CN104592046A - 光学活性的缬氨酸复合物及其生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种光学活性的缬氨酸复合物及其生产方法，由一摩尔L-缬氨酸和一摩尔N-苯甲酰-L-丙氨酸组成，N-苯甲酰-L-丙氨酸在有D-缬氨酸，其他氨基酸，DL-缬氨酸合成过程中的杂质，和水解或发酵蛋白质得到的粗品L-缬氨酸同时存在的条件下，选择性的同L-缬氨酸反应形成新型晶体复合物，有光学活性的L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸可作为中间体用于DL-缬氨酸的光学拆分和纯化L-缬氨酸。

Description

光学活性的缬氨酸复合物及其生产方法

技术领域

本发明是关于一个具有光学活性的缬氨酸复合物：缬氨酸N-苯甲酰丙氨酸，分子式如下所示：

R代表位于邻位，间位和对位的氢，氟，氯，溴，甲基，异丙基和硝基基团，n为0，1/2和1及制备该复合物的一种方法。R基团也可以在苯环上二取代或三取代。

本发明中的新型化合物可作为中间体用于消旋的DL-缬氨酸的光学拆分，和纯化由水解蛋白质或微生物发酵得到的L-缬氨酸。

发明背景

具有光学活性的缬氨酸是制药和农业产品生产中一种重要的原材料。L-缬氨酸是制备缬沙坦，缬更昔洛韦，利托那韦和洛匹那韦的关键起始原料；D-缬氨酸则用于制备截短侧耳素类抗生素沃尼妙林和合成除虫菊精类杀虫剂氟胺氰菊酯。作为一种重要的必需氨基酸，L-缬氨酸在人类和动物营养中广泛应用。

人工合成的缬氨酸是外消旋的产物(DL-形式)，需要进行光学拆分。另外，通过蛋白质水解或合适的微生物发酵得到的L-缬氨酸，通常混杂含有其他与其化学物理性质相似的氨基酸，如L-丙氨酸，L-亮氨酸和L-异亮氨酸。L-缬氨酸和这些杂质氨基酸的分离是工业生产中的一个主要挑战。

传统的拆分DL-缬氨酸的方法包括以下几种：

(1)酰基转移酶不对称水解N-乙酰基缬氨酸，得到L-缬氨酸和N-乙酰基D-缬氨酸。酸水解N-乙酰基D-缬氨酸得到D-缬氨酸。

(2)直接拆分DL-缬氨酸盐酸盐(美国专利NO.3,182,079和NO.4,667,054)或者通过优先结晶法拆分DL-缬氨酸二甲苯磺酸盐(日本发明62096454A)，得到L-缬氨酸和D-缬氨酸。

(3)利用光学活性拆分剂拆分DL-缬氨酸，如N-乙酰基天冬氨酸(美国专利NO.4,610,827)，二苯甲酰基酒石酸(中国专利1477096A，101659622A)，二乙酰基酒石酸(中国专利102796018B)，2-苯氧基丙酸(日本发明2006169158A)和苯乙基磺酸(美国专利NO.4,519,955)。

然而，(1)中的酶分离方法有明显的缺点，该方法需要乙酰化DL-缬氨酸并且需要使用昂贵的酶。

优先结晶拆分方法(2)很难控制，且反应放大存在困难。

本发明的发明者按照已知的方法(3)用光学活性拆分剂进行拆分，发现整个过程若要实现工业生产有极多缺点。N-乙酰基-L-天冬氨酸与L-缬氨酸形成复合物的选择性差，产率低。即使从中间体复合物反复结晶，L-缬氨酸的旋光纯度并不令人满意。

尽管二苯甲酰-L-酒石酸和二乙酰基-L-酒石酸是有效拆分DL-缬氨酸的拆分剂，但是它们在工作条件下不稳定，会部分水解为酒石酸，苯甲酸和乙酸。这些拆分剂的回收和循环使用存在问题，因此此方法的经济性不好。

