap-51
Figure BDA00001874284600502
(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸
将Na2CO3(1.83g，17.2mmol)加入至L-缬氨酸(3.9g，33.29mmol)的NaOH(33mL 1M/H2O，33mmol)溶液中且用冰水浴冷却所得溶液。历时15分钟逐滴加入氯甲酸甲酯(2.8mL，36.1mmol)，移除冷却浴且在环境温度搅拌反应混合物3.25小时。用乙醚(50mL，3次)洗涤反应混合物，用冰水浴冷却水相且用浓HCl酸化至1-2的pH值区域，并用CH2Cl2(50mL，3次)萃取。干燥(MgSO4)有机相且在真空中蒸发，得到呈白色固体状的Cap-51(6g)。对于主要旋转异构体，1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz):12.54(s,1H),7.33(d,J＝8.6,1H),3.84(dd,J＝8.4,6.0,1H),3.54(s,3H),2.03(m,1H),0.87(m,6H)。HRMS:[M+H]+C7H14NO4的分析计算值：176.0923；实测值：176.0922。
Cap-51(替代途径)
Figure BDA00001874284600503
(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸
将DIEA(137.5mL，0.766mol)加入至(S)-2-氨基-3-甲基丁酸叔丁酯盐酸盐(75.0g，0.357mol)的THF(900mL)混悬液中，且将混合物冷却至0℃(冰/水浴)。历时45分钟逐滴加入氯甲酸甲酯(29.0mL，0.375mol)，移除冷却浴且在环境温度搅拌不均匀混合物3小时。在低压除去溶剂且使残余物分配于EtOAc与水(各1L)之间。用H2O(1L)及盐水(1L)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并在低压浓缩。使粗物质通过硅胶填料(1kg)，用己烷(4L)及15:85EtOAc/己烷(4L)洗脱，得到呈澄清油状的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸叔丁酯(82.0g，99%收率)。1H-NMR(500MHz,DMSO-d6,δ=2.5ppm)7.34(d,J＝8.6,1H),3.77(dd,J＝8.6,6.1,1H),3.53(s,3H),1.94-2.05(m,1H),1.39(s,9H),0.83-0.92(m,6H)。13C-NMR(126MHz,DMSO-d6,δ=39.2ppm)170.92,156.84,80.38,60.00,51.34,29.76,27.62,18.92,17.95。LC-MS:[M+Na]+254.17。
向(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸叔丁酯(82.0g，0.355mol)的CH2Cl2(675mL)溶液中先后加入三氟乙酸(343mL，4.62mol)及Et3SiH(142mL，0.887mol)，且在环境温度搅拌混合物4小时。在低压除去挥发性组分且用石油醚(600mL)研磨所得油状物，得到白色固体，过滤并用己烷(500mL)及石油醚(500mL)洗涤。由EtOAc/石油醚中重结晶，得到呈白色片晶状的Cap-51(54.8g，88%收率)。MP=108.5-109.5℃。1H NMR(500MHz,DMSO-d6,δ=2.5ppm)12.52(s,1H),7.31(d,J＝8.6,1H),3.83(dd,J＝8.6,6.1,1H),3.53(s,3H),1.94-2.07(m,1H),0.86(dd,J＝8.9,7.0,6H)。13C NMR(126MHz,DMSO-d6,δ=39.2ppm)173.30,156.94,59.48,51.37,29.52,19.15,17.98。LC-MS:[M+H]+=176.11。C7H13NO4的分析计算值：C,47.99；H,7.48；N,7.99。实测值：C,48.17；H,7.55；N,7.99。旋光度：[α]D=-4.16(12.02mg/mL；MeOH)。光学纯度：>99.5%ee。应注意：光学纯度评估针对Cap-51的甲酯衍生物进行，所述衍生物根据标准TMSCHN2(苯/MeOH)酯化方案制备。HPLC分析条件：柱，
Figure BDA00001874284600511
AD-H(4.6×250mm，5μm)；溶剂，95%庚烷/5%IPA(等度)；流速，1mL/min；温度，35℃；在205nmUV监测。
[应注意：Cap-51也可购自Flamm。]
Cap-52(与Cap-12相同)
(S)-2-(甲氧基羰基氨基)丙酸
根据对于合成Cap-51所述的操作，由L-丙氨酸合成Cap-52。出于表征目的，通过反相HPLC(H2O/甲醇/TFA)纯化一部分粗物质，得到呈无色粘稠油状的Cap-52。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz):12.49(宽单峰,1H),7.43(d,J＝7.3,0.88H),7.09(明显的宽单峰,0.12H),3.97(m,1H),3.53(s,3H),1.25(d,J＝7.3,3H)。
Cap-53至Cap-64
根据对于合成Cap-51所述的操作，由适当起始物质制备Cap-53至Cap-64，应注意可能进行修改。
Figure BDA00001874284600521
Figure BDA00001874284600531
Figure BDA00001874284600541
Cap-65
Figure BDA00001874284600542
历时5分钟将氯甲酸甲酯(0.65mL，8.39mmol)逐滴加入至经冷却的(冰水)Na2CO3(0.449g，4.23mmol)、NaOH(8.2mL 1M/H2O，8.2mmol)及(S)-2-氨基-3-羟基-3-甲基丁酸(1.04g，7.81mmol)的混合物中。搅拌反应混合物45分钟，接着移除冷却浴且再持续搅拌3.75小时。用CH2Cl2洗涤反应混合物，用冰水浴冷却水相且用浓HCl酸化至1-2的pH值区域。在真空中除去挥发性组分，将残余物吸收于MeOH/CH2Cl2的2:1混合物(15mL)中并过滤，旋转蒸发滤液，得到呈白色半粘稠泡沫状的Cap-65(1.236g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ6.94(d,J＝8.5,0.9H),6.53(宽单峰,0.1H),3.89(d,J＝8.8,1H),2.94(s,3H),1.15(s,3H),1.13(s,3H)。
通过使用对于合成Cap-65所述的操作，由适当可商购得到的起始物质制备Cap-66及Cap-67。
Cap-66
Figure BDA00001874284600543
1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ12.58(宽单峰,1H),7.07(d,J＝8.3,0.13H),6.81(d,J=8.8,0.67H),4.10-4.02(m,1.15H),3.91(dd,J＝9.1,3.5,0.85H),3.56(s,3H),1.09(d,J＝6.2,3H)。[应注意：仅记录主要NH信号]。
Cap-67
Figure BDA00001874284600551
1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):12.51(宽单峰,1H),7.25(d,J＝8.4,0.75H),7.12(宽二重峰,J＝0.4,0.05H),6.86(宽单峰,0.08H),3.95-3.85(m,2H),3.54(s,3H),1.08(d,J＝6.3,3H)。[应注意：仅记录主要NH信号]。
Cap-68
Figure BDA00001874284600552
将氯甲酸甲酯(0.38mL，4.9mmol)逐滴加入至1N NaOH(水溶液)(9.0mL，9.0mmol)、1M NaHCO3(水溶液)(9.0mL，9.0mol)、L-门冬氨酸β-苄酯(1.0g，4.5mmol)及二噁烷(9mL)的混合物中。在环境条件下搅拌反应混合物3小时，接着用乙酸乙酯(50mL，3次)洗涤。用12N HCl将水层酸化至pH~1-2，且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩，得到呈浅黄色油状的Cap-68(1.37g；质量超过理论收率，且产物无需进一步纯化即使用)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz):δ12.88(宽单峰,1H),7.55(d,J＝8.5,1H),7.40-7.32(m,5H),5.13(d,J＝12.8,1H),5.10(d,J＝12.9,1H),4.42-4.38(m,1H),3.55(s,3H),2.87(dd,J＝16.2,5.5,1H),2.71(dd,J=16.2,8.3,1H)。LC(条件2)：RT=1.90分钟；LC-MS:[M+H]+C13H16NO6的分析计算值：282.10；实测值：282.12。
Cap-69a及Cap-69b
将NaCNBH3(2.416g，36.5mmol)分批加入至经冷却(约15℃)的丙氨酸(1.338g，15.0mmol)的水(17mL)/MeOH(10mL)溶液中。数分钟后，历时4分钟逐滴加入乙醛(4.0mL，71.3mmol)，移除冷却浴，且在环境条件下搅拌反应混合物6小时。再加入乙醛(4.0mL)且搅拌反应混合物2小时。将浓HCl缓慢加入至反应混合物中直至pH值达到约1.5，且在40℃加热所得混合物1小时。在真空中除去大部分挥发性组分且用
Figure BDA00001874284600561
50WX8-100离子交换树脂(用水洗涤柱，且用通过混合18ml NH4OH与282ml水制备的稀NH4OH洗脱化合物)纯化残余物，得到呈灰白色软吸湿性固体状的Cap-69(2.0g)。1HNMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ3.44(q,J＝7.1,1H),2.99-2.90(m,2H),2.89-2.80(m,2H),1.23(d,J＝7.1,3H),1.13(t,J＝7.3,6H)。
Cap-70至Cap-74x
根据对于合成Cap-69所述的操作，通过使用适当起始物质制备Cap-70至Cap-74x。
Figure BDA00001874284600562
Figure BDA00001874284600571
Cap-75
Figure BDA00001874284600572
Cap-75步骤a
Figure BDA00001874284600573
将NaBH3CN(1.6g，25.5mmol)加入至经冷却(冰/水浴)的H-D-Ser-OBzlHCl(2.0g，8.6mmol)的水(25mL)/甲醇(15mL)溶液中。历时5分钟逐滴加入乙醛(1.5mL，12.5mmol)，移除冷却浴，且在环境条件下搅拌反应混合物2小时。小心地用12N HCl淬灭反应混合物且在真空中浓缩。将残余物溶解于水中且用反相HPLC(MeOH/H2O/TFA)纯化，得到呈无色粘稠油状的(R)-2-(二乙基氨基)-3-羟基丙酸苄酯的三氟乙酸盐(1.9g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz):δ9.73(宽单峰,1H),7.52-7.36(m,5H),5.32(d,J＝12.2,1H),5.27(d,J＝12.5,1H),4.54-4.32(m,1H),4.05-3.97(m,2H),3.43-3.21(m,4H),1.23(t,J＝7.2,6H)。LC-MS(条件2)：RT=1.38分钟；LC-MS:[M+H]+C14H22NO3的分析计算值：252.16；实测值：252.19。
Cap-75
将NaH(0.0727g，1.82mmol，60%)加入至经冷却(冰水)的以上所制备的(R)-2-(二乙基氨基)-3-羟基丙酸苄酯三氟乙酸盐(0.3019g，0.8264mmol)的THF(3.0mL)溶液中且搅拌混合物15分钟。加入碘代甲烷(56μL，0.90mmol)且持续搅拌18小时，同时使浴解冻至环境条件。用水淬灭反应混合物且载入至经MeOH预处理的MCX(6g)柱上并用甲醇洗涤，随后用2N NH3/甲醇洗脱化合物。在真空中除去挥发性组分，得到呈黄色半固体状的受(R)-2-(二乙基氨基)-3-羟基丙酸污染的Cap-75(100mg)。产物无需进一步纯化按原样使用。
Cap-76
Figure BDA00001874284600581
将NaCNBH3(1.60g，24.2mmol)分批加入至经冷却(约15℃)的(S)-4-氨基-2-(叔丁氧基羰基氨基)丁酸(2.17g，9.94mmol)的水/MeOH(各12mL)溶液中。数分钟后，历时2分钟逐滴加入乙醛(2.7mL，48.1mmol)，移除冷却浴，且在环境条件下搅拌反应混合物3.5小时。再加入乙醛(2.7mL，48.1mmol)且搅拌反应混合物20.5小时。在真空中除去大部分MeOH组分，且用浓HCl处理剩余混合物直至其pH值达到约1.0，接着在40℃加热2小时。在真空中除去挥发性组分，且用4M HCl/二噁烷(20mL)处理残余物并在环境条件下搅拌7.5小时。在真空中除去挥发性组分且用
Figure BDA00001874284600582
50WX8-100离子交换树脂(用水洗涤柱且用由18ml NH4OH及282ml水制备的稀NH4OH洗脱化合物)，得到呈灰白色固体状的中间体(S)-2-氨基-4-(二乙基氨基)丁酸(1.73g)。
历时11分钟将氯甲酸甲酯(0.36mL，4.65mmol)逐滴加入至经冷却(冰水)的Na2CO3(0.243g，2.29mmol)、NaOH(4.6mL 1M/H2O，4.6mmol)及以上产物(802.4mg)的混合物中。搅拌反应混合物55分钟，接着移除冷却浴且再持续搅拌5.25小时。用等体积水稀释反应混合物且用CH2Cl2(30mL，2次)洗涤，用冰水浴冷却水相并用浓HCl酸化至2的pH值区域。接着在真空中除去挥发性组分且用MCX树脂(6.0g；用水洗涤柱，且用2.0M NH3/MeOH洗脱样品)来使粗物质形成游离碱，得到呈灰白色固体状的不纯Cap-76(704mg)。1H NMR(MeOH-d4,δ=3.29ppm,400MHz):δ3.99(dd,J=7.5,4.7,1H),3.62(s,3H),3.25-3.06(m,6H),2.18-2.09(m,1H),2.04-1.96(m,1H),1.28(t,J＝7.3,6H)。LC-MS:[M+H]+C10H21N2O4的分析计算值：233.15；实测值：233.24。
Cap-77a及Cap-77b
Figure BDA00001874284600583
根据对于Cap-7所述的操作，通过SN2置换步骤使用7-氮杂二环[2.2.1]庚烷，且通过使用以下条件实现中间体2-(7-氮杂二环[2.2.1]庚-7-基)-2-苯基乙酸苄酯的立体异构分离来进行Cap-77的合成：将中间体(303.7mg)溶解于乙醇中，且将所得溶液注射于手性HPLC柱(Chiracel AD-H柱，30×250mm，5μm)上，在70mL/min及35℃的温度用90%CO2-10%EtOH洗脱，得到124.5mg立体异构体-1及133.8mg立体异构体-2。根据Cap-7的制备，使这些苄酯氢解，得到Cap-77：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ7.55(m,2H),7.38-7.30(m,3H),4.16(s,1H),3.54(明显的宽单峰,2H),2.08-1.88(m,4H),1.57-1.46(m,4H)。LC(条件1)：RT=0.67分钟；LC-MS:[M+H]+C14H18NO2的分析计算值：232.13；实测值：232.18。HRMS:[M+H]+C14H18NO2的分析计算值：232.1338；实测值：232.1340。
Cap-78
将NaCNBH3(0.5828g，9.27mmol)加入至(R)-2-(乙基氨基)-2-苯基乙酸的盐酸盐(合成Cap-3的中间体；0.9923mg，4.60mmol)及(1-乙氧基环丙氧基)三甲基甲硅烷(1.640g，9.40mmol)于MeOH(10mL)中的混合物中，且用油浴在50℃加热半不均匀混合物20小时。再加入(1-乙氧基环丙氧基)三甲基甲硅烷(150mg，0.86mmol)及NaCNBH3(52mg，0.827mmol)且再加热反应混合物3.5小时。接着使其冷却至环境温度且用浓HCl酸化至约2的pH值区域，过滤混合物并旋转蒸发滤液。将所得粗物质吸收于i-PrOH(6mL)中且加热以溶解，滤出未溶解部分并在真空中浓缩滤液。用反相HPLC(H2O/MeOH/TFA)纯化约1/3所得粗物质，得到呈无色粘稠油状的Cap-78的三氟乙酸盐(353mg)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz；在D2O交换后):δ7.56-7.49(m,5H),5.35(S,1H),3.35(m,1H),3.06(明显的宽单峰,1H),2.66(m,1H),1.26(t,J＝7.3,3H),0.92(m,1H),0.83-0.44(m,3H)。LC(条件1)：RT=0.64分钟；LC-MS:[M+H]+C13H18NO2的分析计算值：220.13；实测值：220.21。HRMS:[M+H]+C13H18NO2的分析计算值：220.1338；实测值：220.1343。
Cap-79
Figure BDA00001874284600601
将臭氧鼓泡通过经冷却(-78℃)的Cap-55(369mg，2.13mmol)的CH2Cl2(5.0mL)溶液约50分钟直至反应混合物呈现蓝色色泽。加入Me2S(移液管10滴)，且搅拌反应混合物35分钟。用-10℃浴代替-78℃浴且再持续搅拌30分钟，在真空中除去挥发性组分，得到无色粘稠油状物。
将NaBH3CN(149mg，2.25mmol)加入至以上粗物质及吗啉(500μL，5.72mmol)的MeOH(5.0mL)溶液中并在环境条件下搅拌混合物4小时。冷却至冰水温度且用浓HCl处理，使其pH值达约2.0，接着搅拌2.5小时。在真空中除去挥发性组分，且用MCX树脂(MeOH洗涤；2.0N NH3/MeOH洗脱)及反相HPLC(H2O/MeOH/TFA)的组合纯化残余物，得到含有未知量的吗啉的Cap-79。
为了除去吗啉污染物，将以上物质溶解于CH2Cl2(1.5mL)中且先后用Et3N(0.27mL，1.94mmol)、乙酸酐(0.10mL，1.06mmol)处理并在环境条件下搅拌18小时。加入THF(1.0mL)及H2O(0.5mL)并持续搅拌1.5小时。在真空中除去挥发性组分，且使所得残余物通过MCX树脂(MeOH洗涤；2.0NNH3/MeOH洗脱)，得到呈棕色粘稠油状的不纯Cap-79，其无需进一步纯化即用于下一步骤中。
Cap-80a及Cap-80b
Figure BDA00001874284600602
历时15分钟将SOCl2(6.60mL，90.5mmol)逐滴加入至经冷却(冰水)的(S)-3-氨基-4-(苄基氧基)-4-氧代丁酸(10.04g，44.98mmol)与MeOH(300mL)的混合物中，移除冷却浴且在环境条件下搅拌反应混合物29小时。在真空中除去大部分挥发性组分且小心地使残余物分配于EtOAc(150mL)与饱和NaHCO3溶液之间。用EtOAc(150mL，2次)萃取水相，且干燥(MgSO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩，得到呈无色油状的(S)-2-氨基琥珀酸1-苄酯·4-甲酯(9.706g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ7.40-7.32(m,5H),5.11(s,2H),3.72(明显的三重峰,J＝6.6,1H),3.55(s,3H),2.68(dd,J＝15.9,6.3,1H),2.58(dd,J＝15.9,6.8,1H),1.96(s,2H)。LC(条件1)：RT=0.90分钟；LC-MS:[M+H]+C12H16NO4的分析计算值：238.11；实测值：238.22。
历时1分钟将Pb(NO3)2(6.06g，18.3mmol)加入至(S)-2-氨基琥珀酸1-苄酯·4-甲酯(4.50g，19.0mmol)、9-溴-9-苯基-9H-芴(6.44g，20.0mmol)及Et3N(3.0mL，21.5mmol)的CH2Cl2(80mL)溶液中，且在环境条件下搅拌不均匀混合物48小时。过滤混合物且用MgSO4处理滤液，再次过滤，并浓缩最终滤液。对所得粗物质进行
Figure BDA00001874284600611
纯化(350g硅胶，CH2Cl2洗脱)，得到呈高度粘稠无色油状的(S)-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)琥珀酸1-苄酯·4-甲酯(7.93g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):δ7.82(m,2H),7.39-7.13(m,16H),4.71(d,J＝12.4,1H),4.51(d,J＝12.6,1H),3.78(d,J＝9.1,NH),3.50(s,3H),2.99(m,1H),2.50-2.41(m,2H,部分与溶剂峰重叠)。LC(条件1)：RT=2.16分钟；LC-MS:[M+H]+C31H28NO4的分析计算值：478.20；实测值：478.19。
历时10分钟将LiHMDS(9.2mL 1.0M/THF，9.2mmol)逐滴加入至经冷却(-78℃)的(S)-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)琥珀酸1-苄酯·4-甲酯(3.907g，8.18mmol)的THF(50mL)溶液中且搅拌约1小时。历时8分钟将MeI(0.57mL，9.2mmol)逐滴加入至混合物中，且持续搅拌16.5小时，同时使冷却浴解冻至室温。用饱和NH4Cl溶液(5mL)淬灭后，在真空中除去大部分有机组分且使残余物分配于CH2Cl2(100mL)与水(40mL)之间。干燥(MgSO4)有机层，过滤并在真空中浓缩，且用
Figure BDA00001874284600612
(350g硅胶；25%EtOAc/己烷)纯化所得粗物质，得到3.65g约1.0:0.65比例的3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)琥珀酸1-苄酯·4-甲酯的2S/3S与2S/3R非对映异构混合物(1H NMR)。此时不确定主要异构体的立体化学，且混合物不经分离即进行下一步骤。部分1HNMR数据(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz)：主要非对映异构体,δ4.39(d,J＝12.3,1H ofCH2),3.33(s,3H,与H2O信号重叠),3.50(d,J＝10.9,NH),1.13(d,J＝7.1,3H)；次要非对映异构体,δ4.27(d,J=12.3,1H(CH2)),3.76(d,J＝10.9,NH),3.64(s,3H),0.77(d,J＝7.0,3H)。LC(条件1)：RT=2.19分钟；LC-MS:[M+H]+C32H30NO4的分析计算值：492.22；实测值：492.15。
历时10分钟将二异丁基氢化铝(20.57ml 1.0M己烷溶液，20.57mmol)逐滴加入至经冷却(-78℃)的以上所制备的(2S)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)琥珀酸1-苄酯·4-甲酯(3.37g，6.86mmol)的THF(120mL)溶液中，且在-78℃搅拌20小时。由冷却浴移出反应混合物且在搅拌下快速倒入约1MH3PO4/H2O(250mL)中，且用乙醚(100mL，2次)萃取混合物。用盐水洗涤合并的有机相，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。制备粗物质的硅胶筛且进行色谱法(25%EtOAc/己烷；重力洗脱)纯化，得到1.1g呈无色粘稠油状的受苯甲醇污染的(2S,3S)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯及含有(2S,3R)立体异构体作为杂质的(2S,3R)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯。使后一样品再经受相同柱色谱法纯化条件，得到750mg呈白色泡沫状的纯化物质。[应注意：在以上条件下(2S,3S)异构体在(2S,3R)异构体之前洗脱出]。(2S,3S)异构体：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):7.81(m,2H),7.39-7.08(m,16H),4.67(d,J＝12.3,1H),4.43(d,J＝12.4,1H),4.21(明显的三重峰,J＝5.2,OH),3.22(d,J＝10.1,NH),3.17(m,1H),3.08(m,1H),~2.5(m,1H,与溶剂信号重叠),1.58(m,1H),0.88(d,J＝6.8,3H)。LC(条件1)：RT=2.00分钟；LC-MS:[M+H]+C31H30NO3的分析计算值：464.45；实测值：464.22。(2S,3R)异构体：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz):7.81(d,J＝7.5,2H),7.39-7.10(m,16H),4.63(d,J＝12.1,1H),4.50(明显的三重峰,J＝4.9,1H),4.32(d,J＝12.1,1H),3.59-3.53(m,2H),3.23(m,1H),2.44(dd,J＝9.0,8.3,1H),1.70(m,1H),0.57(d,J＝6.8,3H)。LC(条件1)：RT=1.92分钟；LC-MS:[M+H]+C31H30NO3的分析计算值：464.45；实测值：464.52。
基于对由各异构体制备的内酯衍生物进行的NOE研究，通过使用以下方案进行DIBAL还原产物的相对立体化学指定：将LiHMDS(50μL1.0M/THF，0.05mmol)加入至经冷却(冰水)的(2S,3S)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(62.7mg，0.135mmol)的THF(2.0mL)溶液中，且在类似温度搅拌反应混合物约2小时。在真空中除去挥发性组分且使残余物分配于CH2Cl2(30mL)、水(20mL)与饱和NH4Cl水溶液(1mL)之间。干燥(MgSO4)有机层，过滤并在真空中浓缩，且对所得粗物质进行
Figure BDA00001874284600621
纯化(40g硅胶；10-15%EtOAc/己烷)，得到呈无色固体薄膜状的(3S,4S)-4-甲基-3-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)二氢呋喃-2(3H)-酮(28.1mg)。类似地将(2S,3R)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯精制成(3S,4R)-4-甲基-3-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)二氢呋喃-2(3H)-酮。(3S,4S)-内酯异构体：1HNMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz),7.83(d,J＝7.5,2H),7.46-7.17(m,11H),4.14(明显的三重峰,J＝8.3,1H),3.60(d,J＝5.8,NH),3.45(明显的三重峰,J＝9.2,1H),~2.47(m,1H,部分与溶剂信号重叠),2.16(m,1H),0.27(d,J＝6.6,3H)。LC(条件1)：RT=1.98分钟；LC-MS:[M+Na]+C24H21NNaO2的分析计算值：378.15；实测值：378.42。(3S,4R)-内酯异构体：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz),7.89(d,J＝7.6,1H),7.85(d,J＝7.3,1H),7.46-7.20(m,11H),3.95(dd,J＝9.1,4.8,1H),3.76(d,J＝8.8,1H),2.96(d,J＝3.0,NH),2.92(dd,J＝6.8,3,NCH),1.55(m,1H),0.97(d,J＝7.0,3H)。LC(条件1)：RT=2.03分钟；LC-MS:[M+Na]+C24H21NNaO2的分析计算值：378.15；实测值：378.49。
先后将TBDMS-Cl(48mg，0.312mmol)、咪唑(28.8mg，0.423mmol)加入至(2S,3S)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(119.5mg，0.258mmol)的CH2Cl2(3ml)溶液中，且在环境条件下搅拌混合物14.25小时。接着用CH2Cl2(30mL)稀释反应混合物且用水(15mL)洗涤，干燥(MgSO4)有机层，过滤并在真空中浓缩。用
Figure BDA00001874284600631
(40g硅胶；5%EtOAc/己烷)纯化所得粗物质，得到呈无色粘稠油状的受基于TBDMS的杂质污染的(2S,3S)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(124.4mg)。类似地将(2S,3R)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯精制成(2S,3R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯。(2S,3S)-甲硅烷基醚异构体：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz),7.82(d,J＝4.1,1H),7.80(d,J＝4.0,1H),7.38-7.07(m,16H),4.70(d,J＝12.4,1H),4.42(d,J＝12.3,1H),3.28-3.19(m,3H),2.56(dd,J＝10.1,5.5,1H),1.61(m,1H),0.90(d,J＝6.8,3H),0.70(s,9H),-0.13(s,3H),-0.16(s,3H)。LC(条件1，其中运行时间延长至4分钟):RT=3.26分钟；LC-MS:[M+H]+C37H44NO3Si的分析计算值：578.31；实测值：578.40。(2S,3R)-甲硅烷基醚异构体：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz),7.82(d,J＝3.0,1H),7.80(d,J＝3.1,1H),7.39-7.10(m,16H),4.66(d,J＝12.4,1H),4.39(d,J=12.4,1H),3.61(dd,J=9.9,5.6,1H),3.45(d,J=9.5,1H),3.41(dd,J＝10,6.2,1H),2.55(dd,J＝9.5,7.3,1H),1.74(m,1H),0.77(s,9H),0.61(d,J＝7.1,3H),-0.06(s,3H),-0.08(s,3H)。
将氢气囊连接于(2S,3S)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(836mg，1.447mmol)与10%Pd/C(213mg)于EtOAc(16mL)的混合物且在室温搅拌混合物约21小时，其中视需要向气囊再充填H2。用CH2Cl2稀释反应混合物且经硅藻土填料(
Figure BDA00001874284600641
-545)过滤，且用EtOAc(200mL)、EtOAc/MeOH(1∶1混合物，200mL)及MeOH(750mL)洗涤所述填料。浓缩合并的有机相，由所得粗物质制备硅胶筛并进行快速色谱法(EtOAc/i-PrOH/H2O的8:2:1混合物)纯化，得到呈白色绒毛状固体的(2S,3S)-2-氨基-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基丁酸(325mg)。类似地将(2S,3R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯精制成(2S,3R)-2-氨基-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基丁酸。(2S,3S)-氨基酸异构体：1H NMR(甲醇-d4,δ=3.29ppm,400MHz),3.76(dd,J＝10.5,5.2,1H),3.73(d,J＝3.0,1H),3.67(dd,J＝10.5,7.0,1H),2.37(m,1H),0.97(d,J＝7.0,3H),0.92(s,9H),0.10(s,6H)。LC-MS:[M+H]+C11H26NO3Si的分析计算值：248.17；实测值：248.44。(2S,3R)-氨基酸异构体：1H NMR(甲醇-d4,δ=3.29ppm,400MHz),3.76-3.75(m,2H),3.60(d,J＝4.1,1H),2.16(m,1H),1.06(d,J＝7.3,3H),0.91(s,9H),0.09(s,6H)。[M+H]+C11H26NO3Si的分析计算值：248.17；实测值：248.44。
将水(1mL)及NaOH(0.18mL 1.0M/H2O，0.18mmol)加入至(2S,3S)-2-氨基-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基丁酸(41.9mg，0.169mmol)与Na2CO3(11.9mg，0.112mmol)的混合物中，且超声约1分钟以溶解反应混合物。接着用冰水浴冷却混合物，历时30秒加入氯甲酸甲酯(0.02mL，0.259mmol)，在类似温度持续剧烈搅拌40分钟，接着在环境温度剧烈搅拌2.7小时。用水(5mL)稀释反应混合物，用冰水浴冷却且用1.0N HCl水溶液(约0.23mL)逐滴处理。进一步用水(10mL)稀释混合物且用CH2Cl2(15mL，2次)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩，得到呈灰白色固体状的Cap-80a。类似地将(2S,3R)-2-氨基-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基丁酸精制成Cap-80b。Cap-80a：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,400MHz),12.57(宽单峰,1H),7.64(d,J=8.3,0.3H),7.19(d,J=8.8,0.7H),4.44(dd,J=8.1,4.6,0.3H),4.23(dd,J＝8.7,4.4,0.7H),3.56/3.53(两个单峰,3H),3.48-3.40(m,2H),2.22-2.10(m,1H),0.85(s,9H),~0.84(d,0.9H,与t-Bu信号重叠),0.79(d,J＝7,2.1H),0.02/0.01/0.00(三个重叠单峰,6H)。LC-MS:[M+Na]+C13H27NNaO5Si的分析计算值：328.16；实测值：328.46。Cap-80b：1H NMR(CDCl3,δ=7.24ppm,400MHz),6.00(宽二重峰,J＝6.8,1H),4.36(dd,J＝7.1,3.1,1H),3.87(dd,J=10.5,3.0,1H),3.67(s,3H),3.58(dd,J＝10.6,4.8,1H),2.35(m,1H),1.03(d,J＝7.1,3H),0.90(s,9H),0.08(s,6H)。LC-MS:[M+Na]+C13H27NNaO5Si的分析计算值：328.16；实测值：328.53。粗产物无需进一步纯化即使用。
Cap-81
Figure BDA00001874284600651
根据Falb等人，Synthetic Communications,23:2839(1993)所述的方案来制备。
Cap-82至Cap-85
根据对于Cap-51或Cap-13所述的操作，由适当起始物质合成Cap-82至Cap-85。样品显示类似于其立体异构体(即分别为Cap-4、Cap-13、Cap-51及Cap-52)的光谱分布。
Figure BDA00001874284600652
Cap-86
Figure BDA00001874284600653
(2S,3R)-3-甲氧基-2-(甲氧基羰基氨基)丁酸
在0℃向O-甲基-L-苏氨酸(3.0g，22.55mmol)、NaOH(0.902g，22.55mmol)于H2O(15mL)中的混合物中逐滴加入ClCO2Me(1.74mL，22.55mmol)。使混合物搅拌12小时且使用1N HCl酸化至pH 1。用EtOAc(2×250mL)及10%MeOH的CH2Cl2溶液(250mL)萃取水相且在真空浓缩合并的有机相，得到无色油状物(4.18g，97%)，其具有足以用于后续步骤中的纯度。1HN MR(400MHz,CDCl3)δ4.19(s,1H),3.92-3.97(m,1H),3.66(s,3H),1.17(d,J＝7.7Hz,3H)。LC-MS:C7H13NO5的分析计算值：191；实测值：190(M-H)-。
Cap-87
Figure BDA00001874284600661
在0℃向L-高丝氨酸(2.0g，9.79mmol)、Na2CO3(2.08g，19.59mmol)于H2O(15mL)中的混合物中逐滴加入ClCO2Me(0.76mL，9.79mmol)。使混合物搅拌48小时且使用1N HCl酸化至pH 1。用EtOAc(2×250mL)萃取水相且在真空中浓缩合并的有机相，得到无色固体(0.719g，28%)，其具有足以用于后续步骤中的纯度。1HN MR(400MHz,CDCl3)δ4.23(dd,J＝4.5,9.1Hz,1H),3.66(s,3H),3.43-3.49(m,2H),2.08-2.14(m,1H),1.82-1.89(m,1H)。LC-MS:C7H13NO5的分析计算值：191；实测值：192(M+H)+。
Cap-88
Figure BDA00001874284600662
在100℃将L-缬氨酸(1.0g，8.54mmol)、3-溴吡啶(1.8mL，18.7mmol)、K2CO3(2.45g，17.7mmol)及CuI(169mg，0.887mmol)于DMSO(10mL)中的混合物加热12小时。将反应混合物冷却至室温，倒入H2O(约150mL)中且用EtOAc(2次)洗涤。用少量H2O萃取有机层且用6N HCl将合并的水相酸化至约pH 2。将体积减少至约三分之一且加入20g阳离子交换树脂(Strata)。使淤浆静置20分钟且载入至阳离子交换树脂(Strata)(约25g)填料上。先后用H2O(200mL)、MeOH(200mL)及NH3(3M MeOH溶液，2×200mL)洗涤所述填料。在真空中浓缩适当馏分且将残余物(约1.1g)溶解于H2O中，冷冻并冻干。获得呈泡沫状的标题化合物(1.02g，62%)。1HN MR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,br,1H),7.68-7.71(m,1H),7.01(s,br,1H),6.88(d,J＝7.5Hz,1H),5.75(s,br,1H),3.54(s,1H),2.04-2.06(m,1H),0.95(d,J＝6.0Hz,3H),0.91(d,J＝6.6Hz,3H)。LC-MS:C10H14N2O2的分析计算值：194；实测值：195(M+H)+。
Cap-89
Figure BDA00001874284600663
在100℃将L-缬氨酸(1.0g，8.54mmol)、5-溴嘧啶(4.03g，17.0mmol)、K2CO3(2.40g，17.4mmol)及CuI(179mg，0.94mmol)于DMSO(10mL)中的混合物加热12小时。将反应混合物冷却至室温，倒入H2O(约150mL)中且用EtOAc(2次)洗涤。用少量H2O萃取有机层且用6N HCl将合并的水相酸化至约pH 2。将体积减少至约三分之一且加入20g阳离子交换树脂(Strata)。使淤浆静置20分钟且载入至阳离子交换树脂(Strata)(约25g)填料上。先后用H2O(200mL)、MeOH(200mL)及NH3(3M MeOH溶液，2×200mL)洗涤所述填料。在真空中浓缩适当馏分且将残余物(约1.1g)溶解于H2O中，冷冻并冻干。获得呈泡沫状的标题化合物(1.02g，62%)。1HN MR(400MHz,CD3OD)显示混合物含有缬氨酸且无法估算纯度。将物质按原样用于后续反应中。LC-MS:C9H13N3O2的分析计算值：195；实测值：196(M+H)+。
Cap-90
Figure BDA00001874284600671
根据对于制备Cap-1所述的方法制备Cap-90。将粗物质按原样用于后续步骤中。LC-MS:C11H15NO2的分析计算值：193；实测值：192(M-H)-。
Cap-91至Cap-116
除非另外注明，否则根据用于制备Cap-51的方法制备以下Cap：
Figure BDA00001874284600672
Figure BDA00001874284600681
Figure BDA00001874284600691
Figure BDA00001874284600701
Figure BDA00001874284600711
Cap-117至Cap-123
对于制备Cap-117至Cap-123，由商业来源获得Boc氨基酸且通过用25%TFA的CH2Cl2溶液处理来脱保护。如通过LC-MS判断反应完成后，在真空中除去溶剂且根据对于Cap-51所述的操作，用氯甲酸甲酯使氨基酸的相应三氟乙酸盐进行氨基甲酰化。
Figure BDA00001874284600712
Figure BDA00001874284600721
Cap-124
Figure BDA00001874284600722
根据Cap-51的操作，使L-苏氨酸叔丁酯的盐酸盐进行氨基甲酰化。用1N HCl将粗反应混合物酸化至pH~1且用EtOAc(2×50mL)萃取混合物。在真空中浓缩合并的有机相，产生无色油状物，其在静置后固化。在真空中浓缩水层且用EtOAc-CH2Cl2-MeOH(1∶1:0.1)研磨所得产物与无机盐的混合物，接着在真空中浓缩有机相，产生无色油状物，LC-MS显示其为所需产物。合并两批，得到0.52g固体。1HN MR(400MHz,CD3OD)δ4.60(m,1H),4.04(d,J＝5.0Hz,1H),1.49(d,J＝6.3Hz,3H)。LC-MS:C5H7NO4的分析计算值：145；实测值：146(M+H)+。
Cap-125
Figure BDA00001874284600731
向Pd(OH)2(20%，100mg)、甲醛水溶液(37wt％，4mL)、乙酸(0.5mL)于甲醇(15mL)中的混悬液中加入(S)-4-氨基-2-(叔丁氧基羰基氨基)丁酸(1g，4.48mmol)。用氢气净化反应混合物数次且用室温氢气囊搅拌过夜。经硅藻土
Figure BDA00001874284600732
填料过滤反应混合物，且在真空中除去挥发性组分。将所得粗物质按原样用于下一步骤。LC-MS:C11H22N2O4的分析计算值：246；实测值：247(M+H)+。
Cap-126
Figure BDA00001874284600733
此操作为用于制备Cap-51的操作的修改。在0℃向3-甲基-L-组氨酸(0.80g，4.70mmol)于THF(10mL)及H2O(10mL)中的混悬液中加入NaHCO3(0.88g，10.5mmol)。用ClCO2Me(0.40mL，5.20mmol)处理所得混合物且在0℃使混合物搅拌。搅拌约2小时后，LC-MS显示无起始物质剩余。用6N HCl将反应混合物酸化至pH 2。
在真空中除去溶剂且将残余物混悬于20mL 20%MeOH的CH2Cl2溶液中。过滤并浓缩混合物，产生浅黄色泡沫状物(1.21g)。LC-MS及1H NMR显示物质为甲酯与所需产物的9:1混合物。将该物质吸收于THF(10mL)及H2O(10mL)中，冷却至0℃且加入LiOH(249.1mg，10.4mmol)。搅拌约1小时后，LC-MS显示无酯剩余。因此，用6N HCl酸化混合物且在真空中除去溶剂。LC-MS及1H NMR证实不存在酯。获得受无机盐污染的呈盐酸盐形式的标题化合物(1.91g，>100%)。化合物无需进一步纯化按原样用于后续步骤中。1HN MR(400MHz,CD3OD)δ8.84,(s,1H),7.35(s,1H),4.52(dd,J＝5.0,9.1Hz,1H),3.89(s,3H),3.62(s,3H),3.35(dd,J＝4.5,15.6Hz,1H,部分经溶剂掩蔽),3.12(dd,J＝9.0,15.6Hz,1H)。LC-MS:C9H13N3O4的分析计算值：227.09；实测值：228.09(M+H)+。
Cap-127
Figure BDA00001874284600741
根据以上用于Cap-126的方法，以(S)-2-氨基-3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)丙酸(1.11g，6.56mmol)、NaHCO3(1.21g，14.4mmol)及ClCO2Me(0.56mL，7.28mmol)作为起始物质来制备Cap-127。获得受无机盐污染的呈盐酸盐形式的标题化合物(1.79g，>100%)。LC-MS及1H NMR显示存在约5%甲酯。粗混合物无需进一步纯化按原样使用。1HN MR(400MHz,CD3OD)δ8.90(s,1H),7.35(s,1H),4.48(dd,J＝5.0,8.6Hz,1H),3.89(s,3H),3.62(s,3H),3.35(m,1H),3.08(m,1H)；LC-MS:C9H13N3O4的分析计算值：227.09；实测值：228(M+H)+。
制备Cap-128
Figure BDA00001874284600742
步骤1.制备(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)戊-4-炔酸苄酯(cj-27b)。
Figure BDA00001874284600743
在0℃向cj-27a(1.01g，4.74mmol)、DMAP(58mg，0.475mmol)及iPr2NEt(1.7mL，9.8mmol)于CH2Cl2(100mL)中的溶液中加入Cbz-Cl(0.68mL，4.83mmol)。在0℃使溶液搅拌4小时，洗涤(1N KHSO4、盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱法(TLC 6:1己烷:EtOAc)纯化残余物，产生呈无色油状的标题化合物(1.30g，91%)。1HN MR(400MHz,CDCl3)δ7.35(s,5H),5.35(d,br，J＝8.1Hz,1H),5.23(d,J＝12.2Hz,1H),5.17(d,J＝12.2Hz,1H),4.48-4.53(m,1H),2.68-2.81(m,2H),2.00(t,J＝2.5Hz,1H),1.44(s,9H)。LC-MS:C17H21NO4的分析计算值：303；实测值：304(M+H)+。
步骤2.制备(S)-3-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸苄酯(cj-28)。
Figure BDA00001874284600751
在室温向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)戊-4-炔酸苄酯(0.50g，1.65mmol)、抗坏血酸钠(0.036g，0.18mmol)、CuSO4-5H2O(0.022g，0.09mmol)及NaN3(0.13g，2.1mmol)于DMF-H2O(5mL，4:1)中的混合物中加入BnBr(0.24mL，2.02mmol)且使混合物温热至65℃。5小时后，LC-MS表明转化率低。加入另一部分NaN3(100mg)且持续加热12小时。将反应混合物倒入EtOAc及H2O中并振荡。分离各层且用EtOAc萃取水层3次，洗涤(H2O×3、盐水)合并的有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。通过快速(
Figure BDA00001874284600752
40+M0-5%MeOH的CH2Cl2溶液；TLC 3%MeOH的CH2Cl2溶液)纯化残余物，得到浅黄色油状物，其在静置后固化(748.3mg，104%)。NMR与所需产物一致，但表明存在DMF。所述物质无需进一步纯化按原样使用。1HN MR(400MHz,DMSO-d6)δ7.84(s,1H),7.27-7.32(m,10H),5.54(s,2H),5.07(s,2H),4.25(m,1H),3.16(dd,J＝1.0,5.3Hz,1H),3.06(dd,J＝5.3,14.7Hz),2.96(dd,J＝9.1,14.7Hz,1H),1.31(s,9H)。LC-MS:C24H28N4O4的分析计算值：436；实测值：437(M+H)+。
步骤3.制备(S)-3-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)丙酸苄酯(cj-29)。
Figure BDA00001874284600753
向(S)-3-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸苄酯(0.52g，1.15mmol)的CH2Cl2溶液中加入TFA(4mL)。使混合物在室温搅拌2小时。在真空中浓缩混合物，产生无色油状物，其在静置后固化。将该物质溶解于THF-H2O中并冷却至0℃。加入固体NaHCO3(0.25g，3.00mmol)，随后加入ClCO2Me(0.25mL，3.25mmol)。搅拌1.5小时后，用6N HCl将混合物酸化至pH~2，接着倒入H2O-EtOAc中。分离各层且用EtOAc萃取水相2次。洗涤(H2O、盐水)合并的有机层，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩，产生无色油状物(505.8mg，111%，NMR表明存在未经鉴别的杂质)，其在泵上静置后固化。所述物质无需进一步纯化按原样使用。1HN MR(400MHz,DMSO-d6)δ7.87(s,1H),7.70(d,J＝8.1Hz,1H),7.27-7.32(m,10H),5.54(s,2H),5.10(d,J＝12.7Hz,1H),5.06(d,J＝12.7Hz,1H),4.32-4.37(m,1H),3.49(s,3H),3.09(dd,J＝5.6,14.7Hz,1H),2.98(dd,J＝9.6,14.7Hz,1H)。LC-MS:C21H22N4O4的分析计算值：394；实测值：395(M+H)+。
步骤4.制备(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)丙酸(Cap-128)。
在大气压，在含Pd-C(82mg)的MeOH(5mL)存在下使(S)-3-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)丙酸苄酯氢化12小时。经硅藻土
Figure BDA00001874284600762
过滤混合物且在真空中浓缩。获得呈无色树胶状的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)丙酸(266mg，111%)，其受约10%甲酯污染。所述物质无需进一步纯化按原样使用。1HN MR(400MHz,DMSO-d6)δ12.78(s,br，1H),7.59(s,1H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),4.19-4.24(m,1H),3.49(s,3H),3.12(dd,J＝4.8Hz,14.9Hz,1H),2.96(dd,J＝9.9,15.0Hz,1H)。LC-MS:C7H10N4O4的分析计算值：214；实测值：215(M+H)+。
制备Cap-129
Figure BDA00001874284600763
步骤1.制备(S)-2-(苄基氧基羰基氨基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(cj-31)。
在50℃将(S)-2-氧代氧杂环丁烷-3-基氨基甲酸苄酯(0.67g，3.03mmol)及吡唑(0.22g，3.29mmol)于CH3CN(12mL)中的混悬液加热24小时。将混合物冷却至室温过夜且过滤固体，得到(S)-2-(苄基氧基羰基氨基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(330.1mg)。在真空中浓缩滤液，接着用少量CH3CN(约4mL)研磨，得到第二批(43.5mg)。总收率为370.4mg(44%)。熔点165.5-168℃。文献中的熔点168.5-169.5[Vederas等人，J.Am.Chem.Soc.,107:7105(1985)]。1HN MR(400MHz,CD3OD)δ7.51(d,J＝2.0,1H),7.48(s,J＝1.5Hz,1H),7.24-7.34(m,5H),6.23m,1H),5.05(d,12.7H,1H),5.03(d,J＝12.7Hz,1H),4.59-4.66(m,2H),4.42-4.49(m,1H)。LC-MS:C14H15N3O4的分析计算值：289；实测值：290(M+H)+。
步骤2.制备(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(Cap-129)。
Figure BDA00001874284600772
在大气压，在含Pd-C(45mg)的MeOH(5mL)存在下使(S)-2-(苄基氧基羰基氨基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(0.20g，0.70mmol)氢化2小时。产物似乎不溶于MeOH中，因此，用5mL H2O及数滴6N HCl稀释反应混合物。经硅藻土
Figure BDA00001874284600773
过滤均匀溶液，且在真空中除去MeOH。冷冻及冻干剩余溶液，产生黄色泡沫(188.9mg)。将该物质混悬于THF-H2O(1:1，10mL)中，接着冷却至0℃。小心地向冷混合物中加入NaHCO3(146.0mg，1.74mmol)(释放CO2)。气体释放停止(约15分钟)后，逐滴加入ClCO2Me(0.06mL，0.78mmol)。使混合物搅拌2小时且用6N HCl酸化至pH~2并倒入EtOAc中。分离各层且用EtOAc(5次)萃取水相。洗涤(盐水)合并的有机层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，产生呈无色固体状的标题化合物(117.8mg，79%)。1HN MR(400MHz,DMSO-d6)δ13.04(s,1H),7.63(d,J＝2.6Hz,1H),7.48(d,J＝8.1Hz,1H),7.44(d,J＝1.5Hz,1H),6.19(明显的三重峰,J＝2.0Hz,1H),4.47(dd,J＝3.0,12.9Hz,1H),4.29-4.41(m,2H),3.48(s,3H)。LC-MS:C8H11N3O4的分析计算值：213；实测值：214(M+H)+。
Cap-130
Figure BDA00001874284600781
通过类似于以下文献中所给的操作使可商购得到的(R)-苯基甘氨酸酰化来制备Cap-130：Calmes,M.等人，Tetrahedron,43(10):2285(1987)。
Cap-131
Figure BDA00001874284600782
步骤a：将二甲基氨基甲酰氯(0.92mL，10mmol)缓慢加入至(S)-2-氨基-3-甲基丁酸苄酯盐酸盐(2.44g；10mmol)及许尼希碱(3.67mL，21mmol)于THF(50mL)中的溶液中。在室温搅拌所得白色混悬液(16小时)过夜并减压浓缩。使残余物分配于乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩。通过快速色谱法纯化(用乙酸乙酯:己烷(1:1)洗脱)所得黄色油状物。在真空浓缩所收集的馏分，得到2.35g(85%)澄清油状物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 0.84(d,J＝6.95Hz,3H),0.89(d,J＝6.59Hz,3H),1.98-2.15(m,1H),2.80(s,6H),5.01-5.09(m,J＝12.44Hz,1H),5.13(d,J＝12.44Hz,1H),6.22(d,J＝8.05Hz,1H),7.26-7.42(m,5H)。LC(条件1)：RT=1.76分钟；MS:[M+H]+C16H22N2O3的分析计算值：279.17；实测值：279.03。
步骤b：向以上制备的中间体(2.35g；8.45mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入Pd/C(10%；200mg)且用N2(3次)冲洗所得黑色混悬液并置于1atmH2。在室温搅拌混合物过夜且经微纤维滤器过滤除去催化剂。接着减压浓缩所得澄清溶液，获得1.43g(89%)呈白色泡沫状的Cap-131，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 0.87(d,J＝4.27Hz,3H),0.88(d,J＝3.97Hz,3H),1.93-2.11(m,1H),2.80(s,6H),3.90(dd,J＝8.39,6.87Hz,1H),5.93(d,J＝8.54Hz,1H),12.36(s,1H)。LC(条件1)：RT=0.33分钟；MS:[M+H]+C8H17N2O3的分析计算值：189.12；实测值：189.04。
Cap-132
Figure BDA00001874284600791
根据对于Cap-131所述的方法，由(S)-2-氨基丙酸苄酯盐酸盐制备Cap-132。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 1.27(d,J＝7.32Hz,3H),2.80(s,6H),4.06(qt,1H),6.36(d,J＝7.32Hz,1H),12.27(s,1H)。LC(条件1)：RT=0.15分钟；MS:[M+H]+C6H13N2O3的分析计算值：161.09；实测值：161.00。
Cap-133
根据对于Cap-47所述的方法，由(S)-2-氨基-3-甲基丁酸叔丁酯盐酸盐及氯甲酸2-氟乙酯制备Cap-133。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 0.87(t,J＝6.71Hz,6H),1.97-2.10(m,1H),3.83(dd,J＝8.39,5.95Hz,1H),4.14-4.18(m,1H),4.20-4.25(m,1H),4.50-4.54(m,1H),4.59-4.65(m,1H),7.51(d,J＝8.54Hz,1H),12.54(s,1H)。
Cap-134
Figure BDA00001874284600793
根据对于Cap-51所述的方法，由(S)-二乙基丙氨酸及氯甲酸甲酯制备Cap-134。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 0.72-0.89(m,6H),1.15-1.38(m,4H),1.54-1.66(m,1H),3.46-3.63(m,3H),4.09(dd,J＝8.85,5.19Hz,1H),7.24(d,J＝8.85Hz,1H),12.55(s,1H)。LC(条件2)：RT=0.66分钟；LC-MS:[M+H]+C9H18NO4的分析计算值：204.12；实测值：204.02。
Cap-135
Figure BDA00001874284600794
在25℃使D-2-氨基-(4-氟苯基)乙酸(338mg，2.00mmol)、1NHCl的乙醚溶液(2.0mL，2.0mmol)及福尔马林(37%，1mL)于甲醇(5mL)中的溶液在10%钯/炭(60mg)上进行气囊氢化16小时。接着经
Figure BDA00001874284600795
过滤混合物，得到呈白色泡沫状的Cap-135的盐酸盐(316mg，80%)。1H NMR(300MHz,MeOH-d4)δ7.59(dd,J＝8.80,5.10Hz,2H),7.29(t,J＝8.6Hz,2H),5.17(s,1H),3.05(非常宽的单峰,3H),2.63(非常宽的单峰,3H)；Rt=0.19分钟(条件-MS-W5)；95%均匀性指数；LRMS:[M+H]+C10H13FNO2的分析计算值：198.09；实测值：198.10。
Cap-136
在氮气下向经冷却(-50℃)的1-苄基-1H-咪唑(1.58g，10.0mmol)的无水乙醚(50mL)混悬液中逐滴加入正丁基锂(2.5M己烷溶液，4.0mL，10.0mmol)。在-50℃搅拌20分钟后，将无水二氧化碳(通过Drierite)对反应混合物鼓泡10分钟，随后使其温热至25℃。将向反应混合物中加入二氧化碳后所形成的重沉淀物过滤，得到吸湿性白色固体，将其吸收于水(7mL)中，酸化至pH=3，冷却并用刮插痕(scratching)引起结晶。过滤此沉淀物，产生白色固体，将其混悬于甲醇中，用1NHCl/乙醚(4mL)处理且在真空中浓缩。由水(5mL)冻干残余物，得到呈白色固体状的Cap-136的盐酸盐(817mg，40%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.94(d,J＝1.5Hz,1H),7.71(d,J＝1.5Hz,1H),7.50-7.31(m,5H),5.77(s,2H)；Rt=0.51分钟(条件-MS-W5)；95%均匀性指数；LRMS:[M+H]+C11H12N2O2的分析计算值：203.08；实测值：203.11。
Cap-137
Figure BDA00001874284600802
Cap-137步骤a
Figure BDA00001874284600803
在80℃在氮气下将1-氯-3-氰基异喹啉(188mg，1.00mmol；根据WO2003/099274中的操作制备)(188mg，1.00mmol)、氟化铯(303.8mg，2.00mmol)、二(三叔丁基膦)二氯化钯(10mg，0.02mmol)及2-(三丁基甲锡烷基)呋喃(378μL，1.20mmol)于无水二噁烷(10mL)中的混悬液加热16小时，随后将其冷却至25℃且在剧烈搅拌下用饱和氟化钾水溶液处理1小时。使混合物分配于乙酸乙酯与水之间且分离有机相，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。对残余物进行硅胶纯化(用0%至30%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈白色固体状的Cap-137步骤a(230mg，105%)，其按原样使用。Rt=1.95分钟(条件-MS-W2)；90%均匀性指数；LRMS:[M+H]+C14H8N2O的分析计算值：221.07；实测值：221.12。
Cap-137
Figure BDA00001874284600811
向Cap-137步骤a(110mg，0.50mmol)及高碘酸钠(438mg，2.05mmol)于四氯化碳(1mL)、乙腈(1mL)及水(1.5mL)中的混悬液中加入三氯化钌水合物(2mg，0.011mmol)。在25℃搅拌混合物2小时，接着分配于二氯甲烷与水之间。分离水层，再用二氯甲烷萃取两次且经Na2SO4干燥合并的二氯甲烷萃取物，过滤并浓缩。用己烷研磨残余物，得到呈浅灰色固体状的Cap-137(55mg，55%)。Rt=1.10分钟(条件-MS-W2)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C11H8N2O2的分析计算值：200.08；实测值：200.08。
Cap-138至Cap-158
合成策略。方法A。
Figure BDA00001874284600812
向经搅拌的5-羟基异喹啉(根据WO 2003/099274中的操作制备)(2.0g，13.8mmol)及三苯基膦(4.3g，16.5mmol)于无水四氢呋喃(20mL)中的混悬液中分批加入无水甲醇(0.8mL)及偶氮二羧酸二乙酯(3.0mL，16.5mmol)。在室温搅拌混合物20小时，随后用乙酸乙酯稀释且用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物预吸附于硅胶上且纯化(用40%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈浅黄色固体状的Cap-138步骤a(1.00g，45%)。1H NMR(CDCl3,500MHz)δ9.19(s,1H),8.51(d,J＝6.0Hz,1H),7.99(d,J＝6.0Hz,1H),7.52-7.50(m,2H),7.00-6.99(m,1H),4.01(s,3H)；Rt=0.66分钟(条件D2)；95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C10H10NO的分析计算值：160.08；实测值：160.10。
Cap-138步骤b
在室温向经搅拌的Cap-138步骤a(2.34g，14.7mmol)的无水二氯甲烷(50mL)溶液中加入一份间氯过苯甲酸(77%，3.42g，19.8mmol)。搅拌20小时后，加入粉末状碳酸钾(2.0g)且在室温搅拌混合物1小时，随后过滤并浓缩，得到呈淡黄色固体状的Cap-138步骤b，其纯度足以用于后续步骤(2.15g，83.3%)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.73(d,J＝1.5Hz,1H),8.11(dd,J＝7.3,1.7Hz,1H),8.04(d,J＝7.1Hz,1H),7.52(t,J＝8.1Hz,1H),7.28(d,J＝8.3Hz,1H),6.91(d,J＝7.8Hz,1H),4.00(s,3H)；Rt=0.92分钟(条件-D1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C10H10NO2的分析计算值：176.07；实测值：176.0。
Cap-138步骤c
Figure BDA00001874284600822
在室温在氮气下向经搅拌的Cap-138步骤b(0.70g，4.00mmol)及三乙胺(1.1mL，8.00mmol)于无水乙腈(20mL)中的溶液中加入三甲基甲硅烷基氰化物(1.60mL，12.00mmol)。在75℃加热混合物20小时，随后冷却至室温，用乙酸乙酯稀释且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤，随后经Na2SO4干燥并浓缩溶剂。对残余物进行硅胶快速色谱法(用5%乙酸乙酯/己烷至25%乙酸乙酯/己烷洗脱)纯化，得到呈白色结晶固体状的Cap-138步骤c(498.7mg)以及另外223mg由滤液回收的Cap-138步骤c。1H NMR(CDCl3,500MHz)δ8.63(d,J＝5.5Hz,1H),8.26(d,J＝5.5Hz,1H),7.88(d,J＝8.5Hz,1H),7.69(t,J＝8.0Hz,1H),7.08(d,J＝7.5Hz,1H),4.04(s,3H)；Rt=1.75分钟(条件-D1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C11H9N2O的分析计算值：185.07；实测值：185.10。
Cap-138
Figure BDA00001874284600831
用5N氢氧化钠溶液(10mL)处理Cap-138步骤c(0.45g，2.44mmol)且在85℃加热所得混悬液4小时，冷却至25℃，用二氯甲烷稀释并用1N盐酸酸化。分离有机相，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩至1/4体积且过滤，得到呈黄色固体状的Cap-138(0.44g，88.9%)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ13.6(宽单峰,1H),8.56(d,J＝6.0Hz,1H),8.16(d,J＝6.0Hz,1H),8.06(d,J＝8.8Hz,1H),7.71-7.67(m,1H),7.30(d,J＝8.0Hz,1H),4.02(s,3H)；Rt=0.70分钟(条件-D1)；95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C11H10NO3的分析计算值：204.07；实测值：204.05。
合成策略。方法B(来源于Tetrahedron Letters,42:6707(2001))。
Figure BDA00001874284600832
Cap-139
Figure BDA00001874284600833
Cap-139步骤a
Figure BDA00001874284600834
向含有经氩气脱气的1-氯-6-甲氧基异喹啉(1.2g，6.2mmol；根据WO2003/099274中的操作制备)、氰化钾(0.40g，6.2mmol)、1,5-二(二苯基膦基)戊烷(0.27g，0.62mmol)及乙酸钯(II)(70mg，0.31mmol)于无水甲苯(6mL)中的混悬液的厚壁螺旋盖小瓶中加入N，N，N′，N'-四甲基乙二胺(0.29mL，2.48mmol)。密封所述小瓶，在150℃加热22小时，接着使其冷却至25℃。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用水及盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。对残余物进行硅胶纯化(用5%乙酸乙酯/己烷至25%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈白色固体状的Cap-139步骤a(669.7mg)。1H NMR(CDCl3,500MHz)δ8.54(d,J＝6.0Hz,1H),8.22(d,J＝9.0Hz,1H),7.76(d,J＝5.5Hz,1H),7.41-7.39(m,1H),7.13(d,J＝2.0Hz,1H),3.98(s,3H)；Rt=1.66分钟(条件-D1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C11H9N2O的分析计算值：185.07；实测值：185.20。
Cap-139
Figure BDA00001874284600841
根据对于Cap-138所述的操作，通过用5N NaOH使Cap-139步骤a进行碱性水解来制备Cap-139。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.63(非常宽的单峰,1H),8.60(d,J＝9.3Hz,1H),8.45(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(d,J＝5.9Hz,1H),7.49(d,J＝2.2Hz,1H),7.44(dd,J＝9.3,2.5Hz,1H),3.95(s,3H)；Rt=0.64分钟(条件-D1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C11H10NO3的分析计算值：204.07；实测值：204.05。
Cap-140
Figure BDA00001874284600842
Cap-140步骤a
Figure BDA00001874284600843
在25℃在氮气下向经剧烈搅拌的1,3-二氯-5-乙氧基异喹啉(482mg，2.00mmol；根据WO 2005/051410中的操作制备)、乙酸钯(II)(9mg，0.04mmol)、碳酸钠(223mg，2.10mmol)及1,5-二(二苯基膦基)戊烷(35mg，0.08mmol)于无水二甲基乙酰胺(2mL)中的混合物中加入N,N,N',N'-四甲基乙二胺(60mL，0.40mmol)。10分钟后，将混合物加热至150℃，接着历时18小时使用注射泵分批加入1mL丙酮氰醇的储备溶液(由含457μL丙酮氰醇的4.34mL DMA制备)。接着使混合物分配于乙酸乙酯与水之间且分离有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。对残余物进行硅胶纯化(用10%乙酸乙酯/己烷至40%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈黄色固体状的Cap-140步骤a(160mg，34%)。Rt=2.46分钟(条件-MS-W2)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C12H9ClN2O的分析计算值：233.05；实测值：233.08。
Cap-140
Figure BDA00001874284600851
通过如下文所述的用于制备Cap-141的操作中所述，用12N HCl使Cap-140步骤a进行酸水解来制备Cap-140。Rt=2.24分钟(条件-MS-W2)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C12H11ClNO3的分析计算值：252.04；实测值：252.02。
Cap-141
Figure BDA00001874284600852
Cap-141步骤a
如用于制备Cap-140步骤a的操作(见上)中所述，由1-溴-3-氟异喹啉(使用J.Med.Chem.,13:613(1970)中所阐述的操作，由3-氨基-1-溴异喹啉制备)制备Cap-141步骤a。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.35(d,J＝8.5Hz,1H),7.93(d,J＝8.5Hz,1H),7.83(t,J＝7.63Hz,1H),7.77-7.73(m,1H),7.55(s,1H)；Rt=1.60分钟(条件-D1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C10H6FN2的分析计算值：173.05；实测值：172.99。
Cap-141
Figure BDA00001874284600854
用12N HCl(3mL)处理Cap-141步骤a(83mg，0.48mmol)且在80℃加热所得淤浆16小时，随后冷却至室温并用水(3mL)稀释。搅拌混合物10分钟，接着过滤，得到呈灰白色固体状的Cap-141(44.1mg，47.8%)。用二氯甲烷稀释滤液且用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，另外得到Cap-141，其纯度足以直接用于后续步骤(29.30mg，31.8%)。1H NMR(DMSO-d6,500MHz)δ14.0(宽单峰,1H),8.59-8.57(m,1H),8.10(d,J＝8.5Hz,1H),7.88-7.85(m,2H),7.74-7.71(m,1H)；Rt＝1.33分钟(条件-D1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C10H7FNO2的分析计算值：192.05；实测值：191.97。
Cap-142
Figure BDA00001874284600861
Cap-142步骤a
如用于制备Cap-138步骤b及c的两步操作中所述，由4-溴异喹啉N-氧化物制备Cap-142步骤a。Rt=1.45分钟(条件-MS-W1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C10H6BrN2的分析计算值：232.97；实测值：233.00。
Cap-142步骤b
Figure BDA00001874284600863
向经氩气脱气的Cap-142步骤a(116mg，0.50mmol)、磷酸三钾(170mg，0.80mmol)、乙酸钯(II)(3.4mg，0.015mmol)及2-(二环己基膦基)联苯(11mg，0.03mmol)于无水甲苯(1mL)中的混悬液中加入吗啉(61μL，0.70mmol)。在100℃加热混合物16小时，冷却至25℃且经硅藻土过滤。对残余物进行硅胶纯化(用10%至70%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈黄色固体状的Cap-142步骤b(38mg，32%)，其直接用于后续步骤。Rt=1.26分钟(条件-MS-W1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C14H14N3O的分析计算值：240.11；实测值：240.13。
Cap-142
Figure BDA00001874284600871
如用于Cap-138的操作中所述，用5N氢氧化钠，由Cap-142步骤b制备Cap-142。Rt 0.72分钟(条件-MS-W1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C14H15N2O3的分析计算值：259.11；实测值：259.08。
Cap-143
Figure BDA00001874284600872
Cap-143步骤a
Figure BDA00001874284600873
向经搅拌的3-氨基-1-溴异喹啉(444mg，2.00mmol)的无水二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入一份氢化钠(60％，未洗涤，96mg，2.4mmol)。在25℃搅拌混合物5分钟，随后加入2-溴乙醚(90％，250μL，2.00mmol)。进一步在25℃搅拌混合物5小时且在75℃搅拌72小时，随后冷却至25℃，用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯稀释。分离有机层，用水及盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。对残余物进行硅胶纯化(用0%至70%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈黄色固体状的Cap-143步骤a(180mg，31%)。Rt=1.75分钟(条件-MS-W1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C13H14BrN2O的分析计算值：293.03；实测值：293.04。
Cap-143
Figure BDA00001874284600874
向冷(-60℃)的Cap-143步骤a(154mg，0.527mmol)的无水四氢呋喃(5mL)溶液中加入正丁基锂的己烷溶液(2.5M，0.25mL，0.633mmol)。10分钟后，将无水二氧化碳鼓泡至反应混合物中10分钟，随后用1N HCl淬灭且使其温热至25℃。接着用二氯甲烷(3×30mL)萃取混合物且在真空中浓缩合并的有机萃取物。通过反相HPLC(MeOH/水/TFA)纯化残余物，得到Cap-143(16mg，12%)。Rt=1.10分钟(条件-MS-W1)；90%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C14H15N2O3的分析计算值：259.11；实测值：259.08。
Cap-144
Figure BDA00001874284600881
Cap-144步骤a
Figure BDA00001874284600882
将1,3-二氯异喹啉(2.75g，13.89mmol)以小份加入至冷(0℃)的发烟硝酸(10mL)及浓硫酸(10mL)的溶液中。在0℃搅拌混合物0.5小时，随后逐渐温热至25℃，其中搅拌16小时。接着将混合物倒入含有碎冰及水的烧杯中且在0℃搅拌所得混悬液1小时，随后过滤，得到呈黄色固体状的Cap-144步骤a(2.73g，81%)，其直接使用。Rt=2.01分钟(条件-D1)；95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C9H5Cl2N2O2的分析计算值：242.97；实测值：242.92。
Cap-144步骤b
Figure BDA00001874284600883
将Cap-144步骤a(0.30g，1.23mmol)吸收于甲醇(60mL)中且用氧化铂(30mg)处理，并使混悬液在7psi H2进行帕尔氢化(Parr hydrogenation)1.5小时。接着加入福尔马林(5mL)及另外的氧化铂(30mg)，且使混悬液在45psiH2再进行帕尔氢化13小时。接着经硅藻土抽滤并浓缩至1/4体积。
抽滤产生的沉淀物，得到呈黄色固体状的标题化合物，使其进行硅胶快速色谱法(用含5%乙酸乙酯的己烷至含25%乙酸乙酯的己烷洗脱)纯化，得到呈淡黄色固体状的Cap-144步骤b(231mg，78%)。Rt=2.36分钟(条件-D1)；95%均匀性指数；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(s,1H),7.95(d,J＝8.6Hz,1H),7.57-7.53(m,1H),7.30(d,J＝7.3Hz,1H),2.88(s,6H)；LC-MS:[M+H]+C11H11Cl2N2的分析计算值：241.03；实测值：241.02。HRMS:[M+H]+C11H11Cl2N2的分析计算值：241.0299；实测值：241.0296。
Cap-144步骤c
Figure BDA00001874284600891
根据对于制备Cap-139步骤a所述的操作，由Cap-144步骤b制备Cap-144步骤c。Rt=2.19分钟(条件-D1)；95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C12H11ClN3的分析计算值：232.06；实测值：232.03。HRMS:[M+H]+C12H11ClN3的分析计算值：232.0642；实测值：232.0631。
Cap-144
Figure BDA00001874284600892
根据对于Cap-141所述的操作，制备Cap-144。Rt=2.36分钟(条件-D1)；90%；LC-MS:[M+H]+C12H12ClN2O2的分析计算值：238.01；实测值：238.09。
Cap-145至Cap-162
除非如下文所阐述另外注明，否则根据对于制备Cap-138(方法A)或Cap-139(方法B)所述的操作，由适当1-氯异喹啉制备Cap-145至Cap-162。
Figure BDA00001874284600893
Figure BDA00001874284600901
Figure BDA00001874284600921
Figure BDA00001874284600931
Cap-163
Figure BDA00001874284600932
向2-丁酮酸(1.0g，9.8mmol)的乙醚(25mL)溶液中逐滴加入苯基溴化镁(22mL，1M THF溶液)。在约25℃在氮气下搅拌反应混合物17.5小时。用1N HCl酸化反应混合物且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取产物。先后用水、盐水洗涤合并的有机层并经MgSO4干燥。在真空中浓缩后，获得白色固体。使固体由己烷/乙酸乙酯中重结晶，得到呈白色针状的Cap-163(883.5mg)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz):12.71(宽单峰,1H),7.54-7.52(m,2H),7.34-7.31(m,2H),7.26-7.23(m,1H),5.52-5.39(宽单峰,1H),2.11(m,1H),1.88(m,1H),0.79(明显的三重峰,J=7.4Hz,3H)。
Cap-164
Figure BDA00001874284600933
在帕尔瓶中，使2-氨基-2-苯基丁酸(1.5g，8.4mmol)、甲醛(14mL，37%水溶液)、1N HCl(10mL)及10%Pd/C(0.5mg)于MeOH(40mL)中的混合物暴露于50psi的H2且保持42小时。经
Figure BDA00001874284600934
过滤反应混合物且在真空中浓缩，将残余物吸收于MeOH(36mL)中且用反相HPLC(MeOH/H2O/TFA)纯化产物，得到呈白色固体状的Cap-164的三氟乙酸盐(1.7g)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz)7.54-7.47(m,5H),2.63(m,1H),2.55(s,6H),2.31(m,1H),0.95(明显的三重峰,J=7.3Hz,3H)。
Cap-165
Figure BDA00001874284600941
向2-氨基-2-茚满羧酸(258.6mg，1.46mmol)及甲酸(0.6mL，15.9mmol)于1,2-二氯乙烷(7ml)中的混合物中加入甲醛(0.6mL，37%水溶液)。在约25℃搅拌混合物15分钟，接着在70℃加热8小时。在真空中除去挥发性组分，且将残余物溶解于DMF(14mL)中并通过反相HPLC(MeOH/H2O/TFA)纯化，得到呈粘稠油状的Cap-165的三氟乙酸盐(120.2mg)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz):7.29-7.21(m,4H),3.61(d,J=17.4Hz,2H),3.50(d,J=17.4Hz,2H),2.75(s,6H)。LC-MS:[M+H]+C12H16NO2的分析计算值：206.12；实测值：206.07。
Cap-166a及Cap-166b
根据对于合成Cap-7a及Cap-7b所述的方法，由(1S,4S)-(+)-2-甲基-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷(2HBr)制备Cap-166a及Cap-166b，例外为使用半制备性Chrialcel OJ柱，20×250mm，10μm来分离苄酯中间体(用85:15庚烷/乙醇混合物以10mL/min洗脱速率洗脱，历时25分钟)。Cap-166b：1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz):7.45(d,J=7.3Hz,2H),7.27-7.19(m,3H),4.09(s,1H),3.34(明显的宽单峰,1H),3.16(明显的宽单峰,1H),2.83(d,J＝10.1Hz,1H),2.71(m,2H),2.46(m,1H),2.27(s,3H),1.77(d,J=9.8Hz,1H),1.63(d,J=9.8Hz,1H)。LC-MS:[M+H]+C14H19N2O2的分析计算值：247.14；实测值：247.11。
Cap-167
Figure BDA00001874284600951
在约25℃搅拌外消旋Boc-1,3-二氢-2H-异吲哚羧酸(1.0g，3.8mmol)的20%TFA/CH2Cl2溶液4小时。在真空中除去所有挥发性组分。在帕尔瓶中，将所得粗物质、甲醛(15mL，37%水溶液)、1N HCl(10mL)及10%Pd/C(10mg)于MeOH中的混合物暴露于H2(40PSI)且保持23小时。经
Figure BDA00001874284600952
过滤反应混合物且在真空中浓缩，得到呈黄色泡沫状的Cap-167(873.5mg)。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.5ppm,500MHz)7.59-7.38(m,4H),5.59(s,1H),4.84(d,J=14Hz,1H),4.50(d,J=14.1Hz,1H),3.07(s,3H)。LC-MS:[M+H]+C10H12NO2的分析计算值：178.09；实测值：178.65。
Cap-168
根据对于制备Cap-167所述的操作，由外消旋Boc-氨基茚满-1-羧酸制备外消旋Cap-168。按原样使用粗物质。
Cap-169
将2-氨基-2-苯基丙酸盐酸盐(5.0g，2.5mmol)、甲醛(15mL，37%水溶液)、1N HCl(15mL)及10%Pd/C 1.32g)于MeOH(60mL)中的混合物置于帕尔瓶中且在氢气(55PSI)振荡4天。经
Figure BDA00001874284600955
过滤反应混合物且在真空中浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过反相制备性-HPLC(MeOH/水/TFA)纯化，得到呈粘稠半固体状的Cap-169的三氟乙酸盐(2.1g)。1H NMR(CDCl3,δ=7.26ppm,500MHz):7.58-7.52(m,2H),7.39-7.33(m,3H),2.86(宽单峰,3H),2.47(宽单峰,3H),1.93(s,3H)。LC-MS:[M+H]+C11H16NO2的分析计算值：194.12；实测值：194.12。
Cap-170
Figure BDA00001874284600961
(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸
向(S)-2-氨基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(505mg；3.18mmol；由Astatech获得)的水(15ml)溶液中加入碳酸钠(673mg；6.35mmol)，且将所得混合物冷却至0℃，接着历时5分钟逐滴加入氯甲酸甲酯(0.26ml；3.33mmol)。使反应混合物搅拌18小时，同时使浴解冻至环境温度。接着使反应混合物分配于1N HCl与乙酸乙酯之间。移除有机层且进一步再用2份乙酸乙酯萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩，得到无色残余物Cap-170。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 12.65(1H,宽单峰),7.44(1H,d,J＝8.24Hz),3.77-3.95(3H,m),3.54(3H,s),3.11-3.26(2H,m),1.82-1.95(1H,m),1.41-1.55(2H,m),1.21-1.39(2H,m)；LC-MS:[M+H]+C9H16NO5的分析计算值：218.1；实测值：218.1。
Cap-171
Figure BDA00001874284600962
通过鼓泡氮气来使2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(氧杂环丁烷-3-亚基)乙酸甲酯(200mg，0.721mmol；Il Farmaco(2001),56,609-613)于乙酸乙酯(7ml)及CH2Cl2(4.00ml)中的溶液脱气10分钟。接着加入一缩二碳酸二甲酯(0.116ml，1.082mmol)及Pd/C(20mg，0.019mmol)，使反应混合物配备有氢气囊且使其在环境温度搅拌过夜，此时TLC(95:5CH2Cl2/MeOH：用由1gCe(NH4)2SO4、6g钼酸铵、6ml硫酸及100ml水制成的染色剂显色)表明完全转化。经
Figure BDA00001874284600963
过滤反应混合物并浓缩。经
Figure BDA00001874284600964
(用二氯甲烷载入25个样品；在25S柱上用二氯甲烷洗脱3CV，接着用250ml的0%至5%MeOH/二氯甲烷洗脱，接着保持用250ml的5%MeOH/二氯甲烷洗脱；9mL馏分)纯化残余物。收集含有所需物质的馏分并浓缩成120mg(81%)呈无色油状的2-(甲氧基羰基氨基)-2-(氧杂环丁烷-3-基)乙酸甲酯。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δppm 3.29-3.40(m,J＝6.71Hz,1H)3.70(s,3H)3.74(s,3H)4.55(t,J＝6.41Hz,1H)4.58-4.68(m,2H)4.67-4.78(m,2H)5.31(宽单峰,1H)。LC-MS:[M+H]+C8H14NO5的分析计算值：204.2；实测值：204.0。
向2-(甲氧基羰基氨基)-2-(氧杂环丁烷-3-基)乙酸甲酯(50mg，0.246mmol)的THF(2mL)及水(0.5mL)溶液中加入氢氧化锂一水合物(10.33mg，0.246mmol)。使所得溶液在环境温度搅拌过夜。TLC(1:1EA/己烷；Hanessian染色剂[1g Ce(NH4)2SO4、6g钼酸铵、6ml硫酸及100ml水]表明约10%起始物质剩余。再加入3mg LiOH且使其搅拌过夜，此时TLC显示无起始物质剩余。在真空中浓缩且置于高真空过夜，得到55mg呈无色固体状的2-(甲氧基羰基氨基)-2-(氧杂环丁烷-3-基)乙酸锂。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 3.39-3.47(m,1H)3.67(s,3H)4.28(d,J＝7.93Hz,1H)4.64(t,J＝6.26Hz,1H)4.68(t,J＝7.02Hz,1H)4.73(d,J＝7.63Hz,2H)。
Cap-172
Figure BDA00001874284600971
Cap-172步骤a
以下重氮化步骤由Barton,A.等人，J.C.S.Perkin TransI，159-164(1982)改编：将NaNO2(166mg，2.4mmol)的水(0.6mL)溶液缓慢加入至经搅拌的冷(0℃)的2-氨基-5-乙基-1,3-噻唑-4-羧酸甲酯(186mg，1.0mmol)、CuSO4·5H2O(330mg，1.32mmol)、NaCl(260mg，4.45mmol)及H2SO4(5.5mL)的水(7.5mL)溶液中。在0℃搅拌混合物45分钟且使其温热至室温，其中再搅拌1小时，随后加入CuCl(118mg)。进一步在室温搅拌此混合物16小时，随后用盐水稀释且用乙醚萃取两次。合并有机层，经MgSO4干燥并浓缩，产生呈橙色油状物(80%纯度)的2-氯-5-乙基噻唑-4-羧酸甲酯(即Cap-172步骤a)(175mg，85%)，其直接用于下一反应中。Rt=1.99分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C7H9ClNO2S的分析计算值：206.01；实测值：206.05。
Cap-172
向2-氯-5-乙基噻唑-4-羧酸甲酯(175mg)的THF/H2O/MeOH(20mL/3mL/12mL)溶液中加入LiOH(305mg，12.76mmol)。在室温搅拌混合物过夜，随后浓缩并用1NHCl的乙醚溶液(25mL)中和。用乙酸乙酯萃取残余物两次且合并有机层，经MgSO4干燥并蒸发，得到呈红色固体状的Cap-172(60mg，74%)，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm13.03-13.42(1H,m),3.16(2H,q,J＝7.4Hz),1.23(3H,t,J＝7.5Hz)。Rt=1.78分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C6H7ClNO2S的分析计算值：191.99；实测值：191.99。
Cap-173
Figure BDA00001874284600981
Cap-173步骤a
Figure BDA00001874284600982
以下重氮化步骤由Barton,A.等人，J.C.S.Perkin TransI，159-164(1982)改编：将NaNO2(150mg，2.17mmol)的水(1.0mL)溶液逐滴加入至经搅拌的冷(0℃)的2-氨基-5-乙基-1,3-噻唑-4-羧酸甲酯(186mg，1.0mmol)的50%H3PO2(3.2mL)溶液中。在0℃搅拌混合物1小时且使其温热至室温，其中再搅拌2小时。再冷却至0℃后，用NaOH(85mg)的水(10mL)溶液缓慢处理混合物。接着用饱和NaHCO3溶液稀释混合物且用乙醚萃取两次。合并有机层，经MgSO4干燥并浓缩，产生呈橙色油状(85%纯度)的5-乙基噻唑-4-羧酸甲酯(即Cap-173步骤a)(134mg，78%)，其直接用于下一反应中。Rt=1.58分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C7H10NO2S的分析计算值：172.05；实测值：172.05。
Cap-173
向5-乙基噻唑-4-羧酸甲酯(134mg)的THF/H2O/MeOH(18mL/2.7mL/11mL)溶液中加入LiOH(281mg，11.74mmol)。在室温搅拌混合物过夜，随后浓缩并用1NHCl的乙醚溶液(25mL)中和。用乙酸乙酯萃取残余物两次且合并有机层，经MgSO4干燥并蒸发，得到呈橙色固体状的Cap-173(90mg，73%)，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm12.74-13.04(1H,m),3.20(2H,q,J＝7.3Hz),1.25(3H,t,J=7.5Hz)。Rt=1.27分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C6H8NO2S的分析计算值：158.03；实测值：158.04。
Cap-174
Figure BDA00001874284600991
Cap-174步骤a
Figure BDA00001874284600992
将三氟甲磺酸酐(5.0g，18.0mmol)逐滴加入至冷(0℃)的3-羟基吡啶-2-甲酸甲酯(2.5g，16.3mmol)及TEA(2.5mL，18.0mmol)于CH2Cl2(80mL)中的溶液中。在0℃搅拌混合物1小时，随后使其温热至室温，其中再搅拌1小时。接着用饱和NaHCO3溶液(40mL)淬灭混合物且分离有机层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥并浓缩，产生呈深棕色油状的3-(三氟甲基磺酰基氧基)吡啶-2-甲酸甲酯(即Cap-174步骤a)(3.38g，73%)(>95%纯)，其无需进一步纯化即直接使用。1H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 8.72-8.79(1H,m),7.71(1H,d,J＝1.5Hz),7.58-7.65(1H,m),4.04(3H,s)。Rt=1.93分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C8H7F3NO5S的分析计算值：286.00；实测值：286.08。
Cap-174
向3-(三氟甲基磺酰基氧基)吡啶-2-甲酸甲酯(570mg，2.0mmol)的DMF(20mL)溶液中加入LiCl(254mg，6.0mmol)、三丁基(乙烯基)甲锡烷(761mg，2.4mmol)及二(三苯基膦)二氯化钯(42mg，0.06mmol)。在100℃加热混合物过夜，随后在室温将饱和KF溶液(20mL)加入至反应混合物中。搅拌此混合物4小时，随后经
Figure BDA00001874284600993
过滤且用乙酸乙酯洗涤
Figure BDA00001874284600994
填料。接着分离滤液的水相并在真空中浓缩。用4NHCl的二噁烷溶液(5mL)处理残余物且用甲醇萃取所得混合物，过滤并蒸发，得到呈绿色固体状的Cap-174(260mg)，其略受无机盐污染，但无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.21(1H,d,J＝3.7Hz),7.81-7.90(1H,m),7.09(1H,dd,J＝7.7,4.8Hz),6.98(1H,dd,J＝17.9,11.3Hz),5.74(1H,dd,J＝17.9,1.5Hz),5.20(1H,d,J＝11.0Hz)。Rt=0.39分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C8H8NO2的分析计算值：150.06；实测值：150.07。
Cap-175
Figure BDA00001874284601001
Cap-175步骤a
Figure BDA00001874284601002
向3-(三氟甲基磺酰基氧基)吡啶-2-甲酸甲酯(即Cap-174步骤a)(570mg，2.0mmol)(其为制备Cap-174的中间体)的DMF(20mL)溶液中加入LiCl(254mg，6.0mmol)、三丁基(乙烯基)甲锡烷(761mg，2.4mmol)及二(三苯基膦)二氯化钯(42mg，0.06mmol)。在100℃加热混合物4小时，随后在真空中除去溶剂。将残余物吸收于乙腈(50mL)及己烷(50mL)中且用己烷洗涤所得混合物两次。接着分离乙腈层，经
Figure BDA00001874284601003
过滤并蒸发。通过在Horizon仪器上经快速色谱法(含25%乙酸乙酯的己烷至含65%乙酸乙酯的己烷梯度洗脱)纯化残余物，得到呈黄色油状的3-乙烯基吡啶-2-甲酸甲酯(即Cap-175步骤a)(130mg，40%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 8.60(1H,dd,J＝4.6,1.7Hz),7.94(1H,d,J＝7.7Hz),7.33-7.51(2H,m),5.72(1H,d,J＝17.2Hz),5.47(1H,d,J＝11.0Hz),3.99(3H,s)。Rt=1.29分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C9H10NO2的分析计算值：164.07；实测值：164.06。
Cap-175步骤b
Figure BDA00001874284601004
将钯/炭(10%，25mg)加入至3-乙烯基吡啶-2-甲酸甲酯(120mg，0.74mmol)的乙醇(10mL)溶液中。在室温在氢气气氛搅拌混悬液1小时，随后经
Figure BDA00001874284601005
过滤且用甲醇洗涤
Figure BDA00001874284601006
填料。将滤液浓缩干燥，得到3-乙基吡啶-2-甲酸甲酯(即Cap-175步骤b)，其直接用于下一反应中。Rt=1.15分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C9H12NO2的分析计算值：166.09；实测值：166.09。
Cap-175
向3-乙基吡啶-2-甲酸甲酯的THF/H2O/MeOH(5mL/0.75mL/3mL)溶液中加入LiOH(35mg，1.47mmol)。在室温搅拌混合物2天，随后再加入LiOH(80mg)。在室温再搅拌24小时，过滤混合物且在真空中除去溶剂。接着用4NHCl的二噁烷溶液(5mL)处理残余物且将所得混悬液浓缩干燥，得到呈黄色固体状的Cap-175，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.47(1H,dd,J＝4.8,1.5Hz),7.82-7.89(1H,m),7.53(1H,dd,J＝7.7,4.8Hz),2.82(2H,q,J＝7.3Hz),1.17(3H,t,J＝7.5Hz)。Rt=0.36分钟(条件-MD1)；LC-MS:[M+H]+C8H10NO2的分析计算值：152.07；实测值：152.10。
Figure BDA00001874284601011
(S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸
Cap-176步骤a
Figure BDA00001874284601012
将1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-酮(15g，96mmol)的EtOAc(150mL)溶液加入至2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(21.21g，64.0mmol)于1,1,3,3-四甲基胍(10.45mL，83mmol)及EtOAc(150mL)中的溶液中。在环境温度搅拌所得溶液72小时，接着用EtOAc(25mL)稀释。用1N HCl(75mL)、H2O(100mL)及盐水(100mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。经
Figure BDA00001874284601013
(5%至25%EtOAc/己烷；300g柱)纯化残余物。接着在真空浓缩合并的含有产物的馏分且使残余物由己烷/EtOAc中重结晶，产生对应于2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-亚基)乙酸甲酯(6.2g)的白色晶体。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δppm 7.30-7.44(5H,m),6.02(1H,宽单峰),5.15(2H,s),3.97(4H,s),3.76(3H,宽单峰),2.84-2.92(2H,m),2.47(2H,t,J＝6.40Hz),1.74-1.83(4H,m)。LC(条件OL1)：Rt=2.89分钟。LC-MS:[M+Na]+C19H23NNaO6的分析计算值：745.21；实测值：745.47。
Cap-176步骤b
Figure BDA00001874284601021
根据Burk,M.J.等人(J.Am.Chem.Soc.,117:9375-9376(1995)及其中的参考文献)的方法，由烯Cap-176步骤a制备酯Cap-176步骤b：在N2层下将含烯Cap-176步骤a(3.5g，9.68mmol)的经脱气MeOH(200mL)装入500mL高压瓶中。接着向溶液中装入(-)-1,2-二((2S,5S)-2,5-二甲基磷烷(phospholano))乙烷(环辛二烯)铑(I)四氟硼酸盐(0.108g，0.194mmol)且用N2(3次)冲洗所得混合物并用H2(3次)冲洗。在环境温度在70psi H2剧烈地振荡溶液72小时。减压除去溶剂且将剩余残余物吸收于EtOAc中。接着经硅胶填料过滤淡棕色溶液并用EtOAc洗脱。在真空浓缩溶剂，得到对应于酯Cap-176步骤b(3.4g)的澄清油状物。1H NMR(500MHz,CDCl3-d)δppm 7.28-7.43(5H,m),5.32(1H,d,J＝9.16Hz),5.06-5.16(2H,m),4.37(1H,dd,J＝9.00,5.04Hz),3.92(4H,t,J＝3.05Hz),3.75(3H,s),1.64-1.92(4H,m),1.37-1.60(5H,m)。LC(条件OL1)：Rt=1.95分钟。LC-MS:[M+H]+C19H26NO6的分析计算值：364.18；实测值：364.27。
Cap-176步骤c
Figure BDA00001874284601022
将酯Cap-176步骤b(4.78g，13.15mmol)溶解于THF(15mL)中，随后先后加入水(10mL)、冰醋酸(26.4mL，460mmol)及二氯乙酸(5.44mL，65.8mmol)。在环境温度搅拌所得混合物72小时，且通过在剧烈搅拌下减慢加入固体Na2CO3来淬灭反应混合物直至不再观察到气体释放。用10%乙酸乙酯-二氯甲烷萃取粗产物且合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。经
Figure BDA00001874284601023
(0至30%EtOAc/己烷；25g柱)纯化所得残余物，得到呈澄清油状的酮Cap-176步骤c(3.86g)。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δppm 7.28-7.41(5H,m),5.55(1H,d,J＝8.28Hz),5.09(2H,s),4.46(1H,dd,J＝8.16,5.14Hz),3.74(3H,s),2.18-2.46(5H,m),1.96-2.06(1H,m),1.90(1H,ddd,J＝12.99,5.96,2.89Hz),1.44-1.68(2H,m,J＝12.36,12.36,12.36,12.36,4.77Hz)。LC(条件OL1)：Rt=1.66分钟。LC-MS:[M+Na]+C17H21NNaO5的分析计算值：342.13；
实测值：342.10。
Cap-176步骤d
Figure BDA00001874284601031
将
Figure BDA00001874284601032
(3.13mL，16.97mmol)加入至酮Cap-176步骤c(2.71g，8.49mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中，随后加入催化量的EtOH(0.149mL，2.55mmol)。在室温搅拌所得浅黄色溶液过夜。通过加入饱和NaHCO3水溶液(25mL)来淬灭反应混合物且用EtOAc(3×75mL)萃取混合物。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并干燥，产生浅黄色油状物。经
Figure BDA00001874284601033
色谱法(2%至15%EtOAc/己烷；90g柱)纯化残余物且回收对应于二氟氨基酸二氟化物Cap-176步骤d(1.5g)的白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δppm 7.29-7.46(5H,m),5.34(1H,d,J＝8.28Hz),5.12(2H,s),4.41(1H,dd,J＝8.66,4.89Hz),3.77(3H,s),2.06-2.20(2H,m),1.83-1.98(1H,m),1.60-1.81(4H,m),1.38-1.55(2H,m)。19F NMR(376MHz,CDCl3-d)δppm-92.15(1F，d,J＝237.55Hz),-102.44(1F，d,J＝235.82Hz)。LC(条件OL1)：Rt=1.66分钟。LC-MS:[2M+Na]+C34H42F4N2NaO8的分析计算值：705.28；实测值：705.18。
Cap-176步骤e
将二氟化物Cap-176步骤d(4g，11.72mmol)溶解于MeOH(120mL)中且装入Pd/C(1.247g，1.172mmol)。用N2(3次)冲洗混悬液且将反应混合物置于1atm H2(气囊)。在环境温度搅拌混合物48小时。接着经
Figure BDA00001874284601035
填料过滤混悬液且在真空浓缩，产生对应于氨基酸Cap-176步骤e(2.04g)且无需进一步纯化即使用的油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.62(3H,s),3.20(1H,d,J＝5.77Hz),1.91-2.09(2H,m),1.50-1.88(7H,m),1.20-1.45(2H,m)。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δppm-89.39(1F,d,J＝232.35Hz),-100.07(1F,d,J＝232.35Hz)。13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δppm 175.51(1C,s),124.10(1C,t,J＝241.21,238.90Hz),57.74(1C,s),51.39(1C,s),39.23(1C,宽单峰),32.02-33.83(2C,m),25.36(1C,d,J＝10.02Hz),23.74(1C,d,J＝9.25Hz)。LC(条件OL2)：Rt=0.95分钟。LC-MS:[2M+H]+C18H31F4N2O2的分析计算值：415.22；实测值：415.40。
Cap-176步骤f
将氯甲酸甲酯(1.495mL，19.30mmol)加入至氨基酸Cap-176步骤e(2g，9.65mmol)及DIEA(6.74mL，38.6mmol)于CH2Cl2(100mL)中的溶液中。在室温搅拌所得溶液3小时且减压除去挥发性物质。经(0%至20%EtOAc/己烷；90g柱)纯化残余物。回收在真空静置后固化且对应于氨基甲酸酯Cap-176步骤f(2.22g)的澄清油状物。1H NMR(500MHz,CDCl3-d)δppm 5.27(1H,d,J＝8.55Hz),4.39(1H,dd,J＝8.85,4.88Hz),3.77(3H,s),3.70(3H,s),2.07-2.20(2H,m),1.84-1.96(1H,m),1.64-1.82(4H,m),1.39-1.51(2H,m)。19F NMR(471MHz,CDCl3-d)δppm-92.55(1F,d,J＝237.13Hz),-102.93(1F,d,J＝237.12Hz)。13C NMR(126MHz,CDCl3-d)δppm 171.97(1C,s),156.69(1C,s),119.77-125.59(1C,m),57.24(1C,宽单峰),52.48(1C,宽单峰),52.43(1C,s),39.15(1C,s),32.50-33.48(2C,m),25.30(1C,d,J＝9.60Hz),24.03(1C,d,J＝9.60Hz)。LC(条件OL1)：Rt=1.49分钟。LC-MS:[M+Na]+C11H17F2NNaO4的分析计算值：288.10；实测值：288.03。
Cap-176
Figure BDA00001874284601043
(S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸
将LiOH(0.379g，15.83mmol)的水(25mL)溶液加入至氨基甲酸酯Cap-176步骤f(2.1g，7.92mmol)的THF(75mL)溶液中且在环境温度搅拌所得混合物4小时。真空除去THF且用1N HCl溶液(2mL)酸化剩余水相，接着用EtOAc(2×50mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并浓缩，产生对应于Cap-176(1.92g)的白色泡沫。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm12.73(1H,s),7.50(1H,d,J＝8.78Hz),3.97(1H,dd,J＝8.53,6.02Hz),3.54(3H,s),1.92-2.08(2H,m),1.57-1.90(5H,m),1.34-1.48(1H,m),1.27(1H,qd,J＝12.72,3.26Hz)。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δppm-89.62(1F,d,J＝232.35Hz),-99.93(1F,d,J＝232.35Hz)。LC(条件OL2)：Rt=0.76分钟。LC-MS:[M-H]+C10H14F2NO4的分析计算值：250.09；实测值：250.10。
Cap-177a及Cap-177b
Figure BDA00001874284601051
Cap-177a及Cap-177b步骤a
Figure BDA00001874284601052
将1,1,3,3-四甲基胍(0.985mL，7.85mmol)加入至经搅拌的2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(2.0g，6.0mmol)的EtOAc(40mL)溶液中且在N2在室温搅拌混合物10分钟。接着加入二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮(0.604g，6.04mmol)且在室温搅拌混合物16小时。接着在冷藏箱中冷却反应混合物10分钟且用枸橼酸水溶液(含1.5g的20mL水)中和。分配两相且用0.25N HCl水溶液及盐水洗涤有机层，接着干燥(MgSO4)并浓缩成无色油状物。通过快速硅胶色谱法(装载溶剂：DCM，用EtOAc/己烷洗脱，梯度为20%至30%EtOAc)纯化粗物质，得到两种异构产物：第一洗脱产物为(Z)-2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(2H-吡喃-3(4H,5H,6H)-亚基)乙酸甲酯(490mg)(白色固体)，且第二洗脱产物为(E)-2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(2H-吡喃-3(4H,5H,6H)-亚基)乙酸甲酯(433mg)(白色固体)。LC-MS保留时间1.398分钟(对于Z-异构体)及1.378分钟(对于E-异构体)；m/z 304.08(对于Z-异构体)及304.16(对于E-异构体)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284601053
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)(对于Z-异构体)δppm 7.30-7.44(m,5H),6.18(宽单峰,1H),5.10-5.17(m,2H),4.22(s,2H),3.78(宽单峰,3H),2.93-3.02(m,2H),1.80(dt,J＝11.7,5.8Hz,2H),1.62(s,2H)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)(对于E-异构体)δppm 7.31-7.44(m,5H),6.12(宽单峰,1H),5.13-5.17(m,2H),4.64(宽单峰,2H),3.70-3.82(m,5H),2.49(t,J＝6.5Hz,2H),1.80(宽单峰,2H)。(应注意：由1H NMR位移及偶合常数确定绝对区域化学)。
Cap-177a及Cap-177b步骤b
将(-)-1,2-二((2S,5S)-2,5-二甲基磷烷)乙烷(环辛二烯)-铑(I)四氟硼酸盐(28.2mg，0.051mmol)加入至经搅拌的(Z)-2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(2H-吡喃-3(4H,5H,6H)-亚基)乙酸甲酯(310mg，1.015mmol)的MeOH(10mL)溶液中且先后用N2、H2真空冲洗混合物，接着在室温在H2(60psi)搅拌反应混合物2天。浓缩反应混合物且通过快速硅胶色谱法(装载溶剂：DCM，用含20%EtOAc的己烷洗脱)纯化残余物，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(苄基氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(204mg)。LC-MS保留时间1.437分钟；m/z 307.89(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601062
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601063
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 7.30-7.46(m,5H),5.32(d,J＝8.8Hz,1H),5.12(s,2H),4.36(dd,J＝8.9,5.6Hz,1H),3.84-3.98(m,2H),3.77(s,3H),3.28-3.37(m,1H),3.23(dd,J＝11.3,10.5Hz,1H),2.04-2.16(m,1H),1.61-1.75(m,3H),1.31-1.43(m,1H)。
以类似方式还原另一立体异构体((E)-2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(2H-吡喃-3(4H,5H,6H)-亚基)乙酸甲酯)(360mg，1.18mmol)，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(苄基氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(214mg)。LC-MS保留时间1.437分钟；m/z 308.03(MH+)。在配备有Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601071
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 7.30-7.44(m,5H),5.31(d,J＝9.0Hz,1H),5.12(s,2H),4.31(dd,J＝8.7,6.9Hz,1H),3.80-3.90(m,2H),3.77(s,3H),3.37(td,J＝10.8,3.5Hz,1H),3.28(dd,J＝11.3,9.8Hz,1H),1.97-2.10(m,1H),1.81(d,J＝11.5Hz,1H),1.61-1.72(m,2H),1.33-1.46(m,1H)。
Cap-177a及Cap-177b步骤c
Figure BDA00001874284601072
将10%Pd/C(69.3mg，0.065mmol)加入至(S)-2-(苄基氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(200mg，0.651mmol)及一缩二碳酸二甲酯[4525-33-1](0.104mL，0.976mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中。先后用N2、H2真空冲洗反应混合物，接着在室温在H2(55psi)搅拌反应混合物5小时。经
Figure BDA00001874284601073
/硅胶填料过滤反应混合物且将滤液浓缩成无色油状物。通过快速硅胶色谱法(装载溶剂：DCM，用含30%EtOAc的己烷洗脱)纯化粗油状物，得到呈无色油状的产物(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(132mg)。LC-MS保留时间0.92分钟；m/z 231.97(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601074
Luna 10u C183.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601075
