CN104404094A - 基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，包括如下步骤：1、蛤或其加工水煮液的前处理：分离蛤肉，清洗，匀浆；或收集加工蛤过程中废弃的蛤水煮液，过滤去除去杂质。2、酶转化：适当pH条件下加入酶，进行酶转化反应；3、去除蛋白质：适当pH值条件下沉淀并离心去除酸性、碱性蛋白质。4、超滤设备去除大分子物质：通过超滤设备截去大分子多糖多肽以保留牛磺酸。5、电渗析脱除盐离子。6、离子交换层析：通过强酸性阳离子交换树脂吸附收集牛磺酸。7、乙醇重结晶：加入一定体积的乙醇，析出牛磺酸晶体。本发明方法充分利用废弃原料，且具有操作简单、安全、成本低廉、绿色环保、可连续生产、牛磺酸得率高等优点。

Description

基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法

技术领域

本发明涉及一种工业化利用酶转化方法连续制备蛤或其水煮液中牛磺酸的方法。

背景技术

蛤类，例如菲律宾蛤仔，俗称沙蚬子，是一类双壳贝类，隶属于帘蛤科，广泛分布于我国的南北海域。其主要特点为生长迅速、繁殖周期短、对盐和温度的适应能力强且滋味鲜美、营养丰富、价格便宜。是我国第二大贝类养殖产品，因此对蛤及其加工副产物的深度开发利用有着极其重要的经济价值。新鲜的蛤肉中含有丰富的蛋白质、脂肪、钙、磷、铁等矿物质、维生素、氨基酸、牛磺酸。

牛磺酸(Taurine)学名2-氨基乙磺酸，因首次从牛胆汁中分离出来，故俗称为牛胆酸、牛胆素。牛磺酸是一种含硫的非蛋白质结构氨基酸，是人体必需的氨基酸之一，具有很强的生物活性。牛磺酸在鱼、贝类中含量十分丰富。通过深入研究发现，牛磺酸能增加细胞抗氧化、抗自由基损伤及抗病毒侵害的能力，它还是良好的护肝剂，具有增强视力、促进大脑发育、解除疲劳、提高工作效率、降低胆固醇、抑制胆结石、消炎、镇痛的作用，同时具有一定的抗肿瘤活性。在临床上牛磺酸可用于治疗急慢性肝炎、感冒、高血压、动脉硬化和癌症等疾病。

牛磺酸的需求量大幅增加，我国有20000吨/年的潜在市场，美国年消费量达6000吨以上，日本产量近2000吨。

针对日益增长的需求量，更多的提取牛磺酸的技术日益更新。目前，国内外主要依靠化学合成法提取牛磺酸，多采用乙氯乙烷法、乙醇胺法、乙撑亚胺法等方法。但这些化学合成法存在原料毒性大、工艺操作复杂、回收困难、环境污染严重等问题。

目前对于海洋资源的综合利用，一方面是从低值的水产品中获取相对高附加值的产品；另一方面是对水产品加工过程中产生的废弃物再回收利用。由于生产废弃物给环境带来较大的压力，对其利用无疑会带来较高的环境效益。利用海洋产品加工的下脚料提取牛磺酸，既可以提高海洋资源利用率，又可以降低环境污染。我国海洋生物资源丰富，从鱼贝类及其下脚料中提取牛磺酸，具有巨大经济效益。所以研究如何高效地从海洋生物中提取牛磺酸具有重要的现实意义。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明涉及一种可以替代传统化学合成法提取牛磺酸或者采用水煮法提取牛磺酸的技术，即在蛤及其水煮液中加入蛋白酶类，利用酶转化法，提取牛磺酸，本发明成本低廉、绿色环保、操作简单、提取效率高，充分使用废弃原料并能通过酶转化的作用有效的提高牛磺酸的得率。

为了达到上述目的，本发明提供了一种基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，包括如下步骤：

S1、利用蛤制备反应液；

S2、取胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种，根据所选取的酶对所述反应液调节酶转化反应适宜的pH值，将所选取的酶加入所述反应液中进行酶转化反应；之后，灭酶活，得到酶转化溶液；

S3、所述酶转化溶液去除酸性、碱性蛋白质；

S4、通过超滤设备去除大分子物质，保留牛磺酸；

S5、电渗析脱除盐离子；

S6、通过强酸性阳离子交换树脂吸附收集牛磺酸流出液；

S7、流出液中加入一定体积的乙醇，析出牛磺酸晶体。

优选方式下，步骤S2具体包括工序：

S21、向所述反应液中加入溶液中干物质质量份数为0.1％～10％的胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种；调节pH至所用酶的适宜环境(适宜环境为：胃蛋白酶pH1～3、木瓜蛋白酶pH5～9、胰蛋白酶pH7～9、碱性蛋白酶pH8～11)，20～50℃酶解0.5～10小时；

S22、冷却，调pH至6～8(此步骤能有效保证产品的最后得率)；

S23、80～100℃灭酶活5～30分钟。

此外，步骤S1可选用蛤肉或蛤水煮液制备反应液，具体为：蛤肉按其体积比加入1:1～1:100的水之后进行匀浆处理，获得所述反应液；或者，蛤水煮液浓缩至干物质含量为1％～30％之间，离心去除不溶于水的杂质，获得所述反应液。所述水煮液可以是蛤加工过程中的废弃液(现有技术都予以抛弃)，从而进一步提高产品价值，提升利润。

步骤S3可参考现有技术的方式，具体可参考《文蛤中牛磺酸》【龚丽芬，黄慰生，谢晓兰，郑志福，胡东红.文蛤中牛磺酸的提取(I).精细化工.2003，20(7)，393-395】，先调节溶液酸性，有酸性蛋白沉淀，可以离心脱除，后调节溶液碱性，有碱性蛋白沉淀，可以离心脱除。调节酸或碱的顺序可以改变。本发明提供了一种优选方式，具体为步骤S3包括工序：

S31、向处理后的酶转化溶液中加1mol/L～6mol/L HCl调pH至2～4，即有酸性蛋白质沉淀，离心分离，取上清液：

S32、上清液用1mol/L～6mol/L NaOH调pH至8～10，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

步骤S4：将除蛋白后的溶液进行超滤处理，以超滤膜截去大分子的多肽多糖类物质，收集滤出液。步骤S5中适宜的电渗析工艺参数为：电压1V～20V，流速0.5mL/min～4L/min，样品浓度1mg/mL～100mg/mL。

上述步骤S6和S7可参考现有技术的方式实现，如《贻贝废弃液中天然牛磺酸的提取研究》【崔忠艾,李苹苹,王道波,樊镇棣,杜延兵.贻贝废弃液中天然牛磺酸的提取研究.安徽农业科学.2010,38(16):8671-8673】。其中，步骤S6包括如下工序：

S61、将提取液通过强酸性阳离子交换树脂柱，蒸馏水洗脱，取电导率开始下降至稳定期间的流出液；

S62、将提取液上6×60cmNa⁺型强酸性树脂柱，上样体积为300mL，蒸馏水洗脱，洗脱速度为20mL/min，接取电导率开始下降至电导率稳定期间的流出液。

步骤S7包括如下工序：

S71、上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。

S72、粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到纯度较高的牛磺酸晶体。

最优方式下，溶液经冷冻干燥或真空干燥的方法得到牛磺酸。

水产品中的牛磺酸以游离形式存在，且易溶于热水，不溶于乙醇，所以可采用热水提取，离子交换提纯，乙醇沉淀等方法得到白色结晶。本发明利用酶转化法提取蛤水煮液中的牛磺酸，具有操作简单、成本低、得率高、绿色环保、安全可连续生产。其主要步骤包括：1、收集企业生产废弃蛤水煮液，过滤去除水不溶性杂质；2、水煮液中加入蛋白酶适宜pH条件下进行酶转化反应；3、适当pH值条件下沉淀并离心去除酸性、碱性蛋白质；4、通过超滤设备去除大分子物质，保留牛磺酸；5、电渗析脱除盐离子；6、通过强酸性阳离子交换树脂吸附收集牛磺酸流出液；7、流出液中加入一定体积的乙醇，析出牛磺酸晶体。

本发明具有如下优点；

1、整个提取过程不使用任何的有机溶剂，减少了环境污染，保证了工作人员的自身安全。

2、所得牛磺酸提纯品无任何有毒试剂的混入，安全可靠。

3、可充分利用低值蛤或其加工后产生的废弃水煮液，提高废弃液的利用率。

4、采用酶转化法提取牛磺酸，通过酶转化的方法可有效的提高得率。

5、采用超滤处理及电渗析技术，在有效提高牛磺酸的纯度的同时也可去除掉水产品中存在的重金属元素。

6、可实现全自动连续化生产，设备简单，操作易行，降低劳动强度。

附图说明

图1是酶转化前后牛磺酸在产物中含量的变化情况。

具体实施方式

实例一

蛤去壳，清洗，按体积比1:10加入水，匀浆；采取酶辅助提取方法，匀浆液中加入碱性蛋白酶粉末，加入量为底物量的2.5％，以1mol/LNaOH调节溶液pH至10，37℃反应3.5小时，反应结束，调pH6，沸水浴中灭酶活10min，冷却。

以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液，再用4mol/L NaOH调至pH为l0，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压1V，流速4L/min，样品浓度1mg/mL。滤出液以6mol/LHCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到2.4％。

实例二

蛤去壳，清洗，按体积比1:10加入水，匀浆；采取酶辅助提取方法，匀浆液中加入酸性蛋白酶粉末，加入量为底物量的2.5％，以4mol/LHCl调节溶液pH 1，45℃反应3.5小时，完成后，调pH7，沸水浴中灭酶10min，冷却。

以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液，再用4mol/L NaOH调pH至8，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压15V，流速100mL/min，样品浓度8g/mL。滤出液以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到1.8％。

实例三

收集企业生产蛤水煮液，去除不溶性杂质；以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液，再用4mol/L NaOH调至pH为9，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压1V，流速0.5mL/min，样品浓度1mg/mL。滤出液以6mol/LHCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到0.182g/L。

实例四

收集企业生产蛤水煮液，去除不溶性杂质；采取酶辅助提取方法，水煮液中加入碱性蛋白酶粉末，加入量为底物量的2.5％，以1mol/LNaOH调节溶液pH至10，37℃反应3.5小时，反应结束，调pH8，沸水浴中灭酶活10min，冷却。

以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液，再用6mol/L NaOH调至pH为l0，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压1V，流速1L/min，样品浓度1mg/mL。滤出液以6mol/LHCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到0.316g/L。

实例五

收集企业生产蛤水煮液，去除水不溶性杂质。采取酶辅助提取方法，水煮液中加入胃蛋白酶，加入量为底物量的2.5％，以1mol/L的HCl调节溶液pH至1，20℃反应3.5小时，反应结束，调pH至7，沸水浴中灭酶活10min，冷却。

以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液，再用4mol/L NaOH调pH至8，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压5V，流速100mL/min，样品浓度2mg/mL。滤出液以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到0.284g/L。

实例六

收集企业生产蛤水煮液，去除水不溶性杂质。采取酶辅助提取方法，水煮液中加入木瓜蛋白酶，加入量为底物量的2.5％，以6mol/LNaOH调至溶液pH 8，50℃反应3.5小时，完成后，调pH8，沸水浴中灭酶活20min，冷却。

以1mol/L NaOH调至pH为l0，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。再用6mol/L的HCl调节溶液pH至4，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压10V，流速3L/min，样品浓度4mg/mL。滤出液以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到0.332g/L。

实例七

收集企业生产蛤水煮液，去除水不溶性杂质。采取酶辅助提取方法，水煮液中加入胰蛋白酶粉末，加入量为底物量的2.5％，以4mol/LNaOH调节溶液pH至9，30℃反应3.5小时，完成后，调pH6，沸水浴中灭酶活20min，冷却。

以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液，再用4mol/L调pH至l0，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压15V，流速60mL/min，样品浓度6mg/mL。滤出液以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到0.276g/L。

实例八

收集企业生产蛤水煮液，去除水不溶性杂质。采取酶辅助提取方法，水煮液中加入酸性蛋白酶粉末，加入量为底物量的2.5％，以4mol/LHCl调节溶液pH 1，45℃反应3.5小时，完成后，调pH7，沸水浴中灭酶10min，冷却。

以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液，再用2mol/L NaOH调pH至l0，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压15V，流速100mL/min，样品浓度8g/mL。滤出液以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到0.304g/L。

实例九

收集企业生产蛤水煮液，去除水不溶性杂质。采取酶辅助提取方法，水煮液中加入碱性蛋白酶粉末，加入量为底物量的2.5％，以1mol/LNaOH调节溶液pH至10，37℃反应4小时，完成后，调pH8，沸水浴中灭酶活10min，冷却。

以4mol/LNaOH调pH至l0，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。再用6mol/L的HCl调节溶液pH至3，即有酸性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

将上清液进行超滤处理，超滤膜截留大分子多糖多肽物质，收集滤出液，再经过电渗析脱除盐离子，电渗析电压15V，流速150mL/min，样品浓度8mg/mL。滤出液以6mol/L的HCl调节溶液pH至3，待上柱。

取300mL滤出液通过Na离子型酸性树脂柱，蒸馏水洗脱，洗脱速度为10mL/min，接取电导率开始下降至稳定期间的流出液，上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到牛磺酸固体，经与乙酰丙酮和甲醛比色法测得牛磺酸产品的得率可以达到0.312g/L。

本发明利用酶转化法提取蛤或其水煮液中的牛磺酸，即在蛤或其水煮液中加入转化蛋白酶，利用酶转化的原理，提取牛磺酸，实验表明采用酶对蛤或其煮汁进行转化后其牛磺酸含量相比之未转化前，其含量最高可增加到原来的一倍以上(在此步骤中牛磺酸含量可以提高到3.3mg/g)，由此可以提高牛磺酸的得率，见附图1；再利用文献中报导的方法，进行阳离子树脂交换和乙醇重结晶法进行纯化，既可以减少化学试剂的影响，又可以提高牛磺酸的得率。附图1是酶转化前后牛磺酸在此步骤产物中含量的变化情况；图中横坐标1表示无酶转化的牛磺酸含量，2、3、4、5表示采用2中性蛋白酶，3碱性蛋白酶，4胃蛋白酶，5木瓜蛋白酶等不同酶处理后牛磺酸含量的变化。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、利用蛤制备反应液；

S2、取胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种，根据所选取的酶对所述反应液调节酶转化反应适宜的pH值，将所选取的酶加入所述反应液中进行酶转化反应；之后，灭酶活，得到酶转化溶液；

S3、所述酶转化溶液去除酸性、碱性蛋白质；

S4、通过超滤设备去除大分子物质，保留牛磺酸；

S5、电渗析脱除盐离子；

S6、通过强酸性阳离子交换树脂吸附收集牛磺酸流出液；

S7、流出液中加入乙醇，析出牛磺酸晶体。

2.根据权利要求1所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，S2步骤具体为：

S21、向所述反应液中加入溶液中干物质质量份数为0.1％～10％的胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种；调节pH至所用酶的适宜环境，20～50℃酶解0.5～10小时；

其中，适宜环境为：胃蛋白酶pH1～3、木瓜蛋白酶pH5～9、胰蛋白酶pH7～9、碱性蛋白酶pH8～11；

S22、冷却，调pH至6～8；

S23、80～100℃灭酶活5～30分钟。

3.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，S1步骤具体为：蛤肉按其体积比加入1:1～1:100的水之后进行匀浆处理，获得所述反应液；

或者，蛤水煮液浓缩至干物质含量为1％～30％之间，离心去除不溶于水的杂质，获得所述反应液。

4.根据权利要求3所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，所述水煮液为蛤加工过程中的废弃液。

5.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，所述步骤S3包括工序：

S31、向处理后的酶转化溶液中加1mol/L～6mol/L HCl调pH至2～4，即有酸性蛋白质沉淀，离心分离，取上清液：

S32、上清液用1mol/L～6mol/L NaOH调pH至8～10，即有碱性蛋白沉淀，离心分离，取上清液。

6.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，所述步骤S4包括如下步骤：将除蛋白后的溶液进行超滤处理，以超滤膜截去大分子的多肽多糖类物质，收集滤出液。

7.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，所述步骤S5中适宜的电渗析工艺参数为：电压1V～20V，流速0.5mL/min～4L/min，样品浓度1mg/mL～100mg/mL。

8.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，所述步骤S6包括如下工序：

将提取液通过强酸性阳离子交换树脂柱，蒸馏水洗脱，取电导率开始下降至稳定期间的流出液；

提取液上6×60cmNa⁺型强酸性树脂柱，上样体积为300mL，蒸馏水洗脱，洗脱速度为20mL/min，接取电导率开始下降至电导率稳定期间的流出液。

9.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法，其特征在于，其特征在于，所述步骤S7包括如下工序：

S71、上述流出液经减压浓缩，加3倍体积95％乙醇，置于4℃环境下，析出牛磺酸。

S72、粗品牛磺酸加适量水溶解，再用95％乙醇重结晶，反复2～3次，可得到纯度较高的牛磺酸晶体。