CN109486885A - 一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法 - Google Patents
一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109486885A CN109486885A CN201710814113.9A CN201710814113A CN109486885A CN 109486885 A CN109486885 A CN 109486885A CN 201710814113 A CN201710814113 A CN 201710814113A CN 109486885 A CN109486885 A CN 109486885A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- collagen
- water
- purification
- nanoscale
- level
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 title claims abstract description 100
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 title claims abstract description 100
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 title claims abstract description 98
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims abstract description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 67
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 239000011812 mixed powder Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 29
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 26
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 24
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 23
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 20
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 claims description 16
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 16
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 14
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 12
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 claims description 12
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 12
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 12
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 12
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 claims description 10
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 10
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 8
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 6
- 230000029087 digestion Effects 0.000 claims description 6
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 6
- 239000013535 sea water Substances 0.000 claims description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 6
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 5
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 5
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 5
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims description 3
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 3
- 241000726221 Gemma Species 0.000 claims description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 3
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 3
- 241000505673 Scintilla Species 0.000 claims description 3
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims description 3
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 3
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 claims description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 3
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 3
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000005360 mashing Methods 0.000 claims description 3
- 239000003595 mist Substances 0.000 claims description 3
- 238000011022 operating instruction Methods 0.000 claims description 3
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims description 3
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 239000011435 rock Substances 0.000 claims description 3
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 claims description 3
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 claims 9
- 102000010637 Aquaporins Human genes 0.000 claims 1
- 108010063290 Aquaporins Proteins 0.000 claims 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 6
- DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N Estrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N 0.000 abstract description 4
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 abstract description 4
- 239000002002 slurry Substances 0.000 abstract description 4
- DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N (+)-estrone Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- PROQIPRRNZUXQM-UHFFFAOYSA-N (16alpha,17betaOH)-Estra-1,3,5(10)-triene-3,16,17-triol Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(C(O)C4)O)C4C3CCC2=C1 PROQIPRRNZUXQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- GCKMFJBGXUYNAG-UHFFFAOYSA-N 17alpha-methyltestosterone Natural products C1CC2=CC(=O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C)(O)C1(C)CC2 GCKMFJBGXUYNAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- GCKMFJBGXUYNAG-HLXURNFRSA-N Methyltestosterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@](C)(O)[C@@]1(C)CC2 GCKMFJBGXUYNAG-HLXURNFRSA-N 0.000 abstract description 2
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 abstract description 2
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 abstract description 2
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 abstract description 2
- 229960001348 estriol Drugs 0.000 abstract description 2
