CN102405935B - 鱼精蛋白复配制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了鱼精蛋白复配制剂及其制备方法和应用，本发明鱼精蛋白复配制剂，可由鱼精蛋白、壳聚糖单独制得，也可以与甘氨酸、醋酸钠、单甘油酯、醋酸、无水酒精、溶葡萄糖球菌酶、溶菌酶、抑菌肽、灭菌蒸馏水中的一种或两种以上的混合物复配制得。鱼精蛋白复配制剂的制备方法：在无菌或洁净车间按比例准确称取各组分，放入洁净玻璃或不锈钢中搅拌均匀，封装入无菌容器中，即可。该产品不仅有效杀灭金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、淋球菌、链球菌、厌氧菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、肺炎双球菌、D群肠球菌、四联球菌、产单核李斯特菌、嗜麦芽窄食单孢菌、胃幽门螺旋杆菌等革兰氏阳性菌性及革兰氏阴性菌均有杀灭作用。

Description

鱼精蛋白复配制剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种鱼精蛋白复配制剂，本发明还涉及一种制备该鱼精蛋白复配制剂的方法，本发明还涉及该鱼精蛋白复配制剂的应用。

背景技术

目前市场上传统的消毒剂大部分是含有氯、醇类、典类、醛类、酚类等化学试剂。如凝固蛋白使之变性来消毒的酚、酸、醇类；溶解蛋白质的氢氧化钠，石灰等；强氧化的漂白粉、过氧乙酸等；福尔马林与蛋白质氨基结合、戊二醛与微生物蛋白反应等消毒试剂。

以上消毒试剂绝大部分存在以下一个或多个缺点：

1、对消毒患者有残留、有毒副作用。

2、对皮肤粘膜、伤口及创面有强烈刺激。

3、不易降解，有腐蚀，排放对环境有污染。

4、成本高，效率底，耗时间。

抗菌素(抗生素)在我国大量被乱用，细菌不断地水解青霉素或氨苄或头孢、大环内脂、喹若酮类等抗菌素，由于抗生素耐药性使其药用效果的作用越来越被削弱了，另一方面，抗生素的长期应用也会促使高表达抗药性的菌株逐渐成为优势菌群，而使细菌株越来越难被抑制或杀死。抗菌素的乱用不但使菌株产生了耐药性，而且对人体毒副作用很大。

因而需要一种也需要一种可替代抗生素，可广谱杀菌，而不易产生耐药性菌株的杀菌剂来解决以上不利因素。

发明内容

本发明的所要解决的技术问题在于克服现有技术中的不足之处，提供一种安全无毒副作用，不易产生耐药性，高效、广谱杀菌的鱼精蛋白复配制剂，该制剂可分别添加于外用医药(包括皮肤、粘膜)、保健食品、外用消毒剂、牙膏中。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述鱼精蛋白复配制剂的方法。

本发明还有一个目的是提供一种该鱼精蛋白复配制剂的应用。

为了达到上述目的，本发明采用以下方案：

本发明鱼精蛋白复配制剂，可由鱼精蛋白、壳聚糖单独制得，也可以与甘氨酸、醋酸钠、单甘油酯、醋酸、无水酒精、溶葡萄糖球菌酶、溶菌酶、抑菌肽、灭菌蒸馏水中的一种或两种以上的混合物复配组成。

