CN105319695A - 透射光显微镜和用于透射光显微镜检查的方法 - Google Patents

Abstract

本发明描述了一种透射光显微镜，所述透射光显微镜用于对呈井状的包含液体的样品容器(4)成像，其中所述透射光显微镜(1)具有：照明光束路径(B)，所述照明光束路径(B)用于使用照明光束从上方沿着光轴(OA)照亮样品容器(4)，其中所述照明光束路径(B)具有对准光轴的照明元件(3、15)，所述元件将照明光束照射到样品容器(4)上；成像光束路径(A)，所述成像光束路径(A)用于从下方沿着光轴(OA)对样品容器(4)成像；和吸移管进入通道，所述吸移管进入通道用于将试剂引入样品容器中，其中照明元件(3、15)呈环状并且在光轴(OA)上具有开口(7)，所述吸移管进入通道行进通过所述开口。

Description

透射光显微镜和用于透射光显微镜检查的方法

技术领域

本发明涉及一种透射光显微镜，其用于对呈井状的包含液体的样品容器成像，其中该透射光显微镜具有：照明光束路径，该照明光束路径用于使用照明光束从上方沿着光轴照亮样品容器；和成像光束路径，该成像光束路径用于从下方沿着光轴对样品容器成像；以及，吸移管进入通道，该吸移管进入通道用于将试剂引入样品容器中。

本发明还涉及一种方法，其用于呈井状的包含液体的样品容器的透射光显微镜检查，其中样品容器使用照明光束沿着光轴从上方被照亮，样品容器沿着光轴从下方被成像，并且试剂经由吸移管进入通道被引入样品容器中。

背景技术

活细胞的显微镜检查在生物医学中起重要作用。它们通常在例如微量滴定板或培养皿的容器中被培养。这些细胞位于容器的底部并且被培养基围绕。它们使用倒置的显微镜经受显微镜检查；在该显微镜中，物镜位于样品容器的底部之下。样品可以经由入射光或透射光被照亮。对于透射光图像，光附加在样品容器上方。然而，由于生物细胞仅包含很少的吸收性成分，所以明视野的透射光图像通常仅非常弱地被对比。借助于各种透射光对比方法，例如相位对比，尤其是DIC，个体细胞成分彼此之间的折射率的微小差异以及与周围培养基之间的微小差异可以被转换成光强(intensity，强度，亮度)差，该光强差然后提供对比的透射光图像，但是从该图像中通常仅很少的部分可以被认为是关于细胞中的特定物质的功能或分布。荧光显微镜检查通过特定物质(荧光素)解决了该问题，该特定物质已经可被细胞获得或者已经被引入到借助于入射光照明而被激活的细胞中，所述荧光素然后依次发出信号，该信号被物镜捕获并且传输到照相机或目镜。然而，因为仅荧光素被激活的那些结构可以被看到，因而关于个体细胞的尺寸和形状的信息可能丢失。因此，由于入射光和透射光提供互补的信息，因而入射光和透射光频繁地被组合使用。

由于活细胞是活着的，因而活细胞并非静止的物体，而是一直在变化。特别地，活细胞可以作为研究对生物体的环境影响的效果的对象。这些影响还包括营养培养基的材料成分。如果材料成分改变，则细胞对此作出反应。反应时间可以落在分钟和小时的范围内，但是也可以落在秒的范围内。因而可能极为重要的是，在细胞环境改变之后或甚至在该改变过程中，立即进行观察。环境的改变通常通过将物质吸移进入培养液中而被实现，该物质的影响将被研究。由于样品容器在顶部处开口，因而试剂也被从顶部引入。因而，有意地形成了与透射光照明装置在空间上的冲突。

有多种解决该矛盾的可能性，每种都具有它自己的特定优点和缺点。US2012/0034596描述了一种装置，在该装置中，样品容器可以在保持器中从试剂可以被引入的一个区域被输送到用于显微镜检查的光学元件所位于的另一区域中。试剂然后在样品容器的任何点处直接从上方引入。该方法的缺点是，样品需要在被引入和被观察之间移动较大距离，并且细胞的在引入之后立即发生的反应不能被检测到。此外，通常地，在试剂的引入之前需要对照图像，即样品上适合于显微镜检查的位置必须首先被发现，然后样品容器行进至引入发生的位置，然后再返回。这导致样品的多个运动，这也意味着产生细胞的应力并且可能导致与试剂的实际引入无关的反应。

