CN107673481A - 一种水产养殖水体净化剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种水产养殖水体净化剂及其制备方法。本发明通过将光合细菌、反硝化细菌、芽孢杆菌在含有多孔SiC陶瓷微粒的培养基中培养，使得微生物在多孔SiC陶瓷微粒上富集制备得到一种水产养殖水体净化剂。与现有技术相比，本发明制备的水产养殖水体净化剂对养殖水体中的水质净化、疾病预防等方面具备良好的效果。
Description
技术领域
本发明涉及微生物净水处理技术，尤其涉及一种水产养殖水体净化技术。
背景技术
水产养殖水体中，水域微生态系统是由病原微生物、条件致病微生物和非致病微生物组成，这些微生物彼此之间互相协作，处于相对稳定的动态平衡状态。然而养殖的高密度和人工饵料的加入，使得养殖生态系统成为一个不稳定的生态系统，任何一个环节的波动都可能造成生态失衡。平衡一旦被打破，那么有害菌就会转化为致病菌据不完全统计，2005年～20015年，我国水产养殖病害平均年损失达百亿元之巨。我国水产养殖病害控制以药物防治为主，再加上技术相对单一，加上养殖人员文化和专业素质不高，生产上盲目用药，从而导致水体的重复污染，另一方面大量且频繁的使用药物易使病原微生物产生抗药性，从而失去治疗效果。
水产养殖业的发展，水产养殖单位产量大幅度提高，鱼虾排泄物、食物残料和药物滥用导致水质污染严重，特别是饲养后期，严重影响水质环境和鱼类的生长。
光合细菌具有多种生理功能，代谢类型极为多样，有光能自养、异养和混养多种营养生长方式，具有光合、固碳、降解大分子有机物、固氮、脱氮、硝化、反硝化、硫化物氧化等代谢方式。光合细菌是水域中重要的初级生产者，在厌气和光照条件下，以多种硫化物或有机物作供氢体固定进行光合磷酸化和光氧化还原反应；在好氧黑暗条件下，光合色素的合成受到抑制，胞内缺少内质膜系统，通过氧化磷酸化获取能量，另外还可通过脱氮或发酵获得能量。光合细菌对氮源的利用十分广泛，可利用铵盐、氨基氮，少数种还能利用硝酸盐和尿素。这种随着生长条件的变化而灵活地改变代谢类型的特性与其他光合生物一起构成了自然界生态系统的原始生产者，在自然界物质转化和能量循环中起着重要的作用。
光合细菌的菌体无毒，营养丰富，蛋白质含量超过，超过小球藻和大豆，而且氨基酸组成齐全，含有机体必需的种氨基酸，氨基酸组成非常合理，除了含氨基酸的量较少外，其他各类氨基酸含量都不少，尤其是赖氨酸含量较为丰富。同时光合细菌还含有丰富的族维生素，尤其是维生素、叶酸、生物素等含量相当高，酵母中几乎不含有的维生素种类在中含量较多。光合细菌体内的辅酶含量也大大超过其他生物，另外，光合细菌富含大量的细菌叶绿素和类胡萝卜素，是天然色素的优秀来源。
目前，高密度养殖会导致池内堆积大量的残饵、粪便及其它代谢物，这些物质在池塘内腐败，产生大量有害物质，导致微生物大量繁殖包括致病菌、溶解氧下降、值上升、和三态氮上升，尤其是亚硝氮。亚硝盐的过量积累对养殖生物具有毒害作用，高浓度亚硝酸盐可致鱼虾等死亡，低浓度亚硝酸盐影响鱼类酶的活性，导致鱼虾等生长缓慢。因此，为了净化养殖水体水质，开发成本低、生态环保、无污染的水产养殖水体净化剂十分必要。
发明内容
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是利用光合菌、反硝化细菌、芽孢杆菌、吸附剂等物质制备一种水产养殖水体净化剂。
一种水产养殖水体净化剂，其特征在于，由下述重量份的原料制备而成：光合细菌剂40～50份、反硝化细菌剂10～20份、芽孢杆菌剂10～20份、辣木籽提取液10～20份和4～6份壳聚糖/纤维素复合微球。
优选的，所述的光合细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将光合细菌接种于种子培养基中，在28～33℃，180rpm/min摇床中光照下培养菌体至菌体浓度达108～109CFU/mL，得到光合细菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL光合细菌种子液加入到发酵培养基中，在28～33℃，180rpm/min摇床中光照下培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到光合细菌剂。
优选的，所述的反硝化细菌剂、芽孢杆菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将反硝化细菌或者芽孢杆菌接种于种子培养基中，在28～33℃，180rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108～109CFU/mL，得到反硝化细菌种子液或者芽孢杆菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL上述种子液加入到发酵培养基中，在28～33℃，180rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到反硝化细菌剂或者芽孢杆菌剂。
优选的，光合细菌剂、反硝化细菌剂、芽孢杆菌剂所述的种子培养基的pH为7.0～7.2，含有以下重量百分比的物质：氯化铵1～3份、醋酸钠4～6份、氯化镁0.1份、氯化钙0.1份、磷酸二氢钾1份、磷酸氢二钾0.5份、酵母膏0.1份、水1000份。
优选的，光合细菌剂、反硝化细菌剂、芽孢杆菌剂所述的发酵培养基的pH为7.0～7.2，含有以下重量百分比的物质：多孔SiC陶瓷微粒8～10份、牛肉膏4～6份、蛋白胨8～12份、磷酸氢二钾5份、氯化钠2份、水1000份。
在发酵培养基中添加多孔SiC陶瓷微粒能够使微生物菌种大量附着在多孔SiC陶瓷微粒上。当净水剂投入水产养殖水体中后，附着有大量微生物的多孔SiC陶瓷微粒沉降到池低，迅速在底泥中形成菌种优势，对底泥中的氨氮有机物、亚硝酸盐等进行生物降解。
优选的，所述的光合细菌为沼泽红假单胞菌CGMCC 1.2180、深红红螺菌CGMCC1.3369、云南红球菌CGMCC 4.3558中的一种。
优选的，所述的反硝化细菌为黄色海假单胞菌CGMCC 1.8020或者施氏假单胞菌CGMCC 1.8597。
优选的，所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌CGMCC 1.504、地衣芽孢杆菌CGMCC1.105、凝结芽孢杆菌CGMCC 1.10302、短小芽孢杆菌CGMCC 1.8167中的一种。
更优选地，所述光合细菌为沼泽红假单胞菌CGMCC 1.2180、深红红螺菌CGMCC1.3369、云南红球菌CGMCC 4.3558按质量比1:1:1组成的混合物。
优选的，所述的多孔SiC陶瓷微粒的制备方法如下：
a.取SiC粉、Al2O3粉和石墨加入到乙醇中，搅拌混合均匀，烘干后压制成坯体；
b.将步骤a中坯体放入马弗炉中煅烧，冷却至室温得到多孔SiC陶瓷片；
c.将步骤b得到的多孔SiC陶瓷片用粉碎机粉碎，得到多孔SiC陶瓷微粒。
一种水产养殖水体净化剂的制备方法，其特征在于：将40～50重量份光合细菌剂、10～20重量份反硝化细菌剂、10～20重量份芽孢杆菌剂、10～20重量份辣木籽提取液和4～6重量份壳聚糖/纤维素复合微球在无菌桶中搅拌均匀后即得。
优选的，所述壳聚糖/维生素复合微球的制备方法如下：
取纤维素和壳聚糖分别溶解在离子液体1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐中，得到透明纤维素溶液和壳聚糖溶液，将溶解后的纤维素溶液和壳聚糖溶液混合，在100℃油浴下加热交联1～3h至混合液变成淡黄色均一的液体，将得到的淡黄色均一的液体装入医用注射器中，将混合液推入无水乙醇凝固浴中得到凝胶态复合小球；制备得到的凝胶态复合小球在凝固浴中继续浸泡24h，最后用去离子水清洗，得到壳聚糖/纤维素复合微球。
优选的，所述辣木籽提取液的制备方法如下：
选取表面无破损的辣木籽5g，粉碎后加入到500mL 1mol/L的氯化钠溶液中在40～60℃下恒温水浴下搅拌30～60min，用孔径为0.5μM的玻璃纤维膜过滤，得到的滤液即为辣木籽提取液。
在净化剂中添加具备吸附能力的辣木籽提取液与壳聚糖/纤维素复合微球能很好的将水产养殖水体中悬浮的有机物、排泄物等物质迅速的沉降至池低，供底泥中的微生物分解。不仅如此，水体的透明度增加，使得底泥中原本存在的光合菌能够充分的利用光能，加速繁殖的同时加速对水体中的氨氮有机物、亚硝酸盐的降解。
本发明的有益效果：
1、本发明一种水产养殖水体净化剂能够显著的降低养殖水体中亚硝酸盐、氨氮、活性磷的含量；同时显著提升水中溶解氧的含量，调节水体的pH；使得水产养殖水体的水质得到极大改善。
2、本发明一种水产养殖水体净化剂能够显著水产养殖水体的水质，使得水产品的存活率得到极大的改善。不仅如此，微生物菌体丰富的代谢产物，使得水产品体重增速、肉质与风味也得到极大的改善。
3、本发明克服了现有技术偏见，在无光照的条件下对固氮红细菌进行了扩大培养，制备得到的光合细菌剂具备良好的降解氨氮有机物和亚硝酸盐的特性。
具体实施方式
实施例中各原料来源：
沼泽红假单胞菌：Rhodopseudomonas palustris，CGMCC 1.2180，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
深红红螺菌：Rhodospirillum rubrum，CGMCC 1.3369，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
云南红球菌：Rhodococcus yunnanensis，CGMCC 4.3558，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
黄色海假单胞菌：Pseudomonas xanthomarina，CGMCC菌种编号：1.8020，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
施氏假单胞菌：Pseudomonas stutzeri，CGMCC菌种编号：1.8597，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
枯草芽孢杆菌：Bacillus subtilis subsp.Subtilis，CGMCC菌种编号：1.504，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
地衣芽孢杆菌：Bacillus licheniformis，CGMCC菌种编号：1.105，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
凝结芽孢杆菌：Bacillus coagulans，CGMCC菌种编号：1.10302，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
短小芽孢杆菌：Bacillus pumilus，CGMCC菌种编号：1.8167，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心；
辣木籽：云南克拉拉农业科技有限公司；
壳聚糖：CAS号：9012-76-4，壳聚糖脱乙酰度为95％，陕西森弗天然制品有限公司；
纤维素：CAS号：9004-34-6，平均粒径：250μM，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；
1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐：CAS号：143314-17-4，含量≥99％，淡黄色液体，水含量≤2000ppm，郴州科能材料科技有限公司；
实施例中的辣木籽提取液由如下方法制备：
选取表面无破损的辣木籽，用上海梅香XA-1粉碎机粉碎，设置转速为2000rpm/min，粉碎时间为3min。取5g粉碎后的辣木籽粉加入到500mL 1mol/L的氯化钠溶液中在50℃下恒温水浴下搅拌30min，用孔径为0.5μM的玻璃纤维膜过滤，得到的滤液即为辣木籽提取液。
实施例中的壳聚糖/纤维素复合微球由如下方法制备：
取5g纤维素和5g壳聚糖分别溶解在100mL离子液体1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐中，在70℃下恒温水浴中完全溶解，溶解过程中保持均匀的磁力搅拌，最终得到透明纤维素溶液和壳聚糖溶液。再将溶解后的纤维素和壳聚糖溶液混合，在100℃油浴下加热交联1h至混合液变成淡黄色均一的液体。将得到的淡黄色液体装入医用注射器中，将混合液推入无水乙醇凝固浴中得到凝胶态复合小球；制备得到的凝胶态复合小球在凝固浴中继续浸泡24h，最后用去离子水清洗3次，得到壳聚糖/纤维素复合微球。
实施例中的多孔SiC陶瓷微粒由如下方法制备：
取70g SiC、30gAl2O3和20g石墨加入到100mL乙醇中，在球磨罐中搅拌24h，混合均匀后在100℃下烘30min，过50目筛。单向加压30MPa压制成10mm×5mm×5mm的矩形条状坯体。将上述坯体放入恒温干燥箱中，在110℃下烘24h。冷却至室温后将上述坯体放入马弗炉中，设置第一段反应温度900℃，升温速率5℃/min，到达设置温度后恒温2h，第二段反应温度1500℃，升温速率5℃/min，到达设置温度后恒温3h，。最后，冷却至室温得到多孔SiC陶瓷片。
将上述多孔SiC陶瓷片用上海梅香XA-1粉碎机打碎，设置转速为2000rpm/min，粉碎时间为3min，得到多孔SiC陶瓷微粒。
SiC粉：含量≥97％，粒度1～3mm，巩义市超越滤料厂；
Al2O3粉：含量≥98.5％，粒度10～15μm，大江研磨材料有限公司；
石墨：固定碳≥99.8％，粒度0.3～3mm，临漳县金旺碳素有限公司；
实施例1
一种光合细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将沼泽红假单胞菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到沼泽红假单胞菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL沼泽红假单胞菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到光合细菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：多孔SiC陶瓷微粒9g、牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例2
一种光合细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将深红红螺菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到深红红螺菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL深红红螺菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到光合细菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：多孔SiC陶瓷微粒9g、牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例3
一种光合细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将云南红球菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到云南红球菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL云南红球菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到光合细菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：多孔SiC陶瓷微粒9g、牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例4
一种反硝化细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将黄色海假单胞菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到黄色海假单胞菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL黄色海假单胞菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到反硝化细菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：多孔SiC陶瓷微粒9g、牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例5
一种芽孢杆菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将枯草芽孢杆菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到枯草芽孢杆菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL枯草芽孢杆菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到芽孢杆菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：多孔SiC陶瓷微粒9g、牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例6
一种光合细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将沼泽红假单胞菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到沼泽红假单胞菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL沼泽红假单胞菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到光合细菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例7
一种光合细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将深红红螺菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到深红红螺菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL深红红螺菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到光合细菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例8
一种光合细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将云南红球菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到云南红球菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL云南红球菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中，2400lux的白炽灯下光照培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到光合细菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例9
一种反硝化细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将黄色海假单胞菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到黄色海假单胞菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL黄色海假单胞菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到反硝化细菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例10
一种芽孢杆菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将枯草芽孢杆菌接种于种子培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108CFU/mL，得到枯草芽孢杆菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL枯草芽孢杆菌种子液加入到发酵培养基中，在30℃、180rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到芽孢杆菌剂。
所述的种子培养基的pH为7.0，含有以下物质：氯化铵2g、醋酸钠5g、氯化镁0.1g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾0.5g、酵母膏0.1g、水1000g。
所述的发酵培养基的pH为7.0，含有以下物质：牛肉膏5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾5g、氯化钠2g、水1000g。
实施例11
一种水产养殖水体净化剂的制备方法：
将40重量份光合细菌剂、20重量份反硝化细菌剂、20重量份芽孢杆菌剂、10重量份辣木籽提取液和5重量份壳聚糖/纤维素复合微球在无菌桶中搅拌均匀后即得。
所述的光合细菌剂由实施例6、实施例7、实施例8中制备的光合细菌剂按质量比1:1:1混合均匀而成；所述的反硝化细菌剂为实施例9中制备得到的；所述的孢杆菌剂为实施例10中制备得到的。
实施例12
一种水产养殖水体净化剂的制备方法：
将40重量份光合细菌剂、20重量份反硝化细菌剂、20重量份芽孢杆菌剂在无菌桶中搅拌均匀后即得。
所述的光合细菌剂由实施例1、实施例2、实施例3中制备的光合细菌剂按质量比1:1:1混合均匀而成；所述的反硝化细菌剂为实施例4中制备得到的；所述的孢杆菌剂为实施例5中制备得到的。
实施例13
一种水产养殖水体净化剂的制备方法：
将40重量份光合细菌剂、20重量份反硝化细菌剂、20重量份芽孢杆菌剂、10重量份辣木籽提取液和5重量份壳聚糖/纤维素复合微球在无菌桶中搅拌均匀后即得。
所述的光合细菌剂由实施例1、实施例2、实施例3中制备的光合细菌剂按质量比1:1:1混合均匀而成；所述的反硝化细菌剂为实施例4中制备得到的；所述的孢杆菌剂为实施例5中制备得到的。
实施例14
与实施例13基本相同，其区别仅仅在于：所述的光合细菌剂由实施例1、实施例2中制备的光合细菌剂按质量比1:1混合均匀而成。
实施例15
与实施例13基本相同，其区别仅仅在于：所述的光合细菌剂由实施例1、实施例3中制备的光合细菌剂按质量比1:1混合均匀而成。
实施例16
与实施例13基本相同，其区别仅仅在于：所述的光合细菌剂由实施例2、实施例3中制备的光合细菌剂按质量比1:1混合均匀而成。
测试例1
分别取2Kg实施例11～16中制备的净水剂投入到六个鱼池中与一个未投放净水剂的鱼池做对照，七个鱼池的水深均为1.5米，面积均为一亩，之前均养殖草鱼。经过30天后对鱼池进行水质测定、水质测量的依据为GB11607-89中华人民共和国国家标准渔业水质标准和NY5051-2001无公害食品淡水养殖用水水质，测定指标及数据如表1、表2所示。
表1净水机加入到鱼池中30天后水体中亚硝酸盐、氨氮、活性磷盐的含量变化
表2净水剂加入到鱼池中30天后对水体pH、溶解氧的影响结果
测试例2
分别取2Kg实施例11～16中制备的净水剂投入到六个鱼池中与一个未投放净水剂的鱼池做对照，七个鱼池的水深均为1.5米，面积均为一亩，之前均养殖草鱼。
表3简单光合细菌对产品体重存活结果
| 投入数(尾) | 收货数(尾) | 存活率(％) | 平均体重(g) | |
| 未投放净水剂 | 180000 | 119193 | 66.22 | 15.8 |
| 实施例11 | 180000 | 125646 | 69.80 | 17.4 |
| 实施例12 | 180000 | 129643 | 72.02 | 18.2 |
| 实施例13 | 180000 | 155772 | 86.54 | 20.3 |
| 实施例14 | 180000 | 128268 | 71.26 | 17.6 |
| 实施例15 | 180000 | 128736 | 71.52 | 17.2 |
| 实施例16 | 180000 | 126648 | 70.36 | 18.1 |
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
Claims (10)
1.一种水产养殖水体净化剂，其特征在于，由下述重量份的原料制备而成：光合细菌剂40～50份、反硝化细菌剂10～20份、芽孢杆菌剂10～20份、辣木籽提取液10～20份和壳聚糖/纤维素复合微球4～6份。
2.如权利要求1所述的水产养殖水体净化剂，其特征在于：所述的光合细菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，将光合细菌接种于种子培养基中，在28～33℃，180rpm/min摇床中光照下培养菌体至菌体浓度达108～109CFU/mL，得到光合细菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL光合细菌种子液加入到发酵培养基中，在28～33℃，180rpm/min摇床中光照下培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到光合细菌剂。
3.如权利要求1所述的水产养殖水体净化剂，其特征在于：所述的反硝化细菌剂、芽孢杆菌剂的制备方法如下：
a)、种子液制备
在无菌的操作台上，反硝化细菌或者芽孢杆菌接种于种子培养基中，在28～33℃，180rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108～109CFU/mL，得到反硝化细菌种子液或者芽孢杆菌种子液；
b)、发酵培养
将5mL上述种子液加入到发酵培养基中，在28～33℃，180rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到1010CFU/mL时停止发酵，得到反硝化细菌剂或者芽孢杆菌剂。
4.如权利要求2～3所述的水产养殖水体净化剂，其特征在于：所述的种子培养基的pH为7.0～7.2，含有以下重量份的物质：氯化铵1～3份、醋酸钠4～6份、氯化镁0.1份、氯化钙0.1份、磷酸二氢钾1份、磷酸氢二钾0.5份、酵母膏0.1份、水1000份。
5.如权利要求2～3所述的水产养殖水体净化剂，其特征在于：所述的发酵培养基的pH为7.0～7.2，含有以下重量份的物质：多孔SiC陶瓷微粒8～10份、牛肉膏4～6份、蛋白胨8～12份、磷酸氢二钾5份、氯化钠2份、水1000份。
6.如权利要求2～3所述的水产养殖水体净化剂，其特征在于：所述的光合细菌为沼泽红假单胞菌CGMCC 1.2180、深红红螺菌CGMCC 1.3369、云南红球菌CGMCC 4.3558中的一种。
7.如权利要求2～3所述的水产养殖水体净化剂，其特征在于：所述的反硝化细菌为黄色海假单胞菌CGMCC 1.8020或者施氏假单胞菌CGMCC 1.8597。
8.如权利要求2所述的水产养殖水体净化剂，其特征在于：所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌CGMCC 1.504、地衣芽孢杆菌CGMCC 1.105、凝结芽孢杆菌CGMCC 1.10302、短小芽孢杆菌CGMCC 1.8167中的一种。
9.如权利要求5所述的水产养殖水体净化剂，其特征在于：所述的多孔SiC陶瓷微粒的制备方法如下：
a.取SiC粉、Al2O3粉和石墨加入到乙醇中，搅拌混合均匀，烘干后压制成坯体；
b.将步骤a中坯体放入马弗炉中煅烧，冷却至室温得到多孔SiC陶瓷片；
c.将步骤b得到的多孔SiC陶瓷片用粉碎机粉碎，得到多孔SiC陶瓷微粒。
10.一种水产养殖水体净化剂的制备方法，其特征在于：将40～50重量份光合细菌剂、10～20重量份反硝化细菌剂、10～20重量份芽孢杆菌剂、10～20重量份辣木籽提取液和4～6重量份壳聚糖/纤维素复合微球在无菌桶中搅拌均匀后即得。
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