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm5.24(d,J＝8.5Hz,1H),4.34(dd,J＝8.9,5.6Hz,1H),3.84-3.97(m,2H),3.77(s,3H),3.70(s,3H),3.29-3.38(m,1H),3.23(dd,J＝11.2,10.4Hz,1H),2.03-2.14(m,1H),1.56-1.75(m,3H),1.32-1.43(m,1H)。
以类似方式转化另一非对映异构体((S)-2-(苄基氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯)，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯。LC-MS保留时间0.99分钟；m/z231.90(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601081
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm5.25(d,J＝8.0Hz,1H),4.29(dd,J＝8.4,7.2Hz,1H),3.82-3.90(m,2H),3.77(s,3H),3.70(s,3H),3.37(td,J＝10.8,3.3Hz,1H),3.28(t,J＝10.5Hz,1H),1.96-2.08(m,1H),1.81(dd,J＝12.9,1.6Hz,1H),1.56-1.72(m,2H),1.33-1.46(m,1H)。
Cap-177a及Cap-177b步骤d
在室温向经搅拌的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(126mg，0.545mmol)的THF(4mL)溶液中加入1M LiOH(1.090mL，1.090mmol)的水溶液。在室温搅拌反应混合物3小时，用1M HCl(1.1mL)中和且用EtOAc(3×10mL)萃取。干燥有机层，过滤并浓缩，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸(Cap-177a)(125mg)。LC-MS保留时间0.44分钟；m/z 218.00(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601084
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601091
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 5.28(d，J＝8.8Hz,1H),4.38(dd,J＝8.7,5.6Hz,1H),3.96-4.04(m,1H),3.91(d,J＝11.0Hz,1H),3.71(s,3H),3.33-3.41(m,1H),3.24-3.32(m,1H),2.10-2.24(m,1H),1.74-1.83(m,1H),1.63-1.71(m,2H),1.35-1.49(m,1H)。
以类似方式转化另一非对映异构体((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯)，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸(Cap-177b)。LC-MS保留时间0.41分钟；m/z 217.93(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601092
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601093
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 6.18(宽单峰,1H),5.39(d,J＝8.5Hz,1H),4.27-4.37(m,1H),3.82-3.96(m,2H),3.72(s,3H),3.42(td,J＝10.8,3.3Hz,1H),3.35(t,J＝10.4Hz,1H),2.01-2.18(m,1H),1.90(d,J＝11.8Hz,1H),1.59-1.76(m,2H),1.40-1.54(m,1H)。
Cap-178
Figure BDA00001874284601094
Cap-178步骤a
Figure BDA00001874284601095
在氢化槽中向(2S,3S,4S)-二乙酸2-甲基-3,4-二氢-2H-吡喃-3,4-二基酯(5g，23.34mmol)的20mL MeOH溶液中加入Pd/C(150mg，0.141mmol)。在40psi在帕尔振荡器上使所得混合物氢化1小时。接着过滤混合物且浓缩滤液，得到呈澄清油状的Cap-178步骤a(5.0g)，其在静置后固化。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 4.85-4.94(1H,m),4.69(1H,t,J＝9.46Hz),3.88-3.94(1H,m),3.44(1H,td,J＝12.21,1.83Hz),3.36(1H,dq,J＝9.42,6.12Hz),2.03-2.08(1H,m),2.02(3H,s),2.00(3H,s),1.70-1.80(1H,m),1.16(3H,d,J＝6.10Hz)。
Cap-178步骤b
Figure BDA00001874284601101
向Cap-178步骤a(5.0g，23mmol)的50mL MeOH溶液中加入数滴甲醇钠。在室温搅拌30分钟后，加入甲醇钠(0.1mL，23.12mmol)且在室温搅拌溶液过夜。接着真空除去溶剂。用苯稀释残余物并浓缩，得到呈黄色固体状的相应二醇。将固体溶解于50mL吡啶中且在-35℃向此溶液中逐滴加入苯甲酰氯(2.95mL，25.4mmol)。在-35℃搅拌所得混合物1小时，接着在室温搅拌过夜。用Et2O稀释混合物且用水洗涤。用EtOAc(2次)萃取水层。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，5%-15%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-178步骤b(4.5g)，其在长时间静置后缓慢结晶。LC-MS:[M+Na]+C13H16NaO4的分析计算值：259.09；实测值：259.0；1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 8.02-8.07(2H,m),7.55-7.61(1H,m),7.45(2H,t,J＝7.78Hz),5.01(1H,ddd,J＝11.44,8.70,5.49Hz),3.98(1H,ddd,J＝11.90,4.88,1.53Hz),3.54(1H,td,J＝12.36,2.14Hz),3.41(1H,t,J＝9.00Hz),3.31-3.38(1H,m),2.13-2.19(1H,m),1.83-1.94(1H,m),1.36(3H,d,J＝5.80Hz)。
Cap-178步骤c
Figure BDA00001874284601102
历时15分钟向NaH(1.143g，28.6mmol)(60%矿物油溶液)于6mL CS2中的混合物中逐滴加入Cap-178步骤b(4.5g，19mmol)的40mL CS2溶液。在室温搅拌所得混合物30分钟。混合物变成浅橙色且含有一些固体。接着历时20分钟逐滴加入MeI(14.29mL，229mmol)。接着在室温搅拌混合物过夜。小心地用饱和NH4Cl溶液淬灭反应混合物。用EtOAc(3次)萃取混合物。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，6%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-178步骤c(3.13g)。LC-MS:[M+Na]+C15H18NaO4S2的分析计算值：349.05；实测值：349.11；1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.94-8.00(2H,m),7.50-7.58(1H,m),7.41(2H,t,J＝7.78Hz),5.96(1H,t,J＝9.46Hz),5.28(1H,ddd,J＝11.37,9.38,5.49Hz),4.02(1H,ddd,J＝11.98,4.96,1.68Hz),3.54-3.68(2H,m),2.48(3H,s),2.31(1H,dd),1.88-1.99(1H,m),1.28(3H,d)。
Cap-178步骤d
在80℃向Cap-178步骤c(3.13g，9.59mmol)及AIBN(120mg，0.731mmol)于40mL苯中的混合物中加入三正丁基氢化锡(10.24mL，38.4mmol)。在回流温度搅拌所得混合物20分钟，接着冷却至室温。用乙醚稀释混合物且加入100mL KF(10g)水溶液并剧烈搅拌混合物30分钟。接着分离两层且用EtOAc(2次)萃取水相。用MgSO4干燥有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，用含3%Et3N的己烷去活且用含3%Et3N的己烷冲洗以除去三丁基锡衍生物，接着用15%EtOAc/己烷洗脱)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-178步骤d(1.9g)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.98-8.07(2H,m),7.52-7.58(1H,m),7.43(2H,t,J＝7.63Hz),5.08-5.17(1H,m),4.06(1H,ddd,J＝11.90,4.88,1.53Hz),3.50-3.59(2H,m),2.08-2.14(1H,m),1.99-2.06(1H,m),1.69-1.80(1H,m),1.41-1.49(1H,m),1.24(3H,d,J＝6.10Hz)。
Cap-178步骤e
Figure BDA00001874284601112
向Cap-178步骤d(1.9g，8.63mmol)于10mL MeOH中的混合物中加入甲醇钠(2mL，4.00mmol)(2M甲醇溶液)。在室温搅拌所得混合物5小时。真空除去溶剂。用饱和NH4Cl溶液中和混合物且用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥有机层并浓缩，得到呈澄清油状的Cap-178步骤e(0.8g)。产物无需进一步纯化即用于下一步骤中。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 4.01(1H,ddd,J＝11.80,5.02,1.76Hz),3.73-3.83(1H,m),3.36-3.46(2H,m),1.92-2.00(1H,m),1.88(1H,m),1.43-1.56(1H,m),1.23(3H,d),1.15-1.29(1H,m)。
Cap-178步骤f
将甲苯磺酰氯(2.63g，13.77mmol)加入至Cap-178步骤e(0.8g，6.89mmol)及吡啶(2.23mL，27.5mmol)于100mL CH2Cl2中的溶液中。在室温搅拌所得混合物3天。接着将10mL水加入至反应混合物中且在室温搅拌混合物1小时。分离两层且用水及1N HCl水溶液洗涤有机相。用MgSO4干燥有机相并浓缩，得到呈浅黄色固体状的Cap-178步骤f(1.75g)。产物无需进一步纯化即用于下一步骤中。[M+H]+C13H19O4S的分析计算值：271.10；实测值：270.90；1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.79(2H,d,J＝8.24Hz),7.34(2H,d,J＝7.93Hz),4.53-4.62(1H,m),3.94(1H,ddd,J＝12.13,4.96,1.83Hz),3.29-3.41(2H,m),2.45(3H,s),1.90-1.97(1H,m),1.79-1.85(1H,m),1.64-1.75(1H,m),1.38-1.48(1H,m),1.17(3H,d,J＝6.10Hz)。
Cap-178步骤g
向微波管中置放2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸乙酯(1.6g，5.92mmol)及Cap-178步骤f(1.6g，5.92mmol)。加入10mL甲苯。密封所述管且在N2下逐滴加入LiHMDS(7.1mL，7.10mmol)(1N甲苯溶液)。在100℃在微波辐射下加热所得深棕色溶液6小时。接着向混合物中加入水且用EtOAc(3次)萃取混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用MgSO4干燥并浓缩，得到呈橙色油状的Cap-3步骤g(3.1g)的非对映异构混合物。粗混合物不经分离即进行下一步骤。LC-MS:[M+H]+C23H28NO3的分析计算值：366.21；实测值：366.3。
Cap-178步骤h
Figure BDA00001874284601131
向乙基Cap-178步骤g的非对映异构混合物的20mL THF溶液中加入HCl(30mL，60.0mmol)(2N水溶液)。在室温搅拌所得混合物1小时。用EtOAc萃取混合物且浓缩水层，得到呈橙色油状的Cap-178步骤h的盐酸盐(1.9g)。所述盐无需进一步纯化即用于下一步骤中。LC-MS:[M+H]+C10H20NO3的分析计算值：202.14；实测值：202.1。
Cap-178步骤i
Figure BDA00001874284601132
在室温将1.9g Cap-178步骤h(盐酸盐)、DiPEA(4.19mL，24.0mmol)及氯甲酸甲酯(1.24mL，16.0mmol)于20mL CH2Cl2中的溶液搅拌1小时。用CH2Cl2稀释混合物且用水洗涤。用Na2SO4干燥有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-20%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈黄色油状的Cap-178步骤i(1.1g)。[M+Na]+C12H21NNaO5的分析计算值：282.13；实测值：282.14；1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 5.16(1H,宽单峰),4.43-4.58(1H,m),4.17-4.28(2H,m),3.89-4.03(1H,m),3.72-3.78(2H,m),3.67-3.72(3H,m),2.07-2.19(1H,m),1.35-1.77(4H,m),1.30(3H,td,J＝7.09,2.89Hz),1.19(3H,d,J＝6.53Hz)。
Cap-178步骤j
Figure BDA00001874284601133
向Cap-178步骤i(1.1g，4.2mmol)于5mL THF及2mL水中的混合物中加入LiOH(6.36mL，12.7mmol)(2N水溶液)。在室温搅拌所得混合物过夜。接着用1N HCl水溶液中和混合物且用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈澄清油状的Cap-178步骤j(0.8g)。LC-MS:[M+H]+C10H18NO5的分析计算值：232.12；实测值：232.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 5.20(1H,d,J＝8.28Hz),4.54(1H,t,J＝8.16Hz),3.95-4.10(1H,m),3.66-3.85(5H,m),2.15-2.29(1H,m),1.41-1.85(4H,m),1.23(3H,dd,J＝6.53,1.76Hz)。
Cap-178步骤k
Figure BDA00001874284601141
向Cap-178步骤j(240mg，1.04mmol)、(S)-1-苯基乙醇(0.141mL，1.142mmol)及EDC(219mg，1.14mmol)于10mL CH2Cl2中的溶液中加入DMAP(13.95mg，0.114mmol)。在室温搅拌所得溶液过夜且真空除去溶剂。将残余物吸收于EtOAc中，用水洗涤，用MgSO4干燥并浓缩。通过色谱法(硅胶，0-15%EtOAc/己烷)来纯化粗产物，得到呈两种非对映异构体的混合物形式的Cap-178步骤k。通过手性HPLC(
Figure BDA00001874284601142
AS柱，21×250mm，10um)(用90%0.1%二乙胺/庚烷-10%EtOH以15mL/min洗脱)分离混合物，得到呈白色固体状的Cap-178步骤k立体异构体1(第一个洗脱出)及Cap-178步骤k立体异构体2(第二个洗脱出)。未指定异构体的立体化学。
Cap-178步骤k立体异构体1(130mg)：LC-MS:[M+Na]+C18H25NNaO5的分析计算值：358.16；实测值：358.16；1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm7.28-7.38(5H,m),5.94(1H,q,J＝6.71Hz),5.12(1H,d,J＝9.16Hz),4.55(1H,t,J＝9.00Hz),3.72-3.81(1H,m),3.67(3H,s),3.60-3.70(2H,m),1.98-2.08(1H,m),1.59(3H,d,J＝6.71Hz),1.38-1.47(2H,m),1.30(2H,t,J＝5.34Hz),0.93(3H,d,J＝6.41Hz)。
Cap-178立体异构体1
向Cap-178步骤k立体异构体1((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((2S,4R)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸)(150mg，0.447mmol)的10mL EtOH溶液中加入Pd/C(20mg，0.188mmol)且在40psi在帕尔振荡器上使混合物氢化过夜。接着过滤混合物且浓缩滤液，得到呈粘稠白色固体状的Cap-178立体异构体1(100mg)。LC-MS:[M+H]+C10H18NO5的分析计算值：232.12；实测值：232.1；1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.14-5.27(1H,m),4.51(1H,t,J＝8.39Hz),3.90-4.07(1H,m),3.60-3.83(5H,m),2.06-2.27(1H,m),1.45-1.77(4H,m),1.21(3H,d,J＝6.41Hz)。
Cap-179(对映异构体-1及对映异构体-2)
Figure BDA00001874284601151
Cap-179步骤a
Figure BDA00001874284601152
将2,6-二甲基-4H-吡喃-4-酮(10g，81mmol)溶解于乙醇(125mL)中且加入Pd/C(1g，0.94mmol)。在室温在H2(0.325g，161mmol)(70psi)在帕尔振荡器中使混合物氢化12小时。经填料过滤催化剂且用乙醇洗涤。在真空中浓缩滤液且经
Figure BDA00001874284601154
(2%至25%EtOAc/己烷；160g柱)纯化残余物。分离出两份澄清油状物馏分。第一个洗脱的物质对应于(2R,6S)-2,6-二甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(1.8g)，而第二个洗脱的物质对应于Cap-179步骤a(1.8g)。
(2R,6S)-2,6-二甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮数据：1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 3.69(2H,ddd,J＝11.29,5.95,2.29Hz),2.24-2.36(2H,m),2.08-2.23(2H,m),1.18-1.34(6H,m)；13C NMR(126MHz,CDCl3)δppm206.96(1C,宽单峰),72.69(2C,s),48.70(2C,s),21.72(2C,s)。
Cap-179步骤a数据：1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 3.69-3.78(1H,m),3.36-3.47(2H,m),2.10(1H,宽单峰),1.88(2H,dd,J＝12.05,4.73Hz),1.19(6H,d,J＝6.10Hz),1.10(2H,q,J＝10.70Hz)；13C NMR(126MHz,CDCl3)δppm 71.44(2C,s),67.92(1C,s),42.59(2C,s),21.71(2C,s)。
Cap-179步骤b
将DEAD(2.311mL，14.59mmol)逐滴加入至Cap-179步骤a(0.38g，2.92mmol)、4-硝基苯甲酸(2.195g，13.14mmol)及Ph3P(3.83g，14.59mmol)于苯(25mL)中的溶液中。检测到放热且在环境温度搅拌所得琥珀色溶液6小时。减压除去溶剂且经(0至15%EtOAc/己烷；80g柱)纯化残余物。分离出对应于Cap-179步骤b(0.77g)的白色固体。LC-MS:[M]+C14H17NO5的分析计算值：279.11；实测值：279.12。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm8.27-8.32(2H,m),8.20-8.24(2H,m),5.45(1H,五重峰,J＝2.82Hz),3.92(2H,dqd,J＝11.90,6.10,6.10,6.10,1.53Hz),1.91(2H,dd,J＝14.80,2.29Hz),1.57(3H,dt,J＝14.65,3.05Hz),1.22(6H,d,J＝6.10Hz)。
Cap-179步骤c
将LiOH(0.330g，13.8mmol)的水(8mL)溶液加入至Cap-179步骤b(0.77g，2.76mmol)的THF(30mL)溶液中且在环境温度搅拌所得混合物16小时。减压除去THF且再用水(20mL)稀释水层并用EtOAc(3×15mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并在真空浓缩。回收含白色固体的油状残余物。用己烷研磨混合物且滤出固体，得到对应于Cap-179步骤c(0.34g)的澄清油状物。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 4.21(1H,五重峰,J＝2.82Hz),3.87-3.95(2H,m),1.72(1H,宽单峰),1.63(2H,dd,J＝14.34,2.14Hz),1.39-1.47(2H,m),1.17(6H,d,J＝6.41Hz)。
Cap-179步骤d
在室温将对甲苯磺酰氯(3.98g，20.89mmol)加入至Cap-179步骤c(1.36g，10.5mmol)及吡啶(3.38mL，41.8mmol)于CH2Cl2(150mL)中的溶液中且搅拌24小时，接着浓缩成黄色油状物。将剩余残余物加入至吡啶(20mL)及水(30mL)中且在环境温度搅拌所得混合物1.5小时。用Et2O(75mL)萃取混合物且用1N HCl水溶液(4×50mL)充分洗涤分离的有机层。接着干燥(MgSO4)有机层，过滤并浓缩。分离出对应于Cap-179步骤d(2.2g)的白色固体。LC-MS:[2M+H]+C28H41O8S2的分析计算值：569.22；实测值：569.3。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.80(2H,d,J＝8.28Hz),7.35(2H,d,J＝8.03Hz),4.89(1H,五重峰,J＝2.82Hz),3.77-3.88(2H,m),2.46(3H,s),1.77(2H,dd,J＝14.93,2.89Hz),1.36(2H,ddd,J＝14.31,11.54,2.76Hz),1.13(6H,d,J＝6.27Hz)。
Cap-179步骤e
Figure BDA00001874284601171
在室温在密封微波小瓶中将LiHMDS(4.30mL，4.30mmol)加入至Cap-179步骤d(1.02g，3.59mmol)及2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苄酯(1.181g，3.59mmol)于甲苯(25mL)中的溶液中，接着在100℃在微波辐射下搅拌所得混合物5小时。用水(10mL)淬灭反应混合物，用EtOAc萃取，用水洗涤，经MgSO4干燥，滤液并在真空中浓缩。经
Figure BDA00001874284601172
(0%至6%EtOAc/己烷；80g柱)纯化残余物且分离出对应于Cap-179步骤e(1.2g)的黄色油状物。[2M+Na]+C58H62N2NaO6的分析计算值：905.45；实测值：905.42。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.64-7.70(4H,m),7.29-7.44(29H,m),7.06(4H,dd,J＝7.65,1.63Hz),5.18(2H,d,J＝2.01Hz),3.89(2H,d,J＝6.53Hz),3.79-3.87(1H,m),3.46(5H,dquind,J＝11.26,5.87,5.87,5.87,5.87,1.88Hz),2.47(2H,s),2.35-2.46(2H,m),1.78(1H,dd,J＝14.81,3.01Hz),1.62-1.65(1H,m),1.61(2H,s),1.36-1.43(3H,m),1.19(7H,d,J＝6.27Hz),1.14(11H,dd,J＝6.15,2.89Hz),0.86-0.96(3H,m)。
Cap-179步骤f(对映异构体-1及对映异构体-2)
Figure BDA00001874284601173
将Cap-179步骤e(2.08g，4.71mmol)溶解于THF(100mL)中且用2NHCl(9.42mL，18.84mmol)处理。在环境温度搅拌所得澄清溶液4小时，接着减压除去THF。用己烷(3×20mL)萃取剩余水层且在用H2O(20mL)稀释后，用1N NaOH将水相碱化至pH=10并用EtOAc(3×10mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并在真空浓缩。将所得残余物吸收于CH2Cl2(100mL)中且装入DIEA(2.468mL，14.13mmol)及氯甲酸甲酯(0.401mL，5.18mmol)。在环境温度搅拌所得溶液2小时。用水(10mL)淬灭反应混合物且减压移除有机层。接着用EtOAc(3×10mL)萃取水层且干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并浓缩。经
Figure BDA00001874284601181
(10%EtOAc/己烷；25g柱)纯化残余物。回收对应于Cap-179步骤f(1.05g)的澄清无色油状物。LC-MS:[M+H]+C18H26NO5的分析计算值：336.18；实测值：336.3。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm7.32-7.40(5H,m),5.26(1H,d,J＝8.24Hz),5.13-5.24(2H,m),4.36(1H,dd,J＝8.85,4.88Hz),3.68(3H,s),3.32-3.46(2H,m),2.02-2.14(1H,m),1.52(1H,d,J＝12.82Hz),1.32(1H,d,J＝12.51Hz),1.11-1.18(6H,m),0.89-1.07(2H,m)。
开发在
Figure BDA00001874284601182
AD-H柱(30×250mm，5μm)(温度=35℃，压力=150巴，波长=210nm，流速=70mL/min，历时8分钟，溶剂A=CO2，溶剂B=MeOH)上通过使用12%甲醇作为调节剂来分离外消旋混合物的手性SFC方法。两种经分离的异构体Cap-179步骤f(对映异构体1)(第一个洗脱)及Cap-179步骤f(对映异构体2)(第二个洗脱)显示与相应混合物相同的分析数据(参见上文)。
Cap-179(对映异构体-1及对映异构体-2)
在帕尔瓶中将Cap-179步骤f(对映异构体-1)(0.35g，1.044mmol)溶解于MeOH(50mL)中且装入Pd/C(0.111g，1.044mmol)。接着将混悬液置于帕尔振荡器中且用N2(3次)冲洗混合物，置于40psi H2(2.104mg，1.044mmol)并在室温振荡2小时。经
Figure BDA00001874284601183
填料滤出催化剂且减压除去溶剂，得到对应于Cap-179对映异构体-1(0.25g)的琥珀色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 12.74(4H,宽单峰),7.35(4H,d,J＝6.10Hz),3.85(4H,宽单峰),3.53(3H,s),3.35(2H,ddd,J＝15.95,9.99,6.10Hz),1.97(1H,宽单峰),1.48(2H,t,J＝13.28Hz),1.06(6H,d,J＝6.10Hz),0.82-1.00(2H,m)
类似地制备Cap-179对映异构体-2：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm12.50(1H,宽单峰),7.31(1H,宽单峰),3.84(1H,t,J＝7.32Hz),3.53(3H,s),3.29-3.41(2H,m),1.99(1H,s),1.48(2H,t,J＝14.34Hz),1.06(6H,d,J＝6.10Hz),0.95(1H,q,J＝12.21Hz),0.87(1H,q,J＝11.80Hz)。[应注意：对映异构体的1H NMR分布的微小变化有可能为样品浓度不同的结果。]
Cap-180(外消旋混合物)
Figure BDA00001874284601191
Cap-180步骤a
Figure BDA00001874284601192
在室温将对甲苯磺酰氯(4.39g，23.0mmol)加入至Cap-179步骤a(1.50g，11.5mmol)及吡啶(3.73mL，46.1mmol)于CH2Cl2(50mL)中的溶液中且搅拌2天。用CH2Cl2稀释反应混合物，先后用水及1N HCl洗涤。干燥(MgSO4)有机层并浓缩成黄色油状物，其经
Figure BDA00001874284601193
(5%至20%EtOAc/己烷；40g柱)纯化。分离出在真空固化且对应于Cap-180步骤a(2.89g)的澄清油状物。LC-MS:[2M+Na]+C28H40NaO8S2的分析计算值：591.21；实测值：591.3。1HNMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.80(2H,d,J＝8.24Hz),7.35(2H,d,J＝7.93Hz),4.59(1H,tt,J＝11.37,4.96Hz),3.36-3.46(2H,m),2.46(3H,s),1.91(2H,dd,J＝12.05,5.04Hz),1.37(2H,dt,J＝12.67,11.52Hz),1.19(6H,d,J＝6.10Hz)。
Cap-180步骤b
Figure BDA00001874284601194
在室温将1N LiHMDS(7.09mL，7.09mmol)加入至Cap-180步骤a(1.68g，5.91mmol)及2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸乙酯(1.579g，5.91mmol)于甲苯(30mL)中的溶液中，接着在85℃搅拌所得混合物16小时。用水(50mL)淬灭反应混合物，用EtOAc萃取，用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且在真空中浓缩。经
Figure BDA00001874284601195
(0%至15%EtOAc/己烷；40g柱)纯化残余物。分离出对应于Cap-180步骤b(外消旋混合物；0.64g)的澄清浅黄色油状物。LC-MS:[M+H]+C24H30NO3的分析计算值：380.22；实测值：380.03。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.64-7.70(2H,m),7.45-7.51(3H,m),7.38-7.44(1H,m),7.31-7.37(2H,m),7.13-7.19(2H,m),4.39(1H,d,J＝10.54Hz),4.16-4.26(2H,m),3.29-3.39(1H,m),2.93-3.03(1H,m),2.70(1H,m,J＝9.41,4.14Hz),1.42-1.49(2H,m),1.31-1.37(1H,m),1.29(4H,t,J＝7.15Hz),1.04(6H,dd,J＝7.78,6.27Hz)。
Cap-180步骤c
Figure BDA00001874284601201
将Cap-180步骤b(0.36g，0.949mmol)溶解于THF(10mL)中且用2NHCl(1.897mL，3.79mmol)处理。在环境温度搅拌所得澄清溶液20小时且减压除去THF。用己烷(3×20mL)萃取剩余水层且在用H2O(20mL)稀释后，用1N NaOH将水相碱化至pH=10并用EtOAc(3×10mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并在真空浓缩。将所得残余物吸收于CH2Cl2(10.00mL)中且装入DIEA(0.497mL，2.85mmol)及氯甲酸甲酯(0.081mL，1.044mmol)。在环境温度搅拌所得溶液2小时且用水(10mL)淬灭反应混合物并减压移除有机层。用EtOAc(3×10mL)萃取水层且干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并浓缩。回收对应于Cap-180步骤c(0.21g)的琥珀色油状物且其无需进一步纯化即使用。LC-MS:[M+H]+C13H24NO5的分析计算值：273.17；实测值：274.06。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 5.20(1H,d,J＝8.03Hz),4.59(1H,t,J＝10.16Hz),4.11-4.27(3H,m),3.69-3.82(2H,m),3.64(3H,s),1.95-2.07(1H,m),1.63(1H,d,J＝13.80Hz),1.41(2H,dd,J＝8.03,4.02Hz),1.31-1.37(1H,m),1.26(3H,t,J＝7.15Hz),1.16(1H,d,J＝6.27Hz),1.12(6H,dd,J＝6.15,3.89Hz)。
Cap-180(外消旋混合物)
在0℃将Cap-180步骤c(0.32g，1.2mmol)溶解于THF(10mL)中且装入LiOH(0.056g，2.342mmol)的水(3.33mL)溶液。在室温搅拌所得溶液2小时。减压除去THF且用水(15mL)稀释剩余残余物并用Et2O(2×10mL)洗涤。接着用1N HCl将水层酸化至pH~2且用EtOAc(3×15mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并在真空浓缩，得到呈白色泡沫状的Cap-180(外消旋混合物)(0.2g)。LC-MS:[M+H]+C11H20NO5的分析计算值：246.13；实测值：246.00。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 5.14(1H,d,J＝9.03Hz),4.65(1H,t,J＝9.91Hz),3.63-3.89(5H,m),1.99-2.13(1H,m),1.56-1.73(2H,m),1.48-1.55(1H,m),1.35-1.48(1H,m),1.27(1H,宽单峰),1.17(6H,d,J＝6.02Hz)。
Cap-181
Figure BDA00001874284601211
Cap-181步骤a
Figure BDA00001874284601212
历时5小时通过注射泵将重氮基乙酸叔丁酯(1.832mL，13.22mmol)的50mL CH2Cl2溶液逐滴加入至2,5-二氢呋喃(9.76mL，132mmol)、乙酸铑(II)二聚体(0.058g，0.132mmol)于40mL CH2Cl2中的混合物中。接着在室温搅拌所得混合物过夜。真空除去溶剂。通过色谱法(硅胶，0%-15%EtOAc/己烷)纯化残余物，得到呈澄清油状的Cap-181步骤a(反式异构体)(720mg)及Cap-181步骤a(顺式异构体)(360mg)。Cap-181步骤a(反式异构体)：1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 3.88(2H,d,J＝8.55Hz),3.70(2H,d,J＝8.55Hz),2.03-2.07(2H,m),1.47(1H,t,J＝3.20Hz),1.41(9H,s)；Cap-1步骤a(顺式异构体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 4.06(2H,d,J＝8.53Hz),3.73(2H,d,J＝8.03Hz),1.81-1.86(2H,m),1.65-1.71(1H,m),1.43-1.47(9H,m)。
Cap-181步骤b
Figure BDA00001874284601213
在-10℃历时1小时向Cap-181步骤a(反式异构体)(700mg，3.80mmol)的15mL乙醚溶液中逐滴加入LiAlH4(7.60mL，7.60mmol)(1M THF溶液)。在-10℃搅拌所得混合物1小时，接着在室温搅拌1小时。接着使混合物冷却至-5℃。逐滴加入10mL Rochelle盐(酒石酸钾钠)水溶液以淬灭反应混合物。在室温搅拌混合物30分钟，接着用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈浅黄色油状的Cap-181步骤b(380mg)。产物不经纯化即用于下一步骤中。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 3.85(2H,d,J＝8.28Hz),3.68(2H,d,J＝8.53Hz),3.45-3.55(2H,m),1.50-1.56(2H,m),1.02-1.11(1H,m)。
Cap-181步骤c
在-78℃向DMSO(4.82mL，67.9mmol)的CH2Cl2(70mL)溶液中逐滴加入草酰氯(3.14mL，35.8mmol)。在-78℃搅拌所得混合物15分钟。加入Cap-181步骤b(3.10g，27.2mmol)的35mL CH2Cl2溶液且在-78℃搅拌混合物1小时。接着逐滴加入Et3N(18.93mL，136mmol)。30分钟后，移除冷却浴且用冷20%K2HPO4水溶液(10mL)及水淬灭反应混合物。在室温搅拌混合物15分钟，接着用Et2O稀释。分离各层。用Et2O(2次)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，100%CH2Cl2)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的Cap-181步骤c(2.71g)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 9.41(1H,d,J＝4.27Hz),3.96(2H,d,J＝8.85Hz),3.80(2H,d,J＝8.55Hz),2.27-2.33(2H,m),1.93(1H,m)。
Cap-181步骤d
Figure BDA00001874284601222
在0℃向Cap-181步骤c(2.7g，24.08mmol)于50mL水中的混合物中加入亚硫酸氢钠(2.506g，24.08mmol)及KCN(1.631g，25.04mmol)，随后加入(R)-2-氨基-2-苯基乙醇(3.30g，24.08mmol)的18mL MeOH溶液。在室温搅拌所得混合物2小时，接着加热至回流过夜。将混合物冷却至室温。加入100mL EtOAc。混合15分钟后，分离各层。用EtOAc(2次)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过反相HPLC(柱：WaterSunfire 30×150mm，乙腈/水/NH4OAc)纯化粗非对映异构混合物，得到Cap-181步骤d的两种非对映异构体。未确定各异构体的绝对立体化学。非对映异构体1(后洗脱的馏分)(570mg)：LC-MS:[M+H]+C15H19N2O2的分析计算值：259.14；实测值：259.2。
Cap-181步骤e
Figure BDA00001874284601231
在0℃向Cap-181步骤d(非对映异构体1)(570mg，2.207mmol)于20mLCH2Cl2及20mL MeOH中的溶液中加入四乙酸铅(1174mg，2.65mmol)。在0℃搅拌所得橙色混合物10分钟。接着将水(20mL)加入至混合物中且过滤混合物
Figure BDA00001874284601232
浓缩滤液且用25mL 6N HCl水溶液稀释。回流所得混合物4小时。过滤混合物且用CH2Cl2洗涤。浓缩水层，得到Cap-181步骤e(盐酸盐)。粗产物无需进一步纯化即用于下一步骤中。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 3.87-3.91(2H,m),3.73(2H,dd,J＝8.70,2.90Hz),3.55(1H,d,J＝10.07Hz),2.02-2.07(1H,m),1.94-1.99(1H,m),1.03-1.10(1H,m)。
Cap-181
向以上粗Cap-181步骤e于1N NaOH水溶液(10mL)中的混合物中加入碳酸氢钠(371mg，4.42mmol)。接着逐滴加入氯甲酸甲酯(0.342mL，4.42mmol)，且在室温搅拌所得混合物3小时。用1N HCl水溶液中和混合物且用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈浅黄色油状的Cap-181(100mg，21％，经两个步骤)。LC-MS:[M+H]+C9H14NO5的分析计算值：216.09；实测值：216.1。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.29(1H,宽单峰),3.53-4.02(8H,m),1.66-1.92(2H,m),1.08(1H,宽单峰)。
Cap-182(外消旋混合物)
Cap-182步骤a
Figure BDA00001874284601234
在室温将环戊-3-烯醇(5g，59.4mmol)及Et3N(9.94mL，71.3mmol)于50mL CH2Cl2中的溶液搅拌15分钟。接着逐滴加入苯甲酰氯(8.28mL，71.3mmol)且在室温搅拌混合物过夜。接着用水洗涤混合物，用MgSO4干燥有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-10%EtOAc/己烷)纯化残余物，得到呈澄清油状的Cap-182步骤a(9.25g)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm8.01-8.07(2H,m),7.55(1H,t,J＝7.40Hz),7.43(2H,t,J＝7.65Hz),5.79(2H,s),5.64(1H,tt,J＝6.93,2.60Hz),2.87(2H,dd,J＝16.56,6.78Hz),2.52-2.63(2H,m)。
Cap-182步骤b
Figure BDA00001874284601241
向具有磁性搅拌棒的圆底烧瓶中加入氟化钠(5.02mg，0.120mmol)及Cap-182步骤a(2.25g，11.95mmol)。将所述烧瓶加热至100℃且历时5小时通过注射泵缓慢加入纯2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸三甲基甲硅烷酯(5.89mL，29.9mmol)，且在100℃加热过夜。接着用CH2Cl2稀释混合物，用水、饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-5%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-182步骤b(异构体1)(750mg)及Cap-182步骤b(异构体2)(480mg)。通过NOE研究进行相对立体化学指定。Cap-182步骤b(异构体1)：LC-MS:[M+H]+C13H13F2O2的分析计算值：239.09；实测值：239.2。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.99-8.04(2H,m),7.56(1H,t,J＝7.32Hz),7.43(2H,t,J＝7.63Hz),5.25-5.33(1H,m),2.50(2H,dd,J＝14.04,6.71Hz),2.14-2.22(2H,m),2.08-2.14(2H,m)。Cap-182步骤b(异构体2)：LC-MS:[M+H]+C13H13F2O2的分析计算值：239.09；实测值：239.2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.98-8.08(2H,m),7.53-7.59(1H,m),7.41-7.48(2H,m),5.53-5.62(1H,m),2.59-2.70(2H,m),2.01-2.11(4H,m)。
Cap-182步骤c
向Cap-182步骤b(异构体2)(480mg，2.015mmol)的4mL MeOH溶液中加入KOH(4mL，2.015mmol)(10%水溶液)。在室温搅拌所得混合物过夜。接着用CH2Cl2(3次)萃取混合物。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈浅黄色固体状的Cap-182步骤c(220mg)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm4.41-4.54(1H,m),2.38-2.50(2H,m),1.89-1.99(2H,m),1.81(2H,dd,J＝14.50,5.04Hz)。
Cap-182步骤d
Figure BDA00001874284601252
将对甲苯磺酰氯(625mg，3.28mmol)加入至Cap-182步骤c(220mg，1.640mmol)及吡啶(0.531mL，6.56mmol)于7mL CH2Cl2中的溶液中。在室温搅拌混合物过夜，接着用CH2Cl2稀释，用水及1N HCl水溶液洗涤。干燥(MgSO4)有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-15%EtOAc/己烷)纯化残余物，得到呈澄清油状的Cap-182步骤d(325mg)。LC-MS:[M+Na]+C13H14F2NaO3S的分析计算值：311.05；实测值：311.2。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.76(2H,d,J＝8.24Hz),7.34(2H,d,J＝8.24Hz),4.99-5.08(1H,m),2.45(3H,s),2.31-2.41(2H,m),1.84-1.94(4H,m)。
Cap-182步骤e(外消旋混合物)
Figure BDA00001874284601253
向微波管中加入含N-(二苯基亚甲基)甘氨酸乙酯(241mg，0.902mmol)及Cap-182步骤d(260mg，0.902mmol)的2mL甲苯。密封所述管且在N2下逐滴加入LiHMDS(1.082mL 1N THF溶液，1.082mmol)。在100℃微波加热所得深棕色溶液5小时。接着用水淬灭混合物，且用EtOAc(3次)萃取。用水洗涤合并的有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-5%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈浅黄色油状的Cap-182步骤e的外消旋混合物(240mg)。所述混合物不经分离即进行下一步骤。LC-MS:[M+H]+C23H24F2NO2的分析计算值：384.18，实测值：384.35。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.63-7.70(2H,m),7.43-7.51(3H,m),7.38-7.43(1H,m),7.31-7.38(2H,m),7.13-7.22(2H,m),4.13-4.22(2H,m),3.95(1H,d,J＝6.41Hz),2.67-2.79(1H,m),2.07-2.16(1H,m),1.97-2.07(2H,m),1.90(2H,m),1.65-1.76(1H,m),1.25(3H,t,J＝7.17Hz)。
Cap-182步骤f(外消旋混合物)
Figure BDA00001874284601261
向Cap-182步骤e(240mg，0.626mmol)的4mL THF溶液中加入HCl(1mL，2.0mmol)(2N水溶液)。在室温搅拌所得混合物2小时。接着用EtOAc洗涤混合物，用饱和NaHCO3水溶液中和，接着用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈澄清油状的Cap-182步骤f(120mg)。LC-MS:[M+H]+C10H16F2NO2的分析计算值：220.11；实测值：220.26。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 4.14-4.25(2H,m),3.26(1H,d,J＝6.71Hz),2.22-2.35(1H,m),1.90-2.11(5H,m),1.79-1.90(1H,m),1.22-1.34(3H,m)。
Cap-182步骤g(外消旋混合物)
Figure BDA00001874284601262
向Cap-182步骤f(120mg，0.547mmol)的2mL CH2Cl2溶液中加入氯甲酸甲酯(0.085mL，1.095mmol)。在室温搅拌所得混合物1小时。用CH2Cl2稀释混合物且用水洗涤。用Na2SO4干燥有机层并浓缩，得到呈白色固体状的Cap-182步骤g(150mg)。LC-MS:[M+H]+C12H18F2NO4的分析计算值：278.12；实测值：278.2。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.23(1H,d,J＝8.24Hz),4.29(1H,t,J＝7.48Hz),4.15-4.23(2H,m),3.68(3H,s),2.37(1H,宽单峰),2.02-2.10(1H,m),1.85-2.00(4H,m),1.75-1.84(1H,m),1.27(3H,t,J＝7.02Hz)。
Cap-182(外消旋混合物)
向Cap-182步骤g(150mg，0.541mmol)于2mL THF及1mL水中的混合物中加入LiOH(0.811mL，1.623mmol)(2N水溶液)。在室温搅拌所得混合物过夜。用1N HCl水溶液中和混合物且用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈白色固体状的Cap-182(133mg)。LC-MS:[M+H]+C10H14F2NO4的分析计算值：250.09；实测值：250.13。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.18-5.36(1H,m),4.28-4.44(1H,m),3.70(3H,s),2.37-2.56(1H,m),1.74-2.31(6H,m)。
Cap-183(外消旋混合物)
Figure BDA00001874284601271
根据对于制备Cap-182所述的操作，由Cap-182步骤b(异构体1)合成Cap-183。[M+H]+C10H14F2NO4的分析计算值：250.09，实测值：249.86。1HNMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.15(1H,d,J＝8.24Hz),4.32(1H,t,J＝7.48Hz),3.69(3H,s),2.83-2.99(1H,m),1.96-2.26(4H,m),1.70(1H,t,J＝11.75Hz),1.59(1H,t,J＝12.05Hz)。
Cap-184(外消旋混合物)
Figure BDA00001874284601272
Cap-184步骤a
Figure BDA00001874284601273
在室温将2-氨基-2-((1R,3r,5S)-二环[3.1.0]己-3-基)乙酸乙酯(通过使用对于制备Cap-182所述的相同操作，由可商购得到的(1R,3r，5S)-二环[3.1.0]己-3-醇制备；350mg，1.910mmol)、DiPEA(0.667mL，3.82mmol)、氯甲酸甲酯(0.296mL，3.82mmol)于5mL CH2Cl2中的混合物搅拌1小时。接着用CH2Cl2稀释混合物且用水洗涤。用MgSO4干燥有机层并浓缩，得到呈黄色油状的Cap-184步骤a(461mg)。LC-MS:[M+H]+C12H20NO4的分析计算值：242.14；实测值：242.2。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.04(1H,d,J＝7.63Hz),4.09-4.20(2H,m),4.05(1H,t,J＝8.39Hz),3.63(3H,s),2.55-2.70(1H,m),1.96-2.09(2H,m),1.37-1.60(4H,m),1.24(3H,t,J＝7.17Hz),0.66-0.76(1H,m),-0.03-0.06(1H,m)。
Cap-184(外消旋混合物)
向乙酯Cap-184步骤a(461mg，1.911mmol)于5mL THF及2mL水中的混合物中加入LiOH(2.87mL，5.73mmol)(2N水溶液)。在室温搅拌所得混合物过夜。接着用1N HCl水溶液中和混合物，且用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈澄清油状的Cap-184(350mg)。LC-MS:[2M+Na]+C20H30N2NaO8的分析计算值：449.19；实测值：449.3。1HNMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.07(1H,d,J＝8.85Hz),4.13(1H,t,J＝8.24Hz),3.68(3H,s),2.64-2.79(1H,m),2.04-2.21(2H,m),1.23-1.49(4H,m),0.71-0.81(1H,m),0.03-0.12(1H,m)。
Cap-185(对映异构体-1及对映异构体-2)
Figure BDA00001874284601281
Cap-185步骤a
Figure BDA00001874284601282
在1小时内，在黑暗中向呋喃(1.075mL，14.69mmol)及锌(1.585g，24.24mmol)于1mL THF中的混合物中逐滴加入含1,1,3,3-四溴丙-2-酮(8.23g，22.03mmol)及硼酸三乙酯(5.25mL，30.8mmol)的4mL THF。在室温在黑暗中搅拌所得混合物17小时。使所得深棕色混合物冷却至-15℃，且加入6mL水。使混合物温热至0℃且在此温度搅拌30分钟。接着过滤混合物并用乙醚洗涤。用水稀释滤液且用乙醚(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到深棕色油状物。将所述深棕色油状物溶解于6mL MeOH中且将溶液逐滴加入至锌(4.99g，76mmol)、氯化铜(I)(0.756g，7.64mmol)及氯化铵(5.4g，101mmol)于20mL MeOH中的混合物中。在加入期间保持反应温度低于15℃。接着在室温搅拌混合物20小时，过滤，用水稀释滤液且用CH2Cl2(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-14%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈白色固体状的Cap-185步骤a(1.0g)，其很快变黄。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 6.24(2H,s),5.01(2H,d,J＝4.88Hz),2.73(2H,dd,J＝16.94,5.04Hz),2.31(2H,d,J＝16.79Hz)。
Cap-185步骤b
在-78℃历时100分钟向Cap-185步骤a(240mg，1.933mmol)的2mLTHF溶液中逐滴加入三仲丁基硼氢化锂(L-selectride)(3.87mL，3.87mmol)(1M THF溶液)。在-78℃搅拌所得混合物1小时，接着在室温搅拌过夜。接着使混合物冷却至0℃，加入4mL 20%NaOH水溶液，随后逐滴加入2mLH2O2(30%水溶液)。搅拌所得混合物1小时，接着用6N HCl(约5mL)中和。用NaCl使水层饱和且用CH2Cl2(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-40%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-185步骤b(180mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.49(2H,s),4.76(2H,d,J＝4.27Hz),3.99(1H,t,J＝5.77Hz),2.29(2H,ddd,J＝15.18,5.65,4.02Hz),1.70-1.78(2H,m)。
Cap-185步骤c
将对甲苯磺酰氯(544mg，2.85mmol)加入至Cap-185步骤b(180mg，1.427mmol)及吡啶(0.462mL，5.71mmol)于5mL CH2Cl2(5mL)中的溶液中且在室温搅拌混合物2天。用CH2Cl2稀释反应混合物且用1N HCl水溶液洗涤。用CH2Cl2(2次)萃取水层。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-15%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈白色固体状的Cap-185步骤c(210mg)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.73(2H,d,J＝8.24Hz),7.32(2H,d,J＝8.24Hz),6.25(2H,s),4.76(1H,t,J＝5.65Hz),4.64(2H,d,J＝3.66Hz),2.44(3H,s),2.18(2H,td,J＝10.07,5.49Hz),1.71(2H,d,J＝15.56Hz)。
Cap-185步骤d
Figure BDA00001874284601301
将含2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苄酯(1.5g，4.57mmol)及Cap-185步骤c(1.28g，4.57mmol)的5mL甲苯装入微波管中。密封所述管且在N2下逐滴加入LiHMDS(5.5mL，5.50mmol)(1N甲苯溶液)。在100℃以微波加热所得深棕色溶液5小时。接着向混合物中加入水及EtOAc。分离各层且用EtOAc(2次)萃取水相。浓缩合并的有机层，得到呈外消旋混合物形式的Cap-185步骤d。粗混合物不经纯化或分离即进行下一步骤。LC-MS:[M+H]+C29H28NO3的分析计算值：438.21；实测值：438.4。
Cap-185步骤e
Figure BDA00001874284601302
向Cap-185步骤d的外消旋混合物的30mL THF溶液中加入HCl(20mL)(2N水溶液)。在室温搅拌所得混合物2小时。如通过TLC判断反应完成后，分离两层。用EtOAc洗涤水层，用饱和NaHCO3水溶液中和，接着用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到Cap-185步骤e。LC-MS:[M+H]+C16H20NO3的分析计算值：274.14；实测值：274.12。
Cap-185步骤f
Figure BDA00001874284601303
在室温将粗Cap-185步骤e、DiPEA(1.24mL，7.1mmol)及氯甲酸甲酯(0.55mL，7.1mmol)的5mL CH2Cl2溶液搅拌1小时。接着用CH2Cl2稀释混合物且用水洗涤。用Na2SO4干燥有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-40%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到700mg外消旋混合物。接着通过手性HPLC(
Figure BDA00001874284601304
AD-H柱，30×250mm，5um)(用88%CO2-12%EtOH以70mL/min洗脱)分离混合物，得到呈白色固体状的240mg Cap-1步骤f的对映异构体-1及310mg对映异构体-2。对映异构体-1：LC-MS:[M+H]+C18H22NO5的分析计算值：332.15；实测值：332.3。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.30-7.40(5H,m),6.03-6.16(2H,m),5.09-5.26(3H,m),4.65-4.74(2H,m),4.33(1H,dd,J＝9.16,4.88Hz),3.67(3H,s),2.27-2.38(1H,m),1.61-1.69(1H,m),1.45-1.56(1H,m),1.34(1H,dd,J＝13.43,5.19Hz),1.07(1H,dd,J＝13.12,5.19Hz)。对映异构体-2：LC-MS:[M+H]+C18H22NO5的分析计算值：332.15；实测值：332.06。
Cap-185(对映异构体-1及对映异构体-2)
在氮气气氛下向含有Cap-185步骤f(对映异构体-2)(300mg，0.905mmol)的10mL MeOH溶液的氢化瓶中加入Pd/C(15mg，0.141mmol)。在40psi在帕尔振荡器上使混合物氢化3小时。接着过滤混合物且浓缩滤液，得到呈白色固体状的Cap-185(对映异构体-2)(200mg)。LC-MS:[M+H]+C11H18NO5的分析计算值：244.12；实测值：244.2。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.33(1H,宽单峰),4.46(2H,d),4.28(1H,宽单峰),3.68(3H,s),2.35(1H,宽单峰),1.91-2.03(2H,m),1.56-1.80(4H,m),1.36-1.55(2H,m)。[应注意：Cap-185(对映异构体-1)可以类似方法获得。]
Cap-186
Figure BDA00001874284601311
向酯Cap-185步骤f(对映异构体-2)(150mg，0.453mmol)的4mL MeOH溶液中加入NaOH(4mL 1N水溶液，4.00mmol)。在室温搅拌所得混合物3小时。接着真空除去甲醇，用1N HCl溶液中和残余物并用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到受一些苯甲醇污染的Cap-186(粘稠白色固体；115mg)。LC-MS:[M+H]+C11H16NO5的分析计算值：242.10；实测值：242.1。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 6.10-6.19(2H,m),5.36(1H,d,J＝8.85Hz),4.75-4.84(2H,m),4.28(1H,dd,J＝8.55,4.58Hz),3.68(3H,s),2.33-2.45(1H,m),1.60-1.72(2H,m),1.30-1.48(2H,m)。
Cap-187
Figure BDA00001874284601321
Cap-187步骤a
Figure BDA00001874284601322
向Cap-178步骤e(2.2g，18.94mmol)、PPh3(24.84g，95mmol)及4-硝基苯甲酸(14.24g，85mmol)于30mL苯中的溶液中逐滴加入DEAD(42.9mL，95mmol)。在室温搅拌所得浅橙色溶液过夜。接着真空除去溶剂且通过快速色谱法(硅胶，0-15%EtOAc/己烷)纯化残余物，得到呈白色固体状的Cap-187步骤a(2.3g)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 8.27-8.34(2H,m),8.20-8.26(2H,m),5.45(1H,t,J＝2.90Hz),3.83-3.96(3H,m),1.90-2.03(2H,m),1.80-1.88(1H,m),1.61-1.70(1H,m),1.21(3H,d,J＝6.10Hz)。
Cap-187步骤b
向Cap-187步骤a(2.3g，8.67mmol)的10mL MeOH溶液中加入甲醇钠(2.372mL，8.67mmol)(25%甲醇溶液)。在室温搅拌所得混合物3小时。加入水且用EtOAc(5次)萃取混合物。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-15%EtOAc/己烷，接着15-50%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-187步骤b(0.85g)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 4.19-4.23(1H,m),3.82-3.91(2H,m),3.73-3.79(1H,m),1.79-1.88(1H,m),1.62-1.68(1H,m),1.46-1.58(2H,m),1.14(3H,d,J＝6.10Hz)。
Cap-187
根据对于Cap-178所述的操作，由Cap-187步骤b合成Cap-187的个别对映异构体。LC-MS:[M+H]+C10H18NO5的分析计算值：232.12；实测值：232.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 5.26(1H,d,J＝7.78Hz),4.32-4.43(1H,m),4.07(1H,dd,J＝11.54,3.51Hz),3.72(3H,s),3.39-3.50(2H,m),2.08-2.23(1H,m),1.54-1.68(1H,m),1.38-1.52(1H,m),1.11-1.32(5H,m)。
Cap-188(四种立体异构体)
Figure BDA00001874284601331
Cap-188步骤a
Figure BDA00001874284601332
向2,2-二甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(2g，15.60mmol)的50mL MeOH溶液中缓慢加入硼氢化钠(0.649g，17.16mmol)。在室温搅拌所得混合物3小时。接着向混合物中加入1N HCl水溶液直至其达到酸性pH值范围，接着用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈澄清油状的Cap-188步骤a(1.9g)。产物不经纯化即用于下一步骤中。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 3.91-4.02(1H,m),3.79-3.86(1H,m),3.63(1H,td,J＝12.05,2.51Hz),1.82-1.93(2H,m),1.40-1.53(1H,m),1.29-1.38(1H,m),1.27(3H,s),1.20(3H,s)。
Cap-188.1及Cap-188.2步骤b
Figure BDA00001874284601333
将对甲苯磺酰氯(5.56g，29.2mmol)加入至Cap-188步骤a(1.9g，14.59mmol)及吡啶(4.72mL，58.4mmol)的100mL CH2Cl2溶液中。在室温搅拌所得混合物3天。向反应混合物中加入10mL水，且在室温再搅拌混合物1小时。分离两层且用水及1N HCl水溶液洗涤有机相。用MgSO4干燥有机相并浓缩，得到呈浅黄色固体状的两种对映异构体的混合物。接着通过手性HPLC(AD柱，21×250mm，10um)(用92%0.1%二乙胺/庚烷-8%EtOH以15mL/min洗脱)分离混合物，得到Cap-188.1步骤b(1.0g)及Cap-188.2步骤b(1.0g)。未指定两种对映异构体的绝对立体化学。Cap-188.1步骤b：LC-MS:[2M+Na]+C28H40NaO8S2的分析计算值：591.21；实测值：591.3。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.79(2H,d,J＝8.24Hz),7.34(2H,d,J＝8.24Hz),4.72-4.81(1H,m),3.78(1H,dt,J＝12.44,4.16Hz),3.53-3.61(1H,m),2.45(3H,s),1.75-1.86(2H,m),1.61-1.71(1H,m),1.52-1.60(1H,m),1.22(3H,s),1.14(3H,s)。Cap-188.2步骤b：LC-MS:[2M+Na]+C28H40NaO8S2的分析计算值：591.21；实测值：591.3。
Cap-188
可根据对于制备Cap-178所述的操作，由Cap-188.1步骤b及Cap-188.2步骤b合成Cap-188的四种立体异构体。Cap-188(立体异构体-1)：LC-MS:[M+Na]+C11H19NNaO5的分析计算值：268.12；实测值：268.23。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.32(1H,d,J＝8.55Hz),4.26-4.35(1H,m),3.57-3.82(5H,m),2.11-2.34(1H,m),1.25-1.58(4H,m),1.21(6H,d,J＝6.10Hz)。Cap-188(立体异构体-2)：LC-MS:[M+H]+C11H20NO5的分析计算值：246.13；实测值：246.1。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.25(1H,d,J＝8.55Hz),4.33(1H,dd,J＝8.39,5.04Hz),3.80(1H,dd,J＝11.90,3.97Hz),3.62-3.76(4H,m),2.20-2.32(1H,m),1.52-1.63(1H,m),1.27-1.49(3H,m),1.22(6H,d,J＝14.04Hz)。
Cap-189
Figure BDA00001874284601341
Cap-189步骤a
Figure BDA00001874284601342
向苯基溴化镁(113mL，340mmol)(3M乙醚溶液)的100mL乙醚溶液中逐滴加入含外-2,3-环氧降冰片烷(25g，227mmol)的50mL乙醚。开始放热后，加热混合物至回流过夜。接着使反应混合物冷却至室温且小心地用水(约10mL)淬灭。用乙醚稀释混合物且用3N HCl水溶液(约160mL)洗涤。用乙醚(2次)萃取水层且用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-18%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到Cap-189步骤a(11g)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.03-6.11(2H,m),3.76(1H,d,J＝11.29Hz),2.72-2.81(2H,m),1.98(1H,d,J＝11.29Hz),1.67-1.76(2H,m),0.90-0.97(2H,m)。
Cap-189步骤b
Figure BDA00001874284601343
在-78℃向草酰氯(59.9mL，120mmol)的200mL CH2Cl2溶液中加入含DMSO(17.01mL，240mmol)的100mL CH2Cl2。搅拌混合物10分钟，且加入含Cap-189步骤a(11g，100mmol)的150mL CH2Cl2，随后加入含Et3N(72.4mL，519mmol)的30mL CH2Cl2。在-78℃搅拌混合物30分钟，接着温热至室温。加入水(150mL)且在室温搅拌混合物30分钟。接着分离两层且用CH2Cl2(2次)萃取水层。合并有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-5%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈浅黄色油状的Cap-189步骤b(5.3g)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 6.50-6.55(2H,m),2.78-2.84(2H,m),1.92-1.99(2H,m),1.17-1.23(2H,m)。
Cap-189步骤c
Figure BDA00001874284601351
使Cap-189步骤b(5.3g，49.0mmol)、对甲苯磺酸一水合物(1.492g，7.84mmol)及乙二醇(4.10mL，73.5mmol)于100mL苯中的混合物回流4小时，接着在室温搅拌过夜。使反应混合物分配于Et2O与饱和NaHCO3水溶液之间且分离两层。用盐水洗涤有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-6%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-189步骤c(5.2g)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.20(2H,t,J＝2.13Hz),3.90-3.97(2H,m),3.81-3.89(2H,m),2.54(2H,m),1.89-1.99(2H,m),0.95-1.03(2H,m)。
Cap-189步骤d
Figure BDA00001874284601352
将Cap-189步骤c(5.2g，34.2mmol)于60mL MeOH及50mL CH2Cl2中的溶液冷却至-78℃且用臭氧气体处理直至浅蓝色明显可见。接着用N2对反应混合物鼓泡以除去过量臭氧气体(蓝色消失)并将硼氢化钠(1.939g，51.3mmol)加入至反应混合物中。接着使反应混合物温热至0℃。将丙酮加入至混合物中以淬灭过量硼氢化钠。浓缩混合物且通过快速色谱法(硅胶，100%EtOAc)纯化残余物，得到呈澄清油状的Cap-189步骤d(5.0g)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 3.99-4.09(4H,m),3.68(4H,m),2.17-2.29(2H,m),1.92-2.10(2H,m),1.77-1.88(2H,m),1.57-1.70(2H,m)。
Cap-189步骤e
Figure BDA00001874284601361
向Cap-189步骤d(1g，5.31mmol)的20mL CH2Cl2溶液中加入氧化银(3.8g)，p-Ts-Cl(1.215g，6.38mmol)及KI(0.176g，1.063mmol)。在室温搅拌所得溶液3天。接着过滤混合物且浓缩滤液。通过快速色谱法(硅胶，60%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-189步骤e(0.79g)。LC-MS:[M+Na]+C16H22NaO6S的分析计算值：365.10；实测值：365.22。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.80(2H,d,J＝8.28Hz),7.36(2H,d,J＝8.03Hz),4.11-4.17(1H,m),3.85-4.06(5H,m),3.64-3.71(1H,m),3.55-3.63(1H,m),2.47(3H,s),2.32-2.43(1H,m),2.15-2.27(1H,m),1.70-1.89(2H,m),1.52-1.66(1H,m),1.35-1.47(1H,m)。
Cap-189步骤f
Figure BDA00001874284601362
向Cap-189步骤e(2.2g，6.43mmol)的40mL MeOH溶液中加入碳酸钾(1.776g，12.85mmol)。在室温搅拌所得混合物过夜。接着用水及EtOAc稀释混合物。分离两层。用EtOAc(2次)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-15%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-189步骤f(0.89g，5.23mmol，81%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 3.89-4.02(6H,m),3.58(2H,dd,J＝10.79,2.51Hz),1.69-1.89(6H,m)。
Cap-189步骤g
Figure BDA00001874284601363
向Cap-189步骤f(890mg，5.23mmol)的15mL THF溶液中加入HCl(15mL，45.0mmol)(3M水溶液)。在室温搅拌所得混合物过夜。接着用乙醚稀释混合物且分离两层。用乙醚(2次)萃取水相且用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到Cap-189步骤g(0.95g，含有一些残余溶剂)。产物不经纯化即用于下一步骤中。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 3.95-4.00(2H,m),3.85(2H,d,J＝10.68Hz),2.21-2.28(2H,m),1.99-2.04(2H,m),1.90-1.96(2H,m)。
Cap-189步骤h(对映异构体-1及对映异构体-2)
Figure BDA00001874284601371
在-20℃向(+/-)-苄基氧基羰基-α-膦酰基甘氨酸三甲酯(1733mg，5.23mmol)的6mL THF溶液中加入1,1,3,3-四甲基胍(0.723mL，5.75mmol)。在-20℃搅拌所得浅黄色混合物1小时，且加入含Cap-189步骤g(660mg，5.23mmol)的3mL THF，接着在室温搅拌混合物3天。接着用EtOAc稀释反应混合物，用0.1N HCl水溶液洗涤。用EtOAc(2次)萃取水层且用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，0-4%EtOAc/CH2Cl2)纯化粗产物，得到960mg外消旋混合物。通过手性HPLC(
Figure BDA00001874284601372
AD柱，21×250mm，10um)(用90%0.1%二乙胺/庚烷-10%EtOH以15mL/min洗脱)分离混合物，得到呈白色固体状的Cap-189步骤h(对映异构体-1；300mg)及Cap-189步骤h(对映异构体-2；310mg)。Cap-189步骤h(对映异构体-1)：LC-MS:[M+H]+C18H22NO5的分析计算值：332.15；实测值：332.2。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.29-7.41(5H,m),6.00(1H,宽单峰),5.13(2H,s),3.63-3.87(8H,m),2.84(1H,宽单峰),1.84-2.02(2H,m),1.63-1.84(2H,m)。Cap-189步骤h(对映异构体-2)：LC-MS:[M+H]+C18H22NO5的分析计算值：332.15；实测值：332.2。
Cap-189步骤i
Figure BDA00001874284601373
在500mL氢化瓶中将N2鼓泡通过Cap-189步骤h(对映异构体-2；290mg，0.875mmol)的10mL MeOH溶液达30分钟。向溶液中加入(S,S)-Me-BPE-Rh(9.74mg，0.018mmol)，接着在60psi使混合物氢化6天。浓缩混合物，且手性分析性HPLC(
Figure BDA00001874284601374
OJ柱)表明存在少量剩余起始物质及一种主要产物。接着通过手性HPLC(
Figure BDA00001874284601375
OJ柱，21×250mm，10um)(用70%0.1%二乙胺/庚烷-30%EtOH以15mL/min洗脱)分离残余物，得到呈澄清油状的Cap-189步骤i(150mg)。LC-MS:[M+H]+C18H24NO5的分析计算值：334.17；实测值：334.39。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.28-7.41(5H,m),5.12-5.18(1H,m),5.09(2H,s),4.05(1H,t,J＝10.07Hz),3.75(3H,s),3.60-3.72(2H,m),3.41-3.50(2H,m),2.10(1H,宽单峰),1.72-1.99(6H,m)。
Cap-189步骤j
Figure BDA00001874284601381
在氢化瓶中在氮气气氛下向Cap-189步骤i(150mg，0.450mmol)的10mL MeOH溶液中加入一缩二碳酸二甲酯(0.072mL，0.675mmol)及10%Pd/C(23.94mg，0.022mmol)。接着在45psi在帕尔振荡器上使混合物氢化过夜。过滤混合物且浓缩滤液，得到呈澄清油状的Cap-189步骤j(110mg)。LC-MS:[M+H]+C12H20NO5的分析计算值：258.13；实测值：258.19。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.08(1H,d,J＝9.16Hz),4.03(1H,t,J＝10.07Hz),3.75(3H,s),3.60-3.72(5H,m),3.46(2H,t,J＝10.38Hz),2.11(1H,宽单峰),1.72-1.99(6H,m)。
Cap-189
向Cap-189步骤j(110mg，0.428mmol)于2mL THF及1mL水中的混合物中加入LiOH(0.641mL，1.283mmol)(2N水溶液)。在室温搅拌所得混合物过夜。用1N HCl水溶液中和混合物且用EtOAc(3次)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层并浓缩，得到呈白色固体状的Cap-189(100mg)。LC-MS:[M+Na]+C11H17NNaO5的分析计算值：266.10；实测值：266.21。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.10(1H,d,J＝9.16Hz),4.02(1H,t,J＝10.07Hz),3.62-3.78(5H,m),3.49(2H,d,J＝10.68Hz),2.07-2.22(2H,m),1.72-1.98(6H,m)。
Cap-190(非对映异构混合物)
Figure BDA00001874284601391
Cap-190步骤a
Figure BDA00001874284601392
在0℃向环戊-3-烯醇(2.93g，34.8mmol)及咪唑(5.22g，77mmol)于30mL DMF中的混合物中加入叔丁基二甲基氯甲硅烷(6.30g，41.8mmol)。在室温搅拌所得无色混合物过夜。接着将己烷及水加入至混合物中且分离两层。用EtOAc(2次)萃取水层且用盐水洗涤合并的有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，2%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-190步骤a(6.3g)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.65(2H,s),4.49-4.56(1H,m),2.56(2H,dd,J＝15.26,7.02Hz),2.27(2H,dd,J＝15.26,3.36Hz),0.88(9H,s),0.06(6H,s)。
Cap-190步骤b
Figure BDA00001874284601393
在0℃向Cap-190步骤a(2.3g，11.59mmol)的40mL CH2Cl2溶液中分5份加入m-CPBA(5.60g，16.23mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜。接着将己烷及水加入至混合物中且分离两层。用50mL 10%NaHSO3水溶液及盐水洗涤有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，3%-6%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈澄清油状的Cap-190步骤b(1.42g)及其反式非对映异构体(0.53g)。Cap-190步骤b(顺式)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm4.39-4.47(1H,m),3.47(2H,s),2.01-2.10(2H,m),1.93-2.00(2H,m),0.88(9H,s),0.04(6H,s)。Cap-190步骤b(反式)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm4.04-4.14(1H,m),3.47(2H,s),2.41(2H,dd,J＝14.05,7.28Hz),1.61(2H,dd,J＝14.18,6.90Hz),0.87(9H,s),0.03(6H,s)。
Cap-190步骤c
Figure BDA00001874284601394
在0℃向(S)-1,2'-亚甲基二吡咯烷(0.831g，5.39mmol)的15mL苯溶液中逐滴加入正丁基锂(4.90mL，4.90mmol)(1M己烷溶液)。溶液变成亮黄色。在0℃搅拌混合物30分钟。接着加入含Cap-190步骤b(顺式异构体；0.7g，3.27mmol)的10mL苯且在0℃搅拌所得混合物3小时。将EtOAc及饱和NH4Cl水溶液加入至混合物中且分离两层。用水及盐水洗涤有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，15%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈浅黄色油状的Cap-190步骤c(400mg)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.84-5.98(2H,m),4.53-4.69(2H,m),2.63-2.73(1H,m),1.51(1H,dt,J＝13.73,4.43Hz),0.89(9H,s),0.08(6H,s)。
Cap-190步骤d
Figure BDA00001874284601401
向Cap-190步骤c(400mg，1.866mmol)、MeI(1.866mL，3.73mmol)(2M叔丁基甲基醚溶液)于5mL THF中的溶液中加入NaH(112mg，2.80mmol)(60%矿物油溶液)。使所得混合物温热至室温且在室温搅拌过夜。接着用水淬灭反应混合物且用EtOAc(3次)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶，5%EtOAc/己烷)纯化粗产物，得到呈浅黄色油状的Cap-190步骤d(370mg)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.92-5.96(1H,m),5.87-5.91(1H,m),4.64-4.69(1H,m),4.23-4.28(1H,m),3.32(3H,s),2.62-2.69(1H,m),1.54(1H,dt,J＝13.12,5.49Hz),0.89(9H,s),0.07(5H,d,J＝1.83Hz)。
Cap-190步骤e
在氢化瓶中向Cap-190步骤d(400mg，1.751mmol)的10mL EtOAc溶液中加入氧化铂(IV)(50mg，0.220mmol)。在50psi在帕尔振荡器上使所得混合物氢化2小时。接着经过滤混合物且浓缩滤液，得到呈澄清油状的Cap-190步骤e(400mg)。LC-MS:[M+H]+C12H27O2Si的分析计算值：231.18；实测值：231.3。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 4.10-4.17(1H,m),3.65-3.74(1H,m),3.27(3H,s),1.43-1.80(6H,m),0.90(9H,s),0.09(6H,s)。
Cap-190步骤f
Figure BDA00001874284601411
向Cap-190步骤e(400mg，1.736mmol)的5mL THF溶液中加入TBAF(3.65mL，3.65mmol)(1N THF溶液)。数分钟后，混合物颜色变成棕色，且在室温搅拌过夜。在真空除去挥发性组分，且通过快速色谱法(硅胶，0-25%EtOAc/己烷)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的Cap-190步骤f(105mg)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 4.25(1H,宽单峰),3.84-3.92(1H,m),3.29(3H,s),1.67-2.02(6H,m)。
Cap-190
接着根据对于Cap-182所述的操作，由Cap-190步骤f合成Cap-190。LC-MS:[M+Na]+C10H17NNaO5的分析计算值：254.10；实测值：254.3。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 5.25(1H,d,J＝8.55Hz),4.27-4.41(1H,m),3.81-3.90(1H,m),3.69(3H,s),3.26(3H,s),2.46-2.58(1H,m),1.76-1.99(3H,m),1.64-1.73(1H,m),1.40-1.58(1H,m),1.22-1.38(1H,m)。
Cap-191(对映异构体-1)
Figure BDA00001874284601412
Cap-191步骤a
Figure BDA00001874284601413
在-78℃在氮气下向二异丙胺(3mL，21.05mmol)的THF(3mL)溶液中加入正丁基锂(2.5M己烷溶液；8.5mL，21.25mmol)。在-78℃搅拌反应混合物10分钟，接着温度升至0℃且保持25分钟。使反应混合物再次冷却至-78℃，加入含四氢-2H-吡喃-4-羧酸甲酯(3g，20.81mmol)的THF(3mL)。在-78℃搅拌反应混合物15分钟，接着温度升至0℃且保持30分钟。使反应混合物冷却至-78℃，加入碘代甲烷(1.301mL，20.81mmol)。加入后，移除冷却浴且使反应混合物缓慢温热至约25℃并搅拌22小时。加入乙酸乙酯及HCl水溶液(0.1N)，分离有机层且用盐水洗涤并干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。将残余物载入至Thomson硅胶柱上(用10%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到浅黄色油状物(2.83g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.73-3.66(m,2H),3.66(s,3H),3.40-3.30(m,2H),1.95-1.93(dm,1H),1.92-1.90(dm,1H),1.43(ddd,J=13.74,9.72,3.89,2H),1.18(s,3H)。
Cap-191步骤b
Figure BDA00001874284601421
在-78℃在氮气下向Cap-191步骤a(3g，18.96mmol)的甲苯(190mL)溶液中逐滴加入二异丁基氢化铝(1.5M甲苯溶液；26.5ml，39.8mmol)。在-78℃将反应混合物继续搅拌1.5小时，移除浴并搅拌18小时。用MeOH(20mL)淬灭反应混合物。加入HCl(1M，150mL)且用EtOAc(4×40mL)萃取混合物。用盐水洗涤合并的有机相，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法(硅胶；40%乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到无色油状物(1.36g)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm 3.77(dt,J=11.73,4.55,2H),3.69-3.60(m,2H),3.42(s,2H),1.71-1.40(bs,1H)1.59(ddd,J=13.74,9.72,4.39,2H),1.35-1.31(m,1H),1.31-1.27(m,1H),1.06(s,3H)。
Cap-191步骤c
在-78℃在氮气下向DMSO(5.9ml，83mmol)的CH2Cl2(85ml)溶液中加入草酰氯(3.8ml，43.4mmol)并搅拌40分钟。接着加入Cap-191步骤b(4.25g，32.6mmol)的CH2Cl2(42.5ml)溶液。在-78℃在氮气下将反应混合物继续搅拌2小时。用冷的20%K2HPO4(水溶液)(10mL)及水淬灭反应混合物。在约25℃搅拌混合物15分钟，用乙醚(50mL)稀释且分离各层。用乙醚(2×50mL)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。将残余物吸收于CH2Cl2(4mL)中且用快速色谱法(硅胶，用CH2Cl2洗脱)纯化，得到无色油状物(2.1g)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 9.49(s.1H),3.80(dt,J=11.98,4.67,2H),3.53(ddd,J=12.05,9.41,2.89,2H),1.98(ddd,J=4.71,3.20,1.38,1H),1.94(ddd,J=4.71,3.20,1.38,1H),1.53(ddd,J=13.87,9.60,4.14,2H),1.12(s,3H)。
Cap-191步骤d
Figure BDA00001874284601431
在约25℃在氮气下向Cap191c(2.5g，19.51mmol)的CHCl3(20ml)溶液中加入(R)-2-氨基-2-苯基乙醇(2.94g，21.46mmol)并搅拌5小时。使反应混合物冷却至0℃，逐滴加入三甲基甲硅烷基氰化物(3.8ml，30.4mmol)。移除冷却浴且在约25℃在氮气下使反应混合物搅拌15.5小时。用3N HCl(20mL)及水(20mL)处理反应混合物，且用CHCl3(3×50mL)萃取产物。干燥(NaSO4)合并的有机层，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法(硅胶；40%乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到两种非对映异构体：呈无色油状的Cap-191步骤d1(非对映异构体1)，其在静置后固化成白色固体(3g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.42-7.26(m,5H),5.21(t,J=5.77,1H),3.87(dd,J=8.53,4.52,1H),3.61-3.53(m,1H),3.53-3.37(m,5H),3.10(d,J=13.05,1H),2.65(d,J=13.05,1H),1.64-1.55(m,1H),1.55-1.46(m,1H),1.46-1.39(m,1H),1.31-1.23(m,1H),1.11(s,3H)。LC-MS:[M+H]+C16H23N2O2的分析计算值：275.18；实测值：275.20。呈浅黄色油状的Cap-191步骤d2(非对映异构体2)(0.5g)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.44-7.21(m,5H),4.82(t,J=5.40,1H),3.82-3.73(m,1H),3.73-3.61(m,3H),3.61-3.37(m,5H),2.71(dd,J=9.29,4.77,1H),1.72-1.55(m,2H),1.48-1.37(m,1H),1.35-1.25(m,1H),1.10(s,3H)。LC-MS:[M+H]+C16H23N2O2的分析计算值：275.18；实测值：275.20。
Cap-191步骤e
Figure BDA00001874284601432
在0℃在氮气下向Cap-191步骤d2(非对映异构体2)(0.4472g，1.630mmol)于CH2Cl2(11ml)及MeOH(5.50ml)中的溶液中加入四乙酸铅(1.445g，3.26mmol)。搅拌反应混合物1.5小时，移除冷却浴且持续搅拌20小时。用磷酸盐缓冲液(pH=7；6mL)处理反应混合物并搅拌45分钟。经
Figure BDA00001874284601433
过滤反应混合物，用CH2Cl2洗涤且分离各层。用CH2Cl2(3×25mL)萃取水层，用盐水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法(硅胶；15%乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到呈无色油状的亚胺中间体(181.2mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.55(d,J=1.00,1H),7.89-7.81(m,2H),7.61-7.46(m,3H),4.80(d,J=1.00,1H),3.74(tt,J=11.80,4.02,2H),3.62-3.46(m,2H),1.79-1.62(m,2H),1.46-1.30(m,2H),1.15(s,3H)。
将所述亚胺中间体吸收于6N HCl(10mL)中且在90℃加热10天。将反应混合物移离热源，使其冷却至室温并用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。在真空中浓缩水层，得到灰白色固体。将所述固体吸收于MeOH中且载入至预处理的MCX(6g)柱上，用MeOH洗涤，随后用2N NH3/MeOH溶液洗脱且在真空中浓缩，得到灰白色固体(79.8mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm14.33-13.51(bs,1H),8.30(bs,3H),3.82-3.75(m,1H),3.70(dt,J=11.80,4.02,2H),3.58-3.43(m,2H),1.76-1.60(m,2H),1.47-1.36(m,1H),1.36-1.27(m,1H),1.08(s,3H)。LC-MS:[M+H]+C8H16NO3的分析计算值：174.11；实测值：174.19。
Cap-191(对映异构体-1)
在0℃向Cap-191步骤e(0.0669g，0.386mmol)及碳酸钠(0.020g，0.193mmol)于氢氧化钠(1M水溶液；0.4ml，0.40mmol)中的溶液中逐滴加入氯甲酸甲酯(0.035ml，0.453mmol)。由冷却浴移出反应混合物且在约25℃搅拌3小时。用乙醚(3×20mL)洗涤反应混合物。用12N HCl(pH~1-2)酸化水层且用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并在真空中浓缩，得到呈无色薄膜状的Cap-191(66.8mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 13.10-12.37(bs,1H),7.37(d,J=9.04,1H),4.02(d,J=9.29,1H),3.72-3.57(m,2H),3.56(s,3H),3.54-3.44(m,2H),1.65(ddd,J=13.61,9.72,4.27,1H),1.53(ddd,J=13.68,9.66,4.27,1H),1.41-1.31(m,1H),1.31-1.22(m,1H),1.00(s,3H)。LC-MS:[M+Na]+C10H17NO5Na的分析计算值：254.10；实测值：254.11。
Cap-192(对映异构体-2)
Figure BDA00001874284601441
Cap-192(对映异构体-2)根据对于制备其对映异构体Cap-191所述的操作，由Cap-191步骤d1制备。
中间体
方案1
Literature Chem Comm,2172-2174(2005)。
中间体1与中间体2的混合物
中间体1：2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘
中间体2：2,7-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘
向经脱气的萘(19.34g，151mmol)及联硼酸二频哪醇酯(84g，330mmol)于环己烷(500mL)中的溶液中加入4,4'-二叔丁基-2,2'-联吡啶(4.05g，15.1mmol)及二-μ-甲氧基二(1,5-环辛二烯)二铱(I)(5.0g，7.5mmol)。密封烧瓶且在80℃加热16小时，接着使其冷却至室温。在加热后，反应混合物颜色变成深红色。在真空中除去挥发性组分且用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用0-100%乙酸乙酯/甲苯洗脱)，得到呈白色固体状的2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘与2,7-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘的混合物(54.57g，95%收率，1.5:1比例)。
中间体1：1H NMR(500MHz,苯-d6)δppm 8.70(s,2H),8.16(d,J＝8.2Hz,2H),7.75(d,J＝8.2Hz,2H),1.15(s,24H)。
中间体2：1H NMR(500MHz,苯-d6)δppm 8.77(s,2H),8.22(d,J＝8.2Hz,2H),7.66(d,J＝8.2Hz,2H).1.15(s,24H)。
Figure BDA00001874284601461
中间体3与中间体4的混合物
中间体3：(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
中间体4：(2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,7-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-5,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
向2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘与2,7-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘的混合物(1.5:1)(1.25g，3.29mmol)及(S)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(3.01g，8.22mmol)于1,2-二甲氧基乙烷(50mL)及水(12.5mL)中的溶液中加入NaHCO3(1.38g，16.4mmol)。在真空中使反应混合物脱气且用氮气冲洗。加入Pd(Ph3P)4(190mg，0.164mmol)，将耐压烧瓶加盖并用油浴在85℃加热16小时。在真空中除去挥发性组分。使残余物分配于乙酸乙酯与水之间。分离各层且用乙酸乙酯萃取水相数次。经硅藻土填料过滤合并的有机相且干燥(Na2SO4)滤液，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用10-100%乙酸乙酯/CH2Cl2洗脱)，接着淋洗(10%甲醇/CH2Cl2)，得到呈橙色固体状的(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯与(2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,7-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-5,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的混合物(622mg，27.1%收率)，其不经纯化即使用。通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化等分试样，得到呈三氟乙酸盐形式的各中间体的分析样品。
中间体3的分析数据：LC-MS保留时间1.46分钟；C42H46N6O4的计算值：698.36，m/z实测值：699.26[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.28(宽单峰,2H),8.13(t,J＝8.7Hz,4H),8.05(t,J＝8.4Hz,2H),7.92(dd,J＝14.8,8.7Hz,3H),5.20-5.36(m,2H),3.70-3.84(m,2H),3.57-3.70(m,2H),2.54-2.70(m,2H),2.18-2.28(m,2H),2.14(五重峰,J＝6.9Hz,4H),1.50(s,9H),1.23(s,9H)。
中间体4的分析数据：LC-MS保留时间1.52分钟；C42H46N6O4的计算值：698.36，m/z实测值：699.24[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.33(宽单峰,2H),7.98-8.17(m,6H),7.83-7.98(m,4H),5.18-5.35(m,2H),3.71-3.83(m,2H),3.57-3.70(m,2H),2.63(宽单峰,2H),2.19-2.28(m,2H),2.07-2.18(m,4H),1.50(s,9H),1.22(s,9H)。
中间体5与中间体6的混合物
中间体5：(S)-2-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯三氟乙酸盐
中间体6：(S)-2-(6-(7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯三氟乙酸盐
快速色谱法纯化后，以上反应也得到(S)-2-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯三氟乙酸盐与(S)-2-(6-(7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的混合物(658mg)。在HPLC分离(TFA缓冲液)期间，硼酸酯部分水解得到与硼酸中间体相同的混合物。LC-MS保留时间1.34分钟(硼酸)及2.05(硼酸酯)；(硼酸)C26H28BN3O4的计算值：457.22，m/z实测值：458.14[M+H]+。(硼酸酯)[M+H]+C32H38BN3O4的计算值：539.3，m/z实测值：490.16[M]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。
Figure BDA00001874284601481
中间体7与中间体8
中间体7：2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘
中间体8：2,7-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘
在环境条件下将(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯与(2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,7-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-5,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的混合物(594mg，0.162mmol)及TFA(2mL)于CH2Cl2(10mL)中的溶液搅拌3小时。在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化粗物质，得到呈黄色固体状的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(434mg)及呈黄色固体状的2,7-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(204.8mg)。
中间体7的分析数据：LC-MS保留时间1.05分钟；C32H30N6的计算值：498.25，m/z实测值：499.21[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.18(s,1H),8.06(d,J＝8.6Hz,1H),8.00(s,1H),7.84-7.92(m,1H),7.73-7.81(m,2H),5.08(t,J＝7.6Hz,1H),3.56-3.66(m,1H),3.48-3.56(m,1H),2.62-2.71(m,1H),2.36-2.47(m,1H),2.19-2.36(m,2H)。
中间体8的分析数据：LC-MS保留时间1.11分钟；C32H30N6的计算值：498.25，m/z实测值：499.20[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.23(s,2H),8.01(m,4H),7.82-7.89(m,2H),7.69-7.82(m,4H),5.08(t,J＝7.6Hz,2H),3.57-3.66(m,2H),3.48-3.57(m,2H),2.60-2.73(m,2H),2.37-2.48(m,2H),2.19-2.36(m,4H)。
方案2
Figure BDA00001874284601491
Figure BDA00001874284601501
中间体9
(S)-2-(1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
历时11分钟将乙二醛(2.0mL 40%水溶液)逐滴加入至NH4OH(32mL)及(S)-Boc-脯氨醛(8.56g，43.0mmol)的甲醇溶液中且在环境温度搅拌反应混合物19小时。在真空中除去挥发性组分且通过快速色谱法(硅胶，乙酸乙酯)纯化残余物，随后重结晶(乙酸乙酯，室温)，得到呈白色绒毛状固体的(S)-2-(1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.43g，18.6mmol，43%收率)。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)δppm 11.68/11.59(宽单峰,1H),6.94(s,1H),6.76(s,1H),4.76(m,1H),3.48(m,1H),3.35-3.29(m,1H),2.23-1.73(m,4H),1.39/1.15(s,9H)。LC-MS.RT=0.87分钟；>95%均匀性指数；LC-MS:[M+H]+C12H20N3O2的分析计算值：238.16；实测值：238.22。当在下文所注明的手性HPLC条件下分析时，化合物显示具有98.9ee%。
柱：
Figure BDA00001874284601502
AD，10um，4.6×50mm
溶剂：1.7%乙醇/庚烷(等度)
流速：1mL/min
波长：220或256nm
相对保留时间：3.25分钟(R)，5.78分钟(S)
Figure BDA00001874284601503
中间体10
(S)-2-(4,5-二碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在环境温度将碘(16.17g，63.7mmol)加入至(S)-2-(1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6.87g，29.0mmol)及碳酸钠(9.21g，87mmol)于二噁烷(72mL)及水(72mL)中的溶液中。用铝箔覆盖烧瓶且搅拌16小时。用乙酸乙酯及饱和硫代硫酸钠水溶液稀释反应混合物。搅拌混合物15分钟且分离各相。用乙酸乙酯萃取水相数次。干燥(Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩，得到呈棕褐色固体状的(S)-2-(4,5-二碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(12.5g，88%)。LC-MS保留时间1.40分钟；C12H17I2N3O2的计算值：488.94，m/z实测值：489.96[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm4.72-4.84(m,1H),3.58-3.70(m,1H),3.43-3.54(m,1H),2.36(宽单峰,1H),1.88-2.08(m,3H),1.47(宽单峰,3H),1.27(宽单峰,6H)。
Figure BDA00001874284601511
中间体11
(S)-2-(5-碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将亚硫酸钠(10.31g，82mmol)加入至(S)-2-(4,5-二碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.0g，8.2mmol)于乙醇(75mL)及水(75mL)中的溶液中。用油浴在100℃加热混悬液4小时且在90℃加热16小时。用乙酸乙酯及水稀释反应混合物。分离各层且用乙酸乙酯萃取水层数次。干燥(盐水、Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(将样品干法载入至硅胶上且用0至40%乙酸乙酯/CH2Cl2洗脱)，得到呈白色固体状的(S)-2-(5-碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2.17g，73.1%)。LC-MS保留时间0.930分钟；C12H18IN3O2的计算值：363.04，m/z实测值：364.06[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.52-7.64(m,1H),4.95-5.10(m,1H),3.57-3.70(m,1H),3.47-3.57(m,1H),2.37-2.55(m,1H),1.94-2.10(m,3H),1.46(s,4H),1.27(s,5H)。
Figure BDA00001874284601521
中间体12与中间体13的混合物
中间体12：(S)-2-(5-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
中间体13：(S)-2-(5-(7-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
向(S)-2-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯三氟乙酸盐与(S)-2-(6-(7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯三氟乙酸盐的混合物(560mg，0.980mmol)及(S)-2-(5-碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(463mg，1.27mmol)于1,2-二甲氧基乙烷(11.2mL)及水(2.8mL)中的溶液中加入NaHCO3(412mg，4.90mmol)。在真空中使反应混合物脱气5分钟且用氮气冲洗。加入Pd(Ph3P)4(57mg，0.049mmol)，将耐压烧瓶加盖并用油浴在100℃加热16小时。在真空中除去挥发性组分。使残余物分配于乙酸乙酯与水之间且用乙酸乙酯萃取水相数次。干燥(Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用50-100%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到部分纯化的产物混合物，其进一步通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化，得到(S)-2-(5-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐与(S)-2-(5-(7-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐的混合物(74mg)。LC-MS保留时间1.32分钟；[M+H]+C38H44N6O4的计算值：648.34，m/z实测值：649.20[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。混合物无需进一步纯化即使用。
Figure BDA00001874284601531
中间体14与中间体15
中间体14：2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑
中间体15：2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑
在环境条件下将呈三氟乙酸盐形式的(S)-2-(5-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯与(S)-2-(5-(7-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的混合物(74mg)及TFA(2mL)于CH2Cl2(10mL)中的溶液搅拌4小时。在真空中除去挥发性组分。通过反相HPLC(0至50%水/乙腈/TFA)纯化粗物质，得到呈黄色油状的2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(32mg，31%)及呈黄色油状的2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(16mg)。
中间体14的分析数据：LC-MS保留时间0.081分钟；C38H28N6的计算值：448.24，m/z实测值：449.20[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (500MHz,MeOD)δppm 8.33(s,1H),8.17(s,1H),8.03(d,J＝3.7Hz,1H),8.01(s,2H),7.92-7.97(m,1H),7.877.92(m,1H),7.75-7.80(m,3H),5.11(t,J＝7.8Hz,1H),4.99(t,J＝7.9Hz,1H),3.49-3.69(m,4H),2.56-2.76(m,2H),2.41-2.52(m,2H),2.21-2.41(m,4H)。
中间体15的分析数据：LC-MS保留时间0.87分钟；C38H28N6的计算值：448.24，m/z实测值：449.21[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.39(s,1H),8.19(s,1H),7.97-8.04(m,3H),7.91(d,J＝8.6Hz,1H),7.87(d,J＝8.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.78(s,2H),5.12(t,J＝7.6Hz,1H),5.04(t,J＝8.1Hz,1H),3.50-3.68(m,4H),2.60-2.74(m,2H),2.41-2.55(m,2H),2.21-2.41(m,4H)。
方案3
Figure BDA00001874284601541
中间体16
(S)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将EDCI·HCl(16.9g，88.0mmol)加入至4-溴苯-1,2-二胺(15.0g，80.0mmol)、N-Boc-L-脯氨酸(18.13g，84.0mmol)及1-羟基苯并三唑(12.28g，80.0mmol)于CH2Cl2(500mL)中的混合物中且在环境条件下搅拌16小时。接着用水稀释混合物。滤除所得白色沉淀物且分离各层。用水洗涤有机层，干燥(盐水；Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩，得到棕色泡沫状物。将乙酸(300mL)加入至泡沫状物中且在85℃(浴温度)加热混合物5小时。在真空中除去挥发性组分且将残余物溶解于EtOAc中，用水洗涤且干燥(Na2SO4)有机相，过滤并在真空中浓缩。对所得粗物质进行快速色谱法(硅胶；0-37%EtOAc/CH2Cl2)纯化。对部分纯物质再进行快速色谱法(硅胶；20-35%EtOAc/CH2Cl2)纯化，得到呈黄色泡沫状的(S)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(17.98g，61.2%收率)。LC-MS保留时间1.23分钟；C16H20BrN3O2的计算值：365.07，m/z实测值：368.07[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601551
