CN108593633A - 一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，包括塑料卡片纸及粘贴于塑料卡片纸一端的试纸块；所述试纸块上浸渍有酶显色剂溶液。该检测试纸通过在塑料卡片纸一端粘贴浸渍有酶显色剂溶液的试纸块制成；工艺简单，成本低，利于大规模投产。此外，由于检测过程主要基于偶联终点比色法的显色反应原理实现尿酸浓度的半定量检测，在35 ℃条件下稳定性良好，便于患者自主携带进行尿酸监控，利于患者及时发现病情，选择最佳治疗时机。该检测试纸同样适用于尿液尿酸的监控。
Description
技术领域
本发明涉及尿酸检测试纸，特别涉及一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸。该检测试纸基于偶联终点比色法的显色反应原理制成，能够快速半定量检测来自唾液中尿酸的浓度。
背景技术
近年来随着我国经济飞速发展，生活水平的提高，饮食结构也发生了明显变化，蛋白质及富含嘌呤成分的食物摄入量增大，高尿酸血症的患病率逐年升高，高尿酸肾病的患病率也随之增加。国内外众多研究证实高尿酸血症与痛风、心血管疾病、代谢综合征、高血压及肾脏疾病的发生密切相关，是这些疾病发生发展的独立危险因素。因此，重视尿酸的检测，对于及时预防上述疾病，采取相应治疗措施具有非常重要的意义。目前检测尿酸浓度的方法主要是医院用全自动生化分析仪检测；该检测为有创采血，患者不易接受，特别是需要动态检测尿酸患者更是无法难以检测。尿酸浓度的检测也可以通过尿酸检测试纸配合电生化设备完成，但是这种方法对肾病综末期无尿患者效果不好，且价格昂贵。
根据国外文献报导，由于唾液的来源、成份、功能与其它器官存在互相作用关系，唾液分析已经成为诊断疾病最重要的诊断途径之一。唾液作为一种诊断液，有着比血清更独特的优势，如无创、患者更容易接受、唾液里面很多成分与血液有着极佳的相关性、能降低疾病感染的潜在风险等。唾液尿酸水平可以反映血液中相应物质的变化，并具有很好的相关性。J. Zhao科研团队得出唾液尿酸与血清尿酸的比值为0.83±0.11，这为唾液尿酸检测提供了最重要的理论依据。专利CN IO5445449A提供了一种由固相尿酸一载体蛋白和羊抗兔IgG多克隆抗体的硝酸纤维素膜、吸附有胶体金标记抗尿酸抗体的玻璃纤维、样品垫、吸水纸等其它辅料粘贴制成的纸芯片，其优点在于结构新颖，特异性强，能快速半定量检测唾液尿酸含量；但是制作工艺难度大，不易大规模投产。专利CN 206292240U提出了能够方便快速检测多指标的高通量检测试纸，只需一滴血样品就可以快速测出血液中的多项生理指标，但该试纸必须与微型手持式仪器联用才能实现。
发明内容
针对现阶段尿酸检测过程复杂、有创且价格昂贵等不足，本发明提供了一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，该检测试纸包含浸渍有酶显色剂溶液的试纸块，一旦尿酸与试纸块接触，试纸块上的酶显色剂溶液便会与尿酸反应，根据偶联终点比色法显色反应原理生成醌亚胺化合物，醌亚胺化合物颜色浓度的深浅与尿酸含量成正比关系，又因唾液尿酸浓度与血清尿酸浓度的相关性关系，因此便可通过试纸块颜色变化，进一步判断血清尿酸浓度，为监控健康提供更安全、经济、便捷的手段。
一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，包括塑料卡片纸及粘贴于塑料卡片纸一端的试纸块，所述试纸块上浸渍有酶显色剂溶液。
进一步的，所述酶显色剂溶液包括尿酸酶、辣根过氧化氢酶、4-氨基替比林、3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸（TBHBA）和2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶。
进一步的，所述酶显色剂溶液还包括胆红素氧化酶。
进一步的，所述酶显色剂溶液还包括明胶溶液，所述明胶溶液的浓度为1.6 mg/mL-2.0 mg/mL。
进一步的，所述酶显色剂溶液中各成分浓度如下：
尿酸酶浓度为0.15 KU/L-0.3 KU/L；
辣根过氧化氢酶浓度为2.0 KU/L-3.5 KU/L；
4-氨基替比林浓度为100 mg/L；
3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为4 g/L-6 g/L；
2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.5 g/L-2 g/L；
胆红素氧化酶的浓度为0.05 g/L-0.2 g/L；
明胶溶液为0.5 mL。
进一步的，所述酶显色剂溶液采用硼酸盐标准缓冲溶液作为溶解液，所述硼酸盐标准缓冲溶液的pH值为8.5。
进一步的，所述试纸块为中速定量滤纸或纤维素纸。
一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸制备方法，包括如下步骤：
S1、明胶溶液的配制，首先在超净水中加入适量明胶发泡2 h，随后置于60 ℃条件下溶解成浓度为1.6 mg/mL-2.0 mg/mL的明胶溶液；
S2、酶显色剂溶液的配制，以pH值为8.5的硼酸盐标准缓冲溶液作为溶解液，分别加入适量的尿酸酶、辣根过氧化氢酶、4-氨基替比林、3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸、2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶、胆红素氧化酶及明胶溶液，混合均匀后形成酶显色剂溶液；
S3、将试纸块充分浸渍在酶显色剂溶液中30-40 min后置于低温条件下风干，然后密封避光冷存；
S4、将步骤S3中经过浸渍酶显色剂溶液的试纸块粘贴在塑料卡片纸的一端，低温风干后即可得到用于快速检测唾液尿酸的检测试纸。
进一步的，步骤S2制备得到的酶显色剂溶液中各成分浓度如下：
尿酸酶浓度为0.15 KU/L-0.3 KU/L；
辣根过氧化氢酶浓度为2.0 KU/L-3.5 KU/L；
4-氨基替比林浓度为100 mg/L；
3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为4 g/L-6 g/L；
2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.5 g/L-2 g/L；
胆红素氧化酶的浓度为0.05 g/L-0.2 g/L；
明胶溶液为0.5 mL。
进一步的，所述试纸块为5 mmⅹ5 mm，所述试纸块与塑料卡片纸通过双面胶粘贴。
本发明所起到的有益技术效果如下：
（1）本发明公开的用于快速检测唾液尿酸的检测试纸通过在塑料卡片纸一端粘贴浸渍有酶显色剂溶液的试纸块制成；工艺简单，成本低，利于大规模投产。
（2）本发明公开的用于快速检测唾液尿酸的检测试纸主要基于偶联终点比色法的显色反应原理实现尿酸浓度的半定量检测，在35 ℃条件下稳定性良好，便于患者自主携带进行尿酸监控，利于患者及时发现病情，选择最佳治疗时机。
（3）本发明公开的用于快速检测唾液尿酸的检测试纸具有较高灵敏度，同样适用于尿液尿酸的监控。
附图说明
图1为本发明用于快速检测唾液尿酸的检测试纸结构示意图。
附图标记说明：
1-塑料卡片纸，2-试纸块。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征更易被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围作出更为清楚的界定。
实施例1：
本实施例提供一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，包括塑料卡片纸1及粘贴于塑料卡片纸1一端的试纸块2，所述试纸块2上浸渍有酶显色剂溶液，所述试纸块2可以选用中速定量滤纸或纤维素纸中的任何一种，本实施例中试纸块2选用中速定量滤纸，所述试纸块2大小为5 mmⅹ5 mm，所述试纸块2与塑料卡片纸1通过双面胶粘贴。其中，所述酶显色剂溶液采用硼酸盐标准缓冲溶液作为溶解液，所述硼酸盐标准缓冲溶液的pH值为8.5。酶显色剂溶液具体包括尿酸酶、辣根过氧化氢酶、4-氨基替比林、3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸和2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶，且上述各成分在酶显色剂溶液中的浓度控制如下：尿酸酶浓度为0.15 KU/L-0.3 KU/L；辣根过氧化氢酶浓度为2.0 KU/L-3.5 KU/L；4-氨基替比林浓度为100 mg/L；3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为4 g/L-6 g/L；2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.5 g/L-2 g/L。上述各组分在酶显色剂溶液中的优选浓度如下：尿酸酶浓度为0.23KU/L；辣根过氧化氢酶浓度为2.7 KU/L；4-氨基替比林浓度为100 mg/L；3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为5 g/L；2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.8 g/L。
上述用于快速检测唾液尿酸的检测试纸主要基于偶联终点比色法的显色反应原理实现了尿酸浓度的半定量检测，显色反应原理具体如下：
（1）尿酸+O2+H2O 尿酸酶 尿囊素+CO2+H2O2；
（2）H2O2+4-氨基安替比林+TBHBA 过氧化物酶 醌亚胺染料+H2O；
一旦尿酸与试纸块2接触，试纸块2上的酶显色剂溶液便会与尿酸反应，根据偶联终点比色法显色反应原理生成醌亚胺化合物，醌亚胺化合物颜色浓度的深浅与尿酸含量成正比关系，又因唾液尿酸浓度与血清尿酸浓度的相关性关系，因此便可通过试纸块2颜色变化，进而判断血清尿酸浓度。
唾液中尿酸的半定量检测过程如下：
本实施例中所述的检测试纸主要利用唾液中的尿酸浓度与检测试纸显色的深浅成正比关系而测得唾液尿酸，同时又因唾液中的尿酸与人体血清尿酸存在一定相关性，意味着可以按照两者间的关系测算出血清尿酸含量。因此，唾液中尿酸的半定量检测过程首先需按照唾液中的尿酸与血清中尿酸的相关性制备一系列的标准比色卡。然后，在确保检测对象口腔内容物已清理干净的条件下，采取20 µL唾液滴在本实施例中制成的检测试纸上，并在常温环境下观察1 min内检测试纸的颜色变化，将检测试纸的颜色变化与标准比色卡对比，便可了解血清尿酸浓度的大致范围，完成血清尿酸的半定量检测。该检测方法安全、经济、便捷，对患者的健康检查提供一定的指导意义。
实施例2：
本实施例与实施例类似，进一步的，所述酶显色剂溶液具体包括尿酸酶、辣根过氧化氢酶、4-氨基替比林、3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸、2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶、胆红素氧化酶及明胶溶液，所述明胶溶液的浓度为1.6 mg/mL-2.0 mg/mL。上述各组分在酶显色剂溶液中的含量如下：尿酸酶浓度为0.15 KU/L-0.3 KU/L；辣根过氧化氢酶浓度为2.0 KU/L-3.5KU/L；4-氨基替比林浓度为100 mg/L；3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为4 g/L-6 g/L；2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.5 g/L-2 g/L；胆红素氧化酶的浓度为0.05 g/L-0.2 g/L；明胶溶液为0.5 mL。在本实施例中，各组分在酶显色剂溶液中的优选浓度如下：尿酸酶浓度为0.23 KU/L；辣根过氧化氢酶浓度为2.7 KU/L；4-氨基替比林浓度为100 mg/L；3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为5 g/L；2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.8 g/L；胆红素氧化酶的浓度为1.2 g/L；明胶溶液为0.5 mL。
实施例3：
本实施例提供了一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸制备方法，具体包括如下步骤：
S1、明胶溶液的配制，首先在超净水中加入适量明胶发泡2 h，随后置于60 ℃条件下溶解成浓度为1.6 mg/mL-2.0 mg/mL的明胶溶液，明胶溶液的浓度优选1.8 mg/mL；
S2、酶显色剂溶液的配制，以pH值为8.5的硼酸盐标准缓冲溶液作为溶解液，分别加入适量的尿酸酶、辣根过氧化氢酶、4-氨基替比林、3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸、2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶、胆红素氧化酶及明胶溶液，混合均匀后形成酶显色剂溶液；
S3、将试纸块2充分浸渍在酶显色剂溶液中30-40 min后置于低温条件下风干，然后密封避光冷存，本实施例中，所述试纸块2大小裁剪成5 mmⅹ5 mm为最佳；
S4、将步骤S3中经过浸渍酶显色剂溶液的试纸块2粘贴在塑料卡片纸1的一端，低温风干后即可得到用于快速检测唾液尿酸的检测试纸。本实施例中，所述试纸块2与塑料卡片纸1通过双面胶粘贴。
其中，步骤S2中制备得到的酶显色剂溶液含有各成分浓度如下：
尿酸酶浓度为0.15 KU/L-0.3 KU/L，优选0.23 KU/L；
辣根过氧化氢酶浓度为2.0 KU/L-3.5 KU/L，优选2.7 KU/L；
4-氨基替比林浓度为100 mg/L；
3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为4 g/L-6 g/L，优选5 g/L；
2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.5 g/L-2 g/L，优选1.8 g/L；
胆红素氧化酶的浓度为0.05 g/L-0.2 g/L，优选1.2 g/L；
明胶溶液为0.5 mL。
本实施例在制备用于快速检测唾液尿酸的检测试纸的过程中，为了更好的将试纸块2充分浸渍在酶显色剂溶液当中，可以先将浸渍纸基材按照5 mmⅹ8 cm规格裁剪成试纸条，使试纸条内部全部浸泡在酶显色剂溶液中，浸泡时间保持30-40 min后取出，优选40min，然后低温条件下风干，最后将试纸条再次裁剪成5 mmⅹ5 mm大小的试纸块2，密封避光冷存待用。
