CN109843293A - 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 - Google Patents
吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109843293A CN109843293A CN201780066766.1A CN201780066766A CN109843293A CN 109843293 A CN109843293 A CN 109843293A CN 201780066766 A CN201780066766 A CN 201780066766A CN 109843293 A CN109843293 A CN 109843293A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cyclohexyl
- base
- ethyl
- benzo
- imidazoles
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/08—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing alicyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
- A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
- A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D413/08—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing alicyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/08—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing alicyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D471/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D487/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D491/04—Ortho-condensed systems
- C07D491/056—Ortho-condensed systems with two or more oxygen atoms as ring hetero atoms in the oxygen-containing ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
公开了调节或抑制吲哚胺2,3‑双加氧酶(IDO)的酶促活性的化合物、含有所述化合物的药物组合物和利用本发明的化合物治疗增殖性病症如癌症、病毒感染和/或炎性病症的方法。
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求2016年8月26日提交的美国临时申请第62/380,042号的权益，其整体通过引用并入本文。
发明领域
本发明一般涉及调节或抑制吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的酶活性的化合物，含有所述化合物的药物组合物和利用本发明的化合物治疗增殖性病症如癌症、病毒感染和/或自身免疫疾病的方法。
发明背景
吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO；还称为IDO1)为在免疫调节中起作用的IFN-γ靶基因。IDO为氧化还原酶并且为在色氨酸至N-甲酰基-犬尿氨酸的转化中催化第一且限速的步骤的两种酶中的一个。其以在若干细胞群体(包括免疫细胞、内皮细胞及纤维母细胞)中发现的41kD单体形式存在。IDO在物种之间相对非常保守，小鼠与人类在氨基酸水平下共享63%序列一致性。衍生自其晶体结构及定点诱变的数据显示底物结合及底物与铁结合的双加氧酶之间的关系为活性所必需。已经鉴定出与IDO共享44%氨基酸序列同源性的IDO类似物(IDO2)，但其功能与IDO在很大程度上不同。(参见例如Serafini, P.等人, Semin. Cancer Biol., 16(1):53-65 (2006年2月)和Ball, H.J.等人, Gene, 396(1):203-213 (2007年7月1日))。
IDO在免疫调节中发挥主要作用，且其免疫抑制功能以若干方式显示。重要地，IDO在T细胞水平调节免疫力，且在IDO与细胞因子产生之间存在关系。此外，肿瘤通过上调IDO频繁地操控免疫功能。因此，调节IDO可对多种疾病、病症和病况具有治疗效果。
在IDO与癌症之间存在病理生理学联系。免疫自稳的破坏与肿瘤生长及进展密切相关，且在肿瘤微环境中产生IDO似乎帮助肿瘤生长及转移。此外，IDO活性水平增加与多种不同肿瘤相关(Brandacher, G.等人, Clin. Cancer Res., 12(4):1144-1151 (2006年2月15日))。
治疗癌症通常需要手术切除，随后进行化学疗法及放射疗法。由于肿瘤细胞通过使原发性肿瘤生长再生并且通常更重要地通过播种远端转移来基本上逃脱的能力，标准治疗方案显示出高可变程度的长期成功。治疗癌症及癌症相关疾病、病症和病况的最近进展包括使用将免疫疗法与更传统的化学疗法及放射疗法合并的组合疗法。在大多数情形下，与传统化学疗法相比，免疫疗法与较少毒性相关，因为其利用患者自身的免疫系统来鉴定及消除肿瘤细胞。
除癌症以外，在其他病况中，IDO还已经牵涉免疫抑制、慢性感染及自身免疫疾病或病症(例如类风湿性关节炎)。因此，通过抑制IDO活性来遏制色氨酸降解具有极大治疗价值。此外，当T细胞被妊娠、恶性疾病或病毒(例如HIV)遏制时，IDO的抑制剂可用于增强T细胞活化。尽管其作用未被很好地定义，IDO抑制剂还可应用于治疗患有神经或神经精神疾病或病症(例如抑郁)的患者。
已经研发IDO的小分子抑制剂以治疗或预防IDO相关疾病。举例而言，IDO抑制剂1-甲基-DL-色氨酸；对(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸；对[3-苯并(b)噻吩基]-DL-丙氨酸；及6-硝基-L-色氨酸已经用于通过改变色氨酸及色氨酸代谢物的局部细胞外浓度来调节T细胞介导的免疫力(WO99/29310)。具有IDO抑制活性的化合物进一步报导于PCT公开第WO2004/094409号中。
鉴于吲哚胺2,3-双加氧酶在大量不同疾病、病症和病况中发挥的作用及目前IDO抑制剂的限制(例如功效)，需要新的IDO调节剂及与其相关的组合物及方法。
发明内容
本发明涉及式I和式II的化合物：
其中X是CH或N；T是CH或N；V是键或O；Y是CH或N；W是-CH-、-C(C1-C6烷基)-或N；n是0、1、2、3或4；L是任选被1、2或3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烯基和-C1-C6烷OC1-C6烷基的取代基取代的C1-C6亚烷基；Z是键、-NH-或-N(C1-C6烷基)；B是苯并咪唑基、咪唑并吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、三唑并吡啶基、吡唑并吡啶基、喹唑啉酮基和咪唑并哒嗪基，其中杂芳基任选被一个、两个、三个或四个独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-CN、-OC1-C6烷基、-OC1-C6卤代烷基、-COOH、-COOC1-C6烷基和二氧杂环戊基的R2取代基取代；R1是H、卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基；且R1A是H、卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。
式I和式II的化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物也在本发明的范围内。
本发明还涉及包含一种或多种式I和/或式II的化合物的药物组合物。本发明还涉及使用一种或多种式I和/或式II的化合物治疗癌症的方法。
发明详述
本发明的化合物
本公开涉及式I和式II的化合物：
。
根据本公开，X是CH或N。在一些实施方案中，X是CH。在其他实施方案中，X是N。
根据本公开，T是CH或N。在一些方面，T是CH。在其他方面，T是N。
在一些实施方案中，X是CH且T是CH。在其他实施方案中，X是N且T是CH。在其他实施方案中，X是CH且T是N。在其他实施方案中，X是N且T是N。
根据本公开，R1是H、卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。在一些方面，R1是H。在一些方面，R1是卤素(F、Cl、Br或I)，优选F。在其他方面，R1是C1-C6烷基，例如甲基、乙基、异丙基、丁基和叔丁基。在一些方面，R1是-OC1-C6烷基，例如甲氧基、乙氧基、异丙氧基、丁氧基。在又其他方面，R1是C1-C6卤代烷基，例如-CF3。在一些方面，R1是卤素、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。在一些方面，R1是-OC1-C6烷基。在又其他方面，R1是卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。在其他方面，R1是卤素或C1-C6卤代烷基。
在包含式I化合物的本公开的那些方面中，当R1是卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基时，R1优选存在于萘基或喹啉环的4-碳位置。在包含式I化合物的本公开的其他方面，当R1是卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基时，R1可存在于萘基或喹啉环的2-碳位置。优选地，在包含式I化合物的本公开的那些方面中，R1是在萘基或喹啉环的4-碳位置的F或CF3。
在包含式II化合物的本公开的那些方面中，当R1是卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基时，R1优选存在于苯基或吡啶基环的2-碳位置。在包含式II化合物的本公开的其他方面，当R1是卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基时，R1可存在于苯基或吡啶基环的3-碳位置。优选地，在包含式II化合物的本公开的那些方面中，R1是在苯基或吡啶基环的2-碳位置的F或CF3。
根据本公开，R1A是H、卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。在优选的方面，R1A是H。在一些方面，R1A是卤素(F、Cl、Br或I)。在其他优选的方面，R1A是C1-C6烷基，例如甲基、乙基、异丙基、丁基和叔丁基。在一些方面，R1A是-OC1-C6烷基，例如甲氧基、乙氧基、异丙氧基、丁氧基。在又其他方面，R1A是C1-C6卤代烷基，例如-CF3。
根据本公开，Y是CH或N。在一些方面，Y是CH。在其他方面，Y是N。在可替换的实施方案中，Y是-C(C1-C6烷基)，例如-C(CH3)-或C(CH2CH3)。
根据本公开，W是CH、-C(C1-C6烷基)-或N。在一些方面，W是CH。在其他方面，W是-C(C1-C6烷基)-，例如-C(CH3)-、-C(CH2CH3)-、-C(异丙基)或-C(丁基)-。在其他方面，W是N。在一些方面，W是CH或-C(C1-C6烷基)-。在其他方面，W是CH或N。在又其他方面，W是N或-C(C1-C6烷基)-。
在一些方面，Y是CH且W是CH。在其他方面，Y是CH且W是N。在其他方面，Y是N且W是CH。在仍其他方面，Y是N且W是N。在一些方面，Y是CH且W是C(C1-C6烷基)。在其他方面，Y是N且W是C(C1-C6烷基)。
根据本公开，n是0、1、2、3或4。在优选的方面，n是2。在其他方面，n是0。在其他方面，n是1。在又其他方面，n是3。在仍其他方面，n是4。在一些方面，n是0-2或1-2。在又其他方面，n是1-3。
根据本公开，L是未取代的C1-C6亚烷基，例如，未取代的C1-C5亚烷基、C1-C4亚烷基、C1-C3亚烷基、C1-C2亚烷基或C1亚烷基。在其他方面，L是被一个、两个或三个，优选一个或两个取代基取代的C1-C6亚烷基，例如，C1-C5亚烷基、C1-C4亚烷基、C1-C3亚烷基、C1-C2亚烷基或C1亚烷基，所述取代基独立地选自C1-C6烷基(例如，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基或己基)、C1-C6卤代烷基(例如，CF3)、C1-C6烯基(例如，-CH=CH2或-CH2-CH=CH2)和-C1-C6烷OC1-C6烷基，例如，-C1-C5烷OC1-C6烷基、-C1-C4烷 OC1-C6烷基、-C1-C3烷OC1-C6烷基、-C1-C2烷OC1-C6烷基、-C1烷OC1-C6烷基、-C1-C6烷OC1-C5烷基、-C1-C6烷OC1-C4烷基、-C1-C6烷OC1-C3烷基、-C1-C6烷OC1-C2烷基或-C1-C6烷OC1烷基。在一个优选的方面，L是未取代的C1亚烷基。在另一个优选的方面，L是被一个或两个，优选一个C1-C6烷基(例如甲基或乙基)取代基取代的C1亚烷基。
根据本公开，Z是键、-NH-或-N(C1-C6烷基)-。在一些方面，Z是键。在其他方面，Z是-NH-。在又其他方面，Z是-N(C1-C6烷基)-，例如-N(CH3)-、-N(CH2CH3)-、-N(异丙基)-和-N(叔丁基)-。在一些方面，Z是-NH-或-N(C1-C6烷基)。在其他方面，Z是键或-NH-。
根据本公开，B是未取代的或取代的杂芳基基团。在优选的方面，杂芳基选自苯并咪唑基、咪唑并吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、三唑并吡啶基、吡唑并吡啶基、喹唑啉酮基和咪唑并哒嗪基。在一些方面，B是未取代的或取代的苯并咪唑基。在一些方面，B是未取代的或取代的咪唑并吡啶基。在一些方面，B是未取代的或取代的苯并噻唑基。在一些方面，B是未取代的或取代的苯并噁唑基。在一些方面，B是未取代的或取代的三唑并吡啶基。在一些方面，B是未取代的或取代的吡唑并吡啶基。在一些方面，B是未取代的或取代的喹唑啉酮基。在一些方面，B是未取代的或取代的咪唑并哒嗪基。杂芳基基团可以通过杂芳基基团的任何可用的碳或氮原子与式I或式II的化合物连接。优选地，杂芳基通过可用的碳原子与式I或式II的化合物连接。在其中杂芳基被取代的那些实施方案中，它可以被一个、两个、三个或四个，优选一个或两个独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-CN、-OC1-C6烷基、-OC1-C6卤代烷基、-COOH、-COOC1-C6烷基和二氧杂环戊基的R2取代基取代。
优选的苯并咪唑基基团是。
优选的咪唑并吡啶基基团包括和。
优选的苯并噻唑基基团是。
优选的苯并噁唑基基团是。
优选的三唑并吡啶基基团是。
优选的吡唑并吡啶基基团是。
优选的喹唑啉酮基基团包括和。
优选的咪唑并哒嗪基基团包括和。
在一些实施方案中，杂芳基被至少一个或两个R2取代，所述R2是卤素(例如，F、Cl或Br)。在一些实施方案中，杂芳基被至少一个或两个R2取代，所述R2是C1-C6烷基(例如甲基、乙基、异丙基、丁基、叔丁基等)。在一些实施方案中，杂芳基被至少一个或两个R2取代，所述R2是C1-C6卤代烷基(例如，CF3)。在一些实施方案中，杂芳基被至少一个或两个R2取代，所述R2是-CN。在一些实施方案中，杂芳基被至少一个或两个R2取代，所述R2是-OC1-C6烷基(例如，甲氧基、乙氧基、异丙氧基等)。在一些实施方案中，杂芳基被至少一个或两个R2取代，所述R2是-OC1-C6卤代烷基(例如，-OCF3)。在一些实施方案中，杂芳基被至少一个或两个R2取代，所述R2是-COOH。在一些实施方案中，杂芳基被至少一个或两个R2取代，所述R2是-COOC1-C6烷基(例如COOMe、-COOEt等)。在一些实施方案中，杂芳基被R2取代，所述R2是二氧杂环戊基。
本发明还包括式I和II的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物。
式I的子式包括下列式，其中V是键，Y是CH，W是CH，n是2，L是C1亚烷基且Z是键，例如：
其中X是CH且R4是C1-C2烷基。式I-A和II-A的其他实施方案包括其中X是N且R4是C1-C2烷基的那些。在其他方面，X是CH且T是CH。在一些方面，X是N且T是CH。在其他方面，X是CH且T是N。在其他方面，X是N且T是N。本发明还包括式I-A和II-A的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物。
式I的子式包括下列式，其中V是键，Y是N，W是CH，n是2，L是C1亚烷基且Z是键，例如：
其中X是CH且R4是C1-C2烷基。式I-B和II-B的其他实施方案包括其中X是N且R4是C1-C2烷基的那些。在其他方面，X是CH且T是CH。在一些方面，X是N且T是CH。在其他方面，X是CH且T是N。在其他方面，X是N且T是N。本发明还包括式I-B和II-B的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物。
式I的子式包括下列式，其中V是键，Y是CH，W是CH，n是2，L是C1亚烷基且Z是NH，例如：
其中X是CH且R4是C1-C2烷基。式I-C和II-C的其他实施方案包括其中X是N且R4是C1-C2烷基的那些。在其他方面，X是CH且T是CH。在一些方面，X是N且T是CH。在其他方面，X是CH且T是N。在其他方面，X是N且T是N。本发明还包括式I-C和II-C的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物。
式I的子式包括下列式，其中V是键，Y是N，W是CH，n是2，L是C1亚烷基且Z是NH，例如：
其中X是CH且R4是C1-C2烷基。式I-D和II-D的其他实施方案包括其中X是N且R4是C1-C2烷基的那些。在其他方面，X是CH且T是CH。在一些方面，X是N且T是CH。在其他方面，X是CH且T是N。在其他方面，X是N且T是N。本发明还包括式I-D和II-D的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物。
式I的子式包括下列式，其中V是-O-，Y是CH，W是CH，n是2，L是C1亚烷基且Z是键，例如：
其中X是CH且R4是C1-C2烷基。式I-E和II-E的其他实施方案包括其中X是N且R4是C1-C2烷基的那些。在其他方面，X是CH且T是CH。在一些方面，X是N且T是CH。在其他方面，X是CH且T是N。在其他方面，X是N且T是N。本发明还包括式I-E和II-E的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物。
在另一个实施方案中，本发明的化合物具有> 50 nM的人IDO IC50值。在另一个实施方案中，本发明的化合物具有≤ 50 nM的人IDO IC50值。在另一个实施方案中，本发明的化合物具有< 5 nM的人IDO IC50值。
本发明的其他实施方案
在另一个实施方案中，本发明提供了包含一种或多种本发明的化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体、其互变异构体或其溶剂化物的组合物。
在另一个实施方案中，本发明提供了包含药学上可接受的载体和至少一种本发明的化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体、其互变异构体或其溶剂化物的药物组合物。
在另一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含药学上可接受的载体和治疗有效量的至少一种本发明的化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体、其互变异构体或其溶剂化物。
在另一个实施方案中，本发明提供了用于制备本发明的化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体、其互变异构体或其溶剂化物的方法。
在另一个实施方案中，本发明提供了用于制备本发明的化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体、其互变异构体或其溶剂化物的中间体。
在另一个实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防各种类型的癌症、病毒感染和/或自身免疫疾病的方法，包括向需要这种治疗和/或预防的患者施用单独地或任选地与本发明的另一种化合物和/或至少一种其他类型的治疗剂，如化学治疗剂或信号转导抑制剂组合的治疗有效量的一种或多种本发明的化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体。
在另一个实施方案中，本发明提供了本发明的化合物，和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体，其用于疗法。
在另一个实施方案中，本发明提供了本发明的化合物，和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体和另外的治疗剂(一种或多种)的组合制剂，其同时、单独或相继用于疗法。
在另一个实施方案中，本发明提供了本发明的化合物，和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体和另外的治疗剂(一种或多种)的组合制剂，其同时、单独或相继用于治疗和/或预防与IDO的酶活性相关的多种疾病或病症。
在另一个方面中，本发明提供了治疗患有或易患对IDO的酶活性敏感的医学病况的患者的方法。可以治疗许多医学病况。该方法包括向患者施用治疗有效量的组合物，该组合物包含本文所述的化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体。例如，本文所述的化合物可用于治疗或预防病毒感染、增殖性疾病(例如癌症)和自身免疫疾病。
治疗应用
本发明的化合物和药物组合物可用于治疗或预防对IDO的酶活性敏感的任何疾病或病况。这些包括病毒和其他感染(例如，皮肤感染、GI感染、泌尿道感染、泌尿生殖系统感染、全身感染)、增殖性疾病(例如癌症)和自身免疫疾病(例如，类风湿性关节炎、狼疮)。化合物和药物组合物可以施用于动物，优选哺乳动物(例如家养动物、猫、狗、小鼠、大鼠)，更优选人。可以使用任何施用方法将化合物或药物组合物递送给患者。在某些实施方案中，口服施用化合物或药物组合物。在其他实施方案中，肠胃外施用化合物或药物组合物。
本发明的化合物可以调节酶吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)的活性。术语“调节”意指增加或降低酶或受体活性的能力。因此，本发明的化合物可用于通过使酶与本文所述的任何一种或多种化合物或组合物接触来调节IDO的方法。在一些实施方案中，本发明的化合物可以充当IDO的抑制剂。在进一步的实施方案中，本发明的化合物可用于通过施用调节(例如，抑制)量的本发明的化合物来调节需要调节酶的细胞或个体中IDO的活性。
本发明的化合物可以抑制酶吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)的活性。例如，本发明的化合物可用于通过施用抑制量的本发明的化合物来抑制需要调节酶的细胞或个体中IDO的活性。
本发明进一步提供抑制含有表达IDO的细胞的系统，例如组织、活生物体或细胞培养物中色氨酸降解的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过施用有效量的本文提供的组合物的化合物来改变(例如，增加)哺乳动物细胞外色氨酸水平的方法。测量色氨酸水平和色氨酸降解的方法是本领域常规的。
本发明还提供了通过向患者施用有效量的本文所记载的化合物或组合物来抑制患者中的免疫抑制，例如IDO介导的免疫抑制的方法。IDO介导的免疫抑制已与例如癌症、肿瘤生长、转移、病毒感染和病毒复制有关。
本发明进一步提供了通过向需要这种治疗的个体施用治疗有效量或剂量的本发明的化合物或其药物组合物来治疗与个体(例如，患者)中的IDO的活性或表达，包括异常活性和/或过度表达相关的疾病的方法。示例性疾病可包括与IDO酶的表达或活性，例如过度表达或异常活性直接或间接相关联的任何疾病、病症或病况。IDO相关疾病还可包括可通过调节酶活性来预防、改善或治愈的任何疾病、病症或病况。IDO相关疾病的实例包括癌症，病毒感染如HIV感染、HCV感染，抑郁，神经变性病症如阿尔茨海默病和亨廷顿病，创伤，年龄相关性白内障，器官移植(如器官移植排斥)和自身免疫疾病包括哮喘、类风湿性关节炎、多发性硬化症、过敏性炎症、炎性肠病、牛皮癣和系统性红斑狼疮。
如本文所用，术语“细胞”意指体外、离体或体内细胞。在一些实施方案中，离体细胞可以是从诸如哺乳动物的生物体切除的组织样品的一部分。在一些实施方案中，体外细胞可以是细胞培养物中的细胞。在一些实施方案中，体内细胞是生活在诸如哺乳动物的生物体中的细胞。
如本文所用，术语“接触”是指在体外系统或体内系统中将指定部分集合在一起。例如，将IDO酶与本发明的化合物“接触”包括将本发明的化合物施用于具有IDO的个体或患者，例如人，以及例如将本发明的化合物引入包含含有IDO酶的细胞或纯化制剂的样品中。
术语“IDO抑制剂”是指能够抑制吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)活性从而逆转IDO介导的免疫抑制的试剂。IDO抑制剂可以抑制IDO1和/或IDO2 (INDOL1)。IDO抑制剂可以是可逆的或不可逆的IDO抑制剂。“可逆的IDO抑制剂”是在催化位点或非催化位点可逆地抑制IDO酶活性的化合物，且“不可逆的IDO抑制剂”是不可逆地破坏IDO酶活性的化合物。
可用本发明的化合物治疗的癌症类型包括但不限于脑癌、皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、血癌、肺癌和骨癌。这种癌症类型的实例包括神经母细胞瘤，肠癌如直肠癌、结肠癌、家族性腺瘤性息肉病性癌和遗传性非息肉病性结直肠癌，食道癌，唇癌，喉癌，下咽癌，舌癌，唾液腺癌，胃癌，腺癌，甲状腺髓样癌，乳头状甲状腺癌，肾癌，肾实质癌，卵巢癌，宫颈癌，子宫体癌，子宫内膜癌，绒毛膜癌，胰腺癌，前列腺癌，睾丸癌，乳腺癌，泌尿系统癌，黑色素瘤，脑肿瘤如胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、脑膜瘤、髓母细胞瘤和外周神经外胚层肿瘤，霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，伯基特淋巴瘤，急性淋巴细胞白血病(ALL)，慢性淋巴细胞白血病(CLL)，急性髓性白血病(AML)，慢性髓性白血病(CML)，成人T细胞白血病淋巴瘤，弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)，肝细胞癌，胆囊癌，支气管癌，小细胞肺癌，非小细胞肺癌，多发性骨髓瘤，基底细胞瘤，畸胎瘤，视网膜母细胞瘤，脉络膜黑色素瘤，精原细胞瘤，横纹肌肉瘤，颅咽管瘤，骨肉瘤，软骨肉瘤，肌肉瘤，脂肪肉瘤，纤维肉瘤，尤因肉瘤和浆细胞瘤。
因此，根据另一个实施方案，本发明提供了通过向需要其的患者提供本发明的化合物或组合物来治疗自身免疫疾病的方法。此类自身免疫疾病的实例包括但不限于胶原疾病，例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、夏普氏综合征、CREST综合征(钙质沉着症、雷诺氏综合征、食管活动不良、毛细血管扩张症)、皮肌炎、血管炎(Morbus Wegener's)和舍格伦综合征，肾脏疾病，例如Goodpasture综合征、快速进展性肾小球肾炎和膜增生性肾小球肾炎II型，内分泌疾病，例如I型糖尿病、自身免疫性多内分泌腺病-念珠菌病-外胚层营养不良(APECED)、自身免疫性甲状旁腺病、恶性贫血、性腺功能不全、特发性Morbus Addison's、甲状腺机能亢进、桥本氏甲状腺炎和原发性粘液性水肿，皮肤疾病，例如寻常性天疱疮、大疱性类天疱疮、妊娠期疱疹、大疱性表皮松解症和重症多形性红斑，肝脏疾病，例如原发性胆汁性肝硬化、自身免疫性胆管炎、1型自身免疫性肝炎、2型自身免疫性肝炎、原发性硬化性胆管炎，神经元疾病，例如多发性硬化症、重症肌无力、肌无力朗-伊二氏综合征、后天性肌神经切断术、吉兰-巴雷综合征(Muller-Fischer综合征)、僵人综合征、小脑变性、共济失调、斜视眼阵挛、感觉神经病和失弛缓症，血液疾病，例如自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜(Morbus Werlhof)、具有相关的自身免疫反应的感染性疾病，例如AIDS、疟疾和恰加斯病。
一种或多种另外的药剂或治疗方法，例如抗病毒剂、化学治疗剂或其他抗癌剂、免疫增强剂、免疫抑制剂、放射、抗肿瘤和抗病毒疫苗、细胞因子疗法(例如，IL2和GM-CSF)和/或酪氨酸激酶抑制剂可任选地与本发明的化合物组合用于治疗IDO相关疾病、病症或病况。所述药剂可以与本化合物组合在单一剂型中，或者所述药剂可以作为单独的剂型同时或相继施用。
合适的化学治疗剂或其他抗癌剂包括，例如，烷化剂(包括但不限于氮芥类、乙烯亚胺衍生物、烷基磺酸酯类、亚硝基脲类和三氮烯类)，例如尿嘧啶芥、氮芥、环磷酰胺(CYTOXAN®)、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三乙烯三聚氰胺、三乙烯硫代磷酰胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪和替莫唑胺。
在黑色素瘤的治疗中，用于与本发明的化合物组合使用的合适药剂包括：达卡巴嗪(DTIC)，其任选地与其他化学治疗药物如卡莫司汀(BCNU)和顺铂一起；“Dartmouth方案”，其由DTIC、BCNU、顺铂和他莫昔芬组成；顺铂、长春碱和DTIC、替莫唑胺或YERVOY®的组合。在黑色素瘤的治疗中，根据本发明的化合物还可以与免疫治疗药物组合，所述药物包括细胞因子如干扰素α、白细胞介素2和肿瘤坏死因子(TNF)。
本发明的化合物还可以与疫苗疗法组合用于治疗黑色素瘤。在某些方面，抗黑色素瘤疫苗类似于用于预防由诸如脊髓灰质炎、麻疹和流行性腮腺炎的病毒引起的疾病的抗病毒疫苗。可以将称为抗原的弱化的黑色素瘤细胞或黑色素瘤细胞的一部分注射到患者中，以刺激身体的免疫系统破坏黑色素瘤细胞。
限制在手臂或腿部的黑色素瘤也可以使用高温隔离肢体灌注技术用包括一种或多种本发明的化合物的药剂的组合进行治疗。该治疗方案暂时将所涉及的肢体的循环与身体的其余部分分开，并将高剂量的化学疗法注射到供给肢体的动脉中，从而向肿瘤区域提供高剂量而不使内部器官暴露于这些可能以其他方式引起严重副作用的剂量。通常将液体温热至102°至104℉。美法仑是该化学疗法程序中最常使用的药物。这可以与另一种称为肿瘤坏死因子(TNF)的药剂一起给予。
合适的化学治疗剂或其他抗癌剂包括，例如，抗代谢物(包括但不限于叶酸拮抗剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物和腺苷脱氨酶抑制剂)，例如甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、喷司他丁和吉西他滨。
合适的化学治疗剂或其他抗癌剂还包括，例如，某些天然产物及其衍生物(例如，长春花生物碱类、抗肿瘤抗生素类、酶类、淋巴因子类和表鬼臼毒素类)，例如长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、更生霉素、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、阿糖胞苷、紫杉醇(泰素)、普卡霉素、脱氧柯福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、干扰素类(尤其是IFN-a)、依托泊苷和替尼泊苷。
其他细胞毒性剂包括诺维本、CPT-11、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、雷洛昔芬和屈洛昔芬。
还适合的是细胞毒性剂例如表鬼臼毒素；抗肿瘤酶；拓扑异构酶抑制剂；丙卡巴肼；米托蒽醌；铂配位络合物，如顺铂和卡铂；生物反应调节剂；生长抑制剂；抗激素治疗剂；亚叶酸；替加氟；和造血生长因子。
其他抗癌剂(一种或多种)包括抗体治疗剂如曲妥珠单抗(HERCEPTIN®)、共刺激分子如CTLA-4、4-1BB和PD-1的抗体或细胞因子(IL-1O或TGF-β)的抗体。
其他抗癌剂还包括阻断免疫细胞迁移的那些，例如趋化因子受体，包括CCR2和CCR4的拮抗剂。
其他抗癌剂还包括增强免疫系统的那些，例如佐剂或过继性T细胞转移。
抗癌疫苗包括树突细胞、合成肽、DNA疫苗和重组病毒。
本发明的药物组合物可任选地包括至少一种信号转导抑制剂(STI)。“信号转导抑制剂”是选择性抑制癌细胞正常功能中信号传导途径中的一个或多个关键步骤从而导致细胞凋亡的药剂。合适的STI包括但不限于：(i) bcr/abl 激酶抑制剂，例如STI 571(GLEEVEC®)；(ii) 表皮生长因子(EGF)受体抑制剂，例如，激酶抑制剂(IRESSA®, SSI-774)和抗体 (Imclone: C225 [Goldstein等人, Clin. Cancer Res., 1:1311-1318(1995)]和Abgenix: ABX-EGF)；(iii) her-2/neu 受体抑制剂，例如法尼基转移酶抑制剂(FTI)，如L-744,832 (Kohl等人, Nat. Med., 1(8):792-797 (1995))；(iv) Akt家族激酶或Akt途径的抑制剂，例如，雷帕霉素(参见，例如，Sekulic等人, Cancer Res., 60:3504-3513 (2000))；(v) 细胞周期激酶抑制剂，例如，flavopiridol和UCN-O1 (参见，例如，Sausville, Curr. Med. Chem. Anti-Canc. Agents, 3:47-56 (2003))；和 (vi) 磷脂酰肌醇激酶抑制剂，例如，LY294002 (参见，例如，Vlahos等人, J. Biol. Chem., 269:5241-5248 (1994))。或者，至少一种STI和至少一种IDO抑制剂可以在单独的药物组合物中。在本发明的一个具体实施方案中，可以同时或相继向患者施用至少一种IDO抑制剂和至少一种STI。换句话说，可以首先施用至少一种IDO抑制剂，可以首先施用至少一种STI，或者可以同时施用至少一种IDO抑制剂和至少一种STI。另外，当使用多于一种IDO抑制剂和/或STI时，化合物可以以任何顺序施用。
本发明进一步提供用于治疗患者中的慢性病毒感染的药物组合物，其包含在药学上可接受的载体中的至少一种IDO抑制剂、任选的至少一种化学治疗药物和任选的至少一种抗病毒剂。除了至少一种已确认的(已知的)IDO抑制剂外，药物组合物还可包括至少一种本发明的IDO抑制剂。在一个具体实施方案中，药物组合物的至少一种IDO抑制剂选自式I和(II)的化合物。
还提供了通过施用有效量的上述药物组合物治疗患者中的慢性病毒感染的方法。
在本发明的一个具体实施方案中，可以同时或相继向患者施用至少一种IDO抑制剂和至少一种化学治疗剂。换句话说，可以首先施用至少一种IDO抑制剂，可以首先施用至少一种化学治疗剂，或者可以同时施用至少一种IDO抑制剂和至少一种STI。另外，当使用多于一种IDO抑制剂和/或化学治疗剂时，化合物可以以任何顺序施用。类似地，相比于IDO抑制剂的施用，任何抗病毒剂或STI也可以在任何时候施用。
可以使用本组合治疗治疗的慢性病毒感染包括但不限于由以下引起的疾病：丙型肝炎病毒(HCV)、人乳头瘤病毒(HPV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSV)、爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)、水痘带状疱疹病毒、柯萨奇病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)。值得注意的是，寄生虫感染(例如疟疾)也可以通过上述方法治疗，其中任选地加入已知治疗寄生虫病况的化合物代替抗病毒剂。
在又另一个实施方案中，可以向患者施用包含至少一种本发明的IDO抑制剂的药物组合物以预防动脉再狭窄，例如在球囊内窥镜检查或支架置入后的动脉再狭窄。在一个特别的实施方案中，药物组合物还包含至少一种紫杉烷(例如，紫杉醇(泰素)；参见，例如，Scheller等人, Circulation, 110:810-814 (2004))。
预期与本发明的化合物组合使用的合适抗病毒剂可包含核苷和核苷酸逆转录酶抑制剂(NRTI)、非核苷逆转录酶抑制剂(NNRTI)、蛋白酶抑制剂和其他抗病毒药物。
合适的NRTI的实例包括齐多夫定(AZT)；去羟肌苷(ddl)；扎西他滨(ddC)；司他夫定(d4T)；拉米夫定(3TC)；阿巴卡韦(1592U89)；阿德福韦二匹伏酯[bis(POM)-PMEA]；洛布卡韦(BMS-180194)；BCH-I0652；恩曲他滨[(-)-FTC]；β-L-FD4 (也称为β-L-D4C并命名为β-L-2′,3′-二脱氧-5-氟-胞苷)；DAPD, ((-)-β-D-2,6-二氨基-嘌呤二氧戊环)；和洛德腺苷(FddA)。典型的合适的NNRTI包括奈韦拉平(BI-RG-587)；地拉夫定(BHAP, U-90152)；依法韦仑(DMP-266)；PNU-142721；AG-1549；MKC-442 (1-(乙氧基-甲基)-5-(1-甲基乙基)-6-(苯基甲基)-(2,4(1H,3H)-嘧啶二酮)；和 (+)-绵毛胡桐内酯A (NSC-675451)和B。典型的合适的蛋白酶抑制剂包括沙奎那韦(Ro 31-8959)；利托那韦(ABT-538)；茚地那韦(MK-639)；奈非那韦(AG-1343)；氨普那韦(141W94)；拉西那韦(BMS-234475)；DMP-450；BMS-2322623；ABT-378；和 AG-1549。其他抗病毒剂包括羟基脲、利巴韦林、IL-2、IL-12、喷他夫西和Yissum Project No.11607。
与免疫-肿瘤学药剂的组合
本文进一步提供了治疗方法，其中式I或式II的化合物与一种或多种免疫-肿瘤学药剂一起施用。本文使用的免疫-肿瘤学药剂，也称为癌症免疫疗法，可有效增强、刺激和/或上调对象中的免疫反应。
在一个方面中，在施用免疫-肿瘤学药剂之前相继施用式I或式II的化合物。在另一个方面中，式I或式II的化合物与免疫-肿瘤学药剂同时施用。在又另一个方面中，在施用免疫-肿瘤学药剂之后相继施用式I或式II的化合物。
在另一个方面中，式I或式II的化合物可与免疫-肿瘤学药剂共同配制。
免疫-肿瘤学药剂包括，例如，小分子药物、抗体或其他生物或小分子。生物免疫-肿瘤学药剂的实例包括但不限于癌症疫苗、抗体和细胞因子。在一个方面中，抗体是单克隆抗体。在另一个方面中，单克隆抗体是人源化的或人的。
在一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是T细胞上的(i)刺激性(包括共刺激性)受体的激动剂或(ii)抑制性(包括共抑制性)信号的拮抗剂，其均引起抗原特异性T细胞反应的放大(通常称为免疫检验点调节剂)。
某些刺激性和抑制性分子为免疫球蛋白超家族(IgSF)的成员。结合至共刺激性或共抑制性受体的膜结合配体的一个重要家族为B7家族，其包括B7-1、B7-2、B7-H1 (PD-L1)、B7-DC (PD-L2)、B7-H2 (ICOS-L)、B7-H3、B7-H4、B7-H5 (VISTA)和B7-H6。结合至共刺激性或共抑制性受体的膜结合配体的另一家族为结合至同源TNF受体家族成员的分子的TNF家族，其包括CD40和CD40L、OX-40、OX-40L、CD70、CD27L、CD30、CD30L、4-1BBL、CD137(4-1BB)、TRAIL/Apo2-L、TRAILR1/DR4、TRAILR2/DR5、TRAILR3、TRAILR4、OPG、RANK、RANKL、TWEAKR/Fn14、TWEAK、BAFFR、EDAR、XEDAR、TACI、APRIL、BCMA、LTβR、LIGHT、DcR3、HVEM、VEGI/TL1A、TRAMP/DR3、EDAR、EDA1、XEDAR、EDA2、TNFR1、淋巴毒素α/TNFβ、TNFR2、TNFα、LTβR、淋巴毒素α1β2、FAS、FASL、RELT、DR6、TROY、NGFR。
