CN100549006C

CN100549006C - 有丝分裂驱动蛋白抑制剂

Info

Publication number: CN100549006C
Application number: CNB2004800233097A
Authority: CN
Inventors: P·J·科尔曼; C·D·科克斯; R·M·加巴乔; G·D·哈特曼
Original assignee: Merck and Co Inc
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2003-08-15
Filing date: 2004-08-11
Publication date: 2009-10-14
Anticipated expiration: 2024-08-11
Also published as: CN1839128A

Abstract

本发明涉及有效用于治疗细胞增殖性疾病、用于治疗与KSP驱动蛋白活性有关的障碍和抑制KSP驱动蛋白的式(I)的二氢吡咯类化合物。本发明还涉及含有这些化合物的组合物，和利用它们治疗哺乳动物的癌症的方法。

Description

有丝分裂驱动蛋白抑制剂

发明背景

本发明涉及2，2-二取代2，5-二氢吡咯衍生物，它们是有丝分裂驱动蛋白、特别是有丝分裂驱动蛋白KSP的抑制剂，并且有效治疗细胞增殖性疾病，例如癌症，增生，再狭窄，心脏肥大，免疫疾病和炎症。

在治疗剂中用于治疗癌症的有紫杉烷类和长春花碱类。紫杉烷和长春花碱作用于存在于多种细胞结构内的微管。微管是有丝分裂纺锤体的重要结构组件。有丝分裂纺锤体负责将染色体组的复制版本分布到由细胞分裂得到的两个子细胞的每个细胞内。推定这些药物对有丝分裂纺锤体的破坏作用会导致对癌细胞分裂的抑制，并且诱导癌细胞死亡。然而，微管也构成其他类型的细胞结构，包括神经过程中细胞内传导的通道。由于这些药物不特异性地以有丝分裂纺锤体为靶向，它们具有副作用，由此限制了它们的应用。

人们非常感兴趣改进用于治疗癌症的药物的特异性，因为如果与这些药物的给药有关的副作用能够被减小，其治疗效益将能够得以实现。传统上，癌症治疗中的显著改善与鉴定出具有新作用机理的治疗剂有关。这种实例不但包括紫杉烷类化合物，而且包括发现了喜树碱类的拓扑异构酶I抑制剂。从这两个角度可见，有丝分裂驱动蛋白是新抗癌药的有吸引力的靶向。

有丝分裂驱动蛋白是有丝分裂纺锤体装配和功能所必需的酶，但不是其他微管结构的通用部分。有丝分裂驱动蛋白在有丝分裂的所有阶段中发挥重要作用。这些酶是″分子发动机″，它们将通过ATP水解释放出的能量转化为机械力，这样的机械力推动细胞货柜沿着微管定向运动。胜任这种任务的催化结构域是约340氨基酸的致密结构。有丝分裂过程，驱动蛋白使微管组构成为双极结构，该结构就是有丝分裂纺锤体。驱动蛋白介导染色体沿着纺锤体微管运动，并且与有丝分裂的特定阶段有关的有丝分裂纺锤体出现结构改变。有丝分裂驱动蛋白功能的实验性微扰会引起有丝分裂纺锤体的畸形或机能障碍，随后导致细胞周期停止和死亡。

在有丝分裂驱动蛋白中已经被鉴定的是KSP。KSP属于正末端方向微管发动机的进化保守驱动蛋白质亚族，其装配为由反平行同型二聚体组成的双极同型四聚体。在有丝分裂过程中KSP与有丝分裂纺锤体的微管缔合。给人体细胞微量注射抗KSP的抗体可以防止前中期的纺锤极分离，得到单极纺锤体并引起有丝分裂停止和诱导编程性细胞死亡。其他非人的生物体中，KSP和有关的驱动蛋白使反平行微管扎成束并使它们相对于另一者滑动，由此迫使两个纺锤极分开。KSP也可以介导后期B纺锤体的伸长和纺锤极上微管的聚集。

人KSP(也称作HsEg5)已经公开[Blangy等，Cell，83：1159-69(1995)；Whitehead等，Arthritis Rheum.，39：1635-42(1996)；Galgio等，J.Cell Biol.，135：339-414(1996)；Blangy等，J Biol.Chem.，272：19418-24(1997)；Blangy，等，Cell Motil Cytoskeleton，40：174-82(1998)；Whitehead和Rattner，J.Cell Sci.，111：2551-61(1998)；Kaiser，等，JBC274：18925-31(1999)；GenBank注册号：X85137，NM004523和U37426]，并且KSP基因的片段(TRIP5)已经被公开[Lee，等，Mol Endocrinol.，9：243-54(1995)；GenBank注册号L40372]。非洲蟾蜍属KSP同系物(Eg5)以及Drosophila K-LP61F/KRP 130已经有报导。

目前喹唑啉酮类化合物已经被认为是KSP的抑制剂(PCT公报WO01/30768，2001年5月3日)。

有丝分裂驱动蛋白是发现和开发新的有丝分裂化疗剂的有吸引力的靶向。所以，本发明的一个目的在于提供用于抑制一种有丝分裂驱动蛋白KSP的化合物、方法和组合物。

发明概述

本发明涉及二氢吡咯衍生物，它们用于治疗细胞增殖性疾病，用于治疗与KSP驱动蛋白活性有关的障碍，和用于抑制KSP驱动蛋白。本发明的化合物可以由式I的化合物表示：

附图简述

图1化合物2-5的ORTE图

图2化合物3-1的ORTEP图。为了键合图示，大多数的氢原子未表示。

发明详述

本发明的化合物有效抑制有丝分裂驱动蛋白并如式I的化合物所示：

或其药学可接受盐或立体异构体，其中：

a是0或1；

b是0或1；

m是0，1或2；

n是0，1，2或3；

r是0或1；

s是0或1；

t是0，1或2；

u是0或1；

R¹和R²独立地选自：H，(C₁-C₆)烷基，芳基，杂环基和(C₃-C₆)环烷基，任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R³选自：

1)氢；

2)C₁-C₁₀烷基；

3)C₁-C₁₀烷基-O-R^d，

4)C₂-C₁₀链烯基-O-R^d，

5)C₂-C₁₀链炔基-O-R^d，

6)(C₁-C₆-亚烷基)_nC₃-C₈环烷基-O-R^d，

7)C₁-C₁₀烷基-(C＝O)_b-NR^cR^c′，

8)C₂-C₁₀链烯基-(C＝O)_bNR^cR^c′，

9)C₂-C₁₀链炔基-(C＝O)_bNR^cR^c′，

10)(C₁-C₆-亚烷基)_nC₃-C₈环烷基-(C＝O)_bNR^cR^c′，

11)C₁-C₁₀烷基-S(O)_m-R^d，

12)C₂-C₁₀链烯基-S(O)_m-R^d，

13)C₂-C₁₀链炔基-S(O)_m-R^d，

14)(C₁-C₆-亚烷基)_nC₃-C₈环烷基-S(O)_m-R^d，

该烷基，链烯基，链炔基和环烷基任选地被一个或多个选自R⁶的取代基取代；

R⁴独立地选自：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)CO₂H，

4)卤素，

5)CN，

6)OH，

7)O_bC₁-C₆全氟烷基，

8)O_a(C＝O)_bNR⁸R⁹，

9)S(O)_mR^a，

10)S(O)₂NR⁸R⁹，和

11)-OPO(OH)₂；

该烷基，芳基，链烯基，链炔基，杂环基和环烷基任选地被1、2和3个选自R⁷的取代基取代；

R⁵选自：

1)氢；

2)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)_aO_b芳基，

4)CO₂H，

5)卤素，

6)CN，

7)OH，

8)O_bC₁-C₆全氟烷基，

9)O_a(C＝O)_bNR⁸R⁹，

10)S(O)_mR^a，

11)S(O)₂NR⁸R⁹，和

12)-OPO(OH)₂；

R⁶独立地选自：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)C₂-C₁₀链烯基，

4)C₂-C₁₀链炔基，

5)(C＝O)_aO_b杂环基，

6)CO₂H，

7)卤素，

8)CN，

9)OH，

10)_bC₁-C₆全氟烷基，

11)O_a(C＝O)_bNR⁸R⁹，

12)S(O)_mR^a，

13)S(O)₂NR⁸R⁹，

14)氧代，

15)CHO，

16)(N＝O)R⁸R⁹，

17)(C＝O)_aO_bC₃-C₈环烷基，和

18)-OPO(OH)₂；

R⁷选自：

1)(C＝O)_rO_s(C₁-C₁₀)烷基，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，

3)氧代，

4)OH，

5)卤素，

6)CN，

7)(C₂-C₁₀)链烯基，

8)(C₂-C₁₀)链炔基，

9)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

10)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-N(R^b)₂，

13)C(O)R^a，

14)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

15)C(O)H，

16)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，和

17)(C＝O)_rN(R^b)₂，

18)S(O)_mR^a，

19)S(O)₂N(R^b)₂；和

20)-OPO(OH)₂；

该烷基，链烯基，链炔基，环烷基，芳基，亚烷基和杂环基任选地被至多3个选自R^b，OH，(C₁-C₆)烷氧基，卤素，CO₂H，CN，O(C＝O)C₁-C₆烷基，氧代，NO₂和N(R^b)₂的取代基取代；

R⁸和R⁹独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C₁₀链炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b2，

该烷基，环烷基，芳基，杂环基，链烯基，和链炔基任选地被1、2和3个选自R⁷的取代基取代，或

R⁸和R⁹可以与其所连的氮一起构成单环或双环杂环同时各环具有3-7员和除该氮以外，任选地含有1或2个选自N、O或S的附加杂原子，该单环或双环杂环任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R¹⁰和R¹¹独立地选自：F和-CH₂F；

R¹²和R¹³独立地选自：H和-CH₂F；

R^ox不存在或是氧代；

R^a独立地选自：(C₁-C₆)烷基，(C₃-C₆)环烷基，芳基或杂环基，任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R^b独立地选自：H，(C₁-C₆)烷基，芳基，杂环基，(C₃-C₆)环烷基，(C＝O)OC₁-C₆烷基，(C＝O)C₁-C₆烷基，(C＝O)芳基，(C＝O)杂环基，(C＝O)NR^eR^e′或S(O)₂R^a，任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R^c和R^c′独立地选自：H，(C₁-C₆)烷基，芳基，NH₂，OH，OR^a，-烷基-OH，-(C₁-C₆)烷基-O-(C₁-C₆)烷基，(C＝O)OC₁-C₆烷基，(C＝O)C₁-C₆烷基，(C＝O)芳基，(C＝O)杂环基，(C＝O)NR^eR^e′，S(O)₂R^a和-烷基-N(R^b)₂，其中该烷基任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；或

R^c和R^c′可以与其所连的氮一起构成单环或双环杂环同时各环具有3-7员和除该氮以外，任选地含有1或2个选自N、O或S的附加杂原子，该单环或双环杂环任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R^d选自：H，(C₁-C₆)烷基，-(C₂-C₆)烷基-OH，-(C₁-C₆)烷基-O-(C₁-C₆)烷基和-(C₁-C₆)烷基-N(R^b)₂，其中该烷基任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R^e和R^e′独立地选自：H，(C₁-C₆)烷基，芳基，杂环基和(C₃-C₆)环烷基，任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；或

R^e和R^e′可以与其所连的氮一起构成单环或双环杂环同时各环具有3-7员和除该氮以外，任选地含有1或2个选自N、O或S的附加杂原子，该单环或双环杂环任选地被1、2和3个选自R⁷的取代基取代。

本发明的化合物有效抑制有丝分裂驱动蛋白并如式II的化合物所示：

或其药学可接受盐或立体异构体，

其中：

a是0或1；

b是0或1；

m是0，1，或2；

n是0，1，2或3；

r是0或1；

s是0或1；

t是0或1；

R³选自：

1)氢；

2)C₁-C₁₀烷基；

3)C₁-C₁₀烷基-O-R^d，

4)C₂-C₁₀链烯基-O-R^d，

5)C₂-C₁₀链炔基-O-R^d，

6)(C₁-C₆-亚烷基)_nC₃-C₈环烷基-O-R^d，

7)C₁-C₁₀烷基-(C＝O)_b-NR^cR^c′，

8)C₂-C₁₀链烯基-(C＝O)_bNRCR^c′，

9)C₂-C₁₀链炔基-(C＝O)_bNR^cR^c′，

10)(C₁-C₆-亚烷基)_nC₃-C₈环烷基-(C＝O)_bNR^cR^c′，

11)C₁-C₁₀烷基-S(O)_m-R^d，

12)C₂-C₁₀链烯基-S(O)_mR^d，

13)C₂-C₁₀链炔基-S(O)_m-R^d，

14)(C₁-C₆-亚烷基)_nC₃-C₈环烷基-S(O)_mR^d，

R⁴独立地选自：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)CO₂H，

4)卤素，

5)CN，

6)OH，

7)O_bC₁-C₆全氟烷基，

8)O^a(C＝O)_bNR⁸R⁹，

9)S(O)_mR^a，

10)S(O)₂NR⁸R⁹，

R⁵选自：

1)氢；

2)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)_aO_b芳基，

4)CO₂H，

5)卤素，

6)CN，

7)OH，

O_bC₁-C₆全氟烷基，

9)O_a(C＝O)_bNR⁸R⁹，

10)S(O)_mR^a，

11)S(O)₂NR⁸R⁹，和

12)-OPO(OH)₂；

R⁶独立地选自：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)C₂-C₁₀链烯基，

4)C₂-C₁₀链炔基，

5)(C＝O)_aO_b杂环基，

6)CO₂H，

7)卤素，

8)CN，

9)OH，

10)O_bC₁-C₆全氟烷基，

11)O_a(C＝O)_bNR⁸R⁹，

12)S(O)_mR^a，

13)S(O)₂NR⁸R⁹，

14)氧代，

15)CHO，

16)(N＝O)R⁸R⁹，

17)(C＝O)_aO_bC₃-C₈环烷基，和

18)-OPO(OH)₂；

该烷基，芳基，链烯基，链炔基，杂环基和环烷基任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R⁷选自：

1)(C＝O)_rO_s(C₁-C₁₀)烷基，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，

3)氧代，

4)OH，

5)卤素，

6)CN，

7)(C₂-C₁₀)链烯基，

8)(C₂-C₁₀)链炔基，

9)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

10)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-N(R^b)₂，

13)C(O)R^a，

14)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

15)C(O)H，

16)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，

17)C(O)N(R^b)₂，

18)S(O)_mR^a，

19)S(O)₂N(R^b)₂；和

20)-OPO(OH)₂；

R⁸和R⁹独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C2-C10链炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b2，

该烷基，环烷基，芳基，杂环基，链烯基和链炔基任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代，或

R¹⁰选自：F和-CH₂F；

R¹³选自：H和-CH₂F，

条件是如果t是1，则R¹³是H；

R^ox不存在或是氧代；

R^c和R^c′独立地选自：H，(C₁-C₆)烷基，芳基，NH₂，OH，OR^a，-(C₁-C₆)烷基-OH，-(C₁-C₆)烷基-O-(C₁-C₆)烷基，(C＝O)OC₁-C₆烷基，(C＝O)C₁-C₆烷基，(C＝O)芳基，(C＝O)杂环基，(C＝O)NR^eR^e′，S(O)₂R^a和-(C₁-C₆)烷基-N(R^b)₂，其中该烷基任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；或

R^c和R^c′可以与其所连的氮一起构成单环或双环杂环同时各环内具有3-7员和除该氮以外，任选地含有1或2个选自N、O或S的附加杂原子，该单环或双环杂环任选地被1、2和3个选自R⁷的取代基取代；

R^e和R^e′独立地选自：H，(C₁-C₆)烷基，芳基，杂环基和(C₃-C₆)环烷基，任选地被1、2和3个选自R⁷的取代基取代；或

在本发明的实施方式中该化合物如式III的化合物所示：

或其药学可接受盐或立体异构体，其中：

a是0或1；

b是0或1；

m是0，1或2；

n是0，1或2；

r是0或1；

s是0或1；

R¹和R²独立地选自：H，(C₁-C₆)烷基，芳基和(C₃-C₆)环烷基，任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R⁴独立地选自：

1)卤素，

2)OH，

3)O_bC₁-C₆全氟烷基，

R⁵选自：

1)氢，

2)卤素，

3)OH，

4)O_bC₁-C₆全氟烷基，

R⁷选自：

1)(C＝O)_rO_s(C₁-C₁₀)烷基，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，

3)氧代，

4)OH，

5)卤素，

6)CN，

7)(C₂-C₁₀)链烯基，

8)(C₂-C₁₀)链炔基，

9)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

10)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-N(R^b)₂，

13)C(O)R^a，

14)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

15)C(O)H，

16)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，和

17)C(O)N(R^b)₂，

18)S(O)_mR^a，和

19)S(O)₂N(R^b)₂；

R⁸和R⁹独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C₁₀链炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b2，

该烷基，环烷基，芳基，杂环基，链烯基和链炔基任选地被1、2和3个选自R⁷的取代基取代，或

R⁸和R⁹可以与其所连的氮一起构成单环或双环杂环同时各环具有3-7员和除该氮以外，任选地含有1或2个选自N、O或S的附加杂原子，该单环或双环杂环任选地被1、2和3个选自R⁷的取代基取代；

R^c和R^c′独立地选自：H，(C₁-C₆)烷基，芳基，NH₂，OH，OR^a，-烷基-OH，-(C₁-C₆)烷基-O-(C₁-C₆)烷基，(C＝O)OC₁-C₆烷基，(C＝O)C₁-C₆烷基，(C＝O)芳基，(C＝O)杂环基，(C＝O)NR^eR^e′，S(O)₂R^a和-(C₁-C₆)烷基-N(R^b)₂，其中该烷基任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；或

本发明的另一实施方式是如式IV的化合物所示：

或其药学可接受盐或立体异构体，其中：

a是0或1；

b是0或1；

m是0，1或2；

r是0或1；

s是0或1；

R¹和R²独立地选自：H和(C₁-C₆)烷基，任选地被1、2或3个选自R⁷的取代基取代；

R⁴独立地选自：

1)卤素，

2)OH，

3)O_bC₁-C₆全氟烷基，

R⁷选自：

1)(C＝O)_rO_s(C₁-C₁₀)烷基，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，

3)氧代，

4)OH，

5)卤素，

6)CN，

7)(C₂-C₁₀)链烯基，

8)(C₂-C₁₀)链炔基，

9)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

10)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-N(R^b)₂，

13)C(O)R^a，

14)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

15)C(O)H，

16)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，和

17)C(O)N(R^b)₂，

18)S(O)_mR^a，和

19)S(O)₂N(R^b)₂；

R⁸和R⁹独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C₁₀链炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b2，

本发明的另一实施方式如式V的化合物所示：

或其药学可接受盐或立体异构体，其中：

R¹和R²独立地选自：H和(C₁-C₆)烷基。

本发明的另一实施方式如式VI的化合物所示：

或其药学可接受盐或立体异构体，其中：

R¹和R²独立地选自：H和(C₁-C₆)烷基。

本发明的化合物的具体实例包括：

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(2R，4R)-2-(氟甲基)-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(2S，4S)-2-(氟甲基)-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4R)-3-氟-1-甲基-1-桥氧哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4R)-3-氟哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4R)-3-氟-1-异丙基哌啶4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-3-氟哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺或其药学可接受盐或立体异构体。

本发明的化合物的特定实例是：

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(2R，4R)-2-(氟甲基)-1-甲基哌啶-4-基]-2- (羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺或其药学可接受盐或立体异构体。

本发明的化合物本发明的化合物可以具有不对称中心、手性轴和手性平面(如E.L.Eliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of CarbonCompounds，John Wiley & Sons，New York，1994，1119-1190页所述)，并且出现外消旋体、外消旋混和物和单独的非对映异构体，并且所有可能的异构体和混和物，包括光学异构体，这些立体异构体均属于本发明。此外，本文公开的化合物可以存在互变异构体并且两种互变异构体属于本发明的范围内，即使只表现出一种互变异构结构。

当任何可变部分(例如R⁴，R⁷，R¹⁰等)在任何结构只出现一次以上时，其在各种情况中的定义彼此独立存在。另外，取代基和可变部分的组合也是允许的，只要这样的组合能够得到稳定化合物。从取代基延伸到环系内的线条代表可以与任意可取代环原子相连的键。如果该环系是多元环，该键应只与邻近环的任何适当碳原子相连。

应理解本发明化合物上的取代基和取代方式可以由本领域普通技术人员选择，从而提供化学上稳定且可以很容易利用本领域已知技术以及下文所述的那些方法、从容易获得的起始原料合成的化合物。如果取代基本身被一个以上的基团取代，应理解这样的多个基团可以位于同一碳上或在不同的碳上，只要得到稳定的结构即可。短语″任选地被一个或多个取代基取代″应当等同于短语″任选地被至少一个取代基取代″，并且在此类情况中优选的实施方式应是具有0-3个取代基。

在此使用的″烷基″包括具有特定数目的碳原子的支链或直链饱和脂族烃基。例如，C₁-C₁₀，如″C₁-C₁₀烷基″中定义为包括直链或支链排列的具有1，2，3，4，5，6，7，8，9或10个碳的基团。例如，″C₁-C₁₀烷基″具体包括甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，叔丁基，异丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基，癸基等。术语″环烷基″是指具有特定数目的碳原子的单环饱和脂族烃基。例如，″环烷基″包括：环丙基，甲基-环丙基，2，2-二甲基-环丁基，2-乙基-环戊基，环己基等。在本发明的实施方式中，术语″环烷基″包括上述的基团并且进一步包括单环不饱和脂族烃基。例如，″环烷基″在该实施方式中被定义为包括环丙基，甲基-环丙基，2，2-二甲基-环丁基，2-乙基-环戊基，环己基，环戊烯基，环丁烯基等。

