CN100432077C - N-磺酰氨基噻唑 - Google Patents

Abstract

本发明涉及式(I)的N-(4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)-(C_6-18)芳基磺酰胺：其中吡啶的氮原子是取代的，且其中吡啶环任选地是桥连的，其可用作与类固醇硫酸酯酶有关的药物。

Description

N-磺酰氨基噻唑

本发明涉及N-磺酰氨基噻唑，例如可用于治疗由类固醇硫酸酯酶的作用介导的疾病的N-磺酰氨基噻唑。

一方面，本发明提供了其中吡啶的氮原子是取代的、例如且其中吡啶环任选地是桥连的N-(4，5，6，7-四氢-噻唑并-[5，4-c]吡啶-2-基)-(C_6-18)芳基磺酰胺在制备治疗由类固醇硫酸酯酶的作用介导的疾病例如痤疮的药物中的用途。

其中吡啶的氮原子是取代的、例如并且其中吡啶环任选地是桥连的N-(4，5，6，7-四氢-噻唑并-[5，4-c]吡啶-2-基)-(C_6-18)芳基磺酰胺在本文中被称为“(按照)本发明的噻唑并-吡啶-芳基磺酰胺”。吡啶的氮原于是取代的，例如被以下基团取代：(C_1-12)烷氧基羰基、(C_1-6)烷基羰基、(C_3-6)环烷基(C_1-6)烷基羰基、未取代的或取代的(C_6-18)芳基、单或多重取代的例如苯基，例如被氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基、例如被氨基羰基或卤代(C_1-6)烷基取代的(C_6-18)芳基。优选地，吡啶的氮原子被(C_1-12)烷氧基羰基、(C_3-6)环烷基(C_1-6)烷基羰基、未取代的或取代的(C_6-18)芳基取代。吡啶环是未桥连的或桥连的，例如通过(C_1-4)亚烷基、例如(C_1-2)亚烷基如亚乙基桥连。本发明的噻唑并-吡啶-芳基磺酰胺包括例如N-(4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)-苯磺酰胺。与磺酰胺连接的(C_6-18)芳基可以是未取代的或取代的，例如被有机化学中常规的基团例如卤代(C_1-4)烷基或卤素取代。

另一方面，本发明所提供使用的本发明的噻唑并-吡啶-芳基磺酰胺是式I的化合物：

其中：

R₁是未取代的或取代的(C_6-18)芳基，例如被氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基取代，优选被卤素或卤代(C_1-6)烷基取代，

R₂是(C_1-12)烷氧基羰基、(C_1-6)烷基羰基、(C_3-6)环烷基(C_1-6)烷基羰基或未取代的或取代的(C_6-18)芳基，例如被氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基取代，且

-R₃、R₄和R₅是氢

或者

-R₃和R₅一起是(C_1-4)亚烷基且R₄是氢。

用于制备治疗由类固醇硫酸酯酶的作用介导的疾病的药物的本发明的包括式I化合物在内的噻唑并-吡啶-芳基磺酰胺在下文中被称为“(按照)用于本发明的化合物”。

本发明的噻唑并-吡啶-芳基磺酰胺中所定义的每个单独的取代基可以本身是优选的取代基，独立于所定义的其它取代基。

另一方面，本发明提供了为式II化合物的式I化合物：

其中：

R₁是未取代的或取代的(C_6-18)芳基，例如被氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基取代，

R₂`是(C_1-12)烷氧基羰基、(C_1-6)烷基羰基、(C_3-6)环烷基(C_1-6)烷基羰基或未取代的或取代的(C_6-18)芳基，例如被氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基取代，且

R₃和R₅一起是(C_1-4)亚烷基且R₄是氢。

另一方面，本发明提供了为式II_A化合物的式II化合物：

其中：

R₁是被卤代(C_1-4)烷基或卤素取代的苯基，且

R₂`是(C_1-8)烷氧基羰基、(C_3-6)环烷基(C_1-4)烷基羰基或未取代的或取代的苯基，例如被氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基单或多重取代的苯基。

另一方面，本发明提供了为式II_A1化合物的式II或II_A化合物：

另一方面，本发明提供了为式III化合物的式I化合物：

其中：

R₁是未取代的或取代的(C_6-18)芳基，例如被氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基取代，且

R₂``是(C_1-12)烷氧基羰基、(C_3-6)环烷基(C_1-6)烷基羰基、未取代的(C_6-18)芳基或被氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基取代的(C_6-18)芳基。