一种鱼精蛋白复配制，其特征在于按重量百分比包括以下组分：

鱼精蛋白                0.01-99.99％

水溶性壳聚糖            0.01-99.99％。

如上所述的一种鱼精蛋白复配制剂，其特征在于按重量百分比由以下组分组成：

如上所述的一种鱼精蛋白复配制剂，其特征在于按重量百分比由以下组分组成：

如上所述的一种鱼精蛋白复配制剂，其特征在于按重量百分比由以下组分组成：

鱼精蛋白            0.01-10％

水溶性壳聚糖        0.01-10％

灭菌蒸馏水          80-99％。

如上所述的一种鱼精蛋白复配制剂，其特征在于按重量百分比由以下组分组成：

如上所述的一种鱼精蛋白复配制剂，其特征在于按重量百分比包括以下组分：

如上所述的一种鱼精蛋白复配制剂，其特征在于按重量百分比由以下组分组成：

1、根据权利要求3所述的一种鱼精蛋白复配制剂，其特征在于按重量百分比由以下组分组成：

如上所述的鱼精蛋白复配制剂，其特征在于该制剂可制成气雾剂，水溶剂，颗粒剂，喷雾剂，贴剂，擦剂，口喷剂中的一种。

本发明鱼精蛋白复配制剂在外用医药、口服药物、耳药、鼻药、维生素类、日化中应用。

本发明精蛋白复配制剂在保健食品上的应用。

在本发明鱼精蛋白复配制剂，所运用成分中，水溶性壳聚糖包括水溶性甲壳质、羧化壳聚糖、2-脱氧-D-葡萄糖、壳寡糖、脱乙酰壳聚糖、低分子、高分子壳聚糖等中的一种或两种或两种以上混合；鱼精蛋白包括中药化学成分精巢含精蛋白(protamine)，脱氨核苷酸(deoxynucleotide)，精氨酸(arginine)。太平洋鲱还含棕榈酸(palmiticacid)，油酸(oleic acid)、鱼精蛋白硫酸盐、硫酸鱼金蛋白，以及食品级、药用级的鱼精蛋白。

本发明一种制备如上所述鱼精蛋白复配制剂的方法，其特征在于包括以下步骤：

在无菌或洁净车间按比例准确称取鱼精蛋白，壳聚糖，单甘油酯，甘氨酸，醋酸钠，醋酸，放入灭菌蒸馏水充分搅拌，混匀后装装入无菌塑料瓶、玻璃品、喷剂容器、、西林瓶、塑料袋、纸袋、气雾瓶中。

一、本发明配方中成分的性质如下：

1、鱼精蛋白：鱼精蛋白是存在于各类鱼精巢组织中的一种多聚阳离子肽，具有高效、安全、功能性等特点，是值得开发的一种新型天然食品防腐剂。

鱼精蛋白是一种碱性蛋白，主要在鱼类(如蛙鱼、蹲鱼、鲱鱼等)成熟精子细胞核中作为和DNA结合的核精蛋白存在。鱼精蛋白发现于1870年，到1940～1960年间，正式用作抗菌剂的研究才盛行起来。鱼精蛋白在中性和碱性介质中显示出很强的抑菌能力，并有较高的热稳定性，在210℃条件下加热1小时仍具有活性，在中性和碱性介质中显示出很强的抑菌能力，同时抑菌范围和食品防腐范围均较广，它对枯草杆菌、芽泡杆菌、干酪乳杆菌、胚芽乳杆菌、乳酸菌、霉菌、芽抱耐热菌和革兰氏阳性菌等均有较强的抑制作用，是一种天然抗菌物质，属于简单的球形蛋白质，无毒、安全可靠、可降解的抗菌物。

1942年，Miller等人研究了鱼精蛋白对几种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑菌作用，结果发现革兰氏阳性菌对鱼精蛋白特别敏感。1944年，Negroni和Fischer也得到了同一结论。钟立人等(1997年)研究r鲤鱼鱼精蛋白的抗菌性，也验证了这一结论。

鱼精蛋白对不同菌种的生长抑制作用不同，所以所需的鱼精蛋白最低抑菌浓度也因菌种不同而异。一般情况下，鱼精蛋白使用的最低抑菌浓度在1000mg/kg以下，如鲑鱼鱼精蛋白对枯草杆菌、地衣型芽孢杆菌、凝固芽孢杆菌、胚芽乳杆菌、粪链球菌等最小的抑菌浓度为100-700mg/kg。另外，在不同的食品、不同的环境介质中，鱼精蛋白的抑菌最低有效浓度也不同。

化学性质：

1)、白色或类白色粉末，无臭，有吸湿性，易溶于水，不溶于乙醇、氯仿或乙醚中。

2)、中药化学成分精巢含精蛋白(protamine)，脱氨核苷酸(deoxynucleotide)，精氨酸(arginine)。太平洋鲱还含棕榈酸(palmiticacid)，油酸(oleic acid)等。