术语″亚烷基″是指具有特定数目的碳原子的烃二基。例如，″亚烷基″包括-CH₂-，-CH₂CH₂-等。

当在短语″C₁-C₆芳烷基″和″C₁-C₆杂芳烷基″中使用时，术语″C₁-C₆″是指该基团的烷基部分而不包括该基团的芳基和杂芳基部分中的原子数目。

″烷氧基″代表经氧桥连接的具有指定数目碳原子的环状或非环状烷基。所以″烷氧基″包括上述烷基和环烷基的定义。

如果没有规定碳原子的数目，术语″链烯基″是指含有2-10个碳原子和至少一个碳-碳双键的直链、支链或环状的非芳族烃基。优选存在一个碳-碳双键，并且可以存在至多四个非芳族碳-碳双键。所以，″C₂-C₆链烯基″是指具有2-6个碳原子的链烯基。链烯基包括乙烯基，丙烯基，丁烯基，2-甲基丁烯基和环己烯基。链烯基的直链、支链或环状部分可以含有双键，并且如果图示出被取代链烯基，它可以被取代。

术语″链炔基″是指含有2-10个碳原子和至少一个碳-碳叁键的直链、支链或环状的非芳族烃基。可以存在至多碳-碳叁键。所以，″C₂-C₆链炔基″是指具有2-6个碳原子的链炔基。链炔基包括乙炔基，丙炔基，丁炔基，3-甲基丁炔基等。链炔基的直链、支链或环状部分可以含有叁键，并且如果划出被取代链炔基，它可以被取代。

在某些情况中，取代基可以用一定范围的碳原子定义，该范围包括0，例如(C₀-C₆)亚烷基-芳基。如果芳基是苯基，该定义应包括苯基本身以及-CH₂Ph，-CH₂CH₂Ph，CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)Ph等。

在此使用的″芳基″是指任何各环含有至多7个原子的稳定单环或双环碳环，其中至少一个环是芳族的。此类芳基组成的实例包括苯基，萘基，四氢萘基，二氢茚基和联苯。在其中芳基取代基是双环且一个环是非芳族的情况中，应理解连接应当通过该芳环。

在此使用的术语杂芳基表示各环含有至多7个原子的稳定单环或双环环，其中至少一个环是芳族的且含有1-4个选自O、N和S的杂原子。该定义范围内的杂芳基包括但不限于：吖啶基，咔唑基，噌啉基，喹喔啉基，吡唑基，吲哚基，苯并三唑基，呋喃基，噻吩基，苯并噻吩基，苯并呋喃基，喹啉基，异喹啉基，恶唑基，异恶唑基，吲哚基，吡嗪基，哒嗪基，吡啶基，嘧啶基，吡咯基，四氢喹啉。如下面杂环的定义，″杂芳基″还被理解为包括任何含氮杂芳基的N-氧化物衍生物。在其中杂芳基取代基是双环且一个环是非芳族或不含杂原子时，理解为分别通过芳环或通过含杂原子的环连接。

在此使用的术语″杂环″或″杂环基″是指含有1-4个选自O、N和S的杂原子的5-至10-员芳族或非芳族杂环，并且包括双环基团。″杂环基″包括上述提及的杂芳基，以及其二氢和四氢类似物。″杂环基″的其他实例包括，但不限于下列：苯并咪唑基，苯并呋喃基，苯并呋咱基，苯并吡唑基，苯并三唑基，苯并噻吩基，苯并恶唑基，咔唑基，咔啉基，噌啉基，呋喃基，咪唑基，吲哚啉基，吲哚基，吲嗪基，吲唑基，异苯并呋喃基，异吲哚基，异喹啉基，异噻唑基，异恶唑基，萘吡啶基，恶二唑基，恶唑基，恶唑啉基，异恶唑啉基，氧杂环丁烷基，吡喃基，吡嗪基，吡唑基，哒嗪基，吡啶并吡啶基，哒嗪基，吡啶基，嘧啶基，吡咯基，喹唑啉基，喹啉基，喹喔啉基，四氢吡喃基，四氢噻喃基，四氢异喹啉基，四唑基，四唑并吡啶基，噻二唑基，噻唑基，噻吩基，三唑基，氮杂环丁烷基，1，4-二恶烷基，六氢氮杂卓基，哌嗪基，哌啶基，吡啶-2-酮基，吡咯烷基，吗啉基，硫代吗啉基，二氢苯并咪唑基，二氢苯并呋喃基，二氢苯并噻吩基，二氢苯并恶唑基，二氢呋喃基，二氢咪唑基，二氢吲哚基，二氢异恶唑基，二氢异噻唑基，二氢恶二唑基，二氢恶唑基，二氢吡嗪基，二氢吡唑基，二氢吡啶基，二氢嘧啶基，二氢吡咯基，二氢喹啉基，二氢四唑基，二氢噻二唑基，二氢噻唑基，二氢噻吩基，二氢三唑基，二氢氮杂环丁烷基，亚甲基二氧基苯甲酰基，四氢呋喃基和四氢噻吩基，和其N-氧化物。杂环基取代基的连接可以通过碳原子或杂原子实现。

优选地，杂环选自2-氮杂卓酮，苯并咪唑基，2-二氮杂卓酮，咪唑基，2-咪唑烷酮，吲哚基，异喹啉基，吗啉基，哌啶基，哌嗪基，吡啶基，吡咯烷基，2-哌啶酮(piperidinone)，2-嘧啶酮，2-吡咯烷酮，喹啉基，四氢呋喃基，四氢异喹啉基和噻吩基。

本领域技术人员应理解，在此使用的″卤代″或″卤素″包括氯，氟，溴和碘。

该烷基，链烯基，链炔基，环烷基，芳基，杂芳基和杂环基取代基可以被取代或未取代，除非另外定义。例如，(C₁-C₆)烷基可以被1、2或3个选自OH，氧代，卤素，烷氧基，二烷基氨基，或杂环基如吗啉基，哌啶基等取代。在这样的情况中，如果一个取代基是氧代并且其他取代基是OH时，则定义中包括下列：-C＝O)CH₂CH(OH)CH₃，-(C＝O)OH，-CH₂(OH)CH₂CH(O)等。

在某些情况中，R⁸和R⁹，R^c和R^c′和R^f和R^f’被定义为它们可以与其所连的氮一起构成单环或双环杂环同时各环具有5-7员，并且除该氮以外任选地含有1或2个选自N、O或S的附加杂原子，该杂环任选地被一个或多个选自R⁷的取代基取代。由此可以形成的杂环的实例包括，但不限于，记住该杂环任选地被一个或多个(并且在一实施方式中，是1、2或3个)选自R⁷的取代基取代：

在某些情况中，R^d和R^d′被定义为它们可以与其所连的磷一起构成单环杂环同时该环内具有5-7员，并且除该氮以外任选地含有1或2个选自N、O或S的附加杂原子，该杂环任选地被一个或多个选自R⁷的取代基取代。由此可以形成的杂环的实例包括，但不限于，记住该杂环任选地被一个或多个(并且在一实施方式中，是1、2或3个)选自R⁷的取代基取代：

在一实施方式中，R¹选自H和C₁-C₆烷基。

在一实施方式中，R²选自H和C₁-C₆烷基。

在一实施方式中，R¹²是H。

在一实施方式中，R³选自-C₁-C₁₀烷基-O-Rg和-C₁-C₁₀烷基-NR^fR^f′，任选地被1-2个选自R¹⁰的取代基取代。

在一实施方式中，R⁴独立地选自卤素和OH。

在另一实施方式中，n是2和R⁴独立地选自卤素。

在一实施方式中，R⁵独立地选自H，卤素和OH。

在一实施方式中，u是0。

在一实施方式中，t是1，R¹⁰是氟和R¹³是H。

在另一实施方式中，t是0和R¹³是氟甲基。

在一实施方式中，R^ox不存在。

本发明包括游离形式的式I的化合物，以及其药学可接受盐和立体异构体。本文例举的一些特定化合物是胺化合物的质子化盐。术语“游离形式”是指非盐形式的胺类化合物。所述的药学可接受盐不但包括特定化合物例举的盐，而且包括所有游离形式的式I化合物的典型药学可接受盐。特定盐化合物的游离形式可以通过本领域已知方法分离。例如，游离形式可以通过用适当稀释的碱水溶液如稀释的NaOH、碳酸钾、氨和碳酸氢钠水溶液处理来制成。游离形式在某些物理性质，如在极性溶剂中的溶解度上，可以不同于其各自的盐形式，但基于本发明的目的该酸和碱盐在药学上等同于其各自的游离形式。

本发明化合物的药学可接受盐可以从含有碱性或酸性部分的本发明化合物、通过常规方法合成。通常，碱性化合物的盐或者通过离子交换色谱制备，或者通过游离碱与化学计量量或过量的所需成盐无机酸或有机酸、在适当溶剂或溶剂的不同组合中反应来制成。同样地，酸性化合物的盐通过与适当无机碱或有机碱反应来制成。

所以，本发明化合物的药学可接受盐包括通过本发明碱性化合物与无机酸或有机酸反应生成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规无毒盐包括衍生自无机酸的那些，无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等，以及从有机酸制备的盐，例如乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯基乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙磺酸、三氟乙酸等。

当本发明的化合物是酸性时，适当的″药学可接受盐″是指从药学可接受无毒碱制备的盐，包括无机碱和有机碱。衍生自无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、锰盐、亚锰、钾、钠和锌等。特别优选铵、钙、锂、镁、钾和钠盐。从药学可接受有机无毒碱制备的盐包括一级、二级和三级胺的盐，包括得自天然取代的胺，环胺，和碱性离子交换树脂，例如精氨酸，甜菜碱，咖啡因，胆碱，N，N1-二苄基亚乙基二胺，二乙胺，2-二乙基氨基乙醇，2-二甲基氨基乙醇，乙醇胺，乙二胺，N-乙基-吗啉，N-乙基哌啶，葡糖胺，氨基葡萄糖，组氨酸，hydrabamine，异丙胺，二环己基胺，赖氨酸，甲基葡糖胺，吗啉，哌嗪，哌啶，聚胺树脂，普鲁卡因，嘌呤类，可可碱，三乙胺，三甲胺，三丙胺，氨丁三醇等。当本发明的化合物是酸性时，术语″游离形式″是指其非盐形式的化合物，其酸性官能团仍然呈质子化。

上述药学可接受盐和其他典型药学可接受盐的制备较全面地公开在Berg等的″Pharmaceutical Salts″J.Pham.Sci.，1977：66：1-19中。

还注意，本发明的化合物可能内盐或两性离子，因为在生理条件下化合物中的脱质子酸性部分例如羧基可以是阴离子，并且该电荷可能被质子化或烷基化的碱性部分例如季氮原子的阳离子电荷在内部平衡掉。

CDI	1，1′-羰基二咪唑
CDI	1，1′-羰基二咪唑	CSPHPLC	手性固相高效液体色谱
DAST	(二乙基氨基)三氟化硫	CSPHPLC	手性固相高效液体色谱
DAST	(二乙基氨基)三氟化硫	DCE	1，2-二氯乙烷
DCM	二氯甲烷	DCE	1，2-二氯乙烷
DCM	二氯甲烷	DMF	二甲基甲酰胺
DMSO	二甲基亚砜	DMF	二甲基甲酰胺
DMSO	二甲基亚砜	EtOAc	乙酸乙酯
IPAC	乙酸异丙酯	EtOAc	乙酸乙酯
IPAC	乙酸异丙酯	LAH	氢化锂铝
LiHMDS	六甲基二硅叠氮化(disilazide)锂	LAH	氢化锂铝
LiHMDS	六甲基二硅叠氮化(disilazide)锂	MsCl	甲磺酰氯
NaHMDS	六甲基二硅叠氮化钠	MsCl	甲磺酰氯
NaHMDS	六甲基二硅叠氮化钠	NOE	核欧沃豪斯效应
PTC	相转移催化剂	NOE	核欧沃豪斯效应
PTC	相转移催化剂	TBSC1	叔丁基二甲基甲硅烷基氯
TEA	三乙胺	TBSC1	叔丁基二甲基甲硅烷基氯
TEA	三乙胺	TFA	三氟乙酸
THF	四氢呋喃	TFA	三氟乙酸

除了文献中已知的或试验方法中例举的标准处理方法以外，本发明的化合物可以利用下列路线所示的反应制备。下列示例路线不限于所列的化合物或任何举例目的所使用的特定取代基。路线中所示的取代基编号不一定与权利要求书中所用的有关，并且常常是为了清楚，表示为一个取代基与化合物相连，其中在上式I的定义中允许多个取代基。

路线

如路线A所示，关键的2，2-二取代二氢吡咯中间体A-8可以得自容易获得的适当取代的苯基甘氨酸。按照Van Betsbrugge等(Tetrahedron，1997，53，9233-9240)所述的方法制备α-烯丙基-α-苯基甘氨酸A-3。酯的还原和用羰基二咪唑环化得到中间体A-4。烯丙型烯烃的钌氧化、随后酯的形成和氮的烷基化作用得到中间体A-5。环化和脱羧反应得到中间体A-6。环羰基随后可以用于掺入适当取代的苯基部分。后续皂化和氧化保护反应得到饱和的中间体A-8。A-8的对映异构体可以经常利用手性色谱技术分离。环氮随后可以与光气反应制备活化羰基氯化物A-9。

路线B举例说明氟化氨基哌啶B-5的制备，从N-饱和的哌啶酮。该cis和trans非对映异构体对通常可以通过硅胶色谱分离，并且该对映异构体经常可以利用手性色谱技术分离。

如路线C所示，该氟化氨基哌啶随后与二氢吡咯中间体A-9反应得到本发明化合物C-1。

路线D举例说明2-氟甲基-4-氨基哌啶化合物的制备和那些基团引入到本发明的化合物。应当注意，中间体D-3的侧链羟基的复合物置换常常得到两种预期的中间体D-4和环同系化合物D-5。这些中间体化合物可以通过硅胶色谱分离。

路线E举例说明2-氟甲基-3-氨基哌啶化合物的另一种制备方法，其中不生成7员环立体异构体。

如路线F和G所示，A-9的羟基部分可以用多种试剂进行烷基化。

如路线H所示，化合物C-1的羟基用适当取代的胺的置换反应经过相应的醛H-1，随后还原烷基化，得到本发明化合物H-2。

路线I举例说明本发明化合物的2-一取代二氢吡咯的合成。中间体I-7的甲基咪唑部分与氨基哌啶的制备和置换得到I-8。

路线J举例说明2-烷基侧链的同系化反应得到本发明化合物J-3和J-4。

路线K-M进一步举例说明从C-2烷基侧链和中间体醛H-1开始的修饰。所以在路线K中，醛H-1用格氏试剂例如烷基格氏试剂处理，得到羟基化合物K-1。

路线L举例说明C-2侧链的同系化。醛H-1用膦基乙酸酯处理并且偶联键随后还原生成酯L-1。后续酯的还原和醇的氧化得到醛L-3，其可以还原烷基化适当取代的胺生成本发明化合物L-4。L-4的进一步烷基化反应也如图所示。

路线M举例说明C-2侧链的转化并且羟基部分随后经过用叠氮化钠置换相应的三氟甲磺酸酯转化为胺和。

路线N举例说明将二氟甲基部分引入到C-2侧链。

路线A

路线B

路线C

路线D

路线E

路线F

路线G

路线H

路线I

路线J

路线K

路线L

路线M

路线N

实用性

发现本发明的化合物可在不同的应用中使用。本领域技术人员应懂得，可以以多种方式改变有丝分裂；也就是说，通过提高或降低有丝分裂途径中组分的活性可以影响有丝分裂。换种说法，通过干扰平衡，或通过抑制或激活某些组分可以影响(例如中断)有丝分裂。类似方法可以用于改变有丝分裂。

在一优选实施方式中，本发明的化合物用于调节有丝分裂纺锤体的形成，由此导致长时间的细胞周期停止在有丝分裂。此处所谓的″调节″是指改变有丝分裂纺锤体的形成，包括增加和减少纺锤体的形成。此处所谓的″有丝分裂纺锤体形成″是指通过有丝分裂驱动蛋白作用下微管组构为两极结构的组构化。此处所谓的″有丝分裂纺锤体功能障碍″是指有丝分裂停止且单极纺锤体的形成。

本发明的化合物有效结合和/或调节有丝分裂驱动蛋白的活性。在一优选实施方式中，该有丝分裂驱动蛋白是bimC亚族的有丝分裂驱动蛋白的一员(如美国专利号6,284,480，第5栏所述)。在另一优选实施方式中，所述的有丝分裂驱动蛋白是人体KSP，尽管来源于其他生物的有丝分裂驱动蛋白的活性也可以通过本发明化合物调节。本文中，调节是指增加或减少纺锤极分离，导致有丝分裂纺锤极的变性，即展开，或另外引起有丝分裂纺锤体的形态紊乱。出于这样的目的，KSP的定义中还包括KSP的变体和/或片段。此外，其他有丝分裂驱动蛋白可以用本发明的化合物抑制。

本发明的化合物可有效治疗细胞增殖性疾病。可以利用本发明提供的方法和组合物治疗的疾病状态包括，但不限于，癌症(在下文中讨论)，自身免疫性疾病，关节炎，移植排斥，炎性肠病，医学处理(包括外科手术、血管成形术等)后引起的增生。在某些情况中应理解，细胞可能不处于过度-或低下-增殖状态(异常状态)，但仍然需要治疗。例如，在伤口愈合过程中，细胞可能“正常”增殖，但可能希望增殖作用增强。同样地，如上所述，在农业领域中，细胞可能处于″正常″状态，但可以希望增殖性调节，通过直接提高农作物的生长，或者通过抑制对农作物存在不利影响的植物或生物的生长来增加作物的产量。所以，在一实施方式中，本发明包括应用于患有或即将患有上述任一疾病或病症的细胞或个体。

本文提供的化合物、组合物和方法特别适合于治疗癌症，包括实体瘤例如皮肤、乳腺、脑部、子宫颈癌、睾丸癌等。更加具体地，可以通过本发明的化合物、组合物和方法治疗的癌症包括，但不限于：心血管：肉瘤(血管肉瘤，纤维肉瘤，横纹肌肉瘤，脂肉瘤)，粘液瘤，横纹肌瘤，纤维瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；肺部：支气管原癌(鳞状细胞，未分化小细胞，未分化大细胞，腺癌)，肺泡(细支气管)癌，支气管性腺瘤，肉瘤，淋巴瘤，软骨瘤错构瘤，间皮瘤；胃肠道：食道(鳞状细胞癌，腺癌，平滑肌肉瘤，淋巴瘤)，胃(癌，淋巴瘤，平滑肌肉瘤)，胰腺(导管腺癌，胰岛瘤，glucagonoma，胃瘤，类癌瘤，vipoma)，小肠(腺癌，淋巴瘤，类癌瘤，卡波齐氏肉瘤，平滑肌瘤，血管瘤，脂肪瘤，神经纤维瘤，纤维瘤)，大肠(腺癌，管状腺瘤，绒毛状腺瘤，错构瘤，平滑肌瘤)；泌尿生殖道：肾脏(腺癌，Wilm氏瘤[肾胚细胞瘤]，淋巴瘤，白血病)，膀胱和尿道(鳞状细胞癌，过渡型细胞癌，腺癌)，前列腺(腺癌，肉瘤)，睾丸(精原细胞瘤，畸胎瘤，绒毛膜癌，肉瘤，间质细胞癌，纤维瘤，纤维腺瘤，腺瘤样肿瘤，脂肪瘤)；肝脏：肝细胞瘤(肝细胞癌)，胆管癌，肝胚细胞瘤，血管肉瘤，肝细胞腺瘤，血管瘤；骨骼：骨原性肉瘤(骨肉瘤)，纤维肉瘤，恶性纤维组织细胞瘤，软骨肉瘤，尤因氏肉瘤，恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)，多发性骨髓瘤，恶性巨细胞瘤脊索瘤，osteochronfroma，骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统：头颅(骨瘤，血管瘤，肉芽肿，黄瘤，畸形性骨炎)，脑脊膜(脑脊膜瘤，脑脊膜肉瘤，神经胶质瘤)，脑(星形细胞瘤，成神经管细胞瘤，神经胶质瘤，室管膜瘤，germinoma[松果体瘤]，多形性成胶质细胞瘤，间胶质瘤，神经鞘瘤，成视网膜细胞瘤，先天性肿瘤)，脊髓神经纤维瘤，脑脊膜瘤，肉瘤)；妇科学：子宫(子宫内膜癌)，子宫颈(子宫颈癌，肿瘤前子宫颈发育异常)，卵巢(卵巢癌[浆液囊腺癌，粘液囊腺癌，未分类癌]，粒层-卵巢泡膜细胞瘤，男性细胞瘤，无性细胞瘤，恶性畸胎瘤)，外阴(扁平细胞癌，上皮癌，腺癌，纤维肉瘤，黑素瘤)，阴道(明细胞癌，扁平细胞癌，葡萄样肉瘤(胚胎横纹肌肉瘤)，输卵管(癌)；血液学：血液(骨髓白血病[急性和慢性]，急性成淋巴细胞性白血病，慢性成淋巴细胞性白血病，脊髓增殖性疾病，多发性骨髓瘤，脊髓发育不良综合征)，何杰金氏病，非何杰金氏淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；皮肤：恶性黑素瘤，基底细胞癌，鳞状细胞癌，卡波齐氏肉瘤，moles dysplastic nevi，脂肪瘤，血管瘤，皮肤纤维瘤，瘢痕瘤，牛皮癣；和肾上腺：成神经细胞瘤。所以，在此使用的术语″癌细胞″包括患有上述任一确定病症的细胞。

本发明的化合物还可以通过调节bimC驱动蛋白亚组的真菌成员的活性用作抗镇静剂，如美国专利号6,284,480所述。

本发明的化合物可以单独或者优选与药学可接受载体、赋形剂或稀释剂组合，以药物组合物，按照标准药学实践施用给哺乳动物，优选人体。该化合物可以经口服或非肠道给药，包括静脉内，肌肉内，腹膜内，皮下，直肠和局部的给药途径。