为在观察位置处实现引入，吸移管也可以从侧面倾斜地附加。这在例如培养皿的具有较大开口的样品容器中是可以的，但是，在如被频繁地使用的具有例如96或384个井的微量滴定板中，则导致了较大的困难，因为吸移管不能被定位成足够的角度以保证吸移管浸入培养液中。在培养基上方进行吸移的确也是可以的，但是这存在待吸移的液滴保留在吸移管的尖端上的风险。这在营养培养基中导致需要的吸移液体浓度和实际的吸移液体浓度之间存在差异。特别地，在待吸移的体积较小的情况下，相对误差可能呈现非常高的值或待吸移的量没有完全离开吸移管的尖端，这可能导致不正确的检测结果。

这可以通过使用弧形吸移管尖端来抵消，该弧形吸移管尖端的后端部可以垂直地浸入液体中。即使在这种情况下，可能仅具有非常小的空间，用于在样品容器和置于该样品容器上方的透射光照明装置之间移动。因而，可能发生，即在所述引入之前、在吸移管的尖端能被顺序地定位之前，首先需要抬高透射光照明装置或其部件(例如聚光器)，然后需要再次降低照明。特别地，当使用具有许多井的微量滴定板时，自动化的可能性在重要性方面增加。它也可以在刚刚描述的情况中实现，但是需要有序地执行的多个运动：抬高照明装置，侧面地插入吸移管的尖端，降低吸移管的尖端，降低照明装置。实际上，现在可以同时进行引入和透射光观察，但是在图像中朝向侧面的尖端损害了透射光图像的质量。因此，在拍照之前从照明光束路径再次移除吸移管可能是必要的。

吸移管的弧形尖端的另一个困难包括，轻微的旋转导致弯曲的端部件不再垂直地朝下指向，然而仍然保持倾斜。在较小的井中，例如在具有384个井的微量滴定板中，非常可能与井的边缘的碰撞。如果期望避免需要使用弯曲的吸移管，则照明装置的物镜能够被抬高到使得笔直的吸移管尖端能够放置在样品和照明装置之间，并且弯曲仅在此后发生。在夫琅和费物理测量技术学院的细胞培养器中获得了该溶液。然而，透射光照明装置和试剂的引入只能是次序地进行，并且物镜的提升高度较大。此外，仍然需要进行多个运动，每个需要单独的驱动系统：提升照明装置、引入装置的水平定位、降低吸移管的尖端。

发明内容

本发明的目的是提供透射光显微镜和用于透射光显微镜检查的方法，其结果是试剂可以被引入到样品容器中，而没有所描述的缺点。

该目的通过一种透射光显微镜而实现，所述透射光显微镜用于对呈井状的包含液体的样品容器成像，其中所述透射光显微镜包括：

-照明光束路径，所述照明光束路径用于使用照明光束从上方沿着光轴照亮样品容器，

-成像光束路径，所述成像光束路径用于从下方沿着光轴对样品容器成像，和

-吸移管进入通道，所述吸移管进入通道用于将试剂引入样品容器中，

其中，所述透射光显微镜还具有：

-块体，所述块体具有通过通道和用于照明光束的通路，吸移管进入通道行进通过所述通路，其中所述通过通道和所述通路在垂直于光轴的平面内彼此邻近，

-用于所述块体的导向装置，所述导向装置提供用于块体的第一位置和第二位置，并且提供第一位置和第二位置之间的路径，在第一位置所述通过通道对准光轴并且在第二位置所述通路对准光轴，其中所述路径跟随单一的运动，和

