CN107778383B - 一种舒更葡糖钠的精制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种舒更葡糖钠重结晶精制纯化方法，向舒更葡糖钠粗品中加入保护剂，在惰性气体保护下，通过重结晶得到舒更葡糖钠纯品，其中，所述的保护剂选自巯基乙醇、巯基乙酸盐、巯基乙酸盐酯、巯基丙酸盐、巯基丙酸盐酯、谷胱甘肽、半胱氨酸、胱胺、二硫赤藓糖醇、二硫苏糖醇、三取代基有机磷化合物、三取代基有机磷化合物的盐中一种或两种以上任意比例的混合物，该方法操作简便，产品纯度高，具有良好的经济性，更适合工业化生产。

Description

一种舒更葡糖钠的精制方法

技术领域

本发明涉及的是一种舒更葡糖钠的精制方法，本发明属于医药生产技术领域。

背景技术

舒更葡糖钠化学名为6A,6B,6C,6D,6E,7F,6G,6H-八-S-(2-羧乙基)-6A,6B,6C,6D,6E,7F,6G,6H-八硫代-γ-环糊精,八钠盐，结构式为：

舒更葡糖钠是由荷兰Organon公司研发的一种新型肌松药逆转剂，在临床上作为逆转罗库溴胺或维库溴胺的神经肌肉阻滞作用，具有良好的疗效，并有极好的安全性。自2008年7月欧盟批准其上市以来，已在日本、韩国、美国等国上市，并正在我国申报生产上市。

舒更葡糖钠是一个经过结构修饰的γ-环糊精，其结构复杂，制备反应过程容易产生大量复杂的副产物及降解杂质。而且舒更葡糖钠的分子结构上存在硫醚键，导致该化合物对氧不稳定，纯化过程中易被氧化形成亚砜、砜、二硫醚等一系列的杂质，杂质多产生于舒更葡糖钠分子的侧链结构上，杂质与舒更葡糖钠结构近似，极性差异小，分子量差异小，很难用常规手段除去，这一特性导致了舒更葡糖钠的纯化非常困难。

目前国内外关于舒更葡糖钠制备工艺的报道较少，且纯化过程依赖膜透析或柱层析进行纯化，得到高纯度产品难度大，不利于大规模工业化生产的进行。

J.Med.Chem.2002,45,1806-1816PP提出在N,N-二甲基甲酰胺体系中，三苯基磷催化下，溴素与γ-环糊精反应得到6-脱氧-6-全溴代-γ-环糊精。该产物与3-巯基丙酸甲酯在无水碳酸铯的催化下，反应得到产物舒更葡糖甲酯，再经氢氧化钠水解，得到舒更葡糖钠。收率60％。依此方法得到得为舒更葡糖钠粗品，纯度较低，未有进一步精制纯化的报道。

Chem.Asian J.2011,6,2390–2399先将γ-环糊精碘代得到6-脱氧-6-全碘代-γ-环糊精粗品，该粗品与乙酸酐反应成酯，经硅胶柱层析纯化，再甲醇钠水解，得到纯度较高的6-脱氧-6-全碘代-γ-环糊精精制品。最后于3-巯基丙酸成醚得到目标产物。该反应中间体纯度高，杂质少，产品的后处理纯化较为简单。但采用柱层析工艺制备碘代环糊精，增加了反应步骤，耗时较长。且采用该方法制得的碘代环糊精作为原料制备舒更葡糖钠时，并不能直接得到合格的产品，仍会面临舒更葡糖钠产品的纯化困难问题。

WO0140316PP用碘作为卤化试剂在三苯基磷催化下与γ-环糊精反应，生成6-脱氧-6-全碘代-γ-环糊精。该中间体再与3-巯基丙酸成硫醚，经膜透析纯化后得到目标产物。该方法路线简单可靠，反应活性较高，但产品的纯化仅采用膜透析纯化，要得到高纯度舒更葡糖钠的难度较高。

CN105348412公布了一种舒更葡糖钠粗品的纯化方法，将舒更葡糖钠粗品在酸性条件下水解，得到游离酸固体，游离酸固体水打浆洗涤纯化；再将游离酸与有机胺反应，制备舒更葡糖铵盐，得到的铵盐重结晶纯化；再于酸性条件下游离得游离酸，游离酸固体水打浆洗涤纯化，得到的游离酸与氢氧化钠反应，制备舒更葡糖钠纯品。该方法未使用柱层析，透析等方法，但步骤繁琐，需要在游离酸和盐之间多次转换，操作不便。另外，由于舒更葡糖自身结构的不稳定性，其在酸性条件下的游离过程中，自身结构有解离的风险，形成酸性破坏杂质，加大了提纯产品的难度。该方法也未考虑惰性气体氛围保护，未见抑制舒更葡糖钠氧化杂质增加的条件。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的不足之处，提供一种产品杂质少，稳定性好的舒更葡糖钠的重结晶纯化方法。

本发明的目的通过以下技术方案实施：一种舒更葡糖钠的纯化方法，向舒更葡糖钠粗品中加入保护剂，在惰性气体保护下，通过重结晶得到舒更葡糖钠纯品，其中，所述的保护剂选自巯基乙醇、巯基乙酸盐、巯基乙酸盐酯、巯基丙酸盐、巯基丙酸盐酯、谷胱甘肽、半胱氨酸、胱胺、二硫赤藓糖醇、二硫苏糖醇、三取代基有机磷化合物、三取代基有机磷化合物的盐中一种或两种以上任意比例的混合物。

上述的舒更葡糖钠纯化方法中，优选地，所加入的保护剂与舒更葡糖钠粗品的质量比为0.001％以上，进一步优选为0.1％-20％。

上述的舒更葡糖钠纯化方法中，优选地，重结晶的溶剂选自水与舒更葡糖钠的不良溶剂的组合，所述的舒更葡糖钠的不良溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺中一种或多种的混合。

上述的舒更葡糖钠纯化方法中，所述的三取代基有机磷化合物是以磷原子为中心原子，三个相同或不同的取代基侧链结合在磷原子上，构成的具有一定保护能力的有机磷化合物，优选自三苯基磷(TPP)、三乙基磷(TEP)、三(2-羧乙基)磷(TECP)、三(2-呋喃基)磷(TFP)中的一种，或上述化合物的盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐中的一种。

上述的舒更葡糖钠纯化方法中，重结晶的具体过程是将舒更葡糖钠粗品溶于水中，加入保护剂，惰性气体保护下，升温至回流，然后加入舒更葡糖钠的不良溶剂，加毕，搅拌降温至-20～30℃。

上述的舒更葡糖钠纯化方法中，优选地，所述的惰性气体选自氮气、氩气、氦气、二氧化碳中一种。

有益效果：

1、本发明利用重结晶精制舒更葡糖钠过程中，通过保护剂的作用，在去除舒更葡糖钠粗品中的二硫醚等结构的聚合杂质的同时抑制亚砜、砜类杂质的生成，从而提高了舒更葡糖钠产品的纯度。

2、采用本发明的方法对舒更葡糖钠粗品进行精制，可有效地去除杂质，产品纯度99.0％以上，单一杂质不大于0.1％，产品质量可以满足注射剂原料的质量要求，同样达到了欧盟质量研究技术指导原则ICH的相关技术要求，为舒更葡糖钠注射剂生产提供了质量合格的原料。

3、本发明的精制方法工艺过程简单，成本低，工艺易于操作，具有良好的经济性，更适合工业化生产；采用该原料制成的制剂，杂质少，疗效好，不良反应低，为患者带来最大益处。

附图说明

图1为舒更葡糖钠粗品HPLC图；

图2为本发明方法制备得到的舒更葡糖钠纯品的HPLC图；

图3为除氧、惰性气体置换保护下重结晶制备的舒更葡糖钠纯品的HPLC图；

图4为市售舒更葡糖钠注射液的HPLC图。

具体实施方式

下文对本发明方法的优选实施方案进行更详细的描述。应该正确理解的是：本发明的是实施例中的方法仅仅用于进一步说明本发明，而不是对发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明的简单改进均属本发明要求保护的范围。

在本发明中除非有特殊声明，所用试剂、仪器、设备均为市售商品。

HPLC法测定纯度的方法：取待测试品，置25ml容量瓶中，先加少量水振摇使溶解，再加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取该溶液1ml置100ml容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；照含量测定项下的色谱条件(以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸缓冲液为流动相A、乙腈为流动相B，进行线性梯度洗脱，检测波长为200nm)，取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10～25％，再精密量取供试品溶液及对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍，6-八-(2-羧基乙基)硫代-γ-环糊精钠盐与6-七-(2-羧基乙基)硫代-γ-环糊精钠盐峰面积百分比之和即为待测样品的纯度。

舒更葡糖钠粗品参照专利US6670340公开的方法生产。

根据原研厂家的公开文献描述，舒更葡糖钠产品的药用活性成分主要为6-八-(2-羧基乙基)硫代-γ-环糊精钠盐和6-七-(2-羧基乙基)硫代-γ-环糊精钠盐。因此，下述实施例中所述的纯度为产品中6-八-(2-羧基乙基)硫代-γ-环糊精钠盐和6-七-(2-羧基乙基)硫代-γ-环糊精钠盐的量之和占产品质量的百分比。

参考实施例：舒更葡糖钠粗品的制备

反应瓶中投入3-巯基丙酸(12.2mL，140mol)，加入450mL的N,N-二甲基甲酰胺，在室温下，氮气保护下分三批加入氢化钠(12.3g，308mol，60％)，加完后在室温下搅拌30分钟，滴加γ-碘代环糊精(31.2g，14mmol，溶于450mL的N,N-二甲基甲酰胺中)，滴加完毕，升温至70度，反应12h。反应完毕，冷至室温，加入100mL水，搅拌，减压蒸馏至溶剂剩余400mL，加入2L乙醇，过滤，收集固体，真空干燥得淡黄色固体45g，纯度为91.92％，舒更葡糖钠粗品的检测结果见图1。

实施例1：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入谷胱甘肽3g，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的乙腈，加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品33g，纯度99.56％，见图2。

实施例2：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入半胱氨酸3g，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的乙腈。加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品35g，纯度99.3％。

实施例3：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入巯基乙醇3g，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的乙腈。加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品28g，纯度99.2％。

实施例4：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入二硫赤藓糖醇3g，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的乙腈。加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品32g，纯度99.3％。

实施例5：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入三苯基磷5g，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的乙腈。加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品31g，纯度99.1％。

实施例6：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入三(2-羧乙基)磷盐酸盐5g，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的乙腈。加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品34g，纯度99.5％。

实施例7：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入谷胱甘肽1mg，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的N,N-二甲基甲酰胺。加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品36g，纯度99.4％。

实施例8：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入谷胱甘肽0.1g，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的N,N-二甲基甲酰胺。加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品35g，纯度99.5％。

实施例9：舒更葡糖钠的纯化

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，搅拌下加入谷胱甘肽20g，氮气保护下，升温至回流，向溶液中加入8L的N,N-二甲基甲酰胺。加毕，搅拌降温至室温，有大量白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠纯品27g，纯度99.6％。

对比例1

取舒更葡糖钠粗品100g，用3L水溶解至清，在严格控制的无氧并使用惰性气体多次置换保护的条件下，升温至回流，向溶液中加入8L的乙腈。加毕，搅拌降温至室温，有白色固体析出，抽滤，得舒更葡糖钠精制品32g，其检测结果纯度为97.84％，见图3。

由于舒更葡糖钠分子结构中硫醚键的高易氧化性，单纯的采用惰性气体保护方法或其他除氧方法无法避免氧化杂质的增加。将对比例1与实施例1-9比较可知，在不添加本发明所述的保护剂的前提下，即使是在严格控制的无氧并使用惰性气体多次置换保护的条件下，传统的重结晶方法也无法有效控制氧化杂质增加的同时除去如二硫醚等杂质来提高产品的纯度，精制所得产物纯度较差。

总的来说，通过传统的重结晶方法，将舒更葡糖钠产品中的亚砜类、砜类、二硫醚类杂质单一杂质控制在0.1％以下是很难达到的，所得产品质量难以满足注射剂原料的质量要求，也难以满足欧盟质量研究技术指导原则ICH的相关技术要求，且精制收率也相当低，成本高、不易工业化。

对比例2

市售原研舒更葡糖钠注射液检测结果纯度为97.77％，见图4。

将对比例2与实施例1-9比较可知，本发明得到的舒更葡糖钠纯品比市售产品纯度更高。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种舒更葡糖钠的纯化方法，其特征在于，向舒更葡糖钠粗品中加入保护剂，在惰性气体保护下，通过重结晶得到舒更葡糖钠纯品，其中，所述的保护剂选自巯基乙醇、巯基乙酸盐、巯基乙酸盐酯、巯基丙酸盐、巯基丙酸盐酯、谷胱甘肽、半胱氨酸、胱胺、二硫赤藓糖醇、二硫苏糖醇、三取代基有机磷化合物、三取代基有机磷化合物的盐中一种或两种以上任意比例的混合物。

2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所加入的保护剂与舒更葡糖钠粗品的质量比为0.001%以上。

3.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于，所加入的保护剂与舒更葡糖钠粗品的质量比为0.1%-20%。

4.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，重结晶的溶剂选自水与舒更葡糖钠的不良溶剂的组合，所述的舒更葡糖钠的不良溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺中一种或多种的混合。

5.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述的三取代基有机磷化合物选自三苯基磷、三乙基磷、三（2-羧乙基）磷、三（2-呋喃基）磷中的一种，所述三取代基有机磷的盐选自上述化合物的盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐中的一种。

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