2、壳聚糖：

壳聚糖的其它名称：又称可溶性甲壳质、甲壳素、壳糖葡糖胺、甲壳胺、几丁聚糖等，化学名为2-氨基-β-1，4-葡聚糖，甲壳素是存在于自然界中的唯一一种带阳离子能被生物降解的分布极其广泛的高分子材料，大量存在于昆虫、甲壳纲动物外壳及真菌的细胞壁中，壳聚糖作为一种天然无毒，生物相容性好，可降解，是白色或微黄色，无色、无味，不定形半透明固体或粉末。壳聚糖是以甲壳质为原料，再经提炼而成，不溶于水，能溶于稀酸，能被人体吸收。

分子式为：(C₆H₁₁O₄N)n，结构式为

水溶性壳聚糖：Chitosan

在特定的条件下，甲壳素和壳聚糖能发生水解、烷基化、酰基化、羧甲基化、磺化、硝化、卤化、氧化、还原、缩合和络合等化学反应，可生成各种具有不同性能的甲壳素、壳聚糖衍生物，从而扩大了两者的应用范围。甲壳素与壳聚糖大分子中有活泼的羟基和氨基，它们具有较强的化学反应能力。在碱性条件下C-6上的羟基可以发生如下反应：羟乙基化——甲壳素和壳聚糖与环氧乙烷进行反应，可得羟乙基化的衍生物。羧甲基化——甲壳素和壳聚糖与氯乙酸反应便得羧甲基化的衍生物。黄酸酯化——甲壳素和壳聚糖与纤维素一样，用碱处理后可与二硫化碳反应生成黄酸酯。氰乙基化——丙烯腈和壳聚糖可发生加成反应，生成氰乙基化的衍生物。

上述反应在甲壳素和壳聚糖中引入了大的侧基，破坏了其结晶结构，因而其溶解性提高，可溶于水，羧甲基化衍生物在溶液中显示出聚电解质的性质。

水溶性壳聚糖包括壳糖葡糖胺、水溶性甲壳胺、水溶性羧化壳聚糖(N-羧甲基壳聚、O-羧甲基壳聚糖)、2-脱氧-D-葡萄糖(2-Deoxy-D-Glucose，2-DG)它的优点在与能在中性、碱性及微酸性水中溶解，且性质较稳定。壳聚糖经羧化改性而成，与甲壳质及壳聚糖相比，其物理、化学性质均得到优化，具有水溶性、成膜性和极强的重金属螯合作用以及吸湿、保湿、调理、抑菌等功能。这种纯天然和完全无毒的产物在医学保健、工农业等领域均显示出非常优越的特点。2-脱氧-D-葡萄糖(2-Deoxy-D-Glucose，2-DG)为天然抗代谢物类抗生素，具有能够抑制病毒感染、酵母发酵、致病菌及肿瘤细胞生长等多种生理药理效应。具有抗病毒、抗菌、抗癌、抗癫痫等作用，用于预防病毒及病原菌感染等，可防止HSV、HIV、SARS、流感病毒等及病源菌引起的传染病，在医药及化妆品等行业具有广泛的应用前景

用途：广泛用于食品、饲料、医药、保健、生物工程等领域。特别是由于甲壳胺的纯天然活性及无毒副作用，对人体有良好的亲和性，其化学结构为带阳离子的高分子碱性多糖聚合物具有很强的抗菌性，被大力应用于保健食品和药品添加剂。这类多糖既可生物合成，又可生物降解，与动物的器官组织及细胞有良好的生物相容性，无毒，降解过程中产生的低分子寡聚糖在体内不积累，几乎无免疫原性。其结构中，还有活泼的氨基，易于化学改性，有天然抗菌性能，而且抗菌谱广。

3、甘氨酸：

又名氨基乙酸，为非人体必需氨基酸。名称缩写：Gly甘氨酸是氨基酸系列中结构最为简单，人体非必需的一种氨基酸，在分子中同时具有酸性和碱性官能团，在水溶液中为强电解质，在强极性溶剂中溶解度较大，基本不溶于非极性溶剂，而且具有较高的沸点和熔点，通过水溶液酸碱性的调节可以使甘氨酸呈现不同的分子形态。

