CN106928219B

CN106928219B - 含氮稠杂环化合物、制备方法、中间体、组合物和应用

Info

Publication number: CN106928219B
Application number: CN201611265083.2A
Authority: CN
Inventors: 夏广新; 王倩; 石辰; 翟雄; 葛辉; 廖雪梅; 毛煜; 向志雄; 韩雅男; 霍国永; 刘彦君
Original assignee: Shanghai Phaarmaceuticals Holding Co ltd
Current assignee: Shanghai Phaarmaceuticals Holding Co ltd
Priority date: 2015-12-31
Filing date: 2016-12-30
Publication date: 2021-08-20
Anticipated expiration: 2036-12-30
Also published as: US20200239470A1; EP3398947A4; WO2017114512A1; JP6663021B2; US20190010153A1; EP3398947C0; CN106928219A; US10988476B2; US10662186B2; JP2019500389A; EP3398947A1; EP3398947B1

Abstract

本发明公开了含氮稠杂环化合物、制备方法、中间体、组合物和应用。本发明的如式I所示的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体、其互变异构体、其溶剂化物、其代谢产物或其药物前体，在分子水平对CDK4和CDK6的选择性高，且对其的抑制活性高，其在细胞水平对乳腺癌细胞的抑制活性较佳，其在动物水平对与周期蛋白依赖性激酶活性相关的肿瘤细胞也具有显著的抑制增殖作用，而且其对于人、鼠的肝微粒体稳定性良好，代谢酶无明显抑制，大小鼠体内吸收性质好，生物利用度高，具有较好的成药性。

Description

含氮稠杂环化合物、制备方法、中间体、组合物和应用

技术领域

本发明涉及一种含氮稠杂环化合物、制备方法、中间体、组合物和应用。

背景技术

肿瘤是一类细胞周期性疾病(Cell Cycle Disease,CCD)，调节或阻断细胞周期是治疗肿瘤的途径之一。目前，已发现的与细胞周期调控有关的分子很多，其中细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-Dependent-Kinases,CDKs)是细胞周期调控网络的核心分子。CDKs为催化亚单位，是一类丝氨酸(Ser)/苏氨酸(Thr)激酶，作为细胞内重要的信号转导分子，和周期素(cyclin)形成的CDK-cyclin复合物，参与细胞的生长、增殖、休眠或者进入凋亡。细胞周期调节蛋白在细胞增殖调控中发挥重要作用，在肿瘤细胞中，G1期周期素和CDK失常是最频繁的，可能有多种机制参与这些变化。这些变化常常通过肿瘤基因的活化和肿瘤抑制基因的沉默引起肿瘤发生。恶性细胞通过遗传和渐生机制影响细胞周期调控蛋白的表达，引起周期素的过表达和CDK抑制剂表达的丢失，随之而来的是CDK活性的失控。

细胞周期检测点(cell cycle checkpoint)是指控制细胞增殖周期中的限速位点，在DNA复制和有丝分裂前，负责确定DNA合成的完整性、监控DNA复制、DNA损伤修复和阻断细胞进入有丝分裂期，精确调节细胞周期的进行，以防止增殖周期中发生错误。细胞应答DNA损伤，使细胞周期检测点被激活，导致细胞周期阻断，以修复损伤的DNA，或者通过细胞凋亡或终止生长的方式诱导细胞死亡。细胞周期阻断经常发生在G1/S或G2/M交界处，细胞周期检测点调控分子也是抗肿瘤药物的新靶点。

在研发药物中，以flavopiridol、UCN-01等为代表的第一代CDK抑制剂为"pan-CDK"抑制剂，它们以等效的方式阻断CDK家族所有亚型，在临床试验中表现出了比较高的毒性，有的不能达到有效的治疗剂量，因此激发人们开始研发选择性CDK抑制剂，期望能提高治疗的选择性以及防止正常细胞受到一些副作用的损害。近年来，选择性CDK抑制剂等相继报导并进入临床实验。因此，寻找和发现高效、低毒的特异性细胞周期调节剂是抗肿瘤药物研究的一个热门领域。

发明内容

本发明所要解决的问题是现有的细胞周期调节剂由于特异性不高、选择性差等原因而显示出较大的临床副作用的缺陷，或者虽然选择性高但是活性不好的缺陷，而提供了一种含氮稠杂环化合物、制备方法、中间体、组合物和应用，该化合物在分子水平对CDK4和CDK6的选择性高，且对其的抑制活性高，其在细胞水平对乳腺癌细胞的抑制活性较佳，其在动物水平对与周期蛋白依赖性激酶活性相关的肿瘤细胞也具有显著的抑制增殖作用，而且其对于人、鼠等的肝微粒体稳定性良好，代谢酶无明显抑制，大小鼠体内吸收性质好，生物利用度高，具有较好的成药性。

本发明提供了一种如式I所示的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体、其互变异构体、其溶剂化物、其代谢产物或其药物前体；

其中，p和q独立地为0或1；

m和n独立地为0、1或2；

X和Y独立地为CH或N；

环

中的N原子为氧化态或非氧化态；

较佳地，所述的p和所述的q中至少一个为1(例如，当p和q均为1时，m为0、1或2，n为0；或者，当p和q均为1时，n为0、1或2，m为0；或者，当p为0时，q为1，m和n独立地为0、1或2；或者，当p为1时，q为0，m和n独立地为0、1或2)；

R¹为氢、羟基、氰基、巯基、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基、卤素(例如氟)、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(例如甲基、三氟甲基)、C₁～C₂₀烷巯基、取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基(例如甲氧基)、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基(例如环丙基)、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基、或“C₁～C₂₀烷基单取代、双取代或未取代的氨基”；其中，所述的“C₁～C₂₀烷基双取代的氨基”中的两个取代基相同或不同；

R²为氢、羟基、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基、卤素、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基(例如甲氧基)、取代或未取代的C₁～C₂₀烷巯基(例如甲巯基)、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基(例如环丙基)、氰基、“C₁～C₂₀烷基单取代、双取代或未取代的氨基”或

其中，所述的“C₁～C₂₀烷基双取代的氨基”中的两个取代基相同或不同；

R³为氢、取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基(例如甲基、乙基、异丙基、叔丁基、1-乙基丙基、1-环丙基乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、1-甲基-2,2,2-三氟乙基或环丙基甲基)、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基、取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基(例如1-甲基环丙基、环丙基、3-氧代环丁基、3-羟基环丁基、3-氟环丁基、3,3-二氟环丁基、环丁基、环戊基、环己基或

)、或取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基(例如C₃～C₅杂环烷基，进一步优选C₃杂环烷基；又例如3-氧杂环丁基、3-甲基-3-氮杂环丁基)；其中，所述的“杂环烷基”经其中的碳原子和其他基团进行连接，杂环烷基的杂原子为O、N和S中的一种或多种，杂原子的个数为1～3个，杂原子为N时，可进一步被C₁～C₃烷基所取代，杂原子的位置可在连接其他基团的碳原子的对位(如R³为

)；

所述R¹、R²和R³的“取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”、“取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基”和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷巯基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：卤素(例如氟，可为1、2或3个)、羟基、氧代(如C₃、C₄或C₅环烷基上连一个氧代基团，如

)、巯基、氰基、氨基、硝基、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷巯基、C₃～C₁₂环烷基(例如环丙基)和“C₁～C₂₀烷基单取代、双取代或未取代的氨基”；其中，所述的“C₁～C₂₀烷基双取代的氨基”中的两个取代基相同或不同；

R⁴为氢、卤素(例如氟)、C₁～C₆烷基、C₁～C₃烷氧基(例如甲氧基)、氰基或

所述的R²和R⁴中的R⁷独立地为氢、羟基、C₁～C₆烷基(例如甲基或乙基)、取代或未取代的C₃～C₈环烷基(例如环丁基、环丙基或4-甲基环已基)、C₁～C₆烷氧基或“C₁～C₆烷基单取代、双取代或未取代的氨基”；其中，所述的“取代或未取代的C₃～C₈环烷基”中所述的“取代”为被C₁～C₆烷基所取代；所述的“C₁～C₆烷基双取代的氨基”中的两个取代基相同或不同；

所述的R¹和所述的R⁴中至少一个为卤素；

R⁵为氢、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(例如，取代或未取代的C₁～C₆烷基，优选取代或未取代的甲基、乙基或丙基；又例如，取代或未取代的正丙基或异丙基；又例如，取代或未取代的2-甲基丙基；又例如，取代或未取代的1,2-二甲基丙基；例如，2-甲氧基乙基、2-羟基乙基、2-氟乙基、2,2,2-三氟乙基、二甲基氨基甲基或2-二甲基氨基-乙基)、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基(例如乙烯基)、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基(例如乙炔基、2-丁炔基或2-丙炔基)、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基(例如

)、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基(例如四氢吡咯基、

)、取代或未取代的C₁～C₉杂芳基、取代或未取代的C₃～C₁₂芳基、

所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子和其他基团进行连接；

所述的R⁵中，每个R⁸独立地为羟基、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”优选“取代或未取代的C₁～C₆烷基”，进一步优选“取代或未取代的甲基或乙基”；例如二甲基氨基甲基)、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基(例如乙烯基)、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基(例如乙炔基)、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₉杂芳基、取代或未取代的C₃～C₁₂芳基、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基(例如

)、取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基(例如甲氧基或乙氧基)或

其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

所述的R⁵中，每个R⁹独立地为氢、羟基、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(例如甲基、乙基、异丙基、氨基甲基、羟基甲基、羟基乙基、甲基氨基甲基、二甲基氨基甲基、2-二甲基氨基-乙基、

或甲氧基甲基；所述的“C₁～C₂₀烷基”可为甲基、乙基、

或

)、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基(例如乙烯基)、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基(例如乙炔基)、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基(例如环丁基、

或4-甲基环已基)、取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基(例如2-二甲基氨基-乙氧基；所述的“C₁～C₂₀烷氧基”可为甲氧基或乙氧基)、取代或未取代的C₃～C₁₂芳基、取代或未取代的C₁～C₉杂芳基、或取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基(例如

)、或

所述的R⁸和R⁹中的每个R^10a和R^10b独立地为氢、卤素、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(例如2-二甲基氨基-乙基或2-羟基乙基；其中，所述的“C₁～C₂₀烷基”可为乙基)、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₉杂芳基、取代或未取代的C₃～C₁₂芳基、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基(例如

)；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂芳基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂芳基”、“取代或未取代的C₁～C₂₀烷巯基”和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：

C₁～C₂₀烷基(例如甲基、异丙基)、C₂～C₂₀烯基(例如乙烯基)、C₂～C₂₀炔基(例如2-丙炔基)、羟基、硝基、羧基、醛基、巯基、三氟甲基、C₁～C₂₀硅烷基(如

其中，R^si1、R^si2、R^si3各自独立地为C₁～C₃烷基，如甲基)、卤素(例如氟，可为1、2或3个)、氰基、C₁～C₂₀烷氧基(例如甲氧基)、C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₉饱和或不饱和杂环烷基(所述的“取代”为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：亚甲基、氧代、硫代、卤素、三氟甲基、羟基、-PO(OH)₂、-PO(OR^ps)₂、丙炔基取代或未取代的C₁～C₂₀烷基、乙炔基取代或未取代的C₁～C₂₀烷基、C₁～C₆烯基、C₁～C₂₀炔基、-B(OH)₂和-B(OR^bs)₂，其中R^ps和R^bs独立地为C₁～C₆烷基，如甲基、乙基或丙基，所述C₁～C₂₀烷基可为C₁～C₆烷基，如甲基、乙基或丙基；不饱和杂环烷基例如

饱和杂环烷基例如

)、

硫脲基、C₃～C₁₂芳基、C₁～C₉杂芳基、

-SeR¹⁹和-SF₅；其中，杂原子可以被氧化，N原子可以季铵化；其中，所述的“杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

中的N原子为氧化态或非氧化态；

其中，R^11a和R^11b独立地为氢、卤素、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(如取代或未取代的C₁～C₆烷基，优选取代或未取代的C₁、C₂或C₃烷基；又例如-CF₃；又例如羟乙基、2-二甲氨基乙基)、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基(例如2-丙烯基)、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基(例如2-丙炔基)、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基(例如

所述的取代基例如“C₁～C₂₀烷基”)、胍基、硫脲基、取代或未取代的C₃～C₁₂芳基、取代或未取代的C₁～C₉杂芳基、

-SeR²⁶或-SF₅；其中，杂原子可以被氧化，N原子可以季铵化；其中，所述的“杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子与其他基团进行连接；或者，

中R^11a、R^11b及与它们相连接的N成共同形成

其中t和u独立地为1、2或3，R^c为C(R^cs)₂、NR^cs、O、S、Si(R^cs)₂或Se，每个R^cs独立地为H、C₁～C₆烷基(如甲基、乙基、丙基或异丙基)、或者B(OH)₂；或者，

中R^11a、R^11b及与它们相连接的N成共同形成

其中v和w独立地为1、2或3，R^ch为CH或PH₂，R^cx为CH₂、O、S或＝N-OH，R^cx较佳的与R^ch连接(例如

)，R^hc为H或C₁～C₆烷基(如甲基、乙基或丙基)，较佳的当R^ch为P时，R^hc为C₁～C₆烷基；或者，

中R^11a、R^11b及与它们相连接的N成共同形成

其中v1和w1独立地为1、2或3，R^c1和R^c2独立地为O、NH或N-CN；

其中，所述的R^11a和R^11b中所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂芳基”和“取代或未取代的C₁～C₉杂芳基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基(如乙烯基)、C₂～C₂₀炔基(如乙炔基)、羟基、硝基、羧基、醛基、巯基、C₁～C₂₀硅烷基(如

其中，R^si1、R^si2、R^si3各自独立地为C₁～C₃烷基，如甲基)、卤素、

三氟甲基、氰基、C₁～C₂₀烷氧基、C₃～C₁₂环烷基、C₁～C₉杂环烷基、C₃～C₁₂芳基、C₁～C₉杂芳基、

-SeR²⁶、

和-SF₅；其中，杂原子可以被氧化，N原子可以季铵化；其中，所述的“杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子与其他基团进行连接；

其中，每个R¹²独立地为氢、卤素、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、羟基、-CF₃、-SF₅、C₁～C₂₀烷氧基(例如甲氧基或乙氧基)或

其中，R¹³为氢、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、羟基、-CF₃、-SF₅或

其中，每个R¹⁴独立地为卤素、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、羟基、-CF₃、-SF₅、C₁～C₂₀烷氧基或

其中，每个R¹⁵、R^16a和R^16b独立地为氢、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、醛基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷巯基、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、

-CF₃、-SF₅、C₃～C₁₂环烷基、或、“C₁～C₂₀烷基取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”(例如

其中，R^17a独立地为氢、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、醛基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷巯基、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、-CF₃、-SF₅、-SeR²⁶、

C₃～C₁₂环烷基或“C₁～C₂₀烷基取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”(例如

其中，R^17b独立地为氢、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、醛基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、-CF₃、-SF₅、

-OR²⁸、C₃～C₁₂环烷基或“C₁～C₂₀烷基取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

或者，R^17a和R^17b与它们相连的碳原子、氮原子

共同形成取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基；其中，“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基(如乙烯基)、C₂～C₂₀炔基(如乙炔基)、羟基、硝基、羧基、醛基、巯基、C₁～C₂₀硅烷基(如

-SeR²⁶、

和-SF₅；其中，所述的“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

其中，R^18a和R^18b独立地为氢、卤素、羟基、氰基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、-CF₃、-SF₅、C₃～C₁₂环烷基或“C₁～C₂₀烷基取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

或者，R^18a、R^18b与它们相连的杂原子共同形成取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基；其中，“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基(如乙烯基)、C₂～C₂₀炔基(如乙炔基)、羟基、硝基、羧基、醛基、巯基、C₁～C₂₀硅烷基(如

-SeR²⁶、

和-SF₅；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

其中，R¹⁹为C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、C₃～C₁₂环烷基、C₁～C₉杂环烷基、C₃～C₁₂芳基、C₁～C₉杂芳基；

其中，所述的R²⁰独立地为氢、卤素、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、羟基、-CF₃、-SF₅、C₃～C₅杂芳基(其中杂原子数为1～3个，杂原子为O、N或S，例如

)、C₁～C₂₀烷氧基或

其中，所述的R^11a和R^11b中的R²¹独立地为卤素、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、羟基、-CF₃、-SF₅、C₁～C₂₀烷氧基或

其中，所述的R²²、R^23a和R^23b独立地为氢、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、醛基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷巯基、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、

-CF₃、-SF₅、C₃～C₁₂环烷基、或、“C₁～C₂₀烷基取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

其中，所述的R^24a独立地为氢、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、醛基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷巯基、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、-CF₃、-SF₅、

-SeR³¹，C₃～C₁₂环烷基或“C₁～C₂₀烷基取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

其中，所述的R^24b独立地为氢、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、醛基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、-CF₃、-SF₅、

-OR³²、C₃～C₁₂环烷基或“C₁～C₂₀烷基取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”(例如

或者，R^24a和R^24b与它们相连的碳原子、氮原子共同形成取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基；其中，“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、醛基、羧基、巯基、C₁～C₂₀硅烷基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基(如乙烯基)、C₂～C₂₀炔基(如乙炔基)、-CF₃、-SF₅、

-OR³²、

C₃～C₁₂环烷基、C₁～C₉杂环烷基、C₃～C₁₂芳基、C₁～C₉杂芳基、

-SeR³¹、“C₁～C₂₀烷基单取代，双取代或未取代的氨基”和-SF₅；其中，所述的“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

其中，所述的R^25a和R^25b独立地为氢、卤素、羟基、氰基、C₁～C₂₀烷氧基(例如乙氧基)、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、-CF₃、-SF₅、C₃～C₁₂环烷基或“C₁～C₂₀烷基取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”(例如

或

或者，R^25a和R^25b与它们相连的杂原子共同形成取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基；其中，“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、醛基、羧基、巯基、C₁～C₂₀硅烷基、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷基(例如甲基)、C₂～C₂₀烯基(如乙烯基)、C₂～C₂₀炔基(如乙炔基)、-CF₃、-SF₅、

-OR³²、

-SeR³¹、“C₁～C₂₀烷基单取代，双取代或未取代的氨基”和-SF₅；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

其中，所述的R²⁶独立地为C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、C₃～C₁₂环烷基、C₁～C₉杂环烷基、C₃～C₁₂芳基或C₁～C₉杂芳基；

其中，所述的R^27a和R^27b独立地为氢、卤素、羟基、氰基、醛基、C₁～C₂₀烷氧基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、-CF₃、-SF₅、C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基(例如

)、

或者取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(例如C₁～C₆烷基，优选甲基、乙基或丙基)；其中，所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”和“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：卤素、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷巯基和C₁～C₂₀硅烷基；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

其中，所述的R²⁸独立地为C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、或者、取代或未取代的C₁～C₂₀硅烷基；其中，所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀硅烷基”中取代基为C₂～C₂₀烯基或C₂～C₂₀炔基；

其中，所述的R^29a和R^29b独立地为为氢、卤素、羟基、氰基、醛基、C₁～C₂₀烷氧基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、-CF₃、-SF₅、C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基(例如

)、或者、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基；其中，所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”和“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：卤素、C₁～C₂₀烷氧基、C₁～C₂₀烷巯基和C₁～C₂₀硅烷基；其中，所述的“C₁～C₉杂环烷基”经其中的碳原子和其他基团进行连接；

其中，所述的R³⁰独立地为氢、羟基、卤素取代或未取代的C₁～C₂₀烷基、或者、C₁～C₂₀烷基单取代、双取代或未取代的氨基；

其中，所述的R³¹独立地为氢、氰基、硝基、羟基、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、C₃～C₁₂环烷基、C₁～C₉杂环烷基、C₆～C₁₂芳基、或者、C₁～C₉杂芳基；

其中，所述的R³²独立地为C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、或者、取代或未取代的C₁～C₂₀硅烷基；其中，所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀硅烷基”中取代基为C₂～C₂₀烯基或C₂～C₂₀炔基；