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm7.59-7.75(m.,1H),7.38-7.53(m,1H),7.31-7.38(m,1H),5.04-5.09(m,0.3H),4.94-5.00(m,0.7H),3.68-3.76(m,1H),3.50-3.59(m,1H),2.34-2.51(m.,1H),1.95-2.12(m.,3H),1.47(宽单峰,3H),1.15(s,6H)。
Figure BDA00001874284601552
中间体17
(S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
向含有(S)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.5g，12mmol)与联硼酸二频哪醇酯(6.55g，25.8mmol)于1,4-二噁烷(50mL)中的混合物的烧瓶中加入乙酸钾(3.01g，30.7mmol)。在真空中使反应烧瓶脱气5分钟，接着用氮气净化。加入催化剂Pd(Ph3P)4(710mg，0.614mmol)，将烧瓶加盖且用油浴在85℃(浴温度)加热16小时。于真空中浓缩反应混合物。使粗物质分配于CH2Cl2与饱和NaHCO3溶液之间且用CH2Cl2萃取水层。干燥(盐水、Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用10-50%乙酸乙酯/CH2Cl2洗脱)，得到呈白色固体状的(S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2.80g，55%收率)。LC-MS保留时间1.493分钟；C22H32BN3O4的计算值：413.25，m/z实测值：414.23[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 7.81-8.08(m,1H),7.40-7.68(m.,2H),4.95-5.13(m,1H),3.68-.3.79(宽单峰,1H),3.48-3.60(宽单峰,1H),2.35-2.52(宽单峰,1H),1.95-2.15(m,3H),1.46(s,3H),1.37(s,12H),1.13(s,6H)。
Figure BDA00001874284601561
中间体3
2-(5-(6-(2-(1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
向(S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.29g，33.1mmol)与2,6-二溴萘(446mg，1.56mmol)于1,2-二甲氧基乙烷(20mL)及水(6mL)中的混合物中加入NaHCO3(787mg，9.36mmol)。在真空中使反应混合物脱气10分钟且用氮气冲洗。加入催化剂Pd(Ph3P)4(90mg，0.078mmol)，将烧瓶加盖且用油浴在100℃加热16小时。在真空中除去挥发性组分。使残余物分配于CH2Cl2与水之间且分离各层。用CH2Cl2萃取水相数次且干燥(盐水、Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用0-70%乙酸乙酯/CH2Cl2洗脱)，得到呈黄色固体状的2-(5-(6-(2-(1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(605mg)。LC-MS保留时间1.46分钟；C42H46N6O4的计算值：698.36，m/z实测值：699.26[M+H]+。在配备有WatersSunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.28(宽单峰,2H),8.13(t,J＝8.7Hz,4H),8.05(t,J＝8.4Hz,2H),7.92(dd,J＝14.8,8.7Hz,4H),5.20-5.36(m,2H),3.70-3.84(m,2H),3.57-3.70(m,2H),2.54-2.70(m,2H),2.18-2.28(m,2H),2.14(五重峰,J＝6.9Hz,4H),1.50(s,9H),1.23(s,9H)。
Figure BDA00001874284601571
中间体18
(2S)-2-(5-(6-溴-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
以上反应也得到呈黄色固体状的(2S)-2-(5-(6-溴-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(519mg)。LC-MS保留时间1.88分钟；[M+H]+C26H26BrN3O2的计算值：491.12，m/z实测值：494.04[M+H]+。在配备有WatersSunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.21(d,J＝8.6Hz,1H),8.05-8.14(m,2H),7.93-8.05(m,2H),7.82-7.93(m,3H),7.57-7.67(m,1H),5.28(宽单峰,1H),3.98(s,1H),3.70-3.80(m,1H),3.57-3.70(m,1H),2.54-2.71(m,1H),2.17-2.29(m,1H),2.09-2.17(m,2H),1.49(s,4H),1.22(s,5H)。
Figure BDA00001874284601572
中间体7
5,5'-(2,6-萘二基)二(2-(2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑)
在环境条件下将2-(5-(6-(2-(1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(591mg，0.844mmol)与TFA(2mL)于CH2Cl2(10mL)中的混合物搅拌2小时。在真空中除去挥发性组分且将所得物质载入至MCX柱上，用甲醇淋洗，通过2.0M NH3/甲醇洗脱释放并浓缩，得到呈棕褐色固体状的5,5'-(2,6-萘二基)二(2-(2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑)(419mg)。LC-MS保留时间1.02分钟；C33H31N5的计算值：498.25，m/z实测值：499.25[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.18(s,1H),8.06(d,J＝8.6Hz,1H),8.00(s,1H),7.84-7.92(m,1H),7.73-7.81(m,2H),5.08(t,J＝7.6Hz,1H),3.56-3.66(m,1H),3.48-3.56(m,1H),2.62-2.71(m,1H),2.36-2.47(m,1H),2.19-2.36(m,2H)。
方案4
Figure BDA00001874284601581
中间体1
2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘
在真空中使含有2,6-二溴萘(8.0g，28mmol)、联硼酸二频哪醇酯(21.3g，84.0mmol)、乙酸钾(3.01g，30.7mmol)及1,4-二噁烷(50mL)的混合物的耐压烧瓶脱气5分钟且用氮气净化。加入催化剂Pd(Ph3P)4(710mg，0.614mmol)。将烧瓶加盖且用油浴在85℃(浴温度)加热16小时。在真空中浓缩反应混合物且使粗物质分配于CH2Cl2与饱和NaHCO3溶液之间。用CH2Cl2萃取水层且干燥(Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用50-100%CH2Cl2/己烷洗脱)，得到受联硼酸二频哪醇酯污染的2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘。将固体溶解于CH2Cl2中且加入甲醇直至观察到沉淀。通过过滤收集沉淀物，得到呈白色固体状的2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘(5.1g，48%收率)。1H NMR(500MHz,苯-d6)δppm 8.70(s,2H),8.16(d,J＝8.2Hz,2H),7.75(d,J＝8.2Hz,2H),1.15(s,24H)。
Figure BDA00001874284601591
中间体3
(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
向2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘(2.0g，5.3mmol)与(S)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2.89g，7.89mmol)于1,2-二甲氧基乙烷(42.1mL)及水(10.5mL)中的混合物中加入NaHCO3(2.21g，26.3mmol)。在真空中使反应混合物脱气且用氮气冲洗。加入催化剂Pd(Ph3P)4(90mg，0.078mmol)。将烧瓶加盖且用油浴在100℃加热16小时。在真空中除去挥发性组分且使残余物分配于乙酸乙酯与水之间。分离各层且用乙酸乙酯萃取水相数次。经硅藻土
Figure BDA00001874284601592
填料过滤合并的有机相且干燥(Na2SO4)滤液，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用0-100%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈橙色固体状的(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(761mg，21%收率)。LC-MS保留时间1.46分钟；C42H46N6O4的计算值：698.36，m/z实测值：699.26[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (500MHz,MeOD)δppm 8.28(宽单峰,2H),8.13(t,J＝8.7Hz,4H),8.05(t,J＝8.4Hz,2H),7.92(dd,J＝14.8,8.7Hz,4H),5.20-5.36(m,2H),3.70-3.84(m,2H),3.57-3.70(m,2H),2.54-2.70(m,2H),2.18-2.28(m,2H),2.09-2.19(m,4H),1.50(s,9H),1.23(s,9H)。
Figure BDA00001874284601601
中间体5
(S)-2-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
以上反应也得到呈棕褐色固体状的(S)-2-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.58g，56%收率)。LC-MS保留时间1.46分钟；C32H38BN3O4的计算值：539.3，m/z实测值：540.24[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。
方案5
Figure BDA00001874284601602
Figure BDA00001874284601611
中间体19
(S)-5-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)吡咯烷-2-酮
向(S)-5-(羟基甲基)吡咯烷-2-酮(10g，mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中加入叔丁基氯二苯基甲硅烷(25.6g，93mmol)、Et3N(12.1mL，87mmol)及DMAP(1.06g，8.7mmol)。在室温搅拌混合物直至起始吡咯烷酮耗尽，接着用CH2Cl2(50mL)稀释且用水(50mL)洗涤。干燥(Na2SO4)有机层，过滤，在真空中蒸发且对粗物质进行快速色谱法(硅胶；30至100%EtOAc/己烷)纯化，得到呈无色油状的(S)-5-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)吡咯烷-2-酮(22.7g，74%收率)。LC-MS(M+H)+=354.58。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.69(宽单峰,1H),7.64-7.61(m,4H),7.50-7.42(m,6H),3.67-3.62(m,1H),3.58-3.51(m,2H),2.24-2.04(m,3H),1.87-1.81(m,1H),1.00(s,9H)。
Figure BDA00001874284601612
中间体20
(S)-2-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-5-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
历时10分钟将一缩二碳酸二叔丁酯(38.5g，177mmol)以固体形式分批加入至(S)-5-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)吡咯烷-2-酮(31.2g，88.3mmol)、Et3N(8.93g，88mmol)及DMAP(1.08g，8.83mmol)于CH2Cl2(200mL)中的溶液中且在24℃搅拌反应混合物18小时。在真空中除去大部分挥发性物质且通过硅胶色谱法(20%EtOAc/己烷至50%EtOAc/己烷)纯化粗物质，得到呈白色固体状的(S)-2-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-5-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(32.65g，82%收率)。LC-MS(M-Boc+H)+=354.58。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.61-7.59(m,2H),7.56-7.54(m,2H),7.50-7.38(m,6H),4.18(m,1H),3.90(dd,J＝10.4,3.6,1H),3.68(dd,J＝10.4,2.1,1H),2.68-2.58(m,1H),2.40-2.33(m,1H),2.22-2.12(m,1H),2.01-1.96(m,1H),1.35(s,9H),0.97(s,9H)。
中间体21
(S)-2-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯
将(S)-2-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-5-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(10.05g，22.16mmol)及甲苯(36mL)装入配备有温度计及氮气入口的三颈烧瓶中且降至-55℃冷却浴中。当混合物的内部温度达到-50℃时，历时30分钟逐滴加入三乙基硼氢化锂(23mL 1.0M/THF，23mmol)且搅拌混合物35分钟，同时保持内部温度在-50℃与-45℃之间。历时10分钟逐滴加入许尼希碱(16.5mL，94mmol)。接着加入一批DMAP(34mg，0.278mmol)，随后历时15分钟加入三氟乙酸酐(3.6mL，25.5mmol)，同时保持内部温度在-50℃与-45℃之间。10分钟后移除浴且搅拌反应混合物14小时，同时使其升至环境温度。用甲苯(15mL)稀释反应混合物，用冰水浴冷却且历时5分钟用水(55mL)缓慢处理。分离各相，用水(50mL，2次)洗涤有机层且在真空中浓缩。通过快速色谱法(硅胶；5%EtOAc/己烷)纯化粗物质，得到呈无色粘稠油状的(S)-2-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(7.947g，82%收率)。LC-MS:[M+Na]+=460.19。在以下HPLC条件下，Rt=2.41分钟：溶剂梯度为100%A:0%B至0%A:100%B(A=含0.1%TFA的1:9MeOH/水；B=含0.1%TFA的9:1MeOH/水))，历时2分钟且保持1分钟；在220nm检测；
Figure BDA00001874284601621
Luna 3.0×50mm S10柱。1H-NMR (400MHz,DMSO-d6)δppm 7.62-7.58(m,4H),7.49-7.40(m,6H),6.47(宽单峰,1H),5.07/5.01(重叠宽二重峰,1H),4.18(宽单峰,1H),3.89(宽单峰,0.5H),3.69(宽单峰,1.5H),2.90-2.58(宽多重峰,2H),1.40/1.26(重叠宽单峰,9H),0.98(s,9H)。
Figure BDA00001874284601622
中间体22
(3S)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
历时15分钟将二乙基锌(19mL约1.1M甲苯溶液，21mmol)逐滴加入至经冷却(-30℃)的(S)-2-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(3.94g，9.0mmol)的甲苯(27mL)溶液中。历时10分钟逐滴加入氯碘甲烷(经铜稳定；3.0mL，41mmol)并搅拌，同时保持浴温度在-25℃达1小时且在-25℃与-21℃之间保持18.5小时。使反应混合物向空气敞开且通过减慢加入50%饱和NaHCO3溶液(40mL)淬灭，接着由冷却浴移出并在环境温度搅拌20分钟。经滤纸过滤反应混合物且用50mL甲苯洗涤白色滤饼。分离滤液的有机相且用水(40mL，2次)洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(350g硅胶；用7%EtOAc/己烷装载样品；用7-20%EtOAc/己烷洗脱)纯化粗物质，得到呈顺式/反式异构体混合物形式的(3S)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(3.69g，90.7%)。[应注意：在此阶段未确定确切顺式/反式异构体比例]。LC-MS:[M+Na]+=474.14。在以下HPLC条件下，Rt=2.39分钟：溶剂梯度为100%A:0%B至0%A:100%B(A=含0.1%TFA的1:9MeOH/水；B=含0.1%TFA的9:1MeOH/水))，历时2分钟且保持1分钟；在220nm检测；
Figure BDA00001874284601631
Luna 3.0×50mm S10柱。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.62-7.60(m,4H),7.49-7.40(m,6H),3.77/3.67(重叠宽单峰,3H),3.11-3.07(m,1H),2.23(明显的宽单峰,1H),2.05-2.00(m,1H),1.56-1.50(m,1H),1.33(极宽单峰,9H),1.00(s,9H),0.80(m,1H),0.30(m,1H)。
Figure BDA00001874284601632
中间体23
(3S)-3-(羟基甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
历时5分钟将TBAF(7.27mL 1.0M THF溶液，7.27mmol)逐滴加入至(3S)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(顺式/反式异构体混合物)(3.13g，6.93mmol)的THF(30mL)溶液中且在环境温度搅拌混合物4.75小时。加入饱和NH4Cl溶液(5mL)后，在真空中除去大部分挥发性物质且使残余物分配于CH2Cl2(70mL)与50%饱和NH4Cl溶液(30mL)之间。用CH2Cl2(30mL)萃取水相且干燥(MgSO4)合并的有机相，过滤，在真空中浓缩，接着暴露于高真空过夜。使用快速色谱法(硅胶；40-50%EtOAc/己烷)纯化粗物质，得到呈顺式/反式异构体混合物形式且呈无色油状的(3S)-3-(羟基甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(1.39g，94%收率)。[应注意：在此阶段未确定确切顺式/反式异构体比例。]LC-MS(M+Na)+=236.20。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,δ=2.5ppm)δppm 4.70(t,J＝5.7,1H),3.62-3.56(m,1H),3.49-3.44(m,1H),3.33-3.27(m,1H),3.08-3.04(m,1H),2.07(宽多重峰,1H),1.93-1.87(m,1H),1.51-1.44(m,1H),1.40(s,9H),0.76-0.71(m,1H),0.26(m,1H)。
Figure BDA00001874284601641
中间体24
(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸
将NaIO4(6.46g，30.2mmol)的水(31mL)半溶液加入至(3S)-3-(羟基甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(顺式/反式异构体混合物)(2.15g，10.08mmol)于CH3CN(20mL)及CCl4(20mL)中的溶液中。立即加入RuCl3(0.044g，0.212mmol)且剧烈搅拌不均匀反应混合物75分钟。用水(60mL)稀释反应混合物且用CH2Cl2(50mL，3次)萃取。用1mL MeOH处理合并的有机相，使其静置约5分钟，接着经硅藻土
Figure BDA00001874284601642
填料过滤。用CH2Cl2(50mL)洗涤所述填料且在真空中浓缩滤液，得到浅木炭色固体。在加热下将粗物质溶解于EtOAc(约10mL)中且使其在环境温度静置，同时种晶。约15分钟到达冷却阶段，观察到快速晶体形成。约1小时后，加入己烷(约6mL)且冷冻混合物过夜(似乎无其它物质沉淀出)。过滤混合物且用经冰/水冷却的己烷/EtOAc(2:1比例；20mL)洗涤并在高真空干燥，得到第一批(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(灰白色晶体，1.222g)。在真空中浓缩母液且在加热下将残余物溶解于约3mL EtOAc中，使其在环境温度静置1小时，接着加入3mL己烷并储存于冷藏箱中约15小时。类似地得到第二批(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(灰色晶体，0.133g)，合并的收率为59%。LC-MS[M+Na]+=250.22。在以下HPLC条件下，Rt=1.48分钟：溶剂梯度为100%A:0%B至0%A:100%B(A=含0.1%TFA的1:9甲醇/水；B=含0.1%TFA的9:1甲醇/水))，历时3分钟；在220nm检测；
Figure BDA00001874284601643
Luna 3.0×50mm S10柱。第一批的熔点(分解)=147.5-149.5℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.46(s,1H),3.88(明显的宽单峰,1H),3.27(明显的宽单峰,1H；与水信号重叠),2.28(宽多重峰,1H),2.07(明显的宽单峰,1H),1.56(明显的单峰,1H),1.40/1.34(两个重叠单峰,9H),0.71(m,1H),0.45(m,1H)。13C-NMR(100.6MHz,DMSO-d6)172.96,172.60,154.45,153.68,78.74,59.88,59.58,36.91,31.97,31.17,27.77,27.52,14.86,14.53,13.69。C11H17NO4的分析计算值：C,58.13;H,7.54；N,6.16。实测值(第一批)：C,58.24;H,7.84；N,6.07。旋光度(10mg/mL，于CHCl3中)：第一批及第二批分别为[α]D=-216及-212。
中间体24的替代合成：
Figure BDA00001874284601651
(1R,3R,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-甲酰胺(.CH3SO3H)根据专利WO2004/052850中对于合成其立体异构体所述的操作制备。
Figure BDA00001874284601652
中间体24
(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸
将50g(225mmol)(1R,3R,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-甲酰胺(.CH3SO3H)及250mL异丙醇装入配备有氮气入口、顶置式搅拌器、热电偶及加热套的1L圆底烧瓶中。接着将252mL 23wt%NaOEt的EtOH溶液(2.68M，675mmol，3.0当量)装入所得淤浆中且在50℃搅拌约1小时。将12.2mL(675mmol，3当量)水装入混合物中且加热至60℃。使所得淤浆在60℃搅拌约18小时。使淤浆冷却至室温且装入250mL水及98.2g(450mmol，2.0当量)一缩二碳酸二叔丁酯。经真空蒸馏除去乙醇及异丙醇且使水性混合物冷却至0℃。用76mL(456mmol)6M HCl水溶液中和混合物，同时保持内部温度低于5℃。用500mL MTBE萃取产物且用100mL水洗涤富集有机层。经真空蒸馏将澄清溶液浓缩至150mL且将600mL庚烷装入所得淤浆中，同时保持内部温度高于45℃。历时约30分钟使淤浆冷却至室温且使其在室温搅拌约2小时。过滤产物，用250mL 4:1庚烷:MTBE洗涤并在70℃在真空干燥，产生40.5g(178mmol，79%收率，在205nm 99.8AP)(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),4.02-3.80(m,1H),3.45-3.15(m,1H),2.40-2.19(m,1H),2.19-2.0(m,1H),1.70-1.50(m,1H),1.50-1.20(m,9H),0.83-0.60(m,1H),0.33-0.55(m,1H)；13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ173.7,173.2,155.0,154.3,79.4,60.5,60.2,37.6,32.6,31.8,28.4,28.2,15.6,15.2,14.4；C11H18NO4(M+H；ESI+)HRMS的计算值：228.1236。实测值：228.1234。
方案6
Figure BDA00001874284601661
中间体25
(1R,3S,5R)-3-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将EDCI·HCl(2.65g，13.8mmol)加入至4-溴苯-1,2-二胺(2.35g，12.6mmol)、(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(3.00g，13.2mmol)及1-羟基苯并三唑(1.93g，12.6mmol)于CH2Cl2(80mL)中的混合物中且在环境条件下搅拌16小时。接着用CH2Cl2稀释混合物，用水洗涤，干燥(盐水；MgSO4)，过滤并在真空中浓缩，得到棕色泡沫状物。将乙酸(80mL)加入至所述泡沫状物中且在75℃(浴温度)加热混合物5小时。在真空中除去挥发性组分且将残余物溶解于EtOAc中，用饱和NaHCO3溶液洗涤且干燥(盐水；MgSO4)有机相，过滤并在真空中浓缩。对所得粗物质进行快速色谱法(硅胶；50-100%EtOAc/己烷)纯化，得到呈浅橙色泡沫状的(1R,3S,5R)-3-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(3.01g，7.96mmol，63.3%收率)，其无需进一步纯化即使用。反应也得到847mg较低纯度的相同产物。进一步通过制备性HPLC(C-18/30-100%CH3CN-水+0.1%NH4OAc)纯化所收集物质的等分试样，获得分析样品。LC-MS保留时间1.248分钟；C17H21BrN3O2的计算值：378.08，m/z实测值：380.05[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601671
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.67(宽单峰,1H),7.43(宽单峰,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,1H),4.75(宽单峰,1H),3.62(宽单峰,1H),2.50-2.57-2.31(m,1H),2.31(dt,J＝13.2,6.7Hz,1H),1.66-1.85(m,1H),1.45(宽单峰,3H),1.11(宽单峰,6H),0.87(dt,J＝8.6,5.8Hz,1H),0.66(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284601672
中间体26
(1R,3S,5R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
向含有(1R,3S,5R)-3-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(2.0g，5.3mmol)与联硼酸二频哪醇酯(2.69g，10.6mmol)于1,4-二噁烷(50mL)中的混合物的耐压烧瓶中加入乙酸钾(0.78g，7.9mmol)。在真空中使反应烧瓶脱气10分钟且用氮气净化。将Pd(Ph3P)4(305mg，0.264mmol)加入至反应混合物中，将烧瓶加盖且用油浴在85℃(浴温度)加热16小时。在真空中浓缩反应混合物且使粗物质分配于CH2Cl2(150mL)与水性介质(50mL水+10mL饱和NaHCO3溶液)之间。用CH2Cl2萃取水层且干燥(Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用20-100%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈白色泡沫状的(1R,3S,5R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(1.74g，77%收率)。进一步通过制备性HPLC(C-18/30-100%CH3CN-水+0.1%NH4OAc)纯化所收集物质的等分试样。LC-MS保留时间1.78分钟；C23H32BN32的计算值：425.25，m/z实测值：426.21[M+H]+。在配备有Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mmol乙酸铵且溶剂B为95%乙腈/5%水/10mmol乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601681
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm7.94(s,1H),7.61(d,J＝7.9Hz,1H),7.41-7.56(m,1H),4.83(宽单峰,1H),3.64(d,J＝1.2Hz,1H),2.51-2.70(m,1H),2.33(dt,J＝13.4,6.6Hz,1H),1.67-1.84(m,J＝8.5,6.10,5.8,5.8Hz,1H),1.39-1.59(宽单峰,3H),1.37(s,12H),1.10(宽单峰,6H),0.88(dt,J＝8.2,5.8Hz,1H),0.66(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284601682
中间体27
(1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯)
向(1R,3S,5R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(1.50g，3.53mmol)及2,6-二溴萘(403mg，1.41mmol)于1,2-二甲氧基乙烷(21.7mL)及水(6.50mL)中的混合物中加入NaHCO3(356mg，4.23mmol)。在真空中使反应混合物脱气10分钟且用氮气冲洗。加入Pd(Ph3P)4(82mg，0.071mmol)且用油浴在100℃加热反应混合物16小时，接着在真空中除去挥发性组分。使残余物分配于CH2Cl2与水(30mL)之间且用CH2Cl2萃取水相数次。用盐水洗涤合并的有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用0-70%乙酸乙酯/CH2Cl2洗脱)，得到呈黄色固体状的(1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯)(377mg)。LC-MS保留时间1.49分钟；C44H46N6O4的计算值：722.36，m/z实测值：723.26[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601683
Platform确定MS数据。1HNMR(500MHz,MeOD)δppm 8.26(s,2H),8.12(d,J＝8.5Hz,2H),8.09(s,2H),8.00(m,J＝8.6Hz,2H),7.93(m,J＝8.6Hz,2H),7.86(d,J＝8.6Hz,2H),5.01(宽单峰,2H),3.68(宽单峰,2H),2.76(dd,J＝13.3,9.3Hz,2H),2.42-2.54(m,2H),1.87(宽单峰,2H),1.49(宽单峰,9H),1.19(宽单峰,9H),0.94(dt,J＝8.3,6.1Hz,2H),0.79(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284601691
中间体28
(1R,3S,5R)-3-(6-(6-溴萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
以上反应也得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(6-(6-溴萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(418mg)。LC-MS保留时间1.90分钟；C27H26BrN3O2的计算值：503.12，m/z实测值：506.05[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601692
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.20(s,1H),8.12(s,1H),8.05(s,1H),7.93-8.00(m,2H),7.86-7.93(m,2H),7.84(d,J＝8.6Hz,1H),7.63(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),5.00(宽单峰,1H),3.68(宽单峰,1H),2.75(dd,J＝13.4,9.2Hz,1H),2.41-2.54(m,1H),1.87(宽单峰,1H),1.49(宽单峰,5H),1.17(宽单峰,4H),0.87-0.98(m,1H),0.79(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284601693
中间体29
2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘
在环境条件下将(1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯)(360mg，0.498mmol)与TFA(2mL)于CH2Cl2(10mL)中的混合物搅拌3小时。在真空中除去挥发性组分且将所得物质载入至MCX柱上，用甲醇淋洗，用2.0M NH3/甲醇洗脱并浓缩，得到呈黄色固体状的2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘(253mg)。LC-MS保留时间1.07分钟；C34H30N6的计算值：522.25，m/z实测值：523.19[M+H]+。在配备有WatersSunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601701
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.17(s,2H),8.06(d,J＝8.2Hz,2H),8.00(s,2H),7.88(d,J＝8.6Hz,2H),7.71-7.81(m,4H),4.84(dd,J＝10.8,7.5Hz,2H),3.47-3.53(m,2H),2.80(dd,J＝12.8,7.6Hz,2H),2.54-2.63(m,2H),2.04-2.11(m,2H),1.20-1.27(m,2H),1.02(q,J＝7.7Hz,2H)。
方案7
Figure BDA00001874284601702
Figure BDA00001874284601711
中间体30与中间体31的混合物
中间体30：(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯二三氟乙酸盐
中间体31：(S)-2-(5-(4-(7-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯二三氟乙酸盐
向(S)-2-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐与(S)-2-(6-(7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐的混合物(190mg)、(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯(专利申请：WO 2008/021928、WO 2008/021936及WO2008/021927)(213mg，0.499mmol)于1,2-二甲氧基乙烷(10.0mL)及水(2.0mL)中的溶液中加入NaHCO3(140mg，1.663mmol)。在真空中使反应混合物脱气5分钟且用氮气冲洗。加入Pd(Ph3P)4(19mg，0.017mmol)且将耐压烧瓶加盖并用油浴在85℃加热16小时。在真空中除去挥发性组分且使残余物分配于乙酸乙酯与水之间。分离各层且用乙酸乙酯萃取水相数次。干燥(Na2SO4)合并的有机相，过滤并在真空中浓缩。用快速色谱法纯化所得物质(将样品干法载入至硅胶上且用0-5%甲醇/CH2Cl2洗脱)，得到部分纯化产物。进一步通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化残余物，得到(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯的三氟乙酸盐与(S)-2-(5-(4-(7-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯的三氟乙酸盐的混合物(381mg)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间1.54分钟；C47H46N6O4的计算值：758.36，m/z实测值：759.37[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5uC184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。
Figure BDA00001874284601721
中间体32与中间体33的混合物
中间体32：(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯
中间体33：(S)-2-(5-(4-(7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯
在环境条件下将(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯的三氟乙酸盐与(S)-2-(5-(4-(7-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯的三氟乙酸盐的混合物(381mg)及TFA(2mL)于CH2Cl2(10mL)中的溶液搅拌4小时。在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(0至50%水/乙腈/NH4OAc)纯化粗物质，得到呈黄色油状的(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯与(S)-2-(5-(4-(7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯的混合物(70mg，21%收率)。LC-MS保留时间2.87分钟；C42H38N6O2的计算值：658.31，m/z实测值：659.47[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284601722
Luna10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、80%溶剂A/20%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mmol乙酸且溶剂B为95%乙腈/5%水/10mmol NH4OAc。1H NMR(化合物的混合物,500MHz,MeOD)δppm 8.07-8.24(m,4H),7.91-8.03(m,6H),7.73-7.89(m,12H),7.66-7.73(m,4H),7.27-7.46(m,6H),7.09-7.18(m,4H),6.97-7.04(m,2H),5.01-5.21(m,5H),4.83-5.01(m,2H),3.72-3.82(m,2H),3.53-3.65(m,2H),3.42-3.52(m,2H),3.35-3.42(m,4H),2.48-2.62(m,2H),2.28-2.47(m,4H),2.04-2.24(m,8H)。
中间体34与中间体35
中间体34：2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(6-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑四-三氟乙酸盐
中间体35：2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑四-三氟乙酸盐
在环境温度向(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯与(S)-2-(5-(4-(7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸苄酯的混合物(70mg，0.057mmol)及碳酸钾(K2CO3)于甲醇(5mL)中的溶液中加入钯/炭(10%，11mg)于甲醇(2mL)中的淤浆。真空净化反应器且用氢气回填。在氢气囊下搅拌反应混合物16小时。在真空经硅藻土填料过滤混合物且在真空中蒸发滤液。通过反相HPLC(0至50%水/乙腈/TFA)纯化粗物质，得到呈白色固体状的2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(6-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(50mg)及呈白色固体状的2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(24mg)。
中间体34的分析数据：LC-MS保留时间1.06分钟；C34H32N6的计算值：524.27，m/z实测值：525.26[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、80%溶剂A/20%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.19(d,J＝10.4Hz,2H),8.02-8.10(m,3H),7.84-7.96(m,7H),7.77-7.83(m,2H),5.14(t,J＝7.8Hz,1H),5.06-5.11(m,1H),3.52-3.67(m,4H),2.61-2.74(m,2H),2.43-2.56(m,2H),2.30-2.42(m,2H),2.18-2.30(m,2H)。
中间体35的分析数据：LC-MS保留时间1.13分钟；C34H32N6的计算值：524.27，m/z实测值：525.24[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、80%溶剂A/20%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.27(d,J＝7.0Hz,2H),7.99-8.06(m,3H),7.90-7.96(m,4H),7.87(td,J＝8.2,1.7Hz,2H),7.76-7.85(m,3H),5.13(t,J＝7.8Hz,1H),5.03-5.08(m,1H),3.51-3.67(m,4H),2.61-2.74(m,2H),2.42-2.54(m,2H),2.20-2.40(m,4H)。
方案8
Figure BDA00001874284601741
中间体36
(S)-2-(6-溴-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将HATU(3.64g，9.57mmol)加入至经搅拌的5-溴吡啶-2,3-二胺(1.64g，8.70mmol)及(S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸(1.87g，8.70mmol)于DMF(50mL)及DIPEA(3.19mL，18.3mmol)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物3天，用水(400mL)稀释且用EtOAc(150mL)萃取。用盐水(50mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过快速色谱法(110g SiO2，1-4%MeOH/DCM)部分纯化粗物质，得到3.36g固化泡沫状物。将物质溶解于AcOH(35.0mL)中且在100℃加热8小时。使反应混合物冷却至室温，浓缩且通过快速色谱法(用DCM装载，80g SiO2，20-40%EtOAc/己烷)纯化，得到呈黄色固体状的(S)-2-(6-溴-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.73g)。LC-MS保留时间1.33分钟；m/z 365,367(1:1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284601751
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601752
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.40(宽单峰,1H),8.09(宽单峰,1H),5.12-4.96(m,1H),3.77-3.67(m,1H),3.62-3.51(m,1H),2.56-2.38(m,1H),2.15-1.90(m,3H),1.46(s,3.5H),1.16(s,5.5H)。
Figure BDA00001874284601753
中间体37与中间体38的混合物
中间体37：(S)-2-(6-溴-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
中间体38：(S)-2-(6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将60%NaH分散液(0.120g，3.00mmol)加入至经搅拌的(S)-2-(6-溴-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.7mmol)的DMF(25mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物1.5小时。加入SEM-Cl(0.483mL，2.72mmol)且搅拌反应混合物16小时。用水(约30mL)及EtOAc(约35mL)稀释反应混合物，分离各层且用盐水(30mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过快速色谱法(80g SiO2，20-30%EtOAc/己烷)纯化残余粗黄色油状物，得到呈黄色油状的(S)-2-(6-溴-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯与(S)-2-(6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的混合物(838mg)。混合物无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间2.54分钟；m/z497,499(1∶1)(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601761
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284601763
中间体39与中间体40
中间体39：(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
中间体40：(S)-2-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在微波小瓶中，将2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘(57mg，0.150mmol)、(S)-2-(6-溴-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯与(S)-2-(6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的混合物(112mg)、碳酸铯(147mg，0.450mmol)及二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(12.3mg，0.030mmol)溶解于THF(3mL)及水(0.3mL)中。再加入1.5mL THF且用鼓泡氮气向反应混合物充气直至蒸发掉约2mL。向澄清溶液中加入乙酸钯(II)(3.37mg，0.015mmol)。用氮气冲洗所述小瓶，密封，接着用微波辐射在120℃加热30分钟。用EtOAc(约3mL)稀释反应混合物且用水(2mL)及盐水(2mL)洗涤。干燥(MgSO4)反应混合物，过滤并浓缩成黄色油状物，通过快速色谱法(12g SiO2，25-75%EtOAc/己烷)纯化，得到呈澄清无色油状的(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(74mg)(SEM区域异构体的混合物)及呈无色油状的(S)-2-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(32mg)(SEM区域异构体的混合物)。两者均无需进一步纯化即使用。
中间体39的分析数据：LC-MS保留时间3.42分钟；m/z 961.9(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601771
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601772
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)(SEM区域异构体的混合物)δppm 8.84-8.75(m,2H),8.39-8.31(m,2H),8.26-8.18(m,2H),8.11(宽单峰,2H),7.92-7.84(m,2H),5.94-5.83(m,3H),5.79(d,J＝11.0Hz,1H),5.34-5.25(m,2H),3.86-3.57(m,8H),2.61-2.39(m,2H),2.34-1.99(m,6H),1.45(s,8H),1.17(s,10H),1.10-0.87(m,4H),-0.02(s,18H)。
中间体40的分析数据：LC-MS保留时间3.15分钟；m/z 671.5(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601773
Luna 10u C183.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601774
Platform确定MS数据。(SEM区域异构体的混合物)δppm 8.82-8.75(m,1H),8.39-8.29(m,2H),8.21-8.15(m,1H),8.07-8.01(m,1H),8.11(宽单峰,2H),7.98-7.93(m,1H),7.89-7.80(m,2H),5.94-5.85(m,1.5H),5.79(d,J＝11.3Hz,0.5H),5.33-5.24(m,1H),3.85-3.56(m,4H),2.62-2.39(m,1H),2.33-1.99(m,1H),1.49-0.87(m,23H),-0.02(s,9H)。
Figure BDA00001874284601781
中间体41
2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)萘
将4M盐酸(2.0mL，8.0mmol)的二噁烷溶液加入至经搅拌的(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(萘-2,6-二基)二(3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(74mg，0.077mmol)(SEM区域异构体的混合物)的甲醇(1mL)溶液中。在室温搅拌反应混合物16小时，接着浓缩干燥，得到呈黄色固体状的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)萘(51.1mg)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间0.83分钟；m/z 501.13(MH+)。在配备有Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%水/90%乙腈/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601782
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,D2O)δppm 8.76(s,2H),8.54(s,2H),8.07-7.97(m,4H),7.86-7.78(m,2H),5.26-5.16(m,2H),3.98-3.65(m,8H),2.79-2.63(m,2H),2.46-2.25(m,6H)。
方案9
Figure BDA00001874284601791
中间体42
(S)-2-(6-溴-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将HATU(5.05g，13.3mmol)加入至经搅拌的5-溴吡嗪-2,3-二胺(2.28g，12.1mmol)及(S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸(2.60g，12.0mmol)于DMF(50mL)及DIPEA(4.42mL，25.3mmol)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物3天，接着在90℃搅拌1天。用水(350mL)稀释反应混合物且用EtOAc(200mL)萃取。用盐水(100mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过快速色谱法(110g SiO2，1-4%MeOH/DCM)部分纯化粗物质，得到1.9g固化泡沫状物。将物质溶解于AcOH(35.0mL)中且在95℃加热8小时。使反应混合物冷却至室温，浓缩并通过快速色谱法(用DCM装载，80g SiO2，20-30%EtOAc/己烷)纯化，得到呈黄色固化泡沫状的(S)-2-(6-溴-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(760mg，2.06mmol，17%收率)。LC-MS保留时间1.28分钟；m/z 366,368(1:1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284601792
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601801
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.50-8.43(m,1H),5.11-4.99(m,1H),3.77-3.68(m,1H),3.62-3.51(m,1H),2.57-2.40(m,1H),2.19-1.95(m,3H),1.46(s,3.5H),1.17(s,5.5H)。
Figure BDA00001874284601802
中间体43与中间体44
中间体43：(S)-2-(5-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
中间体44：(S)-2-(6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将60%NaH分散液(75mg，1.9mmol)加入至经搅拌的(S)-2-(6-溴-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(627mg，1.70mmol)的DMF(15mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物1.5小时。接着加入SEM-Cl(0.30mL，1.7mmol)且搅拌反应混合物过夜。用水(约30mL)及EtOAc(约35mL)稀释反应混合物，分离各层且用盐水(30mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过快速色谱法(40g SiO2，20-30%EtOAc/己烷)纯化粗黄色油状物，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(5-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(421mg)及呈澄清无色油状的(S)-2-(6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(345mg)。SEM基团的绝对区域化学未明确地确定，名称(及结构)在这些中间体中可交换。
中间体43的分析数据：LC-MS保留时间2.43分钟；m/z 496,498(1:1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284601803
Luna 10u C183.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601811
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.52(s,0.5H),8.49(s,0.5H),5.90-5.72(m,2H),5.32-5.25(m,1H),3.82-3.54(m 4H),2.59-2.41(m,1H),2.32-1.98(m,3H),1.43(s,4.5H),1.15(s,4.5H),1.07-0.85(m,2H),-0.02(s,9H)。
中间体44的分析数据：LC-MS保留时间2.41分钟；m/z 496,498(1:1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284601812
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601813
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.61(s,0.5H),8.58(s,0.5H),5.88-5.71(m,2H),5.28(dd,J＝8.5,4.5Hz,1H),3.82-3.54(m 4H),2.59-2.41(m,1H),2.32-1.98(m,3H),1.43(s,4.5H),1.15(s,4.5H),1.09-0.85(m,2H),-0.02(s,9H)。
Figure BDA00001874284601814
中间体45与中间体46
中间体45：(2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,6-二基)二(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
中间体46：(S)-2-(5-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在微波小瓶中，将2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘(149mg，0.393mmol)、(S)-2-(5-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(294mg，0.590mmol)(或SEM区域异构体)、碳酸铯(384mg，1.18mmol)及二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(32.3mg，0.079mmol)溶解于THF(4mL)及水(0.4mL)中。再加入1.5mLTHF且用鼓泡氮气向反应混合物充气直至蒸发掉1.5mL。向澄清溶液中加入乙酸钯(II)(8.83mg，0.039mmol)。用氮气冲洗所述小瓶，密封，接着用微波辐射在120℃加热30分钟。用EtOAc(约3mL)稀释反应混合物且用水(2mL)及盐水(2mL)洗涤。干燥(MgSO4)反应混合物，过滤并浓缩成黄色油状物，通过快速色谱法(12g SiO2，25-75%EtOAc/己烷)纯化，得到呈黄色固化泡沫状的(2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,6-二基)二(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(或SEM区域异构体)(210mg)及呈无色油状的(S)-2-(5-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(或SEM区域异构体)(53.5mg)。
中间体45的分析数据：LC-MS保留时间3.27分钟；m/z 963.89(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601821
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601822
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)(SEM区域异构体的混合物)δppm 9.29-9.15(m 2H),8.79-8.66(m,2H),8.43-8.29(m,2H),8.20-7.98(m,2H),6.03-5.84(m,4H),5.34(dd,J＝8.3,4.3Hz,2H),3.87-3.70(m,6H),3.68-3.58(m,2H),2.63-2.43(m,2H),2.36-1.14(m,4H),2.14-1.99(m,2H),1.46(s,8H),1.17(s,10H),1.35-0.85(m,4H),-0.02(s,18H)。
中间体46的分析数据：LC-MS保留时间3.07分钟；m/z 672.52(MH+)。在配备有Luna 10u C183.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601824
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284601831
中间体47
2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)萘
将4M盐酸(6.0mL，24mmol)的二噁烷溶液加入至经搅拌的(2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,6-二基)二(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(210mg，0.218mmol)(SEM的绝对区域化学未确定)的甲醇(3mL)溶液中。在室温搅拌反应混合物16小时并浓缩干燥，得到呈橙色固体状的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)萘(143mg)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间0.90分钟；m/z 503.21(MH+)。在配备有Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%水/90%乙腈/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601832
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,D2O)δppm 8.59(s,2H),7.94(s,2H),7.85(d,J＝8.5Hz,2H),7.76(d,J＝8.5Hz,2H),5.23-5.16(m,2H),3.98-3.66(m,8H),2.78-2.64(m,2H),2.47-2.28(m,6H)。
方案10
Figure BDA00001874284601833
Figure BDA00001874284601841
中间体48
(2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
在室温向2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘(885mg，1.78mmol)、DMAP(10.8mg，0.089mmol)及三乙胺(1.2mL，8.9mmol)于DMF(30mL)中的溶液中加入一份一缩二碳酸二叔丁酯(387mg，1.78mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜且在
Figure BDA00001874284601842
上纯化(干法载入至80g硅胶柱上且用含0至50%DCM的MeOH的梯度洗脱)，得到呈橙色固体状的(2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(500mg，0.835mmol，47.1%收率)。LC-MS保留时间1.207分钟；m/z 599.25[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601843
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.27(d,J＝3.1Hz,1H),8.23(s,1H),8.04-8.17(m,4H),8.03(s,1H),7.88-7.97(m,3H),7.75-7.83(m,2H),5.28-5.35(m,1H),5.11(t,J＝7.8Hz,1H),3.75-3.83(m,1H),3.60-3.72(m,2H),3.51-3.59(m,1H),2.60-2.74(m,2H),2.40-2.50(m,1H),2.21-2.38(m,3H),2.10-2.20(m,2H),1.52(s,4H),1.25(s,4H)。
Figure BDA00001874284601844
中间体49
(2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
向(2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(400mg，0.668mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(176mg，1.00mmol)及DIEA(0.583mL，3.34mmol)于DMF(10mL)中的溶液中加入HATU(381mg，1.00mmol)。在室温搅拌反应混合物2小时，接着通过制备性HPLC纯化(使用Waters Sunfire C18柱30×150mm 5u，用0至50%ACN-水+0.1%TFA的梯度洗脱)，得到呈黄色固体状的(2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(445mg)。LC-MS保留时间1.317分钟；m/z 756.28[M+H]+。在配备有WatersSunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601851
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284601852
中间体50
((1S)-2-甲基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯
在室温向(2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(445mg)于DCM(10mL)中的溶液中加入TFA(1mL，13mmol)。在室温搅拌混合物3小时，浓缩，且用MeOH稀释残余物，载入至Strata XCMCX柱上且用甲醇洗涤。通过用2M氨水的甲醇溶液洗脱，由所述柱释放化合物，接着减压蒸发，产生呈橙色固体状的((1S)-2-甲基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯(275mg)。LC-MS保留时间1.120分钟；m/z 656.27[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601861
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.26(宽单峰,1H),8.22(宽单峰,1H),8.08-8.16(m,3H),8.04-8.08(m,1H),8.03(s,1H),7.86-7.96(m,3H),7.73-7.82(m,2H),5.88-5.93(m,0.1H),5.37-5.44(m,0.9H),5.07-5.15(m,1H),4.28-4.33(m,1H),4.12-4.19(m,0.8H),4.06-4.10(m,0.2H),3.94-4.02(m,1H),3.59-3.75(m,4H),3.50-3.59(m,1H),2.63-2.74(m,2H),2.41-2.47(m,1H),2.23-2.40(m,5H),2.06-2.16(m,1H),1.00-1.04(m,0.4H),0.94-1.00(m,3H),0.88-0.93(m,2.6H)。
方案11
Figure BDA00001874284601862
中间体51与中间体52
中间体51：(S)-2-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
中间体52：(2S,2'S)-2,2'-(4,4'-(萘-2,6-二基)二(1H-咪唑-4,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘(2.00g，5.26mmol)、(S)-2-(5-碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2.10g，5.79mmol)及Pd(Ph3P)4(0.058g，0.05mmol)于DME(47.8mL)及水(4.8mL)中的溶液装入配备有磁性搅拌棒的100mL压力容器中。在真空使溶液脱气5分钟且用氮气回填反应器。密封所述容器且在120℃加热反应混合物过夜。使反应混合物冷却至室温且除去挥发性物质。使残余物分配于水与EtOAc之间且再用EtOAc萃取水层。干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤并浓缩。用
Figure BDA00001874284601871
纯化粗产物(干法载入至90g硅胶柱上且用含0至30%EtOAc的DCM的梯度洗脱)且再用纯化(干法载入至80g硅胶柱上且用含0至50%EtOAc的DCM的梯度洗脱)，得到呈黄色固体状的(S)-2-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(949mg)。所述物质(受(2S,2'S)-2,2'-(4,4'-(萘-2,6-二基)二(1H-咪唑-4,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯污染)无需进一步纯化即用于下一步骤中。LC-MS保留时间1.760分钟；m/z 490.21[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601873
Platform确定MS数据。
来自下一反应的制备性HPLC得到呈黄色固体状的(2S,2'S)-2,2'-(4,4'-(萘-2,6-二基)二(1H-咪唑-4,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(92mg，0.111mmol，11%收率)。LC-MS保留时间1.113分钟；m/z 599.24[M+H]+。在配备有WatersSunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601874
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.35(宽单峰,2H),8.13(宽单峰,2H),8.08(宽单峰,1H),8.00(宽单峰,1H),7.95(m,2H),5.18(宽单峰,2H),3.68-3.78(m,2H),3.62(宽单峰,2H),2.51-2.68(m,2H),2.21(宽单峰,2H),2.06-2.15(m,4H),1.50(宽单峰,9H),1.31(宽单峰,9H)。
Figure BDA00001874284601881
中间体53
(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将(S)-2-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.02mmol)、(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(601mg，1.53mmol)及Pd(Ph3P)4(58mg，0.05mmol)于DME(10mL)及水(1.0mL)中的溶液装入配备有磁性搅拌棒的100mL压力容器中。在真空使溶液脱气5分钟且用氮气回填反应器。在120℃加热混合物8小时，再加入Pd(Ph3P)4(57.8mg，0.05mmol)，使混合物脱气并在130℃搅拌过夜。使反应混合物冷却至室温且在真空除去挥发性物质。使残余物分配于水与EtOAc之间且再用EtOAc萃取水层。干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤并浓缩。在上纯化粗产物(干法载入至90g硅胶柱上且用含5至100%EtOAc的DCM的梯度洗脱)，接着再通过制备性HPLC纯化(使用Waters Sunfire C18柱30×100mm 5u，用MeOH-水+0.1%TFA洗脱)，得到(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(50mg)。LC-MS保留时间1.278分钟；m/z 675.70[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5uC184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR (500MHz,MeOD)δppm 8.31(d,J＝15.9Hz,2H),8.14-8.18(m,1H),8.10(d,J＝8.85Hz,1H),8.05(s,0.6H),7.96-8.03(m,4H),7.85-7.94(m,3.4H),5.11-5.23(m,2H),3.69-3.77(m,2H),3.62(宽单峰,2H),2.51-2.67(m,2H),2.16-2.26(m,2H),2.05-2.16(m,4H),1.51(s,9H),1.32(s,9H)。
中间体54
2-((2S)-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑
向(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(50mg)于DCM(10mL)中的溶液中加入一份TFA(2.0mL，26mmol)。在室温搅拌混合物2小时。在真空浓缩反应混合物，得到呈橙色固体状的2-((S)-吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑的三氟乙酸盐(51.5mg)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间0.978分钟；m/z 475.19[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601892
Platform确定MS数据。使用Waters Sunfire C18柱4.6×50mm 5u的HPLC-MS(TFA)78457-087显示反应完成，在RT=0.978分钟处发现峰。MH+=475.19。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.34(s,1H),8.20(s,1H),8.03(dd,J＝14.2,8.7Hz,2H),7.84-7.96(m,7H),7.79-7.84(m,1H,)4.99-5.11(m,2H),3.48-3.63(m,4H),2.57-2.70(m,2H),2.41-2.55(m,2H),2.29-2.41(m,2H),2.15-2.29(m,2H)。
Figure BDA00001874284601893
中间体55
4,4'-(2,6-萘二基)二(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑)
在室温向(2S,2'S)-2,2'-(4,4'-(萘-2,6-二基)二(1H-咪唑-4,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(82mg)于DCM(2mL)中的溶液中加入一份TFA(2.0mL，26mmol)。在室温搅拌混合物3小时，通过制备性HPLC(WatersSunfire C18柱30×100mm 5u，用5至90%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化且再通过制备性HPLC(
Figure BDA00001874284601901
Luna C18柱30×100mm 10u，用10至90%甲醇-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化，得到呈棕褐色固体状的4,4'-(2,6-萘二基)二(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑)的三氟乙酸盐(68mg)。LC-MS保留时间0.978分钟；m/z 399.18[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5uC184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601902
Platform确定MS数据。1H NMR (500MHz,MeOD)δppm 8.31(s,2H),7.95-8.00(m,2H),7.91-7.95(m,2H),7.85(s,2H),5.03(t,J＝8.2Hz,2H),3.49-3.62(m,4H),2.59-2.67(m,2H),2.42-2.52(m,2H),2.31-2.40(m,2H),2.17-2.28(m,2H)。
方案12
中间体56
(S)-2-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将(S)-2-(5-碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(750mg，2.07mmol)及碘化亚铜(I)(79mg，0.41mmol)溶解于DMF(20mL)及三乙胺(1.439mL，10.33mmol)中。真空冲洗反应溶液10分钟(抽气器真空，用氮气冲洗)，接着加入乙炔基三甲基甲硅烷(1.2mL，8.3mmol)，最后加入Pd(PPh3)4(119mg，0.103mmol)。用氮气冲洗烧瓶，密封且在50℃加热过夜。浓缩反应混合物成粗黑色焦油状物，溶解于DCM中且经
Figure BDA00001874284601911
Horizon(80g SiO2，20-40%EtOAc/己烷)纯化，得到呈黄色固体状的(S)-2-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(546mg，1.64mmol，79%收率)。该物质无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间1.393分钟；m/z 332.33(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284601912
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601913
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm7.19-7.13(m,1H),4.92-4.85(m,1H),3.43-3.31(m,2H),3.04-2.83(m,1H),2.20-1.88(m,3H),1.51(s,3H),1.49(s,6H),0.25(s,3H),0.23(s,6H)。
Figure BDA00001874284601914
中间体57
(S)-2-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将(S)-2-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(537mg，1.61mmol)溶解于MeOH(20mL)中，接着加入碳酸钾(22mg，0.16mmol)且在室温搅拌反应混合物3小时。浓缩反应混合物，溶解于二氯甲烷中，载入至SiO2柱上且通过
Figure BDA00001874284601915
Horizon(30-50%EtOAc/己烷)纯化，得到呈灰白色固体状的(S)-2-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(346mg，1.32mmol，82%收率)。LC-MS保留时间0.878分钟；m/z 260.35(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284601916
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601921
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm7.21-7.17(m,1H),4.92-4.87(m,1H),3.43-3.30(m,2H),3.05(s,1H),3.03-2.85(m,1H),2.20-1.88(m,3H),1.60-1.45(m,9H)。
Figure BDA00001874284601922
中间体58
(2S)-2-(4-((6-((2-((2S)-1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
用DMF(10mL)及三乙胺(0.54mL，3.9mmol)将(S)-2-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(340mg，1.30mmol)、2,6-二溴萘(744mg，2.60mmol)及碘化亚铜(I)(12.39mg，0.065mmol)制成淤浆。用氮气真空冲洗溶液(5次)，用Pd(PPh3)4(75mg，0.065mmol)处理，接着用氮气真空冲洗(2次)。在室温在氮气下搅拌浑浊黄色溶液3小时。浓缩反应混合物成黄橙色半固体，用DMF/MeOH(约1:1)制成淤浆，过滤且以5次注射通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水，15-100%)纯化。合并含有所需产物的馏分并浓缩，得到呈浅黄色固体状的(2S)-2-(4-((6-((2-((2S)-1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(70mg，0.11mmol，18%收率)。LC-MS保留时间1.448分钟；m/z 647.45(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284601923
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601924
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm10.70(宽单峰,2H),7.98(s,2H),7.74(d,J＝8.3Hz,2H),7.57(d,J＝8.3Hz,2H),7.30-7.25(m,2H,在溶剂峰下),4.95(dd,J＝7.3,3.3Hz,2H),3.46-3.37(m,4H),3.08-2.91(m,2H),2.24-2.08(m,4H),2.03-1.92(m,2H),1.51(s,18H)。
Figure BDA00001874284601931
中间体59
4,4'-(2,6-萘二基二-2,1-乙炔二基)二(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑)
将(2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,6-二基二(乙炔-2,1-二基))二(1H-咪唑-5,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(32mg，0.049mmol)溶解于二氯乙烷(2mL)中，接着加入TFA(1mL，13mmol)。在室温搅拌溶液1小时。将反应混合物浓缩干燥，得到呈棕褐色固体状的4,4'-(2,6-萘二基二-2,1-乙炔二基)二(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑)(41.6mg)。1H NMR(500MHz,CD3OD)δppm8.05(s,2H),7.89(d,J＝8.3Hz,2H),7.59(d,J＝8.6Hz,2H),7.52(s,2H),4.89-4.84(m,2H),3.56-3.44(m,4H),2.59-2.50(m,2H),2.42-2.24(m,4H),2.26-2.14(m,2H)。
方案13
Figure BDA00001874284601932
中间体60
(1R,5R)-3-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将许尼希碱(7.69mL，44.0mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(12.23g，44.0mmol)及(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(10g，44mmol)于无水MeCN(400mL)中的溶液中。在室温搅拌混合物16小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤并浓缩。在压力容器中，将残余物吸收于二甲苯(400mL)中且加入乙酸铵(33.9g，440mmol)。密封容器并在140℃加热2小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液(pH=9)、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将呈红橙色泡沫状的粗产物溶解于二氯甲烷中且置于300g Thompson硅胶柱上(用20%B至100%B洗脱，4000mL，其中溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到呈金棕色泡沫状的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(16.67g，39.1mmol，88.8%收率)。LC-MS保留时间1.762分钟；m/z 403.94[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284601941
Luna S10 3.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm7.62(宽二重峰,J＝8.6Hz,2H),7.50(宽二重峰,J＝8.6Hz,2H),7.37(s,1H),4.66(宽单峰,1H),3.58(宽单峰,1H),2.56-2.47(m,1H),2.36-2.27(m,1H),1.75-1.67(m,1H),0.97(宽单峰,9H),0.88-0.81(m,1H),0.64-0.57(m,1H)。
方案14
Figure BDA00001874284601943
中间体61
(1R,3S,5R)-3-(羟基甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在0℃历时30分钟向(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(9.85g，43.3mmol)于THF(200mL)中的溶液中逐滴加入甲硼烷-甲基硫化物复合物(282mL，563mmol)。移除冰浴，搅拌混合物1小时，接着回流加热2小时。使混合物冷却至0℃，用甲醇(约200mL)缓慢淬灭且在真空浓缩。将残余物溶解于DCM中且用水(乳液)、1N HCl、饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤。经Na2SO4干燥有机层，过滤并浓缩，得到呈无色油状的(1R,3S,5R)-3-(羟基甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(8.43g，39.5mmol，91%收率)。LC-MS保留时间1.398分钟；m/z 236.20[M+Na]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%甲醇/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601951
Platform确定MS数据。1HNMR(500MHz,MeOD)δppm 3.72-3.79(m,1H),3.52-3.64(m,3H),3.15-3.24(m,1H),2.00-2.08(m,1H),1.62-1.72(m,1H),1.54-1.62(m,1H),1.45-1.51(m,9H),0.84(宽单峰,1H),0.36(td,J＝5.0,2.4Hz,1H)。
Figure BDA00001874284601952
中间体62
(1R,3S,5R)-3-甲酰基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在0℃向(1R,3S,5R)-3-(羟基甲基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(4.85g，22.74mmol)于DCM(125mL)中的溶液中加入Dess-Martin高碘烷(11.57g，27.3mmol)。使反应混合物温热至室温且搅拌3小时。将反应混合物倒入饱和NaHCO3水溶液中，接着加入约20g Na2S2O3并搅拌1小时。分离各层且用DCM萃取水层数次。经Na2SO4干燥合并的有机萃取物并在真空中蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284601953
(用0至40%EtOAc/己烷的梯度洗脱)纯化残余物，得到呈无色油状的(1R,3S,5R)-3-甲酰基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(4.47g，21.2mmol，93%收率)。LC-MS保留时间0.813分钟；m/z未离子化(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C18 4.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601954
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm9.48(宽单峰,1H),3.67-3.97(m,1H),3.33-3.59(m,1H),2.10-2.31(m,2H),1.56-1.67(m,1H),1.47(宽单峰,9H),0.80(宽单峰,1H),0.55(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284601961
中间体63
(1R,3S,5R)-3-(1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在0℃将氢氧化铵(16.40mL，421mmol)逐滴加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-甲酰基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(4.4g)的甲醇(15mL)溶液中。使反应混合物温热至室温且搅拌45分钟。接着逐滴加入40%乙二醛水溶液(5.32mL，46.3mmol)且搅拌反应混合物过夜。反应混合物颜色随时间推移变成棕色。用盐水稀释反应混合物并浓缩除去挥发性溶剂。接着用乙酸乙酯萃取残余水层数次。经Na2SO4干燥合并的有机层，在真空蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284601962
(用0至70%EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，得到呈白色固体状的(1R,3S,5R)-3-(1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(3.71g，14.9mmol，71%收率)。LC-MS保留时间0.772分钟；m/z 250.20(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C18 4.6×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601963
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm10.43(宽单峰,1H),6.99(s,2H),4.86(dd,J＝9.0,5.0Hz,1H),3.35(宽单峰,1H),3.20(宽单峰,1H),2.28-2.38(m,1H),1.71-1.80(m,1H),1.49(s,9H),0.83-0.90(m,1H),0.45(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284601964
中间体64
(1R,3S,5R)-3-(4,5-二碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将碘(I2，12.43g，49.0mmol)加入至3-(1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸酯(5.55g，22.3mmol)及碳酸钠(7.08g，66.8mmol)于二噁烷(56mL)及水(56mL)中的溶液中且在室温在黑暗中搅拌反应混合物16小时。用EtOAc稀释反应混合物且用饱和硫代硫酸钠水溶液洗涤。分离各层且用EtOAc萃取水层。经Na2SO4干燥合并的有机层并在真空蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284601971
(用0至100%EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，得到呈白色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4,5-二碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(8.3g，16mmol，71%收率)。LC-MS保留时间1.455分钟；m/z502.07(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1％TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601972
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm4.51(宽单峰,1H),3.56(宽单峰,1H),2.40-2.54(m,1H),2.18-2.27(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.20-1.40(宽单峰,9H),0.82(dt,J＝8.6,5.8Hz,1H),0.58(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284601973
中间体65
(1R,3S,5R)-3-(4-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将(1R,3S,5R)-3-(4,5-二碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(8.3g，17mmol)于EtOH(83mL)及水(83mL)中的溶液装入配备有搅拌棒的250mL耐压烧瓶中。接着加入亚硫酸钠(20.88g，166mmol)且在90℃加热混合物16小时。用EtOAc萃取反应混合物且经Na2SO4干燥合并的有机层，并真空蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284601974
(用0至15%EtOAc/DCM的梯度洗脱)纯化残余物，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(3.84g，10.2mmol，62%收率)以及完全还原产物(1R,3S,5R)-3-(1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(550mg，2.21mmol，13%收率)。LC-MS保留时间0.932分钟；m/z376.22(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm7.12(宽单峰,1H),4.59(宽单峰,1H),3.44-3.64(宽单峰,1H),2.40-2.52(m,1H),2.17-2.30(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.27(宽单峰,9H),0.84(dt,J＝8.5,5.7Hz,1H),0.58(宽单峰,1H)。
方案15
Figure BDA00001874284601982
中间体66与中间体67
中间体66：(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
中间体67：(1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(5,5'-(4,4'-(萘-2,6-二基)二(4,1-伸苯基))二(1H-咪唑-5,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯)
在真空使2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘(1.0g，2.6mmol)、(1R,3S,5R)-3-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(1.06g，2.63mmol)、Na2CO3(0.837g，7.89mmol)于DME(20mL)及水(2mL)中的溶液脱气10分钟。在80℃加热混合物，接着在氮气流下加入Pd(Ph3P)4(0.152g，0.132mmol)。密封反应器且在120℃进一步进行加热16小时。在真空中除去DME且使粗物质分配于EtOAc/H2O之间。分离各层且用EtOAc萃取水层数次。经Na2SO4干燥合并的有机萃取物并在真空中蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284601991
(用0%至5%MeOH/DCM的梯度洗脱)纯化残余物，得到受反应副产物污染的部分纯的靶标产物。再次通过快速柱色谱法(用50至100%EtOAc/己烷的梯度洗脱)纯化不纯产物，接着用10%MeOH/DCM冲洗柱，得到呈黄色泡沫状的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(606mg)。LC-MS保留时间1.608分钟；m/z 578.4(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284601993
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,氯仿-d,部分NMR)δppm 4.89(宽单峰,1H),3.20-3.66(m,1H),2.33-2.50(m,1H),1.76-1.86(m,1H),1.52(宽单峰,9H),1.24-1.32(m,12H),0.87-0.93(m,1H),0.51(宽单峰,1H)。
中间体68
(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在真空使(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(568mg)、(1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(369mg，0.983mmol)、Na2CO3(313mg，2.95mmol)于DME(10mL)及水(2mL)中的溶液脱气10分钟。在80℃加热混合物，接着在氮气流下加入Pd(Ph3P)4(114mg，0.098mmol)。密封反应器且在130℃进一步进行加热过夜。在真空中除去DME且使粗物质分配于EtOAc/H2O之间。分离各层且用EtOAc萃取水层数次。经Na2SO4干燥合并的有机萃取物并在真空中蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284602001
(先后用20至100%EtOAc/己烷、10%MeOH/DCM  的梯度洗脱)纯化残余物，得到部分纯的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(277mg)。LC-MS保留时间1.578分钟；m/z 699.56(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.62-7.69(m,6H),7.53-7.59(m,4H),6.95(s,2H),4.67(宽单峰,2H),3.46-3.56(m,2H),2.50-2.59(m,0.5H),2.32-2.49(m,2H),2.27(宽单峰,1.5H),1.65-1.78(m,2H),1.28(宽单峰,18H),0.80-0.88(m,2H),0.53-0.66(m,2H)。
Figure BDA00001874284602003
中间体69
(1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
向(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(275mg)于DCM(10mL)中的溶液中加入TFA(2mL，26.0mmol)。在室温搅拌混合物2小时。在真空除去挥发性物质且通过反相HPLC(水/MeOH/TFA)纯化粗残余物，得到呈棕褐色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的三氟乙酸盐(106mg)。LC-MS保留时间1.153分钟；m/z 499.36(MH+)。在配备有Waters Sunfire5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602011
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.33(s,1H),8.19(s,1H),7.99-8.05(m,2H),7.85-7.95(m,6H),7.83(s,1H),7.76(s,1H),4.78(q,J＝9.4Hz,2H),3.47-3.54(m,2H),2.65-2.74(m,4H),2.02-2.12(m,2H),1.18-1.25(m,2H),0.97-1.05(m,2H)。
方案16
Figure BDA00001874284602012
中间体70
(1R,3S,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-6-喹啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
向经脱气的6-溴-2-氯喹啉(30mg，0.12mmol)、Na2CO3(39.3mg，0.371mmol)及(1R,3S,5R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(116mg，0.272mmol)于二噁烷(1mL)及H2O(0.2mL)中的溶液中加入Pd(Ph3P)4(14.3mg，0.012mmol)且在110℃搅拌混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-6-喹啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(60.6mg，0.057mmol，46.3%收率)。LC-MS保留时间2.05分钟；m/z 724[M+H]+。(柱Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1HNMR(400MHz,MeOD)δppm 8.68(1H,d,J＝8.5Hz),8.60(1H,s),8.44(1H,dd,J＝8.5,1.5Hz),8.39(1H,d,J＝1.3Hz),8.33(1H,d,J＝8.8Hz),8.23-8.29(1H,m),8.25(1H,d,J＝8.5Hz),8.19(1H,s),8.08(1H,d,J＝9.0Hz),7.96(1H,d,J＝9.0Hz),7.93(1H,d,J＝9.5Hz),5.02-5.12(2H,m),3.70(2H,宽单峰),2.74-2.85(2H,m),2.45-2.57(2H,m),1.84-1.96(2H,m),1.05-1.68(18H,m),0.89-1.01(2H,m),0.77-0.86(2H,m)。
Figure BDA00001874284602021
中间体71
2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹啉
将(1R,3S,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-6-喹啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(51mg，0.054mmol)与HCl的二噁烷溶液(0.5mL，2.00mmol)混合且在室温搅拌2小时。除去挥发性物质，得到呈黄色固体状的2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹啉的盐酸盐(53mg)。LC-MS保留时间1.20分钟；m/z 524[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602022
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
方案17
Figure BDA00001874284602023
中间体72
(1R,3S,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-6-喹喔啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将Pd(Ph3P)4(14.24mg，0.012mmol)加入至经脱气的6-溴-2-氯喹喔啉(30mg，0.123mmol)、NaHCO3(31.1mg，0.370mmol)及(1R,3S,5R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(131mg，0.308mmol)于二噁烷(1.0mL)及H2O(0.2mL)中的溶液中且在100℃搅拌混合物2小时，接着在110℃搅拌2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化滤液，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-6-喹喔啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(67.6mg)。LC-MS保留时间2.13分钟；m/z 725[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602032
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.60(1H,s),8.71(1H,s),8.56(1H,dd,J＝8.8,1.5Hz),8.45(1H,d,J＝1.5Hz),8.26-8.35(2H,m),8.21(1H,s),8.06-8.11(1H,m),7.91-7.99(2H,m),5.02-5.13(2H,m),3.70(2H,宽单峰),2.79(2H,dd,J＝13.4,9.2Hz),2.43-2.57(2H,m),1.83-1.96(2H,m),1.07-1.65(18H,m),0.95(2H,m),0.77-0.85(2H,m)。
Figure BDA00001874284602033
中间体73
2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉
将TFA(0.25mL，3.24mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-6-喹喔啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(65mg)的DCM(0.5mL)溶液中且在室温搅拌混合物16小时。除去挥发性物质且用Et2O研磨残余物。经过滤漏斗收集所得固体且用Et2O淋洗，得到呈黄色固体状的2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(60mg)。LC-MS保留时间1.51分钟；m/z 525[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602041
Luna 3.0×50mmS10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.52(1H,s),8.58(1H,s),8.36(1H,s),8.22-8.33(2H,m),8.30(1H,d,J＝9.5Hz),8.08(1H,s),7.76-7.94(2H,m),7.83(1H,d,J＝9.5Hz),4.80-5.05(2H,m),3.45-3.61(2H,m),2.70-2.92(2H,m),2.50-2.67(2H,m),2.00-2.18(2H,m),1.26(2H,宽单峰),1.04(2H,宽单峰)。
方案18
Figure BDA00001874284602042
中间体74
(S)-2-(5-(4-溴苯基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将NCS(0.51g，3.82mmol)加入至2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.55mmol)的DMF(25mL)溶液中且在50℃加热混合物过夜。在真空除去挥发性物质。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284602043
(用0至10%EtOAc/DCM的梯度洗脱)纯化残余物，得到呈黄色泡沫状的部分纯的(S)-2-(5-(4-溴苯基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.04g)。LC-MS保留时间1.99分钟；m/z 427.12(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602051
Platform确定MS数据。1H NMR (500MHz,MeOD)δppm 7.63(s,4H),4.74-4.81(m,1H),3.64-3.72(m,1H),3.45-3.55(m,1H),2.27-2.42(m,1H),2.00-2.15(m,2H),1.90-2.00(m,1H),1.48(m,3H),1.27(m,6H)。
Figure BDA00001874284602052
中间体75
(S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在真空使(S)-2-(5-(4-溴苯基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.04g，2.44mmol)及2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘(0.926g，2.44mmol)于DME(10mL)及水(2mL)中的溶液脱气10分钟。在约80℃加热混合物，在氮气流下加入Pd(Ph3P)4(0.282g，0.244mmol)且密封反应器。进一步进行加热至130℃且保持8小时。再加入Pd(PPh3)4(100mg)且进行加热过夜。在真空中除去DME且使粗物质分配于EtOAc/H2O之间。分离各层且用EtOAc萃取水层数次。经Na2SO4干燥合并的有机萃取物并在真空中蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284602053
(用0至100%EtOAc/己烷的梯度洗脱)纯化残余物，得到受三苯基膦污染的部分纯的(S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(292mg)。进一步通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化少量等分试样，得到纯标题物质。残余物质无需进一步纯化即用于后续步骤中。LC-MS保留时间2.227分钟；m/z 598.46(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602061
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602062
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD,三氟乙酸盐，部分NMR)δppm 3.71(宽单峰,2H),3.55(宽单峰,2H),2.45(宽单峰,1H),2.07-2.17(m,2H),1.97-2.06(m,1H),1.50(s,3H),1.43(m,6H),1.31(宽单峰,6H)。
Figure BDA00001874284602063
中间体76
(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在真空使(S)-2-(5-碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(163mg，0.450mmol)、(S)-2-(5-碘-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(163mg，0.450mmol)、碳酸氢钠(113mg，1.350mmol)于DME(10mL)与水(2mL)的溶剂混合物中的溶液脱气10分钟。在80℃加热混合物，接着加入Pd(Ph3P)4(52.0mg，0.045mmol)，用氮气冲洗反应器并密封。进一步加热至120℃且保持16小时。使烧瓶冷却至室温，在真空中除去DME且使粗物质分配于DCM/H2O之间。分离各层且用DCM萃取水层数次。经Na2SO4干燥合并的有机萃取物并在真空中蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284602064
(用0至100%EtOAc/己烷的梯度洗脱)纯化残余物，得到受三苯基膦污染的部分纯的(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(77mg)。LC-MS保留时间1.830分钟；m/z 709.43(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602071
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d部分NMR)δppm 5.00(d,J＝4.5Hz,2H),3.38-3.52(m,4H),3.10(宽单峰,1H),2.91(宽单峰,1H),2.09-2.33(m,4H),1.93-2.05(m,2H),1.54(s,18H)。
Figure BDA00001874284602072
中间体77
4-氯-2-((S)-吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑
将TFA(2mL)加入至(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(75mg)的DCM(10mL)溶液中且在室温搅拌混合物2小时。在真空中除去溶剂且将残余物吸收于1:1甲醇/CH2Cl2的溶剂混合物中并经MCX柱(Strata XC)过滤。用甲醇洗涤所述柱且用NH3的甲醇溶液(2M)洗脱化合物。在真空中浓缩适当馏分，得到呈黄色固体状的4-氯-2-((S)-吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑(40mg，0.079mmol)。LC-MS保留时间1.353分钟；m/z 509.32(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5uC184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602073
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD,仅部分溶解)δppm 8.20(s,1H),8.09(s,1H),7.88-7.96(m,2H),7.76-7.88(m,6H),7.51(s,1H),4.50(t,J＝7.28Hz,1H),4.35(t,J＝7.15Hz,1H),3.03-3.31(部分经甲醇掩蔽,m,4H),2.24-2.42(m,2H),1.88-2.21(m,6H)。