在此使用的术语″组合物″包括含有特定量的特定组分的产品，以及任何直接或间接从特定量的特定组分的组合获得的产品。

含有活性成分的药物组合物可以是适合口服使用的形式，例如，成为片剂，菱形锭剂，水或油混悬液，可分散散剂或颗粒剂，乳剂，硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。用于口服使用的组合物可以按照制造药物组合物采用的已知方法来制备，并且所述的组合物可以含有一种或多种选自甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的试剂从而提供药学上美观和可口的制剂。片剂含有与适合制备片剂的药学可接受赋形剂相互混和的活性成分。这些赋形剂可以例如，惰性稀释剂，例如碳酸钙，碳酸钠，乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如，微晶纤维素，交联羧甲基纤维素钠，玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉，明胶，聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯胶，和润滑剂，例如，硬脂酸镁，硬脂酸或滑石粉。片剂可以未包衣，或者它们可以通过已知技术将其包衣以掩蔽药物的不快味道或者延迟在胃肠道内的崩解和吸收并由此获得更长时间的缓释作用。例如，可以采用水溶性味觉掩蔽材料例如羟丙基-甲基纤维素或羟丙基-纤维素，或者延时材料例如乙基纤维素，醋酸纤维素buryrate。

口服使用的制剂也可以作为硬明胶胶囊存在，其中活性成分与惰性固体稀释剂混和，该惰性固体稀释剂是例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土，或作为软明胶胶囊存在，其中该活性成分与水或油性介质如花生油、液体石蜡或橄榄油混和。

含水混悬液含有与适合制备水混悬液的赋形剂混和在一起的活性物质。该赋形剂为助悬剂，例如羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟丙基甲基-纤维素，藻酸钠，聚乙烯-吡咯烷酮，黄芪胶和阿拉伯胶；分散或湿润剂可以是天然磷脂，例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷和长链脂肪醇例如十七碳乙烯-氧基鲸蜡醇的缩合产物，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨糖醇一油酸酯，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇一油酸酯。含水混悬液还可以含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种矫味剂，和一种或多种甜味剂，例如蔗糖，糖精或天冬甜素。

油性混悬液可以通过将活性成分悬浮在植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油或矿物油例如液体石蜡中来配制。油性混悬液可以含有增稠剂，例如蜂蜡，硬石蜡或鲸蜡醇。可以加入甜味剂例如上述那些，并加入矫味剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可以通过加入抗氧剂例如丁基羟基苯甲醚或α-生育酚来防腐。

适合通过加入水制成水混悬液的可分散粉末剂和颗粒剂是将活性成分与分散或湿润剂、混悬剂和一种或多种防腐剂混和。适当的分散或湿润剂和助悬剂例如是上述已经提及的那些。其他赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂也可以存在。这些组合物可以通过加入抗氧剂例如抗坏血酸来防腐

本发明的药物组合物还可以是水包油乳液的形式。油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油，或矿物油，例如液体石蜡和这些的混和物。适当的润滑剂可以是天然树胶，例如阿拉伯胶或黄芪胶，天然磷脂，例如大豆卵磷脂，和衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇一油酸酯，该偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧化乙烯脱水山梨糖醇一油酸酯。乳液还可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。

糖浆剂和酏剂可以用甜味剂配制，例如甘油，丙二醇，山梨糖醇或蔗糖。此类制剂还可以含有缓和剂、防腐剂、矫味剂和着色剂和抗氧剂。

该药物组合物可以是灭菌可注射水溶液的形式。在可接受载体和溶剂中可以使用的是水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。

灭菌可注射制剂还可以是一种灭菌可注射水包油微乳液，其中该活性成分溶于油相内。例如，活性成分首先可以溶解在大豆油和卵磷脂的混和物中。该油溶液随后被加入到水和甘油混和物中并处理形成微乳液。

可注射溶液或微乳液可以通过局部快速浓注被引入到患者的血液内。或者，可以优选将溶液或微乳液以维持本发明化合物恒定循环浓度的方式给药。为了维持恒定浓度，可以采用连续静脉内给药装置。该装置的实例是Deltec CADD-PLUS^TM 5400型静脉内输送泵。

该药物组合物可以是用于肌肉内和皮下给药的灭菌可注射水或油性混悬液的形式。该混悬液可以按照已知技术、利用适当的分散剂或水溶液和助悬剂来配制，如上所述。灭菌可注射制剂还可以是存在于无毒非肠道可接受的稀释剂或溶剂中的灭菌溶液或混悬液，例如存在于1，3-丁二醇中的溶液。此外，灭菌、非挥发性油通常用作溶剂或助悬介质。出于此目的，可以使用任何系列的非挥发性油，包括合成甘油一-或二酯。此外，脂肪酸例如油酸可以用于可注射剂的制备中。

式I的化合物还可以以栓剂的形式用于药物的直肠给药。这些组合物可以通过将药物与适当无刺激赋形剂混和制成，所述的无刺激赋形剂在常温下为固体而在直肠温度下为液体并由此在直肠内融化释放药物。该物质包括可可脂，甘油化明胶，氢化植物油，不同分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混和物。

为了局部使用，可以采用含有式I化合物的霜剂、软膏、凝胶、溶液或混悬液等。(出于本申请的目的，局部施用应包括口腔清洗剂和含漱剂)。

本发明的化合物可以以鼻内形式经局部使用适当的鼻内载体和给药装置进行给药，或者经透皮途径给药，采用本领域普通技术人员熟知的透皮贴剂的形式给药。为了以透皮给药体系的形式给药，显然，在给药方案中剂量的施用应当连续而不是间断的。本发明的化合物还可以作为栓剂采用基质如可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、不同分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混和物给药。

当本发明的化合物施用到人体对象中时，日剂量一般可以由主治医生决定，并且该剂量一般根据患者个体的年龄、体重和反应以及患者症状的严重性来决定。

在一个举例应用中，将适量的化合物施用给经受癌症治疗的哺乳动物。给药的量在约0.1mg/kg体重-约60mg/kg体重/天的范围内，优选0.5mg/kg体重-约40mg/kg体重/天。

本发明的化合物还可以与已知的治疗剂和抗癌药联合使用。例如，本发明的化合物与已知抗癌药联合使用。本文公开的化合物与其他抗癌药或化疗剂的联合药物形式属于本发明的范围内。此类药物的实例可以参见V.T.Devita和S.Hellman(编辑)Cancer Principles和Practiceof Oncology，第6版(2001年2月15日)，Lippincott Williams & WilkinsPublishers。本领域普通技术人员应能够懂得药物的联合形式应基于药物的具体特性和所针对的癌症来使用。此类抗癌药包括，但不限于，下列药物：雌激素受体调节剂，雄激素受体调制剂，视黄酸(retinoid)受体调节剂，细胞毒性/细胞抑制剂，抗增殖药，异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂和其他血管生成抑制剂，细胞增殖和存活信号的抑制剂，细胞凋亡诱导剂和细胞周期关卡干扰剂。当与放疗联合施用时，本发明的化合物特别有效。

在一实施方式中，本发明的化合物也有效地与已知的抗癌药联合，包括下列药物：雌激素受体调节剂，雄激素受体调节剂，视黄酸受体调节剂，细胞毒性剂，抗增殖药，异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂，HIV蛋白酶抑制剂，反转录酶抑制剂，和其他血管生成抑制剂。

″雌激素受体调制剂″是指无论其机理如何的能够干扰或抑制雌激素与受体结合的化合物。雌激素受体调制剂的实例包括，但不限于，他莫昔芬(tamoxifen)，雷洛昔芬(raloxifene)，艾多昔芬，LY353381，LY117081，托瑞米芬，fulvestrant，4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]-苯基-2，2-二甲基丙酸酯，4，4′-二羟基二苯酮-2，4-二硝基苯基-腙和SH646。

″雄激素受体调制剂″是指无论其机理如何的能够干扰或抑制雄激素结合受体的化合物。雄激素受体调制剂的实例包括非那雄胺和其他5α-还原酶抑制剂，尼鲁米特，氟他胺，比卡米特，利阿唑，和abiraterone acetate。

″视黄酸受体调制剂″是指无论其机理如何的能够干扰或抑制视黄酸结合受体的化合物。视黄酸受体调制剂的实例包括维生素A酸，13-顺式(cis)-视黄酸，9-cis-视黄酸，α-二氟甲基鸟氨酸，ILX23-7553，反式-N-(4′-羟基苯基)雷替米特(retinamide)，和N-4-羧基苯基雷替米特。

″细胞毒性/细胞抑制剂″是指主要通过直接干扰细胞活动或者抑制或干扰细胞减数分裂引起细胞死亡或抑制细胞增殖的化合物，包括烷化剂，肿瘤坏死因子，嵌入剂，低氧可激活化合物，微管蛋白抑制剂/微管稳定剂，有丝分裂驱动蛋白的抑制剂，参与有丝分裂进程的激酶的抑制剂，抗代谢药；生物反应改进剂；激素/抗激素治疗剂，造血生长因子，单克隆抗体靶向治疗剂，拓扑异构酶抑制剂，蛋白体抑制剂和泛素连接酶抑制剂。

细胞毒性剂的实例包括，但不限于，sertenef，肿瘤坏死因子，异环磷酰胺，tasonermin，氯尼达明，卡铂，六甲蜜胺，泼尼莫司汀，二溴卫矛醇，雷诺氮芥，福泰氮芥，奈达铂，奥沙利铂，泰莫佐罗，heptaplatin，雌莫司汀，二丙胺磺酯，氯乙环磷酰胺，尼莫司汀，螺溴丙酰胺，嘌米舌泊，乐铂，satraplatin，profiromycin，顺铂，irofulven，dexifosfamide，顺式-胺二氯(2-甲基-吡啶)铂，苄基鸟嘌呤，glufosfamide，GPX100，(反式，反式，反式)-二-mu-(己烷-1，6-二胺)-mu-[二胺-铂(II)]二[二胺(氯)铂(n)]四氯化物，二氮杂环丁烷基精胺，三氧化砷，1-(11-十二烷基氨基-10-羟基十一氨基)-3，7-二甲基黄嘌呤，佐柔比星，伊达比星，柔红霉素，比桑那，米托蒽醌，吡喃阿霉素，pinafide，戊柔比星，amrubicin，抗酮瘤，3′-脱氨基-3′-吗啉代-13-脱氧-10-羟基洋红霉素，安那霉素，galarubicin，elinafide，MEN10755，和4-脱甲氧基-3-脱氨基-3-氮杂环丙烷基-4-甲基磺酰基-柔红霉素(参见WO00/50032)。

低氧可激活化合物的一个实例是替拉扎明。

蛋白体抑制剂的实例包括但不限于lactacystin和MLN-341(Velcade)。本发明的药物组合物中还可以包含蛋白体抑制剂。

微管抑制剂/微管稳定剂的实例包括紫杉醇，硫酸长春地辛，3′，4′二氢-4′-脱氧-8′-去甲长春花硷，多西紫杉，根霉素，dolastatin，mivobulin羟乙基磺酸盐，auristatin，cemadotin，RPR109881，BMS184476，vinflunine，cryptophycin，2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺，脱水长春碱，N，N-二甲基-L-缬氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基-L-脯氨酸-t-丁基酰胺，TDX258，环氧硫酮类(epothilones)(参见例如美国专利6,284,781和6,288,237)和BMS188797。

拓扑异构酶抑制剂的一些实例是拓扑替康，hycaptamine，伊立替康，rubitecan，6-乙氧基丙酰基-3′，4′-O-外型-亚苄基-教酒菌素，9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺，l-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3′，4′：b，7]吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮，lurtotecan，7-[2-(N-异丙基氨基)乙基]-(20S)喜树碱，BNP1350，BNPI1100，BN80915，BN80942，磷酸依托泊甙，替尼泊甙，sobuzoxane，2′-二甲基氨基-2′-脱氧-依托泊甙，GL331，N-[2-(二甲基氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-羧酰胺，asulacrine，(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羟基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋(3′，4′：6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧杂环戊烯-6-酮，2，3-(亚甲基二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶鎓，6，9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮，5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟基乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮，N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺，N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-羧酰胺，6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚[2，1-c]喹啉-7-酮，和dimesna。

有丝分裂驱动蛋白，并且特别是人有丝分裂驱动蛋白KSP的抑制剂的实例公开在PCT公报WO 01/30768和WO 01/98278，WO03/050,064(6月19日，2003)，WO 03/050,122(6月19日，2003)，WO03/049,527(6月19日，2003)，WO 03/049,679(6月19日，2003)，WO03/049,678(6月19日，2003)和WO 03/39460(5月15日，2003)和待决PCT申请US 03/06403(2003年5月4日提交)，US 03/15861(2003年5月19日提交)，US 03/15810(2003年5月19日提交)，USO3/18482(2003年6月12日提交)和US 03/18694(2003年6月12日提交)。在一实施方式中，有丝分裂驱动蛋白的抑制剂包括，但不限于KSP的抑制剂，MKLP1的抑制剂，CENP-E的抑制剂，MCAK的抑制剂，Kifl4的抑制剂，Mphosphl的抑制剂和Rab6-KIFL的抑制剂。

″参与有丝分裂进程的激酶的抑制剂″包括，但不限于，极光型(aurora)激酶的抑制剂，Polo样激酶(PLK)的抑制剂(特别是PLK-1的抑制剂)，bub-1的抑制剂和bub-R¹的抑制剂。

″抗增殖药″包括反义RNA和DNA低聚核苷酸，例如G3139，ODN698，RVASKRAS，GEM231和INX3001，和抗代谢药，例如依诺他滨，卡莫氟，替加氟，喷托他丁，多西氟尿啶，曲麦克特，氟达拉宾，卡培他滨，galocitabine，阿糖胞苷酯，fosteabine钠水合物，raltitrexed，paltitrexid，emitefur，噻唑呋林，脱氧氮杂胞苷，nolatrexed，pemetrexed，nelzarabine，2′-脱氧-2′-亚甲基胞苷，2′-氟亚甲基-2′-脱氧胞苷，N-[5-(2，3-二氢-苯并呋喃基)磺酰基]-N′-(3，4-二氯苯基)脲，N6-[4-脱氧-4-[N₂-[2(E)，4(E)-十四坦二烯酰基]甘氨酰基氨基]-L-甘油-B-L-甘露-吡喃庚糖基]腺嘌呤，aplidine，ecteinascidin，troxacitabine，4-[2-氨基4-氧代-4，6，7，8-四氢-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩基-L-谷氨酸，氨基蝶呤，5-flurouracil，丙氨菌素，11-乙酰基-8-(氨基甲酰氧基甲基)4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环丙(7.4.1.0.0)-十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯，swainsonine，洛美曲索，右丙亚胺，methioninase，2′-氰基-2′-脱氧-N4-棕榈酰基-1-B-D-呋喃阿拉伯糖基胞嘧啶，和3-氨基吡啶-2-羧醛缩氨基硫脲。

单克隆抗体靶向的治疗剂的实例包括那些含有与癌细胞特异性或靶向细胞特异性单克隆抗体相连的细胞毒性剂或放射性同位素的治疗剂。实例包括Bexxar。

″HMG-CoA还原酶抑制剂″是指3-羟基-3-甲基戊二醛-CoA还原酶的抑制剂。对HMG-CoA还原酶具有抑制活性的化合物可以很容易地通过本领域熟知的分析方法来鉴定。例如，参见美国专利4,231,938第6栏和WO 84/02131第30-33页中所述或引用的分析试验。术语″HMG-CoA还原酶抑制剂″和″HMG-CoA还原酶的抑制剂″在本文使用时具有相同含义。

可以使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的实例包括但不限于：洛伐他汀(lovastatin)(

参见美国专利4,231,938、4,294,926和4,319,039)；辛伐他汀(辛伐他汀)(参见美国专利4,444,784、4,820,850和4,916,239)；普伐他汀(pravastatin)(

参见美国专利4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)；氟伐他汀(

参见美国专利5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)和阿伐他汀

参见美国专利5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)。本发明方法中可以使用的这些和其他HMG-CoA还原酶抑制剂的结构式公开在M.Yalpani，″Cholesterol Lowering Drugs″，Chemistry & Industry，pp.85-89(52月1996)的第97页和美国专利4,782,084和4,885,314中。本文使用的术语HMG-CoA还原酶抑制剂包括所述化合物的具有HMG-CoA还原酶抑制活性的所有药学可接受内酯和开环酸形式(即，其中内酯环打开形成游离酸)以及盐和酯，而且这些盐、酯、开环酸和内酯形式的应用属于本发明的范围内。内酯部分及其相应开环酸形式的示例如结构I和II所示。

在其中开环酸形式可能存在的HMG-CoA还原酶抑制剂中，从开环酸可优先生成盐和酯形式，并且所有的形式归属于在本文使用的术语″HMG-CoA还原酶抑制剂″的含义内。优选地，该HMG-CoA还原酶抑制剂选自洛伐他汀和辛伐他汀，并且最优选辛伐他汀。文中，有关HMG-CoA还原酶抑制剂的术语″药学可接受盐″应是指本发明所用化合物的无毒盐，它们一般是通过游离酸与适当有机或无机碱反应来制备的，特别是那些形成阳离子的盐，例如钠、钾、铝、钙、锂、镁、锌和四甲基铵，以及那些从胺形成的盐，例如氨、乙二胺、N-甲基葡糖胺，赖氨酸，精氨酸，鸟氨酸，胆碱，N，N′-联苄基乙二胺，氯普鲁卡因，二乙醇胺，普鲁卡因，N-苄基苯乙基胺，1-p-氯苄基-2-吡咯烷-1′-基-甲基苯并咪唑，二乙胺，哌嗪和三(羟基甲基)氨基甲烷。HMG-CoA还原酶抑制剂的盐形式的其他实例可以包括，但不限于，乙酸盐，苯磺酸盐，苯甲酸盐，碳酸氢盐，硫酸氢盐，酒石酸氢盐，硼酸盐，溴化物，乙底酸钙，camsylate，碳酸盐，氯化物，棒酸盐，柠檬酸盐，二氢氯化物，乙底酸盐，edisylate，estolate，esylate，富马酸盐，gluceptate，葡糖酸盐，谷氨酸盐，乙醇酰基对氨酸苯胂酸盐，己基间苯二酚，hydrabamine，氢溴化物，盐酸盐，羟基萘甲酸盐，碘化物，isothionate，乳酸盐，乳糖酸盐，月桂酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，扁桃酸盐，甲磺酸盐，甲基硫酸盐，粘酸盐，napsylate，硝酸盐，油酸盐，草酸盐，扑酸盐，棕榈酸盐，panthothenate，磷酸盐/磷酸氢盐，聚半乳糖醛酸盐，水杨酸盐，硬脂酸盐，碱式醋酸盐，琥珀酸盐，鞣酸盐，酒石酸盐，teoclate，甲苯磺酸盐，triethiodide和戊酸盐。

所述HMG-CoA还原酶抑制剂化合物的酯衍生物可以用作前药，当它们被吸收道温血动物的血液中时，可以裂解释放药物形式并允许药物产生改进的治疗功效。

″异戊烯基蛋白转移酶抑制剂″是指抑制异戊烯基蛋白转移酶的一种或任意组合的化合物，包括法呢基-蛋白质转移酶(FPTase)，香叶基香叶基-蛋白质转移酶I型(GGPTase-I)和香叶基香叶基-蛋白质转移酶II型(GPTase-II，也称作RabGGPTase)。异戊烯基-蛋白转移酶抑制化合物的实例包括：(±)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮，(-)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮，(+)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮，5(S)-正丁基-(2，3-二甲基苯基)-4-[1-(4-氰基苄基)-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮，(S)-1-(3-氯苯基)-4-[1-(4-氰基苄基)-5-咪唑基甲基]-5-[2-(乙磺酰基)甲基]-2-哌嗪酮，5(S)-正丁基-(2-甲基苯基)-4-[1-(4-氰基苄基)-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮，1-(3-氯苯基)-4-[1-(4-氰基苄基)-2-甲基-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮，1-(2，2-联苯基乙基)-3-[N-(1-(4-氰基苄基)-1H-咪唑-5-基乙基)氨基甲酰基]哌啶，4-{5-[4-羟甲基-4-(4-氯吡啶-2-基甲基)-哌啶-1-基甲基]-2-甲基咪唑-1-基甲基}苯甲腈，4-{5-[4-羟甲基-4-(3-氯苄基)-哌啶-1-基甲基]-2-甲基咪唑-1-基甲基}苯甲腈，4-{3-[4-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)苄基]-3H-咪唑-4-基甲基}苯甲腈，4-{3-[4-(5-氯-2-氧代-2H-[1，2’]联吡啶-5’-基)-3H-咪唑-4-基甲基}苯甲腈，4-{3-[4-2-氧代-2H-[1，2’]联吡啶-5’-基)-3H-咪唑-4-基甲基}苯甲腈，4-[3-(2-氧代-1-二氢吡啶-4-基甲基)-3H-咪唑-4-基甲基]苯甲腈，18，19-二氢-19-氧代-5H，17H-6，10，12，16-二甲雄烯(dimetheno)-1H-咪唑[4，3-c][1，11，4]二氧杂氮杂环-nonadecine-9-甲腈，(±)-19，20-二氢-19-氧代-5H-18，21-乙烷并(ethano)-12，14-乙烯并(etheno)-6，10-甲烯-22H-苯并[d]咪唑并[4，3-k][1，6，9，12]氧杂三氮杂-环octadecine-9-甲腈，19，20-二氢-19-氧代-5H，17H-18，21-乙烷并(ethano)-6，10：12，16-二甲烯-22H-咪唑并[3，4-h][1，8，11，14]氧杂三氮杂-环eicosine-9-甲腈，和(±)-19，20-二氢-3-甲基-19-氧代-5H-18，21-乙烷并(ethano)-12，14-乙烯并(etheno)-6，10-甲烯-22H-苯并[d]咪唑并[4，3-k][1，6，9，12]氧杂-三氮杂环octadecine-9-甲腈。

异戊烯基蛋白转移酶抑制剂的其他实例可以参见下列文献和专利：WO 96/30343，WO 97/18813，WO 97/21701，WO 97/23478，WO97/38665，WO 98/28980，WO 98/29119，WO 95/32987，美国专利号5,420,245，美国专利号5,523,430，美国专利号5,532,359，美国专利号5,510,510，美国专利号5,589,485，美国专利号5,602,098，欧洲专利公报0618221，欧洲专利公报0675112，欧洲专利公报0604181，欧洲专利公报0696593，WO 94/19357，WO 95/08542，WO 95/11917，WO95/12612；WO95/12572，WO 95/10514，美国专利号5,661,152，WO95/10515，WO 95/10516，WO 95/24612，WO 95/34535，WO95/25086，WO96/05529，WO 96/06138，WO 96/06193，WO 96/16443，WO 96/21701，WO96/21456，WO 96/22278，WO 96/24611，WO 96/24612，WO96/05168，WO 96/05169，WO 96/00736，美国专利号5,571,792，WO 96/17861，WO96/33159，WO96/34850，WO 96/34851，WO 96/30017，WO 96/30018，WO 96/30362，WO96/30363，WO 96/31111，WO 96/31477，WO96/31478，WO 96/31501，WO 97/00252，WO 97/03047，WO 97/03050，WO97/04785，WO 97/02920，WO 97/17070，WO 97/23478，WO 97/26246，WO 97/30053，WO 97/44350，WO 98/02436，和美国专利号5,532,359。异戊烯基蛋白转移酶抑制剂作用于血管生成的实例参见European J.ofCancer，Vol.35，No.9，pp.1394-1401(1999)。

″血管生成抑制剂″是指无论机理如何的能够抑制新血管形成的化合物。血管生成抑制剂的化合物包括，但不限于，酪氨酸激酶抑制剂，例如酪氨酸激酶受体Flt-1(VEGFR¹)和Flk-1/KDR(VEGFR²0)的抑制剂，表皮衍化的、成纤维细胞衍化的或血小板衍化的生长因子的抑制剂，MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂，整联蛋白阻断剂，干扰素-α，白介素-12，戊聚糖多硫酸酯，环加氧酶抑制剂，包括非甾类抗炎药物(NSAIDs)如阿司匹林和布洛芬以及选择性环加氧酶-2抑制剂如塞来昔布和洛芬昔布(PNAS，Vol.89，p.7384(1992)；JNCI，Vol.69，p.475(1982)；Arch.Opthalmol.，Vol.108，p.573(1990)；Anat.Rec.，Vol.238，p.68(1994)；FEBS Letters，Vol.372，p.83(1995)；Clin，Orthop.Vol.313，p.76(1995)；J.Mol.Endocrinol.，Vol.16，p.107(1996)；Jpn.J.Pharmacol.，Vol.75，p.105(1997)；癌症Res.，Vol.57，p.1625(1997)；Cell，Vol.93，p.705(1998)；Intl.J.Mol.Med.，Vol.2，p.715(1998)；J.Biol.Chem.，Vol.274，p.9116(1999))，甾族抗炎药(例如皮质类固醇，盐皮质类固醇，地塞米松，强的松，强的松龙，甲强龙，倍他米松)，羧酰氨基三唑，combretastatin A-4，squalamine，6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇，沙利度胺，制管张素，肌钙蛋白-1，血管紧张素II拮抗剂(参见Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105：141-145(1985))，和VEGF的抗体(参见，Nature Biotechnology，Vol.17，pp.963-968(October 1999)；Kim等，Nature，362，841-844(1993)；WO 00/44777；和WO00/61186)。

其他调节或抑制血管生成并且也可以与本发明的化合物联合的治疗剂包括调节或抑制凝集和纤维蛋白溶解系统的药物(参见Clin.Chem.La.Med.38：679-692(2000)的综述)。此类调节或抑制凝集和纤维蛋白溶解途径的药物的实例包括，但不限于，肝素(参见Thromb.Haemost.80：10-23(1998))，低分子量肝素和羧肽酶U抑制剂(也称作活性凝血酶可活化纤维蛋白溶解[TAFIa]抑制剂的抑制剂)(参见Thrombosis Res.101：329-354(2001))。TAFIa抑制剂已经公开在PCT公报WO 03/013,526和美国专利系列号60/349,925(2002年2月18日提交)中。

″干扰细胞周期关卡的药物″是指抑制转导细胞周期关卡信号的蛋白激酶致使癌细胞对DNA破坏剂敏感的化合物。此类药物包括ATR、ATM的抑制剂，Chk1和Chk2激酶和cdk和cdc激酶的抑制剂并且特别例如使7-羟基staurosporin，flavopiridol，CYC202(Cyclacel)和BMS-387032。

″细胞增殖和存活信号途径的抑制剂″是指抑制细胞表面受体和那些表面受体的信号转导级联下游的药物。此外药物包括EGFR的抑制剂的抑制剂(例如gefitinib和erlotinib)，ERB-2的抑制剂(例如司徒曼布)，IGFR的抑制剂，细胞因子受体的抑制剂，MET的抑制剂，PI3K的抑制剂(例如LY294002)，丝氨酸/苏氨酸激酶(包括但不限于Akt的抑制剂，例如WO 02/083064，WO 02/083139，WO 02/083140和WO02/083138中所述的)，R^af激酶的抑制剂(例如BAY-43-9006)，MEK的抑制剂(例如CI-1040和PD-098059)和mTOR的抑制剂(例如Wyeth CCI-779)。此类药物包括小分子抑制剂化合物和抗体拮抗剂。

″细胞凋亡诱导剂″包括TNF受体家族成员(包括TRAIL受体)的激活剂。

与NSAID类的组合涉及成为有效COX-2抑制剂的NSAID的应用。出于本文的目的，如果一种NSAID在细胞或微粒体试验中抑制COX-2的IC₅₀小于或等于1μM时，该NSAID被认为是有效的。

本发明还包括与是选择性COX-2抑制剂的NSAID的组合。出于本说明书的目的，作为COX-2的选择性抑制剂的NSAID被定义为具有对COX-2的抑制作用高于对COX-1至少100倍的特异性化合物，这是通过下文所述的细胞或微粒体试验中所评估的对COX-2的IC₅₀与对COX-2的IC₅₀的比率测定的。此类化合物包括，但不限于下列公开的那些：美国专利5,474,995，授权于1995年12月12日；美国专利5,861,419，授权于1999年1月19日；美国专利6,001,843，授权于1999年12月14日；美国专利6,020,343，授权于2000年2月1日；美国专利5,409,944，授权于1995年4月25日；美国专利5,436,265，授权于1995年7月25日；美国专利5,536,752，授权于1996年7月16；美国专利5,550,142，授权于1996年8月27日；美国专利5,604,260，授权于1997年2月18日；美国专利5,698,584，授权于1997年12月16日；美国专利5,710,140，授权于1998年1月20日；WO94/15932，公开于1994年7月21；美国专利5,344,991，授权于1994年6月6日；美国专利5,134,142，授权于1992年6月28日；美国专利5,380,738，授权于1995年1月10日；美国专利5,393,790，授权于1995年2月20；美国专利5,466,823，授权于1995年11月14日；美国专利5,633,272，授权于1997年5月27日，和美国专利5,932,598，授权于1999年8月3日，上述文献均在此引入作为参考。

特别适用于本发明的治疗方法中的COX-2的抑制剂是：

3-苯基-4-(4-(甲基磺酰基)苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和

5-氯-3-(4-甲基磺酰基)苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶；

或其药学可接受盐。

制备上述COX-2抑制剂化合物的通用和具体合成方法参见美国专利5,474,995(授权于1995年12月12日)，美国专利5,861,419(授权于1999年1月19日)和美国专利6,001,843(授权于1999年12月14日)，上述文献均引入作为参考。

已经被认为是COX-2的特异性抑制剂并因此适用于本发明的化合物包括，但不限于，下列：

或其药学可接受盐。

已经被认为是COX-2的特异性抑制剂并因此适用于本发明的化合物，及其合成方法，可以参见下列专利、待决申请和文献中，其在此引入作为参考：WO 94/15932，公开于1994年6月21日；美国专利5,344,991，授权于1994年7月6日；美国专利5,134,142，授权于1992年6月28日；美国专利5,380,738，授权于1995年1月10日；美国专利5,393,790，授权于1995年2月20日；美国专利5,466,823，授权于1995年11月14日；美国专利5,633,272，授权于1997年5月27日；和美国专利5,932,598，授权于1999年8月3日。

被认为是COX-2的特异性抑制剂并因此适用于本发明的化合物，及其合成方法，可以参见下列专利、待决申请和文献中，其在此引入作为参考：美国专利5,474,995，授权于1995年12月12日；美国专利5,861,419，授权于1999年1月19日；美国专利6,001,843，授权于1999年12月14日；美国专利6,020,343，授权于2000年2月1日；美国专利5,409,944，授权于1995年4月25日；美国专利5,436,265，授权于1995年6月25日；美国专利5,536,752，授权于1996年6月16日；美国专利5,550,142，授权于1996年8月27日；美国专利5,604,260，授权于1997年2月18日；美国专利5,698,584，授权于1997年12月16日；和美国专利5,710,140，授权于1998年1月20日。

血管生成抑制剂的其他实例包括，但不限于，endostation，ukrain，ranpirnase，IM862，5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)环氧乙烷基]-1-氧杂螺[2，5]辛-6-基(氯乙酰基)氨基甲酸酯，乙酰基dinanaline，5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，CM101，squalamine，combretastatin，RPI4610，NX31838，硫酸化甘露戊糖磷酸盐，7，7-(羰基-二[亚氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基-亚氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亚氨基]-二-(1，3-萘二磺酸酯)，和3-[(2，4-二甲基吡咯基-5-基)亚甲基]-2-二氢吲哚酮(SU5416)。

如上所述，″整联蛋白阻断剂″是指选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体与α_vβ₃整联蛋白结合的化合物，是指选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体与α_vβ₅整联蛋白结合的化合物，是指选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体与α_vβ₃整联蛋白和α_vβ₅整联蛋白两者结合的化合物，并且是指拮抗、抑制或阻碍表达在毛细管内皮细胞上的特定整联蛋白的活性的化合物。该术语还是指α_vβ₆，α_vβ₈，α₁β₁，α₂β₁，α₅β₁，α₆β₁和α₆β₄整联蛋白。术语还是指α_vβ₃，α_vβ₅，α_vβ₆，α_vβ₈，α₁β₁，α₂β₁，α₅β₁，α₆β₁和α₆β₄整联蛋白的任意组合。

酪氨酸激酶抑制剂的一些具体实例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基异恶唑-4-甲酰胺，3-[(2，4-二甲基吡咯基-5-剂)亚甲基)吲哚啉-2-酮，17-(烯丙基氨基)-17-脱甲氧基格尔德霉素，4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉，N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺，BIBX1382，2，3，9，10，11，12-六氢-10-(羟基甲基)-10-羟基-9-甲基-9，12-环氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg：3′，2′，1′-kl]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮杂环辛间四烯-1-酮，SH₂68，染料木素，STI571，CEP2563，4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲磺酸酯，4-(3-溴-4-羟基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉e，4-(4′-羟基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉，SU6668，STI571A，N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺，和EMD121974。

与除抗癌化合物之外的化合物的联合药物形式也属于本发明的方法内。例如，本发明所述的化合物与PPAR-γ(即PPAR-gamma)激动剂和PPAR-δ(即PPAR-delta)激动剂的组合适用于治疗某些恶性疾病。PPAR-γ和PPAR-δ是核过氧物酶体增殖子(proliferator)活化受体γ和δ。PPAR-γ在内皮细胞上的表达及其在血管生成中的参与作用已有文献报导(参见J.Cardiovasc.Phannacol.1998；31：909-913；J.Biol.Chem.1999；274：9116-9121；Invest.Ophthalnzol Vis.Sci.2000；41：2309-2317)。最近，PPAR-γ激动剂已经被证实在体外抑制对VEGF的血管生成反应；曲格列酮(rosiglitazone)和罗格列酮(rosiglitazone)马来酸盐抑制小鼠中视黄醛新血管形成的恶化(Arch.Ophthamol.2001；119：709-717)。PPAR-γ激动剂和PPAR-γ/α激动剂的实例包括，但不限于，噻唑烷二酮类(例如DRF₂725，CS-011，曲格列酮，罗格列酮，和吡格列酮)，非诺贝特，吉非贝齐，氯贝特，GW2570，SB219994，AR-H039242，JTT-501，MCC-555，GW2331，GW409544，NN2344，KRP297，NP0110，DRF4158，NN622，GI262570，PNU182716，DRF552926，2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并异恶唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(公开在USSN09/782,856)，和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-福苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基色满-2-羧酸(公开在USSN 60/235,708和60/244,697中)。

本发明的另一实施方式是此处所公开的化合物与基因疗法联合在治疗癌症中的应用。有关治疗癌症的基因策略的综述参见Hall等(Am JHum Genet 61：785-789，1997)和Kufe等(Cancer Medicine，5th Ed，pp876-889，BC Decker，Hamilton 2000)。基因疗法可以用于施加任何肿瘤抑制基因。此类基因的实例包括，但不限于，p53，它可以经重组病毒介导的基因传递来输送(参见例如美国专利号6,069,134)，uPA/uPAR拮抗剂(″Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPAR AntagonistSuppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth和Dissemination inMice，″Gene Therapy，August 1998；5(8)：1105-13)，和干扰素γ(J Immunol2000；164：217-222)。

本发明的化合物还可以与固有多药耐药性(MDR)，特别是与转运蛋白的高水平表达有关的NOR的抑制剂联合使用。此类MDR抑制剂包括p-糖蛋白(P-gp)，例如LY335979，XR⁹576，OC144-093，R¹⁰1922，VX853和PSC833(valspodar)。

本发明的化合物可以与止吐剂联合使用来治疗恶心或呕吐，包括急性，延迟型，晚期和早发性呕吐，这些呕吐可能是由本发明化合物单用或与放疗合用所导致的。为了预防或治疗呕吐，本发明的化合物可以于其他止吐剂合用，尤其是神经激肽-1受体拮抗剂，5HT3受体拮抗剂，例如奥丹西隆，格雷西隆，托吡西隆，和zatisetron，GABAB受体激动剂，例如巴氯芬，皮质类固醇例如甲氟烯索(地塞米松)，曲安奈德，去炎舒松，氟尼缩松，布地奈德，Benecorten或其他药物，例如公开在美国专利号2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中的，抗多巴胺能药物，例如吩噻嗪类(例如普鲁氯嗪，氟非那嗪，硫利哒嗪和美索哒嗪)，甲氧氯普胺或屈大麻酚。为了治疗或预防施用本发明化合物可能导致的呕吐，优选采用与选自神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂和皮质类固醇的止吐剂的联合疗法。

和本发明化合物联合施用的神经激肽-1受体拮抗剂全面公开在，例如美国专利号5,162,339、5,232,929、5,242,930、5,373,003、5,387,595、5,459,270、5,494,926、5,496,833、5,637,699、5,719,147；欧洲专利公报号EP 0360390、0394989、0428434、0429366、0430771、0436334、0443132、0482539、0498069、0499313、0512901、0512902、0514273、0514274、0514275、0514276、0515681、0517589、0520555、0522808、0528495、0532456、0533280、0536817、0545478、0558156、0577394、0585913、0590152，0599538、0610793、0634402、0686629、0693489、0694535、0699655、0699674、0707006、0708101、0709375、0709376、0714891、0723959、0733632和0776893；PCT国际专利公报号WO90/05525、90/05729、91/09844、91/18899、92/01688、92/06079、92/12151、92/15585、92/17449、92/20661、92/20676、92/21677、92/22569、93/00330、93/00331、93/01159、93/01165、93/01169、93/01170、93/06099，93/09116、93/10073、93/14084、93/14113、93/18023、93/19064、93/21155、93/21181、93/23380、93/24465、94/00440、94/01402、94/02461、94/02595、94/03429、94/03445、94/04494、94/04496、94/05625、94/07843、94/08997、94/10165、94/10167、94/10168、94/10170，94/11368、94/13639、94/13663、94/14767、94/15903、94/19320、94/19323、94/20500、94/26735、94/26740、94/29309、95/02595、95/04040、95/04042，95/06645、95/07886、95/07908、95/08549、95/11880、95/14017、95/15311、95/16679、95/17382、95/18124、95/18129、95/19344、95/20575、95/21819、95/22525、95/23798、95/26338、95/28418、95/30674、95/30687、95/33744、96/05181、96/05193、96/05203、96/06094、96/07649、96/10562、96/16939、96/18643、96/20197、96/21661、96/29304、96/29317、96/29326、96/29328、96/31214、96/32385、96/37489、97/01553、97/01554、97/03066、97/08144、97/14671、97/17362、97/18206、97/19084、97/19942和97/21702；英国专利公报号2266529、2268931、2269170、2269590、2271774、2292144、2293168、2293169和2302689。这些化合物的制备全面公开在上述专利和公告中，其内容在此引入作为参考。

在一实施方式中，与本发明化合物联合使用的神经激肽-1受体拮抗剂选自：2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)吗啉，或其药学可接受盐，其公开在美国专利号5,719,147中。

本发明的化合物还可以与治疗贫血的药物联合给药。此类贫血治疗药例如是连续eythropoiesis受体激活剂(例如红细胞生成素α)。

本发明的化合物还可以与治疗嗜中性粒细胞减少症的药物联合给药。此类嗜中性粒细胞治疗剂例如是调节嗜中性粒细胞的生成和功能的造血生长因子，例如人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF的实例包括非格司亭。

本发明的化合物还可以与免疫增强药联合给药，例如左旋咪唑，异丙肌苷和胸腺肽。

所以，本发明的范围内包括本发明所述化合物与选自下列的第二化合物的联合应用：1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)视黄酸受体调节剂，4)细胞毒性/细胞抑制剂，5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)反转录酶抑制剂，10)血管生成抑制剂，11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂，13)固有多药耐药性的抑制剂，14)止吐剂，15)贫血治疗剂，16)嗜中性粒细胞减少症治疗剂，17)免疫增强药，18)细胞增殖和存活信号的抑制剂，19)细胞周期关卡干扰剂，和20)细胞凋亡诱导剂。

在本发明化合物的引用中术语″给药″和其变化形式(例如″施用″化合物)是指将所述化合物或该化合物的前药引入到需要治疗的动物体系中。当本发明的化合物或其前药与一种或多种其他活性剂(例如，细胞毒性剂等)联合提供时，″给药″及其变化形式各自理解为包括将所述化合物或其前药和其他药物并行和顺序引入。

在此使用的术语″组合物″包括含有特定量的特定组分的产品，以及任何直接或间接由特定量的特定组分的组合获得的产品。

在此使用的术语″治疗有效量″是指由研究人员、兽医、临床医生和其他临床工作者寻找到的活性化合物或药剂在组织、系统、动物或人体中产生生物或医学反应的量。

术语″治疗癌症″或″癌症的治疗″是指向患有癌性病症的哺乳动物给药并且通过杀死癌细胞来减轻癌性病症，而且产生抑制癌症生长和/或迁移的结果。

在一实施方式中，用作第二化合物的血管生成抑制剂选自：酪氨酸激酶抑制剂，表皮衍生生长因子的抑制剂，成纤维细胞衍生生长因子的抑制剂，血小板衍生生长因子的抑制剂，MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂，整联蛋白阻断剂，干扰素-α，白介素-12，戊聚糖多硫酸酯，环加氧酶抑制剂，羧酰胺基三唑，康布瑞塔卡汀A-4(combretastatin A-4)，角鲨胺(squalamine)，6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇(fumagillol)，沙利度胺，制管张素，肌钙蛋白-1，或VEGF的抗体。在一实施方式中，该雌激素受体调制剂为他莫昔芬或雷洛昔芬。

权利要求书的范围内还包括一种治疗癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的式I的化合物与放疗和/或与选自下列的化合物联合施用：1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)视黄酸受体调节剂，4)细胞毒性/细胞抑制剂，5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)反转录酶抑制剂，10)血管生成抑制剂，11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂，13)固有多药耐药性的抑制剂，14)止吐剂，15)贫血治疗剂，16)嗜中性粒细胞减少症治疗剂，17)免疫增强药，18)细胞增殖和存活信号的抑制剂，19)细胞周期关卡干扰剂和20)细胞凋亡诱导剂。

本发明的另一实施方式涉及一种治疗癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的式I的化合物与紫杉醇或司徒曼布联合给药。

本发明进一步包括一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的式I的化合物与COX-2抑制剂联合给药。

本发明还包括一种用于治疗或预防癌症的药物组合物，其中含有治疗有效量的式I的化合物和选自下列的化合物：1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)视黄酸受体调节剂，4)细胞毒性/细胞抑制剂，5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HTV蛋白酶抑制剂，9)反转录酶抑制剂，10)血管生成抑制剂，11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂；13)细胞增殖和存活信号的抑制剂，14)细胞周期关卡干扰剂，和15)细胞凋亡诱导剂。

本发明进一步涉及本发明的化合物在筛选其他结合KSP的化合物的方法中的应用。为了将本发明的化合物用于筛选结合KSP驱动蛋白的化合物的方法中，令KSP与支持体连接，并且在试验中加入本发明的化合物(它是有丝分裂试剂)。或者，将本发明的化合物与支持体连接并加入KSP。可以从其中寻找到成为新结合剂的化合物类型包括特异性抗体，在化学文库筛选中鉴定的非天然结合剂，肽类似物等。特别感兴趣的是用于筛选对人体细胞具有低毒性的候选试剂的筛选试验。多种试验可以用于此目的，包括标记的体内蛋白-蛋白结合分析，电泳迁移率变动分析，蛋白结合的免疫分析，功能分析(磷酸化试验等)等

对有丝分裂剂和KSP的结合作用的测定可以采取多种方式。在一优选实施方式中，将有丝分裂剂(本发明的化合物)标记，例如，用荧光素或放射性基团并直接测定结合作用。譬如，这可通过将全部或一部分KSP与固体支持体相连，加入标记的有丝分裂剂(例如本发明的化合物，其中至少一个原子已被可检测的同位素置换)，洗涤除去过量的试剂，并且测定固体支持体上存在的标记物的量从而实现。如本领域所知，已知可以采用不同的封阻和洗涤步骤。