英文名Glycine：Aminoacetic acid

分子式C₂H₅NO₂

甘氨酸是两性的它既有一个显酸性的-COOH还有一个碱性的-NH2方程式NH₂CH₂COOH

NaOH+NH₂-CH₂-COOH＝＝NH₂-CH₂-COONa

HCl+NH₂-CH₂-COOH＝＝NH₃Cl-CH₂-COOH

甘氨酸主要用于氨基酸注射液作营养输液，对不能经消化系统吸收(消化道功能障碍)、长期消耗性疾病及急需补充营养以增强体质的患者。

二、本发明的鱼精蛋白复配制剂杀菌原理如下：

1、能够激活部分微生物本身的几丁质酶活性，或使几丁质酶被过分表达，导致其对微生物细胞壁几丁质的降解，从而损伤细胞壁。

2、能阻止营养物质向微生物细胞内运输，直至微生物细菌死亡。

3、本发明的鱼精蛋白复配制剂能损坏微生物细胞壁的完整性，使细胞壁趋于溶解，直至细胞死亡。生物复合抗菌剂是一种带强阳离子的混悬液能，而细菌细胞壁(尤其是革兰氏阳性菌细胞壁较厚，结构紧密，含有丰富的磷壁酸)形成一个负电荷环境，从而形成一个生物电位差达到破坏细菌细胞壁，使细菌细胞汁溢出达到杀灭细菌细胞的作用。

4、鱼精蛋白复配制剂透进入到微生物细胞内，吸附细胞内带负电荷的细胞质，并发生絮凝作用，扰乱细胞正常的生理活动，从而杀灭细菌。

三、本发明的鱼精蛋白复配制剂研究过程中进行了大量的杀菌试验研究。研究方法主要依据卫生部《消毒技术规范》相关消毒试验要求进行。

1、对金黄色葡萄球菌ATCC6538(代表革兰氏阳性菌)的杀灭作用(载体浸泡定量杀菌试验)，原液配比：硫酸鱼精蛋白(英文：reagent grade美国sigma，分子量：5000)0.3g；水溶性壳聚糖(水溶性羧化壳聚糖，羧化度≥60％，分子量2万，产地；浙江金壳生物化学有限公司)1.9g，甘氨酸(C₂H₅NO₂，分子量：75.07医药级产地：石家庄市石兴氨基酸有限公)1.1g，单甘油酯(食品级，含量99％，郑州天亿化工产品有限公司)0.5g，醋酸钠(医药级，含量99.7％，产地：天津金汇化学试剂有限公司)0.1g，醋酸0.1g(医用级，含量99.7％，分析纯，广州市番禺力强化工厂)，灭菌蒸馏水96ml

平均对照菌数(cfu/片)3.01×10⁴

2、对大肠杆菌ATCC8099(代表革兰氏阴性菌)的杀灭作用(载体浸泡定量杀菌试验)：

平均对照菌数(cfu/片)3.01×10⁴

3、对白色菌ATCC10231(代表致病性真菌)的杀灭作用(悬液定量杀菌试验)：

平均对照菌数(cfu/片)2.93×10⁴

4、对手表面现场的杀菌试验

根据规范要求，在受试者双手相充分互搓擦后，用浸润了采样液的棉试子对其左手自然菌采样一次，试子棉花置10ml采样液中作为对照组，用药液喷洒双手，1分钟后对受试者右手的自然菌采样一次，作为实验组样本，进行活菌基数。试验重复30次。结果各次试验对手表面自然杀灭率均在98％以上，平均杀灭率为99.2％。

5、有机物的影响：

载体浸泡定量杀菌试验表明，25％和50％的小牛血清与产口1/3稀释液，作用21min，对含25％的小牛血清金葡菌的杀灭率达99.94％；作用28min，对含50％的小牛血清金葡菌的杀灭率达99.96。表明在大量有机物存在下，本发明鱼精蛋白复配制剂依然表现强大的杀菌作用。

四、本发明鱼精蛋白复配制剂按卫生部《消毒技术规范》的要求进行了急性进经品毒性试验、皮肤刺激试验、眼刺激试验、阴道粘膜刺激试验、蓄积毒性试验及小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验。

