CN104372057A - 一种胎盘素的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种胎盘素的提取方法，包括以下步骤：(1)选取新鲜猪胎盘或者猪胚胎绞碎作为原料，加入纯化水搅拌均匀,蒸煮30～35min；(2)降温调节pH值至7.8～8.3，加入活性含量为15～20U/mg的碱性蛋白酶，温度在50～55℃反应4～5h，在90～95℃保持10～15min；(3)离心脱去脂肪和固形物，得到胎盘液；(4)加入三氯乙酸，再次离心，除去杂蛋白得清液；(5)加入活性炭脱腥，除去活性炭得滤液；(6)使用纳滤膜进行分离，脱盐并浓缩得浓缩液；(7)喷雾干燥得到产品。本发明生产周期短、成本低、无污染，产品纯度高，分子量小，人体吸收好，口感好，可广泛应用于食品、保健品、药品等领域。

Description

一种胎盘素的提取方法

技术领域

本发明涉及猪胎盘的深加工领域，具体涉及一种利用生物技术和化学技术相结合提取胎盘素的方法。 

背景技术

猪胎盘是生猪饲养过程中的一种副产品，其中含有大量蛋白质、血红素、人体生长因子和其他微量元素，营养价值十分可观。猪胎盘具有补血填精，促进骨髓生长的作用，也能够促进排卵，提高生殖能力，是一种机体免疫功能的调节剂和营养、美容保健品。 

近年来，在国内外相继出现了动物胎盘水解液和胎盘浸提液二种新型胎盘生物制品，但上述二种动物胎盘制剂各有弊端，前者在水解过程中将胎盘中的天然活性物质破坏，失去利用胎盘的意义。例如专利公开号为CN1227745A公开了名称为“真空冷冻羊胚胎冻干粉生产工艺”的专利，该工艺是将羊胚胎使用超低温打浆机打制成泥浆状，置于真空冷冻干燥设备的干燥仓中，使物料品温降至共晶点以下，再加热，保持动态真空度在70-200Pa之间，使物料中的固体水分直接升华为气体抽出，升华干燥后的物料再使用超低温打粉机制成20-200目的颗粒或粉粒；专利公开号为CN1440770A公开了名称为“羊胎肽胶囊及其制备方法”的专利，该胶囊中的原料之一“羊胎冻干粉”的提取是将预处理的羊胎和/或羊胎盘匀浆，匀浆液超微粉碎，离心去沉淀，上清液在-20-30℃低温预冻6-8小时，容纳后在真空冷冻干燥机下进行干燥；上述制备羊胎肽粉的方法均对羊胎盘和/或胚胎预处理后，将所得液态物料在真空干燥机内制备干燥成固态羊胎肽粉；发明专利号201010144651.x公开了一种名称为“一种猪胎盘素制备工艺”的专利，该制备方法是将原料预处理、水解、胰酶消化、去蛋白、醇沉纯化、分装灭菌、成品，主要工艺中除蛋白和醇沉纯化是一种比较落后和繁琐的工艺，时间长、收率低、工艺复杂，醇不能重复利用，导致生产成本高，特别是醇沉工艺中不能保证产品的纯度,而且醇沉工艺有安全隐患，需要建防爆 车间。 

目前胎盘提取物类产品加工大多采用真空冷冻干燥来保持其活性，但冷冻干燥常会引起多孔层塌陷，影响成品的理化指标，为此要添加赋形剂减少对成品的低温损伤，通过冷冻的方法处理液态物料转变为固态粉状物冻干技术参数控制因素多，工艺环节多，并且冷冻干燥能耗大，生产成本高，周期长，通常多适用在实验室内制备，真正用于规模化制备的生产工艺少，不适宜产业化生产。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对现有技术存在的不足，提供一种生产工艺简单、容易控制、生产流程短、生产过程无污染、产品纯度高、生物活性高，易于实现工业化生产的胎盘素的提取方法。 

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是： 

一种胎盘素的提取方法，包括以下步骤： 

(1)选取经检验检疫合格的新鲜猪胎盘或者猪胚胎，去掉血、脂肪和脐带，洗净，用绞肉机绞碎作为原料，再加入所述原料重量7～8倍的纯化水搅拌均匀,在95℃～98℃条件下，蒸煮30～35min，得到预处理过的原料。 

(2)将所述预处理过的原料降温至50～55℃，用食品级氢氧化钠调节pH值至7.8～8.3，加入活性含量(酶活量)为15～20U/mg的碱性蛋白酶，然后将温度保持在50～55℃反应4～5h，反应过程中保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至90～95℃，保持10～15min灭酶。 

