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CN107099501B - 一种诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法和应用 - Google Patents

一种诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法。该方法对雌性幼龄灵长类动物给予促性腺激素释放激素或其类似物，并联合给予促性腺激素，诱导卵泡发育并获得成熟卵母细胞，即为雌性配子；雄性幼龄灵长类动物给予促性腺激素，并联合给予促性腺激素释放激素或其类似物，诱导睾丸精子发生并获得精子即为雄性配子；通过对获得的雌性配子和雄性配子进行受精，使受精卵发育至囊胚或子代。本发明采用的组合激素完成诱导幼龄灵长类动物性早熟，提早获得性腺配子，显著缩短灵长类动物的世代周期，加速繁殖其后代。本发明可实现快速大量扩繁幼龄灵长类动物，缩短世代周期，降低费用，为珍贵、濒危动物种质资源保存及基因编辑动物快繁提供经验借鉴。

Description

一种诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法和应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，更具体地，涉及一种诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法和应用。
背景技术
众所周知，一个物种的基因信息会随着其灭绝而丢失，在濒危动物日渐增多的今天，如何安全有效地从幼龄濒危动物获取性腺配子进而获得试管动物是拯救濒危动物的一大难题。
灵长类动物与人类基因同源性高，系统发育类似，而成为了生物医学研究的优秀实验模型。近年来由于基因突变导致的人类重大疾病越来越受重视，灵长类动物转基因模型也应运而生。随着基因编辑技术的不断革新，基因编辑变得越来越简易和高效。但得到的转基因灵长类动物往往为杂合子，或者靶基因序列不相同，要想得到靶基因序列相同的转基因灵长类动物就必须通过世代繁殖。自然情况下雌性食蟹猴3岁左右才能达到性成熟，雄性食蟹猴所需时间更长，一般要到4.5岁左右才能达到性成熟，以及食蟹猴孕期较长(约165天)，而且几乎均为单胎，这就决定了需要很长的时间才能得到子代转基因灵长类动物。
诱导幼年动物性早熟是快速繁殖后代和保存物种的一种重要方法。目前对于性早熟的研究主要集中在雌性性早熟的治疗和与性早熟有关基因的探究方面。下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)是性早熟发生的基础机制。下丘脑-垂体-性腺轴在生殖系统形成时便已存在，性成熟前一直处于发育不健全状态，不能促进性腺发育和性源配子的产生。
目前，可从幼龄灵长类动物获得性源配子的方法只有睾丸组织的异种移植(Liuet al.,Generation of macaques with sperm derived from juvenile monkeytesticular xenografts[J].Cell Research,2016,26(1):139-142)，但该方法有很大的缺陷：(1)首先需对幼猴进行睾丸切除，对幼猴的伤害无法恢复，且不能重复；(2)用时较长，移植12个月后才能获得性源配子；(3)提供睾丸组织的猴的年龄较大。目前，如何能在较短的时间内获得幼龄动物性腺配子，继而获得其囊胚或子代，又不对灵长类动物造成伤害的方法尚未见相关报道。
发明内容
为了解决上述现有技术中存在的不足之处，本发明提供一种诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法。该方法采用组合激素的方法实现诱导幼龄灵长类动物性早熟，获得其精子或成熟卵母细胞，继而获得其囊胚或子代，这极大缩短灵长类动物世代周期，加速繁殖其后代，克服了灵长类动物幼龄在性成熟前神经内分泌器官发育不足的生殖生理现象，特别针对珍贵非人灵长类、基因编辑幼龄非人灵长类的快速繁殖。这不仅诱导灵长类动物幼龄的性早熟，而且快速繁殖其子代，节约时间并创造经济效益。
本发明的目的通过下述技术方案来实现：
一种诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法，包括以下具体步骤：
S1.诱导雌性幼龄灵长类动物：(1)对雌性幼龄灵长类动物每天给予促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物，直到诱导处理结束；(2)当血浆雌激素水平提高5～15倍后，同时给予促卵泡素；(3)在停止使用促卵泡素的当天，同时给予促性腺激素；(4)此后持续给予促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物，诱导雌性幼龄灵长类动物卵巢卵泡发育；
S2.对步骤S1诱导的雌性幼龄灵长类动物取卵泡液，获得卵母细胞，即为幼龄灵长类动物的雌性配子；
S3.诱导雄性幼龄灵长类动物：(1)对雄性幼龄灵长类动物给予促性腺激素，(2)当血浆睾酮水平提高5～15倍或连续给予20～40天后，停止给予促性腺激素，并开始给予促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物，诱导雄性幼龄灵长类动物睾丸精子发生；
S4.对步骤S3诱导的雄性幼龄灵长类动物获取精液和精子，其精子即为幼龄灵长类动物的雄性配子。
为了验证对上述步骤S2中所述的幼龄灵长类动物的雌性配子和步骤S4中所述的幼龄灵长类动物的雄性配子的发育能力，对雌性配子和雄性配子进行受精，受精卵发育至囊胚阶段，继而获得其囊胚或子代。在实施例中也证明组合激素诱导幼龄食蟹猴成功获得成熟性腺配子。显然地，上述方法可以显著缩短灵长类动物的世代周期，加速繁殖其后代。
优选地，步骤S1(1)中所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予量按幼龄动物的体重计为0.1～50微克/公斤/次，所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予的频率为1～288次/天，连续给予15～60天。
优选地，步骤S1(2)中所述促性腺激素释放激素和促卵泡素的同时给予时间为6～12天，所述促卵泡素的每次给予量为5～35IU/公斤，所述促卵泡素的给予频率为1～4次/天；所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予量和给予频率与步骤S1(1)中相同。
优选地，步骤S1(3)中所述促性腺激素为人绒毛膜促性腺激素或促黄体素，所述促性腺激素按幼龄动物的体重计的给予量为100～500IU/公斤，只给予1次；所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予量和给予频率与步骤S1(1)中相同；步骤S1(4)中所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予量和给予频率与步骤S1(1)中相同。
优选地，步骤S3(1)中所述促性腺激素为促黄体素、人绒毛膜促性腺激素或马绒毛膜促性腺激素，所述促性腺激素的每次给予量按幼龄动物的体重计为100～500IU/公斤，所述促性腺激素的给予频率为1～7次/周。
优选地，步骤S3(2)中所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予量按幼龄动物的体重计为0.1～50微克/公斤，所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予频率为1～288次/天，连续给予15～120天。
优选地，步骤S1(1)和S3(3)中所述促性腺激素释放激素类似物为戈那瑞林、曲普瑞林或戈舍瑞林。
优选地，步骤S1和S3所述幼龄灵长类动物为断乳后至性成熟前阶段的灵长类动物。
更为优选地，所述的灵长类动物为恒河猴、食蟹猴、豚尾猴、日本猴或短尾猴。
上述方法在非人灵长类、基因编辑幼年非人灵长类和濒危动物的保护中的应用。
下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)是性早熟发生的基础机制。下丘脑-垂体-性腺轴在生殖系统形成时便已存在，性成熟前处于发育不健全状态，不能促进性腺发育和性源配子的产生。本发明使用的促性腺激素释放激素(GnRH)是由下丘脑分泌，刺激垂体促性腺激素的分泌，诱导性腺发育。在生殖器官组织中，促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)与GnRH的作用系统或相似，有些GnRHa的作用效果更加强烈，或者持续作用时间长。促性腺激素是调节脊椎动物性腺发育，促进性激素生成和分泌的糖蛋白激素，如垂体前叶分泌的黄体生成素(又称促黄体素，LH)和促卵泡素(FSH)，两者协同作用，刺激卵巢或睾丸中生殖细胞的发育及性激素的生成和分泌。人胎盘分泌的绒毛膜促性腺激素(hCG)具有FSH和LH的功能，在胎儿垂体分泌LH以前，刺激胎儿睾丸分泌睾酮促进男性性分化；还可促进性腺发育，对男性能刺激睾丸中间质细胞的活力，增加雄性激素(睾酮)的分泌。孕马血清促性腺激素(也叫马绒毛膜促性腺激素)也具有类似FSH和LH的双重活性，在生产上常用以代替较昂贵的FSH而广泛应用于动物的诱发发情、超数排卵或增加排卵率，对雄性动物具有促使精细管发育和性细胞分化的功能。
本发明采用联合给药的方式，对于雌性幼龄灵长类动物，给予促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物，根据性腺应答继续给予第二种生殖激素，联合刺激动物卵巢卵泡发育，通过取卵获得幼龄灵长类动物的成熟卵子。对于雄性幼龄灵长类动物，给予促性腺激素(马绒毛膜促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素或促黄体生长素)，根据性腺应答继续给予第二种生殖激素，通过人工刺激采集精液的方法，获得活动的精子。所获得的卵子和精子，即为灵长类动物幼龄的性腺配子。
由于进化分类上猕猴属具有相似生殖系统结构与功能特点，如恒河猴、食蟹猴、豚尾猴、日本猴和短尾猴的月经周期等生殖特点非常相似。因此本发明也可用于恒河猴、食蟹猴、豚尾猴、日本猴或短尾猴的研究和保护。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1.本发明首次采用组合激素的方法实现诱导灵长类动物幼龄性早熟，获得其精子或成熟卵母细胞，继而获得其囊胚或子代，显著缩短灵长类动物的世代周期，加速繁殖其后代，可用于诱导幼龄灵长类动物性早熟；
2.本发明的方法可大量、快速、可重复性获得灵长类动物幼龄成熟卵母细胞和活动的精子，使其性腺成熟周期缩短为0.5～4年，显著缩短了灵长类动物世代周期，节省时间和提高繁殖效率，有效减少了生产成本或者实验经费开支；
3.本发明对濒危、珍贵、基因编辑(基因突变或转基因)等灵长类动物的研究提供经验借鉴。
附图说明
图1为组合激素处理幼猴获得雌性配子和雄性配子的照片。
图2为组合激素处理前与处理后雄性幼猴血清睾酮的水平变化。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
实施例中采用的食蟹猴均来自广东蓝岛生物技术有限公司提供，经检验无特定病原体，体重约为1～3公斤。
实施例1
促性腺激素释放激素类似物(戈那瑞林)联合人促卵泡激素和人绒毛膜促性腺激素诱导幼龄雌猴获得性腺配子。
1.取一只1岁龄雌性食蟹猴幼猴，体重为1.0公斤，尚未有任何提前性成熟症状，如血浆雌二醇水平在20ng/mL，其它生理方面未见异常。
2.每天注射戈那瑞林的用量28.8微克，将其溶解在生理盐水中并分成288等分，间隔5分钟皮下注射1次，注射60天。
3.开始注射戈那瑞林之后，每周抽血一次，检测血浆雌激素水平，可观察到幼猴性皮肤范围逐渐增大，颜色渐变为鲜红，说明了血浆雌激素水平升高，雌性幼猴逐渐达到性成熟。并测得雌激素浓度由最初的20ng/mL上升并达到80ng/mL。
4.继续注射戈那瑞林，并同时开始注射5IU重组人促卵泡素每天4次，连续注射12天，在停止注射重组人促卵泡激素后，注射500IU人绒毛膜促性腺激素1次，继续注射与步骤2中相同剂量的戈那瑞林，并在这之后35～36小时内借助于腹腔镜观察卵巢和吸取卵泡液，同时结束注射。
5.在体视显微镜下观察卵泡液中卵母细胞，卵母细胞出现第一极体即为成熟卵母细胞。获得22枚卵母细胞，其中成熟卵母细胞15枚(见图1)，即为灵长类幼龄的雌性配子。
6.利用单精子注射的受精方法使成熟卵母细胞受精，常规体外胚胎培养方法培养受精卵，受精卵发育至囊胚，且囊胚发育率达到40％。
图1中(a)为组合激素处理雌性幼猴获得的成熟卵母细胞。从图1(a)中可以看到出现第一极体的成熟卵母细胞。说明组合激素诱导幼龄雌性食蟹猴成功获得性腺配子。
实施例2
人绒毛膜促性腺激素联合促性腺激素释放激素类似物(戈那瑞林)诱导幼龄雄性食蟹猴获得性腺配子。
1.取一只2岁龄雄性食蟹猴幼猴，体重1.6公斤，尚未有任何提前性成熟症状，如血浆睾酮水平小于1.0ng/mL，其它生理方面未见异常。
2.每天注射1次160IU马绒毛膜促性腺激素，连用15天。在开始马绒毛膜促性腺激素之前一周和注射之后每周抽血一次，检测血浆睾酮水平达到5.0ng/mL。
3.继而开始每天注射促性腺激素释放激素类似物戈那瑞林60μg，将其溶解在生理盐水中，分为六等份，每天间隔3小时连续肌肉注射6次，注射90天。
4.继续给予步骤3中相同剂量和相同方法的戈那瑞林，同时利用人工诱导采精方法，刺激幼猴直肠或者阴茎，诱导幼猴排出精液，获取精液及正常运动的活精子，即为灵长类动物幼龄的雄性配子(见图1b)。间隔1周，可重复人工诱导采精方法和获取精液。
5.利用获得的精子进行单精子注射，使成熟卵母细胞受精，常规体外胚胎培养方法培养受精卵，受精卵发育至囊胚，且囊胚发育率达到50％。
图1中(b)为组合激素处理雄性幼猴获得的成熟精子。从图1中可以看到结构完整的成熟精子。说明组合激素诱导幼龄雄性食蟹猴成功获得性腺配子。图2为组合激素处理前与处理后雄性幼猴血清睾酮的水平变化。从图2中可以看出组合激素处理后幼猴睾酮水平明显升高。说明雄性幼猴能够对组合激素刺激很快应答，雄性幼猴逐渐达到性成熟(血清睾酮水平升高是雄性性成熟的重要指标)。
实施例3
人绒毛膜促性腺激素联合促性腺激素释放激素类似物(戈那瑞林)诱导幼龄雄性食蟹猴获得性腺配子。
1.取一只3岁龄雄性食蟹猴幼猴3.5kg，尚未有任何提前性成熟症状，如血浆睾酮水平小于1.0ng/mL，其它生理方面未见异常。
2.每周注射1次1750IU马绒毛膜促性腺激素，连用3周。在开始马绒毛膜促性腺激素之前一周和注射之后每周抽血一次，检测血浆睾酮水平达到10.0ng/mL以上。
3.继而开始每天注射戈那瑞林80μg，将其溶解在生理盐水中，分为4等份，每天间隔6小时连续肌肉注射4次，注射15天。
4.继续给予步骤3中相同剂量和相同方法的戈那瑞林，同时利用人工诱导采精方法，刺激幼猴直肠或者阴茎，诱导幼猴排出精液，获取精液及正常运动的活精子，即为灵长类动物幼龄的雄性配子。间隔1周，可重复人工诱导采精方法和获取精液。
实施例4
人绒毛膜促性腺激素联合促性腺激素释放激素类似物(戈那瑞林)诱导幼龄雄性恒河猴获得性腺配子。
1.取一只1岁龄雄性恒河猴幼猴，体重为1.5公斤，尚未有任何提前性成熟症状，如血浆睾酮水平小于1.0ng/mL，其它生理方面未见异常。
2.每天注射1次200IU人绒毛膜促性腺激素，连用30天。在开始人绒毛膜促性腺激素之前一周和注射之后每周抽血一次，检测血浆睾酮水平达到5.0ng/mL以上。
3.继而开始每天注射戈那瑞林40μg，将其溶解在生理盐水中，分为9等份，每天间隔2小时连续肌肉注射9次，注射120天。
4.继续给予步骤3中相同剂量和相同方法的戈那瑞林，同时利用人工诱导采精方法，刺激幼猴直肠或者阴茎，诱导幼猴排出精液，获取精液及正常运动的活精子，即为灵长类动物幼龄的雄性配子。间隔1周，可重复人工诱导采精方法和获取精液。
实施例5
促性腺激素释放激素类似物(曲普瑞林)联合人促卵泡激素和人绒毛膜促性腺激素诱导幼龄雌猴获得性腺配子。
1.取一只2.5岁龄雌性食蟹猴幼猴，体重为2.5公斤，尚未有任何提前性成熟症状，如血浆雌二醇水平低于20ng/mL，其它生理方面未见异常。
2.每天注射曲普瑞林的用量125微克，将其溶解在生理盐水中每天注射1次，注射15天。
3.开始注射曲普瑞林之后，每周抽血一次，检测血浆雌激素水平。并测得雌激素浓度由最初低于20ng/mL上升并达到80ng/mL。
4.继续注射曲普瑞林，并同时开始注射87.5IU重组人促卵泡素每天1次，连续注射6天，在停止注射重组人促卵泡激素后，注射1250IU人绒毛膜促性腺激素1次，继续注射步骤3中相同剂量的曲普瑞林，并在这之后32-36小时内借助于腹腔镜观察卵巢和吸取卵泡液，同时结束注射。
5.在体视显微镜下捡卵泡液中卵母细胞。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合和简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法，其特征在于，包括以下具体步骤：
S1.诱导雌性幼龄灵长类动物：所述的灵长类动物为恒河猴、食蟹猴、豚尾猴、日本猴或短尾猴；(1)对雌性幼龄灵长类动物每天给予促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物，直到诱导处理结束；所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予量按幼龄动物的体重计为28.8～50微克/公斤/天，连续给予15-60天；(2)当血浆雌激素水平提高4～5倍后，同时给予促卵泡素；所述促性腺激素释放激素和促卵泡素的同时给予时间为6～12天，所述促卵泡素的每天给予量为20～35IU/公斤；(3)在停止使用促卵泡素的当天，同时给予促性腺激素；所述促性腺激素为人绒毛膜促性腺激素或促黄体素，所述促性腺激素按幼龄动物的体重计的给予量为500IU/公斤，只给予1次；(4)此后持续给予促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物，诱导雌性幼龄灵长类动物卵巢卵泡发育；其中，(1)-(4)中所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予量按幼龄动物的体重计均为28.8～50微克/公斤/天，连续给予15-60天；所述促性腺激素释放激素类似物为戈那瑞林、曲普瑞林或戈舍瑞林；
S2.对步骤S1诱导的雌性幼龄灵长类动物取卵泡液，获得卵母细胞，即为幼龄灵长类动物的雌性配子；
S3.诱导雄性幼龄灵长类动物：(1)对雄性幼龄灵长类动物给予促性腺激素，所述促性腺激素为促黄体素、人绒毛膜促性腺激素或马绒毛膜促性腺激素，所述促性腺激素的给予量按幼龄动物的体重计为100～500IU/公斤/天，所述促性腺激素的给予频率1-7次/周；(2)当血浆睾酮水平提高5～10倍或连续给予20～40天后，停止给予促性腺激素，并开始给予促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物，诱导雄性幼龄灵长类动物睾丸精子发生；所述促性腺激素释放激素类似物为戈那瑞林、曲普瑞林或戈舍瑞林；所述促性腺激素释放激素或促性腺激素释放激素类似物的给予量按幼龄动物的体重计为22.9～37.5微克/公斤/天，给予时间分别为15～120天；
S4.对步骤S3诱导的雄性幼龄灵长类动物获取精液和精子，其精子即为幼龄灵长类动物的雄性配子；所述幼龄灵长类动物的性腺成熟周期缩短为0.5～4年。
2.根据权利要求1所述的诱导幼龄灵长类动物获取性腺配子的方法，其特征在于，步骤S1和S3所述幼龄灵长类动物为断乳后至性成熟前阶段的灵长类动物。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113615638B (zh) * 2020-05-08 2022-12-27 中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心 一种性早熟动物模型的构建方法及其应用
KR102234367B1 (ko) * 2020-09-07 2021-03-31 바이오메디팜 어업회사법인 주식회사 연어의 정소로부터 고순도 피디알엔의 추출 방법

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102296047A (zh) * 2011-08-13 2011-12-28 新疆农垦科学院 利用羔羊超排卵母细胞生产体外胚胎的方法
CN102370973A (zh) * 2010-08-26 2012-03-14 四川大学华西医院 一种恒河猴卵巢及卵泡生成模型的制备方法
WO2013010840A2 (en) * 2011-07-18 2013-01-24 Arts Biologics A/S Long acting biologically active luteinizing hormone (lh) compound
CN106137448A (zh) * 2015-03-19 2016-11-23 河北工程大学 一种诱导高产奶牛定时排卵和提高受胎率的方法
CN108289836A (zh) * 2015-10-05 2018-07-17 奥斯塔拉生物医学公司 用于管理生殖的方法和组合物

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102370973A (zh) * 2010-08-26 2012-03-14 四川大学华西医院 一种恒河猴卵巢及卵泡生成模型的制备方法
WO2013010840A2 (en) * 2011-07-18 2013-01-24 Arts Biologics A/S Long acting biologically active luteinizing hormone (lh) compound
CN102296047A (zh) * 2011-08-13 2011-12-28 新疆农垦科学院 利用羔羊超排卵母细胞生产体外胚胎的方法
CN106137448A (zh) * 2015-03-19 2016-11-23 河北工程大学 一种诱导高产奶牛定时排卵和提高受胎率的方法
CN108289836A (zh) * 2015-10-05 2018-07-17 奥斯塔拉生物医学公司 用于管理生殖的方法和组合物

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