一、急性毒性(经口LD₅₀)试验：

目的：样品通过一次经口接触所能引起的健康危害及求出半数致死剂量，为急性分类、分级提供依据(为亚慢性实验和其他实验确定剂量提供参考)。

1、样品性状：透明液体，溶于水

2、样品处理及配置：取样品5500mg加蒸馏水20ml

3、实验动物：NIH小鼠(动物合格证2002A0365号)，18-22g

4、实验方法：按《消毒技术规范》测试。

4.1实验前，实验动物禁食16小时。

4.2将动物随机分组，雌雄各一组，每组10只，称重，按0.4ml/20g体重，采用灌胃法给一次样。

4.3观察给样后两周，实验动物的中毒表现及死亡情况。

4.4计算LD₅₀及95％可信区间。

5、结果：

表 雌雄小鼠急性经口毒性实验结果

6、结论：雌性小鼠：LD₅₀＞5000mg/kg

雄性小鼠：LD₅₀＞5000mg/kg

经口进行毒性LD₅₀＞5000mg/kg，属实际无毒级

二、蓄积毒性试验

蓄积毒性试验：NIH小鼠(动物合格证2002A035号)18-22g，小鼠每天灌胃给药。

三、急性眼刺激试验

新西兰家兔(合格证99A031号)，2kg左右，每只家兔一眼给药，一眼对照。

四、阴道粘膜刺激试验：SD大鼠(合格证99A032)，250g左右

五、小鼠骨嗜多染红细胞微核试验：

昆明小鼠(合格证99A029)，25-30g，设生理盐水阴性对照组、环磷酰胺(40mg/kg)阳性对照组及试验组。

六、测定鱼精蛋白复配制剂对小鼠烧伤创面金黄色葡萄球菌杀灭效果

1、方法

(1)、烧伤感染模型：

动物为昆明种小白鼠，雌雄各半，体重25-30g。动物随机分为三组，以直径2.6cm圆形烙铁造成小鼠背部皮肤III度烧伤(75℃，15秒)，烧伤面积(约5cm²)约占小鼠体表面积的6-7％，伤后30分钟，创面接种浓度为109cfu/ml的金黄色葡萄球菌菌液0.1ml，菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923。

(2)、烧伤创面的消毒处理

在烧伤创面接种金黄色葡萄球菌后3-4小时，用无菌棉拭子沾取含0.02％十二烷基硫酸钠的生理盐水，涂擦创面作消毒前采样，然后用鱼精蛋白复配制剂，敷贴烧伤创面(1-2ml/只)。消毒作用30分钟，再作消毒后采样。经振荡洗涤，取样液0.1ml作涂抹琼脂平板接种，每一样液接种2个平板，于37℃温箱内培养48小时，观察最终结果。

2、结果

结果证明，经鱼精蛋白复配制剂消毒24小时，没有金黄色葡萄球菌检出，而对照组19只小鼠则全部有金黄色葡萄球菌检出。

生物复合抗菌剂对烧伤创面金黄色葡萄球菌消毒效果

组别	检测动物数(只)	阳性动物数(只)	阳性率(％)
				鱼精蛋白复配制剂	24	0	0
对照组	19	19	100.00

经鱼精蛋白复配制剂消毒后没有金黄色葡萄球菌检出。经24只人工烧伤小鼠模拟消毒试验证明，鱼精蛋白复配制剂对人工污染烧伤创面的金黄色葡萄球菌有杀灭作用。

七、鱼精蛋白复配制剂对人体烧伤创面金黄葡萄球菌实用消毒效果的测定

1、方法

(1)、鱼精蛋白复配制剂的配制，准确称硫酸鱼精蛋白(英文：reagent grade美国sigma，分子量：5000)0.2g；水溶性壳聚糖(水溶性壳聚糖(水溶性羧化壳聚糖，羧化度≥60％，分子量2万，产地；浙江金壳生物化学有限公司)1.9g，甘氨酸(C₂H₅NO₂，分子量：75.07医药级产地：石家庄市石兴氨基酸有限公)1.2g，单甘油酯(食品级，含量99％，郑州天亿化工产品有限公司)0.5g，醋酸钠(医药级，含量99.7％，产地：天津金汇化学试剂有限公司)0.1g，0.1g，醋酸0.1g(医用级，含量99.7％，分析纯，广州市番禺力强化工厂)放入灭菌蒸馏水96ml充分搅拌即可。