另一方面，本发明提供了为式III_A化合物的式III化合物：

其中：

R₁是被卤代(C_1-4)烷基或卤素单或多重取代的苯基，且

R₂``是(C_1-6)烷氧基羰基、(C_3-6)环烷基(C_1-2)烷基羰基或被氨基羰基或卤代(C_1-4)烷基取代的苯基。

另一方面，本发明提供了式III_A1的化合物：

另一方面，本发明提供了式II化合物，其是N-(3-硫杂-5，11-二氮杂-三环[6.2.1.0^＊2，6^＊]十一碳-2(6)，4-二烯-4-基)-苯磺酰胺。

另一方面，本发明提供了选自以下的式III化合物：

-2-[2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺，

-2-[2-(2，3-二氯-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺，

-2-[2-(3，5-二氯-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺，

-2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯，

-2-(2，3-二氯-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯，

-2-(3，5-二氯-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯，和

-N-[5-(2-环戊基-乙酰基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基]-3，5-双-三氟甲基-苯磺酰胺。

如果本文中没有另外定义，则

-(C_6-18)芳基包括未取代的和取代的(C_6-18)芳基、例如苯基，例如被例如包括氨基羰基、卤素或卤代(C_1-6)烷基在内的有机化学中的常规基团单或多重取代的(C_6-18)芳基。

-卤代(C_1-6)烷基包括卤代(C_1-4)烷基，例如CF₃，

-卤素包括氟、氯、溴和碘，例如氯，

-(C_1-12)烷氧基包括(C_1-8)烷氧基，例如(C_1-4)烷氧基，例如叔丁氧基，

-(C_3-6)环烷基包括(C_5-6)环烷基，例如环戊基，

-(C_1-6)烷基羰基包括(C_1-4)烷基羰基，例如甲基羰基。

本发明所提供的化合物例如式II、II_A、II_A1、III、III_A和III_A1的化合物在下文中被称为“(按照)本发明的化合物”。本发明的化合物中以上所定义的每个单独的取代基可以本身是优选的取代基，独立于所定义的其它取代基。式II化合物包括式II_A和II_A1的化合物。式III化合物包括式III_A和III_A1的化合物。

本发明的化合物包括任何形式的化合物，例如游离形式、盐形式、溶剂合物形式以及盐和溶剂合物形式的化合物。

另一方面，本发明提供了盐形式的本发明的化合物。

用于本发明的化合物可以以任何形式被使用，例如游离形式、盐形式、溶剂合物形式以及盐和溶剂合物形式。

本发明的化合物的盐或用于本发明的化合物的盐包括可药用盐，例如包括金属盐和酸加成盐。金属盐包括例如碱金属盐或碱土金属盐，例如钠盐；酸加成盐包括本发明的化合物或用于本发明的化合物与酸例如HCl的盐。

游离形式的本发明的化合物或用于本发明的化合物可以被转化成盐形式的相应化合物；并且反之亦然。游离形式或盐形式或溶剂合物形式的本发明的化合物或用于本发明的化合物可以被转化成游离形式或盐形式或非溶剂合物形式的相应化合物；并且反之亦然。

本发明的化合物或用于本发明的化合物可以以异构体形式和它们的混合物形式存在。异构体混合物例如包括对映体混合物或非对映体混合物在内的异构体混合物可以例如按照常规方法被适当地进行分离以获得纯的异构体。本发明包括任何异构体形式和任何异构体混合物形式的本发明的化合物或用于本发明的化合物。

另一方面，本发明提供了制备本发明的化合物的方法，例如或者制备用于本发明的化合物的方法，该方法包括使4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-胺、例如式IV化合物：

其中X具有以上所定义的R₂、R₂`或R₂``的含义且R₃、R₄和R₅如以上所定义，

与合适的磺酰卤例如磺酰氯、例如其中R₁如以上所定义的式R₁-SO₂Cl的化合物反应，以获得本发明的化合物例如或用于本发明的化合物。

在本发明的优选实施方案中，本发明的化合物或用于本发明的化合物可以通过下述步骤制备：

a.使其中X是叔丁氧基羰基且R₃、R₄和R₅如以上所定义的式IV化合物与其中R₁如以上所定义的式R₁-SO₂Cl化合物反应，以获得其中R₁、R₃、R₄和R₅如以上所定义且X是叔丁氧基羰基的式I或式II或式HI化合物，和

b.断裂叔丁氧基羰基，例如通过用HCl乙醚溶液处理，以获得式V化合物：

其中R₁如以上所定义，例如以盐形式如盐酸盐形式获得，

c.使式V化合物

c1.与(取代的)苯基氟反应，以获得其中R₁如以上所定义且R₂、R₂`或R₂``是(取代的)苯基的式I或式II或式III化合物，或

c2.与(C_3-6)环烷基(C_1-6)烷基碳酰卤例如碳酰氯反应，以获得其中R₁如以上所定义且R₂、R₂`或R₂``是(C_3-6)环烷基(C_1-6)烷基羰基的式I或式II或式III化合物，和

d.从反应混合物中分离出所获得的式I或式III化合物。

式IV和V化合物可用作制备式I或式III化合物的中间体。式IV化合物也构成本发明的一部分。

另一方面，本发明提供了式IV的化合物：

其中X具有以上所定义的R₂``的含义，例如提供盐形式如盐酸盐形式的式IV化合物，例如用作制备式III化合物的中间体。

另一方面，本发明提供了制备本发明的化合物例如或用于本发明的化合物的方法，该方法包括使4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-胺、例如式VI化合物：

其中X具有以上所定义的R₂`的含义，

与磺酰卤例如磺酰氯、例如其中R₁如以上所定义的式R₁-SO₂Cl化合物反应，以获得本发明的化合物例如或用于本发明的化合物，例如式I或式II化合物。

式VI和VII的化合物可用作制备式I或式II或式III化合物的中间体，并且也构成本发明的一部分。

另一方面，本发明提供了式VI的化合物：

其中X具有以上所定义的R₂`的含义，例如提供盐形式如盐酸盐形式的式VI化合物，例如用作制备式I或式II化合物的中间体。

另一方面，本发明提供了式VII的化合物：

其中R₁如以上所定义，例如提供盐形式如盐酸盐形式的式VII化合物，例如用作制备式I或式II化合物的中间体。

上述反应是酰化反应，可以被合适地进行，例如在合适的溶剂中和在合适的温度下、例如按照例如与常规方法类似的方法或如本文所述进行。

式I或式II或式III化合物可以被转化成其钠盐形式，例如通过用NaOH例如在EtOH中处理游离碱形式的式I或式II或式III化合物以获得其中磺酰胺基团的氮原子是带有Na作为阳离子的阴离子形式的式I或式II或式III化合物。

合适时可以获得式IV化合物，例如按照例如与常规方法类似的方法获得，例如通过使N-取代的哌啶酮与氨腈于硫存在下在极性溶剂例如吡啶中反应。

合适时，可以制备本文所述的任何化合物，例如包括本发明的化合物或用于本发明的化合物以及例如包括式IV、V、VI或VII在内的其制备中的中间体，例如按照例如与常规方法类似的方法、例如或本文中所具体描述的方法获得。

在本发明的中间体中，如果存在官能团，其任选地可以是被保护的形式或是盐形式(如果存在成盐基团)。任选存在的保护基可以在合适的阶段被除去，例如按照例如与常规方法类似的方法被除去。

特定组织中的类固醇激素与许多疾病相关，例如乳腺、子宫内膜和前列腺肿瘤以及毛囊皮脂腺单位的疾病例如痤疮、雄激素性脱发和多毛症。局部产生这些类固醇激素的重要前体是类固醇3-O-硫酸酯，其在靶组织中通过类固醇硫酸酯酶被脱硫。对该酶的抑制导致相应的活性类固醇激素局部水平降低，预计这具有治疗相关性。此外，类固醇硫酸酯酶抑制剂可以用作免疫抑制剂，已经证明当其被递送至脑时能增强记忆。

痤疮是由许多因素的相互作用导致的多病因疾病，所述的因素例如遗传、皮脂、激素和细菌。对于痤疮，最重要的诱发因素是皮脂产生；与具有健康皮肤的人相比，在几乎所有痤疮患者中皮脂腺更大且产生更多皮脂。皮脂腺的发育和皮脂产生的程度由雄激素类进行激素控制；因此，雄激素类在痤疮的发病机制中发挥关键作用。在男性中，有两个主要来源向靶组织供应雄激素类：(i)分泌睾酮的性腺，(ii)产生脱氢表雄酮(DHEA)的肾上腺，脱氢表雄酮以硫酸酯轭合物(DHEAS)形式被分泌。睾酮和DHEAS在靶组织例如在皮肤中均被转化成最具活性的雄激素-二氢睾酮(DHT)。有证据表明，与从循环中直接提供活性雄激素类相比，皮肤中的这些DHT局部合成通路更为重要。因此，用特异性抑制剂降低靶组织中的内源性雄激素水平应当对痤疮和皮脂溢有治疗益处。此外，它开启了通过局部治疗调节局部雄激素类水平而非通过全身性治疗影响循环激素水平来治疗这些疾病的前景。

男性雄激素性脱发在白种人中是非常常见的，占所有类型的脱发的约95％。男性型脱发由头皮中进入毛发生长终期的毛囊数量增加和由毛发生长终期持续时间变长引起。其是通过雄激素类实现的遗传上决定的毛发丧失。据报道，与非脱发对照相比，在脱发的男性中有升高的血清DHEA但是有正常的睾酮水平，暗示了在雄激素性脱发中靶组织中的雄激素产生是非常重要的。

多毛症是毛发的病理性增厚和增密，其特征在于儿童和女性的毛发生长的雄性模式。多毛症通过雄激素类形成增加或通过毛囊对雄激素的敏感性增加而由雄激素诱发。因此，导致靶组织(皮肤)中内源性雄激素类和/或雌激素类水平降低的治疗应当对痤疮、雄激素性脱发和多毛症有效。

