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CN106029176B - 丝蛋白片段组合物及从其生产的制品 - Google Patents

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CN106029176B CN201480065012.0A CN201480065012A CN106029176B CN 106029176 B CN106029176 B CN 106029176B CN 201480065012 A CN201480065012 A CN 201480065012A CN 106029176 B CN106029176 B CN 106029176B
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R.L.霍兰
R.L.道
R.M.林德
D.S.哈斯
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Abstract

本申请公开一种包含基本上不含丝胶蛋白的纯丝纤蛋白‑基蛋白片段的组合物，其中组合物具有范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量，其中组合物具有在约1.5和约3.0之间的多分散性，其中组合物是基本上均匀的，其中组合物包含0 ppm至约500 ppm之间的无机残留物，和其中组合物包含0 ppm至约500 ppm之间的有机残留物。

Description

丝蛋白片段组合物及从其生产的制品
相关申请
本申请要求2014年9月30日提交的美国实用申请号14/503,021，2014年9月30日提交的美国实用申请号14/503,076，2013年9月30日提交的美国临时申请号61/884,820，2014年5月20日提交的美国临时申请号62/000,928，和2014年8月12日提交的美国临时申请号62/036,450的优先权和权益。这些申请的每一篇的内容通过引用以其全文结合到本文中。
背景
丝是由各种昆虫和蜘蛛生产的天然聚合物。丝包含丝核心蛋白、丝纤蛋白，和由丝胶蛋白(一种非-丝状蛋白)组成的胶状外膜。丝在历史上已被研究用于医学领域中。丝在其自然纤维形式中得到了很好的描述，并正被进一步研究潜在有用的二次形式如丝凝胶、海绵、精华液、薄膜、粉末和复合材料。许多这些二次形式可仅仅在加工丝纤维成为丝的水溶液后被创造出来。
丝溶液已使用各种方法，用具有一系列特性和不同水平的纯度的最终溶液生成。丝溶液不仅已用于医学应用，而且还已扩大到其它领域如化妆品和电子产品。
概述
本文公开了丝蛋白片段组合物和由此制备的制品。丝蛋白片段组合物被进一步加工以除去水至不同水平，导致从冻干粉末至水凝胶的一系列制品。在一实施方案中，本公开内容的制品是丝膜。在一实施方案中，本公开内容的丝膜可被用来解决皮肤的细纹和皱纹，例如嘴和鼻子周围的细纹和皱纹问题。在一实施方案中，本公开内容的丝膜可被用来解决皮肤上的暗斑问题。在一实施方案中，本公开内容的丝膜被用来减轻浮肿的眼睛。在一实施方案中，本公开内容的制品是丝凝胶。在一实施方案中，本公开内容的丝凝胶可被用作紧致眼胶。在一实施方案中，本公开内容的丝凝胶能补充水分和增加细胞更新，同时恢复光泽。在一实施方案中，本公开内容的丝凝胶是一种舒缓凝胶。在一实施方案中，本公开内容的丝凝胶被用来减轻浮肿的眼睛。在一实施方案中，本公开内容的丝凝胶用于减少眼睛周围的黑眼圈。在一实施方案中，本公开内容的制品是丝精华液。在一实施方案中，本公开内容的丝精华液可被用作水合精华液以恢复对皮肤的水合作用。在一实施方案中，本公开内容的丝精华液可被用来治疗皮肤的红肿、痤疮和过度色素沉着。在一实施方案中，本公开内容的制品是以受控的方式损害皮肤的丝化学去角质剂。在一实施方案中，本公开内容的丝化学去角质剂，当施用于皮肤时，导致健康的有活力的肌肤。在一实施方案中，本公开内容的丝化学去角质剂，当施用于皮肤时，导致细纹的减少。在一实施方案中，本公开内容的丝化学去角质剂，当施用于皮肤时，导致皮肤紧致。在一实施方案中，本公开内容的制品是丝防晒凝胶。
根据本文举例说明的方面，公开了制备纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法。在一实施方案中，创建了至少一个具有特定的平均重均分子量(MW)范围和多分散性的纯丝纤蛋白-基蛋白片段(SPF)混合物溶液。在一实施方案中，创建了具有约6 kDa和16 kDa之间的MW范围和约1.5和约3.0之间的多分散性范围的至少SPF混合物溶液。在一实施方案中，创建了至少一个具有约17 kDa和38 kDa之间的MW和约1.5和约3.0之间的多分散性范围的SPF混合物溶液。在一实施方案中，创建了至少一个具有约39 kDa和80 kDa之间的MW范围和约1.5和约3.0之间的多分散性范围的SPF混合物溶液。
根据本文举例说明的方面，公开了一种包含基本上不含丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的组合物，其中组合物具有范围从约6 kDa至约16 kDa的平均重均分子量，其中组合物具有在约1.5和约3.0之间的多分散性，其中组合物是基本上均匀的，其中组合物包含0 ppm和约500 ppm之间的无机残留物，和其中组合物包含0 ppm和约500 ppm之间的有机残留物。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段具有约10 ppm和约300 ppm之间的溴化锂残留物和约10 ppm和约100 ppm之间的碳酸钠残留物。在一实施方案中，溴化锂残留物可使用高效液相色谱溴化锂分析法测量，和碳酸钠残留物可使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量。在一实施方案中，组合物还包含少于10%的水。在一实施方案中，组合物呈现为冻干结构的形式，如冻干粉末。在一实施方案中，组合物以溶液的形式存在。在一实施方案中，组合物包含从约0.1 wt%至约30.0 wt%的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。纯丝纤蛋白-基蛋白片段在溶液中稳定至少30天。在一实施方案中，术语“稳定的”指不存在自发或渐进的凝胶化，其中溶液的颜色或浊度没有可见的变化。在一实施方案中，术语“稳定的”指没有片段聚集，因此，随着时间的推移，分子量没有增加。在一实施方案中，组合物呈现为水性溶液的形式。在一实施方案中，组合物呈现为有机溶液的形式。组合物可在密封的容器中提供。在一些实施方案中，组合物还包含选自以下的一种或多种分子：治疗剂、生长因子、抗氧化剂、蛋白、维生素、碳水化合物、聚合物、核酸、盐、酸、碱、生物分子、糖胺聚糖、多糖、细胞外基质分子、金属、金属离子、金属氧化物、合成分子、聚酐、细胞、脂肪酸、香料、矿物质、植物、植物提取物、防腐剂和精油。在一实施方案中，在组合物内加入的一种或多种分子是稳定的(即，随着时间的推移保留活性)并可以所需的速率释放。在一实施方案中，一种或多种分子是维生素C或其衍生物。在一实施方案中，组合物还包含选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸的α羟基酸。在一实施方案中，组合物还包含浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸或其盐形式。在一实施方案中，组合物还包含氧化锌或二氧化钛的至少一种。在一实施方案中，在组合物中的纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段是生物相容性的、非-致敏的，和非-免疫原性的。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段在植入或应用后是可生物吸收的或可生物降解的。
根据本文举例说明的方面，公开了一种包含基本上不含丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的组合物，其中组合物具有范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量，其中组合物具有在约1.5和约3.0之间的多分散性，其中组合物是基本上均匀的，其中组合物包含0 ppm和约500 ppm之间的无机残留物，和其中组合物包含0 ppm和约500 ppm之间的有机残留物。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段具有在约10 ppm和约300 ppm之间的溴化锂残留物和约10 ppm和约100 ppm之间的碳酸钠残留物。在一实施方案中，溴化锂残留物可使用高效液相色谱溴化锂分析法测量，和碳酸钠残留物可使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量。在一实施方案中，组合物还包含少于10%的水。在一实施方案中，组合物呈现为冻干结构的形式，如冻干粉末。在一实施方案中，组合物以溶液的形式存在。在一实施方案中，组合物包含从约0.1 wt%至约30.0 wt%的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。纯丝纤蛋白-基蛋白片段在溶液中稳定至少30天。在一实施方案中，术语“稳定的”指不存在自发或渐进的凝胶化，其中溶液的颜色或浊度没有可见的变化。在一实施方案中，术语“稳定的”指没有片段聚集，因此随着时间的推移，分子量没有增加。在一实施方案中，组合物呈现为水性溶液的形式。在一实施方案中，组合物呈现为有机溶液的形式。组合物可在密封的容器中提供。在一些实施方案中，组合物还包含选自以下的一种或多种分子：治疗剂、生长因子、抗氧化剂、蛋白、维生素、碳水化合物、聚合物、核酸、盐、酸、碱、生物分子、糖胺聚糖、多糖、细胞外基质分子、金属、金属离子、金属氧化物、合成分子、聚酐、细胞、脂肪酸、香料、矿物质、植物、植物提取物、防腐剂和精油。在一实施方案中，在组合物内加入的一种或多种分子是稳定的(即，随着时间的推移保留活性)并可以所需的速率释放。在一实施方案中，一种或多种分子是维生素C或其衍生物。在一实施方案中，组合物还包含选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸的α羟基酸。在一实施方案中，组合物还包含浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸或其盐形式。在一实施方案中，组合物还包含氧化锌或二氧化钛的至少一种。在一实施方案中，在组合物中的纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段是生物相容性的、非-致敏的，和非-免疫原性的。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段在植入或应用后是可生物吸收的或可生物降解的。
根据本文举例说明的方面，公开了一种包含基本上不含丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的组合物，其中组合物具有范围从约39 kDa至约80 kDa的平均重均分子量，其中组合物具有在约1.5和约3.0之间的多分散性，其中组合物是基本上均匀的，其中组合物包含0 ppm和约500 ppm之间的无机残留物，和其中组合物包含0 ppm和约500 ppm之间的有机残留物。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段具有约10 ppm和约300 ppm之间的溴化锂残留物和约10 ppm和约100 ppm之间的碳酸钠残留物。在一实施方案中，溴化锂残留物可使用高效液相色谱溴化锂分析法测量，和碳酸钠残留物可使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量。在一实施方案中，组合物还包含少于10%的水。在一实施方案中，组合物呈现为冻干结构的形式，如冻干粉末。在一实施方案中，组合物以溶液的形式存在。在一实施方案中，组合物包含从约0.1 wt%至约30.0 wt%纯丝纤蛋白-基蛋白片段。纯丝纤蛋白-基蛋白片段在溶液中稳定至少30天。在一实施方案中，术语“稳定的”指不存在自发或渐进的凝胶化，其中溶液的颜色或浊度没有可见的变化。在一实施方案中，术语“稳定的”指没有片段聚集，因此随着时间的推移，分子量没有增加。在一实施方案中，组合物呈现为水性溶液的形式。在一实施方案中，组合物呈现为有机溶液的形式。组合物可在密封的容器中提供。在一些实施方案中，组合物还包含选自以下的一种或多种分子：治疗剂、生长因子、抗氧化剂、蛋白、维生素、碳水化合物、聚合物、核酸、盐、酸、碱、生物分子、糖胺聚糖、多糖、细胞外基质分子、金属、金属离子、金属氧化物、合成分子、聚酐、细胞、脂肪酸、香料、矿物质、植物、植物提取物、防腐剂和精油。在一实施方案中，在组合物内加入的一种或多种分子是稳定的(即，随着时间的推移保留活性)并可以所需的速率释放。在一实施方案中，一种或多种分子是维生素C或其衍生物。在一实施方案中，组合物还包含选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸的α羟基酸。在一实施方案中，组合物还包含浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸或其盐形式。在一实施方案中，组合物还包含氧化锌或二氧化钛的至少一种。在一实施方案中，在组合物中的纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段是生物相容性的、非-致敏的，和非-免疫原性的。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段在植入或应用后是可生物吸收的或可生物降解的。
根据本文举例说明的方面，公开了一种包含基本上不含丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段并包含范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量；和在约1.5和约3.0之间的多分散性的薄膜，其中薄膜具有范围从约2.0 wt. %至约20.0 wt. %的含水量，其中薄膜包含0 ppm和500 ppm之间的无机残留物，其中薄膜包含0 ppm和500 ppm之间的有机残留物，和其中薄膜是足够挠性的，以符合解剖学局部形状。在一实施方案中，薄膜包含约1.0%和约50.0%之间的晶体蛋白质结构域且当在室温下浸没在水中时为可溶的。在一实施方案中，薄膜包含从约30.0 wt. %至约99.5 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，薄膜具有从约1.0至约7.0的pH。在一实施方案中，薄膜还包含从约0.5 wt. %至约2.5wt. %的咖啡因。在一实施方案中，薄膜还包含从约1.0 wt. %至约50.0 wt. %的维生素C或其衍生物。在一实施方案中，维生素C或其衍生物在薄膜内保持稳定从约5天至约5年的一段时间。在一实施方案中，维生素C或其衍生物在薄膜内是稳定的，这样就导致了维生素C以生物活性形式的释放。在一实施方案中，薄膜还包含选自以下的一种或多种分子：治疗剂、生长因子、抗氧化剂、蛋白、碳水化合物、聚合物、核酸、盐、酸、碱、生物分子、糖胺聚糖、多糖、细胞外基质分子、金属、金属离子、金属氧化物、合成分子、聚酐、细胞、脂肪酸、香料、矿物质、植物、植物提取物、防腐剂和精油。在一实施方案中，薄膜还包含选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸的α羟基酸。在一实施方案中，薄膜还包含浓度范围从约0.5 wt. %至约10.0wt. %的透明质酸或其盐形式。在一实施方案中，薄膜还包含氧化锌或二氧化钛的至少一种。在一实施方案中，薄膜被包装在气密和避光的箔基包装中。在一实施方案中，薄膜被充分设计用于局部应用。在一实施方案中，局部应用是为了化妆品用途。在一实施方案中，局部应用是用于伤口敷料。在一实施方案中，薄膜被充分设计用于在体内给予。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。在一实施方案中，减少细纹和皱纹的方法包括每日施用本公开内容的薄膜至人类皮肤至少一周的时段和观察人类皮肤上细纹和皱纹的减少。
根据本文举例说明的方面，公开了包含基本上不含丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段并包含范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量；和在约1.5和约3.0之间的多分散性；和从约20 wt. %至约 99.9 wt. %的水的凝胶，其中凝胶包含0 ppm和500 ppm之间的无机残留物，和其中凝胶包含0 ppm和500 ppm之间的有机残留物。在一实施方案中，凝胶包含约1.0%和约50.0%之间的晶体蛋白质结构域。在一实施方案中，凝胶包含从约0.1 wt.%至约6.0 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，凝胶具有从约1.0至约7.0的pH。在一实施方案中，凝胶还包含从约0.5 wt. %至约20.0 wt. %的维生素C或其衍生物。在一实施方案中，维生素C或其衍生物在凝胶中保持稳定从约5天至约5年的一段时间。在一实施方案中，维生素C或其衍生物在凝胶中是稳定的，这样就导致了维生素C以生物活性形式的释放。在一实施方案中，凝胶还包含选自维生素E、迷迭香油、玫瑰油、柠檬汁、柠檬草油和咖啡因的添加剂。在一实施方案中，凝胶被包装在气密容器中。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。在一实施方案中，凝胶具有每毫升少于10个菌落形成单位。在一实施方案中，一种使人类皮肤光滑和年轻化的方法包括每日施用本公开内容的凝胶至人类皮肤至少一周的时段和观察皮肤纹理的改善。
根据本文举例说明的方面，公开了一种包含基本上不含丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段并包含范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量；和在约1.5和约3.0之间的多分散性；和从约0.5%至约10.0%的透明质酸或其盐形式的精华液，其中精华液包含0ppm和500 ppm之间的无机残留物，和其中精华液包含0 ppm和500 ppm之间的有机残留物。在一实施方案中，精华液包含约1.0%和约50.0%之间的晶体蛋白质结构域。在一实施方案中，精华液包含从约0.1 wt. %至约6.0 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，精华液具有从约1.0至约7.0的pH。在一实施方案中，精华液还包含选自维生素E、迷迭香油、玫瑰油、柠檬汁、柠檬草油、香草、天竺葵和绿茶的添加剂。在一实施方案中，精华液还包含从约0.5 wt. %至约30.0 wt. %的维生素C或其衍生物。在一实施方案中，维生素C或其衍生物在精华液内保持稳定从约5天至约5年的一段时间。在一实施方案中，维生素C或其衍生物在精华液内是稳定的，这样就导致了维生素C以生物活性形式的释放。在一实施方案中，精华液被包装在气密容器中。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。在一实施方案中，使人类皮肤保湿的方法包括每日施用本公开内容的精华液至人类皮肤至少一周的时段和观察皮肤水合作用的改善。
根据本文举例说明的方面，公开了一种去皮肤角质化组合物，其包含与至少一种去皮肤角质剂组合的基本上不含丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段，所述片段具有范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量和在约1.5和约3.0之间的多分散性。在一实施方案中，去皮肤角质化组合物包含至少一种选自乙醇酸和乳酸的去皮肤角质剂。在一实施方案中，去皮肤角质化组合物包含约1.0%和约50.0%之间的晶体蛋白质结构域。在一实施方案中，去皮肤角质化组合物具有从约1.0至约6.0的pH。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。
根据本文举例说明的方面，公开了一种制备具有范围从约6 kDa至约16 kDa的平均重均分子量的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法，该方法包括以下步骤：通过加入丝源至沸腾的(100℃)碳酸钠水溶液中约30分钟至约60分钟之间的处理时间，使丝源脱胶；从溶液除去丝胶蛋白以生产包含不能检测水平的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；从丝纤蛋白提取物排出溶液；溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，所述溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时范围从约60℃至约140℃的起始温度；维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有约140℃的温度的烘箱中至少1小时的时段；从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和制备丝蛋白片段的水性溶液，所述水性溶液包含：具有范围从约6 kDa至约16 kDa的平均重均分子量的片段，和其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约1.5和约3.0之间的多分散性。在一实施方案中，所述方法包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物的步骤。在一实施方案中，溴化锂残留物在水性溶液中的量可使用高效液相色谱溴化锂分析法测量。在一实施方案中，碳酸钠残留物在水性溶液中的量可使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量。在一实施方案中，所述方法包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，所述方法包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，所述方法包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，维生素选自维生素C或其衍生物之一。在一实施方案中，所述方法还包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，α羟基酸选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。在一实施方案中，所述方法还包括加入浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸至纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，所述方法还包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种至纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，所述方法还包括冻干纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，化妆品薄膜从丝蛋白片段的水性溶液制备。在一实施方案中，化妆品凝胶从丝蛋白片段的水性溶液制备。
根据本文举例说明的方面，公开了一种制备具有范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法，该方法包括以下步骤：加入丝源至沸腾的(100℃)碳酸钠水溶液中约30分钟至约60分钟之间的处理时间，以导致脱胶；从溶液除去丝胶蛋白以生产包含不能检测水平的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；从丝纤蛋白提取物排出溶液；溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，所述溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时，范围从约80℃至约140℃的起始温度；维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有范围在约60℃至约100℃之间的温度的干燥烘箱中至少1小时的时段；从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和制备纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约10 ppm和约300 ppm之间的溴化锂残留物，其中丝蛋白片段的水性溶液包含在约10 ppm和约100 ppm之间的碳酸钠残留物，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含具有范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量的片段，和其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约1.5和约3.0之间的多分散性。在一实施方案中，所述方法包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物的步骤。在一实施方案中，溴化锂残留物在水性溶液中的量可使用高效液相色谱溴化锂分析法测量。在一实施方案中，碳酸钠残留物在水性溶液中的量可使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量。在一实施方案中，所述方法包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，所述方法包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，所述方法包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，维生素选自维生素C或其衍生物之一。在一实施方案中，所述方法还包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，α羟基酸选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。在一实施方案中，所述方法还包括加入浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸至纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，所述方法还包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种至纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，所述方法还包括冻干纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，化妆品薄膜从丝蛋白片段的水溶液制备。在一实施方案中，化妆品凝胶从丝蛋白片段的水溶液制备。
根据本文举例说明的方面，公开了一种制备具有平均重均分子量范围从约39 kDa至约80 kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法，该方法包括以下步骤：加入丝源至沸腾的(100℃)碳酸钠水溶液中约30分钟的处理时间，以导致脱胶；从溶液除去丝胶蛋白以生产包含不能检测水平的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；从丝纤蛋白提取物排出溶液；溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，所述溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时，范围从约80℃至约140℃的起始温度；维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有范围约60℃至约100℃之间的温度的干燥烘箱中至少1小时的时段；从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和制备纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约10 ppm和约300 ppm之间的溴化锂残留物，在约10 ppm和约100 ppm之间的碳酸钠残留物，具有范围从约40 kDa至约65 kDa的平均重均分子量的片段，和其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约1.5和约3.0之间的多分散性。在一实施方案中，所述方法包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物的步骤。在一实施方案中，溴化锂残留物在水性溶液中的量可使用高效液相色谱溴化锂分析法测量。在一实施方案中，碳酸钠残留物在水性溶液中的量可使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量。在一实施方案中，所述方法包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，所述方法包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，所述方法包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，维生素选自维生素C或其衍生物之一。在一实施方案中，方法还包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中的步骤。在一实施方案中，α羟基酸选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。在一实施方案中，所述方法还包括加入浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸至纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，所述方法还包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种至纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，所述方法还包括冻干纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的步骤。在一实施方案中，化妆品薄膜从丝蛋白片段的水溶液制备。在一实施方案中，化妆品凝胶从丝蛋白片段的水溶液制备。
根据本文举例说明的方面，公开了从本公开内容的SPF混合物溶液制备的丝膜。在一实施方案中，至少一种感兴趣的分子或治疗剂在加工成薄膜期间被物理包埋在本公开内容的SPF混合物溶液中。本公开内容的丝膜可被用来释放至少一种感兴趣的分子或治疗剂。
根据本文举例说明的方面，制备具有包埋的分子或治疗剂的丝膜的方法被公开。
根据本文举例说明的方面，制备具有包埋分子或治疗剂(例如在以下段落中列出的那些)的丝凝胶的方法被公开。在一实施方案中，至少一种感兴趣的分子或治疗剂在加工成水凝胶期间被物理包埋在本公开内容的SPF混合物溶液中。本公开内容的水性丝凝胶可被用来释放至少一种感兴趣的分子或治疗剂。
根据本文举例说明的方面，本公开内容的SPF混合物溶液被用来制备截留分子的丝膜或水凝胶，所述分子包括，但不限于，硒、泛醌衍生物、硫醇-基抗氧化剂、含糖抗氧化剂、多酚、植物提取物、咖啡酸、芹菜素、Pycnogenol、白藜芦醇、叶酸、维生素b12、维生素b6、维生素b3、维生素E、维生素C及其衍生物、维生素D、维生素A、虾青素、叶黄素、番茄红素、必需脂肪酸(ω3和6)、铁、锌、镁、黄酮类化合物(大豆、姜黄素、水飞蓟素、Pycnongeol)、生长因子、芦荟、透明质酸、细胞外基质蛋白、细胞、核酸、生物标志物、生物试剂、氧化锌、过氧化苯甲酰、retnoids、钛、咖啡因、绿茶、已知剂量的过敏原(用于致敏处理)、精油(包括，但不限于，柠檬草或迷迭香油)和香料。当湿润时，本公开内容的薄膜可粘附至皮肤，使得容易地应用和靶向传递至治疗区域，伴有用水擦干的能力。承载分子的薄膜、凝胶或精华液可用于药物递送、医学和个人护理，包括抗衰老、皱纹和细纹减少和预防，鱼尾纹、皱眉纹和眉间纹减少；痤疮治疗；UV防护；各类伤口护理；局部、皮内和皮下和植入式医疗和药物应用；所有类型的炎症和炎性疾病，如湿疹或酒渣鼻；创造一个均匀的肤色，色素减少，色素过度沉着处理，因痤疮、怀孕、生育控制、光损伤所致的暗斑或老年斑；减少疤痕和萎缩纹，和减少痤疮疤痕。通过稳定本公开内容的薄膜或凝胶中的分子，实现分子以其活性形式的控制释放。在一实施方案中，本公开内容的薄膜或凝胶可在与消费者相关的时间框架内传递其分子，用于每日皮肤处理。在一实施方案中，纯丝纤蛋白-基蛋白在水性或有机溶液中的组合物可被用来纺织用于医疗或消费者市场的纤维或织物。
附图简述
本公开的实施方案将参照附图进一步说明。所示的图不必是依比例的，而是重点通常放在举例说明本公开的实施方案的原理上。
图1是显示用于制备本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段(SPF)的各种实施方案的流程图。
图2是显示在制备本公开内容的SPF的过程中，在提取和溶解步骤期间可被修改的各种参数的流程图。
图3是显示干燥提取的丝纤蛋白的照片。
图4是显示本公开内容的以溶液形式存在的SPF的实施方案的照片。
图5A-5D是显示在60℃烘箱中溶解4小时的溴化锂(LiBr)溶液在室温下溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图6A-6D是显示在60℃烘箱中溶解6小时的LiBr溶液在室温下溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图7A-7D是显示在60℃烘箱中溶解8小时的LiBr溶液在室温下溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图8A-8D是显示在60℃烘箱中溶解12小时的LiBr溶液在室温下溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图9A-9D是显示在60℃烘箱中溶解24小时的LiBr溶液在室温下溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图10A-10C是显示在60℃烘箱中溶解168/192小时的LiBr溶液在室温下溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图11A-11C是显示在60℃烘箱中溶解1、4和6小时的LiBr溶液在室温下溶解的丝的照片，其中丝胶蛋白提取于100℃经60 min完成。
图12A-12D是显示在60℃烘箱中溶解1小时的60℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图13A-13D是显示在60℃烘箱中溶解4小时的60℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图14A-14D是显示在60℃烘箱中溶解6小时的60℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图15A-15D是显示在60℃烘箱中溶解1小时的80℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图16A-16D是显示在60℃烘箱中溶解4小时的80℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图17A-17D是显示在60℃烘箱中溶解4小时的80℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图18A-18D是显示在60℃烘箱中溶解1小时的100℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图19A-19D是显示在60℃烘箱中溶解4小时的100℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图20A-20D是显示在60℃烘箱中溶解6小时的100℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图21A-21D是显示在60℃烘箱中溶解1小时的140℃ (LiBr的沸点) LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图22A-22D是显示在60℃烘箱中溶解4小时的140℃ (LiBr的沸点) LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图23A-23D是显示在60℃烘箱中溶解6小时的140℃ (LiBr的沸点) LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图24A-24D是显示在80℃烘箱中溶解1小时的80℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图25A-25D是显示在80℃烘箱中溶解4小时的80℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图26A-26D是显示在80℃烘箱中溶解6小时的80℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图27A-27D是显示在100℃烘箱中溶解1小时的100℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图28A-28D是显示在100℃烘箱中溶解4小时的100℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图29A-29D是显示在100℃烘箱中溶解6小时的100℃的LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图30A-30D是显示在120℃烘箱中溶解1小时的140℃ (LiBr的沸点) LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图31A-31D是显示在120℃烘箱中溶解4小时的140℃ (LiBr的沸点) LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图32A-32D是显示在120℃烘箱中溶解6小时的140℃ (LiBr的沸点) LiBr溶液中溶解的丝的照片(丝胶蛋白提取温度和时间是不同的)。
图33是显示从本公开内容的丝溶液制备本公开内容的丝膜的实施方案的流程图。
图34概述用于本公开内容的丝膜干燥研究的参数的实施方案。
图35是显示丝膜干燥时间(在各种气流和温度条件下)的图。
图36A和36B显示来自包含维生素C的样品的HPLC色谱图。图36A显示来自(1)维生素C的化学稳定的样品在环境条件下的峰和(2)无防止氧化的化学稳定在环境条件下1小时后采用的维生素C的样品的峰，其中降解产物是可见的。图36B显示来自本公开内容的丝膜在室温下老化至少30天的两个不同实施方案的峰。未见到降解产物。
图37A-37D是显示于室温下用开放气流干燥48小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图38A-38D是显示于40℃在对流烘箱中用开放气流干燥8小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图39A-39D是显示于40℃在对流烘箱中用开放气流干燥48小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
Figs 40A-40D是显示于40℃在对流烘箱中，在密闭皿中干燥48小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图41A-41D是显示于54℃在对流烘箱中，在开放皿中干燥8小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图42A-42D是显示于54℃在对流烘箱中，在开放皿中干燥48小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图43A-43D是显示于54℃在薄膜干燥机中，在开放皿中干燥8小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图44A-44D是显示于54℃在薄膜干燥机中，在开放皿中干燥48小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图45A-45D是显示于室温下在对流烘箱中，在开放皿中干燥48小时的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图46A-46D是显示于室温下用开放气流干燥48小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图47A-47D是显示于40℃在对流烘箱中用开放气流干燥8小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图48A-48D是显示于40℃在对流烘箱中用开放气流干燥48小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图49A-49D是显示于40℃在对流烘箱中，在密闭皿中干燥48小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图50A-50D是显示于54℃在对流烘箱中，在开放皿中干燥8小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图51A-51D是显示于54℃在对流烘箱中，在开放皿中干燥48小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图52A-52D是显示于54℃在薄膜干燥机中，在开放皿中干燥8小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图53A-53D是显示于54℃在薄膜干燥机中，在开放皿中干燥48小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图54A-54D是显示于室温下在对流烘箱中，在开放皿中干燥48小时形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。
图55是概述在本公开内容的丝蛋白溶液中的LiBr和碳酸钠(Na2CO3)浓度的表。
图56是概述在本公开内容的丝蛋白片段-薄膜中的(Na2CO3)浓度的表。
图57是概述在本公开内容的丝蛋白片段-薄膜中的LiBr浓度的表。
图58是概述在本公开内容的丝蛋白溶液中的LiBr和Na2CO3浓度的表。
图59是概述在本公开内容的丝蛋白片段-薄膜中的维生素C浓度的表。
图60是概述维生素C在化学稳定的溶液中的稳定性的表。
图61是概述本公开内容的丝蛋白溶液的分子量的表。
图62A和62B是表示提取体积对%质量损失的影响的图。
图63是概述从不同浓度的LiBr和从不同提取和溶解量溶解的丝的分子量的表。
图64是概述提取时间对在100℃提取温度、100℃ LiBr和100℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图65是概述提取时间对在100℃提取温度、沸腾的LiBr和60℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图66是概述提取时间对在100℃提取温度、60℃ LiBr和60℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图67是概述提取时间对在100℃提取温度、80℃ LiBr和80℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图68是概述提取时间对在100℃提取温度、80℃ LiBr和60℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图69是概述提取时间对在100℃提取温度、100℃ LiBr和60℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图70是概述提取时间对在100℃提取温度、140℃ LiBr和140℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图71是概述提取温度对在60分钟提取时间、100℃ LiBr和100℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图72是概述LiBr温度对在60分钟提取时间、100℃提取温度和60℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图73是概述LiBr温度对在30分钟提取时间、100℃提取温度和60℃烘箱溶解(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图74是概述烘箱/溶解温度对在100℃提取温度、30分钟提取时间，和100℃溴化锂(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图75是概述烘箱/溶解温度对在100℃提取温度、60分钟提取时间，和100℃溴化锂(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图76是概述烘箱/溶解温度对在100℃提取温度、60分钟提取时间，和140℃溴化锂(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图77是概述烘箱/溶解温度对在100℃提取温度、30分钟提取时间，和140℃溴化锂(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图78是概述烘箱/溶解温度对在100℃提取温度、60分钟提取时间，和80℃溴化锂(烘箱/溶解时间是变化的)条件下加工的丝的分子量的影响的图。
图79是概述在包括提取时间、提取温度、溴化锂(LiBr)温度、用于溶解的烘箱温度、用于溶解的烘箱时间的不同条件下加工的丝的分子量的图。
图80是概述在其中烘箱/溶解温度等于LiBr温度的条件下加工的丝的分子量的图。
图81是表示维生素C在PureProC™凝胶中的%活性的图。
图82A-82C是显示在贮存(最大干燥(图82A)，最少干燥(图82C))后，薄膜干燥对薄膜颜色和物理完整性的影响的照片。
图83A和83B是激光切割丝膜的照片。
图84是概述PureProC™和竞争产品以每日剂量(即，用来覆盖25 cm2面积的皮肤的产品平均量)，经30天时段的维生素C量的图。
图85是概述在用户体验中收集的PureProC™的易用性的图。
图86是由用户和消费者知识的支持观察到的PureProC™的初始益处的概述。
图87是概述其中试验参与者使用PureProC™润滑凝胶的图。
图88是由试验参与者使用PureProC™润滑凝胶：柠檬草后对皮肤的益处的概述。
图89A-89B是概述维生素C (伴有或不伴有维生素C衍生物)对凝胶化的影响的表。
图90是概述维生素C和维生素C衍生物对本公开内容的丝膜的形成的影响的表。
图91A-91B是概述维生素C和咖啡因对本公开内容的丝膜的形成的影响的表。
图92是概述本公开内容的咖啡因凝胶的实施方案的表。
图93是概述本公开内容的防腐凝胶的实施方案的表。
图94A-94C是概述具有不同添加剂和不同浓度的适合防紫外线辐射(UV)的组分的本公开内容的化妆品精华液的实施方案的表。
图95A-95C是概述本公开内容的高浓度维生素C凝胶的实施方案的表。
图96是概述本公开内容的各种凝胶评价以它们的3种不同状态(完整的，使用中的，最终产品)使用时可能的微生物污染的结果的表。
图97是适合于防UV的本公开内容的泡沫产品的实施方案的照片。
图98是适合于防UV的本公开内容的粘性液体的实施方案的照片。
图99是适合于防UV的本公开内容的粘性液体的实施方案的照片。
图100是适合于防UV的本公开内容的泡沫产品的实施方案的照片。
虽然以上确定的图提出本公开的实施方案，但也构思了其它实施方案，如在讨论中所注明的。本公开内容通过代表和不限制的方式提出示例性实施方案。许多其它的修饰和实施方案可由本领域技术人员设计，所述修饰和实施方案落入本公开的实施方案的原理的范围和精神内。
详细描述
本文提供用于制备纯和高度可扩展的丝蛋白片段(SPF)混合物溶液的方法，该溶液可用于跨多个行业的各种应用。该溶液从未加工的纯的完整丝蛋白材料生成并经加工以除去任何丝胶蛋白，获得所需重均分子量(MW)和多分散性的片段混合物。选择的方法参数可被改变以获得取决于所计划用途的独特的最终丝蛋白片段的特征。生成的最终片段溶液是纯丝蛋白片段和水，以及至不能检测水平的PPM的过程污染物，该水平在药学、医学和消费者化妆品市场中为可接受的。丝蛋白片段在溶液中的浓度、尺寸和多分散性可进一步地改变，这取决于所需用途和性能要求。在一实施方案中，溶液中的纯丝纤蛋白-基蛋白片段基本上不含丝胶蛋白，具有范围从约6 kDa至约16 kDa的平均重均分子量，并具有范围从约1.5和约3.0的多分散性。在一实施方案中，在溶液中的纯丝纤蛋白-基蛋白片段基本上不含丝胶蛋白，具有范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量，并具有范围从约1.5和约3.0的多分散性。在一实施方案中，在溶液中的纯丝纤蛋白-基蛋白片段基本上不含丝胶蛋白，具有范围从约39 kDa至约80 kDa的平均重均分子量，并具有范围从约1.5和约3.0的多分散性。
在一实施方案中，本公开内容的丝溶液可通过改变水含量/浓度用于生成制品，如各种形状和大小的丝膜，或作为原料成分销售到医学、消费者，或电子产品市场中。在一实施方案中，溶液可通过改变水含量/浓度用于生成制品，如不同凝胶和液体密度的丝凝胶，或作为原料成分销售到药学、医学、消费者，或电子产品市场中。取决于所用的丝溶液和铸造薄膜或凝胶的方法，获得各种性质。制品可装载有至少一种治疗剂和/或至少一种分子。
如在此所用的，术语“基本上无丝胶蛋白”或“基本上不含丝胶蛋白”指其中大多数丝胶蛋白已被除去的丝纤维。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.01% (w/w)和约10.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.01% (w/w)和约9.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.01% (w/w)和约8.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.01% (w/w)和约7.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.01% (w/w)和约6.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.01% (w/w)和约5.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0%(w/w)和约4.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.05% (w/w)和约4.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.1% (w/w)和约4.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约0.5% (w/w)和约4.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约1.0% (w/w)和约4.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约1.5% (w/w)和约4.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约2.0% (w/w)和约4.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有约2.5% (w/w)和约4.0% (w/w)之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有丝胶蛋白含量在约0.01% (w/w)和约0.1 % (w/w)之间的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有丝胶蛋白含量低于约0.1 % (w/w)的丝纤蛋白。在一实施方案中，基本上不含丝胶蛋白的丝纤蛋白指具有丝胶蛋白含量低于约0.05 % (w/w)的丝纤蛋白。在一实施方案中，当丝源被加至沸腾的(100℃)碳酸钠水溶液中经约30分钟至约60分钟之间的处理时间时，获得约26 wt. %至约31wt.%的脱胶损失。
如在此所用的，术语“基本上均匀的”可指对确定的分子量以正态分布来分布的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。如在此所用的，术语“基本上均匀的”可指添加剂，例如维生素C，均匀地分布在本公开内容的整个组合物中。
如在此所用的，术语“基本上不含无机残留物”意指组合物显示出0.1 % (w/w)或更少的残留物。在一实施方案中，基本上不含无机残留物指显示出0.05% (w/w)或更少的残留物的组合物。在一实施方案中，基本上不含无机残留物指显示出0.01% (w/w)或更少的残留物的组合物。在一实施方案中，无机残留物的量在0 ppm (“不可检出的”或“ND”)和1000ppm之间。在一实施方案中，无机残留物的量是ND至约500 ppm。在一实施方案中，无机残留物的量是ND至约400 ppm。在一实施方案中，无机残留物的量是ND至约300 ppm。在一实施方案中，无机残留物的量是ND至约200 ppm。在一实施方案中，无机残留物的量是ND至约100ppm。在一实施方案中，无机残留物的量是在10 ppm和1000 ppm之间。
如在此所用的，术语“基本上不含有机残留物”意指显示出0.1 % (w/w)或更少的残留物的组合物。在一实施方案中，基本上不含有机残留物指显示出0.05% (w/w)或更少的残留物的组合物。在一实施方案中，基本上不含有机残留物指显示出0.01% (w/w)或更少的残留物的组合物。在一实施方案中，有机残留物的量在0 ppm (“不可检出的”或“ND”)和1000 ppm之间。在一实施方案中，有机残留物的量是ND至约500 ppm。在一实施方案中，有机残留物的量是ND至约400 ppm。在一实施方案中，有机残留物的量是ND至约300 ppm。在一实施方案中，有机残留物的量是ND至约200 ppm。在一实施方案中，有机残留物的量是ND至约100 ppm。在一实施方案中，有机残留物的量是在10 ppm和1000 ppm之间。
本公开内容的组合物显示出“生物相容性”，意指组合物与活体组织或活体系统相容，而无毒性、有害，或生理反应性且不引起免疫排斥。这样的生物相容性可通过参与者局部应用本公开内容的组合物于它们的皮肤上一个延长的时间段而证实。在一实施方案中，延长的时间段是约3天。在一实施方案中，延长的时间段是约7天。在一实施方案中，延长的时间段是约14天。在一实施方案中，延长的时间段是约21天。在一实施方案中，延长的时间段是约30天。在一实施方案中，延长的时间段选自约1月、约2月、约3月、约4月、约5月、约6月、约7月、约8月、约9月、约10月、约11月、约12月，以及无限定期限。
本公开内容的组合物是“低过敏原性的”，意指它们相对不可能引起过敏反应。这样的低过敏原性可通过参与者局部应用本公开内容的组合物于它们的皮肤上一个延长的时间段而证实。在一实施方案中，延长的时间段是约3天。在一实施方案中，延长的时间段是约7天。在一实施方案中，延长的时间段是约14天。在一实施方案中，延长的时间段是约21天。在一实施方案中，延长的时间段是约30天。在一实施方案中，延长的时间段选自约1月、约2月、约3月、约4月、约5月、约6月、约7月、约8月、约9月、约10月、约11月、约12月，以及无限定期限。
在一实施方案中，本公开内容的溶液在形成该制品之前与治疗剂和/或分子接触。在一实施方案中，分子包含，但不限于，抗氧化剂和酶。在一实施方案中，分子包含，但不限于，硒、泛醌衍生物、硫醇-基抗氧化剂、含糖抗氧化剂、多酚、植物提取物、咖啡酸、芹菜素、Pycnongeol、白藜芦醇、叶酸、维生素b12、维生素b6、维生素b3、维生素E、维生素C及其衍生物、维生素D、维生素A、虾青素、叶黄素、番茄红素、必需脂肪酸(ω3和6)、铁、锌、镁、黄酮类化合物(大豆、姜黄素、水飞蓟素、Pycnongeol)、生长因子、芦荟、透明质酸、细胞外基质蛋白、细胞、核酸、生物标志物、生物试剂、氧化锌、过氧化苯甲酰、retnoids、钛、已知剂量的过敏原(用于致敏处理)、精油(包括，但不限于，柠檬草或迷迭香油)和香料。治疗剂包含，但不限于，小分子、药物、蛋白、肽和核酸。在一实施方案中，本公开内容的丝膜包含为维生素，如维生素C、维生素A和维生素E的分子。在一实施方案中，本公开内容的溶液在形成该制品之前与已知量的过敏原接触。过敏原包括但不限于牛奶、蛋、花生、坚果、鱼、贝类、大豆和小麦。装载在丝制品内的已知剂量的过敏原可以已知的速率释放，用于控制暴露过敏的研究、试验和致敏处理。
在一实施方案中，本公开内容的溶液被用来创建一种使用微针，通过本领域技术人员已知的标准方法，将分子或治疗剂受控传递至或穿过皮肤的制品。
如在此所用的，术语“丝蛋白”包含蚕丝蛋白和昆虫或蜘蛛丝蛋白。在一实施方案中，丝蛋白从家蚕(Bombyx mori)获得。
图1是显示用于制备本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段(SPF)的各种实施方案的流程图。应该理解，不是所有的示例性步骤都是制备本公开内容的所有丝溶液所必需的。如在图1中图示的，步骤A，茧(热处理的或非-热处理的)、丝纤维、丝粉末或蜘蛛丝可用作丝源。如果从家蚕(Bombyx mori)的生丝茧起始，茧可被切成小块，例如大致相等大小的小块，步骤B1。然后提取生丝并经冲洗以去除任何丝胶蛋白, 步骤C1a。这导致基本上无丝胶蛋白的生丝。在一实施方案中，水被加热至84℃和100℃ (理想沸腾)之间的温度，然后Na2CO3(碳酸钠)被加入到沸腾的水中，直至Na2CO3完全溶解。生丝被加入到沸腾的水/Na2CO3 (100℃)中并浸没约15-90分钟，其中沸腾较长的时间导致较小的丝蛋白片段。在一实施方案中，水体积等于约0.4 x 生丝重量和Na2CO3体积等于约0.848 x 生丝重量。在一实施方案中，水体积等于0.1 x 生丝重量和Na2CO3体积维持在2.12g/L。这在图62A和图62B中显示：丝质量(x-轴)在相同体积的提取溶液(即，相同体积的水和Na2CO3浓度)中是变化的，实现丝胶蛋白除去(基本上无丝胶蛋白)，如通过整个丝质量损失26-31 % (y-轴)所证实的。随后，水溶解的Na2CO3溶液被排出，过量的水/Na2CO3从丝纤蛋白纤维除去(如，用手取出丝蛋白提取物，使用机器纺织循环等)。生成的丝纤蛋白提取物用温至热水冲洗，以除去任何剩余的吸附丝胶蛋白或污染物，通常在约40℃至约80℃的温度范围，更换水的体积至少一次(按照需要重复多次)。生成的丝纤蛋白提取物是基本上耗尽丝胶蛋白的丝纤蛋白。在一实施方案中，生成的丝纤蛋白提取物用温度约60℃的水冲洗。在一实施方案中，每一循环的冲洗水量等于0.1 L-0.2 L x 生丝重量。搅动、翻转或循环冲洗水以使冲洗效果最大化可能是有利的。冲洗后，过量的水从提取的丝纤蛋白纤维除去(如，用手或使用机器取出丝纤蛋白提取物)。或者，本领域技术人员已知的方法如压力、温度，或其它试剂或其组合可用于丝胶蛋白提取的目的。或者，丝腺(100%的无丝胶蛋白的丝蛋白)可直接从蠕虫中除去。这将导致无丝胶蛋白的液体丝蛋白，没有任何改变的蛋白质结构。
然后使提取的丝蛋白纤维完全干燥。图3是显示干燥提取的丝纤蛋白的照片。一旦干燥，提取的丝纤蛋白在环境和沸腾之间的温度下使用加入到丝纤蛋白中的溶剂溶解，步骤C1b。在一实施方案中，溶剂是溴化锂溶液(LiBr) (LiBr沸腾是140℃)。或者，提取的丝纤蛋白纤维未经干燥，而是湿的并置于溶剂中；然后溶剂浓度可以改变，以达到如同在加入干燥的丝至溶剂中时类似的浓度。LiBr溶剂的最终浓度可以在从0.1M-9.3M的范围。图63是概述从不同浓度的溴化锂(LiBr)和从不同提取和溶出度溶出的丝的分子量的表。提取的丝纤蛋白纤维的完全溶解可通过改变处理时间和温度以及溶解溶剂的浓度而获得。可使用其它溶剂，包括，但不限于，磷酸盐磷酸、硝酸钙、氯化钙溶液或其它无机盐的浓的水溶液。为确保完全溶解，丝纤维应该完全浸没在已经加热的溶剂溶液中，然后维持在范围从约60℃至约140℃的温度下1-168小时。在一实施方案中，丝纤维应该完全浸没在溶剂溶液中，然后放入一温度约100℃的干燥烘箱中约1小时。
丝纤蛋白提取物被加入到LiBr溶液(或反之亦然)中的温度对完全溶解丝蛋白所需的时间和对最终SPF混合物溶液的生成的分子量和多分散性具有影响。在一实施方案中，丝溶剂溶液浓度是少于或等于20% w/v。此外，在引入或溶解期间搅动可被用来促进在不同的温度和浓度的溶解。LiBr溶液的温度将提供创建的丝蛋白片段混合物分子量和多分散性的控制。在一实施方案中，较高的温度将更快地溶解丝，提供提高的过程可扩展性和规模生产的丝溶液。在一实施方案中，使用加热至80℃-140℃之间的温度的LiBr溶液减少在烘箱中以获得完全溶解所需的时间。不同的时间和在60℃或60℃以上温度的溶解溶剂将改变和控制从天然丝纤蛋白的原始分子量形成的SPF混合物溶液的MW和多分散性。
或者，全茧可直接放入溶剂，如LiBr中，绕过提取，步骤B2。这就要求从丝和溶剂溶液中随后过滤蚕微粒，并使用本领域已知的分离疏水性和亲水性蛋白的方法除去丝胶蛋白，所述方法有例如柱分离和/或色谱、离子交换、用盐和/或pH的化学沉淀，和/或酶消化和过滤或提取，所有的方法都是普通的例子，没有对标准蛋白分离方法的限制，步骤C2。除去蚕的非-热处理的茧，可或者放入溶剂如LiBr中，绕过提取。上述方法可用于丝胶蛋白分离，优点是非-热处理的茧将含有显著较少的蚕残骸。
透析可被用来通过对水的体积透析溶液，从生成的溶解的丝蛋白蛋白片段溶液除去溶解溶剂，步骤E1。在透析前预过滤有助于从丝和LiBr溶液除去任何残骸(即，蚕残留物)，步骤D。在一个实施例中，在200-300mL/min的流速下，使用3μm或5μm滤器，以在透析和可能的浓缩前(如果需要)，过滤0.1%-1.0%丝-LiBr溶液。在此公开的方法，如上所述，是使用时间和/或温度以将浓度从9.3M LiBr降至从0.1M-9.3M的范围，促进过滤和下游透析，特别是当考虑创建一种可扩展的工艺方法时。或者，不采用另外的时间或温度，9.3M LiBr-丝蛋白片段溶液可用水稀释以促进残骸过滤和透析。在所需时间和温度过滤的溶解结果是一种已知MW和多分散性的半透明无颗粒的、在室温下货架稳定的丝蛋白片段-LiBr溶液。有利的是定期地变换透析水，直至溶剂已被除去(如，在1小时、4小时，然后每12小时后更换水，总共6次换水)。水体积更换的总量可基于用于丝蛋白溶解和片段化的溶剂的生成浓度而变化。在透析后，最终丝溶液可被进一步过滤以除去任何剩余的残骸(即，蚕残留物)。
或者，切向流过滤(TFF)，其是用于生物分子的分离和纯化的快速和有效的方法，可被用来从生成的溶解丝纤蛋白溶液除去溶剂，步骤E2。TFF提供一种高度纯水性丝蛋白片段溶液并使得工艺过程的可扩展性成为可能，以受控和可重复的方式生产大量的溶液。丝和LiBr溶液可在TFF之前(丝在或者水或者LiBr中由20%下降至0.1%)被稀释。在TFF处理之前，如上所述的预过滤可维持过滤效率并可能避免因存在残骸颗粒所致的在滤器的表面上建立的丝凝胶边界层。在TFF之前的预过滤也有助于从丝和LiBr溶液(可引起生成的仅仅水溶液的自发或长期凝胶化)除去任何剩余的残骸(即，蚕残留物)，步骤D。TFF，循环或单通，可用于创建范围从0.1%丝-30.0%丝(更优选地，0.1%-6.0%丝)的水-丝蛋白片段溶液。根据丝蛋白片段混合物在溶液中的所需浓度、分子量和多分散性，可需要不同的截止尺寸的TFF膜。范围从1-100 kDa的膜对于例如通过改变提取沸腾时间长度或在溶解溶剂(如，LiBr)中的时间和温度创建的不同分子量的丝溶液可能是必要的。在一实施方案中，TFF 5或10 kDa的膜被用来纯化丝蛋白片段混合物溶液和创建最终所需的丝-与-水比例。最好，TFF单通、TFF，和本领域已知的其它方法，如降膜蒸发器，可被用来在除去溶解溶剂(如，LiBr) (具有产生的范围从0.1%至30%丝的所需浓度)后浓缩溶液。这可被用作一种对本领域已知的标准HFIP浓缩方法的备选方法，以创建一种水-基溶液。较大孔的膜也可被用来滤出小丝蛋白片段并创建一种具有和/或没有严格多分散性值的、较高分子量的丝的溶液。图61是概述本公开内容的丝蛋白溶液的一些实施方案的分子量的表。丝蛋白溶液处理条件如下：100℃提取20 min，室温下冲洗，LiBr在60℃烘箱持续4-6小时。对水溶性薄膜的TFF处理条件如下：100℃提取60 min，60℃冲洗，100℃ LiBr在100℃烘箱中60 min。图67-78进一步演示提取时间、LiBr溶解条件，和TFF处理和生成的实例分子量和多分散性的操作。这些实例并不打算受到限制，而是演示对于特定分子量的丝片段溶液的指定参数的效力。
对于LiBr和Na2CO3检测的分析使用配备有蒸发光散射检测器(ELSD)的HPLC系统进行。通过对于针对浓度绘制的分析物产生的峰面积的线性回归进行计算。许多本公开内容的制剂的超过一个的样品用于样品制备和分析。一般来说，不同制剂的4个样品被直接在一个10 mL的容量瓶中称重。使样品悬浮于5 mL的20mM甲酸铵(pH 3.0)中并在偶尔震摇下于2-8℃保持2小时，以从薄膜提取分析物。2小时后，用20mM甲酸铵(pH 3.0)稀释该溶液。将样品溶液从容量瓶转移到HPLC小瓶并注入HPLC-ELSD系统，用于碳酸钠和溴化锂的估算。
为Na2CO3和LiBr在丝蛋白制剂的量化开发的分析方法被发现在范围10-165 μg/mL内是线性的，对于碳酸钠和溴化锂的RSD的注射精度分别为2%和1% (面积)以及为0.38%和0.19% (保留时间)。分析方法可应用于碳酸钠和溴化锂在丝蛋白制剂中的定量测定。
最终丝蛋白片段溶液，如在图4中所示，是纯丝蛋白片段和具有未可检测水平的微粒残骸和/或过程污染物，包括LiBr和Na2CO3的PPM的水。图55和图58是概述在本公开内容的溶液中的LiBr和Na2CO3浓度的表。在图55中，处理条件包括100℃提取60 min，60℃冲洗，100℃ LiBr在100℃烘箱中60 min。包括压差和dia-过滤体积数的TFF条件是不同的。在图58中，处理条件包括100℃沸腾60 min，60℃冲洗，LiBr在60℃烘箱中4-6小时。在一实施方案中，由于蛋白的结晶性，本公开内容的SPF组合物在水性溶液中是不溶性的。在一实施方案中，本公开内容的SPF组合物在水性溶液是可溶性的。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含约三分之二的晶体部分和约三分之一的无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含约一半的晶体部分和约一半的无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含99%晶体部分和1%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含95%晶体部分和5%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含90%晶体部分和10%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含85%晶体部分和15%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含80%晶体部分和20%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含75%晶体部分和25%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含70%晶体部分和30%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含65%晶体部分和35%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含60%晶体部分和40%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含50%晶体部分和50%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含40%晶体部分和60%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含35%晶体部分和65%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含30%晶体部分和70%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含25%晶体部分和75%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含20%晶体部分和80%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含15%晶体部分和85%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含10%晶体部分和90%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含5%晶体部分和90%无定形区域。在一实施方案中，本公开内容的SPFs组合物包含1%晶体部分和99%无定形区域。
本公开内容的SPF组合物的独特特征是从10天至3年的货架稳定性(当它们在水性溶液中贮存时，将不缓慢地或自发地胶凝，并且没有片段聚集，因此随着时间的推移，分子量没有增加)，这取决于贮藏条件，丝的百分比，和装运数量和装运条件。另外地，可改变pH以通过防止丝的过早折叠和聚集，延长保质期和/或支持装运条件。在一实施方案中，本公开内容的SPF溶液组合物在室温下(RT)具有至多2周的货架稳定性。在一实施方案中，本公开内容的SPF溶液组合物在RT下具有至多4周的货架稳定性。在一实施方案中，本公开内容的SPF溶液组合物在RT下具有至多6周的货架稳定性货架稳定性。在一实施方案中，本公开内容的SPF溶液组合物在RT下具有至多8周的货架稳定性。在一实施方案中，本公开内容的SPF溶液组合物在RT下具有至多10周的货架稳定性。在一实施方案中，本公开内容的SPF溶液组合物在RT下具有至多12周的货架稳定性。在一实施方案中，本公开内容的SPF溶液组合物在RT下具有从约4周至约52周的货架稳定性。下表1显示对本公开内容的SPF组合物的实施方案的货架稳定性试验结果。
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一种已知的添加剂如维生素(如，维生素C)可加入到本公开内容的SPF组合物中，以创建在室温下(RT)稳定10天至3年的凝胶。两个实施例，SPF组合物和具有添加剂的相同组合物，可被冻干用于提高从10天至10年的贮存控制范围，这取决于贮藏和装运条件。冻干丝粉末也可用作医疗、消费者，和电子市场的原料成分。此外，冻干丝粉末在贮存后可被再悬浮于水、HFIP，或有机溶液中，以创建不同浓度的丝溶液，包括比最初生产的那些更高浓度的溶液。在另一个实施方案中，丝纤蛋白-基蛋白片段使用转子温度蒸发器或本领域已知的其它方法干燥，以创建含有少于10%质量水的干燥蛋白形式。
或者丝片段-水溶液或者冻干丝蛋白片段混合物可按照本领域的标准方法(但不限于过滤、加热、辐射或电子束)灭菌。期望丝蛋白片段混合物，由于其较短的蛋白聚合物长度，将比本领域描述的完整性丝蛋白溶液更好地经受灭菌。此外，从在此描述的SPF混合物创建的丝制品可在适合应用时进行灭菌。例如，要用于开放的伤口/切口的医学应用的荷载有分子的丝膜，可用标准方法如通过辐射或电子束灭菌。
图2是显示在制备本公开内容的丝蛋白片段溶液的工艺过程中，在提取和溶解步骤期间可修改的各种参数的流程图。可改变选定的方法参数以获得独特的最终溶液特征，这取决于计划的用途，如分子量和多分散性。应该理解，不是所有的示例性步骤都是制备本公开内容的所有丝溶液所必需的。
在一实施方案中，制备本公开内容的丝蛋白片段溶液的工艺过程包括从家蚕(Bombyx mori)丝茧形成小块；在约100℃水和Na2CO3溶液中提取茧块约60分钟，其中水的体积等于约0.4 x 生丝重量和Na2CO3的量是约0.848 x 茧块重量，以形成丝纤蛋白提取物；于约60℃冲洗丝纤蛋白提取物3次，每次以一定体积的冲洗水冲洗约20分钟，其中每个循环的冲洗水等于约0.2 L x 茧块重量；从丝纤蛋白提取物除去过量的水；干燥丝纤蛋白提取物；在LiBr溶液中溶解干燥的丝纤蛋白提取物，其中LiBr溶液首先被加热至约100℃，以创建丝和LiBr溶液并维持；将丝和LiBr溶液置于约100℃的干燥烘箱中约60分钟，以获得完全溶解并使天然丝蛋白结构进一步片段化为具有所需分子量和多分散性的混合物；过滤溶液以除去任何剩余的来自蚕的残骸；用水稀释溶液，得到1%的丝溶液；和使用切向流过滤(TFF)从溶液除去溶剂。在一实施方案中，使用10 kDa膜来纯化丝溶液和创建所需的最终丝-与-水比例。然后TFF可被用来进一步浓缩纯丝溶液至2%丝/水浓度。
从原料茧至透析的每个过程步骤均可扩展以增加生产的效率。目前购买整茧作为原料，但也已使用预先清洁的茧或非-热处理的茧，其中除去蚕留下最小的残骸。切割和清洗茧是一个手工过程，然而对于可扩展性，该过程可通过例如，使用结合压缩空气的自动机器以除去蚕和任何微粒，或使用切割机切茧成更小的碎片，使得劳动强度更小。提取步骤，目前以小批量进行，可在一个较大的容器中完成，例如其中可维持在或于60℃-100℃之间的温度的工业洗涤机。冲洗步骤也可在工业洗涤机中完成，排除手动冲洗周期。溶解丝在LiBr溶液中可在不是对流烘箱的容器，例如搅拌釜式反应器中进行。通过一系列的水变化透析丝是一个手工和时间密集过程，其可通过改变某些参数，例如在透析前稀释丝溶液而加速。可选择透析过程用于经使用半-自动设备，例如切向流过滤系统来生产。
不同的提取(即，时间和温度)、LiBr (即，当将LiBr溶液加入到丝纤蛋白提取物中或反之亦然时的温度)和溶解(即，时间和温度)参数导致具有不同的粘度、均匀性，和颜色的溶剂和丝溶液(见图5-32)。当溶解丝和增加在所述温度(如，在如在此所示的烘箱中，或备选的热源)下的时间时，升高提取温度，延长提取时间，在再现时和随着时间的推移使用较高温度的LiBr溶液，所有这一切导致更小的粘性和更均匀的溶剂和丝溶液。虽然几乎所有的参数导致一个可行的丝溶液，允许在少于4-6个小时内获得完全溶解的方法对于该工艺可扩展性是优选的。
图5-10显示测试的4个不同丝提取组合的照片：90℃ 30 min，90℃ 60 min，100℃30 min，和100℃ 60 min。简言之，制备9.3 M LiBr并允许在室温下放置至少30分钟。将5mL LiBr溶液加入到1.25 g丝中并置于60℃烘箱中。从每组除去于4、6、8、12、24、168和192小时的样品。剩余的样品被拍照。
图11-23显示测试的4个不同丝提取组合的照片：90℃ 30 min，90℃ 60 min，100℃ 30 min，和100℃ 60 min。简言之，将9.3 M LiBr溶液加热至4个温度之一：60℃、80℃、100℃或沸腾。将5 mL热的LiBr溶液加入到1.25 g丝中并置于60℃烘箱中。从每组除去于1、4和6小时的样品。剩余的样品被拍照。
图24-32显示测试的4个不同丝提取组合的照片：使用4个不同丝提取组合：90℃30 min，90℃ 60 min，100℃ 30 min，和100℃ 60 min。简言之，将9.3 M LiBr溶液加热至4个温度之一：60℃、80℃、100℃或沸腾。将5 mL热的LiBr溶液加入到1.25 g丝中并置于在LiBr的相同温度的烘箱中。从每组除去于1、4和6小时的样品。将1 mL的各样品加入到7.5mL 9.3 M LiBr中并冷冻用于粘度测试。剩余的样品被拍照。
丝蛋白片段的分子量可根据在提取步骤期间所用的特定参数，包括提取时间和温度；在溶解步骤期间所用的特定参数，包括丝浸没在溴化锂中时的LiBr温度和维持溶液在特定的温度的时间；和过滤步骤期间所用的特定参数来控制。通过使用公开的方法控制工艺参数，有可能创建在范围从5 kDa至200 kDa，更优选地在10 kDa和80 kDA之间的各种不同分子量下，具有等于或低于2.5的多分散性的SPF混合物溶液。通过改变工艺参数以获得具有不同分子量的丝溶液，可基于所需性能要求，以一系列具有等于或少于2.5的所需多分散性的片段混合物终产物为目标。例如，含有药物的较低分子量的丝膜可比较高分子量的薄膜具有更快的释放速率，这对于在消费者化妆品中的每日传递介质是更为理想的。此外，可获得具有大于2.5的多分散性的SPF混合物溶液。此外，可混合具有不同平均分子量和多分散性的两种溶液，以创建组合溶液。或者，已从蚕直接除去的液体丝腺(100%无丝胶蛋白的丝蛋白)可与本公开内容的任何SPF混合物溶液组合所用。纯丝纤蛋白-基蛋白片段组合物的分子量使用带有折射率检测器(RID)的高压液相色谱(HPLC)测定。多分散性使用Cirrus GPC在线GPC/SEC软件版本3.3 (Cirrus GPC Online GPC/SEC Software Version3.3) (Agilent)计算。
在生丝茧加工成丝溶液期间参数是不同的。不同的这些参数影响生成的丝溶液的MW。操作参数包括(i) 提取时间和温度，(ii) LiBr的温度，(iii) 溶解烘箱的温度，和(iv)溶解时间。分子量用如在图64-80中所示质谱测定。
进行实验以测定不同提取时间的效果。图64-70是显示这些结果的图，和表2-8概述了结果。下面是概要：
- 30分钟的丝胶蛋白提取时间导致比60分钟的丝胶蛋白提取时间更大的MW
- MW随在烘箱中的时间降低
- 140℃ LiBr和烘箱导致置信区间的低位低于9500 Da的MW
- 在1小时和4小时时间点的30 min提取具有未经消化的丝
- 在1小时时间点的30 min提取导致具有置信区间的低位为35,000 Da的显著高的分子量
- 达到置信区间的高位的MW范围是18000-216000 Da (重要的是提供具有指定的上限的溶液)
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进行实验以确定不同提取温度的效果。图71是显示这些结果的图，和表9概述了所述结果。以下是概要：
- 于90℃的丝胶蛋白提取导致比于100℃的丝胶蛋白提取更高的MW
- 在90℃和100℃烘箱中均显示，MW随着时间的推移而降低
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进行实验以确定不同溴化锂(LiBr)温度在加入到丝中的效果。图72-73是显示这些结果的图，和表10-11概述所述结果。以下是概要：
- 对MW或置信区间(所有CI ~10500-6500 Da)没有影响
- 研究表明，随着LiBr加入和开始溶解，由于大多数质块在室温下是丝，LiBr-丝溶解的温度快速下降至原始LiBr温度以下。
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进行实验以确定v烘箱/溶解温度的效果。图74-78是显示这些结果的图，和表12-16概述所述结果。以下是概要：
- 烘箱温度对60 min提取的丝比30 min提取的丝的影响要小。不希望受理论的束缚，相信30 min丝在提取期间较少降解，因此烘箱温度对丝的较大MW，较少降解部分有更大的影响。
- 对于60℃对比140℃烘箱，30 min提取的丝在较高烘箱温度显示出较低MW的极显著的作用，而60 min提取的丝具有作用但较少。
- 140℃烘箱导致在~6000 Da的置信区间的低位
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在一实施方案中，本文公开的方法导致具有可在生产期间受到控制的特征的溶液，包括，但不限于：MW – 可通过改变提取和/或溶解时间和温度(如，LiBr温度)、压力，和过滤(如，尺寸排阻色谱)；结构 – 除去或裂解重或轻链丝纤蛋白蛋白聚合物；纯度–改善丝胶蛋白除去的热水冲洗温度或改善的除去不利地影响丝片段蛋白混合物溶液的货架稳定性的颗粒的过滤能力；颜色 – 可用例如，LiBr温度和时间控制的溶液颜色；溶液的粘度；澄清度；和稳定性而变化。生成的溶液的pH通常为约7并可在需要时可使用酸或碱改变至贮存的需要条件。
可使用上述SPF混合物溶液以生产纯丝蛋白片段-薄膜或纯丝蛋白片段-凝胶，用于许多应用(如，将药物、维生素、抗氧化剂等传递至皮肤)。图33是显示从本公开内容的丝溶液的制备本公开内容的丝膜的实施方案的流程图。在步骤A中，选择本公开内容的丝溶液，然后至少一个分子或治疗剂在凝胶或薄膜处理之前被直接加入到丝溶液中，步骤B。当制备丝膜时，含有添加剂的丝溶液可直接浇注到成形模具中，以获得独特的薄膜形状(如，硅胶模具)或丝溶液可被浇注为片状物，随后用各种切割技术，包括，但不限于用旋转刀片切割或激光切割例如(图83A和83B)切割或冲压成各种形状，这取决于所需应用，步骤C。如果在模具，例如硅胶上浇注，硅胶模具可在激光-蚀刻/图案化表面上被加热，以创建将被转移至最终薄膜的印象。例如，产品标志可以转移至薄膜，该标志为可见的，但不能用手触及，而是用来显示产品的真实性。最终丝蛋白片段薄膜的浓度和/或质量可以变化，以控制薄膜的柔韧性和符合不同的解剖学局部形状的程度。改变用于丝膜的干燥方法还将导致不同的最终薄膜丝特征。应用气流和/或热会影响薄膜的性质(如，脆性、气泡数目、卷曲、溶解度、表面外观)，步骤D。此外，在包装时在薄膜内的水分百分比将影响随着时间推移的稳定性，因为太多的水分导致薄膜随着时间推移而发黄(图82A-82C)。在一些实施方案中，薄膜理想地在完全干燥时可含有约2至约20%之间的含水量。已观察到在薄膜内大于20%的较大含水量将降低货架贮存寿命。如果薄膜在包装前不够充分干燥(即它们具有大于20%水含量)，它们将随着时间的推移(2+周)而发黄。已建议将薄膜在一个孵化器中干燥，直至在孵化器中的相对湿度低于周围区域的相对湿度且不大于36%。环境湿度将对除去湿气的能力具有影响，因此，触觉/音频测试可被用来确定薄膜是否可备包装。在一实施方案中，该测试包括从干燥系统取出薄膜，稍微弯曲薄膜的一端并释放它。如果薄膜感觉和听起来类似于一张纸或薄塑料片，则认为它是干燥的。如果薄膜未完全干燥，它将是柔软的且在弯曲和释放时不会未发出声音。在一实施方案中，薄膜是柔韧的而不需要处理添加剂如甘油，以致2.5cm宽，10cm长的薄膜可对折弯曲，以使薄膜的相对两端可彼此接触，而薄膜并未折断或破裂。这种相同的尺寸的薄膜可沿着薄膜的长度弯曲，以创建一个45-度的角而不折断或裂开薄膜。
最终丝蛋白片段-薄膜是纯的，未有可检测水平的颗粒残骸和/或过程污染物，包括LiBr和Na2CO3。或者，最终SPF混合物溶液具有少于500ppm的过程污染物。图56和图57是概述本公开内容薄膜(于RT下风干的2%丝膜)中的LiBr和Na2CO3浓度的表。在图56中，处理条件包括100℃提取20 min，RT冲洗，LiBr在60℃烘箱中4-6小时。在图57中，处理条件包括100℃提取提取20 min，RT冲洗，LiBr在60℃烘箱中4-6小时。
在一实施方案中，当制备丝凝胶时，酸被用来帮助促进凝胶化。在一实施方案中，当制备包含中性或碱性分子和/或治疗剂的丝凝胶时，可加入酸以促进凝胶化。在一实施方案中，当制备丝凝胶时，升高pH (使凝胶更具碱性)增加凝胶的货架稳定性。在一实施方案中，当制备丝凝胶时，升高pH (使凝胶更具碱性))允许更大量的酸性分子装载在凝胶中。
在一实施方案中，天然添加剂可加入到丝凝胶，以进一步稳定添加剂。例如，可使用微量元素如硒或镁或L-甲硫氨酸。此外，可加入避光容器以进一步增加稳定性。
图34概述用于本公开内容的丝片段-薄膜干燥研究的参数的实施方案。图35是显示基于图34的丝片段-薄膜干燥研究的丝片段-薄膜干燥时间(在各种气流和温度条件下)的图。这些研究表明，气流是考虑干燥的重要参数(即，在封盖容器中的样品没有干燥)，可改变温度以改变干燥速率(即，增加的温度导致除去水的速率更快)并且可获得具有各种参数(即，从24至48小时，不管温度如何，未封盖的样品中的质量是一致的)的在薄膜内的稳态含水量。应注意，薄膜的最终特性，例如脆性，将随干燥条件而变化。或者，薄膜干燥速率可通过在SPF溶液中使用添加剂，如表面活性剂或油而加速。这些添加剂可与不加热或加热一起用来改变干燥速率和最终薄膜物理特性。
在一实施方案中，SFP薄膜的干燥条件是在一个强制空气流的孵化器中于24℃持续12-48小时，这取决于薄膜的数目和环境湿度。在这些干燥条件下，创建当在箔袋中储存时，随着时间的推移皱缩将不超过5%的薄膜。此外，薄膜在组成和物理结构方面是均匀的，没有侧边和添加剂，例如维生素C在整个薄膜中的均匀分布。
在一实施方案中，当在光照下贮存时，丝蛋白片段-薄膜可在室温下稳定维生素C及其衍生物，在30天贮藏后保留其活性的约30%-约100%。在一实施方案中，当在光照下贮存时，丝蛋白片段-薄膜可在室温下稳定维生素C及其衍生物，在30天贮藏后保留其活性的约35%-约95%。在一实施方案中，当在光照下贮存时，丝蛋白片段-薄膜可在室温下稳定维生素C及其衍生物，在30天贮藏后保留其活性的约40%-约90%。在一实施方案中，当在光照下贮存时，丝蛋白片段-薄膜可在室温下稳定维生素C及其衍生物，在30天贮藏后保留其活性的约45%-约85%。在一实施方案中，当在光照下贮存时，丝蛋白片段-薄膜可在室温下稳定维生素C及其衍生物，在30天贮藏后保留其活性的约50%-约80%。在一实施方案中，当在光照下贮存时，丝蛋白片段-薄膜可稳定维生素C及其衍生物，在30天贮藏后保留其活性的约55%-约75%。在一实施方案中，当在光照下贮存时，丝蛋白片段-薄膜可在室温下稳定维生素C及其衍生物，在30天贮藏后保留其活性的约60%-约70%。在一实施方案中，当在避免薄膜与光接触的密封容器或袋中贮存时，丝蛋白片段-薄膜可在室温下稳定维生素C及其衍生物，在3-24月贮藏后保留其活性的约80%-约100%。在一实施方案中，当在避免薄膜与光接触的密封容器或袋中贮存时，丝蛋白片段-薄膜可在室温下稳定维生素C及其衍生物，在约3至约60月贮藏后保留其活性的约80%-约100%。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在20 mins内释放50%-90%之间的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在20 mins内释放至少50%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在20 mins内释放至少60%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在20 mins内释放至少70%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在20 mins内释放至少80%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在20 mins内释放至少90%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放10%-100%之间的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少10%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少20%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少30%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少40%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少50%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少60%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少70%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少80%的活性维生素C及其衍生物。在一实施方案中，丝蛋白片段-薄膜当粘附至潮湿的皮肤时，可在5分钟至8小时内释放至少90%的活性维生素C及其衍生物。相信暴露于较高温度较长的时间段可将丝蛋白分解为更多不同的丝蛋白片段混合物和/或分裂任何丝蛋白第三和/或第二丝蛋白结构，其可不利地影响货架稳定性和/或生成的结构(如，凝胶、薄膜、泡沫等)的性能以及减少在丝蛋白中的重链的数目。
图36A和36B显示两个来自包含维生素C的样品的HPLC色谱图。在左边的色谱图显示来自以下的峰：(1) 在环境条件下维生素C的化学稳定的样品和(2) 在无化学稳定以防止氧化的环境条件下1小时后获得的维生素C的样品, 其中降解产物是可见的。在右边的色谱图显示来自本公开内容的丝膜(在室温下老化至少30天)的两个不同实施方案的峰。未见到降解产物。图59是概述本公开内容的丝蛋白片段-薄膜(于RT风干的2%丝膜)中的维生素C浓度的表。在图59中，处理条件包括100℃提取20 min，RT冲洗，LiBr在60℃烘箱中4-6小时。图60是概述维生素C在化学稳定的溶液中的稳定性的表。图89A-89B是概述在无化学稳定剂的SPF凝胶中的维生素C稳定性与在竞争性抗老化皮肤护理产品中的化学稳定的维生素C比较的表。一个20%总维生素C添加剂浓度的凝胶铸件并未胶凝。不希望受理论的束缚，似乎在维生素C浓度、丝浓度，和凝胶化之间有关系。给定浓度丝的维生素C的增加将在较长的时间内导致凝胶化或抑制凝胶化。这可能是由于维生素C分子物理地阻断丝蛋白片段之间的相互作用或丝蛋白的交联。
在一实施方案中，一种或多种分子是稳定的并可在延长的时间段释放。在一实施方案中，释放速率受所用的丝纤蛋白-基蛋白片段的特定重均分子量的控制。在另一个实施方案中，释放速率受多层结构的创建的控制。例如，多层薄膜可以分别铸造和干燥。此外，每层可使用相同或不同分子量组合物形成。在一实施方案中，蛋白结构的结晶度是通过薄膜干燥条件改变的，从而控制释放速率。一种或多种分子可在皮肤上局部、在植入后皮下，或通过口服或植入经局部或系统释放。在一实施方案中，一种或多种分子在1分钟和20分钟之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在20分钟和60分钟之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在1小时和4小时之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在4小时和8小时之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在8小时和24小时之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在1天和7天之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在1周和4周之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在1月和3月之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在3月和6月之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在20分钟和6月之间释放。在一实施方案中，一种或多种分子在极端的温度和湿度条件下是稳定的。
包含约20 kDA的平均重均分子量丝纤蛋白-基蛋白片段和含有约20%质量维生素C的本公开内容的薄膜，被分别存放在箔袋内和暴露在极端温度下。含有薄膜的箔袋暴露于：
·环境条件下(时间0薄膜)
·“极端寒冷” (-29℃ ± 2℃ 72小时)，接着是“热湿” (38℃ ± 2℃，85%湿度± 5% 72小时)，和随后“极端高温，湿度适中” (60℃ ± 2℃，30%湿度± 5% 6小时)
活性维生素C的量使用HPLC测量。观察到所有的薄膜在暴露于极端条件下支持维生素C活性的维持，如在表17中所概述的。
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图37-45是显示在各种温度、时间和干燥条件下干燥的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜的照片。
图46-54是显示在各种温度、时间和干燥条件下形成的本公开内容的丝蛋白片段-薄膜在水中溶解的照片。本公开内容的薄膜的水溶性可通过改变干燥条件而变化。例如，强迫空气孵化器干燥薄膜至20%湿度，然后增加环境湿度至50%数小时的时段，随后干燥薄膜回到20%湿度将导致不溶性薄膜。在其中湿度在稳步下降的普通条件下，创建水溶性丝膜。预期湿度增加允许薄膜中的蛋白结构被进一步动员并进一步结晶，导致一种不溶性薄膜。本领域创建不溶性薄膜的备选方法包括引入甲醇。本公开内容的薄膜由于它们在水中的溶解性而明显地不同于那些薄膜。在此描述的SFP凝胶物品的范围从可被注射或局部扩散的水凝胶至似乎为薄膜并含有最少但受控的水含量的薄膜-凝胶物品，从而防止结晶性和允许水溶性。
在一些实施方案中，本公开内容的组合物还可包含皮肤渗透促进剂，包括，但不限于，亚砜(如二甲亚砜)、吡咯烷酮(如2-吡咯烷酮)、醇(如乙醇或正癸醇)、氮酮(如月桂氮酮和1-十二烷基氮杂环庚烷-2-酮)、表面活性剂(包括烷基羧酸酯和它们的对应的酸如油酸、氟代烷基羧酸酯和它们的对应的酸、烷基硫酸酯、烷基醚硫酸酯、多库酯盐(docusates)如磺基琥珀酸二辛酯钠、烷基苯磺酸酯、烷基醚磷酸酯，和烷基芳基醚磷酸酯)、二醇(如丙二醇)、萜(如柠檬烯、对-伞花烃、香叶醇、金合欢醇、丁香酚、薄荷醇、萜品醇、香芹醇、香芹酮、葑酮、和马鞭草烯酮)，和二甲基异山梨醇酯。
以下是在制备和用于制备本公开内容的丝溶液的各种参数的合适范围的非-限制性实例。本公开内容的丝溶液可包括这些参数的一个或多个，但不必是全部，并且可使用这样的参数的范围的各种组合制备。
在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于30%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于25%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于20%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于19%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于18%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于17%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于16%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于15%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于14%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于13%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于12%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于11%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于10%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于9%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于8%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于7%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于6%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于5%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于4%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于3%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于2%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于1%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.9%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.8%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.7%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.6%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.5%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.4%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.3%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.2%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是少于0.1%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.1%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.2%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.3%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.4%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.5%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.6%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.7%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.8%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于0.9%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于1%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于2%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于3%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于4%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于5%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于6%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于7%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于8%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于9%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于10%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于11%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于12%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于13%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于14%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于15%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于16%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于17%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于18%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于19%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于20%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是大于25%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和30%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和25%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和20%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和15%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和10%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和9%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和8%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和7%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和6.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和6%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和5.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和4.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和4%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和3.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和3%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和2.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和2.0%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和2.4%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.5%和5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.5%和4.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.5%和4%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.5%和3.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.5%和3%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.5%和2.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在1和4%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在1和3.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在1和3%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在1和2.5%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在1和2.4%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在1和2%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在20%和30%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在0.1%和6%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在6%和10%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在6%和8%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在6%和9%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在10%和20%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在11%和19%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在12%和18%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在13%和17%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是在14%和16%之间。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是2.4%。在一实施方案中，丝在该溶液中的百分比是2.0%。
在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是未能检测至30%。在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是未能检测至5%。在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是1%。在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是2%。在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是3%。在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是4%。在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是5%。在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是10%。在一实施方案中，丝胶蛋白在该溶液中的百分比是30%。
在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是0至1年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是0至2年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是0至3年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是0至4年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是0至5年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是1至2年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是1至3年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是1至4年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是1至5年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是2至3年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是2至4年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是2至5年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是3至4年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是3至5年。在一实施方案中，LiBr-丝片段溶液的稳定性是4至5年。
在一实施方案中，本公开内容的组合物的稳定性是10天-6月。在一实施方案中，本公开内容的组合物的稳定性是6月-12月。在一实施方案中，本公开内容的组合物的稳定性是12月-18月。在一实施方案中，本公开内容的组合物的稳定性是18月-24月。在一实施方案中，本公开内容的组合物的稳定性是24月-30月。在一实施方案中，本公开内容的组合物的稳定性是30月-36月。在一实施方案中，本公开内容的组合物的稳定性是36月-48月。在一实施方案中，本公开内容的组合物的稳定性是48月-60月。
在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从6kDa-16kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从17 kDa-38kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从39kDa-80kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从1-5kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从5-10kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从10-15kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从15-20kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从20-25kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从25-30kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从30-35kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从35-40kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从40-45kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从45-50kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从50-55kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从55-60kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从60-65kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从65-70kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从70-75kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从75-80kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从80-85kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从85-90kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从90-95kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从95-100kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从100-105kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从105-110kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从110-115kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从115-120kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从120-125kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从125-130kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从130-135kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从135-140kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从140-145kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从145-150kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从150-155kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从155-160kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从160-165kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。I在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从165-170kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从170-175kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从175-180kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从180-185kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从185-190kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从190-195kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从195-200kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从200-205kD纯丝纤蛋白-基蛋白片段a的。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从205-210kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从210-215kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从215-220kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从220-225kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从225-230kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从230-235kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从235-240kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从240-245kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从245-250kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从250-255kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从255-260kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从260-265kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从265-270kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从270-275kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从275-280kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从280-285kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从285-290kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从290-295kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从295-300kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从300-305kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从305-310kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从310-315kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从315-320kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从320-325kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从325-330kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从330-335kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从35-340kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从340-345kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。在一实施方案中，本公开内容的组合物包含具有平均重均分子量范围从345-350kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。
在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有范围从约1至约5.0的多分散性。在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有范围从约1.5至约3.0的多分散性。在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有范围从约1至约1.5的多分散性。在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有范围从约1.5至约2.0的多分散性。在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有范围从约2.0至约2.5的多分散性。在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有范围从约is 2.0至约3.0的多分散性。在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有范围从约2.5至约3.0的多分散性。
在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有不能检测水平的LiBr残留物。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是在10ppm和1000 ppm之间。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是在10 ppm和300 ppm之间。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于25ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于50ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于75ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于100ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于200ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于300ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于400ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于500ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于600ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于700ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于800ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于900ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是少于1000ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至500ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至450ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至400 ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至350ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至300ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至250ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至200ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至150ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是未能检测至100ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是在100ppm-200ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是在200ppm-300ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是在300ppm-400ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中LiBr残留物的量是在400ppm-500ppm。
在一实施方案中，具有纯丝纤蛋白-基蛋白片段的本公开内容的组合物具有不能检测水平的Na2CO3残留物。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于100ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于200ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于300ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于400ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于500ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于600ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于700ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于800ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于900ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是少于1000ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至500ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至450ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至400ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至350ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至300ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至250ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至200ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至150ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是未能检测至100ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是100ppm-200ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是200ppm-300ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是300ppm-400ppm。在一实施方案中，本公开内容的组合物中Na2CO3残留物的量是400ppm-500ppm。
在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水溶性是50-100%。在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水溶性是60-100%。在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水溶性是70-100%。在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水溶性是80-100%。在一实施方案中，水溶性是90-100%。在一实施方案中，本公开内容的丝纤蛋白-基片段在水性溶液中是不溶性的。
在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段在有机溶液中的溶解度是50-100%。在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段在有机溶液中的溶解度是60-100%。在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段在有机溶液中的溶解度是70-100%。在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段在有机溶液中的溶解度是80-100%。在一实施方案中，本公开内容的纯丝纤蛋白-基蛋白片段在有机溶液中的溶解度是90-100%。在一实施方案中，本公开内容的丝纤蛋白-基片段在有机溶液中是不溶性的。
在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是20%-99.9%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是20%-25%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是25%-30%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是30%-35%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是35%-40%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是40%-45%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是45%-50%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是50%-55%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是55%-60%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是60%-65%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶化妆品凝胶中的水百分比65%-70%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是70%-75%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是75%-80%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是80%-85%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是85%-90%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是90%-95%。在一实施方案中，本公开内容的凝胶的百分比含水量是95%-99%。
在一实施方案中，本公开内容的薄膜中的含水量百分比是20%。在一实施方案中，本公开内容的薄膜中的含水量百分比是少于20%。在一实施方案中，本公开内容的薄膜中的含水量百分比是少于18%。在一实施方案中，本公开内容的薄膜中的含水量百分比是少于16%。在一实施方案中，本公开内容的薄膜中的含水量百分比是少于14%。在一实施方案中，本公开内容的薄膜中的含水量百分比是少于12%。在一实施方案中，本公开内容的薄膜中的含水量百分比是少于10%。在一实施方案中，本公开内容的薄膜中的含水量百分比是在约2%和约20%之间。
在一实施方案中，在制备本公开内容的组合物的方法期间的提取温度是大于84℃。在一实施方案中，在制备本公开内容的组合物的方法期间的提取温度是少于100℃。在一实施方案中，在制备本公开内容的组合物的方法期间的提取温度是84℃-100℃。在一实施方案中，在制备本公开内容的组合物的方法期间的提取温度是84℃-94℃。在一实施方案中，在制备本公开内容的组合物的方法期间的提取温度是94℃-100℃。
提出以下实施例以提供本领域技普通术人员如何制备和使用所述实施方案的完整的公开内容和描述，并且不打算限制发明人认为的其发明的范围，即所述范围既不打算表示以下实验是全部，也不表示仅仅限于进行的实验。已进行努力以确保有关所用数目(如量、温度等)的准确性，但一些实验误差和偏差应该被考虑。除非另外指明，所述份是指重量份，分子量是重均分子量，温度是摄氏度，和压力是在大气压或接近大气压下。
实施例
实施例1. 用于细纹提升应用的本公开内容的丝膜的开发
Figure DEST_PATH_IMAGE026
根据在此公开的方法，改变导致细纹提升薄膜的工艺参数，制备丝膜(2.5 cm x10 cm)。所述丝膜被称为“PureProC™薄膜”，并可被包装在气密和避光的箔基包装中。表18提供用于研究32个使用薄膜四(4)周的个体的PureProC™薄膜细节。观察薄膜的生物相容性和低-过敏原性。此外，未观察到致敏、毒性，或免疫反应。图84是概述在每日剂量(即，用来覆盖25 cm2面积的皮肤的产品平均量)的PureProC™和竞争产品中经30天时段的维生素C量的图。图85和86概述生成的使用易用性数据和在第一个月内使用时观察到的益处。
在一实施方案中，PureProC™薄膜通过剥离薄膜去除。在一实施方案中，PureProC™薄膜通过使用一个湿的棉球或类似的清除垫去除。在一实施方案中，PureProC™薄膜通过用洗布洗涤其中薄膜放置的区域去除。在一实施方案中，PureProC™薄膜PureProC™薄膜用水去除。PureProC™薄膜可被成形为用于面部多个区域的条带或较大的片材可以被切割来适应目标区域。在一实施方案中，为容易应用，可包括PureProC™薄膜上的啮合槽或背衬。在一实施方案中，本公开内容的PureProC™薄膜包含丝和维生素C (20%)。
在一实施方案中，本公开内容的薄膜是可溶于水(不溶性边界)的。在一实施方案中，本公开内容的薄膜是澄清/透明的。在一实施方案中，当应用水时，本公开内容的薄膜具有pH=4。本公开内容的薄膜可用%丝和体积的不同组合来制备，以生产具有3mg/cm^2-10mg/cm^2的丝量的薄膜。本公开内容的薄膜可用从约1%至约50% l-抗坏血酸制得。本公开内容的薄膜可用水粘附至皮肤。本公开内容的薄膜在应用水时可在皮肤上展开。当干燥设备的湿度是16-40%且低于实验室的湿度时，本公开内容的薄膜可被干燥。
实施例2. 本公开内容的丝凝胶的开发
Figure DEST_PATH_IMAGE028
Figure DEST_PATH_IMAGE030
丝与维生素C的比例
样品1-10被用来检查丝与维生素C的比例对精华液凝胶化的作用。具有较少维生素C的样品1-3比样品4和5胶凝更快。所有其它条件都保持不变。具有较少维生素C的样品6-8比样品9和10胶凝更快。所有其它条件都保持不变。结论是丝与维生素C的比例降低(维生素C的量增加)，将延长凝胶产生的时间。在具有少量的维生素C的比例时，凝胶产生的天数并没有很大的变化。
物理刺激
样品3和11被用来检查物理刺激对精华液凝胶化的影响。在相同条件下制备每个样品。在加入维生素C后，将样品11剧烈震摇约3分钟。3和11的处理在其它方面是相同的。震摇导致起泡，但没有显著改变凝胶产生的时间。
温度处理
样品1、3、6、8、O-1、O-2、O-3，和O-4被用来检查温度处理对精华液凝胶化时间的影响。样品1、6、O-1，和O-2除温度处理外都是相同的。样品3、8、O-3，和O-4除温度处理外都是相同的。两个组的丝与维生素C比例不同。精华液凝胶化的时间与温度处理直接相关，较高的温度导致更快的精华液凝胶化。
溶液体积
样品1、M和D被用来检查溶液体积对精华液凝胶化时间的影响。样品M和D与样品1的变化仅仅为增加溶液体积。样品M和D在5天内胶凝，而样品1在8天内胶凝。样品M和D被明确地注意到在胶凝的当天出现胶凝，而样品1经过周末后出现胶凝。
添加剂
样品E1、E2、E3、E4、L1、L2、L3、L4、L5、罐2、R1、RO-1和RO-2被用来检查添加剂对精华液凝胶化时间的影响。样品E1-4含有维生素E。只有样品E1和E2含有维生素C并且只有这两个样品胶凝。维生素E可加入到溶液以变成凝胶，但似乎是可能需要另一种添加剂以创建凝胶。样品L1-5含有一种形式的柠檬汁。样品L1和L4具有直接来自柠檬的果汁，而样品L2、L3和L5含有来自塑料柠檬容器的柠檬汁。样品L4和L5不含有维生素C，而所有其它样品含有维生素C。所有胶凝的样品显示，柠檬汁可在其自身上创建凝胶。柠檬汁的量和柠檬汁的类型对凝胶化时间几乎没有影响。样品罐2含有柠檬草油，其在最初加入时形成一种白蛋白样物质。这种样品也含有维生素C，但凝胶化时间比具有其它维生素C的样品显著更快。样品R1含有迷迭香油(其似乎是可溶性的)以及维生素C。样品在与仅含有维生素C的其它样品类似的时帧内胶凝。样品RO-1和RO-2含有玫瑰油，而仅RO-1含有维生素C。只有胶凝的RO-1显示，玫瑰油将不能在在其自身上快速地创建凝胶。在两种情况下，玫瑰油是不混溶的并可见有黄色气泡。
水性丝纤蛋白-基片段溶液和精油是不混溶的液体。在一实施方案中，为增加丝纤蛋白-基片段溶液的香味，而不截留溶液中的油，使用搅拌棒，使溶液与精油混合。搅拌棒以这样一种速度旋转，即使得在混合物中观察到一些湍流，这样就引起芳香精油和分子之间在溶液中的接触，加入一种香精至溶液中。在从溶液铸造产品之前，可停止混合，而所述油允许与溶液上部分开。从溶液的底部分配到最终产品允许没有可见精油的香料存在于最终产品内。
或者，丝纤蛋白-基溶液和精油可与或不与另外的成分和/或成分乳化剂合并，以创建含有两种成分的组合物。
在一实施方案中，如果溶液被用来创建凝胶制剂，如上所述的溶液混合可减少凝胶化时间。
容器
样品T1和罐1被用来检查铸造容器对精华液凝胶化时间的影响。罐1是在玻璃罐中铸造，而T1是在铝管中铸造。两种样品胶凝且未影响精华液凝胶时间。
概述
用于凝胶溶液的丝溶液的所有处理是在一个锥形管中，在室温下进行，除非另外注明。丝与维生素C的比例不影响溶液胶凝的能力，因为高于1:2的比例不发生胶凝且1:2的比例的胶凝时间长度为其它较低比例(5:1、2.5:1、1:1)的两倍。温度影响凝胶产生的时间，较高温度导致凝胶时间更快。50℃处理在快如2天内胶凝，37℃处理在快如3天内胶凝，室温下处理在5-8天内胶凝和在冰箱中贮存须花费至少39天才胶凝。添加剂对凝胶创建的影响取决于添加剂。维生素E、迷迭香油和玫瑰油均对凝胶创建没有影响。这些添加剂的每一种不能防止凝胶化或影响凝胶的时间。各自还需要存在维生素C以胶凝。来自新鲜柠檬的柠檬汁、来自塑料柠檬容器和柠檬草油的预先压榨的柠檬汁影响凝胶创建。不希望受理论的束缚，相信由于这些添加剂所致的较低pH是添加剂具有对减少凝胶化时间的影响的原因。两种类型的柠檬汁能够在不存在维生素C时引起凝胶化。这在与具有维生素C的相同天数内发生。柠檬草油能够减少凝胶化的天数至2-3天。除了柠檬草油和玫瑰油，所有添加剂显示是可溶性的。玫瑰油保留在黄色气泡中，而柠檬草油是部分可溶的并形成了白蛋白样块。在一实施方案中，不能完全溶解的油，仍可作为添加剂悬浮于凝胶内。通过震摇的物理刺激，溶液被浇注到容器中且溶液体积不影响凝胶化时间。图81是表示本公开内容的凝胶中维生素C的%活性的图。
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实施例3. 用作润滑凝胶的本公开内容的丝凝胶的开发
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本公开内容的凝胶可用约0.5%至约8%丝溶液制得。本公开内容的凝胶可用约0.67%至约15% w/v浓度的抗坏血酸葡糖苷制得。本公开内容的凝胶为澄清/白色的。本公开内容的凝胶可具有易在皮肤上展开且被皮肤吸收的稠度。本公开内容的凝胶在应用后可不产生可见的残留物或油性感觉。本公开内容的凝胶不会随着时间的推移呈棕褐色。
含有精油的丝胶通过稀释本公开内容的丝溶液至2%制备。将维生素C加入到溶液中并允许溶解。加入精油，搅拌并溶解。将溶液等分至各罐中。
在44个人中用两个本公开内容的制剂, PureProC™迷迭香凝胶和PureProC™柠檬草凝胶进行试验(图87和88)。调查对象被要求使用每个样品，每天一次，各持续1周。大多数调查对象将凝胶剂应用于整个脸部。其中最常应用的其它区域包括前额、眼睛下部和嘴周围。
大多数调查对象在早晨施用凝胶(67%)，余下的33%在晚上应用凝胶。百分之九十八(98%)的参与者在试验期间每天一次使用凝胶。调查对象被要求以其自身词汇描述当其施用时凝胶剂的感觉如何和在24小时期间直至下一次应用时的感觉如何。润滑、凉爽、柔软是最常被提到的用来描述凝胶剂感觉如何的形容词。百分之八十(80%)的试验参与者给出了高分，以引起对继续使用凝胶的兴趣。
调查对象被询问关于他们在试验期间通常在其脸上使用他们的其它产品的性能。大多数是首先应用凝胶，然后加入其它产品或在晚上应用凝胶而无另外的产品。只有14%的参与者表明，他们排除了他们的正常产品之一而测试了凝胶剂。PureProC™可与其它产品联合使用或用于替换其它产品。此外，可将防晒剂加入凝胶剂中或它可能从泵，而不是罐子分发。采用重复的局部使用，未观察到皮肤刺激、皮疹，或非-相容性的体征。观察到凝胶的生物相容性和低-过敏原性。此外，未观察到致敏、毒性，或免疫反应。
实施例4. 从本公开内容的丝溶液制得的本公开内容的丝制品
各种分子量和/或分子量组合的丝溶液可以为特定的应用程序进行优化。以下提供该过程的实例，但它不打算限制应用或制剂。
根据文献中的标准方法使用标准丝结构的三(3)种丝溶液，具有以下结果：
●溶液#1是丝浓度5.9%，平均MW 19.8 kDa和2.2 PD (经60 min沸腾提取，100度LiBr溶解1小时制得)
●溶液#2是丝浓度6.4% (经30 min沸腾提取，60度LiBr溶解4小时制得)
●溶液#3是丝浓度6.17% (经30 min沸腾提取，100C LiBr溶解1小时制得)
薄膜：薄膜根据Rockwood et al (Nature Protocols；Vol. 6；No. 10；在线发表9/22/2011；doi:10.1038/nprot.2011.379)制得。简言之，将4mL 1%或2% (wt/vol)丝水溶液加入到100mm陪替氏培养皿(丝体积可因较厚或较薄的薄膜而变化并且不是关键的)中并允许在开放条件下干燥过夜。真空干燥器底部用水填充。干燥薄膜被置于干燥器内并应用真空，允许薄膜在从皿移出之前水退火4小时。从溶液#1铸造的薄膜不导致一种结构上连续的薄膜；薄膜被破裂成数块。这些薄膜块溶解于水中而不管水退火处理。
Egel：“Egel”是如在Rockwood et al中所述的电凝胶化过程。简言之，10 ml的丝水溶液被加入到50 ml锥形管中并且一对铂丝电极被浸没在丝溶液中。将20伏的电压施用于铂电极5分钟，关闭电源并收集凝胶。溶液#1施加电流5分钟时未形成EGEL。
凝胶化：根据发表的辣根过氧化酶(HRP)方案，使溶液#2和#3胶凝。行为似乎是典型的已公开的溶液。
超声凝胶：凝胶按照Rockwood et al的超声方法制得。简言之，将5 ml丝溶液加入到一个15 ml锥形管中。将超声变幅喇叭浸没在溶液中并以50%振幅(21W)超声处理溶液。丝胶用2%、4%和6%丝溶液制得。如与标准文献丝比较的，溶液#2和#3在较长的时间后形成凝胶，例如：
●标准文献丝：5-8 min
●溶液#2：20 min
●溶液#3：120 min
多孔3D支架：根据Rockwood发表的方法，制得以水为基础的，盐沥滤了的支架。通过堆叠筛(用最大孔目的筛放在上面而最小孔目的筛放在下面)制备具有感兴趣的粒度的盐。加入盐并剧烈震摇筛以收集盐。用5-ml注射器将6% (wt/vol)丝蛋白溶液等分注入塑料容器中，每模具2 ml并将5-600微米盐颗粒缓慢加入到模具中的丝纤蛋白溶液的顶部，同时旋转容器以使盐均匀。溶液中的盐与丝的比例维持在25:1。
轻轻地拍打在试验台上的容器，以消除气泡，盖上帽，溶液允许在室温下放置过夜。一旦胶凝，除去盖并将模具置于盛有超纯水的2-升烧杯(3个容器，每个2升水)中。将烧杯转移至搅拌盘上并搅拌，每天更换水2-3次，持续2天(总共4-6次洗涤)。从模具中移出支架并将它们置于新鲜水中另外一天。
溶液#1不形成支架；其不胶凝。两种溶液#2和#3形成支架。用溶液#3制得的支架似乎比用溶液#2制得的支架更柔软，但两个支架是均匀的。
实施例5. 切向流过滤(TFF)以从溶解的本公开内容的丝溶液除去溶剂
通过使用切向流过滤(TFF)已制备各种%丝浓度。在所有的情况下，1%丝溶液被用作输入的进料。范围750-18,000mL的1%丝溶液被用作起始体积。溶液在TFF中渗滤以除去溴化锂。一旦低于特定水平的残留物LiBr，使溶液经历超滤，通过除去水增加浓度。见以下实施例。
7.30%丝溶液：用每批次100g丝茧的30分钟提取批次开始生产7.30%丝溶液。然后，提取的丝纤维在100C烘箱中使用100C 9.3M LiBr溶解1小时。溶解每批次100g的丝纤维以创建在LiBr中的20%丝。在LiBr中溶解的丝然后稀释至1%丝并通过5 um滤器过滤以除去大的残骸。15,500 mL 1%的，经过滤的丝溶液被用作TFF的起始体积/渗滤体积。一旦除去LiBr，溶液被超滤至约1300mL的体积。然后收集1262mL的7.30%丝。将水加入到进料中以帮助除去剩余的溶液，然后收集到547mL的3.91%丝。
6.44%丝溶液：用每批次25、33、50、75和100g丝茧的混合物的60分钟提取批次开始生产6.44%丝溶液。然后，提取的丝纤维在100C烘箱中使用100C 9.3M LiBr溶解1小时。溶解每批次35、42、50和71g丝纤维以创建在LiBr中的20%丝并合并。在LiBr中溶解的丝然后稀释至1%丝并通过5 um滤器过滤以除去大的残骸。17,000 mL 1%的、经过滤的丝溶液被用作TFF的起始体积/渗滤体积。一旦除去LiBr，溶液被超滤至约3000mL的体积。然后收集1490mL的6.44%丝。将水加入到进料中以帮助除去剩余的溶液，然后收集到1454mL的4.88%丝。
2.70%丝溶液：用每批次25g丝茧的60分钟提取批次开始生产2.70%丝溶液。然后，提取的丝纤维在100C烘箱中使用100C 9.3M LiBr溶解1小时。溶解每批次35.48g丝纤维以创建在LiBr中的20%丝。在LiBr中溶解的丝然后稀释至1%丝并通过5 um滤器过滤以除去大的残骸。1000 mL 1%的、经过滤的丝溶液被用作TFF的起始体积/渗滤体积。一旦除去LiBr，溶液被超滤至约300mL的体积。然后收集312mL 2.7%丝。
实施例6. 本公开内容的凝胶维生素C衍生物
最纯形式的维生素C是L-抗坏血酸。有维生素C的许多其它衍生物，在它们被转化为体内的L-抗坏血酸后，其功能类似纯维生素C。维生素C衍生物被用于延长货架保质期。衍生物是稳定形式的L-抗坏血酸且不会氧化或失去稳定性。下表25概述一些在本公开内容的皮肤护理产品中测试的维生素C衍生物
表25. 研究的衍生物
抗坏血酸磷酸酯钠(Aromantic)
抗坏血酸磷酸酯钠(DSM)
抗坏血酸磷酸酯镁
抗坏血酸-2-葡糖苷
抗坏血酸四异棕榈酸酯
在图89A-89B中的表概述本公开内容的凝胶的实施方案。抗坏血酸-2-葡糖苷是在凝胶形成中的最成功的维生素C衍生物，该凝胶在2%丝溶液中经3天形成。来自DSM供应商的抗坏血酸磷酸酯钠在2%丝溶液中经28天后形成凝胶，而来自Aromantic的相同分子不能创建凝胶。在所有的情况下，100 mg的维生素C衍生物在15 mL 2%丝溶液中混合，并且所有的凝胶具有与用抗坏血酸创建的凝胶相同的外观。
凝胶还用两个维生素C选项的组合来铸造。在每一种情况下，已知至少一个维生素C选项引起凝胶化(L-抗坏血酸或抗坏血酸-2-葡糖苷)。所有的组合凝胶能够以1%总维生素C添加剂浓度胶凝。以20%总维生素C添加剂浓度铸造的凝胶不胶凝。不希望受理论的束缚，似乎在维生素C浓度、丝浓度，和凝胶化之间有关系。在给定浓度的丝中增加维生素C将导致较长时间的凝胶化或抑制凝胶化。这可能是由于维生素C分子物理地阻断丝蛋白片段之间或丝蛋白交联的相互作用。修改pH可允许另外的浓度的维生素C及其衍生物被加入。
抗坏血酸四异棕榈酸酯不用于任何凝胶形成制剂，因为它不能溶解或分散于水性丝溶液中。抗坏血酸四异棕榈酸酯是高度粘性的、油溶性液体，其可能需要乳化剂的帮助以便可能溶解于水性丝溶液中。
实施例7. 本公开内容的薄膜维生素C衍生物
图90是概述本公开内容的薄膜的实施方案的表。抗坏血酸磷酸酯钠、抗坏血酸磷酸酯镁和抗坏血酸-2-葡糖苷可被浇注为具有不同外观的薄膜。抗坏血酸磷酸酯钠薄膜是具有类似塑料的质感的顶部表面的不透明和白色薄膜。抗坏血酸磷酸酯镁薄膜是具有类似塑料的质感的顶部表面的透明和浑浊薄膜。抗坏血酸-2-葡糖苷薄膜是最类似于L-抗坏血酸薄膜，虽然柔韧和轻微的质感稍低。所有的薄膜是可溶性的，具有不溶性边界。在一实施方案中，具有不溶性边界的薄膜可通过冲压来自包含在可溶性部分内的区域的形状完全展开而制得。
实施例8. 本公开内容的含有维生素C的咖啡因薄膜
图91A-91B是概述本公开内容的咖啡因薄膜的实施方案的表。薄膜用0.5%、1%、2.5%、5%、10%、15%和20%咖啡因和20%或25%维生素C浇注。所有的组合形成薄膜。20%咖啡因薄膜有咖啡因沉淀出来。0.5%-2.5%的薄膜是可溶性的。在一实施方案中，本公开内容的咖啡因薄膜被用来减轻浮肿的眼睛。
实施例9. 本公开内容的含有维生素C的咖啡因凝胶
一种具有2 %丝和100mg L-抗坏血酸/15 mL溶液的丝凝胶用添加50 mg咖啡因/15mL溶液创建。凝胶具有标准L-抗坏血酸凝胶的确切的外观。在一实施方案中，本公开内容的咖啡因凝胶被用来减轻浮肿的眼睛。可使用一系列的精油，包括，但不限于，柠檬草、香草、天竺葵，和绿茶。
实施例10. 本公开内容的含有维生素C的绿茶凝胶
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图92是概述本公开内容的咖啡因凝胶的实施方案的表。具有2%丝和100mg L-抗坏血酸/15 mL溶液的丝凝胶用加入50 mg咖啡因/15mL溶液创建。凝胶具有标准L-抗坏血酸凝胶的确切外观。
实施例11. 本公开内容的含有维生素C的防腐剂凝胶
图93是概述本公开内容的防腐剂凝胶的实施方案的表。丝凝胶用添加防腐剂和螯合剂的标准2%丝溶液和100mg L-抗坏血酸/15 mL溶液浇注。加入的防腐剂是Kinetic的1.5%的Verstatil SL (水、乙酰丙酸钠、山梨酸钾)，螯合剂是Kinetic的0.1%的Dermofeel-PA3 (植酸钠)。添加防腐剂延长凝胶化时间至7天。与L-抗坏血酸和抗坏血酸-2-葡糖苷凝胶比较，观察凝胶的变色和完整性。
实施例12. 本公开内容的化学去角质剂
研究的主要变量是创建所需pH的丝溶液所需的乳酸和/或乙醇酸浓度。为确定丝浓度和pH之间的关系，2%丝溶液(60分钟沸腾，25kDA)用乙醇酸和乳酸滴定并用pH试纸条测定pH。见以下滴定/下面的配方：
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至胶凝的时间：3天
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至胶凝的时间：>5天
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至胶凝的时间：3天
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至胶凝的时间：>5天
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至胶凝的时间：3天
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本公开内容的去角质剂可具有范围从约0.5%至约8%的%丝。本公开内容的去角质剂的pH可用不同量的乳酸和乙醇酸调整。去角质剂也可仅用乳酸或仅用乙醇酸制备。本公开内容的去角质剂可以是清澈/白色的。本公开内容的去角质剂可具有容易展开和被皮肤吸收的凝胶稠度。本公开内容的去角质剂不会出现棕褐色或改变颜色。
在一实施方案中，本公开内容的化学去角质剂可每周应用以展现健康的、有活力的皮肤。在一实施方案中，本公开内容的化学去角质剂可每周应用以减少细纹。在一实施方案中，本公开内容的化学去角质剂可每周应用以紧致皮肤。
每个制剂(滴定后，如果适用)作为液体剂和作为凝胶剂应用并观察外观和感觉。在几分钟的应用后，pH=4的去角质剂(乳酸去角质剂2、乙醇酸去角质剂2)导致最小灼烧感，而pH=~2的去角质剂(乳酸去角质剂1、乙醇酸去角质剂1、乳酸/乙醇酸去角质剂)引起稍稍更强的灼烧感。感觉到液体剂和凝胶剂之间灼烧程度的差别很小，除了在凝胶形式中灼烧感觉更加延迟。PH在凝胶形式中维持并使用pH试纸条证实。
乙醇酸和乳酸二者均为α羟基酸(AHA’s)，其在为表面去角质(最外皮肤层去角质)最常用的去角质剂。化学去角质剂意欲以受控的方式燃烧皮肤的顶层，以清除表面的皮肤层和死亡的皮肤以改进外观。由于不利反应的低风险和高度控制的强度(控制pH和施用的时间)，AHAs在化学去角质剂中是常见的。乙醇酸是最常使用的并具有非常小的分子大小，能够深度渗透进入表皮。乳酸是另一种常用的AHA，并由于其较大的分子大小，提供一种伴有较高控制的更温和的去角质剂。本领域已知的降低pH和为物理鳞片样脱落的任何数目的化学品可被用来代替AHAs。
实施例13. 本公开内容的保湿精华液
变量包括：在溶液中的丝浓度，HA浓度，维生素C的加入，和精华液制备方法。表32是评价样品的表：
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在一实施方案中，本公开内容的保湿精华液保护皮肤并用丝纤蛋白-基片段蛋白的能力锁住水分。在一实施方案中，本公开内容的保湿精华液传递水分以供一整天使用浓缩透明质酸的立即和长期水合作用。一系列的精油可用于本公开内容的保湿精华液，包括，但不限于，柠檬草、香草、天竺葵，和绿茶。在一实施方案中，一或两滴本公开内容的保湿精华液可使脸和颈光滑。在一实施方案中，本公开内容的保湿精华液包含水、水性丝纤蛋白-基片段溶液、透明质酸，和柠檬草油。在一实施方案中，本公开内容的保湿精华液中的丝纤蛋白-基片段蛋白具有稳定和保护皮肤同时锁住水分的能力，全部不使用苛刻的化学防腐剂或合成添加剂。在一实施方案中，本公开内容的保湿精华液中的透明质酸营养皮肤并为持久的水合作用传递水分。在一实施方案中，本公开内容的保湿精华液中的柠檬草精油产生抗氧化剂和支持皮肤再生的抗炎特性。在一实施方案中，本公开内容的保湿精华液具有约6.0的pH。
丝纤蛋白-基片段溶液
由于丝纤蛋白-基片段溶液是含水的且能够捕获和传递小分子，该溶液能够为了水合作用传递水和吸湿HA分子至皮肤。对溶液中浓度范围从0.5%-6.0%的丝纤蛋白-基片段组合物测试了可行性和产品结果。发现测试的所有浓度都是可行的。
透明质酸
透明质酸(透明质酸钠)由于其吸湿特性和促进软化、滋润皮肤的能力，而作为保湿精华液的成分被测试。对溶液中浓度范围从0.5%-10.0%的透明质酸测试了可行性和产品结果。发现测试的所有浓度，除了10.0%外，都是可行的。可行性基于溶解透明质酸的能力测定。
维生素C及其衍生物
维生素C (L-抗坏血酸)作为保湿精华液的成分被测试。初始维生素C样品成为凝胶和液体的非-均匀混合物。使用维生素C的随访试验导致一种均匀的、白色不透明非-粘性液体，其不能由皮肤快速吸收。在一实施方案中，不容易引起凝胶化的维生素C衍生物，如抗坏血酸磷酸酯钠，可被添加至不再是可溶的浓度(例如，0%至约40%)。在一实施方案中，可加入20%抗坏血酸磷酸酯钠。引起凝胶化的维生素C选项(L-抗坏血酸和抗坏血酸葡糖苷)可以抑制凝胶化的高浓度(例如大于约10%至最多约50%)加入。
精华液创建方法
初始精华液通过加入HA至丝纤蛋白-基片段溶液中，接着搅拌来创建。HA似乎粘在一起且在用力搅拌时才溶解。然后改变混合方法以使HA首先溶于水，然后立即用来稀释高浓度丝纤蛋白-基片段溶液(>4%)至所需浓度。生成的精华液是更均匀的且具有理想的光滑、澄清的外观和感觉。在应用于皮肤时，短暂地出现可被擦入皮肤的白色残留物。在一种备选方法中，通过使HA溶于水并使静置1天直至观察到完全溶解来创建制剂。然后HA和水溶液被用来将高浓度丝纤蛋白-基片段溶液稀释至所需浓度。生成的精华液是清澈、柔滑、均匀的且当应用时仅有极少的至没有白色残留物留下。
实施例14. 本公开内容的UV保湿精华液
测试的变量包括：HA浓度、氧化锌浓度、二氧化钛浓度、加入维生素C，和精华液制备方法。
图94A-94C是概述具有不同添加剂和浓度的适合防紫外线辐射(UV)的组分的、本公开内容的化妆品精华液的实施方案的表。表33提供本公开内容的含有维生素C的保湿精华液的实施方案。
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本公开内容的精华液可用从约0.25%至约10%的透明质酸钠(增加%导致更粘性的精华液)制得。0.5%至约10%丝溶液可被用来制备本公开内容的精华液。本公开内容的精华液可以是清澈的并具有黄色色彩。本公开内容的精华液可具有pH=6。本公开内容的精华液可具有轻松涂擦而无残留物的润滑质地。
HA的浓度：
透明质酸钠由于其吸湿特性和在化妆品用产品促进皮肤的水合作用中的广为接受的用途，而作为UV丝精华液中的成分被测试。测试了1%、2.5%和5%的HA溶液。随着不断增加的HA %，精华液变得更加粘稠和凝胶状。由于UV添加剂(氧化锌、二氧化钛)不溶于水并且必须是被分散的这一事实，1% HA对于UV精华液是不可行的。1% HA没有足够分散的粘性而UV添加剂沉淀出来。基于优选的感觉、质地和粘度，2.5%给出最佳的稠度并且能够分散UV添加剂。5%是非常稠厚的粘性精华液。
矿物质过滤料：氧化锌和二氧化钛的浓度：
氧化锌和二氧化钛被探索作为被认为是安全的UV添加剂。这些添加剂在机理上通过在皮肤上形成物理反射屏障避免UV辐射。两者均不溶于水，而对于本水性溶液而言必须是可分散的。氧化锌浓度的变化为从2.5%、3.75%、5%、5.625%、10%、12%和15%不等。二氧化钛浓度的变化为从1.25%、1.875%、3%、5%和10%不等。增加UV添加剂的浓度导致白色残留物的稍微增加和添加剂的分散程度不定，然而如果混合性足够好，作用可以忽略不计。将氧化锌和二氧化钛一起混合到精华液中以获得广谱保护。氧化锌是能够抵御长和短UV A和UV B射线的广谱UV添加剂。然而二氧化钛在UV B防护方面更好并且为最佳广谱保护经常添加氧化锌。组合包括3.75%/1.25% ZnO/TiO2、5.625%/1.875% ZnO/TiO2、12%/3% ZnO/TiO2、15%/5%ZnO/TiO2。3.75%/1.25% ZnO/TiO2导致spf 5和5.625%/1.875% ZnO/TiO2产生spf 8。
维生素C：
抗坏血酸磷酸酯钠被用作维生素C源。创建具有维生素C浓度等于丝凝胶中的维生素C浓度(0.67%)的制剂。也创建具有可溶于水的20%抗坏血酸磷酸酯钠的制剂。
精华液制备：
维生素C (抗坏血酸磷酸酯钠)必须首先溶解于水。然后将透明质酸钠加入水中，剧烈混合并使之完全溶解。结果是粘性液体(取决于HA %)。HA溶液的粘度允许氧化锌和二氧化钛的均匀分散，因此HA必须在加入UV添加剂之前混合。然后将氧化锌和二氧化钛加入溶液并用电动搅拌器大力混合。然后加入丝溶液并混合至完成精华液制剂。
化学过滤料：
本公开内容的UV精华液可包含这些活性化学过滤料成分的一种，或两种或更多种的组合：氧苯酮、阿伏苯宗、辛水杨酯、奥克立林、胡莫柳酯和octinoxate。本公开内容的UV精华液也可包含氧化锌与化学过滤料的组合。
在一实施方案中，本公开内容的UV精华液可在所有皮肤暴露于太阳的太阳照射之前约15分钟应用，并可至少每2小时再次应用。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液包含水、氧化锌、透明质酸钠、二氧化钛、丝，和维生素C或维生素C衍生物如抗坏血酸磷酸酯钠。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液保护皮肤并用丝蛋白的性能锁住水分。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液改善肤色、促进胶原蛋白的生产并借助维生素C的抗氧化能力最大限度地减少皱纹和细纹外貌。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液传递水分以供一整天使用浓缩透明质酸的立即和长期水合作用。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液用氧化锌和二氧化钛联合作用，帮助防止晒伤。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液被设计来保护、保湿，和减少细纹，同时保护皮肤屏蔽来自UVA和UVB的强烈射线。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液中的丝蛋白稳定和保护皮肤，同时锁住水分，而不使用苛刻的化学防腐剂或合成添加剂。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液中的维生素C/衍生物用作支持皮肤再生的强力抗氧化剂。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液中的透明质酸钠营养皮肤并为持久保湿传递水分。在一实施方案中，本公开内容的UV精华液中的氧化锌和二氧化钛保护皮肤屏蔽来自UVA和UVB的有害射线。本公开内容的UV精华液中的丝蛋白稳定基质保护活性成分避免空气，以传递它们的全部益处而不使用苛刻的化学或防腐剂。丝基质也锁住皮肤内水分，增进透明质酸钠的保湿作用。
实施例15. 本公开内容的暗斑薄膜
为减少暗斑外观，高浓度的维生素C对于逆转黑色素的过度生产可能是必要的。在这个实施例中，研究了40%维生素C (1.5:1丝与维生素C)。薄膜的尺寸和形状可被制备得以适合目标区域，例如符合小的直径1英寸(2.54cm)的圆形薄膜。
不同维生素C浓度(0-50%)的本公开内容的暗斑薄膜，或类似的薄膜可作为透明伤口贴(hydrofilm)应用。皮肤可用水湿润。然后将薄膜施用于湿润的区域。然后将水施用于薄膜的顶部表面以将其转变为凝胶。所述凝胶然后可涂布并温和地按摩进入应用区域。表34提供本公开内容的透明伤口贴的实施方案的细节(无不溶性边界)。
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本公开内容的薄膜可用%丝和体积的不同组合制得，以生产具有3mg/cm^2-10mg/cm^2丝量的薄膜。本公开内容的薄膜可用从约1%至约50% l-抗坏血酸制得。本公开内容的薄膜是可溶于水的(不溶性边界通过冲孔出薄膜的中心而除去).本公开内容的薄膜可用水粘附至皮肤。一旦应用水，则本公开内容的薄膜可在皮肤上展开。当干燥设备的湿度是16-40%和低于实验室的湿度时，本公开内容的薄膜可被干燥。本公开内容的薄膜可以是澄清/透明的。
在一实施方案中，本公开内容的暗斑薄膜包含水、丝，和维生素C (L-抗坏血酸)。在一实施方案中，本公开内容的暗斑薄膜包含40%维生素C。在一实施方案中，本公开内容的暗斑薄膜通过每日使用，减少目标区域的皮肤色素沉着并使肤色均匀。维生素C在连续应用时可抑制来自色素生成细胞(称为黑素细胞)的色素转移至皮肤表面细胞。在一实施方案中，本公开内容的暗斑薄膜可施用以清洁、湿润皮肤20分钟。在一实施方案中，另外的水可施用于粘附的薄膜。本公开内容的暗斑薄膜中的丝蛋白稳定基质保护活性成分避免空气，以传递它们的全部益处，而不使用苛刻的化学剂或防腐剂，如对羟基苯甲酸酯和邻苯二甲酸酯。因此，本公开内容的暗斑薄膜是不含对羟基苯甲酸酯和邻苯二甲酸酯的。表35提供本公开内容的薄膜的实施方案的细节。
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本公开内容的2.1%丝溶液(0.321mL/cm^2)-本公开内容的2.4%丝溶液(0.282mL/cm^2)可被用来创建具有34mg丝(6.7mg/cm^2)的本公开内容的暗斑薄膜。在一实施方案中，使用本公开内容的2.2%丝溶液(60分钟沸腾，25kDA)生产本公开内容的薄膜。%丝和溶液体积可以改变以生产等效的薄膜。本公开内容的暗斑薄膜可用%丝和体积的不同组合制得，以生产具有3mg/cm^2-10mg/cm^2丝量的薄膜。本公开内容的暗斑薄膜可用从约15至约50% l-抗坏血酸制得。本公开内容的暗斑薄膜是可溶于水的(不溶性边界)。本公开内容的暗斑薄膜是澄清/透明的。当应用水时，本公开内容的暗斑薄膜的pH=3。本公开内容的暗斑薄膜可用水粘附至皮肤。当干燥设备的湿度是16-40%和低于实验室的湿度时，本公开内容的暗斑薄膜可被干燥。
实施例16. 本公开内容的高浓度维生素C凝胶
高浓度维生素C凝胶被追高至最多20%。维生素C类型、维生素C浓度、%丝和pH是变化的，以增加凝胶中的维生素C的量。
图95A-95C是概述本公开内容的高浓度维生素C凝胶的实施方案的表。最高浓度的维生素C对比凝胶是在12天后具有3.8%丝溶液的15%抗坏血酸2葡糖苷凝胶。具有2、3和3.8%丝的5和10 %抗坏血酸-2-葡糖苷制剂全部胶凝。对于每组的%维生素C，凝胶化首先发生在3.8%丝中，接着是3%而最后是2%。似乎在维生素C浓度、丝浓度和凝胶化之间有关系。如果溶液具有相对于丝的太多的维生素C，凝胶化将得以防止。因此，为生产高浓度维生素C凝胶，需要较高浓度的丝。一种样品以5.5%丝和20%维生素C铸造，但不发生凝胶化，而较高的%丝可能是必要的。样品也用乳酸调节至pH 2，以帮助诱导在含有10或20%维生素C的3%丝溶液中的凝胶化，然而在12天内未发生凝胶化。
实施例17. 本公开内容的凝胶的微生物学研究
在化妆品中污染微生物可导致产品的变质，当致病时，它们对于全球消费者代表一个严重的卫生风险。美国药典(USP)微生物限度检查提供用于测定细菌、酵母和霉菌的总微生物计数的几种方法。本公开内容的各种凝胶被测试以评价在它们使用的3种不同状态(完整的、使用中的、最终产品)中的可能的微生物污染。图96是概述这样的测试结果的表。
对来自瓶子的凝胶样品和水样品分析需氧菌以及酵母和霉菌的CFU/mL (每毫升菌落形成单位)的测定。在23±3℃的暴露温度下，使样品暴露于用于细菌的胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)和用于真菌(酵母/霉菌)的马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)的生长培养基。样品于30.0± 2℃温育3天(细菌)和5天(真菌)。然后观察样品的菌落形成单位/mL的测定结果。
该分析法对于细菌和真菌的检测限度是10 CFU/ml或g，而< 10的值表示在样品中未能检测到微生物。> 1.00E+04的值表示在稀释计数板中微生物菌落是多到难以计数。
实施例18. 本公开内容的UV丝泡沫和液体
在一实施方案中，维生素C衍生物抗坏血酸磷酸酯钠(DSM)溶于水中。然后将透明质酸钠(“HA”)加入水中，强力搅拌，并使之完全溶解。结果是粘性液体(取决于HA %)。HA溶液的粘度允许氧化锌和二氧化钛的均匀分散，因此在加入UV添加剂之前，通常混合HA。将氧化锌和二氧化钛加入HA溶液并强力混合，例如使用电动搅拌器。然后加入60分钟沸腾的(~25 kDa)丝溶液并混合以创建1%丝制剂。
创建两个制剂，而不加入抗坏血酸磷酸酯钠(样品“HU2”和“HU4")。对于样品HU2，加入氧化锌和二氧化钛并用电动搅拌器和搅拌器共混来混合。结果是粘性白色液体(图98和图99)。然后加入丝并用电动搅拌器和搅拌器共混。溶液变成了一种类似于剃须膏的奶油泡沫(图97和图100)。dl-α生育酚醋酸酯形式的维生素E可加入溶液中以恢复可以顺滑的均匀质地应用的粘性液体质地(图98)。随着dl-α生育酚醋酸酯的量的增加，制剂将变得较少泡沫样和更柔滑的液体或洗剂质地。
HU4被分为两个批次：图99，批次2和图100，批次1。第一批次按照与HU2相同的程序并变为一种泡沫。对于HU4的第二批次，加入抗坏血酸磷酸酯钠并在加入任何锌、钛或丝之前溶解。然后通过用电动搅拌器和搅拌器共混加入UV添加剂，创建一种标准白色粘性液体。然后用电动搅拌器和搅拌器加入丝。结果是比通常见到的稍微稠厚的粘性液体。不希望受理论的束缚，似乎添加抗坏血酸磷酸酯钠抑制起泡。不希望受理论的束缚，似乎搅拌，而不是混合或共混，创建一种丝泡沫。
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实施例19. 本公开内容的冻干丝粉末
Figure DEST_PATH_IMAGE066
上述丝溶液通过冻干法除去大部分水并用搅拌器切碎成小碎片而转化为丝粉末。pH用氢氧化钠调节。低分子量丝(~25 kDa)是可溶性的，而高分子量丝(~60 kDa)是不可溶的。
冻干丝粉末对于提高贮存控制范围从10天至10年可能是有利的，这取决于贮藏和装运条件。冻干丝粉末也可用作药学、医学、消费者，和电子市场的原料成分。此外，冻干丝粉末可以在贮存后再悬浮于水、HFIP，或有机溶液中，以创建不同浓度的丝溶液，包括比最初产生的那些更高浓度的溶液。
在一实施方案中，包含1%、3%，和5%重量丝的本公开内容的水性纯丝纤蛋白-基蛋白片段的溶液各自分别地分散到1.8L Lyoguard托盘中。所有3个托盘被置于一个12 ft2冻干机中并进行单次运行。产品用≤ -40℃的货架温度冷冻并保持2小时。然后组合物在-20℃的货架温度下冻干，伴有3小时的缓慢上升并持续20小时，随后在30℃的温度干燥，伴有5小时的缓慢上升并持续约34小时。移去托盘并在环境条件下贮存直至进一步处理。生成的冻干丝片段组合物的每一个能够溶于水性溶剂和有机溶剂中，以重组在0.1 wt%和8 wt%之间的丝片段溶液。不需要加热和混合，但被用来加速溶解速率。所有溶液在环境条件下是货架期稳定的。
在一实施方案中，用30分钟沸腾使用本公开内容的方法制备的本公开内容的水性纯丝纤蛋白-基蛋白片段溶液具有约57 kDa的分子量，约1.6的多分散性，少于500 ppm的无机和有机残留物，和淡琥珀色。
在一实施方案中，用60分钟沸腾使用本公开内容的方法制备的本公开内容的水性纯丝纤蛋白-基蛋白片段溶液具有约25 kDa的分子量，约2.4的多分散性，少于500 ppm的无机和有机残留物，和淡琥珀色。
一种制备具有范围从约6 kDa至约16 kDa的平均重均分子量的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法包括以下步骤：通过加入丝源至沸腾的(100℃)碳酸钠水溶液中约30分钟至约60分钟之间的处理时间使丝源脱胶；从溶液除去丝胶蛋白以生产包含不能检测水平的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；从丝纤蛋白提取物排出溶液；溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，该溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时范围从约60℃至约140℃的起始温度；维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有约140℃的温度的烘箱中至少1小时的时段；从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和制备丝蛋白片段的水性溶液，所述水性溶液包含：具有范围从约6 kDa至约16 kDa的平均重均分子量的片段，和其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约1.5和约3.0之间的多分散性。所述方法还可包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可包含如使用高效液相色谱溴化锂分析法测量的、少于300 ppm的溴化锂残留物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可包含如使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量的、少于100 ppm的碳酸钠残留物。该方法可进一步包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。维生素可以是维生素C或其衍生物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可被冻干。该方法可进一步包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。α羟基酸可选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。该方法可进一步包括将浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸或其盐形式加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种。薄膜可从由该方法生产的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备。薄膜可包含从约1.0 wt. %至约50.0 wt. %的维生素C或其衍生物。该薄膜可具有范围从约2.0 wt. %至约20.0 wt. %的含水量。薄膜可包含从约30.0 wt. %至约99.5 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。凝胶可从由该方法生产的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备。凝胶可包含从约0.5 wt. %至约20.0 wt. %的维生素C或其衍生物。凝胶可具有至少2%的丝含量和至少20%的维生素含量。
一种制备具有范围从约17 kDa至约38 kDa的平均重均分子量的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法，包括以下步骤：加入丝源至沸腾的(100℃)碳酸钠水溶液中约30分钟至约60分钟之间的处理时间，以导致脱胶；从溶液除去丝胶蛋白以生产包含不能检测水平的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；从丝纤蛋白提取物排出溶液；溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，所述溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时范围从约80℃至约140℃的起始温度；维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有范围在约60℃至约100℃之间的温度的干燥烘箱中至少1小时的时段；从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和制备纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含约10 ppm和约300 ppm之间的溴化锂残留物，其中丝蛋白片段的水性溶液包含在约10 ppm和约100 ppm之间的碳酸钠残留物，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含具有范围从约17 kDa至约38kDa的平均重均分子量的片段，和其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约1.5和约3.0之间的多分散性。该方法可进一步包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可包含如使用高效液相色谱溴化锂分析法测量的、少于300ppm的溴化锂残留物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可包含如使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量的、少于100 ppm的碳酸钠残留物。该方法可进一步包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。维生素可以是维生素C或其衍生物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可被冻干。该方法可进一步包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。α羟基酸可选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。该方法可进一步包括将浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸或其盐形式加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种。薄膜可从由该方法生产的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备。薄膜可包含从约1.0 wt. %至约50.0 wt. %的维生素C或其衍生物。薄膜可具有范围从约2.0 wt. %至约20.0 wt. %的含水量。薄膜可包含从约30.0 wt.%至约99.5 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。凝胶可从由该方法生产的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备。凝胶可包含从约0.5 wt. %至约20.0 wt. %的维生素C或其衍生物。凝胶可具有至少2%的丝含量和至少20%的维生素含量。
根据本文举例说明的方面，公开了一种制备具有平均重均分子量范围从约39 kDa至约80 kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法，方法包括以下步骤：加入丝源至沸腾的(100℃)碳酸钠水溶液中约30分钟的处理时间，以导致脱胶；从溶液除去丝胶蛋白以生产包含不能检测水平的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；从丝纤蛋白提取物排出溶液；溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，该溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时范围从约80℃至约140℃的起始温度；维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有范围在约60℃至约100℃之间的温度的干燥烘箱中至少1小时的时段；从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和制备纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约10ppm和约300 ppm之间的溴化锂残留物，在约10 ppm和约100 ppm之间的碳酸钠残留物，具有从约40 kDa至约65 kDa的平均重均分子量范围的片段，和其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在约1.5和约3.0之间的多分散性。该方法可进一步包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可包含如使用高效液相色谱溴化锂分析法测量的、少于300 ppm的溴化锂残留物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可包含如使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量的、少于100 ppm的碳酸钠残留物。该方法可进一步包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。维生素可以是维生素C或其衍生物。纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液可被冻干。该方法可进一步包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。α羟基酸可选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。该方法可进一步包括将浓度约0.5%至约10.0%的透明质酸或其盐形式加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。该方法可进一步包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种。薄膜可从由该方法生产的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备。薄膜可包含从约1.0 wt. %至约50.0 wt. %的维生素C或其衍生物。薄膜可具有范围从约2.0 wt. %至约20.0 wt. %的含水量。薄膜可包含从约30.0 wt. %至约99.5 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。凝胶可从由该方法生产的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备。凝胶可包含从约0.5 wt. %至约20.0wt. %的维生素C或其衍生物。凝胶可具有至少2%的丝含量和至少20%的维生素含量。
本文引用的所有专利、专利申请和公开的参考文献均通过引用以其全文结合到本文中。虽然本公开内容的方法已结合其特定的实施方案进行了描述，但应该理解其能够得到进一步修饰。此外，本申请意欲覆盖本公开内容的方法的任何变量、用法，或修改，包括落入本公开内容的方法所属领域已知的或通常实践的范围内的从本公开内容的此类偏离。

Claims (118)

1.一种组合物，其包含：
具有0% w/w和10.0% w/w之间的丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段，
其中组合物具有范围从6 kDa至16 kDa或从17 kDa至38 kDa或从40 kDa至65 kDa或从39 kDa至80 kDa的平均重均分子量，
其中组合物具有在1.5和3.0之间的多分散性，
其中组合物是基本上均匀的，
其中组合物包含0 ppm至500 ppm之间的无机残留物，
其中组合物包含0 ppm至500 ppm之间的有机残留物，和
其中所述组合物在溶液中达至少10天时，不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化。
2.权利要求1的组合物，其包含在10 ppm和300 ppm之间的溴化锂残留物和10 ppm和100 ppm之间的碳酸钠残留物。
3.权利要求2的组合物，其中溴化锂残留物可使用高效液相色谱溴化锂分析法测量，和碳酸钠残留物可使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量。
4.权利要求1的组合物，其还包含少于10%的水。
5.权利要求1的组合物，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段是从0.1 wt%至30.0 wt%。
6.权利要求1的组合物，其以冻干形式或结构的形式存在。
7.权利要求1的组合物，其以溶液的形式存在。
8.权利要求7的组合物，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段在溶液中是稳定的。
9.权利要求7的组合物，其中溶液是水性溶液。
10.权利要求7的组合物，其中溶液是有机溶液。
11.权利要求1的组合物，其在密封的容器中。
12.权利要求1的组合物，其还包含一种或多种选自以下的分子：生长因子、抗氧化剂、蛋白、维生素、聚合物、核酸、盐、酸、碱、糖胺聚糖、多糖、细胞外基质分子、金属、金属离子、金属氧化物、合成分子、聚酐、细胞、脂肪酸、香料、植物、植物提取物、防腐剂和精油。
13.权利要求1的组合物，其还包含一种或多种选自以下的分子：治疗剂、碳水化合物、生物分子和矿物质。
14.权利要求12或13的组合物，其以溶液的形式存在。
15.权利要求14的组合物，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段在溶液中是稳定的。
16.权利要求12的组合物，其中维生素是维生素C或其衍生物。
17.权利要求12的组合物，其还包含α羟基酸，所述α羟基酸选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。
18.权利要求12的组合物，其还包含浓度0.5%至10.0%的透明质酸或其盐形式。
19.权利要求12的组合物，其还包含氧化锌或二氧化钛的至少一种。
20.权利要求1的组合物，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。
21.权利要求1的组合物，其具有每克少于10个菌落形成单位。
22.一种薄膜，其包含丝蛋白片段组合物，所述组合物包含：
具有0% w/w和10.0% w/w之间的丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段并包含：
范围从6 kDa至16 kDa或从17 kDa至38 kDa或从40 kDa至65 kDa或从39 kDa至80 kDa的平均重均分子量；和
在1.5和3.0之间的多分散性，
其中薄膜具有范围从2.0 wt. %至20.0 wt. %的含水量，
其中薄膜包含0 ppm和500 ppm之间的无机残留物，
其中薄膜包含0 ppm和500 ppm之间的有机残留物，
其中薄膜是足够挠性的，以符合解剖学局部形状，和
其中在形成薄膜之前，所述组合物为溶液，其不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
23.权利要求22的薄膜，其包含1.0%和50.0%之间的晶体蛋白质结构域且当在室温下浸没在水中时为可溶的。
24.权利要求22的薄膜，其包含从30.0 wt. %至99.5 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。
25.权利要求22的薄膜，其具有从1.0至7.0的pH。
26.权利要求22的薄膜，其还包含从0.5 wt. %至2.5 wt. %的咖啡因。
27.权利要求22的薄膜，其还包含从1.0 wt. %至50.0 wt. %的维生素C或其衍生物。
28.权利要求27的薄膜，其中维生素C或其衍生物在薄膜内保持稳定从5天至5年的一段时期。
29.权利要求27的薄膜，其中维生素C或其衍生物在薄膜内是稳定的，这样就导致了维生素C以生物活性形式的释放。
30.权利要求22的薄膜，其还包含一种或多种选自以下的分子：生长因子、抗氧化剂、蛋白聚合物、核酸、盐、酸、碱、糖胺聚糖、多糖、细胞外基质分子、金属、金属离子、金属氧化物、合成分子、聚酐、细胞、脂肪酸、香料、植物、植物提取物、防腐剂和精油。
31.权利要求22的薄膜，其还包含一种或多种选自以下的分子：治疗剂、碳水化合物、生物分子和矿物质。
32.权利要求22的薄膜，其还包含α羟基酸，所述α羟基酸选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。
33.权利要求22的薄膜，其还包含浓度范围从0.5 wt. %至10.0 wt. %的透明质酸或其盐形式。
34.权利要求22的薄膜，其还包含氧化锌或二氧化钛的至少一种。
35.权利要求22的薄膜，其被包装在气密和避光的箔基包装中。
36.权利要求22的薄膜，其被充分设计用于局部应用。
37.权利要求22的薄膜，其被充分设计用于在体内给予。
38.权利要求22的薄膜，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。
39.一种减少细纹和皱纹的非治疗性方法，其包括：
每天将具有权利要求22的特性的薄膜施用于人类皮肤至少一周的时段；和
观察人类皮肤上细纹和皱纹的减少。
40.一种凝胶，其包含丝蛋白片段组合物，所述组合物包含：
具有0% w/w和10.0% w/w之间的丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段并包含：
范围从6 kDa至16 kDa或从17 kDa至38 kDa或从40 kDa至65 kDa或从39 kDa至80 kDa的平均重均分子量；和
在1.5和3.0之间的多分散性；和
从20 wt. %至 99.9 wt. %的水，
其中凝胶包含0 ppm和500 ppm之间的无机残留物，
其中凝胶包含0 ppm和500 ppm之间的有机残留物，和
其中在胶凝之前，所述组合物为溶液，其不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
41.权利要求40的凝胶，其包含1.0%和50.0%之间的晶体蛋白质结构域。
42.权利要求40的凝胶，其包含从0.1 wt. %至6.0 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。
43.权利要求40的凝胶，其具有从1.0至7.0的pH。
44.权利要求40的凝胶，其还包含从0.5 wt. %至20.0 wt. %的维生素C或其衍生物。
45.权利要求44的凝胶，其中维生素C或其衍生物在凝胶中保持稳定从5天至5年的一段时间。
46.权利要求44的凝胶，其中维生素C或其衍生物在凝胶中是稳定的，这样就导致了维生素C以生物活性形式的释放。
47.权利要求40的凝胶，其还包含选自维生素E、迷迭香油、玫瑰油、柠檬汁、柠檬草油和咖啡因的添加剂。
48.权利要求40的凝胶，其被包装在气密容器中。
49.权利要求40的凝胶，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。
50.权利要求40的凝胶，其具有每毫升少于10个菌落形成单位。
51.一种使人类皮肤光滑和年轻化的非治疗性方法，其包括：
每日将具有权利要求40的特性的凝胶施用于人类皮肤至少一周的时段；和
观察皮肤纹理的改善。
52.一种精华液，其包含丝蛋白片段组合物，所述组合物包含：
具有0% w/w和10.0% w/w之间的丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段并包含：
范围从17 kDa至38 kDa的平均重均分子量；和
在1.5和3.0之间的多分散性；和
从0.5%至10.0%的透明质酸或其盐形式，
其中精华液包含0 ppm和500 ppm之间的无机残留物，
其中精华液包含0 ppm和500 ppm之间的有机残留物，和
其中在形成精华液之前，所述组合物为溶液，其不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
53.权利要求52的精华液，其包含1.0%和50.0%之间的晶体蛋白质结构域。
54.权利要求52的精华液，其包含从0.1 wt. %至6.0 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。
55.权利要求52的精华液，其具有从1.0至7.0的pH。
56.权利要求52的精华液，其还包含选自维生素E、迷迭香油、玫瑰油、柠檬汁、柠檬草油、香草、天竺葵和绿茶的添加剂。
57.权利要求52的精华液，其还包含从0.5 wt. %至30.0 wt. %的维生素C或其衍生物。
58.权利要求57的精华液，其中维生素C或其衍生物在精华液内保持稳定从5天至5年的一段时间。
59.权利要求57的精华液，其中维生素C或其衍生物在精华液内是稳定的，这样就导致了维生素C以生物活性形式的释放。
60.权利要求52的精华液，其被包装在气密容器中。
61.权利要求52的精华液，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。
62.一种使人类皮肤保湿的非治疗性方法，其包括：
每日将具有权利要求52的特性的精华液施用于人类皮肤至少一周的时段；和
观察皮肤水合作用的改善。
63.一种去皮肤角质化组合物，其包含丝蛋白片段组合物，所述组合物包含：
与至少一种去皮肤角质剂组合的具有0% w/w和10.0% w/w之间的丝胶蛋白的纯丝纤蛋白-基蛋白片段，所述片段具有范围从17 kDa至38 kDa的平均重均分子量和在1.5和3.0之间的多分散性，
其中在形成去皮肤角质化组合物之前，所述组合物为溶液，其不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
64.权利要求63的去皮肤角质化组合物，其中至少一种去皮肤角质剂选自乙醇酸和乳酸。
65.权利要求63的去皮肤角质化组合物，其包含1.0%和50.0%之间的晶体蛋白质结构域。
66.权利要求63的去皮肤角质化组合物，其具有从1.0至6.0的pH。
67.权利要求63的去皮肤角质化组合物，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段是低过敏原性的。
68.一种制备具有范围从6 kDa至16 kDa的平均重均分子量的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法，该方法包括：
通过加入丝源至沸腾的碳酸钠水溶液中30分钟至60分钟之间的处理时间使丝源脱胶；
从溶液除去丝胶蛋白以生产具有0% w/w和10.0% w/w之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；
从丝纤蛋白提取物排出溶液；
溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，所述溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时范围从60℃至140℃的起始温度；
维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有140℃的温度的烘箱中至少1小时；
从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和
制备纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在0 ppm和300 ppm之间的溴化锂残留物，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在0 ppm和100 ppm之间的碳酸钠残留物，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液具有范围从6 kDa至16 kDa的平均重均分子量，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在1.0和3.0之间的多分散性，和
其中所述溶液不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
69.权利要求68的方法，其还包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物。
70.权利要求68的方法，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含使用高效液相色谱溴化锂分析法测量的、少于300 ppm的溴化锂残留物。
71.权利要求68的方法，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量的、少于100 ppm的碳酸钠残留物。
72.权利要求68的方法，其还包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
73.权利要求68的方法，其还包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
74.权利要求68的方法，其还包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
75.权利要求74的方法，其中维生素是维生素C或其衍生物。
76.权利要求68的方法，其还包括冻干纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液。
77.权利要求68的方法，其还包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
78.权利要求77的方法，其中α羟基酸选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。
79.权利要求77的方法，其还包括将浓度0.5%至10.0%的透明质酸或其盐形式加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
80.权利要求68的方法，其还包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种。
81.一种薄膜，其从由权利要求68的方法制备并包含从1.0 wt. %至50.0 wt. %的维生素C或其衍生物的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备，其中该化妆品薄膜具有范围从2.0 wt. %至20.0 wt. %的含水量，和
其中所述水性溶液在制备薄膜之前不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
82.权利要求81的薄膜，其包含从30.0 wt. %至99.5 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。
83.一种凝胶，其从由权利要求68的方法制备并包含从0.5 wt. %至20.0 wt. %的维生素C或其衍生物的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备，和
其中所述水性溶液在制备凝胶之前不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
84.权利要求83的凝胶，其具有至少2%的丝含量和至少20%的维生素含量。
85.一种制备具有范围从17 kDa至38 kDa的平均重均分子量的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法，该方法包括：
加入丝源至沸腾的碳酸钠水溶液中处理30分钟和60分钟之间的时间，以导致脱胶；
从溶液除去丝胶蛋白以生产具有0% w/w和10.0% w/w之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；
从丝纤蛋白提取物排出溶液；
溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，该溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时，范围从80℃至140℃的起始温度；
维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有60℃至100℃之间的范围的温度的干燥烘箱中至少1小时的时段；
从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和
制备纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在0 ppm和300 ppm之间的溴化锂残留物，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在0 ppm和100 ppm之间的碳酸钠残留物，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含具有范围从17 kDa至38 kDa的平均重均分子量的片段，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在1.0和3.0之间的多分散性，和
其中所述水性溶液不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
86.权利要求85的方法，其还包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物。
87.权利要求85的方法，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含使用高效液相色谱溴化锂分析法测量的、少于300 ppm的溴化锂残留物。
88.权利要求85的方法，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量的、少于100 ppm的碳酸钠残留物。
89.权利要求85的方法，其还包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
90.权利要求85的方法，其还包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入丝纯丝纤蛋白-基片段的水性溶液中。
91.权利要求85的方法，其还包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
92.权利要求85的方法，其中维生素是维生素C或其衍生物。
93.权利要求85的方法，其还包括冻干纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液。
94.权利要求85的方法，其还包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
95.权利要求94的方法，其中α羟基酸选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。
96.权利要求83的方法，其还包括将浓度0.5%至10.0%的透明质酸或其盐形式加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
97.权利要求83的方法，其还包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种。
98.一种薄膜，其从由权利要求85的方法制备并包含从1.0 wt. %至50.0 wt. %的维生素C或其衍生物的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备，其中该化妆品薄膜具有范围从2.0 wt. %至20.0 wt. %的含水量，和
其中所述水性溶液在制备薄膜之前不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
99.权利要求98的薄膜，其包含从30.0 wt. %至99.5 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。
100.一种凝胶，其从由权利要求85的方法制备并包含从0.5 wt. %至20.0 wt. %的维生素C或其衍生物的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备，和
其中所述水性溶液在制备凝胶之前不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
101.权利要求100的凝胶，其具有至少2%的丝含量和至少20%的维生素含量。
102.一种制备具有平均重均分子量范围从39 kDa至80 kDa的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液的方法，该方法包括：
加入丝源至沸腾的碳酸钠水溶液中30分钟的处理时间，以导致脱胶；
从溶液除去丝胶蛋白以生产具有0% w/w和10.0% w/w之间的丝胶蛋白的丝纤蛋白提取物；
从丝纤蛋白提取物排出溶液；
溶解丝纤蛋白提取物于溴化锂溶液中，所述溶液具有在将丝纤蛋白提取物放置在溴化锂溶液中时范围从80℃至140℃的起始温度；
维持丝纤蛋白-溴化锂溶液在具有范围在60℃至100℃之间的温度的干燥烘箱中至少1小时的时段；
从丝纤蛋白提取物除去溴化锂；和
制备纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在0 ppm和300 ppm之间的溴化锂残留物，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在0 ppm和100 ppm之间的碳酸钠残留物，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含具有平均重均分子量范围从39 kDa至80kDa的片段，
其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含在1.0和3.0之间的多分散性，和
其中所述水性溶液不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
103.权利要求102的方法，其还包括在溶解步骤之前干燥丝纤蛋白提取物。
104.权利要求102的方法，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含使用高效液相色谱溴化锂分析法测量的、少于300 ppm的溴化锂残留物。
105.权利要求102的方法，其中纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液包含使用高效液相色谱碳酸钠分析法测量的、少于100 ppm的碳酸钠残留物。
106.权利要求102的方法，其还包括将治疗剂加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
107.权利要求102的方法，其还包括将选自抗氧化剂或酶中的一种的分子加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
108.权利要求102的方法，其还包括将维生素加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
109.权利要求108的方法，其中维生素是维生素C或其衍生物。
110.权利要求102的方法，其还包括冻干纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液。
111.权利要求102的方法，其还包括将α羟基酸加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
112.权利要求111的方法，其中α羟基酸选自乙醇酸、乳酸、酒石酸和柠檬酸。
113.权利要求102的方法，其还包括将浓度0.5%至10.0%的透明质酸或其盐形式加入纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液中。
114.权利要求102的方法，其还包括加入氧化锌或二氧化钛的至少一种。
115.一种薄膜，其从由权利要求102的方法制备并包含从1.0 wt. %至50.0 wt. %的维生素C或其衍生物的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备，其中该化妆品薄膜具有范围从2.0 wt. %至20.0 wt. %的含水量，和
其中所述水性溶液在制备薄膜之前不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
116.权利要求115的薄膜，其包含从30.0 wt. %至99.5 wt. %的纯丝纤蛋白-基蛋白片段。
117.一种凝胶，其从由权利要求102的方法制备并包含从0.5 wt. %至20.0 wt. %的维生素C或其衍生物的纯丝纤蛋白-基蛋白片段的水性溶液制备，和
其中所述水性溶液在制备凝胶之前不自发地或渐进地胶凝，并且颜色或浊度没有可见的变化达至少10天。
118.权利要求117的凝胶，其具有至少2%的丝含量和至少20%的维生素含量。
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