(2)、实用消毒试验

试验用鱼精蛋白复配制剂取2ml，所用中和剂为含0.02％十二烷基硫酸钠的生理盐水。消毒前，用无菌棉拭子在含中和剂生理盐水的试管中浸湿，并于试管内壁挤干后，在患者烧伤创面划定的采样区内涂擦采样，采样面积为1cm²，采样后，将棉拭子放回原采样液试管内，作为消毒前对照。消毒时，用2m1的鱼精蛋白复配制剂敷贴患者烧伤创面，消毒作用2小时后，作消毒采样，采样液经敲打洗涤，取样液原液或进行适当稀释后，作高盐甘露醇琼脂倾注接种，每皿0.1ml，一式二份，置37℃温箱内培养48h，观察最终结果。

2、结果

以11例烧伤患者实用消毒试验证明，经鱼精蛋白复配制剂对烧伤创面敷贴消毒后，创面金黄色葡萄球菌数由1850-55650cfu/cm²下降为0-2250cfu/cm²，杀灭率范围为91.66-100.00％。对患者烧伤创面的金黄色葡萄球菌的杀灭率达98.00％以上，鱼精蛋白复配制剂消毒剂在烧伤引起的金黄色葡萄球菌感染有较好的杀灭作用。

3、烧伤创面的感染：

烧伤感染一直占烧伤死亡原因的首位，也是影响创面愈合的主要因素。本产品已在临床上用于1000多例烧伤病人，其中包括深度及大面积烧伤患者，深受医护人员及患者喜爱，普遍反应控制感染速度快，效果好，无刺激性，使用方便，并能有效促进创面干燥结痂，无一例不良反应报道，可有效预防烧伤创面脓毒症及烧伤败血症的发生。

本产品属液体制剂，渗透性强，杀菌效果受有机物干扰不大，对脓血创面也有效，可在清创时用，清创后用及用于创口的日常抗炎护理。

	常用抗生素	常用消毒剂	生物复合消毒剂
				抗菌谱	有限	广	广
刺激性	无	大	无
				抗药性	有	无	无
有机物干扰	无	大	无
				起效速度	慢	慢	快
促进创面干燥结痂作用	无	无	明显
				毒性	低	大	低

本发明鱼精蛋白复配制剂杀菌谱广，对烧伤感染的常见病菌具有快速而强大的杀灭作用，如金葡菌，绿脓杆菌，弗氏枸椽酸杆菌，硝酸盐阴性杆菌其它肠道阴性杆菌等，对本品敏感的细菌理论上包含所有的细菌繁殖体。

本发明鱼精蛋白复配制剂无抗药性问题，无毒无刺激性，尤其适合用于大面积烧伤的较长疗程的日常抗炎护理。

与现有技术相比，本发明的有意效果：

本发明的鱼精蛋白复配制剂的主要成份是鱼精蛋白、水溶性壳聚糖、甘氨酸、醋酸钠、醋酸、单甘油酯，不会对皮肤和粘膜产生刺激，不对机体产生任何毒副作用，并可通过代谢彻底降解，没有残留，不影响环保。其优点如下：

1)特效性。鱼精蛋白复配制剂在杀灭耐抗生素球菌方面，显示出独特的效果。杀菌效果极佳。

2)杀菌谱更广。鱼精蛋白复配制剂口腔喷雾剂不仅能杀灭耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，而且可以有效杀灭大肠杆菌、白色念珠菌、溶血性链球菌、厌氧菌、绿脓杆菌等常见致病细菌。

3)杀菌活性和稳定性大大高于任何单一鱼精蛋白或壳聚糖。由于鱼精蛋白复配制剂是以鱼精蛋白、壳聚糖为主要成分，配以稳定剂、增效剂等有效生物成分复合而成，在温度80以下活性保持稳定，PH适应范围3-14，溶液保存三年活性仍保持稳定。

本发明鱼精蛋白复配制剂对医院内的交叉感染、烧伤和手术病人的革兰氏阳性菌感革兰氏阴性菌感染球菌特别有效，其他消毒剂和药物无法与之相提并论。

目前，耐药性球菌MRSA的院内感染很广泛，细菌对除万古霉素以外的大多数抗生素都有抗药性。但万古霉素毒副作用很大，病人用后，肝肾毒性大。另外，万古霉素不能外用，I临床常用的SD-Ag和洗必泰对破损皮肤刺激性强，对MRSA基本无作用而且最近已有人报道发现抗万古霉素的耐药性金黄色葡萄球菌。所以临床尤其是烧伤急需能杀死耐药性金黄色葡萄球菌的外用制剂。中山市康乃欣生物医疗科技有限公司研制生产的鱼精蛋白复配制剂水解革兰氏阳性菌特别是耐药性金黄色葡萄球菌，从而彻底杀死细菌，不易产生耐药性菌株，又无任何皮肤刺激作用，故该品是一种很有前景的皮肤外用消毒剂。

临床上MRSA感染的创面大多是愈合困难的晚期残余创面，外用本发明鱼精蛋白复配制剂后分泌物明显减少，创面开始愈合。连续三次使用后，绝大部分创面MRSA转阴，总杀菌率达98％以上，促进创面愈合，减少院内交叉感染。

本发明鱼精蛋白复配制剂杀菌活性强，达到溶解并杀死细菌的目的，并可避免细菌耐药性的产生。本发明鱼精蛋白复配制剂能水解革兰氏阳性细菌细胞壁，从而彻底杀死细菌，避免了细菌耐药性的产生。通过收集到的200多株细菌进行了生鱼精蛋白复配制剂抑杀菌实验。实验结果表明：鱼精蛋白复配制剂对革兰氏阳性菌；如临床上常见的金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌、肺炎双球菌、D群肠球菌、四联球菌、产单核李斯特菌、链球菌以及胃幽门螺旋杆菌等均有明显的抑杀作用。

该系列鱼精蛋白复配制剂易于制造，本说明书所提供及各种产品，适用于各种剂型，该制剂可添加于外用医药(皮肤、皮肤黏膜)、口服药物、耳药、鼻药、维生素类、日化，可制成气雾剂，水溶剂，颗粒剂，喷雾剂，贴剂，擦剂，口喷剂中的一种。

添加了本发明鱼精蛋白复配制剂的药物可用于治疗脓肿、皮癣、溃疡、褥疮、烫伤、灼伤、疖、口腔溃疡、割伤、阴道炎、各类细菌感染引起的口腔疾病、呼吸道疾病、急慢性胃炎、各类的中耳炎、角膜炎、结膜炎、麦粒肿、极慢性鼻炎、鼻窦炎、预防性病、防治粉刺、各类由细菌、真菌引起的面部皮肤疾患等；还可以用于外科、泌尿科、口腔科、妇产科、耳鼻喉科等各种外科手术中术前术后的清创和伤口包扎；可用于各种手术设备、内窥镜、手术刀具、导管等消毒杀菌。

本发明鱼精蛋白复配制剂制备方法简单，益于规模化生产。

具体实施方式

根据不同的抑、杀菌要求和使用方便，可具体配置成：一：配置成无色透明鱼精蛋白复配制剂。

实施例1

本发明鱼精蛋白复配制剂由以下重量百分比的含量组成：

配比：

方法：在无菌室或超净工作台中，将以上试剂准确的称量，鱼精蛋白0.3g、水溶性壳聚糖1.9g、甘氨酸1.1g、单甘油酯0.5g、醋酸钠0.1g、醋酸0.1g、灭菌蒸馏水96ml(96g)，放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，封装入无菌容器内即可。

应用：该配比可用于制造皮肤黏膜杀菌消毒剂，可在2-10分钟内杀灭皮肤、黏膜表面的金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌，杀灭率达99.8％。可治疗脓肿、皮癣、溃疡、褥疮、烫伤、灼伤、疖、口腔溃疡、割伤、阴道炎、各类细菌感染引起的口腔疾病、预防性病，用于外科、泌尿科、口腔科、妇产科、耳鼻喉科等各种外科手术中术前术后的清创和伤口包扎。

实施例2

本发明鱼精蛋白复配制剂由以下重量百分比的含量组成：

配比：

方法：在无菌室或超净工作台中将10g醋酸放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，加入灭菌蒸馏水67ml，轻轻搅拌，充分混合均匀后，再加入，10g水溶性壳聚糖混均后，加入0.01g鱼精蛋白、10g甘氨酸、0.1g单甘油酯、2.89g醋酸钠充分混合均匀，封装入无菌容器内即可。

实施例3

本发明鱼精蛋白复配制剂由以下重量百分比的含量组成：

配比：

方法：如上述1和2一样方式使其混均匀装入无菌载液器皿中封装好。

实施例4

本发明鱼精蛋白复配制剂由以下重量百分比的含量组成：

配比：

鱼精蛋白            10％

水溶性壳聚糖        0.01％

灭菌蒸馏水          89.99％

方法：在无菌室或超净工作台中将以上的成分放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，灌入无菌容器内封装。

实施例5

配比：

鱼精蛋白            10％

水溶性壳聚糖        10％

灭菌蒸馏水          80％

方法：在无菌室或超净工作台中将以上量得的成分放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，灌入无菌容器内封装。

实施例6

配比：

鱼精蛋白          0.01％

水溶性壳聚糖      10％

灭菌蒸馏水        89.99％

方法：在无菌室或超净工作台中将以上量的试剂放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，灌入无菌容器内封装。

以上鱼精蛋白复配制剂主要用于治疗脓肿、皮癣、溃疡、褥疮、烫伤、灼伤、疖、口腔溃疡、割伤、阴道炎、各类细菌感染引起的口腔疾病、呼吸道疾病、急慢性胃炎、各类的中耳炎、角膜炎、结膜炎、麦粒肿、极慢性鼻炎、鼻窦炎、预防性病、防治粉刺、各类由细菌、真菌引起的面部皮肤疾患等；还可以用于外科、泌尿科、口腔科、妇产科、耳鼻喉科等各种外科手术中术前术后的清创和伤口包扎；可用于各种手术设备、内窥镜、手术刀具、导管等消毒杀菌。

二：配置成生物复合抗菌粉剂

实施例7

配比：

鱼精蛋白                99.99％

水溶性壳聚糖            0.01％。

方法：在无菌室或超净工作台中将鱼精蛋白和水溶性壳聚糖放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，封装入无菌西林瓶或朔料瓶或塑料袋内即可。

实施例8

配比：

鱼精蛋                  50％

水溶性壳聚糖            50％。

方法：如上实施例7的方法操作混均，封装入容器内。

实施例9

配比：

鱼精蛋白                0.01％

水溶性壳聚糖            99.99％

方法：如上实施例7的方法操作混均，封装入容器内。

实施例10

配比：

方法：在无菌室或超净工作台中，按以上量将鱼精蛋白、水溶性壳聚糖、甘氨酸、醋酸钠、单甘油酯放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，封装入无菌西林瓶或朔料瓶或塑料袋内即可。

实施例11

配比：

方法：按以实施例10中的制备方法，将其混均，封装入无菌西林瓶或朔料瓶或塑料袋内即可。

实施例12

配比：

方法：如上实施例7的方法，将其混均，封装入无菌西林瓶或朔料瓶或塑料袋内即可。

以上鱼精蛋白复配制剂主要用于烧伤、烫伤、严重口腔溃疡、皮肤黏膜感染等不易接触水的伤口清创包扎，还可以用于外科、泌尿科、口腔科、妇产科、耳鼻喉科等各种外科手术中术前术后的清创和伤口包扎。

实施例13

配比：

在无菌室或超净工作台中，按以上量将上述物质放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，封装入无菌西林瓶或朔料瓶或塑料袋内即可。

实施例14

配比：

在无菌室或超净工作台中，按以上量将上述物质放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，封装入无菌西林瓶或朔料瓶或塑料袋内即可。

实施例15

配比：

在无菌室或超净工作台中，按以上量将上述物质放入洁净的玻璃或不锈钢盛具中，轻轻搅拌，充分混合均匀后，封装入无菌西林瓶或朔料瓶或塑料袋内即可。

Claims (4)

1.一种鱼精蛋白复配制剂，其特征在于按重量百分比由以下组分组成：

2.根据权利要求1所述的鱼精蛋白复配制剂，其特征在于所述的鱼精蛋白复配制剂可制成粉剂，水溶剂，凝胶剂，胶囊剂，颗粒剂，喷雾剂，贴剂，擦剂，口喷剂中的一种。

3.一种制备权利要求1或2所述鱼精蛋白复配制剂的方法，其特征在于包括以下步骤：

在无菌或洁净车间按比例准确称取各组分，放入洁净玻璃或不锈钢盛具中搅拌均匀，封装入无菌容器中，即可。

4.权利要求1或2所述的鱼精蛋白复配制剂在在外用医药、口服药物、耳药、鼻药、维生素类、日化、保健食品中应用。