CN105532641B - 一种胎盘保存液及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种保存采集后的胎盘保存液及其使用方法,属于生物技术领域。一种胎盘保存液,由海藻糖、醋酸酯淀粉、卵磷脂、乙烯乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、柠檬酸三钠、聚山梨酯组成。本发明胎盘保存液,能够深入胎盘内部结构,具有降低冰点,减少冰晶形成、平衡细胞内外渗透压、减轻细胞缩水程度、避免多肽失活等作用。本发明胎盘保存液配比简单,使用方便,能大幅度减少多肽等活性物质在冷冻过程中的损害。
Description
技术领域
本发明涉及一种保存采集后的胎盘保存液及其使用方法,属于生物技术领域。
背景技术
胎盘所含成分较为复杂,包括胎盘球蛋白、胎盘血蛋白、溶菌酶、激肽酶、组胺酶、激素、促生长因子、多肽等活性物质。具有抗感染、增强机体抵抗力、激素样作用、促凝血作用等作用。低温冻存保存是胎盘保存常用的方法,一般能达到2年的保存期限。如专利文献制造胎盘多肽注射液用的原料准备方法(专利申请号:201110209777.5)通过低温实现胎盘保存。尽管低温冷冻技术能够使胎盘长期保存,但是也带来了冷冻损伤的问题。无论采用任何形式的冷冻,在冷冻过程中产生的冻结应力对生物多肽等活性物质都有破坏作用。冷冻过程中产生的冻结应力包括枝状冰晶的形成、离子浓度的增加、pH值的改变、相分离等都会导致多肽及蛋白质等活性物质变性。从而降低了胎盘的药用价值。
发明内容
针对现有冷冻法对胎盘活性物质的损伤,本发明的目的在于提供一种胎盘冷冻保护液及其使用方法,能大幅度减少多肽等活性物质在冷冻过程中的损害。
本发明采用如下技术方案:一种胎盘保存液,由海藻糖、醋酸酯淀粉、卵磷脂、乙烯乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、柠檬酸三钠组成,所述每升保存液中含有海藻糖10~20g、醋酸酯淀粉5~10g、卵磷脂1~2.5g、乙烯乙二醇0.6~1.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.8~1.3g、柠檬酸3~6g、柠檬酸三钠5~8g、聚山梨酯1~1.5g。
优选的是:每升保存液中含有海藻糖含量为13g、醋酸酯淀粉7g、卵磷脂1.5g、乙烯乙二醇0.8g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g、柠檬酸5g、柠檬酸三钠7g、聚山梨酯1.2g。
优选的是:所述的卵磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂中的至少一种。
本发明提供另一种技术方案为:一种胎盘保存液的使用方法,是将保存液预冷至2~6℃,将胎盘置于保存液中,2~6℃冷冻1~2小时,将温度降至-20℃以下,即可完成保存。
优选的是:所述胎盘为无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘。
本发明胎盘保存液,能够深入胎盘内部结构,具有降低冰点,减少冰晶形成、平衡细胞内外渗透压、减轻细胞缩水程度、避免多肽失活等作用。本发明胎盘保存液配比简单,使用方便,能大幅度减少多肽等活性物质在冷冻过程中的损害。
具体实施方式
下面进一步描述本发明的技术方案,但要求保护的范围并不局限于所述。下面结合具体实施例,对本发明作进一步详细的阐述,但本发明的实施方式并不局限于实施例表示的范围。这些实施例仅用于说明本发明,而非用于限制本发明的范围。此外,在阅读本发明的内容后,本领域的技术人员可以对本发明作各种修改,这些等价变化同样落于本发明所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
往10g海藻糖、5g醋酸酯淀粉、1g大豆卵磷脂、0.6g乙烯乙二醇、0.8g聚乙烯吡咯烷酮、3g柠檬酸、5g柠檬酸三钠、1g聚山梨酯中加入800mL双蒸水搅拌均匀,加水至1000mL,调节pH至6.8,使用时先将保存液预冷至2℃,将无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘置于保存液中,2℃冷冻1小时,将温度降至-25℃,即可完成保存。
实施例2
往13g海藻糖、7g醋酸酯淀粉、1.5g卵磷脂(由0.75g大豆卵磷脂、0.75g蛋黄卵磷脂组成)、0.8g乙烯乙二醇、1g聚乙烯吡咯烷酮、5g柠檬酸、7g柠檬酸三钠、1.2g聚山梨酯中加入800mL双蒸水搅拌均匀,加水至1000mL,调节pH至7,使用时先将保存液预冷至4℃,将无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘置于保存液中,2~6℃冷冻1.5小时,将温度降至-22℃,即可完成保存。
实施例3
往20g海藻糖、10g醋酸酯淀粉、2.5g蛋黄卵磷脂、1.2g乙烯乙二醇、1.3g聚乙烯吡咯烷酮、6g柠檬酸、8g柠檬酸三钠、1.5g聚山梨酯中加入800mL双蒸水搅拌均匀,加水至1000mL,调节pH至7.2,使用时先将保存液预冷至6℃,将无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘置于保存液中,6℃冷冻2小时,将温度降至-30℃,即可完成保存。
本发明人对胎盘保存液的处方用量进行了严格的研究筛选,经综合考虑,得出以上的处方用量范围,与低用量(每升保存液中含有海藻糖6g、醋酸酯淀粉3g、卵磷脂0.6g、乙烯乙二醇0.4g、聚乙烯吡咯烷酮0.5g、柠檬酸2g、柠檬酸三钠3g、聚山梨酯0.5g)和高用量(每升保存液中含有海藻糖25g、醋酸酯淀粉15g、卵磷脂3g、乙烯乙二醇1.5g、聚乙烯吡咯烷酮1.5g、柠檬酸8g、柠檬酸三钠10g、聚山梨酯2g)的处方相比,低用量时效果保存不理想,胎盘中多肽等活性物质损害较多,细胞缩水较大,有少量冰晶形成,而高用量时虽然效果可行,但没有明显比本发明处方范围内的用量有更好的效果,综合成本等因素,选择每升保存液中含有海藻糖10~20g、醋酸酯淀粉5~10g、卵磷脂1~2.5g、乙烯乙二醇0.6~1.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.8~1.3g、柠檬酸3~6g、柠檬酸三钠5~8g、聚山梨酯1~1.5g可行,每升保存液中含有海藻糖含量为13g、醋酸酯淀粉7g、卵磷脂1.5g、乙烯乙二醇0.8g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g、柠檬酸5g、柠檬酸三钠7g、聚山梨酯1.2g为最佳。
Claims (5)
1.一种胎盘保存液,其特征在于,所述保存液由海藻糖、醋酸酯淀粉、卵磷脂、乙烯乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、柠檬酸三钠、聚山梨酯组成,所述每升保存液中含有海藻糖10~20g、醋酸酯淀粉5~10g、卵磷脂1~2.5g、乙烯乙二醇0.6~1.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.8~1.3g、柠檬酸3~6g、柠檬酸三钠5~8g、聚山梨酯1~1.5g。
2.根据权利要求1所述胎盘保存液,其特征在于,所述保存液由海藻糖、醋酸酯淀粉、卵磷脂、乙烯乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、柠檬酸三钠、聚山梨酯组成,所述每升保存液中含有海藻糖13g、醋酸酯淀粉7g、卵磷脂1.5g、乙烯乙二醇0.8g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g、柠檬酸5g、柠檬酸三钠7g、聚山梨酯1.2g。
3.根据权利要求1或2所述胎盘保存液,其特征在于,所述的卵磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂中的至少一种。
4.权利要求1或2所述胎盘保存液的使用方法,其特征在于,所述使用方法是将保存液预冷至2~6℃,将胎盘置于保存液中,2~6℃冷冻1~2小时,将温度降至-20℃以下,即可完成保存。
5.根据权利要求4所述胎盘保存液的使用方法,其特征在于,所述胎盘为无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘。
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