CN107048048A - 一种基因编辑实验鼠饲料 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种基因编辑实验鼠饲料，包括如下重量份数的各组分：玉米30‑35份、小麦10‑15份、豆粕15‑20份、碎米5‑12份、鱼粉3‑10份、油1‑5份、酵母水解物2‑9份、石粉0.8‑1.2份、磷酸氢钙1‑2份、复合矿物质0.5‑1份、复合维生素0.1‑0.5份、蛋氨酸0.1‑0.2份、赖氨酸0.1‑0.2份。本发明营养均衡、饲料适口性好，能够增加基因编辑实验鼠采食量，促进生长繁育效果明显，显著提高基因编辑实验鼠的成活率，其营养指标符合《实验动物全价营养饲料》国家标准GB14924.3‑2010中营养指标的要求，卫生指标符合《实验动物全价营养饲料》国家标准GB14924.1‑2010中卫生指标的要求，本发明基因编辑实验鼠饲料应用前景良好。

Description

一种基因编辑实验鼠饲料

技术领域

本发明属于实验动物营养学领域，更具体地，涉及一种基因编辑实验鼠饲料。

背景技术

基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行编辑，实现对特定DNA片段的敲除、加入等。主要有以下三个执行手段：（1）基因敲除：如果想使某个基因的功能丧失，可以在这个基因上产生双链DNA断裂（DSB），非同源末端连接修复的过程中往往会产生DNA的插入或删除，造成移码突变，从而实现基因敲除；（2）特异突变引入：如果想把某个特异的突变引入到基因组上，需要通过同源重组来实现，这时提供一个含有特异突变同源模板。正常情况下同源重组效率非常低，而在这个位点产生DSB会极大的提高重组效率，从而实现特异突变的引入；（3）定点转基因：与特异突变引入的原理一样，在同源模板中间加入一个转基因，这个转基因在DSB修复过程中会被拷贝到基因组中，从而实现定点转基因。通过定点转基因的方法可以把基因插入到人的基因组AAVS1位点，这个位点是一个开放位点，支持转基因长期稳定的表达，破坏这个位点对细胞没有不良影响，因此被广泛利用。

目前，随着基因编辑技术的成熟，通过基因编辑技术处理的实验鼠动物模型在人类疾病的研究领域的地位日渐重要。特别是实验鼠与人类基因组高度同源，对于人类疾病特点和药物效果反应高度一致，因此实验鼠已经是人类疾病研究中最重要的实验动物。

由于通过基因编辑后的实验鼠免疫系统功能明显弱于常规实验鼠，因此其具有生长缓慢、繁育能力低下等特点，使用常规的实验鼠饲料饲喂基因编辑后的实验鼠会引起营养不良、生育能力退化以及导致实验鼠死亡，因此需要针对基因编辑实验鼠研发专用饲料。

发明内容

针对上述现有技术中的不足，发明人经过科学设计、实验观察，研制了一种基因编辑实验鼠饲料，用于通过基因编辑技术处理后的模式实验鼠的生长繁殖。

本发明的上述目的是通过以下技术方案予以实现的。

一种基因编辑实验鼠饲料，包括如下重量份数的各组分：玉米30-35份、小麦10-15份、豆粕15-20份、碎米5-12份、鱼粉3-10份、油1-5份、酵母水解物2-9份、石粉0.8-1.2份、磷酸氢钙1-2份、复合矿物质0.5-1份、复合维生素0.1-0.5份、蛋氨酸0.1-0.2份、赖氨酸0.1-0.2份。

由于基因编辑实验鼠自身的生理特性，如果用常规的实验鼠饲料饲喂后极易导致实验鼠生长缓慢、繁育性能低下甚至死亡，本发明通过使用玉米、小麦、豆粕、碎米、鱼粉、油、酵母水解物、石粉、碳酸氢钙、复合矿物质、复合维生素、蛋氨酸、赖氨酸为原料制成实验鼠饲料，具有适口性好、营养均衡、促进生长繁育效果明显，能够增加采食量和成活率的功效。具体而言，所述豆粕作为大豆提取豆油后的一种副产品，有豆粕的特殊香味，是实验鼠饲料的主食之一。所述酵母水解物为酵母细胞的水解产物，通过自溶或通过外加酶水解得到，富含氨基酸、小肽、谷胱甘肽及核酸类物质。本配方中豆粕、酵母水解物一方面具有丰富的营养，可以与所述蛋氨酸、赖氨酸相互配合，及与所述复合维生素配合，为基因编辑实验鼠提供所需的氨基酸、酶类、多肽、乳酸、维生素、促生长因子等；另一方面，酵母水解物中的核苷酸物质，以及豆粕经益生菌发酵水解过程会产生大量具有独特生理活性功能的小肽混合物，易于消化吸收，有效刺激肠道内有益菌的增殖，调节体内微生态菌群的结构，增加整个消化道对饲料营养物质的分解、合成、吸收和利用，对基因编辑实验鼠具有增强机体免疫力、促进细胞再生和修复、促进肠道发育、抗氧化及维持肠道正常菌群的作用，避免肠道疾病的发生，提高实验鼠对饲料蛋白质和能量的利用率；再者酵母水解物中的肌苷酸和鸟苷酸，结合特有的发酵香味，可作为增鲜呈味剂，适口性好，增加动物的采食量。此外，所述石粉、磷酸氢钙和符合矿物质相互配合提供实验鼠所需的矿物质营养元素，能促使饲料消化，使实验鼠体重增加。