如上所述，DHT-最具活性的雄激素在皮肤中由充足的全身性前体DHEAS合成，并且在从DHEAS到DHT的代谢通路中第一步是通过类固醇硫酸酯酶将DHEAS脱硫产生DHEA。已有描述称在角质形成细胞和皮肤衍生的成纤维细胞中存在该酶。利用已知的类固醇硫酸酯酶抑制剂例如雌酮3-O-氨基磺酸酯和4-甲基香豆素-7-基(umbelliferyl)-O-氨基磺酸酯确证了类固醇硫酸酯酶用于降低皮肤中内源性类固醇激素水平的潜在用途。我们已经发现胎盘类固醇硫酸酯酶的抑制剂也抑制由人角质形成细胞(HaCaT)或人皮肤衍生的成纤维细胞系(1BR3GN)制备的类固醇硫酸酯酶。还证明所述抑制剂能阻断完整单层HaCaT角质形成细胞中的类固醇硫酸酯酶。

因此，类固醇硫酸酯酶的抑制剂可用于降低皮肤中的雄激素和雌激素水平。它们可用作类固醇硫酸酯酶的抑制剂来局部治疗毛囊皮脂腺单位的雄激素依赖性疾病(例如痤疮、皮脂溢、雄激素性脱发、多毛症)和局部治疗鳞状细胞癌。

此外，预计非类固醇性类固醇硫酸酯酶抑制剂可用于治疗由类固醇激素的作用介导的疾病，其中硫酸酯酶分裂的类固醇产物发挥作用。这些新型抑制剂的适应症包括毛囊皮脂腺单位的雄激素依赖性疾病(例如痤疮、皮脂溢、雄激素性脱发、多毛症)；雌激素-或雄激素-依赖性肿瘤，例如鳞状细胞癌和瘤，例如乳腺、子宫内膜和前列腺的鳞状细胞癌和瘤；炎性疾病和自身免疫性疾病，例如类风湿性关节炎、I型和II型糖尿病、系统性红斑狼疮、多发性硬化、重症肌无力、甲状腺炎、脉管炎、溃疡性结肠炎和局限性回肠炎、银屑病、接触性皮炎、移植物抗宿主病、湿疹、哮喘和移植后的器官排斥反应。类固醇硫酸酯酶抑制剂还可用于治疗癌症，尤其是用于治疗雌激素-和雄激素-依赖性癌症，例如乳腺癌、子宫内膜癌和鳞状细胞癌以及前列腺癌。类固醇硫酸酯酶抑制剂还可通过增加中枢神经系统中的DHEAS水平而用于增强认知功能，尤其是用于治疗老年性痴呆，包括阿尔茨海默病。

化合物在抑制类固醇硫酸酯酶活性方面的活性可以在以下试验系统中证实：

人类固醇硫酸酯酶的纯化

在分娩和与膜和结缔组织分离后新鲜获得人胎盘。为了贮存，将该物质冷冻在-70℃下。解冻后，所有进一步的步骤均在4℃下进行，同时在20℃下调节pH值。将400g该组织在1.2升缓冲液A(50mM Tris-HCl，pH7.4，0.25M蔗糖)中均质化。将获得的匀浆在10,000×g下离心45分钟。取出上清液存留并将获得的沉淀物在500ml缓冲液A中再均质化。离心后，将获得的两个上清液合并并进行超速离心(100,000×g，1小时)。将获得的沉淀物重新混悬在缓冲液A中并重复离心。将获得的沉淀物混悬在50ml pH7.4的50mM Tris-HCl中，并贮存在-20℃下直至进一步进行处理。

解冻后，通过超速离心(如上所述)收集微粒体并将其混悬在50ml缓冲液B(10mM Tris-HCl，pH 7.0，1mM EDTA，2mM 2-巯基乙醇，1％ TritonX-100，0.1％抑酶肽)中。在冰上温和搅拌1小时后，将混悬液离心(100,000×g，1小时)。收集含有酶活性的上清液并用1M Tris将pH调整至8.0。将获得的溶液加载在羟基磷灰石柱(2.6×20cm)上并用pH 8.0的缓冲液B平衡。将柱用缓冲液B以2ml/分钟的流速洗涤。在流动中回收活性。将合并物调整至pH 7.4并在于缓冲液C(20mM Tris-HCl，pH 7.4，0.1％ TritonX-100，0.5M NaCl)中平衡的伴刀豆球蛋白A琼脂糖柱(1.6×10cm)上进行色谱分离。用缓冲液C冲洗柱，并用10％的在缓冲液C中的甲基甘露糖苷洗脱结合的蛋白。将活性级分合并并用缓冲液D(20mM Tris-HCl，pH8.0，1mM EDTA，0.1％Triton X-100，10％甘油(v/v))透析。

将获得的渗余物加载在用缓冲液D平衡的蓝琼脂糖柱(0.8×10cm)上，冲洗柱并用缓冲液D至2M的在缓冲液D中的NaCl的线性梯度进行洗脱。将活性级分合并，根据需要进行浓缩(Centricon 10)，用缓冲液D渗析并以等分量贮存在-20℃下。