在另一个方面中，免疫-肿瘤学药剂为抑制T细胞活化的细胞因子(例如IL-6、IL-10、TGF-ß、VEGF及其他免疫抑制细胞因子)或刺激T细胞活化以便刺激免疫反应的细胞因子。
在一个方面中，T细胞反应可通过式I或式II的化合物与以下中的一种或多种的组合刺激：(i) 抑制T细胞活化的蛋白质的拮抗剂(例如免疫检查点抑制剂)，所述蛋白质例如CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG-3、TIM-3、半乳糖凝集素(Galectin) 9、CEACAM-1、BTLA、CD69、半乳糖凝集素-1、TIGIT、CD113、GPR56、VISTA、2B4、CD48、GARP、PD1H、LAIR1、TIM-1及TIM-4；和/或(ii) 刺激T细胞活化的蛋白质的激动剂，所述蛋白质例如B7-1、B7-2、CD28、4-1BB (CD137)、4-1BBL、ICOS、ICOS-L、OX40、OX40L、GITR、GITRL、CD70、CD27、CD40、DR3及CD28H。
可与式I或式II的化合物组合用于治疗癌症的其他药剂包括NK细胞上的抑制性受体的拮抗剂或NK细胞上的活化受体的激动剂。举例而言，式I或式II的化合物可与KIR的拮抗剂如利瑞单抗组合。
用于组合疗法的又其他药剂包括抑制或耗尽巨噬细胞或单核细胞的药剂，包括但不限于CSF-1R拮抗剂，例如CSF-1R拮抗剂抗体，包括RG7155 (WO 11/70024、WO 11/107553、WO 11/131407、WO 13/87699、WO 13/119716、WO 13/132044)或FPA-008 (WO 11/140249、WO13/169264、WO 14/036357)。
在另一个方面中，式I或式II的化合物可与以下中的一种或多种一起使用：接合正性共刺激性受体的激动剂，减弱经由抑制性受体的信号传导的阻断剂，拮抗剂，和一种或多种全身性增加抗肿瘤T细胞频率的药剂，克服肿瘤微环境内的不同免疫抑制路径(例如阻断抑制性受体参与(engagement)(例如PD-L1/PD-1相互作用)，耗尽或抑制Treg (例如使用抗CD25单克隆抗体(例如达利珠单抗)或通过离体抗CD25珠粒耗尽)，抑制代谢酶如IDO，或逆转/防止T细胞无能或耗竭)的药剂及在肿瘤部位处触发先天性免疫活化和/或炎症的药剂。
在一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是CTLA-4拮抗剂，例如拮抗性CTLA-4抗体。适合的CTLA-4抗体包括例如YERVOY®(伊匹木单抗)或曲美木单抗。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是PD-1拮抗剂，例如拮抗性PD-1抗体。适合的PD-1抗体包括例如OPDIVO® (纳武单抗)、KEYTRUDA® (派姆单抗)或MEDI-0680(AMP-514；WO 2012/145493)。免疫-肿瘤学药剂还可包括皮立珠单抗(CT-011)，尽管已经质疑其对于PD-1结合的特异性。靶向PD-1受体的另一途径为由融合至IgG1的Fc部分的PD-L2(B7-DC)的细胞外结构域构成的重组蛋白，称作AMP-224。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是PD-L1拮抗剂，例如拮抗性PD-L1抗体。适合的PD-L1抗体包括例如MPDL3280A (RG7446；WO 2010/077634)、德瓦鲁单抗(MEDI4736)、BMS-936559 (WO 2007/005874)和MSB0010718C (WO 2013/79174)。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是LAG-3拮抗剂，例如拮抗性LAG-3抗体。适合的LAG3抗体包括例如BMS-986016 (WO 10/19570、WO 14/08218)或IMP-731或IMP-321(WO 08/132601、WO 09/44273)。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是CD137 (4-1BB)激动剂，例如激动性CD137抗体。适合的CD137抗体包括例如优瑞路单抗和PF-05082566 (WO 12/32433)。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是GITR激动剂，例如激动性GITR抗体。适合的GITR抗体包括例如BMS-986153、BMS-986156、TRX-518 (WO 06/105021、WO 09/009116)和MK-4166 (WO 11/028683)。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是IDO拮抗剂。适合的IDO拮抗剂包括例如INCB-024360 (WO 2006/122150、WO 07/75598、WO 08/36653、WO 08/36642), indoximod或NLG-919 (WO 09/73620、WO 09/1156652、WO 11/56652、WO 12/142237)。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是OX40激动剂，例如激动性 OX40抗体。适合的OX40抗体包括例如MEDI-6383或MEDI-6469。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是OX40L拮抗剂，例如拮抗性OX40抗体。适合的OX40L 拮抗剂包括例如RG-7888 (WO 06/029879)。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是CD40激动剂，例如激动性 CD40抗体。在又另一个实施方案中，所述免疫-肿瘤学药剂是CD40拮抗剂，例如拮抗性CD40抗体。适合的CD40抗体包括例如鲁卡木单抗或达西珠单抗。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是CD27激动剂，例如激动性 CD27抗体。适合的CD27抗体包括例如varlilumab。
在另一个方面中，所述免疫-肿瘤学药剂是MGA271 (针对B7H3) (WO 11/109400)。
本发明还包括可用于例如治疗或预防IDO相关疾病或病症、肥胖症、糖尿病和本文提及的其他疾病的药物试剂盒，其包括一个或多个含有药物组合物的容器，所述药物组合物包含治疗有效量的本发明的化合物。如果需要，这种试剂盒可以进一步包括一种或多种各种常规药物试剂盒组分，例如具有一种或多种药学上可接受的载体的容器、另外的容器，这对于本领域技术人员来说是显而易见的。试剂盒中还可以包括作为插入物或标签的说明书，其指示待施用的组分的量、施用指南和/或混合组分的指导。
组合疗法旨在包括以相继方式施用这些治疗剂，即，其中每种治疗剂在不同的时间施用，以及以基本同时的方式施用这些治疗剂，或者治疗剂中的至少两种。基本上同时施用可以例如通过向对象施用具有固定比例的各治疗剂的单一剂型或者多个用于各治疗剂的单一剂型而实现。每种治疗剂的相继或基本上同时施用可以通过任何合适的途径实现，所述途径包括但不限于口服途径、静脉内途径、肌肉内途径和通过粘膜组织的直接吸收。治疗剂可以通过相同途径或不同途径施用。例如，所选组合的第一种治疗剂可以通过静脉内注射施用，而该组合的其他治疗剂可以口服施用。或者，例如，可以口服施用所有治疗剂，或者可以通过静脉内注射施用所有治疗剂。组合疗法还可以包括进一步与其他生物活性成分和非药物疗法(例如手术或放射治疗)组合的如上所述的治疗剂的施用。在组合疗法还包括非药物治疗的情况下，非药物治疗可以在任何合适的时间进行，只要实现来自治疗剂和非药物治疗的组合的共同作用的有益效果即可。例如，在适当的情况下，当暂时从治疗剂的施用中去除(可能数天或甚至数周)非药物治疗时，仍然实现有益效果。
药物组合物和给药
本发明还提供药学上可接受的组合物，其包含治疗有效量的一种或多种式I和/或式II的化合物，所述化合物与一种或多种药学上可接受的载体(添加剂)和/或稀释剂一起，并且任选地，与一种或多种上述其他治疗剂一起配制。
本发明的化合物可以为本文所述的任何用途而通过任何合适的方式施用，例如口服，如片剂、胶囊(其各自包括持续释放或定时释放制剂)、丸剂、粉剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、混悬剂(包括纳米混悬剂、微混悬剂、喷雾干燥的分散体)、糖浆和乳剂；舌下；颊；肠胃外，如通过皮下、静脉内、肌肉内或胸骨内注射，或输注技术(例如，作为无菌可注射水性或非水性溶液剂或混悬剂)；鼻，包括施用于鼻膜，例如通过吸入喷雾；局部，如乳膏或软膏的形式；或直肠，如栓剂的形式。它们可以单独施用，但通常与基于所选施用途径和标准药学实践选择的药物载体一起施用。
短语“药学上可接受的”在本文中用于指在合理的医学判断范围内适合用于与人类和动物的组织接触而没有过量的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的利益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
本文所用的短语“药学上可接受的载体”是指涉及将主题化合物从一个器官或身体的一部分运送或运输到另一个器官或身体的一部分的药学上可接受的材料、组合物或媒介物，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(例如，润滑剂，滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌、或硬脂酸)或溶剂包封材料。在与制剂的其他成分相容并且对患者无害的意义上，每种载体必须是“可接受的”。
术语“药物组合物”是指包含本发明的化合物与至少一种另外的药学上可接受的载体的组合的组合物。“药学上可接受的载体”是指本领域通常接受的用于将生物活性剂递送至动物，特别是哺乳动物的介质，根据施用方式和剂型的性质，其包括，即，辅助剂、赋形剂或媒介物，如稀释剂、防腐剂、填充剂、流动调节剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、助悬剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、抗菌剂、抗真菌剂、润滑剂和分配剂。
根据适当地在本领域普通技术人员视界范围内的许多因素配制药学上可接受的载体。这些包括但不限于：配制的活性剂的类型和性质；含有药剂的组合物的待施用对象；组合物的预期施用途径；和目标治疗适应症。药学上可接受的载体包括水性和非水性液体介质二者，以及各种固体和半固体剂型。除活性剂外，这种载体还可包括许多不同的成分和添加剂，这种其他成分由于各种原因，例如，本领域普通技术人员熟知的稳定活性剂、粘合剂等而被包括在制剂中。合适的药学上可接受的载体的描述及其选择中涉及的因素在各种容易获得的来源中找到，所述来源例如Allen, Jr., L.V.等人, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (2卷), 第22版, Pharmaceutical Press (2012)。
当然，本发明的化合物的剂量方案将根据已知因素而变化，所述因素例如特定药剂的药效学特征及其施用方式和途径；接受者的种属、年龄、性别、健康、医疗状况和体重；症状的性质和程度；同时治疗的种类；治疗频率；施用途径、患者的肾和肝功能以及所需的效果。
作为一般指导，当用于所示效果时，每种活性成分的每日口服剂量范围为约0.001至约5000 mg/日，优选约0.01至约1000 mg/日，且最优选约0.1至约250 mg/日。对于静脉内，在恒定速率输注期间，最优选的剂量范围为约0.01至约10 mg/kg/分钟。本发明的化合物可以单一日剂量施用，或者总日剂量可以每日两次、三次或四次的分剂量施用。
所述化合物通常与适当的药物稀释剂、赋形剂或载体(在本文中统称为药物载体)混合施用，所述药物稀释剂、赋形剂或载体根据预期的施用形式，例如口服片剂、胶囊、酏剂和糖浆适当地选择，并且与常规药学实践一致。
适于施用的剂型(药物组合物)每剂量单位可含有约1毫克至约2000毫克的活性成分。在这些药物组合物中，活性成分将通常以基于组合物总重量的约0.1-95重量％的量存在。
用于口服施用的典型胶囊含有至少一种本发明的化合物(250 mg)、乳糖(75 mg)和硬脂酸镁(15 mg)。将混合物通过60目筛并装入1号明胶胶囊中。
通过将至少一种本发明的化合物(250 mg)无菌放入小瓶中，无菌冷冻干燥和密封来制备典型的可注射制剂。使用时，将小瓶中的内容物与2 mL生理盐水混合，以制备可注射制剂。
本发明在其范围内包括药物组合物，其包含单独或与药物载体组合的作为活性成分的治疗有效量的至少一种本发明的化合物。任选地，本发明的化合物可以单独使用，与本发明的其他化合物组合使用，或与一种或多种其他治疗剂，例如，抗癌剂或其他药物活性材料组合使用。
无论选择何种施用途径，都可以通过本领域技术人员已知的常规方法将本发明的化合物(可以以合适的水合形式使用)和/或本发明的药物组合物配制成药学上可接受的剂型。
可以改变本发明的药物组合物中的活性成分的实际剂量水平，以便获得有效实现特定患者、组合物和施用方式的所需治疗反应，而不是对患者有毒的活性成分的量。
所选的剂量水平取决于多种因素，包括所用的本发明的特定化合物或其酯、盐或酰胺的活性、使用的特定化合物的施用途径、施用时间、排泄或代谢的速率、吸收的速度和程度、治疗的持续时间、与所用特定化合物组合使用的其他药物、化合物和/或材料、被治疗患者的年龄、性别、体重、状况、一般健康和既往医学病史，以及医学领域熟知的类似因素。
具有本领域普通技能的医生或兽医可以容易地确定和开出所需药物组合物的有效量。例如，医生或兽医可以以低于实现期望治疗效果所需的水平开始药物组合物中使用的本发明的化合物的剂量，并逐渐增加剂量直至达到期望效果。
通常，本发明的化合物的合适日剂量是有效产生治疗效果的最低剂量的化合物的量。这种有效剂量将通常取决于上述因素。通常，对于患者，本发明的化合物的口服、静脉内、脑室内和皮下剂量为每天每千克体重约0.01至约50 mg。
如果需要，活性化合物的有效日剂量可以作为在一天中以适当的间隔分别施用的两个、三个、四个、五个、六个或更多个亚剂量施用(任选地以单位剂型施用)。在本发明的某些方面中，给药是每天一次施用。
虽然本发明的化合物可以单独施用，但优选将该化合物作为药物制剂(组合物)施用。
定义
除非本文另有明确说明，否则以单数形式提及也可包括复数形式。例如，“一个”和“一种”可以指一个/种，或一个/种或多个/种。
除非另有说明，否则任何具有未满足化合价的杂原子被假定具有足以满足化合价的氢原子。
在整个说明书和所附权利要求书中，给定的化学式或名称应包括其中存在这种异构体的所有立体和光学异构体及其外消旋体。除非另有说明，否则所有手性(对映异构和非对映异构)和外消旋形式都在本发明的范围内。C=C双键、C=N双键、环系统等的许多几何异构体也可以存在于化合物中，并且所有这种稳定的异构体都包括在本发明中。描述了本发明的化合物的顺式-和反式-(或E-和Z-)几何异构体，并且可以作为异构体的混合物或作为分离的异构形式分离。本化合物可以以光学活性或外消旋形式分离。光学活性形式可以通过拆分外消旋形式或通过从光学活性原料合成来制备。用于制备本发明的化合物和其中制备的中间体的所有方法都被认为是本发明的一部分。当制备对映异构体或非对映异构体产物时，它们可以通过常规方法分离，例如通过色谱或分级结晶。取决于方法条件，本发明的最终产物以游离(中性)或盐形式获得。这些最终产物的游离形式和盐都在本发明的范围内。如果需要，可将化合物的一种形式转化为另一种形式。游离碱或酸可以转化成盐；盐可以转化成游离化合物或另一种盐；可以将本发明的异构化合物的混合物分离成单独的异构体。本发明的化合物(游离形式及其盐)可以以多种互变异构形式存在，其中氢原子转移到分子的其他部分并且分子的原子之间的化学键被随后重排。应该理解，只要它们可能存在，所有互变异构形式都包括在本发明内。
为了清楚起见并且根据本领域的标准惯例，符号或用于式和表中以显示作为基团或取代基与结构的核心/核的连接点的键。
另外，为了清楚起见，当取代基具有不在两个字母或符号之间的短划线(-)时；这用于表示取代基的连接点。例如，-CONH2通过碳原子连接。
另外，为了清楚起见，当在实线的末端没有显示取代基时，这表明存在与键连接的甲基(CH3)基团。
如本文所用，术语“烷基”旨在包括具有指定碳原子数的支链和直链饱和脂族烃基二者。例如，“C1-C6烷基”或“C1-6烷基”表示具有1-6个碳原子的烷基。示例性烷基包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如，正丙基和异丙基)、丁基(例如，正丁基、异丁基、叔丁基)和戊基(例如，正戊基、异戊基、新戊基)。术语“烯基”是指具有一个或多个双键的烷基。
如本文所用，“亚烷基”(也称为“烷”)表示具有指定碳原子数的亚烷基。例如，“C1-C6亚烷基”表示具有1至6个碳原子的亚烷基。示例性亚烷基包括但不限于亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2CH2-)等。
如本文所用，“芳基”是指芳环系统，其包括但不限于苯基、联苯、茚满基、1-萘基、2-萘基和四氢萘基。
“卤代”或“卤素”包括氟、氯、溴和碘。
“卤代烷基”旨在包括被一个或多个卤素取代的具有指定碳原子数的支链和直链饱和脂族烃基二者。卤代烷基的实例包括但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基、五氯乙基、2,2,2-三氟乙基、七氟丙基和七氯丙基。卤代烷基的实例还包括“氟代烷基”，其旨在包括被1个或多个氟原子取代的具有指定碳原子数的支链和直链饱和脂族烃基二者。
术语“环烷基”是指环化的烷基。C3-6环烷基旨在包括C3、C4、C5和C6环烷基。示例性的环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和降冰片基。支链环烷基例如1-甲基环丙基和2-甲基环丙基包括在“环烷基”的定义内。术语“环烯基”是指环化的烯基。C4-6环烯基旨在包括C4、C5和C6环烯基。示例性的环烯基包括但不限于环丁烯基、环戊烯基和环己烯基。
如本文所用，术语“杂芳基”旨在表示稳定的单环和多环芳烃，其包括至少一个杂原子环成员，例如硫、氧或氮。杂芳基包括但不限于吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、异噁唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吲唑基、1,2,4-噻二唑基、异噻唑基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基、二氢吲哚基、苯并二氧杂环戊基和苯并二噁烷。杂芳基是取代或未取代的。氮原子是取代或未取代的(即，N或NR，其中R是H或另一个取代基，如果定义了的话)。氮和硫杂原子可任选被氧化(即N→O和S(O)p，其中p为0、1或2)。
如本文所提及的，术语“取代的”是指至少一个氢原子被非氢基团替代，条件是保持正常的化合价并且该取代产生稳定的化合物。
如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中通过制备其酸或碱盐来修饰母体化合物。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性基团如胺的无机或有机酸盐；和酸性基团如羧酸的碱性或有机盐。药学上可接受的盐包括母体化合物的常规无毒盐或季铵盐，其例如由无毒无机或有机酸形成。例如，这种常规的无毒盐包括衍生自无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的那些；和由有机酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸和羟乙基磺酸等制备的盐。
本发明的药学上可接受的盐可以通过常规化学方法由含有碱性或酸性基团的母体化合物合成。通常，这种盐可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的量的适当的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；通常，优选非水介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。合适的盐的列表在Allen, Jr., L.V., ed.,Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第22版, PharmaceuticalPress, London, UK (2012)中找到。其公开内容据此通过引用并入。
此外，式I和式II的化合物可具有前药形式。将在体内转化以提供生物活性剂(即，式I或II的化合物)的任何化合物都是本发明的范围和精神内的前药。各种形式的前药在本领域中是熟知的。有关这种前药衍生物的实例，参见：
a) Bundgaard, H., ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985)和Widder, K.等人, eds., Methods in Enzymology, 112:309-396, Academic Press (1985)；
b) Bundgaard, H., 第5章: "Design and Application of Prodrugs", A Textbook of Drug Design and Development, 第113-191页, Krogsgaard-Larsen, P.等人, eds.,Harwood Academic Publishers (1991)；
c) Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8:1-38 (1992)；
d) Nielsen, N.M.等人, J. Pharm. Sci., 77:285 (1988)；
e) Kakeya, N.等人, Chem. Pharm. Bull., 32:692 (1984)；和
g) Rautio, J., ed., Prodrugs and Targeted Delivery (Methods and Principles in Medicinal Chemistry), Vol. 47, Wiley-VCH (2011)。
含有羧基的化合物可形成生理学上可水解的酯，其通过在体内水解从而产生式I或式II化合物本身而用作前药。这种前药优选口服施用，因为在许多情况下水解主要在消化酶的影响下发生。可以在酯本身具有活性的情况下，或者在血液中发生水解的那些情况下使用肠胃外施用。式I或式II的化合物的生理学上可水解的酯的实例包括C1-6烷基、C1-6烷基苄基、4-甲氧基苄基、茚满基、邻苯二甲酰基、甲氧基甲基、C1-6烷酰氧基-C1-6烷基(例如，乙酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基或丙酰氧基甲基)、C1-6烷氧基羰基氧基-C1-6烷基(例如，甲氧基羰基-氧基甲基或乙氧基羰基氧基甲基、甘氨酰基氧基甲基、苯基甘氨酰基氧基甲基、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)-甲基)和例如用于青霉素和头孢菌素领域中的其他熟知的生理学上可水解的酯。这种酯可通过本领域已知的常规技术制备。
前药的制备是本领域熟知的，并描述于，例如，King, F.D., ed., Medicinal Chemistry: Principles and Practice, The Royal Society of Chemistry,Cambridge, UK (第2版, 再版的, 2006)；Testa, B.等人, Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, VCHA and Wiley-VCH, Zurich, Switzerland (2003)；Wermuth, C.G., ed., The Practice of Medicinal Chemistry,第3版, Academic Press, San Diego, CA (2008)。
本发明旨在包括本化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但不同质量数的那些原子。作为一般实例而非限制，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括13C和14C。本发明的同位素标记的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文所述的那些类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替另外使用的未标记的试剂来制备。
术语“溶剂化物”是指本发明的化合物与一个或多个溶剂分子(无论是有机的还是无机的)的物理缔合。这种物理缔合包括氢键结合。在某些情况下，溶剂化物能够分离，例如，当一个或多个溶剂分子掺入结晶固体的晶格中时。溶剂化物中的溶剂分子可以以规则排列和/或无序排列存在。溶剂化物可包含化学计量或非化学计量的量的溶剂分子。“溶剂化物”包括溶液相和可分离的溶剂化物二者。示例性的溶剂化物包括但不限于水合物、乙醇化物、甲醇化物和异丙醇化物。溶剂化的方法通常是本领域已知的。
如本文所用，术语“患者”是指通过本发明的方法治疗的生物体。这种生物体优选包括但不限于哺乳动物(例如鼠科动物、类人猿、马科动物、牛科动物、猪类动物、犬科动物、猫科动物等)，且最优选指人类。
如本文所用，术语“有效量”是指药物或药剂，即本发明的化合物的量，其将引起例如由研究人员或临床医师寻求的组织、系统、动物或人的生物学或医学反应。此外，术语“治疗有效量”是指与未接受该量的相应对象相比导致疾病、病症或副作用的改进的治疗、愈合、预防或改善，或者降低疾病或病症的发展速度的任何量。有效量可以一次或多次施用、应用或剂量施用，并不意图限于特定的制剂或施用途径。该术语在其范围内还包括有效增强正常生理功能的量。
如本文所用，术语“治疗”包括导致病况、疾病、病症等的改进或其症状的改善的任何效果，例如减轻、减少、调节、改善或消除。
如本文所用，术语“药物组合物”是指活性剂与惰性或活性载体的组合，使得该组合物尤其适合于体内或离体的诊断或治疗用途。
对于治疗用途，预期本发明的化合物的盐是药学上可接受的。然而，非药学上可接受的酸和碱的盐也可应用于例如制备或纯化药学上可接受的化合物。
制备方法
本发明的化合物可以通过诸如下列方案中所示的那些的方法使用本领域技术人员已知的化学转化制备。本领域普通技术人员可以容易地选择溶剂、温度、压力和其他反应条件。起始物料可商购获得或由本领域普通技术人员容易地制备。这些方案是说明性的，并不意味着限制本领域技术人员可用于制备本文公开的化合物的可能技术。对于本领域技术人员来说，不同的方法可以是显而易见的。另外，合成中的各个步骤可以以交替的顺序或次序进行，以得到所需的化合物(一种或多种)。此外，在这些方案中以离散步骤表示反应并不排除它们或者通过在同一反应容器中嵌入多个步骤，或者通过在不纯化或表征中间体(一种或多种)的情况下进行多个步骤来串联进行。此外，通过以下方法制备的许多化合物可以使用本领域技术人员熟知的常规化学方法进一步修饰。本文引用的所有文献均通过引用以其整体并入本文。
还可以提及国际公开第WO2016/073738号、第WO2016/073770号和第WO2016/073774号。
对本文采用的这些化学转化中的许多的提及可以在Smith, M.B.等人, March's Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms, and Structure, 第5版,Wiley-Interscience, New York (2001)或其他关于合成有机化学主题的标准文本中找到。某些转化可能需要通过保护基团(一种或多种)掩蔽反应性官能团。提供了这些基团的引入、去除条件和对反应条件的相对敏感性的方便的参考文献是Greene, T.W.等人,Protective Groups in Organic Synthesis, 第3版, Wiley-Interscience, New York(1999)。
方案1-7和9描述了用于制备式I化合物的方法。这些方法也可用于如方案8中所述的式II化合物的制备。
方案1
在有机碱如2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶的存在下，用亲电子三氟甲磺酸化试剂如三氟甲磺酸酐处理酮(III)，可得到一般结构IV的乙烯基三氟甲磺酸酯。对于酮III，除了所示的乙二醇衍生的缩酮外，还可以使用其他环状和非环状缩酮保护基团。或者，可以用强碱正如LiHMDS处理III型酮，所得的烯醇锂可以用N-苯基三氟甲磺酰胺或其他亲电子三氟甲磺酸化试剂处理。乙烯基三氟甲磺酸酯IV转化为乙烯基硼酸酯V可以使用由Miyaura(T.Ishiyama，M. Murata，N. Miyaura，J. Org. Chem.，1995, 60, 7508-7510)开发的标准条件来完成。乙烯基硼酸酯如V将参与与多种偶联配偶体的Suzuki偶联，所述偶联配偶体包括但不限于芳基和乙烯基卤化物和芳基和乙烯基三氟甲磺酸酯，更具体地如VI的偶联配偶体。除了所示的频哪醇硼酸酯之外，硼酸和其他衍生的硼物质也已成功用于Suzuki偶联。Suzuki偶联的许多变化是已知的，但通常它们涉及在碱如碳酸钾水溶液存在下在溶剂如DMF和催化剂如Pd(PPh3)4中加热两个偶联配偶体。在催化剂如钯/碳存在下，在溶剂如乙酸乙酯中，在大气压或高于大气压的氢气下，还原烯烃中间体，得到中间体如VIII。在共溶剂如THF或丙酮的存在下，在加热或不加热的情况下，与酸水溶液如HCl一起搅拌，可以完成酮水解。可以用各种还原剂(包括硼氢化钠)将酮IX还原成醇，并且通过在碱如吡啶存在下用适当的亲电子试剂(在这种情况下为甲磺酰氯)处理，可以将所得的醇转化成离去基团。甲磺酸酯X然后可通过许多亲核试剂包括去质子化的丙二酸二叔丁酯置换。在这种情况下，丙二酸酯用氢化钠去质子化，但是其他碱也可以实现这种去质子化。置换后，叔丁基酯的水解可受酸水溶液如乙酸的影响，并且在酸性条件下加热时可发生脱羧反应，得到羧酸如XI。在酸XI上安装手性助剂可以通过首先用酰氯(例如新戊酰氯)处理以形成混合酸酐，然后向其中加入去质子化的助剂如Evan's噁唑烷酮(D. A. Evans, M. D. Ennis, D. J. Mathre;J. Am. Chem. Soc.,1982, 104, 1737–1739)来导致。用碱如NaHMDS使得到的手性酰亚胺XII去质子化然后用合适的亲电子试剂R2X处理所得的烯醇化物，可以可预测的控制和在新形成的手性中心处的高非对映选择性进行，以得到物质XIII。在基于Evan's噁唑烷酮的助剂的情况下，助剂的裂解可通过在加入或不加入过氧化氢的情况下用碱水溶液如LiOH处理而发生。对于在中间体XIV上安装各种稠合杂环，参见方案9。
方案2
哌啶、哌嗪和吡咯烷衍生的酯XV是已知的化合物，其可以在添加或不添加碱如DIPEA的情况下进行SNAr反应。所得的酯XVI可在通常使用碱或酸水溶液的各种条件下水解，得到羧酸XVII。对于在中间体XVII上安装各种稠合杂环，参见方案9。
方案3
或者，通过用叠氮磷酸二苯酯(DPPA)处理、然后截取并随后用碱性水溶液如LiOH将所得异氰酸酯脱羧，可以将酸如中间体XIV转化为胺XVIII。对于在中间体XVIII上安装各种稠合杂环，参见方案9。
方案4
与方案3类似，在W= -CH-或-C(C1-C6烷基)-的情况下，中间体XVII也可用DPPA处理，然后用碱性水溶液处理，得到胺XIX。对于在中间体XIX上安装各种稠合杂环，参见方案9。
方案5
在溶剂如THF中用碱如氢化钠，然后用一般结构III的酮处理处理膦酰基乙酸酯，得到三-(当R2=H时)或四取代的烯烃XX。用于烯化和转化(下述)的替代方法是已知的，并且将由本领域技术人员基于它们对所考虑的具体底物的适用性来选择。烯烃XX的还原通过在催化剂(通常为钯/碳)存在下，在大气压或更高的氢气气氛下，在合适的溶剂中搅拌或摇动烯烃溶液来完成。缩酮基团的水解得到一般结构XXI的酮。通常，这通过在共溶剂如THF或丙酮的存在下与酸水溶液如HCl一起加热来完成。除了所示的环状乙二醇基缩酮外，还可以使用其他环状和非环状缩酮保护基团。将酮转化为三氟甲磺酸酯XXII、转化为硼酸酯XXIII、转化为Suzuki产物XXIV可如方案1中所述进行。如前所述，可以在氢化条件下还原Suzuki产物XXIV，并且根据R'的性质，在用碱性或酸性含水介质处理后，所得的酯可以水解成酸XIV。对于在中间体XIV上安装各种稠合杂环，参见方案9。
方案6
或者，酮XXI可以用几种还原剂(优选硼氢化钠)在合适的溶剂如乙醇中还原，得到醇如XXV。这些醇也可以与方案2中讨论的哌啶和哌嗪类似的方式，在碱如叔丁醇钠存在下，在适当的极性非质子溶剂如DMF中，与底物如VI进行SNAr反应，得到XXVI类型的醚。这些醚可以使用方案1、3和5中描述的化学方法精制成由式I描述的各种结构。对于各种稠合杂环的安装，参见方案9。
方案7
哌啶酮XXVIII在文献中是已知的，并且可以使用方案5或6中描述的化学方法精制成直接连接的或醚连接的式I化合物。对于各种稠合杂环的安装，参见方案9。
方案8
使用前述中间体(例如V、XXIII和XXV)，通过利用XXIX型偶联配偶体和亲电子试剂得到烯烃XXX或XXXI以及醚XXXII，可以合成式II化合物。这些可以再次使用方案1、5和6中描述的相同的反应顺序精制为式II化合物。关于稠合杂环的安装，参见方案9。
方案9
可以将XXXIII型的高级中间体精制成各种式(I)的稠合杂环化合物，并且这些顺序也可以应用于产生式(II)化合物的高级中间体。可以将中间体XXXIII转化为酰氯并用适当的XXXIV型亲核试剂淬灭，得到酰胺XXXV。酰胺XXXV可用酸性、活化或脱水试剂，优选三氯氧磷处理，得到式(I)化合物。中间体XXXIII的酰氯也可以用2-肼基-吡啶或2-甲基氨基-吡啶截取，分别得到中间体XXXVI或XXXVII。这些也可以用合适的酸性、活化或脱水试剂处理，得到式(I)化合物。如果中间体XXXIII的酰氯被邻氨基苯甲酰胺捕获得到酰胺如XXXVIII，则在共溶剂如乙醇的存在下用碱水溶液如氢氧化钠处理，也将得到式(I)化合物。在另一个应用中，可以将中间体XXXIII的酰氯转化为Weinreb酰胺，然后用甲基溴化镁处理，得到甲基酮XXXIX。该甲基酮可被溴化并用3-氨基-哒嗪处理，也得到式(I)化合物。如果制备了XL型胺(如由方案3和4得到)，则可以使用多种偶联剂(包括EDCI和HOBT)在标准酰胺键形成条件下使其与邻氨基苯甲酸偶联，得到酰胺XLI。在酸和热的存在下用原甲酸酯处理该酰胺将得到式(I)化合物。在合适的极性非质子溶剂如NMP存在下，在碱如二异丙基乙胺的存在下，该胺XL还能够有能力与XLII型亲电子试剂进行SNAR反应，得到式(I)化合物。最后，中间体XXXIII的酰氯可以用氨捕获，然后用强还原剂如氢化铝锂处理，得到伯胺XLIII。在合适的极性非质子溶剂如NMP存在下，在碱如二异丙基乙胺存在下，该胺还能够有能力与XLII型亲电子试剂进行SNAR反应，得到式(I)化合物。应该注意的是，方案9仅仅代表了由方案1-8中获得的中间体产生稠合杂环的可能的转化的一小部分选择。除了方案9中描述的那些之外的许多其他稠合杂环可以衍生自方案1-8中获得的中间体。
实施例
提出以下实施例以向本领域普通技术人员提供如何制备和使用本发明的完整公开和描述，并且所述实施例不旨在限制发明人视为其发明的内容的范围，它们也不旨在表示执行了下面的实验，或者它们是可以执行的所有实验。应当理解，以现在时书写的示例性描述不一定已被执行，而是可以执行所述描述以生成其中描述的性质的数据等。已经努力确保关于所使用的数字(例如，量、温度等)的准确性，但是应该考虑一些实验误差和偏差。
除非另有说明，否则份数是重量份，分子量是重均分子量，温度以摄氏度(℃)计，且压力是大气压或接近大气压。使用标准缩写，包括以下：wt =野生型； bp =碱基对； kb =千碱基； nt =核苷酸； aa =氨基酸； s或sec =秒； min =分钟； h或hr =小时； ng =纳克；μg=微克； mg =毫克； g =克；kg=千克； dl或dL =分升；μl或μL = 微升；ml或mL = 毫升；l或L = 升；μM = 微摩尔/L；mM = 毫摩尔/L；M = 摩尔/L；kDa = 千道尔顿；i.m. = 肌肉内的(地)；i.p. = 腹膜内的(地)；SC或SQ = 皮下的(地)；QD = 每日； BID =每天两次； QW =每周； QM =每月； HPLC =高效液相色谱； BW =体重； U =单位； ns =无统计学意义； PBS=磷酸盐缓冲盐水； IHC = 免疫组织化学；DMEM = 达尔伯克改良伊格尔培养基；EDTA = 乙二胺四乙酸。
使用以下方法进行分析型HPLC/MS：
方法A：使用以下方法的Waters Acquity SDS：2％至98％溶剂B的线性梯度历经1.7分钟；220 nm的紫外可视化；柱：BEH C18 2.1 mm x 50 mm；1.7μm颗粒(加热至温度50℃)；流速：0.8 mL/min；流动相A：100％水，0.05％TFA；流动相B：100％乙腈，0.05％TFA。
方法B：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；流动相A： 5:95 乙腈:水(含有0.1％三氟乙酸)；流动相B：95:5 乙腈:水(含有0.1％三氟乙酸)；温度：50℃；梯度：0-100% B历经3分钟，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1.0 mL/min；检测：在220 nm处的UV。
方法C：制备型色谱条件：仪器：Berger Prep SFC MGII (LVL-L4021 Lab)；柱：手性IC 25 X 3 cm ID，5 μm；流速：85.0 mL/min；流动相：74/26 CO2/MeOH；检测器波长：220nm。
方法D：制备型色谱条件：仪器：Berger Prep SFC MGII (LVL-L4021 Lab)；柱：手性Phenomenex Cellulose-4 25 X 3 cm ID，5 μm；流速：85.0 mL/min；流动相：70/30 CO2/MeOH；检测器波长：220 nm。
方法E：制备型色谱条件：仪器：Berger Prep SFC MGII (LVL-L4021 Lab)；柱：手性Phenomenex Cellulose-4 25 X 3 cm ID，5 μm；流速：85.0 mL/min；流动相：70/30 CO2/MeOH w/0.1％DEA；检测器波长：220 nm。
方法G：Berger Prep SFC MGII (LVL-L4021 Lab)；柱：手性AD 25 X 3 cm，5 μm；流速：85.0 mL/min；流动相：80/20 CO2/MeOH；检测器波长：220 nm；样品制备和进样量：将21.3 mg溶于4 mL MeOH中，500μL。
方法H：Aurora分析型SFC (LVL-L4021 Lab)，柱：手性AD 250 X 4.6 mm ID，5 μm；流速：2.0 mL/min；流动相：80/20 CO2/MeOH。
方法I：柱：Chiralpak AD-H，30×250mm，5微米；流速：100 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：120巴；紫外波长：220；流动相：75％CO2/25％异丙醇-0.1％DEA(等度)；进样：1250μL，19 mg/2 mL甲醇。
方法J：柱：Chiralpak AD-H，4.6×100μm，5微米(分析型)；流速：2 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：1700 psi；紫外波长：220 nm；流动相：75％CO2/25％异丙醇-0.1％DEA(等度)。
方法K：仪器：Berger Prep SFC MGII (LVL-L4021 Lab)柱；PhenomenexCellulose-4 25×3 cm，5 μm；流速：85.0 mL/min；流动相：80/20 CO2/MeOH/ACN 50:50；检测器波长：220 nm；样品制备和进样量：将6.0 mg溶于3 mL MeOH中，2000μL。