综上，发明人经过大量科学设计、实验观察研究配制出本饲料配方，各组分优化配比，有效解决了现有基因编辑实验鼠生长缓慢、繁育性能低及死亡率低的情况；针对基因编辑实验鼠的生理特征，制作适口性好、营养均衡的饲料，满足基因编辑实验鼠生产繁育的需求，饲料增加酵母水解物促进实验鼠消化吸收能力，提升实验鼠采食量。饲料所有营养指标均满足国家标准要求，微生物和卫生指标均控制字国标允许范围内。本发明营养均衡、促进生长繁育效果明显、质量稳定可靠。

优选地，由如下重量份数的各组分组成：玉米30-33份、小麦13-15份、豆粕19.5-20份、碎米10-12份、鱼粉8-8.5份、油2.5-3份、酵母水解物7.4-8.5份、石粉1.1-1.2份、磷酸氢钙1.0份、复合矿物质0.6份、复合维生素0.4份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

优选地，由如下重量份数的各组分组成：玉米30份、小麦15份、豆粕20份、碎米12份、鱼粉8份、油3份、酵母水解物8.4份、石粉1.2份、磷酸氢钙1份、复合矿物质0.6份、复合维生素0.4份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

优选地，所述酵母水解物的制备方法如下：以新鲜酿酒酵母为原料，经自溶、酶解、浓缩、干燥精制而成。该方法制得的酵母水解物能够显著提高实验鼠的采食量，与其他酵母水解物相比，口感醇厚适中、无苦涩感。

优选地，所述复合矿物质中各元素所占的质量百分比为：铜6%、铁6%、锰1.3%、锌4.2%、硒0.3%、镁1.5%、碘0.13%、钴0.02%，余量为载体沸石粉。

优选地，所述复合维生素为维生素A、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、泛酸钙、烟酸、生物素或叶酸中的两种以上的混合物。

优选地，所述油为植物油；所述豆粕为黄豆粕，其粗蛋白质的含量达到40~50%；所述玉米为东北玉米。

本发明还提供所述基因编辑实验鼠饲料的制备方法，包括如下步骤：S1. 原料配制：将玉米、小麦、黄豆粕和碎米粉碎后，与剩余原料进行充分混合；S2. 调制制粒：将混合好的原料投入颗粒制粒机，在80-120℃的蒸汽下制成颗粒饲料；S3. 饲料筛选：将制作好的颗粒饲料进行筛选，保留粒径11-13mm，长度为30-40mm的颗粒饲料；S4. 营养监测及包装：对筛选好的饲料进行营养指标、卫生指标、微生物指标检测，对于符合标准的饲料进行包装、储存。

更优选地，所述颗粒饲料的粒径12mm。

与现有技术相比，本发明有益效果在于：本发明营养均衡、促进生长繁育效果明显；适口性好，能够增加基因编辑实验鼠采食量；本发明可有效降低基因编辑实验鼠的的死淘率，明显提高生长速度，促进肠道健康，降低胃肠道疾病发生率；富含功能性小肽及多种酵素，消化吸收率高，可有效提高饲料利用率，富含核苷酸、活性肽及免疫多糖等活性成分，可显著提高动物的非特异性免疫力，增强抗病力；营养指标符合《实验动物全价营养饲料》国家标准GB14924.3-2010中营养指标的要求，卫生指标符合《实验动物全价营养饲料》国家标准GB14924.1-2010中卫生指标的要求，在促进实验鼠进食方面具有较好的应用前景。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