所谓″标记的″是指化合物直接或者间接被标记物标记，由此产生可检测的信号，例如，放射性同位素，荧光素标记，酶，抗体，微粒例如磁性微粒，化学发光标记或特异结合分子等。特异结合性分子对，例如生物素和链亲和素，地高辛和抗地高辛等。就特异性结合成员而言，补体成员一般用能够被供检测的分子、按照已知方法标记，如上所列。标记物可以直接或间接产生可检测信号。

在某些实施方式中，只标记一种组分。例如，在酪氨酸位置上的驱动蛋白可以用¹²⁵I或用荧光团标记。另外，可以用不同的标记物标记一种以上的组分；例如，用1²⁵I标记蛋白，并且用荧光团标记有丝分裂剂。

本发明的化合物还可以用作筛选其他药物候选物的竞争剂。″候选生物活性剂″或″药物候选物″或等同文字是指任何被测定生物活性的分子，例如蛋白质，低聚肽，有机小分子，多糖，聚核苷酸等。它们可能直接或间接改变细胞增殖表型或细胞增殖序列的表达，包括核酸序列和蛋白质序列两者。在其他情况中，筛选细胞增殖蛋白质结合作用和/或活性的变化。此类的筛选可以在微管存在或不存在下进行。在筛选蛋白质的结合作用或活性的情况中，优选的实施方式不包括结合特定蛋白质的已知分子，例如聚合结构如微管，和能源如ATP。本文分析的优选实施方式包括其内源性天然状态不与细胞增殖蛋白质结合的候选剂，此处称作″外源性″试剂。在另一优选实施方式中，外源性试剂也不包括KSP的抗体。

尽管通常它们是有机分子，但候选剂可以包括多种化学类型，优选是具有大于100并小于约2,500道尔顿分子量的小有机化合物。候选剂含有与蛋白质在结构上相互作用、特别是氢键和亲脂性结合所必需的官能团，通常包括至少一个胺、羰基、羟基、醚或羧基，优选至少含有两个化学官能团。候选剂经常含有被一个或多个上述官能团取代的环碳或杂环结构和/或芳族或聚芳族结构。候选剂也可以在生物分子中发现，该生物分子包括肽，糖类，脂肪酸，甾族化合物，嘌呤，嘧啶，它们的衍生物、结构类似物或其组合。特别优选是肽。

候选剂得自多种来源，包括合成或天然化合物的文库。例如，许多方式可以用于随机和直接合成多种不同的有机化合物和生物分子，包括随机低聚核苷酸的表达。另外，细菌、真菌、植物和底物萃取物形式的天然化合物的文库可以获得或者很容易生产。另外，天然或合成生成的文库和化合物很容易通过常规的化学、物理和生物活性方法改性。已知的药理学试剂可以直接或随机进行化学改性，例如酰化，烷基化，酯化，酰胺化生成结构类似物。

竞争性筛选分析可以通过将KSP和第一样本中的药物候选物混和来完成。第二样本含有有丝分裂剂、KSP和药物候选物。可以在微管存在或不存在的条件下进行。测定上述两种样本的药物候选物的结合作用，两种样本之间结合作用的变化或差异意味着存在能够结合KSP且可能调节其活性的试剂。也就是说，如果在第二样本中的药物候选物的结合作用不同于第一样本中的，则该药物候选物能够结合KSP。

在一优选实施方式中，候选剂的结合作用是通过竞争性结合分析来测定的。在该实施方式中，竞争剂是已知的KSP结合部分，例如抗体，肽，结合配偶体，配体等。在某些情况下，该候选剂和该结合部分之间可能存在竞争性结合作用，并且该结合部分替换该候选剂。

在一实施方式中，标记该候选剂。将候选剂或竞争剂，或这两者首先加入到KSP中达到足以允许结合反应的时间，如果存在结合的话。可以在任何温度下培养，从而促使活性最佳，通常为约4℃-约40℃。

选择培养周期以达到最佳活性，但也可以优化达到促进快速的高通量筛选。通常0.1-1小时应该足够。过量的试剂一般被除去或洗掉。随后加入第二组分，随后是存在或不存在的标记组分，以证实结合作用。

在一优选实施方式中，首先加入竞争剂，随后加入候选剂。竞争性的替换反应表明该候选剂与KSP结合，并由此能够结合并可能调节KSP的活性。在该实施方式中，可将两种组分标记。例如，如果标记竞争剂，标记物在洗涤溶液中的存在象征着试剂发生了替换反应。另外，如果标记候选剂，标记物在支持体上的存在象征着发生了替换反应。

在另一实施方式中，首先加入候选剂，并且培养和洗涤，随后加入竞争剂。竞争剂结合作用的不存在可以表示该候选剂以更高的亲和力结合KSP。由此，如果标记候选剂，标记物在支持体上的存在，同时竞争剂结合作用的不存在，可以象征着该候选剂能够结合KSP。

鉴定KSP的结合位点可能具有价值。这可以以多种方式进行。在一实施方式中，一旦鉴定KSP可结合有丝分裂剂，则将该KSP片段化或改性，并且重复试验以鉴定结合所必需的组成。

通过筛选能够调节KSP活性的候选剂可以测试出调节作用，包括将候选剂与KSP混和，如上所述，并且测定KSP的生物活性的变化。由此，在该实施方式中，候选剂应在结合KSP(虽然这可能不必要)的同时，还改变如本文定义的生物或生物化学活性。该方法包括对改变细胞周期分布、细胞生存力的细胞或对有丝分裂纺锤体的存在、形态、活性、分布或含量的体外筛选方法和体内筛选方法，一般如下文所述。

另外，不同的筛选法可以用于鉴定结合天然KSP而可以不结合改性KSP的药物候选物。

分析中可以采用阳性对照和阴性对照。优选所有对照和试验样本一式三份进行以得到统计学意义的结果。所有样本的培养达到足以与蛋白质结合的时间。培养后，洗涤所有样本除去非特异结合的物质，并且测定结合的、一般是标记了的试剂的量。例如，当采用放射性标记时，样本可以在闪烁计数器中计数以测定结合了的化合物的量。

筛选分析中可以采用多种其他试剂。其中包括例如盐，中性蛋白(例如白蛋白)，洗涤剂等，它们可以用来促进最佳的蛋白-蛋白结合作用和/或减少非特异或背景相互作用。可以使用其他可提高试验效率的试剂，例如蛋白酶抑制剂，核酶抑制剂，抗微生物剂等。可以以任何能够提供必要结合作用的顺序加入组分的混和物。

本发明的这些和其他方面将从本文的教导中更加清楚。

分析

实施例中描述的本发明化合物通过下述试验测试并且发现具有驱动蛋白抑制活性。其他试验从文献中获知并很容易为本领域技术人员实施。

1.驱动蛋白ATPase体外试验

人聚组氨酸标记的KSP运动结构域(KSP(367H))的克隆和表达

表达人体KSP运动结构域构造的质粒通过PCR用pBluescript全长人KSP构造(Blangy等，Cell，vol.83，ppl 159-1169，1995)作为模板进行克隆。用N-末端引物5′-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG(SEQ.ID.NO.：1)和C-末端引物5′-GCAACGCTCGAGTCAGTGAT

GATGGTGGTGATGCTGATTCACTTCAGGCTTATTCAATAT(SEQ.ID.NO.：2)来扩增该运动结构域和颈连接区。PCR产物用AseI和XhoI消化，连接到pRSETa(Invitrogen)的NdeI/XhoI消化产物且转化到E.coli BL21(DE3)中。

细胞在37℃下生长至OD₆₀₀为0.5。将培养物冷却至室温后，KSP的表达用100μM IPTG诱导且持续培养过夜。细胞通过离心沉淀且用冰冷的PBS洗涤1次。将沉淀速冻且储存在-80℃。

蛋白纯化

在冰上融合细胞沉淀团冰再次悬浮在溶胞缓冲液(50mM K-HEPES，pH 8.0，250mM KCl，0.1％吐温，10mM咪唑，0.5mM Mg-ATP，1mM PMSF，2mM benzimidine，1x完全蛋白酶抑制剂鸡尾酒(Roche))中。细胞混悬液与1mg/ml溶菌酶和5mM巯基乙醇在冰上培养10分钟，随后超声(3×30秒)。所有后续处理在4℃下进行。溶胞产物在40,000xg下离心40分钟。稀释上清液且加载在SP琼脂糖柱(Pharmacia，5ml药筒)上的缓冲液A(50mMK-HEPES，pH 6.8，1mM MgCl₂，1mM EGTA，10μM Mg-ATP，1mM DTT)中并用缓冲液A中的0-750mM KCl梯度洗脱。合并含有KSP的馏分且与Ni-NTA树脂(Qiagen)保温1小时。树脂用缓冲液B(溶胞缓冲液减少PMSF和蛋白酶抑制剂鸡尾酒)洗涤3次，随后培养15分钟3次并用缓冲液B洗涤。最后，将该熟知培养且用缓冲液C(除pH 6.0之外与缓冲液B洗脱)洗涤15分钟共3次并倾入柱内。KSP用洗脱缓冲液(除150mM KCl和250mM咪唑之外与缓冲液B相同)洗脱。合并含KSP的馏分，在蔗糖中达到10％，和储存在-80℃。

从油牛脑分离的微管蛋白制备微管。1mg/ml的纯化微管蛋白(＞97％无MAP)在37℃下在10μM紫杉醇、1mM DTT、1mM GTP的存在下于BRB80缓冲液(80mM K-PIPES，1mM EGTA，1mMMgCl₂，pH 6.8)中聚合。通过超速离心将所得微管与未聚合的微管蛋白分离并除去上清液。将含有微管的沉淀团轻轻再悬浮含在BRB80中的10μM紫杉醇，1mM DTT，50g/ml氨苄西林和5ug/ml氯霉素酯内。

将该驱动蛋白运动结构域与微管、1mM ATP(1∶1MgCl₂∶Na-ATP)和化合物在23℃下于含有80mM K-HEPES(pH7.0)、1mM EGTA、1mMDTT、1mM MgCl₂和50mM KCl的缓冲液中培养。用80mM HEPES和50mM EDTA的最终缓冲组合物稀释2-10倍来终止该反应(或者，向终止缓冲液(1.8M KCl和50mM EDTA)1∶1增加的溶液体积)。利用喹哪啶红/钼酸铵试验、通过加入1.5倍体积的猝灭剂C测定ATP水解反应得到的游离磷酸盐(例如，40μl反应体积+40μl终止缓冲液的混和物加入120μl猝灭剂C)。猝灭剂A含有0.1mg/ml喹哪啶红和0.14％聚乙烯醇；猝灭剂B在1.15M硫酸中含有12.3mM钼酸铵四水合物。猝灭剂C是2∶1比例的猝灭剂A∶猝灭剂B。该反应在23℃下保温5-10分钟，在540nm下测定磷-钼酸盐复合物的吸光度。

实施例中的化合物3-1，4-2，5-3，5-4，7-1，7-2，7-3，8-6a/8-6b，9-1，10-2，11-1，12-1，12-2和12-3在上述试验测定且发现IC₅₀≤50μM。

II.细胞增殖试验

将细胞铺板在96孔组织培养皿中，使其密度能够在24、48和72小时期间呈对数生长且允许过夜附着。次日，化合物以10个点的半数log滴定度加入到所有平板内。各滴定系列按照一式三份进行，并且在整个试验过程中维持0.1％的恒定DMSO浓度。也包括0.1％DMSO单用的对照。各化合物稀释系列是在无血清培养基中进行。试验中在200μl体积的培养基中血清的终浓度是5％。在24、48和72小时时向滴定平板上的各样本和对照孔内加入20微升的Alamar蓝染色剂，随后加入药物并再次在37℃培养。在CytoFluorII平板读取器上用530-560纳米波长激发、590纳米发射在6-12小时后分析Alamar蓝色荧光度。

通过绘制X轴向上的化合物浓度和Y轴上的各滴定点时细胞生长的平均百分抑制率来获得细胞毒性EC₅₀。单独用载体处理的对照孔内的细胞生长被定义为该试验的100％生长率，而将用化合物处理的细胞的生长与该值对比。采用内部专有软件计算百分细胞毒性值并且用逻辑4参数曲线拟合计算拐点。细胞毒性百分率被定义为：

％细胞毒性率：(荧光度_对照)-(荧光度_样本)×100×(荧光度_对照)^-1。

拐点报告为细胞毒性EC₅₀。

III.FACS的有丝分裂停止和细胞凋亡的评估

FACS分析通过测定被处理的细胞群的DNA含量来评估一种化合物抑制细胞有丝分裂并引起细胞凋亡的性能。将细胞以1.4×106个细胞/6cm²组织培养皿的密度接种并令其粘附过夜。随后细胞用载体(0.1％DMSO)或滴定系列的化合物处理8-16小时。处理后，通过胰蛋白酶在指定时间内作用并离心沉淀收获细胞。细胞沉淀团在PBS中漂洗并固定在70％乙醇中，储存在4℃下过夜或更长时间。

对于FACS分析，沉淀至少500,000个固定细胞并通过抽吸除去70％乙醇。随后该细胞在4℃下与RNase A(50Kunitz单位/ml)和碘化丙锭(50pg/ml)培养30分钟，并且用Becton Dickinson FACSCaliber分析。用Modfit细胞周期分析模型软件(Verity Inc.)分析数据(得自10,000个细胞)。

是通过绘制X轴上的化合物浓度和Y轴上的各滴定点的细胞周期的G2/M相中的细胞百分率(通过测定碘化丙锭荧光)来获得有丝分裂停止的EC₅₀。利用SigmaPlot程序分析数据，用逻辑4参数曲线拟合计算拐点。拐点报告为有丝分裂停止的EC₅₀。采用类似方法测定化合物细胞凋亡的EC₅₀。所以，各滴定点处凋亡细胞的百分率(由碘化丙锭荧光测定)绘制在Y轴上，并且按照上述方法进行类似的分析。

IV.检测单极纺锤体的免疫荧光显微镜检查法

用于DNA、微管蛋白和旁中心蛋白(pericentrin)的免疫荧光染色的方法基本上如同Kapoor等(2000)J.Cell Biol.150：975-988所述。为了细胞培养的研究，将细胞铺板在组织培养物处理的玻璃隔室玻片上且令其粘附过夜。随后细胞与感兴趣的化合物一起培养4-16小时。培养完毕后，抽吸培养基和药物并且从玻片除去隔室和垫圈。随后按照参考方案使细胞渗透，固定，洗涤和封阻用于非特异性抗体结合。用二甲苯将石蜡镶嵌的肿瘤切片脱蜡并且在封阻之前用乙醇系列液在水化。玻片在初级抗体(小鼠单克隆抗-α-微管蛋白抗体，得自Sigma的1∶500稀释的克隆DM1A；得自Covance的兔多克隆抗pericentrin抗体，1∶2000稀释)中4℃下培养过夜。洗涤后，室温下该玻片用稀释至15μg/ml的偶联二级抗体(微管蛋白的FITC偶联猴抗小鼠IgG；用于pericentrin的Texas红偶联猴抗兔IgG)培养1小时。随后洗涤玻片且用Hoechst 33342复染色以显示DNA。免疫染色样本用100x油浸渍物镜在Nikon落射荧光显微镜上用Metamorph去卷曲和成像软件进行成像。

实施例

给出的实施例有助于进一步理解本发明。使用的起始原理、种类和条件仅是举例说明本发明而不限定其合理的范围。

路线1

步骤1：4-烯丙基-4-苯基-1，3-恶唑烷-2-酮(1-4)

向15.8g(416mmol)LAH粉在600mL乙醚中的混悬液内加入18.3g(90mmol)存在于75mL乙醚中的α-烯丙基-α-苯基甘氨酸乙酯(1-3)(按照：Van Betsbrugge等，Tetrahedron，1997，53，9233-9240)并使加入速率维持在轻度回流。室温下搅拌过夜后，该反应小心地用27mL水猝灭，随后加入27mL的15％NaOH并且最后加入82mL的水。加入一定量的NaSO₄，将该混合物搅拌1小时。过滤出固体且浓缩该溶液。将残余物溶于300mL的CH₂Cl₂，用Na₂SO₄干燥并浓缩得到氨基醇，其为无色油。将该氨基醇(4.5g，25mmol)溶于50mLCH₂Cl₂并冷却至0℃。随后加入5.4mL(53mmol)三乙胺和4.5g(28mmol)1，1′-羰基二咪唑，该混和物加热至室温并搅拌4小时。该反应随后加入到分液漏斗，用1M HCl、水洗涤2次，用Na₂SO₄干燥和浓缩得到恶唑烷酮1-4，其为无色油。1-4的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，6.6(s，1H)，5.6-5.5(m，1H)，5.2(m，2H)，4.5(d，1H)，4.35(d，1H)，2.8(m，1H)，2.6(m，1H)ppm。

步骤2：二酯(1-5)

将68g(334.6mmol)的1-4在500mL CH₂Cl₂中的溶液冷却至-78℃和将臭氧吹入该溶液直至保持浅蓝色。随后将O₂向该溶液内吹入15分钟，此后通入30分钟N₂。此时，加入491mL(6.7moles)二甲基化硫，将该溶液搅拌过夜同时缓慢升至室温。挥发物通过旋转蒸发除去得到褐色油。将该物质悬浮在1L tBuOH中，并且加入200mL(1.9moles)的2-甲基-2-丁烯。随后向该溶液滴加160g(1.33moles)NaH₂PO₄和70g(774mmol)NaClO₂在800mL H₂O中的混和物内。加料完毕后，该混和物继续搅拌4小时。分离各层后，通过旋转蒸发浓缩有机物，将残余物溶于EtOAc并置于分液漏斗，并从该反应分离水相。分离后，水相用3xEtOAc萃取，用Na₂SO₄干燥，和浓缩得到～90g的黄色树胶。将该残余物悬浮在500mL MeOH，并且将和HCl气体吹入该溶液直至接近回流。将该烧瓶加盖并允许搅拌过夜，同时冷却至室温。通过旋转蒸发除去挥发物，将该残余物加载在硅胶柱上的CH₂Cl₂中并用EtOAc/己烷洗脱得到该甲酯，其为浅橙色树胶。将该残余物溶于500mL的THF，冷却至0℃，加入32.6mL(220.5mmol)的溴乙酸叔丁酯，随后加入10.6g的NaH(264.6mmol的60％混悬液)。令该混和物升至室温且搅拌过夜，用饱和NH₄Cl溶液猝灭，并用EtOAc萃取2次。合并的有机层随后用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，浓缩和残余物通过硅胶色谱用EtOAc/己烷纯化得到1-5，其为稠的浅黄色树胶。1-5的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.3(m，5H)，4.65(d，1H)，4.55(d，1H)，3.9(d，1H)，3.65(s，3H)，3.5(d，1H)，3.35(d，1H)，3.2(d，1H)，1.4(s，9H)ppm.HRMS(ES)C₁₈H₂₃NO₆的M+Na：计算值372.1423.实测值：372.1412。

步骤3：7a-苯基二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]恶唑-3，6(5H)-二酮(1-6)

向18.6g(53mmol)1-5在150mL THF中的溶液内于-78℃下滴加58.6mL(58.6mmol)的LiHMDS的1M THF溶液。此温度下搅拌1小时后，撤去冷却浴并令反应升至室温并搅拌过夜。该混和物用饱和NH₄Cl溶液猝灭，用EtOAc萃取2次，用盐水洗涤2次，用Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物溶于60mL甲酸和在100℃下加热24小时。真空下除去挥发物并且残余物用CH₂Cl₂/己烷/Et₂O研制得到1-6，其为米色固体。1-6的数据：¹HNMR(500MHz，CDCl)δ7.5-7.3(m，5H)，4.7(d，1H)，4.3(d，1H)，4.2(d，1H)，3.5(d，1H)，3.1(d，1H)，2.95(d，1H)，2.9(d，1H)ppm。

步骤4：6-(2，5-二氟苯基)-7a-苯基-5，7a-二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3] 恶唑-3-酮(1-7)

向2.2g(10mmol)1-7在150mL THF中的混悬液内于-78℃下滴加12.2mL(12.2mmol)NaHMDS在THF中的1M溶液。搅拌30分钟后，该溶液升温至0℃且保持1小时。该溶液随后冷却至-78℃并加入4.35g(12.2mmol)N-苯基二(三氟甲磺酰胺)在10mL THF至的溶液。撤去冷却浴并使该混和物升至室温并搅拌过夜。该混和物用饱和NH₄Cl溶液猝灭，用EtOAc萃取2次，用盐水洗涤2次，用Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物溶于75mL的DME和18mL的水中。向该化合物加入1.29g(30mmol)LiCl，3.2g(30mmol)Na₂CO₃，和4.8g(30mmol)的2，5-二氟苯基硼酸。该溶液用N₂脱气1分钟，随后将爱人630mg(0.5mmol)的四(三苯基膦)钯(0)。将该反应在90℃下加热3小时，冷却至室温，用饱和NaHCO₃稀释和用EtOAc萃取2次。合并的有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，浓缩和残余物通过硅胶色谱用CH₂Cl₂/己烷纯化得到1-7，其为白色固体。1-7的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.5-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.8(s，1H)，4.9(d，1H)，4.75(d，1H)，4.5(d，1H)，4.25(d，1H)ppm.HRMS(ES)C₁₈H₁₃F₂NO₂的M+H：计算值314.0987.实测值：314.0993。

步骤5：2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯(1-8)

将1.75g(5.6mmol)1-7在15mL EtOH和10mL 3MnaOH中的混悬液在60℃加热3小时，冷却至室温并转移到含EtOAc和盐水的分液漏斗。分离各层，水相用EtOAc萃取2次，合并的有机相用盐水洗涤2次，用Na₂SO₄干燥和浓缩得到白色固体。向烧瓶内加入30mL CH₂Cl₂，1.5g(22.3mmol)咪唑和1.76g(11.7mmol)TBSC1，并且将所得混悬液搅拌过夜。该反应用CH₂Cl₂稀释，用水洗涤2次，用Na₂SO₄干燥，浓缩和残余物通过硅胶色谱用EtOAc/己烷纯化得到1-8，其为白色固体。1-8的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.6-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.75(s，1H)，4.25(d，1H)，4.1(d，1H)，3.95(d，1H)，3.75(d，1H)，0.9(s，9H)，0.1(s，3H)，0.05(s，3H)ppm。