其中，所述的每个R^33a和R^33b独立地为氢、羟基、氰基、硝基、卤素、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、C₁～C₂₀烷氧基、C₃～C₁₂环烷基、C₁～C₉杂环烷基、C₆～C₁₂芳基、或者、C₁～C₉杂芳基；

R^6a、R^6b、R^6c和R^6d独立地为氢、羟基、C₁～C₂₀烷基、C₃～C₁₂环烷基或C₃～C₁₂杂环烷基，但所述的R^6a和所述的R^6b不同时为羟基，所述的R^6c和所述的R^6d不同时为羟基；或者，R^6a、R^6b与它们相连的碳形成羰基；或者，R^6c、R^6d与它们相连的碳形成羰基；

所述的“杂环烷基”、“杂芳基”中的杂原子为1～7个并选自氧、氮、磷、硫、硒、硼和硅中的一种或多种；

且，所述的化合物I不为如下任一化合物：

较佳地，上述的“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”和“C₂～C₂₀烯基”中的C₂～C₂₀烯基独立地为C₂～C₁₂烯基；更佳地，上述的“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”中的C₂～C₂₀烯基独立地为C₂～C₆烯基。

较佳地，上述的“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”和“C₂～C₂₀炔基”中的C₂～C₂₀炔基独立地为C₂～C₁₂炔基；更佳地，上述的“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”中的C₂～C₂₀炔基独立地为C₂～C₆炔基。

较佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“C₁～C₂₀烷基”和“C₁～C₂₀烷基单取代、双取代或未取代的氨基”中的C₁～C₂₀烷基独立地为C₁～C₁₂烷基；更佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”中的C₂～C₂₀烷基独立地为C₁～C₆烷基；最佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”中的C₂～C₂₀烷基独立地为C₁～C₃烷基。

较佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷巯基”和“C₁～C₂₀烷巯基”中的C₁～C₂₀烷巯基独立地为C₁～C₁₂烷巯基；更佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷巯基”中的C₂～C₂₀烷巯基独立地为C₁～C₆烷巯基；最佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷巯基”中的C₂～C₂₀烷巯基独立地为C₁～C₃烷巯基。

较佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”和“C₁～C₂₀烷氧基”中的C₁～C₂₀烷氧基独立地为C₁～C₁₂烷氧基；更佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中的C₁～C₂₀烷氧基独立地为C₁～C₆烷氧基；最佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中的C₁～C₂₀烷氧基独立地为C₁～C₃烷氧基。

较佳地，上述的“C₁～C₂₀硅烷基”独立地为“C₁～C₁₂硅烷基”；更佳地，上述的“C₁～C₂₀硅烷基”独立地为“C₁～C₆硅烷基”；最佳地，上述的“C₁～C₂₀硅烷基”独立地为“C₁～C₃硅烷基”。

较佳地，上述的“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”中的C₃～C₁₂环烷基独立地为C₃～C₈环烷基；更佳地，上述的“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”中的C₃～C₁₂环烷基独立地为C₃～C₆环烷基。

较佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中的C₁～C₉杂环烷基独立地为“杂原子为硼、硅、氧、硫、硒、氮和磷中的一种或多种，杂原子数为1-4个(又例如1～3个)”C₃～C₈杂环烷基；较佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中的C₁～C₉杂环烷基独立地为“杂原子为硼、硅、氧、硫、硒、氮和磷中的一种或多种，杂原子数为1-4个(又例如1～3个)”C₃～C₅杂环烷基。

较佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₉杂芳基”中的C₁～C₉杂芳基独立地为C₁～C₆杂芳基；更佳地，上述的“取代或未取代的C₁～C₉杂芳基”中的C₁～C₉杂芳基独立地为“杂原子为硼、硅、氧、硫、硒、氮和磷中的一种或多种，杂原子数为1-4个”C₁～C₆杂芳基。

较佳地，上述的“取代或未取代的C₃～C₁₂芳基”中的C₃～C₁₂芳基独立地为C₆～C₁₀芳基。

在某些实施例中，上述的定义优选如下：

在所述的化合物I中，较佳地，p为1，q为1，m为0或1，n为0。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的X为N。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R¹为卤素或三氟甲基。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R²为C₁～C₆烷基。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R³为取代的或未取代的C₁～C₆烷基、或、取代的或未取代的C₃～C₈环烷基。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R⁴为卤素。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R⁵为氢、取代或未取代的C₁～C₆烷基、

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R⁸独立地为取代或未取代的C₁～C₆烷基、或、C₁～C₆烷氧基。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R⁹为乙烯基、取代或未取代的C₁～C₆烷基、取代或未取代的C₃～C₈环烷基、取代或未取代的“杂原子为氧、硫和氮中的一种或多种，杂原子数为1-4个，含有3-8个碳原子的杂环烷基”、取代或未取代的C₁～C₆烷氧基或

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R^10a和R^10b独立地为氢、或、取代或未取代的C₁～C₆烷基。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：

羟基、卤素、C₁～C₃烷氧基、“取代或未取代的C₁～C₉饱和或不饱和杂环烷基”和

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R^11a和R^11b独立地为氢、或、C₁～C₆烷基。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R¹²为羟基、C₁～C₆烷氧基或

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R^27a和R^27b独立地为C₁～C₆烷基。

在所述的化合物I中，较佳地，所述的R^6a、R^6b、R^6c和R^6d独立地为氢；或者，R^6c和R^6d及与它们相连的碳形成羰基。

在某些实施例中，上述的定义优选如下：

p较佳地为1。

q较佳地为1。

n较佳地为0。

m较佳地为1。

X较佳地为N。

Y较佳地为CH。

环

中的N原子较佳地为氧化态或非氧化态；

R^6a、R^6b、R^6c和R^6d较佳地为氢。

R¹较佳地为卤素(例如氟)。

R²较佳地为C₁～C₆烷基。

R³较佳地为取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基(例如异丙基或叔丁基)、或者、取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基(例如1-甲基环丙基或环丙基)。

R⁴较佳地为卤素(例如氟)。

R⁵较佳地为取代的C₁～C₂₀烷基(例如，取代的乙基；又例如，取代的异丙基)。

所述的R⁵中所述的“取代的C₁～C₂₀烷基”中所述的“取代”较佳地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：取代或未取代的C₁～C₉饱和或不饱和杂环烷基、

中的N原子为氧化态或非氧化态。

较佳地，R^11a和R^11b独立地为氢、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基(如取代或未取代的C₁～C₆烷基，优选取代或未取代的C₁、C₂或C₃烷基；又例如-CF₃；又例如羟乙基、2-二甲氨基乙基)、或者、

或者，

中R^11a、R^11b及与它们相连接的N成共同形成

中R^11a、R^11b及与它们相连接的N成共同形成

)，R^hc为H或C₁～C₆烷基(如甲基、乙基或丙基)，较佳的当R^ch为P时，R^hc为C₁～C₆烷基。

较佳地，R¹⁵为C₁～C₆烷基。

较佳地，R^11a和R^11b中所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：羟基、C₁～C₆硅烷基、

R^24a较佳地为氢。

R^24b较佳地为C₁～C₆烷基。

较佳地，R^25a和R^25b独立地为羟基或C₁～C₆烷氧基(例如乙氧基)。

较佳地，R^27a和R^27b独立地为C₁～C₆烷基。

较佳地，本发明中所述的化合物I为如下任一化合物：

本发明涉及的含氮稠杂环化合物可以表现出互变异构、结构异构和立体异构现象。本发明包括其任意互变或结构或立体异构形式及其混合物，它们对CDK4和CDK6的选择性高，且对其的抑制活性高，同时，其对乳腺癌细胞的抑制活性较佳，并且此效果并不限于任何一种异构或其混合物的形式。

对于本发明所述的含氮稠杂环化合物，可以用有机合成和药物化学领域及技术人员熟知的多种方法制备，也可以使用下文中所描述的方法，与有机化学领域已知的合成方法一起或本领域技术人员所理解的在其上的变化来的方法合成。

本发明所述的含氮稠杂环化合物的制备方法可以从易于获得的起始原料使用以下的一般性方法和过程来制备本发明的化合物。将理解的是，当给出典型的或优选的工艺操作条件(即，反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力，等等)时；还可以使用其他工艺操作条件，除非另有说明。最佳反应条件可以随所用的具体反应物或溶剂而变化，但这些条件可以由本领域技术人员通过常规最佳化过程加以确定。

在此所描述的本发明所述的含氮稠杂环化合物的制备方法可以根据本领域已知的任何适宜的方法加以监控。例如，通过核磁共振、红外光谱、分光光度或质谱分析、HPLC或薄层色谱来监控产物的生成。

所述的含氮稠杂环化合物的制备方法可以涉及多个化学基团的保护和脱保护。对于保护和脱保护的需要，以及对适当的保护基的选择可以由本领域技术人员容易的加以确定，保护基的化学过程在例如Greene等人，Protective Groups in Organic Synthesis,第二版,Wiley&Sons,1991中找到，其在此以整体的形式引入作为参考。

可以在适宜的溶剂中进行在此所描述的制备方法，有机合成领域技术人员容易地选择该溶剂。适宜的溶剂基本不与原料、中间体或产物在所描述的反应进行的温度下发生副反应，所述的反应进行的温度可以在从溶剂的冰点到溶剂的沸点温度范围内变化，所给定的反应可以在一种溶剂或多种溶剂的混合物中进行。根据具体的反应步骤，可以选择适宜于具体反应步骤的溶剂。

在此基础上，经特别优选(但并不限于反应条件中的试剂和溶剂)，本发明还提供了上述的含氮稠杂环化合物的制备方法，为如下任一方法：

方法一：

当R⁵为氢时，式I所示的化合物的制备方法包括如下步骤：通过Suzuki偶联反应得到1C，再将式1C所示的化合物与

进行Buchwald偶联，脱除保护基得到式I所示的化合物；式1D所示的化合物上的PG为保护基；

其中，所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d均同前所述；

所述的式1D所示的化合物中的PG可为本领域各种常规的氨基保护基，优选Boc，其目的是在

与化合物1C进行反应时，使其上的某些活泼基团(例如氨基)不参与反应；

所述的脱除保护基的反应的条件可为本领域各种保护基的常规脱除条件，如水解反应的条件、胺解反应的条件、氢化反应的条件等；

所述的脱除保护基的反应在结束后，较佳地，还可进一步包含后处理的操作；所述的后处理的方法和条件可为本领域此类反应后处理常规的方法和条件，较佳地为：将反应体系进行洗涤、干燥、过滤、蒸干溶剂，然后柱层析，即可；或者，将反应体系蒸除溶剂、洗涤、过滤，即可；或者，将反应体系蒸除溶剂、薄层层析，即可；

所述的取代反应或所述的过渡金属催化的偶联反应的条件可以为本领域此类反应的各种常规条件；所述的取代反应可以通过加热或者加压或者酸碱催化等条件下进行；

其中，反应路线中的各步骤反应的方法的条件均可以按照本领域这些反应的方法的常规条件进行；

方法二：

当R⁵为氢时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括如下步骤：上述的方法一中的1C经氨解后与

进行反应得到2A，脱除保护基得到式I所示的化合物；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d均同前所述；

方法三：

当R⁵为

且R¹¹为取代或未取代的C₁～C₆烷基、或、取代或未取代的C₃～C₈环烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂(例如1,4-二氧六环、二氯甲烷和DMF中的一种或多种)中，在缩合剂(例如HOBt和EDCI)的存在下，将化合物3A，与

进行缩合反应，得到化合物I即可；所述的缩合反应的条件可为本领域该类反应常规的条件；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R¹¹、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d均同前所述；

方法四：

当R⁵为

时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂(例如四氢呋喃)，在碱(例如吡啶)的存在下，将化合物4A与

进行反应，得到化合物4B，然后将所述的化合物4B进行水解反应，得到化合物I即可；所述的酰胺反应和水解反应的条件可为本领域该类反应常规的条件；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c、R^6d和R⁸均同前所述；

方法五：

当R⁵为

R¹¹为取代的C₁～C₆烷基或C₃～C₈环烷基，且取代基为

R^13b为H时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂(例如1,4-二氧六环、二氯甲烷和DMF中的一种或多种)，在缩合剂(例如HOBt和EDCI)的存在下，将化合物5A与

进行反应，得到化合物5B，再脱除氨基上的保护基得到化合物I即可；所述的酰胺反应和脱保护基反应的条件可为本领域该类反应常规的条件；所述的R^13aNH-(CH₂)_n1-C(＝O)-即所述的R⁵；所述的-(CH₂)_n1-即所述的被取代的C₁～C₆烷基或C₃～C₈环烷基；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、n₁、R^6a、R^6b、R^6c、R^6d和R^13a均同前所述；

所述的式5B所示的化合物中的PG可为本领域各种常规的氨基保护基，优选Boc，其目的是在

与化合物5A进行反应时，使其上的某些活泼基团(例如氨基)不参与反应；

方法六：

当R⁵为

R¹¹为取代的C₁～C₆烷基或C₃～C₈环烷基，且取代基为

R^13a和R^13b都不为H时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂(例如1,4-二氧六环、二氯甲烷和DMF中的一种或多种)，在缩合剂(例如HOBt和EDCI)的存在下，将化合物6A与

进行反应，得到化合物6B，脱除氨基上的保护基后再进行还原氨化得到化合物I即可；所述的酰胺反应、脱保护基反应和还原氨化的条件可为本领域该类反应常规的条件；所述的

即所述的R⁵；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c、R^6d、R^13a和R^13b均同前所述；

所述的式6B所示的化合物中的PG可为本领域各种常规的氨基保护基，优选Boc，其目的是在

与化合物6A进行反应时，使其上的某些活泼基团(例如氨基)不参与反应；

方法七：

当R⁵为

R¹¹为取代的C₁～C₆烷基或C₃～C₈环烷基，且取代基为

R^13a和R^13b相同时，所述的式I所示的化合物还可通过以下方法制备：在有机溶剂(例如1,4-二氧六环、二氯甲烷和DMF中的一种或多种)，在缩合剂(例如HOBt和EDCI)的存在下，将化合物7A与

进行反应，得到化合物7B，脱除氨基上的保护基后再进行还原氨化得到化合物I即可；所述的酰胺反应、脱保护基反应和还原氨化的条件可为本领域该类反应常规的条件；所述的

即所述的R⁵；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c、R^6d和R^13a均同前所述；

所述的式7B所示的化合物中的PG可为本领域各种常规的氨基保护基，优选Boc，其目的是在

与化合物I进行反应时，使其上的某些活泼基团(例如氨基)不参与反应；

方法八：

当R⁵为取代或未取代的C₁～C₆烷基，取代或未取代的C₃～C₈环烷基(例如

)、取代或未取代的C₃～C₈杂环烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂(例如DMF和/或1,4-二氧六环)中，在碱(例如N,N-二异丙基乙胺)的存在下，将化合物8A与R⁵-X进行取代反应，得到化合物I即可；所述的取代反应的条件可为本领域该类反应常规的条件；所述的X为卤素(例如溴)或CH₃SO₃-；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d均同前所述；

方法九：

当R⁵为取代或未取代的C₁～C₆烷基、取代或未取代的C₃～C₈环烷基(例如

)、或、取代或未取代的C₃～C₈杂环烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂(例如1,2-二氯乙烷、甲醇和二氧六环中的一种或多种)中，在还原剂(例如三乙酰氧基硼氢化钠和/或氰基硼氢化钠)的存在下，将化合物9A与R^5a-CHO进行还原胺化反应，得到化合物I即可；所述的还原胺化反应的条件可为本领域该类反应常规的条件；所述的R^5aCH₂-即所述的R⁵；

方法十：

当R⁵为取代的C₁～C₆烷基、取代的C₃～C₈环烷基、或、取代的C₃～C₈杂环烷基，且取代基为

R¹⁶为羟基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂(例如DMF、二氯甲烷和1,4-二氧六环中的一种或多种)中，在碱(例如N,N- 二异丙基乙胺)的存在下，将化合物10A与R^5b-OC(＝O)-(CH₂)_n2-X进行取代反应，然后水解得到化合物I即可；所述的取代反应和水解反应的条件可为本领域该类反应常规的条件；所述的X为卤素(例如溴)或CH₃SO₃-；所述的R^5b为C₁～C₆烷基(例如甲基)；所述的-(CH₂)_n2-即所述的R⁵中被取代的C₁～C₆烷基(可为支链烷基或直链烷基)、被取代的C₃～C₈环烷基、或、被取代的C₃～C₈杂环烷基；所述的

即所述的R⁵；

所述的X、Y、Z、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、n₂、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d均同前所述；

方法十一：

当R⁵为取代的C₁～C₆烷基，取代的C₃～C₈环烷基，且取代基为

(其中，R^13a和R^13b至少有一个为氢)或羟基、或、未取代的C₃～C₈杂环烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂(例如1，2-二氯乙烷、甲醇和/或二氧六环中的一种或多种)中，在还原剂(例如三乙酰氧基硼氢化钠和/或氰基硼氢化钠)的存在下，将化合物11A与PG-R^5c-CHO进行还原胺化反应，再脱除保护基得到化合物I即可；所述的还原胺化反应的条件和脱保护的条件可为本领域该类反应常规的条件；所述的R^5cCH₂-即所述的R⁵；

所述的式11B所示的化合物中的PG可为本领域各种常规的氨基保护基，优选Boc，其目的是在PG-R^5c-CHO与化合物11A进行反应时，使其上的某些活泼基团(例如氨基)不参与反应；

方法十二：

当R⁵为

R¹¹为

且R^12a和R^12b独立的为取代或未取代的C₁～C₂₀烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在三光气的存在下，将化合物11A与取代或未取代的氨基进行缩合反应，得到化合物I即可；所述的R^12aNR^12b-C(＝O)-即所述的R⁵；

方法十三：

当R⁵为取代的C₁～C₂₀烷基、或、取代的C₁～C₉杂环烷基，取代基为

C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、取代的C₁～C₉杂环烷基、或、C₃～C₁₂环烷基，且R^13a和R^13b独立的为氢、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、C₃～C₁₂环烷基、硼酸基、磷酸基、胍基、硫脲基、

时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在还原剂的存在下，将化合物13A与PG-NR^13a-(CH₂)n-CHO进行还原胺化反应，再脱除保护基,经过取代反应得到化合物I即可；所述的R^13aNR^13b-(CH₂)n-即所述的R⁵；式中所示的化合物上的LG为离去基团。

方法十四：

C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、取代的C₁～C₉杂环烷基、或、C₃～C₁₂环烷基，且R^14a、R^14b和R^14c独立的为氢、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、C₃～C₁₂环烷基、硼酸基、磷酸基、胍基、硫脲基、

时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在还原剂的存在下，将化合物14A与PG-NR^14a-(CH₂)n-CHO进行还原胺化反应，脱除保护基，在与PG-NR^14b-(CH₂)n-CHO进行还原胺化反应，脱除保护基，经过取代反应得到化合物I即可；所述的R^14bNR^14c-(CH₂)n-R^14a即所述的R⁵；式中所示的化合物上的LG为离去基团。

方法十五：

时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在还原剂的存在下，将化合物15A与LG-(CH₂)n-CN进行取代反应再经过加成反应得到化合物I即可；式中所示的化合物上的LG为离去基团。

上述的含氮稠杂环化合物的制备方法结束后，较佳地，还可进一步包含后处理的操作；所述的后处理的方法和条件可为本领域此类反应后处理常规的方法和条件，较佳地为：将反应体系进行洗涤、干燥、过滤、蒸干溶剂，然后柱层析，即可；或者，将反应体系蒸除溶剂、洗涤、过滤，即可；或者，将反应体系蒸除溶剂、薄层层析，即可。

本发明还提供了一种化合物II，其为如下任一化合物：

其中，m、n、p、q、X、Y、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R^5a、R^5b、R^5c、R^6a、R^6b、R^6c、R^6d、R⁸、R^13a和PG均同前所述。