经研究发现，本发明饲料按照以下制备方法相较于常规方法制成的饲料功效较优，具体包括如下步骤：S1. 原料配制：将玉米、小麦、豆粕和碎米粉碎后，与剩余原料进行充分混合；S2. 调制制粒：将混合好的原料投入颗粒制粒机，在80-120℃的蒸汽下制成颗粒饲料；S3. 饲料筛选：将制作好的颗粒饲料进行筛选，保留粒径11-13mm，长度为30-40mm的颗粒饲料；S4. 营养监测及包装：对筛选好的饲料杀菌，并进行营养指标、卫生指标、微生物指标检测，对于符合标准的饲料进行包装、储存。

若无特殊说明，所述原料均采用市售材料。

以下以具体实施条件为例对本发明方法进行进一步说明。

实施例1

一种基因编辑实验鼠饲料，由如下重量份数的各组分组成：玉米30份、小麦15份、豆粕20份、碎米12份、鱼粉8份、油3份、酵母水解物8.4份、石粉1.2份、磷酸氢钙1份、复合矿物质0.6份、复合维生素0.4份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

上述饲料的制备方法包括如下步骤：S1. 原料配制：将玉米、小麦、豆粕和碎米粉碎后，与剩余原料进行充分混合；S2. 调制制粒：将混合好的原料投入颗粒制粒机，在100-120℃的蒸汽下制成颗粒饲料；S3. 饲料筛选：将制作好的颗粒饲料进行筛选，保留粒径12mm，长度为30-40mm的颗粒饲料；S4. 营养监测及包装：对筛选好的饲料进行营养指标、卫生指标、微生物指标检测，对于符合标准的饲料进行包装、储存。

实施例2

一种基因编辑实验鼠饲料，由如下重量份数的各组分组成：玉米32.4份、小麦13份、豆粕19.6份、碎米12份、鱼粉8.5份、油2.5份、酵母水解物8.5份、石粉1.1份、磷酸氢钙1份、复合矿物质0.6份、复合维生素0.4份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

上述饲料的制备方法与实施例1相同。

实施例3

一种基因编辑实验鼠饲料，由如下重量份数的各组分组成：玉米33份、小麦15份、豆粕20份、碎米10份、鱼粉8份、油3份、酵母水解物7.4份、石粉1.2份、磷酸氢钙1份、复合矿物质0.6份、复合维生素0.4份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

上述饲料的制备方法与实施例1相同。

实施例4

一种基因编辑实验鼠饲料，由如下重量份数的各组分组成：玉米35份、小麦12.5份、豆粕18.8份、碎米5份、鱼粉10份、油5份、酵母水解物9份、石粉0.8份、磷酸氢钙2份、复合矿物质1份、复合维生素0.5份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

上述饲料的制备方法与实施例1相同。

实施例5

一种基因编辑实验鼠饲料，由如下重量份数的各组分组成：玉米33.9份、小麦10份、豆粕15份、碎米12份、鱼粉10份、油5份、酵母水解物9份、石粉1.2份、磷酸氢钙2份、复合矿物质1份、复合维生素0.5份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

上述饲料的制备方法与实施例1相同。

实施例6

一种基因编辑实验鼠饲料，由如下重量份数的各组分组成：玉米35份、小麦15份、豆粕20份、碎米5份、鱼粉10份、油5份、酵母水解物6份、石粉1.2份、磷酸氢钙2份、复合矿物质0.5份、复合维生素0.1份、蛋氨酸0.1份、赖氨酸0.1份。

上述饲料的制备方法与实施例1相同。

实施例7

一种基因编辑实验鼠饲料，由如下重量份数的各组分组成：玉米35份、小麦15份、豆粕20份、碎米7.9份、鱼粉3份、油5份、酵母水解物9份、石粉1.2份、磷酸氢钙2份、复合矿物质1份、复合维生素0.5份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

上述饲料的制备方法基本与实施例1相同，不同之处在于，制备方法中步骤上S2所述蒸汽的调制温度为80-100℃。

对比例1

本对比例与实施例1一种基因编辑实验鼠饲料基本相同，具体由如下重量份数的各组分组成：玉米32.4份、小麦13份、豆粕14份、碎米12份、鱼粉8.5份、油2.5份、酵母水解物12份、石粉1.1份、磷酸氢钙1份、复合矿物质0.6份、复合维生素2.5份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

对比例2

本对比例与实施例1一种基因编辑实验鼠饲料基本相同，不同之处在于将所述酵母水解物替换为饲料酵母，其组分含量不变。

对比例3

本对比例一种基因编辑实验鼠饲料基本相同，具体由如下重量份数的各组分组成：玉米35份、小麦13份、豆粕20份、碎米8份、鱼粉5.6份、油2.5份、酵母水解物5份、石粉1.1份、磷酸氢钙3份、复合矿物质2份、复合维生素3份、蛋氨酸0.9份、赖氨酸0.9份。

