BR112021003039A2 - combinações para o tratamento de nash/nafld e doenças relacionadas - Google Patents

Abstract

A presente invenção refere-se à combinação de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, ou seu sal farmaceuticamente aceitável, e ácido 4-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4?-piperidina]-1?-carbo-nil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de doenças, incluindo a esteato-hepatite não alcoólica (NASH) em mamíferos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COM- BINAÇÕES PARA O TRATAMENTO DE NASH/NAFLD E DOENÇAS RELACIONADAS".

CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A presente invenção refere-se a composições farmacêuti- cas incluindo (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidro- furan-3-il)pirididina-5-carboxamida, ou seu sal farmaceuticamente acei- tável, e, na mesma composição ou uma composição diferente, incluin- do ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4'-pi- peridina]-1'-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou seu sal farma- ceuticamente aceitável, para o tratamento da doença hepática gordu- rosa não alcoólica (NAFLD) e doenças a ela relacionadas, por exem- plo, esteato-hepatite não alcoólica (NASH) e doenças relacionadas ao metabolismo.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0002] A esteato-hepatite não alcoólica (NASH) é um subconjunto clínico e histológico da doença hepática gordurosa não alcoólica (NA- FLD, definida como a presença de > 5% de esteatose hepática) asso- ciada ao aumento da mortalidade por todas as causas, cirrose e doen- ça hepática em estágio terminal, aumento da mortalidade cardiovascu- lar e aumento da incidência de cânceres relacionados ao fígado e não relacionados ao fígado (Sanyal et al, Hepatology 2015;61(4):1392- 1405). A NAFLD é a manifestação hepática da síndrome metabólica, e é um espectro de condições hepáticas que abrange a esteatose, NASH, fibrose, cirrose e, em última análise, o carcinoma hepatocelu- lar. A NAFLD e A NASH são considerados as principais doenças hepá- ticas gordurosas, uma vez que são responsáveis pela maior proporção de indivíduos com elevados lipídios hepáticos. A gravidade das NA- FLD/NASH se baseia na presença de lipídios, infiltrado inflamatório de células, balonamento de hepatócitos e grau de fibrose. Atualmente, as opções de tratamento são limitadas ao gerenciamento de condições associadas (Diretrizes de Prática Clínica para EASL-EASD-EASO, J. Hepatol. 2016;64(6):1388-1402).

[0003] Levantou-se a hipótese de que as alterações no metabo- lismo lipídico contribuem para a patogênese molecular de NAFLD e NASH. A esteatose é um componente necessário, mas não suficiente, da patogênese da NASH (Day C, e James O., Hepatology. 1998;27 (6): 1463-6). Em consequência, vários estudos têm demonstrado que a gravidade da esteatose prediz o risco de esteato-hepatite concomitan- te, bem como o risco de progressão para cirrose (Sorensen et al, Lan- cet. 1984; 2(8397): 241-4; Wanless | e Lentz J, Hepatology 1990;12(5): 1106-10; Reeves H, et al, J. Hepatol. 1996; 25(5): 677-83). A esteato- se hepática é uma consequência de um desequilíbrio na produ- ção/absorção de TG pelo fígado e depuração/remoção (Cohen JC, et al, Science). 2011; 2011(6037):1519-1523). Levantou-se a hipótese de que a redução da esteatose, o condutor metabólico subjacente ao de- senvolvimento de NAFLD/NASH, resultará em melhorias subsequen- tes na inflamação e fibrose hepáticas.

[0004] A acetil-CoA carboxilase (ACC) e a diacilglicerol aciltransfe- rase 2 (DGAT2) são duas enzimas-chave que regulam o metabolismo lipídico. A ACC catalisa uma etapa essencial e limitante da taxa no processo de lipogênese de novo (DNL) (Saggerson D, Annu. Rev. Nutr. 2008;28:253-72). Além disso, a ACC também regula a betaoxi- dação mitocondrial de ácidos graxos por meio da regulação alósterica da enzima carnitina palmitoiltransferase 1 (CPT1) (Saggerson, 2008; Waite M, e Wakil SJ. J. Biol. Chem. 1962;237:2750-2757.). Dados emergentes também sugerem que a supressão da DNL por meio da inibição da ACC pode reduzir diretamente a inflamação ao conter a formação de células T secretoras de interleucina-17 (IL-17) inflamató- rias da linhagem de células T auxiliares 17 (células Th17) e favorecer o desenvolvimento de células T regulatórias (Treg) anti-inflamatórias FoxP3(+) (Berod L, et al. Nat. Med. 2014;20(11):1327-33).

[0005] Há a hipótese de que a inibição da atividade da ACC seja benéfica para pacientes com NASH por pelo menos dois mecanismos independentes. Como resumido acima, os seres humanos com NAFLD mostram elevações acentuadas na DNL hepática e a normalização desse fluxo aumentado por meio da inibição farmacológica da ACC hepática é considerada um redutor da esteatose. Além disso, o efeito dos inibidores da ACC para aumentar a oxidação de ácidos graxos também pode contribuir para reduzir o teor de gordura hepática. As- sim, foi demonstrado que os inibidores da ACC inibem a DNL. Con- sulte Griffith DA, et al. J. Med. Chem. 2014;57(24):10512-10526; Kim CW, et al. Cell Metab. 2017;26, 394-406; Stiede K, et al. Hepatology. 2017;66(2):324-334; Lawitz EJ, et al. Clin Gastroenterol Hepatol. 2018 (https://doi.org/10.1016/j.cgh.2018.04.042). Além disso, espera-se que a inibição da DNL nas células T secretoras da IL-17 suprima a infla- mação hepática ao restringir a formação das células inflamatórias Th17 (Berod et a/., 2014), uma via que pode ser importante na patogê- nese da NASH (Rau M, et al. J. Immunol. 2016;196(1):97-105), e favo- recer o desenvolvimento de células Treg anti-inflamatórias. Além dis- so, a inibição do ACC pode reduzir a ativação e a fibrose das células estreladas (Ross et al., 2019).

[0006] Os triglicerídeos ou triacilgliceróis (TG) representam uma forma importante de armazenamento de energia nos mamíferos. Os TGs são formados pela esterificação sequencial de glicerol com três ácidos graxos de diferentes comprimentos de cadeia e graus de satu- ração (Coleman, R. A., e Mashek, D. G. 2011. Chem. Rev. 111: 6359- 6386). Os TGs sintetizados no intestino ou fígado são embalados em quilomícrons ou lipoproteínas de densidade muito baixa (VLDL), res- pectivamente, e exportados para tecidos periféricos onde são hidroli-

sados em seus ácidos graxos constituintes e glicerol pela lipase lipo- protéica (LPL). Os ácidos graxos não esterificados (NEFA) resultantes podem ser ainda metabolizados para produzir energia ou re-esterifi- cados e armazenados.

[0007] Em condições fisiológicas normais, o TG com densidade energética permanece sequestrado em vários depósitos adiposos até que haja uma demanda por sua liberação, sendo hidrolisado em glice- rol e ácidos graxos livres que são, então, liberados no fluxo sanguíneo. Este processo é rigidamente regulado pelas ações opostas de insulina e hormônios, como catecolaminas, que promovem a deposição e a mobilização de estoques de TG em várias condições fisiológicas. No cenário pós-prandial, a insulina age para inibir a lipólise, assim restrin- gindo a liberação de energia na forma de NEFA e assegurando o ar- mazenamento adequado de lipídios dietéticos em vasos adiposos. En- tretanto, em pacientes com diabetes tipo 2, a capacidade da insulina de suprimir a lipólise é amenizada e o fluxo de NEFA dos adipócitos é inapropriadamente elevado. Isso, por sua vez, resulta em aumento do fornecimento de lipídios a tecidos como o muscular e o hepático. Na ausência de demanda energética, o TG e outros metabólitos lipídicos, como o diacilglicerol (DAG), podem acumular-se e causar uma perda de sensibilidade à insulina (Erion, D. M., e Shulman, G. |. 2010. Nat Med 16: 400-402). A resistência à insulina no músculo caracteriza-se pela redução na absorção de glicose e armazenamento de glicogênio, enquanto no fígado, a perda de sinalização de insulina dá origem a uma saída desregulada de glicose e sobreprodução de VLDL rica em TG, uma característica do diabetes tipo 2 (Choi, S. H., e Ginsberg, H. N. 2011. Trends Endocrinol. Metab. 22: 353-363). Acredita-se que a secreção elevada de VLDL enriquecida com TG, as chamadas partícu- las VLDL1, estimule a produção de lipoproteína de baixa densidade (sdLDL) pequena e densa, uma subfração proaterogênica de LDL as-

sociada ao risco elevado de doença coronariana (St-Pierre, A. C. et. al.

2005. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 25:553-559).

[0008] Nos mamíferos, foram caracterizadas duas enzimas de dia- cilglicerol aciltransferases (DGAT) (DGAT1 e DGAT2). Embora essas enzimas catalisem a mesma reação enzimática, suas respectivas se- quências de aminoácidos não estão relacionadas e ocupam famílias distintas de genes. Os camundongos que portam uma ruptura no gene que codifica DGAT1 são resistentes à obesidade induzida por dieta e têm gasto e atividade energéticos elevados (Smith, S. J. et. al., 2000. Nat Genet 25: 87-90). O camundongo Dgat1-/- apresenta liberação pós-aborpative desregulada de quilomícrons e acumula lipídios nos enterócitos (Buhman, K. K. et.al. 2002. J. Biol. Chem. 277: 25474- 25479). Sugere-se que o fenótipo metabolicamente favorável observa- do nesses camundongos seja impulsionado pela perda da expressão de DGAT1 no intestino (Lee, B., et. al. 2010. J. Lipid Res. 51: 1770- 1780). É importante ressaltar que, apesar de um defeito na lactação em camundongos fêmeas Dgat1 - / -, estes animais retêm a capacida- de de sintetizar TG, sugerindo a existência de outras enzimas DGAT. Esta observação e o isolamento de uma segunda DGAT do fungo Mor- tierella rammaniana levaram à identificação e caracterização da DGAT?2 (Yen, C. L. et.al. 2008. J. Lipid Res. 49: 2283-2301).

[0009] A DGAT? é altamente expressa no fígado e no tecido adi- poso, e ao contrário da DGAT1, apresenta uma excelente especifici- dade de substrato para DAG (Yen, C.L., 2008). A exclusão do gene DGAT?2 em roedores resulta em crescimento intrauterino defeituoso, lipemia grave, função de barreira cutânea prejudicada e morte pós- natal precoce (Stone, S. J. et. al. 2004. J. Biol. Chem. 279:11767- 11776). Devido à letalidade causada pela perda da DGAT2, grande parte de nossa compreensão do papel fisiológico da DGAT?2 deriva de estudos realizados com oligonucleotídeos anti-senso (ASO) em mode-

los de roedores de doença metabólica. Nesse cenário, a inibição hepá- tica da DGAT2 resultou em melhora do perfil lipoprotéico no plasma (diminuição do colesterol total e TG) e redução da carga lipídica hepá- tica, acompanhada de melhora da sensibilidade à insulina e do contro- le da glicemia de corpo inteiro (Liu, Y. et.al. 2008. Biochim. Biophys. Acta 1781: 97-104; Choi, C. S. et.al. 2007. J. Biol. Chem. 282: 22678- 22688; Yu, X. X. et.al. 2005. Hepatology 42: 362-371). Embora os me- canismos moleculares subjacentes a essas observações não estejam totalmente elucidados, é evidente que a supressão da DGAT? resulta em uma regulação negativa da expressão de vários genes que codifi- cam proteínas envolvidas na lipogênese, incluindo proteínas de liga- ção de elementos reguladores de esterol 1c (SREBP1c) e estearoil CoA-desaturase 1 (SCD1) (Choi, 2007; Yu, 2005). Paralelamente, as vias oxidativas são induzidas, conforme evidenciado pelo aumento da expressão de genes como a carnitina palmitoil transferase 1 (CPT1) (Choi , 2007). O resultado líquido dessas alterações é a diminuição dos níveis de DAG hepática e lipídio TG, o que, por sua vez, leva a uma melhora da capacidade de resposta à insulina no fígado. Além disso, a inibição da DGAT2 suprime a secreção hepática de TG VLDL e a redução dos níveis circulantes de colesterol. Finalmente, os níveis plasmáticos de apolipoproteína B (APOB) foram suprimidos, possivel- mente devido à diminuição do fornecimento de TG para lipidação da recém-sintetizada proteína APOB (Liu, 2008; Yu, 2005). Os efeitos be- néficos da inibição da DGAT?2 tanto no controle glicêmico quanto no perfil do colesterol plasmático sugerem que esse alvo pode ser valioso no tratamento de doenças metabólicas (Choi , 2007). Além disso, a observação de que a supressão da atividade da DGAT2 resulta em redução do acúmulo de lipídios hepáticos sugere que os inibidores dessa enzima podem ter utilidade no tratamento da NASH.

[0010] Tendo em conta o conteúdo anterior, existe uma necessi-

dade de medicamentos, por exemplo, medicamentos orais, contendo uma combinação de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra- hidrofuran-3-il)pirimidina-S5-carboxamida (inibidor da DGAT2), ou seu sal farmaceuticamente aceitável, e, na mesma composição ou uma composição diferente, ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidro- espiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Dbenzoico (inibidor da ACCI), ou seu sal farmaceuticamente aceitável. As combi- nações específicas descritas neste documento satisfazem as necessi- dades existentes.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0011] A presente invenção refere-se uma composição farmacêu- tica — compreendendo — (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N- (tetra-hidrofuran-3-il)pirididina-5-carboxamida, ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável, em combinação com pelo menos o ácido 4-(4- (1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"- carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamen- te aceitável, cada um deles presente em quantidades terapeuticamen- te eficazes, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitá- vel.

[0012] A invenção também se refere a uma composição farmacêu- tica — compreendendo — (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N- (tetra-hidrofuran-3-il)pirididina-5-carboxamida, ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável, e ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra- hidrospiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0013] A invenção também se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, do- ença hepática gordurosa não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose hepática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com carci- noma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o referido método inclui administrar ao paciente em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3- etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5- carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combi- nação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1- isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"- carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável.

[0014] A invenção se refere ainda a um método de redução de ao menos um ponto na gravidade da doença hepática gordurosa não al- coólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato- hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da ati- vidade da esteato-hepatite não alcoólica, redução da atividade da do- ença esteato-hepatite não alcoólica ou redução das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, com- preendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5- ((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-S5- carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combi- nação com pelo menos uma quantidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4"- piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um sal farma- ceuticamente aceitável.

[0015] A invenção também se refere a um método de tratamento do fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, estea- to-hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose hepática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose ou esteato- hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um ser hu- mano em necessidade de tal tratamento, uma quantidade terapeuti- camente eficaz de uma primeira e uma segunda composições e opcio- nalmente uma terceira composição, em que: i. a primeira composição é composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um excipiente farmaceuti- camente aceitável; ii. a segunda composição é composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, e um excipiente farmaceuticamente aceitável; e iii. a terceira composição é composta por um agente farmacêutico se- lecionado do grupo constituído por um agente anti-inflamatório, um agente antidiabético, um agente antifibrótico, um agente antiesteatióti- co, um agente modulante de colesterol/lipídios, um agente antidiabéti- co e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0016] A invenção também se refere a um método de tratamento do fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, estea- to-hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose hepática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose ou esteato- hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um ser hu- mano em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeutica- mente eficaz de duas composições farmacêuticas diferentes compre- endendo: i. uma primeira composição que inclui (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, presente em uma quantidade terapeuticamente eficaz, em mistura com um excipiente farmaceutica-

mente aceitável; ii. uma segunda composição que inclui ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, presente em uma quantidade terapeuticamente eficaz, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável; e opcionalmente; iii. uma terceira composição composta por ao menos um agente far- macêutico adicional selecionado do grupo constituído por um agonista do GLP-1R, um inibidor KHK ou um agonista FXR, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0017] A invenção também se refere a um método de tratamento da insuficiência cardíaca, insuficiência cardíaca congestiva, doença coronariana, doença vascular periférica, doença renovascular, hiper- tensão pulmonar, vasculite, síndromes coronarianas agudas e modifi- cação do risco cardiovascular, compreendendo administrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuti- camente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra- hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, em combinação com ao menos uma quantidade tera- peuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra- hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il) benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0018] A invenção também se refere a um método de tratamento da obesidade, diabetes tipo |, diabetes mellitus tipo Il, diabetes tipo | idiopático (tipo Ib), diabetes autoimune latente em adultos (LADA), di- abetes tipo 2 de início precoce (EOD), diabetes atípico com início na adolescência (YOAD), diabetes do adulto jovem (MODY), diabetes re- lacionado com a desnutrição, diabetes gestacional, doença coronaria- na, acidente vascular cerebral isquêmico, re-estenose após angioplas- tia, doença vascular periférica, claudicação intermitente, infarto do mi-

ocárdio, dislipidemia, lipemia pós-prandial, condições de tolerância à glicose prejudicada (IGT), condições de glicemia de jejum prejudicada, acidose metabólica, cetose, artrite, retinopatia diabética, degeneração macular, catarata, nefropatia diabética, glomeruloesclerose, insuficiên- cia renal crônica, neuropatia diabética, síndrome metabólica, síndrome X, hiperglicemia, hiperinsulinemia, hipertrigliceridemia, resistência à insulina, metabolismo glicêmico comprometido, distúrbios da pele e do tecido conjuntivo, ulcerações do pé e colite ulcerativa, disfunção endo- telial e comprometimento da complacência vascular, hiperapobetalipo- proteinemia B, e a doença da urina em xarope de bordo que compre- ende administrar a um ser humano em necessidade desse tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com ao me- nos uma quantidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopro- pil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)- 6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel.

[0019] A invenção também se refere a um método de tratamento de carcinoma hepatocelular, carcinoma renal de células claras, carci- noma de células escamosas da cabeça e do pescoço, adenocarcino- ma colorretal, mesotelioma, adenocarcinoma do estômago, carcinoma adrenocortical, carcinoma papilar de células renais, carcinoma cervical e endocervical, carcinoma urotelial da bexiga, adenocarcinoma do pulmão que compreende administrar a um ser humano em necessida- de de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de (S)-2- (5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina- 5-carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em com- binação com ao menos uma quantidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4"-

piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0020] Deve ser entendido que tanto a descrição geral acima quanto a descrição detalhada a seguir são apenas exemplificativas e explicativas, e não são restritivas da invenção como reivindicada.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0021] A Figura 1 é um padrão característico da difração de pó de raios-X mostrando a Forma cristalina 1 do Exemplo 1 do Composto DGAT?2i (Eixo Vertical: Intensidade (CPS); Eixo Horizontal: dois teta (graus)).

[0022] A Figura 2 é um padrão característico da difração de pó de raios-X mostrando a Forma cristalina 2 do Exemplo 1 do Composto DGAT?2i (Eixo Vertical: Intensidade (CPS); Eixo Horizontal: dois teta (graus)).

[0023] A Figura 3 mostra um padrão PXRD ilustrativo da Forma 1 do Composto A, realizado em um difratômetro Bruker AXS D4 Endea- vour equipado com uma fonte de radiação de Cu.

[0024] A Figura 4 mostra um espectro Raman ilustrativo da Forma 1 do Composto A, coletado usando um acessório Nicolet NXR FT- Raman preso à bancada FT-IR.

[0025] A Figura 5 mostra um padrão *ºC ssNMR ilustrativo da Forma 1 do Composto A, conduzido em uma sonda CPMAS Bruker- BioSpin posicionada em um espectrômetro RMN Bruker-BioSpin Avance Ill de 500 MHz (frequência de *H).

[0026] A Figura 6 mostra um padrão PXRD ilustrativo da Forma 2 do Composto A, realizado em um difratômetro Bruker AXS D4 Endea- vour equipado com uma fonte de radiação de Cu.

[0027] A Figura 7 mostra um espectro Raman ilustrativo da Forma 2 do Composto A, coletado usando um acessório Nicolet NXR FT- Raman preso à bancada FT-IR.

[0028] A Figura 8 mostra um padrão *ºC ssNMR ilustrativo da Forma 2 do Composto A, conduzido em uma sonda CPMAS Bruker- BioSpin posicionada em um espectrômetro RMN Bruker-BioSpin Avance Ill de 500 MHz (frequência de *H).

[0029] A Figura 9 mostra uma estrutura de cristal único ilustrativa da Forma 2 do Composto A.

[0030] A Figura 10 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre os níveis de triglicerídeos no plasma em ratos Sprague Dawley alimen- tados com a dieta ocidental, medidos no estado alimentado.

[0031] A Figura 11 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre os níveis de triglicerídeos no plasma em ratos Sprague Dawley alimen- tados com a dieta ocidental medidos no estado de jejum.

[0032] A Figura 12 resume o efeito da administração do Composto A e Composto D como monoterapia e em combinação na localização nuclear SREBP-1 em ratos alimentados com a dieta ocidental.

[0033] A Figura 13 resume o efeito da administração do Composto A e Composto D como monoterapia e em combinação sobre a expres- são hepática de genes lipogênicos em ratos alimentados com a dieta ocidental, especificamente a acetil-CoA carboxilase (ACC1).

[0034] A Figura 14 resume o efeito da administração do Composto A e Composto D como monoterapia e em combinação sobre a expres- são hepática de genes lipogênicos em ratos alimentados com a dieta ocidental, especificamente a ácido graxo sintase (FASN).

[0035] A Figura 15 resume o efeito da administração do Composto A e Composto D como monoterapia e em combinação sobre a expres- são hepática de genes lipogênicos em ratos alimentados com a dieta ocidental, especificamente a esterol-CoA desaturase (SCD1).

[0036] A Figura 16 resume o efeito da administração do Composto

A e Composto D como monoterapia e em combinação sobre a expres- são hepática de genes lipogênicos em ratos alimentados com a dieta ocidental, especificamente a proteína de ligação do elemento de regu- lação do esterol 1c (SREBP-1c).

[0037] A Figura 17 resume o efeito da administração do Composto A e Composto D como monoterapia e em combinação sobre a expres- são hepática de genes lipogênicos em ratos alimentados com a dieta ocidental, especificamente a pró-proteína convertase subtilisina / kexi- na tipo 9 (PCSK9).

[0038] A Figura 18 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre os níveis hepáticos de triglicerídeos em ratos Sprague Dawley alimen- tados com a dieta ocidental.

[0039] A figura 19 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre a elasticidade do fígado, um marcador de inflamação hepática e fibrose, em ratos Wistar Hann machos alimentados com dieta hiperlipídica de- ficiente em colina (CDAHFD).

[0040] A Figura 20 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre a imuno-histoquímica da alfa-actina do músculo liso (ASMA) hepática, um marcador da ativação de miofibroblastos e fibrogênese, em ratos Wistar Hann machos alimentados com CDAHFD.

[0041] A Figura 21 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre a coloração hepática com Picosirius Red em ratos Wistar Hann machos alimentados com a dieta CDAHFD.

[0042] A Figura 22 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre a expressão hepática de genes da alfa-actina do músculo liso (aASMA)

em ratos Wistar Hann machos alimentados com CDAHFD.

[0043] A Figura 23 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre a expressão hepática de genes 1A1 para colágeno em ratos Wistar Hann machos alimentados com CDAHFD.

[0044] A Figura 24 resume os efeitos da administração oral como monoterapia e em combinação do Composto A e Composto D sobre a coloração da molécula adaptadora de ligação ao cálcio ionizado 1 em ratos Wistar Hann machos alimentados com a dieta CDAHFD.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0045] A invenção pode ser mais facilmente entendida por referên- cia à descrição detalhada a seguir das modalidades exemplificativas invenção e os exemplos aqui incluídos.

[0046] Deve ser entendido que a presente invenção não se limita a determinados métodos sintéticos de produção que podem, obviamen- te, variar. Também deve ser entendido que a terminologia aqui usada tem a finalidade de descrever as modalidades particulares apenas, e não deve ser considerada limitante da presente invenção. Neste rela- tório descritivo e nas reivindicações que seguem, referência será feita a uma série de termos que devem ser definidos como tendo os signifi- cados a seguir.

[0047] Conforme utilizado neste relatório descritivo, "um" ou "uma" pode significar um ou mais. Conforme utilizado em uma ou mais reivindicações, quando utilizadas em conjunto com a palavra "compre- ender", as palavras "um" ou "uma" podem significar uma ou mais de uma. Como usado aqui, "outro" pode significar pelo menos um segun- do ou mais.

[0048] O termo "cerca de" se refere a um termo relativo que deno- ta uma aproximação de mais ou menos 10% do valor nominal a que se refere, em uma modalidade, a mais ou menos 5%, em outra modalida-

de, a mais ou menos 2%. Para o campo desta descrição, esse nível de aproximação é apropriado, a menos que o valor seja especificamente declarado como exigindo um intervalo mais apertado.

[0049] "Compostos", quando utilizados neste documento, incluem qualquer derivado ou variação farmaceuticamente aceitável, incluindo os isômeros conformacionais (por exemplo, os isômeros cis e trans) e todos os isômeros ópticos (por exemplo, enantiômeros e diastereôme- ros), misturas racêmicas, diastereoméricas e outras misturas desses isômeros, bem como solvatos, hidratos, isomórficos, polimórficos, tautômeros, ésteres, formas salinas e pró-fármacos. A expressão "pró- fármaco" se refere a compostos que são precursores de fármacos que, após a administração, liberam o fármaco in vivo através de algum pro- cesso químico ou fisiológico (por exemplo, um pró-fármaco sendo le- vado ao pH fisiológico ou através da ação enzimática é convertido na forma de fármaco desejada). Pró-fármacos exemplificativos mediante a liberação por clivagem do ácido livre correspondente, e esses resí- duos de formação de éster hidrolisáveis dos compostos da invenção, incluem, mas não se limitam àqueles que possuem uma porção carbo- xila, em que o hidrogênio livre é substituído por (C1-Ca)alquila, (C2- Cr7)alcanoiloximetila, 1-(alcanoilóxi)etila tendo de 4 a 9 átomos de car- bono, 1-metil-1-(alcanoilóxi)-etila tendo de 5 a 10 átomos de carbono, alcoxicarboniloximetila tendo de 3 a 6 átomos de carbono, 1-(alcoxi- carbonilóxi)etila tendo de 4 a 7 átomos de carbono, 1-metil-1-(alcoxi- carbonilóxi)etila tendo de 5 a 8 átomos de carbono, N-(alcoxicar- bonil)aminometil tendo de 3 a 9 átomos de carbono, 1-(N-(alcoxicar- bonil)amino)etila tendo de 4 a 10 átomos de carbono, 3-ftalidila, 4- crotonolactonila, gama-butirolacton-4-ila, di-N,N-(C1-C2)alquilamino(C>2- C3)alquila (como B-dimetilaminoetil), carbamoil-(C1-C2)alquila, N,N-di (C1-C2)alquilcarbamoil-(C1-C2)alquila e piperidina-, pirrolidino- ou mor- folino(C2-C3)alquila.

[0050] Como usado aqui, uma ponta de seta " / " ou linha ondula- da" Fam indica um ponto de fixação de um substituinte por outro grupo.

[0051] "Paciente" se refere a animais de sangue quente, por exemplo, porquinhos-da-Índia, camundongos, ratos, gerbils, gatos, co- elhos, cães, bovinos, cabras, ovelhas, cavalos, macacos, chimpanzés e seres humanos. Um "mamífero" é um paciente.

[0052] Por "farmaceuticamente aceitável", deve-se entender que a substância ou composição deve ser compatível química e/ou toxicolo- gicamente com os outros ingredientes que constituem uma formulação e/ou o mamífero com ela tratado.

[0053] Conforme aqui utilizado, os termos a seguir têm o significa- do geral para a administração de agentes farmacêuticos: QD significa uma vez ao dia e BID significa duas vezes ao dia.

[0054] Como aqui utilizado, as expressões "solvente inerte em re- ação" e "solvente inerte" se referem a um solvente ou a uma mistura deles que não interage com os materiais de partida, reagentes, inter- mediários ou produtos de uma forma que afete adversamente o rendi- mento do produto pretendido.

[0055] Conforme aqui utilizado, o termo "seletividade" ou "seletivo" se refere a um maior efeito de um composto em um primeiro ensaio, em comparação ao efeito do mesmo composto em um segundo en- saio. Por exemplo, em compostos "seletivos para o intestino", o primei- ro ensaio é para a meia-vida do composto no intestino e o segundo ensaio é para a meia-vida do composto no fígado.

[0056] "Quantidade terapeuticamente eficaz" significa uma quanti- dade de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico (Composto A) em combinação com uma quantidade de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida (Composto D), opcionalmente em combinação com uma quantidade de outro(s) composto(s), que trata a doença, condição ou distúrbio par- ticular aqui descrito.

[0057] O ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro [in- dazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Dbenzoico é um inibidor seletivo da ACC e foi preparado como ácido livre no Exemplo 9 do Documento US 8,859,577, que é a fase nacional norte-americana do Pedido de Patente Internacional nº POT/IB2011/054119, todos aqui incorporados por referência em suas totalidades para todos os fins. As formas cristalinas do composto são descritas no Pedido de Patente Internacional nº PCT/IB2018/058966, publicado como WO 2019/102311 em 31 de maio de 2019.

[0058] (S)-2-(5-((3-Etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofu- ran-3-il)pirimidina-5-carboxamidaé um inibidor da DGAT?2 e é o Exem- plo 1 do Pedido de Patente US Publicado nº US 2018-0051012A1, que é aqui incorporado por referência em sua totalidade para todos os fins.

[0059] O termo "tratando", "tratar" ou "tratamento", tal como aqui utilizado, abrange o tratamento preventivo, ou seja, profilático; o trata- mento paliativo, ou seja, atenuação, alívio ou retardo do avanço da doença (ou condição) do paciente ou qualquer dano tecidual associa- do à doença (ou condição); e a reversão, em que a doença (ou condi- ção) do paciente não é apenas aliviada, mas qualquer dano tecidual associado à doença (ou condição) é colocado em um estado melhor do que quando o tratamento foi iniciado. Este último pode ocorrer, por exemplo e não limitação, a partir de qualquer um ou mais dentre os seguintes: demonstração da resolução de NASH e/ou a partir de uma melhora na classificação da fibrose com base na biopsia hepática; menor incidência de progressão para cirrose, carcinoma hepatocelular e/ou outros resultados relacionados ao fígado; uma redução ou melho- ra do nível sérico ou imagiologia com base em marcadores da ativida- de da esteato-hepatite não alcoólica; redução ou melhora da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica; ou redução das consequên- cias médicas da esteato-hepatite não alcoólica.

[0060] Parece que a administração de um inibidor da ACC pode ter efeitos positivos sobre a redução dos TGs hepáticos e potencial- mente outros efeitos benéficos no tratamento da NASH. Aumentos nos níveis circulantes de TG têm sido relatados como uma consequência mecanicista da inibição da ACC hepática (Kim et al, 2017), embora doses de inibidores da ACC que inibem parcialmente a DNL possam não produzir elevações em TGs circulantes (Bergman et al., (2018) J. de Hepatology, volume 68, S582). O Documento WOZ2016/ 112305 fornece métodos de tratamento, estabilização ou diminuição da gravi- dade ou progressão de uma doença hepática gordurosa não alcoólica usando um inibidor de ACC sozinho ou com um ou mais agentes tera- pêuticos adicionais.

[0061] Descobriu-se que a administração de ácido 4-(4-(1-isopro- pil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)- 6-metoxipiridin-2-il)benzoico, opcionalmente administrado como um sal farmaceuticamente aceitável, tem potencial para resultar em elevações em TGs circulantes (geralmente medidos do plasma) em ratos Spra- gue Dawley alimentados com a dieta ocidental, como foi observado em seres humanos.

[0062] Os compostos da invenção podem conter centros assimé- tricos ou quirais e, portanto, existem em diferentes formas estereoiso- méricas. Salvo especificação em contrário, há a intenção de que todas as formas estereoisoméricas dos compostos da invenção, bem como as suas misturas, incluindo as misturas racêmicas, façam parte da in- venção. Além disso, a invenção abrange todos os isômeros geométri- cos e posicionais. Por exemplo, se um composto da invenção incorpo- rar uma ligação dupla ou um anel fundido, ambas as formas cis- e trans-, hem como suas misturas, são abrangidas pelo âmbito da in-

venção.

[0063] Os compostos quirais da invenção (e seus precursores qui- rais) podem ser obtidos em forma enantiomericamente enriquecida usando cromatografia, normalmente cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) ou cromatografia em fluido supercrítico (SFC), em uma resina com uma fase estacionária assimétrica e com uma fase móvel composta por um hidrocarboneto, normalmente heptano ou he- xano, contendo de O a 50% de isopropanol, normalmente de 2 a 20%, e de O a 5% de alquilamina, normalmente 0,1% de dietilamina (DEA) ou isopropilamina. A concentração do eluente proporciona a mistura enriquecida.

[0064] As misturas diastereoméricas podem ser separadas em seus diastereoisômeros individuais com base em suas diferenças físi- co-químicas por métodos bem conhecidos por aqueles qualificados na arte, como por cromatografia e/ou cristalização fracionária. Os enanti- ômeros podem ser separados convertendo-se a mistura enantiomérica em uma mistura diastereomérica por reação com um composto opti- camente ativo apropriado (por exemplo, auxiliar quiral, como um álcool quiral ou cloreto de ácido de Mosher), separando os diastereoisômeros e convertendo (por exemplo, hidrolisando) os diastereoisômeros indi- viduais nos enantiômeros puros correspondentes. Os enantiômeros também podem ser separados por meio do uso de uma coluna de HPLC quiral. Em alternativa, os estereoisômeros específicos podem ser sintetizados utilizando um material de partida oticamente ativo, por síntese assimétrica utilizando reagentes, substratos, catalisadores ou solventes oticamente ativos, ou convertendo um estereoisômero no outro por transformação assimétrica.

[0065] Quando os compostos da invenção possuem dois ou mais centros estereogênicos e a estereoquímica absoluta ou relativa é dada no nome, as designações R e S se referem, respectivamente, a cada centro estereogênico em ordem numérica crescente (1, 2, 3, etc.), de acordo com os esquemas numéricos IUPAC convencionais para cada molécula. Se os compostos da invenção possuírem um ou mais cen- tros estereogênicos e não for dada nenhuma estereoquímica no nome ou estrutura, entende-se que o nome ou a estrutura se destinam a abranger todas as formas do composto, incluindo a forma racêmica.

[0066] Também é possível que os intermediários e compostos da invenção possam existir em diferentes formas tautoméricas, e todas essas formas são abrangidas pelo escopo da invenção. O termo "tautômero" ou "forma tautomérica" se refere a isômeros estruturais de diferentes energias, que podem ser convertidos um no outro por meio de uma barreira de baixa energia. Por exemplo, os tautômeros de pró- tons (também conhecidos como tautômeros prototrópicos) incluem in- terconversões via migração de um próton, como isomerizações keto- enol e imina-enamina.

[0067] Os tautômeros de valência incluem interconversões por re- organização de alguns dos elétrons de ligação.

[0068] Incluídos no âmbito da invenção dos compostos reivindica- dos estão todos os estereoisômeros, isômeros geométricos e formas tautoméricas dos compostos da invenção, incluindo compostos que apresentam mais de um tipo de isomerismo e misturas de um ou mais dos mesmos. Também são incluídos sais de adição de ácido ou de base, nos quais o contra-íon é oticamente ativo, por exemplo, D- lactato ou L-lisina, ou racêmico, por exemplo, DL-tartarato ou DL- arginina.

[0069] A invenção inclui todos os compostos isotopicamente mar- cados e farmaceuticamente aceitáveis da invenção, em que um ou mais átomos são substituídos por átomos com o mesmo número atô- mico, porém uma massa atômica ou um número de massa diferente da massa atômica ou do número de massa normalmente encontrado na natureza.

[0070] Exemplos de isótopos adequados para inclusão nos com- postos da invenção incluem isótopos de hidrogênio, como ?H e *?H; carbono, como *'C, *3C e *“C; cloro, como CI; flúor, como *F; iodo, como 1?3|, 124) e 151; nitrogênio, como *?N e **N; oxigênio, como *ºO, 17Q0 e *8O; fósforo, como ??P; e enxofre, como *S.

[0071] Alguns compostos isotopicamente marcados da invenção, por exemplo, aqueles que incorporam um isótopo radioativo, são úteis em estudos de distribuição tecidular dos fármacos e/ou substratos. Os isótopos radioativos trítio, ou seja, *H, e o carbono-14, ou seja, *C, são particularmente úteis para este efeito, tendo em conta a sua facili- dade de incorporação e os rápidos meios de detecção.

[0072] A substituição por isótopos mais pesados, como o deutério, ou seja, 2H, pode proporcionar determinadas vantagens terapêuticas resultantes de uma maior estabilidade metabólica, por exemplo, au- mento da meia-vida in vivo ou redução dos requisitos de dosagem, podendo, portanto, ser preferida em algumas circunstâncias.

[0073] A substituição por isótopos emissores de pósitrons, como 11C,18F,15O0 e **N, pode ser útil em estudos de Tomografia de Emissão de Pósitrons (PET) para exame da ocupação do receptor de substrato.

[0074] Os compostos da invenção marcados isotopicamente po- dem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conheci- das para as pessoas qualificadas na arte ou por processos análogos aos descritos nos Exemplos e Preparações anexos, utilizando um rea- gente isotopicamente marcado adequado, em vez do reagente não marcado anteriormente utilizado.

[0075] Os compostos da invenção podem ser isolados e utilizados essencialmente, ou, quando possível, sob a forma do seu sal farma- ceuticamente aceitável. O termo "sais" se refere aos sais inorgânicos e orgânicos de um composto da invenção. Esses sais podem ser prepa-

rados in situ durante o isolamento final e a purificação de um compos- to, ou tratando separadamente o composto com um ácido ou base or- gânica ou inorgânica adequada e isolando o sal assim formado. Os ácidos utilizados para preparar os sais de adição de ácido farmaceuti- camente aceitáveis dos compostos de base acima referidos desta in- venção são aqueles que formam sais de adição de ácido não tóxicos (isto é, sais contendo ânions farmacologicamente aceitáveis, como os sais de cloridrato, bromidrato, iodidrato, nitrato, sulfato, bissulfato, fos- fato, fosfato ácido, acetato, lactato, citrato, citrato ácido, tartarato, bitar- tarato, succinato, maleato, fumarato, gluconato, sacarato, benzoato, metanossulfonato, etanossulfonato, benzenossulfonato, naftilato, mesi- lato, gluco-heptonato, lactobionato, laurilsulfonatom hexafluorofosfato, benzeno sulfonato, torilato, formiato, trifluoroacetato, oxalato, besilato, palmitiato, pamoato, malonato, estearato, laurato, malato, borato, p- toluenossulfonato e pamoato (ou seja, 1,1'-metileno-bis-(2-hidróxi- 3- naftoato)).

[0076] A invenção também se refere a sais de adição de base dos compostos da invenção. As bases químicas que podem ser utilizadas como reagentes para preparar sais de base farmaceuticamente acei- táveis dos compostos da invenção que são de natureza ácida são as que formam sais de base não tóxicos com esses compostos. Esses sais de base não tóxicos incluem, entre outros, os derivados desses cátions farmacologicamente aceitáveis, como cátions de metais alcali- nos (por exemplo, lítio, potássio e sódio) e cátionss de metais alcalino- terrosos (por exemplo, cálcio e magnésio), amônio ou sais de adição de amina solúveis em água, como N-metilglucamina (meglumina), te- trametilamônio, tetraetilamônio, metilamina, dimetilamina, trimetilami- na, trietilamina, etilamina e alcanolamônio inferior e outros sais de ba- se de aminas orgânicas farmaceuticamente aceitáveis. Veja, por exemplo, Berge et al. J. Pharm. Sci. 66, 1-19 (1977).

[0077] Alguns compostos da invenção podem existir em mais de uma forma de cristal (geralmente referidos como "polimorfos"). Os po- limorfos podem ser preparados por cristalização em várias condições, por exemplo, usando diferentes solventes ou diferentes misturas de solventes para recristalização; cristalização a diferentes temperaturas; e/ou vários modos de arrefecimento, variando de arrefecimento muito rápido a muito lento durante a cristalização. Polimorfismos também podem ser obtidos por aquecimento ou fusão do composto da inven- ção, seguido de resfriamento gradual ou rápido. A presença de poli- morfismos pode ser determinada por espectroscopia RMN de sonda sólida, espectroscopia IR, calorimetria exploratória diferencial, difração de pó de raios-X ou outras técnicas.

[0078] Em uma modalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica compreendendo (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirididina-S-carboxamida, — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com pelo menos o ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, cada um deles presente em quantidades terapeuticamente eficazes, em mistura com um excipiente farmaceuti- camente aceitável.

[0079] Em outra modalidade, a composição inclui ainda pelo me- nos um agente farmacêutico adicional selecionado do grupo que con- siste em um agente anti-inflamatório, um agente anti-diabético e um agente modulante de colesterol/lipídios.

[0080] Em outra modalidade, a composição inclui ainda pelo me- nos um agente farmacêutico adicional selecionado a partir do grupo constituído por ácido [(1R,58,6R)-3-(2-[(2S)-2-metilazetidin-1-i]-6- (triluorometil)pirimidin-4-il)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilJacético; ácido 2- [(1R,3R,58)-3-((S-ciclopropil-3-[2-(trifluorometóxi)fenil]-1,2-0xazol-4-il)

metóxi)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-il]-4-fluoro-1,3-benzotiazol-6-carbo- xílico ou ácido 2-[(4-(6-[(4-ciano-2-fluorobenzil )óxilpiridin-2-il)piperidin- 1-il)]metil]-1-[(2S)-oxetan-2-ilmetil]-1 H-benzimidazol|-6-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0081] Em outra modalidade, a composição farmacêutica contém (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il) piri- midina-5-carboxamida como um sólido cristalino de estrutura: à o

AA O ”

N ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0082] Em uma outra incorporação, o sólido cristalino tem um pa- drão de difração de pó de raios-X compreendendo valores 2-teta de (radiação CuKa , comprimento de onda de 1,54056 À) 5,3 + 0,2; 7,7 + 0,2 e 15,4 + 0,2.

[0083] Em outra modalidade, o sólido cristalino tem um padrão de difração de pó de raios-X compreendendo valores 2-teta de (radiação CuKa , comprimento de onda de 1, 54056À) 6,5 + 0,2; 9,3 + 0,2 e 13,6 + 0,2.

[0084] Em outra modalidade, a composição farmacêutica contém ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4'-pipe- ridina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável, como um sólido cristalino de estrutura:

NA o oH Oo ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0085] Em outra modalidade, o sólido cristalino é o sal de 2-amino- 2-(hidroximetil)propano-1,3-diol de 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra- hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il) benzoico.

[0086] Em outra modalidade, a composição farmacêutica inclui ainda pelo menos um agente farmacêutico adicional selecionado a partir do grupo constituído por ácido [(1R,58S,6R)-3-(2-[(2S)-2-metila- zetidin-1-i1]-6-(trifluorometil)pirimidin-4-il)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-il] acético; ácido 2-[(1R,3R,5S)-3-(f5-ciclopropil-3-[2-(trifluorometóxi) fe- nil]-1,2-0xazol-4-ilYmetóxi)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-il]-4-fluoro-1,3- benzotiazol-6-carboxílico ou ácido 2-[(4-[6-[(4-ciano-2-fluorobenzil) óxi] piridin-2-il)pieridin-1-il)]metil]-1-[(2S)-oxetan-2-ilmetil]-1H-benzimidazol|- 6-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0087] Em outra modalidade, a invenção também se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com carcinoma hepatocelular ou com uma doença rela- cionada ao metabolismo, o método compreendendo administrar a um- paciente em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuti- camente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra- hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, em combinação com ao menos uma quantidade tera- peuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hi- droespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)ben- zoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0088] Em uma modalidade adicional, a doença ou a condição é o fígado gorduroso. Em outra modalidade, a doença ou condição é a do- ença hepática gordurosa não alcoólica. Em outra modalidade, a doen-

ça ou condição é a esteato-hepatite não alcoólica. Em outra modalida- de, a doença ou condição é a esteato-hepatite não alcoólica com fibro- se hepática. Em outra modalidade, a doença ou condição é a esteato- hepatite não alcoólica com cirrose. Em outra modalidade, a doença ou condição é a esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carci- noma hepatocelular. Em outra modalidade, a doença ou condição é a esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com uma doença relacio- nada ao metabolismo.

[0089] Em outra modalidade, o método inclui pelo menos outro agente farmacêutico, em que o agente é selecionado a partir do grupo constituído por um inibidor da acetil-CoA carboxilase (ACC), um inibi- dor da diacilglicerol O-aciltransferase 1 (DGAT-1), inibidores da mono- acilglicerol O-aciltransferase, um inibidor da fosfodiesterase (PDE)-10, um ativador de AMPK, uma sulfonilureia, uma meglitinida, um inibidor da a-amilase, um inibidor da a-glicosídeo hidrolase, um inibidor da a- glucosidase, um agonista de PPARy, um agonista de PPAR a/y, uma biguanida, um modulador de peptídeo semelhante ao glucagon 1 (GLP-1), liraglutida, albiglutida, exenatida, albiglutida, lixisenatida, du- laglutida, semaglutida, um inibidor da proteína tirosina fosfatase-1B (PTP-1B), ativador de SIRT-1, um inibidor da dipeptidil peptidase IV (DPP-IV), um secretagogo de insulina, um inibidor de oxidação de áci- do graxo, um antagonista A2, um inibidor de quinase amino-terminal c- jun (JNK), ativadores de glicoquinase (GKa), insulina, um mimético de insulina, um inibidor de glicogênio fosforilase, um agonista do receptor VPAC?, inibidores de SGLT2, um modulador de receptor de glucagon, moduladores de GPR119, derivados ou análogos de FGF21, modula- dores de receptor de TGR5, moduladores de receptor de GPBAR1, agonistas de GPR40, moduladores de GPR120, ativadores do receptor de ácido nicotínico de alta afinidade (HM74A), inibidores de SGLT1, inibidores ou moduladores das enzimas carnitina palmitoil transferase,

inibidores da frutose 1,6-difosfatase, inibidores da aldose redutase, inibidores do receptor mineralocorticoide, inibidores de TORC?2, inibi- dores de CCR2 e / ou CCRS5, inibidores das isoformas de PKC (por exemplo, PKCa, PKCB, PKCY), inibidores da ácido graxo sintetase, ini- bidores da serina palmitoil transferase, moduladores de GPR81, GPR39, GPR43, GPR41, GPR105, Kv1.3, proteína de ligação ao reti- nol 4, receptor de glicocorticoide, receptores de somatostatina, inibido- res ou moduladores de PDHK2 ou PDHKA, inibidores de MAP4KA4, moduladores da família IL1, incluindo IL1 beta, inibidores da HMG-CoA redutase, inibidores da esqualeno sintetase, fibratos, sequestrantes de ácido biliar, inibidores de ACAT, inibidores de MTP, inibidores de lipo- oxigenase, inibidores da absorção de colesterol, moduladores de PCSKS9, inibidores da proteína de transferência de Colesterol Esterifi- cado e moduladores de RXRalfa.

[0090] Em outra modalidade, o método inclui pelo menos outro agente farmacêutico, em que o agente é selecionado a partir do grupo constituído por cisteamina ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, cistamina ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um composto antioxidante, lecitina, complexo vitamínico B, preparações de sal biliar, um antagonista do receptor Canabinoide-1 (CB1), um agonista inverso do receptor Canabinoide-1 (CB1), um receptor ativado por proliferador de peroxissoma, reguladores de atividade, um composto benzotiazepi- na ou benzotiepina, um construção anti-senso de RNA para inibir a proteína tirosina fosfatase PTPRU, uma piperidina substituída ligada a heteroátomo e seus derivados, um derivado de azaciclopentano capaz de inibir a estearoil-coenzima alfa delta-9 desaturase, composto de acilamida com secretagogo ou atividade indutora de adiponectina, um composto de amônio quaternário, acetato de Glatiramer, proteínas de pentraxina, um inibidor da HMG-CoA redutase, n-acetil cisteína, com- posto de isoflavona, um antibiótico macrolídeo, um inibidor de galecti-

na, um anticorpo ou qualquer combinação desses.

[0091] Em outra modalidade, o método inclui ao menos um agente farmacêutico adicional, em que o agente é selecionado a partir do gru- po constituído por ácido [(1R,58,6R)-3-(2-[(2S)-2-metilazetidin-1-i]-6- (triluorometil)pirimidin-4-il)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilJacético; ácido 2- [(1R,3R,58)-3-((S-ciclopropil-3-[2-(trifluorometóxi)fenil]-1,2-0xazol-4-il) metóxi)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-il]-4-fluoro-1,3-benzotiazol-6-carbo- xílico ou ácido 2-[(4-(6-[(4-ciano-2-fluorobenzil )óxilpiridin-2-il)piperidin- 1-il)]metil]-1-[(2S)-oxetan-2-ilmetil]-1 H-benzimidazol|-6-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0092] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3- il)pirimidina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, em combinação com pelo menos uma quantidade terapeuticamen- te eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro [in- dazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Dbenzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0093] Em outra modalidade, o método inclui ao menos um agente farmacêutico adicional, em que o agente é selecionado a partir do gru- po constituído por ácido [(1R,58,6R)-3-(2-[(2S)-2-metilazetidin-1-i]-6- (triluorometil)pirimidin-4-il)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilJacético; ácido 2- [(1R,3R,58)-3-((S-ciclopropil-3-[2-(trifluorometóxi)fenil]-1,2-0xazol-4-il)

metóxi)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-il]-4-fluoro-1,3-benzotiazol-6-carbo- xílico ou ácido 2-[(4-(6-[(4-ciano-2-fluorobenzil )óxilpiridin-2-il)piperidin- 1-il)]metil]-1-[(2S)-oxetan-2-ilmetil]-1 H-benzimidazol|-6-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0094] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento do fígado gorduroso, doença hepática gorduro- sa não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose hepática, esteato-hepatite não alcoólica com cir- rose ou esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular em seres humanos, compreendendo a etapa de admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de duas composições farmacêuticas diferentes compreendendo: i. uma primeira composição que inclui (S)-2-(5-((3-etoxi- piridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina-5-carboxa- mida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, presente em uma quantidade terapeuticamente eficaz, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável; li. uma segunda composição que inclui ácido 4-(4-(1- isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-car- bonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, presente em uma quantidade terapeuticamente eficaz, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável; e opcional- mente; ill. uma terceira composição composta por ao menos um agente farmacêutico adicional selecionado a partir do grupo constituí- do por um agente anti-inflamatório, um agente antidiabético, um agen- te antifibrótico, um agente antiesteatiótico, um agente modulante de colesterol/lipídios, um agente antidiabético e um excipiente farmaceuti- camente aceitável.

[0095] Em outra modalidade, a referida primeira composição e a referida segunda composição são administradas simultaneamente. Em outra modalidade, a composição compreende a primeira composição, a segunda composição e a terceira composição.

[0096] Em outra modalidade, o método inclui uma terceira compo- sição, em que o pelo menos um agente farmacêutico adicional é sele- cionado a partir do grupo constituído por ácido [(1R,5S,6R)-3-(2-[(2S)- 2-metilazetidin-1-il]-6-(trifluorometil)pirimidin-4-i1)-3-azabiciclo[3.1.0] hex-6-ilJacético; ácido 2-[(1R,3R,58)-3-((5-ciclopropil-3-[2-(trifluoro- metóxi)fenil]-1,2-0xazol-4-il)metóxi)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-il]-4-flu- oro-1,3-benzotiazol-6-carboxílico ou ácido 2-[(4-[6-[(4-ciano-2-fluoro- benzil)óxilpiridin-2-il)pieridin-1-il)metil]-1-[(2S)-oxetan-2-ilmetil]-1H-ben- zimidazol-6-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0097] Em outra modalidade da presente invenção, (S)-2-(5-((3- etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirididina-5-car- boxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combina- ção com o ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro [in- dazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Dbenzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, está presente em uma composi- ção farmacêutica em uma quantidade terapeuticamente eficaz, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0098] Em outra modalidade da presente invenção, (S)-2-(5-((3- etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirididina-5- carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combi- nação com pelo menos o ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra- hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il) benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, está presente em uma composição farmacêutica em uma quantidade terapeutica- mente eficaz, em mistura com um excipiente farmaceuticamente acei- tável.

[0099] Em outra modalidade da presente invenção, a composição inclui ainda pelo menos um agente farmacêutico adicional selecionado do grupo constituído por um agonista do GLP-1R, um inibidor de KHK, um agonista de FXR, um agente anti-inflamatório, um agente antidia- bético, um agente antifibrótico, um agente antiesteatiótico e um agente modulante de colesterol/lipídios.

[00100] Em outra modalidade, o método de tratamento de uma do- ença, condição ou distúrbio metabólico ou relacionado ao metabolismo inclui a etapa de administrar a um paciente uma quantidade terapeuti- camente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra- hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, em combinação com o ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel.

[00101] Em outra modalidade, o método de tratamento de uma condição selecionada do grupo que consiste em hiperlipidemia, diabe- tes tipo |, diabetes mellitus tipo Il, diabetes tipo | idiopático (tipo |b), diabetes autoimune latente em adultos (LADA), diabetes tipo 2 de iní- cio precoce (EOD), diabetes atípico com início na adolescência (YO- AD), diabetes do adulto jovem (MODY), diabetes relacionado com a desnutrição, diabetes gestacional, doença coronariana, acidente vas- cular cerebral isquêmico, re-estenose após angioplastia, doença vas- cular periférica, claudicação intermitente, infarto do miocárdio (por exemplo, necrose e apoptose), dislipidemia, lipemia pós-prandial, con- dições de tolerância à glicose prejudicada (IGT), condições de glicemia de jejum prejudicada, acidose metabólica, cetose, artrite, obesidade, osteoporose, hipertensão, insuficiência cardíaca congestiva, hipertrofia ventricular esquerda, doença arterial periférica, retinopatia diabética, degeneração macular, catarata, nefropatia diabética, glomeruloescle-

rose, insuficiência renal crônica, neuropatia diabética, síndrome meta- bólica, síndrome X, síndrome pré-menstrual, doença cardíaca coroná- ria, angina de peito, trombose, aterosclerose, infarto do miocárdio, ataques isquêmicos transitórios, acidente vascular cerebral, restenose vascular, hiperglicemia, hiperinsulinemia, hiperlipidemia, hipertrigliceri- demia, resistência à insulina, metabolismo glicêmico comprometido, condições de tolerância à glicose prejudicada, condições de glicose plasmática de jejum prejudicada, obesidade, disfunção erétil, distúrbios da pele e do tecido conjuntivo, ulcerações do pé e colite ulcerativa, dis- função endotelial e comprometimento da complacência vascular, hipe- rapobetalipoproteinemia B, doença de Alzheimer, esquizofrenia, cogni- ção prejudicada, doença inflamatória do intestino, colite ulcerativa, do- ença de Crohn e síndrome do intestino irritável, esteato-hepatite não alcoólica (NASH), doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD) inclui a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do Composto A, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e uma quan- tidade terapeuticamente eficaz do Composto D, ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável.

[00102] Em outra modalidade, o método de tratamento de uma do- ença, condição ou distúrbio metabólico ou relacionado ao metabolismo inclui a etapa de administrar a um paciente em necessidade de tal tra- tamento pelo menos duas composições farmacêuticas separadas compreendendo: i. uma primeira composição que inclui (S)-2-(5-((3-etoxi- piridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina-5-carboxa- mida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, presente em uma quantidade terapeuticamente eficaz, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável; il. uma segunda composição que inclui ácido 4-(4-(1-iso- propil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carbo-

nil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, , ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, presente em uma quantidade terapeuticamente eficaz, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável; e opcional- mente; li. uma terceira composição composta por ao menos um agente farmacêutico adicional selecionado a partir do grupo constituí- do por um agonista do GLP-1R, um inibidor de KHK, um agente anti- inflamatório, um agente antidiabético, um agente antifibrótico, um agente antiesteatiótico, e um agente modulante de colesterol/lipídios e um agente antidiabético, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00103] —Aindaem uma modalidade adicional, o método da invenção é realizado quando a dita primeira composição, a dita segunda com- posição e a dita terceira composição são administradas simultanea- mente.

[00104] Em ainda outra encarnação, o método da invenção é reali- zado quando a primeira composição, a dita segunda composição, e a dita terceira composição são administradas sequencialmente e em qualquer ordem.

[00105] Em uma modalidade, quando três agentes são administra- dos, o primeiro agente e o segundo são administrados simultaneamen- te e o terceiro é administrado sequencialmente. Em outra modalidade, os três agentes separados são administrados sequencialmente e em qualquer ordem.

[00106] Em uma modalidade, quando são administrados três agen- tes, o terceiro agente compreende um agonista do GLP-1R. O agonis- ta do GLP-1R ácido 2-[(4-(6-[(4-ciano-2-fluorobenzil)óxi]piridin-2-il)pi- peridin-1-il)metil]-1-[(2S)-oxetan-2-ilmetil]-1 H-benzimidazol-6-carboxíli- co ou um seu sal farmaceuticamente aceitável [como seu sal 2-amino- 2-(hidroximetil)propano-1,3-diol, também conhecido como seu sal tris], bem como outros agonistas do GLP-1R e os métodos de produção desses compostos são descritos na Patente US nº 10,208,019, cuja descrição é aqui incorporada por referência em sua totalidade para todos os fins.

[00107] Em algumas modalidades, o agonista do GLP-1R é seleci- onado a partir do grupo constituído por liraglutida, albiglutida, exenati- da, albiglutida, lixisenatida, dulaglutiday semaglutida, HM15211, LY3298176, Medi-0382, NN-9924, TTP-054, TTP-273, efpeglenatida, aqueles descritos no Documento WO2018109607, e DIAST-X2.

[00108] O GLP-1 são um hormônio incretina com 30 aminoácidos de comprimento secretado pelas células L do intestino em resposta à ingestão de alimentos. Mostrou-se que o GLP-1 estimula a secreção de insulina de forma fisiológica e dependente de glicose, diminui a se- creção de glucagon, inibe o esvaziamento gástrico, diminui o apetite e estimula a proliferação de células beta. Em experimentos não clínicos, o GLP-1 promove a competência continuada de células beta, estimu- lando a transcrição de genes importantes para a secreção de insulina dependente de glicose e promovendo a neogênese de células beta (Meier, et al. Biodrugs. 2003;17(2):93-102).

[00109] Em um indivíduo saudável, O GLP-1 desempenha um papel importante na regulação dos níveis de glicose no sangue pós-prandial, estimulando a secreção de insulina dependente da glicose pelo pân- creas, resultando numa maior absorção de glicose na periferia. O GLP-1 também suprime a secreção de glucagon, levando à redução na produção de glucose hepática. Além disso, o GLP-1 retarda o es- vaziamento gástrico e diminui a motilidade do intestino delgado, retar- dando a absorção de alimentos. Em pessoas portadoras de T2DM, a elevação normal pós-prandial em GLP-1 é ausente ou reduzida (Vils- boll T, et al. Diabetes. 2001. 50; 609-613).

[00110] Holst (Physiol. Rev. 2007, 87, 1409) e Meier (Nat. Rev. En- docrinol. 2012, 8, 728) descrevem que os agonistas dos receptores de

GLP-1, como GLP-1, liraglutida e exendina-4, têm 3 principais ativida- des farmacológicas para melhorar o controle glicêmico em pacientes como os portadores de T2DM, reduzindo a glicose de jejum e pós- prandial (FPG e PPG): i) aumento da secreção de insulina dependente de glicose (melhora da primeira e segunda fases); ii) aumento da ativi- dade de supressão de glucagon em condições hiperglicêmicas; iii) re- tardo da taxa de esvaziamento gástrico, resultando em retardo na ab- sorção de glicose derivada de refeições.

[00111] Em outra modalidade, quando são administrados três agen- tes, o terceiro agente compreende um inibidor de KHK.

[00112] Em algumas modalidades, o inibidor de KHK é o ácido [(1R,58,6R)-3-(2-[(28S)-2-metilazetidin-1-il]-6-(trifluorometil )pirimidin-4- il)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilJacético ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis. O ácido [(1R,5S,6R)-3-(2-[(2S)-2-metilazetidin-1-il]-6-(triflu- orometil)pirimidin-4-il)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilJacético (incluindo uma forma cristalina de ácido livre) é um inibidor da cetoquinase e é des- crito no Exemplo 4 da Patente US nº 9,809,579, cuja descrição é aqui incorporada por referência em sua totalidade para todos os fins.

[00113] Em determinadas modalidades, o inibidor de KHK é uma forma cristalina de ácido livre do ácido [(1R,5S,6R)-3-(2-[(2S)-2- metilazetidin-1-il]-6-(trifluorometil)pirimidin-4-i1)-3-azabiciclo[3.1.0]hex- 6-ilJacético.

[00114] A ceto-hexoquinase (KHK) é a principal enzima no metabo- lismo da frutose e catalisa a conversão de frutose em frutose-1-fosfato (F1P). A KHK é expressa como duas variantes alternativas do splicing de mRNA, indicadas KHKa e KHkKc, resultantes do splicing alternativo do terceiro éxon. A afinidade e a capacidade da KHKc de fosforilação da frutose é muito maior que a KHKa, como evidenciado por um km muito menor (Ishimoto, Lanaspa et al., PNAS 109, 4320-4325, 2012). Enquanto a KHKa é expressada ubiquamente, a expressão da KHKc é a mais elevada no fígado, nos rins e nos intestines, os principais locais de metabolism da frutose no corpo (Diggle CP, et al. (2009) J Histo- chem Cytochem 57:763-774; Ishimoto, Lanaspa, et al., PNAS 109, 4320-4325, 2012). Além disso, a perda de mutações funcionais tem sido relatada em seres humanos e denominada Frutosúria Essencial (OMIM * 229800), sem efeitos adversos, exceto o aparecimento de frutose na urina após a ingestão do açúcar.

[00115] Uma condição mais grave envolvida no metabolismo da fru- tose é a Intolerância Hereditária à Frutose (HFI, OMIM % 229600), causada por defeitos na aldolase B (GENE: ALDOB), que é a enzima responsável por quebrar F1P e imediatamente a jusante da etapa da KHK na via (Bouteldja N, et. al, J. Inherit. Metab. Dis. 2010 Apr;33(2): 105-12; Tolan, DR, Hum Mutat. 1995;6(3):210-8; http://www.omim.org/ entry/229600). Trata-se de um distúrbio raro que acomete um número estimado de 1 em 20.000 pessoas, e as mutações resultam em acú- mulo de F1P, esgotamento de ATP e aumento do ácido úrico, cuja combinação causa hipoglicemia, hiperuricemia e acidose lática, entre outros desarranjos metabólicos. A HFI prejudica a capacidade do cor- po de metabolizar a frutose dietética, resultando em sintomas acentu- ados como vômitos, hipoglicemia grave, diarréia e desconforto abdo- minal, levando a defeitos de crescimento de longo prazo, danos hepá- ticos e renais e potencialmente a morte (Ali M et al, J. Med. Genet. 1998 Maio:35(5):353-65). Os pacientes sofrem geralmente ao longo dos primeiros anos de vida antes do diagnóstico, e o único curso do tratamento é evitar a frutose na dieta. Isso se torna um desafio pela presença desse macronutriente na maioria dos alimentos. Além dos sintomas físicos, muitos pacientes experimentam o isolamento emoci- onal e social, como consequência de sua dieta incomum, e lutam constantemente para aderir às rigorosas limitações dietéticas (HFI- INFO Discussion Board, http://hfiinfo.proboards.com. Acessado em 14 de dezembro de 2015). Mesmo quando parecem não sintomáticos, alguns pacientes desenvolvem NAFLD e doença renal, o que ressalta a inadequação da restrição dietética autoimposta como única opção de tratamento, e a alta necessidade médica não atendida para essa con- dição.

[00116] Em condições hiperglicêmicas, a produção endógena de frutose ocorre através da via do poliol, via pela qual a glicose é conver- tida em frutose com sorbitol como intermediário. A atividade dessa via aumenta com a hiperglicemia. Nesses estudos, os autores demonstra- ram que os ratos KHK nulos foram protegidos do ganho de peso indu- zido pela glicose, resistência à insulina e esteatose hepática, sugerin- do que, em condições hiperglicêmicas, a frutose produzida endoge- namente pode contribuir para a resistência à insulina e esteatose he- pática (Lanaspa, M.A., et al., Nature Comm. 4, 2434, 2013). Portanto, a inibição da KHK é antecipada para beneficiar muitas doenças onde estão envolvidas as alterações de uma ou ambas as frutoses endóge- na e ingerida.

[00117] Em outramodalidade, quando são administrados três agen- tes, o terceiro agente compreende um agonista de FXR. Em algumas modalidades, o agonista de FXR é seleccionado do grupo constituído por tropifexor ácido (2-[(1R,3R,58S)-3-((5-ciclopropil-3-[2-(trifluoro- metóxi)fenil]-1,2-0xazol-4-il)metóxi)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-il]-4-flu- oro-1,3-benzotiazol-6-carboxílico) ("Tropifexor"); cilofexor (GS-9674); ácido obeticílico; LY2562175; Met409; TERN-101 e EDP-305 e seus sais farmaceuticamente aceitáveis. O agonista de FXR Tropifexor ou um seu sal farmacêutico aceitável é descrito, por exemplo, no Exemplo 1-1B da patente US nº 9,150,568, cuja descrição é aqui incorporada por referência em sua totalidade para todos os fins. A denominação química do Tropifexor é ácido 2-[(1R,3R,5S)-3-(f5-ciclopropil-3-[2- (triluorometóxi)fenil]-1,2-0xazol|-4-il)metóxi)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-

il]-4-fluoro-1,3-benzotiazol-6-carboxílico.

[00118] O receptor farnesoide X (FXR) é um membro da superfamí- lia de receptores de hormônios nucleares e é expresso principalmente no fígado, rim e intestino (consulte, por exemplo, Seol et al. (1995) Mol. Endocrinol. 9:72-85 e Forman et al. (1995) Cell 81:687-693). Ele funciona como um heterodímero com o receptor retinoide X (RXR) e liga-se aos elementos de resposta nos promotores dos genes-alvo pa- ra regular a transcrição gênica. O heterodímero FXR-RXR liga-se com maior afinidade a um elemento de resposta de repetição invertida 1 (IR-1), no qual os hexâmeros de ligação ao receptor de consenso são separados por um nucleotídeo. O FXR faz parte de um processo inter- relacionado, no qual o FXR é ativado por ácidos biliares (o produto fi- nal do metabolismo do colesterol) (consulte, por exemplo, Makishima et al. (1999) Science 284:1362-1365, Parks et al. (1999) Science 284:1365-1368, Wang et al. (1999) Mol. Cell. 3:543-553), que serve para inibir o catabolismo do colesterol. Consulte também Urizar et al. (2000) J. Biol. Chem. 275:39313-39317.

[00119] O FXRé um regulador essencial da homeostase do coles- terol, da síntese de triglicerídeos e da lipogênese. (Crawley, Expert Opinion Ther. Patents (2010), 20(8): 1047-1057). Além do tratamento da dislipidemia, várias indicações para o FXR têm sido descritas, inclu- indo o tratamento da doença hepática, diabetes, doenças relacionadas à vitamina D, efeitos colaterais induzidos por fármacos e hepatite. (Crawley, supra). Embora tenham sido feitos avanços no desenvolvi- mento de novos agonistas de FXR, ainda há um espaço significativo para desenvolvimentos.

[00120] Em algumas outras modalidades, quando três agentes são administrados, o terceiro agente compreende um inibidor de SGLT?2, metformina, análogos de incretina, um modulador do receptor de incre- tina, um inibidor de DPP-4 ou um agonista de PPAR.

[00121] Em outras modalidades, quando três agentes são adminis- trados, o terceiro agente é um agente antidiabético selecionado a partir de metformina, sitagliptina ou ertuglilozina.

[00122] Em algumas outras modalidades, quando são administra- dos três agentes, o terceiro agente é um agente anti-insuficiência car- díaca selecionado dentre um inibidor da ACE, um bloqueador do re- ceptor da angiotensina, um bloqueador do canal de cálcio ou um va- sodilatador.

[00123] A presente invenção compreende ainda kits adequados pa- ra uso na realização dos métodos de tratamento acima descritos. Em uma modalidade, o kit contém uma primeira forma de dosagem com- posta por um ou mais dos agentes (compostos) ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável da presente invenção e um recipiente para a dosagem, em quantidades suficientes para realizar os métodos da presente invenção.

[00124] Em outra modalidade, o kit contém uma primeira forma de dosagem composta por um dos agentes (compostos) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável da presente invenção e um recipiente pa- ra a primeira dosagem, e uma segunda forma de dosagem composta por outro agente (composto) ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel da presente invenção e um recipiente para a segunda forma de do- sagem, em que ambas as formas de dosagem estão em quantidades suficientes para realizar os métodos da presente invenção.

[00125] Em outra modalidade, o kit contém uma primeira forma de dosagem composta por um dos agentes (compostos) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável da presente invenção e um recipiente pa- ra a primeira dosagem, uma segunda forma de dosagem composta por outro agente (composto) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável da presente invenção e um recipiente para a segunda forma de dosa- gem, e uma terceira forma de dosagem composta por outro agente

(composto) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável da presente invenção e um recipiente para a terceira forma de dosagem, em que as três formas de dosagem estão em quantidades suficientes para rea- lizar os métodos da presente invenção.

[00126] Em algumas modalidades da presente invenção, é forneci- do um kit que inclui uma primeira forma de dosagem composta por (S)- 2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3- iN)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, um recipiente para a primeira forma de dosagem, e uma segunda forma de dosagem composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um recipiente para a segunda forma de dosagem, em que ambas as formas de do- sagem estão em quantidades suficientes para realizar os métodos da presente invenção.

[00127] Em outramodalidade da presente invenção, é fornecido um kit que inclui uma primeira forma de dosagem composta por (S)-2-(5- ((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-S5- carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um recipien- te para a primeira forma de dosagem, uma segunda forma de dosa- gem composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroes- piro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um recipiente para a se- gunda forma de dosagem e uma terceira forma de dosagem composta por outro agente (composto) ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel e um recipiente para a terceira forma de dosagem, em que todas as três formas de dosagem estão em quantidades suficientes para rea- lizar os métodos da presente invenção.

[00128] Em algumas modalidades, a(s) forma(s) de dosagem do kit pode(m) ser administrada(s) simultaneamente ou cronologicamente escalonada(s), ou seja, em diferentes momentos e com intervalos de tempo iguais ou diferentes para qualquer uma das formas de dosagem do kit.

[00129] Em qualquer um dos kits acima mencionados, pode ser for- necido um meio para conter separadamente cada forma de dosagem, como um recipiente, frasco dividido ou embalagem dividida de folha de alumínio. Um exemplo de um kit desse tipo é a embalagem em blister familiar utilizada para o acondicionamento de comprimidos, cápsulas e similares. Esse kit é particularmente adequado para a administração de diferentes formas de dosagem, por exemplo, oral e parenteral, para a administração de agentes separados (compostos) em diferentes in- tervalos de dosagem, ou para a titulação do agente separado (com- posto) entre si. Para auxiliar na conformidade, o kit pode conter orien- tações de administração e pode ser fornecido com um chamado lem- brete.

[00130] A presente invenção contempla também vários outros kits conhecidos por serem utilizados para acondicionamento, distribuição e administração dos agentes (compostos) da presente invenção.

[00131] Em outramodalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um inibidor da HMG-CoA redutase e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00132] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um inibidor da HMG-CoA redutase selecionado a partir do grupo que consiste em pravastatina, pitavastatina, lovastatina, atorvastatina, sin-

vastatina, fluvastatina, itavastatina, nisvastatina, nisbastatina, rosuvas- tatina, atavastatina e visastatina, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00133] Em determinadas modalidades, a presente invenção se re- fere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1- isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"- carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamen- te aceitável, atorvastatina e um excipiente farmaceuticamente aceitá- vel.

[00134] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um inibidor da HMG-CoA redutase. Em algumas modalidades, o inibidor da HMG- CoA redutase é a atorvastatina.

[00135] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um inibidor da HMG-CoA redutase. Em algumas modalidades, o inibidor da HMG-CoA redutase é a atorvasta- tina.

[00136] Em outramodalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um agente fibrato e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00137] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um agente fibrato selecionado do grupo que consiste em gemfibrozil, fenofibrato e clofibrato, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00138] Em determinadas modalidades, a presente invenção se re- fere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1- isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"- carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamen- te aceitável, fenobibrato e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00139] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan-

tidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um agente fibrato. Em determinadas modalidades, o agente de fibrato é o fenofi- brato.

[00140] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e agente de fibrato. Em determinadas modalidades, o agente de fibrato é o fenofibrato.

[00141] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um sequestrante de ácido biliar e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00142] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um sequestrante de ácido biliar selecionado do grupo que consiste em questran, colestipol e colesevelam, e um excipiente farmaceuticamen-

te aceitável.

[00143] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um seques- trante de ácido biliar.

[00144] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um sequestrante de ácido biliar.

[00145] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um inibidor da absorção de colesterol e um excipiente farmaceutica-

mente aceitável. Em algumas modalidades, o inibidor da absorção do cholesterol é o ezetimibe.

[00146] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um inibidor da absorção de colesterol.

[00147] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um inibidor da absorção de colesterol.

[00148] Em outramodalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável,

um agente do ácido nicotínico e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00149] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um agente nicotínico selecionado do grupo que consiste em niacina, niacor e slo-niacina, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00150] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um agente do ácido nicotínico.

[00151] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-

5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um agente do ácido nicotínico.

[00152] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um modulador de PCSK9 e um excipiente farmaceuticamente aceitá- vel.

[00153] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um modulador de PCSKS9 selecionado do grupo que consiste em aliro- cumabe e evolucumabe, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00154] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um modula- dor de PCSKO9.

[00155] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um modulador de PCSK9.

[00156] Em qualquer das modalidades anteriores, o ácido 4-(4-(1- isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"- carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico é um sólido cristalino. Em algu- mas modalidades, o sólido cristaliho é o sal de 2-amino-2- (hidroximetil)propano-1,3-diol de 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra- hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico.

[00157] Em outramodalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um inibidor da HMG-CoA re- dutase e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00158] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um inibidor da HMG-CoA re- dutase selecionado a partir do grupo que consiste em pravastatina, pitavastatina, lovastatina, atorvastatina, sinvastatina, fluvastatina, ita- vastatina, nisvastatina, nisbastatina, rosuvastatina, atavastatina e vi- sastatina, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00159] Em determinadas modalidades, a presente invenção se re- fere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-

etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5- carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, atorvastati- na, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00160] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi) piri- din-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um inibidor da HMG-CoA redutase. Em algumas modalidades, o inibidor da HMG-CoA redutase é a ator- vastatina.

[00161] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3- iN)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um inibidor da HMG-CoA redutase. Em algumas modalidades, o ini- bidor da HMG-CoA redutase é a atorvastatina.

[00162] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um agente de fibrato e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00163] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um agente de fibrato selecio- ando do grupo que consiste em gemfibrozil, fenofibrato e clofibrato, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00164] Ema determinadas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3- etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5- carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, fenobibrato, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00165] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piri- din-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um agente fibrato. Em determinadas modalidades, o agente de fibrato é o fenofibrato.

[00166] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3- iN)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um agente fibrato. Em determinadas modalidades, o agente de fibra- to é o fenofibrato.

[00167] Em outramodalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um sequestrante de ácido biliar e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00168] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um sequestrante de ácido biliar selecioando do grupo que consiste em questran, colestipol e co- lesevelam, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00169] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi) piri-

din-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um sequestrante de ácido biliar.

[00170] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3- iN)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um sequestrante de ácido biliar.

[00171] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um inibidor da absorção de colesterol e um excipiente farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, o inibidor da absorção de colesterol é o ezetimibe.

[00172] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi) piri- din-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um inibidor da absorção de coleste- rol.

[00173] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3- iN)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um inibidor da absorção de colesterol.

[00174] Em outramodalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um agente do ácido nicotíni- co e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00175] Em determinadas modalidades, a presente invenção se re- fere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxi- piridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina-5-carboxa- mida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um agente do ácido nicotínico selecionado do grupo que consiste em niacina, niacor e slo- niacina, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00176] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piri- din-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um agente do ácido nicotínico.

[00177] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3- iN)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um agente do ácido nicotínico.

[00178] Em outramodalidade, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il) óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um modulador de PCSK9 e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00179] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica composta por (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um modulador de PCSK9 selecionado do grupo que consiste em alirocumab e evolucumabe, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00180] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose he- pática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular ou com uma doença relacionada ao metabolismo, o método compreendendo admi- nistrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi) piri- din-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um modulador de POSK9.

[00181] Em outra modalidade, a presente invenção se refere a um método para a redução de ao menos um ponto na gravidade da doen- ça hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontuação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não alcoólica, re- dução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redu- ção das consequências médicas da esteato-hepatite não alcoólica em seres humanos, compreendendo a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redução uma quantidade terapeuticamente efi- caz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3- iN)pirimidina-5-carboxamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um modulador de PCSK9.

[00182] Em qualquer das modalidades anteriores, a (S)-2-(5-((3- etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5- carboxamida é um sólido cristalino. Em algumas modalidades, o sólido cristalino tem um padrão de difração de pó de raios-X compreendendo valores 2-teta de (radiação CuKa, comprimento de onda de 1,54056 À) 5,3 + 0,2; 7,7 + 0,2 e 15,4 + 0,2. Em algumas outras modalidades, o sólido cristalino tem um padrão de difração de pó de raios-X compre- endendo valores 2-teta de (radiação CuKa, comprimento de onda de

1,54056 À) 6,5 + 0,2; 9,3 + 0,2 e 13,6 + 0,2.

[00183] Os compostos da invenção podem ser sintetizados por vias sintéticas que incluem processos análogos aos conhecidos nas artes químicas, particularmente à luz da descrição aqui contida. Os materi- ais de partida estão geralmente disponíveis a partir de fontes comerci- ais, como Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI) ou são prontamente pre- parados utilizando métodos bem conhecidos para os qualificados na arte (por exemplo, preparados por métodos descritos em geral em Louis F. Fieser e Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-19, Wiley, Nova lorque (1967-1999 ed.), ou Beilsteins Handbuch der orga- nischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlim, incluindo suple- mentos (também disponível por meio do banco de dados online Beils- tein)). A preparação de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N- (tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida é apresentada no Exemplo 1 do Documento US 2018-0051012A1, aqui incorporado por referência em sua totalidade para todos os fins. Uma preparação do ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4"- piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico aparece no Exem- plo 9 do Documento US 8,859,577, aqui incorporado por referência em sua totalidade para todos os fins. A preparação do ácido [(1R,5S,6R)- 3-(2-[(28S)-2-metilazetidin-1-il]-6-(trifluorometil )pirimidin-4-i1)-3- azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilJacético (incluindo uma forma cristalina de áci- do livre do mesmo) é descrita no Exemplo 4 da Patente US nº 9,809,579. A preparação dos agonistas do GLP-1R é descrita na Pa- tente US nº 10,208,019.

AGENTES DE COMBINAÇÃO

[00184] Os compostos da invenção podem ser administrados sepa- radamente ou em conjunto como agentes separados ou em uma com- binação de dose fixa ou em combinação com um ou mais agentes te- rapêuticos adicionais. Por "administrado em combinação" ou "terapia combinada", deve ser entendido que o Composto A e o Composto D são administrados juntos como os dois únicos agentes terapêuticos ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais ad- ministrados simultaneamente ao mamífero em tratamento. Quando administrado em combinação, cada componente pode ser administra- do ao mesmo tempo ou sequencialmente em qualquer ordem em mo- mentos diferentes. Assim, cada componente pode ser administrado separadamente, mas suficientemente próximo no tempo, de modo a proporcionar o efeito terapêutico desejado. Assim, os métodos de tra- tamento descritos neste documento incluem o uso de agentes de combinação para administrar três ou mais agentes em combinação.

[00185] Os agentes de combinação são administrados a um mamí- fero em uma quantidade terapeuticamente eficaz. Por "quantidade te- rapeuticamente eficaz", deve ser entendida uma quantidade dos com- postos da invenção que, quando administrados sozinhos ou em com- binação com um agente terapêutico adicional a um mamífero, é eficaz para tratar a doença/condição desejada, por exemplo, NASH.

[00186] Os agentes preferidos para o tratamento da esteato- hepatite não alcoólica (NASH) e/ou da doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD) (ou seja, agentes anti-NASH e anti-NAFLD) são um inibidor da acetil-CoA carboxilase (ACC), um inibidor da ceto- hexoquinase (KHK), um agonista do receptor de GLP-1, um agonista de FXR, um agonista de CB1, um inibidor de ASK1, e inibidor de CCR?2 e / ou CCR5, um inibidor de PNPLA3, um inibidor da hidroxies- teroide 17-B desidrogenase (HSD17B13), um inibidor de DGAT1, um análogo de FGF21, um análogo de FGF19, um inibidor de SGLT2, um agonista de PPAR, um ativador de AMPK, um inibidor de SCD1 ou um inibidor de MPO. Um pedido de patente PCT/IB2017/057577 deposita- do em 12/01/2017, cedido ao mesmo cessionário, se refere a agonis- tas do receptor de GLP-1. São preferidos um agonista de FXR, um ini-

bidor da quinase reguladora do sinal de apoptose 1 (ASK1), um ago- nista de PPAR, um agonista do receptor de GLP-1, um inibidor de SGLT, um inibidor de ACC e um inibidor de KHK.

[00187] Dada a atividade para NASH/NAFLD dos compostos desta invenção, eles podem ser coadministrados com outros agentes para o tratamento da esteato-hepatite não alcoólica (NASH) e/ou da doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD) e doenças/condições asso- ciadas, como Orlistat, TZDs e outros agentes sensibilizantes à insuli- na, análogos de FGF21, Metformina, ésteres etílicos do ácido ômega-3 (por exemplo, Lovaza), Fibratos, Inibidores da HMG CoA-redutase, Ezetimibe, Probucol, ácido ursodeoxicólico, agonistas de TGR5, ago- nistas de FXR, Vitamina E, Betaína, Pentoxifilina, antagonistas de CB1, Carnitina, N-acetilcisteína, glutationa reduzida, lorcaserina, a combinação de naltrexona com bupropiona, inibidores de SGLT2 (in- cluindo dapagliflozina, canaglifozina, empagliflozin, tofogliflozina, ertu- gliflozina, ASP-1941, THR1474, TS-071, ISIS388626 e LX4211, bem como aqueles no Documento WO2010023594), Fentermina, Topira- mato, agonistas do receptor de GLP-1, agonistas do receptor de GIP, agonistas duplos do receptor de GLP-1 / receptor de glucagon (isto é, OPK88003, MEDIO382, JNJ-64565111, NN9277, BI 456906), agonis- tas duplos do receptor de GLP-1 / receptor de GIP (ou seja, Tirzepati- da (LY3298176), NN9423), bloqueadores do receptor da angiotensina, um inibidor da acetil-CoA carboxilase (ACC), um inibidor de BCKDK, um inibidor da ceto-hexoquinase (KHK), inibidores de ASK1, Inibidores da alfa cetoácido desidrogenase quinase de cadeia ramificada (inibido- res de BCBK), inibidores de CCR2 e / ou CCR5, inibidores de PNPLA3, inibidores de DGAT1, um análogo de FGF21, análogos de FGF19, agonistas de PPAR, agonistas de FXR, ativadores de AMPK, inibidores de SCD1 ou inibidores de MPO.

[00188] Inibidores exemplificativos da ACC incluem o ácido 4-(4-[(1-

isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1"- il)carbonil]-6-metoxipiridin-2-il)benzoico; e firsocostat (GS-0976) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

[00189] Inibidores exemplificativos da DGAT2 incluem (S)-2-(5-((3- etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5- carboxamida; 2-(5-((3-etóxi-S-fluoropiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-((3R,4 S)-4- fluoropiperidin-3-il)pirimidina-5-carboxamida; 2-(5-((3-etóxi-S-fluoropiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-((3S,5S)-5- fluoropiperidin-3-il)pirimidina-5-carboxamida; 2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-((3R,4S)-4-fluoropiperidin-3- iN)pirimidina-5-carboxamida; 2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-((3R,4R)-4-fluoropiperidin-3- iN)pirimidina-5-carboxamida; 2-(5-((3-etóxi-S-fluoropiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-((3R,4R)-4- fluoropiperidin-3-il)pirimidina-5-carboxamida; e 2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-((3S,5S)-5-fluoropiperidin-3- iN)pirimidina-5-carboxamida.

[00190] Exemplos de agentes antidiabéticos adequados incluem (por exemplo, insulinas, metfomina, inibidores da DPPIV, agonistas, análogos e miméticos dos receptores de GLP-1, inibidores da SGLT1 e SGLT2). Os agentes antidiabéticos adequados incluem um inibidor da acetil-CoA carboxilase-(ACC), como aqueles descritos nos docu- mentos —WO2009144554, WO2003072197, WOZ2Z009144555 e WO2008065508, um inibidor da diacilglicerol O--aciltransferase 1 (DGAT-1), como aqueles descritos nos Documentos WO09016462 ou WOZ2010086820, AZD7687 ou LCQ908, inibidores da monoacilglicerol O-aciltransferase, um inibidor da fosfodiesterase (PDE)-10, um ativa- dor de AMPK, uma sulfonilureia (por exemplo, aceto-hexamida, clor- propamida, diabinese, glibenclamida, glipizida, gliburida, glimepirida,

gliclazida, glipentida, gliquidona, glisolamida, tolazamida e tolbutami- da), uma medglitinida, um inibidor de a-amilase (por exemplo, tendamis- tate, trestatina e AL-3688), um inibidor da hidrolase de a-glicosídeo (por exemplo, acarbose), um inibidor de a-glicosidase (por exemplo, adiposina, camiglibose, emiglitato, miglitol, voglibose, pradimicina-Q e salbostatina), um agonista PPARy (por exemplo, balaglitazona, ciglita- zona, darglitazona, englitazona, isaglitazona, pioglitazona e rosiglita- zona), um agonista PPAR a / y (por exemplo, CLX-0940, GW-1536, GW-1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767 e SB- 219994), uma biguanida (por exemplo, metformina), um modulador de peptídeo semelhante a glucagon 1 (GLP-1), como um agonista (por exemplo, exendina-3 e exendina-4), liraglutida, albiglutida, exenatida (Byetta&), albiglutida, lixisenatida, dulaglutida, semaglutida, NN-9924, TTP-054, um inibidor de proteína tirosina fosfatase-1B (PTP-1B) (por exemplo, trodusquemina, extrato de hirtiosal e os compostos divulga- dos por Zhang, S., et al., Drug Discovery Today, 12(9/10), 373-381 (2007)), ativador de SIRT-1 (por exemplo, resveratrol, GSK2245840 ou GSK184072), um inibidor de dipeptidil peptidase IV (DPP-IV) (por exemplo, aqueles no Documento WOZ2005116014, sitagliptina, vilda- gliptina, alogliptina, dutogliptina, linagliptina e saxagliptina), um secrea- tagogo de insulina, um inibidor de oxidação de ácidos graxos, um an- tagonista A2, um inibidor da quinase amino-terminal c-jun (JNK), ativa- dores de glicoquinase (GKa), como aqueles descritos nos Documentos WO2010103437, WO2010103438, WO2010013161, WO2007122482, TTP-399, TTP-355, TTP-547, AZD1656, ARRY403, MK-0599, TAK- 329, AZD5658 ou GKM-001, insulina, um mimético de insulina, um ini- bidor de glicogênio fosforilase (por exemplo, GSK1362885), um ago- nista do receptor de VPAC?, inibidores de SGLT2, como aqueles des- critos em E.C.

Chao et al.

Nature Reviews Drug Discovery 9, 551-559 (julho de 2010) incluindo dapagliflozina, canagliflozina, empagliflozina,

tofogliflozina (CSG452), Ertuglilozina, ASP-1941, THR1474, TS-071, ISISS88626 e LX4211, bem como aqueles no Documento WOZ2010023594, um modulador do receptor de glucagon, como aque- les descritos em Demong, D.E. et al.

Annual Reports in Medicinal Chemistry 2008, 43, 119-137, moduladores GPR119, particularmente agonistas, como aqueles descritos nos Documentos WO2010140092, WOZ2010128425, WO2010128414, WO2010106457, Jones, R.M. et al. em Medicinal Chemistry 2009, 44, 149-170 (por exemplo, MBX-2982, GSK1292263, APD597 e PSN821), derivados ou análogos de FGF21, como aqueles descritos em Kharitonenkov, Current Opinion in Investi- gational Drugs 2009, 10(4)359-364, moduladores de receptores de TGR5 (também denominados GPBAR1), particularmente agonistas, como aqueles descritos em Zhong, M., Current Topics em Medicinal Chemistry, 2010, 10(4), 386-396 e INT777, agonistas de GPR40, como aqueles descritos em Medina, J.C., Annual Reports em Medicinal Chemistry, 2008, 43, 75-85, incluindo, mas não se limitando a modula- dores de TAK-875, GPR120, particularmente agonistas, ativadores do receptor de ácido nicotínico de alta afinidade (HM74A) e inibidores de SGLT1, como GSK1614235. Outra lista representativa de agentes an- tidiabéticos que podem ser combinados com os compostos da inven- ção pode ser encontrada, por exemplo, na página 28, linha 35 até a página 30, linha 19 do Documento WO2011005611. Agentes antidia- béticos preferidos são os inibidores da metformina e DPP-IV (por exemplo, sitagliptina, vildagliptina, alogliptina, dutogliptina, linagliptina e saxagliptina). Outros agentes antidiabéticos podem incluir inibidores ou moduladores de enzimas carnitina palmitoil transferase, inibidores da frutose 1,6-difosfatase, inibidores da aldose redutase, inibidores do receptor mineralocorticoide, inibidores da TORC?2, inibidores da CCR2 e/ou CCR5, inibidores da isoforma PKC (por exemplo PKCa, PKCRB, PKCy), inibidores da ácido graxo sintetase, inibidores da serina palmi-

toil transferase, moduladores de GPR81, GPR39, GPR43, GPR41, GPR105, Kv1.3, proteína de ligação ao retinol 4, receptor glicocorticoi- de, receptores de somatostatina (por exemplo SSTR1, SSTR2, SSTR3 e SSTR5), inibidores ou moduladores de PDHK2 ou PDHKA, inibidores de MAP4KA4, moduladores da família IL1, incluindo IL1beta, modulado- res de RXRalpha. Além disso, os agentes antidiabéticos adequados incluem mecanismos listados por Carpino, P.A., Goodwin, B. Expert Opin. Ther. Pat, 2010, 20(12), 1627-51.

[00191] Agentes antiobesidade adequados incluem inibidores da 11fB-hidroxi esteroide desidrogenase-1 (11B-HSD tipo 1), inibidor da estearoil-CoA desaturase-1 (SCD-1), agonistas de MCR-4, agonistas da colecistoquinina-A (CCK-A), inibidores da recaptação de monoami- na (como sibutramina), agentes simpatomiméticos, agonistas adrenér- gicos 33, agonistas da dopamina (como bromocriptina), análogos do hormônio estimulador de melanócitos, agonistas de 5HT2c, antagonis- tas do hormônio concentrador de melanina, leptina (a proteína OB), análogos da leptina, agonistas da leptina, antagonistas da galanina, inibidores da lipase (como tetra-hidrolipstatina, ou seja, orlistat), agen- tes anoréxicos (como um agonista bombesina), antagonistas do neu- ropeptídeo-Y (por exemplo, antagonistas de NPY Y5), PYY3-36 (incluin- do seus análogos), agentes tireomiméticos, de-hidroepiandrosterona ou um análogo deste, agonistas ou antagonistas de glicocorticoides, antagonistas de orexina, agonistas do peptídeo semelhantes a gluca- gon 1, fatores neurotróficos ciliares (como Axokine'“ disponível por Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY e Procter & Gamble Company, Cincinnati, OH), inibidores da proteína agouti-relacionada (AGRP) humana, antagonistas da grelina, antagonistas ou agonistas inversos da histamina 3, agonistas da neuromedina U, Inibidores de MTP/ApoB (por exemplo, inibidores de MTP seletivos para o intestino, como dirlotapide), antagonista opioide, antagonista de orexina, a com-

binação de naltrexona com buproprion e semelhantes

[00192] Agentes antiobesidade preferidos para uso nas combina- ções da invenção incluem inibidores de MTP seletivos para o intestino (por exemplo, dirlotapida, mitratapida e implitapida, R56918 (CAS nº. 403987) e CAS nº 913541-47-6), agonistas de CCKa (por exemplo, a N-benzil-2-[4-(1H-indol-3-ilmetil)-5-0x0-1-fenil-4,5-di-hidro-2,3,6,10b- tetra-aza-benzo[e]azulen-6-il]-N-isopropil-acetamida descrita na Publi- cação de PCT nº WO 2005/116034 ou Publicação US nº 2005- 0267100 A1), agonistas de 5HT2c (por exemplo, lorcaserina), agonista de MCRA4 (por exemplo, compostos descritos no Documento US 6,818,658) , inibidor de lipase (por exemplo, Cetilistat), PYY3-36 (como usado neste documento, "PYY33-36" inclui análogos, como PYY3-3: pe- guilado, por exemplo, aqueles descritos na Publicação US nº 2006/0178501), antagonistas opioides (por exemplo, naltrexona), a combinação de naltrexona com buproprion, oleoil-estrona (CAS nº 180003-17-2), obinepitida (TM30338), pramlintida (SymlinO), tesofen- sina (NS2330), leptina, liraglutida, bromocriptina, orlistat, exenatida (Byetta&) , AOD-9604 (CAS nº 221231-10-3), fentermina e topiramato (nome comercial: Qsymia), e sibutramina. Preferivelmente, os compos- tos da invenção e as terapias de combinação são administradas con- juntamente com exercícios e uma dieta razoável.

[00193] Os compostos da invenção podem ser utilizados em combi- nação com agentes de modulação de colesterol (incluindo agentes de redução de colesterol), como um inibidor da lipase, um inibidor da HMG-C0oA redutase, um inibidor da HMG-CoA sintase, um inibidor da HMG-C0oA redutase, um inibidor da expressão gênica, um inibidor da expressão do gene da HMG-CoA sintase, um inibidor da secreção de MTP/Apo B, um inibidor de CETP, um inibidor da absorção de ácido biliar, um inibidor da absorção de colesterol, um inibidor da síntese de colesterol, um inibidor de esqualeno sintetase, um inibidor da esquale-

no epoxidase, um inibidor da esqualeno ciclase, um inibidor da esqua- leno epoxidase/esqualeno ciclase em combinação, um fibrato, niacina, uma resina de troca iônica, um inibidor antioxidante, um inibidor ACAT ou um sequestrante de ácido biliar ou um agente como o mipomersen.

[00194] Exemplos de agentes de redução de colesterol/lipídios adequados e terapias com perfil lipídico incluem: inibidores da HMG- CoA redutase (por exemplopravastatina, pitavastatina, lovastatina, atorvastatina, sinvastatina, fluvastatina, NK-104 (também conhecido como itavastatina, ou nisvastatina ou nisbastatina) e ZD-4522 (também conhecido como rosuvastatina, ou atavastatina ou visastatina); inibido- res da esqualeno sintetase; fibratos (por exemplo, gemfibrozil, fenofi- brato, clofibrato); sequestrantes de ácido biliar (como questran, coles- tipol, colesevelam); inibidores de ACAT; inibidores de MTP; inibidores da lipo-oxigenase; inibidores da absorção de colesterol (por exemplo, ezetimibe); agentes do ácido nicotínico (por exemplo, niacina, niacor, slo-niacina); ácidos graxos ômega-3; e inibidores da proteína de trans- ferência do éster de colesteril. Outros agentes ateroscleróticos incluem moduladores de PCSK9 (por exemplo, alirocumabe e evoluocumabe).

[00195] Em outra modalidade, os compostos da invenção podem ser coadministrados com agentes para o tratamento da esteato- hepatite não alcoólica (NASH) e/ou da doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD), como Orlistat, TZDs e outros agentes sensibilizan- tes à insulina, Análogos de FGF21, Metformina, Ésteres etílicos do ácido ômega-3 (por exemplo Lovaza), Fibratos, Inibidores da HMG CoA-redutase, Ezitimbe, Probucol, Ácido ursodeoxicólico, Agonistas de TGR5, Agonistas de FXR, Vitamina E, Betaína, Pentoxifilina, Anta- gonistas de CB1, Carnitina, N-acetilcisteína, Glutationa reduzida, lor- caserina, a combinação de naltrexona com bupropriona, Inibidores de SGLT2, Fentermina, Topiramato, Análogos de incretina (GLP e GIP) e Bloqueadores do receptor da angiotensina.

[00196] Em outra modalidade, o agente farmacêutico adicional é selecionado a partir do grupo constituído por cisteamina ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, cistamina ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, um composto antioxidante, lecitina, complexo vitamí- nico B, preparações de sal biliar, um antagonista do receptor Canabi- noide-1 (CB1), um agonista inverso do receptor Canabinoide-1 (CB1), um receptor ativado por proliferador de peroxissoma, reguladores de atividade, um composto benzotiazepina ou benzotiepina, um constru- ção anti-senso de RNA para inibir a proteína tirosina fosfatase PTPRU, uma piperidina substituída ligada a heteroátomo e seus derivados, um derivado de azaciclopentano capaz de inibir a estearoil-coenzima alfa delta-9 desaturase, composto de acilamida com secretagogo ou ativi- dade indutora de adiponectina, um composto de amônio quaternário, acetato de Glatiramer, proteínas de pentraxina, um inibidor da HMG- CoA redutase, n-acetil cisteína, composto de isoflavona, um antibiótico macrolídeo, um inibidor de galectina, um anticorpo ou qualquer combi- nação desses.

[00197] Agentes terapêuticos adicionais incluem agentes anticoagu- lantes ou inibidores da coagulação, agentes antiplaquetários ou inibi- dores de plaquetas, inibidores de trombina, agentes trombolíticos ou fibrinolíticos, agentes antiarrítmicos, agentes anti-hipertensivos, blo- queadores dos canais de cálcio (tipo L e tipo T), glicosídeos cardíacos, diruéticos, antagonistas dos receptores mineralocorticoides, agentes doadores de NO, como organonitratos, agentes promotores de NO, como inibidores da fosfodiesterase, agentes redutores de colesterol / lipídios e terapias do perfil lipídico, agentes antidiabéticos, antidepres- sivos, agentes anti-inflamatórios (esteroides e não esteroides), agen- tes antiosteoporose, terapias de reposição hormonal, anticoncepcio- nais orais, agentes antiobesidade, agentes antiansiedade, agentes an- tiproliferativos, agentes antitumorais, agentes contra úlcera e refluxo gastroesofágico, hormônio de crescimento e/ou secretagogos do hor- mônio de crescimento, miméticos tireoidianos (incluindo antagonista dos receptores do hormônio tireoidiano), agentes anti-infecciosos, agentes antivirais, agentes antibacterianos e agentes antifúngicos.

[00198] São incluídos os agentes utilizados em um ambiente de UTI, por exemplo, dobutamina, dopamina, epinefrina, nitroglicerina, nitroprussida, etc.

[00199] São incluídos os agentes de combinação úteis para o tra- tamento da vasculite, por exemplo, azatioprina, ciclofosfamida, mico- fenolato, mofetil, rituximabe, etc.

[00200] Em outra modalidade, a invenção fornece uma combinação na qual o terceiro agente é pelo menos um agente selecionado dentre um inibidor do fator Xa, um agente anticoagulante, um agente antipla- quetário, um agente inibidor de trombina, um agente trombolítico e um agente fibrinolítico. Inibidores do fator Xa exemplificativos incluem api- xaban e rivaroxaban. Exemplos de anticoagulantes adequados para uso em combinação com os compostos da invenção incluem hepari- nas (por exemplo, heparinas não fracionadas e de baixo peso molecu- lar, como enoxaparina e dalteparina).

[00201] Em outra modalidade preferida, o terceiro agente é pelo menos um agente selecionado dentre warfarina, dabigatrana, heparina não fracionada, heparina de baixo peso molecular, pentassacarídeo sintético, hirudina, argatrobanas, aspirina, ibuprofeno, naproxeno, su- lindaco, indometacina, mefenamato, droxicam, diclofenaco, sulfinpira- zona, piroxicam, ticlopidina, clopidogel, tirofibana, eptifibatida, abcixi- mabe, melagatrana, dissulfato-hirudina, ativador do plasminogênio te- cidual, ativador do plasminogênio tecidual modificado, anistreplase, uroquinase e estreptoquinase.

[00202] Um terceiro agente preferido é pelo menos um agente anti- plaquetário. Os agentes antiplaquetários especialmente preferidos são a aspirina e o clopidogrel.

[00203] O termo agentes antiplaquetários (ou agentes inibidores de plaquetas), como aqui utilizado, indica agentes que inibem a função plaquetária, por exemplo, inibindo a agregação, a aderência ou a se- creção granular de plaquetas. Os agentes incluem, mas não se limitam a, os vários fármacos anti-inflamatórios não esteroidais (NSAIDS) co- nhecidos como aspirina, ibuprofeno, naproxeno, sulindaco, indometa- cina, mefenamato, droxicam, diclofenaco, sulfinpirazona, piroxicam e seus sais ou profármacos farmaceuticamente aceitáveis. Dos NSAIDS, são preferidos a aspirina (ácido acetilsalicílico ou AAS) e os inibidores da COX-2, como CELEBREX ou piroxicam. Outros agentes inibidores de plaquetas adequados incluem antagonistas Ilb/llla (por exemplo, tirofibana, eptifibatide e abciximabe), antagonistas dos receptores de tromboxano-A2 (por exemplo, ifetroban), inibidores da tromboxano-A2- sintetase, inibidores da PDE-III (por exemplo, Pletal, dipiridamol) e sais ou profármacos farmaceuticamente aceitáveis.

[00204] O termo agentes antiplaquetários (ou agentes inibidores de plaquetas), como aqui utilizado, também se destina a incluir antagonis- tas dos receptores de ADP (adenosina difosfato), preferencialmente antagonistas dos receptores purinérgicos P2Y1 e P2Y12, sendo P2Y12 ainda preferido. Os antagonistas dos receptores de P2Y12 pre- feridos incluem ticagrelor, prasugrel, ticlopidina e clopidogrel, incluindo OS seus sais ou profármacos farmaceuticamente aceitáveis. O clopido- grel é um agente ainda preferido. A ticlopidina e o clopidogrel também são compostos preferidos, uma vez que são conhecidos por serem delicados no trato gastrointestinal em uso.

[00205] O termo inibidores de trombina (ou agentes antitrombina), como aqui utilizado, indica inibidores da serina protease trombina. Ao inibir a trombina, vários processos mediados por trombina são inter- rompidos, como a ativação plaquetária mediada por trombina (ou seja,

por exemplo, a agregação de plaquetas e/ou a secreção granular do inibidor do ativador de plasminogênio-1 e/ou serotonina) e/ou a forma- ção de fibrina. Vários inibidores de trombina são conhecidos pelo ver- sado na técnica e esses inibidores são considerados para serem utili- zados em combinação com os presentes compostos. Esses inibidores incluem, entre outros, derivados de boroarginina, boropeptídeos, dabi- gatrana, heparinas, hirudina, argatropana e melagatrana, incluindo sais e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis. Os derivados de boroarginina e os boropeptídeos incluem derivados de N-acetil e pep- tídeo do ácido bórico, como os derivados do ácido alfa-aminoborônico C-terminal de lisina, ornitina, arginina, homoarginina e seus análogos de isotiourônio correspondentes. O termo hirudina, como aqui usado, inclui derivados adequados ou análogos de hirudina, aqui referidos como hirulogos, como dissulfato-hirudina. O termo agentes trombolíti- cos ou fibrinolíticos (ou trombolíticos ou fibrinolíticos), como aqui utili- zado, indica agentes que lisam coágulos sanguíneos (trombos). Esses agentes incluem ativadores de plasminogênio tecidual (natural ou re- combinante) e suas formas modificadas, anistreplase, uroquinase, es- treptoquinase, tenecteplase (TNK), lanoteplase (nPA), inibidores do fator Vila, inibidores de PAI-1 (isto é, inativadores de inibidores do ati- vador de plasminogênio tecidual), inibidores de alfa2-antiplasmina e complexo ativador de plasminogênio-estreptoquinase anisolado, inclu- indo seus sais e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis. O termo anistreplase, como aqui utilizado, se refere ao complexo ativador de plasminogênio-estreptoquinase anisolado, como descrito, por exemplo, no Documento EP 028,489, cuja descrição é aqui incorporada por refe- rência. O termo uroquinase, como aqui utilizado, pretende indicar a uroquinase de cadeia dupla e única, sendo a última também referida como prouroquinase.

[00206] Exemplos de agentes antiarrítmicos adequados incluem:

Agentes da classe | (como propafenona); agentes da classe |l (como metoprolol, atenolol, carvedilol e propranolol); agentes da classe Ill (como sotalol, dofetilida, amiodarona, azimilida e ibutilida); agentes da classe IV (como diltiazem e verapamil); sulcadores de canais de K, como inibidores de IAch e inibidores de IKur (por exemplo, compostos como aqueles revelados no Documento WO01/40231).

[00207] Os compostos da presente invenção podem ser coadminis- trados com agentes anti-insuficiência cardíaca, como inibidores de ACE (por exemplo, captopril, enalapril, fosinopril, Lisinopril, perindopril, quinapril, Ramipril, trandolapril), bloqueadores dos receptores de Angi- otensina Il (por exemplo, Candesartana, Losartana, Valsartana), inibi- dores de neprilisina do receptor de angiotensina (sacubitril/valsartana), bloqueador dos canais |; Ivabradina, agentes bloqueadores beta- Adrenérgicos (por exemplo, bisoprolol, metoprolol succinato, carve- dilol), antagonistas de Aldosterona (por exemplo, espironolactona, eplerenona), dinitrato de hidralazina e de isossorbida, diuréticos (por exemplo, furosemida, bumetanida, torsemida, clorotiazida, amilorida, hidroclorotiazida, Indapamida, Metolazona, Triantereno) ou digoxina.

[00208] Os compostos da invenção podem ser utilizados em combi- nação com agentes anti-hipertensivos e essa atividade anti-hiperten- siva é facilmente determinada por aqueles qualificados na arte de acordo com os ensaios padrão (por exemplo, medidas da pressão ar- terial). Exemplos de agentes anti-hipertensivos adequados incluem: bloqueadores alfa-adrenérgicos; bloqueadores beta-adrenérgicos; blo- queadores dos canais de cálcio (por exemplo, diltiazem, verapamil, nifedipina e anlodipina); vasodilatadores (por exemplo, hidralazina), diruéticos (por exemplo, clorotiazida, hidroclorotiazida, flumetiazida, hidroflumeazida, bendroflumetiazida, metilclorotiazida, triclorometiazi- da, politiazida, benztiazida, tricrinafeno de ácido etacrínico, clortalido- na, torsemida, furosemida, indapamida, metozolona, musolimina, bu-

metanida, triantereno, amilorida, espirolactona); inibidores de renina; inibidores de ACE (por exemplo, captopril, zofenopril, fosinopril, enala- pril, ceranopril, cilazopril, delapril, pentopril, perindopril, quinapril, rami- pril, trandolapril, lisinopril); Antagonistas do receptor de AT-1 (por exemplo, losartana, irbesartana, valsartana); inibidores da neprilisina do receptor de Angiotensina (sacubitril / valsartana); agentes bloquea- dores beta-Adrenérgicos (por exemplo, bisoprolol, succinato de meto- prolol, carvedilol); antagonistas do receptor de ET (por exemplo, sitax- sentana, atrsentana e os compostos revelados nas Patentes U.S. Nº 5,612,359 e 6,043,265); Antagonista duplo de ET / All (por exemplo, os compostos revelados no Documento WO 00/01389); inibidores da endopeptidase neutra (NEP); inibidores de vasopepsidase (inibidores duplos de NEP-ACE) (por exemplo, gemopatrilato e nitratos). Um agente antianginal exemplificativo é a ivabradina.

[00209] “Exemplos de bloqueadores de canais de cálcio (tipo L ou tipo T) adequados incluem diltiazem, verapamil, nifedipina e anlodipina e mibefradil.

[00210] Exemplos de glicosídeos cardíacos adequados incluem di- gitalis e ouabaína.

[00211] Em uma modalidade, os composto da invenção podem ser coadministrados com um ou mais diuréticos. Exemplos de diuréticos adequados incluem (a) diuréticos de alça, como furosemida (como LASIXTY), torsemida (como DEMADEXTY), bemetanida (como BU- MEX'Y) e ácido etacrínico (como EDECRINTY); (b) diuréticos tiazídi- cos, como clorotiazida (como DIURIL'Y, ESIDRIX"Y ou HYDRODIU- RILTY), hidroclorotiazida (como MICROZIDET!Y ou ORETICTY), benzti- azida, hidroflumetiazida (como SAURON'TY), bendroflumetiazida, me- tilclorotiazida, politiazida, triclorometiazida e indapamina (como LOZOL'Y); (c) diuréticos do tipo ftalimida, como clortalidona (como HYGROTON'Y) e metolazona (como ZAROXOLYN''Y); (d) diuréticos do tipo quinazolina, como quinetazona; e (e) diuréticos de reserva de potássio, como triantereno (como DYRENIUM'Y) e amilorida (como MIDAMOR'Y ou MODURETIC'Y).

[00212] Em outra modalidade, os compostos da invenção podem ser coadministrados com um diurético de alça. Em ainda outra modali- dade, o diurético de alça é selecionado dentre furosemida e torsemida. Em ainda outra modalidade, os compostos da invenção podem ser co- administrados com furosemida. Ainda em outra modalidade, os com- postos da invenção podem ser coadministrados com a torsemida, que pode opcionalmente ser uma forma de liberação controlada ou modifi- cada da torsemida.

[00213] Em outra modalidade, os compostos da invenção podem ser coadministrados com um diurético tiazídico. Em ainda outra moda- lidade, o diurético tiazídico é selecionado a partir do grupo constituído por clorotiazida e hidroclorotiazida. Em ainda outra modalidade, os compostos da invenção podem ser coadministrados com clorotiazida. Em ainda outra modalidade, os compostos da invenção podem ser co- administrados com hidroclorotiazida.

[00214] Em outra modalidade, os compostos da invenção podem ser coadministrados com um diurético do tipo ftalimida. Em ainda outra modalidade, o diurético tipo ftalimidina é a clortalidona. Exemplos de antagonistas dos receptores mineralocorticoides adequados incluem espironolactona e eplerenona. Exemplos de inibidores da fosfodieste- rase adequados incluem: Inibidores da PDE Ill (como o cilostazol) e inibidores da PDE V (como o sildenafil).

[00215] Aqueles versados na técnica reconhecerão que os compos- tos desta invenção também podem ser utilizados em conjunto com ou- tros tratamentos cardiovasculares ou cerebrovasculares, incluindo PCI, stents, stents de eluição de fármacos, terapia com células-tronco e dispositivos médicos, como marca-passos implantados, desfibriladores ou terapia de ressincronização cardíaca.

[00216] Particularmente quando fornecido como uma única unidade de dosagem, existe potencial para uma interação química entre os in- gredientes ativos combinados. Por isso, quando um primeiro agente terapêutico e um segundo agente terapêutico são combinados em uma única unidade de dosagem, eles são formulados de forma que, embo- ra os ingredientes ativos sejam combinados em uma única unidade de dosagem, o contato físico entre os ingredientes ativos é minimizado (ou seja, reduzido). Por exemplo, um ingrediente ativo pode ter reves- timento entérico. Com o revestimento entérico de um dos ingredientes ativos, é possível não apenas minimizar o contato entre os ingredien- tes ativos combinados, mas também é possível controlar a liberação de um desses componentes no trato gastrointestinal, de forma que um desses componentes não seja liberado no estômago, mas nos intesti- nos. Um dos ingredientes ativos também pode ser revestido com um material que afeta uma liberação sustentada em todo o trato gastroin- testinal e também serve para minimizar o contato físico entre os ingre- dientes ativos combinados. Além disso, o componente de liberação sustentada pode ser adicionalmente de revestimento entérico, de tal forma que a liberação deste componente ocorre somente no intestino. Ainda outra abordagem envolveria a formulação de um produto de combinação, no qual um componente é revestido com um polímero de liberação sustentada e/ou entérica, e o outro componente é também revestido com um polímero, como um grau de baixa viscosidade da hidroxipropil metilcelulose (HPMC), ou outros materiais apropriados conhecidos na arte, para separar ainda mais os componentes ativos. O revestimento polimérico serve para formar uma barreira adicional à interação com o outro componente.

[00217] Essas, bem como outras maneiras de minimizar o contato entre os componentes dos produtos de combinação da presente in-

venção, sejam administrados em uma forma de dosagem única ou administrados em formas separadas, mas ao mesmo tempo da mesma maneira, serão facilmente evidentes para aqueles versados na técnica, uma vez com conhecimento da presente descrição.

[00218] No tratamento terapêutico combinado, tanto os compostos desta invenção como as outras terapias medicamentosas são adminis- trados a mamíferos (por exemplo, seres humanos, homens ou mulhe- res) por métodos convencionais.

[00219] A dosagem de cada agente terapêutico, por exemplo, Composto A, Composto D, e qualquer agente terapêutico adicional, é geralmente dependente de vários fatores, incluindo a saúde do indiví- duo tratado, a extensão do tratamento desejado, a natureza e o tipo de terapia simultânea, se houver, e a frequência do tratamento e a natu- reza do efeito desejado. Em geral, a faixa de dosagem de cada agente terapêutico está no intervalo de cerca de 0,001 mg a cerca de 100 mg por quilograma de peso corporal do indivíduo por dia, preferencialmen- te de cerca de 0,1 mg a cerca de 10 mg por quilograma de peso corpo- ral do indivíduo por dia. No entanto, pode também ser necessária al- guma variabilidade na faixa de dosagem geral, dependendo da idade e do peso do indivíduo em tratamento, da via de administração pretendi- da, do agente antiobesidade em particular a ser administrado e simila- res. A determinação das faixas de dosagem e dosagens ideais para um paciente em particular também está bem dentro da capacidade do versado na técnica, tendo o benefício da presente descrição.

[00220] “De acordo com os métodos de tratamento da invenção, um composto da invenção ou uma combinação de um composto da inven- ção e pelo menos um agente farmacêutico adicional (aqui referido co- mo uma "combinação") é administrado a um indivíduo em necessidade desse tratamento, de preferência sob a forma de uma composição farmacêutica. No aspecto de combinação da invenção, o composto da invenção e pelo menos outro agente farmacêutico (por exemplo, outro agente antiobesidade) podem ser administrados separadamente ou em uma composição farmacêutica que inclua ambos. Em geral, há a preferência de que essa administração seja oral.

[00221] “Quando uma combinação de um composto da invenção e pelo menos outro agente farmacêutico são administrados juntos, essa administração pode ser sequencial ou simultânea. A administração si- multânea de combinações de fármacos é geralmente preferida. Para a administração sequencial, um composto da invenção e o agente far- macêutico adicional podem ser administrados em qualquer ordem. Em geral, há a preferência de que essa administração seja oral. É particu- larmente preferido que essa administração seja oral e simultânea. Quando um composto da invenção e o agente farmacêutico adicional são administrados sequencialmente, a administração de cada um pode ser feita por métodos iguais ou diferentes.

[00222] “De acordo com os métodos da invenção, um composto da invenção ou uma combinação é administrada preferencialmente na forma de uma composição farmacêutica. Assim, um composto da in- venção ou uma combinação pode ser administrada a um paciente se- paradamente ou em conjunto em qualquer forma de dosagem conven- cional oral, retal, transdérmica, parentérical (por exemplo, endovenosa, intramuscular ou subcutânea), intracisternal, intravaginal, intraperito- neal, tópica (por exemplo, pó, pomada, creme, pulverização ou loção), forma de dosagem bucal ou nasal (por exemplo, pulverização, gotas ou inalante).

[00223] Os compostos da invenção ou as combinações podem ser administradas isoladamente, mas serão geralmente administradas em uma mistura com um ou mais excipientes farmacêuticos adequados, adjuvantes, diluentes ou carreadores conhecidos na arte e seleciona- dos em relação à via de administração prevista e à prática farmacêuti-

ca padrão. O composto da invenção ou combinação pode ser formula- da para fornecer formas de dosagem de liberação imediata, retardada, modificada, sustentada, pulsada ou controlada, dependendo da via de administração desejada e da especificidade do perfil de liberação, pro- porcional às necessidades terapêuticas.

[00224] A composição farmacêutica compreende um composto da invenção ou uma combinação em uma quantidade geralmente no in- tervalo de cerca de 1% a cerca de 75%, 80%, 85%, 90% ou mesmo 95% (em peso) da composição, geralmente na faixa de cerca de 1%, 2% ou 3% a cerca de 50%, 60% ou 70%, mais frequentemente no in- tervalo de cerca de 1%, 2% ou 3% a menos de 50%, como cerca de 25%, 30% ou 35%.

[00225] Os métodos de preparação de várias composições farma- cêuticas com uma quantidade específica de composto ativo são co- nhecidos por aqueles versados na técnica. Para obter exemplos, con- sulte Remington: The Practice of Pharmacy, Lippincott Williams and Wilkins, Baltimore Md. 20.sup.th ed. 2000.

[00226] “Composições adequadas para injeção parentérica incluem geralmente soluções, dispersões, suspensões ou emulsões estéreis aquosas ou não aquosas e farmaceuticamente aceitáveis, e pós esté- reis para reconstituição em soluções ou dispersões estéreis injetáveis. Exemplos de carreadores ou diluentes aquosos e não aquosos ade- quados (incluindo solventes e veículos) incluem água, etanol, polióis (propilenoglicol, polietilenoglicol, glicerol e similares), suas misturas adequadas, triglicerídeos, incluindo óleos vegetais, como azeite, e és- teres orgânicos injetáveis, como o oleato de etila. Um carreador prefe- rido é o éster de ácido caprílico/cáprico da marca Miglyol com glicerina ou propilenoglicol (por exemplo, Miglyol& 812, MiglyolO& 829, MiglyolO 840) disponível por Condea Vista Co., Cranford, NJ. A fluidez adequa- da pode ser mantida, por exemplo, por meio do uso de um revestimen-

to como a lecitina, por meio da manutenção do tamanho de partículas necessário no caso de dispersões, e por meio do uso de tensoativos.

[00227] Essas composições para injeção parentérica também po- dem conter excipientes como conservantes, umidificantes, emulsifican- tes e agentes de dispersão. A prevenção da contaminação das com- posições por micro-organismos pode ser feita com vários agentes an- tibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico e similares. Também pode ser desejável incluir agentes isotônicos, por exemplo, açúcares, cloreto de sódio e afins. À absorção prolongada das composições farmacêuticas injetáveis pode ser provocada pelo uso de agentes capazes de retardar a absorção, por exemplo, monoestearato de alumínio e gelatina.

[00228] As formas de dosagem sólidas para administração oral in- cluem cápsulas, comprimidos, gomas de mascar, pastilhas, pílulas, pós e preparações multiparticuladas (grânulos). Nessas formas de do- sagem sólidas, um composto da invenção ou uma combinação é mis- turada com pelo menos um excipiente, diluente ou carreador inerte. Excipientes, diluentes ou carreadores adequados incluem materiais como citrato de sódio ou fosfato dicálcico e/ou (a) uma ou mais cargas ou extensores (por exemplo, celulose microcristalina (disponível como Avicel& da FMC Corp.) amidos, lactose, sacarose, manitol, ácido silíci- co, xilitol, sorbitol, dextrose, hidrogenofosfato de cálcio, dextrina, alfa- ciclodextrina, beta-ciclodextrina, polietilenoglicol, ácidos graxos de ca- deia média, óxido de titânio, óxido de magnésio, óxido de alumínio e semelhantes); (b) um ou mais aglutinantes (por exemplo, carboximetil- celulose, metilcelulose, hidroxipropilcelulose, hidroxipropilmetilcelulo- se, gelatina, goma arábica, etilcelulose, álcool polivinílico, pululano, amido pré-gelatinizado, ágar, tragacanto, alginatos, gelatina, polivinil- pirrona, sacarose, acácia e similares); (c) um ou mais umectantes (por exemplo, glicerol e semelhantes); (d) um ou mais agentes desintegran-

tes (por exemplo, ágar-ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, alguns silicatos complexos, carbonato de só- dio, lauril sulfato de sódio, glicolato de amido de sódio (disponível co- mo Explotab'!" da Edward Mendell Co. ), polivinilpirrolidona reticulada, croscarmelose de sódio do tipo A (disponível como Ac-di-solO), polia- crilina potássica (uma resina de troca iônica) e semelhantes); (e) um ou mais retardadores de solução (por exemplo, parafina e semelhan- tes); (f) um ou mais aceleradores de absorção (por exemplo, compos- tos de amônio quaternário e semelhantes); (g) um ou mais agentes umidificantes (por exemplo, álcool cetílico, monoestearato de glicerol e semelhantes); (h) um ou mais adsorventes (por exemplo, caulim, ben- tonita e semelhantes); e / ou (i) um ou mais lubrificantes (por exemplo, talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, ácido esteárico, es- tearato de polioxila, cetanol, talco, óleo de rícino hidrogenado, ésteres de sacarose de ácido graxo, dimetilpolissiloxano, cera microcristalina, cera de abelha amarela, cera de abelha branca, polietilenoglicóis sóli- dos, laurilsulfato de sódio e semelhantes). No caso de cápsulas e comprimidos, as formas de dosagem também podem compreende agentes de tamponamento.

[00229] “Composições sólidas de um tipo semelhante podem tam- bém ser utilizadas como cargas em cápsulas de gelatina macias ou duras, utilizando excipientes como a lactose ou o açúcar de leite, bem como polietileno glicois de alto peso molecular e similares.

[00230] As formas sólidas de dosagem, como comprimidos, drá- geas, cápsulas, e grânulos, podem ser preparadas com revestimentos e envoltórios, como revestimentos entéricos, e outros bem conhecidos na arte. Elas podem também conter agentes opacificantes, e também podem ser de composição tal que liberte o composto da invenção e/ou o agente farmacêutico adicional de forma retardada. Exemplos de Composição de impregnação que podem ser usadas são substâncias poliméricas e ceras. O fármaco também pode estar em forma microen- capsulada, se apropriado, com um ou mais dos excipientes acima mencionados.

[00231] Para comprimidos, o agente ativo irá normalmente compre- ender menos de 50% (em peso) da formulação, por exemplo, menos de cerca de 10%, como 5% ou 2,5% em peso. A parte predominante da formulação compreende cargas, diluentes, desintegrantes, lubrifi- cantes e, opcionalmente, saborizantes. A composição desses excipi- entes é bem conhecida na técnica. Frequentemente, as car- gas/diluentes incluirão misturas de dois ou mais dos seguintes compo- nentes: celulose microcristalina, manitol, lactose (todos os tipos), ami- do e fosfato dicálcico. As misturas de carga/diluente compreendem normalmente menos de 98% da formulação e, de preferência, menos de 95%, por exemplo, 93,5%. Desintegrantes preferidos incluem Ac-di- solo, ExplotabO, amido e lauril sulfato de sódio. Quando presente, um desintegrador geralmente compreenderá menos de 10% da formula- ção ou menos de 5%, por exemplo, cerca de 3%. Um lubrificante pre- ferido é o estearato de magnésio. Quando presente, um lubrificante normalmente compreenderá menos de 5% da formulação ou menos de 3%, por exemplo, cerca de 1%.

[00232] Os comprimidos podem ser produzidos por processos de formação de comprimidos convencionais, por exemplo, compressão direta ou granulação úmida, seca ou por fusão, processo de congela- mento por fusão e extrusão. Os núcleos do comprimido podem ser mono ou multicamada(s) e podem ser revestidos com sobrecamadas apropriadas conhecidas na arte.

[00233] As formas de dosagem líquidas para administração oral in- cluem emulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuti- camente aceitáveis. Além do composto da invenção ou da combina- ção, a forma de dosagem líquida pode conter diluentes inertes nor-

malmente utilizados na arte, como água ou outros solventes, agentes solubilizantes e emulsificantes, como, por exemplo, álcool etílico, álco- ol isopropílico, carbonato de etila, acetato de etila, álcool benzílico, benzoato de benzila, propilenoglicol, 1,3-butilenoglicol, dimetilformami- da, óleos (por exemplo, óleo de algodão, óleo de amendoim, óleo de germe de milho, óleo de oliva, óleo de mamona, óleo de semente de gergelim e similares), Migliole"Y (disponível por CONDEA Vista Co., Cranford, N.J.), glicerol, álcool tetra-hidrofurílico, polietileno glicóis e ésteres de ácidos graxos de sorbitano, ou misturas desses, e simila- res.

[00234] Além desses diluentes inertes, a composição pode incluir também excipientes, como agentes umidificantes, agentes emulsifican- tes e de suspensão, edulcorantes, saborizantes e agentes perfuman- tes.

[00235] As formas orais líquidas dos compostos da invenção ou combinações incluem soluções, nas quais o composto ativo é total- mente dissolvido. Exemplos de solventes incluem todos os solventes farmaceuticamente aceitáveis adequados para administração oral, par- ticularmente aqueles em que os compostos da invenção mostram boa solubilidade, por exemplo, polietileno glicol, polipropileno glicol, óleos comestíveis e sistemas com base em glicerídeo e glicerila. Os siste- mas com base em glicerídeo e glicerila podem incluir, por exemplo, os seguintes produtos de marca (e produtos genéricos correspondentes): Captex& 355 EP (tricaprilato / caprato de glicerila, da Abi-tec, Colum- bus OH), CrodamolI& GTC/C (triglicerídeo de cadeia média, da Croda, Cowick Hall, GB) ou Labrafac& CC (triglicerídeos de cadeia média, da Gattefosse), Captex& 500P (triacetato de glicerila, isto é, triacetina, da Abitec), Capmul8& MCM (mono- e diglicerídeos de cadeia média, da Abitec), Migyol& 812 (triglicerídeo caprílico/cáprico, da Condea, Cran- ford NJ), Migyol& 829 (triglicerídeo caprílico/cáprico/succínico, da

Condea), Migyol& 840 (dicaprilato / dicaprato de propileno glicol, da Condea), Labrafil& M1944CS (glicerídeos de oleil macrogol-6, da Gat- tefosse), Peceol'Y (mono-oleato de glicerila , da Gattefosse) e Maisi- net“ 35-1 (mono-oleato de glicerila, da Gattefosse). De especial inte- resse são os óleos de triglicerídeos da cadeia média (cerca de C.sub.8 a C.sub.10). Esses solventes frequentemente compõem a parte pre- dominante da composição, isto é, mais do que cerca de 50%, normal- mente mais do que cerca de 80%, por exemplo cerca de 95%, 97% ou 99%. Os adjuvantes e aditivos podem também ser incluídos nos sol- ventes principalmente como agentes de mascaramento de sabor, agentes de palatabilidade e saborizantes, antioxidantes, estabilizantes, modificadores de textura e viscosidade e solubilizantes.

[00236] As suspensões, além do composto da invenção ou da com- binação, podem ainda incluir carreadores como os agentes de sus- pensão, por exemplo, álcoois isoestearílicos etoxilados, ésteres de sorbitol e sorbitano polioxietileno, celulose microcristalina, meta- hidróxido de alumínio, bentonita, ágar-ágar e tragacanto, ou misturas dessas substâncias, e similares.

[00237] As composições para a administração retal ou vaginal com- preendem, de preferência, supositórios, que podem ser preparados por mistura de um composto da invenção ou uma combinação com excipientes ou carreadores adequados e não irritantes, como manteiga de cacau, polietilenoglicol ou uma cera de supositório, que sejam sóli- dos à temperatura ambiente ambiente normal, porém líquidos à tempe- ratura corporal e, portanto, derretam na cavidade retal ou vaginal, as- sim liberando o(s) componente(s) ativo(s).

[00238] As formas de dosagem para administração tópica dos com- postos da invenção ou combinações incluem pomadas, cremes, lo- ções, pós e pulverizações. Os fármacos são misturados com um exci- piente, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável, e quaisquer conservantes, tampões ou propulsores que possam ser necessários.

[00239] “Quando os compostos são pouco solúveis em água, por exemplo, menos de 1 pg/ml, as composições líquidas em solventes solubilizantes não aquosos, como os óleos de triglicerídeos de cadeia média acima referidos, são uma forma de dosagem preferida para es- ses compostos.

[00240] As dispersões amorfas sólidas, incluindo as dispersões formadas por um processo de secagem por pulverização, são também uma forma de dosagem preferida para os compostos pouco solúveis da invenção. Por "dispersão amorfa sólida", deve ser entendido um material sólido no qual pelo menos uma parte do composto pouco so- lúvel está na forma amorfa e dispersa em um polímero solúvel em água. Por "amorfo", deve ser entendido que o composto pouco solúvel não é cristalino. Por "cristalino", deve ser entendido que o composto exibe ordem de longo alcance em três dimensões de pelo menos 100 unidades repetidas em cada dimensão. Assim, o termo amorfo preten- de incluir não apenas material que essencialmente não tem ordem, mas também material que pode ter um pequeno grau de ordem, mas a ordem está em menos de três dimensões e/ou é apenas em distâncias curtas. O material amorfo pode ser caracterizado por técnicas conhe- cidas na arte, como a cristalografia de difração de pó de raios-X (PXRD), RMN de estado sólido ou técnicas térmicas, como a calorime- tria de varredura diferencial (DSC).

[00241] De preferência, pelo menos uma parte maior (ou seja, pelo menos cerca de 60% em peso) do composto pouco solúvel na disper- são amorfa sólida é amorfa. O composto pode existir dentro da disper- são amorfa sólida em domínios ou regiões amorfas relativamente pu- ras, como uma solução sólida do composto distribuída homogenea- mente por todo o polímero ou qualquer combinação desses estados ou os estados intermediários. Preferencialmente, a dispersão amorfa sóli-

da é substancialmente homogênea, de modo que o composto amorfo é disperso de forma mais homogênea possível por todo o polímero. Tal como aqui utilizado, "substancialmente homogêneo" significa que a fração do composto presente em domínios ou regiões amorfas relati- vamente puras dentro da dispersão amorfa sólida é relativamente pe- quena, da ordem de menos de 20% em peso, e preferivelmente menos de 10% em peso da quantidade total de fármaco.

[00242] Os polímeros solúveis em água adequados para uso nas dispersões amorfas sólidas devem ser inertes, no sentido de não rea- girem quimicamente com o composto pouco solúvel de forma adversa, devem ser aceitáveis do ponto de vista farmacêutico e devem ter pelo menos alguma solubilidade em solução aquosa a pHs fisiologicamente relevantes (por exemplo, de 1 a 8). O polímero pode ser neutro ou io- nizável, e deve ter uma solubilidade aquosa de pelo menos 0,1 mg/mL sobre pelo menos uma parte da faixa de pH de 1 a 8.

[00243] Os polímeros solúveis em água adequados para uso com a invenção podem ser celulósicos ou não celulósicos. Os polímeros po- dem ser neutros ou ionizáveis em solução aquosa. Desses, os políme- ros ionizáveis e celulósicos são preferidos, sendo ainda preferidos os polímeros ionizáveis celulósicos.

[00244] Os polímeros solúveis em água exemplificativos incluem suc- cinato acetato de hidroxipropilmetilcelulose (HPMCAS), hidroxipropilme- tilcelulose (HPMC), ftalato de hidroxipropilmetilcelulose (HPMCP), car- boximetiletilcelulose (CMEC), ftalato acetato de celulose (CAP), trimeli- tato acetato de celulose (CAT), polivinilpirrolidona (PVP), hidroxipropil- celulose (HPC), metilcelulose (MC), copolímeros em bloco de óxido de etileno e óxido de propileno (PEO/PPO), também conhecidos como poloxâmeros), e suas misturas. Os polímeros especialmente preferidos incluem HPMCAS, HPMC, HPMCP, CMEC, CAP, CAT, PVP, polioxà- meros e suas misturas. HPMCAS é preferido. Consulte a Publicação de Pedido de Patente Europeu nº 0 901 786 A2, cuja descrição é aqui incorporada por referência.

[00245] As dispersões amorfas sólidas podem ser preparadas de acordo com qualquer processo para formar dispersões amorfas sólidas que resulte em pelo menos uma porção maior (pelo menos 60%) do composto pouco solúvel no estado amorfo. Esse processos incluem processos mecânicos, térmicos e solventes. Processos mecânicos exemplificativos incluem a moagem e a extrusão; os processos de fu- são incluindo a fusão em alta temperatura, a fusão modificada por sol- ventes e os processos de fusão-congelamento; e os processos solven- tes incluindo a precipitação sem solventes, o revestimento por pulveri- zação e a secagem por pulverização. Consulte, por exemplo, as se- guintes Patentes US, cujas divulgações pertinentes são aqui incorpo- radas por referência: nº*º 5,456,923 e 5,939,099, que descrevem a for- mação de dispersões por processos de extrusão; nº*º 5,340,591 e 4,673,564, que descrevem a formação de dispersões por processos de moagem; e nº* 5,707,646 e 4,894,235, que descrevem a formação de dispersões por processos de fusão-congelamento. Em um processo preferido, a dispersão amorfa sólida é formada por secagem por pulve- rização, conforme divulgado na Publicação de Patente Europeia nº O 901 786 A2. Nesse processo, o composto e o polímero são dissolvidos em um solvente, como acetona ou metanol, e o solvente é, então, ra- pidamente removido da solução por secagem por pulverização para formar a dispersão amorfa sólida. As dispersões amorfas sólidas po- dem ser preparadas para conter até cerca de 99% de peso do com- posto, por exemplo, 1% em peso, 5% em peso, 10% em peso, 25% em peso, 50% em peso, 75% em peso, 95% em peso ou 98% em pe- so, conforme desejado.

[00246] A dispersão sólida pode ser usada como a própria forma de dosagem ou pode servir como um produto de uso para fabricação

(MUP) na preparação de outras formas de dosagem, como cápsulas, comprimidos, soluções ou suspensões. Um exemplo de uma suspen- são aquosa é uma suspensão aquosa de uma dispersão seca por pul- verização de composto/HPMCAS-HF a 1:1 (p/p) contendo 2,5 mg/mL de composto em polissorbato 80 a 2%. As dispersões sólidas para uso em um comprimido ou cápsula geralmente serão misturadas com ou- tros excipientes ou adjuvantes normalmente encontrados nessas for- mas de dosagem. Por exemplo, uma carga exemplificativa para cápsu- las contém uma dispersão seca por pulverização de compos- to/HPMCAS-MF a 2:1 (p/p) (60%), lactose (fluxo rápido) (15%), celulo- se microcristalina (por exemplo, Avicel(Rº-102) (15,8%), amido de sódio (7%), lauril sulfato de sódio (2%) e estearato de magnésio (1%).

[00247] Os polímeros HPMCAS estão disponíveis em graus baixo, médio e alto, como goa(P!F, Agoat(R-MF e Agoat(RHF respectivamente, da Shin-Etsu Chemical Co., LTD, Tóquio, Japão. Os graus mais eleva- dos MF e HF são geralmente preferidos.

[00248] Os parágrafos a seguir descrevem formulações exemplifica- tivas, dosagens, etc. úteis para animais não humanos. A administração do Composto A, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em com- binação com o Composto D, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, como os dois agentes ou em combinações com outro agente, po- de ser realizada por via oral ou não oral.

[00249] Uma quantidade do Composto A, ou um seu sal farmaceu- ticamente aceitável, com o Composto D, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, juntamente ou em combinação com outro agente, é administrada, de modo uma dose eficaz seja recebida. Geralmente, uma dose diária administrada por via oral a um animal situa-se entre cerca de 0,01 e cerca de 1,000 mg/kg de peso corporal, por exemplo, entre cerca de 0,01 e cerca de 300 mg/kg ou entre cerca de 0,01 e cerca de 100 mg/kg ou entre cerca de 0,01 e cerca de 50 mg/kg de peso corporal, ou entre cerca de 0,01 e cerca de 25 mg/kg, ou cerca de 0,01 e cerca de 10 mg/kg ou cerca de 0,01 e cerca de 5 mg/kg. Uma dose diária do Composto A que é administrada pode ser de 2 mg, 3 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg ou 50 mg. A dose diária pode ser dividida em várias doses, como um intervalo de dosa- gem de BID/Q12 horas. Por exemplo, em alguns casos, a dose diária do Composto A pode ser administrada como 15 mg q12 horas. Uma dose diária do Composto D que é administrada pode ser de 50 mg, 100 mg, 200 mg ou 300 mg. A dose diária pode ser dividida em várias doses, como um intervalo de dosagem de BID/Q12 horas. Por exem- plo, em alguns casos, a dose diária do Composto D pode ser adminis- trada como 300 mg q12 horas.

[00250] —Convenientemente, um composto da invenção (ou combi- nação) pode ser carregado na água de beber, de modo que uma dose terapêutica do composto seja ingerida com a fonte diária de água. O composto pode ser doseado diretamente em água potável, de prefe- rência na forma de um concentrado solúvel em água, líquido (tal como uma solução aquosa de um sal solúvel em água).

[00251] —Convenientemente, um composto da invenção (ou combi- nação) também pode ser adicionado diretamente ao alimento, como tal, ou no forma de um suplemento de alimentação animal, também referido como uma pré-mistura ou concentrado. Uma pré-mistura ou concentrado do composto em um excipiente, diluente ou carreador é mais comumente empregada para a inclusão do agente na alimenta- ção. Excipientes, diluentes ou carreadores adequados são líquidos ou sólidos, conforme desejado, como água, várias farinhas, como farinha de alfafa, farinha de soja, farinha de óleo de semente de algodão, fari- nha de óleo de linhaça, farinha de espiga de milho e farinha de milho, melaços, ureia, farinha de osso e misturas de minerais, como as co- mumente empregadas em rações para aves. Um excipiente, diluente ou carreador particularmente eficaz é o próprio alimento para animais; isto é, uma pequena parte desse alimento. O carreador facilita a distri- buição uniforme do composto no alimento acabado com o qual a pré- mistura é misturada. De preferência, o composto é completamente misturado na pré-mistura e, posteriormente, na alimentação. Nesse sentido, o composto pode ser disperso ou dissolvido em um veículo oleoso adequado, como óleo de soja, óleo de milho, óleo de algodão, e similares, ou em um solvente orgânico volátil, e, então, misturado com o carreador. Será apreciado que as proporções de composto no concentrado são capazes de ampla variação, uma vez que a quanti- dade de composto no alimento acabado pode ser ajustada misturando- se a proporção apropriada de pré-mistura com o alimento para obter um nível desejado de composto.

[00252] Os concentrados de alta potência podem ser misturados pelo fabricante de alimentos para animais com carreadores proteicos, como farinha de óleo de soja e outras farinhas, conforme descrito aci- ma, para produzir suplementos concentrados, que são adequados pa- ra a alimentação direta de animais. Nesses casos, é permitido que os animais consumam a dieta usual. Alternativamente, esses suplemen- tos concentrados podem ser adicionados diretamente ao alimento para produzir um alimento nutricionalmente equilibrado, acabado contendo um nível terapeuticamente eficaz de um composto da invenção. As misturas são completamente misturadas por procedimentos convenci- onais, como em um misturador em "V", para garantir a homogeneida- de.

[00253] Seosuplemento for usado como cobertura para o alimento, ele também ajuda a garantir a uniformidade de distribuição do compos- to na cobertura do alimento.

[00254] A água de beber e o alimento eficazes para aumentar a de- posição de carne magra e para melhorar a relação entre carne magra e gordura são geralmente preparados por meio da mistura de um composto da invenção com uma quantidade suficiente de alimentos para animais para fornecer de cerca de 10º a cerca de 500 ppm do composto na alimentação ou água.

[00255] Os alimentos medicamentosos preferidos para suínos, bo- vinos, ovinos e caprinos contêm geralmente de cerca de 1 a cerca de 400 gramas de um composto da invenção (ou combinação) por tone- lada de alimento, sendo a quantidade ideal para estes animais nor- malmente de cerca de 50 a cerca de 300 gramas por tonelada de ali- mento.

[00256] Os alimentos preferidos para aves de capoeira e animais domésticos contêm normalmente cerca de 1 a cerca de 400 gramas e, de preferência, cerca de 10 a cerca de 400 gramas de um composto da invenção (ou combinação) por tonelada de alimento.

[00257] Paraa administração parentérica em animais, os compos- tos da invenção (ou combinação) podem ser preparados sob a forma de uma pasta ou pellet, e administrados como um implante, normal- mente sob a pele da cabeça ou da orelha do animal, em que se procu- ra aumentar a deposição de carne magra e melhorar a razão entre carne magra e gordura.

[00258] —“Formulações de pasta podem ser preparadas dispersando o fármaco em um óleo farmaceuticamente aceitável, como óleo de amendoim, óleo de gergelim, óleo de milho ou similares.

[00259] Os pellets contendo uma quantidade terapeuticamente efi- caz do Composto A, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com o Composto D, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a composição farmacêutica ou a combinação podem ser preparados misturando-se o Composto A, ou um sal farmaceuticamen- te aceitável, com o Composto D, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, com um diluente como o carbowax, a cera de carnaúba, etc.,

e um lubrificante, como o estearato de magnésio ou de cálcio, pode ser adicionado para melhorar o processo de peletização.

[00260] Evidentemente, é reconhecido que mais de um pellet pode ser administrado a um animal para alcançar o nível de dose pretendi- do, o que irá proporcionar o aumento da deposição de carne magra e a melhoria da razão entre carne magra/gordura pretendida. Além dis- so, implantes também podem ser feitos periodicamente durante o pe- ríodo de tratamento do animal, a fim de manter o nível adequado de fármacos no corpo do animal.

[00261] A invenção tem uma série de características veterinárias vantajosas. Para o dono de animal de estimação ou o veterinário que deseja aumentar a magreza e / ou cortar a gordura indesejada dos animais de estimação, a presente invenção fornece os meios pelos quais isso pode ser realizado Para os criadores de aves de capoeira, bovinos e suínos, o uso do método da invenção produz animais mais magros que geram preços de venda mais elevados da indústria de carne.

EXEMPLOS

[00262] Salvo especificação em contrário, os materiais de partida estão geralmente disponíveis a partir de fontes comerciais como Al- drich Chemicals Co. (Milwaukee, WI), Lancaster Synthesis, Inc. (Wind- ham, NH), Acros Organics (Fairlawn, NJ), Maybridge Chemical Com- pany, Ltd. (Cornwall, England) e Tyger Scientific (Princeton, NJ). Fo- ram utilizadas algumas abreviaturas e siglas comuns que podem inclu- ir: ACOH (ácido acético), DBU (1,8-diazabiciclo[5.4.0] undec-7-eno), CDI (1,1'-carbonildi-imidazol), DOM (diclorometano), DEA (dietilamina), DIPEA (N N-di-isopropiletilamina) DMAP (4-dimetilaminopiridina), DMF (N,N'-dimetilformamida), DMSO (dimetilsulfóxido), EDCI (N-(3- dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodi-imida), Et2O (dietil éter), EtOAc (ace- tato de etila), EtOH (etanol), G ou g (grama), HATU (hexafluorofosfato metanamínio de 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-i1)-1,1,3,3-tetrametilurônio), HBTU (hexafluoro fosfato de O-benzotriazol-1-il-N,N,N' N'-tetrametilu- rônio), HOBT (1-hidroxibenzotriazol), H ou h (hora), IPA (álcool isopro- pílico), KHMDS (hexametildisilazano de potássio), MeOH (metanol), L ou | (litro), mL (mililitro), MTBE ( terc-butil metil éter), mg (miligrama), NaBH (OAc);3 (triacetoxiboro-hidreto de sódio), NAHMDS (hexametildi- silazano de sódio), NMP (N-metilpirrolidona), RH (umidade relativa), RT ou rt (temperatura ambiente que é igual à temperatura do ambiente (cerca de 20 a 25 ºC)), SEM ([2-(Trimetilsili)etóxilmetil), TEA (trietila- mina), TFA (ácido trifluoroacético), THF (tetra-hidrofurano) e T3P (ani- drido do ácido propanofosfônico).

[00263] Os espectros de ressonância magnética nuclear *H (RMN) foram, em todos os casos, compatíveis com as estruturas propostas. As variações químicas características (5) são indicadas em partes por milhão (ppm) em relação ao sinal de próton residual no solvente deute- rado (CHCI3 a 7,27 ppm; CD2HOD a 3,31 ppm) e são indicadas usan- do abreviaturas convencionais para a designação de picos importan- tes: por exemplo, s, singuleto; d, dupleto; t, tripleto; q, quarteto; m, mul- tipleto; br, amplo.

[00264] — ssNMR significa RMN de estado sólido.

[00265] —PXRD significa difração de pó de raios-X.

[00266] O termo "substancialmente igual", quando usado para des- crever padrões de difração de pó de raios-X, deve ser entendido como incluindo padrões nos quais os picos estão dentro de um desvio pa- drão de +/- 0,2º 26.

[00267] Tal como aqui utilizado, o termo "substancialmente puro", com referência a uma determinada forma cristalina, significa que a forma cristalina inclui menos de 10%, de preferência menos de 5%, de preferência menos de 3%, de preferência menos de 1%, em peso de qualquer outra forma física do Composto A ou do Composto D.

[00268] As reações foram realizadas no ar ou, quando foram utili- zados reagentes ou intermediários sensíveis ao oxigênio ou à umida- de, sob uma atmosfera inerte (nitrogênio ou argônio). Quando apropri- ado, os aparelhos de reação foram secos sob vácuo dinâmico usando uma pistola de calor, e foram empregados solventes anidros (produtos Sure-Sealº da Aldrich Chemical Company, Milwaukee, Wisconsin ou produtos DriSolvº da EMD Chemicals, Gibbstown, NJ) Solventes e reagentes comerciais foram utilizados sem purificação adicional.

Quando indicado, as reações foram aquecidas por irradiação de micro- ondas utilizando o Iniciador Biotage ou micro-ondas Personal Chemis- try Ehrys Optimizer.

O progresso da reação foi monitorado por meio de cromatograffa em camada fina (TLC), cromatografia líquida- espectrometria de massa (LCMS), cromatografia líquida de alta per- formance (HPLC) e/ou cromatografia gasosa - espectrometria de mas- sa (GCMS). A TLC foi realizada em placas de sílica gel pré-revestidas com indicador de fluorescência (comprimento de onda de excitação de 254 nm) e visualizada sob luz UV e/ou com l2, KMnO:a, CoCl2, ácido fosfomolíbdico e / ou corantes de molibdato de amônio cérico.

Os da- dos da LCMS foram adquiridos em um instrumento Agilent 1100 Series com um autoamostrador Leap Technologies, colunas Gemini C18, gradientes de MeCN /água, e modificadores de TMA, ácido fórmico ou hidróxido de amônio.

O eluente de coluna foi analisado utilizando-se a varredura por espectrômetro de massa Waters ZQ, em ambos os mo- dos de íon positivo e negativo de 100 a 1200 Da.

Outros instrumentos semelhantes também foram utilizados.

Os dados de HPLC foram ad- quiridos em um instrumento Agilent Series 1100 usando colunas Ge- mini ou XBridge C18, gradientes de MeCN/água e modificadores de TFA ou de hidróxido de amônio Os dados da GCMS foram adquiridos utilizando uma estufa Hewlett Packard 6890 com um injector HP 6890, coluna HP-1 (12 m x 0,2 mm * 0,33 um) e gás carreador de hélio.

À amostra foi analisada em uma varredura por detector seletivo de mas- sa HP 5973 de 50 a 550 Da , usando ionização de elétrons. Purifica- ções foram realizadas por cromatografia líquida de desempenho médio (MPLC) utilizando os instrumentos Isco CombiFlash Companion, Ana- Logix IntelliFlash 280, Biotage SP1 ou Biotage Isolera One e cartuchos de sílica pré-empacotados Isco RediSep ou Biotage Snap . Purifica- ções quirais foram realizadas por cromatografia líquida quiral supercrí- tica (SFC) usando instrumentos Berger ou Thar; colunas ChiralPAK- AD, -AS, -IC, Chiralcel-OD ou —OJ; e misturas de CO27 com MeOH, EtOH, iPrOH ou MeCN, isoladamente ou modificadas usando TFA ou iPr2. A detecção de UV foi utilizada para disparar a coleta de frações.

[00269] Os dados da espectrometria de massa são reportados a partir de análises LCMS. A espectrometria de massa (MS) foi realizada por meio de ionização química por pressão atmosférica (APCI), ioniza- ção por eletrospray (ESI), ionização por impacto de elétrons (El) ou fontes de ionização por dispersão de elétrons (ES). Os deslocamentos químicos da espectroscopia magnética nuclear de prótons ('H RMN) são dados em partes por milhão no campo abaixo do tetrametilsilano, e foram registrados em espectrômetros Varian de 300, 400, 500 ou 600 MHz. Os deslocamentos químicos são expressos em partes por milhão (ppm, 5), com referência aos picos residuais de solventes deu- terados. As formas de pico são descritas do seguinte modo: S, singule- to; d, dupleto; t, tripleto; q, quarteto; quin, quinteto; m, multipleto; br s, singuleto amplo; app, aparente. Os dados analíticos da SFC foram ad- quiridos em um instrumento analítico Berger, como descrito acima. Os dados de rotação óptica foram adquiridos em um polarímetro Perki- nElmer modelo 343 utilizando uma célula de 1 dm. A cromatografia em gel de sílica foi realizada principalmente com os sistemas Biotage ou ISCO de média pressão, utilizando colunas pré-empacotadas por vá- rios fornecedores comerciais, incluindo Biotage e ISCO. Microanálises foram realizadas por Quantitative Technologies Inc. e estavam dentro de 0,4% dos valores calculados.

[00270] Salvo indicação em contrário, foram realizadas reações químicas à temperatura ambiente (cerca de 23 graus Celsius).

[00271] Os compostos e intermediários descritos abaixo foram no- meados usando a convenção de nomenclatura fornecida com Chem- BioDraw Ultra, Versão 12.0 (CambridgeSoft Corp., Cambridge, Massa- chusetts). A convenção de nomenclatura fornecida com ChemBioDraw Ultra, Versão 12.0, é bem conhecida por aqueles qualificados na arte e acredita-se que a convenção de nomenclatura fornecida com Chem- BioDraw Ultra, Versão 12.0 esteja, em geral, de acordo com as Reco- mendações da IUPAC (International Union for Pure and Applied Che- mistry) quanto à Nomenclatura da Química Orgânica e as regras de Índices CAS. Salvo indicação em contrário, todos os reagentes foram obtidos comercialmente sem outras purificações ou preparados utili- zando os métodos conhecidos na literatura.

[00272] Os termos "concentrado", "evaporado" e "concentrado no vácuo" se referem à remoção de solvente à pressão reduzida em um evaporador rotativo, com uma temperatura de banho inferior a 60 ºC. As abreviações "min" e "h" significam "minutos" e "horas", respectiva- mente. O termo "TLC" se refere à cromatografia em camada fina, "temperatura ambiente" significa uma temperatura entre 18 e 25 ºC, "GCMS" se refere à cromatografia gasosa — espectrometria de massa, "LCMS" se refere à cromatografia líquida — espectrometria de massa, "UPLC" se refere-se à cromatografia líquida de ultra desempenho e "HPLC" se refere à cromatografia líquida de alta pressão, "SFC" se refere à cromatografia em fluido supercrítico.

[00273] A hidrogenação pode ser realizada em um agitador Parr sob gás de hidrogénio pressurizado, ou em aparelho de hidrogenação de fluxo Thales-nano H-Cube em hidrogênio completo e a uma taxa de fluxo entre 1 e 2 ml/min à temperatura especificada.

[00274] Os tempos de retenção de HPLC, UPLC, LCMS, GCMS e SFC foram medidos pelos métodos indicados nos procedimentos.

PREPARAÇÃO DE INTERMEDIÁRIOS E EXEMPLOS

[00275] Exemplo 1 (composto dgat2i / composto D): (s)-2-(5-((3- etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-n-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina-S5- carboxamida Ds o

AA AO ”

N ETAPA 1: 3-Etoxipiridina

[00276] Carbonato de césio (12 mol; 1,5 equiv) e iodeto de etila (9,7 mol; 1,2 equiv) foram adicionados a uma solução de 3-hidroxipiridina (8,10 mol; 1,0 equiv) em acetona (12 L) a 15ºC. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 24 horas. A mistura de reação foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada para dar o produto em bruto. Acetato de etila (20 L) foi adicionado e lavado com água (3x5 L). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concen- trada para fornecer 3-etoxipiridina (620 g, 62%) como um óleo. *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 1,44 (t, 3H); 4,07 (q, 2H); 7,15-7,23 (m, 2H); 8,20 (dd, 1H), 8,30 (d, 1H). ETAPA 2: 3-Etoxipiridina-1-óxido

[00277] O ácido M-cloroperoxibenzoico (6,5 mol; 1,3 equiv) foi adi- cionado a uma solução de 3-etoxipiridina (5,0 mol; 1,0 equiv) em diclo- rometano (12 L) a 10 C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 24 horas. Tiossulfato de sódio (4 kg, em 5 L de água) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a 15 ºC por 2 horas. Foi adicionada outra porção de tiossulfato de sódio (1,5 kg, em 5 L de água). A mistura de reação foi agitada a 15 ºC por 1 hora. A mistura foi extraída com diclorometano (16x10 L). As camadas orgânicas combi- nadas foram concentradas para dar o produto em bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (dicloro- metano:metanol; 100:1-10:1) para dar o composto do título (680 9, 97%) como óleo castanho. Ele foi posteriormente purificado por tritura- ção com éter de petróleo (4 L) à temperatura ambiente durante 24 ho- ras para dar 3-etoxipiridina-1-óxido (580 g, 83%) como sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 1,41 (t, 3H); 4,02 (q, 2H); 6,84 (dd, 1H); 7,12 (dd, 1H); 7,85 (d, 1H); 7,91-7,95 (m, 1H). ETAPA 3: 2-((5-Bromopiridin-3-il)Óxi)-3-etoxipiridina

[00278] Estareação foi realizada em cinco lotes paralelos.

[00279] Di-isopropiletilamina (2,69 mol; 3,7 equiv) e hexafluorofosfa- to de bromotripirrolidinofosfônio (0,93 mol; 1,3 equiv) foram adiciona- dos a uma solução agitada de 3-etoxipiridina-1-óÓxido (0,72 mol; 1,0 equiv) e 3-bromo-S5-hidroxipiridina (0,72 mol; 1,0 equiv.) em tetra- hidrofurano (2500 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 dias; em seguida, os lotes separados foram combinados em um único lote. A suspensão resultan- te foi concentrada à secura e dissolvida em diclorometano (25 L). À camada orgânica foi lavada com hidróxido de sódio a 1N (15 L), água (3x20 L) e salmoura (20 L). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para dar um óleo. O óleo bruto foi puri- ficado por cromatografia em coluna de sílica gel (éter de petró- leo:acetato de etila; 10:1 a 1:1) para dar o produto em bruto como sóli- do castanho. Esse sólido foi triturado com metil terc-butil éter: éter de petróleo (1:10; 11 L) para dar 2-((5-bromopiridin-3-il)Óxi)-3-etoxipiridina (730 g, 69%) como sólido amarelado. *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 1,49 (t, 3H); 4,16 (q, 2H); 7,04 (dd, 1H); 7,25 (dd, 1H); 7,68-7,73 (m, 2H); 8.44 (d, 1H); 8,49 (d, 1H). MS (ES+) 297,1 (M+H). ETAPA 4: 2-(5-((3-Etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il )pirimidina-S-carboxila-

to de etila

[00280] Uma solução de 2-((5-bromopiridin-3-il)óxi)-3-etoxipiridina (300 mmol; 1,0 equiv) em tetra-hidrofurano (1,3 L) foi desgaseificada com nitrogênio por 30 minutos. Turbo Grignard (390 mmol; 1,3 equiv; 1,3 M em tetra-hidrofurano) foi adicionado à temperatura ambiente a uma taxa para manter a temperatura interna abaixo de 30 C. A mistura de reação foi deixada esfriar à temperatura ambiente e agitada por 3 horas. A reação foi resfriada a 10 C e cloreto de zinco (390 mmol; 1,3 equiv; 1,9 M em 2-metiltraidrofurano) foi adicionada a uma taxa para manter a temperatura abaixo de 15 C. A suspensão resultante foi aquecida à temperatura ambiente até que todo o precipitado foi dissol- vido e, então, resfriado de volta para 10 º C. 2-Cloropirimidina-5- carboxilato de etila (3860 mmol; 1,2 equiv) e dicloro[bis(2-(difenilfosfino) fenil)eter]paládio (11) (6,00 mmol; 0,02 equiv) foram adicionados como sólidos. A suspensão resultante foi desgaseificada com nitrogênio por minutos e, depois, aquecida a 50 C por 16 horas. A reação foi rea- lizada em condições aquosas e, posteriormente, tratada sequencial- mente com sal dissódico do ácido etilenodiaminotetra-acético, tiossilica e carvão para remover impurezas metálicas. O composto cru foi recris- tralizado a partir de metanol (450 mL) para produzir 2-(5-((3- etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il )pirimidina-S-carboxolato de etila (77 9, 70%) como um sólido amarelo pálido. *H RMN (400 MHz, CDCI3) à 1,44 (t, 3H); 1,50 (t, 3H); 4,19 (q, 2H); 4,46 (q, 2H); 7,00-7,04 (m, 1H); 7,25 (s, 1H); 7,71 (d, 1H); 8,59 (s, 1H); 8,66 (d, 1H); 9,32 (s, 2H); 9,55 (s, 1H). ETAPA 5: Ácido 2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)pirimidina-5- carboxílico (intermediário 1)

[00281] “Hidróxido de sódio (307 mmol; 1,5 equiv; 4M aquoso) e me- tanol (50 mL) foram adicionados a uma suspensão de 2-(5-((3-etoxi- piridin-2-il)óxi)piridin-3-il )pirimidina-5-carboxilato (205 mmol; 1,0 equiv)

em tetra-hidrofurano (300 mL). A solução resultante foi agitada à tem- peratura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi diluída com água (400 mL) e extraída com dietil éter:heptanos a 2:1 (2x 300 mL). A camada aquosa foi acidificada a pH de 4 com ácido clorídrico a 4M. À suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. O sólido foi filtrado, lavado com água e seco para produzir o ácido 2-(5- ((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il )pirimidina-S-carboxílico (69 g, 100%) como um sólido amarelo pálido. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 51,37 (t, 3H); 4,18 (q, 2H); 7,19 (dd, 1H); 7,58 (dd, 1H); 7,70 (dd, 1H); 8,35- 8,40 (m, 1H); 8,66 (d, 1H); 9,33 (s, 2H); 9,41 (d, 1H); 13,9 (br. s, 1H). ETAPA 6: (s)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)-n-(tetra- hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida — (exemplo — 1 (composto DGAT?2i))

[00282] Cloreto de oxalila (13,8 mL; 160 mmol; 1,2 equiv) e dimetil- formamida (0,510 mL; 6,65 mmol; 0,05 equiv) foram adicionados a uma suspensão de ácido 2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)piri- midina-S5-carboxílico (45,0 g; 133 mmol; 1,0 equiv.) em diclorometano (500 mL). A suspensão foi agitada por 2 horas quando uma solução foi alcançada. A mistura de reação foi concentrada para produzir cloreto de ácido em bruto como um sólido vermelho. Uma solução de (S)- tetra-hidrofurano-3-amina (12,2 g; 140 mmol; 1,05 equiv) e di-isopro- piletilamina (51,0 mL; 293 mmol; 2,2 equiv) em tetra-hidrofurano (100 mL) foi adicionada em gotas a uma solução de cloreto de ácido bruto em diclorometano (200 mL) a O C. A reação foi deixada aquecer à temperatura ambiente e agitada por 16 horas. Foram adicionados água (1.0 L) e acetato de etila (600 mL), e a camada orgânica foi sepa- rada, lavada com bicarbonato de sódio saturado, seca sobre sulfato de magnésio e filtrada. O filtrado foi Tratado com carvão ativado (20 9), agitado a 65 C por 20 minutos. A suspensão foi filtrada morna e o fil- trado concentrado até um sólido amarelo pálido que foi recristalizado a partir de metanol em acetato de etila (1:4, 1 L) para produzir (S)-2-(5- ((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-S5- carboxamida (43,5 g; 81%) como um sólido sem cor. O composto do título foi combinado com lotes anteriores (108,7 g; 266,8 mmol) prepa- rados da mesma forma e fluidificado com acetato de etila (1,0 L) a 80 “C por 4 horas. A suspensão foi deixada esfriar à temperatura ambien- te e agitada por 4 dias. O sólido foi filtrado, lavado com acetato de etila (3X200 mL) e seco sob vácuo alto a 50 C por 24 horas para produzir (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il) piri- midina-5-carboxamida (100,5 g; 92%) como um sólido sem cor. *H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 5 1,38 (t, 3H); 1,89-1,98 (m, 1H); 2,15-2,26 (m, 1H); 3,65 (dd, 1H); 3,70-3,78 (m, 1H); 3,85-3,92 (m, 2H); 4,18 (q, 2H); 4,46-4,55 (m, 1H); 7,18 (dd, 1H); 7,58 (dd, 1H); 7,69 (dd, 1H); 8,37 (dd, 1H); 8,64 (d, 1H); 8,95 (d, 1H); 9,28 (s, 2H); 9,39 (d, 1H). MS (ES+) 408,4 (M+H). Ponto de fusão 177,5 º C. Análise elementar pa- raC21H21N5O4: calculado C, 61,91; H, 5,20; N, 17,19; encontrado C, 61,86; H, 5,18; N, 17,30.

[00283] A forma sólida deste procedimento foi caracterizada por análise de difração de pó de raios-X (PXRD) e foi atribuída como For- ma 1 do Composto D. ETAPA ALTERNATIVA 6 para preparação de (s)-2-(5-((3-etoxipiridin- 2-il)óxi)piridin-3-il)-n-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-S5-carboxamida (exemplo 1 (composto D))

[00284] Um reator de 100 mL foi carregado com acetonitrila (35 mL), ácido 2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)pirimidina-5S-carbo- xílico (5,0 g; 15 mmol) e cloridrato de (S)-tetra-hidrofuran-3-amina (2,2 9; 18 mmol; 1,2 equiv). Di-isopropiletilamina (18 mL; 103 mmol; 7,0 equiv) foi carregada, mantendo-se a temperatura entre 20 ºC e 30 “ºC. Uma solução de anidrido de ácido propanofosfônico (T3P) em acetoni- trila (21 mL; 30 mmol; 2,0 equiv) foi carregada a uma taxa que mante-

ve a temperatura abaixo de 45 ºC. O reator foi aquecido a 40 + 5ºC por 1 hora e, em seguida, amostrado para conclusão da reação. A re- ação foi resfriada a 20 “ºC até 25 ºC e tetra-hidrofurano foi adicionado (25 mL). Foi carregada uma solução de bicarbonato de sódio (0,5M; 40 mL) e a mistura foi agitada por 1 hora. O pH foi verificado e medido em 8,5. Acetato de etila (40 mL) foi adicionado e a mistura agitada por 15 minutos. A mistura foi assentada e as fases se dividiram. A camada aquosa foi transferida para um funil separador e extraída com acetato de etila (100 mL). As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com água (40 mL). A camada orgânica foi transferida para um reator de 100 mL em porções e concentrada sob vácuo a um baixo volume. Foi adicionada metil etil cetona (100 mL) e a mistura foi concentrada a um volume final de aproximadamente 60 mL. O vácuo foi removido e a pasta fluida foi aquecida ao refluxo e mantida até que os sólidos fos- sem removidos das paredes do reator. A pasta fluida foi resfriada a 15 ºC durante 2 horas e granulada durante a noite. Os sólidos foram iso- lados por filtração, lavando o reator e o bolo duas vezes com metil etil cetona (10 mL cada). Os sólidos foram secos em uma estufa a vácuo a 50 ºC para produzir 4,86 g (81%) do produto desejado. A forma sóli- da deste procedimento foi caracterizada por análise via PXRD e foi atribuída como Forma 2 do Composto D. CONVERSÃO DA FORMA 2 NA FORMA 1 DO COMPOSTO D

[00285] Aum reator de 100 mL, foram carregadas a Forma 2 de S)- 2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3- iN)pirimidina-5-carboxamida (Exemplo 1) (10,0 g; 24,6 mmol; 1,00 equiv.), metil etil cetona (8,8 mL/g; 88,0 mL) e água (1,2 mL/g; 12,0 mL). A reator foi aquecido a 50 ºC durante 30 minutos. Uma solução completa apareceu a aproximadamente 44 ºC. O reator foi resfriado a 40 ºC durante 30 minutos, e, então, a Forma de semente 1 de (S)-2-(5- ((3-etoxipiridin-2-il )óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-S5-

carboxamida (Exemplo 1 do Composto D) (0,050 g; 0,123 mmol; 0,0050 equiv.) foi carregada. Após a semeadura, a pasta fluida turva foi agitada por 1 hora antes do resfriamento a 5 ºC durante 2 horas e, em seguida, agitada a 5 ºC por 12 horas. Uma amostra de controle de processo foi retirada e caracterizada por análise de PXKRD para con- firmar se os sólidos eram a Forma 1 do Composto D. A pasta foi filtra- da, e o reator e o bolo foram lavados com metil etil cetona a 0 ºC (2,5 mL/g; 25 mL) Os sólidos foram secos em uma estufa a vácuo a 50 ºC para produzir 8,15 g (81,5%) do produto desejado. Os padrões de PXRD do produto desejado foram consistentes com a Forma 1 do Composto D. DIFRAÇÃO DE PÓ DE RAIOS-X:

[00286] A análise da difração de pó de raios-X foi realizada utilizan- do-se um difratômetro Bruker AXS D8 Advance equipado com uma fonte de radiação Cu (comprimento de onda médio Ka de 1,54056À), equipado com um duplo primário utilizando um espelho Góbel. A radi- ação difratada foi detectada por um detetor PSD-Lynx Eye. Ambos primário e secundário equipados com 2,5 fendas definidoras. A volta- gem e a amperagem do tubo de raios-X foram ajustadas a40 kV e 40 mA, respectivamente. Os dados foram coletados no goniômetro Theta- Theta em uma varredura dupla bloqueada de 3,0 a 40,0 graus 2-Teta com 1000 etapas, usando uma velocidade de varredura de 6 segundos por etapa. As amostras foram preparadas por colocação em um supor- te de amostra de baixo fundo de silício (C79298A3244B261). Os da- dos foram coletados com o software Bruker DIFFRAC Plus. A análise realizada pelo software EVA Diffract Plus.

[00287] O arquivo de dados PXRD não foi processado antes da busca de pico. Com o uso do algoritmo de busca de pico no software EVA, os picos foram selecionados com um valor limite de 5 e um valor de largura de 0,2. A saída de atribuições automatizadas foi visualmen-

te verificada para garantir a validade e os ajustes feitos manualmente, se necessário. Em geral, foram escolhidos picos com intensidade rela- tiva de > 3%. Os picos que não foram resolvidos ou foram consistentes com o ruído também foram descartados. Um erro comum associado à posição de pico da PXRD indicado em USP está dentro de +/- 0,2º (USP-941).

[00288] Tabela 1: Principais picos de PXRD para caracterizar mate- rial cristalino EXEMPLO 1 (COMPOSTO D)

[00289] A Figura 1 é um padrão característico da difração de pó de raios-X mostrando a Forma cristalina 1 do Exemplo 1 (Composto D) (Eixo Vertical: Intensidade (CPS); Eixo Horizontal: Dois Teta (graus)).

[00290] A Figura 2 é um padrão característico da difração de pó de raios-X mostrando a Forma cristalina 2 do Exemplo 1 (Composto D) (Eixo Vertical: Intensidade (CPS); Eixo Horizontal: Dois Teta (graus)). EXEMPLO 2: Preparação de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico, composto a (composto ACCIi):

[00291] Na preparação do Composto A, observa-se que alguns dos métodos de preparação descritos aqui podem requerer proteção da funcionalidade remota (por exemplo, amina primária, amina secundá- ria, carboxila nos precursores da Fórmula |). A necessidade dessa pro- teção varia de acordo com a natureza da funcionalidade remota e as condições dos métodos de preparação. A necessidade dessa proteção é prontamente determinada por um técnico no assunto. O uso desses métodos de proteção/desproteção também se encontra dentro do âm- bito das habilidade da técnica. Para uma descrição geral dos grupos de proteção e seu uso, consulte T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Nova lorque, 1991. Além disso, esta invenção não se limita aos métodos sintéticos específicos aqui fornecidos, que podem variar. Intermediário A1: Sal de cloridrato de 1-isopropil-4,6-di-hidropiro [in- dazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona. nd o

N N || sem Hc! Etapa 1. 9-Ox0-3-azaspiro[5.5]Jundec-7-eno-3-carboxilato de terc-butila. O. Moe

O

[00292] Um reator seco foi carregado com 4-formilpiperidina-1- carboxilato de terc-butila (108 Kg), ciclo-hexano (1080 L) e pirrolidina (64,8 Kg) a 25-30 “ºC. A mistura foi agitada por 5 a 10 min, e, depois, aquecida ao refluxo por 12 a 16 h, ao mesmo tempo coletando água usando uma armadilha Dean-Stark. A mistura de reação foi, então, resfriada a 50-60 ºC, temperatura na qual vácuo foi aplicado para des- tilar o excesso de pirrolidina e ciclo-hexano. A mistura de reação foi, então, resfriada a 25-30 ºC, e a ciclo-hexano (648 L) foi carregada, se- guida de metil vinil cetona (49,63 Kg). A mistura foi agitada por 12-16 h, depois filtrada e o filtrado carregado em um reator limpo e seco. À solução foi resfriada a 10-15 ºC, então uma solução de ácido acético (54,75 kg) em água (54 L) foi lentamente adicionada, mantendo a tem- peratura abaixo de 15 ºC. Ao final da adição, a mistura foi aquecida até 25-30 ºC e agitada por 12 a 16 h. As camadas foram separadas e a aquosa foi extraída com acetato de etila (824 L). As camadas orgâ- nicas combinadas foram lavadas com uma solução de bicarbonato de sódio (32,34 Kg) em água (324 L) e, em seguida, secas sobre sulfato de sódio. Os sólidos foram lavados com acetato de etila (54 L),) e os filtrados combinados foram concentrados sob pressão reduzida abaixo de 40 ºC. n-Heptano (216 L) foram carregado ao reator e a destilação foi seguida sob pressão reduzida e abaixo de 40 ºC até a secura. À mistura foi resfriada a 25-30 ºC e n-heptano (216 L) foi carregada ao reator. A mistura foi agitada por 1 a 2 h após a formação de sólidos. Os sólidos foram, então, filtrados, lavados com n-heptano (54 L) e se- cos a 40-50 ºC por 10 a 12 h para gerar o material desejado (90,1 kg; rendimento de 67%).

Etapa 2. 10-((Dimetilamino)metileno)-9-0x0-3-azaspiro[5.5]Jundec-7- eno-3-carboxilato de (E)-terc-butila.

O. AN S XX

[00293] Um reator limpo e seco foi carregado com 9-0x0-3-azaspiro [5.5]undec-7-eno-3-carboxilato de terc-butila (50 Kg), N,N-dimetilfor- mamida (500 L) e N N-dimetilformamida dimetil acetal (135 Kg) a 25- 30 ºC sob atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi agitada por a 10 min e aquecida a 120-130 ºC por 20 h. A mistura foi, então, res- friada a 50-60 ºC, e o solvente foi destilado sob vácuo elevado a me- nos de 60 “ºC. A mistura de xilenos (200 L) foi carregada a menos de 45 ºC e o solvente foi destilado sob vácuo elevado a menos de 60 “ºC. Essa operação foi repetida com outro lote de mistura de xilenos (200 L). O tolueno (200 L) foi, então, carregado ao reator e o solvente foi destilado sob vácuo elevado a menos de 60 ºC. Esta operação foi re- petida com um segundo lote de tolueno (200 L). O metil terc-butil éter (100 L) foi, então, carregado a menos de 30 ºC e o solvente foi desti- lado sob vácuo elevado a menos de 40 ºC. A mistura foi resfriada até 15-20 ºC e o metil terc-butil éter (100 L) foi carregado a menos de 20

ºC. A mistura foi agitada por 20 a 30 min e os sólidos foram filtrados, lavados com metil terc-butil éter (50 L) e secos sem vácuo a 50-55 ºC por 10 h para fornecer o composto desejado (52,1 kg; 87% de rendi- mento). *H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,48 (s, 1H); 6,57 (d; J=9,97 Hz; 1H), 5,99 (d; J=10,16 Hz; 1H); 3,32-3,51 (m, 4H); 3,06 (s, 6H); 2,72 (s, 2H); 1,57-1,66 (m, 2H); 1,41-1,53 (m, 11H).

Etapa 3. 1-Isopropil-1,4-di-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbo- xolato de terc-butila “ NÃO. Tr

[00294] Um reator limpo e seco foi carregado com 10-((dimetila- mino)metileno)-9-0x0-3-azaspiro[5.5]Jundec-7-eno-3-carboxilato de (E)- terc-butila (80 kg), tolueno (704 L) e trimetilamina (16 L) a 25-30 ºC. A mistura de reação foi aquecida até 70-80 ºC, e uma solução de sal de cloridrato de isopropil hidrazina em metanol (1,25 equiv.; 141 Kg no total) foi adicionada por 4 a 5 h. A mistura de reação foi, então, agitada por 8 a 10 h a 70-80 ºC, antes do resfriamento a 15-25 ºC. Uma solu- ção de ácido cítrico (48 Kg) em água (480 L) foi, então, lentamente adicionada, mantendo a temperatura interna abaixo de 25 ºC. O aceta- to de etila (208 L) foi adicionado e a mistura foi agitada por 10 min. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada sucessiva- mente com uma solução de ácido cítrico (48 Kg) em água (480 L) e, em seguida, somente com água (320 L). As camadas aquosas combi- nadas foram extraídas com acetato de etila (320 L). As camadas orgâ- nicas combinadas foram, então, secas sobre sulfato de sódio (8 Kg) e os solventes foram evaporados à secura sob pressão reduzida e abai- xo de 40 ºC. O diclorometano (240 L) foi carregado ao reator e a mis- tura foi agitada a 25-30 ºC até ficar clara. Carbono ativado (1,84 kg),

silicato de magnésio (1,84 kg) e gel de sílica (32 kg, malha de 100 a 200) foram carregados sucessivamente a 25-30 ºC, e a mistura hete- rogênea foi agitada por 1 h. A pasta fluida foi, então, filtrada em um leito Hyflow, preparada por mistura de supercélulas Hyflow (8 Kg) e diclorometano (40 L). O bolo foi lavado com diclorometano (três vezes 120 L). Os filtrados combinados foram carregados de volta ao reator e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida a menos de 40 ºC. n- Heptano (160 L) foi, então, carregado e destilado sob pressão reduzi- da a menos de 40 ºC. n-Heptano (200 L) foi carregado ao reator e a mistura foi resfriada até 0-5 ºC. Após agitação por 12 a 15 h, os sóli- dos foram filtrados a O ºC, lavados com n-heptano (160 L) frio (0-5 ºC) e secos sob vácuo a 40-50 ºC para fornecer o composto do título (82,4 Kg; 75%). *H RMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 7,25 (s, 1H); 6,42 (dd; J=10,05; 0,49 Hz; 1H) 5,84 (d; J=9,95 Hz; 1H); 4,42-4,52 (m, 1H); 3,36-3,53 (m, 4H); 2,62 (s, 2H) 1,56-1,68 (m, 2H) 1,45-1,55 (m, 17H). Etapa 4. Sal de cloridrato de 1-isopropil-4,6-di-hidropiro[indazol-5,4"- piperidin]-7(1H)-ona. nd o

N N 1 Da, Hc!

[00295] Um reator limpo e seco foi carregado com 1-isopropil-1,4-di- hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carboxilato de terc-butila (60 Kg) e metanol (600 L) a 25-30 ºC. N-Bromossuccinimida (32,4 kg) foi adi- cionada em 5 porções durante 30 a 40 min a 25-30 ºC, e a agitação continuou por 30 a 60 min. Uma solução de tiossulfato de sódio penta- hidratado (5,4 Kg) em água (102 L) foi lentamente adicionada, man- tendo-se a temperatura interna abaixo de 30 ºC. A mistura foi agitada por 20 a 30 min, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida abaixo de 45 ºC. O resíduo foi resfriado até 25-30 ºC e o 2-metiltetra- hidrofurano (420 L) foi carregado ao reator, juntamente com água (90

L). A mistura foi agitada por 15 a 20 min, em seguida, as camadas fo- ram separadas, a camada aquosa foi posteriormente extraída com 2- metiltetra-hidrofurano (120 L). Os extratos orgânicos combinados fo- ram tratados por 15 a 20 min a 25-30 ºC com uma solução de hidróxi- do de sódio (4,8 Kg) em água (120 L). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com água (120 L), seguida de uma solu- ção de cloreto de sódio (12 Kg) em água (120 L) e, em seguida, seca sobre sulfato de sódio (6 Kg). Após filtração, o bolo foi lavado com 2- metiltetra-hidrofurano (30 L) e o filtrado combinado foi novamente car- regado ao reator.

O solvente foi completamente destilado a menos de 45 ºC sob pressão reduzida, e o resíduo foi solubilizado em tetra- hidrofurano (201 L). Em outro reator limpo e seco, foi carregado terc- butóxido de potássio (60,6 Kg) e tetra-hidrofurano (360 L) a 25-30 ºC.

A essa mistura, foi lentamente adicionada a solução do resíduo em tetra-hidrofurano, mantendo uma temperatura abaixo de 30 ºC.

A mis- tura de reação foi, então, aquecida a 60-65 ºC e mantida nessa tempe- ratura por 1 a 2 h.

Ao final, a mistura foi resfriada a 0-10 ºC e lenta- mente arrefecida com uma solução de ácido clorídrico (1 N, 196 L), mantendo-se a temperatura interna abaixo de 10 ºC.

A mistura de rea- ção foi aquecida a 25-30 ºC, e acetato de etila (798 L) foi carregado.

Após agitação por 15 a 20 min, as camadas foram separadas, e a ca- mada aquosa foi ainda extraída com acetato de etila (160 L). As ca- madas orgânicas combinadas foram lavadas com água (160 L), secas sobre sulfato de sódio (8 Kg), filtradas e o bolo foi lavado com acetato de etila (300 L). Os solventes foram inteiramente destilados sob pres- são reduzida a menos de 45 “ºC, e acetato de etila (540 L) foi carrega- do ao reator a 25-30 ºC, seguido de metanol (156 L). A mistura foi res- friada a 0-5 ºC, altura em que cloreto de acetila (79,8 Kg) foi adiciona- do lentamente, mantendo-se a temperatura na faixa especificada.

À mistura foi, então, deixada aquecer até 20-25 ºC e mantida nessa temperatura por 4 a 5 h com agitação. A pasta fluida resultante foi fil- trada e os sólidos foram lavados com acetato de etila (120 L), em se- guida, secos a 40-45 ºC por 8 a 10 h para fornecer o produto bruto de- sejado (33,5 kg; 65%).

[00296] Uma etapa final de purificação foi realizada por solubiliza- ção desse sólido bruto (56,8 Kg) em metanol (454,4 L) em um reator seco e limpo a 25-30 ºC. A solução foi agitada por 30 a 45 min e, em seguida, passada através de um filtro de cartucho de 0,2 mícron para um reator limpo e seco a 25-30 “C. O metanol foi destilado sob pres- são reduzida a menos de 50 ºC até — 1vol de solvente permanecer. À mistura de reação foi resfriada a 25-30 ºC e acetonitrila fresca (113,6 L) foi carregada através de um filtro de cartucho de 0,2 mícrons. Os solventes foram destilados sob pressão reduzida a menos de 50 ºC até — 1 vol de solvente permanecer. A mistura de reação foi resfriada a 25-30 “C e acetonitrila fresca (190 L) foi carregada ao reator através de um filtro de cartucho de 0,2 mícron. A mistura foi aquecida até 65- 70 ºC e agitada por 45 min, em seguida, resfriada até 25-30 “C e agi- tada por 1 h. A pasta fluida resultante foi filtrada, e o bolo foi lavado com acetonitrila gelada (15 ºC) (56,8 L). Os sólidos foram secos sob pressão reduzida a 40-50 ºC por 8 h para gerar o intermediário A1 (36,4 Kg; 64%). *H RMN (400 MHz, CD3;OD) 5 ppm 7,43 (s, 1H); 5,32- 5,42 (m, 1H); 3,15-3,25 (m, 4H); 2,89 (s, 2H); 2,64 (s, 2H); 1,69-1,90 (m, 4H); 1,37-1,45 (m, 6H); ESI [M+H]* =248. Intermediário = A2: Ácido 2-(4-(terc-butoxicarbonil)fenil)-6-metóxi- isonicotínico o

ÁN Ho A Po. Sr

[00297] Um reator limpo e seco foi carregado com ácido 2,6-

dicloroisonicotínico (30 Kg) e metanol (120 L) a 20-25 “ºC. A pasta flui- da foi agitada por 5 min e, então, aquecido até 65 ºC (refluxo). Uma solução de metóxido de sódio em metanol (30%; 87,2 kg) foi, então, lentamente carregada ao longo de pelo menos 4 h através de funil de adição. O funil foi lavado com metanol (15 L), e a agitação foi realizada a 65 º C por pelo menos 15 h. A mistura foi, então, resfriada até 45 ºC e destilada sob pressão reduzida até um volume residual de — 90 L. Uma solução de bicarbonato de potássio (28,2 kg) e carbonato de po- tássio (21,6 kg) em água (180 L) foi, então, carregada ao reator a 40- 45 “ºC. O reator contendo a solução aquosa foi enxaguado com água (21 L) e a lavagem foi carregada à mistura de reação. A mistura foi destilada sob pressão reduzida a menos de 80 ºC até um volume resi- dual de — 240 L e, em seguida, resfriada até 20-25 ºC.

[00298] Outro reator limpo e seco foi carregado com 4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxoborolan-2-il)benzoato de terc-butila (52,3 kg) e dioxano (340 Kg), e agitado a 2-25 ºC até a dissolução completa. O conteúdo do antigo reator foi, então, aquecido a 40 ºC para assegurar a solubilidade completa e transferido para este novo reator. A mistura de reação foi resfriada até 20-25 ºC, e uma etapa de desoxigenação foi realizada por meio de ciclos de vácuo/nitrogênio. A mistura foi ainda arrefecida até 0-10 ºC e acetato de paládio (0,65 Kg) foi carregado ao reator seguido de trifenilfosfina (2,46 Kg) sob fluxo de nitrogênio. À mistura foi aquecida até 20-25 ºC e outra etapa de desoxigenação foi realizada por meio de ciclos de vácuo/nitrogênio. A mistura foi, então, aquecida a 80 ºC e mantida nessa temperatura durante pelo menos 18 h. A mistura foi arrefecida a 20-25 ºC, em seguida, metil terc-butil éter (133,2 Kg) e a água (30 L) foram sucessivamente carregados no rea- tor. As camadas foram separadas, e as aquosas foram diluídas com água (110 L), sendo, então, extraídas com metil terc-butil éter (110 L). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com uma solução de ácido cítrico (52 Kg) em água (84 L), e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi posteriormente extraída com metil terc-butil éter (88,8 Kg) e as camadas orgânicas foram combinadas, depois lavadas três vezes com um terço de uma solução de cloreto de sódio (43 Kg) em água (80 L). Após a separação final da camada, a camada orgâni- ca foi filtrada através de filtro Pall& contendo um cartucho de carvão, e o bolo foi lavado com metil terc-butil éter (11,2 Kg). O filtrado foi desti- lado sob pressão reduzida a menos de 50 “C até — 90 L e, posterior- mente, codestilado sucessivamente com heptano (120 L), a menos de 50 ºC e até — 120 L. A mistura foi, então, arrefecida a 20-25 ºC durante 1h, em seguida, agitada nessa temperatura por mais 1 h. A pasta flui- da foi filtrada e o bolo lavado três vezes com heptano (3x18 L) e, em seguida, três vezes com acetonitrila (3x18 L). O sólido úmido resultan- te foi seco sob vácuo e fluxo de nitrogênio abaixo de 45 ºC por pelo menos 15 h para produzir o intermediário A2 (44,6 Kg; 87% de rendi- mento). *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 8,13 (s, 2H); 8,09 (s, 2H); 7,97 (d; J=1,17 Hz; 1H); 7,34 (d; J=0,98 Hz; 1H); 4,08 (s, 3H); 1,61 (s, 9H); ESI [M+H]* =330. INTERMEDIÁRIO A3: 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro [indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoato de terc-butila Dr É

NA Po,

O

[00299] Um balão de fundo redondo foi carregado com ácido 2-(4- (terc-butoxicarbonil)fenil)-6-metóxi-isonicotínico (intermediário A2, 15,2 g; 46,2 mmol) e acetato de etila (140 mL). 1,1'-Carbonildi-imidazol (8,98 g; 55,4 mmol) foi adicionado em uma porção e agitado por 1 h à temperatura ambiente. Cloridrato de 1-isopropil-4,6-di-hidroespiro [in- dazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona (intermediário A1; 14,8 g; 52,2 mmol) foi adicionado seguido de N N-di-isopropiletilamina (9,1 mL; 52,2 mL), e a reação foi agitada por 18 h à temperatura ambiente. Foi adicionado HCI aquoso a 2 M (40 mL), seguido de hidrogenossulfato de potássio a 1 M (40 mL) e 50 mL de heptano. A mistura obtida foi agitada por 1 h à temperatura ambiente. A mistura foi transferida para o funil de separa- ção. A fase orgânica foi separada, lavada sucessivamente com água (20 mL), bicarbonato de sódio saturado (30 mL), água (20 mL), sal- moura (20 mL), seca sobre 20 g de sulfato de magnésio e 10 g de síli- ca gel, filtrada e concentrada em vácuo. Sólido começou a se formar no final da concentração. O resíduo foi agitado em 40 mL de acetato de etila a 80 ºC, e heptano (120 mL) foi adicionado lentamente em go- tas. A mistura foi agitada a 80 ºC por 1 h e, em seguida, resfíriada len- tamente até a temperatura ambiente com agitação por 1 h e agitada por 18 h à temperatura ambiente. O sólido foi coletado por filtração, lavado com água e acetato de etila-heptano (1:3) e seco sob vácuo a 50 ºC por 18 h para obter o intermediário A3 (19,64 g; rendimento de 76%).

PREPARAÇÃO ALTERNATIVA DO INTERMEDIÁRIO A3:

[00300] Um reator limpo e seco foi carregado com acetonitrila (219 Kg) e ácido 2-(4-(terc-butoxicarbonil)fenil)-6-metóxi-isonicotínico (in- termediário A2; 34,8 kg) a 20-25 ºC. A mistura foi agitada por 5 min e, em seguida, 1,1-carboxidi-imidazol (18,9 Kg) foi carregada em três partes sucessivas. A pasta fluida foi posteriormente agitada a 20-25 ºC por pelo menos 1 h, e, então, sal de cloridrato de 1-isopropil-4,6-di- hidroespiro[indazol-5,4'-piperidin])-7(1H)-ona (intermediário A1; 33,0 kg) foi carregado ao reator, seguido por N N-di-isopropiletilamina (20,5 kg) via bomba. A bomba de reagente e as paredes do reator foram la- vadas com acetonitrila (13,7 Kg), e a agitação foi continuada a 20-25

ºC por pelo menos 2 h. Ao final, a mistura foi semeada com 4-(4-(1- isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"- carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoato de terc-butila (Intermediário A3, 209 g) e agitada por pelo menos 30 min. Após confirmação do início da cristalização, uma solução de ácido cítrico mono-hidratado (58,5 Kg) em água (257 L) foi carregada por 1 h. A pasta fluida resultante foi posteriormente agitada a 20-25 ºC por pelo menos 2 h, depois filtrada e o bolo lavado com uma mistura de acetonitrila (68,4 Kg) e água (87 L). Essa lavagem também foi usada para enxaguar o reator. Os sóli- dos foram secos sob pressão reduzida abaixo de 55 ºC, proporcionan- do o Intermediário A3 (43,44 Kg, 73% de rendimento). Composto A (como o ácido livre): ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7- tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoico

NA O oH

O

[00301] Um balão de fundo redondo foi carregado com 4-(4-(1-iso- propil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carbo- nil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoato de terc-butila (3,7 g; 6,6 mmol) e tolu- eno (25 mL). Ácido fosfórico a 85% (3,0 mL) foi adicionado em gotas com agitação, e a reação foi aquecida a 60 ºC por 4 horas. Uma goma espessa incolor se formou. A reação foi resfriada à temperatura ambi- ente e foi adicionada água. Sólidos brancos foram observados. A ca- mada orgânica de tolueno foi descartada, reservando-se a camada aquosa e os sólidos. Foi adicionado acetato de etila (60 mL) e adicio- nada solução de NaOH a 4N para ajustar o pH a — 7. As camadas fo- ram separadas e a aquosa foi extraída com acetato de etila (50 mL).

As camadas orgânicas combinadas de acetato de etila foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas em vácuo para forne- cer sólidos brancos. Esses foram dissolvidos em acetato de etila (80 mL) a 50 ºC e o heptano (90 mL) foi adicionado lentamente. O calor foi removido e a mistura foi resfriada à temperatura ambiente e agitada por 16 h. Os sólidos resultantes foram coletados por filtração, enxa- guados com o licor-mãe e secos para fornecer o composto do título (forma livre do Composto A; 2,15 g; rendimento de 65%) como um só- lido branco. PREPARAÇÃO ALTERNATIVA DO COMPOSTO A (COMO O ÁCIDO LIVRE):

[00302] Um reator limpo e seco foi carregado com acetonitrila (130,4 Kg) e 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoato de terc-butila (Intermediário A3; 20,72 Kg) a 20-25 “ºC. A mistura foi agitada por 5 min e, em seguida, ácido p-toluenossulfônico (8,5 Kg) foi carregado sob uma leve varredura de nitrogênio. A mistura de reação foi aqueci- da a 70 ºC e mantida nessa temperatura durante pelo menos 6,5 h. Após a conclusão, a mistura foi resfriada até 40 ºC, semeada com o Composto A (104 g), e água (83 L) foi lentamente carregada por pelo menos 1 h. A mistura foi ainda agitada a 40 ºC por um mínimo de 4 h, e, em seguida, resfriada até 20-25 ºC durante 2 h. Agitou-se ainda por pelo menos 2 h, seguida de filtração, e o bolo foi lavado com uma so- lução de acetonitrila (33 Kg) e água (41 L). Essa lavagem também foi usada para enxaguar o reator. Os sólidos resultantes foram secos sob pressão reduzida abaixo de 55 ºC para gerar o Composto A (16,5 Kg; 89% de rendimento).

PREPARAÇÃO DA FORMA 1 DO COMPOSTO A - MONO-TRIS ANI- DRO DO COMPOSTO A:

ÁREA N o oH Po XT o OH

O

[00303] Um frasco foi carregado com ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxi- piridin-2-il)benzoico (151 mg; 0,300 mmol) e 3 mL de etanol. A mistura foi aquecida a 80 ºC por 5 minutos para dissolver o sólido e, em segui- da, arrefecida à tempertura ambiente. Foi adicionado tris(hidroximetil) aminometano (39 mg; 0,32 mmol), e a mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. O heptano (2,25 mL) foi adicionado em gotas para produzir uma pasta fluida que foi aquecido a 50 ºC para produzir uma solução clara. A mistura foi arrefecida à temperatura am- biente durante a noite com agitação. Foram observados sólidos bran- cos, e a mistura foi agitada por mais 3 dias. O material foi filtrado e se- co em estufa a vácuo a 50 ºC durante a noite para produzir a Forma 1 (151 mg; 0,242 mmol; rendimento de 81%). PREPARAÇÃO ALTERNATIVA DA FORMA 1 DO COMPOSTO A: MONO-TRIS ANIDRO DO COMPOSTO A:

[00304] A um reator limpo e seco, foi carregado etanol (83 L), se- guido da adição do Composto A (9,43 kg) e tris (2,55 kg), enquanto a mistura foi mantida a uma temperatura de 20 a 25 ºC. As paredes do tanque foram enxaguadas com etanol (2 L), e a mistura resultante foi aquecida a 65-70 ºC, mantida nessa temperatura por pelo menos 30 minutos até que todos os sólidos se dissolvessem, então resfriada até 45-50 ºC. Foi realizada uma filtração a quente através de um filtro de polipropileno em linha de 10 um, e o reator e o filtro foram lavados com etanol (9 L). N-heptano (24 L) foi carregado à solução quente através do mesmo filtro em linha, e a mistura foi semeadas com sal tris anidro do ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4"- piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico (100 g) em etanol (0,5 L) a 45-50 ºC. A temperatura foi mantida por pelo menos 2 h antes de esfriar até 20-25 ºC durante pelo menos 2 h. A agitação foi continu- ada por pelo menos 5 dias. A pasta fluida foi, então, filtrada, e o bolo foi lavado com uma mistura de etanol (13 L) e n-heptano (6 L). Os só- lidos foram secos sob pressão reduzida a menos de 45 ºC por pelo menos 12 h, gerando o Exemplo 1 (11,7 kg; 77%). PREPARAÇÃO DA FORMA 2 DO COMPOSTO A - TRI-HIDRATO DO SAL MONO-TRIS DO COMPOSTO A: “x x O OH Dn Ê N úaos ou OH o 3xH,O

[00305] A Forma 2 do Composto A foi obtida por conversão da Forma 1 do Composto A. Em um reator EasyMax de 50 mL, foram adi- cionados a Forma 1 (1,7214 g; 2,760 mmol), isopropanol (16,50 mL; 215,8 mmol) e água (688 uL; 38,190 mmol). A mistura foi agitada (300 rpm) por cerca de 72 horas com temperatura de reator encamisado de ºC. A mistura de reação foi, então, aquecida a 40 ºC durante mais de 15 min e mantida a 40 ºC durante cerca de 24 horas, arrefecendo uma vez a 20 ºC para remover uma amostra para ensaio. Uma mistura de formas foi vista por PXKRD; portanto, água adicional Water (688 uL; 38,190 mmol) foi adicionada. A taxa de agitação foi aumentada para 400 rpm e a pasta fluida foi deixada agitar por 6 horas e, então, resfri- ada a 15 ºC. Os sólidos foram isolados em filtro de 60 mL/40 M e lava- dos com isopropanol/água a 96/4. O material resultante foi consistente com a Forma 2 do Composto A por PXRD.

PREPARAÇÃO ALTERNATIVA DA FORMA 2 DO COMPOSTO A - TRI-HIDRATO DO SAL MONO-TRIS DO COMPOSTO A:

[00306] Um reator limpo e seco foi carregado com isopropanol (60,4 kg), e o Composto A (16,68 kg) e tris (4,42 kg) foram adicionados en- quanto a mistura foi mantida a uma temperatura de 20 a 25 ºC. A mis- tura foi agitada por 5 min e, em seguida, água (6,7 kg) foi carregada e a pasta fluida aquecida até 55 ºC. A solução agora límpida foi filtrada em um reator limpo e seco pré-aquecido (50 a 55 ºC) através de um filtro em linha de polipropileno de 10 um. A solução foi, então, semea- da com o sal mono-tris do Composto A como um tri-hidrato (167 9). Após a verificação de que a semente persistiu, a mistura foi resfriada até 15 ºC por pelo menos 2 h e, em seguida, mantida a 15 ºC por um mínimo de 16 h. A pasta fluida foi filtrada e o bolo lavado com isopro- panol frio (13,1 kg). Os sólidos foram, então, secos sob pressão redu- zida abaixo de 25 ºC para gerar o Forma 2 do Composto A (22,1 Kg; 98% de rendimento).

[00307] A Forma 1do Composto A é anidra e é termodinamicamen- te estável abaixo de uma atividade de água de cerca de 0,2 (20% RH) à temperatura ambiente. A Forma 1 do Composto A tem um padrão de PXRD substancialmente igual ao mostrado na Figura 3 do composto A. Picos de PXRD característicos da Forma 1 do Composto A, expres- sos como 26 + 0,2º 26, são a 9,6; 10,7 e 11,3. As localizações e in- tensidades de pico para o padrão de PXRD na Figura 3 são fornecidas na Tabela 2. TABELA 2 — PICOS E INTENSIDADES RELATIVAS DE PXRD DA FORMA 1 DO COMPOSTO A +0,2º 20 Relativa (%) |+0,2º 20 Relativa (%) | +0,2º 20 Relativa (%) E Fr Fr E Fo e

E TE

Graus 20 Intensidade | Graus 26 Intensidade | Graus 26 Intensidade +0,2º 20 Relativa (%) | +0,2º20 Relativa (%) | + 0,2º 26 Relativa (%) a a a Rea Ba a [Ba e a rs as Ba ee aa a meo re dj

[00308] A Forma 1 do Composto A tem um espectro Raman subs- tancialmente igual ao mostrado na Figura 4. A Forma 1 do Composto A apresenta deslocamentos de picos característicos de Raman, ex- pressos como cm”, a 568, 698, 989, 1218, 1511, 1561 e 1615, + 2 cm”. As posições de pico (+ 2 cm”) e a intensidade normalizada (W: fraca, M: média, S : forte) da Forma 1 do Composto A na Figura 4 estão lis- tadas na Tabela 3. TABELA 3 — PICOS DE RAMAN E INTENSIDADE NORMALIZADA DA FORMA 1 DO COMPOSTO A Posição do | Intensidade | Posição do | Intensidade | Posição do | Intensidade Pico de Ra- | Normalizada | Pico de Ra- | Normalizada | Pico de Ra- | Normalizada man (cm) man (cm) man (cm)

Posição do | Intensidade | Posição do | Intensidade | Posição do | Intensidade Pico de Ra- | Normalizada | Pico de Ra- | Normalizada | Pico de Ra- | Normalizada man (cm) man (cm) man (cm) 17 22 179 a 12 3006 1255 2 Bs

BB

[00309] A Forma 1 do Composto A tem um espectro de *?C ssNMR substancialmente igual ao mostrado na Figura 5. A Forma 1 do Com- posto A tem deslocamentos químicos característicos de **C ssNMR, expressos como ppm, a 22,9; 146,2; 157,9; 161,9 e 172,9 + 0,2 ppm. Os deslocamentos químicos para 1ºC (+ 0,2 ppm) da Forma 1 do Composto A, conforme apresentado na Figura 5, estão listados na Ta- bela 4. TABELA 4 - DESLOCAMENTOS QUÍMICOS E INTENSIDADE PARA 13C DA FORMA 1 DO COMPOSTO A Deslocamentos | Intensi- Deslocamentos | Intensida- | Deslocamentos | Intensi- químicos SC | dade químicos — *ºC | de químicos — *ºC | dade (ppm) (ppm) (ppm)

[00310] A Forma 2 do Composto A é um tri-hidrato e é termodina- micamente estável abaixo de uma atividade de água de cerca de 0,2 à temperatura ambiente e 20% RH. A Forma 2 do Composto A tem um padrão de PXRD substancialmente igual ao mostrado na Figura 6. Os picos característicos de PXKRD da Forma 2 do Composto A, expressos como 26 + 0,2º 26, são a 8,4; 9,0; 10,5; 15,0 e 24,7. As localizações e intensidades de pico para o padrão de PXRD na Figura 6 são forneci- das na Tabela 5. Tabela 5 — Picos e Intensidades Relativas de PXRD da Forma 2 do Composto A Graus 20 Intensidade Graus 260 Intensidade | Graus 26 Intensidade +0,2º20 |Relativa(%) |/+0,2º28 Relativa (%) | +0,2º 20 Relativa (%) Fr TT E q ss me e e Re Ba a a BT TR mm Rg go Fi

[00311] A Forma 2 do Composto A tem um espectro Raman subs- tancialmente igual ao mostrado na Figura 7. A Forma 2 do Composto A apresenta deslocamentos de picos característicos para Raman, ex- pressos como cm”, a 562, 692, 984, 1225, 1507, 1557 e 1610 + 2 cm 1, As posições de pico (+ 2 cm”) e a intensidade normalizada (W: fra- ca, M: média, S : forte) da Forma 2 do Composto A na Figura 7 estão listadas na Tabela 6. Tabela 6 — Picos de Raman e Intensidade Normalizada da Forma 2 do Composto A Posição do | Intensidade | Posição do | Intensidade Posição do | Intensidade Pico de Ra- | Normalizada | Pico de Ra- | Normalizada | Pico de Ra- | Normalizada man (cm) man (cm) man (cm)

Posição do | Intensidade | Posição do | Intensidade Posição do | Intensidade Pico de Ra- | Normalizada | Pico de Ra- | Normalizada | Pico de Ra- | Normalizada man (cm) man (cm) man (cm)

[00312] A Forma 2 do Composto A tem um espectro de *?C ssNMR substancialmente igual ao mostrado na Figura 8. A Forma 2 do Com- posto A tem deslocamentos químicos característicos de "ºC ssNMR, expressos como ppm, a 19,2; 149,5; 155,6; 163,8 e 188,3 + 0,2 ppm. Os deslocamentos químicos para *ºC (+ 0,2 ppm) da Forma 2 do Composto A, conforme apresentado na Figura 8, estão listados na Ta- bela 7. TABELA 7 - DESLOCAMENTOS QUÍMICOS E INTENSIDADE PARA 13C DA FORMA 2 DO COMPOSTO A Deslocamentos | Intensi- Deslocamentos | Intensida- | Deslocamentos | Intensi- químicos — “ºC | dade químicos — ºC | de químicos — *ºC | dade (ppm) (ppm) (ppm)

Deslocamentos | Intensi- Deslocamentos | Intensida- | Deslocamentos | Intensi- químicos SC | dade químicos — *ºC | de químicos — *ºC | dade (ppm) (ppm) (ppm) ESSE LA a e PR ss | 1

[00313] Com base na descrição aqui fornecida, uma das habilida- des comuns na técnica apreciaria que cada Forma 1 e Forma 2 do Composto A pode ser identificada de forma única por vários picos ou padrões espectrais diferentes em combinações variadas. A descrição abaixo são combinações exemplificativas de valores de pico caracte- rísticos que podem ser usados para identificar separadamente a For- ma 1 e a Forma 2 do Composto A, mas, de forma alguma, estas com- binações exemplificativas não devem ser vistas como limitante de ou- tras combinações de valor de pico aqui descritas.

[00314] Para confirmar a presença de três moléculas de água na Forma 2 do Composto A, os dados foram coletados utilizando-se um difratômetro Bruker D8 Venture à temperatura ambiente. Consulte a Figura 9. A estrutura foi solucionada por meio de faseamento intrínse- co usando o pacote de software SHELX no grupo espacial de classe Monoclinic P21/c (Versão 5.1, Bruker AXS, 1997). A estrutura foi poste- riormente refinada pelo método dos quadrados mínimos de matriz completa. Todos os átomos não hidrogênio foram encontrados e refi- nados utilizando-se parâmetros de deslocamento anisotrópico.

[00315] Os átomos de hidrogênio localizados em nitrogênio e oxi- gênio foram encontrados a partir do mapa de diferença de Fourier e refinados com distâncias restringidas. Os átomos de hidrogênio restan- tes foram colocados em posições calculadas e foram deixados em seus átomos portadores.

[00316] O índice R final foi de 7,2%. Uma diferença final de Fourier não revelou densidade de elétrons ausente ou mal posicionada.

[00317] A Tabela8 fornece os dados coletados em relação à Forma 2 do Composto A: TABELA 8 b =13,2753(7) À B=92,451(3)* c =14,6480(8) À a = 90º

[00318] O sal 2-amino-2-(hidroximetil)opropano-1,3-diol cristalino é o ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4"- piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico. Esse sal cristalino é geralmente referido como o sal tris do Composto A.

[00319] Osaltris cristalino do Composto A, em que a razão entre o ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4"- piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico e o sal é de 1: 1.

[00320] Osaltris cristalino do Composto A, em que o sal cristalino é um sal cristalino anidro.

[00321] Osaltris cristalino anidro do Composto A, em que o dito sal cristalino anidro tem um padrão de PXRD composto por picos em ân- gulos de difração de 9,6; 10,7 e 11,3 26, + 0,2º 20.

[00322] O sal tris cristalino anidro do Composto A, em que o sal cristalino anidro tem um espectro Raman composto por picos de des- locamento a 1511, 1561 e 1615 cm”), + 2 cm”.

[00323] O saltris cristalino anidro do Composto A, em que o dito sal cristalino anidro tem um espectro de *?9C ssNMR composto por deslo- camentos químicos a 22,9; 146,2 e 161,9 ppm, + 0,2 ppm.

[00324] Osaltris cristalino anidro do Composto A, em que o dito sal cristalino anidro tem um parâmetro analítico selecionado do grupo constituído por um espectro de Raman composto por picos a 1511 e 1615 cm”, + 2 cm”), e um espectro de *?C ssNMR composto por pelo menos um deslocamento químico a 22,9; 146,2 ou 161,9 ppm, + 0,2 ppm.

[00325] O sal tris cristalino anidro do Composto A, em que o sal cristalino anidro é substancialmente puro.

[00326] Osaltris cristalino do Composto A, em que o sal cristalino é um sal cristalino tri-hidratado.

[00327] O saltris cristalino trichidratado do Composto A, em que o dito sal cristalino tri-hidratado tem um padrão de PXRD composto por picos em ângulos de difração de 8,4; 9,0 e 10,5 26, + 0,2º 26.

[00328] O ;saltris cristalino trichidratado do Composto A, em que o dito sal cristalino tri-hidratado tem um espectro Raman composto por picos de deslocamento a 1507, 1557 e 1610 cm”, + 2 cm”.

[00329] O saltris cristalino tri-chidrato do Composto A, em que o dito sal cristalino tri-chidratado tem um espectro de **C ssNMR composto por deslocamentos químicos a 19,2; 149,5 e 163,8 ppm, + 0,2 ppm.

[00330] O saltris cristalino trichidratado sal do composto A, em que o dito sal cristalino tri-hidratado tem um parâmetro analítico seleciona- do do grupo composto por: um padrão de PXRD constituído por picos em ângulos de difração de 8,4 e 9,0 20, + 0,2º 26; um espectro Raman compreendendo picos de deslocamento de 1557 e 1610 cm, +2cm', e um espectro de **C ssNMR compreendendo pelo menos um desloca- mento químico a 19,2; 149,5 ou 163,8 ppm, + 0,2 ppm.

[00331] O saltris cristalino trichidratado do Composto A, em que o dito sal cristalino tri-hidratado tem um parâmetro analítico selecionado do grupo constituído por um padrão de PXRD composto por picos em ângulos de difração a 8,4 e 9,0 26, + 0,2º 26, e um espectro de Ra- man composto por pelo menos um pico de deslocamento a 1507, 1557 ou 1610 cm”), + 2 cm”.

[00332] O saltris cristalino trichidratado do Composto A, em que o dito sal cristalino tri-hidratado tem um parâmetro analítico selecionado do grupo constituído por um padrão de PXRD composto por picos em ângulos de difração de 8,4 e 9,0 26, + 0,2º 26, e um espectro de SSNMR composto por pelo menos um deslocamento químico a 19,2; 149,5 ou 163,8 ppm, + 0,2 ppm.

DADOS FARMACOLÓGICOS

[00333] Os protocolos a seguir podem, naturalmente, ser variados pelos qualificados na arte.

[00334] Um estudo randomizado, controlado por veículo, com 8 braços paralelos foi realizado em ratos machos Sprague-Dawley (Charles River (Boston, MA)) para a obtenção de níveis de TG circu- lantes e hepáticos. Condições laboratoriais convencionais foram utili- zadas para abrigar 96 ratos (- 200 g); eles foram alojados em aloja- mento duplo e mantidos em esquema reverso de luz-escuro de 12:12 horas (luzes apagadas às 8:00 AM). Os ratos foram randomizados em grupos de dieta Chow ou ocidental e grupos de dose na chegada, e receberam um período de introdução de 14 dias em dieta convencional Chow ou ocidental para ratos antes do início do estudo. A dieta Chow convencional para doedores em laboratório, 5053, foi da Labdiet (PMI, St Louis, Missouri). A dieta ocidental, D1209Bi, foi da Research Diets

(New Brunswick, NJ).

[00335] Para estes estudos, o veículo foi preparado para produzir 0,5% (p/volume) de metil celulose (MC, Sigma Aldrich; 274429) em água desionizada. As soluções de reserva com o Composto A (prepa- rado a partir do sal tris) ou com o Composto D foram preparadas com o respectivo composto para fornecer uma concentração tal que 10 ml da solução proporcionassem a quantidade de dosagem em mg/kg pre- tendida, onde o peso médio dos ratos utilizados foi de cerca de 200 g.

[00336] A partir do Dia 1 do estudo, os ratos foram administrados por via oral (10 mL/kg) com o veículo de controle (0,5% MC (p/volume %) em água desionizada), doses baixas ou altas do Composto A (1 mg/kg ou 10 mg/kg QD, respectivamente), doses baixas ou altas do Composto D (5 mg/kg ou 30 mg/kg BID, respetivamente), ou coadmi- nistração de doses baixas (Composto A a 1 mg/kg QD e Composto D a 5 mg/kg BID), ou coadministração de doses elevadas (Composto A a mg/kg QD e Composto D a 30 mg/kg BID)

[00337] —Analitos de plasma alimentados: sangue para determinação das concentrações plasmáticas de TG foi coletado 2 horas após a do- se (2 horas no ciclo escuro) via veia lateral da cauda, transferido para tubos BD Microtainer revestidos com ácido dipotássico etilenodiamino- tetracético (KDEDTA) (PN365974) e centrifugado a 4 ºC. As amostras de plasma resultantes foram, então, analisadas em um analisador clí- nico Siemens Chemistry XPT (Malven, PA) utilizando reagentes de en- saio Triglycerides 2 Siemens (ref. 10335892).

[00338] —Analitos de plasma em jejum: sangue para determinação do TG plasmático em jejum foi coletado após 4 horas de jejum, 2 horas após a dose (2 horas no ciclo escuro) via veia lateral de cauda, trans- ferido para tubos BD Microtainer revestidos com KEDTA (PN365974) e centrifugado a 4 ºC. As amostras de plasma resultantes foram, en- tão, analisadas em um analisador clínico Siemens Chemistry XPT

(Malven, PA) utilizando reagentes de ensaio Triglycerides 2 Siemens (ref. 10335892).

[00339] No último dia do estudo (Dia 28), os ratos foram sacrifica- dos para coleta de tecido após 4 horas de jejum, 2 horas após a dose: duas horas após a dose, sangue para determinação dos analitos plasmáticos foi coletado por meio da veia lateral da cauda e, em se- guida, os animais foram sacrificados por asfixia com CO». O sangue foi transferido para tubos BD Microtainer revestidos com K2EDTA (PN365974), centrifugados a 4 “ºC e o plasma transferido para uma placa de microtitulação de 96 poços e armazenado a -20 ºC. Os fíga- dos foram rapidamente removidos, presos e congelados em pinça de Wollenberg pré-resfriada em N. líquido, embalados individualmente em folha de alumínio e posteriormente armazenados a -80 ºC.

[00340] Pulverização de tecido: Os fígados congelados foram rapi- damente pulverizados em um bloco de alumínio resfriado em N,. líqui- do, garantindo que o tecido permanecesse congelado durante toda a pulverização. Os tecidos pulverizados foram transferidos e armazena- dos em tubos cônicos de polipropileno de 7 mL a -80 ºC até a análise.

[00341] Extração para triglicerídeos hepáticos: aproximadamente 50 a 100 mg de tecido pulverizado foram adicionados a um tubo de matriz de lise D de 2 ml (MP Bio) contendo 800 uL de gelo frio CHCIa:MEOH a 1:1. As amostras foram imediatamente extraídas a 4 ºC utilizando Qiagen Tissue Lyser Il (Qiagen Cat No. 85300) por 4 minutos a 30 Hz. O homogeneato foi, então, transferido para tubos de vidro de 13x100 mm e colocados em gelo. Os tubos de lise foram, então, lavados com 800 ul de CHCIa:MeOH a 1:1, vortexados por 30 segundos e adicio- nados aos tubos de vidro de 13x100 mm. Enquanto em gelo, foram adicionados 2,4 ml de CHCI3 a 100% a todos os frascos de vidro para levar a razão de CHCI3:MeOH a 4:2. As amostras foram, então, colo- cadas no congelador a -20 ºC durante a noite. No dia seguinte, 1,75 mL de KCl HO a 1 M foram adicionados para levar a razão de CHCIa:MeOH:H2O a 4:2:1,75. As amostras foram, então, vortexadas por 30 segundos e centrifugadas a 1500 rpm x 15 min., a 4 ºC. Após a centrifugação, a fase orgânica foi transferida para um tubo de extração fresco de 13x100 mm, seca a 37 ºC sob N> e ressuspensa em 750 ul de CHCI3. Cartuchos de extração de fase sólida (SPE) de aminopropila (Waters Cat nº 054560, 6 mL, 500 mg) foram umidificados e lavados com 5 mL de hexano. Após a lavagem, 200 uL do extrato de amostra em CHCl3 foram aplicados ao cartucho e removidos por vácuo sem secagem da coluna. Os lipídios neutros foram, então, eluídos com 5 ml de CHCl3:isopropanol/50 UM de hidroxitolueno butilado a 2:1. As amostras foram, então, secas a 37 ºC sob N>? e ressuspensas com 1,75 ml de Iso-octano: Isopropanol a 98:2. As amostras foram filtradas através de filtro de seringa de 0,2 um, antes da injeção em uma coluna Cyanopropy para HPLC (tamanho de partículas de 3,5 um - coluna de 4,6x150 mm Agilent Zororbax Eclipse XBD-CN). O método de execu- ção foi uma injeção de 4 ul com um tempo de execução de 27 minu- tos, utilizando-se o solvente A (1000:1:2, isooctano:isopropanol:ácido acético) e o solvente B (50:50 isopropanol:metil terc-butil éter). A partir do minuto 0-3, a composição de solvente foi mantida a 100% do sol- vente A. A partir do minuto 3-8, a composição de solvente foi alterada de 100% do solvente A para 95% do solvente A e 5% do solvente B. À partir do minuto 8-18, a composição de solvente foi alterada para uma razão de 50:50. A partir do minuto 18-19, a composição de solvente foi alterada de volta para 100% do solvente A e mantida nessa composi- ção a partir dos minutos 19-27.

[00342] As frações nucleares e de membrana foram preparadas por ultracentrifugação, utilizando métodos convencionais de uma porção das amostras de fígado pulverizado, que foram agrupadas por grupo de tratamento. As amostras do extrato nuclear e frações de membrana foram analisadas por Western blotting quanto à SREBP1. Western blot para Calnexina foi usada como um marcador para a fração de mem- brana, a actina como marcador para o carregamento total da amostra e a Histona 2B como um marcador para a fração nuclear. Os níveis de REBP1 nuclear foram quantificados utilizando unidades relativas e normalizados para a Histona 2B para controlar a perda de amostras durante o fracionamento nuclear e a carga de gel.

[00343] Outra parte do fígado pulverizado foi processada e analisa- da quanto à expressão gênica lipogênica. Sondas tagman de ratos contra ACC1, FASN, SCD1, PCSK9 e SREBP-1c foram avaliadas utili- zando Actb como gene de limpeza em qPCR.

[00344] A administração de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3- il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirididina-5-carboxamida (Composto D), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com ácido 4- (4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"- carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico (Composto A), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, resultou em acentuada redução dos ní- veis plsmáticos (Figuras 10, 11) e hepáticos (Figura 18) de TG em comparação aos níveis plasmáticos e hepáticos de TG ao administrar o Composto A como monoterapia.

[00345] A alimentação com a dieta ocidental resultou em um au- mento de 2,2 vezes no TG plasmático em estado alimentado, em rela- ção aos ratos alimentados com uma dieta Chow (Figura 10). A admi- nistração oral da dose baixa (1 mg/kg QD) ou da dose alta (10 mg/kg QD) do Composto A apenas (monoterapia) resultou em um aumento de 1,7 vezes e 1,3 vezes, respectivamente, no TG plasmático no esta- do alimentado, em relação aos ratos alimentados com a dieta ocidental e administrados com veículo. Por outro lado, a administração oral da dose baixa (5 mg/kg BID) ou da dose alta (30 mg/kg BID) do Compos- to D apenas (monoterapia) reduziu o TG plasmático no estado alimen-

tado em 55% e 63%, respectivamente, em relação aos ratos alimenta- dos com a dieta ocidental e administrados com veículo. A coadminis- tração do Composto A e do Composto D resultou em bloqueio comple- to dos aumentos de TG plasmático mediados pelo Composto A no es- tado alimentado. A coadministração oral do Composto A e Composto D, tanto na dose baixa quanto na dose alta, reduziu em 37% e 64% os níveis plasmáticos de TG no estado alimentado em relação aos ratos alimentados com a dieta ocidental e administrados com veículo.

[00346] A alimentação com a dieta ocidental resultou em um au- mento de 1,6 vezes no TG plasmático em jejum, em relação aos ratos alimentados com uma dieta Chow (Figura 11). A administração oral das doses baixa e alta do Composto A como uma monoterapia resul- tou em um aumento de 2,4 vezes e 1,7 vezes, respectivamente, no TG plasmático em jejum em relação aos ratos alimentados com a dieta ocidental e administrados com veículo. Por outro lado, a administração oral das doses baixa e alta do Composto D como uma monoterapia reduziu o TG plasmático em jejum em 20% e 35%, respectivamente, em relação aos ratos alimentados com a dieta ocidental e administra- dos com veículo. A coadministração oral do Composto A e Composto D, tanto na dose baixa de cada um quanto na dose alta de cada um atenuou totalmente o aumento mediado pelo Composto A no TG plasmático em jejum observado ao administrar o Composto A apenas. Os níveis de TG plasmáticos em jejum para ambos os grupos de dose baixa (109 mg/dl) e dose alta (81 mg/dl) do Composto A e Composto D coadministrados foram semelhantes aos ratos alimentados com a dieta ocidental e administrados com veículo (96 mg/dl).

[00347] A localizçção da SREBP-1 nuclear foi comparada em amostras de ratos alimentados com a dieta ocidental administrados com veículo, monoterapia do Composto A em alta dose, monoterapia do Composto D em alta dose, ou coadministrados com o Composto A em alta dose e o Composto D em alta dose (Figura 12). Em relação aos ratos alimentados com a dieta ocidental e tratados com veículo, a administração do Composto A produziu maior localização nuclear da SREBP-1, indicativo de maior ativação da SREBP-1. Por outro lado, a administração do Composto D reduziu a localização nuclear da SREBP-1 e a ativação da SREBP-1. A coadministração do Composto A e Composto D bloqueou o aumento mediado pelo Composto A na localização da SREBP-1 nuclear, produzindo uma diminuição de 50% em comparação com a monoterapia do Composto A apenas.

[00348] Em relação aos ratos tratados com veículo e alimentados com uma dieta Chow, os animais alimentados com uma dieta ocidental e tratados com veículo apresentaram tendência a mostrar uma maior expressão dos genes lipogênicos: ACC1 (FIG. 13), FASN (FIG. 14), SCD1 (FIG. 15) e SREBP1 (Figura 16), porém não do PCSK9 (FIG. 17), que foi mais baixo nos ratos alimentados com a dieta ocidental. À administração do Composto A apresentou tendência a maior aumento em relação aos animais alimentados com a dieta ocidental e tratados com veículo, da expressão de ACC1, FASN (alta dose do composto À apenas), SCD, mas não de PCSK9 e SREBP1. Inversamente, a admi- nistração do Composto D diminuiu a expressão de todos os genes |i- pogênicos. A coadministração do Composto A e Composto D resultou em níveis de expressão comparáveis ou inferiores àqueles observados em ratos alimentados com dieta a ocidental e tratados com veículos.

[00349] Em relação aos ratos alimentados com uma dieta Chow, os ratos alimentados com a dieta ocidental e administrados com veículo mostraram um aumento de cerca de 2,7 vezes no acúmulo hepático de triglicerídeos (Figura 18). A administração oral das dose baixa e dose alta do Composto A produziu uma redução de 36% e 53%, respeciti- vamente, na esteatose em relação aos ratos alimentados com a dieta ocidental e administrados com veículo. Da mesma forma, a adminis-

tração oral das doses baixa e alta do Composto D reduziu a esteatose em 25% e 30%, respectivamente, em relação aos ratos alimentados com a dieta ocidental e administrados com veículo. A coadministração oral da dose baixa ou da dose alta de ambos os Compostos A e D re- duziu a esteatose em 50% e 73%, respectivamente, em relação aos ratos alimentados com a dieta ocidental e administrados com veículo. A administração oral da combinação de dose baixa ou dose alta do Composto A e do Composto D produziu maiores reduções na esteato- se do que a observada com a administração do Composto A ou do Composto D como monoterapia nos mesmos níveis de dose.

[00350] —Foirealizado um estudo randomizado, controlado por veícu- lo, de 5 braços paralelos em ratos machos Wistar-Han (Charles River (Boston, MA)) alimentados com uma dieta hiperlipídica deficiente em colina (CDAHFD) (Dietas de pesquisa; A16092003) para identificar di- ferenças na melhora dos marcadores de inflamação hepática e fibrose quando se administra o Composto A ou o Composto D sozinho como monoterapia ou em combinação. Condições laboratoriais convencio- nais foram utilizadas para abrigar 60 ratos (- 200 g); eles foram aloja- dos em alojamento duplo e mantidos em esquema reverso de luz- escuro de 12:12 horas (luzes apagadas às 8:00 AM). Os ratos foram alimentados com dieta hiperlipídica deficiente em colina (CDAHFD) a partir de 6 semanas antes do início do estudo. Os ratos, randomizados em 4 grupos de dioses (n = 12/grupo), receberam a administração de veículo duas vezes por dia, monoterapia do Composto A (5 mg/kg), monoterapia do Composto D (30 mg/kg) ou co-administração do Com- posto A (5 mg/kg) e Composto D (30 mg/kg) por um período de 6 se- manas. Os animais (n = 12) que permaneceram na dieta Chow normal ao longo do estudo e administrados com veículo duas vezes ao dia foram utilizados como um grupo controle. Amostras de sangue foram coletadas antes do início da administração do composto e 3 e 6 sema-

nas após a administração do composto para avaliação dos marcado- res circulantes. As medições da elastografia de Shearwave (imageador Aixplorer Ultimate, Supersoinc Imagine) foram realizadas na Semana 3, Semana 0 (antes da primeira dose), Semana 3 e Semana 6 para avaliar a inflamação e a progressão da fibrose ao longo do tempo. À histologia foi avaliada após 6 semanas de administração do fármaco, o que correspondeu a 12 semanas na CDAHFD. Os resultados são for- necidos como uma média de animais por cada grupo de dose.

[00351] Após as 12 semanas em CDAHFD, os animais foram sacri- ficados por asfixia com CO». Foram colhidos os lobos lateral direito, medial e lateral esquerdo do fígado. Os cortes foram retirados dos lo- bos lateral esquerdo, médio direito e lateral direito e fixados em forma- lina e processados em blocos de parafina por animal. Um corte do lobo lateral esquerdo por animal foi crioreservado em composto à tempera- tura de corte ideal (OCT). O restante do fígado de cada animal foi con- gelado e rapidamente pulverizado em um bloco de alumínio resfriado em N, líquido, garantindo que o tecido permanecesse congelado du- rante a pulverização. O tecido pulverizado foi transferido e armazena- do a -80 ºC até a análise. Uma parte da amostra de fígado pulverizado de cada animal foi processada e analisada quantos aos marcadores de expressão gênica da fibrogênese. Sondas tagman de ratos contra aSMA e COL1A1 foram avaliadas utilizando Actb como gene de lim- peza em qPCR.

[00352] Os seguintes desfechos foram avaliados por avaliação his- tológica qualitativa por um patologista veterinário certificado pelo Con- selho e histomorfometria quantitativa: ativação e diferenciação da célu- la de estreladas hepáticas em miofibroblastos por imuno-histoquímica de aSMA (IHC); colágeno como correlato de fibrose por coloração com Picrosirius Red. As imagens foram analisadas utilizando o software Visiopharm. Aplicações Visiopharm com parâmetros limiares foram aplicadas uniformemente para identificar os cortes teciduais e quantifi- car os alvos em cada IHC (DAB (3,3'-diaminobenzidina) positiva) ou lâminas histoquimicamente coradas como área percentual: área de coloração de interesse/ROI total do tecido - espaço em branco) x 100%. Foram utilizadas estatísticas não paramétricas para análise dos dados deste estudo. Os valores do grupo foram reportados como mé- dia e/ou erro padrão da média.

[00353] Em relação aos animais de controle alimentados com uma dieta Chow e administrados com veículo, os animais que receberam CDAHFD e administrados com veículo apresentaram um aumento acentuado na rigidez hepática (avaliada usando elastografia por onda de cisalhamento (SWE), medida em quilopascais (kPa)) ao longo da duração do estudo, indicativo de inflamação hepática progressiva e fibrose (Figura 19). A administração do Composto A ou Composto D como monoterapia reduziu a rigidez hepática, sugestivo de inflamação hepática e/ou fibrose reduzida. A coadministração do Composto A e Composto D produziu maiores reduções na rigidez hepática do que qualquer um dos agentes como monoterapia (Figura 19).

[00354] Em relação aos animais de controle alimentados com uma dieta Chow e administrados com veículo, os animais que receberam CDAHFD e administrados com veículo apresentaram um aumento acentuado na coloração da alfa-actina do músculo liso (ASMA) hepáti- ca, indicativo da ativação de miofibroblastos e fibrogênese (Figura 20). A administração do Composto A ou Composto D como monoterapia reduziu a coloração de ASMA em 41% e 23%, respectivamente, suge- rindo redução da ativação de miofibroblastos hepáticos e fibrogênese. A coadministração do Composto A e Composto D produziu maiores reduções na coloração de aSMA do que qualquer um dos agentes como monoterapia, reduzindo a coloração em 72% (Figura 20).

[00355] Em relação aos animais de controle alimentados com uma dieta Chow e administrados com veículo, os animais que receberam CDAHFD e administrados com veículo apresentaram um aumento acentuado na coloração com Picosrius red (PSR), indicativo de depo- sição de colágeno e fibrogênese (Figura 21). A administração do Composto A ou Composto D como monoterapia reduziu a coloração de PSR em 26% e 20%, respectivamente, sugerindo redução da de- posição de colágeno e fibrose. A coadministração do Composto A e Composto D produziu maiores reduções na coloração de PSR do que qualquer um dos agentes como monoterapia, reduzindo a coloração em 56% (Figura 21).

[00356] Em relação os animais de controle alimentados com uma dieta Chow e administrados com veículo, os animais que receberam CDAHFD e administrados com veículo apresentaram um aumento acentuado na coloração da molécula adaptadora da ligação de cálcio onizado (Iba1), indicativo da ativação de macrófagos hepáticos (Figura 24). A administração do Composto A como monoterapia reduziu a co- loração de Iba1 em 15%, sugerindo um tom inflamatório hepático re- duzido. Embora a administração do Composto D como monoterapia não tenha alterado a coloração de lIba1, a coadministração dos Com- postos A e D produziu maiores reduções na coloração de Iba1 do que o Composto A administrado como monoterapia, diminuindo a colora- ção em 33% (Figura 24)

[00357] Em relação aos animais de controle alimentados com uma dieta Chow e administrados com veículo, os animais que receberam CDAHFD e administrados com veículo apresentaram um aumento acentuado na expressão dos genes hepáticos da alfa-actina do mús- culo liso (aASMA) (Figura 22) e colágeno A1A (COL1A1) (Figura 23), indicativo da ativação de miofibroblastos e fibrogênese. A administra- ção do Composto A ou Composto D como monoterapia reduziu a ex- pressão dos genes aSMA e COL1A1 hepáticos, sugerindo redução da ativação de miofibroblastos hepáticos e fibrogênese. A coadministra- ção do Composto A e Composto D produziu maiores reduções na ex- pressão dos genes aSMA (Figura 22) e COL1A1 (Figura 23) hepáticos (Figura 22) do que qualquer um dos agentes como monoterapia.

[00358] Ao longo deste pedido de patente, faz-se referência a vá- rias publicações. As divulgações dessas publicações nos seus respec- tivos órgãos são aqui incorporadas por referência a este pedido de pa- tente para todos os fins.

[00359] Será aparente para aqueles com conhecimento na técnica que várias modificações e variações podem ser feitas na invenção, sem afastamento do âmbito ou espírito da invenção. Outras modalida- des da invenção serão evidentes àqueles qualificados na arte, levando em consideração o relatório descritivo e a prática da invenção aqui re- velada. Pretende-se que o relatório descritivo e os exemplos sejam considerados exemplificativos apenas, sendo os verdadeiros âmbito e espírito da invenção indicados pelas reivindicações a seguir.

Claims (33)

REIVINDICAÇÕES

1. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidro- furan-3-il)pirididina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com pelo menos o ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-meto- xipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ca- da um deles presente em quantidades terapeuticamente eficazes, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável.

2. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidro- furan-3-il)pirimidina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidrospiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um excipiente farmaceuticamente acei- tável.

3. Composição, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ca- racterizada pelo fato de que compreendeainda pelo menos um agente farmacêutico adicional selecionado do grupo composto por um agente anti-inflamatório, um agente anti-diabético e um agente modulante de colesterol/lipídios.

4. Método de tratamento de uma doença ou condição sele- cionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não al- coólica, esteato-hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose hepática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose, e es- teato-hepatite não alcoólica com cirrose e com esteato-hepatite não alcoólica com carcinoma hepatocelular ou com uma doença metabóli- ca, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um paci- ente em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeutica- mente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-

hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, em combinação com ao menos uma quantidade tera- peuticamente eficaz de ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidro- espiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

5. Método de tratamento de uma doença ou condição sele- cionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não al- coólica, esteato-hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose hepática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose, e es- teato-hepatite não alcoólica com cirrose e com esteato-hepatite não alcoólica com carcinoma hepatocelular ou com uma doença metabóli- ca, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao paciente em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran- 3-il)pirimidina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente acei- tável, e ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol- 5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)Denzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

6. Método, de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracteri- zado pelo fato de que a doença ou condição é o fígado gorduroso.

7. Método, de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracteri- zado pelo fato de que a doença ou condição é a doença hepática gor- durosa não alcoólica.

8. Método, de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracteri- zado pelo fato de que a doença ou condição é a esteato-hepatite não alcoólica.

9. Método, de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracteri- zado pelo fato de que a doença ou condição é a esteato-hepatite não alcoólica com fibrose hepática.

10. Método, de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracte-

rizado pelo fato de que a doença ou condição é a esteato-hepatite não alcoólica com cirrose.

11. Método, de acordo com a reivindicação 10, caracteriza- do pelo fato de que a doença ou condição é a esteato-hepatite não al- coólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular.

12. Método, de acordo com a reivindicação 10, caracteriza- do pelo fato de que a doença ou condição é a esteato-hepatite não al- coólica com cirrose e com uma doença relacionada ao metabolismo.

13. Método, de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracte- rizado pelo fato de que compreende ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos outro agente farmacêutico se- lecionado do grupo constituído por um inibidor da acetil-CoA carboxila- se (ACC), um inibidor da diacilglicerol O-aciltransferase 1 (DGAT-1), inibidores da monoacilglicerol O-aciltransferase, um inibidor da fosfo- diesterase (PDE)-10, um ativador de AMPK, uma sulfonilureia, uma medglitinida, um inibidor da a-amilase, um inibidor da a-glicosídeo hidro- lase, um inibidor da a-glucosidase, um agonista de PPARy, um agonis- ta de PPAR a/y, uma biguanida, um modulador de peptídeo semelhan- te ao glucagon 1 (GLP-1), liraglutida, albiglutida, exenatida, albiglutida, lixisenatida, dulaglutida, semaglutida, um inibidor da proteína tirosina fosfatase-1B (PTP-1B), ativador de SIRT-1, um inibidor da dipeptidil peptidase IV (DPP-IV), um secretagogo de insulina, um inibidor de oxi- dação de ácido graxo, um antagonista A2, um inibidor de quinase ami- no-terminal c-jun (JNK), ativadores de glicoquinase (GKa), insulina, um mimético de insulina, um inibidor de glicogênio fosforilase, um agonista do receptor VPAC?2, inibidores de SGLT2, um modulador de receptor de glucagon, moduladores de GPR119, derivados ou análogos de FGF21, moduladores de receptor de TGR5, moduladores de receptor de GPBAR1, agonistas de GPR40, moduladores de GPR120, ativado- res do receptor de ácido nicotínico de alta afinidade (HM74A), inibido-

res de SGLT1, inibidores ou moduladores das enzimas carnitina palmi- toil transferase, inibidores da frutose 1,6-difosfatase, inibidores da al- dose redutase, inibidores do receptor mineralocorticoide, inibidores de TORC?2, inibidores de CCR2 e / ou CCR5, inibidores das isoformas de PKC (por exemplo, PKCa, PKCB, PKCy), inibidores da ácido graxo sin- tetase, inibidores da serina palmitoil transferase, moduladores de GPR81, GPR39, GPR43, GPR41, GPR105, Kv1.3, proteína de ligação ao retinol 4, receptor de glicocorticoide, receptores de somatostatina, inibidores ou moduladores de PDHK2 ou PDHKA4, inibidores de MAP4KA4, moduladores da família IL1, incluindo IL1beta, inibidores da HMG-COoA redutase, inibidores da esqualeno sintetase, fibratos, se- questrantes de ácido biliar, inibidores de ACAT, inibidores de MTP, inibidores de lipo-oxigenase, inibidores da absorção de colesterol, mo- duladores de PCSKS9, inibidores da proteína de transferência de coles- terol esterificado e moduladores de RXRalfa.

14. Método de redução de ao menos um ponto na gravida- de da doença hepática gordurosa não alcoólica ou sistemas de pontu- ação para classificação da esteato-hepatite não alcoólica, redução do nível de marcadores séricos da atividade da esteato-hepatite não al- coólica, redução da atividade da doença esteato-hepatite não alcoólica ou redução das consequências médicas da esteato-hepatite não al- coólica em seres humanos, caracterizado pelo fato de que compreen- de a etapa de administrar a um paciente em necessidade dessa redu- ção uma quantidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxi- piridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina-5-carboxa- mida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com pelo menos uma quantidade terapeuticamente eficaz de ácido 4- (4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]- 1'-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um sal farmaceuticamente aceitável.

15. Método de tratamento de fígado gorduroso, doença he- pática gordurosa não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica, esteato- hepatite não alcoólica com fibrose hepática, esteato-hepatite não al- coólica com cirrose ou esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelular em seres humanos, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de administrar a um ser humano em necessidade de tal tratamento, uma quantidade terapeuticamente efi- caz de um primeiro e um segundo agentes e, opcionalmente, um ter- ceiro agente em que: i. o primeiro agente compreende a (S)-2-(5-((3-etoxi- piridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina-5-carboxa- mida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; ii. o segundo agente compreende o ácido 4-(4-(1-iso- propil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carbo- nil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; e iii. o terceiro agente compreende um agente farmacêuti- co selecionado do grupo constituído por um agente anti-inflamatório, um agente antidiabético, um agente antifibrótico, um agente antiestea- tiótico, um agente modulante de colesterol/lipídios e um agente antidi- abético.

16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 4, 5, 14 e 15, caracterizado pelo fato de que a (S)-2-(5-((3-etoxi- piridin-2-il)óxi)piridin-3-il)- N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina-5-carboxa- mida é um sólido cristalino da estrutura: * fe)

AA AA nNê ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

17. Método, de acordo com a reivindicação 16, caracteriza- do pelo fato de que o sólido cristalino tem um padrão de difração de pó de raios-X compreendendo valores 2-teta de (radiação CuKa, compri- mento de onda de 1,54056 À) 5,3 + 0,2; 7,7 +0,2€ 15,4 + 0,2.

18. Método, de acordo com a reivindicação 16, caracteriza- do pelo fato de que o sólido cristalino tem um padrão de difração de pó de raios-X compreendendo valores 2-teta de (radiação CuKa, compri- mento de onda de 1,54056 À) 6,5 + 0,2; 9,3 + 0,26 13,6 + 0,2.

19. Método, de acordo com qualquer uma qualquer das rei- vindicações 4, 5, 14 e 15, caracterizado pelo fato de que o ácido 4-(4- (1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-car- bonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico é uma sólido cristalino da estrutura: “Ao x

N SS L O oH

O ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

20. Método, de acordo com a reivindicação 19, caracteriza- do pelo fato de que o sólido cristalino é o sal 2-amino-2-(hidroximetil) propano-1,3-diol do ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroes- piro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico.

21. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que a (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida é um sólido cristalino da estrutura: à o

N ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

22. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 21, caracterizada pelo fato de que o sólido cristalino tem um pa- drão de difração de pó de raios-X compreendendo valores 2-teta de (radiação CuKa, comprimento de onda de 1,54056 À) 5,3 + 0,2; 7,7 + 0,2 e 15,4 + 0,2.

23. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 21, caracterizada pelo fato de que o sólido cristalino tem um pa- drão de difração de pó de raios-X compreendendo valores 2-teta de (radiação CuKa, comprimento de onda de 1,54056 À) 6,5 + 0,2; 9,3 + 0,2 e 13,6 + 0,2.

24. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico é um sólido cristalino da estrutura:

NA O oH Oo ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

25. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 24, caracterizada pelo fato de que o sólido cristalino é o sal 2- amino-2-(hidroximetil)propano-1,3-diol do ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0- 1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico.

26. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 2, caracterizada pelo fato de que o agente farmacêutico adicional é selecionado a partir do grupo constituído por ácido [(1R,5S,6R)-3-(2- [(2S)-2-metilazetidin-1-il]-6-(trifluorometil)pirimidin-4-i1)-3-azabiciclo [3.1.0]hex-6-ilJacético; ácido 2-[(1R,3R,5S)-3-(fS-ciclopropil-3-[2-(triflu-

orometóxi)fenil]-1,2-0xazol-4-ilkmetóxi)-8-azabiciclo[3.2.1] octan-8-il]-4- fluoro-1,3-benzotiazol-6-carboxílico ou ácido 2-[(4-[6-[(4-ciano-2-fluoro- benzil)óxilpiridin-2-il)pieridin-1-il)metil]-1-[(2S)-oxetan-2-ilmetil]-1H-ben- zimidazol-6-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

27. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 14 e 15, caracterizado pelo fato de que pelo menos outro agente farmacêutico é usado e é selecionado a partir do grupo constituído por ácido [(1R,5S,6R)-3-(2-[(2S)-2-metilazetidin-1-il]-6-(trifluorometil) piri- midin-4-il)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilJacético; ácido 2-[(1R,3R,5S)-3- (fS-ciclopropil-3-[2-(trifluorometóxi)fenil]-1,2-0xazol-4-il)metóxi)-8-aza- biciclo[3.2.1]octan-8-il]-4-fluoro-1,3-benzotiazol-6-carboxílico ou ácido 2-[(4-(6-[(4-ciano-2-fluorobenzil )óxi]piridin-2-il)piperidin-1-il)metil]-1- [(28S)-oxetan-2-ilmetil]-1H-benzimidazol-6-carboxílico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

28. Método de tratamento da insuficiência cardíaca, insufi- ciência cardíaca congestiva, doença coronariana, doença vascular pe- riférica, doença renovascular, hipertensão pulmonar, vasculite, sín- dromes coronarianas agudas e modificação do risco cardiovascular, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um ser hu- mano em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeutica- mente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hi- drofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, e ácido 4-(4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroes- pirofindazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

29. Método de tratamento da obesidade, diabetes tipo |, di- abetes mellitus tipo Il, diabetes tipo | idiopático (tipo Ib), diabetes au- toimune latente em adultos (LADA), diabetes tipo 2 de início precoce (EOD), diabetes atípico com início na adolescência (YOAD), diabetes do adulto jovem (MODY), diabetes relacionado com a desnutrição, di-

abetes gestacional, doença coronariana, acidente vascular cerebral isquêmico, re-estenose após angioplastia, doença vascular periférica, claudicação intermitente, infarto do miocárdio, dislipidemia, lipemia pós-prandial, condições de tolerância à glicose prejudicada (IGT), con- dições de glicemia de jejum prejudicada, acidose metabólica, cetose, artrite, retinopatia diabética, degeneração macular, catarata, nefropatia diabética, glomeruloesclerose, insuficiência renal crônica, neuropatia diabética, síndrome metabólica, síndrome X, hiperglicemia, hiperinsuli- nemia, hipertrigliceridemia, resistência à insulina, metabolismo glicê- mico comprometido, distúrbios da pele e do tecido conjuntivo, ulcera- ções do pé e colite ulcerativa, disfunção endotelial e comprometimento da complacência vascular, hiperapobetalipoproteinemia B, e a doença da urina em xarope de bordo, caracterizado pelo fato de que compre- ende administrar a um ser humano em necessidade desse tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-(5-((3-etoxipiridin-2- il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il)pirimidina-5-carboxamida, — ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e ácido 4-(4-(1-isopropil-7- 0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1"-carbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel.

30. Método, de acordo com a reivindicação 29, caracteriza- do pelo fato de que o diabetes mellitus tipo Il é tratado.

31. Método de tratamento do carcinoma hepatocelular, car- cinoma renal de células claras, carcinoma de células escamosas da cabeça e do pescoço, adenocarcinoma colorretal, mesotelioma, ade- nocarcinoma do estômago, carcinoma adrenocortical, carcinoma papi- lar de células renais, carcinoma cervical e endocervical, carcinoma urotelial da bexiga, adenocarcinoma do pulmão, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um ser humano em necessida- de de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de (S)-2-

(5-((3-etoxipiridin-2-il)óxi)piridin-3-il)-N-(tetra-hidrofuran-3-il )pirimidina- 5-carboxamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e ácido 4- (4-(1-isopropil-7-0x0-1,4,6,7-tetra-hidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]- 1'-carbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável.

32. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracteriza- do pelo fato de que o carcinoma hepatocelular é tratado.

33. Método de tratamento de uma doença ou condição se- lecionada dentre fígado gorduroso, doença hepática gordurosa não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica, esteato-hepatite não alcoólica com fibrose hepática, esteato-hepatite não alcoólica com cirrose e es- teato-hepatite não alcoólica com cirrose e com carcinoma hepatocelu- lar ou com uma doença relacionada ao metabolismo, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um ser humano em necessi- dade de tal tratamento a composição como definida na reivindicação 2.