方案19
Figure BDA00001874284602081
中间体79
(S)-2-(7-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-4,5-二氢-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在真空使(S)-2-(5-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(402mg，0.821mmol)、(S)-2-(7-溴-4,5-二氢-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(344mg，0.821mmol)及碳酸氢钠(207mg，2.46mmol)于DME(14mL)及水(1.8mL)中的溶液脱气10分钟。在80℃加热混合物，此时打开烧瓶且加入Pd(Ph3P)4(76mg，0.066mmol)。用氮气冲洗烧瓶，密封并在120℃加热16小时。使烧瓶冷却至室温，在真空中除去DME且使粗物质分配于DCM与H2O之间。分离各层且用DCM萃取水层数次。经Na2SO4干燥合并的有机萃取物并在真空中蒸发。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284602082
(先后用20至100%EtOAc/己烷及0至10%甲醇/DCM的梯度洗脱)纯化残余物，得到(S)-2-(7-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-4,5-二氢-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(183mg)。LC-MS保留时间1.543分钟；m/z 701.47(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602091
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602092
中间体80
(S)-2-(7-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将氧化锰(IV)(1.53g，17.6mmol)加入至(S)-2-(7-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-4,5-二氢-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(183mg，0.196mmol)的DCM(5mL)溶液中且在室温搅拌混合物过夜。经硅藻土
Figure BDA00001874284602093
填料过滤反应混合物且用甲醇/DCM 1:1溶液洗涤。在真空使用旋转蒸发器除去挥发性物质，得到呈棕褐色固体状的(S)-2-(7-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(163mg)。LC-MS保留时间1.523分钟；m/z 699.53(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602094
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602095
中间体81
2-((S)-吡咯烷-2-基)-7-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑
在室温将一份TFA(2mL，26.0mmol)加入至经搅拌的(S)-2-(7-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(137mg)的CH2Cl2(10mL)溶液中。于室温搅拌混合物2小时，接着在真空中除去溶剂。将残余物吸收于50%甲醇/CH2Cl2中且经MCX柱(Strata XC)过滤。用甲醇洗涤所述柱且用NH3的甲醇溶液(2M)洗脱化合物。在真空中浓缩适当馏分，得到呈橙色固体状的2-((S)-吡咯烷-2-基)-7-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑(98mg，0.20mmol)。LC-MS保留时间1.245分钟；m/z 499.30(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602101
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.59(d,J＝8.5Hz,1H),8.43(d,J＝1.5Hz,1H),8.36(s,1H),8.31(s,1H),8.13(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),8.01-8.10(m,3H),7.90-7.98(m,2H),7.87(s,1H),7.80(d,J＝8.6Hz,1H),5.18(t,J＝7.9Hz,1H),5.05(t,J＝8.1Hz,1H),3.63-3.72(m,1H),3.52-3.63(m,3H),2.61-2.77(m,2H),2.45-2.58(m,2H),2.33-2.43(m,2H),2.20-2.33(m,2H)。
方案20
Figure BDA00001874284602102
中间体82
(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(喹啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将Pd(Ph3P)4(19.06mg，0.016mmol)加入至经搅拌且脱气的6-溴-2-氯喹啉(40mg，0.165mmol)、(S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(150mg，0.363mmol)及NaHCO3(41.6mg，0.495mmol)于二噁烷(1mL)及H2O(0.2mL)中的溶液中。接着在110℃加热反应混合物2小时，冷却至室温，用MeOH稀释且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(喹啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(73mg)。LC-MS保留时间2.02分钟；m/z 700[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602111
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.63-8.74(1H,m),8.60(1H,s),8.44(1H,dd,J＝8.7,1.6Hz),8.38(1H,宽单峰),8.32(1H,d,J＝8.8Hz),8.25(2H,d,J＝8.8Hz),8.14-8.21(1H,m),8.04-8.12(1H,m),7.90-8.00(2H,m),5.24-5.36(2H,m),3.73-3.83(2H,m),3.59-3.72(2H,m),2.57-2.74(2H,m),2.20-2.33(2H,m),2.09-2.20(4H,m),1.50(9H,宽单峰),1.23(9H,宽单峰)。
Figure BDA00001874284602112
中间体83
2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹啉
将TFA(0.25mL，3.24mmol)加入至(2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(喹啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(65mg)的DCM(0.5mL)溶液中且在室温搅拌混合物2小时。在真空除去挥发性物质且用Et2O研磨残余物。经过滤收集所得固体且用Et2O淋洗，得到呈黄色固体状的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹啉的三氟乙酸盐(61mg)。LC-MS保留时间1.12分钟；m/z 500[M+H]+。(柱Luna3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.89(1H,d,J＝8.8Hz),8.48(1H,d,J＝1.3Hz),8.45(1H,s),8.34-8.41(2H,m),8.31(1H,d,J＝8.8Hz),8.12(1H,dd,J＝8.5,1.8Hz),8.09(1H,s),7.89(1H,d,J＝8.5Hz),7.77-7.85(2H,m),5.05-5.19(2H,m),3.44-3.72(4H,m),2.61-2.75(2H,m),2.19-2.49(6H,m)。
方案21
Figure BDA00001874284602121
中间体84
(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在80℃将Pd(Ph3P)4(0.382g，0.330mmol)加入至经脱气的2,6-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘(2.51g，6.61mmol)、(1R,3S,5R)-3-(5-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(2.5g，6.6mmol)及碳酸钠(2.78g，33.0mmol)于DME(52.9mL)及水(13.2mL)中的溶液中。用氮气回填反应混合物，密封且在100℃加热过夜。在真空除去挥发性物质且将残余物吸收于EtOAc中，用水洗涤，并用EtOAc萃取水层。经硅藻土
Figure BDA00001874284602122
填料过滤合并的有机层并经Na2SO4干燥，浓缩且在
Figure BDA00001874284602123
上纯化(干法载入至硅胶上，装入90g硅胶柱中且用含0至70%乙酸乙酯的己烷的梯度洗脱，接着用10%MeOH/DCM冲洗)，得到呈浅黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(1.8g，3.3mmol，49%收率)。LC-MS保留时间1.905分钟；m/z 552.47(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602131
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602132
中间体85
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(795mg，1.44mmol)、(1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(538mg，1.43mmol)及碳酸氢钠(502mg，5.97mmol)于DME(9.5mL)及水(2.4mL)中的溶液装入配备有磁性搅拌棒的200mL压力圆底烧瓶中。在真空使溶液脱气5分钟且用N2回填反应器。接着在N2流下加入Pd(Ph3P)4(110mg，0.096mmol)，密封反应器并在120℃加热过夜。使反应混合物冷却至室温且在真空除去挥发性物质。使残余物分配于EtOAc与水之间且用EtOAc萃取水层。经硅藻土
Figure BDA00001874284602133
填料过滤合并的有机层，经Na2SO4干燥且在真空除去挥发性物质。通过快速柱色谱法
Figure BDA00001874284602134
(先后用50至100%EtOAc/己烷及10%甲醇/DCM的梯度洗脱)纯化残余物，得到受起始物质、经还原的起始物质及其它反应副产物污染的部分纯的靶标产物。进一步通过制备性HPLC(ACN/水，0.1%TFA)纯化残余物，得到(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(200.5mg)。也由同一反应混合物收集副产物，其经鉴别为(1R,3S,5R)-3-(5-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸酯的三氟乙酸盐(108mg)。LC-MS保留时间1.497分钟；m/z 673.52(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602141
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.33(s,1H),8.31(s,1H),8.09-8.20(m,3H),7.96-8.08(m,2H),7.87-7.94(m,2H),5.07(t,J＝8.2Hz,1H),4.91(m,1H),3.69(宽单峰,2H),2.70-2.84(m,2H),2.48(宽单峰,2H),1.81-1.94(m,2H),1.51(宽单峰,1H),1.51(宽单峰,9H),1.31(宽单峰,5H),1.21(宽单峰,4H),0.89-0.99(m,2H),0.82(宽单峰,1H),0.77(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284602142
中间体86
(1R,3S,5R)-3-(5-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸酯
纯化来自中间体85合成的反应混合物后，获得呈三氟乙酸盐形式的副产物(108mg)。LC-MS保留时间1.882分钟；m/z 849.84(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602143
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.36(s,2H),8.28(s,2H),8.11-8.19(m,6H),8.03-8.09(m,4H),7.87-7.96(m,4H),5.07(t,J＝8.2Hz,2H),3.71(宽单峰,2H),2.75-2.85(m,2H),2.51(宽单峰,2H),1.86-1.94(m,2H),1.52(m,10H),1.22(宽单峰,8H),0.97(ddd,J＝8.4,6.0,5.8Hz,2H),0.83(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284602151
中间体87
6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑
将4M HCl的二噁烷溶液(10mL，40.0mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(151mg)的DCM(3mL)溶液中。立即形成沉淀物。搅拌混悬液30分钟。真空蒸发挥发性组分。将粗残余物吸收于DCM(3mL)中且加入TFA(2mL)。搅拌溶液1小时。减压蒸发挥发性组分。将残余物吸收于MeOH中且经Strata XC MCX柱过滤。用甲醇洗涤所述柱且通过用2M氨水/甲醇溶液洗脱来由柱释放化合物。减压蒸发氨水/甲醇滤液，得到呈黄色固体状的6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑(79mg，0.17mmol)。LC-MS保留时间1.130分钟；m/z 473.35(MH+)。在配备有WatersSunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602152
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.19(s,1H),8.07(s,1H),7.92(dd,J＝8.6,5.8Hz,2H),7.88(s,1H),7.82(dd,J＝5.8,1.5Hz,2H),7.61-7.66(m,2H),7.51(s,1H),4.24-4.35(m,2H),3.11(td,J＝6.1,2.4Hz,1H),3.06(td,J＝6.0,2.6Hz,1H),2.40-2.53(m,2H),2.18-2.33(m,2H),1.69-1.76(m,1H),1.62-1.69(m,1H),0.88(ddd,J＝6.6,4.3,2.6Hz,1H),0.79-0.84(m,1H),0.61-0.68(m,1H),0.55-0.60(m,1H)。
Figure BDA00001874284602153
中间体88
6,6'-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,2'-联萘
将TFA(2.0mL，26mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸酯的三氟乙酸盐(108mg)于DCM(5mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。接着浓缩反应混合物，得到呈棕褐色固体状的6,6'-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,2'-联萘的三氟乙酸盐(22mg)。LC-MS保留时间1.722分钟；m/z 649.54(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602161
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.33(宽单峰,2H),8.22(宽单峰,2H),8.09-8.15(m,4H),8.01-8.07(m,4H),7.89-7.95(m,2H),7.77-7.87(m,4H),4.85-4.98(m,2H),3.51-3.57(m,2H),2.79-2.87(m,2H),2.59-2.68(m,2H),2.07-2.14(m,2H),1.23-1.30(m,2H),1.01-1.09(m,2H)。
方案22
中间体89
(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-1,5-二氮杂萘-2-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将四(三苯基膦)钯(0)(17.4mg，0.015mmol)加入至2,6-二氯-1,5-二氮杂萘(30mg，0.151mmol)、碳酸氢钠(38.0mg，0.452mmol)及(1R,3S,5R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(141mg，0.332mmol)于二噁烷(1.0mL)及H2O(0.2mL)中的溶液中且在110℃加热及搅拌混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤，浓缩且通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈白色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-1,5-二氮杂萘-2-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(22.3mg，0.030mmol)。LC-MS保留时间2.11分钟；m/z 725[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602171
Luna 3.0×50mm S 10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
Figure BDA00001874284602172
中间体90
2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,5-二氮杂萘
将TFA(0.25mL，3.2mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-1,5-二氮杂萘-2-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(20mg，0.028mmol)的DCM(0.5mL)溶液中且在室温搅拌混合物16小时。在真空除去挥发性物质且用Et2O研磨残余物。经过滤收集所得固体且用Et2O淋洗，得到呈黄色固体状的2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,5-二氮杂萘的三氟乙酸盐(26mg，0.022mmol，78%收率)。LC-MS保留时间1.41分钟；m/z 525[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602173
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.61(2H,d,J＝8.8Hz),8.51(2H,s),8.40(2H,d,J＝9.0Hz),8.23(2H,dd,J＝8.5,1.5Hz),7.81(2H,d,J＝8.5Hz),4.74-4.97(2H,m),3.47-3.57(2H,m),2.78-2.88(2H,m),2.52-2.65(2H,m),2.04-2.15(2H,m),1.22-1.33(2H,m),0.99-1.11(2H,m)。
方案23
Figure BDA00001874284602181
中间体91
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-5-氯-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在室温将NCS(20mg，0.15mmol)分批加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(183mg，0.272mmol)的DMF(5mL)溶液中。接着在50℃加热反应混合物3小时。使反应混合物冷却至0℃，再加入NCS(15mg，0.112mmol)，且在50℃搅拌混合物2小时。用水(2mL)及甲醇(2mL)稀释反应混合物，除去挥发性物质且通过制备性HPLC(TFA)纯化粗产物，得到呈橙色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-5-氯-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(140.4mg)。LC-MS保留时间1.822分钟；m/z707.54(1:1)(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm 5μm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602191
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.27(d,J＝2.8Hz,2H),8.03-8.18(m,4H),7.87-7.98(m,3H),5.04-5.10(m,1H),4.63(d,J＝7.6Hz,1H),3.71(宽单峰,1H),3.63(宽单峰,1H),2.74-2.87(m,1H),2.59(dd,J＝13.3,8.7Hz,1H),2.51(宽单峰,1H),2.41(ddd,J＝13.6,6.7,6.6Hz,1H),1.86-1.95(m,1H),1.78(宽单峰,1H),1.12-1.63(m,18H),0.97(ddd,J＝8.7,6.0,5.8Hz,1H),0.79-0.91(m,2H),0.66(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284602192
中间体92
2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-4-氯-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑
将TFA(2mL，26.0mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-5-氯-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(131mg，0.140mmol)的DCM(10mL)溶液中且在室温搅拌混合物3小时。在真空除去挥发性物质且将残余物吸收于MeOH中并经Strata XC MCX柱过滤。用甲醇洗涤所述柱且通过用2M氨水/甲醇溶液洗脱来由柱释放化合物。减压蒸发氨水/甲醇滤液，得到呈棕褐色固体状的2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-4-氯-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑(55mg，0.11mmol)。LC-MS保留时间1.375分钟；m/z 507.33(1:1)(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm 5μm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.26(s,1H),8.19(s,1H),8.00-8.09(m,3H),7.92(ddd,J＝12.1,8.6,1.8Hz,2H),7.85(dd,J＝8.6,1.5Hz,1H),7.81(d,J＝8.6Hz,1H),4.96(dd,J＝11.0,7.6Hz,1H),4.64(明显的三重峰,J＝9.3Hz,1H),3.53-3.59(m,1H),3.44-3.50(m,1H),2.82(dd,J＝13.0,7.5Hz,1H),2.61-2.74(m,3H),2.03-2.15(m,2H),1.24-1.30(m,1H),1.18-1.24(m,1H),0.96-1.09(m,2H)。
方案24
Figure BDA00001874284602201
中间体93
(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(3-溴苯基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯
将DIPEA(2.79mL，16.0mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(2.00g，8.80mmol)及2-溴-1-(3-溴苯基)乙酮(2.22g，8.00mmol)于乙腈(25mL)中的淤浆中(溶液变成澄清琥珀色)且搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物且经(80g SiO2，10-25%EtOAc/己烷)纯化，得到呈粘稠浅黄色油状的(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(3-溴苯基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(3.37g，7.94mmol)。LC-MS保留时间1.853分钟；m/z 423及425.98(1:1)(MH+)。在配备有waters
Figure BDA00001874284602211
MS 7u C18 3.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602212
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.04(d,J＝1.8Hz,1H),7.83(d,J＝7.8Hz,1H),7.75(d,J＝8.0Hz,1H),7.38(dd,J＝8.0,7.8Hz,1H),5.58-5.10(m,2H),4.23(宽单峰,1H),3.62-3.39(m,1H),2.58(dt,J＝13.3,6.5Hz,1H),2.46(dd,J＝13.3,9.5Hz,1H),1.73-1.51(m,1H),1.47(s,9H),0.85(宽单峰,1H),0.51(s,1H)。
Figure BDA00001874284602213
中间体94
(1R,3S,5R)-3-(4-(3-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在350mL高压容器中，将乙酸铵(5.94g，77mmol)加入至(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(3-溴苯基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(3.33g，7.85mmol)的二甲苯(75mL)溶液中且在氮气下搅拌5分钟。密封容器，接着置于已加热至140℃的油浴中(反应混合物变成深棕色)且使反应混合物在140℃保持11小时。再加入乙酸铵(3.0g)且在145℃搅拌反应混合物8小时，冷却至室温并搅拌(根据LC-MS，转化率>90%)。在高真空将反应混合物浓缩成棕色油状物，使其分配于DCM(约200mL)与半饱和碳酸氢钠(约200mL)之间。干燥(MgSO4)有机层，过滤并浓缩。在
Figure BDA00001874284602214
Horizon(20-50%EtOAc/己烷，160g SiO2)上纯化粗橙色固化泡沫状物，得到呈黄色固化泡沫状的(1R,3S,5R)-3-(4-(3-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(2.03g，5.02mmol)。LC-MS保留时间2.450分钟；m/z 404及406.06(1∶1)(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602215
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602221
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.89(s,1H),7.65(d,J＝6.5Hz,1H),7.42-7.32(m 2H),7.26(t,J＝7.8Hz,1H),4.72-4.61(m,1H),3.62-3.53(m,1H),2.51(dd,J＝13.0,7.8Hz,1H),2.36-2.26(m,1H),1.75-1.66(m,1H),1.29(宽单峰,9H),0.84(dt,J＝8.0,5.7Hz,1H),0.63-0.57(m,1H)。
中间体95
(1R,3S,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((1S,3R,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在100mL耐压烧瓶中在真空使(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(220mg，0.395mmol)(以与中间体51相同的方式由中间体55制备)、(1R,3S,5R)-3-(4-(3-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(192mg，0.474mmol)及碳酸铯(386mg，1.185mmol)于THF(4mL)及水(4mL)中的溶液脱气5分钟，接着用氮气回填。加入乙酸钯(II)(8.9mg，0.039mmol)且在120℃加热混合物4小时。将反应混合物冷却至室温，用水稀释并用EtOAc及DCM萃取。用盐水洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。在
Figure BDA00001874284602223
系统上(90g硅胶柱，用含0至100%EtOAc的己烷的梯度洗脱)纯化粗残余物，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((1S,3R,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(142mg，0.203mmol)。LC-MS保留时间1.585分钟；m/z 699.57(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm 5um柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602231
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.33(d,J＝1.2Hz,1H),8.31(s,1H),8.20-8.24(m,1H),8.14-8.20(m,1H),8.10-8.14(m,1H),7.97-8.07(m,3H),7.94(d,J＝7.9Hz,1H),7.87-7.92(m,1H),7.77-7.82(m,1H),7.67-7.74(m,1H),4.84-4.96(m,2H),3.67(宽单峰,2H),2.69-2.80(m,2H),2.47(宽单峰,2H),1.82-1.91(m,2H),1.19-1.63(m,18H),0.89-0.97(m,2H),0.77(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284602232
中间体96
(1R,3S,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((1S,3R,5S)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将TFA(2mL，26.0mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((1S,3R,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(130mg，0.20mmol)的DCM(2mL)溶液中且在室温搅拌混合物2小时。在真空除去挥发性物质且通过制备性HPLC(甲醇/水，0.1%TFA)纯化粗产物，得到呈棕褐色固体的(1R,3S,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((1S,3R,5S)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的三氟乙酸盐(103mg)。LC-MS保留时间1.303分钟；m/z 499.13(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm 5μm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602233
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.33(s,1H),8.22(d,J＝12.5Hz,2H),8.02(dd,J＝8.6,5.8Hz,2H),7.90-7.97(m,2H),7.75-7.82(m,4H),7.58(t,J＝7.8Hz,1H),4.74-4.78(m,2H),3.46-3.53(m,2H),2.64-2.74(m,4H),2.04-2.12(m,2H),1.19-1.26(m,2H),1.02(ddd,J＝14.2,7.3,7.2Hz,2H)。
方案25
Figure BDA00001874284602241
中间体97
(1R,3S,5R)-3-(6-(6-溴喹喔啉-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将Pd(Ph3P)4(28.5mg，0.025mmol)加入至经脱气的6-溴-2-氯喹喔啉(60mg，0.246mmol)、(1R,3S,5R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(115mg，0.271mmol)及碳酸氢钠(62.1mg，0.739mmol)于二噁烷(1mL)及H2O(0.2mL)中的溶液中且在110℃搅拌混合物2小时，接着在120℃搅拌2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈亮黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(6-(6-溴喹喔啉-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯。LC-MS保留时间2.31分钟；m/z 506[M+H]+。(柱Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
Figure BDA00001874284602243
中间体98
2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉-6-基硼酸
将Pd(Ph3P)4(23.28mg，0.020mmol)加入至经脱气的(1R,3S,5R)-3-(6-(6-溴喹喔啉-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(102mg，0.201mmol)、KOAc(49.4mg，0.504mmol)及联硼酸二频哪醇酯(113mg，0.443mmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中且在83℃搅拌反应混合物16小时。使反应混合物分配于EtOAc(20mL)与饱和NH4Cl(水溶液)(5mL)之间。干燥(MgSO4)有机层，过滤并浓缩成橙色油状物，通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈橙色固体状的2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉-6-基硼酸(57mg，0.121mmol，60.0%收率)。LC-MS保留时间1.94分钟；m/z 472[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602251
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
中间体99
(1R,3S,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-6-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将Pd(OAc)2(2.67mg，0.012mmol)加入至经脱气的2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉-6-基硼酸(56mg，0.119mmol)、(1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(66.9mg，0.178mmol)、二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(9.76mg，0.024mmol)及K2CO3(49.3mg，0.356mmol)于THF(1mL)及水(0.25mL)中的溶液中且在120℃搅拌混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉-6-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(32mg，0.047mmol)。LC-MS保留时间1.89分钟；m/z 675[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602253
Luna 3.0×50mm S 10。溶剂A=95%水/5%甲醇/10mM乙酸铵。溶剂B=5%水/95%甲醇/10mM乙酸铵。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=2分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.44(s,1H),8.45(宽单峰,1H),8.39(s,1H),8.23(d,J＝8.8Hz,1H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),8.13(d,J＝8.8Hz,1H),7.69-7.76(m,1H),7.64(s,1H),4.69-4.78(m,1H),4.49-4.57(m,1H),3.56-3.70(m,2H),2.50-2.73(m,2H),2.31-2.47(m,2H),1.67-1.86(m,2H),1.31(宽单峰,18H),0.82-0.95(m,2H),0.54-0.75(m,2H)。
Figure BDA00001874284602261
中间体100
2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)喹喔啉
将TFA(0.25mL，3.24mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉-6-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(30mg，0.044mmol)的DCM(0.5mL)溶液中且在室温搅拌混合物16小时。在真空除去挥发性物质且用Et2O研磨残余物，得到呈黄色固体状的2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(32.7mg)。LC-MS保留时间1.33分钟；m/z 475[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602262
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.47(s,1H),8.54(s,1H),8.50(s,1H),8.31(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),8.26(dd,J＝8.5,1.3Hz,1H),8.15(d,J＝8.8Hz,1H),7.83(s,1H),7.82(d,J＝8.8Hz,1H),4.85-4.97(m,1H),4.67(dd,J＝10.8,7.5Hz,1H),3.45-3.57(m,2H),2.77-2.86(m,1H),2.65-2.74(m,1H),2.52-2.65(m,2H),2.02-2.15(m,2H),1.18-1.30(m,2H),0.95-1.09(m,2H)。
方案26
Figure BDA00001874284602271
中间体101
(1R,3S,5R)-3-(4-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
在室温将TFA(1mL，12.98mmol)逐滴加入至(1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(450mg，1.20mmol)的DCM(5mL)溶液中。在室温搅拌混合物2小时，接着除去挥发性物质且将残余物吸收于MeOH(5mL)中并经Strata XC MCX柱过滤。用甲醇(30mL)洗涤所述柱且通过用2M氨水/甲醇溶液(40mL)洗脱来由柱释放化合物并浓缩，产生呈白色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(283mg，1.03mmol，86%收率)。LC-MS保留时间0.448分钟；m/z 275.94(MH+)。在配备有Waters Sunfire C18 4.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1HNMR(500MHz,MeOD)δppm 7.17(s,1H),4.20(dd,J＝10.4,7.3Hz,1H),3.08(td,J＝6.2,2.6Hz,1H),2.38(dd,J＝12.5,7.3Hz,1H),2.19(ddd,J＝12.7,10.5,4.9Hz,1H),1.68-1.74(m,1H),0.85(ddd,J＝6.6,4.4,2.8Hz,1H),0.61-0.67(m,1H)。
中间体102
(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯
将HATU(464mg，1.22mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(280mg，1.02mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(214mg，1.22mmol)及DIEA(1.8mL，10mmol)于DMF(3mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物2小时，接着用MeOH(5mL)及水(5mL)稀释。在真空除去挥发性物质且用快速色谱法纯化残余物(将样品干法载入至硅胶上且用0-100乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到呈浅黄色油状的(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(500mg，0.925mmol，91%收率)。LC-MS保留时间0.850分钟；m/z 432.97(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602281
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm7.09(s,1H),5.09(dd,J＝8.9,4.6Hz,1H),4.47-4.60(m,1H),3.67(s,3H),3.59-3.62(m,1H),2.39-2.49(m,1H),2.29-2.39(m,1H),2.12(dq,J＝13.6,6.8Hz,1H),1.95-2.06(m,1H),1.11(dt,J＝8.6,5.5Hz,1H),0.94-1.02(m,3H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H),0.76(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284602282
中间体103
(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在0℃在真空使(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(573mg，1.04mmol)、(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(374mg，0.87mmol)、二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(SPHOS，71.0mg，0.173mmol)及碳酸铯(846mg，2.60mmol)于THF(7.9mL)及水(0.8mL)中的溶液脱气5分钟，接着用氮气回填反应器。加入乙酸钯(II)(19.4mg，0.087mmol)且在100℃加热反应混合物3小时。将水加入至经冷却的溶液中且进一步用EtOAc(15mL)稀释反应混合物。分离各相且用EtOAc(15mL)萃取水层。经Na2SO4干燥合并的有机层，经硅藻土
Figure BDA00001874284602291
填料过滤且减压除去挥发性物质。用快速色谱法纯化残余物(将样品干法载入至硅胶上且先后用20-100%乙酸乙酯/己烷、5%MeOH/DCM洗脱)，得到(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(246mg，0.337mmol，39.0%收率)。LC-MS保留时间1.448分钟；m/z 730.21(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1HNMR(500MHz,MeOD)δppm 8.32(宽单峰,1H),8.30(s,1H),8.03-8.19(m,4H),7.96-8.03(m,1H),8.01(s,1H),7.85-7.96(m,2H),5.18(dd,J＝9.0,7.0Hz,1H),5.09(dd,J＝8.9,7.6Hz,1H),4.58(d,J＝6.5Hz,1H),3.81-3.89(m,1H),3.65-3.75(m,1H),3.69(s,3H),2.68-2.86(m,2H),2.52(dt,J＝13.6,6.8Hz,2H),2.15-2.29(m,1H),2.06-2.15(m,1H),1.85-1.95(m,1H),1.51(宽单峰,4H),1.41(d,J＝16.3Hz,1H),1.27(s,1H),1.20(宽单峰,3H),1.12(ddd,J＝8.7,6.0,5.9Hz,1H),1.04(d,J＝6.8Hz,3H),0.87-1.00(m,5H),0.83(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284602293
中间体104
(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯
将TFA(2mL)加入至(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(226mg，0.310mmol)的DCM(5mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。在真空浓缩溶液，将残余物吸收于MeOH(10mL)中，经Strata XC MCX柱过滤且用甲醇(25mL)洗涤。通过用2M氨水/甲醇溶液(10mL)洗涤柱来由柱释放化合物并减压浓缩，产生呈棕褐色固体状的(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(131mg，0.208mmol)。LC-MS保留时间1.235分钟；m/z 630.17(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.16(s,1H),8.07(s,1H),7.92(dd,J＝8.3,6.3Hz,2H),7.87(s,1H),7.78-7.85(m,2H),7.60-7.69(m,2H),7.44(s,1H),5.20(dd,J＝8.8,4.8Hz,1H),4.62(d,J＝6.8Hz,1H),4.28(dd,J＝9.8,7.8Hz,1H),3.66-3.76(m,4H),3.35-3.41(m,2H),3.03(td,J＝6.0,2.5Hz,1H),2.40-2.59(m,3H),2.12-2.25(m,2H),1.99-2.09(m,1H),1.59-1.68(m,1H),1.10-1.18(m,1H),1.00-1.08(m,3H),1.04(d,J=6.8Hz,3H),0.91-1.04(m,1H),0.95(d,J=6.8Hz,3H),0.76-0.84(m,2H),0.50-0.59(m,1H)。
方案27
Figure BDA00001874284602311
中间体105
(S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基氨基甲酸甲酯
将HATU(846mg，2.23mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(510mg，1.85mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(483mg，2.23mmol)及DIEA(3.24mL，18.5mmol)于DMF(5mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(5mL)及水(5mL)稀释反应混合物。在真空除去挥发性物质且用快速色谱法纯化残余物(将样品干法载入至硅胶上且先后用0-100%乙酸乙酯/己烷、10%MeOH/DCM洗脱)，得到呈白色泡沫状的(S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基氨基甲酸甲酯(370mg，0.780mmol，42.1%收率)。进一步在反相HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)上纯化不纯物质，得到呈无色油状的(S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(387mg)。LC-MS保留时间0.690分钟；m/z 474.95(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602321
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 7.58(s,1H),5.04(dd,J＝9.2,6.7Hz,1H),4.56(d,J＝7.8Hz,1H),3.96(td,J＝11.7,3.1Hz,2H),3.74-3.81(m,1H),3.65-3.73(m,3H),3.35-3.44(m,2H),2.61(dd,J＝13.6,9.3Hz,1H),2.37(ddd,J＝13.6,6.7,6.5Hz,1H),1.96-2.09(m,2H),1.37-1.62(m,4H),1.06(dt,J＝8.8,5.9Hz,1H),0.84(td,J＝5.6,2.4Hz,1H)。
Figure BDA00001874284602322
中间体106
(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
在0℃在真空使(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(407mg，0.738mmol)、(S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(350mg)、二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(60.6mg，0.148mmol)及碳酸铯(721mg，2.21mmol)于THF(6.7mL)及水(0.7mL)中的淤浆脱气5分钟，接着用氮气回填反应器。加入乙酸钯(II)(16.6mg，0.074mmol)且在100℃加热混合物3小时。在真空除去挥发性物质且用水(20mL)及EtOAc(20mL)稀释混合物。分离各相且用EtOAc(20mL)萃取水层。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并真空蒸发。用快速色谱法纯化残余物(将样品干法载入至硅胶上且先后用20-100%乙酸乙酯/己烷、10%MeOH/DCM洗脱)。再次在反相HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)上纯化残余物，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(231mg)。LC-MS保留时间1.395分钟；m/z 772.31(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602331
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.31(s,2H),8.09-8.18(m,3H),8.05(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),7.97-8.02(m,2H),7.91(d,J＝8.6Hz,1H),7.88(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),5.16(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),5.01-5.09(m,1H),4.62(d,J＝7.6Hz,1H),3.91-4.02(m,3H),3.83-3.89(m,1H),3.70(宽单峰,4H),3.35-3.45(m,2H),2.68-2.83(m,2H),2.45-2.57(m,2H),2.04-2.16(m,2H),1.90(宽单峰,1H),1.43-1.61(m,8H),1.14-1.31(m,4H),1.07-1.13(m,1H),0.97(dt,J＝8.8,5.8Hz,1H),0.91(宽单峰,1H),0.82(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284602332
中间体107
(S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基氨基甲酸甲酯
将TFA(2mL，26.0mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(150mg)的DCM溶液中且在室温搅拌混合物2小时。在真空除去挥发性物质且将残余物吸收于MeOH(15mL)中，经Strata XC MCX柱(1g)过滤且用甲醇洗涤。通过用2M氨水/甲醇溶液(20mL)洗涤柱来由柱释放化合物并浓缩，产生呈白色固体状的(S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基氨基甲酸甲酯(100mg，0.149mmol)。LC-MS保留时间1.772分钟；m/z 670.36(M-H+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/10mM乙酸铵且溶剂B为10%水/90%甲醇/10mM乙酸铵及溶剂。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602341
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.28(s,1H),8.24(s,1H),8.13(d,J＝8.9Hz,1H),8.05-8.10(m,1H),8.03(s,1H),7.96-8.00(m,2H),7.84(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),7.75-7.82(m,2H),5.16(dd,J＝9.2,7.3Hz,1H),4.84-4.88(部分经MeOD掩蔽,m,1H),4.62(d,J＝7.6Hz,1H),3.91-4.01(m,2H),3.84-3.89(m,1H),3.66-3.76(m,3H),3.51-3.56(m,1H),3.35-3.46(m,2H),2.82(dd,J＝12.8,7.3Hz,1H),2.73(dd,J＝13.7,9.2Hz,1H),2.61(td,J＝12.0,4.7Hz,1H),2.53(ddd,J＝13.8,6.8,6.6Hz,1H),2.06-2.16(m,3H),1.58-1.64(m,1H),1.44-1.57(m,3H),1.23-1.30(m,1H),1.08-1.16(m,1H),1.05(q,J＝7.8Hz,1H),0.88-0.93(m,1H)。
方案28
Figure BDA00001874284602342
中间体108
6-溴-2-(1-乙氧基乙烯基)喹喔啉
将二氯二(三苯基膦)-钯(II)(17.30mg，0.025mmol)加入至6-溴-2-氯喹喔啉(60mg，0.246mmol)及三丁基(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷(107mg，0.296mmol)于二噁烷(1.5mL)中的溶液中且在110℃搅拌混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，且通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈白色固体状的6-溴-2-(1-乙氧基乙烯基)喹喔啉(36mg，0.129mmol，52.3%收率)。LC-MS保留时间2.76分钟；m/z 279[M+H]+。(柱Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
Figure BDA00001874284602352
中间体109
2-溴-1-(6-溴喹喔啉-2-基)乙酮
将NBS(55.1mg，0.310mmol)加入至6-溴-2-(1-乙氧基乙烯基)喹喔啉(72mg，0.26mmol)于THF(2mL)及水(0.500mL)中的溶液中且在室温搅拌混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈白色固体状的2-溴-1-(6-溴喹喔啉-2-基)乙酮(50mg，0.15mmol，59%收率)。LC-MS保留时间2.40分钟；m/z 329[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602353
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
Figure BDA00001874284602354
中间体110
(1S,3S,5S)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴喹喔啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯
将DIPEA(0.040mL，0.227mmol)加入至2-溴-1-(6-溴喹喔啉-2-基)乙酮(50mg，0.152mmol)及(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(37.9mg，0.167mmol)于乙腈(1.5mL)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。蒸发溶剂且使残余物分配于EtOAc(20mL)/饱和NaHCO3水溶液(5mL)之间。干燥(MgSO4)有机层，过滤并浓缩，得到呈橙色固体状的粗(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴喹喔啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(63mg)。LC-MS保留时间2.74分钟；m/z 476[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602355
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
Figure BDA00001874284602361
中间体111
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴喹喔啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将NH4OAc(102mg，1.323mmol)加入至(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴喹喔啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(63mg，0.13mmol)的甲苯(3mL)溶液中且在120℃搅拌混合物4小时。再加入NH4OAc(102mg，1.323mmol)且进一步在120℃加热反应混合物4小时。用EtOAc(20mL)及饱和NaHCO3水溶液(5mL)稀释反应混合物。干燥(MgSO4)有机层，过滤，浓缩，接着通过快速硅胶色谱法(用1:2EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈红橙色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴喹喔啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(25mg，0.055mmol)。LC-MS保留时间2.07分钟；m/z 456[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602362
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
Figure BDA00001874284602363
中间体112
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸酯
将Pd(OAc)2(1.230mg，5.48μmol)加入至经脱气的(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴喹喔啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(25mg，0.055mmol)、K2CO3(22.71mg，0.164mmol)、二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(4.50mg，10.96μmol)及(1R,3S,5R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(30.3mg，0.071mmol)于THF(1mL)及水(0.250mL)中的混悬液中且在110℃搅拌混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(12mg，0.018mmol，33%收率)。LC-MS保留时间1.90分钟；m/z 675[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602371
Luna 3.0×50mm S 10。溶剂A=95%水/5%甲醇/10mM乙酸铵。溶剂B=5%水/95%甲醇/10mM乙酸铵。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=2分钟。波长=220nm)。1HNMR(400MHz,MeOD)δppm 9.38(s,1H),8.28(d,J＝2.0Hz,1H),8.16-8.22(m,1H),8.10-8.15(m,1H),7.95(s,2H),7.66-7.76(m,2H),3.54-3.73(m,2H),2.52-2.69(m,2H),2.33-2.47(m,2H),1.71-1.84(m,2H),1.08-1.57(m,20H),0.83-0.95(m,2H),0.60-0.74(m,2H)。
Figure BDA00001874284602372
中间体113
6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)喹喔啉
将TFA(0.25mL，3.24mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(10mg，0.015mmol)的DCM(0.5mL)溶液中且在室温搅拌混合物16小时。在真空除去挥发性物质且用Et2O研磨残余物。用Et2O淋洗所得固体，得到呈黄色固体状的6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(10.5mg)。LC-MS保留时间1.32分钟；m/z 475[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284602373
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。
Figure BDA00001874284602374
中间体114
(2S)-2-(6-(6-(2-((2S)-1-((苄基氧基)羰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2-萘基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-1-吡咯烷羧酸苄酯
以类似于中间体39的方式，使用(S)-1-(苄基氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸作为起始物质而非(S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸来制备且不用SEM保护中间体。制备呈白色固体状的(2S)-2-(6-(6-(2-((2S)-1-((苄基氧基)羰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2-萘基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-1-吡咯烷羧酸苄酯(20.8mg)。LC-MS保留时间1.742分钟；m/z 769.41(MH+)。在配备有Luna 10u C183.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602382
Platform确定MS数据。
方案29
Figure BDA00001874284602383
中间体114a
1-(4-(6-乙酰基萘-2-基)苯基)乙酮
将碳酸钠(5.43g，51.3mmol)的水(35mL)溶液加入至经搅拌的1-(6-溴萘-2-基)乙酮(2.554g，10.25mmol)及4-乙酰基苯基硼酸(2.017g，12.30mmol)于甲苯(35.0mL)及乙醇(35.0mL)中的溶液中且将氮气鼓泡通过反应混合物15分钟。接着加入Pd(PPh3)4(0.237g，0.205mmol)，用氮气冲洗反应混合物且在95℃在氮气下加热8小时，接着在室温搅拌过夜。在高真空将反应混合物浓缩干燥，接着分配于DCM(约200mL)与水(约150mL)之间。接着用盐水(约100mL)洗涤有机层，干燥(MsSO4)，过滤并浓缩。用MeOH(约120mL)研磨残余物且将剩余固体再溶解于DCM中并浓缩干燥(约2.7g橙色固体)。将该物质溶解于热EtOAc(80mL)中且使其冷却。通过过滤收集所得固体且用Et2O淋洗，得到1-(4-(6-乙酰基萘-2-基)苯基)乙酮(1.84g)。LC-MS保留时间2.443分钟；m/z 288.98(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602391
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602392
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.51(s,1H),8.05-8.16(m,5H),7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.81-7.88(m,3H),2.76(s,3H),2.68(s,3H)。
Figure BDA00001874284602393
中间体114b
2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮
将溴(0.669mL，13.0mmol)的DCM(10mL)溶液加入至经搅拌的1-(4-(6-乙酰基萘-2-基)苯基)乙酮(1.827g，6.34mmol)的DCM(30mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物1天。用DCM(约20mL)稀释反应混合物并浓缩干燥，得到2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(2.83g)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间2.708分钟；m/z 446.71(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602394
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602395
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.57(s,1H),8.07-8.17(m,5H),8.02(d,J＝8.8Hz,1H),7.88(d,J＝8.8Hz,3H),4.60(s,2H),4.51(s,2H)。
Figure BDA00001874284602401
中间体115
(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯
将许尼希碱(1.662mL，9.52mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(1.42g，3.17mmol)及(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(1.45g，6.34mmol)于乙腈(60mL)中的淤浆中。在室温搅拌反应混合物1天(缓慢变澄清)，浓缩澄清橙色溶液且在
Figure BDA00001874284602402
Horizon(160g SiO2，30-40%EtOAc/己烷)上纯化，得到呈灰白色固化泡沫状的(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(1.81g)。LC-MS保留时间3.126分钟；m/z 765.87(M+Na)。在配备有
Figure BDA00001874284602403
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602404
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.48(s,1H),8.13(s,1H),7.99-8.11(m,5H),7.86(d,J＝8.3Hz,3H),5.24-5.76(m,4H),4.41-4.59(m,2H),3.93-4.11(m,2H),2.28-2.42(m,4H),2.11(宽单峰,2H),1.77(宽单峰,2H),1.49(宽单峰,9H),1.48(宽单峰,9H),1.35(宽单峰,6H)。
Figure BDA00001874284602405
中间体116
(2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
将乙酸铵(3.76g，48.7mmol)加入至经搅拌的(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(1.81g，2.437mmol)的甲苯(40mL)溶液中且在室温搅拌淤浆10分钟，随后在100℃加热12小时。使反应混合物冷却至室温，浓缩干燥且使残余物分配于DCM(约150mL)与半饱和NaHCO3(水溶液)(约150mL)之间。用盐水(约100mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩成棕色固化泡沫状物，通过
Figure BDA00001874284602411
Horizon(160gSiO2，1.5-3%MeOH/DCM)纯化，得到呈黄橙色固化泡沫状的(2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(1.46g)。LC-MS保留时间2.92分钟；m/z 703.32(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602412
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602414
中间体117
2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑
将TFA(0.500mL，6.49mmol)逐滴加入至经搅拌的(2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(228mg，0.324mmol)的DCE(6mL)溶液中。在加入期间，形成沉淀物，其防碍搅拌。加入DCM(约10mL)且搅拌淤浆，同时加入剩余TFA。在室温搅拌反应混合物30分钟，再加入TFA(约0.5mL)并搅拌反应混合物3小时。浓缩反应混合物，得到呈橙色固体状的2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑的三氟乙酸盐(102mg，113mg，114mg)。LC-MS保留时间2.756分钟；m/z 503.14(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602415
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602421
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.32(s,1H),8.17(s,1H),8.01(明显的三重峰,J＝8.2Hz,2H),7.85-7.95(m,6H),7.80(s,1H),7.73(s,1H),5.02(明显的四重峰,J＝8.0Hz,2H),3.92(dddd,J＝8.7,7.0,6.9,4.8Hz,2H),2.52-2.67(m,4H),2.38-2.49(m,2H),1.95-2.07(m,2H),1.55(明显的双二重峰,J＝6.7,4.4Hz,6H)。
方案30
Figure BDA00001874284602422
中间体118
2-溴-1-(6-溴萘-2-基)乙酮
将溴(0.682mL，13.3mmol)的DCM(20mL)溶液加入至1-(6-溴萘-2-基)乙酮(3.30g，13.3mmol)(>90%纯度)的DCM(60mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物，得到呈灰白色固体状的2-溴-1-(6-溴萘-2-基)乙酮(4.35g)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间2.177分钟；m/z 342.92(MNa+)。在配备有
Figure BDA00001874284602423
Luna 10u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602424
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.49(s,1H),8.03-8.10(m,2H),7.86(d,J＝8.5Hz,1H),7.85(d,J＝8.8Hz,1H),7.67(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),4.56(s,2H)。
Figure BDA00001874284602431
中间体119
(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴萘-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯
将DIPEA(3.47mL，19.88mmol)加入至经搅拌的粗2-溴-1-(6-溴萘-2-基)乙酮(4.35g，13.3mmol)及(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(3.01g，13.25mmol)于乙腈(80mL)中的淤浆中且在室温搅拌反应混合物过夜。将反应混合物浓缩干燥且通过Horizon(160g SiO2，10-20%EtOAc/己烷)纯化。使含有所需产物的馏分静置3天。一些馏分具有已破碎的大晶体(收集240mg，根据1H NMR为纯的所需产物)。收集含有所需产物的所有馏分并浓缩成黄色固化泡沫状物，用Et2O(约40mL)制成淤浆。通过过滤收集所形成的白色固体且用Et2O淋洗，得到(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴萘-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(3.24g)。LC-MS保留时间2.760分钟；m/z 472,474.02(1:1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602433
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602434
Platform确定MS数据。1H NMR(400mHz,MeOD)d ppm 8.61(宽单峰,1H),8.17(s,1H),8.03(d,J=8.6Hz,1H),8.00(d,J=8.9Hz,1H),7.94(d,J=8.9Hz,1H),7.71(dd,J=8.6,1.8Hz,1H),5.75-5.66(m,1H),5.61-5.46(m,1H),4.34-4.26(m,1H),3.46(宽单峰,1H),2.69-2.59(m,1H),2.55-2.44(m,1H),1.73(宽单峰,1H),1.54-1.43(m,9H),0.88(宽单峰,1H),0.59-0.53(m,1H)。
Figure BDA00001874284602435
中间体120
(1R,3S,5R)-3-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴萘-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(3.46g，7.28mmol)及乙酸铵(11.2g，146mmol)溶解于甲苯(100mL)中并搅拌。接着将反应混合物置于已预加热至100℃的油浴中且在所述温度搅拌12小时。使反应混合物冷却至室温，浓缩并分配于DCM(约200mL)与半饱和NaHCO3水溶液(约150mL)之间。用盐水(约100mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩成棕褐色固化泡沫状物。在Horizon(160g SiO2，用DCM装载，30-50%EtOAc/己烷)上纯化该物质，得到呈黄色固化泡沫状的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(3.05g)。LC-MS保留时间2.238分钟；m/z452.07、454.02(1:1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602442
Luna 3u C18 2.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.14(宽单峰,1H),7.96(d,J＝1.8Hz,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,1H),7.72(d,J＝9.8Hz,2H),7.53(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.38(s,1H),4.91(dd,J＝9.0,5.3Hz,1H),3.25-3.56(m,2H),2.40-2.51(m,1H),1.75-1.85(m,1H),1.38(宽单峰,1H),0.86-0.93(m,1H),0.47-0.55(m,1H)。
方案31
Figure BDA00001874284602444
中间体121
(1R,3S,5R)-3-(4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将氮气鼓泡通过(1R,3S,5R)-3-(5-碘-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(1.65g，4.40mmol)及Cu(I)I(168mg，0.880mmol)于三乙胺(3.07mL，22.0mmol)及DMF(40mL)中的溶液20分钟。接着加入乙炔基三甲基甲硅烷(2.16g，22.0mmol)及Pd(PPh3)4(254mg，0.220mmol)，用氮气冲洗反应混合物，密封且在室温搅拌24小时。将反应混合物浓缩成棕色油状物，且通过
Figure BDA00001874284602451
Horizon(160g SiO2，20-40%EtOAc/己烷)纯化，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(980mg)。LC-MS保留时间3.230分钟；m/z 346.17(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602452
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602453
Platform确定MS数据。1H NMR (400MHz,氯仿-d)δppm 7.18(s,1H),4.77(dd,J＝9.2,5.1Hz,1H),3.20(宽单峰,1H),3.14-3.39(m,1H),2.33(dd,J＝13.2,9.4Hz,1H),1.69-1.78(m,1H),1.34-1.56(m,1H),1.49(s,9H),0.85(dt,J＝8.5,5.7Hz,1H),0.41-0.47(m,1H),0.22-0.24(m,9H)。
Figure BDA00001874284602454
中间体122
(1R,3S,5R)-3-(4-乙炔基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将碳酸钾(194mg，1.40mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(970mg，2.81mmol)的MeOH(30mL)溶液中且在氮气下搅拌反应混合物，接着在50℃(浴温度)加热4小时。浓缩反应混合物至约5mL体积，用DCM(约40mL)稀释且用半饱和盐水(约20mL)洗涤。干燥(MgSO4)有机层，过滤并浓缩成棕褐色固体。通过
Figure BDA00001874284602455
Horizon(40g SiO2，用DCM装载，35-45%EtOAc/己烷)纯化该物质，得到呈浅黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(747mg)。LC-MS保留时间2.866分钟；m/z 272.12(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602456
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602461
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 7.18(宽单峰,1H),4.59(宽单峰,1H),3.36-3.64(m,2H),2.46(dd,J＝13.2,8.9Hz,1H),2.18-2.31(m,1H),1.64-1.74(m,1H),1.18-1.45(m,9H),0.83(dt,J＝8.5,5.8Hz,1H),0.56(宽单峰,1H)。
方案32
Figure BDA00001874284602462
中间体123
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将氮气鼓泡通过(1R,3S,5R)-3-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(400mg，0.880mmol)、(1R,3S,5R)-3-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(313mg，1.14mmol)及Cu(I)I(8.4mg，0.044mmol)于三乙胺(0.37mL，2.6mmol)及DMF(8mL)中的溶液达10分钟。接着加入Pd(PPh3)4(50.9mg，0.044mmol)，将氮气鼓泡通过反应混合物1分钟，接着密封烧瓶并在50℃加热16小时。在高真空浓缩反应混合物，用EtOAc(约5mL)研磨剩余固体且通过过滤收集(用EtOAc及己烷淋洗)，得到呈浅黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(595mg)。所述物质无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间3.140分钟；m/z 647.35(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602471
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602472
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602473
中间体124
(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将4M HCl(1.546mL，6.18mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(200mg，0.309mmol)的二噁烷(3mL)溶液中且剧烈搅拌反应混合物4小时。浓缩反应淤浆，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的盐酸盐(177mg)。LC-MS保留时间3.403分钟；m/z 893.29(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602474
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602475
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)d ppm 8.42(s,1H),8.16(s,2H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),7.97(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),7.74(s,1H),7.66(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),5.01(dd,J＝10.8,7.8Hz,1H),4.78(dd,J＝10.8,8.3Hz,1H),3.57-3.77(m,2H),3.50-3.56(m,1H),2.61-2.92(m,4H),2.13-2.21(m,1H),2.06-2.13(m,1H),1.25(ddd,J＝7.8,5.0,2.5Hz,1H),0.99-1.14(m,2H)。
方案33
Figure BDA00001874284602481
中间体125
(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯
将氮气鼓泡通过(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯(以类似于中间体26的方式制备)(2.0g，4.12mmol)、(1R,3S,5R)-3-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(1.872g，4.12mmol)及Na2CO3(2.184g，20.60mmol)于EtOH(16.0mL)、甲苯(16.0mL)及水(16.0mL)的混合物中的二相溶液达15分钟。接着加入Pd(PPh3)4(0.143g，0.124mmol)，用氮气冲洗反应混合物，密封，接着在95℃加热10小时。用水(约20mL)稀释粗淤浆且用EtOAc(约100mL)萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩成黄色泡沫状物。将该物质溶解于最少量的DCM中，且在
Figure BDA00001874284602491
Horizon(110g SiO2，70-85%EtOAc/己烷)上纯化，得到呈浅黄色固化泡沫状的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯(2.257g)。LC-MS保留时间4.158分钟；m/z 733.17(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602492
Luna 3u C182.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602493
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.17(宽单峰,1H),8.07(s,1H),7.86-7.94(m,2H),7.71-7.86(m,6H),7.44(s,1H),7.32(s,1H),7.20(宽单峰,5H),5.14(d,J＝12.3Hz,1H),4.91-5.05(m,1H),4.63-4.77(m,1H),3.55-3.69(m,2H),3.29-3.34(m,1H),2.46-2.59(m,2H),2.29-2.44(m,2H),1.66-1.80(m,2H),1.30(宽单峰,9H),0.80-0.93(m,2H),0.61(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284602494
中间体126
(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将10%Pd/C(0.022g，0.021mmol)装入(1R,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯(0.305g，0.416mmol)及NaHCO2(0.070g，0.832mmol)于MeOH(15mL)中的反应混合物中。用N2(3次)真空冲洗所得混悬液且在室温置于1atmH2(气囊)下3小时。接着经硅藻土
Figure BDA00001874284602501
填料过滤混合物且在真空浓缩。回收对应于(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(0.235g)的灰白色固体且其无需进一步纯化即使用。LC-MS[M+H]+=599；Rt=1.96分钟为产物。柱Luna 3u C182×50mm；起始%B：0，最终%B：100，溶剂A：10%乙腈/90%H2O+1%TFA；溶剂B：90%乙腈/10%H2O+1%TFA；流速4mL/min。运行时间：5分钟。纯度=94%。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 12.00(2H,宽单峰),8.11-8.32(3H,m),7.88-8.02(5H,m),7.72-7.88(9H,m),7.63(4H,宽单峰),4.64(2H,宽单峰),4.42(1H,t,J＝7.93Hz),3.97-4.18(1H,m),3.45(1H,宽单峰),3.17(3H,s),2.96(1H,dd,J＝13.43,6.71Hz),2.08-2.43(6H,m),1.66(2H,宽单峰),1.07-1.50(20H,m),0.81-0.89(3H,m),0.77(1H,宽单峰),0.45-0.61(3H,m),0.30(1H,宽单峰)。
Figure BDA00001874284602502
中间体127
(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将HATU(0.164g，0.432mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(0.235g，0.392mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(0.069g，0.39mmol)及DIEA(0.137mL，0.785mmol)于DMF(10mL)中的溶液中且在室温搅拌所得黄色溶液过夜。减压除去溶剂且将残余物溶解于甲醇中，过滤且通过制备性HPLC(溶剂A：10%MeOH/90%水/0.1%TFA；溶剂B：90%MeOH/10%水/0.1%TFA；柱：Sunfire Prep MS C1830×100mm 5u；波长：220nM；流速：30ml/min；梯度：0%B至100%B，历时30分钟，保持时间2分钟)纯化，得到呈白色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(0.10g)。LC-MS[M+H]+=756；Rt=2.14分钟为产物。柱Luna 3u C182×50mm；起始%B：0，最终%B：100，溶剂A：10%乙腈/90%H2O+1%TFA；溶剂B：90%乙腈/10%H2O+1%TFA；流速4mL/min。运行时间：5分钟。纯度=96%。1H NMR (500MHz,DMSO-d6)δppm 14.60(1H,宽单峰),8.39(3H,d,J＝4.88Hz),8.09-8.24(4H,m),7.99-8.08(6H,m),7.89-7.98(5H,m),7.27(1H,d,J＝8.55Hz),4.98-5.07(1H,m),4.84(1H,宽单峰),4.42(1H,t,J＝7.32Hz),3.74(1H,宽单峰),3.55(4H,s),2.55(2H,d,J＝9.77Hz),2.32-2.44(3H,m),2.13(1H,dq,J＝13.43,6.71Hz),1.94(1H,dt,J＝13.28,6.79Hz),1.75(1H,dt,J＝12.89,6.22Hz),1.40(4H,d,J＝10.07Hz),1.11-1.30(10H,m),0.90-1.00(5H,m),0.73-0.88(10H,m)。
Figure BDA00001874284602511
中间体128
(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯
将4N HCl的二噁烷溶液(2mL，8.00mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(0.10g，0.12mmol)的CH2Cl2(20mL)溶液中且在室温搅拌所得黄色混悬液2小时。在真空浓缩反应混合物且用Et2O研磨所得残余物，得到呈黄色固体状的(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯盐酸盐(47mg)。LC-MS[M+H]+=656；Rt=1.73分钟为产物。柱Luna 3u C182×50mm；起始%B：0，最终%B：100，溶剂A：10%乙腈/90%H2O+1%TFA；溶剂B：90%乙腈/10%H2O+1%TFA；流速4mL/min。运行时间：5分钟。纯度=95%。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm14.47-15.18(2H,m),9.77-10.61(2H,m),8.30-8.42(2H,m),8.17(1H,s),7.93-8.10(10H,m),7.27(1H,d,J＝8.55Hz),5.08(1H,t,J＝7.93Hz),4.71(1H,t,J＝8.39Hz),4.40-4.46(1H,m),3.77(1H,宽单峰),3.52-3.58(3H,m),3.38-3.44(1H,m),2.52-2.61(3H,m),2.39(1H,dt,J＝13.58,6.64Hz),2.14-2.21(1H,m),1.94(2H,dd,J＝8.24,4.88Hz),1.15(1H,d,J＝5.80Hz),0.93(4H,d,J＝6.71Hz),0.75-0.89(6H,m)。
Figure BDA00001874284602521
中间体129
(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯
将4.0M HCl(1.167mL，4.67mmol)的二噁烷溶液加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯(228mg，0.311mmol)的二噁烷(3mL)溶液中且在室温剧烈搅拌反应混合物3小时。浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯的盐酸盐(233mg)。LC-MS保留时间3.988分钟；m/z 633.18(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602522
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.44(s,1H),8.28(s,1H),8.08-8.18(m,3H),7.92-8.02(m,4H),7.84(宽单峰,3H),7.31(宽单峰,5H),5.21(d,J＝12.1,1H),4.95-5.05(m,2H),4.80-4.91(m,1H),3.70-3.77(m,1H),3.59-3.67(m,1H),2.77-2.93(m,2H),2.74(dd,J＝13.4,9.2Hz,1H),2.46(dt,J＝13.5,6.7Hz,1H),2.12-2.22(m,1H),1.83-1.96(m,1H),1.27-1.35(m,1H),1.09(q,J＝7.9Hz,1H),0.95(ddd,J＝8.7,5.9,5.8Hz,1H),0.75-0.83(m,1H)。
Figure BDA00001874284602531
中间体130
(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯
将HATU(203mg，0.533mmol)加入至经搅拌的(1R,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯(225mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(93mg，0.53mmol)于DMF(3mL)及DIPEA(0.37mL，2.1mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物3小时。在氮气流下浓缩粗反应混合物，将残余物溶解于MeOH中且通过制备性HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的(1R,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯(200mg)。LC-MS保留时间4.053分钟；m/z790.25(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602532
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602533
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.28(s,2H),8.13(d,J＝8.8Hz,1H),8.08(d,J＝8.8Hz,1H),7.94-8.02(m,4H),7.76-7.92(m,3H),7.85(dd,J＝8.7,1.6Hz,1H),7.29(宽单峰,5H),5.21(d,J＝12.1Hz 1H),5.16(dd,J＝9.2,6.9Hz,1H),4.97(t,J＝8.2Hz,1H),4.57(d,J＝6.5Hz,1H),3.78-3.87(m,1H),3.68(s,3H),3.64-3.77(m,2H),2.66-2.77(m,2H),2.40-2.56(m,2H),2.14-2.25(m,1H),2.05-2.14(m,1H),1.87(d,J＝6.5Hz,1H),1.06-1.16(m,1H),1.02(d,J＝6.8Hz,3H),0.94(d,J＝6.8Hz,3H),0.87-0.99(m,2H),0.74-0.82(m,1H)。
中间体131
(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯
将10%钯/炭(100mg，0.094mmol)加入至(1R,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸苄酯(190mg，0.241mmol)及Na2CO3(50mg，0.472mmol)于THF(10mL)中的溶液中且先后用氮气(3次)及用氢气(5次)真空冲洗反应混合物。使反应混合物在氢气囊下搅拌2小时，经硅藻土
Figure BDA00001874284602542
过滤并浓缩。再使残余物在室温经受反应条件(使用50mg 10%Pd/C)过夜，随后经硅藻土
Figure BDA00001874284602543
过滤并浓缩。将残余物溶解于DMSO/MeOH中，过滤并通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeOH/H2O)纯化，得到(2S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(55mg)。LC-MS保留时间2.147分钟；m/z 656.21(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602544
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.28(s,1H),8.24(s,1H),8.12(d,J＝8.9Hz,1H),8.07(d,J＝8.9Hz,1H),7.91-8.01(m,4H),7.83-7.90(m,3H),7.66(s,1H),5.17(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),4.67(dd,J＝10.7,7.6Hz,1H),4.58(d,J＝6.7Hz,1H),3.82-3.87(m,1H),3.69(s,3H),3.44-3.49(m,1H),2.59-2.77(m,3H),2.48-2.56(m,1H),2.16-2.25(m,1H),2.03-2.15(m,2H),1.21(ddd,J＝7.5,4.9,2.6Hz,1H),1.09-1.15(m,1H),1.04(d,J＝6.7Hz,3H),0.98-1.03(m,1H),0.95(d,J＝6.7Hz,3H),0.89-0.95(m,1H)。
方案34
Figure BDA00001874284602551
中间体132
(1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(2,2'-联萘-6,6'-二基)二(1H-咪唑-4,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯)
将氮气鼓泡至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(250mg，0.550mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(69.9mg，0.275mmol)、1,1'-二(二苯基膦基)-二茂铁(15.42mg，0.028mmol)及K2CO3(228mg，1.651mmol)于DMSO(12mL)中的溶液中且保持10分钟。接着将1,1'-二(二苯基膦基)-二茂铁)二氯化钯(22.63mg，0.028mmol)加入至反应混合物中且继续氮气鼓泡10分钟，随后密封反应混合物，接着在110℃加热20小时。使反应混合物分配于水(60mL)与DCM(60mL)之间且分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过
Figure BDA00001874284602552
Horizon(40g SiO2，70-100%EtOAc/己烷)纯化粗残余物，得到呈黄色固体状的(1R,1'R,3S,3′S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(2,2'-联萘-6,6'-二基)二(1H-咪唑-4,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯)(67mg)。LC-MS保留时间4.348分钟；m/z 749.29(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602553
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.22(s,4H),7.91-8.02(m,6H),7.87(d,J＝8.5Hz,2H),7.48(宽单峰,2H),4.68-4.77(m,2H),3.61(宽单峰,2H),2.56(dd,J＝13.1,8.8Hz,2H),2.33-2.43(m,2H),1.70-1.79(m,2H),1.31(宽单峰,18H),0.87(dt,J＝8.5,5.8Hz,2H),0.63(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284602561
中间体133
6,6'-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2,2'-联萘
将4.0M HCl(1.0mL，4.00mmol)的二噁烷溶液加入至经搅拌的(1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(2,2'-联萘-6,6'-二基)二(1H-咪唑-4,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯)(62mg，0.083mmol)的二噁烷(2mL)溶液中且剧烈搅拌反应淤浆3小时。用MeOH稀释淤浆并浓缩干燥，得到呈浅黄色固体状的6,6'-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2,2'-联萘的盐酸盐(56mg)。LC-MS保留时间3.971分钟；m/z 547.25(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602562
Luna 3u C182.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602563
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.44(s,2H),8.38(s,2H),8.12-8.19(m,6H),8.09(dd,2H),7.97(dd,J＝8.5,1.5Hz,2H),4.97(dd,J＝10.5,8.1Hz,2H),3.62-3.66(m,2H),2.79-2.89(m,4H),2.15-2.22(m,2H),1.29-1.34(m,2H),1.11(q,J＝7.9Hz,2H)。
方案35
Figure BDA00001874284602571
中间体134
6-溴-2-(1-乙氧基乙烯基)喹啉
将二氯二(三苯基膦)-钯(II)(0.289g，0.412mmol)加入至6-溴-2-氯喹啉(1.0g，4.1mmol)及三丁基(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷(1.79g，4.95mmol)于二噁烷(8mL)中的溶液中且在100℃搅拌混合物5小时，通过LC-MS鉴别所需产物。浓缩粗反应混合物且通过快速硅胶色谱法(用1:1己烷/DCM洗脱)纯化，得到呈白色固体状的产物6-溴-2-(1-乙氧基乙烯基)喹啉(720mg)。LC-MS保留时间4.091分钟；m/z 279.84(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602572
Luna 3uC182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602574
中间体135
2-溴-1-(6-溴喹啉-2-基)乙酮
将NBS(407mg，2.287mmol)加入至6-溴-2-(1-乙氧基乙烯基)喹啉(530mg，1.91mmol)于THF(10mL)及水(2.5mL)的溶液中且在室温搅拌混合物2小时。使反应混合物分配于EtOAc与盐水之间且浓缩有机层。通过快速硅胶色谱法(用Et2O/己烷洗脱，梯度为0%至5%Et2O)纯化粗物质，得到呈白色固体状的2-溴-1-(6-溴喹啉-2-基)乙酮(380mg)。LC-MS保留时间3.988分钟；m/z 329.84(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602581
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602582
Platform确定MS数据。
中间体136
(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯
将DIPEA(0.21mL，1.2mmol)加入至2-溴-1-(6-溴喹啉-2-基)乙酮(268mg，0.815mmol)及(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(204mg，0.896mmol)于乙腈(8mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物16小时。用饱和NaHCO3水溶液(5mL)稀释反应混合物且用EtOAc(2×20mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过快速硅胶色谱法(使用DCM作为装载溶剂，用Et2O/己烷洗脱，梯度为10%至30%Et2O)纯化粗产物，得到呈白色固体状的(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(332mg)。LC-MS保留时间4.283分钟；m/z 476.88(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602584
Luna 3uC182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602585
Platform确定MS数据。
中间体137
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将乙酸铵(990mg，12.8mmol)加入至(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(407mg，0.856mmol)于甲苯(10mL)中的溶液中且在120℃搅拌混合物3小时。用饱和NaHCO3水溶液(10mL)稀释反应混合物且用EtOAc(50mL)萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过快速硅胶色谱法(用1:1EtOAc/己烷洗脱)纯化粗物质，得到呈浅黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(272mg)。LC-MS保留时间3.306分钟；m/z 456.99(MH+)。在配备有Luna 3uC182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602592
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.08(d,J＝8.5Hz,1H),7.95(d,J＝2.2Hz,1H),7.78(dd,J＝8.9,2.2Hz,1H),7.73-8.14(m,3H),4.86-4.98(m,1H),3.70-3.82(m,0.5H),3.26-3.39(m,1H),2.46(dd,J＝13.3,9.3Hz,1H),1.84-1.91(m,0.5H),1.74-1.84(m,1H),1.52(s,9H),0.87-0.97(m,1H),0.48-0.61(m,1H)。
Figure BDA00001874284602593
中间体138
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将Pd(OAc)2(7.40mg，0.033mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(150mg，0.329mmol)、(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(149mg，0.329mmol)、二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(27.0mg，0.066mmol)及K2CO3(137mg，0.988mmol)于THF(2mL)及水(0.50mL)中的溶液中且在110℃搅拌反应混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈亮黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(140mg)。LC-MS保留时间3.150分钟；m/z 700.36(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602601
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602602
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602603
中间体139
2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)喹啉
将4M HCl(1mL，4.00mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(130mg，0.186mmol)于二噁烷(3mL)、MeOH(0.5mL)及DCM(3mL)中的混悬液中且在室温搅拌混合物2小时。浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)喹啉的盐酸盐(140mg)。LC-MS保留时间2.063分钟；m/z 500.37(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602604
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602611
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.09(d,J＝9.0Hz,1H),8.66(s,1H),8.56-8.62(m,2H),8.47-8.53(m,2H),8.07(s,1H),8.02-8.06(m,4H),4.97(dd,J＝10.8,8.0Hz,1H),3.65-3.71(m,1H),3.55-3.65(m,2H),2.73-2.86(m,3H),2.61-2.72(m,1H),2.07-2.20(m,2H),1.25-1.35(m,2H),1.07(t,2H)。
方案36
Figure BDA00001874284602612
中间体140
1-(4-(5-乙酰基萘-1-基)苯基)乙酮
将碳酸钠(2.55g，24.09mmol)的水(20mL)溶液加入至1-(5-溴萘-1-基)乙酮(1.2g，4.8mmol)及4-乙酰基苯基硼酸(1.03g，6.26mmol)于甲苯(20mL)及乙醇(20mL)中的溶液中，接着在氮气鼓泡下剧烈搅拌不均匀溶液15分钟。接着加入Pd(PPh3)4(0.111g，0.096mmol)，密封反应容器且回流加热6小时。冷却反应混合物并浓缩干燥。将粗残余物吸收于EtOAc(约150mL)及水(约100mL)中。分离各层且用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩成橙色固体。在
Figure BDA00001874284602613
Horizon(40g SiO2，DCM)上纯化橙色固体，得到呈灰白色固体状的1-(4-(5-乙酰基萘-1-基)苯基)乙酮(1.31g)。LC-MS保留时间3.736分钟；m/z 289.19(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602614
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602621
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.75(d,J＝8.8Hz,1H),8.11(d,J＝8.5Hz,2H),7.99(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(dd,J＝7.2,1.1Hz,1H),7.67(dd,J＝8.5,7.0Hz,1H),7.58(d,J＝8.3Hz,2H),7.45-7.51(m,2H),2.79(s,3H),2.70(s,3H)。
Figure BDA00001874284602622
中间体141
2-溴-1-(4-(5-(2-溴乙酰基)萘-1-基)苯基)乙酮