步骤6：中间体1-8的对映异构体拆分

对映异构体的拆分在色谱上用ChiralpakADO 10×50cm柱和含1％异丙醇的己烷(含0.1％二乙胺)以150mL/min拆分。洗脱剂在4×250mmChiralpakAD5柱上用含1％异丙醇的己烷(含0.1％二乙胺)以1mL/分钟的分析HPLC试验证实第一洗脱的、活性对映异构体具有R_t＝5.5分钟且第二对映异构体具有R_t＝6.9分钟。

步骤7(2S)-2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羰基氯1-9

将1.95g(6.6mmol)三光气在25mL THF中的溶液内于0℃下加入1.31g(3.3mmol)的第一洗脱对映异构体1-8和915μL(6.6mmol)三乙胺在10mL THF中的溶液内。撤去冰浴并且令该反应升至室温并搅拌3小时。该反应在水和EtOAc之间分配，有机溶液用Na₂SO₄干燥和浓缩得到1-9，其为褐色油。1-9的数据：HRMS(ES)M+H的C₂₄H₂SClF₂NO₂Si：计算值464.1619.实测值：464.1625。

路线1A

二酯1-5的另一合成

向14.8g(73mmol)1-4和110mL CH₂Cl₂、110mL CH₃CN和320mL水的两相混和物内加入约200mg的氯化钌(III)水合物。随后在1小时内分次加入高碘酸钠(85.6g，400mmol)同时剧烈搅拌。加料完全后，将该反应室温下搅拌4小时。该混和物用500mL水和1.5L EtOAc稀释，该固体通过过滤除去。将滤液置于分液漏斗，分离相，水相用EtOAc萃取2次，合并的有机相用盐水洗涤2次和用Na₂SO₄干燥。浓缩后，将深褐色固体溶于250mL的MeOH并缓慢将HCl(g)吹入该溶液并且吹入速度不能使该溶液的温度高于35℃。5分钟后，将该反应加盖并在室温下搅拌过夜。在旋转蒸发器上除去挥发物，残余物通过硅胶色谱用EtOAc/己烷纯化得到13.6g(58mmol)的甲酯，其为粘性油。该残余物随后被溶于200mL THE，冷却至0℃和加入10.3mL(70mmol)的溴乙酸叔丁酯，随后加入2.8g NaH(70mmol的60％混悬液)。该混和物升至室温并搅拌过夜后，用饱和NH₄Cl溶液猝灭和用EtOAc萃取2次。合并的有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，浓缩和残余物通过硅胶色谱用EtOAc/己烷纯化得到1-5，其为无色油。

路线1B

步骤1：4-亚甲基-2-苯基脯氨酸甲酯(1B-2)

将苯基甘氨酸甲酯-HCl(100g)的水溶液(300mL)用10N NaOH中和至pH 8。水溶液用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机萃取液用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。残余物(56.7g，344mmol)溶于原甲酸三甲酯(100mL)并用苯甲醛(34.9mL，36.4g，344mmol)处理。搅拌2小时后，该反应用Et₂O(200mL)稀释并用水(3×50mL)洗涤。该有机溶液用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。将一部分的亚胺残余物(26.8g，100mmol)溶于二氯甲烷(240mL)并用160mL的10N NaOH、甲基烯丙基二氯(50.0g，400mmol和Bu₄NHSO₄(3.59g)处理。室温下搅拌10小时后，该反应用二氯甲烷稀释且分离该有机溶液，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。该残余物再溶于Et₂O/1NHCl(200mL/200mL)并搅拌2小时。分离水相并用10NNaOH中和(至pH8)。该水混合物用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机溶液用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物溶于水并中和(至pH 8)。该混合物用EtOAc(X3)萃取，随后用MgSO₄干燥，过滤和浓缩得到粗1B-2。该残余物通过快速色谱纯化(SiO₂；30％EtOAc/己烷)得到纯1B- 2。

1B-2的数据：¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.51(m，2H)，7.42(m，3H)，5.03(s，1H)，4.95(s，1H)，3.71(m，5H)，3.41(m，1H)，2.80(m，1H)ppm。

步骤2：7a-苯基二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1.3]恶唑-3，6(5H)-二酮(1-6)

将LiAlH₄(7.14g，188mmol)在THF(500mL)中的混悬液冷却至0℃且用酯1B-2(10.2g，47mmol)在THF(50mL)中的溶液处理约20分钟。0℃下搅拌30分钟后，该反应小心通过加入水(7.1mL)、15％NaOH水溶液(7.1mL)和H₂O(21.3mL)猝灭。加入固体Na₂SO₄且将该混和物搅拌40分钟。过滤该混和物并浓缩。将该残余物(8.2g，43.3mmol)溶于二氯甲烷(300mL)并用三乙胺(9.0mL，6.5g，65.0mmol)和羰基二咪唑(9.14g，56.4mmol)处理。室温下搅拌搅拌48小时后，该反应用二氯甲烷稀释且用1N HCl和盐水洗涤。将该有机溶液浓缩且无需进一步纯化。将残余物1B-3(9.2g，42.8mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液冷却至-78℃并将臭氧通入该溶液直至保持蓝色为止。纯化该溶液并用二甲基硫(35mL)处理。逐渐升至室温过夜后，该溶液浓缩为黄色固体。该固体用Et₂O研制得到纯的1-6。1-6的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.5-7.3(m，5H)，4.7(d，1H)，4.3(d，1H)，4.2(d，1H)，3.5(d，1H)，3.1(d，1H)，2.95(d，1H)，2.9(d，1H)ppm。

路线1C

步骤1：(2R)-[(乙氧基羰基)氨基](苯基)乙酸(1C-2)

1小时内向(R)-(-)-2-苯基甘氨酸(1C-1，4kg)在THF和5NNaOH(10.6L)中的0℃混合物内加入氯甲酸乙酯并维持内温低于10℃。加料完毕后，0-10℃下该反应陈化15分钟且分析达到完全。该反应用37％HCl猝灭(至pH＝1，2.3L)并且保持内温＜25℃。加入甲苯(20L)且在搅拌/放置后，分离水层。分析有机层的收率并将溶剂换为甲苯，分离水层。分析有机层的收率并将溶剂换为甲苯。1C-2的浆液直接用于下一步反应。(2R)-[(乙氧基羰基)氨基]-(苯基)乙酸：mp 154-156℃；¹HNMR(CDCl₃，400MHz)表明旋转异构体的～1.1∶1混合物：δ＝12.12(bs，2H)，7.99(d，J＝5.3Hz，1H)，7.45-7.32(m，10H)，5.78(d，J＝6.2Hz，1H)，5.41(d，J＝7.1Hz，1H)，5.25(d，J＝5.7Hz，1H)，4.12(m，2H)，4.05(m，2H)，1.24(t，J＝6.9Hz，3H)，1.06(t，J＝7.0Hz，3H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝175.1，173.6，157.3，155.8，137.4，136.1，129.0，128.7，128.6，128.2，127.2，127.1，62.1，61.5，58.3，57.7，14.4，14.1；MS m/z 224([M+H]⁺，C₁₁H₁₄NO₄，计算值224.09)。

步骤2：(2S，4R)-5-氧代-24-二苯基-13-恶唑烷-3-羧酸乙酯(1C-3)

在1-2小时中向1C-2和PhSO3H(42.7gm)在甲苯中的85℃溶液内在减压(350torr)下加入苯甲醛二甲基缩醛(3L)在甲苯(5mL/g)中的溶液。反应过程中蒸馏除去甲苯/MeOH。反应完全后，该溶液冷却至室温且用THF(36L)稀释直至均匀为止。该有机溶液用10％NaHSO3(7.5L)洗涤，随后用饱和NaHCO₃(9L)洗涤。完毕后溶剂换为甲苯并用甲苯稀释至7.5mL/g总体积(相对于试验收率)。将该浆液加热至75℃且陈化至均匀。缓慢冷却后，1C-3结晶。但该浆液达到40℃时，加入庚烷(2.5mL/g)。将该浆液冷却至室温并过滤收集固体。该固体用1∶1甲苯/庚烷(5mL/g)洗涤且在在氮气下干燥至重量恒定。(2S，4R)-5-氧代-2，4-二苯基-1，3-恶唑烷-3-羧酸乙酯：mp197-199℃；¹H NMR(CDCl₃，400Hz)：δ＝7.46-7.37(m，10H)，6.77(bs，1H)，5.45(bs，1H)，3.96(m，2H)，3.86(m，2H)，0.84(t，J＝7.1Hz，3H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝130.2，129.1，129.0，218.8，126.7，90.3，61.9，60.3，13.8；MS m/z 312([M+H]⁺，C₁₈H₁₈NO₄，计算值312.12)。

步骤3：(2S，4S)-4-烯丙基-5-氧代-2，4-二苯基-1，3-恶唑烷-3-羧酸乙酯 (1C-4)

1小时中向1C-3和烯丙基-Br(1.67L)在THF(40L)中的-10℃溶液内加入二(三甲基甲硅烷基)氨化钠在THF(7L)中的溶液，并且维持温度＜5℃。5分钟后，分析该反应达到完全。该反应用1N HCl(22.5L)猝灭且用庚烷(20L)稀释。分离水层并有机层用饱和盐水(12L)洗涤。溶剂换为MeOH并共沸蒸发除去水直至达到KF＜900ppm。1C-4的溶液直接用于下一反应。(2S，4S)-4-烯丙基-5-氧代-2，4-二苯基-1，3-恶唑烷-3-羧酸乙酯：¹H NMR(CDCl₃，400Hz)：δ＝7.60-7.52(m，2H)，7.39-7.33(m，8H)，6.55(m，1H)，5.84(m，1H)，5.38(m，2H)，4.16(m，2H)，3.72-3.12(m，2H)，1.17(t，J＝7.0Hz，3H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝172.5，164.0，137.5，131.0，130.5，129.7，128.3，128.1，127.4，126.2，122.0，89.5，62.0，42.2，40.4，14.2；MSm/z 352([M+H]⁺，C21H₂2NO₄，计算值352.15)。

步骤4：(2S)-2-[(乙氧基羰基)氨基l-2-苯基戊-4-烯酸甲酯(1C-5)

0.25小时内向1C-4在MeOH(20L)中的23℃溶液内加入含在MeOH(535mL)中的30％NaOMe，并且维持温度＜30℃。4小时后，分析该反应达到完全。该反应用5％NaHSO3(40L)猝灭且用IPAc(20L)稀释。分离水层且有机层用10％KH₂PO₄(12L).洗涤。溶剂换为MeCN且直接用于下面的反应。(2S)-2-[(乙氧基羰基)氨基]-2-苯基戊-4-烯酸甲酯：¹H NMR(CDCl，400Hz)：δ＝7.46-7.43(m，2H)，7.39-7.27(m，3H)，6.23(bs，1H)，5.76-5.66(m，1H)，5.20-5.14(m，2H)，4.10-4.00(m，2H)，3.68(s，3H)，3.53(bs，1H)，3.20(dd，J＝13.7，7.6Hz，1H)1.27-1.15(m，3H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝172.6，154.3，139.8，132.3，128.4，127.8，125.9，119.4，65.0，60.6，53.1，37.8，14.4；MS m/z300([M+Na]⁺，C₁₅H₁₉NNaO₄，计算值300.12)。

步骤5：4-[(乙氧基羰基)苯基-D-脯氨酸甲酯(1C-6)

向1C-5在MeCN(42L)中的23℃溶液内加入水(12L)，随后加入I₂(8kg)。6小时后，分析该反应达到完全。该反应用10％Na₂SO3(35L)猝灭，用50wt％NaOH(4L)碱化且用IPAc(35L)萃取。分离水层且弃除，有机层用6N HCl(35L)萃取。分离有机层。将水层冷却至-10℃，加入IPAc(35L)，并且缓慢用22L的10N NaOH中和。分离水层且弃除并储存1C-6的溶液。4-[(乙氧基羰基)氧基]-2-苯基-D-脯氨酸甲酯：¹HNMR(CDCl₃，400Hz)表明，非对映异构体的2∶1混合物：δ＝7.55-7.47(m，5H)，7.34-7.22(m，5H)，5.18-5.11(m，2H)，4.22-4.11(m，4H)，3.68(s，6H)，3.33-3.24(m，4H)，3.10(d，J＝14.1Hz，2H)，3.05(b，2H)，2.34(dd J＝14.3，5.5Hz，1H)，2.22(dd J＝14.3，4.1Hz，1H)，1.31-1.23(m，6H)；¹³CNMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝175.2，175.1，154.7，154.4，142.0，141.5，128.3，128.2，127.5，127.4，126.0，125.7，78.5，77.6，71.7，71.0，63.8，52.9，52.8，52.7，52.0，51.8，43.2，42.9，14.1，14.0；MS m/z 294([M+H]⁺，C₁₅H₂₀NO₅，计算值294.13)。

步骤6：(5S)-5-(羟基甲基)-5-苯基吡咯烷-3-醇(1C-7)

-50℃下向碳酸盐1C-6(5.0g，17.0mmol)在THF(50mL)中的溶液内加入R^ed-Al的3.5M甲苯溶液(17.0mL，59.7mmol，3.5mole.)。该反应混合物升至室温并陈化2小时。0℃下该反应用2.0M Rochelle盐溶液猝灭(45mL，等同于约1.5mole的R^ed-Al)且在54时内室温下充分陈化。分离水相后，通过减压下共沸蒸馏(约20torr，60℃)使混合的有机溶液换为n-BuOAc。加入200mL的n-BuOAc后，GC中检测出THF、甲苯和甲氧基乙醇少于0.1％且KF为0.11％.MS m/z 194([M+H]⁺，C₁₁H₁₅NO₂，计算值193.11)。

步骤7：(7aS)-6-羟基-7a-苯基四氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]恶唑-3-酮 (1C-8)

向步骤6所述的n-BuOAc溶液内滴加CDI(3.46g，21.3mmol，1.25moleq.)并室温下陈化1小时。将30mL的2N HCl溶液加入到该反应混合物中且陈化1小时。分离水相且用30mL n-BuOAc萃取，之后加入6.0g的NaCl。向合并的有机层加入150mg的活性炭(Darco KB)，使该混和物陈化过夜。经Solka-Floc垫过滤出炭。数据：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.47-7.28(m，7H)，4.65(d，J＝8.3Hz，1H)，4.64-4.59(m，0.4H)，4.57-4.51(m，1H)，4.51(d，J＝8.8Hz，0.4H)，4.33(d，J＝8.3Hz，1H)，4.28(dd，J＝13.1，6.7Hz，0.4H)，4.15(d，J＝8.8Hz，0.4H)，3.92(d，J＝12.7Hz，1H)，3.28(dd，J＝12.7，3.9Hz，1H)，3.18(dd，J＝13.1，2.7Hz，0.4H)，2.63(d，J＝13.6Hz，0.4H)，2.50(dd，J＝13.7，5.1Hz，1H)，2.40(brd，J＝13.7Hz，1H)，2.25(dd，J＝13.6，6.8Hz，0.4H)。

步骤8：(7aS)-7a-苯基二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]恶唑-3，6(5H)-二酮 (1C-9)

将含在n-BuOAc中的IC-8(粗，一部分的上述溶液1.40g分析，6.38mmol)减压下浓缩并向粗结晶中加入14mL MeCN。GC中溶剂比为n-BuOAc∶MeCN＝8∶92。向该溶液滴加AcOH(1.10mL，19.2mmol，3.0mole.)，室温下在30分钟内滴加TPAP(33.6mg，0.095mmol，1.5mol％)和NaOCl(9.SmL，19.2mmol，3.0mole.)的2.0M溶液(可在HPLC中发现约5％的氯化产物)。30分钟后，该反应混合物用12mL的AcOEt稀释并分离水相。有机相用饱和Na₂S2O3水溶液和盐水洗涤。有机溶剂换为MTBE且过滤出沉淀，用MTBE洗涤。得到的酮1C-9；78％(1.08g，4.97mmol，99.4％面积，97.0w/w％，0.5％的氯化产物面积)。

路线1D

(2S)-2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2- 苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羰基氯1-9

在带有顶部搅拌器、温差电偶和氮气/真空入口的烧瓶内加入S-TBS吡咯啉固体1-8(180gms)且加入IPAC(1.26L)。连续搅拌该溶液约30分钟至变均匀。

在另一带有顶部搅拌器、温差电偶和氮气/真空入口的烧瓶内加入IPAC(1.26L)且将该溶液冷却至-5℃。加入三光气(67gms)且随后缓慢加入二甲基吡啶(173ml)。将S-TBS吡咯啉的溶液随后缓慢加入到该溶液内。该反应通过HPLC监测且200nm下通过HPLC分析当胺转化为产物的转化率＞99A％时则被视为反应完全。该反应通过相反应混合物内加入1.8L的10wt％柠檬酸水溶液猝灭。分离各层且有机层用水(240mL)洗涤2次。有机层随后浓缩至900ml(水含量为105ug/ml)且直接用于偶联反应。HPLC分析证实99.96％转化为氨基甲酰氯。

路线1E

2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基 -2，5-二氢-1H-吡咯(1-8)

步骤1：6-(2，5-二氟苯基)-7a-苯基-57a-二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3] 恶唑-3-酮(1-7)

在20L夹套中将231g(1.06moles)1-6在11L THF中的溶液顶部剧烈搅拌1小时，随后冷却至-70℃。向该混悬液滴加1.28L(1.28moles)的NaHMDS在THF中的溶液。搅拌3小时后，加入478.9g(1.28moles)固体N-苯基二(三氟甲磺酰胺)，随后继续搅拌1.5小时，之后通过加入2L的饱和NH₄Cl水溶液猝灭。该溶液达到室温后，加入2L的水和2L的EtOAc，分离各层并且水层用2L的EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥和通过旋转蒸发浓缩。在20L带有顶部搅拌的夹套反应器中将残余物溶于6L的DME和1.2L水，该溶液用N₂的强气流脱气1小时。向该反应器内加入201.6g(1.28moles)₂，5-二氟苯基硼酸、134g(3.19moles)LiCl、338g(3.19moles)Na₂CO₃和24.6g(21mmol)四(三苯基膦)钯(0)，并且该反应在90℃下加热2小时。该阶段后，蒸馏除去约4.5L的DME，残余溶液冷却至室温并且加入到6L水和8L CH₂Cl₂中。分离各层，水层用2L的CH₂Cl₂萃取，合并有机层，用4L水洗涤，用Na₂SO₄干燥和通过旋转蒸发浓缩得到深红色固体块。该残余物用500mL的CHCl₃处理，并且过滤得到棕色固体。浓缩滤液至～300mL且收集第二批固体。与第一批合并，并且合并的物质与500mL的EtOAc处理过夜。过滤该混悬液得到米色固体，将滤液浓缩至～250mL并且收集第二批，与第一批合并，合并的物质(～205g)从1.6L的EtOAc重结晶得到1-7，其为白色固体。1-7的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl)δ7.5-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.8(s，1H)，4.9(d，1H)，4.75(d，1H)，4.5(d，1H)，4.25(d，1H)ppm.HRMS(ES)C₁₈H₁₃F₂NO₂的M+H：计算值314.0987.实测值：314.0993。

步骤2：2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯(1-8)

在10L圆底烧瓶内将109.4g(349mmol)1-7在2.2L EtOH和105mL(1.05moles)10M NaOH中的混悬液于60℃下加热4小时，冷却至室温并陈化过夜。向此混合物内加入90.2mL(1.08moles)的浓HCl且通过旋转蒸发除去溶剂。残余物悬浮在2L乙腈内并且再次通过旋转蒸发干燥。将该固体悬浮在3.8L的CH₂Cl₂和200mL DMF中，加入118.7g(1.75moles)咪唑，随后加入110.5(733mmol)TBSCI。在N₂的轻气流下搅拌15小时后，该反应加入到4L的水和2LCH₂Cl₂中，分离各层，并且水层用2L的CH₂Cl₂萃取。合并的有机萃取液随后用4×4L的水洗涤，用Na₂SO₄干燥和通过旋转蒸发浓缩。将残余物溶于500mL的MeOH和500mL的2M MeNH₂的MeOH溶液，搅拌4小时，随后通过旋转蒸发浓缩。该残余物置于高真空下直至重量达到恒定，将物质用研钵压碎且捣磨得到1-8，其为米色固体。1-8的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.6-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.75(s，1H)，4.25(d，1H)，4.1(d，1H)，3.95(d，1H)，3.75(d，1H)，0.9(s，9H)，0.1(s，3H)，0.05(s，3H)ppm。

路线2

步骤1：3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸苄酯(2-2)

向10.0g(43mmol)4-氧代-1-哌啶羧酸苄酯在25mL DMF中的溶液内加入14.3mL(103mmol)的三乙胺且随后加入6.53mL(52mmol)TMSCl。该反应在80℃下加热过夜，冷却至室温和随后加入到含己烷的分液漏斗内。该混和物在饱和NaHCO₃水溶液中分配，分离，用盐水洗涤，用MgSO₄干燥和通过旋转蒸发浓缩。将残余物溶于500mL的CH₃CN且用16.7g(47mmol)Selectfluor处理。90分钟后，将该反应浓缩至约半数原体积，在EtOAc和盐水之间分配，分离，用MgSO₄干燥，过滤和通过旋转蒸发浓缩。将该残余物加载在硅胶柱上并用EtOAc/己烷洗脱得到2-2，其为无色油。

步骤2：3-氟-4-(甲基氨基)哌啶-1-羧酸苄酯(2-2a)

向9.4g(37.5mmol)₂ -2在150mL 1，2-二氯乙烷中的溶液内加入37.5mL(74.9mmol)甲基胺在THF中的溶液和11.9g(56.2mmol)Na(OAc)3BH。搅拌2小时后，该反应用饱和K2CO₃水溶液猝灭，用EtOAc分配，分离，水相萃取3x EtOAc。合并的有机萃取液用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤和通过旋转蒸发浓缩。残余物加载在硅胶柱上且用80∶10∶10CHCl₃/EtOAc/MeOH洗脱得到2-2a的cis和trans两种异构体，其为无色油。2-2a的trans异构体的数据，首先被洗脱出来(通过NOE分析法证实)：¹H NMR(600MHz，CD₂Cl₂)δ7.4-7.3(m，5H)，5.1(m，2H)，4.4-4.1(m，2H)，3.9(m，1H)，3.15-3.05(m，2H)，2.75(m，1H)，2.4(s，3H)，2.0(m，1H)，1.25(m，1H)ppm。2-2a的cis异构体的数据，第二被洗脱出来(通过NOE分析法证实)：¹H NMR(600MHz，CD₂Cl₂)δ7.4-7.2(m，5H)，5.1(m，2H)，4.9-4.7(m 1H)，4.4(m，1H)，4.15(m，1H)，3.1-2.9(m，2H)，2.6(m，1H)，2.4(s，3H)，1.8(m，1H)，1.6(m，1H)ppm。HRMS(ES)C₁₄H₁₉F₁N₂O₂的M+H：计算值267.1504.实测值：267.1500。

步骤3：(3R，45)-4-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-3-氟哌啶-1-羧酸苄酯(2-3)

向7.67g(28.8mmol)cis-2-2a在150mL CH₂Cl₂中的溶液内加入12.1mL(86.5mmol)三乙胺和9.44g(43.3mmol)二碳酸二叔丁酯。搅拌1小时后，该反应在CH₂Cl₂和H₂O之间分配，有机相用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤和通过旋转蒸发浓缩。将残余物加载在硅胶柱上且用EtOAc/己烷洗脱得到外消旋cis-2-3，其为白色固体。该对映异构体的拆分通过色谱法用ChiralpakAd 10×50cm柱和含20％异丙醇的己烷(含0.1％二乙胺)在150mL/min下进行。洗脱液在4×250mm Chiralpak ADo柱土用含20％异丙醇的己烷(含0.1％二乙胺)在1mL/min下的分析型HPLC分析试验表明，第一洗脱的对映异构体(2-3的对映异构体)具有Rt＝5.90分钟，并且第二对映异构体(2-3)具有Rt＝6.74分钟。2-3的数据：HRMS(ES)C₁₉H₂₇F₁N₂O₄的M+Na：计算值389.1847.实测值：389.1852。

步骤4：(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基甲基氨基甲酸叔丁酯(2-4)

向4.6g(12.6mmol)第二洗脱对映异构体2-3在150mL EtOH中的溶液内加入29.7mL(314mmol)的1，4-环己二烯和催化量的10％碳载Pd。搅拌过夜后，该反应经硅藻土过滤和通过旋转蒸发浓缩。将残余物溶于75mL的MeOH，加入2mL的AcOH和3.1mL(38mmol)的37％甲醛水溶液，将该混和物搅拌1小时。此时，加入1.58g(25.1mmol)存在于10mLMeOH中的NaCNBH3并且使该反应陈化2小时，之后加入到饱和NaHCO₃水溶液。萃取3x CH₂Cl₂后，有机相用水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤和通过旋转蒸发浓缩得到2-4，其为无色油。2-4的数据：HRMS(ES)C₁₂H₂₃FN₂O₂的M+H：计算值247.1817.实测值：247.1810。

步骤5：(3R，4S)-3-氟-N，1-二甲基哌啶-4-胺(2-5)

向3.0g(12.2mmol)₂ -4在100mL EtOAc中的溶液内吹入HCl气体直至该溶液升至可触摸。随后将该烧瓶加盖且搅拌4小时。通过旋转蒸发除去挥发物，残余物用Et₂O研制且置于高真空下得到白色固体。将该物质与25mL的15％Na₂CO₃水溶液混合并用5×50mL 2∶1CHCl₃/EtOH萃取。有机物通过旋转蒸发和非常温和的加热浓缩，将残余物溶于200mL的CHCl₃，用Na₂SO₄干燥，浓缩得到2-5，其为无色油。2-5的数据：¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ4.8(m，1H)，3.15(m，1H)，2.85(m，1H)，2.5(s，3H)，2.45(m，1H)，2.3(s，3H)，2.2-2.0(m，2H)，1.9-1.7(m，2H)ppm.HRMS(ES)C₇H₁₅FN₂的M+H：计算值147.1292.实测值：147.1300。

路线2A

步骤1：3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸苄酯(2-2)

向带有机械搅拌器的22-L圆底烧瓶内加入Cbz-酮2-1(2.5kg，10.7mol)、5.0L的二甲基乙酰胺、三乙胺(3.0L，21.5mol)。加入三甲基甲硅烷基氯(2.0L，15.7mol)。将该混和物加热至60℃且陈化4小时。冷却至10℃后，该混和物在10L的5％碳酸氢钠和10L正-庚烷中猝灭并维持内温低于20℃。有机层用10L的2.5％碳酸氢钠水溶液洗涤。最终的有机层用硫酸钠干燥，过滤和减压下浓缩，并且将溶剂换为10L MeCN。

向50-L夹套容器内加入7.5L的MeCN和Selectfluor(4.1kg，11.5mol)。该浆液冷却至10℃且加入碳酸钾(0.37kg，2.68mol)。分次转移甲硅烷醚在MeCN中的溶液并保持内温为10-15□。使最终的浆液在10-15℃下陈化2小时。该反应在具有20L的2N盐酸和30L的乙酸乙酯的100L萃取器中猝灭。有机层用20L的2N盐酸、10L的20wt％氯化钠洗涤，用硫酸钠干燥和过滤。滤液浓缩并用干燥EtOAc在减压下洗涤达到KF＝16000gg/mL，随后溶剂在减压下换为～10L THF。

步骤2：3-氟-4-(甲基氨基)哌啶-1-羧酸苄酯(2-2a)

向圆底烧瓶内，将Cbz氟酮(10.3mol)溶于四氢呋喃(30L)中。加入甲胺在四氢呋喃中的2M溶液(2.00当量；20.6moles；10.3L)内，将该混和物室温下搅拌30分钟。该混和物冷却至0℃，加入乙酸(20.6moles；1.17L；1.236kg)，随后在0℃下继续搅拌30分钟。将三乙酰氧基硼氢化钠(12.36moles；2.62kg)在15分钟内分次加入到该溶液，该反应混合物在0℃下陈化直至通过HPLC分析判断反应完全。将该反应混和物缓慢转移到100L圆柱形萃取器中，该萃取器含有12M的盐酸水溶液(30.9moles，2.575L)，水(30L)和甲苯(140mol，15L)。剧烈搅拌15分钟后，分离各层且甲苯层进一步用水(10L)洗涤。合并的水层转移回萃取器。加入10M的氢氧化钠水溶液(82.4mole，8.24L)，并且该混和物用IPAC(30L)萃取1次。

有机层用硫酸钠(3kg)干燥并浓缩。将残余物溶于8∶2(vol∶vol)乙醇∶水(23kg乙醇和7.2kg水)，将85％磷酸(9.83mol，952g，667mL)加入到该溶液且加入晶种。室温下搅拌该混和物过夜。沉淀结晶固体且通过过滤收集。该固体用8∶2乙醇∶水洗涤且真空箱内干燥得到2.1kg固体。

将该固体悬浮在36L EtOH和4L水混和物中且该混和物加热至70℃-80℃直至所有固体溶解。撤去热源且澄清的溶液用cis异构体混和物2-2a接种。室温下搅拌过夜后，沉淀结晶固体且通过过滤收集。该固体产物在真空箱内干燥得到白色固体。

步骤3：(3R，4S)-4-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-3-氟哌啶-1-羧酸苄酯2-3

在50L的萃取器内加入20L水和1.06kgNa₂CO₃，搅拌混和物直至所有固体溶解。加入IPAC(20L)和CBZ胺羧酸盐(1.85kg，5.3mol)。混和后分离各层。水层用另外的5L IPAC萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥。过滤出干燥剂后，将该批次加入到72L圆底烧瓶内，并且加人Boc₂O溶液(1.0M，4.8L)。45分钟后HPLC试验证实转化率为98％。加入附加的Boc₂O溶液(50mL)。该批次陈化15小时后，真空下浓缩达到最小体积，用MeOH(10L-15L)纯化。该批次用甲醇稀释至总重量为约14.3kg。HPLC试验证实约1.9kg的所需产物。

氟哌啶通过色谱分离在20微米Chiralpak AD(Diacel ChemicalIndustries，Ltd.)手性固相柱(30IDx25cm)上拆分。每次注射54g量的外消旋体用甲醇洗脱。收集最低保留时间对映异构体得到45g(85％回收率)的所需(3R，4S)对映异构体，98％ee。重复该分离方法且将不同次注射的所需馏分合并和浓缩。

步骤4：[(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基甲基氨基甲酸叔丁酯(2-4)

从手性分离步骤得到的浓缩溶液(4L)被证实含有489.5g(1.3mol)的Cbz-Boc-二胺2-3。向该溶液中，加入甲醛(37％在水中，430mL，5.3mol)且该混和物在氢气压和5％Pd/C(183g)下4小时。过滤该反应混合物除去催化剂且在8L的EtOAc和8L的0.5M碳酸氢钠之间分配。有机层用8L的0.5M碳酸氢钠洗涤。合并的水层用8L EtOAc萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥和过滤。滤液直接用于下面步骤。

步骤6：(3R，4S)-3-氟-N，1-二甲基哌啶-4-胺(2-5)

将含有Boc保护的二胺2-4(327g，通过HPLC分析鉴定)的乙酸乙酯溶液加入到12L烧瓶中并且在28℃下浓缩。当该批次具有1.5L的总体积时，该批次随后将溶剂换为加入8L的乙醇，同时恒定体积下蒸馏。

向另一12L圆底烧瓶内加入1.5L乙醇(200检验，精制)。随后将436mL乙酰氯加入到乙醇中并借助于水浴维持温度低于35℃。将该溶液搅拌1小时。含有302g Boc保护二胺2-4的乙醇溶液随后缓慢加入到HCl，维持温度＜30℃。当加料完毕时，固体开始从该溶液结晶出来。该反应通过GC监测且将该浆液搅拌过夜。该固体通过过滤分离且滤饼用2L的85％乙醇、15％乙酸乙酯洗涤。滤饼随后真空下用N₂的气流干燥过夜得到243g的所需产物2-5，其为二盐酸盐。GC分析表面该批次为99.3％ee。

向瓶内加入约200mg 2-5(氟哌啶2HCl)且悬浮在甲醇(＜500μL)中。用加热枪将该样本加热至溶解。2小时后，发现出现大的三维结晶。通过除去剩余溶剂分离结晶。选择单一结晶进行单向结晶x-射线。数据收集在Bruker Smart Apex系统。该结晶为无色片并且0.24mm×0.22mm×0.14mm的大小。单位晶胞在5秒扫描率收集且自动指标将晶胞确定为单斜晶系。

用5秒扫描率在象限数据收集后该结构解析为单斜晶P21空间群。参见表1-5用于将有关解析结构的最终说明的信息制成表格。2-5的结构的计算机绘图如图1所示。

表1.2-5的晶体数据和结构精修

经验式C₈H₂₁Cl₂FN₂O

式重251.17

温度298(2)K

波长

晶系，空间群单斜晶，P2(1)

单位晶胞大小：

α＝90°.

β＝105.295(5)°

γ＝90°

体积 664.3(4)°3

Z，计算的密度 2，1.256Mg/m³

吸收系数 0.477mm^-1

F(000) 268

微晶大小0.24×0.22×0.14mm

数据收集的θ范围1.71-26.35°

临界指数(Limiting indices)-9＜＝h＜＝9，-9＜＝k＜＝9，-15＜＝1＜＝15

集合/独特的反射5309/2674[R(int)＝0.0227]

θ完全度＝26.35 99.7％

吸收校正无

精修方法于F²上全矩阵(Full-matrix)少正方形

数据/限制/参数2674/1/135

F₂上的拟合优度1.055

最终的R指数[I＞2sigma(I)] R¹＝0.0383，wR²＝0.0939

R指数(所有数据)R1＝0.0409，wR2＝0.0959

绝对结构参数0.02(6)

最大差峰和谷0.310和

表2.2-5的原子配位(x 10⁴)和等量各向同性位移参数

U(eq)定义为正交Uij张量的第三痕迹。

表3.2-5的键长

和键角[°]。

表4.2-5的各相异性位移参数

各向异性位移因子指数为：-2pi²[h²a＊²U11+...+2h k a＊b＊U12]

表5.2-5的氢配位(x10⁴)和各向同性位移参数(2×10³).

路线3

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(3-1)

向1.6g(3.45mmol)氨基甲酰氯1-9在25mL THF中的溶液那加入630mg(4.31mmol)的胺2-5，1.44mL(10.3mmol)三乙胺和催化量的DMAP。室温下搅拌24小时后，该反应在EtOAc和饱和NaHCO₃水溶液之间分配，有机物用盐水吸毒，用Na₂SO₄干燥，和通过旋转蒸发浓缩。残余物通过硅胶色谱用EtOAc/己烷纯化得到-1.7g的浅黄色胶状物。将其溶于75mL的CH₃CN，加入3mL三乙胺三氟化氢，将该混和物室温下搅拌24小时。再次加入3mL三乙胺三氟化氢且该反应在37℃下加热24小时。该反映随后加入到饱和NaHCO₃水溶液，用3x EtOAc萃取，用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥和通过旋转蒸发浓缩。该残余物通过硅胶色谱用EtOAc-20∶1∶1 EtOH/NH₄OH/H₂O纯化得到3-1，其为白色固体。3-1的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.3(s，1H)，5.25(m，1H)，4.9(d，1H)，4.8(d，1H)，4.6(d，1H)，4.45(m，1H)，4.1-4.0(m，2H)，3.2-3.1(m，1H)，3.1(s，3H)，3.0(m，1H)，2.4-2.3(m，1H)，2.3(s，3H)，2.3-2.2(m，2H)，1.7(m，1H)ppm.HRMS(ES)C25H₂F3N3O2的M+H：460.2207.实测值：460.2213。

路线3A

在带有顶部搅拌器、温差电偶和氮气/真空入口的烧瓶内在IPAC(0.9L)中加入氨基甲酰氯1-9。向该溶液加入0.9L DMF，111gms氟二胺2-5和540ml二异丙基乙基。该溶液在60℃下加热15小时且分析氨基甲酰氯的产物转化率。当氨基甲酰氯的产物转化率通过HPLC在200nm下＞98％时该反映被视为完全。使该反应冷却至5℃和加入450ml6N HCl。使该溶液陈化直至托甲硅烷基化反应达到完全(＞99A％，在200nm下)，约2小时。

乙酸异丙基酯(3L)并且随后将8wt％碳酸氢钠水溶液(2L)加入到该反应混合物中，将其升温至15-20℃。分离各层且随后水草用3L IPAC萃取1次。合并的有机层用1L水洗涤2次。洗涤的有机溶液浓缩至5升，并且在35-40℃下经1μm聚丙烯滤膜转移到另一烧瓶内。持续蒸馏直至达到1L的体积，随后该反应在2小时内冷却至室温。在2小时内缓慢加入庚烷(1L)。所得的浆液被过滤至烧结玻璃漏斗上且结晶产物用500ml的2∶1庚烷∶乙酸异丙酯洗涤3次，作为替换洗涤。该固体3-1用氮气流干燥过夜。该固体的¹H NMR和HRMS数据相当于路线3的产物的数据。

选择一种上述制备方法得到的单一晶体在Bruker Smart Apex系统上进行单晶X射线数据收集。晶体为无色多面体并且大小为0.14mm×0.13mm×0.13mm。该单位晶胞以30秒扫描率收集且自动指数得出该晶胞确定为斜方晶。在象限数据收集喉用30秒扫描率解析该结构为斜方晶P2₁2₁2₁空间群。

参见表6-10用于将有关解析结构的最终说明的信息制成表格。3-1的结构的计算机绘图如图2所示。

表6.3-1的晶体数据和结构精修

经验式C₂₅H₂₈F₃N₃O₂

式重459.50

温度298(2)K

波长

晶系，空间群单斜晶，P2(1)2(1)2(1)

单位晶胞大小：

α＝90°.

β＝90°

γ＝90°

体积 2317.3(5)°³

Z，计算的密度 4，1.317Mg/m³

吸收系数 0.101mm^-1

F(000) 968

微晶大小0.14×0.13×0.13mm

数据收集的θ范围2.11-26435°

临界指数(Limiting indices)-14＜＝h＜＝14，-14＜＝k＜＝14，-22＜＝l＜＝22

集合/独特的反射22539/2698[R(int)＝0.0405]

θ完全度＝26.35 99.8％

吸收校正无

精修方法于F²上全矩阵(Full-matrix)少正方形

数据/限制/参数2698/0/301

F₂上的拟合优度1.157

最终的R指数 [I＞2sigma(I)] R1＝0.0429，wR2＝0.0993

R指数(所有数据)R1＝0.0550，wR2＝0.1047

绝对结构参数0(10)

最大差峰和谷0.165和

表7.化合物3-1的原子配位(x10⁴)和等量各向同性位移参数

U(eq)定义为正交Uij张量的第三痕迹

表8.3-1的键长

和键角[°]。

表9.3-1的各相异性位移参数

各向异性位移因子指数为：-2pi²[h²a＊²U11+...+2h k a＊b＊U12]

表10.3-1的氢原子配位(x10⁴)和各向同性位移参数

路线4

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(4-2)

该化合物以与制备3-1相同的方式制备，但除了从手性柱按照路线2步骤3所述掺入2-3的第一洗脱对映异构体之外。4-2的数据：¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.3(s，1H)，5.4(bs，1H)，5.2(d，1H)，4.9(m，1H)，4.6(m，1H)，4.4(m，1H)，4.0(m，1H)，3.8(m，1H)，3.2(s，3H)，3.0(m，1H)，2.5-2.2(m，3H)，2.4(s，3H)，1.8-1.6(m，2H)ppm.HRMS(ES)C₂₅H₂₈F₃N₃O₂的M+H：计算值460.2207.实测值：460.2229。

路线5

路线5(连续)

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(5-3)

本化合物以和制备3-1相同的方式制成，但处理将2-2a的trans异构体掺入道合成中之外。″trans-2-3″的对映异构体的拆分通过色谱法用Chiralpak

10×50cm柱和含15％EtOH的己烷(含0.1％二乙胺)在150mL/min下进行。洗脱液在4×250mm Chiralpak

柱和含15％EtOH的己烷(含0.1％二乙胺)在1mL/min下的分析HPLC试验表明第一洗脱对映异构体具有Rt＝7.30分钟并且第二对映异构体具有Rt＝11.59分钟。将第一洗脱对映异构体(具有未知的绝对立体化学)进一步处理得到trans胺5-1，将其增加到按照与路线2所述的相同路线中5-3的合成。5-3的合成：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.3(s，1H)，5.0-4.7(m，4H)，4.5(m，1H)，4.0(m，1H)，3.8(m，1H)，3.3(m，1H)，2.9(s，3H)，2.85(m，1H)，2.35(s，3H)，2.2-1.9(m，3H)，1.7(m，1H)ppm.HRMS(ES)C₂₅H₂₈F₃N₃O₂的M+H：计算值460.2207。实测值：460.2231。化合物5-3和5-4的哌啶的绝对立体化学还为测定且所示的立体化学表明已经得到试验确定。

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(5-4)

该化合物以与5-3相同的方式制成，但处理增加从手性柱分离trans-2-3的第二洗脱异构体。5-4的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.3(s，1H)，5.4(m，1H)，4.9-4.6(m，3H)，4.4(m，1H)，4.0(m，1H)，3.85(m，1H)，3.25(m，1H)，3.0(s，3H)，2.85(m，1H)，2.35(s，3H)，2.2-1.9(m，4H)ppm。HRMS(ES)C₂5H28F3N3O2的M+H：460.2207.实测值：460.2229。

路线6

步骤1：(2S，4S)-4-羟基-2-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6-2)

向带有搅拌棒的火焰干燥的烧瓶内加入(2S，4S)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6-1，从(S)-(-)-4-氯-3-羟基丁腈通过Maeda等Synlett 2001，1808-1810的方法制备，7.8g，20.7mmol)和无水乙腈(20.0mL)。所得溶液用三乙胺三氟化氢(10.1mL，62.0mmol)处理且在N₂下搅拌。该反应在40℃下搅拌12小时。该反应随后用EtOAc(100mL)稀释且倾入5％NaHCO₃水溶液。停止放出气体后，有机层再用5％NaHCO₃水溶液洗涤3次。有机层用硫酸镁干燥，过滤和浓缩得到粗产物。从EtOAc/己烷重结晶得到(2S，4S)-4-羟基-2-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6-2)，其为白色晶体固体。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)旋转异构体δ7.38-7.18(m，5H)，4.90(m，1H)，4.42(m，1H)，3.88(m，1H)，3.56(dd，J＝11.5，4.0Hz，1H)，2.60(m，1H)，2.03(m，1H)，1.50和1.20(br s，9H)；MS实测值208.0，理论值208.1(M-C(CH₃)3)。

步骤2：(2S)-4-氧代-2-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6-3)

向带有搅拌棒的火焰干燥的烧瓶内加入150mL无水二氯甲烷，将其冷却至-78℃。依次加入草酰氯(3.8mL，44mmol)和DMSO(4.8mL，61mmol)。并且将该反应搅拌10分钟。滴加存在于10mL无水二氯甲烷中的(2S，4S)-4-羟基-2-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6-2，2.28g，8.73mmol)并在-78℃下搅拌1小时。加入三乙胺(12mL，87mmol)和使该反应在1小时内升至室温。完成后，该反应用5％NaHCO₃、盐水洗涤并用MgSO₄干燥。有机层浓缩得到粗(2S)-4-氧代-2-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6-3)。用EtOAc/己烷重结晶。¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ7.35(m，3H)，7.17(m，2H)，5.38(m，1H)，4.08(d，J＝19.5Hz，1H)，3.90(d，J＝19.3Hz，1H)，3.13(dd，J＝18.8，9.8Hz，1H)，2.58(dd，J＝18.6，2.4Hz，1H)，1.40(br s，9H)；MS实测值206.0，理论值206.1(M-C(CH₃)3)。

步骤3：(2S)-2-苯基-4-{[三氟甲基)磺酰基]氧基}-2，5-二氢-1H-吡咯- 1-羧酸叔丁酯(6-4)

向带有搅拌棒的火焰干燥的烧瓶内加入酮(2S)-4-氧代-2-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6-3，0.16g，0.62mmol)和无水THF(2mL)。所得溶液冷却至-78℃和用滴加的六甲基二甲硅烷基氨化锂(LHMDS，0.68mL，1M在THF中，0.68mmoL)处理。该反应在-78℃下搅拌1小时并且依次加入N-(5-氯吡啶-2-基)-1，1，1-三氟-N-[(三氟甲基)磺酰基]甲磺酰胺(0.27g，068mmol)。该反应升温至0℃且共搅拌4小时。该反应用Et2O(10mL)稀释且连续用H₂O(10mL)和盐水(10mL)洗涤。有机层用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。粗残余物通过快速柱色谱纯化(0-20％EtOAc/己烷梯度，15分钟)得到(2S)-2-苯基-4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(6-4)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)主要的旋转异构体：δ7.30(m，5H)，5.72(m，1H)，5.48(m，1H)，4.42(m，2H)，1.18(s，9H)；MS实测值379.0理论值379.1(M-CH₃)。

步骤4：(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-N，N-二甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(6-5)

向带有搅拌棒的火焰干燥的烧瓶内加入(2S)-2-苯基-4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(6-4，0.250g，0.636mmol)，2，5-二氟苯基硼酸(0.251g，1.59mmol)，Na₂CO₃(0.202g，1.91mmol)和LiCl(0.081g，1.91mmol)。将该固体溶于20mL 4∶1DME/H₂O并且用氮气脱气。加入Pd(PPh3)4(0.037g，0.032mmol)且将该反应密封在氮气下并加热至90℃2小时。完成后，该反应在5％NaHCO₃水溶液和EtOAc(3×50mL)之间分配，并且合并的有机层用MgSO₄干燥。过滤后，有机层浓缩且腈快速柱色谱纯化(SiO₂，0-20％EtOAc/己烷梯度)得到(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(6-5)。

步骤5：1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-基] 羰基}-3-甲基-1H-咪唑-3-鎓(6-6)

向带有搅拌棒的火焰干燥的烧瓶内在氮气下加入6-5(0.63g，1.75mmol)和无水CH₂Cl₂(10mL)。所得溶液用三氟乙酸(5mL)处理且在25℃下搅拌1.5小时。完成后，该反应浓缩，溶于CH₂Cl₂(50mL)并用5％NaHCO₃(50mL)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤和减压下浓缩。将所得游离胺溶于无水的THF(10mL)且用羰基二咪唑(0.31g，1.93mmol)处理。所得溶液回流小时直至完成。浓缩该反应，溶于EtOAc(50mL)和用H₂O和盐水洗涤。干燥合并的有机层(MgSO₄)并浓缩。将粗酰基咪唑溶于无水CH₃CN且用MeI(2.2mL，36mmol)处理。所得溶液在25℃下搅拌过夜。完成后，该反应浓缩得到6-6，其为橙色固体：LRMSm/z(M+H)实测值365.9，理论值366.1。

路线7

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N[(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-N-甲基-2- 苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(7-1)

向75mg(0.15mmol)6-6在1mL THF中的溶液内加入40mg(0.18mmol)胺2-5的二-HCl盐和106L(0.76mmol)三乙胺。室温下搅拌72小时，该反应在CH₂Cl₂和饱和NaHCO₃水溶液之间分配，有机物用盐水洗涤，用MgSO₄干燥和通过旋转蒸发浓缩。残余物通过硅胶色谱用80∶10∶10CHCl₃/EtOAc/MeOH纯化得到7-1，其为白色固体。7-1的数据：HRMS(ES)C₂₄H₂₆F₃N₃O的M+H：计算值430.2101.实测值：430.2116。

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-N-甲基-2- 苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(7-2)

该化合物按照类似于7-1的方式制备，用4-1替代作为起始原料。7-2的数据：HRMS(ES)C₂₄H₂₆F₃N₃O的M+H：计算值430.2101.实测值：430.2119。

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-N-甲基- 2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(7-3)

该化合物按照类似于7-1的方式制备，用5-1替代作为起始原料。7-3的数据RMS(ES)C₂₄H₂₆F₃N₃O的M+H：计算值2101.实测值：430.2115。化合物7-3的哌啶的绝对立体化学还未测定但所示的立体化学已经通过试验确定。

下列化合物通过路线1-7和路线G-N所示的方法的简单改进来制备，但用适当取代的试剂替换上述路线所使用的那些时间。

路线8

4-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基1-2-(羟基甲基)哌啶-1-羧酸苄酯(8-2)

向2.0g(6.8mmol)8-1(报告在：S.J.Hayes，T.C.Malone，G.Johnson J.Org.Chem.1991，56，4084-4086)在100mL CH₂Cl₂中的溶液内加入3.33mL(23.9mmol)三乙胺，随后滴加存在于50mL DMSO中的2.44g(15.4mmol)SO3-吡啶。室温下搅拌5小时后，该混和物在CH₂Cl₂和H₂O之间分配，分离各相，用2×1M HCl、饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤，用MgSO₄干燥并浓缩得到酮。向2.1g(7.2mmol)溶于35mLMeOH中的该酮内加入1mL AcOH和14.4mL(28.9mmol)的MeNH₂在MeOH中的2M溶液。搅拌1小时后，加入910mg(14.4mmol)5mL MeOH中的NaCNBH3并且将该反应搅拌过夜。该反应用饱和NH₄Cl水溶液猝灭，用CH₂Cl₂萃取，用NaHCO₃、H₂O、盐水洗涤，用MgSO₄干燥和浓缩得到2.0g(7.2mmol)胺。将该物质溶于25mL CH₂Cl₂，加入1.78g(8.2mmol)的二碳酸二叔丁酯和1.8mL(12.9mmol)三乙胺，并且将所得混和物搅拌72小时。该反应随后在CH₂Cl₂和饱和NaHCO₃水溶液分配，分离，用H₂O洗涤，盐水，用MgSO₄干燥并浓缩。残余物通过硅胶色谱用EtOAc/己烷纯化得到1.85g(4.6mmol)非对映异构体的混和物。将其溶于20mL THF和1mL of MeOH，冷却至0℃且加入496mg(22.8mmol)LiBH₄。升至室温并搅拌过夜后，该反应用饱和NH₄C1水溶液猝灭，用EtOAc萃取，用H₂O、盐水洗涤，用MgSO₄干燥和浓缩得到8-2，其为无色胶。8-2的数据：LRMS(ES)C₂₀H₃₀N₂O₅的M+H：计算值379.实测值：379。

[2-(羟甲基)-1-甲基哌啶-4-基]甲基氨基甲酸叔丁酯(8-3)

向1.08g(2.9mmol)存在于30mL EtOH中的8-2加入7mL(74mmol)的1，4-换己二烯和催化量的10％碳载Pd。搅拌过夜后，该反应经硅藻土过滤，通过旋转蒸发浓缩，并溶于25mL MeOH。向其中加入2mLAcOH和700μL(8.6mmol)37％甲醛水溶液。搅拌过夜后，加入540mg(8.6mmol)存在于5mL MeOH中的NaCNBH3且将该反应搅拌1小时。通过旋转蒸发除去溶剂，残余物在EtOAc和NaHCO₃水溶液之间分配，有机相用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物溶于CH₂Cl₂，过滤和浓缩得到8-3，其为无色油。8-3的数据：LRS(ES)C₁₃H₂₆N₂O₃的M+H：计算值259.实测值：259.

[2-(氟甲基)-1-甲基哌啶-4-基]甲基氨基甲酸叔丁酯(8-4)和(6-氟-1- 甲基氮杂环庚胺-4-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(8-5)

向350μL(2.6mmol)(二乙基氨基)三氟化硫(DAST)在15mL CH₂Cl₂中的溶液内在-78℃下加入存在于5mL CH₂Cl₂中的520mg(2.0mmol)。令该反应缓慢升至室温且搅拌过夜和随后用冰水猝灭。该混和物在另外的CH₂Cl₂和少量3M KOH之间分配，有机相用水洗涤，用Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物加载在硅胶柱上且用EtOAc-20∶1∶1EtOH/NH₄OH/H₂O。洗脱的第一产物是扩环产物8-5，其为无色油，并且洗脱的第二产物是8-4，其为无色油。8-5和8-4两者分离为trans非对映异构体的对映异构体混和物。该结构通过大量1D和2D NMR光谱来确定的。8-5的数据：¹H NMR(600MHz，CD2Cl2)δ4.75(m，1H)，4.1-3.9(m，1H)，2.9-2.7(m，3H)，2.75(s，3H)，2.4(s，3H)，2.35(m，1H)，2.1-1.7(m，4H)，1.4(s，9H)ppm。8-4的数据：¹H NMR(500MHz，CD2Cl2)δ4.8-4.5(m，2H)，4.1-4.0(m，1H)，3.2(m，1H)，2.75(m，2H)，2.7(s，3H)，2.45(s，3H)，1.9-1.5(m，4H)，1.45(s，9H)ppm。

(25)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(2R，4R)-2-(氟甲基)-1-甲基哌啶-4-基]-2- (羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(8-6a)和(2S)-4- (2，5-二氟苯基)-N-[(2S，4S)-2-(氟甲基)-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)- N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(8-6b)

将80mg(0.31mmol)8-4在30mL EtOAc中的溶液用HCl气体保护且在室温下搅拌1小时。该反应随后通过旋转蒸发浓缩且所得白色固体悬浮在1mL THF中。向其中加入156mg(0.34mmol)的1-9，268L(1.54mmol)二异丙基乙基胺和催化量的DMAP。50℃下加热过夜后，加入500μL三氟乙酸且在室温下持续搅拌，之后用饱和NaHCO₃水溶液猝灭。该混和物在CH₂Cl₂之间分配，有机相用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，并浓缩。将残余物加载在硅胶柱上且用CHCl₃-80∶10∶10CHCl₃/EtOAc/MeOH洗脱得到8-6a和8-6b，其为不可分混和物-无色胶。8-6a/8-6b的数据：HRMS(ES)C26H30F3N3O2的M+H：计算值474.2363.实测值：474.2374。

下列化合物通过路线1-8和路线G-N所示的方法的简单改进来制备，但用适当取代的试剂替换该路线所使用的那些试剂。

路线9

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-甲基-1-氧桥哌啶-4-基]-2- (羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(9-1)

向20mg(0.044mmol)3-1在1mL CH₂Cl₂中的溶液内于0℃下加入11mg(～0.048mmol)的mCPBA。撤去冰浴且将该反应搅拌30分钟。该混和物在EtOAc和饱和NaHCO₃水溶液之间分配，分离，用H₂O、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥和通过旋转蒸发浓缩。将残余物加载在硅胶柱上且用EtOAc-20∶1∶1EtOH/NH₄OH/H₂O洗脱得到9-1，其为白色泡沫。9-1的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.25(s，1H)，5.0-4.9(m，2H)，4.7(m，1H)，4.5(m，1H)，4.3-4.2(m，1H)，4.0(m，2H)，3.7(m，1H)，3.4-3.3(m，2H)，3.3(s，3H)，3.2(s，3H)，2.5-1.9(bs，2H)，1.8(m，1H)ppm.HRMS(ES)C₂₅H₂₈F₃N₃O₃的M+H：计算值476.2156；实测值476.2165。

路线10

步骤1：(3R，4S)-4-[{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-(羟甲基)-2-苯基-2，5- 二氢-1H-吡咯-1-基]羰基}(甲基)氨基]-3-氟哌啶-1-羧酸苄酯(10-1)：

向885mg(2.4mmol)2-3(从色谱洗脱的第一异构体)在12mLEtOAc中的溶液内于0℃下加入12mL(48mmol)HCl在二恶烷中的4M溶液。撤去冰浴，持续搅拌2小时，并且随后通过旋转蒸发除去挥发物。残余物在EtOAc和含5mL 1M NaOH的饱和NaHCO₃水溶液之间分配，分离并且水相用2x EtOAc萃取。合并的有机萃取液再次用NaHCO₃、盐水处理，用Na₂SO₄干燥并且浓缩得到590mg(2.2mmol)的胺。向215mg(0.81mmol)存在于5mL THF中的该物质内加入340mg(0.73mmol)1-9，306μL(2.2mmol)三乙胺和催化量的DMAP。搅拌过夜后，该反应通过LC/MS判断完成～40％，加入另一部分的DMAP。该反应随后在EtOAc和饱和NaHCO₃之间分配，有机相用NaHCO₃、H₂O、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥且浓缩。残余物通过硅胶色谱用EtOAc/己烷纯化得到10- 1，其为无色油。10-1的数据：LRMS(ES)C₃₈H₄₆F₃N₃O₄Si的M+H：计算值694.4.实测值：694.3.

步骤2：(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟哌啶-4-基]-2-羟甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(10-2)：

向405mg(0.58mmol)10-1在4mL EtOH中的溶液内加入1.38mL(14.6mmol)1，4-环己二烯、100mg10％碳载钯，并且随后搅拌过夜。该反应经硅藻土过滤，浓缩且将残余物溶于3mL CH₂Cl₂。向其中加入3mL三氟乙酸，持续搅拌1小时，并且随后该混和物在EtOAc和饱和NaHCO₃+25mL的5％Na₂CO₃水溶液之间分配。有机相用NaHCO₃洗涤，再用H₂O、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥且通过旋转蒸发浓缩。残余物加载在硅胶柱上且用EtOAc-20∶1∶1EtOH/NH₄OH/H₂O洗脱得到10-2，其为白色固体。-5％的杂质随后通过反相色谱用95∶5-5∶95H₂O/CH3CN(两者含有0.1％TFA)除去。馏分用NaHCO₃碱化得到纯的B-2，其为白色固体。10-2的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.3(s，1H)，5.2(bs，1H)，4.9(m，1H)，4.8-4.6(m，2H)，4.45(m，1H)，4.2-4.1(m，1H)，4.0(m，1H)，3.3-3.2(m，2H)，3.1(s，3H)，2.85-2.7(m，2H)，2.1(m，1H)，1.7(m，2H)ppm.HRMS(ES)C₂₄H₂₆F₃N₃O₂的M+H：计算值446.2050.实测值：446.2059.

路线11

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-异丙基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2.5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(11-1)

向38mg(0.085mmol)10-2在1mL 1，2-二氯乙烷中的溶液内加入20ml(0.34mmol)的乙酸、25L(0.34mmol)丙酮和27mg(0.13mmol)Na(OAc)₃BH。搅拌过夜后，该反应在EtOAc和饱和NaHCO₃水溶液之间分配，有机相再次用NaHCO₃、H₂O、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥和通过旋转蒸发浓缩。残余物通过反相色谱用95∶5-5∶95H₂O/CH₃CN(两者含有0.1％TFA)纯化。馏分用NaHCO₃碱化得到11-1，其为无色莫。11-1的数据：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.3(s，1H)，5.3(m，1H)，4.95-4.8(m，2H)，4.6(m，1H)，4.45(m，1H)，4.1-4.0(m，2H)，3.2(m，1H)，3.15(s，3H)，3.0(m，1H)，2.8(m，1H)，2.45-2.25(m，3H)，1.75(m，1H)，1.1-1.0(m，6H)ppm.HRMS(ES)C₂₇H₃₂F₃N₃O₂的M+H：488.2519.实测值：488.2517。

路线12

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4R)-3-氟哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N- 甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(12-1)

该化合物以与10-2相同的方式制备，但除了增加2-3的对映异构体之外。12-1的数据：HRMS(ES)C₂₄H₂₆F₃N₃O₂的M+H：计算值446.2050.实测值：446.2069。

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-3-氟哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N- 甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(12-2)

该化合物以与10-2相同的方式制备，但除了合成中增加2-2a的trans异构体之外。″trans-2-3″的对映异构体通过色谱利用Chiralpak

10×50cm柱和含15％EtOH的己烷(含0.1％二乙胺)以150mL/min进行拆分。洗脱液在4×250mm Chiralpak

柱和含15％EtOH的己烷(含0.1％二乙胺)以1mL/min的分析HPLC施用证实，第一洗脱的对映异构体具有Rt＝7.30分钟和第二对映异构体具有Rt＝11.59分钟。该第一洗脱的对映异构体(具有未知的绝对立体化学)进一步经过处理得到trans胺，将其增加到12-2的合成中按照与路线10所示的相同路线。12-2的数据：HRMS(ES)C24H₂6F3N3O2的M+H：计算值446.2050.实测值：446.2069。

化合物12-2和12-3的哌啶的绝对立体化学未经测定但所示的立体化学已经通过施用确定。

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-3-氟哌啶4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺(12-3)

本化合物以与10-2相同的方式制成，并且除了增加从手性柱分离″trans-2-3″的第二洗脱异构体。12-3的数据：HRMS(ES)C₂₄H₂₆F₃N₃O₂的M+H：计算值446.2050.实测值：446.2068。

序列表

<110>Merck & Co.，Inc.

Coleman，Paul J.

Cox，Christopher D.

Garbaccio，Robert M.

Hartman，George D.

<120>有丝分裂驱动蛋白抑制剂

<130>21481Y

<150>60/495,637

<151>2003-08-15

<150>60/563,580

<151>2004-04-19

<160>2

<170>FastSEQ视窗第4.0版

<210>1

<211>42

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>全合成核苷酸序列

<400>1

gcaacgatta atatggcgtc gcagccaaat tcgtctgcga ag 42

<210>2

<211>60

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>全合成核苷酸序列

<400>2

gcaacgctcg agtcagtgat gatggtggtg atgctgattc acttcaggct tattcaatat 60

Claims

1.式I的化合物：

或其药学可接受盐或立体异构体，其中：

n是2；

t是1；

u是0或1；

R¹选自C₁-C₆烷基；

R²选自：H和C₁-C₆烷基；

R³选自：

1)氢；和

2)C₁-C₆烷基-O-R^d；

R⁴独立地选自：卤素；

R⁵选自：氢；

R¹⁰选自F；

R¹¹为H；

R¹²为H；

R¹³选自H和-CH₂F；

R^ox为氧代；

R^d选自：H。

2.权利要求1的化合物，其为式II的化合物：

或其药学可接受盐或立体异构体，

其中：

n是2；

t是1；

R¹选自C₁-C₆烷基；

R²选自：H和C₁-C₆烷基；

R³选自：

1)氢；和

2)C₁-C₁₀烷基-O-R^d；

R⁴独立地选自：卤素；

R⁵选自：氢；

R¹⁰选自：F；

R¹³选自H和-CH₂F；

R^ox是氧代；

R^d选自：H。

3.权利要求2的化合物，其为式III的化合物：

或其药学可接受盐或立体异构体，其中：

n是2；

R¹选自C₁-C₆烷基；

R²选自：H和C₁-C₆烷基；

R⁴独立地选自：卤素；

R⁵选自：氢。

4.权利要求3的化合物，其为式IV的化合物：

或其药学可接受盐或立体异构体，其中：

R¹选自C₁-C₆烷基；

R²选自：H和C₁-C₆烷基；

R⁴选自卤素。

5.权利要求4的化合物，其为式V的化合物：

或其药学可接受盐或立体异构体，

其中：

R¹选自C₁-C₆烷基；

R²选自：H和C₁-C₆烷基。

6.权利要求2的化合物，其为式VI的化合物：

或其药学可接受盐或立体异构体，

其中：

R¹选自C₁-C₆烷基；

R²独立地选自：H和C₁-C₆烷基。

7.权利要求1的化合物，其中所述化合物选自：

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]-N-甲基-2-苯基-2，5二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(2S，4S)-2-(氟甲基)-1-甲基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-甲基-1-氧桥哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟-1-异丙基哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2.5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-3-氟哌啶-4-基]-2-(羟基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

或其药学可接受盐。

8.权利要求1的化合物，其是：

或其药学可接受盐。

9.权利要求1的化合物，其是：

或其药学可接受盐。

10.权利要求1的化合物，其是：

或其药学可接受盐。

11.权利要求1的化合物，其是：

或其药学可接受盐。

12.权利要求1的化合物，其是：

或其药学可接受盐。

13.一种药物组合物，其含有权利要求1的化合物和药学可接受载体。

14.权利要求13的组合物，其进一步含有选自下列的化合物

1)雌激素受体调节剂，

2)雄激素受体调节剂，

3)视黄酸受体调节剂，

4)细胞毒性/细胞抑制剂，

5)抗增殖剂，

6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，

7)HMG-CoA还原酶抑制剂，

8)HIV蛋白酶抑制剂，

9)反转录酶抑制剂，

10)血管生成抑制剂，

11)PPAR-γ激动剂，

12)PPAR-δ激动剂；

13)细胞增殖和存活信号的抑制剂，

14)细胞周期关卡干扰剂，和

15)细胞凋亡诱导剂。

15.权利要求14的组合物，其中所述进一步含有的化合物是血管生成抑制剂，所述血管生成抑制剂选自：酪氨酸激酶抑制剂，表皮衍生生长因子的抑制剂，成纤维细胞衍生生长因子的抑制剂，血小板衍生生长因子的抑制剂，MMP抑制剂，整联蛋白阻断剂，干扰素-α，白介素-12，戊聚糖多硫酸酯，环加氧酶抑制剂，羧酰胺基三唑，康布瑞塔卡汀A-4，角鲨胺，6-O-(氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇，沙利度胺，制管张素，肌钙蛋白-1或VEGF的抗体。

16.权利要求13的组合物，其进一步含有蛋白体抑制剂。

17.权利要求13的组合物，其进一步极光型激酶抑制剂。

18.权利要求13的组合物，其进一步含有Raf激酶抑制剂。

19.权利要求13的组合物，其进一步含有丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂。

20.权利要求13的组合物，其进一步含有不是KSP的另一种有丝分裂驱动蛋白的抑制剂。

21.权利要求14的组合物，其中所述进一步含有的化合物是选自他莫昔芬和雷洛昔芬的雌激素受体调节剂。