(3)将灭酶后的酶解液用离心机离心脱去脂肪和固形物，得到胎盘液。 

(4)在所述胎盘液中加入三氯乙酸，使得所述胎盘液中三氯乙酸的质量浓度为1～8％，再次离心，除去杂蛋白，得清液。 

(5)在所述清液中加入活性炭脱腥，搅拌1～1.5h,然后过滤除去活性炭，得滤液。 

(6)将所述滤液使用纳滤膜进行分离，脱盐并浓缩得浓缩液。 

(7)将所述浓缩液喷雾干燥得到所述胎盘素产品。 

作为优选的一种技术方案，所述碱性蛋白酶的加入量为所述原料重量的1～2％。 

作为优选的一种技术方案，所述纳滤膜的孔径≤1纳米。 

作为优选的一种技术方案，所述的活性炭为粉末状的食品级活性炭。 

作为优选的一种技术方案，所述活性炭的加入量为所述原料重量的1.5～2％。 

由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是： 

本发明的胎盘素的提取方法，使用的碱性蛋白酶为复合蛋白酶，为外切蛋白酶，复合蛋白酶主要含有胶原蛋白酶，同时含有脂肪酶、糖元酶、核酸酶，因此使用复合蛋白酶进行消化，对原料猪胎盘或者猪胚胎的酶解更彻底，酶解后的胎盘素产品收率更高，比现有技术的物理方法提取和单一胰酶消化提取优势明显。 

本发明在对滤液进行分离时采用纳滤膜分离技术，对液态物料进行脱盐和浓缩，均在常温下操作、无相态变化、并且生产过程中不会产生污染，生产安全性高且工艺流程短，反应条件温和，避免了现有技术中使用醇沉工艺时的安全隐患以及需要建设防暴车间的弊端。而且不但能更好的脱去分子量小于100道尔顿的盐类物质，使产品能保持更好的纯度，而且能更好的使滤液浓缩、节省后续工序浓缩时间、降低生产能耗。 

本发明在对滤液进行分离时采用的纳滤膜的孔径≤1纳米，生产出来的胎盘素的分子量小，人体容易吸收，吸收率可以达到100％。 

本发明对酶解后的酶解液采用两次离心技术，得到的产品可以达到0脂肪，因此产品中杂蛋白含量更低，纯度更高。 

本发明采用食品级活性炭粉末脱腥脱臭，得到的产品品相更白，且无异味，使用时口感更佳。 

本发明方法生产出来的胎盘素产品的纯度高，其肽分子量300-1000道尔顿的肽含量达到98％以上，分子量≥1000道尔顿的在2％以内，使人体能更好的吸收。本发明方法的生产周期短、成本低、生产过程不产生任何有毒有害物质， 安全，无毒副作用，其产品口感好，无异味，无苦味，可广泛应用于食品、保健品、药品等领域。 

具体实施方式

下面结合具体的实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。 

实施例1 

(1)选取经检验检疫合格的新鲜猪胎盘或者猪胚胎，去掉血、脂肪和脐带，洗净，用绞肉机绞碎作为原料，再加入所述原料重量7倍的纯化水搅拌均匀,在95℃条件下，蒸煮35min，得到预处理过的原料。 

(2)将所述预处理过的原料降温至52℃，用食品级氢氧化钠调节pH值至7.9，加入所述原料重量的1.2％、酶活量为18U/mg的碱性蛋白酶，然后将温度保持在52℃反应5h，反应过程中保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至92℃，保持15min灭酶。 

(3)将灭酶后的酶解液用离心机离心脱去脂肪和固形物，得到胎盘液。 

(4)在所述胎盘液中加入三氯乙酸，使得所述胎盘液中三氯乙酸的质量浓度为3％，再次离心，除去杂蛋白，得清液。 

(5)在所述清液中加入活性炭脱腥，搅拌1h,然后过滤除去活性炭，得滤液。 

(6)将所述滤液使用纳滤膜进行分离，脱盐并浓缩得浓缩液。 

(7)将所述浓缩液喷雾干燥得到所述胎盘素产品。实施例1制备得到的胎盘素产品的质量指标与国家标准对比的情况见表1。 

表1 

与国家标准对比的结果可以得出：本实施例制备得到的产品无一般产品的腥味，作为食品口感好，分子量小，几乎全为短肽产品，而其他指标，也明显高于国家标准。 

实施例2 

(1)选取经检验检疫合格的新鲜猪胎盘或者猪胚胎，去掉血、脂肪和脐带，洗净，用绞肉机绞碎作为原料，再加入所述原料重量8倍的纯化水搅拌均匀,在98℃条件下，蒸煮30min，得到预处理过的原料。 