上面结合附图对本发明的实施方式作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式，在本领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。
Claims (10)
1.一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，其特征在于，包括塑料卡片纸（1）及粘贴于塑料卡片纸（1）一端的试纸块（2），所述试纸块（2）上浸渍有酶显色剂溶液。
2.如权利要求1所述一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，其特征在于，所述酶显色剂溶液包括尿酸酶、辣根过氧化氢酶、4-氨基替比林、3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸和2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶。
3.如权利要求2所述一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，其特征在于，所述酶显色剂溶液还包括胆红素氧化酶。
4.如权利要求2或3任一项所述一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，其特征在于，所述酶显色剂溶液还包括明胶溶液，所述明胶溶液的浓度为1.6 mg/mL-2.0 mg/mL。
5.如权利要求4所述一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，其特征在于，所述酶显色剂溶液中各成分浓度如下：
尿酸酶浓度为0.15 KU/L-0.3 KU/L；
辣根过氧化氢酶浓度为2.0 KU/L-3.5 KU/L；
4-氨基替比林浓度为100 mg/L；
3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为4 g/L-6 g/L；
2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.5 g/L-2 g/L；
胆红素氧化酶的浓度为0.05 g/L-0.2 g/L；
明胶溶液为0.5 mL。
6.如权利要求1所述一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，其特征在于，所述酶显色剂溶液采用硼酸盐标准缓冲溶液作为溶解液，所述硼酸盐标准缓冲溶液的pH值为8.5。
7.如权利要求1所述一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸，其特征在于，所述试纸块（2）为中速定量滤纸或纤维素纸。
8.一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、明胶溶液的配制，首先在超净水中加入适量明胶发泡2 h，随后置于60 ℃条件下溶解成浓度为1.6 mg/mL-2.0 mg/mL的明胶溶液；
S2、酶显色剂溶液的配制，以pH值为8.5的硼酸盐标准缓冲溶液作为溶解液，分别加入适量的尿酸酶、辣根过氧化氢酶、4-氨基替比林、3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸、2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶、胆红素氧化酶及明胶溶液，混合均匀后形成酶显色剂溶液；
S3、将试纸块（2）充分浸渍在酶显色剂溶液中30-40 min后置于低温条件下风干，然后密封避光冷存；
S4、将步骤S3中经过浸渍酶显色剂溶液的试纸块（2）粘贴在塑料卡片纸（1）的一端，低温风干后即可得到用于快速检测唾液尿酸的检测试纸。
9.如权利要求8所述一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸制备方法，其特征在于，步骤S2制备得到的酶显色剂溶液中各成分浓度如下：
尿酸酶浓度为0.15 KU/L-0.3 KU/L；
辣根过氧化氢酶浓度为2.0 KU/L-3.5 KU/L；
4-氨基替比林浓度为100 mg/L；
3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸的浓度为4 g/L-6 g/L；
2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶浓度为1.5 g/L-2 g/L；
胆红素氧化酶的浓度为0.05 g/L-0.2 g/L；
明胶溶液为0.5 mL。
10.如权利要求8所述一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸制备方法，其特征在于，所述试纸块（2）为5 mmⅹ5 mm，所述试纸块（2）与塑料卡片纸（1）通过双面胶粘贴。
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