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CA2237000A1 - Lignees cellulaires stables d'encapsidation produisant un retrovirus pseudotype - Google Patents

Lignees cellulaires stables d'encapsidation produisant un retrovirus pseudotype Download PDF

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CA2237000A1
CA2237000A1 CA 2237000 CA2237000A CA2237000A1 CA 2237000 A1 CA2237000 A1 CA 2237000A1 CA 2237000 CA2237000 CA 2237000 CA 2237000 A CA2237000 A CA 2237000A CA 2237000 A1 CA2237000 A1 CA 2237000A1
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CA
Canada
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retroviral
gagpol
cell line
cells
expression
Prior art date
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Abandoned
Application number
CA 2237000
Other languages
English (en)
Inventor
Daniel S. Ory
Michel Sadelain
Richard C. Mulligan
Jean E. Schaffer
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Whitehead Institute for Biomedical Research
Washington University in St Louis WUSTL
Original Assignee
Individual
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Abstract

La présente invention se rapporte à une lignée cellulaire stable d'encapsidation de rétrovirus pseudotypé, cette lignée cellulaire comprenant des cellules d'encapsidation qui génèrent un rétrovirus pseudotypé de recombinaison sans auxiliaire. La lignée cellulaire d'encapsidation comprend une ou plusieurs constructions d'expression non rétrovirales tel qu'une construction d'expression dont le cytomégalovirus humain (CMV) est proche du promoteur précoce ou de dérivés de ce promoteur (tel que pMD) qui dirigent l'expression: a) de gènes gagpol rétroviraux et b) d'un gène non rétroviral qui est sous le contrôle d'un système opérateur inductible dont le produit génique génère des pseudotypes de virions coeur rétroviraux. La présente invention se rapporte également à un procédé de production d'une lignée cellulaire stable d'encapsidation de rétrovirus pseudotypé qui génère un rétrovirus pseudotypé de recombinaison sans auxiliaire, ainsi qu'à des lignées celluaire d'encapsidation spécifiques décrites dans cette demande (telle que H29 gagpol, un nouveau H29 gagpol) et à des cellules et des constructions spécifiques (tels que des éléments d'encapsidation) utilisés pour produire la lignée cellulaire stable d'encapsidation de rétrovirus pseudotypé décrite dans cette demande (telles que des cellules H29 et des constructions pMD, pMDtet, pMDtet.G, PMD.gagpol, p.MD nouveau gagpol). La présente invention se rapporte en outre à un vecteur rétroviral destiné à produire une banque d'ADNc pour l'expression dans des cellules mammaliennes, et comprenant deux longs segments terminaux à répétitions rétroviraux, un site de clonage pour l'insertion de l'ADNc et un promoteur de cytomégalovirus. L'invention se rapporte à une banque d'ADNc pour l'expression des cellules mammaliennes, cette banque comprenant les vecteurs rétroviraux, ainsi qu'à un procédé de clonage d'expression dans des cellules mammaliennes; à un procédé de clonage d'expression de l'ADNc dans les cellules mammaliennes, et à un procédé d'identification d'un défaut génique responsable d'un phénotype mutant mettant en oeuvre le clonage d'expression de l'ADNc par complémentation dans les cellules mammaliennes.
CA 2237000 1995-11-08 1996-11-07 Lignees cellulaires stables d'encapsidation produisant un retrovirus pseudotype Abandoned CA2237000A1 (fr)

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