将溴(0.47mL，9.1mmol)的DCM(10mL)溶液加入至1-(4-(5-乙酰基萘-1-基)苯基)乙酮(1.285g，4.46mmol)的DCM(20mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物1天。将反应混合物浓缩成粘稠浅橙色油状物(约1.92g)。根据1HNMR，主要产物似乎为所需产物，峰对应于两个单溴化区域异构体(约10%)。粗物质不经纯化即使用。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.64(d,J＝8.5Hz,1H),8.13-8.17(m,2H),8.05(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(dd,J＝7.2,1.1Hz,1H),7.71(dd,J＝8.8,7.0Hz,1H),7.60-7.64(m,2H),7.48-7.55(m,2H),4.60(s,2H),4.53(s,2H)。
Figure BDA00001874284602623
中间体142
(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羰基氧基)乙酰基)萘-1-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯
将DIPEA(2.337mL，13.38mmol)加入至粗2-溴-1-(4-(5-(2-溴乙酰基)萘-1-基)苯基)乙酮(1.99g，4.46mmol)及(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(2.03g，8.92mmol)于乙腈(50mL)的溶液中且在室温搅拌澄清黄色溶液过夜。将反应混合物浓缩成黄色固化泡沫状物，在
Figure BDA00001874284602631
Horizon(SiO2，EtOAc/己烷)上纯化，得到呈白色绒毛状固体的(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羰基氧基)乙酰基)萘-1-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(2.95g)。LC-MS保留时间4.363分钟；m/z 737.38(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602632
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602633
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.57(d,J＝8.8Hz,1H),8.14(d,J＝8.0Hz,2H),7.99-8.06(m,2H),7.68(dd,J＝8.8,7.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.3Hz,2H),7.52-7.60(m,2H),5.60-5.70(m,1H),5.32-5.56(m,3H),4.24-4.34(m,2H),3.38-3.49(m,2H),2.59-2.69(m,1H),2.38-2.55(m,3H),1.61-1.77(m,2H),1.47(宽单峰,18H),0.81-0.94(m,2H),0.50-0.58(m,2H)。
Figure BDA00001874284602634
中间体143
(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-1-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
搅拌(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羰基氧基)乙酰基)萘-1-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯(2.01g，2.72mmol)及乙酸铵(4.19g，54.4mmol)于甲苯(40mL)中的溶液且在100℃加热过夜。将反应混合物浓缩干燥且使棕色固体分配于DCM(150mL)与半饱和NaHCO3水溶液(100mL)之间。干燥(MgSO4)有机层，过滤并浓缩。粗物质不易通过快速柱色谱法纯化，因此收集含有所需产物或起始物质的所有馏分，浓缩并再经受反应条件(现为110℃过夜)。浓缩反应混合物且使棕色固体分配于DCM(150mL)与半饱和NaHCO3(100mL)之间。干燥(MgSO4)有机层，过滤并浓缩。通过制备性HPLC纯化约30-35%物质(溶解于MeOH中，过滤，80-100%MeOH/水，乙酸铵缓冲液)，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-1-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(148mg)。通过制备性HPLC纯化剩余物质(溶解于MeOH中，过滤，60-100%MeOH/水，TFA缓冲液)，得到(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-1-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(299mg)。LC-MS保留时间3.100分钟；m/z 699.56(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602641
Luna 3u C18 2.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602642
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.29(d,J＝8.5Hz,1H),7.90(d,J＝8.5Hz,1H),7.83(d,J＝8.3Hz,2H),7.59(dd,J＝7.0,1.0Hz,1H),7.53(dd,J＝8.5,7.0Hz,1H),7.43-7.50(m,4H),7.42(s,1H),7.23(s,1H),4.66-4.80(m,2H),3.60(宽单峰,2H),2.56(dt,J＝13.1,8.9Hz,2H),2.32-2.46(m,2H),1.70-1.78(m,2H),1.38(宽单峰,18H),0.82-0.90(m,2H),0.63(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284602643
中间体144
(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-1-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将4M HCl(0.757mL，3.03mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-1-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(141mg，0.202mmol)的二噁烷(3.0mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物6小时。用MeOH沿小瓶侧面向下洗涤固体且在氮气流下浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-1-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的盐酸盐(119mg)。LC-MS保留时间2.333分钟；m/z 499.57(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602651
Luna 3u C182.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.15(d,J＝8.3Hz,1H),8.03-8.08(m,2H),8.01(d,J＝8.0Hz,2H),7.95(s,1H),7.77(d,J＝6.5Hz,1H),7.68-7.74(m,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,2H),7.57-7.64(m,2H),5.03(t,J＝9.4Hz,1H),4.97(dd,J＝10.8,8.0Hz,1H),3.57-3.66(m,2H),2.76-2.89(m,4H),2.11-2.21(m,2H),1.27-1.34(m,J＝7.7,5.1,5.1,2.6Hz,2H),1.05-1.14(m,2H)。
方案37
中间体145
(2S,3aS,6aS)-六氢环戊[b]吡咯-1,2(2H)-二羧酸2-(2-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-(叔丁氧基羰基)-八氢环戊[b]吡咯-2-羰基氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯
将纯DIPEA(0.068mL，0.388mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(79mg，0.176mmol)及(2S,3aS,6aS)-1-(叔丁氧基羰基)八氢环戊[b]吡咯-2-羧酸(90mg，0.353mmol)于乙腈(1.5mL)及氯仿(1.5mL)中的混悬液中且在室温搅拌混合物过夜。将反应混合物蒸发干燥，接着通过硅胶FCC(含3%MeOH的DCM)纯化，得到呈棕褐色固体的中间体145。LC-MS保留时间:2.480分钟；m/z 793.7(M-H)-。
Figure BDA00001874284602661
中间体146
(2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-(叔丁氧基羰基)-八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-羧酸叔丁酯
在140℃将经搅拌的(2S,3aS,6aS)-六氢环戊[b]吡咯-1,2(2H)-二羧酸2-(2-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-(叔丁氧基羰基)八氢环戊[b]吡咯-2-羰基氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(140mg，0.176mmol)及乙酸铵(272mg，3.52mmol)于二甲苯(4mL)中的混悬液加热2小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc(20mL)稀释，用饱和NaHCO3、水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)，得到棕色固体，通过硅胶FCC(含3-5%MeOH的DCM)纯化，得到(2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-(叔丁氧基羰基)-八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-羧酸叔丁酯。LC-MS保留时间：2.577分钟；m/z 755.7(M+H)+。
Figure BDA00001874284602662
中间体147
(2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢环戊[b]吡咯
将4N HCl的二噁烷溶液(20当量)加入至(2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-(叔丁氧基羰基)-八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-羧酸叔丁酯的DCM溶液中且在室温搅拌混合物2-3小时。将无水甲苯加入至所得黄色混悬液中，接着蒸发干燥，得到呈米色固体状的(2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢环戊[b]吡咯的盐酸盐：LC-MS保留时间：2.343分钟；m/z 555(M+H)+。
方案38
中间体148
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将TFA(1.028mL，13.34mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(中间体120)(606mg，1.334mmol)的DCE(20mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。接着再加入TFA(1mL)且在室温搅拌反应混合物4小时。将反应混合物浓缩干燥，将粗棕色油状物溶解于乙醚中且在真空浓缩(2次)，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的三氟乙酸盐(786mg)。所述物质无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间2.558分钟；m/z 352.03、354.05(1:1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602672
Luna 10uC183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602673
Platform确定MS数据。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm 10.55(宽单峰,1H),8.02(s,1H),7.93(d,J＝1.5Hz,1H),7.72(d,J＝8.5Hz,1H),7.65(d,J＝8.8Hz.1H),7.59(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.52(dd,J＝8.7,1.6Hz,1H),7.44(s,1H),5.10(dd,J＝11.8,7.3Hz,1H),3.49-3.54(m,1H),2.94(td,J＝12.7,4.6Hz,1H),2.68(dd,J＝13.2,7.2Hz,1H),2.06-2.14(m,1H),1.20-1.26(m,1H),1.00-1.09(m,1H)。
Figure BDA00001874284602681
中间体149
(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯
将HATU(411mg，1.082mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的三氟乙酸盐(525mg，0.902mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(190mg，1.08mmol)于DMF(10mL)及DIPEA(0.79mL，4.5mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物4小时。用EtOAc(约80mL)稀释反应混合物且用饱和NaHCO3水溶液、水(30mL)及盐水(30mL)洗涤。接着干燥(MgSO4)有机层，过滤并浓缩成棕色油状物(625mg)。在
Figure BDA00001874284602682
Horizon(40g SiO2，40-80%EtOAc/己烷)上纯化该物质，得到呈黄色玻璃状的(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(412mg)。LC-MS保留时间1.843分钟；m/z 511.24、513.12(1:1)(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602683
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1.0mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602684
Platform确定MS数据。
中间体150
(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将氮气鼓泡通过(1R,3S,5R)-3-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(中间体122)(118mg，0.432mmol)、(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(170mg，0.332mmol)及CuI(3.17mg，0.017mmol)于DMF(4mL)及TEA(0.14mL，0.10mmol)中的混合物达15分钟。接着加入Pd(PPh3)4(19.2mg，0.017mmol)，密封反应容器且在60℃加热过夜。冷却反应混合物，接着再将CuI(5mg)及TEA(100μL)加入至反应混合物中且将氮气鼓泡通过反应混合物达15分钟。接着再加入Pd(PPh3)4(12mg)，密封反应混合物且在70℃搅拌24小时。在高真空浓缩反应混合物且使残余物分配于DCM(25mL)与水(25mL)之间。用DCM(2×10mL)萃取水层且用盐水(约20mL)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩成粘稠深色油状物。将物质溶解于MeOH中，过滤且通过制备性HPLC(MeOH/水，乙酸铵缓冲液)纯化得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(187.4mg)。所述物质无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间1.720分钟；m/z 704.59(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1.0mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602692
Platform确定MS数据。
方案39
Figure BDA00001874284602693
中间体151
(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-溴萘-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯
将DIPEA(0.823mL，4.71mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(6-溴萘-2-基)乙酮(中间体118)(1.03g，3.14mmol)及(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(0.720g，3.14mmol)于乙腈(50mL)中的淤浆中且在室温搅拌反应混合物过夜。将反应混合物浓缩干燥且通过
Figure BDA00001874284602701
Horizon(40g SiO2，10-20%EtOAc/己烷)纯化，得到呈黄色固化泡沫状的(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-溴萘-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(1.09g)。LC-MS保留时间4.413分钟；m/z 476,478.20(1:1)(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602702
Luna 3u C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602703
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.57(宽单峰,1H),8.14(d,J＝1.5Hz,1H),8.01(d,J＝8.5Hz,1H),7.96(d,J＝8.8Hz,1H),7.91(d,J＝8.8Hz,1H),7.68(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),5.62-5.70(m,1H),5.47-5.60(m,1H),4.46(t,J＝7.3Hz,1H),3.92-4.06(m,1H),2.26-2.37(m,2H),2.05-2.19(m,1H),1.67-1.82(m,1H),1.46(d,J＝6.8Hz,9H),1.30(d,J＝6.5Hz,3H)。
Figure BDA00001874284602704
中间体152
(2S,5S)-2-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将乙酸铵(3.79g，49.1mmol)加入至(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-溴萘-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(1.17g，2.47mmol)的甲苯(30mL)溶液中，将反应混合物置于已预加热至100℃的油浴中且在所述温度搅拌过夜。使反应混合物冷却至室温，浓缩且分配于DCM(100mL)与半饱和NaHCO3水溶液(75mL)之间。用盐水(约50mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩成棕褐色固化泡沫状物。在
Figure BDA00001874284602705
Horizon(160g SiO2，用DCM装载，20-35%EtOAc/己烷)上纯化该物质，得到呈棕褐色固化泡沫状的(2S,5S)-2-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(893mg)。LC-MS保留时间3.410分钟；m/z 456、458.22(1:1)(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602712
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284602713
ppm 8.19(宽单峰,1H),8.01(s,1H),7.83-7.93(m,1H),7.76-7.83(m,2H),7.55(dd,J＝8.7,1.6Hz,1H),7.47(宽单峰,1H),4.94(宽单峰,1H),3.99-4.09(m,1H),2.22-2.36(m,2H),2.09-2.21(m,1H),1.72(宽单峰,1H),1.42(d,J＝6.0Hz,3H),1.34(宽单峰,9H)。
Figure BDA00001874284602714
中间体153
(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将氮气鼓泡通过(2S,5S)-2-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(127mg，0.277mmol)、(1R,3S,5R)-3-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(91mg，0.33mmol)及CuI(2.6mg，0.014mmol)于DMF(3mL)及TEA(0.12mL，0.83mmol)中的溶液达15分钟。接着加入Pd(PPh3)4(16mg，0.014mmol)且用氮气冲洗反应容器，密封并在50℃加热过夜。使反应混合物冷却至室温，将氮气鼓泡通过反应混合物达20分钟，接着再加入CuI(约4mg)及Pd(PPh3)4(15mg)。用氮气冲洗反应混合物5分钟，密封并在60℃加热1天。将反应混合物冷却至室温，用甲醇稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-((6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(56.7mg)。LC-MS保留时间3.161分钟；m/z649.62(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602721
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284602723
ppm 8.31(s,1H),8.21(s,1H),8.07(d,J＝8.8Hz,1H),7.99-8.04(m,2H),7.91(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),7.77-7.87(m,1H),7.69(dd,J＝8.7,1.4Hz,1H),5.13(t,J＝7.5Hz,1H),4.12(宽单峰,1H),3.61(宽单峰,1H),2.66(宽单峰,1H),2.45-2.54(m,1H),2.33-2.42(m,1H),2.22-2.32(m,2H),1.75-1.86(m,2H),1.25-1.59(m,21H),1.06(无,1H),0.90(dt,J＝8.5,5.8Hz,1H),0.71(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284602724
中间体154
(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将4M HCl(0.611mL，2.445mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(5-((6-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(53.6mg，0.061mmol)于二噁烷(1.5mL)中的混合物中且剧烈搅拌反应混合物2小时。在氮气流下浓缩反应混合物过夜，得到(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的盐酸盐(37mg)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间2.302分钟；m/z 449.40(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602725
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602731
Platform确定MS数据。
方案40
Figure BDA00001874284602732
中间体155
(1R,3S,5R)-3-(4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将TFA(500μl，6.49mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(299mg，0.865mmol)的DCE(5mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物30分钟。将反应混合物浓缩干燥，接着再经受反应条件5小时。浓缩反应混合物，得到呈粘稠棕色油状的(1R,3S,5R)-3-(4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的三氟乙酸盐，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间2.755分钟；m/z 246.25(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602733
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602734
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602735
中间体156
(S)-3-甲基-1-氧代-1-((1R,3S,5R)-3-(4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯
将HATU(428mg，1.125mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(212mg，0.865mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(197mg，1.125mmol)于DMF(3mL)及DIPEA(1.2mL，6.9mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物过夜。将反应混合物浓缩干燥，接着用Horizon(25g SiO2，40-60%EtOAc/己烷)纯化，得到呈黄色玻璃状的(S)-3-甲基-1-氧代-1-((1R,3S,5R)-3-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯(203mg)。LC-MS保留时间3.095分钟；m/z 403.29(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602742
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 7.17(宽单峰,1H),5.04-5.11(m,1H),4.54(d,J＝6.8Hz,1H),3.65(s,3H),3.54-3.61(m,1H),2.82(s,1H),2.39-2.50(m,1H),2.27-2.36(m,1H),2.04-2.15(m,1H),1.94-2.04(m,1H),1.11(dt,J＝8.7,5.6Hz,1H),0.95(d,J＝6.8Hz,3H),0.90(d,J＝6.8Hz,3H),0.73-0.79(m,1H),0.21(s,9H)。
Figure BDA00001874284602744
中间体157
(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-乙炔基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯
将碳酸钾(34.3mg，0.248mmol)加入至(S)-3-甲基-1-氧代-1-((1R,3S,5R)-3-(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯(200mg，0.497mmol)的甲醇(5mL)溶液中且用氮气冲洗反应混合物，密封，接着在50℃加热4小时，接着在室温搅拌过夜。将反应混合物浓缩干燥，接着在
Figure BDA00001874284602751
Horizon(12g SiO2，70-90%EtOAc/己烷)上纯化，得到呈黄色玻璃状的(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(151mg)。LC-MS保留时间1.788分钟；m/z 331.32(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602752
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602754
中间体158
(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
历时10分钟用氮气(6次)真空冲洗(1R,3S,5R)-3-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(208mg，0.457mmol)、(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-乙炔基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(151mg，0.457mmol)及CuI(8.70mg，0.046mmol)于DMF(4mL)及TEA(0.19mL，1.4mmol)中的混合物。接着加入Pd(PPh3)4(53mg，0.046mmol)且用氮气(3次)真空冲洗反应混合物，密封且在60℃加热20小时。在氮气流下浓缩反应混合物过夜，接着通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的40-80%MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(270mg)。LC-MS保留时间2.995分钟；m/z 704.70(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602755
Luna 3uC182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602761
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284602762
ppm 8.28(s,1H),8.18(s,1H),8.06(d,J＝8.8Hz,1H),7.98-8.03(m,2H),7.89(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),7.69-7.85(m,1H),7.67(dd,J＝8.7,1.4Hz,1H),5.11(宽单峰,1H),4.84-4.91(m,2H),4.55(d,J＝5.8Hz,1H),3.70-3.77(m,1H),3.67(s,3H),2.72(dd,J＝13.6,9.0Hz,1H),2.55-2.63(m,1H),2.39-2.50(m,2H),2.11-2.20(m,1H),2.02-2.11(m,1H),1.81-1.89(m,1H),1.45(宽单峰,9H),1.07-1.14(m,1H),1.00(d,J＝6.8Hz,3H),0.93(d,J＝6.8Hz,3H),0.84-0.93(m,2H),0.74(宽单峰,1H)。
方案41
Figure BDA00001874284602763
中间体159
1-(6-溴喹啉-2-基)乙酮
将3M HCl(水溶液)(10mL，30.0mmol)加入至6-溴-2-(1-乙氧基乙烯基)喹啉(780mg，2.80mmol)的丙酮(20mL)混悬液中且在室温搅拌反应混合物5小时。浓缩反应混合物，溶解于THF(20mL)中且用3N HCl(水溶液)(5mL)处理，在60℃搅拌澄清反应溶液5小时。冷却反应混合物，用NaOH水溶液及NaHCO3中和且用EtOAc萃取。干燥有机层并浓缩，得到呈白色固体状的粗1-(6-溴喹啉-2-基)乙酮(710mg)。LC-MS保留时间3.703分钟；m/z 250、251.99(1∶1)(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602771
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602772
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602773
中间体160
1-(6-(4-乙酰基苯基)喹啉-2-基)乙酮
将Pd(OAc)2(62.9mg，0.280mmol)加入至4-乙酰基苯基硼酸(689mg，4.20mmol)、1-(6-溴喹啉-2-基)乙酮(700mg，2.8mmol)、二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(230mg，0.560mmol)及K2CO3(1.16g，8.40mmol)于二噁烷(10mL)及水(2.500mL)中的溶液中且在110℃使反应混合物回流5小时。将反应混合物冷却至室温且分配于饱和NH4Cl水溶液与EtOAc之间。用NaHCO3及盐水洗涤有机层，接着干燥(MgSO4)，过滤，浓缩且通过快速硅胶色谱法(装载溶剂：DCM，用0~20%EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈白色固体状的1-(6-(4-乙酰基苯基)喹啉-2-基)乙酮(781mg)。LC-MS保留时间3.776分钟；m/z 290.29(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602774
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602775
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.35(d,J＝8.3Hz,1H),8.34(d,J＝8.3Hz,1H),8.19(d,J＝8.5Hz,1H),8.12(d,J＝8.3Hz,1H),8.08-8.16(m,3H),7.85(d,J＝8.3Hz,1H),7.82-7.89(m,1H),2.91(s,3H),2.69(s,3H)。
Figure BDA00001874284602776
中间体161
2-溴-1-(6-(4-(2-溴乙酰基)苯基)喹啉-2-基)乙酮
将三溴化吡啶鎓(221mg，0.691mmol)加入至1-(6-(4-乙酰基苯基)喹啉-2-基)乙酮(100mg，0.346mmol)及HBr(0.061mL，0.35mmol)于乙酸(3mL)中的混悬液中，在70℃搅拌反应混合物6小时。在真空浓缩反应混合物且使残余物分配于NaHCO3水溶液(15mL)与EtOAc(30mL+10mL+10mL)之间。合并有机层，用盐水洗涤，干燥，过滤并浓缩，得到呈白色固体状的粗2-溴-1-(6-(4-(2-溴乙酰基)苯基)喹啉-2-基)乙酮(120mg)。LC-MS保留时间4.138分钟；m/z 448.01(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602781
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602782
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602783
中间体162
(2S,4S)-4-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)苯基)喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯
将DIPEA(0.094mL，0.537mmol)加入至2-溴-1-(6-(4-(2-溴乙酰基)苯基)喹啉-2-基)乙酮(60mg，0.134mmol)及(2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸(64.6mg，0.282mmol)于乙腈(2mL)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。使反应混合物分配于EtOAc(20mL+20mL)/NaHCO3水溶液(5mL)之间。用NaHCO3水溶液、盐水洗涤合并的有机层，干燥，过滤并浓缩，得到呈橙色固体状的粗(2S,4S)-4-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)苯基)喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(100mg)。该物质无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间4.558分钟；m/z 742.36(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602784
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602791
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602792
中间体163
(2S,4S)-2-(5-(4-(2-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)喹啉-6-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将乙酸铵(207mg，2.69mmol)加入至(2S,4S)-4-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)苯基)喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(100mg，0.134mmol)的甲苯(3mL)溶液中且在120℃(微波反应器)搅拌反应混合物3小时。使反应混合物分配于EtOAc(20mL+10mL+10mL)与NaHCO3水溶液(10mL)之间且干燥合并的有机层，过滤并浓缩。通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-CH3CN)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的产物(2S,4S)-2-(5-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(16.6mg)。LC-MS保留时间3.270分钟；m/z 704.72(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602793
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602794
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602795
中间体164
2-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)-6-(4-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉
将4M HCl(0.2mL，0.800mmol)的二噁烷溶液加入至(2S,4S)-2-(5-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(16.6mg，0.024mmol)的二噁烷(1mL)溶液中且在室温搅拌反应混合物3天。浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的粗2-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)-6-(4-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉的盐酸盐(19.1mg)。LC-MS保留时间2.765分钟；m/z 504.47(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602801
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602802
Platform确定MS数据。
方案42
Figure BDA00001874284602803
中间体165
(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)苯基)喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯
将DIPEA(0.059mL，0.335mmol)加入至2-溴-1-(6-(4-(2-溴乙酰基)苯基)喹啉-2-基)乙酮(50mg，0.11mmol)及(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(54mg，0.24mmol)于乙腈(2mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物16小时。使反应混合物分配于EtOAc(20+20mL)/NaHCO3水溶液(5mL)之间。用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤合并的有机层，干燥，过滤并浓缩，得到呈橙色固体状的粗(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-(4-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)苯基)喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(69mg)。此粗物质无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间4.483分钟；m/z 744.61(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602811
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602812
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602813
中间体166
(2S,5S)-2-(5-(4-(2-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)喹啉-6-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将乙酸铵(107mg，1.39mmol)加入至(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(6-(4-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)苯基)喹啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯(69mg，0.093mmol)于甲苯(体积：2mL)中的混悬液中且在120℃(微波反应器)搅拌反应混合物3小时。使反应混合物分配于EtOAc(10mL+5mL+5mL)与NaHCO3水溶液(5mL)之间。干燥合并的有机层，过滤并浓缩，通过制备性HPLC纯化(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-CH3CN)粗产物，得到呈黄色固体状的产物(2S,5S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)喹啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(13.4mg)。LC-MS保留时间4.350min；m/z 702.29(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602814
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602821
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.37(d,J＝8.8Hz,1H),8.16(s,1H),8.07-8.10(m,2H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),7.79-7.88(m,5H),7.40(s,1H),4.90-5.07(m,2H),3.99-4.13(m,2H),2.10-2.39(m,6H),1.68-1.82(m,2H),1.43(d,J＝6.0Hz,6H),1.24-1.59(m,22H)。
Figure BDA00001874284602822
中间体167
2-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)-6-(4-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉
将4M HCl(0.2mL，0.8mmol)的二噁烷溶液加入至(2S,5S)-2-(5-(6-(4-(2-((2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉-2-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(12.7mg，0.018mmol)的二噁烷(1mL)溶液中且在室温搅拌混合物3天。浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的粗2-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)-6-(4-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉的盐酸盐(18.1mg)。LC-MS保留时间2.597分钟；m/z 504.46(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602823
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.09(d,J＝9.0Hz,1H),8.66(s,1H),8.54-8.61(m,2H),8.51(d,J＝9.0Hz,1H),8.50(d,J＝8.8Hz,1H),8.00-8.08(m,4H),7.99(s,1H),5.14(t,J＝8.5Hz,1H),5.07(t,J＝8.0Hz,1H),3.90-4.04(m,2H),2.52-2.75(m,4H),2.39-2.53(m,2H),1.98-2.14(m,2H),1.59(dd,J＝9.7,6.7Hz,6H)。
方案43
Figure BDA00001874284602831
以类似于中间体139的方式，在方案35中通过使用6-溴-2-氯喹喔啉而非6-溴-2-氯喹啉作为起始物质来制备中间体173。下文显示分析数据。
Figure BDA00001874284602832
中间体168
6-溴-2-(1-乙氧基乙烯基)喹喔啉
反应得到呈白色固体状的所需产物(380mg)。LC-MS保留时间4.178分钟；m/z 278.9、280.98(1:1)(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602833
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
中间体169
2-溴-1-(6-溴喹喔啉-2-基)乙酮
反应得到呈白色固体状的所需产物(390mg)。LC-MS保留时间3.743分钟；m/z 331.12(1:2:1)(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602836
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602841
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602842
中间体170
(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2,3-二羧酸3-(2-(6-溴喹喔啉-2-基)-2-氧代乙基)酯·2-叔丁酯
反应得到呈粉红色/橙色固体状的所需产物(270mg)。LC-MS保留时间4.115分钟；m/z 473、475.81(1∶1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602843
Luna 10uC183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602845
中间体171
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-溴-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
反应得到呈红色/橙色固体状的所需产物(125mg)。LC-MS保留时间3.958分钟；m/z 453.90、455.87(1∶1)(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602846
Luna10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602847
Platform确定MS数据。1HNMR(400MHz,MeOD)δppm 9.40(宽单峰,1H),8.22(d,J＝2.0Hz,1H),7.96(d,J＝8.8Hz,1H),7.93-7.99(m,1H),7.90(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),4.71-4.81(m,1H),3.59(宽单峰,1H),2.49-2.63(m,1H),2.31-2.45(m,1H),1.68-1.82(m,1H),1.16-1.53(m,5H),0.81-0.94(m,1H),0.64(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284602851
中间体172
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
反应得到呈亮黄色固体状的所需产物(64.4mg)。LC-MS保留时间3.696分钟；m/z 699.3(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602852
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602853
Platform确定MS数据。1H NMR (400MHz,DMSO-d6)δppm 9.45(s,1H),8.31(s,1H),8.19(d,J＝8.3Hz,1H),8.07(d,J＝8.8Hz,1H),7.97(s,1H),7.81-7.95(m,4H),7.60(s,1H),4.57-4.80(m,2H),3.23-3.60(m,2H),2.23-2.48(m,4H),1.61-1.75(m,2H),1.28(宽单峰,18H),0.73-0.87(m,2H),0.59(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284602854
中间体173
(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
反应得到呈黄色固体状的所需产物的盐酸盐(80mg)。LC-MS保留时间2.915分钟；m/z 501.42(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602861
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.54(s,1H),8.40-8.43(m,1H),8.34(s,1H),8.23-8.30(m,2H),8.13(s,1H),8.00-8.08(m,4H),4.88-5.08(m,2H),3.53-3.77(m,2H),2.64-2.90(m,4H),2.08-2.22(m,2H),1.23-1.36(m,2H),1.02-1.14(m,2H)。
方案44
Figure BDA00001874284602862
中间体174
(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸-叔丁酯
以类似于中间体153的方式，以适当起始物质制备化合物，得到呈黄色玻璃状的标题化合物的三氟乙酸盐(121mg)。LC-MS保留时间4.100分钟；m/z 647.37(MH-)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602864
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602871
中间体175
(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将2M HCl(0.33mL，0.66mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(5-((6-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯的三氟乙酸盐(115mg，0.131mmol)的二噁烷(2mL)溶液中且剧烈搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物，得到(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的盐酸盐(87mg)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS保留时间2.793分钟；m/z 449.41(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602872
Luna 3u C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602873
Platform确定MS数据。
方案45
Figure BDA00001874284602874
以类似于制备中间体117的方式，在方案29中使用(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸而非(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸作为起始物质来制备中间体178。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284602881
中间体176
(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸2-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙酯
反应得到呈棕褐色固体的所需产物(700mg)。LC-MS保留时间2.243分钟；m/z 717.5(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602882
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1.0mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602883
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602884
中间体177
((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯
反应得到呈黄色固体状的所需产物(453mg)。LC-MS保留时间2.407分钟；m/z 677.6(MH-)。在配备有Luna 3u C18 2.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1.0mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602886
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602887
中间体178
(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-1-氨基-2-甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-胺
反应得到呈黄色固体状的所需产物的盐酸盐(390mg)。LC-MS保留时间2.080分钟；m/z 477.4(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284602891
Luna 3u C18 2.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1.0mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602892
Platform确定MS数据。
方案46
以类似于制备中间体117的方式，在方案29中使用(S)-4-(叔丁氧基羰基)吗啉-3-羧酸而非(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸作为起始物质来制备中间体181。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284602894
中间体179
(S)-吗啉-3,4-二羧酸3-(2-(4-(6-(2-((S)-4-(叔丁氧基羰基)吗啉-3-羰基氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·4-叔丁酯
反应得到呈灰白色固体泡沫状的所需产物的盐酸盐(1.60g)。LC-MS保留时间4.413分钟；m/z 770.29(MNa+)。在配备有
Figure BDA00001874284602895
Luna 3uC182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602896
Platform确定MS数据。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.47(s,1H),8.13(s,1H),7.98-8.11(m,5H),7.86(d,J＝8.3Hz,3H),5.39-5.70(m,4H),4.66-4.83(m,2H),4.46-4.63(m,2H),3.91-4.03(m,2H),3.68-3.85(m,4H),3.49-3.59(m,3H),3.27-3.40(m,1H),1.51(s,18H)。
Figure BDA00001874284602901
中间体180
(R)-3-(5-(4-(6-(2-((R)-4-(叔丁氧基羰基)吗啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吗啉-4-羧酸叔丁酯
反应得到呈橙色固体状的所需产物(1.12g)。LC-MS保留时间3.608分钟；m/z 707.94(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602902
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR (400MHz,MeOD)δppm 8.22(宽单峰,1H),8.09(s,1H),7.90-7.97(m,2H),7.75-7.89(m,6H),7.49(宽单峰,1H),7.41(宽单峰,1H),5.17-5.24(m,2H),4.42(t,J＝11.2Hz,2H),3.82-3.95(m,6H),3.59(tt,J＝11.6,3.0Hz,2H),3.39-3.51(m,2H),1.50(d,J＝2.8Hz,18H)。
Figure BDA00001874284602904
中间体181
(R)-3-(5-(4-(6-(2-((R)-吗啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吗啉
反应得到呈黄色固体状的所需产物的盐酸盐(312mg)。LC-MS保留时间2.988分钟；m/z 507.72(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602905
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602911
Platform确定MS数据。
方案47
Figure BDA00001874284602912
以类似于制备中间体117的方式，在方案29中使用(S)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸而非(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸作为起始物质来制备中间体184。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284602913
中间体182
(S)-哌啶-1,2-二羧酸2-(2-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羰基氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯
反应得到呈浅黄色固化泡沫状的所需产物(1.67g)。LC-MS保留时间4.850分钟；m/z 766.37(MNa+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602915
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.47(s,1H),8.13(s,1H),7.99-8.10(m,5H),7.83-7.89(m,3H),5.32-5.67(m,4H),4.92-5.13(m,2H),3.93-4.11(m,2H),3.00-3.28(m,2H),2.40(宽单峰,2H),1.68-1.84(m,6H),1.49(s,18H),1.39-1.67(m,4H)
Figure BDA00001874284602921
中间体183
(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
反应得到呈亮黄色固体状的所需产物(1.18g)。LC-MS保留时间3.778分钟；m/z 703.97(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602922
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602923
Platform确定MS数据。1H NMR (400MHz,MeOD)δppm 8.22(宽单峰,1H),8.09(s,1H),7.93(t,J＝7.7Hz,2H),7.73-7.88(m,6H),7.46(宽单峰,1H),7.38(宽单峰,1H),5.47(宽单峰,2H),4.03-4.15(m,2H),2.99-3.12(m,2H),2.46(宽单峰,2H),1.80-1.94(m,2H),1.50(d,J＝2.3Hz,18H),1.44-1.76(m,8H)。
Figure BDA00001874284602924
中间体184
(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-哌啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶
反应得到呈黄色固体状的所需产物的盐酸盐(280mg)。LC-MS保留时间3.015分钟；m/z 503.69(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602925
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602926
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm 10.06(宽单峰,2H),9.85(宽单峰,2H),8.48(s,1H),8.36(s,1H),8.09-8.19(m,3H),7.96-8.09(m,7H),4.70(宽单峰,2H),3.42-3.53(m,2H),3.14(宽单峰,2H),2.10-2.37(m,4H),1.60-2.00(m,8H)。
方案48
Figure BDA00001874284602931
以类似于制备中间体117的方式，在方案29中使用(2S,5R)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(根据JOC 1995第5011页制备)而非(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸作为起始物质来制备中间体187。下文显示中间体的分析数据。
中间体185
(2S,5R)-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基)酯·1-叔丁酯
反应得到所需产物(979mg)。LC-MS保留时间4.796分钟；m/z 766.19(MNa+)。在配备有
Figure BDA00001874284602933
Luna 3u C182.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602934
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,氯仿-d)
Figure BDA00001874284602935
ppm 8.47(宽单峰,1H),8.13(d,J＝2.5Hz,1H),7.99-8.11(m,5H),7.86(dd,J＝7.8,2.3Hz,3H),5.21-5.77(m,4H),4.51-4.58(m,1H),4.47(dd,J＝7.8,4.5Hz,1H),4.17-4.26(m,1H),4.07-4.14(m,1H),2.23-2.48(m,6H),1.60-1.68(m,2H),1.44-1.52(m,18H),1.25(d,J＝6.3Hz,3H),1.21(d,J＝6.3Hz,3H)。
Figure BDA00001874284602941
中间体186
(2S,5R)-2-(5-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
反应得到呈橙色固体泡沫状的所需产物(561mg)。LC-MS保留时间3.673分钟；m/z 703.95(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602943
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284602944
中间体187
2-((2S,5R)-5-甲基吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((2S,5R)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑
反应得到呈浅橙色固体状的所需产物的盐酸盐(157mg)。LC-MS保留时间2.975分钟；m/z 503.71(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284602945
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602946
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.84-10.25(m,4H),8.54(s,1H),8.36(s,1H),7.95-8.22(m,10H),5.15(宽单峰,2H),4.00(宽单峰,2H),2.53-2.63(m,4H),2.30-2.41(m,2H),1.67-1.82(m,2H),1.43(d,J＝4.3Hz,6H)。
方案49
Figure BDA00001874284602951
如方案49中所示，使用(S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-亚甲基吡咯烷-2-羧酸作为起始物质来制备中间体189。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284602952
中间体188
(2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
将许尼希碱(0.43mL，2.47mmol)加入至经搅拌的(S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-亚甲基吡咯烷-2-羧酸(509mg，2.241mmol)及2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(500mg，1.121mmol)于MeCN(25mL)中的溶液中。在室温搅拌混合物18小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于乙酸乙酯中且用水、饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将残余物吸收于二甲苯(25mL)中且加入乙酸铵(1.3g，16.85mmol)。密封压力容器且在140℃加热2.5小时。将反应混合物溶解于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将粗产物装入(二氯甲烷)80gThompson硅胶柱中(用15%B至100%B洗脱，1L，其中溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到(2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(380mg，45%收率)。LC-MS保留时间3.32分钟；C42H47N6O4的计算值：699.36，m/z实测值：699.41[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284602961
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602962
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.21(s,1H),8.14(s,1H),7.98(s,1H),7.97(s,1H),7.87-7.83(m,6H),7.54(s,1H),7.46(s,1H),5.14(s,2H),5.19(s,2H),4.30(宽单峰,2H),4.15(宽单峰,2H),3.22-3.16(m,2H),2.81-2.76(m,2H),1.51/1.31(s,18H)。
Figure BDA00001874284602963
中间体189
2-((S)-4-亚甲基吡咯烷-2-基)-4-(4-(6-(2-((S)-4-亚甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑
将4N HCl的二噁烷溶液(10mL)加入至(2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(380mg，0.544mmol)的MeOH(10mL)溶液中且在环境条件下搅拌4小时，浓缩并真空干燥。四盐酸盐(假设理论值：350mg)。LC-MS保留时间2.68分钟；C32H31N6的计算值：499.26，m/z实测值：499.21[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284602964
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602965
Platform确定MS数据。
方案50
Figure BDA00001874284602971
如方案50中所示，使用(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸作为起始物质来制备中间体191。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284602972
中间体190
((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将许尼希碱(0.39mL，2.24mmol)加入至经搅拌的(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(424mg，2.24mmol)及2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(500mg，1.121mmol)于MeCN(50mL)中的溶液中。在室温搅拌混合物18小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于乙酸乙酯中且用水、饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将残余物吸收于二甲苯(25mL)中且加入乙酸铵(1.5g，20.18mmol)。密封压力容器且在140℃加热3.5小时。将反应混合物溶解于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将粗产物装入(二氯甲烷)90gThompson硅胶柱中(用15%B至100%B洗脱，1L，其中溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(368mg，47%收率)。应注意，样品仅部分溶解于二氯甲烷中。LC-MS保留时间3.24分钟；C36H43N6O4的计算值：623.33，m/z实测值：623.37[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284602981
Luna 2.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602982
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.20(s,1H),8.11(s,1H),7.95(t,J＝8.24Hz,2H),7.86-7.79(m,6H),7.46(s,1H),7.37(s,1H),4.93-4.89(m,2H),1.57-1.48(m,24H)。
Figure BDA00001874284602983
中间体191
(S)-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-氨基乙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙胺
将4N HCl的二噁烷溶液(10mL)加入至((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(368mg，0.59mmol)的MeOH(10mL)溶液中且在环境条件下搅拌5小时，浓缩并真空干燥。四盐酸盐(假设理论值：334mg)。LC-MS保留时间1.33分钟；C26H27N6的计算值：423.23，m/z实测值：423.17[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284602984
Luna 2.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284602985
Platform确定MS数据。
方案51
Figure BDA00001874284602991
如方案51中所示，使用(S)-2-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)丙酸作为起始物质来制备中间体193。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284602992
中间体192
((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯
将许尼希碱(0.78mL，4.48mmol)加入至经搅拌的(S)-2-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)丙酸(456mg，2.241mmol)及2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(500mg，1.121mmol)于MeCN(50mL)中的溶液中。在室温搅拌混合物18小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于乙酸乙酯中且用水、饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将残余物吸收于二甲苯(25mL)中且加入乙酸铵(859mg，11.15mmol)。密封压力容器且在140℃加热3小时。将反应混合物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将粗产物装入(二氯甲烷)90gThompson硅胶柱中(用15%B至100%B洗脱，1L，其中溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯(460mg，58%收率)。LC-MS保留时间3.28分钟；C38H47N6O4的计算值：651.37，m/z实测值：651.34[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603001
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603002
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.24-8.12(m,2H),7.98-7.82(m,8H),7.52-7.42(m,2H),5.47(宽单峰,2H),2.77(s,3H),2.76(s,3H),1.64(m,6H),1.52(s,18H)。
Figure BDA00001874284603003
中间体193
(S)-N-甲基-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-(甲基氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙胺
将4N HCl的二噁烷溶液(10mL)加入至((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯(434mg，0.667mmol)的MeOH(10mL)溶液中且在环境条件下搅拌3小时，浓缩并真空干燥。四盐酸盐(假设理论值：396mg)。LC-MS保留时间1.44分钟；的计算值：C28H31N6:451.26，m/z实测值：451.17[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603004
Luna 2.0×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603005
Platform确定MS数据。
方案52
如方案52中所示，使用(2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸作为起始物质来制备中间体196。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284603012
中间体194
(2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸
将(S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-亚甲基吡咯烷-2-羧酸(4g，17.60mmol)的2-丙醇(10mL)溶液加入至经氮气净化的10%钯/炭(936mg)的2-丙醇(240mL)混悬液中且向烧瓶中装入氢气(1atm)。搅拌18小时后，通过
Figure BDA00001874284603013
过滤来除去催化剂且浓缩滤液。LC分析显示样品含有约14%反式异构体，且由甲苯中重结晶使顺式异构体富集至96%(16:1)。LC-MS保留时间3.26分钟；C11H20N6O4的计算值：230.14，m/z实测值：252.14[M+Na]+。在配备有
Figure BDA00001874284603014
2×5mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%甲醇/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603015
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 4.21-4.17(m,1H),3.76-3.67(m,1H),2.96-2.92(m,1H),2.49-2.46(m,1H),2.30-2.29(m,1H),1.59-1.51(m,1H),1.47/1.43(m,9H),1.10-1.06(m,3H)。
Figure BDA00001874284603021
中间体195
(2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
将许尼希碱(0.381mL，2.181mmol)加入至经搅拌的(2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸(500mg，2.18mmol)及2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(486mg，1.09mmol)于乙腈(11mL)中的溶液中。在室温搅拌不均匀混合物18小时且再加入许尼希碱(1当量)并搅拌混合物24小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于二氯甲烷中且用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，并经硫酸钠干燥。重复洗涤2次。将所分离的呈棕褐色泡沫状的粗产物吸收于二甲苯(15mL)中且加入乙酸铵(1.261g，16.36mmol)。密封压力容器，置于预加热油浴(140℃)中并搅拌2小时。将反应混合物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将粗产物装入(二氯甲烷)80gThompson硅胶柱(用25%B至100%B洗脱，1.5L且保持0.5L B。溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到呈黄色泡沫状的(2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(214.2mg，27.9%)。LC-MS保留时间3.32分钟；C42H51N6O4的计算值：703.40，m/z实测值：703.28[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603022
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.20(s,1H),8.12(s,1H),7.96-7.94(m,2H),7.87-7.82(m,6H),7.50(s,1H),7.42(s,1H),4.87(宽单峰,2H),3.81(宽单峰,2H),3.24-3.18(m,2H),2.53-2.50(m,2H),2.36(宽单峰,2H),1.82-1.74(m,2H),1.46/1.23(s,18H),1.17-1.16(m,6H)。
Figure BDA00001874284603031
中间体196
2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑
将4N  HCl  的二噁烷溶液(15mL)加入至(2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(200mg，0.285mmol)的MeOH(5mL)溶液中且在环境条件下搅拌2小时，浓缩并真空干燥。四盐酸盐(假设理论值：185mg)。LC-MS保留时间2.64分钟；C32H35N6的计算值：503.29，m/z实测值：503.20[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603032
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603033
Platform确定MS数据。
方案53
Figure BDA00001874284603041
如方案53中所示，使用(2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸作为起始物质来制备中间体201。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284603042
中间体197
自可根据Tetrahedron Letters,2003,3203-3205中所述的操作由(S)-2-甲基-5-氧代吡咯烷-1,2-二羧酸1-叔丁酯的碘代甲烷烷基化获得的顺式、反式及二甲基类似物的混合物分离反式异构体。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm4.66-4.64(m,1H),3.80(s,3H),2.34-2.29(m,1H),2.04-1.99(m,1H),1.49(s,9H),1.21-1.19(m,3H)。
中间体198
将甲硼烷-甲基硫化物复合物(17.67mL，35.3mmol)加入至中间体197(6.06g，23.55mmol)的THF(180mL)溶液中，且在40℃加热反应混合物16小时。在真空中除去溶剂且使残余物分配于EtOAc与水(各250mL)之间。用EtOAc(2×60mL)萃取水层，用Na2SO4干燥合并的有机相，且在真空中浓缩。用快速色谱法(10-65%EtOAc/己烷)纯化所得无色油状物，得到呈无色油状的中间体198(3.65g)。1H NMR(CDCl3,δ=7.24ppm,400MHz):4,36-4.33(dd,J=2.4,10,0.4H),4.26-4.23(dd,J=3,8.9,0.6H),3.73-3.63('s'与'm'重叠,4H),2.97-2.85(m,1H),2.37(m,1H),2.04(m,1H),1.81(m,1H),1.44-1.39(两个's',9H),1.03-1.00(两个's',3H)。
中间体199
(2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸
向酯中间体198(3.63g，14.92mmol)的乙醇(36mL)溶液中加入LiOH(0.393g，10.42mmol)的水(18.00mL)溶液，且在室温搅拌反应混合物22小时。在真空中蒸发有机溶剂，用水(30mL)稀释残余物且用乙酸乙酯(50mL)洗涤。在冰水浴中冷却，且用1N HCl酸化至约2的pH值范围。接着用EtOAc(50mL，2次)萃取。用Na2SO4干燥有机层且在真空中浓缩，得到呈无色油状的中间体199，其在长时间暴露于高真空后变成白色固体(3.3g)。1H NMR(CDCl3,δ=7.24ppm,400MHz):4.37-4.27(重叠'm'1H),3.72-3.50(m,1H),3.01-2.83(重叠'm',1H),2.50-2.11(m,2H),1.89-1.57(m,1H),1.47-1.39(两个's',9H),1.04-1.03(两个's',3H)。
Figure BDA00001874284603052
中间体200
(2S,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯
将许尼希碱(0.381mL，2.181mmol)加入至经搅拌的(2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸(500mg，2.18mmol)及2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(486mg，1.09mmol)于乙腈(11mL)中的溶液中。在室温搅拌不均匀混合物18小时且再加入许尼希碱(1当量)并搅拌混合物24小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于二氯甲烷中且用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，并经硫酸钠干燥。重复洗涤2次。将所分离的呈棕褐色泡沫状的粗产物吸收于二甲苯(15mL)中且加入乙酸铵(1.261g，16.36mmol)。密封压力容器且置于预加热油浴(140℃)中并搅拌2小时。将反应混合物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将粗产物装入(二氯甲烷)80gThompson硅胶柱(用25%B至100%B洗脱，1.5L且保持0.5L B。溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到呈黄色泡沫状的(2S,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(214.2mg，27.9%)。LC-MS保留时间3.32分钟；C42H51N6O4的计算值：703.40，m/z实测值：703.28[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603061
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603062
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.20(s,1H),8.12(s,1H),7.96-7.94(m,2H),7.87-7.82(m,6H),7.50(s,1H),7.42(s,1H),4.87(宽单峰,2H),3.81(宽单峰,2H),3.24-3.18(m,2H),2.53-2.50(m,2H),2.36(宽单峰,2H),1.82-1.74(m,2H),1.46/1.23(s,18H),1.17-1.16(m,6H)。
Figure BDA00001874284603063
中间体201
2-((2S,4R)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4R)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑
将4N HCl的二噁烷溶液(15mL)加入至(2S,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(200mg，0.285mmol)的MeOH(5mL)溶液中且在环境条件下搅拌2小时，浓缩并真空干燥。四盐酸盐(假设理论值：185mg)。LC-MS保留时间2.64分钟；C32H35N6的计算值：503.29，m/z实测值：503.20[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603071
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603072
Platform确定MS数据。
方案54
Figure BDA00001874284603073
如方案54中所示，使用(1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(其可根据WO 2004/052850制备)作为起始物质来制备中间体203。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284603074
中间体202
(1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将许尼希碱(0.384mL，2.2mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(0.491g，1.100mmol)及(1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(500mg，1.1mmol)于乙腈(11mL)中的溶液中。在室温搅拌不均匀混合物20小时，在真空中除去溶剂。将残余物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，并经硫酸钠干燥。重复洗涤2次。将粗产物吸收于二甲苯(11mL)中且加入乙酸铵(1.27g，16.5mmol)。密封压力容器且置于预加热油浴(140℃)中并搅拌2小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将粗产物装入(二氯甲烷)80gThompson硅胶柱(用25%B至100%B洗脱，1.5L且保持0.5L B。溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到呈浅黄色固体状的(1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(418.9mg，43%)。LC-MS保留时间3.46分钟；C42H47N6O4的计算值：699.37，m/z实测值：699.33[M+H]+。在配备有Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603082
Platform确定MS数据。1H NMR (500MHz,MeOD)δppm 8.18(s,1H),8.11(s,1H),7.96-7.93(m,2H),7.85-7.80(m,6H),7.45(宽单峰,1H),7.37(宽单峰,1H),5.36(宽单峰,2H),3.72(宽单峰,1H),3.64(宽单峰,1H),2.82(宽单峰,1H),2.72(宽单峰,1H),2.43(宽单峰,1H),2.15(宽单峰,1H),1.70(宽单峰,2H),1.55/1.33(s,18H),1.10(宽单峰,1H),0.94(宽单峰,1H),0.88(宽单峰,1H),0.81(宽单峰,1H)。
中间体203
(1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将4N HCl的二噁烷溶液(10mL)加入至(1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(375mg，0.537mmol)的MeOH(3mL)溶液中且在环境条件下搅拌2小时，浓缩并真空干燥。四盐酸盐(假设理论值：346mg)。LC-MS保留时间2.75分钟；C32H31N6的计算值：499.26，m/z实测值：499.22[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603091
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603092
Platform确定MS数据。
方案55
Figure BDA00001874284603093
如方案55中所示，使用(1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(其可根据WO 2004/052850制备)作为起始物质来制备中间体209。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284603094
中间体204
在-50℃在干冰/丙酮浴中历时10分钟向中间体197的非对映异构混合物(在带有甲基的碳处)(4.75g，18.46mmol)的溶液中逐滴加入超氢化物(19.20mL，19.20mmol)。加入许尼希碱(13.58mL，78mmol)，搅拌10分钟，加入呈固体状的DMAP(0.122g，0.997mmol)，搅拌15分钟，且历时15分钟逐滴加入三氟乙酸酐(2.98mL，21.08mmol)。移除干冰/丙酮浴且搅拌反应混合物4小时，同时使其温热至室温。用水(50mL)、饱和NaCl(30mL)洗涤反应混合物且在真空中浓缩。通过快速色谱法(8-60%EtOAc/己烷)纯化所得粗物质，得到呈黄色油状的酯中间体204(2.85g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):6.36(s,0.5H),6.25(s,0.5H),4.70-4.57(m,1H),3.78(s,3H),2.96(m,1H),2.54(m,1H),1.70(s,3H),1.50(s,4.5H),1.44(s,4.5H)。
Figure BDA00001874284603101
中间体205及中间体206
历时20分钟将二乙基锌(1.1M甲苯溶液，59.1mL，65.0mmol)逐滴加入至经冷却(-23℃)的中间体203(5.23g，21.68mmol)的甲苯(60mL)溶液中且搅拌10分钟。历时10分钟逐滴加入氯碘甲烷(9.44mL，130mmol)，且在-21℃搅拌反应混合物16小时。将饱和NaHCO3(60mL)加入至反应混合物中，移除冷却浴，且搅拌混合物10分钟。接着过滤并用甲苯(50mL)洗涤滤饼。分配滤液，用Na2SO4干燥有机层，且在真空中浓缩。用快速色谱法纯化(2-10%EtOAc/己烷)所得粗物质，得到中间体205(第一洗脱液；无色油状物；2.88g)及中间体206(第二洗脱液；无色油状物；1.01g)。基于NOE研究进行相对立体化学指定。中间体205：1H NMR(CDCl3,400MHz):4.65-4.52(m,1H),3.72(s,3H),3.28-3.17(m,1H),2.44-2.32(m,1H),2.16-2.10(m,1H),1.51-1.42(两个单峰,9H),1.24(s,3H),1.07(m,1H),0.69-0.60(m,1H)。
Figure BDA00001874284603102
中间体207
(1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸向中间体205(2.88g，11.28mmol)的乙醇(20mL)溶液中加入LiOH(0.324g，13.54mmol)的水(10.00mL)溶液，且在室温搅拌混合物6小时。在真空中除去大部分挥发性组分，且使残余物分配于水(20mL)与乙醚(20mL)之间。在冰水浴中冷却水层，用1N HCl酸化至2的pH值区域，且用EtOAc(30mL，4次)萃取。用Na2SO4干燥合并的有机相，在真空中蒸发，产生呈粘稠固体状的中间体207(2.55g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):4.64(m,1H),3.25(明显的单峰,1H),2.70-2.40(m,1H),2.14(m,1H),1.54-1.44(m,9H),1.27(s,3H),1.10-0.80(m,1H),0.67(m,1H)。
Figure BDA00001874284603111
中间体208
(1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将许尼希碱(0.475mL，2.72mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(0.607g，1.36mmol)及(1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(729.0mg，2.72mmol)于无水乙腈(12mL)中的溶液中。在室温搅拌不均匀混合物20小时，在真空中除去溶剂。将残余物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，并经硫酸钠干燥。重复洗涤2次。将粗产物吸收于二甲苯(12mL)中且加入乙酸铵(1.57g，20.39mmol)。密封压力容器且置于预加热油浴(140℃)中并搅拌2小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将粗产物装入(二氯甲烷)80gThompson硅胶柱(用25%B至100%B洗脱，1.5L且保持0.5L B。溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到呈浅黄色固体状的(1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(279mg，27%)。LC-MS保留时间3.56分钟；C44H51N6O4的计算值：727.40，m/z实测值：727.41[M+H]+。在配备有2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603121
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.18(s,1H),8.11(s,1H),7.96-7.93(m,2H),7.83-7.80(m,6H),7.43(宽单峰,1H),7.35(宽单峰,1H),5.35(宽单峰,2H),3.42(宽单峰,1H),3.36(宽单峰,1H),2.61(宽单峰,1H),2.53(宽单峰,2H),2.72(宽单峰,1H),1.55/1.33(s,25H),1.06(宽单峰,1H),0.85(宽单峰,1H),0.72(宽单峰,1H)。
中间体209
(1S,3S,5S)-5-甲基-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将4N HCl的二噁烷溶液(15mL)加入至(1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(250mg，0.344mmol)的MeOH(5mL)溶液中且在环境条件下搅拌2小时，浓缩并真空干燥。四盐酸盐(假设理论值：231mg)。LC-MS保留时间3.09分钟；C34H35N6的计算值：527.29，m/z实测值：527.35[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603123
2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603124
Platform确定MS数据。
方案56
Figure BDA00001874284603131
如方案56中所示，使用(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(其可根据WO 2004/052850制备)作为起始物质来制备中间体212。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284603132
中间体210
(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸
如上文对于中间体207所述，由中间体206制备中间体210。1H NMR(CDCl3,400MHz):4.13(明显的宽单峰,1H),3.06(明显的宽单峰,1H),2.55/2.41(重叠app宽单峰,2H),1.51(s,9H),1.27(s,3H),0.76(明显的三重峰,J=5.6,1H),0.60(明显的宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284603133
中间体211
(1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯
将许尼希碱(0.29mL，1.66mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(0.37g，0.83mmol)及(1R,3R,5S)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸(0.40g，1.66mmol)于无水乙腈(9mL)中的溶液中。在室温搅拌不均匀混合物20小时，在真空中除去溶剂。将残余物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，并经硫酸钠干燥。重复洗涤2次。将粗产物吸收于二甲苯(9mL)中且加入乙酸铵(1.3g，16.6mmol)。密封压力容器且置于预加热油浴(140℃)中并搅拌2小时。在真空中除去溶剂，将残余物吸收于乙酸乙酯中且用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。浓缩后，将粗产物装入(二氯甲烷)80gThompson硅胶柱(用25%B至100%B洗脱，1.5L且保持0.5L B。溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)，得到(1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(80mg，10%)。LC-MS保留时间3.37分钟；C44H51N6O4的计算值：727.40，m/z实测值：727.38[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603141
2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603142
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.19(s,1H),8.08(s,1H),7.92-7.91(m,2H),7.85-7.77(m,6H),7.47(s,1H),7.38(s,1H),4.67(宽单峰,2H),3.93-3.90(m,2H),2.63-2.57(m,2H),2.20-2.14(m,2H),1.31-1.23(m,24H),0.92(app.d,J=6.7Hz,1H),0.82(宽单峰,1H),0.77-0.75(m,2H)。
Figure BDA00001874284603143
中间体212
(1R,3S,5R)-5-甲基-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将4N HCl的二噁烷溶液(15mL)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(48mg，0.066mmol)的MeOH(1mL)溶液中且在环境条件下搅拌2小时，浓缩并真空干燥。四盐酸盐(假设理论值：44mg)。LC-MS保留时间2.82分钟；C34H35N6的计算值：527.29，m/z实测值：527.26[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603151
2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
方案57
Figure BDA00001874284603161
如方案57中所示，使用(2S，4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸(中间体194)作为起始物质来制备中间体218。下文显示中间体的分析数据。
Figure BDA00001874284603162
(2S，4S)-2-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将许尼希碱(1.6mL，9.0mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(6-溴萘-2-基)乙酮(3.0g，9.0mmol)及(2S，4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸(2.062g，8.99mmol)于无水乙腈(100mL)中的混合物中且在室温搅拌16小时。再加入(S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸(500mg)及许尼希碱(0.4mL)且持续搅拌15小时。通过旋转蒸发除去溶剂，将残余物吸收于EtOAc中且用饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)。在浸没于140℃油浴中的密封压力容器中，将酯吸收于二甲苯(100mL)中且用NH4OAc(10.40g，135mmol)处理，并搅拌2小时。通过在高真空旋转蒸发除去溶剂，将残余物吸收于EtOAc中且用饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)。
用Thompson300g硅胶柱(梯度洗脱3%B至100%B，4.5L且保持0.5LB；溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)纯化此残余物，得到呈泡沫状的(2S,4S)-2-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2g)。出于表征的目的，将约25mg溶解于甲醇(2mL)中且在
Figure BDA00001874284603171
Luna柱(30×100mm，10u)上进行制备性HPLC(梯度0-100%B，历时25分钟，以40mL/min)纯化；溶剂B=95%CH3CN-5%H2O-10mM NH4OAc且A=5%CH3CN-95%H2O-10mM NH4OAc。LC-MS保留时间2.61分钟；C23H27BrN3O2的计算值：456.13m/z；实测值：456.09[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284603172
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603173
Platform确定MS数据。1HNMR(500MHz,MeOD)δppm 8.18(s,1H),8.03(s,1H),7.89(d,J＝8.6Hz,1H),7.82(d,J＝8.6Hz,1H),7.79(d,J＝8.6Hz,1H),7.57(d,J＝10.4Hz,1H),7.51(s,1H),4.91(宽单峰,1H),3.81(t,J＝8.3Hz,1H),3.21(t,J＝8.3Hz,1H),2.53-2.48(m,1H),2.37-2.34(m,1H),1.81-1.73(m,1H),1.46/1.21(s,9H),1.16(d,J＝6.1Hz,3H)。
Figure BDA00001874284603174
中间体214
(2S,4S)-2-(4-(6-溴萘-2-基)-5-氯-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将NCS(203mg，1.52mmol)加入至(2S,4S)-2-(5-(6-溴萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(560mg，1.39mmol)的无水DMF(15mL)溶液中且在50℃加热混合物16小时。通过用氮气净化除去溶剂且用Thompson90g硅胶柱(梯度洗脱5%-100%B，2L；溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)纯化残余物，得到呈棕褐色泡沫状的(2S,4S)-2-(4-(6-溴萘-2-基)-5-氯-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(255mg)。出于表征的目的，将约20mg溶解于甲醇(2mL)中且在
Figure BDA00001874284603181
Luna柱(30×100mm，10u)上进行制备性HPLC(梯度0-100%B，历时25分钟，以40mL/min)纯化；溶剂B=95%CH3CN-5%H2O-10mM NH4OAc且A=5%CH3CN-95%H2O-10mM NH4OAc。LC-MS保留时间2.61分钟；C23H26BrClN3O2的计算值：492.09m/z；实测值：492.03[M+H]。在配备有Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603183
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.18(s,1H),8.09(s,1H),7.91(宽单峰,2H),7.83(d,J＝8.6Hz,1H),7.63(d,J＝8.6Hz,1H),4.79-4.75(m,1H),3.78(t,J＝8.9Hz,1H),3.19(t,J＝10.4Hz,1H),2.49(五重峰,J＝6.1Hz,1H),2.36-2.32(m,1H),1.78(q,J=11.9Hz,1H),1.45/1.24(s,9H),1.15(d,J＝6.1Hz,3H)。
Figure BDA00001874284603184
中间体215
(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将许尼希碱(2.3mL，13.1mmol)加入至经搅拌的2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(3.64g，13.1mmol)及(2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸(3.0g，13mmol)于无水乙腈(150mL)中的混合物中且在室温搅拌16小时。通过旋转蒸发除去溶剂，将残余物吸收于EtOAc中且用水、饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)。在浸没于140℃油浴中的密封压力容器中，将所得酯吸收于二甲苯(150mL)中且用NH4OAc(15.1g，196mmol)处理，并搅拌2小时。通过在高真空旋转蒸发除去溶剂，将残余物吸收于EtOAc中且用饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。用Thompson300g硅胶柱(梯度洗脱3%B至100%B，4.5L且保持0.5L B；溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)纯化粗产物，得到呈泡沫状的(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(3.5g，59%)。出于表征的目的，将约25mg溶解于甲醇(2mL)中且在
Figure BDA00001874284603191
Luna柱(30×100mm，10u)上进行制备性HPLC(梯度0-100%B，历时25分钟，以40mL/min)纯化；溶剂B=95%CH3CN-5%H2O-10mM NH4OAc且A=5%CH3CN-95%H2O-10mM NH4OAc。LC-MS保留时间3.06分钟；C19H25BrN3O2的计算值：408.11m/z；实测值：408.16[M+H]。在配备有
Figure BDA00001874284603192
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm7.62(d,J=8.2Hz,2H),7.51(d,J＝8.6Hz,2H),7.38(s,1H),4.84-4.81(m,1H),3.79(t,J＝8.6Hz,1H),3.17(t,J＝10.4Hz,1H),2.50-2.45(m,1H),2.36-2.31(m,1H),1.76-1.69(m,1H),1.45/1.20(s,9H),1.14(d,J=6.1Hz,3H)。
Figure BDA00001874284603194
中间体216
(2S,4S)-4-甲基-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将Pd(Ph3P)4(213mg，0.185mmol)加入至经氮气净化的(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.5g，3.7mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(1.88g，7.38mmol)及乙酸钾(906mg，9.23mmol)于二噁烷(35mL)中的混悬液中。使压力反应容器脱气，密封并浸没于85℃油浴中达16小时。用EtOAc稀释混合物且用饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。用Thompson160g硅胶柱(梯度洗脱10%至100%B，1L。溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)纯化粗产物，得到呈泡沫状的(2S,4S)-4-甲基-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.8g，97%)。LC-MS保留时间1.78分钟；C19H27BN3O4的计算值：372.21m/z；实测值：372.18[M+H]。在配备有
Figure BDA00001874284603195
Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603201
Platform确定MS数据。
中间体217
(2S,4S)-2-(5-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
将Pd(Ph3P)4(27.1mg，0.023mmol)加入至经氮气净化的(2S,4S)-2-(5-(6-溴萘-2-基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(230mg，0.469mmol)、(2S,4S)-4-甲基-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(234mg，0.515mmol)及NaHCO3(197mg，2.34mmol)于经氩气脱气的DME(4mL)及水(1mL)溶液中的混悬液中。将氩气装入压力容器中，密封，且浸没于预加热油浴(85℃)中并搅拌14小时。用EtOAc稀释混合物(应注意：加入THF及MeOH以助于溶解)且用饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。使用Thompson90g SiO2柱(梯度洗脱5%100%B，2L且保持0.5L，溶剂B=乙酸乙酯且溶剂A=己烷)纯化残余物，得到呈泡沫状的(2S,4S)-2-(5-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(270mg，70%)。出于表征的目的，将约20mg溶解于MeOH(至多2mL)中且使用
Figure BDA00001874284603203
Luna柱(30×100mm，S10)进行制备性HPLC(0至100%B，历时30分钟，梯度，以40ml/min)纯化，其中B=95%CH3CN-5%H2O-10mM NH4OAc且A=5%CH3CN-95%H2O-10mM NH4OAc。LC-MS保留时间3.90分钟；C42H50ClN6O4的计算值：737.36m/z；实测值：737.43[M+H]。在配备有Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1％TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.21(s,1H),8.16(s,1H),8.03(d,J＝8.6Hz,1H),7.99(d,J＝8.6Hz,2H),7.91-7.81(m,6H),7.42(s,1H),4.86(在MeOH下,1H),4.80-4.877(m,1H),3.82-3.77(m,2H),3.20(t,J＝10.4Hz,2H),2.52-2.47(m,2H),2.37-2.34(m,2H),1.83-1.73(m,2H),1.46/1.26/1.23(s,18H),1.16(m,6H)。
Figure BDA00001874284603213
中间体218
4-氯-2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-5-(6-(4-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑
将4N HCl的二噁烷溶液(5mL)加入至经搅拌的(2S,4S)-2-(5-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-4-氯-1H-咪唑-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30mg，0.041mmol)的MeOH(1mL)溶液中且在室温搅拌混合物2小时，浓缩，并在高真空干燥2小时。LC-MS保留时间3.31分钟；C32H34ClN6的计算值：53726，m/z实测值：537.37[M+H]。在配备有Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603215
Platform确定MS数据。
方案58
Figure BDA00001874284603221
中间体219
(S)-4,5-二氢-1H-吡唑-5-羧酸甲酯
将DMAP(2.83g，23.2mmol)加入至(S)-4,5-二氢-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(根据J.Am.Chem.Soc.,119:8379-8380(1997)制备；2.95g，23.02mmol)及Boc2O(11.9mL，51.2mmol)于CH2Cl2(40mL)中的溶液中且在环境条件下搅拌22.5小时。再加入Boc2O(1.83g)且持续搅拌15小时。将硅胶加入至反应混合物中且在真空中除去溶剂，对所得筛进行
Figure BDA00001874284603222
纯化(300g硅胶：用30-50%EtOAc/己烷洗脱柱)，得到呈黄色油状的(S)-4,5-二氢-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(3.956g)。也得到受产物污染的起始吡唑啉样品(695mg)。1H NMR(CDCl3,δ=7.24ppm,400MHz):6.80(s,1H),4.67(dd,J=12.6,6.1Hz,1H),3.75(s,3H),3.22(ddd,J=18.5,12.6,1.4Hz,1H),2.94(ddd,J=18.5,6.1,1.7Hz,1H),1.5(s,9H)。LC-MS:[M+Na]+C10H16N2NaO4的分析计算值：251.10；实测值：251.26。
Figure BDA00001874284603223
中间体220
(S)-1H-吡唑-1,5(4H,5H)-二羧酸1-叔丁酯·5-甲酯
历时1分钟将氰基硼氢化钠(0.769g，12.2mmol)分批加入至(S)-4,5-二氢-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(1.05g，4.61mmol)的乙酸(7.0mL)溶液中，且在环境条件下搅拌20小时。历时4分钟逐滴加入甲醛(1mL 37%水溶液)，且持续搅拌4.5小时。在真空中除去挥发性组分且用饱和NaHCO3(10mL)及CH2Cl2(30mL)处理残余物，振荡混合物并分离各相。再用饱和NaHCO3溶液(10mL)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。用
Figure BDA00001874284603224
(240g硅胶；用CH2Cl2装载样品；用60-100%EtOAc/己烷洗脱)纯化所得粗物质，得到呈无色油状的(S)-1H-吡唑-1,5(4H,5H)-二羧酸1-叔丁酯·5-甲酯(861mg)。1H NMR(CDCl3,δ=7.24ppm,400MHz):4.39(app brt,J=7.7,1H),3.74(s,3H),3.15-3.02(m,2H),2.64(s,3H),2.48-2.40(m,1H),2.30-2.21(m,1H),1.45(s,9H)。LC-MS:[M+Na]+C11H20N2NaO4的分析计算值：267.13；实测值：267.28。
Figure BDA00001874284603231
中间体221
(S)-2-(叔丁氧基羰基)吡唑烷-3-羧酸锂
将LiOH(0.146g，6.09mmol)的水(5mL)溶液加入至(S)-1H-吡唑-1,5(4H,5H)-二羧酸1-叔丁酯·5-甲酯(0.76g，3.11mmol)的甲醇(5mL)溶液中，且在环境条件下搅拌约7小时。用冰水浴冷却反应混合物，逐滴加入HCl/H2O(3mL 1.00N；3.0mmol)并搅拌数分钟。接着在真空中除去挥发性组分且使所得粘稠油状物暴露于高真空，得到呈白色泡沫状的(S)-2-(叔丁氧基羰基)吡唑烷-3-羧酸锂，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(DMSO-d6,δ=2.50ppm,400MHz)粗样品:3.98(dd,J=8.5,6.3,1H),2.86-2.74(m,2H),2.45(s,3H),2.25-2.17(m,1H),2.10-2.02(m,1H),1.35(s,9H)。LC-MS:[M+H]+C10H19N2O4的分析计算值：231.13；实测值：231.21。
方案59
Figure BDA00001874284603232
中间体222
2-氨基-1-(4-(6-(2-氨基乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮
用氯仿(30mL)将2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(1.0g，2.2mmol)及六亚甲基四胺(0.660g，4.71mmol)的淤浆制成淤浆且在50℃加热2小时。使反应混合物冷却至室温且通过过滤收集固体(用氯仿淋洗，3×25mL)。用MeOH(15.0mL)将所得亮黄色固体制成淤浆，接着逐滴加入浓HCl(3.0mL，99mmol)且在黑暗中搅拌反应混合物2天。将反应混合物浓缩成固体，用水制成淤浆且搅拌1小时。通过过滤收集固体且在真空烘箱中干燥滤饼，得到2-氨基-1-(4-(6-(2-氨基乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮的盐酸盐(787mg)。LC-MS保留时间2.342分钟；m/z 319.09(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603241
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603242
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284603243
中间体223
(S)-5-(2-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基吡唑烷-3-甲酰氨基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-2-甲基吡唑烷-1-羧酸叔丁酯
将HATU(1577mg，4.15mmol)加入至经搅拌的2-氨基-1-(4-(6-(2-氨基乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮的盐酸盐(773mg，1.98mmol)及(S)-2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基吡唑烷-3-羧酸锂(980mg，4.15mmol)于DMF(15mL)及许尼希碱(2.070mL，11.85mmol)中的溶液中且搅拌反应混合物2小时。将反应混合物浓缩至约20%体积，用MeOH稀释，过滤且通过HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈亮黄色固体状的(S)-5-(2-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基吡唑烷-3-甲酰氨基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-2-甲基吡唑烷-1-羧酸叔丁酯(537mg)。LC-MS保留时间3.758分钟；m/z741.55(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284603244
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603251
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284603252
中间体224
(S)-5-(5-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基吡唑烷-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基吡唑烷-1-羧酸叔丁酯
在25mL压力管中，用二甲苯(7mL)将(S)-5-(2-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基吡唑烷-3-甲酰氨基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-2-甲基吡唑烷-1-羧酸叔丁酯(420mg，0.565mmol)及乙酸铵(872mg，11.3mmol)制成淤浆。密封反应容器且在135℃加热5小时，接着在室温过夜。用半饱和NaHCO3水溶液(40mL)稀释粗反应混合物且用DCM(3×30mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并浓缩，得到呈深黄色玻璃状的(S)-5-(5-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基吡唑烷-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基吡唑烷-1-羧酸叔丁酯(95mg，约80%纯度)。LC-MS保留时间4.026分钟；m/z 703.63(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284603253
Luna 3u C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.32(s,1H),8.28(s,1H),8.15(d,J＝8.8Hz,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,1H),7.86-8.03(m,8H),5.31-5.39(m,2H),3.22-3.35(m,4H),2.82-2.93(m,2H),2.77(s,3H),2.76(s,3H),2.53-2.65(m,2H),1.43(s,18H)。
方案60
Figure BDA00001874284603261
条件1
Figure BDA00001874284603262
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=4分钟
终止时间=5分钟
流速=0.8mL/min
波长=220nm
溶剂A=含0.1%TFA的10%甲醇/90%水
溶剂B=含0.1%TFA的90%甲醇/10%水
烘箱温度=40℃
条件2
柱=Sunfire，C18，3.0×150mm，3.5μm
起始%B=0
最终%B=100
梯度时间=15分钟
终止时间=18分钟
流速=1mL/min
波长1=220nm
波长2=254nm
溶剂A=含0.1%TFA的5%MeCN/95%水
溶剂B=含0.1%TFA的95%MeCN/5%水
Figure BDA00001874284603263
中间体225
(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3-二甲基丁酸2-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3-二甲基丁酰氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙酯
向2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮(0.2g，0.448mmol)及(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3-二甲基丁酸(0.207g，0.897mmol)于DCM中的溶液中加入DIPEA(0.172mL，0.986mmol)。在室温搅拌反应混合物16小时，接着用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3、水、饱和NaCl洗涤并经无水Na2SO4干燥。接着过滤并浓缩，得到呈淡黄色固体状的(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3-二甲基丁酸2-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3-二甲基丁酰氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙酯。LC-MS(条件1)：[M+H]+747.50,Rt=4.67分钟。
Figure BDA00001874284603271
中间体226
(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-2,2-二甲基-1-(叔丁氧基羰基氨基)丙基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙基氨基甲酸叔丁酯
在密封管中，在130℃将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3-二甲基丁酸2-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3-二甲基丁酰氧基)乙酰基)萘-2-基)苯基)-2-氧代乙酯(0.35g，0.469mmol)于二甲苯(5mL)及乙酸铵(0.361g，4.69mmol)中的反应混合物加热3小时。用EtOAc及水稀释反应混合物。用饱和NaHCO3及饱和NaCl洗涤有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物装入40g硅胶柱中，用0-100%EtOAc/己烷的15分钟梯度洗脱，得到呈黄色固体状的(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-2,2-二甲基-1-(叔丁氧基羰基氨基)丙基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙基氨基甲酸叔丁酯(0.2g)。LC-MS(条件1)：[M+H]+707.6,Rt=3.44分钟。
Figure BDA00001874284603272
中间体226
(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-1-氨基-2,2-二甲基丙基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙-1-胺
向(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-2,2-二甲基-1-(叔丁氧基羰基氨基)丙基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙基氨基甲酸叔丁酯(0.2g，0.283mmol)于DCM中的反应混合物中加入4M盐酸的二噁烷溶液(2mL，8mmol)。在室温搅拌反应混合物4小时，接着浓缩干燥，得到呈黄色固体状的(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-1-氨基-2,2-二甲基丙基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙-1-胺的盐酸盐。LC-MS(条件1)：[M+H]+507.43,Rt=3.241分钟。
实施例
Figure BDA00001874284603281
实施例1
((1S)-1-(((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(59mg，0.15mmol)加入至2,7-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(37mg)、二异丙基乙胺(68μL，0.40mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(27mg，0.15mmol)于DMF(2mL)中的混合物中且在环境条件下搅拌所得混合物2.5小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且搅拌15分钟。在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)及反相HPLC(水/乙腈/NH4OAc)纯化残余物两次，得到所需产物，将其混悬于甲醇及TFA中。在真空中除去挥发性物质，得到呈棕褐色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(11.3mg)。LC-MS保留时间1.34分钟；C46H52N8O6的计算值：812.4，m/z实测值：813.42[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.31(s,2H),8.03-8.10(m,4H),7.96-8.02(m,Hz,2H),7.89(dd,J＝8.6,1.5Hz,2H),7.85(m,2H),5.36(t,J＝7.0Hz,2H),4.22-4.32(m,2H),4.09-4.19(m,2H),3.89-4.00(m,2H),3.63-3.74(m,6H),2.56-2.70(m,2H),2.31-2.40(m,2H),2.19-2.31(m,4H),2.08(dd,J＝13.6,6.9Hz,2H),0.95(d,J＝7.0Hz,6H),0.89(d,J＝6.7Hz,6
Figure BDA00001874284603291
实施例2
((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(82mg，0.217mmol)加入至2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(69mg)、二异丙基乙胺(126μL，0.723mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(51mg，0.29mmol)的DMF(2mL)溶液中且在环境条件下搅拌所得混合物2.5小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化残余物，得到呈棕褐色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(47mg)。LC-MS保留时间1.30分钟；C46H52N8O6的计算值：812.40，m/z实测值：813.42[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C18 4.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.25(s,2H),8.07-8.16(m,4H),8.02(m,J＝8.6Hz,2H),7.91(m,J＝8.6Hz,2H),7.87(d,J＝8.6Hz,2H),5.37(t,J＝7.2Hz,2H),4.28(d,J＝7.0Hz,2H),4.09-4.18(m,2H),3.90-4.01(m,2H),3.63-3.73(m,6H),2.57-2.70(m,2H),2.32-2.45(m,2H),2.19-2.32(m,4H),2.09(dq,J＝13.6,6.9Hz,2H),0.95(d,J＝6.7Hz,6H),0.89(d,J＝6.7Hz,6H)。
Figure BDA00001874284603301
实施例3
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-(1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(39mg，0.10mmol)加入至2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(6-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(50mg)、二异丙基乙胺(89μL，0.51mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(27mg，0.15mmol)于DMF(2mL)中的混合物中且在环境条件下搅拌所得混合物2.5小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化残余物，得到呈棕褐色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-(1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(31.4mg)。LC-MS保留时间1.37分钟；C48H54N8O6的计算值：838.42，m/z实测值：839.36[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.23-8.28(m,2H),8.08-8.15(m,3H),8.02(d,J＝8.6Hz,1H),7.95-8.00(m,2H),7.85-7.95(m,6H),5.40(t,J＝7.2Hz,1H),5.29(t,J＝7.5Hz,1H),4.29(dd,J＝19.4,7.2Hz,2H),4.10-4.19(m,2H),3.96-4.03(m,1H),3.87-3.96(m,1H),3.69(m,6H),2.55-2.73(m,2H),2.04-2.42(m,8H),0.89-1.05(m,12H)。
Figure BDA00001874284603311
实施例4
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(29mg，0.076mmol)加入至2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(25mg)、二异丙基乙胺(45μL，0.26mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(13mg，0.76mmol)于DMF(2mL)中的混合物中且在环境条件下搅拌所得混合物2.5小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化残余物，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(14.2mg)。LC-MS保留时间1.40分钟；C48H54N8O6的计算值：838.42，m/z实测值：839.36[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.33(宽单峰,2H),8.13(s,1H),8.03-8.10(m,3H),8.00(d,J＝8.2Hz,2H),7.86-7.94(m,6H),5.40(t,J＝7.2Hz,1H),5.29(t,J＝7.6Hz,1H),4.31(d,J＝7.3Hz,1H),4.27(d,J＝7.3Hz,1H),4.10-4.20(m,2H),3.85-4.10(m,2H),3.69(s,6H),2.55-2.74(m,2H),2.03-2.37(m,8H),0.85-1.05(m,12H)。
Figure BDA00001874284603321
实施例5
((1S)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-丙氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-1-甲基-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(74.5mg，0.196mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(40mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)丙酸(28.8mg，0.196mmol)及DIEA(0.114mL，0.653mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物9小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩以除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)纯化，得到呈白色固体状的((1S)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-丙氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-1-甲基-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(35.9mg)。LC-MS保留时间1.12分钟；C42H44N8O6的计算值：756.34，m/z实测值：757.20[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.22-8.30(m,2H),8.08-8.18(m,4H),7.99-8.07(m,2H),7.83-7.96(m,4H),5.44(dd,J＝8.6,5.2Hz,2H),4.56(q,J＝6.9Hz,2H),4.0-4.09(m,2H),3.94-4.02(m,2H),3.61-3.75(m,6H),2.58-2.72(m,2H),2.21-2.38(m,6H),1.32-1.45(m,6H)。
实施例6
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(74.5mg，0.196mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(40mg)、(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-苯基乙酸(41.0mg，0.196mmol)及DIEA(0.114mL，0.653mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物9小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩以除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)，接着通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈白色固体状的(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯(32.3mg)。LC-MS保留时间1.43分钟；C52H48N8O6的计算值：880.37，m/z实测值：881.23[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.25-8.35(m,2H),8.12-8.21(m,4H),8.05-8.12(m,2H),7.90-8.00(m,4H),7.38-7.54(m,10H),5.62(s,2H),5.38-5.53(m,2H),4.04-4.18(m,2H),3.67(s,6H),2.34-2.41(m,2H),2.46-2.58(m,2H),2.15-2.35(m,4H),2.02-2.13(m,2H)。
Figure BDA00001874284603331
实施例7
5,5'-(2,6-萘二基)二(2-((2S)-1-((2R)-2-苯基-2-(1-哌啶基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑)
将HATU(74.5mg，0.196mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(40mg)、(R)-2-苯基-2-(哌啶-1-基)乙酸(43.0mg，0.196mmol)及DIEA(0.114mL，0.653mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物9小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩以除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)，接着通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈白色固体状的5,5'-(2,6-萘二基)二(2-((2S)-1-((2R)-2-苯基-2-(1-哌啶基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑)(44.3mg)。LC-MS保留时间1.18分钟；[M+H]+C58H50N8O2的计算值：900.48，m/z实测值：451.33[1/2M+H]+。在配备有Waters Sunfire5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。
Figure BDA00001874284603341
实施例8
(1R)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲基氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N,N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺
将HATU(74.5mg，0.065mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(40mg，0.065mmol)、(R)-2-(二甲基氨基)-2-苯基乙酸(35.1mg)及DIEA(0.114mL，0.653mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物9小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)，接着通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈灰白色固体的(1R)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲基氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N,N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺(44.3mg)。LC-MS保留时间1.07分钟；C52H52N8O2的计算值：820.42，m/z实测值：821.29[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.31(s,2H),8.20-8.24(m,2H),8.13-8.20(m,2H),8.07-8.13(m,2H),7.89-8.05(m,4H),7.60-7.70(m,10H),5.55-5.59(m,2H),5.52(dd,J＝8.7,3.8Hz,2H),4.11-4.19(m,2H),2.42-3.18(m,13H),2.17-2.36(m,5H),1.98-2.08(m,4H)。
Figure BDA00001874284603351
实施例9
((1S,2R)-2-甲氧基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-苏氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(74.5mg，0.196mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(40mg)、(2S,3R)-3-甲氧基-2-(甲氧基羰基氨基)丁酸(37.4mg，0.196mmol)及DIEA(0.114mL，0.653mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物9小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)，接着通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈白色固体状的((1S,2R)-2-甲氧基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-苏氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯(9.3mg)。LC-MS保留时间1.22分钟；[M+H]+C46H52N8O8的计算值：844.39，m/z实测值：845.25[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.10-8.21(m,2H),7.99-8.08(m,2H),7.83-7.96(m,4H),7.58-7.77(m,4H),5.70-5.75(m,0.4H),5.35(dd,J＝7.9,4.9Hz,1.6H),4.58-4.61(m,0.2H),4.51(d,J＝4.9Hz,1.5H),4.37-4.43(m,0.3H),3.89-4.08(m,3H),3.61-3.78(m,7H),3.38-3.45(m,2H),3.23-3.31(m,5H),1.93-2.57(m,9H),1.10-1.28(m,6H)。
Figure BDA00001874284603361
实施例10
((1S)-3-甲氧基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-高丝氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(74.5mg，0.196mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(40mg)、(S)-4-甲氧基-2-(甲氧基羰基氨基)丁酸(37.4mg，0.196mmol)及DIEA(0.114mL，0.653mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物9小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-3-甲氧基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-高丝氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(28.6mg)。LC-MS保留时间1.18分钟；[M+H]+C46H52N8O8的计算值：844.39，m/z实测值：845.22[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.23-8.30(m,2H),8.09-8.18(m,4H),8.00-8.09(m,2H),7.84-7.97(m,4H),5.84-5.90(m,0.2H),5.44(dd,J＝8.2,4.9Hz,1.8H),4.65(dd,J＝9.2,4.0Hz,1.8H),4.38-4.45(m,0.2H),3.91-4.11(m,4H),3.66-3.78(m,6H),3.39-3.55(m,4H),3.27-3.38(m,7H),2.59-2.75(m,2H),2.25-2.40(m,5H),2.16(dddd,J＝14.3,7.0,6.8,4.3Hz,2H),1.74-1.93(m,2H)。
Figure BDA00001874284603371
实施例11
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1S)-1-环丙基-2-氧代-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(74.5mg，0.196mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(40mg，0.065mmol)、(S)-2-环丙基-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(33.9mg，0.196mmol)及DIEA(0.114mL，0.653mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物9小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩以除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)纯化，得到呈白色固体状的(1S,1'S)-2,2'-((2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-5,2-二基))二(吡咯烷-2,1-二基))二(1-环丙基-2-氧代乙烷-2,1-二基)二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(34.9mg，0.038mmol，58%收率)。LC-MS保留时间1.23分钟；C46H48N8O6的计算值：808.37，m/z实测值：809.22[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.20-8.29(m,2H),8.07-8.16(m,4H),7.98-8.07(m,2H),7.84-7.95(m,4H),5.37-5.48(m,2H),4.03-4.13(m,2H),3.87-4.03(m,4H),3.64-3.74(m,6H),2.65-2.74(m,2H),2.20-2.40(m,6H),1.09-1.22(m,2H),0.47-0.67(m,6H),0.30-0.46(m,2H)。
Figure BDA00001874284603372
实施例12
(2,7-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(56.2mg，0.148mmol)加入至经搅拌的2-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(47mg)、(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-苯基乙酸(30.9mg，0.148mmol)及DIEA(0.086mL，0.49mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物4小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的(1R,1'R)-2,2'-((2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(萘-2,7-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-5,2-二基))二(吡咯烷-2,1-二基))二(2-氧代-1-苯基乙烷-2,1-二基)二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(38mg)。LC-MS保留时间1.45分钟；C52H48N8O6的计算值：880.37，m/z实测值：881.26[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (500MHz,MeOD)δppm8.31-8.39(m,2H),8.03-8.17(m,6H),7.84-8.00(m,4H),7.33-7.53(m,10H),5.55-5.63(m,2H),5.40-5.54(m,2H),4.01-4.17(m,2H),3.67(s,6H),3.27-4.41(m,2H),2.44-2.75(m,2H),2.01-2.33(m,6H)。
Figure BDA00001874284603381
实施例13
((1S)-2-((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-丙氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-1-甲基-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(56.2mg，0.148mmol)加入至经搅拌的2-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(47mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)丙酸(21.7mg，0.148mmol)及DIEA(0.086mL，0.49mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物5小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)，接着通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈白色固体状的((1S)-2-((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-丙氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-1-甲基-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯(20.9mg)。LC-MS保留时间1.16分钟；C42H44N8O6的计算值：756.34，m/z实测值：757.27[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.16-8.24(m,2H),7.87-8.02(m,4H),7.80-7.87(m,2H),7.60-7.75(m,4H),5.42-5.46(m,0.3H),5.34(dd,J＝7.9,4.0Hz,1.7H),4.55(q,J＝7.0Hz,1.7H),4.31-4.37(m,0.3H),3.80-3.98(m,4H),3.67(s,5H),3.47(s,1H),2.39-2.55(m,2H),2.04-2.36(m,4H),1.92-2.01(m,2H),1.31-1.42(m,6H)。
Figure BDA00001874284603391
实施例14
((1R)-1-(((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(56.2mg，0.148mmol)加入至经搅拌的2-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(47mg)、(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(25.9mg，0.148mmol)及DIEA(0.086mL，0.49mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物5小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)，接着通过制备性HPLC(含10mM 乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈米色固体状的((1R)-1-(((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(25mg)。LC-MS保留时间1.36分钟；C46H52N8O6的计算值：812.40，m/z实测值：813.36[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.33(s,2H),8.07-8.13(m,4H),8.05(dd,J＝8.5,1.2Hz,2H),7.84-7.96(m,4H),5.49(dd,J＝8.6,3.7Hz,2H),4.36(d,J＝7.3Hz,2H),4.15-4.23(m,2H),3.83-3.97(m,2H),3.72(s,6H),2.58-2.71(m,2H),2.21-2.38(m,6H),2.05-2.18(m,2H),1.07(d,J＝6.7Hz,6H),1.04(d,J＝6.7Hz,6H)。
Figure BDA00001874284603401
实施例15
5,5'-(2,7-萘二基)二(2-((2S)-1-((2R)-2-苯基-2-(1-哌啶基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑)
将HATU(56.2mg，0.148mmol)加入至经搅拌的2-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘的三氟乙酸盐(47mg)、(R)-2-苯基-2-(哌啶-1-基)乙酸(32.4mg，0.148mmol)及DIEA(0.086mL，0.49mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物5小时，用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释，浓缩除去挥发性物质且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)，接着通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈白色固体状的5,5'-(2,7-萘二基)二(2-((2S)-1-((2R)-2-苯基-2-(1-哌啶基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑)(16.4mg)。LC-MS保留时间1.21分钟；[M+H]+C58H60N8O6的计算值：900.48，m/z实测值：451.431/2[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR (400MHz,MeOD)δppm8.18-8.28(m,2H),7.96-8.05(m,2.2H),7.92(d,J＝1.0Hz,1.5H),7.80-7.90(m,2.2H),7.65-7.76(m,3.8H),7.55-7.64(m,3.2H),7.46-7.55(m,4.5H),6.85-6.97(m,1.6H),6.76-6.83(m,1H),5.65-5.70(m,0.5H),5.28(dd,J＝7.5,3.3Hz,1.5H),4.48(宽单峰,0.5H),4.02-4.12(m,1.5H),3.90-3.98(m,0.5H),3.74-3.84(m,0.5H),3.25-3.40(m,3H),2.51-2.93(m,8H),1.89-2.33(m,8H),1.62-1.75(m,8H),1.47-1.59(m 4H)。
实施例16
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(40mg，0.11mmol)加入至2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(32mg)、二异丙基乙胺(62μL，0.35mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(19mg，0.106mmol)于DMF(2mL)中的混合物中且在环境条件下搅拌所得混合物9小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(用含10mM乙酸铵的水/乙腈洗脱一次及用含0.1%TFA的水/乙腈洗脱两次)纯化残余物，得到呈白色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(21mg)。LC-MS保留时间1.17分钟；C42H50N8O6的计算值：762.39，m/z实测值：763.34[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.30(s,1H),8.27(s,1H),8.15(d,J＝8.9Hz,1H),8.10(d,J＝8.9Hz,1H),8.07(s,1H),7.94-8.01(m,3H),7.82-7.89(m,2H),5.38(t,J＝7.2Hz,1H),5.31(t,J＝7.6Hz,1H),4.28(dd,J＝14.5,7.2Hz,2H),4.15(宽单峰,2H),3.86-4.01(m,2H),3.69(s,6H),2.55-2.69(m,2H),2.19-2.39(m,6H),2.04-2.15(m,2H),0.86-1.05(m,12H)。
Figure BDA00001874284603421
实施例17
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(20mg，0.053mmol)加入至2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(16mg)、二异丙基乙胺(31μL，0.18mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(9.3mg，0.053mmol)于DMF(2mL)中的混合物中且在环境条件下搅拌所得混合物9小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(含0.1%TFA的水/乙腈)纯化残余物，得到呈白色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(7.9mg)。LC-MS保留时间1.20分钟；C42H50N8O6的计算值：762.39，m/z实测值：763.35[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.35(s,1H),8.25(s,1H),8.09(dd,J＝8.4,3.2Hz,2H),8.04(s,1H),7.89-8.00(m,3H),7.77-7.87(m,2H),5.37(t,J＝7.0Hz,1H),5.30(t,J=7.3Hz,1H),4.28(dd,J＝15.4,7.2Hz,2H),4.08-4.20(m,2H),3.86-4.01(m,2H),3.69(s,6H),2.56-2.68(m,3H),2.39-2.02(m,7H),0.87-1.04(m,12H)。
Figure BDA00001874284603431
实施例18
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(218mg，0.574mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘(100mg)、二异丙基乙胺(334μL，1.91mmol)与(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(101mg，0.574mmol)于DMF(2mL)中的混合物中且在环境下搅拌所得混合物4小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(含0.1%TFA的水/乙腈)纯化残余物，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(85mg)。LC-MS保留时间1.33分钟；C48H52N8O6的计算值：836.4，m/z实测值：837.32[M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.22(s,2H),8.05-8.13(m,4H),7.96-8.02(m,2H),7.82-7.92(m,4H),5.22-5.32(m,2H),4.59(d,J＝6.4Hz,2H),3.86(t,J＝6.0Hz,2H),3.60-3.75(m,6H),2.66-2.79(m,2H),2.54(m,2H),2.16-2.26(m,2H),2.02-2.16(m,2H),1.10-1.16(m,2H),0.98-1.05(m,6H),0.94-0.97(m,2H),0.91(d,J＝6.7Hz,6H)。
Figure BDA00001874284603442
实施例19
(1R)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2R)-2-(二乙基氨基)-2-苯基乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-N,N-二乙基-2-氧代-1-苯基乙胺
将HATU(109mg，0.287mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘(50mg)、二异丙基乙胺(0.167mL，0.957mmol)及(R)-2-(二乙基氨基)-2-苯基乙酸盐酸盐(70.0mg，0.287mmol)于DMF(2mL)中的混合物中且在环境下搅拌所得混合物5小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(含0.1%TFA的水/乙腈)，接着通过反相HPLC(含10mM乙酸铵的水/乙腈)，最后通过反相HPLC(含0.1%TFA的水/乙腈)纯化残余物，得到呈白色粉末状的(1R)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2R)-2-(二乙基氨基)-2-苯基乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-N,N-二乙基-2-氧代-1-苯基乙胺的三氟乙酸盐(25.2mg)。LC-MS保留时间1.15分钟；[M+H]+C58H60N8O2的计算值：900.48，m/z实测值：451.46[1/2M+H]+。在配备有WatersSunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603451
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.27(s,2H),8.08-8.17(m,4H),7.96(td,J＝8.7,1.5Hz,4H),7.87(d,J＝8.6Hz,2H),7.68-7.72(m,4H),7.57-7.68(m,6H),5.79(s,2H),5.23(dd,J＝9.0,6.3Hz,2H),3.95-4.05(m,2H),3.25-3.48(m,4H),3.06(宽单峰,4H),2.43-2.61(m,4H),2.01-2.11(m,2H),1.31(t,J＝6.9Hz,12H),0.62(ddd,J＝8.7,6.0,5.8Hz,2H),-0.21(td,J＝5.7,2.4Hz,2H)。
Figure BDA00001874284603452
实施例20及实施例21
实施例20：((1R)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯
实施例21：(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(109mg，0.287mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘(50mg)、二异丙基乙胺(0.167mL，0.957mmol)及(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-苯基乙酸(60.0mg，0.287mmol)于DMF(2mL)中的混合物中且在环境下搅拌所得混合物5小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(含0.1%TFA的水/乙腈)，接着通过反相HPLC(含10mM乙酸铵的水/乙腈)，最后通过反相HPLC(含0.1%TFA的水/乙腈)纯化残余物，得到呈白色固体状的((1R)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(6.9mg)及呈白色固体状的(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(12.5mg)。
实施例20的分析数据：LC-MS保留时间1.46分钟；C54H48N8O6的计算值：904.37，m/z实测值：453.35[1/2M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603461
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.28(d,J＝4.6Hz,2H),8.15(d,J＝8.6Hz,2H),8.12(s,1H),8.07(s,1H),8.03(t,J＝8.9Hz,2H),7.92-7.98(m,2H),7.90(d,J＝8.6Hz,1H),7.85(d,J＝8.6Hz,1H),7.48-7.54(m,2H),7.37-7.48(m,8H),5.85(s,1H),5.78(s,1H),5.39(dd,J＝9.0,6.3Hz,1H),5.29(dd,J＝9.2,5.8Hz,1H),3.91-3.97(m,1H),3.68(s,3H),3.66(s,3H),3.52-3.61(m,1H),2.73(dd,J＝13.7,9.2Hz,1H),2.46-2.65(m,3H),2.06-2.14(m,1H),1.98-2.06(m,1H),1.23-1.30(m,1H),1.10(宽单峰,1H),0.66-0.72(m,1H),0.01-0.10(m,1H)。
实施例21的分析数据：LC-MS保留时间1.48分钟；[M+H]+C54H48N8O6的计算值：904.37，m/z实测值：453.35[1/2M+H]+。在配备有Waters Sunfire 5uC18 4.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603462
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(s,2H),8.16(d,J＝8.6Hz,2H),8.11(s,2H),8.01-8.06(m,2H),7.95(d,J＝8.6Hz,2H),7.90(m,J＝8.6Hz,2H),7.48-7.55(m,4H),7.36-7.48(m,6H),5.85(s,2H),5.29(dd,J＝9.2,5.8Hz,2H),3.92-3.97(m,2H),3.66(s,6H),2.55-2.66(m,2H),2.51(ddd,J＝13.3,6.6,6.4Hz,2H),1.97-2.07(m,2H),0.63-0.74(m,2H),-0.02-0.10(m,2H)。
Figure BDA00001874284603471
实施例22及实施例23
实施例22：((1S)-1-(((2S)-2-(6-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
实施例23：((1S)-1-(((2R)-2-(6-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(63.5mg，0.167mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)萘的盐酸盐(45mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(29.3mg，0.167mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.122mL，0.696mmol)中的淤浆中。在室温搅拌反应混合物16小时，用MeOH稀释，过滤且通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈白色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(6-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(19.2mg)及呈白色固体状的((1S)-1-(((2R)-2-(6-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(16.5mg)(若在此步骤期间或在前一步骤中吡咯烷立体中心外消旋化，则不确定)。通过手性HPLC拆分2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)萘显示宽峰，但个别非对映异构体在试验条件下无法拆分。
实施例22的分析数据：LC-MS保留时间1.407分钟；m/z 815.60(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603481
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603482
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.82-8.71(m,2H),8.32-8.18(m,4H),8.14-8.07(m,2H),7.92-7.84(m,2H),5.37-5.29(m,2H),4.30(d,J＝7.3Hz,2H),4.13-4.04(m,2H),4.02-3.92(m,2H),3.68(s,6H),2.54-1.98(m,10H),1.03-0.89(m,12H)。
实施例23的分析数据：LC-MS保留时间1.442分钟；m/z 815.59(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603483
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603484
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.89-8.66(m,2H),8.36-8.20(m,4H),8.15-8.10(m,2H),7.94-7.86(m,2H),5.44-5.29(m,2H),4.34(d,J＝7.6Hz,1H),4.30(d,J＝7.6Hz,1H),4.21-3.80(m,4H),3.74(s,3H),3.68(s,3H),2.69-1.95(m,10H),1.09-0.41(m,12H)。
Figure BDA00001874284603491
实施例24及实施例25A及实施例25B
实施例24：((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
实施例25A：((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
实施例25B：((1S)-1-(((2R)-2-(5-(6-(2-((2R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(63mg，0.17mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)萘的盐酸盐(45mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(29mg，0.17mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.12mL，0.69mmol)中的淤浆中。在室温搅拌反应混合物16小时，用MeOH稀释，过滤且通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的乙腈/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(11.2mg)、呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(17.3mg)及呈黄色固体状的((1S)-1-(((2R)-2-(5-(6-(2-((2R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(6.7mg)(若在此步骤期间或在前一步骤中吡咯烷立体中心外消旋化，则未确定)。通过手性HPLC拆分2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)萘显示宽峰，但个别非对映异构体在试验条件下无法拆分。
实施例24的分析数据：LC-MS保留时间1.420分钟；m/z 817.59(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603501
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603502
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 9.14-9.06(m,2H),8.71-8.64(m,2H),8.37-8.29(m,2H),8.18-8.11(m,2H),5.59-5.30(m,2H),4.30(d,J＝7.3Hz,2H),4.13-3.96(m,4H),3.78-3.64(m,6H),2.57-2.01(m,10H),1.07-0.92(m,12H)。
实施例25A的分析数据：LC-MS保留时间1.507分钟；m/z 817.56(MH+)。在配备有Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603504
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 9.14-9.02(m,2H),8.69-8.60(m,2H),8.36-8.27(m,2H),8.15-8.08(m,2H),5.41-5.36(m,1H),5.34-5.29(m,1H),4.35(d,J＝7.9Hz,1H),4.31(d,J＝7.3Hz,1H),4.24-3.81(m,4H),3.78(s,3H),3.68(s,3H),2.62-1.97(m,10H),1.09-0.46(m,12H)。
实施例25B的分析数据：LC-MS保留时间1.562分钟；m/z 817.58(MH+)。在配备有Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%水/10mM乙酸铵且溶剂B为5%水/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603512
Platform确定MS数据。
实施例26
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(114mg，0.301mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘(50mg)、二异丙基乙胺(175μL，1.0mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(65mg，0.30mmol)于DMF(5mL)中的溶液中且在环境条件下搅拌所得混合物2小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化残余物，得到呈淡黄色固体状的(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(51.5mg)。LC-MS保留时间1.117分钟；m/z 897.31(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603514
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐500MHz,MeOD)δppm 8.27(宽单峰,2H),8.10-8.18(m,4H),8.01-8.07(m,2H),7.86-7.96(m,4H),5.88-5.93(m,0.2H),5.39(t,J＝7.0Hz,1.8H),4.33-4.38(m,2H),4.12-4.22(m,2H),3.89-4.05(m,7H),3.70(s,6H),3.35-3.45(m,2H),2.60-2.75(m,2H),2.14-2.47(m,6.5H),1.94-2.12(m,2.5H),1.32-1.69(m,8H)。
实施例27
((1S)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(87mg，0.23mmol)加入至经搅拌的((1S)-2-甲基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯(50mg)、二异丙基乙胺(133μL，0.76mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(50mg，0.23mmol)于DMF(3mL)中的溶液中且在环境条件下搅拌所得混合物2小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化残余物，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(36mg)。LC-MS保留时间1.177分钟；m/z 855.30(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603522
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.22-8.30(m,1.8H),8.20(宽单峰,0.2H),8.07-8.17(m,4H),8.00-8.06(m,1.8H),7.98(宽单峰,0.2H),7.85-7.95(m,4H),5.86(m,0.1H),5.35-5.44(m,1.8H),5.25-5.31(m,0.1H),4.36(d,J＝7.6Hz,0.5H),4.31(d,J＝6.7Hz,1H),4.15(宽单峰,1.5H),3.87-4.05(m,4H),3.69(宽单峰,6H),3.34-3.47(m,1H),2.96-3.23(m,2H),2.61-2.77(m,2.5H),2.21-2.47(m,6H),1.95-2.16(m,2H),1.33-1.69(m,3.5H),1.00-1.05(m,0.3H),0.94-0.99(m,3H),0.91(d,J＝6.7Hz,2.7H)。
Figure BDA00001874284603531
实施例28
((1S)-2-((2S)-2-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(36.6mg，0.096mmol)加入至经搅拌的2-((S)-吡咯烷-2-基)-6-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的三氟乙酸盐(29mg)、二异丙基乙胺(56μL，0.32mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(21mg，0.10mmol)于DMF(2mL)中的溶液中且在环境条件下搅拌所得混合物2小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。接着在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/乙腈/TFA)纯化残余物，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((2S)-2-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(16.3mg)。LC-MS保留时间1.023分钟；m/z847.31(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603532
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(d,J＝12.5Hz,2H),8.15(d,J＝8.6Hz,1H),8.10(d,J＝8.5Hz,1H),8.07(s,1H),7.92-8.01(m,3H),7.81-7.90(m,2H),5.37(dd,J＝7.9,6.1Hz,1H),5.30(t,J＝7.5Hz,1H),4.28-4.39(m,2H),4.12-4.22(m,2H),3.88-4.04(m,7H),3.65-3.77(m,6H),3.38-3.45(m,1H),2.56-2.69(m,2H),2.20-2.40(m,6.5H),2.01(宽单峰,2.5H),1.57-1.69(m,2.5H),1.35-1.53(m,6.5H)。
Figure BDA00001874284603541
实施例29
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(57.6mg，0.152mmol)加入至经搅拌的2-((S)-吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑的三氟乙酸盐(47mg)、二异丙基乙胺(88μL，0.51mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(26.5mg，0.152mmol)于DMF(4mL)中的溶液中且在环境条件下搅拌所得混合物2小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/甲醇/TFA)纯化残余物，通过反相HPLC(水/乙腈/乙酸铵)再纯化，最后通过反相HPLC(水/甲醇/TFA)再纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(33.3mg)。LC-MS保留时间1.237分钟；m/z 789.29(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5uC184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603542
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(d,J＝8.9Hz,2H),8.15(d,J＝8.5Hz,1H),8.10(d,J＝8.9Hz,1H),7.95-8.03(m,4H),7.93(s,1H),7.84-7.91(m,3H),5.69-5.72(m,0.2H),5.24-5.35(m,1.8H),4.27(dd,J＝7.2,2.6Hz,2H),4.09-4.19(m,2H),3.85-3.97(m,2H),3.67-3.76(m,6H),2.55-2.68(m,2H),2.27-2.38(m,2H),2.14-2.27(m,4H),2.02-2.14(m,2H),0.86-1.06(m,12H)。
Figure BDA00001874284603551
实施例30
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(54.6mg，0.144mmol)加入至经搅拌的2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘(25mg)、二异丙基乙胺(84μL，0.48mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(31.2mg，0.144mmol)于DMF(5mL)中的溶液中且在环境条件下搅拌所得混合物4小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。在真空中除去挥发性组分且通过反相HPLC(水/甲醇/TFA)纯化残余物，通过反相HPLC(水/乙腈/乙酸铵)再纯化，最后通过反相HPLC(水/甲醇/TFA)再纯化，得到呈灰白色固体状的(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(8.2mg)。LC-MS保留时间1.220分钟；m/z 461.3[1/2M+H+]。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%乙腈/90%水/0.1%TFA且溶剂B为90%乙腈/10%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603552
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.28(宽单峰,2H),8.07-8.18(m,4H),8.00-8.07(m,2H),7.84-7.96(m,4H),5.23-5.31(m,2H),4.59-4.67(m,2H),3.85-4.01(m,6H),3.70(s,6H),3.28-3.44(m,4H),2.71-2.80(m,2H),2.58(ddd,J＝13.2,6.5,6.3Hz,2H),2.03-2.20(m,4H),1.41-1.65(m,8H),1.13(宽单峰,2H),0.97(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284603561
实施例31
((1S)-1-(((2S)-2-(4-((6-((2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(47.6mg，0.125mmol)加入至含2,6-二((2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)萘的三氟乙酸盐(38mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(22mg，0.13mmol)的DMF(0.7mL)及TEA(0.047mL，0.33mmol)中且澄清黄色溶液在室温过夜。用MeOH(1mL)稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(15-100%MeOH/水/TFA缓冲液)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-((6-((2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(37.1mg)。LC-MS保留时间2.530分钟；m/z 759.61(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284603562
Luna 10uC18 3.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
实施例32
((1S)-1-(((2S)-2-(4-((6-((2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将4,4'-(2,6-萘二基)二(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑)的三氟乙酸盐(21mg，0.025mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(12.9mg)溶解于DMF(3mL)及DIEA(0.043mL，0.246mmol)中。接着加入HATU(28.0mg，0.074mmol)且在室温搅拌反应混合物2小时。在真空除去挥发性物质且通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×100mm 5u，用0至90%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化粗产物，得到呈灰白色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-((6-((2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(10.4mg)。LC-MS保留时间1.158分钟；m/z 713.60(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603571
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.31(s,2H),8.11(d,J＝8.6Hz,2H),7.94-8.03(m,2H),7.84-7.94(m,2H),5.29(t,J＝7.3Hz,2H),4.26(d,J＝7.02Hz,2H),4.14(t,J＝10.2Hz,2H),3.85-3.96(m,2H),3.68(s,6H),2.53-2.67(m,2H),2.31(d,J＝10.4Hz,2H),2.16-2.28(m,4H),2.03-2.15(m,2H),0.88-1.08(m,12H)。
实施例33
((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(120mg，0.316mmol)加入至经搅拌的2-((2S)-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑的三氟乙酸盐(50mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(68.7mg，0.316mmol)于DMF(5mL)及DIEA(0.18mL，1.1mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×100mm5u，用10至90%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，接着通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×150mm 5u，用至%ACN-水+0.1%TFA的梯度洗脱)再纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(96mg)。LC-MS保留时间1.207分钟；m/z 873.63(MH+)。在配备有WatersSunfire 5u C184.6×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用5mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603581
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(d,J＝7.9Hz,2H),8.14(d,J＝8.9Hz,1H),8.06-8.11(m,1H),7.94-8.03(m,4H),7.90-7.94(m,1H),7.80-7.90(m,3H),5.74(宽单峰,0.2H),5.23-5.35(m,1.8H),4.32(dd,J＝8.1,4.7Hz,2H),4.16(d,J＝2.8Hz,2H),3.94(dd,J＝9.5,7.3Hz,6H),3.69(s,6H),3.31-3.48(m,4H),2.55-2.68(m,2H),2.16-2.35(m,6H),1.92-2.10(m,2H),1.63(d,J＝12.8Hz,2H),1.34-1.54(m,6H)。
Figure BDA00001874284603582
实施例34
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(57mg，0.150mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(25mg，0.050mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(33mg)于DMF(3mL)及DIEA(0.078mL，0.50mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×100mm 5u，用10至100%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(27mg)。LC-MS保留时间1.280分钟；m/z 897.65(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.28-8.32(m,2H),8.14(d,J＝8.6Hz,1H),8.07-8.11(m,1H),7.95-8.02(m,4H),7.84-7.93(m,4H),5.12-5.23(m,2H),4.62(dd,J＝7.6,4.0Hz,2H),3.92-4.00(m,4H),3.83-3.89(m,2H),3.72-3.78(m,2H),3.70(s,6H),3.35-3.46(经甲醇掩蔽,m,4H),2.68-2.77(m,2H),2.47-2.57(m,2H),2.00-2.15(m,4H),1.42-1.65(m,6H),1.06-1.17(m,2H),0.84-0.93(m,2H)。
实施例35
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(57mg，0.150mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(25mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(26mg，0.15mmol)于DMF(3mL)及DIEA(0.070mL，0.40mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×100mm 5u，用10至100%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，得到呈淡黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(34.8mg)。LC-MS保留时间1.402分钟；m/z 813.69(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603601
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(d,J＝7.9Hz,2H),8.14(d,J＝8.9Hz,1H),8.09(d,J＝8.9Hz,1H),7.95-8.01(m,4H),7.92(s,1H),7.84-7.90(m,3H),5.16(ddd,J＝11.6,9.2,7.0Hz,2H),4.58(dd,J＝6.4,2.1Hz,2H),3.81-3.88(m,2H),3.66-3.75(m,6H),2.67-2.77(m,2H),2.46-2.57(m,2H),2.21(dq,J＝12.9,6.5Hz,2H),2.06-2.14(m,2H),1.08-1.18(m,2H),1.04(d,J＝6.7Hz,6H),0.95(d,J＝6.7Hz,6H),0.91(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284603602
实施例36
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(32.7mg，0.086mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹啉的盐酸盐(25mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(15mg，0.086mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.059mL，0.34mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(2S,2'S)-1,1'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(喹啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基))二(3-甲基-1-氧代丁烷-2,1-二基)二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(8.3mg)。LC-MS保留时间1.88分钟；m/z 838[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603611
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.64-8.80(1H,m),8.49-8.62(1H,m),7.45-8.48(9H,m),5.21-5.52(2H,m),4.50-4.68(2H,m),3.82-4.13(2H,m),3.70-3.79(2H,m),3.68,3.66(6H,s,s),2.48-2.83(3H,m),2.02-2.28(3H,m),1.09-1.30(2H,m),0.83-1.08(14H,m)。
Figure BDA00001874284603612
实施例37
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(25mg，0.066mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(28mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(11.5mg，0.066mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.045mL，0.26mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(2S,2'S)-1,1'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(喹喔啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基))二(3-甲基-1-氧代丁烷-2,1-二基)二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(27mg)。LC-MS保留时间1.94分钟；m/z 839[M+H]+。(柱Luna 3.0×50mm S 10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1HNMR(三氟乙酸盐，400MHz,MeOD)δppm 9.56(s,1H),8.67(s,1H),8.52(d,J＝8.8Hz,1H),8.40(s,1H),8.26(d,J＝8.8Hz,1H),8.24(d,J＝8.8Hz,1H),8.17(s,1H),8.05(d,J＝8.5Hz,1H),7.93(d,J＝8.5Hz,1H),7.90(d,J＝8.8Hz,1H),5.30(明显的双二重峰,J＝9.0,6.8Hz,2H),4.60(明显的二重峰,J＝6.0Hz,2H),3.93-3.84(m,2H),3.68(s,6H),2.80-2.70(m,2H),2.63-2.51(m,2H),2.29-2.09(m,4H),1.21-1.11(m,2H),1.03(d,J＝6.8Hz,6H),1.00-0.90(m,2H),0.93(d,J＝6.5Hz,6H)。
实施例38
(2,6-喹喔啉二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(25.9mg，0.068mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(29mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(14.8mg，0.068mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.046mL，0.27mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(喹喔啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基))二(2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙烷-2,1-二基)二二甲酯的三氟乙酸盐(32.5mg)。LC-MS保留时间1.74分钟；m/z 462[1/2M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603631
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(三氟乙酸盐，400MHz,MeOD)δppm 9.53(s,1H),8.70(s,1H),8.55(dd,J＝8.8,1.5Hz,1H),8.44(d,J＝1.8Hz,1H),8.31(d,J＝8.8Hz,1H),8.27(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),8.19(宽单峰,1H),8.08(dd,J＝8.8,1.5Hz,1H),7.96(d,J＝8.8Hz,1H),7.92(d,J＝8.8Hz,1H),5.28(明显的双二重峰,J＝8.8,6.8Hz,2H),4.63(明显的二重峰,J＝7.3Hz,2H),3.99-3.86(m,6H),3.69(s,6H),3.44-3.29(m,4H),2.81-2.71(m,2H),2.63-2.52(m,2H),2.20-2.03(m,4H),1.68-1.37(m,8H),1.17-1.08(m,2H),0.99-0.92(m,2H)。
实施例39
(2,6-喹啉二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(34.0mg，0.089mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹啉的盐酸盐(26mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(19.4mg，0.089mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.061mL，0.350mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(喹啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基))二(2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙烷-2,1-二基)二二甲酯的三氟乙酸盐(6.0mg)。LC-MS保留时间1.65分钟；m/z 462[1/2M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603633
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.70(1H,d,J＝8.5Hz),8.57(1H,s),8.23-8.45(5H,m),8.17(1H,s),8.01-8.12(1H,m),7.88-7.97(2H,m),5.27(2H,t,J＝7.8Hz),4.33-4.68(2H,m),3.84-4.02(6H,m),3.69(6H,s),3.35-3.47(4H,m),2.67-2.81(2H,m),2.49-2.64(2H,m),1.91-2.21(4H,m),1.35-1.71(8H,m),1.07-1.17(2H,m),0.85-1.00(2H,m)。
Figure BDA00001874284603641
实施例40
((1S)-2-((2S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(45mg，0.118mmol)加入至4-氯-2-((S)-吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑(20mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(25.6mg，0.118mmol)于DMF(3mL)及DIEA(0.070mL，0.40mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×100mm 5u，用10至100%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，接着通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×150mm 5u，用10至100%ACN-水+0.1%TFA的梯度洗脱)再纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((2S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(12.9mg)。LC-MS保留时间1.595分钟；m/z 907.39(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5uC184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603651
Plaform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.20-8.28(m,2H),8.09-8.12(m,1H),8.02-8.08(m,1H),7.91-8.00(m,3H),7.87-7.91(m,2H),7.80-7.87(m,2H),5.28(t,J＝7.5Hz,1H),5.06-5.14(m,1H),4.25-4.35(m,2H),4.11-4.19(m,1H),4.00-4.07(m,1H),3.85-4.00(m,6H),3.63-3.69(m,6H),3.32-3.43(m,4H),2.57-2.64(m,1H),2.34-2.40(m,1H),2.26-2.32(m,2H),2.12-2.25(m,4H),1.95-2.09(m,2H),1.34-1.64(m,8H)。
Figure BDA00001874284603652
实施例41
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(4-(4-氯-2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(45mg，0.118mmol)加入至4-氯-2-((S)-吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑(20mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(20.7mg，0.118mmol)于DMF(3mL)及DIEA(0.070mL，0.40mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×100mm 5u，用10至100%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，接着通过HPLC(Waters Sunfire C18柱30×150mm 5u，用10至100%ACN-水+0.1%TFA的梯度洗脱)再纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(4-(4-氯-2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(3.6mg)。LC-MS保留时间1.715分钟；m/z 823.49(MH+)。在配备有Waters Sunfire5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603661
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.24-8.29(m,1H),8.22(s,1H),8.08-8.15(m,1H),8.03-8.08(m,1H),7.81-8.01(m,7H),5.31(t,J＝7.5Hz,1H),5.12(明显的三重峰,J＝7.5Hz,1H),4.21-4.32(m,2H),4.08-4.19(m,1H),3.99-4.08(m,1H),3.85-3.96(m,2H),3.57-3.74(m,6H),2.56-2.67(m,1H),2.35-2.46(m,1H),2.28-2.35(m,2H),2.20-2.26(m,2H),2.05-2.19(m,4H),0.90-1.09(m,12H)。
实施例42
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(7-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-2-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(103mg，0.271mmol)加入至2-((S)-吡咯烷-2-基)-7-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑(45mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(58.8mg，0.271mmol)于DMF(3mL)及DIEA(0.16mL，0.90mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×100mm 5u，用10至100%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，接着通过HPLC(WatersSunfire C18柱30×150mm 5u，用090%ACN-水+0.1%TFA的梯度洗脱)再纯化，得到呈白色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(7-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-2-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(8.7mg)。LC-MS保留时间1.307分钟；m/z 897.67(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603671
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm8.51-8.57(m,2H),8.40(s,1H),8.30(s,1H),8.23(d,J＝10.1Hz,1H),8.18(d,J＝8.6Hz,1H),8.05-8.15(m,3H),8.00(s,1H),7.87(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),7.79-7.85(m,1H),5.43(t,J＝7.3Hz,1H),5.30(t,J＝7.3Hz,1H),4.28-4.40(m,2H),4.19(宽单峰,2H),3.88-4.07(m,6H),3.70(d,J＝1.5Hz,6H),3.26-3.45(与甲醇重叠,m,4H),2.57-2.71(m,2H),2.30-2.42(m,3H),2.20-2.29(m,3H),1.93-2.10(m,2H),1.58-1.68(m.,2H),1.34-1.58(m,6H)。
Figure BDA00001874284603672
实施例43
(2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(喹啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(吡咯烷-2,1-二基))二(3-甲基-1-氧代丁烷-2,1-二基)二氨基甲酸二甲酯
将HATU(24.5mg，0.065mmol)加入至2,6-二(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹啉的三氟乙酸盐(30mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(11.3mg，0.065mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.044mL，0.252mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'-(6,6'-(喹啉-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(吡咯烷-2,1-二基))二(3-甲基-1-氧代丁烷-2,1-二基)二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(34mg)。LC-MS保留时间1.82分钟；m/z 814[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603673
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.71(1H,d,J＝8.8Hz),8.57(1H,s),8.21-8.43(5H,m),8.18(1H,s),8.04(1H,dd,J＝8.5,1.5Hz),7.88-7.96(2H,m),5.40(2H,t,J＝7.03Hz),4.31(2H,d,J＝6.8Hz),4.09-4.21(2H,m),3.91-4.06(2H,m),3.68(6H,s),2.58-2.73(2H,m),2.20-2.49(6H,m),2.02-2.19(2H,m),0.96(6H,dd,J＝6.8,1.8Hz),0.90(6H,dd,J＝6.7,1.6Hz)。
实施例44
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(82mg，0.22mmol)加入至6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑(34mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(37.8mg，0.216mmol)及DIEA(0.13mL，0.72mmol)于DMF(3mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×150mm 5u，用10至80%ACN-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(49.8mg)。LC-MS保留时间1.357分钟；m/z 787.65(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603682
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(d,J＝10.7Hz,2H),8.07-8.19(m,3H),7.94-8.05(m,3H),7.84-7.92(m,2H),5.29(dd,J＝9.2,6.7Hz,1H),5.18(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),4.59(dd,J＝12.4,6.6Hz,2H),3.81-3.91(m,2H),3.69(s,6H),2.67-2.80(m,2H),2.48-2.61(m,2H),2.07-2.27(m,4H),1.09-1.19(m,2H),0.99-1.06(m,6H),0.88-1.00(m,8H)。
Figure BDA00001874284603691
实施例45
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(82mg，0.216mmol)加入至6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)-2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑(34mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(46.9mg，0.216mmol)及DIEA(0.13mL，0.72mmol)于DMF(3mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×150mm 5u，用10至80%ACN-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，得到呈淡黄色固体的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(38mg)。LC-MS保留时间1.240分钟；m/z 871.66(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5uC184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603692
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.30(d,J＝6.1Hz,2H),8.08-8.18(m,3H),8.04(dd,J＝8.6,1.5Hz,1H),7.95-8.01(m,2H),7.85-7.92(m,2H),5.27(dd,J＝9.2,6.7Hz,1H),5.16(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),4.59-4.66(m,2H),3.84-4.01(m,6H),3.70(s,6H),3.35-3.45(m,4H),2.69-2.80(m,2H),2.48-2.61(m,2H),2.03-2.20(m,4H),1.57-1.65(m,2H),1.40-1.56(m,6H),1.07-1.17(m,2H),0.97(宽单峰,1H),0.91(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284603701
实施例46
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(22.7mg，0.060mmol)加入至6,6'-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,2'-联萘的三氟乙酸盐(22mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(10.5mg，0.060mmol)及DIEA(0.035mL，0.20mmol)于DMF(3mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空除去挥发性物质。通过制备性HPLC(Waters Sunfire C18柱30×100mm 5u，用10至80%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化残余物，得到呈棕褐色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(15.6mg)。LC-MS保留时间1.765分钟；m/z 482.68(1/2M+H+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603711
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.36(s,2H),8.27(s,2H),8.12-8.18(m,4H),8.11(s,2H),8.05(明显的三重峰,J＝8.6Hz,4H),7.91-7.96(m,2H),7.86-7.91(m,2H),5.29(dd,J＝9.2,6.7Hz,2H),4.61(d,J＝6.4Hz,2H),3.85-3.91(m,2H),3.70(s,6H),2.72-2.80(m,2H),2.53-2.62(m,2H),2.12-2.26(m,4H),1.13-1.21(m,2H),1.04(d,J＝6.7Hz,6H),0.99(宽单峰,2H),0.95(d,J＝6.7Hz,6H)。
Figure BDA00001874284603712
实施例47
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-1,5-二氮杂萘-2-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(8.7mg，0.023mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,5-二氮杂萘的三氟乙酸盐(12mg，9.93μmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(4.2mg)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.017mL，0.099mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(2S,2'S)-1,1'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(1,5-二氮杂萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基))二(3-甲基-1-氧代丁烷-2,1-二基)二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(5.6mg)。LC-MS保留时间1.91分钟；m/z 420[1/2M+H]+。(柱Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.59-8.67(4H,m),8.48(2H,dd,J＝8.8,1.3Hz),8.44(2H,d,J＝8.8Hz),7.92(2H,d,J＝8.5Hz),5.29(2H,dd,J＝9.2,6.7Hz),4.60(2H,d,J＝6.5Hz),3.84-3.92(2H,m),3.68(6H,s),2.69-2.80(2H,m),2.51-2.62(2H,m),2.07-2.27(4H,m),1.10-1.21(2H,m),1.02(6H,d,J＝6.8Hz),0.95-1.00(2H,m),0.93(6H,d,J＝6.8Hz)。
Figure BDA00001874284603721
实施例48
(1,5-二氮杂萘-2,6-二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯
将HATU(8.68mg，0.023mmol)加入至2,6-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,5-二氮杂萘的三氟乙酸盐(12mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(5.0mg，0.023mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.016mL，0.089mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物3小时。用MeOH稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的(1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6'-(1,5-二氮杂萘-2,6-二基)二(1H-苯并[d]咪唑-6,2-二基))二(2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基))二(2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙烷-2,1-二基)二氨基甲酸二甲酯的三氟乙酸盐(11mg)。LC-MS保留时间1.73分钟；m/z 462[1/2M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603722
Luna3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.61-8.68(4H,m),8.50(2H,dd,J＝8.8,1.51Hz),8.45(2H,d,J＝8.8Hz),7.93(2H,d,J＝8.8Hz),5.28(2H,dd,J＝9.3,6.8Hz),4.64(2H,d,J＝7.5Hz),3.84-4.02(6H,m),3.69(6H,s),3.35-3.46(4H,m),2.75(2H,dd,J＝13.7,9.2Hz),2.58(2H,d,J＝6.8Hz),1.99-2.22(4H,m),1.36-1.69(8H,m),1.07-1.19(2H,m),0.96(2H,m)。
Figure BDA00001874284603723
实施例49
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(76mg，0.20mmol)加入至2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-4-氯-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑(34mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(35.2mg，0.201mmol)及DIEA(0.12mL，0.67mmol)于DMF(3mL)中的溶液中且在环境温度搅拌所得混合物2小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空中除去挥发性组分。通过反相制备性HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)纯化残余物，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(41.3mg)。LC-MS保留时间1.717分钟；m/z 821.58(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm 5mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603731
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284603732
ppm8.24(d,J＝1.8Hz,2H),8.01-8.13(m,4H),7.84-7.98(m,3H),5.29(dd,J＝9.2,6.7Hz,1H),5.09(t,J＝7.2Hz,1H),4.60(t,J＝7.2Hz,2H),3.86-3.91(m,1H),3.71-3.76(m,1H),3.69(s,3H),3.68(m,3H),2.77(dd,J＝13.6,9.3Hz,1H),2.57(ddd,J＝13.6,6.7,6.6Hz,1H),2.44-2.53(m,2H),2.11-2.26(m,3H),1.99-2.10(m,1H),1.10-1.22(m,2H),0.89-1.09(m,13H),0.80-0.84(m,1H)。
Figure BDA00001874284603733
实施例50
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(45.0mg，0.118mmol)加入至2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-4-氯-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑(20mg，0.039mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(25.7mg)及DIEA(0.069mL，0.39mmol)于DMF(3mL)中的溶液中且在环境温度搅拌所得混合物2小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空中除去挥发性组分。通过反相制备性HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)纯化残余物，得到呈淡黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(28.1mg)。LC-MS保留时间1.597分钟；m/z 905.67(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm 5mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1％TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603741
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)ppm 8.24(s,2H),8.02-8.13(m,4H),7.86-7.97(m,3H),5.27(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),5.08(t,J＝7.2Hz,1H),4.65(t,J＝7.3Hz,2H),3.88-4.02(m,5H),3.75-3.83(m,1H),3.70(s,3H),3.68(s,3H),3.36-3.49(m,4H),2.77(dd,J＝13.7,9.5Hz,1H),2.57(ddd,J＝13.7,6.7,6.4Hz,1H),2.46-2.53(m,2H),2.00-2.20(m,4H),1.55-1.69(m,4H),1.40-1.70(m,4H),1.08-1.20(m,2H),0.94-1.00(m,1H),0.80-0.84(m,1H)。
Figure BDA00001874284603751
实施例51
((1S)-1-(((1S,3R,5S)-3-(4-(6-(3-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(47.8mg，0.126mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((1S,3R,5S)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]的三氟乙酸盐(40mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(22mg，0.13mmol)及DIEA(0.073mL，0.42mmol)于DMF(3mL)中的混合物中且在环境温度搅拌所得混合物2小时。用甲醇(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物且在真空中除去挥发性组分。通过反相HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)部分纯化残余物，接着通过反相HPLC(水/乙腈，0.1%TFA)再纯化，得到呈白色固体状的((1S)-1-(((1S,3R,5S)-3-(4-(6-(3-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(45mg)。LC-MS保留时间1.458分钟；m/z 813.30(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/10mM乙酸铵且溶剂B为10%水/90%甲醇/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.30(d,J＝4.6Hz,2H),8.18(s,1H),8.14(d,J＝8.9Hz,1H),8.10(d,J＝8.9Hz,1H),7.98-8.02(m,2H),7.98(s,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,1H),7.88(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),7.77(d,J＝8.2Hz,1H),7.69(t,J＝7.8Hz,1H),5.13-5.20(m,2H),4.57(t,J＝6.1Hz,2H),3.80-3.88(m,2H),3.69(d,J＝6.1Hz,6H),2.67-2.77(m,2H),2.51(dq,J＝13.7,6.8Hz,2H),2.15-2.25(m,2H),2.10(dq,J＝13.8,6.8Hz,2H),1.08-1.18(m,2H),1.03(dd,J＝6.7,4.6Hz,6H),0.95(dd,J＝6.7,3.4Hz,6H),0.92(dd,J＝5.3,2.0Hz,2H)。
Figure BDA00001874284603761
实施例52
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-6-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(13.16mg，0.035mmol)加入至2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(14mg，0.015mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(6.1mg)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.024mL，0.135mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-6-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(11.8mg)。LC-MS保留时间1.77分钟；m/z 789[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603762
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.59(s,1H),8.67(s,1H),8.51(d,J＝8.8Hz,1H),8.46(d,J＝1.8Hz,1H),8.27(d,J＝8.8Hz,1H),8.19(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),8.11(s,1H),7.92(d,J＝8.5Hz,1H),5.29(dd,J＝9.2,6.7Hz,1H),5.17(dd,J＝9.2,7.2Hz,1H),4.58(dd,J＝13.2,6.7Hz,2H),3.78-3.92(m,2H),3.68(s,6H),2.67-2.79(m,2H),2.45-2.62(m,2H),2.03-2.27(m,4H),1.07-1.21(m,2H),1.03(d,J＝6.8Hz,6H),0.93-1.00(m,2H),0.93(dd,J＝6.3,5.8Hz,6H)。
Figure BDA00001874284603771
实施例53
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-6-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(15.0mg，0.040mmol)加入至2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(16mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(8.6mg，0.040mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.027mL，0.16mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，且通过制备性HPLC(含10mM NH4OAc缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-6-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(14.5mg)。LC-MS保留时间1.58分钟；m/z 873[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603772
Luna 3.0×50mm S 10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1HNMR(400MHz,MeOD)δppm 9.34(s,1H),8.36(s,1H),8.28(d,J＝1.0Hz,1H),8.08-8.19(m,2H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),7.66(d,J＝8.5Hz,1H),7.54(s,1H),5.27(t,J＝6.9Hz,1H),5.18(dd,J＝8.9,4.9Hz,1H),4.69(d,J＝5.5Hz,2H),3.87-4.03(m,4H),3.73-3.85(m,2H),3.68(s,6H),3.32-3.47(m,4H),2.50-2.61(m,3H),2.40-2.49(m,1H),1.99-2.16(m,4H),1.51-1.72(m,6H),1.38-1.51(m,2H),1.09-1.22(m,2H),0.76-0.92(m,2H)。
Figure BDA00001874284603781
实施例54
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(157mg，0.413mmol)加入至(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(130mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(90mg，0.41mmol)及DIEA(0.36mL，2.1mmol)于DMF(4mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。在真空除去挥发性物质。在反相HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)上纯化物质，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(194mg)。LC-MS保留时间1.307分钟；m/z 829.27(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603782
Platform确定MS数据。1HNMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.31(s,1H),8.29(s,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),8.11(d,J＝0.9Hz,1H),8.11(d,J＝8.9Hz,1H),8.02(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.98(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.89(d,J＝8.5Hz,1H),7.88(dd,J 8.5,1.8Hz,1H),5.27(dd,J＝9.2,6.7Hz,1H),5.18(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),4.62-4.67(m,1H),4.58(d,J＝6.4Hz,1H),3.87-4.01(m,3H),3.82-3.87(m,1H),3.70(m,6H),3.36-3.44(m,2H),2.74(td,J＝13.3,9.5Hz,2H),2.48-2.62(m,2H),2.04-2.24(m,4H),1.40-1.60(m,4H),1.09-1.19(m,2H),1.04(d,J＝6.7Hz,3H),0.89-0.99(m,5H)。
实施例55
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(100mg，0.263mmol)加入至(S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基氨基甲酸甲酯(118mg)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(46.2mg，0.263mmol)及DIEA(0.31mL，1.8mmol)于DMF(4mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH(2mL)及水(2mL)稀释反应混合物。使用旋转蒸发器在真空除去挥发性物质且在反相HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)上纯化残余物，得到((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(55.3mg)。LC-MS保留时间1.320分钟；m/z829.42(MH+)。在配备有Waters Sunfire C 184.6×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603792
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.31(s,1H)8.29(s,1H),8.08-8.18(m,3H),8.04(dd,J＝8.9,1.5Hz,1H),7.95-8.00(m,2H),7.90(d,J＝8.6Hz,1H),7.87(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),5.29(dd,J＝9.3,6.9Hz,1H),5.17(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),4.62(dd,J＝9.2,7.3Hz,2H),3.96(td,J＝10.8,2.9Hz,2H),3.83-3.92(m,2H),3.64-3.77(m,6H),3.35-3.46(m,2H),2.74(ddd,J＝19.3,13.5,9.3Hz,2H),2.48-2.62(m,2H),2.06-2.26(m,4H),1.45-1.63(m,4H),1.06-1.22(m,2H),1.03(d,J＝6.7Hz,3H),0.96-1.01(m,1H),0.93(d,J＝6.7Hz,3H),0.88-091(m,1H)。
Figure BDA00001874284603801
实施例56
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将NCS(14.98mg，0.112mmol)加入至((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(93mg)的DMF溶液中且在50℃(油浴温度)加热反应混合物2小时。在反相HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)上纯化粗反应混合物，得到((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(102.8mg)。LC-MS保留时间1.648分钟；m/z863.32(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603811
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.22(宽单峰,2H),8.10(s,1H),8.00-8.06(m,3H),7.85-7.94(m,3H),5.28(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),5.09(t,J＝7.2Hz,1H),4.65(d,J＝7.3Hz,1H),4.59(d,J＝7.0Hz,1H),3.89-3.99(m,3H),3.66-3.77(m,7H),3.35-3.44(m,2H),2.77(dd,J＝13.6,9.3Hz,1H),2.57(ddd,J＝13.8,6.8,6.6Hz,1H),2.47-2.52(m,2H),2.02-2.22(m,4H),1.44-1.63(m,4H),1.13(dt,J＝8.6,5.8Hz,2H),1.05(d,J＝7.0Hz,3H),0.92-1.02(m,4H),0.83(d,J＝1.8Hz,1H)。
Figure BDA00001874284603812
实施例57
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将NCS(10.31mg，0.077mmol)加入至((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(64mg)的DMF(2mL)溶液中且在50℃加热反应混合物2小时。在反相HPLC(水/甲醇，0.1%TFA)上纯化粗反应混合物且在反相HPLC(水/ACN，0.1%TFA)上再纯化，得到呈棕褐色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(44.7mg)。LC-MS保留时间1.63分钟；m/z 863.39(MH+)。在配备有Waters Sunfire C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%甲醇/90%水/0.1%TFA且溶剂B为10%水/90%甲醇/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603821
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.24(宽单峰,2H),8.02-8.12(m,4H),7.86-7.95(m,3H),5.28(dd,J＝9.2,6.7Hz,1H),5.08(明显三重峰,J＝7.0Hz,1H),4.65(d,J＝7.6Hz,1H),4.60(d,J＝6.7Hz,1H),3.93-4.01(m,2H),3.86-3.91(m,1H),3.75-3.81(m,1H),3.65-3.74(m,6H),3.36-3.46(m,2H),2.77(dd,J＝13.7,9.2Hz,1H),2.57(ddd,J＝13.7,6.7,6.4Hz,1H),2.49(dd,J＝7.8,3.2Hz,2H),2.12-2.25(m,2H),2.00-2.12(m,2H),1.54-1.67(m,3H),1.41-1.51(m,1H),1.09-1.19(m,2H),0.97-1.06(m,4H),0.94(d,J＝6.7Hz,3H),0.82(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284603822
实施例58
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(5.64mg，0.015mmol)加入至6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(6.0mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(3.2mg)于DMF(0.5mL)及DIPEA(10.13μL，0.058mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。除去溶剂且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化残余物，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(5.5mg)。LC-MS保留时间1.60分钟；m/z 873[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603831
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=95%水/5%甲醇/10mM乙酸铵。溶剂B=5%水/95%甲醇/10mM乙酸铵。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=2分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.42(s,1H),8.41-8.50(m,2H),8.30(d,J＝1.3Hz,2H),8.19(d,J＝1.0Hz,1H),8.07(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.92(d,J＝8.5Hz,1H),5.13-5.33(m,3H),4.57-4.70(m,1H),3.81-4.04(m,6H),3.62-3.77(m,6H),3.34-3.46(m,4H),2.65-2.82(m,2H),2.45-2.61(m,2H),2.01-2.22(m,4H),1.40-1.65(m,8H),1.03-1.17(m,2H),0.83-0.98(m,2H)。
Figure BDA00001874284603832
实施例59
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(5.64mg，0.015mmol)加入至6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉的三氟乙酸盐(6.0mg)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(2.60mg，0.015mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(10.13μL，0.058mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。除去溶剂且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化残余物，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(3.6mg)。LC-MS保留时间1.75分钟；m/z 789[M+H]+。(柱
Figure BDA00001874284603833
Luna 3.0×50mm S10。溶剂A=90%水：10%甲醇：0.1%TFA。溶剂B=10%水：90%甲醇：0.1%TFA。流速=4mL/min。起始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220nm)。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.42(s,1H),8.41-8.48(m,2H),8.30(d,J＝1.3Hz,2H),8.18(d,J＝1.0Hz,1H),8.06(dd,J＝8.7,1.6Hz,1H),7.92(d,J＝8.5Hz,1H),5.24-5.33(m,1H),5.16-5.24(m,1H),4.52-4.63(m,2H),3.78-3.91(m,2H),3.68(d,J＝1.0Hz,6H),2.65-2.79(m,2H),2.46-2.61(m,2H),2.05-2.26(m,4H),1.07-1.20(m,2H),0.99-1.06(m,6H),0.94-1.01(m,2H),0.92(dd,J＝6.8,3.3Hz,6H)。
Figure BDA00001874284603841
实施例60
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
Figure BDA00001874284603842
实施例62
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
Figure BDA00001874284603843
实施例63
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
在室温将NCS(13.0mg，0.097mmol)加入至((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(79mg)的DMF(2mL)溶液中且在50℃加热混合物16小时。通过制备性HPLC(TFA)(使用Waters Sunfire C18柱30×150mm 5u，用30至90%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(20.2mg)及两种一氯化物产物的混合物，通过SFC，在
Figure BDA00001874284603851
IB柱上分离所述混合物，接着分别通过制备性HPLC(TFA)(使用Waters Sunfire C18柱30×150mm 5u，用25至100%MeOH-水+0.1%TFA的梯度洗脱)再纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(11.1mg)及呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(11.4mg)。
对于实施例60：LC-MS保留时间2.133分钟；m/z 883.35(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603852
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284603853
ppm 8.22(s,2H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),8.03(d,J＝8.9Hz,1H),7.83-7.95(m,6H),5.08(td,J＝9.1,6.0Hz,2H),4.59(dd,J＝6.7,1.8Hz,2H),3.71-3.79(m,2H),3.68(s,6H),2.44-2.57(m,4H),2.13-2.25(m,2H),2.00-2.10(m,2H),1.09-1.16(m,2H),1.05(dd,J＝6.7,1.5Hz,6H),0.91-1.02(m,6H),0.79-0.87(m,2H)。
对于实施例62：LC-MS保留时间1.745分钟；m/z 847.33(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603861
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284603862
ppm 8.23(s,2H),8.02-8.09(m,2H),7.98(d,J＝8.2Hz,2H),7.89-7.94(m,3H),7.86(d,J＝8.6Hz,2H),5.15(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),5.09(t,J＝7.0Hz,1H),4.58(t,J＝6.7Hz,2H),3.84(t,J＝4.7Hz,1H),3.71-3.77(m,1H),3.69(d,J＝3.1Hz,6H),2.72(dd,J＝13.7,9.5Hz,1H),2.45-2.54(m,3H),2.14-2.24(m,2H),2.00-2.14(m,2H),1.09-1.18(m,2H),1.00-1.08(m,6H),0.96(t,J＝7.6Hz,6H),0.92(宽单峰,1H),0.83(宽单峰,1H)。
对于实施例63：LC-MS保留时间1.753分钟；m/z 847.32(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603863
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284603864
ppm 8.26(d,J＝7.0Hz,2H),8.13(d,J＝8.9Hz,1H),8.04-8.10(m,1H),7.95-8.01(m,2H),7.89-7.95(m,2H),7.82-7.89(m,3H),5.17(dd,J＝9.2,7.0Hz,1H),5.07(t,J＝7.2Hz,1H),4.58(d,J＝6.4Hz,2H),3.81-3.88(m,1H),3.71-3.76(m,1H),3.69(d,J＝4.6Hz,6H),2.73(dd,J＝13.4,9.5Hz,1H),2.44-2.56(m,3H),2.14-2.25(m,2H),2.08-2.14(m,1H),1.09-1.18(m,2H,)1.00-1.08(m,6H),0.96(t,J＝6.4Hz,6H),0.92(宽单峰,1H)0.78-0.85(m,1H)。
Figure BDA00001874284603871
实施例61
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
中间体105与适当硼酸(以类似于中间体66的方式，使用适当起始物质制备)经类似于制备中间体106的偶联反应的反应，得到呈淡黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(91mg)。LC-MS保留时间1.362分钟；m/z 855.31(MH+)。在配备有Waters Sunfire 5u C184.6×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603872
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284603873
ppm 8.29(s,1H),8.28(s,1H),8.14(d,J＝8.9Hz,1H),8.09(d,J＝8.9Hz,1H),8.01-7.94(m,4H),7.93-7.91(m,1H),7.90-7.83(m,3H),5.19-5.12(m,2H),4.62(d,J＝7.6Hz,1H),4.58(d,J＝6.4Hz,1H),3.99-3.91(m,2H),3.89-3.80(m,2H),3.70(s,3H),3.69(s,3H),3.46-3.35(m,2H),2.76-2.67(m,2H),2.57-2.46(m,2H),2.25-2.16(m,1H),2.15-2.05(m,3H),1.65-1.40(m,4H),1.16-1.07(m,2H),1.04(d,J＝6.7Hz,3H),0.95(d,J＝6.7Hz,3H),0.93-0.87(m,2H)。
Figure BDA00001874284603874
实施例64
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将N-氯琥珀酰亚胺(10.4mg，0.078mmol)加入至经搅拌的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(实施例61)(60mg，0.071mmol)的DMF(1.5mL)溶液中且密封反应容器并在50℃加热16小时。冷却反应混合物，部分浓缩，接着用MeOH稀释。过滤溶液且通过制备性HPLC(MeOH/H2O，含0.1%TFA)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(21.4mg)。LC-MS保留时间2.798分钟；m/z 462.34(1/2MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603881
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603882
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.18(s,2H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),7.99(d,J＝8.8Hz,1H),7.80-7.92(m,6H),5.06(ddd,J＝9.0,5.8,3.5Hz,2H),4.63(d,J＝7.5Hz,1H),4.57(d,J＝6.5Hz,1H),3.92-3.98(m,2H),3.71-3.81(m,2H),3.67(s,6H),3.35-3.44(m,2H),2.42-2.57(m,4H),1.99-2.24(m,4H),1.40-1.66(m,4H),1.06-1.14(m,2H),1.03(d,J＝6.8Hz,3H),0.95(d,J＝6.8Hz,3H),0.82(d,J＝2.8Hz,2H)。
Figure BDA00001874284603891
实施例65
((1S)-1-(4,4-二氟环己基)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(67.3mg，0.177mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体69)的盐酸盐(38.0mg，0.059mmol)及(S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(44.5mg，0.177mmol)于DMF(0.7mL)及DIPEA(0.103mL，0.590mmol)中的溶液中。用MeOH稀释反应混合物，过滤，通过制备性HPLC(含0.1%TFA的水/MeOH)纯化且通过制备性HPLC(含10mM乙酸铵的水/MeOH)再纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-1-(4,4-二氟环己基)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯(22.1mg)。LC-MS保留时间2.713分钟；m/z 483.13(1/2MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603892
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603893
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.16(s,1H),8.11(s,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,2H),7.77-7.85(m,5H),7.47(s,1H),7.39(s,1H),7.08(d,J＝8.5Hz,1H),5.15(ddd,J＝8.2,6.3,6.1Hz,2H),4.68(宽单峰,2H),3.69-3.76(m,2H),3.68(s,6H),2.41-2.57(m,4H),1.65-2.12(m,16H),1.33-1.59(m,4H),1.06-1.17(m,2H),0.78(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284603901
实施例66
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(89mg，0.24mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体69)的三氟乙酸盐(80mg，0.084mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)丁酸(37.8mg，0.235mmol)于DMF(0.8mL)及DIPEA(0.15mL，0.84mmol)中的溶液中。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的水/MeOH)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(70.1mg)。LC-MS保留时间1.688分钟；m/z 785.55(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603902
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603903
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.28(s,1H),8.26(s,1H),8.12(d,J＝8.8Hz,1H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),7.93-8.00(m,4H),7.82-7.90(m,4H),5.12-5.21(m,2H),4.58-4.65(m,2H),3.74-3.81(m,2H),3.67(s,6H),2.70(ddd,J＝13.7,9.0,4.9Hz,2H),2.49(dq,J＝14.2,7.1Hz,2H),2.09(宽单峰,2H),1.86-1.99(m,2H),1.64-1.77(m,2H),1.09-1.17(m,2H),1.02(t,J＝7.4Hz,6H),0.92(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284603911
实施例67
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(101mg，0.266mmol)加入至经搅拌的2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体117)的三氟乙酸盐(102mg，0.106mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(46.6mg，0.266mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.189mL，1.1mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeOH/H2O)纯化，接着通过制备性HPLC(含0.1%TFA的乙腈/水)再纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(63.8mg)。LC-MS保留时间1.900分钟；m/z 817.59(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603912
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1％三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603913
Platform确定MS数据。1H NMR呈现为区域异构体的约4:1混合物。1H NMR (对于主要区域异构体)(400MHz,MeOD)δppm 8.31(s,1H),8.27(s,1H),8.13(d,J＝8.5Hz,1H),8.09(d,J＝8.5Hz,1H),7.94-8.02(m,5H),7.84-7.92(m,3H),5.15-5.24(m,2H),4.13(dd,J＝8.7,1.4Hz,2H),3.74(d,J＝2.8Hz,2H),3.67(s,6H),2.50-2.60(m,2H),2.26-2.45(m,4H),1.95-2.10(m,4H),1.57(dd,J＝6.5,3.0Hz,6H),1.32(t,J＝6.4Hz,2H),0.99(d,J＝6.8Hz,6H),0.89(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例68
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
以及
Figure BDA00001874284603922
实施例69
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
由制备((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(实施例64)的三氟乙酸盐的同一反应分离呈三氟乙酸盐形式的两种氯咪唑区域异构体(实施例68及69)的混合物(21.4mg)。使用SCF色谱法(2-乙基吡啶SCF柱(4.6×250mm，5μm)及80%CO2-20%EtOH/0.1%DEA)以多次注射分离所述两种区域异构化合物。通过HMBC相关性确定所分离物质的绝对区域化学。反应得到((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(7.4mg)及((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(4.5mg)，各呈灰白色固体状。对于实施例68：LC-MS保留时间2.683分钟；m/z 889.17(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603931
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603932
Platform确定MS数据。对于实施例69：LC-MS保留时间2.695分钟；m/z 889.22(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603933
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603934
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284603935
实施例70
((1S)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(73.3mg，0.193mmol)加入至经搅拌的2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体117)的三氟乙酸盐(73.9mg，0.077mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(41.9mg，0.193mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.14mL，0.77mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物30分钟。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeOH/H2O)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(51.2mg)。LC-MS保留时间1.897分钟；m/z 901.39(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603941
Luna 10u C183.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603942
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284603943
实施例71
((1S)-1-(4,4-二氟环己基)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(70.8mg，0.186mmol)加入至经搅拌的2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体117)的三氟乙酸盐(71.4mg，0.074mmol)及(S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(46.8mg，0.186mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.13mL，0.75mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物1.5小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeOH/H2O)纯化，得到呈浅黄色固体状的所需产物((1S)-1-(4,4-二氟环己基)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(43.3mg)。LC-MS保留时间2.828分钟；m/z 485.22(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603951
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603952
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284603953
实施例72
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(4-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将N-氯琥珀酰亚胺(7.1mg，0.053mmol)加入至经搅拌的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(实施例34)(22.7mg，0.025mmol)的DMF(0.5mL)溶液中且密封反应容器并在50℃加热反应混合物12小时。使反应混合物冷却至室温，再加入N-氯琥珀酰亚胺(约3mg)，密封反应容器并在50℃搅拌2小时。使反应混合物冷却至室温，用MeOH稀释，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的甲醇/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(4-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(12mg)。LC-MS保留时间2.708分钟；m/z483.25(1/2MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603961
Luna 10u C183.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603962
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.18(s,2H),8.04(d,J＝8.8Hz,1H),7.99(d,J＝8.8Hz,1H),7.80-7.92(m,6H),5.02-5.09(m,2H),4.63(d,J＝6.0Hz,2H),3.91-3.99(m,4H),3.73-3.80(m,2H),3.67(s,6H),3.34-3.45(m,4H),2.43-2.54(m,4H),1.98-2.13(m,4H),1.38-1.67(m,8H),1.06-1.15(m,2H),0.81(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284603963
实施例73
((1S,2R)-2-甲氧基-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-苏氨酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(65.7mg，0.173mmol)加入至经搅拌的2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体133)的三氟乙酸盐(66mg，0.069mmol)及(2S,3R)-3-甲氧基-2-(甲氧基羰基氨基)丁酸(33.0mg，0.173mmol)于DMF(0.8mL)及DIPEA(0.121mL，0.691mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物过夜。用MeOH稀释反应混合物，过滤且制备性HPLC(含10nM乙酸铵的甲醇/水)纯化，得到呈灰白色固体状的((1S,2R)-2-甲氧基-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-苏氨酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(51.9mg，0.048mmol，98%收率)。LC-MS保留时间2.383分钟；m/z 845.42(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603971
Luna 10u C18 3.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用4mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、3分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及4分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603972
Platform确定MS数据。1H NMR(MeOD,400MHz)
Figure BDA00001874284603973
8.29(宽单峰,1H),8.26(s,1H),8.12(d,J=8.8Hz,1H),8.07(d,J=8.8Hz,1H),8.00-7.93(m,4H),7.91-7.82(m,4H),5.18(td,J=9.0,7.0Hz,2H),4.78(dd,J=3.9,1.7Hz,2H),3.92-3.79(m,4H),3.68(s,6H),3.35(s,3H),3.35(m,3H),2.76-2.65(m,2H),2.59-2.47(m,2H),2.15-2.05(m,2H),1.19(d,J=6.3Hz,6H),1.16-1.07(m,2H),0.94-0.84(m,2H)。
Figure BDA00001874284603974
实施例74
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(193mg，0.506mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体124)的盐酸盐(100mg，0.169mmol)及(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(89mg，0.51mmol)于DMF(1.5mL)及DIPEA(0.24mL，1.4mmol)中的溶液中且在室温搅拌澄清橙色溶液3小时。用甲醇稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(71mg)。LC-MS保留时间3.706分钟；m/z 761.22(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284603981
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603982
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.15(s,1H),7.96(s,1H),7.80-7.88(m,3H),7.51(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.46(s,1H),7.27(s,1H),5.18(dd,J=9.0,4.8Hz,1H),5.13(dd,J=8.8,4.3Hz,1H),4.59(dd,J=11.8,6.8Hz,2H),3.68-3.72(m,1H),3.67(s,3H),3.67(s,3H),3.59-3.64(m,1H),2.31-2.60(m,4H),2.08-2.22(m,2H),1.99-2.08(m,2H),1.13(ddd,J=8.6,5.8,5.5Hz,2H),1.00(dd,J=12.9,6.9Hz,6H),0.93(dd,J=6.7,2.9Hz,6H),0.79(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284603983
实施例75
(非对映异构体混合物)
(2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(((甲氧基羰基)氨基)(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(110mg，0.289mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体124)的盐酸盐(57mg，0.096mmol)及外消旋2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(62.7mg，0.289mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.134mL，0.770mmol)中的溶液中且在室温搅拌澄清橙色溶液3小时。用甲醇稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状且呈非对映异构体混合物形式的(2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(((甲氧基羰基)氨基)(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(37.3mg)。LC-MS保留时间1.522分钟；m/z 845.36(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284603992
Platform确定MS数据。非对映异构体混合物。1H NMR (400MHz,MeOD)δppm 8.15(d,J＝12.8Hz,1H),7.96(s,1H),7.80-7.90(m,3H),7.51(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.46(d,J＝5.5Hz,1H),7.27(d,J＝5.3Hz,1H),5.08-5.24(m,2H),4.61-4.69(m,1H),4.57(dd,J＝8.3,4.5Hz,1H),3.85-4.03(m,5H),3.63-3.79(m,8H),3.34-3.49(m,5H),2.30-2.63(m,4H),1.99-2.16(m,3H),1.70-1.80(m,1H),1.35-1.66(m,6H),1.16-1.26(m,1H),1.07-1.16(m,1H),0.70-0.83(m,2H)。
Figure BDA00001874284603993
实施例76
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-((4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将N-氯琥珀酰亚胺(13.3mg，0.100mmol)加入至经搅拌的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(38mg，0.050mmol)的DMF(1mL)溶液中，接着用氮气冲洗反应容器，密封并在50℃加热16小时。使反应混合物冷却至室温且再加入N-氯琥珀酰亚胺(7.4mg)。在50℃再加热反应混合物3小时，冷却至室温，用MeOH(约0.5mL)稀释，过滤且通过制备性HPLC(MeOH/水，TFA缓冲液)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-((4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(5.0mg)。LC-MS保留时间4.153分钟；m/z 831.02(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604001
Luna 3u C182.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604002
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.19(s,1H),8.07(s,1H),7.87-7.99(m,3H),7.58(dd,J＝8.5,1.3Hz,1H),5.07(t,J＝7.2Hz,1H),4.98-5.03(m,1H),4.54-4.59(m,2H),3.67(s,6H),3.62-3.75(m,2H),2.45-2.50(m,2H),2.41(dd,J＝7.3,3.5Hz,2H),2.09-2.21(m,2H),1.96-2.08(m,2H),1.08-1.16(m,2H),1.02(t,J＝6.1Hz,6H),0.92-0.97(m,6H),0.75-0.85(m,2H)。
实施例77
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(25.4mg，0.067mmol)加入至经搅拌的(S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(中间体128)的盐酸盐(42mg，0.061mmol)、2-((2R,4r，6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(Cap-179立体异构体2)(14.9mg，0.061mmol)及DIEA(0.053mL，0.30mmol)于DMF(2mL)中的溶液中且在室温搅拌所得浅黄色溶液2小时。减压浓缩反应混合物，将残余物再溶解于甲醇中且通过制备性HPLC(溶剂A：05%MeCN/95%水/10mM NH4Ac；溶剂B：95%MeCN/5%水/10mM NH4Ac；柱：Sunfire Prep MS C1830×100mm S10；波长：220nM；流速：40ml/min；梯度：0%B至80%B，历时30分钟，保持时间5分钟)纯化，得到呈白色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(((2R,4r，6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(26mg)。LC-MS[M+H]+=883；Rt=2.99分钟为产物。柱Luna 3u C182×50mm；起始%B：0，最后%B：100，溶剂A：5%ACN/95%H2O+10mM乙酸铵；溶剂B：95%ACN/5%H2O+10mM乙酸铵；流速为4ml/min。运行时间：5分钟。纯度=97%。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 11.85(1H,宽单峰),11.73(1H,宽单峰),8.14-8.27(2H,m),7.90-7.98(3H,m),7.82-7.89(3H,m),7.79(2H,d,J＝8.24Hz),7.64(1H,s),7.57(1H,s),7.19(2H,t,J＝9.31Hz),5.03-5.13(2H,m),4.51(1H,t,J＝7.93Hz),4.44(1H,t,J＝7.78Hz),3.65(1H,宽单峰),3.51-3.60(7H,m),3.29-3.42(7H,m),2.35-2.47(2H,m),2.20-2.33(2H,m),2.01-2.11(2H,m),1.83-1.92(3H,m),1.63(1H,d,J＝12.21Hz),1.57(1H,d,J＝11.60Hz),0.96-1.09(12H,m),0.89(4H,d,J＝6.71Hz),0.72(2H,宽单峰)。
Figure BDA00001874284604011
实施例78
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(91mg，0.240mmol)加入至经搅拌的6,6'-二(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2,2'-联萘(中间体133)(43.9mg，0.080mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(42.0mg，0.240mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.14mL，0.80mmol)中的溶液中且搅拌澄清棕色溶液2小时。用MeOH稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(28.9mg)。LC-MS保留时间1.788分钟；m/z 863.46(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604021
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.37(s,2H),8.29(d,J＝1.0Hz,2H),8.15(d,J＝8.8Hz,2H),8.06-8.13(m,4H),7.97(s,2H),7.86(dd,J＝8.7,1.6Hz,2H),5.17(dd,J＝9.3,7.0Hz,2H),4.57(d,J＝6.8Hz,2H),3.80-3.86(m,2H),3.68(s,6H),2.71(dd,J＝13.7,9.4Hz,2H),2.46-2.56(m,2H),2.15-2.25(m,2H),2.09(d,J＝8.0Hz,2H),1.08-1.16(m,2H),1.03(d,J＝6.8Hz,6H),0.92-0.96(m,6H),0.88-0.96(m,2H)。
Figure BDA00001874284604023
实施例79
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(35.4mg，0.093mmol)加入至经搅拌的(2S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(47mg，0.072mmol)及(S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(23mg，0.093mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.050mL，0.29mmol)中的溶液中且搅拌反应混合物3小时。用MeOH稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含0.1%TFA  的MeOH/水纯化)，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(31.3mg)。LC-MS保留时间1.670分钟；m/z 883.43(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604031
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604032
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.28(d,J＝1.0Hz,1H),8.26(s,1H),8.12(d,J＝8.8Hz,1H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),7.93-7.99(m,4H),7.82-7.92(m,4H),5.15(td,J＝9.6,6.9Hz,2H),4.58(t,J＝7.4Hz,2H),3.79-3.86(m,2H),3.68(s,6H),3.43-3.53(m,2H),2.65-2.75(m,2H),2.50(ddd,J＝13.6,6.7,6.5Hz,2H),2.04-2.24(m,4H),1.54-1.62(m,1H),1.45-1.53(m,1H),0.84-1.21(m,18H)。
实施例80
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(64.1mg，0.169mmol)加入至2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)喹啉(中间体139)的盐酸盐(50mg，0.073mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(29.5mg，0.169mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.115mL，0.660mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(55.3mg)。LC-MS保留时间2.883分钟；m/z 814.65(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604041
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604042
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604043
实施例81
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(64.1mg，0.169mmol)加入至2-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)喹啉(中间体139)的盐酸盐(50mg，0.073mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(36.6mg，0.169mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.12mL，0.66mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(64.8mg)。LC-MS保留时间2.553分钟；m/z 898.70(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604051
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604053
实施例82
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(102mg，0.269mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的盐酸盐(60mg，0.134mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(58.4mg，0.269mmol)于DMF(1.2mL)及DIPEA(0.19mL，1.1mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用甲醇稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(48.9mg)。LC-MS保留时间2.572分钟；m/z 845.65(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.14(s,1H),7.96(s,1H),7.80-7.87(m,3H),7.51(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.45(s,1H),7.27(s,1H),5.16(dd,J＝8.8,5.0Hz,1H),5.11(dd,J＝8.8,4.5Hz,1H),4.66(d,J＝7.5Hz,1H),4.63(d,J＝7.8Hz,1H),3.90-3.98(m,4H),3.67(s,6H),3.63-3.76(m,2H),3.33-3.44(m,4H),2.32-2.56(m,4H),1.98-2.10(m,4H),1.35-1.67(m,8H),1.08-1.16(m,2H),0.78(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284604063
实施例83
((1S)-2-((1R,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(27.8mg，0.073mmol)加入至(2S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(中间体131)(40mg，0.061mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(15.90mg，0.073mmol)溶解于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.053mL，0.31mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用甲醇稀释反应混合物且通过制备性HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-2-((1R,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(3.5mg)。LC-MS保留时间2.785分钟；m/z 855.74(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604071
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604072
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.17(s,1H),8.10(s,1H),7.93(dd,J＝8.5,3.0Hz,2H),7.77-7.86(m,6H),7.44(s,1H),7.35(s,1H),5.20(dd,J＝8.9,4.6Hz,1H),5.15(dd,J＝8.8,5.0Hz,1H),4.66(d,J＝7.8Hz,1H),4.61(d,J＝6.8Hz,1H),3.90-3.99(m,2H),3.68(s,6H),3.64-3.76(m,3H),3.34-3.43(m,3H),2.39-2.61(m,4H),2.12-2.23(m,1H),1.99-2.10(m,2H),1.52-1.67(m,2H),1.41-1.51(m,1H),1.08-1.18(m,2H),1.02(d,J＝6.8Hz,3H),0.94(d,J＝6.8Hz,3H),0.76-0.84(m,2H)。
Figure BDA00001874284604073
实施例84
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
以及
Figure BDA00001874284604081
实施例85
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将N-氯琥珀酰亚胺(6.01mg，0.045mmol)加入至经搅拌的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(实施例80)的三氟乙酸盐(26mg，0.022mmol)的DMF(0.5mL)溶液中且在50℃搅拌反应混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到两种产物：1)呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(12.4mg)。LC-MS保留时间3.871分钟；m/z 882.55(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604082
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604083
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.53(d,J＝8.8Hz,1H),8.26(d,J＝8.8Hz,1H),8.23(s,1H),8.17(s,2H),7.82-7.93(m,4H),5.16(dd,J＝8.8,5.3Hz,1H),5.06(t,J＝7.2Hz,1H),4.53-4.63(m,2H),3.68-3.76(m,2H),3.67(s,6H),2.44-2.60(m,4H),2.11-2.24(m,2H),1.97-2.09(m,2H),1.09-1.18(m,2H),1.03(dd,J＝6.8,3.3Hz,6H),0.95(dd,J＝6.8,2.4Hz,6H),0.75-0.87(m,2H)。2)呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(4.8mg)。LC-MS保留时间2.98分钟；m/z 848.60(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604091
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604092
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.64(d,J＝8.8Hz,1H),8.34(s,1H),8.32(s,1H),8.25-8.29(m,2H),8.09(d,J＝8.8Hz,1H),7.86-7.96(m,4H),5.18-5.25(m,1H),5.03-5.09(m,1H),4.53-4.62(m,2H),3.64-3.83(m,2H),3.64-3.69(m,6H),2.42-2.70(m,4H),1.97-2.24(m,4H),1.08-1.17(m,2H),1.02(dd,J＝6.8,2.4Hz,6H),0.94(t,J＝6.8Hz,6H),0.76-0.91(m,2H)。
Figure BDA00001874284604093
实施例86
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将N-氯琥珀酰亚胺(6.68mg，0.050mmol)加入至((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(实施例81)的三氟乙酸盐(31mg，0.025mmol)的DMF(0.5mL)溶液中且在50℃搅拌反应混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(12.1mg)。LC-MS保留时间3.511分钟；m/z 484.17(1/2MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604101
Luna 3u C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604102
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.60(d,J＝8.8Hz,1H),8.27-8.33(m,2H),8.21(s,2H),7.89-7.95(m,2H),7.83-7.88(m,2H),5.15(dd,J＝8.7,5.6Hz,1H),5.05(dd,J＝8.3,6.3Hz,1H),4.64(dd,J＝11.3,7.8Hz,2H),3.87-4.00(m,4H),3.73-3.81(m,2H),3.68(s,6H),3.33-3.48(m,4H),2.41-2.61(m,4H),1.95-2.16(m,4H),1.39-1.70(m,8H),1.06-1.18(m,2H),0.81(m,2H)。
Figure BDA00001874284604103
实施例87
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(4-氯-2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将N-氯琥珀酰亚胺(18.88mg，0.141mmol)加入至经搅拌的((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(105mg，0.129mmol)的DMF(3.0mL)溶液中，接着用氮气冲洗反应混合物，密封并在50℃加热过夜。根据LC-MS为1.3:1.6:1的起始物质：单氯(可能两种区域异构体：二氯)。浓缩反应混合物，溶解于MeOH中，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到回收的起始物质(36.2mg)、两种单氯咪唑区域异构体(56.6mg)(实施例94及实施例95)的混合物，及呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(4-氯-2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(20.4mg)。LC-MS保留时间2.482分钟；m/z 885.84(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604111
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604112
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604113
实施例88
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-1-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(62.8mg，0.165mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-1-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体144)的盐酸盐(42.6mg，0.066mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(28.9mg，0.165mmol)于DMF(0.8mL)及DIPEA(0.092mL，0.53mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈灰白色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-1-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(53.7mg)。LC-MS保留时间2.821分钟；m/z 813.88(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604121
Luna 3u C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604122
Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm8.06(d,J＝8.5Hz,1H),7.98(d,J＝8.5Hz,1H),7.95(s,1H),7.91(d,J＝8.5Hz,2H),7.78(s,1H),7.65-7.73(m,4H),7.59-7.64(m,2H),5.18(ddd,J＝12.5,9.2,7.0Hz,2H),4.59(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),3.80-3.87(m,2H),3.69(s,6H),2.73(dt,J＝13.4,9.2Hz,2H),2.48-2.59(m,2H),2.18-2.28(m,2H),2.10(宽单峰,2H),1.08-1.15(m,2H),1.06(d,J＝7.0Hz,3H),1.04(d,J＝7.0Hz,3H),0.99(d,J＝6.7Hz,3H),0.95(d,J＝6.7Hz,3H),0.89-0.94(m,2H)
Figure BDA00001874284604123
实施例89
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-1-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(62.8mg，0.165mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-1-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体144)的盐酸盐(42.6mg，0.066mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(35.9mg，0.165mmol)于DMF(0.8mL)及DIPEA(0.092mL，0.53mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物4小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈灰白色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-1-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(42.6mg，0.066mmol)。LC-MS保留时间1.965分钟；m/z 897.59(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604131
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%MeOH/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.23(d,J＝8.2Hz,1H),7.91(d,J＝8.5Hz,1H),7.82(d,J＝8.2Hz,2H),7.52-7.59(m,2H),7.44-7.51(m,4H),7.41(s,1H),7.21(s,1H),5.23(dd,J＝8.9,4.6Hz,1H),5.18(dd,J＝8.9,4.9Hz,1H),4.68(dd,J＝7.5,2.6Hz,2H),3.89-4.01(m,4H),3.70-3.77(m,2H),3.69(s,6H),3.35-3.45(m,4H),2.43-2.63(m,4H),2.00-2.14(m,4H),1.52-1.71(m,6H),1.41-1.52(m,2H),1.10-1.18(m,2H),0.79-0.86(m,2H)。
Figure BDA00001874284604133
实施例90
((1S)-1-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体124)的盐酸盐(50mg，0.073mmol)、2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(Cap-179立体异构体2)(36.9mg，0.151mmol)、HATU(58.6mg，0.154mmol)及DIEA(0.077mL，0.441mmol)于DMF(3mL)中组合且在室温搅拌所得黄色溶液15小时。减压除去挥发性物质，将残余物再溶解于甲醇中且通过制备性HPLC(溶剂A：10%MeOH/90%水/0.1%TFA；溶剂B：90%MeOH/10%水/0.1%TFA；柱：Sunfire Prep MS C1830×100mm 5u；波长：220nM；流速：40ml/min；梯度：10%B至80%B，历时30分钟，保持时间5分钟)纯化，得到呈白色固体状的((1S)-1-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(43mg)。LC-MS  [M+H]+=902；Rt=1.93分钟为产物。柱
Figure BDA00001874284604141
10u C183.0×50mm；起始%B：0，最后%B：100，溶剂A：10%MeOH/90%H2O+1%TFA；溶剂B：90%MeOH/10%H2O+1%TFA；流速为4mL/min。运行时间：5分钟。纯度=98%。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.38(1H,宽单峰),8.14-8.22(1H,m),8.09(1H,d,J＝8.85Hz),7.93-8.00(2H,m),7.62(1H,d,J＝8.85Hz),7.25(2H,t,J＝7.48Hz),5.02(2H,t,J＝6.87Hz),4.51(1H,dd,J＝7.78,6.56Hz),4.45(1H,t,J＝7.93Hz),3.82(1H,宽单峰),3.67(1H,d,J＝13.73Hz),3.54(6H,s),3.31-3.42(3H,m),2.33(2H,宽单峰),1.85-1.97(2H,m),1.43-1.52(1H,m),1.22-1.31(1H,m),1.03-1.12(10H,m),0.89-1.01(9H,m),0.82(1H,宽单峰),0.75(1H,宽单峰)。
Figure BDA00001874284604142
实施例91
((1S)-1-(((2S,3aS,6aS)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,3aS,6aS)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(60.9mg，0.160mmol)加入至经搅拌的(2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢环戊[b]吡咯的盐酸盐(51mg，0.073mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(中间体147)(28.1mg，0.160mmol)及DIPEA(0.076mL，0.44mmol)于DCM(1.5mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。将粗反应混合物浓缩干燥且通过制备性HPLC(TFA缓冲液)纯化，得到呈白色固体状的((1S)-1-(((2S,3aS,6aS)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,3aS,6aS)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(23.7mg)。LC-MS保留时间2.462分钟；m/z 867.8(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284604151
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604152
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604153
实施例92
((1S)-2-((2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)六氢环戊[b]吡咯-2(2H)-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(62.1mg，0.163mmol)加入至经搅拌的(2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢环戊[b]吡咯的盐酸盐(51mg，0.073mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(中间体147)(52mg，0.074mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(35.5mg，0.163mmol)及DIPEA(0.078mL，0.45mmol)于DCM(1.5mL)中的溶液中且在室温搅拌混合物2小时。将粗反应混合物浓缩干燥且通过制备性HPLC(TFA缓冲液)纯化，得到呈白色固体状的((1S)-2-((2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)六氢环戊[b]吡咯-2(2H)-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(25.8mg)。LC-MS保留时间2.350分钟；m/z 477.5(1/2MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604161
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604162
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604163
实施例93
3-氯-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((3-氯-5-甲氧基-1-异喹啉基)羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-5-甲氧基异喹啉
将HATU(48.1mg，0.127mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体124)的盐酸盐(30mg，0.051mmol)及3-氯-5-甲氧基异喹啉-1-羧酸(30.1mg，0.127mmol)于DMF(0.8mL)及DIPEA(0.071mL，0.45mmol)中的溶液中且在室温搅拌过夜。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含NH4OAc缓冲液的MeOH/水)纯化并通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)再纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((3-氯-5-甲氧基-1-异喹啉基)羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-5-甲氧基异喹啉的三氟乙酸盐(40.9mg)。LC-MS保留时间3.621分钟；m/z 887.34(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604171
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604172
Platform确定MS数据。
实施例94
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(4-氯-2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
以及
Figure BDA00001874284604174
实施例95
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
在制备((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(4-氯-2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(实施例87)的反应中制备这两种化合物且其以单氯咪唑区域异构体的混合物形式分离。通过SCFC，在
Figure BDA00001874284604175
OJ-H柱(30×250mm，5μm)上，使用溶剂：75%CO2-25%EtOH/0.1%DEA分离两种区域异构体。未确定两种单氯咪唑区域异构体的绝对区域化学，因此各自任意指定。实施例94：分离出呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(4-氯-2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(18.6mg)。LC-MS保留时间3.756分钟；m/z 851.62(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604182
Platform确定MS数据。实施例95：分离出呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(24.1mg)。LC-MS保留时间3.770分钟；m/z 851.64(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604183
Luna 3uC182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604184
Platform确定MS数据。
实施例96
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将4M HCl(0.370mL，1.48mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(5-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(中间体150)(69mg，0.074mmol)的二噁烷(2mL)溶液中且搅拌淤浆1.5小时。接着在氮气流下浓缩反应混合物且用(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(20.9mg，0.096mmol)、DMF(1.5mL)、DIPEA(0.078mL，0.44mmol)及最后HATU(36.6mg，0.096mmol)处理中间产物。在室温搅拌反应混合物过夜，用MeOH稀释，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(35.3mg)。LC-MS保留时间2.726分钟；m/z 803.74(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604191
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604192
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δ.ppm 8.27(s,1H),8.18(s,1H),8.06(d,J＝8.8Hz,1H),7.98-8.02(m,2H),7.88(dd,J＝8.7,1.6Hz,1H),7.74(s,1H),7.67(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),5.15(dd,J＝9.3,7.0Hz,1H),5.09(dd,J＝9.0,6.3Hz,1H),4.59(d,J＝7.8Hz,1H),4.56(d,J＝6.5Hz,1H),3.91-4.00(m,2H),3.74-3.84(m,2H),3.67(s,6H),3.34-3.45(m,2H),2.70(dd,J＝13.6,9.5Hz,1H),2.61(dd,J＝13.8,8.8Hz,1H),2.40-2.54(m,2H),2.14-2.23(m,1H),2.01-2.13(m,3H),1.56-1.64(m,1H),1.38-1.55(m,3H),1.05-1.14(m,2H),1.01(d,J＝6.8Hz,3H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.82-0.92(m,2H)。
实施例97
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r，6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将4M HCl(0.34mL，1.3mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(5-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(中间体150)(62.7mg，0.067mmol)的二噁烷(2mL)溶液中，搅拌淤浆1.5小时。接着在氮气流下将反应混合物浓缩干燥，接着用2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(Cap-179立体异构体2)(21.45mg，0.087mmol)、DMF(1.5mL)、DIPEA(0.071mL，0.40mmol)及最后HATU(33.3mg，0.087mmol)处理。在室温搅拌反应混合物过夜，用MeOH稀释，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA  的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(28mg)。LC-MS保留时间2.898分钟；m/z 831.80(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604202
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.27(s,1H),8.17(s,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.98-8.02(m,2H),7.88(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),7.74(s,1H),7.66(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),5.15(dd,J＝9.2,6.9Hz,1H),5.10(dd,J＝9.0,6.3Hz,1H),4.56(t,J＝6.0Hz,2H),3.73-3.85(m,2H),3.67(s,6H),3.43-3.54(m,2H),2.70(dd,J＝13.7,9.4Hz,1H),2.61(dd,J＝13.6,9.0Hz,1H),2.40-2.54(m,2H),2.01-2.23(m,4H),1.55-1.64(m,1H),1.46(d,J＝12.0Hz,1H),1.17(dd,J＝6.0,4.3Hz,6H),1.04-1.13(m,3H),1.01(d,J＝6.8Hz,3H),0.96-1.03(m,1H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.88-0.93(m,1H),0.82-0.87(m,1H)。
Figure BDA00001874284604211
实施例98
((1S)-2-((2S,5S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(43.2mg，0.114mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体154)的盐酸盐(27mg，0.045mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(24.7mg，0.114mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.056mL，0.32mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。在氮气流下浓缩反应混合物，溶解于MeOH中，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((2S,5S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(31.4mg)。LC-MS保留时间2.658分钟；m/z847.80(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604221
Platform确定MS数据。1H NMR呈现为旋转异构体的约1:3.5混合物。主要旋转异构体的1H NMR为：1H NMR (400MHz,MeOD)δppm 8.29(s,1H),8.18(s,1H),8.06(d,J＝8.5Hz,1H),8.01(d,J＝8.8Hz,1H),7.99(s,1H),7.89(dd,J＝8.7,1.6Hz,1H),7.74(s,1H),7.67(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),5.19(dd,J＝10.5,7.0Hz,1H),5.09(dd,J＝8.9,6.4Hz,1H),4.59(d,J＝7.5Hz,1H),4.22(d,J＝9.3Hz,1H),3.86-4.00(m,4H),3.72-3.82(m,2H),3.67(s,6H),3.23-3.45(m,4H),2.50-2.70(m,2H),2.24-2.50(m,3H),1.90-2.13(m,4H),1.70-1.85(m,1H),1.57(d,J＝6.5Hz,3H),1.30-1.64(m,6H),1.23(d,J＝11.5Hz,1H),1.04-1.12(m,1H),0.85(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284604222
实施例99
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(43.2mg，0.114mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体154)的盐酸盐(10.1mg，0.017mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(7.44mg，0.042mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.021mL，0.119mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。浓缩反应混合物，溶解于MeOH中，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(9.3mg)。LC-MS保留时间2.930分钟；m/z 763.75(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604223
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604231
Platform确定MS数据。1H NMR呈现为旋转异构体的约1:3混合物，主要旋转异构体的数据为：1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.30(s,1H),8.19(s,1H),8.07(d,J＝8.8Hz,1H),7.99-8.03(m,2H),7.90(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.77(s,1H),7.65-7.71(m,1H),5.19(dd,J＝10.2,6.9Hz,1H),5.10(dd,J＝9.2,6.4Hz,1H),4.55(d,J＝6.5Hz,1H),4.13(d,J＝8.8Hz,1H),3.67(s,6H),3.65-3.79(m,2H),1.95-2.68(m,8H),1.57(d,J＝6.5Hz,3H),1.31(d,J＝6.3Hz,1H),1.01(d,J＝7.0Hz,3H),0.98(d,J＝7.0Hz,3H),0.93(d,J＝6.8Hz,3H),0.88(d,J＝6.8Hz,3H),0.84-1.14(m,2H)。
Figure BDA00001874284604232
实施例100
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将4M HCl(0.32mL，1.3mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(中间体158)的三氟乙酸盐(60mg，0.064mmol)于二噁烷(0.5mL)中的混合物中且剧烈搅拌反应混合物4小时。将反应混合物浓缩干燥。接着将(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(18.2mg，0.084mmol)、DMF(0.5mL)、DIPEA(0.067mL，0.39mmol)及最后HATU(31.8mg)加入至粗物质中且在室温搅拌反应混合物1小时。用氮气流部分浓缩反应混合物，用MeOH稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，接着通过制备性HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)再纯化。第三次通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化物质，得到呈白色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(27.7mg)。LC-MS保留时间3.291分钟；m/z 803.67(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604241
Luna 3u C182.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604242
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.27(s,1H),8.19(s,1H),8.06(d,J＝8.8Hz,1H),7.99-8.03(m,2H),7.88(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),7.78(s,1H),7.68(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),5.15(dd,J＝9.0,7.0Hz,1H),5.09(dd,J＝9.3,6.5Hz,1H),4.80(d,2H),4.54(d,J＝6.5Hz,1H),3.87-3.93(m,1H),3.70-3.79(m,3H),3.68(s,3H),3.67(s,3H),3.54-3.63(m,1H),3.34-3.40(m,1H),2.59-2.74(m,2H),2.40-2.55(m,2H),2.00-2.22(m,4H),1.71-1.81(m,2H),1.51-1.63(m,2H),1.05-1.14(m,2H),1.01(d,J＝6.8Hz,3H),0.93(d,J＝6.8Hz,3H),0.88(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284604243
实施例101
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-((3S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将4M HCl(0.3mL，1.3mmol)的二噁烷溶液加入至(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁酯(中间体158)的三氟乙酸盐(60mg，0.064mmol)于二噁烷(0.5mL)中的混合物中且剧烈搅拌反应混合物4小时。将反应混合物浓缩干燥。接着将(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸(Cap-177a)(18.2mg，0.084mmol)、DMF(0.5mL)、DIPEA(0.067mL，0.39mmol)及最后HATU(32mg，0.084mmol)加入至粗物质中且在室温搅拌反应混合物1小时。部分浓缩反应混合物，用MeOH稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化且以一次注射通过制备性HPLC(含乙酸铵缓冲液的MeOH/水)再纯化，得到呈白色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-((3S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙基)氨基甲酸甲酯(30.5mg)。LC-MS保留时间3.376分钟；m/z 803.66(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604252
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.14(s,1H),7.94(s,1H),7.78-7.86(m,3H),7.49(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.45(s,1H),7.26(s,1H),5.15(ddd,J＝12.9,8.7,4.5Hz,2H),4.57(d,J＝6.8Hz,1H),3.70-3.86(m,3H),3.67(宽单峰,3H),3.66(宽单峰,3H),3.58-3.64(m,1H),3.53(t,J＝8.3Hz,1H),3.45(dd,J＝11.4,8.2Hz,1H),2.31-2.57(m,4H),1.93-2.17(m,5H),1.67-1.84(m,2H),1.50-1.63(m,2H),1.08-1.17(m,2H),0.98(d,J＝6.8Hz,3H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.78(宽单峰,2H)。
Figure BDA00001874284604253
实施例102
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(20.99mg，0.055mmol)加入至2-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)-6-(4-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉(中间体164)的盐酸盐(16.5mg，0.024mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(9.7mg，0.055mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.038mL，0.22mmol)的溶液中且在室温搅拌反应混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(8.3mg，6.94μmol，28.9%收率)。LC-MS保留时间3.555分钟；m/z 818.78(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604261
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604262
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.60(d,J＝8.5Hz,1H),8.34(d,J＝1.8Hz,1H),8.32(s,1H),8.26-8.31(m,1H),8.21-8.26(m,1H),8.06(d,J＝8.5Hz,1H),7.97-8.03(m,1H),8.00(d,J＝8.5Hz,1H),7.93(s,1H),7.87-7.92(m,2H),5.19-5.36(m,2H),4.29-4.41(m,2H),4.24(t,J＝6.9Hz,2H),3.67(s,6H),3.44(q,J＝11.0Hz,2H),2.62-2.74(m,2H),2.46-2.61(m,2H),1.97-2.12(m,2H),1.82-1.97(m,2H),1.26(dd,J＝6.3,3.3Hz,6H),0.91-0.96(m,6H),0.89(dd,J＝6.7,5.1Hz,6H)。
Figure BDA00001874284604263
实施例103
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(15.74mg，0.041mmol)加入至粗2-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)-6-(4-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉(中间体167)的盐酸盐(12.35mg，0.018mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(7.25mg，0.041mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.028mL，0.16mmol)的溶液中且在室温搅拌反应混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(3.9mg)。LC-MS保留时间3.616分钟；m/z 818.73(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604271
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604272
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.68(d,J＝8.8Hz,1H),8.39(d,J＝1.3Hz,1H),8.30-8.35(m,2H),8.26-8.31(m,1H),8.16(d,J＝8.8Hz,1H),7.99-8.06(m,3H),7.89-7.94(m,2H),5.14-5.31(m,2H),4.14(dd,J＝8.8,5.0Hz,2H),3.68(s,6H),2.47-2.59(m,2H),2.23-2.43(m,4H),1.95-2.10(m,4H),1.56(dd,J＝6.7,3.6Hz,6H),1.01-1.07(m,2H),0.99(dd,J＝6.7,3.4Hz,6H),0.89(dd,J＝6.8,1.8Hz,6H)。
Figure BDA00001874284604273
实施例104
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(50.7mg，0.133mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体173)的盐酸盐(41.7mg，0.058mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(23.4mg，0.133mmol)于DMF(1mL)及DIPEA(0.09mL，0.5mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物16小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(22.3mg)。LC-MS保留时间3.451分钟；m/z 815.72(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604281
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604282
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm9.41(s,1H),8.43(d,J＝8.5Hz,1H),8.41-8.47(m,1H),8.28(d,J＝1.3Hz,2H),8.03(d,J＝8.5Hz,1H),8.00-8.07(m,1H),7.87-7.95(m,3H),5.10-5.26(m,2H),4.57(t,J＝6.7Hz,2H),3.76-3.89(m,2H),3.68(s,6H),2.70(dd,J＝13.7,9.2Hz,2H),2.44-2.56(m,2H),2.14-2.26(m,2H),2.04-2.14(m,2H),1.07-1.16(m,2H),1.02(dd,J＝6.8,2.0Hz,6H),0.93(dd,J＝6.8,2.0Hz,6H),0.83-0.99(m,2H)。
Figure BDA00001874284604283
实施例105
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(12.24mg，0.032mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体173)的盐酸盐(10.1mg，0.014mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(7.0mg，0.032mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.022mL，0.13mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(7.3mg)。LC-MS保留时间3.251分钟；m/z 899.79(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604291
Luna 3uC182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604292
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.41(s,1H),8.41-8.47(m,2H),8.27-8.31(m,2H),8.03(d,J＝8.5Hz,1H),8.01-8.06(m,1H),7.87-7.95(m,3H),5.09-5.26(m,2H),4.61(t,J＝7.2Hz,2H),3.90-4.01(m,4H),3.80-3.90(m,2H),3.68(s,6H),3.34-3.47(m,4H),2.70(dd,J＝13.6,9.3Hz,2H),2.45-2.57(m,2H),1.99-2.19(m,4H),1.36-1.68(m,8H),1.02-1.16(m,2H),0.79-0.96(m,2H)。
Figure BDA00001874284604301
实施例106
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-((4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将N-氯琥珀酰亚胺(6.97mg，0.052mmol)加入至经搅拌的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(实施例82)(21.0mg，0.025mmol)的DMF溶液中，接着用氮气流淋洗反应容器，密封且在50℃加热3小时。再加入N-氯琥珀酰亚胺(5.0mg)且用氮气冲洗反应容器，密封且在50℃加热3小时，接着冷却反应混合物并在氮气流下浓缩。将残余物溶解于MeOH中，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-((4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(8.1mg)。LC-MS保留时间4.276分钟；m/z 457.47(1/2MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604302
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.18(s,1H),8.07(s,1H),7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.93(d,J＝8.5Hz,1H),7.88(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),7.59(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),5.05(dd,J＝8.5,6.3Hz,1H),4.99(t,J＝6.9Hz,1H),4.62(d,J＝7.5Hz,2H),3.91-3.98(m,4H),3.74-3.81(m,1H),3.68-3.72(m,1H),3.67(s,6H),3.34-3.45(m,4H),2.45-2.56(m,2H),2.39-2.44(m,2H),1.96-2.11(m,4H),1.37-1.66(m,8H),1.05-1.14(m,2H),0.74-0.84(m,2H)。
实施例107
((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)-2-甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(77mg，0.20mmol)加入至经搅拌的(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-1-氨基-2-甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-胺(中间体178)的盐酸盐(57.4mg，0.092mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(35.4mg，0.202mmol)及DIPEA(0.096mL，0.55mmol)于DCM(1.5mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。将粗反应混合物浓缩干燥且通过制备性HPLC(TFA缓冲液)纯化，得到呈白色固体状的((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)-2-甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(60.4mg)。LC-MS保留时间2.253分钟；m/z 759.6(MH-)。在配备有Luna 3uC182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604313
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604314
实施例108
3-甲基-N-((1S)-2-甲基-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-2-甲基-1-((3-甲基丁酰基)氨基)丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)丙基)丁酰胺
将HATU(119mg，0.313mmol)加入至经搅拌的(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-1-氨基-2-甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-胺(中间体178)的盐酸盐(89mg，0.142mmol)、3-甲基丁酸(32mg，0.31mmol)及DIPEA(0.149mL，0.855mmol)于DCM(2mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。将粗反应混合物浓缩干燥且通过制备性HPLC(TFA缓冲液)纯化两次，得到呈米色固体状的3-甲基-N-((1S)-2-甲基-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-2-甲基-1-((3-甲基丁酰基)氨基)丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)丙基)丁酰胺的三氟乙酸盐(54.6mg)。LC-MS保留时间2.375分钟；m/z645.6(MH-)。在配备有
Figure BDA00001874284604321
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%乙腈/95%H2O/10mM乙酸铵且溶剂B为5%H2O/95%乙腈/10mM乙酸铵。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604322
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604323
实施例109
2-((2S,5S)-1-乙酰基-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-乙酰基-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑
将HATU(63.2mg，0.166mmol)加入至2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体117)(受乙酸铵污染)(38mg，0.076mmol)及(S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(40.8mg，0.166mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.053mL，0.30mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物过夜。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的2-((2S,5S)-1-乙酰基-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-乙酰基-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑的三氟乙酸盐(20mg)。LC-MS保留时间3.123分钟；m/z 587.62(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604331
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604332
Platform确定MS数据。1H NMR (400MHz,MeOD)
Figure BDA00001874284604333
ppm 8.30(s,1H),8.27(s,1H),8.13(d,J＝8.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.8Hz,1H),7.93-8.01(m,4H),7.84-7.91(m,4H),5.25(q,J＝8.4Hz,2H),4.31-4.40(m,2H),2.53-2.66(m,2H),2.28-2.40(m,4H),2.25(s,3H),2.25(s,3H),1.88-1.97(m,2H),1.47(dd,J＝6.5,3.5Hz,6H),1.14-1.19(m,1H)。
Figure BDA00001874284604334
实施例110
(1-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(((2R,4r，6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(61.9mg，0.163mmol)加入至2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体117)的盐酸盐(48mg，0.074mmol)及2-((2R,4r，6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(Cap-179立体异构体2)(39.9mg，0.163mmol)于DMF(0.8mL)及DIPEA(0.09mL，0.52mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且以以两次注射通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的(1-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(55.5mg)。LC-MS保留时间3.506分钟；m/z 479.54(1/2MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604341
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604342
Platform确定MS数据。1H NMR呈现为旋转异构体的复合物混合物。
Figure BDA00001874284604343
实施例111
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(23.99mg，0.063mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体175)的盐酸盐(15mg，0.025mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(13.70mg，0.063mmol)于DMF(0.4mL)及DIPEA(0.03mL，0.2mmol)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物1.5小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且以两次注射通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(12.0mg)。LC-MS保留时间3.040分钟；m/z847.76(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604344
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604351
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.28(s,1H),8.18(s,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.97-8.02(m,2H),7.88(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),7.76(s,1H),7.67(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),5.23(dd,J＝10.9,6.9Hz,1H),5.09(dd,J＝9.0,6.5Hz,1H),4.59(d,J＝7.8Hz,1H),4.34-4.41(m,1H),4.28(d,J＝8.0Hz,1H),3.86-4.00(m,4H),3.75-3.81(m,1H),3.67(s,3H),3.67(s,3H),3.32-3.50(m,5H),2.39-2.74(m,4H),1.87-2.13(m,4H),1.27-1.65(m,8H),1.25(d,J＝6.3Hz,3H),1.04-1.14(m,1H),0.86(宽单峰,1H)。
Figure BDA00001874284604352
实施例112
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(60.8mg，0.160mmol)加入至(1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体175)的盐酸盐(38mg，0.064mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(28.0mg，0.160mmol)于DMF(0.7mL)及DIPEA(0.08mL，0.4mmol)中的溶液中且在室温搅拌1.5小时。用MeOH稀释反应混合物，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化两次，得到呈灰白色固体状的((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(19.1mg)。LC-MS保留时间3.288分钟；m/z 763.74(MH+)。在配备有Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.28(s,1H),8.18(s,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.98-8.03(m,2H),7.88(dd,J＝8.7,1.6Hz,1H),7.76(s,1H),7.67(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),5.24(dd,J＝10.9,7.2Hz,1H),5.10(dd,J＝9.0,6.5Hz,1H),4.55(d,J＝6.5Hz,1H),4.30-4.37(m,1H),4.23(d,J＝7.3Hz,1H),3.72-3.79(m,1H),3.67(s,3H),3.66(s,3H),3.43(t,J＝10.4Hz,1H),2.49-2.74(m,3H),2.44(ddd,J＝13.6,6.7,6.4Hz,1H),2.11-2.22(m,1H),1.98-2.11(m,2H),1.89(q,J＝12.0Hz,1H),1.25(d,J＝6.3Hz,3H),1.06-1.15(m,1H),1.00(d,J＝6.8Hz,3H),0.95-0.98(m,1H),0.94(d,J＝4.0Hz,3H),0.92(d,J＝3.8Hz,3H),0.88(d,J＝6.8Hz,3H)。
Figure BDA00001874284604362
实施例113
2-((2S,4S)-4-甲基-1-(3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-1-(3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑
将HATU(76mg，0.200mmol)加入至2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑(中间体196)的盐酸盐(64.8mg，0.1mmol)、3-甲基丁酸(22.5mg，0.220mmol)及DIPEA(0.122mL，0.700mmol)于DCM(2mL)中的溶液中且在室温搅拌混合物过夜。将反应混合物蒸发干燥，接着通过制备性HPLC纯化，得到呈灰白色固体状的2-((2S,4S)-4-甲基-1-(3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-1-(3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑的三氟乙酸盐(61.7mg)。LC-MS保留时间1.853分钟；m/z 671.64(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604363
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604372
实施例114
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(12.75mg，0.034mmol)加入至2-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)-6-(4-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹啉(中间体164)(10mg，0.015mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(7.28mg，0.034mmol)于DMF(0.5mL)及DIPEA(0.023mL，0.13mmol)中的溶液中且在室温搅拌混合物16小时。浓缩反应混合物且通过制备性HPLC(含0.1%TFA缓冲液的H2O-MeOH)纯化残余物，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(8.6mg)。LC-MS保留时间3.243分钟；m/z 902.90(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604373
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604374
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.61(d,J＝8.8Hz,1H),8.35(d,J＝1.8Hz,1H),8.22-8.33(m,3H),8.07(d,J＝8.8Hz,1H),8.00(d,J＝8.5Hz,1H),7.97-8.04(m,1H),7.89(d,J＝8.5Hz,1H),7.85-7.95(m,2H),5.17-5.33(m,2H),4.32-4.45(m,2H),4.28(dd,J＝8.2,5.4Hz,2H),3.83-3.98(m,4H),3.67(s,6H),3.22-3.54(m,6H),2.63-2.75(m,2H),2.46-2.61(m,2H),1.83-2.04(m,4H),1.52-1.64(m,2H),1.30-1.53(m,6H),1.26(dd,J＝6.3,4.0Hz,6H)。
Figure BDA00001874284604381
实施例115
((1S)-1-(((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-3-吗啉基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-吗啉基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(96mg，0.252mmol)加入至(R)-3-(5-(4-(6-(2-((R)-吗啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吗啉(中间体181)的盐酸盐(71.6mg，0.110mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(44.2mg，0.252mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.13mL，0.77mmol)中的溶液中且用氮气冲洗反应混合物，密封并在室温搅拌3小时。在氮气流下浓缩反应混合物过夜，用MeOH(约5mL)稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈灰白色固体状的((1S)-1-(((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-3-吗啉基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-吗啉基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(75.5mg)。LC-MS保留时间3.351分钟；m/z 822.07(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604382
Luna 3u C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604383
Platform确定MS数据。1H NMR呈现为旋转异构体混合物。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.47(s,0.5H),8.33(s,0.5H),8.27(s,1H),7.85-8.17(m,10H),5.95(d,J＝4.5Hz,2H),4.71(dd,J＝12.5,7.8Hz,1H),4.35-4.58(m,4H),3.94-4.20(m,5H),3.79(s,3H),3.68(s,3H),3.53-3.78(m,3H),2.76-2.91(m,1H),2.12(宽单峰,2H),1.05-1.19(m,6H),0.81-1.00(m,6H)。
实施例116
((1S)-2-((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-3-吗啉基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-吗啉基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(88mg，0.231mmol)加入至(R)-3-(5-(4-(6-(2-((R)-吗啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吗啉(中间体181)的盐酸盐(65.5mg，0.100mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(50.2mg，0.231mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.12mL，0.70mmol)中的溶液中且用氮气冲洗反应混合物，密封并在室温搅拌3小时。在氮气流下浓缩反应混合物过夜，用MeOH(约5mL)稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈灰白色固体状的((1S)-2-((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-3-吗啉基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-吗啉基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(75mg)。LC-MS保留时间3.120分钟；m/z 906.15(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604392
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604393
Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604401
实施例117
(1R,3S,5R)-2-(3-甲基丁酰基)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷
将HATU(74.8mg，0.197mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)萘-2-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体124)的盐酸盐(64.7mg，0.098mmol)、3-甲基丁酸(22.09mg，0.216mmol)及DIPEA(0.103mL，0.590mmol)于DCM(1.5mL)中的溶液中且在室温搅拌反应混合物2-3小时。将反应混合物浓缩干燥且通过制备性HPLC(TFA缓冲液)纯化，得到呈米色固化泡沫状的(1R,3S,5R)-2-(3-甲基丁酰基)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷的三氟乙酸盐(51.5mg)。LC-MS保留时间1.775分钟；m/z 615.41(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604402
Luna 3u C182.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。
Figure BDA00001874284604404
实施例118
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-哌啶基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-哌啶基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(93mg，0.245mmol)加入至(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-哌啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(中间体184)的盐酸盐(69.0mg，0.106mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(42.9mg，0.245mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.13mL，0.75mmol)中的溶液中且用氮气冲洗反应混合物，密封并在室温搅拌1小时。在氮气流下浓缩反应混合物过夜，用MeOH(约5mL)稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-哌啶基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-哌啶基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(88.9mg)。LC-MS保留时间3.530分钟；m/z 818.08(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604411
Luna 3u C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604412
Platform确定MS数据。1H NMR呈现为旋转异构体混合物。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.46(s,0.65H),8.33(宽单峰,0.35H),8.27(s,1H),7.84-8.15(m,10H),6.05(宽单峰,1.3H),5.80-5.90(m,0.7H),4.67-4.78(m,1.3H),4.42-4.50(m,2H),3.99-4.10(m,0.7H),3.78(宽单峰,3.5H),3.69(宽单峰,2.5H),3.40-3.52(m,0.7H),2.61-2.73(m,1.3H),2.46-2.59(m,1.3H),2.37(宽单峰,0.7H),2.03-2.24(m,4H),1.91-2.02(m,1.3H),1.63-1.88(m,5.4H),1.45-1.62(m,1.4.H),1.11(t,J＝6.8Hz,7.3H),0.93-1.03(m,4.7H)。
Figure BDA00001874284604413
实施例119
((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-哌啶基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-哌啶基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(84mg，0.222mmol)加入至(S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-哌啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(中间体184)的盐酸盐(62.5mg，0.096mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(48.2mg，0.222mmol)于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.12mL，0.68mmol)中的溶液中且用氮气冲洗反应混合物，密封并在室温搅拌1小时。在氮气流下浓缩反应混合物过夜，用MeOH(约5mL)稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-哌啶基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-哌啶基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(71.2mg)。LC-MS保留时间3.348分钟；m/z 902.10(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604421
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604422
Platform确定MS数据。1H NMR呈现为旋转异构体混合物。1H NMR (400MHz,MeOD)δppm 8.45(s,0.6H),8.32(宽单峰,0.4H),8.27(s,1H),8.02-8.15(m,4.4H),7.85-8.02(m,5.6H),6.08(宽单峰,1.2H),5.90(宽单峰,0.8H),4.70(宽单峰,1.2H),4.45-4.59(m,2H),3.90-4.10(m,4.8H),3.77(s,3.6H),3.69(宽单峰,2.4H),3.36-3.50(m,5H),2.35-2.73(m,3H),1.36-2.22(m,20H)。
Figure BDA00001874284604423
实施例120
((1S)-1-(((2S,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(62.0mg，0.163mmol)加入至2-((2S,5R)-5-甲基吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((2S,5R)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑(中间体187)的盐酸盐(46mg，0.071mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(28.6mg，0.163mmol)于DMF(0.7mL)及DIPEA(0.09mL，0.5mmol)中的溶液中且用氮气冲洗反应容器，密封并在室温搅拌1小时。在氮气流下浓缩反应混合物过夜，用MeOH(约3mL)稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-1-(((2S,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(53.3mg)。LC-MS保留时间3.255分钟；m/z 818.08(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604431
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1％三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604432
Platform确定MS数据。1H NMR呈现为旋转异构体的复合物混合物。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.31(s,0.5H),8.26-8.30(m,1.5H),8.13(d,J＝8.8Hz,1H),8.08(d,J＝8.5Hz,1H),7.93-8.00(m,4H),7.83-7.93(m,4H),5.67(t,J＝7.8Hz,0.7H),5.38-5.45(m,1.3H),4.44-4.68(m,3.3H),3.92(dd,J＝8.2,4.4Hz,0.7H),3.66(s,3.5H),3.41(s,1H),3.35(s,1.5H),2.53-2.92(m,3.3H),1.96-2.30(m,6H),1.78-1.87(m,0.7H),1.43-1.53(m,3.5H),1.33(dd,J＝6.3,2.5Hz,2.5H),0.98-1.06(m,6H),0.96(d,J＝6.8Hz,2.4H),0.84(d,J＝6.8Hz,3.6H)。
Figure BDA00001874284604433
实施例121
((1S)-2-((2S,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(55.8mg，0.147mmol)加入至2-((2S,5R)-5-甲基吡咯烷-2-基)-5-(4-(6-(2-((2S,5R)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑(中间体187)的盐酸盐(41.4mg，0.064mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(31.9mg，0.147mmol)于DMF(0.7mL)及DIPEA(0.08mL，0.4mmol)中的溶液中且用氮气冲洗反应容器，密封并在室温搅拌1小时。在氮气流下浓缩反应混合物过夜，用MeOH(约3mL)稀释，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-2-((2S,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(27.6mg)。LC-MS保留时间3.135分钟；m/z 902.15(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604441
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604442
Platform确定MS数据。根据1H NMR为旋转异构体混合物。1H NMR(400MHz,MeOD)δ.ppm 8.31(s,0.5H),8.25-8.29(m,1.5H),8.13(d,J＝8.8Hz,1H),8.08(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.93-8.00(m,4H),7.82-7.92(m,4H),5.71(t,J＝7.9Hz,0.8H),5.37-5.45(m,1.2H),4.47-4.69(m,3H),3.89-4.07(m,5H),3.67(s,3H),3.24-3.43(m,7H),2.57-2.92(m,3H),1.96-2.29(m,6H),1.79-1.87(m,1H),1.35-1.67(m,11H),1.33(dd,J＝6.5,2.5Hz,3H)。
Figure BDA00001874284604451
实施例122
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(102mg，0.269mmol)加入至经搅拌的2-((S)-4-亚甲基吡咯烷-2-基)-4-(4-(6-(2-((S)-4-亚甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑(中间体189)的四盐酸盐(86mg，0.148mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(47.1mg，0.269mmol)及许尼希碱(0.234mL，1.34mmol)于DMF(6mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物4小时且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeOH/水)纯化，得到((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(65mg，46%)。LC-MS保留时间3.22分钟；C46H53N8O6的计算值：813.40，m/z实测值：813.7[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604452
Luna C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeCN/95%水/10mM NH4OAc且溶剂B为95%MeCN/5%水/10mMNH4OAc。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604453
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(s,1H),8.28(s,1H),8.15(d,J＝8.9Hz,1H),8.09(d,J＝8.9Hz,1H),8.0-7.85(m,8H),5.50-5.45(m,2H),5.32(s,2H),5.28(s,2H),4.72(d,J＝11.6Hz,2H),4.60(dd,J＝11.3,3.4Hz,2H),4.21(dd,J＝7.6,2.8Hz,2H),3.68(s,6H),2.98-2.92(m,2H),2.10-2.06(m,2H),1.06-1.02(m,2H),0.97-0.94(m,12H)。
Figure BDA00001874284604461
实施例123
((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(102mg，0.269mmol)加入至经搅拌的2-((S)-4-亚甲基吡咯烷-2-基)-4-(4-(6-(2-((S)-4-亚甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑(中间体189)的四盐酸盐(86mg，0.148mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(58.4mg，0.269mmol)及许尼希碱(0.234mL，1.34mmol)于DMF(6mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物5小时且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐。LC-MS保留时间2.81分钟；C50H57N8O8的计算值：897.43，m/z实测值：897.41[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604462
Luna C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(s,2H),8.4(d,J＝8.8Hz,1H),8.09(d,J＝9.0Hz,1H),8.01-7.85(m,8H),5.50-5.44(m,2H),5.32(s,2H),5.28(s,2H),4.75(d,J＝14.6Hz,2H),4.63(dd,J＝13.3,4.5Hz,2H),4.27(dd,J＝8.3,3.5Hz,2H),3.99-3.91(m,4H)3.69(s,6H),3.41-3.37(m 4H),3.0-2.94(m,2H),2.02-1.98(m,2H),1.68-1.65(m,2H),1.59-1.32(m,8H)。
Figure BDA00001874284604471
实施例124
((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(149mg，0.393mmol)加入至经搅拌的(S)-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-氨基乙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙胺(中间体191)的四盐酸盐(111mg，0.148mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(47.1mg，0.196mmol)及许尼希碱(0.343mL，1.96mmol)于DMF(8mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物4小时且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(91mg，47%)。LC-MS保留时间2.96分钟；C40H49N8O6的计算值：737.38，m/z实测值：737.45[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604472
Luna C18 2.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604473
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.35(s,1H),8.27(s,1H),8.13(d,J＝8.9Hz,1H),8.09(d,J＝8.9Hz,1H),7.99-7.88(m,8H),5.30-5.27(m,2H),3.99-3.97(m,2H),3.70(s,6H),2.14(宽单峰,2H),1.78-1.75(m,6H),0.99-0.95(m,12H)。
Figure BDA00001874284604474
实施例125
((1S)-2-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(149mg，0.393mmol)加入至经搅拌的(S)-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-氨基乙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙胺(中间体191)的四盐酸盐(83mg，0.196mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(85mg，0.393mmol)及许尼希碱(0.343mL，1.96mmol)于DMF(8mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物5小时且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-2-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(89mg，42%)。LC-MS保留时间2.64分钟；C44H53N8O8的计算值：821.40，m/z实测值：821.80[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604481
Luna C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%AcCN/95%水/10mM NH4OAc且溶剂B为95%AcCN/5%水/10mMNH4OAc。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.34(s,1H),8.2(s,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(d,J＝8.6Hz,1H),7.99-7.87(m,8H),5.29-5.26(m,2H),4.02-4.00(m,2H),3.98-3.93(m,4H)3.71(s,6H),3.41-3.37(m 4H),2.02(宽单峰,2H),1.79-1.76(m,6H),1.62(d,J＝13.0Hz,2H),1.49-1.39(m,6H)。
Figure BDA00001874284604483
实施例126
((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(84mg，0.222mmol)加入至经搅拌的(S)-N-甲基-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-(甲基氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙胺(中间体193)的四盐酸盐(66mg，0.111mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(38.9mg，0.222mmol)及许尼希碱(0.194mL，1.11mmol)于DMF(5mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物5小时且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐。LC-MS保留时间1.78分钟；C42H53N8O6的计算值：765.41，m/z实测值：765.41[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604491
Luna C18 2.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604492
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐；旋转异构体,500MHz,MeOD)δppm8.44/8.34(s,1H),8.27(s,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,1H),8.10-7.88(m,9H),6.17-6.14/5.33-5.30(m,2H),4.64-4.6/4.41-4.39(m,2H),3.84/3.66(s,3H),3.83/3.59(s,3H),3.37(s,6H),2.10-2.05(m,2H),1.90-1.87/1.85-1.82(m,6H),1.15-0.90(m,12H)。
Figure BDA00001874284604493
实施例127
((1S)-2-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(84mg，0.222mmol)加入至经搅拌的(S)-N-甲基-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-(甲基氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙胺(中间体193)的四盐酸盐(66mg，0.111mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(48mg，0.222mmol)及许尼希碱(0.194mL，1.11mmol)于DMF(5mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物5小时且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-2-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐。LC-MS保留时间1.58分钟；C46H57N8O8的计算值：849.43，m/z实测值：849.46[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604501
Luna C18 2.0×30mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用1mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、2分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及3分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604502
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐；旋转异构体500MHz,MeOD)δppm 8.45/8.34(s,1H),8.28(s,1H),8.14(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(d,J＝8.3Hz,1H),8.06-7.88(m,8H),6.21-6.18/5.38-5.34(m,2H),4.73-4.70/4.47-4.45(m,2H),4.02-3.94(m,4H)3.84/3.63(s,3H),3.83/3.60(s,3H),3.46-3.38(m 4H),3.37/3.35(s,6H),2.02(宽单峰,2H),1.91-1.88/1.84-1.81(m,6H),1.68(d,J＝13.0Hz,2H),1.53-1.42(m,6H)。
实施例128
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(32mg，0.085mmol)加入至经搅拌的2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体196)的四盐酸盐(25mg，0.039mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(14.9mg，0.085mmol)及许尼希碱(0.054mL，0.308mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(24.5mg，57.8%)。LC-MS保留时间3.05分钟；C46H57N8O6的计算值：817.44，m/z实测值：817.36[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604511
LunaC18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604512
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(s,1H),8.27(s,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,1H),8.08(d,J＝8.6Hz,1H),7.99-7.85(m,8H),5.27-5.22(m,2H),4.37-4.33(m,2H),4.25-4.23(m,2H),3.68(s,6H),3.47-3.41(m,2H),2.72-2.68(m 2H),2.55(宽单峰,2H),2.07-2.03(m,2H),1.92-1.87(m,2H),1.27-1.26(m,6H),0.95-0.9(m,12H)。
Figure BDA00001874284604513
实施例129
(2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(((甲氧基羰基)氨基)(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(64.5mg，0.170mmol)加入至经搅拌的2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体196)的四盐酸盐(50mg，0.077mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(36.8mg，0.170mmol)及许尼希碱(0.11mL，0.617mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到(2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(((甲氧基羰基)氨基)(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐。LC-MS保留时间2.84分钟；C50H61N8O8的计算值：901.46，m/z实测值：901.42[M+H]+。在配备有Luna C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604522
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(s,1H),8.28(s,1H),8.14(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(d,J＝8.6Hz,1H),8.00-7.85(m,8H),5.25-5.21(m,2H),4.42-4.39(m,2H),4.30-4.27(m,2H),3.96-3.92(m,4H),3.68(s,6H),3.49-3.35(m 6H),2.71-2.38(m,2H),2.58-2.54(m,2H),1.97-1.89(m,4H),1.60(d,J=13.0Hz,2H),1.48-1.26(m,12H)。
Figure BDA00001874284604523
实施例130
(1-环丙基-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(环丙基((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(39mg，0.102mmol)加入至经搅拌的2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体196)的四盐酸盐(30mg，0.085mmol)、(S)-2-环丙基-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(17.62mg，0.102mmol)及许尼希碱(0.065mL，0.37mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到(1-环丙基-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(环丙基((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(24.5mg，57.8%)。LC-MS保留时间3.08分钟；C46H53N8O6的计算值：813.41，m/z实测值：813.45[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604531
Luna C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604532
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.32(s,1H),8.27(s,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,1H),8.08(d,J＝8.6Hz,1H),7.99-7.87(m,8H),5.29-5.24(m,2H),4.30(宽单峰,2H),3.82-3.80(m,2H),3.68(s,6H),3.43-3.37(m,2H),2.72-2.68(m 2H),2.55(宽单峰,2H),1.91-1.86(m,2H),1.25-1.24(m,6H),1.11(宽单峰,2H),0.60-0.58(m,4H),0.53-0.51(m,2H),0.04-0.38(m,2H)。
实施例131
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(45mg，0.119mmol)加入至经搅拌的2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体196)的四盐酸盐(35mg，0.054mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)丁酸(19.14mg，0.119mmol)及许尼希碱(0.075mL，0.432mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(36.4mg，61.7%)。LC-MS保留时间2.91分钟；C44H53N8O6的计算值：789.41，m/z实测值：789.41[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604541
Luna C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604542
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.30(s,1H),8.28(s,1H),8.14(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(d,J＝8.6Hz,1H),8.00-7.86(m,8H),5.27-5.22(m,2H),4.37(宽单峰,2H),4.24-4.23(m,2H),3.67(s,6H),3.44-3.39(m,2H),2.72-2.68(m 2H),2.58(宽单峰,2H),1.88-1.84(m,2H),1.47-1.25(m,6H),0.98-0.92(m,10H)。
Figure BDA00001874284604543
实施例132
((1S)-1-环丁基-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-环丁基-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(45mg，0.119mmol)加入至经搅拌的2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体196)的四盐酸盐(35mg，0.054mmol)、(S)-2-环丁基-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(22.23mg，0.119mmol)(以类似于Cap-51方式，使用可商购得到的(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-2-环丁基乙酸作为起始物质来制备)及许尼希碱(0.075mL，0.432mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-环丁基-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-环丁基-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(25.6mg，43.6%)。LC-MS保留时间3.13分钟；C48H57N8O6的计算值：841.44，m/z实测值：841.48[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604551
Luna C18 2.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.30(s,1H),8.28(s,1H),8.14(d,J＝8.9Hz,1H),8.09(d,J＝8.6Hz,1H),8.00-7.86(m,8H),5.26-5.21(m,2H),4.41-4.37(m,4H),3.68(s,6H),3.48-3.43(m,2H),2.71-2.66(m 4H),2.56(宽单峰,2H),1.96-1.87(m,14H),1.27-1.26(m,6H)。
Figure BDA00001874284604553
实施例133
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-((2R,4S)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-1-((2S,4R)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(32mg，0.085mmol)加入至经搅拌的2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体196)的四盐酸盐(25mg，0.039mmol)、2-(甲氧基羰基氨基)-2-((2R,4S)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(Cap-178立体异构体1)(19.61mg，0.085mmol)及许尼希碱(0.054mL，0.308mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-((2R,4S)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-1-((2S,4R)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(21.3mg，45.2%)。LC-MS保留时间2.94分钟；C52H64N8O8的计算值：929.49，m/z实测值：929.64[M+H]+。在配备有Luna C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.32(s,1H),8.28(s,1H),8.15-8.12(m,1H),8.09-8.06(m,1H),8.02-7.94(m,5H),7.90-7.86(m,3H),5.28-5.23(m,2H),4.50-4.48(m,2H),4.44(宽单峰,2H),3.95-3.91(m,2H),3.71-3.68(s,10H),3.46-3.41(m,2H),2.72-2.67(m,2H),2.55-2.52(m,2H),2.19(宽单峰,2H),1.97-1.92(m,2H),1.60(宽单峰,2H),1.48-1.46(m,2H),1.39(宽单峰,2H),1.30-1.26(m,8H),1.14-1.10(m,6H)。
Figure BDA00001874284604563
实施例134
((1S)-1-(((2S,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(65mg，0.171mmol)加入至经搅拌的2-((2S,4R)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4R)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体201)的四盐酸盐(50mg，0.077mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(30mg，0.170mmol)及许尼希碱(0.108mL，0.308mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((2S,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(60.7mg，71%)。LC-MS保留时间3.12分钟；C46H57N8O6的计算值：817.44，m/z实测值：817.46[M+H]+。在配备有LunaC182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604571
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.30(s,1H),8.28(s,1H),8.14(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(d,J＝8.6Hz,1H),8.00-7.86(m,8H),5.43-5.38(m,2H),4.26-4.24(m,2H),4.09-4.05(m,2H),3.69(s,6H),3.64(宽单峰,2H),2.76-2.73(m 2H),235-2.32(m,2H),2.25-2.22(m,2H),2.11-2.09(m,2H),1.22-1.20(m,6H),0.98-0.93(m,12H)。
Figure BDA00001874284604572
实施例135
((1S)-1-(((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(65mg，0.171mmol)加入至经搅拌的(1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体203)的四盐酸盐(50mg，0.078mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(30mg，0.111mmol)及许尼希碱(0.108mL，0.621mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(54mg，63%)。LC-MS保留时间3.15分钟；C46H53N8O6的计算值：813.41，m/z实测值：813.45[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604581
Luna C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604582
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.33(s,1H),8.26(s,1H),8.12(d,J＝8.6Hz,1H),8.07(d,J＝8.6Hz,1H),7.98-7.86(m,8H),5.80-5.74(m,2H),4.36-4.34(m,2H),4.02-3.99(m,2H),3.73(s,6H),2.99-2.95(m,2H),2.28-2.25(m 2H),2.16(宽单峰,2H),2.04(宽单峰,2H),1.24-1.20(m,2H),1.08(宽单峰,2H),1.02-1.00(m,12H)。
Figure BDA00001874284604583
实施例136
((1S)-1-(((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(62mg，0.164mmol)加入至经搅拌的(1S,3S,5S)-5-甲基-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体209)的四盐酸盐(50mg，0.074mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(28.7mg，0.164mmol)及许尼希碱(0.104mL，0.595mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(45mg，54%)。LC-MS保留时间3.15分钟；C48H57N8O6的计算值：841.44，m/z实测值：841.50[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604591
C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.33(s,1H),8.25(s,1H),8.11(d,J＝8.5Hz,1H),8.06(d,J＝8.7Hz,1H),7.97-7.85(m,8H),5.82-5.75(m,2H),4.31-4.28(m,2H),3.73-3.71(m,8H),2.75-2.69(m,2H),2.44-2.37(m 2H),2.17-2.12(m,2H),1.40(s,6H),1.1-1.11(m,4H),1.01-0.99(m,12H)。
Figure BDA00001874284604593
实施例137
((1S)-2-((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(62mg，0.164mmol)加入至经搅拌的(1S,3S,5S)-5-甲基-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷(中间体209)的四盐酸盐(50mg，0.074mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(35.5mg，0.164mmol)及许尼希碱(0.104mL，0.595mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-2-((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(46.3mg，51%)。LC-MS保留时间3.15分钟；C52H61N8O86的计算值：925.46，m/z实测值：463.36[M/2+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604601
C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604602
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.31(s,1H),8.25(s,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,1H),8.06(d,J＝8.8Hz,1H),7.97-7.85(m,8H),5.80-5.74(m,2H),4.36-4.35(m,2H),3.99-3.95(m,4H),3.76-3.74(m,8H),3.43-3.35(m,4H),2.75-2.68(m,2H),2.44-2.37(m 2H),2.06-2.04(m,2H),1.74(app.d,J＝13Hz,2H),1.52-1.35(m,12H),1.22-1.19(m,2H),1.14-1.12(m,2H)。
Figure BDA00001874284604603
实施例138
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(31mg，0.082mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸酯(中间体211)的四盐酸盐(25mg，0.037mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(14mg，0.082mmol)及许尼希碱(0.052mL，0.297mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(17mg，41%)。LC-MS保留时间3.10分钟；C48H57N8O6的计算值：841.44，m/z实测值：841.542[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604611
C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604612
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.27(s,1H),8.26(s,1H),8.12(d,J＝8.5Hz,1H),8.07(d,J＝8.7Hz,1H),7.98-7.93(m,4H),7.88-7.85(m,4H),5.09-5.04(m,2H),4.55-4.53(m,2H),3.38(s,6H),3.57(宽单峰,2H),2.81-2.75(m,2H),2.33-2.27(m 2H),2.22-2.16(m,2H),1.44(s,3H),1.43(s,3H),1.05-0.93(m,16H)。
实施例139
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基氨基甲酸甲酯
将HATU(34.8mg，0.092mmol)加入至经搅拌的(1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-2-羧酸酯(中间体211)的四盐酸盐(28mg，0.042mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(20mg，0.092mmol)及许尼希碱(0.085mL，0.333mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA  的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(13mg，25%)。LC-MS保留时间2.92分钟；C52H61N8O86的计算值：925.46，m/z实测值：92.53[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604621
C18 2.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604622
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.28(s,2H),8.14(d,J＝8.8Hz,1H),8.07(d,J＝8.6Hz,1H),8.00-7.96(m,4H),7.91-7.84(m,4H),5.08-5.02(m,2H),4.59-4.56(m,2H),4.00-3.94(m,4H),3.69(s,6H),3.62(宽单峰,2H),3.44-3.38(m,4H),2.81-2.78(m,2H),2.31-2.29(m,2H),2.09(宽单峰,2H),1.60-1.47(m,8H),1.43(s,3H),1.44(s,3H),1.04(宽单峰,2H),0.98-0.97(m,2H)。
Figure BDA00001874284604623
实施例140
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(97mg，0.254mmol)加入至经搅拌的2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑(中间体196)的四盐酸盐(150mg，0.231mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(50mg，0.231mmol)及许尼希碱(0.162mL，0.925mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时，随后加入(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(40.5mg，0.231mmol)并加入许尼希碱(0.162mL，0.925mmol)及HATU(97mg，0.254mmol)。进一步在室温搅拌混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化。应用第二种色谱方法以分离异构体：SFC Diol-HL柱，含0.1%DEA的20%甲醇；4.6×250mm，5μm，流动相：含0.1%DEA的80%CO2-20%甲醇；温度：35℃；压力：150巴；流速：2ml/min；在328nm监测UV。将分离的样品吸收于甲醇(3mL)中且在室温加入纯TFA(50mL)。将混合物浓缩干燥且置于高真空，得到((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐(78.2mg，29.5%收率)。LC-MS保留时间2.95分钟；C48H59N8O7的计算值：859.45，m/z实测值：859.50[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604631
LunaC18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AVUV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604632
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.30(s,1H),8.28(s,1H),8.15(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(d,J＝8.6Hz,1H),8.01-7.85(m,8H),5.26-5.22(m,2H),4.42-4.36(m,2H),4.30-4.27(m,1H),4.24-4.23(m,1H),3.95-3.91(m,2H),3.68(s,6H),3.47-3.36(m 2H),3.08-3.04(m,1H),2.70(宽单峰,2H),2.55(宽单峰,2H),2.08-2.03(m,1H),1.97-1.87(m,3H),1.59(d,J＝13.0Hz,1H),1.48-1.26(m,10H)0.95-0.90(m,6H)。
Figure BDA00001874284604633
实施例141
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
如实施例140中所报导的另一异构体。LC-MS保留时间2.98分钟；C48H59N8O7的计算值：859.45，m/z实测值：859.58[M+H]+。在配备有Luna C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604642
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.29(s,1H),8.28(s,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(d,J＝8.6Hz,1H),7.99-7.86(m,4H),7.91-7.85(m,4H),5.26-5.21(m,2H),4.41-4.36(m,4H),4.28(d,J＝8.24Hz,1H),4.24(d,J＝7.32Hz,1H),3.95-3.91(m,2H),3.68(s,6H),3.47-3.36(m 2H),2.73-2.66(m,2H),2.59-2.53(m,2H),2.07-2.03(m,1H),1.97-1.87(m,3H),1.59(d,J＝13.0Hz,1H),1.51-1.25(m,11H)0.95-0.90(m,6H)。
Figure BDA00001874284604643
实施例142
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将NCS(18.0mg，0.135mmol)加入至经氮气净化的实施例128(55mg，0.067mmol)的DMF(1mL)溶液中且在50℃搅拌反应混合物18小时。通过浓缩除去溶剂，将粗产物吸收于CH2Cl2中且装入4gThompson硅胶柱中。由5-100%B进行梯度洗脱，1L。A/B(A=CH2Cl2；B=10%MeOH/EtOAc)。将纯化产物的样品吸收于MeOH中且进行制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的二三氟乙酸盐。LC-MS保留时间4.48分钟；C46H55Cl2N8O6的计算值：885.36，m/z实测值：885.34[M+H]+。在配备有
Figure BDA00001874284604651
Luna C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604652
Platform确定MS数据。1H NMR (三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.20(s,1H),8.18(s,1H),8.03(d,J＝8.6Hz,1H),8.00(d,J＝8.6Hz,1H),7.90-7.83(m,6H),5.09-5.04(m,2H),4.30-4.7(m,2H),4.24-4.23(m,2H),3.68(s,6H),3.43-3.99(m,2H),2.58-2.56(m 2H),2.43(宽单峰,2H),2.05-2.04(m,2H),1.93-1.87(m,2H),1.24-1.22(m,6H),0.97-0.91(m,12H)。
Figure BDA00001874284604653
实施例143
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(34mg，0.090mmol)加入至经搅拌的4-氯-2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-5-(6-(4-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑的盐酸盐(30.0mg，0.041mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(15.7mg，0.090mmol)及许尼希碱(0.057mL，0.33mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到呈灰白色固体状的((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(24.5mg)。LC-MS保留时间3.77分钟；C46H56ClN8O6的计算值：851.40，m/z实测值：851.42[M+H]。在配备有C18 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604662
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.23(s,1H),8.22(s,1H),8.06(d,J＝8.9Hz,1H),8.02(d,J＝8.9Hz,1H),7.98(d,J＝8.2Hz,2H),7.93-7.89(m,3H),7.85(d,J＝8.9Hz,2H),5.26-5.22(m,1H),5.07-5.04(m,1H),4.36(t,J＝9.1Hz 1H),4.29-4.23(m,3H),3.68(s,3H),3.67(s,3H),3.41(dt,J＝10.7,4.3Hz,2H),2.72-2.67(m,1H),2.58-2.53(m 2H),2.45-2.40(m,1H),2.06-2.02(m,2H),1.91-1.83(m,2H),1.26(d,J＝6.1Hz,3H),1.22(d,J＝8.9Hz,3H),0.97-0.91(m,12H)。
Figure BDA00001874284604663
实施例144
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将HATU(51mg，0.134mmol)加入至经搅拌的4-氯-2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-5-(6-(4-(2-((2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)萘-2-基)-1H-咪唑的盐酸盐(32.7mg，0.061mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(29.2mg，0.134mmol)及许尼希碱(0.085mL，0.49mmol)于DMF(1mL)中的溶液中。在室温搅拌反应混合物1小时且通过氮气净化而部分浓缩。将残余物吸收于MeOH中且通过制备性HPLC(含0.1%TFA的MeCN/水)纯化，得到呈浅黄色固体状的((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(22mg)。LC-MS保留时间3.55分钟；C50H60ClN8O8的计算值：935.42，m/z实测值：935.52[M+H]。在配备有C182.0×50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.21(s,2H),8.05(d,J＝8.9Hz,1H),8.02(d,J＝8.9Hz,1H),7.92(d,J＝8.6Hz,2H),7.93-7.89(m,3H),7.85(d,J＝8.2Hz,2H),5.25-5.22(m,1H),5.06-5.02(m,1H),4.40(t,J＝8.9Hz 1H),4.31-4.27(m,3H),3.95-3.92(m,4H),3.68(s,3H),3.67(s,3H),3.46-3.36(m,6H),2.72-2.67(m,1H),2.57-2.52(m 2H),2.45-2.40(m,1H),1.98-1.86(m,4H),1.61-1.59(m,2H),1.56-131.(m,6H),1.27(d,J＝6.4Hz,3H),1.22(d,J＝6.4Hz,3H)。
Figure BDA00001874284604673
实施例145
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(6-(4-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
将NCS(108mg，0.808mmol)加入至((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(550mg，1.385mmol)于无水DMF(10mL)中的溶液中且在50℃加热混合物18小时。通过在高真空旋转蒸发来除去溶剂且使用Thompson25g硅胶柱(梯度洗脱5%-100%B，1L；溶剂B=含10%MeOH的乙酸乙酯且溶剂A=二氯甲烷)纯化残余物。使部分纯化产物在Waters-Sunfire柱(30×100mm S5)(0-80%B，经35分钟)上进行制备性HPLC(CH3CN/H2O/TFA)且使单氯加合物(116mg，20%，呈7:1混合物形式，偏向实施例145)与二氯加合物(参见实施例142)分离。进一步通过
Figure BDA00001874284604681
OJ-H柱手性SFC色谱法(85%CO2；15%EtOH，含0.1%DEA)纯化单氯加合物，得到呈浅黄色残余物的((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(6-(4-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(10mg)。LC-MS保留时间3.75分钟；C46H56ClN8O6的计算值：851.40，m/z实测值：851.39[M+H]。在配备有Luna 2.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%甲醇/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%甲醇/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604683
Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.20(s,1H),8.15(s,1H),8.01(d,J＝8.2Hz,1H),7.98(d,J＝8.6Hz,1H),7.90(d,J＝8.6Hz,1H),7.86(d,J＝7.0Hz,1H),7.83(d,J＝7.3Hz,2H),7.79(d,J＝8.2Hz,2H),7.44(s,1H),5.14-5.10(m,1H),5.06-5.02(m,1H),4.27-4.22(m,4H),3.67(s,6H),3.46-3.47(m,2H),2.57-2.51(m,2H),2.45-2.39(m 2H),2.06-2.01(m,2H),1.95-1.90(m,2H),1.23-1.22(m,6H),0.97-0.91(m,12H)。
Figure BDA00001874284604684
实施例146
(2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(((甲氧基羰基)氨基)(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
由产生实施例129的同一反应获得且分离实施例146(22mg，13%)且呈其非对映异构体形式。LC-MS保留时间2.86分钟；C50H61N8O8的计算值：901.46，m/z实测值：901.42[M+H]。在配备有
Figure BDA00001874284604691
C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为5%MeOH/95%水/0.1%TFA且溶剂B为95%MeOH/5%水/0.1%TFA。使用电喷射模式的LC的Platform确定MS数据。1H NMR(三氟乙酸盐，500MHz,MeOD)δppm 8.34/8.29(s,1H),8.27(s,1H),8.13(d,J＝7.63Hz,1H),8.08(d,J＝8.6Hz,1H),7.99-7.95(m,4H),7.92-7.87(m,4H),5.29-5.21(m,2H),4.38(t,J＝7.3Hz,1H),4.31-4.28(m,2H),4.16-4.13(m,1H),3.99-3.91(m,4H),3.68(s,3H),3.65/3.61(s,3H),3.56-3.36(m,6H),2.76-2.62(m,2H),2.56(宽单峰,2H),2.00-1.83(m,4H),1.71(d,J＝12.8Hz,1H),1.31-131.(m,7H),1.26-1.2(m,6H)。
Figure BDA00001874284604693
实施例147
((1S)-2-((5S)-5-(4-(4-(6-(2-((3S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-1-甲基-3-吡唑烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基-1-吡唑烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯
将(S)-5-(4-(4-(6-(2-((S)-2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基吡唑烷-3-基)-1H-咪唑-4-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基吡唑烷-1-羧酸叔丁酯(48.4mg，0.069mmol)溶解于二噁烷(1.2mL)中，接着加入4M HCl(0.687mL，2.75mmol)的二噁烷溶液且搅拌所得淤浆4小时。浓缩反应混合物且将残余物及(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(37.3mg，0.172mmol)溶解于DMF(1.0mL)及DIPEA(0.072mL，0.41mmol)中。用HATU(65mg，0.17mmol)处理反应混合物且在室温搅拌反应混合物1小时。用氮气流将反应混合物浓缩干燥，溶解于MeOH中，过滤且通过制备性HPLC(含TFA缓冲液的MeOH/水)纯化，得到呈黄色固体状的((1S)-2-((5S)-5-(4-(4-(6-(2-((3S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-1-甲基-3-吡唑烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基-1-吡唑烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯(9.2mg)。LC-MS保留时间3.261分钟；m/z 903.36(MH+)。在配备有
Figure BDA00001874284604701
Luna 3u C182.0×50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上，使用SPD-10AV UV-Vis检测器，在220nM检测器波长下记录LC数据。洗脱条件使用0.8mL/min的流速、100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B的梯度、4分钟的梯度时间、1分钟的保持时间及5分钟的分析时间，其中溶剂A为10%MeOH/90%H2O/0.1%三氟乙酸且溶剂B为10%H2O/90%MeOH/0.1%三氟乙酸。使用电喷射模式的LC的
Figure BDA00001874284604702
Platform确定MS数据。1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.32(s,1H),8.27(s,1H),8.13(d,J＝8.5Hz,1H),8.09(d,J＝8.8Hz,1H),7.94-8.00(m,4H),7.85-7.93(m,4H),5.47(q,J＝8.1Hz,2H),3.93-4.01(m,4H),3.66(s,6H),3.34-3.49(m,6H),3.20-3.34(m,4H),2.77(s,3H),2.77(s,3H),2.65-2.96(m,4H),2.08(宽单峰,2H),1.38-1.73(m,8H)。
Figure BDA00001874284604703
实施例148
((1R)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)-2,2-二甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯
向(S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-1-氨基-2,2-二甲基丙基)-1H-咪唑-5-基)萘-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙-1-胺的盐酸盐(0.04g，0.061mmol)、(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(0.021g，0.123mmol)及HATU(0.051g，0.135mmol)于DMF中的混合物中加入DIPEA(0.064mL，0.368mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时。通过反相HPLC来纯化反应混合物，得到呈白色固体状的((1R)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)-2,2-二甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐(0.020g)。LC-MS(条件1；如下所示)：[M+H]+821.55,Rt=3.316分钟；1HNMR(400MHz,MeOD)ppm 8.34(1H,s),8.27(1H,d,J＝1.25Hz),8.11(2H,dd,J＝15.94,8.91Hz),7.84-8.02(8H,m),4.94(2H,s),4.07(2H,dd,J＝7.78,3.76Hz),3.60(6H,d,J＝9.29Hz),1.94-2.14(2H,m),1.16(18H,d,J＝5.27Hz),0.95-1.07(12H,m)。条件1：
Figure BDA00001874284604711
起始%B=0；最终%B=100；梯度时间=4分钟；终止时间=5分钟；流速=0.8mL/min；波长=220nm；溶剂A=含0.1%TFA的10%甲醇/90%水；溶剂B=含0.1%TFA的90%甲醇/10%水；烘箱温度=40℃。
实施例149及实施例150
通过使用对于合成实施例148所述的操作，由2-溴-1-(4-(6-(2-溴乙酰基)萘-2-基)苯基)乙酮及获自商业来源的适当起始物质制备实施例149(((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)-2,2-二甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐)及实施例150(N-((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-2,2-二甲基-1-((3-甲基丁酰基)氨基)丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2,2-二甲基丙基)-3-甲基丁酰胺的三氟乙酸盐)。条件2：柱=Sunfire，C18，3.0×150mm，3.5μm；起始%B=0；最终%B=100；梯度时间=15分钟；终止时间=18分钟；流速=1mL/min；波长1=220nm；波长2=254nm；溶剂A=含0.1%TFA的5%MeCN/95%水；溶剂B=含0.1%TFA的95%MeCN/5%水。
Figure BDA00001874284604712
Figure BDA00001874284604713
实施例154
Figure BDA00001874284604721
在500mL反应器中，将实施例151(可商购得到的，17.5g，1.00当量)溶解于THF(87.5mL)中。使所得溶液冷却至-75℃且装入1.5M DIBAL-H的甲苯溶液(61.3mL，1.5当量)，同时保持温度低于-70℃。在-70℃搅拌所得溶液1小时。历时10分钟装入三氟乙酸(2.3mL，0.5当量)，保持内部温度低于-70℃。接着历时15分钟装入三乙胺(51.3mL，6当量)，保持内部温度低于-70℃。历时10分钟装入三氟乙酸酐(11.2mL，1.3当量)，保持内部温度低于-70℃。接着历时90分钟使反应混合物温热至室温且经反向加入至20wt%枸橼酸一水合物水溶液(96.6g，1.5当量)中来淬灭，同时保持温度低于15℃。在室温搅拌所得混合物2小时，接着弃去下部水层。用70mL饱和碳酸氢钠水溶液洗涤富含产物的有机层两次。装入固体碳酸氢钠(1.7g，每克实施例1460.1g)且在真空将溶液的溶剂更换为纯甲苯，得到呈2L/kg甲苯中的溶液形式的实施例152。
将实施例152(16.5g，来自实施例151的理论值)的33mL甲苯溶液抛光过滤至250mL反应器中。接着装入三氟甲苯(50mL)及氯碘甲烷(43.2g，4.0当量)且使所得溶液冷却至-20℃。装入1.1M二乙基锌的甲苯溶液(111mL，2.0当量)，同时保持内部温度低于-8℃。在-15至-20℃搅拌所得溶液14小时。使反应混合物温热至0℃，接着经反向加入至20wt％枸橼酸水溶液(135.7g，2.3当量)中来淬灭。用甲苯(82mL)淋洗反应器且将淋洗液加入至淬灭溶液中。搅拌所得二相混合物20分钟，接着分离下部水层并弃去。先后用60mL 13wt％NaCl水溶液、60mL饱和NaHCO3洗涤富集有机层两次。在真空将所得溶液的溶剂更换为纯IPA，得到呈10L/kg IPA溶液形式的实施例153。
将实施例153(147mL，14.7g，来自实施例151的理论值)的IPA溶液装入250mL反应器中。使溶液温热至35℃且加入固体氢氧化钠(6.2g，3.0当量)。在35℃搅拌所得混合物过夜。加入水(44mL)且在真空除去有机溶剂。加入MTBE(145mL)且用6N HCl水溶液将pH值调整至3.0。分离水层并弃去。用60mL水洗涤富含产物的有机层，接着经加入恒定体积的MTBE，在真空共沸干燥。浓缩溶液至55mL且在50℃搅拌30分钟。历时1小时使溶液冷却至室温，在此期间形成淤浆。历时90分钟装入庚烷(90mL)且使所得淤浆熟化1小时。将固体收集于中等玻璃料上且先后用22.5mL 3:1庚烷:MTBE、22.5mL庚烷洗涤。在50℃真空烘箱中干燥棕褐色固体，得到5.48g(46%)实施例154，其LCAP纯度为94.9。
在50℃将粗实施例154溶解于55mL MTBE中。浓缩所得溶液至20mL且历时1小时冷却至室温。接着历时90分钟加入庚烷(33mL)。将所得固体收集于中等玻璃料上，用庚烷(15mL)洗涤，并在50℃真空烘箱中干燥，得到4.45g(98.8AP，98.8%手性纯度，37%来自实施例151)呈棕褐色粉末状的所需产物。
预期以上反应顺序(对于形成实施例154而言)将足够通用以同样容许其它官能团。例如，实施例147的C2碳上的叔丁氧基羰基可能经酰胺或另一酯置换。同样，氮上的叔丁氧基羰基保护基可经其它保护基(诸如其它氨基甲酸酯、酰胺、烷基、芳基)置换或可能完全不存在(经氢置换)。
生物活性
HCV复制子测定在本发明中使用，并如在共同拥有的PCT/US2006/022197和O’Boyle et.al.Antimicrob Agents Chemother.,49(4):1346-1353(Ap r.2005)中所述制备、进行和验证。结合萤光素酶报告子的测定方法已经如所述(Apath.com)使用。
HCV-neo复制子细胞和在NS5A区域内含有突变的复制子细胞用于测试通常所述家族的化合物。相比于野生型细胞的相应的抑制效能，化合物确定为对含有突变的细胞具有不同程度降低的抑制活性。因此，本发明化合物可有效抑制HCV NS5A蛋白的功能且应该理解为如在申请PCT/US2006/022197和共同拥有的WO/O4014852中先前所述的组合中是有效的。还应该理解的是本发明化合物可抑制HCV的多重基因型。表2显示本申请的代表性化合物对抗HCV 1b基因型的EC50(有效的50%抑制浓度)值。在一个实施方案中，本发明化合物对1a、1b、2a、2b、3a、4a和5a基因型具有活性。对HCV 1b的EC50值如下：A=0.4pM-10pM；B=10.1pM-1.00nM；且C=1.01nM-1μM。
本发明的化合物可通过除NS5A抑制之外或不同于NS5A抑制的机制来抑制HCV。在一个实施方案中，本发明的化合物抑制HCV复制子且在另一个实施方案中，本发明的化合物抑制NS5A。
表2
Figure BDA00001874284604741
Figure BDA00001874284604751
Figure BDA00001874284604761
Figure BDA00001874284604771
本领域技术人员应该明白的是，本发明不限于前述示例性实施例，并且在不背离本发明基本属性的情况下本发明可按其它具体形式来实施。因此期望的是，所述实施例在各个方面都应该被视为示例性的而非限制性的，应该参考所附的权利要求书而不是前述实施例，并且落入所述权利要求书的等价意义和范围内的所有变化形式都应该包括在本申请的范围内。

Claims (13)

1.化合物或其药用盐，其选自：
((1S)-1-(((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-(1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-丙氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-1-甲基-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
5,5'-(2,6-萘二基)二(2-((2S)-1-((2R)-2-苯基-2-(1-哌啶基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑)；
(1R)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲基氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N,N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺；
((1S,2R)-2-甲氧基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-苏氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-3-甲氧基-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-高丝氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯；
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1S)-1-环丙基-2-氧代-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
(2,7-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
((1S)-2-((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-(N-(甲氧基羰基)-L-丙氨酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-1-甲基-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
((1R)-1-(((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
5,5'-(2,7-萘二基)二(2-((2S)-1-((2R)-2-苯基-2-(1-哌啶基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑)；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(7-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(1R)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2R)-2-(二乙基氨基)-2-苯基乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-6-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-N,N-二乙基-2-氧代-1-苯基乙胺；
((1R)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯；
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(6-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2R)-2-(6-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2R)-2-(5-(6-(2-((2R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(2S)-2,1-吡咯烷二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
((1S)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S)-2-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(2,6-萘二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-((6-((2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(2,6-喹喔啉二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
(2,6-喹啉二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
((1S)-2-((2S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(4-(4-氯-2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(7-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹啉基)-1H-苯并咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-1,5-二氮杂萘-2-基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(1,5-二氮杂萘-2,6-二基二(1H-苯并咪唑-5,2-二基(1R,3S,5R)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷-3,2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,1-乙烷二基)))二氨基甲酸二甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1S,3R,5S)-3-(4-(6-(3-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-6-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-6-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)-1H-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(4,4-二氟环己基)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(4,4-二氟环己基)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-(4,4-二氟环己基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(4-(6-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S,2R)-2-甲氧基-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-(N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-苏氨酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(((甲氧基羰基)氨基)(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-((4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6'-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2,2'-联萘-6-基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(4-氯-2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-1-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-1-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,3aS,6aS)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,3aS,6aS)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)八氢环戊[b]吡咯-2-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)六氢环戊[b]吡咯-2(2H)-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
3-氯-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((3-氯-5-甲氧基-1-异喹啉基)羰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-5-甲氧基异喹啉；
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(4-氯-2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-氯-5-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S,5S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)乙炔基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-((3S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,5S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹喔啉基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-氯-5-(6-((4-氯-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)-2-甲基丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
3-甲基-N-((1S)-2-甲基-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-2-甲基-1-((3-甲基丁酰基)氨基)丙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)丙基)丁酰胺；
2-((2S,5S)-1-乙酰基-5-甲基-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-乙酰基-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑；
(1-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
2-((2S,4S)-4-甲基-1-(3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-甲基-1-(3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑；
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-喹啉基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-3-吗啉基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-吗啉基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-3-吗啉基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-吗啉基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
(1R,3S,5R)-2-(3-甲基丁酰基)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)乙炔基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己烷；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-哌啶基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-哌啶基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-哌啶基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-哌啶基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S)-2-(4-(6-(4-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-(((1S)-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-1-(((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)(甲基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(((甲氧基羰基)氨基)(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
(1-环丙基-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(环丙基((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-环丁基-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-环丁基-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-((2R,4S)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-1-((2S,4R)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4R)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((1S,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((1S,3S,5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
((1S)-2-((2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)-2-萘基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；及
((1S)-1-(((2S,4S)-2-(4-氯-5-(6-(4-(4-氯-2-((2S,4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-2-萘基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯。
2.组合物，其包含权利要求1的化合物或其药用盐及药用载体。
3.权利要求2的组合物，其进一步包含至少一种具有抗HCV活性的其它化合物。
4.权利要求3的组合物，其中至少一种其它化合物为干扰素或利巴韦林。
5.权利要求4的组合物，其中所述干扰素选自干扰素α2B、PEG化的干扰素α、同感干扰素、干扰素α2A和淋巴细胞样干扰素τ。
6.权利要求3的组合物，其中至少一种其它化合物选自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、咪喹莫特、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺和金刚乙胺。
7.权利要求3的组合物，其中至少一种其它化合物有效抑制靶标的功能以治疗HCV感染，所述靶标选自HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白和IMPDH。
8.权利要求1的化合物或其药用盐在制备在患者中治疗HCV感染的药物中的用途。
9.权利要求8的的用途，其还包括将权利要求1的化合物或其药用盐与具有抗HCV活性的额外化合物组合。
10.权利要求9的用途，其中所述额外化合物中的至少一种为干扰素或利巴韦林。
11.权利要求10的用途，其中所述干扰素选自干扰素α2B、PEG化的干扰素α、同感干扰素、干扰素α2A和淋巴细胞样干扰素τ。
12.权利要求9的用途，其中所述额外化合物中的至少一种选自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、咪喹莫特、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺和金刚乙胺。
13.权利要求9的用途，其中所述额外化合物中的至少一种有效抑制靶标的功能以治疗HCV感染，所述靶标选自HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白和IMPDH。
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