人类固醇硫酸酯酶的分析

已知纯化的人类固醇硫酸酯酶不仅能够裂解类固醇硫酸酯，而且还能容易地裂解芳基硫酸酯例如4-甲基香豆素-7-基硫酸酯，其在本试验系统中被用作活性指示物。通过顺序将下述溶液加入白色微量滴定板的孔中来制备分析混合物：

1)50μl底物溶液(在0.1M Tris-HCl，pH 7.5中的1.5mM 4-甲基香豆素-7-基硫酸酯)

2)50μl供试化合物在0.1M Tris-HCl pH 7.5，0.1％Triton X-100中的稀释液(在DMSO中制备供试化合物的贮备液；在分析混合物中溶剂的最终浓度不超过1％)

3)50μl酶稀释液(约12个酶单位/ml)

我们将一个酶单位定义为在初始底物浓度500μM时于37℃下在0.1MTris-HCl，pH 7.5，0.1％Triton X-100中每小时水解1nmol 4-甲基香豆素-7-基硫酸酯的类固醇硫酸酯酶的量。

将板在37℃下温育1小时。然后通过加入100μl 0.2M NaOH停止反应。在Titertek Fluoroskan II仪器中用λ_ex＝355nm和λ_em＝460nm测定荧光强度。

相对IC₅₀值的计算

用以下方程由上述人类固醇硫酸酯酶分析中在供试化合物的不同浓度(c)下获得的荧光强度数据(I)计算50％抑制酶活性的浓度(IC₅₀)：

$I=\frac{I_{100}}{1+{(c/{\mathrm{IC}}_{50})}^s},$

其中I₁₀₀是不存在抑制剂时观察到的强度且s是斜率因子。用雌酮氨基磺酸酯作为参比化合物，与所有其它供试化合物平行地测定它的IC₅₀值。相对IC₅₀值的定义如下：

根据我们的试验和计算，雌酮氨基磺酸酯的IC₅₀值为约60nM。

包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物在所述的分析中均显示出活性。

CHO/STS分析

将用人类固醇硫酸酯酶稳定转染的CHO细胞(CHO/STS)接种入微量滴定板。在达到约90％融合后，将它们用梯度浓度的供试物质(例如本发明的化合物或用于本发明的化合物)温育过夜。然后将它们在室温下用4％多聚甲醛固定10分钟并用PBS洗涤4次，在用100μl/孔0.5mM 4-甲基香豆素-7-基硫酸酯(MUS)温育之前，将其溶解在0.1M Tris-HCl，pH 7.5中。在37℃下进行酶反应30分钟。然后每孔加入50μl终止液(1M Tris-HCl，pH10.4)。将酶反应溶液转移入白色板(Microfluor，Dynex，Chantilly，VA)中并在Fluoroskan II荧光微量滴定板读板器中读数。从所有值中减去试剂空白。对于药物试验，用荧光单位(FU)除以将细胞蛋白用sulforhodamine B(OD₅₅₀)染色后的光密度读数以便校正细胞数偏差。通过两个定标点(bracketing point)之间的线性插值法测定IC₅₀值。在用抑制剂进行的每个分析中，用雌酮3-O-氨基磺酸酯作为参比化合物，并且用雌酮3-O-氨基磺酸酯将IC₅₀值进行标化(相对IC₅₀＝IC₅₀化合物/IC₅₀雌酮3-O-氨基磺酸酯)。

包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物在所述分析中均显示出活性。

用人皮肤匀浆进行的分析

用锋利的剪刀将冷冻的人尸体皮肤样品(每个样品约100mg)切成小片(约1×1mm)。将获得的小片混悬在10体积(w/w)含有0.1％Triton X-100的缓冲液(20mM Tris-HCl，pH 7.5)中。加入由在乙醇或DMSO中的贮备液制备的梯度浓度的供试化合物(例如本发明的化合物或用于本发明的化合物)。第二，加入作为底物的DHEAS(1μC/ml[³H]DHEAS，比活性：约60Ci/mmol，和20μM未标记的DHEAS)。将样品在37℃下温育18小时。在温育期结束时，加入50μl 1M Tris，pH 10.4和3ml甲苯。取出1ml等分试样的有机相并将其进行液体闪烁计数。将在等分试样中测定的dpm-值转化成每小时每克皮肤裂解的DHEA的nmol数。

包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物在所述分析中均显示出活性。

包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物在以上所定义的实验系统中均显示出活性。盐和/或溶剂合物形式的包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物显示出与游离形式和/或非溶剂合物形式的本发明的化合物或用于本发明的化合物相同等级的活性。

因此，包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物适合在治疗由类固醇硫酸酯酶的作用介导的疾病中用作类固醇硫酸酯酶抑制剂，所述的疾病例如包括毛囊皮脂腺单位的雄激素依赖性疾病，如