光学活性的2-苯氧基丙酸和2-苯乙基磺酸只能部分拆分DL-缬氨酸，且产品的旋光纯度低。而且，这两种拆分剂价格昂贵，没有商业化，且制备过程复杂。

为了纯化粗品L-缬氨酸得到高纯度的产品，美国专利NO.5,689,001和NO.6,072,083分别发明了使用对异丙基苯磺酸或对乙基苯磺酸制备晶体缬氨酸盐中间体的方法。但是，这两种磺酸没有选择性，它们与L-缬氨酸形成的盐在水中有一定的溶解度(分别为7.8％和14.5％)。因此，使用这些磺酸的方法得到的L-缬氨酸产率低，生成的产品若要应用于生产制药，纯度需要进一步提高。

在对发展商业可行的光学拆分DL-缬氨酸并纯化L-缬氨酸的方法进行调研之后，本发明的发明者发现使用有旋光活性的N-苯甲酰-L-丙氨酸选择性的同L-缬氨酸形成新型晶体复合物，L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸，由一摩尔L-缬氨酸和一摩尔N-苯甲酰-L-丙氨酸组成。即使在D-缬氨酸，其他氨基酸(如丙氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，丝氨酸，苯丙氨酸，酪氨酸，蛋氨酸，天冬氨酸和谷氨酸)，以及其他在制备DL-缬氨酸过程和蛋白质水解发酵过程中产生的杂质存在的情况下，依然选择性的得到该新型晶体复合物。这个发现是本发明形成的基础。发明内容

本发明的目的是提供一种光学活性的缬氨酸复合物，本发明还提供一种光学活性的缬氨酸复合物生产方法，不需要将缬氨酸转化为可溶性的衍生物；旋光活性的拆分剂或选择性沉淀剂都稳定，廉价并容易高产率的回收再使用；作为一个工业可行的方法，本方法得到的最终产品的产率和纯度都极高；本方法中水是最适合的溶剂。

本发明是关于一个具有光学活性的复合物，缬氨酸N-苯甲酰丙氨酸，由一摩尔缬氨酸和一摩尔N-苯甲酰丙氨酸组成，分子式如下：

R代表位于邻位，间位和对位的氢，氟，氯，溴，甲基，异丙基和硝基基团，n为0，1/2和1及制备该复合物的一种方法。R基团也可以在苯环上二取代或三取代。缬氨酸N-苯甲酰丙氨酸中的缬氨酸和丙氨酸可以为D和L的形式。

更具体来说，本发明与L-缬氨酸有关：N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物及其作为中间体用于DL-缬氨酸的光学拆分和粗品L-缬氨酸的纯化。当N-苯甲酰-D-丙氨酸用作拆分剂时，D-缬氨酸将以其中间体的形式得到：N-苯甲酰-D-丙氨酸复合物。

被旋光拆分的缬氨酸的组成可以为含有L-异构体和D-异构体的外消旋混合物，也可以为含有一种异构体超过其对映异构体含量一半以上的混合物。同时该方法也适用于含有合成过程中生成的乙内酰脲的粗品DL-缬氨酸水溶液。

根据本发明的方法可以从任何含有L-缬氨酸的水溶液中提取纯化出L-缬氨酸。任何含有L-缬氨酸的水溶液包括：水解蛋白质(如豆蛋白和角蛋白)后，分离提取基础氨基酸得到的氨基酸混合溶液；培养可积聚L-缬氨酸的微生物发酵后得到的溶液；及从将该发酵溶液中除去细胞后得到的溶液，等等。

本发明中使用的N-苯甲酰丙氨酸制备容易且廉价，按照Schotten-Baumann反应的条件将丙氨酸酰化即可。例如，N-苯甲酰-L-丙氨酸由L-丙氨酸在碱性条件下同苯甲酰氯反应，然后用酸，如硫酸，盐酸，甲酸和乙酸，酸化即可，然后过滤离心后分离出晶体N-苯甲酰-L-丙氨酸。

N-苯甲酰-L-丙氨酸的可以使用酸的形式或是其水溶液性盐的形式。合适的水溶性的盐包括：碱金属盐如钠盐和钾盐，或铵盐。N-苯甲酰-L-丙氨酸或其水溶性的盐的使用量为等摩尔或超过溶液中含有的L-缬氨酸的量，最好为每摩尔L-缬氨酸使用0.9到1.1摩尔N-苯甲酰-L-丙氨酸。在本发明的方法中也许可以使用过量的N-苯甲酰-L-丙氨酸或其盐，但使用大大过量的N-苯甲酰-L-丙氨酸并不会提高从溶液中提取L-缬氨酸的效率。

特别值得注意的是,N-苯甲酰-L-丙氨酸完全不会和D-缬氨酸形成复合物。当N-苯甲酰-L-丙氨酸和过量的D-缬氨酸同时溶解在水中并冷却结晶，只析出N-苯甲酰-L-丙氨酸晶体，而D-缬氨酸则留在溶液中。过滤和水洗后，得到不含任何D-缬氨酸的高纯N-苯甲酰-L-丙氨酸。当过量的对应L-缬氨酸的N-苯甲酰-L-丙氨酸用作旋光拆分DL-缬氨酸时，之析出L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物晶体和过量的N-苯甲酰-L-丙氨酸晶体。N-苯甲酰-L-丙氨酸选择性的同L-缬氨酸反应，使得其旋光拆分的过程极高效且节约成本。

本发明还发现N-苯甲酰-L-丙氨酸不仅选择性的和L-缬氨酸反应，而且在本发明测试过的其他氨基酸存在的情况下也只和L-缬氨酸络合。不同N-苯甲酰-L-丙氨酸反应络合的氨基酸可为天然氨基酸，如丙氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，丝氨酸，甘氨酸，半胱氨酸，谷氨酸，蛋氨酸，苏氨酸，酪氨酸，脯氨酸，天冬酰胺，天冬氨酸，谷氨酸，苯丙氨酸及色氨酸；也可为非天然氨基酸，如苯基甘氨酸，对羟基苯基甘氨酸，2-氨基丁酸，正亮氨酸，高苯丙氨酸。向L-缬氨酸和其他氨基酸的混合溶液中加入N-苯甲酰-L-丙氨酸，只会析出L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸晶体，其他的氨基酸仍留在溶液中。这个新发现提供了一个工业可行性很好的通过L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸中间体纯化L-缬氨酸的方法。

本发明使用的溶液没有特别的限制，缬氨酸复合物和缬氨酸于室温至其沸点之间的温度下溶解在溶剂中，通过将溶液冷却，浓缩或向其中加入其他溶剂实现微溶性复合物的分离。合适的溶剂包括水，亲水性的溶剂(如甲醇，乙醇，异丙醇，丙酮，醋酸，N,N-二甲基甲酰胺和N-甲基吡咯烷酮)及其混合物。水是最适合本发明中方法的溶剂。

尽管复合物溶液的制备温度没有特别的限制，0摄氏度以上即可，但最好温度范围为45摄氏度到溶剂的沸点之间。

尽管结晶的温度没有特别的限制，在溶剂的沸点温度以下即可，但最好温度范围为0到60摄氏度之间。

结晶过程的搅拌时间没有特别的限制，30分钟搅拌即足够。

尽管光学活性复合物的结晶过程中不一定需要加入晶种，但加入少量的晶种无需置疑的会加快结晶析出的速度。

另外，结晶过程中如果加入醛可以显著的提高折分度。可以使用的醛包括芳香醛和脂肪醛，例如乙醛，丙醛，丁醛，异丁醛，乙二醛，乙醛酸，苯甲醛，水杨醛，对羟基苯甲醛，茴香醛和香草醛。这些醛的用量相对于DL-缬氨酸的含量一般为0.01到2摩尔当量，最好为0.02到0.1摩尔当量。