方法L：仪器：Aurora分析型SFC(LVL-L4021 Lab)；柱：Phenomenex Cellulose-4l250 X 4.6 mm ID，5 μm；流速：2.0 mL/min；流动相：80/20 CO2/MeOH/CAN 50:50。
方法M：柱：Chiralpak AD，30×250 mm，5微米；流速：100 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：120巴；紫外波长：220 nm；流动相：80％CO2/20％甲醇-0.1％DEA(等度)；进样：2100 uL，12 mg/3 mL甲醇。
方法N：柱：Chiralpak AD，4.6×100 m，5微米(分析型)；流速：2 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：1700 psi；紫外波长：220 nm；流动相：80％CO2/20％甲醇-0,1％DEA(等度)。
方法O：柱：Chiralcel OD，30×250mm，5微米；流速：100 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：120巴；紫外波长：220 nm；流动相：90％CO2/10％甲醇-0.1％DEA(等度)；进样：500 uL，9.9 mg/2.0 mL甲醇。
方法P：Chiralcel OD 4.6×100mm，5微米(分析型)；流速：2 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：1700 psi；紫外波长：220 nm；流动相：90％CO2/10％甲醇-0.1％DEA(等度)。
方法Q：柱：Chiralpak IC，21×250mm，5微米；流速：60 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：120巴；紫外波长：220 nm；流动相：75％CO2/25％异丙醇-0.1％DEA(等度)；进样：350 uL，19 mg/3 mL甲醇。
方法R：柱：Chiralpak IC，4.6×100mm，5微米(分析型)；流速：2 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：1700 psi；紫外波长：220 nm；流动相：75％CO2/25％异丙醇-0.1％DEA(等度)。
方法S：柱：Chiralpak AD，30×250mm，5微米；流速：100 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：120巴；紫外波长：220 nm；流动相：80％CO2/20％异丙醇-0.1％DEA(等度)；进样：1500 uL，13 mg/3 mL甲醇。
方法T：柱：Chiralpak AD，4.6×100mm，5微米(分析型)；流速：2 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：1700 psi；紫外波长：220 nm；流动相：80％CO2/20％异丙醇-0.1％DEA(等度)。
方法U：柱：Chiralpak AD，30×250mm，5微米；流速：100 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：120巴；紫外波长：220 nm；流动相：85％CO2/15％甲醇-0.1％DEA(等度)；进样：1500 uL，19 mg/3 mL甲醇。
方法V：柱：Chiralpak AD，4.6×100mm，5微米(分析型)；流速：2 mL/min；柱温箱温度：40℃；BPR设定：1700 psi；紫外波长：220 nm；流动相：85％CO2/15％甲醇-0.1％DEA(等度)。
实施例1
4-((顺式)-4-((R)-1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉
实施例1：4-((顺式)-4-((R)-1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉
制备1A：
在N2下在-78℃历经70 分钟向1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(300 g, 1920.86 mmol,1.0eq)和N-苯基三氟甲磺酰亚胺(823.47 g, 2305.03 mmol, 1.2eq)于MTBE (7.5 L)中的搅拌溶液中加入2.0 M NaHMDS/THF (1152.2 mL, 2305.03 mmol, 1.2eq)，并将混合物搅拌另外60 分钟。将反应混合物温热至室温并搅拌过夜，直至TLC显示原料完全消耗。将混合物用KHSO4水溶液(100 ml)淬灭，过滤以除去固体并将滤液完全浓缩。向残余物中加入3 LMTBE，然后用5% NaOH (1.5 L×3)洗涤。浓缩有机相以获得567 g 粗制备1A (浅黄色油状物，产率 102%)。粗品可以不经进一步纯化而直接用于下一步骤。
制备1A：1H NMR(400 MHz ,CDCl3): δ (ppm) 5.65 (t, J=4.0 Hz, 1H), 3.98(d, J=1.5 Hz, 4H), 2.53 (s,2H), 2.40 (s, 2H), 1.90 (t, J=6.6 Hz, 2H)。
制备1B：
将粗制备1A (600 g, 2.08 mol, 1eq)、B2Pin2 (687.1 g, 2.71 mol, 1.3eq)、KOAc(613 g, 6.24 mol, 3eq)、NaBr (86 g, 0.833mol, 0.4 eq)和Pd(dppf)Cl2 (76 g, 0.1mol, 0.05eq)于二噁烷(6.5 L)中的混合物加热至回流过夜。一旦反应完成，就将混合物浓缩并通过FCC纯化 (2% →10% →20% EtOAc/PE)以得到制备1B (369 g, 66%)。
制备1B：LC-MS：267.1 (M+1)+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.46 (s, 1H),3.98 (s, 4H), 2.37-2.35 (m, 4H), 1.74-1.60 (t, 2H), 1.24 (s, 12H)。
制备 1C：
将制备1B (368g, 1.38 mol, 1.3eq)、4-氯-6-氟喹啉(195 g, 1.07 mol, 1eq)、K2CO3 (445 g, 3.22 mol,3eq)和Pd(PPh3)4 (25 g, 22 mmol, 0.02eq)于二噁烷-水(3L,4:1)中的混合物加热至回流过夜。然后浓缩溶液并用EtOAc萃取。通过FCC纯化(38％EtOAc/石油醚)，得到制备1C (236 g, 77%)。
制备1C： LC-MS：286.1 (M+1)+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.80-8.29 (d,1H), 8.11-8.07 (q, 1H), 7.63-7.61 (q, 1H), 7.47-7.46 (q, 1H), 7.26-7.22(m,1H), 5.75-5.74 (m, 1H), 4.08-4.05 (m, 4H), 2.63-2.59 (m, 2H),2.59-2.53(m,2H),2.0-1.97(m,2H)。
制备1D：
在55℃向于IPA (2 L)中的制备1C (125 g, 0.44 mol)中加入10% Pd/C并将混合物在H2气氛下搅拌过夜。将混合物过滤并浓缩，以得到粗制备1D (130 g)，将其直接用于下一步骤。
制备1E：
在45℃将制备1D (100 g, 0.348 mol)用4 N HCl ( 300 mL)/丙酮(1200 mL)处理过夜。通过TLC监测混合物。然后真空浓缩溶液。用6 N NaOH将残余物调节至pH 9并将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，以得到浅黄色固体，然后将其通过硅胶柱使用己烷和乙酸乙酯(从20%乙酸乙酯至70%乙酸乙酯)纯化，以得到制备1E，为白色固体，(47 g+ 20 g 混合物,产率 >55%)。制备1E： LC-MS：244.0(M+1)+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.84 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.16 (dd, J = 9.3,5.7 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 10.3, 2.8 Hz, 1H), 7.52 (ddd, J = 9.2, 7.8, 2.7Hz, 1H), 7.29 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 3.69 (ddd, J = 12.1, 9.0, 3.3 Hz, 1H),2.77 - 2.54 (m, 4H), 2.37 (ddd, J = 13.4, 5.9, 3.0 Hz, 2H), 2.04 (qd, J =12.6, 5.3 Hz, 2H)。
制备1F：
将制备1E (57.8 g, 237.8 mmol)溶解于EtOH (240 mL)并冷却至0℃。分批加入NaBH4(9.94 g, 261.6 mmol)，维持温度在0-10℃的范围内(放热反应)。将所得悬浮液搅拌20 分钟。反应混合物的等分试样的LC/MS表明酮的消耗(m/z (M+H)+ = 244)。通过历经15 分钟缓慢加入丙酮(58 mL)在0℃将反应淬灭(放热)。将反应缓慢倒在500 mL饱和氯化铵水溶液和500 g冰上。将得到的水溶液用EtOAc(3×300mL)萃取并将合并的有机级分用饱和氯化铵水溶液(250 mL)和饱和氯化钠水溶液(250 mL)洗涤。将有机部分经无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。加入足够的二氧化硅以吸附油并用10 % MeOH/CH2Cl2稀释。使用类似量的二氧化硅作为二氧化硅塞来纯化材料。将二氧化硅塞用10 % MeOH/CH2Cl2洗涤，直至通过TLC不再能检测到UV活性物质(7:3 EtOAc/己烷, Rf = 0.4)。浓缩滤液，然后悬浮在500mL甲苯中并再次浓缩。分离作为黄色固体的粗制备1F (58.2 g)，其不经进一步纯化而用于后续步骤。
制备1G
向制备1F (58.2 g, 237.8 mmol)中加入MeCN (125 mL)和吡啶(38.7 mL, 480 mmol)并使用冰/水浴将反应混合物冷却至5℃。在5℃滴加甲磺酰氯(26.0 mL, 336 mmol)(放热反应)，将反应混合物在5℃搅拌1小时，然后升温至室温并搅拌另外16 h，在此期间形成白色沉淀。通过加入饱和氯化铵水溶液(200mL)淬灭非均匀混合物并用CH2Cl2 (3 x 300 mL)萃取。将合并的有机级分经无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。通过与甲苯(3×300mL)共沸除去过量的吡啶。如下从H2O/MeOH中重结晶粗物质：加入1 mL/mmol H2O并将浆液在油浴中加热至120℃。加入MeOH直至固体进入溶液(~0.5 L)。冷却后，通过过滤收集白色晶体，以得到制备1G (58.6 g, >20:1 dr, 76 %历经两步)。m/z (M+H)+ = 324.1。1H-NMR (400 MHz；CDCl3)：δ 8.82 (dd, J = 4.6, 0.2 Hz, 1H), 8.15-8.11 (m, 1H), 7.64-7.61 (m,1H), 7.52-7.46 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.78 (tt, J = 10.9, 5.2 Hz, 1H), 3.24-3.16 (m, 1H), 3.07 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.42-2.38 (m, 2H), 2.16-2.12 (m, 2H),1.93-1.66 (m, 4H)。
制备1H：
在Ar下将丙二酸二叔丁酯(33.5 mL, 150 mmol)滴加至在水-冰浴中冷却的NaH (6.0g, 60 % 于油中的悬浮液，150 mmol)于1,2-二甲氧基乙烷(100 mL)中的搅拌的悬浮液。搅拌10 min后，加入制备1G (16.2 g, 50 mmol)并将反应在85℃加热20 h。此后，加入乙酸(100 mL)，在反应烧瓶上装配蒸馏头并将温度升至130℃。在大气压下蒸馏出1,2-二甲氧基乙烷，直到馏出物呈酸性(~100 mL)。除去蒸馏头，连接回流冷凝器，加入水(20mL)并将反应在130℃加热12h。将反应在减压下浓缩并倒在200g冰和100mL饱和NaOAc水溶液上。通过过滤分离作为白色固体的制备1H 并通过在Dean-Stark装置中与甲苯回流进一步干燥(11.0g, 76 %)。m/z (M+H)+ = 288.2。1H-NMR (400 MHz；DMSO-d6)：δ 12.05 (bs, 1H), 8.79(d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 9.2, 5.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 11.0, 2.8Hz, 1H), 7.66-7.61 (m, 1H), 7.50 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.41 (d, J = 7.6 Hz,2H), 2.28-2.23 (m, 1H), 1.87-1.78 (m, 2H), 1.73-1.64 (m, 6H)。
制备1I：
向制备1H(1.4g，4.8mmol)于THF(15mL)中的溶液中加入NEt3(1.3mL，9.6mmol)。将反应混合物冷却至0℃，滴加三甲基乙酰氯(0.713mL，5.8mmol)，将得到的溶液在0℃下搅拌30分钟。在一个单独的烧瓶中，将(R)-4-苯基噁唑烷-2-酮(3，1.01g，6.24mmol)/THF(45mL)在0℃用1M LiHMDS的THF溶液(滴加6.24mL，6.24mmol)处理并在0℃下搅拌。通过套管将锂化物(lithiate)添加到第一个烧瓶中。使反应混合物温热至室温并搅拌3小时。LC/MS表明起始羧酸完全消耗并形成所需的酰亚胺。将反应混合物倒入饱和氯化铵水溶液(50mL)中，分离层。将水层用EtOAc(3×50 ml)萃取。合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥，并使用EtOAc/己烷0至100％梯度在二氧化硅上进行色谱分离，得到制备1I，为白色泡沫，产率83％。m/z(M+H)+=433.3。1H-NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.80 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.11 (dd, J =9.1, 5.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 10.5, 2.5 Hz, 1H), 7.48-7.43 (m, 1H), 7.40-7.30 (m, 6H), 5.47-5.44 (m, 1H), 4.71 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.31-4.28 (m, 1H),3.20-3.11 (m, 3H), 2.49-2.46 (m, 1H), 1.82-1.67 (m, 6H)。
制备1J：
将制备1I (21.6 g, 50 mmol)于无水THF (200 mL)中的溶液冷却至-40 ℃(使用乙腈/干冰浴，出现一些沉淀)并历经5 min加入2 M NaHMDS的THF溶液(30 mL, 60 mmol) (观察到温度升高5-8℃)。将所得黄色反应混合物搅拌10 min，变得均匀，并历经2 min滴加MeI(10.6 g, 75 mmol)(观察到温度升高10℃)。将反应混合物在-40℃搅拌1 h并且LC/MS表明原料完全消耗并形成所需的甲基酰亚胺。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(400mL)快速稀释并将两相混合物搅拌15 min。加入 i PrOAc (100 mL)，分离层，并将水层用 i PrOAc (3 x50 mL)萃取。将合并的有机萃取物经无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。如下将所得残余物重结晶：溶解在400mL热丙酮中并加入H2O，直至形成乳状溶液，然后加热再溶解(~3:1丙酮/H2O)。获得制备1J，为白色针状物(15.04 g, 2批, 68 %)。m/z (M+H)+ = 447.3。1H-NMR(400 MHz；CDCl3)：δ 8.81 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.10 (dd, J = 9.2, 5.7 Hz, 1H),7.65 (dd, J = 10.6, 2.7 Hz, 1H), 7.47-7.42 (m, 1H), 7.41-7.29 (m, 6H), 5.47(dd, J = 8.8, 3.8 Hz, 1H), 4.69 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.38-4.30 (m, 1H), 4.26(dd, J = 8.9, 3.9 Hz, 1H), 3.26-3.21 (m, 1H), 2.18-2.15 (m, 1H), 1.93-1.64(m, 8H), 1.09 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。
制备1K：
在0℃向制备1J (82.0 g, 183.6 mmol)于THF(610 mL)中的溶液中加入H2O2水溶液(35 wt%, 82 mL)和LiOH (7.04 g, 293.8 mmol)/H2O (189 mL)。使得到的反应混合物缓慢温热至室温并搅拌过夜。将反应冷却至0℃并加入饱和亚硫酸氢钠水溶液(250mL)。搅拌30 min后，在减压下除去THF。加入乙酸 (34 mL)，随后加入EtOAc (300 mL)。分离层，并将水层用EtOAc(3×500mL)萃取。将合并的有机萃取物经无水Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将棕色粗反应混合物悬浮于MeCN (400 mL)中并在剧烈搅拌下使悬浮液回流。冷却至室温后，通过过滤收集固体，用另外的MeCN洗涤。获得制备1K，为白色固体(45.4 g, 82 %)。m/ z (M+H)+= 302.2。1H-NMR (400 MHz；DMSO-d6)：δ 12.10 (s, 1H), 8.79 (d, J = 4.5 Hz,1H), 8.07 (dd, J = 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.97-7.94 (m, 1H), 7.67-7.62 (m, 1H),7.49 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 3.41-3.36 (m, 1H), 2.73-2.65 (m, 1H), 1.83-1.61 (m,9H), 1.08 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。手性HPLC, >99 % ee (ChiralPak IC-3, 3µM, 4.6 x250 mm, 15 min等度70％庚烷30% i-PrOH，230 nm 检测)，流速为0.75 mL/min，所需对映异构体具有8.6分钟的保留时间，不需要的对映异构体在9.5分钟洗脱。
实施例1：4-((顺式)-4-((R)-1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉
将制备1K(30mg，0.100mmol)溶解在THF(498μl)中。然后，加入Hunig碱(43.5μl，0.249mmol)、PYBROP(69.6mg，0.149mmol)和苯-1,2-二胺(21.53mg，0.199mmol)。将反应在室温下搅拌20小时，然后加热至70℃保持4小时。用5：1水/饱和NaHCO3稀释反应并用EtOAc萃取。将有机物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物溶于乙酸(498μl)中并加热至110℃。在110℃下1小时后，将反应用水稀释，用饱和NaHCO3淬灭并用EtOAc萃取。有机物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。
将粗残余物溶于甲苯(0.5mL)中并加入4-甲基苯磺酸(5当量)。将反应回流过夜。将反应浓缩，溶于2mL DMF中，过滤并通过制备型HPLC纯化，得到实施例1 (7.0mg，0.018mmol，产率18％)。LC-MS：C24H24FN3的分析计算值373.20，实测值[M+H] 374.1 Tr=1.736min(方法B)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.91 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.13 (dd,J=9.1, 5.7 Hz, 1H), 8.05 (d, J=11.0 Hz, 1H), 7.81 (dd, J=6.0, 3.1 Hz, 2H),7.69-7.77 (m, 1H), 7.55 (dd, J=6.1, 2.9 Hz, 2H), 7.14 (d, J=8.7 Hz, 1H), 6.94(d, J=8.3 Hz, 1H), 3.69-3.80 (m, 1H), 2.22 (br. s., 1H), 2.06 (br. s., 1H),1.84-2.00 (m, 2H), 1.63-1.84 (m, 5H), 1.59 (d, J=10.4 Hz, 1H), 1.49 (d, J=6.8Hz, 3H)。
实施例2-7
实施例2-7使用实施例1的程序和相应的苯二胺从制备1K制备。
| 实施例编号 | 名称 | R | Tr (min)<sup>(方法B)</sup> | [M+H]<sup>+</sup> |
| 2 | 4-((<i>顺式</i>)-4-((R)-1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | 1.966 | 408.1 | |
| 3 | 6-氟-4-((<i>顺式</i>)-4-((R)-1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹啉 | 1.835 | 392.3 | |
| 4 | 6-((R)-1-((<i>顺式</i>)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-5H-[1,3]二氧杂环戊烯并[4',5':4,5]苯并[1,2-d]咪唑 | 1.734 | 418.1 | |
| 5 | 4-((<i>顺式</i>)-4-((R)-1-(1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | 1.461 | 375.3 | |
| 6 | 4-((<i>顺式</i>)-4-((R)-1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | 1.748 | 409.2 | |
| 7 | 4-((<i>顺式</i>)-4-((R)-1-(1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | 1.521 | 375.3 |
实施例8
6-氯-N-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)苯并[d]噻唑-2-胺
制备8A：
将制备1K(2g，6.64mmol)溶于甲苯(22.12ml)中，加入叠氮磷酸二苯酯(2.009g，7.30mmol)和三乙胺(1.110ml，7.96mmol)。将小瓶密封并加热至70℃。在2小时后，将反应冷却到室温并在减压下浓缩。将粗残余物溶于40mL THF和40mL水中，并加入氢氧化锂(1.589g，66.4mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用1N HCl酸化(形成白色沉淀)并用EtOAc萃取。然后将含水部分用1N NaOH碱化(形成沉淀)，并用EtOAc萃取5次。将碱性萃取物真空浓缩，得到8A(1.68g，6.17mmol，93％产率)。LC-MS：C17H21FN2的分析计算值272.17，实测值[M+H] 273.1 Tr=0.50min(方法A)。1H NMR (400 Mhz, 氯仿-d) δ: 8.80 (d, J=4.6 Hz,1H), 8.11 (dd, J=9.3, 5.7 Hz, 1H), 7.67 (dd, J=10.6, 2.8 Hz, 1H), 7.46 (ddd,J=9.2, 8.0, 2.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J=4.5 Hz, 1H), 3.27-3.37 (m, 1H), 3.13 (dq,J=9.3, 6.3 Hz, 1H), 2.01-2.10 (m, 1H), 1.67-1.92 (m, 6H), 1.37-1.55 (m, 4H),1.15 (d, J=6.4 Hz, 3H)。
实施例8：6-氯-N-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)苯并[d]噻唑-2-胺
将制备8A(34.8mg，0.077mmol，69.7％产率)溶于NMP(110μl)和DIPEA(57.7μl，0.330mmol)中。加入2,6-二氯苯并[d]噻唑(45.0mg，0.220mmol)，将反应密封并加热至150℃。1小时后，将反应用DMF稀释，过滤并通过制备型HPLC纯化，得到实施例8(34.8mg，0.077mmol，70％产率)。LC-MS：C24H23ClFN3S的分析计算值 439.13，实测值[M+H] 440.1 Tr=2.420min(方法B)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (d, J=4.4 Hz, 1H), 8.04-8.11(m, 2H), 7.95 (d, J=10.8 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.65 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.50(d, J=4.3 Hz, 1H), 7.33 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J=8.3 Hz, 1H), 4.27 (br.s., 1H), 3.45 (br. s., 1H), 1.59-1.94 (m, 9H), 1.24 (d, J=6.2 Hz, 3H)。
实施例9-12
使用实施例8的程序和相应的杂芳基卤化物，从制备8A制备实施例9-12。
| 实施例编号 | 名称 | R | Tr (min)<sup>(方法B)</sup> | [M+H]<sup>+</sup> |
| 9 | N-((R)-1-((<i>顺式</i>)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-6-甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺 | 1.550 | 419.2 | |
| 10 | N-((R)-1-((<i>顺式</i>)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)苯并[d]噻唑-2-胺 | 2.209 | 406.1 | |
| 11 | 6-氯-N-((R)-1-((<i>顺式</i>)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)苯并[d]噁唑-2-胺 | 2.277 | 424.2 | |
| 12 | N-((R)-1-((<i>顺式</i>)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺 | 1.602 | 389.3 |
实施例13
4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹啉
中间体13A：2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-亚基)乙酸乙酯
在0℃下将膦酰基乙酸三乙酯(21.79ml，109mmol)加入到氢化钠(3.84g，96mmol)于THF(64.0ml)中的悬浮液中。将反应在室温下搅拌30分钟。30分钟后，将反应再冷却至0℃，加入1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(10g，64.0mmol)于5mL THF中的溶液。然后将反应在室温下搅拌30分钟，然后用水淬灭。将混合物用DCM萃取三次。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化粗残余物，得到中间体13A(13.88g，61.3mmol，96％产率)。TLC：产物在茴香醛中染色为紫色斑点(Rf=0.75，在1：1 Hex/EtOAc中)。1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ: 5.65 (s, 1H), 4.13 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.92-3.99 (m, 4H),2.94-3.02 (m, 2H), 2.31-2.40 (m, 2H), 1.71-1.79 (m, 4H), 1.26 (t, J=7.2 Hz,3H)。
中间体13B：2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)乙酸乙酯
将中间体13A(13.88g，61.3mmol)溶于EtOAc(61.3ml)中，并在氮气气氛下加入到含有湿的10％钯/碳(1.306g，12.27mmol)(54％w/w水)的Parr氢化瓶中。将反应瓶用氮气吹扫并用氮气回填三次，然后用氢气回填。在用氢气将瓶填充至50psi后，将瓶置于Parr振荡器中并摇动。4小时后，将反应通过压制的硅藻土过滤并真空浓缩，得到中间体13B(13.78g，60.4mmol，98％产率)。LC-MS：C12H20O4的分析计算值228.14，实测值[M+H] 299.1 Tr=0.83min(方法A)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ: 4.11 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.88-3.95(m, 4H), 2.21 (d, J=7.0 Hz, 2H), 1.83 (dqd, J=11.0, 7.5, 3.5 Hz, 1H), 1.68-1.78 (m, 4H), 1.50-1.61 (m, 2H), 1.27-1.35 (m, 2H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
中间体13C：2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)丁酸乙酯
将二异丙胺(2.347ml，16.63mmol)溶于干燥THF(15.99ml)(在N2气氛下)并冷却至-78℃。在-78℃下历经约5分钟加入n-BuLi(6.14ml，15.35mmol)(2.5M在己烷中)。搅拌45分钟后，将反应温热至室温10分钟并恢复至-78℃。然后，加入1,3-二甲基四氢嘧啶-2(1H)-酮(1.541ml，12.79mmol)，接着加入中间体13B(2.92g，12.79mmol)于THF(15.99ml)中的溶液(历经约5分钟滴加)。1小时后，历经约5分钟滴加碘乙烷(1.125ml，14.07mmol)(无溶剂)。在-78℃下将反应搅拌另外2小时，然后缓慢温热至室温。然后将反应在室温下搅拌过夜。通过倒入1：1水/盐水中并用EtOAc萃取来淬灭反应。将合并的有机物用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化粗残余物，得到中间体13C(2.27g，8.86mmol，69％产率)。TLC：产物在茴香醛中染色为紫色斑点(Rf=0.80，在1：1 Hex/EtOAc中)。1H NMR(400 MHz, 氯仿-d) δ: 4.14 (q, J=7.5 Hz, 2H), 3.88-3.95 (m, 4H), 2.09 (td, J=8.4, 5.6 Hz, 1H), 1.69-1.83 (m, 4H), 1.45-1.64 (m, 6H), 1.33-1.42 (m, 1H),1.25 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.86 (t, J=7.5 Hz, 3H) 。
中间体13D：2-(4-氧代环己基)丁酸乙酯
将中间体13C(2.00g，7.80mmol)溶于THF(39.0ml)中，加入盐酸1M(39.0ml)。将反应在室温搅拌2小时。将反应真空浓缩，用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗物质在硅胶柱色谱上纯化，得到中间体13D(1.47g，6.92mmol，89％产率)。TLC：产物在茴香醛中染成弱粉红色(Rf=0.65，在1：1 Hex/EtOAc中)。1H NMR(400 MHz, 氯仿-d) δ: 4.15 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.25-2.42 (m, 4H), 2.18 (ddd, J=9.3, 7.8, 5.2 Hz, 1H), 2.10 (ddt, J=13.1, 6.2, 3.3 Hz, 1H), 1.90-2.03 (m,2H), 1.56-1.70 (m, 2H), 1.38-1.56 (m, 2H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.89 (t, J=7.4 Hz, 3H)。
中间体13E：2-((反式)-4-羟基环己基)丁酸乙酯
将中间体13D(1.47g，6.92mmol)溶解在EtOH(13.85ml)中并冷却至0℃。加入NaBH4(0.314g，8.31mmol)，然后将反应在0℃下搅拌1小时。用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应，并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化粗物质，得到中间体13E(1.22g，5.69mmol，82％产率)以及顺式异构体(138mg，0.644mmol，9.30％产率)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ: 4.14 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.53 (t, J=10.5 Hz, 1H), 1.92-2.08 (m, 2H), 1.80-1.89 (m, 1H), 1.63-1.70 (m, 1H), 1.52-1.62 (m, 4H), 1.37-1.52 (m, 2H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.95-1.17 (m, 2H),0.87 (t, J=7.4 Hz, 3H)。
中间体13F：2-((反式)-4-(喹啉-4-基氧基)环己基)丁酸乙酯
将中间体13E(100mg，0.467mmol)溶于DMSO(933μl)中，在室温下历经1分钟分批缓慢加入NaH(22.40mg，0.933mmol)。1小时后，加入4-溴喹啉(117mg，0.560mmol)，将反应加热至80℃，保持16小时。用氯化铵淬灭反应，并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化粗残余物，得到中间体13F(89mg，0.261mmol，55.9％产率)。LC-MS：C21H27NO3的分析计算值341.20，实测值[M+H] 342.3 Tr=0.84min(方法A)。
中间体13G：2-((反式)-4-(喹啉-4-基氧基)环己基)丁酸
将中间体13F(67mg，0.196mmol)溶解在THF(157μl)、水(157μl)和MeOH(78μl)中。加入氢氧化锂(47.0mg，1.962mmol)并将反应在60℃下搅拌过夜。将反应真空浓缩，用水稀释并用EtOAc萃取。然后将水溶液用乙酸处理，用EtOAc萃取，然后用7：3氯仿：丙醇萃取。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到中间体13G(58mg，0.185mmol，94％产率)。随后原样使用该物质。LC-MS：C19H23NO3的分析计算值313.17，实测值[M+H] 314.3 Tr=0.69min(方法A)。
实施例13：4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹啉
将中间体13G(58mg，0.185mmol)溶解在亚硫酰氯(135μl，1.851mmol)中并加入DMF(7.17μl，0.093mmol)。将反应在室温搅拌1小时。然后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空中。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(925μl)中并在约-45℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(52.8mg，0.370mmol)于ACN(925μl)和TEA(129μl，0.925mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。15后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。将粗残余物溶于甲苯(925μl)中并加入4-甲苯磺酸(176mg，0.925mmol)。将反应回流16小时。将反应浓缩，溶于2mL DMF中，过滤并通过制备型HPLC纯化，得到实施例13(24.1mg，0.053mmol，29％)。LC-MS：C25H26ClN3O的分析计算值419.18，实测值[M+H] 420.2 Tr=0.68min(方法A)。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ: 8.62 (d, J=5.1 Hz, 1H), 8.09 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.89 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.70 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.42-7.63 (m, 4H), 7.15 (d, J=7.9 Hz,1H), 7.03 (d, J=5.2 Hz, 1H), 4.53 (br. s., 1H), 2.66 (br. s., 1H), 2.19 (br.s., 1H), 2.11 (d, J=10.1 Hz, 1H), 1.96-2.07 (m, 1H), 1.69-1.89 (m, 3H), 1.32-1.55 (m, 3H), 1.19 (d, J=11.4 Hz, 2H), 0.70 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例13-1(对映异构体1)和实施例13-2(对映异构体2)