(2)将所述预处理过的原料降温至55℃，用食品级氢氧化钠调节pH值至8.2，加入所述原料重量的2％、酶活量为20U/mg的碱性蛋白酶，然后将温度保持在55℃反应4h，反应过程中保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至95℃，保持10min灭酶。 

(3)将灭酶后的酶解液用离心机离心脱去脂肪和固形物，得到胎盘液。 

(4)在所述胎盘液中加入三氯乙酸，使得所述胎盘液中三氯乙酸的质量浓 度为6％，再次离心，除去杂蛋白，得清液。 

(5)在所述清液中加入所述原料重量的2％的粉末状的食品级活性炭脱腥，搅拌1h,然后过滤除去活性炭，得滤液。 

(6)将所述滤液使用纳滤膜进行分离，脱盐并浓缩得浓缩液，所述纳滤膜的孔径为0.3～0.6纳米。 

(7)将所述浓缩液喷雾干燥得到所述胎盘素产品。实施例2制备得到的胎盘素产品的质量指标与国家标准对比的情况见表2。 

表2 

与国家标准对比的结果可以得出：本实施例制备得到的产品无一般产品的腥味，作为食品口感好，分子量小，几乎全为短肽产品，而其他指标，也明显 高于国家标准。 

实施例3 

(1)选取经检验检疫合格的新鲜猪胎盘或者猪胚胎，去掉血、脂肪和脐带，洗净，用绞肉机绞碎作为原料，再加入所述原料重量7.5倍的纯化水搅拌均匀,在96℃条件下，蒸煮32min，得到预处理过的原料。 

(2)将所述预处理过的原料降温至53℃，用食品级氢氧化钠调节pH值至8.0，加入所述原料重量的1.5％、酶活量为22U/mg的碱性蛋白酶，然后将温度保持在53℃反应4.5h，反应过程中保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至93℃，保持13min灭酶。 

(3)将灭酶后的酶解液用离心机离心脱去脂肪和固形物，得到胎盘液。 

(4)在所述胎盘液中加入三氯乙酸，使得所述胎盘液中三氯乙酸的质量浓度为5％，再次离心，除去杂蛋白，得清液。 

(5)在所述清液中加入所述原料重量的1.8％的粉末状的食品级活性炭脱腥，搅拌1.5h,然后过滤除去活性炭，得滤液。 

(6)将所述滤液使用纳滤膜进行分离，脱盐并浓缩得浓缩液，所述纳滤膜的孔径≤0.8纳米。 

(7)将所述浓缩液喷雾干燥得到所述胎盘素产品。实施例3制备得到的胎盘素产品的质量指标与国家标准对比的情况见表3。 

表3 

与国家标准对比的结果可以得出：本实施例制备得到的产品无一般产品的腥味，作为食品口感好，分子量小，几乎全为短肽产品，而其他指标，也明显高于国家标准。 

Claims (5)

1.一种胎盘素的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)选取新鲜猪胎盘或者猪胚胎，去掉血、脂肪和脐带，洗净，用绞肉机绞碎作为原料，再加入所述原料重量7～8倍的纯化水搅拌均匀,在95℃～98℃条件下，蒸煮30～35min，得到预处理过的原料；

(2)将所述预处理过的原料降温至50～55℃，用氢氧化钠调节pH值至7.8～8.3，加入活性含量为15～20U/mg的碱性蛋白酶，然后将温度保持在50～55℃反应4～5h，反应过程中保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至90～95℃，保持10～15min；

(3)将步骤(2)得到的酶解液离心脱去脂肪和固形物，得到胎盘液；

(4)在所述胎盘液中加入三氯乙酸，使得所述胎盘液中三氯乙酸的质量浓度为1～8％，再次离心，除去杂蛋白，得清液；

(5)在所述清液中加入活性炭脱腥，搅拌1～1.5h,然后过滤除去活性炭，得滤液；

(6)将所述滤液使用纳滤膜进行分离，脱盐并浓缩得浓缩液；

(7)将所述浓缩液喷雾干燥得到所述胎盘素产品。

2.如权利要求1所述的胎盘素的提取方法，其特征在于：所述碱性蛋白酶的加入量为所述原料重量的1～2％。

3.如权利要求1所述的胎盘素的提取方法，其特征在于：所述纳滤膜的孔径≤1纳米。

4.如权利要求1所述的胎盘素的提取方法，其特征在于：所述的活性炭为粉末状的食品级活性炭。

5.如权利要求1所述的胎盘素的提取方法，其特征在于：所述活性炭的加入量为所述原料重量的1.5～2％。