对比例4

本对比例与实施例1一种基因编辑实验鼠饲料基本相同，不同之处在于，制备方法中步骤上S2所述蒸汽的调制温度为140-150℃，其他方法相同。

应用例动物实验

将基因编辑后的实验鼠按照日龄、体重、健康状况等情况均匀分组，分为7个实验组和4个对照组，每组3个重复，每个重复包括10只基因编辑后的实验鼠，实验在恒温、恒湿的实验室内统一进行，实验期间定时喂水、喂食（各组分别喂食对应配方饲料），得到各组实验鼠的死亡率和繁殖成活率如下表所示。

本发明实施例与对比例相比，喂养实验鼠的死亡率降低约20-40%，繁殖率提高约20-30%。对比例1改变了豆粕、酵母水解物、复合维生素的配比，对比例2将酵母水解物替换，营养物质搭配不如本发明丰富、合理，还显著影响实验鼠对于饲料的消化吸收效果；对比例3所述复合矿物质、复合维生素、蛋氨酸和赖氨酸等配比不在本发明范围内，无法实现本发明各组分之间的协同作用效果，饲料利用率低；对比例4的制备方法的改变将影响所述饲料的性质，影响其内活性物质的形态，对提高实验鼠非特异性免疫力的效果甚微，对实验鼠死亡率和繁殖率的改善较小。经实验对比发现，实施例1的配方为本发明的最优配比，实施例2~3的配方为本发明的较优配比；本发明基因编辑实验鼠饲料的配方及制备方法相较于现有饲料以及对比饲料，对实验鼠的采食量、成活率及生长繁育效果都有明显提高，可推广应用。

以上详细描述了本发明的实施，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种基因编辑实验鼠饲料，其特征在于，包括如下重量份数的各组分：玉米30-35份、小麦10-15份、豆粕15-20份、碎米5-12份、鱼粉3-10份、油1-5份、酵母水解物2-9份、石粉0.8-1.2份、磷酸氢钙1-2份、复合矿物质0.5-1份、复合维生素0.1-0.5份、蛋氨酸0.1-0.2份、赖氨酸0.1-0.2份。

2.根据权利要求1所述的一种基因编辑实验鼠饲料，其特征在于，由如下重量份数的各组分组成：玉米30-33份、小麦13-15份、豆粕19.5-20份、碎米10-12份、鱼粉8-8.5份、油2.5-3份、酵母水解物7.4-8.5份、石粉1.1-1.2份、磷酸氢钙1.0份、复合矿物质0.6份、复合维生素0.4份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

3.根据权利要求2所述的一种基因编辑实验鼠饲料，其特征在于，由如下重量份数的各组分组成：玉米30份、小麦15份、豆粕20份、碎米12份、鱼粉8份、油3份、酵母水解物8.4份、石粉1.2份、磷酸氢钙1份、复合矿物质0.6份、复合维生素0.4份、蛋氨酸0.2份、赖氨酸0.2份。

4.根据权利要求1~3任一项所述的一种基因编辑实验鼠饲料，其特征在于，所述酵母水解物的制备方法如下：以新鲜酿酒酵母为原料，经自溶、酶解、浓缩、干燥精制而成。

5.根据权利要求1~3任一项所述的一种基因编辑实验鼠饲料，其特征在于，所述复合矿物质中各元素所占的质量百分比为：铜6%、铁6%、锰1.3%、锌4.2%、硒0.3%、镁1.5%、碘0.13%、钴0.02%，余量为载体沸石粉。

6.根据权利要求1~3任一项所述的一种基因编辑实验鼠饲料，其特征在于，所述复合维生素为维生素A、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、泛酸钙、烟酸、生物素或叶酸中的两种以上的混合物。

7.权利要求1所述基因编辑实验鼠饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.原料配制：将玉米、小麦、豆粕和碎米粉碎后，与剩余原料进行充分混合；S2. 调制制粒：将混合好的原料投入颗粒制粒机，在80-120℃的蒸汽下制成颗粒饲料；S3. 饲料筛选：将制作好的颗粒饲料进行筛选，保留粒径11-13mm，长度为30-40mm的颗粒饲料；S4. 营养监测及包装：对筛选好的饲料进行营养指标、卫生指标、微生物指标检测，对于符合标准的饲料进行包装、储存。