- PROQIPRRNZUXQM-ZXXIGWHRSA-N estriol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H]([C@H](O)C4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 PROQIPRRNZUXQM-ZXXIGWHRSA-N 0.000 abstract description 2
- 229960003399 estrone Drugs 0.000 abstract description 2
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 abstract description 2
- 229960001566 methyltestosterone Drugs 0.000 abstract description 2
- NXFQHRVNIOXGAQ-YCRREMRBSA-N nitrofurantoin Chemical class O1C([N+](=O)[O-])=CC=C1\C=N\N1C(=O)NC(=O)C1 NXFQHRVNIOXGAQ-YCRREMRBSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 abstract description 2
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 abstract description 2
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 abstract 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 abstract 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 abstract 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 abstract 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 19
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 2
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 2
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 2
- 230000008676 import Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001086826 Branta bernicla Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 102000034240 fibrous proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005899 fibrous proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 238000005461 lubrication Methods 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 230000009103 reabsorption Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/36—Extraction; Separation; Purification by a combination of two or more processes of different types
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明公开了一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，包括如下步骤：将鱼皮粉碎、去除杂质；将粉碎物置于低温搅拌机中，按照粉碎物与无离子水体积比为1:3的比例进行搅拌混合30分钟，静止10分钟后除去上层浮物，然后置于过滤装置中，进行吸附过滤；收集过滤后的粉碎物，进行第一次提纯、第二次分解和第三次提纯，同时，经过三次提纯和粒子对撞仪得到的纳米级胶原蛋白，经过SGS和PUNY质检检测，达到无雌酮、无氯霉素、无孕酮、无沙门氏菌、无甲基睾酮、无呋喃妥因代谢物、无脂肪、无雌二醇、无无雌三醇，且本发明将鱼皮进行处理后获得的浆液用于进行胶原蛋白的提取，能够明显增加胶原蛋白的提纯率和纯度；再经过纳米级胶原蛋白提纯设备提纯之后得到纳米级混合粉，最后将其经过粒子对撞仪对撞之后得到分子量均匀的纳米级胶原蛋白，其吸收率可以达到96%。
Description
技术领域
本发明涉及胶原蛋白提纯方法技术领域，具体为一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法。
背景技术
胶原蛋白是一种生物性高分子物质，英文学名Collagen。在动物细胞中扮演结合组织的角色。为生物科技产业最具关键性的原材料之一，也是需求量十分庞大的最佳生医材料。其应用领域包括生医材料、化妆品、食品工业、研究用途等。胶原蛋白是一种细胞外蛋白质，它是由3条肽链拧成螺旋形的纤维状蛋白质，胶原蛋白是人体内含量最丰富的蛋白质，世界胶原蛋白之父布兰特（J·Brandt）博士断言：“人体衰老的过程就是胶原蛋白流失的过程！”胶原蛋白占全身总蛋白质的30%以上。胶原蛋白富含人体需要的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸等氨基酸。胶原蛋白是细胞外基质中最重要的组成部分；胶原蛋白是生物大分子，动物结缔组织中的主要成分，也是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白，占蛋白质总量的25％-30％。与组织的形成、成熟、细胞间信息的传递，以及关节润滑、伤口愈合、钙化作用、血液凝固和衰老等有着密切的关系。胶原蛋白肽广泛用于食品、化妆品、保健品行业，以往胶原蛋白肽的制备原料主要来源于陆生动物的骨骼和皮。