尽管在醛存在的条件下，结晶过程的搅拌时间没有特别的限制，但为了提高微溶性复合物的产率，最好搅拌较长的时间，如3到48小时。

L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸在溶液中的浓度一般为10％到60％质量分数，最好为25％到45％质量分数。然而实际溶度则由过滤L-缬氨酸之后，溶液中的D-缬氨酸的溶液所决定。已知在室温条件下D-缬氨酸的溶解度只有8％到10％。如果残余D-缬氨酸的浓度超过了其溶解度，D-缬氨酸将从溶液中析出，使得L-缬氨酸的旋光纯度变低。

为了进一步提高产率，发现在含有pKa为0.90到2.10之间的酸性化合物的水溶液中可以形成L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物；旋光拆分和纯化母液的量，可以减少为不使用酸性化合物时的1/2到1/5之间。

本发明使用的酸性化合物包括盐酸，氢溴酸，硫酸，亚硫酸，硫酸氢根，磷酸，亚磷酸，氨基磺酸，有机磺酸等，其中硫酸，硫酸氢根和盐酸最好。

酸性化合物的用量与D-缬氨酸和其他氨基酸的量基本一样。酸性化合物将与D-缬氨酸和其他氨基酸生成酸性的盐，这些盐比其原本中性的氨基酸形式溶解性好。

析出的L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸晶体可以通过传统的固液分离方法实现分离，如过滤或离心。虽然分离出来的晶体纯度很高，但是它们还可以经过传统的纯化方法，如冲洗，脱水或重结晶，进一步纯化。

因此得到的L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸晶体由1摩尔L-缬氨酸和1摩尔N-苯甲酰-L-丙氨酸组成，这个新型化合物的性质如下：

白色针状晶体。

微溶于甲醇；不溶于乙醇，丙酮，氯仿和甲苯。

水中溶解度为：1.6％质量分数(25摄氏度)

元素分析：实测：碳58％,氢7.1％，氮9.1％；计算：碳58.05％，氢7.15％，氮9.03％。

根据已知工艺的方法，用酸或碱水解旋光活性的L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物得到高纯度旋光活性的L-缬氨酸。例如，分离的实现可以通过酸化复合物水溶液，沉淀出N-苯甲酰-L-丙氨酸，再将酸性溶液通过离子交换柱得到L-缬氨酸的水溶液，蒸馏后得到L-缬氨酸晶体。

综上所述，本发明中的新型化合物是一个非常有用的旋光拆分DL-缬氨酸及纯化L-缬氨酸的中间体。本发明的方法与已知的方法相比有以下优点：

1.不需要将缬氨酸转化为可溶性的衍生物；

2.旋光活性的拆分剂或选择性沉淀剂都稳定，廉价并容易高产率的回收再使用；

3.作为一个工业可行的方法，本方法得到的最终产品的产率和纯度都极高。

4.本方法中水是最适合的溶剂。

下面的实施例将阐述本发明的具体应用，但不仅限于此。若精通工艺，可以简单的修改细节以适合于投入和预期的产出，并不影响本发明的方法。

具体实施方式

L-缬氨酸，D-缬氨酸及两者N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的化学纯度和旋光纯度，通过手性HPLC方法在以下的条件下检测：

分离柱：Crownpak CR(+)，150×4毫米

流动相：pH 1.3高氯酸；流动速率：1.0毫升/分钟

分离柱温度：25摄氏度

检测器：Agilent 1100(紫外检测器，200纳米)

实施例1

24克DL-缬氨酸和19.3克N-苯甲酰-L-丙氨酸混合于200毫升去离子水中。将此悬浊液加热至95摄氏度得到澄清的溶液，然后缓慢降温冷却。2小时后溶液冷却至室温，过滤分离出析出的晶体沉淀，用50毫升去离子水洗，干燥后得到26.8克L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸晶体(L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸的摩尔比为1:1)。

手性HPLC分析晶体显示L-缬氨酸的纯度为99.9％。

母液通过填充有Dowex M43弱离子交换树脂的分离柱，D-缬氨酸组分合并蒸馏得到晶体悬浊液，然后过滤干燥得到9.1克D-缬氨酸。

手性HPLC分析显示纯度为含有99.8％D-缬氨酸，0.2％L-缬氨酸。

旋光率[α]_D ²⁰＝-27.6°(c＝8,6N盐酸)。

晶体复合物分散于100毫升去离子水中，向其中加入6克硫酸。搅拌1小时，过滤N-苯甲酰-L-丙氨酸沉淀，并用20毫升去离子水洗。滤液通过填充有DowexM43弱离子交换树脂的分离柱，L-缬氨酸组分合并蒸馏和干燥后得到9.9克L-缬氨酸。

手性HPLC分析显示纯度为含有99.9％L-缬氨酸。

旋光率[α]_D ²⁰＝+28.1°(c＝8,6N盐酸)。

实施例2

24克DL-缬氨酸和38.6克N-苯甲酰-L-丙氨酸混合于200毫升去离子水中。将此悬浊液加热至95摄氏度得到澄清的溶液，搅拌缓慢降温冷却2小时后至22摄氏度，过滤分离出析出的晶体沉淀，用50毫升去离子水洗，干燥后得到26.8克固体，分析其组成为10.4克L-缬氨酸和34.8克N-苯甲酰-L-丙氨酸。

手性HPLC分析显示L-缬氨酸的纯度为99.9％。

实施例3

48克DL-缬氨酸和38.6克N-苯甲酰-L-丙氨酸混合于200毫升含有19.8克98％质量分数浓硫酸的去离子水中，并加热到95摄氏度。缓慢降温冷却2小时后至22摄氏度，过滤分离出析出的晶体沉淀，用40毫升去离子水洗，干燥后得到56.8克L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物。

手性HPLC分析显示复合物中L-缬氨酸的纯度为99.9％。

实施例4

48克DL-缬氨酸和38.6克N-苯甲酰-L-丙氨酸混合于200毫升含有20.2克30％质量分数浓盐酸的去离子水中，并加热到90摄氏度。搅拌缓慢降温冷却2小时后至20摄氏度，过滤分离出析出的晶体沉淀，用40毫升去离子水洗，干燥后得到58.8克L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物。

手性HPLC分析显示复合物中L-缬氨酸的纯度为99.9％。

实施例5

12克L-缬氨酸，5.0克L-亮氨酸，5.0克L-异亮氨酸，3.0克L-丙氨酸，3.0克L-丝氨酸，3.0克L-苏氨酸，3.0克L-苯丙氨酸和3.0克L-蛋氨酸溶解于200毫升去离子水中，并向其中加入19.8克N-苯甲酰-L-丙氨酸。将悬浊液加热到85摄氏度得到澄清的溶液，然后搅拌缓慢降温冷却至22摄氏度，过滤分离出析出的晶体沉淀，用50毫升去离子水洗，干燥后得到26.8克固体。

手性HPLC分析显示该固体为L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物，其中含有99.7％L-缬氨酸，0.3％L-丙氨酸，其他氨基酸留在溶液中，未在固体中检测到。实施例6

24克DL-缬氨酸和19.3克N-苯甲酰-D-丙氨酸混合于200毫升去离子水中，并加热到95摄氏度。澄清的溶液在2小时内冷却至22摄氏度，过滤分离出析出的晶体沉淀，用40毫升去离子水洗，干燥后得到28.7克D-缬氨酸N-苯甲酰-D-丙氨酸复合物(摩尔比为1:1)。

手性HPLC分析显示复合物中D-缬氨酸的纯度为99.8％。

实施例7

12克D-缬氨酸和19.6克N-苯甲酰-L-丙氨酸混合于200毫升去离子水中，加热到88摄氏度溶解。澄清的溶液在2小时内搅拌冷却至22摄氏度，过滤分离出析出的晶体沉淀，用40毫升去离子水洗，干燥后得到17.5克固体。

分析显示该晶状固体为回收的N-苯甲酰-L-丙氨酸，不含有任何D-丙氨酸。

实施例8

24克DL-缬氨酸和23.5克N-苯甲酰-L-丙氨酸混合于250毫升去离子水中，并加热到95摄氏度。澄清的溶液在2小时内冷却至22摄氏度，过滤分离出析出的晶体沉淀，用40毫升去离子水洗，干燥后得到28.7克L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物(摩尔比为1:1)。

手性HPLC分析显示复合物中L-缬氨酸的纯度为99.9％。

实施例9

24克DL-缬氨酸和21.3克N-苯甲酰-L-丙氨酸混合于250毫升去离子水中，加热到85摄氏度溶解。澄清的溶液在2小时内冷却至22摄氏度，过滤分离出析出的晶体沉淀，用40毫升去离子水洗，干燥后得到26.3克L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物(摩尔比为1:1)。

手性HPLC分析显示复合物中L-缬氨酸的纯度为99.5％。

实施例10

24克DL-缬氨酸和19.3克N-苯甲酰-L-丙氨酸混合于200毫升去离子水中。将此悬浊液加热至95摄氏度得到澄清的溶液，向其中加入0.2克水杨醛。将溶液缓慢冷却至室温，并在25摄氏度下搅拌48小时。过滤分离出析出的晶体沉淀，用50毫升去离子水洗，干燥后得到29.2克L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸晶体(L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸的摩尔比为1:1)。

手性HPLC分析晶体显示L-缬氨酸的纯度为99.9％。

如上所述，便可较为充分的实现本发明。以上所述仅为本发明的较为合理的实施实例，本发明的保护范围包括但并不局限于此，本领域的技术人员任何基于本发明技术方案上非实质性变性变更均包括在本发明包括范围之内。

Claims (10)

1.一种具有旋光活性的复合物，其特征在于：包括一摩尔缬氨酸、一摩尔N-苯甲酰丙氨酸、，分子式如下：

R代表位于邻位、间位和对位的氢、氟、氯、溴、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、硝基基团，n为0，1/2，R基团也能在苯环上二取代或三取代；缬氨酸和N-苯甲酰丙氨酸中的丙氨酸能为D和L形式。

2.根据权利要求1所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：包括在D-缬氨酸，其他氨基酸及其他在合成DL-缬氨酸过程和蛋白质水解发酵过程中产生的杂质存在的情况下，N-苯甲酰-L-丙氨酸选择性的与L-缬氨酸反应。

3.根据权利要求2所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：旋光拆分DL-缬氨酸过程包括：(1)DL-缬氨酸与旋光活性的N-苯甲酰-L-丙氨酸在一种溶剂或混合溶剂中反应；(2)分离得到晶体复合物L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸；(3)用酸或碱分解L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物得到L-缬氨酸。

4.根据权利要求2所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：N-苯甲酰-D-丙氨酸用于合成D-缬氨酸N-苯甲酰-D-丙氨酸。

5.根据权利要求3所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：旋光活性的N-苯甲酰-L-丙氨酸和DL-缬氨酸的摩尔比为0.4:1至4:1。

6.根据权利要求3所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：还包括能向溶液中引入一个酸性化合物以增加不希望得到的异构体的溶解度，因此能减少拆分溶液的体积。

7.根据权利要求3所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：还包括能向拆分溶液中加入醛以提高合成旋光活性的缬氨酸N-苯甲酰丙氨酸复合物的产率。

8.根据权利要求3所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：所述其他氨基酸包括丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸，所述粗品L-缬氨酸的纯化包括在含有L-缬氨酸的溶液中，在有丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸存在的情况下，N-苯甲酰-L-丙氨酸选择性的与L-缬氨酸反应生成L-缬氨酸N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物中间体。

9.根据权利要求8所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：还包括能向含有L-缬氨酸和其他氨基酸的混合溶液中加入酸性化合物，形成其他氨基酸的酸性的盐，而不形成L-缬氨酸的盐。

10.根据权利要求8所述的一种制备旋光活性的L-缬氨酸和N-苯甲酰-L-丙氨酸复合物的方法，其特征在于：含有缬氨酸的水溶液通过蛋白质水解制得。