较佳地，所述的化合物II为如下任一化合物：

本发明还提供了上述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体、其互变异构体、其溶剂化物、其代谢产物或其药物前体，在制备药物中的应用，所述的药物用于预防或治疗与细胞周期调控异常相关的疾病；所述的“与细胞周期调控异常相关的疾病”较佳地为“与周期蛋白依赖性激酶(优选CDK4和/或CDK6)异常相关的疾病”，更佳地为肿瘤，最佳地为恶性肿瘤(例如乳腺癌)。

本发明还提供了上述的含氮稠环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体、其互变异构体、其溶剂化物、其代谢产物或其药物前体，在制备周期蛋白依赖性激酶(优选CDK4和/或CDK6)抑制剂中的应用。

本发明还提供了上述的含氮稠环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体、其互变异构体、其溶剂化物、其代谢产物或其药物前体，在制备具有肿瘤细胞抑制活性的药物中的应用；所述的肿瘤细胞优选癌细胞；所述的癌细胞优选乳腺癌细胞；所述的乳腺癌细胞优选乳腺癌细胞MCF-7、T-47D和ZR-75-1中的一种或多种。

本发明还提供了一种药物组合物，其包含上述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体、其互变异构体、其溶剂化物、其代谢产物或其药物前体，和至少一种药用辅料；

所述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体、其互变异构体、其溶剂化物、其代谢产物或其药物前体的剂量，可为治疗有效量。

所述的药用辅料的选择因施用途径和作用特点而异，通常可为本领域常规的填充剂、稀释剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂等。

所述的药物组合物可以通过口服、注射(静脉、肌肉、皮下和冠状动脉内)、舌下、经颊、经直肠、经尿道、经阴道、经鼻、吸入或局部途径施用，优选途径是口服。

本发明中，除非另有说明，在本发明说明书和权利要求书中出现的以下术语具有下述含义：

术语“卤素”优选氟、氯、溴、碘，更优选氟。

术语“C₁～C₂₀烷基”表示包括1～20个碳原子的支链和直链的饱和脂族烃基，烷基可以独立任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代。其具体实例包括但不限于：甲基(Me，-CH₃)，乙基(Et，-CH₂CH₃)，正丙基(n-Pr，-CH₂CH₂CH₃)，异丙基(i-Pr，-CH(CH₃)₂)，正丁基(n-Bu，-CH₂CH₂CH₂CH₃)，2-甲基丙基或异丁基(i-Bu，-CH₂CH(CH₃)₂)，1-甲基丙基或仲丁基(s-Bu，-CH(CH₃)CH₂CH₃)，叔丁基(t-Bu，-C(CH₃)₃)，正戊基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)，2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃)，3-戊基(-CH(CH₂CH₃)₂)，2-甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH₂CH₃)，3-甲基-2-丁基(-CH(CH₃)CH(CH₃)₂)，3-甲基-1-丁基(-CH₂CH₂CH(CH₃)₂)，2-甲基-1-丁基(-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃)，正己基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)，4-甲基戊基(-CH₂CH₂CH₂CH(CH₃)CH₃)、3-甲基戊基(-CH₂CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃)、2-甲基戊基(-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃)、2-己基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂CH₃)，3-己基(-CH(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃)，3,3-二甲基丁基(-CH₂CH₂CH₂(CH₃)₂CH₃)、2,2-二甲基丁基(-CH₂C(CH₃)₂CH₂CH₃)、2-甲基-2-戊基(-C(CH₃)₂CH₂CH₂CH₃)，3-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH(CH₃)CH₂CH₃)，4-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂)，3-甲基-3-戊基(-C(CH₃)(CH₂CH₃)₂)，2-甲基-3-戊基(-CH(CH₂CH₃)CH(CH₃)₂)，2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH(CH₃)₂)，3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH₃)C(CH₃)₃)，正庚基，正辛基，等等。

本发明中，所用的术语“烯基”指含有指定数目碳原子和至少一个碳碳双键的直链、支链或者环状非芳香烃基。优选存在一个碳碳双键，并且可以存在高达四个非芳香碳碳双键。由此，“C_2-12烯基”是指具有2-12个碳原子的烯基。“C_2-6烯基”是指具有2-6个碳原子的烯基，包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。烯基的直链、支链或者环部分可以含有双键，并且如果表明为取代烯基，那么可以被取代。

术语“炔基”指含有指定数目碳原子和至少一个碳碳三键的直链、支链或者环状烃基。其中可以存在高达三个碳碳三键。由此，“C_2-12炔基”是指具有2-12个碳原子的炔基。“C_2-6炔基”是指具有2-6个碳原子的炔基，包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基和3-甲基丁炔基。

术语“C₁～C₂₀烷氧基”表示通过氧桥连接的C₁～C₂₀烷基；所述的C₁～C₂₀烷基的定义同上。

术语“C₁～C₂₀烷巯基”表示通过硫桥连接的C₁～C₂₀烷基；所述的C₁～C₂₀烷基的定义同上。

术语“C₁～C₂₀硅烷基”表示通过硅桥连接的C₁～C₂₀烷基；所述的C₁～C₂₀烷基的定义同上。

术语“C₃～C₁₂环烷基”表示包含3-12个可形成环的碳原子的环状碳氢基团，其可饱和或部分不饱和(包含1或2个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子体系)，且不包含杂原子；包括3-12个碳原子的单环或7-12个碳原子的二环或三环(包含螺环体系、桥环体系和稠环体系)；其中，环上一个或多个环上的氢原子独立任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代，且碳原子可以被氧化。具有7-12个原子的双碳环可以是二环[4,5]，[5,5]，[5,6]或[6,6]体系，同时具有9或10个原子的双碳环可以是二环[5,6]或[6,6]体系。合适的环烷基基团包括，但并不限于，环烷基，环烯基和环炔基，例如：环丙基、环丁基、环戊基、环己基。1-环戊基-1-烯基，1-环戊基-2-烯基，1-环戊基-3-烯基，环己基，1-环己基-1-烯基，1-环己基-2-烯基，1-环己基-3-烯基，环己二烯基，环庚基，环辛基，环壬基，环癸基，环十一烷基，环十二烷基，金刚烷基等等。视结构而定，环烷基可为单价基团或二价基团，即亚环烷基。

术语“杂环烷基”表示包含1-6个杂原子(选自N、S、B、P、Si、O或Se中的一种或多种)的3-10元单环或多环基团(包含螺环，桥环和稠环)，其中每个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子体系；杂原子上可以取代也可以不取代，N原子可以季铵化。杂环体系可以在任何杂原子或者碳原子上连接到主结构上从而形成稳定的化合物。环上一个或多个氢原子独立任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代。例如是3-7元环的单环(1-6个碳原子和选自N，O，P，B，Si，S，Se的1-3个杂原子，在此N，S、B、P或Se任选地被一个或多个氧原子所取代得到像NO，NO₂，BOH，SO，SO₂，PO，PO₂，SeO的基团，同时，-CH₂-基团可以任选地被-C(＝O)-、-C(＝S)-或-C(＝N)-替代；-SH₂-基团可以任选地被-S(＝O)-、-S(＝O)₂-、-S(＝N)-或-S(＝N)₂-替代；当所述的环为三元环时，其中只有一个杂原子)，或7-10个原子组成的双环(4-9个碳原子和选自N，O，P，B，Si，S的1-3个杂原子，在此N，S、B或P任选地被一个或多个氧原子所取代得到像NO，NO2，BOH，SO，SO₂，PO，PO₂，SeO的基团，同时，-CH₂-基团可以任选地被-C(＝O)-替代)。视结构而定，杂环基可为单价基团或二价基团，即亚杂环基。一些实施例中，含氮的杂环中的N原子被氧化，形成氮氧化物。

术语“杂芳基”表示包含1-6个杂原子(选自N、S、B，P、Si、O或Se中的一种或多种)的3-10元单环或多环芳香体系，其中，双环杂芳环，三环杂芳环或者四环杂芳环体系以稠合的形式成环，N、S、B、P或Se任选地被一个或多个氧原子所取代得到像NO、SO、SO₂、BOH、PO、PO₂、SeO的基团，N原子可以季铵化，环上一个或多个氢原子独立任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代。杂芳基可以在任何杂原子或者碳原子上连接到主结构上从而形成稳定的化合物。杂芳基包括但不限于是3-7个原子组成的单环，或7-10个原子组成的双环，或10-15个原子组成的三环。具有7-10个原子的双环可以是二环[4,5]，[5,5]，[5,6]或[6,6]体系，具有10-15个原子的三环可以是三环[5,5,6]，[5,7,6]或[6,5,6]体系。视结构而定，杂芳基可为单价基团或二价基团，即亚杂芳基。杂芳基包括但并不限于：2-呋喃基，3-呋喃基，N-咪唑基，2-咪唑基，4-咪唑基，5-咪唑基，3-异噁唑基，4-异噁唑基，5-异噁唑基，2-噁唑基，4-噁唑基，5-噁唑基，4-甲基异噁唑-5-基，N-吡咯基，2-吡咯基，3-吡咯基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，2-嘧啶基，4-嘧啶基，嘧啶-5-基，哒嗪基(如3-哒嗪基)基，2-噻唑基，4-噻唑基，5-噻唑基，四唑基(如5-四唑基)，三唑基(如2-三唑基和5-三唑基)，2-噻吩基，3-噻吩基，吡唑基(如2-吡唑基)，异噻唑基，1,2,3-噁二唑基，1,2,5-噁二唑基，1,2,4-噁二唑基，1,2,3-三唑基，1,2,3-硫代二唑基，1,3,4-硫代二唑基，1,2,5-硫代二唑基，1,3,4-噻二唑-2-基，吡嗪基，吡嗪-2-基，1,3,5-三嗪基，苯并[d]噻唑-2-基，咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基，苯并咪唑基，苯并恶唑基，喹喔啉基，1,8-二氮杂萘基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，苯并噻唑基，吲哚(如2-吲哚基)基，嘌呤基，喹啉基(如2-喹啉基，3-喹啉基，4-喹啉)，异喹啉基(如1-异喹啉基，3-异喹啉基或4-异喹啉基)，四氢萘基，苯并吡唑基，吖啶基，苯并咪唑基，苯并吲哚基，苯并异噁嗪基，苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基，苯并[d]咪唑[2,1-b]噻唑基，苯并呋喃基，苯并萘并呋喃基，苯并噻二唑基，苯并噻唑基，苯并硫代苯基，苯并三唑基，苯并硫代吡喃基，苯并噁嗪基，苯并噁唑基，苯并噻唑基，β-咔啉基，咔唑基，邻二氮杂萘基，二苯并呋喃基，咪唑并吡啶基，咪唑并噻唑基，吲唑基，吲哚嗪基，吲哚基，异苯并噻嗯基，异二氢吲哚基，异喹啉基，异噻唑烷基，异噻唑基，萘啶基，十氢吲哚基，十氢异吲哚基，噁唑烷二酮基，噁唑烷基，噁唑并吡啶基，噁唑基，环氧乙烷基，茶嵌二氮苯基，菲啶基，菲绕啉基，吩砒嗪基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩噁嗪基，酞嗪基，蝶啶基，吡啶并吡啶基，喹唑啉基，喹噁啉基，硫代苯基，三嗪基，2H-吡咯并[3,4-c]吡啶基，吡唑并[2’,1’:2,3]恶唑并[4,5-c]吡啶基，咪唑并[2’,1’:2,3]噻唑并[4,5-c]吡啶基，咪唑并[2’,1’:2,3]噻唑并[4,5-b]吡啶基，咪唑并[2’,1’:2,3]噻唑并[5,4-b]吡啶基，吡唑并[2’,1’:2,3]噻唑并[4,5-b]吡嗪基，1H-苯并[4,5]噻吩并[2,3-d]咪唑基，1-甲基-1H-苯并[4,5]噻吩并[2,3-d]咪唑基，咪唑并[2',1':2,3]噻唑并[4,5-b]吡嗪基，咪唑并[2',1':2,3]噻唑并[5,4-b]吡啶基，咪唑并[2',1':2,3]噻唑并[4,5-c]吡啶基，1H-苯并[f]咪唑并[4,5-b][1,4]硫氮杂卓基等。

术语“芳基”表示单环，双环，和三环的碳环体系，其中，至少一个环体系是芳香族的，每一个环体系包含3-7个原子，环上一个或多个氢原子独立任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代。术语“芳基”可以和术语“芳香环”交换使用，例如但不限于苯基，萘基和蒽。视结构而定，芳基可为单价基团或二价基团，即亚芳基。

术语“药学上可接受的盐”表示由适宜的非毒性有机酸、无机酸、有机碱或无机碱与化合物I形成的盐，其保留化合物I的生物活性。所述的有机酸可为本领域常规的能成盐的各种有机酸，优选甲磺酸、对甲苯磺酸、马来酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、草酸、丁二酸、苯甲酸、羟乙基磺酸、萘磺酸和水杨酸中的一种或多种。所述的无机酸可为本领域常规的能成盐的各种无机酸，优选盐酸、硫酸和磷酸中的一种或多种。所述的有机碱可为本领域常规的能成盐的各种有机碱，优选吡啶类、咪唑类、吡嗪类、吲哚类、嘌啉类、叔胺类和苯胺类中的一种或多种。所述的叔胺类有机碱优选三乙胺和/或N,N-二异丙基乙胺。所述的苯胺类有机碱优选N,N-二甲基苯胺。所述的吡啶类有机碱优选吡啶、甲基吡啶、4-二甲氨基吡啶和2-甲基-5-乙基吡啶中的一种或多种。所述的无机碱可为本领域常规的能成盐的各种无机碱，优选碱金属氢化物、碱金属的氢氧化物、碱金属的烷氧化物、碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂、碳酸铯、碳酸氢钾和碳酸氢钠中的一种或多种。所述的碱金属氢化物优选氢化钠和/或氢化钾。所述的碱金属的氢氧化物优选氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化锂中的一种或多种。所述的碱金属的烷氧化物优选甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾和叔丁醇钠中的一种或多种。

本发明中，所述“溶剂化物”表示化合物I与适宜的溶剂形成的物质。所述的溶剂较佳地为水或有机溶剂。

在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：本发明的化合物在分子水平对CDK4和CDK6的选择性高，且对其的抑制活性高，其在细胞水平对乳腺癌细胞的抑制活性较佳，其在动物水平对与周期蛋白依赖性激酶活性相关的肿瘤细胞也具有显著的抑制增殖作用，而且其对于人、鼠等的肝微粒体稳定性良好，代谢酶无明显抑制，大小鼠体内吸收性质好，生物利用度高，具有较好的成药性。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。

本发明所有化合物的结构可通过核磁共振(¹H NMR)和/或质谱检测(MS)鉴定。¹HNMR化学位移(δ)以PPM记录(10^-6)。NMR通过Bruker AVANCE-400光谱仪进行。

LC-MS由Agilent 1200HPLC/6120质谱仪测定.

薄层硅胶板是烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板。柱层析一般使用烟台黄海200-300目硅胶作为载体。

制备例1

第一步：

将6-溴-4-氟-1-异丙基-2-甲基-苯并咪唑(200mg,0.73765mmol)(如式1-a所示的化合物)，联硼酸频那醇酯(280mg,1.1mmol)，三环己基磷(37mg,0.1320mmol)，醋酸钾(218mg,2.221mmol)和醋酸钯(19mg,0.1148mmol)加入到二甲基亚砜(2mL)中，氮气保护下升温到90℃反应2小时。冷却至室温后，反应液用10mL乙酸乙酯稀释，过滤，滤液用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相浓缩后经硅胶柱层析(乙酸乙酯/正己烷0～50％)得如式1-b所示的化合物4-氟-1-异丙基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯并咪唑(180mg,0.5657mmol)。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝319.2。

第二步：

将2,4-二氯-5-氟嘧啶(110mg,0.65880mmol)(如式1-b所示的化合物)，4-氟-1-异丙基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯并咪唑(180mg,0.5657mmol)，(二(三苯基膦))二氯化钯(30mg)加入到2M碳酸钠溶液(1mL)和乙二醇二甲基醚(3mL)中，氮气保护下升温到85℃反应2小时。冷却至室温后，反应液用10mL乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相浓缩后用乙腈重结晶，过滤得如式1-c所示的化合物6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1-异丙基-2-甲基-苯并咪唑(135mg,0.4183mmol)。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝323.2。

第三步：

将6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1-异丙基-2-甲基-苯并咪唑(110mg,0.3409mmol)(如式1-c所示的化合物)，叔丁基2-氨基-7,8-二氢-1,6-萘啶-6-羧酸酯(85mg,0.3410mmol)，碳酸铯(222mg,1.1507mmol)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(17mg,0.02938mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(13mg)加入到1,4-二氧六环(3ml)中，氮气保护下升温到110℃反应12小时。冷却至室温后，反应液用10mL乙酸乙酯稀释，过滤，滤液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式1-d所示的化合物叔丁基2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-羧酸酯(110mg,0.2054mmol)。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝536.2。

制备例2

第一步：

将2-甲基烟酸甲酯(1.9g,13.0mmol)(如式2-a所示的化合物)和三氯异氰尿酸(3.7g, 16.0mmol)(如式2-b所示的化合物)溶解到二氯甲烷(50mL)中，室温下搅拌18小时.然后在反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液，二氯甲烷萃取(30ml x 2)，合并二氯甲烷层，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液经柱层析(硅胶,石油醚/乙酸乙酯＝100％-75％)纯化得如式2-c所示的化合物2-(氯甲基)烟酸甲酯(1.9g,10.3mmol)，淡黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝186。

第二步：

将2-(氯甲基)烟酸甲酯(1.9g,10mmol)(如式2-c所示的化合物)和间氯过氧苯甲酸(2g,11.6mmol)溶解到二氯甲烷(50mL)中，室温搅拌16小时，然后在反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液，二氯甲烷萃取(60ml x 2)，合并二氯甲烷层，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液用柱层析(硅胶,石油醚/乙酸乙酯＝100％to 0％)纯化得如式2-d所示的化合物2-(氯甲基)烟酸甲酯1-氧化物(15g,7.4mmol)，淡黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝202.2。

第三步：

将2-(氯甲基)烟酸甲酯1-氧化物(1.9g,9.4mmol)(如式2-d所示的化合物)溶解到氧氯化磷(9mL)，加热到回流并搅拌5小时，冷却后倒如冰水，然后加入饱和碳酸氢钠水溶液，二氯甲烷萃取(60ml x 2)，合并二氯甲烷层，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液用柱层析(硅胶,石油醚/乙酸乙酯＝100％-0％)纯化得如式2-e所示的化合物6-氯-2-(氯甲基)烟酸甲酯(0.88g,4.0mmol)，淡黄色固体。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝240.2。

第四步：

将6-氯-2-(氯甲基)烟酸甲酯(70mg,0.32mmol)(如式2-e所示的化合物)和N’,N’-二甲基乙二胺(50mg,0.57mmol)(如式2-f所示的化合物)溶解到四氢呋喃(10mL)中，室温下搅拌16小时，然后浓缩，用薄层色谱板(硅胶,二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得如式2-g所示的化合物2-氯-6-(2-(二甲胺基)乙基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5-酮(40mg,0.17mmol)，淡黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝240.2。

制备例3

第一步：

将6-溴-4-氟-1-环戊基-2-甲基-苯并咪唑(200mg,0.6729mmol)(如式3-a所示的化合物)，联硼酸频那醇酯(260mg,1.1mmol)，三环己基磷(37mg,0.1320mmol)，醋酸钾(218mg,2.221mmol)和醋酸钯(19mg,0.1148mmol)加入到二甲基亚砜(2mL)中，氮气保护下升温到90℃反应2小时。冷却至室温后，反应液用10mL乙酸乙酯稀释，过滤，滤液用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相浓缩后经硅胶柱层析(乙酸乙酯/正己烷0～50％)得如式3-b所示的化合物4-氟-1-环戊基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯并咪唑(180mg,0.523mmol)。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝345.2。

第二步：

将2,4-二氯-5-氟嘧啶(110mg,0.65880mmol)，4-氟-1-环戊基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯并咪唑(180mg,0.523mmol)(如式3-b所示的化合物)，(二(三苯基膦)二氯化钯(30mg)加入到2M碳酸钠溶液(1mL)和乙二醇二甲基醚(3mL)中，氮气保护下升温到85℃反应2小时。冷却至室温后，反应液用10mL乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相浓缩后用乙腈重结晶，过滤得如式3-c所示的化合物6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1-环戊基-2-甲基-苯并咪唑(135mg,0.37mmol)。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝349.8。

第三步：

将5-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-1-环戊基-7-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑)(360mg，1.03mmol)(如式3-c所示的化合物)溶于5mL二氧六环中，加入2-氨基-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-甲羧酸叔丁酯(257mg，1.03mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(94mg，0.10mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(119mg，0.21mmol)、碳酸铯(504mg，1.55mmol)，氩气保护，于110℃下搅拌18小时。过滤，减压蒸干溶剂。残留物用硅胶柱层析纯化得如式3-d所示的化合物黄色固体340mg，收率82％。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝548.2。

制备例4

第一步：

环丙胺(30g，525.5mmol)和二异丙基乙酰胺(80g，790.6mmol)溶解到二氯甲烷(200ml)中，冷却到0℃,缓慢滴加醋酸酐(115g，1126mmol)，滴加完毕，升至室温并在室温下搅拌16小时，减压蒸干溶剂，加入乙酸乙酯，碳酸钾(144g，1050mmol)，室温搅拌16小时，过滤，减压蒸干溶剂得如式4-c化合物N-环丙基乙酰胺55g。

第二步：

N-环丙基乙酰胺(54g，544.7mmol)，4-溴-2,6-二氟苯胺(54.6g，263mmol)和N,N-二异丙基乙胺(50.8g，393mmol)溶解到甲苯(250ml)中，缓慢滴加氧氯化磷(40.3g，263mmol)，加热到100℃并搅拌16小时。减压蒸干溶剂，冷却至室温，加热二氯甲烷，用碳酸氢钠饱和溶液洗，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩，乙酸乙酯打浆，过滤，固体干燥得如式4-d化合物N’-(4-溴-2,6-二氟-苯基)-N-环丙基-乙脒43.6g。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝289.1，291.1。

第三步：

N’-(4-溴-2,6-二氟-苯基)-N-环丙基-乙脒(43.6g，151mmol)溶解到N,N-二甲基甲酰胺(300ml)中，缓慢加入叔丁醇钾(28g，249.5mmol)，升温至100℃并搅拌3小时，冷却到室温，加入1.5L水，过滤，水洗，固体减压蒸馏除水，用二氯甲烷/石油醚＝1/2混合溶剂打浆，过滤得如式4-f化合物6-溴-1-环丙基-4-氟-2-甲基-苯并咪唑35g。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝269.1，271.1。

第四步：

6-溴-1-环丙基-4-氟-2-甲基-苯并咪唑(15g，55.7mmol)，双联频哪醇硼酸酯(16g，63mmol)，醋酸钾(10g，102mmol)，三环己基磷(1.5g，5.3mmol)和醋酸钯(1g，4.45mmol)溶解到DMSO(60ml)中，氩气保护下升温至80℃并搅拌16小时。反应液冷却至室温，过滤，用水稀释，二氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩得粗产物，用乙酸乙酯打浆，过滤得部分产物，滤液浓缩，经柱层析纯化(石油醚/二酸乙酯＝100％到25％)得部分产物，合并得如式4-e化合物1-环丙基-4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯并咪唑5g。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝317.2。

第五步：

1-环丙基-4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯并咪唑(5g，15.8mmol)，2,4-二氯-5-氟-嘧啶(3g，18.0mmol)，碳酸钠(3g，28.3mmol)和二氯二三苯基膦钯(550mg，0.83mmol)溶解到乙二醇二甲醚(70ml)和水(10ml)的混合溶液中，氩气保护下升温至80℃并搅拌16小时。反应液冷却至室温，过滤，减压蒸馏除去乙二醇二甲醚，用水稀释，二氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩得粗产物，用乙腈打浆，过滤干燥得如式4-g化合物6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-1-环丙基-4-氟-2-甲基-苯并咪唑4.5g。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝321.2。

第六步：

6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-1-环丙基-4-氟-2-甲基-苯并咪唑(4.5g，14mmol)，叔丁基2-氨基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸酯(3.8g，15mmol)，碳酸铯(9g，27.6mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(900mg，0.98mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(500mg，0.86mmol)溶解到二氧六环(100ml)中，氩气保护下升温到90℃并搅拌16小时。减压蒸馏除去溶剂，用二氯甲烷和甲醇的混合溶剂稀释，过滤，滤液用无水硫酸钠干燥，浓缩，经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝100％到90％)纯化得如式4-h化合物叔丁基2-((5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-羧酸酯7g。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝534.2。

制备例5

叔丁基2-氨基-7-甲基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸酯和叔丁基2-氨基-5-甲基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸酯(如式5-a和5-b所示的化合物,购自KERMANDA)的混合物(3.0g，11.4mmol)，经手性液相制备得四个异构体，分别为：叔丁基2-氨基-5-甲基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸酯(Peak 1，0.5658g)，叔丁基2-氨基-5-甲基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸酯(Peak 3，0.6884g)，叔丁基2-氨基-7-甲基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸酯(Peak2，0.4281g)，叔丁基2-氨基-7-甲基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸酯(Peak 4，0.6460g)。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝264.2。

制备例6

第一步：

在室温和氩气保护下，将DIPEA(1.757g,13.59mmol)和2-溴乙醇(1.446g,11.57mmol)投入到N-[4-(3-叔丁基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(1.3g,2.892mmol)(如式2-a所示的化合物)在无水DMF(22mL)的悬浊液中。得到的反应混合物升温至85℃并搅拌12小时。TLC显示大部分原料已经反应完毕。反应混合物冷却到室温并用20mL的水稀释。过滤析出的固体，然后用水洗涤(10mL x 3)滤饼，在真空中干燥得到如式3-b所示的黄色固体化合物2-[2-[[4-(3-叔丁基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基]乙醇(1.1g,2.229mmol),淡黄色固体。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.40(d,J＝3.8Hz,1H),8.39(d,J＝1.3Hz,1H),8.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.93(s,1H),7.75(d,J＝11.2Hz,1H),7.36(d,J＝8.5Hz,1H),3.78–3.72(m,2H),3.70(s,2H),2.95(dd,J＝10.7,4.6Hz,4H),2.88(s,3H),2.80–2.75(m,2H),1.91(s,9H)。

LC-MS m/z:(M+H)⁺＝494.2。

第二步：

在室温及氩气保护下，将氯化亚砜(7.954g,66.86mmol)加入到2-[2-[[4-(3-叔丁基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基]乙醇(1.1g,2.229mmol)(如式3-b所示化合物)在二氯甲烷(40mL)的悬浊液中。得到的混合物在室温下搅拌16小时。LCMS显示反应完毕。溶剂用减压蒸馏除去。固体残留物用100mL的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂(10:1,v/v)溶解。用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤有机相至中性，再用饱和食盐水洗涤(50mL x 2)。分离出的有机相，用旋转蒸发仪蒸干，残留物用biotage制备液相色谱纯化(甲醇/二氯甲烷＝1％～5％,v/v,10g硅胶柱)，得到如式3-c所示的黄色固体化合物N-[4-(3-叔丁基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基]-6-(2-氯乙基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-胺(600mg,1.172mmol),淡黄色固体。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.41–8.36(m,2H),8.22(d,J＝8.5Hz,1H),7.91(s,1H),7.75(d,J＝11.4Hz,1H),7.35(d,J＝8.4Hz,1H),3.72–3.67(m,4H),3.00–2.90(m,6H),2.87(s,3H),1.91(s,9H)。

LC-MS m/z:(M+H)⁺＝512.2。

实施例3：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(70mg,0.1607mmol)(如式I-1所示的化合物)，2-溴丙烷(40mg,0.32523mmol)，N,N-二异丙基乙胺(50mg)加入到1mL DMF中，升温到90℃反应12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得I-3所示的化合物N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-6-异丙基-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-2-胺(30mg,0.06281mmol)。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝9.90(s,1H),8.68(d,1H,J＝3.6Hz),8.32(d,1H,J＝1.2Hz),8.06(d,1H,J＝8.4Hz),7.69(d,1H,J＝12.4Hz),7.48(d,1H,J＝1.2Hz),4.82-4.89(m,1H),3.63(s,2H),2.81(br,4H),1.97-2.04(m,1H),1.64(d,6H,J＝6.8Hz),1.08(d,6H,J＝6.0Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝478.2。

实施例4：

第一步：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(80mg,0.1837mmol)(如式I-1所示的化合物)，N-Boc-肌氨酸(46mg,0.24312mmol)(如式I-3-a所示的化合物)，HOBt(25mg,0.18502mmol)，EDCI(36mg,0.18779mmol)加入到1mL DMF中，室温搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-4-b所示的化合物叔丁基N-[2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-氧乙基]-N-甲基-氨基甲酸酯(50mg,0.08241mmol)。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝607.2。

第二步：

叔丁基N-[2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-氧乙基]-N-甲基-氨基甲酸酯(50mg,0.08241mmol)(如式I-4-b所示的化合物)加入到2M HCl/MeOH溶液中(2ml)，室温搅拌1小时。浓缩后得到如式I-4 所示的化合物1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-(甲氨基)乙酮(30mg,0.05922mmol)。¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ＝8.96-8.97(m,1H),8.62(s,1H),8.22-8.26(m,2H),7.56(dd,1H,J＝8.8,2.8Hz),5.16-5.23(m,1H),4.87(s,1H),4.78(s,1H),4.32(s,1H),4.27(s,1H),4.08(t,1H,J＝6.0Hz),3.92(t,1H,J＝6.0Hz),3.37-3.38(m,2H),3.24-3.27(m,2H),3.02(s,3H),2.82(d,3H,J＝2.8Hz),1.84(d,6H,J＝6.8Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝507.2。

实施例5：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(80mg,0.1837mmol)(如式I-1所示的化合物)，N,N-二甲基甘氨酸(20.5mg,0.199mmol)，HOBt(25mg,0.18502mmol)，EDCI(36mg,0.18779mmol)分别加入到1mLDMF中，室温搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-5所示的化合物2-(二甲氨基)-1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]乙酮(10mg,0.01921mmol)。¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ＝8.50(d,1H,J＝3.6Hz),8.26-8.30(m,2H),7.78(d,1H,J＝12Hz),7.56(d,1H,J＝8.4Hz),4.86-4.90(m,2H),4.86(s,2H),4.71(s,1H),3.92(t,2H,J＝5.6Hz),3.00(t,1H,J＝5.6Hz),2.92(t,1H,J＝5.6Hz),2.69(s,3H),2.35(s,3H),2.34(s,3H),1.74(d,6H,J＝7.2Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝521.2。

实施例6：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2- 氨(80mg,0.1837mmol)(如式I-1所示的化合物)，2-甲氧基乙酸(18mg,0.1998mmol)，HOBt(25mg,0.18502mmol)，EDCI(36mg,0.18779mmol)加入到1mL DMF中，室温搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-6所示的化合物1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-甲氧基乙酮(60mg,0.1182mmol)。¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ＝8.54(d,1H,J＝3.6Hz),8.33(s,1H),8.23-8.27(m,1H),7.76(d,1H,J＝11.6Hz),7.57(d,1H,J＝8.4Hz),4.87-4.96(m,1H),4.70(s,1H),4.67(s,1H),4.30(s,1H),4.28(s,1H),3.92(t,1H,J＝5.6Hz),3.82(t,1H,J＝5.6Hz),3.46(s,1.8H),3.44(s,1.2H),2.98(t,1H,J＝5.6Hz),2.93(t,1H,J＝5.6Hz),2.71(s,3H),1.73(d,6H,J＝7.6Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝508.2。

实施例8：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(80mg,0.1837mmol,)(如式I-1所示的化合物)，甲醛水溶液20mg，三乙酰氧基硼氢化钠128mg加入到3mL二氧六环中，室温下搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-8所示的化合物N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-6-甲基-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-2-胺(40mg,0.08899mmol)。¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ＝8.54(d,1H,J＝4Hz),8.33(d,1H,J＝1.2Hz),8.22(d,1H,J＝8.4Hz),7.52(d,1H,J＝8.4Hz),4.85-4.96(m,1H),3.75(s,2H),2.98-3.03(m,4H),2.71(s,3H),2.59(s,3H),1.33(d,6H,J＝7.2Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝450.2。

实施例9：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(80mg,0.1837mmol)(如式I-1所示的化合物)，3-羟基丙酸(18mg,0.1998mmol)，HOBt(25mg,0.18502mmol)，EDCI(36mg,0.18779mmol)加入到1mL DMF中，室温下搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-9所示的化合物1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-3-羟基丙酮(8mg,0.01576mmol)。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝10.05(d,1H,J＝10Hz),8.70(d,1H,J＝4Hz),8.32(s,1H),8.13(m,1H),7.71(d,1H,J＝12.4Hz),7.60-7.63(m,1H),4.83-4.89(m,1H),4.69(s,1H)),4.62(s,1H),3.81-3.83(m,2H),3.68-3.69(m,2H),2.91(t,1H,J＝5.6Hz),2.80(t,1H,J＝5.6Hz),2.66(s,3H),2.60-2.63(m,2H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝508.2。

实施例10：

第一步：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(80mg,0.1837mmol)(如式I-1所示的化合物)，吡啶(120mg,1.517mmol)，甲基草酰氯(50mg,0.40813mmol)(如式I-10-a所示的化合物)加入到10mL THF中，室温下搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-10-b所示的化合物2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-(2-甲氧基-2-氧乙酰基)氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-乙醛酸甲酯(100mg,0.1646mmol)。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝608.2。

第二步：

2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-(2-甲氧基-2-氧乙酰基)氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-乙醛酸甲酯(100mg,0.1646mmol)(如式I-10-b所示的化合物)，氢氧化锂(40mg)，水(0.5mL)分别加入到3mL甲醇中，室温下搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-10所示的化合物2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-乙醛酸甲酯(70mg,0.1342mmol)。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝10.10(d,1H,J＝7.2Hz),8.69(d,1H,J＝4Hz),8.32(d,1H,J＝1.2Hz),8.14-8.18(m,1H),7.61-7.72(m,2H),4.82-4.89(m,1H),4.68(s,1H),4.60(s,1H),3.87-3.88(m,4H),3.75(t,1H,J＝5.6Hz),2.88-2.92(m,2H),2.65(s,3H),1.64(d,6H,J＝6.8Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝522.2。

实施例12：

将N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-4氢-1,6-萘啶-2-胺(80mg,0.18mmol)(如式I-1所示的化合物),2,2,2-三氟乙基甲磺酸酯(60mg,0.26mmol)和二异丙基乙基胺(60mg,0.46mmol)溶解到N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中,90℃搅拌16个小时.冷却到室温,过滤,滤渣用二氯甲烷溶解,超生波中超30分钟,过滤,用二氯甲烷淋洗,滤渣再用甲醇溶解,超生波超30分钟,过滤得如式I-12所示的化合物N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)-5,6,7,8-4氢-1,6-萘啶-2-胺(45mg),浅黄色固体。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝9.97(s,1H),8.68(d,1H,J＝4.0Hz),8.31(d,1H,J＝1.2Hz),8.08(d,1H,J＝8.4Hz),7.71(d,1H,J＝12.4Hz),7.48(d,1H,J＝8.4Hz),4.83-4.88(m,1H),3.82(s,2H),3.40(q,2H,J＝10.4Hz),3.04(t,2H,J＝6.0Hz),2.86(t,2H,J＝6.0Hz),2.66(s,3H),1.64(d,6H,J＝6.8Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝518.2。

实施例13：

第一步：

将6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑(100mg,0.31mmol)(如式1-c所示的化合物),2-胺基-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5氢)-碳酸叔丁酯(100mg,0.4mmol)(如式I-13-a所示的化合物),三(二亚苄基丙酮)二钯(50mg,0.05mmol),4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(30mg,0.05mmol)和碳酸铯(326mg,1mmol)溶解到1,4-二氧六环(6mL)中,然后在氩气保护下升温到100℃并搅拌18小时,浓缩经柱层析(二氯甲烷/甲醇：0％到10％)得如式I-13-b所示的化合物2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)胺基)-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5氢)-碳酸叔丁脂(45mg),浅黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝537.2。

第二步：

将2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)胺基)-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5氢)-碳酸叔丁脂(45mg,0.08mmol)(如式I-13-b所示的化合物)溶解到四氢呋喃(2mL)中,然后加入盐酸的四氢呋喃溶液(4M),室温搅拌1小时，浓缩得如式I-13所示的化合物氮-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-胺基盐酸盐(40mg),浅黄色固体。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝10.67(s,1H),9.59(s,1H),8.78(d,1H,J＝3.6Hz),8.53(s,1H),8.39(s,1H),7.92(d,1H,J＝11.6Hz),4.90-4.94(m,1H),4.29(t,2H,J＝4.8Hz),3.51(q,2H,J＝6.0Hz),3.06(t,2H,J＝6.4Hz),2.75(s,3H),1.65(d,6H,J＝6.8Hz).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝437.2。

实施例14：

将氮-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-胺基盐酸盐(30mg,0.06mmol)(如式I-13所示的化合物),N,N-二甲基甘氨酸(8mg,0.08mmol),1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(30mg,0.16mmol),1-羟基苯并三唑(30mg,0.22mmol)和二异丙基乙酰胺(100mg,0.78mmol)溶解到1，4-二氧六环(4mL)中并在室温下搅拌16小时.然后浓缩,用薄层色谱板(DCM/CH₃OH＝10/1),经注层析(C18,H₂O/CH₃OH＝100％to 5％)纯化得如式I-14所示的化合物2-二甲胺基-1-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)胺基)-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5氢)-基)乙酰胺(9mg),浅黄色固体。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ＝8.54-8.55(m,1H),8.44(s,1H),8.22-8.25(m,1H),8.15(s,1H),7.90-7.95(m,1H),4.73-4.85(m,3H),3.97(t,2H,J＝6.0Hz),3.24-3.26(m,2H),2.98-3.08(m,2H),2.72(s,3H),2.30-2.33(m,6H),1.73(d,6H,J＝6.8Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝522.3。

实施例15：

第一步：

将6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1-异丙基-2-甲基-苯并咪唑(500mg,1.55mmol)(如式1-c所示的化合物),氨水(5ml,35％)和1，4-二氧六环(5mL)加入封管,100℃搅拌16小时.然后浓缩，用二氯甲烷(30ml)稀释，超声波超30分钟，过滤，滤渣用二氯甲烷淋洗，干燥得如式I-15-a所示的化合物5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑6-基)嘧啶-2-胺(280mg,0.92mmol，淡黄色固体。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝304.2。

第二步：

将2-氯-6-(2-(二甲胺基)乙基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5-酮(40mg,0.17mmol)(如式2-g所示的化合物),5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑6-基)嘧啶-2-胺(60mg,0.19mmol)(如式I-15-a所示的化合物),三(二亚苄基丙酮)二钯(30mg,0.03mmol),4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(20mg,0.04mmol)and碳酸铯(120mg,0.37mmol)溶解到1，4-二氧六环(6mL)中，在氩气保护下加热到100℃并且搅拌18小时，浓缩经柱层析(二氯甲烷/甲醇：0％到10％)得如式I-15所示的化合物6-(2-(二甲胺基)乙基)-2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)胺基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5-酮(45mg,0.09mmol)，淡黄色固体。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ＝8.62(d,1H,J＝8.8Hz),8.44(s,1H),8.50(d,1H,J＝3.6Hz),8.40(s,1H),8.24(d,1H,J＝1.2Hz),8.09(d,1H,J＝11.6Hz),7.80(d,1H,J＝11.6Hz),4.74-4.79(m,1H),4.53(s,2H),3.89(t,2H,J＝7.8Hz),2.86(t,2H,J＝6.4Hz),2.72(s,3H),2.51(s,6H),1.75(d,6H,J＝6.8Hz).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝507.9。

实施例17：

第一步：

将N-(5-氟-4-(7-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(80mg,0.18mmol)(如式I-1所示的化合物)，N-Boc-甘氨酸(39mg,0.22mmol)(如式I-17-a所示的化合物)，HOBt(30mg,0.22mmol)，EDCI(42mg,0.22mmol)加入到1mL DMF中，室温搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-17-b所示的化合物,黄色固体43mg。收率39％。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ＝8.45(d,1H,J＝3.6Hz),8.34(dd,1H,J＝8.5,3.3Hz),8.17-8.21(m,2H),7.79(d,1H,J＝11.7Hz),7.48(d,0.66H,J＝8.6Hz),7.43(d,0.44H,J＝8.6Hz),5.57(s,1H),4.76(s,1H),4.71-4.79(m,1H),4.56(s,1H),4.10(t,2H,J＝3.2Hz),3.98(t,1H,J＝6.0Hz),3.75(t,1H,J＝5.9Hz),3.00(t,1H,J＝6.0Hz),2.96(t,1H,J＝6.0Hz),2.71(s,3H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H),1.48(s,9H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝593.2。

第二步：

将(2-(2-((5-氟-4-)7-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡啶-2-基)胺)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(43mg，0.23mmol)(如式I-17-b所示的化合物)溶于5mL二氧六环中，滴加4N HCl的二氧六环溶液(1mL)，于室温下搅拌4小时。减压蒸干溶剂，加入饱和碳酸氢钠溶液，用二氯甲烷萃取，减压蒸干溶剂得到如式I-17所示的化合物,黄色固体21mg，收率59％。¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ＝8.94(s,1H),8.58(s,1H),8.20(t,2H,J＝9.3Hz),7.56(d,1H,J＝8.8Hz),5.14-5.15(m,1H),4.78(s,2H),4.17(s,1H),4.14(s,1H),4.08(s,1H),3.92(s,1H),3.24(s,2H),2.97(s,3H),1.83(d,6H,J＝6.9Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝493.2。

实施例19：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(200mg,0.46mmol)(如式I-1所示的化合物)，溴乙酸甲酯(281mg,1.837mmol)(如式I-18-a所示的化合物)，N,N-二异丙基乙胺(178mg)加入到10mL 1，4-二氧六环中，升温到90℃反应12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-19所示的化合物N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-6-乙酸甲酯-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-2-胺(130mg，0.256mmol)。¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ＝8.53(d,J＝3.9Hz,1H),8.32(s,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),7.75(d,J＝12.2Hz,1H),7.46(d,J＝8.5Hz,1H),4.89-4.95(m,1H),3.77-3.81(m,2H),3.78(s,3H),3.62(s,0.5H),3.51(s,1.5H),2.97-3.02(m,4H),2.70(s,3H),1.73(d,6H,J＝6.9Hz).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝508.2。

实施例20：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-6-2-乙酸甲酯-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-2-胺(100mg,0.197mmol)(如式I-19所示的化合物)，LiOH(42mg)，H₂O(10mL)加入到MeOH(10mL)中，升温到75℃反应1小时。反应液过滤，洗涤，得如式I-20所示的化合物N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-6-2-乙酸-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-2-胺(70mg,0.14mmol)。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝10.00(s,1H),8.69(d,J＝4.3Hz,1H),8.32(s,1H),8.09(d,J＝8.7Hz,1H),7.71(d,J＝11.7Hz,1H),7.50(d,J＝8.5Hz,1H),4.83-4.88(m,1H),3.87(s,2H),3.04(s,2H),2.90(s,2H),2.66(s,3H),2.00-2.04(m,2H),1.64(s,6H,6.8Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝495.2。

实施例21：

将2-((4-(1-环戊基-7-氟-2甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-氟嘧啶-2-基)氨)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-羧酸叔丁酯(340mg，0.61mmol)(如式3-d所示的化合物)溶于5mL二氧六环中，滴加4N HCl的二氧六环溶液(1mL),于室温下搅拌4小时。减压蒸干溶剂，加入饱和碳酸氢钠溶液，用二氯甲烷萃取，减压蒸干溶剂得到如式I-21所示的化合物,黄色固体230mg，收率82％。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝9.83(s,1H),8.67(d,1H,J＝3.8Hz),8.12(s,1H),8.02(d,1H,J＝7.6Hz),7.73(d,1H,J＝12.1Hz),7.39-7.45(m,1H),5.06–4.90(m,1H),4.41(s,1H),3.82(s,1H),3.58(s,1H),3.18(s,2H),3.03(s,1H),2.66(s,3H),2.11-2.20(m,4H),1.96-2.01(m,2H),1.83–1.69(m,2H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝461.9。

实施例22：

第一步：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-环戊基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(90mg,0.195mmol)(如式I-21所示的化合物)，N-Boc-肌氨酸(46mg,0.24312mmol)，HOBt(25mg,0.18502mmol)，EDCI(36mg,0.18779mmol)加入到1mLDMF中，室温搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-22-a所示的化合物N-[2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-环戊基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-氧乙基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.158mmol)。

第二步：

N-[2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-环戊基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-氧乙基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.158mmol)(如式I-22-a所示的化合物)加入到2M HCl/MeOH溶液中(2ml)，室温搅拌1小时。浓缩后得到如式I-22-b 所示的化合物1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-环戊基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-(甲氨基)乙酮(70mg,0.1314mmol)。

第三步：

1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-环戊基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-(甲氨基)乙酮(70mg,0.1314mmol)(如式I-22-b所示的化合物)，甲醛水溶液30mg，三乙酰氧基硼氢化钠128mg加入到3mL二氧六环中，室温下搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-22所示的化合物2-(二甲氨基)-1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-环戊基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]乙酮(40mg,0.08899mmol)。¹H-NMR(CD₃OD)δ＝8.50(d,1H,J＝3.6Hz),8.23-8.27(m,1H),8.17(s,1H),7.77-7.80(m,1H),7.55(d,1H,J＝8.4Hz),4.96-5.02(m,2H),4.77(s,1H),4.70(s,1H),3.90-3.94(m,2H),2.90-3.01(m,2H),2.70(s,3H),2.35(s,4H),2.33(s,2H),2.27(s,4H),2.06-2.09(m,2H),1.87-1.90(s,2H).LC-MS:m/z(M+H)⁺＝547.2。

实施例23：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(80mg,0.1837mmol)(如式I-1所示的化合物)，4-甲基-1-哌嗪乙酸(32mg,0.20mmol)，HOBt(25mg,0.18502mmol)，EDCI(36mg,0.18779mmol)加入到1mLDMF中，室温下搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-23所示的化合物1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙酮(60mg,0.104mmol)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ＝9.99-10.02(m,1H),8.69(d,1H,J＝4Hz),8.30(s,1H),8.11-8.16(m,1H),7.70(d,1H,J＝12Hz),7.55-7.72(m,1H),4.81-4.89(m,1H),4.75(s,1H),4.60(s,1H),3.77-3.88(m,2H),3.23-3.25(m,2H),2.90-2.95(m,1H),2.65(s,3H),2.33-2.43(m,6H),2.16(s,2H),2.09(s,1H),1.64(d,6H,J＝6.8Hz).LC-MS:m/z(M+H)⁺＝576.2。

实施例26：

N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(如式I-1所示的化合物)(80mg,0.1837mmol)，3-羟基-3-甲基丁酸(28mg,0.237mmol)，HOBt(25mg,0.18502mmol)，EDCI(36mg,0.18779mmol)加入到1mLDMF中，室温下搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得如式I-26所示的化合物1-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-3-羟基-3-甲基-丁酮(10mg,0.019mmol)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ＝10.06(d,1H,J＝11.2Hz),8.70(d,1H,J＝4Hz),8.32(s,1H),8.12–8.15(m,1H),7.70(d,1H,J＝12Hz),7.57–7.63(m,1H),4.81–4.87(m,2H),4.73(s,1H),4.65(s,1H),3.82–3.88(m,2H),2.89–2.92(m,1H),2.79–2.82(m,1H),2.66 2.57–2.59(m,3H),1.64(d,6H,J＝6.8Hz),1.21(s,3H),1.19(s,3H).LC-MS:m/z(M+H)⁺＝536.2。

实施例27：

第一步：

N-(5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(110mg,0.25mmol)(如式I-1所示的化合物)，N–叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸(100mg,0.49mmol)，EDCI(60mg,0.31mmol)，HOBt(40mg,0.29mmol)和二异丙基乙酰胺(500mg,3.87mmol)溶解到DMF(4mL)中并在室温下搅拌16小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(DCM/CH3OH 0～10％)，纯化得如式I-27-a所示的化合物叔丁基(1-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)胺基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5氢)-基)2-甲基-1-丙羰-2-基)酰胺(70mg)，浅黄色固体。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝621.1。

第二步：

叔丁基(1-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)胺基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5氢)-基)2-甲基-1-丙羰-2-基)酰胺(70mg,0.11mmol)(如式I-27-a所示的化合物)溶解到1,4-二氧六环(4mL)中，加入盐酸的1,2-二氧六环溶液(4M)，室温搅拌16小时，过滤，溶于水，加碳酸氢钠水溶液调PH值到7，用二氯甲烷和甲醇的混合溶液萃取，有机层浓缩得如式I-27-b所示的化合物2-氨基-1-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5氢)-基)-2-甲基丙基-1-酮(40mg)。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝521.2。

第三步：

2-氨基-1-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5氢)-基)-2-甲基丙基-1-酮(40mg,0.077mmol)(如式I-27-b所示的化合物)溶解到二氧六环(4mL)中，缓慢滴加甲醛水溶液(10mg,0.33mmol)并室温搅拌1小时,然后加入醋酸硼氢化钠(60mg,0.28mmol)并搅拌16小时。用水淬灭，然后加碳酸氢钠水溶液调PH值到7，二氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，经薄层色谱纯化(DCM/CH3OH＝10/1)得粗产物，然后粗产物用二甲基亚砜溶解，过滤，滤渣用甲醇淋洗，干燥得如式I-27所示的化合物2-(甲基氨基)-1-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1氢苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7，8-二氢-1,6-萘啶-6(5氢)-基)-2-甲基丙基-1酮(15mg)，黄色固体。¹H-NMR(CDCl₃)δ8.44(d,1H,J＝4.0Hz),8.29(d,1H,J＝6.8Hz),8.22(s,1H),7.92-8.01(m,1H),7.81(d,1H,J＝11.6Hz),7.42-7.50(m,1H),5.40-5.44(m,1H),4.73-4.81(m,2H),4.51-4.54(m,1H),3.96-3.98(m,1H),2.96(t,2H,J＝4.4Hz),2.72(s,3H),2.18-2.26(m,6H),1.74(d,6H,J＝7.2Hz),1.28-1.32(m,6H).LC-MSm/z:(M+H)⁺＝548.9。

实施例28：

叔丁基2-((5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-羧酸酯(7g，13.1mmol)溶解到二氧六环(40ml)中，加入盐酸的二氧六环溶液(2M，30ml)，室温搅拌16小时，浓缩，用二氯甲烷打浆得如式I-28化合物N-(5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨基盐酸盐5.5g。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ11.0(s,1H),10.0(s,2H),8.87(d,1H,J＝3.2Hz),8.29(s,1H),8.08(d,1H,J＝8.8Hz),7.92-7.95(m,2H),4.29(s,2H),3.55-3.60(m,1H),3.46-3.49(m,2H),3.19(t,2H,J＝6.0Hz),2.82(s,3H),1.31-1.36(m,2H),1.20-1.22(m,2H)。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝434.2。

实施例29：

N-(5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(100mg,0.25mmol)(如式I-28所示的化合物)，N,N-二甲基甘氨酸(100mg,0.49mmol)，EDCI(60mg,0.31mmol)，HOBt(40mg,0.29mmol)和二异丙基乙酰胺(500mg,3.87mmol)溶解到DMF(4mL)和二氯甲烷(4mL)的混合溶液中并升温至60℃搅拌16小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(DCM/CH₃OH/NH₃.CH₃OH＝100/10/1)，纯化得如式I-29所示的化合物叔(1-(2-((4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)氨基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)-2-(二甲氨基)-乙酮(70mg),浅黄色固体。¹H-NMR(CDCl₃+CD₃OD)δ8.37(s,1H),8.23(d,1H,J＝8.0Hz),8.11(s,1H),7.72(d,1H,J＝11.2Hz),7.44-7.46(m,1H),4.64-4.67(m,2H),3.82-3.85(m,2H),3.25-3.31(m,4H),2.86-2.92(m,2H),2.66(s,3H),2.31(s,6H),1.28-1.35(m,2H),1.08-1.10(m,2H).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝519.2。

实施例30：

N-(5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(100mg,0.25mmol)(如式I-28所示的化合物),N,N-吗啉-4-基乙酸(100mg,0.49mmol),EDCI(60mg,0.31mmol),HOBt(40mg,0.29mmol)和二异丙基乙酰胺(500mg,3.87mmol)溶解到DMF(4mL)中并室温搅拌16小时.反应液浓缩后经硅胶柱层析(DCM/CH₃OH＝100％到90％)纯化得如式I-30所示的化合物(1-(2-((4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)氨基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)-2-吗啉-乙酮(20mg),浅黄色固体。¹H-NMR(CDCl₃)δ8.44-8.46(m,1H),8.30-8.33(m,1H),8.16-8.18(m,1H),8.09(s,1H),7.78-7.82(m,1H),7.50-7.52(m,1H),4.74-4.79(m,2H),3.92-3.95(m,2H),3.75-3.77(m,2H),3.67-3.72(m,1H),3.31-3.35(m,3H),2.94-3.05(m,2H),2.76(s,3H),2.55-2.57(m,4H),1.33-1.38(m,2H),1.13-1.17(m,2H).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝561.2。

实施例31：

3-羟基环丁基甲酸(26mg,0.22391mmol)，N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-氨(80mg,0.1837mmol)(如式I-28所示的化合物)，1-羟基苯并三唑(25mg,0.185mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(36mg,0.18779mmol)加入到1mL DMF中，室温搅拌12小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇0～10％)得化合物[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5氢-1,6-萘啶-6-基]-(3-羟基环丁基)甲酮(50mg,0.09370mmol)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ10.05(d,1H,J＝12Hz),8.69(d,1H,J＝3.6Hz),8.32(s,1H),8.13(d,1H,J＝8.4Hz),7.71(d,1H,J＝12.4Hz),7.60(d,1H,J＝16.4Hz),5.07(s,1H),4.84-4.88(m,1H),4.57-4.61(m,2H),3.99(s,1H),3.71-3.81(m,2H),2.83-2.90(m,3H),2.68(s,3H),2.38-2.42(m,2H),1.93-2.03(m,2H),1.64(d,6H,J＝6.8Hz).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝534.2。

实施例32：

实施例37：

N-(5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(100mg,0.23mmol)(如式I-28所示的化合物),2-溴-N,N-二甲基乙酰胺(50mg,0.30mmol)和二异丙基乙酰胺(200mg,1.55mmol)溶解到DMF(2mL)中升温至90℃并搅拌16小时。反应液冷却并用水稀释，乙酸乙酯萃取，有机层浓缩后经硅胶波层色谱板(DCM/CH₃OH＝10/1)纯化，然后粗产品用乙酸乙酯打浆得如式I-37所示的化合物(2-(2-((4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)-乙酰胺(5mg),浅黄色固体。¹H-NMR(CDCl₃)δ8.43(d,1H,J＝3.6Hz),8.23(d,1H,J＝8.4Hz),8.19(s,1H),8.06(s,1H),7.80(d,1H,J＝12.0Hz),7.40(d,1H,J＝8.0Hz),3.75(s,2H),3.43(s,2H),3.32-3.33(m,1H),3.15(s,3H),2.96-3.01(m,6H),2.76(s,3H),1.33-1.38(m,2H),1.13-1.17(m,2H).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝519.2。

实施例52：

N-(5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(1g,2.3mmol)(如式I-28所示的化合物),2-(二甲氨基)乙醛(600mg,6.9mmol)溶解到二氯甲烷中，缓慢加入醋酸硼氢化钠(1.5g，7.1mmol)，加热回流并搅拌16小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(DCM/CH₃OH/NH₃.CH₃OH＝100/10/2)纯化得如式I-52所示的化合物N-(4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)6-(2-二甲氨基乙基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-胺(1.1g),浅黄色固体。¹H-NMR(CDCl₃)δ8.43(d,1H,J＝3.6Hz),8.26(d,1H,J＝8.8Hz),8.19(s,1H),7.80(d,1H,J＝11.6Hz),7.42(d,1H,J＝8.4Hz),3.72(s,2H),3.31-3.34(m,1H),3.10(t,2H,J＝6.4Hz),2.92-2.98(m,6H),2.76(s,3H),2.74(s,6H),1.33-1.38(m,2H),1.13-1.17(m,2H).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝505.2。

实施例61：

N-(5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(100mg,0.23mmol)(如式I-28所示的化合物),二(三氯甲基)碳酸酯(40mg,0.13mmol)和DIPEA(120mg，0.93mmol)溶解到二氯甲烷中，室温搅拌1小时，然后加入N,N,N’-三甲基乙二胺(50mg，0.49mmol)，室温搅拌16小时。反应液浓缩后用二氯甲烷和水稀释，分液，水层浓缩，经柱层析(C18，H₂O/CH₃OH＝100％to 90％)纯化，然后经薄层色谱纯化(DCM/CH3OH＝10/1)得如式I-61所示的化合物2-((4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-二甲氨基乙基)-N-甲基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-甲酰胺(10mg),浅黄色固体。¹H-NMR(400M Hz，CD₃OD)δ8.45(d,1H,J＝4.4Hz),7.93(d,1H,J＝8.0Hz),7.79(s,1H),7.43(d,1H,J＝12.0Hz),7.27(d,1H,J＝8.0Hz),4.28(s,2H),3.52-3.55(m,4H),3.24-3.27(m,1H),3.04-3.07(m,5H),2.80-8.83(m,2H),2.72(s,6H),2.58(s,3H),1.22-1.24(m,2H),0.95-0.98(m,2H).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝562.3。

实施例62：

第一步：

N-(5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(110mg,0.23mmol)(如式I-28所示的化合物),BOC-N-甲基-D-丙氨酸(60mg,0.29mmol),EDCI(60mg,0.31mmol),HOBt(50mg,0.37mmol)和二异丙基乙酰胺(100mg,0.77mmol)溶解到DMF(4mL)中并在室温下搅拌16小时.反应液浓缩后经硅胶柱层析(DCM/CH₃OH 0～10％)，纯化得如式I-62-a所示的化合物N-((1R)-(2-(2-((5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)胺基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)-1-甲基-2-氧代-乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(130mg),浅黄色固体。LC-MSm/z:(M+H)⁺＝607.2。

第二步：

N-((1R)-(2-(2-((5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)胺基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)-1-甲基-2-氧代-乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.19mmol)(如式I-62-a所示的化合物)溶解到1,4-二氧六环(4mL)中,加入盐酸的1,2-二氧六环溶液(4M),室温搅拌16小时，过滤，溶于水，加碳酸氢钠水溶液调PH值到7，用二氯甲烷和甲醇的混合溶液萃取，有机溶剂浓缩得如式I-62-b所示的化合物(2R)-1-(2-((5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6-基)-2-(甲基氨基)丙基-1-酮(110mg)。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝507.2。

第三步：

(2R)-1-(2-((5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6-基)-2-(甲基氨基)丙基-1-酮(110mg,0.21mmol)(如式I-62-b所示的化合物)溶解到甲醇(4mL)中，缓慢滴加甲醛水溶液(10mg,0.33mmol)并室温搅拌1小时,然后加入氰基硼氢化钠(50mg,0.44mmol)并搅拌16小时.浓缩经柱层析纯化(DCM/CH₃OH/NH₃.CH₃OH＝10/1/0.2)得粗产物，然后粗产物经制备液相纯化得如式I-62所示的化合物(2R)-2-(甲氨基)-1-(2-((5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)-7，8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)丙基-1酮(30mg)，黄色固体。¹H-NMR(400M Hz，CD₃OD)δ8.55(d,1H,J＝3.6Hz),8.33(d,1H,J＝1.2Hz),8.28(t,1H,J＝7.2Hz),7.80(d,1H,J＝12.0Hz),7.61-7.64(m,1H),4.88-4.96(m,2H),4.66-4.75(m,1H),4.45-4.49(m,1H),3.85-4.11(m,2H),3.03-3.11(m,1H),2.95-2.98(m,1H),2.84(d,6H,J＝3.6Hz),2.71(s,3H),1.74(d,6H，J＝6.8Hz),1.50-1.56(m,3H).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝535.2。

实施例72：

第一步：

将N-(5-氟-4-(7-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(200mg，0.46mmol)(如式I-1所示的化合物)溶于5mL甲醇中，加入1-叔丁氧碳基-3-吡咯烷酮(170mg，0.92mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(146mg，0.92 mmol)，于室温下搅拌16小时。减压蒸干溶剂，加入饱和碳酸氢钠溶液，用二氯甲烷萃取，减压蒸干溶剂。残留物用硅胶柱层析纯化得,如式I-72-a所示的化合物黄色固体170mg，收率61％。LC-MS:604.9[M+H]⁺.

第二步：

将3-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)胺基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(如式I-72-a所示的化合物)(170mg，0.28mmol)溶于5mL二氧六环中，滴加4N HCl的二氧六环溶液(1mL)，于室温下搅拌4小时。减压蒸干溶剂，加入饱和碳酸氢钠溶液，用二氯甲烷萃取，减压蒸干溶剂得到得如式I-72-b所示的化合物黄色固体138mg，收率97％。LC-MS:504.9[M+H]⁺.

第三步：

将N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(吡咯烷-3-基)-5,6，7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(如式I-72-b所示的化合物)(138mg，0.27mmol)溶于5mL二氧六环中，加入氢氧化钠(55mg，1.37mmol)和溴丙炔(32mg，0.27mmol)，于室温下搅拌2小时。减压蒸干溶剂，残留物用硅胶柱层析纯化得如式I-72所示的化合物，黄色固体55mg，收率38％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.43(d,J＝3.8Hz,1H),8.23(dd,J＝9.2,4.8Hz,2H),7.99(s,1H),7.80(d,J＝12.2Hz,1H),7.39(d,J＝8.5Hz,1H),4.75(dt,J＝14.0,7.0Hz,1H),3.69(s,2H),3.49(d,J＝2.2Hz,2H),3.27–3.05(m,2H),3.00(d,J＝7.9Hz,2H),2.97–2.75(m,4H),2.74–2.68(m,3H),2.28(t,J＝2.3Hz,1H),2.20(dd,J＝13.0,6.3Hz,1H),1.92(dd,J＝12.9,6.4Hz,2H),1.73(d,J＝7.0Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝542.9.

实施例73：

第一步：

N-(5-氟-4-(7-氟-3-环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(100mg,0.23mmol)(如式I-28所示的化合物),2(R)-2-氯甲基环氧乙烷(30mg,0.32mmol)和DIPEA(100mg，0.77mmol)溶解到N,N-二甲基甲酰胺(4ml)中，加热至80℃并搅拌16小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(DCM/CH₃OH＝10/1)纯化得如式I-73-a所示的化合物(S)-N-(4-(1-环丙基-4-氟-2-甲基-1H-苯并咪唑-6-基)-5-氟嘧啶-2-基)-6-(环氧-2-基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(30mg),浅黄色固体。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝490.2。

第二步：

(S)-N-(4-(1-环丙基-4-氟-2-甲基-1H-苯并咪唑-6-基)-5-氟嘧啶-2-基)-6-(环氧-2-基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(30mg，0.06mmol)(如式I-73-a所示的化合物),二甲胺(10mg,0.22mmol)溶解到乙醇(5ml)中，加热至60℃并搅拌4小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(DCM/CH₃OH＝10/1)纯化得如式I-73所示的化合物(S)-1-(2-((4-(1-环丙基-4-氟-2-甲基-1H-苯并咪唑-6-基)-5-氟嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)-3-(二甲基氨基)丙基-2-醇(10mg),浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝3.7Hz,1H),8.19(d,J＝8.5Hz,1H),8.13(s,1H),7.77-7.70(m,1H),7.40(d,J＝8.6Hz,1H),4.35(m,1H),3.77(s,2H),3.23(d,J＝15.2Hz,2H),3.06-2.91(m,5H),2.87(s,6H),2.72-2.62(m,5H),1.34-1.29(m,2H),1.10(t,J＝8.0Hz,2H).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝534.9。

实施例77：

第一步：

N-(5-氟-4-(7-氟-3环丙基-2-甲基-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(100mg,0.23mmol)(如式I-28所示的化合物),N-Boc-D-丙氨醛(100mg,0.58mmol)溶解到二氯甲烷中，缓慢加入醋酸硼氢化钠(200mg，0.94mmol)，加热回流并搅拌16小时。反应液浓缩后经硅胶柱层析(DCM/CH₃OH/NH₃.CH₃OH＝100/10/2)纯化得如式I-77-a所示的化合物N-(4-(3-叔丁基-N-((1R)-2-(2-((4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)-1-甲基-乙基)碳酸酯(60mg),浅黄色固体。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝591.2。

第二步

叔丁基-N-((1R)-2-(2-((4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)-1-甲基-乙基)碳酸酯(60mg,0.2mmol)(如式I-77-a所示的化合物)溶解到二氯甲烷(4mL)中，加入盐酸的1,2-二氧六环溶液(4M，1ml)，室温搅拌4小时，浓缩后溶于二氯甲烷中，室温搅拌30mins，过滤然后干燥得如式I-77所示化合物6-((2R)-氨基丙基)-N-(4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-氨基盐酸盐(60mg)，淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.98(d,J＝3.3Hz,1H),8.58(s,1H),8.27(d,J＝11.2Hz,1H),8.22(d,J＝9.1Hz,1H),7.59(d,J＝9.0Hz,1H),4.75-4.44(m,2H),4.08(M,1H),3.95-3.82(m,1H),3.80-3.73(m,2H),3.67-3.48(m,4H),3.04(s,3H),1.54(M,5H),1.42–1.34(m,2H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝490.9。

实施例80：

6-((2R)-氨基丙基)-N-(4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-氨(50mg,0.21mmol)(如式I-77所示的化合物)溶解到甲醇(6mL)中，缓慢滴加甲醛水溶液(20mg,0.67mmol),然后加入醋酸硼氢化钠(50mg,0.24mmol)，升温至60℃并搅拌16小时.浓缩经柱层析纯化(DCM/CH3OH/NH3.CH3OH＝10/1/0.2)得粗产物，然后粗产物经制备液相纯化得如式I-80所示的化合物N-(4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)-6-((2R)-2-(二甲基氨基丙基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-氨(25mg)，淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.52(d,J＝3.9Hz,1H),8.26(s,1H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),7.80(d,J＝12.1Hz,1H),7.52(d,J＝8.6Hz,1H),3.87(d,J＝14.7Hz,1H),3.78-3.65(m,2H),3.46(m,1H),3.14-3.04(m,1H),3.02-2.88(m,4H),2.80(s,6H),2.75(s,3H),2.68(m,1H),1.36(d,J＝7.0Hz,2H),1.31(d,J＝6.6Hz,3H),1.21-1.14(m,2H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝519.0。

实施例95：

第一步：

将碳酸钾(75mg,0.55mmol)和N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(120mg，0.275mmol)加入到15ml N，N-二甲基甲酰胺中,然后加入溴乙酸乙酯(75mg，0.45mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌过夜。将反应液减压蒸干，然后经硅胶柱层析纯化得如式I-95-a所示化合物2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7，8二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙酸乙酯(100mg)，浅黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝522

第二步：

将2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7，8二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙酸乙酯溶解在15ml干燥的二氯甲烷中,在-78度下加入2ml的DIBAL-H(1mol/L在甲苯中的溶液),在这个温度下搅拌3h。然后用甲醇淬灭,再加入2ml饱和氯化铵，室温搅拌10分钟，有机层用硫酸钠干燥，然后浓缩得如式I-95-b所示化合物2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙醛，粗产物未经纯化直接用于下一步。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝478

第三步：

将2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙醛(80mg,0.167mmol),乙酸钠(100mg,0.73mmol)和盐酸羟胺(70mg，1mmol)加入到15ml乙醇中加热到80度搅拌2h。将反应液减压蒸干，然后经硅胶柱层析纯化得如式I-95所示化合物2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙醛肟(28mg)，浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.48(d,J＝3.8Hz,1H),8.28(d,J＝0.9Hz,1H),8.22(d,J＝8.5Hz,1H),7.78(d,J＝11.9Hz,1H),7.55–7.42(m,1.44H),6.90(t,J＝4.5Hz,0.3H),4.89–4.83(m,1H),3.71(d,J＝10.8Hz,2H),3.58(d,J＝4.5Hz,1H),3.36(d,J＝6.1Hz,2H),3.06–2.89(m,4H),2.69(s,3H),1.74(t,J＝6.5Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝493

实施例97：

第一步：

将叔丁基-N-[N-叔丁氧羰基-N'-(三氟甲基磺酰基)甲脒基]氨基甲酸(80mg,0.21mmol),6-(2-氨基乙基)-N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-5，6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺盐酸盐(100mg,0.21mol)和三乙胺(0.5ml)加入到15ml N，N-二甲基甲酰胺中,室温搅拌过夜。将反应液减压蒸干，然后经硅胶柱层析纯化得如式I-97-a所示化合物叔丁基-N-[N-叔丁氧羰基-N'-[2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基]乙基]甲脒基]氨基甲酸(130mg)，浅黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝721

第二步：

将叔丁基-N-[N-叔丁氧羰基-N'-[2-[2-[[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基]-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基]乙基]甲脒基]氨基甲酸(120mg,0.166mmol)加入到5ml的二氯甲烷中,在冰浴下加入5ml三氟醋酸。室温搅拌3h。减压蒸干溶剂，然后经制备高效液相分离纯化，得如式I-97所示化合物2-(2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)胍(50mg)，浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.53(d,J＝3.9Hz,1H),8.32(d,J＝1.2Hz,1H),8.26(s,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),7.77(d,J＝12.8Hz,1H),7.50(d,J＝8.6Hz,1H),4.93(d,J＝6.9Hz,1H),3.73(s,2H),3.48–3.41(m,2H),2.97(s,4H),2.84(t,J＝5.7Hz,2H),2.71(s,3H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝521

实施例107：

将三乙胺(0.5ml)和N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲基氨基)乙基基)-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺盐酸盐(100mg，0.203mmol)加入到15ml干燥的二氯甲烷中,然后加入二甲基氯化膦30mg,0.2667mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌3h。将反应液减压蒸干，经硅胶柱层析(DCM/CH₃OH/NH₃.CH₃OH＝10/1/0.2)纯化得如式I-107所示的化合物N-(2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)-N，P，P-二甲基膦酰胺(40mg)，浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.44(d,J＝3.8Hz,1H),8.22(dd,J＝17.5,9.9Hz,3H),7.78(d,J＝11.6Hz,1H),7.39(d,J＝8.5Hz,1H),4.83-4.67(m,1H),3.77(s,2H),3.29(dd,J＝15.9,7.0Hz,2H), 3.00(s,4H),2.83-2.77(m,2H),2.72(d,J＝11.8Hz,6H),1.74(t,J＝9.7Hz,6H),1.50(d,J＝13.2Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝569。

实施例110：

将N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲基氨基)乙基基)-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺盐酸盐(100mg,0.2mmol),二异丙基乙胺(0.5ml)和硫羰基二眯唑(74mg，0.41mmol)加入到15ml N，N-二甲基甲酰胺中,在50度搅拌3h。将反应混合物冷却到室温,10ml氨水加入到上述反应物,室温搅拌过夜.将反应液减压蒸干，然后经硅胶柱层析纯化得如式I-110所示化合物1-(2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)-1-甲基硫脲(24mg)，浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.95(s,1H),8.68(d,J＝3.9Hz,1H),8.32(s,1H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),7.70(d,J＝12.0Hz,1H),7.45(d,J＝8.5Hz,1H),7.25(s,1H),4.85(dt,J＝13.9,7.0Hz,1H),3.64(s,2H),3.11(d,J＝19.9Hz,2H),2.86(d,J＝11.9Hz,4H),2.72(t,J＝6.5Hz,2H),2.65(s,3H),1.64(d,J＝6.9Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝552

实施例132：

将6-(2-氨基乙基)-N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-5，6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺盐酸盐(120mg,0.25mol)和1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(73mg，0.5mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(5ml)中，然后加入二异丙基乙胺(350mg,2.7mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸干溶剂，然后经制备高效液相分离纯化得到如式I-132所示化合物1-(2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)胍(28mg),浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.51(d,J＝4.0Hz,1H),8.38(s,2H),8.29(d,J＝1.1Hz,1H),8.13(d,J＝8.5Hz,1H),7.71(d,J＝12.7Hz,1H),7.44(d,J＝8.5Hz,1H),4.93(d,J＝7.0Hz,0H),3.69(s,0H),3.45(t,J＝5.6Hz,2H),2.93(s,4H),2.82(t,J＝5.6Hz,2H),2.69(s,3H),1.72(d,J＝6.9Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝521.

实施例133：

第一步：

将N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲基氨基)乙基基)-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺盐酸盐(90mg,0.15mmol),叔丁基(2-氧代乙基)氨基甲酸(50mg,0.31mmol)和三乙胺(1ml)加入到25ml的二氯甲烷中,然后加入醋酸硼氢化钠(65mg,0.3mmol).所形成的反应混合物在室温下搅拌过夜.将反应液减压蒸干，残留物用硅胶柱层析纯化得如式I-133-a所示化合物(2-((2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(80mg)，浅黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝636.

第二步：

将2-((2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(90mg,0.14mmol)溶解在甲醇(3ml)中，加入4ml 4mol/L盐酸1,4-二氧六环，所形成的溶液在室温反应2h。上述反应混合物减压蒸干得如式I-133-b所示化合物N1-(2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)-N1二甲基乙烷-1,2-二胺盐酸盐(80mg)，白色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝536

第三步：

将N1-(2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)-N1二甲基乙烷-1,2-二胺盐酸盐(80mg,0.15mmol)和1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(45mg，0.3mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(5ml)，然后加入二异丙基乙胺(350mg,2.7mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸干溶剂，然后经过制备高效液相分离纯化，得如式I-133所示化合物1-(2-((2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)(甲基)氨基)乙基)胍(29mg)，浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.54(d,J＝3.9Hz,1H),8.40(s,1H),8.31(d,J＝1.0Hz,1H),8.22(d,J＝8.5Hz,1H),7.78(d,J＝12.0Hz,1H),7.54(d,J＝8.6Hz,1H),4.93(d,J＝6.9Hz,1H),3.97(s,2H),3.37(t,J＝5.7Hz,2H),3.21(t,J＝6.0Hz,2H),3.07(t,J＝5.7Hz,2H),3.02(t,J＝6.2Hz,2H),2.86(t,J＝6.1Hz,2H),2.77(t,J＝5.7Hz,2H),2.71(s,3H),2.42(s,3H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝578

实施例135：

将N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲基氨基)乙基基)-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺盐酸盐(100mg,0.2mmol),二异丙基乙胺(0.5ml)和硫羰基二眯唑(74mg,0.41mmol)加入到15ml N，N-二甲基甲酰胺中,在50摄氏度搅拌3h.将反应混合物冷却到室温,30ml甲醇加入到上述反应物,室温搅拌过夜.将反应液减压蒸干，经硅胶柱层析纯化得如式I-135所示化合物N-(2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)-N-甲基-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(21mg)，浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.09(s，1H)，8.71(d，J＝3.9Hz，1H)，8.31(s，1H)，8.16(d，J＝8.6Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.70(d,J＝12.2Hz,1H),7.45(d,J＝8.3Hz,1H),7.23(s,1H),7.00(s,1H),5.37(s,2H),4.90–4.76(m,1H),3.89–3.75(m,2H),3.55(d,J＝3.7Hz,4H),3.05–2.95(m,5H),2.65(s,3H),1.60(d,J＝6.9Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝603

实施例137：

第一步：

将二异丙基乙胺(0.5ml)和N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(132mg，0.3mmol)加入到15ml N，N-二甲基甲酰胺中,然后加入溴乙腈(72mg，0.6mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌2h。将反应液减压蒸干，然后经硅胶柱层析纯化得如式I-137-a所示化合物2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙腈(120mg)，浅黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝475

第二步：

将2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙腈(120mg,0.253mmol)加入到20ml乙醇和20ml四氢呋喃组成的混合溶剂,然后加入0.5ml的50％的羟胺水溶液,在80度搅拌过夜。将反应液减压蒸干，然后经硅胶柱层析纯化得如式I-137所示化合物2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)-N'-羟基乙脒(85mg)，浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.47(d,J＝3.9Hz,1H),8.27(d,J＝0.9Hz,1H),8.19(d,J＝8.5Hz,1H),7.75(d,J＝11.5Hz,1H),7.43(d,J＝8.5Hz,1H),4.87(d,J＝7.0Hz,1H),3.64(s,2H),3.20(s,2H),2.96(d,J＝5.2Hz,2H),2.88(t,J＝5.6Hz,2H),2.69(s,3H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝508

实施例：153

在室温及氩气保护下，在干燥的烧瓶中依次加入N-[4-(3-叔丁基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-yl]-6-(2-氯乙基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-胺(50mg,0.09766mmol)(如式3-c所示化合物)，无水乙腈(1mL)和吗啉(85mg,0.9766mmol)。将反应混合物加热到80℃并搅拌12小时。LCMS显示反应完毕。反应混合物冷却到室温并用旋转蒸发仪浓缩。得到的残留物用制备TLC(硅胶,二氯甲烷/甲醇＝10:1,v/v)纯化得到如I-153所示的黄色固体化合物N-[4-(3-叔丁基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基]-6-(2-二乙基氨基乙基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-胺(12.8mg,0.0227mmol),淡黄色固体。¹HNMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.41(d,J＝3.8Hz,1H),8.38(d,J＝1.2Hz,1H),8.32(br.s,1H),8.24(d,J＝8.5Hz,1H),7.74(d,J＝11.3Hz,1H),7.35(d,J＝8.5Hz,1H),3.84–3.68(m,6H),3.02–2.93(m,4H),2.87(s,3H),2.85–2.79(m,2H),2.75–2.69(m,2H),2.66–2.59(m,4H),1.90(s,9H)。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝563.40。

实施例：155

第一步：

将乙烯基溴化镁(25ml,0.7mmol/L)在-78度的条件下多于半小时的时间加入到甲基膦酰二氯(1g,7.52mmol)在四氢呋喃的溶液中。所形成的混合溶液在此温度下搅拌3.5小时。然后升温至0度，继续搅拌1小时。用20ml饱和的氯化铵溶液淬灭该反应。所得混合物通过一段硅胶柱过滤，并用10％7M氨甲醇在二氯甲烷中的溶液进行洗脱。所得滤液浓缩得粗品，无色粘稠状液体。0.1g，收率10％。直接用于下一步。LC-MS m/z:(M+H)⁺＝117

第二步：

将甲基二乙烯基氧化膦(20mg，0.17mmol)和6-(2-氨基乙基)-N-(4-(1-(叔丁基)-4-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-5-氟嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(50mg，0.1mmol)加入到四氢呋喃(6ml)和水(2ml)的混合溶剂中，然后加入0.5ml三乙胺，加热回流过夜。上述反应混合物减压蒸干，过柱(甲醇：二氯甲烷＝0－20％),所得粗产物通过制备高效液相分离纯化，得到1-(2-(2-((4-(1-(叔丁基)-4-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-5-氟嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-基)乙基)-4-甲基-1,4-氮杂磷杂环己烷4-氧化物(8mg)黄色固体，收率12％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.43(d,J＝8.2Hz,2H),8.26(d,J＝8.1Hz,1H),7.77(d,J＝10.9Hz,1H), 7.42(d,J＝8.6Hz,1H),3.74(s,2H),2.98(s,6H),2.83(m,9H),1.95(t,13H),1.57(d,J＝12.9Hz,3H).LC-MS m/z:(M+H)⁺＝609

实施例：187

第一步：

将N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(400mg,0.918mmol)和二异丙基乙胺(1ml)加入到10ml N，N-二甲基甲酰胺和20ml乙腈组成的混合溶剂中，然后加入2-氯乙基甲基硫醚(0.6ml)，70度搅拌过夜。再加入2-氯乙基甲基硫醚(0.6ml)，70度搅拌过夜。将上述混合物减压浓缩，经硅胶柱层析纯化得如式所示化合物N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲硫基)乙基基)-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺(210mg)，黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝510

第二步：

将N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲硫基)乙基基)-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺(100mg,0.1962mmol)加入到10ml二氯甲烷中，然后加入间氯过氧苯甲酸(42mg,0.188mmol)，室温搅拌过夜。将上述混合物减压浓缩，经硅胶柱层析纯化得如式I-187-b所示化合物N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲基磺酰基)乙基基)-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺(80mg)浅黄色固体。LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝526

第三步：

将N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲基磺酰基)乙基基)-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-胺(90mg，0.17mmol)和2-[(氨基氧基)磺酰]-1,3,5-三甲基苯(60mg，0.28mmol)加入到10ml二氯甲烷和10ml乙腈组成的混合物溶剂中，室温搅拌过夜。减压蒸干溶剂，所得粗产物通过制备高效液相分离纯化，得如式I-187所示化合物N-[5-氟-4-(7-氟-3-异丙基-2-甲基苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-6-[2-(甲基磺酰亚胺)乙基]-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-胺；2,4,6-三甲基苯磺酸盐(30mg)，浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.56(d,J＝3.8Hz,1H),8.40–8.29(m,2H),7.79(d,J＝11.8Hz,1H),7.60(d,J＝8.8Hz,1H),6.88(s,2H),4.92(d,J＝6.9Hz,2H),4.78(s, 1H),4.07(s,4H),3.76–3.61(m,1H),3.52–3.39(m,2H),3.28(dd,J＝14.5,9.5Hz,1H),2.82(d,J＝3.3Hz,3H),2.71(s,3H),2.63(s,6H),2.24(s,3H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝541

实施例：197

将(2-((2-(2-((4-(1-(叔丁基)-4-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-5-氟嘧啶-2(5H)-基)乙基)(甲基)氨基)乙基)膦酸二乙酯(100mg,0.15mmol)加入到10ml二氯甲烷中，然后加入三甲基碘硅烷(0.2mL)，所形成的混合物室温搅拌过夜。上述反应混合物减压蒸干，所得粗产物通过制备高效液相分离纯化，得到(2-((2-(2-((4-(1-(叔丁基)-4-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-5-氟嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)乙基)(甲基)氨基)乙基)膦酸(50mg)浅黄色固体，收率54％。¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.47(d,J＝3.8Hz,1H),8.41(d,J＝1.1Hz,1H),8.17(d,J＝8.6Hz,1H),8.08(s,1H),7.75(d,J＝11.5Hz,1H),7.51(d,J＝8.6Hz,1H),3.87(s,2H),3.24(m,4H),3.13–3.00(m,6H),2.85(s,3H),2.80(s,3H),2.04–1.82(m,12H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝615

实施例：204

将N-(4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)-5-氟-嘧啶-2-基)6-(2-二甲氨基乙基)-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-2-胺(100mg，0.198mmol)溶解到双氧水(5ml)中，室温搅拌约1小时，加入亚硫酸钠水溶液淬灭反应，减压蒸馏除水，固体用二氯甲烷和甲醇的混合溶剂溶解，过滤，滤液经高效液相制备得如I-205所示化合物2-(2-((4-(3-环丙基-7-氟-2-甲基-苯并咪唑-5-基)5-氟-嘧啶-2-基)氨基)6-氧代-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-基)N,N-二甲基-乙氨基氧(30mg)，淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.61-8.47(br,2H),8.02(s,1H),7.52-7.30(br,2H),4.60-4.40(br,4H),4.14-3.85(m,2H),3.56-3.70(br, 4H),3.48-3.35(m,2H),3.02-2.85(m,1H),2.55(s,3H),1.30-1.15(m,2H),1.05-0.84(m,2H).LC-MS:m/z:(M+H)⁺＝537

实施例：205

将膦酸二乙酯(50mg,0.36mmol),三乙胺(0.5ml)和N-(5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)-6-(2-(甲基氨基)乙基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-胺(120mg,0.24mmol)加入到有10ml乙腈,10ml四氯化碳和5ml二氯甲烷组成的混合溶剂中,室温搅拌过夜.上述反应混合物过滤，滤液减压蒸干，所得粗产物通过制备高效液相分离纯化，得到(2-(2-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-7，8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-基)乙基)(甲基)氨基磷酸酯(90mg),浅黄色固体，收率58％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.44(d,J＝3.8Hz,1H),8.28(d,J＝8.5Hz,1H),8.23(d,J＝1.1Hz,1H),7.80(d,J＝11.7Hz,1H),7.42(d,J＝8.6Hz,1H),4.76(dd,J＝13.9,6.9Hz,1H),4.10–3.99(m,4H),3.94(dt,J＝14.2,6.8Hz,2H),3.83(s,2H),3.38(m,2H),3.05(s,3H),2.86(t,J＝6.9Hz,2H),2.76–2.69(m,5H),1.74(d,J＝7.1Hz,6H),1.37–1.27(t,6H).

LC-MS m/z:(M+H)⁺＝607。

表1，实施例列表

效果实施例1

测试方法：

CDK激酶抑制活性实验采用

Ultra技术，在ATP浓度为Km情况下，分别在CDK4/CycD3，CDK6/CycD3和CDK2/CycA2激酶上对受试化合物进行筛选。测试过程中，受试化合物初始浓度均选择为3333nM，各受试化合物均选择10个梯度稀释浓度，梯度稀释倍数为3倍，每浓度2个复孔进行检测。

CDK4/CycD3，CDK6/CycD3和CDK2/CycA2，购自Carna Biosciences,Inc.；二甲基亚砜，ATP、DTT溶液购自Sigma-Aldrich；EDTA溶液，购自GIBCO；

Detection Buffer,10×和

Ultra Europium-anti-phospho-eIF4E-binding protein 1(Thr37/46)和

Ultra ULight^TM-eIF4E-bindingprotein 1(Thr37/46)Peptide，购自Perkinelmer。

测试步骤：

1、取10mM的受试化合物储存液，在96孔化合物板中，用DMSO将为初始浓度100×的化合物，之后再以此浓度化合物为第一个浓度，采用DMSO进行3倍梯度稀释，共稀释10个浓度；之后分别取1μl的梯度稀释液加入19μl的1×反应缓冲液中，配制成5×化合物备用；从96孔板中转移2μl的5×化合物进入384孔板中；无化合物对照孔中加入2μl的如下液体：1μl的DMSO加入19ul的1×反应缓冲液；Min对照孔中加入2μl的250mM的EDTA。

2、采用1×反应缓冲液将激酶、底物、ATP分别配制成2.5×的酶/底物混合液和2.5×的ATP溶液。实验中，CDK4/CycD3激酶的终浓度为：0.76ng/μl，ATP终浓度为：80μM；CDK6/CycD3激酶的终浓度为：0.5ng/μl，ATP终浓度为：50μM；CDK2/CycA2激酶的终浓度为：0.86ng/μl，ATP终浓度为：15μm；CDK2/CycE1激酶的终浓度为:1.016ng/μl，ATP终浓度为:20μM；向384孔板中加入2.5×的酶/底物混合液，室温孵育5分钟；再加入2.5×ATP溶液，室温反应30分钟。

3、用

Detection Buffer,1×配制2×的

Ultra Europium-anti-phospho-eIF4E-binding protein 1(Thr37/46)备用。酶反应进行30分钟后，向384孔板中加入10mM的EDTA，室温反应5分钟。再加入

Ultra Europium-anti-phospho-eIF4E-binding protein 1(Thr37/46)，室温反应1小时。

4、将384孔板放于HERAEUS Multifuge X1R离心机中2000rpm离心2分钟；于EnVisionTM上进行数据测定，选用337nM波长的激光作为激发光，测定RFU665nM以及RFU615nM，并以RFU665nM/RFU615nM×10000作为最终数据进行分析。

5、采用Graphpad Prism 5.0对数据进行Log(inhibitor)vs.response-Variableslope(four parameters)曲线拟合，计算相应的IC50(half maximal inhibitoryconcentration)。

测试结果见表3。

表2-对照例A～F以及LY2835219结构

表3激酶水平的活性测试结果

效果实施例2

MCF-7,T-47D，ZR-75-1，COLO 205和A549细胞增殖抑制实验采用

Luminescent Cell Viability Assay方法测定。实验在人乳腺癌MCF-7,T-47D和ZR-75-1细胞上，人结肠癌COLO 205细胞上，在人非小细胞癌A549细胞上，通过CellTiter的方法检测化合物对五株细胞的增殖抑制作用，检测过程中，受试化合物初始浓度选择为10μM，各实施例化合物均选择10个梯度稀释浓度，梯度稀释倍数为3倍，每浓度2个复孔进行检测。

Mcf-7细胞，购自ATCC,货号HTB-22；

T-47D购自ATCC,货号HTB-133；

ZR-75-1购自上海细胞库,货号TCHu126；

COLO 205人结肠癌细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心，目录号TCHul02；

A549人非小细胞癌细胞，购自ATCC，目录号:CCL-185^TM；

发光法细胞活力检测试剂盒，购自Promega，货号：G7573；

RPMI-1640购自Life technologies,货号A1049101；

F-12K Nutrient Mixture购自Life technologies,货号21127-002；

FBS购自Life technologies,货号10099-141；

抗生素购自Life technologies,货号10378-016；

PBS购自Life technologies,货号10010-023；

二甲基亚砜，购自Sigma-Aldrich，货号：D8418；

384孔细胞培养板，Corning，货号：3570。

测试步骤：

1.分别取正常培养人乳腺癌细胞，正常培养的第12代COLO 205人结肠癌细胞，正常培养的第7代A549细胞，按一定细胞密度种板于384孔板；MCF-7和T-47D细胞种板密度为500cells/well，ZR-75-1，COLO 205细胞和A549细胞种板密度为250cells/well，细胞培养板放置于37摄氏度，5％CO₂的条件下培养24小时。

2.人乳腺癌细胞种板1天后，一块板用来测本底Celltiter值，记为Control D1。其余板加药：设置细胞对照组。受试化合物起始浓度为10μM，依次10个梯度稀释浓度，梯度稀释倍数为3倍，每浓度2个复孔进行检测。

2’.COLO 205细胞和A549细胞种板24小时后，将配置好的浓度梯度药物分别加入相应的细胞孔中。对照组Conctrol为不含药物、含有0.2％DMSO的相应培养基溶液。取未经药物处理的细胞孔测本底值，记为Blank。细胞培养板放置于37摄氏度，COLO 205细胞在5％的CO₂的条件下培养6天，A549细胞在5％的CO₂的条件下培养4天。

3.人乳腺癌细胞：受试化合物处理6天后每孔加入50μl CellTiter检测液，振荡2min充分混匀，离心，静置平衡10分钟后检测，记录荧光信号，药物组记为Drug D7，细胞对照组记为Control D7。

3’.COLO 205细胞和A549细胞：将微孔板从培养箱中取出，室温平衡30分钟。于每孔中加入50μl室温平衡后的

Luminescent Cell Viability Assay反应液，700rpm室温震荡2分钟，之后将微孔板放置于HERAEUS Multifuge X1R离心机中2000rpm离心1分钟；室温平衡10分钟后，于EnVision^TM上测定荧光信号值。

4.采用Graphpad Prism 5.0对数据进行Log(inhibitor)vs.response-Variableslope(four parameters)曲线拟合，计算相应的IC₅₀(half maximal inhibitoryconcentration)。

测试结果见表4。其中对照例A～F的结构参照效果实施例1中记载。

表4细胞水平的活性测试结果

效果实施例3

U87、MGU251、K562、THP1、HepG2、SK-HEP-1、SNU-5、N87、H1975、H1993、CFPAC1、PANC-1、LNCap和PC-3细胞株体外增殖抑制实验采用

Luminescent CellViability Assay方法测定。实验在U87、MGU251、K562、THP1、HepG2、SK-HEP-1、SNU-5、N87、H1975、H1993、CFPAC1、PANC-1、LNCap和PC-3细胞上，通过CellTiter的方法检测化合物对细胞的增殖抑制作用，检测过程中，受试化合物初始浓度选择为10μM，各实施例化合物均选择10个梯度稀释浓度，梯度稀释倍数为3倍，每浓度2个复孔进行检测。

U87MG人脑星形胶质母细胞瘤细胞株购自ATCC，货号HTB-14；

K-562细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库,货号TCHu191；

PANC-1细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库,货号TCHu98；

THP1细胞，购自ATCC,货号TIB-202；

HepG2人肝癌细胞株购自ATCC，货号HB-8065；

SK-HEP-1细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库,货号TCHu109；

SNU-5细胞购自ATCC，货号CRL-5973；

N87细胞购自ATCC,货号CRL-5822；

H1975人非小细胞肺癌细胞购自ATCC，货号CRL-5908；

H1993细胞，购自ATCC,货号CRL-5909；

CFPAC1细胞，购自ATCC，货号CRL-1918

MGU251细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库,货号TCHu58；

LNCap购自ATCC,货号CRL-1740；

PC-3细胞，购自上海细胞库，货号TCHu158；

RPMI-1640培养基购自Life technologies，货号A1049101；

IMDM培养基购自Life technologies，货号12440；

DMEM培养基购自Life technologies，货号11995；

MEM培养基购自Life technologies，货号51200；

FBS购自Life technologies，货号10099；

抗生素，购自Life technologies，货号10378；

PBS购自Life technologies，货号10010；

β-巯基乙醇购自Life technologies，货号1150809；

F-12K购自Life technologies，货号21127022；

HepG2购自ATCC,货号HB-8065；U87MG购自ATCC,货号HTB-14；PC-3购自上海细胞库,货号TCHu158；

发光法细胞活力检测试剂盒，购自Promega，货号：G7573；384孔细胞培养板，购自Corning，货号：3570；96孔化合物板，购自Nunc，货号：267245。

测试步骤：

1.分别取U87MG(用DMED培养基,第11代，第12代和第13代)、MGU251(第4代)、K562(第10代，细胞板密度125cells/well)，THP1(第6代，第8代和第10代)、HepG2(用DMED培养基，第7代，第10代和第13代)、SK-HEP-1(第7代)，SNU-5(第5代)、N87(用1640培养基，Assay1第11代，Assay2第12代，Assay3第13代)、H1975(用RPMI培养基,第6代，第9代，第11代)，H1993(第8代)、CFPAC1(用IMDM培养基，Assay1第9代，Assay2第10代，Assay3第12代)，PANC-1(第5代)，LNCap(第7代，第10代和第12代，细胞板密度625cells/well)、PC-3(第8代)，按250cells/well的细胞密度种板于384孔板。

2.种板1d后，一块板用来测本底Celltiter值，记为Control D1。其余板加药：设置细胞对照组。受试化合物起始浓度为10μM，依次10个梯度稀释浓度，梯度稀释倍数为3倍，每浓度2个复孔进行检测。

3.受试化合物处理数天(U87MG细胞4天，MGU251细胞6天，K562细胞4天，THP1细胞4天，HepG2细胞4天，SK-HEP-1细胞4天，SNU-5细胞6天，N87细胞4天，H1975细胞4天，H1993细胞6天，CFPAC1细胞4天，PANC-1细胞4天，LNCap细胞6天，PC-3细胞6天)后每孔加入50ulCellTiter检测液，振荡2min充分混匀，离心，静置平衡10分钟后检测，记录荧光信号，药物组记为Drug D7，细胞对照组记为Control D7。

测试结果见表5和表6。

表5I-52不同肿瘤细胞的活性数据

表6I-63不同肿瘤细胞的活性数据

效果实施例4(化合物对人乳腺癌MCF-7细胞皮下异种移植瘤BALB/c裸小鼠模型的体内药效研究)

实验目的：

评估受试药对人乳腺癌MCF-7细胞皮下异种移植瘤BALB/c裸小鼠模型的体内药效。

实验设计：

64只BALB/c裸小鼠，6-8周龄，体重18-22克，雌性，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，按表7进行实验。

表7.体内药效实验动物分组及给药方案

注：N¹:每组小鼠数目

给药容积：根据小鼠体重10μl/g。如果体重下降超过15％，给药方案应做出相应调整。实验方法

1，细胞培养：人乳腺癌细胞株MCF-7体外单层培养，培养条件参照供应商技术说明或参考文献。一周两次用胰酶-EDTA进行常规消化处理传代。当细胞饱和度为80％-90％，数量到达要求时，收取细胞，计数，接种。

2，雌激素片接种与排尿：细胞接种前2天，将β-雌二醇缓释药片接种于每只小鼠的左后背。接种后1周，每周3次对动物进行排尿，必要时每天对动物进行排尿。

3，肿瘤细胞接种：将0.2ml 10×10⁶个MCF-7细胞皮下接种于每只裸小鼠的右后背(PBS:Matrigel＝1:1)。肿瘤平均体积达到195mm³时开始分组给药(见表7)。

4，受试物的配制，见表8。

表8.受试物配制方法

注：在给动物给药前需要轻轻将药物充分混匀。

5，肿瘤测量和实验指标：实验指标是考察肿瘤生长是否被抑制、延缓或治愈。每周两次用游标卡尺测量肿瘤直径。肿瘤体积的计算公式为：V＝0.5a×b²，a和b分别表示肿瘤的长径和短径。化合物的抑瘤疗效用TGI(％)或相对肿瘤增殖率T/C(％)评价。TGI(％)，反映肿瘤生长抑制率。TGI(％)的计算：TGI(％)＝【(1-(某治疗组给药结束时平均瘤体积－该处理组开始给药时平均瘤体积))/(溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积－溶剂对照组开始治疗时平均瘤体积)】×100％。相对肿瘤增殖率T/C(％)：计算公式如下：T/C％＝T_RTV/C_RTV×100％(T_RTV：治疗组RTV；C_RTV：溶剂对照组RTV)。根据肿瘤测量的结果计算出相对肿瘤体积(relative tumor volume，RTV)，计算公式为RTV＝V_t/V₀，其中V₀是分组给药时(即d₀)测量所得平均肿瘤体积，V_t为某一次测量时的平均肿瘤体积，T_RTV与C_RTV取同一天数据。实验结束时，测肿瘤重量并计算瘤重抑制率IR(％)；其计算公式为：IR(％)＝(1-Tw/Vw)×100，Tw：治疗组平均瘤重，Vw：溶剂对照组平均瘤重。6，数据总结及统计分析：治疗组在试验结束时给药后第19天表现出最好的治疗效果，因此基于此数据进行统计学分析评估组间差异。两组间比较用T-test进行分析，三组或多组间比较用one-way ANOVA进行分析，如果方差不齐，应用Games-Howell法进行检验。如果方差齐性，应用Dunnet(2-sided)法进行分析。用SPSS19.0进行所有数据分析。p<0.05认为有显著性差异。

实验结果

1,各治疗组相对于对照组的两组间比较，见表9。

表9化合物对MCF-8异种移植瘤生长的抑制作用药效评价

注：a.肿瘤生长抑制由T/C和TGI(TGI(％)＝[1-(T_6/13/19-T₀)/(V_6/13/19-V₀)]×100)计算；

b.p值根据肿瘤体积运用T-test将各给药组与vehicle组进行两两比较。

各治疗组在给药后第6,13和19天与对照组相比均表现出对肿瘤生长的抑制作用。在给药后19天，溶剂对照组荷瘤鼠的平均瘤体积达到840mm³，与其相比受试物I-52，I-63和LY2835219不同剂量给药条件下表现出的药效在T-test检验下均具有统计显著性。化合物I-52在25，50和100mg/kg的肿瘤生长抑制率(TGI)分别达到86.41％、100.18％和104.95％，瘤重抑制率(IR)分别为72.92％、81.93％和86.35％；化合物I-63在10，25和50和mg/kg的肿瘤生长抑制率(TGI)分别达到78.82％、104.88％和117.45％，瘤重抑制率(IR)分别为60.42％、83.38％和92.26％；LY2835219在50mg/kg的肿瘤生长抑制率(TGI)达到82.66％，瘤重抑制率(IR)为56.18％。各给药组与vehicle组运用T-test比较差异均有统计学意义(p＜0.05)。

2,药物I-52和I-63在50mg/kg剂量上的比较分析，见表10。

表10对MCF-7异种移植瘤模型在50mg/kg剂量上的抑瘤药效比较

(基于给药后第19天肿瘤体积计算得出)

注：a.平均值±SEM；

b.肿瘤生长抑制由T/C和TGI(TGI(％)＝[1-(T₁₉-T₀)/(V₁₉-V₀)]×100)计算；

c.p值根据肿瘤体积计算；

d.以I-52,50mg/kg组为对照进行比较；

e.以LY2835219,50mg/kg组为对照进行比较。

两种化合物50mg/kg组进行one-way ANOVA或T-test分析比较时，结果显示在同剂量下，三个化合物在本模型上的抑瘤作用具有显著性差异(p＜0.05)(表10)

3,药物I-52和I-63的量效分析，见表11。

表11I-52和I-63各剂量对MCF-7异种移植瘤模型的抑瘤药效比较

(基于给药后第19天肿瘤体积计算得出)

注：a.平均值±SEM；

c.p值根据肿瘤体积计算；

d.以I-52,25mg/kg组为对照进行比较；

e.以I-52,100mg/kg组为对照进行比较；

f.以I-63,10mg/kg组为对照进行比较；

g.以I-63,50mg/kg组为对照进行比较。

在对化合物I-52的三个剂量组分别进行one-way ANOVA分析比较时。结果显示在不同剂量下，化合物I-52的低剂量与中、高剂量组的抑瘤作用有显著性差异(p＜0.05)，但中、高剂量组之间未见显著性差异(表10)。

在对化合物I-63的三个剂量组分别进行one-way ANOVA分析比较时。结果显示在不同剂量下，化合物I-63的抑瘤作用有显著性差异(p＜0.05)(表11)。

效果实施例5

测试方法：

CDK激酶抑制活性实验采用

Ultra技术，在ATP浓度为Km情况下，分别在CDK1/CycB，CDK5/p25，CDK7/CycH/MAT1和CDK9/CycT1激酶上对受试化合物进行筛选。测试过程中，受试化合物初始浓度均选择为3333nM，各受试化合物均选择10个梯度稀释浓度，梯度稀释倍数为3倍，每浓度2个复孔进行检测。

CDK1/CycB,CDK5/p25和CDK7/CycH/MAT1，购自Carna Biosciences,Inc.，CDK9/CycT1购自Lifetech；二甲基亚砜，ATP、DTT溶液购自Sigma-Aldrich；EDTA溶液，购自GIBCO；

Detection Buffer,10×和

Ultra Europium-anti-phospho-eIF4E-binding protein 1(Thr37/46)和

Ultra ULight^TM-eIF4E-bindingprotein 1(Thr37/46)Peptide，购自Perkinelmer。

测试步骤：

1、取10mM的受试化合物储存液，在96孔化合物板中，用DMSO将为初始浓度100×的化合物，之后再以此浓度化合物为第一个浓度，采用DMSO进行3倍梯度稀释，共稀释10个浓度；之后分别取1μl的梯度稀释液加入19μl的1×反应缓冲液中，配制成5×化合物备用；从96孔板中转移2μl的5×化合物进入384孔板中；无化合物对照孔中加入2μl的如下液体：1μl的DMSO加入19μl的1×反应缓冲液；Min对照孔中加入2μl的250mM的EDTA。

2、采用1×反应缓冲液将激酶、底物、ATP分别配制成2.5×的酶/底物混合液和2.5×的ATP溶液。实验中，CDK1/CycB激酶的终浓度为：3.20ng/μl，ATP终浓度为：12μM；CDK5/p25激酶的终浓度为：0.0334ng/μl，ATP终浓度为：4μM；CDK7/CycH/MAT1激酶的终浓度为：1.93ng/μl，ATP终浓度为：20μm；CDK9/CycT1激酶的终浓度为:0.60ng/μl，ATP终浓度为:12μM；向384孔板中加入2.5×的酶/底物混合液，室温孵育5分钟；再加入2.5×ATP溶液，室温反应30分钟。

3、用

Detection Buffer,1×配制2×的

测试结果见表12。

表12激酶水平的活性测试结果

Claims

1.一种如式I所示的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体或其互变异构体；

其中，p和q独立地为1；

m为0或1，n为0；

X为N，Y为CH或N；

环

中的N原子为氧化态或非氧化态；

R¹为氢、羟基、卤素、卤素取代的C₁～C₂₀烷基；

R²为未取代的C₁～C₂₀烷基；

R³为取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基、取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基、或取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基；其中，R³中所述的“杂环烷基”经其中的碳原子和其他基团进行连接，杂环烷基的杂原子为O、N和S中的一种或多种，杂原子的个数为1～3个；

所述R³的“取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：卤素、羟基、氧代、C₁～C₂₀烷基和C₃～C₁₂环烷基；

R⁴为卤素；

所述的R¹和所述的R⁴中至少一个为卤素；

R⁵为氢、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基、

所述的R⁵中，每个R⁸独立地为取代或未取代的C₂～C₂₀烯基、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基、未取代的C₁～C₂₀烷氧基或

所述的R⁵中，每个R⁹独立地为取代或未取代的C₁～C₂₀烷基、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基、取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基、取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基、或

所述的R⁸和R⁹中的每个R^10a和R^10b独立地为取代或未取代的C₁～C₂₀烷基；

所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”、和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：

C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀炔基、羟基、C₁～C₂₀硅烷基、卤素、C₁～C₂₀烷氧基、C₃～C₁₂环烷基、取代或未取代的C₁～C₉饱和或不饱和杂环烷基、

其中，“取代或未取代的C₁～C₉饱和或不饱和杂环烷基”中所述的“取代”为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：亚甲基、氧代、羟基、-PO(OH)₂、-PO(OR^ps)₂、乙炔基取代或未取代的C₁～C₂₀烷基和-B(OH)₂，其中R^ps独立地为C₁～C₆烷基；所述的“杂环烷基”经其中的碳原子或者杂原子和其他基团进行连接；

中的N原子为氧化态或非氧化态；

其中，R^11a和R^11b独立地为氢、取代或未取代的C₁～C₂₀烷基、取代或未取代的C₂～C₂₀烯基、取代或未取代的C₂～C₂₀炔基、

或者，

中R^11a、R^11b及与它们相连接的N成共同形成

其中t和u独立地为2，R^c为S、Si(R^cs)₂或Se，每个R^cs独立地为H或C₁～C₆烷基；或者，

中R^11a、R^11b及与它们相连接的N成共同形成

其中v1和w1独立地为2，R^c1和R^c2独立地为O或NH；

其中，所述的R^11a和R^11b中所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”和“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”中所述的“取代”独立地为被一个或多个以下基团所取代，当存在多个取代基时，所述的取代基相同或不同：C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、羟基、C₁～C₂₀硅烷基、

其中，每个R¹²独立地为羟基、C₁～C₂₀烷氧基或

其中，每个R¹⁴独立地为C₁～C₂₀烷基；

其中，每个R¹⁵、R^16a和R^16b独立地为氢或氰基；

其中，R^17a独立地为氢、或氨基；

其中，R^17b独立地为羟基；

其中，所述的R²⁰独立地为C₃～C₅杂芳基或

其中，所述的R²²为氢；

其中，所述的R^24a独立地为氨基或C₁～C₂₀烷基；

其中，所述的R^24b独立地为氢、或羟基；

其中，所述的R^25a和R^25b独立地为羟基、C₁～C₂₀烷氧基或C₁～C₂₀烷基；

其中，所述的R^27a和R^27b独立地为氢、

或者未取代的C₁～C₂₀烷基；

其中，所述的R^29a和R^29b独立地为氢；

R^6a、R^6b、R^6c和R^6d独立地为氢或C₁～C₂₀烷基；或者，R^6c、R^6d与它们相连的碳形成羰基；

所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的“杂环烷基”中的杂原子为1～7个并选自氧、氮、磷、硫、硒和硅中的一种或多种；所述的“杂芳基”中的杂原子为1～7个并选自氧、氮、磷、硫、硒和硅中的一种或多种；

且，所述的化合物I不为如下任一化合物：

2.如权利要求1所述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体或其互变异构体，其特征在于，所述的每个“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”和“C₂～C₂₀烯基”中的C₂～C₂₀烯基独立地为C₂～C₁₂烯基；

和/或，所述的每个“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”和“C₂～C₂₀炔基”中的C₂～C₂₀炔基独立地为C₂～C₁₂炔基；

和/或，所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“C₁～C₂₀烷基”和“C₁～C₂₀烷基单取代、双取代或未取代的氨基”中的C₁～C₂₀烷基独立地为C₁～C₁₂烷基；

和/或，所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”和“C₁～C₂₀烷氧基”中的C₁～C₂₀烷氧基独立地为C₁～C₁₂烷氧基；

和/或，所述的每个“C₁～C₂₀硅烷基”独立地为“C₁～C₁₂硅烷基”；

和/或，所述的每个“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”中的C₃～C₁₂环烷基独立地为C₃～C₈环烷基；

和/或，所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中的C₁～C₉杂环烷基独立地为“杂原子为硅、氧、硫、硒、氮和磷中的一种或多种，杂原子数为1-4个”C₃～C₈杂环烷基。

3.如权利要求1所述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体或其互变异构体，其特征在于，所述的每个“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”和“C₂～C₂₀烯基”中的C₂～C₂₀烯基独立地为C₂～C₆烯基；

和/或，所述的每个“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”和“C₂～C₂₀炔基”中的C₂～C₂₀炔基独立地为C₂～C₆炔基；

和/或，所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“C₁～C₂₀烷基”和“C₁～C₂₀烷基单取代、双取代或未取代的氨基”中的C₁～C₂₀烷基独立地为C₁～C₆烷基；

和/或，所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”和“C₁～C₂₀烷氧基”中的C₁～C₂₀烷氧基独立地为C₁～C₆烷氧基；

和/或，所述的每个“C₁～C₂₀硅烷基”独立地为“C₁～C₆硅烷基”；

和/或，所述的每个“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”中的C₃～C₁₂环烷基独立地为C₃～C₆环烷基；

和/或，所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”中的C₁～C₉杂环烷基独立地为“杂原子为硅、氧、硫、硒、氮和磷中的一种或多种，杂原子数为1-4个”C₃～C₅杂环烷基。

4.如权利要求1所述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体或其互变异构体，其特征在于，当p和q均为1时，n为0，m为0；

和/或，R¹中的卤素为氟；

和/或，R¹中的卤素取代的C₁～C₂₀烷基为三氟甲基；

和/或，R²中的未取代的C₁～C₂₀烷基为甲基；

和/或，R³中的取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基为甲基、乙基、异丙基、叔丁基、1-乙基丙基、1-环丙基乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、1-甲基-2,2,2-三氟乙基或环丙基甲基；

和/或，R³中的取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基为1-甲基环丙基、环丙基、3-氧代环丁基、3-羟基环丁基、3-氟环丁基、3,3-二氟环丁基、环丁基、环戊基、环己基或

和/或，R³中的取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基为3-氧杂环丁基或3-甲基-3-氮杂环丁基；

和/或，当所述的R³为取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基、且杂原子为N时，所述的N被C₁～C₃烷基所取代；

和/或，当所述R³的“取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基”中所述的“取代”独立地为被卤素取代时，所述的卤素为氟；

和/或，当所述R³的“取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基”“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基”中所述的“取代”独立地为被C₁～C₂₀烷基取代时，所述的C₁～C₂₀烷基为甲基；

和/或，当所述R³的“取代的或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代的或未取代的C₃～C₁₂环烷基”中所述的“取代”独立地为被C₃～C₁₂环烷基取代时，所述的C₃～C₁₂环烷基为环丙基；

和/或，R⁴中的卤素为氟；

和/或，R⁵中的取代或未取代的C₁～C₂₀烷基为2-甲氧基乙基、2-羟基乙基、2-氟乙基、2,2,2-三氟乙基、二甲基氨基甲基或2-二甲基氨基-乙基；

和/或，R⁵中的取代或未取代的C₂～C₂₀炔基为乙炔基、2-丁炔基或2-丙炔基；

和/或，R⁵中的取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基为四氢吡咯基、

和/或，R⁸中的取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基为

和/或，R⁸中的未取代的C₁～C₂₀烷氧基为甲氧基或乙氧基；

和/或，R⁹中的取代或未取代的C₁～C₂₀烷基为甲基、乙基、异丙基、氨基甲基、羟基甲基、羟基乙基、甲基氨基甲基、二甲基氨基甲基、2-二甲基氨基-乙基、

或甲氧基甲基；

和/或，R⁹中的取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基为环丁基、

或4-甲基环已基；

和/或，R⁹中的取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基为2-二甲基氨基-乙氧基；

和/或，R⁹中的取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基为

和/或，R^10a和R^10b中的取代或未取代的C₁～C₂₀烷基独立地为2-二甲基氨基-乙基或2-羟基乙基；

和/或，当所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”、和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被C₁～C₂₀烷基取代时，所述的C₁～C₂₀烷基为甲基或异丙基；

和/或，当所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被C₂～C₂₀炔基取代时，所述的C₂～C₂₀炔基为2-丙炔基；

和/或，当所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被卤素取代时，所述的卤素为氟；

和/或，当所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被C₁～C₂₀硅烷基取代时，所述的C₁～C₂₀硅烷基为三甲基硅基；

和/或，当所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被取代取代或未取代的C₁～C₉饱和或不饱和杂环烷基时，所述的C₁～C₉不饱和杂环烷基为

和/或，当所述的R⁵、R⁸、R⁹、R^10a和R^10b中所述的每个“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”、“取代或未取代的C₃～C₁₂环烷基”、“取代或未取代的C₁～C₉杂环烷基”和“取代或未取代的C₁～C₂₀烷氧基”中所述的“取代”独立地为被取代取代或未取代的C₁～C₉饱和或不饱和杂环烷基时，所述的C₁～C₉饱和杂环烷基为

和/或，R^11a和R^11b中的取代或未取代的C₁～C₂₀烷基独立地为-CF₃、羟乙基或2-二甲氨基乙基；

和/或，R^11a和R^11b中的取代或未取代的C₂～C₂₀烯基独立地为2-丙烯基；

和/或，R^11a和R^11b中的取代或未取代的C₂～C₂₀炔基独立地为2-丙炔基；

和/或，R^cs中的C₁～C₆烷基为甲基、乙基、丙基或异丙基；

和/或，当R^11a和R^11b中所述的“取代或未取代的C₁～C₂₀烷基”、“取代或未取代的C₂～C₂₀烯基”和“取代或未取代的C₂～C₂₀炔基”中所述的“取代”独立地为被取代时，所述的C₁～C₂₀硅烷基为三甲基硅基；

和/或，R¹²中的C₁～C₂₀烷氧基为甲氧基或乙氧基；

和/或，R²⁰中的C₃～C₅杂芳基为

和/或，R^25a和R^25b中的C₁～C₂₀烷氧基独立地为乙氧基；

和/或，R^27a和R^27b中的未取代的C₁～C₂₀烷基为甲基、乙基或丙基。

5.一种含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体或其互变异构体，其特征在于，其为如下任一化合物：

6.如权利要求1～5中任一项所述的含氮稠杂环化合物的制备方法，其特征在于，其为如下任一方法：

方法一：

进行Buchwald偶联，脱除保护基得到式I所示的化合物；

和式1D所示的化合物上的PG为保护基；方法一中，所述的m、n、p、q、X、Y、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法二：

当R⁵为氢时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括如下步骤：1C经氨解后与

进行反应得到2A，脱除保护基得到式I所示的化合物；

和式2B所示的化合物上的PG为保护基；方法二中，m、n、p、q、X、Y、所述的R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法三：

当R⁵为

且R¹¹为取代或未取代的C₁～C₆烷基、或、取代或未取代的C₃～C₈环烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在缩合剂的存在下，将化合物3A，与

进行缩合反应，得到化合物I即可；方法三中，所述的m、n、p、q、X、Y、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法四：

当R⁵为

时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂，在碱的存在下，将化合物4A与

进行反应，得到化合物4B，然后将所述的化合物4B进行水解反应，得到化合物I即可；方法四中，所述的m、n、p、q、X、Y、R⁸、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法八：

当R⁵为取代或未取代的C₁～C₆烷基，取代或未取代的C₃～C₈杂环烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在碱的存在下，将化合物8A与R⁵-X进行取代反应，得到化合物I即可；R⁵-X中所述的X为卤素或CH₃SO₃-；方法八中，式8A所示的化合物和式I所示的化合物中，所述的m、n、p、q、X、Y、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法九：

当R⁵为取代或未取代的C₁～C₆烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在还原剂的存在下，将化合物9A与R^5a-CHO进行还原胺化反应，得到化合物I即可；R^5aCH₂-即所述的R⁵；方法九中，所述的m、n、p、q、X、Y、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法十：

当R⁵为取代的C₁～C₆烷基，且取代基为

R¹⁶为羟基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在碱的存在下，将化合物10A与R^5b-OC(＝O)-(CH₂)_n2-X进行取代反应，然后水解得到化合物I即可；R^5b-OC(＝O)-(CH₂)_n2-X中所述的X为卤素或CH₃SO₃-；所述的R^5b为C₁～C₆烷基；所述的-(CH₂)_n2-即所述的R⁵中被取代的C₁～C₆烷基；所述的

即所述的R⁵；方法十中，式10A所示的化合物、式8B所示的化合物和式I所示的化合物中所述的m、n、p、q、X、Y、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法十二：

当R⁵为

R¹¹为

且R^12a和R^12b独立的为取代或未取代的C₁～C₂₀烷基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在三光气的存在下，将化合物11A与取代或未取代的氨基进行缩合反应，得到化合物I即可；R^12aNR^12b-C(＝O)-即所述的R⁵；方法十二中，所述的m、n、p、q、X、Y、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法十三：

当R⁵为取代的C₁～C₂₀烷基，取代基为

且R^13a和R^13b独立的为氢、C₁～C₂₀烷基、C₂～C₂₀烯基、C₂～C₂₀炔基、磷酸基、

时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在还原剂的存在下，将化合物13A与PG-NR^13a-(CH₂)n-CHO进行还原胺化反应，再脱除保护基,经过取代反应得到化合物I即可；R^13aNR^13b-(CH₂)n-即所述的R⁵；式中所示的化合物上的LG为离去基团；式中所示的化合物上的PG为保护基；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述；

方法十五：

当R⁵为取代的C₁～C₂₀烷基，取代基为

R^17b独立地为羟基，R^17a独立地为氨基时，所述的式I所示的化合物的制备方法包括下述步骤：在有机溶剂中，在还原剂的存在下，将化合物15A与LG-(CH₂)n-CN进行取代反应再经过加成反应得到化合物I即可；式中所示的化合物上的LG为离去基团；

即所述的R⁵；

所述的X、Y、m、n、p、q、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c和R^6d的定义如权利要求1～5中任一项所述。

7.一种化合物，其特征在于，其为如下任一化合物：

其中，m、n、p、q、X、Y、R¹、R²、R³、R⁴、R^6a、R^6b、R^6c、R^6d、R⁸和PG均如权利要求6所述。

8.如权利要求1～5中任一项所述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体或其互变异构体，在制备药物中的应用，所述的药物用于预防或治疗与细胞周期调控异常相关的疾病、或者、所述的药物用于抑制肿瘤细胞。

9.如权利要求1～5中任一项所述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体或其互变异构体，在制备周期蛋白依赖性激酶抑制剂中的应用。

10.一种药物组合物，其包含权利要求1～5中任一项所述的含氮稠杂环化合物、其药学上可接受的盐、其对映异构体、其非对映异构体或其互变异构体，和至少一种药用辅料。