胶原蛋白是人体内含量最丰富的蛋白质，占全身总蛋白质的30%以上。胶原蛋白富含人体需要的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸等氨基酸。胶原蛋白是细胞外基质中最重要的组成部分。由于胶原蛋白具有紧肤平皱、保湿滋润、修复组织、美白淡斑等功效，一直被人们食用。特别是其中达到纳米级的胶原蛋白还可以被用于临床医疗领域。胶原蛋白一般在畜类、家畜类的皮肤中存在，但高品级的胶原蛋白均采用鱼皮中提取的鱼胶原蛋白，目前现有常规方法的制备胶原蛋白受工艺条件主要为酶解和水解两大手艺，由于提纯精度不够，而且提纯率较低，故而通过这两种方式提取出来的胶原蛋白中杂质较多，严重影响了胶原蛋白的质量，其分子量只能达到小分子级别。小分子级别的胶原蛋白经过分解之后再吸收率上，能够到达30%左右。高品质的胶原蛋白原料主要来源于鱼皮，而随着海洋的污染，高品质的鱼胶原蛋白原料供应降低，所以一种吸收率高的胶原蛋白称为当前胶原蛋白市场上最强烈的技术需求，不仅能够满足民用领域，而且能用于更高端和专业的医用领域。
发明内容
本发明提供一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，采用两次蛋白质分解，两次膜分离相结合的方式，得到的胶原蛋白分子量小，而且经过人体代谢消化后吸收率能够达到96%左右，比普通的小分子胶原蛋白30%左右的吸收率有巨大的提升。本发明操作容易，经过本发明工艺将鱼皮进行处理后获得的浆液用于进行胶原蛋白的提取，能够明显增加胶原蛋白的提纯率和纯度；提纯率可以达到96%，得到的纳米级胶原蛋白可以达到达到无雌酮、无氯霉素、无孕酮、无沙门氏菌、无甲基睾酮、无呋喃妥因代谢物、无脂肪、无雌二醇、无无雌三醇的品质级别，且用本专利之提纯方式提纯胶原蛋白具有提取材料使用效率高，吸收率高、生产成本性价比高、胶原蛋白纯度好的优点，可以有效解决上述背景技术中的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，包括如下步骤：
1）粉碎：先对鱼皮进行精华检测，即分为抗生素检测、重金属残留检测、雌性激素检测和动物源毒素残留检测，然后将鱼皮加入超纯水浸泡，直到含有胶原蛋白的原料冻成松散的组织颗粒，用玻璃棒搅拌均匀，成糊状；将糊状的组织颗粒再加入10倍体积的超纯水，按组织捣碎机的操作规程匀浆3次，至完全悬浮；将组织颗粒绞碎均匀后加入超纯水至组织的含量为25克／升，混匀；加冰醋酸至组织悬浮液，调制溶液浓度0.5毫克/毫升；消化：称取胃蛋白酶，将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后转入到组织悬浮液至0.1mg/ml，即每100ml匀浆中加入1ml的胃蛋白酶溶液，混匀，室温消化7-10天；
2）去除杂质：将粉碎物置于低温搅拌机中，按照粉碎物与无离子水体积比为1:3的比例进行搅拌混合30分钟；静止10分钟后除去上层浮物，然后置于过滤装置中，进行吸附过滤，收集过滤后的粉碎物；
3）第一次分解：中第一次分解包括以下步骤：将步骤2)中的粉碎物与水以体积比为1:3的比例混合得混合物，并将温度调节至30℃，温度pH为7；将含有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的培养液以体积比2:1的比例搅拌混合5分钟，加入到混合物中；匀速搅拌，在温度30℃，pH为7下保持24小时；混合液置入高速离心机中的离心罐中，离心15分钟，静止沉淀10分钟；将上述混合物进行提纯，提取纯方法采用膜分离法，采用3000Da和1000Da的超滤膜截留离心后的上清液，分离得到3000Da-1000Da的胶原蛋白肽组分；置于真空过滤装置中，抽滤，干燥，灭菌；
4）第二次分解：将第一次分解获得的产物与水以体积比为60：40的比例混合，在35℃温度下恒温搅拌30分钟；按胶原蛋白原料重量的0.5％向混合液中加入胰蛋白酶，按胶原蛋白原料重量的5％加入聚二乙醇，继续搅拌10分钟；调节pH值为7-8，37℃，反应8小时；迅速加热至45℃，终结酶活；混合液放入高速离心机中的离心罐中，离心15分钟；将上述混合物进行提纯，提取纯方法采用膜分离法，采用1000Da的超滤膜截留离心后的上清液，分离得到1000Da以下的胶原蛋白肽组分；
5）第一次提纯：在上述步骤中得到的1000Da以下的胶原蛋白肽组分加入阴离子交换树脂，搅拌浸泡3-3.5h,让树脂完全吸附料液的色素和腥味；用层析柱将料液和树脂分离；杀菌，杀菌后过滤，将料液通过超滤膜分离装置过滤，得超滤透析液；离心提纯：将透析后的溶液高速冷冻离心，最后通过微分子对撞工艺进行最后的提纯，所得沉淀为最后纯化的胶原蛋白。
6）第二次提纯：再将最后纯化后的胶原蛋白，经过一种纳米级胶原蛋白提纯设备（我公司专利设备）提纯之后得到纳米级混合粉。
7）纳米级混料进行对撞：将混合的纳米级胶原蛋白粉，置于粒子对撞仪中，进行对撞，最终得到分子量比较品均的纳米级胶原蛋白。
根据上述技术方案，所述的吸附过滤具体为用配置好的10MNaOH标准溶液调节消化液pH至9-9.5，静置过夜，灭活胃蛋白酶；调节pH值：消化液中加入等体积的超纯水,并用浓盐酸调节pH到4.0，搅拌2小时；清洗硅藻土：根据调节pH值后的消化液体积，按浓度为15g/L称取硅藻土，将硅藻土用10mMHCl浸泡2小时，用超纯水清洗数次；吸附过滤：加硅藻土至消化液，混匀，静置2小时；将滤纸置于过滤器中，把过滤器和循环卫生泵用硅胶管连接紧密，按过滤器和循环卫生泵的标准操作规程进行过滤，滤除硅藻土，得消化过滤液。
根据上述技术方案，所述步骤5）提纯过后需要进行干燥，且干燥的方法为为冷冻干燥，干燥时间为24-36小时。
根据上述技术方案，所述超纯水的制备方法为：包括一级淡化过程和二级淡化过程；所述一级淡化过程中，热媒介质由热媒进口进入，经第二换热通道的下部通道，与第二换热通道的各换热板片热交换后从热媒出口排出，待淡化的海水从冷水进水管经集流通道一分别流入第一换热通道，海水在第一换热通道内与换热板片热交换后，初步预热，经布液成膜装置在第一换热通道下部的换热板表面均匀布液成膜，并与经热媒介质加热的换热板片加热，逐渐蒸发生成水蒸汽，未蒸发的浓水流入浓水存贮空间，定期排出，水蒸汽从下方开口经连通腔和捕沫网，向上部的蒸汽空间聚集，不凝汽体定期从不凝汽体排放口排出，其余的水蒸汽从第二换热通道的上方开口进入第二换热通道的上部通道，水蒸汽在第二换热通道的上部通道内与第二换热通道的板片热交换而冷凝成一级淡化水，汇集在集流通道三内定期经一级淡水口排出；所述二级淡化过程中，经一级淡化的一级淡水从二级进水口进入超纯水室一和超纯水室二，同时阴极水室、阳极水室和浓水室的进水口与一级淡水系统的浓水排放口连接，超纯水室内，一级淡水中的阴离子和阳离子杂质经阴极电极、阳极电极、阴离子膜和阳离子膜吸附和选择性渗透作用下，逐渐净化为二级超纯水，定期从超纯水出口排出，阴极水室、阳极水室和浓水室的浓水定期从各自的出口排出。
根据上述技术方案，所述步骤3）中灭菌时的温度为180-200℃。
根据上述技术方案，所述步骤1）含有胶原蛋白的原料为鱼真皮组织。
根据上述技术方案，所述步骤1）中玻璃棒搅拌时的速度为300r/min。
根据上述技术方案，所述步骤1）中玻璃棒搅拌时的速度为300r/min。
根据上述技术方案，所述步骤1）中粒子对撞机的压力为0.06Mpa。
与现有技术相比，本发明的有益效果：采用两次蛋白质分解，两次膜分离相结合的方式，制造成本低、胶原蛋白分子量小；操作容易，经过本发明工艺将鱼皮进行处理后获得的浆液用于进行胶原蛋白的提取，能够明显增加胶原蛋白的提纯率和纯度；得到的纳米级胶原蛋白可以达到无抗生素、无重金属残留、无雌性激素和无动物源毒素残留，且与小分子级别纳米胶原蛋白品均吸收率30%相比，本提纯方法得到的纳米级胶原蛋白吸收率可以达到96%。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。
在附图中：
图1为本发明的制备流程图。
具体实施方式
以下结合附图对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例：如图1所示，本发明提供一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，包括如下步骤：
1）粉碎：先对鱼皮进行精华检测，即分为抗生素检测、重金属残留检测、雌性激素检测和动物源毒素残留检测，然后将鱼皮加入超纯水浸泡，直到含有胶原蛋白的原料冻成松散的组织颗粒，用玻璃棒搅拌均匀，成糊状；将糊状的组织颗粒再加入10倍体积的超纯水，按组织捣碎机的操作规程匀浆3次，至完全悬浮；将组织颗粒绞碎均匀后加入超纯水至组织的含量为25克／升，混匀；加冰醋酸至组织悬浮液，调制溶液浓度0.5毫克/毫升；消化：称取胃蛋白酶，将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后转入到组织悬浮液至0.1mg/ml，即每100ml匀浆中加入1ml的胃蛋白酶溶液，混匀，室温消化7-10天；
2）去除杂质：将粉碎物置于低温搅拌机中，按照粉碎物与无离子水体积比为1:3的比例进行搅拌混合30分钟；静止10分钟后除去上层浮物，然后置于过滤装置中，进行吸附过滤，收集过滤后的粉碎物；
3）第一次分解：中第一次分解包括以下步骤：将步骤2)中的粉碎物与水以体积比为1:3的比例混合得混合物，并将温度调节至30℃，温度pH为7；将含有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的培养液以体积比2:1的比例搅拌混合5分钟，加入到混合物中；匀速搅拌，在温度30℃，pH为7下保持24小时；混合液置入高速离心机中的离心罐中，离心15分钟，静止沉淀10分钟；将上述混合物进行提纯，提取纯方法采用膜分离法，采用3000Da和1000Da的超滤膜截留离心后的上清液，分离得到3000Da-1000Da的胶原蛋白肽组分；置于真空过滤装置中，抽滤，干燥，灭菌；
4）第二次分解：将第一次分解获得的产物与水以体积比为60：40的比例混合，在35℃温度下恒温搅拌30分钟；按胶原蛋白原料重量的0.5％向混合液中加入胰蛋白酶，按胶原蛋白原料重量的5％加入聚二乙醇，继续搅拌10分钟；调节pH值为7-8，37℃，反应8小时；迅速加热至45℃，终结酶活；混合液放入高速离心机中的离心罐中，离心15分钟；将上述混合物进行提纯，提取纯方法采用膜分离法，采用1000Da的超滤膜截留离心后的上清液，分离得到1000Da以下的胶原蛋白肽组分；
5）第一次提纯：在上述步骤中得到的1000Da以下的胶原蛋白肽组分加入阴离子交换树脂，搅拌浸泡3-3.5h,让树脂完全吸附料液的色素和腥味；用层析柱将料液和树脂分离；杀菌，杀菌后过滤，将料液通过超滤膜分离装置过滤，得超滤透析液；离心提纯：将透析后的溶液高速冷冻离心，最后通过微分子对撞工艺进行最后的提纯，所得沉淀为最后纯化的胶原蛋白。
6）第二次提纯：再将最后纯化后的胶原蛋白，经过一种纳米级胶原蛋白提纯设备（我公司专利设备）提纯之后得到纳米级混合粉。
7）纳米级混料进行对撞：将混合的纳米级胶原蛋白粉，置于粒子对撞仪中，进行对撞，最终得到分子量比较品均的纳米级胶原蛋白。
根据上述技术方案，所述的吸附过滤具体为用配置好的10MNaOH标准溶液调节消化液pH至9-9.5，静置过夜，灭活胃蛋白酶；调节pH值：消化液中加入等体积的超纯水,并用浓盐酸调节pH到4.0，搅拌2小时；清洗硅藻土：根据调节pH值后的消化液体积，按浓度为15g/L称取硅藻土，将硅藻土用10mMHCl浸泡2小时，用超纯水清洗数次；吸附过滤：加硅藻土至消化液，混匀，静置2小时；将滤纸置于过滤器中，把过滤器和循环卫生泵用硅胶管连接紧密，按过滤器和循环卫生泵的标准操作规程进行过滤，滤除硅藻土，得消化过滤液。
根据上述技术方案，所述步骤5）提纯过后需要进行干燥，且干燥的方法为为冷冻干燥，干燥时间为24-36小时。
根据上述技术方案，所述超纯水的制备方法为：包括一级淡化过程和二级淡化过程；所述一级淡化过程中，热媒介质由热媒进口进入，经第二换热通道的下部通道，与第二换热通道的各换热板片热交换后从热媒出口排出，待淡化的海水从冷水进水管经集流通道一分别流入第一换热通道，海水在第一换热通道内与换热板片热交换后，初步预热，经布液成膜装置在第一换热通道下部的换热板表面均匀布液成膜，并与经热媒介质加热的换热板片加热，逐渐蒸发生成水蒸汽，未蒸发的浓水流入浓水存贮空间，定期排出，水蒸汽从下方开口经连通腔和捕沫网，向上部的蒸汽空间聚集，不凝汽体定期从不凝汽体排放口排出，其余的水蒸汽从第二换热通道的上方开口进入第二换热通道的上部通道，水蒸汽在第二换热通道的上部通道内与第二换热通道的板片热交换而冷凝成一级淡化水，汇集在集流通道三内定期经一级淡水口排出；所述二级淡化过程中，经一级淡化的一级淡水从二级进水口进入超纯水室一和超纯水室二，同时阴极水室、阳极水室和浓水室的进水口与一级淡水系统的浓水排放口连接，超纯水室内，一级淡水中的阴离子和阳离子杂质经阴极电极、阳极电极、阴离子膜和阳离子膜吸附和选择性渗透作用下，逐渐净化为二级超纯水，定期从超纯水出口排出，阴极水室、阳极水室和浓水室的浓水定期从各自的出口排出。
根据上述技术方案，所述步骤3）中灭菌时的温度为180-200℃。
根据上述技术方案，所述步骤1）含有胶原蛋白的原料为鱼真皮组织。
根据上述技术方案，所述步骤1）中玻璃棒搅拌时的速度为300r/min。
根据上述技术方案，所述步骤1）中玻璃棒搅拌时的速度为300r/min。
根据上述技术方案，所述步骤1）中粒子对撞机的压力为0.06Mpa。
基于上述，本发明的优点在于，采用两次蛋白质分解，两次膜分离相结合的方式，制造成本低、胶原蛋白分子量小；操作容易，经过本发明工艺将鱼皮进行处理后获得的浆液用于进行胶原蛋白的提取，能够明显增加胶原蛋白的提纯率和纯度；提纯率可以达到96%，得到的纳米级胶原蛋白可以达到无抗生素、无重金属残留、无雌性激素和无动物源毒素残留，且具有提取材料利用率高，收率高、生产成本低、胶原蛋白纯度好，提取工艺简单的优点。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，其特征在于：包括如下步骤：
1）粉碎：先对鱼皮进行精华检测，即分为抗生素检测、重金属残留检测、雌性激素检测和动物源毒素残留检测，然后将鱼皮加入超纯水浸泡，直到含有胶原蛋白的原料冻成松散的组织颗粒，用玻璃棒搅拌均匀，成糊状；将糊状的组织颗粒再加入10倍体积的超纯水，按组织捣碎机的操作规程匀浆3次，至完全悬浮；将组织颗粒绞碎均匀后加入超纯水至组织的含量为25克／升，混匀；加冰醋酸至组织悬浮液，调制溶液浓度0.5毫克/毫升；消化：称取胃蛋白酶，将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后转入到组织悬浮液至0.1mg/ml，即每100ml匀浆中加入1ml的胃蛋白酶溶液，混匀，室温消化7-10天；
2）去除杂质：将粉碎物置于低温搅拌机中，按照粉碎物与无离子水体积比为1:3的比例进行搅拌混合30分钟；静止10分钟后除去上层浮物，然后置于过滤装置中，进行吸附过滤，收集过滤后的粉碎物；
3）第一次分解：中第一次分解包括以下步骤：将步骤2)中的粉碎物与水以体积比为1:3的比例混合得混合物，并将温度调节至30℃，温度pH为7；将含有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的培养液以体积比2:1的比例搅拌混合5分钟，加入到混合物中；匀速搅拌，在温度30℃，pH为7下保持24小时；混合液置入高速离心机中的离心罐中，离心15分钟，静止沉淀10分钟；将上述混合物进行提纯，提取纯方法采用膜分离法，采用3000Da和1000Da的超滤膜截留离心后的上清液，分离得到3000Da-1000Da的胶原蛋白肽组分；置于真空过滤装置中，抽滤，干燥，灭菌；
4）第二次分解：将第一次分解获得的产物与水以体积比为60：40的比例混合，在35℃温度下恒温搅拌30分钟；按胶原蛋白原料重量的0.5％向混合液中加入胰蛋白酶，按胶原蛋白原料重量的5％加入聚二乙醇，继续搅拌10分钟；调节pH值为7-8，37℃，反应8小时；迅速加热至45℃，终结酶活；混合液放入高速离心机中的离心罐中，离心15分钟；将上述混合物进行提纯，提取纯方法采用膜分离法，采用1000Da的超滤膜截留离心后的上清液，分离得到1000Da以下的胶原蛋白肽组分；
5）第一次提纯：在上述步骤中得到的1000Da以下的胶原蛋白肽组分加入阴离子交换树脂，搅拌浸泡3-3.5h,让树脂完全吸附料液的色素和腥味；用层析柱将料液和树脂分离；杀菌，杀菌后过滤，将料液通过超滤膜分离装置过滤，得超滤透析液；离心提纯：将透析后的溶液高速冷冻离心，最后通过微分子对撞工艺进行最后的提纯，所得沉淀为最后纯化的胶原蛋白；
6）第二次提纯：再将最后纯化后的胶原蛋白，经过一种纳米级胶原蛋白提纯设备（我公司专利设备）提纯之后得到纳米级混合粉；
7）纳米级混料进行对撞：将混合的纳米级胶原蛋白粉，置于粒子对撞仪中，进行对撞，最终得到分子量比较品均的纳米级胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，其特征在于：所述的吸附过滤具体为用配置好的10MNaOH标准溶液调节消化液pH至9-9.5，静置过夜，灭活胃蛋白酶；调节pH值：消化液中加入等体积的超纯水,并用浓盐酸调节pH到4.0，搅拌2小时；清洗硅藻土：根据调节pH值后的消化液体积，按浓度为15g/L称取硅藻土，将硅藻土用10mMHCl浸泡2小时，用超纯水清洗数次；吸附过滤：加硅藻土至消化液，混匀，静置2小时；将滤纸置于过滤器中，把过滤器和循环卫生泵用硅胶管连接紧密，按过滤器和循环卫生泵的标准操作规程进行过滤，滤除硅藻土，得消化过滤液。
