CN104769110A - 核酸分析试剂盒及核酸分析方法 - Google Patents

Abstract

本发明利用很少种类的核酸准确地鉴定供于分析的多个样品的各自的来源。提供一种核酸分析试剂盒(100)，其具备保持含有核酸的识别探针(1)且支撑待检体的多个支撑体(2)。识别探针(1)包含具有已知的碱基序列的至少1种核酸并且在每个支撑体(2)中的核酸的种类和量中的至少一者不同并以能够混合于待检体的方式保持在支撑体(2)中。

Description

核酸分析试剂盒及核酸分析方法

技术领域

本发明涉及一种核酸分析试剂盒及核酸分析方法。

背景技术

以往，在核酸分析中，从提取待检体到供于分析该待检体中所含有的核酸期间，在进行从待检体提取核酸等前处理中进行多次容器的交换。通常，在以手工操作进行前处理的情况下，通过每进行一次容器交换时对交换前后的容器进行对应，从而防止样品取错。在待检体数目很多的情况下，进行容器的对应操作是很繁琐的，且发生样品取错的概率变高。

作为防止该样品取错的方案，已知有将识别子探针混合于待检体中，将识别子探针与待检体一起进行扩增的方法(例如，参照专利文献1。)。该识别子探针在通过与待检体相同的引物而被扩增的区域具有可对于附于各待检体中的个别编码进行解码的碱基序列。因此，在扩增待检体后，通过对扩增产物中所含有的识别子探针的个别编码进行解码，从而可特定扩增产物源自于哪个待检体。

另一方面，作为对于生物组织的切片中所含有的特定的分子的量或活性的空间分布进行解析的方法，已知有将识别靶分子的探针导入至切片上的多个位置，并将识别各探针的切片上的位置的标记物(Tag)附于该探针的方法(例如，参照专利文献2。)。从切片中回收与分子反应的探针，并分析附于探针的标记物，从而可知切片的各位置中的靶分子的量或活性。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2007-74967号公报

专利文献2：美国专利申请公开第2011/0245111号说明书

发明内容

发明要解决的问题

然而，专利文献1及2中记载的方法中，对于每个待检体需要准备具有不同碱基序列的识别子探针或标记物。即，在分析对象的待检体数目很多的情况下，有对于不得不准备很多种的识别子探针或标记物的不便。

本发明是鉴于上述问题而完成的，其目的在于提供一种利用很少种类的核酸就能很准确地鉴定供于分析的多个样品的各自的来源的核酸分析试剂盒及核酸分析方法。

用于解决问题的方案

为了实现上述发明目的，本发明提供以下的方法。

本发明的第1方式是一种核酸分析试剂盒，其具备多个支撑体，所述多个支撑体保持含有核酸的识别探针且支撑待检体，前述识别探针含有具有已知的碱基序列的至少1种核酸且每个前述支撑体中前述核酸的种类和量中的至少一者不同并以能够混合于前述待检体的方式保持在前述支撑体。

根据本发明的第1方式，在使待检体分别支撑于多个支撑体待检体时，保持在支撑体的识别探针中所含有的检测用的核酸混合于待检体中。此时在混合于各待检体中的识别用的核酸的种类和量中至少一者，在每个待检体中相互不同。因此，在对由支撑于支撑体的各待检体所制备的样品进行核酸分析时，通过对每个样品中所含有的识别用的核酸也进行解析，且对该核酸的种类和/或量也进行鉴定，从而可以基于该检测用的核酸的种类和/或量很准确地鉴定各样品源自于哪个待检体。

如此，通过使混合于各待检体中的识别用的核酸的种类和量中的至少一者不同，从而可以进行多个待检体相互间的识别，因此识别探针只要含有很少种类的核酸即可，从而能够利用很少种类的核酸来准确地鉴定多个样品的各自的来源。

上述第1方式中，可以具备对应表，所述对应表将前述多个支撑体与分别被该多个支撑体保持的前述识别探针的组成即前述核酸的种类和量的组合相对应。

以此方式，可以很容易地把握在哪个支撑体上保持有哪个组成的识别探针。

上述第1方式中，前述支撑体为收容前述待检体的容器，前述识别探针也可以被封入至前述容器内。

以此方式，仅向容器内投入待检体就可以很容易地将识别探针混合于待检体中。

上述第1方式中具备基板，所述基板能够沿着规定的分割线分割成多个芯片且粘贴有作为前述待检体的生物组织的切片，前述识别探针可分别被前述多个芯片保持。

以此方式，在对作为待检体的生物组织的切片的一部分进行分析的情况下，通过将切片粘贴于基板后并沿着分割线将基板和切片同时分割，从而可制备混合了一种识别探针的切片的片段。

上述第1方式中，前述核酸可以为DNA(脱氧核糖核酸)。

以此方式，可制成为适合于待检体中所含有的DNA的分析的构成。

上述第1方式中，前述核酸可以为RNA(核糖核酸)。

作为待检体的分析对象的核酸为RNA时，识别探针中所含有的核酸优选为RNA。在识别探针含有RNA时，为了不被RNA核糖核酸酶分解，也可使用被修饰的RNA例如寡核苷酸的2’位置取代为甲基的RNA等。

上述第1方式中，前述核酸可以为核酸类似物质。作为核酸类似物质，可以举出：如DNA或RNA这样的天然型核苷酸(天然存在的核苷酸)的侧链等被氨基等官能团修饰的物质、或者被蛋白质或低分子化合物等标识的物质。更具体地，例如可举出：桥联的核酸(Bridged nucleic acid：BNA)、2’-O,4’-C-乙烯桥联核酸(2’-O,4’-C-Ethylene-bridged Nucleic Acids：ENA)、天然型核苷酸的4’位氧原子被硫原子取代的核苷酸、天然型核糖核苷酸的2’位羟基被甲氧基取代的核苷酸、己糖醇核酸(Hexitol Nucleic Acid：HNA)、肽核酸(PNA)等。

上述第1方式中，前述DNA的碱基长度可为20个碱基以上且500个碱基以下。

以此方式，可使识别探针的制备及在核酸分析或前处理过程中的DNA操作更加容易。

上述第1方式中，保持在各前述支撑体的前述DNA的分子数可为100分子以上且100000分子以下。

以此方式，识别探针不会对于待检体中所含有的核酸的分析带来影响，从而能够确保识别探针的DNA的定量精度。

本发明的第2实施方式为核酸分析方法，其包括：探针添加工序：将包含具有已知的碱基序列的至少1种核酸的识别探针分别添加至多个待检体中；和核酸分析工序：对于各前述待检体中所含有的核酸进行分析。在前述探针添加工序中，将前述核酸的种类和量中的至少一者相互不同的前述识别探针添加至前述多个待检体中，在前述核酸分析工序中，对于添加至各前述待检体中的前述识别探针中所含有的前述核酸也进行解析。

根据本发明的第2实施方式，探针添加工序中将识别探针添加至待检体之后，核酸分析工序中，在对由该待检体制备的样品进行核酸分析时，通过对于各样品中所含有的检测用的核酸也进行解析，且对于该核酸的种类和/或量也进行鉴定，从而能够很准确地基于该检测用的核酸的种类和/或量来鉴定各样品源自于哪个待检体。

如此，通过使添加至各待检体的识别用的核酸的种类和量中的至少一者不同，从而可使多个待检体相互地识别，因此，识别探针只要含有很少种类的核酸即可，就能利用很少种类的核酸很准确地鉴定多个样品的各自的来源。

上述第2实施方式中，前述探针添加工序中，可以将前述待检体投入至收容前述识别探针的容器内。

以此方式，仅将待检体投入至容器就可很容易地将识别探针添加至待检体。

上述第2实施方式中，前述探针添加工序中进而包括切断工序：在散在并粘贴有前述识别探针的基板上粘贴生物组织的切片，且将粘贴有前述切片的基板与前述切片一起切断成含有一个识别探针的多个芯片，在前述核酸分析工序中，可对于附着于在前述切断工序中得到的前述芯片上的前述切片的一部分进行分析。

以此方式，可以很容易地对存在于切片的各位置上的核酸进行分析。

上述第2实施方式中，前述探针添加工序中进而包括切断工序：在生物组织的切片上散在并粘贴前述识别探针，并将粘贴有前述识别探针的前述切片切断成含有一个识别探针的多个片段，前述核酸分析工序中，也可对在前述切断工序中切断的前述切片的片段进行分析。

以此方式，可以很容易地对存在于切片的各位置的核酸进行分析。

上述第2实施方式中，可以在前述切断工序之前进而包括杂交工序：使用具有与靶核酸互补的已知的碱基序列的核酸探针对前述切片进行原位杂交(in situ hybridization)。

以此方式，在核酸分析工序中可以基于核酸探针检测出靶核酸，并可以提高靶核酸的检测灵敏度。

上述第2实施方式中，前述核酸分析工序中，可使用定量核酸扩增法或能够进行核酸定量的碱基序列读取装置对前述待检体及前述识别探针中所含有的核酸进行分析。

以此方式，能够更准确地定量源自各待检体的样品中所含有的核酸。

上述第2实施方式中，前述识别探针中所含有的前述核酸也可以为DNA。前述DNA的碱基长度优选为20个碱基以上且500个碱基以下，各前述识别探针中所含有的前述DNA的分子数优选为100分子以上且100000分子以下。

上述第2实施方式中，前述核酸分析工序中，使用定量核酸扩增法对添加至各前述待检体中的前述DNA进行分析，前述定量核酸扩增法中的前述DNA的扩增率可大致相同。更优选的是，前述定量核酸扩增法为PCR(聚合酶链式反应)法，各前述DNA的扩增率的差为1.9倍以下，更优选为1.1倍以下。

以此方式，能够更准确地定量源自各待检体的样品中所含有的DNA。

发明的效果

本发明具有如下效果：利用很少种类的核酸就能够很准确地鉴定供于分析的多个待检体的各自的来源。

附图说明

图1是本发明的第1实施方式中的核酸分析试剂盒的整体结构图。

图2是对于使用图1的核酸分析试剂盒的核酸分析方法进行说明的流程图。

图3是本发明的第2实施方式中的核酸分析试剂盒的整体结构图。

图4A是对于图3的核酸分析试剂盒所具备的基板的使用方法进行说明的图，表示基板分割前。

图4B是对于图3的核酸分析试剂盒所具备的基板的使用方法进行说明的图，表示基板分割后。

图5是对于使用图3的核酸分析试剂盒的核酸分析方法进行说明的流程图。

图6是对于本发明的第3实施方式中的核酸分析方法即使用图3的核酸分析试剂盒的另一个核酸分析方法进行说明的流程图。

具体实施方式

(第1实施方式)

以下，参照图1及图2对于本发明的第1实施方式中的核酸分析试剂盒100及使用该试剂盒的核酸分析方法进行说明。

关于本实施方式中的核酸分析试剂盒100，如图1所示，具备：封入了识别探针1的多个容器(支撑体)2和对应表3，所述对应表3将各容器2上附有的容器号与封于各容器2的识别探针1的组成相对应。

容器2是例如通常在分子生物学实验中所使用的1.5mL的微量离心管。识别探针1在干燥状态下粘贴于容器2的底部的内表面。

识别探针1包含具有相互不同的已知碱基序列的多种核酸。这些多种核酸以每个容器2相互不同的配混比进行混合，识别探针1的组成即识别探针1中所含有的核酸的种类及其量在每个容器2中不同。

在本实施方式中，对作为核酸使用4种DNA1、DNA2、DNA3和DNA4的情况进行说明。DNA1、DNA2、DNA3和DNA4以4个阶段各自不同的配混量进行配混。即，在本例中能够制备配混4×4×4×4＝256种具有相互不同配混比的识别探针1，核酸分析试剂盒100所具有的容器2的最大数为256个。

需要说明的是，识别探针1中所含有的核酸的种类可根据待检体的靶核酸的种类进行适宜地选择，也可使用RNA等其他种类的核酸。当靶核酸为DNA时，识别探针1优选含有DNA；当靶核酸为RNA时，识别探针1优选含有RNA。当识别探针1含有RNA时，为了不使RNA被分解酶分解，也可使用被修饰的RNA例如寡核苷酸的2’位置取代为甲基的RNA。

关于DNA1～DNA4的碱基长度，从合成及分析中操作方便的观点考虑，优选为10个碱基以上且1000个碱基以下，更优选为20个碱基以上且500个碱基以下。另外，在后述的核酸分析工序中为了防止DNA1～DNA4对于作为靶的核酸的分析带来影响，并且能够充分地确保DNA1～DNA4的定量性，在各容器2中所封入的DNA1～DNA4的总分子数优选为100分子以上且100000分子以下。然而，毫无疑问根据核酸的分析方法的精度、灵敏度也可将识别探针1的总分子数设定在该范围以外。

在对应表3中，作为各容器2内的识别探针1的组成即各识别探针1所含有的核酸的种类及其量，核酸的种类(DNA1～DNA4)及其配混比与各容器2的容器号以1对1的方式进行对应。

接着，对于使用以此方式构成的核酸分析试剂盒100的核酸分析方法，参照图2的流程图进行说明。

在使用本实施方式中的核酸分析试剂盒100对待检体中所含有的靶DNA进行分析时，首先将待检体投入至容器2中，在该容器2内使待检体与识别探针1充分地混合(步骤S1，探针添加工序)。在此情况下，预先记录将哪个待检体投入到哪个容器号的容器2中(步骤S2)。

其次，对各待检体实施用于核酸分析的前处理。例如当待检体为生物组织的片段或细胞等时，进行从待检体提取DNA的处理。接着，通过使用定量的PCR等定量核酸扩增法对经前处理而由各待检体中得到的样品进行分析，从而对样品中所含有的靶DNA进行检测和定量(步骤S3，核酸分析工序)。

在此，被封入至容器2中的识别探针1也与源自待检体的靶DNA一起存在于各样品中。对于构成识别探针1的4种DNA1～DNA4而言，在步骤S3中也与靶DNA一起实施检测和定量。因此，4种DNA1～DNA4具有通过靶DNA用的引物而扩增的碱基序列，或者在步骤S3中也添加DNA1～DNA4用的引物。由此，对于每个样品而言得到DNA1～DNA4的配混比(步骤S4)。

步骤S3的定量核酸扩增法中，优选以大致相同的扩增率对各样品中的DNA1～DNA4进行扩增。具体而言，DNA1～DNA4的扩增率的差优选为1.9倍以下，更优选为1.1倍以下。

接着，通过将在步骤S4得到的各样品的DNA1～DNA4的配混比与对应表3相对照，从而能够特定各样品是源自于投入至哪个容器号的容器2中的待检体(步骤S5)。

如此，本实施方式通过对由各待检体所制备的样品中所含有的识别探针1进行分析，从而可鉴定该样品的来源。通常，在分子生物学实验中，从将待检体投入至容器2到靶DNA的分析结束为止的期间，从待检体或该待检体得到的样品被多次从一个容器转移至其他的容器。本实施方式具有如下优点：将样品进行转移时即便不记录将哪个样品移至哪个容器中，基于最终供于核酸分析的样品中所含有的识别探针1的配混比，也能够很准确地鉴定该样品的来源。

进而还具有如下优点：通过使多种核酸的配混量不同，从而即使使用极少种类的核酸，也可以很容易地制造可相互识别的多种识别探针1，并能够鉴定多个样品来源。

需要说明的是，在本实施方式中使用定量核酸扩增法进行核酸分析，但关于分析核酸的方法，只要可对样品中所含有的特定的核酸进行检测和定量即可，替代上述的定量核酸扩增法也可使用具有核酸定量功能的碱基序列读取装置(DNA测序)。

即使以此方式进行，也可在对样品中所含有的靶DNA进行检测和定量的同时得到构成识别探针1的DNA1～DNA4的配混比。

(第2实施方式)

接着，对于本发明的第2实施方式中的核酸分析试剂盒200及使用该试剂盒的核酸分析方法，参照图3至图5进行说明。

需要说明的是，在本实施方式中以与第1实施方式不同的点为主进行说明，对于与第1实施方式相同的构成以相同的符号标示并省略说明。

本实施方式中的核酸分析试剂盒200，如图3所示，如下点与第1实施方式不同，代替容器2而具备粘贴有多种识别探针1的基板4，在对应表3’中，各识别探针1的组成与其在基板4中的粘贴位置相对应。

基板4是如盖玻片样的适用于粘贴从生物组织切出的切片的平板。基板4设置有分割线4a，分割线4a将基板表面以棋盘的格状分割成多个区域。在通过该分割线4a分割的各区域中粘贴有1种识别探针1，识别探针1中所含有的DNA1～DNA4的配混比在各区域中相互不同。向基板4粘贴识别探针1时使用例如喷墨式打印机或用于DNA芯片制造的点样仪。

在本实施方式中设想，与第1实施方式相同地，将4种DNA1、DNA2、DNA3和DNA4以4个阶段各自不同的配混量进行混合的情况。因此，通过分割线4a将基板4分割成256以下数目的区域即可。如图3所示的基板4被分割成10行×10列并形成100个区域。

在对应表3’中，各区域的位置与在各区域所粘贴的识别探针1所具有的DNA1～DNA4的配混比之间以1对1的方式进行对应。每个区域的位置使用行号a、b、c、…、j及列号A、B、…、J的方式进行特定。

接着，对于使用以此方式构成的核酸分析试剂盒200的核酸分析方法，参照图5的流程图进行说明。

在使用本实施方式中的核酸分析试剂盒200对生物组织的切片5中所含有的核酸进行分析时，如图4A所示，首先将从生物组织切出的切片5粘贴于基板4(步骤S21，探针添加工序)。接着，如图4B所示，沿着分割线4a切断基板4和切片5，从而得到在至少一部分的芯片上附着有待检体的切片5的片段的100个芯片(支撑体)4b(步骤S22，切断工序)。

对于切断基板4和切片5的方法没有特别限定，例如，通过将预先切断的芯片4b在可伸展的片上进行2维排列从而形成基板4，并将切片5粘贴于基板4后使片伸展并将芯片4b之间分开，从而能够沿着由芯片4b之间的界限所形成的分割线4a同时切断基板4和切片5。

得到的芯片4b分别例如投入至不同的微量离心管中，对于附着于芯片4b的切片5的片段进行了核酸提取等的前处理。接着，将经前处理而从各待检体中得到的样品与第1实施方式的步骤S3相同地进行核酸分析，从而对样品中所含有的靶DNA进行检测和定量(步骤S23，核酸分析工序)。

在此，粘贴于基板4的1种识别探针1与源自片段的靶DNA一起存在于由切片5的各片段所制备的各样品中。因此，以与上述步骤S3～S5相同地方式，对于各样品，通过得到DNA1～DNA4的配混比(步骤S24)，且将得到的各样品的DNA1～DNA4的配混比与对应表3’相对照，从而能够特定各样品是源自于哪个位置的片段(步骤S25)。

本实施方式的效果与上述的第1实施方式相同，因此省略说明。

需要说明的是，在本实施方式中，虽在基板4的各区域粘贴有识别探针1，但也可代替这种方式，在基板4上粘贴切片5后，使用上述的喷墨式打印机或点样仪等在切片5上粘贴识别探针1。在此情况下，以通过分割线4a所分割的各区域各含有一种识别探针1的方式也能决定识别探针1的粘贴位置。

即使这样做也能基于各样品中所含有的识别探针1的组成来准确地特定供于核酸分析的各样品分别是源自于切片5的哪个位置的片段。

(第3实施方式)

接着，对于本发明的第3实施方式中的核酸分析试剂盒及使用该核酸分析试剂盒的核酸分析方法，参照图6进行说明。本实施方式涉及使用第2实施方式中的核酸分析试剂盒200的另一个核酸分析方法。因此，对于与第2实施方式不同的方面主要进行说明，对于与第2实施方式相同的构成用相同的符号标示并省略说明。

根据本实施方式中的核酸分析方法，如图6所示，步骤S21中将切片5粘贴于基板4上后，通过原位杂交在切片5上使检测用的DNA探针(核酸探针。以下称为检测用探针。)与作为靶的RNA缔合(步骤S31，杂交工序)。使检测用探针缔合后，与第2实施方式相同地分割并提取切片5(步骤S22)，并进行核酸分析(步骤S23)，取得识别探针1的配混比(步骤S24)，基于对应表3’来鉴定待检体(步骤S25)。然而，在本实施方式中，在步骤S23中对检测用探针也进行分析，在步骤S24中也能取得各待检体中所含有的检测用探针的种类和量。

如果不使用预先粘贴有识别探针1的基板4，而在基板4上粘贴切片5后使用喷墨式打印机等粘贴识别探针1的情况下，在步骤S31的杂交之后将识别探针1粘贴于切片5。

根据本实施方式中的核酸分析方法，除了第2实施方式的效果以外，在用定量核酸扩增法对靶核酸进行解析的情况下，通过使用已知的检测用探针可使扩增效率大致相同，而且可提高检测的精度。另外，特别是靶核酸为RNA时，在进行核酸分析时能够不将RNA转换为互补的DNA而通过定量核酸扩增法和DNA测序来进行解析。而且，通过将易分解的RNA置换为DNA来进行检测，可以提高检测的精度和灵敏度。

需要说明的是，在上述的第1～第3的实施方式中，对于含有4种核酸的识别探针1进行了说明，但识别探针1中所含有的核酸的种类的数目不限于这些，可根据实际需要选择合适的数目。例如，在第2实施方式中，优选为适用于喷墨式打印机或点样仪的数目。具体地，识别探针1所含有的核酸的种类的数目，在使用4色用喷墨式打印机时，优选核酸种类的数目为4以下，使用点样仪时，优选为点样仪所配备的针的数目以下。

另外，在上述的第1～第3的实施方式中，为了通过核酸分析而准确地得到DNA1、DNA2、DNA3和DNA4的配混比，对于DNA1、DNA2、DNA3和DNA4的各自的配混量而言，当最小的配混量作为1时，以2倍、3倍、4倍不同的方式进行设定。然而，能够以高精度检测样品中所含有的DNA1、DNA2、DNA3和DNA4的量时，也可以使DNA1、DNA2、DNA3和DNA4各自的配混量以更小的比率进行变化。

另外，在上述的第1～第3的实施方式中，识别探针1虽含有多种核酸，但根据分析对象的待检体的数目或核酸分析的定量精度等条件，识别探针1也可仅含有1种核酸。

即，在以第1实施方式为例进行列举时，核酸分析试剂盒100在具备n个(n为自然数。)容器2时，各容器2中封入仅含有1种核酸的识别探针1，并使该核酸的量在每个容器2中n级不同。

即使这样做，通过对供于核酸分析的样品中的识别探针1进行分析，从而可以鉴定样品的来源。

附图标记说明

100，200 核酸分析试剂盒

1 识别探针

2 容器(支撑体)

3，3’ 对应表

4 基板

4a 分割线

4b 芯片(支撑体)

5 切片

S1，S21 探针添加工序

S3，S23 核酸分析工序

S22 切断工序

S31 杂交工序

Claims (18)

1.一种核酸分析试剂盒，其具备多个支撑体，所述多个支撑体保持含有核酸的识别探针且支撑待检体，

所述识别探针包含具有已知的碱基序列的至少1种核酸，且在每个所述支撑体中的所述核酸的种类和量中的至少一者不同并以能够混合于所述待检体的方式保持在所述支撑体中。

2.根据权利要求1所述的核酸分析试剂盒，其具备对应表，所述对应表将所述多个支撑体与分别被该多个支撑体保持的所述识别探针的所述核酸的种类和量的组合相对应。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的核酸分析试剂盒，其中，

所述支撑体为收容所述待检体的容器，

所述识别探针被封入所述容器内。

4.根据权利要求1或权利要求2所述的核酸分析试剂盒，其具备基板，

所述基板能够沿着规定的分割线分割成多个芯片且粘贴有作为所述待检体的生物组织的切片，

所述识别探针分别被所述多个芯片保持。

5.根据权利要求1～权利要求4中任一项所述的核酸分析试剂盒，其中，所述核酸为DNA。

6.根据权利要求5所述的核酸分析试剂盒，其中，所述DNA的碱基长度为20个碱基以上且500个碱基以下。

7.根据权利要求5或权利要求6所述的核酸分析试剂盒，其中，保持在各所述支撑体的所述DNA的分子数为100分子以上且100000分子以下。

8.一种核酸分析方法，其中包括以下工序：

探针添加工序：分别向多个待检体中添加包含具有已知的碱基序列的至少1种核酸的识别探针，及

核酸分析工序：对各所述待检体中所含有的核酸进行分析，

所述探针添加工序中，将所述核酸的种类和量中的至少一者相互不同的所述识别探针向所述多个待检体中添加，

所述核酸分析工序中，对于向各所述待检体中添加的所述识别探针中所含有的所述核酸也进行解析。

9.根据权利要求8所述的核酸分析方法，其中，所述探针添加工序中，将所述待检体投入至收容所述识别探针的容器内。

10.根据权利要求8所述的核酸分析方法，其中，

所述探针添加工序中，在散在并粘贴有所述识别探针的基板上粘贴生物组织的切片，

进而包括切断工序：将粘贴有所述切片的基板与所述切片一起切断成含有一个识别探针的多个芯片，

所述核酸分析工序中，对于附着于在所述切断工序中得到的所述芯片上的所述切片的一部分进行分析。

11.根据权利要求8所述的核酸分析方法，其中，

所述探针添加工序中，在生物组织的切片上散在并粘贴所述识别探针，

进而包括切断工序：将粘贴有所述识别探针的所述切片切断成含有一个识别探针的多个片段，

所述核酸分析工序中，对于在所述切断工序中切断的所述切片的片段进行分析。

12.根据权利要求10或权利要求11所述的核酸分析方法，其还包括杂交工序：在所述切断工序前，使用具有与靶核酸互补的已知的碱基序列的核酸探针对于所述切片进行原位杂交。

13.根据权利要求8～权利要求12中任一项所述的核酸分析方法，其中，所述核酸分析工序中，使用定量核酸扩增法或能够进行核酸定量的碱基序列读取装置对所述待检体及所述识别探针中所含有的核酸进行分析。

14.根据权利要求8～权利要求13中任一项所述的核酸分析方法，其中，所述识别探针中所含有的所述核酸为DNA。

15.根据权利要求14所述的核酸分析方法，其中，所述DNA的碱基长度为20个碱基以上且500个碱基以下。

16.根据权利要求14或权利要求15所述的核酸分析方法，其中，各所述识别探针中所含有的所述DNA的分子数为100分子以上且100000分子以下。

17.根据权利要求14～权利要求16中任一项所述的核酸分析方法，其中，

所述核酸分析工序中，使用定量核酸扩增法对添加于各所述待检体中的所述DNA进行分析，

所述定量核酸扩增法中的所述DNA的扩增率大致相同。

18.根据权利要求17所述的核酸分析方法，其中，

所述核酸分析工序中，使用PCR法对添加于各所述待检体中的所述DNA进行分析，

所述PCR法中的各所述DNA的扩增率的差为1.9倍以下。