-痤疮，

-皮脂溢，

-雄激素性脱发，

多毛症；

-癌症，例如雌激素和雄激素-依赖性癌症；

-认知功能障碍，例如包括阿尔茨海默病在内的老年性痴呆。

包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物优选用于治疗痤疮、皮脂溢、雄激素性脱发、多毛症；雌激素例如和雄激素依赖性-癌症，更优选用于治疗痤疮。所述治疗包括治疗性治疗和预防。

实施例1的化合物是本发明的优选化合物。

例如，已经测定了实施例1的化合物在本文所述的用人皮肤匀浆进行的分析中显示出160nm的IC₅₀。

另一方面，本发明提供了例如在治疗由类固醇硫酸酯酶的作用介导的疾病中用作药物的式II或式III化合物。

另一方面，本发明提供了治疗由类固醇硫酸酯酶的作用介导的疾病例如治疗痤疮、皮脂溢、雄激素性脱发、多毛症；雌激素例如和雄激素-依赖性癌症的方法，该方法包括对需要该治疗的个体施用治疗有效量的本发明的噻唑并-吡啶-芳基磺酰胺，例如包括式I或式II或式III化合物在内。

对于所述用途，使用的剂量当然可以根据例如所用的具体化合物、施用方式和所需的治疗而变化。然而，一般而言，如果以约0.1mg/kg至约100mg/kg动物体重(例如约0.0625mg/kg至约62.5mg/kg)的日剂量施用化合物，例如方便地以每天2至4次的分剂量进行施用，则可以获得令人满意的结果。对于大部分大的哺乳动物，总日剂量为约5mg至约5000mg，可方便地例如以每天不超过4次的分剂量或以延迟形式施用。单位剂量形式包含例如约1.25mg至约2000mg本发明的化合物以及与之混合的至少一种可药用赋形剂，例如载体、稀释剂。

包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物可以以可药用盐形式例如以酸加成盐或金属盐；或以游离形式；任选地以溶剂合物形式施用。

包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物可以以与用于所述适应症的已知标准物相似的方式施用。本发明的化合物或用于本发明的化合物可以与常规的例如可药用的赋形剂例如载体和稀释剂以及任选地其它赋形剂相混合。包括本发明的化合物在内的用于本发明的化合物可以例如以药物组合物形式通过以下途径施用：

-口服施用，例如以片剂、胶囊剂形式口服施用；

-胃肠外、静脉内施用，例如以液体形式如溶液、混悬液形式胃肠外、静脉内施用；

-局部施用，例如以软膏剂、乳膏剂形式局部施用。

药物组合物中活性物质的浓度当然例如根据所用的化合物、所需的治疗和所用的组合物的性质而变化。一般而言，在局部用组合物中以约0.05至约5％例如约0.1至约1％w/w的浓度和在口服、胃肠外或静脉内组合物中以约1％w/w至约90％w/w的浓度下可以获得令人满意的结果。

另一方面，本发明提供了包含药学有效量的至少一种本发明的化合物和与之组合的至少一种可药用赋形剂的药物组合物。

本发明的药物组合物可以包含一种或多种本发明的化合物、例如至少一种本发明的化合物作为活性成分。

除了至少一种本发明的化合物之外，本发明的药物组合物还可以包含一种或多种其它药学活性剂。所述的其它药学活性剂包括例如视黄醛衍生物，例如视黄酸，如异维甲酸；维甲酸(Roche)；阿达帕林(6-[3-(1-金刚烷基)-4-甲氧基苯基]-2-萘甲酸)；口服避孕药，例如19-去甲-17a-孕-1，3，5(10)-三烯-20-炔-3，17-二醇、6-氯-17-羟基-1a，2a-亚甲基-4，6-孕二烯-3，20-二酮，如(Schering)，抗菌药，如红霉素，包括红霉素A、阿奇霉素、克拉霉素、罗红霉素；四环素类，林可酰胺-抗生素，如克林霉素(甲基7-氯-6，7，8-三脱氧-6-(反式-1-甲基-4-丙基-L-2-吡咯烷-甲酰氨基)-1-硫代-L-苏-a-D-半乳-辛吡喃糖苷(octopyranosid))、壬二酸(壬烷二酸)、那地沙星；氨苯砜、过氧苯酰；角质层分离剂，如水杨酸；抗炎剂，如皮质类固醇、吡美莫司；类固醇5α-还原酶抑制剂。

对于治疗乳腺癌和子宫内膜癌，其它药学活性剂包括芳香酶抑制剂，如阿那曲唑、来曲唑、依西美坦。

组合包括

-固定组合，其中两种或多种药学活性剂在同一药物组合物中，

-药盒，其中独立组合物形式的两种或多种药学活性剂在同一包装中出售，例如含有共同施用的说明书；和

-自由组合，其中药学活性剂被单独包装，但给出同时或相继施用的说明书。

另一方面，本发明提供了本发明的化合物或用于本发明的化合物与至少一种其它用作药物的药学上有效的活性剂的组合，如包含至少一种本发明的化合物或用于本发明的化合物与至少一种其它药学上有效的活性剂的组合以及至少一种可药用赋形剂的药物组合物。

另一方面，本发明提供了式I_P1的化合物：

其中：

R_1P1是(C_6-18)芳基，且

R_2P1是(C_1-12)烷氧基羰基，或未取代的或取代的苯基，例如被一个或多个选自以下的基团取代的苯基：

-氨基羰基，

-卤素，

-(C_1-6)卤代烷基。

另一方面，本发明提供了式I_P2的化合物：

其中：

R₁是(C_6-18)芳基，且

R₂是(C_1-12)烷氧基羰基、(C_1-4)烷基羰基或未取代的或取代的苯基，例如被一个或多个以下基团取代的苯基：

-氨基羰基，

-卤素，

-(C_1-6)卤代烷基。

在用于举例说明本发明的以下实施例中，所提及的温度是摄氏度并且未经校正。

使用了下述缩略语：

BOC      叔丁氧基羰基

c-Hex    环己醇

DMSO     二甲亚砜

DMAP     N，N-二甲基氨基吡啶

DIEA    二异丙基乙基胺

EtAc    乙酸乙酯

EtOH    乙醇

m.p.    熔点

RT      室温

实施例1

2-[2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺

A.游离碱

将3.3g 2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-鎓盐酸盐、1.545g 2-氟-4-三氟甲基-苯甲酰胺和3.3g K₂CO₃在DMSO中于150℃下加热5小时。从所得混合物中蒸除溶剂，将所得的蒸发残余物溶解在EtAc/MeOH(9/1)中并用50ml 1M的HCl和盐水萃取所得混合物。获得两相并将其分离，浓缩所得的有机层并进行色谱分离。获得2-[2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺，用EtAc重结晶。

熔点：225-228℃；¹H-NMR/CD₃OD：8.35(s，2H)，8.03(s，1H)，7.92(d，J＝8.0Hz，1H)，7.40(dd，J＝8.0，1.1Hz，1H)，7.35(s，1H)，4.06(t，J＝1.8Hz，2H)，3.44(t，J＝5.6Hz，2H)，2.69(m，2H)；¹³C-NMR/CD₃OD：168.83，149.35，144.47，133.37，133.11，131.99，131.72，131.08，130.83，126.07，124.89，123.27，119.90，116.27，116.24，113.20，49.44，47.90，22.76。

B.钠盐

将1.9ml 0.1M的NaOH水溶液加入118mg 2-[2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺在10ml EtOH中的溶液中，将所得混合物在室温下搅拌5分钟。从所得混合物中蒸除溶剂并冷冻干燥所得的蒸发残余物。获得[2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺钠盐。

类似于实施例1A中所述的方法，但使用合适的起始原料，获得了式EX1的化合物：

其中R₁如表1中所定义。¹H-NMR和¹³C-NMR数据也在表1中给出。

表1

实施例4

2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯

将8.5g 2-氨基-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯、15.6g3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氯和8.1g DMAP在100ml吡啶中的混合物在80℃下搅拌4小时。从所得混合物中蒸除溶剂，用EtAc处理所得的蒸发残余物并用NaHSO₄水溶液和盐水萃取所得混合物。将所得有机层干燥，从所得溶液中蒸除溶剂并用EtAc和c-Hex混合物(+5％MeOH)处理所得残余物。将2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯沉淀物滤出并干燥。

类似于实施例4中所述的方法，但使用合适的起始原料，获得了式EX2的化合物：

其中R₁如表2中所定义：¹H-NMR和¹³C-NMR数据也在表2中给出。

表2

实施例7

类似于实施例4中所述的方法，但使用合适的起始原料，获得了下式的化合物：

¹³C-NMR：133.04，132.70，132.36，129.39，127.24，126.09，124.33，121.61，81.24，52.70，51.50，32.30，28.64。

实施例8

N-[5-(2-环戊基-乙酰基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基]-3，5-双-三氟甲基-苯磺酰胺

在0℃下将DIEA和环戊基乙酰氯加入75mg 2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-鎓盐酸盐在CH₂Cl₂中的混合物中。将所得混合物在室温下搅拌4小时，加入2ml 1M的NaHSO₄水溶液并分离形成的两相。将所得有机层浓缩并进行制备HPLC(RP-18)。获得N-[5-(2-环戊基-乙酰基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基]-3，5-双-三氟甲基-苯磺酰胺。

¹H-NMR/CDCl₃(2种旋转异构体)：12.3(bs，1H)，8.28(s，2H)，7.92(s，1H)，4.44(s，1.2H)，4.32(s，0.8H)，3.79(t，J＝5.5Hz，0.8H)，3.16(t，J＝5.6Hz，1.2H)，2.55(m，1.2H)，2.48(m，0.8H)，2.32(t，J＝6.3Hz，1.2H)，2.17(m，1H)，1.78(m，2H)，1.52(m，4H)，1.07(m，2H)；¹³C-NMR/CDCl₃：172.12，168.95，145.48，132.84，132.50，129.85，127.03，125.64，124.40，121.68，114.06，43.27，42.49，40.41，40.18，39.69，38.65，36.90，33.08，25.28，24.44，23.37。

起始原料的制备

S1.2-氨基-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(其中Y是叔丁氧基羰基的式IV_A化合物)

将19.9g 1-BOC-哌啶-4-酮、8.4g氨腈和6.4g硫在100ml吡啶中的混合物在惰性气氛下回流100分钟。从所得混合物中蒸除溶剂并将所得蒸发残余物在硅胶上进行快速色谱法。获得2-氨基-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯。

¹H-NMR/CDCl₃/d₆-DMSO：5.95(bs，2H)，4.39(s，2H)，3.67(t，J＝5.2Hz，2H)，3.08(bs，2H)，1.43(s，9H)；¹³C-NMR/CDCl₃/d₆-DMSO：166.17，153.87，79.19，28.86，27.69，26.01。

类似于实施例S1中所述的方法，但使用合适的起始原料，制备了实施例S2和S3中的化合物：

S2.4-氨基-3-硫杂-5，11-二氮杂-三环[6.2.1.0^＊2，6^＊]十一碳-2(6)，4-二烯-11-甲酸叔丁酯

¹³C-NMR：80.24，53.09，52.67，36.70，36.19，28.78。

S3.2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-鎓盐酸盐(其中R₁是3，5-三氟甲基苯的式V化合物)

将50ml饱和的盐酸乙醚溶液加入9.95g 2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯在150ml CH₂Cl₂中的溶液中并将所得混合物在室温下搅拌4小时。从所得混合物中蒸除溶剂并用乙醚处理所得的蒸发残余物。将固体沉淀物滤出并干燥。获得2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-鎓盐酸盐。

¹H-NMR/CDCl₃/d₆-DMSO：13.30(bs，1H)，9.86(bs，2H)，8.43(s，2H)，8.29(s，1H)，4.04(s，2H)，3.21(t，J＝5.8Hz，2H)，2.70(t，J＝5.7Hz，2H)；¹³C-NMR/CDCl₃/d₆-DMSO：168.35，145.15，132.17，131.83，131.50，131.17，130.20，127.02，126.66，126.47，124.31，121.59，118.87，109.47，20.30。

类似于实施例S3中所述，但使用合适的起始原料，获得了实施例S4和S5中的化合物：

S4.2-(2，3-二氯-苯磺酰氨基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-鎓盐酸盐(其中R₁是2，3-二氯苯基的式V化合物)

¹³C-NMR：168.03，141.31，134.17，134.06，129.33，129.23，128.56，128.33，108.80，19.95。

S5.2-(3，5-二氯-苯磺酰氨基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-鎓盐酸盐(其中R₁是3，5-二氯苯基的式V化合物)

¹³C-NMR：168.03，141.31，134.17，134.06，129.33，129.23，128.56，128.33，108.80，19.95。

Claims (7)

1.式I的化合物：

其中：

A)

R₁是未取代的苯基或被氨基羰基、卤素或卤代C_1-6烷基取代的苯基，

R₂是C_1-12烷氧基羰基、C_1-6烷基羰基、C_3-6环烷基C_1-6烷基羰基或未取代的苯基或被氨基羰基、卤素或卤代C_1-6烷基取代的苯基，且

R₃和R₅一起是C_1-4亚烷基且R₄是氢；或者

B)

R₁是未取代的苯基或被氨基羰基、卤素或卤代C_1-6烷基取代的苯基，

R₂是C_1-12烷氧基羰基、C_3-6环烷基C_1-6烷基羰基、未取代的苯基或被氨基羰基、卤素或卤代C_1-6烷基取代的苯基，且

R₃、R₄和R₅是氢。

2.权利要求1的化合物，其是N-(3-硫杂-5，11-二氮杂-三环[6.2.1.0^＊2，6^＊]十一碳-2(6)，4-二烯-4-基)-苯磺酰胺

或选自以下的化合物：

-2-[2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺，

-2-[2-(2，3-二氯-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺，

-2-[2-(3，5-二氯-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺，

-2-(3，5-双-三氟甲基-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯，

-2-(2，3-二氯-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯，

-2-(3，5-二氯-苯磺酰氨基)-6，7-二氢-4H-噻唑并[5，4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯，和

-N-[5-(2-环戊基-乙酰基)-4，5，6，7-四氢-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基]-3，5-双-三氟甲基-苯磺酰胺。

3.权利要求1的下式的化合物：

4.权利要求1至3中任一项的盐形式的化合物。

5.权利要求1至4中任一项的化合物在制备用于治疗由类固醇硫酸酯酶的作用介导的疾病的药物中的用途。

6.包含药学有效量的至少一种权利要求1至4中任一项的化合物以及至少一种可药用赋形剂的药物组合物。

7.式VI的化合物：

其中X具有权利要求1 A)中所定义的R₂的含义，或者

式VII的化合物：

其中R₁如权利要求1中所定义。