BR122019024201B1 - Composto macrocíclico como inibidores de trk quinase, seu uso, e composição farmacêutica - Google Patents

Abstract

a invenção refere-se a compostos de fórmula i: e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que o anel a, anel b, w, m, d, r2, r2a, r3, r3a, e z são como aqui definidos, são inibidores de trk quinases e são úteis no tratamento de dor, câncer, inflamação, doença neurodegenerativa e certas doenças infecciosas.

Description

[0001] A presente invenção se refere a novos compostos, acomposições farmacêuticas que compreendem os compostos, a processos para a preparação dos compostos e ao uso dos compostos em terapia. Mais particularmente, ela se refere a certos compostos macrocíclicos que exibem inibição de proteína tirosina quinase da família Trk, e que são úteis no tratamento de dor, câncer, inflamação, doença neurodegenerativa e certas doenças infecciosas.

[0002] Os regimes de tratamento atuais para condições de dorutilizam várias classes de compostos. Os opioides (como a morfina) têm várias desvantagens, incluindo efeitos eméticos, constipatórios e respiratórios negativos, assim como o potencial de dependência. Fármacos anti-inflamatórios analgésicos não esteroides (NSAIDs, tais como os tipos COX-1 ou COX-2), também têm desvantagens, incluindo a eficácia insuficiente no tratamento da dor grave e potencial para hemorragia gastrointestinal interna. Além disso, os inibidores de COX-1 podem causar úlceras da mucosa. Por conseguinte, existe uma necessidade contínua de tratamentos novos e mais eficazes ao alívio da dor, especialmente da dor crônica.

[0003] Os Trks são receptores de tirosina quinase de alta afinidadeativados por um grupo de fatores de crescimento solúveis chamados de neurotrofinas (NT). A família de receptores Trk tem três membros: TrkA, TrkB e TrkC. Entre as neurotrofinas são (i) fator de crescimento nervoso (NGF) que ativa TrkA, (ii) fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) e NT-4/5 que ativam TrkB e (iii) NT3 que ativa TrkC. Os Trks são amplamente expressos em tecido neuronal e estão implicados na manutenção da sinalização, e a sobrevivência de células neuronais (Patapoutian, A. et al., Current Opinion in Neurobiology, 2001, 11, 272-280).

[0004] Os inibidores da via da Trk/neurotrofina têm demonstradoser eficazes em vários modelos animais pré-clínicos de dor. Por exemplo, o NGF antagonístico e anticorpos de TrkA como RN-624 demonstraram ser eficazes em modelos animais de inflamação e dor neuropática (Woolf, C.J. et al. (1994) Neuroscience 62,327-331; Zahn, P.K. et al. (2004) J. Pain 5, 157-163, McMahon, S.B. et al., (1995) Nat. Med. 1, 774-780;. Ma, Q.P. e Woolf, C.J. (1997) Neuroreport 8, 807810; Shelton, D.L. et al. Pain (2005) 116, 8-16; Delafoy, L. et al. (2003) Pain 105, 489-497; Lamb, K. et al (2003) Neurogastroenterol. Motil. 15, 355-361; Jaggar, S.I. et al (1999) Br. J. Anaesth 83, 442-448) e os modelos animais de dor neuropática (Ramer, M.S. e Bisby, M.A. (1999) Eur. J. Neurosci 11, 837-846; Ro, L.S. et al. (1999),. Pain 79, 265-274 Herzberg, U. et al (1997) Neuroreport 8, 1613-1618;.Theodosiou, M. et al (1999) Pain 81, 245-255,. Li, L. et al. (2003) Mol Cell Neurosci 23, 232-250; Gwak, Y.S. et al (2003) Neurosci Lett 336, 117-120).

[0005] Também já foi demonstrado que o NGF secretado pelascélulas tumorais e de tumores invasores de macrófagos estimula diretamente TrkA localizado em fibras de dor periféricas. Usando vários modelos de tumor tanto em camundongos quanto em ratos, demonstrou-se que a neutralização de NGF com um anticorpo monoclonal inibe a dor relacionada com o câncer a um grau semelhante ou superior à dose máxima tolerada de morfina. Além disso, a ativação da via de BDNF/TrkB tem sido implicada em numerosos estudos, como um modulador de vários tipos de dor, incluindo a dor inflamatória (Matayoshi, S., J. Physiol. 2005, 569:68595), dor neuropática (Thompson , S.W., Proc. Natl. Acad. Sci. EUA 1999, 96:7714-18) e dor cirúrgica (Li, C.-Q. et al., Pain Molecular, 2008, 4 (28), 1-11).

[0006] A literatura recente tem também mostrado que asuperexpressão, ativação, amplificação e/ou a mutação de Trk quinases estão associadas com muitos cânceres, incluindo neuroblastoma (Brodeur, G.M., Nat. Rev. Cancer 2003, 3, 203-216), ovário (Davidson . B., et al, Clin. Cancer Res. 2003, 9, 2248-2259), câncer colorrectal (Bardelli, A., Science 2003, 300, 949), melanoma (Truzzi, F., et al., Dermato- Endocrinology 2008, 3 (1), pp 32-36), câncer de cabeça e pescoço (Yilmaz, T., et al., Cancer Biology and Therapy 2010, 10 (6), pp 644-653), carcinoma gástrico (Du, J. et al., World Journal of Gastroenterology 2003, 9 (7) pp 1431-1434),carcinoma do pulmão (Ricci A., et al, American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology 25 (4), 439 pp - 446), câncer da mama (Jin, W., et al., Carcinogenesis 2010, 31 (11), pp 1939-1947), glioblastoma (Wadhwa, S., et al., Journal of Biosciences 2003, 28 (2), pp. 181-188), meduloblastoma (Gruber-Olipitz, M., et al, Journal of Proteome Research 2008, 7 (5), pp 1932-1944), secratory breast cancer (euthus, D.M., et al, Cancer Cell 2002, 2 (5), pp 347-348), câncer da glândula salivar (Li, Y.-G., et al, Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment 2009, 16 (6), pp 428-430), carcinoma papilífero da tireóide (Greco, A., et al., Molecular and Cellular Endocrinology 2010, 321 (1), pp 44-49) e leucemia mieloide adulta (Eguchi, M., et al, Blood 1999, 93 (4), pp 1355-1363). Em modelos pré-clínicos de câncer, os inibidores de moléculas pequenas não seletivas de TrkA, B e C foram eficazes na inibição do crescimento tumoral e paragem da metástase tumoral (Nakagawara, A. (2001) Cancer Letters 169:107-114; Meyer, J. et al. Leukemia (2007), 1-10; Pierottia, M.A. e Greco A., (2006) CancerLetters 232:90-98; Eric Adriaenssens, E., et al. Cancer Res (2008) 68:. (2). 346-351).

[0007] Além disso, a inibição da via da neurotrofina/Trk tem demonstrado ser eficaz no tratamento de modelos pré-clínicos de doenças inflamatórias com anticorpos de NGF ou inibidores de moléculas pequenas não seletivas de TrkA, B e C. Por exemplo, a inibição da via de neurotrofina/Trk tem sido implicada em modelos pré- clínicos de doenças inflamatórias pulmonares, incluindo asma (Freund- Michel, V; Frossard, N., Pharmacology & Therapeutics (2008), 117 (1), 52-76), intersticial cistite (Hu Vivian, Y., et. al. The Journal of Urology (2005), 173(3), 1016-1021), doenças inflamatórias dos intestinosincluindo colite ulcerativa e doença de Crohn (Di Mola, F.F., et. al. Gut, (2000), 46(5), 670-678) e doenças inflamatórias da pele como adermatite atópica (Dou, Y.-C, et al. Archives of Dermatological Research (2006), 298 (1), 31-37), eczema e psoríase (Raychaudhuri, S.P., et al, J. Investigative Dermatology (2004), 122 (3), 812-819).

[0008] A via de neurotrofina/Trk, particularmente BDNF/TrkB,também tem sido implicada na etiologia de doenças neurodegenerativas, incluindo esclerose múltipla, doença de Parkinson e doença de Alzheimer (Sohrabji, F., Lewis, K. Danielle, Frontiers in Neuroendocrinology (2006), 27 (4), 404-414).

[0009] Também se acredita que o receptor de TrkA deve ser críticoao processo da doença na infecção da infecção parasitária do Trypanosoma cruzi (doença de Chagas) em hospedeiros humanos (de Melo-Jorge, M., et al, Cell Host & Microbe (2007), 1 (4), 251-261).

[00010] Várias classes de inibidores de moléculas pequenas de Trk quinases referidos como sendo úteis ao tratamento da dor ou de câncer são conhecidos (Expert Opin. Ther. Patents (2009) 19 (3)).

[00011] Há ainda uma necessidade, no entanto, de compostos e métodos ao tratamento da dor, em especial da dor crônica, assim como ao tratamento do câncer, inflamação, doenças neurodegenerativas e certas doenças infecciosas.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[00012] Foi agora verificado que compostos macrocíclicos que são inibidores das quinases Trk, em particular inibidores de TrkA e/ou TrkB e/ou TrkC, e são úteis ao tratamento de distúrbios e doenças tais como o câncer e dor, incluindo a dor crônica e aguda. Os compostos que são inibidores de TrkA e/ou TrkB podem ser úteis no tratamento de vários tipos de dor, incluindo a dor inflamatória, dor neuropática e dor associada à cirurgia do câncer, e fratura dos ossos. Além disso, os compostos da presente invenção podem ser úteis ao tratamento de inflamações, doenças neurodegenerativas e certas doenças infecciosas.

[00013] Assim, em um aspecto a presente invenção fornece novos compostos que têm a Fórmula geral I:

[00014] e os estereoisômeros e sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que o anel A, anel B, W, m, D, R2, R2a, R3, R3a, e Z são como aqui definidos.

[00015] Em outro aspecto, a presente invenção fornece novos compostos que têm a Fórmula geral I:

[00016] ou sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que o anel A, W, m, R2, R2a, R3, Z, R5 e R6 são como aqui definidos.

[00017] Em um outro aspecto da invenção, são fornecidas composições farmacêuticas que compreendem os compostos de Fórmula I e um veículo, diluente ou excipiente.

[00018] Em outro aspecto da invenção, é fornecido um método para tratar ou prevenir a dor, câncer, inflamação, doenças neurodegenerativas e certas doenças infecciosas em um mamífero, compreendendo a administração ao referido mamífero de uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I.

[00019] Em um outro aspecto da invenção, é fornecido o uso de umcomposto de Fórmula I na fabricação de um medicamento ao tratamento ou a prevenção da dor, câncer, inflamação, doenças neurodegenerativas e certas doenças infecciosas.

[00020] Em um outro aspecto da invenção, é fornecido um uso de um composto de Fórmula I no tratamento ou prevenção da dor, câncer, inflamação, doenças neurodegenerativas e certas doenças infecciosas.

[00021] Um outro aspecto fornece intermediários para a preparação de compostos de Fórmula I. Em uma modalidade, certos compostos de Fórmula I podem ser usados como intermediários para a preparação de outros compostos de Fórmula I.

[00022] Um outro aspecto inclui processos para a preparação, métodos de separação e métodos de purificação dos compostos aqui descritos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[00023] Uma modalidade da presente invenção fornece compostos com a geral Fórmula I contendo um anel pirazolo[1,5-a]pirimidinila e tendo a estrutura:

[00024] ou sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que:

[00025] o anel A é selecionado a partir de anéis de A-1, A-2 e A-3, tendo as estruturas:

[00026] em que a linha ondulada marcada com 1 indica o ponto de fixação do anel A ao anel B e a linha ondulada marcada com 2 indica o ponto de fixação do anel A a W;

[00027] X é N ou CH;

[00028] Y é H ou F;

[00029] R1 é H, (1 -3C)alcóxi ou halogênio;

[00030] o anel B é selecionado a partir dos anéis B-1 e B-2, que possuem as estruturas:

[00031] em que a linha ondulada marcada com 3 indica o ponto defixação ao anel A e a linha ondulada marcada com 4 indica o ponto defixação ao anel de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Fórmula I;

[00032] W é O, NH ou CH2, em que, quando o anel A é A-2, então,W é CH2;

[00033] m é 0, 1 ou 2;

[00034] D é carbono;

[00035] R2 e R2a são, independentemente, H, F, (1-3 C)alquila ouOH, desde que R2 e R2a não sejam ambos OH;

[00036] R3 e R3a são, independentemente, H, (1-3 C)alquila ou hidróxi(1-3 C)alquila;

[00037] ou D é carbono ou nitrogênio, R2 e R estão ausentes e R2a e R3a em conjunto com os átomos aos quais eles estão fixados formam um anel heteroarila de 5-6 membros tendo 1-2 heteroátomos no anel;

[00038] Z é *-NR4aC(=O)-, *-ONHC(=O)-, *-NR4bCH2-ou *-OC (=O) -, em que o asterisco indica o ponto de fixação de Z com o carbono que suporta R3;

[00039] R4a é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1-6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila ou di-hidróxi(2-6C alquila);

[00040] R4b é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1-6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila, di-hidroxi(2- 6C)alquila, (1-6C alquil)C(O)-, (3-6C cicloalquil)C(O)-, Ar1C(O)-, HOCH2C(O)-, (1-6C alquil)sulfonila, (3-6C cicloalquil)sulfonila,AR2(SO2)-, ou HO2CCH2-(1-6C alquil)NH(CO)-;

[00041] Ar1 é fenila opcionalmente substituída por um ou maissubstituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, (1-6C)alquila, e (1-6C)alcóxi;

[00042] Ar2 é fenila opcionalmente substituída por um ou maissubstituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, (1-6C)alquila, e (1-6C)alcóxi; e

[00043] R5 e R6 são, independentemente, H, halogênio, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1- 6C)alquila.

[00044] Em uma modalidade da Fórmula I, o anel B é um anel B-2 tendo a estrutura:

[00045] D é carbono, R2 e R2a são, independentemente, (1-3 C)alquila, e R3 e R3a são, independentemente, H, (1-3 C)alquila ou hidróxi(1-3 C)alquila ou

[00046] D é carbono ou nitrogênio, R2 e R3 e estão ausentes R2a e R3a a juntamente com os átomos aos quais eles estão ligados formam um anel heteroarilaa de 5-6 membros tendo 1 - 2 heteroátomos noanel.

[00047] Em uma modalidade da Fórmula I, o anel A é um anel A-1 tendo a estrutura

[00048] em que X, Y e R1 são como definidos para a Fórmula I. Em uma modalidade da Fórmula I, X é CH. Em uma modalidade, X é N. Em uma modalidade da Fórmula I, Y é F. Em uma modalidade, Y é H. Em uma modalidade da Fórmula I, R1 é H. Em uma modalidade, R1 é (l-3C)alcóxi. Um exemplo particular é metóxi. Em uma modalidade, R1 é halogênio. Em uma modalidade, R1 é F.

[00049] Os exemplos particulares de anel A, quando representado pela estrutura A-1 incluem as estruturas:

[00050] Em uma modalidade, anel A é um anel A-2 tendo aestrutura

[00051] em que Y é H ou F. Em uma modalidade, Y é F. Em uma modalidade, Y é H.

[00052] Em uma modalidade, R1 é H. Em uma modalidade, R1 é (1-3C)alcóxi. Um exemplo particular é metóxi. Em uma modalidade, R1 é halogênio. Em uma modalidade, R1 é F.

[00053] Os exemplos particulares de anel A quando representado pelo anel A-2 são as estruturas:

[00054] Em uma modalidade da Fórmula I, o anel A é um anel A-3 tendo a estrutura

[00055] em que Y e R1 é como definido para a Fórmula I. Em uma modalidade, Y é F. Em uma modalidade, Y é H. Em uma modalidade, R1 é H. Em uma modalidade, R1 é (1-3C)alcóxi. Um exemplo particular é metóxi. Em uma modalidade, R1 é halogênio. Em uma modalidade, R1 é F.

[00056] Os exemplos particulares de anel A quando representado pelo anel A-3 são as estruturas:

[00057] Em uma modalidade da Fórmula I, W é O.

[00058] Em uma modalidade, W é NH.

[00059] Em uma modalidade, W é CH2.

[00060] Em uma modalidade da Fórmula I, D é carbono, R2 e R2a são, independentemente, H, F, (1-3 C)alquila ou OH (desde que R2 e R2a não sejam ambos OH), e R3 e R3a são, independentemente, H, (13 C)alquila ou hidróxi(1-3C)alquila.

[00061] Em uma modalidade, R2 e R2a são, independentemente, H, F, metil ou OH, desde que R2 e R2a não sejam ambos OH.

[00062] Em uma modalidade, R2 e R2a são ambos H.

[00063] Em uma modalidade, R2 é H e R2a é F.

[00064] Em uma modalidade, R2 e R2a são ambos F.

[00065] Em uma modalidade, R2 é H e R2a é OH.

[00066] Em uma modalidade, R2 é H e R2a é metila.

[00067] Em uma modalidade, R2 e R2a são ambos metila.

[00068] Em uma modalidade, R3 e R3a são, independentemente, H, (1-3C)alquila ou hidróxi(1-3 C)alquila.

[00069] Em uma modalidade, R3a é H. Em uma modalidade, R3 é H. Em uma modalidade, tanto o R3 quanto R3a são H.

[00070] Em uma modalidade, R3a é (1-3C)alquila. Exemplos incluem metila, etila, propila e isopropila. Em uma modalidade, R3 é (1- 3C)alquila. Exemplos incluem metila, etila, propila e isopropila.

[00071] Em uma modalidade, R3a é (1-3 C)alquila e R3 é H. Em uma modalidade, R3a é um grupo metila e R3 é H.

[00072] Em uma modalidade, tanto o R3 quanto R3a são (1- 3C)alquila. Em uma modalidade, R3 e R3a são ambos metila.

[00073] Em uma modalidade, R3 é hidróxi(1-3C)alquila. Exemplos incluem hidroximetila, 2-hidroxietila, 2-hidroxipropila e 3-hidroxipropila. Em uma modalidade, R3 é hidroximetila, 2-hidroxietila, 2-hidroxipropila ou 3-hidroxipropila e R3a é H.

[00074] Em uma modalidade da Fórmula I, D é carbono ou nitrogênio, R2 e R3 estão ausentes, e R2a e R3a em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados formam um anel heteroarila de 5- 6 membros tendo 1-2 heteroátomos de anel. Em uma modalidade, R2a e R3a em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados formam um anel heteroarila de 5-6 membros tendo 1-2 átomos de nitrogênio no anel. Exemplos de anéis heteroarila incluem anéis de piridila e pirazolila. Exemplos específicos de anéis de heteroarila incluem as estruturas:

[00075] Em uma modalidade, Z é *-NR4aC(=O)-.

[00076] Em uma modalidade, R4a é H.

[00077] Em uma modalidade, R4a é (1-6C)alquila. Os exemplosincluem metila, etila, propila, isopropila, butila, e isobutila.

[00078] Em uma modalidade, R4a é fluor(1-6C)alquila. Exemplosincluem fluormetila e 2-fluoretila.

[00079] Em uma modalidade, R4a é difluor(1-6C)alquila. Exemploincluem difluormetila e 2,2-difluoretila.

[00080] Em uma modalidade, R4a é trifluor(1-6C)alquila. Exemplos incluem trifluormetil e 2,2,2-trifluoretil.

[00081] Em uma modalidade, R4a é hidróxi(1-6C alquila). Exemplos incluem hidroximetila, 2-hidroxietila, 2-hidroxipropila e 3-hidroxipropila.

[00082] Em uma modalidade, R4a é di-hidroxi(2-6C alquila). Umexemplo inclui o 2,3-di-hidroxipropila.

[00083] Em algumas modalidades, R4a é H ou di-hidroxi(1-6Calquila). Em uma modalidade, R4a é H ou Me.

[00084] Um exemplo de Z quando representado por *-NR4aC(=O)- é *-ONHC(=O)-.

[00085] Em uma modalidade, Z é *-NR4bCH2-.

[00086] Em uma modalidade, R4b é H.

[00087] Em uma modalidade, R4b é selecionado a partir de (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1-6C)alquila, e trifluor(1- 6C)alquila.

[00088] Em uma modalidade, R4b é (1-6C)alquila. Exemplos incluem metila, etila, propila, isopropila, butila e terc-butila. Em uma modalidade, R4b é metila.

[00089] Em uma modalidade, R4b fluor é (1-6C)alquila. Exemplosincluem fluormetila e 2-fluoretila.

[00090] Em uma modalidade, R4b é difluor(1-6C)alquila. Exemploincluem difluormetila e 2,2-difluoretila.

[00091] Em uma modalidade, R4b é alquil trifluor(1-6C). Exemplosincluem trifluormetila e 2,2,2-trifluoretila.

[00092] Em uma modalidade, R4b é selecionado a partir de (1-6Calquil)C(O)-, (3-6C cicloalquil)C(O)-, Ar1C(O)- e HOCH2C(O)-.

[00093] Em uma modalidade, R4b é (1-6C alquil)C(O)-. Exemplosincluem CH3C(O)-, CH3CH2C(O)-, CH3CH2CH2C(O)-, e (CH3)2CHC(O)- . Em uma modalidade, R4 é CH3C(O)-.

[00094] Em uma modalidade, R4b é (3-6C cicloalquil)C(O)-. Exemplos incluem ciclopropilC(O)-, ciclobutilC(O)-, ciclopentilC(O)- e ciclohexilC(O)-.

[00095] Em uma modalidade, R4b é Ar1C(O)-. Um exemplo éfenilC(O)-.

[00096] Em uma modalidade, R4b é HOCH2C(O)-.

[00097] Em uma modalidade, R4b é selecionado a partir de (1-6C alquil)sulfonila, (3-6C cicloalquil)sulfonila, e AR2(SO2)-.

[00098] Em uma modalidade, R4b é (1-6C alquil)sulfonila. Exemplos incluem metilsulfonila, etilsulfonila e propilsulfonila.

[00099] Em uma modalidade, R4b é (3-6C cicloalquil) sulfonila. Exemplos incluem ciclopropilsulfonila, ciclobutilsulfonila,ciclopentilsulfonila e ciclohexilsulfonila. Em uma modalidade, R4 é metilsulfonila.

[000100] Em uma modalidade, R4b é Ar2(SO2)-. Um exemplo é o fenilsulfonila.

[000101] Em uma modalidade, R4b é HO2CCH2-.

[000102] Em uma modalidade, R4b é (1-6C alquil)NH(CO)-. Exemplos incluem CH3NHC(O)-, CH3CH2NHC(O)-, CH3CH2CH2NHC(O)-, e (CH3)2CHNHC(O)-. Em uma modalidade, R4 é CH3NHC(O)-.

[000103] Em uma modalidade, R4b é selecionado a partir de H, metila, -C(O)CH3, metilsulfonila, -C(O)CH2OH, -CH2COOH e - C(O)NHCH2CH3.

[000104] Em uma modalidade, Z é *-OC(=O)-.

[000105] Em uma modalidade da Fórmula I, o anel B é um anel B-1:

[000106] onde R5 e R6 são, independentemente, H, halogênio, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C)alquila.

[000107] Em uma modalidade, R5 e R6 são, independentemente, H, F, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C)alquila. Em uma modalidade, R5 é H e R6 é H, F, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C)alquila.

[000108] Em uma modalidade, R5 e R6 são, independentemente, H, F, OH, (1-3C)alquila ou hidróxi(1-3C)alquila. Em uma modalidade, R5 é hidrogênio e R6 é H, F, OH, (1-3C)alquila ou hidróxi(l-3C)alquila.

[000109] Em uma modalidade, R5 e R6 são, independentemente, H, F, OH, metila, etila, HOCH2- ou -HOCH2CH2. Em uma modalidade, R5 é hidrogênio e R6 é H, F, OH, metila, etila, ou HOCH2-HOCH2CH2-.

[000110] Em uma modalidade, R5 e R6 são, independentemente, H, F, ou metil. Em uma modalidade, R5 é H e R6 é H, F, ou metila.

[000111] Em uma modalidade, R5 é H e R6 é F.

[000112] Em uma modalidade, R5 é H e R6 é metila.

[000113] Em uma modalidade, R5 e R6 são ambos H.

[000114] Em uma modalidade, R5 e R6 são ambos F.

[000115] Em uma modalidade, R5 e R6 são ambos metila.

[000116] Em uma modalidade, o anel B é anel B-1 que é opcionalmente substituído por um ou dois substituintes independentemente selecionados a partir de OH e F, desde que dois substituintes OH não estejam no mesmo átomo de carbono do anel.

[000117] Exemplos particulares de anel B, quando representados pelo anel B-1 incluem as estruturas:

[000118] Em uma modalidade da Fórmula I, o anel B é um anel B-2 com a fórmula:

[000119] Em uma modalidade, m é 0.

[000120] Em uma modalidade, m é 1.

[000121] Em uma modalidade, m é 2.

[000122] Uma modalidade a presente invenção fornece compostos com a Fórmula geral I ou os sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que:

[000123] O anel B é um anel B-1:

[000124] o anel A é selecionado a partir dos anéis A-1, A-2 e A-3, tendo as estruturas:

[000125] em que a linha ondulada marcada com 1 indica um ponto de fixação do anel A ao anel de pirrolidina de Fórmula I e a linha ondulada marcada com 2 indica o ponto de fixação do anel A a W;

[000126] X é N ou CH;

[000127] Y é H ou F;

[000128] R1 é H, (l-3C)alcóxi ou halogênio;

[000129] W é O, NH ou CH2, em que, quando o anel A é A-2, então, W é CH2;

[000130] m é 0, 1 ou 2;

[000131] D é carbono;

[000132] R2 e R2a são, independentemente, H, F, (1-3 C)alquila ouOH, desde que R2 e R2a não sejam ambos OH;

[000133] R3 e R3a são, independentemente, H, (1-3 C)alquila ouhidróxi(1-3 C)alquila;

[000134] ou R2 e R3 e estão ausentes R2a e R3a juntamente com os átomos aos quais eles estão ligados formam um anel de heteroarila de 5-6 membros bivalente tendo 1-2 átomos de nitrogênio no anel;

[000135] Z é *-NR4aC(=O)-, *-ONHC(=O)-, *-NR4bCH2- ou *-OC(=O)-, em que o asterisco indica o ponto de fixação de Z com o carbono que suporta R3;

[000136] R4a é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1- 6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila ou di-hidróxi(2-6C alquila);

[000137] R4b é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1-6C )alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila, di-hidróxi(2- 6C)alquila, (1-6C alquil)C(O)-, (3-6C cicloalquil)C(O)-, Ar1C(O)-, HOCH2C(O)-, (1-6C alquil)sulfonila, (3-6C cicloalquil)sulfonila,AR2(SO2)-, ou HO2CCH2-(1-6C alquil)NH(CO)-;

[000138] Ar1 é fenila opcionalmente substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, (1-6C)alquila, e (1-6C )alcóxi;

[000139] Ar2 é fenila opcionalmente substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, (1-6C)alquila, e (1-6C )alcóxi; e

[000140] R5 e R6 são independentemente H, halogênio, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C )alquila.

[000141] Uma modalidade desta invenção fornece compostos com a Fórmula geral IA

[000142] ou sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que:

[000143] o anel A é selecionado a partir dos anéis A-1, A-2 e A-3, tendo as estruturas:

[000144] em que a linha ondulada marcada com 1 indica um ponto de fixação do anel A ao anel de pirrolidina de Fórmula I e a linha ondulada marcada com 2 indica o ponto de fixação do anel A com W;

[000145] X é N ou CH;

[000146] Y é H ou F;

[000147] R1 é H, (1-3C)alcóxi ou halogênio;

[000148] W é O, NH ou CH2, em que, quando o anel A é A-2, então,W é CH2;

[000149] m é 0, 1 ou 2;

[000150] R2 e R2a são, independentemente, H, F ou OH, desde queR2 e R2a não sejam ambos OH;

[000151] R3 é H, (1-3 C)alquila ou hidróxi(C l-3)-alquila;

[000152] Z é *-NR4aC(=O)-, *-ONHC(=O)-, *-NR4bCH2- ou *-OC(=O)-, em que o asterisco indica o ponto de fixação de Z com o carbono que suporta R3;

[000153] R4a é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1- 6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila ou di-hidróxi(2-6C alquila);

[000154] R4b é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1- 6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila, di-hidróxi(2- 6C)alquila, (1-6C alquil)C(O)-, (3-6C cicloalquil)C(O)-, Ar1C(O)-, HOCH2C(O)-, (1-6C alquil)sulfonila, (3-6C cicloalquil)sulfonila,AR2(SO2)-, ou HO2CCH2-(1-6C alquil)NH(CO)-;

[000155] Ar1 é fenila opcionalmente substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, (1-6C)alquila, e (1-6C )alcóxi;

[000156] Ar2 é fenila opcionalmente substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, (1-6C)alquila, e (1-6C )alcóxi; e

[000157] R5 e R6 são, independentemente, H, halogênio, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C )alquila.

[000158] Em uma modalidade, a Fórmula IA inclui compostos em que:

[000159] o anel A é um anel A-1, representado pela estrutura

[000160] em que a linha ondulada marcada com 1 indica um ponto de fixação do anel A ao anel de pirrolidina de Fórmula I e a linha ondulada marcada com 2 indica o ponto de fixação do anel A com W;

[000161] o anel B é anel B-1 representado pela estrutura:

[000162] em que a linha ondulada marcada com 3 indica o ponto de fixação ao anel A e a linha ondulada marcada com 4 indica o ponto de fixação ao anel de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Fórmula I;

[000163] X é N ou CH;

[000164] Y é H ou F;

[000165] R1 é H, (l-3C)alquila, (1-3C)alcóxi ou halogênio;

[000166] W é O ou H;

[000167] m é 0, 1 ou 2;

[000168] R2 e R2a são, independentemente, H, F ou OH, desde queR2 e R2a não sejam ambos OH;

[000169] R3 é H, (1-3 C)alquila ou hidróxi(1-3 C)alquila;

[000170] Z é *-NR4aC(=O)-, *-ONHC(=O)- ou *-OC(=O)-, em que o asterisco indica o ponto de fixação ao carbono que suporta R3;

[000171] R4a é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1- 6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila ou di-hidróxi(1- 6C)alquila; e

[000172] R5 e R6 são, independentemente, H, halogênio, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C )alquila.

[000173] Em uma modalidade, X é N. Em uma modalidade, X é CH.

[000174] Em uma modalidade, a Fórmula IA inclui compostos em que:

[000175] o anel A é um anel A-2 representado pela estrutura

[000176] em que a linha ondulada marcada com 1 indica um ponto de fixação do anel A ao anel de pirrolidina de Fórmula I e a linha ondulada marcada com 2 indica o ponto de fixação do anel A com W;

[000177] o Anel B é anel B-1 representado pela estrutura:

[000178] em que a linha ondulada marcada com 3 indica o ponto de fixação ao anel A e a linha ondulada marcada com 4 indica o ponto de fixação ao anel de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Fórmula I;

[000179] Y é H ou F;

[000180] R1 é H, (l-3C)alquila, (1-3C)alcóxi ou halogênio;

[000181] m é 0, 1 ou 2;

[000182] W é CH2;

[000183] m é 0, 1 ou 2;

[000184] R2 e R2a são, independentemente, H, F ou OH, desde que R2 e R2a não sejam ambos OH;

[000185] R3 é H, (1-3 C)alquila ou hidróxi(1-3 C)alquila;

[000186] Z é *-NR4aC(=O)-, em que o asterisco indica o ponto de fixação ao carbono que suporta R3;

[000187] R4a é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1- 6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila ou di-hidróxi(1- 6C)alquila; e

[000188] R5 e R6 são independentemente H, halogênio, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C )alquila,

[000189] Em uma modalidade, a Fórmula IA inclui compostos emque:

[000190] o anel A é um anel A-3 representado pela estrutura

[000191] em que a linha ondulada marcada com 1 indica um ponto de fixação do anel A do anel de pirrolidina de Fórmula I e a linha ondulada marcada com 2 indica o ponto de fixação do anel A com W;

[000192] o Anel B é anel B-1 representado pela estrutura:

[000193] em que a linha ondulada marcada com 3 indica o ponto de fixação ao anel A e a linha ondulada marcada com 4 indica o ponto de fixação ao anel de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Fórmula I;

[000194] Y é H ou F;

[000195] R1 é H, (l-3C)alquila, (1-3C)alcóxi ou halogênio;

[000196] W é O;

[000197] m é 0, 1 ou 2;

[000198] R2 e R2a são, independentemente, H, F ou OH, desde queR2 e R2a não sejam ambos OH;

[000199] R3 é H, (1-3 C)alquila ou hidróxi(1-3 C)alquila;

[000200] Z é *-OC(=O)- ou -*-NR4aC(=O)-, em que o asterisco indica o ponto de fixação ao carbono que suporta R3;

[000201] R4a é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1- 6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila, hidróxi(1-6C)alquila ou di-hidróxi(1- 6C)alquila; e

[000202] R5 e R6 são, independentemente, H, halogênio, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C )alquila,

[000203] Em uma modalidade, a Fórmula IA inclui compostos emque:

[000204] o anel A é um anel A-1, representado pela estrutura

[000205] em que a linha ondulada marcada com 1 indica um ponto de fixação do anel A ao anel de pirrolidina de Fórmula I e a linha ondulada marcada com 2 indica o ponto de fixação do anel A com W;

[000206] o Anel B é anel B-1 representado pela estrutura:

[000207] em que a linha ondulada marcada com 3 indica o ponto de fixação ao anel A e a linha ondulada marcada com 4 indica o ponto de fixação ao anel de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Fórmula I;

[000208] X é N ou CH;

[000209] Y é H ou F;

[000210] R1 é H, (1-3C)alquila, (1-3C)alcóxi ou halogênio;

[000211] W é O;

[000212] m é 0, 1 ou 2;

[000213] R2 e R2a são, independentemente, H, F ou OH, desde queR2 e R2a não sejam ambos OH;

[000214] R3 é H, (1-3 C)alquila ou hidróxi(1-3 C)alquila;

[000215] Z é *-NR4bCH2-, em que o asterisco indica o ponto defixação ao carbono que suporta R3;

[000216] R4b é H, (1-6C)alquila, fluor(1-6C)alquila, difluor(1- 6C)alquila, trifluor(1-6C)alquila (1-6C alquil)C(O)-, (3-6Ccicloalquil)C(O)-, Ar1C(O)-, HOCH2C(O)-, (1-6C alquil)sulfonila, (3-6C cicloalquil)sulfonila, AR2(SO2)-, ou HO2CCH2-(1-6C alquil)NH(CO)-;

[000217] Ar1 é fenila opcionalmente substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, (1-6C)alquila, e (1-6C )alcóxi;

[000218] Ar2 é fenil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, (1-6C)alquila, e (1-6C )alcóxi; e

[000219] R5 e R6 são, independentemente, H, halogênio, OH, (1-6C)alquila ou hidróxi(1-6C )alquila.

[000220] Deve notar-se que certos compostos de acordo com a invenção podem conter um ou mais centros de assimetria e podem, por conseguinte, ser preparados e isolados como uma mistura de isômeros, tais como uma mistura racêmica ou diastereomérica, ou em uma forma enantiomericamente ou diastereomericamente pura. Pretende-se que todas as formas estereoisoméricas dos compostos da invenção, incluindo mas não se limitando a, diastereômeros, enantiômeros e atropisômeros, bem como as misturas dos mesmos, como misturas racêmicas, façam parte da presente invenção.

[000221] Em uma modalidade, os compostos de Fórmula geral I em que o Anel B é um anel B-1 têm a configuração absoluta da Figura 1-a:

[000222] Em uma modalidade, os compostos de Fórmula geral I em que o Anel B é um anel B-1 têm a configuração absoluta da Figura 1b:

[000223] Nas estruturas apresentadas aqui, onde a estereoquímica de qualquer átomo quiral particular não for especificada, todos os estereoisômeros estão contemplados e incluídos como os compostos da presente invenção. Onde estereoquímica é especificada por uma cunha sólida ou linha a tracejada representando uma configuração particular, então esse estereoisômero é assim especificado e definido.

[000224] Os termos "(l-3C)alquila" e "(1-6C)alquila-" como usados aqui se referem a radicais hidrocarboneto monovalentes saturados de cadeia ramificada ou linear de um a três átomos de carbono e um a seis átomos de carbono, respectivamente. Os exemplos incluem, mas não estão limitados a, metila, etila, 1-propila, isopropila, 1-butila, isobutila, sec-butila, terc-butila, 2-metil-2-propila, pentila e hexial.

[000225] O termo "fluor(1-6C)alquila" tal como aqui usado se refere a radicais de hidrocarbonetos monovalentes saturados de cadeia ramificada ou linear, de um a seis átomos de carbono tal como aqui definido, em que um dos hidrogênios é substituído por um átomo de flúor.

[000226] O termo "difluor(1-6C)alquila" tal como aqui usado se refere a radicais de hidrocarbonetos monovalentes saturados de cadeia ramificada ou linear de um a seis átomos de carbono tal como aqui definido, em que dois dos átomos de hidrogênio são substituídos por átomos de flúor.

[000227] O termo "trifluor(1-6C)alquila" tal como aqui usado se refere a radicais de hidrocarbonetos monovalentes saturados de cadeia ramificada ou linear de um a seis átomos de carbono tal como aqui definido, em que três dos átomos de hidrogênio são substituídos por átomos de flúor.

[000228] O termo "hidróxi(1-6C alquila)", tal como aqui usado se refere a radicais de hidrocarbonetos monovalentes saturados de cadeia ramificada ou linear de um a seis átomos de carbono, em que um dos hidrogênios é substituído por um grupo hidróxi (OH).

[000229] O termo "di-hidróxi(1-6C alquila)", tal como aqui usado se refere a radicais de hidrocarbonetos monovalentes saturados de cadeia ramificada ou linear de um a seis átomos de carbono tal como aqui definido, em que dois dos átomos de hidrogênio são substituídos por grupos hidróxi (OH), desde que os grupos hidróxi não estejam no mesmo átomo de carbono.

[000230] O termo "(1-6C alquil)sulfonila", tal como aqui usado se refere a um grupo (1-6C alquil)SO2-, em que o radical está sobre um átomo de enxofre e a porção (1-6C alquila) é como definido acima. Exemplos incluem metilsulfonila (CH3SO2-) e etilsulfonila (- CH3CH2SO2).

[000231] O termo "(3-6C cicloalquil)sulfonila", tal como aqui usado se refere a um grupo (3-6C cicloalquil)SO2-, em que o radical está ligado a um átomo de enxofre. Um exemplo é ciclopropilsulfonila.

[000232] Os termos "(l-4C)alcóxi" e "(1-6C )alcóxi", tal como aqui usados se referem aradicais alcóxi monovalentes saturados de cadeia ramificada ou linear, de um a quatro átomos de carbono ou um a seis átomos de carbono, respectivamente, em que o radical está sobre o átomo de oxigênio. Os exemplos incluem metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, e butóxi.

[000233] O termo "halogênio" inclui flúor, cloro, bromo e iodo.

[000234] Será também apreciado que certos compostos de Fórmula I podem ser usados como intermediários para a preparação de outros compostos de Fórmula I.

[000235] Os compostos de Fórmula I incluem os sais dos mesmos. Em certas modalidades, os sais são sais farmaceuticamente aceitáveis. Além disso, os compostos de Fórmula I incluem os sais de outros compostos, que não são, necessariamente, os sais farmaceuticamente aceitáveis, e que podem ser úteis como intermediários para a preparação e/ou purificação de compostos de Fórmula geral I e/ou para a separação de enantiômeros de compostos de Fórmula I.

[000236] O termo "farmaceuticamente aceitável" indica que a substância ou a composição é compatível quimicamente e/ou toxicologicamente, com outros ingredientes que compreendem a formulação, e/ou com o mamífero sendo tratado com o mesmo.

[000237] Também se deve observar que os compostos de Fórmula I e seus sais podem ser isolados sob a forma de solvatos, e consequentemente que qualquer um de tal solvato está incluído dentro do escopo da presente invenção.

[000238] Os compostos da invenção também podem conter proporções não naturais de isótopos atômicos em um ou mais dos átomos que constituem tais compostos. Isto é, um átomo, em particular quando mencionado em relação a um composto de acordo com Fórmula I, compreende todos os isótopos e misturas de isótopos daquele átomo, ou que ocorrem naturalmente ou produzidos sinteticamente, quer com a abundância natural ou em uma forma isotopicamente enriquecida. Por exemplo, quando o hidrogênio é mencionado, entende-se referir-se a 1H, 2H, 3H ou misturas dos mesmos, quando é mencionado carbono, entende-se referir-se a 11C, 12C, 13C, 14C ou as misturas dos mesmos, quando nitrogênio é mencionado, entende-se referir-se a 13N, 14N, 15N ou misturas dos mesmos, quando o oxigênio é mencionado, entende-se referir-se a 14O, 15O, 16O, 17O, 18O ou misturas dos mesmos, e, quando se menciona fluor, entende-se referir-se a 18F, 19F ou misturas dos mesmos. Os compostos de acordo com a presente invenção, portanto, também compreendem os compostos com um ou mais isótopos de um ou mais átomos, e misturas dos mesmos, incluindo compostos radioativos, em que um ou mais átomos não radioativos foi substituído por um dos seus isótopos radioativos enriquecidos. Compostos radiomarcados são úteis como agentes terapêuticos, por exemplo, agentes terapêuticos para câncer, reagentes de pesquisa, por exemplo, os reagentes de ensaio, bem como agentes de diagnóstico, por exemplo, em agentes de imagiologia in vivo. Todas as variações isotópicas dos compostos da presente invenção,quer radioativas ou não, se destinam a serem englobadas dentro do escopo da presente invenção.

[000239] A presente invenção fornece ainda um processo para a preparação de um composto de Fórmula I ou um sal do mesmo tal como definido neste documento, que compreende:

[000240] para um composto de Fórmula I em que Z é * -NHC(=O)-, e o anel A, B, W, D, R2, R2a, R3, R3a e m são como definidos para a Fórmula I, a ciclização de um composto correspondente tendo a fórmula II

[000241] em que P1 é H ou um grupo protetor de carboxila, na presença de um reagente de acoplamento e de uma base, ou

[000242] (b) para um composto de Fórmula I em que W é O, o anel Aé de fórmula A-1:

[000243] X é N, e o anel B, D, Z, Y, R1, R2, R2a, R3, R3a e m são como definidos para a Fórmula I, a ciclização de um composto correspondente que tem a fórmula III

[000244] em que n é 1, 2, 3 ou 4 e L1 é um átomo ou grupo de saída, na presença de uma base, ou

[000245] (c) para um composto de Fórmula I em que W é CH2, o anel

[000246] e o anel B, Z, D, Y, R1, R2, R2a, R3, R3a e m são como definidos para a Fórmula I, a ciclização de um composto correspondente que tem a fórmula IV

[000247] onde L2 é um átomo ou grupo de saída, na presença de uma base, ou

[000248] (d) para um composto de Fórmula I em que Z é * -NHC(=O)-, e o anel A, anel B, W, D, R2, R2a, R3, R3a e m são como definidos para a Fórmula I, a ciclização de um composto correspondente que tem a fórmula V

[000249] na presença de uma base e um reagente de acoplamento; ou

[000250] (e) para um composto de Fórmula I em que Z é *-NHCH2-, eo anel A, anel B, W, D, R2, R2a, R3, R3a e m são como definidos para a Fórmula I, a ciclização de um composto correspondente tendo a fórmula VI

[000251] na presença de um agente redutor; ou

[000252] (f) para um composto de Fórmula I em que Z é *-NHCH2-, eo anel A, anel B, W, D, R2, R2a, R3, R3a e m são como definidos para a Fórmula I, a ciclização de um composto correspondente que tem a fórmula VII

[000253] na presença de trifenilfosfina; ou

[000254] (g) para um composto de Fórmula I em o anel A, anel B, W,D, m, R2, R2a, R3, e R3a são como definidos para a Fórmula I, Z é *- NR4bCH2-, e R4b é (1-6C alquil)C(O)-, (3-6C cicloalquil)C(O)-, Ar1C(O)-, HOCH2C(O)-, (1-6C alquil)sulfonila, (3-6C cicloalquil)sulfonila, (1-6C alquil)sulfonila, (3-6C cicloalquil)sulfonila, ou Ar2(SO2)-, o acoplamento de um composto correspondente que tem a fórmula VIII

[000255] com um reagente tendo a fórmula (1-6C alquil) C(O)-L3, (36C cicloalquil) C(O)-L3, Ar1C(O)-L3, HOCH2C(O)-L3, (1-6C alquil)(SO2)-L3, (3-6C cicloalquil) (SO2)-L3, ou Ar2(SO2)-L3, respectivamente, em que L3 é um átomo de saída, na presença de uma base; ou

[000256] (h) para um composto de Fórmula I em que o anel A, anelB, W, D, R2, R2a, R3, R3a e m são como definidos para a Fórmula I, Z é *-NR4bCH2-, e R4b é (1-6C alquil)NH(CO)-, reagindo com um composto tendo a fórmula VIII

[000257] com um reagente tendo a fórmula (1-6C alquil)N=C=O, na presença de uma base; ou

[000258] para um composto de Fórmula I em que R2 é F, R2a é H, e o anel A, anel B, Z, W, D, R3, R3a e m são como definidos para a Fórmula I, reagindo com um composto correspondente tendo a fórmula IX

[000259] com um reagente de fluoração;

[000260] para um composto de Fórmula I em que W é O, o anel A é de fórmula A-1,

[000261] X é CH, e Y, R1, D, anel B, Z, R2, R2a, R3 e m são como definidos para a Fórmula I, a ciclização de um composto correspondente tendo fórmula X

[000262] em que n é 1, 2, 3 ou 4 e L1 é um átomo ou grupo de saída, na presença de uma base; e

[000263] opcionalmente, remover quaisquer grupos protetores e, opcionalmente, preparar um sal do mesmo.

[000264] Em uma modalidade dos métodos acima descritos (a)-(j), o anel B é um anel B-1, tendo a estrutura:

[000265] D é carbono, R2 e R2a são, independentemente, H, F, (1-3 C)alquila ou OH (desde que R2 e R2a não sejam ambos OH), R3 é H, (1-3 C)alquila ou hidróxi(1-3 C)alquila., e o anel A, W, m, Z, R5 e R6 são como definidos para a Fórmula I.

[000266] Com referência ao método (a), a ciclização pode ser realizada usando condições convencionais de formação de ligação de amida, por exemplo, por tratamento do ácido carboxílico com um agente de ativação, seguido pela adição da amina na presença de uma base. Agentes de ativação adequados incluem EDCI, cloreto de oxalila, cloreto de tionila, HATU, e HOBt. As bases adequadas incluem bases de amina, por exemplo, trietilamina, diisopropiletilamina, piridina, ou amônia em excesso. Os solventes adequados incluem DCM, DCE, THF e DMF.

[000267] Com referência aos métodos (b) e (c), os átomos de saída L1 e L2 podem ser, por exemplo, um átomo de halogênio, tal como Br, Cl ou I. Em alternativa, L1 e L2 podem ser um grupo de saída, por exemplo, um grupo arilsulfonilxi ou um grupo alquilsulfonilóxi, tal como um grupo mesilato ou um tosilato. As bases adequadas incluem os carbonatos de metais alcalinos, tais como carbonato de sódio, carbonato de potássio ou carbonato de césio. Os solventes adequados incluem solventes apróticos, tais como éteres (por exemplo, tetra- hidrofurano ou p-dioxano), DMF ou acetona. A reação pode ser convenientemente realizada a temperaturas elevadas, por exemplo, 50-150°C, por exemplo, 85°C.

[000268] Com referência ao método (d), os reagentes de acoplamento adequados incluem HATU, HBTU, TBTU, DCC, DIEC, e quaisquer outros reagentes de acoplamento de amida bem conhecidos das pessoas versadas na técnica. As bases adequadas incluem bases de aminas terciárias, tais como trietilamina e DIEA. Solventes adequados incluem DMF, THF, DCM e DCE.

[000269] Com referência ao método (e), agentes redutores adequados incluem Me4N(OAc)3BH, Na(OAc)3BH e NaCNBH3. Os solventes adequados incluem solventes neutros, tais como acetonitrila, THF e DCE. A reação pode ser convenientemente realizada à temperatura ambiente.

[000270] Com referência ao método (f), em determinadas modalidades o reagente de trifenilfosfina é usado sob a forma de uma resina de PPh3 ligada a poliestireno (vendido como PS-PPh3 por Biotage Systems). A reação é convenientemente realizada à temperatura ambiente. Os solventes adequados incluem solventes neutros, por exemplo, DCM.

[000271] Com referência ao método (g), o átomo de saída L3 pode ser um halogênio, por exemplo, Cl ou Br. Bases adequadas incluem bases de aminas terciárias, tais como di-isopropiletilamina e trietilamina. A reação é convenientemente realizada à temperatura ambiente.

[000272] Com referência ao método (h), as bases adequadas incluem bases de aminas terciárias tais como a DIEA e trietilamina. A reação é convenientemente realizada à temperatura ambiente.

[000273] Com referência ao método (i), o reagente de fluoração pode ser, por exemplo, trifluoreto de bis(2-metoxietil) amino-enxofre (Desoxo-FluorTM) ou trifluoreto de dietilamino-enxofre (DAST). Os solventes adequados incluem diclorometano, clorofórmio, dicloroetano e tolueno. A reação é convenientemente realizada à temperatura ambiente.

[000274] Com referência ao método (j), a base pode ser, por exemplo, um carbonato de metal alcalino, como por exemplo, carbonato de sódio, carbonato de potássio ou carbonato de césio. Solventes adequados incluem solventes apróticos, tais como éteres (por exemplo, tetrahidrofurano ou p-dioxano) ou tolueno. A reação pode ser convenientemente realizada a uma temperatura entre a temperatura ambiente e a de refluxo, por exemplo, 85°C.

[000275] Os grupos de amina nos compostos descritos em qualquer um dos métodos acima referidos podem ser protegidos com qualquer grupo protetor de amina conveniente, por exemplo, como descrito em Greene e Wuts, eds. "Protecting Groups in Organic Synthesis", 2° ed. New York, John Wiley & Sons, Inc., 1991. Exemplos de grupos protetores de amina incluem grupos acil e alcoxicarbonil, tais como t- butoxicarbonil (BOC), e [2-(trimetilsilil)etoxi]metil (SEM). Da mesma forma, os grupos carboxil podem ser protegido com qualquer grupo protetor de carboxil conveniente, por exemplo, como descrito em Greene e Wuts, eds., "Protecting Groups in Organic Synthesis", 2a ed. New York, John Wiley & Sons, Inc., 1991. Exemplos de grupos protetores de carboxil incluem grupos (1-6C)alquila, tais como metila, etil e t-butil. Grupos de álcool podem ser protegidos com qualquer grupo protetor de álcool conveniente, por exemplo, tal como descrito em Greene e Wuts, eds. "Protecting Groups in Organic Synthesis", 2a ed. New York, John Wiley & Sons, Inc., 1991. Exemplos de grupos protetores de álcool incluem éteres de benzil, tritila, silila e semelhantes.

[000276] Os compostos de fórmulas II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX e X também são considerados como novos e são fornecidos como aspectos adicionais da presente invenção.

[000277] A capacidade dos compostos da invenção para atuar como inibidores de TrkA pode ser demonstrada pelos ensaios descritos nos Exemplos A e B.

[000278] Certos compostos que são inibidores de TrkA e/ou TrkB podem ser úteis no tratamento de vários tipos de dor, incluindo a dor inflamatória, dor neuropática e dor associada ao câncer, a cirurgia, e fratura de ossos.

[000279] Em uma modalidade, os compostos de Fórmula I são úteis ao tratamento da dor, incluindo a dor crônica e aguda, em um mamífero.

[000280] A dor aguda, como definido pela Associação Internacional ao Estudo da Dor, resulta da doença, inflamação ou lesão aos tecidos. Este tipo de dor geralmente vem de repente, por exemplo, após trauma ou cirurgia, e pode ser acompanhada de ansiedade ou de estresse. A causa pode geralmente ser diagnosticada e tratada, e a dor se limita a um determinado período de tempo e gravidade. Em alguns casos raros, pode se tornar crônica.

[000281] Acredita-se amplamente que a dor crônica, como definido pela Associação Internacional ao Estudo da Dor representa a própria doença. Ela pode se tornar muito pior por fatores ambientais e psicológicos. A dor crônica persiste ao longo de um período mais longo do que a dor aguda e é resistente à maioria dos tratamentos médicos, em geral, ao longo de 3 meses ou mais. Ela pode e muitas vezes causar graves problemas aos pacientes.

[000282] Os compostos de Fórmula I são também úteis ao tratamento de câncer em um mamífero. Os exemplos particulares incluem neuroblastoma, o câncer de ovário, de pâncreas, colorrectal e de próstata.

[000283] Os compostos de Fórmula I são também úteis aotratamento de inflamação em um mamífero.

[000284] Os compostos de Fórmula I são também úteis aotratamento de certas doenças infecciosas em mamíferos, tais como a infecção por Trypanosoma cruzi.

[000285] Os compostos de Fórmula I podem também ser usados para tratar doenças neurodegenerativas em um mamífero. Exemplos de doenças neurodegenerativas incluem a desmielinização e desmielinação. Outros exemplos de doenças neurodegenerativas incluem a esclerose múltipla, doença de Parkinson e doença de Alzheimer.

[000286] Além disso, os compostos de Fórmula I podem também ser usados para tratar a cistite intersticial (IC), síndrome da bexiga dolorosa (PBS), incontinência urinária, asma, anorexia, dermatiteatópica, e psoríase em um mamífero.

[000287] Deste modo, outra modalidade da presente invençãofornece um método para tratar ou prevenir dor em um mamífero, compreendendo a administração ao referido mamífero de um ou mais compostos de Fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma quantidade eficaz para tratar ou prevenir a referida dor. Em uma modalidade, a dor é dor crônica. Em uma modalidade, a dor é a dor aguda. Em uma modalidade, a dor é dor inflamatória. Em uma modalidade, a dor é dor neuropática. Em uma modalidade, a dor é a dor associada ao câncer. Em uma modalidade, a dor é a dor associada com a cirurgia. Em uma modalidade, a dor é dor associada com fraturas de ossos. Em uma modalidade, o método compreende um método ao tratamento da referida dor em um mamífero. Em uma modalidade, o método compreende um método para impedir a referida dor, em um mamífero.

[000288] Uma outra modalidade da presente invenção fornece um método para tratar ou prevenir a inflamação em um mamífero, compreendendo a administração ao referido mamífero de um ou mais compostos de Fórmula I ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma quantidade eficaz para tratar ou prevenir a referida inflamação. Em uma modalidade, o método compreende um método de tratamento de inflamação em um referido mamífero. Em uma modalidade, o método compreende um método para prevenir referida inflamação emum mamífero.

[000289] Uma outra modalidade da presente invenção fornece um método para tratar ou prevenir uma doença neurodegenerativa em um mamífero, compreendendo a administração ao referido mamífero de um ou mais compostos de Fórmula I ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmos, em uma quantidade eficaz para tratar ou prevenir a referida doença neurodegenerativa. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é a desmielinização. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é desmielinação. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é a esclerose múltipla. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é a doença de Parkinson. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é a doença de Alzheimer. Outra modalidade a presente invenção fornece um método para tratar ou prevenir doenças infecciosas em um mamífero, compreendendo a administração ao referido mamífero de um ou mais compostos de Fórmula I ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma quantidade eficaz para tratar ou prevenir a referida doença infecciosa. Em uma modalidade, a doença infecciosa é a doença de Chagas. Em uma modalidade, o método compreende ainda um método de tratamento da referida doença neurodegenerativa em um mamífero. Em uma modalidade, o método compreende um método para prevenir a referida doença neurodegenerativa em um mamífero.

[000290] Uma outra modalidade da presente invenção fornece um método para tratar ou prevenir câncer em um mamífero,compreendendo a administração ao referido mamífero de um ou mais compostos de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma quantidade eficaz para tratar ou prevenir o referido câncer. Em uma modalidade, o câncer é o neuroblastoma. Em uma modalidade, o câncer é o câncer do ovário. Em uma modalidade, o câncer é o câncer pancreático. Em uma modalidade, o câncer é o câncer colorretal. Em uma modalidade, o câncer é o câncer da próstata. Em uma modalidade, o método compreende um método para tratar o câncer em um mamífero. Em uma modalidade, o método compreende um método para prevenir o referido câncer em um mamífero.

[000291] Os compostos de Fórmula I podem ser administrados individualmente como uma terapia única ou podem ser administrados em adição a uma ou mais outras substâncias e/ou tratamentos que trabalham pelo mesmo mecanismo ou por um mecanismo de ação diferente. Exemplos incluem compostos anti-inflamatórios, esteroides (por exemplo, dexametasona, cortisona, e fluticasona), analgésicos tais como NSAIDs (por exemplo, aspirina, ibuprofeno, indometacina, e cetoprofeno), e os opioides (como a morfina) e agentes quimioterapêuticos. Estes agentes podem ser administrados com um ou mais compostos de Fórmula I, como parte das mesmas formas de dosagem ou em separado, por meio das mesmas vias ou diferentes vias de administração e por meio dos mesmos esquemas ou diferentes esquemas de administração de acordo com a prática farmacêutica padrão conhecida para um versado na técnica.

[000292] No campo da oncologia médica é prática normal usar uma combinação de diferentes formas de tratamento para tratar cada paciente com câncer. Em oncologia médica o outro componente(s) de tal tratamento conjunto, além de composições da presente invenção pode ser, por exemplo, cirurgia, radioterapia, quimioterapia, inibidores de transdução de sinal e/ou anticorpos monoclonoais.

[000293] Em consequência, os compostos de Fórmula I podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes selecionados a partir de inibidores mitóticos, agentes alquilantes, antimetabólitos, DNA ou RNA antisense, antibióticos de intercalação, inibidores do fator de crescimento, inibidores de transdução de sinal, inibidores do ciclo celular, inibidores de enzimas, moduladores dos receptores de retinóides, inibidores de proteassoma, inibidores de topoisomerase, modificadores da resposta biológica, anti-hormônios, inibidores de angiogênese, agentes antiandrogênios citostáticos, anticorpos alvos, inibidores da HMG-CoA reductase, e inibidores da prenil-proteína transferase. Estes agentes podem ser administrados com um ou mais compostos de Fórmula I, como parte das mesmas formas de dosagem ou em separado, por meios das mesmas vias ou diferentes vias de administração e por meio dos mesmos esquemas ou diferentes esquemas de administração de acordo com a prática farmacêutica padrão conhecida por um versado na técnica.

[000294] Conforme aqui usado, os termos "tratar" ou "tratamento" se referem a medidas terapêuticas, profiláticas, paliativas ou preventivas. Resultados clínicos benéficos ou desejados incluem, mas não estão limitados a, alívio de sintomas, diminuição da extensão da doença, estado estabilizado (isto é, não piora) da doença, retardo ou redução da progressão da doença, amenização ou paliação do estado da doença, e remissão (quer parcial ou total), seja detectável ou indetectável. "Tratamento" também pode significar prolongar a sobrevivência, em comparação com a sobrevivência esperada se não recebesse o tratamento. Aqueles que necessitam de tratamento incluem aqueles já com a doença ou distúrbio, assim como aqueles propensos a ter a condição ou distúrbio, ou aqueles em que a condição ou distúrbio deve para ser prevenida.

[000295] Em uma modalidade, os termos "tratamento" ou "tratar" como usados aqui, significam um alívio, no todo ou em parte, dos sintomas associados com um distúrbio ou condição, tal como aqui descrito (por exemplo, vários tipos de dor, incluindo dor inflamatória, dor neuropática, e dor associada ao câncer, cirurgia, e fratura óssea), ou redução ou parada da progressão ou agravamento desses sintomas.

[000296] Em uma modalidade, o termo "prevenir" tal como aqui usado, significa a prevenção do aparecimento, recorrência ou propagação, no todo ou em parte, da doença ou condição, tal como aqui descrito (por exemplo, vários tipos de dor, incluindo a dor inflamatória, dor neuropática e dor associada ao câncer, acirurgia, e fratura do osso), ou de um sintoma da mesma.

[000297] Os termos "quantidade eficaz" e "quantidade terapeuticamente eficaz" se referem a uma quantidade de composto que, quando administrada a um mamífero com necessidade de tal tratamento, é suficiente para (i) tratar ou prevenir uma doença, condição, ou distúrbio particular, (ii) atenuar, amenizar ou eliminar um ou mais sintomas da doença, condição ou distúrbio particular, ou (iii) prevenir ou retardar o aparecimento de um ou mais sintomas da doença, condição ou distúrbio particular aqui descrita. A quantidade de um composto de Fórmula I que vai corresponder a uma tal quantidade vai variar dependendo de fatores tais como o composto particular, condição da doença e sua gravidade, a identidade (por exemplo, peso) do mamífero com necessidade de tratamento, mas pode, no entanto, ser rotineiramente determinada por um versado na técnica.

[000298] Conforme aqui usado, o termo "mamífero" se refere a um animal de sangue quente que tem ou está em risco de desenvolver uma doença aqui descrita e inclui, mas não está limitado a, porquinhos da índia, cães, gatos, ratos, camundongos, hamsters, e primatas, incluindo humanos.

[000299] Os compostos da invenção podem ser administrados por qualquer via conveniente, por exemplo, ao trato gastrointestinal (por exemplo, por via retal ou por via oral), o nariz, pulmões, musculatura ou vasculatura, ou por via transdérmica ou por via dérmica. Os compostos podem ser administrados em qualquer forma de administração conveniente, por exemplo, comprimidos, pós, cápsulas, soluções, dispersões, suspensões, xaropes, aerossóis, supositórios, géis, emulsões, adesivos, etc.. Tais composições podem conter componentes convencionais em preparações farmacêuticas, por exemplo, diluentes, veículos, modificadores de pH, edulcorantes, agentes de volume e ainda agentes ativos. Se a administração parenteral for desejada, as composições serão estéreis e em uma forma de solução ou suspensão adequada para injeção ou infusão. Tais composições constituem um outro aspecto da invenção.

[000300] A presente invenção fornece ainda uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tal como definido aqui acima. Em uma modalidade, a composição farmacêutica inclui o composto de Fórmula I em conjunto com um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

[000301] A presente invenção fornece ainda um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em terapia.

[000302] Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento da dor em um mamífero. Em uma modalidade, a dor é dor crônica. Em uma modalidade, a dor é a dor aguda. Em uma modalidade, a dor é dor inflamatória. Em uma modalidade, a dor é dor neuropática. Em uma modalidade, a dor é a dor associada ao câncer. Em uma modalidade, a dor é a dor associada com a cirurgia. Em uma modalidade, a dor é dor associada com fraturas dos ossos.

[000303] Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de inflamação em um mamífero.

[000304] De acordo com um aspecto adicional, a presente invenção fornece um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento de uma doença neurodegenerativa em um mamífero. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é a desmielinização. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é desmielinação. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é a esclerose múltipla. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é a doença de Parkinson. Em uma modalidade, a doença neurodegenerativa é a doença de Alzheimer.

[000305] Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento de doenças infecciosas em um mamífero. Em uma modalidade, a doença infecciosa é a doença de Chagas.

[000306] Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento de câncer em um mamífero. Em uma modalidade, o câncer é o neuroblastoma. Em uma modalidade, o câncer é o câncer do ovário. Em uma modalidade, o câncer é o câncer pancreático. Em uma modalidade, o câncer é o câncer colorretal. Em uma modalidade, o câncer é o câncer da próstata.

[000307] Uma outra modalidade da presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento ao tratamento da dor em um mamífero.

[000308] Uma outra modalidade da presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento ao tratamento de inflamação em um mamífero.

[000309] Uma outra modalidade da presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento ao tratamento de uma doença neurodegenerativa em um mamífero.

[000310] Uma outra modalidade da presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento ao tratamento de doenças infecciosas em um mamífero.

[000311] Uma outra modalidade da presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento ao tratamento de câncer em um mamífero.EXEMPLOS

[000312] Os exemplos seguintes ilustram a invenção. Nos exemplos descritos abaixo, a menos que indicado em contrário todas as temperaturas são apresentadas em graus Celsius. Os reagentes foram adquiridos de fornecedores comerciais tais como Aldrich Chemical Company, Lancaster, Alfa, Aesar, TCI, Maybridge, Asta Tech, ou outros fornecedores adequados, e foram usados sem purificação adicional a não ser que seja indicado o contrário. THF, DCM, tolueno, DMF e dioxano foram adquiridos da Aldrich em garrafas Sure/SealTM e usados como recebidos.

[000313] As reações apresentadas abaixo foram realizadas geralmente sob uma pressão positiva de nitrogênio ou argônio, ou com um tubo de secagem (a menos que indicado de outra forma) em solventes anidros, e os frascos de reação foram tipicamente equipados com septos de borracha para a introdução dos substratos e reagentes através de uma seringa. A vidraria foi seca em estufa e/ou seca com calor ou seca sob uma corrente de nitrogênio seco.

[000314] A cromatografia em coluna foi realizada em um sistema Biotage (Fabricante: Dyax Corporation) com uma coluna de fase reversa de sílica-gel ou C-18, ou em um cartucho de sílica SepPak (Waters), ou usando cromatografia em coluna flash convencional em sílica-gel, salvo indicação em contrário.

[000315] As abreviaturas aqui utilizadas têm os seguintes significados:

Ensaios Bio ógicos

Exemplo AEnsaio de ELISA para TrkA

[000316] Um ensaio de imunossorvente ligado à enzima (ELISA) foi usado para avaliar a atividade de quinase TrkA na presença de inibidores. Placas de microtitulação de 384 poços tipo Immulon 4HBX (Thermo part #8755) foram revestidas com uma solução de 0,025 mg/mL de poli (Glu, Ala, Tyr, 6:3:1; Sigma P3899). Várias concentrações do composto do teste, 2,5 nM de TrkA (Invitrogen Corp., TrkA humano recombinante com tag de histidina, domínio citoplasmático), e 500 μM de ATP foram incubados durante 25 minutos à temperatura ambiente nas placas revestidas com agitação. O tampão de ensaio consistia em 25 mM de MOPS pH 7,5, 0,005% (v/v) de Triton X-100 e 5 mM de MgCl2. A mistura reacional foi removida a partir da placa por lavagem com PBS contendo 0,1% (v/v) de Tween 20. O produto de reação fosforilado foi detectado usando 0,2 μg/mL de um anticorpo monoclonal específico de fosfotirosina (clone PY20) conjugado com peroxidase de rábano, em conjunto com o sistema de substrato de Peroxidase TMB (KPL). Após a adição de ácido fosfórico 1M, a intensidade da cor do substrato cromogênico foi quantificada através da absorvância a 450 nm. Os valores de IC50 foram calculados usando um ajustamento de curva logístico de 4 ou 5 parâmetros.

[000317] A Tabela 1 apresenta os valores médios de IC50 aos compostos da invenção, quando testados neste ensaio. Na Tabela 1, a letra "A" designa um valor de IC50 entre cerca de 1 e 100 nM, e a letra "B" designa um valor de IC50 > 100 nM e < 3000 nM.

Exemplo BEnsaio de ligação a TrkA

[000318] A capacidade de um composto para se ligar a TrkA foi medida por ensaio de ligação de quinase LanthaScreenTM Eu da Invitrogen. Neste ensaio, um TrkA humano recombinante com His-tag (domínio citoplasmático) de Invitrogen é incubado com Invitrogen de Alexa-Fluor® Tracer 236, anti-His biotinilado, e Estreptavidina marcada com európio, composto (2% DMSO final) em tampão ( MOPS 25 mM, pH 7,5, MgC12 5 mM, Triton X-100 0,005%). Depois de uma incubação por 60-minutos a 22°C, a reação foi medida usando o EnVision via detecção de comprimento de onda dual TR-FRET e o POC foi calculado a partir da razão de emissão. Os dados de dose-resposta dos compostos foram ajustados a um modelo logístico de 4 parâmetros e o IC50 foi definido como a concentração do composto a 50 POC.

[000319] A Tabela 1 apresenta os valores médios de IC50 aos compostos da invenção, quando testados neste ensaio. Na Tabela 1, a letra "A" designa um valor de IC50 entre cerca de 1 e 100 nM, e a letra "B" designa um valor de IC50 > 100 nM e < 3000 nM.

[000320] 1Composto pode ter sido isolado em conjunto com oenantiômero e/ou um ou mais diastereômeros, em que acreditava-se que o(s) isômero(s) adicional(is) constituia(m) < 1,5% da quantidade total isolada.Preparação A

(R)-5-fluor-2-metóxi-3-(pirrolidin-2-il)-piridinaEtapa A: Preparação de (R)-terc-butil-2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidina-1-carboxilato:

[000321] Uma solução de terc-butil-pirrolidina-1-carboxilato (4,09 mL, 23,4 mmol) e (-)-esparteína (6,44 mL, 28,0 mmol) em MTBE (50 mL) foi resfriada até -78°C e sec-BuLi (20 mL, 28,0 mmol, 1,4 M em ciclo- hexano) foi introduzido gota a gota através de uma cânula, mantendo a temperatura interna abaixo de -78°C. A solução resultante foi agitada durante 3 horas à temperatura de -78°C, seguida pela adição de uma solução de ZnCl2 (21,0 mL, 21,0 mmol, 1M em Et2O) gota a gota, com agitação rápida, mantendo a temperatura interna abaixo de -65°C. A suspensão clara resultante foi agitada a -78°C durante 10 minutos e depois aquecida à temperatura ambiente. A mistura resultante foi carregada sequencialmente com 3-bromo-5-fluor-2-metoxipiridina (5,05 g, 24,5 mmol), Pd(OAc)2 (0,262 g, 1,17 mmol) e t-Bu3P-HBF4 (0,407 g, 1,40 mmol) em uma só porção. Depois de agitar durante a noite à temperatura ambiente, NH4OH concentrado (1 mL) foi adicionado e a reação foi agitada durante 1 hora. A suspensão resultante foi filtrada através de Celite® e lavada com Et2O. A camada orgânica foi filtrada e concentrada, e o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 5% de EtOAc/hexanos para gerar o produto (R)-terc-butil 2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)-pirrolidina-1- carboxilato como um óleo amarelo (4,34 g, 63% de rendimento).Etapa B: Preparação de (R)-5-fluor-2-metóxi-3-(pirrolidin-2-il)piridina:

[000322] Uma solução de DCM (12 mL) de TFA (11,3 mL, 146 mmol) foi adicionada a (R)-terc-butil 2-(5-fluor-2-metóxi-piridin-3-il)-pirrolidina- l-carboxilato (4,33 g, 14,6 mmol) e agitou-se à temperatura ambiente durante 1 hora. A reação foi então concentrada, absorvida em EtOAc, em seguida, lavada com salmoura e NaHCO3. A fase orgânica foi seca (MgSO4), filtrada, e concentrada, e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna de silica eluindo-se com um 1-2% NH3- MeOH/DCM 7 N para produzir (R)-5-fluor-2 -metóxi-3-(pirrolidin-2-il) piridina como um líquido (1,40 g, 49% de rendimento).O excesso enantiomérico (% ee) de (R)-5-fluor-2-metóxi-3-(pirrolidin-2- il)piridina foi determinado como segue:

[000323] A uma solução de propan-2-ol em pequena quantidade de ((R)-5-amida fluor-2-metóxi-3-(pirrolidin-2-il)-piridina foi adicionado o excesso de amida de N-(2,4-dinitro-5-fluorfenil)-L-alanina (FDAA, reagente de Marfey). A mistura foi aquecida a refluxo durante aproximadamente dois minutos depois de resfriar até à temperatura ambiente, a mistura reacional foi diluída com acetonitril e analisada por HPLC (coluna 120Â 3 μm, 4,6 x 50 mm YMC ODS-AQ;. fase móvel: 595% de solvente B em A; solvente A: H2O/ 1% de IPA/ acetato de amónio 10 mM, e o solvente B: ACN/ IPA 1%/ acetato de amônio 10 mM, taxa de fluxo: 2 mL/min). O excesso enantiomérico foi determinado a partir das áreas dos picos de dois derivados diastereoméricos formados. O ee% do produto foi determinado como sendo > 93%.Preparação B

Ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridina-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxílicoEtapa A: Preparação 5-hidroxipirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etila:

[000324] A uma mistura de 3-amino-1H-pirazolo-4-carboxilato de etila (25,0 g, 161 mmol) e (E)-etil 3-etoxiacrilato (35,8 ml, 242 mmol) em DMF (537 mL) foi adicionado carbonato de césio (78,7 g, 242 mmol), e a reação foi aquecida a 110°C durante 15 horas. Após resfriamento à temperatura ambiente a reação foi acidificada com ácido acético até pH 4. O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água e EtOAc, para se obter o produto como um sólido branco. Para recuperar o produto adicional, o filtrado foi concentrado, diluído com EtOAc (500 mL) e lavado com H2O (5 x 200 mL). O precipitado resultante na camada de EtOAc foi filtrado e lavado com água e EtOAc, para se obter um segundo lote de produto. Os dois lotes de produto foram combinados e secos sob pressão reduzida para gerar 5- hidroxiporazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etila como um sólido branco (33,3 g, rendimento de 100%). MS (apci) m/z = 206,2 (M-H).Etapa B: Preparação de 5-cloropirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etila:

[000325] Etil-5-hidroxipirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etila (22,7 g, 110 mmol) foi suspenso em tricloreto de fosforila (100 mL) e aqueceu-se ao refluxo. Após aquecimento durante 2 horas, a mistura reacional foi resfriada e concentrada para remover o excesso de POCl3. O resíduo foi diluído em DCM (100 mL) e adicionado lentamente a um balão contendo água gelada. A mistura foi separada e a camada aquosa foi extraída com DCM (2 x 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4), filtradas e concentradas para produzir 5-cloropirazolo[l,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etila como um sólido amarelo pálido (24,2 g, 97,6% de rendimento). MS (APCI) m/z = 225,9 (M + H).Etapa C: Preparação de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)- pirrolidin-l-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etila:

[000326] Uma mistura de 5-cloropirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de etila (0,75 g, 3,32 mmol), (R)-5-fluor-2-metóxi-3- (pirrolidin-2-il)piridina (Preparação A, 0,984 g, 3,66 mmol), DIEA (2,32 mL, 13,3 mmol) e n-butanol (1,11 mL) foi selada em um tubo de pressão e aquecida a 90°C durante 48 horas. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e lavada com água, salmoura e NaHCO3 sat.. A camada orgânica foi seca (MgSO4), filtrada e concentrada para produzir um óleo cor de laranja escuro. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica eluindo com 50-80% de EtOAc/hexanos para produzir (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)- pirrolidin-1-il)-pirazolo[1 ,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,72 g, 56,2% de rendimento) como um sólido espumoso amarelo. MS (apci) m/z = 386,0 (M + H).Etapa D: Preparação de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridina-3- il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico:

[000327] A uma suspensão de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)-pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,72 g, 1,868 mmol) em MeOH (9,34 mL) foi adicionado LiOH (1 N, 3,74 mL, 3,74 mmol), e a mistura reacional foi aquecida a 70°C durante 15 horas. Após resfriamento, a mistura reacional foi concentrada e o resíduo resultante foi diluído em água. Após acidificação com ácido cítrico, a camada aquosa foi extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas (MgSO4), filtradas e concentradas a fim de produzir (R)-5-(2-(5-fluor-2-metóxi-piridin-3-il)-pirrolidin-l-il)pirazolo[1,5- a]-pirimidina-3-carboxílico (0,67 g, 100% de rendimento) como um sólido amarelo. MS (apci) m/z = 357,9 (M + H).Preparação C

(R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluor-2-metoxifenil)-pirrolidin-2,2,2- trifluoracetato

[000328] As etapas A a D seguiram o procedimento descrito por H. Imamura, et al. em Tetrahedron, 2000, 56, 7705.Etapa A: Preparação de (R)-4-(terc-butildimetilsililoxi)pirrolidin-2-ona:

[000329] A uma suspensão de (R)-4-hidroxipirrolidin-2-ona (adquirido a partir de Asta Tech ou Aldrich) (5,030 g, 48,26 mmol) em DMF (24 mL) a 0°C foi adicionado TBDMS-C1 (7,637 g, 50,67 mmol) seguido por imidazol (4,978 g, 72,39 mmol). A mistura resultante foi aquecida até à temperatura ambiente e agitou-se durante 1 hora, em seguida foi vertida em 100 mL de água com agitação. A suspensão resultante foi filtrada e os sólidos foram lavados com água e secos sob pressão reduzida, para produzir (R)-4-(terc-butildimetilsililoxi)pirrolidin-2-ona (10,14 g, rendimento de 97,56%) que foi usado diretamente sem purificação adicional.Etapa B: Preparação de (R)-terc-butil 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2- oxopirrolidina-1-carboxilato:

[000330] A uma solução de (R)-4-(terc-butildimetilsililoxi)pirrolidin-2- ona (10,14 g, 47,08 mmol) em MeCN (16 mL) a 0°C adicionou-se sequencialmente DMAP (3,221 g, 26,37 mmol), TEA (3,957 mL, 28,25 mmol), e Boc20 (11,49 g, 52,65 mmol). A mistura resultante foiaquecida até à temperatura ambiente e agitou-se durante 48 horas. A mistura reacional foi vertida em água e extraída com EtOAc (100 mL). A camada orgânica foi lavada sucessivamente com HCl aquoso 1 N (2 x 50 mL), solução aquosa de NaOH 1 N (50 mL), e salmoura. A camada orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada em vácuo para produzir (R)-terc-butil 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2- oxopirrolidina-1-carboxilato (13,62 g, 91,69% de rendimento). 1H RMN (CDC13) δ 4,39 (m, 1H), 3,87 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 2,71 (m, 1H), 2,46 (m, 1H), 1,53 (s, 9H), 0,88 (s, 9H), 0,08 (d, 6H).Etapa C: Preparação de (R)-terc-butil 2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-(5- fluor-2-metoxifenil)-4-hidroxibutilcarbamato:

[000331] A uma solução de (R)-terc-butil 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2- oxopirrolidina-1 carboxilato (6,00 g, 19,0 mmol) em THF (36 mL) a 0°C, foi adicionada uma solução 0,5 M de brometo de (5-fluor-2- metoxifenil)magnésio em THF (50,0 mL, 25,0 mmol). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 30 minutos, em seguida, tratada com MeOH (60 mL) e NaBH4 (0,966 g, 25,2 mmol). Após agitação a 0°C durante 30 minutos adicionais, a mistura reacional foi vertida em solução aquosa saturada de NH4Cl (40 mL) e extraída com EtOAc (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução salina, secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 0-2% de MeOH/DCM, para produzir (R)-terc-butil 2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-(5-fluor-2- metoxifenil)-4-hidroxibutilcarbamato (que foi assumido como sendo uma mistura dos isômeros sin e anti), (4,81 g, 57,0% de rendimento). 1H RMN (CDCl3) δ 7,20 (m, 1H), 6,90 (m, 1H), 6,77 (m, 1H), 5,12 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,82 (m, 3H), 3,29 (m, 2H), 1,71-1,93 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 0,93 (d, 9H), 0,11-0,14 (m, 6H).Etapa D: Preparação de (R)-terc-butil 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5- fluor-2-metoxifenil)-pirrolidina-1-carboxilato:

[000332] A uma solução de (R)-terc-butil 2-(terc-butildimetilsililoxi)-4- (5-fluor-2-metoxifenil)-4-hidroxibutilcarbamato (4,810 g, 10,84 mmol) em CH2C12 (108 mL) a -60°C foi adicionado TEA (4,534 mL, 32,53 mmol) seguido por cloreto de metanossulfonila (0,9231 ml, 11,93 mmol). A mistura resultante foi lentamente aquecida a -5°C e vertida para uma mistura de gelo e NaHCO3 (50ml) aquoso saturado. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir material em bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 2-10% de MeOH/DCM, para se obter (R)- terc-butil 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluor-2-metoxifenil)-pirrolidina- 1-carboxilato (assumido como sendo uma mistura de isômeros cis e trans; 2,648 g, 57,38% de rendimento). LC/MS (ES+ APCI) m/z = 326,1 (M + H-Boc).Etapa E: Preparação de (R)-4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluor-2- metoxifenil)pirrolidina 2,2,2-trifluoracetato:

[000333] A uma solução de (R)-terc-butil 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2- (5-fluor-2-metoxifenil)pirrolidina-1-carboxilato (2,648 g, 6,222 mmol) em CH2Cl2 (26 mL) a 0°C adicionou-se TFA (9,3 ml). A mistura resultante foi aquecida até à temperatura ambiente e agitou-se durante 2 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para gerar o material bruto que foi submetido à azeotropia com tolueno-CH2Cl2 (2x) e seco sob pressão reduzida para produzir (R)-4-(terc- butildimetilsililoxi)-2-(5-fluor-2-metoxifenil)-pirrolidina 2,2,2-trifluoracetato (assumido como sendo uma mistura de isômeros cis e trans; 2,92 g, 106,8% de rendimento), o qual foi usado diretamente sem purificação adicional. LC/MS (ES + APCI) m/z = 326,3 (M + H). Preparação D

Ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxílicoEtapa A: Preparação de (R)-etil 5-(4-(terc- butildimetilsililoxi)-2-(5-fluor- 2-metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000334] A uma suspensão etil 5-hidroxipirazolo[1,5-a]pirimidino-3- carboxilato (0,100 g, 0,483 mmol) e reagente BOP (0,320 g 0,724 mmol) em DMF (1 mL) a 0°C foi adicionada uma solução de (R)-4- (terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluor-2-metoxifenil)-pirrolidina 2,2,2 -trifluoracetato (Preparação C; 0,167 g, 0,483 mmol) em CH2Cl2 (1 mL) e N, N-di-isopropiletilamina (0,420 mL, 2,41 mmol) sequencialmente. A mistura resultante foi aquecida até temperatura ambiente e agitada durante 18 horas. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (10 mL), e lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. A fase de salmoura foi re-extraída com EtOAc (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 0-50% EtOAc/Hexanos para produzir (R)-etil 5-(4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluor-2- metoxifenil)-pirrolidin-1-il)pirazolo[l,5-a] pirimidina-3-carboxilato (como uma mistura de isômeros cis e trans) (0,0487 g, 19,6% de rendimento) LC/MS (ES + APCI) m/z = 515,2 (M + H).Etapa B: Preparação de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-l-i1)pirazolo[1,5-a]pirimidino-3-carboxilato:

[000335] A uma solução de (R)-etil 5-(4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5- fluor-2-metoxifenil)-pirrolidin-1-il)pirazolo[l,5-a]pirimidina-3-carboxilato (como uma mistura de isômeros cis e trans) (0,0487 g, 0,0946 mmol) em THF (1 mL) a 0°C, foi adicionado TBAF 1 M em THF (0,104 mL, 0,104 mmol). A mistura reacional foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 2,5 horas a mistura reacional foi diluída com EtOAc (10 mL), lavada com salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir o produto em bruto (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[l,5- a]pirimidina-3-carboxilato (como uma mistura de isômeros cis e trans;. 37,9 mg, 100% de rendimento) LC/MS (ES + APCI) m/z = 401,1 (M + H).Etapa C: Preparação de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-l-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000336] A uma solução de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4- hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[l,5-a]pirimidina-3-carboxilato (como uma mistura de isômeros cis e trans; 0,0379 g, 0,0947 mmol) em CH2Cl2 (1 mL) a 0°C adicionou-se BBr3 1 M em CH2C12 (0,473 ml, 0,473 mmol). A mistura resultante foi aquecida até à temperatura ambiente, durante 25 horas, depois diluiu-se com CH2Cl2 (10 mL) e vertida sobre uma mistura de gelo e NaHCO3 aquoso saturado (15 ml). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi acidificada com HCl aquoso 1N até pH = 5-6. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3x ) e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar uma mistura de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (como uma mistura de isômeros cis e trans) e (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)-4- hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[l,5-a]pirimidina-3-carboxilato (como uma mistura de isômeros cis e trans). A mistura foi dissolvida em MeOH- THF (0,25 mL/0,75 mL) e tratada com LiOH aquoso 1 N (0,474 mL, 0,474 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 50°C durante 1 hora, depois foi resfriada até à temperatura ambiente e acidificada a pH 3-4 com HCl aquoso 1 N. A mistura foi extraída com EtOAc (3 x 15 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtrdas e concentradas sob pressão reduzida para gerar a ácido (R)-5-(2-(5- fluor-2-hidroxifenil)-4-hidróxi-1-il)pirazolo[l,5-a]pirimidina-3-carboxílico bruto (como uma mistura de isômeros cis e trans; 33,9 mg, rendimento de 100%). LC/MS (ES + APCI) m/z = 357,1 (MH).Exemplo 1

(6R)-9-fluor-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo[15.5.2.17,11,02,6,020,24]- pentacosa-1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-dionaEtapa A: Preparação de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3- 1 -il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000337] A uma mistura de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (Preparação B, Etapa C; 0,92 g, 2,39 mmol) e ácido acético (5,73 g, 95,5 mmol) foi adicionado HBr (4,4 rnL, 23,9 mmol, 33% em ácido acético). A mistura da reação foi aquecida a 90°C por 2 horas. Após resfriamento, a mistura da reação foi tratada com EtOAc, lavada com água, NaHCO3 saturado e salmoura, depois seca (MgSO4), filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 3% MeOH/DCM para render o produto desejado (0,605 g, 68% de rendimento). MS (apci) m/z = 372,0 (M+H).Etapa B: Preparação de (R)-etil 5-(2-(1-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2- il)propil)-5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5- a]pirimidina-3-carboxilato:

[000338] A uma suspensão de DMF (5 mL) de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2- oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato (0,20 g, 0,54 mmol) foi adicionado LiH (6,8 mg, 0,81 mmol) a 0°C, seguida primeiro pela agitação por 20 minutos, depois adição de uma solução de DMF (1 mL) de 2-(3-bromopropil)isoindolina-1,3- diona (0,29 g, 1,1 mmol). A reação foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada por 17 horas. Após resfriamento a 0°C a reação foi resfriada rapidamente com gelo-água (30 mL) e o aquoso foi extraído com EtOAc (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram retrolavadas com água e salmoura, secas (MgSO4), filtradas e concentradas. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 2% MeOH DCM para render o produto desejado (0,2 g, 66% de rendimento). MS (apci) m/z = 559,0 (M+H).Etapa C: Preparação de (R)-etil 5-(2-(1-(3-aminopropil)-5-fluor-2-oxo- 1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000339] A uma solução de (R)-etil 5-(2-(1-(3-(l,3-dioxoisoindolin-2- il)propil)-5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5- a]pirimidina-3-carboxilato (0,20 g, 0,36 mmol) em MeOH/THF a 1:1 (12 mL) foi adicionado hidrazina-H20 (0,18 g, 3,6 mmol). A mistura da reação foi aquecida a 50°C por 24 horas. Após resfriamento, a mistura da reação foi derramada em água e extraída com DCM (3 x 20 mL). Os orgânicos combinados foram secos (MgSO4), filtrados e concentrados para produzir o produto desejado (0,11 g, 72% de rendimento). MS (apci) m/z = 429,0 (M+H).Etapa D: Preparação de ácido (R)-5-(2-(1-(3-aminopropil)-5-fluor-2- oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxílico:

[000340] A uma solução de (R)-etil 5-(2-(1-(3-aminopropil)-5-fluor-2- oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato (0,11 g, 0,26 mmol) em THF/MeOH a 3:1 (8 mL) foiadicionado LiOH (1 N, 1,5 mL, 1,5 mmol), e a mistura da reação foi aquecida a 70°C por 20 horas. Após resfriamento, a mistura da reação foi tratada com MeOH, acidificada com 1N HC1 (1,5 mL), e concentrada para produzir o produto desejado (0,1 g, 100% de rendimento). MS (apci) m/z = 401,1 (M+H).Etapa E: Preparação de (6R)-9-fluor-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo[15,5,2,17,11,02,6,020,24]pentacosa- 1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona:

[000341] A uma solução de ácido (R)-5-(2-(1-(3-aminopropil)-5-fluor- 2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxílico (95 mg, 0,24 mmol) em 1:2 DMF/DCM (9 mL) foi adicionado EDCI (0,14 g, 0,71 mmol) seguido por HOBT (96 mg, 0,71 mmol) a temperatura ambiente. Após agitação por 10 minutos, TEA (0,099 mL, 0,71 mmol) foi adicionado à mistura da reação e agitada por 6 horas. A mistura da reação foi tratada com EtOAc, lavada com NH4Cl saturado, NaHCO3 saturado, e salmoura, depois seca (MgSO4), filtrada, concentrada. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 4% MeOH/DCM para render o produto de título (35 mg, 39% de rendimento). MS (apci) m/z = 383,2 (M+H).Exemplo 2

(6R)-12-oxa-2,16,20,21,24,26-hexaazapentaciclo[16,5,2,17,11,02,6,021,25]-hexacosa- 1(24),7(26),8,10,18(25),19,22-heptaen-17-ona Etapa A: Preparação de (R)-2-metóxi-6-(pirrolidin-2-il)piridina:

[000342] Preparada de acordo com o método descrito na Preparação A, substituindo 3-bromo-5-fluor-2-metoxipiridina por 2-bromo-6- metoxipiridina na Etapa A. MS (apci) m/z = 179,1 (M+H).Etapa B: Preparação de (R)-etil 5-(2-(6-metoxipiridin-2-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000343] Preparado pelo mesmo método como descrito na Preparação B, Etapa C, substituindo (R)-5-fluor-2-metóxi-3-(pirrolidin- 2-il)piridina por (R)-2-metóxi-6-(pirrolidin-2-il)piridina. MS (apci) m/z = 368,0 (M+H).Etapa C: Preparação de (R)-etil 5-(2-(6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000344] A uma mistura de (R)-etil 5-(2-(6-metoxipiridin-2-il)pirrolidin- 1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,46 g, 1,25 mmol) e ácido acético (3,0 g, 50 mmol) foi adicionado HBr (3,1 g, 12,5 mmol, 33% em ácido acético). A mistura da reação foi aquecida a 90°C por 2 horas. Após resfriamento, a reação foi diluída com EtOAc, lavada com água, NaHCO3 saturado, e salmoura, depois seca (MgSO4), filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 4% MeOH/DCM para render o produto desejado (0,3 g, 67% de rendimento). MS (apci) m/z = 354,1 (M+H).Etapa D: Preparação de (R)-etil 5-(2-(6-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2- il)propoxi)piridin-2-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000345] À uma suspensão de (R)-etil 5-(2-(6-oxo-1,6-dihidropiridin- 2-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,091 g, 0,26 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado LiH (3,2 mg, 0,39 mmol) a 0°C. Após agitação por 20 minutos, uma solução de 2-(3- bromopropil)isoindolina-1,3-diona (0,14 g, 0,52 mmol) em DMF (1 mL) foi adicionada, e a reação foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada por 17 horas. Após resfriamento para 0°C, a reação foi resfriada rapidamente com gelo-água (30 mL) e extraída com EtOAc (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas (MgSO4), filtradas e concentradas. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 1,5% MeOH/DCM para render o produto desejado (0,117 g, 84% de rendimento). MS (apci) m/z = 541,1 (M+H).Etapa E: Preparação de (R)-etil 5-(2-(6-(3-aminopropoxi)piridin-2- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000346] A uma solução de (R)-etil 5-(2-(6-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2- il)propoxi)piridin-2-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,11 g, 0,20 mmol) em MeOH/THF a 1:1 (12 mL) foi adicionadohidrazina-H2O (0,10 g, 2,0 mmol). A mistura da reação foi aquecida a 50°C por 24 horas. Após resfriamento, a mistura da reação foi derramada em água depois extraída com DCM (3 x 20 mL). Os orgânicos combinados foram secos (MgSO4), filtrados e concentrados para produzir o produto desejado (70 mg, 84% de rendimento). MS (apci) m/z = 441,1 (M+H).Etapa F: Preparação de ácido (R)-5-(2-(6-(3-aminopropoxi)piridin-2- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico:

[000347] A uma solução de (R)-etil 5-(2-(6-(3-aminopropoxi)piridin-2- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (70 mg, 0,17 mmol) em THF/MeOH a 3:1 (8 mL) foi adicionado LiOH (1 N, 1,5 mL, 1,5 mmol) e a mistura da reação foi aquecida a 70°C por 20 horas. Após resfriamento, a mistura da reação foi diluída com MeOH, acidificada com 1 N HCl (1,5 mL), e concentrada para produzir o produto desejado (65 mg, 100% de rendimento). MS (apci) m/z = 383,1 (M+H).Etapa G: Preparação de (6R)-12-oxa-2,16,20,21,24,26-hexaazapentaciclo-[16,5,2,17,11,02,6,021,25]hexacosa- 1(24),7(26),8,10,18(25),19,22-heptaen-17-ona:

[000348] A uma solução de ácido (R)-5-(2-(6-(3-aminopropoxi)piridin- 2-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (70 mg, 0,18 mmol) em DMF/DCM a 1:2 (9 mL) foi adicionado EDCI (110 mg, 0,55 mmol) seguido por HOBT (74 mg, 0,55 mmol) a temperatura ambiente. Após agitação por 10 minutos, TEA (0,077 mL, 0,55 mmol) foi adicionado à mistura da reação e agitada por 6 horas. A mistura da reação foi diluída com EtOAc, lavada com NH4Cl saturado, NaHCO3 saturado, e salmoura, depois seca (MgSO4), filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 2% MeOH/DCM para render o produto de título (30 mg, 45% de rendimento). MS (apci) m/z = 365,2 (M+H).Exemplo 3

(6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18- onaEtapa A: Preparação de (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin- 1 -il)-N-(3-hidroxipropil)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000349] A uma suspensão de DMF (2 mL) de ácido (R)-5-(2-(5-fluor- 2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação B, 250 mg, 0,700 mmol) e HATU (319 mg, 0,840 mmol) resfriada para 0°C foi adicionado 3-aminopropan-1-ol (0,0642 mL, 0,840 mmol) gota a gota, resultando em uma solução amarelada clara. Após adição gota a gota de DIEA (0,366 mL, 2,10 mmol), o banho de gelo foi removido e a reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi diretamente purificada em cromatografia em coluna de fase reversa (sistema Biotage SP4, coluna C-18 25+M, 0 a 54% de acetonitrila/água), para fornecer o produto como sólido branco (200 mg, 69% de rendimento). MS (apci) m/z = 415,1 (M+H).Etapa B: Preparação de (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluor-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000350] Uma mistura de (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)-N-(3-hidroxipropil)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (20 mg, 0,0483 mmol) em HCl (4N dioxano, 1,2 mL, 4,83 mmol) foi aquecida a 85°C durante a noite. A mistura da reação foi concentrada, triturada com éter, e filtrada, para fornecer o produto bruto como um sólido bege, que foi diretamente usado na próxima etapa sem purificação adicional (22 mg, 106% de rendimento). MS (apci) m/z = 419,1 (M+H).Etapa C: Preparação de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona:

[000351] Uma suspensão de DMF (1 mL) de (R)-N-(3-cloropropil)-5- (2-(5-fluor-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (5 mg, 0,012 mmol) e CS2CO3 (4 mg, 0,06 mmol) foi aquecida a 85°C durante a noite. A mistura da reação foi filtrada através de um papel GF/F e diretamente purificada em cromatografia em coluna de fase reversa (sistema Biotage SP4, coluna C-18 12+M, 5 a 60% acetonitrila/água), para fornecer o produto do título como sólido branco (2 mg, 44% de rendimento). MS (apci) m/z = 383,3 (M+H).Exemplo 4

(6R)-9-fluor-15-hidróxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18- onaEtapa A: Preparação de N-(2,3-dihidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000352] Uma mistura de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação B, 250 mg, 0,700 mmol) e HATU (319 mg, 0,840 mmol) em DMF/DMSO de 1:1 (2 mL) foi resfriada para 0°C, seguida primeiro pela adição gota a gota de 3-aminopropano-1,2-diol (76,5 mg, 0,840 mmol) e depois adição de DIEA (366 μL, 2,10 mmol). A reação foi aquecida até a temperatura ambiente, agitada por 20 minutos, e depois diretamente purificada em cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Cartucho C-18 25+M, 5 a 50% de acetonitrila/água), para fornecer o produto como a sólido branco (295 mg, 98% de rendimento). MS (apci) m/z = 431,1 (M+H).Etapa B: Preparação de N-(3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluor-2- oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000353] Uma mistura de N-(2,3-dihidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (100 mg, 0,232 mmol) e HCL (4 N, dioxano, 5,8 mL) foi vedada em um tubo de pressão e aquecida a 85°C durante a noite. Após a solução clara ter sido decantada, o produto bruto foi obtido como um resíduo oleoso amarronzado, que foi seco a vácuo e usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. MS (apci) m/z = 435,0 (M+H). Etapa C: Preparação de (6R)-9-fluor-15-hidróxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- l('25),7,9,11,19('26),20,23-heptaen-18-ona:

[000354] Uma suspensão de N-(3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5- fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (100 mg, 0,23 mmol) e CS2CO3 (375 mg, 1,15 mmol) em DMF (3 niL) foi aquecida a 85°C por 2 horas. A mistura da reação foi filtrada através de um papel GF/F e diretamente purificada em cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 25+M, 5 a 50% acetonitrila/água), para fornecer o produto do título como a sólido branco. MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).Exemplo 5

(6R,13S)-9-fluor-13-hidróxi-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo- [15,5,2,17,11,02,6,020,24]pentacosa-1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno- 16,25-dionaEtapa A: Preparação de cloridrato de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil-5- ((R)-2-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5- a]pirimidina-3-carboxamida:

[000355] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 3, Etapas A-B, substituindo 3-aminopropan-1-ol na Etapa A por (S)-3- aminopropano-1,2-diol. MS (apci) m/z = 435,0 (M+H).Etapa B: Preparação de (6R,13S)-9-fluor-13-hidróxi-2,11,15,19,20,23- hexaazapentaciclo[15,5,2,17,11,02,6,020,24]pentacosa- 1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona:

[000356] Uma suspensão de cloridrato de N-((S)-3-cloro-2- hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (40 mg, 0,085 mmol) eCS2CO3 (138 mg, 0,42 mmol) em DMF (0,8 mL) foi aquecida a 85°C por 2 horas. A mistura da reação foi filtrada através de papel GF/F e diretamente purificada em cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 12+M, 0 a 40% acetonitrila/água), para fornecer o produto do título como a sólido branco (4 mg, 12% de rendimento). MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).Exemplo 6

(6R)-9-fluor-15-hidróxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18- ona

[000357] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 5 e isolada como um subproduto na Etapa B. A integridade enantiomérica do centro quiral onde o grupo HO reside foi encontrada por ter erodido inesperadamente (a razão R/S foi cerca de 10:7) no produto final isolado (6R)-9-fluor-15-hidróxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25- hexaazapentaciclo-[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- l(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona, que foi obtido como um sólido branco (5 mg, 15% de rendimento) pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 12+M, 0 a 50% acetonitrila/água). MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).Exemplo 7

(6R,15R)-9-fluor-15-hidróxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-onaEtapa A: Preparação de N-((R)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5- fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000358] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 3, Etapas A-B, substituindo 3-aminopropan-1-ol na Etapa A com (R)-3- aminopropano-1,2-diol. MS (apci) m/z = 435,0 (M+H).Etapa B: Preparação de (6R,15R)-9-fluor-15-hidróxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona:

[000359] Uma suspensão de N-((R)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2- (5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (30 mg, 0,069 mmol) e CS2CO3 (112 mg, 0,34 mmol) em DMF (0,7 mL) foi aquecida a 85°C por 1 hora. A mistura da reação foi filtrada através de um papel GF/F e diretamente purificada em cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 12+M, 0 a 50% acetonitrila/água), para fornecer o produto do título como um sólido branco (10 mg, 36% de rendimento). Diferente do Exemplo 6, nenhuma erosão da integridade enantiomérica do centro quiral onde o grupo HO reside foi observada para este produto final. MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).Exemplo 8

(6R,13R)-9-fluor-13-hidróxi-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15,5,2,17,11,02,6,020,24]pentacosa-1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona

[000360] Obtido como um subproduto do Exemplo 7, Etapa B eisolado como um sólido branco (1,2 mg, 4% de rendimento) pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 12+M, 0 a 44% acetonitrila/água) do material bruto do Exemplo 7, Etapa B. MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).Exemplo 9

(6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-onaEtapa A: Preparação de (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin- 1 -il)-N-(2-hidroxietil)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000361] A uma suspensão de DMF (1 mL) de ácido (R)-5-(2-(5-fluor- 2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação B, 100 mg, 0,28 mmol) e HATU (128 mg, 0,336 mmol) foi adicionado DIEA (0,146 mL, 0,840 mmol) a temperatura ambiente, seguido por uma solução de 2-aminoetanol (20,5 mg, 0,336 mmol) em quantidade mínima de DMF gota a gota a 0°C. A reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada por 30 minutos, depois diretamente purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa (0 a 70% acetonitrila/água) para render o produto como um sólido branco (95 mg, 85% de rendimento). MS (apci pos) m/z = 401,1 (M+H). Etapa B: Preparação de (R)-N-(2-cloroetil)-5-(2-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000362] À (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-(2- hidroxietil)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (77 mg, 0,192 mmol) em um tubo de reação de pressão foi carregado cloreto de hidrogênio (4N dioxano, 4,8 mL, 19,2 mmol) e a suspensão branca resultante foi aquecida a 85°C durante a noite. Após resfriamento à temperatura ambiente, a mistura da reação foi decantada para render o produto bruto como um resíduo oleoso amarronzado, que foi seco em vácuo e diretamente usado na próxima etapa sem purificação adicional. MS (apci) m/z = 405,0 (M+H).Etapa C: Preparação de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- 1('24),7,9,11,18('25),19,22-heptaen-17-ona:

[000363] Uma suspensão de (R)-N-(2-cloroetil)-5-(2-(5-fluor-2-oxo- 1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (78 mg, 0,19 mmol) e CS2CO3 (314 mg, 0,96 mmol) em DMF (5 mL) foi aquecida a 85°C por 30 minutos. Após filtragem através de um papel GF/F a reação foi diluída com água (40 mL) e NH4Cl (saturado, 5 mL), depois extraída com EtOAc (3 x 40 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secos (Na2SO4), filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 12+M, 0 a 73% acetonitrila/água), para fornecer o produto do título como a sólido branco (17 mg, 24% de rendimento). MS (apci) m/z = 369,2 (M+H).Exemplo 10

(6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,18,22,23,26-hexaazapentaciclo[18,5,2,02,6,07,12,023,27]heptacosa-1(26),9,11,20(27),21,24-heptaen-19-onaEtapa A: Preparação de (R)-N-(4-clorobutil)-5-(2-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000364] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 3, Etapas A-B, substituindo 3-aminopropan-1-ol na Etapa A com 4- aminobutan-1-ol. MS (apci) m/z = 433,0 (M+H).Etapa B: Preparação de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,18,22,23,26-hexaazapentaciclo-[18,5,2,02,6 07,12,023,27]heptacosa-1(26),7,9,11,20(27),21,24-heptaen-19-ona:

[000365] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 3, substituindo (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluor-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida com (R)-N-(4- clorobutil)-5-(2-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida na Etapa C. O produto bruto foi purificado em cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 25+M, 0 a 80% acetonitrila/água), para fornecer o produto do título como um sólido branco (32 mg, 44%). MS (apci pos) m/z =397,2 (M+H).Exemplo 11

('6R)-9-fluor-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16,5,2,17,11,02,6,021,25]-hexacosa- 1(24),7,9,18(25),19,22-hexaeno-17,26-diona

[000366] Obtido como um subproduto no Exemplo 10, Etapa B e isolado como um sólido branco (4 mg, 6%) mediante purificação do material bruto do Exemplo 10, Etapa B pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 25+M, 0 a 50% acetonitrila/água). MS (apci) m/z = 397,2 (M+H). Exemplo 12

(6R)-9-fluor-2,11,13,16,20,21,24-heptaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]-pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-onaEtapa A: Preparação de (R)tert-butil 2-(2-cloro-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidina-1-carboxilato:

[000367] Uma solução de tert-butil pirrolidina-1-carboxilato (1 mL 5,70 mmol) e (-)-esparteína (1,31 mL, 5,70 mmol) em MTBE anidro (30 mL) foi primeiro resfriada para -78°C sob nitrogênio, seguido pela adição de sec-butil lítio (4,07 mL, 1,4M, 5,70 mmol) gota a gota durante 15 minutos com uma seringa, mantendo a temperatura abaixo de -75°C. A solução amarelada pálida foi agitada a -78°C por 3 horas antes de ser tratada com cloreto de zinco (3,80 mL, 1,0 M, 3,80 mmol) gota a gota durante 15 minutos, mantendo a temperatura abaixo de - 73°C. A mistura foi agitada a -78°C por 30 minutos, depois colocada em um banho de água a temperatura ambiente e agitada por mais uma hora. Neste ponto uma grande quantidade de precipitado branco estava presente. A mistura foi tratada com 3-bromo-2-cloro-5- fluorpiridina (1,00 g, 4,75 mmol) em MTBE (5 mL), seguida pela adição de acetato de paládio (53 mg, 0,24 mmol) e tetrafluorborato de tri-t- butilfosfina (83 mg, 0,28 mmol). A mistura foi permitida a agitar a temperatura ambiente durante a noite para alcançar a conclusão. A mistura foi tratada com NH4OH (1 mL), agitada por 30 minutos e filtrada através de papel GF/F, lavagem com MTBE. O filtrado foi lavado com ácido cítrico a 10% (30 mL) e a camada aquosa foi retrolavada com MTBE (2 x 30 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas (MgSO4), e concentradas para produzir o produto bruto como um óleo amarelado escuro. Este material bruto foi purificado em um cartucho de sílica de 50 g Biotage SNAP eluindo com EtOAc a 10% em hexanos para produzir o produto desejado como um óleo incolor (0,5 g, 35% de rendimento). MS (apci) m/z = 201,1 (M+H-Boc).Etapa B: Preparação de dicloridrato de (R)-2-cloro-5-fluor-3-(pirrolidin- 2-il)piridina:

[000368] A uma solução de dioxano (5 mL) de (R)-tert-butil 2-(2- cloro-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidina-1-carboxilato (500 mg, 1,66 mmol) foi adicionado HCl (4 N dioxano, 20 mL), seguida pela agitação a temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e tratada com Et2O, depois seca a vácuo, para fornecer o produto como um sólido branco (0,36 g, 80% de rendimento). MS (apci) m/z = 201,1 (M+H). O excesso enantiomérico (ee%) do produto foi determinado para ser >92% de acordo com o método descrito na Preparação A.Etapa C: Preparação de (R)-etil 5-(2-(2-cloro-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000369] A uma solução de etil 5-hidroxipirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato (Preparação B, Etapa A, 275 mg, 1,33 mmol) em DMF anidro (5 mL) foi adicionado (Benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfônio hexafluorfosfato (BOP) (646 mg, 1,46 mmol). A mistura heterogênea foi agitada por 10 minutos antes da adição de DIEA (1,16 mL, 6,6 mmol), seguido por adição de dicloridrato de (R)-2-cloro-5-fluor-3-(pirrolidin-2-il)piridina (363 mg, 1,33 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite para alcançar a conclusão. A mistura foi dividida entre ácido cítrico a 10% (30 mL) e EtOAc (30 mL), e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 20 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas sucessivamente com água (20 mL), NaHCO3 saturado (20 mL), água (20 mL) e salmoura (3 x 20 mL), depois secas (Na2SO4) e concentradas para produzir o produto bruto como uma esponja laranja. O material bruto foi purificado em um cartucho de sílica de 25 g Biotage SNAP eluindo com 1% MeOH/DCM para produzir o produto desejado como uma espuma colorida cremosa (0,35 g, 68% de rendimento). MS (apci) m/z = 390,0 (M+H).Etapa D: Preparação de (R)-etil 5-(2-(2-(2-(tert-butoxicarbonilamino)etilamino)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000370] Uma mistura de Pd2dba3 (7,05 mg, 0,00770 mmol), CS2CO3 (125 mg, 0,385 mmol), rac-Binap (19,2 mg, 0,0308 mmol), (R)-etil 5-(2- (2-cloro-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato (50 mg, 0,128 mmol), e tert-butil 2-aminoetilcarbamato (24,7 mg, 0,154 mmol) em tolueno degaseificado (1 mL) foi primeiro purgado com nitrogênio, depois vedado e submetido à irradiação de microonda (120°C) por 16 horas. Após ser resfriada para temperatura ambiente, a mistura da reação foi diluída com EtOAc (10 mL) e lavada com água (2 x 5 mL). O orgânico foi seco (Na2SO4) e concentrado. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 cartucho C18 12+M, 5 a 70%acetonitrila/água) para render o produto desejado como um sólido espumoso branco (38 mg, 58% de rendimento). MS (apci) m/z = 514,1 (M+H).Etapa E: Preparação de ácido (R)-5-(2-(2-(2-(tert-butoxicarbonilamino)etilamino)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico:

[000371] A uma solução de (R)-etil 5-(2-(2-(2-(tert- butoxicarbonilamino)etilamino)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (38 mg, 0,074 mmol) em THF/MeOH/água (2:2: 1, 0,7 mL) foi adicionado LiOH-H2O (9,3 mg, 0,22 mmol), seguido pela agitação a 50°C por 18 horas. Após a remoção do solvente, um resíduo da reação foi tomado em água (0,5 mL), e acidificado com 1 N HCl (0,22 mL) ao pH 3. A mistura da reação foi extraída com EtOAc (3 x 2 mL), seca (Na2SO4), filtrada e concentrada para fornecer o produto desejado, que foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional, assumindo a conversão quantitativa. MS (apci) m/z = 486,0 (M+H).Etapa F: Preparação de cloridrato de ácido (R)-5-(2-(2-(2-aminoetilamino)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina- 3-carboxílico:

[000372] Uma solução de ácido (R)-5-(2-(2-(2-(tert-butoxicarbonilamino)etilamino)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (31 mg, 0,064 mmol) em HCl (4 N dioxano, 798 μL) e TFA (50% DCM, 2 mL) foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora antes de ser concentrada e seca sob alto vácuo para fornecer o produto desejado como um sólido esbranquiçado, que foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional, assumindo a conversão quantitativa. MS (apci) m/z = 386,1 (M+H).Etapa G: Preparação de (6R)-9-fluor-2,11,13,16,20,21,24-heptaazapentaciclo-[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona:

[000373] À uma solução de DMF (3 mL) de ácido (R)-5-(2-(2-(2- aminoetilamino)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina- 3-carboxílico (25 mg, 0,065 mmol) foi primeiro adicionado HATU (29 mg, 0,077 mmol), seguido pela agitação por cinco minutos e depois a adição gota a gota de DIEA (56 μL, 0,32 mmol). Após a agitação a temperatura ambiente durante a noite, a reação foi diretamente purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 cartucho C18 25+M, acetonitrila/água 5 a 45%), para render o produto de título como sólido esbranquiçado (7 mg, 30% de rendimento). MS (apci) m/z = 368,2 (M+H).Exemplo 13

(6R)-9-fluor-2,11,13,17,21,22,25-heptaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,261]-hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-onaEtapa A: Preparação de (R)-etil 5-(2-(2-(3-(tert-butoxicarbonilamino)propilamino)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000374] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 12, Etapas D, substituindo tert-butil 2-aminoetilcarbamato com tert-butil 3-aminopropilcarbamato. MS (apci) m/z = 528,1 (M+H).Etapa B: Preparação de (6R)-9-fluor-2,11,13,17,21,22,25-heptaazapentaciclo-[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona:

[000375] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 12, Etapas E-G, em três etapas, de (R)-etil 5-(2-(2-(3-(tert- butoxicarbonilamino)propilamino)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato obtido acima. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Cartucho C-18 25+M, 5 a 50% acetonitrila/água), para fornecer o produto do título como sólido branco (6 mg, 44% de rendimento). MS (apci pos) m/z =382,2 (M+H). Exemplo 14

(6R)-9-fluor-13,16-dioxa-2,11,20,21,24-pentaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,251-pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-onaEtapa A: Preparação de (R)-2-cloroetil 5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000376] À uma suspensão de DMF (1 mL) de ácido (R)-5-(2-(5-fluor- 2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação B, 0,1 g, 0,28 mmol) e HATU (0,128 g, 0,336 mmol) foi adicionado DIEA (0,146 ml, 0,840 mmol), seguido por 2-cloroetanol (0,0270 g, 0,336 mmol).

[000377] Após agitação a temperatura ambiente por 30 minutos, a reação foi diretamente purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 C18 25+M, 5 a 65% acetonitrila/água) aobter o intermediário (R)-3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3-il 5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato como o sólido branco (94,7 mg, 71% de rendimento). Este intermediário isolado foi dissolvido em excesso de cloroetanol (1 mL), seguido por adição de gotas de DIEA a temperatura ambiente e agitado durante a noite para alcançar a conclusão. A reação foi diretamente purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 C18 25+M, acetonitrila/água 5 a 73) aobter o produto de título como um sólido espumoso branco (56 mg, 48% de rendimento). MS (apci) m/z = 419,9 (M+H).

[000378] Etapa B: Preparação de (R)-2-cloroetil 5-(2-(5-fluor-2-oxo- 1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a1pirimidina-3- carboxilato:

[000379] Uma mistura de (R)-2-cloroetil 5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin- 3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (56 mg, 0,13 mmol) em HQ (4 N dioxano, 2,5 mL, 10 mmol) foi vedada em um tubo de reação de pressão e aquecida a 100°C por 45 minutos. A mistura da reação foi resfriada e concentrada para render o produto como óleo amarelado, que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional, assumindo o rendimento quantitativo. MS (apci) m/z = 406,0 (M+H).Etapa C: Preparação de (6R)-9-fluor-13116-dioxa-2111120121124-pentaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]-pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona:

[000380] Uma mistura de (R)-2-cloroetil 5-(2-(5-fluor-2-oxo-1,2- dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (54 mg, 0,133 mmol) e CS2CO3 (217 mg, 0,665 mmol) em DMF (6 mL) foi aquecida a 90°C durante a noite. A reação foi filtrada (papel GF/F) e diretamente purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 C18 25+M, 5 a 60% acetonitrila/água) para render uma mistura do produto desejado e impurezas. Esta mistura foi tratada com uma segunda cromatografia em coluna em Biotage SNAP KP-Sil 10 g, eluindo com 10% hexanos/EtOAc para render o produto do título puro como um sólido branco (11 mg, 22% de rendimento). MS (apci pos) m/z =370,2 (M+H).Exemplo 15

(6R)-9-fluor-14-oxa-2,11,18,19,22-pentaazapentaciclo[14,5,2,17,11,02,6,019'23]tetracosa- 1(22),7,9,16(23),17,20-hexaeno-15,24-diona

[000381] Obtido como um subproduto do Exemplo 14, Etapa C, e isolado como um sólido branco (5 mg, 9% de rendimento) pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 Coluna C-18 25+M, 5 a 60% acetonitrila/água) do material bruto do Exemplo 14, Etapa C. MS (apci) m/z = 370,2 (M+H).Exemplo 16

(6R)-9-fluor-13,16-dioxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo- [17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23 -heptaen-18- onaEtapa A: Preparação de (R)-N-(2-bromoetoxi)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000382] A uma mistura de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação B, 100 mg, 0,280 mmol) e HATU (128 mg, 0,336 mmol) em DMF (1 mL) foi adicionado DIEA (0,146 mL, 0,840 mmol), seguido por hidrobrometo de 0-(2-bromoetil)hidroxilamina (74,2 mg, 0,336 mmol) em uma porção. Após agitação a temperatura ambiente durante a noite, a mistura da reação foi diretamente purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 C-18 25+M, 5 a 67% acetonitrila/água) para render o produto desejado como um sólido esbranquiçado (91 mg, 68% de rendimento). MS (apci) m/z = 479,0 (M+H).Etapa B: Preparação de (R)-N-(2-cloroetoxi')-5-(2-(5-fluor-2-oxo-1,2- dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000383] Uma mistura de (R)-N-(2-bromoetoxi)-5-(2-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (70 mg, 0,146 mmol) e HCL (4 N dioxano, 3,65 mL, 14,6 mmol) foi vedada em um tubo de pressão e aquecida a 90°C por 3 horas. A mistura da reação foi então resfriada, diluída com MeOH, concentrada, e seca sobre alto vácuo aobter o produto desejado que foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional, assumindo a conversão quantitativa.Etapa C: Preparação de (6R)-9-fluor-13,16-dioxa-2,11,17,21,22,25- hexaazepentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,33-heptaen-18-ona:

[000384] Uma mistura de (R)-N-(2-cloroetoxi)-5-(2-(5-fluor-2-oxo-1,2- dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (60 mg, 0,14 mmol) e Cs2C03 (232 mg, 0,71 mmol) em DMF (1,4 mL) foi aquecida a 90°C por 20 minutos para alcançar a conclusão. A mistura da reação foi filtrada (papel GF/F) e diluída com água (10 mL), depois extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura e secas (Na2SO4). O material bruto foi purificado em cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 C18 12+M, acetonitrila/água 5 a 55%) para render uma mistura do produto final desejado e impurezas. Esta mistura foi novamente purificada pela TLC preparativa (10% MeOH/DCM) para render o produto do título puro como sólido branco (1 mg, 1% de rendimento). MS (apci) m/z = 385,1 (M+H).Exemplo 17

(6R,13R)-9,13-difluor-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.1711,02,6,020,24]pentacosa-1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno- 16,25-diona

[000385] Uma solução de (6R,13S)-9-fluor-13-hidróxi-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15,5,2,17,11,02,6,020,24]pentacosa- l(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona (Exemplo 5; 10 mg,0,0251 mmol) em um solvente de mistura de DCM (0,3 mL) e 3 gotas de DMSO foi tratada com trifluoreto de bis(2-metoxietil)amino-enxofre (7,87 μL, 0,0427 mmol) a 0°C, seguido por adição de uma solução DCM (0,1 mL) de etanol (0,231 mg, 0,00502 mmol), e uma mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura da reação foi derramada em NaHCO3 e extraída com DCM, depois seca (Na2SO4), filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de fase reversa (Sistema Biotage SP4 cartucho C18 12+M, acetonitrila/água 5 a 50%) para render o produto do título como sólido bege (1,3 mg, 12% de rendimento). MS (apci) m/z = 401,2 (M+H).Exemplo 18

(6R)-9-fluor-17-metil-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,26]hexacosa-1(25)7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-onaEtapa A: Preparação de (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000386] À uma suspensão de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin- 3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação B, 200 mg, 0,56 mmol) e cloridrato de 3-cloro-N-metilpropan-1-amina (177 mg, 1,23 mmol) em DMF (4 mL) foi adicionado N-metilmorfolina (0,25 mL, 2,30 mmol), seguido por HATU (234 mg, 0,616 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente por 18 horas, então diluída com H2O (10 mL), e extraída EtOAc (2 x 20 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 mL), secos (MgSO4), filtrados e concentrados. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 5 a 60% acetonitrila/água para render o produto desejado como um sólido espumoso branco (129 mg, 52% de rendimento). MS (apci) m/z = 447,0 (M+H).Etapa B: Preparação de (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluor-2-oxo-1,2- dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000387] Uma mistura de HCl (4 N dioxano, 4 mL, 16,0 mmol) e (R)- N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3 -il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (100 mg, 0,224 mmol) foi vedada em um tubo de pressão e aquecida a 90°C por 90 minutos. A mistura da reação foi então diluída com acetonitrila e concentrada para render o produto bruto, que foi levado para a próxima etapa sem purificação adicional (145mg, 150% de rendimento). MS (apci) m/z = 433,0 (M+H).Etapa C: Preparação de (6R)-9-fluor-17-metil-13-oxa-2,11,17,21,22,25- hexaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona:

[000388] Uma mistura de (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluor-2-oxo- 1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (50 mg, 0,12 mmol) e Cs2CO3 (188 mg, 0,58 mmol) em DMF (12 mL) foi aquecida a 90°C por 15 minutos para alcançar a conclusão. A mistura da reação foi filtrada, enxaguada com DMF, e concentrada. O material bruto foi purificado diretamente pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 5 a 60% acetonitrila/água para render o produto de título como pó amarelo pálido (17 mg, 36% de rendimento). MS (apci) m/z = 397,3 (M+H).Exemplo 19

(6R)-9,15,15-trifluor-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo- [17,5,2,02,6,07, 12,022,26]hexacosa-1(25) , 7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18- onaEtapa A: Preparação de cloridrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol:

[000389] A uma solução de benzaldeído (4,50 g, 42,4 mmol) em EtOH (12 mL) foi adicionada amônia aquosa (4,01 g, 65,9 mmol) em algumas porções. Após agitação por 10 minutos, (S)-2- (clorometil)oxirano (3,81 g, 41,2 mmol) foi adicionado e a mistura da reação foi agitada por 2 horas a temperatura ambiente. A mistura da reação foi então aquecida a 35-40°C com uma manta de aquecimento por 6 horas, seguida por agitação a temperatura ambiente por 18 horas. A reação foi concentrada a 5 mL e tolueno (5 mL) foi adicionado. A mistura foi aquecida a 36°C e uma solução de HCl concentrado (6,09 g, 61,8 mmol) e água (5,9 mL) foram adicionadas lentamente durante 5 minutos para manter uma faixa de temperatura de reação interna de 36-41°C. A mistura bifásica foi aquecida a 4245°C por 3 horas. A fase orgânica foi separada e lavada com água (10 mL). As fases aquosas foram combinadas e etanol (10 mL) foram adicionadas. A mistura foi concentrada para 10 mL, e etanol (6 x 10 mL) foi adicionado, concentrando após cada adição. Após a última etapa de concentração, a pasta fluida foi aquecida ao refluxo, resfriada para temperatura ambiente, e depois colocada a -20°C por 18 horas. O produto foi coletado por filtragem a vácuo, lavado com etanol frio, e seco a vácuo, para fornecer o produto como sólido cristalino branco (3,58 g, 60% de rendimento). 1H RMN (d6-DMSO) δ 8,14 (s, 3H), 5,91 (s, 1H), 3,93 (m, 1H), 3,59 (m, 2H), 2,89 (m, 1H), 2,69 (m, 1H).Etapa B: Preparação de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5- fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000390] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 18, substituindo cloridrato de (5)-1-amino-3-cloropropan-2-ol (98,1 mg, 0,672 mmol) por cloridrato de 3-cloro-N-metilpropan-1-amina na Etapa A. MS (apci) m/z = 448,9 (M+H).Etapa C: Preparação de (R)-N-(3-cloro-2-oxopropil)-5-(2-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000391] À uma solução de N-((5)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5- fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (180 mg, 0,401 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado periodinano de Dess-Martin (204 mg, 0,481 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente por 3 horas, depois purificada diretamente por cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 5 a 60% acetonitrila/água para render o produto desejado como um sólido espumoso branco (1 14 mg, 64% de rendimento). MS (apci) m/z = 447,0 (M+H).Etapa D: Preparação de (R)-N-(3-cloro-2,2-difluorpropil)-5-(2-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000392] A uma solução de (R)-N-(3-cloro-2-oxopropil)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (114 mg, 0,255 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado Deoxoflúor (0,103 mL, 0,561 mmol), e a mistura da reação foi agitada a temperatura ambiente por 23 horas. A reação foi resfriada rapidamente com NaHCO3 saturado (5 mL), diluída com DCM (5 mL), e agitada por 30 minutos. Após a separação da fase, a fase aquosa foi extraída com DCM (10 mL). As fases orgânicas combinadas foram concentradas e purificadas pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 5 a 60% acetonitrila/água para render o produto desejado como sólido branco (59 mg, 49% de rendimento). MS (apci) m/z = 469,0 (M+H).Etapa E: Preparação de (R)-N-(3-cloro-2,2-difluorpropil)-5-(2-(5-fluor-2- oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000393] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 18, substituindo (R)-N-(3-cloro-2,2-difluorpropil)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida por (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)- N-metilpirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida na Etapa B. MS (apci) m/z = 455,0 (M+H).Etapa F: Preparação de (6R)-9,15,15-trifluor-13-oxa-2,11,17,21,22,25- hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19,(26),20,23-heptaen-18-ona:

[000394] Preparada de acordo com o mesmo método como descrito no Exemplo 18, substituindo (R)-N-(3-cloro-2,2-difluorpropil)-5-(2-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida por (R)-N-(3 -cloropropil)-5- (2-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida na Etapa C, e aquecimento a 110°C por 5 horas, para fornecer o produto do título como um sólido rosa pálido (6 mg, 11% de rendimento). MS (apci) m/z = 419,3 (M+H). Exemplo 20

(6R)-9-fluor-13-oxa-2,17,21,22,25-pentazapentaciclo[15.5.2.02,6.07,12.022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-onaEtapa A: Preparação de (R)-tert-butil 2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidina- 1-carboxilato.

[000395] Este composto foi preparado de acordo com o método descrito na Preparação A, substituindo 3-bromo-5-fluor-2-metoxipiridina com acetato de 2-bromo-4-fluorfenila na Etapa A (3,2 g, 40% de rendimento). MS (apci) m/z = 182,1 (M+H -Boc).Etapa B: Preparação de cloridrato de (R)-4-fluor-2-(pirrolidin-2-il)fenol:

[000396] A uma solução de (R)-tert-butil 2-(5-fluor-2- hidroxifenil)pirrolidina-1-carboxilato (3,2 g, 11,4 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado HCl (4 N dioxano, 5,69 mL, 22,7 mmol), e a mistura foi agitada a temperatura ambiente por 15 horas. A reação foi concentrada, e o precipitado resultante foi tomado em DCM (15 mL) e filtrado para render cloridrato de (R)-4-fluor-2-(pirrolidin-2-il)fenol (1,85 g, 90% de rendimento) como um sólido bege. MS (apci) m/z = 182,1 (M+H).Etapa C: Preparação de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000397] Preparada de acordo com o método descrito na Preparação B, substituindo cloridrato de (R)-4-fluor-2-(pirrolidin-2-il)fenol for (R)-5- fluor-2-metóxi-3-(pirrolidin-2-il)piridina na Etapa C. O material bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de fase reversa (0-65% acetonitrila/H2O) para render o produto puro (686 mg, 80% de rendimento). MS (apci) m/z = 371,0 (M+H).Etapa D: Preparação de (R)-etil 5-(2-(2-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato:

[000398] Uma suspensão de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (280 mg, 0,756 mmol), 2-(3-bromopropil)isoindolina-1,3-diona (263 mg, 0,983 mmol) e K2CO3 (104 mg, 0,756 mmol) em DMF (0,4 mL) foi agitada a temperatura ambiente por 15 horas. A reação foi diretamente purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa (5-80% acetonitrila/H2O) para render (R)-etil 5-(2-(2-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2- il)propoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (202 mg, 48% de rendimento) como óleo claro. MS (apci) m/z = 558,0 (M+H).Etapa E: Preparação de (R)-etil 5-(2-(2-(3-aminopropoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000399] (R)-etil 5-(2-(2-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (200 mg, 0,359 mmol) e monohidrato de hidrazina (115 mg, 3,59 mmol) foram combinados em MeOH (1 mL) e THF (1 mL) em um recipiente vedado e aquecido a 60°C por 20 minutos. Após resfriamento à temperatura ambiente, a reação foi concentrada, seguida pela adição de NaOH (1N, 2 mL). A mistura foi extraída com DCM, e os extratos orgânicos combinados foram secos (Na2SO4), filtrados e concentrados para render (R)-etil 5-(2-(2-(3-aminopropoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (110 mg, 72% de rendimento). MS (apci) m/z = 428,2 (M+H).Etapa F: Preparação de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo[17.5.2.02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona. (R)-etil 5-(2-(2-(3- aminopropoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato:

[000400] (10 mg, 0,023 mmol) e DIEA (8,1 μL, 0,047 mmol) foramcombinados em EtOH seco (0,1 mL) em um recipiente vedado e aquecida a 200°C durante a noite. A reação foi concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa (0-70% acetonitrila/H2O) para render o composto do título (4,5 mg, 50% de rendimento). MS (apci) m/z = 382,2 (M+H).Exemplo 21

(6R)-9-fluor-13-oxa-2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,251 pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaenoEtapa A: Preparação de (R)-4-fluor-2-(1-(pirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2-il)fenol:

[000401] Uma mistura de cloridrato de (R)-4-fluor-2-(pirrolidin-2- il)fenol (Exemplo 20, Etapa B, 1,50 g, 6,89 mmol), DIEA (2,67 g, 20,7 mmol), 5-cloropirazol[1,5-ajpirimidina (1,11 g, 7,24 mmol) e isopropanol (1 mL) foi aquecida a 120°C durante a noite. A reação foi derramada em éter (50 mL) e extraída com NaOH (1N aquoso, 3 x 25 mL). Os extratos aquosos combinados foram trazidos ao pH 4 com HCl concentrado e extraídos com DCM. Os extratos de DCM combinados foram filtrados através do papel separador de fase e concentrados para fornecer (R)-4-fluor-2-(1-(pirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2- il)fenol (1,82 g, 89% de rendimento) como sólido bege. MS (apci) m/z = 299,4 (M+H). Etapa B: Preparação de ('R-5-('2-('5-fluor-2-hidroxifenilpirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carbaldeído:

[000402] Após POCl3 (221 μL, 2,41 mmol) foi adicionado gota a gota a uma solução de DMF (4 mL) de (R)-4-fluor-2-(1-(pirazol[l,5- a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2-il)fenol (600 mg, 2,01 mmol) a temperatura ambiente, a reação foi agitada por 5 minutos antes NaOH (804 mg, 10,1 mmol) foi introduzido. A reação foi agitada por mais 10 minutos antes de HCL (4 N dioxano, 3 mL) ser adicionado, seguido por DCM (50 mL). Após filtragem através de Celite®, a reação foi concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 0-70% acetonitrila/H2O para fornecer (R)-5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carbaldeído (524 mg, 80% de rendimento) como sólido bege. MS (apci) m/z = 327,2 (M+H).Etapa C: Preparação de (R)-tert-butil 2-(4-fluor-2-(1-(3-formilpirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2-il)fenoxi)etilcarbamato:

[000403] Uma mistura de (R)-5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carbaldeído (159 mg, 0,487 mmol), tert-butil 2-bromoetilcarbamato (13 1 mg, 0,585 mmol), carbonato de potássio (202 mg, 1,46 mmol) e DMF (1 mL) foram combinados em um recipiente vedado e agitado a temperatura ambiente durante a noite e depois a 60°C por 3 horas. Após diluição com DCM (20 mL), a reação foi filtrada através de Celite®, concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 0-70% acetonitrila/H2O para fornecer (R)-tert-butil 2-(4-fluor-2-(1-(3-formilpirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2-il)fenoxi)etilcarbamato (198 mg, 86,6% de rendimento) como sólido amarelado. MS (apci) m/z = 370,4 (M+H - Boc).Etapa D: Preparação de (R)-5-(2-(2-(2-aminoetoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carbaldeído:

[000404] Um HCl (4N dioxano, 80 μL, 0,32 mmol) foi adicionado a uma solução de DCM (2 mL) de (R)-tert-butil 2-(4-fluor-2-(1-(3- formilpirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2-il)fenoxi)etilcarbamato (198 mg, 0,422 mmol), e a reação foi purgada com N2 e agitada a temperatura ambiente durante a noite. Após a remoção do solvente, NaOH (5 mL x IN) foi introduzido e a mistura da reação foi extraída com algumas porções de DCM em um tubo separador de fase. Os extratos orgânicos combinados foram concentrados para fornecer (R)- 5-(2-(2-(2-aminoetoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina- 3-carbaldeído (155 mg, 99,5% de rendimento), que foi usado imediatamente na próxima etapa. MS (apci) m/z = 352,3 (M+H - H2O).Etapa E: Preparação de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,251pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaeno.

[000405] Triacetoxiborohidreto de tetrametilamônio (46,7 mg, 0,629 mmol) foi adicionado a uma solução de DCM (50 mL) de (R)-5-(2-(2-(2- aminoetoxi)-5-fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carbaldeído (155 mg, 0,420 mmol), e a reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura da reação foi então diluída com salmoura e extraída com algumas porções de DCM em um tubo separador de fase, e os extratos orgânicos combinados foram concentrados e purificados pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 0-90% acetonitrila-H2O, aobter o composto do título (32 mg, 21,6% de rendimento). MS (apci) m/z = 354,2 (M+H).Exemplo 22

1 -[(6R)-9-fluor-13-oxa-2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo- ]16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen- 16-il]etan-1-ona

[000406] Cloreto de acetila (1,7 mg, 0,021 mmol) foi adicionado a uma solução de DCM (0,5 mL) de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,16,20,21,24- pentazapentaciclo-[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaeno (Exemplo 21, 5,0 mg, 0,014mmol), seguido por DIEA (7,4 μL, 0,042 mmol). Após agitação a temperatura ambiente durante a noite, a reação foi concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa eluindo com 0-80% acetonitrila/H2O para fornecer o produto do título (3,9 mg, 70% de rendimento). MS (apci) m/z = 396,2 (M+H).Exemplo 23

1 -[(6R)-9-fluor-13-oxa-2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo-]16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen- 16-il]-2-hidroxietan-1-ona

[000407] A uma solução de DCM (0,5 mL) de (6R)-9-fluor-13-oxa- 2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo-[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaeno (Exemplo 21, 6 mg, 0,017 mmol) foi adicionado acetato de 2-cloro-2-oxoetila (3,5 mg, 0,025 mmol), seguido por DIEA (8,9 μL, 0,051 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite, depois concentrada, e MeOH (0,2 mL) foi adicionado seguido por hidróxido de sódio (6,8 mg, 0,085 mmol). Após agitação a temperatura ambiente por 5 horas, a reação foi diluída com salmoura e extraída com algumas porções de DCM em um tubo separador de fase. Os extratos orgânicos combinados foram concentrados e purificados pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 0-70% acetonitrila/H2O, para fornecer o produto do título (3,6 mg, 52% de rendimento). MS (apci) m/z = 412,5 (M+H). Exemplo 24

(6R)-9-fluor-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo[17,5,2,02,6 07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaenoEtapa A: Preparação de (R)-tert-butil 3-(4-fluor-2-(1-(3-formilpirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2-il)fenoxi)propilcarbamato:

[000408] Preparada de acordo com o método descrito no Exemplo 21, substituindo tert-butil 2-bromoetilcarbamato por tert-butil 3- bromopropilcarbamato na Etapa C para produzir o produto desejado (119 mg, 84,5% de rendimento). MS (apci) m/z = 384,2 (M+H - Boc).Etapa B: Preparação de (R)-tert-butil 3-(4-fluor-2-(1-(3-(hidroximetil)pirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2- il)fenoxi)propilcarbamato:

[000409] Uma solução de (R)-tert-butil 3-(4-fluor-2-(1-(3- formilpirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2-il)fenoxi)propilcarbamato(85,0 mg, 0,176 mmol) em MeOH (2 mL) foi primeiro resfriada para 0°C, depois NaBH4 (4,04 mg, 0,176 mmol) foi introduzido, e a reação foi agitada a 0°C por 1 hora. A reação foi diluída com salmoura e extraída com DCM em um cartucho separador de fase. Os extratos orgânicos combinados foram concentrados para fornecer (R)-tert-butil 3-(4-fluor-2-(1-(3-(hidroximetil)pirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-2- il)fenoxi)propilcarbamato (86 mg, 101% de rendimento) como sólido bege. MS (apci) m z = 468,1 (M+H - H2O).Etapa C: Preparação de cloridrato de (R)-(5-(2-(2-3-aminopropoxi)-5- fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidin-3-il)metanol:

[000410] (R)-tert-butil 3-(4-fluor-2-(1-(3-(hidroximetil)pirazol[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidina-2-il)fenoxi)propilcarbamato (80 mg, 0,16 mmol) foi dissolvido em 2 mL de DCM e tratado com HC1 (4 N em dioxano, 6,0 mg, 0,16 mmol). A reação foi purgada com N2, tampada, e agitada a temperatura ambiente por 18 horas, depois concentrada para fornecer cloridrato de (R)-(5-(2-(2-(3-aminopropoxi)-5- fluorfenil)pirrolidina-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidin-3-il)metanol (70 mg, 101% de rendimento) como um sólido bege. MS (apci) m/z = 368,5 (M+H-H2O).Etapa D: Preparação de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo-[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaeno.

[000411] Uma mistura de (R)-(5-(2-(2-(3-aminopropoxi)-5- fluorfenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidin-3-il)metanol (50 mg, 0,130 mmol), PS-PPh3 (0,259 mmol) e perclorometano (200 mg, 1,30 mmol) em DCM (5 mL) foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A reação foi filtrada, concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa eluindo com 0-60% acetonitrila/H2O para render o produto de título (27,4 mg, 57,5% de rendimento). MS (apci) m/z = 368,1 (M+H).Exemplo 25

(6R)-9-fluor-16-metanosulfonil-13-oxa-2,16,20,21,24- pentaazapentaciclo-[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- l(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaeno

[000412] A uma solução de DCM (0,5 mL) de (6R)-9-fluor-13-oxa- 2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo-[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaeno (Exemplo 21, 5 mg, 0,0141 mmol) foi adicionado DIEA (2,46 μL, 0,0141 mmol), seguido por cloreto de metanosulfonila (1,10 μL, 0,0141 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora antes MeOH (0,1 mL) foi adicionado. A reação foi concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa eluindo com 0-80% acetonitrila/H2O para fornecer o produto do título (3,1 mg, 50,8% de rendimento). MS (apci) m/z = 432,3 (M+H).Exemplo 26

Ácido 2-[(6R)-9-fluor-13-oxa-2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-16-il]acético

[000413] Uma solução de IPA (0,1 mL) de (6R)-9-fluor-13-oxa- 2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo-[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaeno (Exemplo 21, 5 mg, 0,014 mmol), ácido 2-bromoacético (2,9 mg, 0,021 mmol) e NaOH (1N, 42 μL, 0,042 mmol) foi aquecida a 60°C em um recipiente vedado durante a noite, depois a 120°C por 24 horas. Após resfriamento, a mistura da reação foi diretamente purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa eluindo com 0-50% acetonitrila/H2O para render o produto do título (3,1 mg, 53% de rendimento). MS (apci) m/z = 412,2 (M+H).Exemplo 27

(6R)-9-fluor-17-metanosulfonil-13-oxa-2,17,21,22,25- pentaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- l(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaeno

[000414] Cloreto de metanossulfonila (1,69 μL, 0,0218 mmol) foi adicionado a uma solução de DCM (0,5 mL) de (6R)-9-fluor-13-oxa- 2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo [17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaeno (Exemplo 24, 4,0 mg, 0,0109mmol), seguido por DIEA (9,48 μL, 0,0544 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite, concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa eluindo com 0-80% acetonitrila/H2O para render o composto do título (2,9 mg, 59,8% de rendimento). MS (apci) m/z = 446,3 (M+H).Exemplo 28

(6R)-N-etil-9-fluor-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-l(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaeno-17-carboxamida

[000415] A uma solução de DCM (0,5 mL) de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaeno (Exemplo 24, 4 mg, 0,011 mmol) foi adicionado isocianatoetano (1,5 mg, 0,022 mmol) seguido por DIEA (1,9 μL, 0,011 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite, depois concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 0-80% acetonitrila/H2O, para render o composto do título (3,5 mg, 73% de rendimento). MS (apci) m/z = 439,1 (M+H).Exemplo 29

(6R)-N-etil-9-fluor-13-oxa-2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo-[16,5,2,02,6.07,12,021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaeno- 16-carboxamida

[000416] A uma solução de DCM (0,5 mL) de (6R)-9-fluor-13-oxa- 2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaeno (Exemplo 21, 5,5 mg, 0,016 mmol) foi adicionado isocianatoetano (1,5 mg, 0,022 mmol), seguido por DIEA (1,9 μL, 0,011 mmol). Após agitação a temperatura ambiente durante a noite a reação foi concentrada e purificada pela cromatografia em coluna de fase reversa, eluindo com 0-80% acetonitrila/H2O para render o composto do título (3,3 mg, 50% de rendimento). MS (apci) m/z = 425,4 (M+H).Exemplo 30

(6S)-9-fluor-4,13-dioxa-2,11,17,21,22,25- hexaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-heptaeno-3,18-dionaEtapa A: Preparação de (S,E)-N-('2-('tert-butildimetilsililoxi)etilideno)-2- metilpropano-2-sulfinamida:

[000417] A uma solução de (S)-2-metilpropano-2-sulfinimida (3,3 g, 27,2 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionado 2-(tert- butildimetilsililoxi)acetaldeído (4,98 g, 28,6 mmol) seguido por sulfato de cobre anidro (8,69 g, 54,5 mmol). A mistura heterogênea foi agitada a temperatura ambiente for 3 dias e depois filtrada através de Celite®. O filtrado concentrado e o resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna rápida, eluindo com EtOAc a 10%/hexanos, para render (S,E)- N-(2-(tert-butildimetilsililoxi)etilideno)-2-metilpropano-2-sulfinamida (5,54 g, 73% de rendimento) como um óleo incolor. 1H RMN (CDCl3) δ 7,96 (m, 1H), 4,44 (d, 1H, J = 2,7 Hz), 1,11 (s, 9H), 0,82 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).Etapa B: Preparação de (S)-N-('(S)-2-('tert-butildimetilsililoxi)-1-(5-fluor- 2-metoxipiridin-3-il)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida:

[000418] A uma solução de n-butil lítio (10,8 mL, 17,3 mmol, 1,6 M em hexanos) em tolueno (100 mL) a -78°C foi adicionada uma solução de 3-bromo-5-fluor-2-metoxipiridina (3,27 g, 15,9 mmol) em tolueno (5 mL) gota a gota, mantendo a temperatura interna abaixo de -70°C. A mistura foi agitada a -78°C por 1 hora, depois tratada com uma solução de (S,E)-N-(2-(tert-butildimetilsililoxi)etilideno)-2-metilpropano- 2-sulfinamida (4,0 g, 14,4 mmol) em tolueno (10 mL) gota a gota, mantendo a temperatura interna abaixo de -65°C. Após agitação a - 78°C por 3 horas a mistura foi tratada com salmoura (100 mL) e EtOAc (100 mL) e agitada a temperatura ambiente por 20 minutos. A solução de NaHCO3 saturada (50 mL) foi adicionada e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 mL) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna rápida, eluindo com EtOAc a 10%/hexanos a 20% EtOAc/hexanos, para render (5)-N-((S)-2-(tert- butildimetilsililoxi)-1-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)etil)-2-metilpropano-2- sulfinamida (1,40 g, 24% de rendimento) misturada com uma impureza menos polar como um óleo incolor. MS (apci) m/z = 405,0 (M+H).Etapa C: Preparação de dicloridrato de (S)-2-amino-2-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)etanol:

[000419] A uma solução de (5)-N-((5)-2-(tert-butildimetilsililoxi)-1-(5- fluor-2-metoxipiridin-3-il)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida (1,40 g, 3,46 mmol) em metanol (20 mL) foi adicionado 4N HCl/di oxano (8,65 mL, 34,6 mmol). A solução foi agitada a temperatura ambiente por 16 horas, depois concentrada e seca sob vácuo para render dicloridrato de (S)-2-amino-2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)etanol como um óleo amarelo que foi usado sem purificação, assumindo 100% de rendimento. MS (apci) m/z = 186,9 (M+H). Etapa D: Preparação de (S)-4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)oxazolidin-2- ona:

[000420] A uma solução de dicloridrato de (5)-2-amino-2-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)etanol (897 mg, 3,46 mmol) em KOH (10 mL, 24,2 mmol, 2,42 M em água) foi adicionado THF (10 mL). A mistura foi resfriada para 0°C e tratada com trifosgênio (1,03 g, 3,46 mmol). A mistura foi permitida a aquecer para a temperatura ambiente com agitação durante 16 horas depois dividida entre EtOAc (50 mL) e água (50 mL), e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 30 mL) e as fases orgânicas combinadas foram lavada com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi triturado com Et2O, filtrado e seco sob pressão reduzida para render (S)-4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)oxazolidin-2-ona (254 mg, 35% de rendimento) como um pó branco. 1H RMN (CDCl3) δ 7,98 (m, 1H), 7,44 (m, 1H), 5,61 (Br S, 1H), 5,13 (m, 1H), 4,83 (m, 1H), 4,16 (m, 1H), 3,96 (s, 3H).Etapa E: Preparação de (S)-etil 5-(4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)-2- oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000421] A uma solução de (5)-4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)oxazolidin-2-ona (254 mg, 1,20 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado hidreto de sódio (58 mg, 1,44 mmol, 60% em óleo mineral). A mistura foi agitada a temperatura ambiente por 20 minutos depois tratada com etil 5-cloropirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (270 mg, 1,20 mmol) em uma porção. A mistura foi agitada por 48 horas depois tratada com solução saturada de NH4Cl (30 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água (5 x 10 mL) e salmoura (10 mL) depois secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna rápida, eluindo com 20% EtOAc/hexanos a 66% EtOAc/hexanos, para render (5)-etil 5-(4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (311 mg, 65% de rendimento) como uma espuma branca. MS (apci) m/z = 401,9 (M+H).Etapa F: Preparação de ácido (S)-5-(1-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)-2- hidroxietilamino)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico:

[000422] A uma solução de (S)-etil 5-(4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)- 2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (311 mg, 0,77 mmol) em uma mistura 1:1:1 de MeOH:THF:H2O (15 mL) foi adicionado monohidrato de hidróxido de lítio (97,6 mg, 2,32 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente por 16 horas e depois a 50°C por 19 horas, depois concentrada a 1/3 de volume, diluída com água (30 mL) e acidificada ao pH 4-5 com 1N HCL. O precipitado resultante foi coletado pela filtragem, lavado com água e Et2O depois seco sob pressão reduzida para render ácido (S)-5-(1-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)-2-hidroxietilamino)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxílico (121 mg, 45% de rendimento) como um pó branco. MS (apci) m/z = 347,9 (M+H).Etapa G: Preparação de (5)-N-(3-cloropropil)-5-(1-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)-2-hidroxietilamino)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000423] À uma suspensão de ácido (S)-5-(1-(5-fluor-2-metoxipiridin- 3-il)-2-hidroxietilamino)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (50 mg, 0,14 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado HOBt (44 mg, 0,29 mmol) seguido por EDCI (83 mg, 0,43 mmol). A mistura heterogênea foi agitada a temperatura ambiente por 10 minutos depois tratada com trietilamina (100 μL, 0,72 mmol) seguido por cloridrato de 3-cloro- propilamina (56 mg, 0,43 mmol). A mistura foi agitada por 2 horas, depois DMF (2 mL) foi adicionado e a agitação foi contínua por 48 horas. A mistura foi dividida entre solução saturada de NH4Cl (20 mL) e EtOAc (20 mL) e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 10 mL) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com água (5 x 10 mL) e salmoura (10 mL), depois secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para render (S)-N-(3- cloropropil)-5-(1-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)-2-hidroxietilamino)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (60 mg, 99% de rendimento) como uma espuma amarela pálida que foi usada sem purificação adicional. MS (apci) m/z = 423,0 (M+H).Etapa H: Preparação de (S)-N-(3-cloropropil)-5-(4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000424] A uma solução de (S)-N-(3-cloropropil)-5-(1-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)-2-hidroxietilamino)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (60 mg, 0,14 mmol) em ACN (2 mL) foi adicionado CDI (35 mg, 0,21 mmol). A solução foi agitada a temperatura ambiente por 16 horas depois dividida entre solução de NH4Cl saturada (20 mL) e EtOAc (10 mL) e as camadas separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 10 mL) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna rápida eluindo com 1% MeOH/DCM para render (S)-N-(3-cloropropil)- 5-(4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5- a]pirimidina-3-carboxamida (37 mg, 58% de rendimento) como um sólido branco. MS (apci) m/z = 449,0 (M+H).Etapa I: Preparação de (S)-N-(3-cloropropil)-5-(4-(5-fluor-2-oxo-1,2- dihidropiridin-3-il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000425] Uma suspensão de (S)-N-(3-cloropropil)-5-(4-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (37 mg, 0,08 mmol) em 4N HCl/dioxano (4 mL) foi agitada a 85°C por 17 horas e depois a temperatura ambiente por 48 horas. A solução resultante foi concentrada para 1/2 volume, transferida para um tubo vedado, tratado com 4N HCl/dioxano (2 mL) e agitado a 100°C por 2 horas. A mistura heterogênea foi concentrada, seco sob pressão reduzida e usada diretamente na próxima etapa, assumindo 100% de rendimento. MS (apci) m/z = 435,1 (M+H).Etapa J: Preparação de (6S)-9-fluor-4,13-dioxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-heptaeno-3,18-diona:

[000426] A uma solução de (S)-N-(3-cloropropil)-5-(4-(5-fluor-2-oxo- 1,2-dihidropiridin-3-il)-2-oxooxazolidin-3 -il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (35 mg, 0,08 mmol) em DMF (3 mL) foi adicionado carbonato de césio (79 mg, 0,24 mmol). A mistura foi agitada a 65°C por 30 minutos depois a temperatura ambiente por 48 horas. A mistura foi tratada com água (30 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água (5 x 10 mL) e salmoura (10 mL), depois secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado através da cromatografia em coluna rápida eluindo com 2% MeOH/DCM para render o composto do título (13 mg, 41% de rendimento) como um sólido branco amorfo. MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).Exemplo 31

(6S)-9-fluor-4,13-dioxa-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo- [16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa-1(24),7(12),8,10,18(25),19,22- heptaeno-3,17-dionaEtapa A: Preparação de ácido 5-hidroxipirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxílico:

[000427] A uma solução de etil 5-hidroxipirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato (Preparação B, Etapa A; 2,0 g, 9,65 mmol) em uma mistura de 2: 1 de THF:MeOH, (40 mL) foi adicionado monohidrato de hidróxido de lítio (29 mL, 29,0 mmol, 1,0 M em água). A solução foi agitada no refluxo por 16 horas depois resfriada e concentrada. O resíduo foi dissolvido em água (100 mL) e acidificado com 6M HCl. O precipitado branco resultante foi coletado por filtragem e lavado com água e Et2O, depois seco sob pressão reduzida para render ácido 5- hidroxipirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (1,18 g, 68% de rendimento) como um sólido branco. 1H RMN (d6-DMSO) δ 8,50 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 8,02 (s, 2H), 6,07 (d, 2H, J = 8,2 Hz).Etapa B: Preparação de cloreto de 5-cloropirazol[1,5-a]pirimidina-3- carbonila:

[000428] À uma suspensão de ácido 5-hidroxipirazol[1,5-a]pirimidina- 3-carboxílico (1,18 g, 6,59 mmol) em DMF (10 mL) a 0°C foi adicionado cloreto de tionila (10 mL) gota a gota durante 5 minutos. A mistura foi aquecida a temperatura ambiente, depois agitada a 60°C por 16 horas. A solução resfriada foi purgada com N2 por 20 minutos depois diluída com 50% EtOAc/hexanos (100 mL) e agitada vigorosamente por 30 minutos. A fase orgânica foi decantada, tratada com Na2CO3 e carbono ativado, agitada por 5 minutos depois filtrada através de Celite® e concentrada. O resíduo foi dissolvido em tolueno (100 mL), tratado com carbono ativado e filtrado através de Celite® novamente. O filtrado foi concentrada e seco sob pressão reduzida para render cloreto de 5-cloropirazol[1,5-a]pirimidina-3-carbonila (800 mg, 56% de rendimento) como um sólido colorido cremoso. 1H RMN (CDCl3) δ 8,70 (m, 1H), 8,66 (s, 1H), 7,16 (m, 1H).Etapa C: Preparação de 5-cloro-N-(2-cloroetil)pirazol[1,5-alpirimidina- 3-carboxamida:

[000429] A uma suspensão de cloreto de 5-cloropirazol[1,5- a]pirimidina-3-carbonila (284 mg, 1,31 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionado DIEA (1,14 mL, 6,57 mmol). A solução foi resfriada para 0°C, depois tratada com cloridrato de 2-cloroetilamina (183 mg, 1,58 mmol) e agitada por 1 hora. A mistura foi dividida entre água (30 mL) e DCM (30 mL) e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM (2 x 20 mL) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para render 5-cloro-N-(2-cloroetil)pirazol[1,5-a]pirimidina- 3-carboxamida (290 mg, 85% de rendimento) como um sólido bege. MS (apci) m/z = 258,9 (M+H).Etapa D: Preparação de (S)-N-(2-cloroetil)-5-(4-(5-fluor-2-metoxipiridin- 3-il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000430] A uma solução de (5)-4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)oxazolidin-2-ona (preparada de acordo com o Exemplo 30; 50 mg, 0,236 mmol) em DMF (1 mL) foi adicionado hidreto de sódio (1 1 mg, 0,28 mmol, 60% em óleo mineral). A mistura foi agitada a temperatura ambiente por 20 minutos, depois tratada com 5-cloro-N-(2- cloroetil)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (61 mg, 0,236 mmol). A mistura foi agitada a 16 horas, e depois tratada com solução de NH4Cl saturada (10 mL) e água (20 mL). O precipitado resultante foi coletado por filtragem, lavado com água e Et2O, depois seco sob pressão reduzida para render (S)-N-(2-cloroetil)-5-(4-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (83 mg, 81% de rendimento) como um sólido bege. MS (apci) m/z = 434,9 (M+H).Etapa E: Preparação de (S)-N-(2-cloroetil)-5-(4-(5-fluor-2-oxo-1,2- dihidropiridin-3-il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000431] Uma suspensão de (S)-N-(2-cloroetil)-5-(4-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (80 mg, 0,18 mmol) em 5-6N HCl/IPA (2,5 mL) foi aquecida a 90°C em um tubo vedado por 1,5 horas. A mistura resfriada foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi concentrado duas vezes a partir de Et2O e seco sob pressão reduzida para render (S)-N-(2-cloroetil)-5-(4-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3- il)-2-oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (63 mg, 82% de rendimento) como um sólido bege. MS (apci) m/z = 421,0 (M+H).Etapa F: Preparação de (6S)-9-fluor-4,13-dioxa-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,251pentacosa- 1(24),7(12),8,10,18(25),19,22-heptaeno-3,17-diona:

[000432] Preparada de acordo com o método do Exemplo 30, Etapa J, usando (5)-N-(2-cloroetil)-5-(4-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-2- oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida no lugar de (5)-N-(3-cloropropil)-5-(4-(5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-2- oxooxazolidin-3-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida para render o composto do título (14 mg, 24% de rendimento) como um sólido branco. MS (apci) m/z = 385,1 (M+H).Exemplo 32

(6R)-9-fluor-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16.5.2.02,6.07,12.021,25]- pentacosa-1 (24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-onaEtapa A: Preparação de (R)-etil 5-(2-(2-(3-((tert-butoxicarbonil)amino)prop-1-in-1 -il)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000433] (R)-etil 5-(2-(2-cloro-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (Exemplo 12, Etapa C; 153 mg, 0,392 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado tert-butil prop-2- inilcarbamato (122 mg, 0,785 mmol), iodeto de cobre (I) (11 mg, 0,0578 mmol), trifenilfosfina (82,4 mg, 0,314 mmol), cloreto de di- trifenilfosfina paládio (II) (116 mg, 0,165 mmol), e diisopropilamina (99,3 mg, 0,981 mmol). A mistura da reação foi vedada e aquecida para 95°C por 8 horas, depois resfriada para temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 33% EtOAc/Hexanos para render o produto final misturado com Ph3P (160 mg, 80,2% de rendimento). MS (apci) m/z = 508,9 (M+H).Etapa B: Preparação de (R)-etil 5-(2-(2-(3-aminopropil)-5-fluorpiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000434] Ao (R)-etil 5-(2-(2-(3-(tert-butoxicarbonilamino)prop-1-inil)-5- fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol [1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (160 mg, 0,315 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado di-hidroxipaládio (101 mg, 0,144 mmol). A mistura da reação foi agitada sob um balão de hidrogênio por 6 horas, depois filtrada através de uma almofada de Celite® e lavada com MeOH (30 mL). O filtrado foi concentrado e o resíduo resultante foi tratado com 4M HCL em dioxano (3 mL). Após agitação por 30 minutos, a solução foi concentrada para render o produto como um sal de HCl (140 mg, 108% de rendimento). MS (apci) m/z = 413,0 (M+H).Etapa C: Preparação de ácido (R)-5-(2-(2-(3-aminopropil)-5-fluorpiridin- 3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico:

[000435] Ao cloridrato de (R)-etil 5-(2-(2-(3-aminopropil)-5- fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (160 mg, 0,356 mmol) em THF/MeOH (2 mL/1 mL) foi adicionado hidróxido de lítio (1,1 mL, 2,20 mmol). A mistura da reação foi aquecida para 70°C por 5 horas, depois concentrada sob pressão reduzida. Água (10 rnL) foi adicionada e a mistura lavada com Et2O (2 x 5 mL), depois neutralizada com HCL (1M) ao pH = 4. A solução aquosa foi extraída com DCM (2 x 10 mL). O extrato orgânico foi seco com Na2SO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para produzir o produto bruto desejado (16,0 mg, 11,7% de rendimento). MS (apci) m/z = 385,0 (M+H).Etapa D: Preparação de (6R)-9-fluor-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona:

[000436] Ao ácido (R)-5-(2-(2-(3-aminopropil)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (16 mg, 0,042 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado HATU (63 mg, 0,17 mmol) e N- etil-N-isopropilpropan-2-amina (22 mg, 0,17 mmol). A mistura da reação foi agitada por 3 horas e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica usando 100% EtOAc para render o composto do título (6,0 mg, 39% de rendimento). MS (apci) m/z = 367,3 (M+H).Exemplo 33

(6R)-9-fluor-15-metil-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16,5,2,02,6 07,12,021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona

[000437] Preparada de acordo com o método do Exemplo 37, substituindo tert-butil 2-metilbut-3-in-2-ilcarbamato com tert-butil but-3- in-2-ilcarbamato na Etapa B para render o composto do título como uma mistura de 1:1 de diastereômeros. MS (apci) m/z = 381,2 (M+H). Exemplo 34

(6R,13R)-9-fluor-13-metil-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo[15,5,2,17,11,02,6,020,24]pentacosa-l(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-dionaEtapa A: Preparação de (R)-metil 5-(2-(5-fluor-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000438] A uma suspensão de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação B; 5,01 g, 14,0 mmol) em MeOH (150 mL) foi adicionado gota a gota TMSCHN2 (8,41 mL, 16,8 mmol). A reação foi agitada por 30 minutos, e depois resfriada rapidamente com 1 mL de ácido acético. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi seco sob alto vácuo para produzir o metil éster. Ao metil éster bruto foi adicionado 4N HC1 em dioxano (100 mL) e a reação foi vedada e aquecida para 90°C por 2 horas. A mistura da reação foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em DCM (100 mL) e lavada com NaHCO3 saturado (40 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir o produto bruto desejado (4,67 g, 93,2% de rendimento). MS (apci) m/z = 357,9 (M+H).Etapa B: Preparação de metil 5-((R)-2-(1-((S)-3-(1,3-dioxoisoindolin-2- il)-2-metilpropil)-5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000439] A uma solução de (R)-metil 5-(2-(5-fluor-2-hidroxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (202 mg, 0,565 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado hidreto de lítio (22,5 mg, 2,83 mmol) e (R)-2-(3-bromo-2-metilpropil)isoindolina-1,3-diona (preparada de acordo com o procedimento descrito em Euro. J. Med. Chem. 2000, 147- 156) (239 mg, 0,848 mmol). A reação foi agitada por 2 horas a 70°C, e depois resfriada para temperatura ambiente. A mistura da reação foi diluída com EtOAc (20 mL) e lavada com água (2 x 10 mL). O camada orgânica foi seco com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 66% EtOAc/Hexanos para render o produto (1 10 mg, 34,8% de rendimento). MS (apci) m/z = 559,0(M+H). Etapa C: Preparação de metil 5-((R)-2-(1-((R)-3-amino-2-metilpropil)-5- fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato:

[000440] A uma solução de metil 5-((R)-2-(l -((S)-3-(l,3-dioxoisoindolin-2-il)-2-metilpropil)-5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (110 mg, 0,197 mmol) em MeOH/THF (3 mL/3 mL) foi adicionado hidrazina (31,6 mg, 0,985 mmol). A reação foi agitada por 14 horas a 50°C. Após resfriamento, a mistura da reação foi concentrada e o resíduo resultante foi diluído com EtOAc (20 mL) e lavado com NaHCO3 saturado aquoso (5 mL), água (2 x 5 mL) e salmoura (5 mL). A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com EtOAc/MeOH/ H4OH 10:1:0,1 para fornecer o produto desejado (65 mg, 77% de rendimento). MS (apci) m/z = 429,2 (M+H).Etapa D: Preparação de (6R,13R)-9-fluor-13-metil-2,11,15,19,20,23- hexaazapentaciclo[15,5,2,17,11,02,6,020,24]pentacosa- 1('23),7,9,17('24),18,21-hexaeno-16,25-diona:

[000441] A uma solução de metil 5-((R)-2-(1-((R)-3-amino-2-metilpropil)-5-fluor-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (65 mg, 0,15 mmol) em THF/MeOH (6 mL/2 mL) foi adicionado hidróxido de lítio (455 μL, 0,91 mmol). A reação foi agitada a 70°C por 3 horas, depois resfriada rapidamente com cloreto de hidrogênio (910 μL, 0,91 mmol). O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi seco sob alto vácuo. Ao resíduo bruto resultante foi adicionado DMF (10 mL), HATU (115 mg, 0,30 mmol) e N-etil-N-isopropilpropan-2- amina (78 mg, 0,61 mmol). A reação foi agitada por 3 horas, e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 10% MeOH/EtOAc para render o composto do título (6,0 mg, 10% de rendimento). MS (apci) m/z = 397,3 (M+H).Exemplo 35

(6R,13S)-9-fluor-13-metil-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo[15,5,2,17,11,02,6 020,24]pentacosa-1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona

[000442] Preparada de acordo com o método do Exemplo 34, substituindo (5)-2-(3-bromo-2-metilpropil)isoindolina-1,3-diona(preparada de acordo com o procedimento descrito em Euro. J. Med. Chem. 2000, 147-156) para (R)-2-(3-bromo-2-metilpropil)isoindolina-1,3-diona na Etapa B. MS (apci) m/z = 397,3 (M+H).Exemplo 36

(6R)-9-fluor-15,15-dimetil-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo- [17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18- ona

[000443] Preparada de acordo com o procedimento ao Exemplo 3, substituindo 3-amino-2,2-dimetilpropan-1-ol por 3-aminopropan-1-ol na Etapa A. MS (apci) m/z = 41 1,2 (M+H). Exemplo 37

(6R)-9-fluor-15,15-dimetil-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-onaEtapa A: Preparação de (R)-metil 5-(2-(5-fluor-2-(trifluormetil-sulfoniloxi)piridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a1pirimidina-3- carboxilato:

[000444] A uma solução de (R)-metil 5-(2-(5-fluor-2-hidroxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (Preparado de acordo com o Exemplo 34, Etapa A; 2,31 g, 6,46 mmol) em DMF (20 mL) foi adicionado 1.1.1-trifluor-N-fenil-N-(trifluormetil-sulfonil)metanosulfonamida (2,54 g, 7,11 mmol) e trietilamina (0,785 g, 7,76 mmol). A reação foi agitada por 18 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 33% EtOAc/Hexanos para produzir o produto desejado (2,36 g, 74,6% de rendimento). MS (apci) m/z = 490,0 (M+H).Etapa B: Preparação de (R)-metil 5-(2-(2-(3-(tert-butoxicarbonilamino)- 3-metilbutil)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato:

[000445] Ao (R)-metil 5-(2-(5-fluor-2-(trifluormetilsulfoniloxi)piridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (503 mg, 1,03 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado tert-butil 2-metilbut-3-in-2- ilcarbamato (377 mg, 2,06 mmol), iodeto de cobre (I) (39,1 mg, 0,206 mmol), cloreto de di-trifenilfosfina paládio (II) (144 mg, 0,206 mmol), diisopropilamina (260 mg, 2,57 mmol). A mistura da reação foi vedada e aquecida para 65°C por 8 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 66% EtOAc/Hexanos para render (R)- metil 5-(2-(2-(3-(tert-butoxicarbonilamino)-3-metilbut-1-inil)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato misturado com Ph3P,que foi imediatamente hidrogenado usando dihidroxipaládio sobre carbono (200 mg, 0,285 mmol) em MeOH (20 mL) sob um balão de H2 por 15 horas. Após filtragem através de uma almofada de Celite® e lavagem com MeOH, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 66% EtOAc/Hexanos para render o produto (166 mg, 30,7% de rendimento). MS (apci) m/z = 527,1 (M+H).Etapa C: Preparação de (6R)-9-fluor-15,15-dimetil-2,11,16,20,21,24- hexaazapentaciclo[16,5,2,02,6,07,12,021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona:

[000446] Ao (R)-metil 5-(2-(2-(3-(tert-butoxicarbonilamino)-3-metilbutil)-5-fluorpiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (166 mg, 0,315 mmol) em THF/MeOH (3 mL/1 mL) foi adicionado hidróxido de lítio (946 μL, 1,89 mmol). O recipiente de reação foi vedado e aquecido para 70°C por 3 horas. A mistura da reação foi depois seca sob pressão reduzida e HCl (4 mL, 4M em dioxano) foi adicionada. A mistura da reação foi agitada por uma hora, depois o solvente foi removido e o resíduo foi seco sob alto vácuo por duas horas. Ao resíduo foi depois adicionado DMF (8 mL), HOBT-H2O (96,5 mg, 0,630 mmol), EDCI (121 mg, 0,630 mmol) e trietilamina (159 mg, 1,58 mmol). A mistura da reação foi agitada a 45°C por 18 horas, depois concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica eluindo com 5% MeOH/DCM para render o composto do título (60,0 mg, 48,3% de rendimento). MS (apci) m/z = 395,1 (M+H). Exemplo 38

(6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,16,17,21,25,26,29-octaazahexaciclo [21,5,2,02,6,07,12,016,20,026,30]triaconta-1(29),7,9,11,17,19,23(30),24,27- nonaen-22-onaEtapa A: Preparação de 1-(2-(tert-butildifenilsililoxi)etil)-1H-pirazol-5- amina:

[000447] À uma suspensão de 2-(5-amino-1H-pirazol-1-il)etanol (2,07 g, 16,0 mmol) e 1H-imidazol (5,43 g, 79,8 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado gota a gota tert-butilclorodifenilsilano (4,96 mL, 19,1 mmol). A reação foi agitada por 15 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com DCM (40 mL). A camada orgânica foi lavada com em 1N HC1 (10 mL), água (10 mL) e salmoura (10 mL), depois concentrada para produzir o produto bruto desejado (5,62 g, 96,4% de rendimento), que foi usado na próxima etapa sem purificação.Etapa B: Preparação de (R)-N-(1-(2-(tert-butildifenilsililoxy)etil)-1H- pirazol-5-il)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5- alpirimidina-3-carboxamida:

[000448] A uma suspensão de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin- 3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (220 mg, 0,616 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado gota a gota cloreto de 2,4,6- triclorobenzoíla (106 μL, 0,677 mmol) e trietilamina (81,0 mg, 0,800 mmol). A reação foi agitada por 2 horas, e 1-(2-(tert- butildifenilsililoxi)etil)-1H-pirazol-5-amina (338 mg, 0,923 mmol) foi adicionado à mistura da reação. A reação foi aquecida para 60°C por 3 horas e depois resfriada para temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica para produzir o produto desejado (201 mg, 46,3% de rendimento). MS (apci) m/z = 705,1 (M+H). Etapa C: Preparação de (6R)-9fluor-13-oxa-2,11,16,17,21,25,26,29- octaazahexaciclo[21,5,2,02,6,07,12,016,20,026,30]triaconta- 1('29),7,9,11,17,19,23(30),24,27-nonaen-22-ona:

[000449] Uma suspensão de (R)-N-(1-(2-(tert-butildifenilsililoxi)etil)- 1H-pirazol-5-il)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (201 mg, 0,285 mmol) em 4M HCl em dioxano (6 mL) foi vedada e aquecida para 100°C por quatro horas. A mistura da reação foi resfriada para temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com DCM (20 mL) e lavado com NaHCO3 saturado (5 mL), água (5 mL) e salmoura (5 mL). A camada orgânica foi concentrada para produzir o (R)-5-(2-(5- fluor-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-(1-(2-hidroxietil)-1H-pirazol-5- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida bruto, ao qual foi adicionado THF (20 mL), DEAD (53,9 μL, 0,342 mmol) e trifenilfosfina (89,8 mg, 0,342 mmol). A mistura da reação foi agitada por 18 horas, depois concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 10% MeOH/DCM para render o composto do título (1,8 mg, 1,5% de rendimento). MS (apci) m/z = 435,3 (M+H).Exemplo 39

(6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,19,21,25,26,29- heptaazahexaciclo[21,5,2,02,6,07,12,015,20,026,30]triaconta- 1('29),7,9,11,15('20),16,18,23(30),24,27-decaen-22-ona Etapa A: Preparação de 3-((tert-butildifenilsililoxi)metil)piridin-2-amina:

[000450] À uma suspensão de (2-aminopiridin-3-il)metanol (2,19 g, 17,6 mmol) e 1H-imidazol (6,00 g, 88,2 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado gota a gota tert-butilclorodifenilsilano (5,49 mL, 21,2 mmol). A reação foi agitada por 15 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com DCM (40 mL). A camada orgânica foi lavada com em 1N HCl (10 mL), água (10 mL) e salmoura (10 mL) e depois concentrada para produzir o produto bruto (6,03 g, 94,3% de rendimento). MS (apci) m/z = 363,1 (M+H).Etapa B: Preparação de (6R)-9-fluor-13-oxa-2,11,19,21,25,26,29-heptaazahexaciclo[21,5,2,02,6,07,12,015,20,026,30]triaconta- 1('29),7,9,11,15('20),16,18,23(30),24,27-decaen-22-ona:

[000451] A uma suspensão de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin- 3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (303 mg, 0,848 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionada trietilamina (103 mg, 1,02 mmol), seguido pela adição gota a gota de cloreto de 2,4,6-triclorobenzoíla (227 mg, 0,933 mmol). A reação foi agitada por duas horas. 3-((tert- butildifenilsililoxi)metil)piridin-2-amina (369 mg, 1,02 mmol) foi adicionada e a mistura da reação foi aquecida para 60°C por 5 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 10% de MeOH/DCM para produzir (R)-N-(3-((tert-butildifenilsililoxi)metil)piridin- 2-il)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida, à qual foi adicionado THF (5 mL) e TBAF (848 μL, 0,848 mmol). A mistura da reação foi agitada por uma hora, depois resfriada rapidamente com NH4Cl saturado (1 mL) e depois concentrada sob pressão reduzida para produzir a (R)-5-(2-(5-fluor-2- metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-(3-(hidroximetil)piridin-2-il)pirazol[1,5- a]pirimidina-3-carboxamida bruta, à qual foi adicionado HCl (4M em dioxano, 5 mL). A mistura da reação foi vedada e aquecida para 100°C por quatro horas. A mistura da reação foi resfriada para temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com DCM (20 mL) e a camada orgânica foi lavada com NaHCO3 saturado (5 mL), água (5 mL) e salmoura (5 mL). A camada orgânica foi concentrada sob pressão reduzida para produzir a (R)-N-(3- (clorometil)piridin-2-il)-5-(2-(5-fluor-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida bruta, à qual foi adicionado DMF (10 mL) e Cs2CO3 (276 mg, 0,848 mmol). A mistura da reação foi aquecida para 60°C por 4 horas, depois resfriada para temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 10% MeOH/DCM para render o composto do título (8,0 mg, 2,2% de rendimento). MS (apci) m/z = 432,3 (M+H).Exemplo 40

(6R)-9-fluor-13,13-dimetil-2,11,15,19,20,23- hexaazapentaciclo[15,5,2,17,11,02,6,020'24]pentacosa- 1('23),7,9,17('24),18,21-hexaeno-16,25-dionaEtapa A: Preparação de bromidrato de 3-bromo-2,2-dimetilpropan-1- amina:

[000452] Uma mistura de 2-(3-bromo-2,2-dimetilpropil)isoindolina- 1,3-diona (1,00 g, 3,38 mmol) em 48% de HBr aquoso (10 mL) foi refluxado por 18 horas. A mistura da reação foi resfriada para temperatura ambiente e os sólidos formados foram filtrados. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o material bruto que foi azeotropado com tolueno (3x) seguido por acetonitrila até os sólidos serem formados. O material bruto foi triturada com éter e seco sob pressão reduzida para render bromidrato de 3-bromo-2,2- dimetilpropan-1-amina (0,816 g, 3,07 mmol, 91,0% de rendimento) (confirmado por 1H-RMN e posAPCI-MS). O produto isolado foi usado diretamente sem purificação adicional.Etapa B: Preparação de (R)-N-(3-bromo-2,2-dimetilpropil)-5-(2-(5-fluor- 2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida:

[000453] A uma solução de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação B; 150 mg, 0,420 mmol), EDCI (88,5 mg, 0,462 mmol), e HOBT-H2O (70,7 mg, 0,462 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado bromidrato de 3- bromo-2,2-dimetilpropan-1-amina (124 mg, 0,504 mmol) seguido por trietilamina (55,2 mg, 0,546 mmol). A reação foi agitada por 18 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 50% EtOAc/Hexanos para fornecer (R)-N-(3-bromo-2,2-dimetilpropil)-5-(2- (5-fluor-2-metoxipiridin-3 -il)pirrolidin-1-il)pirazol [1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (180 mg), à qual foi adicionado HCl (5 mL, 4M em dioxano). A reação foi vedada e aquecida para 90°C por 2 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 20% de Hexanos/ EtOAc para fornecer o produto desejado (130 mg, 63% de rendimento).Etapa C: Preparação de (6R)-9-fluor-13,13-dimetil-2,11,15,19,20,23- hexaazapentaciclo[15.5.2.17,11.02,6.020,24]pentacosa- 1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona:

[000454] A uma solução de (R)-N-(3-bromo-2,2-dimetilpropil)-5-(2-(5- fluor-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (30 mg, 0,061 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado gota a gota 2-metilpropan-2-olato de potássio (153 μL, 0,15 mmol). A reação foi aquecida a 50°C por duas horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 10% MeOH/DCM para fornecer o composto do título (15 mg, 60% de rendimento). MS (apci) m/z = 411,0 (M+H).Exemplo 41

(4R,6R,15S)-9-fluor-4,15-dihidroxi-13-oxa-2,17,21,22,25- pentaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,26]hexacosa- 1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-heptaen-18-onaEtapa A: Preparação de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil-5-((R)-2-(5-fluor- 2-hidroxifenil-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000455] A uma suspensão de ácido (R)-5-(2-(5-fluor-2-hidroxifenil)- 4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (Preparação D; 0,0339 g, 0,0946 mmol) e HATU (0,0540 g, 0,142 mmol) em DMF (0,5 mL) a 0°C foi adicionado cloridrato de (S)-1-amino-3-cloropropan- 2-ol (Exemplo 19, Etapa A; 0,0155 g, 0,142 mmol; preparada de acordo com o método descrito na Org. Process Res. Dev. 2003, vol. 7, p. 533) e N,N-diisopropiletilamina (0,0494 mL, 0,284 mmol). A mistura resultante foi aquecida a temperatura ambiente e agitada por 18 horas. A mistura da reação foi diluída com EtOAc (10 mL), lavada com salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir o material bruto que foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 0-20% MeOH/DCM para render N-((5)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluor-2- hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (como uma mistura de isômeros cis e trans, 0,0407 g, 82,2% de rendimento, 86% de pureza). LC/MS (ES+APCI) m/z = 448,1 (M-H).Etapa B: Preparação de (4R,6R,15S)-9-fluor-4,15-dihidroxi-13-oxa- 2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,26]hexacosa- 1('25),7(12),8,10,19('26),20,23-heptaen-18-ona:

[000456] Uma mistura de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5- fluor-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (0,0407 g, 0,0778 mmol) e CS2CO3 (0,127 g, 0,389 mmol) em DMF (3,6 mL) foi aquecida a 85°C por 30 minutos. A mistura da reação foi resfriada para temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o material bruto que foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 020% MeOH/EtOAc para produzir o produto bruto. O material bruto foi purificado usando a cromatografia de coluna quiral (Chiral Tech OD-H column, 20% EtOH em hexanos). O isolamento do material tendo um tempo de retenção de cerca de 21,8 minutos rendeu o composto do título (0,0052 g, 16,2% de rendimento). A estequiometria do composto do título foi confirmada por 1H-RMN no experimento. LC/MS (ES+APCI) m/z = 414,1 (M+H).Exemplo 41-B

(4R,6S,15S)-9-fluor-4,15-dihidroxi-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo[17,5,02,6,07,12,022,26]hexacosa-1(25),7(12),8,10,19(26'),20,23-heptaen-18-ona

[000457] O composto do título foi isolado durante a separação quiralrelatada no Exemplo 41 a partir das frações tendo um tempo de retenção de cerca de 30,6 minutos, para fornecer 5,4 mg (16,8% de rendimento) do composto que pode ter sido isolado junto com o enantiômero e/ou um ou mais diastereômeros. A estequiometria do composto do título foi confirmada pela 1H-RMN no experimento), LC/MS (ES+APCI) m/z = 414,1 (M+H).Exemplo 42

(4R16R)-9-fluor-4-hidroxi-13-oxa-2117121122125-pentaazapentaciclo- [17.5.2.02,6.07,12.022,26]hexacosa-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23- heptaen- 18-ona

[000458] O composto do título foi preparado de acordo com o método do Exemplo 41, substituindo cloridrato de 3-cloropropan-1- amina por cloridrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol na Etapa A: 13,8 mg (16% de rendimento; Chiral Tech OD-H column, 20% EtOH em hexanos, tempo retenção de cerca de 17,2 minutos). A estequiometria do composto do título foi confirmada pela 1H-RMN no experimento. LC/MS (ES+APCI) m/z = 398,1 (M+H).Exemplo 42-B

[000459] (4R,6S)-9-fluor-4-hidróxi-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,26]hexacosa-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-heptaen-18-ona

[000460] O composto do título foi preparado durante a separaçãoquiral relatada no Exemplo 42 pelo isolamento das frações tendo tempo retenção de cerca de 26,2 minutos (21,1 mg, 24,5% de rendimento) que podem ter sido isoladas junto com o enantiômero e/ou um ou mais diastereômeros. A estequiometria do composto do título foi confirmada por 1H-RMN no experimento. LC/MS (ES+APCI) m/z = 398,1 (M+H).Exemplo 43

(4R,6R)-9-fluor-4-hidróxi-13-oxa-2116120121124-pentaazapentaciclo- [16.5.2.02,6.07,12.021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen- 17-ona

[000461] O composto do título foi preparado de acordo com o método do Exemplo 41, substituindo cloridrato de 2-cloroetilamina por cloridrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol na Etapa A. O composto do título foi purificado usando uma coluna Chiral Tech OJ-H, EtOH a 20% em hexanos, pelo isolamento das frações tendo um tempo de retenção de cerca de 15,7 minutos (10,7 mg, 14,2% de rendimento). A estequiometria do composto do título foi confirmada por 1H-RMN no experimento. LC/MS (ES+APCI) m/z = 384,1 (M+H).Exemplo 43-B

(4R,6S)-9-fluor-4-hidróxi-13-oxa-2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo-[16.5.2.02,6.07,12.021,25]pentacosa-1(24)7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17- ona

[000462] O composto do título foi isolado durante a separação quiral relatada no Exemplo 43 pelo isolamento das frações tendo um tempo de retenção de cerca de 21,3 minutos (15,9 mg, 21,1% de rendimento) que podem ter sido isoladas junto com o enantiômero e/ou um ou mais diastereômeros. A estequiometria do composto do título foi confirmada por 1H-RMN no experimento), LC/MS (ES+APCI) m/z = 384,1 (M+H). Exemplo 44

(4R,6R,15R)-9-fluor-4,15-dihidroxi-13-oxa-2,17,21,22,25- pentaazapentaciclo-[17.5.02,6.07,12.022,26]hexacosa- 1(25),7(12),8,10,19(26'),20,23-heptaen-18-ona

[000463] O composto do título foi preparado de acordo com o método do Exemplo 41, substituindo cloridrato de (R)-1-amino-3- cloropropan-2-ol (preparado de acordo com o procedimento descrito em Exemplo 19, Etapa A usando (R)-2-(clorometil)oxirano) por cloridrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol na Etapa A. O material bruto foi purificado em uma coluna de gel de sílica, eluindo com CH2Cl2 para NH4OH:MeOH:CH2Cl2 (0,5:5:95) (4 execuções). As frações contendo o composto da eluição anterior foram coletadas para fornecer 12 mg (10,9% de rendimento) do material desejado. A estequiometria do composto do título foi confirmada por 1H-RMN no experimento. LC/MS (ES+APCI) m/z = 414,0 (M+H).Exemplo 44-B

(4R,6S,15R)-9-fluor-4,15-dihidroxi-13-oxa-2,17,21,22,25- pentaazapentaciclo[17.5.02,6.07,12.022,26]hexacosa-1(25),7(12),8,10,19(26'),20,23-heptaen-18-ona

[000464] O composto do título foi isolado durante a purificação relatada no Exemplo 44. As frações contendo o último composto de eluição foram coletados para fornecer 15 mg (13,6% de rendimento) do composto do título, que podem ter sido isoladas junto com o enantiômero e/ou um ou mais diastereômeros. A estequiometria do composto do título foi confirmada pela 1H-RMN no experimento); LC/MS (ES+APCI) m/z = 414,1 (M+H).Exemplo 45

Diastereômero 1 e Diastereômero 2 de (15S)-4,4,9-trifluor-15-hidróxi- 13-oxa-2,17,21,22,25- pentaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,26]hexacosa- 1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-heptaen-18-onaEtapa A: Preparação de cloridrato de (R)-5-(5-fluor-2-metoxifenil)pirrolidin-3-ol:

[000465] À solução de (R)-tert-butil 4-(tert-butildimetilsililoxi)-2-(5- fluor-2-metoxifenil)pirrolidina-1-carboxilato (1,01 g, 2,37 mmol) em CH2Cl2 (10 mL) a 0°C foi adicionado 4 M HCL em dioxano (5,93 mL, 23,7 mmol). A mistura resultante foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 8 horas. A mistura da reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir o material bruto que foi triturado com éter. Os sólidos resultantes foram filtrados e secos sob pressão reduzida para render cloridrato de (R)-5-(5-fluor-2-metoxifenil)pirrolidin- 3-ol (0,577 g, 2,33 mmol, 98,2% de rendimento). MS (APCI) m/z = 212,0 (M+H).Etapa B: Preparação de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4- hidroxipirrolidin-1-il pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000466] A uma suspensão de etil 5-hidroxipirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato (0,541 g, 2,61 mmol) e reagente de BOP (1,57 g, 3,56 mmol) em DMF/CH2Cl2 (3 mL/3 mL) a 0°C foi adicionado cloridrato de (R)-5-(5-fluor-2-metoxifenil)pirrolidin-3-ol (0,588 g, 2,37 mmol) seguido por DIEA (1,66 mL, 9,50 mmol). A mistura resultante foi aquecida a temperatura ambiente e agitada por 18 horas. A mistura da reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir o material bruto que foi diluído novamente com EtOAc (30 mL). A camada orgânica foi lavada com NaHC03 saturado aquoso seguido por salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir o material bruto que foi purificado pela cromatografia em sílica-gel em coluna rápida, eluindo com CH2Cl2 para 5% MeOH em CH2Cl2 para render (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazol[l,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,735 g, 1,84 mmol, 77,3% de rendimento). LC/MS (ES+APCI) m/z = 401,1 (M+H).Etapa C: Preparação de etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4-oxopirrolidin- l-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000467] À uma suspensão de periodinano de Dess-Martin (0,233 g, 0,549 mmol) em CH2Cl2 (2,2 mL) a 0°C foi adicionada uma solução de (R)-etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,200 g, 0,499 mmol) em CH2Cl2 (1,5 mL). A mistura resultante foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 18 horas. A mistura da reação foi resfriada para 0°C e resfriada rapidamente com NaHCO3 saturado aquoso (5 mL) contendo Na2S2O3 (0,608 g, 3,85 mmol). A mistura resultante foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 10 minutos. A camada orgânica foi separada, lavada com NaHCO3 saturada aquosa (10 mL) seguido por salmoura (10 mL), seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para render etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4-oxopirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,164 g, 82,4% de rendimento). LC/MS (ES+APCI) m/z = 399,1 (M+H).Etapa D: Preparação de etil 5-(4,4-difluor-2-(5-fluor-2-metoxiphenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato:

[000468] A uma solução de etil 5-(2-(5-fluor-2-metoxifenil)-4- oxopirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,162 g, 0,407 mmol) em CH2Cl2 (3 mL) foi adicionado uma solução de trifluoreto de bis(2-metoxietil)aminoenxofre (0,134 mL, 0,691 mmol) seguido por EtOH (0,00475 mL, 0,0813 mmol). A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 18 horas. A mistura da reação foi derramada em NaHCO3 saturado aquoso (6 mL) e extraída com CH2Cl2 (2 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secos sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir o material bruto que foi purificado pela cromatografia em coluna de sílica, eluindo com 0-50% EtOAc/Hexanos para render etil 5- (4,4-difluor-2-(5-fluor-2-metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,126 g, 65,6% de rendimento). MS (APCI) m/z = 420,9 (M+H).Etapa E: Preparação de ácido 5-(4,4-difluor-2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol [1,5-a]pirimidina-3-carboxílico:

[000469] A uma solução de etil 5-(4,4-difluor-2-(5-fluor-2- metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (0,126 g, 0,267 mmol) em CH2Cl2 (1,3 mL) a 0°C foi adicionado 1 M BBr3 em CH2Cl2 (1,50 mL, 1,50 mmol). A mistura resultante foi aquecida a temperatura ambiente e agitada por 18 horas. A mistura da reação foi diluída com CH2Cl2 (5 mL) e derramada em uma mistura de gelo e NaHCO3 saturado aquoso (3 mL). A camada aquosa foi depois acidificada para cerca do pH 3 com 1N de HCl aquoso. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir uma mistura de etil 5-(4,4-difluor-2-(5- fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato e ácido 5-(4,4-difluor-2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico. Esta mistura foi tomada em MeOH-THF (0,25 mL/0,75 mL) a temperatura ambiente, e 2 N LiOH aquoso (0,667 mL, 1,33 mmol) foi adicionado. A mistura resultante foi aquecida a 50°C por 24 horas. A mistura da reação foi resfriada para temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida para remover os solventes orgânicos. O resíduo foi diluído com 5 mL de EtOAc e acidificado ao pH 3 a 4 com 6 N HCl aquoso com agitação. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa ácida foi extraída com EtOAc (2 x 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para render ácido 5-(4,4-difluor-2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (0,094 g, 93,1% de rendimento). MS (APCI) m/z = 378,9 (M+H).Etapa F: Preparação de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-(4,4-difluor-2- (5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida:

[000470] A uma mistura de ácido 5-(4,4-difluor-2-(5-fluor-2- hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (0,047 g, 0,124 mmol) e HOBT (0,0252 g, 0,186 mmol) em DMF (1 mL) a temperatura ambiente foi adicionado EDCI (0,0357 g, 0,186 mmol). A mistura resultante foi agitada por 1 hora. À esta mistura foi adicionado cloridrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol (Exemplo 19, Etapa A; 0,0218 g, 0,149 mmol) seguido por DIEA (0,0656 mL, 0,373 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada por 48 horas. A mistura da reação foi diluída com EtOAc (10 mL), e a camada orgânica foi lavada com uma mistura de 1:1 de salmoura e água. A camada aquosa foi separada e extraída com EtOAc (2 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com uma mistura de 1:1 de salmoura e água (15 mL) e combinadas com a camada orgânica obtida anteriormente. A camada orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para render N-((S)-3-cloro- 2-hidroxipropil)-5-(4,4-difluor-2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1- il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (0,061 g, 105% de rendimento). LC/MS (ES+APCI) m/z = 468,1 (M-H).Etapa G: Preparação de Diastereômeros 1 e 2 de (15S)-4,4,9-trifluor- 15-hidróxi-13-oxa-2,17,21,22,25- pentaazapentaciclo[17,5,2,02,6,07,12,022,26]hexacosa- 1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-heptaen-18-ona:

[000471] Uma mistura de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-(4,4- difluor-2-(5-fluor-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazol[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (0,060 g, 0,128 mmol) e Cs2CO3 (0,208 g, 0,639 mmol) em DMF (6,4 mL) foi aquecida a 85°C por 30 minutos. A mistura da reação foi resfriada para a temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o material bruto que foi purificado pela cromatografia em coluna rápida de sílica-gel (CH2Cl2 para NH4OH:MeOH:CH2Cl2 = 0,5:5:95) para render umamistura dos diastereômeros. Os diastereômeros isolados foram ainda purificados pela cromatografia de coluna quiral (coluna Chiral Tech OD-H, 20% EtOH em hexanos). As frações tendo um tempo de retenção de cerca de 17,1 minutos foram isolados para render o composto do título designado como diastereômero 1 (11 mg, 20% de rendimento.; MS (APCI) m/z = 434,2 (M+H). As frações tendo um tempo de retenção de cerca de 21,0 minutos foram isoladas para fornecer o composto de título designado como Diastereômero 2 (13 mg; 24% de rendimento); MS (APCI) m/z = 434,2 (M+H).

Claims (11)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula (6R)-9-fluoro-15-metil-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16.5.2.02,6.07,12.021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen- 17-ona,

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

3. Uso de um composto, como definido na reivindicação 1, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é para preparação de uma composição farmacêutica para tratar uma doença ou distúrbio selecionado a partir de dor, câncer ou infecção por Trypanosoma cruzi, em um mamífero.

4. Uso, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a doença ou distúrbio é câncer.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 3 ou 4, caracterizado pelo fato de que o câncer está associado com a superexpressão, ativação, amplificação e/ou a mutação de uma Trk quinase.

6. Uso, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que a Trk quinase é selecionada do grupo consistindo em TrkA, TrkB e TrkC.

7. Uso, de acordo com a reivindicação 5 ou 6, caracterizado pelo fato de que o câncer exibe a superexpressão de uma Trk quinase.

8. Uso, de acordo com a reivindicação 5 ou 6, caracterizado pelo fato de que o câncer exibe a ativação de uma Trk quinase.

9. Uso, de acordo com a reivindicação 5 ou 6, caracterizado pelo fato de que o câncer exibe a amplificação de uma Trk quinase.

10. Uso, de acordo com a reivindicação 5 ou 6, caracterizado pelo fato de que o câncer exibe a mutação de uma Trk quinase.

11. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 10, caracterizado pelo fato de que o câncer, é selecionado do grupo que consiste em neuroblastoma, câncer de ovário, câncer pancreático, câncer colorretal, câncer de próstata, melanoma, câncer de cabeça e pescoço, carcinoma gástrico, carcinoma de pulmão, câncer de mama, glioblastoma, meduloblastoma, câncer de mama secretório, câncer de glândula salivar e câncer de tireóide papilar.