-驱动机构，所述驱动机构使块体以单一的运动在第一位置和第二位置之间移动。

该目的最终还通过一种用于呈井状的包含液体的样品容器的透射光显微镜检查的方法而实现，其中

-使用照明光束从上方沿着光轴照亮样品容器，

-从下方沿着光轴对样品容器成像，并且

-经由吸移管进入通道将试剂引入样品容器中，

其中

-使用块体，所述块体具有通过通道和用于照明光束的通路，吸移管进入通道行进通过所述通路，其中所述通过通道和所述通路在垂直于光轴的平面内彼此邻近，

-利用第一位置和第二位置之间的单一的运动移动所述块体，在所述第一位置通过通道对准光轴并且在第二位置通路对准光轴。

该目的还通过一种透射光显微镜而实现，所述透射光显微镜用于对呈井状的包含液体的样品容器成像，其中所述透射光显微镜包括：

-照明光束路径，所述照明光束路径用于使用照明光束从上方沿着光轴照亮样品容器，其中所述照明光束路径具有对准光轴的照明元件，所述元件将照明光束照射到样品容器上，

-成像光束路径，所述成像光束路径用于从下方沿着光轴对样品容器成像和

-吸移管进入通道，所述吸移管进入通道用于将试剂引入样品容器中，

其中

-照明元件呈环状并且在光轴上具有开口，所述吸移管进入通道行进通过所述开口。

该目的还通过一种用于呈井状的包含液体的样品容器的透射光显微镜检查的方法而实现，其中：

-使用照明光束从上方沿着光轴照亮样品容器，其中使用与光轴对准的照明元件，所述元件将照明光束照射到样品容器上，

-从下方沿着光轴对样品容器成像，并且

-经由吸移管进入通道将试剂引入样品容器中，

其中

-使用环状照明元件，所述环状照明元件在光轴上具有开口，所述吸移管进入通道行进通过所述开口。

在第一变形例中，透射光照明和试剂的引入被顺序地执行，其中透射光照明装置和引入通道通过在光轴上的单一的运动而被切换。

这例如可以通过旋转块体而发生，块体可以至少在两个位置处被旋转，其中在一个位置透射光照明装置位于样品上面，并且在另一位置自由通道可用于待引入的试剂。在该吸移过程中，吸移管然后可以手动地引入或经由遥控装置引入。

可选地吸移装置在设备中可能已被保持可用。在这一点上，如何设计透射光照明装置总是没有关系的：是否作为具有或没有附加物镜的点光源，或是否作为具有或没有附加物镜的区域光源。然而，如果远离旋转轴线的较大物体被避免，则是有利的。因此，优选的是没有偏转镜的透射光照明装置。该照明装置可能比商业中惯用的吸移管维持更长时间损坏。如果透射光照明装置还和通往吸移管的通路具有共用壳体，则将导致矛盾，由于在这种情况下吸移管的尖端不再到达样品。

两个位置(透射光照明的位置，吸移管进入的位置)可以通过块体的横向运动设定。并且在这种情况下仅需要一个运动来从透射光切换到吸移。同时地，在这种情况下，照明光束路径可以借助于偏转镜弯曲，而不会产生问题，其结果是可以设置共用壳体用于透射光和引入通道。

当引入试剂时，重要的是该引入在正确高度上进行。如果吸移从太高处进行，则吸移管的尖端没有浸入培养液中并且部分量的待吸移物质或全部待吸移物质可能保持在尖端上。如果吸移从太低处进行，则吸移管的尖端可能接触样品容器的底板并且在该位置毁坏样品。使吸移管进入自由空间中并且保持吸移管静止需要较高程度的技能。因此，吸移管的部分或吸移管的尖端可以抵靠其放置的止动件是有利的。在这一点上，吸移管的尖端例如具有在任何情况下存在的轴环。该止动件在吸移位置上方的高度可被设置成固定的或被选择为可变化的，以使插入通道适应所使用的吸移管或吸移管尖端，以及适应样品平面的高度。该高度可以变化几毫米。微量滴定板例如可以具有由薄膜制成的底部或由1毫米厚的聚苯乙烯制成的底部。此外，它们通常不位于该底部上，但是具有在单独井的下方形成几毫米的空气间隙的圆周偏离边缘。然而，该值随着制造商的不同而变化，并且还仅通过最小值的确立而被标准化。并且，该标准通常在用于显微镜检查的微板中被没有达到，以使得具有较高数值孔径和因此必然地较大直径的物镜的使用成为可能。因此，样品平面相对于样品保持器并且因而也相对于吸移管通路位于不同高度处。

用于对该变化做出反应的可能的方法如下：吸移管止动件或整个进送单元的高度被设计成是可调节的。在引入开始之前，程序需要所使用的吸移管的尖端并且从列表中搜索从轴环的端部到尖端的对应长度。然后，物镜沿着光轴移动，使得样品位于焦平面中。程序计算样品平面距离物镜位置的高度。(在移动样品保持器而非物镜的聚焦装置中，由于在这种情况下样品平面的高度未改变，因而该步骤被省去)。可选地，如果在样品平面上方需要的引入高度没有被预设任何值，则程序还要求该高度。吸移管止动件的合适高度被从该信息计算，并且该高度相应地被设置。设置吸移管止动件的高度还可以延伸到透射光照明装置，其结果是二者经由单个系统同时地移动。从而实现了透射光照明装置的焦点同样地总是接近焦平面。

本发明的第二变形例提供了与环状方式的照明装置的配合，其结果是在光轴上保持使吸移管进入通道行进通过的开口。环状照明装置使用可以为环状光源或环状光束偏转元件的环状照明元件。聚光物镜可以布置在该照明元件和样品容器之间以聚焦照明光束。该聚光物镜在光轴上也具有开口，吸移管进入通道行进通过该开口。

用于组合透射光和试剂的引入的第二变形例的一种可能包括将透射光源设计成环状，其结果是沿着光轴产生自由通路。为此，照明环是由单独的点光源还是照明区域的元件构成是不重要的。中心开口的直径需要足够大以使需要的吸移系统或吸移管的尖端装配通过。在一个实施例中，在光源和样品平面之间没有光学元件。因而，不会发生可从该源获得的光被集中在由物镜成像的样品场上。可代替地，由于光从该源以发散的方式发射，因而高百分比的该光被损失。然而，因为相对于标准透射光照明装置中常用的仅具有一个螺旋卷绕的灯丝或LED的光源，大体上更高数量的单独光源可以用于环照明，因而该损失可以被克服。作为回报地，该照明装置非常简单并且因此实现获得了有利的成本控制。物镜将来自NA(数值孔径)区域的光提供到环状光源，该孔径由环的直径和距离样品平面的距离确定。被照亮的表面越宽，可用的NA区域越大。可选地，漫射盘插入光源和样品之间以使光分布均匀，并且防止光结构(lightstructure)穿透图像。然后，该漫射盘也需要用于吸移管的尖端的中心孔。

特别地，在具有多个(例如96或384个)井的多滴定(multititer)板中，孔自身对照明孔径具有限制作用。因此，如下情况可以发生，即来自环照明装置的光由于被井的边缘阻挡，因而该光未到达样品容器的底部。不证自明地，具有较小直径的环状光可以被优先使用。然而，照明装置然后仅具有非常小的数值孔径，而不管样品容器允许多少孔径。因而，如果环状光的尺寸与样品容器的类型匹配，则是有利的。不同的环状光源因而可以用于不同的样品容器。替代地，环状光的高度也可以被调节。并且，光照射到样品上的角度从而可以被监控。该高度可以手动地调节或使用马达调节。

可选地，可以使用具有中心通道的物镜(惯常的穿孔透镜或环状菲涅耳透镜)。装置的增加的复杂性有助于更好地使用光。为了使用尽可能多的光，中心通道应该尽可能狭窄，这是为什么该装置与吸移管的标准尖端偶尔不相容的原因。然后，可以使用薄壁管(thintube)，该薄壁管一方面引导待吸移的液体通过物镜，并且另一方面，保护物镜免于接触前述液体。如果光沿着引入通道被反射，则包括高度调节器的环状照明装置也可以被省略，并且惯常的光源，例如单个LED或灯丝(lightfilament)可以再次被取走。然后缺点是，照明装置孔径的径向部分被引入通道屏蔽。然而，因为整个系统可以被设计成使得光束直径在耦合点处比直接在样品上方明显更大，因而该屏蔽仅对样品的照明具有很小的影响，并且与吸移管的尖端直接在样品上方侧面地阻挡光束路径相比明显具有更小的破坏性。

应该理解，在没有脱离本发明的范围的情况下，上述特征和下文待说明的那些特征不仅适用于所声称的组合，而且还适用于其它组合或单独适用。

附图说明

在下文中参照附图通过示例更详细地说明了本发明，附图也公开了对本发明而言必要的特征。其中示出：

图1a-c是透射光显微镜的第一实施例的示意图，

图2是透射光显微镜的第二实施例的示意图，

图3是透射光显微镜的第三实施例的示意图，

图4是透射光显微镜的第四实施例的示意图，

图5是图1a-c的透射光显微镜的发展例(development)，

图6是图4的显微镜的元件的示图，

图7是图4的显微镜的发展例，

图8是图4的显微镜中的吸移管止动件的示图，以及

图9是用于透射光显微镜检查的方法的框图。

具体实施方式

图1a-c示出了三个不同版本的透射光显微镜1，该透射光显微镜用于使微量滴定板2在透射光中经受显微镜检查。显微镜1使用成像光束路径A在沿着光轴OA的透射光中对微量滴定板2的单独井4成像。环状光源3被提供用于透射光照明，所述光源从待经受显微镜检查的微量滴定板2的井4的上方照明。环状光源3是照明光束路径B的一部分，并且将辐射发射到井4上。能够照亮井4的底部的光锥被编号为5。使用吸移管的尖端6，试剂被滴入位于井4中的液体8内。吸移管的尖端6被引导穿过吸移管进入通道，该吸移管进入通道基本由位于光轴OA上的在环状光源3中的开口7形成。吸移管的尖端从而可以沿着光轴OA插入并且引入试剂，而同时地，物镜7和照相机10在成像光束路径中对井4进行成像并且例如还产生了井的底部的放大图像。

图1b和1c示出了在环状光源3的高度可以被调节的范围内的图1a的显微镜1的可选的发展例。入射辐射的角度因而改变。根据环状光源的高度，辐射的不同部分进入光锥5中。应当避免如图1b的情况，在该情况下，被开口7确定的区域太大，由于井4的纵横比使得没有光到达井的底部。通过沿着光轴OA移动环状光源3，可以确保光到达井的底部并且因而到达样品。

图2示出了图1a的显微镜的发展例，其中为了清楚起见成像光束路径A的元件未被示出。聚光器11在照明光束路径B中布置在环状光源3和微量滴定板2之间，所述聚光器具有适于开口7的孔12。开口7和孔12因而形成吸移管进入通道，吸移管7的尖端可以被推动穿过吸移管进入通道。同时地，聚光器11使待经受显微镜检查的井4的照明均匀。

图3示出了图2的显微镜1的修改例，其中，取代环状光源3，照明光束路径B具有带有下游物镜14的通常的光源13，该物镜14照射偏转镜15，偏转镜15沿着光轴OA联接照明光束。被照射的偏转镜15因而承担环状光源3的功能，与此前类似，该偏转镜具有开口7，用于清理出吸移管进入通道。

不证自明地，偏转镜15还能够在根据图1a-c的设计中用作环状光源3的替换。

唯一必要的是，照明元件(例如环状光源3或偏转镜15)具有用于吸移管进入通道的开口7。

图4示出了透射光显微镜1的另一个实施例。图4的显微镜1同样地被设计为使微量滴定板2经受显微镜检查。那些对应于图1a-c、2或3的显微镜元件的元件在图4中具有相同的附图标记。

试剂的引入和样品经受显微镜检查在图4的显微镜1中按时间进行。为此，显微镜1具有块体16，该块体具有腔17和通过通道18，该腔用于接收照明光束路径B的元件。

腔17在其下端处具有通路19，照明辐射可以沿着光轴OA被发射穿过该通路到达待经受显微镜检查的微量滴定板2的井4上。例如，用于发射照明辐射的光源和用于调节腔17中的照明辐射的对应物镜(出于简化的考虑未在图4中示出)被定位在那里。

图5示意性地示出了沿着线C-C通过块体16的截面。如图所示，块体16可以围绕旋转轴线20旋转。这是沿着箭头21的运动。沿着箭头21的旋转运动是在两个端位置之间移动块体16的单一的运动。图5示出了该两个端位置中的第一个位置，该第一个位置定位为使得腔17对准具有照明光束路径B的元件的光轴OA。可理解地，图5所示仅示出了通路的一点，作为用于光轴OA。

旋转，即沿着箭头21的单一的运动，可以替代地移动通过通道18经过在那里待经受显微镜检查的微量滴定板2和井4。然后，到达两个端位置中的第二个位置，在第二个位置通过通道18位于光轴OA上，并且试剂可以被引入微量滴定板2的井4中。

自然地，块体16也可以被修改。因而，例如，取代在顶部处关闭的容纳照明光束路径的元件的腔17，照明通道还可以设置在块体16中，并且如果对应的偏转镜在块体16处设置在通路19上方，则照明光束路径的元件可以布置在块体上方，如果块体16移动到图4或5示出的位置中，则只有该偏转镜接收辐射。

另一个修改例包括单一的运动，并非旋转运动，而是线性运动。然后，块体16在两个端位置之间移动。

图6和7示出了图1a-c或4的修改例。该修改例包括例如在DE102005033927A1中公开的培养腔22，用于显示微量滴定板的显微镜。培养腔22具有台部23，微量滴定板2可以在该台部上沿着箭头24移动。培养腔22覆盖有盖25并且通过横向样品保持器28关闭侧面。微量滴定板2通过台部23在培养腔中移动或可选地通过移动横向接收器28而移动。后者的方案的优点是，培养空间可以被保持得非常小并且因而仅需要较小的气体体积和较短的升温时间。

两个设计的优点在于以下事实，即全部的透射光照明装置位于培养空间的外侧。本文给出了与DE102005033927A1的差异。结果，例如所有的电气元件可以保持在培养腔22的增加的温度和大气湿度的区域的外侧。

培养腔22可以与环状照明元件(根据图1a-c的环状光源)或者还可以与根据图4的显微镜一起使用，即按时间顺序的吸移和显微镜成像。

在图1a-c的设计中，有利的是，盖25是显微镜的一部分并且具有透明部件25a，该透明部件25a终止于吸移管喷嘴26，该吸移管喷嘴沿着光轴OA行进通过环状光源(或偏转镜15)的开口7并且简化了吸移管的尖端的插入。盖25还可以用于进一步密封也在图7的设计中的培养空间(当然，这是可选的)。盖25然后具有孔29，如果块体16在第二端位置处则试剂可以通过该孔引入，通过通道18在该第二端位置处对准光轴OA。

图8示出了吸移管保持器33形式的可选的发展例，该吸移管保持器33可被用于图1a-c、2和3的设计中，或者也被用于图4、5和7的设计中。在图4、5和7的变形例中，保持器33位于通过通道18中，在图1a-c、2和3的变形例中，保持器33位于开口7中。这在图8中通过附图标记7/18被图示。保持器33具有接收器35，该接收器在其底端处逐渐变细进入轴环30中。轴环30用作止动件36，用于设置在吸移管的尖端6处的肩部32。如果吸移管6被推动进入接收器35中，则保持器33因而限定吸移管的尖端6的精确位置。

如箭头34所示，保持器33可以沿着光轴OA被调节以适应待实施的、如已经在说明书的综述部分所述的吸移管的尖端的各种长度，并且确保吸移管的尖端6的底端37在微量滴定板2的井4中的液体8的液面38以下。

本发明同样地涉及透射光显微镜和用于透射光显微镜检查的方法。对应的方法步骤使用控制设备C可选地被执行，该控制设备通过用于图4的显微镜的示例而被示出，但是该控制设备也可以被提供用于显微镜的其它实施例。

块体16可以沿着表示运动路径的箭头21移动，控制控制设备C，其中块体16被驱动机构(未示出)驱动。

图9示意性地示出了用于透射光显微镜检查的方法的框图，其中保持器33被使用。

在步骤S1中，首先关于吸移管的哪个尖端6被使用的检查被执行。有了该信息，肩部23和吸移管的尖端6的底端27之间的距离被确定。这发生在步骤S2中。

在步骤S3中，关于需要的样品平面是否位于物镜6的焦点处的检查被执行。如果情况就是这样(″+″交叉)，则方法跳到步骤S5。如果情况不是这样(″-″交叉)，则首先在步骤S4中对物镜进行聚焦。

在步骤S5中，焦点位置被读入并且样品的高度被确定。因为还已知样品的类型，因而从样品的该高度，自动知道液面28的高度。现在，已知底端37和肩部32之间的距离以及液面38，轴环30和保持器33的预期高度被计算(S6)。替代地，被用户预定的吸移管的尖端在样品平面上方的高度还可以被用作参数。然后，液体的高度不再有意义。

随后，在步骤S7中，保持器33在箭头34的方向上被调节，即沿着光轴OA被调节，使得关于液面38，通过吸移管的尖端6插入保持器33中的吸移管31被定位为使得吸移管的尖端6的底端37精确地浸入液体8中，该吸移管31的值已经在步骤S1和S2中被确定。当然，还可以部分地手动地执行步骤S7。为此，然后向用户给出关于高度的信息，他需要将止动件定位在该高度处以到达样品平面上方需要的吸移高度。

Claims (23)

1.一种透射光显微镜，所述透射光显微镜用于对呈井状的包含液体的样品容器(4)成像，其中所述透射光显微镜(1)包括：

-照明光束路径(B)，所述照明光束路径(B)用于使用照明光束从上方沿着光轴(OA)照亮样品容器(4)，

-成像光束路径(A)，所述成像光束路径(A)用于从下方沿着光轴(OA)对样品容器(4)成像，和

-吸移管进入通道，所述吸移管进入通道用于将试剂引入样品容器(4)中，

其中，所述透射光显微镜还包括：

-块体(16)，所述块体(16)具有通过通道(18)和用于照明光束的通路(19)，吸移管进入通道行进通过所述通过通道(18)，其中所述通过通道(18)和所述通路(19)在垂直于光轴(OA)的平面内彼此邻近，

-用于所述块体(16)的导向装置，所述导向装置提供用于块体(16)的第一位置和第二位置，并且提供第一位置和第二位置之间的路径，在第一位置所述通过通道(18)对准光轴(OA)并且在第二位置所述通路对准光轴(OA)，其中所述路径跟随单一的运动，和

-驱动机构，所述驱动机构使块体(16)以所述单一的运动在第一位置和第二位置之间移动。

2.根据权利要求1所述的透射光显微镜，其中所述单一的运动是旋转运动，优选地为在垂直于光轴(OA)的平面内的旋转运动。

3.根据权利要求1所述的透射光显微镜，其中所述单一的运动是精确地沿着一个轴线的线性运动，优选地为精确地沿着垂直于光轴(OA)的一个轴线的线性运动。

4.根据权利要求1所述的透射光显微镜，其中所述通过通道(18)具有环状轴环(30)，该环状轴环(30)被设计为用于吸移管的尖端的止动件。

5.根据权利要求4所述的透射光显微镜，其中所述止动件可以沿着光轴(OA)移动。

6.根据权利要求1所述的透射光显微镜，其中透明盖(25a)设置在样品容器(4)上方，所述盖在光轴(OA)上具有孔，试剂被引导通过所述孔。

7.一种用于呈井状的包含液体的样品容器(4)的透射光显微镜检查的方法，其中

-使用照明光束从上方沿着光轴(OA)照亮样品容器(4)，

-从下方沿着光轴(OA)对样品容器成像，并且

-经由吸移管进入通道将试剂引入样品容器(4)中，

其中

-使用块体(16)，所述块体(16)具有通过通道(18)和用于照明光束的通路(19)，吸移管进入通道行进通过所述通过通道(18)，其中所述通过通道(18)和所述通路(19)在垂直于光轴(OA)的平面内彼此邻近，

-利用第一位置和第二位置之间的单一的运动移动所述块体(16)，在所述第一位置通过通道(18)对准光轴(OA)并且在第二位置通路(19)对准光轴(OA)。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述单一的运动是旋转运动，优选地为在垂直于光轴(OA)的平面内的旋转运动。

9.根据权利要求7所述的方法，其中所述单一的运动是精确地沿着一个轴线的线性运动，优选地为精确地沿着垂直于光轴(OA)的一个轴线的线性运动。

10.根据权利要求7所述的方法，其中所述通过通道(18)具有环状轴环(30)，该环状轴环(30)被设计为用于吸移管的尖端的止动件。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述止动件可以沿着光轴(OA)移动。

12.根据权利要求8所述的方法，其中吸移管的尖端的底端(37)和样品容器(4)的底部、边缘或液面(38)之间的距离根据关于所使用的吸移管的尖端的信息被确定，并且止动件被设置为使得吸移管的尖端的底端(37)在距离液面(38)的预定位置，优选地在液面(38)以下。

13.根据权利要求8所述的方法，其中透明盖(25a)设置在样品容器(4)上方，所述盖在光轴(OA)上具有孔，试剂被引导通过所述孔。

14.一种透射光显微镜，所述透射光显微镜用于对呈井状的包含液体的样品容器(4)成像，其中所述透射光显微镜(1)包括：

-照明光束路径(B)，所述照明光束路径(B)用于使用照明光束从上方沿着光轴(OA)照亮样品容器(4)，其中所述照明光束路径(B)具有对准光轴的照明元件(3、15)，所述元件将照明光束照射到样品容器(4)上，

-成像光束路径(A)，所述成像光束路径(A)用于从下方沿着光轴(OA)对样品容器(4)成像，和

-吸移管进入通道，所述吸移管进入通道用于将试剂引入样品容器中，

其中

-照明元件(3、15)呈环状并且在光轴(OA)上具有开口(7)，所述吸移管进入通道行进通过所述开口。

15.根据权利要求14所述的透射光显微镜，其中所述照明元件是环状光源(3)或环状光束偏转元件(15)。

16.根据权利要求14所述的透射光显微镜，其中用于使照明光束会聚的聚光物镜(11)布置在照明元件(3、15)和样品容器(4)之间，所述物镜也在光轴(OA)上具有开口(12)。

17.根据权利要求14所述的透射光显微镜，其中吸移管进入通道具有在环状元件(3、15)下方的环状轴环(30)，所述轴环被设计为用于吸移管的尖端(6)的止动件(36)。

18.根据权利要求14所述的透射光显微镜，其中透明盖(25a)设置在样品容器上方，所述盖在光轴(OA)上具有孔(29)，试剂被引导通过所述孔。

19.一种用于呈井状的包含液体的样品容器(4)的透射光显微镜检查的方法，其中：

-使用照明光束从上方沿着光轴(OA)照亮样品容器(4)，其中使用与光轴(OA)对准的照明元件(3、15)，所述元件将照明光束照射到样品容器(4)上，

-从下方沿着光轴(OA)对样品容器(4)成像，并且

-经由吸移管进入通道将试剂引入样品容器(4)中，

其中

-使用环状照明元件(3、15)，所述环状照明元件在光轴(OA)上具有开口，所述吸移管进入通道行进通过所述开口。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述照明元件是环状光源(3)或环状光束偏转元件(15)。

21.根据权利要求19所述的方法，其中用于使照明光束会聚的聚光物镜(11)布置在照明元件(3、15)和样品容器(4)之间，所述物镜也在光轴(OA)上具有开口(12)。

22.根据权利要求19所述的方法，其中吸移管进入通道具有在环状元件(3、15)下方的环状轴环(30)，所述轴环被设计为用于吸移管的尖端(6)的止动件(36)。

23.根据权利要求19所述的方法，其中透明盖(25a)设置在样品容器上方，所述盖在光轴(OA)上具有孔(29)，试剂被引导通过所述孔。