对映异构体1：实施例13-1，4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹啉(纯手性，立体化学未确定)
对映异构体2：实施例13-2，4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹啉(纯手性，立体化学未确定)
实施例13-1(对映异构体1)和实施例13-2(对映异构体2)：外消旋样品的手性分离(方法C)得到对映异构体1 Tr=12.052min(方法D)和对映异构体2 Tr=14.206min(方法D)。未确定绝对立体化学。
实施例13-1，对映异构体1：MS(ES)：m/z=420.3 [M+H]+。Tr=1.995分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.63 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J=8.2 Hz, 1H),7.90 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.70 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.42-7.62 (m, 3H), 7.15 (br.s., 1H), 7.04 (d, J=5.1 Hz, 1H), 4.54 (br. s., 1H), 2.67 (d, J=6.1 Hz, 1H),2.21 (d, J=10.8 Hz, 1H), 2.13 (d, J=11.4 Hz, 1H), 2.01 (d, J=11.4 Hz, 1H),1.70-1.88 (m, 3H), 1.37-1.58 (m, 3H), 1.11-1.28 (m, 3H), 0.72 (t, J=7.1 Hz,3H)。
实施例13-2，对映异构体2：MS(ES)：m/z=420.2 [M+H]+。Tr=1.963分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.63 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J=8.2 Hz, 1H),7.90 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.70 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.40-7.62 (m, 3H), 7.15 (br.s., 1H), 7.04 (d, J=5.1 Hz, 1H), 4.54 (br. s., 1H), 2.67 (d, J=6.1 Hz, 1H),2.21 (d, J=10.7 Hz, 1H), 2.12 (d, J=11.5 Hz, 1H), 2.01 (d, J=12.8 Hz, 1H),1.69-1.88 (m, 3H), 1.34-1.57 (m, 3H), 1.11-1.28 (m, 3H), 0.72 (t, J=7.0 Hz,3H)。
实施例14：4-(((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹啉
中间体14A：2-((顺式)-4-(喹啉-4-基氧基)环己基)丁酸乙酯
将中间体13E(300mg，1.400mmol)溶解在THF(5600μl)中，并加入喹啉-4-醇(447mg，3.08mmol)和三苯基膦(808mg，3.08mmol)。将溶液在冰浴中冷却至0℃。加入偶氮二甲酸二异丙酯(599μl，3.08mmol)，一旦加入完成就将反应在室温下搅拌。16小时后，将反应真空浓缩，并通过硅胶柱色谱纯化，得到中间体14A(411mg，0.782mmol，55.9％产率)。LC-MS：C21H27NO3的分析计算值341.20，实测值[M+H] 342.3 Tr=0.81min(方法A)。
中间体14B：2-((顺式)-4-(喹啉-4-基氧基)环己基)丁酸
将中间体14A(411mg，1.204mmol)溶于THF(963μl)、水(963μl)和MeOH(481μl)中。加入氢氧化锂(288mg，12.04mmol)并将反应在60℃下搅拌过夜。16小时后，加入氢氧化锂(288mg，12.04mmol)并将反应在60℃下搅拌另外24小时。将反应真空浓缩，用水稀释并用EtOAc萃取。然后将含水物用AcOH处理并用EtOAc萃取。还用7：3氯仿：丙醇再次萃取。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到中间体25B(315mg，1.005mmol，84％产率)。LC-MS：C19H23NO3的分析计算值313.17，实测值[M+H] 314.3 Tr=0.64min(方法A)。
实施例14：4-(((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹啉
将中间体14B(75mg，0.239mmol)溶解在亚硫酰氯(175μl，2.393mmol)中并加入DMF(9.27μl，0.120mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空中。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(1197μl)中，并在-45℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(68.2mg，0.479mmol)于ACN(1197μl)和TEA(167μl，1.197mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。15后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。将粗残余物溶于甲苯(1197μl)中并加入4-甲苯磺酸(228mg，1.197mmol)。将反应回流反应16小时。然后将其浓缩，溶于2mL DMF中，过滤并通过制备型HPLC纯化，得到实施例14(34.9mg，0.080mmol，33％)。LC-MS：C25H26ClNO3的分析计算值419.18，实测值[M+H] 420.2 Tr=0.63min(方法A)。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ: 8.65 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.88 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.81 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.67 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.53 (br. s., 1H), 7.48 (d, J=7.9 Hz,1H), 7.21 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.16 (d, J=8.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J=5.2 Hz, 1H),4.95 (br. s., 1H), 2.67-2.75 (m, 1H), 2.04 (d, J=14.6 Hz, 1H), 1.98 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.77-1.87 (m, 3H), 1.51-1.77 (m, 3H), 1.24-1.51 (m, 3H), 0.73(t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例15
实施例15，对映异构体1-4
4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)-6-氟喹啉
(所有四种异构体均为纯手性，绝对立体化学未确定)
中间体15A：2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-亚基)乙酸乙酯
在氮气下，在3升4颈圆底烧瓶中加入氢化钠(46.1g，1153mmol)。向其中加入THF(1200mL)并冷却至0℃。向其中滴加膦酰基乙酸三乙酯(258g，1153mmol)。将反应在0℃搅拌30分钟。然后加入1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(150g，960mmol)，将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物温热至室温并搅拌16小时。16小时后，将反应混合物用水(500ml)淬灭，并将混合物真空浓缩。将残余物用乙酸乙酯(3X1000ml)萃取。将合并的有机层用水(500ml)和盐水(500ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶快速柱色谱纯化粗物质(750g柱，使用0至30％乙酸乙酯/石油醚)。将纯级分浓缩并在高真空泵上干燥，得到中间体1A(135g，597mmol，62％)。1H NMR (氯仿-d, 400 MHz) δ: 5.48 (br. s., 1H), 4.10-4.17(m, 2H), 3.96-4.01 (m, 4H), 3.00 (s, 2H), 2.23-2.33 (m, 4H), 1.75-1.83 (m,2H), 1.26 (t, J=7.1 Hz, 3H)。
中间体15B：2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)乙酸乙酯
向5升高压釜中加入中间体1A(135g，597mmol)和乙酸乙酯(1500mL)。向其中加入Pd/C(15.87g，149mmol)并将反应用氮气冲洗5分钟。然后将其在室温下在3kg/cm2氢气压下搅拌2小时。2小时后，将反应混合物从高压釜中排出，通过硅藻土床过滤，用乙酸乙酯洗涤硅藻土床。将滤液浓缩至干，得到中间体1B(135g，591mmol，91％)。1H NMR (氯仿-d, 400 MHz)δ: 4.12 (q, J=7.4 Hz, 2H), 3.92-3.94 (m, 4H), 2.22 (d, J=7.0 Hz, 2H), 1.83(td, J=7.2, 3.8 Hz, 1H), 1.69-1.78 (m, 4H), 1.51-1.60 (m, 2H), 1.28-1.36 (m,2H), 1.23-1.27 (m, 3H)。
中间体15C：2-(4-氧代环己基)乙酸乙酯
在10升反应器中加入中间体1B(67.5g，296mmol)/丙酮(5000mL)。向其中加入HCl(1M)(1183mL，1183mmol)并将反应加热至回流2小时。2小时后，浓缩反应混合物。然后将残余物转移到10升分液漏斗中并用乙酸乙酯(3×1000ml)萃取。用水(1000mL)和盐水(1000mL)洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，并真空浓缩。通过硅胶快速柱纯化粗物质(750g柱，使用0至20％乙酸乙酯/石油醚)，得到中间体1C(40g，217mmol，73％)。1H NMR (氯仿-d, 400MHz) d: 4.15 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.35-2.41 (m, 3H), 2.20-2.34 (m, 3H), 2.04-2.13 (m, 3H), 1.41-1.53 (m, 2H), 1.24-1.30 (t, 3H)。
中间体15D：2-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
在氮气下，在2升4颈瓶中加入2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶(84g，407mmol)/二氯甲烷(500mL)。向其中滴加三氟甲磺酸酐(55.0mL，326mmol)。然后缓慢加入乙基中间体1C(50g，271mmol)/二氯甲烷(500mL)。添加完成后，在室温下搅拌过夜。搅拌过夜后，将反应混合物用1000ml二氯甲烷稀释，用水(500ml)洗涤，然后用碳酸钠(500ml)洗涤，然后再次用水(500ml)洗涤。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。通过快速硅胶柱色谱纯化粗物质(750g柱，使用0至10％乙酸乙酯/石油醚)，得到中间体1D(65g，206mmol，76％)。浓缩纯级分。1H NMR (氯仿-d, 400 MHz) δ: 5.73 (dt, J=4.9, 2.3 Hz, 1H), 4.15 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.28-2.52 (m, 5H), 2.07-2.21 (m, 1H), 1.89-2.00 (m, 2H), 1.54(dt, J=6.0, 3.5 Hz, 1H), 1.25-1.30 (t, 3H)。
中间体15E：2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧杂环戊-2-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
在氮气下，在2升4颈圆底烧瓶中加入于1,4-二噁烷(1200mL)中的中间体1D(120g，379mmol)、双(频哪醇合)二硼(106g，417mmol)和乙酸钾(112g，1138mmol)。然后在反应混合物中吹扫氮气10分钟。然后加入1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(15.49g，18.97mmol)并再吹扫氮气5分钟。然后在氮气氛下将反应加热至80℃保持16小时。通过快速柱色谱使用0至10％乙酸乙酯/石油醚纯化粗物质，得到中间体1E(56g，190mmol，50％)。1H NMR (氯仿-d, 400 MHz) δ: 6.46-6.55 (m, 1H), 4.12 (q, J=7.2Hz, 2H), 1.99-2.35 (m, 6H), 1.68-1.87 (m, 2H), 1.17-1.34 (m, 16H)。
中间体15F：2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
将中间体15E(5g，17.00mmol)溶于二噁烷(28.3ml)和水(7.08ml)中。加入4-氯-6-氟喹啉(2.57g，14.15mmol)，然后加入碳酸钾(5.87g，42.5mmol)。将混合物用氮气鼓泡5分钟，然后加入Pd(Ph3P)4(0.327g，0.283mmol)。添加后，将反应用氮气鼓泡另外5分钟，然后密封并加热至100℃保持16小时。然后将反应真空浓缩，并通过柱色谱直接纯化，得到中间体15F(4.22g，13.47mmol，95％收率)。LC-MS：C19H20FNO2的分析计算值313.15，实测值[M+H] 314.1Tr=0.75min(方法A)。
中间体15G：2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙酸乙酯(顺式和反式非对映异构体的混合物)
将中间体15F(4.22g，13.47mmol)溶解在甲醇(67.3ml)中，加入甲酸铵(4.25g，67.3mmol)。该容器装有回流冷凝器并排空并用氮气冲洗3次。然后，加入钯/碳(0.143g，1.347mmol)(湿的，Degussa型)并将反应加热至回流1小时。将反应冷却，真空浓缩，并用二氯甲烷稀释。滤出固体，浓缩滤液，得到粗制的中间体15G(4.20g，13.32mmol，99％产率)，为顺式和反式非对映异构体的~2：1混合物。LC-MS：C19H22FNO2的分析计算值315.16，实测值[M+H] 316.2 Tr=0.76min(方法A)。
中间体15H：2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丁酸乙酯(4种非对映异构体的混合物)
在-78℃下向含有THF(6mL)的烧瓶中加入二异丙基氨基锂(2.0M THF溶液)(3.17mL，6.34mmol)，然后在-78℃下滴加1,3-二甲基四氢嘧啶-2(1H)-酮(0.573mL，4.76mmol)和中间体15G(1.0g，3.17mmol)于THF(10mL)中的溶液。所得混合物变为棕色并在-78℃下搅拌1小时，然后缓慢加入碘乙烷(0.507mL，6.34mmol)(无溶剂)。然后将反应混合物在冰浴温度下搅拌1小时，然后温热至室温过夜。16小时后，通过倒入水中并用乙酸乙酯萃取来使反应淬灭。将合并的有机物用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过快速柱色谱纯化粗残余物，得到中间体15H(0.81g，2.36mmol，74％产率)。LC-MS：C21H26FNO2的分析计算值343.20，实测值[M+H] 344.3 Tr=0.86min(方法A)。
中间体15I：2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丁酸(4种非对映异构体的混合物)
向中间体15H(0.81g，2.359mmol)于四氢呋喃(4mL)和甲醇(7mL)中的溶液中缓慢加入2M氢氧化锂(7.08mL，14.15mmol)于水(4mL)中的溶液。在室温下搅拌反应混合物过夜。向反应混合物中加入额外的2M氢氧化锂(7.08mL，14.15mmol)，将得到的反应混合物在70℃下加热72小时。冷却反应混合物，向混合物中加入乙酸乙酯。分离水层，向水层中加入1N HCl溶液以调节pH至5-6。将所得混合物用水和CHCl3：2-丙醇(2：1)稀释。分离有机层并经MgSO4干燥。将滤液真空浓缩，得到中间体15I(0.64g，2.029mmol，86％产率)，为白色固体。LC-MS：C19H22FNO2的分析计算值315.16，实测值[M+H] 316.3 Tr=0.72min(方法A)。
实施例15：4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)-6-氟喹啉
将中间体15I(76mg，0.241mmol)溶解在亚硫酰氯(176μl，2.410mmol)中并加入DMF(9.33μl，0.120mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空中。15分钟后，将粗制酰氯溶于乙腈(1205μl)中并在-45℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(68.7mg，0.482mmol)于乙腈(1205μl)和三乙胺(168μl，1.205mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。30分钟后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。合并有机物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。
将得到的粗残余物溶于甲苯(1205μl)中，加入4-甲苯磺酸(229mg，1.205mmol)。将反应加热至回流16小时。然后将反应浓缩，溶于2mL DMF中，过滤并通过HPLC纯化，得到实施例15，为四种异构体的混合物(21mg，0.051mmol，21％)。LC-MS：C25H25ClFN3的分析计算值421.17，实测值[M+H] 422.2 Tr=0.73min(方法A)。
对映异构体1-4
4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)-6-氟喹啉
(所有四种异构体均为纯手性，绝对立体化学未确定)
实施例15，对映异构体1，对映异构体2，对映异构体3和对映异构体4：外消旋样品的手性分离(方法G)得到实施例15-1，对映异构体1Tr=4.905分钟(方法H)，实施例15-2，对映异构体2 Tr=7.483分钟，实施例15-3，对映异构体3 Tr=9.256分钟(方法H)和实施例15-4，对映异构体4 Tr=11.884分钟(方法H)(绝对立体化学未确定)。
实施例51-1，对映异构体1：MS(ES)：m/z=422.1 [M+H]+。Tr=2.044分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.85 (d, J=4.3 Hz, 1H), 8.09 (dd, J=9.1, 5.9 Hz,1H), 7.96 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.62-7.69 (m, 1H), 7.56-7.62 (m, 2H), 7.53 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.19 (d, J=8.1 Hz, 1H), 3.32-3.45 (m, 1H), 3.24 (td, J=10.9,3.2 Hz, 1H), 2.18 (d, J=9.2 Hz, 1H), 1.99-2.07 (m, 1H), 1.58-1.99 (m, 7H),1.52 (d, J=11.3 Hz, 1H), 1.05 (d, J=12.1 Hz, 1H), 0.69 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例15-2，对映异构体2：MS(ES)：m/z=422.2 [M+H]+。Tr=2.022分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.77 (d, J=4.4 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=9.1, 5.8 Hz,1H), 7.92 (dd, J=10.9, 2.1 Hz, 1H), 7.63 (td, J=8.6, 2.4 Hz, 1H), 7.55 (s,1H), 7.50 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.15 (d, J=8.5 Hz, 1H),3.22 (t, J=11.5 Hz, 1H), 2.64-2.71 (m, 1H), 2.05 (d, J=10.9 Hz, 1H), 1.74-1.96 (m, 5H), 1.40-1.60 (m, 3H), 1.27-1.38 (m, 2H), 0.73 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例15-3，对映异构体3：MS(ES)：m/z=422.3 [M+H]+。Tr=2.075分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (d, J=4.2 Hz, 1H), 8.08 (dd, J=8.9, 5.9 Hz,1H), 7.94 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.64 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.40-7.59 (m, J=4.2 Hz,3H), 7.14 (d, J=8.1 Hz, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.14-3.24 (m, 1H), 2.17 (br.s., 1H), 2.02 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.55-1.97 (m, 7H), 1.51 (d, J=12.3 Hz, 1H),1.06 (d, J=13.9 Hz, 1H), 0.68 (t, J=7.1 Hz, 3H)。
实施例15-4，对映异构体4：MS(ES)：m/z=422.1 [M+H]+。Tr=2.022分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.77 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=9.0, 5.8 Hz,1H), 7.91 (d, J=10.9 Hz, 1H), 7.37-7.67 (m, 4H), 7.09-7.20 (m, 1H), 3.17-3.25(m, 1H), 2.68 (br. s., 1H), 1.99-2.10 (m, 1H), 1.72-1.97 (m, 5H), 1.40-1.61(m, 3H), 1.24-1.40 (m, 2H), 0.73 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例16
非对映异构体1和2
(±)-4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹啉
(每个顺式或反式非对映异构体都是外消旋的；顺式和反式任意分配)
中间体16A：2-(4-(喹啉-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
将中间体15E(6.22g，21.15mmol)溶于二噁烷(38.5ml)和水(9.61ml)中。加入4-溴喹啉(4g，19.23mmol)，然后加入碳酸钾(7.97g，57.7mmol)。将混合物用氮气鼓泡5分钟，然后加入Pd(Ph3P)4(0.444g，0.385mmol)。添加后，排空反应并用氮气回填三次，然后密封并加热至100℃保持16小时。将反应真空浓缩，并通过硅胶柱色谱直接纯化，得到中间体16A(3.29g，11.14mmol，57.9％产率)。LC-MS：C19H21NO2的分析计算值295.16，实测值[M+H] 296.2，Tr=0.71min(方法A)。
中间体16B：2-(4-(喹啉-4-基)环己基)乙酸乙酯
将中间体16A(3.29g，11.14mmol)溶解在甲醇(55.7ml)中，加入甲酸铵(3.51g，55.7mmol)。该容器装有回流冷凝器并排空并用氮气冲洗三次。然后，加入钯/碳(0.119g，1.114mmol)(湿的51重量％，degussa型)并将反应加热至回流1小时。将反应冷却，真空浓缩，并用二氯甲烷稀释。滤出固体，浓缩滤液，得到粗中间体16B(2.99g，10.05mmol，90％产率)。LC-MS：C19H23NO2的分析计算值297.17，实测值[M+H] 298.2，Tr=0.71min(方法A)。
中间体16C：2-(4-(喹啉-4-基)环己基)丙酸乙酯
在氮气氛下将二异丙胺(3.12ml，22.12mmol)溶于干燥THF(12.57ml)中并冷却至-78℃。在-78℃下历经约5分钟加入nBuLi(8.45ml，21.11mmol)(在己烷中2.5M)。搅拌30分钟后，将反应温热至室温10分钟并恢复至-78℃。然后，加入1,3-二甲基四氢嘧啶-2(1H)-酮(1.211ml，10.05mmol)，接着加入中间体16B(2.99g，10.05mmol)于THF(12.57ml)中的溶液(滴加约5分钟，在-78℃)(反应变为橙色)。10分钟后，加入碘甲烷(1.565ml，25.1mmol)(无溶剂)。添加完成后1小时，使反应温热至室温并在室温下搅拌过夜。用氯化铵(饱和水溶液)和水淬灭反应。其然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化粗残余物，得到中间体16C(2.42g，5.44mmol，54.1％产率)，其被少量16B污染。继续进行而无需进一步纯化。LC-MS：C20H25NO2的分析计算值311.19，实测值[M+H]312.2，Tr=0.74min(方法A)。
中间体16D：2-(4-(喹啉-4-基)环己基)丙酸
将中间体16C(2.42g，7.77mmol)溶于THF(6.22ml)、水(6.22ml)和MeOH(3.11ml)中。加入氢氧化锂(1.861g，78mmol)并在室温下搅拌反应2小时。然后将其在50℃下搅拌过夜。16小时后，将反应真空浓缩，用水稀释，用AcOH处理并用EtOAc萃取。然后用7：3氯仿：丙醇再次萃取水层。将合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，并在真空下放置过夜(以除去剩余的AcOH)，得到中间体16D(2.10g，7.41mmol，95％产率)。LC-MS：C18H21NO2的分析计算值283.16，实测值[M+H] 284.2，Tr=0.60min(方法A)。
实施例16 非对映异构体1和2
(±)-4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹啉(每个顺式或反式非对映异构体是外消旋的；顺式-和反式-任意分配)
将中间体16D(100mg，0.353mmol)溶解在亚硫酰氯(258μl，3.53mmol)中并加入DMF(13.66μl，0.176mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于真空管线上以除去过量的溶剂和试剂。15分钟后，将粗制酰氯溶于乙腈(1765μl)中，并在0℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(101mg，0.706mmol)于乙腈(1765μl)和三乙胺(246μl，1.765mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温并在室温下搅拌过夜。16小时后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗残余物溶于甲苯(1765μl)中并加入4-甲苯磺酸(336mg，1.765mmol)。将反应回流16小时。16小时后，浓缩反应，溶于2mL DMF中，过滤，通过HPLC纯化一小部分物质，得到实施例16 非对映异构体1和2。
实施例16-1，非对映异构体1：LC-MS：C24H24ClN3的分析计算值389.17，实测值[M+H]390.3，Tr=1.841min(方法B)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.79 (d, J=4.5 Hz, 1H),8.18 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.72 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.59(t, J=7.5 Hz, 2H), 7.42-7.55 (m, 1H), 7.38 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.10-7.19 (m,1H), 3.32 (br. s., 1H), 2.91 (t, J=7.0 Hz, 1H), 1.96 (t, J=12.0 Hz, 2H),1.76-1.92 (m, 3H), 1.46-1.63 (m, 3H), 1.29-1.43 (m, 4H)。
实施例16-2，非对映异构体2：LC-MS：C24H24ClN3的分析计算值389.17，实测值[M+H]390.2，Tr=1.872min(方法B)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.86 (d, J=4.4 Hz, 1H),8.21 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.02 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.74 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.61(t, J=7.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J=4.3 Hz, 2H), 7.49 (br. s., 1H), 7.14 (d, J=8.2Hz, 1H), 3.32-3.52 (m, 1H), 2.12 (br. s., 1H), 2.04 (d, J=12.0 Hz, 1H), 1.65-1.98 (m, 5H), 1.50-1.65 (m, 2H), 1.33 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.15 (d, J=12.6 Hz,1H)。
实施例17
非对映异构体1和2
(±)-4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-3-丙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹啉
(相对立体化学未确定)
中间体17A：2-(4-(6-(三氟甲基)喹啉-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
向4-氯-6-(三氟甲基)喹啉(2.05g，8.85mmol)和中间体15E(3.12g，10.62mmol)于1,4-二噁烷(35mL)中的溶液中加入碳酸钾(3.67g，26.6mmol)和水(7mL)。将反应混合物用氮气流吹扫3分钟，然后加入Pd(Ph3P)4(0.409g，0.354mmol)。将所得混合物再次用氮气吹扫，密封，并在氮气流下在100℃下加热16小时。冷却反应混合物并用乙酸乙酯和饱和NaHCO3水溶液稀释。分离有机层并用饱和NaHCO3水溶液洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化所得残余物，得到中间体17A(3.0g，8.26mmol，93％)。LC-MS：C20H20F3NO2的分析计算值363.15，实测值[M+H] 364.5，Tr=0.97min(方法A)。
中间体17B：2-(4-(6-(三氟甲基)喹啉-4-基)环己基)乙酸乙酯
将中间体17A(3.0g，8.26mmol)加入到甲酸铵(2.082g，33.0mmol)于MeOH(50mL)中的混合物中，用氮气流吹扫该混合物3分钟，然后加入10％钯/碳(0.879g，0.413mmol)(湿的，Degussa型)。将所得混合物在85℃下回流2小时。然后冷却反应混合物并用二氯甲烷稀释。用硅藻土过滤反应混合物，滤饼用二氯甲烷洗涤。将滤液真空浓缩。将残余物用乙酸乙酯萃取并依次用饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤。将有机层经MgSO4干燥，将滤液真空浓缩，得到中间体17B(2.6克，7.12mmol，86％)，为顺式-和反式-非对映异构体的混合物。LC-MS：C20H22F3NO2的分析计算值365.16，实测值[M+H] 366.2，Tr=0.94min(方法A)。
中间体17C：2-(4-(6-(三氟甲基)喹啉-4-基)环己基)丁酸乙酯
在-78℃下向含有THF(15mL)的烧瓶中加入二异丙基氨基锂(2.0M THF溶液)(7.65mL，15.30mmol)，然后在-78℃下滴加1,3-二甲基四氢嘧啶-2(1H)-酮(1.287mL，10.67mmol)和2-(4-(6-(三氟甲基)喹啉-4-基)环己基)乙酸乙酯(2.6g，7.12mmol)于THF(10mL)中的溶液。所得混合物变成棕色并在-78℃下搅拌1小时，然后缓慢加入碘乙烷(1.138mL，14.23mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌3小时。通过倒入水中并用EtOAc萃取来淬灭反应。合并的有机物用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化所得物质，得到中间体17C(1.1g，2.77mmol，39％)。LC-MS：C22H26F3NO2的分析计算值393.19，实测值[M+H] 394.3，Tr=0.97min(方法A)。
中间体17D：2-(4-(6-(三氟甲基)喹啉-4-基)环己基)丁酸
向中间体17C(1.1g，2.80mmol)于THF(20mL)和MeOH(8mL)中的混合物中加入氢氧化锂(2.0M溶液)(13.98mL，28.0mmol)。将得到的混合物在65℃加热72小时。将反应混合物冷却，并用水稀释。向混合物中加入1N HCl溶液以将pH调节至约5。白色固体在pH 5-6下破碎。将得到的混合物用乙酸乙酯萃取两次。分离有机层并用盐水洗涤，经MgSO4干燥。将滤液真空浓缩，得到中间体17D(0.93克，2.55mmol，91％)，为淡黄色固体。LC-MS：C20H22F3NO2的分析计算值365.16，实测值[M+H] 366.3，Tr=0.97min(方法A)。
实施例17：对映异构体1和2
4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-3-丙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹啉
(两种异构体都是外消旋的，在环己基环上具有顺式或反式立体化学，绝对立体化学未确定)
将中间体17D(40mg，0.109mmol)溶解在亚硫酰氯(80μl，1.095mmol)中并加入DMF(4.24μl，0.055mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去过量的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(547μl)中，并在0℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(31.2mg，0.219mmol)于ACN(547μl)和TEA(76μl，0.547mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温并搅拌过夜。16小时后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。合并有机物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗残余物溶于甲苯(547μl)中并加入4-甲苯磺酸(104mg，0.547mmol)。将反应回流16小时。然后将反应浓缩，溶于2mL DMF中，过滤并通过HPLC纯化，得到顺式-和反式-实施例17。
实施例17-1，非对映异构体1：(5.6mg，0.012mmol，11％)LC-MS：C26H25ClF3N3的分析计算值471.17，实测值[M+H] 472.1，Tr=2.178min(方法B)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)δ:8.98 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.22 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.7Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.79 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.52(d, J=8.6 Hz, 1H), 3.43-3.53 (m, 1H), 3.02 (br. s., 1H), 1.79-2.11 (m, 6H),1.46-1.68 (m, 3H), 1.29-1.44 (m, 2H), 0.79 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例17-2，非对映异构体 2：(16.6mg，0.035mmol，32％)LC-MS：C26H25ClF3N3的分析计算值471.17，实测值[M+H] 472.4，Tr=2.206min(方法B)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)δ: 9.04 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.25 (d, J=8.7 Hz, 1H), 8.02 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.80 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J=4.5 Hz, 1H),7.46-7.56 (m, 1H), 3.45-3.73 (m, 2H), 2.28 (d, J=8.9 Hz, 1H), 2.07 (d, J=12.1Hz, 2H), 1.67-2.00 (m, 6H), 1.56 (d, J=11.1 Hz, 1H), 1.03 (d, J=13.1 Hz, 1H),0.75 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例18
(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲氧基乙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹啉
中间体18A：3-甲氧基-2-((顺式)-4-(6-(三氟甲基)喹啉-4-基)环己基)丙酸乙酯
在-78℃下向含有THF(10mL)的烧瓶中加入二异丙基氨基锂(1.5M己烷溶液)(3.65mL，5.47mmol)，然后在-78℃下滴加1,3-二甲基四氢嘧啶-2(1H)-酮(0.396mL，3.28mmol)和中间体17B(0.8g，2.189mmol)于THF(5mL)中的溶液。所得混合物变为棕色并在-78℃下搅拌1小时，然后缓慢加入氯甲基甲基醚(0.249mL，3.28mmol)(无溶剂)。将反应混合物在-78℃下搅拌2小时，然后除去浴并在室温下搅拌20小时。20小时后，将反应混合物用水淬灭，并将得到的混合物用乙酸乙酯萃取。分离有机层并用盐水洗涤，经MgSO4干燥并过滤。将滤液真空浓缩。将残余物溶于DCM中，通过硅胶柱色谱纯化，得到中间体18A(0.39g，0.952mmol，44％)。LC-MS：C22H26F3NO3的分析计算值409.19，实测值[M+H] 410.2，Tr=0.91min(方法A)。
中间体18B：3-甲氧基-2-((顺式)-4-(6-(三氟甲基)喹啉-4-基)环己基)丙酸
向中间体18A(0.49g，1.197mmol)于THF(6mL)和MeOH(6mL)中的溶液中加入氢氧化锂(2.0M溶液)(7.18mL，14.36mmol)。将反应混合物在70℃下加热5小时。然后冷却反应混合物，向混合物中加入水和1N HCl以调节至pH~6并加入2mL乙酸至pH~4。沉淀出白色固体，用乙酸乙酯萃取所得悬浮液。分离有机层，经MgSO4干燥，过滤。将滤液真空浓缩，通过 HPLC纯化粗产物，得到中间体18B(0.38g，0.996mmol，83％)，为黄色固体。LC-MS：C20H22F3NO3的分析计算值381.13，实测值[M+H] 382.2，Tr=0.74min(方法A)。
实施例18：(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲氧基乙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹啉
将中间体18B(27mg，0.071mmol)溶解在亚硫酰氯(51.7μl，0.708mmol)中并加入DMF(2.74μl，0.035mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去另外的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(177μl)中，在0℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(20.19mg，0.142mmol)于ACN(177μl)和TEA(49.3μl，0.354mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。1小时后，LCMS显示转化为所需中间体的M+1峰。用水稀释反应并用EtOAc萃取。合并有机物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗制中间体溶解在POCl3(330μl，3.54mmol)中并加热至90℃持续1小时。通过缓慢加入到1NNaOH中并碱化直至pH~10来淬灭反应。用EtOAc萃取所得含水悬浮液。有机物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗产物溶于DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到实施例18(8.4mg，0.017mmol，24％产率)。LC-MS：C26H25ClF3N3O的分析计算值487.16，实测值[M+H] 488.1，Tr=0.86min(方法A)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12.38-12.48 (m, 1H), 9.04 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.23 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.8 Hz, 1H),7.72 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.41-7.62 (m, 2H), 7.14 (ddd, J=10.8, 8.8, 1.7 Hz,1H), 3.71-3.80 (m, 2H), 3.56-3.65 (m, 2H), 3.35 (br. s., 1H), 3.20 (s, 3H),2.25 (d, J=10.8 Hz, 1H), 1.72-2.03 (m, 5H), 1.64 (t, J=13.1 Hz, 1H), 1.54 (d,J=12.4 Hz, 1H), 1.10 (d, J=13.1 Hz, 1H)。
实施例19
(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲氧基乙基)环己基)-6-氟喹啉
中间体19A：2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己-3-烯-1-基)-3-甲氧基丙酸乙酯
在-78℃下向含有THF(8mL)的烧瓶中加入二异丙基氨基锂(1.5M己烷溶液)(4.89mL，7.34mmol)，然后在-78℃下滴加1,3-二甲基四氢嘧啶-2(1H)-酮(0.539mL，4.47mmol)和中间体15G(1.0g，3.19mmol)于THF(3mL)中的溶液。所得混合物变绿并在-78℃下搅拌1小时。然后缓慢加入氯甲基甲基醚(0.388mL，5.11mmol)(无溶剂)。将反应混合物在-78℃下搅拌0.5小时，然后温热至约-20℃保持4小时，然后温热至室温过夜。将反应混合物用水淬灭，并将得到的混合物用乙酸乙酯萃取。分离有机层并用盐水洗涤，经MgSO4干燥并过滤。将滤液真空浓缩。将残余物溶于DCM中，通过硅胶柱色谱纯化，得到中间体19A(0.80g，2.24mmol，70％)。LC-MS：C21H24FNO3的分析计算值357.17，实测值[M+H] 358.2，Tr=0.78min(方法A)。
中间体19B：2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)-3-甲氧基丙酸乙酯
向中间体19A(1.08g，3.02mmol)于甲醇(20mL)中的溶液中加入10％钯/碳(0.643g，0.302mmol)。将反应混合物抽空，然后用氢气填充，再次抽空并再次用氢气回填。在室温下使用氢气球在氢气下搅拌反应过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并将垫用乙酸乙酯和MeOH洗涤。将滤液真空浓缩。通过超临界流体色谱纯化残余物，分离顺式-和反式-非对映异构体，得到中间体19B(0.44g，1.224mmol，41％产率)。LC-MS：C21H26FNO3的分析计算值359.19，实测值[M+H] 360.2，Tr=0.74min(方法A)。
中间体19C：2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)-3-甲氧基丙酸
向中间体19B(0.44g，1.224mmol)于THF(5mL)和MeOH(5mL)中的溶液中加入氢氧化锂(2.0m溶液)(3.67mL，7.34mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。约16小时后，向反应混合物中加入额外的MeOH(5mL)(2mL)和氢氧化锂(2.0m溶液)(3.67mL，7.34mmol)(4mL)并将反应混合物在65℃下加热6小时，然后在40℃下搅拌2天。冷却反应混合物并用水稀释，加入1NHCl溶液以将pH调节至4-5。将得到的混合物用乙酸乙酯萃取两次。分离有机层，经MgSO4干燥，过滤。将滤液真空浓缩以产生棕色油。通过HPLC纯化粗残余物，得到中间体19C(0.38,1.15mmol，94％产率)。LC-MS：C19H22FNO3的分析计算值331.16，实测值[M+H] 332.2，Tr=0.62min(方法A)。
实施例19：(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲氧基乙基)环己基)-6-氟喹啉
将中间体19C(35mg，0.106mmol)溶解在亚硫酰氯(77μl，1.056mmol)中并加入DMF(4.09μl，0.053mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去额外的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(264μl)中，并在0℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(30.1mg，0.211mmol)于ACN(264μl)和TEA(73.6μl，0.528mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。1小时后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。合并有机物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗中间体溶于POCl3(492μl，5.28mmol)中并加热至90℃保持1小时。然后通过缓慢加入到1N NaOH中并碱化直至pH~10来淬灭反应。用EtOAc萃取所得混合物。将合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。将粗残余物溶于DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到实施例19(10.6mg，0.024mmol，22％)。LC-MS；C25H25ClFN3O的分析计算值437.17，实测值[M+H] 438.1，Tr=0.75min(方法A)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.86(d, J=4.5 Hz, 1H), 8.09 (dd, J=9.2, 5.8 Hz, 1H), 7.97 (dd, J=10.9, 2.4 Hz,1H), 7.66 (td, J=8.6, 2.7 Hz, 1H), 7.40-7.61 (m, 3H), 7.14 (d, J=8.6 Hz, 1H),3.71-3.79 (m, 2H), 3.59 (br. s., 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.20 (s, 3H), 2.20-2.30 (m, 1H), 1.69-2.02 (m, 5H), 1.62 (t, J=13.2 Hz, 1H), 1.53 (d, J=13.5 Hz,1H), 1.09 (d, J=13.3 Hz, 1H)。
实施例20
(±)-4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-3-丙基)环己基)氧基)喹啉
实施例20：(±)-4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-3-丙基)环己基)氧基)喹啉
将中间体13G(92mg，0.294mmol)溶解在亚硫酰氯(214μl，2.94mmol)中并加入DMF(11.37μl，0.147mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去额外的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(734μl)中，并在0℃下加入到5-氯吡啶-2,3-二胺(84mg，0.587mmol)于ACN(734μl)和TEA(205μl，1.468mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。30分钟后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。将粗制中间体溶于三氯氧磷(450mg，2.94mmol)中并加热至90℃。2小时后，通过缓慢加入到1N NaOH中并碱化直至pH~10来淬灭反应。用EtOAc萃取所得混合物。将合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。将粗物质溶于2mL DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到外消旋实施例20(18.9mg，0.044mmol，15％产率)。LC-MS：C24H25ClN4O的分析计算值420.17，实测值[M+H] 421.1，Tr=0.69min(方法A)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.62 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.27 (br. s., 1H), 8.09 (d,J=8.2 Hz, 1H), 8.04 (br. s., 1H), 7.89 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.70 (t, J=7.5 Hz,1H), 7.52 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.54 (t, J=10.4 Hz, 1H),3.58 (br. s., 1H), 2.65-2.71 (m, 1H), 2.21 (d, J=11.8 Hz, 1H), 2.11 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.97-2.06 (m, 1H), 1.72-1.90 (m, 3H), 1.35-1.57 (m, 3H), 1.13-1.28 (m, 2H), 0.71 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
对映异构体1和对映异构体2
对映异构体1：实施例20-1，4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-3-丙基)环己基)氧基)喹啉(纯手性，绝对立体化学未确定)
对映异构体2：实施例20-2，4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-3-丙基)环己基)氧基)喹啉(纯手性，绝对立体化学未确定)
实施例20-1，对映异构体1和实施例20-2，对映异构体2：外消旋样品的手性分离(方法I)得到实施例20-1，对映异构体1Tr=5.974分钟(方法J)和实施例20-2，对映异构体2 Tr=9.600分钟(方法J)。未确定绝对立体化学。
实施例20-1，对映异构体1：MS(ES)：m/z=421.0 [M+H]+。Tr=1.797分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.62 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.20-8.35 (m, 1H), 7.95-8.13 (m, 2H), 7.89 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.70 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.51 (t, J=7.6Hz, 1H), 7.03 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.54 (br. s., 1H), 3.65 (br. s., 1H), 2.68(br. s., 1H), 2.21 (d, J=11.7 Hz, 1H), 2.11 (d, J=11.3 Hz, 1H), 2.02 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.72-1.92 (m, 3H), 1.35-1.55 (m, 3H), 1.09-1.27 (m, 2H), 0.70(t, J=7.1 Hz, 3H)。
实施例20-2，对映异构体2：MS(ES)：m/z=421.3 [M+H]+。Tr=1.814分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.62 (d, J=4.9 Hz, 1H), 8.21-8.33 (m, 1H), 7.95-8.12 (m, 2H), 7.89 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.70 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.52 (t, J=7.5Hz, 1H), 7.03 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.54 (br. s., 1H), 3.65 (br. s., 1H), 2.68(br. s., 1H), 2.20 (d, J=11.8 Hz, 1H), 2.11 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.02 (d, J=14.3 Hz, 1H), 1.74-1.94 (m, 3H), 1.33-1.56 (m, 3H), 1.11-1.28 (m, 2H), 0.70(t, J=7.0 Hz, 3H)。
实施例21
异构体1-4
4-(4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)丙基)环己基)-6-氟喹啉
(所有四种异构体均为纯手性，绝对立体化学未确定)
实施例21，异构体1-4
4-(4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)丙基)环己基)-6-氟喹啉
(所有四种异构体均为纯手性，绝对立体化学未确定)
将中间体15I(81mg，0.257mmol)溶解在亚硫酰氯(187μl，2.57mmol)中并加入DMF(9.94μl，0.128mmol)。在室温下搅拌该反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去额外的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(642μl)中，并在0℃下加入到5-氯吡啶-2,3-二胺(73.7mg，0.514mmol)于ACN(642μl)和TEA(179μl，1.284mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。30分钟后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。合并有机物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将得到的粗制中间体溶解在三氯氧磷(394mg，2.57mmol)中并加热至90℃。1小时后，通过缓慢加入到1N NaOH中并碱化直至pH~10来淬灭反应。用EtOAc萃取所得混合物。有机物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗物质溶解在2mL DMF中，过滤，并通过HPLC纯化以分离顺式和反式非对映异构体，并用手性SFC将各自分离成一对对映异构体，得到4种纯手性产物(未确定相对和绝对立体化学)。
异构体 1-4
4-(4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)丙基)环己基)-6-氟喹啉
(所有四种异构体均为纯手性，绝对立体化学未确定)
实施例21-1，对映异构体1和实施例21-2，对映异构体2：外消旋样品的手性分离(方法K)得到实施例21-1，对映异构体1 Tr=13.038分钟(方法L)和实施例21-2，对映异构体2 Tr=19.022分钟(方法L)(未确定相对和绝对立体化学)。
实施例21-3，对映异构体3和实施例21-4，对映异构体：外消旋样品的手性分离(方法M)得到实施例21-3，对映异构体3 Tr=3.177分钟(方法N)和实施例21-4，对映异构体4 Tr=8.289分钟(方法N)(未确定相对和绝对立体化学)。
实施例21-1，对映异构体1：MS(ES)：m/z=423.0 [M+H]+。Tr=1.862分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.84 (d, J=4.3 Hz, 1H), 8.26 (br. s., 1H), 8.08(dd, J=9.0, 6.0 Hz, 1H), 8.04 (br. s., 1H), 7.94 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.60-7.68(m, 1H), 7.56 (d, J=4.3 Hz, 1H), 3.60 (br. s., 1H), 3.38 (br. s., 1H), 3.23(t, J=9.6 Hz, 1H), 2.20 (d, J=9.5 Hz, 1H), 2.03 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.57-1.98(m, 7H), 1.52 (d, J=10.4 Hz, 1H), 1.07 (d, J=13.1 Hz, 1H), 0.69 (t, J=7.2 Hz,3H)。
实施例21-2，对映异构体2：MS(ES)：m/z=423.2 [M+H]+。Tr=1.824分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (d, J=4.3 Hz, 1H), 8.25 (br. s., 1H), 8.07(dd, J=9.2, 5.8 Hz, 1H), 8.02 (br. s., 1H), 7.89-7.97 (m, 1H), 7.60-7.67 (m,1H), 7.56 (d, J=4.6 Hz, 1H), 3.60 (br. s., 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.17-3.27(m, 1H), 2.19 (d, J=10.1 Hz, 1H), 2.02 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.56-1.96 (m, 7H),1.51 (d, J=10.4 Hz, 1H), 1.06 (d, J=13.4 Hz, 1H), 0.69 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例21-3，对映异构体3：MS(ES)：m/z=423.2 [M+H]+。Tr=1.804分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.78 (d, J=4.0 Hz, 1H), 8.26 (br. s., 1H), 8.06(dd, J=9.0, 6.0 Hz, 2H), 7.88-7.96 (m, 1H), 7.58-7.67 (m, 1H), 7.41 (d, J=4.3Hz, 1H), 3.40 (br. s., 1H), 3.23 (br. s., 1H), 2.71 (br. s., 1H), 2.06 (d, J=11.3 Hz, 1H), 1.77-1.97 (m, 5H), 1.42-1.61 (m, 3H), 1.28-1.42 (m, 2H), 0.75(t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例21-4，对映异构体4：MS(ES)：m/z=423.0 [M+H]+。Tr=1.825分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.26-8.40 (m, 1H), 7.87-8.22 (m, 4H), 7.70 (br. s.,1H), 7.54 (br. s., 1H), 3.26 (br. s., 1H), 2.72 (s, 1H), 2.04 (br. s., 1H),1.74-1.96 (m, 5H), 1.43-1.64 (m, 3H), 1.35 (br. s., 2H), 0.74 (br. s., 3H)。
实施例22
(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)丙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹啉
实施例22：(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)丙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹啉
将中间体17(40mg，0.109mmol)溶解在亚硫酰氯(80μl，1.095mmol)中并加入DMF(4.24μl，0.055mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去额外的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(547μl)中，并在0℃下加入到5-氯吡啶-2,3-二胺(31.4mg，0.219mmol)于ACN(547μl)和TEA(76μl，0.547mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。1小时后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。合并有机物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗残余物溶于POCl3(102μl，1.095mmol)中并加热至90℃保持1小时。将反应在冷(冰上)1N NaOH中淬灭，并用EtOAc萃取。有机物用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗残余物溶于DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到实施例22。LC-MS：C25H24ClF3N4的分析计算值472.16，实测值[M+H] 473.1，Tr=0.85min(方法A)。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ: 9.04 (d, J=4.4 Hz, 1H), 8.56 (br. s., 1H), 8.16-8.35 (m,2H), 7.93-8.14 (m, 2H), 7.71 (d, J=4.1 Hz, 1H), 3.60 (br. s., 1H), 3.36 (br.s., 1H), 3.17-3.28 (m, 1H), 2.20 (br. s., 1H), 2.04 (d, J=14.1 Hz, 1H), 1.20-1.98 (m, 8H), 1.08 (d, J=12.5 Hz, 1H), 0.71 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例22，对映异构体1和2
4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)丙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹啉
(纯手性，绝对立体化学未确定)
实施例22-1，对映异构体1和实施例22-2，对映异构体2：外消旋样品的手性分离(方法O)得到实施例21-1，对映异构体1 Tr=5.905分钟(方法P)和实施例22-2，对映异构体2 Tr=6.896分钟(方法P)(未确定绝对立体化学)。
实施例22-1，对映异构体1：MS(ES)：m/z=472.9 [M+H]+。Tr=2.079分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.03 (d, J=4.3 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.20-8.30 (m,2H), 8.04 (br. s., 1H), 7.99 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.70 (d, J=4.3 Hz, 1H), 3.60(br. s., 1H), 3.44 (br. s., 1H), 3.24 (br. s., 1H), 2.20 (br. s., 1H), 2.04(d, J=15.6 Hz, 1H), 1.60-1.98 (m, 7H), 1.54 (d, J=11.9 Hz, 1H), 1.09 (d, J=12.8 Hz, 1H), 0.71 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例22-2，对映异构体2：MS(ES)：m/z=473.3 [M+H]+。Tr=2.079分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.03 (d, J=4.3 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.20-8.29 (m,2H), 8.04 (br. s., 1H), 7.99 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J=4.6 Hz, 1H), 3.59(br. s., 1H), 3.24 (br. s., 1H), 2.21 (d, J=7.3 Hz, 1H), 2.04 (d, J=16.2 Hz,1H), 1.61-1.99 (m, 8H), 1.54 (d, J=10.4 Hz, 1H), 1.08 (d, J=12.2 Hz, 1H),0.71 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例23对映异构体1和2
6-氯-2-(1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)-3-丙基)-1H-苯并[d]咪唑
(纯手性，绝对立体化学未确定)
中间体23A：2-(4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
向含有中间体15E(9.90g，33.7mmol)于二噁烷(195mL)中的溶液的可密封反应烧瓶中加入4-溴-2-氟-3-甲基吡啶(6.21g，32.7mmol)、水(65.0mL)和Na2CO3(13.86g，131mmol)。将混合物用氩气脱气10-15分钟后，加入Pd(Ph3P)4(1.888g，1.634mmol)，将烧瓶密封，将混合物加热至100℃保持24小时，然后缓慢冷却到室温。用EtOAc和水稀释反应，加超声处理以破碎固体，然后转移至分液漏斗中。分离层，水层再用EtOAc萃取一次。合并有机层，用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到深棕色残余物。在硅胶柱色谱上纯化，得到中间体23A(7.23g，26.1mmol，80％产率)。LC-MS：C16H20FNO2的分析计算值277.15，实测值[M+H]278.2，Tr=1.04min(方法A)。
中间体23B：2-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)乙酸乙酯
向装有回流冷凝器、含有中间体23A(7.2285g，26.1mmol)于甲醇(100mL)中的均匀混合物的圆底烧瓶中加入甲酸铵(8.22g，130mmol)。将所得混合物用氩气喷射5-10分钟，接着抽空，然后用氮气吹扫(x3)。然后向该混合物中加入钯/碳(10％Pd/C，湿的，Degussa型)(2.77g，2.61mmol)，并将反应加热至回流(浴温约70℃)。回流3小时，然后缓慢冷却至室温。在将反应浓缩除去挥发物之前除去搅拌棒，然后用DCM处理并通过硅藻土垫过滤，用DCM彻底冲洗硅藻土垫。将合并的滤液真空浓缩，得到不透明的残余物。对残余物重新施以反应的原始条件[甲醇(100mL)，甲酸铵(8.22g，130mmol)；抽空然后用氮气吹扫x3；钯/碳(10％Pd/C，湿的，Degussa型)(2.77g，2.61mmol)；加热至回流]。4小时后，将反应冷却至室温。在将反应浓缩除去挥发物之前除去搅拌棒，然后用DCM处理并通过硅藻土垫过滤，用DCM彻底冲洗硅藻土垫。将合并的滤液真空浓缩，得到澄清油状物。通过超临界流体色谱纯化该残余物，分离顺式和反式非对映异构体，得到中间体23B(2.18g，7.80mmol，30％)。LC-MS：C16H22FNO2的分析计算值279.35，实测值[M+H] 280.2，Tr=1.02min(方法A)。
中间体23C：2-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)丁酸乙酯
在-78℃下向含有THF(15mL)的烧瓶中加入二异丙基氨基锂(1.5M环己烷溶液)(11.03mL，16.54mmol)和DMPU(1.360mL，11.28mmol)，然后在-78℃下滴加中间体23B(2.1g，7.52mmol)于THF(8mL)中的溶液。将得到的橙色溶液混合物在-78℃下搅拌1小时，然后加入碘乙烷(0.969mL，12.03mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌，然后逐渐温热至室温并搅拌4小时。反应混合物变成混浊的黄色。用NH4Cl水溶液淬灭反应混合物。将得到的混合物用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥。将滤液真空浓缩。将残余物溶于DCM中，通过硅胶柱色谱纯化，得到中间体23C(1.31g，4.26mmol，57％)。LC-MS：C18H26FNO2的分析计算值307.20，实测值[M+H] 308.2，Tr=1.08min(方法A)。
中间体23D：2-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)丁酸
向中间体23C(0.9g，2.93mmol)于THF(10mL)和MeOH(6mL)中的反应混合物中加入氢氧化锂(2M水溶液)(14.64mL，29.3mmol)。将反应混合物在70℃下加热过夜。过夜后，向反应混合物中加入额外的2M氢氧化锂溶液(14.64mL，29.3mmol)(4mL)和MeOH(6mL)(4mL)。将反应混合物在70℃下加热另外20小时。冷却反应混合物，向反应混合物中加入2mL乙酸至pH=5。将所得混合物用乙酸乙酯萃取两次，将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，并过滤。将滤液真空浓缩。通过HPLC纯化残余物，得到中间体23D(425mg，1.51mmol，51％产率)。LC-MS：C16H22FNO2的分析计算值279.16，实测值[M+H] 280.1，Tr=0.89min(方法A)。
实施例23对映异构体1和2：6-氯-2-(1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)-3-丙基)-1H-苯并[d]咪唑(纯手性，绝对立体化学未确定)
将中间体23D(34mg，0.122mmol)溶解在亚硫酰氯(89μl，1.217mmol)中并加入DMF(4.71μl，0.061mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去残留的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(609μl)中并在0℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(34.7mg，0.243mmol)于ACN(609μl)和TEA(85μl，0.609mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。过夜后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。合并有机物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗残余物溶于POCl3(113μl，1.217mmol)中。反应加热至90℃。1小时后，将反应在1N NaOH中淬灭并用EtOAc萃取。有机物用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗制残余物溶于DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到外消旋实施例23。通过手性SFC进一步纯化该物质，得到下面的对映异构体1和2。
实施例23，对映异构体1和2
6-氯-2-(1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)-3-丙基)-1H-苯并[d]咪唑
(纯手性，绝对立体化学未确定)
实施例23-1，对映异构体1和实施例23-2，对映异构体2：外消旋样品的手性分离(方法Q)得到实施例23-1，对映异构体1 Tr=3.944分钟(方法R)和实施例23-3，对映异构体2 Tr=4.681分钟(方法R)(未确定绝对立体化学)。
实施例23-1，对映异构体1：MS(ES)：m/z=386.0 [M+H]+。Tr=2.051分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.02 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.41-7.60 (m, 2H), 7.33 (d,J=4.9 Hz, 1H), 7.09-7.17 (m, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.17 (d, J=10.8 Hz, 1H),2.84 (br. s., 1H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (d, J=10.4 Hz, 1H), 2.02 (d, J=12.5 Hz,1H), 1.89 (d, J=11.8 Hz, 1H), 1.52-1.78 (m, 5H), 1.45 (br. s., 1H), 1.35 (d,J=10.7 Hz, 1H), 1.02 (d, J=12.2 Hz, 1H), 0.68 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例23-2，对映异构体2：MS(ES)：m/z=386.2 [M+H]+。Tr=2.055分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.02 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.41-7.61 (m, 2H), 7.33 (d,J=4.8 Hz, 1H), 7.13 (t, J=9.3 Hz, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.17 (d, J=11.8 Hz,1H), 2.84 (br. s., 1H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (br. s., 1H), 2.02 (d, J=12.5 Hz,1H), 1.90 (br. s., 1H), 1.52-1.75 (m, 5H), 1.45 (br. s., 1H), 1.35 (d, J=11.4Hz, 1H), 1.02 (d, J=12.9 Hz, 1H), 0.68 (t, J=7.1 Hz, 3H)。
实施例24
(±)-6-氯-2-(1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)-3-丙基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶
实施例24：(±)-6-氯-2-(1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)-3-丙基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶
按照用于由中间体23D制备实施例23的程序合成实施例24，除了使用5-氯吡啶-2,3-二胺。LC-MS：C21H24ClF的分析计算值386.17，实测值[M+H] 387.1，Tr=0.85min(方法A)。1H NMR(500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.26 (br. s., 1H), 7.97-8.11 (m, J=5.2 Hz, 2H), 7.33(d, J=4.9 Hz, 1H), 3.15-3.29 (m, 1H), 2.80-2.90 (m, 1H), 2.10-2.21 (m, 4H),2.02 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.92 (br. s., 1H), 1.54-1.80 (m, 5H), 1.48 (t, J=13.3 Hz, 1H), 1.37 (d, J=11.0 Hz, 1H), 1.04 (d, J=13.1 Hz, 1H), 0.71 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例24，对映异构体1和2
6-氯-2-(1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)-3-丙基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶
(纯手性，绝对立体化学未确定)
实施例24-1，对映异构体1和实施例24-2，对映异构体2：外消旋样品的手性分离(方法S)得到实施例24-1，对映异构体1 Tr=2.375分钟(方法T)和实施例24-2，对映异构体2 Tr=3.701分钟(方法T)(未确定绝对立体化学)。
实施例24-1，对映异构体1：MS(ES)：m/z=387.0 [M+H]+。Tr=1.847分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.20-8.33 (m, 1H), 7.95-8.08 (m, 2H), 7.32 (br. s.,1H), 3.21 (d, J=9.8 Hz, 1H), 2.80-2.88 (m, 1H), 2.16 (s, 4H), 1.97-2.07 (m,1H), 1.90 (s, 1H), 1.52-1.77 (m, 5H), 1.47 (t, J=13.4 Hz, 1H), 1.35 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.01 (d, J=14.3 Hz, 1H), 0.68 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
实施例24-2，对映异构体2：MS(ES)：m/z=387.0 [M+H]+。Tr=1.862分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.20-8.32 (m, 1H), 7.96-8.08 (m, 2H), 7.32 (br. s.,1H), 3.17-3.27 (m, J=12.8 Hz, 1H), 2.79-2.89 (m, 1H), 2.16 (s, 4H), 1.95-2.08(m, 1H), 1.90 (br. s., 1H), 1.52-1.77 (m, 5H), 1.42-1.52 (m, 1H), 1.35 (d, J=10.7 Hz, 1H), 1.01 (d, J=13.7 Hz, 1H), 0.68 (t, J=7.0 Hz, 3H)。
实施例25
(±)-6-氯-2-(2-乙氧基-1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑
中间体25A：3-乙氧基-2-(4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)丙酸乙酯
在-78℃下向含有THF(15mL)的烧瓶中加入二异丙基氨基锂(1.5M的环己烷溶液)(16.66mL，24.99mmol)。一旦添加完成，就加入DMPU(2.152mL，17.85mmol)，接着在-78℃下滴加中间体23A(3.3g，11.90mmol)于THF(8mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌1.5小时，然后加入氯甲基乙基醚(2.228mL，23.80mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌，然后逐渐温热至室温，搅拌3小时。在此期间，形成棕色粘性固体。3小时后，反应混合物变成澄清的橙色溶液。将反应混合物用NH4Cl水溶液淬灭，并将得到的混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，经MgSO4干燥并过滤。将滤液真空浓缩。将残余物溶于DCM中，通过硅胶柱色谱纯化，得到中间体25A(1.8g，5.37mmol，45％产率)。LC-MS：C19H26FNO3的分析计算值335.19，实测值[M+H] 336.3，Tr=1.06min(方法A)。
中间体25B：3-乙氧基-2-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)丙酸乙酯
将含有中间体25A(1.8g，5.37mmol)于MeOH(40mL)中的溶液的圆底烧瓶抽空，然后在室温下在氮气流下加入甲酸铵(1.692g，26.8mmol)和钯/碳(10wt％，湿的，Degussa型)(0.571g，0.537mmol)(湿的)。将得到的混合物在80℃加热5小时。冷却反应混合物，真空浓缩，并溶于DCM。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用DCM冲洗。将滤液真空浓缩，通过SFC纯化顺式和反式非对映异构体，得到顺式中间体25B(通过NMR确认)(0.76g，2.25mmol，42％产率)。LC-MS：C19H28FNO3的分析计算值337.21，实测值[M+H] 338.2，Tr=1.04min(方法A)。
中间体25C：3-乙氧基-2-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)丙酸
向中间体25B(0.72g，2.134mmol)于THF(10mL)和MeOH(4mL)中的溶液中加入LiOH(2M溶液)(10.67mL，21.34mmol)。将所得混合物在45℃下加热5.5小时。冷却反应混合物，向反应混合物中加入1N HCl溶液，使pH达到约5。沉淀出白色固体。将得到的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经MgSO4干燥并过滤。将滤液真空浓缩。通过HPLC纯化粗产物，得到中间体25C(0.60g，1.94mmol，91％产率)。LC-MS：C17H24FNO3的分析计算值309.17，实测值[M+H] 310.2，Tr=0.86min(方法A)。
实施例25：(±)-6-氯-2-(2-乙氧基-1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑
将中间体25C(62mg，0.200mmol)溶解在亚硫酰氯(146μl，2.004mmol)中并加入DMF(7.76μl，0.100mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去残留的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(501μl)中，并在0℃下加入到4-氯苯-1,2-二胺(57.1mg，0.401mmol)于ACN(501μl)和TEA(140μl，1.002mmol)中的溶液中。然后使反应温热至室温。15分钟后，将反应用水稀释并用EtOAc萃取。合并有机物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗制中间体溶于三氯氧磷(307mg，2.004mmol)中并加热至90℃。2小时后，通过缓慢加入到1N NaOH中并碱化直至pH~10来淬灭反应。用EtOAc萃取所得混合物。将合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。将粗物质溶于2mL DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到外消旋实施例25(20.5mg，0.048mmol，24％产率)。LC-MS：C23H27ClFN3O 的分析计算值415.18，实测值[M+H] 416.2，Tr=0.81min(方法A)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.02 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.56 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.34 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.23 (d, J=8.9 Hz, 1H), 3.79 (d, J=6.4Hz, 2H), 3.58-3.67 (m, 1H), 3.34 (dd, J=9.5, 7.0 Hz, 1H), 2.85 (br. s., 1H),2.13-2.26 (m, 4H), 1.97 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.55-1.80 (m, 4H), 1.48 (t, J=13.4 Hz, 1H), 1.37 (d, J=12.2 Hz, 1H), 0.94-1.07 (m, 4H)。
实施例25，对映异构体1和2
6-氯-2-(2-乙氧基-1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑
(纯手性，绝对立体化学未确定)
实施例25-1，对映异构体1和实施例25-2，对映异构体2：外消旋样品的手性分离(方法U)得到实施例25-1，对映异构体1 Tr=3.783分钟(方法V)和实施例25-2，对映异构体2 Tr=6.989分钟(方法V)(未确定绝对立体化学)。
实施例25-1，对映异构体1：MS(ES)：m/z=416.0 [M+H]+。Tr=2.066分钟(方法B)。1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.01 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.40-7.62 (m, 2H), 7.32 (d,J=5.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J=7.3 Hz, 1H), 3.76 (d, J=6.4 Hz, 2H), 3.38-3.46 (m,1H), 3.27-3.38 (m, 1H), 2.83 (br. s., 1H), 2.16 (s, 4H), 1.91-2.03 (m, 1H),1.52-1.78 (m, 4H), 1.45 (t, J=13.1 Hz, 1H), 1.35 (d, J=11.6 Hz, 1H), 0.92-1.05 (m, 4H)。
实施例25-2，对映异构体2：MS(ES)：m/z=416.0 [M+H]+。Tr=2.066分钟(方法B)。1HNMR (500 Mhz, DMSO-d6) δ: 8.01 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.38-7.60 (m, 2H), 7.32 (d,J=4.9 Hz, 1H), 7.14 (d, J=7.3 Hz, 1H), 3.76 (d, J=6.1 Hz, 2H), 3.39-3.48 (m,1H), 3.28-3.38 (m, 1H), 2.83 (br. s., 1H), 2.16 (s, 4H), 1.96 (d, J=12.2 Hz,1H), 1.52-1.74 (m, 4H), 1.45 (t, J=13.3 Hz, 1H), 1.35 (d, J=10.4 Hz, 1H),0.89-1.09 (m, 4H)。
实施例26
4-((顺式)-4-((R)-1-([1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉
中间体26A：(R)-2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)-N'-(吡啶-2-基)丙酰肼
将制备1K(50mg，0.166mmol)溶解在亚硫酰氯(60.5μl，0.830mmol)中并加入DMF(6.42μl，0.083mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去过量的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(1659μl)中，并在0℃下加入到2-肼基吡啶(36.2mg，0.332mmol)于ACN(1659μl)和TEA(116μl，0.830mmol)中的溶液中。然后将其在室温下搅拌16小时。16小时后，将反应真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化粗残余物，得到中间体26A(54mg，0.138mmol，83％产率)。LC-MS：C23H25FN4O的分析计算值392.20，实测值[M+H] 393.2，Tr=0.61min(方法A)。
实施例26：4-((顺式)-4-((R)-1-([1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉
将中间体26A(54mg，0.138mmol)溶解在密封小瓶中的POCl3(275μl)中并加热至100℃。90分钟后，将反应冷却并小心地在冰上淬灭。用1N NaOH将所得混合物调至pH~10，并用iPrOH/CHCl3(3/7比率)萃取。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。然后将所得残余物溶于DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到实施例26(6.9mg，0.018mmol，13％产率)。LC-MS：C23H23FN4的分析计算值374.19，实测值[M+H] 375.2，Tr=0.60min(方法A)。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ: 8.82 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.67 (d, J=6.9 Hz, 1H), 8.07 (dd, J=9.0, 5.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=10.9, 2.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J=9.3 Hz, 1H),7.59-7.67 (m, 2H), 7.29-7.37 (m, 1H), 6.98 (t, J=6.7 Hz, 1H), 3.87 (dd, J=10.6, 7.0 Hz, 1H), 3.39 (br. s., 1H), 2.41 (d, J=10.2 Hz, 1H), 2.05 (d, J=8.4Hz, 1H), 1.82-1.97 (m, 2H), 1.59-1.82 (m, 3H), 1.53 (d, J=11.6 Hz, 1H), 1.34(d, J=6.8 Hz, 3H), 1.10 (d, J=11.3 Hz, 1H)。
实施例27
6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(咪唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙基)环己基)喹啉
中间体27A：(R)-2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)-N-(吡啶-2-基甲基)丙酰胺
将制备1K(50mg，0.166mmol)溶解在亚硫酰氯(60.5μl，0.830mmol)中并加入DMF(6.42μl，0.083mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去过量的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(1659μl)中并在0℃下加入到吡啶-2-基甲胺(35.9mg，0.332mmol)于ACN(1659μl)和TEA(116μl，0.830mmol)中的溶液中。30分钟后，将反应真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化得到的粗残余物，得到中间体27A(64mg，0.163mmol，99％产率)。LC-MS：C24H26FN3O的分析计算值391.21，实测值[M+H] 392.2，Tr=0.61min(方法A)。
实施例27：6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(咪唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙基)环己基)喹啉
将中间体27A(54mg，0.138mmol)溶于多磷酸(276μl)中并加热至120℃。加热16小时。然后将反应冷却并小心地用水稀释。然后将其用1N NaOH碱化，并将得到的混合物用EtOAc萃取。合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗残余物溶于DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到实施例27(21.4mg，0.057mmol，42％产率)。LC-MS：C24H24FN3的分析计算值373.20，实测值[M+H] 374.2，Tr=0.60min(方法A)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.84(d, J=4.3 Hz, 1H), 8.43 (d, J=7.0 Hz, 1H), 8.07 (dd, J=9.0, 6.0 Hz, 1H),7.90-7.97 (m, 1H), 7.60-7.69 (m, 2H), 7.47 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H),6.64-6.70 (m, 1H), 6.57-6.64 (m, 1H), 3.77 (dd, J=10.5, 6.9 Hz, 1H), 3.37(br. s., 1H), 2.35 (d, J=9.8 Hz, 1H), 2.03 (d, J=12.2 Hz, 1H), 1.81-1.99 (m,2H), 1.55-1.76 (m, 3H), 1.52 (d, J=12.2 Hz, 1H), 1.27 (d, J=6.7 Hz, 3H), 1.07(d, J=12.5 Hz, 1H)。
实施例28
3-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)喹唑啉-4(3H)-酮
中间体28A：(R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙-1-胺
将制备1K(2g，6.64mmol)溶于甲苯(22.12ml)中，加入叠氮磷酸二苯酯(2.009g，7.30mmol)和三乙胺(1.110ml，7.96mmol)。将小瓶密封并加热至70℃。2小时后，将反应冷却至室温并减压浓缩。将粗残余物溶于40mL THF和40mL水中，并加入氢氧化锂(1.589g，66.4mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用1N HCl酸化(形成白色沉淀)并用EtOAc萃取。然后将含水部分用1N NaOH碱化(形成沉淀)，并用EtOAc萃取5次。将碱性萃取物真空浓缩，得到中间体28A(1.68g，6.17mmol，93％产率)。LC-MS：C17H21FN2的分析计算值272.17，实测值[M+H] 273.1 Tr=0.50min(方法A)。1H NMR (400 Mhz, 氯仿-d) δ: 8.80 (d, J=4.6Hz, 1H), 8.11 (dd, J=9.3, 5.7 Hz, 1H), 7.67 (dd, J=10.6, 2.8 Hz, 1H), 7.46(ddd, J=9.2, 8.0, 2.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J=4.5 Hz, 1H), 3.27-3.37 (m, 1H),3.13 (dq, J=9.3, 6.3 Hz, 1H), 2.01-2.10 (m, 1H), 1.67-1.92 (m, 6H), 1.37-1.55(m, 4H), 1.15 (d, J=6.4 Hz, 3H)。
中间体28B：2-氨基-N-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)苯甲酰胺
将中间体28A(50mg，0.184mmol)溶于DMF(1836μl)中并加入HOBT(36.5mg，0.239mmol)、EDC(45.8mg，0.239mmol)、2-氨基苯甲酸(50.4mg，0.367mmol)和TEA(128μl，0.918mmol)。在室温下搅拌反应。3天后，将反应用EtOAc稀释，并用5：1水：饱和碳酸氢钠水溶液萃取。合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗残余物在硅胶柱色谱上纯化，得到中间体28B(57mg，0.146mmol，79％产率)。LC-MS：C24H26FN3O的分析计算值391.21，实测值[M+H]392.2 Tr=0.72min(方法A)。
实施例28：3-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)喹唑啉-4(3H)-酮
将中间体28B(57mg，0.146mmol)溶于压力小瓶中的DMSO(728μl)中。加入4-甲苯磺酸(41.5mg，0.218mmol)和原甲酸三乙酯(36.4μl，0.218mmol)，将反应加热至50℃保持1小时。然后将反应加热至70℃保持另外2小时。冷却反应，加入原甲酸三乙酯(36.4μl，0.218mmol)，并将反应在70℃下搅拌另外1小时。然后将反应用1mL DMSO进一步稀释，过滤，并通过 HPLC纯化，得到实施例28(30mg，0.073mmol，50％产率)。LC-MS：C25H24FN3O的分析计算值401.19，实测值[M+H] 402.2 Tr=0.74min(方法A)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ:8.86 (d, J=4.3 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.17 (d, J=7.9 Hz, 1H), 8.09 (dd, J=9.3, 6.0 Hz, 1H), 7.97 (dd, J=10.8, 2.6 Hz, 1H), 7.78-7.86 (m, 1H), 7.61-7.72(m, 2H), 7.47-7.59 (m, 2H), 3.32-3.46 (m, 1H), 1.90-2.04 (m, 3H), 1.72-1.90(m, 4H), 1.66 (t, J=13.1 Hz, 1H), 1.56 (d, J=10.7 Hz, 1H), 1.50 (d, J=6.1 Hz,3H), 1.25 (d, J=13.4 Hz, 1H)。
实施例29
6-氯-2-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)喹唑啉-4(3H)-酮
中间体29A：5-氯-2-((R)-2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺基)苯甲酰胺
将制备1K(50mg，0.166mmol)溶解在亚硫酰氯(60.5μl，0.830mmol)中并加入DMF(6.42μl，0.083mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去过量的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(1659μl)中并在0℃下加入到2-氨基-5-氯苯甲酰胺(28.3mg，0.166mmol)于ACN(1659μl)和TEA(116μl，0.830mmol)中的溶液中。1小时后，将反应真空浓缩。用水稀释粗残余物并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗制中间体29A(75mg，0.166mmol，100％产率)。在后续步骤中无需进一步纯化原样使用。LC-MS：C25H25ClFN3O2的分析计算值453.16，实测值[M+H] 454.1 Tr=0.80min(方法A)。
实施例29：6-氯-2-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)喹唑啉-4(3H)-酮
将粗中间体29A(69mg，0.152mmol)溶于小瓶中的EtOH(760μl)中。将NaOH(122mg，3.04mmol)溶于水(760μl)中，并将所得溶液加入到乙醇溶液中。将小瓶密封并加热至100℃保持1小时。然后将反应用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。将粗残余物溶于DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到实施例29(3.4mg，0.008mmol，5％产率)。LC-MS：C25H23ClFN3O的分析计算值435.15，实测值[M+H] 436.1 Tr=0.82min(方法A)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.85 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.08 (dd,J=9.2, 5.8 Hz, 1H), 8.02 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.95 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.79 (dd,J=8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.60-7.69 (m, 2H), 7.58 (d, J=4.3 Hz, 1H), 3.39 (br. s.,1H), 3.16 (dd, J=10.7, 6.7 Hz, 1H), 2.20 (br. s., 1H), 1.77-2.04 (m, 4H),1.70 (br. s., 3H), 1.57 (d, J=10.7 Hz, 1H), 1.35 (d, J=14.3 Hz, 1H), 1.27 (d,J=6.7 Hz, 3H) 。
实施例30
6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)乙基)环己基)喹啉
中间体30A：(R)-2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)-N-甲氧基-N-甲基丙酰胺
将制备1K(500mg，1.659mmol)溶于亚硫酰氯(0.605ml，8.30mmol)中，并加入DMF(0.064ml，0.830mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，将反应真空浓缩，溶于甲苯中，再次浓缩并置于高真空下以除去过量的亚硫酰氯。15分钟后，将粗制酰氯溶于ACN(16.600ml)中，并在0℃下加入到N,O-二甲基羟胺盐酸盐(324mg，3.32mmol)于ACN(16.600ml)和TEA(1.156ml，8.30mmol)中的溶液中。30分钟后，将反应真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化得到的粗残余物，得到中间体30A(487mg，1.414mmol，85％产率)。LC-MS：C20H25FN2O2的分析计算值344.19，实测值[M+H] 345.3Tr=0.68min(方法A)。
中间体30B：(R)-3-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丁-2-酮
将中间体30A(478mg，1.388mmol)在氮气氛下溶于干燥THF(2776μl)中，并在冰浴上冷却至0℃。滴加甲基溴化镁(3M乙醚溶液)(1.0mL，3.00mmol)并将反应在0℃下搅拌。1小时后，加入另外0.5当量的MeMgBr。另外几小时后，通过加入1M HCl淬灭反应，用1N NaOH碱化并用EtOAc萃取。将有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化粗残余物，得到中间体30B(356mg，1.189mmol，86％产率)。LC-MS：C19H22FNO的分析计算值299.17，实测值[M+H] 300.2 Tr=0.71min(方法A)。
中间体30C：(R)-1-溴-3-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丁-2-酮
将二异丙胺(203μl，1.427mmol)/干燥THF(1189μl)冷却至-78℃。滴加n-BuLi(571μl，1.427mmol)(2.5M于己烷中)。15分钟后，加入中间体30B(356mg，1.189mmol)并将反应在-78℃下搅拌40分钟。历经5分钟滴加TMS-Cl(274μl，2.140mmol)并将反应在-78℃下搅拌另外1小时。然后将反应混合物倒入饱和NaHCO3(50mL)中并用EtOAc(100mL)萃取。将萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩。在氮气氛下将所得残余物溶于无水THF(12mL)中并冷却至0℃。加入碳酸氢钠(125mg，1.486mmol)，然后加入NBS(212mg，1.189mmol)，并将反应在0℃下搅拌90分钟。用NaHCO3淬灭反应，并用EtOAc萃取。有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到棕色油状物，其为约20％中间体30C(通过LCMS)，但主要是原料。该粗混合物的产量为(363mg，0.96mmol，81％)。粗品随后直接使用。LC-MS：C19H21BrFNO的分析计算值377.08，实测值[M+H] 378.0 Tr=0.78min(方法A)。
实施例30：6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)乙基)环己基)喹啉
将粗中间体30C(60mg，0.159mmol)溶于压力释放小瓶中的EtOH中，并加入6-甲基哒嗪-3-胺(22.50mg，0.206mmol)。将反应密封并在80℃下搅拌1小时。1小时后，将反应真空浓缩，溶于DMF中，过滤，并通过HPLC纯化，得到实施例30(4.0mg，7％产率)。LC-MS：C24H25FN4的分析计算值388.21，实测值[M+H] 389.1 Tr=0.64min(方法A)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ:8.92 (br. s., 1H), 8.43 (s, 1H), 8.22 (d, J=9.3 Hz, 1H), 8.09-8.17 (m, 1H),8.05 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.68-7.77 (m, 2H), 7.55 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.45 (m.,1H), 2.60 (s, 3H), 2.05 (br. s., 2H), 1.69-1.94 (m, 5H), 1.64 (t, J=13.1 Hz,1H), 1.56 (d, J=12.3 Hz, 1H), 1.27-1.37 (m, 4H)。
实施例31
6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)乙基)环己基)喹啉
实施例31：6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)乙基)环己基)喹啉
使用与由中间体30C和哒嗪-3-胺制备实施例30类似的程序制备实施例31。LC-MS：C23H23FN4的分析计算值374.19，实测值[M+H] 375.1 Tr=0.63min(方法A)。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (d, J=4.3 Hz, 1H), 8.41 (d, J=3.4 Hz, 1H), 8.16 (s,1H), 8.08 (dd, J=9.2, 5.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.95 (dd, J=11.0,2.4 Hz, 1H), 7.65 (td, J=8.6, 2.6 Hz, 1H), 7.59 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.14 (dd,J=9.2, 4.6 Hz, 1H), 3.46 (m., 1H), 1.99-2.10 (m, 2H), 1.68-1.95 (m, 5H),1.50-1.62 (m, 2H), 1.26-1.36 (m, 4H)。
实施例32
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丁-3-烯-1-基)环己基)-6-氟喹啉
中间体32A (R)-3-((R)-2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)戊-4-烯酰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮
在-40℃下，向制备1J(50mg，0.116mmol，参考实施例40，在文件12547中)于THF(2mL)中的溶液中滴加NaHMDS(1M在THF中)(0.139mL，0.139mmol)。将混合物在-40℃至-30℃下搅拌15分钟。然后滴加3-溴丙-1-烯(28.0mg，0.231mmol)/THF(0.5mL)。将反应在-20℃下搅拌16小时。通过将反应倒入饱和NH4Cl溶液中使反应在-20℃下淬灭。将含水物用EtOAc萃取。将有机物用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗物质。向该粗物质中加入MeOH并过滤除去固体。将滤液用制备型HPLC纯化(Phen Luna 5u 30×100mm)，流速为40mL/min，梯度为20％B-100％B历经10分钟，在100％B保持5min(A：含0.1％TFA的水/MeOH(90:10)，B：含0.1％TFA的水/MeOH(10:90))，在254nm下监测。合并含有产物的级分(tr=9.428分钟)。浓缩后得到中间体32A(25mg，0.052mmol，44.8％产率)，为白色固体。1H NMR (400MHz, 氯仿-d)δ 9.12 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.64 (dd, J=9.3, 5.0 Hz, 1H), 8.01 - 7.89 (m, 2H),7.89 - 7.75 (m, 1H), 7.47 - 7.31 (m, 5H), 5.62 - 5.45 (m, 2H), 4.84 - 4.76(m, 1H), 4.76 - 4.68 (m, 1H), 4.68 - 4.52 (m, 1H), 4.36 (dd, J=9.0, 3.9 Hz,1H), 3.55 - 3.33 (m, 1H), 2.49 - 2.35 (m, 1H), 2.33 - 2.21 (m, 2H), 2.12 -1.97 (m, 2H), 1.93 - 1.65 (m, 6H)。LC-MS：M+H=473.3(tr=0.90min)(方法A)。
中间体32B：(R)-2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)戊-4-烯酸
在0℃下，向中间体32A(250mg，0.529mmol)于THF(2mL)中的溶液中加入2.0M LiOH/H2O(0.476mL，0.952mmol)，然后加入30％H2O2(0.360mL，3.17mmol)。将反应在0℃下搅拌10min。然后将其温热至室温并在室温下搅拌16小时。通过加入饱和Na2SO3在0℃小心地淬灭反应。用1N HCl将pH调节至5~6，并用EtOAc萃取混合物。将合并的有机物经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将粗物质用制备型HPLC纯化(Phen Luna 5u 30×100mm)，流速为40mL/min，梯度为20％B-100％B历经10分钟，在100％B保持5min(A：含0.1％TFA的水/MeOH(90:10)，B：含0.1％TFA的水/MeOH(10:90))，在254nm下监测。得到32B(78mg，0.236mmol，44.6％产率)，为白色固体。1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ 9.22 (br. s., 1H), 8.63 (dd, J=9.0, 5.0 Hz, 1H),7.98 - 7.75 (m, 4H), 5.85 (dd, J=16.9, 9.7 Hz, 1H), 5.25 - 5.03 (m, 2H), 3.50(br. s., 1H), 2.89 - 2.75 (m, 1H), 2.54 - 2.32 (m, 2H), 2.16 (d, J=10.1 Hz,1H), 2.06 (d, J=13.2 Hz, 1H), 2.01 - 1.71 (m, 6H)。LC-MS：M+H=328(tr=0.69min)(方法A)。
中间体32C：(R)-N-(2-氨基-4-氯苯基)-2-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)戊-4-烯酰胺
在室温下，向中间体32B(10mg，0.031mmol)于CH2Cl2(0.5mL)中的溶液中滴加草酰氯(15.51mg，0.122mmol)，然后加入1滴DMF。将反应在室温下搅拌2小时。除去溶剂，将残余物在真空泵下干燥2小时。在室温下向于THF(0.5mL)中的该(R)-2-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)戊-4-烯酰氯(11mg，0.032mmol)中加入4-氯苯-1,2-二胺(9.07mg，0.064mmol)，然后加入Hunig碱(0.017mL，0.095mmol)。将反应在室温下搅拌3小时。LCMS显示原料消耗和在rt=0.76min处的新峰，其是所需的M+1。将反应用MeOH稀释，并用制备型HPLC纯化(PhenLuna 5u 30×100mm)，流速为40mL/min，梯度为20％B-100％B历经10分钟，在100％B保持5min.(A：含0.1％TFA的水/MeOH(90:10)，B：含0.1％TFA的水/MeOH(10:90))，在254nm下监测。得到中间体32C(11mg，0.015mmol，48.4％产率)，为浅棕色固体。LC-MS：M+H=452.3(tr=0.80min)(方法A)。
实施例32：4-((1S,4s)-4-((R)-1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丁-3-烯-1-基)环己基)-6-氟喹啉
在室温下，向32C(10mg，0.022mmol)于甲苯(0.5mL)中的溶液中加入对甲苯磺酸(19.05mg，0.111mmol)。将反应在115℃下搅拌16小时。16小时后的LCMS显示原料消耗和为所需的M+1的新峰。将反应浓缩，溶于2mL MeOH中，过滤并进行单一化合物纯化。通过制备型LC/MS纯化粗物质，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经20分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到实施例32(3.2mg，0.0073mmol，33％)。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.87 (d, J=4.4Hz, 1H), 8.09 (dd, J=9.0, 5.9 Hz, 1H), 7.97 (d, J=10.8 Hz, 1H), 7.72 - 7.64(m, 1H), 7.63 - 7.52 (m, 2H), 7.49 (br. s., 1H), 7.15 (d, J=7.8 Hz, 1H), 5.75- 5.55 (m, 2H), 3.96 (t, J=10.1 Hz, 1H), 2.30 (br. s., 1H), 2.01 - 1.90 (m,1H), 1.86 (br. s., 1H), 1.84 - 1.72 (m, 3H), 1.72 - 1.59 (m, 4H), 1.54 (d, J=12.0 Hz, 1H), 1.15 (d, J=11.5 Hz, 1H)；LC-MS：M+H=434.3(tr=1.34min)(方法B)。
实施例33
(±)-顺式和反式-4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-3,3,3-三氟丙基)环己基)-6-氟喹啉
制备33A. (E)-4,4,4-三氟-2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己-3-烯-1-基)丁-2-烯酸乙酯
将中间体15F(0.500g，1.596mmol)和DMPU(0.192ml，1.596mmol)于THF(10.64ml)中的溶液冷却至-78℃。向该溶液中加入KHMDS(1M THF溶液)(3.35ml，3.35mmol)。1.75小时后，滴加三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(0.463ml，3.35mmol)。用Al箔覆盖反应并在-78℃下搅拌3.5小时，然后温热至室温过夜。用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应并用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (2X)萃取水相。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到橙色残余物。通过硅胶色谱使用ISCO机器纯化粗物质(40g柱，40mL/min，0-50％EtOAc/己烷历经21分钟，tr=14min)，得到(E)-4,4,4-三氟-2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己-3-烯-1-基)丁-2-烯酸乙酯(0.109g，0.263mmol，16.50％产率)，为无色残余物。
ESI MS(M+H)+=394.1。HPLC峰tr=0.93分钟。HPLC条件：A。
制备33B. 4,4,4-三氟-2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丁酸乙酯
向中间体33A(0.109g，0.277mmol)于MeOH(1.385ml)中的溶液中加入甲酸铵(0.087g，1.385mmol)，然后加入Pd/C(7.96mg，0.075mmol)。将反应在70℃下加热1小时。将反应通过硅藻土过滤，将滤饼用MeOH洗涤，并浓缩滤液。将粗物质重新溶解在MeOH中，并加入甲酸铵(0.087g，1.385mmol)和Pd/C(7.96mg，0.075mmol)。将反应在70℃下加热2.5小时。将反应通过硅藻土过滤，滤饼用CH2Cl2洗涤。浓缩滤液。将粗物质溶于CH2Cl2中并用饱和NaHCO3水溶液(1X)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物，为无色残余物。ESI MS(M+H)+=398.3。HPLC峰tr=0.85分钟。HPLC条件：方法A。
制备33C. 4,4,4-三氟-2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丁酸
向中间体33B(0.0336g，0.085mmol)于THF(0.068ml)、MeOH(0.034ml)和水(0.068ml)中的溶液中加入氢氧化锂(0.020g，0.845mmol)。将反应在80℃下加热1小时，然后冷却至室温。用1N HCl将反应调节至pH 7，然后用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (5X)萃取水相。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物，为无色残余物。ESI MS(M+H)+=370.2。HPLC峰tr=0.71分钟。HPLC条件：方法A。
实施例33：(±)-顺式和反式-4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-3,3,3-三氟丙基)环己基)-6-氟喹啉
将中间体33C(0.0216g，0.058mmol)溶解在亚硫酰氯(0.043ml，0.585mmol)中并加入DMF(2.264μl，0.029mmol)。在室温下搅拌该反应。1小时后，浓缩反应，溶于甲苯中，再次浓缩，并置于高真空下。将粗酰氯溶于乙腈(0.292ml)中，将溶液冷却至0℃，然后加入4-氯苯-1,2-二胺(0.017g，0.117mmol)和三乙胺(0.041ml，0.292mmol)。使反应温热至室温。反应用水稀释并用EtOAc (3X)萃取。合并有机物，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到棕色残余物。将粗物质溶于甲苯(0.292ml)中，加入对甲苯磺酸一水合物(0.056g，0.292mmol)。将反应在110℃加热过夜，然后冷却至室温。蒸发溶剂，粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经30分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分并通过离心蒸发干燥。通过制备型LC/MS进一步纯化该物质，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含0.1％三氟乙酸)；流动相B：95：5乙腈：水(含0.1％三氟乙酸)；梯度：18-43％B历经25分钟，然后在43％B下保持2分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到标题化合物，为4种异构体的混合物(8.5mg，29％)。ESI MS(M+H)+=476.2。HPLC峰tr=2.062分钟。纯度=96％。HPLC条件：方法B。
实施例34
(±)-顺式和反式-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-1,8-萘啶
制备34A. 2-(4-(1,8-萘啶-4-基)环己基)丙酸
向2-(4-(1,8-萘啶-4-基)环己基)丙酸乙酯(0.202g，0.647mmol)于THF(0.517ml)、MeOH(0.259ml)和水(0.517ml)中的溶液中加入氢氧化锂(0.155g，6.47mmol)。将反应在80℃下加热1小时，然后冷却至室温。用1N HCl将反应调节至pH 7，然后用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (5X)萃取水相。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物，为黄色泡沫。ESI MS(M+H)+=285.1。HPLC峰tr=0.56分钟。HPLC条件：A。
实施例34：(+/-)-顺式和反式-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-1,8-萘啶
将2-(4-(1,8-萘啶-4-基)环己基)丙酸(0.1356g，0.477mmol)溶于亚硫酰氯(0.348ml，4.77mmol)中，加入DMF(0.018ml，0.238mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，浓缩反应，溶于甲苯中，再次浓缩，并置于高真空下。将粗酰氯溶于乙腈(2.384ml)中，将溶液冷却至0℃，然后加入4-氯苯-1,2-二胺(0.136g，0.954mmol)和三乙胺(0.332ml，2.384mmol)。使反应温热至室温。将反应用水稀释并用EtOAc(3X)萃取。合并有机物，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到棕色残余物。将粗物质溶于甲苯(2.384ml)中，加入对甲苯磺酸一水合物(0.454g，2.384mmol)。将反应在110℃下加热3小时，然后冷却至室温。通过制备型LC/MS纯化粗物质，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：20-70％B历经25分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分并通过离心蒸发干燥。通过制备型LC/MS进一步纯化该物质，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含0.1％三氟乙酸)；流动相B：95：5乙腈：水(含0.1％三氟乙酸)；梯度：0-25％B历经19分钟，然后在100％B下保持4分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到标题化合物(22.5mg，12％)。ESI MS(M+H)+=391.2。HPLC峰tr=1.679分钟。纯度=100％。HPLC条件：方法B。
实施例35
(4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-1,8-萘啶，纯手性，绝对和相对立体化学未确定
拆分出约21.2mg的非对映异构和外消旋混合物。异构体混合物通过制备型SFC纯化，条件如下：柱：WhelkO1-Kromasil，25×3cm ID，5-μm颗粒；流动相A：80/20 CO2/MeOH(含0.1％DEA)；检测器波长：220nm；流速：85mL/min。级分(“峰-1”tr=28.078分钟，“峰-2”tr=29.448分钟；分析条件：柱：WhelkO1-Kromasil，250×4.6mm ID，5-μm颗粒；流动相A：80/20 CO2/MeOH(含0.1％DEA)；流速：2.0mL/min)收集在MeOH中。基于制备型SFC色谱图，估计峰1和峰2的立体异构纯度大于98％。通过制备型LC/MS进一步纯化各对映异构体：
实施例35-1，第一洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridgeC18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：20-70％B历经25分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到异构体1(1.7mg，1％)。ESI MS(M+H)+=391.1。HPLC峰tr=1.595分钟。纯度=95％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例35-2，第二洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：20-70％B历经25分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到异构体2(1.8mg，1％)。ESIMS(M+H)+=391.2。HPLC峰tr=1.696分钟。纯度=99％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例36
(+/-)-顺式和反式-6-氯-2-(1-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑
制备36A. 2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
将4-溴-2-(三氟甲基)吡啶(1.170ml，8.85mmol)、中间体15E(2.68g，9.12mmol)、Na2CO3(3.75g，35.4mmol)和Pd(Ph3P)4(0.511g，0.442mmol)于二噁烷(82ml)和水(27.3ml)中的混合物在100℃加热过夜。将反应用水淬灭并用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (3X)萃取水相。合并有机物，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到黄色残余物。通过硅胶色谱使用ISCO机器纯化粗物质(80g柱，60mL/min，0-20％EtOAc/己烷历经16.5分钟，tr=11min)，得到2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯(2.336g，7.46mmol，84％产率)，为无色残余物。ESI MS(M+H)+=314.1。HPLC峰tr=1.05分钟。HPLC条件：方法A。
制备36B. 2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)丁酸乙酯
将2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯(2.191g，6.99mmol)和DMPU(0.843ml，6.99mmol)于THF(46.6ml)中的溶液冷却至-78℃。向该溶液中加入KHMDS(1MTHF溶液)(14.69ml，14.69mmol)。1小时后，滴加碘乙烷(1.187ml，14.69mmol)。用Al箔覆盖反应并在-78℃下搅拌3.5小时，然后温热至室温过夜。用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应并用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (2X)萃取水相。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到橙色残余物。通过硅胶色谱使用ISCO机器纯化粗物质(80g柱，60mL/min，0-18％EtOAc/己烷历经19分钟，tr=14min)，得到2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)丁酸乙酯(0.836g，2.448mmol，35％产率)，为无色残余物。ESI MS(M+H)+=342.2。HPLC峰tr=1.14分钟。HPLC条件：A。
制备36C. 2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丁酸乙酯
向2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)丁酸乙酯(0.884g，2.59mmol)于MeOH(12.95ml)中的溶液中加入甲酸铵(0.816g，12.95mmol)，然后加入Pd/C(0.074g，0.699mmol)。将反应在70℃下加热1小时。将反应通过硅藻土过滤，滤饼用CH2Cl2洗涤。浓缩滤液。将粗物质溶于CH2Cl2中并用饱和NaHCO3水溶液(1X)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物，为无色残余物。ESI MS(M+H)+=344.3。HPLC峰tr=1.12分钟。HPLC条件：A。
制备36D. 2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丁酸
向2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丁酸乙酯(0.729g，2.123mmol)于THF(4.25ml)、MeOH(2.123ml)和水(4.25ml)中的溶液中加入氢氧化锂(0.763g，31.8mmol)。将反应在80℃加热过夜，然后冷却至室温。加入另外的LiOH(0.381mg，15.9mmol)并将反应再次加热过夜。用1N HCl将反应调节至pH 7，然后用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (5X)萃取水相。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物，为黄色残余物。ESI MS(M+H)+=316.4。HPLC峰tr=0.95分钟。HPLC条件：A。
实施例36：(+/-)-顺式和反式-6-氯-2-(1-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑
将2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丁酸(0.1086g，0.344mmol)溶于亚硫酰氯(0.251ml，3.44mmol)中，并加入DMF(0.013ml，0.172mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，浓缩反应，溶于甲苯中，再次浓缩，并置于高真空下。将粗酰氯溶解在乙腈(1.722ml)中并将溶液冷却至0℃，然后加入4-氯苯-1,2-二胺(0.098g，0.689mmol)和三乙胺(0.240ml，1.722mmol)。使反应温热至室温。反应用水稀释并用EtOAc(3X)萃取。合并有机物，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到棕色残余物。将粗物质溶于甲苯(1.722ml)中，加入对甲苯磺酸一水合物(0.328g，1.722mmol)。将反应在110℃加热8小时，然后冷却至室温。蒸发溶剂，粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经20分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到标题化合物(66.5mg，99％)。ESI MS(M+H)+=422.2。HPLC峰tr=2.077分钟。纯度=99％。HPLC条件：方法B。
实施例37
4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-1,8-萘啶，纯手性，绝对和相对立体化学未确定
拆分出约68.4mg的非对映异构和外消旋混合物。异构体混合物通过制备型SFC纯化，条件如下：柱：手性AD，25×3cm ID，5-μm颗粒；流动相A：88/12 CO2/MeOH；检测器波长：220nm；流速：85mL/min。级分(“峰-1”tr=4.205分钟，“峰-2”tr=4.677分钟，“峰-3”tr=5.792分钟，“峰-4”tr=6.848分钟；分析条件：柱：手性AD，250×4.6mm ID，5-μm颗粒；流动相A：85/15CO2/MeOH；流速：2.0mL/min)收集在MeOH中。基于制备型SFC色谱图，估计每个峰的立体异构纯度大于96％。通过制备型LC/MS进一步纯化各对映异构体：
实施例37-1，第一洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridgeC18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经20分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到异构体1(4.1mg，3％)。ESI MS(M+H)+=422.2。HPLC峰tr=2.162分钟。纯度=98％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例37-2，第二洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经20分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到异构体2(3.5mg，3％)。ESIMS(M+H)+=422.2。HPLC峰tr=2.164分钟。纯度=99％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例37-3，第三洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经20分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到异构体3(24.1mg，16％)。ESIMS(M+H)+=422.2。HPLC峰tr=2.160分钟。纯度=97％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例37-4，第四洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经20分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到异构体4(25.8mg，17％)。ESIMS(M+H)+=422.2。HPLC峰tr=2.161分钟。纯度=94％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例38
(±)-顺式和反式-6-氯-2-(1-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑
制备38A. 2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
将4-溴-2-(三氟甲基)吡啶(1.5mL，11.35mmol)、2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯(3.44g，11.69mmol)、Na2CO3(4.81g，45.4mmol)和Pd(Ph3P)4(0.656g，0.567mmol)于二噁烷(105mL)和水(35.0mL)中的混合物在100℃加热过夜。将反应用水淬灭并用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (3X)萃取水相。合并有机物，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到黄色残余物。通过硅胶色谱使用ISCO机器纯化粗物质(80g柱，60mL/min，0-45％EtOAc/己烷历经27分钟，tr=15,23min)，得到2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯(2.7477g，8.33mmol，73.4％产率)，为无色残余物。ESI MS(M+H)+=314.1。HPLC峰tr=1.03分钟。HPLC条件：A。
制备38B. 2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)丙酸乙酯
将2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯(2.7477g，8.77mmol)和DMPU(1.057ml，8.77mmol)于THF(58.5ml)中的溶液冷却至-78℃。向该溶液中加入KHMDS(1MTHF溶液)(18.42ml，18.42mmol)。45分钟后，滴加碘甲烷(1.152ml，18.42mmol)。将反应用Al箔覆盖并在-78℃下搅拌3.5小时，然后温热至室温。用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应并用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (2X)萃取水相。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到橙色残余物。通过硅胶色谱使用ISCO机器纯化粗物质(80g柱，60mL/min，0-25％EtOAc/己烷历经19分钟，tr=10min)，得到2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)丙酸乙酯(2.116g，5.82mmol，66.3％产率)，为无色残余物。ESI MS(M+H)+=329.2。HPLC峰tr=1.10分钟。HPLC条件：方法A。
制备38C. 2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丙酸乙酯
向2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己-3-烯-1-基)丙酸乙酯(2.116g，6.46mmol)于MeOH(32.3ml)中的溶液中加入甲酸铵(2.038g，32.3mmol)，然后加入Pd/C(0.186g，1.745mmol)。将反应在70℃下加热1小时。将反应通过硅藻土过滤，滤饼用CH2Cl2洗涤。浓缩滤液。将粗物质溶于CH2Cl2中并用饱和NaHCO3水溶液(1X)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物，为无色残余物。ESI MS(M+H)+=330.2。HPLC峰tr=1.08分钟。HPLC条件：方法A。
制备38D. 2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丙酸
向2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丙酸乙酯(2.0177g，6.13mmol)于THF(4.90ml)、MeOH(2.450ml)和水(4.90ml)中的溶液中加入氢氧化锂(1.467g，61.3mmol)。将反应在80℃下加热1小时，然后冷却至室温。用1N HCl将反应调节至pH 7，然后用EtOAc稀释。分离层。用EtOAc (5X)萃取水相。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物，为白色泡沫。ESI MS(M+H)+=302.1。HPLC峰tr=0.90分钟。HPLC条件：方法A。
实施例38：(+/-)-顺式和反式-6-氯-2-(1-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑
将2-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丙酸(0.100g，0.332mmol)溶于亚硫酰氯(0.242mL，3.32mmol)中并加入DMF(0.013ml，0.166mmol)。在室温下搅拌反应。1小时后，浓缩反应，溶于甲苯中，再次浓缩，并置于高真空下。将粗酰氯溶解在乙腈(1.659mL)中并将溶液冷却至0℃，然后加入4-氯苯-1,2-二胺(0.095g，0.664mmol)和三乙胺(0.231mL，1.659mmol)。使反应温热至室温。反应用水稀释并用EtOAc(3X)萃取。合并有机物，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到棕色残余物。将粗物质溶于甲苯(1.659ml)中，加入对甲苯磺酸一水合物(0.316g，1.659mmol)。将反应在110℃加热8小时，然后冷却至室温。蒸发溶剂，粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经25分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到标题化合物(39.6mg，28％)。ESI MS(M+H)+=408.1。HPLC峰tr=1.984分钟。纯度=97％。HPLC条件：B。
实施例39
6-氯-2-(1-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑
(纯手性，绝对和相对立体化学未确定)
拆分出约41mg的非对映异构和外消旋混合物。异构体混合物通过制备型SFC纯化，条件如下：柱：Whelk-O R,R Kromasil，25×3cm ID，5-μm颗粒；流动相A：85/15 CO2/MeOH(含0.1％DEA)；检测器波长：220nm；流速：85mL/min。将级分(“峰-1”tr=9.88分钟，“峰-2”tr=11.55分钟，“峰-3”tr=12.99分钟；)收集在MeOH中。通过制备型LC/MS进一步纯化各对映异构体：
实施例39-1，第一洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridgeC18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经25分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到异构体1(1.3mg，1％)。ESI MS(M+H)+=408.2。HPLC峰tr=1.977分钟。纯度=100％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例39-2，第二洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经25分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min. 合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到异构体2(13.9mg，10％)。ESI MS(M+H)+=408.2。HPLC峰tr=2.119分钟。纯度=100％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例39-3，第三洗脱异构体：粗物质通过制备型LC/MS纯化，条件如下：柱：XBridge C18, 19×200mm，5-μm颗粒；流动相A：5：95乙腈：水(含10mM乙酸铵)；流动相B：95：5乙腈：水(含10mM乙酸铵)；梯度：40-80％B历经25分钟，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。合并含有所需产物的级分，通过离心蒸发干燥，得到异构体3(11.3mg，8％)。ESIMS(M+H)+=407.9。HPLC峰tr=2.119分钟。纯度=99％。HPLC条件：B。未确定绝对立体化学。
实施例40-52
使用本文所述的方法，可以制备诸如下列的其他化合物。
| 实施例 | 化合物 | 名称 |
| 40 | 4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5,6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | |
| 41 | 4-((1S,4s)-4-((R)-1-(4,5-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | |
| 42 | 4-((1S,4s)-4-((R)-1-(6-氯-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | |
| 43 | 6-氟-4-((1S,4s)-4-((R)-1-(4,5,6,7-四氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹啉 | |
| 44 | 4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5,6-二氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | |
| 45 | 6-氟-4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹啉 | |
| 46 | 4-((1S,4s)-4-((R)-1-(7-氯-5-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | |
| 47 | 4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5,7-双(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉 | |
| 48 | 6-氟-4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5-(三氟甲氧基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹啉 | |
| 49 | 2-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈 | |
| 50 | 2-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酸甲酯 | |
| 51 | 4-(((1s,4s)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹啉 | |
| 52 | 4-(((1s,4s)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹啉 |
材料和方法
以下一般材料和方法在指示时使用或可用于以下实施例中：
分子生物学中的标准方法描述于科学文献中(参见例如Sambrook等人, Molecular Cloning, 第三版, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY(2001)；和Ausubel等人, Current Protocols in Molecular Biology, Vols. 1-4, JohnWiley and Sons, Inc. NewYork, NY (2001)，其描述在细菌细胞中克隆和DNA突变形成(Vol. 1)、在哺乳动物细胞和酵母中克隆(Vol. 2)、糖缀合物和蛋白质表达(Vol. 3)和生物信息学(Vol. 4))。
科学文献描述了用于蛋白质纯化(包括免疫沉淀、色谱、电泳、离心和结晶)，以及化学分析、化学修饰、翻译后修饰、产生融合蛋白及蛋白质的糖基化的方法(参见例如Coligan等人, Current Protocols in Protein Science, Vols. 1-2, John Wiley andSons, Inc., NY (2000))。
可获得用于测定例如抗原片段、前导序列、蛋白质折叠、功能结构域、糖基化位点和序列比对的软件包和数据库(参见例如GCG® Wisconsin Package (Accelrys, Inc.,SanDiego, CA)；和DECYPHER® (Time Logic Corp., Crystal Bay, NV))。
所述文献充满了可充当评估本文所描述的化合物的基础的测定和其他实验技术。
IDO酶测定和犬尿氨酸(KYN)的细胞产生描述于Sarkar, S.A.等人, Diabetes,56:72-79 (2007)中。简而言之，除非另有规定，否则所有化学物质可购自Sigma-Aldrich(St. Louis, MO)。1,000个人胰岛的组可在1 mL培养基中与细胞因子一起培养24小时，通过在800 x g下离心5分钟来回收且在150 µL含有蛋白酶抑制剂混合物(Set 2；Calbiochem, EMD Biosciences, SanDiego, CA)的PBS 中超声波处理。超声波处理物可在10,000 x g下离心10分钟，且可通过将40 µl样品与相等体积的含有40 mmol/L抗坏血酸(中和至pH 7.0)、100 µmol/L亚甲基蓝、200 µg/mL过氧化氢酶和400 µmol/l L-Trp的100mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 6.5)在37℃下一起孵育30分钟来一式三份地测试上清液。测定可通过添加16 µL 30% (w/v)三氯乙酸(TCA)终止且进一步在60℃下孵育15分钟以将N-甲酰基犬尿氨酸水解成KYN。混合物可随后在12,000 rpm下离心15分钟，且KYN可通过在96孔微量滴定板中混合相等体积的上清液与2% (w/v)欧利希试剂(Ehrlich's reagent)/冰乙酸且使用L-KYN作为标准读取在480 nm下的吸光度来定量。胰岛样品中的蛋白质可通过Bio-Rad蛋白测定在595 nm下定量。为了检测胰岛培养上清液中的L-KYN，蛋白质可用5% (w/v)TCA沉淀且在12,000 rpm下离心15分钟，且可如上文所描述测定用欧利希试剂进行的上清液中的KYN的测定。可向所指示的孵育培养基中添加IL-4 (10 µg/mL；500-2,000单位/mL)和1-α-甲基Trp (1-MT；40 µmol/L)。此测定还可形成基于细胞的测定的基础，且可经由作为UV/Vis检测的替代方案的LCMS/MS来定量。
Western印迹分析. 在Miami培养基中在细胞因子存在下孵育24小时的1,000-1,200个胰岛的组可被收获且在如上所述的PBS中超声波处理，且50 µg蛋白样品可在10%SDS-PAGE凝胶上进行电泳。用人-IDO质粒(3 µg)转染的COS7细胞(0.6×106个细胞/60 mm3皮氏培养皿)或空载体细胞可分别用作阳性及阴性对照。蛋白质可通过半干法以电泳方式转移至聚偏二氟乙烯膜上且用5% (w/v)脱脂奶粉/Tris缓冲盐水和0.1% Tween阻断1小时且随后用抗人小鼠IDO抗体(1:500；Chemicon, Temecula, CA)、磷酸化-STAT1αp91和STAT1αp91 (1:500; Zymed, San Francisco, CA)孵育过夜。在用抗小鼠辣根过氧化物酶缀合的二级抗体(Jackson Immunolabs, WestGrove, PA)孵育1小时之后，免疫反应性蛋白可用ECL PLUS® Western印迹检测试剂(Amersham BioSciences, Buckinghamshire, U.K.)可视化。
IDO的免疫组织化学检测. 胰岛可固定在4%多聚甲醛/PBS (Invitrogen)中1小时，在熔融10%猪皮明胶块(37℃)中固定化，且包埋在最佳切割温度化合物中。对胰岛组织的免疫荧光染色可在用针对胰十二指肠同源异型框1 (PDX1)和IDO产生的抗体染色的7 µm切片上进行。抗原修复可在水浴中在含有10 mmol/l Tris及1 mmol/l EDTA (pH 9.0)的缓冲液中在97℃下进行30分钟。切片可用含5%正常山羊血清/PBS阻断1小时。组织可随后与小鼠单克隆抗人IDO抗体(1:20；Chemicon)和山羊多克隆抗人PDX1抗体(1:2,000；其可自Dr.Chris Wright, School of Medicine, Vanderbilt, TN请求获得)在室温下在潮湿室中反应过夜。二级抗体抗山羊(用Cy3标记)和抗小鼠(用Cy2标记)可购自Jackson Immunolabs且可以1:200的浓度使用。核可用Hoechst 33258 (Molecular Probes, Eugene, OR)染色。图像可通过Intelligent Imaging System软件自配备有Olympus DSU (旋转盘共焦)和Hamamatsu ORCA IIER单色CCD摄影机的Olympus 1X81倒置电动显微镜获取。
评估本发明的IDO抑制剂的替代方式描述于WO2010/0233166中且在下文概述。
生物化学测定. 人及小鼠IDO二者的cDNA克隆已经分离且通过测序检验且为可商购获得的。为了制备用于生物化学研究的IDO，可在大肠杆菌中使用IPTG可诱导的pET5a载体系统产生C端His标记的IDO蛋白且在镍柱上分离。部分纯化蛋白的产率可通过凝胶电泳检验且浓度通过与蛋白标准比较来估计。为了测试IDO酶活性，可遵循公开的程序(参见例如Littlejohn, T.K.,等人, Prot. Exp. Purif., 19:22-29 (2000))运行用于犬尿氨酸产生的96孔板分光光度测定。为了筛选IDO抑制活性，化合物可在例如200 µM的单一浓度下针对50 ng IDO酶在100 µL反应体积中进行评估，其中在例如0、2、20及200 µM的渐增浓度下添加色氨酸。犬尿氨酸产生可在1小时时测定。
基于细胞的测定. COS-1细胞可用表达IDO cDNA的CMV启动子驱动质粒使用Lipofectamine 2000 (Invitrogen)如制造商所建议短暂转染。一组伴侣细胞可用TDO表达质粒短暂转染。转染后四十八小时，细胞可以6×104个细胞/孔分配成96孔格式。第二天，可洗涤孔且含有20 µg/mL色氨酸的新培养基(无酚红)可与抑制剂一起添加。可在5小时时停止反应且移除上清液且如先前针对酶测定所描述以分光光度计测量的方式测试犬尿氨酸。为了获得IDO活性的初步确认，化合物可以例如100 µM的单一浓度评估。可收集所选化合物的更广泛的剂量递增概况。
药效学和药代动力学评估. 药效学测定可基于测量犬尿氨酸及色氨酸两者的血清水平，且计算犬尿氨酸/色氨酸比提供独立于基线色氨酸水平的IDO活性的估计值。血清色氨酸和犬尿氨酸水平可通过HPLC分析测定，且血清化合物水平任选地可还在相同HPLC运行中测定。
化合物可首先通过用LPS攻击小鼠且然后在血清犬尿氨酸水平平稳时随后施用单次剂量的化合物来评估。因为犬尿氨酸池以在血清中小于10分钟的半衰期快速代谢，不预期预先存在的犬尿氨酸会过度掩盖IDO抑制剂对犬尿氨酸产生的影响。各实验可包括非LPS暴露小鼠(以测定基线犬尿氨酸水平，与其他小鼠比较)和一组仅用媒介物给药的LPS暴露小鼠(以提供IDO活化的阳性对照)。各化合物可首先在小鼠中以在至少100mg/kg范围内的单一高腹膜内单次剂量评估。血液可在确定的时间间隔(例如在化合物施用之后5分钟、15分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时和24小时，50 µL样品)收集用于犬尿氨酸及色氨酸水平(药效学分析)以及用于化合物的水平(药代动力学分析)的HPLC分析。从药代动力学数据，可测定实现的化合物的峰值血清浓度以及估计的清除率。通过比较在各个时间点相对于犬尿氨酸/色氨酸比，化合物在血清中的水平，可粗略地估计体内IDO抑制的有效IC50。可评估表现出功效的化合物以测定在峰值浓度下实现100% IDO抑制的最大剂量。
生物活性的评估
检测实施例化合物对IDO活性的抑制。实验程序和结果提供如下。
通过电穿孔用含有人IDO1 cDNA (NM 002164.2)的基于pCDNA的哺乳动物表达载体转染HEK293细胞。将它们在含有1 mg/ml G418的培养基(含10％FBS的DMEM)中培养两周。选择稳定表达人IDO1蛋白的HEK293细胞的克隆并扩增用于IDO抑制测定。
将于含有10％FBS的RPMI/无酚红培养基中的人IDO1/HEK293细胞以10,000个细胞/50μL/孔接种在384孔黑色壁透明底部组织孵育板(Matrix Technologies LLC)中。然后使用ECHO液体处理系统将100 nL的一定浓度的化合物加入到每个孔中。将细胞在具有5%CO2的37℃孵育箱中孵育20小时。
通过加入三氯乙酸(Sigma-Aldrich)至终浓度为0.2％来终止化合物处理。将细胞板在50℃下进一步孵育30分钟。将等体积的上清液(20μL)和0.2％(w/v)欧利希试剂(4-二甲基氨基苯甲醛，Sigma-Aldrich)/冰乙酸混合在新的透明底384孔板中。然后将该板在室温下孵育30分钟。在Envision读板仪上测量490 nm处的吸光度。
使用500 nM参考标准处理的计数(作为100%抑制)计算化合物IC50值，并且将无化合物但DMSO处理的计数作为0％抑制。
在基于HeLa细胞的吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)测定中评价抑制剂活性：
HeLa (ATCC® CCL-2)细胞获自ATCC®且在补充有4.5 g/L葡萄糖、4.5 g/L L-谷氨酰胺和4.5 g/L丙酮酸钠(编号10-013-CV，Corning)、2 mM L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽(编号35050-061，Gibco)、100 U/mL青霉素、100 µg/mL链霉素(编号SV30010，HyClone)和10%胎牛血清(编号SH30071.03 HyClone)的达尔伯克改良伊格尔培养基中培养。将细胞维持在在37℃下5% CO2中的增湿孵育箱中。
如下评价作为犬尿氨酸产生的函数的IDO活性：HeLa细胞以5,000个细胞/孔的密度接种于96孔培养板中且使其平衡过夜。在24小时之后，抽吸培养基且替换为含有IFNγ(编号285-IF/CF，R&D Systems)的培养基，终浓度为25 ng/mL。将各测试化合物的连续稀释液以200 µL培养基的总体积添加至细胞中。再孵育48小时之后，将170 µL上清液自各孔转移至新96孔板。将12.1 µL的6.1N 三氯乙酸(编号T0699，Sigma-Aldrich)添加至各孔中且混合，随后在65℃下孵育20分钟以将吲哚胺2,3-双加氧酶的产物N-甲酰基犬尿氨酸水解成犬尿氨酸。随后使反应混合物在500xg下离心10分钟以使沉淀物沉降。将100μL上清液自各孔转移至新96孔板。将100μl 2% (w/v)对-二甲氨基苯甲醛(编号15647-7，Sigma-Aldrich)/乙酸(编号A6283，Sigma-Aldrich)添加至各孔中，混合且在室温下孵育20分钟。通过使用SPECTRAMAX® M2e微板读取器(Molecular Devices)测量在480 nm下的吸光度和相对于L-犬尿氨酸(编号K8625，Sigma-Aldrich)标准曲线校准来测定犬尿氨酸浓度。测定在各抑制剂浓度下的活性百分比且使用非线性回归评价IC50值。
本文所述的化合物的活性在图1中提供，其中效能水平提供如下：(效能：IDO IC50：A <0.1μM；B <1μM；C <10μM)。
本文所述的化合物的活性提供在下面，其中效能水平提供如下：(效能：IDO IC50：A< 0.05 μM；B < 0.25 μM；C < 2 μM)。
IDO测定的结果如下表中所示。
Claims (18)
1.式I或式II的化合物：
其中
X是CH或N；
T是CH或N；
V是键或O；
Y是CH或N；
W是-CH-、-C(C1-C6烷基)-或N；
n是0、1、2、3或4；
L是任选被1、2或3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烯基和-C1-C6烷OC1-C6烷基的取代基取代的C1-C6亚烷基；
Z是键、-NH-或-N(C1-C6烷基)；
B是选自苯并咪唑基、咪唑并吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、三唑并吡啶基、吡唑并吡啶基、喹唑啉酮基和咪唑并哒嗪基的杂芳基，其中所述杂芳基任选被一个、两个、三个或四个独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-CN、-OC1-C6烷基、-OC1-C6卤代烷基、-COOH、-COOC1-C6烷基和二氧杂环戊基的R2取代基取代；
R1是H、卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基；
R1A是H、卤素、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基或C1-C6卤代烷基；
或其药学上可接受的盐、其立体异构体、其互变异构体或其溶剂化物。
2.权利要求1所述的化合物，其为式I的化合物。
3.权利要求1所述的化合物，其为式II的化合物。
4.前述权利要求中任一项所述的化合物，其中n是2。
5.前述权利要求中任一项所述的化合物，其中V是键。
6.权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中V是O。
7.前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Y是CH且W是CH。
8.权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中Y是N且W是CH。
9.前述权利要求中任一项所述的化合物，其中L是被一个C1-C6烷基或一个C1-C6烷OC1-C6烷基取代的C1-C2亚烷基。
10.前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Z是键。
11.权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中Z是-NH-或-N(C1-C6烷基)。
12.前述权利要求中任一项所述的化合物，其中B是
或其中B任选被一个或两个R2取代基取代。
13.前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R1是H、F或CF3。
14.前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R1A是H。
15.权利要求1所述的化合物，其为：
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
6-氟-4-((1S,4s)-4-((R)-1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹诺酮；
6-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-5H-[1,3]二氧杂环戊烯并[4',5':4,5]苯并[1,2-d]咪唑；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
6-氯-N-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)苯并[d]噻唑-2-胺；
N-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-6-甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺；
N-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)苯并[d]噻唑-2-胺；
6-氯-N-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)苯并[d]噁唑-2-胺；
N-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺；
4-(((1r,4r)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹诺酮；
4-(((1s,4s)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹诺酮；
4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)-6-氟喹啉；
4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹诺酮；
4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-3-丙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹诺酮；
(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲氧基乙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹诺酮；
(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲氧基乙基)环己基)-6-氟喹啉；
(±)-4-(((反式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)-3-丙基)环己基)氧基)喹诺酮；
4-(4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)丙基)环己基)-6-氟喹啉；
(±)-4-((顺式)-4-(1-(6-氯-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)丙基)环己基)-6-(三氟甲基)喹诺酮；
6-氯-2-(1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)-3-丙基)-1H-苯并[d]咪唑；
(±)-6-氯-2-(1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)-3-丙基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶；
(±)-6-氯-2-(2-乙氧基-1-((顺式)-4-(2-氟-3-甲基吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑；
4-((顺式)-4-((R)-1-([1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(咪唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙基)环己基)喹诺酮；
3-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)喹唑啉-4(3H)-酮；
6-氯-2-((R)-1-((顺式)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)喹唑啉-4(3H)-酮；
6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)乙基)环己基)喹诺酮；
6-氟-4-((顺式)-4-((R)-1-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)乙基)环己基)喹诺酮；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丁-3-烯-1-基)环己基)-6-氟喹啉；
(+/-)-顺式和反式-4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-3,3,3-三氟丙基)环己基)-6-氟喹啉；
(+/-)-顺式和反式-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-1,8-萘啶；
(4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-1,8-萘啶；
(+/-)-顺式和反式-6-氯-2-(1-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑；
4-(4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-1,8-萘啶；
(+/-)-顺式和反式-6-氯-2-(1-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑；
6-氯-2-(1-(4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5,6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(4,5-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(6-氯-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
6-氟-4-((1S,4s)-4-((R)-1-(4,5,6,7-四氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹诺酮；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5,6-二氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
6-氟-4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹诺酮；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(7-氯-5-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5,7-双(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)-6-氟喹啉；
6-氟-4-((1S,4s)-4-((R)-1-(5-(三氟甲氧基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)环己基)喹诺酮；
2-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈；
2-((R)-1-((1s,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酸甲酯；
4-(((1s,4s)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹诺酮；或
4-(((1s,4s)-4-(1-(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙基)环己基)氧基)喹诺酮；
或其药学上可接受的盐、其立体异构体、其互变异构体或其溶剂化物。
16.药物组合物，其包含根据权利要求1-15中任一项所述的化合物和药学上可接受的赋形剂。
17.权利要求16所述的药物组合物，其还包含YERVOY、OPDIVO或KEYTRUDA，或其组合。
18.在需要这种治疗的患者中治疗癌症的方法，包括向所述患者施用治疗有效量的权利要求1-15中任一项所述的化合物。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201662380042P | 2016-08-26 | 2016-08-26 | |
| US62/380042 | 2016-08-26 | ||
| PCT/US2017/048533 WO2018039512A1 (en) | 2016-08-26 | 2017-08-25 | Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109843293A true CN109843293A (zh) | 2019-06-04 |
Family
ID=61246258
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201780066766.1A Pending CN109843293A (zh) | 2016-08-26 | 2017-08-25 | 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11337970B2 (zh) |
| EP (1) | EP3503891A1 (zh) |
| JP (1) | JP2019528301A (zh) |
| KR (1) | KR20190040502A (zh) |
| CN (1) | CN109843293A (zh) |
| WO (1) | WO2018039512A1 (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109574988A (zh) * | 2017-12-25 | 2019-04-05 | 成都海博锐药业有限公司 | 一种化合物及其用途 |
| CN111406050A (zh) * | 2018-01-17 | 2020-07-10 | 杭州阿诺生物医药科技有限公司 | 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其用途 |
| CN111417626A (zh) * | 2017-12-05 | 2020-07-14 | 葛兰素史克知识产权开发有限公司 | 吲哚胺2,3-双加氧酶的调节剂 |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3280715B1 (en) | 2015-04-10 | 2020-11-25 | Beigene, Ltd. | NOVEL 5 OR 8-SUBSTITUTED IMIDAZO [1, 5-a]PYRIDINES AS INDOLEAMINE AND/OR TRYPTOPHANE 2, 3-DIOXYGENASES |
| CN109843322A (zh) * | 2016-08-26 | 2019-06-04 | 百时美施贵宝公司 | 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 |
| EP3515914A4 (en) | 2016-09-24 | 2020-04-15 | BeiGene, Ltd. | NEW IMIDAZO [1,5-A] PYRIDINES SUBSTITUTED IN POSITION 5 OR 8 AS INDOLEAMINE AND / OR TRYPTOPHANE 2,3-DIOXYGENASES |
| WO2018136437A2 (en) | 2017-01-17 | 2018-07-26 | Tesaro, Inc. | Compounds useful as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan dioxygenase |
| CN111655264B (zh) * | 2017-06-30 | 2023-08-15 | 百时美施贵宝公司 | 经取代的喹啉基环己基丙酰胺化合物和改进的其制备方法 |
| WO2019027855A1 (en) * | 2017-08-02 | 2019-02-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | NOVEL SUBSTITUTED PHENYL COMPOUNDS AS INHIBITORS OF INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE (IDO) |
| WO2019027856A1 (en) * | 2017-08-02 | 2019-02-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | NOVEL SUBSTITUTED PYRIDINE COMPOUNDS AS INHIBITORS OF INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE (IDO) |
| US11180497B2 (en) | 2017-10-18 | 2021-11-23 | Angex Pharmaceutical, Inc. | Cyclic compounds as immunomodulating agents |
| US11472788B2 (en) | 2017-11-25 | 2022-10-18 | Beigene, Ltd. | Benzoimidazoles as selective inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenases |
| WO2019179369A1 (zh) * | 2018-03-19 | 2019-09-26 | 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 | 含环化合物、其制备方法及其在医药上的应用 |
| CN110498769A (zh) * | 2018-05-17 | 2019-11-26 | 南京药捷安康生物科技有限公司 | Ido抑制剂与应用 |
| CN110526898A (zh) * | 2018-05-25 | 2019-12-03 | 北京诺诚健华医药科技有限公司 | 3-吲唑啉酮类化合物、其制备方法及其在医药学上的应用 |
| EP3818052A1 (en) | 2018-07-06 | 2021-05-12 | Gilead Sciences, Inc. | Therapeutic heterocyclic compounds |
| CA3104398A1 (en) | 2018-07-06 | 2020-01-09 | Gilead Sciences, Inc. | Therapeutic heterocyclic compounds |
| US11046649B2 (en) | 2018-07-17 | 2021-06-29 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Compounds useful as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan dioxygenase |
| EP3877366A4 (en) * | 2018-11-06 | 2022-08-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | NOVEL SUBSTITUTED TRICYCLIC COMPOUNDS AS INDOLAMINE-2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS |
| WO2020233677A1 (en) * | 2019-05-22 | 2020-11-26 | Beigene (Beijing) Co., Ltd. | Process for preparing amide-substituted imidazo compounds |
| CN113891880A (zh) * | 2019-05-22 | 2022-01-04 | 百济神州有限公司 | 作为吲哚胺2,3-双加氧酶的选择性抑制剂的酰胺取代的咪唑并化合物 |
| WO2022203332A1 (en) * | 2021-03-24 | 2022-09-29 | Yuhan Corporation | Novel indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors, processes for the preparation thereof and pharmaceutical compositions comprising the same |
| WO2023090850A1 (en) * | 2021-11-17 | 2023-05-25 | Yuhan Corporation | Synergic combination of 2,3-dioxygenase inhibitor and immune checkpoint inhibitor for the treatment of cancer |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1218461A (zh) * | 1996-05-10 | 1999-06-02 | 詹森药业有限公司 | 烷氨基苯并噻唑及－苯并噁唑衍生物 |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20010049379A1 (en) | 1997-08-27 | 2001-12-06 | Lowe John Adams | 2-aminopyridines containing fused ring substituents |
| US6395876B1 (en) | 1997-12-05 | 2002-05-28 | Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. | High-affinity tryptophan transporter |
| EP1613308A4 (en) | 2003-03-27 | 2008-02-20 | Lankenau Inst Medical Res | CANCER TREATMENT METHODS |
| JP4883996B2 (ja) | 2005-05-24 | 2012-02-22 | 四国化成工業株式会社 | 水溶性プレフラックス及びその利用 |
| WO2011056652A1 (en) * | 2009-10-28 | 2011-05-12 | Newlink Genetics | Imidazole derivatives as ido inhibitors |
| RU2565541C2 (ru) | 2009-12-10 | 2015-10-20 | Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг | Антитела, связывающиеся преимущественно с внеклеточным доменом 4 человеческого csf-1r, и их применение |
| MX336682B (es) | 2010-03-05 | 2016-01-27 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos contra csf-1r humanos y usos de los mismos. |
| US9169323B2 (en) | 2010-03-05 | 2015-10-27 | Hoffmann-La Roche Inc. | Antibodies against human CSF-1R |
| NZ603193A (en) | 2010-05-04 | 2014-07-25 | Five Prime Therapeutics Inc | Antibodies that bind csf1r |
| CA2853889A1 (en) | 2011-12-15 | 2013-06-20 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies against human csf-1r and uses thereof |
| RU2014136332A (ru) | 2012-02-06 | 2016-03-27 | Дженентек, Инк. | Композиции и способы применения ингибиторов csf1r |
| AR090263A1 (es) | 2012-03-08 | 2014-10-29 | Hoffmann La Roche | Terapia combinada de anticuerpos contra el csf-1r humano y las utilizaciones de la misma |
| KR20220162819A (ko) | 2012-05-11 | 2022-12-08 | 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. | 콜로니 자극 인자 1 수용체(csf1r)에 결속하는 항체들에 의한 질병 상태의 치료 방법 |
| EP2890398A4 (en) | 2012-08-31 | 2016-03-09 | Five Prime Therapeutics Inc | METHODS OF TREATING DISEASES WITH ANTIBODIES THAT BIND COLONY STIMULATING FACTOR RECEIVER 1 (CSF1R) |
| CA2921199A1 (en) * | 2013-08-27 | 2015-03-05 | Bristol-Myers Squibb Company | Ido inhibitors |
-
2017
- 2017-08-25 JP JP2019511499A patent/JP2019528301A/ja active Pending
- 2017-08-25 KR KR1020197008212A patent/KR20190040502A/ko unknown
- 2017-08-25 EP EP17844458.4A patent/EP3503891A1/en not_active Withdrawn
- 2017-08-25 WO PCT/US2017/048533 patent/WO2018039512A1/en unknown
- 2017-08-25 CN CN201780066766.1A patent/CN109843293A/zh active Pending
- 2017-08-25 US US16/328,449 patent/US11337970B2/en active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1218461A (zh) * | 1996-05-10 | 1999-06-02 | 詹森药业有限公司 | 烷氨基苯并噻唑及－苯并噁唑衍生物 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| MARI´A L. LO´PEZ-RODRI´GUEZ 等: "Benzimidazole derivatives. Part 5: Design and synthesis of new benzimidazole–arylpiperazine derivatives acting as mixed 5-HT1A/5-HT3 ligands", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY》 * |
| VARIAM ULLAS JEANKUMAR 等: "Engineering another class of anti-tubercular lead: Hit to lead optimization of an intriguing class of gyrase ATPase inhibitors", 《EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111417626A (zh) * | 2017-12-05 | 2020-07-14 | 葛兰素史克知识产权开发有限公司 | 吲哚胺2,3-双加氧酶的调节剂 |
| CN109574988A (zh) * | 2017-12-25 | 2019-04-05 | 成都海博锐药业有限公司 | 一种化合物及其用途 |
| CN109574988B (zh) * | 2017-12-25 | 2022-01-25 | 成都海博锐药业有限公司 | 一种化合物及其用途 |
| CN111406050A (zh) * | 2018-01-17 | 2020-07-10 | 杭州阿诺生物医药科技有限公司 | 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其用途 |
| CN111406050B (zh) * | 2018-01-17 | 2023-02-03 | 厦门宝太生物科技股份有限公司 | 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3503891A1 (en) | 2019-07-03 |
| JP2019528301A (ja) | 2019-10-10 |
| US11337970B2 (en) | 2022-05-24 |
| KR20190040502A (ko) | 2019-04-18 |
| US20210290613A1 (en) | 2021-09-23 |
| WO2018039512A1 (en) | 2018-03-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109843293A (zh) | 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 | |
| CN109414421A (zh) | 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 | |
| TWI680970B (zh) | 可做為ｓｕｍｏ活化酵素抑制劑之雜芳基化合物 | |
| CN109414420A (zh) | 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 | |
| CN103038233B (zh) | 吡啶酮和氮杂吡啶酮化合物及使用方法 | |
| US11066383B2 (en) | Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use | |
| CN104662024B (zh) | 酪氨酸激酶抑制剂 | |
| CN111566089A (zh) | Ire1小分子抑制剂 | |
| CN109348714A (zh) | 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 | |
| CN109415320A (zh) | 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 | |
| CN109843322A (zh) | 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法 | |
| US11649212B2 (en) | Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20190604 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |