CN105567612A - 一种园林废弃物降复合解菌剂制备及应用 - Google Patents
一种园林废弃物降复合解菌剂制备及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105567612A CN105567612A CN201610126120.5A CN201610126120A CN105567612A CN 105567612 A CN105567612 A CN 105567612A CN 201610126120 A CN201610126120 A CN 201610126120A CN 105567612 A CN105567612 A CN 105567612A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- streptomycete
- bacterium
- streptomyces
- composite fungus
- fungus agent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000010921 garden waste Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 15
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 title abstract 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 6
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 54
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 48
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 35
- 238000009264 composting Methods 0.000 claims abstract description 32
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims abstract description 29
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims abstract description 26
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims abstract description 26
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims abstract description 26
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims abstract description 25
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 claims abstract description 13
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 claims abstract description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 11
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 claims description 36
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 32
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 31
- 239000002361 compost Substances 0.000 claims description 30
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 16
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 claims description 15
- 241000193764 Brevibacillus brevis Species 0.000 claims description 12
- 241000187091 Streptomyces diastaticus Species 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 9
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims description 6
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 5
- 241000191775 Brevibacillus borstelensis Species 0.000 claims description 4
- 241000187761 Streptomyces albidoflavus Species 0.000 claims description 4
- 241000607101 Streptomyces thermocarboxydus Species 0.000 claims description 4
- 241000178287 Streptomyces thermodiastaticus Species 0.000 claims description 4
- 241000187094 Streptomyces thermoviolaceus Species 0.000 claims description 4
- 241000187177 Streptomyces thermovulgaris Species 0.000 claims description 4
- CKUAXEQHGKSLHN-UHFFFAOYSA-N [C].[N] Chemical compound [C].[N] CKUAXEQHGKSLHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 101000610620 Homo sapiens Putative serine protease 29 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100040345 Putative serine protease 29 Human genes 0.000 claims description 3
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 claims description 3
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 3
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 28
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 26
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 3
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 abstract 8
- 241000555281 Brevibacillus Species 0.000 abstract 2
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 abstract 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 abstract 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 abstract 1
- 241000946725 Streptomyces vulgaris Species 0.000 abstract 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 abstract 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 22
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 9
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 5
- 208000035238 familial hemiplegic 1 migraine Diseases 0.000 description 5
- 208000013779 familial hemiplegic migraine 1 Diseases 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 4
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- 239000002420 orchard Substances 0.000 description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 3
- 238000013138 pruning Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 108010046845 tryptones Proteins 0.000 description 2
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 2
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 2
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229920002488 Hemicellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000002154 agricultural waste Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000003413 degradative effect Effects 0.000 description 1
- 239000006160 differential media Substances 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- 230000007269 microbial metabolism Effects 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F17/00—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F3/00—Fertilisers from human or animal excrements, e.g. manure
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W30/00—Technologies for solid waste management
- Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fertilizers (AREA)
Abstract
本发明公开了一种具有在高温条件下能高效降解纤维素功能的复合菌剂，包括五种放线菌：高温紫链霉菌(<i>Streptomyces</i><i>？thermoviolaceus</i>)，嗜热淀粉酶链霉菌(<i>Streptomyces</i><i>？thermodiastaticus</i>)，嗜热一氧化碳链霉菌(<i>Streptomyces</i><i>？thermocarboxydus</i>)，微白黄链霉菌(<i>Streptomyces</i><i>？albidoflavus</i>)和热普通链霉菌(<i>Streptomyces</i><i>？thermovulgaris</i>)，及一种细菌：波茨坦短芽孢杆菌(<i>Brevibacillus</i><i>？borstelensis</i>)。本发明解决了由于纤维素的难降解限制造成园林废弃物堆肥化速度慢、周期长的问题，可在堆肥过程中使纤维素降解加速，缩短发酵周期，提高转化效率，在园林废弃物堆肥化处理及资源化利用等方面具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于环境生物技术领域，具体涉及一种园林废弃物高温降解纤维素的复合菌剂的制作备及其应用。
背景技术
园林废弃物指园林植物自然凋落或人工修剪所产生的枯枝、落叶、草屑、残花、树木与灌木剪枝及其它植物残体等，主要成分为难降解的纤维素和半纤维素。近年来，我国园林废弃物每年8%-10%的速度递增，给城市绿色化进程带来了巨大阻力，目前我国处理园林废弃物的方式主要为焚烧和填满，这两种处理方式不仅浪费了可再生资源还造成了严重的环境污染。利用生物堆肥降解园林废弃物是目前最为绿色环保、无害的方法。
园林废弃物中含有大量的木质素、纤维素等难降解的物质，导致堆肥效率低、周期长，大大限制了园林废弃物的再利用价值。仅靠自身堆肥发酵，是一个长期且较难实现的（BernabéG.A.,KobelnikM.,AlmeidaS.,etal.Thermalbehaviorofligninandcellulosefromwastecompostingprocess．JournalofThermalAnalysisandCalorimetry,2013,111(1):589-595.）。堆肥中园林废弃物的降解是在微生物代谢过程中产生的一系列酶的共同作用下完成的。所以接种外源降解纤维素的菌株或菌剂在堆肥进程中显得尤为重要。纤维素降解菌能完全水解纤维素，自然界中，纤维素主要是被微生物降解，主要是细菌、真菌和放线菌。真菌主要在中温条件下，酶活最大，如木霉、青霉属、曲霉属、根霉属等。细菌和放线菌的研究和应用均较少。堆肥过程中纤维素降解主要发生在高温期，而真菌主要在中温条件下，酶活最大，随着堆肥过程温度的上升，真菌活菌数量及其产生的酶活性大大降低，这就限制了产纤维素酶霉菌在堆肥中的利用。耐高温纤维素降解菌的筛选和应用是解决上述问题的有效措施。很多纤维素降解菌都是针对玉米秸秆、稻草、麦秸等农业废弃物，很少有专门针对园林废弃物纤维素材料的降解菌的筛选和利用研究。中国专利申请“一株高温纤维素降解菌及其应用”（专利申请号：201410018582.6）公布了一株从园林废弃物高温期堆肥样品中分离的高温纤维素降解菌地芽孢杆菌，纤维素酶活性仅为7.8U/ml，该菌为细菌。关于从园林废弃物堆肥中分离耐高温纤维素降解放线菌的报道较少。
有观点认为单一菌株与混合菌剂相比，纤维素酶活低很多。因为纤维素酶是一系列酶系共同作用的结果（MartinezAT,SPeranzaM,Ruiz-DuenasFJ,etal.Biodegradationoflignocellulosics:microbial,chemical,andenzymaticaspectsofthefungalattackoflignin[J].IntMicrobiol,2005,8(3):195-204.）。史玉英（史玉英,沈其荣.纤维素分解菌群的分离和筛选[J].南京农业大学学报.1996,19(3):59-62.）等最早把筛选到的纤维素降解菌混合培养，并对单一菌株和混合菌株的酶活进行了比较，结果混合菌株纤维素酶或比任何一个单一菌株都要高；崔宗均等（崔宗均,李美丹,朴哲,等.一组高效稳定纤维素分解菌复合系MC1的筛选及功能[J].环境科学,2002,23(3):36-39.）在前人研究的基础上首次把酸碱菌株进行混合，得到pH在适宜范围内的混合菌株。上述学者的研究表明，几种高效纤维素降解菌株混合培养所产生的纤维素酶活力要比单一菌株酶活高。
基于此，本发明通过对园林废弃物堆肥高温期样品进行富集培养，筛选出一系列高温微生物，主要是高温放线菌和耐高温细菌，并将其混合制作成腐熟剂，接种于以园林废弃物为主要材料的堆肥中，有助于弥补堆肥高温期土著菌纤维素降解能力的不足，从而加快园林废弃物堆肥腐熟进程。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：提供一种能加速堆肥处理园林废弃物降解过程的功能复合菌剂，解决园林废弃物由于纤维素的难降解性造成堆肥周期长的问题，可在堆肥过程中使纤维素降解加速，缩短发酵周期，提高转化效率。
本发明提供的技术方案是：一种具有在高温条件下能高效降解纤维素功能的复合菌剂，所述复合菌剂包括放线菌和细菌，其中放线菌为高温紫链霉菌(Streptomycesthermoviolaceus)，嗜热淀粉酶链霉菌(Streptomycesthermodiastaticus)，嗜热一氧化碳链霉菌(Streptomycesthermocarboxydus)，微白黄链霉菌(Streptomycesalbidoflavus)和热普通链霉菌(Streptomycesthermovulgaris)，保藏号分别为CGMCCNo.12133、CGMCCNo.12134、CGMCCNo.12135、CGMCCNo.12136和CGMCCNo.12137，细菌为波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillusborstelensis)，保藏号为CGMCCNo.12138，均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，所述复合菌剂由各菌株种子液分别等体积混合后进行发酵获得。
本发明所述复合菌剂中高温紫链霉菌(Streptomycesthermoviolaceus)，嗜热淀粉酶链霉菌(Streptomycesthermodiastaticus)，嗜热一氧化碳链霉菌(Streptomycesthermocarboxydus)，微白黄链霉菌(Streptomycesalbidoflavus)，热普通链霉菌(Streptomycesthermovulgaris)和波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillusborstelensis)分别编号为ST1、ST2、ST3、ST4、ST5、FHM1，均已于2016年2月18日为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC所保藏（保藏地址是：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮政编码：100101），其保藏号分别为CGMCCNo.12133、CGMCCNo.12134、CGMCC.12135No、CGMCCNo.12136、CGMCCNo.12137、CGMCCNo.12138，经检测均存活。
本发明还提供所述复合菌剂的制备方法，其步骤如下：
（1）菌株活化：取本发明微生物4℃保存斜面，5株放线菌分别接种至高氏I号固体平板培养基，1株细菌接种到LB固体平板培养基，在50℃的恒箱中培养3d实现菌株活化；
（2）种子液制备：将步骤（1）中经斜面活化的菌种平板，5株放线菌分别转接到1L无菌ISP2液体培养基中（成分：酵母浸粉4g/L，麦芽糖10g/L，葡萄糖4g/L，琼脂16g/L），1株细菌转接到1L无菌LB液体培养基中（成分：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，Nacl10g/L），pH7.2-7.4，50℃、150rpm摇床条件下培养，高温紫链霉菌，嗜热淀粉酶链霉菌，热普通链霉菌和波茨坦短芽孢杆菌培养12h，嗜热一氧化碳链霉菌和微白黄链霉菌培养72h，获得种子液；
（3）液体发酵复合菌剂的制备：上述种子液按6-10%（v/v）的接种量接种至已灭菌的发酵罐中，进行扩大发酵培养，在温度50℃、振荡频率120rpm的条件下，高温紫链霉菌，嗜热淀粉酶链霉菌，热普通链霉菌和波茨坦短芽孢杆菌培养24h，嗜热一氧化碳链霉菌和微白黄链霉菌培养72h，上述菌液混合均匀，即得到液体发酵复合菌剂。
进一步地，本发明还提供固态复合菌剂的制备方法：将麦麸与玉米面按照2:1质量比混合后作为菌液吸附剂，与步骤（3）中制得的菌液，按菌液与吸附剂体积质量比1:1混合，制作成固态复合菌剂，堆置1-2周，期间翻动1-2次，即获得固态复合菌剂，可用于以园林废物为主要材料的高温堆肥。
本发明具有以下有益效果：
本发明涉及菌种是从园林废弃物与动物粪便混合材料高温堆肥期样品中分离而来的一系列高温放线菌和细菌，具有耐高温、高效降解纤维素特性的混合菌剂，对园林废弃物的降解有更好的适应性。本发明中高温紫链霉菌，嗜热淀粉酶链霉菌，嗜热一氧化碳链霉菌，微白黄链霉菌，热普通链霉菌和波茨坦短芽孢杆菌菌株间没有拮抗作用且具有良好的协同作用，这种协同作用可有效的加速堆肥化的进程。本发明菌剂中的微生物种群间具有良好的协同作用，不仅对高温条件下园林废弃物具有高效稳定的降解能力，而且对不同环境的适应能力强，菌剂可加速园林废弃物的堆肥化进程，提高发酵效率，缩短堆肥时间，降低处理成本。
将本发明所述复合菌剂应用于园林废弃物高温堆肥体系中，该混合菌群能在40-70℃高温内大量产纤维素酶酶，活性可达76U/ml。本发明制得的复合菌剂接种于以园林废弃物为主要材料的堆肥中，与不接种的对照相比，能够提高堆肥进入高温期的时间、延长高温期持续时间已经高温期温度，降低堆肥C/N比，从而加快堆肥腐熟进程。
本发明解决了由于纤维素的难降解限制造成园林废弃物堆肥化速度慢、周期长的问题，可以在堆肥过程中使纤维素降解加速，缩短发酵周期，提高转化效率，而且对不同环境的适应能力强，以期能达到有效提高园林废弃物的堆肥效率，从而为园林废弃物变废为宝，城市绿色化的进程中提供依据，在园林废弃物堆肥化处理及资源化利用等方面具有广阔的应用前景。
附图说明
图1混合菌群与单一菌株产酶活性比较。
图26株菌株系统发育树。
图3堆肥过程中堆体温度变化。
图4堆肥过程中碳氮比（C/N比）变化。
具体实施方式
下面通过具体实施方式的详细描述来进一步阐明本发明，但并不是对本发明的限制，仅仅作示例说明。
实施例1高温纤维素降解菌种的筛选和鉴定
从北京昌平区某苹果园园林废弃物堆肥高温初期、高温中期、高温后期材料、北京延庆平原造林地区园林绿化废弃物堆积物中采集样品；称取上述新鲜样品10g放于装有10粒玻璃珠、并盛有90ml无菌水的锥形瓶中，置于30℃150rpm的摇床中摇30min，使样品充分散开，50℃下静置富集培养24h。用无菌吸管吸取1ml上清液加入到含有9ml无菌水的试管中，此即为10-1样品稀释液，再从10-1样品中取1ml加入到9ml无菌水中，此即为10-2样品稀释液，以此类推，得到10-3、10-4、10-5、10-6样品稀释液，然后用移液器吸取100μl的10-3、10-4、10-5、10-6样品稀释液于纤维素刚果红培养基上（培养基组成为：K2HPO40.5g，微晶纤维素1.88g，MgSO40.25g，明胶2.0g，刚果红0.5g，琼脂16g，蒸馏水1000ml，pH7.0），用涂布器把稀释液均匀涂布于整个平板，并置于50℃培养箱中培养3天。挑选在纤维素刚果红平板上有明显透明圈的菌落，进行编号，再进行反复划线分离纯化获得纯种菌株，将分离后的菌种接到斜面上，4℃保存进行后续实验。
将保藏于4℃的纯菌株转接到CMC-Na培养基（培养基成分：CMC-Na15.0g，NH4NO31.0g，酵母膏1.0g，MgSO4·7H2O0.5g，KH2PO41.0g，蒸馏水1000ml，琼脂16g，pH7.0）平板上，50℃下活化培养，然后挑起平板上的单菌落转接到纤维素刚果红平板上，置于50℃培养箱中培养，72h后测量菌落直径d和透明圈直径D，计算其比值H，即H=D/d，H值越大，值较大表示该菌株分解纤维素的能力越强。按照纤维素刚果红鉴定培养基上形成透明圈的大小初步确定其产纤维素酶活性。
通过上述操作，获得多株纤维素降解菌，其中在北京昌平区某苹果园园林废弃物堆肥高温初期采集的样品中分离的菌种，编号为FHM1的，在北京昌平区某苹果园园林废弃物堆肥高温中期采集的样品中分离的菌种，编号分别为ST1、ST2、ST3、ST4、ST5，并于2016年2月18日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其简称为CGMCC（单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101），FHM1、ST1、ST2、ST3、ST4、ST5保藏编号分别为CGMCCNo.12138、CGMCCNo.12133、CGMCCNo.12134、CGMCCNo.12135、CGMCCNo.12136、CGMCCNo.12137。对上述菌株进行16SrDNA分子鉴定，FHM1菌株为波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillusborstelensis)，ST1菌株为高温紫链霉菌(Streptomycesthermoviolaceus)，ST2菌株为嗜热淀粉酶链霉菌(Streptomycesthermodiastaticus)，ST3菌株为嗜热一氧化碳链霉菌(Streptomycesthermocarboxydus)，ST4菌株为微白黄链霉菌(Streptomycesalbidoflavus)，ST5菌株为热普通链霉菌(Streptomycesthermovulgaris)。
实施例2菌株之间拮抗作用研究
将上述六株纤维素降解菌株在羧甲基纤维素培养基上两两划线但不相交，50℃，培养3d。两菌交叉处如形成无菌区，说明两菌之间产生了抑菌圈，两菌彼此拮抗，不能组合到一起，如果两菌间没有形成无菌区，则说明两菌不彼此拮抗，可以组合。从结果来看，各个菌株之间没有拮抗作用，不会互相干扰，影响菌种生长，因此可以制作为复合菌剂。
实施例3混合菌群产纤维素酶能力
将筛选得到的6株高温高效纤维素降解菌分别接种于CMC-Na的液体培养基中，并于50℃，转速为150rpm/min的恒温摇床中培养，高温紫链霉菌，嗜热淀粉酶链霉菌，热普通链霉菌和波茨坦短芽孢杆菌培养12h，嗜热一氧化碳链霉菌和微白黄链霉菌培养72h，分别将各培养液的浊度OD600调至0.2，然后这6株菌菌悬液按照等量体积的比例混合均匀，即得到混合菌液。将混合菌液与各单一菌株以相同的接种量，在相同的发酵条件下进行发酵产酶培养，比较混合菌群和单一菌株的产酶能力，见图1。由图1可见，单一菌株产酶能力大小顺序为ST2>ST1>ST3>ST5>ST4>FHM1，ST2产酶能力相对最高，酶活力达60U/ml；混合菌群产酶能力最强，产酶活力达76U/ml，是单一菌株产酶能力的1.3-3.8倍，比组成它的任何单一菌株产酶能力都强。
实施例4混合菌群对不同纤维素材料的降解能力
用5g纤维素材料（秸秆、树叶、园林修剪枝条）为唯一碳源，秸秆剪成2cm长、树叶直接加入、园林修剪枝条剪成1cm长，以10%的接种量接入复合菌剂，50℃，150rmp摇床培养，7d后，将菌体过滤后烘干纤维素材料，采用失重法研究复合菌剂对纤维素材料的降解能力。结果表明，混合菌群对秸秆和树枝有明显的降解能力，秸秆降解率达65%，树叶降解率达54%，木屑降解率达35%。
实施例5复合菌剂的制备
（1）菌株活化：取本发明微生物4℃保存斜面，5株放线菌分别接种至高氏I号固体平板培养基，1株细菌接种到LB固体平板培养基，在50℃的恒箱中培养3d实现菌株活化。
（2）种子液制备：将（1）步骤中经斜面活化的菌种平板，5株放线菌分别转接到1L无菌ISP2液体培养基中（成分：酵母浸粉4g/L，麦芽糖10g/L，葡萄糖4g/L，琼脂16g/L），1株细菌转接到1L无菌LB液体培养基中（成分：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，Nacl10g/L），pH7.2-7.4，50℃、150rpm摇床条件下培养，高温紫链霉菌，嗜热淀粉酶链霉菌，热普通链霉菌和波茨坦短芽孢杆菌培养12h，嗜热一氧化碳链霉菌和微白黄链霉菌培养72h，获得种子液。
（3）液体发酵复合菌剂的制备：上述种子液按6-10%（v/v）的接种量接种至已灭菌的发酵罐中，进行扩大发酵培养。在温度50℃、振荡频率120rpm的条件下，高温紫链霉菌，嗜热淀粉酶链霉菌，热普通链霉菌和波茨坦短芽孢杆菌培养24h，嗜热一氧化碳链霉菌和微白黄链霉菌培养72h，上述菌液混合均匀，即得到液体发酵复合菌剂。
（4）固态复合菌剂的制备：将麦麸与玉米面按照2:1质量比混合后作为菌液吸附剂，与步骤（3）中制得的菌液，按菌液与吸附剂体积质量比1:1混合，制作成固态复合菌剂，堆置1-2周，期间翻动1-2次，即获得固态复合菌剂，可用于以园林废物为主要材料的高温堆肥。
实施例6复合菌剂的堆肥效果试验
以园林废弃物为主要堆肥原料，添加动物粪便和水，使混合物料碳氮比为25-40:1、含水率50-60%，固态复合菌剂按物料重量的2.5%比例接种到堆肥物料中，进行高温堆肥，以不加复合菌剂的材料为对照，当堆体温度上升到50℃时，开始翻堆，高温期每2天翻堆一次，降温期每周翻堆一次，当温度下降到40℃后不在翻堆。堆肥过程中，通过测定堆体每天的温度变化、堆肥材料碳氮（C/N）比变化，考察添加复合菌剂对园林废弃物堆肥腐熟进度的影响。
堆肥过程中堆体温度变化如图3所示。由图3可知，接种复合菌剂的堆肥处理在堆肥2d温度即上升到50℃，之后温度继续上升，而且50℃以上的高温期持续22d，之后温度开始下降。而未接种的堆肥处理温度在堆肥第4d才上升到50℃以上，比接种的处理推迟2天到达50℃以上高温期，而且50℃以上高温期持续时间是12d，比接种的处理少了10d，接种处理的堆体高温期的最高温度也高于未接种处理，之后堆体开始降温，到40d后，温度下降到30℃以下，并稳定下来。由此说明接种复合菌剂后能够加快堆肥进入高温期时间，以及高温期持续时间，这有助于有害微生物的杀灭以及加快堆肥的腐熟进程。堆肥过程中C/N变化如图4所示。由图4可知，随着堆肥的进行，接种复合菌剂和不接种的处理C/N比均持续降低，而接种的处理下降程度高于未接种处理，由此进一步说明，添加本菌制得的复合菌剂可以加快堆肥进程，提高园林废弃物堆肥的腐熟效果。
Claims (5)
1.一种具有在高温条件下能高效降解纤维素功能的复合菌剂，所述复合菌剂包括放线菌和细菌，其中放线菌为高温紫链霉菌(Streptomycesthermoviolaceus)，嗜热淀粉酶链霉菌(Streptomycesthermodiastaticus)，嗜热一氧化碳链霉菌(Streptomycesthermocarboxydus)，微白黄链霉菌(Streptomycesalbidoflavus)和热普通链霉菌(Streptomycesthermovulgaris)，保藏号分别为CGMCCNo.12133、CGMCCNo.12134、CGMCCNo.12135、CGMCCNo.12136和CGMCCNo.12137，细菌为波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillusborstelensis)，保藏号为CGMCCNo.12138，均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，所述复合菌剂由各菌株种子液分别等体积混合后进行发酵获得。
2.一种如权利要求1所述的复合菌剂制备方法，包括如下制备步骤：
（1）菌株活化：取本发明微生物4℃保存斜面，5株放线菌分别接种至高氏I号固体平板培养基，1株细菌接种到LB固体平板培养基，在50℃的恒箱中培养3d实现菌株活化；
（2）种子液制备：将步骤（1）中经斜面活化的菌种平板，5株放线菌分别转接到1L无菌ISP2液体培养基中，1株细菌转接到1L无菌LB液体培养基中，pH7.2-7.4，50℃、150rpm摇床条件下培养，高温紫链霉菌，嗜热淀粉酶链霉菌，热普通链霉菌和波茨坦短芽孢杆菌培养12h，嗜热一氧化碳链霉菌和微白黄链霉菌培养72h，获得种子液；
（3）液体发酵复合菌剂的制备：上述种子液按6-10%（v/v）的接种量接种至已灭菌的发酵罐中，进行扩大发酵培养，在温度50℃、振荡频率120rpm的条件下，高温紫链霉菌，嗜热淀粉酶链霉菌，热普通链霉菌和波茨坦短芽孢杆菌培养24h，嗜热一氧化碳链霉菌和微白黄链霉菌培养72h，上述菌液混合均匀，即得到液体发酵复合菌剂。
3.如权利要求1所述的复合菌剂制备方法，其特征在于：进一步地，将麦麸与玉米面按照2:1质量比混合后作为菌液吸附剂，与步骤（3）中制得的菌液，按菌液与吸附剂体积质量比1:1混合，制作成固态复合菌剂，堆置1-2周，期间翻动1-2次，即获得固态复合菌剂。
4.如权利要求1所述复合菌剂在以园林废物为主要材料的高温堆肥中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于：以园林废弃物为主要堆肥原料，添加动物粪便和水，使混合物料碳氮比为25-40:1、含水率50-60%，固态复合菌剂按物料重量的2.5%比例接种到堆肥物料中，进行高温堆肥。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610126120.5A CN105567612B (zh) | 2016-03-05 | 2016-03-05 | 一种园林废弃物降解复合菌剂制备及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610126120.5A CN105567612B (zh) | 2016-03-05 | 2016-03-05 | 一种园林废弃物降解复合菌剂制备及应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105567612A true CN105567612A (zh) | 2016-05-11 |
| CN105567612B CN105567612B (zh) | 2019-08-02 |
Family
ID=55878246
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610126120.5A Active CN105567612B (zh) | 2016-03-05 | 2016-03-05 | 一种园林废弃物降解复合菌剂制备及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105567612B (zh) |
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106906171A (zh) * | 2017-05-04 | 2017-06-30 | 陕西枫丹百丽生物科技有限公司 | 一种苹果树腐烂病生防菌剂的制备方法 |
| CN107164272A (zh) * | 2017-06-09 | 2017-09-15 | 北京林业大学 | 一种用于园林废弃物降解的复合微生物菌剂、制备方法和应用 |
| CN108486017A (zh) * | 2018-04-27 | 2018-09-04 | 苏州大学 | 一种园林废弃物降解菌剂 |
| CN109355227A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-02-19 | 江苏省农业科学院 | 一株高温紫链霉菌及其在纤维素降解中的应用 |
| CN109943508A (zh) * | 2019-03-26 | 2019-06-28 | 陕西省西安植物园 | 一种促园林废弃物降解型的微生物菌粉评价方法 |
| CN110156501A (zh) * | 2019-07-04 | 2019-08-23 | 山西农业大学 | 一种基于园林废弃物与菌糠生产的有机肥及其制备方法 |
| CN110982748A (zh) * | 2019-12-26 | 2020-04-10 | 北京林业大学 | 一种用于煤矸石人工生态基质的复合微生物菌剂制备及应用 |
| CN110999753A (zh) * | 2019-12-26 | 2020-04-14 | 北京林业大学 | 一种基于煤矸石的人工生态基质及其制备方法 |
| CN111657036A (zh) * | 2020-06-05 | 2020-09-15 | 北京林业大学 | 一种高寒地园区木本植物种植方法 |
| CN112314392A (zh) * | 2020-10-28 | 2021-02-05 | 甘肃省科学院生物研究所 | 一种园林废弃物固态强化发酵制作土壤的调节基质工艺 |
| CN112625959A (zh) * | 2020-12-28 | 2021-04-09 | 中农新科(苏州)有机循环研究院有限公司 | 用于有机废弃物好氧发酵的嗜高温复合菌剂 |
| CN114317323A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-04-12 | 中农新科(苏州)有机循环研究院有限公司 | 一种快速降解餐厨垃圾有机质的微生物菌剂 |
| CN115197023A (zh) * | 2022-05-30 | 2022-10-18 | 北京林业大学 | 一种以园林绿化废弃物为基质的生物有机肥及其制备方法 |
| CN115504827A (zh) * | 2022-07-27 | 2022-12-23 | 国家林业和草原局林草调查规划院 | 一种具有生防功能的微生物有机调理剂及应用 |
| CN115724703A (zh) * | 2022-12-05 | 2023-03-03 | 广东中微环保生物科技有限公司 | 一种吹填海泥联合园林废弃物资源化处理方法及应用 |
| CN116283438A (zh) * | 2023-02-20 | 2023-06-23 | 四川大学 | 一种具有土壤调理功能的竹纤维肥料及其制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103484396A (zh) * | 2013-08-15 | 2014-01-01 | 北京农学院 | 一种嗜热一氧化碳链霉菌新菌株及其应用 |
| CN103820361A (zh) * | 2014-01-15 | 2014-05-28 | 深圳市铁汉生态环境股份有限公司 | 一株高温纤维素降解菌及其应用 |
-
2016
- 2016-03-05 CN CN201610126120.5A patent/CN105567612B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103484396A (zh) * | 2013-08-15 | 2014-01-01 | 北京农学院 | 一种嗜热一氧化碳链霉菌新菌株及其应用 |
| CN103820361A (zh) * | 2014-01-15 | 2014-05-28 | 深圳市铁汉生态环境股份有限公司 | 一株高温纤维素降解菌及其应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| A.D. BRABBAN ET AL.: "Characterizationof growth and product formation by a thermophilic streptomycete grown in a particulate rapemeal-derived liquid medium", 《JOURNAL OF APPLIED BACTERIOLOGY》 * |
| DON L. CRAWFORD ET AL.: "Cellulases of Thermomonospora fusca and Streptomyces thermodiastaticus", 《APPLIED MICROBIOLOGY》 * |
| 冯红梅 等: "园林废弃物堆肥中高温纤维素降解菌的筛选及产酶特性", 《中国环境科学学会学术年会论文集》 * |
| 匡石滋 等: "利用香蕉菠萝茎叶工厂化生产复合生物有机肥关键技术研究", 《热带农业科学》 * |
| 黄翠 等: "堆肥嗜热纤维素分解菌的筛选鉴定及其强化堆肥研究", 《环境科学学报》 * |
Cited By (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106906171A (zh) * | 2017-05-04 | 2017-06-30 | 陕西枫丹百丽生物科技有限公司 | 一种苹果树腐烂病生防菌剂的制备方法 |
| CN107164272A (zh) * | 2017-06-09 | 2017-09-15 | 北京林业大学 | 一种用于园林废弃物降解的复合微生物菌剂、制备方法和应用 |
| CN108486017A (zh) * | 2018-04-27 | 2018-09-04 | 苏州大学 | 一种园林废弃物降解菌剂 |
| CN109355227A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-02-19 | 江苏省农业科学院 | 一株高温紫链霉菌及其在纤维素降解中的应用 |
| CN109355227B (zh) * | 2018-11-20 | 2021-12-07 | 江苏省农业科学院 | 一株高温紫链霉菌及其在纤维素降解中的应用 |
| CN109943508A (zh) * | 2019-03-26 | 2019-06-28 | 陕西省西安植物园 | 一种促园林废弃物降解型的微生物菌粉评价方法 |
| CN110156501A (zh) * | 2019-07-04 | 2019-08-23 | 山西农业大学 | 一种基于园林废弃物与菌糠生产的有机肥及其制备方法 |
| CN110982748A (zh) * | 2019-12-26 | 2020-04-10 | 北京林业大学 | 一种用于煤矸石人工生态基质的复合微生物菌剂制备及应用 |
| CN110999753A (zh) * | 2019-12-26 | 2020-04-14 | 北京林业大学 | 一种基于煤矸石的人工生态基质及其制备方法 |
| CN110999753B (zh) * | 2019-12-26 | 2021-07-27 | 北京林业大学 | 一种基于煤矸石的人工生态基质及其制备方法 |
| CN110982748B (zh) * | 2019-12-26 | 2022-06-03 | 北京林业大学 | 一种用于煤矸石人工生态基质的复合微生物菌剂制备及应用 |
| CN111657036A (zh) * | 2020-06-05 | 2020-09-15 | 北京林业大学 | 一种高寒地园区木本植物种植方法 |
| CN112314392A (zh) * | 2020-10-28 | 2021-02-05 | 甘肃省科学院生物研究所 | 一种园林废弃物固态强化发酵制作土壤的调节基质工艺 |
| CN112625959A (zh) * | 2020-12-28 | 2021-04-09 | 中农新科(苏州)有机循环研究院有限公司 | 用于有机废弃物好氧发酵的嗜高温复合菌剂 |
| CN112625959B (zh) * | 2020-12-28 | 2023-06-23 | 中农新科(苏州)有机循环研究院有限公司 | 用于有机废弃物好氧发酵的嗜高温复合菌剂 |
| CN114317323A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-04-12 | 中农新科(苏州)有机循环研究院有限公司 | 一种快速降解餐厨垃圾有机质的微生物菌剂 |
| CN115197023A (zh) * | 2022-05-30 | 2022-10-18 | 北京林业大学 | 一种以园林绿化废弃物为基质的生物有机肥及其制备方法 |
| CN115197023B (zh) * | 2022-05-30 | 2024-04-19 | 北京林业大学 | 一种以园林绿化废弃物为基质的生物有机肥及其制备方法 |
| CN115504827A (zh) * | 2022-07-27 | 2022-12-23 | 国家林业和草原局林草调查规划院 | 一种具有生防功能的微生物有机调理剂及应用 |
| CN115724703A (zh) * | 2022-12-05 | 2023-03-03 | 广东中微环保生物科技有限公司 | 一种吹填海泥联合园林废弃物资源化处理方法及应用 |
| CN116283438A (zh) * | 2023-02-20 | 2023-06-23 | 四川大学 | 一种具有土壤调理功能的竹纤维肥料及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105567612B (zh) | 2019-08-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105567612A (zh) | 一种园林废弃物降复合解菌剂制备及应用 | |
| CN101974436B (zh) | 一种木质纤维素降解菌及其应用 | |
| CN103820349B (zh) | 一株地衣芽孢杆菌及其菌剂的生产方法和用途 | |
| CN103194407B (zh) | 一种稻草腐解复合微生物制剂及其制备方法 | |
| CN101775359A (zh) | 一种直接分解农作物秸秆发酵产沼气的专用微生物复合菌剂制备及其应用方法 | |
| CN104450530A (zh) | 一株生棘孢木霉菌株、菌剂及其在有机垃圾处理中的应用 | |
| CN105647832B (zh) | 一株耐高温园林废弃物分解菌fhm1及其应用 | |
| CN103045511B (zh) | 一株具有解磷解钾功能的产纤维素酶地衣芽孢杆菌及其应用 | |
| CN109486684B (zh) | 一株低温秸秆降解真菌jgdw-1及其菌剂与应用 | |
| CN102174423B (zh) | 一种降解秸秆的地衣芽孢杆菌ch15及其菌剂 | |
| CN106350469A (zh) | 耐高温的具有纤维素降解能力的芽孢杆菌及其应用 | |
| CN103602592A (zh) | 一株纤维素降解真菌及其菌剂的制备和应用 | |
| CN105567609B (zh) | 一株耐高温园林废弃物分解菌st2及其应用 | |
| CN105802888A (zh) | 一种降解食用菌菌渣纤维素的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| CN103992958B (zh) | 一株水稻秸秆降解真菌拟康宁木霉zjc-1及其菌剂 | |
| CN105670966B (zh) | 一株耐高温园林废弃物分解菌st4及其应用 | |
| CN108865927B (zh) | 低温酵解玉米秸秆的细菌菌株及其发酵培养方法和应用 | |
| CN110055197A (zh) | 一种解淀粉类芽孢杆菌brec-10及其菌剂和应用 | |
| CN103361282A (zh) | 一种耐低温纤维素降解菌及其应用 | |
| CN108893414A (zh) | 寒地小麦秸秆腐熟真菌产红青霉菌株及其发酵培养方法和应用 | |
| CN106834143A (zh) | 微生物菌剂，绿化垃圾土壤修复剂及其应用 | |
| CN103013887A (zh) | 一种短小芽孢杆菌kmxu56及其接种剂 | |
| CN102174424A (zh) | 一种降解秸秆的微生物菌剂 | |
| CN106609250A (zh) | 一种发酵中药渣有机肥菌剂的制备方法及其应用 | |
| CN113481111B (zh) | 一种高效生物秸秆发酵菌剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |