CN107987975A - 一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,包括以下步骤:将化橘红叶粉碎并过筛得粉末,将粉末湿样均匀填充到玻璃层析柱中;根据相似相溶原理,先采用极性较低的石油醚与乙醇混合溶剂提取极性低的挥发油,再用中等极性溶剂乙醇水溶液提取类黄酮,合并两提取液,静置分层,上层含挥发油,下层主要含有柚皮苷和野漆树苷两种黄酮。本发明中连续提取两大类物质,并利用石油醚在有水存在的情况下自动分层,目标产物分别溶在两液相中从而达到分离的目的。本工艺流程简单,所用的溶剂量少,提取效率高,能充分利用通常作为废弃物的叶片生产大量的挥发油和类黄酮。
Description
技术领域
本发明涉及天然药物化学领域,具体涉及到一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法。
背景技术
化橘红原植物是芸香科植物的化州柚,果实是化痰止咳的名贵中药。芸香科植物全体含挥发油,叶具透明油腺点,挥发油的含量比其果实更丰富,挥发油在香料和药用方面的应用广泛,提取挥发油的传统方法为水蒸气蒸馏法;化橘红叶中富含野漆树苷和柚皮苷等类黄酮化合物,它们均有清除自由基、抗氧化、消炎和化痰止咳等作用,其中野漆树苷是黄嘌呤氧化酶的抑制剂,能强烈抑制尿酸的形成,因此,它是治疗痛风的天然特效药。目前,提取黄酮的主要方法是溶剂浸泡法或溶剂浸泡辅助超声波提取法。现有对同一材料提取两类极性不同的挥发油和类黄酮目标成分的方法均采取分别提取法,导致工艺复杂,提取效率低,提取的杂质也多,后续纯化的工艺繁杂。
发明内容
本发明提供了一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,包括以下步骤:
1、一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)采集化橘红叶洗净,太阳晒干或置烘箱中50~60℃烘干至恒重,粉碎过40~60目筛,得叶粉末,备用;
(2)选取直径为2.0~3.0cm的玻璃层析柱;
(3)将化橘红叶粉末30~50g用石油醚乙醇混合液湿样上柱并在柱中浸泡1~2小时;
(4)连续添加石油醚乙醇混合液使之渗过材料,自上而下流动,浸出有效成分,并收集3~5倍体积量的洗脱液;
(5)转用体积分数为50~70%乙醇溶液重复步骤(4),收集5~7倍量的洗脱液;
(6)将步骤(4)和步骤(5)的洗脱液合并,充分混合,萃取分层,上层液中含有挥发油成分,下层液中含有类黄酮;
(7)将步骤(6)分别所得上层液和下层液减压浓缩回收石油醚和乙醇,分别得到挥发油和类黄酮的粗产品;
(8)将100~120 mL纯水加入到挥发油粗产品中,经水蒸气蒸馏得到纯度较高的精油;
(9)类黄酮的粗产品经大孔吸附树脂LSA-10吸附分离得到柚皮苷和野漆树苷。
上述中,石油醚乙醇混合液中石油醚与乙醇的体积为8:2。
上述中,所述湿样是指化橘红叶粉末与石油醚乙醇混合液充分吸胀至饱和。
上述中,所述收集3~5倍体积量的洗脱液,是指每1g化橘红叶粉末收集洗脱液3~5 mL。
本发明将化橘红叶粉碎并过筛得粉末,将粉末湿样均匀填充到玻璃层析柱中;根据相似相溶原理,先采用极性较低的石油醚与乙醇混合溶剂提取极性低的挥发油,再用中等极性溶剂乙醇水溶液提取类黄酮,合并两提取液,静置分层,上层含挥发油,下层主要含有柚皮苷和野漆树苷两种黄酮。挥发油是指化橘红叶中的低沸点、易挥发的一类具有芳香气味、可随水蒸气蒸馏出来而又与水不相混溶的挥发性油状成分的总称。本发明采用大孔吸附树脂LSA-10,适宜于分离纯化中等极性的类黄酮。
本发明的有益效果在于:
利用层析柱填充被提取的物料,可连续利用不同极性的溶剂自上而下提取洗脱不同的目标成分。化橘红叶中含有挥发油、黄酮两类极性差异很大的生物活性成分,只需用最小体积(物料达到饱和的溶剂体积)的提取溶剂、通过连续提取法, 能成功地提取95%以上的挥发油和黄酮,提取液能够自动分离为石油醚相(含挥发油)和醇水相(含黄酮),很容易地把挥发油和黄酮分离开来。通过这样的简单工序,消耗溶剂少,能耗低,高效地提取制备化橘红叶中挥发油和类黄酮。
具体实施方式
在下文的描述中,给出了具体的细节以便提供对本发明更为彻底的理解。然而,对于本领域技术人员而言显而易见的是,本发明可以无需一个或多个这些细节而得以实施。在其他的例子中,为了避免与本发明发生混淆,对于本领域公知的一些技术特征未进行描述。
为了彻底理解本发明,将在下列的描述中提出详细的步骤,以便阐释本发明的技术方案。本发明的较佳实施例详细描述如下,然而除了这些详细描述外,本发明还可以具有其他实施方式。
实施例1
本发明提供了一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,包括以下步骤:
(1)采集化橘红叶片洗净,太阳晒干或置烘箱中50℃烘干至恒重,粉碎过40目筛,得叶粉末,备用;
(2)选取直径为2.0cm的玻璃层析柱;
(3)将化橘红叶粉末30g用石油醚乙醇混合液湿样上柱并在柱中浸泡1小时;
(4)连续添加石油醚乙醇混合液洗使之渗过材料,自上而下流动,浸出有效成分,并收集3倍体积量的洗脱液;
(5)转用体积分数50%乙醇溶液重复步骤(4),收集5倍体积量的洗脱液;
(6)将步骤(4)和步骤(5)的洗脱液合并,充分混合,萃取分层,上层液中含有挥发油成分,下层液中含有类黄酮;
(7)将步骤(6)分别所得上层液和下层液减压浓缩回收石油醚和乙醇,得到挥发油膏状粗产品,类黄酮的粗产品;
(8)在挥发油粗产品中加入100 mL纯水,经水蒸气蒸馏法蒸馏,去除叶绿素等大分子杂质,得到橙黄色的精油。
(9)类黄酮的粗产品经大孔吸附树脂LSA-10吸附分离得到柚皮苷和野漆树苷。
上述中,石油醚乙醇混合液中石油醚与乙醇的体积为8:2。
上述中,所述湿样是指化橘红叶粉末与石油醚乙醇混合液充分吸胀至饱和。
上述中,所述收集3倍或5倍体积量的洗脱液,是指每1g化橘红叶粉末收集洗脱液3mL或5 mL。
实施例2
本发明提供了一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,包括以下步骤:
(1)采集化橘红叶洗净,太阳晒干或置烘箱中60℃烘干至恒重,粉碎过60目筛,得叶粉末,备用;
(2)选取直径为3.0 cm的玻璃层析柱;
(3)将化橘红叶粉末50g用石油醚乙醇混合液湿样上柱并在柱中浸泡2小时;
(4)连续添加石油醚乙醇混合液使之渗过材料,自上而下流动,浸出有效成分,并收集5倍体积量的洗脱液;
(5)转用体积分数为70%乙醇溶液重复步骤(4),收集7倍体积量的洗脱液;
(6)将步骤(4)和步骤(5)的洗脱液合并,充分混合,萃取分层,上层液中含有挥发油成分,下层液中含有类黄酮;
(7)将步骤(6)分别所得上层液和下层液减压浓缩回收石油醚和乙醇,得到挥发油膏状粗产品,类黄酮的粗产品;
(8)在挥发油粗产品中加入120mL纯水,经水蒸气蒸馏法蒸馏,去除叶绿素等大分子杂质,得到橙黄色的精油。
(9)类黄酮的粗产品经大孔吸附树脂LSA-10吸附分离得到柚皮苷和野漆树苷。
上述中,石油醚乙醇混合液中石油醚与乙醇的体积为8:2。
上述中,所述湿样是指化橘红叶粉末与石油醚乙醇混合液充分吸胀至饱和。
上述中,所述收集3倍或5倍体积量的洗脱液,是指每1g化橘红叶粉末收集洗脱液5mL或7 mL。
实施例3
本发明提供了一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,包括以下步骤:
(1)采集化橘红叶洗净,太阳晒干或置烘箱中55℃烘干至恒重,粉碎过50目筛,得叶粉末,备用;
(2)选取直径为2.5 cm的玻璃层析柱;
(3)将化橘红叶粉末40 g用石油醚乙醇混合液湿样上柱并在柱中浸泡1.5小时;
(4)连续添加石油醚乙醇混合液使之渗过材料,自上而下流动,浸出有效成分,并收集4倍体积量的洗脱液;
(5)转用体积分数60%乙醇溶液重复步骤(4),收集6倍体积量的洗脱液;
(6)将步骤(4)和步骤(5)的洗脱液合并,充分混合,萃取分层,上层液中含有挥发油成分,下层液中含有类黄酮;
(7)将步骤(6)分别所得上层液和下层液减压浓缩回收石油醚和乙醇,得到挥发油膏状粗产品,类黄酮的粗产品;
(8)在挥发油粗产品中加入纯水110 mL,经水蒸气蒸馏法蒸馏,去除叶绿素等大分子杂质,得到纯度较高的精油;
(9)类黄酮的粗产品经大孔吸附树脂LSA-10吸附分离得到柚皮苷和野漆树苷。
上述中,石油醚乙醇混合液中石油醚与乙醇的体积为8:2。
上述中,所述湿样是指化橘红叶粉末与石油醚乙醇混合液充分吸胀至饱和。
上述中,所述收集3倍或5倍体积量的洗脱液,是指每1g化橘红叶粉末收集洗脱液4mL或6 mL。
以上对本发明的较佳实施例进行了描述。需要理解的是,本发明并不局限于上述特定实施方式,其中未尽详细描述的设备和结构应该理解为用本领域中的普通方式予以实施;任何熟悉本领域的技术人员,在不脱离本发明技术方案范围情况下,都可利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰,或修改为等同变化的等效实施例,这并不影响本发明的实质内容。因此,凡是未脱离本发明技术方案的内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰,均仍属于本发明技术方案保护的范围内。
Claims (4)
1.一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)采集化橘红叶洗净,太阳晒干或置烘箱中50~60℃烘干至恒重,粉碎过40~60目筛,得叶粉末,备用;
(2)选取直径为2.0~3.0cm的玻璃层析柱;
(3)将化橘红叶粉末30~50g用石油醚乙醇混合液湿样上柱,并在柱中浸泡1~2小时;
(4)连续添加石油醚乙醇混合液使之渗过材料,自上而下流动,浸出有效成分,并收集3~5倍体积量的洗脱液;
(5)转用体积分数为50~70%乙醇溶液重复步骤(4),收集5~7倍体积量的洗脱液;
(6)将步骤(4)和步骤(5)的洗脱液合并,充分混合,萃取分层,上层液中含有挥发油成分,下层液中含有类黄酮;
(7)将步骤(6)分别所得上层液和下层液减压浓缩回收石油醚和乙醇,分别得到挥发油和类黄酮的粗产品;
(8)将100~120 mL纯水加入到挥发油粗产品中,经水蒸气蒸馏得到纯度较高的精油;
(9)类黄酮的粗产品经大孔吸附树脂LSA-10吸附分离得到柚皮苷和野漆树苷。
2.如权利要求1所述的一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,其特征在于,所述石油醚乙醇混合液中石油醚与乙醇的体积比为8:2。
3.如权利要求1所述的一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,其特征在于,所述湿样是指化橘红叶粉末与石油醚乙醇混合液充分吸胀至饱和。
4.如权利要求1所述的一种从化橘红叶中连续提取分离挥发油和类黄酮的方法,其特征在于,所述收集3~5倍体积量的洗脱液,是指每1g化橘红叶粉末收集洗脱液3~5 mL。
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