3.根据权利要求1所述的一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，其特征在于：所述步骤5）提纯过后需要进行干燥，且干燥的方法为为冷冻干燥，干燥时间为24-36小时。
4.根据权利要求1所述的一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，其特征在于：所述超纯水的制备方法为：包括一级淡化过程和二级淡化过程；所述一级淡化过程中，热媒介质由热媒进口进入，经第二换热通道的下部通道，与第二换热通道的各换热板片热交换后从热媒出口排出，待淡化的海水从冷水进水管经集流通道一分别流入第一换热通道，海水在第一换热通道内与换热板片热交换后，初步预热，经布液成膜装置在第一换热通道下部的换热板表面均匀布液成膜，并与经热媒介质加热的换热板片加热，逐渐蒸发生成水蒸汽，未蒸发的浓水流入浓水存贮空间，定期排出，水蒸汽从下方开口经连通腔和捕沫网，向上部的蒸汽空间聚集，不凝汽体定期从不凝汽体排放口排出，其余的水蒸汽从第二换热通道的上方开口进入第二换热通道的上部通道，水蒸汽在第二换热通道的上部通道内与第二换热通道的板片热交换而冷凝成一级淡化水，汇集在集流通道三内定期经一级淡水口排出；所述二级淡化过程中，经一级淡化的一级淡水从二级进水口进入超纯水室一和超纯水室二，同时阴极水室、阳极水室和浓水室的进水口与一级淡水系统的浓水排放口连接，超纯水室内，一级淡水中的阴离子和阳离子杂质经阴极电极、阳极电极、阴离子膜和阳离子膜吸附和选择性渗透作用下，逐渐净化为二级超纯水，定期从超纯水出口排出，阴极水室、阳极水室和浓水室的浓水定期从各自的出口排出。
5.根据权利要求1所述的一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，其特征在于：所述步骤3）中灭菌时的温度为180-200℃。
6.根据权利要求1所述的一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，其特征在于：所述步骤1）含有胶原蛋白的原料为鱼真皮组织。
7.根据权利要求1所述的一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法，其特征在于：所述步骤1）中玻璃棒搅拌时的速度为300r/min。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710814113.9A CN109486885A (zh) | 2017-09-09 | 2017-09-09 | 一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法 |
| KR1020180101860A KR20190028633A (ko) | 2017-09-09 | 2018-08-29 | 일종 흡수율이 96%에 달하는 나노급 콜라겐 정제 방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710814113.9A CN109486885A (zh) | 2017-09-09 | 2017-09-09 | 一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109486885A true CN109486885A (zh) | 2019-03-19 |
Family
ID=65687775
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710814113.9A Pending CN109486885A (zh) | 2017-09-09 | 2017-09-09 | 一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20190028633A (zh) |
| CN (1) | CN109486885A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111036375A (zh) * | 2019-12-17 | 2020-04-21 | 沃菲生态环境科技有限公司 | 纳米级微晶材料制备方法 |
| CN112813127A (zh) * | 2021-04-08 | 2021-05-18 | 日照岚山生化制品有限公司 | 一种硫酸软骨素超滤废液制备胶原蛋白肽的方法 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113603768B (zh) * | 2021-07-14 | 2024-01-23 | 烟台德胜海洋生物科技有限公司 | 一种鱼源胶原蛋白的制备方法 |
| CN117466993B (zh) * | 2023-12-28 | 2024-03-08 | 山东鑫日海食品有限公司 | 深海鱼胶原蛋白肽的膜过滤提纯方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104628066A (zh) * | 2014-12-26 | 2015-05-20 | 巴布科克环境工程江苏有限公司 | 一种超纯水制备装置及其超纯水制备方法 |
| CN105063148A (zh) * | 2015-08-27 | 2015-11-18 | 长春博泰医药生物技术有限责任公司 | 胶原蛋白的制备方法 |
| CN105753971A (zh) * | 2016-04-11 | 2016-07-13 | 马鞍山中粮生物化学有限公司 | 一种胶原蛋白的提取方法 |
| CN105985996A (zh) * | 2015-02-14 | 2016-10-05 | 上海拜瑞曼克生物科技有限公司 | 一种胶原蛋白的制备方法 |
-
2017
- 2017-09-09 CN CN201710814113.9A patent/CN109486885A/zh active Pending
-
2018
- 2018-08-29 KR KR1020180101860A patent/KR20190028633A/ko not_active Application Discontinuation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104628066A (zh) * | 2014-12-26 | 2015-05-20 | 巴布科克环境工程江苏有限公司 | 一种超纯水制备装置及其超纯水制备方法 |
| CN105985996A (zh) * | 2015-02-14 | 2016-10-05 | 上海拜瑞曼克生物科技有限公司 | 一种胶原蛋白的制备方法 |
| CN105063148A (zh) * | 2015-08-27 | 2015-11-18 | 长春博泰医药生物技术有限责任公司 | 胶原蛋白的制备方法 |
| CN105753971A (zh) * | 2016-04-11 | 2016-07-13 | 马鞍山中粮生物化学有限公司 | 一种胶原蛋白的提取方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 潘卫三: "《工业药剂学》", 31 August 2015, 中国医药科技出版 * |
| 胡建平: "《鱼胶原蛋白的开发与应用》", 31 March 2014, 四川大学出版社 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111036375A (zh) * | 2019-12-17 | 2020-04-21 | 沃菲生态环境科技有限公司 | 纳米级微晶材料制备方法 |
| CN112813127A (zh) * | 2021-04-08 | 2021-05-18 | 日照岚山生化制品有限公司 | 一种硫酸软骨素超滤废液制备胶原蛋白肽的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20190028633A (ko) | 2019-03-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109486885A (zh) | 一种吸收率达到96%的纳米级胶原蛋白提纯方法 | |
| CN104531817B (zh) | 一种透明质酸、硫酸软骨素、胶原蛋白肽、骨粉饲料和肥皂联产的方法 | |
| CN105586379B (zh) | 一种具有抑制癌细胞增殖作用的胶原蛋白活性肽的制备方法 | |
| CN101061827B (zh) | 从鱼皮、鱼骨中酶法制取鱼胶原肽的工业生产方法 | |
| KR101531479B1 (ko) | 의료용 재료로 사용하기 위한 고농도 콜라겐 제조방법 | |
| CN101603038B (zh) | 一种溶菌酶的制备方法 | |
| US20180258147A1 (en) | Pearl protein preparation method and a water-soluble pearl protein and acid-soluble pearl protein obtained by adopting this method | |
| CN105969830A (zh) | 一种从猪皮中提取活性胶原蛋白肽的方法 | |
| US20190022590A1 (en) | Device for separation and purification of collagen type 2 in chicken bones | |
| CN104745664B (zh) | 一种动物胎盘提取物的制备工艺 | |
| CN109371092A (zh) | 一种胶原蛋白肽的制备方法 | |
| CN107365824A (zh) | 一种水解鱼胶原蛋白肽粉的制备方法 | |
| CN110357978A (zh) | 一种硒化卡拉胶的制备方法 | |
| CN107674905A (zh) | 螺旋藻活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN105985996A (zh) | 一种胶原蛋白的制备方法 | |
| CN108203566A (zh) | 一种碱法制备药用明胶的工艺 | |
| CN106119328A (zh) | 一种适合工业化生产的优质虾低聚肽粉制备方法 | |
| CN101480216A (zh) | 一种从西瓜或打瓜中提取复合氨基酸的方法 | |
| CN109021095A (zh) | 一种高纯度无腥味藻蓝色素及其制备方法与应用 | |
| CN108179167A (zh) | 一种林蛙体蛋白低聚肽的工业化生产工艺 | |
| KR20150078870A (ko) | 콜라겐 제조방법 | |
| KR20140091435A (ko) | 고농도 콜라겐 제조방법 | |
| CN107188988A (zh) | 一种生物医用海藻酸钠的纯化方法 | |
| CN112176017A (zh) | 从海参肠中高效提取蛋白肽的方法 | |
| CN106434781B (zh) | 一种l-谷氨酰胺发酵法清洁生产工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190319 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |